【手続補正書】
【提出日】平成31年1月17日(2019.1.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
［Ｄ−Ｌ１−Ｌ２−（ＰＥＧ）−Ｌ３］ｘ−Ｆ  （Ｉ）
の分枝状キメラ化合物であって、式中、
Ｄは、線状キメラ化合物であり；
Ｌ１は、アルキルチオ基を含む第１のリンカーであり；
Ｌ２は、スクシンイミド基を含む第２のリンカーであり；
Ｌ３は、アミド基を含む第３のリンカーであり；
ＰＥＧは、式−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−のものであり、式中、ｎは、２〜８０の整数であり；
ｘは、３〜３００の整数であり；
Ｆは、約１００，０００〜約７００，０００ダルトンの分子量を有する、スクロースとエピクロロヒドリンとの分枝状コポリマーであり、エーテル基を介してＬ３に接続されており、
Ｄの前記線状キメラ化合物は、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）として３つの核酸部分および２つのヘキサエチレングリコール（ＨＥＧ）スペーサーを含み、前記線状キメラ化合物は、３５未満のヌクレオチドを含有し、前記ヌクレオチド同士間、前記ヌクレオチドと前記ＨＥＧスペーサーとの間、および３’末端ヌクレオチドとＬ１との間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結である、分枝状キメラ化合物。
【請求項２】
Ｌ２が、
【化２２】
2018504116.tif 000001
である、請求項１に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項３】
Ｌ３が、
【化２３】
2018504116.tif 000002
である、請求項１または２に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項４】
式−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−のｎが、６、２４、４５、または７０である、請求項１から３のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項５】
Ｆが、約３００，０００〜約５００，０００ダルトンの分子量を有する、請求項１から４のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項６】
Ｆが、約４００，０００ダルトンの分子量を有する、請求項１から５のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項７】
Ｄが、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）からなる線状キメラ化合物である、請求項１から５のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項８】
Ｌ１が、−（ＣＨ２）ｍ−Ｓ−であり、ｍは、２〜９の整数である、請求項１から７のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項９】
ｘが、２０〜２００である、請求項１から８のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項１０】
ｘが９０〜１５０であり、ｎが６であり、ｍが３または６である、請求項９に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項１１】
前記ヌクレオチド同士間の前記連結、前記ヌクレオチドと前記ＨＥＧスペーサーとの間の前記連結、および前記３’−末端ヌクレオチドとＬ１との間の前記連結のすべてが、ホスホロチオエートエステル連結である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
【請求項１２】
（ｉ）薬学的に許容される賦形剤、ならびに（ｉｉ）請求項１から１１のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物を含む医薬組成物。
【請求項１３】
前記分枝状キメラ化合物が、
ヒト末梢血単核細胞によるＩＦＮ−アルファの産生を刺激すること；
ヒトＢリンパ球によるＩＬ−６の産生を刺激すること；ならびに
マウス脾細胞によるＩＬ−１２ｐ４０およびＩＬ−６の一方または両方の産生を刺激すること
からなる群のうちの１つまたは複数を含む、哺乳動物白血球によるサイトカイン産生を刺激することができる、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記分枝状キメラ化合物が、哺乳動物Ｂリンパ球の増殖を刺激することができる、請求項１２または請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
