【手続補正書】
【提出日】平成31年4月23日(2019.4.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第ＸＩＩ因子（ハーゲマン因子）（Ｆ１２）の発現を阻害するための二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）剤であって、前記ｄｓＲＮＡ剤がセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、前記センス鎖が、配列番号９のヌクレオチド配列と３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含み、且つ前記アンチセンス鎖が、配列番号１０のヌクレオチド配列と３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含み、
ここで、センス鎖及びアンチセンス鎖が、以下のヌクレオチド配列と３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含み：
（ａ）ＡＡＣＵＣＡＡＵＡＡＡＧＵＧＣＵＵＵＧＡＡ（配列番号８９１）およびＵＵＣＡＡＡＧＣＡＣＵＵＵＡＵＵＧＡＧＵＵＵＣ（配列番号８９９）；
（ｂ）ＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＡＧＵＧＡＡＡＧＡＡ（配列番号３９３）およびＵＵＣＵＵＵＣＡＣＵＵＵＣＵＵＧＧＧＣＵＣＣＡ（配列番号４４３）；および
（ｃ）ＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＡＧＵＧＡＡＡＧＡＣＡ（配列番号３９４）およびＵＧＵＣＵＵＵＣＡＣＵＵＵＣＵＵＧＧＧＣＵＣＣ（配列番号４４４）；
ここで、ｄｓＲＮＡ剤が少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含む、ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項２】
第ＸＩＩ因子（ハーゲマン因子）（Ｆ１２）の発現を阻害するための二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）剤であって、前記ｄｓＲＮＡ剤がセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、前記アンチセンス鎖が、
（ａ）ＡＤ−６７２４４（ＵＵＣＡＡＡＧＣＡＣＵＵＵＡＵＵＧＡＧＵＵＵＣ（配列番号８９９））；
（ｂ）ＡＤ−６６１７６（ＵＵＣＵＵＵＣＡＣＵＵＵＣＵＵＧＧＧＣＵＣＣＡ（配列番号４４３））；および
（ｃ）ＡＤ−６６１２５（ＵＧＵＣＵＵＵＣＡＣＵＵＵＣＵＵＧＧＧＣＵＣＣ（配列番号４４４））のアンチセンス配列のいずれか１つと３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含む相補性領域を含み、
ここでｄｓＲＮＡ剤が少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含む、ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項３】
第ＸＩＩ因子（ハーゲマン因子）（Ｆ１２）の発現を阻害するための二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）剤であって、前記ｄｓＲＮＡ剤が、二本鎖領域を形成するセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、
前記センス鎖が、配列番号９のヌクレオチド配列と３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含み、且つ前記アンチセンス鎖が、配列番号１０のヌクレオチド配列と３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含み、
ここで、センス鎖及びアンチセンス鎖が、以下のヌクレオチド配列と３つ以下のヌクレオチドだけ異なる少なくとも１５連続ヌクレオチドを含み：
（ａ）ＡＡＣＵＣＡＡＵＡＡＡＧＵＧＣＵＵＵＧＡＡ（配列番号８９１）およびＵＵＣＡＡＡＧＣＡＣＵＵＵＡＵＵＧＡＧＵＵＵＣ（配列番号８９９）；
（ｂ）ＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＡＧＵＧＡＡＡＧＡＡ（配列番号３９３）およびＵＵＣＵＵＵＣＡＣＵＵＵＣＵＵＧＧＧＣＵＣＣＡ（配列番号４４３）；および
（ｃ）ＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＡＧＵＧＡＡＡＧＡＣＡ（配列番号３９４）およびＵＧＵＣＵＵＵＣＡＣＵＵＵＣＵＵＧＧＧＣＵＣＣ（配列番号４４４）、
前記センス鎖のヌクレオチドの実質的に全て及び前記アンチセンス鎖のヌクレオチドの実質的に全てが修飾ヌクレオチドであり、且つ
前記センス鎖が、３’末端に結合したリガンドにコンジュゲートされている、ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項４】
前記センス鎖のヌクレオチドの全て及び前記アンチセンス鎖のヌクレオチドの全てが修飾を含む、請求項３に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項５】
