【手続補正書】
【提出日】令和1年11月7日(2019.11.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号：１のヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
【請求項２】
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターエレメントをさらに含む、請求項１に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３】
前記プロモーターエレメントが、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列の上流の肝臓特異的プロモーター配列である、請求項２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項４】
前記肝臓特異的プロモーター配列と、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列との間に位置するイントロン配列をさらに含む、請求項３に記載のポリヌクレオチド。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子。
【請求項７】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子に感染した、宿主細胞。
【請求項８】
哺乳類の宿主細胞内に請求項１〜４のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを導入する段階を含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を作製するための方法であって、前記ポリヌクレオチドが前記哺乳類宿主細胞において複製能力がある、前記方法。
【請求項９】
血友病Ａの治療に使用するための、請求項６に記載のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を含む医薬組成物。
【請求項１０】
宿主細胞に形質導入するための方法であって、前記宿主細胞を請求項６に記載のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子と接触させる段階を含む、前記方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８６】
別の態様では、本開示は、血友病Ａ治療用医薬を製造するための上記のような哺乳類遺伝子治療ベクターの使用を提供する。
[本発明1001]
ＣＳ01−ＦＬ−ＮＡに対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1002]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＦＬ−ＮＡ（配列番号13）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1001のポリヌクレオチド。
[本発明1003]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ01−ＦＬ−ＮＡ（配列番号13）である、本発明1001のポリヌクレオチド。
[本発明1004]
第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、軽鎖、重鎖、及び前記重鎖のＣ末端を前記軽鎖のＮ末端に連結させるポリペプチドリンカーを含み、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記重鎖は、ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ（配列番号24）に対して少なくとも95％の同一性を有する第1のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記軽鎖は、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ（配列番号25）に対して少なくとも95％の同一性を有する第2のヌクレオチド配列によってコードされ、かつ
前記ポリペプチドリンカーは、ｆｕｒｉｎ切断部位を含む、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1005]
前記ポリペプチドリンカーが、ＢＤＬＯ01（配列番号5）に対して少なくとも95％の同一性を有する第3のヌクレオチド配列によってコードされる、本発明1004のポリヌクレオチド。
[本発明1006]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ（配列番号24）に対して少なくとも99％の同一性を有し、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ（配列番号25）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1004または1005のポリヌクレオチド。
[本発明1007]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ（配列番号24）であり、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ（配列番号25）である、本発明1004または1005のポリヌクレオチド。
[本発明1008]
ＣＳ04−ＦＬ−ＮＡ（配列番号1）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1009]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＦＬ−ＮＡ（配列番号1）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1008のポリヌクレオチド。
[本発明1010]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ04−ＦＬ−ＮＡ（配列番号1）である、本発明1008のポリヌクレオチド。
[本発明1011]
第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、軽鎖、重鎖、及び前記重鎖のＣ末端を前記軽鎖のＮ末端に連結させるポリペプチドリンカーを含み、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記重鎖は、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ（配列番号3）に対して少なくとも95％の同一性を有する第1のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記軽鎖は、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ（配列番号4）に対して少なくとも95％の同一性を有する第2のヌクレオチド配列によってコードされ、かつ
前記ポリペプチドリンカーは、ｆｕｒｉｎ切断部位を含む、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1012]
前記ポリペプチドリンカーが、ＢＤＬＯ04（配列番号6）に対して少なくとも95％の同一性を有する第3のヌクレオチド配列によってコードされる、本発明1011のポリヌクレオチド。
[本発明1013]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ（配列番号3）に対して少なくとも99％の同一性を有し、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ（配列番号4）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1011または1012のポリヌクレオチド。
[本発明1014]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ（配列番号3）であり、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ（配列番号4）である、本発明1011または1012のポリヌクレオチド。
[本発明1015]
ＣＳ23−ＦＬ−ＮＡ（配列番号20）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1016]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＦＬ−ＮＡ（配列番号20）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1015のポリヌクレオチド。
[本発明1017]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ23−ＦＬ−ＮＡ（配列番号20）である、本発明1015のポリヌクレオチド。
[本発明1018]
