【手続補正書】
【提出日】令和1年10月17日(2019.10.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
切断高分子量キニノーゲン（ＨＭＷＫ）を検出するためのイムノアッセイであって、
（ｉ）切断ＨＭＷＫと特異的に結合する第一の薬剤を固定化した支持要素を準備すること、
（ｉｉ）（ｉ）の支持要素と、切断ＨＭＷＫを含有することが疑われる生体試料と、を接触させること、
（ｉｉｉ）（ｉｉ）で得られた支持要素と、ＨＭＷＫと結合する第二の薬剤であって標識とコンジュゲートされている第二の薬剤と、を接触させること、および
（ｉｖ）前記支持要素に直接的または間接的に結合した前記第二の薬剤の前記標識から放出されるシグナルを検出して、前記生体試料中の切断ＨＭＷＫのレベルを決定すること
を含む、イムノアッセイ。
【請求項２】
前記第一の薬剤が、切断ＨＭＷＫと特異的に結合する抗体であり、任意選択で前記抗体は５５９Ｂ−Ｍ００４−Ｂ０４であってもよい、請求項１に記載のイムノアッセイ。
【請求項３】
（ｉ）前記支持要素が９６ウェルプレートである、
（ｉｉ）段階（ｉｉ）の前に（ｉ）の支持要素をブロッキング緩衝液とインキュベートする、
（ｉｉｉ）前記第二の薬剤が、ＨＭＷＫと結合するポリクローナル抗体、モノクローナル抗体または２種以上のモノクローナル抗体の混合物である、
（ｉｖ）前記標識がシグナル放出物質である、
（ｖ）前記標識が受容体−リガンド対の要素であり、前記イムノアッセイが、段階（ｉｖ）の前に、前記支持要素と結合した（ｉｉｉ）の前記第二の薬剤と、前記受容体−リガンド対の他方の要素と、を接触させることをさらに含み、前記他方の要素がシグナル放出物質とコンジュゲートされており、任意選択で前記受容体−リガンド対はビオチンとストレプトアビジンであってもよい、
（ｖｉ）段階（ｉｉ）をＺｎＣｌ２の存在下で実施する、
（ｖｉｉ）前記生体試料はヒト対象から採取されたものである、および／または
（ｖｉｉｉ）ウエスタンブロットアッセイ、ＥＬＩＳＡアッセイまたはラテラルフローアッセイである、
請求項１または２に記載のイムノアッセイ。
【請求項４】
前記生体試料が、１種以上のプロテアーゼ阻害剤を含む真空採血管に採取した血液試料から処理される血清試料または血漿試料である、請求項３に記載のイムノアッセイ。
【請求項５】
前記ヒト対象が疾患を有し、前記イムノアッセイが、段階（ｉｖ）で決定した切断ＨＭＷＫのレベルに基づき、前記疾患がｐＫａｌの介在によるものであるかどうかを判定することをさらに含み、前記生体試料中の切断ＨＭＷＫのレベルが対照試料のレベルから逸脱していれば、前記疾患がｐＫａｌの介在によるものであることを示している、請求項３または４に記載のイムノアッセイ。
【請求項６】
段階（ｉｖ）で決定した切断ＨＭＷＫのレベルに基づき、前記ヒト対象が血漿カリクレインの介在による疾患を有するか、またはそのリスクがあるかを決定することをさらに含み、前記対象由来の生体試料の切断ＨＭＷＫのレベルが対照試料の切断ＨＭＷＫのレベルから逸脱していれば、前記対象が前記疾患を有するか、またはそのリスクがあると同定される、請求項３または４に記載のイムノアッセイ。
【請求項７】
前記対象が前記疾患を有すると同定された場合、前記疾患を治療するため前記対象に有効量の治療剤を投与することをさらに含む、請求項６に記載のイムノアッセイ。
【請求項８】
前記治療剤が、血漿カリクレイン（ｐＫａｌ）阻害剤、ブラジキニン２受容体（Ｂ２Ｒ）阻害剤および／またはＣ１エステラーゼ阻害剤であり、任意選択で前記ｐＫａｌ阻害剤は抗ｐＫａｌ抗体または阻害ペプチドであってもよく、任意選択で前記治療剤はラナデルマブ、エカランチド、イカチバントまたはヒト血漿由来Ｃ１−ＩＮＨであってもよい、請求項７に記載のイムノアッセイ。
