【手続補正書】
【提出日】令和1年11月1日(2019.11.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
そのゲノムが内因性Ｌａｇ−３遺伝子座にヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含む齧歯類であって、前記齧歯類は、前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子からヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドを発現し、前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドは、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの最初の２つのＮ末端免疫グロブリン（Ｉｇ）様ドメインと、内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの最後の２つのＩｇ様ドメインとを含む細胞外部分；内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの膜貫通ドメイン；ならびに内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの細胞内ドメインを含み、前記齧歯類はマウスまたはラットである、齧歯類。
【請求項２】
そのゲノムが内因性Ｌａｇ−３遺伝子座にヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含む齧歯類であって、前記齧歯類は、前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子からヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドを発現し、前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドは、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの最初の２つのＮ末端Ｉｇ様ドメインを含み、前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子は、内因性Ｌａｇ−３エクソン１、５、６、７および８を含み、前記齧歯類はマウスまたはラットである、齧歯類。
【請求項３】
（ａ）前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドが、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドのアミノ酸２９〜２６０を含む；ならびに／あるいは
（ｂ）前記齧歯類が、ヒト化ＰＤ−１ポリペプチドをさらに発現し、前記ヒト化ＰＤ−１ポリペプチドは、ヒトＰＤ−１ポリペプチドの細胞外部分と、内因性ＰＤ−１ポリペプチドの細胞内部分とを含み、必要に応じて、
前記ヒト化ＰＤ−１ポリペプチドは、前記内因性ＰＤ−１ポリペプチドの膜貫通部分をさらに含む；および／または
前記ヒト化ＰＤ−１ポリペプチドは、前記ヒトＰＤ−１ポリペプチドのアミノ酸３５〜１４５を含む、請求項１または請求項２に記載の齧歯類。
【請求項４】
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結しており、必要に応じて、
前記齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターが、内因性齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターである；および／または
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子が、ヒトＬＡＧ−３遺伝子のエクソン２〜４を含む、請求項１または請求項２に記載の齧歯類。
【請求項５】
前記齧歯類のゲノムが、齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターに動作可能に連結し、かつ、前記ヒト化ＰＤ−１ポリペプチドをコードするヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子をさらに含み、必要に応じて、
（ａ）前記齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターは内因性齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターである；および／または
（ｂ）前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子は、内因性Ｐｄｃｄ１エクソン１、４および５を含み、そして、内因性Ｐｄｃｄ１エクソン３の全部または一部を含む、請求項４に記載の齧歯類。
【請求項６】
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子のヒト部分が、ヒトＰＤＣＤ１遺伝子のエクソン２を含み、必要に応じて、前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子は、ヒトＰＤＣＤ１エクソン３の全部または一部をさらに含む、請求項５に記載の齧歯類。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の齧歯類によって作製されるヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチド。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の齧歯類の単離された細胞または組織。
【請求項９】
そのゲノムが内因性Ｌａｇ−３遺伝子座にヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドをコードするヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含む齧歯類胚幹（ＥＳ）細胞であって、前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドは、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの最初の２つのＮ末端Ｉｇ様ドメインと、内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの最後の２つのＩｇ様ドメインとを含む細胞外ドメイン；内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの膜貫通ドメイン；ならびに内因性齧歯類Ｌａｇ−３ポリペプチドの細胞内ドメインを含み、
