【手続補正書】
【提出日】平成31年1月30日(2019.1.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式:
2018507404.tif 000001
により表される、不純物を実質的に含まない化合物またはその塩。
【請求項２】
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%純粋である、請求項1記載の化合物。
【請求項３】
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%光学的に純粋である、請求項2記載の化合物。
【請求項４】
標識されている、請求項1〜3のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５】
請求項1〜4のいずれか一項記載の化合物、ならびに
対象由来の生体サンプルにおいて検出された該化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書
を含む、キット。
【請求項６】
疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーを含む、請求項5記載のキット。
【請求項７】
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩(ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、請求項6記載のキット。
【請求項８】
3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーをさらに含む、請求項5〜7のいずれか一項記載のキット。
【請求項９】
(1) マラバルニワウルシ(Ailanthus triphysa)から式3の化合物:
2018507404.tif 000002
を単離する段階;
(2) 式3の化合物を酸化試薬と反応させて式4の化合物:
2018507404.tif 000003
を生ずる段階;
(3) 式4の化合物を還元試薬と反応させて式5の化合物:
2018507404.tif 000004
を生ずる段階;
(4) 式5の化合物を硫酸と反応させて式(VII)の化合物を生ずる段階
を含む、以下の式:
2018507404.tif 000005
により表される化合物またはその塩を調製する方法。
【請求項１０】
式3の化合物が、マラバルニワウルシの樹脂を有機溶媒で抽出することによって単離される、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
有機溶媒がヘキサンである、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
酸化試薬がPCCである、請求項9〜11のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３】
還元試薬がLiAlH4またはNaBH4である、請求項9〜12のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４】
式（VII）の化合物が標識されている、請求項9〜13のいずれか一項記載の化合物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
本発明の別の態様は、対象におけるインスリン抵抗性処置、代謝障害処置、糖尿病処置または前糖尿病処置の有効性をモニタリングする方法であって、対象由来の生体サンプルにおける式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルを判定する段階; インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病について対象を処置する段階; 処置後の第2の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルを判定する段階; および第1のサンプルにおける式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルを第2のサンプルにおける式(I)、(II)または(III)の化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階を含む、該方法である。
[本発明1001]
対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
2018507404.tif 000006
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階
を含み、
該化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定され、正常対照サンプルにおける該化合物のレベルと比較して生体サンプルにおける該化合物のレベル上昇が、対象における疾患または障害を示す、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法。
[本発明1002]
対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
2018507404.tif 000007
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階
を含み、
該化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定され、正常対照サンプルにおける該化合物のレベルと比較して生体サンプルにおける該化合物のレベル上昇が、対象における疾患または障害を示す、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断するための方法。
[本発明1003]