滅菌溶液である、請求項１２から１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記分枝状キメラ化合物に共有結合的に連結されていない抗原をさらに含む、請求項１２から１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記抗原が、微生物抗原、アレルゲン、または腫瘍抗原である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
本質的にエンドトキシンフリーである、請求項１２から１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
哺乳動物被験体における免疫応答を刺激するための、請求項１２から１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
免疫応答を刺激することが、
ＩＦＮ−アルファ産生を刺激すること；
ＩＬ−６産生を刺激すること；
Ｂリンパ球増殖を刺激すること；
インターフェロン経路関連遺伝子発現を刺激すること；
化学誘引物質関連遺伝子発現を刺激すること；および
形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）成熟を刺激すること
からなる群のうちの１つまたは複数を含む、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記医薬組成物が抗原と組み合わせて投与される場合、免疫応答を刺激することは、抗原特異的抗体応答を誘導することを含み、前記抗原特異的抗体応答の力価は、前記抗原が前記医薬組成物と組み合わせて投与されるときには、前記抗原が前記医薬組成物無しで投与されるときより高いことを特徴とする、請求項１９または請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
哺乳動物被験体における抗原特異的抗体応答を誘導するための、請求項１６から１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
哺乳動物被験体における感染疾患を防止するための、請求項１２から１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
哺乳動物被験体における感染疾患の症状を改善するための、請求項１２から１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
哺乳動物被験体におけるがんを処置するための、請求項１２から１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
がんを処置することが、固形腫瘍のサイズを縮小することを含む、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
式（Ｉ）：
［Ｄ−Ｌ１−Ｌ２−（ＰＥＧ）−Ｌ３］ｘ−Ｆ  （Ｉ）
の分枝状キメラ化合物を調製するための方法であって、
式中、
Ｄは、線状キメラ化合物であり；
Ｌ１は、アルキルチオ基を含む第１のリンカーであり；
Ｌ２は、スクシンイミド基を含む第２のリンカーであり；
Ｌ３は、アミド基を含む第３のリンカーであり；
ＰＥＧは、ポリエチレングリコールであり；
ｘは、３〜３００の整数であり；
Ｆは、約１００，０００〜約７００，０００ダルトンの分子量を有する、スクロースとエピクロロヒドリンとの分枝状コポリマーであり、エーテル基を介してＬ３に接続されており、
前記線状キメラ化合物は、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）として３つの核酸部分および２つのヘキサエチレングリコール（ＨＥＧ）スペーサーを含み、前記線状キメラ化合物は、３５未満のヌクレオチドを含有し、前記ヌクレオチド同士間、前記ヌクレオチドと前記ＨＥＧスペーサーとの間、および３’末端ヌクレオチドとＬ１との間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結であり、前記方法は、
式Ｄ−Ｌ１ａ−ＳＨの化合物（式中、Ｄは、式（Ｉ）について定義した通りであり、Ｌ１ａは、（ＣＨ２）ｍであり、ｍは、２〜９の整数である）を式（ＩＩ）：
［Ｌ２ａ−（ＰＥＧ）−Ｌ３］ｙ−Ｆ  （ＩＩ）
の化合物（式中、Ｌ３、ＰＥＧ、およびＦは、式（Ｉ）について定義した通りであり；
Ｌ２ａは、
【化２４】
2018504116.tif 000003
であり；
ｙは、３〜３５０の整数である）と反応させることを含む方法。
【請求項２８】
式Ｄ−Ｌ１ａ−ＳＳ−Ｌ１ａ−ＯＨの化合物を還元剤と反応させて、式Ｄ−Ｌ１ａ−ＳＨの化合物を生成することをさらに含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
式（ＩＩＩ）：
［ＮＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２］ｚ−Ｆ  （ＩＩＩ）
の化合物（式中、Ｆは、式（Ｉ）について定義した通りであり、ｚは、３〜４００の整数である）を、式Ｌ２ａ−（ＰＥＧ）−Ｌ３ａ−Ｌｖの化合物（式中、Ｌ２ａおよびＰＥＧは、式（ＩＩ）について定義した通りであり；Ｌ３ａは、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−であり；Ｌｖは、脱離基である）と反応させて、式（ＩＩ）の化合物を形成することをさらに含む、請求項２７または請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
