【手続補正書】
【提出日】平成20年3月17日(2008.3.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
神経学的細胞の生物学的機能を改善する医薬を製造するための血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)産物の使用。
【請求項２】
神経学的細胞の生物学的機能を改善する医薬を製造するための血管内皮増殖因子Ｄ(ＶＥＧＦ-Ｄ)産物の使用。
【請求項３】
前記医薬が、薬学的に許容可能な担体をさらに含む請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
前記医薬が、神経治療剤をさらに含む請求項１または２に記載の使用。
【請求項５】
前記医薬が、神経細胞または神経前駆細胞の集積、増殖、分化、移動または生存を促す請求項１または２に記載の使用。
【請求項６】
前記医薬が、ニューロン細胞またはニューロン前駆細胞の集積、増殖、分化、移動または生存を促す請求項１または２に記載の使用。
【請求項７】
前記医薬が、オリゴデンドロサイトまたはオリゴデンドロサイト前駆細胞の集積、増殖、または分化を促す請求項１または２に記載の使用。
【請求項８】
前記医薬が、ニューロン細胞の異常な成長、ニューロン瘢痕化または神経変性を特徴とする疾患または状態の治療用剤である請求項１乃至４のいずれかに記載の使用。
【請求項９】
前記医薬が、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病、運動ニューロン病、筋萎縮性側索硬化症(ＡＬＳ)、痴呆症、脳性麻痺、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される神経変性障害に起因する神経変性の治療用剤である請求項１乃至４のいずれかに記載の使用。
【請求項１０】
前記医薬が、オリゴデンドロサイトまたはオリゴデンドロサイト前駆細胞の異常な成長を特徴とする疾患または状態の治療用剤である請求項１乃至４のいずれかに記載の使用。
【請求項１１】
前記医薬が、神経系での脱髄を特徴とする疾患または状態の治療用剤である請求項１乃至４のいずれかに記載の使用。
【請求項１２】
前記医薬が、多発性硬化症、フェニルケトン尿症、脳室周囲白質軟化症(ＰＶＬ)、ＨＩＶ-１脳炎(ＨＩＶＥ)、ギヤン-バレー症候群(ＧＢＳ)、急性炎症性脱髄多発性神経障害(ＡＩＤＰ)、急性運動軸索神経障害(ＡＭＡＮ)、急性運動感覚軸索神経障害(ＡＭＳＡＮ)、フィッシャー症候群、急性自立神経異常、クラッベ病、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される状態の治療用剤である請求項１乃至４のいずれかに記載の使用。
【請求項１３】
前記医薬が、慢性炎症性脱髄多発神経根神経障害(ＣＩＤＰ)の治療用剤である請求項１乃至４のいずれかに記載の使用。
【請求項１４】
前記ＣＩＤＰが、多病巣性後天性脱髄感覚(ＭＡＤＳＡＭ)および運動神経障害(ルイス-スムナー症候群)、遠位後天性脱髄対称神経障害(ＤＡＤＳ)、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
前記医薬が、神経外傷または神経損傷の治療用剤である請求項１乃至４のいずれかに記載の使用。
【請求項１６】
前記神経外傷が、発作関連損傷、脊髄損傷、手術後損傷、脳虚血症、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
神経幹細胞または神経前駆細胞の増殖、分化、移動または生存をin vitroで促す方法であって、以下の工程、すなわち；
精製した神経幹細胞または神経前駆細胞に対して、当該細胞の生存を促す上で有効量の血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)産物、あるいは当該細胞の増殖または分化を刺激する上で有効量の血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)産物を接触する工程を含み、および
当該神経幹細胞または神経前駆細胞が、Ｃ１７.２、精製された神経幹細胞、ＨＳＮ-１細胞、胎児ブタ細胞、神経堤細胞、骨髄由来神経幹細胞、ｈＮＴ細胞、ヒトニューロン前駆細胞系、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される、
ことを特徴とする方法。
【請求項１８】
オリゴデンドロサイト前駆細胞の増殖をin vitroで誘導する方法であって、以下の工程、すなわち；
