【手続補正書】
【提出日】平成31年3月29日(2019.3.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルファ−フェトプロテイン（ＡＦＰ）ペプチドおよび主要組織適合（ＭＨＣ）クラスＩタンパク質を含む複合体（ＡＦＰ／ＭＨＣクラスＩ複合体またはＡＭＣ）に特異的に結合する抗体部分を含み、該ＡＦＰペプチドが、ＦＭＮＫＦＩＹＥＩ（配列番号４）のアミノ酸配列を有し、任意選択で、該ＭＨＣクラスＩタンパク質が、ＨＬＡ−Ａ０２対立遺伝子のＨＬＡ−Ａ＊０２：０１サブタイプである、単離された抗ＡＭＣ構築物。
【請求項２】
ｉ．前記抗ＡＭＣ抗体部分が、
ｉａ）配列番号６３のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域（ＨＣ−ＣＤＲ）１、もしくは最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント；配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ２、もしくは最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント；および配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ３、もしくは最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む重鎖可変ドメイン；ならびに
ｉｂ）配列番号９６のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域（ＬＣ−ＣＤＲ）１、もしくは最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント；配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ２、もしくは最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント；および配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ３、もしくは最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む軽鎖可変ドメイン
を含む；ならびに／または
ｉｉ．該抗ＡＭＣ抗体部分が、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、もしくは配列番号２３に対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するそのバリアント、および配列番号３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、もしくは配列番号３３に対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するそのバリアントを含む、
請求項１に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
【請求項３】
ｉ．前記抗体部分が、
ｉａ）Ｇ−Ｆ／Ｙ−Ｓ／Ｔ−Ｆ−Ｄ／Ｓ／Ｔ−Ｄ／Ｎ／Ｓ−Ｙ／Ａ−Ａ／Ｇ／Ｗ（配列番号８７）のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ１、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアント、Ｉ／Ｓ−Ｋ／Ｓ−Ｘ−Ｈ／Ｙ−Ｘ−Ｇ−Ｘ−Ｔ（配列番号８８）のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ２、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアント、およびＡ／Ｇ−Ｘ−Ｗ／Ｙ−Ｙ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｆ／Ｙ−Ｄ（配列番号８９）のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ３、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む重鎖可変ドメイン；ならびに
ｉｂ）Ｓ／Ｔ−Ｇ／Ｓ−Ｄ／Ｎ−Ｉ／Ｖ−Ａ／Ｇ−Ａ／Ｓ／Ｖ−Ｘ−Ｈ／Ｙ（配列番号１２０）のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ１、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアント、およびＱ−Ｓ／Ｔ−Ｙ／Ｗ−Ｄ／Ｔ−Ｓ／Ｔ−Ａ／Ｓ（配列番号１２１）のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ３、または最大で３アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む軽鎖可変ドメイン
を含み、Ｘは任意のアミノ酸であり得る；または
ｉｉ．前記抗体部分が、
ｉｉａ）配列番号５７〜６６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ１、または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント、配列番号６７〜７６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ２、または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント、および配列番号７７〜８６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ３；または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む重鎖可変ドメイン；ならびに
ｉｉｂ）配列番号９０〜９９のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ１、または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント、配列番号１００〜１０９のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ２、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアント、および配列番号１１０〜１１９のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ３；または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
