【手続補正書】
【提出日】平成20年10月2日(2008.10.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
温血動物に治療上有効量のレニン阻害剤またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための方法。
【請求項２】
レニン阻害剤がＲＯ６６−１１３２、ＲＯ６６−１１６８および式（ＩＩＩ）：
【化１】
2008515903.tif 000001
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）の化合物；または各々の場合のその薬学的に許容される塩からなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項３】
レニン阻害剤が式：
【化２】
2008515903.tif 000002
（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり；Ｒ２はメトキシであり；そしてＲ３およびＲ４はイソプロピルである）を有する式（ＩＩＩ）の化合物；またはその薬学的に許容される塩である請求項２に記載の方法。
【請求項４】
式（ＩＶ）の化合物がそのヘミフマル酸塩の形態である請求項３に記載の方法。
【請求項５】
温血動物にレニン阻害剤またはその薬学的に許容される塩と
（ｉ）アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤もしくはその薬学的に許容される塩；または
（ｉｉ）アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬もしくはその薬学的に許容される塩；
との治療上有効量の組み合わせを投与することを含む拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための方法。
【請求項６】
レニン阻害剤がＲＯ６６−１１３２、ＲＯ６６−１１６８および式（ＩＩＩ）：
【化３】
2008515903.tif 000003
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）の化合物；または各々の場合のその薬学的に許容される塩からなる群から選択される請求項５に記載の方法。
【請求項７】
レニン阻害剤が式：
【化４】
2008515903.tif 000004
（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり；Ｒ２はメトキシであり；そしてＲ３およびＲ４はイソプロピルである）を有する式（ＩＩＩ）の化合物；またはその薬学的に許容される塩である請求項６に記載の方法。
【請求項８】
式（ＩＶ）の化合物がそのヘミフマル酸塩の形態である請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ＡＣＥ阻害剤がベナゼプリルおよびエナラプリルからなる群から選択される請求項５から８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
アンギオテンシンＩＩ受容体がバルサルタンまたはその薬学的に許容される塩である請求項５から８のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための
（ｉ）ＡＣＥ阻害剤もしくはその薬学的に許容される塩；または
（ｉｉ）アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬もしくはその薬学的に許容される塩；
と組み合わせたレニン阻害剤またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１２】
レニン阻害剤がＲＯ６６−１１３２、ＲＯ６６−１１６８および式（ＩＩＩ）：
【化５】
2008515903.tif 000005
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）の化合物；または各々の場合のその薬学的に許容される塩からなる群から選択される請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
レニン阻害剤が式：
【化６】
2008515903.tif 000006
（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり；Ｒ２はメトキシであり；そしてＲ３およびＲ４はイソプロピルである）を有する式（ＩＩＩ）の化合物；またはその薬学的に許容される塩である請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
式（ＩＶ）の化合物がそのヘミフマル酸塩の形態である請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ＡＣＥ阻害剤がベナゼプリルおよびエナラプリルからなる群から選択される請求項１１から１４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
アンギオテンシンＩＩ受容体がバルサルタンまたはその薬学的に許容される塩である請求項１１から１４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための医薬品の製造のためのレニン阻害剤の使用。
【請求項１８】
レニン阻害剤がＲＯ６６−１１３２、ＲＯ６６−１１６８および式（ＩＩＩ）：
【化７】
2008515903.tif 000007
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）の化合物；または各々の場合のその薬学的に許容される塩からなる群から選択される請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
式（ＩＩＩ）の化合物が式：
【化８】
2008515903.tif 000008
（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり；Ｒ２はメトキシであり；そしてＲ３およびＲ４はイソプロピルである）を有するか；またはその薬学的に許容される塩である請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
式（ＩＶ）の化合物がそのヘミフマル酸塩の形態である請求項１９に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
「処置」なる用語は疾患、状態または障害を治す目的での患者の管理およびケアと理解される。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
とりわけ本発明は式：
【化３】
2008515903.tif 000009
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）のδ−アミノ−γ−ヒドロキシ−ω−アリール−アルカン酸アミド誘導体またはその薬学的に許容される塩であるレニン阻害剤に関する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
ＡＣＥ阻害剤の場合、ＡＣＥ阻害剤の好ましい投与量単位は、例えばベナゼプリル約５ｍｇから約２０ｍｇ、好ましくは５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇもしくは４０ｍｇ；カプトプリル約６.５ｍｇから１００ｍｇ、好ましくは６.２５ｍｇ、１２.５ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇもしくは１００ｍｇ；エナラプリル約２.５ｍｇから約２０ｍｇ、好ましくは２.５ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇもしくは２０ｍｇ；フォシノプリル約１０ｍｇから約２０ｍｇ、好ましくは１０ｍｇもしくは２０ｍｇ；ペリンドプリル約２.５ｍｇから約４ｍｇ、好ましくは２ｍｇもしくは４ｍｇ；キナプリル約５ｍｇから約２０ｍｇ、好ましくは５ｍｇ、１０ｍｇもしくは２０ｍｇ；またはラミプリル約１.２５ｍｇから約５ｍｇ、好ましくは１.２５ｍｇ、２.５ｍｇ、もしくは５ｍｇを含む錠剤またはカプセルである。好ましいのは１日３回投与である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６９】
