【手続補正書】
【提出日】平成31年3月1日(2019.3.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
錐体関連網膜障害を有するか、またはそれを発症する危険性がある霊長動物の被験体において、錐体関連網膜障害を治療または予防するための、治療ポリヌクレオチドを含む組み換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）バリアントを含む組成物であって、ここで、
ａ）該ｒＡＡＶバリアントが、親ＡＡＶカプシドタンパク質のＧＨループ中に挿入されたアミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１１）を含むバリアントＡＡＶカプシドタンパク質を含み；そして、
ｂ）該治療ポリヌクレオチドが、治療タンパク質をコードするポリヌクレオチドに動作可能に連結されるｐＭＮＴＣ発現カセットを含み；
該組成物が静脈内投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項２】
配列番号１９のポリペプチドと少なくとも８０％の配列同一性を有するＶＰ１タンパク質を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
配列番号１９の前記ポリペプチドと少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＰ１タンパク質を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
配列番号１９の前記ポリペプチドと少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＰ１タンパク質を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
配列番号１９のＶＰ１タンパク質を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記網膜障害が、錐体関連障害である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記錐体関連障害が、杆体錐体ジストロフィー；錐体杆体ジストロフィー；進行性錐体ジストロフィー；網膜色素変性（ＲＰ）；シュタルガルト病；黄斑毛細血管拡張症、レーベル遺伝性視神経症、ベスト病；成人卵黄様黄斑ジストロフィー、Ｘ連鎖性網膜分離症；色覚障害；加齢性黄斑変性；滲出型加齢性黄斑変性；地図状萎縮；糖尿病網膜症；網膜静脈閉塞症；網膜虚血；家族性滲出性硝子体網膜症（ＦＥＶＲ）；コーツ病；及びソースビー眼底ジストロフィーからなる群から選択される、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
ａ）前記被験体が、前記錐体関連障害を有し；そして／または
ｂ）前記組成物が、前記被験体の視力を改善する、
請求項１に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
ポリヌクレオチドを錐体光受容体に硝子体内送達するための方法及び組成物が提供される。本方法の態様は、眼の硝子体に、目的となるポリヌクレオチドを含む組み換えアデノ随伴ウイルスを注射することを含む。これらの方法及び組成物は、錐体機能障害及び／または錐体細胞死滅に関連する眼球障害を治療する上で、特定の用途を見出す。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
目的となるポリヌクレオチドを、対象における錐体光受容体に送達するための方法であって、
眼の硝子体に、前記目的となるポリヌクレオチドを含む有効量の組み換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）バリアントを送達することを含む、方法。
（項目２）
前記ｒＡＡＶバリアントが、親ＡＡＶカプシドタンパク質のＧＨループ中にアミノ酸ペプチドの挿入を含むバリアントＡＡＶカプシドタンパク質を含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記親カプシドタンパク質の前記ＧＨループが、ＡＡＶ１  ＶＰ１（配列番号１）のアミノ酸５７１〜６１２、ＡＡＶ２  ＶＰ１（配列番号２）のアミノ酸約５７０〜６１１、ＡＡＶ３  ＶＰ１（配列番号３）のアミノ酸約５７１〜６１２、ＡＡＶ４  ＶＰ１（配列番号４）のアミノ酸約５６９〜６１０、ＡＡＶ５  ＶＰ１（配列番号５）のアミノ酸約５６０〜６０１、ＡＡＶ６  ＶＰ１（配列番号６）のアミノ酸約５７１〜６１２、ＡＡＶ７  ＶＰ１（配列番号７）のアミノ酸約５７２〜６１３、ＡＡＶ８  ＶＰ１（配列番号８）のアミノ酸約５７３〜６１４、ＡＡＶ９  ＶＰ１（配列番号９）のアミノ酸約５７１〜６１２、ＡＡＶ１０  ＶＰ１（配列番号１０）のアミノ酸約５７３〜６１４、またはこれらのバリアントの対応するアミノ酸範囲から本質的になる、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記親カプシドが、ＡＡＶ２  ＶＰ１であり、前記挿入部位が、ＡＡＶ２  ＶＰ１のアミノ酸５８０と５８１との間、アミノ酸５８１と５８２との間、アミノ酸５８２と５８３との間、アミノ酸５８３と５８４との間、アミノ酸５８４と５８５との間、アミノ酸５８５と５８６との間、アミノ酸５８６と５８７との間、アミノ酸５８７と５８８との間、アミノ酸５８８と５８９との間、アミノ酸５８９と５９０との間、アミノ酸５９０と５９１との間、アミノ酸５９１と５９２との間、アミノ酸５９２と５９３との間、アミノ酸５９３と５９４との間、またはアミノ酸５９４と５９５との間である、項目２に記載の方法。
