【手続補正書】
【提出日】令和1年7月23日(2019.7.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞から産生される組み換えヒト酸性α−グルコシダーゼ（ｒｈＧＡＡ）を含む組成物であって、ｒｈＧＡＡにおけるＮ−グリカンの４０％〜６０％が複合型Ｎ−グリカンであり、かつｒｈＧＡＡが、１ｍｏｌのｒｈＧＡＡあたり３．０〜５．０ｍｏｌのマンノース−６−リン酸（Ｍ６Ｐ）残基を含む、組成物。
【請求項２】
ｒｈＧＡＡが、１ｍｏｌのｒｈＧＡＡあたり３．０〜４．０ｍｏｌのＭ６Ｐを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ｒｈＧＡＡが、１ｍｏｌのｒｈＧＡＡあたり４．０〜５．０ｍｏｌのＭ６Ｐを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
ｒｈＧＡＡが、１ｍｏｌのｒｈＧＡＡあたり少なくとも４ｍｏｌのシアル酸を更に含む、請求項１〜３の何れか一項に記載の組成物。
【請求項５】
ｒｈＧＡＡが、１ｍｏｌのｒｈＧＡＡあたり２．０〜８．０ｍｏｌのシアル酸を更に含む、請求項１〜３の何れか一項に記載の組成物。
【請求項６】
ｒｈＧＡＡが、ｒｈＧＡＡあたり少なくとも１個のビス−リン酸化Ｎ−グリカンを含む、請求項１〜５の何れか一項に記載の組成物。
【請求項７】
ｒｈＧＡＡにおけるＮ−グリカンの４５％〜５５％が複合型Ｎ−グリカンである、請求項１〜６の何れか一項に記載の組成物。
【請求項８】
ｒｈＧＡＡにおけるＮ−グリカンの５０％が複合型Ｎ−グリカンである、請求項１〜７の何れか一項に記載の組成物。
【請求項９】
ｒｈＧＡＡが、１ｍｏｌのｒｈＧＡＡあたり４ｍｏｌのＭ６Ｐ、１ｍｏｌのｒｈＧＡＡあたり４．５ｍｏｌのシアル酸、及びｒｈＧＡＡあたり少なくとも１個のビス−リン酸化Ｎ−グリカンを含む、請求項１〜８の何れか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
組成物が、薬理学的シャペロンを更に含む、請求項１〜９の何れか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
薬理学的シャペロンが、１−デオキシノジリマイシン又は薬理学的に許容されるその塩、及びＮ−ブチル−デオキシノジリマイシンまたは薬理学的に許容されるその塩からなる群から選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
それを必要とする対象におけるポンペ病の治療における使用のための、請求項１〜１１の何れか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
対象の心筋に投与される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
対象の四頭筋、三頭筋またはその他の骨格筋に投与される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
対象の横隔膜に投与される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１６】
組成物が薬理学的シャペロンと組み合わされ、かつ組成物と薬理学的シャペロンは単一の薬学的組成物として投与される、または別々に投与される、請求項１２〜１５の何れか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
薬理学的シャペロンが、１−デオキシノジリマイシン、または薬学的に許容されるその塩である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
薬理学的シャペロンが、Ｎ−ブチル−デオキシノジリマイシン、または薬学的に許容されるその塩である、請求項１６に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９１】
これらの結果から、ＡＴＢ−２００  ｒｈＧＡＡ（このＮ−グリカン上のＭ６Ｐおよびビス−Ｍ６Ｐのレベルがより高い）は骨格筋中のＣＩＭＰＲを効率的に標的にすることが分かる。ＡＴＢ−２００  ｒｈＧＡＡはまた、ｉｎ  ｖｉｖｏでの非生産的クリアランスを最小化する、十分に処理された複合型Ｎ−グリカンも有し、ｉｎ  ｖｉｖｏでの使用に適した薬物動態特性も有し、ｉｎ  ｖｉｖｏでの重要な筋組織への良好なターゲティングも示す。これらから、ＡＴＢ−２００  ｒｈＧＡＡは筋組織中のグリコーゲンの低減に関して従来の標準的治療Ｌｕｍｉｚｙｍｅと比べて良好であること、およびＡＴＢ−２００  ｒｈＧＡＡとシャペロンＡＴ２２２１との組合せにより、標的組織からのグリコーゲンの除去が更に改善されて筋肉病理が改善されることも分かる。
＜本発明の更なる実施態様＞
［実施態様１］
モノ−マンノース−６−リン酸（Ｍ６Ｐ）またはビス−Ｍ６Ｐを担持するＮ−グリカンを含むｒｈＧＡＡを、Ｌｕｍｉｚｙｍｅ（登録商標）（アルグルコシダーゼアルファ；ＣＡＳ４２０７９４−０５−０）により例示される従来のｒｈＧＡＡと比べて多量に含む、ＣＨＯ細胞に由来するｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様２］
前記ｒｈＧＡＡが、配列番号１で表されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、実施態様１に記載のｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様３］
前記ｒｈＧＡＡの３０％以上がカチオン非依存性マノース−６−リン酸受容体（ＣＩＭＰＲ）に結合するか、または前記ｒｈＧＡＡの３０％以上が、モノ−Ｍ６Ｐもしくはビス−Ｍ６Ｐを担持するＮ−グリカンを含む、実施態様１に記載のｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様４］