【請求項４】
前記抗体部分が、ａ）配列番号１７〜２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン、または配列番号１７〜２６のいずれか１つに対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するそのバリアント；およびｂ）配列番号２７〜３６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、または配列番号２７〜３６のいずれか１つに対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するそのバリアントを含む、請求項３に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
【請求項５】
（ｉ）前記抗ＡＭＣ抗体部分が、全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖまたは単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である；および／または
（ｉｉ）前記単離された抗ＡＭＣ構築物が、約０．１ｐＭ〜約５００ｎＭのＫｄで前記ＡＦＰ／ＭＨＣクラスＩ複合体に結合する；および／または
（ｉｉｉ）前記単離された抗ＡＭＣ構築物が多特異的であり、例えば該単離された抗ＡＭＣ構築物が、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体、ノブ−イントゥ−ホール（ＫｉＨ）抗体、ドックアンドロック（ＤＮＬ）抗体、化学架橋抗体、ヘテロマルチマー抗体またはヘテロコンジュゲート抗体であり、任意選択で、該単離された抗ＡＭＣ構築物が、ペプチドリンカーによって連結された２つのｓｃＦｖを含むタンデムｓｃＦｖである；および／または
（ｉｖ）前記単離された抗ＡＭＣ構築物が、第２の抗原に特異的に結合する第２の抗体部分をさらに含み、例えば
ａ．該第２の抗原が、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２８、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ４０ＬおよびＨＶＥＭからなる群から選択される；または
ｂ．第２の抗原がＣＤ３εであり、前記単離された抗ＡＭＣ構築物が、前記ＡＦＰ／ＭＨＣクラスＩ複合体に特異的なＮ末端ｓｃＦｖおよびＣＤ３εに特異的なＣ末端ｓｃＦｖを含むタンデムｓｃＦｖである；および／または
（ｖ）前記単離された抗ＡＭＣ構築物が、該抗体部分およびエフェクター分子を含むイムノコンジュゲートであり、該エフェクター分子が、薬物、毒素、放射性同位体、タンパク質、ペプチドおよび核酸からなる群から選択される治療剤である；および／または
（ｖｉ）前記単離された抗ＡＭＣ構築物が、抗体部分および標識を含むイムノコンジュゲートである；および／または
（ｖｉｉ）前記単離された抗ＡＭＣ構築物が、抗体部分を含む細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、ならびにＣＤ３細胞内シグナル伝達配列およびＣＤ２８細胞内シグナル伝達配列を含む細胞内シグナル伝達ドメインを含むキメラ抗原受容体であり、任意選択で、
ａ．該細胞内シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達配列および共刺激シグナル伝達配列を含み、任意選択で、該共刺激シグナル伝達配列が、ＣＤ２８または４−１ＢＢの細胞内シグナル伝達配列を含む；および／または
ｂ．該膜貫通ドメインが、ＣＤ２８膜貫通領域を含む、
請求項１から４のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
【請求項６】
請求項１から５のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物を含む医薬組成物。
【請求項７】
請求項１から５のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物を発現する宿主細胞。
【請求項８】
請求項１から５のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物のポリペプチド成分をコードする核酸。
【請求項９】
請求項５のｖｉｉに記載の単離された抗ＡＭＣ構築物を発現するエフェクター細胞であって、任意選択でＴ細胞である、エフェクター細胞。
【請求項１０】
ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣクラスＩタンパク質を含む複合体をその表面上に提示する細胞を検出するｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法であって、該細胞を、請求項５のｖｉに記載の単離された抗ＡＭＣ構築物と接触させるステップ、および該細胞上の前記標識の存在を検出するステップを含む方法。
【請求項１１】
ＡＦＰ陽性疾患を有する個体を処置するための、請求項６に記載の医薬組成物であって、該個体に、有効量の該医薬組成物が投与されることを特徴とし；任意選択で、
ａ）該投与が、静脈内経路もしくは腫瘍内経路を介した投与である；または
ｂ）該投与が、第１の疾患部位に対して遠位の注射部位への投与である、
医薬組成物。
【請求項１２】
ＡＦＰ陽性疾患を有する個体を処置するための、請求項９に記載のエフェクター細胞を含む組成物であって、該個体に、有効量の該組成物が投与されることを特徴とし；任意選択で、
ａ）該投与が、静脈内経路もしくは腫瘍内経路を介した投与である；または
ｂ）該投与が、第１の疾患部位に対して遠位の注射部位への投与である、
組成物。
【請求項１３】
ＡＦＰ陽性疾患を有する個体を診断するための、請求項５のｖｉに記載の単離された抗ＡＭＣ構築物を含む組成物であって、
ａ）有効量の該単離された抗ＡＭＣ構築物が、該個体に投与され；および
ｂ）該個体における前記標識のレベルが決定され、閾値レベルを上回る該標識のレベルは、該個体が該ＡＦＰ陽性疾患を有することを示す
ことを特徴とする、または
ａ）該組成物が、該個体に由来する試料と接触され；および
ｂ）該試料中の、該組成物と結合した細胞の数が決定され、閾値レベルを上回る、該組成物と結合した細胞の数の値は、該個体が該ＡＦＰ陽性疾患を有することを示す
ことを特徴とする、組成物。
【請求項１４】