（項目５）
前記ペプチドが、下記式、
Ｙ１Ｙ２Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｙ３Ｙ４
のものであり、式中、
存在する場合、Ｙ１〜Ｙ４のそれぞれが独立して、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、及びＴｈｒから選択され、
存在する場合、Ｘ１が、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、及びＬｙｓから選択され、
Ｘ２が、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、及びＡｓｐから選択され、
Ｘ３が、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ、及びＰｒｏから選択され、
Ｘ４が、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｇｌｎ、及びＬｙｓから選択され、
Ｘ５が、Ｔｈｒ及びＡｌａから選択され、
Ｘ６が、Ａｒｇ、Ａｓｎ、及びＴｈｒから選択され、
存在する場合、Ｘ７が、Ｐｒｏ及びＡｓｎから選択される、項目２に記載の方法。
（項目６）
前記ペプチドが、アミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１１）を含む、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記錐体光受容体が、中心窩錐体である、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記対象が、霊長動物である、項目１に記載の方法。
（項目９）
対象における錐体光受容体中で遺伝子産物を発現させるための方法であって、
眼の硝子体に、前記遺伝子産物をコードするポリヌクレオチドを含む有効量の組み換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）バリアントを送達することを含む、方法。
（項目１０）
前記ｒＡＡＶバリアントが、親ＡＡＶカプシドタンパク質のＧＨループ中にアミノ酸ペプチドの挿入を含むバリアントＡＡＶカプシドタンパク質を含む、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記親カプシドタンパク質の前記ＧＨループが、ＡＡＶ１  ＶＰ１（配列番号１）のアミノ酸５７１〜６１２、ＡＡＶ２  ＶＰ１（配列番号２）のアミノ酸約５７０〜６１１、ＡＡＶ３  ＶＰ１（配列番号３）のアミノ酸約５７１〜６１２、ＡＡＶ４  ＶＰ１（配列番号４）のアミノ酸約５６９〜６１０、ＡＡＶ５  ＶＰ１（配列番号５）のアミノ酸約５６０〜６０１、ＡＡＶ６  ＶＰ１（配列番号６）のアミノ酸約５７１〜６１２、ＡＡＶ７  ＶＰ１（配列番号７）のアミノ酸約５７２〜６１３、ＡＡＶ８  ＶＰ１（配列番号８）のアミノ酸約５７３〜６１４、ＡＡＶ９  ＶＰ１（配列番号９）のアミノ酸約５７１〜６１２、ＡＡＶ１０  ＶＰ１（配列番号１０）のアミノ酸約５７３〜６１４、またはこれらのバリアントの対応するアミノ酸範囲から本質的になる、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
前記親カプシドが、ＡＡＶ２  ＶＰ１であり、前記挿入部位が、ＡＡＶ２  ＶＰ１のアミノ酸５８０と５８１との間、アミノ酸５８１と５８２との間、アミノ酸５８２と５８３との間、アミノ酸５８３と５８４との間、アミノ酸５８４と５８５との間、アミノ酸５８５と５８６との間、アミノ酸５８６と５８７との間、アミノ酸５８７と５８８との間、アミノ酸５８８と５８９との間、アミノ酸５８９と５９０との間、アミノ酸５９０と５９１との間、アミノ酸５９１と５９２との間、アミノ酸５９２と５９３との間、アミノ酸５９３と５９４との間、またはアミノ酸５９４と５９５との間である、項目１０に記載の方法。
（項目１３）
前記ペプチドが、下記式、
Ｙ１Ｙ２Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｙ３Ｙ４
のものであり、式中、
存在する場合、Ｙ１〜Ｙ４のそれぞれが独立して、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、及びＴｈｒから選択され、
存在する場合、Ｘ１が、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、及びＬｙｓから選択され、
Ｘ２が、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、及びＡｓｐから選択され、
Ｘ３が、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ、及びＰｒｏから選択され、
Ｘ４が、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｇｌｎ、及びＬｙｓから選択され、
Ｘ５が、Ｔｈｒ及びＡｌａから選択され、
