(57)【要約】プロトンポンプ（Ｈ＋／Ｋ＋ＡＴＰアーゼ）阻害作用を有する化合物を有効成分とするＡβの産生抑制剤を提供する。本発明はアルツハイマー病やダウン症候群などのＡβ沈着に基づく神経変性疾患を予防し、および／または治療する医薬として有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロトンポンプ阻害作用を有する化合物（ただし、以下の化合物：
【化１】
2008016002.tif 000014
を除く）
もしくはその製薬上許容される塩またはその溶媒和物を含有することを特徴とする、アミロイドβ産生抑制剤。
【請求項２】
式（Ｉ）：
【化２】
2008016002.tif 000015
（式中、Ａは
【化３】
2008016002.tif 000016
Ｘ１およびＸ２は各々独立してＣＲ４またはＮであり、
Ｒ１は低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシ、ヒドロキシ低級アルコキシ、低級アルコキシ低級アルコキシまたは置換基を有していてもよいフェニルアミノであり、
Ｒ２は低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシまたはヘテロ環式基であり、
Ｒ３は低級アルキルであり、
Ｒ４は水素、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシ、ヒドロキシ低級アルコキシ、低級アルコキシ低級アルコキシまたは置換基を有していてもよいフェニルアミノであり、
ｎ、ｍおよびｐは各々独立して０〜３の整数である。
ただし、以下の化合物：
【化４】
2008016002.tif 000017
を除く）
で示される化合物、もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を含有することを特徴とする、アミロイドβ産生抑制剤。
【請求項３】
ランソプラゾール（lansoprazole）、パントプラゾール（pantoprazole）、エソメプラゾール（esomeprazole）、ラベプラゾール（rabeprazole）、レバプラザン（revaprazan）、イラプラゾール（ilaprazole）、テナトプラゾール（tenatoprazole）、ＣＳ−５２６もしくはそれらの製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を含有することを特徴とする、アミロイドβ産生抑制剤。
【請求項４】
プロトンポンプ作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を含有することを特徴とする、アミロイドβ産生抑制剤。
【請求項５】
アルツハイマー症治療剤である、請求項１〜４のいずれかに記載のアミロイドβ産生抑制剤。
【請求項６】
プロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を投与することを特徴とする、アミロイドβの産生抑制方法。
【請求項７】
プロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を投与することを特徴とする、アルツハイマー症の治療方法。
【請求項８】
アミロイドβ産生抑制のための医薬の製造のためのプロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用。 
【請求項９】
アルツハイマー症の治療のための医薬の製造のためのプロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アミロイドβタンパク質の神経系への沈着を抑制する医薬に関する。より詳細には、プロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物剤を有効成分とし、アミロイドβの神経系への沈着を抑制し、または同沈着物を除去することにより、例えば、アルツハイマー病やダウン症候群などのアミロイドβ沈着に基づく神経変性疾患を予防および／または治療する医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
アミロイドβ（以下、Ａβ）は神経変性疾患の一つであるアルツハイマー病患者の脳に多く見られる老人斑の主たる構成物である。Ａβは正常人の脳内にも存在するが速やかに分解されるものと考えられている。このタンパクはアミロイド前駆体タンパク質（βＡＰＰ）の代謝過程においてβセクレターゼおよびγセクレターゼにより副次的に生成されることが分かってきた。βＡＰＰは通常αセクレターゼによって分解されるが、この場合Ａβは産生されない。ＡβにはＡβ１−４０とＡβ１−４２（４３）の二つのアイソフォームが存在するが、転写レベルではなくβセクレターゼおよびγセクレターゼによってβＡＰＰの代謝段階で生成されると考えられている。脳で産生されるＡβのほとんどはＡβ１−４０だが、難溶性のＡβ１−４２（４３）の方が凝集・沈着しやすく、現在のところいずれが病態に深く関与するのかは解明されていない。【０００３】
アルツハイマー病においては、Ａβが凝集して不溶性の繊維形成がなされて脳に沈着し老人斑を形成する。Ａβは神経細胞に対して細胞毒として作用するので、現在、アルツハイマー病の根治的治療法としてβＡＰＰおよびＡβの代謝系を制御しＡβ産生を抑制する方法が検討されており、βセクレターゼ阻害は最も注目されるＡβ産生抑制方法のひとつである。
