【手続補正書】
【提出日】平成19年12月4日(2007.12.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【書類名】  明細書
【発明の名称】  癌および前立腺疾患のための治療としての結合体
【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化１−１】
2002543163.tif 000001
からなる群より選択される化合物、およびその任意の塩または立体異性体。
【請求項２】  以下の式：
【化１−２】
2002543163.tif 000002
請求項１に記載の化合物およびその任意の塩または立体異性体。
【請求項３】  以下の式：
【化１−３】
2002543163.tif 000003
の、請求項１に記載の化合物およびその任意の塩。
【請求項４】  以下の式：
【化１−４】
2002543163.tif 000004
の、請求項１に記載の化合物およびその任意の塩。
【請求項５】  請求項２、３または４のいずれかに記載の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む、組成物。
【請求項６】  疾患を処置するための組成物であって、該疾患は、細胞増殖制御の有意な損失によって特徴付けられる異常な細胞増殖であり、該組成物は、請求項２、３または４に記載の化合物のうちの１以上を含む、組成物。
【請求項７】  前記疾患が癌である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】  前記癌が前立腺癌である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】  前記癌が乳癌である、請求項７に記載の組成物。
【請求項１０】  前記癌が転移性癌である、請求項７に記載の組成物。
【請求項１１】  前記疾患が良性前立腺過形成である、請求項６に記載の組成物。
【請求項１２】  前記疾患が前立腺炎である、請求項６に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（関連出願の引用）
本出願は、同時係属中の米国仮特許出願番号６０／１３１，８０９（１９９９年４月３０日出願）に対する優先権を主張する。この出願の内容は、本明細書中でその全体が参考として援用される。本出願はまた、参考文献米国出願番号６０／１３１，７７９（代理人整理番号３７６４６３０００４００）および米国出願番号６０／１３１，８４２（代理人整理番号３７６４６３０００５００）（１９９９年４月３０日に出願）により援用する。これらの出願の内容は、その全体が本明細書中で参考として援用される。本出願はまた、参考文献米国出願番号  （代理人整理番号３７６４６２０００４００）および米国出願番号  （代理人整理番号３７６４６２０００５００）（２０００年４月２７日に本出願と同時出願）により援用する。これらの出願の内容はまた、その全体が本明細書中で参考として援用される。
【０００２】
（連邦政府がスポンサーの研究に基づいてなされた発明に対する権利の陳述）
該当なし
（技術分野）
本発明は、細胞増殖抑制性化合物または細胞破壊性化合物（例えば、ポリアミンアナログまたはキノン）が、酵素（例えば、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）およびカテプシンＢ）によって認識かつ切断されるポリペプチドに結合体化される治療組成物に関する。本発明はまた、これらの結合体の医薬的使用に関し、例えば、癌の処置の際の使用、および前立腺疾患（例えば、前立腺癌、前立腺炎および良性前立腺過形成（ＢＰＨ））を処置する際の使用に関する。
【０００３】
（発明の背景）
近年の診断の進歩にもかかわらず、前立腺癌は、１年の発生率および死亡率が高くかつ増加する疾患のままである。前立腺癌は、今や、ヒトにおいて最も頻繁に診断される癌である。この癌は、しばしば潜在的である：多くのヒトは、疾患の明白な兆候を伴なわずに前立腺癌細胞を携行する。他の原因により死亡した個体の検死は、５０歳の３０％のヒトにおいて前立腺癌細胞を示し；８０歳までの罹患率は、６０％である。さらに、前立腺癌は、最初の診断後患者が死亡するのに１０年までかかり得る。前立腺癌は、米国において各年１８０，０００人を超えて新規に診断され、そのうち３９，０００人を超える人が、この疾患で死ぬ。初期段階の癌において、転移がリンパ節に生じる。末期段階において、骨への転移が、一般的であり、そしてしばしば手におえない疼痛がつきまとう。
【０００４】
癌に加えて、前立腺の２つの有意な疾患は、ＢＰＨおよび前立腺炎である。これらの３つの疾患を処置する費用は、莫大である。米国において前率線疾患の１年の処置は、約４．４百万医師の訪問および８５０，０００の入院、ならびに数十億ドルの費用を必要とする。前立腺癌についての処置は、存在するが、これらは、一般的に、部分的または暫定的にのみ有効であり、そして／または容認し難い副作用を生じる。
【０００５】
良性前立腺過形成（ＢＰＨ）は、尿障害を引き起こし、尿失禁を生じる。それは、８０歳までに人のほぼ８０％において生じる。ＢＰＨは、しばしば、前立腺の経尿道的電気切除術（ＴＵＲＰ）で外科的に処置される。この手順は、非常に一般的である：５００，０００ＴＵＲＰが、米国において各年実施され、そしてＢＰＨは、男性における手術の第２の最も一般的な原因である。不幸にも、ＴＵＲＰの副作用は、射精管および陰茎の神経束の除去であり、患者の９０％において性交不能を生じる。
【０００６】
前立腺癌についての代替の治療は、放射線治療を含む。マイクロ波照射の間前立腺組織を圧搾するカテーテルが、発達されてきた；これは、治療温度を増大させ、マイクロ波アンテナに対してより遠位の前立腺組織は、非前立腺組織を近くで過剰に加熱することなしに加熱され得る（米国特許第５，００７，４３７号）。尿廃液Ｆｏｌｅｙ型カテーテルと一体になった照射エネルギーデバイスの組み合わせがまた、発達されてきた（米国特許第５，３４４，４３５号）。しかし、癌性前立腺細胞は、一般的に、ゆっくりとした成長速度を示す；ほとんどの癌細胞は、任意の一時に活性に分裂しない。結果として、前立腺癌は、放射線治療に一般的に耐性である。
【０００７】
このゆっくりとした成長速度はまた、前立腺癌を化学療法に耐性にするが、このような幾らかの方法は、今や、使用中でありるかまたは発展中である。ＢＰＨの処置についての薬理学的治療は、現状では、前立腺平滑筋（α1遮断）を緩和することおよび前立腺容量（アンドロゲン抑制）を減少することを目的とする。臨床試験は、ＢＰＨの処置に対して選択的α１ブロッカー、抗アンドロゲンおよび５−αレダクターゼインヒビターを評価するように企てられてきた。フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、５−αレダクターゼインヒビターは、大部分の患者において過形成前立腺の退化を引き起こす能力を示した（Ｍｏｃｅｌｌｉｎｉら（１９９３）Ｐｒｏｓｔａｔｅ２２：２９１；およびＭａｒｂｅｒｇｅｒ（１９９８）Ｕｒｏｌｏｇｙ５１：６７７−８６）。
【０００８】
前立腺癌についてのさらなる治療技術は、精巣におけるアンドロゲン産生を中断させるかまたは前立腺におけるアンドロゲン産生を直接ブロックすることによる医学的去勢の化学形態を用いることを含む。前立腺癌の処置のために、経口エストロゲンおよび黄体形成放出ホルモンアナログならびにアンドロゲンを産生する腺の外科的除去（精巣摘除または副腎摘出）が、使用される。しかし、エストロゲンは、もはや、重大な、致死的でさえある、心血管合併症のために薦められない。黄体ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アナログは、その代わりに使用される。しかし、ホルモン治療は、ホルモン耐性腫瘍細胞の進行に伴なう時間にいつも失敗する。さらに、患者の２０％が、ホルモン治療に応答することに失敗するので、ホルモン耐性細胞が、治療の開始に存在すると考えられる。
【０００９】
エストラムスチン、ステロイド性ナイトロジェンマスタード誘導体は、エストロゲンの毒性ナイトロジェンマスタードへの結合体化を介する標的化薬物送達に適切であると元は考えられた。しかし、臨床試験は、生存が終点として使用される場合、失望させた。フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、４−アザステロイド（Ｐｏｓｃａｒ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．から））は、テストステロンのジヒドロテストステロンへの細胞内転化を担う酵素、前立腺における最も潜在的なアンドロゲンを阻害する。Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標）（ビカルタミド、Ｚｅｎｅｃａ，Ｌｔｄ．）、非ステロイド性抗アンドロゲンは、核におけるアンドロゲンレセプターをブロックすることによってテストステロンの細胞摂取を阻害する。しかし、ほとんどすべての促進された前立腺癌細胞は、アンドロゲン剥奪に応答することに失敗する。
【００１０】
前立腺疾患を処置するためのさらなる方法は、ポリアミン合成のインヒビターの投与を含む（Ｄｕｎｚｅｎｄｏｒｆｅｒ（１９８５）Ｕｒｏｌ．Ｉｎｔ．４０：２４１−２５０）。自然に産生されたポリアミンは、スペルミジンおよびスペルミンならびにその前駆体、ジアミンプトレシンを含み、これらは、前立腺によって分泌され、かつ精液流体中に豊富にある。ポリアミンは、細胞分裂に対して必要とされ、かつおそらく分化に対して必要とされる。スペルミンは、明らかに、ＤＮＡを安定化し、スペルミンは、精子細胞の頭中に密接に包まれている。ポリアミンは、アクチンフィラメント束および微小管の安定化に不可欠であり得る。しかし、ポリアミン生合成インヒビター（例えば、α−ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）は、毒性（聴覚障害を含む）を引き起こし、これらの毒性は、時には処置の休止を強いらせる（Ｓｐｌｉｎｔｅｒら（１９８６）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２２：６１−６７；およびＨｏｒｎら（１９８７）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３：１１０３−１１０７）。別のインヒビター、メチルグリオキサル−ビス−グアニルヒドラゾン（ＭＧＢＧ）は、副作用を極度に引き起こし、その結果、１つの研究において、薬物死が、処置された動物の半分にわたって生じる（Ｄｕｎｚｅｎｄｏｒｆｅｒ（１９８５）；およびＨｅｒｒら（１９８４）Ｃａｎｃｅｒ５３：１２９４−１２９８）。
【００１１】
前立腺癌についての関連した型の治療は、ポリアミンアナログ（例えば、ＤＥＮＳＰＭ（Ｎ１，Ｎ１１−ジエチルノルスペルミンまたはＢＥ−３３３）を用いることを含む（Ｍｉら（１９８８）Ｐｒｏｓｔａｔｅ  ３４：５１−６０）。自然に産生されたポリアミンの正確な役割は、明確に規定されていないが、ＤＮＡおよびＲＮＡとの相互作用は、納得いくように関係された。これらの相互作用の性質は、非常に構造依存性であるが、ポリアミンアナログは、自然に生じるポリアミンとの競合によってポリアミン機能を有効に崩壊させるように設計されてきた。培養物およびヌードマウス異種移植片の両方におけるヒト腫瘍細胞成長の顕著な阻害を発揮するいくらかのポリアミンアナログは、発達されてきた。ポリアミンアナログ（例えば、ＢＥ−４４４４［１，１９−ビス（エチルアミノ）−５，１０，１５−トリアザノナデカン］、ＢＥ−３７３［Ｎ，Ｎ’−ビス−（３−エチルアミノ）プロピル）−１，７−ヘプタンジアミン］、およびＢＥ−３３３）は、ヌードマウスにおいて前立腺異種移植片腫瘍を阻害する際に特に有効である（Ｚａｇａｊａら（１９９８）Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．４１：５０５−５１２；Ｊｅｆｆｅｒｓら（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．４０：１７２−１７９；Ｆｅｕｅｒｓｔｅｉｎら（１９９１）Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．４６：３７−４７；およびＭａｒｔｏｎら（１９９５）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３５：５５−９１）。しかし、ポリアミンアナログは、全身性毒性を引き起こし得る。例えば、ＢＥ−３３３は、副作用（例えば、頭痛、吐気および嘔吐、片側衰弱、嚥下困難、構語障害、麻痺、感覚異常および運動失調）を引き起こす（Ｃｒｅａｖｅｎら（１９９７）Ｉｎｖｅｓｔ．Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ  １５：２２７−３４）。１つの試験において、ＢＥ−３３３の投与は、ラットにおいて呼吸困難、痙攣運動および急性死を引き起こす（Ｋａｎｔｅｒら（１９９４）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇｓ  ５：４４８−５６）。この毒性は、多くのポリアミンアナログを小さな治療濃度域に限定する。
【００１２】
前立腺疾患を処置するための上記の技術の記載は、普遍的に成功してきた。局所治療に従って、進行した疾患を有する患者の４０％まで、かつすべての患者の大部分は、結果的に転移性の疾患を発達させる。ホルモン操作および姑息的放射線治療を初期に含む、進行した疾患についての処置は、症候性軽減を示したが、長期的に疾患を伴なわない生存は示さなかった。ホルモン耐性進行前立腺癌の対応における細胞毒性薬剤の使用は、不十分に規定されたままである。少しの単一の薬剤が、「標準治療」となってきたが、現代の基準によるそれらの効力の実証は、不足している。コンビナトリアル化学療法は、しばしば使用されるが、すべての患者の対応に対するその寄与は、特に、効力パラメータの臨界評価が使用される場合において、大部分において実証されてない。化学ホルモン（ｃｈｅｍｏｈｏｒｍｏｎａｌ）治療およびホルモンプライミング治療を用いる新規のアプローチは、失敗した。移植片レジメンを用いる高用量の化学療法は、高齢者集団において十分に耐性でなく、前立腺癌の多くの犠牲者がこれに属している。成長因子インヒビター、スラミンは、将来有望な初期の結果を示したが、多くの副作用も示した（Ａｌｌｏｌｉｏら（１９８９）Ｄｔｓｃｈ．Ｍｅｄ．Ｗｏｓｃｈｅｎｓｃｈｒ．１１４：３８１−４；およびＢｒｏｄｅｒら（１９８５）Ｌａｎｃｅｔ  ２：６２７−３０）。しかし、進行したホルモン抵抗性前立腺癌を有する患者におけるすべての生存を改善するデータに対する治療は、実証されてない。
【００１３】
およそ５５歳以上の４人に１人が、前立腺疾患に罹患する。米国の老齢人口に起因して、ＢＰＨ、前立腺炎および前立腺癌の兆候が、増大しかつより重大な問題にさえなりそうである。
【００１４】
種々の副作用および現状の治療の不利益に供されなく、化学療法の潜在性を維持する、前立腺癌の新規の処置を発達させることは、有益である。
【００１５】
本明細書中に列挙されるすべての参考文献は、その全体が本明細書中で参考として援用される。
【００１６】
（発明の要旨）
本発明は、細胞増殖抑制剤または細胞破壊剤がポリペプチドに結合体化された治療組成物を提供し、ここで、このポリペプチドは、酵素によってこの薬剤から切断される。
【００１７】
１つの実施形態では、この細胞増殖抑制剤または細胞破壊剤はポリアミンアナログである。このポリアミンアナログは、このポリアミンの一級アミン基または二級アミン基へのアミド結合によってこのペプチドのカルボキシ末端でこのペプチドに連結され得る。このポリアミンアナログは、ヒドロキシ基を含み得、そしてこのヒドロキシ基を通したエステル結合によってこのペプチドのカルボキシ末端でこのペプチドに連結され得る。別の実施形態では、このポリアミンアナログは、コンホメーションが制限されている。
【００１８】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されるポリアミンアナログは、以下の式：
−Ｎ（−Ｅ）−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｅ
または
−ＨＮ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｅ
のものおよびその任意の塩または立体異性体であり、
ここで、各Ａは、単結合、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｂは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキルおよびＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より独立して選択され；そして各Ｅは、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択される。
【００１９】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されるポリアミンアナログは、以下の式：
−Ｎ（−Ｅ）−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｅ
または
−ＨＮ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｅ
のものおよびその任意の塩または立体異性体であり、
ここで、各Ａは、単結合、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｂは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキルおよびＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より独立して選択され；そして各Ｅは、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；ただし、Ａ部分の少なくとも１つは、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より選択されるか、またはＢ部分の少なくとも１つはＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より選択されるかのいずれかである。
【００２０】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されるこのポリアミンアナログは、以下の式：
−Ｎ（−Ｅ）−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ（−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ）x−Ｅ
または
−ＨＮ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ（−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ）x−Ｅ
のものおよびその任意の塩または立体異性体であり、
ここで、ここでＡは、単結合、Ｃ6−Ｃ2アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｂは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキルおよびＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｅは、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；そしてｘが、２〜１６の整数である。
【００２１】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されるポリアミンアナログは、以下の式：
−Ｎ（−Ｅ）−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ（−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ）x−Ｅ
または
−ＨＮ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ（−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ）x−Ｅ
のものおよびその任意の塩または立体異性体であり、
ここで、各Ａは、単結合、Ｃ6−Ｃ2アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｂは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキルおよびＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｅは、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；そしてｘは、２〜１６の整数であり；ただし、Ａ部分の少なくとも１つは、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より選択されるか、またはＢ部分の少なくとも１つはＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より選択されるかのいずれかである。
【００２２】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されるポリアミンアナログは、以下の式：
Ｅ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ（−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ）x−Ｅ
のものおよびその任意の塩または立体異性体であり、
ここで、各Ａは、単結合、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｂは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキルおよびＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｅは、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルカノール、Ｃ3−Ｃ6シクロアルカノールおよびＣ3−Ｃ6ヒドロキシアリールからなる群より独立して選択され、そしてこのペプチドは、唯一のＥ基のヒドロキシでエステル結合を介してこのポリアミンへと連結され；そしてｘは、０〜１６の整数である。
【００２３】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されるポリアミンアナログは、以下の式：
Ｅ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ（−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ）x−Ｅ
のものおよびその任意の塩または立体異性体であり、
ここで、各Ａは、単結合、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｂは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキルおよびＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｅは、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルカノール、Ｃ3−Ｃ6シクロアルカノールおよびＣ3−Ｃ6ヒドロキシアリールからなる群より独立して選択され、ただし、Ｅ部分の少なくとも１つは、Ｃ1−Ｃ6アルカノール、Ｃ3−Ｃ6シクロアルカノールおよびＣ3−Ｃ6ヒドロキシアリールからなる群より選択され、そしてこのペプチドは、唯一のＥ基のヒドロキシでエステル結合を介してこのポリアミンへと連結されており；そしてｘは、０〜１６の整数である。
【００２４】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されるポリアミンアナログは、以下の式：
−Ｎ（−Ｅ）−Ｄ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｄ−ＮＨ−Ｅ
または
−ＮＨ−Ｄ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｄ−ＮＨ−Ｅ
のものおよびその任意の塩または立体異性体であり、
ここで、Ａは、Ｃ2−Ｃ6アルキニルからなる群より選択され；各Ｂは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキルおよびＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｄは、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルケニルおよびＣ3−Ｃ6シクロアリールからなる群より独立して選択され；そして各Ｅは、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択される。
【００２５】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されるポリアミンアナログは、以下の式：
−Ｎ（−Ｅ）−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｆ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｅ
または
−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｆ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｅ
のものおよびその任意の塩または立体異性体であり、
ここで、Ｆは、Ｃ1−Ｃ6アルキルからなる群より選択され；各Ａは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキル；Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｂは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキルおよびＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より独立して選択され；そして各Ｅは、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択される。
【００２６】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されるポリアミンアナログは、以下の式：
−Ｎ（−Ｅ）−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｆ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｅ
または
−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｆ−ＮＨ−Ｂ−Ａ−Ｂ−ＮＨ−Ｅ
のものおよびその任意の塩または立体異性体であり、
ここで、Ｆは、Ｃ1−Ｃ6アルキルからなる群より選択され；Ａは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキル；Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；各Ｂは、単結合、Ｃ1−Ｃ6アルキルおよびＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より独立して選択され；そして各Ｅは、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より独立して選択され；ただし、Ａ部分の少なくとも１つは、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ3−Ｃ6シクロアルキル、Ｃ3−Ｃ6シクロアリールおよびＣ3−Ｃ6シクロアルケニルからなる群より選択されるか、またはＢ部分の少なくとも１つはＣ2−Ｃ6アルケニルからなる群より選択されるかのいずれかである。
【００２７】
別の実施形態では、細胞増殖抑制剤または細胞破壊剤は、キノン（例えば、ナフトキノン）である。１つの実施形態では、このナフトキノンは、ヒドロキシ基を含み、そしてこのヒドロキシ基によってペプチドに連結されている。別の実施形態では、このナフトキノンは、一級アミノ基または二級アミノ基を含み、そしてこのアミノ基によってペプチドに連結されている。
【００２８】
本発明の別の実施形態では、このポリペプチドに連結されているキノンは、以下の式の化合物：
【００２９】
【化８】
2002543163.tif 000005
から選択され、
ここで、Ａは、−ＣＨ2−、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり、そしてＭ1は、Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｃ1−Ｃ8分岐アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキルまたはＣ3−Ｃ8シクロアリールである。
【００３０】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されているキノンは、以下の式の化合物：
【００３１】
【化９】
2002543163.tif 000006
から選択され、
ここで、ｘは、１または２であり；そして各Ｋは、Ｈ、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｃ1−Ｃ8アルケニル、Ｃ1−Ｃ8アルカノール、Ｃ1−Ｃ8アルコキシおよび
【００３２】
【化１０】
2002543163.tif 000007
からなる群より独立して選択され、そして
ただし、唯一のＫは、ＯＨおよびＣ1−Ｃ8アルカノールからなる群より選択され、このペプチドは、このアルコールの末端ヒドロキシ基に結合しており；そしてこの分子中の０または２個の、しかし２個を超えないビシナルＫが、π結合を形成する単一の電子を表す場合、この２つのビシナルＫを保有する２つの隣接した炭素の間の既存のσ結合と一緒になって二重結合を形成する。
【００３３】
本発明の別の実施形態では、このポリペプチドに連結されているキノンは、以下の式の化合物：
【００３４】
【化１１】
2002543163.tif 000008
から選択され、
ここで、Ｙは、−Ｈ、−Ｆ、−Ｂｒ、−Ｃｌおよび−Ｉからなる群より選択され；そしてここでＧ1は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ8アルキル、
【００３５】
【化１２】
2002543163.tif 000009
および−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨnＸ3-nからなる群より選択され、ここでｎは、０〜３の整数であり、そしてＸは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩからなる群より選択され；そしてこのペプチドが、Ｇ１を保有するアミノ基を介してこのキノンへと結合されている。
【００３６】
本発明の別の実施形態では、ポリペプチドに連結されているキノンは、以下の式の化合物：
【００３７】
【化１３】
2002543163.tif 000010
から選択され、
ここで、ｘは、１または２であり；そして各Ｋは、Ｈ、Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｃ1−Ｃ8アルケニル、Ｃ1−Ｃ8アルコキシ、および
【００３８】
【化１４】
2002543163.tif 000011
からなる群より独立して選択され、そしてここでこの分子中の０または２個の、しかし２個を超えないビシナルＫが、π結合を形成する単一の電子を表す場合、この２つのビシナルＫを保有する２つの隣接した炭素の間の既存のσ結合と一緒になって二重結合を形成する。
【００３９】
本発明の１つの実施形態では、細胞増殖抑制剤または細胞破壊剤は、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）によって認識されそして切断されるポリペプチドへと結合体化されている。１つの実施形態では、このポリペプチドは、ＰＳＡによって認識されそして切断され、そして約２５未満のアミノ酸を含む。好ましくは、このポリペプチドは、約１０未満のアミノ酸を含む。より好ましくは、このポリペプチドは、配列ＨＳＳＫＬＱを含む。より好ましくは、このポリペプチドは、配列ＳＫＬＱ−β−アラニンもしくはＳＫＬＱＬを含むかもしくはこの配列からなるか、または配列ＳＫＬＱを含むかもしくはこの配列からなる。
【００４０】
別の実施形態では、この細胞増殖抑制剤または細胞破壊剤は、カテプシンＢによって認識されそして切断されるポリペプチドに結合体化されている。１つの実施形態では、このペプチド配列はＸ−Ｐ２−Ｐ１であり、ここでＸは、Ｐ２のＮ末端に結合した水素、アミノ保護基またはアミノキャッピング基であり；Ｐ２はＮ末端アミノ酸であり、そしてＰ１はＣ末端アミノ酸であり；そしてＰ２が疎水性アミノ酸であり；そしてＰ１は、塩基性または極性のアミノ酸である。別の実施形態では、このペプチド配列はＸ−Ｐ２−Ｐ１−Ｙであり、ここでＸは、Ｐ２のＮ末端に結合した水素、アミノ保護基またはアミノキャッピング基であり；Ｐ２は疎水性アミノ酸であり；Ｐ１は、塩基性または極性のアミノ酸であり；そしてここでＹは、ロイシン、β−アラニンまたは非存在である。さらなる実施形態では、Ｘは、４−モルホリノカルボニル基である。なお別の実施形態では、Ｐ２は、ロイシン、イソロイシン、バリン、メチオニンおよびフェニルアラニンからなる群より選択され；そしてＰ１は、リジン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジンおよびシトルリンからなる群より選択される。
【００４１】
本発明はまた、組成物を含み、ここで、ポリペプチドに結合体化された細胞増殖抑制剤または細胞破壊剤が薬学的に受容可能な賦形剤と合わされている。
【００４２】
本発明はまた、個体における、細胞の増殖によって特徴付けられる、癌および他の疾患（例えば、前立腺癌）を処置する方法を提供し、この方法は、ポリペプチドに結合体化された細胞増殖抑制剤または細胞破壊剤の治療量を含む有効量の組成物をこの個体に投与する工程を包含する。これらの結合体としては、本発明のポリアミンアナログ結合体またはキノン結合体（例えば、酵素（例えば、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）またはカテプシンＢ）によって認識されそして切断されるポリペプチドに結合体化されたポリアミンアナログまたはキノン）が挙げられる。これらの疾患は、前立腺炎、良性前立腺過形成（ＢＰＨ）または前立腺癌であり得、そして転移性腫瘍の増殖の抑制を含み得る。この個体は哺乳動物であり得、そして好ましくはヒトである。
【００４３】
（発明の実施の形態）
本発明は、ポリアミンアナログおよびキノン結合体を含み、このポリアミンアナログまたはキノンは、ポリペプチドに結合して不活性のプロドラッグを形成する。本発明の結合体は、癌および細胞増殖によって特徴付けられる他の疾患の処置において有用である。本発明のポリアミンアナログ結合体は、前立腺細胞の増殖の抑制において特に有用である。
【００４４】
このポリペプチドは、好ましくは癌性細胞または標的組織の細胞によって過剰発現されるか、またはこれらによって独占的に発現される酵素によって、特異的に認識および切断されるように設計された酵素基質である。例えば、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）は、前立腺組織のみによって大量に産生される。従って、ＰＳＡについてのペプチド基質は、ポリアミンアナログに結合され、プロドラッグを形成し得る。結合体のポリペプチド部分がＳＰＡによって除去される場合、このプロドラッグは活性になり、そしてこのポリアミンアナログは、前立腺細胞の増殖を阻害し得る。この増殖阻害は、種々の前立腺疾患の処置において有用である。
【００４５】
ＰＳＡは、前立腺分泌（管腔）細胞の高度に特定化された先端表面性の層（ａｐｉｃａｌｌｙ−ｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌ  ｌａｙｅｒ）、ならびに必尿生殖器路の他の部位において発現されるプロテアーゼであり、グルコサミングルカン、糖タンパク質および多くの酵素タンパク質と頻繁に同時発生する。ＰＳＡは、その遊離形態で精液において、および血清において見出され、ここで、これはα1−キモトリプシンと共に不活性複合体形態で発生する。ＰＳＡは、キモトリプシン様基質特異性を有する。Ｌｉｌｊａら（１９８５）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７６：１８９９−１９０３；Ｗａｔｔら（１９８６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８３：３１６６−３１７０；およびＣｈｒｉｓｔｅｎｓｓｏｎら（１９９０）Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９４：７５５−７６５。ＰＳＡは、ポリペプチド（大量の血清プロテアーゼには認識されないＨＳＳＫＬＱおよびＳＫＬＱの配列のポリペプチドを含む）を特異的に認識および切断する。Ｄｅｎｍｅａｄｅら（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７：４９２４−３０；およびＤｅｎｍｅａｄｅら（１９９８）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５８：２５３７−４０。正常な前立腺組織および癌性前立腺組織の両方がＰＳＡを産生するが［Ｄｅｎｍｅａｄｅら（１９９７）］、精液および血清中のＰＳＡレベルは、前立腺腫瘍を有する患者において何倍も増加する。増加したＰＳＡレベルはまた、ＢＰＨまたは前立腺炎を有する患者において検出される。Ｒａｉｎｗａｔｅｒら（１９９０）Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｐｒｏｃ．６５：１１１１８−２６。さらに、進行した前立腺癌を有する患者において血清ＰＳＡレベルが１０００ｎｇ／ｍｌまで増加した場合であっても、血清におけるＰＳＡは不活性である。Ｄｅｎｍｅａｄｅら（１９９７）。
【００４６】
ポリアミンアナログおよびＰＳＡによって切断されたポリペプチドの接合は、２つの方法においてポリアミンの毒性の危険を減少する。第１に、このポリペプチド部分は、この標的組織の外側のポリアミンアナログの生物学的活性を減少させる。第２に、このポリアミンはＰＳＡによって認識され、従って前立腺にプロドラッグを標的化するため、低用量のポリアミンが投与され得る。以下に議論されるように、このポリアミンアナログアナログは、以下を含むがこれらに限定されない任意のポリアミンアナログであり得る：１，１２−Ｍｅ2−ＳＰＭ，ＳＬ−１１０２７，ＳＬ−１１０２８，ＳＬ−１１０２９，ＳＬ−１１０３３，ＳＬ−１１０３４，ＳＬ−１１０３７，ＳＬ−１１０３８，ＳＬ−１１０４３，ＳＬ−１１０４４，ＳＬ−１１０４７，ＳＬ−１１０４８，ＳＬ−１１０５０，ＳＬ−１１０９０，ＳＬ−１１０９１，ＳＬ−１１０９２，ＳＬ−１１０９３，ＳＬ−１１０９４，ＳＬ−１１０９８，ＳＬ−１１０９９，ＳＬ−１１１００，ＳＬ−１１１０１，ＳＬ−１１１０２，ＳＬ−１１１０３，ＳＬ−１１１０４，ＳＬ−１１１０５，ＳＬ−１１１０８，ＳＬ−１１１１４，ＳＬ−１１１１８，ＳＬ−１１１１９，ＳＬ−１１１２１，ＳＬ−１１１２２，ＳＬ−１１１２３，ＳＬ−１１１２４，ＳＬ−１１１２６，ＳＬ−１１１２７，ＳＬ−１１１２８，ＳＬ−１１１２９，ＳＬ−１１１３０，ＳＬ−１１１３２，ＳＬ−１１１３３，ＳＬ−１１１３４，ＳＬ−１１１３６，ＳＬ−１１１３７，ＳＬ−１１１４１，ＳＬ−１１１４４，ＳＬ−１１１５０，ＳＬ−１１２０１，およびＳＬ−１１２０２。好ましくは、このポリアミンアナログは、コンホメーション的に制限される。
【００４７】
（定義）
「ポリアミンアナログ」によって、スペルミンおよび／またはスペルミジンのようなポリアミンならびにその前駆体、ジアミンプトレシンに構造的に類似するが一致しない有機カチオンが意味される。「ポリアミン」によって、アミノ酸から生合成的に誘導された脂肪族の直鎖アミンの任意の基が意味され；ポリアミンはＭａｒｔｏｎら（１９９５）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３５：５５−９１において総説される。ポリアミンのカダベリンおよびプトレシンは、それぞれリジンまたはオルニチンの脱カルボキシル化によって生成されるジアミンである。アミノプロピル基の付加によって、プトレシンはスペルミジンに変換され、そしてスペルミジンはスペルミンに変換される。この基は、脱カルボキシル化Ｓ−アデノシルメチオニンによって提供される。ポリアミンアナログ（分枝状または非分枝状であり得る）としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ＢＥ−４４４４［１，１９−ビス（エチルアミノ）−５，１０，１５−トリアザノナデカン］；ＢＥ−３３３［Ｎ１，Ｎ１１−ジエチルノルスペルミン；ＤＥＮＳＰＭ；１，１１−ビス（エチルアミノ）−４，８−ジアザウンデカン；セルミン（ｔｈｅｒｍｉｎｅ）；Ｗａｒｎｅｒ  Ｐａｒｋｅ−Ｄａｖｉｓ］；ＢＥ−３３［Ｎ１，Ｎ７−ビス（エチル）ノルスペルミジン］；ＢＥ−３４［Ｎ１，Ｎ８−ビス（エチル）スペルミジン］；ＢＥ−４４［Ｎ１，Ｎ９−ビス（エチル）ホモスペルミジン］；ＢＥ−３４３［Ｎ１，Ｎ１２−ビス（エチル）スペルミン；ジエチルスペルミジン−Ｎ１−Ｎ１２；ＤＥＳＰＭ］；ＢＥ−３７３［Ｎ，Ｎ’−ビス（３−エチルアミノ）プロピル）−ｌ，７−へプタンジアミン，Ｍｅｒｒｅｌｌ−Ｄｏｗ］；ＢＥ−４４４［Ｎ１，Ｎ１４−ビス（エチル）ホモスペルミン；ジエチルホモスペルミン−Ｎ１−Ｎ１４］；ＢＥ−３４４３［１，１７−ビス（エチルアミノ）−４，９，１４−トリアザヘプタデカン］；ＢＥ−４３３４［１，１７−ビス（エチルアミノ）−５，９，１３−トリアザヘプタデカン］；１，１２−Ｍｅ2−ＳＰＭ［１，１２−ジメチルスペルミン］；ＷＯ９８／１７６２４および米国特許第５，８８９，０６１号に開示の種々のポリアミンアナログ；および図に例示され、そして本明細書中に記載の種々の新規なポリアミンアナログであって、これらとしては、以下の指定された化合物が挙げられるがこれらに限定されない：ＳＬ−１１０２７，ＳＬ−１１０２８，ＳＬ−１１０２９，ＳＬ−１１０３３，ＳＬ−１１０３４，ＳＬ−１１０３７，ＳＬ−１１０３８，ＳＬ−１１０４３，ＳＬ−１１０４４，ＳＬ−１１０４７，ＳＬ−１１０４８，ＳＬ−１１０５０，ＳＬ−１１０９０，ＳＬ−１１０９１，ＳＬ−１１０９２，ＳＬ−１１０９３，ＳＬ−１１０９４，ＳＬ−１１０９８，ＳＬ−１１０９９，ＳＬ−１１１００，ＳＬ−１１１０１，ＳＬ−１１１０２，ＳＬ−１１１０３，ＳＬ−１１１０４，ＳＬ−１１１０５，ＳＬ−１１１０８，ＳＬ−１１１１４，ＳＬ−１１１１８，ＳＬ−１１１１９，ＳＬ−１１１２１，ＳＬ−１１１２２，ＳＬ−１１１２３，ＳＬ−１１１２４，ＳＬ−１１１２６，ＳＬ−１１１２７，ＳＬ−１１１２８，ＳＬ−１１１２９，ＳＬ−１１１３０，ＳＬ−１１１３２，ＳＬ−１１１３３，ＳＬ−１１１３４，ＳＬ−１１１３６，ＳＬ−１１１３７，ＳＬ−１１１４１，ＳＬ−１１１４４，ＳＬ−１１１５０，ＳＬ−１１２０１，およびＳＬ−１１２０２。本発明に有用なさらなるポリアミンアナログは当該分野で公知であり、例えばＯ’Ｓｕｌｌｉｖａｎら（１９９７）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５：２１４５−２１５５；およびＭｕｋｈｏｐａｄｈｙａｙａら（１９９５）Ｅｘｐ．Ｐａｒａｓｉｔ．８１：３９−４６；ならびに米国特許第４，９３５，４４９号である。
【００４８】
「コンホメーションが制限された」によって、ポリアミンアナログにおいて、少なくとも２つのアミノ基が、互いに関して空間的配置においてロックまたは制限されていることを意味する。２つのアミノ基の相対的運動は、例えば、これらの間の環状部分または不飽和部分（三炭素環、四炭素環、五炭素環、六炭素環のような環、あるいは炭素二重結合または炭素三重結合のような二重結合または三重結合が例示されるが、これらに限定されない）の取り込みによって制限され得る。立体障害によってコンホメーション的柔軟性を制限するが、抗増殖性効果について構造的に好都合な基もまた、本発明に従って使用され得る。「コンホメーションが制限」されたポリアミンアナログは、互いに関してコンホメーション的に制限された少なくとも２つのアミノ基を含み得るが、互いに関してコンホメーション的に制限されていないアミノ基もまたさらに含むみ得る。スペルミンおよびＢＥ−４４４のような可撓性分子は、種々のコンホメーションを有し得、従ってコンホメーション的に制限されない。
【００４９】
「癌」によって、相対的に自発的な増殖を示す細胞の異常な存在が意味され、その結果、これらは細胞増殖制御の有意な損失によって特徴付けられる異常な増殖表現型を示す。本発明の１つの実施形態は、前立腺癌の処置方法を含む。
【００５０】
「前立腺」によって、膀胱の基部で男性の尿道を囲む筋肉腺器官が意味される。前立腺は、非必須な器官である。
【００５１】
本発明の目的について、「ＰＳＡ」は、ＰＳＡの機能的に保存された任意の改変体、誘導体および／またはフラグメントを含み、これは翻訳後の改変において異なるアミノ酸配列改変体およびタンパク質を含み、これはＰＳＡの配列特異的タンパク分解性の能力を保持する。
【００５２】
本発明の目的について、「カテプシンＢ」は、カテプシンＢの機能的に保存された任意の改変体、誘導体および／またはフラグメントを含み、これは翻訳後の改変において異なるアミノ酸配列改変体およびタンパク質を含み、これはカテプシンＢの配列特異的タンパク分解性の能力を保持する。
【００５３】
用語「ポリペプチド」、「ポリペプチド部分」、「タンパク質」などは、本明細書中で交換可能に使用され、任意の長さのアミノ酸残基の任意のポリマーをいう。このポリマーは、直鎖状または非直鎖状（例えば、分枝状）であり得、これは改変されたアミノ酸またはアミノ酸アナログを含み得、そしてこれはアミノ酸以外の化学部分によって中断され得る。この用語はまた、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化（ｌｉｐｉｄａｔｉｏｎ）、アセチル化、リン酸化あるいは標識成分または生物活性成分との結合のような任意の他の操作または改変によって、天然に、または本発明によって改変されたアミノ酸ポリマーを含む。本発明の結合体のポリペプチド成分は、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）またはカテプシンＢのような酵素によって認識および切断される。好ましくは、切断の特異性は、ポリペプチドが、生物学的活性を有する遊離のポリアミンアナログまたは遊離のキノン、あるいは非常に短い残余ポリペプチドまたは結合した単一のアミノ酸を有するポリアミンアナログまたは遊離のキノンを生成するように切断される程度であり、この残余ポリペプチドまたは単一アミノ酸は、ポリアミンアナログまたはキノンの所望の生物学的活性に干渉しない。
【００５４】
「結合」により、ポリアミンアナログおよびポリペプチド部分のような２つの部分の間に、在介性リンカーを用いてまたは用いずに、共有結合を形成するプロセスが意味される。結合は、Ｗｏｎｇ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｉｎｇ，１９９１，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎに記載される方法および本明細書に記載されるような、当該分野で公知の任意の方法によって行われ得る。適切な方法には、ｔ−ブチロキシカルボニル（ＢＯＣ）保護基（ＢＯＣ基を導入するための試薬であり、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．，および他の供給業者から入手可能である）のような保護基を組み入れる計略の使用が挙げられる。結合反応において使用され得る他の適切な保護基は、Ｇｒｅｅｎｅら、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版，１９９１，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋに記載される。好ましくは、このポリペプチド部分は、ポリアミンアナログ部分またはキノン部分に結合し、その結果（１）ポリペプチド部分の存在が、ポリアミンアナログまたはキノンの機能性を妨げ；そして（２）酵素による切断が、遊離のポリアミンアナログまたは遊離のキノン、あるいは結合したまま残っているポリペプチド部分のこのような小さな残余部分を有するポリアミンアナログまたはキノンを生成し、その結果ポリアミンアナログは抗増殖活性をもたらし得る。「結合」によって、共有結合した２つの部分を含む化学物質が意味される。
【００５５】
「アミノキャッピング基」または「アミノ末端キャッピング基」は、アミノ基に共有結合した基である。アミノキャッピング基の例としては、４−モルホリノカルボニル、アセチルおよびトリフルオロアセチルが挙げられるがこれらに限定されない。「アミノ保護基」または「アミノ末端保護基」は、分子の残りに影響することなく、分子のアミノ基から選択的に除去され得る基である。アミノ保護基の例としては、ｔ−ブチロキシカルボニル（ＢＯＣ）、９−フルオレニルメトキシカルボニル（ＦＭＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺ）、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＩＭＳ）、または６−ニトロベラチルオキシカルボニル（Ｎｖｏｃ）のような適切な感光性保護基などが挙げられるがこれらに限定されない。
【００５６】
ポリアミンまたはポリアミンアナログの「外部窒素」または「外部アミノ基」は、唯一の他の窒素基に隣接する窒素（アミノ）基であり、一方、ポリアミンまたはポリアミンアナログの「内部窒素」または「内部アミノ基」は、２つの他の窒素（アミノ）基に隣接する窒素（アミノ）基である。例えば、式Ｒ1−Ｎ1Ｈ−Ｒ2−Ｎ2Ｈ−Ｒ3−Ｎ3Ｈ−．．．−Ｒ(n-1)−Ｎ(n-1)Ｈ−ＮnＨ−Ｒn（ここで、ｎは整数である）のポリアミンにおいて、Ｎ1およびＮnと示された窒素は、これらが唯一の他の窒素基に隣接しているため「外部窒素」または「外部アミノ基」であり、一方、Ｎ2、Ｎ3など〜Ｎ(n-1)は、２つの他の窒素（アミノ）基に隣接しているため「内部窒素」または「内部アミノ基」である。
【００５７】
「個体」は、脊椎動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトである。哺乳動物としては、以下が下られるがこれらに限定されない：家畜、スポーツ動物（ｓｐｏｒｔ  ａｎｉｍａｌ）、げっ歯類、霊長類およびペット。好ましくは、個体はＢＰＨ、前立腺炎および／または前立腺癌のような前立腺の疾患によって冒されていることが既知であるか、または推測される。この個体がヒトでない場合、決定は、その個体種のＰＳＡによって認識および切断された特定のアミノ酸配列でなされるべきである。このポリアミンアナログ結合体のポリペプチド部分は、配列中で安定に改変されるべきであり、必要な場合、この個体種に存在するＰＳＡによって認識および切断される。
【００５８】
「有効量」または「治療量」は、有利な、または所望の臨床的結果をもたらすのに十分な量である。有効量は、１以上の投与において投与され得る。本発明の目的について、ポリアミンアナログ結合体の有効量は、疾患状態の進行を緩和、改善、安定化、逆転、緩慢または遅延するために十分な量である。本発明のポリアミンアナログ結合体の治療量は、前立腺細胞の増殖を阻害するのに十分な量である。ポリアミンアナログ結合体は、これが、例えば少なくとも１つの型の前立腺癌細胞株に対して有効である場合、これが異なる前立腺細胞株に対して有効でない場合でも、前立腺疾患の処置に有効な薬剤であるとみなされる。
【００５９】
本明細書中で使用される場合、「処置」は、有利な、または所望な臨床的結果（前立腺細胞の増殖の抑制が挙げられるがこれに限定されない）を得るためのアプローチである。本発明の目的について、有利な、または所望の臨床的結果としては、検出可能であろうと検出不可能であろうと、症状の緩和、疾患の程度の減少、疾患状態の安定化（すなわち、悪化させない）、疾患の伝播（すなわち、転移）の防止、疾患の進行の遅延または緩徐化、疾患状態の回復または緩和、生活の楽しみの質の改善、および緩解（部分的または全体的）が挙げられるがこれらに限定されない。「処置」はまた、処置を受けない場合の予想される生存と比較して、延長した生存も意味する。
