【手続補正書】
【提出日】平成20年3月10日(2008.3.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）ヒトのＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物とヒト細胞を接触させて、化合物であるＰＰＮ／ＭＧ６１の複合体を生成させるステップ、（Ｂ）前記複合体の存在を検査することにより、前記細胞が表現するＰＰＮ／ＭＧ６１のレベルを検測するステップから構成され、ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物は、ＰＰＮ／ＭＧ６１に結合した小分子化合物、単一特異的抗体或はＰＰＮ／ＭＧ６１に結合したscFv、及び核酸プローブからなる群から選択され、前記核酸プローブにはアンチセンスオリゴマー、ｓiＲＮＡ及びｓｈＲＮＡが含まれており、これらのプローブは必ずＰＰＮ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡ及び／又はＣＤＮＡと交雑したものでなくてはならず、ＰＰＮ／ＭＧ６１のアミノ酸序列は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１、或は任意のＳＥＱＩＤＮＯ：１と少なくとも８０％以上の同一性を持つ序列或はＰＰＮ／ＭＧ６１活性を持つ序列である、ヒトのＰＰＮ／ＭＧ６１の表現と酵素レベルの検測方法。
【請求項２】
（Ａ）ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物と基礎レベルでＰＰＮ／ＭＧ６１を表現する第１種細胞を接触させて、第１種化合物であるＰＰＮ／ＭＧ６１の複合体を生成させステップ、（Ｂ）ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物と過剰拡増のレベルでＰＰＮ／ＭＧ６１を表現する第２種細胞を接触させて、第２種化合物であるＰＰＮ／ＭＧ６１の複合体を生成させるステップ、（Ｃ）前記、第１種と第２種の複合体の存在を検査することにより、前記、第１種と第２種細胞により、表現されるＰＰＮ／ＭＧ６１レベルを検測するステップ、（Ｄ）前記、第１種と第２種細胞により表現されるＰＰＮ／ＭＧ６１レベルの差を検測するステップから構成され、ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物は、ＰＰＮ／ＭＧ６１に結合した小分子化合物、単一特異的抗体或はＰＰＮ／ＭＧ６１に結合したｓｃＦｖ及び核酸プローブからなる群から選択され、前記核酸プローブにはアンチセンスオリゴマー、ＳＩＲＮＡ及びＳＨＲＮＡが含まれており、これらのプローブは必ずＰＰＮ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡ及び／又はＣＤＮＡと交雑したものでなくてはならず、前記ＰＰＮ／ＭＧ６１のアミノ酸序列はＳＥＱＩＤＮＯ：１、或は任意のＳＥＱＩＤＮＯ：１と少なくとも８０％以上の同一性を持つ序列或はＰＰＮ／ＭＧ６１活性を持つ序列である。ヒトのＰＰＮ／ＭＧ６１の活性と表現の検測方法。
【請求項３】
（Ａ）過剰拡増のレベルでＰＰＮ／ＭＧ６１を表現するヒト細胞と結合した、検測可能なタグ（Ｔａｇ）を含むＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物をヒトに投薬するステップ、（Ｂ）前記、検測可能なタグ（Ｔａｇ）により、ヒト組織中の前記細胞の位置を検測するステップから構成され、ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物は、ＰＰＮ／ＭＧ６１に結合した小分子化合物、単一特異的抗体或は、ＰＰＮ／ＭＧ６１に結合したscFv及び核酸プローブからなる群から選択され、前記核酸プローブにはアンチセンスオリゴマー、ｓｉＲＮＡ及びｓｈＲＮＡが含まれており、これらのプローブはＰＰＮ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡ及び／又はＣＤＮＡと交雑したものでなくてはならず、ＰＰＮ／ＭＧ６１のアミノ酸序列はＳＥＱＩＤＮＯ：１、或は任意のＳＥＱＩＤＮＯ：１と少なくとも８０％以上の同一性を持つ序列或はＰＰＮ／ＭＧ６１活性を持つ序列である、組織に対する体内イメージング方法。
【請求項４】
（Ａ）ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物と過剰拡増レベルでＰＰＮ／ＭＧ６１を表現する第１種細胞を接触させて、第１種化合物であるＰＰＮ／ＭＧ６１の複合体を生成させるステップ、（Ｂ）ＰＰＮ／ＭＧ６１の潜在的な抑制剤と過剰拡増レベルでＰＰＮ／ＭＧ６１を表現する第２種細胞を接触させて、第２種化合物であるＰＰＮ／ＭＧ６１の複合体を生成させるステップ、（Ｃ）前記、第１種と第２種の複合体の存在を検査することにより、第１種と第２種の複合体により表現されるＰＰＮ／ＭＧ６１のレベルを検測するステップ、（Ｄ）前記、第１種と第２種細胞により表現されるＰＰＮ／ＭＧ６１のレベルの差を検測することにより、前記、潜在的な抑制剤のＰＰＮ／ＭＧ６１の表現及び／又は活性に対する抑制を検測するステップから構成され、ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物は、ＰＰＮ／ＭＧ６１に結合した小分子化合物、単一特異的抗体或はＰＰＮ／ＭＧ６１に結合したscFv及び核酸プローブからなる群から選択され、前記、核酸プローブにはアンチセンスオリゴマー、ｓｉＲＮＡ及びｓｈＲＮＡが含まれており、これらのプローブはＰＰＮ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡ及び／又はＣＤＮＡと交雑したものでなければならず、ＰＰＮ／ＭＧ６１のアミノ酸序列はＳＥＱＩＤＮＯ：１、或は任意のＳＥＱＩＤＯＮＯ：１と少なくとも８０％以上の同一性を持つ序列或はＰＰＮ／ＭＧ６１活性を持つ序列である、医療上でＰＰＮ／ＭＧ６１を有効的に抑制できる化合物を選出する方法。
【請求項５】
前記細胞は、副腎細胞、脳細胞、乳腺細胞、結腸細胞、上皮細胞、内皮細胞、心臓細胞、免疫細胞、腎臓細胞、肝蔵細胞、肺細胞、卵巣細胞、膵臓細胞、前立腺細胞、皮膚細胞、脾臓細胞、胃細胞、睾丸細胞、甲状腺細胞、子宮細胞、血管細胞からなる群から選出される請求項１〜４の何れかの一項に記載の方法。
【請求項６】
前記上皮細胞は、 内皮細胞、非膠質の神経細胞、 結腸細胞、乳腺細胞、腎臓の近位尿細管細胞、前立腺の平滑筋細胞、子宮の平滑筋細胞、そして睾丸の平滑筋細胞からなる群から選出される請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記免疫細胞は、多形核白血球、単核細胞、大食細胞、上皮細胞、大細胞、小神経膠細胞、肺胞大食細胞からなる群から選出される請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記、過剰拡増レベルでＰＰＮ／ＭＧ６１を表現するヒト細胞は、癌細胞或は腫瘍微環境の中にある細胞である請求項２に記載の方法。
【請求項９】
前記、癌細胞は: 肺癌、 乳癌、直腸結腸癌、腫瘍癌、胃癌、神経膠腫、肝細胞腫、平滑筋肉瘤、肝癌、腎臓癌、膀胱癌、子宮癌、頭頚部癌、膣又は睾丸癌、脳腫、子宮頸部癌、食道癌、リンパ腫、悪性黒色素腫、中皮腫、骨髓腫、卵巣癌、膵膓癌、前立腺癌、甲状腺癌、腎細胞癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、肉腫、未分化腫瘍そして白血病からなる群から選出される請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記、腫瘍微環境の中にある細胞は、神経膠芽細胞、膠質の単核細胞、そして筋繊維芽細胞からなる群から選出される請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
ＰＰＮ／ＭＧ６１を介して誘発される癌の治療薬の製造におけるＰＰＮ／ＭＧ６１抑制剤化合物の応用であって、前記ＰＰＮ／ＭＧ６１抑制化合物は、小分子、抗体、ｓｃＦｖ、アンチセンスオリゴマー、低分子干渉ＲＮＡ、ショートヘアピンＲＮＡからなる群から選出される。
【請求項１２】
前記、ＰＰＮ／ＭＧ６１抑制剤化合物は一種のＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物である請求項１１に記載の応用。
【請求項１３】
前記、ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物は一種の小分子、ペプチド或は一本鎖抗体断片である請求項１２に記載の応用。 
【請求項１４】
前記、ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物は単一特異性抗体から選出され、該抗体は場合によって、細胞毒性薬品の標識により、前記ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物は場合によって、核酸プローブから選出され、該核酸プローグは場合によって、ＰＰＮ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡと雑交する請求項１２に記載の応用。
【請求項１５】
前記薬品は、第２種治療薬或は化学療法と組み合せて使用する請求項１１に記載の応用。
【請求項１６】
前記、第２種治療薬は、一種の化学療法薬品である請求項１５に記載の応用。
【請求項１７】
一種の薬品混合物であって、中にはＰＰＮ／ＭＧ６１を抑制する化合物と薬品賦形剤が含まれている。
【請求項１８】
一種の薬品混合物であって、中にはＰＰＮ／ＭＧ６１蛋白質と薬品賦形剤が含まれている。
【請求項１９】
ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリヌクレオチドの存在とレベルを、ＳＥＱＩＤＮＯから成るグループから選ばれた核酸分子を含む生物学のサンプルに検出するための試薬箱（ＫＩＴ）：３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、及び１２。
【請求項２０】
ＰＰＮ／ＭＧ６１のために具体的な１つ以上の抗体から成り、ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドの存在とレベルを生物学のサンプルに提出するための試薬箱（ＫＩＴ）。
【請求項２１】
ＰＰＮ／ＭＧ６１により演じられる時に、発見できる製品を備える基盤から成り、ＰＰＮ／ＭＧ６１の酵素の活動を生物学のサンプルに検出するための試薬箱（ＫＩＴ）。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】ＰＰＮ／ＭＧ６１の表現に対する検測方法及びその応用
【技術分野】
【０００１】  本発明はヒト細胞においてＰＰＮ／ＭＧ６１の表現と活性レベルを検測する方法、酵素の活性を抑制することにより癌の治療をおこなう方法、そしてこれら方法の応用を提供する。  より具体的には、本発明は正常な細胞と癌細胞中のＰＰＮ／ＭＧ６１の表現と活性レベルに対して比較検測を行う方法、酵素の活性を抑制することにより癌の治療をおこなう方法、そしてこれら方法の応用を提供した。
【背景技術】
【０００２】  ＷＮＴ（ｗｉｎｇｌｅｓｓ  ａｎｄ  ｉｎｔ  ｈｏｍｏｌｏｇｕｅ）はシステイン（アミノ酸の一種）を豊富に含む分泌糖タンパク質ファミリーで、該ファミリーはすでに複数の多種脊椎動物と無脊椎動物の中から検測され、細胞運命の確定及び発育と複数の段階において癌の中の細胞に対して重要な働きをもたらしていることが証明された。  これらは細胞表面の特異的な受身ファミリー（Ｆｒｉｚｚｌｅｄ（ＦＺ）ファミリー）と結合し、信号通路を活性化することにより働きをもたらしている。  例えば、遺伝子転写（参考文献１）に作用する。ＷＮＴファミリーの特徴の一つはこのタンパク質分子の保守部位には２３或は２４個のシステイン残基が存在すことである。  これらのシステイン残基ジスルフィドの結合の形成によりＷＮＴタンパク質の折りたたみに重要な役割を果たしていると推測されている。【０００３】  処理された多くの種類のＷＮＴ培養細胞を使って、ＷＮＴタンパク質の加工と分泌に対する研究（特許文献２）がおこなわれた。  多数細胞類型の中でＷＮＴに対する加工効率は大変低いのだが、それは多種の加工中間体が存在するためであり、それによりＷＮＴは細胞の外に良く分泌できなくなる。  大多数ＷＮＴタンパク質は等しい一種のＨＳ７０タンパク質−ＢＩＰ−と結合してＥＲ（特許文献３）中に残っている。  ショウジョウバエ結合試薬を通じて、ＷＧ（ショウジョウバエ同源物）信号伝導する遺伝子に対して選別し、一種の新しい遺伝子に対しても検証し、その産物はＷＧの加工と分泌（特許文献４）に必須である。  このような結果はＷＮＴ加工と分泌は複雑であり、多くの種の特異性遺伝子がこの事件に参与されたこことを提示した。【０００４】  ショウジョウバエセグメントポラリティー遺伝子のひとつである。  ｐｏｒｃｕｐｉｎｅ（ＰＯＲＣ）は一種のマルチスパン膜ＥＲタンパク質をコーディングし、このタンパク質はＷＧが胚中の正常分布に必須であるＰＯＲＣ突然変異体の胚中、ＷＧは合成細胞内に隔離され周辺細胞の中には分布されなかった。  ＷＧ信号ユニットは多細胞生物の体内で、相当保守的で、ＰＯＲＣ類似物もその他と同一に存在する。  線虫類ＰＯＲＣ類似物であるＭＯＭ-1は ＭＯＭ−２細胞を生成するにおいて必須だが、これはＰＯＲＣはＷＧ合成細胞の中に必須だからである（特許文献５）。  脊椎動物（鼠とツメガエル）のＰＯＲＣ類似物はすでに培養した細胞の中でＷＧ及び鼠ＷＮＴタンパク質のＮ−グリシコル化（特許文献６）を修飾することができることが証明された。【０００５】  ショウジョウバエ遺伝子ｐｏｒｃｕｐｉｎｅ（ＰＯＲＣ）のヒト類似物も近年クローンされた（特許文献７）。  ヒトｐｏｒｃｕｐｉｎｅ遺伝子（ＰＰＮ／ＭＧ６１）は１５個内の胞子にかかわっており、ＸＰ１１．２３の遺伝子組序列中おおよそ１２ＫＢに相当する。  鼠とツメガエル類似物が似ているのでＰＰＮ／ＭＧ６１は組織特異性方式に表現される。  またＴ−細胞因子回答レポーターの分析（Ｔ−ｃｅｌｌ  ｆａｃｔｏｒ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｒｅｐｏｒｔｅｒ  ａｓｓａｙ）の中でヒトＰＰＮ／ＭＧ６１はヒトＷＮＴ７Ａ表現構成体の活性に対しても影響を与えることが分かる。  このような結果はＰＯＲＣ遺伝子ファミリーが進化上���守的なＥＲ膜タンパク質に対してコーディングし、このタンパク質がＷＮＴファミリーの加工に参与したことを充分に証明した。【０００６】  ＰＯＲＣとその他の膜結合されたアシラーゼのスーパーファミリー間のアミノ酸の保守性に根拠して、ＰＯＲＣはＷＮＴのアシラーゼとして機能を発揮（特許文献８）する可能性がある。  ＰＯＲＣはＷＮＴタンパク質に対してアシル化を進行し、またＥＲ膜上に固定させこれらの転写を刺激させた後Ｎ−グリシコル化させて、この過程で分泌は必須であるＰＯＲＣが欠乏した状況でＷＮＴタンパク質は合成細胞の中で分泌するのではなく、このためＷＮＴ信号伝達は周辺細胞の中で活性化されない。【０００７】すべての生（物）化学検証を経た膜結合されたアシラーゼのスーパーファミリー構成員はすべてコーディングされた酵素類で、このような酵素は有機酸を膜包囲目的にした水酸基単位で転移させて、典型的な情況で有機酸は脂肪酸を言う。  このような例題の中には：ＡＣＡＴ（コレステロールアシラーゼ：脂肪酸をコレステロールで転換させる。）、ＡＲＥ１／２（脂肪酸を酵母ステロール上に転移させる。）、ＤＧＡＴ（ジアシルグリセロール アシルトランスフェラーゼ；脂肪酸をトアシルギグリセリン上に転移させる。）、パラフィン合成酵素（脂肪酸をチャンリョンアルコール上に転移させる。）、ＤＬＴＢ（テイコ酸中でアルラニンを浸透させる。）及びＡＬＧＩ（アルギン酸塩Ｏ−アシルキ化）（特許文献８）などが含まれる。  このタンパク質ファミリーの推測に根拠した酵素作用は膜内と膜附近極性残基の保守性の支持を受けなければならない。  最も著しいことは一つの長い疎水区域内のヒスタディンは変わらないし、これは可能に一つの活性位置残基である。【０００８】  このスーパーファミリーのその他の構成員はただ遺伝子上で検証された。  このような構成員にはショウジョウバエ遺伝子ＰＯＲＣＵＰＩＮＥ及び線虫類似物ＭＯＭ−１が含まれる。  ＰｏｒｃｕｐｉｎｅはＷｉｎｇｌｅｓｓ信号伝達に対して重要で、これはＷｉｎｇｌｅｓｓ加工及び分泌（特許文献９）に影響を与える。  ＭＯＭ−１は胚内層分化の突然変異体に対して進行した遺伝子選別の中とＭＯＭ−２（一種のｗｉｎｇｌｅｓｓ類似物）とＭＯＭ−５（一種のｆｒｉｚｚｌｅｄ類似物）と共に検証された（特許文献１０）。  Ｐｏｒｃｕｐｉｎｅ型タンパク質はＷｉｎｇｌｅｓｓ信号伝導での一つの公証はもう確認されたところがある。  同族関係に根拠してこれは一種のアシラーゼの作用方式で見る時、概して信頼を得たのである。【特許文献１】ＣＡＤＩＧＡＮＫＭとＮＵＳＳＥＲ、１９９７ＰＯＬＡＫＩＳＰ、２０００
【特許文献２】ＳＭＯＬＩＣＨＢＤ、ＥＴＡＬ、１９９３；ＢＵＲＲＵＳＬＷとＭＣＭＡＨＯＮＡＰ  １９９５
【特許文献３】ＫＩＴＡＪＥＷＳＫＩＪ、ＥＴＡＬ、１９９２
【特許文献４】ＭＵＬＬＥＲＨ、ＥＴＡＬ、１９９９
【特許文献５】ＴＨＯＲＰＥＣＪ、ＥＴＡＬ、１９９７
【特許文献６】ＴＡＮＡＫＡＫ、ＥＴＡＬ、２０００
【特許文献７】ＣＡＲＩＣＡＳＯＬＥＡ、ＥＴＡＬ、２０００
【特許文献８】ＨＯＦＭＡＮＮＫ、２０００
【特許文献９】ＴＨＯＲＰＥＣＪ、ＥＴＡＬ、１９９７
【特許文献１０】ＴＨＯＲＰＥＣＪ、ＥＴＡＬ、１９９７
【特許文献１１】ＡＲＡＶＩＮＤＬとＫＯＯＮＩＮＥＶ、１９９８
【特許文献１２】Ｔａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２），Ｎａｔｕｒｅ  ３５６：１５２−１５４
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】  しかし、この基礎の物質の性質はまだ研究解決しなければならない問題である。  このような観察結果はアシルキ化とＷＮＴ信号伝達の間にだけ存在する関係ではない。  ＷＮＴ抑制剤であるＤｉｃｋｋｏｐｆ（ＤＫＫ）メンバー構成が発現されたことはコリパーゼに関係がある（Ａｒａｖｉｎｄ  ＬとＫｏｏｎｉｎ  ＥＶ、１９９８）。  これによってＤｉｃｋｋｏｐｆ（ＤＫＫ）タンパク質の仲介する脱アシルキ化がＰｏｒｃｕｐｉｎｅ（ＰＯＲＣ；ＰＰＮ／ＭＧ６１）の仲介するアシルキ化に対して行う拮抗作用が可能になる。【００１０】ＷＮＴ／ＦＲＩＺＺＬＥＤＦＺ経路は一部重要な調節遺伝子と連関されるのでこのような遺伝子は動員原発癌と（Ｐｒｉｍａｒｙ  ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ）と係わる多形性現象をもたらした。  信号伝導期間胞質β−カテニン（ｃａｔｅｎｉｎ）は蓄積を進行して転移して細胞核に入って行くようにし、またその他転写ー遺伝子と複合体を生成することを通じて遺伝子の表現を増強させた。ＷＮＴ信号が欠乏した状況で、分離的な胞質β−カテニンは一種の複合体に併入れされて、この複合体はＡＸＩＮ、大腸腺腫性ポリポーシス（ａｄｅｎｏｍａｔｏｕｓ  ｐｏｌｙｐｏｓｉｓ  ｃｏｌｉ、ＡＰＣ））遺伝子産物及びグリコーゲン合成酵素キナーゼＧＳＫ）−３βに造成された。  ＧＳＫ−３βを通じて進行したＡＸＩＮ、ＡＰＣとβ−カテニンの接着とリン酸化はβ−カテニンを経路に設定及び蛋白質媒体を通じて分解を進行した。   ＷＮＴβ−カテニンの信号伝導は多種細胞の中で細胞の存在を促進させることはすでに認証された。  またＷＮＴ信号経路は腫瘍の発育／或は発展に関連すると認められた。  ＷＮＴ信号通路の異常な活性化は多種類の人間の癌とも関係がある。  例えば、遺伝子ＡＰＣ突変は、散発的或は遺伝的な直腸結腸腫瘍の中での発生はすべて一種の発端事件である。  ＡＰＣ突変体と腫瘍に関連があることはこの異常タンパク質がＷＮＴ信号伝導造成部分だからである。  このタンパク質産物はいくつかの考量構造範囲を含んでいるし、このような構造範囲はβ−カテニンと分解部位に作用を発揮する。【００１１】  β−カテニンのＮ―末端フラグメント的な突然変異は一般的にリン酸化に依頼された分解に参与し、これによりβ−カテニンを安定させた。  安定化された細胞質のカテニンが蓄積される時、このタンパク質は細胞核に入って行ってＴＣＦ／ＬＥＦ高速移動群（ｈｉｇｈ−ｍｏｂｉｌｉｔｙ  ｇｒｏｕｐ）転写遺伝子とともに作用して、このような転写遺伝子の調節例を挙げれば、Ｃ―ＭＹＣがこのような癌遺伝子の表現である証拠は更に、ＷＮＴタンパク質の多くの癌症の中で表現と異常な活性化に対しても提示した。  しかし、ＷＮＴ信号伝導通路は癌症の発生過程での具体的な役目に対しては上記不透明である。【００１２】本発明の方法は、ショウジョウバエＰｏｒｃｕｐｉｎｅ遺伝子のヒト類似物であるＰＰＮ／ＭＧ６１は多くの種類のヒト癌症細胞系中、豊かに表現されることを証明するが、このような癌症には肺癌、乳腺癌、直腸結腸癌、中皮腫、頭頸部癌（ｈｅａｄ  ａｎｄ  ｎｅｃｋ  ｃａｎｃｅｒ）及び悪性黒色腫瘍が含まれる。  これと対応して培養した正常細胞の中ではＰＰＮ／ＭＧ６１の表現が観察されなかった。  本��明は更にＰＰＮ／ＭＧ６１が初期肺癌と中皮腫試料の中で過量に表現されたことが明らかになったが、対応した正常な組織試料（同一患者で採取）中では明らかにならなかった。  以外で、多くの種類の癌症患者から採取した血清の中でＰＰＮ／ＭＧ６１の表現に対して検測することができた。  このような癌には肺癌と甲状腺癌などが含まれるが、正常な血清の中では検測されなかった。【００１３】  本発明の方法はまた、ヒトＰＰＮ／ＭＧ６１の表現が癌細胞存在において必須なことも表明した。  Ｋｎｏｃｋｉｎｇ−ｄｏｗｎＰＰＮ／ＭＧ６１  ｍＲＡ及び、或は抑制ＰＰＮ／ＭＧ６１タンパク質のアシラーゼの活性は多種癌中で細胞の死亡を誘導した。  特に肺癌と中皮腫である。  このような数値はＰＰＮ／ＭＧ６１を通じて進行したＷＮＴ信号伝達分子の脂肪修飾はこの経路が腫瘍の発生過程での作用に対して非常に重要さを提示したし、またＰＰＮ／ＭＧ６１が一種の治療效果を考えさせる医療目的の可能性があることを提示した。  そのためＰＰＮ／ＭＧ６１の表現の検測及びＰＰＮ／ＭＧ６１酵素活性の抑制がヒト癌症分子診断、初期検測と治療において広範な可能性があることを示している。
