【手続補正書】
【提出日】平成19年11月30日(2007.11.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2007516244.tif 000001
式（Ｉ）
〔式中、
Ｃａｔ＋は、１種の（もしくは数種の、同一のもしくは異なる）有機または無機のカチオン（プロトンを含む）を表し；
ｍは、１〜３の整数であり；
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解可能な任意の基であり；
Ｙ＝Ｏ−Ｃａｔ＋、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、−Ａ−Ｒ基であるか、またはヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、核酸、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、単糖、オリゴ糖、多糖、脂肪酸、単純脂質、複合脂質、葉酸、テトラヒドロ葉酸、リン酸、イノシトール、ビタミン、補酵素、フラボノイド、アルデヒド、エポキシド、およびハロヒドリンよりなる群から選択される基であり；
Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２、またはＣＨ２であり；そして
Ｒは、少なくとも１個のヘテロ原子が介在していてもよい、線状、分枝状、もしくは環状の、芳香族もしくは非芳香族の、飽和もしくは不飽和のＣ１〜Ｃ５０炭化水素基｛ここで、該炭化水素基は、アルキル、アルキレニル、アルキニル、エポキシアルキル、アリール、ヘテロ環、アルコキシ、アシル、アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、エステル、アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、チオアルキル、スルホン、スルホキシド、およびそれらの組合せよりなる群から選択される１個もしくは数個の置換基により置換可能な、アルキル、アルキレニル、またはアルキニル、好ましくは、アルキルまたはアルキレンを含む｝である〕
で示されるγδＴ細胞アクチベーター。
【請求項２】
前記アクチベーターが、式（Ｘ）：
【化２】
2007516244.tif 000002
〔式中、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、同一であるかもしくは異なり、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基であり、Ｗは、−ＣＨ−または−Ｎ−であり、Ｒ６は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルであり、Ｃａｔ＋は、１種の（もしくは数種の、同一のもしくは異なる）有機または無機のカチオン（プロトンを含む）を表し、Ｂは、ＯまたはＮＨであり、ｍは、１〜３の整数であり、そしてＹは、Ｏ−Ｃａｔ＋、ヌクレオシド、または−Ａ−Ｒ基｛ここで、Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２、またはＣＨ２であり、そしてＲは、１｝
【化３】
2007516244.tif 000003
〔式中、ｎは、２〜２０の整数であり、Ｒ１は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基であり、そしてＲ２は、ハロゲン化（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ハロゲン化（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、または（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ２〜Ｃ３）アシルである〕
２）
【化４】
2007516244.tif 000004
〔式中、ｎは、２〜２０の整数であり、そしてＲ１はメチル基またはエチル基である〕、または
３）
【化５】
2007516244.tif 000005
〔式中、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、同一であるかもしくは異なり、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基であり、Ｗは、−ＣＨ−または−Ｎ−であり、そしてＲ６は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルである〕よりなる群から選択される｝である〕
で示される化合物である、請求項１に記載のγδＴ細胞アクチベーター。
【請求項３】
前記アクチベーターが、式（ＸＩ）
【化６】
2007516244.tif 000006
で示される化合物である、請求項２に記載のγδＴ細胞アクチベーター。
【請求項４】
前記アクチベーターが、式（ＸＩＩ）
【化７】
2007516244.tif 000007
