【誤訳訂正書】
【提出日】平成31年3月1日(2019.3.1)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１０】
一つの態様によると、前記１種類以上のＲＮＡはガイドＲＮＡである。一つの態様によると、前記１種類以上のＲＮＡはｔｒａｃｒＲＮＡ‐ｃｒＲＮＡ融合体である。一つの態様によると、前記ガイドＲＮＡはスペーサー配列とトレーサーメイト配列（tracer mate sequence）を含む。前記ガイドＲＮＡは、その一部がｔｒａｃｒメイト配列にハイブリダイズするｔｒａｃｒ配列を含んでもよい。前記ガイドＲＮＡはトレーサーメイト配列とｔｒａｃｒ配列を連結（link）してｔｒａｃｒＲＮＡ‐ｃｒＲＮＡ融合体を作製するリンカー核酸配列を含んでもよい。前記スペーサー配列は、例えばハイブリダイゼーションにより、標的ＤＮＡに結合する。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８０】
一つの態様によると、転写活性化ドメインをヌクレアーゼ欠損Ｃａｓ９またはガイドＲＮＡのどちらかに連結することによってヒト細胞においてのＲＮＡ誘導性ゲノム制御を可能にする、遺伝子改変されたＣａｓ９‐ｇＲＮＡシステムが提供される。本開示の一つの態様によると、１つ以上の転写制御タンパク質またはドメイン（そのような用語は互換的に使用される）がヌクレアーゼ欠損型Ｃａｓ９または１つ以上のガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）に結びつけられ、あるいはこれ以外のやり方で接続される。それらの転写制御ドメインは標的座位に対応する。したがって、本開示の態様は、転写制御ドメインをＣａｓ９ＮまたはｇＲＮＡのどちらかに融合し、接続し、または結びつけることによりそのようなドメインを標的座位に局在させるための方法および材料を含む。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８１】
一つの態様によると、転写活性化可能なＣａｓ９Ｎ融合タンパク質が提供される。一つの態様によると、ＶＰ６４活性化ドメイン（ここにその全体が参照により援用されるＺｈａｎｇら著、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ誌、第２９巻、１４９〜１５３頁（２０１１年）を参照のこと）がＣａｓ９ＮのＣ末端に結びつけられ、融合され、接続され、あるいはこれら以外のやり方で連結（tether）される。一つの方法によると、当該Ｃａｓ９Ｎタンパク質により標的ゲノムＤＮＡ部位に転写制御ドメインが提供される。一つの方法によると、転写制御ドメインに融合したＣａｓ９Ｎが１つ以上のガイドＲＮＡと共に細胞内に提供される。融合した転写制御ドメインを有するＣａｓ９Ｎが、標的ゲノムＤＮＡに、または標的ゲノムＤＮＡ近傍に結合する。１つ以上のガイドＲＮＡが、標的ゲノムＤＮＡに、または標的ゲノムＤＮＡ近傍に結合する。転写制御ドメインが標的遺伝子の発現を制御する。特定の態様によると、Ｃａｓ９Ｎ−ＶＰ６４融合体は、プロモーター近辺の配列を標的とするｇＲＮＡと組み合わさった時に、レポーターコンストラクトの転写を活性化し、それによってＲＮＡ誘導性転写を活性化した。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８２】
一つの態様によると、転写活性化可能なｇＲＮＡ融合タンパク質が提供される。一つの態様によると、ＶＰ６４活性化ドメインがｇＲＮＡに結びつけられ、融合され、接続され、あるいはこれら以外のやり方で連結（tether）される。一つの方法によると、そのｇＲＮＡによりゲノムＤＮＡ部位を標的とする転写制御ドメインが提供される。一つの方法によると、転写制御ドメインに融合したｇＲＮＡがＣａｓ９Ｎタンパク質と共に細胞内に提供される。当該Ｃａｓ９Ｎは、標的ゲノムＤＮＡに、または標的ゲノムＤＮＡ近傍に結合する。転写制御タンパク質またはドメインと融合した、１つ以上のガイドＲＮＡが、標的ゲノムＤＮＡに、または標的ゲノムＤＮＡ近傍に結合する。転写制御ドメインが標的遺伝子の発現を制御する。特定の態様によると、Ｃａｓ９Ｎタンパク質と、転写制御ドメインが融合したｇＲＮＡとが、レポーターコンストラクトの転写を活性化し、それによってＲＮＡ誘導性転写を活性化した。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０３】
