【手続補正書】
【提出日】平成20年10月17日(2008.10.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）酵母ビヒクルと、
（ｂ）ＨＣＶ配列を含むＮＳ３−Ｃｏｒｅ融合タンパク質とを含む組成物であり、
上記ＨＣＶ配列は、ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ配列、またはＨＣＶ Ｃｏｒｅ配列の少なくとも一部分に連結された少なくとも１つの免疫原性ドメイン、もしくは少なくとも１つの免疫原性ドメインからなり、
上記ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ配列は、天然のＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼの触媒ドメインを欠失しており；
上記ＨＣＶ融合タンパク質は酵母ビヒクルによって発現され；且つ
上記組成物はＨＣＶ ＮＳ３特異的な免疫応答およびＨＣＶ Ｃｏｒｅ特異的な免疫応答を誘発する、組成物。
【請求項２】
上記ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼは、ＮＳ３全長タンパク質のＮ末端の８８アミノ酸の後に続く、２６２アミノ酸（配列番号２０の第１１１５位〜第１３７８位）からなる請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
上記ＨＣＶ Ｃｏｒｅ配列は、ＨＣＶ Ｃｏｒｅの全長配列の第２位〜第１４０位のアミノ酸（配列番号２０の第２位〜第１４０位）からなる請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
上記ＨＣＶ Ｃｏｒｅの疎水性のＣ末端配列は切断されている請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
上記融合タンパク質は、配列番号２からなる請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
（ａ）酵母ビヒクルと、
（ｂ）ＨＣＶ配列を含むＨＣＶ融合タンパク質とを含む組成物であり、
上記ＨＣＶ配列は不活性化された、全長のＨＣＶ ＮＳ３タンパク質、または少なくとも１つの免疫原性ドメインからなり、
上記ＨＣＶ融合タンパク質は酵母ビヒクルにより発現され；且つ
上記組成物はＨＣＶ ＮＳ３特異的な免疫応答を誘発する、組成物。
【請求項７】
上記ＨＣＶ ＮＳ３タンパク質は、配列番号２０のＨＣＶ ポリタンパク質配列の第１１６５位の残基に変異を含み、タンパク質分解活性が不活性化している請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
上記融合タンパク質は、配列番号４からなる請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
（ａ）酵母ビヒクルと、
（ｂ）ＨＣＶ配列を含むＨＣＶ融合タンパク質とを含む組成物であり、
上記ＨＣＶ配列は、ＨＣＶ Ｅ１タンパク質、またはＨＣＶ Ｅ２タンパク質に融合された少なくとも１つの免疫原性ドメイン、もしくは少なくとも１つの免疫原性ドメインからなり、
上記ＨＣＶ融合タンパク質は酵母ビヒクルにより発現され；且つ
上記組成物はＨＣＶ Ｅ１特異的な免疫応答、およびＨＣＶ Ｅ２特異的な免疫応答を誘発する、組成物。
【請求項１０】
上記ＨＣＶ Ｅ１タンパク質は全長のタンパク質であり、且つ上記ＨＣＶ Ｅ２タンパク質は全長のタンパク質である請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
上記融合タンパク質は、配列番号１２からなる請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】
上記ＨＣＶ Ｅ１タンパク質は、ＨＣＶ Ｅ１の第１位〜第１５６のアミノ酸（配列番号２０の第１９２位〜第３４７位）からなる切断されたＥ１タンパク質である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１３】
上記ＨＣＶ Ｅ２タンパク質は、ＨＣＶ Ｅ２の第１位〜第３３４位のアミノ酸（配列番号２０の第３８４位〜第７１７位）からなる切断されたＥ２タンパク質である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１４】
上記融合タンパク質は、配列番号６からなる請求項９に記載の組成物。
【請求項１５】
（ａ）酵母ビヒクルと、
（ｂ）ＨＣＶ配列を含むＨＣＶ融合タンパク質とを含む組成物であり、
上記ＨＣＶ配列は膜貫通ドメインが欠失したＨＣＶ ＮＳ４ｂタンパク質、または少なくとも１つの免疫原性ドメインからなり、
上記ＨＣＶ融合タンパク質は酵母ビヒクルにより発現され；且つ
上記組成物はＨＣＶ ＮＳ４ｂ特異的な免疫応答を誘発する、組成物。
