【手続補正書】
【提出日】令和1年5月9日(2019.5.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脳梗塞を有する対象において閉塞した血管を再疎通させるための医薬組成物であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含み、該医薬組成物は閉塞した血管を再疎通させるために前記対象に投与される、医薬組成物。
【請求項２】
対象において閉塞した血管を再疎通させることにより対象において脳梗塞を治療するための医薬組成物であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含み、該医薬組成物は脳梗塞を治療するために前記対象に投与される、医薬組成物。
【請求項３】
前記医薬組成物は、約４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１，０００、１，２５０、１，５００、１，７５０、又は２，０００Ｕ／ｋｇの用量で前記対象に投与され、および／または
前記医薬組成物は、梗塞検出の３００分以内に前記対象に投与される、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記医薬組成物は、約４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１，０００、１，２５０、１，５００、１，７５０、又は２，０００Ｕ／ｋｇの用量で前記対象に投与され、かつ梗塞検出の３００分以内に前記対象に投与される、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項５】
脳梗塞を有する対象において閉塞した血管を再疎通させるための医薬組成物であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含み、該医薬組成物は閉塞した血管を再疎通させるために前記対象に投与され、前記対象におけるＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質のレベルを、投与前の前記対象におけるＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質のレベルの１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、又は２０倍に増加させる量で前記対象に投与される、医薬組成物。
【請求項６】
前記医薬組成物は、梗塞検出の３００分以内に前記対象に投与される、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記対象における局所脳血流量は、脳梗塞を有しない対照における局所脳血流量の少なくとも２５％まで改善される、請求項１から６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記対象における局所脳血流量は、脳梗塞を有しない対照における局所脳血流量の少なくとも５０％まで改善される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記対象における局所脳血流量は、脳梗塞を有しない対照における局所脳血流量の少なくとも７５％まで改善される、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質はグリコシル化されている、請求項１から９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、１時間より長い血漿中半減期を有する、請求項１から１０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、ＨＥＫ２９３細胞により組換え技術で生成されたものである、請求項１から１１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、ＣＨＯ細胞により組換え技術で生成されたものである、請求項１から１１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
複数回投与又は連続注入により投与される、請求項１から１３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記医薬組成物を投与されていない対照における出血のレベルと比較して、出血のレベルを増加させない、請求項１から１４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
梗塞体積を減少させる、請求項１から１５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記医薬組成物を投与されていない対照における梗塞体積と比較して、梗塞体積が少なくとも５０％低減される、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
脳梗塞を経験した対象において感覚運動機能の回復を改善するための医薬組成物であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含み、該医薬組成物は感覚運動機能の回復を改善するために前記対象に投与され、前記対象における局所脳血流量は、脳梗塞を有しない対照における局所脳血流量の少なくとも２５％まで改善される、医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７４】
Ｆ．実施例５：ｒｈＡＤＡＭＴＳ１３の遅い投与でも脳卒中の結果を改善する血栓溶解促進効果を発揮する
ＡＤＡＭＴＳ１３の血栓溶解能力が臨床的により現実的なより広い時間枠においても有効であるか否かを評価するために、ＭＣＡの安定閉塞の１時間後にｒｈＡＤＡＭＴＳ１３（３５００Ｕ／ｋｇ）を静脈注射した。この長時間の血栓性閉塞の後でさえ、ｒｈＡＤＡＭＴＳ１３はまだ血栓を不安定化することができ、それによりＭＣＡの開放を部分的に回復した（図５Ａ）。この効果は早いｒｈＡＤＡＭＴＳ１３投与よりも弱かったが、ｒＣＢＦはｒｈＡＤＡＭＴＳ１３注射の６０分後にベールライン値の４３．９％±１１．７％まで回復した。再度、ビヒクルで処置した群において、ｒＣＢＦは注射の６０分後に１８．２％±１．７％のままであった。この血流の部分的回復は、虚血発作（ischemic insult）から脳を部分的に救済するのにまだ十分であった。ｒｈＡＤＡＭＴＳ１３で処置されたマウスの梗塞１時間後の梗塞サイズは実際に、ビヒクルを投与されたマウスと比較して有意に減少した（それぞれ、１１．３ｍｍ３±１．６ｍｍ３対１８．８ｍｍ３±２．９ｍｍ３）。