既に多くのβセクレターゼ阻害剤が提案されているが、ハース等(C.Haass et al.)は液胞型（Ｖ型）Ｈ＋-ＡＴＰａｓｅ阻害剤であるバフィロマイシン(ＢＭ)の作用を検討し、スウェーデン変異型βＡＰＰを組み込んだ培養細胞でＢＭがＡβ産生を抑制したことを報告している（非特許文献１参照）。
スウェーデン変異とはβＡＰＰの家族性アルツハイマー病変異のひとつであり、βセクレターゼに対する親和性が高くＡβを産生し易いことが知られており、そのような培養系におけるＡβ産生抑制はＢＭがβセクレターゼを阻害することが考えられる。しかしながら該報告によれば、ＢＭは野生型細胞においてはむしろ逆にＡβ産生を増加させており、Ｖ型Ｈ＋-ＡＴＰａｓｅ阻害剤が一般にβＡＰＰの代謝を抑制するとはいえない。【０００４】
一般にＶ型ＡＴＰａｓｅは、リソソーム、エンドソーム、ゴルジ体などの細胞内膜に存在し、液胞内のｐＨの制御や物質貯蔵に重要なイオン輸送性ＡＴＰａｓｅである。特にＶ型Ｈ＋−ＡＴＰａｓｅは「真核細胞の万能プロトンポンプ」（非特許文献２）と呼ばれるほど人体の多くの組織および細胞に存在し、多様な生理学的機能の維持に関与していることから、その阻害剤、例えばコンカナマイシンやバフィロマイシンにはガン細胞の増殖や転移抑制等多くの作用が期待され、アルツハイマー症の治療可能性も言及されている（特許文献１）。【０００５】
また、Ａβが神経細胞に対して毒性を発現するメカニズムについても研究がなされている。例えば、Ａβが細胞膜の脱分極を誘導して細胞毒性を発現するとの仮説から脱分極阻害剤によるアルツハイマー病の治療が提案されている（特許文献２）。胃壁細胞のプロトンポンプ阻害剤として知られているオメプラゾールも候補薬のひとつとして挙げられているが脱分極に対する阻害効果は強くなく、Ａβの産生自体を抑制するということは記載も示唆もされていない。【０００６】
ここで胃壁細胞のプロトンポンプとは、胃の壁細胞に多く存在していて、胃内腔に水素イオン（Ｈ＋）を分泌し壁細胞内にＫ＋を輸送しているＨ＋／Ｋ＋−ＡＴＰａｓｅをいい、一般に形質膜に存在し、細胞内液と細胞外液との間のカチオン輸送に関与するイオン輸送性ＡＴＰａｓｅ（Ｐ−ＡＴＰａｓｅ）の一種である。その選択的な阻害剤は、胃酸分泌を抑制することから、消化性潰瘍治療剤として広く利用され、オメプラゾールはその代表的な薬物である。上記特許公開公報の記載からオメプラゾールがＡβの細胞毒性を緩和する作用は否定できないが、消化性潰瘍治療剤として使用されるプロトンポンプ阻害剤の脱分極阻害作用は何等示唆されない。
【特許文献１】ＰＣＴ国際公開公報ＷＯ００／５０５８９号公報
【特許文献２】ＰＣＴ国際公開公報ＷＯ０３／０６８１４７号公報
【非特許文献１】ハース等(C.Haass et al.), J.Biol.Chem., 270(11), 6186-6192(1995).
【非特許文献２】フィンボアとハリソン(Finbour and Harrison), Biochem.J., 324,697-712(1997)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、アルツハイマー病やダウン症候群などのＡβ沈着に基づく神経変性疾患を予防および／または治療する医薬を提供することである。
本発明の目的は、また、これら神経変性疾患の原因となるＡβの産生を抑制する方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者等は、消化性潰瘍治療薬として用いられているプロトンポンプ阻害剤が意外にも培養細胞中でＡβの産生を減少させることを見出した。さらには、プロトンポンプ阻害剤を投与した野生型マウスにおいて、Ａβの血中濃度が低下することも確認して、本発明を完成した。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、アルツハイマー病やダウン症候群などの神経変性疾患の進行を抑える予防薬としての使用のみならず、既に神経細胞にＡβ沈着が生じている患者を治療することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】βＡＰＰスウェーデン変異を恒常発現したHEK293(HEK/βAPPswe)細胞において、オメプラゾールおよびランソプラゾールがＡβ産生に及ぼす影響を比較した図である。
【００１１】
【図２】野生型マウスにランソプラゾールを経口投与した場合の血漿中Ａβ濃度の変化を示した図である。
【００１２】
【図３】βＡＰＰスウェーデン変異を恒常発現したHEK293(HEK/APPswe)細胞において、ランソプラゾール、テナトプラゾール、ラベプラゾールおよびオメプラゾールがＡβの産生に及ぼす影響を示した図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明は、以下のものを提供する。
（１）プロトンポンプ阻害作用を有する化合物（ただし、以下の化合物：
【化１】
2008016002.tif 000002
（以下、化合物１とする）を除く）
もしくはその製薬上許容される塩またはその溶媒和物を含有することを特徴とする、アミロイドβ産生抑制剤。