【請求項１６】
上記膜貫通ドメインが欠失したＨＣＶ ＮＳ４ｂタンパク質は、ＨＣＶ ＮＳ４ｂの第１位〜第６９位のアミノ酸（配列番号２０の第１７１２位〜第１７８０位）と、第１７７位〜第２６１位のアミノ酸（配列番号２０の第１８８８位〜第１９７２位）とが連結されている請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
上記融合タンパク質は、配列番号８からなる請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
（ａ）酵母ビヒクルと、
（ｂ）ＨＣＶ配列を含むＨＣＶ融合タンパク質とを含む組成物であり、
上記ＨＣＶ配列は、切断ＨＣＶ Ｃｏｒｅタンパク質、もしくは膜貫通ドメインが欠失したＨＣＶ Ｅ１タンパク質に融合された少なくとも１つの免疫原性ドメイン、または膜貫通ドメインが欠失したＨＣＶ Ｅ２タンパク質に融合された少なくとも１つの免疫原性ドメイン、もしくは少なくとも１つの免疫原性ドメインからなり、
上記ＨＣＶ融合タンパク質は酵母ビヒクルにより発現され；且つ
上記組成物はＨＣＶ Ｃｏｒｅ特異的な免疫応答、ＨＣＶ Ｅ１特異的な免疫応答、およびＨＣＶ Ｅ２特異的な免疫応答を誘発する、組成物。
【請求項１９】
上記切断ＨＣＶ Ｃｏｒｅタンパク質は、ＨＣＶ Ｃｏｒｅタンパク質の第２位〜第１４０位（配列番号２０の第２位〜第１４０位）からなり、
上記膜貫通ドメインが欠失したＨＣＶ Ｅ１タンパク質は、ＨＣＶ Ｅ１タンパク質の第１位〜第１５６位（配列番号２０の第１９２位〜第３４７位）からなり、且つ
上記膜貫通ドメインが欠失したＨＣＶ Ｅ２タンパク質は、ＨＣＶ Ｅ２タンパク質の第１位〜第３３４位（配列番号２０の第３８４位〜第７１７位）からなる、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
上記融合タンパク質は、配列番号１４からなる請求項１８に記載の組成物。
【請求項２１】
（ａ）酵母ビヒクルと、
（ｂ）ＨＣＶ配列を含むＨＣＶ融合タンパク質とを含む組成物であり、
上記ＨＣＶ配列は、不活性化されたＨＣＶ ＮＳ３、もしくはＨＣＶ ＮＳ４ａに融合された少なくとも１つの免疫原性ドメイン、または膜貫通ドメインを欠くＨＣＶ ＮＳ４ｂに融合された少なくとも１つの免疫原生ドメイン、もしくは少なくとも１つの免疫原生ドメインからなり、
上記ＨＣＶ融合タンパク質は酵母ビヒクルにより発現され；且つ
上記組成物は、ＨＣＶ ＮＳ３特異的な免疫応答、ＨＣＶ ＮＳ４ａ特異的な免疫応答、およびＨＣＶ ＮＳ４ｂ特異的な免疫応答を誘発する、組成物。
【請求項２２】
上記ＨＣＶ ＮＳ３タンパク質は、ＨＣＶ ＨＳ３の第１位〜第６３１位（配列番号２０の第１０２７位〜第１６５７位）からなり；
配列番号２０の第１１６５位のセリンがアラニンに置換され、プロテアーゼが不活性化しており；
上記ＨＣＶ ＮＳ４ａタンパク質は、ＨＣＶ ＮＳ４ａタンパク質の第１位〜第５４位（配列番号２０の第６３５位〜第６９１位）からなり；且つ
上記ＨＣＶ ＮＳ４ｂタンパク質は、ＨＣＶ ＮＳ４ｂの第１７７位〜第２６１位（配列番号２０の第１８８８位〜第１９７２位）に融合されたＨＣＶ ＮＳ４ｂの第１位〜第６９位（配列番号２０の第１７１２位〜第１７８０位）からなる、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
上記融合タンパク質は、配列番号１６からなる請求項２１に記載の組成物。
【請求項２４】
（ａ）酵母ビヒクルと、
（ｂ）ＨＣＶ配列を含むＨＣＶ融合タンパク質とを含む組成物であり、
上記ＨＣＶ配列は、ＨＣＶ ＮＳ５ａタンパク質、またはＮＳ５ｂのＣ末端が欠失し、不活性化されているＨＣＶ ＮＳ５ｂタンパク質に融合された少なくとも１つの免疫原性ドメイン、もしくは少なくとも１つの免疫原性ドメインからなり、
上記ＨＣＶ融合タンパク質は酵母ビヒクルにより発現され；且つ
上記組成物は、ＨＣＶ ＮＳ５ａ特異的な免疫応答を誘発する、組成物。
【請求項２５】
上記ＨＣＶ ＮＳ５ａタンパク質は、ＨＣＶ ＮＳ５ａの第１位〜第４４８位（配列番号２０の第１９７３位〜第２４２０位）からなり；且つ
上記ＨＣＶ ＮＳ５ｂタンパク質は、ＨＣＶ ＮＳ５ｂの第１位〜第５３９位（配列番号２０の第２４２１位〜第２９５９位）からなる、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
上記融合タンパク質は、配列番号１８からなる請求項２４に記載の組成物。
【請求項２７】
（ａ）酵母ビヒクルと、
（ｂ）ＨＣＶ配列を含むＨＣＶ融合タンパク質とを含む組成物であり、
上記ＨＣＶ配列は１つと５つとの間のＨＣＶタンパク質の融合体、または免疫原性ドメインからなり、