【課題を解決するための手段】
【００１４】本発明はヒト細胞、組織、血清と唾液を含む体液におけるＰＰＮ／ＭＧ６１の表現及び／或は酵素活性及びアシラーゼの活性を抑制することにより、過剰表現を抑制するＰＰＮ／ＭＧ６１の癌細胞成長の診断方法を提供した。  第１実施方案の中で本発明は一種のＰＰＮ／ＭＧ６１遺伝子転写（例えばＭＲＮＡ）の検測に対する方法を提供し、この方法は繰り返しＰＣＲ−（ＲＴ−ＰＣＲ）の使用を通じて進行するとか、或は拡増（例えばＰＣＲ）による使用を通じて直接的にＤＮＡ転写数を検測する方法で実施された。  第２実施方案の中で本発明は一種のＰＰＮ／ＭＧ６１タンパク質数量の検測に使われる。  或は、このようなタンパク質細胞数量に対する検測表現の方法を提供し、この方法は任意の一種の広範囲で認証された免疫結合の分析を使って進行しなければならないし、このような分析には等しいＰＰＮ／ＭＧ６１と結合された単一の特異的抗体を使って進行したＥＬＬＩＳＡ（酵素免疫定量法）に対する分析が含まれる。【００１５】ＰＰＮ／ＭＧ６１のタンパク質を翻訳するレベルは当該分野の技術人員たちがよく分かっている任意の手段を使うことを通じて検測を進行することができる。  このような手段には分析性生化学方法、例えば電気泳動、キャピラリー電気泳動、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、スーパー拡散（ｈｙｐｅｒｄｉｆｆｕｓｉｏｎ）色譜などが含まれる。  また分離したタンパク質は標準方法に根拠して序列検測を進行することで多形性（Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ）を検証することもできる。  第３実施方案中、本発明は一種のＰＰＮ／ＭＧ６１の酵素（Ｏ−アシラーゼ）活性に使われる測量及び／或は定量を進行する方法を提供し、この方法は基質の転換の使用を通じて進行した。【００１６】  第１課第２細胞のＰＰＮ／ＭＧ６１表現レベル及び／或は酵素活性の差はあらゆる癌症に対する検査或は診断、あらゆる癌の転移可能性に対する診断、あらゆる癌症に対する予後と発展に対するモニタリング或は母種癌症に対する治療効果に対するモニタリングなどに使われた。  このような癌症には：肺癌、 乳腺癌、直腸結腸癌、カルチノイド（ｃａｒｃｉｎｏｉｄ）、胃癌、神経膠腫、肝細胞腫、平滑筋腫、肝臓癌、腎臓癌、膀胱癌、子宮癌、頭頚部癌、膣又は睾丸癌、脳腫瘍、子宮頸部癌、食道癌、リンパ腫、悪性黒色腫、中皮腫、骨髓腫、卵巣癌、膵膓癌、前立腺癌、甲状腺癌、腎細胞癌、網膜芽腫、 横紋筋肉腫、肉腫、未分化腫瘍及び白血病などが含まれ、これは全部ではない。【００１７】  第４実施方案の中で、本発明は一種の本発明で提示したＰＰＮ／ＭＧ６１表現レベル及び／或は酵素活性の試薬箱（ＫＩＴ）する方法を提供し、この試薬箱はあらゆる癌症に対する検査或は診断、あらゆる癌症の転移可能性に対する 診断、あらゆる癌症の予測と発展に対するモニタリング或はあらゆる癌症に対する治療效果に対するモニタリングなどに使われた。  これ以外の実施方案の中で、本発明は体外と体内で使われるある種の組織に対する性状の方法を提供した。  以外の実施方案の中で、本発明は一種の方法及び／或は発明が提示したＫＩＴを提供し、この方法及び／或は試薬箱はＰＰＮ／ＭＧ６１に対する医療に��力的な化合物の選別に使われた。【００１８】本発明でＰＰＮ／ＭＧ６１を含んだ特異性化合物には：ある種のＰＰＮ／ＭＧ６１と結合、基質を模倣して酵素活性を抑制する小分子化合物、ある種のＰＰＮ／ＭＧ６１タンパク質と結合した単特異的抗体、或はＰＰＮ／ＭＧ６１のＭＲＮＡ／ＣＤＮＡと雑交を進行した核酸プローブ／プライマー（ｐｒｉｍｅｒ）などが含まれるが、これが全部ではない。【００１９】本発明の一つの、更なる実施方案には一種の需要に対して治療を進行した受試者のＰＰＮ／ＭＧ６１が開導した癌症に対して治療を進行する方法が含まれ、この方法には治療の有効量のＰＰＮ／ＭＧ６１抑制剤の化合物の薬学製剤としてこの受試者に投薬を行うのが含まれ、その中でＰＰＮ／ＭＧ６１抑制剤の化合物は状況に応じて細胞毒性を持っている。  好ましくは選別されたＰＰＮ／ＭＧ６１抑制剤化合物にはＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物が含まれるがこれは全部ではない。  本発明のこのような方面で、一つのまず選別された実施方案の中には、この薬学製剤は一種のバルーンカテーテル（ｂａｌｌｏｏｎ  ｃａｔｈｅｔｅｒ）、或はＳＴＥＮＴの中に埋め込まれ、時間依存方式で放出する。この実施方案は更に、単独で癌症患者に前記薬学製剤を試用、或は2種治療薬品（例えば化学療法薬品）及び/或は放射線治療に共にに試用される二つが含まれる。【００２０】定義  他の一種のポリヌクレオチド或はポリペプチドは一定のパーセンテージである。  “序列相同性”の一種のポリヌクレオチド或はポリペプチドを持っている。  言い換えれば配列比較を進行するにおいて、二つの種類の序列に対して比較の時の等しいアルカリ基或はアミノ酸のパーセンテージに対して比較を進行する。  序列の同一性は複数の方法で検測することができる。  序列の同一性を検測するために、一部方法と計算器機プログラムを利用して、序列配列に対する比較を進行し、このような方法とプログラムにはＢＬＡＳＴが含まれて、IMG SRC="http://ww.ncbi.nlm.nih.gov/blastがある。  他の一種の配列比較計算法はＦＡＳＴＡで、ＭＡＤＩＳＯＮ、ＷＩＳ．ＵＳＡ、ａ  ｗｈｏｌｌｙ  ｏｗｎｅｄ  ｓｕｂｓｉｄｉａｒｙ  ｏｆ  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．の遺伝学計算基調（ＧＣＧ）で捜すことができる。【００２１】  配列比較に使われるその他方法はＭｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、ｖｏｌ．２６６：Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ（１９９６）、ｅｄ．Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｉｎｃ．、ａ  ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｈａｒｃｏｕｒｔ  Ｂｒａｃｅ＆Ｃｏ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆ．ＵＳＡ．中で説明された。  序列の中でギャップを許容した配列比較プログラムは特に人々の興味を催した。  Ｓｍｉｔｈ  Ｗａｔｅｒｍａｎの局部同源性計算法（Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃｓ  ２：４８２−４８９（１９８１）を使うにおいて、序列の同上性ＢＥＳＴＦＩＴ検測プログラムは特におもしろい。  ギャップはペナルティが賦課されるのに（ｇａｐ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｐｅｎａｌｔｙ）一般的に１から５間であり、２から４の場��もあるので、いくつかの実施方案の中では３で規定した。【００２２】  Ｓｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎは一種の序列配列の中でギャップを許容する計算法であるＭｅｔｈ．Ｍｌｏ．Ｂｉｌｏ．７０：１７３−１８７（１９９７）。  この以外にも、ＮＥＥＤＬＥＭＡＮ（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ）とＷＵＮＳＣＨ配列比較方法を使うＧＡＰプログラムは序列の配列比較（参照，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３−４５３（１９７０））を進行するにも使われる。  ギャップ生成ペナルティ（ｇａｐ  ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ  ｐｅｎａｌｔｙ）は一般的に０．０１から０．２０間であり、ほとんどの場合は０．１０である。  このプログラムのデフォルトパラメータは比較を待つ入力序列を通じて検測を進行する。好ましくは、この序列の同一性の使用プログラムは決めたデフォルトパラメータで検測を進行する。【００２３】  このプログラムはＧｅｎｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ（ＧＣＧ）ｐａｃｋａｇｅ、ｆｒｏｍ  Ｍａｄｉｓｏｎ、Ｗｉｓ．ＵＳＡで捜すことができる。  この配列比較区域の長さのパーセンテージは最強配列株の個体序列の残期数に対する計算を通じて計算される。  この数値で目標或はＱＵＥＲＹの序列の残期数を差し引いた値段がパーセンテージである序列白粉同一性は目標とＱＵＥＲＹのポリヌクレオチド序列間の符合残期数を通じて計算を進行して、最強配列区域中の総符合数で目標或はＱＵＥＲＹ序列の残期数を差し引いて計算する。【００２４】  “ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物”とは、例えば、合成或は天然アミノ酸、ポリペプチド、タンパク質、小合成有機分子或はデオキシリボ核酸或はリボ核酸序列、このような化合物とＰＰＮ／ＭＧ６１が結合した親和性はその他タンパク質と核酸の２０倍或は以上である。  例えば、抗ＰＰＮ／ＭＧ６１タンパク質或はそのペプチド断片のすべてクローン或はただクローン（典型的な或はバクテリオファージ展示が含まれる）抗体、或はＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡと雑交した核酸プローブなどがあるのに、これは全部ではない。  好ましくは、ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物は：ＰＰＮ／ＭＧ６１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、或は任意のＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１と少なくとも８０％以上同一性の序列或はＰＰＮ／ＭＧ６１活性の序列）を結合した小分子化合物、単一特異的抗体或はＰＰＮ／ＭＧ６１を結合したｓｃＦｖ及び核酸プローブで選定したことであり、この核酸プローブにはアンチセンスオリゴマー、ｓｉＲＮＡ及びｓｈＲＮＡなどが含まれているし、このようなプローブとＰＰＮ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡ及び／又はＣＤＮＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、或は任意のＳＥＱＩＤＮＯ：２と少なくとも８０％等しい序列）と雑交する。【００２５】特別に好ましくは、小分子はパルミチン塩酸或はブローモパルミチン酸塩（ｂｒｏｍｏｐａｌｍｉｔａｔｅ）或はその他のパルミチン酸塩の派生物である。ＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡと／或はＣＤＮＡと結合した核酸序列の長さは６ＢＰ或は６ＢＰ以上であり、好ましくは６から１３８６ＢＰ、より好ましくは６から５０ＢＰ、更により好ましくは６から２０ＢＰ、更によりもっと好ましくは６から１５ＢＰ、最も好ましくは６から１０ＢＰである。  好ましくは、ＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡ及び／���はＣＤＮＡを結合した核酸序列とＰＰＮ／ＭＧ６１遺伝子（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）、或は相補体序列、少なくとも８０％、好ましくは９０％以上、より好ましくは９５％以上、最も好ましくは１００％が序列の同族関係。  或は、ＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡ及び／又はＣＤＮＡを結合した核酸序列とＰＰＮ／ＭＧ６１遺伝子（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）の補助序列中のある序列に少なくとも８０％、好ましくは９０％以上、より好ましくは９５％以上、最も好ましくは１００％の序列相同性。【００２６】本発明の中で、以外の説明がない限り“ＰＰＮ／ＭＧ６１”はＰＰＮ／ＭＧ６１タンパク質或はポリプチペド、斜体字“ＰＰＮ／ＭＧ６１”は符号化（コーディング）ＰＰＮ／ＭＧ６１タンパク質の遺伝子を意味する。  本文でいう“医療有効量”は薬品調合物或はその中の化合物は一種の抑制ＰＰＮ／ＭＧ６１活性を抑制する量を言う。  この薬品調合物は一般的に約０．００１から１００ＭＧ/ＫＧの毎剤単位（例えば、錠剤、カプセル、粉末、注射剤、薬匙（ＭＥＤＩＣＩＮＥ  ＳＰＯＯＮ）量等々）である。  一つの実施方案の中で、この薬品調合物は約０．０１から５０ＭＧ／ＫＧ化合物の毎剤量単位を持っているし、好ましくは約０．０５から２０ＭＧ／ＫＧを含む。【００２７】この薬品調合物の医療有効量を検測するのに使う方法は当該分野の中ではもう知られている。  例えば、この薬品調合物でヒトに投薬する有効量は動物研究の結果の中で数学的に計算することができる。  更に、本発明の化合物は鼻腔内形式方法で投薬することができるし、この級の薬は適当な鼻腔内キャリアの局部応用を通じて、或は経皮ルートより経皮皮膚貼り付け吸収薬を使って進行することができるし、この経皮皮膚貼り付け吸収薬は当該分野の技術人員たちが掌握している。  経皮搬送システムにより投薬をするためにはこの服用量の投薬は連続的に、投与計画（ｄｏｓａｇｅ  ｒｅｇｉｍｅｎ）を通じた間接進行ではならない。  また本発明において互換して使用可能な用語、“個体”、“受験試者”。  “宿主（ＨＯＳＴ）”と“患者”は哺乳動物、例えばネズミ、類人猿、ヒト、猫、犬、馬、牛、哺乳類家畜、哺乳類競技動物で哺乳類ペットが含まれるが、これは全部ではない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２８】本発明は証拠を提供して、アシラーゼとして働きを発揮するようにしたヒトＰＰＮ／ＭＧ６１は特定の組織病患状態で上方調節（ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ）になった。  特に、ＰＰＮ／ＭＧ６１は色々な種類のヒト癌の中で豊かに表現されたし、肺癌、乳腺癌、直腸結腸癌、中皮腫、頭頚部癌と悪性黒色腫を含む。  これに対し、培養した正常細胞中ではＰＰＮ／ＭＧ６１の表現に対して観察することができなかった。  また本発明は初めて証拠を提供して、ヒトＰＰＮ／ＭＧ６１の過剰表現は癌細胞の生存に必須したことを証明した。  ＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡをノッキングダウン（ｋｎｏｃｋｉｎｇ  ｄｏｗｎ）及び／又はＰＰＮ／ＭＧ６１のアシラーゼの活性を抑制することにより多くの種類の癌症の中で細胞の死亡を誘導した。特に肺がんの中で。【００２９】従がって、ある種の細胞の中でＰＰＮ／ＭＧ６１の存在に対する検測及び定量或は体内でＰＰＮ／ＭＧ６１の存在に対する検測に一種の方法を提供したし、この方法は疾病の状態に対して診断或は検測を進行するのに使われたし、このような疾病には癌症と腫瘍転移が含まれながらもこれは全部ではない。  よって、ＰＰＮ／ＭＧ６１の上方調節或は上方調節の過剰表現に対して抑制を進行する一種の方法を提供したし、この方法はある種の疾病状態に対する治療、特にＰＰＮ／ＭＧ６１の表現に誘発された癌症に使われた。【００３０】本発明に関わるヒト細胞は: 副腎細胞、脳細胞、乳腺細胞、結腸細胞、上皮細胞、内皮細胞、心臓細胞、兔疫細胞、腎臓細胞、肝細胞、肺細胞、卵巣細胞、膵臓細胞、前立腺細胞、皮膚細胞、脾細胞、胃細胞、睾丸細胞、甲状腺細胞、子宮細胞と脈管細胞からなる群から選択され、上皮細胞は: 内皮細胞、膠質の神経細胞、結腸細胞、乳腺細胞、近位尿細管（ｐｒｏｘｉｍａｌ  ｔｕｂｕｌｅｓ）細胞、前立腺の平滑筋細胞、子宮の平滑筋細胞及び睾丸の平滑筋細胞からなる群から選択され、兔疫細胞は、多形核白血球（ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒ  ＬＥＵＣＯＣＹＴＥ）、単核細胞、大食細胞、類上皮様細胞（ｅｐｉｔｈｅｌｏｉｄｃｅｌｌｓ）、巨細胞、小神経膠細胞、肝細胞（Ｋｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌ）と肺細胞大食細胞からなる群から選択される。【００３１】  本発明は更に複数の調合物を提供した。  このような調合物には薬学的調合物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）が含まれて、この薬学的調合物には本発明のポリペプチド、ポリヌクレオチド、抗体、組換えキャリア及び宿主細胞が含まれる。  このような調合物にはある種の緩衝液が含まれてもよい。この緩衝液はポリペプチド、ポリヌクレオチド、抗体、組換えキャリア及び宿主細胞が必要な応用に根拠して選択を進行して、またその他の目的応用にふさわしい物質も含むことができる。  当該分野の技術人員は目的に合わせて適当な緩衝液を選択してもよい。  その中の多くは当該分野で既知のものである。  状況によって、この調合物に一種の当該分野で既知の薬用賦形剤が含まれてもよい。  ここで詳しく述べるのは省略する。【００３２】本発明はＰＰＮ／ＭＧ６１に珍しい抗体を提供した。  適当な抗体はある種の宿主動物に対して免疫を進行して得ることができるし、この免疫は目的タンパク質を含���だ全部の或は一部分のペプチドを使って進行する。  適当な宿主動物にはマウス、ラット、羊、山羊、ハムスター、兎など等が含まれる。  このタンパク質免疫原はマウス、ヒト、兎、類人猿等から取ってもよい。  この宿主動物は一般的に免疫原の異なる種であるのが望ましい。  例えば、ヒトタンパク質を使ってマウスに対して免疫を行うなど。【００３３】この免疫原には完成されたタンパク質或は端くれ及び誘導体が含まれてもよい。  免疫原にはこの種のタンパク質の全部或は一部が含まれるのが望ましい。  その中でこのような残期は天然目的蛋白中に存在する翻訳後の修飾を含んでいるのに例えれば、グリコシル化である細胞外構造地域を含んだ免疫原は当該分野が示すさまざまな方法を通じて産出を進行して例えれば伝統的な組み換え方法で行うクローン遺伝子の表現であり、腫瘍細胞培養物の上澄みの中で分離する等々である。  多クローン抗体の進行を製造準備するために、第一歩は目的タンパク質で宿主動物に対して免疫化を進行して、そこで優選された目的タンパク質は必ず基本的に純正で、雑質の含量は１％以下にする。  当該免疫原は完全な目的タンパク質とし、或はその小片或は派生物とする。【００３４】当該宿主動物の免疫反応を高めるためには、当該タンパク質を補助剤（アジュバント）と合成させる。  その中にはアルミナ、ポツィ糖、乳酸塩、ダポルリウムイオン、油と水の乳液が含まれる。  例えば、フロイントアジュバント（Ｆｒｅｕｎｄ  ａｄｊｕｖａｎｔ）、完全フロイントアジュバントなどである。  当該タンパクはまた輸送タンパク或は合成された抗原とも結合できる。多種類の宿主に対して免疫化を行って、ポリクローン抗体をも産出させる。  そういう宿主には兎、モルモット、例えばマウス、ラットなどげっ歯類動物、ヒツジ、山ヒツジ等々である。  