(57)【要約】  本発明は、安全且つ簡便なポリフェノール含有組成物の製造方法及びポリフェノール製造方法を提供するものである。  ポリフェノール含有溶液を特定の多糖類に接触させ、該多糖類へポリフェノールを担持させることにより、飲食品の添加物としても利用可能なポリフェノール含有組成物を得ることができる。また、ポリフェノールを担持した多糖類を溶媒に接触させてポリフェノールを溶媒中へ溶出させ、溶媒除去後にポリフェノールを粉末化させることによりポリフェノールの精製が可能である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリフェノール含有溶液をセルロース、デンプン、キチン、キトサンからなる群から選択される多糖類に接触させ、該多糖類へポリフェノールを担持させることを特徴とするポリフェノール高含有組成物の製造方法。
【請求項２】
セルロースが結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、微小繊維状セルロース、粉末セルロースであることを特徴とする請求項１に記載のポリフェノール高含有組成物の製造方法。
【請求項３】
高濃度化対象となるポリフェノールがケルセチンであることを特徴とする請求項１〜２に記載のポリフェノール高含有組成物の製造方法。
【請求項４】
ポリフェノール含有溶液が、タマネギ外皮を水または４０％以下のエタノール、メタノール、ないしアセトン水溶液で抽出したケルセチン含有溶液であることを特徴とする請求項１〜３に記載のポリフェノール高含有組成物の製造方法。
【請求項５】
ポリフェノール担持多糖類を含有することを特徴とする飲食品。
【請求項６】
ポリフェノール担持多糖類がデンプンであることを特徴とする請求項５に記載の飲食品。
【請求項７】
ポリフェノール担持多糖類を溶媒に接触させて溶媒中へポリフェノールを溶出し、
溶媒除去後にポリフェノールを粉末化させることを特徴とするポリフェノール精製方法。
【請求項８】
精製対象となるポリフェノールがケルセチンであることを特徴とする請求項７に記載のポリフェノール精製方法。
【請求項９】
ケルセチンと、アルギニンとを含有することを特徴とする血圧上昇抑制組成物。
【発明の詳細な説明】
【関連出願】
【０００１】
本出願は、２００６年  ５月２３日付け出願の日本国特許出願２００６−１４２３８５号の優先権を主張しており、ここに折り込まれるものである。
【技術分野】
【０００２】
本発明はポリフェノール高含有組成物の製造方法及びポリフェノール精製方法、特にポリフェノールであるケルセチンにアルギニンを添加して得られる血圧上昇抑制組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
ポリフェノールは、同一分子内に２個以上のフェノール性水酸基をもつ化合物の総称であり、多くの種類が植物界に広く分布している。代表的なポリフェノールであるフラボノイドには、抗酸化性、抗変異原性、抗がん性、血圧上昇抑制、抗糖尿病性、抗アレルギー性等の生体調節機能等を有するものが多く、特に、フラボノイドの一種であるケルセチンが優れた血圧上昇抑制効果を示すことが報告されている。近年、健康志向の向上に伴ってポリフェノールの優れた作用が注目され、その需要は食品、化粧品、医薬品等多岐に亘る。このような分野においてポリフェノールを添加物もしくは原材料として用いるに際し、ポリフェノールを含有する原料から特定分画のポリフェノールを分離する必要がある。従来のポリフェノールの分離方法として、吸着性物質にポリフェノールを選択的に吸着させる技術が知られている。具体的には例えば、ポリフェノール含有液をスチレン系合成吸着剤に接触させ、ポリフェノール類を吸着させ、分離する方法（特許文献１）、タマネギ外皮抽出液と蛋白質を混合し、ポリフェノール化合物含有溶液と木粉を接触させ、木粉にポリフェノールを吸着し、溶媒に溶出させる方法（特許文献２）が報告されている。
また、可食物質を吸着剤とした技術として、フラボノイドであるケルセチンと蛋白質の複合体を形成して遊離する方法（特許文献３）が報告されている。
【特許文献１】特開２００２−３３５９１１号公報
【特許文献２】特開平７−２３８０８７号公報
【特許文献３】特開２００５−２８９８５０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、特許文献１及び２のようなポリフェノールの吸着精製法においては、ポリフェノールを吸着した吸着剤の利用については着目されていなかった。すなわち、これら従来の吸着精製法では、可食物質を吸着剤として用い、ポリフェノールを吸着させた吸着剤をポリフェノール高含有の食品材料として利用することについては考慮されていない。
