【手続補正書】
【提出日】平成20年6月25日(2008.6.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  皮膚老化の徴候を予防または治癒処置するためのケア調剤中における菌類グリフォラ・フロンドサ（Grifola frondosa）の抽出物の化粧用の使用。
【請求項２】  ＵＶで誘発される皮膚の老化の兆候を処置することを特徴とする、請求項１に記載の使用。
【請求項３】  菌類グリフォラ・フロンドサの抽出物、および
・３-ベンジリデンカンファー、３-ベンジリデンノルカンファー、３-(４-メチルベンジリデン)-カンファー、
・４-(ジメチルアミノ)-安息香酸-２-エチルヘキシルエステル、４-(ジメチルアミノ)-安息香酸-２-オクチルエステル、４-(ジメチルアミノ)-安息香酸アミルエステル、
・４-メトキシケイ皮酸-２-エチルヘキシルエステル、４-メトキシケイ皮酸プロピルエステル、４-メトキシケイ皮酸イソアミルエステル、２-シアノ-３,３-フェニルケイ皮酸-２-エチルヘキシルエステル（オクトクリレン）、
・サリチル酸-２-エチルヘキシルエステル、サリチル酸-４-イソプロピルベンジルエステル、サリチル酸ホモメンチルエステル、
・２-ヒドロキシ-４-メトキシベンゾフェノン、２-ヒドロキシ-４-メトキシ-４'-メチルベンゾフェノン、２,２'-ジヒドロキシ-４-メトキシベンゾフェノン、
・４-メトキシベンザルマロン酸-ジ-２-エチルヘキシルエステル、
・２,４,６-トリアニリノ-(ｐ-カルボ-２'-エチル-１'-ヘキシロキシ)-１,３,５-トリアジン、オクチルトリアゾン、ジオクチルブタミドトリアジン、
・１-(４-tert-ブチルフェニル)-３-(４'-メトキシフェニル)-プロパン-１,３-ジオン、
・２-フェニルベンズイミダゾール-５-スルホン酸、およびそのアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、アルキルアンモニウム塩、アルカノールアンモニウム塩およびグルクアンモニウム塩、
・２-ヒドロキシ-４-メトキシベンゾフェノン-５-スルホン酸およびその塩、
・４-(２-オキソ-３-ボルニリデンメチル)-ベンゼンスルホン酸、２-メチル-５-(２-オキソ-３-ボルニリデン)スルホン酸およびこれらの塩。
・１-(４'-tert-ブチルフェニル)-３-(４'-メトキシフェニル)-プロパン-１,３-ジオン、４-tert-ブチル-４'-メトキシジベンゾイルメタン、１-フェニル-３-(４'-イソプロピルフェニル)-プロパン-１,３-ジオン、
並びに
・酸化亜鉛、二酸化チタン、およびまた鉄、ジルコニウム、ケイ素、マンガン、アルミニウムおよびセリウムの酸化物、シリケート、硫酸バリウムおよびステアリン酸亜鉛
からなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含む、化粧用太陽光保護調剤。
【請求項４】  太陽光保護調剤として治療または予防に使用するための菌類グリフォラ・フロンドサの抽出物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
コラーゲンは、タンパク質繊維からなり、３つの異なるタイプ（タイプ I、III および IV）で人の皮膚中に生ずる。コラーゲン中において、個々のポリベプチド鎖（多くのアミノ酸プロリンおよび全第３残基としてグリセリンを含有する）は、相互にからみつき、三重らせんを形成する。コラーゲン繊維は、線維芽細胞中でトロポコラーゲンとして合成され、細胞外基質に置き換えられる。本発明によるコラーゲン合成の刺激は、コラーゲン生産の増加につながり、それゆえ真皮の向上した分子間剛化、そうしてより引き締まって見える皮膚につながる。
エラスチンも、繊維状タンパク質である。それは、未組織化の共有的に架橋されたポリペプチド鎖からなり、これは、ゴム状弾性物質を形成する。皮膚細胞中での合成後、エラスチンは、細胞外基質に置き換えられる。本発明によるエラスチンポリペプチド鎖合成の刺激は、エラスチン生産の増加につながり、それゆえ皮膚弾性の増加につながる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
フィブロネクチンは、細胞外基質および細胞外液中で見出される高分子量糖タンパク質（ダイマーＭＷ 約４４０,０００〜５５０,０００）の群である。３つの異なる繰返し領域の直線状の組合せにより、２つのジスルフィド架橋により連結されているフィブロネクチンダイマー（伸張分子計測６００×２５Å）は、とりわけコラーゲン、グリコサミノグリカン、プロテオグリカン、フィブリン（フィブリノーゲン）、デオキシリボ核酸、免疫グロブリン、プラスミノゲン、プラスミノゲン活性化因子、トロンボスポンジン（Thrombospondin）、細胞および微生物を結合する。この性質により、フィブロネクチンは、例えば結合組織細胞をコラーゲンフィブリルまたは血小板に、および線維芽細胞をフィブリンに結合することができる（傷の治癒に貢献する）。