Ｌｖが、（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
Ｄが、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）である、請求項２７から３０のいずれか一項に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
さらに、本開示は、式（Ｉ）：［Ｄ−Ｌ１−Ｌ２−（ＰＥＧ）−Ｌ３］ｘ−Ｆ  （Ｉ）の分枝状キメラ化合物を調製するための方法であって、式中、Ｄは、ポリヌクレオチドまたは線状キメラ化合物であり；Ｌ１は、アルキルチオ基を含む第１のリンカーであり；Ｌ２は、スクシンイミド基を含む第２のリンカーであり；Ｌ３は、アミド基を含む第３のリンカーであり；ＰＥＧは、ポリエチレングリコールであり；ｘは、３〜３００の整数であり；Ｆは、約１００，０００〜約７００，０００ダルトンの分子量を有する、スクロースとエピクロロヒドリンとの分枝状コポリマーであり、エーテル基を介してＬ３に接続されており、ポリヌクレオチドは、ヌクレオチド配列：５’−ＴＣＧＧＣＧＣ  ＡＡＣＧＴＴＣ  ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号１）を含み、ポリヌクレオチドは、長さが５０ヌクレオチド未満であり、ヌクレオチド同士間および３’末端ヌクレオチドとＬ１との間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結であり；線状キメラ化合物は、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）として３つの核酸部分および２つのヘキサエチレングリコール（ＨＥＧ）スペーサーを含み、線状キメラ化合物は、５０未満のヌクレオチドを含有し、ヌクレオチド同士間、ヌクレオチドとＨＥＧスペーサーとの間、および３’末端ヌクレオチドとＬ１との間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結であり、この方法は、式Ｄ−Ｌ１ａ−ＳＨの化合物（式中、Ｄは、式（Ｉ）について定義した通りであり、Ｌ１ａは、（ＣＨ２）ｍであり、ｍは、２〜９の整数である）を式（ＩＩ）：［Ｌ２ａ−（ＰＥＧ）−Ｌ３］ｙ−Ｆ  （ＩＩ）の化合物（式中、Ｌ３、ＰＥＧ、およびＦは、式（Ｉ）について定義した通りであり；Ｌ２ａは、
【化４】
2018504116.tif 000004
であり；ｙは、３〜３５０の整数である）と反応させることを含む方法を提供する。一部の実施形態では、ｘは、２０〜３００、９０〜１５０、または１００〜１４０であり；ｙは、２０〜３５０、３０〜３００、１５５〜２１５、または１６５〜２０５である。一部の実施形態では、本方法は、式Ｄ−Ｌ１ａ−ＳＳ−Ｌ１ａ−ＯＨの化合物を還元剤と反応させて式Ｄ−Ｌ１ａ−ＳＨの化合物を生成することをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、式（ＩＩＩ）：［ＮＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２］ｚ−Ｆ  （ＩＩＩ）の化合物（式中、Ｆは、式（Ｉ）について定義した通りであり、ｚは、３〜４００の整数である）を、式Ｌ２ａ−（ＰＥＧ）−Ｌ３ａ−Ｌｖの化合物（式中、Ｌ２ａおよびＰＥＧは、式（ＩＩ）について定義した通りであり；Ｌ３ａは、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−であり；Ｌｖは、脱離基である）と反応させて式（ＩＩ）の化合物を形成することをさらに含む。一部の実施形態では、ｚは、２０〜４００、５０〜３００、１９０〜２５０、または２００〜２４０である。一部の実施形態では、Ｌｖは、（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシである。一部の実施形態では、方法Ｄは、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）である。本開示の方法で使用するのに適したＤのポリヌクレオチドおよび線状キメラ化合物におけるバリエーションは、前記段落においてより完全に記載されている。
特定の実施形態において、例えば、以下が提供される：
（項目１）
式（Ｉ）：
［Ｄ−Ｌ１−Ｌ２−（ＰＥＧ）−Ｌ３］ｘ−Ｆ  （Ｉ）
の分枝状キメラ化合物であって、式中、
Ｄは、ポリヌクレオチドまたは線状キメラ化合物であり；
Ｌ１は、アルキルチオ基を含む第１のリンカーであり；
Ｌ２は、スクシンイミド基を含む第２のリンカーであり；
Ｌ３は、アミド基を含む第３のリンカーであり；
ＰＥＧは、式−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−のものであり、式中、ｎは、２〜８０の整数であり；
ｘは、３〜３００の整数であり；
Ｆは、約１００，０００〜約７００，０００ダルトンの分子量を有する、スクロースとエピクロロヒドリンとの分枝状コポリマーであり、エーテル基を介してＬ３に接続されており、
