(57)【要約】   液体試料中の被検査物質を測定する分析装置において、該液体試料および分析素子の性状の影響により測定の信頼性が低下するため、高精度な測定が不可能であった。  液体試料中の被検査物質の反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定部と、分析素子上の流路に展開された該液体試料から測定誤差への影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集部と、前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムをあらかじめ保持するアルゴリズム保持部と、前記パラメータに基づいて、前記シグナルより前記被検査物質の分析値を演算処理する演算処理部とを備え、前記演算処理部は、前記アルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記パラメータ収集部にて得たパラメータに基づき前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める。【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体試料を分析素子上の流路に展開させて該液体試料中の被検査物質を測定する分析装置において、
前記流路上での前記液体試料中の被検査物質の反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定部と、
前記流路に展開された前記液体試料から前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集部と、
前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムをあらかじめ保持するアルゴリズム保持部と、
前記パラメータに基づいて、前記シグナルより前記被検査物質の分析値を演算処理する演算処理部とを備え、
前記演算処理部は、前記アルゴリズム保持部より前記アルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記パラメータ収集部にて得たパラメータに基づき前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項２】
請求項１に記載の分析装置において、
前記演算処理部は、前記シグナル測定部にて得たシグナルより前記液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出部と、
前記被検査物質の測定誤差が極小になるように前記被検査物質の測定値を補正して該被検査物質の分析値を求める測定値補正部とを備え、
前記測定値補正部は、前記アルゴリズム保持部より前記パラメータと前記被検査物質の測定誤差との関係からなるアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて前記パラメータ収集部にて得たパラメータに基づき、前記測定値算出部にて得た前記被検査物質の測定値を補正し該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項３】
請求項１に記載の分析装置において、
前記分析素子は、前記液体試料を前記流路上に添加するための試料添加部と、前記被検査物質と反応する標識試薬を該液体試料の展開により溶出可能に保持する標識試薬部と、前記被検査物質と前記標識試薬との反応の度合を把握する試薬を固定化して保持する試薬固定化部とを有する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項４】
請求項１に記載の分析装置において、
前記パラメータは、前記液体試料が前記流路を展開するときの展開速度、または展開時間、または展開距離のいずれかである、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項５】
請求項１に記載の分析装置において、
前記シグナル測定部と、前記パラメータ収集部とのうちの少なくとも一方が、電磁放射線を用いる、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項６】
請求項１に記載の分析装置において、
前記分析素子は、乾式分析素子である、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項７】
請求項１に記載の分析装置において、
前記シグナル測定部は、抗原抗体反応由来の反応に基づくシグナルを測定する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項８】
請求項１に記載の分析装置において、
前記分析素子は、免疫クロマトセンサである、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項９】
請求項１に記載の分析装置において、
前記分析素子は、ワンステップの免疫クロマトセンサである、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１０】
請求項１に記載の分析装置において、
前記流路は、単層または複数層の多孔質性材料からなる、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１１】
請求項２に記載の分析装置において、
前記アルゴリズム保持部は、前記パラメータに基づいて前記被検査物質の測定値を補正するための補正式を保持し、
前記測定値補正部は、前記アルゴリズム保持部より前記補正式を読み出し、該読み出した補正式、および前記パラメータを用いて、前記被検査物質の測定値を補正し該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１２】
請求項１１記載の分析装置において、
前記アルゴリズム保持部は、複数の前記補正式を保持し、前記被検査物質の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部に保持された複数の補正式のうちのいずれかを選択するアルゴリズム選択部を備え、
前記測定値補正部は、前記アルゴリズム選択部が選択した補正式、および前記パラメータを用いて前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１３】
請求項１記載の分析装置において、
前記アルゴリズム保持部は、前記シグナル測定部にて得たシグナルより、前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求めるための複数の検量線を保持し、前記パラメータに基づいて、前記アルゴリズム保持部に保持された複数の検量線のうちのいずれかを選択するアルゴリズム選択部を備え、
前記演算処理部は、前記アルゴリズム選択部が選択した検量線、および前記パラメータを用いて前記シグナルより前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１４】
請求項１に記載の分析装置において、
前記演算処理部は、前記液体試料の粘度、または前記液体試料の添加量、または前記分析素子の製造後経過時間、の影響による前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１５】
液体試料を流路に展開させて該液体試料中の被検査物質を測定する分析方法において、
前記流路に展開された前記液体試料から、前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集ステップと、
前記流路上での前記液体試料中の被検査物質の反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定ステップと、
前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムを予め保持するアルゴリズム保持部よりアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて前記パラメータ収集ステップにて得たパラメータに基づき、前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める演算処理ステップとを含む、
ことを特徴とする分析方法。
【請求項１６】
請求項１５に記載の分析方法において、
前記演算処理ステップは、前記シグナル測定ステップにて得たシグナルより前記液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出ステップと、前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求める測定値補正ステップとを含む、
ことを特徴とする分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体試料中の被検査物質を測定する分析装置に関し、特に、液体試料中の被検査物質の検出において、該液体試料および分析素子の性状による測定誤差への影響度合に応じて、該被検査物質の測定誤差を確実に補正する分析装置、及びその方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年では、在宅医療、および医院や診療所などの地域医療の充実、さらには早期診断、および緊急性の高い臨床検査の増加などに伴い、臨床検査の専門家でなくとも、それを用いて、簡易かつ迅速に、高精度の測定を実施可能である分析装置が要望されるようになってきており、このため、煩雑な操作を伴わず、短時間で信頼性の高い測定を行うことのできる、ＰＯＣＴ（Ｐｏｉｎｔ  ｏｆ  Ｃａｒｅ  Ｔｅｓｔｉｎｇ）向けの小型分析装置が、脚光をあびている。【０００３】
ＰＯＣＴとは、一般的に、開業医、専門医の診察室、病棟および外来患者向け診療所などの「患者の近いところ」で行われる検査の総称であり、検査結果を即座に医師が判断し、迅速な処置を施し、治療の過程や、予後のモニタリングまでを行うという診療の質の向上に大きく役立つものとして注目されている方法である。このような小型分析装置による検査は、中央検査室での検査に比べて、検体の運搬や、設備にかかるコストや、不要な検査にかかる費用を抑えることができ、トータルの検査費用の削減が可能になるといわれており、ＰＯＣＴ市場は、病院経営合理化の進む米国では、急速に拡大してきており、日本をはじめ世界的にみても成長市場となっていくことが予想されている。【０００４】
免疫クロマトセンサに代表されるような乾式分析素子は、試薬の調整を必要とせず、測定対象となる血液や尿などの液体試料を、分析素子上に滴下するなどの簡単な操作のみにより、該液体試料中の被検査物質を分析することが可能なものであり、液体試料中の被検査物質を、簡便かつ迅速に分析するのに非常に有用なため、ＰＯＣＴの代表として今日多数実用化されている。また、市場からは、いつでもどこでも誰でも測定できることに加え、より高精度な分析精度が要求されている。【０００５】
しかし、前述した乾式分析素子は、液体試料によって、粘度、各成分量、夾雑物などの性状に個体差があり、かかる乾式分析素子による分析方法では、それらの影響を受けやすく、これらの要因を排除可能な大型の分析装置に比べ、高精度な測定結果を得ることが困難であった。そこで、従来より、前記のような測定の信頼性を低下させる要因を排除する分析装置が、多くのメーカーによって開発されている。【０００６】
例えば、液体試料が血液の場合には、代表的な個体差としてヘマトクリットがあり、前記乾式分析素子により血液中の被検査物質を分析する場合、その血液のヘマトクリット値による影響を支配的に受ける。そこで、種々の方法により、該ヘマトクリット値を求め、その値に応じて被検査物質濃度を補正する分析装置が、多数報告されている（特許文献１ から特許文献３参照）。【０００７】
前記の方法は、何れも全血中のヘマトクリット値が正常域を逸脱した試料を測定する場合に生じる測定誤差を確実に補正できる方法であり、全血中の被検査物質の定量を行うのに適応可能である。しかしながら、前記のいずれの方法も、ヘマトクリット値による影響に限定して補正するものであり、液体試料の粘度や、夾雑物など、ヘマトクリット値以外の性状による影響を補正することはできないという問題点がある。【０００８】
一方、測定の信頼性を低下させる要因は、前述したヘマトクリット値に限らず、例えば液体試料の粘度などの性状、分析環境、反応試薬の失活なども、その要因となりえる。このような、ヘマトクリット値に限らず、該液体試料の性状、分析環境、反応試薬の失活などの測定の信頼性を低下させる要因による分析結果への影響を考慮した分析方法も報告されている。例えば、特異結合反応後に、特異結合に関与し、かつ信号物質を発する信号物質発生体を、流路内を拡散して検知部まで到達して発する信号を、流動方向に複数配置される検知部において計測し、それぞれの検知部で信号変調の差、もしくは比を求めることによって、液体試料中の被検査物質以外の非特異的要因による分析結果への影響が極小化するように、演算処理を行う方法である（特許文献４参照）。
【特許文献１】特許第３５８６７４３号公報
【特許文献２】特開２０００−２６２２９８号公報
【特許文献３】特開２００１−９１５１２号公報
【特許文献４】特開平８−７５７４８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
前述したように、前記特許文献１〜３に示す方法は、全血中のヘマトクリット値が正常域を逸脱した試料を測定する場合に生じる測定誤差を確実に補正でき、全血中の被検査物質の定量に適応可能であるが、前記特許文献１〜３の方法は、液体試料が血液の場合に、ヘマトクリット値による影響に限定して補正するものであり、液体試料の粘度や、試料中の夾雑物など、ヘマトクリット値以外の液体試料由来の性状による影響をも除いた結果に補正することはできないものであるため、非常に測定精度が悪いという課題を有していた。【００１０】
またもう一方の、特許文献４に示す、液体試料の性状などの測定の信頼性を低下させる要因による影響を考慮した分析方法においては、複数の検知部に対して等しく影響を与えていることを前提としているが、分析結果への影響を極小化するための指標となる信号発生に到るまでに多段階の反応を経ており、反応状態の差が生じやすいため、前記影響を確実に極小化することは困難であった。また、上記特許文献４の方法では複数の検知部が必要となり、分析装置の構成を複雑化しなくてはならないため、その複雑さが測定精度を悪化させる要因となる恐れがあると共に、コスト的にも高価であるという課題を有していた。【００１１】
さらにこれらの方法は、操作性や構成上の面において、いつでもどこでも誰でも測定可能であることが必要とされるクロマトセンサには導入することが不可能であり、汎用性に欠くという課題もあった。
また、全血・血漿・尿などの種類の異なる液体試料がいずれであるかを自動で識別することは、従来の方法では到底不可能であった。そのため、クロマトセンサにおいて使用する液体試料は何であるかを予め指定し明示する必要があり、使用する現場では誤って異なる液体試料を用いてしまい、正確な結果が得られないというようなミスもあり、ＰＯＣＴ向けの診断薬でありながら、現場における取り扱い者への徹底した教育が必要不可欠であるという課題も、近年では多く発生していた。【００１２】
本発明は、前記課題に鑑みてなされたものであり、液体試料が何であるかを識別し、該液体試料の種類に応じた該液体試料および分析素子の性状による測定誤差への影響度合に応じて、容易に該液体試料中の被検査物質の測定値誤差を補正した分析値を求めることが可能であり、いつでもどこでも誰でも、簡易かつ迅速に、より高精度な測定を行うことのできる分析装置、及び分析方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
前記課題を解決するために、本発明にかかる分析装置は、液体試料を分析素子上の流路に展開させて該液体試料中の被検査物質を測定する分析装置において、前記流路上での前記液体試料中の被検査物質の反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定部と、前記流路に展開された前記液体試料から、前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集部と、前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムを、あらかじめ保持するアルゴリズム保持部と、前記パラメータに基づいて、前記シグナルより前記被検査物質の分析値を演算処理する演算処理部とを備え、前記演算処理部は、前記アルゴリズム保持部より前記アルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記パラメータ収集部にて得たパラメータに基づき前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める、ものである。【００１４】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を補正することが可能となり、簡易で迅速な、より正確性の高い分析装置を提供することができる。【００１５】
なお、ここで示す測定誤差とは、前記液体試料および分析素子の性状の影響による、前記被検査物質の測定値の、該被検査物質の真値からの乖離度である。また、アルゴリズムとは、前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるものである。すなわち、前記パラメータと被検査物質の測定誤差との関係、あるいは、前記パラメータに基づいて補正した被検査物質の分析値を算出可能にする、前記シグナルと被検査物質の真値との関係からなるものである。例えば、該パラメータに基づいて演算処理を行う数式や、該パラメータに基づいた補正度合を選択するために複数用意した数式があるが、その他任意の方法が挙げられる。【００１６】
また、パラメータとは、液体試料の展開に関与する情報を数値化したものであり、例えば、液体試料の展開速度や展開距離、展開時間があげられるが、反応に関与しないバックグランドにおける吸光度変化など、これ以外の情報であっても何ら問題はない。【００１７】
さらに、液体試料及び分析素子の性状の影響とは、例えば液体試料が全血・血漿・尿・細菌細胞懸濁液のいずれかである場合など異なる種類の液体試料であったり、液体試料の添加量の多少であったり、全血や細菌細胞懸濁液が液体試料の場合には液体試料中の細胞含有度合が異なっていたり、分析素子の保存期間の長短や分析素子の保存環境の相違による性状の変化など、測定誤差が発生する任意の影響を示す。【００１８】
さらに、本発明の分析装置において、前記演算処理部は、前記シグナル測定部にて得たシグナルより該液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出部と、前記被検査物質の測定誤差が極小になるように前記被検査物質の測定値を補正して該被検査物質の分析値を求める測定値補正部とを備え、前記測定値補正部は、前記アルゴリズム保持部より前記パラメータと前記被検査物質の測定誤差との関係からなるアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記パラメータ収集部にて得たパラメータに基づき前記測定値算出部にて得た前記被検査物質の測定値を補正し該被検査物質の分析値を求めるものである。【００１９】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を極小化するように前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求めることが可能となり、簡易で迅速な、より正確性の高い分析装置を提供することができる。【００２０】
さらに、本発明の分析装置において、前記分析素子は、前記液体試料を前記流路上に添加するための試料添加部と、前記被検査物質と反応する標識試薬を該液体試料の展開により溶出可能に保持する標識試薬部と、前記被検査物質と前記標識試薬との反応の度合を把握する試薬を固定化して保持する試薬固定化部とを有するものである。【００２１】
これにより、前記液体試料中の被検査物質の正確な分析値を、簡易かつ迅速に得ることができる。【００２２】
さらに、本発明の分析装置において、前記パラメータは、前記液体試料が前記流路を展開するときの展開速度、または展開時間、または展開距離のいずれかであるものである。【００２３】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状の差異に影響された、該液体試料の展開状況を、より正確かつ定量的に検知することができる。これを用いることで、迅速かつ簡易で、なおかつより正確性、汎用性の高い分析装置を得ることができる。【００２４】
さらに、本発明の分析装置において、前記シグナル測定部と、前記パラメータ収集部とのうちの少なくとも一方が、電磁放射線を用いるものである。【００２５】
これにより、前記流路上におけるシグナルの微小な変調の程度を検知することが可能になり、より高精度かつ正確性が高い分析装置を提供できる。【００２６】
さらに、本発明の分析装置において、前記分析素子は、乾式分析素子であるものである。【００２７】
これにより、分析素子全体が乾燥担体であることから持ち運びが容易であるばかりでなく、保存環境や保存状態を厳密に制御する必要性がないため、取り扱いが容易であり、いつでもどこでも迅速かつ簡易で、より正確性の高い分析装置を提供できる。【００２８】
さらに、本発明の分析装置において、前記シグナル測定部は、抗原抗体反応由来の反応に基づくシグナルを測定するものである。【００２９】
これにより、前記抗体は人為的に作れるため、当該分析装置にて検出できるターゲットが多様化し、様々な被検査物質の測定が可能になる。また、抗体の特異的反応を生かして、より正確性の高い分析装置を提供できる。【００３０】
さらに、本発明の分析装置において、前記分析素子は、免疫クロマトセンサであるものである。【００３１】
これにより、使用者が誤判定することのない高い正確性と、いつでもどこでも誰でも使用可能な簡易操作を実現できる。【００３２】
さらに、本発明の分析装置において、前記分析素子は、ワンステップの免疫クロマトセンサであるものである。【００３３】
これにより、免疫測定法でありながら、前処理や洗浄などの煩雑な操作を必要としない、簡易で迅速な、より正確性の高い分析装置を提供できる。【００３４】
さらに、本発明の分析装置において、前記流路は、単層または複数層の多孔質性材料からなるものである。【００３５】
これにより、前記流路に確実に試薬を保持させ、該液体試料を展開させることが可能になり、液体試料の分析において、簡易で迅速な、より正確性の高い分析装置を提供できる。【００３６】
さらに、本発明の分析装置において、前記アルゴリズム保持部は、前記パラメータに基づいて前記被検査物質の測定値を補正するための補正式を保持し、前記測定値補正部は、前記アルゴリズム保持部より前記補正式を読み出し、該読み出した補正式、および前記パラメータを用いて、前記被検査物質の測定値を補正し該被検査物質の分析値を求めるものである。【００３７】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を、容易に補正することができ、迅速且つ簡便に、より正確な該被検査物質の分析値を求めることができる。【００３８】
さらに、本発明の分析装置において、前記アルゴリズム保持部は、複数の前記補正式を保持し、前記被検査物質の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部に保持された複数の補正式のうちのいずれかを選択するアルゴリズム選択部を備え、前記測定値補正部は、前記アルゴリズム選択部が選択した補正式、および前記パラメータを用いて前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求めるものである。【００３９】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を、複数ある補正式の中から該被検査物質の測定値に応じて選択した補正式を用いて補正するため、迅速且つ簡便に、より正確な該被検査物質の分析値を求めることができる。【００４０】
