【手続補正書】
【提出日】平成19年8月8日(2007.8.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
糖質の一種であるポリアルコール（一般に、「糖アルコール」もしくは「多価アルコール」とも呼ばれる。）は、低う蝕性や難消化性など食品素材として優れた機能性を有することから、その関連化合物、例えば、グルコシル転移ポリアルコールなどを製造し、その機能性の解析を進めることにより、より優れた機能性や新規な機能性を有する糖質が実用化できる可能性がある。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の実施の形態について説明する。本発明のポリアルコールへのグルコシル基の転移方法（以下、単に「本発明の転移方法」又は「当該転移方法」という場合がある。）はコージビオースホスホリラーゼを利用することを特徴とする。本発明でいうコージビオースとは、α−Ｄ−グルコシル（１→２）Ｄ−グルコースで表される二糖を意味する。本発明でいうコージビオースホスホリラーゼとは、この二糖コージビオースを、無機リン酸及び／又はその塩の存在下で加リン酸分解してＤ−グルコース及びβ−Ｄ−グルコース−１リン酸及び／又はその塩（以下、本明細書を通じて、不都合が生じない限り、β−Ｄ−グルコース−１リン酸及び／又はその塩を単に「β−Ｄ−グルコース−１リン酸」という。）を生成する反応ならびにこの逆反応を触媒する酵素を意味する。本発明で利用できるコージビオースホスホリラーゼは、このように定義され、下記に詳述する本発明で用いるポリアルコールの１種又は２種以上にグルコシル基を転移する作用を有するものである限り起源や調製方法などは特定のものに限定されない。例えば、同じ特許出願人による特開平１０−３０４８８２号公報に開示された、サーモアナエロビウム・ブロッキイ（ＡＴＣＣ  ３５０４７）起源の天然型ならびに組換え型の該酵素はいずれも本発明に有利に利用できる。また、同公報に開示された同酵素をコードするＤＮＡに蛋白質工学的手法を適用して得られる変異酵素も、所期の転移作用を実質的に消失していないものである限り本発明に利用できる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
本発明の転移方法で用いる、構成糖としてグルコースを含む糖化合物とは、コージビオースホスホリラーゼの作用によるポリアルコールへのグルコシル基転移反応においてグルコシル基供与体となる、構成糖としてグルコースを含有する単糖、オリゴ糖、多糖ならびにそれらの誘導体を意味する。斯かる糖化合物の調製方法や存在形態に特に制限はなく、例えば、市販品を含む、天然より単離された調製品、酵素的又は化学的に調製ないしは合成された調製品、さらには、本発明の転移方法における酵素反応の進行や当該転移方法による生成物の利用に悪影響を及ぼさない範囲で、斯かる糖化合物以外の夾雑物質を含んでいる調製品や、以上のような調製品を組み合わせてなる組成物であってもよい。斯かる糖化合物として比較的望ましいものはβ−Ｄ−グルコース−１リン酸である。β−Ｄ−グルコース−１リン酸を酵素的に調製するには、例えば、グルコースがα−１，２′結合で連結してなるコージビオースやコージトリオースなどのコージオリゴ糖にコージビオースホスホリラーゼ（上述のもの等）を作用させたり、マルトースにマルトースホスホリラーゼ（オリエンタル酵母株式会社販売等）を作用させたり、トレハロースにトレハロースホスホリラーゼ（同じ特許出願人による特開平１０−３０４８８１号に記載のもの等）を作用させることなどによりβ−Ｄ−グルコース−１リン酸を生成させ、これを、必要に応じて常法により所望のレベルにまで精製すればよい。また、本発明においては、酵素の作用を受けてβ−Ｄ−グルコース−１リン酸を生成しうる、構成糖としてグルコースを含む以上のようなオリゴ糖類をそのまま利用することもできる。例えば、コージオリゴ糖を利用する場合、コージビオースホスホリラーゼの作用によるβ−Ｄ−グルコース−１リン酸の生成と、生成したβ−Ｄ−グルコース−１リン酸からのポリアルコールへのグルコシル基の転移反応とが同時に進行することとなる。また、マルトース及び／又はトレハロースを利用する場合には、それぞれからβ−Ｄ−グルコース−１リン酸を生成する上述のホスホリラーゼを本発明の転移方法を行う反応系に共存させれば、所期の転移反応は進行させることができる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
以上のような本発明の転移方法で生成するグルコシル転移ポリアルコールは、目的に応じて、反応混合物そのままの状態で、あるいは、慣用の方法により所望のレベルにまで精製した状態で諸種の用途に利用することができる。したがって、本発明の転移方法は、グルコシル転移ポリアルコール及び／又はグルコシル転移ポリアルコール含有物の製造方法における一工程として有利に実施できる。本発明は斯かるグルコシル転移ポリアルコール及び／又はグルコシル転移ポリアルコール含有物の製造方法を提供するものでもあり、当該製造方法は、本発明の転移方法を実施する工程と、この工程で生成したグルコシル転移ポリアルコール及び／又は該グルコシル転移ポリアルコール含有物を採取する工程を含んでなる。生成したグルコシル転移ポリアルコール及び／又は該グルコシル転移ポリアルコール含有物は、目的に応じて、慣用の方法、例えば、活性炭処理等による脱色、イオン交換樹脂処理等による脱塩、けい藻土等の助剤を用いる濾過、イオン交換樹脂等を用いるクロマトグラフィー、エバポレーター等を用いる濃縮、噴霧乾燥、真空乾燥、凍結乾燥などの乾燥、水・アルコール等の適宜の溶媒中で行う結晶化などから選ばれる適宜の工程を経て採取することができる。以上のような本発明の製造方法により製造される製品は、目的に応じて、グルコシル転移ポリアルコールを結晶等の純粋な状態から他の成分を含む組成物に至るまでの諸種の純度で含む、粉末状、結晶粉末状、顆粒状、ブロック状、シラップ状など適宜の形状で提供される。本発明の製造方法により製造される製品は、本発明で用いられるポリアルコールと同様に、例えば、甘味料、難消化性甘味料、低う蝕性甘味料、保湿剤、澱粉老化防止剤、整腸剤、ミネラル吸収促進剤などとして健康食品・飲料を含む飲食品分野、化粧品分野、医薬品分野、飼料分野などの諸種の分野で有利に利用することができる。また、本発明の方法で製造される製品は、その機能性を解析するための研究用試薬として利用することもでき、斯かる解析の結果に基づいて、本発明の製造方法によるグルコシル転移ポリアルコールならびにグルコシル転移ポリアルコール含有物は、例えば、防腐剤、保存剤、抗菌剤、抗ウィルス剤、生体機能調節剤などとして上記のような諸種の分野ならびにその他の分野で利用できる可能性もある。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
本品は、甘味料、難消化性甘味料、低う蝕性甘味料、保湿剤、澱粉老化防止剤、整腸剤などとして、健康食品・飲料を含む飲食品分野、化粧品分野、医薬品分野、飼料分野などの諸種の分野で有利に利用できる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本品は、甘味料、難消化性甘味料、低う蝕性甘味料、保湿剤、澱粉老化防止剤、整腸剤などとして、健康食品・飲料を含む飲食品分野、化粧品分野、医薬品分野、飼料分野などの諸種の分野で有利に利用できる。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２８】
本品は、甘味料、難消化性甘味料、低う蝕性甘味料、保湿剤、澱粉老化防止剤、整腸剤などとして、健康食品・飲料を含む飲食品分野、化粧品分野、医薬品分野、飼料分野などの諸種の分野で有利に利用できる。