【手続補正書】
【提出日】令和1年7月24日(2019.7.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
特異的にグリピカン3を認識する抗体であって、軽鎖可変領域および重鎖可変領域を有し、かつ、
その軽鎖可変領域のCDR1は、配列番号16、配列番号67、配列番号69からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有し、
その軽鎖可変領域のCDR2は、配列番号18、配列番号68、配列番号70からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有し、
その軽鎖可変領域のCDR3は、配列番号20のアミノ酸配列を有し、
その重鎖可変領域のCDR1は、配列番号10、配列番号60、配列番号62、配列番号64からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有し、
その重鎖可変領域のCDR2は、配列番号12、配列番号61、配列番号63、配列番号65、配列番号66、配列番号71からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有し、
その重鎖可変領域のCDR3は、配列番号14、配列番号72からなる群から選ばれるアミノ酸配列を有する、
抗体であって、
好ましくは、
前記の抗体は、
軽鎖可変領域が配列番号16で示されるCDR1、配列番号18で示されるCDR2、配列番号20で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号10で示されるCDR1、配列番号12で示されるCDR2、配列番号14で示されるCDR3を有する抗体(a)、
軽鎖可変領域が配列番号16で示されるCDR1、配列番号18で示されるCDR2、配列番号20で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号60で示されるCDR1、配列番号61で示されるCDR2、配列番号14で示されるCDR3を有する抗体(b)、
軽鎖可変領域が配列番号16で示されるCDR1、配列番号18で示されるCDR2、配列番号20で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号62で示されるCDR1、配列番号63で示されるCDR2、配列番号14で示されるCDR3を有する抗体(c)、
軽鎖可変領域が配列番号16で示されるCDR1、配列番号18で示されるCDR2、配列番号20で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号64で示されるCDR1、配列番号65で示されるCDR2、配列番号14で示されるCDR3を有する抗体(d)、
軽鎖可変領域が配列番号67で示されるCDR1、配列番号68で示されるCDR2、配列番号20で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号10で示されるCDR1、配列番号66で示されるCDR2、配列番号14で示されるCDR3を有する抗体(e)、
軽鎖可変領域が配列番号69で示されるCDR1、配列番号70で示されるCDR2、配列番号20で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号10で示されるCDR1、配列番号66で示されるCDR2、配列番号14で示されるCDR3を有する抗体(f)、
軽鎖可変領域が配列番号16で示されるCDR1、配列番号70で示されるCDR2、配列番号20で示されるCDR3を有するか、重鎖可変領域が配列番号10で示されるCDR1、配列番号71で示されるCDR2、配列番号72で示されるCDR3を有する抗体(g)、
（a）〜（g）のうちのいずれか1つに記載の抗体によって識別される抗原決定基と同様の抗原決定基を識別する抗体（h）、
から選ばれる抗体であり、
より好ましくは、
抗体（a）の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号4のうちの1〜121番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号4のうちの137〜247番目で示されるか、
抗体（b）の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号25のうちの1〜121番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号25のうちの137〜247番目で示されるか、
抗体（c）の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号27のうちの1〜121番目で示され、