【請求項９】
（ｉ）前記ヒト対象が前記疾患の治療を受けており、方法が、段階（ｉｖ）で決定した切断ＨＭＷＫのレベルに基づき前記治療の有効性を評価することをさらに含み、前記対象由来の生体試料中の切断ＨＭＷＫのレベルが対照試料のレベルから逸脱していれば、前記治療が有効であることを示している、
（ｉｉ）切断ＨＭＷＫのレベルに基づき前記対象に適した治療を特定することをさらに含む、
（ｉｉｉ）切断ＨＭＷＫのレベルに基づき、前記対象が前記疾患の治療の候補者であると同定することをさらに含む、または
（ｉｖ）前記ヒト対象がＨＡＥの病歴を有し、前記イムノアッセイが、切断ＨＭＷＫのレベルに基づき前記対象の疾患の発作のリスクを評価することをさらに含み、前記対象由来の生体試料中の切断ＨＭＷＫのレベルが対照試料のレベルから逸脱していれば、前記疾患の発作のリスクがあることを示しており、任意選択で、前記対象に疾患の発作のリスクがある場合、前記対象に治療剤を投与することをさらに含む、
請求項３または４に記載のイムノアッセイ。
【請求項１０】
前記ヒト対象が前記疾患の病歴を有し、任意選択で前記疾患はＨＡＥであってもよい、請求項３、４または６〜９のいずれか１項に記載のイムノアッセイ。
【請求項１１】
切断高分子量キニノーゲン（ＨＭＷＫ）と特異的に結合する、単離抗体。
【請求項１２】
５５９Ｂ−Ｍ００４−Ｂ０４と同じエピトープと結合するか、または切断ＨＭＷＫとの結合に関して５５９Ｂ−Ｍ００４−Ｂ０４と競合し、任意選択で５５９Ｂ−Ｍ００４−Ｂ０４と同じ重鎖相補性決定領域および軽鎖相補性決定領域を含んでもよい、請求項１１に記載の単離抗体。
【請求項１３】
５５９Ｂ−Ｍ００４−Ｂ０４である、請求項１２に記載の単離抗体。
【請求項１４】
切断高分子量キニノーゲン（ＨＭＷＫ）を検出するためのキットであって、切断ＨＭＷＫと特異的に結合する第一の薬剤を含み、前記第一の薬剤が、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の抗体である、キット。
【請求項１５】
（ｉ）ＨＭＷＫと結合する第二の薬剤、支持要素またはその両方をさらに含む、
（ｉｉ）前記支持要素が９６ウェルプレートである、および／または
（ｉｉｉ）前記切断ＨＭＷＫを検出するための指示書をさらに含む、
請求項１４に記載のキット。
【請求項１６】
インタクトの高分子量キニノーゲン（ＨＭＷＫ）および切断ＨＭＷＫの両方と結合する、単離抗体。
【請求項１７】
低分子量キニノーゲン（ＬＭＷＫ）と結合しない、請求項１６に記載の単離抗体。
【請求項１８】
５５９Ｂ−Ｍ００６７−Ｅ０２、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｇ０７、５５９Ｂ−Ｍ００４４−Ｅ０９、５５９Ｂ−Ｍ０００３−Ｃ０８、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｈ０６、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｄ０８、５５９Ｂ−Ｍ００６８−Ｃ０７、５５９Ｂ−Ｍ００２１−Ｇ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６１−Ｇ０６、５５９Ｂ−Ｍ００３６−Ｇ１２、５５９Ｂ−Ｍ００４２−Ｅ０６、５５９Ｂ−Ｍ００７０−Ｈ１０、５５９Ｂ−Ｍ００６８−Ｄ０１もしくは５５９Ｂ−Ｍ０００４−Ｅ０８と同じエピトープと結合