通常この目的タンパク質はこの宿主に対して肌内投薬を行う。  １次初期剤量の後に、１回或は複数回に渡って余分の剤量を入れる。  通常２回に渡ってこの余分の剤量を入れる。【００３５】  免疫化された後この宿主体内で血液を収集して、血清と血細胞を分離する。  生成された抗血清の中にはＩＧが存在して、更に、段階的に分離を行って、この分離は既知の方法を使って行う。  例えばＥＬＩＳＡ、アムモニュム塩分離、ＤＥＡＥ階分析等々であるモノクローナル抗体は伝統的な方法を通じて進行する。  一般的な情況下で、免疫化された宿主動物の脾臓とリンパ腺は血細胞を提供する根源であるこの血細胞は、骨髄腫細胞との融合を進行することを通じて永生化されたし、交雑腫瘍細胞も生成した。  標準的な方法を使って個体からの交雑腫瘍の培養物上聴に対して選別を進行して必要な特異性を含んだ抗体細胞の生成を検証するのである。  抗ヒトタンパク質単クローンでは抗体に使われる適当な動物には: マウス、ラット、ハムスター、モルモット、兎など等が含まれる。【００３６】  この抗体は交雑腫瘍細胞の上澄み（ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ）或は腹水の中で浄化を行う、この清浄化過程は伝統的な方法に進行される。  例えば、不可用媒体を結合したタンパク質を使って親和層分析を進行して、タンパク質Ａ寒天糖、タンパク質Ｇ寒天糖等々を使って親和層分析を進行する。  抗体は単鎖形式で 非正常なすべ��の合成体の構造を生成する。  単鎖抗体のデザインはＪｏｓｔｅｔｓｌ．（１９９４）Ｊ．Ｂ．Ｃ．２６９：２６２６７−７３とその他文献を参照。  この中列の可変区とひきつけ可変区のＤＮＡ序列のコーディングは一つの間隔区（ｓｐａｃｅｒ）で繋がれて、この間隔区は少なくとも４個の中小性アミノ酸残期にコーディングされているし、このようなアミノ酸には減アミノ酸及び/又は減アミノ酸が含まれている。  こんな融合を通じてコーディングになったタンパク質は原抗体特異性と親和性の考量性可変区のユニットを維持することを承諾する。【００３７】体内での応用を進行するために、特にヒトに対する注射に使うためには、この抗体の抗原性を低下させなければならない。  ある種の数体がこの防配薬剤の免疫反応に対応するようになればこの治療の有效期間を著しく低下させる。  抗体に対して進行するヒト化の方法はもう当該分野の中で分かっているところである人員化抗体は、転移遺伝子ヒト免疫区タンパク質工程区遺伝子を持っている動物の産物（例えば、アメリカ特許申し込みしたＷＯ９０／１００７７とＷＯ９０／０４０３６を参照）。  或は、この目的抗体は重組ＤＮＡ方法により加工処理を進行して ＣＨ１,ＣＨ２,ＣＨ３、ヒンジ構造領域及び/又はフレーム構造領域にとって相応のヒト序列を使って切り替えする（ＷＯ９２／０２１９０を参照）。【００３８】ＩＧ  ＣＤＮＡは雑合免疫球団白質遺伝子構造に対する応用はもう当該分野の中で分かっている（Ｌｉｕ  ｅｒ  ａｌ．（１９８７）Ｐ．Ｎ．Ａ．Ｓ．８４：３４３９と（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：３５２１）。  交雑腫瘍或はその他抗体を生成する細胞の中で分離した ＭＲＮＡもこれはＣＤＮＡ生成に使われた。  目的ＣＤＮＡは特異性プライマー（アメリカ特許号４，６８３，１９５ａｎｄ４，６８３，２０２）を使って合成酵素軟式反応を通じて拡増を進行する。  或は一つの文庫を生成してそれに対して選別を進行することで目的序列を分離する。  この抗体可変区のＤＮＡ序列をコーディングした後、ヒト工程区序列と融合を進行する。  このヒト工程区遺伝子の序列はＫａｂａｔｅｔａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｎ．Ｉ．Ｈ．Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ｎｏ．９１−３２４２を参照する。【００３９】ヒトＣ区域遺伝子はもう分かっているクローンの中で易しく求めることができる。等しい類型の選択に対して必ず必要な原型考量の地図に根拠して進行しなければならない。例えば 補助体結合或は数体で依頼した細胞毒作用中の活性である。  好ましくは同種型はＩＧＧ、ＩＩＧ３、ＩＧＧ４であるヒト軽鎖定常部、κ或はλが皆使われることができる。次の伝統的な方法を通じてこの異型接合ヒト化抗体（Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ）に対する表現を行う。【００４０】他の一つの実施方案中、この抗体は皆人類抗体であるかも知れない。  例えばヒト抗体と等しい浮動した種類のヒト抗体（ｘｅｎｏｇｅｎｉｃ  ｈｕｍａｎ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）に応用することができる。  浮動した種類（異種）のヒト抗体と言うのはヒト抗体と等しい抗体を言ってすなわち、彼らは完全にヒト抗体であり、浮動した点は彼らが非ヒト宿主を使って生成された点であり、このような宿主は遺伝子公正の処理を経って人類抗体に表現された。例えばＷＯ９８１５０４３３；ＷＯ９８、２４８９３とＷＯ９９／５３０４９、このような文献はここで参照できる。  ＦＶ、Ｆ（ＡＢ’）とＦＡＢこのような抗体段落は完全タンパク質に対する切断で製造用意したのである例えば、タンパク質酵素或は化学切断を利用するのである。或は一種の極力節約（切断）の遺伝子を設計しなければならない。  例えば、Ｆ（ＡＢ’）端くれが一部分の雑合遺伝子のコーディングにはＨ演義ＣＨ1構造地域とヒンジ領域（ｈｉｎｇｅ  ｒｅｇｉｏｎ）ＤＮＡ序列が含まれて、一つの翻訳中止コドンで、切断分子を生成する。【００４１】ＨとＬ列のＪ区域の共有序列は科ヌクレオシドの設計に使われて、プライマーとしてこのＪ区域中に制限性位置店を取り入れて、次のＶ旧段落とヒトＣで段落の連結に使われるようにする。  Ｃ区域のＣＤＮＡは頂点突然変異誘導を通じて修飾を進行して、一つの制限性部位を人類序列の同源位置に位するようにする。  表現キャリアにはプラスミド、レトロウイルス（ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ）、ＹＡＣ、ＥＢＶから派生したエピゾーム（ｅｐｉｓｏｍｅｓ）等々が含まれる。  便利なキャリアコードの機能が完全である人類のＣＨ或はＣＬ免疫グロブリン序列は、適当に制限さる部位を持っていて、如何なるＶＨ或はＶＬの序列が自由にインサート（挿入）或は表現できるようにする。【００４２】このようなキャリアの中で、切断は通常インサートされるＪ区域の切断ドナー部位（ｄｏｎｏｒ  ｓｉｔｅ）とか人類のＣ区域前の切断アクセプター部位（ａｃｃｅｐｔｏｒ  ｓｉｔｅ）の間に発生する。  当該切断は同じく人類のＣＨエキソンの切断区域中で行われる。ポリアデニル酸化と転写終止はコーディング領域下流の天然染色体の部位に存在する。  生成された雑合抗体には如何なる強プロモーターが加入されることができるし、そこには反転写ＬＴＲを含む。  例えば、ＳＶ−４０早期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスＬＲＴとモロニーマウス白血病ウイルスＬＴＲ：天然ＩＧプロモーター等である本発明のポリペプチドと核酸調合物はさまざま異なる用途がある。  目的応用には：研究、診断と治療薬品の選別／発見／製造準備応用及び医療調合物などが含まれる。  目的応用には以外にも：ＰＰＮ／ＭＧ６１動員物の検証、新しい機動資源本の根源で使用、調節因子の表達検証、合成酵素軟式反応（ＰＣＲ）でこのような交雑応用中プローブとプライマーで使用、生物物種の中で表達模式の検証、ＰＰＮ／ＭＧ６１考量に使われる細胞或は動物模型の製造準備、ＰＰＮ／ＭＧ６１機能の体外模型の製造準備なども含まれる。【００４３】さまざまな方法を通じて同源物を検証やりこなすことができる。  提供されたＣＤＮＡの段落は目的有機体から来たｃＤＮＡ文庫（ＤＮＡ  ｌｉｂｒａｒｙ）の交雑プローブに対するオーダーメードに使われることができる。  この引導水は一つの段落或は一つ或はいろいろな小簡病プライマーである序列の上司性を持っている核酸はゾオム性の条件で条件の下で例えば５０℃及び６＊ＳＳＣ（０．９ｍ塩化ナトリウム／０．０９ｍ弱酸ナトリウム）中での交雑、５５℃ 及び１＊ＳＳＣ（０．１５ｍ��塩化ナトリウム／０．０１５ｍ弱酸ナトリウム）の中で結合を保存して検側になる。序列の同上性は全ての条件下で、例えば、５０℃或はもっと高い温度で及び０．０１＊ＳＳＣ（１５ｍｍ塩化ナトリウム／１．５ｍｍ弱酸ナトリウム）の中で交雑して検測される。  提供した核酸序列である。【００４４】例えば：ＳＥＱＩＤＮＯ：２と基本上等しい核酸を保有した及びこの遺伝子の遺伝変化板本・版本と基本上等しい核酸と提供した序列は全ての交雑条件の下で結合される。  ５’側生（ｆｌａｎｋｉｎｇ）区域の序列は増強子結合部位を含んだ機動自負品に使われて、この部品は遺伝子の組織の中での表現に発育の調節を提供した。  この組織の特異性表の方は表現模式の検測及び模擬天然表現模式の肩同士を提供するのに使う。この肩同士区域の中で天然で存在する多型胎性は表現中の天然変化を検測するのに使われて、特に等しい疾病（特に癌症）と係わる表現変化である。  或は、突然変異をこのプロモーター区域を引入して実験定義（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｌｙｄｅｆｉｎｄｅ）システムの中で変化された表現の働きを検測する。【００４５】転写因子の結合に参加した特定ＤＮＡ祈願に対する検証に使われる方法は当該分野の中ではすでに分かっているし例えば、すでに分かっている結合基元序列想像性、運行引き延ばし（ｇｅｌｒｅｔａｒｄａｔｉｏｎ）研究などである。【００４６】調節序列は表現の転写と翻訳調節の順式作用（ｃｉｓ−ａｃｔｉｎｇ）序列に使われて、特に浮動した組織と発育の浮動した階段で進行した検証であり、また調節と開度表現の順式作用序列と反式作用（Ｔｒａｎｓ−ａｃｔｉｎｇ）序列の検証に使われる。  このような転写と翻訳調節区域は調節可能に一種の遺伝子に繋がれて、野生型或は目的タンパク質の培養細胞、配組織、胎組織或は性体組織中の表現を促進して、遺伝子治療に使われる。【００４７】小ＤＮＡ段落はＰＣＲプライマー、交雑選別プローブ等々に使われる。  比較的大きいＤＮＡ段落、すなわち１００ＮＴより大きい段落はポリペプチドのコーディング産出に使われることができる。  ＰＣＲのようなこのような拡増反応に対してつがいのプライマーを使わなければならない。  好ましくは選択したプライマーは一種で少なくとも５０ＮＴの拡増産物を対応産出して、好ましくは少なくとも約１００−３００ＮＴであるプライマー序列に使われる選択の計算法は一般的に分かっているし、商品化されたソフトウェアの中で得ることができる。  拡増プライマーはＤＮＡの補助連と交雑を進行してまた上向き引導も進行する。【００４８】ＤＮＡは生物物種の中で遺伝子表現の検証に使われる。細胞に対して特定ヌクレオシド序列の存在を進行する。  例えば、遺伝子組ＤＮＡ或はＲＮＡの存在に対して進行した検証方法は文献の中でもう比較的良好に確立された。  総体的に言えば、細胞の試料の中でＤＮＡ或はＭＲＮＡを分離させるのであるＲＴ−ＰＣＲを通じてＭＲＮＡに対して拡増を進行して、繰り返し死酵素を使って一つの補助ＤＮＡ列を生成した後ＤＮＡ序列特異のプライマーを使って合成酵素軟式反応を通じて拡増を進行する。  或は、運行電気永同を通じてこのＭＲＮＡ序列を分離させて、彼を一つの適当なホルダーで転移させる。  例えば、窒酸纎維素、ナイロン等であり、次にこのＤＮＡ段落を使ってプローブとして検証を進行する。  その他の方法を使うこともでき、例えば科ヌクレオシドの連結分析、円位交雑及び陳列した固体チップ上のＤＮＡプローブに対して進行した交雑等々である同序列で進行した交雑がＭＲＮＡの検測は試料中の遺伝子表現を提示した。【００４９】  本発明の遺伝子序列は、側生プロモーター区域とコーディング区域が含まれて、さまざまな当該分野で分かっている方法を通じて突然変異を進行して、プロモーターの強度、タンパク質序列などの中で目的変化が産生する。  このような突然変異ＤＮＡ序列或はタンパク質を所有した産物は通常に本文で提供した序列に基本的に類似している。  即ち、少なくと一個のヌクレオチドティド或はアミノ酸に分別して変化があり、或は少なくとも２個多くても１０個以内のヌクレオチドティド或はアミノ酸に変化があることも可能である。  この序列変化は交換、結実或は彼らの組合せであるかも知れない。  このような結実は、更に比較的大きい変化を含んで、例えば、某区域の結実或は外現者であるその他の目的修飾には表上表記が含まれて、例えばＦＬＡＧシステム、ＨＡ等々を通じて進行した表上表記であるアセポの正位の研究に対して緑蛍光タンパク質（ＧＦＰ）を含んだ融合タンパク質を使うことができる。【００５０】本発明の核酸は転移遺伝子を生成するのヒト動物或は細胞系の中で生成された位置の特異性遺伝子修飾に使われる。  従がって、一部実施方案の中で本発明は一種の非ヒトの転移遺伝子動物を提供したし、この動物は一種の核酸を含んだ分子にこの動物の転移遺伝子に整合口して、この核酸分子は一種のＰＰＮ／ＭＧ６１序列を含んで、この序列は一種のプロモーター（Ｐｒｏｍｏｔｏｒ）と調節可能に接続されて、コーディングＰＰＮ／ＭＧ６１の核酸分子が細胞或は動物の中で表現するようにする。  このようなトランスジェニック動物は相同組み換えを通して産生し、その中の内在性遺伝子座に少し変化が発生する。  或は一種類の核酸分子を適切に当該遺伝子組に組入れする。  安定して組入れられたキャリアにはプラスミド、レトロウイルスとその他の動物ウイルス、ＹＡＣ等などが含まれる。【００５１】修飾された細胞或は動物は遺伝子の機能と調節の研究に使われる。  例えば、宿主の天然遺伝子の中で生きた一連の小規模結実及び／又は入れ替えに浮動した外現者が癌発生、信号伝導の中での働きを検測する。  興味を催すことはこのような遺伝子が癌の導入遺伝子（Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ）動物模型の構築への応用である。  その中で、このタンパク質は特異性が低下或は不足を表現する。  具体的な目的具体的な目標構造物（ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ）にはアンチセンス構造物（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ダンバルカＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）が含まれて、このＲＮＡＡはＰＰＮ／ＭＧ６１の表現、優性（ｄｏｍｉｎａｎｔ）と劣性（ｒｅｃｅｓｓｉｖｅ）変異の表現及び遺伝子の過表現を中断させる。某序列を引入する時には、引入された序列は宿主動物の天然遺伝子序列の全部或は一部であることもできて、或は宿主動物に対して言えば外生序列の全部或は一部であるかも知れない。  ＬＡＣＺように���のような仮検査表記はこの遺伝子組に引入することができるし、その表現された上向き調節は表現上で易しく検側になる変化をもたらす。【００５２】また一部細胞或は組織の中で遺伝子を表現することができるし、例えば、ＰＰＮ／ＭＧ６１遺伝子或はその変体、表という水準は上で言及した細胞或は組織の中での正常な情況下で存在しないし、或は発育の異常時間以内で表現される。  一部宿主細胞（転移遺伝子を含んだ動物中の宿主細胞）でも生きていて、このような細胞には一種の二元核酸分子が含有されているし、この分子は一種のポリペプチドをコーディングしたし、このポリペプチドは内源ＰＰＮ／ＭＧ６１起動者を調節或は転写調節区域の機能を持っている。  相同組み換えに用いわれるＤＮＡ構築体は少なくとも人類遺伝子の一部分或は宿主動物の天然遺伝子の一部分を含まなければならない。  その中この遺伝子は必要な遺伝子修飾を行われているし、また目的遺伝子の同源区域も含んでいる。  任意整合を進行するのに使われるＤＮＡ具体的には犬も重合の同源区域を含む必要がない。  便宜をはかるために、陽性と陰性選択に使用される表記を含む。  同源重合を通じて使われる目的遺伝子修飾を含んだ方法は当該分野の中ですでに分かっている。【００５３】胚性干細胞（ＥＳ）に対して、ＥＳ細胞系を利用或は宿主中から新鮮な胚細胞を得て宿主の例題には小さな鼠、大きい鼠、モルモットなどがある。このような細胞は適当な纎維原細胞飼養（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ−ｆｅｅｄｅｒ）階上で生長を進行するとか或は存在白細胞抑制因子（ＬＩＦ）の情況下で成長する。  ＥＳ或は胚細胞がもう転化時には転移遺伝子動物の発生に利用される。  転移された後、これらの細胞を適当な培養基のフィーダー層（ＦｅｅｄｅｒＬａｙｅｒ）の上に並べておく。  当該構築体含んだ細胞は培養基の使用及び選択を通して検査と測定を行うことができる。  このクローンが十分な時間を経て成長された後は、細胞を検測すると共に構築体に相同組み換えの組合えが発生したか否かに対して分析を行う。【００５４】養成クローンは直ちに、配調節と配布注射に利用される。配布は４から６株大きさの過剰排卵の雌を得る。  トリプシンでＥＳ縦を処理して、修飾された細胞をこの配布の肺難癌に注射して入れ込む。  注射した後にはこの配布を仮母体の各個に子宮閣で返す。  次にこの仮母体にとって安全出産するようにしてこのように産まれた後代に対してこの構築物の選別を進行する。  不同表現型の配布と遺伝修飾した細胞を提供することを通じて、易しく後代の雑合を検測することができる。  この雑合動物に対して修飾遺伝子を狙った選別を進行して、この修飾を行われている数体に対して交配を進行して後代を生かす。  もしこの遺伝変化が発育の某位置で死んだ場合、組織或は器官を得て等しい種類の振込み或は同類の係の植物体或は移植体にして或はその体外培養物を得ることができる。  この転移遺伝子動物は任意のヒトの包囲動物であり、例えば実験室動物、飼い馴らされた動物等々であるこの転移遺伝子動物は 機能性研究、薬品選別等々に使われて例えばある種のＰＰＮ／ＭＧ６１活性に働く候補薬品の效果に対して検測を進行する。【００５５】本発明はまた疾病状態を診断するひとつの方法を��供した。  特には癌に対する診断方法である。  当該方法は目標生物試料の中で観察できたＰＰＮ／ＭＧ６１レベルと／或は活性及び／或はＰＰＮ／ＭＧ６１ポリヌクレオチドのレベルに基づいて行う。  本文中で使用していた見本には生物液体が含まれている。  例えば血液、脳骨髓液、涙、唾液、淋巴液、滲出液、洗浄液乳線管洗液Ｋ（ｂｒｅｓｔ  ｄｕｃｔａｌ  ｌａｖａｇｅ  ｆｌｕｉｄ）、精液等などが含まれて、細胞；器官或は組織培養物が発生した液体；腫瘍活組織検査試料、糞便試料及び生理組織の中で抽出した液体である試料の外にこのような液体の誘導体と成分も含まれる。  固体組織において細胞に対して分解を進行するとか或は組織切片に対して分析を進行する。  入れ替えされた情況下でこのような細胞の分解分解物を製造準備することができる。  本発明の検測方法は定性或は定量で進行することができる。だから本文で使われた用語“検測”、“検測”等々が示すことは定性と定量の検測であり、“測量”も含まれる。  本発明の検測方法には生物試料に使われるＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドを検測する方法、生物の中でＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡを検測する方法及び生物試料の中でＰＰＮ／ＭＧ６１の酵素活性を検測する方法などがある。【００５６】一部実施方案の中で、検測方法は生物試料（例えば：血液、血清）中癌細胞に対して検測を進行する方法を提供した。実施例題中の描写に根拠して、ヒトＰＰＮ／ＭＧ６１レベルが癌測定の中で決まった向上があったし、例えば肺癌、有線癌、直腸結腸癌と中皮腫中であるこれにして正常（癌ではない）組織と比べてコーディングＰＰＮ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡレベルの昇華を検測したし、検測された生物試料の中には癌組織が存在した。  このような検測方法は試薬箱の一部分として提供できる。  本発明はさらに生物試料の中からＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチド或はＰＰＮ／ＭＧ６１ヌクレオシドの存在とレベルを検測するのに用いられる試薬箱をさらに提供する。  こういう試薬箱を使用するプログラマ方法は臨床実験室、実験性実験室、医学従業人員と個人によって実施された。本発明はＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドの試薬箱を検測するのに使われるし、それにはＰＰＮ／ＭＧ６１特異性の結合できる一部分（ｍｏｉｅｔｙ）をふくみ、ＰＰＮ／ＭＧ６１特異性化合物或は抗体を含んでいても、これに限られることではない。