【手続補正書】
【提出日】平成20年3月24日(2008.3.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質分解に耐性の少なくとも1つの安定化Tat抗原を含み、該安定化抗原が：
a) HIV Tatタンパク質又は少なくとも11アミノ酸のTatフラグメントと、Tatの非金属リガンドとを少なくとも含むTat/リガンド複合体、
b) HIV Tatタンパク質の人工変異形又は少なくとも11アミノ酸のTatフラグメントの人工変異形であって、Tatアミノ酸配列の位置22、25、27、30、31、34及び／又は37に位置する1〜7つのシステインが、疎水性基で修飾されているか、及び／又はロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン及びこれらのアミノ酸の疎水性アナログから選択される疎水性アミノ酸で置換されている変異形、及び
c) b)で規定されるTatタンパク質又はTatフラグメントの人工変異形と、Tatの非金属リガンドとの複合体
からなる群より選択されることを特徴とするHIVワクチン組成物。
【請求項２】
a)又はc)の前記非金属リガンドが、タンパク質、脂質、炭水化物、ヌクレオチド又は本質的にそれらの混合物であることを特徴とする請求項1に記載のワクチン組成物。
【請求項３】
a)又はc)の前記非金属リガンドが、デキストラン硫酸、ペントサンポリ硫酸及びヘパリン又はヘパラン硫酸のようなポリ硫酸グリコサミノグリカンから選択されるポリ硫酸化糖類であることを特徴とする請求項2に記載のワクチン組成物。
【請求項４】
前記ヘパリンが、15000 Daの分子量を有するヘパリン又は6000 Daの分子量を有するヘパリンフラグメントであることを特徴とする請求項3に記載のワクチン組成物。
【請求項５】
a)又はc)の前記非金属リガンドがHIV Vprタンパク質であることを特徴とする請求項2に記載のワクチン組成物。
【請求項６】
少なくとも位置25、27、30及び31の4つのシステインが、疎水性アミノ酸で置換されているか及び／又は疎水性基で修飾されている請求項1に記載のワクチン組成物。
【請求項７】
前記疎水性アミノ酸が、ロイシン、トリプトファン及びフェニルアラニンからなる群より選択され、及び／又は前記疎水性基がS tert-ブチルであることを特徴とする請求項1又は6に記載のワクチン組成物。
【請求項８】
前記安定化Tat抗原が、不活化Tatタンパク質又は不活化Tatフラグメントに由来することを特徴とする請求項1〜7のいずれか1つに記載のワクチン組成物。
【請求項９】
前記不活化Tatタンパク質又は前記不活化Tatフラグメントが、位置22、34及び37の各システインのセリンへの置換、又は位置52及び53の各アルギニンのグルタミンへの置換を含むことを特徴とする請求項8に記載のワクチン組成物。
【請求項１０】
前記Tatタンパク質又は該タンパク質のフラグメントが、101アミノ酸のTatタンパク質、86アミノ酸のTatタンパク質、Tatのフラグメント1〜57及び前記タンパク質又はフラグメントに含まれる少なくとも11アミノ酸のフラグメントから選択されることを特徴とする請求項1〜9のいずれか1つに記載のワクチン組成物。
【請求項１１】
前記安定化Tat抗原が、配列番号1の配列のTatタンパク質又はこの配列の少なくとも11アミノ酸のフラグメントに由来することを特徴とする請求項1〜10のいずれか1つに記載のワクチン組成物。
【請求項１２】
a)の前記Tatタンパク質又は前記Tatフラグメントが、多価カチオン、好ましくは二価カチオン、例えばZn2+又はCd2+から選択される金属イオンとも複合体化されていることを特徴とする請求項1〜11のいずれか1つに記載のワクチン組成物。
【請求項１３】
b)又はc)の前記Tatタンパク質又は前記Tatフラグメントの人工変異形が、多価カチオン、好ましくは二価カチオン、例えばZn2+又はCd2+から選択される金属イオンとも複合体化されていることを特徴とする請求項1〜11のいずれか1つに記載のワクチン組成物。
【請求項１４】
前記Tatタンパク質又は前記Tatフラグメントがモノマーであることを特徴とする請求項1〜13のいずれか1つに記載のワクチン組成物。
【請求項１５】
前記Tatタンパク質又は前記Tatフラグメントがオリゴマー、好ましくはダイマーであることを特徴とする請求項1〜13のいずれか1つに記載のワクチン組成物。
【請求項１６】
