【手続補正書】
【提出日】令和1年6月19日(2019.6.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍分泌因子、ケモカインおよび細胞表面抗原から選択されるリガンドに結合するエキソドメイン；および
サイトカイン受容体エンドドメイン
を含む、キメラサイトカイン受容体（ＣＣＲ）。
【請求項２】
２つのポリペプチド：
（ｉ）
（ａ）前記リガンドの第１のエピトープに結合する第１の抗原結合ドメイン
（ｂ）前記サイトカイン受容体エンドドメインの第１の鎖
を含む第１のポリペプチド；および
（ｉｉ）
（ａ）前記リガンドの第２のエピトープに結合する第２の抗原結合ドメイン
（ｂ）前記サイトカイン受容体エンドドメインの第２の鎖
を含む第２のポリペプチド
を含む、請求項１に記載のキメラサイトカイン受容体。
【請求項３】
前記第１および第２の抗原結合ドメインの各々が、一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である、請求項２に記載のキメラサイトカイン受容体。
【請求項４】
前記第１および第２の抗原結合ドメインの各々が、単一ドメインバインダー（ｄＡｂ）である、請求項２に記載のキメラサイトカイン受容体。
【請求項５】
２つのポリペプチド：
（ｉ）
（ａ）重鎖可変ドメイン（ＶＨ）
（ｂ）前記サイトカイン受容体エンドドメインの第１の鎖
を含む第１のポリペプチド；および
（ｉｉ）
（ａ）軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
（ｂ）前記サイトカイン受容体エンドドメインの第２の鎖
を含む第２のポリペプチド
を含む、請求項１に記載のキメラサイトカイン受容体。
【請求項６】
前記サイトカイン受容体エンドドメインについての第１の鎖と第２の鎖が、異なり、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのα鎖、β鎖およびγ鎖から選択される、請求項５に記載のキメラサイトカイン受容体。
【請求項７】
前記サイトカイン受容体エンドドメインに対する第１の鎖と第２の鎖が、同じであり、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのα鎖、β鎖およびγ鎖から選択される、請求項５に記載のキメラサイトカイン受容体。
【請求項８】
前記サイトカイン受容体エンドドメインが、
（ｉ）ＩＬ−２受容体のβ鎖エンドドメイン
（ｉｉ）ＩＬ−７受容体のα鎖エンドドメイン；もしく
（ｉｉｉ）ＩＬ−１５受容体のα鎖エンドドメイン；および／または
（ｉｖ）共通γ鎖受容体エンドドメイン
を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載のキメラサイトカイン受容体。
【請求項９】
前記リガンドが、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、がん胎児抗原（ＣＥＡ）および血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）およびＣＡ１２５から選択される腫瘍分泌因子である、請求項１〜８のいずれか一項に記載のキメラサイトカイン受容体。
【請求項１０】
前記リガンドが、ＣＸＣＬ１２、ＣＣＬ２、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５およびＣＣＬ２２から選択されるケモカインである、請求項１〜７のいずれかに記載のキメラサイトカイン受容体。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のキメラサイトカイン受容体を含む細胞。
【請求項１２】
同じリガンド上の異なるエピトープに結合する、第１のキメラサイトカイン受容体および第２のキメラサイトカイン受容体を含む、請求項１１に記載の細胞。
【請求項１３】
前記第１のキメラサイトカイン受容体および前記第２のサイトカイン受容体が、前記リガンドに結合したとき、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのα／β鎖およびγ鎖を介して、組み合わされたシグナル伝達が生じるように、前記第１のキメラサイトカイン受容体が、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのα鎖またはβ鎖を含み、前記第２のキメラサイトカイン受容体が、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのγ鎖を含む、請求項１２に記載の細胞。
【請求項１４】
キメラ抗原受容体も含む、請求項１１〜１３のいずれかに記載の細胞。
【請求項１５】
前記キメラ抗原受容体が、腫瘍関連細胞表面抗原に結合する、請求項１４に記載の細胞。
【請求項１６】
前記キメラ抗原受容体が、前立腺がんに関連する細胞表面抗原に結合する、請求項１５に記載の細胞。
【請求項１７】
