【手続補正書】
【提出日】令和1年10月25日(2019.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
シグナルペプチドと、重鎖可変（ＶＨ）領域及び軽鎖可変（ＶＬ）領域を有する抗原結合ドメインと、ペプチドスペーサーと、膜貫通ドメインと、エンドドメインとを含むポリペプチドであって、
（ａ）前記抗原結合ドメインがＴＧＦ−βに特異的に結合する、または
（ｂ）前記ＶＨ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５（ＨＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６（ＨＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７（ＨＣＤＲ３）とを含み、前記ＶＬ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８（ＬＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９（ＬＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０（ＬＣＤＲ３）とを含む、または
（ｃ）前記ＶＨ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１（ＨＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２（ＨＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３（ＨＣＤＲ３）とを含み、前記ＶＬ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４（ＬＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５（ＬＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６（ＬＣＤＲ３）とを含む、または
（ｄ）前記ＶＨ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１（ＨＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２（ＨＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３（ＨＣＤＲ３）とを含み、前記ＶＬ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４（ＬＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５（ＬＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６（ＬＣＤＲ３）とを含む、
前記ポリペプチド。
【請求項２】
前記ＶＨ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５（ＨＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６（ＨＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７（ＨＣＤＲ３）とを含み、前記ＶＬ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８（ＬＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９（ＬＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０（ＬＣＤＲ３）とを含み、かつ前記ＶＨ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１を含み、前記ＶＬ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
前記ＶＨ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１（ＨＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２（ＨＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３（ＨＣＤＲ３）とを含み、前記ＶＬ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４（ＬＣＤＲ１）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５（ＬＣＤＲ２）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６（ＬＣＤＲ３）とを含み、かつ
（ａ）前記ＶＨ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３を含み、前記ＶＬ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４を含む、または
