【手続補正書】
【提出日】平成19年9月3日(2007.9.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
検体中の赤血球を溶血させずに酵母様真菌の細胞膜に損傷を与え、更に蛍光色素により蛍光染色処理を施して試料液を調製する試料調製ステップ、
試料液中の粒子から、粒子の大きさを反映する第一の情報と、粒子の蛍光染色度合いを反映する第二の情報を検出する検出ステップ、
検出した第一、第二の情報に基づき、酵母様真菌と赤血球を判別する判別ステップ、
を含む検体中粒子分析方法。
【請求項２】
前記試料調製ステップにおいて、ベンゼン環を有する非イオン性有機化合物によって、検体中の赤血球を溶血させずに酵母様真菌の細胞膜に損傷を与える、請求項１に記載の検体中粒子分析方法。
【請求項３】
前記試料調製ステップにおいて、ベンゼン環を有する非イオン性有機化合物と、蛍光色素と、検体とを混合することにより試料液を調製する、請求項２に記載の検体中粒子分析方法。
【請求項４】
前記試料調製ステップにおいて、ベンゼン環を有する非イオン性有機化合物と検体を混合し、得られた混合液と蛍光色素とを混合することにより試料液を調製する、請求項２に記載の検体中粒子分析方法。
【請求項５】
前記ベンゼン環を有する非イオン性有機化合物が第一の試薬に含有され、前記蛍光色素が第二の試薬に含有される、請求項２〜４のいずれかに記載の検体中粒子分析方法。
【請求項６】
前記ベンゼン環を有する非イオン性有機化合物は、芳香族アルコール、酢酸フェニル、又はベンゾチアゾール化合物である、請求項２〜５のいずれかに記載の検体中粒子分析方法。
【請求項７】
前記非イオン性有機化合物は、ベンジルアルコール、βフェネチルアルコール、フェノール、１−フェノキシ−２−プロパノール、２−フェノキシエタノール、酢酸フェニル、２−アミノベンゾチアゾール又はベンゾチアゾールである、請求項２〜５のいずれかに記載の検体中粒子分析方法。
【請求項８】
前記蛍光染色処理はｐＨが７．０〜９．０の環境下で行われる、請求項１〜７のいずれかに記載の検体中粒子分析方法。
【請求項９】
前記第一の情報は、光を照射された粒子から発せられる散乱光の強度である、請求項１〜８のいずれかに記載の検体中粒子分析方法。
【請求項１０】
前記第二の情報は、光を照射された粒子から発せられる蛍光の強度である、請求項１〜９のいずれかに記載の検体中粒子分析方法。
【請求項１１】
前記蛍光色素は、以下の式
【化１】
2006105625.tif 000001
〔式中、Ａは−Ｏ−，−Ｓ−又は−Ｃ（ＣＨ３）２−、Ｒは低級アルキル基、Ｘはハロゲン、Ｙは−ＣＨ＝又は−ＮＨ−、ｎは０又は１、Ｂは、
【化２】
2006105625.tif 000002
（式中ＡとＲは上記と同義である）又は２つの低級アルコキシ基もしくは１つのジ低級アルキルアミノ基（この低級アルキルはシアノ基で置換されていてもよい）で置換されたフェニル基である。〕から選ばれる請求項１〜１０のいずれかに記載の検体中粒子分析方法。
【請求項１２】
前記検体は尿である、請求項１〜１１のいずれかに記載の検体中粒子分析方法。
【請求項１３】
検体中の赤血球を溶血させずに酵母様真菌の細胞膜に損傷を与える物質を含む第一の試薬と、蛍光色素を含む第二の試薬と、検体と、を混合して試料液を調製する試料調製部、
試料液中の粒子から、粒子の大きさを反映する第一の情報と、粒子の蛍光染色度合いを反映する第二の情報を検出する検出部、
検出した第一、第二の情報に基づき、酵母様真菌と赤血球を判別する制御部、
を有する検体中粒子分析装置。
【請求項１４】
前記試料調製部は、
第一の試薬を収容する第一試薬収容部、
第二の試薬を収容する第二試薬収容部、
検体を収容する検体収容部、
検体と第一、第二の試薬を混合する混合部、
検体収容部に収容された検体と、第一試薬収容部に収容された第一の試薬と、第二試薬収容部に収容された第二の試薬と、を混合部へ供給する供給機構、