【００６０】
「前立腺細胞の増殖阻害」によって、前立腺、前立腺によって誘導される腫瘍細胞（転移性腫瘍を含む）、またはＰＳＡを発現する任意の細胞の細胞増殖が阻害されることが意味される。
【００６１】
疾患の「緩和」は、疾患状態の程度および／または所望でない臨床的症状が減少され、そして／または進行の時間経過が、本発明のポリアミンアナログ結合体を投与されない場合と比較して、緩徐化または伸長されることを意味する。
【００６２】
（本発明において有用なポリアミンアナログ）
本発明の１つの実施形態は、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）によって特異的に認識され、そして切断されるポリペプチドに結合体化されたポリアミンアナログを包含する。本発明の別の実施形態は、カテプシンＢによって特異的に認識され、そして切断されるポリペプチドに結合体化されたポリアミンアナログを包含する。本発明の他の局面は、これらの結合体を含む組成物を包含する。使用され得るポリアミンアナログは、以下に説明されるようなポリアミンアナログである。
【００６３】
一般的に、本発明のポリアミンアナログ結合体は、以下の手順によって生成され得る。第１に、ポリアミンアナログは選択されるか、または新規のポリアミンアナログが設計される。ポリアミンアナログ毒性を説明するいかなる特定の理論にも束縛されることを望まないが、新規のポリアミンアナログの設計は、ＤＮＡとのポリアミンの相互作用および核酸中に構造的変化を誘導する能力に関する現在の見識に基づき得ると考えられる。Ｆｅｕｅｒｓｔｅｉｎら（１９９１）；Ｇｏｓｕｌｅら（１９７８）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１２１：３１１−３２６；Ｂｅｈｅら（１９８１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７８：１６１９−２３；Ｊａｉｎら（１９８９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．２８：２３６０−２３６４；およびＢａｓｕら（１９９０）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．２６９：３２９−３３４。あるいは、新規のポリアミンアナログは、天然のポリアミン合成を抑制することによって細胞増殖を阻害するその有望な能力、または細胞内の天然のポリアミンプールを枯渇させるその有望な能力に基づいて設計され得る。Ｐｏｒｔｅｒら（１９８８）Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、５７〜７９頁。次の工程において、ポリアミンアナログは、前立腺細胞（例えば、ＬＮＣａＰ細胞、ＰＣ−３細胞、またはＤＵＰＲＯ細胞）の増殖を阻害する際の効力について、インビトロで試験される。有効である場合、そのポリアミンアナログを、ポリペプチドに結合体化する。次いで、そのポリアミンアナログ結合体を、インビトロでの無細胞培地中で、他のプロテアーゼではなくＰＳＡによって特異的に認識されそして切断されるその能力について試験し得る。ポリアミンアナログ結合体がこの試験を通過する場合、このポリアミンアナログ結合体を、動物（例えば、前立腺癌異種移植片を有するヌードマウス）において試験し得る。次いで、試験をヒトでの試行に進め得る。
【００６４】
（コンホメーションが制限されたポリアミンアナログ）
それぞれ、アミド連結またはエステル連結においてポリペプチド部分のＣ末端に結合体化され得るペンダント（ｐｅｎｄａｎｔ）アミノ基またはヒドロキシル基を有する、任意のポリアミンアナログ（これは、必須の機能的細胞増殖抑制性または細胞殺傷特性を有する）が使用され得、そして例が、本発明の要旨、「ポリアミンアナログ」の定義、および合成スキームにおいて提供される。本発明において使用されるポリアミンアナログは、好ましくは、コンホメーションが制限されている。コンホメーションは、レセプター結合部位と相互作用するファルマコフォアまたは官能基の空間的配列の決定因子である。後者は、特定のリガンドコンホメーションまたは特定のコンホメーション分布を好む。可撓性分子（例えば、スペルミンまたはＢＥ−４４４４）は、多数のコンホメーションを有し得る。高分子（例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡ）に結合する型は、分光学的方法によるかまたは分子機構計算によって理論的に決定される場合に、必ずしも最も低いエネルギーを有するものでなくとも良い。核酸へのポリアミンアナログ結合の結合エネルギーは、不安定な型の形成によって克服され得る。逆に、可撓性分子のコンホメーション的に剛性のアナログの存在下で、ホストの高分子は、その全体的コンホメーションまたは一方の鎖から他方への距離を変化し得る。水素結合は、ｔＲＮＡのヘリックス領域（そして同様に、おそらくＤＮＡのヘリックス領域）と会合するスペルミンまたはスペルミジンのいずれかの主要な結合力である。Ｆｒｙｄｍａｎら（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：９１８６−９１９１；およびＦｅｒｎａｎｄｅｚら（１９９４）Ｃｅｌｌ
Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４０：９３３−９４４。直線状スペルミンアナログＢＥ−４４４４中に存在する二級アミノ基は、ｔＲＮＡの対の塩基との水素結合の形成に最も直接的に関与する基である。操作に関するいかなる特定の理論にも本発明が束縛されることを望まないが、ポリアミンアナログの中心の４つの炭素または３つの炭素のセグメントに通常隣接するこれらのアミノ基は、ファルマコフォアとして機能する可能性が最も高いと考えられる。窒素が、２つの炭素セグメントのみによって分離される場合、それらはｐＨ７．４でプロトン化されず、従ってそれらは、水素結合を形成しない。これらのアミノ基が、環式または不飽和部分のポリアミンアナログ分子への組み込みによって、種々のコンホメーションにロックされる場合、コンホメーション的に剛性のアナログが得られる。このようなアナログがＤＮＡまたはｔＲＮＡに結合する場合、それらは、核酸鎖またはループのコンホメーションにおいて変化を誘導する可能性が非常に高く、それは、天然のポリアミンによって誘導されるコンホメーション変化とは異なり得る。
【００６５】
スキーム１〜２５は、本発明において使用され得る種々のポリアミンアナログの合成を示す。本発明において使用され得るポリアミンアナログの例はまた、テトラアミノポリアミンアナログを記載する、米国特許第５，８８９，０６１号、および同第５，６２７，２１５号において提供される。これらの特許のポリアミンアナログの合成は、その点で通常結合される基に変わる外部窒素（すなわち、Ｒ1−Ｎ1Ｈ−Ｒ2−Ｎ2Ｈ−Ｒ3−Ｎ3Ｈ−Ｒ4−Ｎ4Ｈ−Ｒ5としてテトラアミンを表す場合、Ｎ1およびＮ4と称される窒素は、それらが１つのみの他の窒素基と隣接している限りは「外部」窒素であり、一方、Ｎ2およびＮ3は、２つの他の窒素基によって隣接される「内部」窒素である）においてアミノ保護基を誘導するように改変され得（この実施例の場合、保護基が、Ｒ1またはＲ5の代わりに使用される）、そして外部窒素の１つにおける一級アミノ基を生成するように切断され得るが、他の外部窒素および内部窒素上のアミノ保護基は維持される。スキーム２６は、外部アミノ基の１つが選択的に脱保護されることを可能にするが、他の外部アミノ基および内部アミノ基上のアミノ保護基は維持する、保護基レジメンを確立するこのようなストラテジーを示す。ポリアミンの示差的な保護レジメンの例はまた、Ｆｉｅｄｌｅｒら（１９９３）Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  ７６：１５１１−１５１９およびＩｗａｔａら（１９８９）Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊａｐａｎ  ６２：１１０２−１１０６に提供される。
【００６６】
【表１】
2002543163.tif 000012
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（インビトロにおける腫瘍細胞に対するポリアミンアナログの効力）
新規のポリアミンアナログは、一旦設計および構築されると、罹患した細胞（例えば、前立腺腫瘍細胞）に対するインビトロでの効力について試験される。公知のポリアミンもまた、このように試験され得る。罹患した細胞に対して活性であることが見出されたアナログは、本発明の結合体および方法における使用に特に適切である。
【００６７】
（本発明において有用なキノン）
本発明において有用なキノンとしては、それぞれ、アミド連結またはエステル連結においてポリペプチド部分のＣ末端に結合体化され得るペンダントアミノ基またはヒドロキシル基を有する、細胞傷害性キノンが挙げられる。本発明において有用ないくつかのキノンの合成を、以下に示す。本発明において有用なキノンのさらなる例は、それらの調製方法と共に、以下において見出される：米国特許第５，７６３，６２５号（第４欄、４０〜５２行に記載されるような化合物（ここで、Ｒは（ＣＨ2）n−Ｒ1であり、Ｒ1はヒドロキシまたはアミンである）が挙げられるが、これに限定されない）；同第５，８２４，７００号（第４欄、２０〜４８行の式ＩＩのような化合物（これはアミノ基またはヒドロキシ基を含む）が挙げられるが、これに限定されない）、および同第５，８８３，２７０号（第１欄、４９〜６７行の式Ｉのような化合物（これはアミノ基を含む）が挙げられるが、これに限定されない）。
【００６８】
（本発明の結合体のポリペプチド部分の調製）
本発明の結合体（例えば、本発明のポリアミンアナログ結合体またはキノン結合体）のポリペプチド部分は、非標的組織におけるレベルと相対的に標的組織において高レベルで存在する酵素、または非標的組織と相対的に標的組織においてより容易に利用可能な酵素によって、特異的に認識され、そして切断されるべきである。このような酵素の１つの例が、前立腺特異抗原であり、これは、前立腺において高レベルで存在する。このような酵素の別の例が、カテプシンＢであり、これは通常、主にリソソーム中に存在するが、これは、形質膜の細胞外面と関連付けられるいくつかの癌において見出されている（同様に、正常細胞と相対的に癌細胞において過剰に発現される）。Ｙａｎら（１９９８）Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．３７９：１１３−１２３を参照のこと。カテプシンＢは、細胞外マトリクスの崩壊において役割を担い、腫瘍による新脈管形成を促進すると考えられる。Ｓｉｎｈａら（１９９５）Ａｎａｔ．Ｒｅｃ．２４１：３５３−３６２；Ｓｉｎｈａら（１９９５）Ｐｒｏｓｔａｔｅ  ２６：１７１−１７８。ドキソルビシンに結合されたペプチドは、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋら（１９９８）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．８：３３４１−３３４６に開示されている。
【００６９】
前立腺組織を標的化する際の使用について、本発明の結合体のポリペプチド成分は、約１００個未満のアミノ酸、好ましくは約５０個未満のアミノ酸、より好ましくは約２５個未満のアミノ酸、好ましくは約１０個未満のアミノ酸、より好ましくは約７個または数個のアミノ酸、そして最も好ましくは、４個または５個のアミノ酸を含む。好ましくは、このポリペプチドは、アミノ酸配列ＨＳＳＫＬＱを含み、より好ましくはこのポリペプチドは、テトラペプチドの配列ＳＫＬＱを含み、そしてなおより好ましくはこのポリペプチドは、ＳＫＬＱからなる。別の実施形態では、このペプチドは、配列ＳＫＬＱＬまたはＳＫＬＱ−β−アラニンを含み、そしてより好ましい実施形態では、このペプチドは、ＳＫＬＱＬまたはＳＫＬＱ−β−アラニンからなる。このペプチド配列は、Ｎ末端改変（アミノ酸キャップ形成基（例えば、４−モルホリノカルボニルおよびアセチル）でのキャップ形成、保護基（例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）またはｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ））での保護が挙げられるが、これらに限定されない）を含み得る。
【００７０】
カテプシンＢによるポリペプチドの切断が所望される場合、ペプチドは、一般的に、約１０個未満のアミノ酸、好ましくは約４個未満のアミノ酸を含む。好ましい実施形態では、このペプチドは、２個または３個のアミノ酸を含む。好ましい配列は、配列Ｘ−Ｐ２−Ｐ１のジペプチドを含み、ここでＰ２は、Ｎ末端アミノ酸であり、そしてＰ１は、Ｃ末端アミノ酸であり、ここでＸは、水素、アミノ保護基、またはアミノキャップ形成基であり；Ｐ２は、疎水性アミノ酸であり；そしてＰ１は、塩基性または極性アミノ酸である。別の好ましい配列は、Ｘ−Ｐ２−Ｐ１−β−アラニンまたはＸ−Ｐ２−Ｐ１−ロイシンの形態のトリペプチドを含み、ここでＰ２は、Ｎ末端アミノ酸であり、そしてβ−アラニンまたはロイシンは、Ｃ末端アミノ酸である。Ｘについての好ましい実施形態は、４−モルホリノカルボニルである。Ｐ２についての好ましいアミノ酸としては、ロイシン、イソロイシン、バリン、メチオニン、およびフェニルアラニンが挙げられる。Ｐ１についての好ましいアミノ酸としては、リシン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、およびシトルリンが挙げられる。このペプチド配列は、Ｎ末端改変（アミノ酸キャップ形成基（例えば、４−モルホリノカルボニルおよびアセチル）でのキャップ形成、保護基（例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）またはｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ））での保護が挙げられるが、これらに限定されない）を含み得る。
【００７１】
本発明において使用されるポリペプチドは、当該分野において公知の手順によって作製され得る。ポリペプチドは、組換え方法によって（すなわち、単一または融合ポリペプチド）か、または化学合成によって生成され得る。ポリペプチド（特に、約５０アミノ酸までの短いポリペプチド）は、従来的に、化学合成によって作製される。例えば、ＡｔｈｅｒｔｏｎおよびＳｈｅｐｐａｒｄ、Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ、１９８９；ＳｔｅｗａｒｔおよびＹｏｕｎｇ：Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ：Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．１９８４；ならびにＪｏｎｅｓ、Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、Ｏｘｆｏｒｄ：Ｃｌａｒｅｎｄｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９９４を参照のこと。ポリペプチドは、固相方法を使用する自動化ポリペプチド合成装置（例えば、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ−Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａによって販売されるもの）によって生成され得るか、または当該分野において公知の方法によって、溶液中で作製され得る。
【００７２】
ポリペプチドはまた、組換え方法を使用して、発現系によって作製され得る。ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの利用可能性が、ポリペプチドをコードする発現ベクターの構築を可能にする。所望のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが、融合形態であるか成熟形態であるかに関わらず、そして分泌を可能にするシグナル配列を含んでいるか否かに関わらず、任意の都合よい宿主に適切な発現ベクター中に連結され得る。真核生物宿主系および原核生物宿主系の両方ともが使用され得る。次いで、ポリペプチドは、溶解された細胞からか、培養培地から単離され、そしてその意図される用途に必要とされる程度まで精製される。宿主系において発現されるポリペプチドの精製および単離は、当該分野において公知の方法によって達成され得る。例えば、インタクトなポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするｃＤＮＡが、適切なプロモーターに作動可能に連結され得、発現ベクター中に挿入され得、そして適切な宿主細胞中にトランスフェクトされ得る。次いで、この宿主細胞を、転写および翻訳を生じさせる条件下で培養し、そして所望されるポリペプチドを回収する。他の制御する転写または翻訳セグメント（例えば、特定の細胞区画にポリペプチドを指向させるシグナルフラグメント（すなわち、分泌のため））もまた、使用され得る。原核生物宿主細胞の例は、当該分野において公知であり、そして例えば、Ｅ．ｃｏｌｉおよびＢ．ｓｕｂｔｉｌｉｓが挙げられる。真核生物宿主細胞の例は、当該分野において公知であり、そして、酵母、鳥類、昆虫、植物および動物細胞（例えば、ＣＯＳ７細胞、ＨｅＬａ細胞、ＣＨＯ細胞および他の哺乳動物細胞）が挙げられる。
【００７３】
精製を容易にする融合タンパク質もまた、構築され得る。このような融合タンパク質の成分の例としては、ｍｙｃ、ＨＡ、ＦＬＡＧ、Ｈｉｓ−６、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ、マルトース結合タンパク質または免疫グロブリンのＦｃ部分が挙げられるが、これらに限定されない。これらの方法は、当該分野において公知である。例えば、Ｒｅｄｄら（１９９７）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１１１９３−１１１９７を参照のこと。
【００７４】
好ましくは、特に診断目的のために使用される場合、ポリペプチドは、他の細胞構成要素から少なくとも部分的に精製および単離される。好ましくは、ポリペプチドは、少なくとも５０％純粋である。この文脈において、純度は、調製物の総タンパク質含量の重量パーセントとして算出される。より好ましくは、このタンパク質は５０〜７５％純粋である。より高度に純粋なポリペプチドもまた獲得され得、そして本発明によって包含される。臨床用途のために、ポリペプチドは、好ましくは、非常に純粋であり、少なくとも約８０％純粋であり、そして発熱物質および他の夾雑物を含まない。タンパク質精製の方法は、当該分野において公知であり、そして本明細書中で詳細には記載されない。
【００７５】
ポリペプチドは、標的化された酵素（例えば、ＰＳＡまたはカテプシンＢ）によって切断されなければならない。ポリペプチドは、このポリペプチドが、適切な条件下でＰＳＡまたはカテプシンＢと反応する場合に、切断が生じたか否かを決定することによって、この特徴について容易に試験され得る。例えば、Ｄｅｎｍｅａｄｅら（１９９７）を参照のこと。
【００７６】
（ポリペプチド部分へのポリアミンアナログおよびキノンの結合体化）
当該分野で公知の任意の方法を使用して、酵素（例えば、ＰＳＡまたはカテプシンＢ）によって認識および切断されたポリペプチドを、ポリアミンアナログまたはキノン（本明細書中に記載されるポリアミンアナログまたはキノンが挙げられるが、これらに限定されない）に結合体化（すなわち、連結）させ得る。適切な方法は、ｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）保護基のような保護基を組み込むストラテジーの使用を包含する（ＢＯＣ基を導入するための試薬は、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉおよび他の供給源から入手可能である）。結合体化反応に使用され得る他の適切な保護基は、Ｇｒｅｅｎｅら、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版、１９９１、Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋに記載される。好ましくは、このポリペプチド部分は、（１）このポリペプチド部分の存在が、ポリアミンアナログまたはキノンの官能性を妨げ；そして（２）ＰＳＡによる切断が、遊離のポリアミンアナログまたはキノン、あるいは結合されたまま残存するポリペプチド部分の小さい残余部分を含むポリアミンアナログまたはキノンを生じるように、ポリアミンアナログ部分またはキノン部分に結合体化され、その結果、このポリアミンアナログまたはキノンは、抗増殖活性をもたらし得る。
【００７７】
ペプチドは、Ｃ末端アミノ酸のα−ＣＯＯＨ基を介して優先的に結合されるが、他の連結が、ポリペプチドの配列に依存して可能である（例えば、グルタミン酸残基のγ−カルボキシル基が、連結に使用され得る）。ポリアミンが結合される場合、この連結は、このポリアミンのアミノ基を介し（すなわち、アミド連結）；ポリアミンアルコールが結合体化される場合、この連結は、このポリアミンアルコールのアミノ基またはヒドロキシル基のいずれかを介し得る（すなわち、それぞれ、アミド連結またはエステル連結）。ポリアミンへのアミド連結を使用する場合、このペプチドは、好ましくは、外側の窒素に結合される。ポリアミンへのエステル連結を使用する場合、このペプチドは、好ましくは、末端ヒドロキシル基に結合される。アミノ基を含有するキノンを結合体化させる場合、ペプチドへの連結は、アミド連結であり；キノンがヒドロキシル基を含有する場合、連結は、エステル連結であり；そしてキノンが、その両方の基を含有する場合、アミド連結またはエステル連結のいずれかが、使用され得る。
【００７８】
（ポリアミンアナログ結合体およびキノン結合体のインビトロおよびインビボ試験）
ポリアミンアナログまたはキノンが、インビトロで効果的であることが示された場合、その結合体を構築し得、そしてインビトロで試験し得る。好ましくは、ポリアミンアナログまたはキノンの結合体のインビトロ試験は、このポリアミンアナログまたはキノン自体の有効性が実証された細胞株と同じ細胞株（例えば、ヒト前立腺癌細胞株ＰＣ−３、ＤＵ−１４５およびＤｕＰｒｏ）で行われる。米国特許第５，８８３，２７０号、同第５，８８９，０６１号、同第５，７６３，６２５号および同第５，８２４，７００号は全て、生物学的活性について化合物を試験するために使用されるプロトコルの例を提供する。
【００７９】
次いで、インビトロで有効性を有することが示されたこれらの結合体は、一般に、インビボで試験される。例えば、前立腺腫瘍異種移植片を、ヌードマウスにおいて増殖させ、そしてポリアミンアナログ結合体またはキノン結合体を、これらの試験動物に投与し得る。有効性の決定は、有効投薬量の測定および副作用のモニタリングを含み得る。
【００８０】
（ポリアミンアナログ結合体の投与方法）
本発明はまた、細胞増殖または制御されない細胞増殖（特に、前立腺細胞増殖）を、処置する方法および抑制する方法を提供する。これらの方法は、本明細書中に記載される任意の結合体の有効量を投与する工程を包含する。処置のために、有効量は、この疾患状態を緩和、寛解、安定化、逆転、緩徐化または遅延するのに、あるいは細胞（例えば、前立腺細胞）増殖の阻害または抑制のために十分な量である。
【００８１】
本発明のポリアミンアナログ結合体は、当該分野で公知の任意の経路を介して個体に投与され得、これらの経路としては、本明細書中に記載される経路が上げられるが、これらに限定されない。ポリアミンアナログ結合体の好ましい投与は、静脈内である。他の投与方法としては、経口、動脈内、腫瘍内、筋内、経皮（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）または経皮（ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、皮下、腹腔内、胃腸内、および特定の器官または罹患した器官（例えば、前立腺）への直接的な投与が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８２】
本明細書中に記載されるポリアミンアナログ結合体は、錠剤、丸剤、粉末混合物、カプセル剤、注射剤、液剤、坐剤、エマルジョン、散剤、食品補助剤（ｆｏｏｄ  ｐｒｅｍｉｘ）、および他の適切な形態で投与可能である。さらなる投与方法は、当該分野で公知である。本明細書中に記載される化合物を含む薬学的投薬形態は、非毒性の薬学的有機キャリアまたは非毒性の薬学的無機キャリアと都合よく混合される。代表的な薬学的に受容可能なキャリアとしては、例えば、マンニトール、尿素、デキストラン、ラクトース、ジャガイモデンプンおよびトウモロコシデンプン、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ポリアルキレングリコール、エチルセルロース、ポリ（ビニルピロリドン）、炭酸カルシウム、オレイン酸エチル、ミリスチル酸イソプロピル、安息香酸ベンジル、炭酸ナトリウム、ゼラチン、炭酸カリウム、ケイ酸、ならびに他の慣用的に使用されている受容可能なキャリアが挙げられる。薬学的投薬形態はまた、乳化剤、保存剤、湿潤剤などのような、非毒性の補助物質を含み得る。適切なキャリアは、許容可能でない副作用を引き起こさないが、体内で、この結合体にその薬理学的活性を保持させるキャリアである。非経口的薬物送達および非経口的でない薬物送達のための処方物は、当該分野で公知であり、そしてＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１９版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ（１９９５）に示される。固体形態（例えば、錠剤、カプセル剤および粉末剤）は、従来の打錠機械およびカプセル充填機械を使用して製造され得、これらの機械は、当該分野で周知である。固体投薬形態は、任意の数の当該分野で公知のさらなる非活性成分を含有し得、これらの非活性成分としては、賦形剤、潤滑剤、乾燥剤、結合剤、着色剤、崩壊剤、乾燥流量改変剤、保存剤などが挙げられる。
【００８３】
摂取のための液体形態は、公知の液体キャリアを使用して処方され、これらの液体キャリアとしては、水性キャリアまたは非水性キャリア、懸濁剤、水中油エマルジョンおよび／または油中水エマルジョンなどが挙げられる。液体処方物はまた、任意の数のさらなる非活性成分を含み得、これらの非活性成分としては、着色剤、香料、矯味矯臭剤、粘性改変剤、保存剤、安定化剤などが挙げられる。非経口投与のために、ポリアミンアナログ結合体またはキノン結合体は、生理学的に受容可能な賦形剤または滅菌液体キャリア（例えば、水またはオイル）（さらなる界面活性剤またはアジュバントを、含むかまたは含まない）中の化合物の溶液または懸濁液の注射可能な投薬として投与され得る。キャリアオイルの例示的リストとしては、動物油および植物油（ピーナッツ油、ダイズ油）、石油由来の油（鉱油）、および合成油が挙げられる。一般に、注射可能な単位用量については、水、生理食塩水、水性デキストロースおよび関連する糖溶液、ならびにエタノールおよびグリコール溶液（例えば、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコール）が、好ましい液体キャリアである。１投与あたりに投与される結合体の量は、処置される状態および個体の病歴に依存して変化する。
【００８４】
選択された薬学的単位投薬量は、好ましくは、癌細胞との接触時に約１μＭ〜約１０ｍＭの最終濃度の薬物を提供するように、製造および投与される。より好ましくは、約１μＭ〜約１００μＭの濃度であり、さらにより好ましくは、約１μＭ〜約５０μＭの濃度である。全ての医薬について、ポリアミンアナログ結合体またはキノン結合体の最適な有効濃度は、経験的に決定される必要があり、そして疾患の型および重篤度、投与経路、患者の疾患の進行および健康状態ならびに体重または体の面積に依存する。このような決定は、当業者の範囲内である。ポリアミンアナログ結合体またはキノン結合体は、単一の活性成分として投与され得るか、または別の活性成分との組み合わせで投与され得、これらの別の活性成分としては、細胞傷害性の薬剤、抗生物質、代謝拮抗物質、ニトロソ尿素類、およびビンカアルカロイド類が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８５】
治療は、当該分野における標準的な方法（例えば、血中のＰＳＡレベルの決定、生検、あるいは前立腺または他の器官もしくは組織の画像化）を使用してモニターされ得る。
【００８６】
以下の実施例は、例示のために提供され、本発明を限定しない。
【００８７】
（実施例）
（コンホメーションが制限されたポリアミンアナログの合成）
（（ａ）コンホメーションの制限を含むスペルミンおよびホモスペルミンアナログ）
スキーム２は、中心のｔｒａｎｓ−不飽和結合を含むＮα，Ｎω−ビスエチルホモスペルミンアナログ７を例示する。アミド４を、ブロモブチロニトリルでアミド１をアルキル化して２を得、続いてこのニトリルの還元によってアミン３を得て、これをメシチルスルホン酸化して４を得ることによってスキーム１に記載される通りに調製した。ｔｒａｎｓ−アリルジエステル５を用いてアミド４をアルキル化し、そしてテトラミド（ｔｅｔｒａｍｉｄｅ）６を得た。脱保護によってｔｒａｎｓ−テトラミド７を得た（スキーム２）。
【００８８】
ホモスペルミンのブタンセグメントへの三重結合の導入はまた、その可動性を低下させる。これは、ブチンジエステル８で出発し、そして上記に概説した一連の反応を続けることによって達成された（スキーム３）。スキーム１５〜２０は、この型のポリアミンスペルミンおよびホモスペルミンアナログの合成のさらなる例である。
【００８９】
（（ｂ）コンホメーションの制限を有するペンタミン（ｐｅｎｔａｍｉｎｅ）の合成）
スキーム４〜１４は、コンホメーションが制限されているペンタミンの合成の概要である。スキーム４は、ｃｉｓ−１−クロロ−４−フタルイミドブテンをアミド１と反応させて１１を得ることを示す。１１のヒドラジン分解によって１２を得て、１２をアミド化して１３を得た。後者と１，４−ジヨードブタンとの反応によって１４を得て、一方、等モル量のｃｉｓ−１，４−ジクロロブテンとの反応によって１５を得た。
【００９０】
アミド４を４−クロロブチロニトリルでアルキル化して１６を得たか、またはｃｉｓ−１，４−ジクロロブテンでアルキル化して１９を得た。ニトリル１６をＮｉ  Ｒａｎｅｙ上で水素で還元してアミン１７を得、そして後者をアミド１８に変換した（スキーム５）。１８とクロロアルキル中間体１５との縮合によってペンタミド（ｐｅｎｔａｍｉｄｅ）２０を得て、２０を脱保護してペンタミン（ｐｅｎｔａｍｉｎｅ）２１を得た（スキーム６）。１８とヨードアルキル誘導体１４との縮合によって２２を得て、２２を脱保護して、ペンタミン２３を得た（スキーム７）。１８と１９との縮合によってペンタミド２４を得て、２４を脱保護して、ペンタミン２５を得た（スキーム８）。１４をアルキル化剤として用いて、メシチレンスルホンアミドをジアルキル化して２６を得て、そして後者を脱保護して２７を得た（スキーム９）。１５をアルキル化剤として用いて行った類似の反応によって２８を得て、そして脱保護化後、ペンタミン２９を得た（スキーム１０）。
【００９１】
メシチレンスルホンアミドの、１９でのアルキル化によってペンタミド３０を得て、３０を脱保護して３１を得た（スキーム１１）。１９を用いて等モル量のメシチレンスルホンアミドをアルキル化したとき、３２が得られた。３２の、１４でのアルキル化によって３３を得て、３３を脱保護して３４を得た（スキーム１２）。クロロアルキル中間体１５を用いて１当量のメシチレンスルホンアミドをアルキル化した場合、トリアミド３５が得られた。３５と１４との反応によって３６を得て、次いで３６を脱保護して３７を得た（スキーム１３）。３５と１９との縮合によってペンタミド３８を得て、３８を脱保護して３９を得た（スキーム１４）。上記のスキームは、ｃｉｓ−化合物の合成を記載する。同じ合成方法論を用いて、ｔｒａｎｓ−異性体または同じ分子内の異なるセグメントにシス結合およびトランス結合を入手し得る。
【００９２】
（（ｃ）ジアミジン置換基を有するポリアミンアナログ）
新たなクラスのポリアミンアナログをスキーム２１に示す。これらを、１，４−ジベンジルプトレシン、１，５−ジベンジルカダベリンおよび１，６−ジベンジルヘキサンジアミンから誘導する。これらはジアミジン誘導体であり、ここで、ジアミジン残基は、種々の原生動物への薬物の輸送において効率的であることが示されたキャリア基である。合成の一般手順は、４−シアノベンズアルデヒドとジアミノアルカンとの縮合によってＳｃｈｉｆｆ塩基を得、続いてインサイチュで還元して対応するジニトリル６８を得ることに基づいていた。後者を、イミノエーテルを通してジアミジン６９に変換した。
【００９３】
（（ｄ）オリゴアミンの合成）
スキーム２２は、７５のようなペンタミンのＮ−２ヒドロキシエチル誘導体の合成を記載する。１８で出発し、４−ブロモブチロニトリルでアルキル化して７０を得た。７０のニトリルの還元および得られたアミノ基のメシチレンスルホニル化によって７１を得た。これを４−ブロモブチロニトリルで再度アルキル化して７２を得、そして再度還元し、そしてメシチルスルホニル化して７３を得た。次いで、後者を２−ブロモエタノールのベンジルエステルでアルキル化して、７４を得た。酢酸中の臭化水素酸での処理によって、メシチレンスルホニル保護基およびベンジルエーテル残基の両方を切断して７５を得た。
【００９４】
スキーム２３は、ｔｒａｎｓ−デカミン（ｔｒａｎｓ−ｄｅｃａｍｉｎｅ）７７の合成およびｃｉｓ−デカミン７９の合成を報告する。ペンタミド７３（スキーム２２）で出発し、そしてｔｒａｎｓ−ジエステル５（スキーム２）との反応によって、デカミド（ｄｅｃａｍｉｄｅ）７６を調製し、７６を脱保護して７７をデカヒドロクロリドとして得た。同様の様式で、７３とｃｉｓ−１，４−ジメシチレンオキシ−２−ブテンとの縮合によって、デカミド７８を調製し、７８を脱保護して７９をデカヒドロクロリドとして得た。
【００９５】
スキーム２４は、Ｎ−２ヒドロキシエチルｔｒａｎｓ−デカミン９２およびｃｉｓ−２−ヒドロキシエチルデカミン９５の合成を概説する。この手順は、上記のスキームに記載したほぼ全ての手順を繰り返す。８０の合成は、２−ブロモエタノールのベンジルエステルでのＢＯＣ−メシチレンスルホンアミドのアルキル化によって進行した。ＢＯＣ保護基の切断によって８１が得られ、次いで４−ブロモブチロニトリルでのアルキル化によって８２を得て、そしてニトリル基の還元およびメシチレンスルホニルクロリドとの反応の後、ジアミド８３を得た。さらに、４−ブロモブチロニトリルでのアルキル化によって８４を得て、還元およびメシチルスルホニル化によって８５を得て、８５のアルキル化によって８６を得て、還元およびメシチルスルホニル化によって８７を得て、そして８７のアルキル化、還元およびメシチルスルホニル化を行って８９を得た。ｔｒａｎｓ−１，４−ジブロモ−２−ブテンでの７３のアルキル化によって９０を得た。９０での８９のアルキル化によって９１を得て、９１の脱保護の後にｔｒａｎｓ−ω−ヒドロキシ−デカミン９２を得た。ｃｉｓ−１，４−ジクロロ−２−ブテンでの７３のアルキル化によって９３を得た。９３での８９のアルキル化によって９４を得た。９４の脱保護によって、９２の異性体である、ｃｉｓ−ω−ヒドロキシ−デカミン９５を得た。
【００９６】
（（ｅ）オリゴアミンジペプチドの合成）
スキーム２５は、カテプシンＢの基質と考えられ得る、７５のジペプチド誘導体（ＳＬ−１１１４１）の合成を概説する。７４で出発し、水素化分解によって９６を得、これを次いでＮ−ＢＯＣ−グルタミンでエステル化して９７を得た。Ｎ−ＢＯＣ残基をＴＦＡで切断し、そしてＮ−ＢＯＣ−ロイシンをグルタミン残基にカップリングして９８を得た。次いで、酸性媒体中での脱保護によってジペプチド９９を得る（ＳＬ−１１１５５）。
【００９７】
（（ｆ）ペプチドのポリアミン結合体の合成）
スキーム２６は、テトラペプチドＳＫＬＱのＮ−モルホリノ誘導体のポリアミン結合体の合成を概説する。ＳＫＬＱは、ＰＳＡの基質の最小の構造要件である。保護した形態のペプチド（Ｎ−ＢＯＣ残基）を、そのカルボキシ末端で、ＳＬ−１１０４７、ＳＬ−１１１０１またはＢＥ−４−４−４−４に対応するポリアミン残基と結合体化して結合体１１２、１１３および１１４を得る。ポリアミン中間体を以下の通りに構築する。クロリド１００を４６と縮合して１０１を得る。フタルイミド基をヒドラジン分解（ｈｙｄｒａｚｙｎｏｌｙｓｉｓ）によって切断して１０２を得て、そして後者をメシチル化して１０３を得る。このアミドを１０４で再度アルキル化して１０５を得る。次いで、１０５のメシチレンスルホニル基を切断して１０６を得る。これを（ＢＯＣ）2Ｏを用いて保護し、そして得られる１０２をヒドラジン分解によって脱保護して１１２のポリアミン部分を得る。タンデムに、公知の７４（スキーム１７）を１０８でアルキル化して１０９を得た。メシチレンスルホニル基の切断によって１１０を得た。遊離のアミノ基を（ＢＯＣ）2Ｏで再保護して１１１を得た。以下の化合物１２についての手順と同様の手順を用いたヒドラジン分解を介したフタルイミド残基の切断によって、１１４の合成のためのアミノポリアミン中間体を得た。
【００９８】
化合物１１２〜１１４および類似の化合物の一級アミノ基の代わりに二級アミンが所望される場合には、一級アミンは、塩基性条件下でハロゲン化アルキルを用いて容易にアルキル化されて二級アミンが得られ得る。このアミンは保護されていないままであるが、一方、他のアミンはＢＯＣ基によって依然として保護されているので、二級アミンへのこのペプチドのカップリングは、一級アミンについて上記で示したのと同じプロトコールを用いて達成され得；カップリングについての反応時間は、延長される必要があり得、そして反応の進行は、ＨＰＬＣまたは他の方法によって容易にモニタリングされ得る。
【００９９】
（実施例１：ポリアミン化合物の合成）
化合物２：ＮａＨ（８０％、１．０８ｇ、３６ｍｍｏｌ）を、Ｎ2下で氷水浴中でＤＭＦ（５０ｍｌ）中のアミド１（６．８１ｇ、３０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この混合物を１ｈ攪拌し、そしてＤＭＦ（１０ｍｌ）中の４−ブロモブチロニトリル（４．８８ｇ、３３ｍｍｏｌ）の溶液を少しずつ添加した。この混合物を一晩、７５℃にて攪拌した。溶媒を蒸留除去し、残渣をクロロホルム中に溶解し、塩化アンモニウムの飽和溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてエバポレートした。残渣を  シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル  ３：１）によって精製して８．０ｇ（９０％）の２を無色のオイルとして得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  １．０５（ｔ、３Ｈ）、１．９０（ｍ、２Ｈ）、２．３０（ｂ、ｍ、５Ｈ）、２．６０（ｓ、６Ｈ）、３．２０（ｑ、２Ｈ）、３．３５（ｔ、２Ｈ）、６．９５（ｓ、２Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．５０、２０．６１、２２．４３、２３．６０、３１．０５、３６．１２、４０．３９、４３．７８、１１８．６２、１３１．７９、１３２．６７、１３９．７１、１４２．４１。ＭＳ−ＥＩ（ｍ／ｚ）２９４（Ｍ+）。
【０１００】
化合物４：ニトリル２（７．８ｇ、２７ｍｍｏｌ）を、エタノール（１５０ｍｌ）と濃塩酸（１．５ｍｌ）との混合物に溶解した。ＰｔＯ2を添加し（７００ｍｇ）、そしてこの混合物を５０ｐｓｉで一晩水素添加した。触媒を濾別し、そして溶媒をエバポレートした。残渣（７８ｇ、９８％）をさらなる精製を伴わずに次の工程に用いた。遊離塩基は以下を与えた：1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  １．００（ｔ、３Ｈ）、１．５５（ｍ、４Ｈ）、２．２５（ｓ、３Ｈ）、２．８０（ｔ、２Ｈ）、３．２０（ｍ、４Ｈ）、６．９５（ｓ、２Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．５４、２０．６９、２２．５３、２４．７２、２７．６５、３９．９２、４０．２９、４４．５９、１３１．７１、１３３．２１、１３９．８２、１４２．０９。ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）２９９（Ｍ+＋１）。ジオキサン（３０ｍｌ）中のメシチレンスルホニルクロリド（８．８ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）を、０℃で、ジオキサン（６０ｍｌ）中に溶解した化合物３（７．８ｇ、２７ｍｍｏｌ）と５０％  ＫＯＨ（３０ｍｌ）との攪拌した混合物に滴下した。この反応混合物を２０℃に達するようにし、次いで一晩保持した。過剰の水を添加し、そしてこの混合物をクロロホルムで抽出し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてエバポレートした。オイル状の残渣を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化させて４を得た；１０．９ｇ（８２％）；ｍｐ  ７１．５−７２℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  １．００（ｔ、３Ｈ）、１．１０−１．５０（ｍ、４Ｈ）、２．３０（ｓ、６Ｈ）、２．５５，２．６０（ｓ、１２Ｈ）、２．８５（ｑ、２Ｈ）、３．１５（ｍ、４Ｈ）、４．７０（ｔ、１Ｈ）、６．９５、７．００（ｓ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  １２．７０、２０．９２、２１．０４、２２．７３、２２．９２、２４．５８、２６．６８、４０．０４、４２．０２、４４．４２、１３１．９１、１３３．３１、１３３．６４、１３８．９９、１４０．０５、１４２．１５、１４２．３５。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）４８０（Ｍ+）。
【０１０１】
（Ｅ）−２−ブテン−１，４−ジイルビス［メシチレンスルホネート］（５）：（Ｅ）−２−ブテン−１，４−ジオール（１．７６ｇ、２０ｍｍｏｌ）およびベンジルトリエチルアンモニウムブロミド（２７０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を、３０ｍｌの５０％水酸化カリウム溶液および３０ｍｌのジオキサン中に溶解した。この混合物を５℃で攪拌し、そして３０ｍｌのジオキサンに溶解したメシチレンスルホニルクロリド（８．７２ｇ、４０ｍｍｏｌ）を滴下した。添加が終わったら、攪拌を１ｈ続け、次いで水を添加し、そして白色沈殿物を濾過し、そしてクロロホルム−ヘキサンから結晶化させて５を得た；７．０ｇ（７７％）；ｍｐ  １１９−１２０℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２．３５（ｓ、６Ｈ）、２．６０（ｓ、１２Ｈ）、４．４５（ｄ、４Ｈ）、５．７５（ｂ、２Ｈ）、６．９５（ｓ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２０．９６、２２．５２、６７．９６、１２７．６７、１３１．６９、１３１．７４、１３９．７９、１４３．４５。ＭＳ−ＥＩ（ｍ／ｚ）、４５２（Ｍ+）、２５３、２００、１８３。Ｃ22Ｈ28０6Ｓ2についての分析計算値：Ｃ、５８．４０；Ｈ、６．１９。実測値：Ｃ、５８．３５；Ｈ、６．２２。
【０１０２】
化合物６を、他の箇所（Ｒｅｄｄｙら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４１：４７２３（１９９８））に記載される手順に従って５から５６％の収率で合成した。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｔ、Ｊ＝７．１５  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．３４（ｍ、８Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、１２Ｈ、ＣＨ3）、２．５５（ｓ、２４Ｈ、ＣＨ3）、３．０９（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７２（ｄ、Ｊ＝４．５３  Ｈｚ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４８（ｔ、Ｊ＝４．３１  Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９２（ｓ、４Ｈ、Ｐｈ）、６．９３（ｓ、４Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．７１、２０．９０、２２．７１、２２．７６、２４．７４、４０．０４、４２．２１、４４．５６、４５．６９、１２８．４５、１３１．８８、１３２．０２、１４０．０５、１４０．１６、１４２．２０、１４２．５８。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１０１２．８（Ｍ+、１００％）、８２８．７、６４６．７、５６１、１７６。
【０１０３】
化合物７を、他の箇所（Ｒｅｄｄｙら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４１：４７２３（１９９８））に記載される手順に従って６から７５％の収率で、ｍｐ＞２３０℃で得た。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．２６（ｔ、Ｊ＝１２．５  Ｈｚ、６Ｈ、２ＣＨ3）、１．７９（ｍ、８Ｈ、ＣＨ2）、３．１２（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８０（ｄ、Ｊ＝７．１６，４Ｈ、ＮＣＨ2）、６．１０（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １２．７９、２５．１０、４５．１９、４８．５３、４８．６２、５０．３６、１３０．６６。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）：２８５．３（ＭＨ+、１００％）。
【０１０４】
化合物８を、市販のブチンジオールから得た。ジオキサン（３０ｍｌ）中のメシチレンスルホニルクロリド（１９．５ｇ、９０ｍｍｏｌ）を、ブチンジオール（２．５８ｇ、３０ｍｍｏｌ）、５０％水酸化カリウム（３０ｍｌ）およびトリエチルベンジンアンモニウムブロミド（４０５ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の攪拌し冷却した混合物に滴下した。一旦添加が終了したら、この混合物を室温でさらに３ｈ攪拌した。過剰の水を添加し、そして白色沈殿物を一晩冷却し、濾別し、そして乾燥した。酢酸エチル／ヘキサンからの再結晶によって８．６ｇ（６３％）の８を得た；ｍｐ１０５〜１０６℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２．３０（ｓ、６Ｈ）、２．６０（ｓ、１２Ｈ）、４．５０（ｓ、４Ｈ）、６．９５（ｓ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２０．９３、２２．４８、５６．１３、８０．４１、１３０．６５、１３１．６７、１３９．９８、１４３．６７。ＭＳ−ＥＩ（ｍ／ｚ）  ４５０（Ｍ+）。
【０１０５】
化合物９を、化合物４２について記載した手順（以下を参照のこと）と類似の手順に従って得た。４５０ｍｇ（１ｍｍｏｌ）のジエステル８および１．０５ｇ（２．２ｍｍｏｌ）のジアミド４から、５７０ｍｇ（５６％）のテトラミド９を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９０（ｔ、６Ｈ）、１．３０（ｂｓ、８Ｈ）、２．２０（ｓ、１２Ｈ）、２．４５（ｓ、２４Ｈ）、３．０５（ｍ、１２Ｈ）、３．７５（ｓ、４Ｈ）、６．８７（ｓ、８Ｈ）：13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．７０、２０．７８、２２．６８、３４．６５、３９．９７、４４．４６、４４．９９、７８．６２、１３１．８５、１３１．９８、１３２．３４、１４０．１４、１４２．１３、１４２．５５。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１０１０（Ｍ+）。
【０１０６】
化合物１０を、化合物４３について記載した手順（以下を参照のこと）と類似の手順に従って得た。５００ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）のテトラミド９から、１６０ｍｇ（７６％）のテトラヒドロクロリド２５を得た；ｍｐ＞２８０℃（分解）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３０（ｔ、６Ｈ）、１．８０（ｂ、８Ｈ）、２．９０−３．２５（ｍ、１２Ｈ）、４．０５（ｓ、４Ｈ）：13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．３９、２５．６４、３９．２６、４５．７２、４９．００、４９．２０、８１．２０。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ  ２８３（Ｍ+＋１）。
【０１０７】
化合物１１：メシチレンスルホニルエチルアミド１（３．１ｇ、１３．６５ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（３０ｍｌ）に溶解し、続いてＮａＨ（８５％、０．４２３ｇ）をいくつかに分けて添加した。この混合物を室温で１ｈ攪拌した。２０ｍｌのＤＭＦ中のＮ−（４−クロロ−２−ブテニル）−フタルイミド（Ａｌｄｒｉｃｈ、３．０６ｇ、１３ｍｍｏｌ）を、フラスコに添加し、続いて８０℃にて一晩攪拌した。この混合物を室温まで冷却し、Ｈ2Ｏ（１０ｍｌ）でクエンチし、そしてこの溶液を減圧下でエバポレートして乾固させた。この固体残渣を、２５ｍｌのＨ2Ｏと２５ｍｌのＣＨＣｌ3との間で分配した。水層をＣＨＣｌ3（３×２５ｍｌ）で抽出し、有機層をブライン（３５ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、溶媒をエバポレートしてゴム状物を得て、このゴム状物をヘキサンでの粉砕によって凝固させて１１を得た。1Ｈ−ＮＭＲおよび13Ｃ−ＮＭＲのスペクトルは、１１が、さらなる精製を伴わずに次の工程に用いるために充分に純粋であることを示した。収率４．７５ｇ。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ１．１６（ｔ、Ｊ＝７．１１  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、２．２９（ｓ、３Ｈ、ＣＨ3）、２．６３（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、３．２９（ｑ、Ｊ＝７．１１  Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ2）、４．０６（ｄ、Ｊ＝５．２４  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、４．２６（ｄ、Ｊ＝５．７２  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、５．５９（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９５（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）、７．７１（ｍ、２Ｈ、Ｐｈ）、７．８３（ｍ、２Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １３．０６、２０．８９、２２．７２、３４．３５、４０．６８、４２．０１、１２３．２７、１２６．６９、１２９．４７、１３１．９０、１３４．００、１４０．２４。
【０１０８】
