【手続補正書】
【提出日】平成20年8月4日(2008.8.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
集団が７５％以上の充実腫瘍幹細胞及び２５％以下の充実腫瘍細胞を含み、
充実腫瘍幹細胞が
（ｉ）腫瘍形成性であり；
（ｉｉ）ＣＤ４４を発現し；
（ｉｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず；
（ｉｖ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現し；
充実腫瘍細胞が腫瘍形成性でない、
上皮の充実腫瘍から得られる単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項２】
充実腫瘍幹細胞が、検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１４、ＣＤ１６及びＣＤ６４を発現しない、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項３】
充実腫瘍幹細胞が、検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーＣＤ１０、ＣＤ３１、及びＣＤ１４０ｂを発現しない、請求項２記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項４】
充実腫瘍幹細胞が、乳癌幹細胞又は卵巣癌幹細胞である、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項５】
一以上の充実腫瘍幹細胞がポリヌクレオチドベクターを有する、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項６】
ポリヌクレオチドベクターが、ウイルスベクター又はプラスミドである、請求項５記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項７】
ポリヌクレオチドベクターが、リポーターポリヌクレオチドである、請求項５記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項８】
リポーターポリヌクレオチドが、充実腫瘍幹細胞内で活性を有するときに、検出できるシグナルを与える、請求項７記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項９】
一以上の組換えポリヌクレオチドを含む、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１０】
組換えポリヌクレオチドが、該一以上の充実腫瘍幹細胞の染色体に組み込まれている、請求項９記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１１】
培地中に該充実腫瘍幹細胞が存在する、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１２】
培地がＮｏｔｃｈリガンドを含む、請求項１１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１３】
基質に充実腫瘍幹細胞を付着させた、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１４】
充実腫瘍幹細胞の増殖を低下させるよう処理された、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１５】
充実腫瘍幹細胞の増殖を増大させるよう処理された、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１６】
充実腫瘍幹細胞が、細胞表面マーカーＢ３８．１を発現する、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１７】
充実腫瘍幹細胞が、さらに上皮特異性抗原（ＥＳＡ）を発現する、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１８】
充実腫瘍幹細胞が、ＣＤ２４を発現しない、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項１９】
充実腫瘍幹細胞が、低レベルでＣＤ２４を発現する、請求項１記載の単離された充実腫瘍幹細胞の集団。
【請求項２０】
集団が充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞を含み、
充実腫瘍幹細胞が
（ａ）その集団が、未分画腫瘍細胞に比して少なくとも２倍富化されており；
（ｂ）腫瘍形成性であり；
（ｃ）ＣＤ４４を発現し；
（ｄ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず；
（ｅ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現し；
充実腫瘍細胞が腫瘍形成性でない、
上皮の充実腫瘍から得られる充実腫瘍幹細胞の富化された集団。
【請求項２１】
集団が、少なくとも５倍富化された、請求項２０記載の富化集団。
