【手続補正書】
【提出日】平成19年5月8日(2007.5.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体が接する水系環境中にα，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を共存せしめることを特徴とする、水系環境に接する生体の生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張する方法。
【請求項２】
生体が接する水系環境がミネラル濃度０乃至５ｗ／ｖ％の水溶液であり、その水溶液中にα，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を無水物換算で０．０１乃至４ｗ／ｖ％共存せしめることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項３】
生体が接する水系環境が、その生体の生命活動に好適な本来のミネラル濃度に対し±２．０％の範囲にある請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
α，α−トレハロースの糖質誘導体がα−グリコシルα，α−トレハロースである請求項１乃至３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
ミネラルがナトリウム、マグネシウム、アルミニウム、カリウム、カルシウム、クロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、銅、亜鉛、モリブデン、鉛から選ばれる１種又は２種以上である請求項１乃至４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
好適でないミネラル濃度による悪影響の緩和、農作物の塩害防止、農作物のミネラル補強、魚介類の飼育、魚介類の臭み抜き、貝類の砂だし、又は、淡水魚介類の病気治療に用いられる請求項１乃至５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
生体が海水魚介類又は淡水魚介類である請求項１乃至６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を有効成分とする生体の生命活動の強化及び／又は生命活動好適域拡張剤。
【請求項９】
α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を０．０１乃至４ｗ／ｖ％の濃度で含有する水溶液であることを特徴とする請求項８に記載の剤。
【請求項１０】
α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を０．０１乃至４ｗ／ｖ％の濃度で含有する水溶液中で、魚介類を飼育することを特徴とする生きた魚介類の身やせ防止方法。
【請求項１１】
α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を０．０１乃至４ｗ／ｖ％の濃度で含有する水溶液中で、貝類を飼育することを特徴とする、貝類の可食部にコハク酸及び／又はリンゴ酸含量を増加させる方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
本発明で用いられるα，α−トレハロースは、２分子のグルコースが還元末端同士でα，α結合してなる二糖であり、ミネラル水溶液中で生体の生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張しうるものである限り、純度、存在形態、性状や調製方法は特定のものに限定されない。α，α−トレハロースの調製方法としては、例えば、同じ特許出願人による、特開平７−１４３８７６号公報、特開平７−２１３２８３号公報、特開平７−２９８８８０号公報、特開平７−３２２８８３号公報、特開平８−６６１８７号公報、特開平８−６６１８８号公報、特開平８−８４５８６号公報及び特開平８−３３６３８８号公報に開示された非還元性糖質生成酵素及びトレハロース遊離酵素を澱粉又は澱粉部分加水分解物に作用させる方法が好適である。この方法によるときには、廉価な材料である澱粉から、α，α−トレハロースが高収量で得られるので、経済的に極めて有利である。ちなみに、斯かる方法により調製された市販品としては、例えば、含水結晶α，α−トレハロース（登録商標『トレハ』、固形分量当りのα，α−トレハロース含量９８ｗ／ｗ％以上、株式会社林原商事販売）がある。なお、澱粉からのα，α−トレハロースの製法に起因する副産物の澱粉分解物は、還元性を有しており、アミノ基とメイラード反応を起こし褐変物質を生成しやすいことが知られている。副産物の澱粉分解物の還元性が本発明を実施するうえで障害となる場合は、ラネーニッケル法などの常法の水素添加方法により、副産物の澱粉分解物を糖アルコールに変換して非還元性にして利用することも随意である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
