【手続補正書】
【提出日】令和1年7月16日(2019.7.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
流体分析装置であって、
少なくとも一つの凍結融解バルブと少なくとも一つの氷核形成剤（ＩＮＡ）とを包含する少なくとも一つの流体通路であって、前記少なくとも一つのＩＮＡが炭素含有ＩＮＡである、少なくとも一つの流体通路、
を包含する流体分析装置。
【請求項２】
前記少なくとも一つのＩＮＡが、氷核形成タンパク質及び／又は氷核形成タンパク質の機能的断片、氷核形成核酸、氷核形成脂質、及び／又は、氷核形成炭水化物を包含する、請求項１に記載の流体分析装置。
【請求項３】
前記少なくとも一つのＩＮＡが有機体から抽出されるか有機体に由来する、請求項１に記載の流体分析装置。
【請求項４】
前記少なくとも一つのＩＮＡが氷核形成タンパク質（ＩＮＰ）及び／又は氷核形成タンパク質の機能的断片を包含する、請求項１に記載の流体分析装置。
【請求項５】
前記ＩＮＰ又は前記ＩＮＰの機能的断片が、ｉｃｅＥ，ｉｃｅＨ，ｉｎａＡ，ｉｎａＥ，ｉｎａＦ，ｉｎａＫ，ｉｎａＰｂ，ｉｎａＱ，ｉｎａＵ，ｉｎａＶ，ｉｎａＷ，ｉｎａＸ，ｉｎａＺで構成されるグループから選択される遺伝子により符号化され、前記遺伝子が、シュードモナス・シリンゲ、シュードモナス・フルオレセンスＫＵＩＮ−１、エルウィニア・ヘルビコラ、エルウィニア・ウレドヴォラ、パントエア・アナナチス、ザントモナス・カンペストリス、エルウィニア・カロトボーラ、シュードモナス・アンタークチカ、シュードモナス・アエルギノーサ、シュードモナス・プチダ、シュードモナス・ヴィリディフラヴァ、パントエア・アグロメランス、エルウィニア・アナナス、及び／又は、シュードモナス・ボレアリスで構成されるグループから選択される有機体で発見されるか前記有機体から採取される、請求項４に記載の流体分析装置。
【請求項６】
合体されて流体分析装置としてのマイクロ流体チップを画定する第１及び第２基板をさらに包含し、前記少なくとも一つの流体輸送通路と、前記少なくとも一つの流体輸送通路に沿った前記少なくとも一つの凍結融解バルブとしての複数の離間した凍結融解バルブとが設けられる、請求項１から５のいずれか一項に記載の流体分析装置。
【請求項７】
前記少なくとも一つのＩＮＡを包含する液体緩衝液との流体連通状態で、前記少なくとも一つのＩＮＡが流体分析装置の流体ポートへ流動導入される、請求項１から６のいずれか一項に記載の流体分析装置。
【請求項８】
前記少なくとも一つの凍結融解バルブが複数の離間した凍結融解バルブであって、各々が、前記少なくとも一つの流体通路の規定領域との熱連通状態にある熱電冷却器を包含し、前記少なくとも一つの流体通路が、マイクロ流体又はナノ流体通路のサイズである少なくとも一つの区画を有する、請求項１から７のいずれか一項に記載の流体分析装置。
【請求項９】
前記少なくとも一つの流体通路が主輸送通路と少なくとも一つの試薬通路とを包含し、すべてが前記主輸送通路との流体連通状態にある試料インプットと緩衝液インプットとビードウェルアレイとを包含する流体分析装置であって、前記少なくとも一つの凍結融解バルブが、前記主輸送通路及び／又は少なくとも一つの試薬通路との流体連通状態にある複数の離間した凍結融解バルブを包含する、請求項１から８のいずれか一項に記載の流体分析装置。
【請求項１０】
前記少なくとも一つの流体通路が、前記少なくとも一つのＩＮＡが表面に接合及び／又はコーティングされた少なくとも一つの流体通路を包含する、請求項１から９のいずれか一項に記載の流体分析装置。
【請求項１１】
ビード貯蔵／試料培養室と廃棄物容器と試料計量ループとをさらに包含して、前記試料計量ループが前記ビード貯蔵／培養室と前記試料インプットとの間に所在し、前記試料計量ループが、約１μＬと約１ｍＬの間の容積を有して、前記試料計量ループの各端部分の第１及び第２凍結融解バルブとの流体連通状態にある、請求項９に記載の流体分析装置。
【請求項１２】
前記少なくとも一つのＩＮＡが、氷に似た構造、及び／又は、水分子を氷状の格子に配列する構造を包含しうる、請求項１から１１のいずれか一項に記載の流体分析装置。
【請求項１３】
標的分析物を分析する方法であって、
少なくとも一つの凍結融解バルブとの流体連通状態にある少なくとも一つの流体通路を備える流体分析装置を用意することと、
少なくとも一つの氷核形成剤（ＩＮＡ）を前記少なくとも一つの流体通路へ導入することであって、前記少なくとも一つのＩＮＡが炭素原子を含有することと、
前記少なくとも一つの凍結融解バルブを電子選択的に冷却し、前記少なくとも一つのＩＮＡを使用して前記少なくとも一つの凍結融解バルブを凍結させることと、
を包含する方法。
【請求項１４】