正常対照サンプルにおける化合物のレベルと比較して生体サンプルにおいて化合物のレベル上昇が存在する場合に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む、本発明1001または1002の方法。
[本発明1004]
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
2018507404.tif 000008
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階；
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける該化合物のレベルを判定する段階
を含み、
該化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示し、該化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法。
[本発明1005]
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
2018507404.tif 000009
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階；
(2) 第1の時点よりも遅い第2の時点で対象から得られた第2の生体サンプルにおける該化合物のレベルを判定する段階
を含み、
該化合物のレベルの変化が対象における疾患の進行または退行を示し、該化合物のレベルがクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害の進行または退行をモニタリングするための方法。
[本発明1006]
化合物のレベルの増加が、疾患の進行を示す、本発明1004または1005の方法。
[本発明1007]
疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法で対象を処置する段階をさらに含む、本発明1004、1005または1006の方法。
[本発明1008]
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(IV):
2018507404.tif 000010
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に対する治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、該化合物のレベルを判定する段階; および
(4) 第1のサンプルにおける該化合物のレベルを第2のサンプルにおける該化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含み、
該化合物のレベルが、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための治療法の有効性をモニタリングするための方法。
[本発明1009]
(1) 対象由来の生体サンプルにおける、式(VI):
2018507404.tif 000011
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階;
(2) インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病に対する治療法で対象を処置する段階;
(3) 処置後の時点で対象から得られた、対象由来の第2の生体サンプルを分析して、該化合物のレベルを判定する段階; および
(4) 第1のサンプルにおける該化合物のレベルを第2のサンプルにおける該化合物のレベルと比較して、インスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための処置の有効性を評価する段階
を含み、
該化合物のレベルが、クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合、または他の免疫化学的方法によって判定される、
対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病または前糖尿病を処置するための治療法の有効性をモニタリングするための方法。
[本発明1010]
第1のサンプルと比較して第2のサンプルにおける化合物のレベルの減少は、用いられる治療法が対象を処置するのに有効であることを示す、本発明1008または1009の方法。
[本発明1011]
対象を処置する段階が、疾患または障害を処置するのに適した治療剤の有効量を対象に投与することを含む、本発明1003および1007〜1010のいずれかの方法。
[本発明1012]
治療剤が抗糖尿病薬または抗肥満薬である、本発明1011の方法。
[本発明1013]
治療剤が、メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、アカルボース、テトラヒドロリプスタチン、フェンテルミン/トピラメート、ブプロピオン/ナルトレキソン、ロルカセリン、リラグルチド、およびカナグリフロジンを含む群より選択される、本発明1011の方法。
[本発明1014]
対象を処置する段階が、対象の生活様式の改変を含む、本発明1003および1007〜1010のいずれかの方法。
[本発明1015]
生活様式の改変が食事の改変および/または活動もしくは運動の増加を含む、本発明1014の方法。
[本発明1016]
化合物のレベルがタンデム液体クロマトグラフィー - 質量分析(LC-MS/MS)によって判定される、本発明1001〜1015のいずれかの方法。
[本発明1017]
生体サンプルを分析して、疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1001〜1016のいずれかの方法。
[本発明1018]