（１’）プロトンポンプ阻害剤（ただし、オメプラゾールを除く）を含有することを特徴とする、アミロイドβ産生抑制剤。【００１４】
（２）式（Ｉ）：
【化２】
2008016002.tif 000003
（式中、Ａは
【化３】
2008016002.tif 000004
【００１５】
Ｘ１およびＸ２は各々独立してＣＲ４またはＮであり、
Ｒ１は低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシ、ヒドロキシ低級アルコキシ、低級アルコキシ低級アルコキシまたは置換基を有していてもよいフェニルアミノであり、
Ｒ２は低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシまたはヘテロ環式基であり、
Ｒ３は低級アルキルであり、
Ｒ４は水素、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシ、ヒドロキシ低級アルコキシ、低級アルコキシ低級アルコキシまたは置換基を有していてもよいフェニルアミノであり、
ｎ、ｍおよびｐは各々独立して０〜３の整数である。
ただし、化合物１を除く）
で示される化合物、もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を含有することを特徴とする、アミロイドβ産生抑制剤。【００１６】
（３）ランソプラゾール（lansoprazole）、パントプラゾール（pantoprazole）、エソメプラゾール（esomeprazole）、ラベプラゾール（rabeprazole）、レバプラザン（revaprazan）、イラプラゾール（ilaprazole）、テナトプラゾール（tenatoprazole）、ＣＳ−５２６もしくはそれらの製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を含有することを特徴とする、アミロイドβ産生抑制剤。
（４）プロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物剤を含有することを特徴とする、アミロイドβ産生抑制剤。
（５）アルツハイマー症治療剤である、上記（１）〜（４）のいずれかに記載のアミロイドβ産生抑制剤。【００１７】
（６）プロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物剤を投与することを特徴とする、アミロイドβの産生抑制方法。
（６’）プロトンポンプ阻害作用を有する化合物（ただし化合物１を除く）もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物剤（ただしオメプラゾールを除く）を投与することを特徴とする、アミロイドβの産生抑制方法。
（７）プロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を投与することを特徴とする、アルツハイマー症の治療方法。
（７’）プロトンポンプ阻害作用を有する化合物（ただし化合物１を除く）もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を投与することを特徴とする、アルツハイマー症の治療方法。
（８）アミロイドβ産生抑制のための医薬の製造のためのプロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物剤の使用。
（８’）アミロイドβ産生抑制のための医薬の製造のためのプロトンポンプ阻害作用を有する化合物（ただし化合物１を除く）もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物剤（ただしオメプラゾールを除く）の使用。【００１８】
（９）アルツハイマー症の治療のための医薬の製造のためのプロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用。 
（９’）アルツハイマー症の治療のための医薬の製造のためのプロトンポンプ阻害作用を有する化合物（ただし化合物１を除く）もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用。【００１９】
本発明のＡβ産生抑制剤は、プロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物剤を有効成分とする。ここでいうプロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物剤とは、Ａβが沈着した、もしくはＡβが将来沈着するおそれのある神経細胞の細胞膜上に存在するＨ＋／Ｋ＋-ＡＴＰアーゼであって、細胞内外のイオン環境の恒常性維持に重要な役割を担っているＡＴＰアーゼの阻害薬を意味し、例えば、下式（Ｉ）
【化４】
2008016002.tif 000005
【００２０】
（式中、Ａは
【化５】
2008016002.tif 000006
【００２１】
Ｘ１およびＸ２は各々独立してＣＲ４またはＮであり、
Ｒ１は低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシ、ヒドロキシ低級アルコキシ、低級アルコキシ低級アルコキシまたは置換基を有していてもよいフェニルアミノであり、
