【手続補正書】
【提出日】令和1年8月23日(2019.8.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
融合タンパク質、前記融合タンパク質をコードする核酸、または前記核酸を含むベクターを含む、疼痛の治療のための医薬組成物であって、前記融合タンパク質が以下：
（ａ）ボツリヌス神経毒素（ＢＴｘ）または破傷風神経毒素（ＴＴｘ）部分；および
（ｂ）炭疽毒素防御抗原（ＰＡ）、またはＰＡのＣ末端受容体結合ドメイン
を含み、
（ａ）部分と（ｂ）部分とが、共に連結または融合されている、
前記医薬組成物。
【請求項２】
前記ＢＴｘまたはＴＴｘ部分が、ＢＴｘまたはＴＴｘの酵素部分及び転位ペプチド／ドメインを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ＢＴｘの酵素部分または転位ペプチド／ドメインが、ＢＴｘ／Ａ、ＢＴｘ／Ｂ、ＢＴｘ／Ｃ、ＢＴｘ／Ｄ、ＢＴｘ／Ｅ、ＢＴｘ／Ｆ、ＢＴｘ／Ｇ、及び非クロストリジウムのボツリヌス様毒素のいずれか１つのＢＴｘ軽鎖ドメイン及びＢＴｘ重鎖ドメインから選択される、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
（ａ）（ｉ）前記ＢＴｘもしくはＴＴｘの酵素部分が、クロストリジウム神経毒素もしくは非クロストリジウムのボツリヌス様毒素に由来するＮ末端酵素ドメイン（ＬＣ）を含み、または
（ｉｉ）前記ＢＴｘもしくはＴＴｘの酵素部分が、クロストリジウム神経毒素もしくは非クロストリジウムのボツリヌス様毒素に由来するＮ末端酵素ドメイン（ＬＣ）を含み、かつ表１に記載のＬＣ酵素部分から選択され；かつ
（ｂ）（ｉ）前記転位ペプチド／ドメインが、クロストリジウム神経毒素もしくは非クロストリジウムのボツリヌス様毒素に由来するポア形成／転位ドメインを含み、または
（ｉｉ）前記転位ペプチド／ドメインが、クロストリジウム神経毒素もしくは非クロストリジウムのボツリヌス様毒素に由来するポア形成／転位ドメインを含み、かつ表１に記載のＨＮ転位ペプチドから選択される、
請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項５】
ＬＣとＨＮとの接合部に対応する残基が切断されている、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記酵素部分および前記転位ペプチド／ドメインが、リンカーペプチドによって連結されている、請求項２〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ＢＴｘまたはＴＴｘ部分、および前記ＰＡまたはＰＡのＣ末端受容体結合ドメインが、リンカーペプチドによって連結されている、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記リンカーペプチドが：
（ｉ）１〜２０アミノ酸長である；
（ｉｉ）ヒト血清において少なくとも１分間安定である；
（ｉｉｉ）ＧｌｙもしくはＳｅｒであるアミノ酸を少なくとも１個含む；かつ／または
（ｉｖ）Ｌｙｓ、Ａｒｇ、もしくはその両方を欠いている、
請求項６または７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
（ｉ）前記ＰＡもしくはＰＡの前記Ｃ末端受容体結合ドメインが、プロテアーゼによる切断に抵抗性となるように修飾もしくは変異導入される；または
（ｉｉ）前記ＰＡもしくはＰＡの前記Ｃ末端受容体結合ドメインが、プロテアーゼによる切断に抵抗性となるように修飾もしくは変異導入され、前記プロテアーゼが、リシルペプチダーゼ、トリプシン、エンテロキナーゼ、クロストリパイン、エラスターゼ、サーモリシン、エンドプロテイナーゼＬｙｓ−Ｃ、エンドプロテイナーゼＡｒｇ−Ｃ、及びフーリンからなる群から選択される、
