(57)【要約】  本発明に係る癌治療薬は、下記化合物Ａまたはその医薬的に許容し得る塩と、下記化合物Ｂまたはその医薬的に許容し得る塩とを組み合わせてなることを特徴とする；  化合物Ａ：下記一般式（１）で表される化合物Ａ１またはその水溶性プロドラッグＡ２；  化合物Ｂ：白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物；2007023778.tif 000058（式中、Ｒ11は水素原子、ハロゲン原子、またはＣ１−Ｃ６アルキル基であり；  Ｒ12は水素原子、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基または水酸基であり；  Ｒ21は、水素原子または下記Ｂ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル基を示し、  Ｂ群：Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環およびアリール環（アリール環は、ヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、およびジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基からなる群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい。）；  Ｒ22は、水素原子、アミノ基、下記Ｃ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基またはジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基を示し、  Ｃ群：Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環またはアリール環（アリール環はヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基またはジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基からなる群より選択される１〜３個の置換基を有していてもよい。）。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化合物Ａまたはその医薬的に許容し得る塩と、下記化合物Ｂまたはその医薬的に許容し得る塩とを組み合わせてなる、癌治療薬；
化合物Ａ：下記一般式（１）で表される化合物Ａ１またはその水溶性プロドラッグＡ２；
化合物Ｂ：白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物；
2007023778.tif 000051
（式中、Ｒ11は水素原子、ハロゲン原子、またはＣ１−Ｃ６アルキル基であり；
Ｒ12は水素原子、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基または水酸基であり；
Ｒ21は、水素原子または下記Ｂ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル基を示し、
Ｂ群：Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環およびアリール環（アリール環は、ヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、およびジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基からなる群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい。）；
Ｒ22は、水素原子、アミノ基、下記Ｃ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基またはジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基を示し、
Ｃ群：Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環またはアリール環（アリール環はヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基またはジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基からなる群より選択される１〜３個の置換基を有していてもよい。）。
【請求項２】
前記化合物Ａが、前記化合物Ａ１であり、
前記化合物Ｂが、白金系抗癌化合物である、請求項１に記載の癌治療薬。
【請求項３】
前記化合物Ａが、前記化合物Ａ１の水溶性プロドラッグＡ２であり、
前記化合物Ｂが、白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物である、請求項１に記載の癌治療薬。
【請求項４】
前記化合物Ｂが５−ＦＵ系化合物を含む場合、前記癌治療薬が、さらにロイコボリンを含む、請求項１または３に記載の癌治療薬。
【請求項５】
前記水溶性プロドラッグＡ２が、下記一般式（２）で表される化合物である、請求項１〜４のいずれかに記載の癌治療薬；
2007023778.tif 000052
（式中、  Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は、請求項１に記載の定義と同じであり；
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示し；
Ｗは、２級アミノ基を含む２価の基、３級アミノ基を含む２価の基、またはスルホニル基を含む２価の基を示す。）。
【請求項６】
前記水溶性プロドラッグＡ２が、下記一般式（３）で表される化合物である、請求項１〜５のいずれかに記載の癌治療薬；
2007023778.tif 000053
〔式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は請求項１に記載の定義と同じであり；
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示し；
Ｒ2およびＲ4はそれぞれ独立に水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基またはアミノ酸側鎖を示し、Ｒ3はＣ１−Ｃ６アルキル基を示し、ＸはＣ＝ＯまたはＣ１−Ｃ３アルキレン基を示す。  〕。
【請求項７】
前記Ｒ1が水素原子、メチル基またはエチル基である、請求項６に記載の癌治療薬。
【請求項８】
前記Ｒ2が水素原子またはメチル基である、請求項６または７に記載の癌治療薬。
【請求項９】
前記Ｒ3がＣ１−Ｃ３アルキル基である、請求項６〜８のいずれかに記載の癌治療薬。
【請求項１０】
前記Ｒ4が水素原子またはメチル基である、請求項６〜９のいずれかに記載の癌治療薬。
【請求項１１】
前記水溶性プロドラッグＡ２が、下記一般式（４）で表される化合物である、請求項１〜５のいずれかに記載の癌治療薬；
2007023778.tif 000054
〔式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は請求項１に記載の定義と同じであり；
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示し；
Ｒ5は水素原子または−ＣＯＯＲ6（式中、Ｒ6は水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基を示し；
ｎは１〜６の整数を示す。〕。
【請求項１２】
前記Ｒ1が水素原子、メチル基またはエチル基である、請求項１１に記載の癌治療薬。
【請求項１３】
前記ｎが１であって、前記Ｒ5が水素原子または−ＣＯＯＲ6（式中、Ｒ6は水素原子、またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示す。）である、請求項１１または１２に記載の癌治療薬。
【請求項１４】
前記ｎが２〜６のいずれかの整数であって、前記Ｒ5が水素原子である、請求項１１または１２に記載の癌治療薬。
【請求項１５】
前記水溶性プロドラッグＡ２が、下記一般式（５）で表される化合物である、請求項１〜５のいずれかに記載の癌治療薬；
2007023778.tif 000055
〔式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は請求項１に記載の定義と同じであり；
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示し；
Ｒ6は水素原子、分岐Ｃ３−Ｃ１０アルキル基またはＣ３−Ｃ８シクロアルキル基であり；
Ｒ7は天然または非天然アミノ酸の側鎖であり；
ｍは１〜３の整数である。〕。
【請求項１６】
Ｒ1が水素原子である、請求項１５に記載の癌治療薬。
【請求項１７】
Ｒ6が水素原子である、請求項１５または１６に記載の癌治療薬。
【請求項１８】
Ｒ7が、２−メチルプロピル、シクロヘキシルメチル、ベンジル、インドール−３−イルメチル、４−アミノブチル、または４−アミノプロピルである、請求項１５〜１７のいずれかに記載の癌治療薬。
【請求項１９】
前記Ｒ11が水素原子であり；
前記Ｒ12が水素原子またはＣ１−Ｃ３アルキル基であり；
前記Ｒ21が、水素原子または下記Ｄ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよいＣ１−Ｃ８アルキル基であり；
前記Ｒ22が、水素原子、アミノ基、または下記Ｄ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基である、請求項１〜１８のいずれかに記載の癌治療薬；
Ｄ群：Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ３アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ３アルキルアミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環およびアリール環（アリール環はヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、およびハロゲン原子からなる群より選択される１〜３個の置換基を有していてもよい。）。
【請求項２０】
前記化合物Ａ１またはその水溶性プロドラッグＡ２の活性体（Ａ１）が、下記からなる群から選択される少なくとも１種の化合物である、請求項１〜１９のいずれかに記載の記載の癌治療薬；
a）(9S)-1-ブチル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
b）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-[2-(4-モルホリノ)エチル]-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
c）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-プロピル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
d）(9S)-1-ベンジル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
e）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-フェネチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
f）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-フェネチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
g）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-フェニルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
h）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
i）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
j）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
k）(9S)-9-エチル-1-ヘプチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
l）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-メチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
m）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
n）(9S)-9-エチル-1-ヘキシル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
o）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
p）(9S)-1,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
q）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-[2-(4-メトキシフェニル)エチル]-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
r）(9S)-1-[2-(4-クロロフェニル)エチル]-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
s）(9S)-9-エチル-1-[2-(4-フルオロフェニル)エチル]-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
t）(9S)-9-エチル-1-[2-(4-フルオロフェニル)エチル]-9-ヒドロキシ-2-メチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
u）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(1-メチルエチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
v）(9S)-1-(3,3-ジメチルブチル)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
w）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-メトキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
x）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
y）(9RS)-9-エチル-9-ヒドロキシ-4-メチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
z）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-ヒドロキシエチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
aa）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-ヒドロキシエチル)-2-メチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
bb）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-メチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
cc）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
dd）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-2-プロピル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ee）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ff）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
gg）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
hh）(9S)-2-クロロメチル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ii）(9S)-2-アミノメチル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
jj）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-2-トリフルオロメチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
kk）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-2-メチルチオ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ll）(9S)-9-エチル-2-エチルチオ-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
mm）(9S)-2-(ジメチルアミノ)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；および
nn）(9S)-2-(ブチルアミノ)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン。
【請求項２１】
前記水溶性プロドラッグＡ２が下記式で表される、請求項１〜１０のいずれかに記載の癌治療薬。
2007023778.tif 000056
【請求項２２】
前記化合物Ａ１が下記式で表される、請求項１または２に記載の癌治療薬。
2007023778.tif 000057
【請求項２３】
癌治療剤が配合剤である、請求項１〜２２のいずれかに記載の癌治療薬。
【請求項２４】
癌治療薬が、化合物Ａを含有してなる薬剤と、化合物Ｂを含有してなる薬剤とからなるキットである、請求項１〜２２のいずれかに記載の癌治療薬。
【請求項２５】
前記癌が固形腫瘍である、請求項１〜２４のいずれかに記載の癌治療薬。
【請求項２６】
前記癌が結腸直腸癌、肺癌、乳癌、胃癌、子宮頸癌、膀胱癌、直腸癌、膵臓癌および／または卵巣癌である、請求項１〜２５のいずれかに記載の癌治療薬。
【請求項２７】
癌患者に、治療上有効量の請求項１〜２６のいずれかに記載の癌治療薬を投与する段階を含む、癌の治療方法。
【請求項２８】
癌治療薬を調製するための、請求項１〜２６のいずれかに記載の癌治療薬の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な抗癌併用治療薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
カンプトテシン類、シスプラチンなどの白金系癌化合物、タキサン類などの抗癌化合物は、広範な腫瘍細胞に対して活性を有し、抗癌剤の治療剤として期待されている（特許文献１、２）。これらの化合物は、抗癌剤として優れた化合物もあるが、更なる活性の向上が求められている。
ところで、上記化合物は、脂溶性の高いものが多く、その低い水溶性のため、注射（非経口投与）での使用が制限される場合があった（特許文献１）。このような脂溶性薬剤の水への可溶化のため、水溶性プロドラッグの研究も報告されている（非特許文献１、特許文献１）。
【特許文献１】ＷＯ０３／０４３６３１
【特許文献２】ＷＯ０３／０４５９５２
【非特許文献１】Shan et al, J.Pharm.Sci.,86(7),765-767,1997
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、カンプトテシン類および他の抗癌剤について、抗癌効果の更なる向上を図ることを課題とする。
ところで、従来、脂溶性薬剤の水溶性プロドラッグは、その多くは、投与後に、主に酵素により活性化体に変換されるが、投与後一定時間経過後に活性化体に変換される為、変換に種間差や個体差が認められ、開発の一つのさまたげとなっていた。このため、非経口投与が可能な水溶性プロドラッグであって、酵素変換によらない種間差や個体差の小さいプロドラッグが求められていた。また、血中において活性体への変換速度及び効率が十分でない場合があり、薬剤の血中濃度上昇時間の短縮化が求められていた。このため本願発明者らは、既に、非経口投与が可能な水溶性プロドラッグであって、酵素変換によらない種間差や個体差の小さい、活性体への変換速度及び効率に優れたプロドラッグの提供に成功している（PCT/JP2005/6957：本願優先日以降にWO05/097803として公開）。従って、本発明は、好ましくは、特定の水溶性プロドラッグを含むカンプトテシン類および他の抗癌剤について、抗癌効果の更なる向上を図ることを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本件発明者らは、上記課題を解決するべく鋭意研究した結果、特定構造のカンプトテシン類またはその水溶性プロドラッグと、特定の抗癌剤とを併用すると、抗癌効果が著しく向上することを見出し、本発明を完成するに至った。【０００５】
すなわち本件発明は、以下を含む。
〔１〕
下記化合物Ａまたはその医薬的に許容し得る塩と、下記化合物Ｂまたはその医薬的に許容し得る塩とを組み合わせてなる、癌治療薬；
化合物Ａ：下記一般式（１）で表される化合物Ａ１またはその水溶性プロドラッグＡ２；
化合物Ｂ：白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物；
2007023778.tif 000002
（式中、  Ｒ11は水素原子、ハロゲン原子、またはＣ１−Ｃ６アルキル基であり；
Ｒ12は水素原子、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基または水酸基であり；
Ｒ21は、水素原子または下記Ｂ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル基を示し、
Ｂ群：Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環およびアリール環（アリール環は、ヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、およびジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基からなる群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい。）；
Ｒ22は、水素原子、アミノ基、下記Ｃ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基またはジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基を示し、
Ｃ群：Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環またはアリール環（アリール環はヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基またはジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基からなる群より選択される１〜３個の置換基を有していてもよい。）。
〔２〕
前記化合物Ａが、前記化合物Ａ１であり、
前記化合物Ｂが、白金系抗癌化合物である、〔１〕に記載の癌治療薬。
〔３〕
前記化合物Ａが、前記化合物Ａ１の水溶性プロドラッグＡ２であり、
前記化合物Ｂが、白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物である、〔１〕に記載の癌治療薬。
〔４〕
前記化合物Ｂが５−ＦＵ系化合物を含む場合、前記癌治療薬が、さらにロイコボリンを含有する、〔１〕または〔３〕に記載の癌治療薬。
〔５〕
前記水溶性プロドラッグＡ２が、下記一般式（２）で表される化合物である、〔１〕〜〔４〕のいずれかに記載の癌治療薬；
2007023778.tif 000003
（式中、  Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は、〔１に記載の定義と同じであり；
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示し；
Ｗは、２級アミノ基を含む２価の基、３級アミノ基を含む２価の基、またはスルホニル基を含む２価の基を示す。）。
〔６〕
前記水溶性プロドラッグＡ２が、下記一般式（３）で表される化合物である、〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の癌治療薬；