標的核酸には、本明細書に記載される共局在複合体が制御またはニックの形成のどちらかにとって有用であり得るあらゆる核酸配列が含まれる。標的核酸には遺伝子が含まれる。本開示の目的のため、二本鎖ＤＮＡなどのＤＮＡは標的核酸を含むことができ、共局在複合体はその共局在複合体が標的核酸に対する所望の作用を有し得るようにその標的核酸で、またはそれに隣接して、またはその近傍でそのＤＮＡに結合するか、あるいはこれら以外のやり方でそのＤＮＡと共局在することができる。そのような標的核酸には内在性の（または天然の）核酸および外来性の（または外来の）核酸が含まれ得る。当業者は標的核酸を含むＤＮＡに共局在するガイドＲＮＡおよびＣａｓ９タンパク質を本開示に基づいて容易に特定またはデザインすることができる。当業者は標的核酸を含むＤＮＡに同様に共局在する転写制御因子タンパク質またはドメインをさらに特定することができる。ＤＮＡにはゲノムＤＮＡ、ミトコンドリアＤＮＡ、ウイルスＤＮＡまたは外来性ＤＮＡが含まれる。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０６】
疾患および有害な健康状態は特定のタンパク質の発現の異常な喪失を特徴とするものである。そのような疾患または有害な健康状態は特定のタンパク質の上方制御によって治療され得る。以上より、疾患または有害な健康状態を治療する方法であって、本明細書に記載される共局在複合体が標的核酸を含むＤＮＡに会合その他のやり方で結合し、共局在複合体の転写活性化因子が標的核酸の発現を上方制御する前記方法を提供する。例えば、褐色脂肪分化および代謝取込みの増加を促進するＰＲＤＭ１６と他の遺伝子の上方制御を用いてメタボリックシンドロームまたは肥満を治療することができる。抗炎症性遺伝子の活性化は自己免疫疾患および心血管疾患において有用である。腫瘍抑制遺伝子の活性化は癌の治療に有用である。当業者は本開示に基づいてそのような疾患および有害な健康状態を容易に特定する。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的核酸を含むＤＮＡに相補的である１種類以上のガイドＲＮＡをコードする第１外来核酸を細胞に導入すること、
前記ＤＮＡに結合し且つ前記１種類以上のガイドＲＮＡによってガイドされるヌクレアーゼ欠損（ｎｕｃｌｅａｓｅ−ｎｕｌｌ）Ｃａｓ９タンパク質をコードする第２外来核酸を前記細胞に導入すること、
転写制御因子タンパク質またはドメインをコードする第３外来核酸を前記細胞に導入することを含み、
前記１種類以上のガイドＲＮＡ、前記ヌクレアーゼ欠損Ｃａｓ９タンパク質および前記転写制御因子タンパク質またはドメインが発現し、前記１種類以上のガイドＲＮＡ、前記ヌクレアーゼ欠損Ｃａｓ９タンパク質および前記転写制御因子タンパク質またはドメインが前記ＤＮＡに共局在し、前記転写制御因子タンパク質またはドメインが前記標的核酸の発現を制御し、
前記１種類以上のガイドＲＮＡをコードする前記第１外来核酸が連結（tether）配列をさらにコードし、前記転写制御因子タンパク質またはドメインをコードする前記第３外来核酸が前記転写制御因子タンパク質またはドメインに融合した連結配列結合ドメインをさらにコードする、
細胞において標的核酸の発現を制御する方法（ただし、該方法が人体内で行われる場合を除く）。
【請求項２】
ヌクレアーゼ欠損Ｃａｓ９タンパク質をコードする前記第２外来核酸が、前記ヌクレアーゼ欠損Ｃａｓ９タンパク質に融合した前記転写制御因子タンパク質またはドメインをさらにコードする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記連結配列がＲＮＡ結合ドメインの標的であり、