または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号27のうちの137〜247番目で示されるか、
抗体（d）の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号29のうちの1〜121番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号29のうちの137〜247番目で示されるか、
抗体（e）の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号31のうちの1〜121番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号31のうちの137〜247番目で示されるか、
抗体（f）の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号33のうちの1〜121番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号33のうちの137〜247番目で示されるか、または
抗体（g）の重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号35のうちの1〜121番目で示され、または前記の抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号35のうちの137〜247番目で示される、
抗体。
【請求項２】
特異的にグリピカン3を認識する抗体であって、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含有し、その重鎖可変領域が配列番号73で示されるCDR1、配列番号74で示されるCDR2、配列番号75で示されるCDR3を含むか、その軽鎖可変領域が配列番号76で示されるCDR1、配列番号77で示されるCDR2、配列番号78で示されるCDR3を含む抗体であって、
好ましくは、
当該抗体が、ヒト化モノクローナル抗体で、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含有し、その重鎖可変領域が配列番号73で示されるCDR1、配列番号74で示されるCDR2、および配列番号75で示されるCDR3を含むか、その軽鎖可変領域が配列番号76で示されるCDR1、配列番号77で示されるCDR2、および配列番号78で示されるCDR3を含む抗体であって、
より好ましくは、
当該抗体は配列番号58で示されるアミノ酸配列の重鎖可変領域、または配列番号59で示されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域を有するか、または
当該抗体は配列番号81で示されるアミノ酸配列の重鎖可変領域、または配列番号82で示されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域を有する抗体。
【請求項３】
請求項1または2に記載の抗体をコードする核酸。
【請求項４】
請求項3に記載の核酸を含む発現ベクター。
【請求項５】
請求項4に記載の発現ベクターを含むか、またはゲノムに請求項3に記載の核酸が組み込まれた宿主細胞。
【請求項６】
請求項1または2に記載の抗体の使用であって、特異的にグリピカン3を発現する腫瘍細胞を標的とする標的性薬物、抗体薬物抱合体または多機能抗体の製造、または
グリピカン3を発現する腫瘍を診断する試薬の製造、または
キメラ抗原受容体で修飾された免疫細胞の製造における使用。
【請求項７】
請求項1または2に記載の抗体と、
それと連結した、腫瘍表面マーカーを標的とする分子、腫瘍を抑制する分子、免疫細胞の表面マーカーを標的とする分子または検出可能な標識物から選ばれる機能性分子と、
を含む多機能免疫複合体であり、
好ましくは、
前記の腫瘍表面マーカーを標的とする分子は腫瘍表面マーカーと結合する抗体または配位子であるか、
前記の腫瘍を抑制する分子は抗腫瘍サイトカインまたは抗腫瘍毒素で、好ましくは、前記のサイトカインはIL-12、IL-15、IFN-β、TNF-αを含むか、または
前記の検出可能な標識物は、蛍光標識物、呈色標識物を含むか、または
免疫細胞の表面マーカーを標的とする分子はT細胞の表面マーカーと結合する抗体で、請求項1または2に記載の抗体とT細胞が関与する二重機能抗体になることができ、
より好ましくは、
前記の腫瘍表面マーカーと結合する抗体は、グリピカン3以外のほかの抗原を認識する抗体であって、前記のほかの抗原は、EGFR、EGFRvIII、メソテリン（mesothelin）、HER2、EphA2、Her3、EpCAM、MUC1、MUC16、CEA、クローディン18.2、葉酸受容体、クローディン6、WT1、NY-ESO-1、MAGE 3、ASGPR1またはCDH16を含むか、または
