【手続補正書】
【提出日】平成20年5月14日(2008.5.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩｇＧ１および／またはＩｇＧ３の定常領域から成る、抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体。
【請求項２】
各個々のメンバーが、表３の異なるクローン名により特定できるアミノ酸配列の対に対応するＶＨ：ＬＣ対の１つから選択されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３領域を含む、抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体。
【請求項３】
個々のメンバーの少なくとも１つがｅｐＤ３、ｅｐＤ４及びｅｐＤ９（ＲｈＤカテゴリーＶＩ抗原）に特異的に結合し、及びさらなるメンバーが単独又は組み合わせて残りのＲｈＤ抗原エピトープ、ｅｐＤ１、ｅｐＤ２、ｅｐＤ５、ｅｐＤ６／７及びｅｐＤ８に結合する、請求項１又は２記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体。
【請求項４】
ＶＨ：ＬＣ対に由来するＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３領域がクローン名ＲｈＤ１５７．１１９Ｄ１１、ＲｈＤ１５８．１１９Ｂ０６、ＲｈＤ１５９．１１９Ｂ０９、ＲｈＤ１６１．１１９Ｅ０９、ＲｈＤ１６３．１１９Ａ０２、ＲｈＤ１９０．１１９Ｆ０５、ＲｈＤ１９１．１１９Ｅ０８、ＲｈＤ１９２．１１９Ｇ０６、ＲｈＤ１９７．１２７Ａ０８及びＲｈＤ２０４．１２８Ａ０３により特定される、請求項２又は３記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体。
【請求項５】
ＶＨ：ＬＣ対に由来するＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３領域がクローン名ＲｈＤ１５７．１１９Ｄ１１、ＲｈＤ１５９．１１９Ｂ０９、ＲｈＤ１６０．１１９Ｃ０７、ＲｈＤ１６１．１１９Ｅ０９、ＲｈＤ１６２．１１９Ｇ１２、ＲｈＤ１６３．１１９Ａ０２、ＲｈＤ１８９．１８１Ｅ０７、ＲｈＤ１９１．１１９Ｅ０８、ＲｈＤ１９２．１１９Ｇ０６、ＲｈＤ１９６．１２６Ｈ１１、ＲｈＤ１９７．１２７Ａ０８、ＲｈＤ１９９．１６４Ｅ０３、ＲｈＤ２０１．１６４Ｈ１２、ＲｈＤ２０２．１５８Ｅ０７、ＲｈＤ２０３．１７９Ｆ０７、ＲｈＤ２０７．１２７Ａ１１、ＲｈＤ２４０．１２５Ａ０９、ＲｈＤ２４１．１１９Ｂ０５、ＲｈＤ２４４．１５８Ｂ１０、ＲｈＤ２４５．１６４Ｅ０６、ＲｈＤ２９３．１０９Ａ０９、ＲｈＤ３０１．１６０Ａ０４、ＲｈＤ３０５．１８１Ｅ０６、ＲｈＤ３０６．２２３Ｅ１１、ＲｈＤ３０７．２３０Ｅ１１、ＲｈＤ３１９．１８７Ａ１１及びＲｈＤ３２４．２３１Ｆ０７により特定される、請求項２又は３記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体フラグメント。
【請求項６】
有効量の請求項１〜５の１項に記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナルが投与される、動物における処置、改善又は予防方法。
【請求項７】
新生児溶血性疾患の予防、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）の処置、又はＲｈＤ（−）の個人にＲｈＤ（＋）の血液を誤って輸血した後のＲｈＤ抗原に対する感作の予防のための組成物を調製するための、請求項１〜５の１項に記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体の使用。
【請求項８】
活性成分として請求項１〜５の１項に記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体及び医薬上許容される賦形剤を含有する、医薬組成物。
【請求項９】
請求項１〜５の１項に記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体の発現のための製造細胞系統として適切な細胞群を産生するための方法であって、
ａ）抗−ＲｈＤ抗体発現ベクターのライブラリーを提供する段階であって、ここで、前記ライブラリーの各個々のベクターが、１）抗−ＲｈＤポリクローナル抗体の異なるメンバーをコードする核酸セグメントの１つの単一コピー、及び２）１つ以上のリコンビナーゼ認識配列を含む、段階；
ｂ）抗−ＲｈＤ抗体発現ベクターの前記ライブラリーを宿主細胞系統に導入する段階であって、ここで、前記宿主細胞系統の各個々の細胞のゲノムは、そのゲノム内で前記ベクターのものと整合するリコンビナーゼ認識配列を含む、段階；
ｃ）段階（ａ）の抗−ＲｈＤ抗体コーディング核酸セグメントが宿主細胞系統の細胞内に部位特異的に組み込まれるように、１つ以上のリコンビナーゼの前記細胞内での存在を保証する段階であって、ここで、前記１つ以上のリコンビナーゼは、ｉ）前記核酸セグメントが導入される前記細胞により発現されるか；ｉｉ）段階（ａ）のベクターにより操作可能な形でコードされるか；ｉｉｉ）第２のベクターからの発現を通して提供されるか；又はｉｖ）１つの蛋白質として前記細胞に提供されるかのいずれかである、段階；及び
ｄ）抗−ＲｈＤ抗体発現ベクターの前記ライブラリーから、抗−ＲｈＤ抗体コーディング核酸セグメントの組込まれたコピーを含む細胞を選択する段階：
を含む、方法。
【請求項１０】
