【手続補正書】
【提出日】平成31年4月24日(2019.4.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
C末端を介してCD28ポリペプチドの細胞内ドメインのN末端に機能的に連結しているPD-1ポリペプチドを含む融合タンパク質であって、該PD-1ポリペプチドがPD-1の細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインを含む、融合タンパク質。
【請求項２】
PD-1ポリペプチドが、SEQ ID NO: 16の配列、またはSEQ ID NO: 16との比較において1〜10個の置換、欠失もしくは挿入を有しかつPD-L1および／もしくはPD-L2結合活性を有することを特徴とする配列を含む、請求項1記載の融合タンパク質。
【請求項３】
PD-1の膜貫通ドメインがSEQ ID NO: 20のアミノ酸配列を有する、請求項1または2記載の融合タンパク質。
【請求項４】
CD28ポリペプチドが、配列YMNM（SEQ ID NO: 29）および／またはPYAP（SEQ ID NO: 30）を有するCD28ポリペプチドの細胞内ドメインに由来する配列を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の融合タンパク質。
【請求項５】
CD28ポリペプチドがSEQ ID NO: 22のアミノ酸配列を有する、請求項1〜4のいずれか一項記載の融合タンパク質。
【請求項６】
SEQ ID NO: 24からなる、請求項1〜5のいずれか一項記載の融合タンパク質。
【請求項７】
（a）SEQ ID NO: 18との比較において1〜10個の置換、欠失または挿入を有しかつPD-L1および／またはPD-L2結合活性を有することを特徴とする配列を含むPD-1ポリペプチド；
（b）SEQ ID NO: 20のアミノ酸配列を有するPD-1の膜貫通ドメイン；ならびに
（c）配列YMNM（SEQ ID NO: 29）および／またはPYAP（SEQ ID NO: 30）を有するCD28ポリペプチドの細胞内ドメインに由来する配列を含むCD28ポリペプチド
を有する、請求項6記載の融合タンパク質。
【請求項８】
請求項1〜7のいずれか一項記載の融合タンパク質をコードする、核酸分子。
【請求項９】
第二のポリペプチドをさらにコードする、請求項8記載の核酸分子。
【請求項１０】
請求項8記載の核酸分子である第一の核酸分子と、第二のポリペプチドをコードする第二の核酸分子とを含む、組成物。
【請求項１１】
第二のポリペプチドが、キメラ抗原受容体、アルファ／ベータT細胞受容体、天然T細胞受容体、抗CD3 T細胞エンゲージャーまたはT細胞受容体（TCR）融合タンパク質（TFP）である、請求項9記載の核酸分子または請求項10記載の組成物。
【請求項１２】
請求項8〜9および11のいずれか一項記載の核酸分子を含む、ベクター。
【請求項１３】
第一の核酸分子および第二の核酸分子が第一のベクターおよび第二のベクターに含まれる、請求項10または11記載の組成物。
【請求項１４】
第一および第二のベクターが同じまたは異なるベクターである、請求項13記載の組成物。
【請求項１５】
請求項8、9および11のいずれか一項記載の核酸分子；請求項10、11、13および14のいずれか一項記載の組成物；または請求項12記載のベクターを含む、形質導入細胞。
【請求項１６】
請求項8記載の核酸分子によってコードされた融合タンパク質を発現する、形質導入細胞。
【請求項１７】
請求項9または11記載の核酸分子；請求項10、11、13および14のいずれか一項記載の組成物；または請求項12記載のベクターを含む、融合タンパク質および第二のポリペプチドを発現する形質導入細胞。
【請求項１８】
請求項1〜7のいずれか一項に規定された融合タンパク質を発現する形質導入細胞を産生するための方法であって、
（a）請求項12記載のベクターまたは請求項13もしくは14記載の組成物を細胞に形質導入する工程；
（b）該形質導入細胞の中または上での該融合タンパク質の発現が可能な条件下で、該形質導入細胞を培養する工程；および
