【手続補正書】
【提出日】令和1年5月17日(2019.5.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
β-サラセミアの治療のためにActRIIシグナル伝達インヒビターが投与される患者を選択するためのデータを取得するための方法であって：
(a)赤血球前駆細胞(EPC)及び間質細胞を、ある期間にわたって、アクチビンII型受容体(ActRII)シグナル伝達インヒビターの存在下で共培養する工程、及び
(b)該EPC中のGYPA、GATA1、GATA2、又はα-グロビンのレベルを決定するか、又は、該EPCの増殖のレベルを決定する工程
を含む、インビトロ細胞培養法であって、該間質細胞及び／又は該EPCが、該患者から得られている、前記インビトロ細胞培養法；又は
(a)該患者から得られた間質細胞を、ある期間にわたって、アクチビンII型受容体(ActRII)シグナル伝達インヒビターの存在下で培養する工程、及び
(b)工程(a)の培養物から得られた上清中のICAM-1、IL-1Ra、サバイビン、Bcl-2、Bcl-xL、MCP-1、セルピンE1、GRO-a、IL-8、IL-10、IL-2、RANTES、IP-10、IL-1a、IL-1b、MIF、G-CSF、GMCSF、C5a、IL-6、HO-2、HIF-1a、TRAIL R1、切断型カスパーゼ-3、p27、p21、Bax、Bad、CIAP1、又はPON2のレベルを決定する工程
を含む、インビトロ細胞培養法；又は
(a)EPCを、ある期間にわたって、馴化培地中で培養する工程であって、該馴化培地が、ActRIIシグナル伝達インヒビターの存在下で培養された間質細胞から得られており、該間質細胞及び／又は該EPCが、該患者から得られている、前記工程、及び
(b)該EPC中のGYPA、GATA1、GATA2、及び／又はα-グロビンのレベル、及び／又は、工程(a)の培養物から得られた上清中のICAM-1、IL-1Ra、サバイビン、Bcl-2、Bcl-xL、MCP-1、セルピンE1、GRO-a、IL-8、IL-10、IL-2、RANTES、IP-10、IL-1a、IL-1b、MIF、G-CSF、GMCSF、C5a、IL-6、HO-2、HIF-1a、TRAIL R1、切断型カスパーゼ-3、p27、p21、Bax、Bad、CIAP1、又はPON2のレベルを決定するか、又は、該EPCの増殖のレベルを決定する工程
を含む、インビトロ細胞培養法；又は
(a)該患者から得られたEPCを、ある期間にわたって、ActRIIシグナル伝達インヒビターの存在下で培養する工程、及び
(b)該EPC中のGYPA、GATA1、GATA2、又はα-グロビンのレベル、及び／又は、工程(a)の培養物から得られた上清中のICAM-1、IL-1Ra、サバイビン、Bcl-2、Bcl-xL、MCP-1、セルピンE1、GRO-a、IL-8、IL-10、IL-2、RANTES、IP-10、IL-1a、IL-1b、MIF、G-CSF、GMCSF、C5a、IL-6、HO-2、HIF-1a、TRAIL R1、切断型カスパーゼ-3、p27、p21、Bax、Bad、CIAP1、又はPON2のレベルを決定する工程
を含む、インビトロ細胞培養法
を使用することを含む、前記方法。
【請求項２】
前記患者がヒトである、請求項1記載の方法。
【請求項３】
前記間質細胞が、前記患者の骨髄から得られている、請求項1記載の方法。
【請求項４】
前記赤血球前駆細胞が、前記患者の末梢血から得られている、請求項1記載の方法。
【請求項５】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが：
(a)配列番号2と90%同一のもの；
(b)配列番号2と95%同一のもの；
(c)配列番号2と98%同一のもの；
(d)配列番号2；
(e)配列番号3と90%同一のもの；
(f)配列番号3と95%同一のもの；
(g)配列番号3と98%同一のもの；
(h)配列番号3；
(i)配列番号6と90%同一のもの；
(j)配列番号6と95%同一のもの；
(k)配列番号6と98%同一のもの；
(l)配列番号6；
(m)配列番号7と90%同一のもの；
(n)配列番号7と95%同一のもの；
(o)配列番号7と98%同一のもの；
(p)配列番号7；
(q)配列番号12と90%同一のもの；
(r)配列番号12と95%同一のもの；
(s)配列番号12と98%同一のもの；
(t)配列番号12；
(u)配列番号17と90%同一のもの；
(v)配列番号17と95%同一のもの；
(w)配列番号17と98%同一のもの；
(x)配列番号17；
(y)配列番号20と90%同一のもの；
(z)配列番号20と95%同一のもの；
(aa)配列番号20と98%同一のもの；
(bb)配列番号20；
(cc)配列番号21と90%同一のもの；
(dd)配列番号21と95%同一のもの；
(ee)配列番号21と98%同一のもの；
(ff)配列番号21；
(gg)配列番号25と90%同一のもの；
(hh)配列番号25と95%同一のもの；
(ii)配列番号25と98%同一のもの；及び
(jj)配列番号25
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項1記載の方法。
【請求項６】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIAシグナル伝達インヒビターである、請求項1記載の方法。
【請求項７】
前記ActRIIAシグナル伝達インヒビターが：
(a)配列番号2と90%同一のもの；
