【手続補正書】
【提出日】平成20年6月23日(2008.6.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  主要な ヌクレオキャプシド(N)タンパク質、ヌクレオキャプシドリン酸タンパク質(P)、大型ポリメラーゼタンパク質(L)，RNAポリメラーゼ伸長因子、及び一部又は完全な組換えRSVゲノムまたはアンチゲノムを含んで成り、前記一部又は完全な組換えRSVゲノムまたはアンチゲノムが、野生型RSVゲノム又はアンチゲノム内の前記RSV遺伝子又はゲノム分節の位置に対してプロモータへ有意的に隣接するか、又はプロモータへ遠位の位置に、位置的に変位される前記組換え型ゲノム又はアンチゲノム内に、1又は複数の変位されたRSV遺伝子又はゲノム分節を有する、単離された感染性呼吸器合胞体ウイルス(RSV)。
【請求項２】  前記一部又は完全な組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内の1又は複数の置換ポリヌクレオチドの欠失又は挿入により、前記1又は複数の変位された遺伝子又はゲノム分節を、プロモータへ有意的に隣接する位置、又はプロモータへ遠位の位置に変位される請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３】  前記ポリヌクレオチド挿入部が、1又は複数のRSV遺伝子又はゲノム分節を含んで成る請求項２記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４】  前記置換ポリヌクレオチドが、RSVのNS1、NS2、N、P、M、M2(ORF1)、M2(ORF2)、L、F及びG遺伝子及びゲノム分節から選択される1又は複数のRSV遺伝子又はゲノム分節、及び前記RSVゲノムの先導部、尾部及び遺伝子間領域、及びその分節を含んで成る請求項２記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５】  野生型RSVゲノム又はアンチゲノム内の前記RSV遺伝子又はゲノム分節の位置に対してプロモータへ有意的に隣接する位置に、前記組換えゲノム又はアンチゲノム内の前記1又は複数の変位されたRSV遺伝子又はゲノム分節を位置的に変位させる組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために、前記置換ポリヌクレオチドを欠失させる請求項２記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６】  組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失された前記置換ポリヌクレオチドが、1又は複数のRSVのNS1、NS2、SH、M2(ORF2)、又はG遺伝子又はそのゲノム分節を含んで成る請求項５記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項７】  RSVのNS1遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８】  RSVのNS2遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項９】  RSVのSH遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項8記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１０】  RSVのM2(ORF2)を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１１】  RSVのG遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１２】  RSVのF及びG遺伝子の両方が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１３】  RSVのNS1及びNS2遺伝子の両方が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１４】  RSVのSH及びNS2遺伝子の両方が組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１５】  RSVのSH,NS1及びNS2遺伝子が全て組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１６】  前記置換ポリヌクレオチドが、1部遺伝子の欠失を含んで成る請求項５記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１７】  前記遺伝子の1部欠失が、SH遺伝子の1部欠失である請求項１６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１８】  前記置換ポリヌクレオチドが、RSV遺伝子下流の非翻訳配列の1又は複数の領域から選択される請求項５記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項１９】  前記置換ポリヌクレオチドが、RSV遺伝子上流の非翻訳配列の1又は複数の領域から選択される請求項５記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２０】  前記置換ポリヌクレオチドが、1又は複数のRSV遺伝子間配列から選択される請求項５記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２１】  前記置換ポリヌクレオチドが、RSVの5’尾部領域内のヌクレオチドから選択される請求項５記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２２】  前記置換ポリヌクレオチドが、RSVの3’の先導部領域内のポリヌクレオチドから選択される請求項５記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２３】  3’先導部から最初の11ヌクレオチド内に配置されたウイルスプロモータの中核部分を除く3’尾部領域の1部分が、欠失される請求項２２記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２４】  前記置換ポリヌクレオチドが、野生型RSVゲノム又はアンチゲノム内の前記RSV遺伝子又はゲノム分節の位置に対してプロモータへ有意的に隣接する位置に、又はプロモータへ遠位な位置に、前記組換えゲノム又はアンチゲノム内の前記1又は複数の変位されたRSV遺伝子又はゲノム分節を位置的に変位させる組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて、付加、置換、又は再配列される請求項２記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２５】  組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて付加、置換、又は再配列された前記置換ポリヌクレオチドが、1つ又は複数のRSVのNS1、NS2、SH、M2(ORF2)、F、及び／又はG遺伝子又はそのゲノム分節を含んで成る請求項２４記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２６】  前記置換ポリヌクレオチドが、RSVのF、G及び/又はSH糖タンパク質、又は免疫遺伝子ドメイン又はそのエピトープをコードする遺伝子又はゲノム分節から選択される請求項２４記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２７】  