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結しており、前記齧歯類ＥＳ細胞はマウスまたはラットＥＳ細胞である、ＥＳ細胞。
【請求項１０】
そのゲノムが内因性Ｌａｇ−３遺伝子座にヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドをコードするヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含む齧歯類胚幹（ＥＳ）細胞であって、前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドは、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの最初の２つのＮ末端Ｉｇ様ドメインを含み、前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子は、内因性Ｌａｇ−３エクソン１、５、６、７および８を含み、前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結しており、前記齧歯類ＥＳ細胞はマウスまたはラットＥＳ細胞である、ＥＳ細胞。
【請求項１１】
請求項９または請求項１０に記載のＥＳ細胞から生成される齧歯類胚。
【請求項１２】
齧歯類を作製する方法であって、
齧歯類のゲノムが内因性Ｌａｇ−３遺伝子座にヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含むように前記齧歯類のゲノムを改変し、それによって前記齧歯類を作製することを含み、前記ヒト化遺伝子が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結し、前記齧歯類は、前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子からヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドを発現し、前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドは、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの最初の２つのＮ末端Ｉｇ様ドメインと、内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの最後の２つのＩｇ様ドメインとを含む細胞外部分；内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの膜貫通ドメイン；ならびに内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの細胞内ドメインを含み、前記齧歯類はマウスまたはラットである、方法。
【請求項１３】
齧歯類を作製する方法であって、
齧歯類のゲノムがヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含むように前記齧歯類のゲノムを改変し、それによって前記齧歯類を作製することを含み、前記ヒト化遺伝子が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結し、前記齧歯類は、前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子からヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドを発現し、前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドは、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの最初の２つのＮ末端Ｉｇ様ドメインを含み、前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子は、内因性Ｌａｇ−３エクソン１、５、６、７および８を含み、前記齧歯類はマウスまたはラットである、方法。
【請求項１４】
前記齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターが内因性齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターである、請求項１２または請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記方法が、
ａ）齧歯類ＥＳ細胞における内因性Ｌａｇ−３遺伝子にゲノム断片を組み込むことであって、前記ゲノム断片は、前記ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの最初の２つのＮ末端Ｉｇ様ドメインをコードするヌクレオチド配列を含み、それによって、遺伝的に改変された齧歯類胚幹細胞を得ること；および
ｂ）（ａ）の前記遺伝的に改変された齧歯類ＥＳ細胞を使用して齧歯類を作製すること
を含む、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
（ａ）前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子が、ヒトＬＡＧ−３遺伝子のエクソン２〜４を含むか；または前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子が、前記ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの少なくともアミノ酸２９〜２６０をコードする；ならびに／あるいは
（ｂ）前記方法が、前記齧歯類のゲノムが、ヒトＰＤ−１ポリペプチドの細胞外部分および内因性ＰＤ−１ポリペプチドの細胞内部分を含むヒト化ＰＤ−１ポリペプチドをコードするヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子を含むように前記齧歯類のゲノムを改変することをさらに含む、請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤の抗腫瘍効果または薬物動態特性を評価する方法であって、前記方法が、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の齧歯類に前記薬剤を投与するステップと、
前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤の１つ以上の抗腫瘍特性を決定するアッセイを行うステップと