（ｂ）前記ＶＨ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９を含み、前記ＶＬ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０を含む、
請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
（ａ）ＶＨ領域とＶＬ領域とがペプチドリンカーもしくはグリシン−セリンリンカーによって分離されている、かつ／または
（ｂ）前記ポリペプチドが、Ｓ−Ｘ−ＰＬ−Ｙ−ＰＳ−Ｔ−ＥもしくはＳ−Ｙ−ＰＬ−Ｘ−ＳＰ−Ｔ−Ｅという構造を有し、Ｓは前記シグナルペプチドであり、ＸはＶＨであり、ＰＬはペプチドリンカーもしくはグリシン−セリンリンカーであり、ＹはＶＬであり、ＰＳは前記ペプチドスペーサーであり、Ｔは前記膜貫通ドメインであり、及びＥは前記エンドドメインである、かつ／または
（ｃ）前記ポリペプチドが共刺激領域をさらに含む、かつ／または
（ｄ）前記ポリペプチドが共刺激領域をさらに含み、前記共刺激領域が、前記膜貫通ドメインとエンドドメインの間にある、かつ／または
（ｅ）前記膜貫通ドメインがＣＤ２８の膜貫通ドメインを含む、かつ／または
（ｆ）前記エンドドメインがＣＤ２８シグナル伝達ドメインもしくはＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む、
請求項１〜３のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項５】
前記ペプチドリンカーまたはグリシン−セリンリンカーが少なくとも４個のアミノ酸である、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項６】
（ａ）前記エンドドメインがＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインである、かつ／または
（ｂ）前記ペプチドスペーサーが、（ｉ）５０個未満のアミノ酸、もしくは（ｉｉ）５０個超のアミノ酸を含む、かつ／または
（ｃ）前記ペプチドスペーサーがＩｇＧ分子のヒンジ領域を含む、かつ／または
（ｄ）前記ペプチドスペーサーがＩｇＧ分子のヒンジ領域とＣＨ２ＣＨ３領域とを含む、かつ／または
（ｅ）前記ペプチドスペーサーがＩｇＧ分子のヒンジ領域からなる、かつ／または
（ｆ）前記ポリペプチドが検出ペプチドをさらに含む、かつ／または
（ｇ）前記ポリペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、９４、もしくは９５のペプチドである検出ペプチドをさらに含む、かつ／または
（ｈ）前記ポリペプチドが検出ペプチドをさらに含み、かつ前記検出ペプチドが、（ｉ）リンカーと隣接している、かつ／もしくは（ｉｉ）ＶＨ領域及びＶＬ領域に対してＮ末端である、かつ／もしくは（ｉｉｉ）前記シグナルペプチドと前記抗原結合ドメインの間にある、
請求項１〜５のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項７】
（ａ）前記シグナルペプチドがＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８を含む、かつ／または
（ｂ）前記ポリペプチドが、癌分子特異的抗原結合ドメインをさらに含む、かつ／または
（ｃ）前記ポリペプチドが、癌分子特異的抗原結合ドメインをさらに含み、前記癌分子がＨｅｒ２を含む、もしくはＣＤ１９もしくはＣＤ２０を含む、
請求項１〜６のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項８】
前記抗原結合ドメインが可溶性ＴＧＦ−βに特異的に結合する、請求項１〜７のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードする単離された核酸。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれか１項に記載のポリペプチドまたは請求項９に記載の核酸を含む、細胞。
【請求項１１】
（Ａ）癌特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）もしくはＨｅｒ２に特異的に結合する癌特異的ＣＡＲをさらに含む、かつ／または
（Ｂ）エクスビボにある、
請求項１０に記載の細胞。
【請求項１２】
（Ａ）ＣＤ１９もしくはＣＤ２０に特異的に結合する癌特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む、かつ／または
（Ｂ）ＣＤ１９もしくはＣＤ２０に特異的に結合する癌特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含み、免疫細胞、Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞である、かつ／または
（Ｃ）エクスビボにある、
請求項１０に記載の細胞。
【請求項１３】
請求項１０に記載の細胞を含む、免疫応答を刺激するための医薬組成物であって、前記細胞をＴＧＦ−βと接触させることによって、免疫応答が刺激される、前記医薬組成物。