2007023778.tif 000004
〔式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は〔１〕に記載の定義と同じであり；
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示し；
Ｒ2およびＲ4はそれぞれ独立に水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基またはアミノ酸側鎖を示し、Ｒ3はＣ１−Ｃ６アルキル基を示し、ＸはＣ＝ＯまたはＣ１−Ｃ３アルキレン基を示す。〕。
〔７〕
前記Ｒ1が水素原子、メチル基またはエチル基である、〔６〕に記載の癌治療薬。
〔８〕
前記Ｒ2が水素原子またはメチル基である、〔６〕または〔７〕に記載の癌治療薬。
〔９〕
前記Ｒ3がＣ１−Ｃ３アルキル基である、〔６〕〜〔８〕のいずれかに記載の癌治療薬。
〔１０〕
前記Ｒ4が水素原子またはメチル基である、〔６〕〜〔９〕のいずれかに記載の癌治療薬。
〔１１〕
前記水溶性プロドラッグＡ２が、下記一般式（４）で表される化合物である、〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の癌治療薬；
2007023778.tif 000005
〔式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は〔１に記載の定義と同じであり；
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示し；
Ｒ5は水素原子または−ＣＯＯＲ6（式中、Ｒ6は水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基を示し；
ｎは１〜６の整数を示す。〕。
〔１２〕
前記Ｒ1が水素原子、メチル基またはエチル基である、〔１１〕に記載の癌治療薬。
〔１３〕
前記ｎが１であって、前記Ｒ5が水素原子または−ＣＯＯＲ6（式中、Ｒ6は水素原子、またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示す。）である、〔１１〕または〔１２〕に記載の癌治療薬。
〔１４〕
前記ｎが２〜６のいずれかの整数であって、前記Ｒ5が水素原子である、〔１１〕または〔１２〕に記載の癌治療薬。
〔１５〕
前記水溶性プロドラッグＡ２が、下記一般式（５）で表される化合物である、〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の癌治療薬；
2007023778.tif 000006
〔式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は〔１に記載の定義と同じであり；
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示し；
Ｒ6は水素原子、分岐Ｃ３−Ｃ１０アルキル基またはＣ３−Ｃ８シクロアルキル基であり；
Ｒ7は天然または非天然アミノ酸の側鎖であり；
ｍは１〜３の整数である。〕。
〔１６〕
Ｒ1が水素原子である、〔１５〕に記載の癌治療薬。
〔１７〕
Ｒ6が水素原子である、〔１５〕または〔１６〕に記載の癌治療薬。
〔１８〕
Ｒ7が、２−メチルプロピル、シクロヘキシルメチル、ベンジル、インドール−３−イルメチル、４−アミノブチル、または４−アミノプロピルである、〔１５〕〜〔１７〕のいずれかに記載の癌治療薬。
〔１９〕
前記Ｒ11が水素原子であり；
前記Ｒ12が水素原子またはＣ１−Ｃ３アルキル基であり；
前記Ｒ21が、水素原子または下記Ｄ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよいＣ１−Ｃ８アルキル基であり；
前記Ｒ22が、水素原子、アミノ基、または下記Ｄ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基である、〔１〕〜〔１８〕のいずれかに記載の癌治療薬；
Ｄ群：Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ３アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ３アルキルアミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環およびアリール環（アリール環はヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、およびハロゲン原子からなる群より選択される１〜３個の置換基を有していてもよい。）。
〔２０〕
前記化合物Ａ１またはその水溶性プロドラッグＡ２の活性体（Ａ１）が、下記からなる群から選択される少なくとも１種の化合物である、〔１〕〜〔１９〕のいずれかに記載の記載の癌治療薬；
a）(9S)-1-ブチル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
b）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-[2-(4-モルホリノ)エチル]-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
c）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-プロピル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
d）(9S)-1-ベンジル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
e）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-フェネチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
f）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-フェネチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
g）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-フェニルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
h）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
i）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
j）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
k）(9S)-9-エチル-1-ヘプチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
l）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-メチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
m）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
n）(9S)-9-エチル-1-ヘキシル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
o）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
p）(9S)-1,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
q）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-[2-(4-メトキシフェニル)エチル]-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
r）(9S)-1-[2-(4-クロロフェニル)エチル]-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
s）(9S)-9-エチル-1-[2-(4-フルオロフェニル)エチル]-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
t）(9S)-9-エチル-1-[2-(4-フルオロフェニル)エチル]-9-ヒドロキシ-2-メチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
u）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(1-メチルエチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
v）(9S)-1-(3,3-ジメチルブチル)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
w）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-メトキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
x）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
y）(9RS)-9-エチル-9-ヒドロキシ-4-メチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
z）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-ヒドロキシエチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
aa）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-ヒドロキシエチル)-2-メチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
bb）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-メチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
cc）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
dd）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-2-プロピル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ee）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ff）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
gg）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
hh）(9S)-2-クロロメチル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ii）(9S)-2-アミノメチル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
jj）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-2-トリフルオロメチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
kk）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-2-メチルチオ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ll）(9S)-9-エチル-2-エチルチオ-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
mm）(9S)-2-(ジメチルアミノ)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；および
nn）(9S)-2-(ブチルアミノ)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン。
〔２１〕
前記水溶性プロドラッグＡ２が下記式で表される、〔１〕〜〔１０〕のいずれかに記載の癌治療薬。
2007023778.tif 000007
〔２２〕
前記化合物Ａ１が下記式で表される、〔１〕または〔２〕に記載の癌治療薬。
2007023778.tif 000008
〔２３〕
癌治療剤が配合剤である、〔１〕〜〔２２〕のいずれかに記載の癌治療薬。
〔２４〕
癌治療薬が、化合物Ａを含有してなる薬剤と、化合物Ｂを含有してなる薬剤とからなるキットである、〔１〕〜〔２２〕のいずれかに記載の癌治療薬。
〔２５〕
前記癌が固形腫瘍である、〔１〕〜〔２４〕のいずれかに記載の癌治療薬。
〔２６〕
前記癌が結腸直腸癌、肺癌、乳癌、胃癌、子宮頸癌、膀胱癌、直腸癌、膵臓癌および／または卵巣癌である、〔１〕〜〔２５〕のいずれかに記載の癌治療薬。
〔２７〕
癌患者に、治療上有効量の〔１〕〜〔２６〕のいずれかに記載の癌治療薬を投与する段階を含む、癌の治療方法。
〔２８〕
癌治療薬を調製するための、〔１〕〜〔２６〕のいずれかに記載の癌治療薬の使用。【０００６】
本明細書における「アルキル基」とは、脂肪族炭化水素から任意の水素原子を１個除いて誘導される１価の基であり、骨格中にヘテロ原子または不飽和炭素−炭素結合を含有せず、水素および炭素原子を含有するヒドロカルビルまたは炭化水素基構造の部分集合を有する。アルキル基は直鎖状および分枝鎖状の構造を含む。
「Ｃ１−Ｃ３アルキル基」とは、炭素原子数が１〜３個のアルキル基を示し、「Ｃ１−Ｃ６アルキル基」とは、炭素原子数が１〜６個のアルキル基を示し、「Ｃ１−Ｃ８アルキル基」とは、炭素原子数が１〜８個のアルキル基を示し、「Ｃ１−Ｃ１０アルキル基」とは、炭素原子数が１〜１０個のアルキル基を示し、「Ｃ３−Ｃ１０アルキル基」とは、炭素原子数が３〜１０個のアルキル基を示す。【０００７】
「アルキル基」としては、具体的にはメチル基、エチル基、n−プロピル基、i−プロピル基、ｎ−ブチル基、sec−ブチル基、ｔ−ブチル基、イソブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、2，3−ジメチルプロピル基、ヘキシル基、２，３−ジメチルヘキシル基、１，１−ジメチルペンチル基、ヘプチル基、オクチル基などが挙げられる。【０００８】
本明細書における「アルキレン基」は、前記「アルキル基」からさらに任意の水素原子を１個除いて誘導される二価の基を意味し、アルキレン基としては好ましくはＣ１−Ｃ３アルキレン基、さらに好ましくはＣ１−Ｃ２アルキレン基が挙げられる。アルキレン基としては具体的には、たとえば、メチレン基、１，２−エチレン基、１，１−エチレン基、１，３−プロピレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基などが挙げられる。【０００９】
本明細書における「アルコキシ基」は、基−Ｏ−Ｒ'を意味し、Ｒ'は前記定義のアルキル基である。たとえば「Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基」としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、tert-ブトキシ基、ペントキシ基、３−メチルブトキシ基、２，２−ジメチルプロポキシ基などが挙げられる。【００１０】
本明細書における「アルキルチオ基」は、基−Ｓ−Ｒ'を意味し、Ｒ'は前記定義のアルキル基である。たとえば「Ｃ１−Ｃ８アルキルチオ基」としては、メチルチオ基、エチルチオ基、プロピルチオ基、ブチルチオ基、ペンチルチオ基、ヘキシルチオ基、ヘプチルチオ基、オクチルチオ基などが挙げられる。【００１１】
本明細書における「ヒドロキシ基」は、基ＨＯ−を意味する。【００１２】
本明細書における「ハロゲン原子」は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、またはヨウ素原子を意味する。【００１３】
本明細書における「アミノ基」は、基ＮＨ2−を意味し、ホルミル、アセチル、トリチル、tert-ブトキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニルなどの当技術分野における公知の基で保護されたアミノ基を含む。アミノ基のうち好ましくはＮＨ2−である。【００１４】
本明細書における「モノアルキルアミノ基」は、基-NH-R'を意味し、R'は上記定義のアルキル基であり、ホルミル、アセチル、トリチル、tert-ブトキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニルなどの当技術分野における公知の基で窒素原子上の水素原子を置換することにより保護されたアミノ基を含む。たとえば「モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基」としては、好ましくはN-メチルアミノ基、N-エチルアミノ基、N-プロピルアミノ基、N-イソプロピルアミノ基、N-ブチルアミノ基、N-(1-メチルプロピル)アミノ基、N-(2-メチルプロピル)アミノ基、N-ペンチルアミノ基などが挙げられ、より好ましくはN-エチルアミノ基、N-プロピルアミノ基、N-ブチルアミノ基などが挙げられる。【００１５】
本明細書における「ジアルキルアミノ基」は、基-NR'R''を意味し、R'およびR''は（互いに独立に）上記定義のアルキル基である。たとえば「ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基」としては、好ましくはN,N-ジメチルアミノ基、N,N-ジエチルアミノ基、N,N-ジプロピルアミノ基、N,N-ジイソプロピルアミノ基、N,N-ジブチルアミノ基、N-メチル-N-エチルアミノ基、N-メチル-N-プロピルアミノ基などが挙げられ、より好ましくはN,N-ジメチルアミノ基、N,N-ジエチルアミノ基が挙げられる。【００１６】
本明細書における「３級アミノ基」は、アミノ基の全ての水素原子が置換されている基を意味する。【００１７】
本明細書における「Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基」という用語は、環にいかなるヘテロ原子も含まない、３から７員環を意味する。「Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル基」という用語は、環にいかなるヘテロ原子も含まない、３から８員環を意味する。「シクロアルキル基」としては、好ましくはシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基など、より好ましくはシクロペンチル基およびシクロヘキシル基が挙げられる。【００１８】
本明細書における「複素環」は、N、SおよびOから選択される1つまたは複数のヘテロ原子を含む3から10員環、好ましくはオキサゾリル基、チアゾリル基、4,5-ジヒドロオキサゾリル基、4,5-ジヒドロチアゾリル基、フリル基、ピロリル基、チエニル基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、ピリジル基、ピラジニル基、ピリミジニル基、トリアジニル基、オキサジアゾリル基、チアジアゾリル基、ピロリジニル基、テトラヒドロチエニル基、テトラヒドロフリル基、モルホリニル基、ピペリジル基、ピペラジニル基、1-メチルピペラジニル基など、より好ましくはイミダゾリル基、ピリジル基、モルホリニル基およびピロリジニル基が挙げられる。【００１９】
本明細書における「アリール環」は、芳香族炭素環基、すなわち６〜１０員環の芳香環または部分的芳香環、例えばフェニル、ナフチルまたはテトラヒドロナフチル、好ましくはフェニルまたはナフチル、最も好ましくはフェニルを意味する。【００２０】
「医薬的に許容される塩」とは、式（１）で表される水溶性プロドラッグの生物学的有効性および性質を保持し、かつ適当な非毒性有機もしくは無機酸または有機もしくは無機塩基から形成される、通常の塩を意味する。
酸付加塩には塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸および硝酸などの無機酸由来のもの、ならびにp-トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸などの有機酸由来のものが含まれる。
塩基付加塩には水酸化カリウム、ナトリウム、アンモニウム、および水酸化テトラメチルアンモニウムなどの水酸化四級アンモニウム由来のものが含まれる。【００２１】
また、本発明の水溶性プロドラッグは、大気中に放置しておくことにより、水分を吸収し、吸着水が付いたり、水和物となったりする場合があり、そのような水和物も本発明に包含される。【００２２】
さらに、本発明の水溶性プロドラッグは、他のある種の溶媒を吸収し、溶媒和物となる場合があるが、そのような溶媒和物も本発明に包含される。【００２３】
本明細書において「アミノ酸側鎖」としては、天然アミノ酸側鎖または非天然のアミノ酸側鎖が挙げられる。
「天然のアミノ酸側鎖」は、好ましくはメチル基、イソプロピル基、2-メチルプロピル基、1-メチルプロピル基、ベンジル基、インドール-3-イルメチル基、2-(メチルチオ)エチル基および4-アミノブチル基、3-アミノプロピル基などの天然アミノ酸の側鎖が挙げられ、より好ましくはメチル基、2-メチルプロピル基、ベンジル基およびインドール-3-イルメチル基などの天然親油性アミノ酸の側鎖が挙げられる。【００２４】
「非天然アミノ酸側鎖」は、好ましくはＣ５−Ｃ１２アルキル基、シクロアルキルメチル基、置換または無置換アリールメチル基、(シクロアルキルチオ)メチル基、rが1または2の整数であるアルキルチオ-(CH2)r-などが挙げられる。【００２５】
上記において「Ｃ５−Ｃ１２アルキル基」は、５から１２個の炭素原子を含む直鎖または分枝アルキル鎖；より好ましくはn-オクチル基、ノニル基、デシル基、ウンデシル基およびドデシル基などのＣ８−Ｃ１２直鎖アルキル鎖が挙げられる。【００２６】
「アルキルチオ-(CH2)r-」は、エチルチオメチル基、エチルチオエチル基、n-プロピルチオメチル基、n-ブチルチオメチル基、n-ペンチルチオメチル基、n-オクチルチオメチル基、n-ノニルチオメチル基、n-デシルチオメチル基、tert-ブチルチオメチル基などの２から１０個の炭素原子を含む直鎖、分枝アルキル鎖を有するアルキルチオメチル基またはアルキルチオエチル基；より好ましくはエチルチオエチル基、n-プロピルチオメチル基およびn-ブチルチオメチル基が挙げられる。【００２７】
「置換または無置換アリールメチル基」は、好ましくは4-フェニルベンジル基、ナフト-2-イルメチル基、[4-(4-ヒドロキシフェノキシ)フェニル]メチル基および(4-低級-アルコキシフェニル)メチル基（「低級-アルコキシ」という用語は1から6個の炭素原子を含む直鎖または分枝アルキル鎖；好ましくはメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基およびイソプロポキシ基を意味する）が挙げられる。「置換または無置換アリールメチル基」の最も好ましい態様は、4-フェニルベンジル基、ナフト-2-イルメチル基、(4-メトキシフェニル)メチル基および[4-(4-ヒドロキシフェノキシ)フェニル]メチル基である。【００２８】
本明細書における「活性体」は、水溶性プロドラッグもしくはその医薬的に許容し得る塩、またはこれらの水和物もしくは溶媒和物が加水分解した化合物で、具体的には化合物Ａ１、化合物Ａ１のイオン、塩等を示す。【００２９】
本明細書において「カンプトテシン類」（（a） Cancer Chemotherapy and Biotherapy: Principle and Practice, 第2版, Lippincott-Ravenmeans, p.463-484、（b）Biochim. Biophys. Acta (1998), 1400(1-3), 107-119、(c)Expert Opinion, Investig.. Drugs (2004)13(3), pages 269-284）は、カンプトテシン、SN-38、9-アミノカンプトテシン、9-ニトロカンプトテシン、BN-80915（Anti-cancer Drugs (2001), 12(1), 9-19）や、上記文献に記載されたカンプトテシン誘導体などのカンプトテシン骨格を有する化合物も意味する。【００３０】
本明細書において、「白金系抗癌化合物」とは抗腫瘍効果を有する白金錯体であり、たとえば、シスプラチン（ＣＤＤＰ）、カルボプラチン、オキサリプラチン、Nedaplatinなどが挙げられる。【００３１】
本明細書において、「ゲムシタビン系化合物」とは、シチジン系の代謝拮抗剤であり、たとえば、ゲムシタビン、Ara-Cなどが挙げられる。これらのうちでは、ゲムシタビンが好ましい。【００３２】
本明細書において、「５−ＦＵ系化合物」とはフッ化ピリミジン系の代謝拮抗剤であり、たとえば、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、Doxifluridine、UFT、Carmofur、S-1などが挙げられる。また、５−ＦＵのプロドラッグであるカペシタビン（capecitabine）も含まれる。
