【誤訳訂正書】
【提出日】平成20年3月31日(2008.3.31)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
測定媒体中に存在するドナー蛍光化合物及びアクセプター蛍光化合物間のエネルギー移動を検出する方法であって、
（i）該ドナー蛍光化合物が励起される波長である波長λ１の光線により該測定媒体を励起し、及び
（ii）該アクセプター蛍光化合物の蛍光が放射される波長である波長λ３で放射された蛍光から生じる信号を測定する段階を含み、
（iii）該ドナー蛍光化合物の蛍光が放射される波長である波長λ２で放射された蛍光から生じる信号を測定し、及び
（iv）該波長λ３で該アクセプター蛍光化合物によって放射された該蛍光から生じる該信号を、該波長λ２で該ドナー蛍光化合物によって放射された該蛍光から生じる該信号により補正する
段階をさらに含んで、該ドナー蛍光化合物及び該アクセプター蛍光化合物が異なること、
その励起光が偏光していること、並びに
該波長λ３で放射された該蛍光から生じる該信号を該励起光の偏光面と異なる面内で測定すること
を特徴とする方法。
【請求項２】
前記波長λ２で放射された前記蛍光から生じる前記信号もまた、前記励起光の前記偏光面と異なる面内で測定することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記波長λ３で前記アクセプター蛍光化合物によって放射された前記蛍光から生じる前記信号を、前記波長λ２で前記ドナー蛍光化合物によって放射された前記蛍光から生じる前記信号により補正することが、前記波長λ３及びλ２で測定された前記信号比を決定することを含むことを特徴とする、請求項１又は２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
前記波長λ２及び／又はλ３で放射された前記蛍光から生じる前記信号が、前記励起光の前記偏光面と直交する面内で測定されることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５】
（i）前記ドナー蛍光化合物が励起される波長である前記波長λ１で偏光した光線によって前記測定媒体を励起し、
（ii）前記励起光の前記面と平行な面内の、前記ドナー蛍光化合物の光が放射される波長である前記波長λ２で放射された全蛍光強度（Ｉｔ//）λ2を測定し、
（iii）前記励起光の前記偏光面と異なる面内の、前記波長λ２で放射された全蛍光強度（Ｉｔ⊥）λ2を測定し、
（iv）前記励起光の前記面と平行な面内の、前記アクセプター蛍光化合物の光が放射される波長である前記波長λ３で放射された全蛍光強度（Ｉｔ//）λ3を測定し、
（v）前記励起光の前記偏光面と異なる面内の、前記波長λ３で放射された全蛍光強度（Ｉｔ⊥）λ3を測定し、
（vi）前記ドナー蛍光化合物及びアクセプター蛍光化合物間の前記エネルギー移動に起因する偏光Ｐを次式に従って計算し、並びに
【数１】
2008504517.tif 000001
（ここで、
・Ａは前記励起光の前記面と平行な面内の、前記ドナー単独により前記波長λ２及びλ３で放射された前記蛍光から生じる前記信号間の比例定数を表し、
・Ｂは前記励起光の前記偏光面と異なる面内の、前記ドナー単独により前記波長λ２及びλ３で放射された前記蛍光から生じる前記信号間の比例定数を表し、
・ｎ＝１又は２であり、
・Ｇは０．１〜２の間の、使用する測定装置に固有の感度補正係数である。）
（vii）そのＰの計算値を前記エネルギー移動が起こっていないコントロール測定媒体中で得られたものと比較して、Ｐの減少量をエネルギー移動の指標とする
段階を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
段階（vi）において、前記偏光Ｐを次式に従って計算することを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【数２】
2008504517.tif 000002
（ここで、
・ｎ＝１又は２であり、
・Ｇは０．１〜２の間の、使用する測定装置に固有の感度補正係数であり、
・Ａ＝（Ｉｄ//）λ3−（Ｉｄ//）λ2、
・Ｂ＝（Ｉｄ⊥）λ3−（Ｉｄ⊥）λ2であって、
（Ｉｄ//）λ3、（Ｉｄ//）λ2、（Ｉｄ⊥）λ3、（Ｉｄ⊥）λ2は、前記ドナー蛍光化合物を含むが前記アクセプター蛍光化合物を含まない測定媒体による、前記励起光の前記面と平行（／／）又は異なる（⊥）面内の、前記波長λ２又はλ３で放射された前記蛍光強度に相当する。）
【請求項７】
前記励起光の前記偏光面と異なる前記面が、前記励起光の前記偏光面と直交する面であることを特徴とする、請求項５又は６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