Ｒ２は低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシまたはヘテロ環式基であり、
Ｒ３は低級アルキルであり、
Ｒ４は水素、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシ、ヒドロキシ低級アルコキシ、低級アルコキシ低級アルコキシまたは置換基を有していてもよいフェニルアミノであり、ただし、化合物１を除く）
で示される芳香族ヘテロ環式化合物、その製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を用いることができる。ここで、ｎまたはｍが２以上である場合、複数個存在するＲ１またはＲ２は各々異なっていてもよい。【００２２】
好ましくは、上記式（Ｉ）において、ｎが２または３であり、Ｒ１が低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲノ低級アルコキシまたは低級アルコキシ低級アルコキシであり、
Ａが
【化６】
2008016002.tif 000007
であり、ｍが０または１であり、Ｒ２が低級アルコキシであり、Ｘ１がＣＨであり、Ｘ２がＣＨまたはＮである化合物（ただし、化合物１を除く）もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物である。【００２３】
ここで、「低級アルキル」とは、炭素数１〜１０、好ましくは炭素数１〜６、さらに好ましくは炭素数１〜３までの直鎖状または分岐状のアルキルを包含し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ｎ−へプチル、イソヘプチル、ｎ−オクチル、イソオクチル、ｎ−ノニルおよびｎ−デシル等が例示される。特に好ましくはメチルまたはエチルである。【００２４】
「低級アルコキシ」、「ハロゲノ低級アルコキシ」、「ヒドロキシ低級アルコキシ」、「低級アルコキシ低級アルコキシ」および「低級アルコキシカルボニル」の低級アルキル部分は上記「低級アルキル」と同様である。
「ハロゲン」とはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩを包含する。
「ハロゲノ低級アルコキシ」のハロゲン部分は上記「ハロゲン」と同様である。
「置換基を有していてもよいフェニルアミノ」の置換基としては、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、アシル等が挙げられる。【００２５】
「アシル」とは、炭素数１〜７の脂肪族アシルおよびアロイルを包含する。具体的には、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、バレリル、ピバロイル、ヘキサノイル、アクリロイル、プロピオロイル、メタクリロイル、クロトノイルおよびベンゾイル等が例示される。【００２６】
「ヘテロ環式基」とは、Ｏ、ＳおよびＮから任意に選択されるヘテロ原子を環内に１個以上有する複素環式基を包含し、具体的にはピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアゾリル、トリアジニル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、イソチアゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、フリルおよびチエニル等の５〜６員環のヘテロアリール；インドリル、イソインドリル、インダゾリル、インドリジニル、インドリニル、イソインドリニル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、プリニル、プテリジニル、ベンゾピラニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンズオキサゾリル、ベンズオキサジアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾフリル、イソベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンゾトリアゾリル、イミダゾピリジル、ピラゾロピリジン、トリアゾロピリジル、イミダゾチアゾリル、ピラジノピリダジニル、キナゾリニル、キノリル、イソキノリル、ナフチリジニル、ジヒドロベンゾフリル、テトラヒドロキノリル、テトラヒドロイソキノリル、ジヒドロベンズオキサジン、テトラヒドロベンゾチエニル等の２環の縮合複素環式基；カルバゾリル、アクリジニル、キサンテニル、フェノチアジニル、フェノキサチイニル、フェノキサジニル、ジベンゾフリル、イミダゾキノリル等の３環の縮合複素環式基；ジオキサニル、チイラニル、オキシラニル、オキサチオラニル、アゼチジニル、チアニル、チアゾリジン、ピロリジニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、モルホリノ、チオモルホリニル、チオモルホリノ、ジヒドロピリジル、ジヒドロベンズイミダゾリル、テトラヒドロピリジル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチアゾリル、テトラヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジニル、ヘキサヒドロアゼピニル、テトラヒドロジアゼピニル等の非芳香族複素環式基を包含する。好ましくは５〜６員のヘテロアリールまたは非芳香族複素環式基である。【００２７】
