【手続補正書】
【提出日】平成19年12月17日(2007.12.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  アミノ酸配列
Ｘ1ｈ2Ｘ3ｈ4Ｌｐ5ｐ6
〔式中、Ｘ1は、グルタミン酸（Ｅ）、グルタミン（Ｑ）またはアラニン（Ａ）残基を表し、
ｈ2は、イソロイシン（Ｉ）またはアラニン（Ａ）残基を表し、
Ｘ3は、セリン（Ｓ）、アラニン（Ａ）またはアスパラギン酸（Ｄ）残基を表し、
ｈ4は、メチオニン（Ｍ）またはアラニン（Ａ）残基を表し、
ｐ5は、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン残基（Ｎ）を表し、そして
ｐ6は、グルタミン（Ｑ）またはグルタミン酸（Ｅ）残基を表す〕からなる、モノロイシン依存性基底側部選別シグナル。
【請求項２】  （Ｘ1；ｈ2；Ｘ3；ｈ4；ｐ5；ｐ6）が、
（ｉ）（いかなる極性アミノ酸残基もしくはＡ；Ｉ；Ｓ；Ｍ；Ｑ；ＱもしくはＥ）、
（ii）（Ｅ；いかなる疎水性アミノ酸残基；Ｓ；Ｍ；Ｑ；ＱもしくはＥ）、
（iii）（Ｅ；Ｉ；いかなるアミノ酸残基；Ｍ；Ｑ；ＱもしくはＥ）、
（iv）（Ｅ；Ｉ；Ｓ；ロイシンおよびイソロイシン以外のいかなる疎水性アミノ酸残基；Ｑ；ＱもしくはＥ）、
（ｖ）（Ｅ；Ｉ；Ｓ；Ｍ；いかなる極性アミノ酸残基；ＱもしくはＥ）、または
（vi）（Ｅ；Ｉ；Ｓ；Ｍ；Ｑ；いかなる極性アミノ酸残基）
を表す、請求項１記載のモノロイシン依存性基底側部選別シグナル。
【請求項３】  下記のアミノ酸配列：ＥＩＳＭＬＱＱ、ＥＩＳＭＬＱＥ、ＡＩＳＭＬＱＱ、ＡＩＳＭＬＱＥ、ＱＩＳＭＬＱＱ、ＱＩＳＭＬＱＥ、ＥＡＳＭＬＱＱ、ＥＡＳＭＬＱＥ、ＥＩＤＭＬＱＱ、ＥＩＤＭＬＱＥ、ＥＩＡＭＬＱＱ、ＥＩＡＭＬＱＥ、ＥＩＳＡＬＱＱ、ＥＩＳＡＬＱＥ、ＥＩＳＭＬＮＱ、ＥＩＳＭＬＮＥおよびＱＡＳＭＬＮＱのいずれか一つからなる、請求項２記載のモノロイシン依存性基底側部選別シグナル。
【請求項４】  プロリン残基を欠く、請求項２記載のモノロイシン依存性基底側部選別シグナル。
【請求項５】  一般式：
ｚ−（Ｘ）p−Ａｃｃ−（Ｘ）q−（Ｂａ）−（Ｘ）r−（Ｖ）f
〔式中、Ｘは、それぞれ独立して、アミノ酸残基を表し；
ｚは、リシン（Ｋ）またはアルギニン残基（Ｒ）を表し；
ｐは、１２〜２２の整数を表し；
ｑは、０、または１〜４の整数を表し；
ｒは、２〜１２の整数を表し；
「Ａｃｃ」は、酸性クラスターを表し；
「Ｂａ」は、請求項１〜４のいずれか一項に記載の基底側部選別シグナルを表し；
Ｖは、バリン残基を表し；
ｆは、０または１を表し、かつ
（Ｘ）で表される複数のアミノ酸残基は、同じであるか、または異なることができる〕
を有する細胞質ドメインからなる、ペプチドまたはタンパク質。
【請求項６】  該酸性クラスターが、グルタミン酸（Ｅ）およびアスパラギン酸（Ｄ）から選ばれる少なくとも２つの酸性アミノ酸を含む、請求項５記載のペプチドまたはタンパク質。
【請求項７】  該酸性クラスターが、モノロイシン基底側部選別シグナルのロイシンから８または９アミノ酸に位置するグルタミン酸残基を含む、請求項５記載のペプチドまたはタンパク質。
【請求項８】  該酸性クラスターが、アミノ酸配列ＥＥＤもしくはＱＥＥ、ＥＡＥ、またはＥＫＤを含む、請求項５記載のペプチドまたはタンパク質。
【請求項９】  バリンをそのＣ末端に含む、請求項５〜８のいずれか一項に記載のペプチドまたはタンパク質。
【請求項１０】  アミノ酸５０個までを含む、請求項５〜９のいずれか１項に記載のペプチド又はタンパク質。
【請求項１１】  請求項５〜９のいずれか１項記載のペプチド、及び膜貫通ドメイン又は膜アンカーからなる、ペプチド又はタンパク質。
【請求項１２】  基底側部選別シグナル中のロイシンが、膜貫通ドメインから１５〜３５アミノに位置する、請求項１１記載のペプチドまたはタンパク質。
【請求項１３】  分極した細胞内で発現されたとき、該基底側部選別シグナルが該細胞の基底側部膜をその標的とさせる、請求項５〜１２のいずれか一項に記載のペプチドまたはタンパク質。
【請求項１４】  細胞内で発現されたとき、該基底側部選別シグナルによって細胞膜から内部化されない請求項１３記載のペプチドまたはタンパク質。