これらのうちでは、５−ＦＵ、カペシタビン、Doxifluridineが好ましい。【００３３】
本明細書において、「タキサン系化合物」としては、タキソール［Front. Biotechnol. Pharm. (2000), 1, 336-348］、タキソテール［J. Med. Aromat. Plant Sci. (2001), 22/4A-23/lA 4-5]、IDN 5109[Chirality, (2000), 12(5/6), 431-441］、BMS 188797［Clinical Cancer Research. 5 (suppl.), 3859, Nov 1999］、BMS184476［J. Clinical Oncology19:2493-2503, 1 May 2001］、パクリタキセル、Docetaxelなどが挙げらる。【００３４】
本明細書において、「ビンアルカロイド系化合物」とは、植物アルカロイド類の１種であり、たとえば、ビノレルビン、Vincristine、Vinblastine、Vindesineなどが挙げられる。これらのうちでは、ビノレルビンが好ましい。【００３５】
本明細書において、「抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物」とは、抗癌活性を有するチロシンキナーゼ阻害化合物をいい、「チロシンキナーゼ阻害化合物」とは、ＡＴＰのγ−リン酸基を蛋白質の特定のチロシンのヒドロキシル基に転移する「チロシンキナーゼ」を阻害する化合物をいう。「抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物」としては、イレッサ（gefitinib）、タルセバ（erlotinib）などが挙げられる。【００３６】
本明細書において、「抗癌性モノクローナル抗体」とは、抗癌活性を有するモノクローナル抗体をいい、「モノクローナル抗体」とは、単クローン性抗体ともいわれ、単一クローンの抗体産生細胞が産生する抗体をいう。「抗癌性モノクローナル抗体」としては、アバスチン（Avastin(bevacizumab)、ハーセプチン（Herceptin(trastuzumab)）、エルビタックス（Erbitux(cetuximab)）などが挙げられる。【００３７】
本発明は、化合物Ａと化合物Ｂとの併用医薬である。具体的には、下記化合物Ａまたはその医薬的に許容し得る塩と、下記化合物Ｂまたはその医薬的に許容し得る塩とを組み合わせてなる、癌治療薬である。
化合物Ａ：一般式（１）で表される化合物Ａ１またはその水溶性プロドラッグＡ２。水溶性プロドラッグＡ２の活性体は化合物Ａ１である。
化合物Ｂ：白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物。【００３８】
本発明において、「組み合わせてなる、癌治療薬」という用語は、治療において同時に、別々に、又は順次に投与するための２個以上の製剤からなるものをいい、それらが、いわゆるキット型の製剤又は配合剤となった医薬組成物になっていてもよい。
上述したような、癌治療において用いる２つの別個の製剤からなる組み合わせ製剤に対して、さらに１個以上の製剤を組み合わせたものも、上記「組み合わせてなる、癌治療剤」に含まれる。【００３９】
上述した２個の別個の製剤に対して、薬学的に許容し得る担体又は希釈剤と一緒に、カンプトテシン類、白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群から選ばれる少なくとも１種以上又はその薬学的に許容し得る塩を含む製剤１個以上を、さらに組み合わせることもできる。この場合、さらに加えられた１個以上の製剤は、上記２つの別個の製剤と、同時に、別個に、又は順次に投与されてもよい。例えば、３つ以上の化合物を組み合わせてなる癌治療薬としては、下記の化合物を組み合わせてなる製剤が挙げられる。【００４０】
前記化合物Ａ、５−ＦＵ系化合物（好ましくは５−ＦＵ）、ロイコボリン；
前記化合物Ａ、５−ＦＵ系化合物（好ましくは５−ＦＵ）、ロイコボリン、アバスチン；
前記化合物Ａ、５−ＦＵ系化合物（好ましくはカペシタビン）、アバスチン；
前記化合物Ａ、白金系抗癌化合物（好ましくはオキサリプラチン）、アバスチン；
前記化合物Ａ、白金系抗癌化合物（好ましくはシスプラチン）、５−ＦＵ；
前記化合物Ａ、白金系抗癌化合物（好ましくはシスプラチン）、タキサン系化合物（好ましくはタキソール）。【００４１】
このうちより好ましくは、下記の組み合わせが挙げられる。
前記化合物Ａ、５−ＦＵ系化合物（好ましくは５−ＦＵ）、ロイコボリン；
前記化合物Ａ、５−ＦＵ系化合物（好ましくは５−ＦＵ）、ロイコボリン、アバスチン；
前記化合物Ａ、５−ＦＵ系化合物（好ましくはカペシタビン）、アバスチン；
前記化合物Ａ、白金系抗癌化合物（好ましくはオキサリプラチン）、アバスチン。【００４２】
ここで、上記の「組み合わせてなる、癌治療薬」において、２個の別個の製剤のいずれか一方又は両方が、非経口製剤であってもよく、好ましくは、注射剤又は点滴剤であってもよく、さらに好ましくは、静脈内点滴剤であってもよい。
本発明に係る「製剤」においては、通常、本発明の化合物の治療上の有効量を薬学的に許容される担体又は希釈剤と共に含んでいてもよい。この製剤化技術は、当該技術分野の当業者にとって技術常識であると考えられ、よく知られている。好ましくは、薬学的に許容される担体又は希釈剤と一緒に、当業者によく知られている多くの方法で静脈内点滴用又は注射用に製剤化することができる。【００４３】
さらに、本明細書で用いる「投与」という用語は、本発明に係る「組み合わせてなる、癌治療薬」を用いる場合、非経口投与及び／又は経口投与を意味し、好ましくは、非経口投与である。即ち、「組み合わせてなる、癌治療薬」を投与する場合、両方とも非経口投与でもよく、一方が非経口投与でもう一方が経口投与でもよく、また、両方とも経口投与でもよい。好ましくは、「組み合わせてなる、癌治療薬」の両方が非経口投与される。ここで、「非経口投与」は、例えば、静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与などであり、好ましくは、静脈内投与である。また、３個以上の製剤が組み合わされて投与される場合でも、少なくとも１個の製剤は、非経口投与されてもよく、好ましくは、静脈内投与されてもよく、さらに好ましくは静脈内点滴又は静脈内注射されてもよい。【００４４】
なお、本発明の実施において、化合物Ａは、化合物Ｂ等の他の抗がん剤と同時に投与してもよい。また、化合物Ａを投与してから連続して化合物Ｂ等の他の抗がん剤を投与してもよいし、化合物Ｂ等の他の抗がん剤を投与してから化合物Ａを連続して投与してもよい。さらに、化合物Ａを投与し、時間をおいて別々に他の抗がん剤を投与してもよいし、他の抗がん剤を投与し、時間を置いて別々に化合物Ａを投与してもよい。かかる投与順序及び投与間隔は、用いられる化合物Ａを含む製剤、及びそれと併用される抗がん剤を含む製剤、治療すべきがん細胞の種類、患者の状態などに応じて、当業者が適宜選択することができる。【００４５】
また、本明細書で用いる「同時に」とは、ほぼ同じ時間に治療に使用することをいい、「別々に」とは、異なった時間に別々に治療に使用することをいい、例えば、１日目に１つの薬剤、２日目にもう１つの薬剤を治療に使用するような場合をいう。「順次に」とは、順番に従って使用することをいい、例えば、最初に１つの薬剤を使用し、次いで、決められた時間後に、他の薬剤を治療に使用するような場合をいう。【００４６】
化合物Ａ１
本発明で用いられる化合物Ａ１は下記式（１）で表される。
2007023778.tif 000009
【００４７】
式中、Ｒ11は水素原子、ハロゲン原子、またはＣ１−Ｃ６アルキル基である。
Ｒ12は水素原子、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基または水酸基である。
Ｒ21は、水素原子または下記Ｂ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよいＣ１−Ｃ１０アルキル基を示す。
Ｂ群：Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環およびアリール環（アリール環は、ヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、およびジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基からなる群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい。）
Ｒ22は、水素原子、アミノ基、下記Ｃ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基またはジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基を示す。
Ｃ群：Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環またはアリール環（アリール環はヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、アミノ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基またはジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基からなる群より選択される１〜３個の置換基を有していてもよい。）。【００４８】
(i)  式（１）において、前記Ｒ11は好ましくは水素原子である。【００４９】
(ii)  前記Ｒ12は、好ましくは、水素原子またはＣ１−Ｃ３アルキル基であり、さらに好ましくは水素原子またはメチル基である。【００５０】
(iii)  前記Ｒ21は、好ましくは水素原子または下記Ｄ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよいＣ１−Ｃ８アルキル基である。【００５１】
Ｄ群：Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ３アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ３アルキルアミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環およびアリール環（アリール環はヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、およびハロゲン原子からなる群より選択される１〜３個の置換基を有していてもよい。）。【００５２】
(iv)  前記Ｒ21は、さらに好ましくは、メチル基、エチル基、n-プロピル基、1-メチルエチル基、n-ブチル基、1,1-ジメチルエチル基、2-メチルプロピル基、2,2-ジメチルプロピル基、n-ペンチル基、3-メチルブチル基、2-n-ヘキシル基、3,3-ジメチルブチル基、n-ヘプチル基、n-オクチル基、ベンジル基、フェネチル基、2-(ジメチルアミノ)エチル基、2-(4-モルホリノ)エチル基、3-(ジメチルアミノ)プロピル基、2-(ピリジン-2-イル)エチル基、2-(ピリジン-3-イル)エチル基、2-(4-メトキシフェニル)エチル基、2-(4-クロロフェニル)エチル基または2-(4-フルオロフェニル)エチル基、3-フェニルプロピル基である。【００５３】
(v)  前記Ｒ22は、好ましくは水素原子、アミノ基、または下記Ｄ群から選ばれる１〜３個の置換基を有していてもよい、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ基、モノＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基である。
Ｄ群：Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、アミノ基、モノＣ１−Ｃ３アルキルアミノ基、ジＣ１−Ｃ３アルキルアミノ基、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル基、複素環およびアリール環（アリール環はヒドロキシ基、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ基、およびハロゲン原子からなる群より選択される１〜３個の置換基を有していてもよい。）。【００５４】
(vi)  前記Ｒ22は、さらに好ましくは水素原子、メチル基、エチル基、プロピル基、ヒドロキシメチル基、アミノメチル基、(メチルアミノ)メチル基、(ジメチルアミノ)メチル基、クロロメチル基、トリフルオロメチル基、フェニル基、2-ピリジル基、メトキシ基、エトキシ基、メチルチオ基、エチルチオ基、メチルアミノ基、ブチルアミノ基またはジメチルアミノ基である。【００５５】
上記(i)〜(vi)においては、任意に好ましい態様を組み合わせることができる。たとえば、(i)、(ii)、(iii)および(v)の組み合わせ、(i)、(ii)、(iii)および(vi)の組み合わせ、(i)、(ii)、(iv)および(v)の組み合わせ、(i)、(ii)、(iv)および(vi)の組み合わせなどを挙げることができる。【００５６】
このような式（１）で表される化合物Ａ１は、より具体的には、下記化合物が挙げられる。【００５７】
a）(9S)-1-ブチル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
b）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-[2-(4-モルホリノ)エチル]-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン塩；
c）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-プロピル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
d）(9S)-1-ベンジル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
e）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-フェネチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
f）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-フェネチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
g）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-フェニルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
h）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
i）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
j）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
k）(9S)-9-エチル-1-ヘプチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
l）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-メチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
m）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)- ジオン；
n）(9S)-9-エチル-1-ヘキシル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
o）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
p）(9S)-1,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
q）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-[2-(4-メトキシフェニル)エチル]-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
r）(9S)-1-[2-(4-クロロフェニル)エチル]-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
s）(9S)-9-エチル-1-[2-(4-フルオロフェニル)エチル]-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
t）(9S)-9-エチル-1-[2-(4-フルオロフェニル)エチル]-9-ヒドロキシ-2-メチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
u）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(1-メチルエチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
v）(9S)-1-(3,3-ジメチルブチル)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
w）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-メトキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
x）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
y）(9RS)-9-エチル-9-ヒドロキシ-4-メチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
z）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-ヒドロキシエチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
aa）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-ヒドロキシエチル)-2-メチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
bb）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-メチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
cc）(9S)-2,9-ジエチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
dd）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-2-プロピル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ee）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ff）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
gg）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
hh）(9S)-2-クロロメチル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ii）(9S)-2-アミノメチル-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
jj）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-2-トリフルオロメチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
kk）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-2-メチルチオ-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
ll）(9S)-9-エチル-2-エチルチオ-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
mm）(9S)-2-(ジメチルアミノ)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(2-メチルプロピル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン塩酸塩；および
nn）(9S)-2-(ブチルアミノ)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-(3-メチルブチル)-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン塩酸塩。【００５８】
前記に示した化合物Ａ１のうち、さらに好ましくは下記化合物が挙げられる。
４（Ｓ）−エチル−４−ヒドロキシー１Ｈ−ピラノ[３'、４’：６，７]インドリジノ[１，２−ｂ]キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン（カンプトテシン）；
５（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−５−ヒドロキシ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ[３'、４’：６，７]インドリジノ[１，２−ｂ]キノリン−３，１５−ジオン（ＢＮ−８０９１５）；
o）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン；
bb）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-メチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)- ジオン；
ee）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチル-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン。【００５９】
前記に示した化合物Ａ１のうち、特に好ましくは下記化合物が挙げられる。
o）(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン。【００６０】
水溶性プロドラッグＡ２
本発明に含まれる水溶性プロドラッグＡ２は、前記化合物Ａ１の水溶性プロドラッグである。【００６１】
Ａ１の前記水溶性プロドラッグＡ２としては、好ましくは下記一般式（２）で表されるプロドラッグ化合物が挙げられる。【００６２】
2007023778.tif 000010
【００６３】
式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は、化合物Ａ１の定義と同じであり、その好ましい態様も同様である。【００６４】
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示し、Ｗは、２級アミノ基を含む２価の基、３級アミノ基を含む２価の基、またはスルホニル基を含む２価の基を示す。【００６５】
式（２）で表される化合物について、より好ましい化合物として、下記一般式（３）で表されるプロドラッグ化合物が挙げられる。
2007023778.tif 000011
【００６６】
式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は化合物Ａ１の定義と同じであり、その好ましい態様も同様である。式（３）のプロドラッグに対応する好ましい活性体も、前記化合物Ａ１の好ましい態様と同様である。
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示す。
Ｒ2およびＲ4はそれぞれ独立に水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基またはアミノ酸側鎖を示し、Ｒ3はＣ１−Ｃ６アルキル基を示し、ＸはＣ＝ＯまたはＣ１−Ｃ３アルキレン基を示す。  【００６７】
前記式（３）で表されるプロドラッグ化合物において、前記Ｒ1は、好ましくは、水素原子、メチル基またはエチル基であり、さらに好ましくは、水素原子またはメチル基であり、特に好ましくは水素原子である。【００６８】
前記Ｒ2は好ましくは水素原子またはメチル基である。【００６９】
前記Ｒ3は好ましくはＣ１−Ｃ３アルキル基であり、さらに好ましくはメチル基またはエチル基であり、特に好ましくはメチル基である。【００７０】
前記Ｒ4は好ましくは水素原子またはメチル基である。【００７１】
前記Ｘは、好ましくはカルボニル基またはメチレン基であり、さらに好ましくはカルボニル基である。【００７２】
このような、式（３）で表される化合物において可溶性側鎖部分を構成する、Ｘ、Ｒ1〜Ｒ4の好ましい組み合わせとしては下記のものが挙げられるが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００７３】
