【手続補正書】
【提出日】平成31年2月8日(2019.2.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
パタチン様ホスホリパーゼドメイン含有３（ＰＮＰＬＡ３）の発現を阻害するための二本鎖リボ核酸（ＲＮＡｉ）剤であって、前記二本鎖ＲＮＡｉ剤は、センス鎖およびアンチセンス鎖を含み、前記センス鎖が、配列番号１のヌクレオチド配列と３ヌクレオチド以下異なる、少なくとも１５個の連続したヌクレオチドを含み、前記アンチセンス鎖が、配列番号２のヌクレオチド配列と３ヌクレオチド以下異なる、少なくとも１５個の連続したヌクレオチドを含む、二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２】
前記二本鎖ＲＮＡｉ剤が、少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含む、請求項１に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３】
前記センス鎖のヌクレオチドの全部および前記アンチセンス鎖のヌクレオチドの全部が修飾を含む、請求項１に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項４】
リガンドをさらに含む、請求項１に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項５】
ＰＮＰＬＡ３の発現を阻害するための二本鎖リボ核酸（ＲＮＡｉ）剤であって、前記二本鎖ＲＮＡｉ剤は、アンチセンス鎖と相補的なセンス鎖を含み、前記アンチセンス鎖は、ＰＮＰＬＡ３をコードするｍＲＮＡの一部と相補的な領域を含み、各鎖は、約１４〜約３０ヌクレオチド長であり、前記二本鎖ＲＮＡｉ剤が、式（ＩＩＩ）：
センス：５’ｎｐ−Ｎａ−（ＸＸＸ）ｉ−Ｎｂ−ＹＹＹ−Ｎｂ−（ＺＺＺ）ｊ−Ｎａ−ｎｑ３’
アンチセンス：３’ｎｐ’−Ｎａ’−（Ｘ’Ｘ’Ｘ’）ｋ−Ｎｂ’−Ｙ’Ｙ’Ｙ’−Ｎｂ’−（Ｚ’Ｚ’Ｚ’）ｌ−Ｎａ’−ｎｑ’５’  （ＩＩＩ）
（式中、
ｉ、ｊ、ｋ、およびｌは、各々独立に、０または１であり；
ｐ、ｐ’、ｑ、およびｑ’は、各々独立に、０〜６であり；
各ＮａおよびＮａ’は、独立に、修飾もしくは未修飾のいずれかまたはそれらの組合せである、０〜２５個のヌクレオチドを含む、オリゴヌクレオチド配列を表し、各配列は、少なくとも２つの異なる修飾のヌクレオチドを含み；
各ＮｂおよびＮｂ’は、独立に、修飾もしくは未修飾のいずれかまたはそれらの組合せである、０〜１０個のヌクレオチドを含む、オリゴヌクレオチド配列を表し；
各ｎｐ、ｎｐ’、ｎｑ、およびｎｑ’は、各々存在してもしなくてもよく、独立に、オーバーハングヌクレオチドを表し；
ＸＸＸ、ＹＹＹ、ＺＺＺ、Ｘ’Ｘ’Ｘ’、Ｙ’Ｙ’Ｙ’、およびＺ’Ｚ’Ｚ’は、各々独立に、３つの連続したヌクレオチドに対する３つの同一修飾の１つのモチーフを表し；
Ｎｂに対する修飾は、Ｙに対する修飾とは異なり、Ｎｂ’に対する修飾は、Ｙ’に対する修飾とは異なる）により表され；
ここで、前記センス鎖は、少なくとも１つのリガンドにコンジュゲートしている、二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項６】
ｉは、０であり；ｊは、０であり；ｉは、１であり；ｊは、１であり；ｉおよびｊの両方が、０であり；またはｉおよびｊの両方が、１である、請求項５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項７】
前記Ｙ’Ｙ’Ｙ’モチーフが、５’末端から前記アンチセンス鎖の１１、１２および１３位に存在する、請求項５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項８】
前記Ｙヌクレオチドが、２’−フルオロ修飾を含む、請求項５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項９】
前記Ｙ’ヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾を含む、請求項５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１０】
前記リガンドが、
【化１】
2018510621.tif 000001
である、請求項５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１１】
前記リガンドが、前記センス鎖の３’末端に結合される、請求項５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１２】
前記ＲＮＡｉ剤が、以下の概略図：
【化２】
2018510621.tif 000002
に示すように、前記リガンドにコンジュゲートしている、請求項１１に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１３】
前記二本鎖ＲＮＡｉ剤が、少なくとも１つのホスホロチオエートまたはメチルホスホネートヌクレオチド間結合をさらに含む、請求項１または５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項１４】
請求項１または５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤を含有する細胞。
【請求項１５】
請求項１または５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤を含む、ＰＮＰＬＡ３遺伝子の発現を阻害するための医薬組成物。
【請求項１６】
前記二本鎖ＲＮＡｉ剤が、非緩衝液中で投与される、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記非緩衝液が、食塩水または水である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記二本鎖ＲＮＡｉ剤が、緩衝液を用いて投与される、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記緩衝液が、酢酸塩、クエン酸塩、プロラミン、炭酸塩、もしくはリン酸塩またはそれらの任意の組合せを含む、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記緩衝液が、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）である、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤と、脂質製剤を含む、医薬組成物。
【請求項２２】
細胞におけるＰＮＰＬＡ３の発現を阻害する方法であって、
（ａ）請求項１または５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤と前記細胞を接触させるステップ；および
（ｂ）ステップ（ａ）で生成した前記細胞を、ＰＮＰＬＡ３遺伝子のｍＲＮＡ転写物の分解を達成するのに十分な時間にわたって維持し、これにより、前記細胞における前記ＰＮＰＬＡ３遺伝子の発現を阻害するステップ
を含む方法。
【請求項２３】
ＰＮＰＬＡ３発現の低下から利益を受ける疾患または障害を有する対象を治療する方法に使用するための請求項１または５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２４】
ＰＮＰＬＡ３発現の低下から利益を受ける疾患または障害を有する対象の少なくとも１つの症状を予防する方法に使用するための請求項１または５に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２５】
前記対象への投与によって、ヘッジホッグシグナル伝達経路の低減が起こる、請求項２３または２４に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２６】
前記障害が、ＰＮＰＬＡ３関連疾患である、請求項２３または２４に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２７】
前記ＰＮＰＬＡ３関連疾患が、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、脂肪肝（脂肪症）、または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である、請求項２６に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２８】
前記対象が、ヒトである、請求項２３または２４に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項２９】
抗ＰＮＰＬＡ３抗体、またはその抗原結合断片とともに使用するための、請求項２３または２４に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３０】
約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇまたは約０．５ｍ
ｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項２３または２４に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３１】
約１０ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、
請求項３０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３２】
０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、および３０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、
請求項３０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３３】
前記二本鎖ＲＮＡｉ剤が、週１回、または月１回前記対象に投与される、請求項３０に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３４】
前記対象に皮下投与される、請求項２３または２４に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。
【請求項３５】
前記対象におけるヘッジホッグシグナル伝達経路を測定することと併用するための、請求項２３または２４に記載の二本鎖ＲＮＡｉ剤。