(57)【要約】中性子捕捉療法の安全性を高めるべく、腫瘍細胞への集積性に優れる中性子捕捉製剤を提供する。中性子捕捉剤としてボロン化合物を用い、前記ボロン化合物を含む内水相、油相および外水相からなるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを形成し、これを中性子捕捉製剤とする。前記ボロン化合物としては、ボロカプテイト（ＢＳＨ：ｂｏｒｏｃａｐｔａｔｅ）およびｐ−ボロノフェニルアラニン（ｐ−ｂｏｒｏｎｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎ）があげられる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
多相エマルションを含む中性子捕捉製剤であって、
前記多相エマルションが、中性子捕捉剤を含む内水相、油相および外水相からなるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションであり、
前記中性子捕捉剤がボロン化合物である中性子捕捉製剤。
【請求項２】
前記Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションが単分散エマルションである、請求の範囲１記載の中性子捕捉製剤。
【請求項３】
前記内水相が前記油相中に分散され、前記内水相を含有する前記油相が前記外水相に分散されることによって、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションが形成されており、
前記外水相に分散された前記油相粒子のうち、平均孔径の７５％〜１５０％の粒径である油相粒子が、全油相粒子の５０容積％以上である、請求の範囲１記載の中性子捕捉製剤。
【請求項４】
前記内水相が前記油相に分散され、前記内水相を含有する前記油相が前記外水相に分散されることによって、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションが形成されており、
前記外水相に分散された前記油相粒子の平均粒径が、３０μｍ以上である、請求の範囲１記載の中性子捕捉製剤。
【請求項５】
前記外水相に分散された前記油相粒子の平均粒径が、３０〜５００μｍの範囲である、請求の範囲１記載の中性子捕捉製剤。
【請求項６】
前記内水相が前記油相に分散され、前記内水相を含有する前記油相が前記外水相に分散されることによって、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションが形成されており、
前記油相に分散された前記内水相粒子の平均孔径が、２００μｍ以下の範囲である、請求の範囲１記載の中性子捕捉製剤。
【請求項７】
前記ボロン化合物が水溶性ボロン化合物である、請求の範囲１記載の中性子捕捉製剤。
【請求項８】
前記水溶性ボロン化合物が、ボロカプテイトおよびｐ−ボロノフェニルアラニンの少なくとも一方を含む、請求の範囲７記載の中性子捕捉製剤。
【請求項９】
前記油相が、油脂類および界面活性剤を含む油相である、請求の範囲１記載の中性子捕捉製剤。
【請求項１０】
前記界面活性剤がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油である、請求の範囲９記載の中性子捕捉製剤。
【請求項１１】
請求の範囲１記載の中性子捕捉製剤の原料であって、
中性子捕捉剤を含む内水相および油相からなるＷ／Ｏ型エマルションであり、
前記中性子捕捉剤がボロン化合物であることを特徴とする原料。
【請求項１２】
中性子捕捉製剤を用いた中性子捕捉療法であって、
前記中性子捕捉製剤が、請求の範囲１記載の中性子捕捉製剤であり、
前記中性子捕捉製剤を体内に投与して前記中性子捕捉製剤を目的の細胞に集積させ、中性子照射により前記目的細胞を破壊する中性子捕捉療法。
【請求項１３】
腫瘍細胞に対する中性子捕捉療法である、請求の範囲１２記載の中性子捕捉療法。
【請求項１４】
腫瘍細胞が血管に富む腫瘍細胞である、請求の範囲１３記載の中性子捕捉療法。
【請求項１５】
腫瘍細胞が肝臓の腫瘍細胞である、請求の範囲１３記載の中性子捕捉療法。
【請求項１６】
前記中性子捕捉製剤を動脈に投与する、請求の範囲１２記載の中性子捕捉療法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、ボロン化合物を含む中性子捕捉製剤およびその用途に関する。
【背景技術】
【０００２】  肝臓ガンは、肝炎ウィルスや肝硬変等が原因となって発症するガンであり、現在、肺ガンおよび胃ガンに次ぐ死因として問題視されている。特に、有効な治療方法の選択が困難であることからも、治療方法の改良が研究されている状況である。【０００３】  肝臓ガンの治療方法の選択が困難な理由としては、以下のような理由があげられる。例えば、ガンの一般的な治療方法として外科的切除が知られているが、肝臓ガンの場合、ガンの状況（例えば、多発肝ガン、巨大肝ガン）や、肝硬変等による肝機能の低下により、切除が制限され、実際に切除が行われるのは肝臓ガン患者全体の約１５％程度にすぎないという現状である。また、仮に切除を行ったとしても、肝硬変により発症するという肝臓ガンの性質上、常に再発の危険性が残るという問題もある。さらに、外科的切除以外の方法として、例えば、肝動脈塞栓術、エタノール注入法、マイクロ波による壊死療法等が知られているが、これらの療法についても、例えば、ガンの進行状態、患者の年齢、性別等により、治療可能な状況が限られている。【０００４】  現在、肝臓ガンの治療方法として比較的広く採用されているのは、腫瘍細胞に選択的に抗ガン剤を投与する動注化学療法である。これは、カテーテルを通じて動脈に抗ガン剤を直接注入し、目的の部位に抗ガン剤を投与する方法である。この方法によれば、例えば、抗ガン剤を静脈に投与する全身化学療法と比較して、正常細胞への抗ガン剤の拡散や、それに伴う副作用等の問題を軽減できるという利点がある。一方、治療効果を向上させるためには、抗ガン剤を確実に目的部位に集積させ、滞留させる必要がある。このため、動注化学療法については、抗ガン剤の集積を実現させるために、注入する抗ガン剤の薬剤形態の改良等が行われている（例えば、特許文献１）。しかしながら、動注化学療法は、その治療効果が、抗ガン剤の種類（効能）、ガンの種類や患者に対する抗ガン剤の適応性、患者の病期に左右されるため、局所的な集積が確実となっても、例えば、ガンの種類や患者に適した抗ガン剤のさらなる開発が余儀なくされるという問題も残っている。【０００５】  他方、治療効果に優れるガンの治療方法として、ボロン中性子捕捉療法（ｂｏｒｏｎ  ｎｅｕｔｒｏｎ  ｃａｐｔｕｒｅ  ｔｈｅｒａｐｙ：ＢＮＣＴ）の研究が進められている。この療法は、ボロン化合物を投与し、目的の腫瘍細胞にボロンを集積させ、それに熱中性子を照射する方法である。ボロンと中性子とが核反応（ボロン中性子捕捉反応）を起こすことによって、細胞破壊力に優れるα粒子とＬｉ粒子（反跳リチウム原子核）とが発生し、これにより腫瘍細胞が破壊される。α粒子とＬｉ粒子は、共に飛程が１０μｍ以下であり、ボロンが取り込まれた細胞１個を選択的に破壊することが可能である。【０００６】  このようなボロン中性子捕捉療法は、前述の化学療法とは異なり、抗ガン剤の種類等によって効果が左右されるものではないため、非常に有用な治療方法である。しかしながら、α粒子やＬｉ粒子は細胞破壊力に優れるため、治療効果が期待できる半面、確実に目的の腫瘍細胞にボロン化合物を集積させなければ、正常細胞をも破壊するおそれがある。