【手続補正書】
【提出日】令和1年5月22日(2019.5.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＨ１又はＣκドメインに融合された可変ドメイン（Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位）であって、前記ＣＨ１又はＣκドメインがそのＣ末端でヒトＦｃドメインに融合されている、可変ドメインをそれぞれ含む第１及び第２のポリペプチド鎖を含む多重特異的タンパク質であって、前記第１の鎖の前記Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位がＣＨ１−Ｃκ二量体化によって前記第２の鎖の前記Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位に結合され、それにより第１の抗原結合ドメイン及び二量体Ｆｃドメインを形成し、前記ポリペプチド鎖の１つが、第２の抗原結合ドメインを形成する抗原結合ドメインをさらに含み、前記Ｆｃドメインが残基Ｎ２９７（Ｋａｂａｔ  ＥＵ付番）においてＮ連結グリコシル化を含み、且つヒトＣＤ１６ポリペプチドに結合する、多重特異的タンパク質。
【請求項２】
ＣＨ１又はＣκドメインに融合された可変ドメイン（Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位）をそれぞれ含む３つのポリペプチド鎖を含む多重特異的タンパク質であって、第１の（中心）鎖が、２つのＶ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位と、前記単位間に介在するヒトＦｃドメインとを含み、第２の鎖が１つのＶ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位とヒトＦｃドメインとを含み、且つ第３の鎖が１つのＶ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位を含み、前記中心鎖の前記Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位の一方が、ＣＨ１−Ｃκ二量体化によって前記第２の鎖の前記Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位に結合され、それにより第１の抗原結合ドメイン及び二量体Ｆｃドメインを形成し、前記中心鎖の前記Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位の他方が、ＣＨ１−Ｃκ二量体化によって前記第３の鎖の前記Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位に結合され、それにより第２の抗原結合ドメインを形成し、前記Ｆｃドメインが残基Ｎ２９７（Ｋａｂａｔ  ＥＵ付番）においてＮ連結グリコシル化を含み、且つヒトＣＤ１６ポリペプチドに結合する、多重特異的タンパク質。
【請求項３】
３つの目的の抗原とヒトＣＤ１６ポリペプチドとに結合する多重特異的タンパク質であって、ＣＨ１又はＣκドメインに融合された可変ドメイン（Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位）をそれぞれ含む３つのポリペプチド鎖を含み、第１の（中心）鎖が、Ｎ末端からＣ末端へと、第１のＶ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位、ヒトＦｃドメイン及び第２のＶ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位を含み、且つ第２の鎖が、Ｎ末端からＣ末端へと、第１のＶ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位及びヒトＦｃドメインを含み、且つ第３の鎖がＶ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位を含み、前記中心鎖の前記第１のＶ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位が、ＣＨ１−Ｃκ二量体化によって前記第２の鎖の前記Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位に結合され、それにより第１の抗原結合ドメイン及び二量体Ｆｃドメインを形成し、前記中心鎖の前記第２のＶ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位が、ＣＨ１−Ｃκ二量体化によって前記第３の鎖の前記Ｖ−（ＣＨ１／Ｃκ）単位に結合され、それにより第２の抗原結合ドメインを形成し、前記第３のポリペプチド鎖が、第３の抗原結合ドメインを形成する抗原結合ドメインをさらに含み、前記Ｆｃドメインが残基Ｎ２９７（Ｋａｂａｔ  ＥＵ付番）においてＮ連結グリコシル化を含み、且つヒトＣＤ１６ポリペプチドに結合する、多重特異的タンパク質。
【請求項４】
二量体Ｆｃドメインを有する二量体であり、ドメイン配置：
【化１】
2018519296.tif 000001
を有し、一方のＶ１が軽鎖可変ドメインであり、且つ他方のＶ１が重鎖可変ドメインであり、一方のＶ２が軽鎖可変ドメインであり、且つ他方のＶ２が重鎖可変ドメインであり、Ｖ１の対が第１のＡＢＤを形成し、且つＶ２の対が第２のＡＢＤを形成する、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項５】
二量体Ｆｃドメインを有する三量体であり、ドメイン配置：
【化２】
2018519296.tif 000002
を有し、一方のＶ１が軽鎖可変ドメインであり、且つ他方のＶ１が重鎖可変ドメインであり、一方のＶ２が軽鎖可変ドメインであり、且つ他方のＶ２が重鎖可変ドメインであり、Ｖ１の対が第１のＡＢＤを形成し、且つＶ２の対が第２のＡＢＤを形成する、請求項２に記載のタンパク質。
【請求項６】
ドメイン配置：
【化３】
2018519296.tif 000003
を有し、一方のＶ１が軽鎖可変ドメインであり、且つ他方のＶ１が重鎖可変ドメインであり、一方のＶ２が軽鎖可変ドメインであり、且つ他方のＶ２が重鎖可変ドメインであり、一方のＶ３が軽鎖可変ドメインであり、且つ他方のＶ３が重鎖可変ドメインであり、Ｖ１の対が第１のＡＢＤを形成し、Ｖ２の対が第２のＡＢＤを形成し、且つ前記Ｖ３が対形成して第３のＡＢＤを形成する、請求項２または３に記載のタンパク質。
【請求項７】
Ｆｃドメインがヒンジ領域を介してＣＫドメインに融合されている、請求項１〜６のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項８】
表面上に固定されて、Ｂｉａｃｏｒｅによる表面プラズモン共鳴を使用して決定された場合に、２０００ｎＭ以下である一価結合に対するＫＤで可溶性ヒトＣＤ１６に結合する、請求項１〜７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項９】
前記Ｆｃドメインが、ヒトＦｃγ受容体への結合を増加させるためのアミノ酸置換を含むヒトＣＨ２ドメインを含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１０】
１つのＡＢＤが、エフェクター細胞の表面で発現される活性化受容体に結合し、且つ１つのＡＢＤが癌、ウイルス又は細菌抗原に結合する、請求項１〜９のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１１】
少なくとも１つのＡＢＤが、完全長ヒトＩｇＧ１抗体の結合時に細胞内インターナリゼーションの誘導又は増加を受け得ることが分かっている癌、ウイルス又は細菌抗原に結合する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１２】
標的細胞上の、前記タンパク質が結合する抗原の細胞内インターナリゼーションを実質的に増加させない、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１３】
癌の処置のための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のタンパク質又は組成物の使用。
【請求項１４】
ヘテロ二量体又はヘテロ三量体タンパク質を作製する方法であって、
（ａ）請求項１〜１０のいずれか一項に記載の第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸を用意するステップ、
（ｂ）請求項１〜１０のいずれか一項に記載の第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸を用意するステップ、
（ｃ）任意選択により、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の第３のポリペプチド鎖を含む第３の核酸を用意するステップ、及び
（ｄ）前記第１及び第２（並びに任意選択により第３）の核酸を宿主細胞中で発現させて、それぞれ前記第１及び第２（並びに任意選択により第３）のポリペプチド鎖を含むタンパク質を産生させ、前記産生されたタンパク質を親和性精製支持体、任意選択によりプロテインＡ支持体上にローディングし、且つヘテロ二量体タンパク質を回収するステップ
を含む方法。
【請求項１５】
多量体ポリペプチドを同定又は評価する方法であって、
（ａ）請求項１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチド鎖をコードする核酸を用意するステップ、
（ｂ）前記核酸を宿主細胞中で発現させて、それぞれ前記ポリペプチド鎖を産生させ、且つ前記ポリペプチド鎖を含む多量体タンパク質を回収するステップ、及び
（ｃ）前記産生されたポリペプチドを目的の生物学的活性に関して評価するステップ
を含む方法。