【請求項１５】  細胞質ドメインが、図２Ｂに示されるとおり、ヒト、マウス、ニワトリ、ネコ、イヌ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウズラ、ラットまたはサンショウウオＳＣＦの細胞質尾部のアミノ酸配列を含む、請求項５記載のペプチドまたはタンパク質。
【請求項１６】  分極した細胞内で過剰発現されたとき、該細胞内でさらに発現されるタンパク質の基底側部発現を阻害できる能力を有する、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のペプチドまたはタンパク質。
【請求項１７】  ｉ）可溶性タンパク質Ｐ、ii）シグナルペプチド、iii）膜貫通ドメイン及びiv）請求項１〜４のいずれか１項に記載の基底側部選別シグナルを含み、シグナルペプチド及び膜貫通ドメインの少なくとも一方が、タンパク質Ｐに関して異種である、膜貫通キメラタンパク質。
【請求項１８】  ・請求項１〜４のいずれか一項に記載の基底側部選別シグナル、または
・該シグナルを含むペプチドもしくはタンパク質の基底側部選別シグナル
を特異的に認識する抗体、又はそのフラグメント。
【請求項１９】  一本鎖抗体またはイントラボディーである、請求項１８記載の抗体。
【請求項２０】  細胞内で発現されるタンパク質の基底側部発現を阻害できる能力を有する、請求項１７または１８記載の抗体。
【請求項２１】  請求項１〜４のいずれか一項に記載の基底側部選別シグナルをコードしている核酸分子。
【請求項２２】  請求項５〜２０のいずれか一項に記載のタンパク質またはペプチドをコードしている配列を含む核酸分子。
【請求項２３】  請求項２１または２２記載の核酸分子と相補的である核酸分子。
【請求項２４】  請求項５〜２０のいずれか一項に記載のペプチドまたはタンパク質を発現する細胞。
【請求項２５】  請求項２１〜２３のいずれか一項に記載の核酸を含む細胞。
【請求項２６】  該細胞が、分極している、たとえばＭＤＣＫ細胞である、請求項２４または２５記載の細胞。
【請求項２７】  分極した細胞の側底膜内で特異的に発現されるのを常とする、膜貫通タンパク質の基底側部発現を阻害するための、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のペプチドまたはタンパク質の使用。
【請求項２８】  モノロイシン基底側部選別シグナルを担持する、Ｉ型またはII型のトポロジーの膜貫通タンパク質の基底側部選別を廃絶するための、請求項２７記載の使用。
【請求項２９】  該膜貫通タンパク質が、ＳＣＦである、請求項２７または２８記載の使用。
【請求項３０】  基底側部を標的にさせた膜貫通タンパク質Ｐの基底側部発現を調整する方法であって、Ｐを発現する細胞に、請求項１〜４のいずれか一項に記載の基底側部選別シグナル、または請求項１〜２０のいずれか一項に記載のタンパク質もしくはペプチドを導入することを含む方法。
【請求項３１】  基底側部タンパク質ＰがＳＣＦであり、該細胞が、セルトリ細胞、ケラチノサイト、肺上皮細胞、腎上皮細胞、皮膚の内皮細胞、呼吸および消化管、大動脈ならびに骨髄からの細胞、骨芽細胞、胸腺上皮細胞、卵巣細胞、およびＳＣＦを発現するニューロンから選ばれる、請求項３０記載の方法。
【請求項３２】  膜貫通タンパク質Ｔの膜保持を調整する方法であって、Ｔを発現する細胞に、請求項１〜４のいずれか一項に記載の基底側部選別シグナル、または請求項１〜２０のいずれか一項に記載のタンパク質もしくはペプチドを導入することを含む方法。
【請求項３３】  膜貫通タンパク質ＴがＳＣＦであり、該細胞が、皮膚の繊維芽細胞、心房、大動脈の平滑筋細胞、骨髄間質細胞およびライディッヒ細胞から選ばれる、請求項３２記載の方法。
【請求項３４】  （ｉ）可溶性タンパク質Ｐ、（ii）シグナルペプチド、（iii）膜貫通ドメイン、および（iv）請求項１〜４のいずれか一項に記載のシグナルを含み、該シグナルペプチドおよび膜貫通ドメインの少なくとも一方が、タンパク質Ｐについて異種である、キメラ膜貫通タンパク質Ｔの基底側部発現を得る方法であって、該タンパク質をコードしている核酸を分極した細胞内で発現させることを含む方法。
【請求項３５】  該タンパク質Ｔが、（ｉ）シグナルペプチド、（ii）細胞外ドメイン、（iii）膜貫通ドメイン、および（iv）式：