【請求項１４】
（ａ）
（ｉ）免疫応答を刺激することが、免疫刺激サイトカイン及び／もしくは免疫刺激分子の発現及び／もしくは分泌を増加させることを含む、
（ｉｉ）免疫応答を刺激することが、免疫刺激サイトカイン及び／もしくは免疫刺激分子の発現及び／もしくは分泌を増加させることを含み、前記免疫刺激サイトカイン及び／もしくは免疫刺激分子が、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、及び顆粒球マクロファージコロニー刺激因子のうちの１つもしくは複数である、
（ｉｉｉ）免疫応答を刺激することが、免疫細胞の増殖を増加させることを含む、
（ｉｖ）免疫応答を刺激することが、Ｔ細胞である免疫細胞の増殖を増加させることを含む、もしくは
（ｖ）免疫応答を刺激することが、Ｔ細胞である免疫細胞の増殖を増加させることを含み、かつ前記医薬組成物が、ＴＧＦ−βと組み合わせて使用される、かつ／または
（ｂ）前記細胞が、免疫刺激を必要とする対象のインビボにある、かつ／または
（ｃ）前記細胞が、免疫刺激を必要とする対象のインビボにあり、かつ前記ＴＧＦ−βが、免疫刺激を必要とする前記対象において産生される内因性ＴＧＦ−βである、かつ／または
（ｄ）前記ヒト対象が、癌、線維症、開放創、黒色腫、Ｂ細胞悪性腫瘍、もしくは固体腫瘍を有する、
請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
溶液中でＴＧＦ−βを検出するための方法であって、請求項１０に記載の細胞を前記溶液に接触させることと、免疫刺激を測定することとを含み、免疫刺激の増加はＴＧＦ−βが存在することを示し、免疫刺激の増加がないことはＴＧＦ−βが存在しないことを示す、前記方法。
【請求項１６】
（ａ）免疫刺激が、
（ｉ）免疫刺激サイトカイン及び／もしくは免疫刺激分子の発現を含む、
（ｉｉ）ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、及び顆粒球マクロファージコロニー刺激因子のうちの１つもしくは複数の発現を含む、
（ｉｉｉ）免疫細胞の増殖の増加を含む、もしくは
（ｉｖ）Ｔ細胞の増殖の増加を含む、かつ／または
（ｂ）前記細胞が、エクスビボにある、
請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１〜８のいずれか１項に記載のポリペプチドを作製するための方法であって、前記ポリペプチドをコードするヌクレオチドを細胞内で発現させることを含む、前記方法。
【請求項１８】
Ｔ細胞をインビトロで増殖させるための方法であって、請求項１２に記載のインビトロのＴ細胞を、ＴＧＦ−βを含む組成物と接触させることを含む、前記方法。
【請求項１９】
（Ａ）前記組成物が、
（ａ）１〜５０ｎｇ／ｍＬのＴＧＦ−βを含む、かつ／もしくは
（ｂ）ＩＬ−２を含む、かつ／もしくは
（ｃ）２０〜４００Ｕ／ｍＬのＩＬ−２を含む、かつ／または
（Ｂ）前記方法が、（ｉ）前記細胞をフィーダー細胞と接触させることをさらに含む、もしくは前記細胞を放射線照射されているフィーダー細胞と接触させることをさらに含む、もしくは（ｉｉ）前記Ｔ細胞とフィーダー細胞との接触を除いている、かつ／または
（Ｃ）前記Ｔ細胞が制御性Ｔ細胞である、もしくは前記Ｔ細胞が制御性Ｔ細胞であり、前記増殖した制御性Ｔ細胞が１０％未満の非制御性Ｔ細胞を含む、
請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１２に記載の細胞を含む、患者における疾患または病的状態を治療するための医薬組成物。
【請求項２１】
（Ａ）前記細胞が制御性Ｔ細胞である、前記細胞が制御性Ｔ細胞でありかつ前記疾患が自己免疫疾患である、前記細胞が制御性Ｔ細胞でありかつ前記疾患が関節リウマチである自己免疫疾患である、もしくは前記疾患が癌である、かつ／または
（Ｂ）前記細胞が、
（ａ）インビトロの前記細胞とＴＧＦ−βを含む組成物とを接触させることを含む方法によってインビトロで増殖する、もしくは
（ｂ）インビトロの前記細胞とＴＧＦ−βを含む組成物とを接触させることを含む方法によってインビトロで増殖し、かつ
（ｉ）前記組成物が１〜５０ｎｇ／ｍＬのＴＧＦ−βを含む、かつ／もしくは
（ｉｉ）前記組成物がＩＬ−２をさらに含む、かつ／もしくは
（ｉｉｉ）前記組成物が２０〜４００Ｕ／ｍＬのＩＬ−２を含む、かつ／もしくは
（ｉｖ）前記細胞をフィーダー細胞と接触させることを含む、もしくは前記細胞を放射線照射されているフィーダー細胞と接触させることを含む、もしくは前記細胞がフィーダー細胞と接触していない、かつ／もしくは
（ｖ）前記Ｔ細胞が制御性Ｔ細胞である、もしくは前記Ｔ細胞が制御性Ｔ細胞であり、前記増殖した制御性Ｔ細胞が、１０％未満の非制御性Ｔ細胞を含む、かつ／または
（Ｃ）前記医薬組成物がＴＧＦ−βと組み合わせて使用される、
請求項２０に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４１】
[本発明1001]
シグナルペプチドと、重鎖可変（ＶＨ）領域及び軽鎖可変（ＶＬ）領域を有する抗原結合ドメインと、ペプチドスペーサーと、膜貫通ドメインと、エンドドメインとを含むポリペプチドであって、前記抗原結合ドメインがＴＧＦ−βに特異的に結合する、前記ポリペプチド。