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩 (ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、本発明1017の方法。
[本発明1019]
生体サンプルを分析して、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)のレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1018の方法。
[本発明1020]
生体サンプルを分析して、3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1017〜1019のいずれかの方法。
[本発明1021]
年齢、性別、家族歴、体型指数(BMI)、胴囲、体重、空腹時グルコース、空腹時インスリン、プロインスリン、C-ペプチド、C-反応性タンパク質、ヘモグロビンA1c (HbA1c、A1c)、LDL-C、HDL-C、遊離脂肪酸(FFA)、1,5-Ag (Glycomark)、トリグリセリド、ペプチドYYおよびグルコース処理速度(Rd, M)より選択される他の臨床的および人口学的パラメータを判定する段階をさらに含む、本発明1001〜1020のいずれかの方法。
[本発明1022]
生体サンプルを分析して、空腹時グルコースレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1001〜1020のいずれかの方法。
[本発明1023]
生体サンプルが血液、血漿、血清または尿である、本発明1001〜1022のいずれかの方法。
[本発明1024]
生体サンプルが血漿である、本発明1023の方法。
[本発明1025]
正常対照の対象と比較して、以下の式:
2018507404.tif 000012
により表される化合物またはその塩のレベル上昇を有する対象に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法。
[本発明1026]
正常対照の対象と比較して、以下の式:
2018507404.tif 000013
により表される化合物またはその塩のレベル上昇を有する対象に、疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法。
[本発明1027]
化合物のレベルが、対象から生体サンプルを得ることによって、およびクロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、抗体結合または他の免疫化学的方法により該化合物のレベルを判定することによって判定される、本発明1025または1026の方法。
[本発明1028]
(1) クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、または他の免疫化学的方法により対象由来の生体サンプルにおいて、以下の式:
2018507404.tif 000014
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階; および
(2)正常対照サンプルにおける該化合物のレベルと比較して対象が該化合物のレベル上昇を有する場合に、対象に疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階
を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法。
[本発明1029]
(1) クロマトグラフィー、質量分析、酵素免疫測定法(ELISA)、または他の免疫化学的方法により対象由来の生体サンプルにおいて、以下の式:
2018507404.tif 000015
により表される化合物またはその塩のレベルを判定する段階; および
(2)正常対照サンプルにおける該化合物のレベルと比較して対象が該化合物のレベル上昇を有する場合に、対象に疾患または障害を処置するのに適した有効な治療法を施す段階
を含む、対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を処置する方法。
[本発明1030]
生体サンプルが血液、血漿、血清または尿である、本発明1027、1028または1029の方法。
[本発明1031]
生体サンプルが血漿である、本発明1030の方法。
[本発明1032]
対象を処置する段階が、疾患または障害を処置するのに適した治療剤の有効量を対象に投与することを含む、本発明1025〜1031のいずれかの方法。
[本発明1033]
治療剤が抗糖尿病薬または抗肥満薬である、本発明1032の方法。
[本発明1034]
治療剤が、メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、アカルボース、テトラヒドロリプスタチン、フェンテルミン/トピラメート、ブプロピオン/ナルトレキソン、ロルカセリン、リラグルチド、およびカナグリフロジンを含む群より選択される、本発明1032の方法。
[本発明1035]
対象を処置する段階が、対象の生活様式の改変を含む、本発明1025〜1031のいずれかの方法。
[本発明1036]
生活様式の改変が食事の改変および/または活動の増加を含む、本発明1035の方法。
[本発明1037]
化合物のレベルがタンデム液体クロマトグラフィー - 質量分析(LC-MS/MS)によって判定される、本発明1025〜1036のいずれかの方法。
[本発明1038]
生体サンプルを分析して、疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1025〜1037のいずれかの方法。
[本発明1039]
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩 (ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、本発明1038の方法。
[本発明1040]