本発明でいう生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張するとは、水系環境に接する動物や植物などの生体にとって本来生命活動に好適なミネラル濃度の水系環境での生命活動をより活発に強化し、さらには、本来生命活動に好適でないミネラル濃度の水系環境中においても生命活動が可能な環境に改変することである。この結果、本来好適でないミネラル濃度の水系環境に接する生体が受けるはずの悪影響が緩和されることになる。生体にとっての本来の生命活動好適域は、ミネラルの種類や生体が属する生物の種類によっても異なるものの、生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張するという本発明の効果は、多種のミネラルにおいて観察される。特に、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属イオン濃度に対する生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張の程度を調べることで確認することができる。例えば、ナトリウムを主成分とするミネラルの場合では、海水又は汽水域の水系環境を最も好適な生命活動域のミネラル濃度として、それを基準にして±２ｗ／ｖ％、好ましくは±１．５ｗ／ｖ％、より好ましくは±１ｗ／ｖ％の範囲内において、生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張する。例えば、望ましいミネラルの総和濃度が海水又は海水に相当する濃度（３ｗ／ｖ％）のような水系環境の場合には、１乃至５ｗ／ｖ％、好ましくは１．５乃至４．５ｗ／ｖ％、より好ましくは２乃至４ｗ／ｖ％の範囲内で、また、ミネラル濃度が０乃至３ｗ／ｖ％の範囲内で変化する汽水域では、例えば１．５ｗ／ｖ％の濃度で好適に生息する生体の場合には、０乃至３．５ｗ／ｖ％、好ましくは０乃至３．０ｗ／ｖ％、より好ましくは０．５乃至２．５ｗ／ｖ％の範囲内で本発明は効果を発揮する。また、通常、ミネラルを含有しない真水、淡水の場合においては、０乃至２ｗ／ｖ％、好ましくは０乃至１．５ｗ／ｖ％以下、より好ましくは０乃至１ｗ／ｖ％の範囲内で効果を発揮する。この際、有効成分であるα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体は、水系環境中に、無水物換算で０．０１乃至４ｗ／ｖ％、好ましくは０．１乃至３ｗ／ｖ％の濃度の範囲内で含有させればよい。０．０１ｗ／ｖ％に満たない場合は効果が現れないことがあり、４ｗ／ｖ％を超える場合は、量の割に効果が発揮されず、含有させたα，α−トレハロース又はα，α−トレハロースの糖質誘導体による浸透圧の上昇が懸念され好ましくない。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
本発明の生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張方法は、有効成分として、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を用いることにより、多種類のミネラル水溶液で生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張することができる。ミネラルとしては、例えば、ナトリウム、マグネシウム、アルミニウム、カリウム、カルシウム、クロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、銅、亜鉛、モリブデン、鉛などのイオン化合物又は塩の形態のものが挙げられる。本発明の生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張方法は、上記したミネラルの１種又は２種以上の混合物に、α，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体を共存させて、これらのミネラルとα，α−トレハロース及び／又はα，α−トレハロースの糖質誘導体との組成物として、生体の生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張する組成物として有利に利用できる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