一方、可食物質である蛋白質を吸着剤とする特許文献３の技術では、ポリフェノールを蛋白質へ吸着させる際にポリフェノールの他に残留農薬をも吸着してしまう危険性があり、安全上の問題が残されていた。
また、特に近年注目されているケルセチンについては、その回収率、純度の観点からも、優れた抽出、分離方法が求められていた。
本発明は上記事情を鑑み行われたものであり、安全かつ簡便なポリフェノール高含有組成物の製造方法、及びポリフェノールの精製方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らが鋭意研究を行った結果、ポリフェノール含有溶液のポリフェノールを特定の多糖類に担持させれば、食品材料として利用可能なポリフェノール担持多糖類が得られることを見出した。
また、前記ポリフェノール担持多糖類からポリフェノールが精製可能であること、さらに、ポリフェノールの一種であるケルセチンと、アルギニンとを含有する組成物が優れた血圧上昇抑制効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。【０００６】
すなわち、本発明のポリフェノール高含有組成物の製造方法は、ポリフェノール含有溶液をセルロース、デンプン、キチン、キトサンからなる群から選択される多糖類に接触させ、該多糖類へポリフェノールを担持させることを特徴とする。
また、前記ポリフェノール高含有組成物の製造方法においては、セルロースが結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、微小繊維状セルロース、粉末セルロースであることが好適である。
また、前記ポリフェノール高含有組成物の製造方法においては、高濃度化対象となるポリフェノールがケルセチンであることが好適である。
また、前記ポリフェノール高含有組成物の製造方法においては、ポリフェノール含有溶液が、タマネギ外皮を水または４０％以下のエタノール、メタノール、ないしアセトン水溶液で抽出したケルセチン含有溶液であることが好適である。
さらに、本発明は、ポリフェノール担持多糖類を含有することを特徴とする飲食品を提供するものである。
前記飲食品においては、ポリフェノール担持多糖類がデンプンであることが好適である。
さらに、本発明は、ポリフェノール担持多糖類を溶媒に接触させて溶媒中へポリフェノールを溶出し、溶媒除去後にポリフェノールを粉末化させることを特徴とするポリフェノール精製方法を提供する。
前記ポリフェノール精製方法においては、精製対象となるポリフェノールがケルセチンであることが好適である。
また、本発明は、ケルセチンと、アルギニンとを含有することを特徴とする血圧上昇抑制組成物を提供する。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の方法によれば、ポリフェノールを含む植物材料よりポリフェノールを簡便且つ安全に精製することができる。また、ポリフェノールを吸着剤ごと食品材料として飲食物に添加することが可能であるため、高濃度のポリフェノールを効率良く摂取することができる。
さらに、ポリフェノールとしてケルセチンを適用すれば、アルギニンを添加することにより優れた血圧上昇防止組成物を得ることが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】本発明の製造例のフローチャートを示した図である。
【図２】実施例２におけるＳＨＲラットの血圧の変化を示した図である。
【図３】実施例２におけるＷＫＹラットの血圧の変化を示した図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明に適用し得るポリフェノールには限定はないが、例えばフェニルカルボン酸系、リグナン系、クルクミン系、クマリン系、フラボノイド系等が挙げられ、特にフラボノイドに分類されるポリフェノールが好ましい。
