【手続補正書】
【提出日】平成31年4月24日(2019.4.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１０】
本明細書につながる研究は、“Bio.NRW:MoBiDiK - Modulare Bioproduktion - Disposable und Kontinuierlich” [Bio.NRW:MoBiDiK - modular bioproduction - disposable and continuous]に基づき欧州地域開発基金（ＥＲＤＦ）の合意の下により資金調達された。
［１］
不均一な細胞培養液混合物由来のバイオ医薬生体高分子生成物を、連続的に、微生物を減少させて生産および／または処理する方法であって、以下の工程：
（ａ）生成物流（２６）の形態の、前記生成物を含有する不均一な細胞培養液混合物由来の粒子を含有しない流体を提供すること、
（ｂ）少なくとも１回ろ過し、ろ液を提供すること、
（ｃ）前記生成物を精製するために、少なくとも２回クロマトグラフィー工程を行うこと、
（ｄ）少なくとも１回ウイルスを減少させること、
（ｅ）工程（ｂ）、（ｃ）および／または（ｄ）の生成物流（２６）を、少なくとも１回限外ろ過および／または少なくとも１回ダイアフィルトレーションすること
を含んでなり、工程（ｃ）による前記少なくとも２回のクロマトグラフィー工程は少なくとも２つのクロマトグラフィーカラム（４）および／または膜吸着器（５）を介する精製を含んでなり、かつ前記方法は閉鎖式およびモジュラー式で実施される、方法。
［２］
ｐＨ調節および／または伝導率調節および／またはろ過工程および／または濃縮工程および／または緩衝液交換のための１回以上のさらなる工程が、（ｃ）中の少なくとも２回のクロマトグラフィー工程の間および／または工程（ｄ）におけるウイルス不活化後に実施される、［１］に記載の方法。
［３］
前記生成物と接触する工程（ａ）〜（ｅ）で使用される全ての要素が、適切な微生物減少方法を介して微生物減少に供される方法であって、前記微生物減少方法が好ましくは、ガンマ線照射、ベータ線照射、加圧滅菌、エチレンオキシド（ＥＴＯ）処理、オゾン処理（Ｏ３）、過酸化水素処理（Ｈ２Ｏ２）、および定置蒸気滅菌（ＳＩＰ）処理からなる群から選択される、［１］または［２］に記載の方法。
［４］
工程（ｂ）以降に使用され、かつ生成物と接触する全ての要素が、使い捨て物品であるか、または使い捨て物品として使用される、［１］〜［３］に記載の方法。
［５］
全ての入口流体が微生物減少フィルター（１０）を通じてろ過され、かつ全ての出口が後方成長を妨げる微生物バリア（１１）によって好ましくは保護される、［１］〜［４］に記載の方法。
［６］
モジュラープロセス工程が複数のモジュールにおいて実行され、前記複数のモジュールは互いに接続され、前記複数のモジュールが好ましくは溶着または無菌コネクタ（１２）によって互いに接続される、［１］〜［５］に記載の方法。
［７］
工程（ａ）〜（ｅ）で使用される全ての液体、気体、および固体が微生物減少に供され、前記微生物減少が好ましくは０．４５μｍ以下の孔径を有するフィルター（１３）を介したろ過によって好ましくは達成され、かつプロセス内の滅菌が好ましくは前記プロセスの間には実施されない、［１］〜［６］のいずれか一つに記載の方法。
［８］
少なくとも２つのクロマトグラフィーカラム（４）に流出する全ての液体の脱気が工程（ｃ）の前に行われ、前記脱気が好ましくは、少なくとも１つの気泡トラップ（１４）、および／または少なくとも１つの真空を介する疎水性精密ろ過膜（１５）、および／または超音波による処理、および／またはヘリウムを用いたスパージングによって達成される、［１］〜［７］に記載の方法。
［９］