（c）該形質導入細胞を培養物から回収する工程
を含む、方法。
【請求項１９】
請求項18記載の方法によって得ることのできる、請求項8記載の核酸分子によってコードされた融合タンパク質を発現する形質導入細胞。
【請求項２０】
請求項8、9および11のいずれか一項記載の核酸分子によってコードされた融合タンパク質を発現する形質導入細胞、請求項15〜17および19のいずれか一項記載の形質導入細胞、または請求項18記載の方法によって産生された形質導入細胞を含む、薬学的組成物。
【請求項２１】
肺がん、卵巣がん、黒色腫、結腸がん、胃がん、腎細胞がん、食道がん、神経膠腫、尿路上皮がん、網膜芽細胞腫、乳がん、非ホジキンリンパ腫、膵臓がん、ホジキンリンパ腫、骨髄腫、肝細胞がん、白血病、子宮頸がん、胆管がん、口腔がん、頭頸部がんまたは中皮腫を処置するための、請求項8、9および11のいずれか一項記載の核酸分子によってコードされた融合タンパク質を発現する形質導入細胞、請求項15〜17および19のいずれか一項記載の形質導入細胞、または請求項18記載の方法によって産生された形質導入細胞を含む、薬学的組成物。
【請求項２２】
請求項8、9、および11のいずれか一項記載の核酸分子、請求項12記載のベクターおよび／または請求項1〜7のいずれか一項記載の融合タンパク質を含む、キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７０】
本明細書に記載されるように、本発明は、本発明の核酸分子、本発明のベクターおよび／または本発明の融合タンパク質を含むキットに関する。したがって、本明細書に提供される処置法は、このキットを使用して実現され得る。好都合に、本発明のキットはさらに、任意で、（a）反応バッファ、貯蔵溶液（すなわち保存剤）、洗浄溶液および／または本明細書に記載されるアッセイの実施のために必要な残りの試薬もしくは物質を含む。さらに、本発明のキットの一部は、バイアルまたはボトルの中に個別にパッケージングされることもできるし、あるいは容器またはマルチ容器ユニットとして組み合わされることもできる。加えて、キットは、使用のための指示を含み得る。本発明のキットの製造は、好ましくは、当業者に公知である標準的な手順に従う。上述したように、本明細書に提供されるキットは、PD-1のリガンド（すなわちPD-L1および／またはPD-L2）を発現することを特徴とする疾患、たとえば肺がん、卵巣がん、黒色腫、結腸がん、胃がん、腎細胞がん、食道がん、神経膠腫、尿路上皮がん、網膜芽細胞種、乳がん、非ホジキンリンパ腫、膵臓がん、ホジキンリンパ腫、骨髄腫、肝細胞がん、白血病、子宮頸がん、胆管がん、口腔がん、頭頸部がんまたは中皮腫を有する対象（好ましくはヒト患者）を処置するのに有用である。
[本発明1001]
C末端を介してCD28ポリペプチドの細胞内ドメインのN末端に機能的に連結しているPD-1ポリペプチドを含む融合タンパク質であって、該PD-1ポリペプチドがPD-1の細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインを含む、融合タンパク質。
[本発明1002]
PD-1ポリペプチドが、SEQ ID NO: 16の配列、またはSEQ ID NO: 16との比較において1〜10個の置換、欠失もしくは挿入を有しかつPD-L1および／もしくはPD-L2結合活性を有することを特徴とする配列を含む、本発明1001の融合タンパク質。
[本発明1003]
PD-1の膜貫通ドメインがSEQ ID NO: 20のアミノ酸配列を有する、本発明1001または1002の融合タンパク質。
[本発明1004]
CD28ポリペプチドが、配列YMNM（SEQ ID NO: 29）および／またはPYAP（SEQ ID NO: 30）を有するCD28ポリペプチドの細胞内ドメインに由来する配列を含む、本発明1001〜1003のいずれかの融合タンパク質。
[本発明1005]
CD28ポリペプチドがSEQ ID NO: 22のアミノ酸配列を有する、本発明1001〜1004のいずれかの融合タンパク質。
[本発明1006]