フラボノイド系ポリフェノールとしては、アピゲニン、クリシン、ルテオリン等のフラボン類；ガランギン、ケルセチン、ルチン、ケンフェロール、ミリセチン等のフラボノール類；ダイゼイン、ダイジン、ゲニステイン等のイソフラボン；カテキン、エピカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレート、テアフラビン等のフラバノール類；ナリンゲニン、ナリンギン、ヘスペレチン、ヘスペリジン等のフラバノン類；アントシアニジン、アントシアニン、シアニジン、シアニン、プロアントシアニジン、プロアントシアニン、デルフィニジン、デルフィニン、ペラルゴニジン、ペラルゴニン等のアントシアニジン類やその配糖体が挙げられる。本発明においては、ケルセチン、カテキン、エピカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレート、プロアントシアニジンが好適であり、特にケルセチンが好ましい。【００１０】
本発明におけるポリフェノール含有溶液とは、ポリフェノールを1種でも含有する溶液であればよく、植物等のポリフェノールを含有する材料の抽出液、ポリフェノールを含有する材料の加工過程等において生じる絞り汁、混合液、煮汁、絞り粕等の残渣物等が含まれる。ポリフェノールの種類や含有量は材料により異なるため、使用する材料は希求するポリフェノールによって適宜選択すればよい。本発明においては、特にタマネギ外皮から抽出したケルセチン含有溶液を用いることが好ましい。【００１１】
本発明において、ポリフェノール含有溶液として植物抽出液を用いる場合、抽出方法について特に制限はなく、一般的に適用される抽出手段に準ずればよい。例えば、植物材料を溶媒中に浸漬し、場合によって適宜加熱しながら成分を撹拌抽出し、抽出後に濾過を行えば抽出液のみを得ることができる。抽出溶媒は、水、エタノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、メタノール、ヘキサン、アセトン、ジエチルエーテル、ジオキサン、酢酸エチル等の有機溶媒から選択することが可能である。特に、水又は４０％以下のエタノール、メタノール、ないしアセトン水溶液を用いれば、前記抽出工程後に続く多糖類へのポリフェノール担持工程を通じて同じ溶媒を使用することができるため、実施効率上好ましい。なお、植物からのポリフェノール抽出量を考慮するならば、３０〜８０％エタノール水溶液が好適であるが、抽出工程で濃度の高い有機溶媒を用いた場合は、ポリフェノール担持工程に進むに際し、溶媒を除去するか水で希釈する作業が必要となることがある。【００１２】
本発明において、ポリフェノールを担持させる多糖類としては、セルロース、デンプン、キチン、キトサンが好適である。セルロースとしては、特に結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、微小繊維状セルロース、粉末セルロースがより好ましい。
ポリフェノール担持工程は、ポリフェノール含有溶液と前記多糖類とを接触させ、該多糖類へポリフェノールを選択的に担持させることにより行う。多糖類の添加量には特に制限はなく、抽出液の量、担持させるポリフェノールの濃度、用途によって適宜設定すればよい。ポリフェノール担持工程における溶媒は、水又は４０％以下のエタノール、メタノール、アセトン水溶液が好適である。有機溶媒濃度が４０％を超えると、ポリフェノールの多糖類への担持量が低下するため好ましくない。【００１３】
ポリフェノールを担持させた多糖類は、乾燥、減圧等により溶媒を除去すれば、ポリフェノール担持多糖類として飲食品へ添加することができる。また、そのまま食品として摂取することも可能である。ポリフェノール担持多糖類を摂取する場合、担持したポリフェノールの吸収効率を考慮すれば、担持多糖類は可消化性のものを使用することがより好ましい。
本発明のポリフェノール担持多糖類を添加する飲食品としては、菓子類、麺類、乳製品、加工水産製品、加工畜産製品、加工野菜・果物製品、発酵食品、調味料、みそ汁、スープ類、飲料等の一般食品や、健康食品、栄養補助食品、その他、ガム、キャンデー、タブレット等の口腔剤、インスタント食品等が挙げられる。
本発明の飲食品におけるポリフェノール担持多糖類の添加量は、製造する飲食品によって適宜決定すればよく、どの飲食品も常法により製造し得る。【００１４】
また、前記ポリフェノール担持多糖類は、溶媒に接触させて多糖類に担持したポリフェノールを溶媒中へ溶出させることにより、ポリフェノールを精製することが可能である。ポリフェノールの溶出に用いる溶媒としては、水、エタノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、メタノール、ヘキサン、アセトン、ジエチルエーテル、ジオキサン、酢酸エチル等の有機溶媒を単独又は組み合わせて使用することができる。特に水、エタノール、メタノール、アセトンが好適であり、４０〜８０％エタノール水溶液がより好ましい。【００１５】