で示される化合物である、請求項３に記載のγδＴ細胞アクチベーター。
【請求項５】
前記アクチベーターが、式（ＩＩ）：
【化８】
2007516244.tif 000008
〔式中、Ｘは、ハロゲン（好ましくは、Ｉ、Ｂｒ、およびＣｌから選択される）であり、Ｂは、ＯまたはＮＨであり、ｍは、１〜３の整数であり、Ｒ１は、メチル基またはエチル基であり、Ｃａｔ＋は、１種の（もしくは数種の、同一のもしくは異なる）有機または無機のカチオン（プロトンを含む）を表し、そしてｎは、２〜２０の整数であり、そしてＹは、Ｏ−Ｃａｔ＋、ヌクレオシド、または−Ａ−Ｒ基｛ここで、Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２、またはＣＨ２であり、そしてＲは、１）
【化９】
2007516244.tif 000009
〔式中、ｎは、２〜２０の整数であり、Ｒ１は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基であり、そしてＲ２は、ハロゲン化（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ハロゲン化（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、または（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ２〜Ｃ３）アシルである〕
２）
【化１０】
2007516244.tif 000010
〔式中、ｎは、２〜２０の整数であり、そしてＲ１はメチル基またはエチル基である〕、または
３）
【化１１】
2007516244.tif 000011
〔式中、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、同一であるかもしくは異なり、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基であり、Ｗは、−ＣＨ−または−Ｎ−であり、そしてＲ６は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルである〕よりなる群から選択される｝である〕
で示される化合物である、請求項１に記載のγδＴ細胞アクチベーター。
【請求項６】
前記アクチベーターが、式（ＩＩＩ）
【化１２】
2007516244.tif 000012
で示される化合物である、請求項５に記載のγδＴ細胞アクチベーター。
【請求項７】
前記アクチベーターが、式（Ｖ）
【化１３】
2007516244.tif 000013
で示される化合物である、請求項５に記載のγδＴ細胞アクチベーター。
【請求項８】
前記アクチベーターが、式（ＶＩ）：
【化１４】
2007516244.tif 000014
〔式中、Ｒ１は、メチル基またはエチル基であり、Ｃａｔ＋は、１種の（もしくは数種の、同一のもしくは異なる）有機または無機のカチオン（プロトンを含む）を表し、Ｂは、ＯまたはＮＨであり、ｍは、１〜３の整数であり、そしてｎは、２〜２０の整数であり、そしてＹは、Ｏ−Ｃａｔ＋、ヌクレオシド、または−Ａ−Ｒ基｛ここで、Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２、またはＣＨ２であり、そしてＲは、１）
【化１５】
2007516244.tif 000015
〔式中、ｎは、２〜２０の整数であり、Ｒ１は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基であり、そしてＲ２は、ハロゲン化（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ハロゲン化（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、または（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ２〜Ｃ３）アシルである〕
２）
【化１６】
2007516244.tif 000016
〔式中、ｎは、２〜２０の整数であり、そしてＲ１はメチル基またはエチル基である〕、または
３）
【化１７】
2007516244.tif 000017
〔式中、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、同一であるかもしくは異なり、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基であり、Ｗは、−ＣＨ−または−Ｎ−であり、そしてＲ６は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルである〕よりなる群から選択される｝である〕
で示される化合物である、請求項１に記載のγδＴ細胞アクチベーター。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載のγδＴ細胞アクチベーターを含む医薬組成物。
【請求項１０】
