【手続補正書】
【提出日】令和1年10月28日(2019.10.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子であって、
（i）EGFRと特異的に結合する第一のFab又はscFvフラグメントであって、前記第一のFab又はscFvフラブメントがセツキシマブ（C225）に由来し、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５および配列番号４６からなる群より選ばれるVLおよびVH配列を含み、及び
（ii）c-METと特異的に結合する第二のFab又はscFvフラグメントであって、前記第二の及びFab又はscFvフラグメントが少なくとも5x10-8 MのKDでc-METと結合し、かつ、前記第二のFab又はscFvフラグメントが配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号４７、配列番号４９および配列番号５１からなる群より選ばれるVLを含み、
前記第二のFab又はscFvフラグメントのVH配列が配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３４、配列番号４８、配列番号５０および配列番号５２からなる群より選ばれ、及び、
（iii）抗体ヒンジ領域、抗体CH2ドメイン、及びハイブリッドタンパク質-タンパク質相互作用境界ドメインを含む抗体CH3ドメインを含み、前記相互作用境界ドメインの各々が、第一のメンバーのCH3ドメインのアミノ酸セグメント及び第二のメンバーのCH3ドメインのアミノ酸セグメントによって形成され、前記第一鎖の前記タンパク質-タンパク質境界ドメインが、前記相互作用ドメイン内の免疫グロブリンスーパーファミリーの同じメンバーの対応するアミノ酸セグメントのホモダイマー形成によって前記第二鎖の前記タンパク質-タンパク質境界面と相互作用し、
前記第一又は第二の操作された免疫グロブリン鎖が、ポリペプチド配列（“AG-SEED”）、GQPFRPEVHLLPPSREEMTKNQVSLTCLARGFYPX1DIAVEWESNGQPENNYKTTPSRQEPSQGTTTFAVTSKLTX2DKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKX3ISL（配列番号:1）（式中、X1、X2及びX3は任意のアミノ酸であり得る）を含むか、又は
前記第一の操作された免疫グロブリン鎖がポリペプチド配列（"AG-SEED"）GQPFEPEVHTLPPSREEMTKNQVSLTCLVRGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPSRLEPSQGTTTFAVTSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLを含み、かつ、前記第二の操作された免疫グロブリン鎖がポリペプチド配列（"GA-SEED"）、GQPREPQVYTLPPPSEELALNNQVTLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEPREKYLTWAPVLDSDGSFFLYSILRVDASRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLを含む、前記ヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項２】
免疫グロブリンスーパーファミリーの第一のメンバーがIgGであり、第二のメンバーがIgAである、請求項1に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項３】
X1がK又はSであり、X2がV又はTであり、X3がT又はSである、請求項2に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項４】
第一又は第二の操作された免疫グロブリン鎖が、ポリペプチド配列（“GA-SEED”）、GQPREPQVYTLPPPSEELALNEX1VTLTCLVKGFYPSDIAVEWLQGSQELPREKYLTWX2PVX3DSD GSX4FLYSILRVX5AX6DWKKGDTFSCSVMHEALHNHYTQKSLDR（式中、X1、X2、X3、X4、X5及びX6は任意のアミノ酸であり得る）を含む、請求項1−3のいずれか1項に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項５】
X1がL又はQであり、X2がA又はTであり、X3がL、V、D又はTであり、X4がF、A、D、E、G、H、K、N、P、Q、R、S又はTであり、X5がA又はTであり、X6がE又はDである、請求項4に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項６】
第一の操作された免疫グロブリン鎖が、ポリペプチド配列（“AG-SEED”）、GQPFRPEVHLLPPSREEMTKNQVSLTCLARGFYPKDIAVEWESNGQPENNYKTTPSRQEPSQGTTTFAVTSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKTISLを含み、第二の操作された免疫グロブリン鎖が、ポリペプチド配列（“GA-SEED”）、GQPREPQVYTLPPPSEELALNELVTLTCLVKGFYPSDIAVEWLQGSQELPREKYLTWAPVLDSDG SFFLYSILRVAAEDWKKGDTFSCSVMHEALHNHYTQKSLDRを含む、請求項1−5のいずれか1項に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項７】
第一のFabフラグメントが少なくとも5ｘ10-8MのKDでEGFRと結合する、請求項1−6のいずれか1項に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項８】
