【手続補正書】
【提出日】平成20年8月1日(2008.8.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  Ｓｌｏカリウムチャネルのαサブユニットを含むＳｌｏ４ポリペプチドをコードする単離された核酸であって、該ポリペプチドが、以下：
（ｉ）少なくとも１つのさらなるαサブユニットと共に、電位依存性特徴を含むカリウムチャネルを形成し；そして
（ｉｉ）ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で、配列番号４のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸にハイブリダイズし、ここで、該ハイブリダイゼーション反応は、５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣおよび１％ＳＤＳを含む溶液中で４２℃でインキュベートされ、そして０．２×ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳを含む溶液中で６５℃で洗浄される、
単離された核酸。
【請求項２】  前記ポリペプチドが、配列番号４に対して生成された抗体に特異的に結合する、請求項１に記載の核酸。
【請求項３】  前記カリウムチャネルが、迅速な活性化特徴をさらに含む、請求項１に記載の核酸。
【請求項４】  配列番号４のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、請求項１に記載の核酸。
【請求項５】  配列番号３のヌクレオチド配列を含む、請求項１に記載の核酸。
【請求項６】  請求項１に記載の核酸であって、該核酸は、少なくとも１つのプライマー対によって増幅され、該プライマー対は、ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で、以下：
【化１】
2005507633.tif 000001
からなる群より選択されるプライマーと同じ配列に選択的にハイブリダイズする、核酸。
【請求項７】  前記核酸によってコードされるポリペプチドが、ホモマーカリウムチャネルのαサブユニットを含む、請求項１に記載の核酸。
【請求項８】  前記核酸によってコードされるポリペプチドが、ヘテロマーカリウムチャネルのαサブユニットを含む、請求項１に記載の核酸。
【請求項９】  前記核酸が、配列番号４のアミノ酸配列に対して、少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を有する配列を含むポリペプチドをコードする、請求項１に記載の核酸。
【請求項１０】  配列番号４のアミノ酸配列をコードする核酸に、中程度にストリンジェントな条件下で特異的にハイブリダイズする単離された核酸であって、ここで、該ハイブリダイゼーション条件は、４０％ホルムアミド、１Ｍ  ＮａＣｌ、１％ＳＤＳを含む溶液中３７℃でのインキュベーション、および１×ＳＳＣを含む溶液中４５℃での洗浄を含む、単離された核酸。
【請求項１１】  核酸を検出する方法であって、該方法は、該核酸を、請求項１に記載の単離された核酸と接触させる工程を包含する、方法。
【請求項１２】  Ｓｌｏカリウムチャネルのαサブユニットを含む、単離されたＳｌｏ４ポリペプチドであって、該ポリペプチドは、以下：
（ｉ）少なくとも１つのさらなるαサブユニットと共に、電位依存性特徴を含むカリウムチャネルを形成し；そして
（ｉｉ）高度にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で、配列番号４のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸にハイブリダイズする核酸配列によってコードされ、ここで、該ハイブリダイゼーション反応は、５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣおよび１％ＳＤＳを含む溶液中４２℃でインキュベートされ、そして０．２×ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳを含む溶液中６５℃で洗浄される、
単離されたＳｌｏ４ポリペプチド。
【請求項１３】  前記ポリペプチドが、配列番号４に対して生成された抗体に特異的に結合する、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項１４】  前記カリウムチャネルが、迅速な活性化特徴をさらに含む、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項１５】  前記ポリペプチドが、約１３４ｋＤ〜約１４４ｋＤの分子量を有する、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項１６】  前記ポリペプチドが、配列番号４のアミノ酸配列を含む、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項１７】  前記ポリペプチドが、ホモマーカリウムチャネルのαサブユニットを含む、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項１８】  前記ポリペプチドが、ヘテロマーカリウムチャネルのαサブユニットを含む、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項１９】  前記ポリペプチドが、配列番号４に対して少なくとも６０％の同一性を有する配列を含む、請求項１２に記載のポリペプチド。