このため、近年、腫瘍細胞に集積し易いボロン化合物として、ボロカプテイト（ＢＳＨ：ｂｏｒｏｃａｐｔａｔｅ）、ｐ−ボロノフェニルアラニン（ｐ−ｂｏｒｏｎｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎ）等が報告されている（非特許文献２）。【０００７】  しかしながら、実際の臨床医療の分野において、このボロン中性子捕捉療法は未だ臨床例が少なく、適用された腫瘍も、例えば、脳腫瘍、皮膚ガン等に限られている。これは、ボロンの集積性が、所望の程度にまで達していないためと考えられる。ボロン化合物は、通常、ボロン化合物単独での静脈投与や、油性造影剤（例えば、リピオドール）と混合したエマルションの形態で動脈を介して腫瘍細胞に投与される。しかしながら、前述のＢＳＨ等の使用によって腫瘍細胞への集積性は向上したものの、投与後にエマルションからボロン化合物が流出するため、正常細胞への影響が懸念され、また、集積したボロン化合物が腫瘍細胞に十分に取り込まれないために、腫瘍細胞内のボロン濃度が向上せず、腫瘍細胞が十分に破壊されないというおそれがある。【０００８】  したがって、他の腫瘍細胞、特に治療方法の選択が困難である肝臓ガンの腫瘍細胞に対して、より安全にボロン中性子捕捉療法を適用するためには、例えば、腫瘍細胞に対するボロンの集積性をさらに向上させ、腫瘍細胞におけるボロン濃度を高めることが必要と考えられる。
【特許文献１】特開平１０−１５８１５２号公報
【非特許文献１】Ｓｈｕｓｈｉ  Ｈｉｇａｓｈｉ，Ｍ．Ｄ．，Ｐｈ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｍａｒｃｈ  １５，１９９５，Ｖｏｌｕｍｅ  ７５，Ｎｏ．６Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １０４，１７４６−１７４８，２００１
【非特許文献２】Ｙａｎａｇｉｅ  Ｈｉｒｏｎｏｂｕ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，３（４）：５２２−５２６，１９９１
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】  したがって、本発明は、中性子捕捉療法の安全性を高めるべく、腫瘍細胞への選択的な集積性に優れる中性子捕捉製剤の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】  前記目的を達成するために、本発明の中性子捕捉製剤は、多相エマルションからなる中性子捕捉製剤であって、前記多相エマルションが、中性子捕捉剤を含む内水相、油相および外水相からなるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションであり、前記中性子捕捉剤がボロン化合物であることを特徴とする。【００１１】  また、本発明は、本発明の中性子捕捉製剤の原料であって、中性子捕捉剤を含む内水相および油相からなるＷ／Ｏ型エマルションであり、前記中性子捕捉剤がボロン化合物であることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１２】  このように、本発明の中性子捕捉製剤は、中性子捕捉剤であるボロン化合物を含む内水相、油相および外水相からなるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの形態をとることによって、エマルション内に、流出することなくボロン化合物を包含させ、効率よく腫瘍細胞へのボロン化合物の集積ならびに沈着を行うことが可能である。このように腫瘍細胞への選択的な集積が可能であることから、例えば、血液を介して中性子捕捉製剤を投与した場合であっても、拡散が防止され、他の組織や正常組織への影響が軽減される。また、ボロンがより確実に目的腫瘍細胞に集積し沈着することにより、従来法と比較して、腫瘍細胞におけるボロン濃度の絶対値を高く設定し、治療効果を向上することもできる。したがって、本発明の中性子捕捉製剤によれば、今まで中性子捕捉療法が適用されていなかった腫瘍組織に対しても適用が可能となり、優れた治療効果も実現できる。特に、肝臓ガンは治療方法の選択が困難であったため、本発明によって、優れた治療効果を奏する中性子捕捉療法の適用が実現可能となったことは、臨床医療において極めて大きな進歩であり、極めて有用であるといえる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、本発明の実施例におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの概略図である。
【図２】図２は、本発明の実施例におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの粒径分布を示すグラフであり、（ａ）は実施例１−１、（ｂ）は実施例１−２の結果を示す。
【図３】図３は、本発明の実施例におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの写真であり、（ａ）は実施例１−１、（ｂ）は実施例１−２の結果を示す。
【図４】図４は、比較例における混合物の写真である。
【図５】図５は、本発明の実施例における軟線撮影の結果を示す画像写真である。
【図６】図６は、本発明の実施例における光学顕微鏡観察の結果を示す画像写真である。
【図７】図７は、比較例における光学顕微鏡観察の結果を示す画像写真である。
【図８】図８は、本発明の実施例における腫瘍組織の電子顕微鏡写真であり、（ａ）は、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションを動注した腫瘍の結果であり、（ｂ）は、比較例のＬｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルションを動注した腫瘍の結果である。
【図９】図９は、比較例のボロン溶液を動注した腫瘍の電子顕微鏡写真である（ｃ）。
【図１０】図１０は、本発明の実施例（Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションの動注）および比較例（Ｌｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルジョンの動注）における腫瘍組織の経時的な電子顕微鏡写真である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】  本発明の中性子捕捉製剤は、前述のように、多相エマルションからなる中性子捕捉製剤であって、前記多相エマルションが、中性子捕捉剤を含む内水相、油相および外水相からなるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションであり、前記中性子捕捉剤がボロン化合物であることを特徴とする。なお、Ｗ／Ｏ／Ｗ型とは、エマルションの形態を示す一般的な表現である「ｗａｔｅｒ  ｉｎ  ｏｉｌ  ｉｎ  ｗａｔｅｒ  ｔｙｐｅ  ｅｍｕｌｓｉｏｎ」の略であり、水（Ｗ）滴粒子を内部に閉じこめた油（Ｏ）滴粒子が、さらに水（Ｗ）中に分散しているダブルエマルションを意味する。【００１５】  前記Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションは、例えば、図１に表すことができる。