さらに、本発明の分析装置において、前記アルゴリズム保持部は、前記シグナル測定部にて得たシグナルより、前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求めるための複数の検量線を保持し、前記パラメータに基づいて、前記アルゴリズム保持部に保持された複数の検量線のうちのいずれかを選択するアルゴリズム選択部を備え、前記演算処理部は、前記アルゴリズム選択部が選択した検量線、および前記パラメータを用いて前記シグナルより前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求めるものである。【００４１】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を、複数ある検量線の中から前記パラメータに基づいて選択した検量線を用いて、想定される測定誤差を極小化するため、より正確な該被検査物質の分析値を、迅速且つ簡便に得ることができる。【００４２】
さらに、本発明の分析装置において、前記演算処理部は、前記液体試料の粘度、または前記液体試料の添加量、または前記分析素子の製造後経過時間、の影響による前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求めるものである。【００４３】
これにより、前記液体試料がいかなる性状およびいかなる添加量であっても、該液体試料中の被検査物質の正確な分析値を得ることができる。また、当該分析素子の製造後経過時間による劣化の影響を回避することが可能である。【００４４】
さらに、本発明にかかる分析方法は、液体試料を流路に展開させて該液体試料中の被検査物質を測定する分析方法において、前記流路に展開された前記液体試料から、前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集ステップと、前記流路上での前記液体試料中の被検査物質の反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定ステップと、前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムを予め保持するアルゴリズム保持部よりアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記パラメータ収集ステップにて得たパラメータに基づき前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める演算処理ステップとを含むものである。【００４５】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を、容易に補正することができ、より正確性の高い分析値を得ることができる。【００４６】
さらに、本発明の分析方法において、前記演算処理ステップは、前記シグナル測定ステップにて得たシグナルより前記液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出ステップと、前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求める測定値補正ステップとを含むものである。【００４７】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状の影響による前記被検査物質の測定誤差を除くように、前記被検査物質の測定値を補正して、より適正な分析値を求めることができる。
【発明の効果】
【００４８】
本発明によれば、液体試料中の被検査物質の測定において、前記分析素子上の流路に展開された前記液体試料から、該液体試料および分析素子の性状が前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集し、該液体試料中の被検査物質の測定誤差を、前記パラメータに基づいて補正するようにしたので、より高精度な該被検査物質の分析値を簡易、且つ迅速に得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００４９】
【図１】図１は、本実施の形態１にかかる分析装置の概念図である。
【図２】図２は、本実施の形態１によるクロマトグラフィを利用した分析素子を示す分解図である。
【図３】図３は、本実施の形態１によるクロマトグラフィを利用した分析素子を示す斜視図である。
【図４】図４は、本発明の実施の形態１にかかる分析素子上の試薬固定化部における、標識試薬由来のシグナルを測定するためのシグナル測定部を示す図である。
【図５】図５は、本発明の実施の形態１にかかるシグナル測定部により得られる、分析素子上の試薬固定化部IおよびIIにおける呈色反応を読み取った結果を模式的に示した図である。
【図６】図６は、本発明の実施の形態１にかかる分析素子上に展開された液体試料からパラメータを収集するパラメータ収集部を示す図である。
【図７】図７は、本発明の実施の形態１にかかる分析素子上の、時間の経過による液体試料の展開状況を示す図である。
【図８】図８は、本発明の実施の形態１にかかる分析素子上の検知部における液体試料到達前後の光学的変化を示す図である。
【図９】図９は、本実施の形態１にかかる補正方法の概念図である。
【図１０】図１０は、本発明の実施例１における液体試料の展開速度と真値からの乖離度との関係を示す図である。
【図１１】図１１は、本発明の実施例１におけるヘマトクリット値差要因に対する、補正前後のＣＶ値を示す図である。
【図１２】図１２は、本発明の実施例１におけるヘマトクリット値差要因に対する、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１３】図１３は、本発明の実施例２における総タンパク質濃度差要因に対する、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１４】図１４は、本発明の実施例３における液体試料の添加量不足要因に対する、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１５】図１５は、本発明の実施例４におけるヘマトクリット値及び総タンパク質濃度差要因に対する、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１６】図１６は、本発明の実施例５における複数の検量線を用いた補正ありと、補正なしの、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１７】図１７は、本発明の実施の形態１にかかる液体試料が全血の場合のヘマトクリット値と液体試料の展開速度との関係を示す図である。
【図１８】図１８は、本発明の実施の形態１にかかる液体試料が血漿の場合の総タンパク質濃度と液体試料の展開速度との関係を示す図である。
【図１９】図１９は、本発明の実施の形態１にかかる液体試料の添加量と液体試料の展開速度との関係を示す図である。
【図２０】図２０は、本発明の実施例１におけるＣＲＰ定量のフロー図である。
【図２１】図２１は、本発明の実施例６における液体試料毎の展開速度を示す図である。
【図２２（ａ）】図２２（ａ）は、本発明の実施例６におけるｈＣＧ定量の概念図である。
【図２２（ｂ）】図２２（ｂ）は、本発明の実施例６におけるｈＣＧ定量の概念図である。
【図２２（ｃ）】図２２（ｃ）は、本発明の実施例６におけるｈＣＧ定量のフロー図である。
【図２３】図２３は、本発明の実施例６における液体試料が尿の場合の、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図２４】図２４は、本発明の実施例６における液体試料が血漿の場合の、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図２５】図２５は、本発明の実施例６における液体試料が全血の場合の、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【符号の説明】
【００５０】
１  展開層（流路） 
２  標識試薬部
３  試薬固定化部I
４  試薬固定化部II 
５  液体不透過性シート材
６  微細空間（試料添加部） 
７  開放部
８  基板
９  微細空間形成材
１０  細胞成分収縮試薬
１３  検知部
１４  液体試料
２０  シグナル測定部
２１，３１  照射部
２２，３２  受光部
３０  パラメータ収集部
４０  アルゴリズム保持部
５０  測定値補正部
６０  分析装置
７０  測定値算出部
８０  アルゴリズム選択部
９０  演算処理部
１００  分析素子
１１０  液体試料識別アルゴリズム
１２０  測定値補正アルゴリズム
１３０  液体試料識別アルゴリズム選択
１４０  測定値補正アルゴリズム選択
１５０  検量線
１６０  検量線選択
【発明を実施するための最良の形態】
【００５１】
以下、本発明の分析装置の実施の形態について、図面を参照しながら詳細に説明する。なお、ここで示す実施の形態はあくまでも一例であって、必ずしもこの実施の形態に限定されるものではない。【００５２】
（実施の形態１） 
図１は本実施の形態１の分析装置の構成を示す概念図であり、本実施の形態１の分析装置６０は、液体試料を分析素子１００上の流路に展開させ、該液体試料中の被検査物質の、分析素子１００上での反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定部２０と、前記分析素子１００上に展開された前記液体試料から、該液体試料および分析装置６０の性状が該被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集部３０と、前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムを、あらかじめ保持するアルゴリズム保持部４０と、前記パラメータ収集部３０により得た前記パラメータに基づいて前記アルゴリズム保持部４０からアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記シグナル測定部２０にて測定したシグナルより、被検査物質の測定誤差を補正した被検査物質の分析値を演算処理する演算処理部９０とを備える。そして、前記演算処理部９０は、前記シグナル測定部２０にて得たシグナルより、前記液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出部７０と、前記被検査物質の測定誤差が極小になるように、該被検査物質の測定値を補正して、被検査物質の分析値を求める測定値補正部５０とを、必要に応じて備える。【００５３】
ここで、前記被検査物質の測定誤差とは、前記シグナル測定部２０にて測定したシグナルから算出される前記被検査物質の測定値の、前記液体試料および分析素子１００の性状の影響による、該被検査物質の真値からの乖離度を示すものである。また、前記アルゴリズムとは、前記パラメータと前記被検査物質の測定誤差との関係、あるいは、前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなり、前記パラメータに基づいて補正した被検査物質の分析値を算出可能にするものである。例えば、前記パラメータに基づいて演算処理を行う数式や、前記パラメータに基づいた補正度合を選択するために複数用意した数式が例に挙げられるが、その他の任意の方法が挙げられる。また、前記パラメータとは、液体試料の展開に関与する情報を数値化したものであり、例えば、液体試料の展開速度や展開距離、展開時間があげられるが、反応に関与しないバックグランドにおける吸光度変化など、これ以外の情報であっても何ら問題はない。【００５４】
さらに、図１では前記シグナル測定部２０と、前記パラメータ収集部３０とを、別々に表示しているが、同一のものが、前記シグナル測定部２０と、パラメータ収集部３０として用いられても何ら問題はない。また、図１では、前記アルゴリズム保持部４０と、前記演算処理部９０とを、別々に表示しているが、該演算処理部９０中に該アルゴリズム保持部４０が存在していても何ら問題はない。【００５５】
まず、本実施の形態１における、分析素子１００について説明する。
図２及び図３は、本実施の形態１によるクロマトグラフィを利用した分析素子を示す図である。即ち、図２は、本実施の形態１の分析素子１００の分解図であり、図３は、本実施の形態１の分析素子１００の斜視図である。【００５６】
図２において、１は流路となる展開層を示し、ニトロセルロースで構成される。これら、展開層１に使用する材料は、ニトロセルロースに限らず、液体試料により湿潤かつ該液体試料を展開可能な流路を形成できる材料であれば、濾紙、不織布、メンブレン、布、ガラス繊維等多孔質な任意の材料でよい。あるいは、前記展開層１を中空の毛細管で形成してもよく、このような場合、材料は樹脂材料で構成できる。また、前記展開層１は、単層あるいは複数層の多孔質材料で構成されていればよく、本実施の形態１では単層の場合を例に挙げて説明する。なお、単層とは一つの層で構成されていることを意味し、複数層とは、複数層が平行あるいは垂直に配置され、該複数層の第１の層に添加された液体試料が各々の層に順次移動可能なように構成されていることを意味する。【００５７】
２は標識試薬部を示し、液体試料の展開により溶出可能な乾燥状態で、液体試料中の被検査物質に対する金コロイド標識抗体が保持してある。標識試薬は、抗体に金コロイドなどの標識物を標識したもので、後述する試薬固定化部３，４における結合を検出する手段として用いられるものであり、前述した金コロイドはほんの一例に過ぎず、金属あるいは非金属コロイド粒子、酵素、タンパク質、色素、蛍光色素、ラテックスなどの着色粒子など、必要に応じて任意に選択可能である。【００５８】
そして、３は試薬固定化部I、４は試薬固定化部IIを示し、液体試料中の被検査物質に対して特異的反応の可能な抗体であり、なおかつ、どちらの抗体も前記標識試薬とは異なるエピトープで結合するもので、乾燥状態で固定化されている。さらに、試薬固定化部I３に用いる抗体と、試薬固定化部II４で用いる抗体とは、液体試料中の被検査物質に対する親和性が異なる抗体により構成されている。【００５９】
前記試薬固定化部I３、及び試薬固定化部II４に使用する抗体は、標識試薬、及び被検査物質との複合体を形成できれば良く、従って、被検査物質に対するエピトープもしくは親和性は、同じであっても異なっていてもいずれでも良い。さらに、２つの抗体の親和性は異なるが、エピトープが同じでも何ら問題はない。【００６０】
また、図２では、試薬固定化部が２カ所設けられている例を示すが、これは必ずしも２カ所である必要はなく、１カ所以上であれば、その目的に応じて自在に選択できる。また、展開層１上の形状についても、ライン状である必要はなく、スポット形状、もしくは、文字形状、鍵型形状など、自由に選択できる。図２における試薬固定化部I３と試薬固定化部II４とは空間的に離れているが、これらも必ずしも離れている必要はなく、見かけ上一本のライン状に見える様に接触させることも可能である。【００６１】
５は液体不透過性シート材を示し、ここでは、透明テープで構成される。該液体不透過性シート材５は、試料添加部となる微細空間６に接続する部分、及び前記液体試料の到達する終端を除き、展開層１を密着被覆する構造を持つものである。【００６２】
このように液体不透過性シート材５により展開層１を被覆させることで、試料添加部以外への点着を遮断保護すると共に、外部からの汚染を防止する作用を持たせることができるばかりでなく、液体試料の展開時に液体試料が展開しながら蒸発してしまうのを防ぎ、展開層上の反応部分である試薬固定化部３、４、および標識試薬部２を必ず液体試料が通過し、前記反応部分において液体試料中の被検査物質との反応を効率よく行うようにすることができる。ここでの外部からの汚染とは、該展開層上の反応部分に対して不用意に液体試料が接触することや、被験者が手などで直接展開層に接触することなどを指す。前記展開層１を被覆する液体不透過性シート５には、透明な材料を用いることが好ましく、前記試薬固定化部３，４を覆う部分は、シグナルを測定する部分であるから、少なくとも透過可能な状態を持たせることが好ましい。【００６３】
また、より高精度な測定を必要とする場合には、展開層１の上部を、特に前記標識試薬部２、及び前記試薬固定化部３，４の部分を含んで密着密閉し、かつ、液体試料の展開方向に対して平行な側面を、同様に密着密閉させる構造をとることもできる。【００６４】
７は展開層１における開放部であり、８は展開層１を保持する基板である。この基板８ は、ＰＥＴフィルムなどの液体不透過性シート材で構成され、透明、半透明、不透明のいずれをとってもよいが、透過光を測定する場合は透明、反射光を測定する場合は不透明の材料を用いるのが好ましい。また、その材質は、ＡＢＳ、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル等の合成樹脂材料の他、金属、ガラス等、液体不透過性の材料を用いることが可能である。【００６５】
前記基板８は展開層１を補強する役割を持つとともに、血液、唾液、尿など感染の危険性のある試料を用いる場合には、それを遮断する作用をも有する。さらには、展開層１が湿潤した場合に光透過性を帯びる場合などにおいては、前記基板８に、光を遮断する効果を持たせることも可能である。【００６６】
９は微細空間形成材であり、液体試料が毛細管現象により流入する空間を形成する働きを持ち、透明ＰＥＴフィルムを積層させたもので構成される。また、微細空間形成材９は、液体試料添加後の分析素子を取り扱う際に、液体試料の外部への汚染を保護する役割をも有する。この微細空間形成材９には、ＡＢＳ、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル等の合成樹脂材料の他、金属、ガラス等、液体不透過性の材料を用いることが可能であり、また、透明もしくは半透明であることが好ましいが、透明でなくて有色であってもよく、あるいはこの不透明の材料の場合には任意の材料で構成できる。【００６７】
６は微細空間を示し、前記微細空間６は、前記微細空間形成材９により形成され、毛細管現象により液体試料を流入することのできる試料添加部となる。また、該微細空間６は前記展開層１と接続しており、液体試料を該微細空間６へ流入させることにより、該液体試料の展開層１への展開を開始することができる。【００６８】
次に、本実施の形態１の分析装置６０による、液体試料中の被検査物質の測定方法について、図２、図３を用いて説明する。【００６９】
液体試料を、試料添加部６に接触させると、毛細管現象により機械的操作を必要とせず、自然に液体試料が前記微細空間６中に流入され、展開層（流路）１上を展開する。液体試料の流入量が十分であるかどうかは、微細空間形成材９を透して確認できる。また、液体試料の添加量を、一定量確保する必要がある場合は、前記微細空間６の体積を一定体積とすることで、精度良く添加量を制限することができ、さらに、前記液体試料を一定量以上必要とする場合には、必要量以上の体積を保持させる構造をとることで、これを実現することができる。【００７０】
前記微細空間６内には、細胞成分収縮試薬１０を保持してある。細胞成分収縮試薬１０ は、前記液体試料中に細胞成分を含む場合に設置すべき試薬であり、細胞成分を含まない液体試料を用いる場合には、特に必要ではない。また、細胞成分収縮試薬１０は、細胞を収縮する効果のある塩化カリウムや塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム塩等を含む無機化合物や、グリシン、グルタミン酸、等のアミノ酸、プロリン等のイミノ酸、グルコース、スクロース、トレハロースなどの糖類、グルシトール等の糖アルコール等を用いても、同様に実施可能である。この様な細胞成分収縮試薬１０を含む系は、特に液体試料として全血を用いる場合に有効である。【００７１】
前記微細空間６に流入された液体試料は、前記微細空間６と展開層１との接触部分から、展開層１へと展開する。標識試薬部２に液体試料が到達したとき、標識試薬の溶出が開始される。液体試料中に被検査物質が存在する場合、標識試薬と被検査物質とが反応しながら展開が進み、液体試料は試薬固定化部I３に到達する。被検査物質が液体試料中に存在する場合には、その量に応じて、試薬固定化部I３に固定化された抗体と、被検査物質と、標識試薬との複合体が形成される。【００７２】
次に、試薬固定化部II４に液体試料が到達し、該液体試料中に前記被検査物質が存在する場合には、前記被検査物質の量に応じて、試薬固定化部II４に固定化された抗体と、被検査物質と、標識試薬との複合体を形成する。【００７３】
前記液体試料は、さらに、展開層１における開放部７に到達する。開放部７は、前記液体不透過性シート５がなく開放されているため、前記液体試料が到達した後、あるいは到達しながら揮発もしくは蒸発される。さらには、開放部７に前記液体試料が滲み出て、開放部７における展開層１の上部にのみ、前記液体試料が、前記微細空間６内の展開層１上部にある液体試料と同じ高さ、もしくは準じた高さまで至る。一般的には、開放部７の代わりに吸水部を設けることが多いが、それは、展開層１に使用する材料に対して、より保水効果、吸水効果の高い多孔質材料を用いることで、液体試料を吸水あるいは吸引し、展開層１上を通過させる働きや、測定時間を短縮できる働きを有するものとすることができる。前記開放部７はそれらと同様の効果を持たせたものであり、特に前記微細空間６もしくは前記開放部７を用いる手法は、例えば、液体試料が指先からの穿刺による血液などであるように、液体試料が微量である場合に適している。【００７４】
前記液体試料中の被検査物質の測定値は、前記試薬固定化部I３、及び試薬固定化部II ４における標識試薬由来のシグナルを測定することで得られる。【００７５】
図４に、分析素子上の試薬固定化部３，４における標識試薬由来のシグナルを測定するシグナル測定部を示した。２１は前記展開層１に光を照射するための照射部、２２は前記照射部２１から前記展開層１に照射された光の反射または透過光などの光学的変化を検出する受光部を示し、前記シグナル測定部２０は、これらの照射部２１および受光部２２を利用することによって、試薬固定化部３，４における標識試薬由来のシグナルを測定する。図５は、図４のように試薬固定化部I３、および試薬固定化部II４における呈色反応を読み取った結果を、模式的に示したものである。試薬固定化部では、その他の部分に比べてシグナルが上昇し、その強度は、試薬固定化部の呈色度合に応じて変化する【００７６】
なお、前記照射部２１としては可視領域、もしくは近可視領域であることが好ましく、ＬＥＤ（Ｌｉｇｈｔ  Ｅｍｉｔｔｉｎｇ  Ｄｉｏｄｅ；発光ダイオード）、もしくはＬＤ （Ｌａｓｅｒ  Ｄｉｏｄｅ；レーザーダイオード）など必要に応じて選択可能である。【００７７】
そして、前記シグナル測定部２０によって測定された試薬固定化部３，４における標識試薬由来のシグナルを、測定値算出部７０にて演算処理することで、被検査物質の測定値を求めることができる。このとき得られる被検査物質の測定値は、前記測定値算出部７０ において、前記シグナル測定部２０にて得た標識試薬由来のシグナルより検量線を用いて得られた該被検査物質の値である。ここで述べる検量線とは、シグナル測定部２０にて得たシグナルと、液体試料中の被検査物質の値との関係を示した回帰式である。未知の量の被検査物質を含む液体試料を測定する場合に、シグナル測定部２０にて得られたシグナルを代入することで、その未知液体試料中の被検査物質の測定値を算出することができる。また、前記シグナル測定部２０は、シグナルを測定する手段としては、光学的変化、電気的変化や電磁的変化を読み取るものであったり、画像としてとらえるものであったり、任意の手段を用いてよい。【００７８】
また、前記の反応例は、抗原抗体反応を利用したサンドイッチ反応について述べたが、試薬の選択により、競合反応を利用した反応系でも何ら問題はない。【００７９】
また、特異的な反応を利用したい場合、前記分析素子１００上の任意の反応を形成する系の試薬成分で構成することにより、抗原抗体反応以外の反応による測定を行うことも可能である。特異的反応をする、ある特定の物質と、それに対する特異結合物質との組合せとしては、抗原とそれに対する抗体、相補的核酸配列、エフェクター分子とレセプター分子、酵素とインヒビター、酵素と補因子、酵素と基質、糖鎖を有する化合物とレクチン、ある抗体とその抗体に対する抗体、レセプター分子とそれに対する抗体、特異結合活性が消失しない程度に化学修飾されたもの、あるいは、他の成分と結合してなる複合性物質を利用した反応系などが例示される。しかし、前述のようにして、前記測定値算出部７０により得た前記被検査物質の測定値は、前記液体試料、および分析素子６０の性状による影響を受けており、高精度とは言い難い。よって、より高精度な被検査物質の分析値を得るためには、以下に示す測定値の補正が必要となる。【００８０】