(b)配列番号2と95%同一のもの；
(c)配列番号2と98%同一のもの；
(d)配列番号2；
(e)配列番号3と90%同一のもの；
(f)配列番号3と95%同一のもの；
(g)配列番号3と98%同一のもの；
(h)配列番号3；
(i)配列番号6と90%同一のもの；
(j)配列番号6と95%同一のもの；
(k)配列番号6と98%同一のもの；
(l)配列番号6；
(m)配列番号7と90%同一のもの；
(n)配列番号7と95%同一のもの；
(o)配列番号7と98%同一のもの；及び
(p)配列番号7
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項1記載の方法。
【請求項８】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、配列番号7のアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項1記載の方法。
【請求項９】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIAの細胞外ドメイン及びヒトIgG1 Fcドメインからなるヒト化融合タンパク質である、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIBのシグナル伝達インヒビターである、請求項1記載の方法。
【請求項１１】
前記ActRIIBシグナル伝達インヒビターが：
(a)配列番号17と90%同一のもの；
(b)配列番号17と95%同一のもの；
(c)配列番号17と98%同一のもの；
(d)配列番号17；
(e)配列番号20と90%同一のもの；
(f)配列番号20と95%同一のもの；
(g)配列番号20と98%同一のもの；
(h)配列番号20；
(i)配列番号21と90%同一のもの；
(j)配列番号21と95%同一のもの；
(k)配列番号21と98%同一のもの；
(l)配列番号21；
(m)配列番号25と90%同一のもの；
(n)配列番号25と95%同一のもの；
(o)配列番号25と98%同一のもの；及び
(p)配列番号25
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項1記載の方法。
【請求項１２】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、配列番号25のアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIBの細胞外ドメイン及びヒトIgG1 Fcドメインからなるヒト化融合タンパク質である、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
前記インビトロ細胞培養が：
(a)インビトロ細胞培養法のEPC中のGYPAレベルの、対照EPC中のGYPAレベルと比べた増加；
(b)インビトロ細胞培養法のEPC中のGATA1レベルの、対照EPC中のGATA1レベルと比べた増加；
(c)インビトロ細胞培養法のEPC中のGATA2レベルの、対照EPC中のGATA2レベルと比べた減少；
(d)インビトロ細胞培養法のEPC中のα-グロビンレベルの、対照EPC中のα-グロビンレベルと比べた減少；
(e)インビトロ細胞培養法におけるEPCの増殖レベルの、対照EPCにおける増殖レベルと比べた増加；
(f)インビトロ細胞培養法の上清中のICAM-1レベルの、対照上清中のICAM-1レベルと比べた増加；
(g)インビトロ細胞培養の上清中のIL-1Raレベルの、対照上清中のIL-1Raレベルと比べた増加；
(h)インビトロ細胞培養法の上清中のサバイビンレベルの、対照上清中のサバイビンレベルと比べた増加；
(i)インビトロ細胞培養法の上清中のBcl-2レベルの、対照上清中のBcl-2レベルと比べた増加；
(j)インビトロ細胞培養法の上清中のBcl-xLレベルの、対照上清中のBcl-xLレベルと比べた増加；
(k)インビトロ細胞培養法の上清中のMCP-1レベルの、対照上清中のMCP-1レベルと比べた増加；
(l)インビトロ細胞培養法の上清中のセルピンE1レベルの、対照上清中のセルピンE1レベルと比べた増加；
(m)インビトロ細胞培養法の上清中のGRO-aレベルの、対照上清中のGRO-aレベルと比べた増加；
(n)インビトロ細胞培養法の上清中のIL-8レベルの、対照上清中のIL-8レベルと比べた増加；
(o)インビトロ細胞培養法の上清中のIL-10レベルの、対照上清中のIL-10レベルと比べた増加；
(p)インビトロ細胞培養法の上清中のIL-2レベルの、対照上清中のIL-2レベルと比べた増加；
(q)インビトロ細胞培養法の上清中のCIAP1レベルの、対照上清中のCIAP1レベルと比べた増加；
(r)インビトロ細胞培養法の上清中のPON2レベルの、対照上清中のPON2レベルと比べた増加；
(s)インビトロ細胞培養法の上清中のRANTESレベルの、対照上清中のRANTESレベルと比べた減少；
(t)インビトロ細胞培養法の上清中のIP-10レベルの、対照上清中のIP-10レベルと比べた減少；
(u)インビトロ細胞培養法の上清中のIL-1aレベルの、対照上清中のIL-1aレベルと比べた減少；
(v)インビトロ細胞培養法の上清中のIL-1bレベルの、対照上清中のIL-1bレベルと比べた減少；
(w)インビトロ細胞培養法の上清中のMIFレベルの、対照上清中のMIFレベルと比べた減少；
(x)インビトロ細胞培養法の上清中のG-CSFレベルの、対照上清中のG-CSFレベルと比べた減少；