製薬上許容される塩としては、酸付加塩の場合、例えば塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、過塩素酸塩等の無機酸塩；例えばシュウ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、フマール酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩等の有機酸塩；例えばメタンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等のスルホン酸塩；例えばアスパラギン酸塩、グルタミン酸塩等の酸性アミノ酸等を挙げることができる。また、塩基付加塩の場合、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩、アルギニン、リシン等の塩基性アミノ酸塩等を挙げることができる。【００２８】
化合物（Ｉ）は、水、アセトニトリル、酢酸エチル、メタノール、エタノール等の溶媒和物であってもよい。又本発明化合物の溶媒和物の溶媒和数は通常、合成方法、精製方法または結晶化条件等によって変化し得るが、例えば、化合物１分子当り１〜５分子の範囲である。【００２９】
この化合物（Ｉ）は例えば以下に示す方法で製造される。
Ａ法
【化７】
2008016002.tif 000008
【００３０】
公知化合物または公知化合物から常法により得られる化合物（II)またはその塩、および化合物（III)またはその塩を、適当な溶媒中、約０℃〜溶媒の沸点付近、好ましくは約２０℃〜約８０℃で、約５分〜約２４時間、好ましくは約３０分〜約３時間程度反応させれば化合物（IV)を得ることができる。化合物（III)の脱離基Ｙとしては、塩素、臭素等のハロゲン、メタンスルホニルオキシ基等の脂肪族スホニルオキシ基、ｐ-トルエンスルホニルオキシ基等の芳香族スルホニルオキシ基等が挙げられる。また、化合物（II)および（III)の塩は前記の「製薬上許容される塩」と同義である。溶媒としてはメタノール、エタノール、ジメチルホルムアミド、ＤＭＳＯ、テトラヒドロフラン、またはそれらの混合物等が挙げられる。【００３１】
本反応は必要に応じて適当な塩基存在下で反応させればよく、塩基としては、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ-ジメチルアニリン、ピリジン、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド等が挙げられ、基質に対し約１〜１０当量、好ましくは約１〜４当量程度を用いればよい。 【００３２】
得られた化合物（ＩＶ）を酸化反応に付すことにより、目的とする化合物（Ｉａ）が得られる。酸化反応は通常用いられる反応であれば特に限定されず、適当な酸化剤を用い、適当な溶媒中、氷冷下〜約８０℃、好ましくは約０℃〜２０℃で、約５分〜約２４時間、好ましくは約５分〜約３時間程度反応させればよい。酸化剤としては、例えばメタクロロ過安息香酸、過酢酸、過酸化水素、クロム酸、二酸化マンガン、過ヨウ素酸ナトリウム等が挙げられ、基質に対して約１〜３当量、好ましくは約１〜１．５当量を用いればよい。溶媒としてはテトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ＤＭＳＯ、ジクロロメタン、水、またはそれらの混合物等を用いればよい。【００３３】
Ｂ法
【化８】
2008016002.tif 000009
（式中、Ｙは脱離基であり、その他の各記号は前記と同義）【００３４】
化合物（Ｖ)またはその塩および化合物（ＶＩ)またはその塩を適当な溶媒中、約０℃〜溶媒の沸点付近、好ましくは約２０℃〜約８０℃で、約５分〜約２４時間、好ましくは約１時間〜約５時間程度反応させれば化合物（Ｉｂ)を得ることができる。化合物（ＶＩ)の脱離基Ｙとしては、塩素、臭素等のハロゲン、メタンスルホニルオキシ基等の脂肪族スホニルオキシ基、ｐ-トルエンスルホニルオキシ基等の芳香族スルホニルオキシ基等が挙げられる。また化合物（Ｖ)および（ＶＩ)の塩は前記の製薬上許容される塩と同義である。溶媒としてはジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＳＯ、テトラヒドロフラン、またはそれらの混合物等が挙げられる。【００３５】
本反応は必要に応じて適当な塩基存在下で反応させればよく、塩基としては、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ-ジメチルアニリン、ピリジン、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド等が挙げられ、基質に対し約１〜１０当量、好ましくは約１〜４当量程度を用いればよい。Ａ法、Ｂ法共に、化合物（Ｉ）に反応の障害となる官能基が存在する場合は所望により公知の方法で予め保護しておき反応の終了後に脱保護すればよい。【００３６】