【請求項２２】
集団が、少なくとも１０倍富化された、請求項２０記載の富化集団。
【請求項２３】
集団が、少なくとも５０倍富化された、請求項２０記載の富化集団。
【請求項２４】
充実腫瘍が、乳癌又は卵巣癌である、請求項２０記載の富化集団。
【請求項２５】
充実腫瘍幹細胞が、細胞表面マーカーＢ３８．１を発現する、請求項２０記載の富化集団。
【請求項２６】
充実腫瘍幹細胞が、さらに上皮特異性抗原（ＥＳＡ）を発現する、請求項２０記載の富化集団。
【請求項２７】
充実腫瘍幹細胞が、ＣＤ２４を発現しない、請求項２０記載の富化集団。
【請求項２８】
充実腫瘍幹細胞が、低レベルでＣＤ２４を発現する、請求項２０記載の富化集団。
【請求項２９】
充実腫瘍幹細胞の集団を富化する方法であって、
（ａ）充実腫瘍を解離させて、細胞懸濁液を形成し；
（ｂ）解離した細胞を、ＣＤ４４を結合させる第一の試薬、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる一以上のＬＩＮＥＡＧＥマーカーを結合させる第二の試薬、並びに、ＣＤ２４マーカーを結合させる第三の試薬、
と接触させ；
（ｃ）第一の試薬に選択的に結合し、第２の試薬及び第３の試薬に検出不可能なほど結合しないか、少ししか結合しない細胞を選別する工程であり、該選別された細胞が、充実腫瘍幹細胞中で富化されている工程
を含む方法。
【請求項３０】
第一又は第二の試薬が抗体である、請求項２９記載の方法。
【請求項３１】
第一又は第二の試薬を、蛍光色素又は磁性粒子と結合させる、請求項２９記載の方法。
【請求項３２】
細胞選別を、フローサイトメトリー、蛍光活性化細胞選別法、パンニング法、アフィニティーカラム分離法又は磁気選別法によって実施する、請求項２９記載の方法。
【請求項３３】
（ｄ）選別した充実腫瘍幹細胞を単離する工程
をさらに含む、請求項２９記載の方法。
【請求項３４】
請求項２９〜３３の何れか一項の方法によって単離された充実腫瘍幹細胞の富化された集団。
【請求項３５】
充実腫瘍幹細胞が、乳癌幹細胞又は卵巣癌幹細胞である、請求項２９記載の方法。
【請求項３６】
選別された細胞が、細胞表面マーカーＢ３８．１を発現する、請求項２９記載の方法。
【請求項３７】
選別された細胞が、さらに上皮特異性抗原（ＥＳＡ）を発現する、請求項２９記載の方法。
【請求項３８】
選別された細胞が、検出可能なほどに第二及び第三の試薬と結合しない、請求項２９記載の方法。
【請求項３９】
外皮由来の充実腫瘍幹細胞の腫瘍形成を阻害する試験化合物の能力を決定する方法であって、
ａ）外皮の充実腫瘍から富化された充実腫瘍幹細胞を得て、該充実腫瘍幹細胞は、
ｉ）未分画腫瘍細胞に比して少なくとも２倍富化されており；
ｉｉ）ＣＤ４４を発現し；
ｉｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず；
ｉｖ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現し；
ｂ）充実腫瘍幹細胞の第二のセットでなく第一のセットを試験化合物にさらし；
ｃ）充実腫瘍幹細胞の第一のセットを、最初のホスト動物に導入し、そして、充実腫瘍幹細胞の第二のセットを、第２のホスト動物に導入し；
ｄ）試験化合物が腫瘍の形成を阻害したかを決定するために、もし腫瘍が存在していれば、第一の動物の腫瘍と、第二の動物の腫瘍を比較する
ことを含む方法。
【請求項４０】
充実腫瘍幹細胞が結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、及び膀胱癌から選択される充実腫瘍から得られる請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
フローサイメトリーにより未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項３９記載の方法。
【請求項４２】
蛍光標示式細胞分取法（ＦＡＣＳ）により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項３９記載の方法。
【請求項４３】
磁気選別法により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項３９記載の方法。
【請求項４４】
試験化合物が抗Ｎｏｔｃｈ４抗体である、請求項３９記載の方法。
【請求項４５】
外皮由来の充実腫瘍幹細胞の腫瘍形成を阻害する試験化合物の能力を決定する方法であって、
ａ）外皮の充実腫瘍から富化された充実腫瘍幹細胞を得て、該充実腫瘍幹細胞は、
ｉ）未分画腫瘍細胞に比して少なくとも２倍富化されており；
ｉｉ）ＣＤ４４を発現し；
ｉｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず；
ｉｖ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現し；
ｂ）充実腫瘍幹細胞を、第一及び第二のホスト動物に導入し、
ｃ）第一のホスト動物を試験化合物で処理し、第二のホスト動物を試験化合物で処理しないで、
ｄ）試験化合物が腫瘍の形成を阻害したかを決定するために、もし腫瘍が存在していれば、第一の動物の腫瘍と、第二の動物の腫瘍を比較する
ことを含む方法。