(y)インビトロ細胞培養法の上清中のGMCSFレベルの、対照上清中のGMCSFレベルと比べた減少；
(z)インビトロ細胞培養法の上清中のC5aレベルの、対照上清中のC5aレベルと比べた減少；
(aa)インビトロ細胞培養法の上清中のIL-6レベルの、対照上清中のIL-6レベルと比べた減少；
(bb)インビトロ細胞培養法の上清中のHO-2レベルの、対照上清中のHO-2レベルと比べた減少；
(cc)インビトロ細胞培養法の上清中のHIF-1aレベルの、対照上清中のHIF-1aレベルと比べた減少；
(dd)インビトロ細胞培養法の上清中のTRAIL R1レベルの、対照上清中のTRAIL R1レベルと比べた減少；
(ee)インビトロ細胞培養法の上清中の切断型カスパーゼ-3レベルの、対照上清中の切断型カスパーゼ-3レベルと比べた減少；
(ff)インビトロ細胞培養法の上清中のp27レベルの、対照上清中のp27レベルと比べた減少；
(gg)インビトロ細胞培養法の上清中のp21レベルの、対照上清中のp21レベルと比べた減少；
(hh)インビトロ細胞培養法の上清中のBaxレベルの、対照上清中のBaxレベルと比べた減少；及び
(ii)インビトロ細胞培養法の上清中のBadレベルの、対照上清中のbadレベルと比べた減少
の1以上の転帰パラメータの達成を生じる場合に、前記患者が選択される、請求項1記載の方法。
【請求項１５】
ActRIIシグナル伝達インヒビターを含む、患者のβ-サラセミアを治療するための医薬組成物であって、該患者が、請求項1〜14のいずれか一項記載の方法によって取得されたデータに基づいて選択されている、前記医薬組成物。
【請求項１６】
前記インビトロ細胞培養法を使用して、前記患者がモニタリングされる、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが：
(a)配列番号2と90%同一のもの；
(b)配列番号2と95%同一のもの；
(c)配列番号2と98%同一のもの；
(d)配列番号2；
(e)配列番号3と90%同一のもの；
(f)配列番号3と95%同一のもの；
(g)配列番号3と98%同一のもの；
(h)配列番号3；
(i)配列番号6と90%同一のもの；
(j)配列番号6と95%同一のもの；
(k)配列番号6と98%同一のもの；
(l)配列番号6；
(m)配列番号7と90%同一のもの；
(n)配列番号7と95%同一のもの；
(o)配列番号7と98%同一のもの；
(p)配列番号7；
(q)配列番号12と90%同一のもの；
(r)配列番号12と95%同一のもの；
(s)配列番号12と98%同一のもの；
(t)配列番号12；
(u)配列番号17と90%同一のもの；
(v)配列番号17と95%同一のもの；
(w)配列番号17と98%同一のもの；
(x)配列番号17；
(y)配列番号20と90%同一のもの；
(z)配列番号20と95%同一のもの；
(aa)配列番号20と98%同一のもの；
(bb)配列番号20；
(cc)配列番号21と90%同一のもの；
(dd)配列番号21と95%同一のもの；
(ee)配列番号21と98%同一のもの；
(ff)配列番号21；
(gg)配列番号25と90%同一のもの；
(hh)配列番号25と95%同一のもの；
(ii)配列番号25と98%同一のもの；及び
(jj)配列番号25
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIAシグナル伝達インヒビターである、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記ActRIIAシグナル伝達インヒビターが：
(a)配列番号2と90%同一のもの；
(b)配列番号2と95%同一のもの；
(c)配列番号2と98%同一のもの；
(d)配列番号2；
(e)配列番号3と90%同一のもの；
(f)配列番号3と95%同一のもの；
(g)配列番号3と98%同一のもの；
(h)配列番号3；
(i)配列番号6と90%同一のもの；
(j)配列番号6と95%同一のもの；
(k)配列番号6と98%同一のもの；
(l)配列番号6；
(m)配列番号7と90%同一のもの；
(n)配列番号7と95%同一のもの；
(o)配列番号7と98%同一のもの；及び
(p)配列番号7
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、配列番号7のアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIAの細胞外ドメイン及びヒトIgG1 Fcドメインからなるヒト化融合タンパク質である、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIBのシグナル伝達インヒビターである、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記ActRIIBシグナル伝達インヒビターが：
(a)配列番号17と90%同一のもの；
(b)配列番号17と95%同一のもの；
(c)配列番号17と98%同一のもの；
(d)配列番号17；
(e)配列番号20と90%同一のもの；
(f)配列番号20と95%同一のもの；
(g)配列番号20と98%同一のもの；
(h)配列番号20；
(i)配列番号21と90%同一のもの；
(j)配列番号21と95%同一のもの；
(k)配列番号21と98%同一のもの；
(l)配列番号21；
(m)配列番号25と90%同一のもの；
(n)配列番号25と95%同一のもの；
(o)配列番号25と98%同一のもの；及び
(p)配列番号25
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、配列番号25のアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIBの細胞外ドメイン及びヒトIgG1 Fcドメインからなるヒト化融合タンパク質である、請求項15記載の医薬組成物。
【請求項２６】
ActRIIシグナル伝達インヒビター及び培地を含む、請求項1〜14のいずれか一項記載の方法において使用するためのキット。
【請求項２７】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが：
(a)配列番号2と90%同一のもの；
(b)配列番号2と95%同一のもの；
(c)配列番号2と98%同一のもの；
(d)配列番号2；
(e)配列番号3と90%同一のもの；
(f)配列番号3と95%同一のもの；
(g)配列番号3と98%同一のもの；
(h)配列番号3；
(i)配列番号6と90%同一のもの；
(j)配列番号6と95%同一のもの；
(k)配列番号6と98%同一のもの；
(l)配列番号6；
(m)配列番号7と90%同一のもの；
(n)配列番号7と95%同一のもの；
(o)配列番号7と98%同一のもの；
(p)配列番号7；
(q)配列番号12と90%同一のもの；
(r)配列番号12と95%同一のもの；
(s)配列番号12と98%同一のもの；
(t)配列番号12；
(u)配列番号17と90%同一のもの；
(v)配列番号17と95%同一のもの；
(w)配列番号17と98%同一のもの；
(x)配列番号17；
(y)配列番号20と90%同一のもの；
(z)配列番号20と95%同一のもの；
(aa)配列番号20と98%同一のもの；
(bb)配列番号20；
(cc)配列番号21と90%同一のもの；
(dd)配列番号21と95%同一のもの；
(ee)配列番号21と98%同一のもの；
(ff)配列番号21；
(gg)配列番号25と90%同一のもの；
(hh)配列番号25と95%同一のもの；
(ii)配列番号25と98%同一のもの；及び
(jj)配列番号25
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項26記載のキット。
【請求項２８】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIAシグナル伝達インヒビターである、請求項26記載のキット。
【請求項２９】
前記ActRIIAシグナル伝達インヒビターが：
(a)配列番号2と90%同一のもの；
(b)配列番号2と95%同一のもの；
(c)配列番号2と98%同一のもの；
(d)配列番号2；
(e)配列番号3と90%同一のもの；
(f)配列番号3と95%同一のもの；
(g)配列番号3と98%同一のもの；
(h)配列番号3；
(i)配列番号6と90%同一のもの；
(j)配列番号6と95%同一のもの；
(k)配列番号6と98%同一のもの；
(l)配列番号6；
(m)配列番号7と90%同一のもの；
(n)配列番号7と95%同一のもの；
(o)配列番号7と98%同一のもの；及び
(p)配列番号7
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項26記載のキット。
【請求項３０】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、配列番号7のアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項26記載のキット。
【請求項３１】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIAの細胞外ドメイン及びヒトIgG1 Fcドメインからなるヒト化融合タンパク質である、請求項26記載のキット。
【請求項３２】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIBのシグナル伝達インヒビターである、請求項26記載のキット。
【請求項３３】
前記ActRIIBシグナル伝達インヒビターが：
(a)配列番号17と90%同一のもの；
(b)配列番号17と95%同一のもの；
(c)配列番号17と98%同一のもの；
(d)配列番号17；
(e)配列番号20と90%同一のもの；
(f)配列番号20と95%同一のもの；
(g)配列番号20と98%同一のもの；
(h)配列番号20；
(i)配列番号21と90%同一のもの；
(j)配列番号21と95%同一のもの；
(k)配列番号21と98%同一のもの；
(l)配列番号21；
(m)配列番号25と90%同一のもの；
(n)配列番号25と95%同一のもの；
(o)配列番号25と98%同一のもの；及び
(p)配列番号25
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項26記載のキット。
【請求項３４】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、配列番号25のアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項26記載のキット。
【請求項３５】
前記ActRIIシグナル伝達インヒビターが、ActRIIBの細胞外ドメイン及びヒトIgG1 Fcドメインからなるヒト化融合タンパク質である、請求項26記載のキット。