前記ＡＦＰ陽性疾患ががんであり、例えば、該がんが、肝細胞癌、胚細胞腫瘍または乳がんであり、好ましくは該がんが肝細胞癌であり、任意選択で、該がんが転移性肝細胞癌である、請求項１１に記載の医薬組成物または請求項１２もしくは１３に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
本明細書に記載される構築物のいずれかを作製する方法、本明細書に記載される方法に適切な製造物品およびキットもまた提供される。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
アルファ−フェトプロテイン（ＡＦＰ）ペプチドおよび主要組織適合（ＭＨＣ）クラスＩタンパク質を含む複合体（ＡＦＰ／ＭＨＣクラスＩ複合体またはＡＭＣ）に特異的に結合する抗体部分を含む、単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目２）
前記ＭＨＣクラスＩタンパク質が、ＨＬＡ−Ａ０２対立遺伝子のＨＬＡ−Ａ＊０２：０１サブタイプである、項目１に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目３）
前記ＡＦＰペプチドが、配列番号３〜１３および１６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、項目１または２に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目４）
前記ＡＦＰペプチドが、ＦＭＮＫＦＩＹＥＩ（配列番号４）のアミノ酸配列を有する、項目３に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目５）
前記抗体部分が、全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖまたは単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、項目１から４のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目６）
約０．１ｐＭ〜約５００ｎＭのＫｄで前記ＡＦＰ／ＭＨＣクラスＩ複合体に結合する、項目１から５のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目７）
前記抗体部分が、
ｉ）Ｇ−Ｆ／Ｙ−Ｓ／Ｔ−Ｆ−Ｄ／Ｓ／Ｔ−Ｄ／Ｎ／Ｓ−Ｙ／Ａ−Ａ／Ｇ／Ｗ（配列番号８７）のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域（ＨＣ−ＣＤＲ）１、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアント、Ｉ／Ｓ−Ｋ／Ｓ−Ｘ−Ｈ／Ｙ−Ｘ−Ｇ−Ｘ−Ｔ（配列番号８８）のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ２、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアント、およびＡ／Ｇ−Ｘ−Ｗ／Ｙ−Ｙ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｆ／Ｙ−Ｄ（配列番号８９）のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ３、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む重鎖可変ドメイン；ならびに
ｉｉ）Ｓ／Ｔ−Ｇ／Ｓ−Ｄ／Ｎ−Ｉ／Ｖ−Ａ／Ｇ−Ａ／Ｓ／Ｖ−Ｘ−Ｈ／Ｙ（配列番号１２０）のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域（ＬＣ−ＣＤＲ）１、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアント、およびＱ−Ｓ／Ｔ−Ｙ／Ｗ−Ｄ／Ｔ−Ｓ／Ｔ−Ａ／Ｓ（配列番号１２１）のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ３、または最大で３アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む軽鎖可変ドメイン
を含み、Ｘは任意のアミノ酸であり得る、項目１から６のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目８）
前記抗体部分が、
ｉ）配列番号５７〜６６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ１、または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント、配列番号６７〜７６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ２、または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント、および配列番号７７〜８６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ３；または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む重鎖可変ドメイン；ならびに
ｉｉ）配列番号９０〜９９のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ１、または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアント、配列番号１００〜１０９のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ２、または最大で約３アミノ酸の置換を含むそのバリアント、および配列番号１１０〜１１９のいずれか１つのアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ３；または最大で約５アミノ酸の置換を含むそのバリアントを含む軽鎖可変ドメイン
を含む、項目１から６のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目９）
前記抗体部分が、ａ）配列番号１７〜２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン、または配列番号１７〜２６のいずれか１つに対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するそのバリアント；およびｂ）配列番号２７〜３６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、または配列番号２７〜３６のいずれか１つに対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するそのバリアントを含む、項目８に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１０）
