【手続補正書】
【提出日】平成20年2月19日(2008.2.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中のエベロリムス濃度の測定方法であって、
(a) オキシム結合を通じて、検出可能な標識と結合しているエベロリムスを含む、標識競合体を供給する工程と、
(b) 前記オキシム結合と異なる構造または位置をもつリンカー鎖を通じて、抗原担体と結合しているエベロリムスを含む抗原化合物を用いて産生された、抗エベロリムス抗体を供給する工程と、
(c) 前記試料、前記抗エベロリムス抗体および前記標識競合体を混合することにより、前記抗エベロリムス抗体との結合について、試料中のエベロリムスが前記標識競合体と競合する工程と、
(d) 前記抗エベロリムス抗体と結合していない前記標識競合体量を前記標識の検出により測定することによって、試料中のエベロリムスの濃度を測定する工程と、
からなる方法。
【請求項２】
前記抗原化合物が、26位および28位からなるグループから選択される位置でリンカーを通じて抗原担体と結合している、請求項１に記載のエベロリムス濃度の測定方法。
【請求項３】
前記標識競合体が、
X１は酸素を含む1つまたはそれ以上の原子からなるリンカー鎖であり、各々のリンカー鎖は置換鎖または非置換鎖でありえ、さらに分岐鎖または非分岐鎖でありえ、酸素原子は窒素原子と結合しており、
Yは-C(O)-,  -NH-,  -S-,  -CH2-および-O-からなるグループから選択され、
Zは検出可能な標識である、次の化学式の化合物である、請求項１に記載のエベロリムス濃度の測定方法。
【化１】
2007528502.tif 000001
【請求項４】
前記抗原化合物が、
nは0または1であり、
Xは置換鎖または非置換リンカー鎖でありえ、さらに直鎖または分岐鎖でありえ、
Yは-C(O)-,  -NH-,  -S-,  -CH2-および-O-からなるグループから選択され、
Zは前記抗原担体である、次の化学式の化合物である、請求項１または３に記載のエベロリムス濃度の測定方法。
【化２】
2007528502.tif 000002
【請求項５】
前記抗原化合物が、
Xは-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-であり、
Yは-C(O)-である、請求項４に記載のエベロリムス濃度の測定方法。
【請求項６】
前記抗エベロリムス抗体が、前記標識競合体に対してよりも、前記試料中のエベロリムスに対してより大きな親和性を有する、請求項１に記載のエベロリムス濃度の測定方法。
【請求項７】
前記工程(d)において、前記抗エベロリムス抗体と結合していない前記標識競合体量を前記標識の検出が、FPIA法、均一微粒子（免疫比濁法）イムノアッセイ、クローン化酵素ドナー・イムノアッセイ（CEDIA法）、化学発光不均一イムノアッセイおよび側方流動イムノアッセイからなるグループから選択されることを特徴とする、請求項1に記載のエベロリムス濃度の測定方法。
【請求項８】
試料中のエベロリムス濃度の測定キットであって、
オキシム結合を通じて、検出可能な標識と結合しているエベロリムスを含む標識競合体と、
抗エベロリムス抗体と、からなり、
前記抗エベロリムス抗体は、前記オキシム結合と異なる構造または位置をもつリンカー鎖を通じて、抗原担体と結合しているエベロリムスを含む抗原化合物を用いて産生されており、
前記標識競合体は、前記抗エベロリムス抗体との結合について、試料中のエベロリムスと競合する、エベロリムス濃度の測定キット。
【請求項９】
前記抗原化合物が、位置番号26番および28番からなるグループから選択される位置でリンカーを通じて抗原担体と結合している、請求項８に記載のエベロリムス濃度の測定キット。
【請求項１０】
前記標識競合体が、
X１は酸素を含む1つまたはそれ以上の原子からなるリンカー鎖であり、各々のリンカー鎖は置換鎖または非置換鎖でありえ、さらに分岐鎖または非分岐鎖でありえ、酸素原子は窒素原子と結合しており、
Yは-C(O)-,  -NH-,  -S-,  -CH2-および-O-からなるグループのから選択され、
Zは検出可能な標識である、次の化学式の化合物である、請求項８に記載のエベロリムス濃度の測定キット。
【化３】
2007528502.tif 000003
【請求項１１】
前記抗原化合物が、
nは0または1であり、
Xは置換鎖または非置換リンカー鎖でありえ、さらに直鎖または分岐鎖でありえ、
Yは-C(O)-,  -NH-,  -S-,  -CH2-および-O-からなるグループから選択され、
Zは前記抗原担体である、次の化学式の化合物である、請求項８または１０に記載のエベロリムス濃度の測定キット。
【化４】
2007528502.tif 000004
【請求項１２】
前記抗原化合物が、
Xは-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-であり、
Yは-C(O)-である、請求項１１に記載のエベロリムス濃度の測定キット。
【請求項１３】
前記抗エベロリムス抗体が、前記標識競合体に対してよりも、前記試料中のエベロリムスに対してより大きな親和性を有する、請求項８に記載のエベロリムス濃度の測定キット。
【請求項１４】
前記抗エベロリムス抗体が、モノクローナル抗体である、請求項８に記載のエベロリムス濃度の測定キット。
【請求項１５】
前記抗エベロリムス抗体が、ポリクローナル抗体である、請求項８に記載のエベロリムス濃度の測定キット。
【請求項１６】
3ng/mL以上15ng/mL以下の範囲である試料中のエベロリムス濃度を、十分に測定可能である請求項８に記載のエベロリムス濃度の測定キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】エベロリムスの測定方法および測定キット
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
エベロリムスのTDMは次の参考文献（非特許文献５〜７）により報告されており、各々参考により本稿に援用される。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
【特許文献】国際公開WO-009409010パンフレット
【非特許文献１】Nashan B.、"The role of Certicanin the many pathways of chronic rejection. Transplantation Proceedings," Transplantation Proceedings, 2001, 33:3215-3230.
【非特許文献２】Kovarik JM, et al. "Exposure-response relationship for Certican in de novo kidney transplantation : define a therapeutic range." Transplantation 2002; 73（6）: 920-925.
【非特許文献３】Wallemacq, Pierre E. "Therapeutic monitoring of immunosuppressant drugs. Where are we?," Clinical Chemistry and Laboratory Medicine（2004）, 42（11）, 1204-121.
【非特許文献４】Starling, Randall C.; et al. "Therapeutic drug monitoring for everolimus in heart transplant recipients based on exposure-effect modeling." American Journal of Transplantation （2004）, 4（12）, 2126- 2131.
【非特許文献５】McMahon LM, et al. "High-throughput analysis of Certican （RAD001）and cyclosporin A （CsA）in whole blood by liquid chromatography/massspectrometryusing a semi-automated 96-well solid-phase extraction system." Rapid Communications in Mass Spectrometry 2000; 14: 1965-1971.
【非特許文献６】Brignol N, et al. "High-throughput semi-automated 96-wellliquid/liquid extraction and liquid chromatography/mass spectrometric analysisof Certican（RAD001） and cyclosporinA （CsA） in whole blood." Rapid Communications in Mass Spectrometry 2002; 15: 1-10.
【非特許文献７】Streit F. et al. "Rapid liquid chromatography-tandem massspectrometry routine method for simultaneous determination of sirolimus, Certican, tacrolimus, and cyclosporin A in whole blood." Clinical Chemistry. 2002; 48 （6）: 955-958.