【手続補正書】
【提出日】平成31年3月27日(2019.3.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
グアユールおよび/またはグアユール系植物の樹脂から、少なくとも1種のイソプレン系成分を分離するための方法であって、以下の工程：
a) グアユールおよび/またはグアユール系の脱脂された樹脂を準備する工程、
b) 前記脱脂された樹脂を、相互に不混和性の溶媒を用いる液-液型の分配処理に掛け、このようにしてイソプレン系成分のグアユリンA、グアユリンBおよびアルゲンタチンBを含有する非極性抽出液と、イソプレン系成分のアルゲンタチンA、アルゲンタチンCおよびアルゲンタチンDを含有する極性抽出液とを得る工程、および
c) このようにして得られた前記極性抽出液からおよび/または前記非極性抽出液から、少なくとも1種のイソプレン系成分を分離する工程、
を含み、工程c)が、前記極性抽出液を、相互に不混和性の溶媒を用いる液-液型の分配処理に掛ける工程、および/または前記非極性抽出液を、固-液型の分配処理に掛ける工程を含む、前記方法。
【請求項２】
前記少なくとも1種のイソプレン系成分が、グアユリンA、グアユリンB、アルゲンタチンA、アルゲンタチンB、アルゲンタチンC、アルゲンタチンD、およびこれらの混合物を含む群の中で選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
工程a)の前記脱脂された樹脂が、グアユールまたはグアユール系植物の粗抽出液を脱脂する工程によって得られる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
工程b)において、前記相互に不混和性の溶媒が、極性溶媒および非極性溶媒を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
工程c)において、前記固-液型の分配処理は、相互に混和性の2種の溶媒の組合せ中に溶解させた、工程b)で得られた前記非極性抽出液を、固体マトリックスに対して吸着に付す工程、およびこのようにして得た前記固体マトリックスを、相互に混和性の2種の溶媒の組合せを用いる処理に掛け、このようにしてグアユリンAおよびグアユリンBの混合物を含む溶液と、アルゲンタチンBを含む固体マトリックスとを得る工程を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記アルゲンタチンBを含む固体マトリックスを、極性溶媒を用いる更なる処理に掛け、このようにしてアルゲンタチンBの溶液を得る、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
工程c)において、前記液-液型の分配処理が、工程b)において得られた前記極性抽出液を、極性溶媒と非極性溶媒との組合せ中での分離処理に掛け、このようにしてアルゲンタチンAを含む有機相と、アルゲンタチンCおよびアルゲンタチンDの混合物を含む水性相とを得る工程を含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
工程c)の前記液-液型の分配工程において、前記非極性溶媒が、シクロヘキサン、n-ヘキサン、石油エーテル、およびこれらの組合せを含む群の中で選択され、前記極性溶媒が、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、tert-ブタノール、およびこれらの組合せを含む群の中で選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
工程c)の後に、少なくとも1種の前記イソプレン系成分を精製する少なくとも一つの工程d)が続く、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
精製工程d)が、少なくとも一つのイソプレン系成分を結晶化させ、このようにして前記樹脂の少なくとも一つのイソプレン系成分を実質的に純粋な結晶形態で得る工程を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