前記修飾ヌクレオチドの少なくとも１つが、デオキシ−ヌクレオチド、３’末端デオキシ−チミン（ｄＴ）ヌクレオチド、２’−Ｏ−メチル修飾ヌクレオチド、２’−フルオロ修飾ヌクレオチド、２’−デオキシ修飾ヌクレオチド、固定ヌクレオチド、非固定ヌクレオチド、立体配座的に制限されたヌクレオチド、拘束エチルヌクレオチド、非塩基性ヌクレオチド、２’−アミノ修飾ヌクレオチド、２’−Ｏ−アリル修飾ヌクレオチド、２’−Ｃ−アルキル修飾ヌクレオチド、２’−ヒドロキシル修飾ヌクレオチド、２’−メトキシエチル修飾ヌクレオチド、２’−Ｏ−アルキル修飾ヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ホスホルアミデート、非天然塩基を含むヌクレオチド、テトラヒドロピラン修飾ヌクレオチド、１，５−アンヒドロヘキシトール修飾ヌクレオチド、シクロヘキセニル修飾ヌクレオチド、ホスホロチオエート基を含むヌクレオチド、メチルホスホネート基を含むヌクレオチド、５’−ホスフェートを含むヌクレオチド、及び５’−ホスフェート模倣体を含むヌクレオチドからなる群から選択される、請求項３または４に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項６】
前記修飾ヌクレオチドの少なくとも１つが、２’−Ｏ−メチル及び２’フルオロ修飾からなる群から選択される、請求項３または４に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項７】
少なくとも１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を更に含む、請求項５又は６に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項８】
６〜８つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、請求項７に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項９】
前記相補性領域が少なくとも１７ヌクレオチド長である、１９〜３０ヌクレオチド長である、２１ヌクレオチド長である、２１〜２３ヌクレオチド長である、または１９ヌクレオチド長である、請求項１または２に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１０】
各鎖が３０ヌクレオチド長以下である、または各鎖が独立して１９〜３０ヌクレオチド長である、もしくは１９〜２５ヌクレオチド長である、請求項１〜９のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１１】
少なくとも一方の鎖が少なくとも１ヌクレオチドまたは少なくとも２ヌクレオチドの３’オーバーハングを含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１２】
リガンドを更に含む、請求項１または２に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１３】
前記リガンドが前記ｄｓＲＮＡ剤の前記センス鎖の３’末端にコンジュゲートされる、請求項１２に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１４】
前記リガンドがＮ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）誘導体である、請求項３または１３に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１５】
前記リガンドが、
【化１】
2018519797.tif 000001
である、請求項１４に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１６】
前記ｄｓＲＮＡ剤が、以下の概略図
【化２】
2018519797.tif 000002
に示されるとおりのリガンドにコンジュゲートされ、及び、式中ＸはＯ又はＳである、請求項１５に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１７】
前記ＸがＯである、請求項１６に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１８】
前記薬剤が、（ａ）ＡＤ−６６１７６（ＧｆｓａｓＧｆｃＣｆｃＡｆａＧｆＡｆＡｆａＧｆｕＧｆａＡｆａＧｆａＡｆＬ９６（配列番号４９３）およびｕｓＵｆｓｃＵｆｕＵｆｃＡｆｃＵｆｕｕｃＵｆｕＧｆｇＧｆｃＵｆｃｓｃｓａ（配列番号５４３））、
（ｂ）ＡＤ−６６１２５（ＡｆｓｇｓＣｆｃＣｆａＡｆｇＡｆＡｆＡｆｇＵｆｇＡｆａＡｆｇＡｆｃＡｆＬ９６（配列番号９０９）およびｕｓＧｆｓｕＣｆｕＵｆｕＣｆａＣｆｕｕｕＣｆｕＵｆｇＧｆｇＣｆｕｓｃｓｃ（配列番号９１７））、および
（ｃ）ＡＤ−６７２４４（ａｓａｓｃｕｃａＡｆｕＡｆＡｆＡｆｇｕｇｃｕｕｕｇａａＬ９６（配列番号９０７）およびｕｓＵｆｓｃａａＡｆｇＣｆＡｆｃｕｕｕＡｆｕＵｆｇａｇｕｕｓｕｓｃ（配列番号９１５））；
ここで、ａ、ｃ、ｇ、およびｕが、それぞれ２’−Ｏ−メチルアデノシン−３’−リン酸、２’−Ｏ−メチルシチジン−３’−リン酸、２’−Ｏ−メチルグアノシン−３’−リン酸、および２’−Ｏ−メチルウリジン−３’−リン酸であり；
Ａｆ、Ｃｆ、Ｇｆ、およびＵｆがそれぞれ２’−フルオロアデノシン−３’−リン酸、２’−フルオロシチジン−３’−リン酸、２’−フルオログアノシン−３’−リン酸、および２’−フルオロウリジン−３’−リン酸であり；
ｓがホスホロチオエート結合であり；かつ
Ｌ９６がＮ−［トリス（ＧａｌＮＡｃ−アルキル）−アミドデカノイル）］−４−ヒドロキシプロリノールＨｙｐ−（ＧａｌＮＡｃ−アルキル）３