RSVのF、G及びSHの1又は複数のRSV糖タンパク質遺伝子又はゲノム分節が、前記1又は複数のRSV糖タンパク質遺伝子の野生型遺伝子順位の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する位置に、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内に付加、置換、又は再配列される請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２８】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、Gの野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子順位の位置に、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項２７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項２９】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gを、RSVゲノム又はアンチゲノム内遺伝子順位の位置1に変位する請求項２８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３０】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、Fの野生型遺伝子順位の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子順位の位置に、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項２７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３１】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Fを、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内遺伝子順位の位置1に変位する請求項３０記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３２】  前記RSV糖タンパク質遺伝子G及びFが、G及びＦの野生型遺伝子順位の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子順位の位置に、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項２７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３３】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gを、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内遺伝子順位の位置1に，そして前記RSV糖タンパク質遺伝子Fを、その遺伝子順位の位置2に変位する請求項３２記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３４】  組換えRSVゲノム又はアンチゲノムにおいて、1又は複数のRSVのNS1，NS2，SH，M2(ORF2)又はG遺伝子又はそのゲノム分節が、欠失される請求項２７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３５】  RSVのNS1遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項２７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３６】  RSVのNS2遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項２７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３７】  RSVのSH遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項２７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３８】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、Gの野生型遺伝子順位の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子順位の位置に前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内に，再配列される請求項３７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項３９】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内に，遺伝子順位の位置1に変位される請求項３８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４０】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、Ｆの野生型遺伝子順位の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子順位の位置に対して、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項３７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４１】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Ｆが、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて遺伝子順位の位置1に変位される請求項４０記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４２】  前記RSV糖タンパク質遺伝子G及びFの両方が、G及びFの野生型遺伝子順位の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子順位の位置に前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて、再配列される請求項３７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４３】  前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて、前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、遺伝子順位の位置1に、且つ前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、遺伝子順位の位置2に変位される請求項４２記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４４】  前記RSVのSH及びNS2遺伝子の両方が、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される、請求項２７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４５】  前記RSV糖タンパク質遺伝子G及びFの両方が、G及びFの野生型遺伝子順位の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子順位の位置に前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて、再配列される請求項４４記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４６】  