【請求項２０】  請求項１２に記載のＳｌｏ４ポリペプチドに特異的に結合する、抗体。
【請求項２１】  前記抗体が結合する前記ポリペプチドが、配列番号４のアミノ酸配列を有する、請求項２０に記載の抗体。
【請求項２２】  請求項１に記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項２３】  請求項２２に記載のベクターでトランスフェクトされた、宿主細胞。
【請求項２４】  カリウムチャネルを介したイオンフラックスを増大または減少させる化合物を同定するための方法であって、該方法は、以下の工程：
（ｉ）該化合物を、Ｓｌｏ４ポリペプチドと接触させる工程であって、該ポリペプチドは、以下：
（ａ）少なくとも１つのさらなるαサブユニットと共に、電位依存性特徴を有するカリウムチャネルを形成し；そして
（ｂ）高度にストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で、配列番号４のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸にハイブリダイズする核酸配列によってコードされ、ここで、該ハイブリダイゼーション反応は、５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣおよび１％ＳＤＳを含む溶液中４２℃でインキュベートされ、そして０．２×ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳを含む溶液中６５℃で洗浄される、工程；ならびに
（ｉｉ）該カリウムチャネルに対する該化合物の機能的効果を決定する工程、を包含する、方法。
【請求項２５】  前記機能的効果が、物理的効果である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】  前記機能的効果が、化学的効果である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】  前記ポリペプチドが、真核生物宿主細胞または真核生物細胞膜において発現される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】  前記機能的効果が、イオンフラックス、イオン濃度の変化、電流の変化または電位の変化を測定することによって決定される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】  前記機能的効果が、前記チャネルに対するリガンド結合を測定することによって決定される、請求項２４に記載の方法。
【請求項３０】  前記ポリペプチドが、組換え体である、請求項２４に記載の方法。
【請求項３１】  前記カリウムチャネルが、ホモマーである、請求項２４に記載の方法。
【請求項３２】  前記カリウムチャネルが、ヘテロマーである、請求項２４に記載の方法。
【請求項３３】  前記ポリペプチドが、配列番号４のアミノ酸配列を有する、請求項２４に記載の方法。
【請求項３４】  Ｓｌｏ４を含むカリウムチャネルを介したイオンフラックスを増大または減少させる化合物を同定するための方法であって、該方法は、以下の工程：
（ｉ）Ｓｌｏ４ポリペプチドの少なくとも２５アミノ酸、またはＳｌｏ４ポリペプチドをコードする核酸の少なくとも７５ヌクレオチドのアミノ酸配列を、コンピュータシステムに入力する工程であって、該Ｓｌｏ４ポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を有する部分配列を含む、工程；
（ｉｉ）該アミノ酸配列によってコードされた該ポリペプチドの三次元構造を生成する工程；
（ｉｉｉ）該Ｓｌｏ４ポリペプチドを含むカリウムチャネルの三次元構造を生成する工程；
（ｉｖ）該化合物の三次元構造を生成する工程；ならびに
（ｖ）該ポリペプチドと該化合物の三次元構造とを比較して、該化合物が該ポリペプチドに結合するか否かを決定する工程、
を包含する、方法。
【請求項３５】  Ｓｌｏ４ポリペプチドを含むＳｌｏカリウムチャネルを介したイオンフラックスを調節して、被験体において疾患を処置するための組成物であって、該組成物は、請求項２４または３４に記載の方法を使用して同定された化合物の治療的有効量を含む、組成物。
【請求項３６】  ヒト組織におけるｈＳｌｏ４の存在を検出する方法であって、該方法は、以下の工程：
（ｉ）ヒト組織の単離された生物学的サンプルを、ｈＳｌｏ４と選択的に会合する、ｈＳｌｏ４特異的試薬と接触させる工程；および
（ｉｉ）該サンプルに選択的に会合するｈＳｌｏ４特異的試薬のレベルを検出する工程、
を包含する、方法。
【請求項３７】  前記ｈＳｌｏ４特異的試薬が、ｈＳｌｏ４特異的抗体、ｈＳｌｏ４特異的オリゴヌクレオチドプライマー、およびｈＳｌｏ４核酸プローブからなる群より選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】  コンピュータシステムにおいて、ヒトＳｌｏ４遺伝子の変異についてスクリーニングする方法であって、該方法は、以下の工程：
（ｉ）配列番号４のアミノ酸配列を有するＳｌｏ４ポリペプチド、およびその保存的に改変されたバージョンをコードする第一の核酸配列を、該コンピュータに入力する工程；
（ｉｉ）該第一の核酸配列を、該第一の核酸と実質的同一性を有する第二の核酸配列と比較する工程；ならびに
（ｉｉｉ）該第一の核酸配列と該第二の核酸配列との間のヌクレオチド差異を同定する工程、
を包含する、方法。
【請求項３９】  前記第二の核酸配列が、疾患状態と関連する、請求項３８に記載の方法。