【手続補正書】
【提出日】平成20年1月10日(2008.1.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための方法であって、前記被験体から得られた試料中のＭＢＬ遺伝子における１つもしくはそれ以上の核酸変異体の有無を検出する工程を含んでなる、方法。
【請求項２】
下記工程：
（ａ）前記被験体のＭＢＬ遺伝子における１つもしくはそれ以上の核酸変異体の有無を検出し；次いで
（ｂ）工程（ａ）において検出される核酸変異体から、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定し、それによって、ＭＢＬ遺伝子における所定の変異体配列の非存在または存在が、被験体が神経疾患を発症する危険性にあることを示すものである
を含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
神経疾患は、以下のもの：アルツハイマー病、ピック病、パーキンソン病、レビー小体型痴呆、ハンチントン病、第１３染色体認知症、ダウン症候群、脳血管疾患、多発性硬化症、ラスムッセン脳炎、ウイルス性髄膜炎、ＮＰＳＬＥ、筋萎縮性側索硬化症、クロイツフェルト・ヤコブ病、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、伝染性海綿状脳症、虚血再潅流損傷（例えば、脳卒中）、脳外傷、微生物感染および慢性疲労症候群から選択されることをさらに特徴とする、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ＭＢＬ遺伝子における変異体配列は、プロモーター領域、５’ＵＴＲおよび／またはＭＢＬ２遺伝子のエキソン１において検出されることをさらに特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
ＭＢＬ２遺伝子における変異体配列は、ＭＢＬ２遺伝子の−５５０位、−２２１位、＋４位、＋１５４位、＋１６１位および／または＋１７０位の少なくとも１つにおいて検出されることをさらに特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
変異体は、ＭＢＬ２遺伝子の−５５０（Ｇ＞Ｃ）、−２２１（Ｇ＞Ｃ）、＋４（Ｃ＞Ｔ）、＋１５４（Ｃ＞Ｔ）、＋１６１（Ｇ＞Ａ）および／または＋１７０（Ｇ＞Ａ）であることをさらに特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
＋１５４位のヌクレオチドＴ（変異体Ｄ）、＋１６１位のヌクレオチドＡ（変異体Ｂ）および＋１７０位のヌクレオチドＡ（変異体Ｃ）の非存在は、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すことをさらに特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
ハプロタイプＨＹＰＤ、ＬＹＰＢおよびＬＹＱＣの非存在は、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すことをさらに特徴とする、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
−２２１位（変異体Ｘ）のヌクレオチドＣの存在は、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すことをさらに特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
ハプロタイプＬＸＰＡの存在は、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すことをさらに特徴とする、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ハプロタイプＬＹＰＡの存在は、被験体が多発性硬化症を発症する危険性にあることを示すことをさらに特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項１２】
核酸変異体の有無は、以下の方法：ハイブリダイゼーション、配列決定、ＰＣＲ、プライマー伸長および制限部位解析のうちの１つによって検出されることをさらに特徴とする、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ＭＢＬ遺伝子における核酸変異体は、それらの表現型によって検出されることをさらに特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ＭＢＬ産物の１つもしくはそれ以上のタンパク質変異体の濃度が測定されることをさらに特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
下記工程：
（ａ）前記被験体におけるＭＢＬ産物の１つもしくはそれ以上のタンパク質変異体の濃度を測定し；次いで
（ｂ）工程（ａ）における測定から、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定し、それによって、所定のＭＢＬタンパク質変異体の濃度の変化が、被験体が神経疾患を発症する危険性にあることを示すものである
を含んでなる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＭＢＬ２産物の１つもしくはそれ以上のタンパク質変異体の濃度が測定されることをさらに特徴とする、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
アミノ酸位置５２でＣ（変異体Ｄ）、アミノ酸位置５４でＤ（変異体Ｂ）またはアミノ酸位置５７でＥ（変異体Ｃ）を伴うＭＢＬ２タンパク質変異体が検出され、それによって、前記ＭＢＬ２タンパク質変異体の非存在は、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すことをさらに特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
イムノアッセイによって、１つもしくはそれ以上のＭＢＬタンパク質変異体の濃度が測定されることをさらに特徴とする、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
ＭＢＬ産物の機能的活性が測定されることをさらに特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
下記工程：
（ａ）前記被験体におけるＭＢＬ産物の機能的活性を測定し；
（ｂ）測定工程（ａ）から、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定し、それによって、ＭＢＬ産物の機能的活性の変化が、被験体が神経疾患を発症する危険性にあることを示すものである
を含んでなる、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
ＭＢＬ遺伝子における核酸変異体の有無が、前記被験体から得られる生物学的サンプルにおいてインビトロで決定されることをさらに特徴とする、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
