(57)【要約】式（Ｉ）：2007072845.tif 000006（式中、Ｒ１は水素または代謝性エステル残基を表し、Ｒ２は水素または−Ｒ３−Ｒ４（ここでＲ３は、−ＳＯ３−、−ＣＨ２ＣＯＯ−、−ＣＯＣＯＯ−または−ＣＯＲ５ＣＯＯ−（ここでＲ５は、低級アルキレンまたは低級アルケニレンを表す）を表し、Ｒ４は水素または代謝性エステル残基を表す）である）で示される化合物、その製薬上許容される塩もしくはそれらの溶媒和物を有効成分とすることを特徴とする、血栓除去手段に起因する出血傾向の軽減薬。
2007072845.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2007072845.tif 000005
（式中、Ｒ１は水素または代謝性エステル残基を表し、Ｒ２は水素または−Ｒ３−Ｒ４（ここでＲ３は、−ＳＯ３−、−ＣＨ２ＣＯＯ−、−ＣＯＣＯＯ−または−ＣＯＲ５ＣＯＯ−（ここでＲ５は、低級アルキレンまたは低級アルケニレンを表す）を表し、Ｒ４は水素または代謝性エステル残基を表す）である）
で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を有効成分とすることを特徴とする、血栓除去手段に起因する出血傾向の軽減薬。
【請求項２】
血栓除去手段が組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体および／または血栓除去装置である、請求項１記載の出血傾向の軽減薬。
【請求項３】
請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物と組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を組み合わせてなる虚血性脳卒中治療薬。
【請求項４】
虚血性脳卒中治療薬が請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を含有してなる薬剤および組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を含有してなる薬剤を含有するキットであることを特徴とする、請求項３記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項５】
組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、請求項３または４記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項６】
請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、請求項３〜５のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項７】
請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与中または投与終了後５時間以内に、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体の投与が開始されるものであることを特徴とする、請求項３〜６のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項８】
請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、請求項３〜７のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項９】
請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、点滴投与されるものであることを特徴とする、請求項３〜８のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項１０】
請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、１〜５００ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、請求項３〜９のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項１１】
組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、請求項３〜１０のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項１２】
、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、全投与量の５％〜２０％が急速投与された後、残量が２０分間〜３時間かけて点滴投与されることを特徴とする、請求項３〜１１のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項１３】
組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、０．３〜１０ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、請求項３〜１２のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項１４】
虚血性脳卒中治療薬が配合剤であることを特徴とする、請求項３記載の虚血性脳卒中治療薬。
【請求項１５】
請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物および組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を組み合わせてなる、虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防または改善薬。
【請求項１６】
請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を有効成分とすることを特徴とする、血栓除去装置の虚血性脳卒中治療効果の増強薬。
【請求項１７】
請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を有効成分とすることを特徴とする、血栓除去装置の虚血性脳卒中に起因する運動機能傷害の予防または改善効果の増強薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は虚血性脳卒中の治療薬または治療方法および血栓除去手段に起因する出血傾向の軽減薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
脳梗塞等の虚血性脳卒中は、かつては一度発症すると治癒は困難と考えられていたが、発症後３時間以内の組織プラスミノゲンアクチベータ（以下ｔＰＡ）投与が有効であることが確認され、ｔＰＡは１９９５年に米食品医薬品局（ＦＤＡ）により超急性期脳梗塞治療薬として認可された。
日本においては、１９９１年より組換型ｔＰＡが「急性心筋梗塞における冠動脈血栓の溶解（発症後６時間以内）」を適応として販売されており、２００５年１０月には「虚血性脳血管障害急性期に伴う機能障害の改善（発症後３時間以内）」についても追加承認された。
ｔＰＡはフィブリンヘの親和性が高く、循環血液中でのブラスミノゲン活性化に伴うフィブリノゲン分解が起こりにくい。従って、副作用である出血傾向の上昇が少ないとされているが、ｔＰＡ投与による出血傾向の増加は避けられず、その使用に際しては厳格な適応基準が定められている。
また、カテーテルを用いて血栓を直接破壊または除去するための装置が種々研究、開発されており、Merci（登録商標）Retrieval Systemが既にＦＤＡにより認可されている（非特許文献１）。この機械的血栓摘出装置を用いれば薬物による血栓溶解と比較して短時間で血流再開が可能であり、また、薬物による溶解が困難な大きな血栓を除去することも可能であることから、現在期待されている治療法である。しかしながら、この装置によって発症から８時間以内においても血流再開効果が確認されているものの、その脳内出血リスクはtPAと同様に依然として高く、より安全かつ有効な新しい治療法が望まれている。
本発明に用いる、式（Ｉ）：
【化１】
2007072845.tif 000003
（式中、Ｒ１は水素または代謝性エステル残基を表し、Ｒ２は水素または−Ｒ３−Ｒ４（ここでＲ３は、−ＳＯ３−、−ＣＨ２ＣＯＯ−、−ＣＯＣＯＯ−または−ＣＯＲ５ＣＯＯ−（ここでＲ５は、低級アルキレンまたは低級アルケニレンを表す）を表し、Ｒ４は水素または代謝性エステル残基を表す）である）
で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物（以下、化合物（Ｉ）とする）は特許文献１に記載されている公知の化合物であり、エンドセリン拮抗作用を有することが記載されている。【０００３】
ｔＰＡおよび他の薬剤の組み合わせによる脳梗塞の治療方法が非特許文献２および３に記載されているが、いずれにも化合物（Ｉ）およびｔＰＡの組み合わせについては記載も示唆もされていない。
非特許文献４には、ＳＵＮ９２１６（修飾型ｔＰＡ）の単独投与では脳梗塞巣進展抑制作用が認められるが、エンドセリン拮抗剤であるＦＲ１３９３１７を併用するとこの効果が消失してしまうことが示されている。
【特許文献１】特開平７−５３４８４号公報
【非特許文献１】アメリカン ジャーナル オブ ニューロラジオール（American Journal of Neuroradiol)、２００４年、第２５巻、p.1812-1815
【非特許文献２】ストローク（Stroke）、 2001年、第32巻、p.2635-2640