他の実施形態
１．脳梗塞を有する対象において閉塞した血管を再疎通させる方法であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含む医薬組成物を前記対象に投与し、それにより閉塞した血管を再疎通させる工程を含み、前記医薬組成物は、約４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１，０００、１，２５０、１，５００、１，７５０、又は２，０００Ｕ／ｋｇの用量で前記対象に投与される、方法。
２．脳梗塞を有する対象において閉塞した血管を再疎通させる方法であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含む医薬組成物を前記対象に投与し、それにより閉塞した血管を再疎通させる工程を含み、前記医薬組成物は、梗塞検出の１５、３０、６０、９０、１２０、１８０、２１０、２４０、２７０又は３００分以内に前記対象に投与される、方法。
３．対象において閉塞した血管を再疎通させることにより、対象において脳梗塞を治療する方法であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含む医薬組成物を前記対象に投与し、それにより脳梗塞を治療する工程を含み、前記医薬組成物は、約４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１，０００、１，２５０、１，５００、１，７５０、又は２，０００Ｕ／ｋｇの用量で前記対象に投与される、方法。
４．対象において閉塞した血管を再疎通させることにより、対象において脳梗塞を治療する方法であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含む医薬組成物を前記対象に投与し、それにより脳梗塞を治療する工程を含み、前記医薬組成物は、梗塞検出の１５、３０、６０、９０、１２０、１８０、２１０、２４０、２７０、又は３００分以内に前記対象に投与される方法。
５．前記医薬組成物は、約４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１，０００、１，２５０、１，５００、１，７５０、又は２，０００Ｕ／ｋｇの用量で前記対象に投与され、かつ梗塞検出の１５、３０、６０、９０、１２０、１８０、２１０、２４０、２７０又は３００分以内に前記対象に投与される、実施形態１から４のいずれかに記載の方法。
６．脳梗塞を有する対象において閉塞した血管を再疎通させる方法であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含む医薬組成物を前記対象に投与し、それにより閉塞した血管を再疎通させる工程を含み、前記医薬組成物は、前記対象におけるＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質のレベルを、投与前の前記対象におけるＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質のレベルの１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、又は２０倍に増加させる量で前記対象に投与される、方法。
７．前記医薬組成物は、梗塞検出の１５、３０、６０、９０、１２０、１８０、２１０、２４０、２７０又は３００分以内に前記対象に投与される、実施形態６記載の方法。
８．前記対象における局所脳血流量は、脳梗塞を有しない対照と比較して、少なくとも２５％まで改善される、実施形態１から７のいずれかに記載の方法。
９．局所脳血流量は、前記対照における局所脳血流量と比較して、少なくとも５０％まで改善される、実施形態８記載の方法。
１０．局所脳血流量は、前記対照における局所脳血流量と比較して、少なくとも７５％まで改善される、実施形態８記載の方法。
１１．単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質はグリコシル化されている、実施形態１から１０のいずれかに記載の方法。
１２．単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、１時間より長い血漿中半減期を有する、実施形態１から１１のいずれかに記載の方法。
１３．単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、ＨＥＫ２９３細胞により組換え技術で生成されたものである、実施形態１から１２のいずれかに記載の方法。
１４．単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、ＣＨＯ細胞により組換え技術で生成されたものである、実施形態１から１２のいずれかに記載の方法。
１５．前記医薬組成物は、複数回又は連続注入により投与される、実施形態１から１４のいずれかに記載の方法。
１６．前記投与は、前記医薬組成物を投与されていない対照における出血のレベルと比較して、出血のレベルを増加させない、実施形態１から１５のいずれかに記載の方法。
１７．前記投与は梗塞体積を減少させる、実施形態１から１６のいずれかに記載の方法。
１８．梗塞体積は、脳梗塞を有していない対照における梗塞体積と比較して、少なくとも５０％低減される、実施形態１７記載の方法。
１９．  脳梗塞を経験した対象において、感覚運動機能の回復を改善する方法であって、治療有効量の単離ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含む医薬組成物を前記対象に投与し、それにより感覚運動機能の回復を改善する工程を含み、前記対象における局所脳血流量は、脳梗塞を有しない対照における局所脳血流量と比較して、少なくとも２５％まで改善される、方法。