５ｎｍ＜λ３−λ２＜１００ｎｍであることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９】
前記ドナー及びアクセプター蛍光化合物が蛍光タンパク質、有機フルオロフォアから選択されることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１０】
前記ドナー及びアクセプター蛍光化合物が、ローダミン類、シアニン類、スクアライン類（squaraines）、ｂｏｄｉｐｙ類、フルオレセイン類、ＧＦＰ、ＣＦＰ、ＹＦＰ、ＢＦＰ、ｅＧＦＰ、ＲＣＦＰ類、ＤｓＲｅｄ  ＨｃＲｅｄ、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ類、及びこれら誘導体から選択されることを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１１】
前記ドナー及びアクセプター蛍光化合物の偏光が５０ｍＰより大きいことを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１２】
前記ドナー及びアクセプター蛍光化合物の偏光が１００ｍＰより大きいことを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ドナー及びアクセプター蛍光化合物が、前記ドナーの前記励起波長λ１で励起した後に前記ドナーの前記放射波長λ２で前記アクセプターの放射が検出されないように選択されることを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１４】
前記ドナー及びアクセプター化合物間の距離が、前記測定媒体中で起こる生化学的事象の関数として変化可能であることを特徴とする、請求項１〜１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ドナー及びアクセプター蛍光化合物が、ペプチド、タンパク質、抗体、抗原、細胞間情報伝達物質、細胞内情報伝達物質、ハプテン、レクチン、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジン、毒素、炭水化物、オリゴ糖、多糖、核酸を含む群から選択される分子と結合していることを特徴とする、請求項１〜１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ドナー及びアクセプター化合物が加水分解性の基質と直接又は間接的に結合していることを特徴とする、請求項１〜１５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１７】
前記ドナー及びアクセプター化合物が、互いに認識可能な一対の分子に共有結合的にそれぞれ結合していることを特徴とする、請求項１〜１６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１８】
前記ドナー及びアクセプター化合物が、前記測定媒体中に存在する第３の分子を認識可能な２つの分子にそれぞれ結合していることを特徴とする、請求項１〜１７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１９】
測定媒体中に存在するドナー蛍光化合物及びアクセプター蛍光化合物間のエネルギー移動から生じる蛍光を測定可能にする装置であって、
・偏光した励起光により該媒体を照射する手段、
・様々な波長にて、かつ該励起光の偏光面と平行の又は非平行の、優先的には直交する、様々な偏光面内で、該媒体により放射された蛍光を収集する手段、並びに
・該ドナー蛍光化合物の放射波長で測定された信号により、該アクセプター蛍光化合物の放射波長で測定された信号を補正可能にする計算手段
を含む装置。
【請求項２０】
測定媒体中に存在するドナー蛍光化合物及びアクセプター蛍光化合物間のエネルギー移動から生じる蛍光を測定可能にする装置であって、
・偏光した励起光により該媒体を照射する手段、
・様々な波長にて、かつ該励起光の偏光面と平行の又は非平行の、優先的には直交する、様々な偏光面内で、該媒体により放射された蛍光を収集する手段、
・請求項３〜７のいずれか１つに記載の方法により、該測定媒体中で起こる該エネルギー移動に特異的に起因する該測定媒体の偏光を計算可能にする計算手段
を含む装置。
【請求項２１】
前記装置が顕微鏡であることを特徴とする、請求項１９又は２０のいずれかに記載の装置。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４０】
このように本発明の方法は、ドナー及びアクセプター蛍光化合物間の距離が測定媒体中で起こる生化学的事象の関数として変化する生体系に使用できる。