生体サンプルを分析して、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)のレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1039の方法。
[本発明1041]
生体サンプルを分析して、3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーのレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1038〜1040のいずれかの方法。
[本発明1042]
年齢、性別、家族歴、体型指数(BMI)、胴囲、体重、空腹時グルコース、空腹時インスリン、プロインスリン、C-ペプチド、C-反応性タンパク質、ヘモグロビンA1c (HbA1c、A1c)、LDL-C、HDL-C、遊離脂肪酸(FFA)、1,5-Ag (Glycomark)、トリグリセリド、ペプチドYYおよびグルコース処理速度(Rd, M)より選択される他の臨床的および人口学的パラメータを判定する段階をさらに含む、本発明1025〜1041のいずれかの方法。
[本発明1043]
生体サンプルを分析して、空腹時グルコースレベルを判定する段階をさらに含む、本発明1025〜1041のいずれかの方法。
[本発明1044]
疾患または障害が2型糖尿病である、本発明1001〜1043のいずれかの方法。
[本発明1045]
疾患または障害が前糖尿病である、本発明1001〜1043のいずれかの方法。
[本発明1046]
前糖尿病が、単独の空腹時グルコース障害(IFG)、単独のグルコース耐性障害(IGT)、IFGおよびIGTの組み合わせ、高ヘモグロビンA1Cレベル、またはそれらの組み合わせで特徴付けられる、本発明1045の方法。
[本発明1047]
前糖尿病が5.7%〜6.4%のヘモグロビンA1Cレベルで特徴付けられる、本発明1046の方法。
[本発明1048]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%純粋である、以下の式:
2018507404.tif 000016
により表される化合物またはその塩。
[本発明1049]
以下の式:
2018507404.tif 000017
またはその塩により表される、本発明1048の化合物。
[本発明1050]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%光学的に純粋である、本発明1049の化合物。
[本発明1051]
不純物を実質的に含まない、以下の式:
2018507404.tif 000018
により表される化合物またはその塩。
[本発明1052]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%純粋である、本発明1051の化合物。
[本発明1053]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%光学的に純粋である、本発明1051の化合物。
[本発明1054]
以下の式:
2018507404.tif 000019
により表される化合物またはその塩。
[本発明1055]
不純物を実質的に含まない、本発明1054の化合物。
[本発明1056]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%純粋である、本発明1054の化合物。
[本発明1057]
少なくとも60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%または99.9%光学的に純粋である、本発明1056の化合物。
[本発明1058]
放射性標識されている、本発明1048〜1057のいずれかの化合物。
[本発明1059]
本発明1048〜1058のいずれかの化合物、ならびに
対象由来の生体サンプルにおいて検出された該化合物のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書
を含む、キット。
[本発明1060]
本発明1054〜1058のいずれかの化合物、ならびに
対象由来の生体サンプルにおいて検出された、以下の式:
2018507404.tif 000020
により表される化合物またはその塩のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書
を含む、キット。
[本発明1061]
本発明1054〜1058のいずれかの化合物、ならびに
対象由来の生体サンプルにおいて検出された、以下の式:
2018507404.tif 000021
により表される化合物またはその塩のレベルに基づき対象におけるインスリン抵抗性、代謝障害、糖尿病および前糖尿病からなる群より選択される疾患または障害を診断および/またはモニタリングするための使用説明書
を含む、キット。
[本発明1062]
本発明1054〜1058のいずれかの化合物が放射性標識されている、本発明1060または1061のキット。
[本発明1063]
疾患または障害に関連する1つまたは複数のさらなるバイオマーカーを含む、本発明1059〜1062のいずれかのキット。
[本発明1064]
1つまたは複数のさらなるバイオマーカーが、2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)、リノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)、オレイン酸塩、4-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、パントテン酸塩(ビタミンB5)、β-ヒドロキシ酪酸塩(BHBA)およびセリンからなる群より選択される、本発明1063のキット。
[本発明1065]
さらなるバイオマーカーとして2-ヒドロキシ酪酸塩(AHB)およびリノレオイルリゾホスファチジルコリン(LGPC)をさらに含む、本発明1064のキット。
