【手続補正書】
【提出日】平成20年10月28日(2008.10.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
赤血球組成物の処理方法であって、赤血球組成物と以下のもの：
（ａ）核酸結合リガンドと、核酸と反応することができる求電子性基であるか、または該基を構成する官能基とを含む、存在する場合には病原体を不活性化するための、有効量の病原体不活化化合物；
（ｂ）該求電子性基と反応することができるチオールを含む、有効量のクエンチャー；および
（ｃ）適当な塩基であって、該赤血球組成物、該病原体不活化化合物、該クエンチャーおよび該塩基を含む混合物において、該塩基を有しない混合物と比べて少なくとも２５％、処理された赤血球組成物に対する抗病原体不活性化化合物の抗体の結合のレベルを低下させるのに充分な量の適当な塩基
を混合することを含む、方法。
【請求項２】
前記病原体不活化化合物と赤血球との前記望ましくない反応が、該病原体不活化化合物による該赤血球の表面の改変である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記塩基および前記クエンチャーの両方が前記赤血球組成物と、前記病原体不活化化合物と該赤血球組成物との混合前、該混合と同時、または該混合後約３０分以内に混合される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記塩基および前記クエンチャーを、該塩基または該クエンチャーのいずれかと前記赤血球組成物と混合する前に互いに混合する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記クエンチャーおよび前記塩基がともに、該クエンチャーを構成する塩基性の塩によって提供される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記塩基がＮａＯＨである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記塩基が塩基性バッファーである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物中の該クエンチャーの濃度が２ｍＭより高い、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物中の該クエンチャーの濃度が約１０ｍＭ〜３０ｍＭの範囲内にある、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物が室温で約７．０〜８．５のｐＨを有する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記クエンチャーがシステインまたはシステイン誘導体を含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記クエンチャーがグルタチオンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記官能基が、マスタード、マスタード中間体およびマスタード同等物からなる群より選択される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記病原体不活化化合物が、β−アラニン、Ｎ−（アクリジン−９−イル）、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記処理が、前記赤血球組成物中の病原体汚染物質の少なくとも１ｌｏｇの不活化をもたらす、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む、得られる混合物中の該病原体不活化化合物の濃度を低下させる最終工程をさらに含む、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法によって作製される赤血球含有組成物。
【請求項１８】
赤血球組成物の処理方法であって、赤血球組成物と以下のもの：
（ａ）核酸結合リガンドと、核酸と反応することができる求電子性基であるか、または該基を構成する官能基とを含む、存在する場合には病原体を不活性化するための、有効量の病原体不活化化合物；
（ｂ）該求電子性基と反応することができるチオールを含む、有効量のクエンチャー；および
（ｃ）適当な塩基であって、該赤血球組成物、該病原体不活化化合物、該クエンチャーおよび該塩基を含む得られる混合物のｐＨを、室温において６．７より高くに増大させるのに充分な量の適当な塩基、
を混合することを含む、方法。
【請求項１９】
前記塩基および前記クエンチャーの両方が、前記赤血球組成物と、前記病原体不活化化合物と該赤血球組成物との混合前、該混合と同時、または該混合後約３０分以内に混合される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記塩基および前記クエンチャーを、該塩基または該クエンチャーのいずれかと前記赤血球組成物とを混合する前に互いに混合する、請求項１８または１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記クエンチャーおよび前記塩基がともに、該クエンチャーを構成する塩基性の塩によって提供される、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記塩基がＮａＯＨである、請求項１８〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記塩基が塩基性バッファーである、請求項１８〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物中の該クエンチャーの濃度が２ｍＭより高い、請求項１８〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物中の該クエンチャーの濃度が約１０ｍＭ〜３０ｍＭの範囲内にある、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物が室温で約７．