【請求項４６】
充実腫瘍幹細胞が結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、及び膀胱癌から選択される充実腫瘍から得られる請求項４５記載の方法。
【請求項４７】
フローサイメトリーにより未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項４５記載の方法。
【請求項４８】
蛍光標示式細胞分取法（ＦＡＣＳ）により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項４５記載の方法。
【請求項４９】
磁気選別法により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項４５記載の方法。
【請求項５０】
試験化合物が抗Ｎｏｔｃｈ４抗体である、請求項４５記載の方法。
【請求項５１】
外皮由来の充実腫瘍幹細胞の腫瘍形成を阻害する試験化合物の能力を決定する方法であって、
ａ）外皮の充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞の混合物を得て、
ｂ）充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞の混合物から７５％以上の充実腫瘍幹細胞及び２５％以下の充実腫瘍細胞を含むフラクションを選別し、ここで選別は
ｉ）解離した細胞を、ＣＤ４４を結合させる第一の試薬、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる一以上のＬＩＮＥＡＧＥマーカーを結合させる第二の試薬、並びに、ＣＤ２４マーカーを結合させる第三の試薬、
と接触させ；
ｉｉ）第一の試薬に選択的に結合し、第２の試薬及び第３の試薬に検出不可能なほど結合しないか、少ししか結合しない細胞を選別する工程
を含み
ｃ）充実腫瘍幹細胞の第二のセットでなく第一のセットを試験化合物にさらし；
ｄ）充実腫瘍幹細胞の第一のセットを、最初のホスト動物に導入し、そして、充実腫瘍幹細胞の第二のセットを、第２のホスト動物に導入し；
ｅ）試験化合物が腫瘍の形成を阻害したかを決定するために、もし腫瘍が存在していれば、第一の動物の腫瘍と、第二の動物の腫瘍を比較する
ことを含む方法。
【請求項５２】
充実腫瘍幹細胞が結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、及び膀胱癌から選択される充実腫瘍から得られる請求項５１記載の方法。
【請求項５３】
フローサイメトリーにより未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項５１記載の方法。
【請求項５４】
蛍光標示式細胞分取法（ＦＡＣＳ）により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項５１記載の方法。
【請求項５５】
磁気選別法により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項５１記載の方法。
【請求項５６】
試験化合物が抗Ｎｏｔｃｈ４抗体である、請求項５１記載の方法。
【請求項５７】
外皮由来の充実腫瘍幹細胞の腫瘍形成を阻害する試験化合物の能力を決定する方法であって、
ａ）充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞の混合物から７５％以上の充実腫瘍幹細胞及び２５％以下の充実腫瘍細胞を含むサンプルを得て、
ここで充実腫瘍幹細胞は、
ｉ）ＣＤ４４を発現し；
ｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず；
ｉｉｉ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現し；
ｂ）充実腫瘍幹細胞の第二のセットでなく第一のセットを試験化合物にさらし；
ｃ）充実腫瘍幹細胞の第一のセットを、最初のホスト動物に導入し、そして、充実腫瘍幹細胞の第二のセットを、第２のホスト動物に導入し；
ｄ）試験化合物が腫瘍の形成を阻害したかを決定するために、もし腫瘍が存在していれば、第一の動物の腫瘍と、第二の動物の腫瘍を比較する
ことを含む方法。
【請求項５８】
充実腫瘍幹細胞が結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、及び膀胱癌から選択される充実腫瘍から得られる請求項５７記載の方法。
【請求項５９】
試験化合物が抗Ｎｏｔｃｈ４抗体である、請求項５７記載の方法。
【請求項６０】
外皮由来の充実腫瘍幹細胞の腫瘍形成を阻害する試験化合物の能力を決定する方法であって、
ａ）ヒトの外皮の充実腫瘍から充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞の混合物を得て、
ｂ）充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞の混合物から７５％以上の充実腫瘍幹細胞及び２５％以下の充実腫瘍細胞を含むフラクションを選別し、ここで選別は
ｉ）解離した細胞を、ＣＤ４４を結合させる第一の試薬、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる一以上のＬＩＮＥＡＧＥマーカーを結合させる第二の試薬、並びに、ＣＤ２４マーカーを結合させる第三の試薬、