からなる群から選択される、請求項１に記載のｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含有する細胞。
【請求項２０】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、Ｆ１２遺伝子の発現を阻害するための医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤と脂質製剤とを含む医薬組成物。
【請求項２２】
インビトロで細胞におけるＦ１２発現を阻害する方法であって、
（ａ）請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤、又は請求項２０もしくは２２に記載の医薬組成物に前記細胞を接触させる工程と；
（ｂ）Ｆ１２遺伝子のｍＲＮＡ転写物の分解を得るのに十分な時間にわたって工程（ａ）で産生された前記細胞を維持し、それによって前記細胞における前記Ｆ１２遺伝子の発現を阻害する工程と、を含む方法。
【請求項２３】
前記Ｆ１２発現が、少なくとも約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％、約９８％又は約１００％阻害される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、接触活性化経路遺伝子の発現の低下から利益を受け得る疾患又は障害を有する対象を治療するための医薬組成物。
【請求項２５】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、接触活性化経路遺伝子の発現の低下から利益を受け得る疾患又は障害を有する対象の少なくとも１つの症状を予防するための医薬組成物。
【請求項２６】
前記対象への前記ｄｓＲＮＡの投与により、ブラジキニンレベルの低下又は凝固第ＸＩＩ因子活性の低下が生じる、請求項２４又は２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記障害が接触活性化経路関連疾患である、請求項２４又は２５に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記接触活性化経路関連疾患が血栓形成傾向、遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）、フレッチャー因子欠乏症または本態性高血圧症である、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記少なくとも１つの症状が血管浮腫発作または血栓形成である、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記対象がヒトである、請求項２４又は２５に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
抗ＫＬＫＢ１抗体、又はその抗原結合断片を前記対象に投与する処置において使用される、請求項２４〜３０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記対象のブラジキニン及び／又は凝固第ＸＩＩ因子レベルを計測する処置において使用される、請求項２４又は２５に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、血栓形成傾向を有する対象を治療するための医薬組成物。
【請求項３４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、血栓形成傾向を有する対象の少なくとも１つの症状を予防するための医薬組成物。
【請求項３５】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）を有する対象を治療するための医薬組成物。
【請求項３６】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）を有する対象の少なくとも１つの症状を予防するための医薬組成物。
【請求項３７】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、対象におけるＦ１２の発現を阻害するための医薬組成物。
【請求項３８】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、血栓形成リスクのある対象の血栓形成を予防するための医薬組成物。
【請求項３９】
前記血栓形成リスクのある対象が接触活性化経路関連疾患又は障害を有する、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記接触活性化経路関連疾患が血栓形成傾向、遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）、フレッチャー因子欠乏症、または本態性高血圧症である、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記血栓形成リスクのある対象が、外科患者；内科患者；妊娠中の対象；分娩後の対象；血栓の既往がある対象；ホルモン補充療法を受けている対象；長時間座っている対象；及び肥満の対象からなる群から選択される、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のｄｓＲＮＡ剤を含む、遺伝性血管浮腫（ＨＡＥ）を有する対象の血管浮腫発作を予防するための医薬組成物。