【手続補正書】
【提出日】平成20年7月16日(2008.7.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウイルス含有組成物から夾雑物を除去するための方法であって、該方法は、選択されたウイルス及び望ましくない夾雑物を含む水性組成物を得る工程、及び、該水性組成物を、ウイルスは保持し、かつ夾雑物は通過させる分画細孔を有するサイズ分画膜を用いたサイズ分画精製に供して夾雑物を除去することにより精製されたウイルス組成物を得る工程、を包含し、該ウイルス含有組成物は、少なくとも１０倍の透析濾過に供される、方法。
【請求項２】
前記ウイルスが、アデノウイルス、レンチウイルス、アデノ随伴ウイルス、レトロウイルス又はヘルペスウイルスである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
精製されたアデノウイルス組成物を製造する方法であって、以下：
ａ）培地中に宿主細胞を生育させる工程；
ｂ）該宿主細胞に栄養物を提供する工程；
ｃ）該宿主細胞をアデノウイルスに感染させる工程；
ｄ）該宿主細胞を溶解してアデノウイルスを含有する細胞溶解物を得る工程；及び、
ｅ）サイズ分画膜を用いたサイズ分画精製により該溶解物からアデノウイルスを精製することにより精製されたアデノウイルス組成物を得る工程であって、該溶解物は少なくとも１０倍の透析濾過に供される、工程；
を包含する、方法。
【請求項４】
前記サイズ分画膜が透析膜である、請求項１又は３記載の方法。
【請求項５】
前記サイズ分画膜が多孔性フィルターである、請求項１又は３記載の方法。
【請求項６】
前記サイズ分画膜が旋回流濾過装置内にある、請求項１又は３記載の方法。
【請求項７】
前記サイズ分画膜が約０．０８ミクロン未満の孔径を有する、請求項１又は３記載の方法。
【請求項８】
前記サイズ分画膜が約０．０８ミクロン未満であり約０．０００１ミクロン超である孔径を有する、請求項５記載の方法。
【請求項９】
前記サイズ分画膜が約０．０５ミクロン未満であり約０．０００１ミクロン超である孔径を有する、請求項５記載の方法。
【請求項１０】
前記サイズ分画膜が約０．０２ミクロン未満であり約０．０００１ミクロン超である孔径を有する、請求項５記載の方法。
【請求項１１】
前記サイズ分画膜が約０．０１ミクロン未満であり約０．０００１ミクロン超である孔径を有する、請求項５記載の方法。
【請求項１２】
イオン交換クロマトグラフィーを使用することなく、薬学的に受容可能な程度にまで前記ウイルスが精製される、請求項１又は３記載の方法。
【請求項１３】
前記培地が血清非含有培地であり、前記宿主細胞が血清非含有培地中で生育可能である、請求項１又は３記載の方法。
【請求項１４】
前記生育培地のウシ胎児血清含有量の逐次的低減により、前記宿主細胞が血清非含有培地中での生育に適合させられる、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
前記宿主細胞が２９３細胞である、請求項３記載の方法。
【請求項１６】
前記溶解工程が、低張性溶液、高張性溶液、インピンジジェット、マイクロ流動化、固体剪断、洗剤、液体剪断、高圧押し出し、自己溶解又は超音波を包含するプロセスにより実施される、請求項３記載の方法。
【請求項１７】
洗剤溶解により前記細胞が溶解される、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
洗剤であるＴｈｅｓｉｔ（登録商標）、ＮＰ−４０（登録商標）、Ｔｗｅｅｎ−２０（登録商標）、Ｂｒｉｊ−５８（登録商標）、ＴｒｉｔｏｎＸ−１００（登録商標）又はオクチルグルコシドにより、前記細胞が溶解される、請求項１６記載の方法。
【請求項１９】
前記洗剤が約１％（ｗ／ｖ）の濃度で前記溶解溶液中に存在する、請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
灌流チャンバー、バイオリアクター、可撓性ベッドプラットホームにおいて、又は、フェッドバッチにより、少なくとも一部の時間、前記宿主細胞を生育させる、請求項３記載の方法。
【請求項２１】