を含み、必要に応じて、
（ａ）前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤が、抗Ｌａｇ−３抗体である；および／または
（ｂ）前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤が、前記齧歯類に静脈内投与、腹腔内投与または皮下投与される、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２８】
当業者であれば、アッセイまたは本明細書に記述されたその他のプロセスで得られた値に起因する一般的な標準偏差または誤差を理解するであろう。本発明の背景を説明し、その実践に関して追加的詳細を提供するための本明細書の出版物、ウェブサイトおよびその他の参考資料は、参照により本明細書に組み込まれる。
本発明の実施形態の例として、以下の項目が挙げられる。
（項目１）
ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドを発現する齧歯類であって、前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドがヒト部分および内因性部分を含む、齧歯類。
（項目２）
前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドの前記内因性部分が、内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの細胞内部分を含む、項目１に記載の齧歯類。
（項目３）
前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドの前記内因性部分が、内因性Ｌａｇ−３ポリペプチドの膜貫通部分をさらに含む、項目２に記載の齧歯類。
（項目４）
前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドの前記内因性部分が、配列番号２または配列番号４の齧歯類Ｌａｇ−３ポリペプチドに存在する、相当するアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を有する、項目３に記載の齧歯類。
（項目５）
前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドの前記ヒト部分が、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドのアミノ酸２９〜２６０を含む、項目１〜４のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目６）
前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドの前記ヒト部分が、配列番号６のヒトＬＡＧ−３ポリペプチドに存在する、相当するアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜４のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目７）
前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドが、内因性Ｌａｇ−３座位に配置された核酸配列によりコードされる、項目１〜６のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目８）
前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドの内因性部分が、内因性Ｌａｇ−３のエクソン１、５、６、７および８によりコードされる、項目７に記載の齧歯類。
（項目９）
前記齧歯類が、ヒト部分および内因性部分を含むヒト化ＰＤ−１ポリペプチドをさらに発現する、項目１〜８のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目１０）
前記ヒト化ＰＤ−１ポリペプチドの前記内因性部分が、内因性ＰＤ−１ポリペプチドの細胞内部分および／または膜貫通部分を含む、項目９に記載の齧歯類。
（項目１１）
前記ヒト化ＰＤ−１ポリペプチドの前記ヒト部分が、ヒトＰＤ−１ポリペプチドのアミノ酸２６〜１６９を含む、項目９または１０に記載の齧歯類。
（項目１２）
そのゲノムが内因性部分およびヒト部分を含むヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含む齧歯類であって、前記内因性およびヒト部分が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結した、齧歯類。
（項目１３）
前記齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターが、内因性齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターである、項目１２に記載の齧歯類。
（項目１４）
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子の前記内因性部分が、内因性Ｌａｇ−３のエクソン１、５、６、７および８を含む、項目１２または１３に記載の齧歯類。
（項目１５）
前記内因性Ｌａｇ−３遺伝子のエクソン１、５、６、７および８は、配列番号１または配列番号３の齧歯類Ｌａｇ−３  ｍＲＮＡ配列中に存在する、相当するエクソン１、５、６、７および８に対し、少なくとも９５％同一である、項目１４に記載の齧歯類。
（項目１６）
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子の前記ヒト部分が、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの少なくともアミノ酸２９〜２６０をコードする、項目１２〜１５のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目１７）
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子の前記ヒト部分が、ヒトＬＡＧ−３遺伝子のエクソン２〜４を含む、項目１２〜１５のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目１８）
ヒトＬＡＧ−３遺伝子のエクソン２〜４が、配列番号５のヒトＬＡＧ−３  ｍＲＮＡ中に存在する、相当するエクソン２〜４に対し、少なくとも９５％同一である、項目１７に記載の齧歯類。
（項目１９）
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子の前記ヒト部分が、前記齧歯類における発現のためにコドン最適化された配列を含む、項目１７に記載の齧歯類。