【非特許文献３】ブレイン リサーチ（Brain Research）、2003年、 第959巻、p.169-172
【非特許文献４】ヨーロピアン ジャーナル オブ ファーマコロジー（European Journal of Pharmacology）、１９９５年、第２７５巻、第１号、p.17-21
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
上記化合物（Ｉ）および血栓除去手段（好ましくはｔＰＡ類縁体または血栓除去装置）を組み合わせることによる虚血性脳卒中（脳梗塞等）治療薬を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、以下のものを提供する。
（１）式（Ｉ）：
【化２】
2007072845.tif 000004
（式中、Ｒ１は水素または代謝性エステル残基を表し、Ｒ２は水素または−Ｒ３−Ｒ４（ここでＲ３は、−ＳＯ３−、−ＣＨ２ＣＯＯ−、−ＣＯＣＯＯ−または−ＣＯＲ５ＣＯＯ−（ここでＲ５は、低級アルキレンまたは低級アルケニレンを表す）を表し、Ｒ４は水素または代謝性エステル残基を表す）である）
で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を有効成分とすることを特徴とする、血栓除去手段に起因する出血傾向の軽減薬。
（２）血栓除去手段が組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体および／または血栓除去装置である、上記（１）記載の出血傾向の軽減薬。
（２−１）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（１）または（２）記載の出血傾向の軽減薬。
（２−２）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与中または投与終了後５時間以内に、血栓除去手段の適用が開始されるものであることを特徴とする、上記（１）〜（２−１）のいずれかに記載の出血傾向の軽減薬。
（２−３）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（１）〜（２−２）のいずれかに記載の出血傾向の軽減薬。
（２−４）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、点滴投与されるものであることを特徴とする、上記（１）〜（２−３）のいずれかに記載の出血傾向の軽減薬。
（２−５）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、１〜５００ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（１）〜（２−４）のいずれかに記載の出血傾向の軽減薬。【０００６】
（２’）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を有効成分とすることを特徴とする、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体に起因する出血傾向の軽減薬。
（２’−１）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（２’）記載の組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体に起因する出血傾向の軽減薬。
（２’−２）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与中または投与終了後５時間以内に、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体の投与が開始されるものであることを特徴とする、上記（２’）または（２’−１）に記載の組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体に起因する出血傾向の軽減薬。
（２’−３）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（２’）〜（２’−２）のいずれかに記載の組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体に起因する出血傾向の軽減薬。
（２’−４）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、点滴投与されるものであることを特徴とする、上記（２’）〜（２’−３）のいずれかに記載の組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体に起因する出血傾向の軽減薬。
（２’−５）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、１〜５００ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（２’）〜（２’−４）のいずれかに記載の組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体に起因する出血傾向の軽減薬。
（２’−６）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物および組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を含有することを特徴とする、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体に起因する出血傾向が軽減された医薬組成物。【０００７】
（３）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物と組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を組み合わせてなる虚血性脳卒中治療薬。
（４）虚血性脳卒中治療薬が上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を含有してなる薬剤および組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を含有してなる薬剤を含有するキットであることを特徴とする、上記（３）記載の虚血性脳卒中治療薬。
（５）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（３）または（４）記載の虚血性脳卒中治療薬。
（６）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（３）〜（５）のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
（７）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与中または投与終了後５時間以内に、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体の投与が開始されるものであることを特徴とする、上記（３）〜（６）のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
（８）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（３）〜（７）のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
（９）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、点滴投与されるものであることを特徴とする、上記（３）〜（８）のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
（１０）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、１〜５００ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（３）〜（９）のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
（１１）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（３）〜（１０）のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
（１２）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、全投与量の５％〜２０％が急速投与された後、残量が２０分間〜３時間かけて点滴投与されることを特徴とする、上記（３）〜（１１）のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
（１３）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、０．３〜１０ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（３）〜（１２）のいずれかに記載の虚血性脳卒中治療薬。
（１４）虚血性脳卒中治療薬が配合剤であることを特徴とする、上記（３）記載の虚血性脳卒中治療薬。【０００８】
