【手続補正書】
【提出日】平成20年9月18日(2008.9.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
2008516902.tif 000001
の化合物及びその生理学上許容しうる塩。
式中、
R1及びR3は、相互に独立してフッ素、メトキシ、−OCF3、C2−C3−アルケニル又は塩素、メトキシ若しくは１、２若しくは３個のフッ素原子によって場合により置換されたC1−C4−アルキルであり；
R2は、水素、フッ素、メトキシ、−OCF3、C2−C3−アルケニル又は塩素、メトキシ若しくは１、２若しくは３個のフッ素原子によって場合により置換されたC1−C4−アルキルであり；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、NH又はN(C1−C3−アルキル)であり；
Arは、非置換、又は少なくとも一置換されたアリール又はヘテロアリールであり、ここで置換基は、フッ素、塩素、臭素、−CF3、−OCF3、−NO2、−CN、−C(O)(C1−C6−アルキル)、NH2、−NHC(O)(C1−C6−アルキル)、ヒドロキシ、オキソ、C1−C6−アルキル、C1−C6−アルコキシ、−NH(C1−C6−アルキル)、−N(C1−C6−アルキル)2、−SO2(C1−C6−アルキル)、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、アリール、−O−アリール、−O−ヘテロアリール、−CH2−NR4R5、−SO2NR4R5及び−C(O)NR4R5からなる群より選ばれ、
ここでC1−C6−アルキル置換基は、C1−C6−アルコキシ、フッ素、塩素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル又はOHによ
って少なくとも１回置換されていてもよく、
そしてアリール、ヘテロアリール及びヘテロシクリル置換基は、C1−C6−アルキル、C1−C6−アルコキシ、フッ素、塩素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ又はOHによって少なくとも１回置換されていてもよく；
アリールは、５〜10員芳香族単又は二環であり；
ヘテロアリールは、Ｎ、Ｏ及びＳから選ばれる１つ又はそれ以上のヘテロ原子を含む５〜10員芳香族単又は二環式複素環であり；
ヘテロシクリルは、Ｎ、Ｏ及びＳから選ばれる１つ又はそれ以上のヘテロ原子を含む５〜10員非芳香族単又は二環式複素環であり；
R4及びR5基は、相互に独立して水素；非置換又は少なくとも一置換されたC1−C10−アルキル、C2−C6−アルケニル、フェニル、インダニル、ヘテロシクリル及びヘテロアリールからなる群より選ばれ、
ここで置換基は、フェニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−O−フェニル、フッ素、−CN、−C(O)NH2、−C(O)(C1−C3−アルキル)、−C(O)−フェニル、−N(C1−C3−アルキル)2、−NH(C1−C3−アルキル)、−NH2、−NH−ヘテロアリール、−NHC(O)−ヘテロアリール、C1−C6−アルキル、C1−C3−アルコキシ及びヒドロキシからなる群より選ばれ、
そしてこれらの置換基のフェニル、ヘテロシクリル及びヘテロアリール断片も又、フッ素、塩素、臭素、オキソ、−CF3、−OCF3、−NO2、−CN、フェニル、ピリジニル、−NHC(O)(C1−C3−アルキル)、−COOH、ヒドロキシ、C1−C3−アルキル、C1−C3−アルコキシ、−SO2NH2、−SO2NH(C1−C3−アルキル)、−SO2N(C1−C3−アルキル)2、−C(O)NH2、−C(O)NH(C1−C3−アルキル)、−C(O)N(C1−C3−アルキル)2、−SO2(C1−C3−アルキル)、−NH2、−NH(C1−C3−アルキル)又は−N(C1−C3−アルキル)2によって少なくとも一置換されていてもよく；又は
R4及びR5は、それらが結合した窒素原子と一緒になって非置換又は少なくとも一置換されたヘテロシクリルを形成し、
ここで置換基は、フェニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、オキソ、フッ素、塩素、−C(O)(C1−C3−アルキル)、−C(O)−フェニル及びヒドロキシからなる群より選ばれ、
そしてこれらの置換基のフェニル、ヘテロシクリル及びヘテロアリール断片も又、フッ素又はC1−C3−アルキルによって少なくとも一置換されていてもよく；
但し、ＸがNH又はN(C1−C3−アルキル)である場合、Arはトリアジニル又はクロマニルでなく、そしてArはピリドピラジニル又はナフチリジニルでない。
【請求項２】
式Ｉにおいて、
Ｘは、Ｏ、NH又はN(C1−C3−アルキル)であり；
R1は、フッ素、−OCF3又はC1−C4−アルキルであり；
R2は、水素、フッ素、−OCF3又はC1−C4−アルキルであり；
R3は、フッ素、−OCF3又はC1−C4−アルキルであり；
Arは、非置換、又は一置換されたフェニル又はヘテロアリールであり、ここで置換基は、フッ素、塩素、−CF3、−OCF3、−CN、−C(O)(C1−C3−アルキル)、NH2、−NHC(O)(C1−C3−アルキル)、ヒドロキシ、オキソ、C1−C3−アルキル、C1−C3アルコキシ、−NH(C1−C3−アルキル)、−N(C1−C3−アルキル)2、−SO2(C1−C3−アルキル)、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、アリール、−O−アリール、−O−ヘテロアリール、−CH2−NR4R5、−SO2−NR4R5及び−C(O)NR4R5からなる群より選ばれ、