Ｄの前記ポリヌクレオチドは、ヌクレオチド配列：５’−ＴＣＧＧＣＧＣ  ＡＡＣＧＴＴＣ  ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号１）を含み、前記ポリヌクレオチドは、長さが５０ヌクレオチド未満であり、前記ヌクレオチド同士間および３’末端ヌクレオチドとＬ１との間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結であり；
Ｄの前記線状キメラ化合物は、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）として３つの核酸部分および２つのヘキサエチレングリコール（ＨＥＧ）スペーサーを含み、前記線状キメラ化合物は、５０未満のヌクレオチドを含有し、前記ヌクレオチド同士間、前記ヌクレオチドと前記ＨＥＧスペーサーとの間、および３’末端ヌクレオチドとＬ１との間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結である、分枝状キメラ化合物。
（項目２）
Ｌ２が、
【化２２】
2018504116.tif 000005
である、項目１に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目３）
Ｌ３が、
【化２３】
2018504116.tif 000006
である、項目１または２に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目４）
式−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−のｎが、６、２４、４５、または７０である、項目１から３のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目５）
Ｆが、約３００，０００〜約５００，０００ダルトンの分子量を有する、項目１から４のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目６）
Ｄが、ヌクレオチド配列５’−ＴＣＧＧＣＧＣ  ＡＡＣＧＴＴＣ  ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号１）からなるポリヌクレオチドである、項目１から５のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目７）
Ｄが、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）からなる線状キメラ化合物である、項目１から５のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目８）
Ｌ１が、−（ＣＨ２）ｍ−Ｓ−であり、ｍは、２〜９の整数である、項目１から７のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目９）
ｘが、２０〜２００である、項目１から８のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目１０）
ｘが９０〜１５０であり、ｎが６であり、ｍが３または６である、項目９に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目１１）
前記ヌクレオチド同士間の前記連結、存在する場合には前記ヌクレオチドと前記ＨＥＧスペーサーとの間の前記連結、および前記３’−末端ヌクレオチドとＬ１との間の前記連結のすべてが、ホスホロチオエートエステル連結である、項目１から１０のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物。
（項目１２）
ヌクレオチド配列５’−ＴＣＧＧＣＧＣ  ＡＡＣＧＴＴＣ−３’（配列番号３）を含む単離ポリヌクレオチドであって、長さが５０ヌクレオチド未満であり、前記ヌクレオチド同士間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結である、単離ポリヌクレオチド。
（項目１３）
ヌクレオチド配列５’−ＴＣＧＧＣＧＣ  ＡＡＣＧＴＴＣ  ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号１）を含む単離ポリヌクレオチドであって、長さが５０ヌクレオチド未満であり、前記ヌクレオチド同士間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結である、単離ポリヌクレオチド。
（項目１４）
５’−ＴＣＧＧＣＧＣ  ＡＡＣＧＴＴＣ  ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号１）のヌクレオチド配列からなる、項目１３に記載のポリヌクレオチド。
（項目１５）
一本鎖である、項目１２から１４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１６）
２’−デオキシリボポリヌクレオチドである、項目１２から１５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１７）