本発明は別々に投与することができる化合物の組み合わせでの予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための方法に関し、本発明はまたキットの形態での別々の医薬組成物を組み合わせることにも関する。キットは例えば別々の２つの医薬組成物：（１）レニン阻害剤、とりわけアリスキレンまたはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物；ならびに（２）ＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を含み得る。（１）および（２）の量は、別々に同時投与したときに有益な治療効果が得られるような量である。キットは分かれたビンまたは分かれたホイルのような別々の組成物を含有する容器を含み、ここで各区画は例えば（１）または（２）を含む複数の投与形態（例えば錠剤）を含有する。これに代えて、活性成分を含有する投与形態を別々にするよりもむしろ、キットは別々の区画を含有でき、その各々が今度は別々の投与形態を含む全投与量を含有する。この型のキットの例はブリスターパックであり、ここで各個々のブリスターは２つ（またはそれより多い）錠剤、医薬組成物（１）を含む第１の（またはそれより多い）錠剤、および医薬組成物（２）を含む第２の（またはそれより多い）錠剤を含有する。典型的にはキットは別々の構成成分の投与のための指示書を含む。別々の構成成分が異なる投与形態（例えば経口および非経口）で投与されるのが好ましいとき、異なる投与間隔で投与されるとき、または組み合わせの個々の構成成分のタイトレーションが処方医により望まれるとき、キット形態は特に有利である。したがって本発明の場合、キットは：
（１）第１の投与形態でレニン阻害剤、とりわけアリスキレン、好ましくはそのヘミフマル酸塩の形態、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む治療上有効量の組成物；
（２）第２の投与形態で、投与後に有益な治療効果が得られるような量のＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物；ならびに
（３）該第１および第２投与形態を含有するための容器；
を含む。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７３】
したがって、レニン阻害剤、またはその薬学的に許容される塩を単独でまたはＡＣＥ阻害剤もしくはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、または各々の場合のその薬学的に許容される塩との組み合わせで、ヒトレニンおよびヒトアンギオテンシノーゲン（ｄＴＧＲ）を発現する二重遺伝子導入ラットの拡張機能障害または拡張期心不全に及ぼすその阻害効果に関して試験することができる。例えば拡張機能障害を発症する前（予防計画）または拡張機能障害を発症した後（処置計画）に動物をアリスキレン（１ｍｇ／ｋｇ／日−３０ｍｇ／ｋｇ／日）で処置することができる。心機能の測定をインビボでラット心臓の組織ドップラー撮像により行うことができる。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７４】
同様にレニン阻害剤、またはその薬学的に許容される塩を単独でまたはＡＣＥ阻害剤もしくはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、または各々の場合のその薬学的に許容される塩との組み合わせで、マウスｒｅｎ−２（レニン）遺伝子を発現するＲｅｎ−２遺伝子導入ラットの拡張機能障害または拡張期心不全に及ぼすその阻害効果に関して試験することができる。これらのラットをストレプトゾトシンの注射により糖尿病にすることができ、そして冠動脈を結紮（糸で縛る）して心筋梗塞を誘起することにより拡張機能障害を誘起することができる。その後から１か月までにわたって心線維症および拡張機能障害が発症する。例えば拡張機能障害を発症する前（予防計画）または拡張機能障害を発症した後（処置計画）に動物をアリスキレン（１ｍｇ／ｋｇ／日−６０ｍｇ／ｋｇ／日）で処置することができる。心機能の測定をインビボでラット心臓の組織ドップラー撮像により行うことができる。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７５】
例としては、４週齢、雄ｄＴＧＲに高血圧を発症させ、そして５.５週齢で代謝ケージに入れる。収縮期血圧（テールカフ）および２４時間アルブミン排泄（ＥＬＩＳＡ、CellTrend, Germany）を Muller et al. Am J Pathol. １６１：１６７９−９３（２００２）および Muller et al. Am J Pathol.１６４：５２１−３２（２００４）により先に記載されたように測定する。ｄＴＧＲは２４時間アルブミン排泄に関して６週目で一致させ、そして各１９匹のラット５群に分配される。ラットが６週齢のときに処置を開始する。ラットにベヒクル処置、アリスキレン０.３ｍｇ／ｋｇ／日および３ｍｇ／ｋｇ／日（皮下ミニポンプによる）、バルサルタン１ｍｇ／ｋｇ／日、およびバルサルタン１０ｍｇ／ｋｇ／日（食餌中で与える）を投与する。死亡率を低下させ、しかも血圧および器官損傷への影響は最低限にする閾値処置として低用量のバルサルタンを選択する。ベヒクル処置動物が８週齢を超えて生存しないことは先の研究から解っており、そしてしたがって、この低用量バルサルタン群が９週で対照群として提供される。心エコー検査（短軸のＭモードトレーシングおよび組織ドップラー撮像；７および９週で群あたりｎ＝５−６）をイソフルラン麻酔下で１５ＭＨｚフェーズドアレイトランスデューサーを用いて実施した（Mazak et al. Circulation. １０９：２７９２−８００（２００４））。心臓ごとのこれらの測定値を決定し、平均化し、そして統計分析する。ＬＶ短軸でＭモードを実施し、そしてリーディングエッジ法に従って測定する。全壁厚を中隔＋左心室後壁の合計として計算する。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７８】
TRIZOL（Gibco Life Technology）を用いてＲＴ−ＰＣＲのためのＬＶ  ｍＲＮＡを単離する。α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）およびβ−ＭＨＣならびに心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）のためのＲＴ−ＰＣＲを０.３または０.９モル／ｌプライマーを含有する SybrGreen ＰＣＲ Master Mix（Applied Biosystems, Germany）２５μｌおよび５７００ Sequence Detection System（Applied Biosystems）中逆転写反応物１μｌ中で実施する。熱サイクリング条件は９５℃で１０分の初期変性工程、続く９５℃で１５秒間および６５℃で１分間の４０サイクルを含む。ハウスキーピング遺伝子（要求に応じて利用可能なプライマー配列）としてヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子にｍＲＮＡ発現を標準化する。