前記細胞表面抗原が、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）または前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）である、請求項１６に記載の細胞。
【請求項１８】
請求項１〜１０のいずれかに記載のキメラサイトカイン受容体（ＣＣＲ）をコードする、核酸配列。
【請求項１９】
第１のＣＣＲをコードする第１の核酸配列および第２のＣＣＲをコードする第２の核酸配列を含む核酸構築物であって、該核酸構築物は、構造：
ＡｇＢ１−スペーサー１−ＴＭ１−エンド１−ｃｏｅｘｐｒ−ＡｂＢ２−スペーサー２−ＴＭ２−エンド２
（ここで、
ＡｇＢ１は、前記第１のＣＣＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；
スペーサー１は、前記第１のＣＣＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＴＭ１は、前記第１のＣＣＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
エンド１は、前記第１のＣＣＲのエンドドメインをコードする核酸配列であり；
ｃｏｅｘｐｒは、両ＣＣＲの共発現を可能にする核酸配列であり、
ＡｇＢ２は、前記第２のＣＣＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；
スペーサー２は、前記第２のＣＣＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＴＭ２は、前記第２のＣＣＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
エンド２は、前記第２のＣＣＲのエンドドメインをコードする核酸配列である）
を有する、核酸構築物。
【請求項２０】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）もコードする請求項１９に記載の核酸構築物であって、該核酸構築物は、構造：
（ｉ）ＣＣＲＡｇＢ１−ＣＣＲスペーサー１−ＣＣＲＴＭ１−ＣＣＲエンド１−ｃｏｅｘｐｒ１−ＣＣＲＡｇＢ２−ＣＣＲスペーサー２−ＣＣＲＴＭ２−ＣＣＲエンド２−ｃｏｅｘｐｒ２−ＣＡＲＡｇＢ−ＣＡＲスペーサー−ＣＡＲＴＭ−ＣＡＲエンド；
（ｉｉ）ＣＣＲＡｇＢ１−ＣＣＲスペーサー１−ＣＣＲＴＭ１−ＣＣＲエンド１−ｃｏｅｘｐｒ１−ＣＡＲＡｇＢ−ＣＡＲスペーサー−ＣＡＲＴＭ−ＣＡＲエンド−ｃｏｅｘｐｒ２−ＣＣＲＡｇＢ２−ＣＣＲスペーサー２−ＣＣＲＴＭ２−ＣＣＲエンド２；または
（ｉｉｉ）ＣＡＲＡｇＢ−ＣＡＲスペーサー−ＣＡＲＴＭ−ＣＡＲエンド−ｃｏｅｘｐｒ１−ＣＣＲＡｇＢ１−ＣＣＲスペーサー１−ＣＣＲＴＭ１−ＣＣＲエンド１−ｃｏｅｘｐｒ２−ＣＣＲＡｇＢ２−ＣＣＲスペーサー２−ＣＣＲＴＭ２−ＣＣＲエンド２；
（ここで、
ＣＣＲＡｇＢ１は、前記第１のＣＣＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；ＣＣＲスペーサー１は、前記第１のＣＣＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲＴＭ１は、前記第１のＣＣＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲエンド１は、前記第１のＣＣＲのエンドドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲＡｇＢ２は、前記第２のＣＣＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；ＣＣＲスペーサー２は、前記第２のＣＣＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲＴＭ２は、前記第２のＣＣＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲエンド２は、前記第２のＣＣＲのエンドドメインをコードする核酸配列であり；
Ｃｏｅｘｐｒ１およびｃｏｅｘｐｒ２は、隣接する２つの配列の共発現を可能にする核酸配列であり；
ＣＡＲＡｇＢは、該ＣＡＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＡＲスペーサーは、該ＣＡＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＣＡＲＴＭは、該ＣＡＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＡＲエンドは、該ＣＡＲのエンドドメインをコードする核酸配列である）
を有する、請求項１９に記載の核酸構築物。
【請求項２１】
ｃｏｅｘｐｒが、自己切断性ペプチドを含む配列をコードする、請求項１９または２０に記載の核酸構築物。
【請求項２２】
相同組換えを回避するために、代替的コドンが、同一または類似のアミノ酸配列をコードする配列の領域で使用される、請求項１９〜２１のいずれかに記載の核酸構築物。