【００５７】本発明はＰＰＮ／ＭＧ６１ポリヌクレオチドの試薬箱を検測することに使われるし、そこには特異性とＰＰＮ／ＭＧ６１ポリヌクレオチド  ポリヌクレオチドと交雑一部分を含む。  一部の実施形態中で、本発明のＰＰＮ／ＭＧ６１オリゴヌクレオチドの検測に使われる試薬箱は、例えばコーディングＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡを検測の試薬箱には２個の核酸が含まれるし、それは“正方向”と“反方向”の引き物機能を発揮する。  これらの引き物は特異性を持っていて、コーディングＰＰＮ／ＭＧ６１のｍＲＮＡのｃＤＮＡのコピーに対して拡大を行う。【００５８】これら“正方向”と“反方向”の引き物は２個の分離された核酸分子となって提供されるし、オリゴヌクレオチドがそれぞれ１０から２００個にまでなると、当該引き物二つのうち第１の核酸分子に少なくとも１０個の連続されたヌクレオ��ドの序列を含み、当該序列とＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：０２中の一段落の核酸序列とが１００％のヌクレオシドと相同性を持つし、当該引き物二つのうち第２の核酸分子に少なくとも１０個の連続されたヌクレオシドの序列を含み、当該序列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：０２中の一段落の核酸序列の反方向補助序列が１００％のヌクレオシドと相同性を持つし、その内、当該第二の核酸分子の序列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：０２中で第１核酸分子の核酸序列の３’に位置する。当該引き物核酸分子は任意の分かっている方法を使って製造準備を行うことができる。例えば自動合成等である。  ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、４、５、６、７、８、９、１０、１１と１２は“正方向”と“反方向”の引き物の一部例である。【００５９】本発明は一種の試薬箱を提供したし、この試薬箱は上で言及した一双の核酸が含まれている。  このような核酸は適当な保存媒体の中に存在して例えば緩衝溶液である典型的な情況のもとでは適当な容器中に保存する。  この試薬箱（Ｋｉｔ）には核酸番が含まれて、更に一種の緩衝液、合成酵素列式反応（ＰＣＲ）に使われる試薬（例えば脱酸ツリーヌクレオシド ＤＡＴＰ、ＤＴＴＰ、ＤＣＴＰ、ＤＧＴＰ）、熱安定的なＤＮＡ合成酵素、繰り返し死酵素、ＰＣＲに相応しい緩衝液、ＭＧ２＋イオンを含んだ溶液及びその他分野の技術人員たちがよく分かっているＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ或は実施ＲＴ−ＰＣＲの成分）が含まれている。この試薬箱（Ｋｉｔ）には、更ににこの試薬の使用指導が含まれて、この指導はさまざまな形式で提供されるのに、例えば印刷材料或はコンパクトディスク等である。この試薬箱には更に生物試料（例えば血液、血清試料、スライサー試料等）から抽出したＤＮＡに必要となる試薬、及びｍＲＮＡを産生させるｃＤＮＡコピー試薬も含まれる。  下の文の最も詳細な記述によれば、この試薬箱は病気の診断にも応用できられる。  分離された２個の核酸分子は拡増反応（例えば、ＰＣＲ、ＲＴ−ＰＣＲ或は実時のＲＴ−ＰＣＲ）中で引き物となって使われる。【００６０】一部実施方案の中で第１及び／又は第２核酸分子には一種の仮検測タグ（Ｔａｇ）が含有されている。適当なタグ（Ｔａｇ）では蛍光染料が含まれて例えばフルオレセインイソチオシアネー（ＦＩＴＣ）、ローダミン、テキサスレッド（ｔｅｘａｓ  ｒｅｄ）、フィコエリトリン（ｐｈｙｃｏｅｒｙｔｈｒｉｎ）、アロフィコシアニン（ａｌｌｏｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ）、６−カルボキシフルオレセイン（６−ＦＭＡ）（６−ｃａｒｂｏｘｙｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ）、２’，７’−ジメトキシ−４‘，５’−二塩化−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）、６−カルボキシーＸ−ローダミン（ＲＯＸ）、６−カルボキシ−２’，４，４’，５’，７，７’−ヘキサクロロ  カルボキシフルオレセイン（ＨＥＸ）、５−カルボキシフルオレセイン（５−ＦＡＭ） 或は Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）、また放射性活性タグ（Ｔａｇ）も含まれて、例えば32Ｐ、35Ｓ、3Ｈ等々であるこのタグ（Ｔａｇ）は一種のツーステージシステム（ｔｗｏ  ｓｔａｇｅ  ｓｙｓｔｅｍ）で、その中にこの拡張ＤＮＡはビオチン（ｂｉｏｔｉｎ）、ハプテン（Ｈａｐｔｅｎ）等に結��される。【００６１】一種のその親和性を持っている結合複式分子であり、例えば親和性、特異的抗体等などでその中にこの結合複式分子は一種のが検測可能なタグ（Ｔａｇ）と繋がれた。  このタグ（Ｔａｇ）はプライマーの一つ或は二つと皆繋がれることができる。  或は拡増の中で使われたヌクレオシド合併水（ｐｏｏｌ）で表記することで、この表記を拡張産物に引入できる。  試薬箱は状況によって付加的な組みを提供できる。  これれの組みは上述の方法に用いられるし、その組みには緩衝液、顕色試薬、表記物、反応表面、検測手段、参照試料、標準物、指導説明及び解釈情報などが含めているが、それに限られることでもない。  試薬箱がＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドの検測を提供する際、当該試薬箱には一種類の或は多種類の特異なＰＰＮ／ＭＧ６１抗体を含む。一部実施形態の中特異なＰＰＮ／ＭＧ６１抗体は仮検測の表記を受ける。【００６２】その他の実施方案の中で特になったこのＰＰＮ／ＭＧ６１の抗体は検測可能の表記を受けないで、第2種の検測可能の表記の抗体を提供するが、この抗体は特異なＰＰＮ／ＭＧ６１抗体（“第１”抗体）と結合する。試薬箱は更に密閉試薬、緩衝液及び顕色試薬として用いわれる試薬及び／又は検測に用いわれる表記試薬が含まれる。この試薬箱は更に使用ガイド、参照及び解釈的情報が含まれる。  この試薬箱がＰＰＮ／ＭＧ６１酵素活性の検測に使われる時、この試薬箱（Ｋｉｔ）には一種の基質が含まれて、この基質はＰＰＮ／ＭＧ６１働きを受ける時一種の検測可能な産物を提供する。  この試薬箱（Ｋｉｔ）には更に検測可能なタグ（Ｔａｇ）現色と検測に必要な試薬が含まれる。  この試薬箱（Ｋｉｔ）には、更に使用ガイド、参照及び解釈的な情報が含まれる。  本発明は、更に生物試料の中で検測したＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドの存在及び／又はＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドのレベルを検測する方法を提供した。  この方法は一種のＰＰＮ／ＭＧ６１特異的抗体を使う。  この方法には一般的に：Ａ）この試料とＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドと異なるの抗体と接触させるステップと、Ｂ）この抗体とこの試料分子の間の結合を検査するステップとからなる。【００６３】  適当な参照と備えを進行する時、ＰＰＮ／ＭＧ６１特異的抗体の特異性結合の検測はこの試料の中で存在するＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドの跡である適当な参照には：すでに分かっているＰＰＮ／ＭＧ６１を含まないポリペプチドの試料；及び一種の非特異されたＰＰＮ／ＭＧ６１の抗体と接触した試料、例えば同抗特異的抗体（ａｎｔｉ−ｉｄｉｏｔｙｐｅ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）と接触した試料である多くの検測特異的抗体抗原作用に使われた方法は当該分野の中ですでに分かっているし、この方法で使われることができる。  この方法には標準免疫組織化学方法 、免疫沈澱、酵素法免疫分析及び放射性免疫等が含まれるが、これは全部ではない。  一般的に、このＰＰＮ／ＭＧ６１特異的抗体は直接的或は間接的に仮検測表記を進行する。  直接表記には放射性同位素；仮検測産物の酵素（例えば、発光酵素、β−ガラクトシダーゼ等々）；蛍光発射金属（例えば152ＥＵ或はランタニドその他の、このような金属はＥＤＴＡなどの金属キレート化グループ（ｃｈｅｌａｔ��ｏｎ  ｇｒｏｕｐ）を通じて抗体に繋がれて；化学的発光化合物、例えば発光アンモニア、ｉｓｏｌｕｍｉｎｏｌ、ａｃｒｉｄｉｎｉｕｍ塩など；生物発光化合物、例えばルシフェリン、緑色蛍光タンパク質等々が含まれる。【００６４】この抗体はある種の不用ホルダーに連結（右列）できて、例えばポリスチレンプレート或は微小球体である間接表記には特異されたＰＰＮ／ＭＧ６１特異的抗体の二項が含まれて、その中にこの二項は上文で言及した表記に根拠して進行して；及び特異性結合分子台の構成員、例えばビオチン-アビディン等々であるこの生物学試料は一種の固体支持物或はただキャリア上の固定物と接触してもよい。  例えば窒酸繊維素、このような支持物或はキャリアは細胞、細胞ただ或は可溶タンパク質を固定化させることができる。  この支持物は次に使われる適当な緩衝液に対して洗浄を進行して、その次ＰＰＮ／ＭＧ６１特異的抗体と接触を進行して、この抗体は仮検測表記を経過する。  検測方法は当該分野ですでに分かっているし、可検測表記が発射する信号に相応しい選択を進行しなければならない。  一般的に適当な参照と適当な標準と備えを進行して検測を完成する。【００６５】本発明は、更に一部方法を提供したし、このような方法は生物試料中のＰＰＮ／ＭＧ６１酵素活性の存在及び／又はＰＰＮ／ＭＧ６１酵素活性のレベルの測量にふさわしくなければならない。  このような方法には次のような何種類が連関される。  Ａ）この試料を同一の基質と接触させ、この基質はＰＰＮ／ＭＧ６１の働きを受ける時可検測可能な産物を生み出すと、Ｂ）この酵素反応の産物を検測するとからなる。  全てのアシル化化合物が本分析の応用に適用される。  このアシル化化合物はＰＰＮ／ＭＧ６１の実技の前が酵素活性を通じてアシル基の分裂を進行した情況下で、吸収も、蛍光及びその他検測に相応しい検測の物理性質変化をもたらす。【００６６】  本発明は更に、一部方法を提供したし、このような方法は生物試料中のＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡの存在を検測するのに使われた。  このような方法は例えばＰＰＮ／ＭＧ６１遺伝子表現に影響させるある種の化合物に対して、直接的に或は間接的に推測を進行するのに使われる。  このような方法には一般的に：Ａ）交雑を許容した条件の下でこの資料と本発明のＰＰＮ／ＭＧ６１ポリヌクレオチドの接触を進行する；Ｂ）可能に存在する交雑に対して検測を進行する。  適当な参照と備えを進行する情況下で雑交に対する検測はＰＰＮ／ＭＧ６１ポリヌクレオチド存在の表示跡である適当な参照には例えば、すでに分かっているＰＰＮ／ＭＧ６１ ｍＲＮＡを含まない試料及びＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡと“同意”の表記ポリヌクレオチドが含まれる。【００６７】  交雑を承諾した条件は当該分野ですでに分かっているし、また上文でも詳細に描いた。表記したＰＰＮ／ＭＧ６１ポリヌクレオチドを使うにおいて任意ですでに分かっている方法を通じて検測を完成する。  このような方法には円位交雑、ＰＣＲ、ＲＴ−ＰＣＲ、実施ＲＴ−ＰＣＲと“ＮＲＴＨＥＲＮ”或はノーザンブロット、或はこのような方法の組合せが含まれながらこれは全部ではない。  このようなポリヌクレオチドに使われる多種タグ（Ｔａｇ）と表記方法は当該分野���すでに分かっているし、本発明の分析方法に使われる。  特異性交雑は適当な参照との備えを通じて検測を進行する。【００６８】  一部実施方案の中で、こんな方法は生物試料で連関されたある種の ｍＲＮＡの一つのＣＤＮＡ転写を発生して、また一双の分離した核酸を使って拡増反応（例えば、ＰＣＲ）中の正方向と逆方向プライマーとしてこのＣＤＮＡに対して拡増を進行する。  この核酸双の中の各個核酸分子は長さが１０から２００ヌクレオシドの間であり、このプライマー双の中の第１核酸分子は一つで少なくとも１０個の連続ヌクレオシドの序列を含んでいるし、この序列はＳＥＱＩＤＮＯ：０２中の一段落の核酸序列と１００％のヌクレオシドの同上性を持ってなければならないし、このプライマー双の中の第2核酸分子は一つで少なくとも１０個の連続ヌクレオシドの序列を含んでいるし、この序列はＳＥＱＩＤＮＯ：０２中の一段落の核酸序列の反響補助序列と１００％のヌクレオシド同上性を持ってなければならないし、その中にこの第２核酸分子の序列はＳＥＱＩＤＮＯ：０２中の第１核酸分子の核酸序列の３’に位する。  このプライマー核酸分子は任意の分かっている方法を使って製造準備することができるし例えば、自動合成等々であるＳＥＱＩＤＮＯ：３、４、５、６、７、８、９、１０、１１と１２は“正方向”と“逆方向”プライマーの一部例である。【００６９】  ＰＣＲ拡増の方法を使って単一細胞中のＤＮＡを進行することができるし、少なくとも約１０5個細胞を使うにおいて比較的便利である。  合成酵素連鎖反応の使用に対する描写はＳａｉｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：４８７を参照して、ただ前方法の総合叙述はＳａｎｂｒｏｏｋ，ｅｔ  ａｌ．Ｍｉｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、ＣＳＨ  Ｐｒｅｓｓ  １９８９、ＰＰ．１４．２−１４．３３で参照にする。  この拡増反応の中では一種の可検測表記水を含む。適当なタグ（Ｔａｇ）には蛍光染料が含まれて、例えばフルオレッセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ローダミン、テキサスレッド（ｔｅｘａｓ  ｒｅｄ）、フィコエリトリン（ｐｈｙｃｏｅｒｙｔｈｒｉｎ）、６−カルボキシフルオレセイン（６−ＦＡＭ）、２’，７’−ジメトキシ−４‘，５’−二塩−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）、６−カルボキシーＸ−ローダミン（ＲＯＸ）、６−カルボキシ−２’，４，４’，５’，７，７’−ヘキサクロロ  カルボキシフルオレセイン（ＨＥＸ）、５−カルボキシフルオレセイン（５−ＦＡＭ）或はＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）、また放射活性タグ（Ｔａｇ）も含まれているし、例えば32Ｐ、35Ｓ、3Ｈ等々であるこのタグ（Ｔａｇ）は一種のツーステージシステム（ｔｗｏ  ｓｔａｇｅ  ｓｙｓｔｅｍ）で、その中にこの拡増ＤＮＡはビオチンに繋がれるなど、彼らは一種のその親和性結合複式分子を持っているし、例えばアビディン、特異的抗体など等であるその中にこの結合複式分子は同一種の仮検測タグ（Ｔａｇ）と連結する。このタグ（Ｔａｇ）はプライマー中の一つ或は養子と皆連結することができる。  或は拡増の中で使われたヌクレオシドを合併物によって表記して、���のタグ（Ｔａｇ）を拡増産物で引入させる。【００７０】  さまざまな方法は特定された組織の中である種の遺伝子或はタンパク質の表現レベルを検測するのに使われる。  さまざまな方法を通じて、診断を進行して患者の試料の中で正常或は変なＰＰＮ／ＭＧ６１の存在可否或は量の変化を検測する。  例えば、検測は細胞或は組織切片に染め付けを進行する伝統的な方法を利用及び根拠で実施することができる。  この細胞試料中に目的抗体を添加して、十分な時間を保温して表上に対する結合を許容して、この時間は一般的に約１０分であるこの抗体は放射性同位素、酵素、発光剤、化学的発光物或はその他直接的に検測した表記を使うことができる。  或は第２の抗体或は試薬を使ってこの信号を拡増する。  このような試薬は当該分野の方ならでれでも分かっている。  例えば、第１の抗体はビオチンとカップリングを進行して、円形群と陽化物酵素右列のアビディンを加入して第２試薬にする。【００７１】  或は第２抗体は一種の蛍光化合物と右列して、例えば発光素、ローダミン、テキサスレッド等。  最終の検測は一種のペルオキシダーゼ（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）の存在の下に色変化になる基質を使う。このような方法には分散細胞のフローサイトメトリー、顕微鏡、放射現像、シンチレーション計測（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ  ｃｏｕｎｔｉｎｇ）等々が含まれる。  入れ替えされた情況下でＰＰＮ／ＭＧ６１遺伝子の表現に着眼しなければならない。  生物化学研究を進行してコーディング区域或は調節区域の序列多形性が疾病と関係があるか否かを検測する。  疾病と係わるすべて形態性にはタンパク質活性に影響を与えるには遺伝子結実或は切断、表現レベルを改変させる突然変異等々が含まれる。【００７２】  遺伝子の表現レベルに影響を与えるにはサブチェーン（ｓｕｂｃｈａｉｎ）を起動する或はサブチェーンを強化する変化は当該分野中ですでに分かっている。  さまざまな方法と正常の同位遺伝子の表現レベルを通じて比較を進行する。プロモーター或はエンハンサー（Ｅｎｈａｎｃｅｒ）強度を検測する方法には、表現された天然タンパク質に対する定量、さまざまなコントロール部品を報告遺伝子を有するキャリアに挿入する。  この報告遺伝子ではクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ  ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）、発光酵素、β−ガラクトシダーゼ等々があり、この遺伝子は便利な定量を提供することができる。【００７３】  特異性序列に使うにおいて、例えば疾病と係わる多形性に対して核酸分析を進行する方法はとても多い。  大量のＤＮＡを得ることができる情況で、遺伝子組ＤＮＡを直接使う。  或は、この目的区域クローンを適当なキャリアに入れて分析の量に充分に使われるまで伸ばす。  この遺伝子を表現する細胞はＭＲＮＡの根源で使われて、このＭＲＮＡは直接分析或は繰り返し視を進行してＣＤＮＡで作りながらこれは分析に使われる。  この核酸は伝統的な方法を通じて、例えばＰＣＲ、拡増を進行して分析に充分に量を提供する。  合成酵素軟式反応の使用描写はＳａｉｋｉ，ｅｔ  ａｌ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：４８７を参照して、方法に対する総合叙述はＳａｍｂｒｏｏｋ、ｅｔ  ａ���．ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、ＣＳＨ  Ｐｒｅｓｓ  １９８９、ＰＰ．１４．２−１４．３３を参照する。  或は、当該分野の中ですでに分かっているさまざまな方法はオリゴヌクレオチド（ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）を利用した連結ですべての形態性の方法を検測する。  例えばＲｉｌｅｙ  ｅｒ  ａｌ．（１９９０）、Ｇｅｎｅｔ．５８：１２３９−１２４６である。【００７４】  この拡増反応の中から一種の仮検測表記物質を含むことができる。  適当な表記物質には蛍光染料が含まれて、例えば フルオレッセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ローダミン、テキサスレッド、フィコエリトリン（ｐｈｙｃｏｅｒｙｔｈｒｉｎ）、６−カルボキシフルオレセイン（６−ＦＡＭ）、２’，７’−ジメトキシ−４’，５’−二塩−６−カルボキシフルオレセイン（ＪＯＥ）、６−カルボキシーＸ−ローダミン（ＲＯＸ）、６−カルボキシ−２’，４，４’，５’，７，７’−ヘキサクロロ  カルボキシフルオレセイン（ＨＥＸ）、５−カルボキシフルオレセイン（５−ＦＡＭ）或はＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’,−テトラメチル−６−カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）、放射活性タグ（Ｔａｇ）も含まれる。例えば32Ｐ、35Ｓ、3Ｈ等々であるこのタグ（Ｔａｇ）は一種のツーステージシステム（ｔｗｏ  ｓｔａｇｅｓｙｓｔｅｍ）で、その中のこの拡張ＤＮＡはビオチンなどに繋がれて、一種のその親和性結合複式分子を持っているし、例えば、親和素、特異的抗体等々、その中にこの結合複式分子は一種の仮検測表記水と繋がれる。【００７５】  このタグ（Ｔａｇ）はプライマー中の一つ或は両方と皆繋がれる。  或は、確定中使われたヌクレオシド合併物で表記して、拡増産物に引入する。  