【手続補正書】
【提出日】平成18年11月13日(2006.11.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】菌茸類の栽培において培地として利用する素材、果樹剪定材及びその原木及び桑、楢等の樹の内容の違いによって異なった水溶性多糖体の糖組成の構成を作る。菌茸類の栽培において多糖体の組成構成を計画し、菌茸類の菌糸体、子実体の組成に含有させる方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
霊芝（サルノコシカケ科マンネンダケ）の栽培において、培地として利用する樹の選択、果樹の樹やそれらの剪定材や桑、楢の樹等の異なった素材を培地として選択する事によって、水溶性多糖体の量的格差が生じ、組成構成においても異なった含有率を示した。その格差は高分子、水溶性多糖体ほど多くなった。培地に利用する樹の種類によって霊芝の菌糸体、子実体に含有する水溶性多糖体の組成構成の含有量が数倍から７０倍以上の格差が生じることを発見した。
果樹材の剪定材、桑、楢などの樹をチップ状に粉砕して、培地として利用し、霊芝を栽培すると、水溶性低分子及び高分子多糖体のガラクトース、グルコース、マンノース、フコース、アラビノース、ラムノース、キシロース等の含有量がそれぞれ樹の特性として現れ、その含有率の格差は数倍から７０倍以上になる。
霊芝は培地に利用する樹の品種によって異なった、水溶性多糖体を生成し生育する。霊芝の栽培においてあらかじめ、培地として利用する樹の種類とその培地から育成される霊芝が組成する水溶性多糖体を分析し、目的とする組成構成に合った培地の配合をおこない、霊芝の菌を培養すると菌糸体、子実体に医薬学的に必要とするこれらの水溶性多糖体の組成を有する構成の目的別に栽培できる。
霊芝の栽培において水溶性多糖体の組成構成を計画し、培地の樹の選択と配合によって、霊芝に各種の水溶性多糖体の組成目的に合わせ、栽培する方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２】
霊芝の栽培において、あらかじめ樹から生成する水溶性多糖体の組成を分析し、目的とする水溶性多糖体の組成の配合比率に基づき数種類の樹のチップを組み合わせ、培地に入れ栽培すると配合比率に基づく、水溶性多糖体の組成配合が得られる。
樹の種類によって水溶性多糖体の組成のガラクトース、グルコース、マンノース、フコース、アラビノース、ラムノース、キシロース等の含有量に相違があり、複合的に組み合わすことから、多糖体の組成配合比率を計画し、霊芝に含まれる水溶性多糖体の組成構成が得られ、目的に合わせ複合的に水溶性多糖体の組成を生成させ栽培が出来る。
水溶性多糖体の組成比率に基づき、樹を選択し、培地に利用する樹の配合比率から目的とする水溶性多糖体構成を組成を含有させる方法。
【手続補正４】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３】
霊芝の栽培において水溶性多糖体の組成のうち高分子多糖体の組成、アラビノース、キシロース、ラムノース、ガラクトース、グルコース、マンノースは培地に利用する樹の品種によって含有比率構成が変化する。これらの高分子の水溶性多糖体はそれぞれ機能性を有しており、含有量の多さを求められている。
カキ、クワ等を培地に入れ霊芝を栽培すると高分子の水溶性多糖体のアラビノース、ガラクトース、キシロース、ラムノースの含有率は高く、選択的に利用することによって高分子、水溶性多糖体のアラビノース、ガラクトース、キシロース、ラムノースの持つ機能性の高い品質が得られる。
サクラ、リンゴ等の樹を培地に入れ霊芝を栽培すると高分子、水溶性多糖体のガラクトース、マンノース、グルコースの含有量が高くなる。選択的にサクラ、リンゴの樹を培地にして栽培すると高分子、水溶性多糖体のガラクトース、マンノース、グルコースの機能性の高い栽培が出来る。