（項目２０）
齧歯類の前記ゲノムが、内因性部分およびヒト部分を含むヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子をさらに含み、前記内因性およびヒト部分が齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターと動作可能に連結した、項目１２〜１９のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目２１）
前記齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターが、内因性齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターである、項目２０に記載の齧歯類。
（項目２２）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、内因性Ｐｄｃｄ１エクソン１、４および５を含む、項目２０または２１に記載の齧歯類。
（項目２３）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、内因性Ｐｄｃｄ１エクソン３の全部または一部をさらに含む、項目２２に記載の齧歯類。
（項目２４）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、ヒトＰＤ−１ポリペプチドのアミノ酸２６〜１６９をコードする、項目２０〜２３のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目２５）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、ヒトＰＤＣＤ１遺伝子のエクソン２を含む、項目２０〜２３のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目２６）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、ヒトＰＤＣＤ１エクソン３の全部または一部をさらに含む、項目２５に記載の齧歯類。
（項目２７）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、前記齧歯類における発現のためにコドン最適化された配列を含む、項目２０〜２６のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目２８）
前記齧歯類がラットまたはマウスである、項目１〜２７のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目２９）
項目１〜２８のいずれか一項に記載の齧歯類によって作製されるヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチド。
（項目３０）
前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドが、配列番号８のヒト化ＬＡＧ−３ポリペプチド中に存在するアミノ酸配列に対し、少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、項目２９に記載のヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチド。
（項目３１）
ヒト部分および内因性部分を有するヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドをコードするヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含むゲノムを有する単離された齧歯類の細胞または組織であって、前記部分が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結した、単離された齧歯類の細胞または組織。
（項目３２）
ヒト部分および内因性部分を有するＬａｇ−３ポリペプチドをコードするヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含むゲノムを有する齧歯類胚性幹細胞であって、前記部分が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結した、齧歯類胚性幹細胞。
（項目３３）
項目３２に記載の胚性幹細胞から生成される齧歯類胚。
（項目３４）
内因性Ｌａｇ−３遺伝子座からＬａｇ−３ポリペプチドを発現する齧歯類を作製する方法であって、前記Ｌａｇ−３ポリペプチドがヒト配列を含み、前記方法が、
（ａ）齧歯類胚性幹細胞の内因性Ｌａｇ−３遺伝子にゲノム断片を配置することであって、前記ゲノム断片が、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの全部または一部をコードするヌクレオチド配列を含む、配置することと、
（ｂ）（ａ）で生成された齧歯類胚性幹細胞を得ることと、
（ｃ）（ｂ）の前記齧歯類胚性幹細胞を使用して齧歯類を作製すること、とを含む、方法。
（項目３５）
前記ヒト配列が、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドのアミノ酸２９〜２６０を含む、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
前記ヌクレオチド配列がヒトＬＡＧ−３エクソン２〜４を含む、項目３４または３５のいずれかに記載の方法。
（項目３７）
前記ヌクレオチド配列が、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの少なくともアミノ酸２９−２６０をコードしている、項目３４または３５に記載の方法。
（項目３８）
前記ヌクレオチド配列が、一つ以上の選択マーカーを含む、項目３４〜３７のいずれか一項に記載の方法。
（項目３９）
前記ヌクレオチド配列が、一つ以上の部位特異的組み換え部位を含む、項目３４〜３８のいずれか一項に記載の方法。
（項目４０）
前記方法が、（ａ）の前記齧歯類胚性幹細胞の内因性Ｐｄｃｄ１遺伝子へゲノム断片を配置するステップをさらに含み、前記ゲノム断片は、ヒトＰＤ−１ポリペプチドの全部または一部をコードするヌクレオチド配列を含む、項目３４〜３９のいずれか一項に記載の方法。
（項目４１）
ヒトＰＤ−１ポリペプチドの全部または一部をコードするヌクレオチド配列を含む前記ゲノム断片が、前記ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの全部または一部をコードするヌクレオチド配列を含むゲノム断片を内因性Ｌａｇ−３遺伝子内に配置する前、または配置と同時、または配置した後に、（ａ）の前記齧歯類胚性幹細胞の前記内因性Ｐｄｃｄ１遺伝子内に配置される、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