工程d)が、工程c)において得られた前記グアユリンAとグアユリンBとの混合物を、冷却しつつ、非極性溶媒を用いる処理により、グアユリンAの沈殿処理に掛け、このようにして精製されたグアユリンAの沈殿と、グアユリンAおよびグアユリンBの混合物を含む上澄みとを得る工程d1)を含む、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記工程d)が、工程c)において得られた前記アルゲンタチンBを、冷却しつつ、非極性溶媒を用いる沈殿処理に掛け、このようにして精製されたアルゲンタチンBの沈殿を得る工程d2)を含む、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記工程d)が、工程c)において得られた前記アルゲンタチンAを、冷却しつつ、非極性溶媒を用いる沈殿処理に掛け、このようにして精製されたアルゲンタチンAの沈殿を得る工程d3)を含む、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記工程d)が、工程c)において得られたアルゲンタチンCとアルゲンタチンDとの前記混合物を、冷却しつつ、非極性溶媒を用いる、アルゲンタチンDの沈殿処理に掛け、このようにして精製されたアルゲンタチンDの沈殿と、アルゲンタチンCを含む上澄みとを得る工程d4)を含む、請求項９〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記工程d4)の後に、前記アルゲンタチンCを含む上澄みを、前記溶媒の蒸発処理に掛け、残渣を、冷却しつつ、非極性溶媒中に溶解し、このようにして精製されたアルゲンタチンCの沈殿を得る工程d5)が続く、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記工程c)が、工程d1)において得られた前記グアユリンAおよび/または工程c)において得られたグアユリンAとグアユリンBとの前記混合物を塩基性加水分解反応に掛け、このようにしてパルテニオールを含む溶液を得ることを含む工程e1)を伴う、請求項５〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記工程e1)が、このようにして得られた前記パルテニオールをエステル化し、このようにしてグアユリンBを含む溶液を得る工程e2)を伴う、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
このようにして工程e2)において得られたグアユリンBを含む前記溶液を蒸発処理に掛け、残渣を非極性溶媒に溶解させ、このようにして精製されたグアユリンBの沈殿を得る、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記工程c)が、工程c)および/または工程d2)において得られた前記アルゲンタチンBの還元反応を含む工程e3)を伴い、このようにしてアルゲンタチンDを含む溶液を得る、請求項５〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記還元反応の後で、このようにして得られたアルゲンタチンDを含む前記溶液を蒸発処理に掛け、残渣を非極性溶媒中に溶解し、このようにして精製されたアルゲンタチンDの沈殿を得る、請求項１９に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
実施例12(比較例)：グアユールゴムの木由来の脱蝋処理されていない抽出液から誘導されたグアユリンおよびアルゲンタチンの結晶化
a. グアユリンAおよびアルゲンタチンB：比較例9において記載された液-液分配処理により得られた2.5gの非極性抽出液を、10mLのn-ヘキサンに溶解させた。この溶液を-23℃に冷却(ドライアイス/アセトン浴内)することによっては、期待されるグアユリンAおよび/またはアルゲンタチンB何れの沈殿の形成も観測できなかった。
b. アルゲンタチンA：比較例11において記載された液-液分配処理工程から得た有機相を由来とする300mgの抽出液を、5mLのエチルエーテルに溶解させた。この溶液を-23℃に冷却(ドライアイス/アセトン浴内)し、また結果として非効率的なアルゲンタチンAの沈殿をもたらす、該溶液のかすかな濁りが観測されるまでずっと、n-ヘキサンを徐々に添加した。
c. アルゲンタチンCおよびD：比較例11において記載された液-液分配処理工程から得られた水性相由来の100mgの抽出液を、2mLの石油エーテルに溶解させた。該溶液を-23℃に冷却(ドライアイス/アセトン浴内で)した後に、沈殿の形成は全く観測されなかった。
これら比較例は、本発明の分離法から必要不可欠の脱蝋段階を省くことが、結果として精製された形状にあるグアユリンまたはグアユリン-様の樹脂に係るイソプレン系成分を得る際に、該方法の有効性を徹底的に減じてしまうことを明らかに立証している。
本発明の好ましい態様は、下記の通りである。
〔１〕グアユールおよび/またはグアユール系植物の樹脂から、少なくとも1種のイソプレン系成分を分離するための方法であって、以下の工程：
a) グアユールおよび/またはグアユール系の脱脂された樹脂を準備する工程、