化合物１２：アミド１１（２０ｇ、４６．９５ｍｍｏｌ）をメタノールに溶解し、ヒドラジン一水和物（５ｍｌ、９８．５２ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの溶液を５５℃で２４ｈ攪拌した。最初に、これは均質な溶液であった；しかし、数時間後、白色固体が沈殿した。この混合物を室温に冷却し、３００ｍｌの濃ＨＣｌをゆっくりと添加し（発熱反応）、そして室温での攪拌をさらに１２ｈ続けた。メタノールをエバポレートし、そして得られた固体をＣＨＣｌ3（３×１５０ｍｌ）で抽出した。水層を５０％  ＮａＯＨで中和し、ＣＨＣｌ3（３×１００ｍｌ）で再度抽出し、合わせた有機層を乾燥した（ＭｇＳＯ4）；この溶液をエバポレートしてゴム状物を得、このゴム状物を高減圧下で凝固して１２を得た；収率９．０ｇ（６５％）。この化合物を、ヘキサン、酢酸エチル（７：３）を溶離液として用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した；ｍｐ  １６７−１６９℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．０（ｔ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、２．２８（ｓ、３Ｈ、ＣＨ3）、２．５６（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、２．６２（ｂｒ、ＮＨ2）、３．１２（ｑ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７３（ｂｒ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．９４（ｄ、Ｊ＝６．０  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、５．８０（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９２（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ１２．９７、２０．９３、２２．７４、３６．４３、４０．９４、４２．０８、１２４．２９、１３１．８９、１３２．００、１３２．６２、１４０．２１、１４２．６７。
【０１０９】
化合物１３を、４について記載された通りに１２から収率９６％で得た。化合物１３を、ヘキサンおよび酢酸エチル（４：１．５）を溶離液として用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した；ｍｐ  ９８−９９℃；1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９３（ｔ、Ｊ＝５．８５  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、２．２３（ｓ、３Ｈ、ＣＨ3）、２．２４（ｓ、３Ｈ、ＣＨ3）、２．５０（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、２．５６（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、３．０６（ｑ、Ｊ＝７．１５  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．４８（ｔ、Ｊ＝５．９９  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．６８（ｄ、Ｊ＝５．７２  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、４．５８（ｔ、Ｊ＝６．２４  Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ）、５．４４（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．８７（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）、６．８９（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．８０、２０．８９、２２．６４、２２．８９、３９．０１、４０．５９、４１．４１、１２８．１４、１２８．４６、１３１．９１、１３１．９６、１３９．０８、１４０．１９、１４２．２６、１４２．５４．ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）４７９．２（Ｍ+、６５％）、２９６．２、２７９．１、２６７．２、１８３．１。
【０１１０】
化合物１５：アミド１３（４．７９ｇ、１０ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（４０ｍｌ）に溶解し、続いてＮａＨ（０．３７ｇ）をいくつかに分けて添加し、この混合物を室温で２ｈ攪拌し、１０ｍｌ  ＤＭＦ中のｃｉｓ−１，４−ジクロロ−２−ブテン（７．５ｇ、６０ｍｍｏｌ）を一度に添加し、そして攪拌を５０℃で一晩続けた。この混合物を室温に冷却し、１０ｍｌ  Ｈ2Ｏでクエンチし、この溶媒をエバポレートし、そしてその内容物をＨ2Ｏ（５０ｍｌ）とＣＨＣｌ3（５０ｍｌ）との間で分配した。水層をＣＨＣｌ3（３×５０ｍｌ）で抽出し、プールした有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、エバポレートし、そして１５を、ヘキサン、酢酸エチル（８．５：１．５）を溶離液として用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した；収率５．５ｇ（９７％）、ｍｐ  １０６−１０８℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．０３（ｔ、Ｊ＝７．３３  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、２．３０（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、２．５７（ｓ、１２Ｈ、４ＣＨ3）、３．１７（ｑ、Ｊ＝７．３１  Ｈｚ、ＮＣＨ2）、３．７１（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８１（ｄ、Ｊ＝６．８７  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．９５（ｄ、Ｊ＝７．７０  Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨＣｌ2）、５．５０（ｍ、３Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、５．７４（ｍ、１Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９３（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）、６．９５（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．９１、２２．７０、２２．７４、３８．２０、４０．４５、４１．６０、４２．１１、４２．３３、１２８．１７、１２８．９５、１２９．３４、１２９．４０、１３１．９４、１３２．０８、１４０．２３、１４０．３４、１４２．９１。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）５６６．７（Ｍ+、１００％）、１５３．４、９６．３。
【０１１１】
化合物１４を、１５について上記の通りに１３および１，４−ジヨードブタンから調製した。生成物を、ヘキサンおよび酢酸エチル（４：１）を溶離液として用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した；収率７９％。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．０４（ｔ、Ｊ＝７．１０  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．６３（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、２．３０（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、２．５８（ｓ、１２Ｈ、４ＣＨ3）、３．０４（ｔ、Ｊ＝６．５０  Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ2Ｉ）、３．１６（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７８（ｄ、Ｊ＝５．１４  Ｈｚ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、５．５５（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９４（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）、６．９５（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ５．６９、１２．９２、２０．９５、２２．７２、２２．７８、２８．２５、３０．３６、４０．４７、４１．５９、４２．１１、４４．７１、１２８．３４、１２９．００、１３１．９４、１３２．０６、１３２．６０、１３２．８９、１４０．１５、１４０．２１、１４２．５０、１４２．７１。
【０１１２】
化合物１６を、化合物２について上記の通りに４および４−ブロモブチロニトリルから収率９４％で調製した。
【０１１３】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９７（ｔ、Ｊ＝７．１２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．４０（ｍ、４Ｈ、２ＣＨ2）、１．８５（Ｐｅｎｔ．、ｍ、２Ｈ、ＣＨ2）、２．２７（ｔ、Ｊ＝７．１７Ｈｚ、２Ｈ  ＣＨ2ＣＮ）、２．３０（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、２．５７（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、２．５８（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、３．１３（ｍ、６Ｈ、ＮＣＨ2）、３．２８（ｔ、Ｊ＝７．１１Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、６．９４（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）、６．９６（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．５５、１４．５４、２０．８４、２２．６４、２２．７３、２３．６５、２４．４３、２４．５７、３９．８８、４４．３１、４４．５４、４５．５８、１１８．６９、１３１．８４、１３２．０５、１３２．７３、１３３．３６、１３９．９４、１４２．２０、１４２．７１。
【０１１４】
化合物１７を、化合物３について上記の通りに１６から収率９３％で調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．００（ｔ、Ｊ＝６．９２Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．４０（ｍ、１０Ｈ、４ＣＨ2、ＮＨ2）、２．２９（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、２．５７（ｂ、１４Ｈ、４ＣＨ3、ＣＨ2Ｎ）、３．１３（ｍ、８Ｈ、４ＣＨ2Ｎ）、６．９３（ｓ、４Ｈ、２  Ｐｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１２．７２、２０．９０、２２．７２、２２．７８、２４．６７、２４．８０、３０．８０、４０．０２、４１．６１、４４．５６、４５．１０、４５．３８、１３１．８７、１４０．０４、１４２．２１、１４２．２８；ＭＳ−ＦＡＢ（Ｍ／Ｚ）５５２．３（Ｍ+、１００％）、３６８．２、２９９．１、１８３．０、１５４．０。
【０１１５】
化合物１８を、化合物４について上記の通りに１７から調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９６（ｔ、Ｊ＝７．１３Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．３８（ｍ、８Ｈ、４ＣＨ2）、２．２９（ｓ、９Ｈ、３ＣＨ3）、２．５５（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、２．５６（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）；２．５９（ｓ、６Ｈ、２ＣＨ3）、２．８０（ｍ、２Ｈ、ＣＨ2Ｎ）、３．１０（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、４．６７（ｔ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ）、６．９３（ｓ、６Ｈ、３  Ｐｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．５６、２０．８７、２２．７０、２２．７４、２２．８４、２４．４０、２６．４５、２４．６７、２６．６２、３９．８７、４１．８８、４４．４５、４５．０２、４５．０９、１３１．８６、１３１．９０、１３１．９２、１３３．１２、１３３．３２、１３３．６８、１３８．９１、１３９．９７、１４２．０２、１４２．２１、１４２．３８；ＭＳ−ＦＡＢ（Ｍ／Ｚ）：７５６．９（Ｍ＋２３（Ｎａ）、１００％）５７２．８、３９０．７、３３３．６、３０５．６。
【０１１６】
化合物１９を、１５について上記の通りに４および１，４−ジクロロ−２−ブテンから収率９９％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．０１（ｔ、Ｊ＝７．１１  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．３８（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、３Ｈ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）、２．５７（ｓ、６Ｈ）、２．６１（ｓ、６Ｈ）、３．１１（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．１６（ｑ、Ｊ＝７．１５  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８１（ｄ、Ｊ＝７．１７  Ｈｚ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．９８（ｄ、Ｊ＝８．０５  Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ2Ｃｌ）、５．５１（ｍ、１Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、５．７７（ｍ、１Ｈ、ＣＨ−ＣＨ）、６．９３（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）、６．９５（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．７６、２０．９１、２２．７１、２２．７６、２４．７４、３８．１２、４０．０８、４１．８５、４４．５９、４５．５４、１２９．１４、１２９．２５、１３１．８８、１３２．０２、１４０．０９、１４０．１９、１４２．２１、１４２．６３。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）５６９．３（Ｍ+、２０％）、３８５．２、２４０．１、２０３．３、１８３．０、１１９（１００％）。
【０１１７】
化合物２０を、１５について上記の手順に従って１８および１５から調製した。化合物２０を、ヘキサン−酢酸エチル（７：３）を溶離液として用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した（収率７８％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９７（ｔ、Ｊ＝７．１０  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、０．９９（ｔ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．２９（ｍ、８Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、１５Ｈ、ＣＨ3）、２．５４、２．５５、２．５９（ｓ、３０Ｈ、ＣＨ3）、３．０６（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．６５（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４８（ｍ、４Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９２（ｓ、１０Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．７０、１２．８３、２０．８８、２０．９１、２２．６５、２２．６８、２２．７２、２２．７４、２４．４８、２４．７２、４０．０４、４０．４７、４１．５３、４２．０７、４２．２２、４２．３４、４４．９６、１２７．９４、１２８．２７、１２８．５７、１２９．２０、１３１．９２、１３２．０５、１３９．９６、１４０．００、１４０．１２、１４０．１６、１４０．２７、１４２．１９、１４２．２５、１４２．４７、１４２．５８、１４２．８７。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１２６３．８１（Ｍ+、１００％）、１０８０．０１、８９８．１１、７１４．８１、５６３。
【０１１８】
化合物２１：ペンタミド２０（０．９３ｇ、０．７３５ｍｍｏｌ）を２０ｍｌの無水ＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、フェノール（３．４６ｇ、３６．７７ｍｍｏｌ）を添加し、続いて酢酸中のＨＢｒ（３０％、１７．６２ｍｌ）を添加し、そしてこの混合物を一晩、２５℃で攪拌した。水（１０ｍｌ）をこのフラスコに添加し、水層を分離し、有機層を５ｍｌのＨ2Ｏで抽出し、そして合わせた水層をＣＨ2Ｃｌ2（６×１５ｍｌ）で洗浄した。水を減圧下でエバポレートして固体を得て、この固体を１ｍｌの１Ｎ  ＮａＯＨ中に溶解し、続いて１ｍｌの５０％  ＫＯＨ中に溶解した。この溶液をＣＨＣｌ3（１０×５ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、ＣＨＣｌ3をエバポレートし、そして残渣を無水ジエチルエーテル中に溶解した。０℃に冷却しながら、無水ＨＣｌガスをこの溶液に通過させた。白色固体が沈殿し、この沈澱を濾過し、そしてエーテルで洗浄した。これは２１であった（８４％）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．２９（ｔ、Ｊ＝７．３２  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．３１（ｔ、Ｊ＝７．２４  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．７９（ｍ、８Ｈ、ＣＨ2）、３．１２（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８７（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、５．９８（ｍ、４Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．３６、１３．４６、２５．６６、２５．７７、４５．４４、４５．７４、４６．２４、４６．４１、４６．８４、４９．０９、４９．４１、４９．７０、１２９．０２、１２９．１６、１２９．４７、１２９．６６。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）３５４．３６（ＭＨ+、１００％）。
【０１１９】
化合物２２を、化合物１５について上記の通りに１８および１４から収率５１％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９７（ｔ、Ｊ＝６．５９  Ｈ、３Ｈ、ＣＨ3）、０．９９（ｔ、Ｊ＝７．０２  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．２９（ｍ、１２Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、１５Ｈ、ＣＨ3）、２．５５（ｓ）、２．５６（ｓ）、２．５７（ｓ）、３．１０（ｍ、１６Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７０（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４７（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９３（ｓ、１０Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．６９、１２．８３、２０．９１、２２．６９、２２．７１、２２．７６、２４．４３、２４．７０、４０．４８、４１．１１、４１．４８、４４．５０、４４．９１、１２８．１３、１２８．９０、１３１．８８、１３１．９４、１３２．０１、１３３．２９、１３９．９５、１４０．００、１４０．１５、１４２．２２、１４２．２９、１４２．６０。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１２６５．９１（Ｍ+、１００％）、１０８２．０１、９００．１１、７１６．９１、５６３．８１。
【０１２０】
化合物２３を、２１について上記の通りに２２から収率７９％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．２９（ｔ、Ｊ＝７．２９  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．３０（ｔ、Ｊ＝７．３０  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．７８（ｍ、１２Ｈ、ＣＨ2）、３．１２（ｍ、１６Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８３（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、５．９６（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．３１、１３．４２、２５．６２、２５．７５、４５．３８、４５．７１、４６．１８、４６．７６、４９．０７、４９．３２、４９．６９、１２９．１１、１２９．３９。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）３５６．３８（ＭＨ+、１００％）。
【０１２１】
化合物２４を、上記の通りに１８から調製した（収率５２％）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｍ、６Ｈ、２ＣＨ3）、１．３２（ｍ、１２Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、１５Ｈ、ＣＨ3）、２．５５（ｓ、３０Ｈ、ＣＨ3）、３．０６（ｍ、１６Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７０（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４７（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９２（ｓ、１０Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．６７、２０．９０、２２．７１、２２．７６、２４．４３、２４．６８、３９．９７、４２．０８、４４．４８、４４．９０、４５．６１、１２８．２８、１２８．４５、１３１．８７、１３１．９３、１３２．０１、１３９．９６、１４０．００、１４０．１２、１４２．２１、１４２．２８、１４２．５８。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１２６５．９１（Ｍ+、１００％）、１０８２．０１、９００．１１。
【０１２２】
化合物２５を、２１について上記の通りに２４から収率９６％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．２８（ｔ、Ｊ−７．２９  Ｈｚ、６Ｈ、２ＣＨ3）、１．７８（ｍ、１２Ｈ、ＣＨ2）、３．０９（ｍ、１６Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８４（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、５．９６（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．３１、２５．６１、２５．７３、４５．７０、４６．７９、４９．０５、４９．３６、４９．６５、１２９．１９。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）３５６．４（ＭＨ+）。
【０１２３】
化合物２６：ＫＯＨ（０．２５ｇ）、Ｋ2ＣＯ3（０．２５ｇ）およびテトラ−ｎ−ブチル−アンモニウム水素ブロミド（０．０５ｇ）の混合物を、１５ｍｌベンゼン中に懸濁した。メシチレンスルホニルアミド（０．１９９ｇ、１ｍｍｏｌ）をこの懸濁液に添加し、そしてこの混合物５０℃に加熱した。１０ｍｌベンゼン中のヨウ化物１４（１．９８ｇ、３ｍｍｏｌ）をこのフラスコに添加し、そしてこの混合物を還流下で一晩加熱し、次いで室温に冷却した；無機固体を濾別し、そしてベンゼン（２×２０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を、洗浄液が中性になるまで水で数回洗浄した。このベンゼンを乾燥し（ＭｇＳＯ4）、エバポレートし、そして残渣を、ヘキサンおよび酢酸エチル（７．５：２．５）を溶離液として用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した；収率２５％（０．９４８ｇ）。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．００（ｔ、Ｊ＝７．１８  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．２８（ｍ、８Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、１５Ｈ、ＣＨ3）、２．５３（ｓ）、２．５５（ｓ）、２．５７（ｓ）、３．０３（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、３．１２（ｑ、Ｊ＝７．１３  Ｈｚ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７０（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４７（ｍ、４Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９３（ｓ、１０Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．７８、２０．８５、２２．６３、２２．６９、２４．３２、２４．５８、４０．４１、４１．４３、４２．００、４４．７６、４５．４３、１２８．０８、１２８．８３、１３１．８８、１３１．９５、１３２．７７、１３２．８５、１３３．２３、１３９．９０、１４０．０４、１４０．０８、１４２．２２、１４２．４３、１４２．５３。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１２６３．８１（Ｍ+、１００％）、１０８１、８９８．１１、８１５．０１、５６１．８１、４１８．８１。
【０１２４】
化合物２７を、２１について上記の通りに２６から収率５７％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３１（ｔ、Ｊ＝７．３１  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．７８（ｍ、８Ｈ、ＣＨ2）、３．１５（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８３（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、５．９６（ｍ、４Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １３．４３、２５．６４、２５．７６、４５．３９、４６．１９、４６．７７、４９．３５、４９．７２、１２９．１１、１２９．４１。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）３５４．３（ＭＨ+、１００％）。
【０１２５】
化合物２８を、２６について上記の通りに１５およびメシチレンスルホニルアミドから収率２４％で調製した；ｍｐ  ５７．７℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９９（ｔ、Ｊ＝７．０９  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、２．２９（ｓ、１５Ｈ、ＣＨ3）、２．５３（ｓ）、２．５５（ｓ）、３．１２（ｑ、Ｊ＝７．０９  Ｈｚ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．６３（ｍ、１６Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４９（ｍ、８Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９３（ｓ、１０Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．８５、２０．８９、２０．９２、２２．６６、４０．４７、４１．５３、４２．１９、１２８．００、１２８．４７、１２８．５８、１２９．１１、１３１．９２、１３２．０５、１４０．１７、１４０．３０、１４２．４６、１４２．８７。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１２５９．８１（Ｍ+、６０％）、１０７５．９１、８９４．０１、３０６．５１、１５３．４（１００％）。
【０１２６】
化合物２９を、２１について上記の通りに２８から収率８１％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３１（ｔ、Ｊ＝７．２９  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、３．１５（ｑ、Ｊ＝７．３１  Ｈｚ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８４（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．９０（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、５．９８（ｍ、８Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．４２、４５．４１、４６．２２、４６．４４、１２９．０７、１２９．３７、１２９．４２、１２９．５８。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）３５０．３１（ＭＨ+）。
【０１２７】
化合物３０を、２６について上記の通りに１９から収率２５％で調製した；ｍｐ  ６２．３℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（５、Ｊ＝７．１７  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．３３（ｍ、８Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、１５Ｈ、ＣＨ3）、２．５４（ｓ）、２．５５（ｓ）、３．０７（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．６５（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４８（ｍ、４Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９２（ｓ、１０Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ１２．６９、２０．９０、２２．６９、２２．７３、２４．７０、４０．０３、４２．１３、４２．３０、４４．５３、４５．５９、１２８．１１、１２８．７９、１３１．８７、１３２．００、１４０．０２、１４０．１４、１４０．２８、１４２．１７、１４２．５８、１４２．８５。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１２６３．８１（Ｍ+、１００％）、１０８０．０１、８９８．１１、７１４．０１、１５３。
【０１２８】
化合物３１を、２１について上記の通りに３０から収率８７％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．２８（ｔ、Ｊ＝７．３２  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．７９（ｍ、８Ｈ、ＣＨ2）、３．１０（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８７（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、５．９８（ｍ、４Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １２．７０、２５．００、２５．１３、４５．１０，４５．８１、４６．２１、４８．４４、４８．７８、１２８．４４、１２８．８５。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）３５４．３（ＭＨ+）。
【０１２９】
化合物３２：メシチレンスルホニルアミド（１．４７ｇ、７．３８ｍｍｏｌ）を５０ｍｌ無水ＤＭＦ中に溶解し、そしてＮａＨ（８５％、０．３ｇ）を窒素雰囲気下でそれに添加した。この混合物を室温で攪拌し、そして２５ｍｌ  ＤＭＦ中の１９（１．４０ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）を添加した。６５℃での加熱を一晩続けた。この混合物を室温に冷却し、そして１０ｍｌのＨ2Ｏを添加した。溶媒をエバポレートし、そして固体残渣を４０ｍｌ  Ｈ2Ｏと４０ｍｌ  ＣＨＣｌ3との間で分配した。水層をＣＨＣｌ3（２×３０ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層をＨ2Ｏ（３×５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）し、そしてエバポレートした。残渣を、ヘキサン−酢酸エチル（７．５：２．５）を用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した。１．７ｇ（９７％）の３２を白色固体として得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９４（ｔ、Ｊ＝７．１０  Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ3）、１．３０（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ）、２．３０（ｓ）、２．５５（ｓ、１２Ｈ、ＣＨ3）、２．６５（ｓ、６Ｈ、ＣＨ3）、３．１１（ｍ、６Ｈ、ＮＣＨ2）、３．５２（ｍ、１Ｈ、ＮＣＨ）、３．６５（ｍ、２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７１（ｍ、１Ｈ、ＮＣＨ2）、４．８２（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、５．４７（ｍ、２Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９３（ｓ、４Ｈ、Ｐｈ）、６．９６（ｓ、２Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．５０、２０．９１、２２．７１、２２．７６、２２．８３、２２．９１、２４．６６、３８．９８、３９．８５、４２．１５、４２．２６、４４．５０、１２８．０６、１２８．５１、１３１．８６、１３１．９１、１３８．１８、１４０．００、１４０．１４、１４０．２８、１４２．１７、１４２．６５。
【０１３０】
化合物３３を、２２について上記の通りに３２および１４から収率５１％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９９（５、Ｊ＝７．１９  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．３３（ｍ、８Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、１５Ｈ、ＣＨ3）、２．５５（ｓ）、２．５７（ｓ）、３．１０（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７０（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７７（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４２（ｍ、４Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９３（ｓ、１０Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．７０、１２．７１、２０．８９、２２．６６、２２．７２、２２．７８、２２．８１、２４．６０、２６．５３、４０．３９、４１．３７、４１．８７、４２．２０、４５．４７、１２８．２６、１２８．６２、１３１．７８、１３１．８４、１３１．８６、１３１．９２、１３２．７７、１３８．９２、１３９．９６、１４０．０９、１４０．１７、１４２．５７、１４２．６３。
【０１３１】
化合物３４を、２１について上記の通りに３３から収率４０％で調製した。
【０１３２】
化合物３５を、３２について上記の通りに１５から収率９４％で調製した。
【０１３３】
化合物３６を、３３について上記の通りに３５および１４から収率８２％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９９（ｔ、Ｊ＝７．１１  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．３３（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、１５Ｈ、ＣＨ3）、２．５５（ｓ）、２．５７（ｓ）、３．０７（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、３．７０（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４６（ｍ、６Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９２（ｓ、１０Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．６９、１２．８０、２０．８４、２２．６２、２２．６８、２２．７３、２２．７７、２４．５８、２６．５５、４０．４４、４１．５１、４１．８６、４２．０４、４２．２４、４５．４９、１２８．１０、１２８．２５、１２８．５２、１２８．６２、１２８．８２、１３１．８９、１３１．９５、１３２．７９、１３８．８９、１４０．０７、１４０．１４、１４０．２３、１４１．９４、１４２．４４、１４２．５３、１４２．８２。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１２６２．８（Ｍ+、７５％）、１０８０．０１、８９６、１１９（１００％）。
【０１３４】
化合物３７を、２１について上記の通りに３６から収率６５％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３１（ｔ、Ｊ＝６．９７  Ｈｚ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．７９（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、３．１２（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８３（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、５．９６（ｍ、６Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．４８、２５．６９、２６．７６、４１．６７、４５．４４、４６．２４、４６．４５、４６．８０、４９．４１、１２９．００、１２９．１２、１２９．４５、１２９．７１。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）３５２．３（ＭＨ+）。
【０１３５】
化合物３８を、上記の通りに３５および１９から収率８９％で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｍ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．３３（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、２．２９（ｓ、１５Ｈ、ＣＨ3）、２．５４（ｓ）、２．５５（ｓ）、２．５７（ｓ）、３．０９（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、３．６６（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、５．４８（ｍ、６Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）、６．９３（ｓ、１０Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．５１、１２．６３、２０．８４、２０．８６、２２．６３、２２．６５、２２．８４、２４．６１、３８．９２、４０．４０、４１．４０、４２．１１、４２．１８、４４．４４、４５．４８、１２７．９５、１２８．０７、１２８．４９、１２８．６２、１２８．８０、１３１．７６、１３１．８３、１３１．８５、１３１．８８、１３２．０１、１３８．０５、１３９．０１、１４０．０７、１４０．１３、１４０．２４、１４２．１５、１４２．２１、１４２．８７。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１２６３．１（Ｍ+、９０％）、１０８０．１、８９６．０１、１１９（１００％）。
【０１３６】
化合物３９を、２１について上記の通りに３８から収率５４％で調製した；ｍｐ  ２７０℃（ｄｅｃ．）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３１（ｍ、６Ｈ、ＣＨ3）、１．８０（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、３．１０（ｍ、８Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８６（ｍ、１２Ｈ、ＮＣＨ2）、５．９８（ｍ、６Ｈ、ＣＨ＝ＣＨ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．３０、１３．４２、２５．５８、２５．７０、４５．６９、４６．２１、４６．４３、４６．８１、４９．０２、４９．３７、１２９．００、１２９．１５、１２９．３７、１２９．５９。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）：３５２．３４３（ＭＨ+）。
【０１３７】
化合物４２：ＮａＨ（８０％、１３２ｍｇ、４．４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍｌ）中のジアミド４１（１．９８ｇ、４．４ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この混合物を２０℃で３０分間攪拌し、そしてＤＭＦ（１０ｍｌ）中のジエステル４０（Ｒｅｄｄｙら（１９９８）Ｊ．Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．、４１：４７２３）（９６０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。この混合物を７５℃で２ｈ攪拌し、溶媒を蒸留除去し、残渣をクロロホルム中に溶解し、塩化アンモニウムの飽和溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固した。粗オイルを、ヘキサン−酢酸エチル（８：２）を展開溶媒として用いたカラムクロマトグラフィーによって精製した。１．４ｇ（７０％）をガラス状オイルとして得た。13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２０．５８、２２．６３、２２．８０、３２．４２、３３．８６、４３．１６、４５．４２、４６．２６、１３２．７５、１３３．２１、１３９．８２、１４２．４０。ＭＳ−ＦＡＢ  ９８４（Ｍ+）。
【０１３８】
化合物４３：氷酢酸（３５ｍｌ）中のフェノール（１．８６ｇ、１９．７ｍｍｏｌ）および３０％  ＨＢｒを、ＣＨ2Ｃｌ2（３５ｍｌ）中の４２（６００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の溶液に室温でその順番で添加した。この溶液を２４ｈ攪拌し、水（３０ｍｌ）を添加し、続いて塩化メチレン（３×２０ｍｌ）で抽出した。水層を減圧下でエバポレートし、そして残渣を２Ｎ  ＮａＯＨ（２ｍｌ）中に溶解し、次いで５０％  ＫＯＨ（２ｍｌ）中に溶解し、続いてクロロホルム（６×１０ｍｌ）で抽出した。クロロホルムの除去後、残渣をエタノール（１５ｍｌ）中に溶解し、そして濃塩酸（０．４ｍｌ）で酸性化した。生成物４３（２３０ｍｇ、９３％）を水性エタノールから再結晶した；ｍｐ＞２７０℃（ｄｅｃｏｍｐ）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．９５（ｍ、２Ｈ）、２．０５−２．２５（ｍ、６Ｈ）、２．７５（ｓ、６Ｈ）、２．９０（ｂ、２Ｈ）、３．１０−３．３５（ｍ、１２Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  ２５．２１、２５．２４、３５．６０、３５．６４、４７．４１、４８．５８、５０．８７。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）２４０（Ｍ+＋１）。
【０１３９】
化合物４７：ＮａＨ（８０％、１３２ｍｇ、４．４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍｌ）中のジアミド４６（１．９８ｇ、４．４ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この混合物を２０℃で３０分間攪拌し、そしてＤＭＦ（１０ｍｌ）中のジエステル８（９００ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。この混合物を７５℃で２ｈ攪拌した。溶媒を蒸留除去し、残渣をクロロホルム中に溶解し、塩化アンモニウムの飽和溶液で洗浄し、乾燥し（ＮａＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固させた。オイル状残渣を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化した。１．２ｇ（６１％）；ｍｐ  １６５−１６６℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．０８（ｔ、３Ｈ）、１．７５（ｍ  ４Ｈ）、２．２８（ｓ、１２Ｈ）、２．５５（ｂｓ、２４Ｈ）、３．１０（ｍ、１２Ｈ）、３．９８（ｓ、４Ｈ）、６．９５（ｍ、８Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．７０、２０．８６、２２．６４、２５．１４、３４．８５、４０．２２、４２．６２、４３．３７、７８．８０、１３１．９９、１３２．２６、１３３．２１、１４０．２６、１４２．２８、１４２．７１。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）９８２（Ｍ+）。
【０１４０】
化合物４８を、４７について上記の通りに得た。１．２ｇ（１．２２ｍｍｏｌ）のテトラミド４７から、４２０ｍｇ（８６％）のテトラヒドロクロリド４８を得た；ｍｐ＞２７０℃（ｄｅｃｏｍｐ）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．２９（ｔ、６Ｈ）、２．１３（ｍ、４Ｈ）、３．１４（ｍ、１２Ｈ）、４．０６（ｓ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．３４、２５．５２、３９．４５、４５．９０、４５．６４、４６．７１、８１．３２。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）２５５（Ｍ+＋１）。
【０１４１】
化合物４４を、４７について上記の通りに得た。４５０ｍｇ（１ｍｍｏｌ）のジエステル８および９９４ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）のジアミド４１から、５００ｍｇ（５２％）のテトラミド４４を得て、そして酢酸エチル−ヘキサンから結晶化した；ｍｐ  １５５−１５６℃。
【０１４２】
化合物４５を、４３について上記の通りに得た。５００ｍｇ（０．５２ｍｍｏｌ）のテトラミド４４から、１６０ｍｇ（８２％）のテトラヒドロクロリド４５を得た；ｍｐ＞２７０℃（ｄｅｃｏｍｐ）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  ２．１５（ｍ、４Ｈ）、２．７３（ｓ、３Ｈ）、３．０５−３．４０（ｍ、８Ｈ）、４．１０（ｓ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  ２５．５９、３５．６６、４５．９０、４６．５７、４８．６１。
【０１４３】
化合物５１は、シス／トランス異性体の混合物である。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．１５−２．１０（ｍ、７Ｈ）、２．９０（ｑ、１Ｈ）、３．３０−３．８０（ｂ、２Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  ２４．１６、２４．９７、２８．４４、３０．４２、３６．５８、３７．１４、４８．２４、５２．２７、５５．１９、５７．４５、６４．５５、６７．２６。
【０１４４】
化合物５２：ジオキサン（１０ｍｌ）中のメシチレンスルホニルクロリド（６．５ｇ、３０ｍｍｏｌ）を、アミンアルコール５１（１．１５ｇ、１０ｍｍｏｌ）、トリエチルベンジルアンモニウムブロミド（１３５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、５０％  ＫＯＨ（１０ｍｌ）およびジオキサン（１０ｍｌ）の攪拌し冷却した混合物に滴下した。この反応混合物を一晩、２０℃で磁気攪拌しながら放置した。過剰の水を添加し、この溶液をクロロホルム（３×３０ｍｌ）で抽出し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固させた。オイル状の残渣を、ヘキサン：酢酸エチル（８：２）を溶離液として用いる、シリカ−ゲルカラムでのクロマトグラフィーにかけた。酢酸エチル−ヘキサンからの結晶化によって１．２ｇ（２５％）の純粋な５２を得た；ｍｐ  １６７−１６８℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．３５−１．９０（６Ｈ）、１．９０−２．１５（ｍ、１Ｈ）、２．３０、２．３５（ｓ、６Ｈ）、２．６５（ｓ、１２Ｈ）、３．２０（ｍ、１Ｈ）、３．７０（ｍ、１Ｈ）、３．９０（ｍ、１Ｈ）、５．１５（ｄ、１Ｈ）、６．９０、７．００（ｓ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２０．７３、２０．８５、２２．１５、２２．３７、２２．７０、２６．９４、３２．７５、４５．３４、５６．０９、７０．３８、１３０．２２、１３１．５７、１３３．９８、１３８．６８、１３９．６４、１４２．０２、１４３．１０。ＭＳ−ＥＩ（ｍ／ｚ）４７９（Ｍ+）、２８０（Ｍ+−１９９）。
【０１４５】