本発明の生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張方法の具体的な利用方法としては、農業用水に適用すれば、塩害防止の効果を発揮したり、高濃度のミネラルを含み農業用水として適さない水、例えば海水などを必要に応じて希釈して農業用水として用いることも可能となる。また、養殖用いけす、水槽などの用水として用いれば、魚介類の生命活動が活発になることにより、代謝が改善されて、身やせ（肉質劣化）を防止したり、有用な旨味成分を蓄積させたりすることができ、また、雨水の混入や水分の蒸発による水分の増減に起因するミネラル濃度の変化から飼育中の生体が受ける悪影響を緩和することができる。また、本発明の生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張する組成物は、例えば、天然海水、海洋深層水及び人工海水などの海水、培地、生体洗浄液などに用いれば、本来生命活動に好適でない濃度のミネラル水溶液の水系環境に接する生物の悪影響を緩和することができる。また、例えば、当該組成物を天然海水、海洋深層水及び人工海水などの海水、培地、洗浄液用の固形状又は濃縮液状のプレミックス形態にすれば、これを水に溶解又は希釈する際、その計量誤差の許容範囲を拡張することができるので、価値の高い動物、植物に用いる際にも安心して利用することができる。また、本発明の生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張方法並びに生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張する組成物は、水系環境において、本来生命活動に好適でないミネラル濃度の水溶液においても、その生体を生存、発育させることができる。したがって、淡水魚介類、陸上植物、海水魚介類、海水植物などを本来好適でないミネラル濃度中で飼育、栽培することが可能となる。この特徴を利用して、本発明の生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張する組成物を、金魚、錦鯉などの淡水の魚介類の病気治療を目的とする食塩浴に利用すれば、本来淡水の魚類に好適でない濃度のミネラル水溶液から受ける悪影響を緩和しつつ、魚体の低ナトリウム症が改善されるので、病気治療の効果をさらに高めることができる。また、この場合、藻類、水草などの他の生物への悪影響が緩和されるので、水槽、池などで安心して食塩浴を行うことができる。さらに、本発明の生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張する組成物を、上記食塩浴に適用する場合においては、魚類の病症に適応した抗生物質、殺菌剤、抗ウイルス剤、ビタミン剤などの薬剤と併用することができる。また、本発明の生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張する方法によって、植物を栽培した場合、生体内に取り込まれたミネラルが有機化する割合が高くなるので、例えば、スプラウト食品などの生鮮野菜におけるミネラル補強をより効果的に行うことができる。また、魚介類の泥抜きや臭み抜き又は生きたままでの輸送などに適用すれば、生体の生命活動を損ねることなく、より効果的に目的を達成することができる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
本発明が望ましく適用可能な水系環境に接する生体としては、海水、汽水域又は淡水に生息する動植物、例えば、魚介類又は植物全般が挙げられる。魚介類としては、例えば、サケ、マス、イワナ、アユ、ワカサギ、ニシン、イワシ、ウナギ、アナゴ、トビウオ、サンマ、タラ、アンコウ、スズキ、ボラ、タイ、アジ、ブリ、サバ、カツオ、サワラ、マグロ、タチウオ、カサゴ、アイナメ、オコゼ、カレイ、ヒラメ、フグ、カワハギ、サメ、エイ、コイ、フナ、ハゼ、ドジョウ、ナマズなどの魚類、熱帯魚、金魚、錦鯉、メダカなどの鑑賞魚、クルマエビ、イセエビなどのエビ類、ワタリガニ、ケガニ、シャンハイガニ、ズワイガニ、タラバガニ、シャコなどのカニ類、アワビ、サザエ、バイ、ツブ、アカガイ、ミルガイ、トリガイ、アオヤギ、マテガイ、アサリ、ハマグリ、カキ、ホタテガイ、イガイ、シジミなどの貝類、ウニ、ナマコなどの棘皮動物、イカ、タコなどの軟体動物類、ホヤ類、クラゲ類、又はこれらの受精卵、卵子、精子、稚魚などが列挙できる。植物としては、イネ、ムギ、ダイズ、トウモロコシなどの穀物、ワカメ、コンブなどの藻類、キャベツ、レタスなどの野菜類、モヤシ、アルファルファなどのスプラウト食品などが列挙できる。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
以下、実験により、本発明にかかる生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張に与える糖質の影響について、動物の例として、海水に生息するアサリ、淡水に棲息するシジミ、ゲンゴロウブナ及び金魚を、植物の例として淡水にて発芽する玄米及びアルファルファを用いて、詳細に説明する。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
＜実験５：マシジミの生命活動強化に影響を及ぼすα，α−トレハロースまたはα−マルトシルα，α−トレハロースの共存濃度の検討＞