前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて、前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、遺伝子順位の位置1に、且つ前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、遺伝子順位の位置2に変位される請求項４５記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４７】  RSVのSH,SH,NS1及びNS2遺伝子が、前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために全て欠失される、請求項２７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４８】  前記RSV糖タンパク質遺伝子G及びFの両方が、G及びFの野生型遺伝子順位の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子順位の位置に前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて、再配列される請求項４７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項４９】  前記組換え型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて、前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、遺伝子順位の位置1に、そして前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、遺伝子順位の位置2に変位される請求項４８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５０】  ヒト-子牛キメラRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために、1又は複数の不均一遺伝子又は相違するRSVからのゲノム分節により結合された一部又は完全なヒトRSV(HRSV)、又は牛RSV(BRSV)を背景とするゲノム又はアンチゲノムを含んで成る請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５１】  一部又は完全なHRSV、又はBRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノム内の同等の遺伝子又はゲノム分節に野生型遺伝子順位の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する位置か、又はプロモータへ遠位の位置に、不均一遺伝子又はゲノム分節が付加されるか、又は置換される請求項５０記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５２】  一部ウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノムにおいて、野生型遺伝子の7と8の位置にそれぞれ欠失される同等のG及びF糖タンパク質遺伝子に置き換えるために、ヒトRSV糖タンパク質遺伝子GとFの両方が、遺伝子順位の位置1と2にそれぞれ置換される請求項５１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５３】  F,G,SH及びMから選択される1又は複数のヒトRSVエンベロープ関連遺伝子が、F,G,SH及びMから選択される1又は複数のヒトRSVエンベロープ関連遺伝子が欠失される一部ウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノム内にて、付加、又は置換される請求項５１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５４】  ヒトRSVエンベロープ関連遺伝子F,G及びMが、エンベロープ関連遺伝子F,G及びMの全てが欠失される、1部ウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノム内に、付加される請求項５３記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５５】  ヒトRSV糖タンパク質遺伝子GとFの両方が、一部ウシRSVを背景としたゲノム又はアンチゲノムにおいて、それぞれ野生型の位置7と8にて欠失される同等のG及びF糖タンパク質遺伝子を置き換えるために、遺伝子順位の位置3と4にそれぞれ置換される請求項５１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５６】  ヒトRSV糖タンパク質遺伝子GとFの両方が、野生型の位置7と8にてそれぞれ欠失された同等のG及びF糖タンパク質遺伝子を置き換えるために、遺伝子順位の位置1と2にてそれぞれ置換され、そして前記RSV遺伝子NS1及びNS2が、一部ウシRSVを背景としたゲノム又はアンチゲノムおいて、これらウシの同等の遺伝子として、置換される請求項５１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５７】  RSVのM2(ORF1)を、組換えウイルスの転写を上限調節するために、組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内においてプロモータへ有意的に隣接する位置に変位する請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５８】  組み込みゲノム又はアンチゲノムが、1パネルの変異ヒトRSV菌株内に存在する変異体の弱毒化する少なくとも1つ及び全部の補体を組み込み、前記パネルが、cpts RSV 248(ATCC VR2450),cpts RSV 248/404(ATCC VR2454),cpts RSV 248/955(ATCC VR2453),cpts RSV 530(ATCC VR2452),cpts RSV 530/1009(ATCC VR2451),cpts RSV 530/1030(ATCC VR2455),RSV B-1 cp52/2B5(ATCC VR2542),及びRSV B-1 cp-23(ATCC VR2579)を含んで成る請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項５９】  前記組換えゲノム又はアンチゲノムが、異なる変異体RSV菌株から採用された弱毒変異体を組み込む請求項５８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６０】  前記組換えゲノム又はアンチゲノムが、RSVのＮ遺伝子のVal267、RSVのF遺伝子のGlu218及び／又はThr523、RSV ポリメラーゼ遺伝子LのAsn43、Cys319、Phe521、Gln831、Met1169、Tyr1321及び／又はHis1690にてアミノ酸の置換、及び遺伝子M2遺伝子の開始配列におけるヌクレオチド置換を特定する弱毒化変異体の少なくとも1つ、又は最大限として十分な補体を組み込む請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６１】  組換えゲノム又はアンチゲノムが、変異体に特異性のあるコドンにおける複数のヌクレオチドの変化によって安定化する少なくとも1つの弱毒化変異体を含んで成る請求項６０記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６２】  さらなるヌクレオチドの修飾が、組換えウイルスのSH、NS1、NS2、M2ORF2、又はG遺伝子を変化させる請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６３】  遺伝子のオープンリーデングフレームにおける1又は複数のコドンを導入することによって、組換えウイルスのSH、NS1、NS2、M2のORF2、又はG遺伝子が、全体的、又は1部が欠失された、又は前記遺伝子の発現が除去される請求項６２記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６４】  