（１５）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物および組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を組み合わせてなる、虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−１）運動機能障害の予防または改善薬が上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を含有してなる薬剤および組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を含有してなる薬剤を含有するキットであることを特徴とする、上記（１５）記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−２）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（１５）または（１５−１）記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−３）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（１５）〜（１５−２）のいずれかに記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−４）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与中または投与終了後５時間以内に、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体の投与が開始されるものであることを特徴とする、上記（１５）〜（１５−３）のいずれかに記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−５）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（１５）〜（１５−４）のいずれかに記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−６）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、点滴投与されるものであることを特徴とする、上記（１５）〜（１５−５）のいずれかに記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−７）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、１〜５００ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（１５）〜（１５−６）のいずれかに記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−８）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（１５）〜（１５−７）のいずれかに記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−９）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、全投与量の５％〜２０％が急速投与された後、残量が２０分間〜３時間かけて点滴投与されることを特徴とする、上記（１５）〜（１５−８）のいずれかに記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−１０）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、０．３〜１０ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（１５）〜（１５−９）のいずれかに記載の運動機能障害の予防または改善薬。
（１５−１１）運動機能障害の予防または改善薬が配合剤であることを特徴とする、上記（１５）記載の運動機能障害の予防または改善薬。【０００９】
（１６）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を有効成分とすることを特徴とする、血栓除去装置の虚血性脳卒中治療効果の増強薬。
（１７）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を有効成分とすることを特徴とする、血栓除去装置の虚血性脳卒中に起因する運動機能傷害の予防または改善効果の増強薬。【００１０】
（１８）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を投与することを特徴とする、血栓除去手段に起因する出血傾向の軽減方法。
（１９）血栓除去手段が組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体および／または血栓除去装置である、上記（１８）記載の出血傾向の軽減方法。
（１９’）上記（１）の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物を投与することを特徴とする、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体に起因する出血傾向の軽減方法。
（２０）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物と血栓除去手段を組み合わせてなる虚血性脳卒中の治療方法。
（２１）血栓除去手段が組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体および／または血栓除去装置である、上記（２０）記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２１’）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物と組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を組み合わせてなる虚血性脳卒中の治療方法。
（２２）血栓除去手段が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（２０）〜（２１’）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２２’）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（２０）〜（２１’）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２３）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（２０）〜（２２’）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２４）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与中または投与終了後５時間以内に、血栓除去手段が適用開始されるものであることを特徴とする、上記（２０）〜（２３）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２４’）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与中または投与終了後５時間以内に、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体の投与が開始されるものであることを特徴とする、上記（２０）〜（２３）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２５）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（２０）〜（２４’）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２６）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、点滴投与されるものであることを特徴とする、上記（２０）〜（２５）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２７）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、１〜５００ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（２０）〜（２６）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２８）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（２０）〜（２７）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（２９）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、全投与量の５％〜２０％が急速投与された後、残量が２０分間〜３時間かけて点滴投与されることを特徴とする上記（２０）〜（２８）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（３０）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、０．３〜１０ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（２０）〜（２９）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（３１）虚血性脳卒中治療薬が上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物と組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体の配合剤であることを特徴とする、上記（２０）〜（３０）のいずれかに記載の虚血性脳卒中の治療方法。
