【手続補正書】
【提出日】平成20年5月7日(2008.5.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  配列番号２のタンパク質の最小活性トキシンのアミノ酸配列を含むタンパク質であって、この最小活性トキシンが、
ａ．配列番号２のタンパク質のフラグメントであり、かつ
ｂ．配列番号４のアミノ酸位置５１〜４５７のタンパク質との組み合わせにおいて、ディアブロチカ ビルギフェラ（Diabrotica virgifera）幼虫によって摂取された場合、この幼虫に対して殺虫性であること、
を特徴とするタンパク質。
【請求項２】  配列番号４のタンパク質の最小活性トキシンのアミノ酸配列を含むタンパク質であって、この最小活性トキシンが、
ａ．配列番号４のタンパク質のフラグメントであり、かつ
ｂ．配列番号２のアミノ酸位置３８〜８７１のタンパク質との組み合わせにおいて、Diabrotica virgifera幼虫によって摂取された場合、この幼虫に対して殺虫性であること、
を特徴とするタンパク質。
【請求項３】  配列番号２のアミノ酸位置３８〜アミノ酸位置７６８又は８７１のアミノ酸配列を含む、タンパク質。
【請求項４】  配列番号２又は配列番号１０のアミノ酸配列を含む、請求項３記載のタンパク質。
【請求項５】  配列番号４のアミノ酸位置５１〜アミノ酸位置４４９又は４５７のアミノ酸配列を含む、タンパク質。
【請求項６】  配列番号４又は配列番号８のアミノ酸配列を含む、請求項５記載のタンパク質。
【請求項７】  ＢＣＣＭ−ＬＭＢＰに受託番号ＬＭＢＰ４００９として寄託されているｉｓｐ１Ａ ＤＮＡによってコードされるタンパク質のプロテアーゼ消化フラグメントのアミノ酸配列を含むタンパク質であって、このプロテアーゼ消化フラグメントが、配列番号４のアミノ酸位置５１〜アミノ酸位置４５７のタンパク質との組み合わせでの適用に際し、Diabrotica virgiferaに対して殺虫性である、タンパク質。
【請求項８】  ＢＣＣＭ−ＬＭＢＰに受託番号ＬＭＢＰ４００９として寄託されているｉｓｐ２Ａ ＤＮＡによってコードされるタンパク質のプロテアーゼ消化フラグメントのアミノ酸配列を含むタンパク質であって、このプロテアーゼ消化フラグメントが、アミノ酸位置３８〜アミノ酸位置８７１の配列番号２のタンパク質との組み合わせでの適用に際し、Diabrotica virgiferaに対して殺虫性である、タンパク質。
【請求項９】  前記プロテアーゼ消化フラグメントが、甲虫類消化管液での処理によって得られる、請求項７記載のタンパク質。
【請求項１０】  前記プロテアーゼ消化フラグメントが、甲虫類消化管液での処理によって得られる、請求項８記載のタンパク質。
【請求項１１】  請求項１、３、４、７又は９のいずれか１項記載のタンパク質をコードする、ＤＮＡ配列。
【請求項１２】  請求項２、５、６、８又は１０のいずれか１項記載のタンパク質をコードする、ＤＮＡ配列。
【請求項１３】  天然のＤＮＡ配列と比較して異なるコドン使用頻度を有するが同じタンパク質配列をコードする人工ＤＮＡ配列を含む、請求項１１記載のＤＮＡ。
【請求項１４】  天然のＤＮＡ配列と比較して異なるコドン使用頻度を有するが同じタンパク質配列をコードする人工ＤＮＡ配列を含む、請求項１２記載のＤＮＡ。
【請求項１５】  請求項１３記載のＤＮＡと植物発現可能プロモーター領域とを含む、キメラ遺伝子。
【請求項１６】  請求項１４記載のＤＮＡと植物発現可能プロモーター領域とを含む、キメラ遺伝子。
【請求項１７】  前記プロモーター領域が、根組織において優先的に活性である、請求項１５記載のキメラ遺伝子。
【請求項１８】  前記プロモーター領域が、根組織において優先的に活性である、請求項１６記載のキメラ遺伝子。
【請求項１９】  前記プロモーターが、配列番号５又は６のＤＮＡ配列又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下でそれにハイブリダイズするＤＮＡを含む、請求項１５記載のキメラ遺伝子。
【請求項２０】  前記プロモーターが、配列番号５又は６のＤＮＡ配列又はストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下でそれにハイブリダイズするＤＮＡを含む、請求項１６記載のキメラ遺伝子。
【請求項２１】  前記キメラ遺伝子が、細胞からの分泌のため又は細胞のオルガネラへのターゲティングのためのシグナルペプチドを更に含む、請求項１５記載のキメラ遺伝子。
【請求項２２】  前記キメラ遺伝子が、細胞からの分泌のため又は細胞のオルガネラへのターゲティングのためのシグナルペプチドを更に含む、請求項１６記載のキメラ遺伝子。
【請求項２３】  前記シグナルペプチドが、葉緑体輸送ペプチドである、請求項２１記載のキメラ遺伝子。
【請求項２４】  前記シグナルペプチドが、葉緑体輸送ペプチドである、請求項２２記載のキメラ遺伝子。
【請求項２５】  請求項１５、１７、１９、２１又は２３のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択されるキメラ遺伝子を含む、植物細胞。
【請求項２６】  請求項１６、１８、２０、２２又は２４のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択されるキメラ遺伝子を含む、植物細胞。