[本発明1002]
シグナルペプチドと、重鎖可変（ＶＨ）領域及び軽鎖可変（ＶＬ）領域を有する抗原結合ドメインと、ペプチドスペーサーと、膜貫通ドメインと、エンドドメインとを含むポリペプチドであって、前記ＶＨ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：5（ＨＣＤＲ1）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：6（ＨＣＤＲ2）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：7（ＨＣＤＲ3）とを含み、前記ＶＬ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：8（ＬＣＤＲ1）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：9（ＬＣＤＲ2）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：10（ＬＣＤＲ3）とを含む、前記ポリペプチド。
[本発明1003]
前記ＶＨ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1を含み、前記ＶＬ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：2を含む、本発明1002のポリペプチド。
[本発明1004]
シグナルペプチドと、ＶＨ領域及びＶＬ領域を有する抗原結合ドメインと、ペプチドスペーサーと、膜貫通ドメインと、エンドドメインとを含むポリペプチドであって、前記ＶＨ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：11（ＨＣＤＲ1）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：12（ＨＣＤＲ2）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：13（ＨＣＤＲ3）とを含み、前記ＶＬ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：14（ＬＣＤＲ1）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：15（ＬＣＤＲ2）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：16（ＬＣＤＲ3）とを含む、前記ポリペプチド。
[本発明1005]
前記ＶＨ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：3を含み、前記ＶＬ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：4を含む、本発明1004のポリペプチド。
[本発明1006]
シグナルペプチドと、ＶＨ領域及びＶＬ領域を有する抗原結合ドメインと、ペプチドスペーサーと、膜貫通ドメインと、エンドドメインとを含むポリペプチドであって、前記ＶＨ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：21（ＨＣＤＲ1）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：22（ＨＣＤＲ2）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：23（ＨＣＤＲ3）とを含み、前記ＶＬ領域が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：24（ＬＣＤＲ1）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：25（ＬＣＤＲ2）と、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：26（ＬＣＤＲ3）とを含む、前記ポリペプチド。
[本発明1007]
前記ＶＨ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：19を含み、前記ＶＬ領域がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：20を含む、本発明1004のポリペプチド。
[本発明1008]
ＶＨ領域とＶＬ領域とがペプチドリンカーによって分離されている、本発明1001〜1007のいずれかのポリペプチド。
[本発明1009]
前記ポリペプチドが、Ｓ−Ｘ−ＰＬ−Ｙ−ＰＳ−Ｔ−ＥまたはＳ−Ｙ−ＰＬ−Ｘ−ＳＰ−Ｔ−Ｅという構造を有し、Ｓは前記シグナルペプチドであり、ＸはＶＨであり、ＰＬはペプチドリンカーであり、ＹはＶＬであり、ＰＳは前記ペプチドスペーサーであり、Ｔは前記膜貫通ドメインであり、及びＥは前記エンドドメインである、本発明1001〜1008のいずれかのポリペプチド。
[本発明1010]
共刺激領域をさらに含む、本発明1001〜1009のいずれかのポリペプチド。
[本発明1011]
前記共刺激領域が、前記膜貫通ドメインとエンドドメインの間にある、本発明1010のポリペプチド。
[本発明1012]