核酸分子、例えば拡張或はクローンを経った段落は、当該分野でもうさまざまな方法で分析を進行した。  核酸は双脱酸或はその他方法で検測を進行して、アルカリ気序列と野生型序列を比較分析する。  Ｓｏｕｔｈｅｒｎを通じる跡、点跡など方法と変化序列の交雑も存在の検測に利用することができる。  参照組及び多種の変化序列と固体支持物であるオリゴヌクレオチドの核酸プローブ陣列の雑種モードは、変化序列の存在を検測する手段として使われる。  一本鎖高次構造多型（ＳＳＣＰ）分析、変性剤濃度勾配ゲル電気泳動（ＤＧＧＥ）及びゲル基質中のヘテロ二本鎖分析は、電気泳動移動度に基づきＤＮＡ序列変化によって現れる構造変化を検測できる。  或多態性の産生或はあるネゾル酵素の識別部位を破壊した情況で、このネゾル酵素を使ってこの試料を消化し、またこの産物大きさに対して分給を進行して、この部分の消化可否を検測する。    分給は運行或はキャピラリー電気流しを通じて進行して特にアクリンサ酸アミン或は寒天糖運行である。  この遺伝子中突然変異の選別はこのタンパク質の機能性或は抗原性特徴に根拠して進行する。  タンパク質切断分析は当該タンパク質の生物活性に影響を与えられる欠失を検測するのに使われる。  選別の中でさまざまな設計を利用して、タンパク質のすべて形態性の免疫分析に使われる。  さまざまな浮動した遺伝子突然変異である種の特定された疾病表現型をもたらした情況下で、考量性タンパク質分析はもう���効な選別工具に証明された。  このコーディングタンパク質の活性は野生型タンパク質との比較を通じて検測される。【００７６】本発明の表現水準を狙う診断方法は、典型的な情況下で目標試料の核酸度と参照値の比較に係わる。  この係りによって任意的な相対変化に対して検測を行い、当該変化は定量測定及び/又は定性測定されるし、従って当該変化とある種の異常表現の存在とが何の関連に対して測定できる。  当該分野の技術人員はもはや多種の試料の中で核酸存在量（ａｂｕｎｄａｎｃｅ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）の浮動した方法に対して検測したし、その中面白い特定方法にはＰｉｅｔｕ  ｅｒ  ａｌ、Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．（Ｊｕｎｅ  １９９６）６：４９２−５０３；Ｚｈａｏ  ｅｒ  ａｌ、Ｇｅｎｅ（メック．２４，１９９５）１５６：２０７−２１３；Ｓｏａｒｅｓ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（Ｏｃｔｏｂｅｒ  １９９７）８：５４２−５４６；Ｒａｖａｌ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ（Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  １９９４）３２：１２５−１２７；及びＣｈａｌｉｆｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ（Ｆｅｂ．１，１９９４）２１６：２９９−３０４で描写された方法である。【００７７】本発明は調節ＰＰＮ／ＭＧ６１酵素活性の薬品に対する検証の選別を進行するのに使われる方法を提供したし、細胞の中での調節ＰＰＮ／ＭＧ６１多ポリペプチドレベルの薬品に対して検証する選別を進行するのに使われる方法も提供した。  及び細胞の中での調節ＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡレベルの薬品に対して検証選別を進行するのに使われる方法、調節ＰＰＮ／ＭＧ６１のチン核細胞の中での放出された薬品に対して検証の選別を進行するのに使われる方法なども含まれる。  一部実施方案の中でこの分析は無細胞分析であるその他の実施方案の中でこの分析は細胞の分析に基礎したのである。【００７８】本文で使った用語“調節”には“向上”と“低下”が含まれる。  一部実施方案の中で、注目を引くことは抑制ＰＰＮ／ＭＧ６１活性の薬品、及び／或は細胞の中でＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドのレベルを低下させる薬品及び／又は細胞の中でＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡのレベルを低下させる薬品及び／或はＰＰＮ／ＭＧ６１が腎核細胞の中から放出されることを低下させる薬品であるこのような薬品は癌を治療する候補薬品として関心を受けている。  その他の実施方案の中で注目を引くことはＰＰＮ／ＭＧ６１活性を向上する薬品であり、このような薬品はある種の均衡を失う症状を治療するのに使われて、このような均衡の失うことは血管発生を向上することを通じて治療を進行する。  例えば局所虚血症状である。【００７９】  技術用語である“候補薬物”、“薬物”、“物質”と“化合物”はここの文でお互いに交換され使われる。  候補薬物には多種の化学類型が含まれるし、典型的な情況下で合成、半合成或は天然存在の有機分子或は無機分子で分かれる。  候補薬品は有機所化合物であり、その分子量は５０以上で約２５００ドルトンよりは低い。  候補薬品には一部機能性グループ（Ｇｒｏｕｐ）が含有されていて、このグループはタンパク質と構造作用を進行するのに必要であり、特に水素結合がそうである。  且つ���なくとも一種類のアミドゲン、カルボニル、水酸基或は水酸基グループも含みながら少なくとも二つこのような機能性化学グループを含む。  この候補薬品には炭素リング（ｃａｒｂｏａｔｏｍｉｃ  ｒｉｎｇ）或は複素環構造及び／又は芳香族或は多芳香族構造が含まれてこのような構造は一種の或は色々種の上で言及した機能性グループの代替を受ける。  候補薬品も同じく生物分子の中で捜すことができるし、このような分子にはペプチド、糖、脂肪酸、ステロール、プリン、ピリミディン、このような分子の誘導体、構造類似物或は彼らの組合せ等が含まれる。【００８０】候補薬品のさまざまなルートから得ることができ、このようなルートには合成或は天然パッケージベースが含まれて、例えば、多種の方法は大量の有機化合物と生物分子の随時合成或は指向合成に利用されて、これは随時化のオリゴヌクレオチドとオリゴペプチドの表現を含が含まれる。  或は、細菌、真菌、植物と動物の抽出物から獲得可能或は産出し易い形態で存在する天然化合物の倉庫である。  外にも、天然或は合成により産生できたベースと化合物は伝統的な化学、物理と生物化学の方法を通してで便利に修飾されるし、且つパッケージベースの産生に用いられるされる。  周知である薬学試剤は直接或は随時の化学修飾に使われる。  例えばアシルキ化、アルキル化、エステル化、アミド化等によって構造類似物を産出する。【００８１】選別分析は一種の結合分析である情況で、一種の或はさまざまなこういう分子は一種のタグ（Ｔａｇ）で繋がれて、その中にこのタグ（Ｔａｇ）は直接或は間接的に一種の仮検測信号を提供する。  さまざまなタグ（Ｔａｇ）には放射性同位元素、発光剤、化学的発光物、酵素、特異性結合分子、料粒、例えば自性料粒、等々が含まれる。  特異性化合物には一対の分子、例えばビオチンとストレプトアビジン、ジゴキシンと抗ジゴキシン等々が含まれる。  特異性結合構成員に対して補助性の構成員は正常な情況下ですでに分かっているプログラムに根拠して検測した分子に対して表記を進行する。  この選別分析中にはさまざまなその他試薬も含まれる。【００８２】このような試薬に含まれた例では塩、中性タンパク質（例えば白檀白質）、クレンザー等々であり、このような試薬は補助タンパク質−タンパク質の最適結合及び／又は非特異性の低下或は背景の相互作用に使われる。  一部分析効率を向上させる試薬を使って、例えばタンパク質酵素抑制剤、核酸酵素抑制剤、抗微生物薬品等々であるこのような成分の混合物は、任意の必要結合を生かす序列で添加することができる。  保温は任意の適当な温度下で進行されて、典型的な情況下で４℃から４０℃間である保温は最適活性を狙って選択を進行して、また最適化を通じて速かに苦痛量選別を補助することができる。典型的な情況下で０．１から１時間なら満たす。【００８３】本発明は一部方法を提供して本発明のＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドの酵素活性を調節する薬品に対して検証を進行した。この用語“調節”には血検測ＰＰＮ／ＭＧ６１活性と検測した参照と比べると相対的に向上或は低下が含まれる。  上文で提示した方法には一般的にＡ）検測する薬品をＰＰＮ／ＭＧ６１を含んだポリペプチドの試料との接触を進行する。  ���びＢ）この物質が存在する情況下でＰＰＮ／ＭＧ６１のアシル気前二酵素活性に対して分析を進行する。  適当に参照されたＰＰＮ／ＭＧ６１活性（例えば被検測物質が不足な場合でＰＰＮ／ＭＧ６１を含んだポリペプチドの試料）と比べるとＰＰＮ／ＭＧ６１活性の低下するこの物質の調節ＰＰＮ／ＭＧ６１の酵素活性を表示する。【００８４】ここの文で使われる“調節ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドであるアシル基転移酵素活性化薬品”に記述した任意の分子は、例えば合成或は天然の有機或は無機化合物、タンパク質或は薬品、こんな分子は本文では調節ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドを変化させるアシル基転移酵素活性を持っている能力に対して説明した。  一般的な情況下でさまざまな分析混合物は浮動した薬品濃度化で平行作用を進行して異なる濃度の異なる反応を得ることができる。  典型的な情況下で一種の濃度は陰性参照になれる。  すなわち零濃度或は検測レべルより低い濃度である。  アシルトランスフェラーゼの活性は当該分野で既知のいかなるキナーゼ分析により測定することができる。【００８５】アシルトランスフェラーゼの活性のアシルに対する分裂作用の下で、吸収性、蛍光或はその他検測に有利な物理性性質の任意のアシル化化合物は皆本分析の応用に相応しい。  特定された実施方案の中で、一種の３５Ｓタグ（Ｔａｇ）を含んだ物質を使っている。３５Ｓ放出は任意のふさわしい分析を使って測量を進行して例えばシンチレーション計測等々である。  その他の実施方案中、この物質は一種のアシル基化部分を含有しており、いったんアシル基がアシル基転移酵素の作用を通して放出され、可検測信号を提供する。  アシル基移転酵素の活性は蛍光についての検測を通して検測を進める。  この分析は高通量形式（ｈｉｇｈ−ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  ｇｏｒｍａｔ）に特別に適応している。【００８６】適当な参照組と比較してみると、調節ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドを調節するアシル基転移酵素活性の薬品は活性を少なくとも１０％程度上昇或は低下させ、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％であり、好ましくは５０％以上、さら好ましくは１００％或は二倍以上、さらに好ましくは約５倍以上、最も好ましくは約１０倍或はそれ以上である。  理想程度においてＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドを上昇或は低下させるアシル基転移酵素活性の薬品は選択を経て、研究をさらに一歩すすめるために用いられ、細胞の可用性（ａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）、細胞毒作用、生物相容性などに対して推定を進めることができる。【００８７】ある実施方案では、ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドを低下させるアシル基転移酵素活性の薬品は特に注目を浴びている。医療効果を生み出す状況下でアシル基転移酵素活性の最大抑制に対して一般的に必要なことではなく、また、さらに言うと理想的でもない。  ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドを低下させるアシル基転移酵素活性の薬品は腫瘍細胞が刺激するWNT信号伝導及び／或は血管発生を低下させるのに使用し、これによって癌の治療に使用される。  ある実施方案では、ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドを上昇させるアシル基転移酵素活性の薬品は特に注目を浴びている。  ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドを上昇させるアシル基転移酵素活性の薬物は血管発生の上昇に使用され、これによって局部欠血症状を治療するのに使用される。  細胞に基づく方法は調節ＰＰＮ／ＭＧ６１ＭＲＮＡレベル及び／或はＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドレベルの薬品について検測を進める方法及び調節ＰＰＮ／ＭＧ６１が真核細胞中から放出する薬品について検測を進める方法を含む。【００８８】候補薬品に対して、分析中で使用可能である細胞が産生する任意の細胞の毒作用に対して分析を行い、当該分析は皆様周知の分析を使用して行う。例えばトリパンブルー色素除去法、ＭＴＴ（３−（４、５−イメチルキディアゾル−２−基）−２、５−イペニルギ−２Ｈ−ソサオンブロームなどである。  分析中使用した細胞は一般的に哺乳細胞であり、このような細胞にはヒト細胞が含まれるのだが、これはすべてではない。このような細胞は原細胞培養物また永生化細胞系である。  さまざまな細胞の分析に既存の分析は調節ＰＰＮ／ＭＧ６１ＭＲＮＡレベルの薬品に対する検証及び調節ＰＰＮ／ＭＧ６１を真核細胞中に放出する薬品に対する検証に使用される。  このような方法の使用は、例えばコーディングＰＰＮ／ＭＧ６１のＣＤＮＡを含む構造体転化哺乳類細胞としてこのＣＤＮＡを過剰表現する。  或はおおくの状況下で、一種のＰＰＮ／ＭＧ６１起動子を含有した構建体を使用し、この起動子と同一種類の報告遺伝子を連結させる。【００８９】ゆえに、本発明は一種の検証薬品に使用され、特に生物活性薬品を検証する方法を提供する。  また、この薬物は細胞中にＰＰＮ／ＭＧ６１表現レベルを調節し、この方法には検測を待っている候補薬品と一種の細胞と結合を進める方法を含む。  そしてこの細胞には一種のコーディングＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドの核酸を含有している。  更にすでに言及した薬品に対する検測はＰＰＮ／ＭＧ６１について表現した効果である。  ＰＰＮ／ＭＧ６１表現レベルの「調節」には次のようなものがいくつか含まれる。  被検測薬品が結合した参照組と比べ、ＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡの上昇或は低下と／或はこのＰＰＮ／ＭＧ６１ダオリゴヌクレオチドがコーディングしたＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドレベルの上昇或は低下である。  未添加薬品の参照と比較するとこの細胞と大気検測の候補薬品を接触させた後、ＰＰＮ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡと／或はＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドレベル（すなわち含量）上に約１．２５倍程度上昇或は低下させ、一般的に少なくとも１．５倍、一般的に少なくとも２倍、一般的に少なくとも５倍、一般的に少なくとも約１０倍或はそれ以上この薬品がＰＰＮ／ＭＧ６１表現を調節した指示意向である。【００９０】検測されるＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡ及び／又はＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドは内源ＰＰＮ／ＭＧ６１ダオリゴヌクレオチドにコーディング或は組換えキャリアを含有するこの細胞に引き入れられたＰＰＮ／ＭＧ６１ダオリゴヌクレオチドコーディング、すなわちこのＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡ及び/又はＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドは内源ＰＰＮ／ＭＧ６１ダオリゴヌクレオチドにコーディングする。  例えばひとつの組換えキャリアは分離したＰＰＮ／ＭＧ６１転写調節序列を含有することができ、例えば起動子序列、この序列と一種の報告遺伝子（例えばβ−パンラ���ターゼ、ＣＡＴ蛍光酵素或はその他簡単に表現分析を進行する遺伝子）と可調節的に連結される。  このような実施方案に細胞中にＰＰＮ／ＭＧ６１表現レベルを調節する薬品に対して検証を進行する方法には次のようないくつかが含まれる。  待機検測中の候補薬品と一種の細胞を結合し、この細胞には一種の核酸を含有していて、この核酸には一種のＰＰＮ／ＭＧ６１転写調節部品を含有しており、この部品は報告遺伝子と可調節的に結合する。【００９１】また、言及した薬品がこの報告遺伝子の表現の効果を検測する。  組換えキャリアには一種の分離したＰＰＮ／ＭＧ６１転写調節序列を含有しており、例えば起動子序列、この序列とコーディングＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドの序列は可調節的に連結し、或はこの転写調節序列は酵母のＰＰＮ／ＭＧ６１融合蛋白質のコーディング序列と可調節的を連結し、この融合蛋白質にはＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドが含まれ、このＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドは検測を補助することができるポリペプチドと融合をすすめる。  このような実施方案中にこの方法には次のようないくつかが含まれる。  待機検測中の候補薬品は一種の細胞と結合し、この細胞は一種の核酸を含有しており、この核酸には一種のＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドコーディング序列と可調節的に連結する。  及び言及した薬品がＰＰＮ／ＭＧ６１表現の効果に対して検測する。  この検測はこの細胞が産出したＰＰＮ／ＭＧ６１ ｍＲＮＡ、ＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチド或はＰＰＮ／ＭＧ６１融合ポリペプチドの量を通して進行する。【００９２】  細胞に基礎をおいた分析には次のような手続きが含まれる。この細胞と待機検測中の薬品を接触させ、検測試料を形成、及び適当な時間経過後この薬品がＰＰＮ／ＭＧ６１表現レベルの効果を推定する。参照試料には同一の細胞を含有しているが、候補薬品は添加しない。この検測試料と参照試料中にＰＰＮ／ＭＧ６１の表現レベルを検測する。  この検測試料と参照試料のＰＰＮ／ＭＧ６１表現レベルのあいだに比較を進める。  例えばＰＰＮ／ＭＧ６１表現を生み出す構建体を哺乳細胞系に転化するとき、上に言及したＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡのレベルに根拠をおいて検査と測量を進める。  この薬品と細胞が接触するのだが使用される適当な時間は経験に根拠をおいて検測を進める。  一般的にこの薬品を十分にこの細胞に侵入させる、或はこの薬品がＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡと／或はポリペプチドレベルに対して検測することができる効果をもつことができる時間である。  一般的にいって、適当な時間は１０分と２４時間のあいだであり、典型的な状況では約１８時間である。【００９３】ＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡレベルを測量する方法は当該分野ですでにわかっており、そのなかでさまざまな方法は上で描写されており、このような方法中の任意の一種はすべて本発明の方法で細胞中でのＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡレベルを調節する薬品に対して検証を進行するのに使用し、進めたＰＣＲ、実施ＲＴ−ＰＣＲ及びさまざまな交雑分析が含まれ、これは全部ではない。  類似のＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドレベルは任意の標準方法を使用し、検測を進める。  そのなかで、さまざまな方法に対して上で言及した。  この方法にはＥＬＩＳＡの���うな免疫分析、例えば一種の可検測表記をへた特異なＰＰＮ／ＭＧ６１ポリペプチドの抗体を使用して進行したＥＬＩＳＡ、これはすべてではない。