図１は、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションの構成の一例を示す概略図である。Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション１は、中性子捕捉剤を含有する水相（内水相）１０が、分散媒である油相１１に分散されており、さらに、内部に内水相１０を有する油相１１が、分散媒である外水相１２に分散されている。本発明では、以下、中性子捕捉剤を含有する内水相（水滴）を内水相粒子、これを包含する油相（油滴）をＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子ともいう。なお、図１は、あくまでも概略図であって、本発明は、同図のエマルションにおける粒子数や粒径等は、何ら制限されない。【００１６】  本発明におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションは、単分散エマルション（均一液滴粒子）であることが好ましい。単分散エマルションとは、通常、均一に液滴粒子が分散されているエマルションを意味し、単分散エマルジョン以外のエマルジョンは、一般に多分散エマルションという。本発明においてＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子（前記外水相に分散された前記油相の粒子）の割合は、特に制限されないが、例えば、前記Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子のうち、平均粒径の７５％から１５０％の粒径であるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子が、全Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子の５０容積％以上を満たすことが好ましく、より好ましくは８０容積％以上である。なお、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子の粒径分布は、従来公知の方法で求めることができ、例えば、レーザー回折／散乱式粒度分布計等によって測定することができる（以下、同様）。【００１７】  前記Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションは、例えば、前記平均粒径の５０％以下の粒径であるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子、平均粒径の２００％以上の粒径であるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子を実質的に含まないことが好ましい。また、前記平均粒径の７５％から１５０％の粒径であるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子が、全Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子の８０容積％以上であることが好ましく、より好ましくは８０容積％以上である。なお、前記平均粒径の５０％以下の粒径であるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子や前記平均粒径の２００％以上の粒径であるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子は、例えば、本発明の効果を損なわない範囲で含まれてもよい。【００１８】  前記Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子（油相粒子）の平均粒径は、特に制限されないが、その下限は、例えば、３０μｍ以上が好ましく、より好ましくは４０μｍ、さらに好ましくは６０μｍであり、その上限は、例えば、５００μｍ以下であり、好ましくは３５０μｍ以下、より���ましくは３００μｍ以下、さらに好ましくは２００μｍ以下である。具体的には、例えば、３０〜３５０μｍ、好ましくは３０〜３００μｍ、より好ましくは２０〜２００μｍの範囲である。なお、これらの粒径は、少なくとも投与前における粒径である。【００１９】  Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子（油相粒子）内に分散される内水相粒子は、単分散エマルション（均一液滴粒子）であることが好ましく、例えば、前記内水相粒子のうち、その平均粒径の７５％から１５０％の粒径である内水相粒子が、全内水相粒子の５０容積％以上であることが好ましく、より好ましくは８０容積％以上である。【００２０】  Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子は、例えば、前記平均粒径（内水相粒子の平均粒径）の５０％以下の粒径である内水相粒子、前記平均粒径の２００％以上の粒径である内水相粒子を実質的に含まないことが好ましい。また、前記平均粒径の７５％から１５０％の粒径である内水相粒子が、全内水相粒子の８０容積％以上であることが好ましく、より好ましくは８０容積％以上である。なお、前記平均粒径の５０％以下の粒径である内水相粒子や前記平均粒径の２００％以上の粒径である内水相粒子は、例えば、本発明の効果を損なわない範囲で含まれてもよい。【００２１】  前記油相に分散された内水相粒子の平均孔径は、例えば、２００μｍ以下であり、好ましくは０．５〜１０μｍである。また、内水相粒子の最大粒径は、例えば、４００μｍ以下、好ましくは２００μｍ以下である。なお、これらの粒径は、少なくとも投与前における粒径である。【００２２】  前記Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションにおいて、内水相と外水相との体積比は、特に制限されないが、例えば、１：１０〜１：０．１の範囲、好ましくは１：５〜１：１の範囲である。また、内水相と油相との体積比は、特に制限されないが、例えば、１：９〜１：０．１の範囲、好ましくは１：９〜１：０．２の範囲、より好ましくは１：９〜１：０．５の範囲である。このように体積比を調節することによって、例えば、エマルションの粘度を自由に調節でき、より優れた沈着性を実現することができる。また、ボロン化合物の徐放速度を調節することもできる。なお、これら体積比は、例えば、水相や油相の種類、癌組織の性質等に応じて適宜変更できる。【００２３】  本発明において、前記内水相は、中性子捕捉剤を含有する水溶液であれよい。前記中性子捕捉剤としては、ボロン化合物があげられるが、その種類は特に制限されないが、水溶性ボロン化合物が好ましく、例えば、ボロカプテイト（ＢＳＨ：ｂｏｒｏｃａｐｔａｔｅ）、ｐ−ボロノフェニルアラニン（ｐ−ｂｏｒｏｎｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎ）等があげられ、好ましくはＢＳＨである。ＢＳＨ（ボロン原子数１２個）のようにボロン化合物１分子に含まれるボロン原子数が多い化合物であれば、ボロン化合物１分子当たりに生じるα線量も高くなるため、ボロン化合物の濃度が同じであっても、ボロン濃度の絶対値をより向上でき、また、内水相に含有させるボロン化合物量が少ない場合であっても十分な効果を得ることができる。これらの化合物は、１種類でもよいし２種類以上を併用してもよい。