前記方法が、第二の齧歯類と、（ｃ）の前記齧歯類を交配させることをさらに含み、前記第二の齧歯類が、ヒト部分と内因性部分を含むＰＤ−１ポリペプチドをコードするＰｄｃｄ１遺伝子を含むゲノムを有する、項目３４〜３９のいずれか一項に記載の方法。
（項目４３）
ヒト部分および内因性部分を有するＬａｇ−３ポリペプチドをコードするＬａｇ−３遺伝子を含むゲノムを有する齧歯類を作製する方法であって、前記部分が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結し、前記方法が、
ヒト部分および内因性部分を有するＬａｇ−３ポリペプチドをコードするＬａｇ−３遺伝子を含むように齧歯類のゲノムを改変することであって、前記部分が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結し、それによって前記齧歯類を作製する、改変すること、を含む、方法。
（項目４４）
前記齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターが内因性齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターである、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記ヒト部分がヒトＬａｇ−３ポリペプチドのアミノ酸２９〜２６０を含む、項目４３または４４に記載の方法。
（項目４６）
前記Ｌａｇ−３遺伝子が、ヒトＬＡＧ−３のエクソン２〜４を含むように改変される、項目４３〜４５のいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
前記Ｌａｇ−３遺伝子が、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドの少なくともアミノ酸２９−２６０をコードするよう改変される、項目４３〜４５のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
前記方法が、そのゲノムがヒト部分と内因性部分を含むＰＤ−１ポリペプチドをコードするＰｄｃｄ１遺伝子を含むように、前記齧歯類の前記ゲノムを改変することをさらに含む、項目４３〜４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
ゲノムがヒト部分と内因性部分を含むＰＤ−１ポリペプチドをコードするＰｄｃｄ１  遺伝子を含むように前記齧歯類の前記ゲノムを改変することが、そのゲノムがヒト部分と内因性部分を有するＬａｇ−３ポリペプチドをコードするＬａｇ−３遺伝子を含むように前記齧歯類の前記ゲノムを改変する前、同時、または後に行われる、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
前記方法が、そのゲノムがヒト部分と内因性部分を有するＬＡＧ−３ポリペプチドをコードするＬａｇ−３遺伝子を含む前記齧歯類を第二の齧歯類と交配させることをさらに含み、前記第二の齧歯類が、ヒト部分と内因性部分を含むＰＤ−１ポリペプチドをコードするＰＤ−１ポリペプチドをコードするＰｄｃｄ１遺伝子を含むゲノムを有する、項目４３〜４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目５１）
前記齧歯類がマウスまたはラットである、項目３４〜５０のいずれか一項に記載の方法。
（項目５２）
項目３４〜５１のいずれか一項に記載の方法から得られる齧歯類。
（項目５３）
ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤の抗腫瘍効果を評価する方法であって、前記方法が、
そのゲノムがヒト部分および内因性部分を有するヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドをコードするヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含む齧歯類に前記薬剤を投与するステップであって、前記部分が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結した、投与するステップと、
前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤の１つ以上の抗腫瘍特性を決定するアッセイを行うステップ、とを含む、方法。
（項目５４）
ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤の薬物動態特性を評価する方法であって、前記方法が、
そのゲノムがヒト部分および内因性部分を有するヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドをコードするヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含む齧歯類に前記薬剤を投与するステップであって、前記部分が齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターと動作可能に連結した、投与するステップと、
前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤の一つ以上の薬物動態特性を決定するアッセイを行うステップと、を含む、方法。
（項目５５）
前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドの前記ヒト部分が、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドのアミノ酸２９〜２６０を含む、項目５３または５４に記載の方法。
（項目５６）
前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤がＬａｇ−３拮抗薬である、項目５３〜５５のいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤が、Ｌａｇ−３拮抗薬である、項目５４または５５に記載の方法。
（項目５８）
前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤が、抗Ｌａｇ−３抗体である、項目５３〜５５のいずれか一項に記載の方法。
（項目５９）
前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤が、前記齧歯類に静脈内投与される、項目５３〜５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目６０）
