【手続補正書】
【提出日】平成20年7月18日(2008.7.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  原核宿主細胞中で異種組換えタンパク質を生産する方法であって、
宿主細胞遺伝子に対する宿主細胞によるコドンの使用を決定し、
宿主細胞内で異種組換えタンパク質をコードする核酸において、平均頻度が１０％未満のコドンを少なくとも１０％の平均頻度を有するコドンにより置換し、
組換えタンパク質をコードする核酸で宿主細胞を形質転換し、そして
組換え核酸を発現させる、方法であり、
ｉ）宿主細胞内で使用され、かつ、平均頻度が１０％未満の全てのコドンを、少なくとも１０％の平均頻度を有するコドンにより置換する、及び／又は
ii）宿主細胞を、宿主細胞に希に存在するコドンをコードする１以上のｔＲＮＡ又は該ｔＲＮＡをコードする核酸で形質転換する
ことを特徴とする方法。
【請求項２】  宿主細胞が大腸菌であることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  宿主細胞がスタフィロコッカス属から選ばれる宿主細胞であることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項４】  宿主細胞がスタフィロコッカス・カルノサスであることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項５】  スタフィロコッカス・カルノサス中で異種組換えタンパク質を生産する方法であって、
宿主細胞遺伝子に対する宿主細胞によるコドンの使用を決定し、
宿主細胞内で異種組換えタンパク質をコードする核酸において、平均頻度が１０％未満のコドンを少なくとも１０％の平均頻度を有するコドンにより置換し、
組換えタンパク質をコードする核酸で宿主細胞を形質転換し、そして
組換え核酸を発現させるか、又は、
宿主細胞遺伝子に対する宿主細胞によるコドンの使用を決定し、
宿主細胞を、宿主細胞に希に存在するコドンをコードする１以上のｔＲＮＡ又は該ｔＲＮＡをコードする核酸、及び、組換えタンパク質をコードする核酸で形質転換し、そして
組換え核酸を発現させる
方法。
【請求項６】  組換えタンパク質が抗体タンパク質であることを特徴とする、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】  組換えタンパク質がインシュリンであることを特徴とする、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項８】  組換えタンパク質が組織プラスミノーゲンアクチベーター（ｔＰａ）であることとする、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項９】  組換えタンパク質が成長ホルモンであることを特徴とする、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】  組換えタンパク質がヒトタンパク質であることを特徴とする、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】  組換えタンパク質がヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）であることを特徴とする、請求項９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】  Ｇ又はＣに富むコドンをＡ又はＴを含むコドンで置換することを特徴とする、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】  コドンＧＣＣをＧＣＡで置換することを特徴とする、請求項３〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】  コドンＴＧＣをＴＧＴで置換することを特徴とする、請求項３〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】  コドンＧＡＣをＧＡＴで置換することを特徴とする、請求項３〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】  コドンＧＡＧをＧＡＡで置換することを特徴とする、請求項３〜１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】  コドンＴＴＣをＴＴＴで置換することを特徴とする、請求項３〜１６のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】  コドンＧＧＧをＧＧＴで置換することを特徴とする、請求項３〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】  コドンＣＡＣをＣＡＴで置換することを特徴とする、請求項３〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】  コドンＡＴＡをＡＴＴで置換することを特徴とする、請求項３〜１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】  コドンＡＡＧをＡＡＡで置換することを特徴とする、請求項３〜２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】  コドンＣＴＣをＴＴＡで置換することを特徴とする、請求項３〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】  コドンＡＡＣをＡＡＴで置換することを特徴とする、請求項３〜２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】  