化合物（Ｉ）が光学異性体、立体異性体、位置異性体、回転異性体を含有する場合には、これらも本発明化合物として含有されるとともに、それ自体公知の合成手法、分離手法によりそれぞれを単品として得ることができる。例えば、化合物（Ｉ）に光学異性体が存在する場合には、該化合物から分割された光学異性体も本発明化合物に包含される。該光学異性体は、自体公知の方法により製造することができる。具体的には、光学活性な合成中間体を用いる、または、最終物のラセミ体の混合物を常法に従って光学分割することにより光学異性体を得る。【００３７】
光学分割法としては、自体公知の方法、例えば、以下に詳述する分別再結晶法、キラルカラム法、ジアステレオマー法等が用いられる。
１）分別再結晶法
ラセミ体と光学活性な化合物(例えば、(+)−マンデル酸、(−)−マンデル酸、(+)−酒石酸、(−)−酒石酸、(+)−1−フェネチルアミン、(−)−1−フェネチルアミン、シンコニン、シンコニジン、ブルシンなど)と塩を形成させ、これを分別再結晶法によって分離し、所望により、中和工程を経てフリーの光学異性体を得る。【００３８】
２）キラルカラム法
ラセミ体またはその塩を光学異性体分離用カラム(キラルカラム)にかけて分離する方法である。例えば液体クロマトグラフィーの場合、TSKgel ENANTIO−OVM(東ソー社製)あるいは、ダイセル化学工業社製 CHIRALシリーズなどのキラルカラムに光学異性体の混合物を添加し、水、種々の緩衝液(例えば、リン酸緩衝液)、有機溶媒(例えば、ヘキサン、エタノール、メタノール、イソプロパノール、アセトニトリル、トリフルオロ酢酸、ジエチルアミンなど)を単独あるいは混合した溶液として展開させることにより、光学異性体を分離する。また、例えば、ガスクロマトグラフィーの場合、CP−Chirasil−DeX CB(ジーエルサイエンス社製)などのキラルカラムを使用して分離する。【００３９】
３）ジアステレオマー法
ラセミ体の混合物を光学活性な試薬と化学反応によってジアステレオマーの混合物とし、これを通常の分離手段(例えば、分別再結晶、クロマトグラフィー法等)などを経て単一物質とした後、加水分解反応などの化学的な処理により光学活性な試薬部位を切り離すことにより光学異性体を得る方法である。例えば、本発明化合物が分子内にヒドロキシまたは１，２級アミノを有する場合、該化合物と光学活性な有機酸(例えば、（−）−MTPA〔α−メトキシ−α−(トリフルオロメチル)フェニル酢酸〕、(−)−メントキシ酢酸等)などとを縮合反応に付すことにより、それぞれエステル体またはアミド体のジアステレオマーを得ることができる。一方、本発明化合物がカルボキシル基を有する場合、該化合物と光学活性アミンまたはアルコール試薬とを縮合反応に付すことにより、それぞれアミド体またはエステル体のジアステレオマーが得られる。分離されたジアステレオマーは、酸加水分解あるいは塩基性加水分解反応に付すことにより、元の化合物の光学異性体に変換される。【００４０】
さらに本発明のプロトンポンプ阻害作用を有する化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物剤としては、消化性潰瘍の治療薬として用いられる胃酸分泌抑制剤を好適に使用することができる。
具体的には、オメプラゾール（omeprazole；米国特許4255431号、同6166213号）、ランソプラゾール（lansoprazole；米国特許4628098号）、パントプラゾール（pantoprazole；米国特許4555518号、同4758579号）、エソメプラゾール（esomeprazole；米国特許4738974号）、ラベプラゾール（rabeprazole；米国特許5045552号）、レバプラザン（revaprazan；米国特許5750531号、同6252076号、同5990311号）、イラプラゾール（ilaprazole；米国特許5703097号）、テナトプラゾール（tenatoprazole；米国特許4808596号）等、ＡＧＮ−２０１９０４、およびＣＳ−５２６等のピロロピリダジン誘導体（米国特許6063782号）等が例示され、これらは併せて記載した特許公報の記載に基づき容易に入手することができる。また、製薬上許容されるその他の塩もしくは溶媒和物も同様に、好ましく使用することができる。【００４１】
本発明化合物（Ｉ）は例えば、下記の通り、互変異性体をも含有する。
【化９】
2008016002.tif 000010
【００４２】
本発明のＡβ産生抑制剤は、医薬組成物、特にＡβ沈着に基づく神経変性疾患の治療または予防に有効である。かかる疾患としては、例えばアルツハイマー型痴呆（アルツハイマー症、アルツハイマー型老年痴呆等）、ダウン症、記憶障害、プリオン病（クロイツフェルト・ヤコブ病等）、軽度認知障害（MCI）、オランダ型遺伝性アミロイド性脳出血、脳アミロイド血管障害、他の変性痴呆、血管性変性混合型痴呆、パーキンソン病に随伴する痴呆、進行性核上麻痺に随伴する痴呆、皮質基底核変性症に随伴する痴呆、びまん性レビー小体型アルツハイマー病、加齢黄斑変性症、パーキンソン病、アミロイドアンジオパシーなどを挙げることができる。好ましくはアルツハイマー型痴呆、特にアルツハイマー病の進行を抑えるために、または治療を目的として経口または非経口投与用に処方され得る。【００４３】