【００２４】  前記内水相におけるボロン化合物の含有量は、特に制限されず��ボロン化合物の種類（例えば、ボロン化合物１分子当たりのボロン原子数、化合物の溶解度）、ボロン化合物を添加する水性溶媒の種類、投与目的の腫瘍組織の部位、大きさ等に応じて適宜決定できる。具体的には、ＢＳＨの場合、溶解度の関係から、例えば、０．９ｍｏｌ／ｌ程度、もしくは０．９ｍｏｌ／ｌ以下である。【００２５】  なお、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション全体におけるボロンの含有量は、前記内水相におけるボロン化合物の含有量（ボロンの含有量）だけでなく、例えば、油相に分散された内水相粒子の量、外水相に分散された油相粒子の量等によって、総合的に適宜決定できる。【００２６】  前記内水相は、ボロン化合物以外に適宜添加物を含有してもよい。前記添加物としては、例えば、実質上人体に無害な化合物があげられ、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、デキストラン硫酸ナトリウム等のナトリウム塩、塩化カルシウム、グルコン酸カルシウム等のカルシウム塩等の各種塩類；ブドウ糖、ラクトース等の各種糖類；グリセリン、Ｄ−マンニトール、アミノ酸等があげられる。【００２７】  前記内水相は、浸透圧が、例えば、０．０１〜７．０ＭＰａ程度の範囲であり、好ましくは０．１〜５ＭＰａ、より好ましくは０．１〜３．５ＭＰａであり、例えば、腫瘍組織の種類、部位、大きさ等に応じて適宜決定できる。本発明におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの内水相粒子を体内でさらに膨張させる場合には、例えば、生理食塩水の浸透圧を超える値、好ましくは生理食塩水の浸透圧の１．１〜５倍（０．７５〜３．５ＭＰａ）程度に調節すればよい。これにより、本発明の中性子捕捉製剤を血液中に動注した後、血液中の水分が内水相粒子に移動するため、血管内で水相粒子が膨張する。膨張が不要な場合には、例えば、血液と同じである生理食塩水の浸透圧に設定すれば、そのままの粒径を維持することもできる。内水相の浸透圧は、例えば、ボロン化合物や各種添加物の種類や量等によって調節できる。なお、本発明において、生理食塩水の浸透圧は、約３７℃における値を基準とする。【００２８】  本発明における前記油相は、例えば、油脂類を含み、さらに界面活性剤を含むことが好ましい。前記油脂類としては、薬理的に許容されるものであれば特に制限されず、例えば、大豆油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、ナタネ油、トウモロコシ油、ラッカセイ油、メンジツ油、ヨード油、強ヨード油等があげられる。【００２９】  前記界面活性剤としては、薬理的に許容されるものであれば特に制限されず、市販品が使用できる。具体例としては、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の親油性界面活性剤が好ましく、特に、酸化エチレン付加４０モルのポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（例えば、商品名ＨＣＯ−４０、日光ケミカルズ社製等）は、生体に対する安全性がより高く、より少ない濃度で安定性に優れたＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを調製できることから好ましい。また、テトラグリセリン縮合リシノレイン酸エステル（例えば、商品名ＣＲ−３１０、阪本薬品工業社製等）、デカグリセリン縮合リシノレイン酸エステル（例えば、商品名ＣＲ−５００、阪本薬品工業社製等）等のポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル系���界面活性剤を使用してもよい。前記界面活性剤の添加量は、特に制限されず、例えば、油脂類の種類、界面活性剤の種類、内水相と外水相との体積比等に応じて適宜設定することができ、例えば、０．１〜２０重量％、好ましくは０．５〜１０重量％である。【００３０】  前記油相は、さらに他の添加物を含有してもよく、例えば、ボロン化合物、抗癌剤（例えば、親油性抗ガン剤）、レシチン、コレステロール、ビタミンＥ等があげられる。また、これらの添加物の含有量は、特に制限されず、油脂類、界面活性剤の種類や腫瘍組織の部位等に応じて適宜決定できる。【００３１】  本発明における前記外水相は、例えば、薬理的に許容される水溶液であれば特に制限されず、例えば、塩類、糖類等の水溶液が使用できる。塩類、糖類、その他の添加物としては、例えば、前述の内水相と同様のものがあげられる。なお、これらの塩類、糖類等の濃度によって、後述するような浸透圧を調整することができる。【００３２】  また、外水相は、例えば、他の成分を含有してもよく、例えば、必要に応じて界面活性剤（例えば、親水性界面活性剤）を含有してもよい。前記界面活性剤としては、人体に実質的に無害であれば特に制限されず、例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ブロックポリマー型非イオン界面活性剤（商品名プルローニックＦ６８、商品名ポロクサマー１８８、ミドリ十字社製）や、リゾレシチン、胆汁酸、ポリグリセリンエステル（ＰＧＣＲ）等が使用できる。これらの中でも、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油が好ましく、特に、酸化エチレン付加６０モルのポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（例えば、商品名ＨＣＯ−６０、日光ケミカルズ社製等）は、生体に対する安全性がより高く、より少ない濃度で安定性に優れたＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを調製できることから好ましい。【００３３】  前記外水相は、浸透圧が、例えば、０．０１〜７．０ＭＰａ程度の範囲であり、好ましくは０．１〜５ＭＰａ、より好ましくは０．１〜３．５ＭＰａである。なお、浸透圧の調節方法等は、前述の内水相と同様に行うことができる。【００３４】  本発明におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションは、内水相の浸透圧を外水相の浸透圧以上の値とし、且つ、得られたＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションにおける内水相および外水相の浸透圧を、生理食塩水の浸透圧を超える値とすることが好ましい。具体的には、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションの内水相および外水相の浸透圧は、例えば、生理食塩水の浸透圧の１．１〜５倍（０．７５〜３．５ＭＰａ）であることが好ましい。これによって、より沈着性に優れたＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション製剤を得ることができる。【００３５】  また、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションは、それぞれ分離した内水相、油相および外水相からなるため、例えば、いずれかの相または各相に、それぞれ、中性子捕捉療法を補うための薬剤や、相乗効果のための抗ガン剤を含有させてもよい。