前記遺伝子修飾が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内の選択された遺伝子のシス作用調節配列におけるヌクレオチドの欠失、挿入、置換、追加、又は再配列を含んで成る請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６５】  NS1又はNS2遺伝子の遺伝子末端(GE)シグナルが修飾される請求項６４記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６６】  ヌクレオチドの修飾は、RSVゲノム又はアンチゲノム内の翻訳開始部位の挿入、欠失、又は再配列を含んで成る請求項６４記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６７】  RSV G糖タンパク質の選択された形状の転写開始部位が除去される請求項６６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６８】  哺乳動物の宿主内の前記病原体に対する保護としての免疫応答を惹起することのできる、サイトカイン、T-ヘルパーエピトープ、制限酵素部位マーカ、又は微生物病原体のタンパク質から選択される非RSV分子をコードするために、組換えゲノム又はアンチゲノムが修飾される請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項６９】  パラインフルエンザウイルス(PIV)から1又は複数の遺伝子、及び／又はゲノム分節を組み込む請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項７０】  前記組換えゲノム又はアンチゲノムが、HN又はF糖タンパク質、又はPIV1，PIV2又はPIV3のHN又はFのエクトドメイン又は免疫原エピトープをコードする請求項６９記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項７１】  ウイルスである請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項７２】  サブウイルス粒子である請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項７３】  組換えゲノム又はアンチゲノムが、ヒトRSVのサブクループAとサブグループBの一方又は両方から抗原決定基を組み込む請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項７４】  生理的に受け入れ可能な担体において、請求項１の組換えRSVの免疫学的に十分な量を含むRSVに対する免疫応答を誘発する免疫原組成物。
【請求項７５】  103から106PFUの容量にて形成される請求項７４記載の方法。
【請求項７６】  前記組換えRSVが、噴霧(spray)、小滴、エアロゾルにより気道上部に投与するために処方される請求項７４記載の免疫原組成物。
【請求項７７】  前記組換えRSVが、ヒトRSV AかRSV Bのいずれかに、又はヒトRSV AとRSV Bの両方に対して免疫応答を誘発する請求項７４記載の免疫原組成物。
【請求項７８】  前記組換えゲノム又はアンチゲノムが、1又は複数の異種病原体の1又は複数の抗原決定基をコードする1又は複数の異種遺伝子又はゲノム分節により結合した1部又は完全なRSVベクターゲノム又はアンチゲノムを含んで成る請求項１記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項７９】  前記1又は複数の異種病原体が、異種RSVであり、そして前記異種遺伝子又はゲノム文節が、1又は複数のRSVのNS1、NS2、N、P、SH、M2(ORF1)、M2(ORF2)、L、F又はGタンパク質又はその断片をコードする請求項７８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８０】  前記ベクターゲノム又はアンチゲノムが、1部又は完全なRSV Aゲノム又はアンチゲノムであり、そして抗原決定基をコードする異種遺伝子又はゲノム分節が、RSV Bサブグループウイルスのものである請求項７８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８１】  キメラゲノム又はアンチゲノムが、弱毒化を特定するBRSVの1又は複数の遺伝子又はゲノム分節を組み込む請求項７８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８２】  1又は複数のHN及び/又はF糖タンパク質、又抗原ドメイン、断片又はそのエピトープをコードする前記1又は複数のHPIV1,HPIV2又はHPIV3遺伝子、又はゲノム文節が、1部又は完全なHRSVベクターのゲノム又はアンチゲノム内に付加されるか、又は組み込まれている請求項７８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８３】  前記ベクターゲノム又はアンチゲノムが、1部又は完全なBRSVゲノム又はアンチゲノムであり、そして抗原決定基をコードする異種遺伝子又はゲノム分節が1又は複数のHRSV(s)からである請求項７８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８４】  前記1部又は完全なBRSVゲノム又はアンチゲノムが、F，G及びSHから選択される1又は複数のHRSV糖タンパク質遺伝子をコードする遺伝子又はゲノム分節(segment)、あるいは細胞形質ドメイン、貫通膜ドメイン、エクトドメイン、又は免疫原エピトープ部位をコードするHRSVのF，G及び／又はSHの1又は複数のゲノムセグメントを組み込む請求項８３記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８５】  前記ベクターゲノム又はアンチゲノムが、1部又は完全なHRSV又はBRSVゲノムまたはアンチゲノムであり、そして前記異種病原体が、麻疹ウイルス(measles virus),サブグループA及びサブグループBの呼吸器合胞ウイルス、ムンプスウイルス(mumps)，ヒト乳頭腫ウイルス、1型と2型のヒト免疫不全ウイルス、単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、ラビーウイルス、エプステン・バーウイルス(Epstein Barr Virus)、フィロウイルス(filoviruses)，ブンヤウイルス(bunyaviruses)、フラビウイルス(flaviviruses)、アルファウイルス(alphaviruses)、及びインフルエンザウイルスから選択される請求項７８記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８６】  前記1又は複数の異種抗原決定基が、麻疹ウイルス(measles virus)HA及びFタンパク質、サブグループA又はサブグループBの呼吸器合胞ウイルスF,G,SH及びM2タンパク質、ムンプスウイルス(mumps)NH及びFタンパク質、ヒト乳頭腫ウイルスL1タンパク質、1型と2型のヒト免疫不全ウイルスのgp160タンパク質、単純ヘルペスウイルス及びサイトメガロウイルスのgB,gC,gD,gE,gG,gH,gI,gJ,gK,gL,及びgMタンパク質、ラビーウイルスGタンパク質、エプステン・バーウイルス(Epstein Barr Virus)のgp350タンパク質、フィロウイルス(filoviruses)Gタンパク質、ブンヤウイルス(bunyaviruses)Gタンパク質、フラビウイルス(flaviviruses)のE及びNS1タンパク質、及びアルファウイルス(alphaviruses)Eタンパク質、及び抗原ドメイン、断片及びそのエピトープから選択される請求項８５記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８７】  前記異種病原体が、麻疹ウイルス(measles virus)であり、そして異種抗原決定基が、麻疹ウイルス(measles virus)HA及びFタンパク質及び抗原ドメイン、断片及びそのエピトープから選択される請求項８６記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８８】  前記麻疹ウイルス(measles virus)HA遺伝子のオープンリーデングフレーム(ORF)を含む転写単位が、HRSVベクターゲノム又はアンチゲノム内に付加されるか、又は組み込まれている請求項８７記載の単離された感染性組換えRSV。