化合物５４：ＮａＨ（１０５ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の化合物５２（１．７ｇ、３．５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この混合物を２０℃で３０分間攪拌し、そしてＤＭＦ（５ｍｌ）中の化合物５３（１．３４ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）の溶液を少しずつ添加した。この混合物を７５℃で２ｈ攪拌した。溶媒を蒸留除去し、残渣をクロロホルム中に溶解し、塩化アンモニウムの飽和溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてエバポレートした。オイル状の残渣を、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル  ８：２）によって精製し、これによって、化合物５４（１．２２ｇ、４７％）を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．９８（ｔ、３Ｈ）、１．２０−２．０５（９Ｈ）、２．２０（ｓ、６Ｈ）、２．５５、２．６５（ｓ、１２Ｈ）、２．７０−３．５５（９Ｈ）、６．８５（ｓ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．４９、２０．８０、２１．６４、２１．８７、２２．８８、２８．７２、３３．１６、３６．１３、３９．９６、４３．８０、４７．９５、５７．７７、６１．２６、１３１．８３、１３２．９４、１３３．１４、１３８．８２、１３９．９０、１４２．０７、１４２．６３。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）６２８（Ｍ+＋１）、５４６（Ｍ+−８１）。
【０１４６】
化合物５５を、化合物４２について記載された手順に従って得た。１．２２ｇ（１．６ｍｍｏｌ）のブロモ誘導体５４および８２０ｍｇ（１．７６ｍｍｏｌ）のジアミド４６から、１．２６ｇ（７７％）のテトラミド５５をガラス状オイルとして得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．８０（ｔ、６Ｈ）、１．２０−１．７５（６Ｈ）、１．９０（ｍ、１Ｈ）、２．１５（ｓ、１２Ｈ）、２．３５−２．６０（ｓ、２４Ｈ）、２．６５−３．４０（１５Ｈ）、６．８５（ｂ、８Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．３８、２０．７１、２２．５２、２２．６６、２４．７２、２７．５５、２８．０４、３９．１９、３９．７１、４１．０２、４２．３３、４２．６２．４３．３７、４８．８１、６１．４４、１３１．７６、１３１．８８、１３３．１０、１３３．８９、１３８．６６、１３９．９３、１４２．１７、１４２．３３、１４２．５７。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１０１２（Ｍ+）、８２８（Ｍ+−１８４）。
【０１４７】
化合物５６を、化合物４３について記載された手順に従って得た。１．２６ｇ（１．２４ｍｍｏｌ）のテトラミド５５から、３００ｍｇ（５６％）のテトラヒドロクロリド５６を得た；ｍｐ＞２７０℃（ｄｅｃｏｍｐ）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３５（ｔ、６Ｈ）、１．６０（ｍ、１Ｈ）、１．８０（ｂ、３Ｈ）、２．１５（ｂ、６Ｈ）、２．５０（ｂ、１Ｈ）、３．２０（ｍ、１３Ｈ）、３．４５（ｍ、２Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．２３、２５．４８、２５．７３、２５．７９、３１．６９、３１．９９、４３．４０、４５．９１、４６．４３、４６．７１、４８．０７、５３．２０、７５．２８。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）２８５（Ｍ+＋１）。
【０１４８】
化合物５７：ＮａＨ（８０％、１５０ｍｇ、５ｍｍｏｌ）およびＮａＢｒ（２．５ｇ、２５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１５ｍｌ）中の化合物５２（２．３５ｇ、４．９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この混合物を２０℃で３０分間攪拌し、そしてＤＭＦ（１０ｍｌ）中の１−ブロモエタン（２．２ｇ、２５ｍｍｏｌ）の溶液を少しずつ添加した。この混合物を９０℃で３ｈ攪拌した。溶媒を蒸留除去し、残渣をクロロホルム中に溶解し、塩化アンモニウムの飽和溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてエバポレートした。生成物を、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル  ９：１）によって精製した。オイル状残渣（１．５ｇ、７９％）を静置して結晶化させた；ｍｐ  ６８−６９℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．１０（ｔ、３Ｈ）、１．３０−２．１０（６Ｈ）、２．２５（ｂ、４Ｈ）、２．６０（ｓ、６Ｈ）、３．２０（ｍ、２Ｈ）、３．３５（ｍ、２Ｈ）、３．６０（ｍ、２Ｈ）、６．９５（ｓ、２Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １６．３５、２０．９３、２１．７９、２２．８９、２９．３２、２９．３７、３６．５４、３８．１２、４４．１３、６１．４０、１３１．９９、１３２．８０、１４０．２０、１４２．５２。ＭＳ−ＦＡＢ  ３８９（Ｍ+＋１）、３０８（Ｍ+−８０）。
【０１４９】
化合物５９を、化合物４２について記載した手順に従って得た。７００ｍｇ（１．８０ｍｍｏｌ）の化合物５７および３９４ｍｇ（０．９ｍｍｏｌ）のジアミド５８から、４００ｍｇ（３７％）のテトラミド５９を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９０（ｔ、６Ｈ）、１．２５−１．８０（ｍ、８Ｈ）、１．８０−２．１０（ｍ、８Ｈ）、２．１５（ｓ、１２Ｈ）、２．４０、２．５０（ｓ、２４Ｈ）、２．６０−３．３５（ｍ、６Ｈ）、２．８５、２．９０（ｓ、８Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １６．１４、２０．８５、２１．９５、２１．９９、２２．５５、２５．４９、２８．７８、２８．８８、３１．４９、３７．８７、４０．５０、４０．８３、４３．８５、４４．０６、４９．３０、６１．４２、１３１．８６、１３１．９６、１３３．０９、１３３．４０、１３９．９３、１３９．９８、１４２．２７、１４２．４０。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１０５２（Ｍ+）、８９１（Ｍ+−１８４）。
【０１５０】
化合物６０を、化合物４３について記載した手順に従って得た。４００ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）のテトラミド５９から、９５ｍｇ（５３％）のテトラヒドロクロリド誘導体を得た；ｍｐ＞２７０℃（ｄｅｃｏｍｐ．）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３０（ｔ、６Ｈ）、１．６０（ｍ、２Ｈ）、１．８０（ｍ、６Ｈ）、１．９５−２．３５（６Ｈ）、２．４５（ｍ、２Ｈ）、３．２０（ｍ、１０Ｈ）、３．４０（ｍ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．５９、２５．３４、２５．７１、３１．７５、３２．００、４３．３４、４４．８３、４８．０２、５３．２４、６４．５２。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）３２５（Ｍ+＋１）。
【０１５１】
化合物６２：ジオキサン（２０ｍｌ）中のメシチレンスルホニルクロリド（３．２７ｇ、１５ｍｍｏｌ）を、０℃の、ジオキサン（２０ｍｌ）中の６１（１．３ｇ、１０ｍｍｏｌ）および５０％  ＫＯＨ（１５ｍｌ）の攪拌した溶液に滴下した。添加が完了したとき、この混合物を一晩、２０℃で放置した。過剰の水を添加し、この溶液を冷却し、そして沈殿物を濾別した。酢酸エチル−ヘキサンからの結晶化によって、化合物６２（２ｇ、８０％）を得た；ｍｐ  １１５−１１６℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２．３５（ｓ、３Ｈ）、２．５５（ｔ、２Ｈ）、２．６５（ｓ、６Ｈ）、３．２５（ｑ、２Ｈ）、５．１５（ｔ、１Ｈ）、７．０（ｓ、２Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １９．０７、２０．８２、２２．７８、３８．３７、１１７．５６、１３２．０７、１３３．０、１３８．９９、１４２．６７。ＭＳ−ＥＩ（ｍ／ｚ）２５２（Ｍ+）。
【０１５２】
化合物６３：ＮａＨ（８０％、３３０ｍｇ、１１ｍｍｏｌ）を、Ｎ2下でＤＭＦ（２０ｍｌ）中の化合物６２（２．５２ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この混合物を３０分間攪拌し、そしてＤＭＦ（１０ｍｌ）中の化合物５３（３．８２ｇ、１１ｍｍｏｌ）の溶液を少しずつ添加した。この混合物を７０℃で２ｈ攪拌した。溶媒を蒸留除去し、残渣をクロロホルム中に溶解し、塩化アンモニウムの飽和溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固した。生成物を、シリカ−ゲルクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル  ８：２）によって精製した。オイル状の残渣（３．０ｇ、５７％）を、静置して結晶化させた；ｍｐ  １０５−１０６℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．００（ｔ、３Ｈ）、１．７５（ｍ、２Ｈ）、２．３５（ｓ、６Ｈ）、２．６０（１４Ｈ）、３．１０（ｍ、６Ｈ）、３．４５（ｔ、３Ｈ）、６．９０、６．９５（ｓ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．６３、１６．９４、２０．８９、２２．６７、２５．７３、４０．２７、４２．１９、４２．５１、４４．７２、１１７．３６、１３１．９５、１３２．２２、１４０．０６、１４０．３４、１４２．５２、１４３．３３。ＭＳ−ＥＩ（ｍ／ｚ）５１９（Ｍ+）、４２９（Ｍ+−ＨＣＮ）。
【０１５３】
化合物６５：ニトリル６３（３．０ｇ、５．７ｍｍｏｌ）を、エタノール（１５０ｍｌ）と濃塩酸（１．５ｍｌ）との混合物に溶解した。ＰｔＯ2を添加し（３００ｍｇ）、この混合物を５０ｐｓｉで一晩水素添加し、触媒を濾別し、そして溶媒をエバポレートして、化合物６４のオイル状残渣を得て、これを、さらなる精製を伴わずに次の工程で用いた。遊離塩基1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．００（ｔ、３Ｈ）、１．５５（ｍ、２Ｈ）、１．７５（ｍ、２Ｈ）、２．３０（ｓ、６Ｈ）、２．５５（１４  Ｈ）、２．９０−３．３０（８Ｈ）、６．９５（ｓ、４Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．６４、２０．８７、２２．６９、２５．３５、３０．９３、３９．０４、４０．１２、４２．６５、４３．１１、１３１．８６、１３３．１０、１４０．０４、１４２．４３。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）５２４（Ｍ+＋１）。
【０１５４】
ジオキサン（１５ｍｌ）中のメシチレンスルホニルクロリド（１．８６ｇ、８．５５ｍｍｏｌ）を、０℃の、ジオキサン（３０ｍｌ）中に溶解した６４（３．０ｇ、５．７ｍｍｏｌ）と５０％  ＫＯＨ（１５ｍｌ）との攪拌した混合物に滴下した。この反応混合物を室温に到達させ、そしてさらに２ｈ保持した。過剰の水を添加し、そしてこの混合物をクロロホルムで抽出し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固させた。精製は、ヘキサン−酢酸エチル（８：２）を溶離液として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって達成された；２．７９ｇ（６９％）の６５を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｔ、３Ｈ）、１．６０（ｍ、４Ｈ）、２．３０（ｓ、９Ｈ）、２．５０（ｓ、１２Ｈ）、２．６５（ｓ、６Ｈ）、２．８５（ｍ、２Ｈ）、３．０５（６Ｈ）、３．２０（ｔ、２Ｈ）、５．００（ｔ、１Ｈ）、６．９５（６Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．４５、２０．８１、２２．７３、２５．２３、２７．４６、３９．１９、３３．９９、４２．４９、４２．９２、４３．１７、１３１．８４、１３３．０５、１３３．８２、１３８．８０、１３９．９０、１４１．９２、１４２．３６、１４２．６４。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）７０５（Ｍ+）。
【０１５５】
化合物６６を、化合物４２について記載された手順に従って得た。７０５ｍｇ（１ｍｍｏｌ）の６５および４２６ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）の５７から、４７０ｍｇ（４６％）のテトラミド６６がガラス状生成物として得られた。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．８５−１．１０（ｔ、６Ｈ）、１．３５−２．１０（ｍ、１  １Ｈ）、２．３０（ｓ、１２Ｈ）、２．４０−２．６５（ｍ、２４Ｈ）、２．７５−３．５５（ｍ、１３Ｈ）、６．９５（ｍ、８Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．６４、１６．１１、２０．９１、２２．０８、２２．７５、２４．８１、２５．０９、２８．８３、２９．０７，３７．９３、４０．０８、４０．８４、４２．５０、４２．８１、４３．１１、４３．４２、４９．１１、６１．４３。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１０１３（Ｍ+＋１）。
【０１５６】
化合物６７を、化合物４３について記載された手順に従って得た。４７０ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）のテトラミド６６から、１４２ｍｇ（７１％）のテトラヒドロクロリド誘導体が得られた；ｍｐ＞２５０℃（ｄｅｃｏｍｐ）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３０（ｔ、６Ｈ）、１．６０（ｍ、１Ｈ）、１．８５（ｂ、ｓ、３Ｈ）、２．１５（ｍ、６Ｈ）、２．４５（ｍ、１Ｈ）、３．１５（ｍ、１３Ｈ）、３．４５（ｍ、２Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．２９、１３．５７、２５．３４、２５．４４、２５．６４、３１．６８、３１．９４、４３．２７、４４．８０、４５．８６、４６．６２、４７．４２、４７．９７、５３．１９、６４．５０。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ  ２８５（Ｍ+＋１）、２８６（Ｍ+＋２）。
【０１５７】
化合物６８ａ：４−シアノベンズアルデヒド（Ａｌｄｒｉｃｈ、１．３１ｇ、１０ｍｍｏｌ）を、３０ｍｌの無水ＭｅＯＨに溶解し、続いてＭｇＳＯ4（無水、１．５ｇ）および１，４−ジアミノブタン（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．４４ｇ、５ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの混合物をアルゴン下で一晩攪拌した。この懸濁液を氷浴中で冷却し、そしてＮａＢＨ4（２．０ｇ）を少しずつ添加し、そして攪拌を０℃で２ｈ続けた。メタノールを減圧下でエバポレートし、そして得られた固体を３５ｍｌ  Ｈ2Ｏと５０ｍｌ  ＣＨＣｌ3との間で分配した。固体の一部はＨ2ＯにもＣＨＣｌ3にもいずれにも溶けず、そしてこれを濾別し、そして水層をＣＨＣｌ3（２×２５ｍｌ）で抽出した。プールした有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、エバポレートし、そして固体を酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して１．１ｇ（３５％）を得た；ｍｐ  ９０．６−９０．８℃、1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．４３（ブロード、２Ｈ、ＮＨ）、１．５５（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、２．６３（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８５（ｓ、４Ｈ、ベンジルのＣＨ2）、７．４４（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）、７．６０（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２７．７８、４９．２８、５３．４４、１１０．６５、１１８．８８、１２８．５２、１３２．１２、１４６．２１。ＭＳ（ｍ／ｚ）３１８（Ｍ+）、１８５、１４５、１３１、１１６（１００％）、７０。
【０１５８】
化合物６８ｂを、６８ａについて上記の通りに４−シアノ−ベンズアルデヒドおよび１，５−ジアミノペンタンから調製した；収率４２％；ｍｐ  ９２．９−９３．０℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．４０（ｍ、４Ｈ、ＮＨ、ＣＨ2）、１．５０（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、２．５９（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８３（ｓ、４Ｈ、ベンジルのＣＨ２）、７．４５（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）、７．５９（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２４．８６、２９．８７、４９．２９、５３．４０、１１０．５０、１１８、８５、１２８．４８、１３２．０４、１４６．１９。ＭＳ（ｍ／ｚ）３３２（Ｍ+）、２１６、１９９、１４５、１１６（１００％）、８４。
【０１５９】
化合物６８ｃを、６８ａについて上記の通りに４−シアノベンジルデヒド（４−ｃｙａｎｏｂｅｎｚｙｌｄｅｈｙｄｅ）および１，６−ジアミノヘキサンから調製した；収率４５％；ｍｐ  ９５．６−９５．８℃。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １．３５（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、１．５０（ｍ、６Ｈ、ＮＨ、ＣＨ2）、２．６０（ｔ、Ｊ＝６．９２  Ｈｚ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、３．８４（ｓ、４Ｈ、ベンジルのＣＨ2）、７．４４（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）、７．６０（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ２７．１７、３０．０２、４９．４２、５３．５０、１１０．６５、１１８．９２、１２８．５５、１３２．１４、１４６．２７。ＭＳ（ｍ／ｚ）３４６（Ｍ+）、２３０、２１３、１４５、１１６（１００％）９８。
【０１６０】
化合物６９ａ：ジニトリル６８ａ（０．７５ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ中に溶解し、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（ＴＨＦ中の１ｍ溶液、９．４３ｍｌ）をアルゴン雰囲気下でゆっくりと添加した。この混合物を室温で２ｈ攪拌し；次いで、氷浴中で冷却し、続いてエーテル中の４当量の６Ｎ
ＨＣｌを添加した。白色固体が迅速に沈殿し、そしてこれを１２ｈ後に濾過した。固体をエタノール−エーテルから再結晶して１．１９ｇの化合物６９ａ（９３％）を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．８７（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、３．２２（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2Ｎ）、４．４０（ｓ、４Ｈ、ベンジルのＣＨ2）、７．７４（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）、７．９１（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ  ２２．６８、４６．０９、４９．２８、１２８．１０、１２８．４７、１３０．６９、１３８．１５、１６５．４４。ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３５３．２（Ｍ+）、１７７．２（１００％）。
【０１６１】
化合物６９ｂを、６９ａについて上記の通りに６８ｂから９２％の収率で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．５２（ｍ、２Ｈ、ＣＨ2）、１．８０（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、３．１９（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、４．４０（ｓ、４Ｈ、ベンジルのＣＨ2）、７．７５（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）、７．９１（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ  ２４．９０、２６．９１、４８．９６、５１．８８、１３０．２９、１３０．４６、１３２．４３、１３９．５１、１６７．５２。ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３６７．２（Ｍ+）、３５０．２（１００％）、３０１．２。
【０１６２】
化合物６９ｃを、６９ａについて上記の通りに６８ｃから９６％の収率で調製した。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．４６（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、１．７８（ｍ、４Ｈ、ＣＨ2）、３．１６（ｍ、４Ｈ、ＮＣＨ2）、４．３９（ｓ、４Ｈ、ベンジルのＣＨ2）、７．７４（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）、７．９１（ｍ、４Ｈ、Ｐｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ  ２５．２４、２５．８２、４６．７３、４９．４４、１２８．３５、１２８．５６、１３０．８１、１３８．３８、１６５．５８。ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３８１．２（Ｍ+）、１９１．２（１００％）、１５０、１１６。
【０１６３】
化合物７０：トリアミド１８（４．３ｇ、５．８ｍｍｏｌ）を３０ｍｌのＤＭＦに溶解し、そして８０％  ＮａＨ（２０８ｍｇ、６．９ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物をＮ2雰囲気下で１ｈ攪拌し、そして３ｍｌのＤＭＦ中に溶解した１．１２ｇ（７．５ｍｍｏｌ）のブロモブチロニトリルを全て１回で添加した。この反応混合物を９０℃で３ｈ加熱した。溶媒を蒸留除去し、そして残渣をクロロホルムに溶解し、そして塩化アンモニウムの飽和溶液で２回洗浄し；乾燥し（ＮａＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固した。ヘキサン−酢酸エチル（６：４）を溶離液として用いた、残渣のフラッシュクロマトグラフィーによって、黄色オイル７０（３．７ｇ、７７％）が得られた。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｔ、３Ｈ）、１．３５（ｍ、８Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）、２．２０（ｔ、２Ｈ）、２．３０（ｓ、９Ｈ）、２．５５（ｓ、１８Ｈ）、３．１０（ｍ、１０Ｈ）、３．２５（ｔ、２Ｈ）、６．９５（ｓ、６Ｈ）。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）８２３（Ｍ+＋Ｎａ）、６３９、４５７。
【０１６４】
化合物７１：ニトリル７０（３．７ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を、２０ｍｌのクロロホルムに溶解し、そして１５０ｍｌのエタノールを添加した。この混合物を０．３５ｇのＰｔＯ2で５０ｐｓｉで一晩還元した。触媒を濾別し、そして溶媒をエバポレートして乾固した。オイル状の残渣を減圧下で２ｈ乾燥し、そして５０ｍｌのＣｌ3ＣＨおよび１２ｍｌの２Ｎ  ＮａＯＨに溶解した。この混合物を、効率的に磁気攪拌しながら氷水浴中で冷却し、そして１．５０ｇ（６．９ｍｍｏｌ）の１０ｍｌのクロロホルム中に溶解したメシチレンクロリドを１度に全て添加した。２ｈ時間後、有機層を分離し、塩化アンモニウムの飽和溶液で２回洗浄し、乾燥し（ＮａＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固した。ヘキサン−酢酸エチル（７：３）を溶離液として用いた、残渣のフラッシュクロマトグラフィーによって、テトラミド７１を無色のオイル（３．３ｇ、２つの工程全体で７３％）として得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｔ、３Ｈ）、１．４０（ｍ、１２Ｈ）、２．３０（ｓ、１２Ｈ）、２．６０（ｓ、２４Ｈ）、２．８０（ｂ、２Ｈ）、３．１０（ｍ、１２Ｈ）、４．７０（ｂ、１Ｈ）、６．９０（ｓ、８Ｈ）。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１０１０（Ｍ+＋１＋Ｎａ）、８２６、６４３。
【０１６５】
化合物７２：テトラミド７１（６．２８ｇ、６．３ｍｍｏｌ）を４０ｍｌのＤＭＦに溶解し、そして８０％  ＮａＨ（２３０ｍｇ、７．６ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物をＮ2雰囲気で１ｈ攪拌し、そして３ｍｌのＤＭＦ中に溶解した１．３０ｇ（８．８ｍｍｏｌ）のブロモブチロニトリルを１度に全て添加した。この反応混合物を９０℃に３ｈ加熱し、溶媒を蒸留除去し、そして残渣をクロロホルム中に抽出し、そして塩化アンモニウムの飽和溶液で２回洗浄し；乾燥し（ＮａＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固した。ヘキサン−酢酸エチル（７：３）を溶離液として用いた、残渣のフラッシュクロマトグラフィーによって、ニトリル７２（５．０ｇ、７４％）を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｔ、３Ｈ）、１．３５（ｍ、１２Ｈ）、１．８０（ｍ、２Ｈ）、２．２５（ｔ、２Ｈ）、２．３５（ｓ、１２Ｈ）、２．７０（ｓ、２４Ｈ）、３．１０（ｍ、１４Ｈ）、３．２５（ｔ、２Ｈ）、７．０（ｓ、８Ｈ）。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１０７７（Ｍ+＋１＋Ｎａ）、８９３、７１１、５８６。
【０１６６】
化合物７３：ニトリル７２（６．０ｇ、５．６ｍｍｏｌ）を２０ｍｌのクロロホルムに溶解し、そして１５０ｍｌのエタノールを添加した。この混合物を６００ｍｇのＰｔＯ2で５０ｐｓｉで一晩還元した。触媒を濾別し、そして溶媒をエバポレートして乾固した。オイル状残渣を減圧下で２ｈ乾燥し、そして１００ｍｌのクロロホルムおよび１５ｍｌの２Ｎ  ＮａＯＨに溶解した。この混合物を効率的に磁気攪拌をしながら氷水浴中で冷却し、そして１０ｍｌのＣｌ3ＣＨ中に溶解した１．８０ｇ（８．４ｍｍｏｌ）のメシチレンクロリドを１度に全て添加した。２ｈ後、有機層を分離し、塩化アンモニウムの飽和溶液で２回洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固した。ヘキサン−酢酸エチル（７：３）を溶離液として用いた、残渣のフラッシュクロマトグラフィーによって、ペンタミド７３が無色のオイル（５．０ｇ、２つの工程全体で７１％）として得られた。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｔ、３Ｈ）、１．３５（ｍ、１６Ｈ）、２．３０（ｓ、１５Ｈ）、２．５５（ｓ、３０Ｈ）、２．７５（ｂｓ、２Ｈ）、３．０５（ｍ、１６Ｈ）、４．７０（ｂ、１Ｈ）、６．９０（ｓ、１０Ｈ）。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１２６１（Ｍ+−１＋Ｎａ）、１０７７、８９５。
【０１６７】
化合物７４：ペンタミド７３（３．４ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を３０ｍｌのＤＭＦに溶解し、そして６０％  ＮａＨ（１６２ｍｇ、４．０５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物をＮ2雰囲気下で０．５ｈ攪拌し、そして３ｍｌのＤＭＦに溶解した２．３ｇ（１０．８ｍｍｏｌ）の２−ブロモエタノールベンジルエーテルを一度に全て添加した。この反応混合物を８０℃で２ｈ加熱し、溶媒を蒸留濾過し、そして残渣をクロロホルムに溶解し、そして塩化アンモニウムの飽和溶液で２回洗浄し、乾燥し（ＮａＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固した。ヘキサン−酢酸エチル（７：３）を溶離液として用いた、残渣のフラッシュクロマトグラフィーによって、生成物７４（２．６ｇ、７０％）を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｔ、３Ｈ）、１．３０（ｍ、１６Ｈ）、２．３０（ｓ、１５Ｈ）、２．５０（ｓ、３０Ｈ）、２．９０−３．２０（ｍ、１８Ｈ）、３．２５（ｔ、２Ｈ）、２．３５（ｔ、２Ｈ）、４．３５（ｓ、２Ｈ）、６．９５（ｓ、１０Ｈ）、７．２０−７．３５（ｍ、５Ｈ）。13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  １２．６５、２０．８４、２２．６７、２２．７１、２４．４１、２４．６６、３９．９７、４４．４８、４４．８８、４６．５９、６８．０１、７２．９５、１２７．４６、１２７．５７、１２８．２５、１３１．８３、１３１．８９、１３３．２８、１３９．８８、１３９．９５、１４０．０４、１４２．１６、１４２．２３。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）１３９４（Ｍ+−２＋Ｎａ）１０３０。
【０１６８】
化合物７５：ペンタミド７４（１．２ｇ、０．８７ｍｍｏｌ）を１２ｍｌの塩化メチレンに溶解し、続いて３０％  ＨＢｒ／酢酸（１６ｍｌ）およびフェノール（３．０ｇ、３２ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で一晩攪拌し、水（１６ｍｌ）を添加し、続いて塩化メチレン（３×１０ｍｌ）で抽出した。水層を減圧下でエバポレートした。残渣を２Ｎ  ＮａＯＨ（４ｍｌ）および５０％  ＫＯＨ（４ｍｌ）に溶解し、続いてクロロホルム（４×１０ｍｌ）で抽出した。溶媒の除去後、残渣をエタノール（２０ｍｌ）に溶解し、そして濃塩酸（０．５ｍｌ）で酸性化した。白色沈殿物（７５）を水性エタノール（４４０ｍｇ、９０％）から再結晶させた；ｍｐ  ２７０℃より上（ｄｅｃｏｍｐ）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３０（ｔ、３Ｈ）、１．７５（ｂ、１６Ｈ）、２．９０−３．３０（ｍ、２０Ｈ）、２．８５（ｔ、２Ｈ）。13Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ
１３．２９、２５．４８、２５．５９、４５．７０、４９．０４、４９．４９、４９．６７、５１．８８、５９．３９。ＭＳ−ＭＡＬＤＩ（ｍ／ｚ）３７４（Ｍ+＋１）。
【０１６９】
化合物７６：ペンタミド７３（８５０ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５ｍｌ）中に溶解し、そして８０％  ＮａＨ（３０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物をＮ2雰囲気下で室温で０．５ｈ攪拌し、そして５ｍｌのＤＭＦ中に溶解した１３７ｍｇ（０．３０ｍｍｏｌ）の７３をゆっくりと添加した。この反応混合物を８０℃で２ｈ加熱し、溶媒を蒸留除去し、そして残渣をクロロホルムに溶解し、そして塩化アンモニウムの飽和溶液で２回洗浄し、乾燥し（ＮａＳＯ4）、そしてエバポレートして乾固した。ヘキサン−酢酸エチル−メタノール（６：４：０．１）を溶離液として用いた残渣のフラッシュクロマトグラフィーによって、生成物７６（５９０ｍｇ、７７％）を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｔ、６Ｈ）、１．１５−１．４０（ｍ、３２Ｈ）、２．３０（ｓ、３０Ｈ）、２．５５（ｓ、６０Ｈ）、２．９０−３．２５（ｍ、３６Ｈ）、３．６０（ｄ、４Ｈ）、５．４０（ｔ、２Ｈ）、６．９５（ｓ、２０Ｈ）。ＭＳ−ＦＡＢ  ２５５３（Ｍ+＋Ｎａ）。
【０１７０】
化合物７７を、化合物７５について記載した手順に従って得た。６５０ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）のデカミド７６から、２２５ｍｇ（８１％）のデカヒドロクロリド７７を得た；ｍｐ＞２７０℃（ｄｅｃｏｍｐ）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３０（ｔ、６Ｈ）、１．７５（ｂ、３２Ｈ）、３．１０（ｂ、３６Ｈ）、３．７５（ｂ、４Ｈ）、６．０５（ｂ、２Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．２８、２５．５７、４５．６６、４９．００、４９．１３、４９．６４、５０．８６、１３１．１５。ＭＳ−ＥＳＩ  ７１１（Ｍ+＋  １）。
【０１７１】
化合物７８を、化合物７６について記載した手順に従って得た。８５０ｍｇの７３から、３６０ｍｇ（４７％）のデカミド７８を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（ｔ、６Ｈ）、１．１５−１．４５（ｍ、３２Ｈ）、２．３０（ｓ、３０Ｈ）、２．５５（ｓ、６０Ｈ）、２．９０−３．２０（ｂ、３６Ｈ）、３．６５（ｄ、４Ｈ）、５．４０（ｔ、２Ｈ）、６．９０（ｓ、２０Ｈ）。ＭＳ−ＦＡＢ（ｍ／ｚ）２５５３（Ｍ+＋Ｎａ）。
【０１７２】
化合物７９を、化合物７５について記載した手順に従って得た。３３０ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）のデカミド７８から、１２７ｍｇ（９０％）のデカヒドロクロリド７９を得た；ｍｐ＞２７０℃（ｄｅｃｏｍｐ）。1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １．３０（ｔ、６Ｈ）、１．８０（ｂ、ｓ、３２Ｈ）、３．１０（ｂ、３６Ｈ）、３．８５（ｄ、４Ｈ）、６．０（ｔ、２Ｈ）。13Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）：δ  １３．３１、２５．５９、４５．７１、４６．８３、４９．０５、４９．３９、４９．６９、１２９．２１。ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）５１２（Ｍ+＋２）。
【０１７３】
化合物９６。ペンタミド７４（１．４ｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を１００ｍｌのエタノールに溶解し、そして２００ｍｇの１０％  Ｐｄ／Ｃを添加した。この混合物を５０ｐｓｉで４ｈ水素添加した。触媒を濾別し、そして溶媒をエバポレートして乾固した。酢酸エチル／ヘキサン  ６：４を展開溶媒として用いたシリカ−ゲルカラムクロマトグラフィーによって、１．０ｇ（８０％）の所望の生成物をオイルとして得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．９５（ｔ、３Ｈ）、１．３０（ｍ、１６Ｈ）、２．３０（ｓ、１５Ｈ）、２．５５（ｓ、３０Ｈ）、３．１０（ｍ、１８Ｈ）、３．２５（ｔ、２Ｈ）、３．６０（ｔ、２Ｈ）、６．９５、（ｓ、１０Ｈ）、13Ｃ  ＮＭＲ  δ：１２．６７、２０．８９、２２．７５、２４．５２、４０．０２、４４．５４、４４．９７、４６．８３、４８．２２、６０．２９、１３１．８８、１３２．７８、１３３．２８、１３９．９５、１４０．１１、１４２．３３。
【０１７４】
化合物９７。アルコール９６（４７０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌｅ）をテトラヒドロフラン（５ｍｌ）に溶解し、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ（９７ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌｅ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（８９ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌｅ）およびジメチルアミノピリジン（５ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌｅ）を添加した。この反応混合物を室温で一晩攪拌した。シクロヘキシルウレアを濾別し、そして濾液をエバポレートして乾固した。残渣をクロロホルムに溶解し、２Ｎ  ＨＣｌで２回、水で１回およびＮａＨＣＯ3の飽和溶液で２回洗浄し、次いで乾燥し、そしてエバポレートした。この生成物を、メタノール／クロロホルム  ２％を展開溶媒として用いたシリカ−ゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。アミノ酸−ポリアミン結合体は２５０ｍｇ（４５％）の重さであった。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．９５（ｔ、３Ｈ）、１．３０（ｍ、１８Ｈ）、１．４５（ｓ、９Ｈ）、１．９０−２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．３５（ｓ、１５Ｈ）、２．６０（ｓ、３０Ｈ）２．９０−３．２５（ｍ、１８Ｈ）、３．４５（ｍ、２Ｈ）、４．１０−４．３５（ｍ、３Ｈ）、６．９５（ｓ、１０Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１２．５７、２０．７８、２２．６３、２４．６３、２８．１９、３１．４８、３９．９２、４４．０４、４４．４３、４４．８２、４５．９２、５３．０６、６１．９６、７９．８０、１３１．９９，１３３．３３、１３９．８０、１４２．１２、１５６．４０、１７１．７０、１７４．２５。
【０１７５】
化合物９８。アミノ酸−ポリアミン結合体９７（１７０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌｅ）を、塩化メチレン（５ｍｌ）中のトリフルオロ酢酸（１．２５ｍｌ）で３０分間処理した。溶媒を室温でエバポレートし、残渣をクロロホルムに溶解し、そしてＮａＨＣＯ3の飽和溶液で洗浄し、次いで乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。減圧下で乾燥した後、残渣は１５８ｍｇ（１００％）の重さであり、そしてこれを次の工程でさらなる精製を伴わずに用いた。
【０１７６】
脱保護したアミノ酸−ポリアミン結合体（１５８ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌｅ）をテトラヒドロフラン（５ｍｌ）に溶解し、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ（３０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌｅ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（２７ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌｅ）およびジメチルアミノピリジン（１６ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌｅ）を添加した。この反応混合物を室温で一晩攪拌した。シクロヘキシルウレアを濾別し、そして濾液をエバポレートして乾固した。残渣をクロロホルムに溶解し、２Ｎ  ＨＣｌで２回、水で１回およびＮａＨＣＯ3の飽和溶液で２回洗浄し、乾燥し、そしてエバポレートした。ジペプチド−ポリアミン結合体を、メタノール／クロロホルム４％を展開溶媒として用いたシリカ−ゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して１３０ｍｇ（７０％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．９５（ｍ、９Ｈ）、１．３０（ｍ、１６Ｈ）、１．４５（ｓ、９Ｈ）、１．５０−２．０５（ｍ、３Ｈ）、２．３０（ｓ、１９Ｈ）、２．６０（ｓ、３０Ｈ）、３．５０（ｍ、２Ｈ）３．９０−４．３０（ｍ、３Ｈ）、４．５０（ｍ、１Ｈ）、６．９５（ｓ、１０Ｈ）。
【０１７７】
化合物９９を、化合物２１について記載された手順に従って得た。１００ｍｇ（０．０６１ｍｍｏｌ）のジペプチド−ポリアミン結合体９８から、２６ｍｇ（５０％）のヘキサクロリド９９を得た；ｍｐ＞２７０℃（ｄｅｃｏｍｐ）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．９５（ｍ、６Ｈ）、１．３０（ｔ、３Ｈ）、１．４０−１．９０（ｍ、２０Ｈ）、１．９０−２．５０（ｍ、３Ｈ）、３．０−３．３０（ｍ、２０Ｈ）、３．４０−４．２０（ｍ、４Ｈ）。ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６１５（Ｍ+＋１）、６５１（Ｍ+＋１＋ＨＣｌ）、６８７（Ｍ+＋１＋２ＨＣｌ）。
【０１７８】
（実施例２：新規なキノン誘導体の合成）
（キノン化合物の合成による調製）
本発明のキノンの調製を以下に記載し、そして図面に図示する。
【０１７９】
新たな化学を、１，２−ナフトキノン部分がＤＮＡ小溝結合単位（ＤＮＡ  ｍｉｎｏｒ  ｇｒｏｏｖｅ  ｂｉｎｄｅｒ  ｕｎｉｔ）またはＤＮＡインターカレーターに結合している薬物を構築するために開発した。本発明を任意の特定の作動理論に限定することを望まないが、１，２−ナフトキノン誘導体はトポイソメラーゼＩＩを「汚染」し、そしてこの必須のＤＮＡ複製酵素を、ＤＮＡを切断するヌクレアーゼ型酵素へと変換すると考えられる。１，２−ナフトキノンによる、トポイソメラーゼＩＩのこの改変が、キノンによるこの酵素のチオール残基のアルキル化（Ｍｉｃｈａｅｌ付加）に起因する可能性が非常に高いと仮定される。
【０１８０】
スキーム５０１は、１，２−ナフトキノン中間体をもたらす誘導体化反応を概説する。２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンの銀塩を５−ブロモ−ペンタン酸のｔｅｒｔ−ブチルまたはベンジルエステルでアルキル化して５０１または５０２のいずれかを得た。ベンジルエステル５０２を、水素添加によって酸５０３へと変換した。この銀塩をまた、６−ブロモヘキサノールでアルキル化して５０４を得たか、または１，６−ジヨードヘキサンでアルキル化して５０５を得た。トリホスゲン（ｔｒｉｐｈｏｓｇｅｎｅ）でアルコール５０４を処理して、５０６を得た（スキーム５０２）。酸５０３は、ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム（ｕｒｏｎｉｕｍ）ヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）およびジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）の存在下での３−アミノ−１−メチル−５−メチルオキシカルボニルピロール（ＢａｉｒｄおよびＤｅｒｖａｎ（１９９６）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１８：６１４１）との反応によって誘導体化されて、アミド５０７が得られ得る。２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンの銀塩とピバリルクロリド（ｐｉｖａｌｙｌ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）との反応によって５０８を得た（スキーム５０２）。酸５０３を、ＴＦＡによる、保護しているｔ−ブチル基の切断後にポリピロールアミド５０９（ＢａｉｒｄおよびＤｅｒｖａｎ（１９９６）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１８：６１４１）と縮合させた。得られた生成物５１０は、１，２−ナフトキノン部分がＤＮＡの小溝結合体に共有結合している分子である（スキーム５０３）。アルコール５０４を、４−ヒドロキシ−ベンゾニトリルによるＭｉｔｓｏｎｏｂｕ反応（トリフェニルホスフィン、ジエチルアセチレンジカルボキシレート）を用いて縮合して５１１を得た。ヨウ化物５０５をフェノールのテトラブチルアンモニウム塩と反応させて５１２を得た。酸５０３を、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を用いて３−ジメチルアミノフェノールでエステル化し、そして５１３を得た。５０５とＨｏｅｃｈｓｔ  ３３５２８のテトラブチルアンモニウム塩との反応によって、キノンがＤＮＡの小溝結合体に共有結合している５１４を得ることが可能であった。ＤＣＣおよびＤＭＡＰの存在下での６−アミノヘキサン酸（そのＢＯＣ誘導体として用いられ、そしてＴＦＡを用いて脱保護される）を用いた５０４のエステル化によって、５１５をそのトリフルオロアセテートとして得ることが可能であった（スキーム５０４）。酸５０３とＮ−エチルジアミド５１６との縮合によって、ポリアミドキノン５１７を調製した（スキーム５０４）。
【０１８１】
新たなクラスの４−アミノアルキル置換１，２−ナフトキノンを、スキーム５０５に示した概要に従って得た。１，２−ジメトキシナフタレンでのＶｉｌｓｍｅｉｅｒ反応によって、ホルミル誘導体５１８を得た。これは、ｎ−ブチルアミンでの還元的アミノ化によって５１９へと変換された。塩化アセチルでの５１９の処理によって５２０を得て、一方、トリフルオロ酢酸無水物での処理によって５２１を得た（スキーム５０５）。モルホリノスクシニルクロリドでの５１９のアシル化によって５２２を得た。三臭化ホウ素での５１９の１，２−ジメトキシ基の切断によってキノン５２３を得て、５２３は、ｐ−キノンメチンの形態で存在することが見出された。５２０および５２１のジメトキシ残基の切断によって、予測されたキノン５２４および５２５をもたらした。５２２のメトキシ残基の切断によって、キノン５２６を得た（スキーム５０５）。
【０１８２】
１，２−ナフトキノン残基をまた、ポルフィリン骨格に共有結合させた。なぜなら、ポルフィリンは癌組織に濃縮することが公知だからである。ヨウ化物５０５とメソ−ｐ−ヒドロキシフェニルポルフィリンのテトラブチルアンモニウム塩との反応によって、このポルフィリンキノン５２７を得た（スキーム５０６）。
【０１８３】
ＥＤＣＩ（１，（３−ジメチルアミノエチル）−３−エチルカルボジイミド）およびＤＭＡＰの存在下での、キノンアルコール５０４での４，４’，４”，４’’’−（２１Ｈ、２３Ｈ−ポルフィン−５，１０，１５，２０−テトライル）テトラキス（安息香酸）のエステル化によってキノン−ポルフィリン５２８を調製することが可能であった（スキーム５０７）。
【０１８４】
（ＤＮＡインターカレーターに結合した１，２−ナフトキノンの合成）
４−アミノアクリジン誘導体が、ＤＮＡヘリックスにおいてインターカレートすることが公知である。それゆえ、４−アミノアクリジン誘導体に結合した１，２−ナフトキノン残基の合成を設計した（スキーム５０８）。塩（６−ヒドロキシヘキシル）トリフェニルホスホニウムブロミドを、還流アセトニトリル中での６−ブロモヘキサノールとトリフェニルホスフィンとの反応によって調製した。（６−ヒドロキシヘキシル）トリフェニルホスホニウムブロミドと４−アセトアミドベンズアルデヒドとのＷｉｔｔｉｇ反応によって、アルケン５２９がＥ異性体とＺ異性体との混合物として産生された。二重結合（Ｈ2、Ｐｄ／Ｃ）の還元および酸性加水分解（２Ｎ  ＨＣｌ、ＭｅＯＨ）によって、４−（７−ヒドロキシヘプチル）−アニリン５３０を得た。アニリン５３０を、トリエチルアミンの存在下でＭｅＯＨ中で９−クロロアクリジンと反応させて、アルコール５３１を得た。アルコール５３１を、ピリジン中でのメタンスルホニルクロリドでの反応、続いてアセトン中でのヨウ化ナトリウムとの反応によってヨウ化物５３２に変換した。ヨウ化物５３２と２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンの銀塩との反応によって、キノン５３３をｏ−キノン異性体とｐ−キノン異性体との混合物として得た。ｏ−キノン異性体およびｐ−キノン異性体は、カラムクロマトグラフィーによって分離および精製され得る。
【０１８５】
これらの型の化合物に対する第２のアプローチを、スキーム５０９に示す。異性体混合物５３４を、ピリジンの存在下でのＣＨ2Ｃｌ2中のメタンスルホニルクロリドとの反応、続いてアセトン中でのヨウ化ナトリウムでの置換によってヨウ化物５３５へと変換した。５３５と還流アセトニトリル中のトリフェニルホスフィンとの反応によって、ホスホニウム塩を得た。ホスホニウム塩とナフトアルデヒド５１８との間のＷｉｔｔｉｇ反応によって、ジエン５３６を（二重結合異性体の混合物として）得た。Ｐｄ／ＣでのＨ2での還元、続いて加水分解（２Ｎ  ＨＣｌ、ＭｅＯＨ）によってアニリン５３７を得た。アニリン５３７をトリエチルアミンの存在下でＭｅＯＨ中の９−クロロアクリジンと反応させて５３８を得た。三臭化ホウ素でのメチルエーテルの切断によって、キノン５３９を得た。
【０１８６】
アミノアクリジンインターカレーターに結合した１，２−ナフトキノン部分に対する第３の合成アプローチをスキーム５１０に示す。アミノアクリジンをメシチレンスルホニルクロリドで保護して５４１を得て、次いで５４１を１，５−ジブロモペンタンでアルキル化して５４２を得た。後者を２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンの銀塩と反応させ、そしてキノンアクリジン５４３をこのようにして得た。ヨウ化サマリウムを用いたアミド基の切断によって、予測された化合物である５４４を得た。
【０１８７】
（１，２−ナフトキノールホスフェートの合成）
「プロドラッグ」として挙動する１，２−ナフトキノン誘導体を得るために、細胞のホスファターゼによって加水分解されて親キノンを遊離し得るキノールホスフェートの合成を行った。スキーム５１１は、キノールホスフェートの合成を概説する。親１，２−ナフトキノン５４６を、ジベンジルホスファイトと反応させて、２つの可能な位置異性体５４７の混合物を得た。活性炭上の１０％  Ｐｄの存在下での水素でのベンジル残基の切断によって、２つの可能なキノールホスフェート５４８の混合物が得られた。これらを、生物学的研究においてのように用いた。
【０１８８】
（８−ヒドロキシ−β−ラパコン５５５の合成）
スキーム５１２は、５５５の合成を概説する。５５５は、β−ラパコンのペプチド誘導体の構築のための構築ブロックとして用いられ得る、β−ラパコンのフェノール誘導体である。合成を市販のエステル５４９で始め、５４９をＦｒｉｅｄｅｌ−Ｃｒａｆｔｓ反応を用いてアセチル化して５５０を得る。塩基および空気の存在下での５５０の環化によってｐ−キノン５５１を得た。ジメチルアリルブロミドでの５５１のアルキル化によって、Ｃ−アルキル誘導体５５２とＯ−アルキル誘導体５５３との混合物を得た。これらを分離し、そして濃硫酸での５５２の処理によって、８−メトキシ−β−ラパコン５５４を得た。三臭化ホウ素でのメトキシ基の切断によって、予測されたσ−ナフトキノン５５５を得た。