前記精製されたアデノウイルス組成物が、１ミリリットル用量当たり夾雑物ＤＮＡ１０ナノグラム未満の純度を有する、請求項１記載の方法。
【請求項２２】
前記アデノウイルスが外来遺伝子構築物をコードするアデノウイルスベクターを含む、請求項３記載の方法。
【請求項２３】
前記遺伝子構築物がプロモーターに作動可能に連結している、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
前記プロモーターが、ＳＶ４０  ＩＥ、ＲＳＶ  ＬＴＲ、β−アクチン、ＣＭＶ  ＩＥ、アデノウイルス主要後期、ポリオーマＦ９−１又はチロシナーゼである、請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
前記外来遺伝子構築物が治療用遺伝子をコードする、請求項２２記載の方法。
【請求項２６】
前記治療用遺伝子がアンチセンスｒａｓ、アンチセンスｍｙｃ、アンチセンスｒａｆ、アンチセンスｅｒｂ、アンチセンスｓｒｃ、アンチセンスｆｍｓ、アンチセンスｊｕｎ、アンチセンスｔｒｋ、アンチセンスｒｅｔ、アンチセンスｇｓｐ、アンチセンスｈｓｔ、アンチセンスｂｃｌ、アンチセンスａｂｌ、Ｒｂ、ＣＦＴＲ、ｐ１６、ｐ２１、ｐ２７、ｐ５７、ｐ７３、Ｃ−ＣＡＭ、ＡＰＣ、ＣＴＳ−１、ｚａｃ１、ｓｃＦＶ  ｒａｓ、ＤＣＣ、ＮＦ−１、ＮＦ−２、ＷＴ−１、ＭＥＮ−Ｉ、ＭＥＮ−ＩＩ、ＢＲＣＡ１、ＶＨＬ、ＭＭＡＣ１、ＦＣＣ、ＭＣＣ、ＢＲＣＡ２、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＧＭ−ＣＳＦ  Ｇ−ＣＳＦ、チミジンキナーゼ又はｐ５３をコードする、請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
前記治療用遺伝子がｇｐ５３をコードする請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
前記アデノウイルスが複製不能アデノウイルスである、請求項２２記載の方法。
【請求項２９】
前記アデノウイルスがＥ１領域の少なくとも一部分を欠失している、請求項２２記載の方法。
【請求項３０】
前記アデノウイルスがＥ１Ａ及び／又はＥ１Ｂ領域の少なくとも一部分を欠失している、請求項２２記載の方法。
【請求項３１】
前記宿主細胞が複製を補完し得る、請求項２２記載の方法。
【請求項３２】
０．５ｇ／Ｌより高値のグルコース濃度を与えるような速度においてグルコース含有培地で前記細胞が灌流される、請求項２２記載の方法。
【請求項３３】
約０．７ｇ／Ｌ〜１．７ｇ／Ｌのグルコース濃度を与えるような速度においてグルコース含有培地で前記細胞が灌流される、請求項２２記載の方法。
【請求項３４】
前記細胞溶解物が、Ｂｅｎｚｏｎａｓｅ（登録商標）又はＰｕｌｍｏｚｙｍ（登録商標）で処理される、請求項１又は３記載の方法。
【請求項３５】
前記細胞を、細胞懸濁培養物として生育させる、請求項３記載の方法。
【請求項３６】
前記細胞を、足場依存培養物として生育させる、請求項３記載の方法。
【請求項３７】
少なくとも５×１０１５のウイルス粒子が単一の培養調製物から得られる、請求項３記載の方法。
【請求項３８】
少なくとも１×１０１６ウイルス粒子が得られる、請求項３７記載の方法。
【請求項３９】
前記ウイルス含有組成物が、約１０倍と約６０倍との間の透析濾過に供される、請求項１記載の方法。
【請求項４０】
前記ウイルス含有組成物が、約１０倍と約４０倍との間の透析濾過に供される、請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
前記ウイルス含有組成物が、ヌクレアーゼで処理される、請求項１記載の方法。
【請求項４２】
前記溶解物が、約１０倍と約６０倍との間の透析濾過に供される、請求項３記載の方法。
【請求項４３】
前記溶解物が、約１０倍と約４０倍との間の透析濾過に供される、請求項４２記載の方法。
【請求項４４】
前記溶解物が、ヌクレアーゼで処理される、請求項３記載の方法。
【請求項４５】
請求項１〜４１の何れかの方法に従って製造された、精製されたアデノウイルス組成物。