ポリフェノールを溶媒に溶出させた後、濾過により多糖類を除去し、さらに濃縮により溶媒を除去すれば、残滓として精製ポリフェノールを得ることができる。
前記精製ポリフェノールは、フリーズドライ又はスプレードライ等の方法により乾燥し、粉末化することが可能である。【００１６】
本発明により精製されたポリフェノールは、食品、化粧品、医薬品等、ポリフェノールが通常用いられる用途に適用し得る。【００１７】
さらに、ポリフェノールの一種であるケルセチンと、アルギニンとを含有する組成物は、優れた血圧上昇抑制作用を示す。ケルセチンが血圧の上昇を抑制する作用を有することは従来知られているが、アミノ酸の一種であるアルギニンの添加によりその作用が著しく増進されることを、本発明者らが見出した。
ケルセチンは０．７ｍｇ／ｄａｙ／ｋｇ以上摂取すれば十分な血圧上昇抑制作用を示し、また、効果、飲用量の両面から考慮してケルセチンとアルギニンの配合比は１０〜２３：１となるように添加することが好適である。
本発明の血圧上昇抑制組成物に使用するケルセチンは、精製されたものが好ましいが、有効量を含むものであればケルセチン含有物の状態であってもよい。すなわち、本発明の方法に即して述べるならば、多糖類に接触させる前のケルセチン含有溶液、前記溶液を多糖類に接触させて得たケルセチン担持多糖類、ケルセチン担持多糖類から精製したケルセチン等、又はこれらを配合した組成物等が該当し得る。
アルギニンも同様に、精製された状態ないし含有物を使用することができ、従来の精製法等で得たものでも、市販のものを用いてもよい。
上記ケルセチンとアルギニンとを含有する本発明の血圧上昇抑制組成物は、食品、医薬品、化粧料等に配合することが可能であり、通常これらに使用される成分や添加物を併用してもよい。組成物の配合量は特に規定はない。
以下、実施例を挙げながら本発明をさらに詳しく説明する。なお、これらの実施例は本発明を限定するものではない。
【実施例１】
【００１８】
＜製造例＞
図１は、タマネギ外皮から本発明の方法によってポリフェノールの一種であるケルセチンを精製し、前記ケルセチンにアルギニンを添加して本発明の血圧上昇抑制組成物を得るまで工程をチャートで示したものである。
すなわち、８０℃に加熱した水１０Ｌに洗浄したタマネギ外皮１００ｇを投入してケルセチンを抽出し、不純物を除き、ケルセチン含有溶液を得た。
続いて、前記ケルセチン含有溶液中に多糖類として結晶セルロース１００ｇを投入し、撹拌してケルセチンを結晶セルロースへ担持させる。その後排水し、ケルセチン担持結晶セルロースを得た。
ケルセチン担持結晶セルロースは１０Ｌの５０％エタノール水溶液中に浸漬し、ケルセチンを溶出させた。
ケルセチン溶出後、溶媒を濃縮除去して得た精製ケルセチン溶液をフリーズドライにより粉末化し、ケルセチン粉末２ｇを得た。
さらに、前記ケルセチン粉末に市販のアルギニン粉末を添加し、本発明の血圧上昇抑制組成物を得た。【００１９】
＜各種多糖類のポリフェノールの担持能力＞
上記製造例において、ケルセチンの担持に結晶セルロース及び各種多糖類を用いた場合のケルセチンの担持能力を調査した。各多糖類のケルセチン担持率（ケルセチンの抽出量に対する多糖類へのケルセチン担持量）を表１に示す。なお、ケルセチンの定量は、液体クロマトグラフィー測定による。【００２０】
ポリフェノール量の測定
各溶媒の抽出試料４ｍｌ、メタノール３ｍｌ、２ｍＭジエチルジチオカルバメート／メタノール溶液３ｍｌ、５０％塩酸２．５ｍｌをヒーティングブロック用試験管に調製し、９０℃にて２時間加熱した。加熱後、調製試料を１ｍｌ分取し、水２．５ｍｌを加え、０．４５μｍポアサイズのＰＴＦＥフィルターで濾過し、液体クロマトグラフィー測定を行った。【００２１】
【表１】
2007136068.tif 000002
【００２２】
本発明のポリフェノール担持物質である多糖類は、いずれも高いポリフェノール担持能力を示し、特に結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースにおいては、ケルセチンの担持率が著しく優れていた。また、本発明ではポリフェノールを担持した多糖類ごとポリフェノールを摂取することが可能であるため、ポリフェノールの摂取効率については、ポリフェノール担持多糖類が従来の吸着剤より優れていることは明白である。特に、かたくり粉、コーンスターチ、タピオカでんぷんのような可消化性多糖類は体内で消化吸収されるため、該多糖類に担持したポリフェノールの吸収効率は、非消化性多糖類に担持した場合よりも高くなると考えられる。したがって、食品へ添加するポリフェノール担持多糖類としては、可消化性多糖類が特に好ましい。【００２３】