【表１】
2007023778.tif 000012
【００７４】
式（３）において、表１のうち好ましくは、例示番号１、２、３、４に含まれる可溶性側鎖を有する化合物、さらに好ましくは、例示番号１、２に含まれる可溶性側鎖を有する化合物が挙げられる。【００７５】
このような可溶性側鎖を有していると、化合物Ａ１が難溶性の化合物であっても、優れた水溶性を有する化合物とすることができ、しかも、該水溶性プロドラッグは、たとえば、ｐＨが４以下の溶液中では長時間安定に存在するが、ｐＨ５以上、特にｐＨ７−８の生理的条件化では、短時間で速やか、かつ定量的に活性体（化合物Ａ１等）を遊離することができる。
このような水溶性プロドラッグは、特定の抗癌化合物Ｂとの組み合わせにより、抗癌効果が著しく向上する。【００７６】
さらに、式（２）で表される化合物について、より好ましい別のプロドラッグ化合物として、下記一般式（４）で表される化合物が挙げられる。
2007023778.tif 000013
【００７７】
式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は化合物Ａ１の定義と同じであり、その好ましい態様も同様である。式（４）のプロドラッグに対応する好ましい活性体も、前記化合物Ａ１の好ましい態様と同様である。
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示す。
Ｒ5は水素原子または−ＣＯＯＲ6（式中、Ｒ6は水素原子、Ｃ１−Ｃ６アルキル基を示す。ｎは１〜６の整数を示す。【００７８】
前記式（４）で表される化合物において、前記Ｒ1は、好ましくは、水素原子、メチル基またはエチル基であり、さらに好ましくは、水素原子またはメチル基であり、特に好ましくは水素原子である。【００７９】
式（４）中、ｎは好ましくは１〜３であり、さらに好ましくは１である。
ｎが１のとき、Ｒ5としては、好ましくは水素原子、−ＣＯＯＲ6（Ｒ6はＣ１−Ｃ３アルキル基）であり、さらに好ましくは水素原子、−ＣＯＯＣＨ3、−ＣＯＯＣ2Ｈ5である。【００８０】
ｎが２〜６のとき、Ｒ5は、好ましくは水素原子である。【００８１】
このような、式（４）で表される化合物において可溶性側鎖部分を構成する、ｎ、Ｒ1、Ｒ5の好ましい組み合わせとしては下記のものが挙げられるが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００８２】
【表２】
2007023778.tif 000014
【００８３】
式（４）において、表２のうち好ましくは、例示番号１、２、３、４、５、６に含まれる可溶性側鎖を有する化合物、さらに好ましくは、例示番号１、３、４に含まれる可溶性側鎖を有する化合物が挙げられる。【００８４】
このような可溶性側鎖を有していると、化合物Ａ１が難溶性の化合物であっても、優れた水溶性を有する化合物とすることができ、しかも、該水溶性プロドラッグは、たとえば、ｐＨが４以下の溶液中では長時間安定に存在するが、ｐＨ５以上、特にｐＨ７−８の生理的条件化では、短時間で速やか、かつ定量的に活性体（化合物Ａ１等）を遊離することができる。
このような水溶性プロドラッグは、特定の抗癌化合物Ｂとの組み合わせにより、抗癌効果が著しく向上する。【００８５】
さらに、式（２）で表される化合物について、より好ましい別のプロドラッグ化合物として、下記一般式（５）で表される化合物が挙げられる。
2007023778.tif 000015
【００８６】
式中、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ21、Ｒ22は化合物Ａ１の定義と同じであり、その好ましい態様も同様である。式（５）のプロドラッグに対応する好ましい活性体も、前記化合物Ａ１の好ましい態様と同様である。
Ｒ1は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示す。Ｒ6は水素原子、分岐Ｃ３−Ｃ１０アルキル基またはＣ３−Ｃ８シクロアルキル基を示す。Ｒ7は天然または非天然アミノ酸の側鎖である。ｍは１〜３の整数である。【００８７】
Ｒ1としては好ましくは水素原子である。
Ｒ6としては好ましくは水素原子である。【００８８】
Ｒ7は、好ましくは、２−メチルプロピル、シクロヘキシルメチル、ベンジル、インドール−３−イルメチル、４−アミノブチルまたは４−アミノプロピルであり、さらに好ましくは、２−メチルプロピル、シクロヘキシルメチル、ベンジルまたはインドール−３−イルメチルである。【００８９】
このような可溶性側鎖を有していると、化合物Ａ１が難溶性の化合物であっても、優れた水溶性を有する化合物とすることができ、しかも、該水溶性プロドラッグは、たとえば、ｐＨが４以下の溶液中では長時間安定に存在するが、ｐＨ５以上、特にｐＨ７−８の生理的条件化では、短時間で速やか、かつ定量的に活性体（化合物Ａ１等）を遊離することができる。
このような水溶性プロドラッグは、特定の抗癌化合物Ｂとの組み合わせにより、抗癌効果が著しく向上する。【００９０】
本発明に係る水溶性プロドラッグＡ２としては、好ましくは上記式（３）〜（５）で表される化合物を挙げることができ、さらに好ましくは上記式（３）または（４）で表される化合物を挙げることができ、特に好ましくは上記式（３）で表される化合物を挙げることができる。【００９１】
化合物Ｂ
本発明で用いる化合物Ｂとしては、白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物が挙げられる。【００９２】
これらのうち本発明で用いる化合物Ｂとしては、好ましくは白金系抗癌化合物である。【００９３】
癌治療薬
本発明は、前記化合物Ａと前記化合物Ｂとの併用医薬である。具体的には、前記化合物Ａまたはその医薬的に許容し得る塩と、前記化合物Ｂまたはその医薬的に許容し得る塩とを組み合わせてなる、癌治療薬である。
このように化合物Ａと化合物Ｂとを併用して用いると、抗癌効果が著しく向上する。【００９４】
前記癌治療薬としては、好ましくは、前記化合物Ａが、前記化合物Ａ１であり、前記化合物Ｂが、白金系抗癌化合物である癌治療薬が挙げられる。【００９５】
前記癌治療薬としては、別の好ましい態様は、前記化合物Ａが、前記化合物Ａ１の水溶性プロドラッグＡ２であり、前記化合物Ｂが、白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群、好ましくは、白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、および５−ＦＵ系化合物からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物が挙げられる。【００９６】
さらに好ましくは、前記化合物Ａが、前記水溶性プロドラッグＡ２であり、前記化合物Ｂが、白金系抗癌化合物である癌治療薬が挙げられる。
このような化合物Ａと化合物Ｂとの組み合わせの場合、抗癌効果がより顕著になる。【００９７】
癌治療薬において、前記化合物Ａ１、前記水溶性プロドラッグＡ２、前記化合物Ｂの好ましい態様および具体的な態様は前述のとおりである。
癌種別に見た、前記化合物Ａと前記化合物Ｂとの組み合わせの好ましい態様は以下のとおりである：
肺癌：前記化合物Ａ１、白金系抗癌化合物（好ましくはシスプラチン）；
肺癌：前記水溶性プロドラッグＡ２、白金系抗癌化合物（好ましくはシスプラチンおよびカルボプラチン）；
胃癌：前記化合物Ａ１、白金系抗癌化合物（好ましくはシスプラチン）；
胃癌：前記水溶性プロドラッグＡ２、５−ＦＵ系化合物（好ましくはカペシタビン）ならびに白金系抗癌化合物（好ましくはシスプラチンおよびカルボプラチン）；
結腸直腸癌：前記水溶性プロドラッグＡ２、５−ＦＵ系化合物（好ましくはカペシタビン）；
直腸癌：前記水溶性プロドラッグＡ２、白金系抗癌化合物（好ましくはオキサリプラチン）；
膵臓癌：前記水溶性プロドラッグＡ２、ゲムシタビン系化合物（好ましくはゲムシタビン）；
乳癌：前記水溶性プロドラッグＡ２、５−ＦＵ系化合物（好ましくはカペシタビン）；
卵巣癌：前記化合物Ａ１、白金系抗癌化合物（好ましくはシスプラチン）。【００９８】
本発明の癌治療薬は、化合物Ａと化合物Ｂとの配合剤であってもよく、あるいは、化合物Ａを含有してなる製剤と、化合物Ｂを含有してなる製剤とからなるキットであってもよい。このようなキットでは化合物Ａと化合物Ｂとを別々に投与する。【００９９】
化合物の製造方法
本発明で用いる式（１）で表される化合物は、たとえば、市販品または公知の方法（ＷＯ０３／０４５９５２、ＷＯ０３／０４３６３１など）により入手することができる。
本発明で用いる式（２）、特に式（５）で表される化合物は、たとえば、市販品または公知の方法（ＷＯ０３／０４３６３１など）により入手することができる。
本発明で用いる式（２）、特に式（３）、（４）で表される化合物は、例えば下記の方法に従って製造することができる。製造に際して用いる原料化合物としては市販されているものを用いても、または必要に応じて常法により製造してもよい。【０１００】
下記に例示する製造方法において、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｘ、Ｒ5、ｎは、式（２）、（３）、（４）に示すＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｘ、Ｒ5、ｎとそれぞれ同意義である。また、Ｐ1はアミノ保護基であり、Ｐ2はカルボニル化剤残基であり、Halはハロゲン原子（塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子）を示す。Ｙは、化合物Ａ１において、９位の水酸基の残基（Ｙ−ＯＨ）を示す。Ｒ8は、ハロゲン原子またはＯＲ9で表される基を示す。Ｒ9は、水素原子またはＣ１−Ｃ６アルキル基を示す。【０１０１】
反応工程１−１
2007023778.tif 000016
【０１０２】
反応工程１−２
2007023778.tif 000017
【０１０３】
<反応工程１>
反応工程１−１および１−２は、前記式（３）で表される、可溶性側鎖に３級アミノ基を有する水溶性プロドラッグの製造例を示すものである。
前記式（３）で表される水溶性プロドラッグは、たとえば、式（１）の化合物Ａ１の９位の水酸基のアシル化より容易に得ることができる。【０１０４】
化合物３ａの調製
反応工程１−１に示すように、化合物Ａ１（１ａ）を適当な溶媒中、縮合剤存在下に、対応する化合物（２ａ）（カルボン酸（Ｒ8＝ＯＨ）、カルボン酸エステル（Ｒ8＝ＯＲ9）、またはハロゲン化アシル化合物（Ｒ8＝ハロゲン原子（塩素原子等））が挙げられ、このうちカルボン酸が好ましい。）と反応させることによってエステル体（３ａ）を得ることができる。【０１０５】
前記化合物（２ａ）がジペプチド（Ｘ＝ＣＯ）であるカルボン酸の場合、あるいはペプチド誘導体（Ｘ＝ＣＨ2）である場合において、これら化合物（２ａ）の調製に用いるアミノ酸誘導体は、市販されているか、または文献記載の公知の方法により調製することができる。（例えば、J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 762-766；J. Org. Chem, 1998 5240；Tetrahedron Asymmetry 1995, 1741；Tetrahedron Asymmetry 1998, 4249）。該カルボン酸は、カルボン酸エステル（Ｒ8＝ＯＲ9）またはハロゲン化アシル化合物（Ｒ8＝ハロゲン原子）に公知の方法により変換できる。【０１０６】
またジペプチド誘導体は、当業者には公知の通常のペプチド化学によって調製することができる（The practice oｆ Peptide Synthesis、M. BodanskyおよびA. Bodansky/第2版、1994（Springer-Verlag）参照）。【０１０７】
前記縮合反応における溶媒としては、たとえば、塩化メチレン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、クロロホルム、ジオキサン、ジメチルホルムアミドなどが挙げられる。【０１０８】
前記縮合剤としては、たとえば、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩、ジシクロヘキシルカルボジイミド、BOP、HBTU、TNTU、PyBroP(商標)、PyBOP(商標)、TBTU、TSTU、HOBt（市販のカップリング試薬：The Combinatorial Chemistry Catalog, Feb., 1997; Novabiochem.参照）などが挙げられる。【０１０９】
化合物４ａの調製
対応するカルボン酸の種類にもよるが、たとえば、通常、対応するカルボン酸中のアミノ基が保護されたカルボン酸（２ａ）を用いることが好ましい。縮合反応後、続いて化合物（３ａ）から保護基を除去して、化合物（４ａ）で表される水溶性プロドラッグを得ることができる。
たとえば、工程１−２に示すように、得られたアミノ保護基を有する水溶性プロドラッグを脱保護する。【０１１０】
上記工程１−１、１−２において、アミノ保護基Ｐ1の選択、縮合反応は公知（The practice of Peptide Synthesis、M. BodanskyおよびA. Bodansky/第2版、1994（Springer-Verlag）、Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora Greene(著), 1999, Wiley-Interscience参照）の方法に従って適宜実施できる。【０１１１】
アミノ基の保護基としては、たとえば、下記の保護基が挙げられる。
カーバメート型
メチルオキシカルボニル基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基、９−（２−スルホ）フルオレニルメチルオキシカルボニル基、９−（２、７―ジブロモ）フルオレニルメチルオキシカルボニル基、４−メトキシフェナシルオキシカルボニル基、
エチルオキシカルボニル基、２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル基、２−トリメチルシリルエチルオキシカルボニル基、フェネチルオキシカルボニル基、１−（１−アダマンチル）−１−メチルエチルオキシカルボニル基、２−クロロエチルオキシカルボニル基、２−ブロモエチルオキシカルボニル基、２−ヨードエチルオキシカルボニル基、２，２−ジクロロエチルオキシカルボニル基、２，２−ジブロモエチルオキシカルボニル基、２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル基、２，２，２−トリブロモエチルオキシカルボニル基、１，１−ジメチル−２−クロロエチルオキシカルボニル基、１，１−ジメチル−２−ブロモエチルオキシカルボニル基、１，１−ジメチル−２，２−ジブロモエチルオキシカルボニル基、１，１−ジメチル−２，２，２−トリクロロエチルオキシカルボニル基、１−メチル−１−（４−ビフェニリル）エチルオキシカルボニル基、１−（３，５−ジｔ−ブチルフェニル）−１−メチルエチルオキシカルボニル基、２−（２'−ピリジル）エチルオキシカルボニル基、２−（４'−ピリジル）エチルオキシカルボニル基、２−（Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボキサミド）エチルオキシカルボニル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、１−アダマンチルオキシカルボニル基、ビニルオキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、１−イソプロピルアリルオキシカルボニル基、シンナミルオキシカルボニル基、４−ニトロシンナミルオキシカルボニル基、８−キノリルオキシカルボニル基、ピペリジニルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル基、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル基、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル基、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル基、ｐ−シアノベンジルオキシカルボニル基、ｏ−ニトロベンジルオキシカルボニル基、２，４−ジクロロベンジルオキシカルボニル基、４−メチルスルフィニルベンジルオキシカルボニル基、９−アントリルメチルオキシカルボニル基、ジフェニルメチルオキシカルボニル基、２−メチルチオエチルオキシカルボニル基、２−メチルスルホニルエチルオキシカルボニル基、２−（ｐ−トルエンスルホニル）エチルオキシカルボニル基、［２−（１，３−ジチアニル）］メチルオキシカルボニル基、４−メチルチオフェニルオキシカルボニル基、２，４−ジメチルチオフェニルオキシカルボニル基、２−ホスフィノエチルオキシカルボニル基、２−トリフェニルホスホニオイソプロピルオキシカルボニル基、１，１−ジメチル−２−シアノエチルオキシカルボニル基、ｍ−クロロ−ｐ−アセチルベンジルオキシカルボニル基、ｐ−（ジヒドロキシボリル）ベンジルオキシカルボニル基、５−ベンズイソキサゾリルメチルオキシカルボニル基、２−（トリフルオロメチル）−６−クロモニルメチルオキシカルボニル基、ｍ−ニトロフェニルオキシカルボニル基、３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル基、３，４−ジメトキシ−６−ニトロベンジルオキシカルボニル基、フェニル（ｏ−ニトロフェニル）メチルオキシカルボニル基。【０１１２】
ウレア型
ピペリジニルカルボニル基、ｐ−トルエンスルホニルアミノカルボニル基、フェニルアミノチオカルボニル基。【０１１３】
その他
ｔ−アミルオキシカルボニル基、ベンジルチオカルボニル基、シクロブチルオキシカルボニル基、シクロペンチルオキシカルボニル基、シクロヘキシルオキシカルボニル基、シクロプロピルメチルオキシカルボニル基、ｐ−デシルオキシベンジルオキシカルボニル基、ジイソプロピルメチルオキシカルボニル基、２，２−ジメトキシカルボニルビニルオキシカルボニル基、ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド）ベンジルオキシカルボニル基、１，１−ジメチル−３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド）プロピルオキシカルボニル基、１，１−ジメチルプロピニルオキシカルボニル基、ジ（２−ピリジル）メチルオキシカルボニル基、２−フラニルメチルオキシカルボニル基、イソボルニルオキシカルボニル基、イソブチルオキシカルボニル基、イソニコチニルオキシカルボニル基、ｐ−（ｐ'−メトキシフェニルアゾ）ベンジルオキシカルボニル基、１−メチルシクロブチルオキシカルボニル基、１−メチルシクロヘキシルオキシカルボニル基、１−メチル−１−シクロプロピルメチルオキシカルボニル基、１−メチル−１−（３，５−ジメトキシフェニル）エチルオキシカルボニル基、１−メチル−１−（ｐ−フェニルアゾフェニル）エチルオキシカルボニル基、１−メチル−１−フェニルエチルオキシカルボニル基、１−メチル−１−（４−ピリジル）エチルオキシカルボニル基、ｐ−（フェニルアゾ）ベンジルオキシカルボニル基、２，４，６−トリ−ｔ−ブチルフェニルオキシカルボニル基、４−（トリメチルアンモニウム）ベンジルオキシカルボニル基、２，４，６−トリメチルベンジルオキシカルボニル基。【０１１４】
アミド型
ホルミル基、アセチル基、クロロアセチル基、トリクロロアセチル基、トリフルオロアセチル基、フェニルアセチル基、３−フェニルプロピオニル基、ピコリノイル基、ベンゾイル基、ｐ−フェニルベンゾイル基、
ｏ−ニトロフェニルアセチル基、ｏ−ニトロフェノキシアセチル基、アセトアセチル基、（Ｎ−ジチオベンジルオキシカルボニルアミノ）アセチル基、３−（ｐ−ヒドロキシフェニル）プロピオニル基、３−（ｏ−ニトロフェニル）プロピオニル基、２−メチル− ２−（ｏ−ニトロフェノキシ）プロピオニル基、２−メチル−２−（ｏ−フェニルアゾフェノキシ）プロピオニル基、４−クロロブチリル基、３−メチル−３−ニトロブチリル基、ｏ−ニトロシンナモイル基、ｏ−ニトロベンゾイル基、ｏ−（ベンゾイルオキシメチル）ベンゾイル基。【０１１５】
縮合反応後のアミノ保護基の除去は、当業者には公知の方法、例えばBoc基にはトリフルオロ酢酸、Fmoc基にはピペリジン、または2-(トリメチルシリル)エトキシカルボニル（Teoc）、トリメチルシリルエチルおよびter-ブチルジメチルシリル基にはフッ化テトラブチルアンモニウムを反応させること、ならびにCbz基には接触水素添加によって行うことができる。【０１１６】
反応工程２−１
2007023778.tif 000018
【０１１７】
反応工程２−２
2007023778.tif 000019
【０１１８】
<反応工程２>
反応工程２−１および２−２は、前記式（４）で表される、可溶性側鎖にスルホニル基を含む水溶性プロドラッグの製造方法の一例を示すものである。
化合物２ｂの調製
まず、アルコール（１ｂ）をカルボニル化し、化合物（２ｂ）を調製する。水酸基のカルボニル化は、適当な溶媒中、アルコール（１ｂ）を適当なカルボニル化剤と反応させて得ることができる。【０１１９】
溶媒としては、たとえば、塩化メチレン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、クロロホルム、ジオキサン、ジメチルホルムアミドなどを用いることができる。
カルボニル化剤としては、たとえば、クロロぎ酸パラニトロフェニル、カルボニルジイミダゾール、ホスゲン類などを用いることができる。【０１２０】
反応は、通常、−１０℃〜２５℃にて、１〜２４時間にわたり実施できる。【０１２１】
化合物３ｂの調製
可溶性側鎖を構成する化合物３ｂは、公知の方法（Tetrahedron, 55(1999) 6623-6634）により調製することができる。
アルコール（３ｂ）中のアミノ基の保護は、公知（The practice of Peptide Synthesis、M. BodanskyおよびA. Bodansky/第2版、1994（Springer-Verlag）参照）の方法に従って適宜実施できる。【０１２２】
化合物４ｂの調製
次に、対応するアミノ基が保護されたアルコール（３ｂ）を、適当な溶媒の存在下、カルボニル化化合物（２ｂ）と反応させることによって、アミノ基が保護されたカーボネート体（４ｂ）を得ることができる。
溶媒としては、たとえば、塩化メチレン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、クロロホルム、ジオキサン、ジメチルホルムアミドなどを用いることができる。
反応は、通常、１５℃〜２５℃にて、２〜４８時間にわたり実施できる。【０１２３】
化合物５ｂの調製
このカーボネート体（４ｂ）のアミノ保護基を既知の方法により除去することにより、化合物（５ｂ）を得ることができる。アミノ基の除去は、前記反応工程１と同様にして公知の方法により実施できる。例えばBoc基にはトリフルオロ酢酸、Fmoc基にはピペリジン、または2-(トリメチルシリル)エトキシカルボニル（Teoc）、トリメチルシリルエチルおよびter-ブチルジメチルシリル基にはフッ化テトラブチルアンモニウムを反応させること、ならびにCbz基には接触水素添加によって行うことができる。
前記反応工程２−２は、具体例を示すものである。【０１２４】
反応工程３−１
2007023778.tif 000020
【０１２５】
反応工程３−２
2007023778.tif 000021
【０１２６】
<反応工程３>
反応工程３−１および３−２は、前記式（４）で表される、可溶性側鎖にスルホニル基を含む水溶性プロドラッグの製造方法の、他の一例を示すものである。
化合物２ｃの調製
まず、アルコール（１ｃ）を２−ハロゲン化エチルカーボネート化して、化合物（２ｃ）を調製する。
水酸基の２−ハロゲン化エチルカーボネート化は、適当な溶媒中、アルコール（１ｃ）を市販のクロロギ酸エステルと反応させて実施できる。
溶媒としては、たとえば、塩化メチレン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、クロロホルム、ジオキサン、ジメチルホルムアミドなどを用いることができる。
反応は、通常、−１０℃〜２５℃にて、１〜２４時間にわたり実施できる。【０１２７】
化合物３ｃの調製
可溶性側鎖を構成するチオール化合物３ｃは、市販品または公知の方法（Tetrahedron, 55, 1999, 6623-6634  および  J. Org. Chem.1995, 60, 8105-8109）により調製することができる。
チオール化合物（３ｃ）中のアミノ基の保護は、公知（The practice of Peptide Synthesis、M. BodanskyおよびA. Bodansky/第2版、1994（Springer-Verlag）参照）の方法に従って適宜実施できる。【０１２８】
化合物４ｃの調製
次に、対応するアミノ基が保護されたチオール化合物（３ｃ）を、適当な溶媒中、塩基の存在下、２−ハロゲン化エチルカーボネート化化合物（２ｃ）と反応させることによって、アミノ基が保護されたカーボネート体（４ｃ）を得ることができる。
溶媒としては、たとえば、塩化メチレン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、クロロホルム、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、メタノール、エタノールなどを用いることができる。