０〜８．５のｐＨを有する、請求項１８〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記クエンチャーがシステインまたはシステイン誘導体を含む、請求項１８〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記クエンチャーがグルタチオンである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記官能基が、マスタード、マスタード中間体およびマスタード同等物からなる群より選択される、請求項１８〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記病原体不活化化合物が、β−アラニン、Ｎ−（アクリジン−９−イル）、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記処理が、前記赤血球組成物中の病原体汚染物質の少なくとも１ｌｏｇの不活化をもたらす、請求項１８〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物中の該病原体不活化化合物の濃度を低下させる最終工程をさらに含む、請求項１８〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
請求項１８〜３２のいずれか１項に記載の方法によって作製される赤血球含有組成物。
【請求項３４】
（ａ）ｉ）反応性求電子性基であるか、または該基を構成する官能基を含む、存在する場合には病原体を不活性化するための、有効量の病原体不活化化合物、ｉｉ）該病原体不活化化合物の該反応性求電子性基と反応することができるチオール基を含む、有効量のクエンチャー、およびｉｉｉ）赤血球含有組成物であって、病原体で汚染されている可能性がある赤血球組成物を提供すること；および
（ｂ）該病原体不活化化合物および該クエンチャーを赤血球含有組成物と混合することであって、ここで、該赤血球組成物、該病原体不活化化合物、該クエンチャーおよび該塩基を含む得られる混合物中の該クエンチャーの濃度が２ｍＭより高いこと、
を含み、
得られる混合物の室温でのｐＨが約７．０〜８．５の範囲内にある、
赤血球組成物の処理方法。
【請求項３５】
（ｃ）赤血球含有組成物のｐＨを、前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物の室温でのｐＨが約７．０〜８．５の範囲内となるように調整する工程をさらに含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項３６】
前記クエンチャーが、前記赤血球組成物への該クエンチャーの添加前に少なくとも約１当量の適当な塩基で中和され、該赤血球含有組成物のｐＨが、該中和されたクエンチャーの添加によって調整される、請求項３４および３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
得られる混合物が室温で約７．２〜８．５の範囲内のｐＨを有する、請求項３４〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物中のクエンチャーの濃度が約１０ｍＭ〜約３０ｍＭの範囲内にある、請求項３４〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記クエンチャーがシステインまたは適当なシステイン誘導体を含む、請求項３４〜３８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記クエンチャーがグルタチオンである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記反応性求電子性基が、マスタード、マスタード中間体およびマスタード同等物からなる群より選択される、請求項３４〜４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
前記病原体不活化化合物が、β−アラニン、Ｎ−（アクリジン−９−イル）、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記処理が、前記赤血球組成物中の病原体汚染物質の少なくとも１ｌｏｇの不活化をもたらす、請求項３４〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物中の該病原体不活化化合物の濃度を低下させる最終工程をさらに含む、請求項３４〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
請求項３４〜４４のいずれか１項に記載の方法によって作製される赤血球組成物。
【請求項４６】
以下の順に、
（ａ）ｉ）有効量のβ−アラニン、Ｎ−（アクリジン−９−イル）、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル、ｉｉ）有効量の中和グルタチオン、およびｉｉｉ）赤血球含有組成物であって、病原体で汚染されている可能性がある赤血球組成物を提供すること；