前記膜貫通ドメインがＣＤ28の膜貫通ドメインを含む、本発明1001〜1011のいずれかのポリペプチド。
[本発明1013]
前記エンドドメインがＣＤ28シグナル伝達ドメインまたはＣＤ3ゼータシグナル伝達ドメインを含む、本発明1001〜1012のいずれかのポリペプチド。
[本発明1014]
前記ペプチドリンカーがグリシン−セリンリンカーである、本発明1008〜1013のいずれかのポリペプチド。
[本発明1015]
前記ペプチドリンカーが少なくとも4個のアミノ酸である、本発明1003〜1014のいずれかのポリペプチド。
[本発明1016]
前記エンドドメインがＣＤ3ゼータシグナル伝達ドメインである、本発明1001〜1015のいずれかのポリペプチド。
[本発明1017]
前記ペプチドスペーサーが50個未満のアミノ酸を含む、本発明1001〜1016のいずれかのポリペプチド。
[本発明1018]
前記ペプチドスペーサーが50個超のアミノ酸を含む、本発明1001〜1016のいずれかのポリペプチド。
[本発明1019]
前記ペプチドスペーサーがＩｇＧ分子のヒンジ領域を含む、本発明1001〜1018のいずれかのポリペプチド。
[本発明1020]
前記ペプチドスペーサーがＩｇＧ分子のヒンジ領域とＣＨ2ＣＨ3領域とを含む、本発明1001〜1019のいずれかのポリペプチド。
[本発明1021]
前記ペプチドスペーサーがＩｇＧ分子のヒンジ領域からなる、本発明1019のポリペプチド。
[本発明1022]
検出ペプチドをさらに含む、本発明1001〜1021のいずれかのポリペプチド。
[本発明1023]
前記検出ペプチドがＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：17、94、または95のペプチドである、本発明1022のポリペプチド。
[本発明1024]
前記検出ペプチドがリンカーと隣接している、本発明1022または1023のポリペプチド。
[本発明1025]
前記検出ペプチドがＶＨ領域及びＶＬ領域に対してＮ末端である、本発明1022〜1024のいずれかのポリペプチド。
[本発明1026]
前記検出ペプチドが前記シグナルペプチドと前記抗原結合ドメインの間にある、本発明1022〜1025のいずれかのポリペプチド。
[本発明1027]
前記シグナルペプチドがＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：18を含む、本発明1001〜1026のいずれかのポリペプチド。
[本発明1028]
癌分子特異的抗原結合ドメインをさらに含む、本発明1001〜1027のいずれかのポリペプチド。
[本発明1029]
前記癌分子がＨｅｒ2を含む、本発明1028のポリペプチド。
[本発明1030]
前記癌分子がＣＤ19またはＣＤ20を含む、本発明1028のポリペプチド。
[本発明1031]
前記抗原結合ドメインが可溶性ＴＧＦ−βに特異的に結合する、本発明1002〜1030のいずれかのポリペプチド。
[本発明1032]
本発明1001〜1031のいずれかのポリペプチドをコードする単離された核酸。
[本発明1033]
本発明1001〜1031のいずれかのポリペプチドまたは本発明1032の核酸を含む、細胞。
[本発明1034]
癌特異的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をさらに含む、本発明1033の細胞。
[本発明1035]
前記癌特異的ＣＡＲがＨｅｒ2に特異的に結合する、本発明1034のポリペプチド。
[本発明1036]
前記癌特異的ＣＡＲがＣＤ19またはＣＤ20に特異的に結合する、本発明1034のポリペプチド。
[本発明1037]
免疫細胞である、本発明1036の細胞。
[本発明1038]
Ｔ細胞である、本発明1037の細胞。
[本発明1039]
ＣＤ4＋Ｔ細胞またはＣＤ8＋Ｔ細胞である、本発明1038の細胞。
[本発明1040]
ナチュラルキラー細胞である、本発明1037の細胞。
[本発明1041]
前記Ｔ細胞が制御性Ｔ細胞である、本発明1038の細胞。
[本発明1042]
エクスビボにある、本発明1033〜1040のいずれかの細胞。
[本発明1043]
本発明1033〜1042のいずれかの細胞をＴＧＦ−βと接触させることを含む、免疫応答を刺激するための方法。
[本発明1044]
免疫応答を刺激することが、免疫刺激サイトカイン及び／または免疫刺激分子の発現及び／または分泌を増加させることを含む、本発明1043の方法。
[本発明1045]
前記免疫刺激サイトカイン及び／または免疫刺激分子が、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−1、ＩＬ−2、ＩＬ−4、ＩＬ−6、ＩＬ−8、ＩＬ−10、ＩＬ−12、ＩＬ−18、及び顆粒球マクロファージコロニー刺激因子のうちの1つまたは複数である、本発明1044の方法。
[本発明1046]
免疫応答を刺激することが、免疫細胞の増殖を増加させることを含む、本発明1043の方法。
[本発明1047]
前記免疫細胞がＴ細胞である、本発明1046の方法。
[本発明1048]
前記細胞が、免疫刺激を必要とする対象のインビボにある、本発明1043〜1047のいずれかの方法。
[本発明1049]
前記ＴＧＦ−βが、免疫刺激を必要とする前記対象において産生される内因性ＴＧＦ−βである、本発明1048の方法。