ｚ−（Ｘ）p−Ａｃｃ−（Ｘ）q−（Ｂａ）−（Ｘ）r−（Ｖ）f
〔式中、Ｘは、それぞれ、アミノ酸残基を表し；
ｚは、リシン（Ｋ）またはアルギニン残基（Ｒ）を表し；
ｐは、１２〜２２の整数を表し；
ｑは、０、または１〜４の整数を表し；
ｒは、２〜１２の整数を表し；
「Ａｃｃ」は、酸性クラスターを表し；
「Ｂａ」は、請求項１〜４のいずれか一項に記載の基底側部選別シグナルを表し；
Ｖは、バリン残基を表し；
ｆは、０または１を表し、かつ（Ｘ）で表される複数のアミノ酸残基は、同じであるか、または異なることができる〕
を有する細胞質尾部、
を含むキメラ膜貫通タンパク質であって、該細胞質尾部が、タンパク質Ｔに関して異種であり、Ｔの内生の細胞質尾部に加えてか、または該内生の尾部の全体もしくは部分的置換としてかのいずれかでＴに存在する、請求項３４記載の方法。
【請求項３６】  基底側部発現の阻害物質を特定するためのスクリーニング方法であって、
・分極した細胞に、阻害特性について試験しようとする化合物を導入し、
・該細胞内の、リポータータンパク質の基底側部発現の改変、およびこのリポータータンパク質に対する頂端発現の出現を検出し、
・場合により、こうして特定された阻害物質を回収する
ことを含むスクリーニング方法。
【請求項３７】  該リポータータンパク質が、図１に示されるとおりのキメラＧＦＰ−ＳＣＦタンパク質である、請求項３６記載のスクリーニング法。
【請求項３８】  請求項１〜４のいずれか一項に記載の基底側部標的化シグナルの、該シグナルを含むタンパク質の基底側部発現を阻害できる阻害物質であって、請求項３６または３７記載のスクリーニング法を実施することによって得られる阻害物質。
【請求項３９】  該阻害物質が、ペプチド、抗体、抗体のフラグメント、一本鎖抗体、イントラボディー、ファージライブラリーの成員によって発現されるペプチド、または合成化合物である請求項３８記載の阻害物質。
【請求項４０】  ＳＣＦの細胞内の役割を変更する医薬の製造のための、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のタンパク質もしくはペプチド、および／または請求項２１〜２３のいずれか一項に記載の核酸、および／または請求項３８もしくは３９記載の阻害物質を含む組成物の使用。
【請求項４１】  ＳＣＦの役割の該改変が、メラニン細胞増殖、メラニン細胞局在の数または変化の低下へと導く、請求項４０記載の使用。
【請求項４２】  ほくろ、老人性ほくろまたは母斑ほくろのような過度に色素沈着した皮膚病変を軽減するための、請求項４０記載の使用。
【請求項４３】  黒色腫細胞を処置するための、請求項４０記載の使用。
【請求項４４】  ＵＶ損傷した皮膚からメラニン細胞を除去するための、請求項４０記載の使用。
【請求項４５】  気道および消化管内の肥満細胞が仲介するアレルギー反応を防止するための、請求項４０記載の使用。
【請求項４６】  単球増加症、白血病または肥満細胞腫を処置するための、請求項４０記載の使用。
【請求項４７】  精子形成または卵子形成の阻害を処置するための、請求項４０記載の使用。
【請求項４８】  骨粗鬆症、または上皮小体機能亢進症の骨を処置するための、請求項４０記載の使用。
【請求項４９】  造血前駆細胞新生物、たとえば急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）を処置するための、請求項４０記載の使用。
【請求項５０】  乾癬または関節硬化症を処置するための、請求項４０記載の使用。
【請求項５１】  皮膚の色素沈着を軽減するための美容学における、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のタンパク質もしくはペプチド、および／または請求項２１〜２３のいずれか一項に記載の核酸、および／または請求項３８もしくは３９記載の阻害物質を含む組成物の使用。
【請求項５２】  分極した細胞の側底膜内で特異的に発現されるのを常とする、膜貫通タンパク質の基底側部発現を阻害するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の基底側部選別シグナルを含むペプチドの使用。