（３２）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物および血栓除去手段を組み合わせてなる、虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防方法または改善方法。
（３２’）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物および組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体を組み合わせてなる、虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防方法または改善方法。【００１１】
（３３）血栓除去手段に起因する出血傾向の軽減のための医薬を製造するための、上記（１）の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用。
（３４）血栓除去手段が組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体および／または血栓除去装置である、上記（３３）記載の使用。
（３４’）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体に起因する出血傾向の軽減のための医薬を製造するための、上記（１）の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用。
（３５）虚血性脳卒中の治療のための医薬を製造するための、上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物および組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体の使用。
（３６）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（３５）記載の使用。
（３７）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与が、虚血性脳卒中発症直後〜２０時間以内に投与開始されるものであることを特徴とする、上記（３５）または（３６）記載の使用。
（３８）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の投与中または投与終了後５時間以内に、組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体の投与が開始されるものであることを特徴とする、上記（３５）〜（３７）のいずれかに記載の使用。
（３９）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（３５）〜（３８）のいずれかに記載の使用。
（４０）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、点滴投与されるものであることを特徴とする、上記（３５）〜（３９）のいずれかに記載の使用。
（４１）上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物が、１〜５００ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（３５）〜（４０）のいずれかに記載の使用。
（４２）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与および脊髄内投与からなる群より選択される投与経路により投与されるものであることを特徴とする、上記（３５）〜（４１）のいずれかに記載の使用。
（４３）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、全投与量の５％〜２０％が急速投与された後、残量が２０分間〜３時間かけて点滴投与されることを特徴とする上記（３５）〜（４２）のいずれかに記載の使用。
（４４）組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体が、０．３〜１０ｍｇ／ｋｇの量にて投与されるものである、上記（３５）〜（４３）のいずれかに記載の使用。
（４５）虚血性脳卒中治療薬が配合剤であることを特徴とする、上記（３５）〜（４４）のいずれかに記載の使用。【００１２】
（４６）虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防または改善のための医薬を製造するための、上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物および組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体の使用。
（４７）血栓除去装置の虚血性脳卒中治療効果の増強薬を製造するための、上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用。
（４８）血栓除去装置の虚血性脳卒中に起因する運動機能傷害の予防または改善効果の増強薬を製造するための、上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物の使用。
（４９）虚血性脳卒中の治療に使用するための、上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物および血栓除去手段の組み合わせ。
（５０）血栓除去手段が組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体または血栓除去装置である、上記（４９）記載の組み合わせ。
（５１）虚血性脳卒中に起因する運動機能障害を予防または改善するための、上記（１）記載の式（Ｉ）で示される化合物もしくはその製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物および血栓除去手段の組み合わせ。
【発明の効果】
【００１３】
本発明は虚血性脳卒中の治療薬、それに伴う運動機能障害の予防薬または治療薬、および血栓除去手段に起因する出血傾向の改善薬として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】対照群、化合物（Ｉ−１）単独投与群、ｒｔＰＡ単独投与群、化合物（Ｉ−１）とｒｔＰＡ併用群の患側脳内出血面積を示す図である。
【図２】対照群、化合物（Ｉ−１）単独投与群、ｒｔＰＡ単独投与群、化合物（Ｉ−１）とｒｔＰＡ併用群のfoot fault testの結果を示す図である。
【図３】対照群、化合物（Ｉ−１）単独投与群、ｒｔＰＡ単独投与群、化合物（Ｉ−１）とｒｔＰＡ併用群のAdhesive removed testの結果を示す図である。
【図４】対照群（Ａ群）、化合物（Ｉ−１）単独投与群（Ｂ群）、血栓除去装置単独適用群（Ｃ群）、化合物（Ｉ−１）と血栓除去装置併用群（Ｄ群）の体重の減少を示す図である。
【図５】対照群（Ａ群）、化合物（Ｉ−１）単独投与群（Ｂ群）、血栓除去装置単独適用群（Ｃ群）、化合物（Ｉ−１）と血栓除去装置併用群（Ｄ群）の患側脳内出血面積を示す図である。
【図６】対照群（Ａ群）、化合物（Ｉ−１）単独投与群（Ｂ群）、血栓除去装置単独適用群（Ｃ群）、化合物（Ｉ−１）と血栓除去装置併用群（Ｄ群）のfoot fault testの結果を示す図である。
【図７】対照群（Ａ群）、化合物（Ｉ−１）単独投与群（Ｂ群）、血栓除去装置単独適用群（Ｃ群）、化合物（Ｉ−１）と血栓除去装置併用群（Ｄ群）の脳血管開通率を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本明細書中、式（Ｉ）で示される化合物は、好ましくは式（Ｉ）において、Ｒ１が水素、Ｒ２が−ＣＯＣＨ＝ＣＨＣＯＯＨである化合物、その製薬上許容される塩またはそれらの溶媒和物であり、さらに好ましくはＲ１が水素、Ｒ２が−ＣＯＣＨ＝ＣＨＣＯＯＨである化合物の２ナトリウム塩（以下、化合物（Ｉ−１）とする）である。
「代謝性エステル残基」とは、生体内で加水分解され、生物活性なカルボン酸を産生し得るエステル残基を意味する。
上記代謝性エステル残基としては、例えば、メチル、エチル、ｔ−ブチル等の炭素数１〜６のアルキル；アリール；ピバロイルオキシメチル、アセトキシメチル、１−アセトキシエチル等の１−（アシルオキシ）低級アルキル；１−（エトキシカルボニルオキシ）エチル、１−（イソプロポキシカルボニルオキシ）エチル等の１−（低級アルキルオキシカルボニルオキシ）低級アルキル；（５−メチル−１，３−ジオキソレン−４−イル）メチル等を挙げることができる。
上記「低級アルキル」とは、炭素数１〜６の直鎖状または分枝状のアルキルを意味し、例えば、メチル、エチル、プロピル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル等を挙げることができる。「低級アルキルオキシ」の低級アルキル部分も上記「低級アルキル」と同様である。
「低級アルキレン」とは、炭素数１〜６の２価の炭素鎖を包含し、好ましくは炭素数１〜３、より好ましくは炭素数１または２のアルキレンである。
「低級アルケニレン」とは、任意の位置に二重結合を有する直鎖または分枝状の炭素数２〜６の２価の炭素鎖を包含する。好ましくは炭素数２〜４、より好ましくは炭素数２または３である。具体的にはビニレン、プロペニレン、ブテニレン、ブタジエニレン、メチルプロペニレン、ペンテニレンおよびヘキキセニレン等が挙げられ、好ましくはビニレンである。