多特異的である、項目１から９のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１１）
タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体、ノブ−イントゥ−ホール（ＫｉＨ）抗体、ドックアンドロック（ＤＮＬ）抗体、化学架橋抗体、ヘテロマルチマー抗体またはヘテロコンジュゲート抗体である、項目１０に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１２）
ペプチドリンカーによって連結された２つのｓｃＦｖを含むタンデムｓｃＦｖである、項目１１に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１３）
第２の抗原に特異的に結合する第２の抗体部分をさらに含む、項目１０〜１２のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１４）
前記第２の抗原が、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２８、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ４０ＬおよびＨＶＥＭからなる群から選択される、項目１３に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１５）
前記第２の抗原がＣＤ３εであり、前記単離された抗ＡＭＣ構築物が、前記ＡＦＰ／ＭＨＣクラスＩ複合体に特異的なＮ末端ｓｃＦｖおよびＣＤ３εに特異的なＣ末端ｓｃＦｖを含むタンデムｓｃＦｖである、項目１３に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１６）
前記抗体部分を含む細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、ならびにＣＤ３ζ細胞内シグナル伝達配列およびＣＤ２８細胞内シグナル伝達配列を含む細胞内シグナル伝達ドメインを含むキメラ抗原受容体である、項目１から９のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１７）
前記単離された抗ＡＭＣ構築物が、前記抗体部分およびエフェクター分子を含むイムノコンジュゲートであり、該エフェクター分子が、薬物、毒素、放射性同位体、タンパク質、ペプチドおよび核酸からなる群から選択される治療剤である、項目１から９のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１８）
前記抗体部分および標識を含むイムノコンジュゲートである、項目１から９のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物。
（項目１９）
項目１から１７のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物を含む医薬組成物。
（項目２０）
項目１から１８のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物を発現する宿主細胞。
（項目２１）
項目１から１８のいずれか一項に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物のポリペプチド成分をコードする核酸。
（項目２２）
項目１６に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物を発現するエフェクター細胞。
（項目２３）
Ｔ細胞である、項目２２に記載のエフェクター細胞。
（項目２４）
ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣクラスＩタンパク質を含む複合体をその表面上に提示する細胞を検出する方法であって、該細胞を、項目１８に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物と接触させるステップ、および該細胞上の前記標識の存在を検出するステップを含む方法。
（項目２５）
ＡＦＰ陽性疾患を有する個体を処置する方法であって、該個体に、
ａ）有効量の項目１９に記載の医薬組成物、または
ｂ）有効量の項目２２もしくは２３に記載のエフェクター細胞
を投与するステップを含む方法。
（項目２６）
前記投与が、静脈内経路または腫瘍内経路を介した投与である、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記投与が、第１の疾患部位に対して遠位の注射部位への投与である、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
ＡＦＰ陽性疾患を有する個体を診断する方法であって、
ａ）有効量の項目１８に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物を該個体に投与するステップ；および
ｂ）該個体における前記標識のレベルを決定するステップであって、閾値レベルを上回る該標識のレベルは、該個体が該ＡＦＰ陽性疾患を有することを示す、ステップ
を含む方法。
（項目２９）
ＡＦＰ陽性疾患を有する個体を診断する方法であって、
ａ）該個体に由来する試料を、項目１８に記載の単離された抗ＡＭＣ構築物と接触させるステップ；および
ｂ）該試料中の、該単離された抗ＡＭＣ構築物と結合した細胞の数を決定するステップであって、閾値レベルを上回る、該単離された抗ＡＭＣ構築物と結合した細胞の数の値は、該個体が該ＡＦＰ陽性疾患を有することを示す、ステップ
を含む方法。
（項目３０）
前記ＡＦＰ陽性疾患ががんである、項目２５から２９のいずれか一項に記載の方法。
（項目３１）
前記がんが、肝細胞癌、胚細胞腫瘍または乳がんである、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記がんが肝細胞癌である、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記がんが転移性肝細胞癌である、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記ＡＦＰ陽性疾患が肝細胞癌であり、転移が阻害される、項目２５から２７のいずれか一項に記載の方法。