生物学的サンプルは組織サンプルまたは体液サンプルであることをさらに特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
生物学的サンプルは脳、血液、血漿、唾液または脳脊髄液サンプルであることをさらに特徴とする、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ＭＢＬ遺伝子における核酸変異体の有無が、１つもしくはそれ以上の他の危険因子の検出の組み合わせで決定されることをさらに特徴とする、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
他の危険因子は、ＡｐｏＥ遺伝子型、プレセニリン−１遺伝子型、プレセニリン−２遺伝子型、ＡＰＰ遺伝子における変異またはＣＹＰ４６多型であることをさらに特徴とする、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
下記工程：
被験体における神経疾患の処置または防止のための方法であって、以下：
（ａ）前記被験体から得られた試料中のＭＢＬ遺伝子における１つもしくはそれ以上の核酸変異体の有無を検出し；次いで
（ｂ）工程（ａ）において検出される核酸変異体に基づいて、被験体に適切な治療用薬剤を投与する
を含んでなる、方法。
【請求項２７】
被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するためのキットであって：
（ａ）前記被験体のＭＢＬ遺伝子における１つもしくはそれ以上の核酸変異体の有無を検出する、前記被験体における１つもしくはそれ以上のＭＢＬタンパク質変異体の濃度を測定する、および／または前記被験体におけるＭＢＬ機能的活性を測定するための手段；ならびに
（ｂ）工程（ａ）の手段によって検出される核酸変異体、タンパク質変異体濃度および／または機能的活性から、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための手段
を含んでなるキット。
【請求項２８】
（ａ）前記被験体のＭＢＬ２遺伝子の核酸位置＋１５４（Ｃ＞Ｔ）、＋１６１（Ｇ＞Ａ）および／または＋１７０（Ｇ＞Ａ）の１つもしくはそれ以上の核酸変異体の有無を検出するための手段；ならびに
（ｂ）工程（ａ）の手段によって検出される核酸変異体から、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための手段であって、それによって、ＭＢＬ２遺伝子の＋１５４位のヌクレオチドＴ（変異体Ｄ）、＋１６１位のヌクレオチドＡ（変異体Ｂ）および＋１７０位のヌクレオチドＡ（変異体Ｃ）の非存在が、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すものである手段
を含んでなる、請求項２７に記載のキット。
【請求項２９】
（ａ）前記被験体のＭＢＬハプロタイプを検出するための手段；ならびに
（ｂ）工程（ａ）の手段によって検出されるハプロタイプから、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための手段であって、それによって、ハプロタイプＨＹＰＤ、ＬＹＰＢおよびＬＹＱＣの非存在が、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すものである手段
を含んでなる、請求項２８に記載のキット。
【請求項３０】
（ａ）前記被験体のＭＢＬ２遺伝子の−２２１位（Ｇ＞Ｃ）の１つもしくはそれ以上の核酸変異体の有無を検出するための手段；および
（ｂ）工程（ａ）の手段によって検出される核酸変異体から、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための手段であって、それによって、ＭＢＬ２遺伝子の−２２１位（変異体Ｘ）のヌクレオチドＣ存在が、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すものである手段
を含んでなる、請求項２７に記載のキット。
【請求項３１】
（ａ）前記被験体のＭＢＬハプロタイプを検出するための手段；ならびに
（ｂ）工程（ａ）の手段によって検出されるハプロタイプから、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための手段であって、それによって、ハプロタイプＬＸＰＡの存在が、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すものである手段
を含んでなる、請求項３０に記載のキット。
【請求項３２】
（ａ）前記被験体のＭＢＬハプロタイプを検出するための手段；ならびに
（ｂ）工程（ａ）の手段によって検出されるハプロタイプから、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための手段であって、それによって、ハプロタイプＬＹＰＡの存在が、被験体が多発性硬化症を発症する危険性にあることを示すものである手段
を含んでなる、請求項２７に記載のキット。
【請求項３３】
（ａ）測定されるＭＢＬタンパク質変異体を特異的に認識する抗体；および
（ｂ）工程（ａ）の手段によって測定されるＭＢＬタンパク質変異体濃度から、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための手段
を含んでなる、請求項２７に記載のキット。
【請求項３４】
（ａ）アミノ酸位置５２でＣ（変異体Ｄ）、アミノ酸位置５４でＤ（変異体Ｂ）および／またはアミノ酸位置５７でＥ（変異体Ｃ）を伴うＭＢＬ２タンパク質変異体を特異的に認識する抗体；ならびに
（ｂ）工程（ａ）の手段によって測定されるＭＢＬタンパク質変異体濃度から、被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための手段であって、それによって、アミノ酸位置５２でＣ（変異体Ｄ）、５４位でＤ（変異体Ｂ）および５７位でＥ（変異体Ｃ）を伴うＭＢＬ２タンパク質変異体の非存在が、被験体がアルツハイマー病を発症する危険性にあることを示すものである手段
を含んでなる、請求項３３に記載のキット。
【請求項３５】
被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するための手段は、以下：ＭＢＬ核酸変異体もしくはハプロタイプ、ＭＢＬタンパク質変異体濃度および／またはＭＢＬ機能的活性のうち少なくとも１つを考慮して、神経疾患を発症する危険性を決定する素因危険性アルゴリズムを含んでなることをさらに特徴とする、請求項２７〜３４のいずれか一項に記載のキット。
【請求項３６】
被験体が神経疾患を発症する危険性にあるかどうかを決定するためのキットであって：
（ａ）前記被験体のＭＢＬ遺伝子における１つもしくはそれ以上の核酸変異体の有無を検出する、前記被験体における１つもしくはそれ以上のＭＢＬタンパク質変異体の濃度を測定する、および／または前記被験体におけるＭＢＬ機能的活性を測定するための手段；ならびに
（ｂ）前記被験体においてＡｐｏＥ遺伝子型、プレセニリン−１遺伝子型、プレセニリン−２遺伝子型、ＡＰＰ遺伝子における変異および／またはＣＹＰ４６多型を検出するための手段、
を含んでなるキット。