前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤が、前記齧歯類に腹腔内投与される、項目５３〜５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目６１）
前記ヒトＬＡＧ−３を標的とする薬剤が、前記齧歯類に皮下投与される、項目５３〜５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目６２）
前記齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターが、内因性齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターである、項目５３〜６１のいずれか一項に記載の方法。
（項目６３）
齧歯類の前記ゲノムが、内因性部分およびヒト部分を含むヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子をさらに含み、前記内因性およびヒト部分が齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターと動作可能に連結した、項目５３〜６２のいずれか一項に記載の方法。
（項目６４）
前記齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターが、内因性齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターである、項目６３に記載の方法。
（項目６５）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記内因性部分が、内因性Ｐｄｃｄ１エクソン１、４および５を含む、項目６３または６４に記載の方法。
（項目６６）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記内因性部分が、内因性Ｐｄｃｄ１エクソン３の全部または一部をさらに含む、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、ヒトＰＤ−１ポリペプチドのアミノ酸２６〜１６９をコードする、項目６３〜６６のいずれか一項に記載の方法。
（項目６８）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、ヒトＰＤＣＤ１遺伝子のエクソン２を含む、項目６３〜６６のいずれか一項に記載の方法。
（項目６９）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、ヒトＰＤＣＤ１エクソン３の全部または一部をさらに含む、項目６８に記載の方法。
（項目７０）
前記ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子の前記ヒト部分が、前記齧歯類における発現のためにコドン最適化された配列を含む、項目６３〜６９に記載の方法。
（項目７１）
前記齧歯類がマウスまたはラットである、項目５３〜７０のいずれか一項に記載の方法。
（項目７２）
そのゲノムが、ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子を含む齧歯類であって、前記遺伝子が、
内因性Ｌａｇ−３エクソン１、５、６、７および８を含む内因性部分と、
ヒトＬＡＧ−３遺伝子のエクソン２〜４を含むヒト部分と、を含み、
前記内因性部分とヒト部分は、内因性齧歯類Ｌａｇ−３プロモーターに動作可能に連結され、前記齧歯類は、ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドのアミノ酸２９〜２６０を含むヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドを発現する、齧歯類。
（項目７３）
前記齧歯類により発現されるヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドが、配列番号８のヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチド中に存在するアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、項目７２に記載の齧歯類。
（項目７４）
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子の前記ヒト部分が、前記齧歯類における発現のためにコドン最適化された配列を含む、項目７２または７３に記載の齧歯類。
（項目７５）
前記齧歯類の前記ゲノムが、ヒト化Ｐｄｃｄ１遺伝子をさらに含み、前記遺伝子が、
内因性Ｐｄｃｄ１エクソン１、３の全部または一部、エクソン４および５を含む内因性部分と、
ヒトＰＤＣＤ１遺伝子のエクソン２およびエクソン３の全部または一部を含むヒト部分と、を含み、
前記内因性部分とヒト部分は、内因性齧歯類Ｐｄｃｄ１プロモーターに動作可能に連結され、前記齧歯類が、ヒトＰＤ−１ポリペプチドのアミノ酸２６〜１６９を含むＰＤ−１ポリペプチドを発現する、項目７２〜７６のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目７６）
前記ヒト部分が、前記齧歯類における発現のためにコドン最適化された配列を含む、項目７５に記載の齧歯類。
（項目７７）
前記齧歯類が、ラットまたはマウスである、項目７４〜７６のいずれか一項に記載の齧歯類。
（項目７８）
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子のヒト部分が、前記ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドのイムノグロブリン様ドメイン１および２のアミノ酸配列をコードするか、または前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドのヒト部分が、前記ヒトＬＡＧ−３ポリペプチドのイムノグロブリン様ドメイン１および２のアミノ酸配列を含む、項目１〜２８、５２、および７２〜７７のいずれか一項に記載の齧歯類、または項目３４〜５１および５３〜７１のいずれか一項に記載の方法。
（項目７９）
前記ヒト化Ｌａｇ−３遺伝子の前記ヒト部分が、ＭＨＣＩＩ結合に関与するヒトＬＡＧ−３ポリペプチドのアミノ酸配列をコードするか、または前記ヒト化Ｌａｇ−３ポリペプチドの前記ヒト部分が、ＭＨＣＩＩ結合に関与するヒトＬＡＧ−３ポリペプチドのアミノ酸配列を含む、項目１〜２８、５２、および７２〜７７のいずれか一項に記載の齧歯類、ならびに項目３４〜５１および５３〜７１のいずれか一項に記載の方法。