を有する、請求項１３に記載の検体中粒子分析装置。
【請求項１５】
前記混合部が、
検体と第一試薬とを混合し、
得られた混合液と第二試薬とを混合する、請求項１４に記載の検体中粒子分析装置。
【請求項１６】
前記検出部は、
試料液を流すためのフローセル、
フローセル中を流れる試料液に光を照射するための光源、
光を照射された試料液中の粒子から発せられた散乱光を前記第一の情報として検出する散乱光受光部、
光を照射された試料液中の粒子から発せられた蛍光を前記第二の情報として検出する蛍光受光部、
を有する、請求項１４又は１５に記載の検体中粒子分析装置。
【請求項１７】
検体中の赤血球を溶血させずに酵母様真菌の細胞膜に損傷を与える物質を含む第一の試薬と、蛍光色素を含む第二の試薬とを含む、検体中粒子分析用試薬。
【請求項１８】
前記第一の試薬は、検体中の赤血球を溶血させずに酵母様真菌の細胞膜に損傷を与える物質として、ベンゼン環を有する非イオン性有機化合物を含む、請求項１７に記載の検体中粒子分析用試薬。
【請求項１９】
前記ベンゼン環を有する非イオン性有機化合物は、芳香族アルコール、酢酸フェニル、又はベンゾチアゾール化合物である、請求項１８に記載の検体中粒子分析用試薬。
【請求項２０】
前記非イオン性有機化合物は、ベンジルアルコール、βフェネチルアルコール、フェノール、１−フェノキシ−２−プロパノール、２−フェノキシエタノール、酢酸フェニル、２−アミノベンゾチアゾール又はベンゾチアゾールである、請求項１８に記載の検体中粒子分析用試薬。
【請求項２１】
前記蛍光色素は、以下の式
【化４】
2006105625.tif 000003
〔式中、Ａは−Ｏ−，−Ｓ−又は−Ｃ（ＣＨ3 ）2 −、Ｒは低級アルキル基、Ｘはハロゲン、Ｙは−ＣＨ＝又は−ＮＨ−、ｎは０又は１、Ｂは、
【化５】
2006105625.tif 000004
（式中ＡとＲは上記と同義である）又は２つの低級アルコキシ基もしくは１つのジ低級アルキルアミノ基（この低級アルキルはシアノ基で置換されていてもよい）で置換されたフェニル基である。〕から選ばれる、請求項１７〜２０のいずれかに記載の検体中粒子分析用試薬。
【請求項２２】
前記第一の試薬は、ｐＨが７．０〜９．０の範囲にあることを特徴とする、請求項１７〜２１のいずれかに記載の検体中粒子分析用試薬。
【請求項２３】
検体中の赤血球を溶血させずに酵母様真菌の細胞膜に損傷を与える物質及び蛍光色素を含む、検体中粒子分析用試薬。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
本発明は、検体中の赤血球を溶血させずに酵母様真菌の細胞膜に損傷を与え、更に蛍光色素により蛍光染色処理を施して試料液を調製する試料調製ステップ、試料液中の粒子から、粒子の大きさを反映する第一の情報と、粒子の蛍光染色度合いを反映する第二の情報を検出する検出ステップ、検出した第一、第二の情報に基づき、酵母様真菌と赤血球を判別する判別ステップ、を含む検体中粒子分析方法を提供する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
上記前記試料調製ステップにおいて、ベンゼン環を有する非イオン性有機化合物によって、検体中の赤血球を溶血させずに酵母様真菌の細胞膜に損傷を与えることができる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
また本発明は、検体中の赤血球を溶血させずに酵母様真菌の細胞膜に損傷を与える物質を含む第一の試薬と、蛍光色素を含む第二の試薬と、検体と、を混合して試料液を調製する試料調製部、試料液中の粒子から、粒子の大きさを反映する第一の情報と、粒子の蛍光染色度合いを反映する第二の情報を検出する検出部、検出した第一、第二の情報に基づき、酵母様真菌と赤血球を判別する制御部、を有する検体中粒子分析装置を提供する。