【請求項８９】  野生型RSVゲノムまたはアンチゲノム内に前記RSV遺伝子又はゲノムセグメントの位置に対してプロモータへ有意的に隣接する位置又はプロモータへ遠位な位置に、位置的に変位される前記組換えゲノム又はアンチゲノム内の1又は複数の変位されたRSV遺伝子又はゲノムを有する組換えRSVガノム又はアンチゲノムを含む単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９０】  前記1又は複数の転座遺伝子又はゲノム分節が、前記1部又は完全な組み換えRSVゲノム又はアンチゲノム内により1又は複数の置換ポリヌクレオチドの挿入又は欠失により有意的にプロモータへ隣接する位置に変位される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９１】  前記ポリヌクレオチドの挿入体は、1又は複数のRSV遺伝子又はゲノム分節を含んで成る請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９２】  野生型RSVゲノム又はアンチゲノム内にて前記RSV遺伝子又はゲノム分節の位置に対して有意的なプロモータ隣接位置に、前記組換えゲノム又はアンチゲノム内の前記1又は複数の変位されたRSV遺伝子又はゲノム分節を位置的に変位させる組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために、前記置換ポリヌクレオチドが欠失される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９３】  組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される前記置換ポリヌクレオチドが、1又は複数のRSVのNS1,NS2,SH,M2(ORF2)、又はG遺伝子又はそのゲノム分節を含んで成る請求項９２記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９４】  RSVのNS1遺伝子を含む前記置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項９３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９５】  RSVのNS2遺伝子を含む前記置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項９３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９６】  RSVのSH遺伝子を含む前記置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項９３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９７】  RSVのM2(ORF2)遺伝子を含む前記置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項９３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９８】  RSVのG遺伝子を含む前記置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項９３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項９９】  RSVのF及びG遺伝子が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために共に欠失される請求項９３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１００】  RSVのNS1及びNS2遺伝子が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために共に欠失される請求項９３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１０１】  RSVのSH及びNS2遺伝子が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために共に欠失される請求項９３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１０２】  RSVのSH,NS1及びNS2遺伝子が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために全て欠失される請求項９３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１０３】  組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて付加、置換、又は再配列される前記置換ポリヌクレオチドが、1又は複数のRSVのNS1,NS2,SH,M2(ORF2)、F及び／又はG遺伝子又はそのゲノム分節を含んで成る請求項９１記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１０４】  前記置換ポリヌクレオチドが、RSVのF,G及び／又はSHの糖タンパク質、又は免疫原ドメイン又はそのエピトープをコードする遺伝子又はゲノム分節から選択される請求項９０記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１０５】  F,G及びSHから選択される1又は複数のRSV糖タンパク質遺伝子が、前記1又は複数のRSV糖タンパク質遺伝子における野生型遺伝子順位の位置と比較して有意的にプロモータへ隣接する位置に、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて付加、置換又は再配列される請求項１０４記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１０６】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、Gの野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子配列の位置に対して、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項１０５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１０７】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて遺伝子順位の位置1に変位される請求項１０６記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１０８】  前記糖タンパク質遺伝子Ｆが、Fの野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子配列の位置に対して、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項１０５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１０９】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて遺伝子順位の位置1に変位される請求項１０８記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１０】  