経口投与による場合、本発明のＡβ産生抑制剤は通常の製剤、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤等の固形剤；水剤；油性懸濁剤；またはシロップ剤もしくはエリキシル剤等の液剤のいずれかの剤形としても用いることができる。非経口投与による場合、水性または油性懸濁注射剤、点鼻液として用いることができる。その調製に際しては、慣用の賦形剤、結合剤、滑沢剤、水性溶剤、油性溶剤、乳化剤、懸濁化剤、保存剤、安定剤等を任意に用いることができる。【００４４】
本発明の製剤は、治療有効量の化合物を製薬上許容される担体または希釈剤とともに組み合わせる（例えば混合する）ことによって製造され、その場合、周知の、容易に入手できる成分を用いて既知の方法により製造される。
本発明の医薬組成物を製造する際、活性成分は担体と混合されるかまたは担体で希釈されるか、カプセル、サッシェー、紙、あるいは他の容器の形態をしている担体中に入れられる。担体が希釈剤として働く時、担体は媒体として働く固体、半固体、または液体の材料であり、それらは錠剤、丸剤、粉末剤、口中剤、エリキシル剤、懸濁剤、エマルジョン剤、溶液剤、シロップ剤、エアロゾル剤（液体媒質中の固体）、軟膏にすることができ、例えば、１０％までの活性化合物を含む。【００４５】
当業者には公知の適当な担体はいずれもこの製剤のために使用できる。このような製剤では担体は、固体、液体、または固体と液体の混合物である。例えば、静脈注射のために有効成分の化合物を４％デキストロース／０．５％クエン酸ナトリウム水溶液中に溶解する。固形の製剤は粉末、錠剤およびカプセルを包含する。固形担体は、香料、滑沢剤、溶解剤、懸濁剤、結合剤、錠剤崩壊剤、カプセル剤にする材料としても役立つ１またはそれ以上の物質である。経口投与のための錠剤は、トウモロコシデンプン、アルギン酸などの崩壊剤、および／またはゼラチン、アカシアなどの結合剤、およびステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、滑石などの滑沢剤とともに炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムなどの適当な賦形剤を含む。【００４６】
粉末剤では担体は細かく粉砕された活性成分と混合された、細かく粉砕された固体である。錠剤では活性成分は、適当な比率で、必要な結合性を持った担体と混合されており、所望の形と大きさに固められている。粉末剤および錠剤は約１〜約９９重量％の本発明の活性成分を含んでいる。適当な固形担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、滑石、砂糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、低融点ワックス、ココアバターである。【００４７】
液体製剤は懸濁剤、エマルジョン剤、シロップ剤、およびエリキシル剤を含む。活性成分は、滅菌水、滅菌有機溶媒、または両者の混合物などの製薬上許容し得る担体中に溶解または懸濁することができる。活性成分はしばしば適切な有機溶媒、例えばプロピレングリコール水溶液中に溶解することができる。水性デンプン、ナトリウムカルボキシメチルセルロース溶液、または適切な油中に細かく砕いた活性成分を散布することによってその他の組成物を製造することもできる。
本発明における化合物の投与量は、投与方法、患者の年齢、体重、状態および疾患の種類・程度によっても異なるが、通常、経口投与の場合、成人１日あたり約０．１ｍｇ〜１００００ｍｇ、好ましくは、約０．５ｍｇ〜３０００ｍｇを、要すれば分割して投与すればよい。また、非経口投与の場合、成人１日あたり約０．１ｍｇ〜３０００ｍｇ、好ましくは、約０．５ｍｇ〜１０００ｍｇを投与する。
【実施例１】
【００４８】
本発明の効果を下記の例のとおり試験した。
試験例１
βＡＰＰスウェーデン変異を恒常発現したHEK293(HEK/βAPPswe)細胞におけるＡβの定量（オメプラゾールとランソプラゾールの効力比較）
βＡＰＰスウェーデン変異を恒常発現したHEK293（HEK/βAPPswe）細胞株は10% 仔牛血清および200μg/mL ハイグロマイシンを含むダルベッコの修飾イーグル培地（DMEM）で培養した。96ウェルポリスチレン製培養ディッシュに2×10４ cells / wellになるように200μL / wellで細胞を播種した。およそ70%コンフルエンス時に培養液交換と同時に化合物を添加した。ランソプラゾール（DMSO中50mMのストック溶液）を最終濃度50μM、オメプラゾール（DMSO中100mM のストック溶液）を最終濃度300 μMになるように添加し、よく混和した。一晩（約16時間）37℃で培養後、培養上清100μLを回収し、Ａβ40をHTRF法（日本シェーリング ＃62B40PEC）を用いて測定した。方法はメーカー推奨のプロトコール（添付文書記載の方法）に従って行った。但し、Ａβ標品はバイオソース社 Ａβ40エライザキット(＃KHB3482）に添付されている標品を利用した。結果は、これらの化合物の適用DMSO濃度と同じ0.5% DMSOの培養上清中Ａβ濃度をコントロールとして、これに対する百分率（コントロールに対する％、% of control）で示した。【００４９】
細胞生存の評価はＷＳＴ法を用いて評価を実施した。Ａβ測定用に培養上清を回収した後の96ウェルポリスチレン製培養ディッシュに10μLのＷＳＴ試薬（ナカライテスク ＃07553-44）を添加し、37℃で3時間培養を行った。測定はメーカー推奨のプロトコール（添付文書記載の方法）に従って行った。結果は、0.5% DMSO処理の培養上清中生存率に対する百分率（コントロールに対する％、% of control）にて示した。