前記ｒｈＧＡＡの５０％以上がカチオン非依存性マノース−６−リン酸受容体（ＣＩＭＰＲ）に結合するか、または前記ｒｈＧＡＡの５０％以上が、モノ−Ｍ６Ｐもしくはビス−Ｍ６Ｐを担持するＮ−グリカンを含む、実施態様１に記載のｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様５］
前記ｒｈＧＡＡの９０％〜１００％がカチオン非依存性マノース−６−リン酸受容体（ＣＩＭＰＲ）に結合するか、または前記ｒｈＧＡＡの９０％〜１００％もしくはより多くが、モノ−Ｍ６Ｐもしくはビス−Ｍ６Ｐを担持するＮ−グリカンを含む、実施態様１に記載のｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様６］
Ｍ６Ｐを担持するＮ−グリカンの平均含有量が０．５〜７．０ｍｏｌ／ｍｏｌ  ｒｈＧＡＡの範囲である、実施態様１に記載のｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様７］
Ｍ６Ｐを担持するＮ−グリカンの平均含有量が１．０〜４．０ｍｏｌ／ｍｏｌ  ｒｈＧＡＡの範囲である、実施態様１に記載のｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様８］
Ｍ６Ｐを担持するＮ−グリカンの平均含有量が５．０〜６．０ｍｏｌ／ｍｏｌ  ｒｈＧＡＡの範囲である、実施態様１に記載のｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様９］
平均して、前記Ｎ−グリカンが３ｍｏｌ／ｍｏｌ超のＭ６Ｐと４ｍｏｌ／ｍｏｌ超のシアル酸とを含む、実施態様１に記載のｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様１０］
平均して、前記ｒｈＧＡＡ上の前記Ｎ−グリカンの４０〜６０％が複合型Ｎ−グリカンであり、前記ｒｈＧＡＡ上のＮ−グリカンの６．５％以下がハイブリッド型Ｎ−グリカンであり、前記ｒｈＧＡＡ上の高マンノース型Ｎ−グリカンの１５％以下が非リン酸化型であり、前記ｒｈＧＡＡ上の前記高マンノース型Ｎ−グリカンの少なくとも１０％がモノ−Ｍ６Ｐリン酸化型であり、および／または前記ｒｈＧＡＡ上の前記高マンノース型Ｎ−グリカンの少なくとも２％がビス−Ｍ６Ｐリン酸化型である、実施態様１に記載のｒｈＧＡＡ組成物。
［実施態様１１］
前記ｒｈＧＡＡが平均して、１ｍｏｌのｒｈＧＡＡ当たり２．０〜８．０個のシアル酸残基を担持する、実施態様１に記載の組成物。
［実施態様１２］
前記ｒｈＧＡＡがＣＨＯ細胞株ＡＴＢ２００−００１−Ｘ５−１４によりまたはその継代培養物により産生される、実施態様１に記載の組成物。
［実施態様１３］
シャペロンを更に含む、実施態様１に記載の組成物。
［実施態様１４］
実施態様１に記載の組成物を製造する方法であって、ＣＨＯ細胞株を培養することと、前記ＣＨＯ細胞の培養物から前記組成物を回収することとを含む方法。
［実施態様１５］
実施態様１に記載の組成物を産生するＣＨＯ細胞株。
［実施態様１６］
実施態様１に記載の組成物を産生するＣＨＯ細胞株ＧＡ−ＡＴＢ−２００またはその継代培養物。
［実施態様１７］
実施態様１５に記載のＣＨＯ細胞株を製造する方法であって、ｒｈＧＡＡをコードするＤＮＡでＣＨＯ細胞を形質転換させることと、前記ｒｈＧＡＡをコードするＤＮＡを前記ＣＨＯ細胞の染色体に安定的に組み込み、かつｒｈＧＡＡを安定的に発現するＣＨＯ細胞を選択することと、Ｍ６Ｐまたはビス−Ｍ６Ｐを担持するグリカンの含有量が高いｒｈＧＡＡを発現するＣＨＯ細胞を選択することと、任意選択で、シアル酸含有量が高いＮ−グリカンを有するおよび／または非リン酸化高マンノース含有量が低いＮ−グリカンを有するＣＨＯ細胞を選択することとを含む方法。
［実施態様１８］
不十分なリソソームｒｈＧＡＡに関連する状態、障害または疾患を処置する方法であって、実施態様１に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む方法。
［実施態様１９］
前記対象がグリコーゲン貯蔵症ＩＩ型（ポンペ病）を有する、実施態様１８に記載の方法。
［実施態様２０］
前記組成物を前記対象の心筋に投与することを含む、実施態様１８に記載の方法。
［実施態様２１］
前記組成物を前記対象の四頭筋、三頭筋またはその他の骨格筋に投与することを含む、実施態様１８に記載の方法。
［実施態様２２］
前記組成物を前記対象の横隔膜に投与することを含む、実施態様１８に記載の方法。
［実施態様２３］
前記組成物が薬理学的シャペロンと組み合わされるか、それと共投与されるか、またはそれと共に別々に投与される、実施態様１８に記載の方法。
［実施態様２４］
前記組成物がＡＴ２２２０もしくはその塩と組み合わされるか、それと共投与されるか、またはそれと共に別々に投与される、実施態様１８に記載の方法。
［実施態様２５］
前記組成物がＡＴ２２２１もしくはその塩と組み合わされるか、それと共投与されるか、またはそれと共に別々に投与される、実施態様１８に記載の方法。
［実施態様２６］
組織、筋肉、筋繊維、筋細胞、リソソーム、オルガネラ、細胞内コンパートメントまたは細胞質中のグリコーゲンを代謝するか、分解するか、除去するか、またはその他に低減させる方法であって、任意選択でシャペロンまたはｒｈＧＡＡに対する免疫応答を低減させる薬剤と共に、実施態様１に記載の組成物を対象に投与することを含む方法。
［実施態様２７］
細胞中におけるリソソームの増殖、自食作用または開口分泌を調節する方法であって、任意選択でシャペロンとの組合せにおいて、実施態様１に記載の組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図６Ｂ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図６Ｂ】
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