前記オリゴマー、好ましくはダイマーが、前記Tatタンパク質及び／又は該タンパク質のフラグメントの位置22、25、27、30、31、34又は37のシステインの1つを伴う分子間ジスルフィド結合による共有結合で形成されることを特徴とする請求項15に記載のワクチン組成物。
【請求項１７】
前記ジスルフィド結合が、位置22、34又は37のシステインの1つを伴うことを特徴とする請求項16に記載のワクチン組成物。
【請求項１８】
Tatダイマーが、2つのTatタンパク質又は位置22及び37のセリンと位置25、27、30及び31のロイシンとを含む少なくとも11アミノ酸の2つのTatフラグメントの位置34のシステイン間のジスルフィドブリッジによる結合で形成されることを特徴とする請求項17に記載のワクチン組成物。
【請求項１９】
前記オリゴマー、好ましくはダイマーが、前記Tatタンパク質及び／又は該タンパク質のフラグメントの、金属イオン、好ましくは多価カチオン、特に二価カチオン、例えばZn2+及びCd2+による非共有結合で形成されることを特徴とする請求項15に記載のワクチン組成物。
【請求項２０】
任意に修飾されていてよい前記Tatタンパク質及び／又は該タンパク質のフラグメントが、前記タンパク質及び／又は前記フラグメントをコードするポリヌクレオチド又は組換えベクターの形にあることを特徴とする請求項1〜19のいずれか1つに記載のワクチン組成物。
【請求項２１】
医薬的に許容される媒体及び／又はアジュバント及び／又は担体物質を含むことを特徴とする請求項1〜19のいずれか1つに記載のワクチン組成物。
【請求項２２】
請求項1〜19のいずれか1つで規定される安定化抗原と、医薬的に許容される媒体及び／又は担体物質とからなることを特徴とする請求項21に記載のワクチン組成物。
【請求項２３】
前記アジュバントが水酸化アルミナであることを特徴とする請求項21に記載のワクチン組成物。
【請求項２４】
ヒトにおけるHIV感染の予防及び／又は治療用のワクチンとして用いるための、請求項1〜20のいずれか1つで規定される安定化Tat抗原。
【請求項２５】
請求項1〜20のいずれか1つで規定される安定化Tat抗原の、ヒトにおけるHIV感染の予防及び／又は治療用のワクチンを製造するための使用。
【請求項２６】
- 請求項13で規定されるTatの金属リガンド、及び／又は請求項2〜5のいずれか1つで規定されるTatの非金属リガンドと結合した
- 請求項1、6〜11及び14〜18のいずれか1つで規定されるTatタンパク質又はTatフラグメントの変異形
からなることを特徴とするペプチド複合体。
【請求項２７】
請求項1、6〜11及び14〜18のいずれか1つで規定されるTatタンパク質又はTatフラグメントの変異形から選択されることを特徴とするタンパク質又はペプチドフラグメント。
【請求項２８】
少なくとも：
- いずれの適切な手段により、請求項1、8〜17及び20のいずれか1つで規定されるHIV Tatタンパク質又はTatフラグメントを作製し、同時に又は逐次的に
- 請求項１、6及び7のいずれか1つで規定されるように、Tatアミノ酸配列の位置22、25、27、30、31、34及び／又は37に位置する1〜7つのシステインを、疎水性基で修飾するか、及び／又はロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン及びこれらのアミノ酸の疎水性アナログから選択される疎水性アミノ酸で置換して、該修飾されたTatタンパク質又は修飾されたTatフラグメントと、請求項2〜5のいずれか1つで規定されるTatの非金属リガンド及び／又は請求項13で規定されるTatの金属リガンドとの複合体を形成する
ことを含むことを特徴とする、安定化Tat抗原を作製する方法。
【請求項２９】
a) 請求項1、6〜11及び14〜18のいずれか1つで規定される、HIV Tatタンパク質又は少なくとも11アミノ酸のTatフラグメントをコードする配列と、Tatのペプチドリガンドをコードする配列とを含むポリヌクレオチド又はポリヌクレオチド混合物、及び
b) 請求項1、6及び7のいずれか1つで規定されるHIV Tatタンパク質又はTatフラグメントの変異形をコードする配列を含むポリヌクレオチド
からなる群より選択されるポリヌクレオチド又はポリヌクレオチド混合物。
【請求項３０】
請求項29のa)又はb)で規定されるポリヌクレオチドを含む組換えベクター。
【請求項３１】
請求項29のa)で規定される混合物のポリヌクレオチドをそれぞれが含む、組換えベクターの混合物。
【請求項３２】
請求項29〜31のいずれかで規定されるポリヌクレオチド、組換えベクター又は混合物で改変された真核細胞。