第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、軽鎖、重鎖、及び前記重鎖のＣ末端を前記軽鎖のＮ末端に連結させるポリペプチドリンカーを含み、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記重鎖は、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ（配列番号22）に対して少なくとも95％の同一性を有する第1のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記軽鎖は、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡ（配列番号23）に対して少なくとも95％の同一性を有する第2のヌクレオチド配列によってコードされ、かつ
前記ポリペプチドリンカーは、ｆｕｒｉｎ切断部位を含む、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1019]
前記ポリペプチドリンカーが、ＢＤＬＯ23（配列番号7）に対して少なくとも95％の同一性を有する第3のヌクレオチド配列によってコードされる、本発明1011のポリヌクレオチド。
[本発明1020]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ（配列番号22）に対して少なくとも99％の同一性を有し、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡ（配列番号23）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1018または1019のポリヌクレオチド。
[本発明1021]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ（配列番号22）であり、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡ（配列番号23）である、本発明1018または1019のポリヌクレオチド。
[本発明1022]
ＣＳ01−ＦＬ−ＮＡ（配列番号13）に対して少なくとも95％の同一性を有するアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、本発明1001〜1021のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1023]
ＣＳ01−ＦＬ−ＡＡ（配列番号2）のアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、本発明1001〜1021のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1024]
ＣＳ01−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号26）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1025]
ＣＳ04−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号9）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1026]
ＣＳ01−ＳＣ1−ＡＡ（配列番号10）に対して少なくとも95％の同一性を有するアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、本発明1024または1025のポリヌクレオチド。
[本発明1027]
ＣＳ01−ＳＣ1−ＡＡ（配列番号10）のアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、本発明1024または1025のポリヌクレオチド。
[本発明1028]
ＣＳ01−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号27）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1029]
ＣＳ04−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号11）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1030]
ＣＳ01−ＳＣ2−ＡＡ（配列番号12）に対して少なくとも95％の同一性を有する、アミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、本発明1028または1029のポリヌクレオチド。
[本発明1031]
ＣＳ01−ＳＣ2−ＡＡ（配列番号12）のアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、本発明1028または1029のポリヌクレオチド。
[本発明1032]
ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡからなる群から選択される配列に対して少なくとも95％の同一性を有する配列を含む、ポリヌクレオチド。
[本発明1033]
ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡからなる群から選択される配列に対して少なくとも99％の同一性を有する配列を含む、ポリヌクレオチド。
[本発明1034]
ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡからなる群から選択される配列を含む、ポリヌクレオチド。
[本発明1035]
ＣＳ01−ＦＬ−ＮＡ（配列番号13）に対して少なくとも95％の同一性を有するアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、本発明1032〜1034のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1036]
ＣＳ01−ＦＬ−ＡＡ（配列番号2）のアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、本発明1032〜1034のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1037]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、連続する2つのアミノ酸の間に位置するグリコシル化ポリペプチドを含む、本発明1001〜1036のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1038]
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターエレメントをさらに含む、本発明1001〜1037のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1039]
前記プロモーターエレメントが、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列の上流の肝臓特異的プロモーター配列である、本発明1038のポリヌクレオチド。
[本発明1040]
前記肝臓特異的プロモーター配列と、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列との間に位置するイントロン配列をさらに含む、本発明1039のポリヌクレオチド。
[本発明1041]
本発明1001〜1040のいずれかのポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
[本発明1042]
本発明1001〜1040のいずれかのポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子。
[本発明1043]
本発明1001〜1040のいずれかのポリヌクレオチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子に感染した、宿主細胞。
[本発明1044]
哺乳類の宿主細胞内に本発明1001〜1040のいずれかのポリヌクレオチドを導入する段階を含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を作製するための方法であって、前記ポリヌクレオチドは前記哺乳類宿主細胞における複製能力がある、前記方法。
[本発明1045]
血友病Ａを治療するための方法であって、それを必要とする患者に対し、本発明1042のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を投与する段階を含む、前記方法。
[本発明1046]
宿主細胞に形質導入するための方法であって、前記宿主細胞を本発明1042のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子と接触させる段階を含む、前記方法。
[本発明1047]
血友病Ａを治療するための、本発明1042のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子。
[本発明1048]
宿主細胞に形質導入するための、本発明1042のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子。
[本発明1049]
血友病Ａ治療用医薬を製造するための、本発明1042のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子の使用。