オリゴデンドロサイトまたはオリゴデンドロサイト前駆細胞に対して、血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)産物を接触する工程を含み、および
当該オリゴデンドロサイト前駆細胞が、ＣＧ-４細胞、ＳＶＧ ｐ１２胎児神経膠細胞系、ＤＢＴＲＧ-０５ＭＧ神経膠細胞系、精製されたオリゴデンドロサイト前駆細胞、単離されたＮＧ２プロテオグリカン(ＮＧ２＋細胞)、骨髄由来神経幹細胞、ヒトニューロン前駆細胞系、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される、
ことを特徴とする方法。
【請求項１９】
神経幹細胞を含む生物学的試料に対して、血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)産物を接触する工程を含む、ことを特徴とする神経幹細胞の増殖または分化をin vitroで刺激する方法。
【請求項２０】
神経前駆細胞を含む生物学的試料に対して、血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)産物を接触する工程を含む、ことを特徴とする神経前駆細胞の増殖または分化をin vitroで刺激する方法。
【請求項２１】
オリゴデンドロサイト前駆細胞を含む生物学的試料に対して、血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)産物を接触する工程を含む、ことを特徴とするオリゴデンドロサイト前駆細胞の増殖または分化をin vitroで刺激する方法。
【請求項２２】
前記細胞が、血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)産物を含有している培地で培養されたものである請求項１７乃至２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記細胞を精製および単離する工程をさらに含む請求項１７乃至２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の方法に従って得られた精製および単離した神経細胞。
【請求項２５】
神経幹細胞または神経前駆細胞の増殖、分化、移動または生存をin vitroで促す方法であって、以下の工程、すなわち；
精製した神経幹細胞または神経前駆細胞に対して、当該細胞の生存を促し、あるいは当該細胞の増殖または分化を刺激する上で有効量の血管内皮増殖因子Ｄ(ＶＥＧＦ-Ｄ)産物を接触する工程を含み、および
当該神経幹細胞または神経前駆細胞が、Ｃ１７.２、精製された神経幹細胞、ＨＳＮ-１細胞、胎児ブタ細胞、神経堤細胞、骨髄由来神経幹細胞、ｈＮＴ細胞、ヒトニューロン前駆細胞系、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される、
ことを特徴とする方法。
【請求項２６】
オリゴデンドロサイト前駆細胞の増殖をin vitroで誘導する方法であって、以下の工程、すなわち；
オリゴデンドロサイトまたはオリゴデンドロサイト前駆細胞に対して、血管内皮増殖因子Ｄ(ＶＥＧＦ-Ｄ)産物を接触する工程を含み、および
当該オリゴデンドロサイト前駆細胞が、ＣＧ-４細胞、ＳＶＧ ｐ１２胎児神経膠細胞系、ＤＢＴＲＧ-０５ＭＧ神経膠細胞系、精製されたオリゴデンドロサイト前駆細胞、単離されたＮＧ２プロテオグリカン(ＮＧ２＋細胞)、骨髄由来神経幹細胞、ヒトニューロン前駆細胞系、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される、
ことを特徴とする方法。
【請求項２７】
神経幹細胞を含む生物学的試料に対して、血管内皮増殖因子Ｄ(ＶＥＧＦ-Ｄ)産物を接触する工程を含む、ことを特徴とする神経幹細胞の増殖または分化をin vitroで刺激する方法。
【請求項２８】
神経前駆細胞を含む生物学的試料に対して、血管内皮増殖因子Ｄ(ＶＥＧＦ-Ｄ)産物を接触する工程を含む、ことを特徴とする神経前駆細胞の増殖または分化をin vitroで刺激する方法。
【請求項２９】
オリゴデンドロサイト前駆細胞を含む生物学的試料に対して、血管内皮増殖因子Ｄ(ＶＥＧＦ-Ｄ)産物を接触する工程を含む、ことを特徴とするオリゴデンドロサイト前駆細胞の増殖または分化をin vitroで刺激する方法。
【請求項３０】
前記細胞が、血管内皮増殖因子Ｄ(ＶＥＧＦ-Ｄ)産物を含有している培地で培養されたものである請求項２５乃至２９のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