塩基としては、たとえば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、炭酸カリウム、炭酸ナトリウムなどが挙げられる。
反応は、通常、１５℃〜１００℃にて、１〜２４時間にわたり実施できる。【０１２９】
化合物５ｃの調製
さらに、公知の方法により、化合物４ｃを過酸化試薬と反応させて、化合物５ｃを得ることができる。
過酸化試薬としては、たとえば、オキソン、過酸化水素、メタクロロ過安息香酸などを用いることができる。
反応は、通常、−１０℃〜１００℃にて、１〜２４時間にわたり実施できる。【０１３０】
化合物６ｃの調製
この化合物５ｃのアミノ保護基を既知の方法により除去することにより、化合物（６ｃ）を得ることができる。アミノ保護基の除去は、前記反応工程１と同様にして公知の方法により実施できる。たとえば、例えばBoc基にはトリフルオロ酢酸、Fmoc基にはピペリジン、または2-(トリメチルシリル)エトキシカルボニル（Teoc）、トリメチルシリルエチルおよびter-ブチルジメチルシリル基にはフッ化テトラブチルアンモニウムを反応させること、ならびにCbz基には接触水素添加によって行うことができる。
前記反応工程３−２は、具体例である。【０１３１】
以上、本発明に係る水溶性プロドラッグＡ２の製造方法の一例を示したが、前記反応工程１〜３に示した目的化合物の単離・精製は、抽出、濃縮、留去、結晶化、濾過、再結晶、各種クロマトグラフィーなどの通常の化学操作を適用して行うことができる。【０１３２】
本発明で用いる、式（１）で表される化合物Ａ１、式（２）〜（５）で表される水溶性プロドラッグＡ２、その医薬的に許容し得る塩、これらの水和物または溶媒和物には、上記で挙げた化合物の全ての立体異性体（例えば、エナンチオマー、ジアステレオマー（シス及びトランス幾何異性体を含む。））、前記異性体のラセミ体、及びその他の混合物が含まれる。特に本発明においては、前記式（１）で表される化合物Ａ１、式（２）〜（５）で表される水溶性プロドラッグＡ２、化合物Ｂは立体異性体を含む。【０１３３】
また本発明で用いる、式（１）で表される化合物Ａ１または、式（２）〜（５）で表される水溶性プロドラッグＡ２、化合物Ｂ、その医薬的に許容し得る塩、これらの水和物または溶媒和物には、いくつかの互変異性形態、例えばエノール及びイミン形態、ケト及びエナミン形態、並びにそれらの混合物で存在することができる。互変異性体は、溶液中で、互変異性セットの混合物として存在する。固体の形態では、通常、一方の互変異性体が優勢である。一方の互変異性体を記載することがあるが、本発明で用いる化合物には、全ての互変異性体が含まれる。【０１３４】
さらに、本発明で用いる化合物にはアトロプ異性体も含まれる。アトロプ異性体とは、回転が制限された異性体に分割できる式（１）で表される化合物Ａ１、式（２）〜（５）で表される水溶性プロドラッグＡ２、化合物Ｂを意味する。【０１３５】
これらの異性体は、異性体間の物理化学的な性質の差を利用して常法により単離することができる。たとえば、ラセミ化合物は一般的な光学分割法、たとえば、酒石酸等の光学活性酸とのジアステレオマー塩に誘導し光学分割する方法等により、立体的に純粋な異性体にすることができる。ジアステレオマーの混合物は分別結晶化、各種クロマトグラフィー（たとえば、薄層クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー等）を用いることにより分離できる。【０１３６】
本発明で用いる化合物がフリー体として得られる場合、前記化合物が形成していてもよい塩またはそれらの水和物もしくは溶媒和物の状態に、常法に従って変換することができる。
また、本発明で用いる化合物が、化合物の塩、水和物、または溶媒和物として得られる場合、化合物のフリー体に常法に従って変換することができる。また、本発明で用いる化合物が、化合物の塩、水和物、または溶媒和物として得られる場合、その重量をフリー体重量（塩、水和物、または溶媒和物の重量から、塩部分、水または溶媒が占める重量を差し引いたもの）に換算して、製剤中に占める有効成分の量や投与量を決定することもできる。【０１３７】
本発明で用いる化合物Ａ：式（１）で表される化合物Ａ１、または式（２）〜（５）で表される水溶性プロドラッグＡ２、化合物Ｂ：白金系抗癌化合物、ゲムシタビン系化合物、５−ＦＵ系化合物、タキサン系化合物、ビンアルカロイド系化合物、抗癌性チロシンキナーゼ阻害化合物、および抗癌性モノクローナル抗体からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物は、それぞれが抗癌効果を有するが、化合物Ａと化合物Ｂとを併用することにより、抗癌効果が相乗的に向上する。【０１３８】
本発明では、プロドラッグＡ２は、優れた水溶性を示し、しかも化学的変換により速やかに活性体に変換されることにより、種間差や個体差が小さいという特徴および容易に水溶性にすることができるという特徴を保持しつつ、他の化合物Ｂとの併用により抗癌効果の向上を図ることができる。【０１３９】
本発明に係る癌治療薬は治療が有効な癌として、固形腫瘍が挙げられる。癌としてはたとえば、脳腫瘍、神経膠腫、頭頚部癌（咽頭癌、喉頭癌、舌癌等）、食道癌、胃癌、大腸癌(盲腸癌、結腸癌（上行結腸癌、横行結腸癌、Ｓ状結腸癌）、直腸癌、結腸直腸癌（colorectal carcinoma））、肺癌（小細胞癌、非小細胞癌等）、甲状腺癌、乳癌、胆のう癌、膵臓癌、肝臓癌、前立腺癌、卵巣癌、子宮癌（子宮頸癌、子宮体癌）、精巣癌、腎細胞癌、膀胱癌、腎盂・尿管癌、悪性黒色腫、皮膚癌などに適用でき、好ましくは結腸直腸癌、肺癌、乳癌、胃癌、子宮頸癌、膀胱癌、直腸癌、膵臓癌および卵巣癌など、更に好ましくは結腸直腸癌、肺癌、乳癌、胃癌、直腸癌、膵臓癌および卵巣癌などに適用できる。【０１４０】
また、本発明は、癌の予防または治療法であって、それを必要とする患者に治療上有効量の前記癌治療薬を投与する段階を含む方法にも関する。この方法は、たとえば、癌のうちでは、たとえば結腸直腸癌、肺癌、乳癌、胃癌、子宮頸癌、膀胱癌、直腸癌、膵臓癌および卵巣癌、好ましくは結腸直腸癌、肺癌、乳癌、胃癌、直腸癌、膵臓癌および卵巣癌のような固形腫瘍および癌の治療のために特に有用である。【０１４１】
本発明の癌治療薬を、癌の治療剤又は予防剤として使用する場合、その投与方法は、好ましくは非経口的（静脈内的、筋肉内的、皮下的）、局所的（点滴）投与および吸入（口腔内または鼻スプレー）などが挙げられる。【０１４２】
本発明に係る組み合わせてなる、癌治療薬中の各製剤は、投与方法に対応して、各種の形態を選択することができる。例えば錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤若しくは液剤等の経口製剤、或いは、例えば溶液若しくは懸濁液等の殺菌した液状の非経口製剤、坐剤、軟膏剤等が挙げられる。【０１４３】
固体の製剤は、そのまま錠剤、カプセル剤、顆粒剤又は粉末の形態として製造することもできるが、適当な担体（添加物）を使用して製造することもできる。そのような担体（添加物）としては、例えば乳糖若しくはブドウ糖等の糖類； 例えばトウモロコシ、小麦若しくは米等の澱粉類；例えばステアリン酸等の脂肪酸； 例えばメタケイ酸アルミン酸マグネシウム若しくは無水リン酸カルシウム等の無機塩；例えばポリビニルピロリドン若しくはポリアルキレングリコール等の合成高分子；例えばステアリン酸カルシウム若しくはステアリン酸マグネシウム等の脂肪酸塩；例えばステアリルアルコール若しくはベンジルアルコール等のアルコール類；例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース若しくはヒドロキシプロピルメチルセルロース等の合成セルロース誘導体；その他、ゼラチン、タルク、植物油、アラビアゴム等通常用いられる添加物が挙げられる。【０１４４】
これらの錠剤、カプセル剤、顆粒剤及び粉末等の固形製剤は一般的には、製剤全体の重量を基準として、例えば、化合物Ａ０．１〜１００重量％、好ましくは５〜１００重量％、さらに好ましくは５〜６０重量％、特に好ましくは５〜４０重量％の有効成分を含んでいてもよい。【０１４５】
液状製剤は、水、アルコール類又は例えば大豆油、ピーナツ油、ゴマ油等の植物由来の油等の液状製剤において通常用いられる適当な添加物を使用し、懸濁液、シロップ剤、注射剤、点滴剤（静脈内輸液）等の形態として製造される。【０１４６】
特に、非経口的に筋肉内注射、静脈内注射又は皮下注射の形で投与する場合の適当な溶剤又は希釈剤としては、例えば注射用蒸留水、塩酸リドカイン水溶液（筋肉内注射用）、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、静脈内注射用液体（例えばクエン酸及びクエン酸ナトリウム等の水溶液）若しくは電解質溶液（点滴静注及び静脈内注射用）等、又はこれらの混合溶液が挙げられる。【０１４７】
これらの注射剤は予め溶解したものの他、粉末のまま或いは適当な担体（添加物）を加えたものを用時溶解する形態もとり得る。これらの注射液は、製剤全体の重量を基準として、例えば、０．１〜１０重量％、好ましくは０．１〜５重量％の有効成分を含むことができる。【０１４８】
また、経口投与用の懸濁剤、シロップ剤等の液剤は、製剤全体の重量を基準として、例えば、０．５〜１０重量％の有効成分を含むことができる。【０１４９】
化合物Ａが水溶性プロドラッグＡ２の場合、化合物Ａを水溶液状製剤として用いることが好ましい。すなわち、本発明で用いることのできる水溶性プロドラッグＡ２、その医薬的に許容し得る塩、これらの水和物または溶媒和物を含有する水溶液として用いることができる。水溶液としては、たとえば、リン酸緩衝液、生理食塩水、各種輸液などを用いることができる。【０１５０】
水溶液のｐＨは好ましくは４以下、さらに好ましくは３以下、より好ましくはｐＨ２〜３である。このようなｐＨの溶液中で、式（２）〜（５）で表される水溶性プロドラッグ、その医薬的に許容し得る塩、これらの水和物または溶媒和物長時間安定に存在することができる。一方、好ましくはｐＨ５以上、さらに好ましくはｐＨ７−８の生理的条件下では短時間で速やかにかつ定量的に活性化体Ａ１を遊離することができる。【０１５１】
したがって、水溶性プロドラッグＡ２を用いる場合、注射剤としての使用に特に有効で、ｐＨを好ましくは４以下、さらに好ましくは３以下、より好ましくはｐＨ２〜３とした水溶液状製剤を注射すれば、たとえば、血液中で、速やかに活性体Ａ１を遊離できる。
この場合、水溶性プロドラッグＡ２の投与形態としては、好ましくは、水性の経口用溶液および懸濁液、および個々の投与量に小分けするのに適応した容器に充填した非経口用溶液が挙げられる。また投与形態は、皮下移植のような調節された放出処方物を包含する種々の投与方法に適応させることもできる。【０１５２】
本発明の癌治療薬を、癌の治療剤または予防剤として使用する場合、化合物Ａ、化合物Ｂ、その医薬的に許容し得る塩、これらの水和物または溶媒和物の使用割合および合計使用量は、症状、年齢、体重、相対的健康状態、他の投薬の存在、投与方法等により異なる。【０１５３】
化合物Ａの投与量について、目安として、例えば、患者（温血動物、特に人間）に対して、一般に有効な量は、経口投与の場合、１日当たりの成人１人当りの投与量は、例えば、１ないし５００ｍｇの範囲内とすることができる。
また非経口投与、好ましくは静脈内投与、さらに好ましくは点滴静注の場合、例えば、化合物Ａは、１日につき体重１ｋｇ当たり好ましくは０．１〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは体重１ｋｇ当たり１０〜８００ｍｇである。これを１日１回または数回に分けて、症状に応じて投与することが望ましい。【０１５４】
化合物Ａ、その医薬的に許容し得る塩、これらの水和物または溶媒和物を水溶液で用いる場合、水溶液中での濃度（有効成分の合計量）は、疾患の程度、種類により異なり限定されないが、通常、好ましくは１μＭ〜５００μＭの範囲である。【０１５５】
ここで、点滴静注の場合、例えば、１〜４時間、好ましくは２〜３時間、さらに好ましくは２時間連続して投与してもよい。なお、投与回数は、投与方法及び症状により異なるが、例えば、１日１回ないし５回、好ましくは１日１〜２回、さらに好ましくは１日１回である。また、隔日投与、隔々日投与などの間けつ投与等の投与方法でも用いることができる。非経口投与の場合の治療の休薬期間は、例えば、１〜６週間、好ましくは、２〜４週間、さらに好ましくは３〜４週間である。【０１５６】
また、化合物Ａと併用される化合物Ｂ等の他の抗がん剤の治療単位は、特に限定されないが、公知文献などにより当業者が必要に応じて決定することができる。例えば、以下に示す通りである。【０１５７】
シスプラチンの治療単位は、静脈内注射の場合、例えば、１日１回５０〜７０ｍｇ／ｍ２（体表面積）で投与し、３週間以上休薬する（投与量は、適宜増減してもよい）。これを１コースとして繰り返す。
カルボプラチンの治療単位は、例えば、１日１回３００〜４００ｍｇ／ｍ２を３０分以上かけて点滴静注し、少なくとも４週間休薬する（投与量は適宜増減してもよい）。これを１コースとして繰り返す。
オキザリプラチンの治療単位は、１日１回８５ｍｇ／ｍ２を静注し、２週間休薬し、これを１コースとして繰り返す。【０１５８】
ゲムシタビンの治療単位は、例えば、ゲムシタビンとして１回１ｇ／ｍ２を３０分かけて点滴静注し、週１回投与を３週連続し、４週目は休薬する。これを１コースとして投与を繰り返す。年齢、症状又は副作用の発現に応じて適宜減量する。【０１５９】
５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）の治療単位は、経口投与の場合、例えば、１日２００〜３００ｍｇを１〜３回に連日投与し、注射剤の場合は、例えば、１日５〜１５ｍｇ／ｋｇを最初の５日間連日１日１回静注又は点滴静注し、以後、５〜７．５ｍｇ／ｋｇを隔日に１日１回静注又は点滴静注する（投与量は、適宜増減してもよい）。【０１６０】
カペシタビンの治療単位は、経口投与の場合、一定の投与量を、たとえば１日２回、１４〜２１日間程度連続投与し、その後７日間休薬する。これを１コースとして投与を繰り返す。１回の投与量は、体表面積に応じ、たとえば、体表面積が１．３１ｍ2未満の場合１回９００ｍｇ、体表面積が１．３１ｍ2以上１．６４ｍ2未満の場合１２００ｍｇ、体表面積が１．６４ｍ2以上の場合１回１５００ｍｇを用いる。【０１６１】
ドセタキセル（ドセタキセル水和物）の治療単位は、例えば、１日１回、ドセタキセルとして６０ｍｇ／ｍ２（体表面積）を１時間以上かけて３〜４週間間隔で点滴静注する（投与量は、適宜増減することができる）。
パクリタキセルの治療単位は、例えば、１日１回２１０ｍｇ／ｍ２（体表面積）を３時間かけて点滴静注し、少なくとも３週間休薬する。これを１コースとして、繰り返す。投与量は適宜増減することができる。【０１６２】
その他、化合物Ｂ以外の抗癌化合物をさらに用いる場合、たとえば、下記の治療単位が好ましい。
Ｓ−１（テガフール・ギメスタット・オスタットカリウム）の治療単位は、例えば、初回投与量（１回量）を体表面積に合わせて次の基準量とし、朝食後及び夕食後の１日２回、２８日間連日経口投与し、その後１４日間休薬する。これを１コースとして投与を繰り返す。体表面積当たりの初回基準量（テガフール相当量）は、１．２５ｍ２未満：４０ｍｇ／回、１．２５ｍ２以上〜１．５ｍ２未満：５０ｍｇ／回、１．５ｍ２以上：６０ｍｇ／回であり、患者の状態により適宜増減する。【０１６３】
ドキソルビシン（例えば、塩酸ドキソルビシン）の治療単位は、静脈内注射の場合、例えば、１日１回１０ｍｇ（０．２ｍｇ／ｋｇ）（力価）で４〜６日間連日静脈内ワンショット投与後、７〜１０日間休薬し、これを１コースとし、２〜３コース繰り返す。ここで、総投与量は、５００ｍｇ（力価）／ｍ２（体表面積）以下が好ましく、その範囲内で適宜増減してもよい。【０１６４】
エトポシドの治療単位は、静脈内注射の場合、例えば、１日６０〜１００ｍｇ／ｍ２（体表面積）で５日間連続投与し、３週間休薬する（投与量は、適宜増減してもよい）。これを１コースとして繰り返す。一方、経口投与の場合は、例えば、１日１７５〜２００ｍｇを５日間連続投与し、３週間休薬する（投与量は、適宜増減してもよい）。これを１コースとして繰り返す。【０１６５】
イリノテカン（例えば、塩酸イリノテカン）の治療単位は、例えば、１日１回１００ｍｇ／ｍ２、１週間間隔で３〜４回点滴静注し、少なくとも２週間休薬する。【０１６６】
トポテカンの治療単位は、例えば、１日１回１．５ｍｇ／ｍ２を５日間点滴静注し、少なくとも３週間休薬する。【０１６７】
シクロホスファミドの治療単位は、静脈内注射の場合、例えば、１日１回１００ｍｇ連日静注し、患者が耐えられる場合は１日２００ｍｇに増量してもよく、総量で３０００〜８０００ｍｇ投与するが、適宜増減してもよい。また必要に応じて筋肉内、胸腔内、又は腫瘍内に注射又は注入してもよい。一方、経口投与の場合は、例えば、１日１００〜２００ｍｇで投与する。【０１６８】
イレッサの治療単位は、例えば、１日１回２５０ｍｇを経口投与する。【０１６９】
ＳＵ５４１６の治療単位は、例えば、６０分かけて１４５ｍｇ／ｍ２を週２回点滴静注し、４週間投与する。これを１コースとして繰り返す。【０１７０】
ＩＭＣ−Ｃ２２５の治療単位は、例えば、第１日目に４００ｍｇ／ｍ２を点滴静注し、その後２５０ｍｇ／ｍ２を毎週点滴静注する。【０１７１】
ＲｈｕＭａｂＶＥＧＦの治療単位は、例えば、３ｍｇ／ｋｇを毎週点滴静注する。【０１７２】
５−ＦＵとロイコボリンを組み合わせた場合の治療単位は、例えば、第１日目から第５日目に５−ＦＵ ４２５ｍｇ／ｍ２、ロイコボリン ２００ｍｇ／ｍ２を点滴静注し、これを４週間間隔で繰り返す。【０１７３】
タルセバの治療単位は、空腹時にエルロチニブとして１５０ｍｇを１日１回、経口投与する。【０１７４】
ハーセプチンの治療単位は、１日１回、トラスツズマブとして初回投与時には、４ｍｇ／ｋｇ（体重）を、２回目以降は、２ｍｇ／ｋｇ（体重）を、９０分以上かけて１週間間隔で点滴注射する。【０１７５】
本発明の癌治療薬は、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤などの添加剤を用いて周知の方法で製造できる。【０１７６】
安定剤としては、例えばメチルパラベン、プロピルパラベンのようなパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコールのようなアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノール、クレゾールのようなフェエノール類；チメロサール；デヒドロ酢酸；及びソルビン酸を挙げることができる。【０１７７】
矯味矯臭剤としては、例えば通常使用される、甘味料、酸味料、香料等を挙げることができる。【０１７８】
また、液剤を製造するための溶媒としては、エタノール、フェノール、クロロクレゾール、精製水、蒸留水等を使用することができる。【０１７９】
界面活性剤又は乳化剤としては、例えば、ポリソルベート８０、ステアリン酸ポリオキシル４０、ラウロマクロゴール等を挙げることができる。【０１８０】
具体的には、例えば、化合物Ａと併用される化合物Ｂ等の他の抗がん剤を含む製剤は、それが経口製剤の場合、例えば、該抗がん剤適量と、乳糖適量を混合し、経口投与に適した硬ゼラチンカプセルに詰めることにより製造することができる。一方、該抗がん剤を含む製剤が注射剤の場合は、例えば、該抗がん剤適量を０．９％生理食塩水適量と混合し、この混合物を注射用バイアルに詰めることにより製造することができる。【０１８１】
また、本発明に係る化合物Ａと化合物Ｂ等の他の抗がん剤を含む合剤の場合にも、常法或いは慣用技術に従って、当業者が容易に製造することができる。
なお、本明細書において引用された全ての先行技術文献は、参照として本明細書に組み入れられる。
【図面の簡単な説明】
【０１８２】
【図１−１】ヒト肺癌細胞株Calu-6における化合物１０Ａ（調製例２で調製した化合物２Ａの活性型）と他の細胞毒性物質との組み合わせ効果のアイソボログラムによる分析結果を示すグラフである。
【図１−２】ヒト胃癌細胞株MKN-28、MKN-45、およびヒト卵巣癌細胞株OVCAR-3における化合物１０Ａ（調製例２で調製した化合物２Ａの活性型）と化合物１B（CDDP）との組み合わせ効果のアイソボログラムによる分析結果を示すグラフである。
【図２−１】ヒト結腸直腸癌HCT116異種移植モデルにおける、化合物２Ａ、CPT-11、カペシタビン（化合物６Ｂ）単品、または組合せ療法による抗腫瘍効果を示すグラフである。矢印は化合物２Ａ、CPT-11を投与した日を示し、X軸上の横棒はカペシタビンを投与した日を示している。各点の縦棒は標準偏差を示している。グラフ中の記号は下記の通りである。カペシタビン：白三角、化合物２ＡまたはCPT-11：黒丸、組み合わせ：黒三角、媒体：白丸。各群はマウス５匹で、腫瘍量はその平均値である。
【図２−２】ヒト胃癌NCI-N87異種移植モデルにおける化合物２Ａ、CPT-11、カペシタビン（化合物６Ｂ）単品、または組合せ療法による抗腫瘍効果を示すグラフである。矢印は化合物２Ａ、CPT-11を投与した日を示し、X軸上の横棒はカペシタビンを投与した日を示している。各点の縦棒は標準偏差を示している。グラフ中の記号は下記の通りである。カペシタビン：白三角、化合物２ＡまたはCPT-11：黒丸、組み合わせ：黒三角、媒体：白丸。各群はマウス５匹で、腫瘍量はその平均値である。
【図３】ヒト結腸直腸癌HCT116異種移植モデルにおける化合物２Ａ、カペシタビン（化合物６Ｂ）単品、または組合せ療法による、ＭＴＤを変化させた場合の抗腫瘍活性を示すグラフである。  矢印は化合物２Ａを投与した日を示し、X軸上の横棒はカペシタビンを投与した日を示している。各点の縦棒は標準偏差を示している。グラフ中の記号は下記の通りである。カペシタビン：白三角、化合物２Ａ：黒丸、組み合わせ：黒三角、媒体：白丸。各群はマウス６匹で、腫瘍量はその平均値である。
【図４−１】Calu-6ヒト肺癌異種移植モデルにおける化合物２ＡまたはCPT-11と、CDDPとの組み合わせ療法による抗腫瘍効果を示すグラフである。上段の矢印は化合物２ＡまたはCPT-11を、下段の矢印はCDDPを投与した日を示している。各点の縦棒は標準偏差を示している。グラフ中の記号は下記の通りである。CDDP：白三角、化合物２ＡまたはCPT-11：黒丸、組み合わせ：黒三角、媒体：白丸。各群はマウス５匹で、腫瘍量はその平均値である。
【図４−２】ヒト肺癌Calu-6異種移植モデルにおける化合物２Ａとカルボプラチンとの組み合わせ療法による抗腫瘍効果を示すグラフである。上段の矢印は化合物２Ａ、下段の矢印はカルボプラチンを投与した日を示している。各点の縦棒は標準偏差を示している。グラフ中の記号は下記の通りである。カルボプラチン：白三角、化合物２Ａ：黒丸、組み合わせ：黒三角、媒体：白丸。各群はマウス５匹で、腫瘍量はその平均値である。
【図５−１】ヒト直腸癌COL-16-JCK異種移植モデルにおける化合物２Ａとオキサリプラチンとの組み合わせ療法による抗腫瘍効果を示すグラフで、化合物２Ａを1週間に1回投与した場合の結果である。上段の矢印は化合物２Ａを、下段の矢印はオキサリプラチンを投与した日を示している。各点の縦棒は標準偏差を示している。グラフ中の記号は下記の通りである。オキサリプラチン：白三角、化合物２Ａ：黒丸、組み合わせ：黒三角、媒体：白丸。各群はマウス５匹で、腫瘍量はその平均値である。
【図５−２】ヒト直腸癌COL-16-JCK異種移植モデルにおける化合物２Ａとオキサリプラチンとの組み合わせ療法による抗腫瘍効果を示すグラフで、化合物２Ａを2週間に1回投与した場合の結果である。上段の矢印は化合物２Ａを、下段の矢印はオキサリプラチンを投与した日を示している。各点の縦棒は標準偏差を示している。グラフ中の記号は下記の通りである。オキサリプラチン：白三角、化合物２Ａ：黒丸、組み合わせ：黒三角、媒体：白丸。各群はマウス５匹で、腫瘍量はその平均値である。
【図６】ヒト膵臓癌Capan-1異種移植モデルにおける化合物２Ａとゲムシタビンとの組み合わせ療法による抗腫瘍効果を示すグラフで、化合物２Ａおよびゲムシタビン共に１週間に1回投与した場合の結果である。上段の矢印は化合物２Ａを、下段の矢印はゲムシタビンを投与した日を示している。各点の縦棒は標準偏差を示している。グラフ中の記号は下記の通りである。ゲムシタビン：白三角、化合物２Ａ：黒丸、組み合わせ：黒三角、媒体：白丸。各群はマウス５匹で、腫瘍量はその平均値である。
【図７】ヒト乳癌MX-1異種移植モデルにおける化合物２Ａ、カペシタビン（化合物６Ｂ）単品、または組合せ療法による抗腫瘍効果を示すグラフで、化合物２Ａは１週間に1回計3回静脈内投与、カペシタビンは5日間連日投与2日間休薬のサイクルを3回繰り返し経口投与した。矢印は化合物２Ａを投与した日を示し、X軸上の横棒はカペシタビンを投与した日を示している。各点の縦棒は標準偏差を示している。グラフ中の記号は下記の通りである。カペシタビン：白三角、化合物２Ａ：黒丸、組み合わせ：黒三角、媒体：白丸。各群はマウス５匹で、腫瘍量はその平均値である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１８３】
以下本発明の一態様を実施例により更に詳しく説明するが本発明はこれら実施例に限定されるものではない。【０１８４】
NMR解析は、JEOL社製JNM-EX270(270MHz)、JNMGSX400(400MHz)、またはJNM-A500(500MHz)を用いて行い、NMRデータはppm(parts per million)で表わし、サンプル溶媒からの重水素ロック信号を参照した。【０１８５】
質量スペクトルデータは、JEOL社製JMS-DX303、またはJMS-SX/SX102Aを用いて得た。【０１８６】