前記少なくとも一つの凍結融解バルブが複数の離間した凍結融解バルブであり、前記少なくとも一つの流体通路と熱連通している冷却器を−１００℃と−１℃の間の温度に設定して前記凍結融解バルブを凍結させることを包含する方法である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記流体装置が、０．１ｍｍと１０ｍｍの間の厚さを持つ流体マイクロチップであり、前記少なくとも一つの凍結融解バルブが複数の離間した凍結融解バルブであり、前記凍結融解バルブの少なくとも幾つかが、３分以内に行われる凍結操作の為に約−１００℃と約−１℃の間に設定される熱電冷却器を有し、前記電子選択的冷却が各試料について複数回実行される、請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記装置が流体マイクロチップであって、前記分析物が、有機分子、元素化合物、無機化合物、薬剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ペプチド、タンパク質、グリカン、あるいは他の生体又は合成高分子である、請求項１３から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記少なくとも一つのＩＮＡが、氷核形成タンパク質及び／又は氷核形成タンパク質の機能的断片、氷核形成核酸、氷核形成脂質、及び／又は、氷核形成炭水化物を包含する、請求項１３から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記少なくとも一つのＩＮＡが有機体から抽出されるか有機体に由来する、請求項１３から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記少なくとも一つのＩＮＡが、氷核形成タンパク質（ＩＮＰ）及び／又は氷核形成タンパク質の機能的断片を包含する、請求項１３から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＩＮＰ又は前記ＩＮＰの機能的断片が、ｉｃｅＥ，ｉｃｅＨ，ｉｎａＡ，ｉｎａＥ，ｉｎａＦ，ｉｎａＫ，ｉｎａＰｂ，ｉｎａＱ，ｉｎａＵ，ｉｎａＶ，ｉｎａＷ，ｉｎａＸ，ｉｎａＺで構成されるグループから選択される遺伝子により符号化され、前記遺伝子が、シュードモナス・シリンゲ、シュードモナス・フルオレセンスＫＵＩＮ−１、エルウィニア・ヘルビコラ、エルウィニア・ウレドヴォラ、パントエア・アナナチス、ザントモナス・カンペストリス、エルウィニア・カロトボーラ、シュードモナス・アンタークチカ、シュードモナス・アエルギノーサ、シュードモナス・プチダ、シュードモナス・ヴィリディフラヴァ、パントエア・アグロメランス、エルウィニア・アナナス、及び／又は、シュードモナス・ボレアリスで構成されるグループから選択される有機体で発見されるか前記有機体から採取される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記少なくとも一つのＩＮＡが前記少なくとも一つの流体通路へ液体として流動導入される、請求項１３から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記液体が緩衝液であり、前記少なくとも一つのＩＮＡが前記緩衝液で希釈される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記少なくとも一つのＩＮＡのコーティングを包含する表面から前記少なくとも一つのＩＮＡが導入される、及び／又は、前記少なくとも一つのＩＮＡが前記少なくとも一つの流体流路の表面に吸着される、及び／又は化学的に接合される、請求項１３から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記少なくとも一つのＩＮＡが固形支持体に固定又は結合される、請求項１３から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記少なくとも一つのＩＮＡが、氷に似た構造、及び／又は、水分子を氷状の格子に配列する構造を包含する、請求項１３から２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
少なくとも一つの氷核形成剤（ＩＮＡ）を包含するＤＮＡ処理用の液体緩衝液であって、前記少なくとも一つのＩＮＡが炭素原子を含有し、任意で前記少なくとも一つのＩＮＡが、１分子／μＬと１００億分子／μＬの間の量で、及び／又は、約１ｎＭから約１ｍＭの濃度で前記液体緩衝液に存在する、液体緩衝液。
【請求項２７】
前記少なくとも一つのＩＮＡが有機体から抽出されるか有機体に由来する、請求項２６に記載の液体緩衝液。
【請求項２８】
前記少なくとも一つのＩＮＡが氷核形成タンパク質（ＩＮＰ）及び／又は氷核形成タンパク質の機能的断片を包含する、請求項２６に記載の液体緩衝液。
【請求項２９】