前記細胞を精製および単離する工程をさらに含む請求項２５乃至３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
請求項３１に記載の方法に従って得られた精製および単離した神経細胞。
【請求項３３】
ヒト以外の哺乳動物での神経学的状態を処置する医薬を製造するための請求項２４または３２に記載の細胞の使用。
【請求項３４】
前記医薬が、薬学的に許容可能な担体をさらに含む請求項３３に記載の使用。
【請求項３５】
前記医薬が、神経治療剤をさらに含む請求項３３に記載の使用。
【請求項３６】
前記神経学的状態が、ニューロン細胞の異常な成長、ニューロン瘢痕化または神経変性を特徴とする請求項３３乃至３５のいずれかに記載の使用。
【請求項３７】
前記神経学的状態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病、運動ニューロン病、筋萎縮性側索硬化症(ＡＬＳ)、痴呆症、脳性麻痺、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される神経変性障害に起因する請求項３３乃至３５のいずれかに記載の使用。
【請求項３８】
前記神経学的状態が、オリゴデンドロサイトまたはオリゴデンドロサイト前駆細胞の異常な成長を特徴とする請求項３３乃至３５のいずれかに記載の使用。
【請求項３９】
前記神経学的状態が、神経系での脱髄を特徴とする請求項３３乃至３５のいずれかに記載の使用。
【請求項４０】
前記神経学的状態が、多発性硬化症、フェニルケトン尿症、脳室周囲白質軟化症(ＰＶＬ)、ＨＩＶ-１脳炎(ＨＩＶＥ)、ギヤン-バレー症候群(ＧＢＳ)、急性炎症性脱髄多発性神経障害(ＡＩＤＰ)、急性運動軸索神経障害(ＡＭＡＮ)、急性運動感覚軸索神経障害(ＡＭＳＡＮ)、フィッシャー症候群、急性自立神経異常、クラッベ病、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される請求項３３乃至３５のいずれかに記載の使用。
【請求項４１】
前記神経学的状態が、慢性炎症性脱髄多発神経根神経障害(ＣＩＤＰ)である請求項３３乃至３５のいずれかに記載の使用。
【請求項４２】
前記ＣＩＤＰが、多病巣性後天性脱髄感覚(ＭＡＤＳＡＭ)および運動神経障害(ルイス-スムナー症候群)、遠位後天性脱髄対称神経障害(ＤＡＤＳ)、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される請求項４１に記載の使用。
【請求項４３】
前記神経学的状態が、神経外傷または神経損傷である請求項３３乃至３５のいずれかに記載の使用。
【請求項４４】
前記神経外傷が、発作関連損傷、脊髄損傷、手術後損傷、脳虚血症、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される請求項４３に記載の使用。
【請求項４５】
前記ＶＥＧＦ-Ｃ産物が、精製された哺乳動物プレプロ-ＶＥＧＦ-Ｃポリペプチド、またはＶＥＧＦＲ-３もしくはニューロピリン-２に結合するその断片を含む請求項１、３乃至１６および２４のいずれかに記載の使用。
【請求項４６】
前記ＶＥＧＦ-Ｃ産物が、ＶＥＧＦ-ＣΔＣ156ポリペプチドを含む請求項１、３乃至１６および２４のいずれかに記載の使用。
【請求項４７】
前記ＶＥＧＦ-Ｃ産物が、キメラヘアピン-結合ＶＥＧＦ-Ｃポリペプチドを含む請求項１、３乃至１６および２４のいずれかに記載の使用。
【請求項４８】
前記ＶＥＧＦ-Ｃ産物が、配列番号：２４に記載のアミノ酸配列の第１位〜第４１９位のアミノ酸、第３２位〜第２２７位のアミノ酸、または第１０３位〜第２２７位のアミノ酸に対して、少なくとも９５％の同一性を示すアミノ酸配列を含み、かつＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドを含む請求項１、３乃至１６および２４のいずれかに記載の使用。
【請求項４９】
前記ＶＥＧＦ-Ｃ産物が、
(ａ) 配列番号：２３に記載のヌクレオチド配列に対して少なくとも９０％の同一性を示すヌクレオチド配列を含み、かつＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；
(ｂ) 配列番号：２４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を示すアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含み、かつＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；