【０１８９】
（１，２−ナフトキノン亜硫酸水素塩付加物の合成）
１，２−ナフトキノンの亜硫酸水素塩付加物を「プロドラッグ」として調製した。これらは、７未満のｐＨの水溶液中で安定であるが、７を超えたｐＨではキノンコアを遊離させる。生物学的媒体は通常ｐＨ７を超えるので、亜硫酸水素塩付加物は、水性媒体中での投与後にキノンの徐放をもたらす。一般的調製手順を実験の節に示す。
【０１９０】
（１，２−ナフトキノンペプチドの合成）
テトラペプチドおよびヘキサペプチドの１，２−ナフトキノン結合体を調製さして、前立腺ＰＳＡによって切断され得る「プロドラッグ」誘導体を得た。ペプチドの合成についての以下のガイドラインは、Ｉｓａａｃｓおよび協同実験者（Ｄｅｎｍｅａｄｅら、Ｃｅｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９７、５７、４９２４）の公開された結果に基づく。ここで、これらはＰＳＡ（前立腺特異抗原）の基質特異性を規定する。キノンテトラペプチドの合成を、３−β−アラニルオキシ−ｐ−ラパコン（ＳＬ−１１００６）結合体についてスキーム５１３に概説する。ＳＬ−１１００６（Ｑｕｉｎ）を、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下でＤＣＣでＢｏｃ−Ｇｌｎへとカップリングして、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎを得た。ＣＨ2Ｃｌ2中のＴＦＡを用いた、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−ＱｕｉｎからのＢｏｃ基の除去によって、ＴＦＡ・Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎを得た。１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下でＤＣＣを用いてＢｏｃ−ＬｅｕをＴＦＡ・Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎに対してカップリングして、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎを得た。ＣＨ2Ｃｌ2中のＴＦＡを用いてＢｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−ＱｕｉｎからＢｏｃ基を除去することによって、ＴＦＡ・Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎを得た。Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）を、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下でＤＣＣを用いてＴＦＡ・Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎへとカップリングして、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｌ−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎを得た。ＣＨＣｌ3中のＴＦＡを用いたＢｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−ＱｕｉｎからのＢｏｃ基の除去によってＴＦＡ・Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎを得た。モルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）を、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下でＤＣＣを用いてＴＦＡ−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎに対してカップリングして、モルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎを得た。側鎖保護基を水素化分解によって除去して、モルホリノ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｑｕｉｎを得た。水素添加の間、キノンをヒドロキノンへと還元し、これは空気への曝露によってキノンへと再酸化される。
【０１９１】
モルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）を、Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）から調製した。触媒量のＨ2ＳＯ4の存在下で、イソブチレンでのＮ−Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）のエステル化によってＮ−Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−ＯｔＢｕを得た。Ｆｍｏｃ基をＣＨ2Ｃｌ2中でピペリジンを用いて除去して、Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−ＯｔＢｕを産生した。ピリジンにおけるＳｅｒ（ＯＢｎ）−ＯｔＢｕと４−モルホリンカルボニルクロリドとの反応によって、モルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−ＯｔＢｕを得た。モルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−ＯｔＢｕをＣＨ2Ｃｌ2中のＴＦＡを用いて加水分解して、モルホリン−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）を得た。
【０１９２】
３−ロイシルオキシ−ｐ−ラパコンのテトラペプチド結合体の合成を、スキーム５１４に概説する。
【０１９３】
（実験）
ｔｅｒｔ−ブチルδ−［（１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフト−４−イル）オキシ］バレレート（５０１）。ベンゼン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−ブロモバレレート（１ｇ、４．２ｍｍｏｌ）と２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンの銀塩（０．８ｇ、３．８４ｍｍｏｌ）との混合物を、５０℃で２４ｈ攪拌した。この反応混合物をセライトを通して濾過し、次いで溶媒を減圧下で除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（クロロホルム中５％メタノール）によって精製して黄色固体（３８４ｍｇ、３０％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１２（ｄ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８９（ｄ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｔ、Ｊ＝６．１  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｔ、Ｊ＝６．４  Ｈｚ、１Ｈ）、５．９５（ｓ、１Ｈ）、４．１７（ｔ、Ｊ＝５．９  Ｈｚ、２Ｈ）、２．３５（ｔ、Ｊ＝７．２  Ｈｚ、２Ｈ）、１．９０−２．０５（ｍ、２Ｈ）、１．７８−１．９０（ｍ、２Ｈ）、１．４７（ｓ、９Ｈ）。
【０１９４】
ベンジル５−［（１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフト−４−イル）オキシ］バレレート（５０２）。ベンゼン（８ｍＬ）中のベンジル５−ブロモバレレート（２．２７ｇ、８．４ｍｍｏｌ）と２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンの銀塩（１．６３ｇ、５．８１ｍｍｏｌ）との混合物を５５℃で４８ｈ攪拌し、そしてセライトを通して濾過した。濾液をジエチルエーテルで希釈し、ＮａＨＳＯ3の２０％水溶液で抽出し、次いでＮａ2ＣＯ3でｐＨ１０〜１１に塩基性化し、そしてＣＨ2Ｃｌ2で抽出した。黄色固体（１．３３４ｇ、６３％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１２（ｄ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６８（ｔ、Ｊ＝７．５、１Ｈ）、７．５８（ｔ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１Ｈ）、７．２５−７．５０（ｍ、５Ｈ）、５．９３（ｓ、１Ｈ）、５．１４（ｓ、２Ｈ）、４．１５（ｔ、Ｊ＝５．７  Ｈｚ、２Ｈ）、２．５０（ｔ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ、２Ｈ）、１．８−２．２（ｍ、４Ｈ）。
【０１９５】
５−［（１，２−ジオキソ−１，２−ジヒドロナフト−４−イル）オキシ］吉草酸（５０３）。ベンジルエステル５０２（１．９０ｇ、５．２２ｍｍｏｌ）を、酢酸エチル（１２０ｍＬ）中のＰｄ（４００ｍｇ）で３０ｐｓｉで６ｈ水素添加した。触媒をセライトを通した濾過によって除去し、溶媒を減圧下でエバポレートし、そして残渣をＥｔ2Ｏ中のＡｇ2Ｏ（１．４５ｇ、６．２５ｍｍｏｌ）で１０ｈ攪拌して酸化した。濾過および溶媒のエバポレーション後、生成物をベンゼンから結晶化して０．５３ｇの純粋な物質を得た。母液をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ  １５：１）によって精製し、生成物をＣＨ2Ｃｌ2中に溶解し、ＮａＨＣＯ3水溶液で抽出し、３％  ＨＣｌでｐＨ１に酸性化し、そしてＣＨ2Ｃｌ2で抽出し戻してさらに０．２５ｇの純粋な物質を得た（総収率５５％）、ｍｐ  １３４−１３６℃；1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１２（ｄ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８７（ｄ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｔ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｔ、Ｊ＝７．４  Ｈｚ、１Ｈ）、７．２７（ｓ、１Ｈ）、４．１８（ｔ、Ｊ＝５．９  Ｈｚ、２Ｈ）、２．５１（ｔ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ、２Ｈ）、１．７５−２．１５（ｍ、４Ｈ）。
【０１９６】
１，２−ジヒドロ−４−（６−ヒドロキシヘキシルオキシ）−１，２−ジオキソ−ナフタレン（５０４）。ベンゼン（２４ｍＬ）中の６−ブロモヘキサノール−１（４．５ｇ、２４．８５ｍｍｏｌ）と２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンの銀塩（６．４６ｇ、２３．０１ｍｍｏｌ）との混合物を６０℃で４８ｈ攪拌した。この反応混合物を５０２について記載されるようにして作製し、そしてヘキサンから結晶化させて黄色固体（３．１８ｇ、５０％）を得た。ｍｐ  ９６−９８℃、1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１２（ｄ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８７（ｄ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｔ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｔ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、５．９５（ｓ、１Ｈ）、４．１５（ｔ、Ｊ＝６．３  Ｈｚ、２Ｈ）、３．６９（ｔ、Ｊ＝６．２  Ｈｚ、２Ｈ）、１．９２−１．９７（ｍ、２Ｈ）、１．３−１．８（ｍ、７Ｈ）。
【０１９７】
１，２−ジヒドロ−４−（６−ヨードヘキシルオキシ）−１，２−ジオキソナフタレン（５０５）。ベンゼン（６０ｍＬ）中の１，６−ジヨードヘキサン（１０．１４ｇ、３０ｍｍｏｌ）と２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンの銀塩（２．８１ｇ、１０ｍｍｏｌ）との混合物を室温で１２ｈ攪拌した。この反応混合物をセライトを通して濾過し、減圧下で濃縮し、そしてフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ４：１）によって精製して黄色固体（２，１９ｇ、５７％）を得た；ｍｐ  ８５−８７℃；1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１２（ｄｄ、Ｊ＝６．５、１．０  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８６（ｄｄ、Ｊ＝６．９、０．９  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｄｔ、Ｊ＝７．６、１．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｄｔ、Ｊ＝７．５、１．３  Ｈｚ、１Ｈ）、５．９５（ｓ、１Ｈ）、４．１５（ｔ、Ｊ＝６．３、２Ｈ）、３．２２（ｔ、Ｊ＝６．９  Ｈｚ、２Ｈ）、１．８０−２．０５（ｍ、４Ｈ）、１．４５−２．１０（ｍ、４Ｈ）。
【０１９８】
ビス［６−［（１，２−ジヒドロ−１、２−ジオキソナフト−４−イル）オキシ］ヘキシル］カルボネート（５０６）。ピリジン（０．１２ｍｌ、１．５ｍｍｏｌ）を、０℃の、ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のアルコール５０４（２００ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）およびビス（トリクロロメチル）カルボネート（４０ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に添加した。冷却浴を除去し、この反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、３％  ＨＣｌ、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／ＥｔＯＡｃ  ４：１、２：１）によって精製した。この生成物をＥｔ2Ｏで粉砕して黄色固体（１２７ｍｇ、３０％）、ｍｐ  ７８−８２℃（ｄｅｃｏｍｐ．）を得た。ＭＳ（ＬＳＩＭＳ、３−ＮＢＡ）５７６（Ｍ+＋２）、４０１、１７５；1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．０９（ｄｄ、Ｊ＝６．０、１．６  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８５（ｄｄ、Ｊ＝７．８、１．２  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７１（ｔ、Ｊ＝６．９  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｔ、Ｊ＝６．２  Ｈｚ、１Ｈ）、５．９４（ｓ、１Ｈ）、４．１７（ｔ、Ｊ＝６．０  Ｈｚ、２Ｈ）、４．１５（ｔ、Ｊ＝５．６  Ｈｚ、２Ｈ）、１．８５−２．１０（ｍ、２Ｈ）、１．６５−１．８５（ｍ、２Ｈ）、１．４０−１．６５（ｍ、４Ｈ）。
【０１９９】
Ｎ−（１−メチル−５−メチルオキシカルボニルピロール−３−イル）−５−［（１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフト−４−イル）オキシ］バレルアミド（５０７）。ＤＭＦ（１．６７ｍＬ）中の酸５０３（３３４ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）の溶液をＨＢＴＵ（４６２ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）で、続いてＤＩＥＡ（４５２ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）で処理し、そして５分間攪拌した。３−アミノ−１−メチル−５−メチルオキシカルボニルピロールヒドロクロリド（２３２ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３７８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）をこの反応混合物に添加した。後者を２ｈ攪拌し、Ｅｔ2Ｏで希釈し、沈殿物を取り出し、ＣＨＣｌ3中に溶解し、３％  ＨＣｌ、Ｈ2Ｏ、水性ＮａＨＣＯ3、再度Ｈ2Ｏで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、そしてアルミナカラムでのクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ  ８０：１、５０：１）によって精製した。この生成物をＥｔ2Ｏ／ＣＨＣｌ3で粉砕して黄−赤固体（２００ｍｇ、４０％）を得た；ｍｐ  １２２−１２３℃（ｄｅｃｏｍｐ．）：ＭＳ（ＬＳＩＭＳ、３−ＮＢＡ）４１０（Ｍ+）、２３７（Ｍ+−１７３）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．０８（ｄ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８６（ｄ、Ｊ＝７．３  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６８（ｔ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５７（ｔ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝１．８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．３４（ｓ、１Ｈ）、６．６５（ｄ、Ｊ＝２  Ｈｚ、１Ｈ）、５．９５（ｓ、１Ｈ）、４．１９（ｔ、Ｊ＝５．５３  Ｈｚ、２Ｈ）、３．８８（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、２．４６（ｔ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ、２Ｈ）、１．９０−２．１５（ｍ、４Ｈ）。
【０２００】
４−（ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルオキシ）−１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフタレン（５０８）。ベンゼン（５ｍＬ）中の２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンの銀塩（８４２ｍｇ、３ｍｍｏｌ）とピバロイルクロリド（４３４ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）との混合物を室温で８ｈ攪拌した。反応混合物をセライトを通して濾過し、沈殿物をＥｔＯＡｃで洗浄し、そして合わせた有機溶液を減圧下で濃縮し、そしてフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン
１：１０、１：５）によって精製した。生成物をヘキサンから再結晶化させて黄色固体（１９０ｍｇ、２５％）を得た；ｍｐ  １２５−１２６℃；1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１５（ｄｄ、Ｊ＝７．７、１．１  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７１（ｄｔ、Ｊ＝７．７、１．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｄｔ、Ｊ＝７．５、１．２  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５７（ｄｄ、Ｊ＝７．６、１．１  Ｈｚ、１Ｈ）、６．４８（ｓ、１Ｈ）、１．４４（ｓ、９Ｈ）。
【０２０１】
Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］［３−［［３−［［３−［４−［（１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフト−４−イル）オキシ］ブチルカルボニルアミノ］−１−メチルピロール−５−イル］カルボニルアミノ］−１−メチルピロール−５−イル］カルボニルアミノ］−１−メチルピロール−５−イル］カルボキサミド（５１０）を、酸５０３（６１ｍｇ、０．２２２ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ保護ピロールイルアミン５０９（８４ｍｇ、０．１４８ｍｍｏｌ）から、５０７について記載された手順を用いて調製した。反応が完了した後、この反応混合物をＥｔ2Ｏで希釈し、沈殿物を取り出し、熱いＥｔＯＡｃで粉砕し、そしてＣＨＣｌ3／Ｅｔ2Ｏ混合物から結晶化させた。この生成物は黄色固体（３０ｍｇ、２８％）であった；ｍｐ  １５９−１６２℃（ｄｅｃｏｍｐ．）；1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）９．９０（ｓ、１Ｈ）、９．８９（ｓ、１Ｈ）、９．８６（ｓ、１Ｈ）、８．０８（ｂｓ、１Ｈ）、７．９７（ｄ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８７（ｄ、Ｊ＝７．２  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８１（ｔ、Ｊ＝７．９  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６８（ｔ、Ｊ＝７．２、１Ｈ）、７．２４（ｓ、１Ｈ）、７．１９（ｓ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、６．８９（ｓ、１Ｈ）、６．８４（ｓ、１Ｈ）、６．０６（ｓ、１Ｈ）、４．２５（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、３．１２−３．３０（ｍ、２Ｈ）、２．２５−２．４５（ｍ、４Ｈ）、２．１９（ｓ、６Ｈ）、１．７２−２．００（ｍ、４Ｈ）、１．６０−１．７０（ｍ、２Ｈ）．）。ＭＳ（ＬＳＩＭＳ、３−ＮＢＡ）７２５．２（Ｍ+＋１）。
【０２０２】
１，２−ジヒドロ−４−［６−［（４−シアノフェニル）オキシ］ヘキシルオキシ］−１，２−ジオキソナフタレン（５１１）。ジオキサン（１０ｍＬ）中の４−ヒドロキシベンゾニトリル（８７ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）、ナフトキノン５０４（２００ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ3（１９１ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）の混合物を、１０℃に冷却し、そしてＤＥＡＤ（１４０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）で処理した。この反応混合物を１０ｈ攪拌し、減圧下で濃縮し、そしてクロマトグラフィー（ベンゼン中の５％  ＥｔＯＡｃ）によって精製して５１１を黄色固体（１７１ｍｇ、５３％）として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１３（ｄｄ、Ｊ＝７．３、１．４  Ｈｚ、１Ｈ）、８．８６（ｄｄ、Ｊ＝７．７、１．１  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６７（ｄｔ、Ｊ＝７．５、１．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．６０（ｄｔ、Ｊ＝７．５、１．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５７（ｄ、Ｊ＝８．８  Ｈｚ、２Ｈ）、６．９３（ｄ、Ｊ＝８．９  Ｈｚ、２Ｈ）、５．９６（ｓ、１Ｈ）、４．１７（ｔ、Ｊ＝６．４  Ｈｚ、２Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝６．３  Ｈｚ、２Ｈ）、１．８０−２．０５（ｍ、４Ｈ）、１．５８−１．６８（ｍ、４Ｈ）。
【０２０３】
１，２−ジヒドロ−４−［６−（フェニルオキシ）ヘキシルオキシ］−１，２−ジオキソナフタレン（５１２）。フェノール（２８ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）をテトラブチルアンモニウムヒドロキシド（メタノール中の１．０Ｍ溶液０．３ｍＬ）で処理し、そしてこの反応混合物を減圧下で濃縮して乾固させた。ＤＭＦ（３ｍＬ）中のヨードナフトキノン５０５（１１５ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）をテトラブチルアンモニウム塩に添加し、４８ｈ攪拌し、そしてＨ2Ｏ（１０ｍＬ）でクエンチした。この生成物をＣＨＣｌ3で抽出し、抽出物をＨ2Ｏ、次いでブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そしてクロマトグラフィー（ベンゼン中の５％  ＥｔＯＡｃ）によって精製して５１２を黄色固体（４５ｍｇ、４３％）として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１３（ｄ、Ｊ＝７．４  Ｈｚ、１Ｈ）、７．８６（ｄ、Ｊ＝７．４  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６７（ｔ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６１（ｔ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．１５−７．４０（ｍ、２Ｈ）、６．８５−７．１０（ｍ、３Ｈ）、５．９６（ｓ、１Ｈ）、４．１７（ｔ、Ｊ＝６．５  Ｈｚ、２Ｈ）、３．９９（ｔ、Ｊ＝６．２  Ｈｚ）、１．７０−２．１０（ｍ、４Ｈ）、１．３５−１．７０（ｍ、４Ｈ）。
【０２０４】
３−ジメチルアミノフェニル５−［（１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフト−４−イル）オキシ］バレレート（５１３）。ＴＨＦ（２ｍＬ）中の酸５０３（１３７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、３−ジメチルアミノフェノール（８２ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（１０３ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１２ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）の混合物を２ｈ攪拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をベンゼン中に溶解し、Ｈ2Ｏで洗浄し、そして乾燥した（Ｎａ2ＳＯ4）。ベンゼン中でのカラムクロマトグラフィー（１０％  ＥｔＯＡｃ）によって５１３を黄色固体（７０ｍｇ、３６％）として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１３、（ｄ、Ｊ＝７．３  Ｈｚ、１Ｈ）、７．９０（ｄ、Ｊ＝７．４  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６９（ｔ、Ｊ＝６．１  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｔ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、１Ｈ）、７．２２（ｄｄ、Ｊ＝８．１、８．１  Ｈｚ、１Ｈ）、６．３０−６．７０（ｍ、２Ｈ）、５．９６（ｓ、１Ｈ）、４．２１（ｔ、Ｊ＝５．６  Ｈｚ、２Ｈ）、２．６９（ｔ、Ｊ＝６．５  Ｈｚ、２Ｈ）、１．９０−２．１５（ｍ、４Ｈ）。
【０２０５】
２’−［４−［６−（１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソ−ナフト−４−イル）オキシヘキシル］オキシフェニル］−５−（４−メチルピペラジン−１−イル）−２，５’−ビ−１Ｈ−ベンズイミダゾール（５１４）。Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３２５８（３．０ｇ、５ｍｍｏｌ）をイソプロパノール−水（２４ｍＬ／１２ｍＬ）の熱い混合物に溶解し、そして水酸化アンモニウム（３ｍＬ）で中和した。沈殿物を濾過し、Ｅｔ2Ｏで粉砕し、そして減圧下で乾燥してビスベンズイミダゾールの遊離塩基を得た。ＭｅＯＨ（０．６ｍＬ、０．６ｍｍｏｌ）中のＢｕ4ＮＯＨの１．０Ｍ溶液をＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中のビスベンズイミダゾール（１．６３５ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、１５分間攪拌し、そして減圧下で濃縮して乾固した。ＤＭＦ（３０ｍＬ）中のヨードナフトキノン５０５（１．４８５ｇ、３．８７ｍｍｏｌ）をテトラブチルアンモニウム塩に添加し、そしてこの混合物を４８ｈ攪拌した。この反応混合物をＨ2Ｏ中に懸濁し、粗生成物を濾過し、Ｈ2Ｏで洗浄し、乾燥し、そしてフラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ3  １：９、１：５）によって精製して、５１４を黄色固体（７９０ｍｇ、３０％）として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＭｅＯＨ−ｄ4）８．２１（ｓ、１Ｈ）、８．０９（ｄ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、１Ｈ）、８．０５（ｄ、Ｊ＝８．７  Ｈｚ、２Ｈ）、７．８５−７．９５（ｍ、２Ｈ）、７．４８−７．７５（ｍ、４Ｈ）、７．１４（ｂｓ、１Ｈ）、７．１０−６．９８（ｍ  ３Ｈ）、４．２１（ｔ、Ｊ＝６．３  Ｈｚ、２Ｈ）、４．０８（ｔ、Ｊ＝６．２  Ｈｚ、２Ｈ）、２．６５−２．７５（ｍ、４Ｈ）、２．４０（ｓ、３Ｈ）、１．８０−２．１５（ｍ、４Ｈ）、１．６０−１．７５（ｍ、４Ｈ）。ＭＳ（ＬＳＩＭＳ、３−ＮＢＡ）７２５．２（Ｍ+＋１）。
【０２０６】
６−［（１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフト−４−イル）オキシ］ヘキシル６−アミノヘキサノエートのトリフルオロアセテート（５１５）。［６−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノ］ヘキサン酸（１３９ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を、０℃の、ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中のＤＣＣ（１１３ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（６４ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）の溶液中に添加し、そして１５分間攪拌し、このときナフトキノン５０４（１３７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で１２ｈ攪拌し、ＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、ＫＨＳＯ4の水溶液で３回、次いでＮａＨＣＯ3溶液、続いてブラインで抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、そして最終的にこれを減圧下で濃縮して乾固させ、そしてＥｔ2Ｏで粉砕した。残渣をＣＨ2Ｃｌ2（３ｍＬ）中に溶解し、ＴＦＡ（０．５ｍＬ）をこの溶液に添加し、そしてこの混合物を０℃で１ｈ攪拌した。全ての揮発物を減圧下で除去し、そして残渣をＥｔ2Ｏ中で粉砕して５１５（１００ｍｇ、４０％）を暗黄色オイルとして得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．９０（ｄ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、１Ｈ）、７．９９（ｂｓ、３Ｈ）、７．８７（ｄ、Ｊ＝７．８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７１（ｔ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｔ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、５．９６（ｓ、１Ｈ）、４．１７（ｔ、Ｊ＝６．３  Ｈｚ、２Ｈ）、４．０９（ｔ、Ｊ＝６．２  Ｈｚ、２Ｈ）、２．９０−３．１５（ｍ、２Ｈ）、２．２９（ｔ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、２Ｈ）、１．９０−２．１０（ｍ、２Ｈ）、１．３０−１．８５（ｍ、１２Ｈ）。
【０２０７】
１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソ−４−［４−［２−［３−［２−（エチルアミノカルボニル）エチルアミノカルボニル］プロピル＝アミノカルボニル］エチルアミノカルボニル］ブチルオキシ］ナフタレン（５１７）。酸５０３（１３７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）中に溶解し、ＨＢＴＵ（１９０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）で、続いてＤＩＥＡ（２６０μＬ、１．５ｍｍｏｌ）で処理し、そして１０分間攪拌した。Ｎ−エチル［２−［３−（２−アミノエチルカルボニルアミノ）プロピルカルボニルアミノ］エチル］カルボキサミドヒドロクロリド５１６（１５４ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２６０μＬ、１．５ｍｍｏｌ）をこの反応混合物に添加し、後者を２ｈ攪拌し、そしてこの反応混合物をＥｔ2Ｏで希釈した。この生成物を濾過し、そしてＣＨＣｌ3で粉砕して黄色固体を得た（１００ｍｇ、３８％）、ｍｐ  １４５−１７０℃（ｄｅｃｏｍｐ．）1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、ＭｅＯＨ−ｄ4）８．１０（ｄｄ、Ｊ＝７．６、１．４  Ｈｚ、１Ｈ）、７．９２（ｄｄ、Ｊ＝７．８、１．２  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７２（ｄｔ、Ｊ＝７．７、１．２  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６２（ｄｔ、７．６、１．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．３０−７．５０（ｍ、２Ｈ）、７．１５（ｂｓ、１Ｈ）、５．９７（ｓ、１Ｈ）、４．２０（ｔ、Ｊ＝５．８  Ｈｚ、２Ｈ）、３．３５−３．５０（ｍ、４Ｈ）、３．１０−３．３０（ｍ、４Ｈ）、３．３２−３．４２（ｍ、４Ｈ）、２．３０（ｔ、Ｊ＝６．９  Ｈｚ、２Ｈ）、２．１９（ｔ、Ｊ＝７．４  Ｈｚ、２Ｈ）、１．７５−２．０５（ｍ、４Ｈ）、１．７８（ｔ、Ｊ＝７．２、２Ｈ）、１．１３（ｔ、Ｊ＝７．３、３Ｈ）。ＭＳ（ＦＡＢ、ＮａＩ）５５１．２（Ｍ＋Ｎａ）、５２９（Ｍ+＋１）。
【０２０８】
３，４−ジメトキシ−１−ナフトアルデヒド（５１８）。ジクロロベンゼン（０．８ｍＬ）中の１，２−ジメトキシナフタレン（０．７４ｇ、４ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（０．８ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）との混合物を、ＰＯＣｌ3と共に１００℃で２ｈ攪拌した。この反応混合物を０℃に冷却し、ＮａＯＡｃの冷たい水溶液でクエンチし、Ｈ2Ｏで希釈し、そしてベンゼンで抽出した。この抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、減圧下で濃縮し、そしてジクロロベンゼンを１１０℃／０．５ｍｍＨｇでのクゲルローア（ｋｕｇｅｌｒｏｈｒ）蒸留によって除去した。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の２０％  ＥｔＯＡｃ）によって生成物５１８（５９６ｍｇ、６８％）を得て、この生成物５１８をさらなる精製を伴わずに次の工程で用いた。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）１０．４２（ｓ、１Ｈ）、９．００−９．１５（ｍ、１Ｈ）、８．１５−８．３０（ｍ、１Ｈ）、７．６１（ｓ、１Ｈ）、７．５０−７．６５（ｍ、２Ｈ）、４．１２（ｓ、３Ｈ）、４．０７（ｓ、３Ｈ）。
【０２０９】
４−ブチルアミノメチル−１，２−ジメトキシ−ナフタレン（５１９）。ＥｔＯＨ（２ｍＬ）中のＰｔＯ2（４０ｍｇ）の懸濁液を２５ｐｓｉのＨ2で３０分間攪拌した。ナフトアルデヒド５１８（５９６ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ中に溶解し、そして懸濁液中に添加し、続いてブチルアミン（２１９ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を５０ｐｓｉにて６ｈ水素添加した。触媒をＣｅｌｉｔｅを通して濾過し、アセトンで洗浄し、そして濾液を濃縮して乾固して５１９をオイル（６６５ｍｇ、８７％）として得た。この生成物をさらなる精製を伴わずに次の工程において利用した。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１６（ｄ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．９９（ｄ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、２Ｈ）、７．４０−７．６０（ｍ、２Ｈ）、７．３５（ｓ、１Ｈ）、４．１９（ｓ、２Ｈ）、４．００（ｓ、３Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、２．７６（ｔ、Ｊ＝７．０
Ｈｚ、２Ｈ）、１．６４（ｂｓ、１Ｈ）、１．４５−１．６０（ｍ、２Ｈ）、１．３０−１．４５（ｍ、２Ｈ）、０．９３（ｔ、Ｊ＝７．２  Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２１０】
４−（Ｎ−アセチル−Ｎ−ブチルアミノメチル）−１，２−ジメトキシ−ナフタレン（５２０）。トリエチルアミン（３５０μＬ、２．５ｍｍｏｌ）を、０℃の、ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のアミノナフタレン５１９（２５０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）およびＡｃＣｌ（９０μＬ、１．２７ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。冷却浴を１０分後に除去し、反応混合物を室温で１ｈ攪拌し、ＣＨ2Ｃｌ2で５倍希釈し、ＮａＨＣＯ3の水溶液、続いて３％  ＨＣｌ、ブラインで洗浄し、そして乾燥した（ＭｇＳＯ4）。溶媒のエバポレーション後に得た粗生成物（３１５ｍｇ、１００％）を、さらなる精製を伴わずに次の工程で用いた。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１９、８．１５（２ｄ、Ｊ＝７．６、８．４  Ｈｚ、１Ｈ）、８．９７、７．８０（２ｄ、Ｊ＝７．９、８．２  Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５−７．５８（ｍ、２Ｈ）、７．１６、７．０４（２ｓ、１Ｈ）、５．０５、４．９５（２ｓ、２Ｈ）、４．０１、３．９９（２ｓ、３Ｈ）、３．９９、３．９６（２ｓ、３Ｈ）、３．４７、３．１３（２ｔ、Ｊ＝７．４、７．８  Ｈｚ、２Ｈ）、２．２０、２．０９（２ｓ、３Ｈ）、１．１５−１．７０（ｍ、４Ｈ）、０．９１、０．８７（２ｔ、Ｊ＝７．２、７．３  Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２１１】
４−（Ｎ−ブチル−Ｎ−トリフルオロアセチルアミノメチル）−１，２−ジメトキシ−ナフタレン（５２１）。ナフタレン５１９（２００ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を、３ｈの間に温度を−４０℃から０℃に上昇させることによって、ＴＥＡ（０．２ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）の存在下でトリフルオロアセチル無水物（２１０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）でアシル化した。この反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、水性ＮａＨＣＯ3、３％  ＨＣｌ、ブラインで洗浄し、そして最終的に乾燥した（ＭｇＳＯ4）。粗生成物（２６６ｍｇ、９９％）を、さらなる精製を伴わずに次の工程で用いた。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１７−８．２５（ｍ、１Ｈ）、７．８２（ｔ、Ｊ＝７．７  Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０−７．５５（ｍ、２Ｈ）、７．１６、７．０３（２ｓ、１Ｈ）、５．１１、５．０８（２ｓ、２Ｈ）、４．０１，４．０３（２ｓ、３Ｈ）、３．９８、３．９６（２ｓ、３Ｈ）、３．４０、３．２５（２ｔ、Ｊ＝７．５、７．４  Ｈｚ、２Ｈ）、１．４５−２．７５（ｍ、２Ｈ）、１．１０−１．４５（ｍ、２Ｈ）、０．８９（ｔ、Ｊ＝７．４、３Ｈ）。
【０２１２】
４−［Ｎ−ブチル−Ｎ−［３−（４−モルホリノカルボニル）エチルカルボニル］アミノメチル］−１，２−ジメトキシナフタレン（５２２）。ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中の３−（Ｎ−モルホリノカルボニル）プロピオン酸（１３９ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を加熱し、塩化チオニル（４４０ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）を用いて１ｈ還流し、そして全ての揮発物を減圧下でエバポレートした。残渣を無水ＣＨ2Ｃｌ2（３ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、そしてナフタレン５１９（１００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、続いてＤＭＡＰ（４５ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（１４０μＬ、１ｍｍｏｌ）をこの反応混合物に添加した。室温にて１ｈの攪拌後、この反応物を湿ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）でクエンチし、３％  ＨＣｌ、水性ＮａＨＣＯ3、ブラインで洗浄し、そして乾燥した（Ｎａ2ＳＯ4）。クロマトグラフィー（ヘキサン中の１５％  ＥｔＯＡｃ）による精製によって５２２（１６０ｍｇ、９８％）を得た。生成物を次の工程に直接用いた。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１９、８．１７（２ｄ、Ｊ＝７．７、７．８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．９２、７．８５（２ｄ、Ｊ＝８．２、８．０５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．３８−７．５６（ｍ、４Ｈ）、７．２５、７．１７（２ｓ、１Ｈ）、５．０５、５．０３（２ｓ、２Ｈ）、４．０３−４．００（２ｓ、３Ｈ）、３．９９、３．９８（２ｓ、３Ｈ）、３．２５−３．８２（ｍ、１４Ｈ）、１．１５−１．８２（ｍ、４Ｈ）、０．８８．０．８５（２ｔ、Ｊ＝７．１、６．７  Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２１３】
三臭化ホウ素でのジメトキシナフタレンの脱メチル化。４−（ブチルアミノ＝メチレン）−１，４−ジヒドロ−２−ヒドロキシ−１−オキソ−ナフタレン（５２３）。ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）中のジメトキシナフタレン５１９（３０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液を、ＣＨ2Ｃｌ2（１．１ｍＬ）中のＢＢｒ3の１Ｍ溶液で−７８℃で処理し、そしてこの温度で２ｈ攪拌した。この反応混合物を−１０℃の冷凍庫に３ｈ入れ、室温での１５分間の攪拌によってＥｔ2Ｏ（１ｍＬ）でクエンチし、そしてＮａＨＣＯ3の水溶液で中和した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、そして溶媒を減圧下で除去した。残渣をＥｔ2Ｏに溶解し、開口フラスコ中で１０ｈ攪拌し、そしてクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3中の５％  ＭｅＯＨ）によって精製した。Ｅｔ2Ｏでの粉砕によって生成物５２３（８ｍｇ、３０％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）９．０５（ｂｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、Ｊ＝８．１  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６５−７．８５（ｍ、１Ｈ）、７．０５−７．６５（ｍ、３Ｈ）、３．２０−３．６０（ｍ、２Ｈ）、１．５０−１．８５（ｍ．２Ｈ）、２．２５−１．５０（ｍ、２Ｈ）、０．８０−１．１０（ｍ、３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＩ）２４３．１２５０。Ｃ15Ｈ17ＮＯ2についての計算値２４３．１２５９。
【０２１４】
４−（Ｎ−アセチル−Ｎ−ブチルアミノメチル）−１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフタレン（５２４）を、５２３について記載した手順を用いてジメトキシナフタレン５２０から調製した。生成物（６０％）をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3中の１．５％  ＭｅＯＨ）によって精製し、続いてＥｔ2Ｏで粉砕した。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１（ｄｄ、Ｊ＝７．５３、１．２  Ｈｚ、１Ｈ）、７．６７（ｄｄ、Ｊ＝７．７、１．１  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５０−７．６２（ｍ、２Ｈ）、６．２１（ｓ、１Ｈ）、４．６８（ｓ、２Ｈ）、３．３５（ｔ、Ｊ＝８．０  Ｈｚ、２Ｈ）、２．２５（ｓ、３Ｈ）、１．５０−１．７５（ｍ、２Ｈ）、１．１５−１．５０（ｍ、２Ｈ）、０．９６（ｔ、Ｊ＝５．８、３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＩ）２８５．１３８３。Ｃ17Ｈ19ＮＯ3についての計算値２８５．１３６５。
【０２１５】
４−（Ｎ−ブチルアミノメチル−Ｎ−トリフルオロセチル）−１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフタレン（５２５）を、５２３について記載した手順を用いてジメトキシナフタレン５２１から得た。生成物（３７％）をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3中の３％  ＭｅＯＨ）によって精製し、続いてＥｔ2Ｏ中で粉砕した。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．２９（ｄ、Ｊ＝７．１３  Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０−７．８５（ｍ、３Ｈ）、６．１９（ｓ、１Ｈ）、４．７３（ｓ、２Ｈ）、３．３５−３．７０（ｍ、２Ｈ）、１．５０−１．８０（ｍ、２Ｈ）、１．３５−１．８０（ｍ、２Ｈ）、０．９６（ｔ、Ｊ＝７．２  Ｈｚ、３Ｈ）。ＨＲＭＳ（ＥＩ）３３９．１１０６。Ｃ17Ｈ16Ｆ3ＮＯ3についての計算値３３９．１０８２。
【０２１６】
４−［［Ｎ−ブチル−Ｎ−（４−モルホリノ−４−オキソブチリル）アミノ］メチル］−１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフタレン（５２６）を、５２３について記載した手順を用いてジメトキシナフタレン５２２から得た。生成物（１０％）をクロマトグラフィー（ヘキサン中の２５％〜４０％  ＥｔＯＡｃ）によって精製し、続いてＥｔ2Ｏ中で粉砕した。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．１９（ｄ、Ｊ＝７．４  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｔ、Ｊ＝６．４  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｄ、Ｊ＝６．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５０（ｔ、Ｊ＝７．９  Ｈｚ、１Ｈ）、６．３３（ｓ、１Ｈ）、４．６５（ｓ、２Ｈ）、３．３５−３．８０（ｍ、１４  Ｈ）、１．６５−１．８５（ｍ、２Ｈ）、１．２５−１．５０（ｍ、２Ｈ）、０．９６（ｔ、Ｊ＝７．２  Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２１７】
メソ−テトラ［４−［６−［（１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキソナフト−４−イル）オキシ］ヘキシルオキシ］フェニル］ポルフィン（５２７）。ＭｅＯＨ（０．２１２ｍＬ）中のＢｕ4ＮＯＨの１Ｍ溶液を、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中のメソ−テトラ（４−ヒドロキシフェニル）ポルフィン（３６ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に添加し、攪拌を１０分間維持し、そしてこの混合物を減圧下で濃縮して乾固した。ＤＭＦ（２ｍＬ）中のナフトキノン５０５（８１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）をポルフィリンに添加し、この溶液を４８ｈ攪拌し、そしてＨ2Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した。生成物をＣＨＣｌ3で抽出し、ブラインで洗浄し、溶媒をエバポレートし、そして残渣をＥｔ2Ｏで粉砕した。フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3中の２〜３％  ＭｅＯＨ）によって精製し、続いてＣＨＣｌ3／Ｅｔ2Ｏ（１：３）から再結晶して生成物を暗赤色固体（１９．６ｍｇ、２１％）として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．８６（ｓ、８Ｈ）、８．０１−８．１５（ｍ、１２Ｈ）、７．９（ｄ、Ｊ＝７．８  Ｈｚ、４Ｈ）、７．６８（ｔ、Ｊ＝６．３  Ｈｚ、４Ｈ）、７．５５（ｔ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、４Ｈ）、７．２７（ｄ、Ｊ＝７．８  Ｈｚ、８Ｈ）、５．９８（ｓ、４Ｈ）、４．１５−４．３０（ｍ、１６  Ｈ）、１．８０−２．１０（ｍ、１６Ｈ）、１．６５−１．８０（ｍ、１６Ｈ）。Ｃ108Ｈ94Ｎ4Ｏ16×１．５Ｈ2Ｏについての分析計算値：Ｃ、７４．８７；Ｈ、５．４３；Ｎ、３．２３。実測値：Ｃ、７４．６２；Ｈ、５．５７；Ｎ、３．１１。