＜ポリフェノール担持における溶媒濃度＞
上記製造例において、結晶セルロースにケルセチンを担持させる際の溶媒について検討した。上記製造例における抽出溶媒を水に代えて、各種濃度のエタノール、メタノール、アセトンを用いて、ケルセチン含有溶液を得た後に、結晶セルロースを投入し、以降の操作は製造例に準じた。溶媒の評価は、結晶セルロースに担持されるケルセチンの担持率（ケルセチンの抽出量に対する結晶セルロースへの担持量）により行った。なお、ポリフェノール量の測定は上記と同様、液体クロマトグラフィーによる。
各溶媒の濃度毎のケルセチン担持率を表２に示す。【００２４】
【表２】
2007136068.tif 000003
【００２５】
表２より、いずれの有機溶媒においても、濃度４０％以下ではケルセチンの担持率は良好であったが、濃度が４０％を超えると、以降濃度が上昇するほど担持率が著しく減少する傾向にあった。また、水を溶媒とした場合も、十分なケルセチン担持が認められた。
したがって、ポリフェノール吸着の際の溶媒は、水または濃度４０％以下のエタノール、メタノール、アセトン水溶液が好適であることが認められた。【００２６】
＜ポリフェノール抽出溶媒濃度＞
上記製造例において、タマネギ外皮からのケルセチン抽出溶媒を水に代えて、各種濃度のエタノール、メタノール、アセトン水溶液としてケルセチン抽出量を調べた。ケルセチンの定量は上記と同様、液体クロマトグラフィーによる。【００２７】
各溶媒とその濃度によるケルセチンの抽出量を表３に示す。
【表３】
2007136068.tif 000004
【００２８】
ケルセチンは、エタノール、メタノール、アセトンの各濃度においてほぼ安定に抽出されたが、特に３０〜８０％エタノール水溶液が抽出量に優れていた。なお、水を用いた場合も十分なケルセチンの抽出が認められた。
したがって、ポリフェノール含有材料よりポリフェノールをより多量に抽出する際の溶媒としては、３０〜８０％エタノール水溶液が好適である。しかしながら、上記したポリフェノール担持における溶媒濃度の検討において、ポリフェノール担持の際の好適な溶媒が水又は濃度４０％以下のエタノール、メタノール、アセトン水溶液であったことを考慮すると、抽出の際もポリフェノール担持時と同様の溶媒を用いれば、それぞれの工程毎に溶媒を入れ替える必要がなくなるため、作業効率やコスト上好ましい。【００２９】
＜ポリフェノール溶出溶媒濃度＞
上記製造例において、ケルセチン担持結晶セルロースよりケルセチンを溶出させる際の溶媒濃度を検討した。すなわち、上記製造例における溶出溶媒を５０％エタノールに代えて、水ないし各種濃度のエタノール、メタノール、アセトンを用い、ケルセチン担持結晶セルロースからケルセチンを溶出させた。溶媒の評価は溶出率（ケルセチンの担持量に対する溶媒への溶出量）により行った。ケルセチンの定量は上記と同様、液体クロマトグラフィーによる。
各溶媒の濃度毎のケルセチン溶出率を表４に示す。【００３０】
【表４】
2007136068.tif 000005
【００３１】
ケルセチンの溶出は、エタノール、メタノール、アセトンのいずれの溶媒においても可能であり、４０〜８０％エタノール水溶液のケルセチン溶出能力が著しく優れていた。また、いずれの溶媒においても濃度が４０％より低くなると、ポリフェノールの溶出率は低下する傾向にあった。
したがって、ポリフェノール担持多糖類からポリフェノールを溶出させる溶媒としては、４０〜８０％エタノールが好適であることが認められた。【００３２】
＜ポリフェノールの回収率＞
続いて、本発明の方法に適したポリフェノールを調査した。
すなわち、上記製造例において、ポリフェノール含有材料をタマネギ外皮に代えて、茶、ブドウ搾汁粕、小豆煮汁として、各材料の含有ポリフェノールを精製した。各材料からのポリフェノール回収率（ポリフェノール含有溶液中のポリフェノール量に対する精製ポリフェノール量）を表５に示す。
なお、小豆煮汁とは、小豆１００ｇを水４００ｍｌで煮出した煮汁をポリフェノール含有溶液としたものであり、茶及びタマネギ皮は１ｇを熱水１００ｍｌで抽出し、ブドウ搾汁粕は１０gを熱水１００ｍｌで抽出し、ポリフェノール含有溶液とした。以降の操作は上記製造例に準じた。【００３３】