(ｃ) ハイブリダイゼーションおよび洗浄のための条件下、すなわち、６５℃で、０.５Ｍ NaHPO4、７％ドデシル硫酸ナトリウム(ＳＤＳ)、１mM ＥＤＴＡを用いたハイブリダイゼーション、および４７℃で、０.２×ＳＳＣ/０.１％ＳＤＳを用いた洗浄のための条件下で、配列番号：２３に記載のヌレオチド配列の相補体にハイブリダイズし、かつＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；
(ｄ) 配列番号：２４に記載のヒトＶＥＧＦ-Ｃのアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および
(ｅ) ＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドをコードする前掲の(ａ)乃至(ｄ)のいずれかのポリヌクレオチドの断片、
からなるグループから選択されるポリヌクレオチドを含む請求項１、３乃至１６および２４のいずれかに記載の使用。
【請求項５０】
前記ＶＥＧＦ-Ｃ産物が、ＶＥＧＦ-ＣΔＣ156ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む請求項１、３乃至１６および２４のいずれかに記載の使用。
【請求項５１】
前記ＶＥＧＦ-Ｃ産物が、キメラヘアピン結合ＶＥＧＦ-Ｃポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む請求項１、３乃至１６および２４のいずれかに記載の使用。
【請求項５２】
前記ポリヌクレオチドが、ウイルスベクターの形態である請求項４５乃至５１のいずれかに記載の使用。
【請求項５３】
前記ベクターが、複製-欠陥アデノウイルス、アデノ-関連ウイルス、またはレンチウイルスを含む請求項５２に記載の使用。
【請求項５４】
前記ＶＥＧＦ-Ｄ産物が、配列番号：２６に記載のアミノ酸配列の第１位〜第３５４位のアミノ酸、第２２位〜第２０１位のアミノ酸、または第９３位〜第２０１位のアミノ酸に対して、少なくとも９５％の同一性を示すアミノ酸配列を含み、かつＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドを含む請求項２乃至１６および３２のいずれかに記載の使用。
【請求項５５】
前記ＶＥＧＦ-Ｄ産物が、
(ａ) 配列番号：２３に記載のヌクレオチド配列に対して少なくとも９０％の同一性を示すヌクレオチド配列を含み、かつＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；
(ｂ) 配列番号：２６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を示すアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含み、かつＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；
(ｃ) ハイブリダイゼーションおよび洗浄のための条件下、すなわち、６５℃で、０.５Ｍ NaHPO4、７％ドデシル硫酸ナトリウム(ＳＤＳ)、１mM ＥＤＴＡを用いたハイブリダイゼーション、および４７℃で、０.２×ＳＳＣ/０.１％ＳＤＳを用いた洗浄のための条件下で、配列番号：２５に記載のヌレオチド配列の相補体にハイブリダイズし、かつＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；
(ｄ) 配列番号：２６に記載のヒトＶＥＧＦ-Ｃのアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド；および
(ｅ) ＶＥＧＦＲ-３に結合するポリペプチドをコードする前掲の(ａ)乃至(ｄ)のいずれかのポリヌクレオチドの断片、
からなるグループから選択されるポリヌクレオチドを含む請求項２乃至１６および３２のいずれかに記載の使用。
【請求項５６】
その活性成分が、血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)産物からなる、ことを特徴とする薬学的組成物。
【請求項５７】
薬学的に許容可能な希釈剤または担体に取り込まれた神経成長因子および／または神経治療剤をさらに含む請求項５６に記載の組成物。
【請求項５８】
その活性成分が、血管内皮増殖因子Ｄ(ＶＥＧＦ-Ｄ)産物からなる、ことを特徴とする薬学的組成物。
【請求項５９】
薬学的に許容可能な希釈剤または担体に取り込まれた神経成長因子および／または神経治療剤をさらに含む請求項５８に記載の組成物。