以下、前記被検査物質の測定値から、その被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める方法について説明する。なお、後述する補正方法は、いずれもほんの一例であり、これ以外の方法を用いても何ら問題はない。前記被検査物質の測定誤差への影響度合を示すパラメータとしては、液体試料の展開速度を用いる。なお、展開速度を算出しなくても、任意の一定距離を展開するのに要した展開時間、もしくは任意の一定時間における展開距離、もしくは、流路上の試薬固定化部を除いた任意の位置におけるバックグランドの吸光度変化など、液体試料の展開状況に関するその他の情報を、パラメータとして利用することも可能である。【００８１】
本実施の形態１では、前記パラメータを収集するパラメータ収集部３０は、図６に示されるように照射部３１、および受光部３２を用いて光学的変化により、液体試料の展開状況を検知する。この他にも、電気的変化や、電磁的変化を読み取るものであったり、画像としてとらえるものであったり、任意の手段を用いてよい。なお、前記液体試料の到達時間の検出は、複数の照射部、および受光部を用いて同時に行っても良いし、同一の照射部および受光部を用いて、前記始点への液体試料の到達を検知した後に、該液体試料が前記終点へ順に移動するのを検出することによって計測しても良い。さらに、これらのパラメータ収集部３０の照射部３１および受光部３２は、標識試薬由来のシグナルを測定するためのシグナル測定部２０の照射部２１および受光部２２を用いることも可能である。【００８２】
図６において、３１は前記展開層に光を照射するための照射部、３２は前記照射部から前記展開層に照射された光の反射または透過光などの光学的変化を検知する受光部を示す。図７、及び図８は、液体試料の展開速度を測定する任意の検知区間の始点、あるいは終点において液体試料の到達を検知する検知部における液体試料到達前後の図である。なお、この検知区間において液体試料が展開する上流側を始点、下流側を終点と呼ぶ。図７は、時間の経過による液体試料の展開状況を示す図であり、図８は、前記検知部における液体試料到達前後の光学的変化を示したものである。【００８３】
図７において、１３は検知部、１４は分析素子１００の流路上に展開している液体試料を示す。図８に示すように、検知部１３に液体試料１４が到達すると吸光度が上昇する。受光部は所定の吸光度を越えるときに液体試料が検知部に到達したことを検知し、液体試料の到達時間を計測する。【００８４】
図６（ａ）に示すように、まず、流路１上の任意の検知区間の始点において、照射部３１および受光部３２を用いて、光学的変化から液体試料が到達したことを検知する。前記流路１上の任意の区間は、液体試料の展開速度と測定誤差である被検査物質の真値からの乖離度との相関関係が強い検知区間、ここでは液体不透過性シート材５に保護された部分から選択する。次に、図６（ｂ）に示すように、照射部３１および受光部３２を、分析素子１００上の流路である展開層１の任意の区間の終点へ走査し、液体試料の到達時間を検知する。これらの結果から、液体試料が展開層１の任意の検知区間を展開する時にかかる展開時間を算出することによって、液体試料の展開速度を求める。また、ここでは任意の検知区間における展開時間から算出した展開速度をパラメータとして利用したが、前記展開速度は任意の時間に前記液体試料が展開する展開距離から算出してもよい。【００８５】
次に、前記演算処理部９０が、前記アルゴリズム保持部４０より、アルゴリズムを読み出し、前記パラメータ収集部３０にて得たパラメータに基づき、前記被検査物質の測定誤差を補正した被検査物質の分析値を求める。前記被検査物質の分析値とは、演算処理部９ ０において、パラメータ収集部３０にて得たパラメータに基づき、被検査物質の真値との差が極小化するように、該被検査物質の測定誤差を補正した被検査物質の値である。そして前記アルゴリズムとしては、パラメータ収集部３０にて得たパラメータと該被検査物質の測定誤差との関係から導出した、被検査物質の測定値を補正して該被検査物質の分析値を求める式、もしくは、パラメータに基づきシグナル測定部２０にて得たシグナルと被検査物質の真値との関係から導出した補正式が例示される。このアルゴリズムの導出方法には、種々の方法が可能であり、以下の補正方法が簡便で精度の高い方法として好ましいものの、他の方法をとっても何ら問題はない。図９（ａ）、（ｂ）、（ｃ）それぞれは、以下の各方法１）、２）、３）を示す概念図である。【００８６】
方法１）  図９（ａ）に示すように、測定値補正部５０は、アルゴリズム保持部４０に保持してある、パラメータと測定誤差との相関関係から導出した補正式を読み出し、該読み出した補正式に、前記パラメータ収集部３０によって収集されたパラメータと、前記シグナル測定部２０にて測定されたシグナルより測定値算出部７０にて算出した測定値とを代入することで、該被検査物質の測定値を補正して、該被検査物質の分析値を求める。例えば、前記被検査物質の測定値をＺとし、前記パラメータをＸとすると、補正された該被検査物質の分析値Ｙは、
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（ａＸ＋ｂ）｝；（ａ，ｂは定数） 
なる式によって求められる。【００８７】
前記補正式は、あらかじめ、該液体試料の粘性など測定誤差への影響度合が異なり、既知の量の被検査物質を含む液体試料を用いて、パラメータと測定誤差との関係より導出した数式である。その後、未知の量の被検査物質を含む液体試料を測定する場合、得られたパラメータから、該被検査物質の測定値を補正して、該被検査物質の分析値を求めることが可能である。【００８８】
方法２）  図９（ｂ）に示すように、前記シグナル測定部２０にて測定されたシグナルより測定値算出部７０にて求めた被検査物質の測定値に応じて、複数の補正式をアルゴリズム保持部４０に用意しておき、アルゴリズム選択部８０が前記測定値に基づいて前記補正式のいずれかを選択し、該選択された補正式に、前記パラメータ収集部３０によって収集されたパラメータと、前記測定値とを代入することで、該被検査物質の測定値を補正して、該被検査物質の分析値を求める。前記分析素子１００上に前記シグナル測定部２０ にて反応に基づくシグナルを測定する部分（試薬固定化部）が複数ある場合、各試薬固定化部に応じて、すなわち、各試薬固定化部で得たシグナルより算出した測定値に応じて、前記測定値を補正することで、より正確な分析値を算出することが可能である。【００８９】
方法３）  図９（ｃ）に示すように、前記パラメータ収集部３０にて得たパラメータに応じた複数の検量線をアルゴリズム保持部４０に用意しておき、アルゴリズム選択部８０ がパラメータに基づいて該検量線のいずれかを選択し、前記演算処理部９０において、前記シグナル測定部２０にて測定されたシグナルを、該選択された検量線に代入することで、被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を得る。パラメータに基づいて選択される前記検量線は、あらかじめ、既知の量の被検査物質を含み、ヘマトクリット値や総タンパク質濃度などの測定精度および液体試料の展開状況に影響を与える成分を、臨床上想定される広範囲において調整した液体試料を用いることにより導出する。つまりこの方法では、シグナル測定部２０にて得たシグナルを測定値算出部７０に代入して被検査物質の測定値を検出することなく、該シグナルを直接、パラメータに基づいて選択された前記検量線に代入して、前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める。【００９０】
また、前記演算処理部９０が補正を行う際に読み出すアルゴリズムを保持するアルゴリズム保持部４０としては、当該分析装置６０内に回路として組み込む方法、または、記憶媒体を用いるなどして変換可能なように記憶させる方法、または、測定時に分析装置６０ に入力し、測定後に演算させ該被検査物質の分析値を表示させる方法が例示されるが、その他の方法を用いても何ら問題はない。また、あらかじめ分析装置６０内に回路として組み込んである相関式に対して、分析装置６０もしくは分析素子１００に固有の定数を入力する方法も可能で、この方法は、分析装置６０あるいは分析素子１００のロット差を考慮する上で好ましい。関数の定数部分の一部、あるいはすべてが、分析装置６０もしくは分析素子１００のロットに依存する場合、分析を開始する前にこれらの定数部分を装置にセットすることにより、分析装置６０、あるいは分析素子１００のロット差による影響を排除することができる。さらに、図９（ｂ），（ｃ）では、前記アルゴリズム選択部８０を前記演算処理部９０の外部に表示したが、該演算処理部９０中に該アルゴリズム選択部８０が存在しても何ら問題はない。【００９１】
本発明の分析装置６０で補正できる主要な測定誤差要因として下記を例示する。Iの測定誤差要因を考慮した補正を行うことで、IIとIIIの測定誤差要因による精度悪化を軽減することが可能である。【００９２】
I．液体試料の性状
液体試料の種類
例えば、全血、血漿、血清、尿、細菌細胞懸濁液など
液体試料特性
例えば、液体試料の粘性、有形成分の量、液体試料が全血の場合にはヘマトクリット値、総タンパク質濃度など
液体試料添加量
例えば、添加量の多少、添加量不足など【００９３】
II．分析素子の性状
例えば、特異結合に関与する試薬の活性の変化、流路を形成する展開層などの材料の性状の変化、流路上のゴミもしくは汚れなどによる液体試料の展開不良【００９４】
III．分析環境
例えば、測定時の温度および湿度など【００９５】
これらの測定誤差要因により液体試料の流動に変化が生じ、反応時間に差が出ることによって、被検査物質の測定値の正確さに影響を与える。例えば、液体試料の性状による液体試料の測定誤差への影響としては、例えば図１７に示すように、液体試料が全血の場合、ヘマトクリット値が高値になるほど展開速度は遅くなる傾向が見られる。また、図１８に示すように、液体試料が血漿の場合、総タンパク質濃度が濃くなるほど展開速度は遅くなる傾向がある。さらに、図１９に示すように、液体試料の添加量が減少するほど展開速度は遅くなる傾向がある。ただし、前記例はほんの一部であり、これに明示していない測定誤差要因であっても補正することが可能である。【００９６】
以上のように、本発明の実施の形態１による分析装置によれば、液体試料中の被検査物質の測定において、該液体試料あるいは分析装置の性状による測定誤差への影響度合に応じて、該被検査物質の測定誤差を容易に補正して、該被検査物質の分析値を求めるようにしたので、簡易、迅速、かつ高精度な分析装置を提供することが可能となる。【００９７】
以下の実施例により、本発明を実施する方法を、さらに詳細に説明する。なお、本発明は、以下の実施例になんら制約されるものではない。
【実施例１】
【００９８】
（ヘマトクリットによる影響を補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部I及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。図中、免疫クロマトセンサは、抗体が固定化された試薬固定化部I３、試薬固定化部II４と、それよりも液体試料を添加する添加部分に近い部分にある、抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体が含有された領域である標識試薬部２と、試料添加部６とを含む。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。【００９９】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
リン酸緩衝溶液にて希釈して濃度調整をした抗ＣＲＰ抗体Ａ溶液を準備した。この抗体溶液は溶液吐出装置を用いて、ニトロセルロース膜上に塗布した。これにより、ニトロセルロース膜上に試薬固定化部である固定化抗体ラインＩ３が得られた。次に同様にして、試料添加部より下流側に２ｍｍ離れた部分に、抗ＣＲＰ抗体Ｂ溶液を塗布した。このニトロセルロース膜を乾燥後、１％スキムミルクを含有するＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液中に浸漬して３０分間緩やかに振った。３０分後、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽に膜を移動し、１０分間緩やかに振った後に、別のＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽にて更に１０分間緩やかに振り、膜の洗浄を行なった。次に、０．０５％シュクロースモノラウレートを含有するＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液中に浸漬して１０分間緩やかに振った後に、膜を液槽から取り出して、室温で乾燥させた。これにより、ニトロセルロース膜上に試薬固定化部である固定化抗体ラインI３、および固定化抗体ラインII４が得られた。【０１００】
金コロイドは、還流中の０．０１％塩化金酸１００℃溶液に１％クエン酸３ナトリウム溶液を加えることによって調製した。還流を１５分間続けた後に、室温放置にて冷却した。０．２Ｍの炭酸カリウム溶液によって、ｐＨ８．９に調製した前記金コロイド溶液に、抗ＣＲＰ抗体Ｃを加えて数分間攪拌した後に、ｐＨ８．９の１０％ＢＳＡ（牛血清アルブミン）溶液を最終１％になる量だけ加えて攪拌することで、抗体−金コロイド複合体（標識抗体）を調製した。前記標識抗体溶液を４℃、２００００Ｇで５０分間遠心分離することによって、標識抗体を単離して、それを洗浄緩衝液（１％ＢＳＡ５％スクロース・リン酸緩衝液）中に懸濁した後に、前記遠心分離を行って、標識抗体を洗浄単離した。この標識抗体を洗浄緩衝液で懸濁して、０．８μｍのフィルタにて濾過した後に、５２０ｎｍの吸光度が１５０となるように調製して、４℃で貯蔵した。前記標識抗体溶液を溶液吐出装置にセットして、固定化抗ＣＲＰ抗体Ａ及び固定化抗ＣＲＰ抗体Ｂが塗布された乾燥膜上の固定化ラインI及び固定化ラインIIから離れた位置に、液体試料添加開始方向から順番に、標識抗体、固定化ラインI、固定化ラインIIの位置関係になるように塗布した後に、膜を真空凍結乾燥させた。これによって、試薬固定化部および標識試薬部を備えた反応層担体が得られた。【０１０１】
次に、調製された標識試薬を含む反応層担体を、厚さ０．５ｍｍの白色ＰＥＴからなる基板８上に貼り付け、標識試薬部２から終端部分にかけて、透明テープを貼り付けた。その後、レーザーを用いて、２．０ｍｍの幅に切断した。切断後、透明テープを貼り付けない始端部分上に、厚さ１００μｍの透明ＰＥＴを積層させて作製した微細空間形成材９を貼り付け、微細空間（幅２．０ｍｍ×長さ７．０ｍｍ×高さ０．３ｍｍ）６を形成した。前記空間形成材９は、あらかじめ１０％塩化カリウム水溶液を添加した後に、液体窒素にて直ちに凍結し、凍結乾燥を行い、これによって、塩化カリウムが乾燥状態で保持された細胞収縮剤を保持する空間形成材を作製したものである。こうして免疫クロマトセンサを製造した。【０１０２】
ｂ）液体試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度０．６ｍｇ／ｄＬ、５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、総タンパク質濃度を７．５ｇ／ｄＬとし、ヘマトクリット値を２０％、３０％、４０％、５０％に調製した。【０１０３】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
前記免疫クロマトセンサの試料添加部に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を５μＬ 程度添加して、開放部方向へと展開処理して、抗原抗体反応をさせた。該免疫クロマトセンサへの試料添加から５分後の抗体固定化部における呈色状況を計測した。図４は本実施例１における測定図を示し、図４において照射部２１は、６３５ｎｍの半導体レーザーからなる光源を示し、また、受光部２２は受光素子（フォトダイオード）で構成される。さらに、該免疫クロマトセンサ側を走査し、試薬固定化部I３及び試薬固定化部II４における前記標識抗体結合量を、前記展開層からの反射散乱光を演算処理して、吸光度として結果を得る。図５は本発明の一実施例における測定波形図を示す。ここでは試薬固定化部が２カ所であり、前記試料添加部に対して上流側に親和力の高い抗体を使用した。光源及び受光素子を固定し、免疫クロマトセンサ側を走査して、得られた波形から、ピーク値（反射吸光度）を読み取る。この様な波形を得るためには、光源側を走査することも可能である。【０１０４】
次に、試薬固定化部I３と試薬固定化部II４の反射吸光度を、あらかじめ用意しておいた各々の検量線に代入することで、ＣＲＰ濃度がわかる。【０１０５】
ｄ）パラメータを収集する検知区間の選出
ここで、パラメータである展開速度の検知区間の選出について説明する。図６に示すパラメータ収集部３０の照射部３１および受光部３２を用いて、流路上の任意の検知区間における液体試料の展開速度と、試薬固定化部IおよびIIにおける反射吸光度を測定し、展開速度と測定誤差であるＣＲＰ濃度の真値からの乖離度の関係をみた。乖離度を算出する際のＣＲＰ濃度の真値は、ｂ）にて調整した全血をあらかじめ分注しておき、市販の自動分析装置（日立７０２０：日立製作所製）を用いて測定した。ここでは、パラメータとして液体試料の展開速度を用いた。【０１０６】
まず、パラメータである展開速度の検知区間を０．５、４．０、７．５、２０．０ｍｍ に変更し、それぞれの距離における液体試料の展開速度を算出した。次に、試薬固定化部Iおよび試薬固定化部IIにおける反射吸光度を予め用意しておいた検量線に代入して予測されるＣＲＰ濃度の測定値を算出し、この測定に用いた血液試料のＣＲＰ濃度の真値からの乖離度を求めた。この展開速度と乖離度との関係を図１０に示す。この結果から、検知区間が４．０と７．５と２０．０ｍｍの場合に非常に良好な相関性が見られた。展開速度の速い場合は、反応部分において試料中の被検査物質であるＣＲＰの通過量が多くなるため、測定値はＣＲＰ濃度の真値に比べて高値となり、一方、展開速度が遅い場合は、反応部分において試料中の被検査物質であるＣＲＰの通過量が少なくなるため、測定値はＣＲ Ｐ濃度の真値に比べて低値となる傾向がある。測定値とは、あらかじめ用意した検量線に吸光度を代入することにより得られたＣＲＰ濃度を示す。【０１０７】
例えば、パラメータの検知区間が４．０ｍｍの場合、展開速度ｘと乖離度ｙとの相関式は下記の式１で表される。【０１０８】
ｙ＝２６．２５８ｘ−２．７２８１                          式１ 【０１０９】
この相関式を基にして、展開速度からＣＲＰ濃度を補正する数式を導くことが可能である。ＣＲＰ濃度の測定値をＺとすると、ＣＲＰ濃度の分析値Ｙを求める補正式は、下記の式２で表される。【０１１０】
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（２６．２５８ｘ−２．７２８１）｝          式２ 【０１１１】
ｅ）ヘマトクリット値による影響を補正する数式の導出
ここでは、ｄ）の検知区間の検討において、展開速度と乖離度との相関が最も大きかった流路の始端から半ばまでの２０．０ｍｍを検知区間として、この検知区間の液体試料の展開速度とＣＲＰ濃度の真値からの乖離度の相関関係から導出した補正式を用いた。前記補正式は、測定値が１．０ｍｇ／ｄＬ未満の場合と、１．０ｍｇ／ｄＬ以上の場合とに分けて用いた。ＣＲＰ濃度の測定値をＺ、展開速度をｘとすると、ＣＲＰ濃度の分析値Ｙを求める補正式は、下記の式３および４で表される。【０１１２】
１．０ｍｇ／ｄＬ未満の場合； 
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（６．３５８９ｘ−１．３９４９）｝            式３ 【０１１３】
１．０ｍｇ／ｄＬ以上の場合； 
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（３．８２３３ｘ−０．６１８７９）｝          式４ 【０１１４】
ｆ）ヘマトクリット値による影響の補正
アルゴリズム選択部８０が、ＣＲＰ濃度の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部４ ０に保持してある補正式のいずれかを選択し、該測定値補正部５０にて、該選択された補正式にパラメータと測定値を代入することで、ＣＲＰ濃度の測定値を補正し、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた。このフロー図は、図２０に示した。補正前と補正後のＣＶを示したのが、図１１である。補正前のＣＶ値は、ヘマトクリット値の影響を反映しており、より信頼性の高いＣＲＰ濃度の分析値を得るにはＣＶ値を良化させる必要があった。それに対して、液体試料の展開速度由来のパラメータに基づいて測定値の補正を行った場合、著しく測定精度が向上したことは図１１からも明らかである。また、図１２には、補正前と補正後の乖離度の分布を示した。横軸はＣＲＰ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、ヘマトクリットが低値の場合にかなり大きく乖離していた。それに対して、補正を行った場合には、乖離度が顕著に減少し、充分な補正効果が示された。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。
【実施例２】
【０１１５】
（総タンパクによる影響を補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部Ｉ及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。【０１１６】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
前記実施例１において用いた免疫クロマトセンサと同一ロットのセンサを用いて、以下の測定を行った。【０１１７】
ｂ）液体試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度０．６、５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、ヘマトクリット値を４０ ％とし、総タンパク質濃度を２．５ｇ／ｄＬ、５ｇ／ｄＬ、７．５ｇ／ｄＬ、１０ｇ／ｄＬ、１２．５ｇ／ｄＬに調製した。【０１１８】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法によりＣＲＰ濃度の測定値を算出した。【０１１９】
ｄ）ヘマトクリット値による影響を補正する式を利用した総タンパク質濃度による影響の補正
前記実施例１において導出した補正式に基づいて、ＣＲＰ濃度の測定値の補正を行い、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた。図１３に補正前と補正後の測定結果図を示した。図１３の横軸はＣＲＰ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、総タンパク質濃度の影響を受けて、大きく乖離していた。それに対して、前記補正式を用いて補正を行った場合には、液体試料間の総タンパク質濃度差要因に対する補正効果が明瞭に認められた。このように、液体試料が全血の場合は、へマトクリット値による影響を補正する場合と同一の補正式を用いて、総タンパク質濃度による影響も補正することが可能である。【０１２０】
この補正式を用いることで、ヘマトクリット値が１４．９〜５１％、総タンパク質濃度が４．２〜１０ｇ／ｄＬ、アルブミン濃度が１．４〜４．９％の血液試料において、著しく測定精度が向上し、血液試料の性状による影響に対する補正効果が明瞭に認められた。
【実施例３】
【０１２１】
（液体試料の添加量不足による影響を補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部Ｉ及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。【０１２２】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