【０２１８】
メソ−テトラ［４−［６−［（１，２−ジヒドロ−１，２−ジオキサナフト−４−イル）オキシヘキシル］オキシカルボニル］フェニル］ポルフィリン（５２８）。ＥＤＣＩ（５１８ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）を０℃で、ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中のメソ−テトラ（４−カルボキシフェニル）ポルフィリン（５００ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）、アルコール４（８３１ｍｇ、３ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１５９ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。この溶液を２ｈ攪拌し、冷却浴を除去し、そしてこの反応混合物を室温で一晩放置した。これをＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、２％  ＨＣｌ、Ｈ2Ｏ、ＮａＨＣＯ3の水溶液、Ｈ2Ｏ、ＮａＨＳＯ3の５％水溶液、Ｈ2Ｏで洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、そして減圧下で濃縮した。分析サンプルをシリカでのカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3中の２％
ＭｅＯＨ）によって調製した。Ｍｐ  ９８−１１０℃（ｄｅｃｏｍｐ．）収量５７２ｍｇ、５０％。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）８．８１（ｓ、８Ｈ）、８．４５（ｄ、Ｊ＝８．２  Ｈｚ、８Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．０  Ｈｚ、８Ｈ）、８．０９（ｄ、Ｊ＝６．９  Ｈｚ。４Ｈ）、７．８９（ｄ、Ｊ＝７．３  Ｈｚ、４Ｈ）、７．７０（ｔ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、４Ｈ）、７．５６（ｔ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、４Ｈ）、５．９８（ｓ、４Ｈ）、４．５６（ｔ、Ｊ＝６．５  Ｈｚ、８Ｈ）、４．２１（ｔ、Ｊ＝６．１  Ｈｚ、８Ｈ）、１．８５−２．２０（ｍ、１６Ｈ）、１．６０−１．８０（ｍ、１６Ｈ）。ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）１８３８（Ｍ+＋２３）、１８１７（Ｍ+＋１）。Ｃ112Ｈ94Ｎ4Ｏ20×４  Ｈ2Ｏについての分析計算値：Ｃ、７１．１８；Ｈ、５．４０；Ｎ、２．９７。実測値：Ｃ、７１．２７；Ｈ、５．２４；Ｎ、３．０３。
【０２１９】
Ｎ−アセチル−４−（７−ヒドロキシ−１−ヘプテニル）−アニリン（５２９）。５０ｍＬのＣＨ3ＣＮ中の５．２１３ｇ（２８．８ｍｍｏｌ）の６−ブロモヘキサノールおよび７．５５ｇ（２８．８ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンの溶液を２４時間還流した。溶媒のエバポレーションによって粗ホスホニウム塩を得て、この塩を次の反応に直接用いた。粗ホスホニウム塩および４．６９０ｇ（２８．７ｍｍｏｌ）の４−アセトアミドベンズアルデヒドを、１５０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2と１５０ｍＬのＴＨＦとの混合物中に溶解した。冷却した溶液に、１．５２９ｇ（６０．５ｍｍｏｌ）の９５％  ＮａＨをＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中でのスラリーとして添加した。この反応混合物を氷浴中で１ｈｒ攪拌し、次いで室温で１９ｈｒ攪拌した。この混合物を、３５０ｍＬ  ＣＨ2Ｃｌ2と５００ｍＬ  １Ｎ  ＨＣｌとの間で分配した。水相をＣＨ2Ｃｌ2（４×１００ｍＬ）で抽出した。ＣＨ2Ｃｌ2抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中の１％ＭｅＯＨで最初に溶出し、次いでＣＨ2Ｃｌ2中の２％  ＭｅＯＨで溶出するシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、４．９１３ｇ（６−ブロモヘキサノールから６９％）のアルケン５２９を、Ｅ異性体とＺ異性体との混合物として得た：1Ｈ  ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ７．５−７．４（ｍ、４Ｈ）、７．３−７．１（ｍ、４Ｈ）、６．４−６．３（ｍ、２Ｈ）、６．２−６．１（ｍ、１Ｈ）、５．７−５．６（ｍ、２Ｈ）、３．６５（ｔ、Ｊ＝６．５  Ｈｚ、２Ｈ）、３．６３（ｔ、Ｊ＝６．５  Ｈｚ、２Ｈ）、２．４−２．１（ｍ、４Ｈ）、２．１８（ｓ、３Ｈ）、２．１７（ｓ、３Ｈ）、１．７−１．３（ｍ、１２Ｈ）。
【０２２０】
４−（７−ヒドロキシヘプチル）−アニリン（５３０）。Ｐａｒｒボトル中のＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨ１００ｍＬ中の４．９１３ｇ（１９．９ｍｍｏｌ）のＮ−アセチル−４−（７−ヒドロキシ−１−ヘプテニル）−アニリン５２９の溶液に、４９０ｍｇの１０％  Ｐｄ／Ｃを添加した。このボトルを水素化装置に置き、そして２５ｐｓｉの水素で４ｈｒ振盪した。セライトパッドを通した濾過によって触媒を除去し、そして溶媒をエバポレーションすることによって５．２９４ｇのアルカンを得た：1Ｈ  ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ７．８０（ｓ、ＮＨ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、２Ｈ）、７．０９（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、２Ｈ）、３．６１（ｔ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．５４（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、３Ｈ）、１．６−１．５（ｍ、４Ｈ）、１．４−１．３（ｍ、６Ｈ）。
【０２２１】
４０ｍＬのＭｅＯＨ中のこのアルカンの溶液を１９０ｍＬの２Ｎ  ＨＣｌと混合した。この反応混合物を２３ｈｒ還流した。次いで、この反応混合物を、１９０ｍＬの２Ｎ  ＮａＯＨと２００ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2との冷却した混合物に添加した。水相をＣＨ2Ｃｌ2（４×１００ｍＬ）で抽出した。ＣＨ2Ｃｌ2抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートし乾固して、３．５７９ｇのアニリン５３０（アルケンから８７％）を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ６．９５（ｄ、Ｊ＝８．３  Ｈｚ、２Ｈ）、６．６１（ｄ、Ｊ＝８．３  Ｈｚ、２Ｈ）、３．６０（ｔ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ、２Ｈ）、２．４８（ｔ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、２Ｈ）、１．６−１．５（ｍ、４Ｈ）、１．４−１．３（ｍ、６Ｈ）。
【０２２２】
Ｎ−（９−アクリジニル）−４−（７−ヒドロキシヘプチル）−アニリン（５３１）。２０ｍＬのＭｅＯＨ中の６３６．９ｍｇ（３．０７ｍｍｏｌ）の４−（７−ヒドロキシヘプチル）−アニリン５３０および４２８μＬ（３．０７ｍｍｏｌ）のＥｔ3Ｎの溶液に、６５６．４ｍｇ（３．０７ｍｍｏｌ）の９−クロロアクリジンを添加した。室温で７ｈｒの攪拌後、溶媒をエバポレートした。ＣＨ2Ｃｌ２中の５％  ＭｅＯＨを用いた、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによる精製によって、１．０７９ｇ（９１％）のＮ−（９−アクリジニル）−４−（７−ヒドロキシヘプチル）−アニリン５３１を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ８．０−７．９（ｍ、４Ｈ）、７．６３（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ、２Ｈ）、７．３−７．２（ｍ、２Ｈ）、７．０７（ｄ、Ｊ＝８．３  Ｈｚ、２Ｈ）、６．８５（ｄ、Ｊ＝８．３  Ｈｚ、２Ｈ）、３．６４（ｔ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ、２Ｈ）、２．５７（ｔ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、２Ｈ）、１．７−１．５（ｍ、４Ｈ）、１．４−１．３（ｍ、６Ｈ）。
【０２２３】
Ｎ−（９−アクリジニル）−４−（７−ヨードヘプチル）−アニリン（５３２）。０℃に冷却した２０ｍＬのピリジン中の６０４．１ｍｇ（１．５７ｍｍｏｌ）のＮ−（９−アクリジニル）−４−（７−ヒドロキシヘプチル）−アニリン５３１の溶液に、２００μＬ（２．５８ｍｍｏｌ）のメタンスルホニルクロリドを添加した。この反応混合物を０℃で１時間２０分間攪拌し、次いで１８０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2と７５ｍＬの水との間で分配した。水相をＣＨ2Ｃｌ2（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＣＨ2Ｃｌ2抽出物を合わせ、４０ｍＬの飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。
【０２２４】
このスルホネートを２０ｍＬのアセトンに溶解した。この溶液に３５５．０ｍｇ（２．３７ｍｍｏｌ）のＮａＩを添加し、そしてこの混合物を８ｈｒ還流し、次いで室温で１６ｈｒ攪拌した。この反応混合物を、２００ｍＬの酢酸エチルと１００ｍＬの水との間で分配した。有機相を５％チオ硫酸ナトリウム（３×３０ｍＬ）で洗浄した。全ての水相を合わせ、そして７５ｍＬの酢酸エチルで抽出し戻した。両方の酢酸エチル相を合わせ、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートし乾固して、６００．２ｍｇ（７７％）のＮ−（９−アクリジニル）−４−（７−ヨードヘプチル）−アニリン５３２を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ８．０−７．９（ｍ、４Ｈ）、７．６６（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ、２Ｈ）、７．３−７．２（ｍ、２Ｈ）、７．０６（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、３．１８（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ、２Ｈ）、２．５７（ｔ、Ｊ＝７．６  Ｈｚ、２Ｈ）、１．９−１．８（ｍ、２Ｈ）、１．７−１．７（ｍ、２Ｈ）、１．４−１．３（ｍ、６Ｈ）。
【０２２５】
キノン−アニリノアクリジン（５３３）（ＳＬ−１１０６４）。４０ｍＬのＣＨＣｌ3と２ｍＬのＭｅＯＨとの混合物中の１．５５４ｇ（３．１４ｍｍｏｌ）のＮ−（９−アクリジニル）−４−（７−ヨードヘプチル）−アニリン５３２の溶液に、１．７６５ｇ（６．２８ｍｍｏｌ）の銀塩を添加した。この反応混合物を２３ｈｒ還流した。この反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、濾過し、そしてエバポレートして乾固した。精製およびｐ−キノン異性体とｏ−キノン異性体との分離を、ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨ、Ｅｔ2ＯおよびＣＨ2Ｃｌ2中の１０％
ＭｅＯＨを用いて、シリカゲルでの一連のカラムを用いて達成した。１０８．９ｍｇの５３３が暗橙色固体として単離された。
【０２２６】
Ｎ−アセチル−４−（７−メタンスルホニル−１−ヘプテニル）−アニリン。１０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の５００ｍｇ（２．０２ｍｍｏｌ）のＮ−アセチル−４−（７−ヒドロキシ−１−ヘプテニル）−アニリン５２９および０．５ｍＬ（６．１８ｍｍｏｌ）のピリジンの冷却した溶液に、２４０μＬ（３．１０ｍｍｏｌ）のメタン−スルホニルクロリドを添加した。この反応混合物を室温で２２ｈｒ攪拌した。この反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（４×５０ｍＬ）で洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって４１６．１ｍｇ（６３％）のメシレート（Ｅ異性体とＺ異性体との混合物）を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ７．４７（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）、７．４３（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ）、７．２９（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）、６．４−６．３（ｍ）、６．２−６．０（ｍ）、５．７−５．６（ｍ）、４．２３（ｔ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ）、４．２２（ｔ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ）、２．４−２．３（ｍ）、２．３−２．１（ｍ）、２．１８（ｓ）、２．１７（ｓ）、１．９−１．７（ｍ）、１．６−１．４（ｍ）。
【０２２７】
Ｎ−アセチル−４−（７−ヨード−１−ヘプテニル）−アニリン（５３４）。６０ｍＬのアセトン中の２．６４１ｇ（８．１１ｍｍｏｌ）のＮ−アセチル−４−（７−メタンスルホニル−ｌ−ヘプテニル）−アニリンの溶液に、１．８３２ｇ（１２．２ｍｍｏｌ）のＮａＩを添加した。この反応混合物を１９ｈｒ還流した。次いで、濾過および溶媒のエバポレーションによって、３．４１０ｇ（定量的）のヨウ化物５３４を得て、このヨウ化物をそのまま次の反応に用いた。
【０２２８】
ヨウ化ホスホニウム（５３５）。７０ｍＬのＣＨ3ＣＮ中の３．４１０ｇのＮ−アセチル−４−（７−ヨード−１−ヘプテニル）−アニリン５３４および２．１４３ｇ（８．１７ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンの溶液を４３ｈｒ還流した。溶媒のエバポレーションおよびＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、４．７８１ｇ（メシレートから９５％）のヨウ化ホスホニウムを得た。
【０２２９】
１−（３，４−ジメトキシ−１−ナフチル）−８−（４−アセトアミドフェニル）−１，７−オクタジエン（５３６）。２０ｍＬのＴＨＦおよび２５ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の３．１７ｇ（５．１２ｍｍｏｌ）のヨウ化ホスホニウム５３５および１．０９３ｇ（５．０５ｍｍｏｌ）の３，４−ジメトキシ−１−ナフトアルデヒド５１８の冷却した溶液に、１３０ｍｇ（５．１４ｍｍｏｌ）の９５％  ＮａＨを添加した。この反応混合物を室温で２１ｈｒ攪拌した。この混合物を、２００ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌと３５０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2との間で分配した。水相をＣＨ2Ｃｌ2（６×７５ｍＬ）で抽出した。ＣＨ2Ｃｌ2抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中の１％  ＭｅＯＨを用いた、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、１．０７３ｇ（４９％）のジエン５３６を得た。
【０２３０】
１−（３，４−ジメトキシ−１−ナフチル）−８−（４−アセトアミドフェニル）−オクタン。Ｐａｒｒボトル中の２０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の５５６．３ｍｇ（１．２９ｍｍｏｌ）の１−（３，４−ジメトキシ−１−ナフチル）−８−（４−アセトアミドフェニル）−１，７−オクタジエン５３６の溶液に、５５．４ｍｇの１０％  Ｐｄ／Ｃを添加した。このボトルを水素化装置に置き、そして３２ｐｓｉの水素で２．５ｈｒ振盪した。セライトパッドを通した濾過による触媒の除去および溶媒のエバポレーションによって、５５４．６ｍｇ（９９％）のオクタンを得た：1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ８．１４（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．９４（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５−７．４（ｍ、１Ｈ）、７．４−７．３（ｍ、３Ｈ）、７．１２（ｓ  １Ｈ）、７．１１（ｄ、Ｊ＝８．２  Ｈｚ、２Ｈ）、３．９９（ｓ、３Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、３．０−２．９（ｍ、２Ｈ）、２．６−２．５（ｍ、２Ｈ）、２．１６（ｓ、３Ｈ）、１．８−１．３（ｍ  １２Ｈ）。
【０２３１】
１−（３，４−ジメトキシ−１−ナフチル）−８−（４−アミノフェニル）−オクタン（５３７）。２０ｍＬのＭｅＯＨ中の５５４．６ｍｇ（１．２８ｍｍｏｌ）の１−（３，４−ジメトキシ−１−ナフチル）−８−（４−アセトアミドフェニル）−オクタンの溶液を、２１ｍＬの２Ｎ  ＨＣｌと混合した。この反応混合物を２３ｈｒ還流した。次いで、この反応混合物を、７５ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2と２１ｍＬの２Ｎ  ＮａＯＨとの間で分配した。水相をＣＨ2Ｃｌ2（５×４０ｍＬ）で抽出した。ＣＨ2Ｃｌ2抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中の１％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって３７４．６ｍｇ（７５％）のアニリン５３７を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ８．１４（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．９４（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７（ｔ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．３７（ｔ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．１２（ｓ、１Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、６．６２（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、３．９９（ｓ、３Ｈ）、３．９７（ｓ、３Ｈ）、３．１−３．０（ｍ、２Ｈ）、２．５−２．４（ｍ、２Ｈ）、１．８−１．３（ｍ  １２Ｈ）。
【０２３２】
ナフチルアクリジン（５３８）。４ｍＬのＭｅＯＨ中の９９ｍｇ（２．５３×１０-4ｍｏｌ）の１−（３，４−ジメトキシ−１−ナフチル）−８−（４−アミノフェニル）−オクタン５３７および３５ｍＬ（２．５１×１０-4ｍｏｌ）のＥｔ3Ｎの溶液に、５４ｍｇ（２．５３×１０-4ｍｏｌ）の９−クロロアクリジンを添加した。この反応混合物を室温で２０ｈｒ攪拌した。溶媒のエバポレーションおよび最初にＣＨ2Ｃｌ2中の１％  ＭｅＯＨ、次いでＣＨ2Ｃｌ2中の３％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、１１８．２ｍｇ（８２％）のアクリジン５３８を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ８．１４（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、８．０−７．９（ｍ、５Ｈ）、７．６６（ｂｒ  ｔ、２Ｈ）、７．４６（ｔ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．３７（ｔ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．３−７．２（ｍ、２Ｈ）、７．１２（ｓ、１Ｈ）、７．０６（ｄ、Ｊ＝８．４  Ｈｚ、２Ｈ）、６．８２（ｄ、Ｊ＝８．４  Ｈｚ、２Ｈ）、３．１−３．０（ｍ、２Ｈ）、２．６−２．５（ｍ、２Ｈ）、１．８−１．３（ｍ、１２Ｈ）。
【０２３３】
キノン−アクリジン（５３９）（ＳＬ−１１１２５）。−６８℃に冷却した１５ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の５４６ｍｇ（９．６０×１０-4ｍｏｌ）のアクリジン５３８の溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2中の１Ｍ  ＢＢｒ3９．６ｍＬを添加した。−１０℃で１８．５ｈｒ後、この反応混合物を−６８℃に冷却し、そして１０ｍＬのＥｔ2Ｏを添加した。室温で３０分間の攪拌後、２０ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ3溶液を添加した。得られた沈殿物を濾過によって回収し、そして５０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で２回粉砕して５５５．９ｍｇのキノン５３９を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ９．１１（ｓ）、８．５９（ｓ）、８．１４（ｄ、Ｊ＝９  Ｈｚ）、８．０−７．９（ｍ）、７．８２（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ）、７．４−７．２（ｍ）、６．９８（ｓ）、２．８７（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ）、２．６５（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ）、１．７−１．５（ｍ）、１．４−１．３（ｍ）。
【０２３４】
Ｎ−（９−アクリジル）−メシチレンスルホンアミド（５４１）。３５０ｍＬのＣＨＣｌ3中の４．００ｇ（２０．６ｍｍｏｌ）の９−アミノアクリジン５４０の懸濁液に、２．９ｍＬ（２０．８ｍｍｏｌ）のＥｔ3Ｎおよび４．５０ｇ（２０．６ｍｍｏｌ）のメシチレンスルホニルクロリドを添加した。この反応混合物を７２ｈｒ還流した。次いで、この反応混合物を濾過し、そして溶媒をエバポレートした。この物質を、最初にＣＨ2Ｃｌ2中の１％  ＭｅＯＨで溶出し、次いでＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨで溶出することによるシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して、４５８．４ｍｇ（６％）のスルホンアミド５４１を橙色固体として得た：1Ｈ  ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ９．２５（ｓ、１Ｈ）、８．７７（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、７．４６（ｔ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、７．２１（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、７．１５（ｔ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、７．０２（ｓ、２Ｈ）、２．７８（ｓ、６Ｈ）、２．３６（ｓ、３Ｈ）。
【０２３５】
Ｎ−（９−アクリジル）−Ｎ−（５−ブロモペンチル）−メシチレンスルホンアミド（５４２）。２０ｍＬのＤＭＦ中の４５０ｍｇ（１．２０ｍｍｏｌ）のＮ−（９−アクリジル）−メシチレンスルホンアミドの溶液をアルゴン雰囲気下に置き、そして０℃に冷却した。この冷却した溶液に、３６ｍｇ（１．４２ｍｍｏｌ）のＮａＨ（９５％）を添加した。この反応混合物を０℃で５分間攪拌し、そして室温で１ｈｒ攪拌した。次いで、この反応混合物を０℃に冷却し、そして１．６５ｍＬ（１２．１ｍｍｏｌ）の１，５−ジブロモペンタンを添加した。この反応混合物を７０〜８０℃で２３ｈｒ攪拌した。この反応混合物を冷却し、そして２０ｍＬの水でクエンチした。この混合物をＣＨ2Ｃｌ2と水との間で分配した。水相をＣＨ2Ｃｌ2（２×２０ｍＬ）で洗浄した。このＣＨ2Ｃｌ2洗浄液を有機相と合わせ、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。この物質を、ＣＨ2Ｃｌ2を用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して３８２．２ｍｇ（６０％）のブロミド５４２を橙色オイルとして得た：1Ｈ  ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ８．２５（ｄ、Ｊ＝９  Ｈｚ、２Ｈ）、７．９４（ｄ、Ｊ＝９  Ｈｚ、２Ｈ）、７．７６（ｔ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、７．４５（ｔ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、６．８７（ｓ、２Ｈ）、４．０−３．９（ｍ、２Ｈ）、３．２７（ｔ、Ｊ＝６．５  Ｈｚ、２Ｈ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）、２．２２（ｓ、６Ｈ）、１．８−１．６（ｍ、４Ｈ）、１．４−１．３（ｍ、２Ｈ）。
【０２３６】
メシチル−アクリジン−キノン（５４３）。１５ｍＬのベンゼン中の６３２．６ｍｇ（１．２０ｍｍｏｌ）のＮ−（９−アクリジル）−Ｎ−（５−ブロモペンチル）−メシチレンスルホンアミド５４２の溶液に、３３８．４ｍｇ（１．２０ｍｍｏｌ）の銀塩を添加した。この反応混合物を２４ｈｒ還流した。この反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして濾過して不溶性塩を取り出した。溶媒を除去し、そしてこの物質を、Ｅｔ2Ｏを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して、３３３．１ｍｇ（４５％）のｏ−キノン５４３を橙色ガラス状固体として得た：1Ｈ  ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）δ  ８．２４（ｄ、Ｊ＝９  Ｈｚ、２Ｈ）、８．１１（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１Ｈ）、７．９５（ｄ、Ｊ＝９  Ｈｚ、２Ｈ）、７．８−７．７（ｍ、３Ｈ）、７．７−７．５（ｍ、２Ｈ）、７．５−７．４（ｍ、２Ｈ）、６．８６（ｓ、２Ｈ）、５．８５（ｓ、１Ｈ）、４．１−４．０（ｍ、４Ｈ）、２．２９（ｓ、３Ｈ）、２．２１（ｓ、６Ｈ）、１．９−１．５（ｍ、４Ｈ）、１．５−１．４（ｍ、２Ｈ）。
【０２３７】
アクリジン−キノン（５４４）（ＳＬ−１１０５９）。アルゴン雰囲気下で、１５１．４ｍｇ（２．４５×１０-4ｍｏｌ）のメシチル−アクリジン−キノン５４３を、ＴＨＦ中の０．１Ｍ  ＳｍＩ2３０ｍＬに溶解した。次いで、２．２ｍＬ（１８．２ｍｍｏｌ）のＤＭＰＵを滴下した。この反応混合物を２４ｈｒ還流した。沈殿物を除去するための濾過および溶媒のエバポレーションによって、橙色オイルを得て、この橙色オイルを、ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して、４８．７ｍｇ（４５％）のアクリジン−キノン５４４を橙色ガラス状固体として得た：1Ｈ  ＮＭＲ（３００  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．５４（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、２Ｈ）、７．９６（ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ、２Ｈ）、７．９２（ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、１Ｈ）、７．７９（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、２Ｈ）、７．７−７．６（ｍ、３Ｈ）、７．５１（ｔ、Ｊ＝８  Ｈｚ、２Ｈ）、６．０１（ｓ、１  Ｈ）、４．２０（ｔ、Ｊ＝６  Ｈｚ、２Ｈ）、４．１３（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ、２Ｈ）、２．１−１．９（ｍ、４Ｈ）、１．７−１．６（ｍ、２Ｈ）。
【０２３８】
（キノールホスフェートの合成：一般的手順）
１０ｍＬのベンゼン中の５００ｍｇ（２．０５ｍｍｏｌ）の４−ペンチルオキシ−１，２−ナフトキノン５４６の溶液に、２．３ｍＬ（２５．１ｍｍｏｌ）のジベンジルホスファイトを添加した。この反応混合物を窒素下で２．５ｈｒ還流し、その後、ベンゼンを除去した。ＣＨ2Ｃｌ2中の１％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでの、残渣のカラムクロマトグラフィーによって、７２９．３ｍｇ（７０％）のアリールジベンジルホスフェート５４７（２つの位置異性体の混合物）を橙色オイルとして得た：Ｒf＝０．５１、０．６６（ＣＨ2Ｃｌ2中の１％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）主な位置異性体δ  ８．１（ｄ）、８．０（ｂｒ、ｓ）、７．８（ｄ）、７．４（ｔ）、７．３−７．１（ｍ）、６．５０（ｓ）、５．３−５．０（ＡＢＸのＡＢ、δA＝５．１６、δB＝５．０８、ＪAB＝１１．５  Ｈｚ、ＪAX＝８．３  Ｈｚ、ＪBX＝８．８  Ｈｚ）、４．０１（ｔ、Ｊ＝６  Ｈｚ）、２．０−１．８（ｍ）、１．６−１．３（ｍ）、０．９６（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3、ＴＭＳ）両方の位置異性体δ  １５３．４、１４４．７、１３５．６（ｄ、Ｊ＝６．１  Ｈｚ、少ない方の位置異性体）、１３４．８（ｄ、Ｊ＝５．５  Ｈｚ、主な位置異性体）、１２８．７−１２７．７（ｍ）、１２７．２、１２３．０、１２２．２、１２１．４、１１９．８、９９．５、７１．０（ｑ、Ｊ＝４．８  Ｈｚ）、６８．３、２８．８、２２．５。
【０２３９】
４０ｍＬのＭｅＯＨ中の１．６３７ｇ（３．２３ｍｍｏｌ）のアリールジベンジルホスフェート５４７の溶液に、１５０ｍｇの１０％  Ｐｄ／Ｃを添加した。この反応混合物を水素雰囲気（バルーン）下に置き、そして室温で１ｈｒ攪拌した。濾過による触媒の除去および溶媒のエバポレーションによって、ホスフェートを褐色のオイルとして得た。このホスフェートを、６ｍＬのベンゼンに溶解した。９ｍＬのヘキサンの添加および冷却によって沈殿物を得た。この沈殿物を濾過によって回収し、ベンゼン／ヘキサン＝２：３で洗浄し、そして乾燥して７９７．３ｍｇ（７６％）のアリールホスフェート５４８を灰色固体として得た；Ｒf＝０．７７（ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．１３（ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、１  Ｈ）、７．９６（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ  ；１Ｈ）、７．４９（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ、１  Ｈ）、７．３２（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ、１  Ｈ）、６．５９（ｓ、ｌＨ）、４．１３（ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ）、２．０−１．８（ｍ、２Ｈ）、１．６−１．３（ｍ、４Ｈ）、０．９６（ｔ、Ｊ＝７  Ｈｚ、３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ
１５３．３（ｄ、Ｊ＝１．３  Ｈｚ）、１４５．８（狭いｔ）、１２９．３（ｄ、Ｊ＝３．３  Ｈｚ）、１２７．４、１２３．２、１２２．２、１２１．６、１２０．９、１００．０、６８．７、２９．２、２８．７、２２．７、１３．９。
【０２４０】
エチル２’−アセチル−５’−メトキシフェニルアセテート（５５０）。塩化アセチル（２１．３ｍＬ、３００ｍｍｏｌ）を、０℃のＣＳ2（２００ｍＬ）中のＡｌＣｌ3（２６．７ｇ、２００ｍｍｏｌ）とエチル３’−メトキシフェニルアセテート（５４９、２８．６６ｇ、１４７．６ｍｍｏｌ）との混合物に添加した。氷浴を除去し、そしてこの混合物を、ＨＣｌガスを吹き込みながら２０℃まで温めた。２０℃で３０分間の攪拌後、この混合物を３０分間還流した。冷却後、この混合物に氷（２００ｇ）および水性２Ｎ  ＨＣｌ（４００ｍＬ）を添加した。得られた混合物を、酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。この抽出物を水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）とヘキサン（６０ｍＬ）との混合物から結晶化して５５０（３０．６０ｇ、８８％）を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  ７．８４（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．６  Ｈｚ）、６．８６（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．６  Ｈｚ）、６．７５（１  Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．６  Ｈｚ）、４．１７（２Ｈ、ｑ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ）、３．９２（２Ｈ、ｓ）、３．８６（３Ｈ、ｓ）、２．５５（３Ｈ、ｓ）、１．２８（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ）；13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  １９９．０４（ｓ）、１７１．４４（ｓ）、１６２．２２（ｓ）、１３７．７０（ｓ）、１３２．９７（ｄ）、１２９．４８（ｓ）、１１８．６８（ｄ）、１１１．８４（ｄ）、６０．６０（ｔ）、５５．３９（ｑ）、４１．１７（ｔ）、２８．３９（ｑ）、１４．２４（ｑ）。
【０２４１】
２−ヒドロキシ−７−メトキシ−１，４−ナフトキノン（５５１）。ナトリウムエトキシド（１０．４０ｇ、１５０ｍｍｏｌ）を、２０℃の無水アルコール（２００ｍＬ）中の５５０（３０．４５ｇ、１２８．９０ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加した。この混合物を１ｈ攪拌した後、空気を２０ｈ吹き込んだ。この混合物を減圧下で濃縮した。残渣を水（５００ｍＬ）に溶解し、そしてジエチルエーテル（２００ｍＬ）で抽出した。このエーテル層を水（５０ｍＬ）で向流−抽出した。合わせた水相を濃ＨＣｌ（３０ｍＬ）で酸性化した。この混合物を濾過して、５５１（１４．４２ｇ、５５％）を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ  １１．５６（１Ｈ、ｓ、ｂｒ）、７．８９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．５  Ｈｚ）、７．４２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．８  Ｈｚ）、７．３６（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．５、２．８  Ｈｚ）、６．１０（１Ｈ、ｓ）、３．９２（３Ｈ、ｓ）；13Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１８４．０７（ｓ）、１８１．２０（ｓ）、１６２．９２（ｓ）、１５９．１６（ｓ）、１３２．３５（ｓ）、１２７．８２（ｄ）、１２５．１６（ｓ）、１２０．０２（ｄ）、１１０．８５（ｓ）、１０９．９４（ｄ）、５５．９０（ｑ）。
【０２４２】
７−メトキシ−ラパコール（５５２）。ＨＭＰＡ（１００ｍＬ）中のＫ2ＣＯ3（３０ｍｍｏｌ）と５５１（１０．２１ｇ、５０ｍｍｏｌ）との混合物を３０分間攪拌し、このとき、これは懸濁液となった。ジメチルアリルブロミド（８．７ｍＬ、７５ｍｍｏｌ）およびＫＩ（４．１５ｇ、２５ｍｍｏｌ）を添加し、そして攪拌を２０℃で２０ｈ続けた。この混合物を氷水（６００ｍＬ）および濃ＨＣｌ（３０ｍＬ）で希釈し、そして酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。いくらかの固体を濾過によって回収して、第１の部分の５５３（０．６２８ｇ）を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  ８．０１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．６  Ｈｚ）、７．５６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．７  Ｈｚ）、７．２０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．７  Ｈｚ）、６．０９（１Ｈ、ｓ）、５．４９（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．８
Ｈｚ）、４．５７（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．８  Ｈｚ）、３．９４（３Ｈ、ｓ）、１．８１（３Ｈ、ｓ）、１．７６（３Ｈ、Ｓ）。酢酸エチル抽出物をプールし、飽和ＮａＨＣＯ3（２×１５０ｍＬ）で抽出し、そして得られた水性抽出物を濃ＨＣｌで酸性化し、そして濾過して５５１（２．１０ｇ、２１％）を回収した。
【０２４３】
主な酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮した。残渣を、１Ｎ  ＮａＯＨ（５００ｍＬ）とジエチルエーテル（３００ｍＬ）との混合物に溶解した。分離後、有機層を１Ｎ  ＮａＯＨ（１００ｍＬ）で抽出し、そして減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（ヘキサン中で１０％酢酸エチル）にかけて、第２の部分の５５３（３．４３ｇ、合計３０％）を得た。
【０２４４】
ＮａＯＨ抽出物を濃ＨＣｌ（５０ｍＬ）によって酸性化し、そして酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。プールした抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、減圧下で濃縮し、そして残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（ヘキサン中の１０％酢酸エチル）  によって精製して、５５２（４．３９ｇ、３２％）を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  ８．０５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．６  Ｈｚ）、７．５１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．７  Ｈｚ）、７．２０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．７  Ｈｚ）、７．１８（ＯＨ、ｓ）、５．２０（１Ｈ、ｔｔ、Ｊ＝６．７、１．５  Ｈｚ）、３．９３（３Ｈ、ｓ）、３．２９（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．２  Ｈｚ）、１．７９（３Ｈ、ｓ）、１．６８（３Ｈ、ｓ）；13Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  １８３．９９（ｓ）、１８１．８５（ｓ）、１６３．２８（ｓ）、１５２．５１（ｓ）、１３３．７１（ｓ）、１３１．１８（ｓ）、１２９．０４（ｄ）、１２６．２３（ｓ）、１２３．２８（ｓ）、１２０．６９（ｄ）、１１９．８２（ｄ）、１０９．８２（ｄ）、５５．８９（ｑ）、２５．７７（ｑ）、２２．６０（ｔ）、１７．９０（ｑ）。
【０２４５】
８−メトキシ−β−ラパコン（５５４）。濃Ｈ2ＳＯ4（２５ｍＬ）を２０℃の化合物５５２（２．４５４ｇ）に添加した。２０分間の攪拌後、この混合物を氷水（５００ｍＬ）で希釈した。得られた赤色沈殿物５５４を濾過によって回収し、水で洗浄し、そして減圧下で乾燥した。これは、赤色粉末（２．３６ｇ、９６％）として得られた：1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  ７．７２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．６  Ｈｚ）、７．５６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．７  Ｈｚ）、７．１２（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．６、２．７  Ｈｚ）、３．９０（３Ｈ、Ｓ）、２．５５（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．７  Ｈｚ）、１．８４（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．７  Ｈｚ）、１．４６（６Ｈ、Ｓ）。
【０２４６】
８−ヒドロキシ−β−ラパコン（５５５）。三臭化ホウ素（１５．０ｍＬ、ＣＨ2Ｃｌ2中の１．０Ｍ）を、０℃の無水ＣＨ2Ｃｌ2（４０ｍＬ）中の５５４（１．０５ｇ、ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。１５分間の攪拌後、この混合物を２０℃まで温め、そして２ｈ攪拌し続けた。氷水（５００ｍＬ）を添加し、この混合物をＣＨＣｌ3（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物を乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残渣を２０℃の濃Ｈ2ＳＯ4（２０ｍＬ）で処理した。この混合物を氷水（５００ｍＬ）で希釈し、そしてＣＨＣｌ3（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を水性５％  ＮａＨＳＯ3（３×１５０ｍＬ）で再抽出した。この水性抽出物を濃ＨＣｌ（１００ｍＬ）で酸性化し、そしてＣＨＣｌ3（３×１５０ｍＬ）で抽出した。この抽出物を乾燥し、そして濃縮して５５５（２７０ｍｇ、２７％）を得た：1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ  ９．８１（ＯＨ、ｓ）、７．６４（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．５  Ｈｚ）、７．４９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．６  Ｈｚ）、７．０６（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．５、２．６  Ｈｚ）、２．５１（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ）、１．８４（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ）、１．４５（６Ｈ、ｓ）；ＨＲＭＳ（ｍ／ｚ）Ｃ15Ｈ14Ｏ4についての計算値２５８．０８９２、実測値２５８．０８８５。
【０２４７】
（１，２−ナフトキノン亜硫酸水素塩付加物の調製）
一般手順Ｉ。このキノンを１０％  ＮａＨＳＯ3中に溶解した。室温で、または冷却しながら数時間静置した後、このキノン−亜硫酸水素塩付加物が沈殿した。このキノン−亜硫酸水素塩を濾過によって回収し、そして乾燥した。このキノン−亜硫酸水素塩を、その重さの３００％の亜硫酸水素ナトリウムの添加によって安定化した。
【０２４８】
一般的手順ＩＩ。このキノンを、３００重量％を超える過剰なＮａＨＳＯ3は存在しない（キノン亜硫酸水素塩に対して）容量の溶液中の１０％  ＮａＨＳＯ3に溶解する。キノン−亜硫酸水素塩が沈殿しなかった場合、これを、減圧下での水のエバポレーションによってこの溶液から回収した。この手順によって、３００重量％過剰なＮａＨＳＯ3を有するキノン−亜硫酸水素塩付加物を得た。
【０２４９】
（モルホリノ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコンの合成（スキーム５１３））
（Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン）
１０ｍＬのＤＭＦ中の１．０００ｇ（２．４３７ｍｍｏｌ）のβ−Ａｌａ−β−ラパコン−ＴＦＡ塩（ＳＬ−１１００６）および６００．３ｍｇ（２．４３７ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｇｌｎの溶液に、３９５．３ｍｇ（２．９２５ｍｍｏｌ）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを添加した。この混合物を氷浴中で冷却した。次いで、２７０μＬ（２．４５６ｍｍｏｌ）のＮ−メチルモルホリンを添加し、続いて５５３．０ｍｇ（２．６８０ｍｍｏｌ）のＤＣＣを添加した。この反応混合物を氷浴中で３０分間攪拌し、そして室温で６．５ｈｒ攪拌した。次いで、この反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして濾過した。この濾液を飽和ＮａＨＣＯ3（５０ｍＬ）で、５％クエン酸（３×５０ｍＬ）で、飽和ＮａＨＣＯ3（２×５０ｍＬ）で、飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによる精製によって６９２．７ｍｇ（５１％）のペプチドを橙色のガラス状固体として得た：Ｒf＝０．１１（ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．００（ｄｄ、Ｊ＝７．６、１．３  Ｈｚ、ＩＨ）、７．９−７．７（ｍ、２Ｈ）、７．６４（ｔｄ、Ｊ＝７．６、１．３  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５−７．４（ｂｒ  ｄ、ＮＨ）、６．９（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．２（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、５．２−５．１（ｍ、ＩＨ）、４．１−４．０（ｍ、１Ｈ）、３．５−３．４（ｍ、２Ｈ）、２．７−２．５、（ｍ、４Ｈ）、２．３−２．２（ｍ、２Ｈ）、２．０−１．８（ｍ、２Ｈ）、１．５３（ｓ、３Ｈ）、１．５１（ｓ、３Ｈ）、１．３９（ｓ、９Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７９．８、１７８．８、１７５．０、１７２．５、１７１．６、１６０．８、１５６．２、１１１．１、１３５．６、１３３．０、１３１．６、１３１．２、１２８．７、１２４．８、８０．８、８０．３、７９．２、７０．２、５４．８、３５．６、３４．７、３２．１、２８．４、２４．８、２３．２、２３．１。
【０２５０】
（Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン）
１０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の６８１．９ｍｇ（１．２２３ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコンの溶液に、１０ｍＬのＴＦＡを添加した。この反応混合物を室温で２５〜３０分間攪拌した。溶媒を減圧下で除去した。ＣＨ2Ｃｌ2中の１０〜２０％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、５７８．５ｍｇ（８３％）のＴＦＡ塩を橙色のガラス状固体として得た：Ｒf＝０．５５（ＢｕＯＨ／Ｈ2Ｏ／ＡｃＯＨ＝５：３：２）、０．０５（ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨ）、０．２４（ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨ）。
【０２５１】
（Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン）
４．６ｍＬのＤＭＦ中の６５０．２ｍｇ（１．１３８ｍｍｏｌ）のＧｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン−ＴＦＡ塩および２６３．０ｍｇ（１．１３８ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｌｅｕの溶液に、１８４．５ｍｇ（１．３６５ｍｍｏｌ）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを添加した。この混合物を氷浴中で冷却した。次いで、１３０μＬ（１．１８２ｍｍｏｌ）のＮ−メチルモルホリンを添加し、続いて２５８．４ｍｇ（１．２５２ｍｍｏｌ）のＤＣＣを添加した。この反応混合物を氷浴中で３０分間攪拌し、そして室温で６．５ｈｒ攪拌した。次いで、この反応混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして濾過した。この濾液を飽和ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）で、５％クエン酸（４×３０ｍＬ）で、飽和ＮａＨＣＯ3（３×３０ｍＬ）で、飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中での５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによる精製によって、３９６．９ｍｇ（５１％）のペプチドを黄色−橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．１１（ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨ）、０．４５（ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨ）、０．８１（ＣＨ2Ｃｌ2中の２０％  ＭｅＯＨ）、０．７８（ＢｕＯＨ／Ｈ2Ｏ／ＡｃＯＨ＝５：３：２）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6；ＴＭＳ）δ  ８．００（ｄ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．９−７．７（ｍ、２Ｈ）、７．６４（ｔ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、１Ｈ）、７．５（ｂｒ  ｄ、ＮＨ）、６．９（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．３（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、５．２−５．１（ｍ、１Ｈ）、４．４−４．２（ｍ、１Ｈ）、４．１−４．０（ｍ、１Ｈ）、３．６−３．３（ｍ、２Ｈ）、２．７−２．５（ｍ、４Ｈ）、２．３−２．２（ｍ、２Ｈ）、２．０−１．８（ｍ、２Ｈ）、１．８−１．７（ｍ、１Ｈ）、１．６−１．５（ｍ、２Ｈ）、１．５３（ｓ、３Ｈ）、１．５１（ｓ、３Ｈ）、１．３９（ｓ、９Ｈ）、１．０−０．９（ｍ、６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７９．９、１７９．０、１７５．２、１７３．４、１７２．０、１７１．５、１６０．９、１５６．８、１３５．７、１３３．１、１３１．６、１３１．２、１２８．８、１２４．９、１１１．２、８０．９、８０．４、７９．５、７０．３、５４．５、５３．５、４１．７、３５．８、３４．８、３２．１、２８．５、２７．８、２５．４、２４．９、２３．４、２３．２、２１．９。