（ｂ）該中和グルタチオンを該赤血球含有組成物と混合すること；
（ｃ）中和グルタチオンと赤血球含有組成物との混合物を適切な時間枠インキュベートすること；および
（ｄ）該β−アラニン、該Ｎ−（アクリジン−９−イル）、該２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルを、中和グルタチオンと赤血球含有組成物との混合物と混合すること
を含み、ここで、病原体は、該赤血球含有組成物中に存在する場合には、少なくとも１ｌｏｇ不活化される、
赤血球組成物の処理方法。
【請求項４７】
クエンチャーの存在下での病原体不活化化合物による赤血球含有組成物の処理中において、該病原体不活化化合物と該赤血球との望ましくない副作用のクエンチングを改善する方法であって、ここで、該クエンチャーがチオールを含み、そしてここで、該病原体不活化化合物が、該クエンチャーの該チオールと反応性である求電子体であるか、または該求電子体を構成する官能基を含む方法であって、該方法は、該赤血球組成物、該病原体不活化化合物および該クエンチャーを含む反応混合物のｐＨを増大させることを含む、方法。
【請求項４８】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む反応混合物中の該クエンチャーの濃度を増大させる工程をさらに含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記病原体不活化化合物と赤血球との望ましくない前記反応が、該病原体不活化化合物による該赤血球の表面の改変である、請求項４７または４８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
（ａ）赤血球；
（ｂ）核酸結合リガンドと反応性求電子性基とを含む病原体不活化化合物；および
（ｃ）該求電子性基と反応することができるチオール基を含むクエンチャー
を含む組成物であって、
該クエンチャーが２ｍＭより高い濃度であり、該組成物のｐＨが約７．０〜８．５の範囲内にある、
組成物。
【請求項５１】
核酸結合リガンドと、求電子性基であるか、または該基を構成する官能基とを含む病原体不活化化合物、チオール基を含むクエンチャー、および少なくとも約１当量の塩基を含むキットであって、当量は、該キット内のクエンチャーのモル量に相当するモル量を意味する、キット。
【請求項５２】
請求項４６に記載の方法によって作製される赤血球組成物。
【請求項５３】
前記塩基が少なくとも約０．５当量の塩を含み、ここで当量とは、前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物中のクエンチャーのモル量に相当するモル量を意味する、請求項１〜１６、１８〜３２、および３４〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
前記塩基が少なくとも約１当量の塩を含み、ここで当量とは、前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物中のクエンチャーのモル量に相当するモル量を意味する、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物は、約６．７以上の室温でのｐＨを有する、請求項１〜９、または１１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物は、約６．７の室温でのｐＨを有する、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物における、処理された赤血球組成物に対する抗病原体不活性化化合物抗体結合のレベルが、該塩基を有しない混合物と比べて少なくとも５０％低下される、請求項１〜１６、１８〜３２、および３４〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５８】
前記赤血球組成物、前記病原体不活化化合物、前記クエンチャーおよび前記塩基を含む得られる混合物における、処理された赤血球組成物に対する抗病原体不活性化化合物抗体結合のレベルが、該塩基を有しない混合物と比べて少なくとも７５％低下される、請求項５７に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
別の態様では、本発明は、赤血球組成物と以下のもの：（ａ）核酸結合リガンドと、核酸と反応することができる求電子性基であるか、または該基を構成する官能基とを含む病原体不活化化合物；（ｂ）該求電子性基と反応することができるチオールを含むクエンチャー；および（ｃ）適当な塩基であって、赤血球組成物、病原体不活化化合物、クエンチャーおよび該塩基を含む混合物において、該塩基を有しない混合物（すなわち、（ｃ）の塩基が添加されていない以外は第１のものと同じ成分を含む第２の混合物）と比べて、該混合物において病原体不活化化合物と赤血球とのの望ましくない副作用のレベルを低下させるのに充分な量の適当な塩基を含む、赤血球組成物の処理方法を提供する。一部の実施形態では、病原体不活化化合物と赤血球との望ましくない反応が、病原体不活化化合物による赤血球の表面の改変である。一部の実施形態では、該塩基およびクエンチャーを赤血球組成物と、病原体不活化化合物を赤血球組成物と合わせる前、合わせるのと同時、または合わせた後１時間、約３０分、約２０分、約１０分、約５分、約２分、または約１分以内に合わせる。一部の実施形態では、該塩基およびクエンチャーを赤血球組成物と、病原体不活化化合物と赤血球組成物との混合前に混合する。