前記糖タンパク質遺伝子G及びＦが共に、G及びFの野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子配列の位置に対して、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項１０５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１１】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて遺伝子順位の位置1に変位され，前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて遺伝子順位の位置2に変位される請求項１１０記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１２】  1又は複数のRSVのNS1、NS2、SH、M2(ORF2)、又はG遺伝子又はそのゲノム分節が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムにおいて欠失される請求項１０５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１３】  RSVのNS1遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項１０５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１４】  RSVのNS2遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項１０５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１５】  RSVのSH遺伝子を含む置換ポリヌクレオチドが、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項１０５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１６】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、Gの野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子配列の位置に対して、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項１１５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１７】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて遺伝子順位の位置1に変位される請求項１１６記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１８】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、Fの野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子配列の位置に対して、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項１１５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１１９】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて遺伝子順位の位置1に変位される請求項１１８記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２０】  前記糖タンパク質遺伝子G及びＦが共に、G及びFの野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子配列の位置に対して、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項１１５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２１】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内の遺伝子順位の位置1に変位され，前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内の遺伝子順位の位置2に変位される請求項１２０記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２２】  RSVのSH及びNS2遺伝子の両方が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために欠失される請求項１０５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２３】  前記糖タンパク質遺伝子G及びＦが共に、G及びFの野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子配列の位置に対して、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項１２２記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２４】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内の遺伝子順位の位置1に変位され，前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内の遺伝子順位の位置2に変位される請求項１２３記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２５】  RSVのSH,NS1及びNS2遺伝子が、組換えRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために全て欠失される請求項１２４記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２６】  前記糖タンパク質遺伝子G及びＦが共に、G及びFの野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する遺伝子配列の位置に対して、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内にて再配列される請求項１２５記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２７】  前記RSV糖タンパク質遺伝子Gが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内の遺伝子順位の位置1に変位され，前記RSV糖タンパク質遺伝子Fが、前記組換えRSVゲノム又はアンチゲノム内の遺伝子順位の位置2に変位される請求項１２６記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２８】  前記組換えゲノム又はアンチゲノムが、ヒト-ウシ・キメラゲノム又はアンチゲノムを形成するために、異なるRSVから1又は複数の異種遺伝子及び／又はゲノム分節と結合する1部又は完全なヒト又はウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノムを含んで成る請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１２９】  1部ウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノムにおけるF及びGの糖タンパク質遺伝子の一方又は両方の等価物に置き換えるため、ヒトRSV糖タンパク質遺伝子F及びGの一方又は両方が，置換される請求項１２８記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３０】  