実験４において、α，α−トレハロースまたはα−マルトシルα，α−トレハロースの効果が顕著であったミネラル濃度１．５ｗ／ｖ％水溶液において、α，α−トレハロースまたはα−マルトシルα，α−トレハロースの濃度を無水物換算で０．０１、０．１、１、２、３、４ｗ／ｖ％として、実験４の方法に準じて、α，α−トレハロースまたはα−マルトシルα，α−トレハロースの有効な濃度範囲を調べ評価した。また、対照として、濃度１．５ｗ／ｖ％のミネラルのみを含み、糖質を含まない水溶液を用いて同様の実験を行った。結果を表５に示す。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
表６に示すとおり、４８時間乃至１２０時間での玄米の発芽数は、ミネラル水溶液の場合よりも、ミネラル水溶液にα，α−トレハロース又はα−マルトシルα，α−トレハロースを共存させた場合の方が多かった。これを７２時間後の結果でみると、糖質もミネラルも含まない水を用いた場合には、発芽数が２０個であるのに対し、これにミネラルだけが加わり、ミネラル濃度０．５ｗ／ｖ％、１．０ｗ／ｖ％、１．５ｗ／ｖ％及び２．０ｗ／ｖ％の場合の発芽数は、それぞれ、１４個、４個、０個、０個となる。これらミネラル濃度のものにα，α−トレハロースが共存する場合の発芽数は、それぞれ、２０個、２０個、４個、０個となり、また、α−マルトシルα，α−トレハロースが加わると１９個、１０個、３個、０個となる。したがって、ミネラル水溶液にα，α−トレハロース又はα−マルトシルα，α−トレハロースを共存せしめることは、ミネラル水溶液中における玄米の発芽を促進することが判明した。この結果から、α，α−トレハロース又はα−マルトシルα，α−トレハロースは、ミネラル水溶液濃度１．５ｗ／ｖ％以下、好ましくは１．０ｗ／ｖ％以下における玄米の発芽を促進する効果を有しており、玄米のミネラル水溶液中での生命活動好適域を拡張する効果を発揮することが明らかとなった。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
＜実験８：α，α−トレハロース又はα−マルトシルα，α−トレハロースによるミネラル水溶液中におけるスプラウト植物食品（アルファルファ）の発芽に及ぼす影響＞
１ｗ／ｖ％ミネラル（食塩）とともに、無水物換算で１ｗ／ｖ％α，α−トレハロース又はα−マルトシルα，α−トレハロースを含有する水溶液を脱脂綿に湿らせ、透明の容器に入れ、それに市販のアルファルファの種子を各群１００粒ずつ播種した。また、比較例として、ミネラルのみ、α，α−トレハロースのみ、又は、α−マルトシルα，α−トレハロースのみ含有する水を、対照として水を用いた。透明の蓋をした後、１８℃で３日間室内で間接光下で栽培した後、アルファルファの地上部（茎）の長さの平均値を算出し、対照の水におけるその長さと比較し、相対伸張率を算出した。また、２０名のパネラーに食してもらい、対照の水で栽培したものと風味を比較判定してもらった。結果を表８に示す。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
＜生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張剤＞
含水結晶α，α−トレハロース（（株）林原商事販売、登録商標『トレハ』）２質量部を水１００質量部に溶解し、生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張剤を製造した。本品をそのままあるいは適度に希釈して、水耕用水又は散布用水などの農業用水として用いれば、台風、津波などによる農作物の塩害を防止することができる。また、ミネラルを含む海水、培地、洗浄液などに添加して生体に用いれば、生体の生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張することができるので、水分の蒸発、雨水の混入などによるミネラル濃度の変動による悪影響を緩和することができる。したがって、本品は、水系環境に棲息する生物の飼育、洗浄及び保存などに有利に用いることができる。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
＜生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張剤＞
特開平７−１４３８７６号公報の実験４に開示される方法にしたがって製造したα−マルトシルα，α−トレハロース含有粉末（純度９８ｗ／ｗ％以上）３質量部を水１００質量部に溶解し、生命活動の強化及び／又は生命活動好適域の拡張剤を製造した。本品をそのままあるいは適度に希釈して、水耕用水又は散布用水などの農業用水として用いれば、台風、津波などによる農作物の塩害を防止することができる。また、ミネラルを含む海水、培地、洗浄液などに添加して生体に用いれば、生体の生命活動を強化及び／又は生命活動好適域を拡張することができるので、水分の蒸発、雨水の混入などによるミネラル濃度の変動による悪影響を緩和することができる。したがって、本品は、水系環境に棲息する生物の飼育、洗浄などに有利に用いることができる。