前記実施例１において用いた免疫クロマトセンサと同一ロットのセンサを用いて、以下の測定を行った。【０１２３】
ｂ）液体試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、総タンパク質濃度を７．５ｇ／ｄＬとし、ヘマトクリット値を３０％、４０％、５０％に調製した。【０１２４】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部分に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を液体試料の添加量不足である４μＬ、４．２５μＬ、４.５μＬ、４.７５μＬと規格の液体試料の添加量である５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法によりＣＲＰ濃度の測定値を算出した。【０１２５】
ｄ）ヘマトクリット値による影響を補正する式を利用した液体試料の添加量不足による影響の補正
前記実施例１において導出した補正式に基づいて、ＣＲＰ濃度の測定値の補正を行い、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた。図１４に補正前と補正後の測定結果の乖離度分布図を示した。図１４の横軸は乖離度、縦軸は検体数を示す。補正前は、液体試料の添加量不足の影響を受けて、低値に乖離していた。それに対して、前記補正式を用いて補正を行った場合には、液体試料の添加量不足要因に対する補正効果が明瞭に認められた。【０１２６】
この補正式を用いることで、液体試料の添加量不足で低値に乖離していた測定において、著しく精度が向上し、液体試料の添加量不足の影響に対する補正効果が明瞭に認められた。この補正方法を用いることにより、添加量不足による感度低下を回避することが可能となった。
【実施例４】
【０１２７】
（ヘマトクリットおよび総タンパク質濃度による影響を補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部Ｉ及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。【０１２８】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
前記実施例１において用いた免疫クロマトセンサと同一ロットのセンサを用いて、以下の測定を行った。【０１２９】
ｂ）試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度０．６ｍｇ／ｄＬ、５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、ヘマトクリット値および総タンパク質濃度を、２０％・４ｇ／ｄＬ、３０％・５．５ｇ／ｄＬ、４０％・７ｇ／ｄＬ、５０％・８．５ｇ／ｄＬ、６０％・１０ｇ／ｄＬ、３０％・８．５ｇ／ｄＬ、５０％・５．５ｇ／ｄＬに調整した。【０１３０】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部分に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法によりＣＲＰ濃度の測定値を算出した。【０１３１】
ｄ）ヘマトクリット値および総タンパク質濃度による影響を補正する数式の導出
図６に示す、パラメータ収集部３０の照射部３１および受光部３２を用いて、展開層上の任意の区間における液体試料の展開時間と、試薬固定化部I３およびII４における吸光度を測定し、展開時間とＣＲＰ濃度の真値からの乖離度の関係をみた。乖離度を算出する際のＣＲＰ濃度の真値は、ｂ）にて調整した液体試料をあらかじめ分注しておき、市販測定装置（日立７０２０：日立製作所製）を用いて測定した。まず、液体試料の展開速度を算出した。次に、試薬固定化部I３およびII４における吸光度を予め作成しておいた検量線に代入して、予測されるＣＲＰ濃度を算出し、この測定に用いた血液試料のＣＲＰ濃度の真値からの乖離度を求めた。この展開速度と乖離度との関係を図１０に示す。展開速度の速い場合は、反応部において試料中の被検査物質であるＣＲＰの通過量が多くなるため、測定値はＣＲＰ濃度の真値に比べて高値となり、一方、展開速度が遅い場合は、反応部において試料中の被検査物質であるＣＲＰの通過量が少なくなるため、測定値はＣＲＰ濃度の真値に比べて低値となる傾向がある。【０１３２】
展開速度と乖離度との相関式を基にして、展開速度からＣＲＰ濃度の測定値を補正する数式を導いた。ＣＲＰ濃度の測定値をＺ、展開速度をｘとすると、ＣＲＰ濃度の分析値Ｙを求める補正式は、下記の式５で表される。【０１３３】
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（１．２８２５Ｌｎ（ｘ）−２．５７０００）｝      式５ 【０１３４】
ｅ）ヘマトクリット値および総タンパク質濃度による影響の補正
測定値補正部５０にて、ＣＲＰ濃度の測定値を補正して、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた結果を図１５に示した。図１５は、補正前と補正後の測定結果の乖離度分布図であり、横軸は乖離度、縦軸は検体数を示す。補正前は、液体試料の性状の個体差による影響を受けて、大きく乖離していた。それに対して、ヘマトクリット値および総タンパク質濃度の影響による補正を行った場合には、補正効果が明瞭に認められた。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。
【実施例５】
【０１３５】
（パラメータに基づいた複数の検量線にて補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部I、及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部、を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。【０１３６】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
前記実施例１において用いた免疫クロマトセンサと同一ロットのセンサを用いて、以下の測定を行った。【０１３７】
ｂ）試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度０．６ｍｇ／ｄＬ、５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、ヘマトクリットおよび総タンパク質濃度を、２０％・４ｇ／ｄＬ、３０％・５．５ｇ／ｄＬ、４０％・７ｇ／ｄＬ、５０％・８．５ｇ／ｄＬ、６０％・１０ｇ／ｄＬ、３０％・８．５ｇ／ｄＬ、５０％・５．５ｇ／ｄＬに調整した。【０１３８】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部分に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法により、前記シグナル測定部２０にて試薬固定化部３，４における反射吸光度を測定した。【０１３９】
ｄ）ヘマトクリット値および総タンパク質濃度による影響を補正する数式の導出
図６に示すパラメータ収集部３０の照射部３１および受光部３２を用いて、展開層上の任意の区間における液体試料の展開時間と、試薬固定化部I３およびII４における反射吸光度を測定し、一定の展開速度毎に、反射吸光度とＣＲＰ濃度の真値との関係をみた。ＣＲＰ濃度の真値は、ｂ）にて調整した液体試料をあらかじめ分注しておき、市販測定装置（日立７０２０：日立製作所製）を用いて測定した。反射吸光度とＣＲＰ濃度の真値との関係から、一定の展開速度毎に複数の検量線を用意した。反射吸光度をｚとすると、ＣＲＰ濃度の分析値Ｙを求める試薬固定化部Iの検量線は、一定の展開速度毎に、下記の式６〜１０で表される。【０１４０】
展開速度０．１００ｍｍ／ｓ未満の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.1363)/-0.5663}        式６ 【０１４１】
展開速度０．１００ｍｍ／ｓ以上０．１１０ｍｍ／ｓ未満の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.2642)/-0.4162}        式７ 【０１４２】
展開速度０．１１０ｍｍ／ｓ以上０．１２０ｍｍ／ｓ未満の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.3185)/-0.4628}        式８【０１４３】
展開速度０．１２０ｍｍ／ｓ以上０．１３０ｍｍ／ｓ未満の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.3661)/-0.3937}        式９ 【０１４４】
展開速度０．１３０ｍｍ／ｓ以上の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.4168)/-0.3233}        式１０ 【０１４５】
ｅ）ヘマトクリット値および総タンパク質濃度による影響の補正
アルゴリズム選択部８０により、展開速度に基づいて、アルゴリズム保持部４０に保持してある複数の検量線のいずれかを選択し、該演算処理部９０にて該選択された検量線に、シグナル測定部２０にて得られたシグナル（反射吸光度）を代入することで、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた結果を図１６に示した。図１６は、補正なしと補正ありの測定結果の乖離度の分布を示す。横軸はＣＲＰ濃度の真値、縦軸はＣＲＰ濃度の真値からの乖離度を示す。補正なしの場合は、液体試料の性状の個体差による影響を受けて、大きく乖離していた。それに対して、パラメータに基づいた複数の検量線を用いた補正ありの場合には、補正効果が明瞭に認められた。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。
【実施例６】
【０１４６】
（液体試料の種類による影響を補正したｈＣＧの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ｈＣＧ抗体Ａを固定化した試薬固定化部I及び抗ｈＣＧ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ｈＣＧ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。図中、免疫クロマトセンサは、抗体が固定化された試薬固定化部I３、試薬固定化部II４と、それよりも液体試料を添加する添加部分に近い部分にある、抗ｈＣＧ抗体Ｃと金コロイドとの複合体が含有された領域である標識試薬部２と、試料添加部６とを含む。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。【０１４７】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
リン酸緩衝溶液にて希釈して濃度調整をした抗ｈＣＧ抗体Ａ溶液を準備した。この抗体溶液は溶液吐出装置を用いて、ニトロセルロース膜上に塗布した。これにより、ニトロセルロース膜上に試薬固定化部である固定化抗体ラインＩ３が得られた。次に同様にして、試料添加部より下流側に２ｍｍ離れた部分に、抗ｈＣＧ抗体Ｂ溶液を塗布した。このニトロセルロース膜を乾燥後、１％スキムミルクを含有するＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液中に浸漬して３０分間緩やかに振った。３０分後、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽に膜を移動し、１０分間緩やかに振った後に、別のＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽にて更に１０分間緩やかに振り、膜の洗浄を行なった。次に、０．０５％シュクロースモノラウレートを含有するＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液中に浸漬して１０分間緩やかに振った後に、膜を液槽から取り出して、室温で乾燥させた。これにより、ニトロセルロース膜上に試薬固定化部である固定化抗体ラインI３、および固定化抗体ラインII４が得られた。【０１４８】
金コロイドは、還流中の０．０１％塩化金酸１００℃溶液に１％クエン酸３ナトリウム溶液を加えることによって調製した。還流を１５分間続けた後に、室温放置にて冷却した。０．２Ｍの炭酸カリウム溶液によって、ｐＨ８．９に調製した前記金コロイド溶液に、抗ｈＣＧ抗体Ｃを加えて数分間攪拌した後に、ｐＨ８．９の１０％ＢＳＡ（牛血清アルブミン）溶液を最終１％になる量だけ加えて攪拌することで、抗体−金コロイド複合体（標識抗体）を調製した。前記標識抗体溶液を４℃、２００００Ｇで５０分間遠心分離することによって、標識抗体を単離して、それを洗浄緩衝液（１％ＢＳＡ５％スクロース・リン酸緩衝液）中に懸濁した後に、前記遠心分離を行って、標識抗体を洗浄単離した。この標識抗体を洗浄緩衝液で懸濁して、０．８μｍのフィルタにて濾過した後に、５２０ｎｍの吸光度が１５０となるように調製して、４℃で貯蔵した。前記標識抗体溶液を溶液吐出装置にセットして、固定化抗ｈＣＧ抗体Ａ及び固定化抗ｈＣＧ抗体Ｂが塗布された乾燥膜上の固定化ラインI及び固定化ラインIIから離れた、液体試料添加開始方向から順番に、標識抗体、固定化ラインI、固定化ラインIIの位置関係になるように塗布した後に、膜を真空凍結乾燥させた。これによって、試薬固定化部および標識試薬部を備えた反応層担体が得られた。【０１４９】
次に、調製された標識試薬を含む反応層担体を、厚さ０．５ｍｍの白色ＰＥＴからなる基板８上に貼り付け、標識試薬部２から終端部分にかけて、透明テープを貼り付けた。その後、レーザーを用いて、２．０ｍｍの幅に切断した。切断後、透明テープを貼り付けない始端部分上に、厚さ１００μｍの透明ＰＥＴを積層させて作製した微細空間形成材９を貼り付け、微細空間（幅２．０ｍｍ×長さ７．０ｍｍ×高さ０．３ｍｍ）６を形成した。前記空間形成材９はあらかじめ１０％塩化カリウム水溶液を添加した後に、液体窒素にて直ちに凍結し、凍結乾燥を行い、これによって、塩化カリウムが乾燥状態で保持された細胞収縮剤を保持する空間形成材を作製したものである。こうして免疫クロマトセンサを製造した。【０１５０】
ｂ）試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のｈＣＧ溶液を加えることにより、ｈＣＧ濃度１００Ｕ／Ｌ、１０００Ｕ／Ｌ、１００００Ｕ／Ｌの血液を調整した。この血液中の総タンパク質濃度は７．５ｇ／ｄＬとし、ヘマトクリット値を２０％、３０％、４０％、５０％に調製した。【０１５１】
また、人の血漿に、既知濃度のｈＣＧ溶液を加えることにより、ｈＣＧ濃度１００Ｕ／Ｌ、１０００Ｕ／Ｌ、１００００Ｕ／Ｌの血漿を調整した。この総タンパク質濃度は２．５ｇ／ｄＬ、５ｇ／ｄＬ、７．５ｇ／ｄＬ、１０ｇ／ｄ Ｌ、１２．５ｇ／ｄＬに調製した。【０１５２】
更に、ヒト尿に、既知濃度のｈＣＧ溶液を加えることにより、ｈＣＧ濃度１００Ｕ／Ｌ、１０００Ｕ／Ｌ、１００００Ｕ／Ｌの尿を調整した。
以上により、各液体試料溶液を調整した。【０１５３】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部分に、ｂ）にて調整したｈＣＧを含む各液体試料溶液を５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法により、前記シグナル測定部２０にて試薬固定化部３，４における反射吸光度を測定した。【０１５４】
ｄ）液体試料の種類を識別するアルゴリズムの導出
（実施例１）ｄ）の検知区間の検討において、展開速度と乖離度との相関が最も大きかった流路の始端から半ばまでの２０．０ｍｍを検知区間として、この検知区間の各液体試料により異なる展開速度の関係から液体試料識別アルゴリズムを導出した。【０１５５】
各液体試料毎の展開速度は図２１に示す。この図からわかるように、尿・血漿・全血によって展開速度は全く異なる。この図より、検知区間の展開速度が０．４５ｍｍ／ｓ以上であれば尿、０．２９〜０．４５ｍｍ／ｓまでの間であれば血漿、０．２９ｍｍ／ｓ未満であれば全血と液体試料を識別する液体試料識別アルゴリズムを導出した。【０１５６】
ｅ）液体試料が尿と識別した場合の尿中ｈＣＧ濃度の測定
尿中ｈＣＧ濃度の測定について、図２２（ａ）を用いて説明する。
まず始めに、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある液体試料識別アルゴリズム１１０を選択、液体試料識別アルゴリズムによって液体試料を尿と識別した。次に、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある尿用検量線を選択し、演算処理部９０にて、尿中ｈＣＧ濃度を算出した。【０１５７】
次にアルゴリズム選択部８０は、ｈＣＧ濃度の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部４０に保持してある補正式のいずれかを選択し、該測定値補正部５０にて、該選択された補正式にパラメータと測定値を代入することで、ｈＣＧ濃度の測定値を補正し、ｈＣＧ濃度の分析値を求めた。このフロー図は、図２２（ｃ）に示した。図２３に、補正前と補正後の乖離度の分布を示した。横軸はｈＣＧ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、尿の展開速度の相違の場合に大きく乖離していた。それに対して、補正を行った場合には、乖離度が顕著に減少し、充分な補正効果が示された。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。【０１５８】
ｆ）液体試料が血漿と識別した場合の総タンパク質濃度による影響の補正
血漿ｈＣＧ濃度の測定について、図２２（ａ）を用いて説明する。
まず始めに、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある液体試料識別アルゴリズム１１０を選択、液体試料識別アルゴリズムによって液体試料を血漿と識別した。次に、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある血漿用検量線を選択し、演算処理部９０にて、血漿中のｈＣＧ濃度を算出した。【０１５９】
次にアルゴリズム選択部８０は、ｈＣＧ濃度の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部４０に保持してある補正式のいずれかを選択し、該測定値補正部５０にて、該選択された補正式にパラメータと測定値を代入することで、ｈＣＧ濃度の測定値を補正し、ｈＣＧ濃度の分析値を求めた。このフロー図は、図２２（ｃ）に示した。図２４に、補正前と補正後の乖離度の分布を示した。横軸はｈＣＧ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、総タンパク質濃度が低値や高値の場合にかなり大きく乖離していた。それに対して、補正を行った場合には、乖離度が顕著に減少し、充分な補正効果が示された。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。【０１６０】
ｇ）液体試料が血液と識別した場合のヘマトクリット値による影響の補正
血液ｈＣＧ濃度の測定について、図２２（ａ）を用いて説明する。
まず始めに、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある液体試料識別アルゴリズム１１０を選択、液体試料識別アルゴリズムによって液体試料を全血と識別した。次に、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある全血用検量線を選択し、演算処理部９０にて、血液中のｈＣＧ濃度を算出した。【０１６１】
次にアルゴリズム選択部８０は、ｈＣＧ濃度の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部４０に保持してある補正式のいずれかを選択し、該測定値補正部５０にて、該選択された補正式にパラメータと測定値を代入することで、ｈＣＧ濃度の測定値を補正し、ｈＣＧ濃度の分析値を求めた。このフロー図は、図２２（ｃ）に示した。図２５には、補正前と補正後の乖離度の分布を示した。横軸はｈＣＧ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、ヘマトクリットが低値の場合にかなり大きく乖離していた。それに対して、補正を行った場合には、乖離度が顕著に減少し、充分な補正効果が示された。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。【０１６２】
尚、図２２（ａ）（ｂ）の概念図や図２２（ｃ）のフロー図はあくまで一例であり、他の概念やフロー図でも何ら問題はない。
以上のように、本実施例６を用いれば、液体試料の種類を問わずクロマト試験片を用いた定量測定が可能であり、各液体試料の特性に応じた検量線や補正式が備えられており、いずれの液体試料を用いても自動的に液体試料を識別し、高精度な定量測定を実現することができる。【０１６３】
なお、前記実施例１〜５においては、同一ニトロセルロース膜上に標識試薬部と試薬固定化部を設けたセンサを用いたが、ニトロセルロースとは異なる材質の、例えば不織布のような多孔質担体に標識試薬を担持したものを支持体上に配しても何ら問題はない。標識試薬を構成する標識物としては、金コロイドを用いて例を示したが、着色物質、蛍光物質、燐光物質、発光物質、酸化還元物質、酵素、核酸、小胞体でもよく、反応の前後において何らかの変化が生じるものであれば何を用いてもよい。【０１６４】
さらに、前記実施例１〜５においては、標識試薬が１カ所であり、試薬固定化部が複数の例で示したが、標識試薬も必ずしも１カ所である必要性はなく、複数の試薬固定化部と複数の試薬の組合せにより構成することもできる。例えば、複数の試薬固定化部を設ける場合は、各試薬固定化部の上流側に各々標識試薬部を備える構成を取ることも可能であり、製造上の工法は複雑になるが、任意の位置に任意の数で設置できることはいうまでもない。【０１６５】
また、測定される液体試料としては、例えば、水や水溶液、尿、血漿、血清、唾液などの体液、固体および粉末や気体を溶かした溶液などがあり、その用途としては、例えば、血液検査や尿検査、水質検査、便検査、土壌分析、食品分析などがある。また、被検査物質としてｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）を例として実施例を述べたが、抗体、免疫グロブリン、ホルモン、酵素及びペプチドなどのタンパク質及びタンパク質誘導体や、細菌、ウイルス、真菌類、マイコプラズマ、寄生虫ならびにそれらの産物及び成分などの感染性物質、治療薬及び乱用薬物などの薬物及び腫瘍マーカーが挙げられる。具体的には、例えば、絨毛性腺刺激ホルモン（ｈＣＧ）、黄体ホルモン（ＬＨ）、甲状腺刺激ホルモン、濾胞形成ホルモン、副甲状腺刺激ホルモン、副腎脂質刺激ホルモン、エストラジオール、前立腺特異抗原、Ｂ型肝炎表面抗体、ミオグロビン、ＣＲＰ、心筋トロポニン、ＨｂＡ１ｃ、アルブミン等でも何ら問題はない。また、水質検査や土壌分析などの環境分析、食品分析などにも実施可能である。簡便かつ迅速で、高感度・高性能な測定が実現でき、また、いつでもどこでも誰でも測定が可能であるため、ＰＯＣＴ向けの分析装置としても利用できる。
【産業上の利用可能性】
【０１６６】
本発明の分析装置は、例えば、抗原抗体反応のような任意の反応に基づいて、液体試料中の被検査物質を分析検出し、定量または半定量する際に、簡便かつ迅速で、高感度・高性能な測定が実現でき、また、いつでもどこでも誰でも測定が可能であるため、ＰＯＣＴ向けの分析装置として有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２（ａ）】
2007007849.tif 000023
【図２２（ｂ）】
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【図２２（ｃ）】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年1月18日(2008.1.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体試料を分析素子上の流路に展開させて該液体試料中の被検査物質を測定する分析装置において、
前記流路上での前記液体試料中の被検査物質の反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定部と、
前記流路に展開された前記液体試料から前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集部と、
前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムをあらかじめ保持するアルゴリズム保持部と、
前記パラメータに基づいて、前記シグナルより前記被検査物質の分析値を演算処理する演算処理部とを備え、
前記演算処理部は、前記アルゴリズム保持部より前記アルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記パラメータ収集部にて得たパラメータに基づき前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項２】
請求項１に記載の分析装置において、
前記演算処理部は、前記シグナル測定部にて得たシグナルより前記液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出部と、
前記被検査物質の測定誤差が極小になるように前記被検査物質の測定値を補正して該被検査物質の分析値を求める測定値補正部とを備え、
前記測定値補正部は、前記アルゴリズム保持部より前記パラメータと前記被検査物質の測定誤差との関係からなるアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて前記パラメータ収集部にて得たパラメータに基づき、前記測定値算出部にて得た前記被検査物質の測定値を補正し該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項３】
請求項１に記載の分析装置において、
前記分析素子は、前記液体試料を前記流路上に添加するための試料添加部と、前記被検査物質と反応する標識試薬を該液体試料の展開により溶出可能に保持する標識試薬部と、前記被検査物質と前記標識試薬との反応の度合を把握する試薬を固定化して保持する試薬固定化部とを有する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項４】
請求項１に記載の分析装置において、
前記パラメータは、前記液体試料が前記流路を展開するときの展開速度、または展開時間、または展開距離のいずれかである、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項５】
請求項１に記載の分析装置において、
前記シグナル測定部と、前記パラメータ収集部とのうちの少なくとも一方が、電磁放射線を用いる、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項６】
請求項１に記載の分析装置において、
前記分析素子は、乾式分析素子である、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項７】
請求項１に記載の分析装置において、
前記シグナル測定部は、抗原抗体反応由来の反応に基づくシグナルを測定する、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項８】
請求項１に記載の分析装置において、
前記分析素子は、免疫クロマトセンサである、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項９】
請求項１に記載の分析装置において、
前記分析素子は、ワンステップの免疫クロマトセンサである、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１０】
請求項１に記載の分析装置において、
前記流路は、単層または複数層の多孔質性材料からなる、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１１】
請求項２に記載の分析装置において、
前記アルゴリズム保持部は、前記パラメータに基づいて前記被検査物質の測定値を補正するための補正式を保持し、
前記測定値補正部は、前記アルゴリズム保持部より前記補正式を読み出し、該読み出した補正式、および前記パラメータを用いて、前記被検査物質の測定値を補正し該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１２】
請求項１１記載の分析装置において、
前記アルゴリズム保持部は、複数の前記補正式を保持し、前記被検査物質の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部に保持された複数の補正式のうちのいずれかを選択するアルゴリズム選択部を備え、
前記測定値補正部は、前記アルゴリズム選択部が選択した補正式、および前記パラメータを用いて前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１３】
請求項１記載の分析装置において、
前記アルゴリズム保持部は、前記シグナル測定部にて得たシグナルより、前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求めるための複数の検量線を保持し、前記パラメータに基づいて、前記アルゴリズム保持部に保持された複数の検量線のうちのいずれかを選択するアルゴリズム選択部を備え、
前記演算処理部は、前記アルゴリズム選択部が選択した検量線、および前記パラメータを用いて前記シグナルより前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１４】
請求項１に記載の分析装置において、
前記演算処理部は、前記液体試料の粘度、または前記液体試料の添加量、または前記分析素子の製造後経過時間、の影響による前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める、
ことを特徴とする分析装置。
【請求項１５】
液体試料を流路に展開させて該液体試料中の被検査物質を測定する分析方法において、
前記流路に展開された前記液体試料から、前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集ステップと、
前記流路上での前記液体試料中の被検査物質の反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定ステップと、
前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムを予め保持するアルゴリズム保持部よりアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて前記パラメータ収集ステップにて得たパラメータに基づき、前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める演算処理ステップとを含む、
ことを特徴とする分析方法。
【請求項１６】
請求項１５に記載の分析方法において、
前記演算処理ステップは、前記シグナル測定ステップにて得たシグナルより前記液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出ステップと、前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求める測定値補正ステップとを含む、
ことを特徴とする分析方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体試料中の被検査物質を測定する分析装置に関し、特に、液体試料中の被検査物質の検出において、該液体試料および分析素子の性状による測定誤差への影響度合に応じて、該被検査物質の測定誤差を確実に補正する分析装置、及びその方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年では、在宅医療、および医院や診療所などの地域医療の充実、さらには早期診断、および緊急性の高い臨床検査の増加などに伴い、臨床検査の専門家でなくとも、それを用いて、簡易かつ迅速に、高精度の測定を実施可能である分析装置が要望されるようになってきており、このため、煩雑な操作を伴わず、短時間で信頼性の高い測定を行うことのできる、ＰＯＣＴ（Ｐｏｉｎｔ  ｏｆ  Ｃａｒｅ  Ｔｅｓｔｉｎｇ）向けの小型分析装置が、脚光をあびている。
【０００３】
ＰＯＣＴとは、一般的に、開業医、専門医の診察室、病棟および外来患者向け診療所などの「患者の近いところ」で行われる検査の総称であり、検査結果を即座に医師が判断し、迅速な処置を施し、治療の過程や、予後のモニタリングまでを行うという診療の質の向上に大きく役立つものとして注目されている方法である。このような小型分析装置による検査は、中央検査室での検査に比べて、検体の運搬や、設備にかかるコストや、不要な検査にかかる費用を抑えることができ、トータルの検査費用の削減が可能になるといわれており、ＰＯＣＴ市場は、病院経営合理化の進む米国では、急速に拡大してきており、日本をはじめ世界的にみても成長市場となっていくことが予想されている。
【０００４】
免疫クロマトセンサに代表されるような乾式分析素子は、試薬の調整を必要とせず、測定対象となる血液や尿などの液体試料を、分析素子上に滴下するなどの簡単な操作のみにより、該液体試料中の被検査物質を分析することが可能なものであり、液体試料中の被検査物質を、簡便かつ迅速に分析するのに非常に有用なため、ＰＯＣＴの代表として今日多数実用化されている。また、市場からは、いつでもどこでも誰でも測定できることに加え、より高精度な分析精度が要求されている。
【０００５】
しかし、前述した乾式分析素子は、液体試料によって、粘度、各成分量、夾雑物などの性状に個体差があり、かかる乾式分析素子による分析方法では、それらの影響を受けやすく、これらの要因を排除可能な大型の分析装置に比べ、高精度な測定結果を得ることが困難であった。そこで、従来より、前記のような測定の信頼性を低下させる要因を排除する分析装置が、多くのメーカーによって開発されている。
【０００６】
例えば、液体試料が血液の場合には、代表的な個体差としてヘマトクリットがあり、前記乾式分析素子により血液中の被検査物質を分析する場合、その血液のヘマトクリット値による影響を支配的に受ける。そこで、種々の方法により、該ヘマトクリット値を求め、その値に応じて被検査物質濃度を補正する分析装置が、多数報告されている（特許文献１ から特許文献３参照）。
【０００７】
前記の方法は、何れも全血中のヘマトクリット値が正常域を逸脱した試料を測定する場合に生じる測定誤差を確実に補正できる方法であり、全血中の被検査物質の定量を行うのに適応可能である。しかしながら、前記のいずれの方法も、ヘマトクリット値による影響に限定して補正するものであり、液体試料の粘度や、夾雑物など、ヘマトクリット値以外の性状による影響を補正することはできないという問題点がある。
【０００８】
一方、測定の信頼性を低下させる要因は、前述したヘマトクリット値に限らず、例えば液体試料の粘度などの性状、分析環境、反応試薬の失活なども、その要因となりえる。このような、ヘマトクリット値に限らず、該液体試料の性状、分析環境、反応試薬の失活などの測定の信頼性を低下させる要因による分析結果への影響を考慮した分析方法も報告されている。例えば、特異結合反応後に、特異結合に関与し、かつ信号物質を発する信号物質発生体を、流路内を拡散して検知部まで到達して発する信号を、流動方向に複数配置される検知部において計測し、それぞれの検知部で信号変調の差、もしくは比を求めることによって、液体試料中の被検査物質以外の非特異的要因による分析結果への影響が極小化するように、演算処理を行う方法である（特許文献４参照）。
【特許文献１】特許第３５８６７４３号公報
【特許文献２】特開２０００−２６２２９８号公報
【特許文献３】特開２００１−９１５１２号公報
【特許文献４】特開平８−７５７４８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
前述したように、前記特許文献１〜３に示す方法は、全血中のヘマトクリット値が正常域を逸脱した試料を測定する場合に生じる測定誤差を確実に補正でき、全血中の被検査物質の定量に適応可能であるが、前記特許文献１〜３の方法は、液体試料が血液の場合に、ヘマトクリット値による影響に限定して補正するものであり、液体試料の粘度や、試料中の夾雑物など、ヘマトクリット値以外の液体試料由来の性状による影響をも除いた結果に補正することはできないものであるため、非常に測定精度が悪いという課題を有していた。
【００１０】
またもう一方の、特許文献４に示す、液体試料の性状などの測定の信頼性を低下させる要因による影響を考慮した分析方法においては、複数の検知部に対して等しく影響を与えていることを前提としているが、分析結果への影響を極小化するための指標となる信号発生に到るまでに多段階の反応を経ており、反応状態の差が生じやすいため、前記影響を確実に極小化することは困難であった。また、上記特許文献４の方法では複数の検知部が必要となり、分析装置の構成を複雑化しなくてはならないため、その複雑さが測定精度を悪化させる要因となる恐れがあると共に、コスト的にも高価であるという課題を有していた。
【００１１】
さらにこれらの方法は、操作性や構成上の面において、いつでもどこでも誰でも測定可能であることが必要とされるクロマトセンサには導入することが不可能であり、汎用性に欠くという課題もあった。
また、全血・血漿・尿などの種類の異なる液体試料がいずれであるかを自動で識別することは、従来の方法では到底不可能であった。そのため、クロマトセンサにおいて使用する液体試料は何であるかを予め指定し明示する必要があり、使用する現場では誤って異なる液体試料を用いてしまい、正確な結果が得られないというようなミスもあり、ＰＯＣＴ向けの診断薬でありながら、現場における取り扱い者への徹底した教育が必要不可欠であるという課題も、近年では多く発生していた。
【００１２】
本発明は、前記課題に鑑みてなされたものであり、液体試料が何であるかを識別し、該液体試料の種類に応じた該液体試料および分析素子の性状による測定誤差への影響度合に応じて、容易に該液体試料中の被検査物質の測定値誤差を補正した分析値を求めることが可能であり、いつでもどこでも誰でも、簡易かつ迅速に、より高精度な測定を行うことのできる分析装置、及び分析方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
前記課題を解決するために、本発明にかかる分析装置は、液体試料を分析素子上の流路に展開させて該液体試料中の被検査物質を測定する分析装置において、前記流路上での前記液体試料中の被検査物質の反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定部と、前記流路に展開された前記液体試料から、前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集部と、前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムを、あらかじめ保持するアルゴリズム保持部と、前記パラメータに基づいて、前記シグナルより前記被検査物質の分析値を演算処理する演算処理部とを備え、前記演算処理部は、前記アルゴリズム保持部より前記アルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記パラメータ収集部にて得たパラメータに基づき前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める、ものである。
【００１４】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を補正することが可能となり、簡易で迅速な、より正確性の高い分析装置を提供することができる。
【００１５】
なお、ここで示す測定誤差とは、前記液体試料および分析素子の性状の影響による、前記被検査物質の測定値の、該被検査物質の真値からの乖離度である。また、アルゴリズムとは、前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるものである。すなわち、前記パラメータと被検査物質の測定誤差との関係、あるいは、前記パラメータに基づいて補正した被検査物質の分析値を算出可能にする、前記シグナルと被検査物質の真値との関係からなるものである。例えば、該パラメータに基づいて演算処理を行う数式や、該パラメータに基づいた補正度合を選択するために複数用意した数式があるが、その他任意の方法が挙げられる。
【００１６】
また、パラメータとは、液体試料の展開に関与する情報を数値化したものであり、例えば、液体試料の展開速度や展開距離、展開時間があげられるが、反応に関与しないバックグランドにおける吸光度変化など、これ以外の情報であっても何ら問題はない。
【００１７】
さらに、液体試料及び分析素子の性状の影響とは、例えば液体試料が全血・血漿・尿・細菌細胞懸濁液のいずれかである場合など異なる種類の液体試料であったり、液体試料の添加量の多少であったり、全血や細菌細胞懸濁液が液体試料の場合には液体試料中の細胞含有度合が異なっていたり、分析素子の保存期間の長短や分析素子の保存環境の相違による性状の変化など、測定誤差が発生する任意の影響を示す。
【００１８】
さらに、本発明の分析装置において、前記演算処理部は、前記シグナル測定部にて得たシグナルより該液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出部と、前記被検査物質の測定誤差が極小になるように前記被検査物質の測定値を補正して該被検査物質の分析値を求める測定値補正部とを備え、前記測定値補正部は、前記アルゴリズム保持部より前記パラメータと前記被検査物質の測定誤差との関係からなるアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記パラメータ収集部にて得たパラメータに基づき前記測定値算出部にて得た前記被検査物質の測定値を補正し該被検査物質の分析値を求めるものである。
【００１９】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を極小化するように前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求めることが可能となり、簡易で迅速な、より正確性の高い分析装置を提供することができる。
【００２０】
さらに、本発明の分析装置において、前記分析素子は、前記液体試料を前記流路上に添加するための試料添加部と、前記被検査物質と反応する標識試薬を該液体試料の展開により溶出可能に保持する標識試薬部と、前記被検査物質と前記標識試薬との反応の度合を把握する試薬を固定化して保持する試薬固定化部とを有するものである。
【００２１】
これにより、前記液体試料中の被検査物質の正確な分析値を、簡易かつ迅速に得ることができる。
【００２２】
さらに、本発明の分析装置において、前記パラメータは、前記液体試料が前記流路を展開するときの展開速度、または展開時間、または展開距離のいずれかであるものである。
【００２３】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状の差異に影響された、該液体試料の展開状況を、より正確かつ定量的に検知することができる。これを用いることで、迅速かつ簡易で、なおかつより正確性、汎用性の高い分析装置を得ることができる。
【００２４】
さらに、本発明の分析装置において、前記シグナル測定部と、前記パラメータ収集部とのうちの少なくとも一方が、電磁放射線を用いるものである。
【００２５】
これにより、前記流路上におけるシグナルの微小な変調の程度を検知することが可能になり、より高精度かつ正確性が高い分析装置を提供できる。
【００２６】
さらに、本発明の分析装置において、前記分析素子は、乾式分析素子であるものである。
【００２７】
これにより、分析素子全体が乾燥担体であることから持ち運びが容易であるばかりでなく、保存環境や保存状態を厳密に制御する必要性がないため、取り扱いが容易であり、いつでもどこでも迅速かつ簡易で、より正確性の高い分析装置を提供できる。
【００２８】
さらに、本発明の分析装置において、前記シグナル測定部は、抗原抗体反応由来の反応に基づくシグナルを測定するものである。
【００２９】
これにより、前記抗体は人為的に作れるため、当該分析装置にて検出できるターゲットが多様化し、様々な被検査物質の測定が可能になる。また、抗体の特異的反応を生かして、より正確性の高い分析装置を提供できる。
【００３０】
さらに、本発明の分析装置において、前記分析素子は、免疫クロマトセンサであるものである。
【００３１】
これにより、使用者が誤判定することのない高い正確性と、いつでもどこでも誰でも使用可能な簡易操作を実現できる。
【００３２】
さらに、本発明の分析装置において、前記分析素子は、ワンステップの免疫クロマトセンサであるものである。
【００３３】
これにより、免疫測定法でありながら、前処理や洗浄などの煩雑な操作を必要としない、簡易で迅速な、より正確性の高い分析装置を提供できる。
【００３４】
さらに、本発明の分析装置において、前記流路は、単層または複数層の多孔質性材料からなるものである。
【００３５】
これにより、前記流路に確実に試薬を保持させ、該液体試料を展開させることが可能になり、液体試料の分析において、簡易で迅速な、より正確性の高い分析装置を提供できる。
【００３６】
さらに、本発明の分析装置において、前記アルゴリズム保持部は、前記パラメータに基づいて前記被検査物質の測定値を補正するための補正式を保持し、前記測定値補正部は、前記アルゴリズム保持部より前記補正式を読み出し、該読み出した補正式、および前記パラメータを用いて、前記被検査物質の測定値を補正し該被検査物質の分析値を求めるものである。
【００３７】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を、容易に補正することができ、迅速且つ簡便に、より正確な該被検査物質の分析値を求めることができる。
【００３８】
さらに、本発明の分析装置において、前記アルゴリズム保持部は、複数の前記補正式を保持し、前記被検査物質の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部に保持された複数の補正式のうちのいずれかを選択するアルゴリズム選択部を備え、前記測定値補正部は、前記アルゴリズム選択部が選択した補正式、および前記パラメータを用いて前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求めるものである。
【００３９】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を、複数ある補正式の中から該被検査物質の測定値に応じて選択した補正式を用いて補正するため、迅速且つ簡便に、より正確な該被検査物質の分析値を求めることができる。
【００４０】
さらに、本発明の分析装置において、前記アルゴリズム保持部は、前記シグナル測定部にて得たシグナルより、前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求めるための複数の検量線を保持し、前記パラメータに基づいて、前記アルゴリズム保持部に保持された複数の検量線のうちのいずれかを選択するアルゴリズム選択部を備え、前記演算処理部は、前記アルゴリズム選択部が選択した検量線、および前記パラメータを用いて前記シグナルより前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求めるものである。
【００４１】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を、複数ある検量線の中から前記パラメータに基づいて選択した検量線を用いて、想定される測定誤差を極小化するため、より正確な該被検査物質の分析値を、迅速且つ簡便に得ることができる。