これによって、さらに治療効果を向上させることができる。この場合、水相には親水性の薬剤、油相には親油性の薬剤を使用することが好ましい。【００３６】  つぎに、本発明の中性子捕捉製剤の製造方法について説明するが、以下の方法には制限されない。【００３７】  まず、前述のような中性子捕捉剤を含む内水相を、油相に分散させることによって、Ｗ／Ｏ型エマルション（ｗａｔｅｒ  ｉｎ  ｏｉｌ  ｔｙｐｅ  ｅｍｕｌｓｉｏｎ）を形成する。なお、このＷ／Ｏ型エマルションは、本発明のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの原料として使用できる。【００３８】  分散方法は、特に制限されないが、例えば、攪拌、ホモジナイザー、超音乳化機等による公知の乳化方法があげられる。中でも、単分散性に優れるＷ／Ｏ型エマルションが得られることから、前記内水相となるボロン化合物含有水溶液を、多孔質膜を介して、分散媒である油相に分散させる膜乳化方法が好ましい。具体的には、ボロン含有水溶液を多孔質膜の孔を通して油相に投入し、前記ボロン含有水溶液を前記油相に分散させる方法である。なお、ボロン含有水溶液の分散の際には、圧力をかけて前記油相に投入して分散させることが好ましい（圧入分散）。【００３９】  このような膜乳化方法によれば、例えば、エマルションの安定性を維持しつつ、界面活性剤の添加量をより一層減少できる。また、膜乳化法によれば、例えば、粒径０．５〜１０μｍ程度の小さな内水相粒子を形成したり、粒径のコントロールも容易に行うことができる。さらに、乳化の際に発熱することもないため、熱に敏感な組成に対しても有用な製法である。【００４０】  前記多孔質膜としては、特に制限されないが、多孔質ガラス膜を使用することが好ましく、前記多孔質ガラス膜としては、従来公知のものが使用でき、例えば、ガラスのミクロ相分離を利用して製造されたものが好ましい。具体的には、特許第１５０４００２号に開示されたＣａＯ−Ｂ２Ｏ３−ＳｉＯ２−Ａｌ２Ｏ３系多孔質ガラス、特許第１５１８９８９号および米国特許第４６５７８７５号に開示されたＣａＯ−Ｂ２Ｏ３−ＳｉＯ２−Ａｌ２Ｏ３−ＮａＯ２系多孔質ガラス、ＣａＯ−Ｂ２Ｏ３−ＳｉＯ２−Ａｌ２Ｏ３−ＮａＯ２−ＭｇＯ系多孔質ガラス、ＣａＯ−Ｂ２Ｏ３−ＳｉＯ２−ＺｒＯ２系多孔質ガラス等があげられる。これらの多孔質ガラス膜の中でも、例えば、相対累積細孔分布曲線において、細孔容積が全体の１０％を占める時の細孔径を、細孔容積が全体の９０％を占める時の細孔径で除した値が、実質的に１から１．５までの範囲内にあるミクロ多孔膜体を用いることが好ましい。このような膜は、特に細孔が均一であることから、膜乳化法に極めて適している。このような多孔質ガラス膜としては、例えば、ＳＰＧテクノ社製の商品名ＳＰＧ膜、商品名ＳＰＧフィルターキット等が使用できる。前記多孔質膜は、水相を油相に通過させることから、疎水性の多孔質膜であることが好ましい。【００４１】  前記多孔質膜の孔径は、特に制限されないが、前述のようなＷ／Ｏ型エマルション粒子（内水相粒子）の所望の粒径に応じて適宜決定できる。また、単分散エマルジョンを形成するために、孔径が均一でムラのない細孔を有するものが好ましい。前記多孔質膜の孔径（Ｄｍ１）と形成する内水相粒子の粒径（Ｄｐ１）との関係は、特に制限されないが、例えば、Ｄｐ１／Ｄｍ１＝約３〜４が好ましい。このような多孔質膜を使用することによって、種々の粒径の内水相粒子を形成でき、特に、微小な粒子（例えば、最小０．５μｍ以上、好ましくは１μｍ以上）の形成に適している。【００４２】  また、圧入の際の圧力条件は、例えば、内水相や油相の組成等に応じて適宜決定できるが、例えば、Ｐｃ＞２γｃｏｓθ／ｒ（但し、Ｐｃは圧力、γは界面張力、θは接触角、ｒは多孔膜体細孔半径を示す。）の圧力であることが好ましい。【００４３】  また、上述のような多孔質膜を使用する以外にも、シリンジ等を用いて、前記内水相となるボロン化合物含有水溶液を分散媒である油相に滴下することによって分散させてもよい。この場合、Ｗ／Ｏ型エマルション粒子の所望の粒径に応じて、前記シリンジ先端の開口部の直径や、シリンジから前記ボロン化合物含有水溶液を押し出す際の圧力、ならびに、一滴の容量等を適宜決定すればよい。【００４４】  前記油相に対する界面活性剤の添加方法は、特に制限されないが、例えば、予め、油層を所定の界面活性剤濃度（例えば、０．１〜１０重量％）に調整して、安定なＷ／Ｏ型エマルションを形成し、さらに、得られたＷ／Ｏ型エマルションに、界面活性剤の全量が所定濃度（例えば、２０重量％以下）となるように界面活性剤を追加してもよい。これによって、得られたＷ／Ｏ型エマルション粒子（水性粒子）を効果的に膨張させることができる。また、膨張させない場合は、Ｗ／Ｏ型エマルションを得た時点における界面活性剤の濃度をそのまま維持すれば良い。このように、界面活性剤の追加によって、例えば、Ｗ／Ｏ型エマルション粒子の大きさ等を任意にコントロールすることもできる。【００４５】  続いて、得られたＷ／Ｏ型エマルションを、外水相に分散させることによって、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションを形成する。このようにして本発明の中性子捕捉製剤を製造できる。【００４６】  なお、分散方法は特に限定されず、前述のＷ／Ｏ型エマルションの形成と同様であり、前記Ｗ／Ｏ型エマルションを、多孔質膜を介して、分散媒である外水相に圧入分散させる膜乳化方法が好ましい。前記多孔質膜としては、前述と同様に多孔質ガラス膜が好ましく、その材質も前述と同様のものがあげられる。また、同様にシリンジ等を使用することもできる。【００４７】  前記多孔質膜の孔径は、特に制限されないが、前述のようなＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子（油相粒子）の所望の粒径に応じて適宜決定できる。また、単分散エマルジョンを形成するために、孔径が均一でムラのない細孔を有する多孔質膜が好ましい。前記多孔質膜の孔径（Ｄｍ２）と形成する油相粒子の粒径（Ｄｐ２）との関係は、特に制限されないが、例えば、Ｄｐ２／Ｄｍ２＝約３〜４が好ましい。このような多孔質膜を使用することによって、種々の粒径の油相粒子を形成できるが、例えば、粒径１０μｍ〜１２０μｍ（好ましくは１０〜８０μｍ）程度の粒子の形成に適している。また、内水相を含む油相を外水相に通過させることから、親水性の多孔質膜であることが好ましい。【００４８】  本発明の中性子捕捉製剤において、内水相と外水相の浸透圧は、中性子捕捉製剤の機能、各相の体積比等に影響を与えるため、例えば、浸透圧の設定により以下のようにＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子の粒径や充填率をコントロールすることもできる。なお、充填率とは、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションにおいてＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子が占める割合（割合）をいう。【００４９】  （１）��水相と外水相の浸透圧を、生理食塩水の浸透圧と等しくなるように調整した場合、例えば、体内への動注後も、粒径を実質的に維持することができる。この場合、内水相と油相の体積比は、例えば、１：９〜１：０．５程度であり、内水相と外水相の体積比は、例えば、１：１０〜１：２程度であり、充填率は、例えば、６０容積％以下である。