「アリール」とはフェニル、ナフチル等を包含する。
「アシル」とは、炭素数１〜７の脂肪族アシルおよびアロイルを包含する。具体的には、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、バレリル、ピバロイル、ヘキサノイル、アクリロイル、プロピオロイル、メタクリロイル、クロトノイルおよびベンゾイル等が例示される。
「アシルオキシ」のアシル部分も上記「アシル」と同様である。【００１６】
化合物（Ｉ）はその製薬上許容される塩をも包含し、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、フッ化水素酸、臭化水素酸等の鉱酸の塩；ギ酸、酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、フマール酸、マレイン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、カンファースルホン酸等の有機酸の塩；アンモニウム、トリメチルアンモニウム、トリエチルアンモニウム等の有機塩基の塩；ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属の塩またはカルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属の塩等を挙げることができる。好ましくはナトリウム塩であり、具体的には２ナトリウム塩または３ナトリウム塩が挙げられる。
化合物（Ｉ）はその溶媒和物をも包含し、化合物（Ｉ）１分子に対して任意の数の溶媒分子と配位していてもよい。溶媒は好ましくは水である。【００１７】
本発明において「組織プラスミノゲンアクチベーター類縁体」または「ｔＰＡ類縁体」とは、天然型組織プラスミノゲンアクチベーター（天然型ｔＰＡ、GenBank Accession No. AAO34406）、遺伝子組替型組織プラスミノゲンアクチベーター（以下、ｒｔＰＡ）、修飾型組織プラスミノゲンアクチベーター（以下、修飾型ｔＰＡ）および動物プラスミノゲン活性化因子（吸血コウモリプラスミノゲン活性化因子等）のいずれをも包含する。
ｒｔＰＡとは、例えば、ヒト組織プラスミノゲン活性化因子をコードしているＤＮＡ（GenBank Accession No. AY221101)で形質転換されたヒト細胞以外の宿主細胞を該ＤＮＡの発現可能な条件下で培養することにより産生されたｔＰＡである。ｒｔＰＡは、Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition(1989)(Cold Spring Harbor Laboratory Press)、Current Protocols in Molecular Biology (1994) (Wiley-Interscience)に記載された方法等を用い、例えば、以下の方法により作製することができる。
ヒトの脳、心臓、骨格筋、脾臓、腎臓、肝臓、小腸、胎盤、これらの組織由来のヒト正常細胞、ヒト臍帯静脈内皮細胞より、常法によりｃＤＮＡライブラリーを作製することによって、ｔＰＡ（ヒト天然型）をコードするＤＮＡを取得する。また、オリゴヌクレオチドをセンスプライマー及びアンチセンスプライマーとして用い、これらＤＮＡに相補的なｍＲＮＡを発現している細胞のｍＲＮＡから調製したｃＤＮＡを鋳型として、ＰＣＲを行うことによっても、目的とするｔＰＡをコードするＤＮＡを調製することができる。
さらに、アミノ酸配列に基づいて、ｔＰＡをコードするＤＮＡを化学合成することによって、調製することができる。ＤＮＡの化学合成は、チオホスファイト法を利用した島津製作所社製のＤＮＡ合成機、フォスフォアミダイト法を利用したパーキン・エルマー社製のＤＮＡ合成機ｍｏｄｅｌ３９２等を用いて行うことができる。
上記の方法で得られたｔＰＡのＤＮＡを適当な発現ベクターのプロモーターの下流に挿入することにより、組換え体ＤＮＡ（発現用プラスミド）を作製する。該発現用プラスミドを、該発現ベクターに適合した宿主細胞に導入することにより、ｔＰＡを生産する形質転換体を得ることができる。
宿主細胞としては、原核細胞、酵母、動物細胞、植物細胞、昆虫細胞等、目的とする遺伝子を発現できるものであればいずれも用いることができる。発現ベクターとしては、上記宿主細胞において自立複製が可能、又は染色体中への組込みが可能で、ｔＰＡをコードする遺伝子の転写に適した位置にプロモーターを含有しているものが用いられる。例えばチャイニーズハムスター卵巣の樹立細胞株（ＣＨＯ細胞）、マウスＣ１２７細胞株、マウスＬ細胞、マウス線維芽細胞、マウスＮＩＨ３Ｔ３細胞、マウス骨髄腫細胞系、ＣＯＳ細胞、ヒーラ細胞、ＢＨＫ細胞、Ｂｏｗｅｓ細胞、ヒト肝含細胞系（ＨｅｐＧ２等）、ヒト大腸線維芽細胞、ヒト肺由来二倍体線維芽細胞、吸血コウモリ唾液腺等が挙げられる。好ましくはＣＨＯ細胞株である。【００１８】
修飾型ｔＰＡとは、天然型ｔＰＡの糖鎖中の１個〜数個の糖の種類が変更されたもの、天然型ｔＰＡまたはｒｔＰＡ中の１個〜数個のアミノ酸が糖鎖により修飾されたものおよび天然型ｔＰＡまたはｒｔＰＡ中の１個〜数個のアミノ酸が、糖鎖により修飾された異なるアミノ酸に置換されたものを包含する。
ここで糖鎖とは単位糖（単糖またはその誘導体）が１つ以上連なってできた化合物である。単位糖同士はグリコシド結合による脱水縮合によって結合する。具体的には、グルコース、ガラクトース、マンノース、フコース、グルコサミン、Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルガラクトサミン、シアル酸等の単糖、ラクトース、マルトース、フルクトース等のオリゴ糖およびそれらの複合体および誘導体、分解された多糖、糖たんぱく質、プロテオグリカン、グリコサミノグリカン、糖脂質などの複合生体分子から分解または誘導された糖鎖等が挙げられる。
修飾型ｔＰＡは公知の方法により適宜製造することができる。例えば、ｒｔＰＡを調製する際に培地中の糖組成または糖濃度を変更することにより糖鎖の種類や分子量を変更する方法、糖転移酵素遺伝子を導入した細胞を用いて糖鎖構造を変更する方法、培地中に糖を添加することによりガラクトース残基の転移を制御する方法、トランスグルタミナーゼ等を使用して天然型ｔＰＡまたはｒｔＰＡに糖鎖を導入する方法などの方法が挙げられる。
本発明に用いられる好ましいｔＰＡ類縁体の具体例としては、アルテプラーゼ、アメジプラーゼ、モンテプラーゼ、デスモテプラーゼ、テネクテプラーゼ、レテプラーゼ、チソキナーゼ、パミテプラーゼ等の一般名で市販または開発されている公知のｔＰＡ類縁体が挙げられる。【００１９】
本発明の１つの態様は、化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体を組み合わせてなる虚血性脳卒中治療薬である。
本発明虚血性脳卒中治療薬は、虚血性脳卒中を治療し、それに起因する諸症状（運動機能障害及び各種神経機能障害等）を予防または軽減することができる。虚血性脳卒中としては、例えば脳塞栓、脳血栓（ラクナ梗塞、アテローム血栓性梗塞等）、脳梗塞、一過性脳虚血発作、RIND（reversible ischemic neurological deficit）、播種性血管内凝固症候群および脳出血またはくも膜下出血後に発症する二次的な虚血性脳卒中等を包含する。虚血性脳卒中に起因する症状としては運動機能傷害、意識障害、感覚障害、言語障害、記憶障害、感情の障害、思考能力の障害、めまい、頭痛、吐き気、嘔吐等が挙げられる。
本発明の虚血性脳卒中治療薬を投与する場合、化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体はいずれも経口的、非経口的のいずれの方法でも安全に投与することができるが、好ましくは非経口投与である。非経口投与は、例えば静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与、脊髄内投与、坐剤、経皮吸収剤、吸入剤等、通常用いられるいずれの剤型でも好適に投与することができるが、特に静脈注射または動脈注射（例えば点滴静脈注射、カテーテルを用いた血栓部への局所投与等）、脳内投与、脊髄内投与が好ましい。経口投与は、例えば散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、丸剤、液剤等の形態で投与することができる。として
本発明の虚血性脳卒中治療薬は、有効成分の有効量に最終投与剤型に適した賦形剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、滑沢剤、希釈剤、香料等の各種医薬用添加剤を必要に応じて混合して調製することができる。注射剤として調製する場合には、注射剤用の添加剤として使用されている溶解補助剤、懸濁化剤、乳化剤、安定化剤、保存剤、等張剤等を適宜添加してもよい。
虚血性脳卒中治療薬としての化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体の投与量は、患者の年齢、体重、投与経路、症状の程度等を考慮した上で設定することが望ましい。通常、化合物（Ｉ）は１ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１ｍｇ〜３５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは１０ｍｇ〜２５０ｍｇ／ｋｇを投与すればよい。ｔＰＡ類縁体は０．０５ｍｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ（約３万〜５８０万国際単位（ＩＵ））、好ましくは、０．１ｍｇ〜５ｍｇ／ｋｇ（約６万〜２９０万国際単位（ＩＵ））、より好ましくは０．３ｍｇ〜３ｍｇ／ｋｇ（約１７万〜１７０万国際単位（ＩＵ））、より好ましくは０.５〜１ｍｇ／ｋｇ（約２９万〜５８万国際単位（ＩＵ））を投与すればよい。【００２０】