ここでC1−C3−アルキル置換基は、C1−C3−アルコキシ、フッ素、塩素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル又はOHによって少なくとも一置換されていてもよく、
そしてアリール、ヘテロアリール及びヘテロシクリル置換基は、C1−C3−アルキル、C1−C3−アルコキシ、フッ素、塩素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ又はOHによって少なくとも一置換されていてもよく；
R4は、水素又はC1−C3−アルキルであり；
R5は、水素；非置換又は少なくとも一置換されたC1−C6−アルキル、シクロヘキセニル、インダニル、フェニル、ピロリジニル、ピロリル、ピラゾリル、フラニル及びピペリジニルからなる群より選ばれ、
ここで置換基は、フッ素、−CN、−C(O)NH2、−O−フェニル、−C(O)−フェニル、−N(CH3)2、C1−C3−アルキル、C1−C3−アルコキシ、ヒドロキシ、非置換又は少なくとも一置換されたフェニル、ピリジニル、チエニル、ピリミジニル、イミダゾリル、フラニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ピラゾリル、モルホリニル、ピロリジニル、1,3−ベンゾジオキソリル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、トリアゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソオキサゾリル及びジヒドロイソオキサゾリルからなる群より選ばれ、これらの置換基も又、フッ素、塩素、オキソ、CF3、−OCF3、−NO2、フェニル、ピリジニル、−NHC(O)CH3、−COOH、ヒドロキシ、C1−C3−アルキル、C1−C3アルコキシ、−SO2NH2、−C(O)NH2及び−N(CH3)2からなる群より選ばれ；又は
R4及びR5は、それらが結合している窒素原子と一緒になって非置換又は少なくとも一置換されたピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル及びピペラジニルからなる群より選ばれる基を形成し、
ここで置換基は、フッ素、−C(O)(C1−C3−アルキル)、オキソ、C1−C3−アルキル、ヒドロキシ、非置換又は少なくとも一置換されたフェニル、イミダゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピペリジニル及びピロリジニルからなる群より選ばれ、これらの置換基も又、フッ素又はC1−C3−アルキルであり；
アリールは、フェニル、インダニル又はナフチルであり；
ヘテロアリールは、ピリジニル、チエニル、ピリミジニル、イミダゾリル、フラニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ピラゾリル、1,3−ベンゾジオキソリル、トリアゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、ピロリル、ピラジニル、オキサゾリル、ピリダジニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾフラニル、3−オキソ−1,3−ジヒドロイソベンゾフラニル、2,3−ジヒドロインドリル又は4,5,6,7−テトラヒドロベンゾチアゾリルであり；
ヘテロシクリルは、モルホリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、チアゾリジニル、ジヒドロイソオキサゾリル、ピペラジニル又はテトラヒドロフラニルである；
請求項１記載の式Ｉの化合物及びその生理学上許容しうる塩。
【請求項３】
式Ｉにおいて、
Ｘは、NH又はN(C1−C3−アルキル)であり；
R1は、C1−C3−アルキルであり；
R2は、水素であり；
R3は、C1−C3−アルキルであり；
Arは、非置換、又は一置換されたフェニル、インドリル、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、フラニル、チエニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、イソキノリニル、ピリジニル、キノリニル又は2,3−ジヒドロインドリルであり、ここで置換基は、フッ素、塩素、−CF3、−OCF3、−CN、−C(O)(C1−C3−アルキル)、NH2、−NHC(O)(C1−C3−アルキル)、ヒドロキシ、オキソ、C1−C3−アルキル、C1−C3−アルコキシ、−NH(C1−C3−アルキル)、−N(C1−C3−アルキル)2、−SO2(C1−C3−アルキル)、ヘテロアリール、フェニル、−O−フェニル、−O−ヘテロアリール、−CH2−NR4R5、−SO2−NR4R5及び−C(O)NR4R5からなる群より選ばれ、
ここでC1−C3−アルキル置換基は、C1−C3−アルコキシ、フッ素、塩素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、フェニル、ヘテロアリール又はOHによって少なくとも一置換されていてもよく、
そしてフェニル及びヘテロアリール置換基は、C1−C3−アルキル、C1−C3−アルコキシ、フッ素、塩素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ又はOHによって少なくとも
一置換されていてもよく；
R4は、水素であり、
R5は、水素；非置換又は一置換されたC1−C6−アルキル、シクロヘキセニル、インダニル、フェニル、ピロリジニル、ピロリル、ピラゾリル、フラニル及びピペリジニルからなる群より選ばれ、