【００５０】  （２）内水相と外水相の浸透圧を等しく、且つ、それらの浸透圧を生理食塩水の浸透圧を超える値に調整した場合、体内への動注後、例えば、外水相は血液で置換され、内水相との間に浸透圧差が生ずるため、浸透圧が等しくなるように血液中の水が内水相に移動する。このため、血管中でＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子を膨張させることができる。【００５１】  （３）外水相に対して内水相の浸透圧が高い条件下で膜乳化を行った場合、浸透圧差により、外水相から内水相に水が移動するため、油相および外水相に対する内水相の体積比が増加し、充填率の高いＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子が得られる。【００５２】  なお、水の移動が停止した時点で内水相と外水相の浸透圧が生理食塩水の浸透圧と等しくなるように調整すれば、動注後もＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子の粒径は変化しない。一方、水の移動が停止した時に、内水相と外水相の浸透圧が生理食塩水の浸透圧よりも高くなるように設計した場合には、動注後に血管の中でＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子が膨張する。【００５３】  また、このような挙動（例えば、前記（３））を利用して以下に示すようにしてＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを形成することもできる。【００５４】  通常、膜乳化法で単分散Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションを形成する場合、例えば、外水相を十分に循環させることによって、生成したＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子を多孔質ガラス膜の膜面から離脱させることが望ましい。そして、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションの膜面からの離脱は、例えば、充填率が相対的に低いことが好ましい。一方、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションからなる中性子捕捉製剤は、より優れた沈着性を実現するには、充填率が相対的に高いことが好ましい。したがって、この製造時の目的と製造物の効果の両方を満たすために、例えば、予め、相対的に低い充填率（例えば、６０容積％以下）のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを形成し、エマルション形成後に、浸透圧差を利用して、外水相の水を内水相に移動させ、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子を膨張させることによって、相対的に高い充填率（例えば、６０容積％以上、好ましくは充填率６０〜８０容積％）に変化させることが好ましい。【００５５】  つぎに、本発明のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションからなる中性子捕捉製剤は、ボロン化合物を用いた中性子捕捉療法に使用できる。前述のように、従来の中性子捕捉療法では、腫瘍組織（腫瘍細胞）にボロン化合物を十分に集積させることが困難であったため、例えば、熱中性子線の照射により発生するα粒子や反跳リチウム原子核が正常細胞や正常組織をも攻撃するという問題があった。このため、中性子捕捉療法は、腫瘍細胞や腫瘍組織を破壊できるにも関わらず、正常細胞等への影響から、適用部位や適用患者が限られていた。しかしながら、本発明のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションからなる中性子捕捉製剤によれば、対象となる腫瘍組織や腫瘍細胞に選択的にボロン化合物を集積、沈着できるため、従来法に比べて、正常細胞等への影響を回避しつつ、目的の腫瘍組織や腫瘍細胞を破壊することができる。このように正常細胞等への影響を回避できることからも、本発明の中性子捕捉製剤を用いれば、中性子捕捉療法を適用できる対象範囲を拡大できる。このため、本発明の中性子捕捉製剤を用いれば、特に制限されないが、例えば、血管に富む（ｈｙｐｅｒｖａｓｃｕｌａｒ）腫瘍（肝腫瘍、脳腫瘍、卵巣腫瘍、乳癌、腎臓癌等）にも適用でき、特に集積性、沈着性に優れることから、肝腫瘍の治療に有用といえる。【００５６】  本発明の中性子捕捉製剤の体内への投与方法は特に制限されず、例えば、粘膜下の局所投与や、動脈内への投与があげられる。中でも、経動脈的にカテーテルを挿入し、このカテーテルを介して目的物質（本発明の中性子捕捉製剤）を標的臓器に投与する動注法によって、患部に直接投与することが好ましい。標的臓器が肝臓の場合には、例えば、右大腿動脈から分岐した肝動脈を投与経路としてもよい。【００５７】  また、本発明の中性子捕捉製剤の投与形態も特に制限されず、本発明におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションをそのまま投与してもよいし、他の補液（例えば、ブドウ糖、アミノ酸等）とともに投与してもよい。また、本発明の中性子捕捉製剤の投与量は、特に制限されず、例えば、中性子捕捉製剤に含まれるボロン化合物の種類や量（ボロンの量）、腫瘍組織の部位や大きさ、患者の年齢や性別等に応じて適宜決定できる。一般的に、腫瘍細胞１ｇあたりのボロンの割合は、例えば、１０〜３０μｇ／ｇ（ｗｅｔ）の範囲であり、好ましくは１５〜３０μｇ／ｇ（ｗｅｔ）の範囲である。【００５８】  また、熱中性子・熱外中性子の照射方法等も何ら制限されず、従来公知の方法や条件に基づいて適宜決定できる。
【実施例１】
【００５９】  ボロ化合物を包含するＷ／Ｏ／Ｗ型エマルジョンを作製した。【００６０】  （実施例１−１）
中性子捕捉剤であるＢＳＨ（ＫＡＴＣＨＥＭ社製）５２５ｍｇをラクトース（商品名ラクトース−水和物、２０％、ナカライテスク社製）３ｍｌに溶解し、この溶液を内水相材料とした。また、ヨード化油（商品名リピオドール）４．５ｍｌに、酸化エチレン付加（４０モル）のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（商品名ＨＣＯ４０、日光ケミカルズ社製）０．５ｍｌを添加したものを、油相材料とした。そして、０．４重量％ＮａＣｌ  ７．５ｍｌに酸化エチレン付加（６０モル）のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（商品名ＨＣＯ６０、日光ケミカル社製）０．５ｍｌを添加したものを、外水相材料とした。【００６１】  まず、細孔径５μｍの疎水性多孔質ガラス膜（以下、「第１の多孔質膜」という）を通して、前記内水相材料を前記油相材料中に分散させてＷ／Ｏ型エマルションを形成した。さらに、得られたＷ／Ｏ型エマルションを細孔径２０μｍの親水性多孔質ガラス膜（以下、「第２の多孔質膜」という）を通して前記外水相材料中に分散させ、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションを形成した。なお、前記多孔質ガラス膜としては、ＳＰＧテクノ株式会社の商品名ＳＰＧフィルターキットを使用した。【００６２】  （実施例１−２）
