【手続補正書】
【提出日】平成20年1月8日(2008.1.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞をミスマッチ修復の阻害剤にさらすことを含んでなる試験管内での超突然変異性（ｈｙｐｅｒｍｕｔａｂｌｅ）哺乳動物細胞または植物細胞の製造方法であって、ここで、該阻害剤が、式：
【化１】
2005510199.tif 000001
式中、Ｒ1−Ｒ10は独立して水素、ヒドロキシル、アミノ、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ−アルキル、Ｏ−アルケニル、Ｓ−アルケニル、Ｎ−アルケニル、Ｏ−アルキニル、Ｓ−アルキニル、Ｎ−アルキニル、アリール、置換されたアリール、アリールオキシ、置換されたアリールオキシ、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキルオキシ、アリールアルキル、アルキルアリール、アルキルアリールオキシ、アリールスルホニル、アルキルスルホニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、グアニジノ、カルボキシ、アルコール、アミノ酸、スルホネート、スルホン酸アルキル、ＣＮ、ＮＯ2、アルデヒド基、エステル、エーテル、クラウンエーテル、ケトン、有機硫黄化合物、有機金属基、カルボン酸、有機ケイ素化合物、または１個もしくはそれ以上のアルキル化ヒドロキシル基を含有していてもよい炭水化物であり；
ここで、該ヘテロアルキル、ヘテロアリール、および置換されたヘテロアリールは、酸素、硫黄、金属原子、リン、ケイ素もしくは窒素である少なくとも１個のヘテロ原子を含有し；そして
ここで、該置換されたアルキル、置換されたアルケニル、置換されたアルキニル、置換されたアリール、および置換されたヘテロアリールの該置換基は、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、アラルキルオキシ、グアニジノ、アルコキシカルボニル、アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシおよびアミノであり；
そしてここで、該アミノ基はアシル基、または１〜３個のアリールもしくは低級アルキル基で置換されていてもよい、
で表されるアントラセンである、上記方法。
【請求項２】
Ｒ1−Ｒ10が独立して水素、ヒドロキシル、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヒドロキシアルキル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、フェニル、トリル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシプロピルおよびヒドロキシブチルよりなる群から選択される請求項1記載の方法。
【請求項３】
アントラセンが１，２−ジメチルアントラセン、９，１０−ジメチルアントラセン、７，８−ジメチルアントラセン、９，１０−ジフェニルアントラセン、９，１０−ジヒドロキシメチルアントラセン、９−ヒドロキシメチル−１０−メチルアントラセン、ジメチルアントラセン−１，２−ジオール、９−ヒドロキシメチル−１０−メチルアントラセン−１，２−ジオール、９−ヒドロキシメチル−１０−メチルアントラセン−３，４−ジオールおよび９，１０−ジ−ｍ−トリアントラセンよりなる群から選択される請求項1記載の方法。
【請求項４】
Ｒ5およびＲ6が水素である請求項1記載の方法。
【請求項５】
Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9およびＲ10が水素である請求項1記載の方法。
【請求項６】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＲ8が水素である請求項1記載の方法。
【請求項７】
Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＲ8が水素である請求項1記載の方法。
【請求項８】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ9およびＲ10が水素である請求項1記載の方法。
【請求項９】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＲ8が水素である請求項1記載の方法。
【請求項１０】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8およびＲ10が水素である請求項1記載の方法。
【請求項１１】
対象遺伝子を含んでなる細胞を化学ミスマッチ修復阻害剤に試験管内でさらすことを含んでなる対象遺伝子における突然変異の発生方法であって、ここで、該化学ミスマッチ修復阻害剤が、式：
【化１】
2005510199.tif 000002
式中、Ｒ1−Ｒ10は独立して水素、ヒドロキシル、アミノ、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ−アルキル、Ｏ−アルケニル、Ｓ−アルケニル、Ｎ−アルケニル、Ｏ−アルキニル、Ｓ−アルキニル、Ｎ−アルキニル、アリール、置換されたアリール、アリールオキシ、置換されたアリールオキシ、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキルオキシ、アリールアルキル、アルキルアリール、アルキルアリールオキシ、アリールスルホニル、アルキルスルホニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、グアニジノ、カルボキシ、アルコール、アミノ酸、スルホネート、スルホン酸アルキル、ＣＮ、ＮＯ2、アルデヒド基、エステル、エーテル、クラウンエーテル、ケトン、有機硫黄化合物、有機金属基、カルボン酸、有機ケイ素化合物、または１個もしくはそれ以上のアルキル化ヒドロキシル基を含有していてもよい炭水化物であり；
ここで、該ヘテロアルキル、ヘテロアリール、および置換されたヘテロアリールは、酸素、硫黄、金属原子、リン、ケイ素もしくは窒素である少なくとも１個のヘテロ原子を含有し；そして
ここで、該置換されたアルキル、置換されたアルケニル、置換されたアルキニル、置換されたアリール、および置換されたヘテロアリールの該置換基は、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、アラルキルオキシ、グアニジノ、アルコキシカルボニル、アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシおよびアミノであり；
そしてここで、該アミノ基はアシル基、または１〜３個のアリールもしくは低級アルキル基で置換されていてもよい、
で表されるアントラセンであり、かつ、
該対象遺伝子が突然変異を含んでいるかどうかを決定するために該細胞を試験する工程を含んでなる、上記方法。
【請求項１２】