第一及び第二のFab又はscFvフラグメントが、配列番号:9、配列番号:43、配列番号:17、配列番号:18、又は配列番号:47、配列番号:48（225L、B10）、又は（225M、B10v5）配列番号:11、配列番号:44、配列番号:31、配列番号:51、配列番号:32、又は（225H、F06）配列番号:45、配列番号:46、配列番号:29、配列番号:49、配列番号:30、配列番号:50、又は（225H、CS06）配列番号:45、配列番号:46、配列番号:33、配列番号:34、配列番号:52、又は（225M、CS06）配列番号:11、配列番号:44、配列番号:33、配列番号:34、配列番号:52から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項９】
第一及び第二のFab又はscFvフラグメントが、アミノ酸配列（225M、CS06）配列番号:11、配列番号:44、配列番号:33、配列番号:34、配列番号:52、又は（225H、CS06）配列番号:45、配列番号:46、配列番号:29、配列番号:49、配列番号:30、配列番号:50を含む、請求項8に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項１０】
FcドメインがFcRnと相互作用する、請求項1−9のいずれか1項に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項１１】
抗体依存細胞性細胞傷害を媒介する、請求項1−10のいずれか１項に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項１２】
以下の工程を含む、請求項1−11のいずれか1項に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子を生成する方法：
−前記ヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子の異種発現のために十分な条件下で、
（ａ）配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６，配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２，配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８，配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、または配列番号５２，の少なくとも一つのアミノ酸配列をコードする少なくとも一つのポリヌクレオチド、又は、
（ｂ）配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６，配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２，配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８，配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、または配列番号５２，の少なくとも一つのアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチドを含む少なくとも一つのベクター、
を含む少なくとも1つの宿主細胞を培養する工程、
−前記ヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子を精製する工程。
【請求項１３】
ヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子が少なくとも1つのリンカーに共有結合により連結している、請求項1−11のいずれか1項又は請求項12に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項１４】
ヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子のリンカーが色素、放射性同位元素、又は細胞毒素に連結している、請求項13に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項１５】
少なくとも1つのリンカーが、ヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子のFab又はscFv軽鎖の少なくとも1つに共有結合により連結している、請求項14に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項１６】
ヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子が、当該ヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子のFab又はscFv軽鎖に共有結合により連結している2つのリンカーを含む、請求項15に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項１７】
Fab又はscFv軽鎖及び/又はCH3ドメイン及び/又はCH2ドメインがリンカーに共有結合により連結しており、前記リンカーが色素、放射性同位元素、又は細胞毒素に共有結合により連結している、請求項16に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子。
【請求項１８】
請求項1−11、又は請求項13−17のいずれか1項に記載のヘテロダイマー二重特異性免疫グロブリン分子を含む、癌の治療用医薬組成物。
【請求項１９】
癌が、前立腺癌、乳癌、副腎癌、白血病、リンパ腫、骨髄腫、骨及び結合組織の肉腫、脳腫瘍、甲状腺癌、膵臓癌、脳下垂体癌、眼の癌、膣癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮癌、卵巣癌、食道癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、肝癌、胆嚢癌、胆管癌、肺癌、精巣癌、陰茎癌、口部癌、皮膚癌、腎臓癌、ウィルムス腫瘍及び膀胱癌、転移性（mCRC）、切除不能性肝転移、頭部及び頸部の扁平上皮癌、非小細胞肺癌（NSCLC）、頭頸部扁平上皮癌（HNSCC）である、請求項18に記載の医薬組成物。