ヒアルロン酸は、酸性グリコサミノグリカンである。ヒアルロン酸の基本単位は、アミノ二糖類であり、これは、（ベータ１−３）グリコシド結合において D-グルクロン酸およびＮ-アセチル-D-グルコサミンから製造され、（ベータ１−４）グリコシド結合により次の単位と結びついている。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８５】
実施例５  皮膚再生および回復活性
この試験の目的は、生体外ヒト線維芽細胞培養物に対するグリフォラ・フロンドサの再生および回復活性を示すことである。
方法１：細胞増殖に対する効果
ヒト線維芽細胞に、合成栄養培地（ＤＭＥＭ＝ Dulbecco Minimum Essential Medium、Life Technologie S.a.r.l. の製品）中で１０質量％のウシ胎児血清を接種し、５％のＣＯ2雰囲気中３７℃で２４時間培養した。次いでウシ胎児血清を含有する栄養培地を、ウシ血清胎児無しのＤＭＥＭ栄養培地に取り替えた。次いで実施例１および２のグリフォラ抽出物の形態の活性物質を、この栄養培地に様々な濃度で添加した。比較のために、活性物質無しのヒト線維芽細胞の試験系を、対照として培養した。線維芽細胞を、栄養培地中で３日間培養した後、増殖および代謝活性を、粒子計数器を用いて細胞を数え、Vasseur の方法（Journal Francais Hydrologie, 1981年, 9, 第149〜156頁）により細胞内ＡＴＰ含有量、Bradford の方法 (Anal. Biochem. 1976年, 72, 第248〜254頁) により細胞タンパク質含有量、および Desaulnier の方法 (In vitro, 1998年, 12(4), 第409〜422頁) により細胞ＤＮＡ含有量を測定することにより評価した。実施例１および２の菌類抽出物の濃度０.００１〜０.１質量％で、対照物と比較して、８〜２３％のＡＴＰ含有量（％）の増加が得られた。細胞タンパク質含有量（％）は、実施例１および２の菌類抽出物濃度０.００１〜０.１質量％に対して５〜３２％増加した。細胞ＤＮＡ含有量（％）は、実施例１の菌類抽出物濃度０.００１〜０.００３質量％での３日および６日の培養後に測定した。その含有量（％）は、対照物と比較して１０〜４２％増加したことが観察された。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８６】
【表２】
2004501974.tif 000001
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８７】
【表３】
2004501974.tif 000002
この研究は、実施例１〜３のグリフォラ・フロンドサ抽出物は、生体外ヒト線維芽細胞の増殖および代謝をかなりの程度で刺激することを示す。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８８】
方法２：生育力の向上
試験を、ヒト線維芽細胞に対して行った。それは、或るパラメーター数を休止細胞について定量測定できるようにする。細胞の培養は、培養時間以外は方法１の培養に相当する。この試験の培養時間は７２時間であった。生育力を、Bradford の方法 (Anal. Biochem. 1976年, 72, 第248〜254頁）によりタンパク質含有量（％）の比色定量により評価した。試験を３回行い、次いで２回繰り返した。そうして植物抽出物１つあたり、よってバッチ１つあたり６つの結果が存在し、これを全て平均した。結果を、対照物と比較して、割合（％）で表した。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８９】
【表４】
2004501974.tif 000003
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９０】
濃度０.００１〜０.０１質量％の実施例１〜３のグリフォラ・フロンドサ抽出物は、対照物と比較して、生体外試験において５〜８０％、ヒト線維芽細胞中のタンパク質含有量を増加させる。これらの結果は、グリフォラ・フロンドサ抽出物は、線維芽細胞の代謝を刺激する高い能力を有することを示す。該抽出物は、ヒト線維芽細胞に対する再生および回復活性を示し、従って、化粧および皮膚用調剤中のエネルギー源および老化防止剤として使用することができる。