するか、またはインタクトのＨＭＷＫおよび／もしくは切断ＨＭＷＫとの結合に関して５５９Ｂ−Ｍ００６７−Ｅ０２、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｇ０７、５５９Ｂ−Ｍ００４４−Ｅ０９、５５９Ｂ−Ｍ０００３−Ｃ０８、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｈ０６、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｄ０８、５５９Ｂ−Ｍ００６８−Ｃ０７、５５９Ｂ−Ｍ００２１−Ｇ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６１−Ｇ０６、５５９Ｂ−Ｍ００３６−Ｇ１２、５５９Ｂ−Ｍ００４２−Ｅ０６、５５９Ｂ−Ｍ００７０−Ｈ１０、５５９Ｂ−Ｍ００６８−Ｄ０１もしくは５５９Ｂ−Ｍ０００４−Ｅ０８と競合し、任意選択で５５９Ｂ−Ｍ００６７−Ｅ０２、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｇ０７、５５９Ｂ−Ｍ００４４−Ｅ０９、５５９Ｂ−Ｍ０００３−Ｃ０８、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｈ０６、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｄ０８、５５９Ｂ−Ｍ００６８−Ｃ０７、５５９Ｂ−Ｍ００２１−Ｇ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６１−Ｇ０６、５５９Ｂ−Ｍ００３６−Ｇ１２、５５９Ｂ−Ｍ００４２−Ｅ０６、５５９Ｂ−Ｍ００７０−Ｈ１０、５５９Ｂ−Ｍ００６８−Ｄ０１または５５９Ｂ−Ｍ０００４−Ｅ０８と同じ重鎖ＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲを含んでもよく、任意選択で５５９Ｂ−Ｍ００６７−Ｅ０２、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｇ０７、５５９Ｂ−Ｍ００４４−Ｅ０９、５５９Ｂ−Ｍ０００３−Ｃ０８、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｈ０６、５５９Ｂ−Ｍ００３９−Ｄ０８、５５９Ｂ−Ｍ００６８−Ｃ０７、５５９Ｂ−Ｍ００２１−Ｇ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６１−Ｇ０６、５５９Ｂ−Ｍ００３６−Ｇ１２、５５９Ｂ−Ｍ００４２−Ｅ０６、５５９Ｂ−Ｍ００７０−Ｈ１０、５５９Ｂ−Ｍ００６８−Ｄ０１および５５９Ｂ−Ｍ０００４−Ｅ０８からなる群より選択されてもよい、請求項１７に記載の単離抗体。
【請求項１９】
ＬＭＷＫとも結合する、請求項１６に記載の単離抗体。
【請求項２０】
５５９Ｂ−Ｍ００６９−Ｃ０９、５５９Ｂ−Ｍ００３８−Ｆ０４、５５９Ｂ−Ｍ００４４−Ｃ０５、５５９Ｂ−Ｍ００４７−Ｈ０１、５５９Ｂ−Ｍ００１９−Ｅ１２、５５９Ｂ−Ｘ０００４−Ｂ０５、５５９Ｂ−Ｍ００４８−Ｄ１２、５５９Ｂ−Ｍ００５３−Ｇ０１、５５９Ｂ−Ｍ００３８−Ｈ０３、５５９Ｂ−Ｍ００１７−Ｈ０８、５５９Ｂ−Ｍ００３５−Ｆ０５、５５９Ｂ−Ｍ００３５−Ｈ０９、５５９Ｂ−Ｍ００４３−Ｃ０６、５５９Ｂ−Ｍ０００３−Ａ０８、５５９Ｂ−Ｍ００５４−Ｂ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６７−Ｇ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６４−Ｈ０２もしくは５５９Ｂ−Ｍ００６５−Ｂ１０と同じエピトープと結合するか、またはインタクトのＨＭＷＫ、切断ＨＭＷＫおよび／もしくはＬＭＷＫとの結合に関して５５９Ｂ−Ｍ００６９−Ｃ０９、５５９Ｂ−Ｍ００３８−Ｆ０４、５５９Ｂ−Ｍ００４４−Ｃ０５、５５９Ｂ−Ｍ００４７−Ｈ０１、５５９Ｂ−Ｍ００１９−Ｅ１２、５５９Ｂ−Ｘ０００４−Ｂ０５、５５９Ｂ−Ｍ００４８−Ｄ１２、５５９Ｂ−Ｍ００５３−Ｇ０１、５５９Ｂ−Ｍ００３８−Ｈ０３、５５９Ｂ−Ｍ００１７−Ｈ０８、５５９Ｂ−Ｍ００３５−Ｆ０５、５５９Ｂ−Ｍ００３５−Ｈ０９、５５９Ｂ−Ｍ００４３−Ｃ０６、５５９Ｂ−Ｍ０００３−Ａ０８、５５９Ｂ−Ｍ００５４−Ｂ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６７−Ｇ１１、５５９−Ｍ００６４−Ｈ０２もしくは５５９Ｂ−Ｍ００６５−Ｂ１０と競合し、任意選択で５５９Ｂ−Ｍ００６９−Ｃ０９、５５９Ｂ−Ｍ００３８−Ｆ０４、５５９Ｂ−Ｍ００４４−Ｃ０５、５５９Ｂ−Ｍ００４７−Ｈ０１、５５９Ｂ−Ｍ００１９−Ｅ１２、５５９Ｂ−Ｘ０００４−Ｂ０５、５５９Ｂ−Ｍ００４８−Ｄ１２、５５９Ｂ−Ｍ００５３−Ｇ０１、５５９Ｂ−Ｍ００３８−Ｈ０３、５５９Ｂ−Ｍ００１７−Ｈ０８、５５９Ｂ−Ｍ００３５−Ｆ０５、５５９Ｂ−Ｍ００３５−Ｈ０９、５５９Ｂ−Ｍ００４３−Ｃ０６、５５９Ｂ−Ｍ０００３−Ａ０８、５５９Ｂ−Ｍ００５４−Ｂ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６７−Ｇ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６４−Ｈ０２または５５９Ｂ−Ｍ００６５−Ｂ１０と同じ重鎖ＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲを含んでもよく、任意選択で５５９Ｂ−Ｍ００６９−Ｃ０９、５５９Ｂ−Ｍ００３８−Ｆ０４、５５９Ｂ−Ｍ００４４−Ｃ０５、５５９Ｂ−Ｍ００４７−Ｈ０１、５５９Ｂ−Ｍ００１９−Ｅ１２、５５９Ｂ−Ｘ０００４−Ｂ０５、５５９Ｂ−Ｍ００４８−Ｄ１２、５５９Ｂ−Ｍ００５３−Ｇ０１、５５９Ｂ−Ｍ００３８−Ｈ０３、５５９Ｂ−Ｍ００１７−Ｈ０８、５５９Ｂ−Ｍ００３５−Ｆ０５、５５９Ｂ−Ｍ００３５−Ｈ０９、５５９Ｂ−Ｍ００４３−Ｃ０６、５５９Ｂ−Ｍ０００３−Ａ０８、５５９Ｂ−Ｍ００５４−Ｂ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６７−Ｇ１１、５５９Ｂ−Ｍ００６４−Ｈ０２および５５９Ｂ−Ｍ００６５−Ｂ１０からなる群より選択されてもよい、請求項１９に記載の単離抗体。
【請求項２１】
試料中の切断高分子量キニノーゲン（ＨＭＷＫ）を検出するための方法であって、
（ｉ）切断ＨＭＷＫを含有することが疑われる試料と、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の抗体と、を接触させること、
（ｉｉ）段階（ｉ）で形成された切断ＨＭＷＫと前記抗体の複合体を測定すること、および
（ｉｉｉ）段階（ｉｉ）の結果に基づき前記試料中の切断ＨＭＷＫのレベルを決定すること
を含む、方法。
【請求項２２】
（ｉ）前記試料が、対象から得られた生体試料である、
（ｉｉ）前記生体試料が、血清試料または血漿試料である、および／または
（ｉｉｉ）前記対象がヒト患者である、
請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