実施例１−１と同様に、第１の多孔質膜（細孔径５μｍ）を通して、前記油相材料中に内水相材料を分散させて、Ｗ／Ｏ型エマルションを形成した。そして、第２の多孔質膜に代えてシリンジを使用し、得られたＷ／Ｏ型エマルションを外水相材料に滴下して、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションを形成した。なお、シリンジ先端の直径は約５００μｍ（２２ゲージ）であり、３００μｍ／１ｄｒｏｐの条件下、スターラーで外水相材料を攪拌しながら、Ｗ／Ｏ型エマルションを滴下した。これらの条件以外は、実施例１と同様にしてＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを形成した。【００６３】  （比較例１）
実施例１と同じ内水相材料と、ヨード化油（商品名リピオドール）５ｍｌとをポンピング法によって混合した後、さらに、この混合物を０．４重量％ＮａＣｌ  ８ｍｌ中に添加し、同様にポンピング法により混合してエマルション（リピオドール−ボロンミックスエマルション、以下「Ｌｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルション」ともいう）を得た。【００６４】  得られた実施例のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションについて、レーザー回折／散乱式粒度分布計（商品名ＳＡＬＤ−２０００、島津製作所製）を用いて粒径分布の測定を行った。この結果を図２のグラフに示す。図２において（ａ）は実施例１−１、（ｂ）は実施例１−２のエマルションの粒径分布（Ｙ軸：相対粒子量（ｑ３／Δｌｏｇｘ）、Ｘ軸：粒子径μｍ）をそれぞれ示す。また、実施例のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの写真を図３に示し、比較例のＬｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルションの写真を図４に示す。なお、図３において、（ａ）は実施例１−１、（ｂ）は実施例１−２の写真である。【００６５】  実施例１−１のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションは、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子の平均粒径が、約３３．５μｍであり、平均粒径の７５％〜１５０％の粒径（約２５〜５０．２５μｍ）である粒子がしめる割合が、全粒子の約８８．９％であった。また、実施例１−２のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションは、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション粒子の平均粒径が約３２１．４μｍであり、平均粒径１８８．９μｍ〜５３５．３μｍの粒子がしめる割合が、全粒子の約９９．３％であり、平均粒径の７５％〜１５０％の粒径（約２４１〜４８２．１μｍ）である粒子がしめる割合が、全粒子の約７５．５％であった。図２のグラフおよび図３ならびに図４の結果から、比較例では均一なエマルションが得られなかったのに対して、実施例１−１および１−２では、極めて優れた均一性のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションが得られたことがわかる。なお、実施例１−１のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションについては、４℃で保存した結果、調製から約１ヶ月後においても粒径の均一性は維持された。
【実施例２】
【００６６】  実施例１で作製したＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションについて、肝腫瘍への沈着を確認した。【００６７】  （肝腫瘍モデルの作製）
１２週齢の日本白ウサギ（雌、２．５〜３ｋｇ）を正中開腹し、肝左葉に腫瘍細胞（ＶＸ−２ウサギ扁平上皮癌細胞）を直接注入した。腫瘍細胞の移植後、１０〜１４日で径１０ｍｍの肝腫瘍が形成された。【００６８】  （Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションの動注）
肝腫瘍を発現した前述のウサギを正中開腹し、固有肝動脈を同定露出した後、胃十二指腸動脈を半切開してエラスターチューブを挿入した。そして、前記チューブを通して、実施例１のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルション（４ｍｌ）を注入した（ＢＳＨ７５ｍｇ／ｋｇ）。総肝動脈は、エマルション動注の間クリッピングした。【００６９】  （ボロン濃度の測定）
エマルションの動注から２４時間後にウサギを犠牲死させ、肝腫瘍と血液とを採取し、これらのボロン濃度を測定した。ボロン濃度の測定は、定法に基づいて、ＩＣＰ−ＭＡＳ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙによって行った。なお、比較例１のＬｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルションについても同様に試験を行い、エマルション無添加のものをコントロールとした。肝腫瘍のボロン濃度の結果を表１に、血液のボロン濃度の結果を表２に示す。【００７０】
【表１】
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【００７１】
【表２】
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【００７２】  前記表１（肝腫瘍）に示すように、比較例のエマルションは、投与２４時間後にはボロン濃度が極めて低下しているのに対して、実施例のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションであれば、投与２４時間後であっても、肝腫瘍に選択的にボロン化合物が集積していることがわかる。また、前記表２（血液）に示すように、いずれも血液中のボロン濃度が低いことから、実施例のエマルションであれば、ボロン化合物が血液に滞留することなく、肝腫瘍に集積していることが明らかである。このように、本発明のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションからなる中性子捕捉製剤によれば、目的の腫瘍組織にボロンを集積できるため、極めて効率よく腫瘍組織のみの破壊を実現することが可能となる。
【実施例３】
【００７３】  実施例１−１のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションと実施例１−２のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを使用して、実施例２と同様に１日後、３日後、７日後における肝腫瘍へのＢＳＨの沈着を確認した（実施例３−１、３−２）。また、比較例としては、比較例１のＬｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルション（比較例３−１）、および、実施例１で調製したボロン溶液（前記内水相材料）（比較例３−２）を使用した。【００７４】  （１）エマルション動注後におけるボロン濃度の経時的変化