化合物（Ｉ）は、虚血性脳卒中発症直後〜約２０時間以内、好ましくは約１０時間以内、より好ましくは６時間以内、より好ましくは３時間以内、最も好ましくは１時間以内に投与開始すればよい。
投与方法は特に限定されないが、
１）上記投与量を約３０分〜９６時間、好ましくは約１時間〜７２時間、より好ましくは約３時間〜約４８時間程度かけて点滴投与等により持続投与する方法、
２）上記投与量の約５％〜３０％、好ましくは約１０％〜約２０％を静脈注射、動脈注射、皮下注射、脳内投与または脊髄内投与等により上記投与時間内に急速投与し、その後に残量を約３０分〜９６時間、好ましくは約１時間〜７２時間、より好ましくは約３時間〜約４８時間程度かけて点滴投与等により持続的に投与する方法、
３）上記投与量を約３０分〜約１０時間、好ましくは約１時間〜約５時間投与した後、約１時間〜約１５時間、好ましくは約３時間〜約１０時間休薬、を１単位として一日１単位〜５単位、好ましくは１日１単位〜３単位を繰り返して間歇投与する方法、
等が挙げられる。
急速投与と持続投与は連続して行われてもよく、約１時間〜１５時間、好ましくは約３時間〜１０時間程度の間隔をおいて行われてもよい。【００２１】
ｔＰＡ類縁体は、虚血性脳卒中発症直後〜約２０時間以内、好ましくは約１０時間以内、より好ましくは７時間以内、より好ましくは５時間以内、より好ましくは３時間以内に投与開始すればよい。
投与方法は特に限定されないが、上記投与量を約３０分〜９６時間、好ましくは約１時間〜７２時間、より好ましくは約３時間〜約４８時間程度かけて点滴投与等により持続投与する方法、上記投与量の約５％〜３０％、好ましくは約１０％〜約２０％を静脈注射、動脈注射、皮下注射等により急速投与し、その後に残量を約２０分〜１２時間、好ましくは約３０分〜５時間、より好ましくは約３０分〜約２時間程度かけて点滴投与等により持続的に投与する方法、上記投与量を１回〜数回に分けて静脈注射、動脈注射、皮下注射等により急速投与する方法等が挙げられる。急速投与と持続投与は連続して行われてもよく、約１時間〜１５時間程度の間隔をおいて行われてもよい。【００２２】
化合物（Ｉ）とｔＰＡ類縁体の投与間隔は特に限定されない。従って、いずれか一方（例えば化合物（Ｉ））を先に投与開始し、連続してまたは約１５時間以内、好ましくは約１０時間以内、好ましくは約５時間以内、好ましくは約３時間以内、より好ましくは約２時間以内に他方を投与してもよく、両化合物を同時に投与してもよい。
また、化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体は個別に調製されたものを使用してもよく、キットの形態または合剤であってもよい。
化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体に加え、さらに他の抗血栓薬と併用することも可能である。抗血栓薬としては血液凝固阻止薬および血栓溶解薬等を包含し、好ましくは血栓溶解薬である。具体的には上記ｔＰＡ類縁体、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、サルポグレラート塩酸塩、オザグレルナトリウム、ナファモスタットメシル酸塩、エプティフィバチド、クロピドグレル硫酸塩、シロスタゾール、バトロキソビン、アスピリン、アルガトロバン、アニストレプラーゼ、アンクロッド、アルフィメプラーゼ、プラスグレル等が挙げられる。
化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体の投与スケジュールの具体的例としては以下のような方法が可能である。
１）スケジュール例１
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約２０時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：１ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約３０分〜９６時間の持続投与
ｔＰＡ類縁体の投与開始時間：化合物（Ｉ）の投与開始から５時間以内
ｔＰＡ類縁体の投与量：０．０５ｍｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ
ｔＰＡ類縁体の投与方法：投与量の約５％〜３０％を急速投与し、残量を約３０分〜５時間かけて持続投与
２）スケジュール例２
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約１０時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：１０ｍｇ〜４００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約１時間〜７２時間の持続投与
ｔＰＡ類縁体の投与開始時間：化合物（Ｉ）の投与開始から３時間以内
ｔＰＡ類縁体の投与量：０．１ｍｇ〜５ｍｇ／ｋｇ
ｔＰＡ類縁体の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約３０分〜２時間かけて持続投与
３）スケジュール例３
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約６時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：２０ｍｇ〜４００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約１時間〜７２時間の持続投与
ｔＰＡ類縁体の投与開始時間：化合物（Ｉ）の投与開始から２時間以内
ｔＰＡ類縁体の投与量：０．３ｍｇ〜３ｍｇ／ｋｇ
ｔＰＡ類縁体の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約３０分〜２時間かけて持続投与
３）スケジュール例４
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約３時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：３０ｍｇ〜３００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約１時間〜７２時間の持続投与
ｔＰＡ類縁体の投与開始時間：化合物（Ｉ）の投与開始から２時間以内
ｔＰＡ類縁体の投与量：０．３ｍｇ〜３ｍｇ／ｋｇ
ｔＰＡ類縁体の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約３０分〜２時間かけて持続投与
５）スケジュール例５
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約６時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：２０ｍｇ〜４００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約１時間〜７２時間かけて持続投与
ｔＰＡ類縁体の投与開始時間：化合物（Ｉ）の初回投与開始から５時間以内
ｔＰＡ類縁体の投与量：０．３ｍｇ〜３ｍｇ／ｋｇ
ｔＰＡ類縁体の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約３０分〜２時間かけて持続投与
６）スケジュール例６
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約６時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：２０ｍｇ〜４００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約１時間〜７２時間の持続投与
ｔＰＡ類縁体の投与開始時間：化合物（Ｉ）と同時
ｔＰＡ類縁体の投与量：０．３ｍｇ〜３ｍｇ／ｋｇ
ｔＰＡ類縁体の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約３０分〜２時間かけて持続投与
７）スケジュール例７
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約２０時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：１ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約３０分〜約１０時間投与した後、約１時間〜約１５時間休薬、を１単位として１日１単位〜３単位を繰り返して間歇投与
ｔＰＡ類縁体の投与開始時間：化合物（Ｉ）の初回投与開始から５時間以内
ｔＰＡ類縁体の投与量：０．３ｍｇ〜３ｍｇ／ｋｇ
ｔＰＡ類縁体の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約３０分〜２時間かけて持続投与
本発明の別の態様は、化合物（Ｉ）を有効成分とする、ｔＰＡ類縁体の脳卒中治療効果の増強薬またはｔＰＡ類縁体の虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防または改善効果の増強薬である。増強薬としての化合物（Ｉ）の投与量、投与時間、ｔＰＡ類縁体の投与量、投与時間等は特に限定されない。例えば上記虚血性脳卒中治療薬として使用する場合と同様である。【００２３】
本発明の別の態様は、化合物（Ｉ）を有効成分とする、血栓除去手段に起因する出血傾向の軽減薬である。
「血栓除去手段に起因する出血傾向の軽減」とは、血栓除去手段を適用することにより生じる脳内出血の面積が有意に減少することを示す。