１種以上のプロテアーゼ阻害剤を含む真空採血管に前記生体試料を採取することをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
酵素結合免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）、イムノブロッティングアッセイまたはラテラルフローアッセイを用いて実施する、請求項２１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
（ｉ）前記対象が疾患を有し、前記方法が、段階（ｉｉｉ）で決定した切断ＨＭＷＫのレベルに基づき、前記疾患がｐＫａｌの介在によるものであるかどうかを決定することをさらに含み、前記試料中の切断ＨＭＷＫのレベルが対照試料のレベルから逸脱していれば、前記疾患がｐＫａｌの介在によるものであることを示している、または
（ｉｉ）段階（ｉｉｉ）で決定した切断ＨＭＷＫのレベルに基づき、前記対象が、血漿カリクレインの介在による障害を有するかどうか、またはそのリスクがあるかどうかを決定することをさらに含み、前記対象由来の試料の切断ＨＭＷＫのレベルが、対照試料の切断ＨＭＷＫのレベルから逸脱していれば、前記対象が、前記障害を有するか、またはそのリスクがあると同定される、
請求項２２〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記対象が前記障害を有すると同定された場合、前記障害を治療するため前記対象に有効量の治療剤を投与することをさらに含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記治療剤が、血漿カリクレイン（ｐＫａｌ）阻害剤、ブラジキニン２受容体（Ｂ２Ｒ）阻害剤および／またはＣ１エステラーゼ阻害剤であり、任意選択でｐＫａｌ阻害剤は抗ｐＫａｌ抗体または阻害ペプチドであってもよく、任意選択で前記治療剤はラナデルマブ、エカランチド、イカチバントまたはヒト血漿由来Ｃ１−ＩＮＨであってもよい、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
（ｉ）前記対象が、前記障害の治療を受けているヒト患者であり、前記方法が、段階（ｉｉｉ）で決定した切断ＨＭＷＫのレベルに基づき前記治療の有効性を評価することをさらに含み、前記対象由来の試料中の切断ＨＭＷＫのレベルが対照試料のレベルから逸脱していれば、前記治療が有効であることを示している、または
（ｉｉ）前記ヒト患者が前記疾患の病歴を有しており、任意選択で前記疾患はＨＡＥであってもよい、
請求項２３または２４に記載の方法。
【請求項２９】
前記切断ＨＭＷＫのレベルに基づき前記対象に適した治療を特定することをさらに含む、または切断ＨＭＷＫのレベルに基づき、前記対象が前記疾患の治療の候補者であると同定することをさらに含む、請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記ヒト患者がＨＡＥの病歴を有し、前記方法が、切断ＨＭＷＫのレベルに基づき前記対象の疾患の発作のリスクを評価することをさらに含み、前記対象由来の試料中の切断ＨＭＷＫのレベルが対照試料のレベルから逸脱していれば、前記疾患の発作のリスクを示しており、任意選択で、前記対象に疾患の発作のリスクがある場合、前記対象に治療剤を投与することをさらに含んでもよい、請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
段階（ｉ）をＺｎＣｌ２の存在下で実施する、請求項２１〜３０のいずれか１項に記載の方法。