【００４２】
さらに、本発明の分析装置において、前記演算処理部は、前記液体試料の粘度、または前記液体試料の添加量、または前記分析素子の製造後経過時間、の影響による前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求めるものである。
【００４３】
これにより、前記液体試料がいかなる性状およびいかなる添加量であっても、該液体試料中の被検査物質の正確な分析値を得ることができる。また、当該分析素子の製造後経過時間による劣化の影響を回避することが可能である。
【００４４】
さらに、本発明にかかる分析方法は、液体試料を流路に展開させて該液体試料中の被検査物質を測定する分析方法において、前記流路に展開された前記液体試料から、前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集ステップと、前記流路上での前記液体試料中の被検査物質の反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定ステップと、前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムを予め保持するアルゴリズム保持部よりアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記パラメータ収集ステップにて得たパラメータに基づき前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める演算処理ステップとを含むものである。
【００４５】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状による前記被検査物質の測定誤差を、容易に補正することができ、より正確性の高い分析値を得ることができる。
【００４６】
さらに、本発明の分析方法において、前記演算処理ステップは、前記シグナル測定ステップにて得たシグナルより前記液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出ステップと、前記被検査物質の測定値を補正し、該被検査物質の分析値を求める測定値補正ステップとを含むものである。
【００４７】
これにより、前記液体試料および分析素子の性状の影響による前記被検査物質の測定誤差を除くように、前記被検査物質の測定値を補正して、より適正な分析値を求めることができる。
【発明の効果】
【００４８】
本発明によれば、液体試料中の被検査物質の測定において、前記分析素子上の流路に展開された前記液体試料から、該液体試料および分析素子の性状が前記被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集し、該液体試料中の被検査物質の測定誤差を、前記パラメータに基づいて補正するようにしたので、より高精度な該被検査物質の分析値を簡易、且つ迅速に得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４９】
以下、本発明の分析装置の実施の形態について、図面を参照しながら詳細に説明する。なお、ここで示す実施の形態はあくまでも一例であって、必ずしもこの実施の形態に限定されるものではない。
【００５０】
（実施の形態１） 
図１は本実施の形態１の分析装置の構成を示す概念図であり、本実施の形態１の分析装置６０は、液体試料を分析素子１００上の流路に展開させ、該液体試料中の被検査物質の、分析素子１００上での反応に基づくシグナルを測定するシグナル測定部２０と、前記分析素子１００上に展開された前記液体試料から、該液体試料および分析装置６０の性状が該被検査物質の測定誤差に及ぼす影響度合を示すパラメータを収集するパラメータ収集部３０と、前記パラメータと前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなるアルゴリズムを、あらかじめ保持するアルゴリズム保持部４０と、前記パラメータ収集部３０により得た前記パラメータに基づいて前記アルゴリズム保持部４０からアルゴリズムを読み出し、該読み出したアルゴリズムを用いて、前記シグナル測定部２０にて測定したシグナルより、被検査物質の測定誤差を補正した被検査物質の分析値を演算処理する演算処理部９０とを備える。そして、前記演算処理部９０は、前記シグナル測定部２０にて得たシグナルより、前記液体試料中の被検査物質の測定値を算出する測定値算出部７０と、前記被検査物質の測定誤差が極小になるように、該被検査物質の測定値を補正して、被検査物質の分析値を求める測定値補正部５０とを、必要に応じて備える。
【００５１】
ここで、前記被検査物質の測定誤差とは、前記シグナル測定部２０にて測定したシグナルから算出される前記被検査物質の測定値の、前記液体試料および分析素子１００の性状の影響による、該被検査物質の真値からの乖離度を示すものである。また、前記アルゴリズムとは、前記パラメータと前記被検査物質の測定誤差との関係、あるいは、前記シグナルと前記被検査物質の真値との関係からなり、前記パラメータに基づいて補正した被検査物質の分析値を算出可能にするものである。例えば、前記パラメータに基づいて演算処理を行う数式や、前記パラメータに基づいた補正度合を選択するために複数用意した数式が例に挙げられるが、その他の任意の方法が挙げられる。また、前記パラメータとは、液体試料の展開に関与する情報を数値化したものであり、例えば、液体試料の展開速度や展開距離、展開時間があげられるが、反応に関与しないバックグランドにおける吸光度変化など、これ以外の情報であっても何ら問題はない。
【００５２】
さらに、図１では前記シグナル測定部２０と、前記パラメータ収集部３０とを、別々に表示しているが、同一のものが、前記シグナル測定部２０と、パラメータ収集部３０として用いられても何ら問題はない。また、図１では、前記アルゴリズム保持部４０と、前記演算処理部９０とを、別々に表示しているが、該演算処理部９０中に該アルゴリズム保持部４０が存在していても何ら問題はない。
【００５３】
まず、本実施の形態１における、分析素子１００について説明する。
図２及び図３は、本実施の形態１によるクロマトグラフィを利用した分析素子を示す図である。即ち、図２は、本実施の形態１の分析素子１００の分解図であり、図３は、本実施の形態１の分析素子１００の斜視図である。
【００５４】
図２において、１は流路となる展開層を示し、ニトロセルロースで構成される。これら、展開層１に使用する材料は、ニトロセルロースに限らず、液体試料により湿潤かつ該液体試料を展開可能な流路を形成できる材料であれば、濾紙、不織布、メンブレン、布、ガラス繊維等多孔質な任意の材料でよい。あるいは、前記展開層１を中空の毛細管で形成してもよく、このような場合、材料は樹脂材料で構成できる。また、前記展開層１は、単層あるいは複数層の多孔質材料で構成されていればよく、本実施の形態１では単層の場合を例に挙げて説明する。なお、単層とは一つの層で構成されていることを意味し、複数層とは、複数層が平行あるいは垂直に配置され、該複数層の第１の層に添加された液体試料が各々の層に順次移動可能なように構成されていることを意味する。
【００５５】
２は標識試薬部を示し、液体試料の展開により溶出可能な乾燥状態で、液体試料中の被検査物質に対する金コロイド標識抗体が保持してある。標識試薬は、抗体に金コロイドなどの標識物を標識したもので、後述する試薬固定化部３，４における結合を検出する手段として用いられるものであり、前述した金コロイドはほんの一例に過ぎず、金属あるいは非金属コロイド粒子、酵素、タンパク質、色素、蛍光色素、ラテックスなどの着色粒子など、必要に応じて任意に選択可能である。
【００５６】
そして、３は試薬固定化部I、４は試薬固定化部IIを示し、液体試料中の被検査物質に対して特異的反応の可能な抗体であり、なおかつ、どちらの抗体も前記標識試薬とは異なるエピトープで結合するもので、乾燥状態で固定化されている。さらに、試薬固定化部I３に用いる抗体と、試薬固定化部II４で用いる抗体とは、液体試料中の被検査物質に対する親和性が異なる抗体により構成されている。
【００５７】
前記試薬固定化部I３、及び試薬固定化部II４に使用する抗体は、標識試薬、及び被検査物質との複合体を形成できれば良く、従って、被検査物質に対するエピトープもしくは親和性は、同じであっても異なっていてもいずれでも良い。さらに、２つの抗体の親和性は異なるが、エピトープが同じでも何ら問題はない。
【００５８】
また、図２では、試薬固定化部が２カ所設けられている例を示すが、これは必ずしも２カ所である必要はなく、１カ所以上であれば、その目的に応じて自在に選択できる。また、展開層１上の形状についても、ライン状である必要はなく、スポット形状、もしくは、文字形状、鍵型形状など、自由に選択できる。図２における試薬固定化部I３と試薬固定化部II４とは空間的に離れているが、これらも必ずしも離れている必要はなく、見かけ上一本のライン状に見える様に接触させることも可能である。
【００５９】
５は液体不透過性シート材を示し、ここでは、透明テープで構成される。該液体不透過性シート材５は、試料添加部となる微細空間６に接続する部分、及び前記液体試料の到達する終端を除き、展開層１を密着被覆する構造を持つものである。
【００６０】
このように液体不透過性シート材５により展開層１を被覆させることで、試料添加部以外への点着を遮断保護すると共に、外部からの汚染を防止する作用を持たせることができるばかりでなく、液体試料の展開時に液体試料が展開しながら蒸発してしまうのを防ぎ、展開層上の反応部分である試薬固定化部３、４、および標識試薬部２を必ず液体試料が通過し、前記反応部分において液体試料中の被検査物質との反応を効率よく行うようにすることができる。ここでの外部からの汚染とは、該展開層上の反応部分に対して不用意に液体試料が接触することや、被験者が手などで直接展開層に接触することなどを指す。前記展開層１を被覆する液体不透過性シート５には、透明な材料を用いることが好ましく、前記試薬固定化部３，４を覆う部分は、シグナルを測定する部分であるから、少なくとも透過可能な状態を持たせることが好ましい。
【００６１】
また、より高精度な測定を必要とする場合には、展開層１の上部を、特に前記標識試薬部２、及び前記試薬固定化部３，４の部分を含んで密着密閉し、かつ、液体試料の展開方向に対して平行な側面を、同様に密着密閉させる構造をとることもできる。
【００６２】
７は展開層１における開放部であり、８は展開層１を保持する基板である。この基板８ は、ＰＥＴフィルムなどの液体不透過性シート材で構成され、透明、半透明、不透明のいずれをとってもよいが、透過光を測定する場合は透明、反射光を測定する場合は不透明の材料を用いるのが好ましい。また、その材質は、ＡＢＳ、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル等の合成樹脂材料の他、金属、ガラス等、液体不透過性の材料を用いることが可能である。
【００６３】
前記基板８は展開層１を補強する役割を持つとともに、血液、唾液、尿など感染の危険性のある試料を用いる場合には、それを遮断する作用をも有する。さらには、展開層１が湿潤した場合に光透過性を帯びる場合などにおいては、前記基板８に、光を遮断する効果を持たせることも可能である。
【００６４】
９は微細空間形成材であり、液体試料が毛細管現象により流入する空間を形成する働きを持ち、透明ＰＥＴフィルムを積層させたもので構成される。また、微細空間形成材９は、液体試料添加後の分析素子を取り扱う際に、液体試料の外部への汚染を保護する役割をも有する。この微細空間形成材９には、ＡＢＳ、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル等の合成樹脂材料の他、金属、ガラス等、液体不透過性の材料を用いることが可能であり、また、透明もしくは半透明であることが好ましいが、透明でなくて有色であってもよく、あるいはこの不透明の材料の場合には任意の材料で構成できる。
【００６５】
６は微細空間を示し、前記微細空間６は、前記微細空間形成材９により形成され、毛細管現象により液体試料を流入することのできる試料添加部となる。また、該微細空間６は前記展開層１と接続しており、液体試料を該微細空間６へ流入させることにより、該液体試料の展開層１への展開を開始することができる。
【００６６】
次に、本実施の形態１の分析装置６０による、液体試料中の被検査物質の測定方法について、図２、図３を用いて説明する。
【００６７】
液体試料を、試料添加部６に接触させると、毛細管現象により機械的操作を必要とせず、自然に液体試料が前記微細空間６中に流入され、展開層（流路）１上を展開する。液体試料の流入量が十分であるかどうかは、微細空間形成材９を透して確認できる。また、液体試料の添加量を、一定量確保する必要がある場合は、前記微細空間６の体積を一定体積とすることで、精度良く添加量を制限することができ、さらに、前記液体試料を一定量以上必要とする場合には、必要量以上の体積を保持させる構造をとることで、これを実現することができる。
【００６８】
前記微細空間６内には、細胞成分収縮試薬１０を保持してある。細胞成分収縮試薬１０ は、前記液体試料中に細胞成分を含む場合に設置すべき試薬であり、細胞成分を含まない液体試料を用いる場合には、特に必要ではない。また、細胞成分収縮試薬１０は、細胞を収縮する効果のある塩化カリウムや塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム塩等を含む無機化合物や、グリシン、グルタミン酸、等のアミノ酸、プロリン等のイミノ酸、グルコース、スクロース、トレハロースなどの糖類、グルシトール等の糖アルコール等を用いても、同様に実施可能である。この様な細胞成分収縮試薬１０を含む系は、特に液体試料として全血を用いる場合に有効である。
【００６９】
前記微細空間６に流入された液体試料は、前記微細空間６と展開層１との接触部分から、展開層１へと展開する。標識試薬部２に液体試料が到達したとき、標識試薬の溶出が開始される。液体試料中に被検査物質が存在する場合、標識試薬と被検査物質とが反応しながら展開が進み、液体試料は試薬固定化部I３に到達する。被検査物質が液体試料中に存在する場合には、その量に応じて、試薬固定化部I３に固定化された抗体と、被検査物質と、標識試薬との複合体が形成される。
【００７０】
次に、試薬固定化部II４に液体試料が到達し、該液体試料中に前記被検査物質が存在する場合には、前記被検査物質の量に応じて、試薬固定化部II４に固定化された抗体と、被検査物質と、標識試薬との複合体を形成する。
【００７１】
前記液体試料は、さらに、展開層１における開放部７に到達する。開放部７は、前記液体不透過性シート５がなく開放されているため、前記液体試料が到達した後、あるいは到達しながら揮発もしくは蒸発される。さらには、開放部７に前記液体試料が滲み出て、開放部７における展開層１の上部にのみ、前記液体試料が、前記微細空間６内の展開層１上部にある液体試料と同じ高さ、もしくは準じた高さまで至る。一般的には、開放部７の代わりに吸水部を設けることが多いが、それは、展開層１に使用する材料に対して、より保水効果、吸水効果の高い多孔質材料を用いることで、液体試料を吸水あるいは吸引し、展開層１上を通過させる働きや、測定時間を短縮できる働きを有するものとすることができる。前記開放部７はそれらと同様の効果を持たせたものであり、特に前記微細空間６もしくは前記開放部７を用いる手法は、例えば、液体試料が指先からの穿刺による血液などであるように、液体試料が微量である場合に適している。
【００７２】
前記液体試料中の被検査物質の測定値は、前記試薬固定化部I３、及び試薬固定化部II ４における標識試薬由来のシグナルを測定することで得られる。
【００７３】
図４に、分析素子上の試薬固定化部３，４における標識試薬由来のシグナルを測定するシグナル測定部を示した。２１は前記展開層１に光を照射するための照射部、２２は前記照射部２１から前記展開層１に照射された光の反射または透過光などの光学的変化を検出する受光部を示し、前記シグナル測定部２０は、これらの照射部２１および受光部２２を利用することによって、試薬固定化部３，４における標識試薬由来のシグナルを測定する。図５は、図４のように試薬固定化部I３、および試薬固定化部II４における呈色反応を読み取った結果を、模式的に示したものである。試薬固定化部では、その他の部分に比べてシグナルが上昇し、その強度は、試薬固定化部の呈色度合に応じて変化する
【００７４】
なお、前記照射部２１としては可視領域、もしくは近可視領域であることが好ましく、ＬＥＤ（Ｌｉｇｈｔ  Ｅｍｉｔｔｉｎｇ  Ｄｉｏｄｅ；発光ダイオード）、もしくはＬＤ （Ｌａｓｅｒ  Ｄｉｏｄｅ；レーザーダイオード）など必要に応じて選択可能である。
【００７５】
そして、前記シグナル測定部２０によって測定された試薬固定化部３，４における標識試薬由来のシグナルを、測定値算出部７０にて演算処理することで、被検査物質の測定値を求めることができる。このとき得られる被検査物質の測定値は、前記測定値算出部７０ において、前記シグナル測定部２０にて得た標識試薬由来のシグナルより検量線を用いて得られた該被検査物質の値である。ここで述べる検量線とは、シグナル測定部２０にて得たシグナルと、液体試料中の被検査物質の値との関係を示した回帰式である。未知の量の被検査物質を含む液体試料を測定する場合に、シグナル測定部２０にて得られたシグナルを代入することで、その未知液体試料中の被検査物質の測定値を算出することができる。また、前記シグナル測定部２０は、シグナルを測定する手段としては、光学的変化、電気的変化や電磁的変化を読み取るものであったり、画像としてとらえるものであったり、任意の手段を用いてよい。
【００７６】
また、前記の反応例は、抗原抗体反応を利用したサンドイッチ反応について述べたが、試薬の選択により、競合反応を利用した反応系でも何ら問題はない。
【００７７】
また、特異的な反応を利用したい場合、前記分析素子１００上の任意の反応を形成する系の試薬成分で構成することにより、抗原抗体反応以外の反応による測定を行うことも可能である。特異的反応をする、ある特定の物質と、それに対する特異結合物質との組合せとしては、抗原とそれに対する抗体、相補的核酸配列、エフェクター分子とレセプター分子、酵素とインヒビター、酵素と補因子、酵素と基質、糖鎖を有する化合物とレクチン、ある抗体とその抗体に対する抗体、レセプター分子とそれに対する抗体、特異結合活性が消失しない程度に化学修飾されたもの、あるいは、他の成分と結合してなる複合性物質を利用した反応系などが例示される。しかし、前述のようにして、前記測定値算出部７０により得た前記被検査物質の測定値は、前記液体試料、および分析素子６０の性状による影響を受けており、高精度とは言い難い。よって、より高精度な被検査物質の分析値を得るためには、以下に示す測定値の補正が必要となる。
【００７８】
以下、前記被検査物質の測定値から、その被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める方法について説明する。なお、後述する補正方法は、いずれもほんの一例であり、これ以外の方法を用いても何ら問題はない。前記被検査物質の測定誤差への影響度合を示すパラメータとしては、液体試料の展開速度を用いる。なお、展開速度を算出しなくても、任意の一定距離を展開するのに要した展開時間、もしくは任意の一定時間における展開距離、もしくは、流路上の試薬固定化部を除いた任意の位置におけるバックグランドの吸光度変化など、液体試料の展開状況に関するその他の情報を、パラメータとして利用することも可能である。
【００７９】
本実施の形態１では、前記パラメータを収集するパラメータ収集部３０は、図６に示されるように照射部３１、および受光部３２を用いて光学的変化により、液体試料の展開状況を検知する。この他にも、電気的変化や、電磁的変化を読み取るものであったり、画像としてとらえるものであったり、任意の手段を用いてよい。なお、前記液体試料の到達時間の検出は、複数の照射部、および受光部を用いて同時に行っても良いし、同一の照射部および受光部を用いて、前記始点への液体試料の到達を検知した後に、該液体試料が前記終点へ順に移動するのを検出することによって計測しても良い。さらに、これらのパラメータ収集部３０の照射部３１および受光部３２は、標識試薬由来のシグナルを測定するためのシグナル測定部２０の照射部２１および受光部２２を用いることも可能である。
【００８０】
図６において、３１は前記展開層に光を照射するための照射部、３２は前記照射部から前記展開層に照射された光の反射または透過光などの光学的変化を検知する受光部を示す。図７、及び図８は、液体試料の展開速度を測定する任意の検知区間の始点、あるいは終点において液体試料の到達を検知する検知部における液体試料到達前後の図である。なお、この検知区間において液体試料が展開する上流側を始点、下流側を終点と呼ぶ。図７は、時間の経過による液体試料の展開状況を示す図であり、図８は、前記検知部における液体試料到達前後の光学的変化を示したものである。
【００８１】
図７において、１３は検知部、１４は分析素子１００の流路上に展開している液体試料を示す。図８に示すように、検知部１３に液体試料１４が到達すると吸光度が上昇する。受光部は所定の吸光度を越えるときに液体試料が検知部に到達したことを検知し、液体試料の到達時間を計測する。
【００８２】
図６（ａ）に示すように、まず、流路１上の任意の検知区間の始点において、照射部３１および受光部３２を用いて、光学的変化から液体試料が到達したことを検知する。前記流路１上の任意の区間は、液体試料の展開速度と測定誤差である被検査物質の真値からの乖離度との相関関係が強い検知区間、ここでは液体不透過性シート材５に保護された部分から選択する。次に、図６（ｂ）に示すように、照射部３１および受光部３２を、分析素子１００上の流路である展開層１の任意の区間の終点へ走査し、液体試料の到達時間を検知する。これらの結果から、液体試料が展開層１の任意の検知区間を展開する時にかかる展開時間を算出することによって、液体試料の展開速度を求める。また、ここでは任意の検知区間における展開時間から算出した展開速度をパラメータとして利用したが、前記展開速度は任意の時間に前記液体試料が展開する展開距離から算出してもよい。
【００８３】
次に、前記演算処理部９０が、前記アルゴリズム保持部４０より、アルゴリズムを読み出し、前記パラメータ収集部３０にて得たパラメータに基づき、前記被検査物質の測定誤差を補正した被検査物質の分析値を求める。前記被検査物質の分析値とは、演算処理部９ ０において、パラメータ収集部３０にて得たパラメータに基づき、被検査物質の真値との差が極小化するように、該被検査物質の測定誤差を補正した被検査物質の値である。そして前記アルゴリズムとしては、パラメータ収集部３０にて得たパラメータと該被検査物質の測定誤差との関係から導出した、被検査物質の測定値を補正して該被検査物質の分析値を求める式、もしくは、パラメータに基づきシグナル測定部２０にて得たシグナルと被検査物質の真値との関係から導出した補正式が例示される。このアルゴリズムの導出方法には、種々の方法が可能であり、以下の補正方法が簡便で精度の高い方法として好ましいものの、他の方法をとっても何ら問題はない。図９（ａ）、（ｂ）、（ｃ）それぞれは、以下の各方法１）、２）、３）を示す概念図である。
【００８４】
方法１）  図９（ａ）に示すように、測定値補正部５０は、アルゴリズム保持部４０に保持してある、パラメータと測定誤差との相関関係から導出した補正式を読み出し、該読み出した補正式に、前記パラメータ収集部３０によって収集されたパラメータと、前記シグナル測定部２０にて測定されたシグナルより測定値算出部７０にて算出した測定値とを代入することで、該被検査物質の測定値を補正して、該被検査物質の分析値を求める。例えば、前記被検査物質の測定値をＺとし、前記パラメータをＸとすると、補正された該被検査物質の分析値Ｙは、
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（ａＸ＋ｂ）｝；（ａ，ｂは定数） 
なる式によって求められる。
【００８５】
前記補正式は、あらかじめ、該液体試料の粘性など測定誤差への影響度合が異なり、既知の量の被検査物質を含む液体試料を用いて、パラメータと測定誤差との関係より導出した数式である。その後、未知の量の被検査物質を含む液体試料を測定する場合、得られたパラメータから、該被検査物質の測定値を補正して、該被検査物質の分析値を求めることが可能である。
【００８６】
