【手続補正書】
【提出日】令和1年5月30日(2019.5.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
心疾患、心臓損傷、虚血性疾患または虚血性損傷を処置するための注射可能組成物であって、
（ａ）  構造タンパク質として、フィブロネクチン、コラーゲンタイプＩ、コラーゲンタイプＩＩＩおよびエラスチンを含む、改変された心臓線維芽細胞由来細胞外マトリックスの１つまたは複数のフラグメントであって、前記改変された細胞外マトリックスに存在している前記構造タンパク質の６０％〜９０％が、フィブロネクチンであり、１８ゲージの皮下注射針の注射開口部を通り抜けるに十分小さい１つまたは複数のフラグメントと、
（ｂ）  水溶性でかつ注射可能な薬学的に許容可能な担体であって、前記１つまたは複数のフラグメントが該担体中に懸濁されて、注射可能な懸濁液を形成する担体と、
を含むことを特徴とする注射可能組成物。
【請求項２】
前記改変された心臓細胞外マトリックスの前記構造タンパク質が、化学的に架橋されていない、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記１つまたは複数の各フラグメントが、２０〜５００μｍの厚さを有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記注射可能な懸濁液が、前記１つまたは複数のフラグメントを含む凍結乾燥粉末を、前記担体中に懸濁することにより調製される、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記改変された心臓細胞外マトリックスが、マトリックス細胞タンパク質として、潜在型形質転換成長因子ベータ１（ＬＴＧＦＢ−１）、潜在型形質転換成長因子ベータ２（ＬＴＧＦＢ−２）、結合組織成長因子（ＣＴＧＦ）、酸性かつシステインリッチな分泌タンパク質（ＳＰＡＲＣ）、バーシカンコアタンパク質（ＶＣＡＮ）、ガレクチン１、ガレクチン３、マトリックスｇｌａタンパク質（ＭＧＰ）、硫酸化グリコプロテイン１およびビグリカンのうちの１つまたは複数をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
無傷の心臓線維芽細胞を本質的に含まない、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
細胞不含である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
心疾患、心臓損傷、虚血性疾患、または虚血性損傷のための治療用の１つまたは複数の細胞をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
心疾患、心臓損傷、虚血性疾患、または虚血性損傷のための治療用の前記１つまたは複数の細胞が、骨格筋芽細胞、胚性幹（ＥＳ）細胞もしくはその誘導体、人工多能性幹（ｉＰＳ）細胞もしくはその誘導体、多能性成体生殖幹細胞（ｍａＧＳＣ）、骨髄間葉系幹細胞（ＢＭＳＣ）、極小胚様幹細胞（ＶＳＥＬ細胞）、血管内皮前駆細胞（ＥＰＣ）、心臓形成細胞（ＣＰＣ）、カーディオスフェア由来細胞（ＣＤＣ）、多能性Ｉｓｌ１＋心血管前駆細胞（ＭＩＣＰ）、心外膜由来前駆細胞（ＥＰＤＣ）、脂肪由来幹細胞、ｉＰＳ細胞もしくはＥＳ細胞に由来するヒト間葉系幹細胞、ｉＰＳ細胞もしくはＥＳ細胞に由来するヒト間葉系間質細胞およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
１つまたは複数の外因性非細胞治療剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記１つまたは複数の外因性非細胞治療剤が、１つまたは複数の成長因子を含む、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記１つまたは複数の成長因子が、上皮成長因子（ＥＤＦ）、形質転換成長因子−α（ＴＧＦ−α）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）、血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、線維芽細胞成長因子１（ＦＧＦ−１）、線維芽細胞成長因子２（ＦＧＦ−２）、形質転換成長因子−β（ＴＧＦ−β）、間質由来因子−１（ＳＤＦ−１）およびケラチノサイト成長因子（ＫＧＦ）からなる群から選択される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記１つまたは複数のフラグメントが、２７ゲージの皮下注射針の注射開口部を通り抜けるに十分小さい、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】
構造タンパク質として、フィブロネクチン、コラーゲンタイプＩ、コラーゲンタイプＩＩＩおよびエラスチンを含む、改変された心臓線維芽細胞由来細胞外マトリックスの１つまたは複数のフラグメントの、心疾患、心臓損傷、虚血性疾患または虚血性損傷を有する対象を治療するための医薬組成物の製造のための使用であって、
前記改変された細胞外マトリックスに存在している前記構造タンパク質の６０％〜９０％が、フィブロネクチンであり、前記１つまたは複数のフラグメントが、１８ゲージの皮下注射針の注射開口部を通り抜けるに十分小さく、前記医薬組成物が、心疾患、心臓損傷、虚血性疾患または虚血性損傷の重症度を軽減することを特徴とする使用。
【請求項１５】
前記心疾患、心臓損傷、虚血性疾患または虚血性損傷が、急性心筋梗塞、心不全、ウイルス感染、細菌感染、先天性欠損、脳卒中、糖尿病性足潰瘍、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）、ＰＡＤ関連潰瘍または虚血肢によって引き起こされる、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