ヒト被験者においてγδＴ細胞をレギュレートするための医薬組成物を製造するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載のγδＴ細胞アクチベーターの使用。
【請求項１１】
癌、感染性疾患、自己免疫性疾患、またはアレルギー性疾患を患っているかまたは患いやすい被験者を治療するための医薬組成物を製造するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載のγδＴ細胞アクチベーターの使用。
【請求項１２】
前記癌が固形腫瘍である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
ワクチンアジュバントとしての、請求項１〜８のいずれか１項に記載のγδＴ細胞アクチベーターの使用。
【請求項１４】
ワクチンアジュバントとして請求項１〜８のいずれか１項に記載のγδＴ細胞アクチベーターを含むワクチン組成物。
【請求項１５】
（ａ）カップリング工程でアルキルハライドＲ−Ｘをジエチルホスホルアミデート試薬またはジエチルクロロホスフェート試薬と反応させることと；
（ｂ）工程（ａ）で調製された化合物を鹸化工程で反応させることによりＯ−エチル基を除去することと；
（ｃ）工程（ｂ）で調製された化合物をリン酸化工程で反応させることによりジホスホルアミデートモノエステルを調製することと；
を含む、ジホスホルアミデートモノエステル化合物の調製方法であって、
Ｒが、少なくとも１個のヘテロ原子が介在していてもよい、線状、分枝状、もしくは環状の、芳香族もしくは非芳香族の、飽和もしくは不飽和のＣ１〜Ｃ５０炭化水素基｛ここで、該炭化水素基は、アルキル、アルキレニル、アルキニル、エポキシアルキル、アリール、ヘテロ環、アルコキシ、アシル、アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、エステル、アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、チオアルキル、スルホン、スルホキシド、およびそれらの組合せよりなる群から選択される１個もしくは数個の置換基により置換可能な、アルキル、アルキレニル、またはアルキニル、好ましくは、アルキルまたはアルキレンを含む｝であり、そして
Ｘが、好適な条件下でジエチルホスホルアミデート基により置換可能な部分である、方法。
【請求項１６】
Ｘが、ＮＨ２基であり、かつ前記Ｒ−Ｘ化合物が、カップリング工程でジエチルクロロホスフェート化合物と反応される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｘが、Ｉ、Ｂｒ、およびＣｌよりなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
（Ｅ）−２−（４−クロロ−２−メチルブト−２−エニルオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン化合物を提供することと、相間移動触媒の存在下で水−ペンタン二相混合物中で該化合物をナトリウムアジドと反応させることと、を含む、（Ｅ）−２−（４−アジド−２−メチルブト−２−エニルオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン化合物の調製方法。
【請求項１９】
γδＴ細胞を活性化させる方法であって、γδＴ細胞を請求項１〜８のいずれか１項に記載のγδＴ細胞アクチベーターと接触させることを含む、方法。
【請求項２０】
γδＴ細胞が前記γδＴ細胞アクチベーターにｉｎ  ｖｉｔｒｏで接触される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
請求項１９または２０に記載の方法に従って活性化されたγδＴ細胞。
【請求項２２】
医薬組成物を製造するための、請求項２１に記載のγδＴ細胞の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０１】
この反応はまた、Ｙ基として単糖を含む化合物を調製するために使用することも可能である。この場合、Ｎｕｃｌ−Ｏ−Ｖは、ＭｏｎｏＳａｃ−Ｏ−Ｖ（ただし、Ｍｏｎｏｓａｃは単糖である）と置き換えられる。たとえば、ニルソン（Ｎｉｌｓｓｏｎ）およびモスバッハ（Ｍｏｓｂａｃｈ）、（１９８０年）の論文（参照により本明細書に援用されるものとする）に記載されているようなメチル−６−Ｏ−トシル−アルファ−Ｄ−ガラクトピラノシド化合物または市販のマンノーストリフレート化合物に対応するＭｏｎｏＳａｃ−Ｏ−Ｖ基を使用することが可能である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０２】
