【手続補正書】
【提出日】平成20年3月21日(2008.3.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  ａ）ｉ）その発現が調整されるべき遺伝子に関連する応答エレメントを認識するＤＮＡ−結合ドメイン、および
ｉｉ）エジクソン受容体ポリペプチドからのリガンド結合ドメインを含むリガンド結合ドメイン、
を含む、第１のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む、宿主細胞で発現させることができる第１の遺伝子発現カセットと、
ｂ）ｉ）トランス活性化ドメイン、および
ｉｉ）少なくともＡおよびＢドメインの欠失を含む、切断レチノイドＸ受容体からのリガンド結合ドメインを含むリガンド結合ドメイン、
を含む、第２のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む、宿主細胞で発現させることができる第２の遺伝子発現カセットと、
を含み、
トランス活性化ドメインがエクジソン受容体、レチノイドＸ受容体、またはウルトラスピラクル受容体以外の核受容体からのものであり、および、第１のポリペプチドおよび第２のポリペプチドからのリガンド結合ドメインが異なり、二量体化することを特徴とする遺伝子発現調整系。
【請求項２】  さらに
ｉ）ポリペプチドのＤＮＡ−結合ドメインが結合する応答エレメント、
ｉｉ）第２のポリペプチドのトランス活性化ドメインによって活性化されるプロモーター、および
ｉｉｉ）その発現が調整されるべき遺伝子、
を含む第３の遺伝子発現カセットを含む請求項１記載の遺伝子発現調整系。
【請求項３】  第１のポリペプチドのリガンド結合ドメインが、配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：８、配列番号：９および配列番号：１０よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされた請求項１記載の遺伝子発現調整系。
【請求項４】  第１のポリペプチドのリガンド結合ドメインが、配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５、配列番号：１６、配列番号：１７、配列番号：１８、配列番号：１９および配列番号：２０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含む請求項１記載の遺伝子発現調整系。
【請求項５】  第２のポリペプチドのリガンド結合ドメインが、配列番号：２１、配列番号：２２、配列番号：２３、配列番号：２４、配列番号：２５、配列番号：２６、配列番号：２７、配列番号：２８、配列番号：２９および配列番号：３０よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされた請求項１記載の遺伝子発現調整系。
【請求項６】  第２のポリペプチドのリガンド結合ドメインが、配列番号：３１、配列番号：３２、配列番号：３３、配列番号：３４、配列番号：３５、配列番号：３６、配列番号：３７、配列番号：３８、配列番号：３９および配列番号：４０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含む請求項１記載の遺伝子発現調整系。
【請求項７】  ａ）ｉ）その発現が調整されるべき遺伝子に関連する応答エレメントを認識するＤＮＡ−結合ドメイン、および
ｉｉ）少なくともＡおよびＢドメインの欠失を含む、切断レチノイドＸ受容体からのリガンド結合ドメインを含むリガンド結合ドメイン、
を含む、第１のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む、宿主細胞で発現することができる第１の遺伝子発現カセットと、
ｂ）ｉ）トランス活性化ドメイン、および
ｉｉ）エジクソン受容体からのリガンド結合ドメインを含むリガンド結合ドメイン、
を含む、第２のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む、宿主細胞で発現させることができる第２の遺伝子発現カセットと、
を含み、
第１のポリペプチドおよび第２のポリペプチドからのリガンド結合ドメインが異なり、二量体化することを特徴とする遺伝子発現調整系。
【請求項８】  さらに
ｉ）第１のポリペプチドのＤＮＡ−結合ドメインが結合する応答エレメント、
ｉｉ）第２のポリペプチドのトランス活性化ドメインによって活性化されるプロモーター、および
ｉｉｉ）その発現が調整されるべき遺伝子、
を含む第３の遺伝子発現カセットを含む請求項１記載の遺伝子発現調整系。
【請求項９】  第１のポリペプチドのリガンド結合ドメインが、配列番号：２１、配列番号：２２、配列番号：２３、配列番号：２４、配列番号：２５、配列番号：２６、配列番号：２７、配列番号：２８、配列番号：２９および配列番号：３０よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされた請求項７記載の遺伝子発現調整系。
【請求項１０】  第１のポリペプチドのリガンド結合ドメインが、配列番号：３１、配列番号：３２、配列番号：３３、配列番号：３４、配列番号：３５、配列番号：３６、配列番号：３７、配列番号：３８、配列番号：３９および配列番号：４０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含む請求項７記載の遺伝子発現調整系。
【請求項１１】  第２のポリペプチドのリガンド結合ドメインが、配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：８、配列番号：９および配列番号：１０よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされた請求項７記載の遺伝子発現調整系。
【請求項１２】  第２のポリペプチドのリガンド結合ドメインが、配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５、配列番号：１６、配列番号：１７、配列番号：１８、配列番号：１９および配列番号：２０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含む請求項７記載の遺伝子発現調整系。
【請求項１３】  ａ）エクジソン受容体以外の核受容体からのＤＮＡ−結合ドメインおよびエクジソン受容体リガンド結合ドメイン、
ｂ）レチノイドＸ受容体以外の核受容体からのＤＮＡ−結合ドメインおよび少なくともＡおよびＢドメインの欠失を含む、切断レチノイドＸ受容体からのリガンド結合ドメイン、
ｃ）エクジソン受容体以外の核受容体からのトランス活性化ドメインおよびエクジソン受容体リガンド結合ドメイン、および
ｄ）レチノイドＸ受容体以外の核受容体からのトランス活性化ドメインおよび少なくともＡおよびＢドメインの欠失を含む、切断レチノイドＸ受容体からのリガンド結合ドメイン、
よりなる群から選択されるハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む遺伝子発現カセット。
【請求項１４】  エクジソン受容体以外の核受容体からのＤＮＡ−結合ドメインおよびエクジソン受容体リガンド結合ドメイン、または
レチノイドＸ受容体以外の核受容体からのＤＮＡ−結合ドメインおよびレチノイドＸ受容体リガンド結合ドメイン、
を含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み、