と接触させ；
ｉｉ）第一の試薬に選択的に結合し、第２の試薬及び第３の試薬に検出不可能なほど結合しないか、少ししか結合しない細胞を選別する工程
を含み
ｃ）充実腫瘍幹細胞を、第一及び第二のホスト動物に導入し、
ｄ）第一のホスト動物試験化合物で処理し、第二のホスト動物試験化合物で処理しないで、
ｅ）試験化合物が腫瘍の形成を阻害したかを決定するために、もし腫瘍が存在していれば、第一の動物の腫瘍と、第二の動物の腫瘍を比較する
ことを含む方法。
【請求項６１】
充実腫瘍幹細胞が結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、及び膀胱癌から選択される充実腫瘍から得られる請求項６０記載の方法。
【請求項６２】
フローサイメトリーにより選別する請求項６０記載の方法。
【請求項６３】
蛍光標示式細胞分取法（ＦＡＣＳ）により選別する請求項６０記載の方法。
【請求項６４】
磁気選別法により選別する請求項６０記載の方法。
【請求項６５】
試験化合物が抗Ｎｏｔｃｈ４抗体である、請求項６０記載の方法。
【請求項６６】
外皮由来の充実腫瘍幹細胞の腫瘍形成を阻害する試験化合物の能力を決定する方法であって、
ａ）外皮腫瘍から７５％以上の充実腫瘍幹細胞を含むサンプルを得て、
ここで充実腫瘍幹細胞は
ｉ）ＣＤ４４を発現し；
ｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず；
ｉｉｉ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現し；
ｂ）充実腫瘍幹細胞を、第一及び第二のホスト動物に導入し、
ｃ）第一及のホスト動物試験化合物で処理し、第二のホスト動物試験化合物で処理しないで、
ｄ）試験化合物が腫瘍の形成を阻害したかを決定するために、もし腫瘍が存在していれば、第一の動物の腫瘍と、第二の動物の腫瘍を比較する
ことを含む方法。
【請求項６７】
充実腫瘍幹細胞が結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、及び膀胱癌から選択される充実腫瘍から得られる請求項６６記載の方法。
【請求項６８】
試験化合物が抗Ｎｏｔｃｈ４抗体である、請求項６６記載の方法。
【請求項６９】
外皮由来の充実腫瘍幹細胞の腫瘍形成を阻害する試験化合物の能力を決定する方法であって、
ａ）外皮の充実腫瘍から富化された充実腫瘍幹細胞を得て；
ここで該充実腫瘍幹細胞は
ｉ）未分画腫瘍細胞に比して少なくとも２倍富化されており；
ｉｉ）ＣＤ４４を発現し；
ｉｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず、
ｉｖ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現し；
ｂ）第一のホスト動物試験化合物で処理し、第二のホスト動物試験化合物で処理しないで、
ｃ）充実腫瘍幹細胞を、第一及び第二のホスト動物に導入し、
ｄ）試験化合物が腫瘍の形成を阻害したかを決定するために、もし腫瘍が存在していれば、第一の動物の腫瘍と、第二の動物の腫瘍を比較する
ことを含む方法。
【請求項７０】
充実腫瘍幹細胞が結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、及び膀胱癌から選択される充実腫瘍から得られる請求項６９記載の方法。
【請求項７１】
フローサイメトリーにより未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項６９記載の方法。
【請求項７２】
蛍光標示式細胞分取法（ＦＡＣＳ）により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項６９記載の方法。
【請求項７３】
磁気選別法により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項６９記載の方法。
【請求項７４】
外皮由来の充実腫瘍幹細胞の腫瘍形成を阻害する試験化合物の能力を決定する方法であって、
ａ）外皮の充実腫瘍から富化された充実腫瘍幹細胞を得て；
ここで該充実腫瘍幹細胞は
ｉ）未分画腫瘍細胞に比して少なくとも２倍富化されており；
ｉｉ）ＣＤ４４を発現し；
ｉｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず、
ｉｖ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現し；
ｂ）充実腫瘍幹細胞を試験化合物にさらし；
ｃ）充実腫瘍幹細胞を、ホスト動物に導入し、；そして
ｄ）ホスト動物中で腫瘍の存在又は非存在を確認する
ことを含む方法。
【請求項７５】
充実腫瘍幹細胞が結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、及び膀胱癌から選択される充実腫瘍から得られる請求項７４記載の方法。
【請求項７６】
フローサイメトリーにより未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項７４記載の方法。
【請求項７７】
蛍光標示式細胞分取法（ＦＡＣＳ）により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項７４記載の方法。
【請求項７８】
磁気選別法により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項７４記載の方法。
【請求項７９】
試験化合物が抗Ｎｏｔｃｈ４抗体である、請求項７４記載の方法。
【請求項８０】
外皮由来の充実腫瘍幹細胞の腫瘍形成を阻害する試験化合物の能力を決定する方法であって、
ａ）外皮の充実腫瘍から富化された充実腫瘍幹細胞を得て；
ここで該充実腫瘍幹細胞は
ｉ）未分画腫瘍細胞に比して少なくとも２倍富化されており；
ｉｉ）ＣＤ４４を発現し；
ｉｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず、
ｉｖ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現し；
ｂ）充実腫瘍幹細胞を、ホスト動物に導入し；
ｃ）充実腫瘍幹細胞を試験化合物で処理し；そして
ｄ）ホスト動物中で腫瘍の存在又は非存在を確認する
ことを含む方法。
【請求項８１】
充実腫瘍幹細胞が結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、及び膀胱癌から選択される充実腫瘍から得られる請求項８０記載の方法。
【請求項８２】
フローサイメトリーにより未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項８０記載の方法。
【請求項８３】
蛍光標示式細胞分取法（ＦＡＣＳ）により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項８０記載の方法。
【請求項８４】
磁気選別法により未分離の腫瘍細胞から充実腫瘍幹細胞を選別する工程を含む請求項８０記載の方法。
【請求項８５】
試験化合物が抗Ｎｏｔｃｈ４抗体である、請求項８０記載の方法。
【請求項８６】
７５％以上の充実腫瘍幹細胞及び２５％以下の充実腫瘍細胞を含み、充実腫瘍から得られる細胞組成物であり、
充実腫瘍幹細胞が腫瘍形成性であり；
充実腫瘍細胞が腫瘍形成性でない、細胞組成物。
【請求項８７】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、神経膠腫、星状細胞腫及び黒腫から選択される充実腫瘍から得られる請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項８８】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの頭頸部癌から得られる請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項８９】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの膵臓癌から得られる請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項９０】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの肺癌から得られる請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項９１】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの卵巣癌から得られる請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項９２】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの肝癌から得られる請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項９３】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの腎癌から得られる請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項９４】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの結腸癌から得られる請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項９５】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの乳癌から得られる請求項８６記載の方法。
【請求項９６】
培地中にある請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項９７】
Ｎｏｔｃｈリガンドを含む請求項９６記載の細胞組成物。
【請求項９８】
腫瘍形成抑制処理を受けた請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項９９】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、体液から得られる請求項８６記載の細胞組成物。