【請求項６０】
血小板由来増殖因子Ａ(ＰＤＧＦ-Ａ)産物をさらに含む請求項５６乃至５９のいずれかに記載の組成物。
【請求項６１】
血小板由来増殖因子Ｃ(ＰＤＧＦ-Ｃ)産物をさらに含む請求項５６乃至５９のいずれかに記載の組成物。
【請求項６２】
前記神経治療剤が、(１)インターフェロンガンマ、神経成長因子、表皮成長因子(ＥＧＦ)、塩基性線維芽細胞成長因子(ｂＦＧＦ)、ニューロゲニン、脳由来神経栄養因子(ＢＤＮＦ)、甲状腺ホルモン、骨形態蛋白質(ＢＭＰ)、白血病阻害性因子(ＬＩＦ)、ソニックヘッジホッグ、神経膠細胞系-由来神経栄養因子(ＧＤＮＦ)、血管内皮成長因子(ＶＥＧＦ)、インターロイキン、インターフェロン、幹細胞因子(ＳＣＦ)、アクチビン、インヒビン、ケモカイン、レチノイン酸、繊毛神経栄養因子(ＣＮＴＦ)、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される神経成長因子、または(２)当該神経成長因子(１)をコードするポリヌクレオチドをさらに含む請求項５７または５９に記載の組成物。
【請求項６３】
前記神経治療剤が、タクリン(Cognex)、ドネペジル(Aricept)、リバスチグミン(Exelon)、ガランタミン(Reminyl)、コリンエステラーゼ阻害剤、抗-炎症剤、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される請求項５７乃至５９のいずれかに記載の組成物。
【請求項６４】
前記神経治療剤が、抗-コリン作用剤、ドーパミンアゴニスト、カテコール-０-メチル-トランスステアラーゼ(COMTs)、アマンタジン(Symmetrel)、シネメット(Sinemet(登録商標))、セレギリン(Selegiline)、カルビドーパー、ロピニロール(Requip)、コエンザイムＱ10、プラミペキソール(Mirapex)、レボドーパ(Ｌ-ドーパ)、およびこれらの組み合わせからなるグループから選択される請求項５７乃至５９のいずれかに記載の組成物。
【請求項６５】
神経学的細胞の生物学的機能を改善する請求項５６乃至６４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６６】
神経幹細胞または神経前駆細胞の増殖、移動、分化または生存に関与する血管内皮増殖因子Ｃ(ＶＥＧＦ-Ｃ)刺激のモジュレーターをスクリーニングする方法であって、以下の工程、すなわち；
試験薬剤の存在下および不在下で、ＶＥＧＦ-Ｃに対して神経細胞または神経前駆細胞を接触させ、
当該薬剤の存在下および不在下で、当該細胞の増殖、移動、分化または生存を測定し、および
当該薬剤の存在下および不在下で得られた測定結果に基づいて、当該薬剤を、神経細胞または神経前駆細胞に関するＶＥＧＦ-Ｃ効果のモジュレーターとして同定する、
工程を含む、ことを特徴とする方法。
【請求項６７】
神経幹細胞または神経前駆細胞の増殖、移動、分化または生存に関与する血管内皮増殖因子Ｄ(ＶＥＧＦ-Ｄ)刺激のモジュレーターをスクリーニングする方法であって、以下の工程、すなわち；
試験薬剤の存在下および不在下で、ＶＥＧＦ-Ｄに対して神経細胞または神経前駆細胞を接触させ、
当該薬剤の存在下および不在下で、当該細胞の増殖、移動、分化または生存を測定し、および
当該薬剤の存在下および不在下で得られた測定結果に基づいて、当該薬剤を、神経細胞または神経前駆細胞に関するＶＥＧＦ-Ｄ効果のモジュレーターとして同定する、
工程を含む、ことを特徴とする方法。
【請求項６８】
前記細胞が、神経幹細胞系を含む請求項６６または６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記細胞が、ＶＥＧＦＲ-３を発現する神経細胞または神経前駆細胞を含む請求項６６または６７に記載の方法。
【請求項７０】
前記細胞が、ニューロピリン２を発現する請求項６６、６７または６９のいずれかに記載の方法。
【請求項７１】
神経幹細胞または神経前駆細胞の増殖、移動、分化または生存を刺激するアゴニストであるモジュレーターを検出する工程をさらに含み、かつ当該アゴニストが、細胞表面の神経細胞マーカーの染色度の増大または細胞内の増殖マーカーの増大によって検出される請求項６６または６７に記載の方法。
【請求項７２】
神経幹細胞または神経前駆細胞の増殖、移動、分化または生存を刺激するアンタゴニストであるモジュレーターを検出する工程をさらに含み、かつ当該アンタゴニストが、細胞表面の神経細胞マーカーの染色度の減退または細胞内の増殖マーカーの減少によって検出される請求項６６または６７に記載の方法。