ここで置換基は、フッ素、−CN、−C(O)NH2、−O−フェニル、−C(O)−フェニル、−N(CH3)2、C1−C3アルキル、C1−C3アルコキシ、ヒドロキシ、非置換又は少なくとも一置換されたフェニル、ピリジニル、チエニル、ピリミジニル、イミダゾリル、フラニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ピラゾリル、モルホリニル、ピロリジニル、1,3−ベンゾジオキソリル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、トリアゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソオキサゾリル及びジヒドロイソオキサゾリルからなる群より選ばれ、これらの置換基も又、フッ素、塩素、オキソ、CF3、−OCF3、−NO2、フェニル、ピリジニル、−NHC(O)CH3、−COOH、ヒドロキシ、C1−C3−アルキル、C1−C3−アルコキシ、−SO2NH2、−C(O)NH2及び−N(CH3)2からなる群より選ばれ；又は
R4及びR5は、それらが結合している窒素原子と一緒になって非置換又は少なくとも一置換されたピロリジニル基を形成し、ここで置換基は、C1−C3−アルキル及びヒドロキシからなる群より選ばれ；
アリールは、フェニル又はインダニルであり；
ヘテロアリールは、ピリジニル、キノリニル、インドリル、ベンゾフラニル、チエニル、ピリミジニル、イミダゾリル、フラニル、ベンゾイミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、イソキノリニル、ピロリル又は2,3−ジヒドロインドリルである；
請求項１または２記載の式Ｉの化合物及びその生理学上許容しうる塩。
【請求項４】
式Ｉにおいて、
Ｘは、NH又はＮ−メチルであり；
R1は、エチルであり；
R2は、水素であり；
R3は、メチルであり；
Arは、非置換、又は一置換されたフェニル、インダニル、5,6,7,8−テトラヒドロナフチル、ピリジニル、キノリニル又は2,3−ジヒドロインドリルであり、
ここで置換基は、−CN、−C(O)(C1−C3−アルキル)、−NHC(O)(C1−C3−アルキル)、オキソ、C1−C3−アルキル、C1−C3−アルコキシ、−SO2(C1−C3−アルキル)、ヘテロアリール、−O−ヘテロアリール、−CH2−NR4R5、−SO2−NR4R5及び−C(O)NR4R5からなる群より選ばれ、
ここでC1−C3−アルキル置換基は、ヘテロアリール又はOHによって一置換されていてもよく、
そしてヘテロアリール置換基は、C1−C3−アルキルによって一置換されていてもよく；
R4は、水素であり
R5は、水素、C1−C3−アルキル又はピリジニルであり；
R4及びR5は、それらが結合している窒素原子と一緒になってピロリジニル基を形成し；
ヘテロアリールは、ピリジニル、イミダゾリル又はピリミジニルである；
請求項１〜３のいずれか１項記載の式Ｉの化合物及びその生理学上許容しうる塩。
【請求項５】
3−(5−エチル−2−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)ベンゾニトリル；
3−(5−エチル−2−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)ベンズアミド；
5−(3−アセチルフェニルアミノ)−3−エチル−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
N−[3−(5−エチル−2−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)フェニル]アセトアミド；
3−エチル−6−メチル−5−(キノリン−3−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
4−(5−エチル−2−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)ベンゼンスルホンアミド；
3−エチル−6−メチル−5−[4−(ピリジン−3−イルオキシ)フェニルアミノ]−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−5−(4−イミダゾール−1−イルフェニルアミノ)−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
5−(1−アセチル−2,3−ジヒドロ−1H−インドール−6−イルアミノ)−3−エチル−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
4−(5−エチル−2−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)−N−ピリジン−2−イル−ベンゼンスルホンアミド；
3−エチル−6−メチル−5−(5−オキソ−5,6,7,8−テトラヒドロナフタレン−2−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
N−[6−(5−エチル−2−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)ピリジン−3−イル] −アセトアミド；
6−(5−エチル−2−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)ニコチノニトリル；
3−エチル−6−メチル−5−(1−オキソインダン−5−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(ピリジン−4−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(ピリジン−2−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
