【手続補正書】
【提出日】平成31年2月25日(2019.2.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オリゴヌクレオチドを含む、ＣＥＰ２９０遺伝子のイントロン２６におけるｃ．２９９１＋１６５５Ａ＞Ｇ変異を有するヒトを処置するための医薬であって、前記オリゴヌクレオチドが配列番号２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１及び１２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含み、又はその群から選択されるヌクレオチド配列からなり、かつ、前記オリゴヌクレオチドは、配列番号１６、３３、３４又は３５のヌクレオチド配列を含まない、医薬。
【請求項２】
前記オリゴヌクレオチドが、２’−Ｏ−低級アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアルコキシ修飾リボース部分を含む、請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
前記オリゴヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチル修飾リボース部分を含む、請求項２に記載の医薬。
【請求項４】
すべてのリボースが２’−Ｏ−メチル化されている、請求項２又は３に記載の医薬。
【請求項５】
前記オリゴヌクレオチドが、２’−Ｏ−メトキシエチル修飾リボース部分を含む、請求項２に記載の医薬。
【請求項６】
すべてのリボースが２’−Ｏ−メトキシエチル修飾されている、請求項２又は５に記載の医薬。
【請求項７】
前記オリゴヌクレオチドがホスホロチオエート骨格を含む、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬。
【請求項８】
ＣＥＰ２９０遺伝子のイントロン２６におけるｃ．２９９１＋１６５５Ａ＞Ｇ変異を有するヒトを処置するための医薬として用いられるウイルスベクターであって、配列番号２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１及び１２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含み、又はその群から選択されるヌクレオチド配列からなり、かつ、前記オリゴヌクレオチドは、配列番号１６、３３、３４又は３５のヌクレオチド配列を含まない、オリゴヌクレオチドを含むウイルスベクター。
【請求項９】
ＣＥＰ２９０遺伝子のイントロン２６におけるｃ．２９９１＋１６５５Ａ＞Ｇ変異を有するヒトを処置するための医薬組成物であって、配列番号２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１及び１２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含み、又はその群から選択されるヌクレオチド配列からなり、かつ、前記オリゴヌクレオチドは、配列番号１６、３３、３４又は３５のヌクレオチド配列を含まない、オリゴヌクレオチド、又は請求項８のウイルスベクターを含む、医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３５】
本発明のＡＯＮは、エクソンスキッピングに関して先行技術のＡＯＮよりも良好に機能
することが要件ではないため、エクソンスキッピングを誘導するのに足りる性能であれば
十分である。例に開示されている本発明によるＡＯＮは、本発明の好ましい実施形態に過
ぎない。本発明によって包含される特許請求される本発明の要件を満たすその他のＡＯＮ
が設計されてもよい。本発明は、例えば、次の態様を含む。
（１）ヒトＣＥＰ２９０遺伝子がヒト細胞において発現するときに、前記遺伝子のイントロン２６におけるｃ．２９９１＋１６５５Ａ＞Ｇ突然変異と関連する異常なスプライシング部位のスプライシング部位選択を低減することができるオリゴヌクレオチドであって、前記オリゴヌクレオチドが配列番号１６からなるものではないという条件で、前記オリゴヌクレオチドの配列が特性（ａ）から（ｄ）：
（ａ）３つ以下の連続したグアノシンを含む、
（ｂ）６０％以下のグアノシンヌクレオベースを有する、
（ｃ）最大１つのＣｐＧ配列を含む、かつ／または
（ｄ）３つ以上の連続した相補的な塩基対を含むヘアピンを形成する可能性がない
のうちの少なくとも１つを有することを特徴とするオリゴヌクレオチド。
（２）５０％を超えるグアノシンヌクレオベースを含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（３）４０％を超えるグアノシンヌクレオベースを含まないことを特徴とする、上記（１）または（２）に記載のオリゴヌクレオチド。
（４）３つ超の連続したグアノシンの配列、もしくはグアノシンテトラド、または６０％を超えるグアノシンを含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（５）３つ超の連続したグアノシンの配列、もしくはグアノシンテトラド、または１つ超のＣｐＧ配列を含まないことを特徴とする、上記（１）〜（４）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（６）３つ超の連続したグアノシンの配列、もしくはグアノシンテトラド、または３つ以上の連続した相補的な塩基対を含むヘアピンを形成する可能性のある配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（７）３つ超の連続したグアノシンの配列、もしくはグアノシンテトラド、またはＣｐＧ配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（８）６０％を超えるグアノシンヌクレオベース、または１つ超のＣｐＧ配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（９）ＣｐＧ配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（１０）６０％を超えるグアノシンヌクレオベース、または３つ以上の連続した相補的な塩基対を含むヘアピンを形成する可能性のある配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（１１）３つ超の連続したグアノシンの配列、もしくはグアノシンテトラド、または６０％を超えるグアノシンヌクレオベース、または１つ超のＣｐＧ配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（１２）３つ超の連続したグアノシンの配列、もしくはグアノシンテトラド、または６０％を超えるグアノシンヌクレオベース、または３つ以上の連続した相補的な塩基対を含むヘアピンを形成する可能性のある配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（１３）３つ超の連続したグアノシンの配列、もしくはグアノシンテトラド、または１つ超のＣｐＧ配列、または３つ以上の連続した相補的な塩基対を含むヘアピンを形成する可能性のある配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（１４）３つ超の連続したグアノシンの配列、もしくはグアノシンテトラド、または６０％を超えるグアノシンヌクレオベース、または１つ超のＣｐＧ配列、または３つ超の連続した相補的な塩基対を含む二本鎖構造を形成する可能性のある配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（１５）３つ超の連続したグアノシンの配列、もしくはグアノシンテトラド、または６０％を超えるグアノシンヌクレオベース、またはＣｐＧ配列、または３つ超の連続した相補的な塩基対を含む二本鎖構造を形成する可能性のある配列を含まないことを特徴とする、上記（１）に記載のオリゴヌクレオチド。
（１６）３０ヌクレオチド長より短い、例えば、２５ヌクレオチド長より短い、好ましくは２１ヌクレオチド長より短い、より好ましくは２０ヌクレオチド長より短い、最も好ましくは１６〜１９の間のヌクレオチド長であることを特徴とする、上記（１）〜（１５）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（１７）１７ヌクレオチド長であることを特徴とする、上記（１）〜（１６）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（１８）以下の任意のヌクレオチド配列を含むか、またはそれからなることを特徴とするオリゴヌクレオチド。
【表３−２】
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（１９）ホスホロチオエート骨格を含む、上記（１）〜（１８）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（２０）２’−Ｏ−低級アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアルコキシ修飾リボース部分、好ましくは２’−Ｏ−メチルを含むオリゴリボヌクレオチドである、上記（１）〜（１９）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（２１）配列番号７または配列番号１２からなる配列を有し、任意選択ですべてのリボースが２’−Ｏ−メチル化されている、上記（１）〜（２０）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド、特に上記（１９）または上記（２０）に記載のオリゴリボヌクレオチド。
（２２）ヒト細胞において、上記（１）〜（１８）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチドの発現を促す条件下に置かれたときに、前記分子を発現させるウイルスベクター。
（２３）上記（１）〜（２０）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチドまたは上記（２１）に記載のウイルスベクターを含む医薬組成物。
（２４）薬剤として使用するための上記（１）〜（２０）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド、上記（２１）に記載のウイルスベクターまたは上記（２２）に記載の医薬組成物。
（２５）ゲノムにおいてＣＥＰ２９０遺伝子のイントロン２６に突然変異（ｃ．２９９１＋１６５５Ａ＞Ｇ）があるヒトを処置するための薬剤として使用するための上記（１）から（２０）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド、上記（２１）に記載のウイルスベクターまたは上記（２２）に記載の医薬組成物。
（２６）細胞におけるＣＥＰ２９０のスプライシングを調節するためのｉｎ  ｖｉｔｒｏおよび／またはｅｘ  ｖｉｖｏにおける方法であって、前記細胞を、上記（１）〜（２０）のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド、上記（２１）に記載のウイルスベクター、または上記（２２）に記載の医薬組成物と接触させることを含む方法。