Ｘ６が、Ａｒｇ、Ａｓｎ、及びＴｈｒから選択され、
存在する場合、Ｘ７が、Ｐｒｏ及びＡｓｎから選択される、項目１０に記載の方法。
（項目１４）
前記ペプチドが、前記アミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１１）を含む、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記ポリヌクレオチドが、ＭＮＴＣプロモーターに作動可能に連結される、項目９に記載の方法。
（項目１６）
前記方法が、前記錐体光受容体中の前記ポリヌクレオチドの前記発現を検出することを更に含む、項目９に記載の方法。
（項目１７）
前記錐体光受容体が、中心窩錐体である、項目９に記載の方法。
（項目１８）
前記対象が、霊長動物である、項目９に記載の方法。
（項目１９）
錐体関連網膜障害を有するか、またはそれを発症する危険性がある対象において、錐体関連網膜障害を治療または予防するための方法であって、
前記錐体関連網膜障害を治療または予防するのに有効な量の治療ポリヌクレオチドを含む組み換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）バリアントを硝子体内投与することを含む、方法。
（項目２０）
前記ｒＡＡＶバリアントが、親ＡＡＶカプシドタンパク質のＧＨループ中にアミノ酸ペプチドの挿入を含むバリアントＡＡＶカプシドタンパク質を含む、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記親カプシドタンパク質の前記ＧＨループが、ＡＡＶ１  ＶＰ１（配列番号１）のアミノ酸５７１〜６１２、ＡＡＶ２  ＶＰ１（配列番号２）のアミノ酸約５７０〜６１１、ＡＡＶ３  ＶＰ１（配列番号３）のアミノ酸約５７１〜６１２、ＡＡＶ４  ＶＰ１（配列番号４）のアミノ酸約５６９〜６１０、ＡＡＶ５  ＶＰ１（配列番号５）のアミノ酸約５６０〜６０１、ＡＡＶ６  ＶＰ１（配列番号６）のアミノ酸約５７１〜６１２、ＡＡＶ７  ＶＰ１（配列番号７）のアミノ酸約５７２〜６１３、ＡＡＶ８  ＶＰ１（配列番号８）のアミノ酸約５７３〜６１４、ＡＡＶ９  ＶＰ１（配列番号９）のアミノ酸約５７１〜６１２、ＡＡＶ１０  ＶＰ１（配列番号１０）のアミノ酸約５７３〜６１４、またはこれらのバリアントの対応するアミノ酸範囲から本質的になる、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記親カプシドが、ＡＡＶ２  ＶＰ１であり、前記挿入部位が、ＡＡＶ２  ＶＰ１のアミノ酸５８０と５８１との間、アミノ酸５８１と５８２との間、アミノ酸５８２と５８３との間、アミノ酸５８３と５８４との間、アミノ酸５８４と５８５との間、アミノ酸５８５と５８６との間、アミノ酸５８６と５８７との間、アミノ酸５８７と５８８との間、アミノ酸５８８と５８９との間、アミノ酸５８９と５９０との間、アミノ酸５９０と５９１との間、アミノ酸５９１と５９２との間、アミノ酸５９２と５９３との間、アミノ酸５９３と５９４との間、またはアミノ酸５９４と５９５との間である、項目２０に記載の方法。
（項目２３）
前記ペプチドが、下記式、
Ｙ１Ｙ２Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６Ｘ７Ｙ３Ｙ４
のものであり、式中、
存在する場合、Ｙ１〜Ｙ４のそれぞれが独立して、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、及びＴｈｒから選択され、
存在する場合、Ｘ１が、Ｌｅｕ、Ａｓｎ、及びＬｙｓから選択され、
Ｘ２が、Ｇｌｙ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、及びＡｓｐから選択され、
Ｘ３が、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ、及びＰｒｏから選択され、
Ｘ４が、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｇｌｎ、及びＬｙｓから選択され、
Ｘ５が、Ｔｈｒ及びＡｌａから選択され、
Ｘ６が、Ａｒｇ、Ａｓｎ、及びＴｈｒから選択され、
存在する場合、Ｘ７が、Ｐｒｏ及びＡｓｎから選択される、項目２０に記載の方法。
（項目２４）
前記ペプチドが、アミノ酸配列ＬＧＥＴＴＲＰ（配列番号１１）を含む、項目２０に記載の方法。
（項目２５）
前記網膜障害が、錐体関連障害である、項目１９に記載の方法。
（項目２６）
前記錐体関連障害が、杆体錐体ジストロフィー；錐体杆体ジストロフィー；進行性錐体ジストロフィー；網膜色素変性（ＲＰ）；シュタルガルト病；黄斑毛細血管拡張症、レーベル遺伝性視神経症、ベスト病；成人卵黄様黄斑ジストロフィー、Ｘ連鎖性網膜分離症；色覚障害；加齢性黄斑変性；滲出型加齢性黄斑変性；地図状萎縮；糖尿病網膜症；網膜静脈閉塞症；網膜虚血；家族性滲出性硝子体網膜症（ＦＥＶＲ）；コーツ病；及びソースビー眼底ジストロフィーからなる群から選択される、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記方法が、前記対象が錐体関連障害を有すると特定することを更に含む、項目１９に記載の方法。
（項目２８）
前記方法が、前記投与ステップ後に視力の改善を検出することを更に含む、項目１９に記載の方法。
（項目２９）
前記対象が、霊長動物である、項目１９に記載の方法。