ＤＮＡ−結合ドメインが、ＧＡＬ４  ＤＮＡ−結合ドメインまたはＬｅｘＡ  ＤＮＡ−結合ドメインである請求項１３記載の遺伝子発現カセット。
【請求項１５】  エクジソン受容体以外の核受容体からのトランス活性化ドメインおよびエクジソン受容体リガンド結合ドメイン、または
レチノイドＸ受容体以外の核受容体からのトランス活性化ドメインおよびレチノイドＸ受容体リガンド結合ドメイン、
を含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み、
トランス活性化ドメインが、ＶＰ１６トランス活性化ドメインである請求項１３記載の遺伝子発現カセット。
【請求項１６】  ＧＡＬ４  ＤＢＤ（配列番号：４１）またはＬｅｘＡ  ＤＢＤ（配列番号：４３）よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされたＤＮＡ−結合ドメイン、および配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：８、配列番号：９および配列番号：１０よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされたエクジソン受容体リガンド結合ドメインを含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む遺伝子発現カセット。
【請求項１７】  ＧＡＬ４  ＤＢＤ（配列番号：４２）またはＬｅｘＡ  ＤＢＤ（配列番号：４４）よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＤＮＡ−結合ドメイン、および配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５、配列番号：１６、配列番号：１７、配列番号：１８、配列番号：１９および配列番号：２０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含むエクジソン受容体リガンド結合ドメインを含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む遺伝子発現カセット。
【請求項１８】  ＧＡＬ４  ＤＢＤ（配列番号：４１）またはＬｅｘＡ  ＤＢＤ（配列番号：４３）よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされたＤＮＡ−結合ドメイン、および配列番号：２１、配列番号：２２、配列番号：２３、配列番号：２４、配列番号：２５、配列番号：２６、配列番号：２７、配列番号：２８、配列番号：２９および配列番号：３０よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされたレチノイドＸ受容体リガンド結合ドメインを含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む遺伝子発現カセット。
【請求項１９】  ＧＡＬ４  ＤＢＤ（配列番号：４２）またはＬｅｘＡ  ＤＢＤ（配列番号：４４）よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＤＮＡ−結合ドメイン、および配列番号：３１、配列番号：３２、配列番号：３３、配列番号：３４、配列番号：３５、配列番号：３６、配列番号：３７、配列番号：３８、配列番号：３９および配列番号：４０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含むレチノイドＸ受容体リガンド結合ドメインを含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む遺伝子発現カセット。
【請求項２０】  配列番号：４５の核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされたトランス活性化ドメイン、および配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：８、配列番号：９および配列番号：１０よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされたエクジソン受容体リガンド結合ドメインを含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む遺伝子発現カセット。
【請求項２１】  配列番号：４６のアミノ酸配列を含むトランス活性化ドメイン、および配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５、配列番号：１６、配列番号：１７、配列番号：１８、配列番号：１９および配列番号：２０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含むエクジソン受容体リガンド結合ドメインを含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む遺伝子発現カセット。
【請求項２２】  配列番号：４５の核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされたトランス活性化ドメイン、および配列番号：２１、配列番号：２２、配列番号：２３、配列番号：２４、配列番号：２５、配列番号：２６、配列番号：２７、配列番号：２８、配列番号：２９および配列番号：３０よりなる群から選択される核酸配列を含むポリヌクレオチドによってコードされたレチノイドＸ受容体リガンド結合ドメインを含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む遺伝子発現カセット。
【請求項２３】  配列番号：４６のアミノ酸配列を含むトランス活性化ドメイン、および配列番号：３１、配列番号：３２、配列番号：３３、配列番号：３４、配列番号：３５、配列番号：３６、配列番号：３７、配列番号：３８、配列番号：３９および配列番号：４０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含むレチノイドＸ受容体リガンド結合ドメインを含むハイブリッドポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む遺伝子発現カセット。
【請求項２４】  請求項１または７記載の遺伝子発現調整系が導入されている単離された宿主細胞。
【請求項２５】  宿主細胞が細菌細胞、真菌細胞、酵母細胞、植物細胞、動物細胞および哺乳動物細胞よりなる群から選択される請求項２４記載の単離された宿主細胞。
【請求項２６】  哺乳動物細胞がマウス細胞またはヒト細胞である請求項２５記載の単離された宿主細胞。
【請求項２７】  配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５、配列番号：１６、配列番号：１７、配列番号：１８、配列番号：１９および配列番号：２０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、単離された切断エクジソン受容体ポリペプチド。
【請求項２８】  配列番号：３１、配列番号：３２、配列番号：３３、配列番号：３４、配列番号：３５、配列番号：３６、配列番号：３７、配列番号：３８、配列番号：３９および配列番号：４０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、単離された切断レチノイドＸ受容体ポリペプチド。