【０２５２】
（Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン）
４ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の３１７．０ｍｇ（４．７２５×１０-4ｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコンの溶液に、４ｍＬのＴＦＡを添加した。この反応混合物を室温で２５〜３０分間攪拌した。この溶媒を減圧下で除去した。ＣＨ2Ｃｌ2中の２０％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって２７７．３ｍｇ（８６％）のＴＦＡ塩を橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．１７（ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨ）、０．３９（ＣＨ2Ｃｌ2中の２０％  ＭｅＯＨ）、０．７４（ＢｕＯＨ／Ｈ2Ｏ／ＡｃＯＨ＝５：３：２）。
【０２５３】
（Ｎα−Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン）
１．６ｍＬのＤＭＦ中の２７７．３ｍｇ（４．０５０×１０-4ｍｏｌ）のＬｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン−ＴＦＡ塩および１６８．０ｍｇ（４．０４９×１０-4ｍｏｌ）のＮα−Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）の溶液に、６５．７ｍｇ（４．８６２×１０-4ｍｏｌ）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを添加した。この混合物を氷浴中で冷却した。次いで、５０μＬ（４．５４８×１０-4ｍｏｌ）のＮ−メチルモルホリンを添加し、続いて９１．９ｍｇ（４．４５４×１０-4ｍｏｌ）のＤＣＣを添加した。この反応混合物を氷浴中で３０分間攪拌し、そして室温で６．５ｈｒ攪拌した。次いで、この反応混合物を２ｍＬのＣＨＣｌ3で希釈し、そして濾過した。濾液を飽和ＮａＨＣＯ3（２０ｍＬ）で、５％クエン酸（４×２０ｍＬ）で、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２０ｍＬ）で、飽和ＮａＣｌ（２×２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによる精製によって、１６７．５ｍｇ（４２％）のペプチドを橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．０８（ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨ）、０．４４（ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．０−７．７（ｍ、６Ｈ、キノン−Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、およびＮＨ）、７．７−７．６（ｍ、ＮＨ）、７．５−７．４（ｍ、２Ｈ、Ｃｌ−Ｃｂｚ）、７．４−７．３（ｍ、２Ｈ、Ｃｌ−Ｃｂｚ）、７．２０（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．７３（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．９０（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７．９  Ｈｚ、ＮＨ）、５．０７（ｓ、３Ｈ）、４．３−４．２（ｍ、１Ｈ）、４．２−４．１（ｍ、１Ｈ）、３．９−３．８（ｍ、１Ｈ）、３．３−３．２（ｍ、２Ｈ）、３．０−２．９（ｍ、２Ｈ）、２．８−２．７（ｍ、２Ｈ）、２．６−２．４（ｍ、２Ｈ）、２．１−２．０（ｍ、２Ｈ）、１．８−１．３（ｍ、１１Ｈ）、１．４３（ｓ、３Ｈ）、１．３９（ｓ、３Ｈ）、１．３６（ｓ、９Ｈ）、０．８５（ｄ、Ｊ＝６．５  Ｈｚ、３Ｈ）、０．８１（ｄ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ、３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７８．６、１７７．８、１７３．５、１７３．４、１７２．０、１７１．７、１７１．０、１７０．５、１６２．２、１５５．７、１３４．９、１３４．５、１３２．２、１３１．４、１３０．９、１２９．９、１２９．５、１２９．２、１２７．９、１２７．２、１２３．７、７９．７、７９．３、７８．０、６８．９、６２．４、５４．２、５２．０、５０．８、４０．７、３５．７、３３．５、３１．２、３０．７、２９．０、２８．１，２７．８、２４．１，２３．９、２３．０、２２．８、２２．７、２２．１、２１．４。
【０２５４】
（Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン）
２ｍＬのＣＨＣｌ3中の２０３．１ｍｇ（２．０９９×１０-4ｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコンの懸濁液に、１．７ｍＬのＴＦＡ（溶解した物質）を添加した。この反応混合物を室温で２０〜２５分間攪拌した。溶媒を減圧下で除去した。ＣＨ2Ｃｌ2中の２０％
ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、２０２．０ｍｇ（９８％）のＴＦＡ塩が橙色ガラス状固体として得られた：Ｒf＝０．１０（ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨ）、０．４０（ＣＨ2Ｃｌ2中の２０％  ＭｅＯＨ）。
【０２５５】
（モルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン）
１．０ｍＬのＤＭＦ中の１９４．８ｍｇ（１．９８５×１０-4ｍｏｌ）のＬｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン−ＴＦＡ塩および６１．２ｍｇ（１．９８５×１０-4ｍｏｌ）のモルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）の溶液に、３２．２ｍｇ（２．３８３×１０-4ｍｏｌ）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを添加した。この混合物を氷浴中で冷却した。次いで、２３μＬ（２．０９２×１０-4ｍｏｌ）のＮ−メチルモルホリンを添加し、続いて４５．１ｍｇ（２．１８６×１０-4ｍｏｌ）のＤＣＣを添加した。この反応混合物をを氷浴中で３５分間攪拌し、そして室温で６ｈｒ攪拌した。次いで、反応混合物を２ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして濾過した。濾液を５％クエン酸（３×２０ｍＬ）で、飽和ＮａＨＣＯ3（３×２０ｍＬ）で、飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによる精製によって、８３．３ｍｇ（３６％）のペプチドを橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．０５（ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨ）、０．４１（ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．０−７．７（ｍ、７Ｈ、キノン−Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、ＮＨ）、７．７−７．６（ｍ、ＮＨ）、７．５−７．２（ｍ、１０Ｈ、Ｃｌ−Ｃｂｚ、ＯＢｎ、ＮＨ）、６．７５（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．６０（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７．１  Ｈｚ、ＮＨ）、５．０７（ｓ、３Ｈ）、４．４９（ｓ、２Ｈ）、４．４−４．３（ｍ、１Ｈ）、４．３−４．０（ｍ、３Ｈ）、３．７−３．６（ｍ、２Ｈ）、３．６−３．５（ｍ、４Ｈ）、３．３−３．２（ｍ、６Ｈ）、３．０−２．９（ｍ、２Ｈ）、２．８−２．７（ｍ、２Ｈ）、２．５−２．４（ｍ、２Ｈ）、２．１−２．０（ｍ、２Ｈ）、１．８−１．３（ｍ、１１  Ｈ）、１．４３（ｓ、３Ｈ）、１．３８（ｓ、３Ｈ）、０．８２（ｄ、Ｊ＝６．０  Ｈｚ、３Ｈ）、０．７８（ｄ、Ｊ＝６．１  Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２５６】
（モルホリノ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン（ＳＬ−１１１４７））
１．５ｍＬのＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2＝１：９中の７８．３ｍｇ（６．７６３×１０-5ｍｏｌ）のモルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコンの溶液に、３０．６ｍｇの１０％  Ｐｄ／Ｃを添加した。次いで、０．５ｍＬのＭｅＯＨおよび１滴のＨＣｌを添加した。この反応混合物をＨ2雰囲気下（バルーン）に置き、そして室温で１６ｈｒ攪拌した。濾過による触媒の除去および溶媒のエバポレーションによって６４．５ｍｇの粗キノン−テトラペプチドを得た。この物質を分取ＨＰＬＣによって精製して１４．４ｍｇ（２４％）を得た：Ｒf＝０．０４（ＣＨ2Ｃｌ2中の２０％
ＭｅＯＨ）。
【０２５７】
（Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）ｔ−ブチルエステル）
イソブチレンを、容量が３０ｍＬと４０ｍＬとの間になるまで５００ｍＬ圧力ボトル中に濃縮した。２０ｍＬのＴＨＦ中の３．０２ｇ（７．２３ｍｍｏｌ）のＮ−Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）の溶液を添加し、続いて２ｍＬの濃Ｈ2ＳＯ4を添加した。このボトルを密閉し、そして室温で２４ｈｒ振盪した。この反応混合物を、１５０ｍＬの酢酸エチルと１５０ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ3との氷冷混合物に注いだ。有機相を水（３×５０ｍＬ）で洗浄し、そしてＭｇＳＯ4で乾燥した。溶媒を除去し、そしてＣＨ2Ｃｌ2を用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによて２．４５３ｇ（７２％）のｔ−ブチルエステルを無色のオイルとして得た：1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ７．８５（ｄ、Ｊ＝７．５  Ｈｚ、２Ｈ）、７．７４（ｄ、Ｊ＝７．３  Ｈｚ、２Ｈ）、７．５−７．３（ｍ、９Ｈ）、６．７１（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝８．６  Ｈｚ、ＮＨ）、４．５５（ＡＢｑ、δA＝４．５７、δB＝４．５２、ＪAB＝１２  Ｈｚ、２Ｈ）、４．４−４．２（ｍ、４Ｈ）、３．９−３．７（ＡＢＸのＡＢ、δA＝３．８９、δB＝３．７５、ＪAB＝９．５  Ｈｚ、ＪAX＝４．６  Ｈｚ、ＪBX＝３．６  Ｈｚ、２Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７０．０、１５６．８、１４５．０、１４４．９、１４２．０、１２９．０、１２８．４、１２８．３、１２８．２、１２７．８、１２６．１、１２０．７、８１．９、７３．６、７０．９、６７．３、５５．９、４７．９、２８．１。
【０２５８】
（Ｓｅｒ（ＯＢｎ）ｔ−ブチルエステル）
５０ｍＬ  のＣＨ2Ｃｌ2中の３．０４９ｇ（６．４４ｍｍｏｌ）のＮ−Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）ｔ−ブチルエステルの溶液に、３ｍＬのピペリジンを添加した。この反応混合物を室温で２．３ｈｒ攪拌した。溶媒の除去およびＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、１．３０６ｇ（８１％）のＳｅｒ（ＯＢｎ）ｔ−ブチルエステルを無色のオイルとして得た：Ｒf＝０．１２（ＣＨ2Ｃｌ2中の２％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ７．４−７．２（ｍ、５Ｈ）、４．５３（Ａｂｑ、δA＝４．５５、δB＝４．５２、ＪAB＝１２  Ｈｚ、２Ｈ）、３．７−３．６（ｍ、ＡＢＸのＡＢ、δA＝３．６８、δB＝３．６１、ＪAB＝１２  Ｈｚ、ＪAX＝４．９  Ｈｚ、ＪBX＝４．４  Ｈｚ、２Ｈ）、３．５−３．４（ｍ、ＡＢＸのＸ、δX＝１．４３（ｓ、９Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７３．９、１３９．５、１２８．９、１２８．２、１２８．１、８０．７、７３．８、７３．５、５６．２、２８．１。
【０２５９】
（モルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）ｔ−ブチルエステル）
４ｍＬのピリジン中の１４０．６ｍｇ（５．５９×１０-4ｍｏｌ）のＳｅｒ（ＯＢｎ）ｔ−ブチルエステルの溶液に、６６μＬ（５．６６×１０-4ｍｏｌ）の４−モルホリンカルボニルクロリドを添加した。１ｈｒの攪拌後、この反応混合物を７５ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2と６０ｍＬの水との間で分配した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ3（５０ｍＬ）で、１Ｎ  ＨＣｌ（２×５０ｍＬ）で、飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。粗アミドを、酢酸エチルを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して、８０．９ｍｇ（４０％）のアミドを淡橙色オイルとして得た：Ｒf＝０．５８（酢酸エチル）、０．６０（ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ７．４−７．２（ｍ、５Ｈ）、５．８（ｂｒ  ｄ、ＮＨ）、４．５３（Ａｂｑ、δA＝４．５５、δB＝４．５２、ＪAB＝１２  Ｈｚ、２Ｈ）、４．５−４．４（ｍ、ＡＢＸのＸ、δX＝４．４７、１Ｈ）、３．９−３．６（ｍ、ＡＢＸのＡＢ、δA＝３．８６、δB＝３．６９、ＪAB＝９．４  Ｈｚ、ＪAX＝４．４  Ｈｚ、ＪBX＝３．７  Ｈｚ、２Ｈ）、３．６３−３．５８（ｍ、４Ｈ）、３．４−３．３（ｍ、４Ｈ）、１．４４（ｓ、９Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７０．９、１５７．９、１３９．２、１２９．０、１２８．３、１２８．２、８１．５、７３．５、７１．３、６７．０、５５．５、４４．９、２８．１。
【０２６０】
（モルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ））
１．５ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2と１．５ｍＬのＴＦＡとの混合物中の８０ｍｇ（２．１９５×１０-4ｍｏｌ）のモルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）ｔ−ブチルエステルの溶液を、室温で３０分間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、そして残りのＴＦＡを、アセトンとのエバポレーションを繰り返すことによって除去した。残渣をＥｔ2Ｏで粉砕した。次いでこの物質を濾過し、Ｅｔ2Ｏで洗浄し、０．５ｍＬアセトンで洗浄し、Ｅｔ2Ｏで再度洗浄し、そして乾燥して４１．８ｍｇ（６２％）のアミノ酸をオフホワイトの固体として得た：Ｒf＝０．７２（ＢｕＯＨ／Ｈ2Ｏ／ＡｃＯＨ＝５：３：２）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ７．４−７．３（ｍ、５Ｈ）、６．０−５．９（ｂｒ  ｄ、ＮＨ）、４．６−４．５（ｍ、３Ｈ、ＯＣＨ2ＰｈおよびＡＢＸのＸ）、３．９５−３．７５（ｍ、ＡＢＸのＡＢ、δA＝３．９０、δB＝３．７３、ＪAB＝９．６  Ｈｚ、ＪAX＝４．９  Ｈｚ、ＪBX＝３．９  Ｈｚ、２Ｈ）、３．６−３．５（ｍ、４Ｈ）、３．４−３．３（ｍ、４Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）ｄ  １７２．４、１５７．２、１３８．２、１２８．２、１２７．４、１２７．４、７２．０、６９．５、６５．９、５３．８、４３．９。
【０２６１】
（モルホリノ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコンの合成（スキーム５１４））
（Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−β−ラパコン）
３３ｍＬのＤＭＦ中の２．８２０ｇ（１２．２０ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｌｅｕおよび１．９７６ｇ（１２．１９ｍｍｏｌ）の１，１−カルボニルジイミダゾールの溶液を室温で２０分間攪拌した。この溶液に、２．１００ｇ（８．１３０ｍｍｏｌ）の３−ヒドロキシ−β−ラパコンを添加し、続いて１．６ｍＬ（１０．７０ｍｍｏｌ）のＤＢＵを添加した。室温で５ｈｒ攪拌した後、この反応混合物を、２００ｍＬの水と２００ｍＬのＣＨＣｌ3との間で分配した。水相をＣＨＣｌ3（４×５０ｍＬ）で洗浄した。ＣＨＣｌ3抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中の２％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、２．０３８ｇ（５３％）のキノンを橙色ガラス状固体（および２つのジアステレオマーの混合物）として得た：Ｒf＝０．４５（ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、アセトン−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．１−８．０（ｍ、１Ｈ）、８．０−７．９（ｍ、１Ｈ）、７．９−７．８（ｍ、１Ｈ）、７．７−７．６（ｍ、１Ｈ）、６．３４（ｂｒ  ｄ、ＮＨ）、５．２−５．１（ｍ、１Ｈ）、４．２−４．１（ｍ、１Ｈ）、２．９−２．８（ｍ、１Ｈ）、２．７−２．５（ｍ、１Ｈ）、１．８−１．６（ｍ、３Ｈ）、１．５６（ｓ、１．５Ｈ）、１．５３（ｓ、３Ｈ）、１．５２（ｓ、１．５Ｈ）、１．３４（ｓ、４．５Ｈ）、１．３３（ｓ、４．５Ｈ）、０．９１（ｄ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．８８（ｄ、Ｊ＝６．７  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．８４（ｄ、Ｊ＝６．３  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．８２（ｄ、Ｊ＝６．１  Ｈｚ、１．５Ｈ）。
【０２６２】
（Ｌｅｕ−β−ラパコン）
２０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の２．０１７ｍｇ（４．２７７ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｌｅｕ−β−ラパコンの溶液に、２０ｍＬのＴＦＡを添加した。この反応混合物を室温で３０分間攪拌した。溶媒を減圧下で除去した。ＣＨ2Ｃｌ2中の２０％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、２．５０７ｇ（定量的）のＴＦＡ塩が橙色ガラス状固体として得られた：Ｒf＝０．５２（ＣＨ2Ｃｌ2中の１０％  ＭｅＯＨ）、０．８２（ＣＨ2Ｃｌ2中の２０％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．６−８．５（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、８．０−７．９（ｍ、１Ｈ）、７．９−７．８（ｍ、２Ｈ）、７．７−７．６（ｍ、１Ｈ）、５．３−５．２（ｍ、１Ｈ）、４．１−４．０（ｍ、１Ｈ）、２．８−２．５（ｍ、２Ｈ）、１．８−１．５（ｍ、３Ｈ）、１．５２（ｓ、１．５Ｈ）、１．４９（ｓ、１．５Ｈ）、１．４３（ｓ、３Ｈ）、０．８３（ｄ、Ｊ＝６．０  Ｈｚ、３Ｈ）、０．６６（ｂｒ  ｔ、３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７８．７、１７７．８、１６９．２、１６９．１、１６０．０、１５９．７、１３５．１、１３５．１、１３１．５、１３１．４、１３１．１、１３１．０、１２９．８、１２９．８、１２７．９、１２３．９、１２３．８、１０９．６、１０９．３、７９．４、７９．１、７１．１、７０．９、５０．６、５０．４、３９．０、２４．０、２３．９、２２．９、２２．３、２２．１，２２．０、２１．８、２１．７、２１．１。
【０２６３】
（Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン）
１５．６ｍＬのＤＭＦ中の２．２３５ｇ（３．８９５ｍｍｏｌ）のＬｅｕ−β−ラパコン−ＴＦＡ塩および９５９．１ｍｇ（３．８９４ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｇｌｎの溶液に、６３１．４ｍｇ（４．６７３ｍｍｏｌ）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを添加した。この混合物を氷浴中で冷却した。次いで、７６０μＬ（６．９１２ｍｍｏｌ）のＮ−メチルモルホリンを添加し、続いて８８３．９ｍｇ（４．２８４ｍｍｏｌ）のＤＣＣを添加した。この反応混合物を氷浴中で３０分間攪拌し、そして室温で５．８ｈｒ攪拌した。次いでこの反応混合物を８ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして濾過した。濾液を５％クエン酸（３×５０ｍＬ）で、飽和ＮａＨＣＯ3（３×５０ｍＬ）で、飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによる精製によって、１．５５５ｇ（６６％）のペプチドを橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．１９（ＣＨ2Ｃｌ2中の５％  ＭｅＯＨ）、０．０９（ＣＨ2Ｃｌ2中の５％
ＭｅＯＨ）、０．３７（ＣＨＣｌ3中の１０％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．２４（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、ＮＨ）、８．１７（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、ＮＨ）、８．０−７．９（ｍ、１Ｈ）、７．８−７．７（ｍ、２Ｈ）、７．７−７．６（ｍ、１Ｈ）、７．２２（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．８３（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、ＮＨ）、６．７６（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、５．１−５．０（ｍ、１Ｈ）、４．３−４．１（ｍ、１Ｈ）、３．９−３．８（ｍ、１Ｈ）、２．８−２．６（ｍ、１Ｈ）、２．６−２．４（ｍ、１Ｈ）、２．１−２．０（ｍ、２Ｈ）、１．８−１．４（ｍ、５Ｈ）、１．４７（ｓ、１．５Ｈ）、１．４３（ｓ、１．５Ｈ）、１．４２（ｓ、１．５Ｈ）、１．４０（ｓ、１．５Ｈ）、１．３６（ｓ、９Ｈ）、０．８６（ｄ、Ｊ＝６．３  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７９（ｄ、Ｊ＝６．２  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７３（ｂｒ  ｔ、３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７８．７、１７７．８、１７７．７、１７３．７、１７２．０、１７１．７、１７１．５、１５９．９、１５９．７、１５５．１、１３５．１、１３５．０、１３１．５、１３１．４、１３１．０、１３０．９、１２９．８、１２９．７、１２７．９、１２７．８、１２３．８、１０９．８、１０９．６、７９．５、７９．３、７７．９、６９．６、６９．４、５３．７、５３．６、５０．５、５０．４、３１．４、２８．１、２７．６、２７．４、２４．２、２４．１、２４．０、２２．６、２２．５、２２．１、２１．９、２１．６、２１．２。
【０２６４】
（Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン）
１２ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の１．５１９ｇ（２．５３３ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコンの溶液に、１１ｍＬのＴＦＡを添加した。この反応混合物を室温で３０分間攪拌した。溶媒を減圧下で除去した。ＣＨ2Ｃｌ2中の２０％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって１．９７６ｍｇ（定量的）のＴＦＡ塩を橙色ガラス状固体として得た；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．９７（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝６．５  Ｈｚ、ＮＨ）、８．９０（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７．０  Ｈｚ、ＮＨ）、８．３０（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、８．０−７．９（ｍ、１Ｈ）、７．９−７．８（ｍ、２Ｈ）、７．７−７．６（ｍ、１Ｈ）、７．４５（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．９８（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、５．２−５．１（ｍ、１Ｈ）、４．３−４．２（ｍ、１Ｈ）、３．９−３．８（ｍ、１Ｈ）、２．８−２．７（ｍ、１Ｈ）、２．５−２．４（ｍ、１Ｈ）、２．２−２．１（ｍ、２Ｈ）、２．０−１．８（ｍ、２Ｈ）、１．７−１．５（ｍ、３Ｈ）、１．４９（ｓ、１．５Ｈ）、１．４４（ｓ、１．５Ｈ）、１．４２（ｓ、１．５Ｈ）、１．４１（ｓ、１．５Ｈ）、０．８７（ｄ、Ｊ＝６．３  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．８１（ｄ、Ｊ＝６。３  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７５（ｄ、Ｊ＝５．８  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７３（ｄ、Ｊ＝５．８  Ｈｚ、１．５Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７８．７、１７７．８、１７７．８、１７３．５、１７１．３、１７１．１、１６８．７、１６８．７、１５９．９、１５９．８、１３５．１、１３１．５、１３１．５、１３１．１、１３１．０、１２９．９、１２９．８、１２８．０、１２３．８、１０９．７、１０９．５、７９．５、７９．３、６９．９、６９．８、５１．７、５１．６、５０．８、５０．８、３０．３、２６．８、２４．２，２４．１、２２．７、２２．５、２２．２、２２．０、２１．９、２１．６、２１．２。
【０２６５】
（Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン）
１０ｍＬのＤＭＦ中の１．９４９ｇ（最大２．５３３ｍｍｏｌ）のＧｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン−ＴＦＡ塩および５８５．７ｍｇ（２．５３３ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｌｅｕの溶液に、４１０．６ｍｇ（３．０３８ｍｍｏｌ）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを添加した。この混合物を氷浴中で冷却した。次いで、６８５μＬ（６．２３０ｍｍｏｌ）のＮ−メチルモルホリンを添加し、続いて５７４．７ｍｇ（２．７８５ｍｍｏｌ）のＤＣＣを添加した。この反応混合物を氷浴中で３０分間攪拌し、そして室温で５．５ｈｒ攪拌した。次いで、この反応混合物をＣＨＣｌ3で希釈し、そして濾過した。濾液を５％クエン酸（５×５０ｍＬ）で、飽和ＮａＨＣＯ3（４×７０ｍＬ）で、飽和ＮａＣｌ（７０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨＣｌ3中の５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによる精製によって、１．２２１ｇ（６８％、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコンから）のペプチドを橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．０９（ＣＨＣｌ3中の５％  ＭｅＯＨ）、０．２９（ＣＨＣｌ3中の７％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．３６（ｂｒ  ｄ、ＮＨ）、８．３０（ｂｒ  ｄ、ＮＨ）、８．０−７．９（ｍ、１Ｈ）、７．９−７．７（ｍ、２Ｈ）、７．７−７．６（ｍ、１Ｈ）、７．１９（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．９０（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．７５（ｂｒ  ｄ、ＮＨ）、５．１−５．０（ｍ、１Ｈ）、４．３−４．１（ｍ、２Ｈ）、４．０−３．９（ｍ、１Ｈ）、２．８−２．７（ｍ、１Ｈ）、２．５−２．４（ｍ、１Ｈ）、２．１−２．０（ｍ、２Ｈ）、１．８−１．４（ｍ、８Ｈ）、１．４７（ｓ、１．５Ｈ）、１．４３（ｓ、１．５Ｈ）、１．４１（ｓ、１．５Ｈ）、１．４０（ｓ、１．５Ｈ）、１．３７（ｓ、４．５Ｈ）１．３５（ｓ、４．５Ｈ）、０．９−０．８（ｍ、７．５Ｈ）、０．７８（ｄ、Ｊ＝６．２  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７３（ｄ、Ｊ＝５．５  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７１（ｄ、Ｊ＝５．３  Ｈｚ、13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７８．７、１７７．８、１７７．７、１７３．６、１７３．６、１７２．３、１７１．５、１７１．４、１７１．３、１５９．９、１５９．７、１５５．２、１３５．０、１３１．５、１３１．４、１３１．０、１３０．９、１２９．８、１２９．８、１２７．９、１２７．９、１２３．８、１０９．７、１０９．６、７９．５、７９．３、７８．０、６９．６、６９．５、５２．８、５１．４、５０．５、５０．５、４０．７、３１．２、２８．１，２４．２、２４．１、２２．９、２２．６、２２．５、２２．１，２２．０、２１．９、２１．６、２１．４、２１．２。
【０２６６】
（Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン）
８ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の１．１９６ｇ（１．６７８ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコンの溶液に、８ｍＬのＴＦＡを添加した。この反応混合物を室温で３０分間攪拌した。溶媒を減圧下で除去した。ＣＨＣｌ3中の２０％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー  によって、１．４３０ｇ（定量的）のＴＦＡ塩を橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．０４（ＣＨＣｌ3中１０％  ＭｅＯＨ）、０．１０（ＣＨＣｌ3中１５％  ＭｅＯＨ）、０．１９（ＣＨＣｌ3中２０％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．４６（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝６．６  Ｈｚ、ＮＨ）、８．４１（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７．２  Ｈｚ、ＮＨ）、８．０−７．９（ｍ、１Ｈ）、７．９−７．８（ｍ、２Ｈ）、７．７−７．６（ｍ、１Ｈ）、７．２６（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．７７（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、５．１−５．０（ｍ、１Ｈ）、４．３−４．１（ｍ、２Ｈ）、３．５−３．４（ｍ、１Ｈ）、２．８−２．７（ｍ、１Ｈ）、２．５−２．４（ｍ、１Ｈ）、２．１−２．０（ｍ、２Ｈ）、１．９−１．４（ｍ、８Ｈ）、１．４７（ｓ、１．５Ｈ）、１．４３（ｓ、１．５Ｈ）、１．４１（ｓ、１．５Ｈ）、１．４０（ｓ、１．５Ｈ）、０．９−０．８（ｍ、７．５Ｈ）、０．７８（ｄ、Ｊ＝６．１  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７４（ｄ、Ｊ＝５．９  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７２（ｄ、Ｊ＝５．５  Ｈｚ、１．５Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７８．７、１７７．８、１７７．８、１７３．６、１７１．６、１７１．４、１７１．２、１５９．９、１５９．８、１３５．１、１３１．５、１３１．４、１３１．１、１３１．０、１２９．９，１２９．８、１２７．９、１２３．９、１０９．８、１０９．６、７９．６、７９．３、６９．６、６９．５、５１．９−５１．６、５１．６、５０．５、４２．３−４１．８、３１．２、２８．２、２８．０、２４．２、２４．１、２３．７、２２．８、２２．７、２２．６、２２．１、２１．９、２１．８、２１．６、２１．３、２１．２。
【０２６７】
（Ｎα−Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｌ−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−ｐ−ラパコン）
６．６ｍＬのＤＭＦ中の１．４００ｇ（最大１．６４３ｍｍｏｌ）のＬｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン−ＴＦＡ塩および６８１．６ｍｇ（１．６４３ｍｍｏｌ）のＮα−Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎｓ−Ｃｌ−Ｃｂｚ）の溶液に、２６６．３ｍｇ（１．９７１ｍｍｏｌ）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを添加した。この混合物を氷浴中で冷却した。次いで、３８０μＬ（３．４５６ｍｍｏｌ）のＮ−メチルモルホリンを添加し、続いて３７２．９ｍｇ（１．８０７ｍｍｏｌ）のＤＣＣを添加した。この反応混合物を氷浴中で３０分間攪拌し、そして室温で５．５ｈｒ攪拌した。次いで、この反応混合物をＣＨＣｌ3で希釈し、そして濾過した。この濾液を５％クエン酸（４×５０ｍＬ）で、飽和ＮａＨＣＯ3（４×５０ｍＬ）で、飽和ＮａＣｌ（６５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨＣｌ3中の５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによる精製によって、８９７．４ｍｇ（５４％）のペプチドを橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．１０（ＣＨＣｌ3中の５％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．３１（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、ＮＨ）、８．２５（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、ＮＨ）、８．０−７．９（ｍ、２Ｈ（１  キノン−Ｈ＋１  ＮＨ））、７．８−７．７（ｍ、３Ｈ（２  キノン−Ｈ＋１  ＮＨ））、７．７−７．６（ｍ、１Ｈ（キノン−Ｈ））、７．５−７．４（ｍ、２Ｈ）、７．４−７．３（ｍ、３Ｈ（２  Ｃｌ−Ｐｈ−Ｈ＋１  ＮＨ））、７．１９（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．９０（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝８  Ｈｚ、ＮＨ）、６．７７（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、５．１−５．０（ｍ、４Ｈ）、４．３−４．１（ｍ、３Ｈ）、３．９−３．８（ｍ、１Ｈ）、３．０−２．９（ｍ、２Ｈ）、２．８−２．７（ｍ、１Ｈ）、２．５−２．４（ｍ、１Ｈ）、２．１−２．０（ｍ、２Ｈ）、１．９−１．４（ｍ、１４Ｈ）、１．４７（ｓ、１．５Ｈ）、１．４２（ｓ、１．５Ｈ）、１．４１（ｓ、１．５Ｈ）、１．４０（ｓ、１．５Ｈ）、１．３７（ｓ、９Ｈ）、０．９−０．８（ｍ、７．５Ｈ）、０．７７（ｄ、Ｊ＝６．２  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７３（ｄ、Ｊ＝５．７  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７０（ｄ、Ｊ＝５．６  Ｈｚ、１．５Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７８．７、１７７．８、１７７．７、１７３．６、１７１．８、１７１．６、１７１．４、１７１．３、１５９．９、１５９．７、１５５．７、１５５．３、１３５．０、１３４．５、１３２．２、１３１．５、１３１．４、１３１．０、１３０．９、１２９．８、１２９．８、１２９．５、１２９．１、１２７．９、１２７．８、１２７．２、１２３．８、１０９．７、１０９．６、７９．５、７９．３、７８．０、６９．６、６９．５、６２．４、５４．３、５１．６、５０．７、５０．５、５０．４、４１．０、４０．１、３１．３、２９．０、２８．１、２７．９、２７．７、２４．２、２４．１、２４．０、２３．９、２３．０、２２．７、２２．６、２２．５、２２．１、２２．０、２１．９、２１．６、２１．５、２１．２。
【０２６８】
（Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｌ−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン）
６ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中の１．１９６ｇ（１．６７８ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｌ−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコンの溶液に、５ｍＬのＴＦＡを添加した。この反応混合物を室温で３０分間攪拌した。溶媒を減圧下で除去した。ＣＨＣｌ3中の１５％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、５６８．９ｍｇ（６５％）のＴＦＡ塩を橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．０９（ＣＨＣｌ3中の１０％  ＭｅＯＨ）、０．２３（ＣＨＣｌ3中の１５％  ＭｅＯＨ）、０．３８（ＣＨＣｌ3中の２０％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．２８（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、ＮＨ）、８．２３（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、ＮＨ）、８．１−８．０（ｍ、ＮＨ）、８．０−７．９（ｍ、２Ｈ（１  キノン−Ｈ＋１  ＮＨ））、７．８−７．７（ｍ、２Ｈ）、７．７−７．６（ｍ、１Ｈ）、７．５−７．４（ｍ、２Ｈ）、７．４−７．３（ｍ、３Ｈ（２  Ｃｌ−Ｐｈ−Ｈ＋１ＮＨ））、７．２３（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．７８（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、５．１−５．０（ｍ、４Ｈ）、４．３−４．１（ｍ、４Ｈ）、３．０−２．９（ｍ、２Ｈ）、２．８−２．７（ｍ、ＩＨ）、２．５−２．４（ｍ、ＩＨ）、２．１−２．０（ｍ、２Ｈ）、１．９−１．４（ｍ、１４Ｈ）、１．４７（ｓ、１．５Ｈ）、１．４２（ｓ、１．５Ｈ）、１．４１（ｓ、１．５Ｈ）、１．３９（ｓ、１．５Ｈ）、０．９−０，８（ｍ、７．５Ｈ）、０．７７（ｄ、Ｊ＝６．２  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７３（ｄ、Ｊ＝５．８  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７１（ｄ、Ｊ＝５．６  Ｈｚ、１．５Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７８．７、１７７．８、１７７．７、１７３．７、１７１．８、１７１．６、１７１．４、１７１．３、１５９．９、１５９．７、１５５．７、１３５．０、１３４，６、１３２．２、１３１．５、１３１．４、１３１．０、１３０．９、１２９．９、１２９．８、１２９．５、１２９．２、１２７．９、１２７．８、１２７．２、１２３．８、１０９．７、１０９．６、７９．５、７９．３、６９．６、６９．４、６２．４、５４．４、５１．７、５０．６、５０．５、５０．４、４１．１、３１．２、２９．２、２７．６、２７．５、２４．２、２４．２、２４．１、２３．０、２２．６、２２．５、２２．４、２２．０、２１．９、２１．６、２１．２。
【０２６９】
（モルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−Ｌｙｓ（Ｎε−Ｃｌ−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン）
２．１５ｍＬのＤＭＦ中の５４４．９ｍｇ（５．３２３×１０-4ｍｏｌ）のＬｙｓ（Ｎε−Ｃｌ−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン−ＴＦＡ塩および１６４．２ｍｇ（５．３２５×１０-4ｍｏｌ）のモルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）の溶液に、８６．２ｍｇ（６．３７９×１０-4ｍｏｌ）の１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを添加した。この混合物を氷浴中で冷却した。次いで、５９μＬ（５．３６６×１０-4ｍｏｌ）のＮ−メチルモルホリンを添加し、続いて１２０．７ｍｇ（５．８５０×１０-4ｍｏｌ）のＤＣＣを添加した。この反応混合物を氷浴中で３０分間攪拌し、そして室温で５．５ｈｒ攪拌した。次いで、この反応混合物をＣＨＣｌ3で希釈し、そして濾過した。濾液を５％クエン酸（４×３０ｍＬ）で、飽和ＮａＨＣＯ3（４×３０ｍＬ）で、飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そしてエバポレートして乾固した。ＣＨＣｌ3中の７％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによる精製によって、５１５．８ｍｇ（８１％）のペプチドを橙色ガラス状固体として得た：Ｒf＝０．１７（ＣＨＣｌ3中の７％  ＭｅＯＨ）、０．３６（ＣＨＣｌ3中の１０％  ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  ８．２２（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、ＮＨ）、８．１８（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、ＮＨ）、８．０−７．９（ｍ、２Ｈ（１キノン−Ｈ＋１  ＮＨ））、７．９−７．７（ｍ、３Ｈ（２キノン−Ｈ＋１  ＮＨ））、７．７−７．６（ｍ、１Ｈ）、７．５−７．４（ｍ、２Ｈ）、７．４−７．２（ｍ、８Ｈ（２  Ｃｌ−Ｐｈ−Ｈ＋５  Ｐｈ−Ｈ＋１  ＮＨ））、７．２０（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．７８（ｂｒ  ｓ、ＮＨ）、６．６０（ｂｒ  ｄ、Ｊ＝７  Ｈｚ、ＮＨ）、５．１−５．０（ｍ、４Ｈ）、４．５０（ｓ、２Ｈ）、４．４−４．３（ｍ、１Ｈ）、４．３−４．１（ｍ、４Ｈ）、３．７−３．６（ｍ、２Ｈ）、３．６−３．５（ｍ、４Ｈ）、３．３−３．２（ｍ、４Ｈ）、３．０−２．９（ｍ、２Ｈ）、２．８−２．６（ｍ、１Ｈ）、２．５−２．４（ｍ、１Ｈ）、２．１−２．０（ｍ、２Ｈ）、１．９−１．４（ｍ、１４Ｈ）、１．４６（ｓ、１．５Ｈ）、１．４２（ｓ、１．５  Ｈ）、１．４１（ｓ、１．５Ｈ）、１．３９（ｓ、１．５Ｈ）、０．９−０．７（ｍ、９Ｈ）、０．７２（ｄ、Ｊ＝５．４  Ｈｚ、１．５Ｈ）、０．７０（ｄ、Ｊ＝５．３  Ｈｚ、１．５Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（５２  ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6、ＴＭＳ）δ  １７８．７、１７７．８、１７７．７，１７３．６、１７１．６，１７１．５、１７１．４、１７１．３、１７１．３、１７０．８、１７０．８、１５９．９、１５９．７、１５７．３、１５５．７、１３８．２、１３５．０、１３４．５、１３２．２、１３１．５、１３１．４、１３１．０、１３０．９、１２９．９、１２９．８、１２９．５、１２９．１、１２８．１、１２７．９、１２７．８、１２７．４、１２７．３、１２７．２、１２３．８、１０９．８、１０９．６、７９．５、７９．３、７１．９、６９．６、６９．５、６５．８、６２．４、５４．６、５２．７、５１．７、５１．０、５０．５、５０．４、４３．９、３１．３，３１．３、２９．０、２７．８、２７．７、２４．２、２４．２、２４．１、２４．０、２２．９、２２．５、２２．５、２２．０、２１．８、２１．６、２１．４、２１．２。
【０２７０】
（モルホリノ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコン（ＳＬ−１１１５４））
９ｍＬのＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ3＝１：９中の４８６．８ｍｇ（４．０５７×１０-4ｍｏｌ）のモルホリノ−Ｓｅｒ（ＯＢｎ）−Ｌｙｓ（Ｎｓ−Ｃｌ−Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−β−ラパコンの溶液に、１８０．５ｍｇ  １０％  Ｐｄ／Ｃを添加した。次いで、２滴のＨＣｌを添加した。この反応混合物をＨ2雰囲気（バルーン）下に置き、そして室温で１５．５ｈｒ攪拌した。濾過による触媒の除去および溶媒のエバポレーションによって、淡褐色の固体を得た。この物質を１２ｍＬのＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３＝１：９に溶解し、そしてこの溶液を通じて空気を吹き込みながら室温で１ｈｒ攪拌した。溶媒のエバポレーションによって橙色ガラス状の固体を得た。ＣＨＣｌ3中の２０〜３０％  ＭｅＯＨを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって、５２．８ｍｇ（１４％）の物質を橙色固体として得た。この物質を分取ＨＰＬＣによってさらに精製した：Ｒf＝０．０６（ＣＨＣｌ3中の２０％  ＭｅＯＨ）。
【０２７１】
（モルホリノ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコン（ＳＬ−１１１４７）（以下に示される）を、３−ヒドロキシ−β−ラパコンに対するＢｏｃ−Ｌｅｕの最初のカップリングを、３−ヒドロキシ−β−ラパコンに対するＢｏｃ−β−Ａｌａのカップリングによって置き換えたこと以外は、モルホリノ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−β−Ａｌａ−β−ラパコンと類似の様式で合成した。
【０２７２】
【化１５】
2002543163.tif 000018
（実施例３）
（新規ポリアミンアナログ結合体の腫瘍細胞株に対する効果のインビトロ試験）
以下に記載される実験は、上記の新規に合成されたポリアミンアナログ結合体の培養ヒト前立腺癌細胞株ＬＮＣａＰおよびＰＣ−３に対する、細胞増殖、細胞周期調節およびポリアミン調節応答へのそれらの効果を評価するために設計された。ＰＳＡ認識されるポリペプチド部分に対して結合されたアナログは、ＰＳＡ発現が高いＬＮＣａＰ細胞およびＰＳＡ発現が欠損しているＰＣ−３細胞に対して評価される。本発明において有用なポリアミンアナログ結合体は、ＰＳＡを発現する細胞の特異的なインビトロ殺傷を示すが、ＰＳＡを発現しない細胞では示さない（かまたはより少ない程度で殺傷を示す）。
【０２７３】
（モデル系および生化学／細胞アッセイ）
前立腺におけるポリアミン代謝の独特の性質の周りに確立された理論的根拠に基づいて、これらの実験は、主に（しかし、独占的にではない）ヒト前立腺癌に焦点をあて、より詳細には、培養および無胸腺症ヌードマウス中のインビボで増殖可能な２つの変化しやすい分化した細胞株に焦点をあてる。ＰＣ−８２およびＬＮＣａＰ細胞はＰＳＡが高いが、ＰＣ−３細胞は、低いＰＳＡレベルを示す。インビボヌードマウス異種移植片研究が、ＰＣ−８２細胞株を用いて実施される。ヌードマウス異種移植片におけるＰＣ−８２細胞の増殖条件は、十分に確立されている。Ｄｅｎｍｅａｄｅら（１９９７）。ＰＣ−８２細胞株が、異種移植片で増殖された場合にＰＳＡを産生する非常に少ないヒト前立腺癌細胞株の内の１つであることにもまた注意する。ＬＮＣａＰ細胞株は、アンドロゲン応答性であり、ポリアミンを合成しかつ特徴的な前立腺に特異的な抗原を発現する原発性腫瘍に由来する、十分に分化した前立腺癌腫である。Ｈｏｒｏｓｚｅｗｉｃｚら（１９８３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４３：１８０９−１８１８。骨転移に由来するＰＣ−３癌腫は、不十分に分化されかつ転移の傾向がある。Ｋａｉｇｈｎら（１９７９）Ｉｎｖｅｓｔ．Ｕｒｏｌ．１７：１６−２３。前立腺癌細胞株の培養および処置、フローサイトメトリー；ＯＤＣ、ＳＡＭＤＣおよびＳＳＡＴ活性を含む酵素活性；ならびに天然のポリアミンおよびポリアミンアナログの高圧液体クロマトグラフィーによる検出および定量化に基づく細胞周期およびアポトーシス測定は、当該分野に記載されている。例えば、Ｍｉら（１９９８）Ｐｒｏｓｔａｔｅ  ３４：５１−６０；Ｋｒａｍｅｒら（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７：５５２１−２７；およびＫｒａｍｅｒら（１９９５）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：２１２４−２１３２。