上記のＨＣＶタンパク質は以下からなる群から選択される；ＨＣＶ Ｃｏｒｅ（配列番号２０の第１位〜第１９１位）；ＨＣＶ Ｅ１エンベロープ糖タンパク質（配列番号２０の第１９２位〜第３８３位）；ＨＣＶ Ｅ２エンベロープ糖タンパク質（配列番号２０の第３８４位〜第７４６位）；ＨＣＶ Ｐ７イオンチャネル（配列番号２０の第７４７位〜第８０９位）；ＨＣＶ ＮＳ２金属プロテアーゼ（配列番号２０の第８１０位〜第１０２６位）；ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ／ヘリカーゼ（配列番号２０の第１０２７位〜第１６５７位）；ＨＣＶ ＮＳ４ａ ＮＳ３プロテアーゼ補因子（配列番号２０の第１６５８位〜第１７１１位）；ＨＣＶ ＮＳ４ｂ（配列番号２０の第１７１２位〜第１９７２位）；ＨＣＶ ＮＳ５ａ（配列番号２０の第１９７３位〜第２４２０位）；およびＨＣＶ ＮＳ５ｂ ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（配列番号２０の第２４２１位〜第３０１１位）；
上記ＨＣＶ融合タンパク質は酵母ビヒクルにより発現され；且つ
上記組成物は、各ＨＣＶタンパク質、または上記ＨＣＶ融合タンパク質の免疫原性ドメインに対する免疫応答を誘発する、組成物。
【請求項２８】
少なくとも１つの生物学的応答の修飾因子をさらに含む請求項１〜２７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２９】
請求項１〜２７のいずれか１項に記載の組成物の使用方法であって、
ＨＣＶ抗原に対する抗原特異的な細胞性免疫応答を誘発させる製剤の調製において、上記組成物をいずれか１以上使用する使用方法。
【請求項３０】
請求項１〜２７のいずれか１項に記載の組成物の使用方法であって、
疾患もしくは異常を治療または予防するための製剤の調製において、上記組成物をいずれか１以上使用する使用方法。
【請求項３１】
請求項１〜２７のいずれか１項に記載の組成物の使用方法であって、
ＨＣＶに感染している個体群を治療するための製剤の調製において、上記組成物をいずれか１以上使用する使用方法。
【請求項３２】
請求項１〜２７のいずれか１項に記載の組成物の使用方法であって、
ＨＣＶに感染する危険がある個体群を免疫するための製剤の調製において、上記組成物をいずれか１以上使用する使用方法。
【請求項３３】
ＨＣＶ配列を含む単離されたＨＣＶ融合タンパク質であり、
上記ＨＣＶ配列は、ＨＣＶ Ｃｏｒｅ配列の少なくとも１つの免疫原性ドメインに連結された、ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼの少なくとも１つの免疫原性ドメインからなり、
上記ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼは、天然のＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼの触媒ドメインを欠失している、ＨＣＶ融合タンパク質。
【請求項３４】
上記ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼは、ＮＳ３全長タンパク質のＮ末端の８８アミノ酸に後に続くＨＣＶ ＮＳ３の２６２アミノ酸（配列番号２０の第１１１５位〜第１３７６位）からなる請求項３３に記載の単離された融合タンパク質。
【請求項３５】
上記ＨＣＶ Ｃｏｒｅの疎水性のＣ末端配列は、切断されている請求項３３に記載の単離された融合タンパク質。
【請求項３６】
上記ＨＣＶ Ｃｏｒｅの配列は、ＨＣＶ Ｃｏｒｅの全長配列の第２位〜第１４０位のアミノ酸（配列番号２０の第２位〜第１４０位）からなる請求項３４に記載の単離された融合タンパク質。
【請求項３７】
配列番号２からなる請求項３４に記載の単離された融合タンパク質。
【請求項３８】
配列番号４、６、８、１２、１４、１６、および１８からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、単離された融合タンパク質。
【請求項３９】
請求項３３〜３８のいずれか１項に記載の融合タンパク質をコードする核酸配列を含む、単離された核酸分子。
【請求項４０】
請求項３９に記載の単離された核酸分子を含む、組換え核酸分子。
【請求項４１】
請求項４０に記載の組換え核酸分子が導入された、組換え細胞。
【請求項４２】
酵母である請求項４１に記載の組換え細胞。
【請求項４３】
（ａ）請求項３３〜３８のいずれか１項に記載のＨＣＶ融合タンパク質と、
（ｂ）薬学的に許容可能な担体とを含む、組成物。
【請求項４４】
請求項３３〜３８のいずれか１項に記載のＨＣＶ融合タンパク質をコードする単離された核酸分子を含む、組成物。
【請求項４５】
ＨＣＶ抗原に対する抗原特異的な細胞性免疫応答を誘発するための製剤の調製において、請求項３３〜３８のいずれか１項に記載の融合タンパク質を使用する方法。
【請求項４６】
請求項３３〜３８のいずれか１項に記載の融合タンパク質の使用方法であって、
ＨＣＶに感染している個体群を治療する、またはＨＣＶに感染する危険がある個体群を免疫するための製剤の調製において、上記融合タンパク質を使用する使用方法。