前記連結のすべてが、ホスホロチオエートエステル連結である、項目１２から１６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
（項目１８）
５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’（配列番号４）として２つの核酸部分および１つのヘキサエチレングリコール（ＨＥＧ）スペーサーを含む線状キメラ化合物であって、５０未満のヌクレオチドを含有し、前記ヌクレオチド同士間および前記ヌクレオチドと前記ＨＥＧスペーサーとの間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結である、線状キメラ化合物。
（項目１９）
５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）として３つの核酸部分および２つのヘキサエチレングリコール（ＨＥＧ）スペーサーを含む線状キメラ化合物であって、５０未満のヌクレオチドを含有し、前記ヌクレオチド同士間および前記ヌクレオチドと前記ＨＥＧスペーサーとの間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結である、線状キメラ化合物。
（項目２０）
５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）からなる、項目１９に記載の線状キメラ化合物。
（項目２１）
前記核酸部分が、２’−デオキシリボポリヌクレオチドである、項目１８から２０のいずれか一項に記載の線状キメラ化合物。
（項目２２）
前記連結のすべてが、ホスホロチオエートエステル連結である、項目１８から２１のいずれか一項に記載の線状キメラ化合物。
（項目２３）
（ｉ）薬学的に許容される賦形剤、ならびに（ｉｉ）項目１から１１のいずれか一項に記載の分枝状キメラ化合物、項目１２から１７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、および項目１８から２２のいずれか一項に記載の線状キメラ化合物からなる群のうちの１つを含む医薬組成物。
（項目２４）
前記分枝状キメラ化合物、前記ポリヌクレオチド、および前記線状キメラ化合物がそれぞれ、
ヒト末梢血単核細胞によるＩＦＮ−アルファの産生を刺激すること；
ヒトＢリンパ球によるＩＬ−６の産生を刺激すること；ならびに
マウス脾細胞によるＩＬ−１２ｐ４０およびＩＬ−６の一方または両方の産生を刺激すること
からなる群のうちの１つまたは複数を含む、哺乳動物白血球によるサイトカイン産生を刺激することができる、項目２３に記載の医薬組成物。
（項目２５）
前記分枝状キメラ化合物、前記ポリヌクレオチド、および前記線状キメラ化合物がそれぞれ、哺乳動物Ｂリンパ球の増殖を刺激することができる、項目２３または項目２４に記載の医薬組成物。
（項目２６）
滅菌溶液である、項目２３から２５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目２７）
前記分枝状キメラ化合物、前記ポリヌクレオチド、および前記線状キメラ化合物に共有結合的に連結されていない抗原をさらに含む、項目２３から２６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目２８）
前記抗原が、微生物抗原、アレルゲン、または腫瘍抗原である、項目２７に記載の医薬組成物。
（項目２９）
本質的にエンドトキシンフリーである、項目２３から２８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（項目３０）
哺乳動物被験体における免疫応答を刺激する方法であって、哺乳動物被験体における免疫応答を刺激するのに十分な量で項目２３から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記哺乳動物被験体に投与することを含む方法。
（項目３１）
免疫応答を刺激することが、
ＩＦＮ−アルファ産生を刺激すること；
ＩＬ−６産生を刺激すること；
Ｂリンパ球増殖を刺激すること；
インターフェロン経路関連遺伝子発現を刺激すること；
化学誘引物質関連遺伝子発現を刺激すること；および
形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）成熟を刺激すること
からなる群のうちの１つまたは複数を含む、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記医薬組成物が抗原をさらに含む場合、免疫応答を刺激することは、抗原特異的抗体応答を誘導することを含み、前記抗原特異的抗体応答の力価は、前記抗原が前記分枝状キメラ化合物、前記ポリヌクレオチド、または前記線状キメラ化合物と組み合わせて投与されるときには、前記抗原が前記分枝状キメラ化合物も前記ポリヌクレオチドも前記線状キメラ化合物も無しで投与されるときより高い、項目３０または３１に記載の方法。
（項目３３）
哺乳動物被験体における抗原特異的抗体応答を誘導する方法であって、哺乳動物被験体における抗原特異的抗体応答を誘導するのに十分な量で項目２７から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記哺乳動物被験体に投与することを含む方法。