「血栓除去手段」とは、虚血性脳卒中によって生じた血栓を除去する方法の全てを包含する。たとえば、ｔＰＡ類縁体による血栓溶解などの化学的な血栓除去手段、血栓除去装置等による機械的または物理的な血栓除去手段、およびこれらの併用等が挙げられる。
「血栓除去装置」とは、物理的、化学的または機械的に血栓を除去するための装置であれば特に限定されない。血栓除去の方法としては生理食塩水噴出吸引（suction-creating salin jet）を用いる方法、レーザーエネルギーを用いる方法、超音波を用いる方法、コークスクリュー（corkscrew)法、シリンジを用いて引き抜く方法等が挙げられる。具体的にはMERCI（登録商標）Retrieval System（Concentric社製）、Ultrasound Thrombolytic Infusion Catheter(EKOS 社製）などの装置が挙げられる。
血栓除去手段に起因する出血傾向の改善薬としての化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体の投与量、投与時間等は特に限定されない。例えば上記虚血性脳卒中治療薬として使用する場合と同様である。
血栓除去装置による血栓除去は、各装置により適用方法が異なるため、各装置に添付されている使用説明書に従って操作を行えばよい。例えば、虚血性脳卒中発症直後〜約２０時間以内、好ましくは約１０時間以内、より好ましくは７時間以内、より好ましくは５時間以内、より好ましくは３時間以内に使用説明書に従って適用開始すればよい。
化合物（Ｉ）の投与と血栓除去装置の適用間隔は特に限定されない。従って、化合物（Ｉ）を急速投与後、例えば約１５時間以内、好ましくは約１０時間以内、好ましくは約５時間以内、好ましくは約３時間以内、より好ましくは約２時間以内に血栓除去装置による処置を行ってもよく、また化合物（Ｉ）を持続投与中に血栓除去装置による処置を行うことも可能である。さらに、血栓除去装置による処置の後、例えば約１５時間以内、好ましくは約１０時間以内、好ましくは約５時間以内、好ましくは約３時間以内、より好ましくは約２時間以内に化合物（Ｉ）を投与してもよい。【００２４】
使用する血栓除去装置の種類や患者の病態に応じ、抗血栓薬と併用することも可能である。従って、化合物（Ｉ）、血栓除去装置および上記ｔＰＡ類縁体を含む抗血栓薬の３種を併用することもできる。抗血栓薬としては血液凝固阻止薬および血栓溶解薬等を包含し、好ましくは血栓溶解薬である。具体的には上記ｔＰＡ類縁体、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、サルポグレラート塩酸塩、オザグレルナトリウム、ナファモスタットメシル酸塩、エプティフィバチド、クロピドグレル硫酸塩、シロスタゾール、バトロキソビン、アスピリン、アルガトロバン、アニストレプラーゼ、アンクロッド、アルフィメプラーゼ、プラスグレル等が挙げられる。
血栓除去装置が抗血栓薬と併用するタイプである場合には、化合物（Ｉ）の投与後または投与前に、装置の使用法に従って装置による処置および抗血栓薬の投与を行えばよい。
また、化合物（Ｉ）および抗血栓薬を適宜投与し、その後に血栓除去装置による処置を行うことも可能である。
化合物（Ｉ）の投与方法、投与量、血栓除去装置の適用方法、適用時間および併用され抗血栓薬の投与方法、投与量等は例えば下記の通りである。
８）スケジュール例８
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約２０時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：１ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約３０分〜９６時間の持続投与
血栓除去装置の適用開始時間：化合物（Ｉ）の投与開始から５時間以内
９）スケジュール例９
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約６時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：２０ｍｇ〜４００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約１時間〜７２時間かけて持続投与
血栓除去装置の適用開始時間：化合物（Ｉ）の初回投与開始から５時間以内
１０）スケジュール例１０
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約６時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：１ｍｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約３０分〜９６時間の持続投与
血栓除去装置の適用開始時間：虚血性脳卒中発症から８時間以内
１１）スケジュール例１１
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約６時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：２０ｍｇ〜４００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約１時間〜７２時間かけて持続投与
血栓除去装置の適用開始時間：虚血性脳卒中発症から８時間以内
１２）スケジュール例１２
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約６時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：２０ｍｇ〜４００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約１時間〜７２時間の持続投与
血栓除去装置の適用開始時間：化合物（Ｉ）の投与開始から２時間以内
血栓溶解薬の投与量：血栓溶解薬の種類によって異なるが、例えば０．３ｍｇ〜３００ｍｇ／ｋｇ
血栓溶解薬の投与方法：血栓除去装置の使用説明書に従って投与
１３）スケジュール例１２
化合物（Ｉ）投与開始時間：虚血性脳卒中発症直後〜約６時間以内
化合物（Ｉ）の投与量：２０ｍｇ〜４００ｍｇ／ｋｇ
化合物（Ｉ）の投与方法：約１時間〜７２時間の持続投与
ｔＰＡ類縁体の投与開始時間：化合物（Ｉ）の投与開始から５時間以内
ｔＰＡ類縁体の投与量：０．３ｍｇ〜３００ｍｇ／ｋｇ
ｔＰＡ類縁体の投与方法：投与量の約１０％〜２０％を急速投与し、残量を約３０分〜２時間かけて持続投与
血栓除去装置の適用開始時間：化合物（Ｉ）の投与開始から５時間以内【００２５】
本発明の別の態様は、化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体を有効成分とする、虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防または改善薬である。
虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防または改善薬としての化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体の投与量、投与時間並びに血栓除去装置の適用方法、適用時間等は特に限定されない。例えば上記虚血性脳卒中治療薬として使用する場合と同様である。【００２６】
本発明の別の態様は、化合物（Ｉ）を有効成分とする、血栓除去装置の虚血性脳卒中治療効果の増強薬である。
血栓除去装置の虚血性脳卒中治療効果の増強薬としての化合物（Ｉ）の投与量、投与時間等は特に限定されない。例えば上記出血傾向の軽減薬として使用する場合と同様である。
血栓除去装置の適用方法、適用時間は各装置により異なるため、各装置に添付されている使用説明書に従って操作を行えばよい。例えば、虚血性脳卒中発症直後〜約２０時間以内、好ましくは約１０時間以内、より好ましくは８時間以内、より好ましくは５時間以内、より好ましくは３時間以内に使用説明書に従って適用開始すればよい。【００２７】
本発明の別の態様は、化合物（Ｉ）を有効成分とする、血栓除去装置の虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防または改善効果の増強薬である。
虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防または改善効果の増強薬としての化合物（Ｉ）の投与量、投与時間等は特に限定されない。例えば上記出血傾向の軽減薬として使用する場合と同様である。
血栓除去装置の適用方法、適用時間は各装置により異なるため、各装置に添付されている使用説明書に従って操作を行えばよい。例えば、虚血性脳卒中発症直後〜約２０時間以内、好ましくは約１０時間以内、より好ましくは８時間以内、より好ましくは５時間以内、より好ましくは３時間以内に使用説明書に従って適用開始すればよい。【００２８】
本発明の別の態様は、化合物（Ｉ）を有効成分とする、血栓除去手段のタイムウィンドウ（発症時間からの治療可能な時間範囲）延長薬である。各々の血栓除去手段は、虚血性脳卒中発症から血栓除去手段の適用時間までが長くなるにつれて治療効果が低くなり、出血等のリスクが高くなると考えられる。しかし、化合物（Ｉ）と併用することにより、血栓除去手段単独の適用では高い効果が見られない条件下においても、運動機能改善において有意な効果が見られ、併用による相乗効果を得ることができる。また、併用により、出血等のリスクも単独適用と比較して有意に低下する。
「タイムウインドウ」とは、例えば、
血栓除去手段が運動機能改善または脳卒中治療に対して有意な効果を示し得る「発症から該血栓除去手段適用開始までの最長時間」または