工程（ａ）由来の前記粒子を含有しない流体が殺菌剤含有緩衝液に対して少なくとも１回の限外ろ過に供され、前記殺菌剤が好ましくは、イミダゾール、安息香酸、ソルビン酸、パラヒドロキシ安息香酸エステル、亜硫酸塩、二亜硫酸塩、アジド、オルトフェニルフェノール、ナイシン、ナタマイシン、ヘキサメチレンテトラミン、二炭酸ジメチル、亜硝酸塩、硝酸塩、酢酸、アスコルビン酸、イソアスコルビン酸、Ｌ−乳酸、プロピオン酸、ホウ酸、およびリゾチームからなる群から選択される、［１］〜［８］に記載の方法。
［１０］
前記バイオ医薬生体高分子生成物が、たんぱく質もしくはペプチドであるか、またはＤＮＡもしくはＲＮＡを含んでなり、前記たんぱく質またはペプチドが、モノクローナル抗体、ポリクロナール抗体、組換えたんぱく質、およびたんぱく質ワクチンからなる群から選択され、前記ＤＮＡまたはＲＮＡが、ＤＮＡおよび／またはＲＮＡワクチンの一部である、［１］〜［９］のいずれか一つに記載の方法。
［１１］
工程（ｃ）の前記少なくとも２つのクロマトグラフィーカラム（４）および／または膜吸着器（５）が、親和性の原理に従って、イオン相互作用を介して、金属キレート結合を介して、疎水性相互作用を介して、またはファンデルワールス力を介して、生成物と結合し、前記少なくとも２つのクロマトグラフィーカラム（４）および／または膜吸着器（５）が、前記親和性の原理に従って結合する場合において、たんぱく質Ａ、たんぱく質Ｇ、たんぱく質Ｌ、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ならびに、たんぱく質Ａ、たんぱく質Ｇ、たんぱく質Ｌ、ＩｇＭ、およびＩｇＧとは異なり前記生成物に対して親和性を有する組換えたんぱく質からなる群から好ましくは選択されるリガンドを含んでなる、［１］〜［１０］のいずれか一つに記載の方法。
［１２］
工程（ａ）〜（ｅ）の前記方法が、少なくとも４時間、好ましくは少なくとも８時間、好ましくは少なくとも１２時間、好ましくは少なくとも２４時間、より好ましくは少なくとも４８時間、より好ましくは少なくとも７日間、より好ましくは少なくとも４週間、および特に好ましくは少なくとも８週間の実行時間を有する、［１］〜［１１］のいずれか一つに記載の方法。
［１３］
少なくとも１つのフィルター（１３）を含んでなる少なくとも１回のろ過工程が、工程（ａ）〜（ｅ）の間および／またはそれらの後に実施される、［１］〜［１２］のいずれか一つに記載の方法。
［１４］
前記フィルター（１３）が微生物減少条件下において自動的に交換され、前記自動フィルター交換が好ましくは以下の工程：
（ｉ）流路の閉鎖に伴う非ろ液側の圧力センサ（１８）において閾値が超過し、使用済みフィルター（１７）における前記生成物が好ましくはろ液側へと気体または液体によって押し込まれる場合、または前記流路における前記使用済みフィルター（１７）の最長時間が超過する場合、または前記使用済みフィルター（１７）を介したろ液の最大量が超過する場合、新規フィルター（１６）へ流路を切り替えること、
（ｉｉ）供給ポンプ（２１）により前記新規フィルター（１６）内にまたは微生物減少様式で接続された密閉袋（２９）内に生成物を運搬することを好ましくは伴い、前記新規フィルター（１６）のガス抜き弁（２０）において、好ましくは０．２５μｍ以下の孔径を有するエアフィルター（１９）を介して前記新規フィルター（１６）のガス抜きを行うこと、
（ｉｉｉ）前記圧力センサ（１８）または充填レベルセンサ（２２）または天秤（２３）または液体検出装置（２８）により、前記非ろ液側の前記新規フィルター（１６）のガス抜きの完了を検出すること、
（ｉｖ）弁（２４）により前記ろ液出口を開放しかつ前記ガス抜き弁（２０）と前記エアフィルター（１９）との間の前記流路を閉鎖すること、ならびに、