その結果、ランソプラゾールおよびオメプラゾールは共に細胞毒性と乖離した条件化でＡβ産生を抑制した。ランソプラゾールはオメプラゾールより低濃度で同等の効果を示し、ランソプラゾールはオメプラゾールと比較して極めて強い活性を有することを見出した（図１参照）。【００５０】
試験例２
野生型マウス（CD-1)における血漿含有Ａβ量に及ぼす影響
野生型マウス（CD-1(ICR)、雄、8週齢）は日本チャールスリバー社より購入した。溶媒には0.5% メチルセルロースを使用し、ランソプラゾール投与群（各n=8）は100 mg/kgまたは200 mg/kgで経口投与を実施し、投与後2時間でハロセン麻酔下において開腹し大静脈からの採血を行った。ランソプラゾールの非投与群（基剤, n=8）として0.5% メチルセルロースを10 mL/kgで経口投与を実施し、投与後２時間で採血を行った。10μLの0.25M EDTAを含む1 mLシリンジで採血を行い、1.5 mLエッペンドルフチューブに回収した。9600 g、4℃、10分間遠心分離を行い上清を回収し血漿を調製した。血漿はＡβ測定時まで-80℃で冷凍保存した。Ａβ測定は和光純薬社製Ａβ40 エライザキット（#294-625901）を使用した。血漿サンプルはエライザキット付属のスタンダード希釈液で4倍希釈を行い、メーカー推奨のプロトコール（添付文書記載の方法）に従って行った。結果は化合物非投与群（基剤）の血漿Ａβ含量に対する百分率（コントロールに対する％、% of control）にて示した。
その結果ランソプラゾール 200 mg/kg、投与後２時間群において血漿含有Ａβの有意な減少〔p=0.0241, ダネット検定(Dunnett's test)〕が認められた（図２参照）。【００５１】
試験例３
βＡＰＰスウェーデン変異を恒常発現したHEK293(HEK/APPswe)細胞におけるＡβの定量（ＩＣ５０値の測定）
オメプラゾールは和光純薬工業、ランソプラゾールはシグマ(Sigma)社より購入した。テナトプラゾールおよびラベプラゾールは3Bメディカルシステムズ(3B medical systems)より購入した。
βAPPスウェーデン変異恒常発現HEK293（HEK/APPswe）細胞株は10% 仔牛血清及び200 μg/mL ハイグロマイシンを含むダルベッコの修飾イーグル培地(DMEM）で培養した。6 ウェルポリスチレン製培養ディッシュに1.5×10５ cells / wellになるように2 mL / wellで細胞を播種した。およそ70% コンフルエンス時に培養液交換と同時に化合物を添加した。各試験化合物（DMSO中50 mMのストック溶液）は最終濃度500、300、180、108、64.8、38.88μMになるように添加し、よく混和した。一晩（約16時間）37℃で培養後、培養上清1 mLを回収し、Ａβ40をHTRF法（日本シェーリング #62B40PEC）を用いて測定した。方法はメーカー推奨のプロトコール（添付文書記載の方法）に従って行った。但し、Ａβ標品はバイオソース(BIOSOURCE)社 Ａβ40 エライザキット(#KHB3482）に添付されている標品を利用した。結果は、これらの化合物の適用DMSO濃度と同じ1% DMSOの培養上清中Ａβ濃度をコントロールとして、これに対する百分率（コントロールに対する％、% of control）で示した。【００５２】
細胞生存の評価はＷＳＴ法を用いて評価を実施した。Ａβ測定用に培養上清を回収した後の6 ウェルポリスチレン製培養ディッシュに20 μLのＷＳＴ試薬（ナカライテスク #07553-44）を添加し、37℃で３時間培養を行った。測定はメーカー推奨のプロトコール（添付文書記載の方法）に従って行った。結果は、1% DMSO処理の培養上清中生存率に対する百分率（コントロールに対する％、% of control）にて示した。各試験化合物のＡβ産生阻害に対するIC５０値を算出した。
その結果、各試験化合物は細胞毒性と乖離した条件でＡβ産生を抑制し、さらにランソプラゾール、テナトプラゾール、ラベプラゾールはオメプラゾールと比較して強いＡβ産生阻害活性を示すことを確認した（表１および図３参照）。
【表１】
2008016002.tif 000011
【００５３】
実施例１
2008016002.tif 000012
以下の成分を含有する錠剤を製造する。
式（Ｉ）で表わされる化合物、乳糖、微結晶セルロース、CMC-Na（カルボキシメチルセルロース  ナトリウム塩）を60メッシュのふるいに通し、混合する。混合末にステアリン酸マグネシウム混合し、製錠用混合末を得る。本混合末を直打し、150mgの錠剤を得る。
2008016002.tif 000013
【００５４】
実施例２
以下の成分を加温混合後、滅菌して注射剤とする。
【産業上の利用可能性】
【００５５】
本発明はアルツハイマー病やダウン症候群などのＡβ沈着に基づく神経変性疾患を予防し、および／または治療するための医薬として有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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