【請求項２３】
請求項１９〜２２のいずれかに記載の核酸構築物を含む、ベクター。
【請求項２４】
請求項２３に記載の、レトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターまたはトランスポゾン。
【請求項２５】
ｉ）請求項１〜１０のいずれかにおいて定義されたような第１のＣＣＲをコードする核酸配列を含むベクター；および
ｉｉ）請求項１〜１０のいずれかにおいて定義されたような第２のＣＣＲをコードする核酸配列を含むベクター
を含む、キット。
【請求項２６】
キメラ抗原受容体をコードする核酸配列を含むベクターも含む、請求項２５に記載のキット。
【請求項２７】
ｉ）請求項１〜１０のいずれかにおいて定義されたようなＣＣＲをコードする核酸配列を含むベクター；および
ｉｉ）キメラ抗原受容体をコードする核酸配列を含むベクター
を含む、キット。
【請求項２８】
請求項１１〜１７のいずれかに記載の細胞を作製するための方法であって、請求項１８に記載の核酸配列；請求項１９〜２２のいずれかに記載の核酸構築物；請求項２３もしくは２４に記載のベクター；または請求項２５〜２７のいずれかに記載のベクターのキットを細胞に導入する工程を含み、前記細胞が、被験体から単離された試料に由来する、方法。
【請求項２９】
請求項１１〜１７のいずれかに記載の複数の細胞を含む、医薬組成物。
【請求項３０】
疾患を処置および／または予防するための、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
以下の工程：
（ｉ）請求項１８に記載の核酸配列；請求項１９〜２２のいずれかに記載の核酸構築物；請求項２３もしくは２４に記載のベクター；または請求項２５〜２７のいずれかに記載のベクターのキットで前記細胞が形質導入またはトランスフェクションされ；
（ｉｉ）被験体に（ｉ）からの該細胞が投与されること
を特徴とする、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記試料が、Ｔ細胞含有試料である、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記疾患が、がんである、請求項３１または３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
疾患の処置および／または予防において使用するための請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
疾患を処置および／または予防するための医薬の製造における請求項１１〜１７のいずれかに記載の細胞の使用。
【請求項３６】
請求項１１〜１７のいずれかに記載の細胞を含む、疾患を処置および／または予防するための組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
ゆえに、そのような「オンターゲットオフ腫瘍」毒性が減少したまたは排除された、改善されたがん治療アプローチが必要である。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
腫瘍分泌因子、ケモカインおよび細胞表面抗原から選択されるリガンドに結合するエキソドメイン；および
サイトカイン受容体エンドドメイン
を含む、キメラサイトカイン受容体（ＣＣＲ）。
(項目２)
２つのポリペプチド：
（ｉ）
（ａ）前記リガンドの第１のエピトープに結合する第１の抗原結合ドメイン
（ｂ）前記サイトカイン受容体エンドドメインの第１の鎖
を含む第１のポリペプチド；および
（ｉｉ）
（ａ）前記リガンドの第２のエピトープに結合する第２の抗原結合ドメイン
（ｂ）前記サイトカイン受容体エンドドメインの第２の鎖
を含む第２のポリペプチド
を含む、項目１に記載のキメラサイトカイン受容体。
(項目３)
前記第１および第２の抗原結合ドメインの各々が、一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である、項目２に記載のキメラサイトカイン受容体。
(項目４)
前記第１および第２の抗原結合ドメインの各々が、単一ドメインバインダー（ｄＡｂ）である、項目２に記載のキメラサイトカイン受容体。
(項目５)
２つのポリペプチド：
（ｉ）
（ａ）重鎖可変ドメイン（ＶＨ）
（ｂ）前記サイトカイン受容体エンドドメインの第１の鎖
を含む第１のポリペプチド；および
（ｉｉ）
（ａ）軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）
（ｂ）前記サイトカイン受容体エンドドメインの第２の鎖
を含む第２のポリペプチド
を含む、項目１に記載のキメラサイトカイン受容体。
(項目６)
前記サイトカイン受容体エンドドメインについての第１の鎖と第２の鎖が、異なり、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのα鎖、β鎖およびγ鎖から選択される、項目５に記載のキメラサイトカイン受容体。
