【手続補正書】
【提出日】平成20年9月4日(2008.9.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＥＲストレスを低減することが知られている薬剤を含有してなる、肥満、インスリン抵抗性、高血糖症及び２型糖尿病から成る群より選択される疾患を治療する又は予防するための医薬組成物。
【請求項２】
抗糖尿病薬、抗肥満薬、抗異常脂質血症薬、抗アテローム性動脈硬化症薬及び抗高血圧薬から成る群より選択される薬剤を更に包含する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記抗糖尿病薬が、ビグアニド、メトホルミン、スルホニル尿素、インスリン、インスリンの類似体、ＰＰＡＲｇアゴニスト、メグリチニド及びＤＰＰ−ＩＶ阻害剤から成る群より選択され；
前記抗肥満薬が、膵リパーゼ阻害剤、セロトニン再取込み阻害剤、ノルエピネフリン再取込み阻害剤、ノルアドレナリン作動性食欲抑制薬、末梢作用薬、中枢作用薬及び熱産生剤から成る群より選択され；
前記抗異常脂質血症薬又は抗アテローム性動脈硬化症薬が、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ナイアシン、抗血小板薬、ＡＣＥ阻害剤、アスピリン、アスピリンの類似体及びＭＣＰ−１阻害剤から成る群より選択され；
前記抗高血圧薬が、利尿薬、β遮断薬、Ｃａ＋２チャネル遮断薬、ＡＣＥ阻害剤及びＡＴ−ＩＩ阻害剤から成る群より選択される、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
投与の工程が、経口、非経口又は静脈内に投与することを包含する、請求項１〜３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５】
ＥＲストレスを低減することが知られている薬剤が、化学シャペロンである、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記化学シャペロンが、グリセロール、Ｄ２Ｏ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、グリシンベタイン（ベタイン）、グリセロールホスホコリン（ＧＰＣ）、メチルアミン及びトリメチルアミンＮ−オキシド（ＴＭＡＯ）から成る群より選択される、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記化学シャペロンが、トリメチルアミンＮ−オキシド（ＴＭＡＯ）又はその誘導体、塩、若しくは異性体である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ＥＲストレスを低減することが知られている薬剤が、式：
【化００１】
2008513465.tif 000001
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、それぞれ独立して水素、ハロゲン又は低級Ｃ１−Ｃ６アルキルである）
で表される化合物であるか、又は医薬的に許容され得るその塩若しくはその混合物である、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
ＥＲストレスを低減することが知られている薬剤が、フェニル酪酸（ＰＢＡ）又はその誘導体、塩若しくは異性体である、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＥＲストレスを低減することが知られている薬剤が、式：
【化００２】
2008513465.tif 000002
（式中、
ｎは、１又は２であり；
Ｒ０は、アリール、ヘテロアリール又はフェノキシであり、前記アリール及びフェノキシは、置換されていないか、又はそれぞれ独立して、１個又はそれ以上のハロゲン、ヒドロキシ又は低級アルキルで置換されており；
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、Ｈ、低級アルコキシ、ヒドロキシ、低級アルキル又はハロゲンであり；及び
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ又はハロゲンである）
で表される化合物であるか、又は医薬的に許容され得るその誘導体若しくは塩である、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１１】
Ｒ０が、フェニル、ナフチル又はフェノキシであり、前記フェニル、ナフチル及びフェノキシが、置換されていないか、又はそれぞれ独立して、ハロゲン、ヒドロキシ又は１〜４個の炭素原子の低級アルキルの１〜４個の部分で置換されており；
Ｒ１及びＲ２が、それぞれ独立して、Ｈ、ヒドロキシ、１〜２個の炭素原子の低級アルコキシ、１〜４個の炭素原子の低級直鎖又は分枝鎖アルキル又はハロゲンであり；及び