血栓除去手段が運動機能改善または脳卒中治療に対して有意な効果を示し、かつ出血を生じさせない「発症から該血栓除去手段適用開始までの最長時間」
である。
「タイムウインドウの延長」とは、血栓除去手段単独適用の場合のタイムウインドウと比較して、化合物（Ｉ）と血栓除去手段の併用の場合のそれが１０％以上延長されていることを意味する。好ましくは２０％以上、さらにましくは３０％以上、さらに好ましくは５０％以上、さらに好ましくは８０％以上、さらに好ましくは１００％以上、さらに好ましくは２００％以上、さらに好ましくは３００％以上、さらに好ましくは４００％以上延長されていることを包含する。
血栓除去手段のタイムウインドウ延長薬としての化合物（Ｉ）およびｔＰＡ類縁体の投与量、投与時間並びに血栓除去装置の適用方法、適用時間等は特に限定されない。例えば上記虚血性脳卒中治療薬または血栓除去手段に起因する出血傾向の改善薬として使用する場合と同様である。【００２９】
化合物（Ｉ）は単独投与により脳浮腫抑制作用を示すことが知られており、血栓除去手段との併用後、引き続き化合物（Ｉ）を単独で投与することにより脳浮腫を治療または予防することも可能である。【００３０】
化合物（Ｉ）は単独投与においても虚血性脳卒中治療作用、脳梗塞巣の進展抑制作用および虚血性脳卒中に起因する運動機能障害の予防または改善作用、虚血性脳卒中に起因する神経症状の予防または改善作用を示すが、化合物（Ｉ）および血栓除去手段を組み合わせて投与することによりこれらの作用に対して相乗効果を示す。
化合物（Ｉ）またはｔＰＡ類縁体を単独投与する場合と比較して、各々の投与量を減少させることも可能であり、副作用が軽減された虚血性脳卒中治療薬とすることも可能である。
【実施例】
【００３１】
試験例１  ラット脳血栓モデルにおける、rtPAのtherapeutic time window（発症時間からの治療可能な時間範囲）及び脳内出血に対する化合物（Ｉ−１）の作用
１）実験方法
麻酔下で、ラットの右大腿動脈及び静脈にカニューレを留置し、新鮮自己動脈血とトロンビンで生成した凝血塊を、反転させた外頚動脈から挿入したカテーテルを通して中大脳動脈（middle cerebral artery; MCA）起始部に注入して脳血栓モデルを作成した。MCA閉塞90分後に虚血性神経症状を呈した動物を以後の実験に用いた。術中は、直腸内温度を継続的に測定しながら、保温装置を用いて体温を37 ℃に維持した。大腿動脈カニューレを用いて血圧を測定し、動脈血のpH、pCO2、pO2を経続的にモニターした。薬物投与は大腿静脈カニューレを用いて行った。ラットを4群（A：対照（生理食塩水）群，B：recombinant tissue plasminogen activator (rtPA) 単独投与群、C：化合物（Ｉ−１）単独投与群、D：化合物（Ｉ−１）とrtPA併用群に分けて実験を行った。
化合物（Ｉ−１）（3 mg/kg/h）はMCA閉塞2時間後から74時間後まで持続投与し、rtPAは、MCA閉塞4時間後に1 mg/kgを急速投与し、その後30分かけて9 mg/kgを持続投与した。C或いはB群では、それぞれrtPA或いは化合物（Ｉ−１）の代わりに生理食塩水を投与し、A群ではrtPA及び化合物（Ｉ−１）の代わりに生理食塩水を同様な操作で投与した。静注速度は2 mL/kg/hとした。
運動機能障害は、MCA閉塞直前および閉塞7日後にそれぞれ測定した。運動機能障害はAdhesive removed testとFoot fault testを用いて検討した。Adhesive removed testの場合、前肢にパッキングテープの輪をつけて、それを剥ぎ取るまでの時間（所要時間）を指標にした。また、Foot-fault testでは、ラットを金網の上に乗せた後に、行動をビデオテープに記録、肢を金網の針金から踏み外す割合（左前肢の踏み外し回数）を指標として定量化した。
MCA閉塞7日後に、運動機能障害を測定した後、麻酔下で10％フォルマリンを経心的に注入し、脳を摘出、パラフィン冠状連続切片を作成した。更に、各切片をヘマトキシリン（Hematoxylin）とエオシン（Eosin）を用いて染色し、患側脳内出血面積は、それぞれの切片において、血管から赤血球が漏出している部位の面積をイメージ解析プログラムを用いて算出した。【００３２】
２）結果
結果を図１〜３に示す。
図１から、化合物（Ｉ−１）はｔＰＡ類縁体による出血傾向の軽減作用を有することがわかる。
図２および図３から、化合物（Ｉ−１）は単独投与においても運動機能障害改善作用を有するが、ｔＰＡ類縁体との併用により化合物（Ｉ−１）の単独投与と比較しても有意に運動機能障害改善作用を示すことが明らかである。すなわち、ｔＰＡ類縁体および化合物（Ｉ−１）の併用投与は高い相乗作用を示し、優れた運動機能障害改善作用を示す。【００３３】
試験例２  血栓除去装置および化合物（Ｉ−１）の併用効果
１）実験方法
麻酔下で、ラットの右大腿動脈及び静脈にカニューレを留置し、右総頸動脈、内頸動脈及び外頸動脈を露出した。4-0 ナイロン栓止（18.5-19.5 mm：動物の体重に合わせて選択）を、外頸動脈から内頸動脈を経由して、右中大脳動脈（MCA）の起始部まで挿入し、右中大脳動脈（MCA）を閉塞した。閉塞30分後に、虚血性神経症状を呈したラットのみを虚血負荷成功例として以降の実験に供した。
術中は、直腸内温度を継続的に測定しながら、保温装置を用いて体温を37 ℃に維持した。2時間MCA閉塞後再開通群では、MCA閉塞2時間後に再度動物を麻酔下におき、栓止を抜去することで脳血流を再開させた（栓止の抜去は血栓除去装置による血栓除去に対応する）。また、1週間MCA閉塞群では、栓止を1週間MCA起始部に留置した。
血圧は、大腿動脈に挿入したカニューレを用いて測定した。また、薬物の投与は、大腿静脈に挿入したカニューレを用いて行なった。
ラットを4群（A：1週間MCA閉塞/Vehicle投与群、B：1週間MCA閉塞/化合物（Ｉ−１）投与群、C：2時間MCA閉塞・再開通/Vehicle投与群、D：2時間MCA閉塞・再開通/化合物（Ｉ−１）投与群）に分けて実験を行なった。
化合物（Ｉ−１）（3 mg/kg/h）あるいはVehicle（生理食塩水）は、MCA閉塞1時間から73時間後までシリンジポンプを用いて持続投与された（静注速度：2 mL/kg/h）。
運動機能障害は、Foot fault testを用いて検討し、MCA閉塞直前及び7日後に測定した。すなわち、ラットを金網の上に乗せた後に、行動をビデオテープに記録、左前肢を金網の針金から踏み外す回数の割合を指標として定量化した。  
MCA閉塞7日目の運動機能障害および体重を測定した後に、ラットにisothiocyanate (FITC) dextranを静脈内投与した。5分後に麻酔下で脳を摘出し、パラフィン冠状連続切片を作成した。各切片の蛍光強度を、イメージ解析装置を用いて測定し、微小血管の開通率について検討した。すなわち、各冠状切片の右MCA支配領域において、設定した閾値以上の蛍光を示すピクセル数を、領域全体のピクセル数に対する％で表した。患側脳内出血面積は、それぞれの切片において、血管から赤血球が漏出している部位の面積を、イメージ解析プログラムを用いて定量した。【００３４】
２）結果
結果を図４〜７に示す。
図４から、血栓除去装置と化合物（Ｉ−１）の併用（Ｄ群）時には他の群と比較して、虚血ストレスに伴う体重減少の軽減が見られ、動物への損傷が軽減されていることがわかる。MCA閉塞前の平均体重は、それぞれ、対照群（Ａ群）で２８８ｇ、化合物（Ｉ−１）単独投与群（Ｂ群）で290ｇ、血栓除去装置単独適用群（Ｃ群）で292ｇ、化合物（Ｉ−１）と血栓除去装置併用群（Ｄ群）で291ｇであり、各群間に有意差は見られなかった。
図５から、血栓除去装置と化合物（Ｉ−１）の併用（Ｄ群）においては他の群と比較して著しい出血面積の低減が見られることがわかる。
図６から、血栓除去装置と化合物（Ｉ−１）の併用（Ｄ群）においては化合物（Ｉ−１）単独投与（Ｂ群）、血栓除去装置の単独適用（Ｃ群）と比較して著しく運動機能障害が改善されており、化合物（Ｉ−１）および血栓除去装置の併用による相乗効果が見られることがわかる。
図７から、血栓除去装置と化合物（Ｉ−１）の併用（Ｄ群）においては化合物（Ｉ−１）単独投与（Ｂ群）、血栓除去装置の単独適用（Ｃ群）と比較して、MCA支配領域の血管開通率が増加し、化合物（Ｉ−１）および血栓除去装置の併用により相乗効果が見られることがわかる。【００３５】
製剤例１  ｔＰＡ類縁体による出血傾向の軽減薬
化合物（Ｉ−１）    ９０ｇ
Ｄ−マンニトール    ４５．０ｇ
注射用水            １５００ｇ
上記成分を混合し、攪拌する。１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウムをｐＨが９．５になるまで少量ずつ添加し、注射用水を加えて善良を１８００ｇとする。得られた溶液を０．４５μｍのフィルターで粗ろ過し、さらに０．２２マイクロｍのフィルターで無菌ろ過する。このろ液を１バイアルあたり６．０ｇずつ分注し、凍結乾燥して注射用製剤とする。【００３６】
製剤例２  虚血性脳卒中治療用キット
アルテプラーゼ        １２００万国際単位   
Ｌ−アルギニン         ５７９〜８６９ｍｇ   
ポリソルベート８０    ０．４〜３．３ｍｇ   
リン酸   
上記成分を含むアルテプラーゼ製剤、製剤例１で得られる製剤およびそれらの溶解液として注射用水を組み合わせることにより虚血性脳卒中治療用キットとする。
【産業上の利用可能性】
【００３７】
本発明は、虚血性脳卒中（脳梗塞等）の治療に有効である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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