(項目７)
前記サイトカイン受容体エンドドメインに対する第１の鎖と第２の鎖が、同じであり、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのα鎖、β鎖およびγ鎖から選択される、項目５に記載のキメラサイトカイン受容体。
(項目８)
前記サイトカイン受容体エンドドメインが、
（ｉ）ＩＬ−２受容体のβ鎖エンドドメイン
（ｉｉ）ＩＬ−７受容体のα鎖エンドドメイン；もしく
（ｉｉｉ）ＩＬ−１５受容体のα鎖エンドドメイン；および／または
（ｉｖ）共通γ鎖受容体エンドドメイン
を含む、前述のいずれかの項目に記載のキメラサイトカイン受容体。
(項目９)
前記リガンドが、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）、がん胎児抗原（ＣＥＡ）および血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）およびＣＡ１２５から選択される腫瘍分泌因子である、前述のいずれかの項目に記載のキメラサイトカイン受容体。
(項目１０)
前記リガンドが、ＣＸＣＬ１２、ＣＣＬ２、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５およびＣＣＬ２２から選択されるケモカインである、項目１〜７のいずれかに記載のキメラサイトカイン受容体。
(項目１１)
前述のいずれかの項目に記載のキメラサイトカイン受容体を含む細胞。
(項目１２)
同じリガンド上の異なるエピトープに結合する、第１のキメラサイトカイン受容体および第２のキメラサイトカイン受容体を含む、項目１１に記載の細胞。
(項目１３)
前記第１のキメラサイトカイン受容体および前記第２のサイトカイン受容体が、前記リガンドに結合したとき、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのα／β鎖およびγ鎖を介して、組み合わされたシグナル伝達が生じるように、前記第１のキメラサイトカイン受容体が、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのα鎖またはβ鎖を含み、前記第２のキメラサイトカイン受容体が、Ｉ型サイトカイン受容体エンドドメインのγ鎖を含む、項目１２に記載の細胞。
(項目１４)
キメラ抗原受容体も含む、項目１１〜１３のいずれかに記載の細胞。
(項目１５)
前記キメラ抗原受容体が、腫瘍関連細胞表面抗原に結合する、項目１４に記載の細胞。
(項目１６)
前記キメラ抗原受容体が、前立腺がんに関連する細胞表面抗原に結合する、項目１５に記載の細胞。
(項目１７)
前記細胞表面抗原が、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）または前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）である、項目１６に記載の細胞。
(項目１８)
項目１〜１０のいずれかに記載のキメラサイトカイン受容体（ＣＣＲ）をコードする、核酸配列。
(項目１９)
第１のＣＣＲをコードする第１の核酸配列および第２のＣＣＲをコードする第２の核酸配列を含む核酸構築物であって、該核酸構築物は、構造：
ＡｇＢ１−スペーサー１−ＴＭ１−エンド１−ｃｏｅｘｐｒ−ＡｂＢ２−スペーサー２−ＴＭ２−エンド２
（ここで、
ＡｇＢ１は、前記第１のＣＣＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；
スペーサー１は、前記第１のＣＣＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＴＭ１は、前記第１のＣＣＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
エンド１は、前記第１のＣＣＲのエンドドメインをコードする核酸配列であり；
ｃｏｅｘｐｒは、両ＣＣＲの共発現を可能にする核酸配列であり、
ＡｇＢ２は、前記第２のＣＣＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；
スペーサー２は、前記第２のＣＣＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＴＭ２は、前記第２のＣＣＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
エンド２は、前記第２のＣＣＲのエンドドメインをコードする核酸配列である）
を有する、核酸構築物。
(項目２０)
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）もコードする項目１９に記載の核酸構築物であって、該核酸構築物は、構造：
（ｉ）ＣＣＲＡｇＢ１−ＣＣＲスペーサー１−ＣＣＲＴＭ１−ＣＣＲエンド１−ｃｏｅｘｐｒ１−ＣＣＲＡｇＢ２−ＣＣＲスペーサー２−ＣＣＲＴＭ２−ＣＣＲエンド２−ｃｏｅｘｐｒ２−ＣＡＲＡｇＢ−ＣＡＲスペーサー−ＣＡＲＴＭ−ＣＡＲエンド；