（項目３４）
哺乳動物被験体における感染疾患を防止する方法であって、哺乳動物被験体における感染疾患を防止するのに十分な量で項目２３から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記哺乳動物被験体に投与することを含む方法。
（項目３５）
哺乳動物被験体における感染疾患の症状を改善する方法であって、哺乳動物被験体における感染疾患の症状を改善するのに十分な量で項目２３から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記哺乳動物被験体に投与することを含む方法。
（項目３６）
哺乳動物被験体におけるＩｇＥ関連障害の症状を改善する方法であって、哺乳動物被験体におけるＩｇＥ関連障害の症状を改善するのに十分な量で項目２３から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記哺乳動物被験体に投与することを含む方法。
（項目３７）
哺乳動物被験体におけるがんを処置する方法であって、哺乳動物被験体におけるがんを処置するのに十分な量で項目２３から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記哺乳動物被験体に投与することを含む方法。
（項目３８）
がんを処置することが、固形腫瘍のサイズを縮小することを含む、項目３７に記載の方法。
（項目３９）
式（Ｉ）：
［Ｄ−Ｌ１−Ｌ２−（ＰＥＧ）−Ｌ３］ｘ−Ｆ  （Ｉ）
の分枝状キメラ化合物を調製するための方法であって、
式中、
Ｄは、ポリヌクレオチドまたは線状キメラ化合物であり；
Ｌ１は、アルキルチオ基を含む第１のリンカーであり；
Ｌ２は、スクシンイミド基を含む第２のリンカーであり；
Ｌ３は、アミド基を含む第３のリンカーであり；
ＰＥＧは、ポリエチレングリコールであり；
ｘは、３〜３００の整数であり；
Ｆは、約１００，０００〜約７００，０００ダルトンの分子量を有する、スクロースとエピクロロヒドリンとの分枝状コポリマーであり、エーテル基を介してＬ３に接続されており、
前記ポリヌクレオチドは、ヌクレオチド配列：５’−ＴＣＧＧＣＧＣ  ＡＡＣＧＴＴＣ  ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号１）を含み、前記ポリヌクレオチドは、長さが５０ヌクレオチド未満であり、前記ヌクレオチド同士間および３’末端ヌクレオチドとＬ１との間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結であり
前記線状キメラ化合物は、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）として３つの核酸部分および２つのヘキサエチレングリコール（ＨＥＧ）スペーサーを含み、前記線状キメラ化合物は、５０未満のヌクレオチドを含有し、前記ヌクレオチド同士間、前記ヌクレオチドと前記ＨＥＧスペーサーとの間、および３’末端ヌクレオチドとＬ１との間の１個または複数個の連結は、ホスホロチオエートエステル連結であり、前記方法は、
式Ｄ−Ｌ１ａ−ＳＨの化合物（式中、Ｄは、式（Ｉ）について定義した通りであり、Ｌ１ａは、（ＣＨ２）ｍであり、ｍは、２〜９の整数である）を式（ＩＩ）：
［Ｌ２ａ−（ＰＥＧ）−Ｌ３］ｙ−Ｆ  （ＩＩ）
の化合物（式中、Ｌ３、ＰＥＧ、およびＦは、式（Ｉ）について定義した通りであり；
Ｌ２ａは、
【化２４】
2018504116.tif 000007
であり；
ｙは、３〜３５０の整数である）と反応させることを含む方法。
（項目４０）
式Ｄ−Ｌ１ａ−ＳＳ−Ｌ１ａ−ＯＨの化合物を還元剤と反応させて、式Ｄ−Ｌ１ａ−ＳＨの化合物を生成することをさらに含む、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
式（ＩＩＩ）：
［ＮＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２］ｚ−Ｆ  （ＩＩＩ）
の化合物（式中、Ｆは、式（Ｉ）について定義した通りであり、ｚは、３〜４００の整数である）を、式Ｌ２ａ−（ＰＥＧ）−Ｌ３ａ−Ｌｖの化合物（式中、Ｌ２ａおよびＰＥＧは、式（ＩＩ）について定義した通りであり；Ｌ３ａは、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−であり；Ｌｖは、脱離基である）と反応させて、式（ＩＩ）の化合物を形成することをさらに含む、項目３９または４０に記載の方法。
（項目４２）
Ｌｖが、（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシである、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
Ｄが、５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＡＡＣＧＴＴＣ−３’−ＨＥＧ−５’−ＴＣＧＧＣＧＣ−３’（配列番号２）である、項目３９から４２のいずれか一項に記載の方法。