高速液体クロマトグラフィーを備えた質量スペクトルデータは、Ｗａｔｅｒｓ社製９９６−６００Ｅ勾配高速液体クロマトグラフィー付きマイクロマス（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ社製ＺＭＤ）、またはＡｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製Ａｇｉｌｅｎｔ １１００勾配高速液体クロマトグラフィー付きマイクロマス（Ｆｉｎｎｉｇａｎ社製Ｎａｖｉｇａｔｏｒ）を用いて得た。【０１８７】
有機合成反応には市販の試薬を更に精製しないで使用した。
実施例中、室温とは20〜25℃程度の範囲をいう。
すべての禁水性反応は窒素雰囲気下実施した。減圧下での濃縮は或いは溶媒留去は特に言及しない限り、ロータリーエバポレータを用いて行ったものである。【０１８８】
化合物の調製において、必要に応じ保護基により官能基を保護し、標的分子の保護体を調製した後、保護基を除去した。保護基の選択および脱着操作は、例えば「Greene and Wuts, ''Protective Group in Organic Synthesis'' 第２版、John Wiley & Sons 1991」に記載の方法により実施した。【０１８９】
高速液体クロマトグラフィーの条件は、下記のいずれかを用いた。
高速液体クロマトグラフィーの条件 1
カラム：Ｃｏｍｂｉ  ＯＤＳ（ＯＤＳ，５μｍ，４．６ｍｍＩ．Ｄ．ｘ５０ｍｍ，和光純薬工業社製）、ＣＯＳＭＯＳＩＬ（ＯＤＳ，５μｍ，４．６ｍｍＩ．Ｄ．ｘ５０ｍｍ，ナカライテスク社製）、あるいはＩｎｅｒｔｓｉｌ  Ｃ１８（ＯＤＳ，５μｍ，４．６ｍｍＩ．Ｄ．ｘ５０ｍｍ，ＧＬサイエンス社製）
移動相：０．０１％トリフルオロ酢酸を含有する水（Ａ）及び０．０１％トリフルオロ酢酸を含有するアセトニトリル（Ｂ）
溶出法：１０％Ｂから９５％Ｂ（３．５分）、９５％Ｂから１０％Ｂ（１分）、１０％Ｂで保持（０．５分）のステップワイズな溶媒勾配溶出
流速：４．０ｍＬ／分【０１９０】
高速液体クロマトグラフィーの条件 ２
カラム：Ｃｏｍｂｉ  ＯＤＳ（ＯＤＳ，５μｍ，４．６ｍｍＩ．Ｄ．ｘ５０ｍｍ，和光純薬工業社製）、ＣＯＳＭＯＳＩＬ（ＯＤＳ，５μｍ，４．６ｍｍＩ．Ｄ．ｘ５０ｍｍ，ナカライテスク社製）、あるいはＩｎｅｒｔｓｉｌ  Ｃ１８（ＯＤＳ，５μｍ，４．６ｍｍＩ．Ｄ．ｘ５０ｍｍ，ＧＬサイエンス社製））
移動相：０．０１％トリフルオロ酢酸を含有する水（Ａ）及び０．０１％トリフルオロ酢酸を含有するアセトニトリル（Ｂ）
溶出法：３０％Ｂから３５％Ｂ（０．２分）、３５％Ｂから９８％Ｂ（３．３分）、９８％Ｂから３０％Ｂ（１分）、３０％Ｂで保持（０．５分）のステップワイズな溶媒勾配溶出
流速：４．０ｍＬ／分【０１９１】
〔調製例１〕
(９Ｓ)−９−エチル−９−{[メチル−(２−メチルアミノ−エチル)−アミノ]−アセトキシ}−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩（化合物１Ａ）
2007023778.tif 000022
【０１９２】
工程１−Ａ
｛[２−(tert−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸 ベンジルエステル
2007023778.tif 000023
【０１９３】
既知物質であるメチル−（2−メチル−アミノ−エチル）−カルバミン酸 tert-ブチル エステル854mg（4.54 mmol）（J.Med.Chem., 2000, 43, 3093）を、塩化メチレン（50 mL）に溶解し、２−ブロモ酢酸ベンジル1.0 mL（6.35 mmol）を加え、室温にて１昼夜攪拌した。【０１９４】
反応終了後、反応溶液を濃縮することによって得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝5:1-3:1）で精製することにより、｛[２−(tert−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸 ベンジルエステル 534.3mg (35%) を無色粘性油状物質として得た。【０１９５】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 1.42 (9H, s), 2.40 (3H, s), 2.65 (2H, t, J = 7.1 Hz), 2.82 (3H, s), 3.20-3.38 (2H, m), 3.34 (2H, s), 5.13 (2H, s), 7.24-7.38 (5H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 337 (M+H)。【０１９６】
工程１−Ｂ
｛[２−(tert−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸
2007023778.tif 000024
工程１−Ａで調製した｛[２−(tert−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸 ベンジル エステル534.3mg （1.59 mmol）をメタノール（20 mL）に溶解し、5%パラジウム炭素51mgを加え、水素雰囲気下室温にて１時間攪拌した。不溶物をろ去した後、ろ液を濃縮することにより、｛[２−(tert−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸391.1mg（100%）を無色粘性油状物質として得た。【０１９７】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 1.43 (9H, s), 2.72 (3H, s), 2.87 (3H, s), 2.95-3.10 (2H, m), 3.45 (2H, s), 3.31-3.63 (2H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 247 (M+H)。【０１９８】
工程１−Ｃ
(９Ｓ)−９−（{[２−（tert−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−エチル]−メチル−アミノ}−アセトキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000025
【０１９９】
工程１−Ｂで調製した｛[２−(tert−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ)−エチル]−メチル−アミノ｝−酢酸391mg（1.59 mmol）、(９Ｓ)−９−エチル−９−ヒドロキシ−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 279mg（0.61 mmol）（WO03/045952実施例2.15に従って製造した。）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩 525mg（2.74 mmol）、４−ジメチルアミノピリジン 224mg（1.83 mmol）を塩化メチレン（15 mL）に溶解し、室温にて４時間攪拌した。【０２００】
反応溶液を0.15N塩酸水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝３０：０−１０：１）で精製することにより、(９Ｓ)−９（{[２−（tert−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−エチル]−メチル−アミノ}−アセトキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 136.4mg（33%） を黄色アモルファスとして得た。【０２０１】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 0.85-0.95 (6H, m), 1.27-1.50 (4H, m), 1.40 (9H, s), 1.70-1.84 (2H, m), 2.03-2.30 (2H, m), 2.39 (3H, s), 2.58-2.70 (2H, m), 2.80 (3H, s), 3.18-3.36 (2H, m), 3.48 (2H, s), 3.81 (2H, t, J = 7.3 Hz), 5.21 (2H, s), 5.37 (1H, d, J = 17.3 Hz), 5.64 (1H, d, J = 17.3 Hz), 7.07 (1H, s), 7.14 (1H, dd, J = 1.3, 7.3 Hz), 7.38 (1H, s), 7.53-7.70 (2H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 687 (M+H)。【０２０２】
工程１−Ｄ
(９Ｓ)−９−エチル−９−{[メチル−(２−メチルアミノ−エチル)−アミノ]−アセトキシ}−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩
2007023778.tif 000026
【０２０３】
工程１−Ｃで調製した(９Ｓ)−９−（{[２−（tert−ブトキシカルボニル−メチル−アミノ）−エチル]−メチル−アミノ}−アセトキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン136.4mg（0.20 mmol）を１Ｎ塩酸−酢酸溶液（3ｍL）に溶かし、室温にて２時間半攪拌した。【０２０４】
反応溶液に酢酸エチルを加え、さらに室温にて30分攪拌し、生じた固体をろ取することにより、(９Ｓ)−９−エチル−９−{[メチル−(２−メチルアミノ−エチル) −アミノ] −アセトキシ}−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２-de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩（化合物１Ａ）102.7mg（74%） を黄赤色固体として得た。【０２０５】
1H-NMR (270MHz, CD3OD) δ(ppm): 0.99 (3H, t, J = 6.9 Hz), 1.09 (3H, t, J = 7.4 Hz), 1.40-1.62 (4H, m), 1.88-2.02 (2H, m), 2.15-2.31 (2H, m), 2.75 (3H, s), 2.96-3.06 (3H, m), 3.39-3.62 (4H, m), 4.25 (2H, t, J = 7.9 Hz), 4.44-4.60 (1H, m), 4.87-5.03 (1H, m), 5.53 (2H, s), 5.54 (1H, d, J = 17.2 Hz), 5.67 (1H, d, J = 17.2 Hz), 7.55 (1H, d, J = 7.3 Hz), 7.96-8.17 (3H, m), 8.33 (1H, s)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 587 (M+H)。【０２０６】
〔調製例２〕
(９Ｓ)−９−エチル−９−（グリシル−ザルコシロキシ）−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩（化合物２Ａ）
2007023778.tif 000027
【０２０７】
工程２−Ａ
(９Ｓ)−９−{[Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−グリシル]−ザルコシロキシ}−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000028
【０２０８】
既知物質である[Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−グリシル]−ザルコシン1.4g（5.67 mmol）（Helvetica Chimica Acta, 1991, 74, 197）、(９Ｓ)−９−エチル−９−ヒドロキシ−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 1.3g（2.84 mmol）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩 2.2g（11.34 mmol）、４−ジメチルアミノピリジン 1.4g（11.34 mmol）を塩化メチレン（50 mL）に溶解し、室温にて１時間半攪拌した。【０２０９】
反応溶液を0.2N塩酸水溶液および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝１００：１−３０：１）で精製することにより、(９Ｓ)−９−{[Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−グリシル]−ザルコシロキシ}−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン1.34g（69%） を黄赤色アモルファスとして得た。【０２１０】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 
ロータマーＡ* 0.86-1.04 (6H, m), 1.24-1.53 (4H, m), 1.38 (9H, s), 1.70-1.90 (2H, m), 2.03-2.36 (2H, m), 3.04 (3H, s), 3.83 (2H, t, J = 7.1 Hz), 3.96-4.05 (2H, m), 4.12 (1H, d, J = 17.7 Hz), 4.57 (1H, d, J = 17.7 Hz), 5.21 (2H, s), 5.38 (1H, d, J = 17.3 Hz), 5.46-5.56 (1H, m), 5.66 (1H, d, J = 17.3 Hz), 7.10-7.21 (2H, m), 7.40 (1H, s), 7.60-7.75 (2H, m)【０２１１】
ロータマーＢ* 0.86-1.04 (6H, m), 1.24-1.53 (4H, m), 1.38 (9H, s), 1.70-1.90 (2H, m), 2.03-2.36 (2H, m), 3.02 (3H, s), 3.83 (2H, t, J = 7.1 Hz), 3.90-3.96 (2H, m), 4.12 (1H, d, J = 17.7 Hz), 4.57 (1H, d, J = 17.7 Hz), 5.24 (2H, s), 5.38 (1H, d, J = 17.3 Hz), 5.46-5.56 (1H, m), 5.68 (1H, d, J = 17.3 Hz), 7.10-7.21 (2H, m), 7.40 (1H, s), 7.60-7.75 (2H, m)
*二つのロータマーＡとＢの比はおよそ 5 : 1
ESI (LC-MS positive mode) m/z 687 (M+H)。【０２１２】
工程２−Ｂ
(９Ｓ)−９−エチル−９−（グリシル−ザルコシロキシ）−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩
2007023778.tif 000029
【０２１３】
工程２−Ａで調製した(９Ｓ)−９−{[Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−グリシル]−ザルコシロキシ}−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン1.33g（1.94 mmol）を１Ｎ塩酸−酢酸溶液（15ｍL）に溶かし、室温にて２時間45分攪拌した。【０２１４】
反応溶液に酢酸エチルを加え、さらに室温にて30分攪拌し、生じた固体をろ取することにより、(９Ｓ)−９−エチル−９−（グリシル−ザルコシロキシ）−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩1.28g（100%）（化合物２Ａ） を黄色固体として得た。【０２１５】
1H-NMR (270MHz, CD3OD) δ(ppm): 
ロータマーＡ* 0.99 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.03 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.34-1.58 (4H, m), 1.90-2.00 (2H, m), 2.14-2.30 (2H, m), 3.11 (3H, s), 3.99 (2H, s), 4.25 (2H, t, J = 7.3 Hz), 4.56 (1H, d, J = 17.9 Hz), 4.57 (1H, d, J = 17.9 Hz), 5.51 (1H, d, J = 17.4 Hz), 5.52 (2H, s), 5.61 (1H, d, J = 17.4 Hz), 7.52-7.57 (1H, m), 7.89 (1H, s), 7.80 (1H, d, J = 8.2 Hz), 8.10 (1H, t, J = 8.2 Hz), 8.38 (1H, s)【０２１６】
ロータマーB* 0.99 (3H, t, J = 7.1 Hz), 1.08 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.34-1.58 (4H, m), 1.90-2.00 (2H, m), 2.14-2.30 (2H, m), 3.08 (3H, s), 3.90 (1H, d, J = 16.5 Hz), 4.02 (1H, d, J = 16.5 Hz), 4.25 (2H, t, J = 7.3 Hz), 4.62 (1H, d, J = 18.8 Hz), 4.76 (1H, d, J = 18.8 Hz), 5.52 (2H, s), 5.53 (1H, d, J = 16.9 Hz), 5.65 (1H, d, J = 16.9 Hz), 7.52-7.57 (1H, m), 8.03 (1H, d, J = 8.2 Hz), 8.10 (1H, t, J = 8.2 Hz), 8.19 (1H, s), 8.34 (1H, s)
*二つのロータマーＡとＢの比はおよそ 3 : 2
ESI (LC-MS positive mode) m/z 587 (M+H)。【０２１７】
〔調製例３〕
(９Ｓ)−９−｛[(２−アミノ−エチル)−メチル−アミノ]−アセトキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩（化合物３Ａ）
2007023778.tif 000030
【０２１８】
工程３−Ａ
｛[２−(tert−ブトキシカルボニルアミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸 ベンジル エステル
2007023778.tif 000031
【０２１９】
ザルコシン  ベンジルエステル  パラ−トルエンスルホン酸塩500mg(1.42 mmol)、２−(tert−ブトキシカルボニルアミノ)−エチル  ブロミド478mg（2.13 mmol）、ジイソプロピル−エチルアミン0.25mL(2.13 mmol) を塩化メチレン（10 mL）に溶解し、室温にて3昼夜攪拌した。反応終了後、反応溶液を濃縮することによって得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製することにより、｛[２−(tert−ブトキシカルボニルアミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸 ベンジル エステル 175mg (38%) を無色粘性油状物質として得た。【０２２０】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 1.44 (9H, s), 2.37 (3H, s), 2.63 (2H, t, J = 6.0 Hz), 3.20 (2H, br.q), 3.33 (2H, s), 5.15 (1H, br.s), 5.16 (2H, s), 7.32-7.39 (5H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 323 (M+H)。【０２２１】
工程３−Ｂ
｛[２−(tert−ブトキシカルボニルアミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸
2007023778.tif 000032
【０２２２】
工程３−Ａで調整した｛[２−(tert−ブトキシカルボニルアミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸 ベンジル エステル 162mg （0.5 mmol）をメタノール（5 mL）に溶解し、5%パラジウム炭素を加え、水素雰囲気下室温にて１時間攪拌した。不溶物をろ去した後、ろ液を濃縮することにより、｛[２−(tert−ブトキシカルボニルアミノ)−エチル]−メチル-アミノ｝−酢酸116mg（100%）を無色粘性油状物質として得た。【０２２３】
1H-NMR (270MHz, CD3OD) δ(ppm): 1.45 (9H, s), 2.91(3H, s), 3.22 (2H, t, J = 6.3 Hz), 3.41 (2H, t, J = 6.3 Hz), 3.63 (2H, s)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 233 (M+H)。【０２２４】
工程３−Ｃ
(９Ｓ)−９−（{[２−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）−エチル]−メチル−アミノ}−アセトキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000033
【０２２５】
工程３−Ｂで調製した｛[２−(tert−ブトキシカルボニルアミノ)−エチル]−メチル−アミノ｝−酢酸112mg（0.48 mmol）、(９Ｓ)−９−エチル−９−ヒドロキシ−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５] ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 157mg（0.34 mmol）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩 197mg（1.03 mmol）、４−ジメチルアミノピリジン 83mg（0.68 mmol）を塩化メチレン（10 mL）に溶解し、室温にて3時間攪拌した。【０２２６】
反応溶液を0.3N塩酸水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝5０：１）で精製することにより、(９Ｓ)−９（{[２−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）−エチル]−メチル−アミノ}−アセトキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 61mg（27%） を黄色粘性油状物質として得た。【０２２７】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 0.88-1.00 (6H, m), 1.32-1.53 (4H, m), 1.42 (9H, s), 1.73-1.86 (2H, m), 2.08-2.36 (2H, m), 2.39 (3H, s), 2.63 (2H, t,J =5.9 Hz), 3.20 (2H, br.q), 3.46 (2H, s), 3.82 (2H, t, J = 7.1 Hz), 5.21 (1H, br.s), 5.22 (2H, s), 5.40 (1H, d, J = 17.2 Hz), 5.67 (1H, d, J = 17.2 Hz), 7.10 (1H, s), 7.14 (1H, br.d), 7.40 (1H, br.s), 7.58-7.70 (2H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 673 (M+H)。【０２２８】
工程３−Ｄ
(９Ｓ)−９−｛[(２−アミノ−エチル)−メチル−アミノ]−アセトキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩
2007023778.tif 000034
【０２２９】
工程３−Ｃで調製した(９Ｓ)−９−（{[２−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）−エチル]−メチル−アミノ}−アセトキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン58mg（0.086 mmol）を１Ｎ塩酸−酢酸溶液（2ｍL）に溶かし、室温にて4時間攪拌した。【０２３０】
反応溶液に酢酸エチルを加え、さらに室温にて30分攪拌し、生じた固体をろ取することにより、(９Ｓ)−９−｛[(２−アミノ−エチル)−メチル−アミノ]−アセトキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩（化合物３Ａ）54mg（93%） を黄色固体として得た。【０２３１】