方法２）  図９（ｂ）に示すように、前記シグナル測定部２０にて測定されたシグナルより測定値算出部７０にて求めた被検査物質の測定値に応じて、複数の補正式をアルゴリズム保持部４０に用意しておき、アルゴリズム選択部８０が前記測定値に基づいて前記補正式のいずれかを選択し、該選択された補正式に、前記パラメータ収集部３０によって収集されたパラメータと、前記測定値とを代入することで、該被検査物質の測定値を補正して、該被検査物質の分析値を求める。前記分析素子１００上に前記シグナル測定部２０ にて反応に基づくシグナルを測定する部分（試薬固定化部）が複数ある場合、各試薬固定化部に応じて、すなわち、各試薬固定化部で得たシグナルより算出した測定値に応じて、前記測定値を補正することで、より正確な分析値を算出することが可能である。
【００８７】
方法３）  図９（ｃ）に示すように、前記パラメータ収集部３０にて得たパラメータに応じた複数の検量線をアルゴリズム保持部４０に用意しておき、アルゴリズム選択部８０ がパラメータに基づいて該検量線のいずれかを選択し、前記演算処理部９０において、前記シグナル測定部２０にて測定されたシグナルを、該選択された検量線に代入することで、被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を得る。パラメータに基づいて選択される前記検量線は、あらかじめ、既知の量の被検査物質を含み、ヘマトクリット値や総タンパク質濃度などの測定精度および液体試料の展開状況に影響を与える成分を、臨床上想定される広範囲において調整した液体試料を用いることにより導出する。つまりこの方法では、シグナル測定部２０にて得たシグナルを測定値算出部７０に代入して被検査物質の測定値を検出することなく、該シグナルを直接、パラメータに基づいて選択された前記検量線に代入して、前記被検査物質の測定誤差を補正した該被検査物質の分析値を求める。
【００８８】
また、前記演算処理部９０が補正を行う際に読み出すアルゴリズムを保持するアルゴリズム保持部４０としては、当該分析装置６０内に回路として組み込む方法、または、記憶媒体を用いるなどして変換可能なように記憶させる方法、または、測定時に分析装置６０ に入力し、測定後に演算させ該被検査物質の分析値を表示させる方法が例示されるが、その他の方法を用いても何ら問題はない。また、あらかじめ分析装置６０内に回路として組み込んである相関式に対して、分析装置６０もしくは分析素子１００に固有の定数を入力する方法も可能で、この方法は、分析装置６０あるいは分析素子１００のロット差を考慮する上で好ましい。関数の定数部分の一部、あるいはすべてが、分析装置６０もしくは分析素子１００のロットに依存する場合、分析を開始する前にこれらの定数部分を装置にセットすることにより、分析装置６０、あるいは分析素子１００のロット差による影響を排除することができる。さらに、図９（ｂ），（ｃ）では、前記アルゴリズム選択部８０を前記演算処理部９０の外部に表示したが、該演算処理部９０中に該アルゴリズム選択部８０が存在しても何ら問題はない。
【００８９】
本発明の分析装置６０で補正できる主要な測定誤差要因として下記を例示する。Iの測定誤差要因を考慮した補正を行うことで、IIとIIIの測定誤差要因による精度悪化を軽減することが可能である。
【００９０】
I．液体試料の性状
液体試料の種類
例えば、全血、血漿、血清、尿、細菌細胞懸濁液など
液体試料特性
例えば、液体試料の粘性、有形成分の量、液体試料が全血の場合にはヘマトクリット値、総タンパク質濃度など
液体試料添加量
例えば、添加量の多少、添加量不足など
【００９１】
II．分析素子の性状
例えば、特異結合に関与する試薬の活性の変化、流路を形成する展開層などの材料の性状の変化、流路上のゴミもしくは汚れなどによる液体試料の展開不良
【００９２】
III．分析環境
例えば、測定時の温度および湿度など
【００９３】
これらの測定誤差要因により液体試料の流動に変化が生じ、反応時間に差が出ることによって、被検査物質の測定値の正確さに影響を与える。例えば、液体試料の性状による液体試料の測定誤差への影響としては、例えば図１７に示すように、液体試料が全血の場合、ヘマトクリット値が高値になるほど展開速度は遅くなる傾向が見られる。また、図１８に示すように、液体試料が血漿の場合、総タンパク質濃度が濃くなるほど展開速度は遅くなる傾向がある。さらに、図１９に示すように、液体試料の添加量が減少するほど展開速度は遅くなる傾向がある。ただし、前記例はほんの一部であり、これに明示していない測定誤差要因であっても補正することが可能である。
【００９４】
以上のように、本発明の実施の形態１による分析装置によれば、液体試料中の被検査物質の測定において、該液体試料あるいは分析装置の性状による測定誤差への影響度合に応じて、該被検査物質の測定誤差を容易に補正して、該被検査物質の分析値を求めるようにしたので、簡易、迅速、かつ高精度な分析装置を提供することが可能となる。
【００９５】
以下の実施例により、本発明を実施する方法を、さらに詳細に説明する。なお、本発明は、以下の実施例になんら制約されるものではない。
【実施例１】
【００９６】
（ヘマトクリットによる影響を補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部I及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。図中、免疫クロマトセンサは、抗体が固定化された試薬固定化部I３、試薬固定化部II４と、それよりも液体試料を添加する添加部分に近い部分にある、抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体が含有された領域である標識試薬部２と、試料添加部６とを含む。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。
【００９７】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
リン酸緩衝溶液にて希釈して濃度調整をした抗ＣＲＰ抗体Ａ溶液を準備した。この抗体溶液は溶液吐出装置を用いて、ニトロセルロース膜上に塗布した。これにより、ニトロセルロース膜上に試薬固定化部である固定化抗体ラインＩ３が得られた。次に同様にして、試料添加部より下流側に２ｍｍ離れた部分に、抗ＣＲＰ抗体Ｂ溶液を塗布した。このニトロセルロース膜を乾燥後、１％スキムミルクを含有するＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液中に浸漬して３０分間緩やかに振った。３０分後、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽に膜を移動し、１０分間緩やかに振った後に、別のＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽にて更に１０分間緩やかに振り、膜の洗浄を行なった。次に、０．０５％シュクロースモノラウレートを含有するＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液中に浸漬して１０分間緩やかに振った後に、膜を液槽から取り出して、室温で乾燥させた。これにより、ニトロセルロース膜上に試薬固定化部である固定化抗体ラインI３、および固定化抗体ラインII４が得られた。
【００９８】
金コロイドは、還流中の０．０１％塩化金酸１００℃溶液に１％クエン酸３ナトリウム溶液を加えることによって調製した。還流を１５分間続けた後に、室温放置にて冷却した。０．２Ｍの炭酸カリウム溶液によって、ｐＨ８．９に調製した前記金コロイド溶液に、抗ＣＲＰ抗体Ｃを加えて数分間攪拌した後に、ｐＨ８．９の１０％ＢＳＡ（牛血清アルブミン）溶液を最終１％になる量だけ加えて攪拌することで、抗体−金コロイド複合体（標識抗体）を調製した。前記標識抗体溶液を４℃、２００００Ｇで５０分間遠心分離することによって、標識抗体を単離して、それを洗浄緩衝液（１％ＢＳＡ５％スクロース・リン酸緩衝液）中に懸濁した後に、前記遠心分離を行って、標識抗体を洗浄単離した。この標識抗体を洗浄緩衝液で懸濁して、０．８μｍのフィルタにて濾過した後に、５２０ｎｍの吸光度が１５０となるように調製して、４℃で貯蔵した。前記標識抗体溶液を溶液吐出装置にセットして、固定化抗ＣＲＰ抗体Ａ及び固定化抗ＣＲＰ抗体Ｂが塗布された乾燥膜上の固定化ラインI及び固定化ラインIIから離れた位置に、液体試料添加開始方向から順番に、標識抗体、固定化ラインI、固定化ラインIIの位置関係になるように塗布した後に、膜を真空凍結乾燥させた。これによって、試薬固定化部および標識試薬部を備えた反応層担体が得られた。
【００９９】
次に、調製された標識試薬を含む反応層担体を、厚さ０．５ｍｍの白色ＰＥＴからなる基板８上に貼り付け、標識試薬部２から終端部分にかけて、透明テープを貼り付けた。その後、レーザーを用いて、２．０ｍｍの幅に切断した。切断後、透明テープを貼り付けない始端部分上に、厚さ１００μｍの透明ＰＥＴを積層させて作製した微細空間形成材９を貼り付け、微細空間（幅２．０ｍｍ×長さ７．０ｍｍ×高さ０．３ｍｍ）６を形成した。前記空間形成材９は、あらかじめ１０％塩化カリウム水溶液を添加した後に、液体窒素にて直ちに凍結し、凍結乾燥を行い、これによって、塩化カリウムが乾燥状態で保持された細胞収縮剤を保持する空間形成材を作製したものである。こうして免疫クロマトセンサを製造した。
【０１００】
ｂ）液体試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度０．６ｍｇ／ｄＬ、５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、総タンパク質濃度を７．５ｇ／ｄＬとし、ヘマトクリット値を２０％、３０％、４０％、５０％に調製した。
【０１０１】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
前記免疫クロマトセンサの試料添加部に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を５μＬ 程度添加して、開放部方向へと展開処理して、抗原抗体反応をさせた。該免疫クロマトセンサへの試料添加から５分後の抗体固定化部における呈色状況を計測した。図４は本実施例１における測定図を示し、図４において照射部２１は、６３５ｎｍの半導体レーザーからなる光源を示し、また、受光部２２は受光素子（フォトダイオード）で構成される。さらに、該免疫クロマトセンサ側を走査し、試薬固定化部I３及び試薬固定化部II４における前記標識抗体結合量を、前記展開層からの反射散乱光を演算処理して、吸光度として結果を得る。図５は本発明の一実施例における測定波形図を示す。ここでは試薬固定化部が２カ所であり、前記試料添加部に対して上流側に親和力の高い抗体を使用した。光源及び受光素子を固定し、免疫クロマトセンサ側を走査して、得られた波形から、ピーク値（反射吸光度）を読み取る。この様な波形を得るためには、光源側を走査することも可能である。
【０１０２】
次に、試薬固定化部I３と試薬固定化部II４の反射吸光度を、あらかじめ用意しておいた各々の検量線に代入することで、ＣＲＰ濃度がわかる。
【０１０３】
ｄ）パラメータを収集する検知区間の選出
ここで、パラメータである展開速度の検知区間の選出について説明する。図６に示すパラメータ収集部３０の照射部３１および受光部３２を用いて、流路上の任意の検知区間における液体試料の展開速度と、試薬固定化部IおよびIIにおける反射吸光度を測定し、展開速度と測定誤差であるＣＲＰ濃度の真値からの乖離度の関係をみた。乖離度を算出する際のＣＲＰ濃度の真値は、ｂ）にて調整した全血をあらかじめ分注しておき、市販の自動分析装置（日立７０２０：日立製作所製）を用いて測定した。ここでは、パラメータとして液体試料の展開速度を用いた。
【０１０４】
まず、パラメータである展開速度の検知区間を０．５、４．０、７．５、２０．０ｍｍ に変更し、それぞれの距離における液体試料の展開速度を算出した。次に、試薬固定化部Iおよび試薬固定化部IIにおける反射吸光度を予め用意しておいた検量線に代入して予測されるＣＲＰ濃度の測定値を算出し、この測定に用いた血液試料のＣＲＰ濃度の真値からの乖離度を求めた。この展開速度と乖離度との関係を図１０に示す。この結果から、検知区間が４．０と７．５と２０．０ｍｍの場合に非常に良好な相関性が見られた。展開速度の速い場合は、反応部分において試料中の被検査物質であるＣＲＰの通過量が多くなるため、測定値はＣＲＰ濃度の真値に比べて高値となり、一方、展開速度が遅い場合は、反応部分において試料中の被検査物質であるＣＲＰの通過量が少なくなるため、測定値はＣＲ Ｐ濃度の真値に比べて低値となる傾向がある。測定値とは、あらかじめ用意した検量線に吸光度を代入することにより得られたＣＲＰ濃度を示す。
【０１０５】
例えば、パラメータの検知区間が４．０ｍｍの場合、展開速度ｘと乖離度ｙとの相関式は下記の式１で表される。
【０１０６】
ｙ＝２６．２５８ｘ−２．７２８１                          式１ 
【０１０７】
この相関式を基にして、展開速度からＣＲＰ濃度を補正する数式を導くことが可能である。ＣＲＰ濃度の測定値をＺとすると、ＣＲＰ濃度の分析値Ｙを求める補正式は、下記の式２で表される。
【０１０８】
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（２６．２５８ｘ−２．７２８１）｝          式２ 
【０１０９】
ｅ）ヘマトクリット値による影響を補正する数式の導出
ここでは、ｄ）の検知区間の検討において、展開速度と乖離度との相関が最も大きかった流路の始端から半ばまでの２０．０ｍｍを検知区間として、この検知区間の液体試料の展開速度とＣＲＰ濃度の真値からの乖離度の相関関係から導出した補正式を用いた。前記補正式は、測定値が１．０ｍｇ／ｄＬ未満の場合と、１．０ｍｇ／ｄＬ以上の場合とに分けて用いた。ＣＲＰ濃度の測定値をＺ、展開速度をｘとすると、ＣＲＰ濃度の分析値Ｙを求める補正式は、下記の式３および４で表される。
【０１１０】
１．０ｍｇ／ｄＬ未満の場合； 
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（６．３５８９ｘ−１．３９４９）｝            式３ 
【０１１１】
１．０ｍｇ／ｄＬ以上の場合； 
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（３．８２３３ｘ−０．６１８７９）｝          式４ 
【０１１２】
ｆ）ヘマトクリット値による影響の補正
アルゴリズム選択部８０が、ＣＲＰ濃度の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部４ ０に保持してある補正式のいずれかを選択し、該測定値補正部５０にて、該選択された補正式にパラメータと測定値を代入することで、ＣＲＰ濃度の測定値を補正し、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた。このフロー図は、図２０に示した。補正前と補正後のＣＶ（％）を示したのが、図１１である。補正前のＣＶ（％）値は、ヘマトクリット値の影響を反映しており、より信頼性の高いＣＲＰ濃度の分析値を得るにはＣＶ（％）値を良化させる必要があった。それに対して、液体試料の展開速度由来のパラメータに基づいて測定値の補正を行った場合、著しく測定精度が向上したことは図１１からも明らかである。また、図１２には、補正前と補正後の乖離度の分布を示した。横軸はＣＲＰ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、ヘマトクリットが低値の場合にかなり大きく乖離していた。それに対して、補正を行った場合には、乖離度が顕著に減少し、充分な補正効果が示された。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。
【実施例２】
【０１１３】
（総タンパクによる影響を補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部Ｉ及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。
【０１１４】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
前記実施例１において用いた免疫クロマトセンサと同一ロットのセンサを用いて、以下の測定を行った。
【０１１５】
ｂ）液体試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度０．６、５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、ヘマトクリット値を４０ ％とし、総タンパク質濃度を２．５ｇ／ｄＬ、５ｇ／ｄＬ、７．５ｇ／ｄＬ、１０ｇ／ｄＬ、１２．５ｇ／ｄＬに調製した。
【０１１６】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法によりＣＲＰ濃度の測定値を算出した。
【０１１７】
ｄ）ヘマトクリット値による影響を補正する式を利用した総タンパク質濃度による影響の補正
前記実施例１において導出した補正式に基づいて、ＣＲＰ濃度の測定値の補正を行い、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた。図１３に補正前と補正後の測定結果図を示した。図１３の横軸はＣＲＰ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、総タンパク質濃度の影響を受けて、大きく乖離していた。それに対して、前記補正式を用いて補正を行った場合には、液体試料間の総タンパク質濃度差要因に対する補正効果が明瞭に認められた。このように、液体試料が全血の場合は、へマトクリット値による影響を補正する場合と同一の補正式を用いて、総タンパク質濃度による影響も補正することが可能である。
【０１１８】
この補正式を用いることで、ヘマトクリット値が１４．９〜５１％、総タンパク質濃度が４．２〜１０ｇ／ｄＬ、アルブミン濃度が１．４〜４．９％の血液試料において、著しく測定精度が向上し、血液試料の性状による影響に対する補正効果が明瞭に認められた。
【実施例３】
【０１１９】
（液体試料の添加量不足による影響を補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部Ｉ及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。
【０１２０】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
前記実施例１において用いた免疫クロマトセンサと同一ロットのセンサを用いて、以下の測定を行った。
【０１２１】
ｂ）液体試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、総タンパク質濃度を７．５ｇ／ｄＬとし、ヘマトクリット値を３０％、４０％、５０％に調製した。
【０１２２】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部分に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を液体試料の添加量不足である４μＬ、４．２５μＬ、４.５μＬ、４.７５μＬと規格の液体試料の添加量である５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法によりＣＲＰ濃度の測定値を算出した。
【０１２３】
ｄ）ヘマトクリット値による影響を補正する式を利用した液体試料の添加量不足による影響の補正
前記実施例１において導出した補正式に基づいて、ＣＲＰ濃度の測定値の補正を行い、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた。図１４に補正前と補正後の測定結果の乖離度分布図を示した。図１４の横軸は乖離度、縦軸は検体数を示す。補正前は、液体試料の添加量不足の影響を受けて、低値に乖離していた。それに対して、前記補正式を用いて補正を行った場合には、液体試料の添加量不足要因に対する補正効果が明瞭に認められた。
【０１２４】
この補正式を用いることで、液体試料の添加量不足で低値に乖離していた測定において、著しく精度が向上し、液体試料の添加量不足の影響に対する補正効果が明瞭に認められた。この補正方法を用いることにより、添加量不足による感度低下を回避することが可能となった。
【実施例４】
【０１２５】
（ヘマトクリットおよび総タンパク質濃度による影響を補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部Ｉ及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。
【０１２６】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
前記実施例１において用いた免疫クロマトセンサと同一ロットのセンサを用いて、以下の測定を行った。
【０１２７】
ｂ）試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度０．６ｍｇ／ｄＬ、５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、ヘマトクリット値および総タンパク質濃度を、２０％・４ｇ／ｄＬ、３０％・５．５ｇ／ｄＬ、４０％・７ｇ／ｄＬ、５０％・８．５ｇ／ｄＬ、６０％・１０ｇ／ｄＬ、３０％・８．５ｇ／ｄＬ、５０％・５．５ｇ／ｄＬに調整した。
【０１２８】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部分に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法によりＣＲＰ濃度の測定値を算出した。
【０１２９】
ｄ）ヘマトクリット値および総タンパク質濃度による影響を補正する数式の導出
図６に示す、パラメータ収集部３０の照射部３１および受光部３２を用いて、展開層上の任意の区間における液体試料の展開時間と、試薬固定化部I３およびII４における吸光度を測定し、展開時間とＣＲＰ濃度の真値からの乖離度の関係をみた。乖離度を算出する際のＣＲＰ濃度の真値は、ｂ）にて調整した液体試料をあらかじめ分注しておき、市販測定装置（日立７０２０：日立製作所製）を用いて測定した。まず、液体試料の展開速度を算出した。次に、試薬固定化部I３およびII４における吸光度を予め作成しておいた検量線に代入して、予測されるＣＲＰ濃度を算出し、この測定に用いた血液試料のＣＲＰ濃度の真値からの乖離度を求めた。この展開速度と乖離度との関係を図１０に示す。展開速度の速い場合は、反応部において試料中の被検査物質であるＣＲＰの通過量が多くなるため、測定値はＣＲＰ濃度の真値に比べて高値となり、一方、展開速度が遅い場合は、反応部において試料中の被検査物質であるＣＲＰの通過量が少なくなるため、測定値はＣＲＰ濃度の真値に比べて低値となる傾向がある。
【０１３０】
展開速度と乖離度との相関式を基にして、展開速度からＣＲＰ濃度の測定値を補正する数式を導いた。ＣＲＰ濃度の測定値をＺ、展開速度をｘとすると、ＣＲＰ濃度の分析値Ｙを求める補正式は、下記の式５で表される。
【０１３１】
Ｙ＝Ｚ÷｛１＋（１．２８２５Ｌｎ（ｘ）−２．５７０００）｝      式５ 
【０１３２】
ｅ）ヘマトクリット値および総タンパク質濃度による影響の補正
測定値補正部５０にて、ＣＲＰ濃度の測定値を補正して、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた結果を図１５に示した。図１５は、補正前と補正後の測定結果の乖離度分布図であり、横軸は乖離度、縦軸は検体数を示す。補正前は、液体試料の性状の個体差による影響を受けて、大きく乖離していた。それに対して、ヘマトクリット値および総タンパク質濃度の影響による補正を行った場合には、補正効果が明瞭に認められた。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。
【実施例５】
【０１３３】