1部ウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノムにおける同等のF及びGの糖タンパク質遺伝子に置き換えるため、ヒトRSV糖タンパク質遺伝子F及びGが共に置換される請求項１２９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３１】  1部又は完全なウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノム内に同等の遺伝子又はゲノム分節の野生型遺伝子配列の位置と比較してプロモータへ有意的に隣接する位置にて、F，G及びSHから選択される1又は複数のヒトRSV糖タンパク質遺伝子が、付加又は置換される請求項１２８記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３２】  1部ウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノムにおいて、野生型位置7及び8にそれぞれ欠失される同等のG及びF糖タンパク質遺伝子を置き換えるために、ヒトRSV糖タンパク質遺伝子G及びFが共に置換される請求項１３１記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３３】  遺伝子の安定性を増大するため、又は組み換えウイルスの培養において弱毒化、反応の誘発性、又は増殖を変化させるために1部又は完全なウシを背景とするゲノム又はアンチゲノム内により、1又は複数の付加的な異種遺伝子又はゲノム文節のヒトのRSVから付加又は置換によって、組換えゲノム又はアンチゲノムが、さらに修飾される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３４】  組み換えゲノム又はアンチゲノムが、ヒトRSVのサブグループAとサブグループBの両方から抗原決定基を組み込む請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３５】  組み換えゲノム又はアンチゲノムが、1又は複数の弱毒化する変異化を組み込むことによりさらに修飾される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３６】  SH、S1、NS2、M2ORF2又はG遺伝子が修飾される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３７】  上記SH、NS1、NS2、M2ORF2又はG遺伝子が、一部又は全体において欠失され、上記遺伝子の発現が、遺伝子のオープンリーデングフレームの1又は複数の停止コドンを導入することにより除去される請求項１３６記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３８】  ヌクレオチドの修飾が、組み換えゲノム又はアンチゲノム内の選択されるRSV遺伝子のシス作用調節配列におけるヌクレオチドの欠失、挿入、付加又は再配列を含んで成る請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１３９】  前記置換ポリヌクレオチドが、RSVのオープンリーデングフレームの開始部又は終了部における、又は遺伝子間領域に、又はRSVゲノムの3’先導部又は5’尾部おける非翻訳配列内にて1又は複数の欠失を含んで成る請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１４０】  前記置換ポリヌクレオチドが、完全か、1部欠失した遺伝子を含んで成る請求項１３９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１４１】  一部欠失した前記遺伝子が、一部欠失したSH遺伝子である請求項１４０記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１４２】  前記置換ヌクレオチドが、RSV遺伝子下流の非翻訳配列の1又は複数の領域から選択される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１４３】  前記置換ヌクレオチドが，RSV遺伝子上流の非翻訳配列の1又は複数の領域から選択される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１４４】  前記置換ヌクレオチドが、1又は複数のRSV遺伝子間配列から選択される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１４５】  前記置換ヌクレオチドが、SV5’尾部領域内のヌクレオチソから選択される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１４６】  前記置換ヌクレオチドが，RSV3’先導部領域内のヌクレオチソから選択される請求項８９記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１４７】  3’先導部領域の最初の11ヌクレオチドに配置されるウイルスプロモータの中核部分を除いて3’尾部領域部を欠失する請求項１４６記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
【請求項１４８】  前記RSVをコードする1又は複数の単離されたポリヌクレオチド分子から感染性弱毒化組換えRSV粒子を製造するための方法であって、野生型RSVゲノム又はアンチゲノム内の前記RSV遺伝子又はゲノム分節，位置に対してプロモータへ有意的に隣接するか、又はプロモータへ遠位な位置に位置的に変位される前記組換えゲノム又はアンチゲノム内の1又は複数の変位されたRSV遺伝子又はゲノム、あるいはゲノム分節を有する組換えRSVゲノム又はアンチゲノム、及びRSVのN,P,L及びRNAポリメラーゼ伸長因子タンパク質を含む発現ベクターを、細胞又は細胞の無い溶離産物中にて発現させることを含んでいる感染性弱毒化組換えRSV粒子を製造するための方法。
【請求項１４９】  組換えRSVゲノム又はアンチゲノム、及びRSVのN,P,L及びRNAポリメラーゼ伸長因子タンパク質が、1又は複数の異なる発現ベクターにより発現される請求項１４８記載の方法。
【請求項１５０】  ヒト-ウシキメラRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために、RSVのNS1、NS2、M、G、及び／又はＦの異種遺伝子及び／又はゲノム分節から選択されるヒトRSVの複数の異種遺伝子及び／又はゲノム分節と組み合わされる主要なヌクレオキャプシド(N)タンパク質、ヌクレオキャプシドリン酸タンパク質(P)、大型ポリメラーゼタンパク質(L)、RNAポリメラーゼ伸長因子、及び1部又は完全なウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノムを含んでいる単離された感染性キメラ呼吸器合胞体ウイルス(RSV)。
【請求項１５１】  ヒトのNS1とNS2遺伝子の両方を、ウシの同等なNS1及びNS2遺伝子にて置換する請求項１５０記載の単離された感染性RSV。
【請求項１５２】  ヒトNS1，NS2，G,及びF遺伝子を、ウシの同等なNS1，NS2，G,及びF遺伝子にて置換する請求項１５０記載の単離された感染性RSV。
【請求項１５３】  ヒトM、SH、G及びF遺伝子を、ウシの同等なM、SH、G及びF遺伝子に置換する請求項１５０記載の単離された感染性RSV。
【請求項１５４】  ヒト-ウシ・キメラRSVゲノム又はアンチゲノムを形成するために、RSVのNS1、NS2、M、SH、G、及び／又はF遺伝子の異種遺伝子及び／又はゲノム分節から選択される複数の異種遺伝子及び／又はゲノム分節と組み合わされた一部又は完全なウシRSVを背景とするゲノム又はアンチゲノムを含む組替えRSVゲノム又はアンチゲノムを含んでいる単離されたポリヌクレオチド分子。