試験する工程が、対象遺伝子のポリヌクレオチド配列を分析することを含んでなる請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
細胞が哺乳動物細胞であり、そして該哺乳動物細胞をミスマッチ修復の阻害剤にさらすことによって該哺乳動物細胞をミスマッチ修復欠損にする請求項１１記載の方法。
【請求項１４】
試験する工程が、対象遺伝子のポリヌクレオチド配列を分析することを含んでなる請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
細胞を突然変異誘発物質にさらすことをさらに含んでなる請求項１１記載の方法。
【請求項１６】
突然変異誘発物質がＮ−メチル−Ｎ'−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、メタンスルホン酸、ジメチルスルホン酸、Ｏ−６−メチルベンザジン、エチルメタンスルホン酸、メチルニトロソ尿素およびエチルニトロソ尿素よりなる群から選択される請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
少なくとも１個の超突然変異性植物の細胞をミスマッチ修復の阻害剤にさらすことを含んでなる超突然変異性植物の作製方法であって、ここで、該ミスマッチ修復の阻害剤が式：
【化１】
2005510199.tif 000003
式中、Ｒ1−Ｒ10は独立して水素、ヒドロキシル、アミノ、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ−アルキル、Ｏ−アルケニル、Ｓ−アルケニル、Ｎ−アルケニル、Ｏ−アルキニル、Ｓ−アルキニル、Ｎ−アルキニル、アリール、置換されたアリール、アリールオキシ、置換されたアリールオキシ、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキルオキシ、アリールアルキル、アルキルアリール、アルキルアリールオキシ、アリールスルホニル、アルキルスルホニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、グアニジノ、カルボキシ、アルコール、アミノ酸、スルホネート、スルホン酸アルキル、ＣＮ、ＮＯ2、アルデヒド基、エステル、エーテル、クラウンエーテル、ケトン、有機硫黄化合物、有機金属基、カルボン酸、有機ケイ素化合物、または１個もしくはそれ以上のアルキル化ヒドロキシル基を含有していてもよい炭水化物であり；
ここで、該ヘテロアルキル、ヘテロアリール、および置換されたヘテロアリールは、酸素、硫黄、金属原子、リン、ケイ素もしくは窒素である少なくとも１個のヘテロ原子を含有し；そして
ここで、該置換されたアルキル、置換されたアルケニル、置換されたアルキニル、置換されたアリール、および置換されたヘテロアリールの該置換基は、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、アラルキルオキシ、グアニジノ、アルコキシカルボニル、アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシおよびアミノであり；
そしてここで、該アミノ基はアシル基、または１〜３個のアリールもしくは低級アルキル基で置換されていてもよい、
で表されるアントラセンである、上記方法。
【請求項１８】
Ｒ1−Ｒ10が独立して水素、ヒドロキシル、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヒドロキシアルキル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、フェニル、トリル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシプロピルおよびヒドロキシブチルよりなる群から選択される請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
アントラセンが１，２−ジメチルアントラセン、９，１０−ジメチルアントラセン、７，８−ジメチルアントラセン、９，１０−ジフェニルアントラセン、９，１０−ジヒドロキシメチルアントラセン、９−ヒドロキシメチル−１０−メチルアントラセン、ジメチルアントラセン−１，２−ジオール、９−ヒドロキシメチル−１０−メチルアントラセン−１，２−ジオール、９−ヒドロキシメチル−１０−メチルアントラセン−３，４−ジオールおよび９，１０−ジ−ｍ−トリアントラセンよりなる群から選択される請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
Ｒ5およびＲ6が水素である請求項１７記載の方法。
【請求項２１】
Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9およびＲ10が水素である請求項１７記載の方法。
【請求項２２】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＲ8が水素である請求項１７記載の方法。
【請求項２３】
Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＲ8が水素である請求項１７記載の方法。
【請求項２４】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ9およびＲ10が水素である請求項１７記載の方法。
【請求項２５】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＲ8が水素である請求項1７記載の方法。
【請求項２６】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8およびＲ10が水素である請求項1７記載の方法。
【請求項２７】
対象遺伝子が突然変異を含むか否かを決定するために細胞を試験した後にミスマッチ修復の阻害剤を除去する工程をさらに含んでなる請求項１１記載の方法。
【請求項２８】
対象遺伝子が突然変異を含むか否かを決定するために細胞を試験した後にミスマッチ修復の阻害剤を除去する工程をさらに含んでなる請求項１７記載の方法。
【請求項２９】
非ヒト生物体を候補化合物にさらすことおよびマイクロサテライト不安定性に関して該生物体のＤＮＡをスクリーニングし、こうしてミスマッチ修復の化学阻害剤を同定する工程を含んでなるミスマッチ修復の化学阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項３０】
非ヒト生物体が非ヒト哺乳動物である請求項２９記載の方法。
【請求項３１】
非ヒト生物体が原核生物である請求項２９記載の方法。
【請求項３２】
非ヒト生物体が植物である請求項２９記載の方法。
【請求項３３】
スクリーニングがレポーター発現遺伝子の使用を含んでなり、かつ、該レポーター発現遺伝子が該レポーター遺伝子のコーディング領域内にポリヌクレオチド反復を含んでなる請求項２９記載の方法。
【請求項３４】
レポーター遺伝子がβ−グルクロニダーゼである請求項３３記載の方法。
【請求項３５】
ミスマッチ修復の化学阻害剤を植物の成長培地に添加する請求項１７記載の方法。