5−(2−アセチルフェニルアミノ)−3−エチル−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
5−(4−アセチルフェニルアミノ)−3−エチル−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(ピリジン−3−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−5−(3−メトキシフェノキシ)−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
3−(5−エチル−2−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルオキシ)ベンゾニトリル；
3−エチル−6−メチル−5−(3−メチルアミノメチルフェニルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−5−(3−ヒドロキシメチルフェニルアミノ)−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−5−(3−メタンスルホニルフェニルアミノ)−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−[3−(2−メチルピリミジン−4−イル)フェニルアミノ]−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(3−ピロリジン−1−イルメチルフェニルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−5−[3−(1−ヒドロキシエチル)フェニルアミノ]−6−メチル1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(メチルフェニルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
からなる群より選ばれる、請求項１〜４のいずれか１項記載の式Ｉの化合物及びその生理学上許容しうる塩。
【請求項６】
式Ｉ：
【化２】
2008516902.tif 000002
［式中、
R1及びR3は、相互に独立してフッ素、メトキシ、−OCF3、C2−C3−アルケニル又は塩素、メトキシ若しくは１、２若しくは３個のフッ素原子によって場合により置換されたC1−C4−アルキルであり；
R2は、水素、フッ素、メトキシ、−OCF3、C2−C3−アルケニル又は塩素、メトキシ若しくは１、２若しくは３個のフッ素原子によって場合により置換されたC1−C4−アルキルであり；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、NH又はN(C1−C3−アルキル)であり；
Arは、非置換、又は少なくとも一置換されたアリール又はヘテロアリールであり、ここで置換基は、フッ素、塩素、臭素、−CF3、−OCF3、−NO2、−CN、−C(O)(C1−C6−アルキル)、NH2、−NHC(O)(C1−C6−アルキル)、ヒドロキシ、オキソ、C1−C6−アルキル、C1−C6−アルコキシ、−NH(C1−C6−アルキル)、−N(C1−C6−アルキル)2、−SO2(C1−C6−アルキル)、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、アリール、−O−アリール、−O−ヘテロアリール、−CH2−NR4R5、−SO2NR4R5及び−C(O)NR4R5からなる群より選ばれ、
ここでC1−C6−アルキル置換基は、C1−C6−アルコキシ、フッ素、塩素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル又はOHによって少なくとも１回置換されていてもよく、
そしてアリール、ヘテロアリール及びヘテロシクリル置換基は、C1−C6−アルキル、C1−C6−アルコキシ、フッ素、塩素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ又はOHによって少なくとも１回置換されていてもよく；
アリールは、５〜10員芳香族単又は二環であり；
ヘテロアリールは、Ｎ、Ｏ及びＳから選ばれる１つ又はそれ以上のヘテロ原子を含む５〜10員芳香族単又は二環式複素環であり；
ヘテロシクリルは、Ｎ、Ｏ及びＳから選ばれる１つ又はそれ以上のヘテロ原子を含む５〜10員非芳香族単又は二環式複素環であり；
R4及びR5基は、相互に独立して水素；非置換又は少なくとも一置換されたC1−C10−アルキル、C2−C6−アルケニル、フェニル、インダニル、ヘテロシクリル及びヘテロアリールからなる群より選ばれ、
ここで置換基は、フェニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−O−フェニル、フッ素、−CN、−C(O)NH2、−C(O)(C1−C3−アルキル)、−C(O)−フェニル、−N(C1−C3−アルキル)2、−NH(C1−C3−アルキル)、−NH2、−NH−ヘテロアリール、−NHC(O)−ヘテロアリール、C1−C6−アルキル、C1−C3−アルコキシ及びヒドロキシからなる群より選ばれ、
そしてこれらの置換基のフェニル、ヘテロシクリル及びヘテロアリール断片も又、フッ素、塩素、臭素、オキソ、−CF3、−OCF3、−NO2、−CN、フェニル、ピリジニル、−NHC(O)(C1−C3−アルキル)、−COOH、ヒドロキシ、C1−C3−アルキル、C1−C3−アルコキシ、−SO2NH2、−SO2NH(C1−C3−アルキル)、−SO2N(C1−C3−アルキル)2、−C(O)NH2、−C(O)NH(C1−C3−アルキル)、−C(O)N(C1−C3−アルキル)2、−SO2(C1−C3−アルキル)、−NH2、−NH(C1−C3−アルキル)又は−N(C1−C3−アルキル)2によって少なくとも一置換されていてもよく；又は
