【手続補正書】
【提出日】平成31年4月4日(2019.4.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１の核酸塩基３１６２〜３１８４の等しい長さの部分と相補的な少なくとも８個の連続した核酸塩基の部分を含む核酸塩基配列を有する１２〜３０個の連結したヌクレオシドから成る修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、該修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列が、配列番号１と少なくとも８０％相補的である、上記化合物。
【請求項２】
ｉ）修飾オリゴヌクレオチドが、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２４、１６〜２４、１７〜２４、１８〜２４、１９〜２４、２０〜２４、１９〜２２、２０〜２２、１６〜２０、１６または２０個の連結したヌクレオシドから成る；又は
ｉｉ）修飾オリゴヌクレオチドが、配列番号１の等しい長さの部分と相補的な少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０の連続した核酸塩基の部分を含む核酸塩基配列を含む、
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列が、配列番号１と少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相補的である、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
１２〜３０個の連結したヌクレオシドから成り、配列番号３６の少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、または２０個の連続した核酸塩基を含む、核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項５】
（ｉ）配列番号２３、３６、３７の核酸塩基配列のいずれかの少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、または２０個の連続した核酸塩基；又は
（ｉｉ）配列番号６３、７７の核酸塩基配列のいずれかの少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６個の連続した核酸塩基、
を含む核酸塩基配列を有する１２〜３０個の連結したヌクレオシドから成る修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項６】
ｉ）修飾オリゴヌクレオチドが一本鎖である；及び／又は
ｉｉ）少なくとも１つのヌクレオシド間結合が修飾ヌクレオシド間結合である、
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
ｉ）少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合がホスホロチオエートヌクレオシド間結合である；又は
ｉｉ）修飾ヌクレオシド間結合のそれぞれがホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、
請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも１つの修飾糖を含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
ｉ）少なくとも１つの修飾糖が二環糖である；又は。
ｉｉ）少なくとも１つの修飾糖が、２’−Ｏ−メトキシエチル、拘束エチル、３’−フルオロ−ＨＮＡ、または４’−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−２’架橋を含み、ここでｎが１または２である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
少なくとも１つのヌクレオシドが修飾核酸塩基を含み、場合により、該核酸塩基が５−メチルシトシンである、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
修飾オリゴヌクレオチドが、１２〜３０個の連結したヌクレオシドから成り、
ａ．連結したデオキシヌクレオシドから成るギャップセグメント、
ｂ．連結したヌクレオシドから成る５’ウイングセグメント、及び
ｃ．連結したヌクレオシドから成る３’ウイングセグメントを含み、
該ギャップセグメントが、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが修飾糖を含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
ｉ）修飾オリゴヌクレオチドが１６〜２０個の連結したヌクレオシドから成る；又は
ｉｉ）修飾オリゴヌクレオチドが、２０個の連結したヌクレオシドから成り、
ａ．１０個の連結したデオキシヌクレオシドから成るギャップセグメント、
ｂ．５個の連結したヌクレオシドから成る５’ウイングセグメント、及び
ｃ．５個の連結したヌクレオシドから成る３’ウイングセグメントを含み、
該ギャップセグメントが、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、少なくとも１つのヌクレオシド間結合がホスホロチオエート結合であり、各シトシン残基が５−メチルシトシンである、
請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
配列番号３６の少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する２０個の連結したヌクレオシドから成る修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、該修飾オリゴヌクレオチドが、
ａ．１０個の連結したデオキシヌクレオシドから成るギャップセグメント、
ｂ．５個の連結したヌクレオシドから成る５’ウイングセグメント、
ｃ．５個の連結したヌクレオシドから成る３’ウイングセグメント、及び