【請求項１００】
７５％以上の充実腫瘍幹細胞及び２５％以下の充実腫瘍細胞を含み、充実腫瘍から得られる細胞組成物であり、
ホスト動物への充実腫瘍幹細胞の連続導入によって充実腫瘍幹細胞が腫瘍形成性であり；
ホスト動物への充実腫瘍細胞の連続導入によって充実腫瘍細胞が腫瘍形成性でない、細胞組成物。
【請求項１０１】
９０％以上の充実腫瘍幹細胞及び１０％以下の充実腫瘍細胞を含み、充実腫瘍から得られる細胞組成物であり、
充実腫瘍幹細胞が腫瘍形成性であり；
充実腫瘍細胞が腫瘍形成性でない、細胞組成物。
【請求項１０２】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、子宮頸癌、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、神経膠腫、星状細胞腫及び黒腫から選択される充実腫瘍から得られる請求項１０１記載の細胞組成物。
【請求項１０３】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの頭頸部癌から得られる請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１０４】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの膵臓癌から得られる請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１０５】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの肺癌から得られる請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１０６】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの卵巣癌から得られる請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１０７】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの肝癌から得られる請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１０８】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの腎癌から得られる請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１０９】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの結腸癌から得られる請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１１０】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、ヒトの乳癌から得られる請求項１０２記載の方法。
【請求項１１１】
培地中にある請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１１２】
Ｎｏｔｃｈリガンドを含む請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１１３】
腫瘍形成抑制処理を受けた請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１１４】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が、体液から得られる請求項１０２記載の細胞組成物。
【請求項１１５】
９０％以上の充実腫瘍幹細胞及び１０％以下の充実腫瘍細胞を含む細胞組成物であり、
ホスト動物への充実腫瘍幹細胞の連続導入によって充実腫瘍幹細胞が腫瘍形成性であり；
ホスト動物への充実腫瘍細胞の連続導入によって充実腫瘍細胞が腫瘍形成性でない、細胞組成物。
【請求項１１６】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞を含み、充実腫瘍から得られる細胞組成物であり、充実腫瘍幹細胞が、２倍富化されており、ホスト動物への充実腫瘍幹細胞の連続導入によって充実腫瘍幹細胞が腫瘍形成性である細胞組成物。
【請求項１１７】
充実腫瘍幹細胞が、少なくとも５倍富化された、請求項１１６記載の細胞組成物。
【請求項１１８】
充実腫瘍幹細胞が、少なくとも１０倍富化された、請求項１１６記載の細胞組成物。
【請求項１１９】
充実腫瘍幹細胞及び充実腫瘍細胞が体液から得られる、請求項１１６記載の細胞組成物。
【請求項１２０】
充実腫瘍を有する患者に治療に有効な量のＮｏｔｃｈ４アンタゴニストを投与することを含む腫瘍の治療方法。
【請求項１２１】
上記治療に有効な量は、充実腫瘍の細胞死、又は充実腫瘍中の細胞の増殖阻害を引き起こすのに充分な量である請求項１２０記載の方法。
【請求項１２２】
充実腫瘍が充実腫瘍幹細胞を含む請求項１２０記載の方法。
【請求項１２３】
上記治療に有効な量は、充実腫瘍中の充実腫瘍細胞に対する充実腫瘍幹細胞の割合を減少させる
のに充分な量である請求項１２２記載の方法。
【請求項１２４】