1H-NMR (270MHz, CD3OD) δ(ppm): 0.99 (3H, t, J = 6.9 Hz), 1.09 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.39-1.62 (4H, m), 1.88-2.02 (2H, m), 2.16-2.30 (2H, m), 3.07 (3H, s), 3.37-3.61 (4H, m), 4.25 (2H, br.t), 4.62 (1H, d, J = 17.5 Hz), 5.05 (1H, d, J = 17.5 Hz), 5.52 (2H, s), 5.53 (1H, d, J = 17.5 Hz), 5.67 (1H, d, J = 17.5 Hz), 7.55 (1H, br.d), 7.98-8.16 (3H, m), 8.32 (1H, s)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 573 (M+H)。【０２３２】
〔調製例４〕
(９Ｓ)−９−エチル−９−（ザルコシル−ザルコシロキシ）−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩（化合物４Ａ）
2007023778.tif 000035
【０２３３】
工程４−Ａ
(９Ｓ)−９−{[Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−ザルコシル]−ザルコシロキシ}−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000036
【０２３４】
既知物質である[Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−ザルコシル]−ザルコシン113mg（0.44 mmol）、(９Ｓ)−９−エチル−９−ヒドロキシ−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 100mg（0.22 mmol）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩 125mg（0.65 mmol）、４−ジメチルアミノピリジン 53mg（0.44 mmol）を塩化メチレン（6 mL）に溶解し、室温にて3時間半攪拌した。【０２３５】
反応溶液を0.25N塩酸水溶液および炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝50：１）で精製することにより、(９Ｓ)−９−{[Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−ザルコシル]−ザルコシロキシ}−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン103mg（68%） を黄色アモルファスとして得た。【０２３６】
1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ(ppm): 
0.88-1.02 (6H, m), 1.25-1.51(13H, m), 1.73-1.82 (2H, m), 2.11-2.32 (2H, m), 2.84 (3H, m), 3.02 (3H, m), 3.80 (2H, br.t), 3.92-4.29 (3H, m), 4.58-4.71 (1H, m), 5.12-5.70 (4H, m), 7.04-7.19 (2H, m), 7.39 (1H, m), 7.55-7.68 (2H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 701 (M+H)。【０２３７】
工程４−Ｂ
(９Ｓ)−９−エチル−９−（ザルコシル−ザルコシロキシ）−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩
2007023778.tif 000037
【０２３８】
工程４−Ａで調製した(９Ｓ)−９−{[Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）−ザルコシル]−ザルコシロキシ}−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン98mg（0.14 mmol）を１Ｎ塩酸−酢酸溶液（3ｍL）に溶かし、室温にて２時間攪拌した。【０２３９】
反応溶液に酢酸エチルを加え、さらに室温にて30分攪拌し、生じた固体をろ取することにより、(９Ｓ)−９−エチル−９−（ザルコシル−ザルコシロキシ）−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン塩酸塩（化合物４Ａ）67mg（71%） を黄色固体として得た。【０２４０】
1H-NMR (270MHz, CD3OD) δ(ppm): 
0.96-1.11 (6H, m), 1.40-1.62 (4H, m), 1.87-2.01 (2H, m), 2.15-2.31 (2H, m), 2.71 (3H, s), 3.10 (3H, m), 4.05-4.15 (2H, m), 4.24 (2H, br.t), 4.55-4.70 (2H, m), 5.46-5.70 (4H, m), 7.52 (1H, m), 7.81-8.15 (3H, m), 8.34 (1H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 601 (M+H)。【０２４１】
〔調製例５〕
(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−アミノ−２−メトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン  トリフルオロ酢酸塩（化合物５Ａ）
2007023778.tif 000038
【０２４２】
工程５−Ａ
(９Ｓ)−９−（２−ブロモ−エトキシカルボニロキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000039
【０２４３】
（９Ｓ)−９−エチル−９−ヒドロキシ−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 620mg（1.35 mmol）、クロロぎ酸２−ブロモエチル 0.29mL（2.70 mmol）、ジイソプロピル−エチルアミン0.47mL(2.70 mmol) 、４−ジメチルアミノピリジン 165mg（1.35 mmol）を塩化メチレン（20 mL）に溶解し、室温にて1昼夜攪拌した。【０２４４】
反応溶液を0.3N塩酸水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製することにより、(９Ｓ)−９−（２−ブロモ−エトキシカルボニロキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 681mg (83%) を黄色固体として得た。【０２４５】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 0.93 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.00 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.31-1.54 (4H, m), 1.72-1.86 (2H, m), 2.08-2.35 (2H, m), 3.50 (2H, t, J = 6.2Hz), 3.83 (2H, t, J = 7.3Hz), 4.41 (2H, t, J = 6.2Hz), 5.23 (2H, s), 5.37 (1H, d, J = 17.0 Hz), 5.68 (1H, d, J = 17.0 Hz), 7.16 (1H, br.d) , 7.22 (1H, s), 7.40 (1H, s), 7.59-7.71 (2H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 609, 611 (M+H)。【０２４６】
工程５−Ｂ
(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−メトキシカルボニル)エタンスルファニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000040
【０２４７】
工程５−Ａで調製した(９Ｓ)−９−（２−ブロモ−エトキシカルボニロキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 50mg （0.082 mmol）、tert−ブトキシカルボニル−システイン  メチルエステル  58mg （0.25 mmol）、炭酸カリウム  34mg （0.25 mmol）をアセトニトリル（2mL）中室温にて6時間攪拌した。【０２４８】
反応混合物に塩化メチレンを加え0.3N塩酸水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝5０：１）で精製することにより、(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−メトキシカルボニル)エタンスルファニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 51mg (82%) を黄色固体として得た。【０２４９】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 0.93 (3H, t, J = 7.0 Hz), 0.98 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.30-1.54 (4H, m), 1.41 (9H, s), 1.68-1.86 (2H, m), 2.05-2.34 (2H, m), 2.78 (2H, t, J = 6.8Hz), 2.89-3.05 (2H, m), 3.71 (3H, s), 3.82 (2H, t, J = 7.3Hz), 4.23 (2H, t, J = 6.8Hz), 4.46 (1H, m), 5.23 (2H, s), 5.37 (1H, d, J = 17.0 Hz), 5.42 (1H, m), 5.67 (1H, d, J = 17.0 Hz), 7.17 (1H, br.d) , 7.22 (1H, s), 7.40 (1H, s), 7.60-7.70 (2H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 764 (M+H)。【０２５０】
工程５−Ｃ
(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−メトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000041
【０２５１】
工程５−Ｂで調製した(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−メトキシカルボニル)エタンスルファニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 98mg （0.13 mmol）、オキソン（商標名）  158mg （0.26 mmol）をメタノール（5mL）中室温にて2時間半攪拌した。【０２５２】
反応混合物に塩化メチレンを加え、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝40：１）で精製することにより、(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−メトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 93mg (92%) を黄色固体として得た。
ESI (LC-MS positive mode) m/z 796 (M+H)。【０２５３】
工程５−Ｄ
(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−アミノ−２−メトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン  トリフルオロ酢酸塩
2007023778.tif 000042
【０２５４】
工程５−Ｃで調製した(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−メトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン93mg（0.12 mmol）をトリフルオロ酢酸（3ｍL）に溶かし、室温にて1時間攪拌した。【０２５５】
反応溶液にジエチルエーテルを加え、さらに室温にて10分攪拌し、生じた固体をろ取することにより、(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−アミノ−２−メトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン  トリフルオロ酢酸塩（化合物５Ａ）88mg（94%） を黄色固体として得た。【０２５６】
1H-NMR (270MHz, CD3OD) δ(ppm): 0.95 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.03 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.37-1.56 (4H, m), 1.76-1.92 (2H, m), 2.10-2.28 (2H, m), 3.69-4.05 (6H, m), 3.90 (3H, s), 4.48-4.82 (3H, m), 5.35 (2H, s), 5.48 (1H, d, J = 16.8 Hz), 5.64 (1H, d, J = 16.8 Hz), 7.13 (1H, br.d) , 7.28 (1H, s), 7.56 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.71 (1H, m) , 7.80 (1H, s)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 696 (M+H)。【０２５７】
〔調製例６〕
(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−アミノ−２−エトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン  塩酸塩（化合物６Ａ）
2007023778.tif 000043
【０２５８】
工程６−Ａ
(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−エトキシカルボニル)エタンスルファニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000044
【０２５９】
(９Ｓ)−９−（２−ブロモ−エトキシカルボニロキシ）−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 270mg （0.44 mmol）、tert−ブトキシカルボニル−システイン  エチルエステル  333mg （1.33 mmol）、炭酸カリウム  184mg （1.33 mmol）をアセトニトリル（10mL）中室温にて20時間攪拌した。【０２６０】
反応混合物に塩化メチレンを加え0.3N塩酸水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝5０：１）で精製することにより、(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−エトキシカルボニル)エタンスルファニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 159mg (46%) を黄色油状物質として得た。【０２６１】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 0.93 (3H, t, J = 7.3 Hz), 0.97 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.25 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.32-1.53 (4H, m), 1.41 (9H, s), 1.73-1.85 (2H, m), 2.05-2.35 (2H, m), 2.79 (2H, t, J = 6.9Hz), 2.88-3.05 (2H, m), 3.83 (2H, t, J = 7.3Hz), 4.09-4.28 (4H, m), 4.43 (1H, m), 5.23 (2H, s), 5.37 (1H, d, J = 17.2 Hz), 5.43 (1H, m), 5.67 (1H, d, J = 17.2 Hz), 7.17 (1H, br.d) , 7.21 (1H, s), 7.40 (1H, s), 7.60-7.70 (2H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 778 (M+H)。【０２６２】
工程６−Ｂ
(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−エトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000045
【０２６３】
工程６−Ａで調製した(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−エトキシカルボニル)エタンスルファニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 159mg （0.20 mmol）、オキソン（商標名）  252mg （0.41 mmol）をメタノール（8mL）中室温にて2時間攪拌した。【０２６４】
反応混合物に塩化メチレンを加え水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝40：１）で精製することにより、(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−エトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 141mg (88%) を黄色固体として得た。【０２６５】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 0.93 (3H, t, J = 6.9 Hz), 0.99 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.29 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.32-1.55 (4H, m), 1.45 (9H, s), 1.72-1.87 (2H, m), 2.07-2.32 (2H, m), 3.25-3.52 (2H, m), 3.73 (2H, m), 3.84 (2H, t, J = 7.3Hz), 4.23 (2H, q, J = 7.3Hz), 4.55 (2H, br.t), 4.71 (1H, m), 5.25 (2H, s), 5.37 (1H, d, J = 17.2 Hz), 5.69 (1H, d, J = 17.2 Hz), 5.76 (1H, d,J =7.9Hz), 7.18 (1H, br.d) , 7.19 (1H, s), 7.40 (1H, s), 7.61-7.72 (2H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 810 (M+H)。【０２６６】
工程６−Ｃ
(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−アミノ−２−エトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン  塩酸塩
2007023778.tif 000046
【０２６７】
工程６−Ｂで調製した(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−２−エトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 140mg（0.17 mmol）を１Ｎ塩酸−酢酸溶液（5ｍL）に溶かし、室温にて1時間攪拌した。【０２６８】
反応溶液に酢酸エチルを加え、さらに室温にて30分攪拌し、生じた固体をろ取することにより、(９Ｓ)−９−｛２−[(Ｒ−２−アミノ−２−エトキシカルボニル)エタンスルフォニル]エトキシカルボニロキシ｝−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン  塩酸塩（化合物６Ａ）127mg（94%） を黄色固体として得た。【０２６９】
1H-NMR (400MHz, CD3OD) δ(ppm): 0.99 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.04 (3H, t, J = 7.2 Hz), 1.36 (3H, t, J = 7.2 Hz), 1.40-1.60 (4H, m), 1.92-2.00 (2H, m), 2.10-2.25 (2H, m), 3.70-3.86 (3H, m), 4.10 (1H, dd,J =15.2, 4.0Hz), 4.25 (2H, t, J = 8.0Hz), 4.36 (2H, q, J = 7.6Hz), 4.60 (2H, t, J = 5.2Hz), 4.77 (1H, m), 5.52 (1H, d, J = 16.8 Hz), 5.54 (2H, s), 5.65 (1H, d, J = 16.8 Hz), 7.54 (1H, d, J = 7.6 Hz) , 7.83 (1H, s), 7.91 (1H, d, J = 8.0 Hz) , 8.09 (1H, br.t) , 8.38 (1H, s)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 710 (M+H)。【０２７０】
〔調製例７〕
(９Ｓ)−９−[２−(２−アミノエタンスルフォニル)エトキシカルボニロキシ]−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン  塩酸塩（化合物７Ａ）
2007023778.tif 000047
【０２７１】
工程７−Ａ
(９Ｓ)−９−[２−(２−tert−ブトキシカルボニルアミノエタンスルフォニル)エトキシカルボニロキシ]−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン
2007023778.tif 000048
【０２７２】
(９Ｓ)−９−エチル−９−ヒドロキシ−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 825mg（1.8 mmol）、クロロぎ酸パラ−ニトロフェニル  543mg（2.7mmol）、ジイソプロピル−エチルアミン0.47mL(2.7 mmol) 、４−ジメチルアミノピリジン 220mg（1.8 mmol）を氷冷下塩化メチレン（16 mL）に溶解し、室温にて3時間攪拌した後、２−(２−tert−ブトキシカルボニルアミノエタンスルフォニル)エタノール1.6g（6.3 mmol）(Tetrahedron, 55(1999), 6623-6634) を加え室温にて1昼夜攪拌した。【０２７３】
反応溶液を0.3N塩酸水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝30：１）で精製することにより、(９Ｓ)−９−[２−(２−tert−ブトキシカルボニルアミノエタンスルフォニル)エトキシカルボニロキシ]−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン550mg（42%） を黄色固体として得た。【０２７４】
1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ(ppm): 0.94 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.00 (3H, t, J = 7.3 Hz),. 1.33-1.55 (4H, m), 1.43 (9H, s), 1.73-1.86 (2H, m), 2.07-2.31 (2H, m), 3.20-3.49 (4H, m), 3.70 (2H, m), 3.84 (2H, t, J = 7.3Hz), 4.57 (2H, br.t), 5.25 (2H, s), 5.37 (1H, d, J = 17.2 Hz), 5.45 (1H, m), 5.69 (1H, d, J = 17.2 Hz), 7.15-7.20 (2H, m), 7.41 (1H, s), 7.61-7.73 (2H, m)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 738 (M+H)。【０２７５】
工程７−Ｂ
(９Ｓ)−９−[２−(２−アミノエタンスルフォニル)エトキシカルボニロキシ]−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン  塩酸塩
2007023778.tif 000049
【０２７６】
工程７−Ａで調製した(９Ｓ)−９−[２−(２−tert−ブトキシカルボニルアミノエタンスルフォニル)エトキシカルボニロキシ]−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン 530mg（0.72 mmol）を１Ｎ塩酸−酢酸溶液（10ｍL）に溶かし、室温にて1時間攪拌した。【０２７７】