前記の免疫細胞の表面マーカーと結合する抗体は抗CD3抗体であり、
より好ましくは、
融合ポリペプチドで、かつ請求項1または2に記載の抗体およびそれと連結した機能性分子の間に、さらに連結ペプチドが含まれている多機能免疫複合体。
【請求項８】
請求項7に記載の多機能免疫複合体をコードする核酸。
【請求項９】
請求項7に記載の多機能免疫複合体の使用であって、抗腫瘍薬の製造、または
グリピカン3を発現する腫瘍を診断する試薬の製造、または
キメラ抗原受容体で修飾された免疫細胞、好ましくは、T細胞、NK細胞またはNKT細胞を含む免疫細胞の製造における使用。
【請求項１０】
請求項1または2に記載の抗体を含むキメラ抗原受容体であって、前記のキメラ抗原受容体は順に連結した請求項1または2に記載の抗体、膜貫通領域および細胞内シグナル領域を含み、前記の細胞内シグナル領域はCD3ζ、FcεRIγ、CD27、CD28、CD137、CD134、MyD88、CD40の細胞内シグナル領域の配列、またはこれらの組み合わせから選ばれるキメラ抗原受容体であり、
好ましくは、
前記の膜貫通領域はCD8またはCD28の膜貫通領域を含むか、または
前記のキメラ抗原受容体は、
請求項1または2に記載の抗体、CD8およびCD3ζ、
請求項1または2に記載の抗体、CD8、CD137およびCD3ζ、
請求項1または2に記載の抗体、CD28分子の膜貫通領域、CD28分子の細胞内シグナル領域およびCD3ζ、または
請求項1または2に記載の抗体、CD28分子の膜貫通領域、CD28分子の細胞内シグナル領域、CD137およびCD3ζ、
のような順で連結した抗体、膜貫通領域および細胞内シグナル領域を含むか、または
前記の抗体は一本鎖抗体またはドメイン抗体であるか。または
前記のキメラ抗原受容体は、
配列番号49またはそのうちの22〜346番目で示されるアミノ酸配列、
配列番号50またはそのうちの22〜447番目で示されるアミノ酸配列、
配列番号51またはそのうちの22〜491番目で示されるアミノ酸配列、
配列番号52またはそのうちの22〜494番目で示されるアミノ酸配列、
配列番号53またはそのうちの22〜536番目で示されるアミノ酸配列、
配列番号86で示されるアミノ酸配列、
配列番号88で示されるアミノ酸配列、または
配列番号90で示されるアミノ酸配列、
を有するキメラ抗原受容体。
【請求項１１】
請求項10に記載のキメラ抗原受容体をコードする核酸。
【請求項１２】
請求項11に記載の核酸を含む発現ベクター。
【請求項１３】
請求項12に記載のベクターを含むウイルス。
【請求項１４】
請求項10に記載のキメラ抗原受容体、または請求項11に記載の核酸、または請求項12に記載の発現ベクター、または請求項13に記載のウイルスの使用であって、
好ましくは、
前記のグリピカン3を発現する腫瘍は、肝臓癌、メラノーマ、卵巣明細胞癌、卵黄嚢腫、神経芽細胞腫を含む、
グリピカン3を発現する腫瘍を標的とする遺伝子修飾された免疫細胞の製造における使用。
【請求項１５】
請求項11に記載の核酸、または請求項12に記載のベクターまたは請求項13に記載のウイルスを形質導入されたか、
表面に請求項10のいずれかに記載のキメラ抗原受容体が発現され、
好ましくは、
さらに、外来のサイトカインのコード配列を担持し、好ましくは、前記のサイトカインは、IL-12、IL-15またはIL-21を含むか、または
さらにもう1種類のキメラ抗原受容体を発現し、当該受容体はCD3ζを含まないが、CD28の細胞内シグナルドメイン、CD137の細胞内シグナルドメインまたはこの両者の組み合わせを含むか、または
さらにケモカイン受容体を発現し、好ましくは、前記のケモカイン受容体はCCR2を含むか、または
さらにケモカイン受容体を発現し、好ましくは、前記のケモカイン受容体はCCR2を含むか、または
さらにPD-1の発現を低下させるsiRNAまたはPD-L1を遮断するタンパク質を発現するか、または
さらに安全スイッチを発現し、好ましくは、前記の安全スイッチは誘導性カスパーゼ9（iCaspase-9）、短縮型EGFR（Truancated EGFR）またはRQR8を含むか、または
前記の免疫細胞はT細胞、NK細胞またはNKT細胞を含む、
遺伝子修飾された免疫細胞。
【請求項１６】
請求項15に記載の遺伝子修飾された免疫細胞の使用であって、腫瘍を抑制する薬物の製造に使用され、前記の腫瘍はグリピカン3を発現する腫瘍である使用。
【請求項１７】
請求項1または2に記載の抗体または当該抗体をコードする核酸、または
請求項7に記載の免疫複合体または当該複合体をコードする核酸、または
請求項10に記載のキメラ抗原受容体または当該キメラ抗原受容体をコードする核酸、または
請求項15に記載の遺伝子修飾された免疫細胞、
を含む薬物組成物。