【００９４】選別分析にはさまざまなその他の試薬も含まれる。  含まれた試薬は塩、白蛋白のような中性蛋白質、クレンザーなどである。  このような試薬は最適な蛋白質−蛋白質結合の補助と／或は非特異性或は背景の相互適用に使用される。  この分析の効率を提供することができる試薬を使用することができ、例えば蛋白質酵素抑制剤、核酸抑制剤、抗微生物薬品などである。  このような選別方法は当該分野で知られた多種の形態を通して設計を行うし、そこには分析配置と方法を使用することができる。例えばこのような組分中のひとつは某種の固体ホルダーと結合し、或はほかの組分はこのホルダーと結合した組分と接触を進める。  この方法は上の組分は基本上同時に或は不同の時間に結合を進める。  保温は任意の適当な温度下で進行し、典型的な状況下で４から４０度の間である。  保温に必要な時間は最適活性によって選択を進め優化へて迅速な高通量選別を進めることができる。  典型的な状況下で０．１から１時間は十分である。【００９５】このような接触と保温手続き後、本方法は一般的な状況下でさらにひとつの洗浄手続きで検測時、発生することができる背景信号の表記を除去する。例えば放射状或は蛍光表記の非特異性結合の組分、これは全部ではない。状況に根拠をおいて進める選択手続きは次にはすなわち結合複合体の存在を検測する。  上記の方法を通して、さまざまな不同な候補薬品に対して選別を進める。  候補薬品にはさまざまな化学類型が含まれ、典型的な条件下で合性、反合成或は天然的に存在する有機或は無機分子である。候補薬品は有機消化合物であり、分子量は５０より大きく２５００トルレンよりは少ない。候補薬品には一部功能性グループが含有され、このようなグループは蛋白質と構造相互作用（ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ）を進行するのに必須であり、特には水素結合がそうであり、少なくとも一種のアミドゲン、カルボニル、ヒドロキシル或はカルボキシル基グループ、且つ少なくとも２種類のこのような機能性化学グループを含む。  この候補薬品には炭環或は雑環構造と／或は芳香族或は多芳香族構造を含有し、このような構造中で一種類或は複数の上記功能性グループに代用される。【００９６】候補薬品も同様に生物分子中で求めることができ、このような分子には胎、糖、脂肪酸、コレステロール、プリン、ピリミドン、このような分子の誘導体、構造類似物或はその総合が含まれる。  候補薬品はさまざまなルートから得ることができる。  これらのルートには合成或は天然パッケージベースが含まれる。  例えば、多種の方法はは大量の有機化合物と生物分子の随時合成或は典型合成に利用されるし、これは随時化のオリゴヌクレオチドとオリゴペプチドの表現を含が含まれる。  或は、細菌、真菌、植物と動物の抽出物から獲得可能或は産出し易い形態で存在する天然化合物のベースである。  外にも、天然或は合成により産生できた倉庫と化合物は伝統的な化学、物理と生物化学の方法を通してで便利に修飾されるし、且つパッケージベースの産生に用いられるされる。  周知であ���薬学試剤は直接或は随時の化学修飾に使われる。  例えばアシルキ化、アルキル化、エステル化、アミド化等によって構造類似物を産出する。【００９７】  調節ＰＰＭ／ＭＧ６１が真核細胞中に放出された薬品に対して検証を進めるのに使用される方法には、一般的に正常的に生じたＰＰＭ／ＭＧ６１の細胞と検測薬品を接触させ、或はＰＰＭ／ＭＧ６１放出の影響に対して検測を行う。【００９８】ＰＰＭ／ＭＧ６１が真核細胞中に放出した「調節」にはこの大気検測物が不足する参照組と対比するとＰＰＭ／ＭＧ６１が真核細胞中での放出を上昇或は低下させる。  未添加薬品の参照と比較すると、この細胞と待機検測の抗余白物を接触させたのち、ＰＰＭ／ＭＧ６１と／或はＰＰＭ／ＭＧ６１ポリペプチドレベル（すなわち含量）上に約１．２５倍程度上昇或は低下させ、一般的に少なくとも１．５倍一般的に少なくとも２倍、一般的に少なくとも５倍、一般的に少なくとも約１０倍或はこれ以上。  この薬品がＰＰＭ／ＭＧ６１表現を調節した指示跡である。【００９９】細胞に基礎をおく分析には一般的に次のような手続きが含まれる。  この細胞と待機検測中である薬品を接触し生産された検測試料と適当な時間経過後、この薬品がＰＰＭ／ＭＧ６１に対して真核細胞中から放出した効果を推定する。  参図試料は同一の細胞を含んでいるが、候補薬物は参加していない。  検測試料と参照試料中でＰＰＭ／ＭＧ６１が真核細胞で放出を検測する。  この検測試料と参照試料中でＰＰＭ／ＭＧ６１が真核細胞中の放出の間に比較を進行する。  伝統的な方法を使用し、ＰＰＭ／ＭＧ６１の活性を検測することができ、これによりＰＰＭ／ＭＧ６１が真核細胞中の放出に対して検測される。  例えば産出されたＰＰＭ／ＭＧ６１の表現構建体を哺乳細胞系に転化するのに使用されるとき、上で描写した真核細胞中に放出されるＰＰＭ／ＭＧ６１酵素活性に根拠をおき、検査と測量を進行する。  この薬品を細胞で接触するのに使用される適当な時間は経験に根拠をおき、検測を進行し、一般的にこの薬品で十分にこの細胞に進入する（必要ならば）。  或は細胞とその他の働き（例えば細胞表面成分と）を進行し、或はこの薬品でＰＰＭ／ＭＧ６１放出に対して検測することができる効果の時間をもつようにする。  一般的に適当な時間は１０分から２４時間の間であり、さらに典型的な状況で約１−８時間である。【０１００】本発明はさらに本発明の選別分析を使用し、検証した薬品、及びこのような薬品を含む化合物を提供し、このような総合物には薬品化合物がふくまれ、このような化合物はすでにわかっている試薬と方法を使用し、配制を進めることができる。  当該分野ではさまざまな薬物賦形剤に対してすでにわかっているので本分でさらに討論する必要がない。  薬品賦形剤はさまざまな出版物中で十分に描写されており、このような出版物には例えば、Ａ．  Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、”２０th  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｉａｍｓ、＆  Ｗｉｋｉｎｓ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．���．Ａｎｓｅｌｅｔａｌ．、ｅｄｓ．、７th  ｅｄ．、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ、＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅｅｔａｌ．、ｅｄｓ．、３rd  ｅｄ、．Ａｍｅｒ．Ｐｈａａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃ．このような薬品賦形剤、例えば佐剤、キャリア剤、或は希釈剤は、簡単に購入することができる。  さらに薬品物質、例えばＰＨ調節剤と緩衝剤、浸透液調節剤、安定剤、潤湿剤などであり、やはり簡単に購入することができる。  本発明の核酸化合物とポリペプチドは宿主体内のＰＰＭ／ＭＧ６１活性を高める必要がある状況下で薬品に特にこのポリペプチドの活性を高め或は特定の解剖位置にＰＰＭ／ＭＧ６１活性を提供するのに使用される。  一部実施方案中にＰＰＭ／ＭＧ６１は一種の薬品化合物中に提供され、この薬品化合物は一種の薬品賦形剤をもっている。  これらの遺伝子、遺伝子断片或はコーディングされた蛋白或は蛋白質の断片はＰＰＭ／ＭＧ６１と関連する失調症を治療するのに使われる。  表現キャリアが当該遺伝子を細胞の中に引入れるのに使われことができる。【０１０１】このようなキャリアは一般的に当該プロモーター序列付近で便利的な制限性部位を持っていて、核酸序列の挿入を提供するのに使われる。  転写箱には調整を通して一種の転写開始区域、当該目標遺伝子或はその断片、及び転写終止区域を含むようにする。  転写箱には多種のキャリアに引入れることができる。  例えばプラスミド、レトロウイルス、遅発性ウイルス、アデノウイルスなどである。  その中、当該キャリアはこのような細胞中で瞬時性或は安定性を維持されるが、通常は少なくとも約一日の時間を維持されるし、さらに通常な状況下では少なくとも約数日間或は数週間を維持される。【０１０２】遺伝子或は蛋白質は多種類の経路を経て組織或は宿主細胞に引入れられるし、これらの経路はウイルス感染、微量注射（ミクロインジェクション）或は小胞の融合などが含まれる。  無針注射（ｊｅｔ−ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）も筋肉間投薬に利用される。  記述はＦｕｒｔｈ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２），Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ２０５：３６５−３６８を参照する。  このＤＮＡは金微粒子に包まれており、且つ顆粒衝撃設備（ｐａｒｔｉｃｌｅ  ｂｏｍｂａｒｄｍｅｎｔ ｄｅｖｉｃｅ）或は「遺伝子銃」を通して皮内運送を行う。  記述は文献（例Ｔａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２），Ｎａｔｕｒｅ  ３５６：１５２−１５４）を参照する。  その中これらのような金微粒子はＤＮＡに埋められた後、衝撃によって皮膚細胞に入れられる。【０１０３】このほかの実施方案中で、この活性薬品は宿主内で目的遺伝子の表現に対して調節コーディングし、一般的な状況下でそれに対して削弱或は下向調節を進行する。  例えば反義分子、低分子干渉（Ｓｍａｌｌ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ）ＲＮＡ （ｓｉＲＮＡ）、短発カーＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）は細胞中でこの遺伝子の表現に対して下向調節を進行する。  この反義試薬は反義カニュクルレオチード（ＯＮＤ）であり、一部は天然核酸からきたもので化学修飾の合成のＯＮＤを持っている。  或は、このようなＲＮＡ形式の反義分子の核酸構建���をもっている。  このＯＮＤ、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ序列はこの目的遺伝子のｍＲＮＡ 或はｃＤＮＡと相互補助し、この目的遺伝子の産物表現を抑制する。ＯＤＮ、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ分子中のひとつ或は化合を利用して急速に進行し、そのなかで一種類化合にはさまざまな不同な序列を含むことができる。【０１０４】反義序列、ｓｉＲＮＡとｓｈＲＮＡ分子は適当なキャリア中の目的遺伝子序列の全部或は部分を通して表現を進行し、産出し、そのなかでこの転写開始の典型はひとつの反義鍵のＲＮＡ分子で生産される。  或は反義、ｓｉＲＮＡとｓｈＲＮＡ分子は合成されたものである。  アンチセンスオリゴヌクレオチド（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）、ｓｉＲＮＡとｓｈＲＮＡ分子は当該分野中で示した方法を通して合成を行う。優選のオリゴヌクレオチドは天然二リン酸エステル（ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｅｓｔｅｒ）構造より獲得し且つ化学修飾を有し、またこれによってヌクレオチド細胞内の安定性と結合親和性を高められる。当該分野中で既に多種このような骨格改変、糖或は雑環アルカリ基の化学的修飾に対して記述していた。【０１０５】  骨格化学性状での有用変化ではリュデイン酸エステル、比較（ｎｏｎ−ｖｒｉｄｇｉｎｇ）酸素が原因で代替される二リュデイン酸エステル（ｐｈｏｓｐｈｏｎｏｄｉｔｈｉｏａｔｅ）、亜燐酸アミド、三環リン酸エステル（ｔｒｉａｌｋｙｌ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ  ｅｓｔｅｒ）及びｂｏｒａｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｓがある。  アキラルな（ａｃｈｉｒａｌ）燐酸誘導体には３’−Ｏ’−５’−Ｓ−リュデイン酸エステル、３’−Ｓ−５’−Ｏ−リュデイン酸エステル、３’−ＣＨ2−５’−Ｏ−燐酸塩及び３’−ＮＨ−５’−Ｏ−亜燐酸アミドなどが含まれる。胎核酸は胎の連結で全体リボ核酸イエステル骨格を代替した。糖修飾は安定性と親和性を増加させるのに使用される。  脱酸リボースの β−類頭物（ａｎｏｍｅｒ）を使用し、そのなかでアルカリ基の天然α類頭物に対して反転を進行する。【０１０６】  このリボースは２’−ＯＨを使用し、変化をへて２’−Ｏ−メチル基或は２’−Ｏ−燐丙基糖を産出し、この糖は低下した抗性を提供し、親和性には損傷を与えない。  雑環アルカリ基の修飾は必ず適当なアルカリ基複式を維持しなければならない。  一部使用可能な交換にはデオキシチミジン（Ｄｅｏｘｙｔｈｙｍｉｄｉｎｅ）を代替し、５−メチル基−２’−脱酸ポピリミディンと５−ブロム−２’−デオキシシチジンに脱酸ポピリミディンに交代する。  ５−ｐｒｏｐｉｎｙｌ−２’−デオキシウリジン（ｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ）と５−ソプロピレン−２’−ノグルコシドと５−ソプロピレン−２’−デオキシシチジン（ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ，  ｄＣ）はそれぞれ脱酸胸ソンピリミディンと 脱酸ポピリミディンに交代するとき親和性と生物活性を上昇することはすでに証明されている。【０１０７】本発明はさまざまな治療方法を提供した。一部実施方案中で蛋白質の酵素活性を調節する方法を提供し、その方法にはそれに対する調節と抑制が含まれていた。  本方法はさまざまな不同な疾病に対する治療中で用途を探し、このような病気には癌、炎症が含まれる。  ＷＮＴ信号伝導と或は血管発���を高めることを通して不均衡に影響を与える。  例えば局部欠血性失調、及び血栓症などであり、これは全部ではない。  宿主或は患者は任意の哺乳類物からきたものであり、例えば霊長類、特にヒトである。  実験性探索に使用される動物模型は注目をよんでおり、このような模型はヒト疾病治療の模型を提供した。【０１０８】本文で使用した術語「薬品」がさすものは酵素学活性を持っているＰＰＭ／ＭＧ６１のレベルの調節する物質である。  一部実施方案中で薬品は本発明の選別分析を通して検定された薬物である。  「調節は酵素学性質をもっている本ＰＰＭ／ＭＧ６１のレベル」にはＰＰＭ／ＭＧ６１の酵素活性を上昇或は低下させる。  酵素学活性をもっているＰＰＭ／ＭＧ６１蛋白質のレベルを高め或は低下させる。  及びコーディングが酵素学活性を持っているＰＰＭ／ＭＧ６１蛋白質のＭＲＮＡレベルの上昇或は低下などを含む。  一部実施方案中、薬品はＰＰＭ／ＭＧ６１としてそのなかでＰＰＭ／ＭＧ６１自体は個体に対して投薬をするのに使用される。  一部実施方案中薬物は特異なＰＰＭ／ＭＧ６１の抗体である。【０１０９】ＰＰＭ／ＭＧ６１活性の低下と／或はＰＰＭ／ＭＧ６１ポリペプチド或はＭＲＮＡレベルの低下を通して影響を与える疾病には腫瘍中のWNT信号伝導と／或は血管発生の促進と関連した症状或はそれによって招来される症状が含まれる。  ゆえに、本方案はWNT信号伝導と／或は血管発生を低下させ、誘導した腫瘍に使用する。  一部実施方案中で一部方法を提供し、癌治療に使用された。  このような実施方案中の一部方案中で腫瘍発生を低下させる方法を提供した。  その他の実施方案中で分化がＥＣＭ中の放出を低下させる方法を提供した。  腫瘍生長を低下させる方法及びＰＰＭ／ＭＧ６１活性を低下させる方法には一般的に、某種の酵素活性ＰＰＭ／ＭＧ６１のレベルを低下させる薬品を個体に対して薬品を進行する。  適当な参照と比較すると、有効量の薬品は酵素活性ＰＰＭ／ＭＧ６１のレベルを少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％或はそれ以上を低下させた。【０１１０】因子がＥＣＭ中の放出を制限させる方法を提供し、このような因子の例としては生長因子と分化因子がある。  このような方法には一般的に某種の酵素活性ＰＰＭ／ＭＧ６１のレベルを低下させる薬品として個体に対して投薬を進行し、そのなかで酵素活性ＰＰＭ／ＭＧ６１レベルの低下は因子が腫瘍付近或は周辺のＰＰＭ／ＭＧ６１中の放出を低下させた。  分化と生長因子にはＷＮＴ、繊維原細胞生長因子（ＦＧＦ）、肝素結合の類ＥＧＦ生長因子、肝細胞成長因子、ＷＮＴ家族の分泌糖蛋白質の成員、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、血小板誘導の生長因子（ＰＤＧＦ）、転化生長因子（ＴＧＦ）例えばＴＧＦ−β, 骨格形態発生蛋白質、ＧＭ−ＣＳＦ及び肝細胞生長因子などが含まれているがすべてではない。【０１１１】本発明の方法を使用して治療を進めることができる腫瘍には悪性腫瘍、例えば非小細胞肺がん、結腸癌、前立腺がん、乳腺癌、悪性黒色小腫瘍、導管腫瘍、子宮内膜腫瘍、胃がん、脾臓がん、中皮腫、口腔粘膜発育異常（ｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ  ｏｒａｌｍｕｃｏｓａ）、侵入性口腔がんｔｒａｎｓｉｔｉｏｎａｌ  ａｎｄ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｃａｒｃｉｍｏｍａなどが含まれる。また、神経悪性増長、例えば神経細胞腫瘍、成交質細胞腫瘍、星細胞腫瘍、神経交質腫瘍など、慢性リンパ性白血病、悪性皮膚Ｔ細胞（ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ｔ−ｃｅｌｌ）、菌状息肉腫（Ｍｙｃｏｓｉｓ  Ｆｕｎｇｏｉｄｅｓ）菌病、非ＭＦ皮膚Ｔ細胞リンパ腫瘍、リンパ腫瘍瘍丘疹病、Ｔ細胞富集皮膚リンパ増生（Ｔ−ｃｅｌｌ  ｒｉｃｈ  ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｌｙｍｐｈｏｉｄ  ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ）、大疱性遺伝疱疹、盛状紅斑狼瘡、扁平苔癬などが含まれる。【０１１２】当該分野で既知の任意の手段は腫瘍細胞の成長の抑制或は低下に対して推定を進行し、このような方法には腫瘍体積の検測、腫瘍の増殖いかんに対する検測、例えば3Ｈ−参入分析、及び／或は腫瘍細胞に対して計数を進行するのにこれは全部ではない。  一部実施方案中で本発明はがんを低下させる方法を提供し、この方法には酵素活性ＰＰＭ／ＭＧ６１のレベルを高める方法が含まれた。一部実施方案中でこの方法にはＰＰＭ／ＭＧ６１で個体に投薬した。  その他の実施方案中でこの方法は薬品で（例えば上で言及した選別方法を総じて検証した薬品）で個体に投薬を進行し、そのなかで言及した薬品は個体中でＰＰＭ／ＭＧ６１のレベルを上昇させる薬品である。  医療有効量の薬品の量は十分に相当比例の配基中でアシル基部分を除去することができ、これによってがんを防止或は改善するものである。  これから本文は癌の上下文で使用される「治療」が指すことはがんの、或はがんと関連した症状の防止と改善をいう。【０１１３】薬品に使用されるＰＰＭ／ＭＧ６１或は薬品の量を測定するためには必ず完全にすべてのアシル基グループを除去しようとは考えてはならないという点を注意しなければならない。  正常の治療を進行するために傷の発生した部分、肝炎、或は疾病形態の区域の組織中で必ず少なくとも一部分白血細胞或は嗜中性細胞を添付しなければならない。  投薬に使用されるＰＰＭ／ＭＧ６１或は薬品の量は患者の特定需要に根拠をおいて調節を進め、同時にさまざまな要素も考慮しなければならない。  例えば治療をのぞむ疾病類型である。  このようなＰＰＭ／ＭＧ６１と／或は薬品はさまざまな疾病の治療に使用され、例えば風習性関節炎、喘息、成人呼吸困難総合症、有類型腫瘍病、過敏性肺炎、多発性硬化、同種異体移植物排類及びリンパ腫瘍が皮膚位置への分布などである。  本発明の化合物は任意の状態を治療するのに使用され、そのなかでこの免疫系統が転換され身体を対抗することによって白細胞が組織中で積累する程度を招来し、これによって組織損傷、浮腫、炎症と／或は病痛を誘発した。  例えば大量の白血細胞は迅速に患病区域の間接に浸入し或は周辺細胞を振興するとき風湿性関節炎の炎症を発生した。【０１１４】  一部実施方案中でこの発明は血管発生の増強に使用される方法を提供した。  このような方法には一般的に一種の有効量のＰＰＭ／ＭＧ６１で失っている症状の哺乳動物に対して投薬を進行するのに関連し、この症状は血管発生を増強させることをとおして治療を進行する。  多くの実施方案中でＰＰＭ／ＭＧ６１は某解剖位置に対して局部投薬を行った。  本発明の方法に根拠をおいて進めたＣＬＦＹＲＫ影響は症状と疾病の例としては血管閉塞と関連した任意の症状が含まれており、例えば動脈、静脈或は毛細系統の閉塞である。  