b) 前記脱脂された樹脂を、相互に不混和性の溶媒を用いる液-液型の分配処理に掛け、このようにしてイソプレン系成分のグアユリンA、グアユリンBおよびアルゲンタチンBを含有する非極性抽出液と、イソプレン系成分のアルゲンタチンA、アルゲンタチンCおよびアルゲンタチンDを含有する極性抽出液とを得る工程、および
c) このようにして得られた前記極性抽出液からおよび/または前記非極性抽出液から、少なくとも1種のイソプレン系成分を分離する工程、
を含み、工程c)が、前記極性抽出液を、相互に不混和性の溶媒を用いる液-液型の分配処理に掛ける工程、および/または前記非極性抽出液を、固-液型の分配処理に掛ける工程を含む、前記方法。
〔２〕前記少なくとも1種のイソプレン系成分が、グアユリンA、グアユリンB、アルゲンタチンA、アルゲンタチンB、アルゲンタチンC、アルゲンタチンD、およびこれらの混合物を含む群の中で選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔３〕工程a)の前記脱脂された樹脂が、グアユールまたはグアユール系植物の粗抽出液を脱脂する工程、より好ましくは分別結晶化工程によって得られる、前記〔１〕または〔２〕に記載の方法。
〔４〕工程b)において、前記相互に不混和性の溶媒が、極性溶媒および非極性溶媒を含み、好ましくは、前記極性溶媒が、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、tert-ブタノール、酢酸エチルおよびこれらの組合せ、より好ましくはメタノールと水との溶液を含む群の中で選択され、前記非極性溶媒が、石油エーテル、n-ヘキサンおよびこれらの組合せ、より好ましくは石油エーテルの間で選択される、前記〔１〕〜〔３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔５〕工程c)において、前記固-液型の分配処理は、相互に混和性の2種の溶媒の組合せ中に溶解させた、工程b)で得られた前記非極性抽出液を、固体マトリックスに対して、好ましくは選択的捕捉による吸着に付す工程、およびこのようにして得た前記固体マトリックスを、相互に混和性の2種の溶媒の組合せを用いる処理、好ましくは濯ぎに掛け、このようにしてグアユリンAおよびグアユリンBの混合物を含む溶液と、アルゲンタチンBを含む固体マトリックスとを得る工程を含む、前記〔１〕〜〔４〕のいずれか１項に記載の方法。
〔６〕前記アルゲンタチンBを含む固体マトリックスを、極性溶媒を用いる更なる処理、好ましくは濯ぎに掛け、このようにしてアルゲンタチンBの溶液を得る、前記〔５〕に記載の方法。
〔７〕工程c)において、前記液-液型の分配処理が、工程b)において得られた前記極性抽出液を、極性溶媒と非極性溶媒との組合せ中での分離処理に掛け、このようにしてアルゲンタチンAを含む有機相と、アルゲンタチンCおよびアルゲンタチンDの混合物を含む水性相とを得る工程を含む、前記〔１〕〜〔６〕のいずれか１項に記載の方法。
〔８〕工程c)の前記液-液型の分配工程において、前記非極性溶媒が、シクロヘキサン、n-ヘキサン、石油エーテル、およびこれらの組合せ、より好ましくはシクロヘキサンを含む群の中で選択され、前記極性溶媒が、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、tert-ブタノール、およびこれらの組合せ、好ましくはメタノールおよび水を含む群の中で選択される、前記〔７〕に記載の方法。
〔９〕工程c)の後に、少なくとも1種の前記イソプレン系成分を精製する少なくとも一つの工程d)が続く、前記〔１〕〜〔８〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１０〕精製工程d)が、少なくとも一つのイソプレン系成分を結晶化させ、このようにして前記樹脂の少なくとも一つのイソプレン系成分を実質的に純粋な結晶形態で得る工程を含む、前記〔９〕に記載の方法。
〔１１〕工程d)が、工程c)において得られた前記グアユリンAとグアユリンBとの混合物を、冷却しつつ、好ましくは石油エーテル、n-ヘキサンおよびこれらの組合せ、より好ましくはn-ヘキサンを含む群の中で選択される非極性溶媒を用いる処理により、グアユリンAの沈殿処理に掛け、このようにして精製されたグアユリンAの沈殿と、グアユリンAおよびグアユリンBの混合物を含む上澄みとを得る工程d1)を含み、好ましくは前記精製されたグアユリンAの沈殿を結晶化処理に掛け、このようにして純粋なグアユリンAの結晶を得る、前記〔９〕または〔１０〕に記載の方法。