ｄ．ＧａｌＮＡｃ共役体を含み、
該ギャップセグメントが、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、少なくとも１つのヌクレオシド間結合がホスホロチオエート結合であり、各シトシン残基が５−メチルシトシンである、上記化合物。
【請求項１４】
配列番号７７の少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する１６個の連結したヌクレオシドから成る修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、該修飾オリゴヌクレオチドが、
ａ．９個の連結したデオキシヌクレオシドから成るギャップセグメント、
ｂ．３個の連結したヌクレオシドから成る５’ウイングセグメント、
ｃ．４個の連結したヌクレオシドから成る３’ウイングセグメント、及び
ｄ．ＧａｌＮＡｃ共役体を含み、
該ギャップセグメントが、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが修飾糖を含み、各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエート結合であり、各シトシン残基が５−メチルシトシンである、上記化合物。
【請求項１５】
以下の式：ｍＣｅｓ  Ｔｅｏ  Ｔｅｏ  Ｔｅｏ  Ａｅｏ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  ｍＣｄｓ  ｍＣｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ｇｄｓ  Ｇｄｓ  Ｇｄｓ  ｍＣｅｏ  Ａｅｏ  Ｇｅｓ  ｍＣｅｓ  Ｔｅ（配列番号３６）に従う修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、式中、
Ａ＝アデニン、
ｍＣ＝５−メチルシトシン、
Ｇ＝グアニン、
Ｔ＝チミン、
ｅ＝２’−Ｏ−メトキシエチル修飾ヌクレオシド、
ｄ＝２’−デオキシヌクレオシド、
ｓ＝ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、上記化合物。
【請求項１６】
以下の式：ｍＣｋｓ  Ａｅｓ  Ｇｋｓ  ｍＣｄｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  Ａｄｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  ｍＣｄｓ  ｍＣｄｓ  Ａｅｓ  Ａｅｓ  Ａｋｓ  Ｇｋ（配列番号７７）に従う修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、式中、
Ａ＝アデニン、
ｍＣ＝５−メチルシトシン、
Ｇ＝グアニン、
Ｔ＝チミン、
ｅ＝２’−Ｏ−メトキシエチル修飾ヌクレオシド、
ｄ＝２’−デオキシヌクレオシド、
ｓ＝ホスホロチオエートヌクレオシド間結合、
ｋ＝拘束エチルである、上記化合物。
【請求項１７】
共役ＧａｌＮＡｃ部分をさらに含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１８】
以下の式：
【化１】
2018511307.tif 000001
（配列番号３６）
又はその塩に従う、化合物。
【請求項１９】
以下の式：
【化２】
2018511307.tif 000002
（配列番号７７）
又はその塩に従う、化合物。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物及び薬学的に許容可能な担体もしくは希釈剤を含む、組成物。
【請求項２１】
治療に使用するための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物及び薬学的に許容可能な担体もしくは希釈剤を含む、組成物。
【請求項２２】
薬学的に許容可能な担体もしくは希釈剤がリン酸緩衝生理食塩水である、請求項２０又は２１に記載の組成物。
【請求項２３】
医薬品の調製に使用するための、請求項１〜１９のいずれか１項の化合物を含む、組成物。
【請求項２４】
細胞、組織、臓器または動物におけるＴＭＰＲＳＳ６を減少させる際に使用するための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２５】
動物における、鉄蓄積を減少し、ヘプシジン発現レベルを増加し、かつ／またはトランスフェリンの飽和度を減少するために使用するための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２６】
動物における過剰鉄蓄積に関連する疾患、障害または病態を治療し、予防し、またはその進行を遅らせる際に使用するための、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物であって、場合により、該疾患、障害または病態が、赤血球増加症、ヘモクロマトーシスまたは貧血である、上記化合物。
【請求項２７】
前記貧血が、遺伝性貧血、骨髄異形成症候群または重症慢性溶血であり、場合により、該遺伝性貧血が、鎌状赤血球貧血、サラセミア、ファンコニー貧血、ダイアモンド・ブラックファン貧血、シュワックマン・ダイアモンド症候群、赤血球膜傷害、グルコース−６−リン酸脱水素酵素欠損症、または遺伝性出血性毛細血管拡張症である、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
前記サラセミアがβ‐サラセミアである、請求項２７に記載の化合物。
【請求項２９】
配列番号３６の核酸塩基配列を有する２０個の連結したヌクレオシドから成る一本鎖修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、該修飾オリゴヌクレオチドが、
ａ．１０個の連結したデオキシヌクレオシドから成るギャップセグメント、
ｂ．５個の連結したヌクレオシドから成る５’ウイングセグメント、
ｃ．５個の連結したヌクレオシドから成る３’ウイングセグメント、及び
ｄ．ＧａｌＮＡｃ共役体を含み、