反応溶液に酢酸エチルを加え、さらに室温にて30分攪拌し、生じた固体をろ取することにより、(９Ｓ)−９−[２−(２−アミノエタンスルフォニル)エトキシカルボニロキシ]−９−エチル−１−ペンチル−１H,１２H−ピラノ[３'',４'':６',７']インドリジノ[１',２':６,５]ピリド[４,３,２−de]キナゾリン−１０,１３（９H,１５H）−ジオン  塩酸塩（化合物７Ａ）480mg（94%） を黄色固体として得た。【０２７８】
1H-NMR (270MHz, CD3OD) δ(ppm): 0.94-1.05 (6H, m), 1.40-161 (4H, m), 1.90-2.04 (2H, m), 2.07-2.28 (2H, m), 3.48-3.81 (6H, m), 4.25 (2H, br.t), 4.55 (2H, m), 5.51 (1H, d, J = 17.2 Hz), 5.53 (2H, s), 5.65 (1H, d, J = 17.2 Hz), 7.52 (1H, d, J = 7.6 Hz) , 7.90 (1H, s), 7.93 (1H, d, J = 8.6 Hz) , 8.08 (1H, br.t) , 8.35 (1H, s)
ESI (LC-MS positive mode) m/z 638 (M+H)。【０２７９】
〔実施例１〕
ヒト肺癌細胞株Calu-6、ヒト胃癌細胞株MKN-28、MKN-45及び、ヒト卵巣癌細胞株OVCAR-3における化合物１０Ａ（調製例２で調製した化合物２Ａの活性型）と他の細胞毒性物質との組み合わせ効果
2007023778.tif 000050
【０２８０】
細胞の培養
ヒト肺癌細胞株Calu-6、及びヒト卵巣癌細胞株OVCAR-3はAmerican Type Culture Collection（ATCC）から、ヒト胃癌細胞株MKN-28、及びMKN-45は株式会社免疫生物研究所（IBL）から購入した。ヒト肺癌細胞株Calu-6は0.1mM可欠アミノ酸、1mMピルビン酸ナトリウムおよび10％（v/v）ウシ胎仔血清を補足したE-MEM培地中で、ヒト卵巣癌細胞株OVCAR-3は20％（v/v）ウシ胎仔血清を含むRPMI1640培地中で、ヒト胃癌細胞株MKN-28、及びMKN-45は10％（v/v）ウシ胎仔血清を含むRPMI1640培地中で、それぞれ単層培養した。【０２８１】
試験薬として、下記のものを用意した。
試験薬
化合物Ａ：公知の方法（ＷＯ２００３／０４５９５２の実施例２．１５）に従って、化合物１０Ａ（(9S)-9-エチル-9-ヒドロキシ-1-ペンチル-1H,12H-ピラノ[3'',4'':6',7']インドリジノ[1',2':6,5]ピリド[4,3,2-de]キナゾリン-10,13(9H,15H)-ジオン）を合成した。
化合物Ｂ：ＣＤＤＰ（シスプラチン）（化合物１Ｂ）、５−ＦＵ（カペシタビン（capecitabine）化合物６Ｂ）の活性型）（化合物２Ｂ）、ゲムシタビン（化合物３Ｂ）、パクリタキセル（化合物４Ｂ）、ビノレルビン（化合物５Ｂ）【０２８２】
ヒト肺癌細胞株Calu-6での薬物濃度：
化合物１０Ａ：20 nmol/L〜0.3125 nmol/L、
CDDP：4μmol/L〜0.0156 μmol/L、
5-FU：200 μmol/L〜0.7813 μmol/L、
ゲムシタビン：80 nmol/L〜0.3125 nmol/L、
パクリタキセル：30 nmol/L〜0.1172 nmol/L、
ビノレルビン：40 nmol/L〜0.1563 nmol/L。
卵巣癌細胞株OVCAR-3、及びヒト胃癌細胞株MKN-28での薬物濃度：
化合物１０Ａ：400 nmol/L〜6.25 nmol/L、
CDDP：42 μmol/L〜0.1641μmol/L。
ヒト胃癌細胞株MKN-45での薬物濃度：
化合物１０Ａ：4 nmol/L〜0.0625 nmol/L、
CDDP：4 μmol/L〜0.0156 μmol/L。
各薬物をDMSOに溶解し、培地で希釈した。【０２８３】
抗増殖活性の評価方法
薬物の抗細胞増殖活性を次のようにして試験した。第１日目に、単細胞懸濁液190 μL（各ウェル3000細胞）を96穴プレートに播種し、5％CO2を含む加湿インキュンベーター中、37℃で培養した。翌日、各薬物単体、または化合物１０Ａと化合物１Ｂ〜５Ｂとの混合物を、種々の混合割合で含む溶液10 μLを終夜培養した96穴プレートに加えた。5％CO2を含む加湿インキュンベーター中、37℃でこれらをさらに3日間培養した。培養最終日、Cell Counting Kit-8  10 μlを各ウェルに加え、5％CO2を含む加湿インキュンベーター中、37℃で細胞をさらに数時間インキュベートした。インキュベーション後、各ウェルの450nmおよび630nmの吸光度をMicro plate reader（バイオ・ラッドModel 3550）を用いて測定した。各薬物の抗細胞増殖活性を式（1-T/C）×100（%）（TおよびCはそれぞれ薬物処理細胞および未処理対照細胞の450nmと630nmの吸光度の差の平均を表す）で計算した。【０２８４】
結果
その結果、図１-1、および1-2に示すように、アイソボログラム分析の結果より、化合物１０Ａと化合物１Ｂとの組み合わせは顕著な相乗効果を示した。化合物１０Ａと化合物２Ｂ〜５Ｂとの組み合わせにおいても有効な効果が認められた。【０２８５】
〔実施例２〕
ヒト結腸直腸癌および胃癌異種移植モデルにおける水溶性プロドラッグ（化合物２Ａ）とカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせの抗腫瘍効果（投与計画：化合物２Ａを1週間に1回と、カペシタビンを1日1回連続2週間の後、1週間休薬）【０２８６】
細胞の培養
細胞として、ヒト結腸直腸癌細胞株HCT116、およびヒト胃癌細胞株NCI-N87をATCCから購入した。HCT116細胞は2mM L-グルタミンおよび10％（v/v）ウシ胎仔血清を含むMcCoy’s 5a培地中で、NCI-N87細胞は10％（v/v）ウシ胎仔血清を含むRPMI1640培地中でそれぞれ単層培養した。【０２８７】
異種移植モデルの作製
試験用マウスとして、5週齢、雄の無胸腺ヌードマウス（BALB/c nu/nu）を日本チャールス・リバー株式会社から購入した。マウスを実験前に少なくとも1週間、研究所の動物施設で飼育した。
前記のように培養した、HCT116（マウス1匹あたり7.5×106細胞）、およびNCI-N87（マウス1匹あたり5.9×106細胞）の単細胞懸濁液を、各マウスの右側腹部の皮下に接種した。各マウスの腫瘍サイズを1週間に1回または2回測定し、腫瘍体積を式ab2/2（aおよびbはそれぞれ腫瘍の長さおよび幅を表す）で推定した。無作為化および薬物投与を、腫瘍体積が100mm3を越えた日に開始した。【０２８８】
試験薬
試験薬として、調製例２で合成した化合物２Ａ、公知の方法（日本国特許第２５０１２９７号）により合成したカペシタビン（化合物６Ｂ）、化合物Ａの対照用にCPT-11（イリノテカン（カンプトテシン類）：第一製薬株式会社製）を用いた。薬物用量は下記のとおりである。なお、明細書中、「ＭＴＤ」は（最大耐用量）を意味する。【０２８９】
HCT116モデル：化合物２Ａ；6.7mg/kg/注入（フリーベースとして5.3 mg/kg/注入）（1/9 MTD）および20mg/kg/注入（フリーベースとして16 mg/kg/注入）（1/3 MTD）、CPT-11；33mg/kg/注入（1/3 MTD）、カペシタビン（化合物６Ｂ）；135mg/kg/注入（3/8 MTD）および270mg/kg/注入（3/4 MTD）
NCI-N87モデル：化合物２Ａ；20mg/kg/注入（フリーベースとして16 mg/kg/注入）（1/3 MTD）、CPT-11；66mg/kg/注入（2/3 MTD）、カペシタビン（化合物６Ｂ）；135mg/kg/注入（3/8 MTD）【０２９０】
単品の投与方法
化合物２Ａ、CPT-11を、それぞれ食塩液中で溶解および希釈した。カペシタビン（化合物６Ｂ）を5％アラビアゴムを含む40mMクエン酸緩衝液（pH6）で溶解および希釈した。化合物２Ａ、CPT-11を1週間に1回連続6週間、静脈内に投与した。カペシタビンを1日1回、連続2週間、経口投与した後、1週間休薬した（3週間に1日1回14日間）。【０２９１】
混合物の投与方法
HCT116およびNCI-N87ヒト癌異種移植モデルにおいて、化合物２Ａとカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせの抗腫瘍効果と、CPT-11とカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせの抗腫瘍効果とを比較した。治療1サイクルで、化合物２ＡまたはCPT-11を1週間に1回連続3週間投与し、カペシタビン（化合物６Ｂ）を1日1回連続2週間投与した後、1週間休薬した（3週間に1日1回14日間）；マウスに治療2サイクルを施した。【０２９２】
結果
異種移植モデル毎の結果を図２−１（HCT116モデル）、図２−２（NCI-N87モデル）に示す。
いずれのモデルにおいても、化合物２Ａとカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせの抗腫瘍効果は同用量の単剤の効果よりも強かった。また、HCT116（図２−１）、およびNCI-N87（図２−２）異種移植モデルにおいて、化合物２Ａとカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせは、体重減少から判断した毒性を増強することなく、相加的な抗腫瘍効果を示した。
さらに、試験したすべての異種移植モデルにおいて、化合物２Ａとカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせによる抗腫瘍効果は、CPT-11とカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせによる抗腫瘍効果よりも優れた効果を示した。すなわち化合物２Ａおよびカペシタビン（化合物６Ｂ）の組み合わせによる抗腫瘍効果は顕著であり、臨床業務において有効な組み合わせ療法となると推定される。【０２９３】
〔実施例３〕
ヒト結腸直腸癌HCT116異種移植モデルにおける水溶性プロドラッグ（化合物２Ａ）とカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせの抗腫瘍効果（投与計画：化合物２Ａを3週間に1回と、カペシタビンを1日1回連続2週間の後、1週間休薬）【０２９４】
細胞の増殖
ヒト結腸直腸癌細胞株HCT116をATCCから購入した。細胞を2mM L-グルタミンおよび10％（v/v）ウシ胎仔血清を含むMcCoy’s 5a培地中で単層培養した。【０２９５】
異種移植モデルの作製
5週齢、雄の無胸腺ヌードマウス（BALB/c nu/nu）を日本チャールス・リバー株式会社から購入した。マウスを実験前に少なくとも1週間、研究所の動物施設で飼育した。
HCT116（マウス1匹あたり8×106細胞）の単細胞懸濁液を各マウスの右側腹部の皮下に接種した。各マウスの腫瘍サイズを1週間に2回測定し、腫瘍体積を式ab2/2（aおよびbはそれぞれ腫瘍の長さおよび幅を表す）で推定した。無作為化および薬物投与を、腫瘍体積が100mm3を越えた日に開始した。【０２９６】
試験薬
実施例２と同様に調製した、化合物２Ａ、カペシタビン（化合物６Ｂ）を用いた。薬物用量は下記のとおりである。
薬物用量：
化合物２Ａ：20mg/kg/注入（フリーベースとして16 mg/kg/注入）（1/3 MTD）、40mg/kg/注入（フリーベースとして32 mg/kg/注入）（2/3 MTD）および60mg/kg/注入（フリーベースとして47 mg/kg/注入）（MTD）、
カペシタビン：180mg/kg/注入（1/2 MTD）および360mg/kg/注入（MTD）【０２９７】
投与方法
化合物２Ａを食塩液中で溶解および希釈した。カペシタビンを5％アラビアゴムを含む40mMクエン酸緩衝液（pH6）で溶解および希釈した。化合物２Ａを3週間に1回、静脈内に投与した。カペシタビンを1日1回、連続2週間、経口投与した後、1週間休薬した（3週間に1日1回14日間）。【０２９８】
結果
ヒト結腸直腸癌HCT116異種移植モデルにおいて、化合物２Ａとカペシタビンとの組み合わせの抗腫瘍効果を調べた。治療1サイクルで、化合物２Ａを3週間の初日に投与し、カペシタビンを1日1回、連続2週間投与した後、1週間休薬した（3週間に1日1回14日間）；マウスに治療2サイクルを施した。【０２９９】
図３に示すように、化合物２Ａとカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせの抗腫瘍効果は同用量の単剤の効果よりも強かった。また、HCT116異種移植モデルにおいて、化合物２Ａとカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせは、体重減少から判断した毒性を増強することなく、相加的な抗腫瘍効果を示した。加えて、化合物２Ａの1/3 MTDとカペシタビンのMTDとの組み合わせによる抗腫瘍効果は、化合物２ＡのMTDの効果よりも優れていた（図３）。すなわち、化合物２Ａおよびカペシタビンとの併用は有効な効果を有し、単剤のMTDよりも有効であった。したがって臨床業務において、有効な組み合わせ療法となると推定される。【０３００】
〔実施例４〕
ヒト肺癌Calu-6異種移植モデルにおける水溶性プロドラッグ（化合物２Ａ）とCDDPまたはカルボプラチン（Carboplatin）との組み合わせの抗腫瘍効果【０３０１】
細胞の増殖
ヒト肺癌細胞株Calu-6をATCCから購入した。細胞を0.1mM可欠アミノ酸、1mMピルビン酸ナトリウムおよび10％（v/v）ウシ胎仔血清を補足したE-MEM中で単層培養した。
異種移植モデルの作製
5週齢、雄の無胸腺ヌードマウス（BALB/c nu/nu）を日本チャールス・リバー株式会社から購入した。マウスを実験前に少なくとも1週間、研究所の動物施設で飼育した。【０３０２】
Calu-6（マウス1匹あたり5×106細胞）の単細胞懸濁液を各マウスの右側腹部の皮下に接種した。各マウスの腫瘍サイズを1週間に2回測定し、腫瘍体積を式ab2/2（aおよびbはそれぞれ腫瘍の長さおよび幅を表す）で推定した。無作為化および薬物投与を、腫瘍体積が100mm3を越えた日に開始した。【０３０３】
試験薬
化合物２Ａは実施例２と同様に調製した。CPT-11、CDDP、およびカルボプラチンはそれぞれ第一製薬株式会社、日本化薬株式会社、およびブリストル・マイヤーズスクイブ社から購入した。【０３０４】
薬物用量：
化合物２Ａ；15mg/kg/注入（フリーベースとして12 mg/kg/注入）（1/4 MTD）および30mg/kg/注入（フリーベースとして24 mg/kg/注入）（1/2 MTD）、CPT-11；50mg/kg/注入（1/2 MTD）、CDDP；5mg/kg/注入（1/2 MTD）、カルボプラチン；50mg/kg/注入（MTD）【０３０５】
投与方法
化合物２Ａ、CPT-11、CDDPおよびカルボプラチンを食塩液中で溶解および希釈した。化合物２ＡおよびCPT-11は1週間に1回連続6週間、静脈内に投与した。CDDPおよびカルボプラチンは3週間に1回、静脈内に投与した。 【０３０６】
結果
ヒト肺癌Calu-6における化合物２ＡとCDDPまたはカルボプラチンとの組み合わせの抗腫瘍効果を調べ、CPT-11とCDDP、及びCPT-11とカルボプラチンとの組み合わせの効果と比較した。治療1サイクルで、化合物２ＡおよびCPT-11を1週間に1回連続3週間投与し、CDDPおよびカルボプラチンを3週間に1回投与した；マウスに治療2サイクルを施した。【０３０７】
図４−１に示すように、化合物２ＡとCDDPとの組み合わせの抗腫瘍効果は同用量の単剤の効果よりも強かった。また、化合物２ＡとCDDPとの組み合わせは、体重減少から判断した毒性を増強することなく、相乗的な抗腫瘍効果を示した。加えて、このモデルにおいて、化合物２ＡとCDDPとの組み合わせによる抗腫瘍効果は、CPT-11とCDDPとの組み合わせの効果よりも優れていた。【０３０８】
図４−２に示すように、ヒト肺癌Calu-6異種移植モデルにおいて、化合物２Ａとカルボプラチンとの組み合わせでも、抗腫瘍効果に顕著な相乗効果が生じた。
したがって、化合物２ＡとCDDPまたはカルボプラチンとの組み合わせは、臨床業務において、有効な組み合わせ療法となると推定される。【０３０９】
〔実施例５〕
ヒト直腸癌COL-16-JCK異種移植モデルにおける水溶性プロドラッグ（化合物２Ａ）とオキサリプラチン(Oxaliplatin)との組み合わせの抗腫瘍効果【０３１０】
ヒト腫瘍
ヒト直腸癌COL-16-JCKを財団法人実験動物中央研究所から購入した。腫瘍片を皮下に接種し、異種移植にて維持した。【０３１１】
異種移植モデルの作製
5週齢、雄の無胸腺ヌードマウス（BALB/c nu/nu）を日本チャールス・リバー株式会社から購入した。マウスを実験前に少なくとも1週間、研究所の動物施設で飼育した。
COL-16-JCK の一腫瘍片（直径約3mm）を各マウスの右側腹部の皮下に接種した。各マウスの腫瘍サイズを1週間に1回または2回測定し、腫瘍体積を式ab2/2（aおよびbはそれぞれ腫瘍の長さおよび幅を表す）で推定した。無作為化および薬物投与を、腫瘍体積が100mm3を越えた日に開始した。【０３１２】
試験薬
化合物２Ａは実施例２と同様に調製した。オキサリプラチンはSanofi-Synthelabo Inc.から購入した。
薬物用量：
化合物２Ａ；1週間に1回投与の場合15mg/kg/注入（フリーベースとして12 mg/kg/注入）（1/4 MTD）および30mg/kg/注入（フリーベースとして24 mg/kg/注入）（1/2 MTD）、2週間に1回投与の場合20mg/kg/注入（フリーベースとして16 mg/kg/注入）（1/3 MTD）および40mg/kg/注入（フリーベースとして32 mg/kg/注入）（2/3 MTD）、オキサリプラチン；5mg/kg/注入（1/2 MTD）【０３１３】
投与方法
化合物２Ａを食塩液中で溶解および希釈した。オキサリプラチンを5％グルコース中で溶解および希釈した。化合物２Ａを1週間に1回または2週間に1回連続6週間、静脈内に投与した。オキサリプラチンを2週間に1回、静脈内に投与した。【０３１４】
結果
ヒト直腸癌COL-16-JCK異種移植モデルにおける化合物２Ａとオキサリプラチンとの組み合わせの抗腫瘍効果を調べた。化合物２Ａを1週間に1回または2週間に1回連続6週間投与した。オキサリプラチンを2週間に1回投与した。【０３１５】
化合物２Ａとオキサリプラチンとの組み合わせの抗腫瘍効果は、化合物２Ａを1週間に1回（図５−１）および2週間に1回（図５−２）のいずれの投与法においても、同用量の単剤の効果よりも強かった。また、化合物２Ａとオキサリプラチンとの組み合わせは、体重減少から判断した毒性を増強することなく、相乗的な抗腫瘍効果を示した。【０３１６】
したがって、化合物２Ａとオキサリプラチンとの組み合わせは、臨床業務において、有効な組み合わせ療法となると推定される。
〔実施例６〕
ヒト膵臓癌Capan-1異種移植モデルにおける水溶性プロドラッグ（化合物２Ａ）とゲムシタビン（化合物３Ｂ）との組み合わせの抗腫瘍効果【０３１７】
細胞の増殖
ヒト膵臓癌Capan-1をATCCから購入した。細胞は10％（v/v）ウシ胎仔血清を補足したRPMI1640中で単層培養した。【０３１８】
異種移植モデルの作製
5週齢、雄の無胸腺ヌードマウス（BALB/c nu/nu）を日本チャールス・リバー株式会社から購入した。マウスを実験前に少なくとも1週間、研究所の動物施設で飼育した。
Capan-1（マウス1匹あたり8.4 × 106細胞）の単細胞懸濁液を各マウスの右側腹部の皮下に接種した。各マウスの腫瘍サイズを1週間に2回測定し、腫瘍体積を式ab2/2（aおよびbはそれぞれ腫瘍の長さおよび幅を表す）で推定した。無作為化および薬物投与を、腫瘍体積が100mm3を越えた日に開始した。【０３１９】
試験薬
化合物２Ａは実施例２と同様に調製した。ゲムシタビンはイーライリリーから購入した。
薬物用量：
化合物２Ａ；34 mg/kg/注入（フリーベースとして24 mg/kg/注入）（1/2 MTD）、ゲムシタビン；200 mg/kg/注入（1/2 MTD）および400 mg/kg/注入（MTD）【０３２０】
投与方法
化合物２Ａを1mMクエン酸/生理食塩液（pH3.1-3.2）に溶解および希釈し、1週間に1回連続4週間、静脈内に投与した。ゲムシタビンを生理食塩液で溶解および希釈し、1週間に1回連続4週間、静脈内に投与した。【０３２１】
結果
ヒト膵臓癌Capan-1異種移植モデルにおける化合物２Ａとゲムシタビンとの組み合わせの抗腫瘍効果を調べた。化合物２Ａを1週間に1回連続4週間投与した。ゲムシタビンを1週間に1回連続4週間投与した。【０３２２】
化合物２Ａとゲムシタビンとの組み合わせの抗腫瘍効果は、同用量の単剤の効果よりも強かった。また、化合物２Ａとゲムシタビンとの組み合わせは、体重減少から判断した毒性を増強することなく、腫瘍を退縮し、少なくとも相加的な抗腫瘍効果を示した（図6）。【０３２３】
したがって、化合物２Ａとゲムシタビンとの組み合わせは、臨床業務において、有効な組み合わせ療法となると推定される。【０３２４】
〔実施例７〕
ヒト乳癌MX-1異種移植モデルにおける水溶性プロドラッグ（化合物２Ａ）とカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせの抗腫瘍効果【０３２５】
細胞の増殖
ヒト乳癌MX-1は財団法人癌研究会より分与された。腫瘍片を皮下に接種し、異種移植にて維持した。【０３２６】
異種移植モデルの作製
5週齢、雌の無胸腺ヌードマウス（BALB/c nu/nu）を日本チャールス・リバー株式会社から購入した。マウスを実験前に少なくとも1週間、研究所の動物施設で飼育した。
MX-1 の一腫瘍片（直径約3mm）を各マウスの右側腹部の皮下に接種した。各マウスの腫瘍サイズを1週間に2回測定し、腫瘍体積を式ab2/2（aおよびbはそれぞれ腫瘍の長さおよび幅を表す）で推定した。無作為化および薬物投与を、腫瘍体積が100mm3を越えた日に開始した。【０３２７】
試験薬
実施例２と同様に調製した、化合物２Ａ、カペシタビン（化合物６Ｂ）を用いた。薬物用量は下記のとおりである。
薬物用量：
化合物２Ａ：8.4 mg/kg/注入（フリーベースとして6 mg/kg/注入）（1/4 MTD）、および17 mg/kg/注入（フリーベースとして12 mg/kg/注入）（1/2 MTD）
カペシタビン：250mg/kg/注入（1/2 MTD）【０３２８】
投与方法
化合物２Ａを1mMクエン酸/生理食塩液（pH3.1-3.2）に溶解および希釈し、1週間に1回連続3週間、静脈内に投与した。カペシタビンを5％アラビアゴムを含む40mMクエン酸緩衝液（pH6）で溶解し、1日1回、連続5日間経口投与した後、2日間休薬するサイクルを3サイクル繰り返した（合計：15回投与）。【０３２９】
結果
ヒト乳癌MX-1異種移植モデルにおいて、化合物２Ａとカペシタビンとの組み合わせの抗腫瘍効果を調べた。治療1サイクルで、化合物２Ａを1週間に1回連続3週間、静脈内に投与し、カペシタビンを1日1回、連続5日間経口投与した後、2日間休薬するサイクルを3サイクル繰り返した（合計：15回投与）。【０３３０】
図7に示すように、化合物２Ａとカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせの抗腫瘍効果は同用量の単剤の効果よりも強かった。また、MX-1異種移植モデルにおいて、化合物２Ａとカペシタビン（化合物６Ｂ）との組み合わせは、体重減少から判断した毒性を増強することなく、相加的な抗腫瘍効果を示した。すなわち、化合物２Ａおよびカペシタビンとの併用は有効な効果を有し、臨床業務において、有効な組み合わせ療法となると推定される。【０３３１】
なお、化合物２Ａは、塩酸塩であるが、反応のロット、反応スケール、反応溶媒、反応時間、反応温度、試薬の種類および当量、反応溶液の処理方法、工程２−Ａにおける反応溶液の洗浄時に用いる塩酸水溶液の規定度（Ｎ）、および／または工程２−Ｂで用いる塩酸の規定度などを変更することにより、フリーのカンプトテシン誘導体（フリーベース）に塩として付加する塩酸の量（フリーベースに対するモル比）に、差が生じることがある。したがって、実施例２〜７で用いた化合物２Ａの用量は、実測した重量に基づく用量と、実測した重量をフリーベースの重量に換算した重量に基づく用量とを併記することとした。また、図面上で記す化合物２Ａの用量には、実測した重量をフリーベースの重量に換算した重量に基づく用量を用いた。
【図１−１】
2007023778.tif 000059
【図１−２】
2007023778.tif 000060
【図２−１】
2007023778.tif 000061
【図２−２】
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【図３】
2007023778.tif 000063
【図４−１】
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【図４−２】
2007023778.tif 000065
【図５−１】
2007023778.tif 000066
【図５−２】
2007023778.tif 000067
【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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