【請求項２７】  請求項１５、１７、１９、２１又は２３のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択されるキメラ遺伝子と、請求項１６、１８、２０、２２又は２４のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択されるキメラ遺伝子とを含むように形質転換された、植物細胞。
【請求項２８】  請求項１、３、４又は７のいずれか１項記載のタンパク質と、請求項２、５、６又は８のいずれか１項記載のタンパク質とを産生するように形質転換された、植物細胞。
【請求項２９】  その細胞中に組み込まれたキメラ遺伝子を含む植物又は種子であって、そのキメラ遺伝子が、請求項１５、１７、１９、２１又は２３のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択される、植物又は種子。
【請求項３０】  請求項１６、１８、２０、２２又は２４のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択されるキメラ遺伝子を含む、植物又は種子。
【請求項３１】  トウモロコシ又はトウモロコシの種子である、請求項２９記載の植物又は種子。
【請求項３２】  トウモロコシ又はトウモロコシの種子である、請求項３０記載の植物又は種子。
【請求項３３】  請求項１１記載のＤＮＡ又は請求項１２記載のＤＮＡを含むように形質転換された、微生物。
【請求項３４】  植物の細胞においてタンパク質を発現させることを含む、昆虫の防除方法であって、前記タンパク質が、請求項１〜８のいずれか１項記載のタンパク質から選択される、方法。
【請求項３５】  植物細胞を第一のキメラ遺伝子及び第二のキメラ遺伝子で形質転換し、昆虫に対して耐性の前記細胞から形質転換された植物を再生させることを含む、植物を甲虫類昆虫に対して耐性にする方法であって、前記第一のキメラ遺伝子が請求項１５、１７、１９、２１又は２３のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択され；前記第二のキメラ遺伝子が請求項１６、１８、２０、２２又は２４のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択される、方法。
【請求項３６】  第一のキメラ遺伝子と第二のキメラ遺伝子とで形質転換された植物を植え付け、播種し、又は生育させることを含む、甲虫類有害昆虫を防除する方法であって、前記第一のキメラ遺伝子が請求項１５、１７、１９、２１又は２３のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択され；前記第二のキメラ遺伝子が請求項１６、１８、２０、２２又は２４のいずれか１項記載のキメラ遺伝子から選択される、方法。
【請求項３７】  前記植物がトウモロコシである、請求項３６記載の方法。
【請求項３８】  前記昆虫が、以下：
根きり虫類、ゾウムシ類、ジャガイモハムシ類、ディアブロチカ（Diabrotica）属、アンソノムス（Anthonomus）属、レプチノタルサ（Leptinotarsa）属、アゲラスチカ  アルニ（Agelastica alni）、アルファルファタコゾウムシ（Hypera postica）、ヒペラ  ブルネイペニス（Hypera brunneipennis）、ハルチカ  トンバシア（Haltica tombacina）、アントノムス  グランジス（Anthonomus grandis）、テネブリオ  モリトー（Tenebrio molitor）、トリボレウム  カスタネウム（Triboleum castaneum）、ジクラジスパ  アルミゲラ（Dicladispa armigera）、トリキスパ  セリカ（Trichispa serica）、オウレマ  オリゼ（Oulema oryzae）、コラスピス  ブルネ（Colaspis brunnea）、リゾロルプトルス  オリゾフィラス（Lissorhorptrus oryzophilus）、フィロトレタ  クルシフェラ（Phyllotreta cruciferae）、フィロトレタ  ストリオラタ（Phyllotreta striolata）、フィリオデス  プンクツラタ（Psylliodes punctulata）、エントモセリス  アメリカナ（Entomoscelis americana）、メリゲテス  アエネウス（Meligethes aeneus）、セウトリンクス（Ceutorynchus）属、フィリオデス  クリソセファラ（Psylliodes chrysocephala）、フィロトレタ  ウンズラタ（Phyllotreta undulata）、レプチノタルサ  デセミリネタ（Leptinotarsa decemlineata）、ディアブロチカ  ウンデシムプンクタタ  ウンデシムプンクタタ（Diabrotica undecimpunctata undecimpunctata）、ディアブロチカ  ウンデシムプンクタタ  ホワルジ（Diabrotica undecimpunctata howardi）、ディアブロチカ  バルベリ（Diabrotica barberi）、及びディアブロチカ  ビルフェラ（Diabrotica virgifera）からなる群から選択される、請求項３５、３６又は３７のいずれか１項記載の方法。
【請求項３９】  請求項１、３、４、７又は９のいずれか１項記載のタンパク質と請求項２、５、６、８及び１０のいずれか１項記載のタンパク質とを、トウモロコシ根切り虫からトウモロコシを保護するための同時、別個又は連続的使用のための組み合わされた調製物として含む、製品。
【請求項４０】  トウモロコシ、又はトウモロコシ根切り虫からトウモロコシを保護するための殺虫性組成物である、請求項３９記載の製品。