コドンＣＣＣをＣＣＡで置換することを特徴とする、請求項３〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】  コドンＣＡＧをＣＡＡで置換することを特徴とする、請求項３〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】  コドンＣＧＧをＣＧＴで置換することを特徴とする、請求項３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】  コドンＴＣＧをＴＣＡで置換することを特徴とする、請求項３〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】  コドンＡＣＣをＡＣＡで置換することを特徴とする、請求項３〜２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】  コドンＧＴＣをＧＴＴで置換することを特徴とする、請求項３〜２８のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】  コドンＴＡＣをＴＡＴで置換することを特徴とする、請求項３〜２９のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】  コドンＴＧＡをＴＡＡで置換することを特徴とする、請求項１〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】  ＡＧＧ−ｔＲＮＡ又はＡＧＡ−ｔＲＮＡをコードする核酸及び組換えタンパク質をコードする核酸で宿主細胞を形質転換することを特徴とする、請求項１〜３１のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】  組換え異種タンパク質をコードする核酸分子であって、宿主細胞中で使用されかつ平均頻度が１０％未満の全てのコドンが、少なくとも１０％の平均頻度を有するコドンにより置換されていることを特徴とする核酸分子。
【請求項３４】  ヒト成長ホルモンｈＧＨをコードすることを特徴とする、請求項３３に記載の核酸分子。
【請求項３５】  配列番号１：
NNAGATCTAAAGGAGGTAATTCATATGAAAGAAACAAAACATCAACACACATTTTCTATCCGTAAGTCGGCTTATGGTGCCGCGTCGGTTATGGTCGCATCATGTATATTTGTCATCGGTGGGGGCGTGGCAGAGGCAAATGATTCGACAACACAAACAACGACACCACTAGAAGTCGCTCAAACGTCGCAGCAAGAAACACATACACATCAAACACCTGTTACATCATTACATACTGCAACACCTGAACATGTTGATGACTCTAAAGAAGCAACACCTTTACCTGAAAAAGCAGAGTCACCAAAAACCGAAGTGACAGTTCAACCTTCATCGCATACACAGGAAGTACCTGCGTTACATAAAAAAACACAGCAACAACCGGCGTATAAGGATAAAACGGTACCAGAGTCAACGATAGCATCAAAGTCGGTTGAATCAAATAAAGCAACAGAAAATGAGATGTCACCTGTTGAACATCATGCTTCAAATGTGGAAAAACGTGAAGATAGATTGGAGACTAATGAGACAACACCGCCATCAGTGGACCGTGAATTTAGCCATAAAATCATCAATAATACGCACGTAAATCCAAAAACGGATGGACAAACAAACGTTAATGTTGATACGAAAACGATAGACACCGTTTCACCGAAAGATGACAGAATAGATACGGCGCAACCGAAACAAGTCGACGTTCCTAAAGAAAATACAACGGCACAAAATAAATTTACATCACAAGCGAGCGACAAAAAACCAACAGTAAAAGATGCATCAGGTGGTGATGATGATGATAAATTTCCAACAATTCCCTTAAGTCGATTGTTCGATAACGCTATGTTACGTGCACATAGATTACACCAGCTAGCATTCGATACTTATCAAGAATTTGAGGAAGCTTACATCCCAAAAGAACAAAAGTATAGCTTTTTACAAAATCCGCAAACATCATTATGTTTCTCTGAATCAATTCCAACACCTAGTAACCGTGAGGAAACTCAGCAAAAATCAAATTTAGAACTTTTACGTATTAGCTTGTTACTTATACAATCTTGGTTAGAACCAGTTCAATTTTTACGTTCAGTATTCGCAAATAGTTTAGTCTATGGTGCTTCAGACTCTAACGTATACGATTTATTGAAAGACTTAGAAGAAGGAATTCAAACATTAATGGGTCGTTTGGAAGATGGTTCACCAAGAACTGGCCAAATTTTTAAACAAACATATAGCAAATTCGATACTAATTCACATAACGATGACGCATTACTTAAAAATTACGGTTTATTGTATTGTTTTCGTAAAGATATGGATAAAGTTGAAACATTCTTACGCATAGTACAATGCCGTTCTGTTGAAGGATCATGTGGTTTTTAATGATAACTGCAG
のヌクレオチド配列によりコードされる核酸分子。
【請求項３６】  請求項３３〜３５のいずれかに記載の核酸分子を含むことを特徴とするベクター。
【請求項３７】  請求項３３〜３５のいずれかに記載の核酸分子又は請求項３６に記載のベクターを含むことを特徴とする宿主細胞。
【請求項３８】  スタフィロコッカス属の宿主細胞であって、当該宿主細胞中に希に存在するコドンをコードする１以上のｔＲＮＡ分子で形質転換されていることを特徴とする宿主細胞。
【請求項３９】  スタフィロコッカス・カルノサスであることを特徴とする、請求項３８に記載の宿主細胞。