[本発明1050]
前記ヒト対象が、癌、線維症、または開放創を有する、本発明1049の方法。
[本発明1051]
前記癌が黒色腫である、本発明1050の方法。
[本発明1052]
前記ヒト対象がＢ細胞悪性腫瘍を有する、本発明1049の方法。
[本発明1053]
前記ヒト対象が固体腫瘍を有する、本発明1049の方法。
[本発明1054]
前記細胞をヒト対象に投与することをさらに含む、本発明1043〜1053のいずれかの方法。
[本発明1055]
ＴＧＦ−βを前記対象に投与することをさらに含む、本発明1047〜1054のいずれかの方法。
[本発明1056]
溶液中でＴＧＦ−βを検出するための方法であって、本発明1033〜1042のいずれかの細胞を前記溶液に接触させることと、免疫刺激を測定することとを含み、免疫刺激の増加はＴＧＦ−βが存在することを示し、免疫刺激の増加がないことはＴＧＦ−βが存在しないことを示す、前記方法。
[本発明1057]
免疫刺激が、免疫刺激サイトカイン及び／または免疫刺激分子の発現を含む、本発明1056の方法。
[本発明1058]
前記免疫刺激サイトカイン及び／または免疫刺激分子が、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−1、ＩＬ−2、ＩＬ−4、ＩＬ−6、ＩＬ−8、ＩＬ−10、ＩＬ−12、ＩＬ−18、及び顆粒球マクロファージコロニー刺激因子のうちの1つまたは複数である、本発明1057の方法。
[本発明1059]
免疫刺激が、免疫細胞の増殖の増加を含む、本発明1056の方法。
[本発明1060]
前記免疫細胞がＴ細胞である、本発明1059の方法。
[本発明1061]
前記細胞がエクスビボにある、本発明1056〜1060のいずれかの方法。
[本発明1062]
本発明1001〜1031のいずれかのポリペプチドを作製するための方法であって、前記ポリペプチドをコードするヌクレオチドを細胞内で発現させることを含む、前記方法。
[本発明1063]
Ｔ細胞をインビトロで増殖させるための方法であって、本発明1038〜1041のいずれかのインビトロのＴ細胞を、ＴＧＦ−βを含む組成物と接触させることを含む、前記方法。
[本発明1064]
前記組成物が1〜50ｎｇ／ｍＬのＴＧＦ−βを含む、本発明1063の方法。
[本発明1065]
前記組成物がＩＬ−2をさらに含む、本発明1063または1064の方法。
[本発明1066]
前記組成物が20〜400Ｕ／ｍＬのＩＬ−2を含む、本発明1065の方法。
[本発明1067]
前記細胞をフィーダー細胞と接触させることをさらに含む、本発明1063〜1066のいずれかの方法。
[本発明1068]
前記フィーダー細胞が放射線照射されている、本発明1067の方法。
[本発明1069]
前記Ｔ細胞とフィーダー細胞との接触が除かれている、本発明1063〜1066のいずれかの方法。
[本発明1070]
前記Ｔ細胞が制御性Ｔ細胞である、本発明1063〜1069のいずれかの方法。
[本発明1071]
前記増殖した制御性Ｔ細胞が、10％未満の非制御性Ｔ細胞を含む、本発明1070の方法。
[本発明1072]
患者における疾患または病的状態を治療するための方法であって、本発明1038〜1042のいずれかの細胞を前記患者に投与することを含む、前記方法。
[本発明1073]
前記細胞が制御性Ｔ細胞である、本発明1072の方法。
[本発明1074]
前記疾患が自己免疫疾患である、本発明1073の方法。
[本発明1075]
前記疾患が癌である、本発明1072の方法。
[本発明1076]
インビトロの前記細胞とＴＧＦ−βを含む組成物とを接触させることを含む方法によって前記細胞をインビトロで増殖させることをさらに含む、本発明1072〜1075のいずれかの方法。
[本発明1077]
前記組成物が1〜50ｎｇ／ｍＬのＴＧＦ−βを含む、本発明1076の方法。
[本発明1078]
前記組成物がＩＬ−2をさらに含む、本発明1076または1077の方法。
[本発明1079]
前記組成物が20〜400Ｕ／ｍＬのＩＬ−2を含む、本発明1078の方法。
[本発明1080]
前記細胞をフィーダー細胞と接触させることをさらに含む、本発明1076〜1079のいずれかの方法。
[本発明1081]
前記フィーダー細胞が放射線照射されている、本発明1080の方法。
[本発明1082]
前記Ｔ細胞とフィーダー細胞との接触が除かれている、本発明1076〜1079のいずれかの方法。
[本発明1083]
前記Ｔ細胞が制御性Ｔ細胞である、本発明1076〜1082のいずれかの方法。
[本発明1084]
前記増殖した制御性Ｔ細胞が、10％未満の非制御性Ｔ細胞を含む、本発明1083の方法。
[本発明1085]
前記自己免疫疾患が関節リウマチである、本発明1074または本発明1076〜1084のいずれかの方法。
[本発明1086]
前記患者へのＴＧＦ−βの投与をさらに含む、本発明1072〜1085のいずれかの方法。
本発明の他の目的、特徴及び利点は以下の詳細な記載から明らかになるであろう。しかしながら、本発明の趣旨及び範囲の範囲内にある種々の変更及び改変がこの詳細な記載から当業者に明らかになる以上、詳細な記載及び具体的な実施例は、本発明の好ましい実施形態を示しつつ説明目的のみで提供されることを理解すべきである。