[本発明1066]
3-メチル-2-オキソ-酪酸、α-ケトグルタン酸塩、クレアチン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、ロイシン、オレオイルリゾホスファチジルコリン、フェニルアラニン、トリゴネリン、チロシン、バリン、ヒドロ桂皮酸、キサンチン、マンノース、3-メチル-2-オキソ吉草酸塩、グリセロールホスホリルコリン、アドレネート、3-メチル-2-オキソ-吉草酸塩、2-メチルコハク酸塩、1-オクタデカノール、2-アミノアジピン酸塩、3-ヒドロキシイソ酪酸塩、α-トコフェロール、アルギニン、ベタイン、デカノイルカルニチン、ドコサテトラエン酸、グルタミン酸、リノール酸、リノレン酸、マルガリン酸、N-アセチルグリシン、オクタノイルカルニチン、パルミチン酸塩、パルミトレイン酸、パルミトイルリゾホスファチジルコリン、ステアリン酸塩、トレオニンおよびトリプトファンからなる群より選択される1つまたは複数のさらなるバイオマーカーをさらに含む、本発明1059〜1065のいずれかのキット。
[本発明1067]
以下の式:
2018507404.tif 000022
により表される化合物またはその塩に結合する、抗体または抗体断片。
[本発明1068]
以下の式:
2018507404.tif 000023
により表される化合物またはその塩に結合する、抗体または抗体断片。
[本発明1069]
本発明1067または1068の抗体のVH配列およびVL配列を含む、ポリペプチド。
[本発明1070]
融合タンパク質である、本発明1069のポリペプチド。
[本発明1071]
本発明1067もしくは1068の抗体もしくは抗体断片または本発明1069もしくは1070のポリペプチドを産生する、細胞。
[本発明1072]
(1) 本発明1071の細胞を培養する段階; および
(2) 該培養細胞から抗体もしくはその抗原結合断片、またはポリペプチドを単離する段階
を含む、本発明1067もしくは1068の抗体もしくはその抗原結合断片または本発明1069もしくは1070のポリペプチドを産生する方法。
[本発明1073]
細胞が真核細胞である、本発明1072の方法。
[本発明1074]
以下の式:
2018507404.tif 000024
により表される化合物またはその塩を調製する方法であって、ヒト血漿から該化合物を単離する段階を含む、方法。
[本発明1075]
以下の式:
2018507404.tif 000025
により表される化合物またはその塩を調製する方法であって、ヒト血漿から該化合物を単離する段階を含む、方法。
[本発明1076]
(1) 有機溶媒をヒト血漿に添加して沈殿物を生ずる段階; ならびに
(2) 沈殿物を除去し、かつ前記化合物を含む得られた溶液を回収する段階
を含む、本発明1074または1075の方法。
[本発明1077]
段階(1)における有機溶媒がメタノールである、本発明1076の方法。
[本発明1078]
段階(1)後の血漿溶液を遠心分離し、ろ過して沈殿物を除去する、本発明1076または1077の方法。
[本発明1079]
酸を添加して第1の溶液を得ることにより段階(2)で得られた溶液を酸性化する段階をさらに含む、本発明1076〜1078のいずれかの方法。
[本発明1080]
第1の溶液を陰イオン交換クロマトグラフィーに供し、得られた溶出液を回収する、本発明1079の方法。
[本発明1081]
得られた溶出液中の溶媒を除去して、前記化合物を含む第1の精製混合物を得る、本発明1080の方法。
[本発明1082]
第1の精製混合物を、非極性有機溶媒による溶媒抽出によりさらに精製して、前記化合物を含む第2の精製混合物を得る、本発明1081の方法。
[本発明1083]
第1の精製混合物をメタノールに溶解し; 得られたメタノール溶液をシクロヘキサンで抽出し; かつ第2の精製混合物を含むメタノール層を回収する、本発明1081の方法。
[本発明1084]
第2の精製混合物を溶媒抽出によりさらに精製して、前記化合物を含む第3の精製混合物を得る、本発明1082または1083の方法。
[本発明1085]
第2の精製混合物を1-ブタノールに溶解し; 得られた溶液を水で抽出し; かつ第3の精製混合物を含む有機層を回収する、本発明1084の方法。
[本発明1086]
第3の精製混合物を溶媒抽出によりさらに精製して、前記化合物を含む第4の精製混合物を得る、本発明1084または1085の方法。
[本発明1087]
第3の精製混合物を水に溶解し; この水溶液を酢酸エチルで抽出し; かつ第4の精製混合物を含む水層を回収する、本発明1086の方法。
[本発明1088]
第4の精製混合物をシリカカラムクロマトグラフィーによりさらに精製する、本発明1086または1087の方法。
[本発明1089]
シリカカラムがC18逆相シリカカラムである、本発明1088の方法。
[本発明1090]
(1) マラバルニワウルシ(Ailanthus triphysa)から式3の化合物:
2018507404.tif 000026
を単離する段階;
(2) 式3の化合物を酸化試薬と反応させて式4の化合物:
2018507404.tif 000027
を生ずる段階;
(3) 式4の化合物を還元試薬と反応させて式5の化合物:
2018507404.tif 000028
を生ずる段階;
(4) 式5の化合物を硫酸と反応させて式(VII)の化合物を生ずる段階
を含む、以下の式:
2018507404.tif 000029
により表される化合物またはその塩を調製する方法。
[本発明1091]
式3の化合物が、マラバルニワウルシの樹脂を有機溶媒で抽出することによって単離される、本発明1090の方法。
[本発明1092]
有機溶媒がヘキサンである、本発明1091の方法。
[本発明1093]
酸化試薬がPCCである、本発明1090〜1092のいずれかの方法。
[本発明1094]
還元試薬がLiAlH4またはNaBH4である、本発明1090〜1093のいずれかの方法。