R4及びR5は、それらが結合した窒素原子と一緒になって非置換又は少なくとも一置換されたヘテロシクリルを形成し、
ここで置換基は、フェニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、オキソ、フッ素、塩素、−C(O)(C1−C3−アルキル)、−C(O)−フェニル及びヒドロキシからなる群より選ばれ、
そしてこれらの置換基のフェニル、ヘテロシクリル及びヘテロアリール断片も又、フッ素又はC1−C3−アルキルによって少なくとも一置換されていてもよい］
の化合物又はその生理学上許容しうる塩を含有するポリ(ADP−リボース)ポリメラーゼ(PARP)を阻害するための医薬。
【請求項７】
壊死又はアポトーシスのために細胞損傷又は細胞死から生じる組織損傷、神経に介在する組織損傷又は障害、脳虚血、頭部外傷、卒中、再灌流障害、神経学的障害及び神経変性障害、血管卒中、心臓血管障害、心筋梗塞、心筋虚血、実験的アレルギー性脳脊髄炎（EAE）、多発性硬化症（MS）、心臓手術に伴う虚血、加齢性黄斑変性、関節炎、動脈硬化症、癌、その後に複製老化を伴う骨格筋の変性障害、糖尿病及び糖尿病の心筋障害からなる群より選ばれる疾患を治療する薬剤を製造するための請求項１〜６のいずれか１項記載の式Ｉの化合物又はその生理学上許容しうる塩の使用。
【請求項８】
疾患が脳虚血、再灌流損傷、心臓血管障害、心筋梗塞、心臓手術に伴う心筋虚血及び虚血からなる群より選ばれる請求項７記載の使用。
【請求項９】
疾患が心筋梗塞である請求項７または８記載の使用。
【請求項１０】
請求項１〜５のいずれか１項記載の少なくとも１つの化合物又はその生理学上許容しうる塩の有効量及び生理学上許容しうる担体を含む医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
3−エチル−6−メチル−5−(1−オキソインダン−5−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(ピリジン−4−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(ピリジン−2−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
5−(2−アセチルフェニルアミノ)−3−エチル−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
5−(4−アセチルフェニルアミノ)−3−エチル−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(ピリジン−3−イルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−5−(3−メトキシフェノキシ)−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
3−(5−エチル−2−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルオキシ)ベンゾニトリル；
3−エチル−6−メチル−5−(3−メチルアミノメチルフェニルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−5−(3−ヒドロキシメチルフェニルアミノ)−6−メチル−1H−ピリジン−2
−オン；
3−エチル−5−(3−メタンスルホニルフェニルアミノ)−6−メチル−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−[3−(2−メチルピリミジン−4−イル)フェニルアミノ]−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(3−ピロリジン−1−イルメチルフェニルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−5−[3−(1−ヒドロキシエチル)フェニルアミノ]−6−メチル1H−ピリジン−2−オン；
3−エチル−6−メチル−5−(メチルフェニルアミノ)−1H−ピリジン−2−オン；
からなる群より選ばれる一般式Ｉの化合物及びその生理学上許容しうる塩に関する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９７】
薬理学的研究
PARP酵素アッセイ
試験物質を、DNA活性化され、組換え発現され、そして精製されたPARP−1酵素と共にインキューベートすることによって最大半減阻害剤濃度を測定した。具体的には、種々の濃度の試験物質を50mMトリス、５mM MgCl2、１mM DTT、200μM NAD、0.1mCi／ml トリチウ
ム標識化NAD、0.1mg／ml DNA、0.1mg／ml ヒストン、２μg／ml 組換え発現されたヒトPARP−1酵素を含む反応溶液50μl中、pH＝8.0、室温で１時間インキューベートした。20％トリクロロ酢酸150μlを加えることによって反応を停止し、放射性同位元素標識化タンパク質成分が沈殿した。氷上で10分間インキュベーションした後、標識化された不溶性成分を、ガラス繊維フィルタを通して分離し、そして20％トリクロロ酢酸で３回を洗浄した後に、PARP−1酵素によって取り込まれた放射活性を放射線ルミネセンスで測定した。このように測定した取り込み率を試験物質の濃度の関数として考察し、達成しうる最大値(阻害剤なしのインキュベーション)の半分に取り込み率を減らす試験物質の濃度として最大半減阻害剤濃度(IC50)を得た。