SEQ ID NO: 24からなる、本発明1001〜1005のいずれかの融合タンパク質。
[本発明1007]
（a）SEQ ID NO: 18との比較において1〜10個の置換、欠失または挿入を有しかつPD-L1および／またはPD-L2結合活性を有することを特徴とする配列を含むPD-1ポリペプチド；
（b）SEQ ID NO: 20のアミノ酸配列を有するPD-1の膜貫通ドメイン；ならびに
（c）配列YMNM（SEQ ID NO: 29）および／またはPYAP（SEQ ID NO: 30）を有するCD28ポリペプチドの細胞内ドメインに由来する配列を含むCD28ポリペプチド
を有する、本発明1006の融合タンパク質。
[本発明1008]
本発明1001〜1007のいずれかの融合タンパク質をコードする、核酸分子。
[本発明1009]
第二のポリペプチドをさらにコードする、本発明1008の核酸分子。
[本発明1010]
本発明1008の核酸分子である第一の核酸分子と、第二のポリペプチドをコードする第二の核酸分子とを含む、組成物。
[本発明1011]
第二のポリペプチドが、キメラ抗原受容体、アルファ／ベータT細胞受容体、天然T細胞受容体、抗CD3 T細胞エンゲージャーまたはT細胞受容体（TCR）融合タンパク質（TFP）である、本発明1009の核酸分子または本発明1010の組成物。
[本発明1012]
本発明1008〜1009および1011のいずれかの核酸分子を含む、ベクター。
[本発明1013]
第一の核酸分子および第二の核酸分子が第一のベクターおよび第二のベクターに含まれる、本発明1010または1011の組成物。
[本発明1014]
第一および第二のベクターが同じまたは異なるベクターである、本発明1013の組成物。
[本発明1015]
本発明1008、1009および1011のいずれかの核酸分子；本発明1010、1011、1013および1014のいずれかの組成物；または本発明1012のベクターを含む、形質導入細胞。
[本発明1016]
本発明1008の核酸分子によってコードされた融合タンパク質を発現する、形質導入細胞。
[本発明1017]
本発明1009または1011の核酸分子；本発明1010、1011、1013および1014のいずれかの組成物；または本発明1012のベクターを含む、融合タンパク質および第二のポリペプチドを発現する形質導入細胞。
[本発明1018]
本発明1001〜1007のいずれかに規定された融合タンパク質を発現する形質導入細胞を産生するための方法であって、
（a）本発明1012のベクターまたは本発明1013もしくは1014の組成物を細胞に形質導入する工程；
（b）該形質導入細胞の中または上での該融合タンパク質の発現が可能な条件下で、該形質導入細胞を培養する工程；および
（c）該形質導入細胞を培養物から回収する工程
を含む、方法。
[本発明1019]
本発明1018の方法によって得ることのできる、本発明1008の核酸分子によってコードされた融合タンパク質を発現する形質導入細胞。
[本発明1020]
本発明1008、1009および1011のいずれかの核酸分子によってコードされた融合タンパク質を発現する形質導入細胞、本発明1015〜1017および1019のいずれかの形質導入細胞、または本発明1018の方法によって産生された形質導入細胞を含む、薬学的組成物。
[本発明1021]
肺がん、卵巣がん、黒色腫、結腸がん、胃がん、腎細胞がん、食道がん、神経膠腫、尿路上皮がん、網膜芽細胞腫、乳がん、非ホジキンリンパ腫、膵臓がん、ホジキンリンパ腫、骨髄腫、肝細胞がん、白血病、子宮頸がん、胆管がん、口腔がん、頭頸部がんまたは中皮腫を処置する方法に使用するための、本発明1008、1009および1011のいずれかの核酸分子によってコードされた融合タンパク質を発現する形質導入細胞、本発明1015〜1017および1019のいずれかの形質導入細胞、または本発明1018の方法によって産生された形質導入細胞。
[本発明1022]
本発明1008〜1010のいずれかの核酸分子、本発明1011のベクターおよび／または本発明1001〜1007のいずれかの融合タンパク質を含む、キット。