このような症状の具体的な例には冠状動脈閉塞疾病、結動脈閉塞疾病、動脈閉塞疾病、末梢動脈閉塞疾病、動脈硬化症、ｍｙｏｎｔｉｍａｌ  ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ（例えば血管手術或は気嚢血管整形術或はｖａｘｃｕｌａｒ  ｓｔｅｎｔｉｎｇ）、閉塞性血栓性管炎、成血栓失調、脈管炎などが含まれるのだがこれは全部ではない。【０１１５】  本発明の方法を使用して予防することができる症状と疾病にはさまざまな局部失血症のうち（例えば、心筋失血、四肢失血、中風と関連した失血）任意の一種が含まれ、心臓病発作（心筋失血）或はその他の血流減少と関連した血管壊死、中風、四肢壊死、或は消失など含んでいるが、これに限られることでもない。  これから、本発明は失血症状を治療する方法を提供した。  有効量のＰＰＭ／ＭＧ６１で進行した投薬は血管発生を促進し、その結果は失血組織に対する血液供給の増加である。  適当な参照と比較すると、ＰＰＭ／ＭＧ６１で吸薬を進めた後失血組織に対する血液供給（血流）が増加は少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約５０％、少なくとも約７５％、少なくとも約１００％或はそれ以上である。【０１１６】  当該分野ですでにわかっている任意の方法を通して、局部失血組織に対する血液供給の増加いかんについて検測して、このような方法には温度記録（ｔｈｅｒｍｎｏｇｒａｐｈｙ）、赤外記録、透皮ＰＯ2、透皮ＰＣＯ2、レーザーｄｕｏｐｕｌｅ、ｄｕｏｐｕｌｅ波形、上腕と足首の血圧比（ａｎｋｌｅ  ｂｒａｃｈｉａｌ  ｉｎｄｅｘ）、脈拍体積記録（ｐｕｌｓｅ  ｖｏｌｕｍｅ  ｒｅｃｏｒｄｉｎｇ）、指圧（ｔｏｅ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）、双波形（ｄｕｐｌｅｘｗａｖｅｆｏｒｍ）、磁共振成像影、同位素衝失（ｉｓｏｔｏｐｅ  ｗａｓｈｏｕｔ）及びＮＡＤ／ＮＤＨ蛍光分光密度などが含まれており、これがすべてではない。このような方法は当該分野中ですでにわかっており、いくつかの出版物でもすでに描写された。【０１１７】血管発生が増加しているか否かを測定するには当該分野中の任意の周知の方法を使用して行うことができる。  この方法には：新生血管を浸以松弛の植物内への生成を刺激し、血管が角膜或は前眼室内の生長を刺激し、内皮細胞の増殖、転移或は体外管の形成を刺激し、及び鶏絨幕尿嚢幕分析、ハムスター頬嚢分析、ポリビニールアルコール錦板分析（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ  ｓｐｏｎｇｅ  ｄｉｓｋ  ａｓｓａｙ）などが含まれる。  このような分析は本領域中ですでに広範囲にわかっているさまざまな種類の出版物で描写されている。これら出版物の例にはＡｕｅｒｂａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｐｈａｒｍａｃ  Ｔｈｅｒ  ５１：  １−１１）が含まれていて、これを参考できる。  上記のように、一種の有効量の活性薬品（例えば小分子、抗ＰＰＭ／ＭＧ６１抗体或はＰＰＭ／ＭＧ６１）は宿主に対してこの薬品を進行し、そのなかで「有効量」が指すことは十分に必要な結果を産出する量をいう。【０１１８】  一部実施方案中で必要な結果は少なくともＰ��Ｍ／ＭＧ６１酵素活性と参照と比較した低下である。  その他の実施方案中でこの必要な結果はＰＰＭ／ＭＧ６１酵素活性と参照と比較した増加（個体中、或は個体の局部解剖位置）である。  典型的な状況で、本発明の化合物は必ず活性分子が１％から約９５％以下を含まねばならず、約１０％から約５０％の間にあるのが好ましい。  一般的な状況下で自動に対しては必ず１００ＭＧから約５００ＭＧのあいだで投薬を進行させなければならない、成人は約５００ｍｇから約５ｇの間で投薬を進行する。  投薬は一般的な状況下で注射により行う。  一般的に注射を通して局部区域に対して投薬を進行する。  投薬の頻度は必ず患者反応に基礎をおいて決定を考慮しなければならない。  その他有効量は当該分野中の普通技術人員が産出した剤量反応曲線で簡単に検測することができる。【０１１９】ＰＰＭ／ＭＧ６１の量を検測するために、当該分野の技術人員は簡単に得られる有管除去給定量ＰＰＭ／ＭＧ６１に必要な酵素量の情報、例えば給定された酵素がもっている活性はひとつ単位で酵素で生理ＰH下で基質から１ＭＭＯＬ／分のＳＯ4の除去を進行し、治療目的として７０ｋｇの人類へは１から１０単位で静脈内投薬を進行する。  酵素活性ＰＰＭ／ＭＧ６１レベルを除去するのだが、必要な薬品の量は対外実験を通して計算を進行する。  例えば高アシル基グループが給定量の基質中の除去に必要な薬品量を除去することを通して計算を進行し、待機治療区域中のこの基質（或は体内対応物）の量を推定することを通して投与する薬品の量を測定する。この薬品量は使用される特定薬品によって変化がある。【０１２０】本発明の方法中で活性薬品は任意の便利な手段を利用し、投薬を進行しこの手段は必要なＰＰＭ／ＭＧ６１活性抑制を招来することができなければならない。  本発明の薬品は適当な薬用キャリア又はシンナー（Ｔｈｉｎｎｅｒ）と結合して薬用混合物に入れることができる。  さらに特定の状況下で、本発明の薬品は適当な薬品用キャリア或は希釈剤を通して化合を進行し薬品化合物に配入することができ、また固体、半固体、液体或は気体形式の制剤、例えば薬片、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、座薬、注射剤、吸入剤或は気体交質（ジェル）などである。  同様に、このような薬品の使用はさまざまな方式で完成された場合、口腔、直腸、非腸胃道、皮下、透皮、ｉｎｔｒａｃｈｅａｌなど投薬が含まれる。【０１２１】薬学薬剤の形式下で、この薬品は薬品用塩の形式で投薬を進行し、或はそれらは単独の使用或はその他の薬学活性化合物と適当な添加物と組み合わせて使用することができる。以下の方法と賦形剤は例にすぎず絶対的なものではない。【０１２２】口腔製剤に対してこの薬品は単独の使用或は適当な添加物と組み合わせて、薬片、粉末、顆粒、カプセルを産出し、例えば伝統的な添加剤と加工した乳糖、甘露糖、とうもろこしでんぷん、或はさつまいもでんぷん、粘合剤と結合した結晶繊維素、繊維素衍生物、アラビア松脂とうもろこしでんぷん或はジェル、崩解剤（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｏｒ）と結合したとうもろこしでんぷん、さつまいもでんぷん或は水酸メチル基繊維ナトリウム、潤滑剤と結合した滑石或は硬脂酸マグネシウム、必要な希釈剤、緩衝剤、潤滑剤、防腐剤と調味剤と結合することができる。【０１２３】適当な賦形剤キャリアは、例えば水、塩、ブドウ糖、グリセリン、エチルアルコールなど、及びその加工物である。  もし必要ならばこのキャリアは最小量の補助物質を含有しなければならない。例えば潤湿剤或はＰH緩衝剤である。このような薬剤形式の物質を製造する実際の方法は当該分野の技術人員が知っており、簡単に見ることができる。  例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ‘ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐａ．、１７ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ、１９８５である。  投薬に使用される化合物或は製剤は任意の状況下で一定の量の充分に待機治療対象の体内で得ることができる必要な塩酸塩／セレン塩及び／或はＰＰＭ／ＭＧ６１を含有しなければならない。  溶解を通して浮遊或は乳化された含水溶剤或は非水溶剤でこの薬品は注射に使用される製剤として製造することができ非水溶製剤の例としては植物性油、或はその他類似の油、合成された脂肪酸グリセリンエステル、トリプロピルアルコール或は高級脂肪酸エステル。  もし需要されれば伝統的な添加剤も含有することができ、例えば増溶剤、等浸薬品、浮遊薬品、乳化剤、安定剤或は防腐剤である。【０１２４】  当該薬品は基溶膠製剤に使用され、吸入を通して投薬を進行する。  本発明の化合物は加圧を加えることができるプロモーターに配入することができ、例えばジフルオロジクロロメタン（ｄｉｆｌｕｏｒｏｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）、プロパン、窒素などである。  さらに、当該薬品は多種類の基質を通して混合を行った後には座薬として入れることができる。  例えば乳化基質或は水溶基質混合である。本発明の化合物は座薬を通して直腸投薬を進行する。  この座薬に含まれることができるキャリアにはココア油、タンラプ、ポリエチレングリコール（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）アルコールが含まれこのような座薬は体温下で溶解し室温では固体形態である。  口腔又は直腸投薬に使用される単位剤量形式提供される。  例えばシロップ、エリクサー及び浮遊物であり、そのなかで体量単位ごとに例えば茶さじ量ごと、湯さじ量ごと、欠片ごと、栓ごとであり、予定量の調合物を含有し、この調合物は一種の或はさまざまの抑制剤を含有した。  類似の注射或は静脈内投薬に使用される単位剤量は調合物中で抑制剤を含有し、この調合物は無菌水溶液、生理塩水、或はほかの一種の薬品キャリアである。【０１２５】本文で使用した術語「単位剤量形式」が指すものは実際中連結されない単位であり、単位はヒト或は動物対象の一つ単位の剤量に適合する単位ごとには予定量の本発明の化合物を含有しており、この量は計算を通して水溶に充分な効果を生み出し、この化合物は薬品希釈剤、キャリア或は負荷物と連合する。  本発明に使用される新しい単位製剤形式の企画は使用される特定化合物及び必要なだけの効果及び各化合物が宿主体内に関連した薬効学によって決定される。  薬品賦形剤例えば座薬、キャリア或は希釈剤はすでにわかっている。  さらに薬学で受け付けることができる補助性物質例えば ＰH調節剤と緩衝剤、浸透圧調節剤、安定剤、潤滑剤などに対してもすでに充分に���かっている。【０１２６】薬品が一種のポリペプチド、タポリニュークレオチドそれらの類似物或は模型物（ｍｉｍｅｔｉｃ）である場合、例えば反義序列ｓｉＲＮＡ、或はｓｈＲＮＡ調合物の状況下でこの薬品は任意の道筋をへて組織或は宿主細胞に浸入しこのような道筋にはウイルス感染、微注射或は嚢泡融合が包括される。噴射注射は筋肉間投薬に使用され、描写は、Ｆｕｒｔｈ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）、Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ２０５：３６５−３６８を参照する。このＤＮＡは金微粒につ持っており、顆粒衝撃設備或は「気因銃」を通して皮下に運送される。描写は文献（例えば：Ｔａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）、Ｎａｔｕｒｅ  ３５６：１５２−１５４）を参照とし、そのなかでこのような金微粒はＤＮＡによって埋もれ、皮膚細胞に砲撃浸入された。【０１２７】技術人員は剤量水準を具体的な化合物、症状の重さ程度及び被実験者が副作用に対する敏感度などによって変化されることを認定しなければならない。給定化合物に対して選択した剤量は簡単に当該分野中の技術人員がさまざまな手段を通して検測することができる。  治療とはこの対象を困惑させる病状と関連した症状が少なくとも緩和がなければならず、その中の緩和は広範囲な意味で同一の待機治療の病状と関連した某ケースをいう。例えば症状程度の緩和、病状の例としては炎症或は関連した病痛がある。  治療には或はこの病状或は少なくとも関連した症状が緩制抑制例えば防止と発生、或は完全停止、例えば中止であり、これによって宿主がさらにこのような病状を病まず少なくともこの病状の特定症状を病んではならない。【０１２８】さまざまな宿主は本発明に根拠をおいて治療を進行することができる。一般的な状況下でこのような宿主は「哺乳動物」或は「哺乳類」であり、そのなかでこのような術語は広範囲な意味でこのような哺乳類に属する有機物に対して描写し、このような有機物には食肉目（例えば犬と猫）、げっ歯類（例えば小さなねずみ、モルモット、大きなねずみ）、及び霊長動物（例えばヒト、オラウータン、類人猿）である。多くの実施方案中で宿主は大部分が人類である。【０１２９】上の文の描写に根拠をおいて、本発明のＰＰＭ／ＭＧ６１と薬品自体に使用され、おたがいに同じように使用することができ、或は薬品賦形剤材料と連合使用することができる。  単位剤量活性をもっている試薬箱を提供し、一般的に口服或は注射薬剤である。このような試薬箱中で単位剤量の含有する容器を除いたほかには説明書がなければならず、この説明書はこの薬品が治療目的病状のなかでの応用と付加特長に対して描写されなければならない。  好ましい化合物と投薬量の単位は本文で上記の通りである。【０１３０】有利な状況で本発明のＰＰＭ／ＭＧ６１と薬品は少なくとも一種のその他の非白金と含白金の抗腫瘍薬品とともに悪性症状を病んでいる対象に対して投薬を進行するのに使用された。  例えば一種の抗ＰＰＭ／ＭＧ６１の化合物は投薬処方（ｄｏｓｉｎｇ  ｒｅｇｉｍｅｎ）中で一種の細胞毒性化合物、例えばＤＮＡアルコール気化薬品、或は一種の抗血管発生薬品或は抗腫瘍薬品（化合物或はタンクルロン抗体）とともに投薬を進行するのに本発明はこれが全部ではない。  好ましい腫瘍薬品はｃｈａｄｒｉｂｉｎｅ（２−クロロデオキシアデノシン、２−Ｃｈｌｏｒｏｄｅｏｘｙａｄｅｎｏｓｉｎｅ，Ｃ１０Ｈ１２ＣｌＮ５Ｏ３）、クロラムブシル（ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ、Ｃ１４Ｈ１９Ｃｌ２ＮＯ２）、ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（ダカルバジン、ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ 、Ｃ６Ｈ１０Ｎ６Ｏ）、白金類抗腫瘍薬品及び非白金類抗腫瘍薬品から選出されたものである。  白金を含有する抗腫瘍薬品にはシスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）が含まれるが、これらに限定しない。  白金を含有しない抗腫瘍薬品にはシクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、フルオロウラシル（ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）、エピルビシン（ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ）、アメトプテリン（ａｍｅｔｈｏｐｔｅｒｉｎ）、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）、アドリアマイシン（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、ブレオマイシン（ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ）とエトポシド（Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）などが含まれているが、これらに限定しない。  各種腫瘍薬品は医療有効領内で投薬し、このの量は当該分野ですでにわかっており、使用された薬物、悪性症状類型及びその他症状によって変化がなければならない。
【実施例】
【０１３１】  以下の実施例題は当該分野の普通技術人員にどのように実施するのかを提供と本発明の完全提示と描写に使用され、このような例題は本発明者が認定した発明範囲に対して進めた制限ではなく、また下の問いの実験は実施した全部の実験ではない実施することができる実験である。【０１３２】実施例１：人類正常と癌細胞系中のＰＰＭ／ＭＧ６１の表現      私たちは半定量ＲＴ−ＰＣＲを使用しＰＰＭ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡがさまざまなヒトがん細胞中での表現及び正常ヒト原細胞中での表現に対して研究した。（図１）  私たちが検測したヒトがん細胞系には非小細胞肺がん（ＮＡＣＬＣ）（Ａ５４９，  Ｈ４６０，  Ｈ８３８，  Ｈ１７０３）、乳腺がん（ＭＣＦ−７、ＢＴ４７４、ＨＵＬ１００）、悪性中皮腫細胞系（Ｈ５１３，  Ｈ２０５２，  Ｈ２９０，  ＭＳ−１，  Ｈ２８）、結腸がん細胞系（ＳＷ４８０）、頭頚癌細胞系（Ｕ８７）,子宮頚部がん（ＨＥＬＡ）、瘤細胞系（ＭＥＳ−ＳＡ、ＳＡＯＳ−２, Ａ２０４）が含まれる。私たちが検測した正常ヒト原細胞としては小気管上皮細胞（ＳＡＥＣ）、気管支上皮細胞（ＮＨＢＥ）、及び正常の間皮細胞（ＬＰ−９）などである。各個の細胞できた類型の総ＲＮＡを製造準備して同量の総ＲＮＡをそれぞれＲＴ−ＰＣＲ分析に使用した。【０１３３】  それぞれ試料中で一種の持ち家（ｈｏｕｓｅｋｅｅｐｉｎｇ）遺伝子ＧＡＰＤＨに対して拡増を進行し内参加と可量で対照した。すべて3種類の正常ヒト細胞培養物中ＰＰＭ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡの表現を見ることができなかった。（図１）  これと比較して、私たちは検測したすべての人類がん細胞中ですべて高レベルのＰＰＭ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡの表現を考察することができた。（図１）  このような結果はＰＰＭ／ＭＧ６１がさまざまな、或はすべてのヒト癌細胞系中で高度に表現されたが正常ヒト細胞中では貫徹しなかったことを提示した。【０１３４】実施例２：ＰＰＭ／ＭＧ６１がヒト正常細胞と癌組織試料中での表現      私たちは半定量のＲＴ−ＰＣＲを使用し原非小細胞がん（ＮＳＣＬＣ）組織試料とそれが同一の患者体内で対応した正常肺試料中でＰＰＭ／ＭＧ６１ｍＲＮＡの表現に対して検測した。（図２）  腫瘍に対する治療性初歩切除の患者の新鮮な肺がん組織と周辺の正常肺組織は手術時収集されたものであり、即時液体窒素内に冷凍させたものである。このような組織試料は液体窒素冷凍容器中で保存され−１７０度まで冷凍した後使用した。【０１３５】次にこのような新鮮に除去した肺がんと同一の患者自体に対応する正常肺組織中から総ＲＮＡを製造準備して同量の総ＲＮＡをそれぞれＲＴ−ＰＣＲ分析に使用する。私たちが検測した２４個の対応したヒト非がんとがん化肺組織サンプル中、私たちは対応した正常肺組織サンプルと比較してほとんどすべて（２３個）肺がん組織サンプル（９５．８％）からＰＰＭ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡが過表現された。（図２）実施例３：原ヒト中皮腫組織試料中のＰＰＭ／ＭＧ６１表現レベルに対するＲＴ−ＰＣＲ分析  私たちは半定量のＲＴ−ＰＣＲを使用して原中皮腫組織と正常複合（ｐｌｕｒａｌ）組織試料におけるＰＰＭ／ＭＧ６１ｍＲＮＡの表現に対して研究をした。腫瘍治療性初歩切除を受けた患者の新鮮な中皮腫組織と��辺の正常複合組織を手術時収集し、即時液体窒素で冷凍させた。  このような組織試料は液体窒素で−１７０度まで保存して使用した。  次にこの患者の新鮮に除去された中皮腫と正常組織中で総ＲＮＡを製造準備し同量の総ＲＮＡをそれぞれＲＴ−ＰＣＲ分析に使用する。  私たちが検測したすべてのがん化中皮腫の組織試料中で、私たちは６４．７％（１７中の１１個）の中皮腫組織試料からＰＰＭ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡが過剰表現されたことを発見した。（図３）  すべての正常組織中ではＰＰＭ／ＭＧ６１の表現を貫徹できなかった。【０１３６】実施例４：正常ヒト血清とがん患者からの血清試料中のＰＰＭ／ＭＧ６１表現レベルのＲＴ−ＰＣＲ分析      その後、私たちはがん患者の血清試料の中からＰＰＭ／ＭＧ６１ｍＲＮＡの頻度過表現が検測できたか否かに対する検査を行う。血清試料は標準プログラマに従って多種の患者の中から収集を行う。  そこにはＮＳＣＬＣ、中皮腫、結腸癌、悪性黒色腫、腎臓がん、食道がん、甲状腺がん、悪性毒腫瘍及び卵巣がんが含まれる。  次は血清収集の３時間内にこのような血清試料からの血清の３２個の試料中から私たちは９３．８％（３２個中の３０個）の試料中からＰＰＭ／ＭＧ６１ｍＲＮＡが過剰表現されたことを発見した。  参照組中から総ＲＮＡ８個の不同な正常人の血清中から製造されたものである。【０１３７】  第２実験中にわたしたちはＰＰＭ／ＭＧ６１ｍＲＮＡの過剰表現のいかんについて検測し、ＲＴ−ＰＣＲを使用してがん患者の血清試料中から総ＲＮＡに対する分離作業がなく直接的に検測した。