実施例１−１のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの動注から１日後、３日後、７日後における腫瘍組織内、正常組織内および血中のＢＳＨ濃度を、ＩＣＰ−ＭＡＳ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙにより測定した（実施例３−１）。これらの結果を下記表３に示す。【００７５】
【表３】
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【００７６】  前記表３に示すように、比較例と比べて、実施例３−１によれば腫瘍組織内におけるボロン濃度を７日後においても十分に留めておくことができた。具体的には、７日後において、比較例３−１の腫瘍組織内のＢＳＨ濃度は９．０に減少しているが、実施例３−１は約３．２倍の濃度を示した。さらに、正常組織において、実施例３−１は、比較例３−１よりも組織内のＢＳＨ濃度を１／４に低減することができた。この結果から、実施例のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションによれば、ＢＳＨを効率良く腫瘍組織内に集積・沈着することが可能であり、また、正常組織内への集積や沈着を抑制して正常組織への影響も低減できる。【００７７】  （２）軟線撮影によるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの集積の確認
動注から１日後、３日後、７日後における腫瘍組織および正常組織について軟線撮影を行い、各組織におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの集積を確認した。比較例３−１についても同様に確認を行った。この結果を、図５に示す。図５は、軟線撮影の結果を示す画像写真であり、同図において「Ｗ／Ｏ／Ｗ  ｅｍｕｌｓｉｏｎ」は、実施例３−１のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを示し、「Ｌｉｐｉｏｄｏｌ  ｍｉｘ」は、比較例３−１のＬｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルションを示し、「ｄａｙ」は、それぞれ動注後の日数を示す（他の図面においても同様）。【００７８】  軟線撮影によれば、組織におけるリピドオールの残存を確認することができる。図５に示すように、実施例のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを投与した組織は、動注から７日後においてもＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションに含まれるリピオドールの沈着が確認された。したがって、前記（１）におけるＩＣＰ−ＭＡＳ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙによるＢＳＨ濃度のデータを照らし合わせて、実施例のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションのみが腫瘍組織への集積を顕著に示しているといえる。【００７９】  （３）光学顕微鏡観察によるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの集積の確認
動注から１日後、３日後、７日後における腫瘍組織および正常組織について軟線撮影を行い、各組織におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの集積を確認した。比較例３−１についても同様に確認を行った。実施例３−１の結果を図６、比較例３−１の結果を図７に示す。両図は、光学顕微鏡による画像写真である。両図において「×数値」は顕微鏡の倍率を示す（他の図においても同様）。【００８０】  両図に示すように、実施例および比較例のいずれのエマルションについても集積が確認された。しかしながら、比較例は、図７に示すように、非常に径が大きな油滴の集積であり、また、サイズも不ぞろいであった。これに対して、実施例のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションは、サイズが小さく均一な油滴が血管に富む腫瘍周囲に集積していることが確認できた。【００８１】  （４）電子顕微鏡観察によるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの集積の確認
動注（４ｍｌ）から１日後における腫瘍組織および正常組織について電子顕微鏡観察を行い、各組織におけるＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションの集積を確認した。比較例３−１のＬｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルション、および、比較例３−２のボロン溶液についても同様に確認を行った。実施例３−１の結果を図８（ａ）、比較例３−１の結果を図８（ｂ）、比較例３−２の結果を図９に示す。これらの図は、電子顕微鏡写真であり、図９において、「ＢＳＨ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ」は、比較例３−２のボロン溶液を示す。【００８２】  また、図１０に、実施例のＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションまたは比較例３−１のＬｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルションを使用した、動注１日、３日、７日後における肝腫瘍細胞の電子顕微鏡写真を示す。【００８３】  図８（ａ）に示すように、実施例のエマルションを動注した結果、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルションの構成成分であるリピドール油滴と思われる胞が確認された。これに対して比較例３−１および３−２では、このような胞の形成は観察できなかった（図８（ｂ）、図９）。また、実施例のエマルションによれば、７日後においてもリピオドールの取り込みが確認され、また、その集積は、Ｌｉｐｉｏｄｏｌミックスエマルションを動注した比較例３−１と比較して、腫瘍細胞周囲へ集積する傾向にあった。
【産業上の利用可能性】
【００８４】  以上のように、本発明の中性子捕捉製剤によれば、エマルション内に、流出することなくボロン化合物を包含させ、効率よく腫瘍細胞へのボロン化合物の集積ならびに沈着を行うことが可能である。このため、例えば、血液を介して中性子捕捉製剤を投与した場合であっても、他の組織や正常組織への影響が軽減される。したがって、今まで中性子捕捉療法が適用されていなかった腫瘍組織に対しても、本発明の中性子捕捉製剤を用いることによって適用が可能になったといえる。特に肝ガンは、治療方法の選択が困難であったことからも、優れた治療効果を奏する中性子捕捉療法を、本発明によって実現可能となったことは、臨床医療において極めて有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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