細胞不含の改変された心臓線維芽細胞由来細胞外マトリックス（CF-ECM）の、虚血性疾患または虚血性損傷を有する対象を治療する医薬組成物の製造のための使用であって、
前記CF-ECMが、２０〜５００μｍの厚さを有し、構造タンパク質として、フィブロネクチン、コラーゲンタイプＩ、コラーゲンタイプＩＩＩおよびエラスチンを含み、前記改変された細胞外マトリックスに存在している前記構造タンパク質の６０％〜９０％が、フィブロネクチンであり、前記改変された心臓線維芽細胞由来細胞外マトリックス上に細胞が播種されず、そして、前記医薬組成物が、虚血性疾患または虚血性損傷の重症度を軽減することを特徴とする使用。
【請求項１７】
前記細胞不含の改変された心臓細胞外マトリックスが、マトリックス細胞タンパク質として、潜在型形質転換成長因子ベータ１（ＬＴＧＦＢ−１）、潜在型形質転換成長因子ベータ２（ＬＴＧＦＢ−２）、結合組織成長因子（ＣＴＧＦ）、酸性かつシステインリッチな分泌タンパク質（ＳＰＡＲＣ）、バーシカンコアタンパク質（ＶＣＡＮ）、ガレクチン１、ガレクチン３、マトリックスｇｌａタンパク質（ＭＧＰ）、硫酸化グリコプロテイン１およびビグリカンのうちの１つまたは複数をさらに含む、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
虚血性疾患または虚血性損傷を示す前記対象の組織が、１つまたは複数の外因性非細胞治療剤とさらに接触される、請求項１６に記載の使用。
【請求項１９】
前記１つまたは複数の非細胞治療剤が、１つまたは複数の成長因子を含む、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
前記１つまたは複数の成長因子が、間質由来因子−１（ＳＤＦ−１）、上皮成長因子（ＥＤＦ）、形質転換成長因子−α（ＴＧＦ−α）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）、血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、線維芽細胞成長因子１（ＦＧＦ−１）、線維芽細胞成長因子２（ＦＧＦ−２）、形質転換成長因子−β（ＴＧＦ−β）およびケラチノサイト成長因子（ＫＧＦ）からなる群から選択される、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
前記虚血性疾患または虚血性損傷が、心筋梗塞、脳卒中、糖尿病性足潰瘍、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）、ＰＡＤ関連潰瘍または虚血肢によって引き起こされる、請求項１６に記載の使用。
【請求項２２】
前記虚血肢が、アテローム性動脈硬化または糖尿病の結果である、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
２０〜５００μｍの厚さを有しかつ構造タンパク質として、フィブロネクチン、コラーゲンタイプＩ、コラーゲンタイプＩＩＩおよびエラスチンを含む改変された心臓線維芽細胞由来細胞外マトリックスの、虚血性肢損傷を示している対象の治療のための医薬組成物の製造のための使用であって、前記医薬組成物が、前記対象の組織に注射されるものであり、前記改変された細胞外マトリックスに存在している前記構造タンパク質の６０％〜９０％が、フィブロネクチンであり、そして、前記医薬組成物が、虚血性肢損傷の重症度を軽減することを特徴とする、使用。
【請求項２４】
前記改変された心臓細胞外マトリックスが、マトリックス細胞タンパク質として、潜在型形質転換成長因子ベータ１（ＬＴＧＦＢ−１）、潜在型形質転換成長因子ベータ２（ＬＴＧＦＢ−２）、結合組織成長因子（ＣＴＧＦ）、酸性かつシステインリッチな分泌タンパク質（ＳＰＡＲＣ）、バーシカンコアタンパク質（ＶＣＡＮ）、ガレクチン１、ガレクチン３、マトリックスｇｌａタンパク質（ＭＧＰ）、硫酸化グリコプロテイン１およびビグリカンのうちの１つまたは複数をさらに含む、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
前記改変された心臓細胞外マトリックスに、虚血性肢損傷の治療用の１つまたは複数の細胞が播種される、請求項２３に記載の使用。
【請求項２６】
虚血性肢損傷のための治療用の前記１つまたは複数の細胞が、骨格筋芽細胞、胚性幹（ＥＳ）細胞もしくはその誘導体、人工多能性幹（ｉＰＳ）細胞もしくはその誘導体、多能性成体生殖幹細胞（ｍａＧＳＣ）、骨髄間葉系幹細胞（ＢＭＳＣ）、極小胚様幹細胞（ＶＳＥＬ細胞）、血管内皮前駆細胞（ＥＰＣ）、脂肪由来幹細胞、ｉＰＳ細胞もしくはＥＳ細胞に由来するヒト間葉系幹細胞、ｉＰＳ細胞もしくはＥＳ細胞に由来するヒト間葉系間質細胞およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項２５に記載の使用。
【請求項２７】
前記対象の組織が、１つまたは複数の外因性非細胞治療剤にさらに接触される、請求項２３に記載の使用。
【請求項２８】
前記１つまたは複数の非細胞治療剤が、１つまたは複数の成長因子を含む、請求項２７に記載の使用。
【請求項２９】
前記１つまたは複数の成長因子が、間質由来因子−１（ＳＤＦ−１）、上皮成長因子（ＥＤＦ）、形質転換成長因子−α（ＴＧＦ−α）、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）、血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、線維芽細胞成長因子１（ＦＧＦ−１）、線維芽細胞成長因子２（ＦＧＦ−２）、形質転換成長因子−β（ＴＧＦ−β）およびケラチノサイト成長因子（ＫＧＦ）からなる群から選択される、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
前記虚血性肢損傷が、アテローム性動脈硬化の結果である、請求項２３に記載の使用。