請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
（ｉ）ＰＡの前記Ｃ末端受容体結合ドメインが、ＰＡｄ４ドメイン、ＰＡｄ２およびＰＡｄ４ドメイン、ＰＡｄ３およびＰＡｄ４ドメイン、ＰＡ６３、もしくはＰＡｄ２、ＰＡｄ３、およびＰＡｄ４ドメインを含む；または
（ｉｉ）前記融合タンパク質が、２〜１０個のＰＡｄ４ドメインを直列で含む；または
（ｉｉｉ）ＰＡの前記Ｃ末端受容体結合ドメインが、ＰＡｄ４ドメインを含み、かつ天然のＰＡｄ４ドメインに隣接する、前記Ｎ末端側に由来する１〜６０個の連続アミノ酸が、前記ＢＴｘもしくはＴＴｘ部分とＰＡｄ４との間に組み込まれている；または
（ｉｖ）ＰＡの前記Ｃ末端受容体結合ドメインが、ＰＡｄ４ドメインを含み、かつ配列番号１（配列番号１における２９アミノ酸残基のシグナルペプチドを差し引いたもの）の位置５９４、位置６１３、位置６３３、位置６３７、位置６５３、位置６７３、位置６７９、位置６８０、位置６８４、位置６９５、位置７０３、位置７２２、位置７２３、位置７２９、および位置７３０で、ＰＡｄ４ドメインにおけるＬｙｓ残基の１つもしくは複数が、ＡｒｇもしくはＨｉｓによって交換されている；または
（ｖ）ＰＡの前記Ｃ末端受容体結合ドメインが、ＰＡｄ４ドメインを含み、かつ配列番号１の、位置６２３、位置６４２、位置６６２、位置６６６、位置６８２、位置７０２、位置７０８、位置７０９、位置７１３、位置７２４、位置７３２、位置７５１、位置７５２、位置７５８、および位置７５９で、ＰＡｄ４ドメインにおけるＬｙｓ残基の１つもしくは複数（それぞれを含めた最大数を含む）がＡｒｇもしくはＨｉｓによって交換されている；または
（ｖｉ）ＰＡの前記Ｃ末端受容体結合ドメインが、ＰＡｄ４ドメインを含み、かつ配列番号１（配列番号１における２９アミノ酸残基のシグナルペプチドを差し引いたもの）の、位置６０１、位置７１３、および位置７１９で、ＰＡｄ４ドメインにおけるＡｓｎ残基の１つもしくは複数が、Ａｓｐによって交換されている、
請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
（ｉ）前記融合タンパク質が、全ＰＡタンパク質を含み、前記フーリン切断部位が、フーリン抵抗性のアミノ酸配列によって交換されているアミノ酸配列ＲＫＫＲを含み、ＲＫＫＲが、配列番号１（配列番号１における２９残基のシグナルペプチドを差し引いたもの）の残基１６４〜１６７である；または
（ｉｉ）前記融合タンパク質が、全ＰＡタンパク質を含み、前記フーリン切断部位が、ＳＳＳＲ（配列番号３２）、ＳＳＳＳ（配列番号３３）、もしくはＲＲＳＳ（配列番号１４９）であるフーリン抵抗性のアミノ酸配列によって交換されているアミノ酸配列ＲＫＫＲを含み、ＲＫＫＲが、配列番号１（配列番号１における２９残基のシグナルペプチドを差し引いたもの）の残基１６４〜１６７である、
請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記融合タンパク質が：
（ｉ）前記融合タンパク質のＮ末端に少なくとも１個のＤ−アミノ酸を含む；かつ／または
（ｉｉ）グリコシル化されている、もしくはグリコシル化されていない、
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
（ｉ）前記融合タンパク質が、１つもしくは複数のシステイン残基でのアミノ酸置換を含む；または
（ｉｉ）前記融合タンパク質が、１つもしくは複数のシステイン残基でのアミノ酸置換を含み、１つもしくは複数のシステイン残基が、セリンで置換される、
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