Ｎｏｔｃｈ４アンタゴニストがＮｏｔｃｈ４ポリペプチドの細胞外ドメインに直接的に作用する請求項１２０記載の方法。
【請求項１２５】
Ｎｏｔｃｈ４アンタゴニストがＮｏｔｃｈ４に特異的に結合する抗体である請求項１２３記載の方法。
【請求項１２６】
Ｎｏｔｃｈ４アンタゴニストがＮｏｔｃｈ４リガンドに直接的に作用する請求項１２０記載の方法。
【請求項１２７】
Ｎｏｔｃｈ４アンタゴニストがＮｏｔｃｈ４リガンドに対する抗体である請求項１２６記載の方法。
【請求項１２８】
抗体がＤｌｌ４に対する抗体である請求項１２７記載の方法。
【請求項１２９】
抗体がＤｅｌｔａ１に対する抗体である請求項１２７記載の方法。
【請求項１３０】
抗体がＤｌｌ３に対する抗体である請求項１２７記載の方法。
【請求項１３１】
抗体がＪａｇｇｅｄ１に対する抗体である請求項１２７記載の方法。
【請求項１３２】
抗体がＪａｇｇｅｄ２に対する抗体である請求項１２７記載の方法。
【請求項１３３】
充実腫瘍幹細胞が
（ｉ）ＣＤ４４を発現し；
（ｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず、
（ｉｉｉ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現する
ことを特徴とする請求項１２２記載の方法。
【請求項１３４】
充実腫瘍幹細胞が細胞表面マーカーＣＤ４４を発現する請求項１２２記載の方法。
【請求項１３５】
充実腫瘍幹細胞がＣＤ２４を発現しない請求項１２２記載の方法。
【請求項１３６】
充実細胞の非腫瘍形成性癌細胞によるＣＤ２４の平均的発現レベルより低レベルのＣＤ２４を発現する請求項１２２記載の方法。
【請求項１３７】
ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現しない請求項１２２記載の方法。
【請求項１３８】
充実腫瘍幹細胞がＢ３８．１によりさらに特徴づけられる請求項１３３記載の方法。
【請求項１３９】
充実腫瘍幹細胞が上皮特異性抗原（ＥＳＡ）によりさらに特徴づけられる請求項１３３記載の方法。
【請求項１４０】
充実腫瘍幹細胞が細胞表面マーカーＢ３８．１を発現する請求項１２２記載の方法。
【請求項１４１】
充実腫瘍幹細胞が細胞表面マーカー上皮特異性抗原（ＥＳＡ）を発現する請求項１２２記載の方法。
【請求項１４２】
充実腫瘍が上皮癌である、請求項１２０記載の方法。
【請求項１４３】
上皮癌が、乳癌又は卵巣癌である、請求項１４２記載の方法。
【請求項１４４】
充実腫瘍が肉腫である、請求項１２０記載の方法。
【請求項１４５】
患者に治療に有効な量のＮｏｔｃｈレセプター蛋白質のアンタゴニストを投与することを含む腫瘍の治療方法であって、アンタゴニストが充実腫瘍中の充実腫瘍細胞に対する充実腫瘍幹細胞の割合を減少させる方法。
【請求項１４６】
アンタゴニストが充実腫瘍幹細胞を死滅させる、請求項１４５記載の方法。
【請求項１４７】
アンタゴニストが充実腫瘍幹細胞の増殖を阻害する、請求項１４５記載の方法。
【請求項１４８】
アンタゴニストがＮｏｔｃｈシグナリングを阻害する、請求項１４５記載の方法。
【請求項１４９】
アンタゴニストが抗体である、請求項１４５記載の方法。
【請求項１５０】
抗体がＮｏｔｃｈ４に対する抗体である、請求項１４９記載の方法。
【請求項１５１】
充実腫瘍幹細胞が
（ｉ）ＣＤ４４を発現し；
（ｉｉ）ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上の検出できるレベルのＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現せず、
（ｉｉｉ）ＣＤ２４を発現しない、又は、低レベルでＣＤ２４を発現する
ことを特徴とする請求項１４５記載の方法。
【請求項１５２】
充実腫瘍幹細胞が細胞表面マーカーＣＤ４４を発現する請求項１４５記載の方法。
【請求項１５３】
充実腫瘍幹細胞がＣＤ２４を発現しない請求項１４５記載の方法。
【請求項１５４】
充実腫瘍幹細胞が、充実腫瘍中の非腫瘍形成性癌細胞によるＣＤ２４の平均的発現レベルより低レベルのＣＤ２４を発現する請求項１４５記載の方法。
【請求項１５５】
ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１０、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ６４及びＣＤ１４０ｂからなる群から選ばれる、一以上のＬＩＮＥＡＧＥマーカーを発現しない請求項１４５記載の方法。
【請求項１５６】
充実腫瘍幹細胞がＢ３８．１の発現によりさらに特徴づけられる請求項１５１記載の方法。
【請求項１５７】
充実腫瘍幹細胞が上皮特異性抗原（ＥＳＡ）の発現によりさらに特徴づけられる請求項１５１記載の方法。
【請求項１５８】
充実腫瘍幹細胞が細胞表面マーカーＢ３８．１を発現する請求項１４５記載の方法。
【請求項１５９】
充実腫瘍幹細胞が細胞表面マーカー上皮特異性抗原（ＥＳＡ）を発現する請求項１４５記載の方法。
【請求項１６０】
充実腫瘍が上皮癌である、請求項１４５記載の方法。
【請求項１６１】
上皮癌が、乳癌又は卵巣癌である、請求項１６０記載の方法。
【請求項１６２】
充実腫瘍が肉腫である、請求項１４５記載の方法。