該ギャップセグメントが、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、少なくとも１つのヌクレオシド間結合がホスホロチオエート結合であり、各シトシン残基が５−メチルシトシンである、上記化合物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４６４】
血清鉄及びトランスフェリン飽和分析
１４の処理群のそれぞれの４匹の対象の平均値を以下の表３１に示す。表３１に示されるように、血清鉄レベル及びトランスフェリン飽和（「Ｔｆ  ｓａｔ」）は、対照群と比較して、処理群において８６日目に減少した。
【表３２】
2018511307.tif 000003
ある態様において、本発明は以下であってもよい。
［態様１］配列番号１の核酸塩基３１６２〜３１８４の等しい長さの部分と相補的な少なくとも８個の連続した核酸塩基の部分を含む核酸塩基配列を有する１２〜３０個の連結したヌクレオシドから成る修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列が、配列番号１と少なくとも８０％相補的である、前記化合物。
［態様２］前記修飾オリゴヌクレオチドが、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２４、１６〜２４、１７〜２４、１８〜２４、１９〜２４、２０〜２４、１９〜２２、２０〜２２、１６〜２０、１６または２０個の連結したヌクレオシドから成る、態様１に記載の化合物。
［態様３］前記修飾オリゴヌクレオチドが、配列番号１の等しい長さの部分と相補的な少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０の連続した核酸塩基の部分を含む核酸塩基配列を含む、態様１に記載の化合物。
［態様４］前記修飾オリゴヌクレオチドの核酸塩基配列が、配列番号１と少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相補的である、先行態様のいずれかに記載の化合物。
［態様５］配列番号６３、７７の核酸塩基配列のいずれかの少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６個の連続した核酸塩基を含む、核酸塩基配列を有する１２〜３０個の連結したヌクレオシドから成る修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
［態様６］配列番号２３、３６、３７の核酸塩基配列のいずれかの少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、または２０個の連続した核酸塩基を含む、核酸塩基配列を有する１２〜３０個の連結したヌクレオシドから成る修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
［態様７］１２〜３０個の連結したヌクレオシドから成り、配列番号３６の核酸塩基配列の少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、または２０個の連続した核酸塩基を含む、核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
［態様８］前記修飾オリゴヌクレオチドが、一本鎖である、前記態様のいずれかに記載の化合物。
［態様９］少なくとも１つのヌクレオシド間結合が、修飾ヌクレオシド間結合である、先行態様のいずれかに記載の化合物。
［態様１０］少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、態様９に記載の化合物。
［態様１１］修飾ヌクレオシド間結合のそれぞれが、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、態様９に記載の化合物。
［態様１２］前記修飾オリゴヌクレオチドが、少なくとも１つの修飾糖を含む、先行態様のいずれかに記載の化合物。
［態様１３］少なくとも１つの修飾糖が、二環糖である、態様１２に記載の化合物。
［態様１４］少なくとも１つの修飾糖が、２’−Ｏ−メトキシエチル、拘束エチル、３’−フルオロ−ＨＮＡ、または４’−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−２’架橋を含み、ここでｎが１または２である、態様１２に記載の化合物。
［態様１５］少なくとも１つのヌクレオシドが、修飾核酸塩基を含む、先行態様のいずれかに記載の化合物。
［態様１６］前記核酸塩基が、５−メチルシトシンである、態様１５に記載の化合物。
［態様１７］前記修飾オリゴヌクレオチドが、１２〜３０個の連結したヌクレオシドから成り、
ａ．  連結したデオキシヌクレオシドから成るギャップセグメント、
ｂ．  連結したヌクレオシドから成る５’ウイングセグメント、及び
ｃ．  連結したヌクレオシドから成る３’ウイングセグメントを含み、
前記ギャップセグメントが、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが修飾糖を含む、先行態様のいずれかに記載の化合物。
［態様１８］前記修飾オリゴヌクレオチドが、１６〜２０個の連結したヌクレオシドから成る、態様１７に記載の方法。
［態様１９］前記修飾オリゴヌクレオチドが、２０個の連結したヌクレオシドから成り、
ａ．１０個の連結したデオキシヌクレオシドから成るギャップセグメント、
ｂ．５個の連結したヌクレオシドから成る５’ウイングセグメント、及び
ｃ．５個の連結したヌクレオシドから成る３’ウイングセグメントを含み、
前記ギャップセグメントが、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが、２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、少なくとも１つのヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合であり、各シトシン残基が、５−メチルシトシンである、態様１７に記載の化合物。
［態様２０］配列番号３６の少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する２０個の連結したヌクレオシドから成る修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、