【表５】
2007136068.tif 000006
【００３４】
表５に示すとおり、ケルセチンの回収率が極めて優れていることが認められた。また、他のポリフェノールについても、安定して回収が可能であった。
以上の結果から、本発明に適用するポリフェノールとしては、特にケルセチンが好適であることが分かった。【００３５】
＜ポリフェノールの回収率２＞
さらに、上記製造例において、ポリフェノールを担持させる多糖類としてリグノセルロースを用いた場合のケルセチン回収率を調査し、上記試験における結晶セルロースによるケルセチン回収率と比較した。ポリフェノール含有溶液は、上記試験と同様にタマネギ皮１ｇを熱水１００ｍｌで抽出したものとし、その他の操作は上記製造例にしたがった。各セルロースによるポリフェノール（ケルセチン）回収率（ポリフェノール含有溶液中のポリフェノール量に対する精製ポリフェノール量）を表６に示す。なお、ケルセチンの定量は、液体クロマトグラフィー測定によって行い、リグノセルロースは下記の方法により調製したものを使用した。【００３６】
リグノセルロース調製方法
スギ木粉１００ｇを５０℃下にて１日間乾燥した後、８０メッシュでふるった。得られた乾燥木粉を１Ｌの０．１規定の水酸化ナトリウム溶液に３日間浸漬した後、水で十分に洗浄した。次いで１Ｌの０．１規定の塩酸溶液に１日間浸漬した後、水で十分に洗浄した。さらに、これを６０％エタノール溶液に１日間浸漬した後、水で十分に洗浄し、自然乾燥させた。【００３７】
【表６】
2007136068.tif 000007
【００３８】
表６に示すとおり、リグノセルロースは結晶セルロースに比べ、ケルセチンの担持力に劣っていた。すなわち、ケルセチンの担持においては、特に結晶セルロースがリグノセルロースよりも著しく担持力に優れることが明らかになった。
リグノセルロースは木部に存在する高分子であるリグニンを含むセルロースであり、いわゆる木粉である。結晶セルロースは結晶体である純粋なセルロースのみを精製したもので、リグニンを含有しない。
以上を考慮すれば、特にケルセチンの精製に関しては、ポリフェノールの担持にセルロースを用いる場合、リグニン等を含まないセルロース純度の高いものが好適であると考えられる。
【実施例２】
【００３９】
＜ラット血圧上昇抑制試験＞
ケルセチンにアルギニンを添加して得られる、本発明の血圧上昇抑制組成物について血圧上昇抑制効果を検討した。
ケルセチンの調整
８０℃に加熱した水１０Ｌに洗浄したタマネギ外皮１００ｇを投入してケルセチンを抽出し、不純物を除き、ケルセチン含有溶液を得た。前記ケルセチン含有液中のケルセチン含有量は０．１ｍｇ／ｍｌであった。ケルセチン含有溶液は適宜エバポレーターで濃縮を行った。【００４０】
試験方法
１１週齢の雄性高血圧自然発症ラット（ＳＨＲ）及び正常血圧のウィスター京都ラット（ＷＫＹ）を、体重、血圧の平均値がほぼ等しくなるようにＳＨＲラットをＡ〜Ｉ群（１群５頭・９群）に、ＷＫＹラットをＪ〜Ｌ群（１群５頭・３群）に分類し、室温２２．０±１．０℃、湿度６０±１０％、明暗サイクル１２時間に維持された飼育室内にて、飼料及び水を自由に摂取させ、１週間予備飼育を行った。
予備飼育後、上記調製方法で得たケルセチン含有溶液と市販アルギニン粉末（味の素株式会社）をケルセチン及びアルギニンの含有量が下記表７に示す量となるように混合し、各群１日１回経口投与し、予備飼育と同環境で８週間飼育した。試験期間中の飼料及び水は自由に摂取させた。
ラットの血圧は１週間に１回測定した。各ラットを３８℃の加温器中で数分間加温させ順応した後、非観血式血圧自動測定装置（ＢＰ−９８Ａ；株式会社ソフトロン製）を用いて、ラットの尾脈波から収縮期血圧を測定した。各ラットの血圧は毎回３回測定した値の平均値を記録した。各群の血圧の変化を図２に示す。【００４１】
【表７】
2007136068.tif 000008
【００４２】
図２によれば、ケルセチン及びアルギニン非投与群であるＡ群においては経時的に血圧の上昇が認められたが、その他の群においては血圧の上昇が抑制された。ケルセチン又はアルギニンのみを投与した群に比べ、ケルセチンとアルギニンとの混合物を投与した群（Ｆ、Ｇ、Ｉ群）により優れた血圧上昇抑制作用が認められた。
前記結果及び、作用と飲用量の関係を考慮すれば、特にケルセチンとアルギニンの配合比率が１０〜２３：１であるとき、好ましい効果が得られることが分かる。また、図３に示すとおり、ケルセチン及びアルギニンの投与は、正常血圧のＷＫＹラットの血圧に対しては影響を及ぼさなかった。