（ｉｉ）ＣＣＲＡｇＢ１−ＣＣＲスペーサー１−ＣＣＲＴＭ１−ＣＣＲエンド１−ｃｏｅｘｐｒ１−ＣＡＲＡｇＢ−ＣＡＲスペーサー−ＣＡＲＴＭ−ＣＡＲエンド−ｃｏｅｘｐｒ２−ＣＣＲＡｇＢ２−ＣＣＲスペーサー２−ＣＣＲＴＭ２−ＣＣＲエンド２；または
（ｉｉｉ）ＣＡＲＡｇＢ−ＣＡＲスペーサー−ＣＡＲＴＭ−ＣＡＲエンド−ｃｏｅｘｐｒ１−ＣＣＲＡｇＢ１−ＣＣＲスペーサー１−ＣＣＲＴＭ１−ＣＣＲエンド１−ｃｏｅｘｐｒ２−ＣＣＲＡｇＢ２−ＣＣＲスペーサー２−ＣＣＲＴＭ２−ＣＣＲエンド２；
（ここで、
ＣＣＲＡｇＢ１は、前記第１のＣＣＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；ＣＣＲスペーサー１は、前記第１のＣＣＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲＴＭ１は、前記第１のＣＣＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲエンド１は、前記第１のＣＣＲのエンドドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲＡｇＢ２は、前記第２のＣＣＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；ＣＣＲスペーサー２は、前記第２のＣＣＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲＴＭ２は、前記第２のＣＣＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＣＲエンド２は、前記第２のＣＣＲのエンドドメインをコードする核酸配列であり；
Ｃｏｅｘｐｒ１およびｃｏｅｘｐｒ２は、隣接する２つの配列の共発現を可能にする核酸配列であり；
ＣＡＲＡｇＢは、該ＣＡＲの抗原結合ドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＡＲスペーサーは、該ＣＡＲのスペーサーをコードする核酸配列であり；
ＣＡＲＴＭは、該ＣＡＲの膜貫通ドメインをコードする核酸配列であり；
ＣＡＲエンドは、該ＣＡＲのエンドドメインをコードする核酸配列である）
を有する、項目１９に記載の核酸構築物。
(項目２１)
ｃｏｅｘｐｒが、自己切断性ペプチドを含む配列をコードする、項目１９または２０に記載の核酸構築物。
(項目２２)
相同組換えを回避するために、代替的コドンが、同一または類似のアミノ酸配列をコードする配列の領域で使用される、項目１９〜２１のいずれかに記載の核酸構築物。
(項目２３)
項目１９〜２２のいずれかに記載の核酸構築物を含む、ベクター。
(項目２４)
項目２３に記載の、レトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターまたはトランスポゾン。
(項目２５)
ｉ）項目１〜１０のいずれかにおいて定義されたような第１のＣＣＲをコードする核酸配列を含むベクター；および
ｉｉ）項目１〜１０のいずれかにおいて定義されたような第２のＣＣＲをコードする核酸配列を含むベクター
を含む、キット。
(項目２６)
キメラ抗原受容体をコードする核酸配列を含むベクターも含む、項目２５に記載のキット。
(項目２７)
ｉ）項目１〜１０のいずれかにおいて定義されたようなＣＣＲをコードする核酸配列を含むベクター；および
ｉｉ）キメラ抗原受容体をコードする核酸配列を含むベクター
を含む、キット。
(項目２８)
項目１１〜１７のいずれかに記載の細胞を作製するための方法であって、項目１８に記載の核酸配列；項目１９〜２２のいずれかに記載の核酸構築物；項目２３もしくは２４に記載のベクター；または項目２５〜２７のいずれかに記載のベクターのキットを細胞に導入する工程を含む、方法。
(項目２９)
前記細胞が、被験体から単離された試料に由来する、項目２８に記載の方法。
(項目３０)
項目１１〜１７のいずれかに記載の複数の細胞を含む、医薬組成物。
(項目３１)
疾患を処置および／または予防するための方法であって、項目３０に記載の医薬組成物を被験体に投与する工程を含む、方法。
(項目３２)
以下の工程：
（ｉ）被験体からの細胞含有試料の単離；
（ｉｉ）項目１８に記載の核酸配列；項目１９〜２２のいずれかに記載の核酸構築物；項目２３もしくは２４に記載のベクター；または項目２５〜２７のいずれかに記載のベクターのキットでの前記細胞の形質導入またはトランスフェクション；および
（ｉｉｉ）該被験体に（ｉｉ）からの該細胞を投与すること
を含む、項目３１に記載の方法。
(項目３３)
前記試料が、Ｔ細胞含有試料である、項目３２に記載の方法。
(項目３４)
前記疾患が、がんである、項目３２または３３に記載の方法。
(項目３５)
疾患の処置および／または予防において使用するための項目３０に記載の医薬組成物。
(項目３６)
疾患を処置および／または予防するための医薬の製造における項目１１〜１７のいずれかに記載の細胞の使用。