Ｒ３及びＲ４が、それぞれ独立して、Ｈ、１〜２個の炭素原子の低級アルコキシ、１〜４個の炭素原子の低級直鎖又は分枝鎖アルキル又はハロゲンである、
請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
ＥＲストレスを低減することが知られている薬剤が、タウロウルソデオキシコール酸（ＴＵＤＣＡ）又はその誘導体、塩若しくは異性体である、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ＥＲストレスを低減することが知られている薬剤が、式：
【化００３】
2008513465.tif 000003
（式中、Ｒは、−Ｈ又はＣ１−Ｃ４アルキルであり；
Ｒ１は、−ＣＨ２−ＳＯ３Ｒ３であり、及びＲ２は、−Ｈであるか；又はＲ１は、−ＣＯＯＨであり、及びＲ２は、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２−ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＳＣＨ３又は−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＯＯＨであり；及び
Ｒ３は、−Ｈ又は塩基性アミノ酸残基である）
で表される化合物であるか、又は医薬的に許容され得るその塩若しくは誘導体である、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１４】
スクリーニングする薬剤を、提供する工程；
前記薬剤を、細胞と接触させる工程；及び
ＥＲストレスマーカーが低下するかどうかを測定する工程；
を含有してなる、肥満、インスリン抵抗性若しくは糖尿病を治療する若しくは予防するため、インスリン作用若しくはインスリン受容体シグナル伝達を調節するため、又はＥＲストレスを低減するための薬剤をスクリーニングする方法。
【請求項１５】
ＥＲストレスマーカーが、スプライシングされた形態のＸＢＰ−１、ＰＥＲＫのリン酸化状態、ｅＩＦ２αのリン酸化、ＧＲＰ７８／ＢＩＰのｍＲＮＡレベル、ＧＲＰ７８／ＢＩＰのタンパク質レベル及びＪＮＫ活性から成る群より選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記細胞が、哺乳動物細胞である、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記細胞が、ＥＲストレスを経験している、請求項１４〜１６のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
請求項１４〜１７のいずれかに記載の方法により同定される化合物。
【請求項１９】
請求項１８に記載の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項２０】
（１）ＥＲストレスを低減することが知られている薬剤、及び（２）抗糖尿病薬、抗肥満薬、抗異常脂質血症薬、抗アテローム性動脈硬化症薬及び抗高血圧薬から成る群より選択される薬剤、を含有する医薬組成物。
【請求項２１】
少なくとも１つのＥＲストレスマーカーの発現レベルを測定する方法の指示書を含有してなるインスリン抵抗性、高血糖症若しくは２型糖尿病のリスクの診断における使用のためのキット。
【請求項２２】
前記ＥＲストレスマーカーが、スプライシングされた形態のＸＢＰ−１、ＰＥＲＫのリン酸化状態、ｅＩＦ２αのリン酸化、ＧＲＰ７８／ＢＩＰのｍＲＮＡレベル、ＧＲＰ７８／ＢＩＰのタンパク質レベル及びＪＮＫ活性から成る群より選択される、請求項２１に記載のキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９２】
ノーザンブロット分析：トリゾール試薬（Invitrogen, Carlsbad, CA）を用いてマウス肝臓から全ＲＮＡを単離し、１％のアガロースゲルによって分離して、その後ＢｒｉｇｈｔＳｔａｒ  Ｐｌｕｓナイロン膜（Ambion, Austin, TX）に移した。ＧＲＰ７８ｃＤＮＡプローブを、以下のプライマーを用いたＲＴ−ＰＣＲによってマウス肝全ｃＤＮＡから作製した：５’−ＴＧＧＡＧＴＴＣＣＣＣＡＧＡＴＴＧＡＡＧ−３’及び５’−ＣＣＴＧＡＣＣＣＡＣＣＴＴＴＴＴＣＴＣＡ−３’。ＤＮＡプローブを、ランダムプライムドＤＮＡ標識キット（Roche, Indianapolis, IN）を使用して３２Ｐ−ｄＣＴＰで標識した。製造者のプロトコール（Ambion, Austin, TX）に従ってハイブリダイゼーションを実施し、Ｖｅｒｓａ  Ｄｏｃ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ  ３０００（BioRad, Hercules, CA）によって視覚化した。