（図５）  この実験中にすべて血清試料は収集した後さらに処理過程をへず直接的にＲＴ−ＰＣＲ反応（毎２５μＩ反応系統中１μＩ血清）に添加した。  この実験は血清収集後３時間内に進行した。  ３６個の循環した後私たちは１６個のがん患者の血清試料中の１０個６２．５％からＰＰＭ／ＭＧ６１ｍＲＮＡの過剰表現を検測した。  これと反対に同一の実験条件下で全部で４個の正常血清試料中ではＰＰＭ／ＭＧ６１の表現を発見できなかった。（図５）  第３実験中、私たちはＰＰＭ／ＭＧ６１ｍＲＮＡの過剰表現がＲＴ−ＰＣＲを使用することを通してがん患者の熱処理された血清試料中から総ＲＮＡ分離なく直接的に測定されたのかどうかについて検測した。（図６）  この実験から血清収集後すべての血清試料は７５度から１０分間加熱しこのＲＴ−ＰＣＲ反応（毎２５μＩ反応系統中１Μｉ熱処理された血清）に添加した。  この実験は同様に血清収集後3時間内に進行した。  ３６個循環した後に私たちは２２個のがん患者の血清試料の１２個５４．５％のＰＰＭ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡの過剰表現を発見することができた。  これと反対に同一の実験条件かで全部の４個の正常血清試料からはＰＰＭ／ＭＧ６１の表現を発見することはできなかった。  まとめると、不同の方法を使用することを通して私たちはがん患者から収集した血清試料から直接の比較的高い比率（５５％超過）のＰＰＭ／ＭＧ６１ｍＲＮＡの過剰表現を検測することができた。  しかし同一の条件下で私たちは不同の非癌人から収集したすべての正常細胞血清試料からはのＰＰＭ／ＭＧ６１の表現を発見できなかった。【０１３８】実施例５：のＰＰＭ／ＭＧ６１ｓiＲＮＡ���非小細胞肺がん（ＮＡＣＬＣ）細胞から細胞の死亡を誘導し、ＷＮＴ／β−連関蛋白質の信号伝導を遮断した。    さらにのＰＰＭ／ＭＧ６１が人類ＮＳＣＬＣ発展期間中での役割について理解するために私たちはのＰＰＭ／ＭＧ６１がＮＳＣＬＣ細胞生存と増殖に必要かどうか検測した。  この実験はＲＮＡ干渉（ＲＮＡＩ）を通して進行したのＰＰＭ／ＭＧ６１表現の考証によって完成する。  低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）は設計を通してＱＩＡＧＥＮ、ＩＮＣから合成される。次にＥｌｂａｓｈｉｒ氏ら（２００１）が記述したプランに従ってＲＮＡＩを進めた。  のＰＰＭ／ＭＧ６１ siＲＮＡを持って４〜６日間処理を行って私たちが検測する表現のＰＰＭ／ＭＧ６１のＮＳＣＬＣ細胞系から顕著な細胞死亡を誘導した（図７Ａと８Ａ、Ｐ＜０．００１）。  しかし参照ｓｉＲＮＡ処理を経た後、私たちは顕著な効果を見ることはできなかった。【０１３９】  私たちは更に、細胞の死傷は概ねこのような細胞系で誘導した細胞の死亡によるものであることを発見した。  １００ＮＭのＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡは顕著な細胞死亡を誘導し、非沈黙ｓｉＲＮＡ参照は細胞の死亡（１００ＮＭ）（Ｐ＜０．０１）（図７Ｂ，８Ｂ，９Ｂ）を誘導できなかった。  私たちはＲＴ−ＰＣＲ分析を通してのＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理後（１００ＮＭ、７２時間）のＰＰＭ／ＭＧ６１  ｍＲＮＡ表現の沈黙（図７Ｃ，８Ｃ，９Ｃ）を証明した。  非沈黙性 ｓｉＲＮＡは参照（１００ＮＭ、７２時間）で使用した。  この細胞の死亡効果がＷＮＴ信号伝導の抑制と関連のいかんを測定するために私たちはのＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理（図７Ｃ，８Ｃ，９Ｃ）を経た後、胞質β−連関蛋白質と生存蛋白質（ｓｕｒｖｉｖｉｎｇ）の表現レベルが下向調節された。   β−肌動蛋白質はすべて実験から加量で参照された。【０１４０】実施例６：のＰＰＭ／ＭＧ６１  ｓｉＲＮＡが中皮腫細胞から誘導し、またＷＮＴ／．β−連関蛋白質の信号伝導を遮断した。  さらにのＰＰＭ／ＭＧ６１がヒト中皮腫発展時間中の作用について理解するために私たちはのＰＰＭ／ＭＧ６１が中皮腫細胞の生存と増殖に必要いかんについて検測した。  この実験はＲＮＡＩを使用することを通して進めたＰＰＭ／ＭＧ６１表現の考証によって完成された。  使用されたｓｉＲＮＡは上での描写と同一である。  次にＥｌｂａｓｈｉｒ氏ら（２００１）が描写したプランに従ってにＲＮＡｉを進めた。  ＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡで４−６日の処理を進めて私たちが検測する表現のＰＰＭ／ＭＧ６１の中皮腫細胞から細胞死亡を誘導した。（図１０）  １００ＮＭのＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡは顕著な細胞死亡を誘導し、非沈黙のｓｉＲＮＡ参照は細胞の死亡（１００ＮＭ）（Ｐ＜０．０１）（図１０Ａ）を誘導できなかった。  私たちはＲＴ−ＰＣＲ分析を通してのＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理後（１００ＮＭ、７２時間）のＰＰＭ／ＭＧ６１表現の沈黙（図１０Ｂ）を証明した。  非沈黙性ｓｉＲＮＡは参照（１００ＮＭ、７２時間）で使用された。  この細胞の死亡効果がＷＮＴ信号伝導の抑制と関連のいかんを測定するためにわたしたちはのＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理（図１０Ｂ）を経た後胞質β−連関蛋白質と生存蛋白質（ｓｕｒｖｉｖｉｎｇ）の表現レベルが下向調節された。  β−起動蛋白質はすべて実験から加量に参照された。【０１４１】実施例７：のＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡが乳腺がん細胞から細胞死亡を誘導し或はＷＮＴ／．β−連関蛋白質の信号伝導を遮断した。  ＰＰＭ／ＭＧ６１が人類の乳腺癌発展期間中に演ずる役割を最も理解するために、私たちはＰＰＭ／ＭＧ６１の乳腺がん細胞の生存と増殖に対する必要性に対して検測を行った。  この検測はＲＮＡｉを使って行うＰＰＮ／ＭＧ６１表現の検証を通して完成する。  使用されｓｉＲＮＡは上の文の記述に相同する。  つぎにＥｌｂａｓｈｉｒ氏ら（２００１）が描写した方案のとおりにＲＮＡｉを進めた。ＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡに４〜６日間処理を行って、私たちが検測する表現のＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡの乳腺がん細胞中から細胞の死亡を誘導した。（図１１）  １００ＮＭののＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡは顕著な細胞の死亡を誘導し、非沈黙ｓｉＲＮＡ参照は細胞の死亡（１００ＮＭ）（Ｐ＜０．０１）（図１１Ａ）を誘導できなかった。  わたしたちはＲＴ−ＰＣＲ分析を通して、ＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理後（１００ｎＮＭ、７２時間）のＰＰＭ／ＭＧ６１表現の沈黙（図１１Ｂ）を証明した。  非沈黙性 のｓｉＲＮＡは参照（１００ＮＭ、７２時間）に使用された。  この細胞の死亡効果がＷＮＴ信号伝導の抑制と関連があるのか否かを検証するために私たちはＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理（図１１Ｂ）をした後、胞質β−連関蛋白質と生存蛋白質（ｓｕｒｖｉｖｉｎｇ）の表現レベルが下向調節された。  β−アクチンはすべて実験の中で試料投与量参照とされている。【０１４２】実施例８：陰性対照：ＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡはＰＰＮ／ＭＧ６１が表現する正常細胞欠乏した状況かで細胞の死亡を誘導できず、且つＷＮＴ／．β−連環蛋白質の信号伝導を遮断しなかった。  ＰＰＭ／ＭＧ６１表現を貫徹できず正常細胞からのＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡＰ効果を検測し、私たちはのＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡを転移染色し二種類の不同なのＰＰＭ／ＭＧ６１表現が欠乏した正常細胞培養物に添加した。（図１２）  １００ＮＭののＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡに４〜６日間処理を行った後、非沈黙性のｓｉＲＮＡ（１００ＮＭ）参照との比較で私たちは顕著な細胞死亡の誘導を発見できなかった。（図１２Ａ）  このような正常な組織から半定量ＲＴ−ＰＣＲを使用し、ｓｉＲＮＡ処理する前とその後に、ＰＰＭ／ＭＧ６１の表現を検測できなかった。（１００ＮＭ、７２時間）（図１２Ｂ）  非沈黙性のｓｉＲＮＡは参照（１００ＮＭ、７２時間）で使用された。  同様に胞質β−連関蛋白質と生存蛋白質の表現水準はのＰＰＭ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理後には変化がなく、私たちはＷＮＴ信号伝導も抑制しないことを発見した。（図１２Ｂ）  同様にβ−起動蛋白質はすべての実験で加量に対照された。  私たちの結果はＰＰＭ／ＭＧ６１の抑制は表現のＰＰＭ／ＭＧ６１のがん細胞から特異に或は選択的に細胞死亡を誘導することを提示したが、表現しないのＰＰＭ／ＭＧ６１の正常細胞にもこのようなことではない。  このような結果はさらにのＰＰＭ／ＭＧ６１の功能とがん細胞生存のあいだに強烈な関係があることを提示した。 実施例��：膜結合Ｏ−アシル基転移酵素ファミリーの保守区域の多配列比較          単に選択された蛋白質（図１３）に対してのみ提示した。  物種と酵素の名称は：ＡＴ、シロイヌナズナ.Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ  ｔｈａｌｉａｎａ；ＢＳ、枯草菌；ＣＥ、線虫；ＤＭ、ショウジョウバエ  ＨＳ、ヒト；ＭＭ、子ネズミ；ＳＡ、黄色ブドウ状球菌；ＳＣ、酵母；ＳＩ、ホホバ（Ｓｉｍｍｉｎｄｓｉａ  ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）；ＴＰ、梅毒らせん体；ＡＣＡＴ、コレステロールアシル基転移酵素；ＤＧＡＴ、ジアシルグリセロール アシルトランスフェラーゼ（（Ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ  Ａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）；ＷａｘＳｙｎ，、ワックス合成酵素である。  ５０％以上の序列からの変化残基と保守残基はそれぞれ黒色と灰色背景を表現し、高度に保守された激性残基は有色背景で表現された。排列比較の左側の数値は序列の位置を表現し、上部の黒線は長い疏水区域を表現した。【０１４３】序列表；  北京雅康博生物化学有限会社  ＰＰＭ／ＭＧ６１の表現の測定方法とその応用  ヒトＰＰＭ／ＭＧ６１のペプチド序列ヒト；  引物対ヒト；  引物対ヒト；  引物対標的序列
【図面の簡単な説明】
【０１４４】
【図１】ＰＰＮ／ＭＧ６１がヒトの正常と癌細胞系中の表現。多種癌細胞系の中でのＰＰＮ／ＭＧ６１が表現したＰＴ−ＰＣＲ分析、使った細胞系には非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）（Ａ５４９、Ｈ４６０、Ｈ８３８、Ｈ１７０３）、乳癌細胞系（ＭＣＦ−７、ＢＴ４７４とＨＵＬ１００）、悪性多中皮腫細胞系（Ｈ５１３、Ｈ２０５２、Ｈ２９０、ＭＳ−１、Ｈ２８）、結腸癌細胞系（ＳＷ４８０）、小腸癌細胞系（Ｕ８７）、ＨＥＬＡ細胞系、肉腫細胞系（ＭＥＳＳＡ）及び正常細胞（小気道上皮細胞）（ＳＡＥＣ）、支気管上皮細胞（ＮＨＢＥ）などが含まれる。各細胞類型の総ＲＮＡを製造準備した。
【図２】ＰＰＮ／ＭＧ６１が正常ヒトと癌細胞組織試料の中での表現。初期非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）組織試料中のＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡレベルに対するＲＴＰＣＲ分析。総ＲＮＡは新鮮に切り取りされた肺癌と等しい患者の体内の同源符号した正常な肺組織中で培われる。悪性黒色腫、腎臓癌、食道癌、甲状腺癌、肉腫、卵巣癌などが含まれる
【図３】初期ヒト中皮種組織試料中のＰＰＮ／ＭＧ６１の表現レベルとＲＴＰＣＲ分析。総ＲＮＡは新鮮に切り取りされた癌症患者の中で培われる。
【図４】正常ヒト血清と癌症患者からの血清試料中のＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡレベルのＲＴＰＣＲ分析、この癌症にはＮＳＣＬＣ、中皮腫、結腸癌。  総ＲＮＡは血清試料の中で培われて、またこの反応に使われる。
【図５】正常ヒト血清と癌症患者からの血清試料中のＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡレベルのＲＴＰＣＲ分析。血清試料は未処理状態に直接、この反応に使われる。
【図６】正常ヒト血清と癌症患者からの血清試料中のＰＰＮ／ＭＧ６１ｍＲＮＡレベルのＲＴＰＣＲ分析。血清試料はこの反応に使われる前に熱処理されなければならない。
【図７】標的はＰＰＮ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡを向けて、ＮＳＣＬＣ細胞系のＨ４６０の中で、細胞の死亡を誘導する。Ａ）このＨ４６０細胞を１００ＮＭのＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理された後、（６日後）０．５％のゲンチアナバイオレットにより染色する。Ｂ）ＰＰＮ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡが誘導する細胞死亡に対して進行したフローサイトメーター分析（アネキシン（ＡＮＥＥＸＩＮ）Ｖ−ＦＩＴＣとＰＩ染色）。左から右の順で、Ｈ４６０癌細胞はそれぞれ１００ＮＭの非沈黙（ｎｏｎ−ｓｉｅｎｃｉｎｇ）参照  ｓｉＲＮＡとＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡの処理を受ける。Ｃ）ＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理後、Ｈ４６０細胞の中でのＲＴ−ＰＣＲとＷＥＳＴＥＲＮ分析。非沈黙ｓｉＲＮＡは参照で使われる。β−アクチンは試料添加量の対照に使われる。
【図８】標的はＰＰＮ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡを向けてＮＳＣＬＣ細胞系のＨ１７０３の中で細胞の死亡を誘導して、ＷＮＴ／β‐カテニン信号を遮断する。Ａ）Ｈ１７０３細胞は１００ＮＭのＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理された後（４日後）、０．５％のゲンティアン  ゲンチアナバイオレットの使用を通じて、染色を進行する。Ｂ）ＰＰＮ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡが誘導する細胞死亡に対して進行したフローサイトメーター分析（アネキシン  Ｖ−ＦＩＴＣとＰＩ染色）。左から右の順で、Ｈ１７０３癌細胞はそれぞれ１００ＮＭの非沈黙（ｎｏｎ−ｓｉｅｎｃｉｎｇ）参照  ｓｉＲＮＡとＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡの処理を受ける。Ｃ）ＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理後、Ｈ１７０３細胞中でのＲＴ−ＰＣＲとＷＥＳＴＥＲＮ分析、非沈黙ｓｉＲＮＡは参照で使われる。β‐アクチンは試料添加量の対照に使われる。
【図９】標的はＰＰＮＴ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡを向けてＮＳＣＬＣ細胞系のＡ５４９の中で細胞の死亡を誘導して、ＷＮＴ／β−カテニン信号伝達を遮断する。Ａ） ＰＰＮ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡが誘導する細胞死亡に対して進行したフローサイトメーター分析（アネキシンＶ−ＦＩＴＣとＰＩ染色）。左から右の手順で、Ｈ４６０癌細胞はそれぞれ１００ＮＭの非沈黙（ｎｏｎ−ｓｉｅｎｃｉｎｇ）参照  ｓｉＲＮＡとＰＰＮＴ／ＭＧ６１ ｓｉＲＮＡの処理を受ける。Ｃ） ＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理後 Ａ５４９細胞中でのＲＴ−ＰＣＲとＷＥＳＴＥＲＮ分析。非沈黙ｓｉＲＮＡは参照で使われる。
【図１０】標的はＰＰＮ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡを向けて中皮腫細胞系Ｈ２０５２の中で細胞死亡を誘導して、ＷＮＴ／β−カテニン信号伝達を遮断する。Ａ） ＰＰＮ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡが誘導する細胞死亡に対して進行したフローサイトメーター分析（アネキシンＶ−ＦＩＴＣ とＰＩ染色）。左から右の手順で、Ｈ２０５２癌細胞は１００ＮＭの非沈黙（ｎｏｎ−ｓｉｅｎｃｉｎｇ）参照  ｓｉＲＮＡとＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡの処理を受ける。Ｂ） ＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ 処理後Ｈ２０５２細胞の中でのＲＴ−ＰＣＲとＷＥＳＴＥＲＮ分析。非沈黙ｓｉＲＮＡは参照で使われる。 β−アクチンは試料添加量の対照に使われる。
【図１１】標的はＰＰＮ／ＭＧ６１の ｓｉＲＮＡを向けて中皮腫細胞系ＭＣＦ−７の中で細胞死亡を誘導して、ＷＮＴ／β−カテニン信号伝達を遮断する。Ａ） ＰＰＮ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡが誘導する細胞死亡に対して進行したフローサイトメーター分析（アネキシンＶ−ＦＩＴＣとＰＩ染色）。左から右の手順で、ＭＦＣ−７癌細胞は１００ＮＭの非沈黙（ｎｏｎ−ｓｉｅｎｃｉｎｇ）参照  ｓｉＲＮＡとＰＰＮ／ＭＧ６１ ｓｉＲＮＡの処理を受ける。Ｂ） ＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ処理後ＭＣＦ−７細胞中でのＲＴ−ＰＣＲとＷＥＳＴＥＲＮ分析。非沈黙ｓｉＲＮＡは参照で使われる。  β−アクチンは試料添加量の対照に使われる。
【図１２】陰性参照実験：標的はＰＰＮ／ＭＧ６１のｓｉＲＮＡを向けてＰＰＮ／ＭＧ６１表現が欠乏した正常細胞培養物ＳＡＥＣとＮＨＢＥで細胞死亡を誘導しなくて、ＷＮＴ／β−カテニン信号伝達を遮断する。Ａ）フローサイトメーター分析（アネキシンＶ−ＦＩＴＣとＰＩ染色）。左から右の手順で、ＳＡＥＣ（上部）とＮＨＢＥ（下部）はそれぞれ１００ＮＭの非沈黙（ｎｏｎ−ｓｉｅｎｃｉｎｇ）参照  ｓｉＲＮＡとＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡの処理を受ける。Ｂ）ＰＰＮ／ＭＧ６１ｓｉＲＮＡ 処理後  正常細胞（ＳＡＥＣとＮＨＢＥ）中でのＲＴ−ＰＣＲと ＷＥＳＴＥＲＮ分析。非沈黙ｓｉＲＮＡは参照で使われる。Β−アクチンは試料添加量の対照に使われる。
【図１３】膜結合の Ｏ−アシラーゼファミリー中の、一つの保守区域の多配列に対する比較。表示されたことは選択されたタンパク質だけだ。生物種と酵素の名称の短縮語：ＡＴ、シロイヌナズナ（ＡＲＡＢＩＤＯＰＳＩＳ  ＴＨＡＬＩＡＮＡ）；ＢＳ，枯草菌；ＣＥ，線虫；ＤＭ，ショウジョウバエ；ＨＳ，ヒト；ＭＭ，ネズミ；ＰＡ，緑膿菌；ＳＡ，黄色ブドウ球菌；ＳＣ，出芽酵母；ＳＩ，ｓｉｍｍｏｎｄｓｉａ  ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ；ＴＰ，トレポネ−マ・パリダム（ＴＲＥＰＯＮＥＭＡ  ＰＡＬＬＩＤＵＭ）；ＡＣＡＴ，コレステロールアシルトランスフェラーゼ；ＤＧＡＴ，ジアシルグリセロール  アシルトランスフェラーゼ；ＷＡＸＳＹＮ， ワックス合成酵素
【符号の説明】
【０１４５】図１：正常（正常）；  乳腺癌（乳腺癌）；中皮腫；其他（その他）；試料投与量対照（試料加量対照或は加量対照）図２：■瘤（腫瘍）；正常（正常）；患者号（患者番号） 図３：中皮腫；正常な中皮瘤試料図４〜図６：癌症患者血清（癌患者血清）；正常血清（正常血清）図７〜図１３：対照（対照）；凋亡細胞死亡（衰退性細胞死亡）図７Ｃ：細胞質体β−カテニン（Ｃａｔｅｎｉｎ）；生存蛋白質；アクチン（Ａｃｔｉｎ）