さらに、上記試験のケルセチン含有溶液に代えて、精製したケルセチンを用いた場合においても、同様の結果が得られた。したがって、食品等に配合した場合の味の点や、農薬等の有害物質を含有しないという点を考慮すれば、本発明の血圧上昇抑制組成物に配合するケルセチンとして、精製したものを用いることがより好ましいと考えられる。【００４３】
以下、本発明によるポリフェノール担持多糖類の飲食品への処方例を示す。なお、本発明はこれらに限定されるものではない。【００４４】
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【００４５】
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【図１】
2007136068.tif 000011
【図２】
2007136068.tif 000012
【図３】
2007136068.tif 000013
【手続補正書】
【提出日】平成20年11月6日(2008.11.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリフェノール含有溶液をセルロース、デンプン、キチン、キトサンからなる群から選択される多糖類に接触させ、
得られたポリフェノール担持多糖類を４０〜８０％エタノール水溶液に接触させて該溶液中へポリフェノールを溶出させることを特徴とするポリフェノール高含有組成物の製造方法。
【請求項２】
ポリフェノールを溶出させた後、４０〜８０％エタノール水溶液を除去し、ポリフェノールを粉末化することを特徴とする請求項１に記載のポリフェノール高含有組成物の製造方法。
【請求項３】
セルロースが結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、微小繊維状セルロース、粉末セルロースからなる群から選択されることを特徴とする請求項1または２に記載のポリフェノール高含有組成物の製造方法。
【請求項４】
高濃度化対象となるポリフェノールがケルセチンであることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のポリフェノール高含有組成物の製造方法。
【請求項５】
ポリフェノール含有溶液が、タマネギ外皮を水または４０％以下のエタノール、メタノール、ないしアセトン水溶液で抽出したケルセチン含有溶液であることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載のポリフェノール高含有組成物の製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
ポリフェノールは、同一分子内に２個以上のフェノール性水酸基をもつ化合物の総称であり、多くの種類が植物界に広く分布している。代表的なポリフェノールであるフラボノイドには、抗酸化性、抗変異原性、抗がん性、血圧上昇抑制、抗糖尿病性、抗アレルギー性等の生体調節機能等を有するものが多く、特に、フラボノイドの一種であるケルセチンが優れた血圧上昇抑制効果を示すことが報告されている。近年、健康志向の向上に伴ってポリフェノールの優れた作用が注目され、その需要は食品、化粧品、医薬品等多岐に亘る。このような分野においてポリフェノールを添加物もしくは原材料として用いるに際し、ポリフェノールを含有する原料から特定分画のポリフェノールを分離する必要がある。従来のポリフェノールの分離方法として、吸着性物質にポリフェノールを選択的に吸着させる技術が知られている。具体的には例えば、ポリフェノール含有液をスチレン系合成吸着剤に接触させ、ポリフェノール類を吸着させ、分離する方法（特許文献１）、ポリフェノール化合物含有溶液と木粉を接触させ、木粉にポリフェノールを吸着し、溶媒に溶出させる方法（特許文献２）が報告されている。
また、可食物質を吸着剤とした技術として、タマネギ外皮抽出液と蛋白質を混合し、フラボノイドであるケルセチンと蛋白質の複合体を形成して遊離する方法（特許文献３）が報告されている。
【特許文献１】特開２００２−３３５９１１号公報
【特許文献２】特開平７−２３８０７８号公報
【特許文献３】特開２００５−２８９８５０号公報
【国際調査報告】
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