高分子、水溶性多糖体の組成構成とその含有比率を高めるために、培地に配合する樹を選択し、栽培する方法。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】菌茸類にはβ−グルカン、β−１−３グルカン、β−１−６グルカン、β−４−６グルカン、β−Ｄ−グルカンを初め多くの多糖体の存在が認められている。この分野の研究課題は水溶性の高分子多糖体及び低分子多糖体の組成構成がどのような機能性を有しているかにあり、機能性の研究においてはその構成と組成比率を確定することが基礎研究の課題である。
これまで樹の種類を複数配合し、低分子、高分子水溶性多糖体の構成比率を確定し、量的安定下の基に基礎研究がされていない。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】追加
【補正の内容】
【０００６】霊芝を栽培する培地を果実の樹カキ、ウメ、リンゴ、ブドウ、サクラの剪定材と他にクワ、ナラの樹をチップ状に粉砕し、他に混合剤としてフスマを入れ、配合比率を同一にして栽培した。生育した子実体において水溶性多糖体の組成を比較した。
それぞれの子実体を凍結乾燥しミキサーによって粉砕し、粉砕後の粉末１０ｇに対して２００ｍｌの蒸留水を加え、室温下で３時間の振とうを行い、振とう後、濾過し、ろ液と残さとに分離し、全ての濾過液を合わせ水溶性多糖画分（ＷＳ）とした。残された、残さを回収し、凍結乾燥後、水不溶性画分（ＷＩＳ）とした。水不溶性多画分（ＷＩＳ）の９２〜９３％をグルコースから構成されておりこれらはβ−グルカンであると示唆できる。
水溶性多糖画分は濃縮後、エチルアルコールを加え、一定期間低温室に管理後、遠心操作により、沈殿物と上清とに分離し、沈殿物は蒸留水によって、透析して高分子多糖画分（ＷＳ−Ｈ）として回収した。
水溶性多糖画分（ＷＳ）及び（ＷＳ−Ｈ）を加水分解し、分解物を減圧乾固した。
反応物を炭酸バリウムによって中和後、濾過し、ろ液をＡｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＩＲ−１２０（Ｈ＋型）で処理し減圧乾固した。得られた加水分解物中の構成中性単糖はパルスドアンベメトリー検出、陰イオンクロマトグラフィー（ＨＰＡＥＣ）によって分析した。
その結果、水溶性多糖体（ＷＳ）の含有量はカキ、クワ、サクラ、ウメ、ブドウ、リンゴ、ナラに違いがあり、子実体の乾燥重量あたり１６０〜３３０ｍｇ／１０ｇの格差が生じ、その差は２倍以上となり、構成糖組成の差は１．９３倍から１１．２２倍になった。
水溶性多糖画分より分別した高分子多糖画分の含有量は約２０〜６８ｍｇ／１０ｇで格差は低分子より多く、３．４倍になり、構成糖組成は、約２倍から最大７０倍以上の大きな違いが生じた。
水溶性多糖画分（ＷＳ）の糖組成の最低と最高の含有量格差は、以下である。
ラムノース    １３．２２倍
キシロース      ８．８８倍、
アラビノース    ８．９８倍、
マンノース      ２．８１倍
グルコース      １．９５倍
フコース        ３．０４倍
ガラクトース    ２．５７倍、
水溶性多糖画分より分別した高分子多糖画分（ＷＳ−Ｈ）の最低と最高の含有量格差は、
アラビノース    ７９．００倍、
キシロース      ２９．４５倍、
ラムノース      ６５．２９倍
マンノース        ４．２５倍
グルコース        ２．８９倍
フコース          １．６４倍、
ガラクトース      ２．０５倍
の違いがあることが判明した。霊芝の栽培において栽培する培地の樹の選択によって水溶性多糖体の組成に大きな違いが生じることが証明された。
これらの格差から多糖体の多くが樹の種類に依存する傾向が強いことが示される。なかでも高分子多糖体のアラビノース、キシロース、ラムノースに格差が大きく、フコース、グルコース、マンノースも２倍以上の格差がある。
2005229991.tif 000001
2005229991.tif 000002