前記連結配列結合ドメインがＲＮＡ結合ドメインである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記細胞が真核細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記細胞が酵母細胞、植物細胞、または動物細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記転写制御因子タンパク質またはドメインが転写活性化因子である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記転写制御因子タンパク質またはドメインが前記標的核酸の発現を上方制御する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記転写制御因子タンパク質またはドメインが、疾患または有害な健康状態を治療するために前記標的核酸の発現を上方制御する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記標的核酸が疾患または有害な健康状態と関連する、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記１種類以上のガイドＲＮＡがｔｒａｃｒＲＮＡ‐ｃｒＲＮＡ融合体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＤＮＡがゲノムＤＮＡ、ミトコンドリアＤＮＡ、ウイルスＤＮＡ、または外来性ＤＮＡである、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記連結配列が２コピーのＭＳ２バクテリオファージ・コートプロテイン結合性ＲＮＡステムループを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記連結配列結合ドメインがＭＳ２バクテリオファージ・コートプロテインである、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記連結配列がアプタマーである、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
標的核酸を含むＤＮＡに相補的である１種類以上のガイドＲＮＡをコードする第１外来核酸、
ヌクレアーゼ欠損Ｃａｓ９タンパク質をコードする第２外来核酸、および
転写制御因子タンパク質またはドメインをコードする第３外来核酸を含み、
前記１種類以上のガイドＲＮＡ、前記ヌクレアーゼ欠損Ｃａｓ９タンパク質、および前記転写制御因子タンパク質またはドメインが、前記標的核酸に対する共局在複合体の構成要素であり、
前記１種類以上のガイドＲＮＡをコードする前記第１外来核酸が連結（tether）配列をさらにコードし、前記転写制御因子タンパク質またはドメインをコードする前記第３外来核酸が前記転写制御因子タンパク質またはドメインに融合した連結配列結合ドメインをさらにコードする、細胞。
【請求項１６】
前記ヌクレアーゼ欠損Ｃａｓ９タンパク質をコードする前記第２外来核酸が、前記ヌクレアーゼ欠損Ｃａｓ９タンパク質に融合した前記転写制御因子タンパク質またはドメインをさらにコードする、請求項１５に記載の細胞。
【請求項１７】
前記連結配列がＲＮＡ結合ドメインの標的であり、
前記連結配列結合ドメインがＲＮＡ結合ドメインである、請求項１５に記載の細胞。
【請求項１８】
前記細胞が真核細胞である、請求項１５に記載の細胞。
【請求項１９】
前記転写制御因子タンパク質またはドメインが転写活性化因子である、請求項１５に記載の細胞。
【請求項２０】
前記転写制御因子タンパク質またはドメインが、疾患または有害な健康状態を治療するために前記標的核酸の発現を上方制御する、請求項１５に記載の細胞。
【請求項２１】
前記１種類以上のガイドＲＮＡがｔｒａｃｒＲＮＡ‐ｃｒＲＮＡ融合体である、請求項１５に記載の細胞。
【請求項２２】
前記ＤＮＡがゲノムＤＮＡ、ミトコンドリアＤＮＡ、ウイルスＤＮＡ、または外来性ＤＮＡである、請求項１５に記載の細胞。
【請求項２３】
前記連結配列が２コピーのＭＳ２バクテリオファージ・コートプロテイン結合性ＲＮＡステムループを含む、請求項１５に記載の細胞。
【請求項２４】
前記連結配列結合ドメインがＭＳ２バクテリオファージ・コートプロテインである、請求項１５に記載の細胞。
【請求項２５】
前記連結配列がアプタマーである、請求項１５に記載の細胞。