【手続補正書】
【提出日】令和1年7月19日(2019.7.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
特異的に腫瘍細胞によって発現されるEGFRvIIIまたは過剰発現のEGFRを識別する抗体であって、軽鎖可変領域および重鎖可変領域を有し、かつ、
その軽鎖可変領域のCDR1は、配列番号41、配列番号47、配列番号55からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有し、
その軽鎖可変領域のCDR2は、配列番号42、配列番号53からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有し、
その軽鎖可変領域のCDR3は、配列番号43、配列番号48、配列番号54、配列番号56、配列番号57からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有し、
その重鎖可変領域のCDR1は、配列番号44のアミノ酸配列を有し、
その重鎖可変領域のCDR2は、配列番号45、配列番号49、配列番号51、配列番号52からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有し、
その重鎖可変領域のCDR3は、配列番号46、配列番号50からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有する、
抗体であり、
好ましくは、
前記の抗体は、
軽鎖可変領域が配列番号41で示されるCDR1、配列番号42で示されるCDR2、配列番号43で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号45で示されるCDR2、配列番号46で示されるCDR3を有する抗体(a)、
軽鎖可変領域が配列番号47で示されるCDR1、配列番号42で示されるCDR2、配列番号48で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号49で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(b)、
軽鎖可変領域が配列番号41で示されるCDR1、配列番号42で示されるCDR2、配列番号48で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号51で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(c)、
軽鎖可変領域が配列番号41で示されるCDR1、配列番号42で示されるCDR2、配列番号43で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号52で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(d)、
軽鎖可変領域が配列番号41で示されるCDR1、配列番号42で示されるCDR2、配列番号43で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号45で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(e)、
軽鎖可変領域が配列番号41で示されるCDR1、配列番号53で示されるCDR2、配列番号54で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号51で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(f)、
軽鎖可変領域が配列番号41で示されるCDR1、配列番号42で示されるCDR2、配列番号54で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号51で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(g)、
軽鎖可変領域が配列番号55で示されるCDR1、配列番号42で示されるCDR2、配列番号56で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号45で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(h)、
軽鎖可変領域が配列番号41で示されるCDR1、配列番号53で示されるCDR2、配列番号56で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号52で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(i)、
軽鎖可変領域が配列番号41で示されるCDR1、配列番号42で示されるCDR2、配列番号56で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号52で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(j)、
軽鎖可変領域が配列番号41で示されるCDR1、配列番号42で示されるCDR2、配列番号57で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号44で示されるCDR1、配列番号52で示されるCDR2、配列番号50で示されるCDR3を有する抗体(k)、あるいは
（a）〜（k）のうちのいずれかに記載の抗体によって識別される抗原決定基と同様の抗原決定基を識別する抗体（l）、
を含む抗体であり、
より好ましくは、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号13のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号13のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号59のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号59のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号61のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号61のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号63のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号63のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号65のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号65のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号67のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号67のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号69のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号69のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号71のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号71のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号73のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号73のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号75のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号75のうちの1〜108番目で示されるか、