一部の実施形態では、該塩基およびクエンチャーを、該塩基またはクエンチャーのいずれかと赤血球組成物と混合する前に互いに混合する。一部の実施形態では、該クエンチャーを構成する塩基性の塩は、クエンチャーおよび該塩基の両方を提供し、これらは、ともに、該クエンチャーを構成する塩基性の塩によって提供される。一部の実施形態では、該塩基がＮａＯＨである。一部の実施形態では、該塩基が塩基性バッファーである。一部の実施形態では、少なくとも約０．５当量、少なくとも約１．０、または少なくとも約２当量の塩基が添加され、ここで、当量は、混合物中のクエンチャーのモル量に相当するモル量を意味する。一部の実施形態では、該塩基が少なくとも約１当量の塩基を構成する。該方法の一部の実施形態では、室温での適当なｐＨ範囲は、約６．８〜８．５、約７．０〜８．５、約７．２〜８．５、または約７．２〜８．０である。一部の実施形態では、得られる混合物が室温で約７．０〜８．５のｐＨを有する。一部の実施形態では、得られる混合物中のクエンチャーの濃度が２ｍＭより大きく、約４ｍＭより大きく、または約１０ｍＭより大きい。一部の実施形態では、得られる混合物中のクエンチャーの濃度が約２ｍＭ〜約４０ｍＭの範囲である。一部の実施形態では、得られる混合物中のクエンチャーの濃度が約４ｍＭ〜約４０ｍＭ、約１０〜約３０ｍＭの範囲である。例えば、一部の実施形態では、得られる混合物中のクエンチャーの濃度が約１０ｍＭ〜３０ｍＭの範囲である。一部の実施形態では、クエンチャーが酸性である。一部の実施形態では、クエンチャーが、システインまたはシステイン誘導体、例えばグルタチオンなどを含むものである。一部の実施形態では、該官能基が、マスタード、マスタード中間体およびマスタード同等物からなる群より選択される。例えば、一部の実施形態では、病原体不活化化合物が、β−アラニン、Ｎ−（アクリジン−９−イル）、２−［ビ���（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルである。一部の実施形態では、該処理により、赤血球組成物において少なくとも１ｌｏｇの病原体汚染物質の不活化がもたらされる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３０】
さらに別の実施形態では、本発明は、赤血球組成物と以下のもの：（ａ）核酸結合リガンドと、核酸と反応することができる求電子性基であるか、または該基を構成する官能基とを含む病原体不活化化合物；（ｂ）該求電子性基と反応することができるチオールを含むクエンチャー；および（ｃ）適当な塩基であって、赤血球組成物、病原体不活化化合物、クエンチャーおよび該塩基を含む混合物のｐＨを、該塩基を有しない混合物（すなわち、該混合物に（ｃ）の塩基が添加されていない以外は第１のものと同じ成分を含む第２の混合物）と比べて増大させるのに充分な量の適当な塩基を混合することを含む、赤血球組成物の処理方法を提供する。一部の実施形態では、（例えば、クエンチャーが酸性化合物である一部の実施形態では）、充分な量の適当な塩基を添加して、混合物のｐＨを、少なくとも塩基またはクエンチャーのいずれかを有しない混合物のｐＨあたりまで増大させる。一部の実施形態では、該塩基およびクエンチャーを赤血球組成物と、病原体不活化化合物を赤血球組成物と合わせる前、合わせるのと同時、または合わせた後１時間、約３０分、約２０分、約１０分、約５分、約２分、または約１分以内に合わせる。一部の実施形態では、該塩基およびクエンチャーを赤血球組成物と、病原体不活化化合物と赤血球組成物との混合前に混合する。一部の実施形態では、該塩基およびクエンチャーを、該塩基またはクエンチャーのいずれかと赤血球組成物と混合する前に互いに混合する。一部の実施形態では、該クエンチャーを構成する塩基性の塩は、クエンチャーおよび該塩基の両方を提供し、これらは、ともに、該クエンチャーを構成する塩基性の塩によって提供される。一部の実施形態では、該塩基がＮａＯＨである。一部の実施形態では、該塩基が塩基性バッファーである。一部の実施形態では、少なくとも約０．５当量、少なくとも約１．０、または少なくとも約２当量の塩基が添加され、ここで、当量は、混合物中のクエンチャーのモル量に相当するモル量を意味する。一部の実施形態では、該塩基が少なくとも約１当量の塩基を構成する。該方法の一部の実施形態では、室温での適当なｐＨ範囲は、約６．８〜８．５、約７．０〜８．５、約７．２〜８．５、または約７．２〜８．０である。一部の実施形態では、得られる混合物が室温で約７．０〜８．５のｐＨを有する。一部の実施形態では、得られる混合物中のクエンチャーの濃度が２ｍＭより大きく、約４ｍＭより大きく、または約１０ｍＭより大きい。一部の実施形態では、得られる混合物中のクエンチャーの濃度が約２ｍＭ〜約４０ｍＭの範囲である。一部の実施形態では、得られる混合物中のクエンチャーの濃度が約４ｍＭ〜約４０ｍＭ、約１０〜約３０ｍＭの範囲である。例
えば、一部の実施形態では、得られる混合物中のクエンチャーの濃度が約１０ｍＭ〜３０ｍＭの範囲である。一部の実施形態では、クエンチャーが酸性である。一部の実施形態では、クエンチャーが、システインまたはシステイン誘導体、例えばグルタチオンなどを含むものである。一部の実施形態では、該官能基が、マスタード、マスタード中間体およびマスタード同等物からなる群より選択される。例えば、一部の実施形態では、病原体不活化化合物が、β−アラニン、Ｎ−（アクリジン−９−イル）、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステルである。一部の実施形態では、該処理により、赤血球組成物において少なくとも１ｌｏｇの病原体汚染物質の不活化がもたらされる。