（パラメータに基づいた複数の検量線にて補正した全血ＣＲＰの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ＣＲＰ抗体Ａを固定化した試薬固定化部I、及び抗ＣＲＰ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ＣＲＰ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部、を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。
【０１３４】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
前記実施例１において用いた免疫クロマトセンサと同一ロットのセンサを用いて、以下の測定を行った。
【０１３５】
ｂ）試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のＣＲＰ溶液を加えることにより、ＣＲＰ濃度０．６ｍｇ／ｄＬ、５ｍｇ／ｄＬの血液を調整した。また、ヘマトクリットおよび総タンパク質濃度を、２０％・４ｇ／ｄＬ、３０％・５．５ｇ／ｄＬ、４０％・７ｇ／ｄＬ、５０％・８．５ｇ／ｄＬ、６０％・１０ｇ／ｄＬ、３０％・８．５ｇ／ｄＬ、５０％・５．５ｇ／ｄＬに調整した。
【０１３６】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部分に、ｂ）にて調整したＣＲＰを含む全血を５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法により、前記シグナル測定部２０にて試薬固定化部３，４における反射吸光度を測定した。
【０１３７】
ｄ）ヘマトクリット値および総タンパク質濃度による影響を補正する数式の導出
図６に示すパラメータ収集部３０の照射部３１および受光部３２を用いて、展開層上の任意の区間における液体試料の展開時間と、試薬固定化部I３およびII４における反射吸光度を測定し、一定の展開速度毎に、反射吸光度とＣＲＰ濃度の真値との関係をみた。ＣＲＰ濃度の真値は、ｂ）にて調整した液体試料をあらかじめ分注しておき、市販測定装置（日立７０２０：日立製作所製）を用いて測定した。反射吸光度とＣＲＰ濃度の真値との関係から、一定の展開速度毎に複数の検量線を用意した。反射吸光度をｚとすると、ＣＲＰ濃度の分析値Ｙを求める試薬固定化部Iの検量線は、一定の展開速度毎に、下記の式６〜１０で表される。
【０１３８】
展開速度０．１００ｍｍ／ｓ未満の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.1363)/-0.5663}        式６ 
【０１３９】
展開速度０．１００ｍｍ／ｓ以上０．１１０ｍｍ／ｓ未満の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.2642)/-0.4162}        式７ 
【０１４０】
展開速度０．１１０ｍｍ／ｓ以上０．１２０ｍｍ／ｓ未満の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.3185)/-0.4628}        式８
【０１４１】
展開速度０．１２０ｍｍ／ｓ以上０．１３０ｍｍ／ｓ未満の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.3661)/-0.3937}        式９ 
【０１４２】
展開速度０．１３０ｍｍ／ｓ以上の場合； 
Ｙ＝１０{(Log(z)-0.4168)/-0.3233}        式１０ 
【０１４３】
ｅ）ヘマトクリット値および総タンパク質濃度による影響の補正
アルゴリズム選択部８０により、展開速度に基づいて、アルゴリズム保持部４０に保持してある複数の検量線のいずれかを選択し、該演算処理部９０にて該選択された検量線に、シグナル測定部２０にて得られたシグナル（反射吸光度）を代入することで、ＣＲＰ濃度の分析値を求めた結果を図１６に示した。図１６は、補正なしと補正ありの測定結果の乖離度の分布を示す。横軸はＣＲＰ濃度の真値、縦軸はＣＲＰ濃度の真値からの乖離度を示す。補正なしの場合は、液体試料の性状の個体差による影響を受けて、大きく乖離していた。それに対して、パラメータに基づいた複数の検量線を用いた補正ありの場合には、補正効果が明瞭に認められた。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。
【実施例６】
【０１４４】
（液体試料の種類による影響を補正したｈＣＧの定量） 
ニトロセルロース膜上に抗ｈＣＧ抗体Ａを固定化した試薬固定化部I及び抗ｈＣＧ抗体Ｂを固定化した試薬固定化部II、さらに抗ｈＣＧ抗体Ｃと金コロイドとの複合体（標識試薬）を保持した標識試薬部を含む分析素子である免疫クロマトセンサを製造した。この免疫クロマトセンサを図２，３に示す。図中、免疫クロマトセンサは、抗体が固定化された試薬固定化部I３、試薬固定化部II４と、それよりも液体試料を添加する添加部分に近い部分にある、抗ｈＣＧ抗体Ｃと金コロイドとの複合体が含有された領域である標識試薬部２と、試料添加部６とを含む。この免疫クロマトセンサは、次のようにして製造した。
【０１４５】
ａ）免疫クロマトセンサの調製
リン酸緩衝溶液にて希釈して濃度調整をした抗ｈＣＧ抗体Ａ溶液を準備した。この抗体溶液は溶液吐出装置を用いて、ニトロセルロース膜上に塗布した。これにより、ニトロセルロース膜上に試薬固定化部である固定化抗体ラインＩ３が得られた。次に同様にして、試料添加部より下流側に２ｍｍ離れた部分に、抗ｈＣＧ抗体Ｂ溶液を塗布した。このニトロセルロース膜を乾燥後、１％スキムミルクを含有するＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液中に浸漬して３０分間緩やかに振った。３０分後、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽に膜を移動し、１０分間緩やかに振った後に、別のＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽にて更に１０分間緩やかに振り、膜の洗浄を行なった。次に、０．０５％シュクロースモノラウレートを含有するＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液中に浸漬して１０分間緩やかに振った後に、膜を液槽から取り出して、室温で乾燥させた。これにより、ニトロセルロース膜上に試薬固定化部である固定化抗体ラインI３、および固定化抗体ラインII４が得られた。
【０１４６】
金コロイドは、還流中の０．０１％塩化金酸１００℃溶液に１％クエン酸３ナトリウム溶液を加えることによって調製した。還流を１５分間続けた後に、室温放置にて冷却した。０．２Ｍの炭酸カリウム溶液によって、ｐＨ８．９に調製した前記金コロイド溶液に、抗ｈＣＧ抗体Ｃを加えて数分間攪拌した後に、ｐＨ８．９の１０％ＢＳＡ（牛血清アルブミン）溶液を最終１％になる量だけ加えて攪拌することで、抗体−金コロイド複合体（標識抗体）を調製した。前記標識抗体溶液を４℃、２００００Ｇで５０分間遠心分離することによって、標識抗体を単離して、それを洗浄緩衝液（１％ＢＳＡ５％スクロース・リン酸緩衝液）中に懸濁した後に、前記遠心分離を行って、標識抗体を洗浄単離した。この標識抗体を洗浄緩衝液で懸濁して、０．８μｍのフィルタにて濾過した後に、５２０ｎｍの吸光度が１５０となるように調製して、４℃で貯蔵した。前記標識抗体溶液を溶液吐出装置にセットして、固定化抗ｈＣＧ抗体Ａ及び固定化抗ｈＣＧ抗体Ｂが塗布された乾燥膜上の固定化ラインI及び固定化ラインIIから離れた、液体試料添加開始方向から順番に、標識抗体、固定化ラインI、固定化ラインIIの位置関係になるように塗布した後に、膜を真空凍結乾燥させた。これによって、試薬固定化部および標識試薬部を備えた反応層担体が得られた。
【０１４７】
次に、調製された標識試薬を含む反応層担体を、厚さ０．５ｍｍの白色ＰＥＴからなる基板８上に貼り付け、標識試薬部２から終端部分にかけて、透明テープを貼り付けた。その後、レーザーを用いて、２．０ｍｍの幅に切断した。切断後、透明テープを貼り付けない始端部分上に、厚さ１００μｍの透明ＰＥＴを積層させて作製した微細空間形成材９を貼り付け、微細空間（幅２．０ｍｍ×長さ７．０ｍｍ×高さ０．３ｍｍ）６を形成した。前記空間形成材９はあらかじめ１０％塩化カリウム水溶液を添加した後に、液体窒素にて直ちに凍結し、凍結乾燥を行い、これによって、塩化カリウムが乾燥状態で保持された細胞収縮剤を保持する空間形成材を作製したものである。こうして免疫クロマトセンサを製造した。
【０１４８】
ｂ）試料の調製
抗凝固剤としてヘパリンを加えた人の血液に、既知濃度のｈＣＧ溶液を加えることにより、ｈＣＧ濃度１００Ｕ／Ｌ、１０００Ｕ／Ｌ、１００００Ｕ／Ｌの血液を調整した。この血液中の総タンパク質濃度は７．５ｇ／ｄＬとし、ヘマトクリット値を２０％、３０％、４０％、５０％に調製した。
【０１４９】
また、人の血漿に、既知濃度のｈＣＧ溶液を加えることにより、ｈＣＧ濃度１００Ｕ／Ｌ、１０００Ｕ／Ｌ、１００００Ｕ／Ｌの血漿を調整した。この総タンパク質濃度は２．５ｇ／ｄＬ、５ｇ／ｄＬ、７．５ｇ／ｄＬ、１０ｇ／ｄ Ｌ、１２．５ｇ／ｄＬに調製した。
【０１５０】
更に、ヒト尿に、既知濃度のｈＣＧ溶液を加えることにより、ｈＣＧ濃度１００Ｕ／Ｌ、１０００Ｕ／Ｌ、１００００Ｕ／Ｌの尿を調整した。
以上により、各液体試料溶液を調整した。
【０１５１】
ｃ）免疫クロマトセンサ上の呈色度合の測定
免疫クロマトセンサの試料添加部分に、ｂ）にて調整したｈＣＧを含む各液体試料溶液を５μＬ程度添加して、前記実施例１と同様の方法により、前記シグナル測定部２０にて試薬固定化部３，４における反射吸光度を測定した。
【０１５２】
ｄ）液体試料の種類を識別するアルゴリズムの導出
（実施例１）ｄ）の検知区間の検討において、展開速度と乖離度との相関が最も大きかった流路の始端から半ばまでの２０．０ｍｍを検知区間として、この検知区間の各液体試料により異なる展開速度の関係から液体試料識別アルゴリズムを導出した。
【０１５３】
各液体試料毎の展開速度は図２１に示す。この図からわかるように、尿・血漿・全血によって展開速度は全く異なる。この図より、検知区間の展開速度が０．４５ｍｍ／ｓ以上であれば尿、０．２９〜０．４５ｍｍ／ｓまでの間であれば血漿、０．２９ｍｍ／ｓ未満であれば全血と液体試料を識別する液体試料識別アルゴリズムを導出した。
【０１５４】
ｅ）液体試料が尿と識別した場合の尿中ｈＣＧ濃度の測定
尿中ｈＣＧ濃度の測定について、図２２（ａ）を用いて説明する。
まず始めに、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある液体試料識別アルゴリズム１１０を選択、液体試料識別アルゴリズムによって液体試料を尿と識別した。次に、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある尿用検量線を選択し、演算処理部９０にて、尿中ｈＣＧ濃度を算出した。
【０１５５】
次にアルゴリズム選択部８０は、ｈＣＧ濃度の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部４０に保持してある補正式のいずれかを選択し、該測定値補正部５０にて、該選択された補正式にパラメータと測定値を代入することで、ｈＣＧ濃度の測定値を補正し、ｈＣＧ濃度の分析値を求めた。このフロー図は、図２２（ｃ）に示した。図２３に、補正前と補正後の乖離度の分布を示した。横軸はｈＣＧ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、尿の展開速度の相違の場合に大きく乖離していた。それに対して、補正を行った場合には、乖離度が顕著に減少し、充分な補正効果が示された。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。
【０１５６】
ｆ）液体試料が血漿と識別した場合の総タンパク質濃度による影響の補正
血漿ｈＣＧ濃度の測定について、図２２（ａ）を用いて説明する。
まず始めに、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある液体試料識別アルゴリズム１１０を選択、液体試料識別アルゴリズムによって液体試料を血漿と識別した。次に、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある血漿用検量線を選択し、演算処理部９０にて、血漿中のｈＣＧ濃度を算出した。
【０１５７】
次にアルゴリズム選択部８０は、ｈＣＧ濃度の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部４０に保持してある補正式のいずれかを選択し、該測定値補正部５０にて、該選択された補正式にパラメータと測定値を代入することで、ｈＣＧ濃度の測定値を補正し、ｈＣＧ濃度の分析値を求めた。このフロー図は、図２２（ｃ）に示した。図２４に、補正前と補正後の乖離度の分布を示した。横軸はｈＣＧ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、総タンパク質濃度が低値や高値の場合にかなり大きく乖離していた。それに対して、補正を行った場合には、乖離度が顕著に減少し、充分な補正効果が示された。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。
【０１５８】
ｇ）液体試料が血液と識別した場合のヘマトクリット値による影響の補正
血液ｈＣＧ濃度の測定について、図２２（ａ）を用いて説明する。
まず始めに、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある液体試料識別アルゴリズム１１０を選択、液体試料識別アルゴリズムによって液体試料を全血と識別した。次に、アルゴリズム選択部８０にて、アルゴリズム保持部４０にある全血用検量線を選択し、演算処理部９０にて、血液中のｈＣＧ濃度を算出した。
【０１５９】
次にアルゴリズム選択部８０は、ｈＣＧ濃度の測定値に基づいて前記アルゴリズム保持部４０に保持してある補正式のいずれかを選択し、該測定値補正部５０にて、該選択された補正式にパラメータと測定値を代入することで、ｈＣＧ濃度の測定値を補正し、ｈＣＧ濃度の分析値を求めた。このフロー図は、図２２（ｃ）に示した。図２５には、補正前と補正後の乖離度の分布を示した。横軸はｈＣＧ濃度の真値、縦軸は乖離度を示す。補正前は、ヘマトクリットが低値の場合にかなり大きく乖離していた。それに対して、補正を行った場合には、乖離度が顕著に減少し、充分な補正効果が示された。この補正方法を用いることで、より正確な測定が可能になることが伺える。
【０１６０】
尚、図２２（ａ）（ｂ）の概念図や図２２（ｃ）のフロー図はあくまで一例であり、他の概念やフロー図でも何ら問題はない。
以上のように、本実施例６を用いれば、液体試料の種類を問わずクロマト試験片を用いた定量測定が可能であり、各液体試料の特性に応じた検量線や補正式が備えられており、いずれの液体試料を用いても自動的に液体試料を識別し、高精度な定量測定を実現することができる。
【０１６１】
なお、前記実施例１〜５においては、同一ニトロセルロース膜上に標識試薬部と試薬固定化部を設けたセンサを用いたが、ニトロセルロースとは異なる材質の、例えば不織布のような多孔質担体に標識試薬を担持したものを支持体上に配しても何ら問題はない。標識試薬を構成する標識物としては、金コロイドを用いて例を示したが、着色物質、蛍光物質、燐光物質、発光物質、酸化還元物質、酵素、核酸、小胞体でもよく、反応の前後において何らかの変化が生じるものであれば何を用いてもよい。
【０１６２】
さらに、前記実施例１〜５においては、標識試薬が１カ所であり、試薬固定化部が複数の例で示したが、標識試薬も必ずしも１カ所である必要性はなく、複数の試薬固定化部と複数の試薬の組合せにより構成することもできる。例えば、複数の試薬固定化部を設ける場合は、各試薬固定化部の上流側に各々標識試薬部を備える構成を取ることも可能であり、製造上の工法は複雑になるが、任意の位置に任意の数で設置できることはいうまでもない。
【０１６３】
また、測定される液体試料としては、例えば、水や水溶液、尿、血漿、血清、唾液などの体液、固体および粉末や気体を溶かした溶液などがあり、その用途としては、例えば、血液検査や尿検査、水質検査、便検査、土壌分析、食品分析などがある。また、被検査物質としてｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）を例として実施例を述べたが、抗体、免疫グロブリン、ホルモン、酵素及びペプチドなどのタンパク質及びタンパク質誘導体や、細菌、ウイルス、真菌類、マイコプラズマ、寄生虫ならびにそれらの産物及び成分などの感染性物質、治療薬及び乱用薬物などの薬物及び腫瘍マーカーが挙げられる。具体的には、例えば、絨毛性腺刺激ホルモン（ｈＣＧ）、黄体ホルモン（ＬＨ）、甲状腺刺激ホルモン、濾胞形成ホルモン、副甲状腺刺激ホルモン、副腎脂質刺激ホルモン、エストラジオール、前立腺特異抗原、Ｂ型肝炎表面抗体、ミオグロビン、ＣＲＰ、心筋トロポニン、ＨｂＡ１ｃ、アルブミン等でも何ら問題はない。また、水質検査や土壌分析などの環境分析、食品分析などにも実施可能である。簡便かつ迅速で、高感度・高性能な測定が実現でき、また、いつでもどこでも誰でも測定が可能であるため、ＰＯＣＴ向けの分析装置としても利用できる。
【産業上の利用可能性】
【０１６４】
本発明の分析装置は、例えば、抗原抗体反応のような任意の反応に基づいて、液体試料中の被検査物質を分析検出し、定量または半定量する際に、簡便かつ迅速で、高感度・高性能な測定が実現でき、また、いつでもどこでも誰でも測定が可能であるため、ＰＯＣＴ向けの分析装置として有用である。
【図面の簡単な説明】
【０１６５】
【図１】図１は、本実施の形態１にかかる分析装置の概念図である。
【図２】図２は、本実施の形態１によるクロマトグラフィを利用した分析素子を示す分解図である。
【図３】図３は、本実施の形態１によるクロマトグラフィを利用した分析素子を示す斜視図である。
【図４】図４は、本発明の実施の形態１にかかる分析素子上の試薬固定化部における、標識試薬由来のシグナルを測定するためのシグナル測定部を示す図である。
【図５】図５は、本発明の実施の形態１にかかるシグナル測定部により得られる、分析素子上の試薬固定化部IおよびIIにおける呈色反応を読み取った結果を模式的に示した図である。
【図６】図６は、本発明の実施の形態１にかかる分析素子上に展開された液体試料からパラメータを収集するパラメータ収集部を示す図である。
【図７】図７は、本発明の実施の形態１にかかる分析素子上の、時間の経過による液体試料の展開状況を示す図である。
【図８】図８は、本発明の実施の形態１にかかる分析素子上の検知部における液体試料到達前後の光学的変化を示す図である。
【図９】図９は、本実施の形態１にかかる補正方法の概念図である。
【図１０】図１０は、本発明の実施例１における液体試料の展開速度と真値からの乖離度との関係を示す図である。
【図１１】図１１は、本発明の実施例１におけるヘマトクリット値差要因に対する、補正前後のＣＶ（％）値を示す図である。
【図１２】図１２は、本発明の実施例１におけるヘマトクリット値差要因に対する、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１３】図１３は、本発明の実施例２における総タンパク質濃度差要因に対する、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１４】図１４は、本発明の実施例３における液体試料の添加量不足要因に対する、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１５】図１５は、本発明の実施例４におけるヘマトクリット値及び総タンパク質濃度差要因に対する、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１６】図１６は、本発明の実施例５における複数の検量線を用いた補正ありと、補正なしの、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図１７】図１７は、本発明の実施の形態１にかかる液体試料が全血の場合のヘマトクリット値と液体試料の展開速度との関係を示す図である。
【図１８】図１８は、本発明の実施の形態１にかかる液体試料が血漿の場合の総タンパク質濃度と液体試料の展開速度との関係を示す図である。
【図１９】図１９は、本発明の実施の形態１にかかる液体試料の添加量と液体試料の展開速度との関係を示す図である。
【図２０】図２０は、本発明の実施例１におけるＣＲＰ定量のフロー図である。
【図２１】図２１は、本発明の実施例６における液体試料毎の展開速度を示す図である。
【図２２（ａ）】図２２（ａ）は、本発明の実施例６におけるｈＣＧ定量の概念図である。
【図２２（ｂ）】図２２（ｂ）は、本発明の実施例６におけるｈＣＧ定量の概念図である。
【図２２（ｃ）】図２２（ｃ）は、本発明の実施例６におけるｈＣＧ定量のフロー図である。
【図２３】図２３は、本発明の実施例６における液体試料が尿の場合の、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図２４】図２４は、本発明の実施例６における液体試料が血漿の場合の、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【図２５】図２５は、本発明の実施例６における液体試料が全血の場合の、補正前後の、真値からの乖離度を示す分布図である。
【符号の説明】
【０１６６】
１  展開層（流路） 
２  標識試薬部
３  試薬固定化部I
４  試薬固定化部II 
５  液体不透過性シート材
６  微細空間（試料添加部） 
７  開放部
８  基板
９  微細空間形成材
１０  細胞成分収縮試薬
１３  検知部
１４  液体試料
２０  シグナル測定部
２１，３１  照射部
２２，３２  受光部
３０  パラメータ収集部
４０  アルゴリズム保持部
５０  測定値補正部
６０  分析装置
７０  測定値算出部
８０  アルゴリズム選択部
９０  演算処理部
１００  分析素子
１１０  液体試料識別アルゴリズム
１２０  測定値補正アルゴリズム
１３０  液体試料識別アルゴリズム選択
１４０  測定値補正アルゴリズム選択
１５０  検量線
１６０  検量線選択
【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】全図
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１】
2007007849.tif 000029
【図２】
2007007849.tif 000030
【図３】
2007007849.tif 000031
【図４】
2007007849.tif 000032
【図５】
2007007849.tif 000033
【図６】
2007007849.tif 000034
【図７】
2007007849.tif 000035
【図８】
2007007849.tif 000036
【図９】
2007007849.tif 000037
【図１０】
2007007849.tif 000038
【図１１】
2007007849.tif 000039
【図１２】
2007007849.tif 000040
【図１３】
2007007849.tif 000041
【図１４】
2007007849.tif 000042
【図１５】
2007007849.tif 000043
【図１６】
2007007849.tif 000044
【図１７】
2007007849.tif 000045
【図１８】
2007007849.tif 000046
【図１９】
2007007849.tif 000047
【図２０】
2007007849.tif 000048
【図２１】
2007007849.tif 000049
【図２２（ａ）】
2007007849.tif 000050
【図２２（ｂ）】
2007007849.tif 000051
【図２２（ｃ）】
2007007849.tif 000052
【図２３】
2007007849.tif 000053
【図２４】
2007007849.tif 000054
【図２５】
2007007849.tif 000055
【国際調査報告】
2007007849.tif 000056
2007007849.tif 000057
2007007849.tif 000058
2007007849.tif 000059