前記ＩＮＰ及び／又は前記ＩＮＰの機能的断片が、ｉｃｅＥ，ｉｃｅＨ，ｉｎａＡ，ｉｎａＥ，ｉｎａＦ，ｉｎａＫ，ｉｎａＰｂ，ｉｎａＱ，ｉｎａＵ，ｉｎａＶ，ｉｎａＷ，ｉｎａＸ，ｉｎａＺで構成されるグループから選択される遺伝子により符号化され、前記遺伝子が、シュードモナス・シリンゲ、シュードモナス・フルオレセンス、エルウィニア・ヘルビコラ、エルウィニア・ウレドヴォラ、パントエア・アナナチス、及びザントモナス・カンペストリスで構成されるグループから選択される有機体で発見されるか有機体から採取される、請求項２８に記載の液体緩衝液。
【請求項３０】
前記少なくとも一つのＩＮＡが一つ以上のアプタマーを包含する、請求項２６に記載の液体緩衝液。
【請求項３１】
前記少なくとも一つのＩＮＡが氷核形成タンパク質及び／又は氷核形成タンパク質の機能的断片、氷核形成核酸、氷核形成脂質、及び／又は、氷核形成炭水化物を包含する、請求項２６に記載の液体緩衝液。
【請求項３２】
前記少なくとも一つのＩＮＡが、氷に似た構造、及び／又は、水分子を氷状の格子に配列する構造を包含する、請求項２６から３１のいずれか一項に記載の液体緩衝液。
【請求項３３】
試料を調製する方法であって、
試料計量ループと少なくとも一つの流体通路とを包含する流体分析装置を用意することであって、前記試料計量ループと前記少なくとも一つの流体通路とが少なくとも一つの凍結融解バルブとの流体連通状態にあることと、
前記試料計量ループへ試料を導入することであって、前記試料が、炭素原子を含有する少なくとも一つの氷核形成剤（ＩＮＡ）を包含することと、
前記少なくとも一つの凍結融解バルブを使用して前記試料計量ループを電子選択的に冷却して、前記少なくとも一つの凍結融解バルブ及び／又は前記試料計量ループの前記試料の少なくとも一部分を凍結させることと、
を包含する方法。
【請求項３４】
前記少なくとも一つの流体通路が主輸送通路と少なくとも一つの試薬通路とを包含し、前記流体分析装置が、すべて前記主輸送通路との流体連通状態にある試料インプットと緩衝液インプットとビードウェルアレイとを包含し、前記少なくとも一つの凍結融解バルブが、前記主輸送通路及び／又は少なくとも一つの試薬通路との連通状態にある複数の離間した凍結融解バルブである、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記流体分析装置がさらに、ビード貯蔵／試料培養室と廃棄物容器とを包含し、前記試料計量ループが前記ビード貯蔵／培養室と前記試料インプットとの間に所在する、請求項３３又は３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記試料計量ループが、約１μＬと約１ｍＬの間の容積を有して、前記試料計量ループの各端部分の第１及び第２凍結融解バルブとの流体連通状態にある、請求項３３から３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記少なくとも一つのＩＮＡが、氷核形成タンパク質及び／又は氷核形成タンパク質の機能的断片、氷核形成核酸、氷核形成脂質、及び／又は、氷核形成炭水化物を包含する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３８】
前記少なくとも一つのＩＮＡが有機体から抽出されるか有機体に由来する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３９】
前記少なくとも一つのＩＮＡが氷核形成タンパク質（ＩＮＰ）及び／又は氷核形成タンパク質の機能的断片を包含する、請求項３３に記載の方法。
【請求項４０】
前記ＩＮＰ及び／又はＩＮＰの機能的断片が、ｉｃｅＥ，ｉｃｅＨ，ｉｎａＡ，ｉｎａＥ，ｉｎａＦ，ｉｎａＫ，ｉｎａＰｂ，ｉｎａＱ，ｉｎａＵ，ｉｎａＶ，ｉｎａＷ，ｉｎａＸ，ｉｎａＺで構成されるグループから選択される遺伝子により符号化され、前記遺伝子が、シュードモナス・シリンゲ、シュードモナス・フルオレセンスＫＵＩＮ−１、エルウィニア・ヘルビコラ、エルウィニア・ウレドヴォラ、パントエア・アナナチス、ザントモナス・カンペストリス、エルウィニア・カロトボーラ、シュードモナス・アンタークチカ、シュードモナス・アエルギノーサ、シュードモナス・プチダ、シュードモナス・ヴィリディフラヴァ、パントエア・アグロメランス、エルウィニア・アナナス、及び／又は、シュードモナス・ボレアリスで構成されるグループから選択される有機体で発見されるか有機体から採取される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記試料が複数の細胞を包含し、前記少なくとも一つの凍結融解バルブを使用して前記試料計量ループを電子選択的に冷却して前記少なくとも一つの凍結融解バルブ及び／又は前記試料計量ループで前記試料の少なくとも一部分を凍結させると、前記複数の細胞の少なくとも一部分が溶解する、請求項３３から４０のいずれか一項に記載の方法。