〔１２〕前記工程d)が、工程c)において得られた前記アルゲンタチンBを、冷却しつつ、好ましくは石油エーテル、n-ヘキサンおよびこれらの組合せ、より好ましくは石油エーテルを含む群の中で選択される非極性溶媒を用いる沈殿処理に掛け、このようにして精製されたアルゲンタチンBの沈殿を得る工程d2)を含み、好ましくは前記精製されたアルゲンタチンBの沈殿を結晶化処理に掛け、このようにして純粋なアルゲンタチンBの結晶を得る、前記〔９〕〜〔１１〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１３〕前記工程d)が、工程c)において得られた前記アルゲンタチンAを、冷却しつつ、好ましくはシクロヘキサン、n-ヘキサン、エチルエーテル、石油エーテル、およびこれらの組合せ、より好ましくはエチルエーテルおよびn-ヘキサンを含む群の中で選択される非極性溶媒を用いる沈殿処理に掛け、このようにして精製されたアルゲンタチンAの沈殿を得る工程d3)を含み、好ましくは前記精製されたアルゲンタチンAの沈殿を結晶化処理に掛け、このようにして純粋なアルゲンタチンAの結晶を得る、前記〔９〕〜〔１２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１４〕前記工程d)が、工程c)において得られたアルゲンタチンCとアルゲンタチンDとの前記混合物を、冷却しつつ、好ましくは石油エーテル、n-ヘキサンおよびこれらの組合せ、より好ましくは石油エーテルを含む群の中で選択される非極性溶媒を用いる、アルゲンタチンDの沈殿処理に掛け、このようにして精製されたアルゲンタチンDの沈殿およびと、アルゲンタチンCを含む上澄みとを得る工程d4)を含み、好ましくは前記精製されたアルゲンタチンDの沈殿を結晶化処理に掛け、このようにして純粋なアルゲンタチンDの結晶を得る、前記〔９〕〜〔１３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１５〕前記工程d4)の後に、前記アルゲンタチンCを含む上澄みを、前記溶媒の蒸発処理に掛け、残渣を、冷却しつつ、好ましくはシクロヘキサン、石油エーテル、エチルエーテル、n-ヘキサンおよびこれらの組合せ、より好ましくはエチルエーテルを含む群の中で選択される非極性溶媒中に溶解し、このようにして精製されたアルゲンタチンCの沈殿を得る工程d5)が続き、好ましくは前記精製されたアルゲンタチンCの沈殿を結晶化処理に掛け、このようにして純粋なアルゲンタチンCの結晶を得る、前記〔１４〕に記載の方法。
〔１６〕前記工程c)が、工程d1)において得られた前記グアユリンAおよび/または工程c)において得られたグアユリンAとグアユリンBとの前記混合物を塩基性加水分解反応に掛け、このようにしてパルテニオールを含む溶液を得ることを含む工程e1)を伴い、好ましくは前記塩基性加水分解反応を、前記グアユリンAおよび/またはグアユリンAとグアユリンBとの前記混合物ならびに塩基性溶液を含む反応混合物中で行い、好ましくは前記パルテニオールを含む溶液を、冷却しつつ、結晶化処理に掛け、このようにして純粋なパルテニオールを得る、前記〔５〕〜〔１５〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１７〕前記工程e1)が、このようにして得られた前記パルテニオールを、好ましくはアニス酸または塩化アニソイルでエステル化し、このようにしてグアユリンBを含む溶液を得る工程e2)を伴う、前記〔１６〕に記載の方法。
〔１８〕このようにして工程e2)において得られたグアユリンBを含む前記溶液を蒸発処理に掛け、残渣を、好ましくはシクロヘキサン、n-ヘキサン、エチルエーテル、石油エーテルおよびこれらの組合せ、より好ましくは石油エーテルを含む群の中で選択される非極性溶媒に溶解させ、このようにして精製されたグアユリンBの沈殿を得、好ましくは前記精製されたグアユリンBの沈殿を、冷却しつつ、結晶化処理に掛け、このようにして純粋なグアユリンBの結晶を得る、前記〔１７〕に記載の方法。
〔１９〕前記工程c)が、工程c)および/または工程d2)において得られた前記アルゲンタチンBの還元反応を含む工程e3)を伴い、好ましくは前記還元反応が、前記アルゲンタチンBと、水素化アルミニウムリチウムLiAlH4または水素化ホウ素ナトリウム、より好ましくは水素化ホウ素ナトリウムNaBH4とを含む反応混合物中で行われ、このようにしてアルゲンタチンDを含む溶液を得る、前記〔５〕〜〔１８〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２０〕前記還元反応の後で、このようにして得られたアルゲンタチンDを含む前記溶液を蒸発処理に掛け、残渣を、好ましくはシクロヘキサン、エチルエーテル、n-ヘキサン、石油エーテルおよびこれらの組合せ、より好ましくは石油エーテルを含む群の中で選択される非極性溶媒中に溶解し、このようにして精製されたアルゲンタチンDの沈殿を得、好ましくは前記精製されたアルゲンタチンDの沈殿を、冷却しつつ、結晶化処理に掛け、このようにして純粋なアルゲンタチンDの結晶を得る、前記〔１９〕に記載の方法。