前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号77のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号77のうちの1〜108番目で示される、抗体であり、
より好ましくは、
前記の抗体は抗体（a）で、より好ましくは、前記の抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号13のうちの124〜239番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号13のうちの1〜108番目で示される抗体。
【請求項２】
請求項1に記載の抗体をコードする核酸。
【請求項３】
請求項2に記載の核酸を含む発現ベクター。
【請求項４】
請求項3に記載の発現ベクターを含む、あるいはゲノムに請求項2に記載の核酸が組み込まれた宿主細胞。
【請求項５】
請求項1に記載の抗体の使用であって、特異的にEGFRvIIIを発現するかEGFRを過剰発現する腫瘍細胞を標的とする標的性薬物、抗体薬物抱合体または多機能抗体の製造、あるいは
EGFRvIIIを発現するかEGFRを過剰発現する腫瘍を診断する試薬の製造、あるいは
キメラ抗原受容体で修飾された免疫細胞、好ましくは、T細胞、NK細胞またはNKT細胞を含む免疫細胞の製造における使用。
【請求項６】
請求項1に記載の抗体と、
それと連結した、腫瘍表面マーカーを標的とする分子、腫瘍を抑制する分子、免疫細胞の表面マーカーを標的とする分子または検出可能な標識物から選ばれる機能性分子と、
を含む多機能免疫複合体であり、
好ましくは、
前記の腫瘍表面マーカーを標的とする分子は腫瘍表面マーカーと結合する抗体または配位子であるか、
前記の腫瘍を抑制する分子は抗腫瘍サイトカインまたは抗腫瘍毒素で、好ましくは、前記のサイトカインはIL-12、IL-15、IFN-β、TNF-αを含むか、または
前記の検出可能な標識物は、蛍光標識物、呈色標識物を含むか、または
前記の免疫細胞の表面マーカーを標的とする分子は免疫細胞の表面マーカーと結合する抗体または配位子で、好ましくは、前記の免疫細胞の表面マーカーは、CD3、CD16、CD28を含むか、または
前記の多機能免疫複合体は融合ポリペプチドで、かつ請求項1に記載の抗体およびそれと連結した機能性分子の間に、さらに連結ペプチドが含まれており、
より好ましくは、
前記の免疫細胞の表面マーカーを標的とする分子はT細胞の表面マーカーと結合する抗体で、請求項1に記載の抗体とT細胞が関与する二重機能抗体になり、
より好ましくは、
前記の免疫細胞の表面マーカーと結合する抗体は抗CD3抗体である、
多機能免疫複合体。
【請求項７】
請求項6に記載の多機能免疫複合体をコードする核酸。
【請求項８】
請求項6に記載の多機能免疫複合体の使用であって、抗腫瘍薬の製造、あるいは
EGFRvIIIを発現するかEGFRを過剰発現する腫瘍を診断する試薬の製造、あるいは
キメラ抗原受容体で修飾された免疫細胞、好ましくは、T細胞、NK細胞またはNKT細胞を含む免疫細胞の製造における使用。
【請求項９】
免疫細胞の表面に発現される、請求項1に記載の抗体を有するキメラ抗原受容体であって、前記のキメラ抗原受容体は順に連結した請求項1に記載の抗体、膜貫通領域および細胞内シグナル領域を含むキメラ抗原受容体であり、
好ましくは
前記の細胞内シグナル領域は、CD3ζ、FcεRIγ、CD27、CD28、CD137、CD134の細胞内シグナル領域、またはこれらの組み合わせから選ばれ、
より好ましくは
前記の膜貫通領域はCD8またはCD28の膜貫通領域を含むか、または
前記の免疫細胞はT細胞、NK細胞またはNKT細胞を含むか、または
前記のキメラ抗原受容体は、
請求項1のいずれかに記載の抗体、CD8およびCD3ζ、
請求項1のいずれかに記載の抗体、CD8、CD137およびCD3ζ、
請求項1のいずれかに記載の抗体、CD28分子の膜貫通領域、CD28分子の細胞内シグナル領域およびCD3ζ、あるいは
請求項1のいずれかに記載の抗体、CD28分子の膜貫通領域、CD28分子の細胞内シグナル領域、CD137およびCD3ζ、
のような順で連結した抗体、膜貫通領域および細胞内シグナル領域を含むか、または
前記の抗体は一本鎖抗体またはドメイン抗体であるか、または
前記のキメラ抗原受容体は、
配列番号36またはそのうちの285〜601番目で示されるアミノ酸配列、あるいは
配列番号37またはそのうちの285〜702番目で示されるアミノ酸配列、あるいは
配列番号38またはそのうちの285〜744番目で示されるアミノ酸配列、あるいは
配列番号39またはそのうちの285〜749番目で示されるアミノ酸配列、あるいは
配列番号40またはそのうちの285〜791番目で示されるアミノ酸配列、
を有する、
キメラ抗原受容体。
【請求項１０】
請求項9に記載のキメラ抗原受容体をコードする核酸。
【請求項１１】
請求項10に記載の核酸を含む発現ベクター。
【請求項１２】
請求項11に記載のベクターを含むウイルス。
【請求項１３】
請求項9に記載のキメラ抗原受容体、または請求項10に記載の核酸、または請求項11に記載の発現ベクター、または請求項12に記載のウイルスの使用であって、EGFRvIIIを発現するかEGFRを過剰発現する腫瘍細胞を標的とする遺伝子修飾された免疫細胞の製造における使用。
【請求項１４】
遺伝子組み換えTリンパ球であって、請求項10に記載の核酸、または請求項11に記載のベクターまたは請求項12に記載のウイルスを形質導入されたか、
表面に請求項9のいずれかに記載のキメラ抗原受容体が発現され、
好ましくは
さらに、外来のサイトカインのコード配列を担持し、好ましくは、前記のサイトカインは、IL-12、IL-15またはIL-21を含むか、または
さらにもう1種類のキメラ抗原受容体を発現し、当該受容体はCD3ζを含まないが、CD28の細胞内シグナルドメイン、CD137の細胞内シグナルドメインまたはこの両者の組み合わせを含むか、または
さらにケモカイン受容体を発現し、好ましくは、前記のケモカイン受容体はCCR2を含むか、または
さらにPD-1の発現を低下させるsiRNAまたはPD-L1を遮断するタンパク質を発現するか、または
さらに安全スイッチを発現し、好ましくは、前記の安全スイッチは誘導性カスパーゼ9（iCaspase-9）、短縮型EGFR（Truancated EGFR）またはRQR8を含む、
遺伝子修飾された免疫細胞。
【請求項１５】
請求項14に記載の遺伝子修飾された免疫細胞の使用であって、腫瘍を抑制する薬物の製造に使用され、前記の腫瘍はEGFRvIIIを発現するかEGFRを過剰発現する腫瘍である使用。
【請求項１６】
請求項1に記載の抗体または当該抗体をコードする核酸、あるいは
請求項6に記載の免疫複合体または当該複合体をコードする核酸、あるいは
請求項9に記載のキメラ抗原受容体または当該キメラ抗原受容体をコードする核酸、あるいは
請求項14のいずれかに記載の遺伝子修飾された免疫細胞、
を含む薬物組成物。