融合タンパク質、前記融合タンパク質をコードする核酸、または前記核酸を含むベクターを含む、疼痛の治療のための医薬組成物であって、前記融合タンパク質が以下：
（ａ）侵害受容ニューロンにおけるＳＮＡＲＥタンパク質を切断する能力を有する非細胞傷害性プロテアーゼと、
（ｂ）前記侵害受容ニューロンに存在する結合部位に結合する能力を有する標的指向化部分（ＴＭ）であって、前記結合部位が、エンドサイトーシスを受けることでエンドソームに取り込まれて前記侵害受容ニューロンに入る能力を有し、前記侵害受容ニューロンが、前記ＳＮＡＲＥタンパク質を発現する、前記標的指向化部分（ＴＭ）と、
（ｃ）エンドソーム内からエンドソーム膜を横切って前記プロテアーゼを前記侵害受容ニューロンのサイトゾルに転位させる能力を有する転位ドメイン（ＴＬ）と
を含み、
ただし、（ａ）部分、（ｂ）部分、及び（ｃ）部分が、異種性起源のものであるか、または少なくとも１つの異種性部分もしくは異種性ドメインを含む、
前記医薬組成物。
【請求項１５】
（ｉ）前記融合タンパク質が、プロテアーゼによって前記融合タンパク質をそこで切断することが可能なプロテアーゼ切断部位をさらに含み、前記プロテアーゼ切断部位が、前記融合タンパク質における前記非細胞傷害性プロテアーゼのＣ末端に位置し；
（ｉｉ）前記非細胞傷害性プロテアーゼが、非クロストリジウムのボツリヌス様毒素に由来するＬ鎖もしくはクロストリジウム神経毒素のＬ鎖、ボツリヌス神経毒素（ＢＴｘ）のＬ鎖、もしくは破傷風神経毒素（ＴＴｘ）のＬ鎖を含み；
（ｉｉｉ）前記ＴＬが、非クロストリジウムのボツリヌス様毒素の転位ドメイン、もしくはクロストリジウム神経毒素の転位ドメイン、ボツリヌス神経毒素（ＢＴｘ）の転位ドメイン、もしくは破傷風神経毒素（ＴＴｘ）の転位ドメインを含み、；かつ／または
（ｉｖ）前記ＴＭが、前記侵害受容ニューロンに発現したＡＮＴＸＲ２（ＣＭＧ２）受容体に結合する、
請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記ＴＭが、炭疽毒素防御抗原（ＰＡ）、またはＰＡのＣ末端受容体結合ドメイン、またはＡＮＴＸＲ２への結合活性を保持するそのＰＡ断片である、請求項１４または１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
（ｉ）ＰＡの前記Ｃ末端受容体結合ドメインが、ＰＡ６３、ＰＡｄ３−ｄ４、ＰＡｄ２−ｄ４、及びＰＡｄ４からなる群から選択される；かつ／または
（ｉｉ）前記ＰＡもしくはＰＡのＣ末端受容体結合ドメインが、プロテアーゼ、ＬｙｓＣ、またはフーリンによる切断に抵抗性である、
請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
（ｉ）医薬的に許容可能な担体、賦形剤、または希釈剤をさらに含む； 
（ｉｉ）医薬的に許容可能な担体、賦形剤、または希釈剤に炭疽菌防御抗原（ＰＡ）を含む組成物の、投与の前、投与と同時、または投与の後に、別に投与される；
（ｉｉｉ）中枢神経系へのくも膜下腔内注入もしくは脳室内注入もしくは硬膜外注射によって投与されるか、または皮内注射、皮下注射、筋肉内注射、神経内注射、もしくは関節内注射を用いて末梢性投与される；かつ／または
（ｉｖ）前記疼痛が、糖尿病性の神経障害性疼痛、癌性疼痛、線維筋痛症、および他の全身性疼痛障害から選択される、
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記疼痛が、神経、関節、皮膚、内臓、膀胱、または筋肉の疼痛から選択され；かつ
前記組成物が、皮内注射、皮下注射、筋肉内注射、神経内注射、または関節内注射によって末梢性投与される、
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。