（ｖ）前記使用済みフィルター（１７）と新規フィルター（１６）とを交換することを含んでなる、［１３］に記載の方法。
［１５］
不均一な細胞培養液混合物由来のバイオ医薬生体高分子生成物を、連続的に、微生物を減少させて生産および／または処理するモジュラーシステム（１）であって、以下のモジュール：
（ａ）少なくとも１つのろ過モジュール（２）、
（ｂ）少なくとも２つのクロマトグラフィーカラム（４）および／または膜吸着器（５）を含んでなる、少なくとも１つのクロマトグラフィーモジュール（３）、
（ｃ）少なくとも１つの限外ろ過モジュール（６）および／または少なくとも１つのダイアフィルトレーションモジュール（７）および／または少なくとも１つの透析モジュール（８）、ならびに、
（ｄ）連続的ウイルス減少（９）のための少なくとも１つのモジュール
を含んでなり、前記モジュラーシステム（１）は閉鎖され、微生物が減少されている、モジュラーシステム。
［１６］
前記生成物と接触するモジュール（ａ）〜（ｄ）で使用される全ての要素が、微生物減少方法によって微生物減少に供されるモジュラーシステムであって、前記微生物減少方法が好ましくは、ガンマ線照射、ベータ線照射、加圧滅菌、エチレンオキシド（ＥＴＯ）処理、オゾン処理（Ｏ３）、過酸化水素処理（Ｈ２Ｏ２）、および定置蒸気滅菌（ＳＩＰ）処理からなる群から選択される、［１５］に記載のモジュラーシステム（１）。
［１７］
前記生成物と接触するモジュール（ａ）〜（ｄ）で使用される全ての前記要素が、使い捨て物品であるか、または使い捨て物品として使用され、かつ前記複数のモジュールが好ましくは溶着または無菌コネクタによって互いに接続される、［１５］または［１６］に記載のモジュラーシステム。
［１８］
全ての入口流体が微生物減少フィルター（１０）を通過し、かつ全ての出口が微生物の後方成長を妨げる微生物バリア（１１）によって好ましくは保護される、［１５］〜［１７］に記載のモジュラーシステム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
不均一な細胞培養液混合物由来のバイオ医薬生体高分子生成物を、連続的に、微生物を減少させて生産および／または処理する方法であって、以下の工程：
（ａ）生成物流（２６）の形態の、粒子を含有しない、前記生成物を含有する不均一な細胞培養液混合物由来の流体を提供すること、
（ｂ）少なくとも１回ろ過し、ろ液を提供すること、
（ｃ）前記生成物を精製するために、少なくとも２回クロマトグラフィー工程を行うこと、
（ｄ）少なくとも１回ウイルスを減少させること、
（ｅ）工程（ｂ）、（ｃ）および／または（ｄ）の生成物流（２６）を、少なくとも１回限外ろ過および／または少なくとも１回ダイアフィルトレーションすること
を含んでなり、工程（ｃ）による前記少なくとも２回のクロマトグラフィー工程は少なくとも２つのクロマトグラフィーカラム（４）および／または膜吸着器（５）を介する精製を含んでなり、かつ前記方法は閉鎖式およびモジュラー式で実施される、方法。
【請求項２】
不均一な細胞培養液混合物由来のバイオ医薬生体高分子生成物を、連続的に、微生物を減少させて生産および／または処理するモジュラーシステム（１）であって、以下のモジュール：
（ａ）少なくとも１つのろ過モジュール（２）、
（ｂ）少なくとも２つのクロマトグラフィーカラム（４）および／または膜吸着器（５）を含んでなる、少なくとも１つのクロマトグラフィーモジュール（３）、
（ｃ）少なくとも１つの限外ろ過モジュール（６）および／または少なくとも１つのダイアフィルトレーションモジュール（７）および／または少なくとも１つの透析モジュール（８）、ならびに、
（ｄ）連続的ウイルス減少（９）のための少なくとも１つのモジュール
を含んでなり、前記モジュラーシステム（１）は閉鎖され、微生物が減少されている、モジュラーシステム。