【０２７４】
（アナログ評価に関する一般的な戦略）
ポリアミンアナログは、ヒト前立腺癌細胞培養中、細胞増殖およびポリアミン関連代謝に対するこれらの効果について評価される。分析は、７２時間で実施された０．１〜１０００μＭの範囲の用量応答曲線に基づくＩＣ50測定から開始する。これらの研究から、約５０％増殖阻害を生成する条件を定義し、以下のことに使用した：（ａ）薬物誘導細胞死を示し得る細胞数の減少に特に注意して、６日までの時間依存的増殖阻害を続ける；（ｂ）フローサイトメトリー（付着された細胞および脱着された細胞に対して実施される分析）を使用して細胞周期進行およびアポトーシスに対するアナログの効果を特徴付ける；（ｃ）生合成酵素のＯＤＣ、ＳＡＭＤＣ、胃化酵素のＳＳＡＴ、およびポリアミンプールそれ自身を含むポリアミン代謝のパラメーターに対する、アナログの効果を試験する。アナログの効果は、細胞内濃度（ＨＰＬＣ分析による）に対して基準化され、これはまた、浸透細胞に対するこれらの相対的な能力の指標を提供する。アナログ取り込みにおける顕著な差異は、ポリアミン輸送体を利用しかつ調節するアナログの能力を研究することによって（例えば、Ｍｉら（１９９８）に以前に記載されたように、放射性標識スペルミジンを用いた競合研究によってアッセイされる）さらに特徴付けられる。
【０２７５】
表２および図１〜３２に示されるように、いくつかの新規の構造的に制限されたポリアミンアナログを、癌細胞に対して抗増殖特性に関して試験した。表２は、ヒト癌細胞株であるＬＮＣａＰ、ＰＣ−３、ＤｕＰｒｏ（これらの全ては、ヒト前立腺癌細胞株）、ＨＴ−２９（結腸癌細胞株）、Ａ５４９（肺癌細胞株）、ＭＣＦ７（乳癌細胞株）およびＵ２５１  ＭＧ−ＮＣＩ（脳腫瘍細胞株）に関して、５０％増殖阻害（ＩＤ50）値に必要である種々の新規ポリアミンアナログのμＭでの濃度を示す。図１〜３２は、ＭＴＴ（メチルチアゾールテトラゾリウム）アッセイによって測定された、ヒト腫瘍細胞株の増殖に対するいくつかのこれら新規アナログの効果に関する代表的なプロットを示し；既知の抗増殖ポリアミンアナログであるＢＥ−３３３、ＢＥ−３４３、ＢＥ−４４４およびＢＥ−４４４４を比較目的のために使用した。
【０２７６】
（細胞株および培地）
ヒト乳癌細胞株ＭＣＦ７は、１０％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）および２．２ｇ／Ｌ炭酸水素ナトリウムを補充したＲｉｃｈｔｅｒ’ｓ  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ培地で増殖させた。ヒト脳腫瘍細胞株Ｕ２５１  ＭＧ−ＮＣＩは、１０％ＦＢＳを補充したＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ培地で増殖させた。ヒト肺癌細胞株Ａ５４９は、１０％ＦＢＳおよび２ｍＭ  Ｌ−グルタミンを補充したＨａｍ’ｓ  Ｆ−１２Ｋ培地（Ｃｅｌｌｇｒｏ，Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，ＶＡ）で増殖させた。ヒト結腸癌細胞株ＨＴ２９は、１０％ＦＢＳを補充したＭｃＣｏｙ’ｓ  ５Ａ培地（Ｇｉｂｃｏ，ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）で増殖させた。ヒト前立腺癌細胞株ＰＣ−３、ＬＮＣＡＰおよびＤｕＰｒｏは、１０％ＦＢＳを補充したＲＰＭＩ  １６４０培地（Ｃｅｌｌｇｒｏ，Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，ＶＡ）で増殖させた。別のヒト前立腺癌細胞株のＤＵ１４５は、５％ＦＢＳを補充したＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ培地（Ｇｉｂｃｏ，ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）で増殖させた。Ａ５４９、ＭＣＦ７、ＰＣ３、ＬＮＣＡＰおよびＤｕＰｒｏ細胞株は、１００ユニット／ｍＬペニシリンおよび１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン中で培養した。ＨＴ２９およびＵ２５１ＭＧ細胞株は、５０μｇ／ｍＬゲンタマイシン（Ｇｉｂｃｏ，ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）中で増殖させた。ＤＵ１４５細胞株は、１％抗生物質抗真菌溶液（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）中で維持した。細胞培養は、５％ＣＯ2／９５％の加湿空気中、３７℃で維持した。ＤｕＰｒｏ細胞は、Ｍ．Ｅｉｌｅｅｎ  Ｄｏｌａｎ、シカゴ大学から得た。全ての他の細胞は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤから入手可能である。
【０２７７】
（ＭＴＴアッセイ）
従来のＭＴＴアッセイを使用してパーセント細胞生存を評価した。対数増殖期の単層細胞を、１ウェル当たり５００細胞の密度で９６ウェルプレートにプレートし、そして２４時間増殖させた。連続希釈の薬物をウェルに添加した。薬物処理の６日後、２５μｌのＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍｌ）を各ウェルに添加し、そして３７℃で４時間インキュベートした。次いで、１００μｌの溶解緩衝液（２０％ドデシル硫酸ナトリウム、５０％ＤＭＦおよび０．８％酢酸、ｐＨ  ４．７）を各ウェルに添加し、そしてさらに２２時間インキュベートした。５７０ｎｍに設定したマイクロプレートリーダー（「ＥＭＡＸ」（商標）、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，Ｃａｌｉｆ．）を使用して培養物の吸光度を測定した。結果は、ビヒクルのみで処理したウェルの吸光度に対する薬物処理したウェルの吸光度の比として表現する。
【０２７８】
表２に示されるように、いくつかのポリアミンアナログを、前立腺癌細胞に対して抗増殖特性に関して試験した。表２は、ヒト前立腺癌細胞株ＰＣ−３、ＤＵ−１４５およびＤｕＰｒｏならびに他の腫瘍細胞株に関する、５０％増殖阻害（ＩＤ50）値に必要な種々の新規ポリアミンアナログの濃度を示す。図１〜３２は、これらのうちのいくつかの新規アナログのヒト前立腺癌細胞株の増殖に対する効果の代表的なプロットを示す。本発明に有用なポリアミンに関するさらなるデータは、Ｒｅｄｄｙら（１９９８）Ｊ．Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．４１：４７２３−３２に提供される。
【０２７９】
【表２】
2002543163.tif 000019
2002543163.tif 000020
ＮＴは、試験していないことを示す。
【０２８０】
試験された化合物のほとんどは、少なくとも１つの前立腺癌細胞株の増殖を阻害した。これらのデータより、本発明者らは、脂肪族骨格においてある程度の硬性までのビスエチル化ポリアミンアナログが、培養中のいくつかの前立腺癌細胞株において顕著な細胞毒性を示し得る、と結論付けた。
【０２８１】
図５７〜５９に示されるように、ポリアミンアルコールＳＬ−１１１４１およびその対応するペプチド結合体ＳＬ−１１１５５（これらの２つの化合物の構造は表１を参照のこと）は、インビトロで、腫瘍細胞株に対する有効性を示した。これは、有用なプロドラッグとして機能するこれらのペプチドの能力を示す。
【０２８２】
（実施例４）
（キノンに関する細胞培養および薬物試験プロトコール）
（細胞培養）
ヒト肺腺癌細胞株Ａ５４９およびヒト前立腺癌細胞株ＤＵＰＲＯは、Ｍ．Ｅｉｌｅｅｎ  Ｄｏｌａｎ博士（シカゴ大学、医学部）から贈与された。Ａ５４９は、１０％胎仔ウシ血清および２ｍＭ  Ｌ−グルタミンを補充したＨａｍ’ｓ  Ｆ−１２Ｋ培地（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｔａｓｃａ，ＩＬ）中で増殖させた。ＤＵＰＲＯは、１０％胎仔ウシ血清を補充したＲＰＭＩ−１６４０中で増殖させた。ヒト結腸癌細胞株ＨＴ２９およびヒト乳癌細胞株ＭＣＦ７は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから得た。ＨＴ２９細胞は、１０％胎仔ウシ血清を補充したＭｃＣｏｙ’ｓ  ５Ａ培地（Ｇｉｂｃｏ，ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）で増殖させた。ＭＣＦ７細胞は、１０％胎仔ウシ血清および２．２ｇ／Ｌ炭酸水素ナトリウムを補充したＲｉｃｈｔｅｒ’ｓ  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ培地で増殖させた。ヒト前立腺腺癌細胞株ＬＮＣＡＰ、ＰＣ−３およびＤＵ１４５は、Ｇｅｏｒｇｅ  Ｗｉｌｄｉｎｇ博士（ウィスコンシン大学、総合癌センターおよび医学部）から贈与され、そして５％胎仔ウシ血清を補充したＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ培地で増殖させた。悪性神経膠腫細胞株Ｕ２５１  ＭＧ  ＮＣＩは、カルフォルにア大学、サンフランシスコ校、脳神経外科学部の脳腫瘍組織バンクから得、そして１０％胎仔ウシ血清を補充したＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ培地で増殖させた。ＤＵＰＲＯ、Ａ５４９およびＭＣＦ７細胞は、１００ユニット／ｍＬペニシリンおよび１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン中で増殖させた。ＨＴ２９およびＵ２５１ＭＧ  ＮＣＩ細胞は、５０μｇ／ｍＬゲンタマイシン中で増殖させた。ＬＮＣＡＰ、ＰＣ−３およびＤＵ１４５細胞は、１％抗生物質抗真菌溶液（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）中で維持した。すべての細胞培養は、５％ＣＯ2／９５％加湿空気中、３７℃で維持した。
【０２８３】
（ＭＴＴアッセイ）
対数増殖期の単層細胞を、５００細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートにプレートし、２４時間増殖させた。連続的に希釈した薬物溶液を、処置培地中の最終薬物濃度が０と３５μＭとの間であるように添加した。細胞は薬物を用いて４時間または７２時間のいずれかでインキュベートした。４時間および７２時間の処置の後、薬物を除去し、薬物を含まない新鮮培地（１００μＬ）を添加し、細胞を６日間インキュベートした。６日後、５ｍｇ／ｍＬのＭＴＴ（チアゾイルブルー）（Ｓｉｇｍａ）を含む２５μＬのＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓリン酸緩衝化生理食塩水溶液を各ウェルに添加し、そして３７℃で４時間インキュベートした。次いで、１００μＬの溶解緩衝液（２０％ドデシル硫酸ナトリウム、５０％Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよび０．８％酢酸、ｐＨ  ４．７）を各ウェルに添加し、そしてさらに２２時間インキュベートした。５７０ｎｍに設定したマイクロプレートリーダー（Ｅ  ｍａｘ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）を使用して、吸光度を測定した。結果を、ビヒクル単独で処置したウェルの吸光度に対して薬物処理したウェルの吸光度の比としてプロットした。ＩＤ50値のプロットおよび推定は、製造者らが供給したソフトウェアを用いて達成した。このデータを、以下の表３、４、５および６に示す。
【０２８４】
【表３】
2002543163.tif 000021
2002543163.tif 000022
2002543163.tif 000023
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【０２８５】
【表４】
2002543163.tif 000027
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2002543163.tif 000029
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2002543163.tif 000033
【０２８６】
【表５】
2002543163.tif 000034
【０２８７】
【表６】
2002543163.tif 000035
（実施例５）
（ポリアミンアナログ結合体の抗腫瘍活性のインビボ試験）
（ポリアミンアナログ−ＰＳＡペプチド結合体に関するデータの戦略および解釈）
ポリアミンアナログ結合体の評価において、ＰＳＡを発現しないＰＣ−３と比較した、ＰＳＡを発現するＬＮＣａＰ細胞に対するポリアミンアナログ結合体のインビトロ抗増殖活性を測定される。細胞株ＰＣ−８２は、高いＰＳＡレベルを発現するが、インビトロでは増殖せず、従ってインビボ分析のためのみに使用した。ＬＮＣａＰ細胞に対して差次的抗増殖活性を示すこれらの結合体（ＩＣ50判定に基づく）を、さらなる開発のために選択し得た。
【０２８８】
インビトロで培養前立腺癌細胞に対して強力または機構ベースの抗増殖活性を有することが見出されたアナログ結合体を、インビボモデル系、すなわち、ＬＮＣａＰおよびＰＣ−８２前立腺癌異種移植片（これらの両方はＰＳＡを発現する）で評価した。なぜなら、この結合体は、循環から素早く清澄され得、毎日２または３回の処置スケジュールを増強することが必要であり得るからである。抗腫瘍活性の評価に加えて、上記のように、腫瘍および正常組織の遊離のアナログレベルが決定される。有意義な抗腫瘍活性が観察される場合、これら同じ結合体は、ＰＳＡを発現しないＰＣ−３前立腺癌異種移植片を処置するために使用される。これらの実験は、薬物作用の特異性を確認するために設計された。なぜなら、ＰＣ−３のようなＰＳＡを発現しないそのような腫瘍に対する活性は顕著に減少されると予想されるからである。上記のように、これらの研究は、腫瘍中の遊離のアナログレベルの決定によって議論される。
【０２８９】
最初の目的は、非腫瘍保有ＤＢＡ／２マウスにおいて、アナログの相対的な毒性を決定することである。３つの動物群の各々に、漸増する濃度のアナログ（１０ｍｇ／ｋｇから開始）を腹腔内注射する。罹患率によって示される毒性を、最初の２４時間にわたって厳密にモニターする。ポリアミンアナログであるＢＥ−３３３をこれらの研究の内部標準として使用する。なぜなら、毎日×５日（５ｄ）スケジュールを介した慢性毒性と比較した単一用量処置を介した急性毒性に関するデータベースが、既に確立されているからである。従って、新規アナログの場合、ＢＥ−３３３と比較した単一用量毒性を使用して、毎日×５日スケジュールで使用される用量の範囲を計画する。
【０２９０】
毎日×５日スケジュールに対して最も高く寛容された投薬量が推定された後、抗腫瘍活性を測定した。代表的には、ＰＣ−３腫瘍を、トロカールによってヌード無胸腺症マウスに皮下移植し、腹腔内注射、毎日×５日による処置を開始する前に１００〜２００ｍｍ3に達するようにさせた。ＬＮＣａＰ腫瘍は、移植の前にマトリゲル（Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃ．）中の懸濁を必要とし、その後、約４日の倍加時間で増殖した。ほとんどの結合体は、１０と２００ｍｇ／ｋｇとの間の範囲で与えられる。結合体は、１群当たり１０〜１５匹の動物を用いて、３つの処置投薬量で評価した（各々からの最小の３つを、以下に記載される薬理学的研究に使用する）。マウスをモニターし、１週間に２回体重を測り、腫瘍サイズおよび毒性を測定する。腫瘍サイズは、ｍｍ3で体積が計算される多方向測定によって測定した。腫瘍を、各群の中央の腫瘍体積が１５００ｍｍ3（すなわち、体重の２０％）に達するまで続けて、達した時に、動物を屠殺する。最初の抗腫瘍研究は、毎日×５日スケジュールに焦点を当ててきたが、一定の注入が、Ａｌｚｅｔポンプ送達を介して５日間実施され得る。なぜなら、このスケジュールは、Ａ５４９ヒトラージ細胞肺癌に対するＢＥ−３３３の抗腫瘍活性を劇的に改善するからである。Ｓｈａｒｍａら（１９９７）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．３：１２３９−１２４４。
【０２９１】
前述の発明は、理解を明確にする目的のための例示および実施例によっていくらか詳細に記載されてきたが、ある小さな変化および改変が実施されることは当業者に明らかである。従って、説明および実施例は、本発明の範囲の限定として構成されるべきではない。
【０２９２】
【配列表】
SEQUENCE LISTING
<110> CellGate, Inc.
<120> CONJUGATES AS THERAPIES FOR CANCERS AND PROSTATE DISEASES
<130> F1-0136P23
<140> JP 2000-615058
<141> 2000-04-27
<150> US 60/131,809          
<151> 1999-04-30  
<160> 14
<170> FastSEQ for Windows Version 4.0
<210> 1
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<400> 1
His Ser Ser Lys Leu Gln
1               5
<210> 2
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 5
<223> Xaa = Beta-Alanine
<400> 2
Ser Lys Leu Gln Xaa
1               5
<210> 3
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<400> 3
Ser Lys Leu Gln Leu
1               5
<210> 4
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<400> 4
Ser Lys Leu Gln
1
<210> 5
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = N-alpha-Boc-Lys(N-epsilon-Cl-Cbz)
<220>
<221> VARIANT        
<222> 4
<223> Xaa = beta-Ala-beta-lapachone
<400> 5
Xaa Leu Gln Xaa
1
<210> 6
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = Lys(N-epsilon-Cl-Cbz)
<220>
<221> VARIANT        
<222> 4
<223> Xaa = Leu-(beta-lapachone)
<400> 6
Xaa Leu Gln Xaa
1
<210> 7
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = morpholino-Ser-(OBn)
<220>
<221> VARIANT        
<222> 2
<223> Xaa = Lys(N-epsilon-Cl-Cbz)
<220>
<221> VARIANT        
<222> 5
<223> Xaa = beta-Ala-beta-lapachone
<400> 7
Xaa Xaa Leu Gln Xaa
1               5
<210> 8
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = morpholino-Ser
<220>
<221> VARIANT        
<222> 5
<223> Xaa = beta-Ala-beta-lapachone
<400> 8
Xaa Lys Leu Gln Xaa
1               5
<210> 9
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = Boc-Lys-(N-epsilon-Cl-Cbz)
<220>
<221> VARIANT        
<222> 4
<223> Xaa = Leu-beta-lapachone
<400> 9
Xaa Leu Gln Xaa
1
<210> 10
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = Lys(N-epsilon-Cl-Cbz)
<220>
<221> VARIANT        
<222> 4
<223> Xaa = Leu-beta-lapachone
<400> 10
Xaa Leu Gln Xaa
1
<210> 11
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = morpholino-Ser(OBn)
<220>
<221> VARIANT        
<222> 2
<223> Xaa = Lys(N-epsilon-Cl-Cbz)
<220>
<221> VARIANT        
<222> 5
<223> Xaa = Leu-beta-lapachone
<400> 11
Xaa Xaa Leu Gln Xaa
1               5
<210> 12
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = morpholino-Ser
<220>
<221> VARIANT        
<222> 5
<223> Xaa = Leu-beta-lapachone
<400> 12
Xaa Lys Leu Gln Xaa
1               5
<210> 13
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = morpholino-Ser
<400> 13
Xaa Lys Leu Gln
1
<210> 14
<211> 4
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220> 
<223> Peptide substrate for prostate specific antigen
<220>
<221> VARIANT        
<222> 1
<223> Xaa = Morpholino-Ser
<220>
<221> VARIANT        
<222> 4
<223> Xaa = Gln-Quin
<400> 14
Xaa Lys Leu Xaa
1
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、漸増濃度のＢＥ−４４４４（白丸）、ＳＬ−１１１２１（黒丸）、ＳＬ−１１１２２（白四角）、ＳＬ−１１１２３（黒四角）、ＳＬ−１１１２６（白三角）、ＳＬ−１１１２７（黒三角）、ＳＬ−１１１２８（白菱形）、ＳＬ−１１１２９（黒菱形）、ＳＬ−１１１３０（白逆三角）、ＳＬ−１１１３３（黒逆三角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＰＣ３の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＢＥ−４４４４＝０．６μＭ、ＳＬ−１１１２１＝０．５２μＭ、ＳＬ−１１１２２＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２３＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２６＝０．２μＭ、ＳＬ−１１１２７＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２８＝０．５μＭ、ＳＬ−１１１２９＝１．７μＭ、ＳＬ−１１１３０＞３１．２５μＭおよびＳＬ−１１１３３＞３１．２５μＭ。
【図２】
図２は、漸増濃度のＢＥ−４４４４（白丸）、ＳＬ−１１１２１（黒丸）、ＳＬ−１１１２２（白四角）、ＳＬ−１１１２３（黒四角）、ＳＬ−１１１２６（白三角）、ＳＬ−１１１２７（黒三角）、ＳＬ−１１１２８（白菱形）、ＳＬ−１１１２９（黒菱形）、ＳＬ−１１１３０（白逆三角）およびＳＬ−１１１３３（黒逆三角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵ１４５の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＢＥ−４４４４＝０．０７μＭ、ＳＬ−１１１２１＝０．０８μＭ、ＳＬ−１１１２２＝０．０８μＭ、ＳＬ−１１１２３＝０．５１μＭ、ＳＬ−１１１２６＝０．５１μＭ、ＳＬ−１１１２７＝０．２２μＭ、ＳＬ−１１１２８＝０．１４μＭ、ＳＬ−１１１２９＝０．３２μＭ、ＳＬ−１１１３０＝０．４３μＭおよびＳＬ−１１１３３＝０．３４μＭ。
【図３】
図３は、漸増濃度のＢＥ−４４４４（白丸）、ＳＬ−１１１２１（黒丸）、ＳＬ−１１１２２（白四角）、ＳＬ−１１１２３（黒四角）、ＳＬ−１１１２６（白三角）、ＳＬ−１１１２７（黒三角）、ＳＬ−１１１２８（白菱形）、ＳＬ−１１１２９（黒菱形）、ＳＬ−１１１３０（白逆三角）およびＳＬ−１１１３３（黒逆三角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵＰＲＯの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＢＥ−４４４４＝０．２μＭ、ＳＬ−１１１２１＝０．４μＭ、ＳＬ−１１１２２＝０．５６μＭ、ＳＬ−１１１２３＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２６＝１．１μＭ、ＳＬ−１１１２７＝１．３μＭ、ＳＬ−１１１２８＝１．２８μＭ、ＳＬ−１１１２９＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１３０＞３１．２５μＭおよびＳＬ−１１１３３＝３１．２５μＭ。
【図４】
図４は、漸増濃度のＢＥ−４４４４（白丸）、ＳＬ−１１１２１（黒丸）、ＳＬ−１１１２６（白三角）、ＳＬ−１１１２８（白菱形）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＬＮＣＡＰの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＢＥ−４４４４＝０．１４μＭ、ＳＬ−１１１２１＝０．１４μＭ、ＳＬ−１１１２６＝０．５５μＭおよびＳＬ−１１１２８＝０．３μＭ。
【図５】
図５は、漸増濃度のＢＥ−４４４４（白丸）、ＳＬ−１１１２１（黒丸）、ＳＬ−１１１２２（白四角）、ＳＬ−１１１２３（黒四角）、ＳＬ−１１１２６（白三角）、ＳＬ−１１１２７（黒三角）およびＳＬ−１１１２８（白菱形）の、培養したヒト結腸癌細胞ＨＴ２９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＢＥ−４４４４＝０．５μＭ、ＳＬ−１１１２１＝０．８μＭ、ＳＬ−１１１２２＝０．８μＭ、ＳＬ−１１１２３＞１０．４２μＭ、ＳＬ−１１１２６＝１．５μＭ、ＳＬ−１１１２７＝２．９１μＭおよびＳＬ−１１１２８＝１．３５μＭ。
【図６】
図６は、漸増濃度のＢＥ−４４４４（白丸）、ＳＬ−１１１２１（黒丸）、ＳＬ−１１１２２（白四角）、ＳＬ−１１１２３（黒四角）およびＳＬ−１１１２６（白三角）の、培養したヒト肺癌細胞Ａ５４９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＢＥ−４４４４＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２１＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２２＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２３＞３１．２５μＭおよびＳＬ−１１１２６＞３１．２５μＭ。
【図７】
図７は、漸増濃度のＢＥ−４４４４（白丸）、ＳＬ−１１１２１（黒丸）、ＳＬ−１１１２２（白四角）、ＳＬ−１１１２３（黒四角）およびＳＬ−１１１２６（白三角）の、培養したヒト乳癌細胞ＭＣＦ７の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＢＥ−４４４４＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２１＝１７．０μＭ、ＳＬ−１１１２２＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２３＞３１．２５μＭおよびＳＬ−１１１２６＝０．７μＭ。
【図８】
図８は、漸増濃度のＳＬ−１１１０５（黒丸）、ＳＬ−１１１２４（白丸）、ＳＬ−１１１３２（黒四角）およびＢＥ−３３３（白四角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＰＣ３の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０５＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２４＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１３２＞３１．２５μＭおよびＢＥ−３３３＝０．３４μＭ。
【図９】
図９は、漸増濃度のＳＬ−１１１０５（黒丸）、ＳＬ−１１１２４（白丸）、ＳＬ−１１１３２（黒四角）およびＢＥ−３３３（白四角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵ１４５の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０５＝１．６μＭ、ＳＬ−１１１２４＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１３２＝０．０１５μＭおよびＢＥ−３３３＝０．１２μＭ。
【図１０】
図１０は、漸増濃度のＳＬ−１１１０５（黒丸）、ＳＬ−１１１２４（白丸）、ＳＬ−１１１３２（黒四角）およびＢＥ−３３３（白四角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵＰＲＯの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０５＝０．４３μＭ、ＳＬ−１１１２４＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１３２＞３１．２５μＭおよびＢＥ−３３３＝０．９μＭ。
【図１１】
図１１は、漸増濃度のＳＬ−１１１０５（黒丸）、ＳＬ−１１１２４（白丸）およびＢＥ−３３３（白四角）の、培養したヒト結腸癌細胞ＨＴ２９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０５＝２５．２μＭ、ＳＬ−１１１２４＞３１．２５μＭおよびＢＥ−３３３＝０．３μＭ。
【図１２】
図１２は、漸増濃度のＳＬ−１１１０５（黒丸）、ＳＬ−１１１２４（白丸）およびＢＥ−３３３（白四角）の、培養したヒト肺癌細胞Ａ５４９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０５＝０．４３μＭ、ＳＬ−１１１２４＞３１．２５μＭおよびＢＥ−３３３＝０．３μＭ。
【図１３】
図１３は、漸増濃度のＳＬ−１１１０５（黒丸）、ＳＬ−１１１２４（白丸）およびＢＥ−３３３（白四角）の、培養したヒト乳癌細胞ＭＣＦ７の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０５＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１２４＞３１．２５μＭおよびＢＥ−３３３＝３．７μＭ。
【図１４】
図１４は、漸増濃度のＳＬ−１１１０５（黒丸）およびＢＥ−３３３（白四角）の、培養したヒト脳腫瘍細胞Ｕ２５１  ＭＧ  ＮＣＩの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０５＝２５．９μＭおよびＢＥ−３３３＝０．２３μＭ。
【図１５Ａ】
図１５Ａは、漸増濃度のＳＬ−１１０９３（黒丸）、ＳＬ−１１０９８（白丸）、ＳＬ−１１０９９（黒四角）、ＳＬ−１１１００（白四角）、ＳＬ−１１１０１（黒三角）、ＳＬ−１１１０２（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＰＣ３の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９３＝１．６μＭ、ＳＬ−１１０９８＝１．４μＭ、ＳＬ−１１０９９＝２．５μＭ、ＳＬ−１１１００＝４．７μＭ、ＳＬ−１１１０１＝７．７μＭ、ＳＬ−１１１０２＞３１．２５μＭおよびＢＥ−４４４＝０．７μＭ。
【図１５Ｂ】
図１５Ｂは、漸増濃度のＳＬ−１１１０３（黒丸）、ＳＬ−１１１０４（白丸）、ＳＬ−１１１０８（黒四角）、ＳＬ−１１１１４（白四角）、ＳＬ−１１１１８（黒三角）、ＳＬ−１１１１９（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＰＣ３の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０３＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１０４＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１０８＝２．２μＭ、ＳＬ−１１１１４＝０．７μＭ、ＳＬ−１１１１８＝１．６５μＭ、ＳＬ−１１１１９＞３１．２５μＭおよびＢＥ−４４４＝０．７μＭ。
【図１６Ａ】
図１６Ａは、漸増濃度のＳＬ−１１０９３（黒丸）、ＳＬ−１１０９８（白丸）、ＳＬ−１１０９９（黒四角）、ＳＬ−１１１００（白四角）、ＳＬ−１１１０１（黒三角）、ＳＬ−１１１０２（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵ１４５の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９３＝０．０１６μＭ、ＳＬ−１１０９８＝０．０２μＭ、ＳＬ−１１０９９＝０．０１４μＭ、ＳＬ−１１１００＝０．０２１μＭ、ＳＬ−１１１０１＝０．２２μＭ、ＳＬ−１１１０２＝０．０３μＭおよびＢＥ−４４４＝０．０３μＭ。
【図１６Ｂ】
図１６Ｂは、漸増濃度のＳＬ−１１１０３（黒丸）、ＳＬ−１１１０４（白丸）、ＳＬ−１１１０８（黒四角）、ＳＬ−１１１１４（白四角）、ＳＬ−１１１１８（黒三角）、ＳＬ−１１１１９（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵ１４５の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０３＝２．８μＭ、ＳＬ−１１１０４＝９．４μＭ、ＳＬ−１１１０８＝０．１３μＭ、ＳＬ−１１１１４＝０．１３μＭ、ＳＬ−１１１１８＝０．０５μＭ、ＳＬ−１１１１９＝０．０８μＭおよびＢＥ−４４４＝０．０３μＭ。
【図１７Ａ】
図１７Ａは、漸増濃度のＳＬ−１１０９９（黒四角）、ＳＬ−１１１００（白四角）、ＳＬ−１１１０１（黒三角）、ＳＬ−１１１０２（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵＰＲＯの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９９＝０．０８μＭ、ＳＬ−１１１００＝０．３μＭ、ＳＬ−１１１０１＝０．８５μＭ、ＳＬ−１１１０２＝０．１５μＭおよびＢＥ−４４４＝０．２μＭ。
【図１７Ｂ】
図１７Ｂは、漸増濃度のＳＬ−１１１０８（黒四角）、ＳＬ−１１１１４（白四角）、ＳＬ−１１１１８（黒三角）、ＳＬ−１１１１９（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵＰＲＯの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０８＝０．９８μＭ、ＳＬ−１１１１４＝０．６４μＭ、ＳＬ−１１１１８＝０．２５μＭ、ＳＬ−１１１１９＝０．４４μＭおよびＢＥ−４４４＝０．２μＭ。
【図１８Ａ】
図１８Ａは、漸増濃度のＳＬ−１１０９３（黒丸）、ＳＬ−１１０９８（白丸）、ＳＬ−１１０９９（黒四角）、ＳＬ−１１１００（白四角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＬＮＣＡＰの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９３＝０．２１μＭ、ＳＬ−１１０９８＝０．１７μＭ、ＳＬ−１１０９９＝０．２１μＭ、ＳＬ−１１１００＝０．７μＭおよびＢＥ−４４４＝０．１μＭ。
【図１８Ｂ】
図１８Ｂは、漸増濃度のＳＬ−１１１０８（黒四角）、ＳＬ−１１１１４（白四角）、ＳＬ−１１１１８（黒三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＬＮＣＡＰの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０８＝７．７μＭ、ＳＬ−１１１１４＝３．０μＭ、ＳＬ−１１１１８＝０．２１μＭおよびＢＥ−４４４＝０．１μＭ。
【図１９Ａ】
図１９Ａは、漸増濃度のＳＬ−１１０９３（黒丸）、ＳＬ−１１０９８（白丸）、ＳＬ−１１０９９（黒四角）、ＳＬ−１１１００（白四角）、ＳＬ−１１１０１（黒三角）、ＳＬ−１１１０２（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト結腸癌細胞ＨＴ２９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９３＝０．４μＭ、ＳＬ−１１０９８＝０．４μＭ、ＳＬ−１１０９９＝１．０μＭ、ＳＬ−１１１００＝２．０μＭ、ＳＬ−１１１０１＝５．２μＭ、ＳＬ−１１１０２＝０．７３μＭおよびＢＥ−４４４＝０．９３μＭ。
【図１９Ｂ】
図１９Ｂは、漸増濃度のＳＬ−１１１０３（黒丸）、ＳＬ−１１１０４（白丸）、ＳＬ−１１１０８（黒四角）、ＳＬ−１１１１４（白四角）、ＳＬ−１１１１８（黒三角）、ＳＬ−１１１１９（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト結腸癌細胞ＨＴ２９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０３＝２９．４μＭ、ＳＬ−１１１０４＝２５．８μＭ、ＳＬ−１１１０８＝２．０μＭ、ＳＬ−１１１１４＝３．６μＭ、ＳＬ−１１１１８＝０．９８μＭ、ＳＬ−１１１１９＝０．９７μＭおよびＢＥ−４４４＝０．９３μＭ。
【図２０Ａ】
図２０Ａは、漸増濃度のＳＬ−１１０９３（黒丸）、ＳＬ−１１０９８（白丸）、ＳＬ−１１０９９（黒四角）、ＳＬ−１１１００（白四角）、ＳＬ−１１１０１（黒三角）、ＳＬ−１１１０２（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト肺癌細胞Ａ５４９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９３＝０．２６μＭ、ＳＬ−１１０９８＝０．２９μＭ、ＳＬ−１１０９９＝０．５１μＭ、ＳＬ−１１１００＝０．６５μＭ、ＳＬ−１１１０１＝２．２μＭ、ＳＬ−１１１０２＝０．１５μＭおよびＢＥ−４４４＝０．１５μＭ。
【図２０Ｂ】
図２０Ｂは、漸増濃度のＳＬ−１１１０３（黒丸）、ＳＬ−１１１０４（白丸）、ＳＬ−１１１０８（黒四角）、ＳＬ−１１１１４（白四角）、ＳＬ−１１１１８（黒三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト肺癌細胞Ａ５４９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０３＝１２．４μＭ、ＳＬ−１１１０４＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１０８＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１１４＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１１８＝０．２１４μＭおよびＢＥ−４４４＝０．１５μＭ。
【図２１Ａ】
図２１Ａは、漸増濃度のＳＬ−１１０９３（黒丸）、ＳＬ−１１０９８（白丸）、ＳＬ−１１０９９（黒四角）、ＳＬ−１１１００（白四角）、ＳＬ−１１１０１（黒三角）、ＳＬ−１１１０２（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト乳癌細胞ＭＣＦ７の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９３＝０．６６μＭ、ＳＬ−１１０９８＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１０９９＝２６．３μＭ、ＳＬ−１１１００＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１０１＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１０２＞３１．２５μＭおよびＢＥ−４４４＞３１．２５μＭ。
【図２１Ｂ】
図２１Ｂは、漸増濃度のＳＬ−１１１０３（黒丸）、ＳＬ−１１１０４（白丸）、ＳＬ−１１１０８（黒四角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト乳癌細胞ＭＣＦ７の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０３＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１０４＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１０８＞３１．２５μＭおよびＢＥ−４４４＞３１．２５μＭ。
【図２２Ａ】
図２２Ａは、漸増濃度のＳＬ−１１０９３（黒丸）、ＳＬ−１１０９８（白丸）、ＳＬ−１１０９９（黒四角）、ＳＬ−１１１００（白四角）、ＳＬ−１１１０１（黒三角）、ＳＬ−１１１０２（白三角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト脳腫瘍細胞Ｕ２５１  ＭＧ  ＮＣＩの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９３＝０．０７μＭ、ＳＬ−１１０９８＝０．１μＭ、ＳＬ−１１０９９＝０．１１μＭ、ＳＬ−１１１００＝０．２２μＭ、ＳＬ−１１１０１＝１．７μＭ、ＳＬ−１１１０２＝０．１５μＭおよびＢＥ−４４４＝０．２μＭ。
【図２２Ｂ】
図２２Ｂは、漸増濃度のＳＬ−１１１０３（黒丸）、ＳＬ−１１１０４（白丸）、ＳＬ−１１１０８（黒四角）およびＢＥ−４４４（黒菱形）の、培養したヒト脳腫瘍細胞Ｕ２５１  ＭＧ  ＮＣＩの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１０３＝９．５μＭ、ＳＬ−１１１０４＝１４．７１μＭ、ＳＬ−１１１０８＝２．０μＭおよびＢＥ−４４４＝０．２μＭ。
【図２３】
図２３は、漸増濃度のＳＬ−１１０９１（黒丸）、ＳＬ−１１０９４（白丸）およびＢＥ−３４３（黒四角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＰＣ３の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９１＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１０９４＞３１．２５μＭおよびＢＥ−３４３＝０．２４μＭ。
【図２４】
図２４は、漸増濃度のＳＬ−１１０９１（黒丸）、ＳＬ−１１０９４（白丸）およびＢＥ−３４３（黒四角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵ１４５の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９１＝４．３３μＭ、ＳＬ−１１０９４＝１５．４μＭおよびＢＥ−３４３＝０．０４４μＭ。
【図２５】
図２５は、漸増濃度のＳＬ−１１０９１（黒丸）、ＳＬ−１１０９４（白丸）およびＢＥ−３４３（黒四角）の、培養したヒト結腸癌細胞ＨＴ２９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９１＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１０９４＝２８．８μＭおよびＢＥ−３４３＝０．６μＭ。
【図２６】
図２６は、漸増濃度のＳＬ−１１０９１（黒丸）、ＳＬ−１１０９４（白丸）およびＢＥ−３４３（黒四角）の、培養したヒト肺癌細胞Ａ５４９の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９１＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１０９４＞３１．２５μＭおよびＢＥ−３４３＝０．２μＭ。
【図２７】
図２７は、漸増濃度のＳＬ−１１０９１（黒丸）、ＳＬ−１１０９４（白丸）およびＢＥ−３４３（黒四角）の、培養したヒト乳癌細胞ＭＣＦ７の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９１＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１０９４＞３１．２５μＭおよびＢＥ−３４３＝０．５μＭ。
【図２８】
図２８は、漸増濃度のＳＬ−１１０９１（黒丸）、ＳＬ−１１０９４（白丸）およびＢＥ−３４３（黒四角）の、培養したヒト脳腫瘍細胞Ｕ２５１  ＭＧ  ＮＣＩの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１０９１＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１０９４＞３１．２５μＭおよびＢＥ−３４３＝０．１４μＭ。
【図２９】
図２９は、漸増濃度のＳＬ−１１１４１（黒丸）、ＳＬ−１１１４４（白四角）、ＳＬ−１１１５０（黒四角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＰＣ３の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１４１＞３１．２５μＭ、ＳＬ−１１１４４＝０．３μＭおよびＳＬ−１１１５０＝０．５μＭ。
【図３０】
図３０は、漸増濃度のＳＬ−１１１４１（黒丸）、ＳＬ−１１１４４（白四角）、ＳＬ−１１１５０（黒四角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵ１４５の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１４１＝０．１３μＭ、ＳＬ−１１１４４＝０．１μＭおよびＳＬ−１１１５０＝０．１１μＭ。
【図３１】
図３１は、漸増濃度のＳＬ−１１１４１（黒丸）、ＳＬ−１１１４４（白四角）、ＳＬ−１１１５０（黒四角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵＰＲＯの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１４１＝０．７１μＭ、ＳＬ−１１１４４＝０．３６μＭおよびＳＬ−１１１５０＝０．４８μＭ。
【図３２】
図３２は、漸増濃度のＳＬ−１１１４１（黒丸）、ＳＬ−１１１４４（白四角）、ＳＬ−１１１５０（黒四角）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＬＮＣＡＰの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
ＥＤ50：ＳＬ−１１１４１＝０．０７μＭ、ＳＬ−１１１４４＝０．２０μＭおよびＳＬ−１１１５０＝０．２３μＭ。
【図３３】
図３３は、本発明において有用なポリアミン化合物を調製するために用いられる合成方法論を図示する。
【図３４】
図３４は、本発明において有用なポリアミン化合物を調製するために用いられるさらなる合成方法論を図示する。
【図３５】
図３５は、本発明において有用なポリアミン化合物を調製するために用いられるさらなる合成方法論を図示する。
【図３６】
図３６は、本発明において有用なポリアミン化合物を調製するために用いられるさらなる合成方法論を図示する。
【図３７】
図３７は、本発明において有用なポリアミン化合物を調製するために用いられるさらなる合成方法論を図示する。
【図３８】
図３８は、本発明において有用なポリアミン化合物を調製するために用いられるさらなる合成方法論を図示する。
【図３９】
図３９は、本発明において有用なポリアミン化合物を調製するために用いられるさらなる合成方法論を図示する。
【図４０Ａ】
図４０Ａは、本発明において有用なポリアミン化合物を調製するために用いられるさらなる合成方法論を図示する。
【図４０Ｂ】
図４０Ｂは、本発明において有用なポリアミン化合物を調製するために用いられるさらなる合成方法論を図示する。
【図４１】
図４１はスキーム５０１を示し、これは、本発明において有用なキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図４２】
図４２はスキーム５０２を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図４３】
図４３はスキーム５０３を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図４４】
図４４はスキーム５０４を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図４５】
図４５はスキーム５０５を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図４６】
図４６はスキーム５０６を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図４７】
図４７はスキーム５０７を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図４８】
図４８はスキーム５０８を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図４９】
図４９はスキーム５０９を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図５０】
図５０はスキーム５１０を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図５１】
図５１はスキーム５１１を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図５２】
図５２はスキーム５１２を示し、これは、本発明において有用なさらなるキノン化合物の合成的調製を図示する。
【図５３】
図５３はスキーム５１３を示し、これは、特定のキノン化合物に結合体化したペプチドの合成的調製を図示する。
【図５４】
図５４はスキーム５１４を示し、これは、特定のキノン化合物に結合体化したペプチドのさらなる合成的調製を図示する。
【図５５】
図５５はスキーム２５を示し、これは、エステル結合を介してポリアミンアルコールへと結合体化したジペプチドの合成を図示する。
【図５６】
図５６はスキーム２６を示し、これは、アミド結合を介して種々のポリアミンへと結合体化したテトラペプチドの合成を図示する。
【図５７】
図５７は、漸増濃度のＳＬ−１１１４１（白丸）およびＳＬ−１１１５５（黒丸）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＰＣ３の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
【図５８】
図５８は、漸増濃度のＳＬ−１１１４１（白丸）およびＳＬ−１１１５５（黒丸）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵＰＲＯの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
【図５９】
図５９は、漸増濃度のＳＬ−１１１４１（白丸）およびＳＬ−１１１５５（黒丸）の、培養したヒト前立腺癌細胞ＬＮＣＡＰの生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。
【図６０】
図６０は、漸増濃度のＳＬ−１１１４１（黒丸）およびＢＥ  ４ｘ４（白丸）およびＳＬ−１１１５５の、培養したヒト前立腺癌細胞ＤＵ１４５の生存に対するインビトロでの効果を示すグラフである。