この反応はさらに、Ｙ基としてオリゴ糖を含む化合物を調製するために使用することも可能である。この場合、Ｎｕｃｌ−Ｏ−Ｖは、ｏｌｉｇｏＳａｃ−Ｏ−Ｖ（ただし、ｏｌｉｇｏＳａｃはオリゴ糖である）と置き換えられる。たとえば、論文（Ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ、第７７巻、２２５−２２８頁（その開示内容は、参照により本明細書に援用されるものとする））に記載されているような６Ａ−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニル−β−シクロデキストリン化合物に対応するｏｌｉｇｏＳａｃ−Ｏ−Ｖ基を使用することが可能である。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０３】
この反応は、Ｙ基として多糖を含む化合物を調製するために使用することが可能である。この場合、Ｎｕｃｌ−Ｏ−Ｖは、ｐｏｌｙＳａｃ−Ｏ−Ｖ（ただし、ｐｏｌｙＳａｃは多糖である）と置き換えられる。たとえば、ニルソン（Ｎｉｌｓｓｏｎ）ら、（１９８１年）；ならびにニルソン（Ｎｉｌｓｓｏｎ）およびモスバッハ（Ｍｏｓｂａｃｈ）、（１９８０年）（それらの開示内容は、参照により本明細書に援用されるものとする）の論文に記載されているようなトシル化多糖に対応するｐｏｌｙＳａｃ−Ｏ−Ｖ基を使用することが可能である。トシル化による多糖担体のヒドロキシル基の活性化に基づくこのカップリング技術を用いれば、水性または有機性の媒体中で共有結合カップリングを行うことが可能である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３４】
好ましい一実施形態では、γδＴ細胞アクチベーターの投与は、２週間〜４週間ごとのサイクル（すなわち、約１４〜２８日単位の反復サイクル）の初日に行われる。好ましい実施形態では、γδＴ細胞アクチベーターは、２週間〜４週間ごとのサイクルまたは好ましくは３週間ごとのサイクルの初日にだけ投与される。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６２】
４−アジド−２−メチルブト−１−エンの調製：
２０ｍｌのＤＭＳＯ中の２．０ｇ（８．３２ｍｍｏｌ）の３−メチル−３−ブテン−１−イル−トシレートの溶液に８２０ｍｇ（１２．４８ｍｍｏｌ）のナトリウムアジド（ＮａＮ３）および１２５ｍｇ（触媒量）のＮａＩを添加した。反応混合物を５５℃で一晩攪拌した。反応混合物を室温まで冷却させ、１２０ｍｌの水を添加した。溶液を３×１００ｍｌのＥｔ２Ｏで抽出した。合わせた有機相を１００ｍｌの水、１００ｍｌのブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、そして室温において３００ｍｍＨｇで濃縮させた。８７５ｍｇ（７．８７ｍｍｏｌ、収率９５％）の４−アジド−２−メチルブト−１−エンを褐色の油として単離した。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６３】
３−メチルブト−３−エン−１−アミンの調製：
２７ｍｌのＴＨＦ中の５００ｍｇ（４．５０ｍｍｏｌ）の４−アジド−２−メチルブト−１−エン、３．９２ｇ（１４．９５ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンＰＰｈ３、および２．７ｍｌの水の溶液を、室温で一晩攪拌し、そして溶媒を蒸発させた。次に、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／Ｅｔ３Ｎ  ９／１／０．５を溶出液として使用してシリカゲルクロマトグラフィーにより、得られた粗生成物を精製した。１２５ｍｇ（１．４７ｍｍｏｌ）の３−メチルブト−３−エン−１−アミンを３２％の単離収率で黄色の油として単離した。精製アミンを乾燥Ｎ２下に保持し、次の工程に供すべく−２０℃で保存した。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６４】
３−メチルブト−３−エニルピロホスホルアミデート（Ｎ−ＩＰＰ）の調製：
３−メチル−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ブト−２−エニルピロホスホルアミデートを調製するための実施例１で報告した手順に従って、３−メチルブト−３−エニルピロホスホルアミデートを調製する。ピロリン酸二ナトリウム（０．２５ｍｍｏｌ−１ｅｑ．）および３−メチルブト−３−エン−１−アミン（０．２５ｍｍｏｌ−１ｅｑ．）を３ｍｌの１／１（ｖ／ｖ）脱イオン水／アセトニトリル混合物に溶解させてガラス反応槽中に導入する。室温で攪拌しながらシリンジを用いて１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２．５ｍｍｏｌ−１０ｅｑ）の１２．５ｍｌの０．２Ｍ脱イオン水／アセトニトリル溶液を滴下する。０．１ＮＨＣｌ水溶液を添加することにより、最終的にｐＨを６〜６．５の範囲内に調整し保持する。次に、イオンクロマトグラフィー（ＨＰＡＥＣ）により反応の進行を監視する。約３時間後、反応混合物を約５ｍｌの最終体積になるように減圧下で濃縮し、そして過剰のダウエックス（ＤＯＷＥＸ）  ５０ＷＸ８−２００（ＮＨ４＋形）樹脂の入ったカラムに水溶液を通して２カラム体積の脱イオン水で溶出させることにより、この段階で得られた粗製物質をアンモニウム形に変換する。