ａ．１０個の連結したデオキシヌクレオシドから成るギャップセグメント、
ｂ．５個の連結したヌクレオシドから成る５’ウイングセグメント、
ｃ．５個の連結したヌクレオシドから成る３’ウイングセグメント、及び
ｄ．ＧａｌＮＡｃ共役体を含み、
前記ギャップセグメントが５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、少なくとも１つのヌクレオシド間結合がホスホロチオエート結合であり、各シトシン残基が５−メチルシトシンである、前記化合物。
［態様２１］配列番号７７の少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する１６個の連結したヌクレオシドから成る修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、前記修飾オリゴヌクレオチドが、
ａ．９個の連結したデオキシヌクレオシドから成るギャップセグメント、
ｂ．３個の連結したヌクレオシドから成る５’ウイングセグメント、
ｃ．４個の連結したヌクレオシドから成る３’ウイングセグメント、及び
ｄ．ＧａｌＮＡｃ共役体を含み、
前記ギャップセグメントが５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが修飾糖を含み、各ヌクレオシド間結合がホスホロチオエート結合であり、各シトシン残基が５−メチルシトシンである、前記化合物。
［態様２２］以下の式：ｍＣｅｓ  Ｔｅｏ  Ｔｅｏ  Ｔｅｏ  Ａｅｏ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  ｍＣｄｓ  ｍＣｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ｇｄｓ  Ｇｄｓ  Ｇｄｓ  ｍＣｅｏ  Ａｅｏ  Ｇｅｓ  ｍＣｅｓ  Ｔｅ（配列番号３６）に従う修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、式中、
Ａ＝アデニン、
ｍＣ＝５−メチルシトシン、
Ｇ＝グアニン、
Ｔ＝チミン、
ｅ＝２’−Ｏ−メトキシエチル修飾ヌクレオシド、
ｄ＝２’−デオキシヌクレオシド、
ｓ＝ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、前記化合物。
［態様２３］以下の式：ｍＣｋｓ  Ａｅｓ  Ｇｋｓ  ｍＣｄｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  Ａｄｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  ｍＣｄｓ  ｍＣｄｓ  Ａｅｓ  Ａｅｓ  Ａｋｓ  Ｇｋ（配列番号７７）に従う修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物であって、式中、
Ａ＝アデニン、
ｍＣ＝５−メチルシトシン、
Ｇ＝グアニン、
Ｔ＝チミン、
ｅ＝２’−Ｏ−メトキシエチル修飾ヌクレオシド、
ｄ＝２’−デオキシヌクレオシド、
ｓ＝ホスホロチオエートヌクレオシド間結合、
ｋ＝拘束エチルである、前記化合物。
［態様２４］共役ＧａｌＮＡｃ部分をさらに含む、先行態様のいずれかに記載の化合物。
［態様２５］以下の式に従う修飾オリゴヌクレオチド。
【化２７】
2018511307.tif 000004
［態様２６］以下の式に従う修飾オリゴヌクレオチド。
【化２８】
2018511307.tif 000005
［態様２７］先行態様のいずれかに記載の化合物もしくは修飾オリゴヌクレオチド、またはその塩、及び薬学的に許容可能な担体もしくは希釈剤を含む、組成物。
［態様２８］治療に使用するための、先行態様のいずれかに記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチドを含む、組成物。
［態様２９］医薬品の調製に使用するための、先行態様のいずれかに記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチドを含む、組成物。
［態様３０］細胞、組織、臓器または動物におけるＴＭＰＲＳＳ６を減少させる際に使用するための、先行態様のいずれかに記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチド。
［態様３１］動物における、鉄蓄積を減少し、ヘプシジン発現レベルを増加し、かつ／またはトランスフェリンの飽和度を減少するために使用するための、先行態様のいずれかに記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチド。
［態様３２］動物における過剰鉄蓄積に関連する疾患、障害または病態を治療し、予防し、またはその進行を遅らせる際に使用するための、先行態様のいずれかに記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチド。
［態様３３］前記疾患、障害または病態が、赤血球増加症、ヘモクロマトーシスまたは貧血である、態様３２に記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチド。
［態様３４］前記貧血が、遺伝性貧血、骨髄異形成症候群または重症慢性溶血である、態様３３に記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチド。
［態様３５］前記遺伝性貧血が、鎌状赤血球貧血、サラセミア、ファンコニー貧血、ダイアモンド・ブラックファン貧血、シュワックマン・ダイアモンド症候群、赤血球膜傷害、グルコース−６−リン酸脱水素酵素欠損症、または遺伝性出血性毛細血管拡張症である、態様３４に記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチド。
［態様３６］前記サラセミアが、β‐サラセミアである、態様３５に記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチド。