【手続補正書】
【提出日】平成31年2月25日(2019.2.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトグルココルチコイド誘導腫瘍壊死因子受容体（GITR）に結合する単離されたヒト化モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントであって、
a.  SEQ ID NO:39のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:40のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
b.  SEQ ID NO:2のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:4のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
c.  SEQ ID NO:6のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:8のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
d.  SEQ ID NO:10のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:12のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
e.  SEQ ID NO:14のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:16のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
f.  SEQ ID NO:18のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:20のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
g.  SEQ ID NO:22のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:24のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
h.  SEQ ID NO:26のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:28のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
i.  SEQ ID NO:30のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:32のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
j.  SEQ ID NO:34のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:36のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；または
k.  SEQ ID NO:42のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:44のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域
を含む、抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２】
（a）SEQ ID NO:99、100もしくは101のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:102、103もしくは104のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（b）SEQ ID NO:45、46もしくは47のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:48、49もしくは50のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（c）SEQ ID NO:51、52もしくは53のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:54、55もしくは56のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（d）SEQ ID NO:57、58もしくは59のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:60、61もしくは62のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（e）SEQ ID NO:63、64もしくは65のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:66、67もしくは68のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（f）SEQ ID NO:69、70もしくは71のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:72、73もしくは74のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（g）SEQ ID NO:75、76もしくは77のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:78、79もしくは80のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（h）SEQ ID NO:81、82もしくは83のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:84、85もしくは86のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（i）SEQ ID NO:87、88もしくは89のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:90、91もしくは92のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（j）SEQ ID NO:93、94もしくは95のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:96、97もしくは98のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；または
（k）SEQ ID NO:105、106もしくは107のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:108、109もしくは110のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）
を含み、ヒトグルココルチコイド誘導腫瘍壊死因子受容体（GITR）に結合する、単離されたヒト化モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３】
1価または2価である、請求項1または2記載の抗体。
【請求項４】
単鎖抗体である、請求項1〜3のいずれか一項記載の抗体。
【請求項５】
10-5 M〜10-12 Mの範囲内の結合親和性を有する、請求項1〜4のいずれか一項記載の抗体。
【請求項６】
IgG4重鎖定常領域を有する、請求項1〜5のいずれか一項記載の抗体。
【請求項７】
Fc領域がアミノ酸234位および235位に変異を含む、請求項1〜6のいずれか一項記載の抗体。
【請求項８】
変異がL234AおよびL235Aである、請求項7記載の抗体。
【請求項９】
腫瘍関連抗原、サイトカイン、または細胞表面受容体にも結合する二重特異性抗体である、請求項1〜8のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１０】
治療剤に連結されている、請求項1〜9のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１１】
治療剤が、毒素、放射性標識、siRNA、低分子、またはサイトカインである、請求項10記載の抗体。
【請求項１２】
請求項1〜11のいずれか一項記載の抗体を産生する、細胞。
【請求項１３】
請求項1〜11のいずれか一項記載の抗体を含む、対象において制御性T細胞を除去するための薬学的組成物。
【請求項１４】
請求項1〜11のいずれか一項記載の抗体を含む、抗原に対する免疫応答を増大させるための薬学的組成物。
【請求項１５】
抗原が、ウイルス抗原、細菌抗原、または腫瘍関連抗原である、請求項14記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
抗原特異的なT細胞の活性を増加させる、請求項14または15記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
NK細胞の細胞傷害性を増加させる、請求項14または15記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
IL-15と併用するための、請求項14〜17のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
請求項1〜11のいずれか一項記載の抗体を含む、癌の症状を処置または軽減するための薬学的組成物。
【請求項２０】
癌が、GITRまたはそのリガンドであるGITR-Lを過剰発現する癌である、請求項19記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
サイトカインまたは化学療法剤と併用するための、請求項20記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
サイトカインがIL-15である、請求項21記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
SEQ ID NO:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、38、41、または43の核酸配列を含む、核酸。
【請求項２４】
SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、39、40、42、または44のポリペプチドをコードする、核酸。
【請求項２５】
SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、39、40、42、または44のアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項２６】
請求項23または24記載の核酸を含む、ベクター。
【請求項２７】
請求項26記載のベクターを含む、細胞。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
様々な局面において、本発明は、ヒト抗グルココルチコイド誘導腫瘍壊死因子受容体（GITR）に結合する単離されたヒト化モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。この抗体は、SEQ ID NO:2のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:4のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；SEQ ID NO:6のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:8のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；SEQ ID NO:10のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:12のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；SEQ ID NO:14のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:16のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；SEQ ID NO:18のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:20のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；SEQ ID NO:22のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:24のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；SEQ ID NO:26のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:28のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；SEQ ID NO:30のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:32のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；SEQ ID NO:34のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:36のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；SEQ ID NO:39のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:40のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域；またはSEQ ID NO:42のアミノ酸配列を有する可変重鎖領域およびSEQ ID NO:44のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域を有する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
本発明はさらに、SEQ ID NO:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、38、41、43の核酸配列を有する核酸を提供する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
さらなる局面において、本発明は、SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、39、40、42、44のポリペプチドをコードする核酸またはSEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、39、40、42、44のアミノ酸配列を有するポリペプチドを提供する。本発明にしたがう核酸を含むベクターもまた提供される。本発明にしたがうベクターを含む細胞もまた、本発明に含まれる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５４】
（表１０Ａ）#15-68の可変領域の核酸配列
2017531427.tif 000001
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
（表１０Ｂ）#15-68の可変領域のアミノ酸配列
2017531427.tif 000002
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
[本発明1001]
ヒトグルココルチコイド誘導腫瘍壊死因子受容体（GITR）に結合する単離されたヒト化モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントであって、
a.  SEQ ID NO:2のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:4のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
b.  SEQ ID NO:6のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:8のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
c.  SEQ ID NO:10のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:12のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
d.  SEQ ID NO:14のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:16のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
e.  SEQ ID NO:18のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:20のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
f.  SEQ ID NO:22のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:24のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
g.  SEQ ID NO:26のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:28のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
h.  SEQ ID NO:30のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:32のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
i.  SEQ ID NO:34のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:36のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；
j.  SEQ ID NO:38のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:40のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域；または
k.  SEQ ID NO:42のアミノ酸配列を含む可変重鎖領域およびSEQ ID NO:44のアミノ酸配列を含む可変軽鎖領域
を含む、抗体またはその抗原結合フラグメント。
[本発明1002]
（a）SEQ ID NO:45、46もしくは47のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:48、49もしくは50のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（b）SEQ ID NO:51、52もしくは53のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:54、55もしくは56のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（c）SEQ ID NO:57、58もしくは59のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:60、61もしくは62のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（d）SEQ ID NO:63、64もしくは65のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:66、67もしくは68のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（e）SEQ ID NO:69、70もしくは71のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:72、73もしくは74のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（f）SEQ ID NO:75、76もしくは77のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:78、79もしくは80のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（g）SEQ ID NO:81、82もしくは83のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:84、85もしくは86のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（h）SEQ ID NO:87、88もしくは89のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:90、91もしくは92のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（i）SEQ ID NO:93、94もしくは95のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:96、97もしくは98のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；
（j）SEQ ID NO:99、100もしくは101のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:102、103もしくは104のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）；または
（k）SEQ ID NO:105、106もしくは107のアミノ酸配列を含む、それぞれ、可変重鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VH-CDR）；およびSEQ ID NO:108、109もしくは110のアミノ酸配列を含む可変軽鎖相補性決定領域1、2もしくは3（VL-CDR）
を含み、ヒトグルココルチコイド誘導腫瘍壊死因子受容体（GITR）に結合する、単離されたヒト化モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメント。
[本発明1003]
1価または2価である、本発明1001の抗体。
[本発明1004]
単鎖抗体である、本発明1001の抗体。
[本発明1005]
10-5 M〜10-12 Mの範囲内の結合親和性を有する、本発明1001の抗体。
[本発明1006]
IgG4重鎖定常領域を有する、本発明1001の抗体。
[本発明1007]
Fc領域がアミノ酸234位および235位に変異を含む、本発明1001の抗体。
[本発明1008]
変異がL234AおよびL235Aである、本発明1007の抗体。
[本発明1009]
腫瘍関連抗原、サイトカイン、または細胞表面受容体にも結合する二重特異性抗体である、本発明1001の抗体。
[本発明1010]
治療剤に連結されている、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1011]
治療剤が、毒素、放射性標識、siRNA、低分子、またはサイトカインである、本発明1010の抗体。
[本発明1012]
本発明1001〜1011のいずれかの抗体を産生する、細胞。
[本発明1013]
対象において制御性T細胞を除去する方法であって、その必要がある対象に本発明1001〜1011のいずれかの抗体を含む組成物を投与する段階を含む、方法。
[本発明1014]
抗原に対する免疫応答を増大させる方法であって、その必要がある対象に本発明1001〜1011のいずれかの抗体を含む組成物を投与する段階を含む、方法。
[本発明1015]
抗原が、ウイルス抗原、細菌抗原、または腫瘍関連抗原である、本発明1014の方法。
[本発明1016]
前記抗体の投与が、抗原特異的なT細胞の活性を増加させる、本発明1014の方法。
[本発明1017]
前記抗体の投与が、NK細胞の細胞傷害性を増加させる、本発明1014の方法。
[本発明1018]
対象にIL-15を投与する段階をさらに含む、本発明1014の方法。
[本発明1019]
癌の症状を処置または軽減する方法であって、その必要がある対象に本発明1001〜1011のいずれかの抗体を含む組成物を投与する段階を含む、方法。
[本発明1020]
癌が、GITRまたはそのリガンドであるGITR-Lを過剰発現する癌である、本発明1019の方法。
[本発明1021]
対象にサイトカインまたは化学療法剤をさらに投与する段階を含む、本発明1020の方法。
[本発明1022]
サイトカインがIL-15である、本発明1021の方法。
[本発明1023]
SEQ ID NO:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43の核酸配列を含む、核酸。
[本発明1024]
SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44のポリペプチドをコードする、核酸。
[本発明1025]
SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44のアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
[本発明1026]
本発明1023または1024の核酸を含む、ベクター。
[本発明1027]
本発明1026のベクターを含む、細胞。
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかであり、かつそれらに包含される。