抗−ＲｈＤ抗体発現ベクターの前記ライブラリーが、前記ベクターライブラリーの個々のメンバーを用いて別々に前記宿主細胞をトランスフェクションすることによって前記宿主細胞系統内に導入され、及び前記細胞が、段階（ｄ）の選択の後に、組換えポリクローナル製造細胞系統として適切な細胞群を形成するべくプールされる、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
抗−ＲｈＤ抗体発現ベクターの前記ライブラリーが、前記ベクターライブラリーの５〜５０個の個々のベクターを含むフラクションを用いた前記宿主細胞のアリコートの半バルクトランスフェクションにより前記宿主細胞系統内に導入され、及び前記細胞が、段階（ｄ）の選択の後に、組換えポリクローナル製造細胞系統として適切な細胞群を形成するべくプールされる、請求項９記載の方法。
【請求項１２】
抗−ＲｈＤ抗体発現ベクターの前記ライブラリーが、前記ベクターライブラリーを用いた前記宿主細胞の一群のバルクトランスフェクションにより前記宿主細胞系統内に導入される、請求項９記載の方法。
【請求項１３】
抗−ＲｈＤポリクローナルの異なるメンバーをコードする核酸セグメントの前記単一コピーが、前記細胞群内の各個々の細胞の単一の所定の遺伝子座内に組み込まれており、前記遺伝子座が前記組換えポリクローナル抗体の各メンバーの高レベル発現を媒介し得る、前記請求項９〜１２いずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記細胞群が哺乳類細胞系統又は細胞型から誘導される、前記請求項９〜１３いずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記哺乳類細胞系統が、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＣＯＳ細胞、ＢＨＫ細胞、ＹＢ２／０、ＮＩＨ３Ｔ３、骨髄腫細胞、繊維芽細胞、ＨｅＬａ、ＨＥＫ２９３、ＰＥＲ．Ｃ６及びそれらから誘導された細胞系統からなる群より選択される、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
請求項１〜５の１項に記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体の製造方法であって、
ａ）ポリクローナルワーキングセルバンクを提供するか、又は変異体抗−ＲｈＤ抗体コーディング核酸セグメントのライブラリーを含む細胞群を提供する段階であって、ここで、前記群中の各個々の細胞は、前記抗−ＲｈＤポリクローナル抗体の異なるメンバーをコードする核酸セグメントの単一コピーを含み、前記コピーは、各個々の細胞のゲノムの同じ部位に組み込まれている、段階；
ｂ）前記組換えポリクローナル抗体の発現を容易にする条件の下で、前記ポリクローナルワーキングセルバンク又は細胞群を培養する段階；及び
ｃ）細胞培養物、細胞又は上清から前記発現された組換えポリクローナル抗体を回収する段階：
を含む、方法。
【請求項１７】
回収された組換えポリクローナル抗体をさらなる精製に付す、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
請求項１〜５の１項に記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体をコードする変異体抗−ＲｈＤ抗体コーディング核酸セグメントの集団を含む、部位特異的組込み用の抗−ＲｈＤ発現ベクターのライブラリーであって、ここで、前記ベクターの各々は、１）抗−ＲｈＤポリクローナル抗体の異なるメンバーをコードする核酸セグメントの１つのコピー、及び２）１つ以上のリコンビナーゼ認識配列を含むものである、ライブラリー。
【請求項１９】
各セグメントが、表３の異なるクローン名により特定できる核酸配列の対に対応するＶＨ：ＬＣ対の１つから選択されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３領域を含む、請求項１〜５の１項に記載の抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体をコードする抗−ＲｈＤ抗体コーディング核酸セグメントのライブラリー。
【請求項２０】
請求項１９記載の抗−ＲｈＤ抗体コーディング核酸セグメントのライブラリーを用いてトランスフェクションした細胞群を含む組換えポリクローナル製造細胞系統であって、ここで、前記群中の各細胞は、ライブラリーの１つのメンバーを発現し得るものであり、該メンバーは、抗−ＲｈＤ組換えポリクローナル抗体の異なるメンバーをコードし、及び前記群中の個々の細胞のゲノム内の同じ部位に位置しており、前記核酸セグメントは群中の前記細胞と天然においては関連していないものである、組換えポリクローナル製造細胞系統。
【請求項２１】
抗−ＲｈＤポリクローナルの異なるメンバーをコードする前記核酸セグメントが、前記細胞群中の各個々の細胞の単一の所定の遺伝子座内に組み込まれ、前記遺伝子座は前記組換えポリクローナル抗体の各メンバーの高レベル発現を媒介し得るものである、請求項２０記載の組換えポリクローナル製造細胞系統。
【請求項２２】
前記細胞群が哺乳類細胞系統又は細胞型から誘導されている、請求項２０又は２１記載の組換えポリクローナル製造細胞系統。
【請求項２３】
前記哺乳類細胞系統が、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＣＯＳ細胞、ＢＨＫ細胞、ＹＢ２／０、ＮＩＨ３Ｔ３、骨髄腫細胞、繊維芽細胞、ＨｅＬａ、ＨＥＫ２９３、ＰＥＲ．Ｃ６及びそれらから誘導された細胞系統からなる群より選択される、請求項２２記載の組換えポリクローナル製造細胞系統。