【手続補正書】
【提出日】平成30年12月17日(2018.12.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
６〜２５個の連結ヌクレオチドから構成され、且つｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖と実質的に相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項２】
前記修飾オリゴヌクレオチドが８〜１５個の連結ヌクレオチドから構成される、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項３】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、前記アンチセンス鎖と少なくとも９０％の相補性を有する一本鎖オリゴヌクレオチドである、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項４】
前記修飾オリゴヌクレオチドが前記アンチセンス鎖のヌクレオチド２〜１６と実質的に相補的である、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項５】
前記修飾オリゴヌクレオチドが前記アンチセンス鎖と完全に相補的である、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項６】
前記修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも１つの修飾ヌクレオチド間結合を含む、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項７】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、少なくとも１つの修飾ヌクレオチド間結合と、少なくとも１つの非修飾ヌクレオチド間結合とを含む、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項８】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、３’末端ヌクレオチドと、最後から２番目のヌクレオシドとの間に非修飾ヌクレオチド間結合を含む、請求項７に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項９】
前記修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも１つの修飾核酸塩基を含む、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１０】
前記修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも１つの修飾糖を含む、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１１】
前記少なくとも１つの修飾糖が二環式糖である、請求項１０に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１２】
前記修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも１つのヌクレオチドを含み、フルナオシルの２’位が、−[Ｃ(Ｒ１)(Ｒ２)]ｎ−、−[Ｃ(Ｒ１)(Ｒ２)]ｎ−Ｏ−、−[Ｃ(Ｒ１)(Ｒ２)]ｎ−Ｎ(Ｒ１)−、−[Ｃ(Ｒ１)(Ｒ２)]ｎ−Ｎ(Ｒ１)−Ｏ−、−[Ｃ(Ｒ１Ｒ２)]ｎ−Ｏ−Ｎ(Ｒ１)−、−Ｃ(Ｒ１)＝Ｃ(Ｒ２)−Ｏ−、−Ｃ(Ｒ１)＝Ｎ−、−Ｃ(Ｒ１)＝Ｎ−Ｏ−、−Ｃ(＝ＮＲ１)−、−Ｃ(＝ＮＲ１)−Ｏ−、−Ｃ(＝Ｏ)−、−Ｃ(＝Ｏ)Ｏ−、−Ｃ(＝Ｓ)−、−Ｃ(＝Ｓ)Ｏ−、−Ｃ(＝Ｓ)Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓｉ(Ｒ１)２−、−Ｓ(＝Ｏ)Ｘ−及び−Ｎ(Ｒ１)−から独立に選択されるリンカーによって４’位に連結され、
式中、
ｘは、０、１、又は２であり；
ｎは、０、１、２、３、又は４であり；
各Ｒ１及びＲ２は、独立に、Ｈ、保護基、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換されたＣ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換されたＣ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換されたＣ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換されたＣ５〜Ｃ２０アリール、複素環式ラジカル、置換された複素環式ラジカル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、Ｃ５〜Ｃ７脂環式ラジカル、置換されたＣ５〜Ｃ７脂環式ラジカル、ハロゲン、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＣＯＯＪ１、アシル(Ｃ(＝Ｏ)−Ｈ)、置換されたアシル、ＣＮ、スルホニル(Ｓ(＝Ｏ)２−Ｊ１)、又はスルホキシル(Ｓ(＝Ｏ)−Ｊ１)であり；及び
各Ｊ１及びＪ２は、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換されたＣ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換されたＣ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換されたＣ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換されたＣ５〜Ｃ２０アリール、アシル(Ｃ(＝Ｏ)−Ｈ)、置換されたアシル、複素環式ラジカル、置換された複素環式ラジカル、Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、置換されたＣ１〜Ｃ１２アミノアルキル又は保護基である、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１３】
前記修飾オリゴヌクレオチドがリガンドと共役される、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１４】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、構造：
【化１】
2018504380.tif 000001
のリガンドと共役される、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１５】
前記修飾オリゴヌクレオチドがリガンドと共役され、及び前記リガンドが前記修飾オリゴヌクレオチドの３’−末端に共役される、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１６】
前記修飾オリゴヌクレオチドがリガンドと共役され、及び前記リガンドが、前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物中のデオキシ糖を有するヌクレオシドに共役される、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１７】
前記デオキシ糖が２’−デオキシリボースである、請求項１６に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１８】
前記ｓｉＲＮＡがｍＲＮＡ、ｐｒｅ−ｍＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｐｒｅ−マイクロＲＮＡにターゲティングされる、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項１９】
前記ｓｉＲＮＡがリガンドと共役される、請求項１に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
【請求項２０】
ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物を含むキット。
【請求項２１】
ｓｉＲＮＡとＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物とを含むキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６２８】
本明細書において好ましい態様を示し、詳細に説明してきたが、当業者には、様々な改変形態、追加形態、代替形態などが本発明の趣旨を逸脱することなくなされ得、従って、これらは、以下の特許請求の範囲に定義する通り、本発明の範囲内であるとみなされることは明らかであろう。さらに、当業者であれば、既述していない範囲まで本明細書で説明及び例示した様々な態様のいずれか１つをさらに改変して、本明細書に開示する他の態様のいずれかに示される特徴を組み込み得ることは理解されよう。
さらに、本願発明は次の態様を含む。
１. ｓｉＲＮＡの活性を阻害する方法であって、ｓｉＲＮＡを受けた対象を特定し、そして、６〜２５個の連結ヌクレオチドから構成され、且つ前記ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖と実質的に相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含むＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物を前記対象に投与することを含む方法。
２. 前記対象が哺乳動物である、項１に記載の方法。
３. 前記対象がヒトである、項２に記載の方法。
４. 細胞のｓｉＲＮＡの活性を阻害する方法であって、前記細胞を、６〜２５個の連結ヌクレオチドから構成され、且つ前記ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖と実質的に相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含むＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物と接触させることを含む方法。
５. 前記細胞がｉｎ  ｖｉｖｏである、項４に記載の方法。
６. 前記細胞が哺乳動物におけるものである、項５に記載の方法。
７. 前記哺乳動物がヒトである、項６に記載の方法。
８. 前記接触がｉｎ  ｖｉｖｏにおけるものである、項４に記載の方法。
９. 細胞をｓｉＲＮＡと接触させ；
ｓｉＲＮＡ活性を検出し；そして
前記細胞をＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物と接触させる
ことを含む方法。
１０. 前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物が、６〜２５個の連結ヌクレオチドから構成され、且つ前記ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖と実質的に相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、項９に記載の方法。
１１. 前記ｓｉＲＮＡ活性の検出が、存在する標的ｍＲＮＡの量、存在する標的タンパク質の量、及び標的タンパク質の活性からなる群から選択されるパラメータを測定することを含む、項１０に記載の方法。
１２. ｓｉＲＮＡ治療の副作用を阻害する方法であって、
細胞をｓｉＲＮＡと接触させ；
副作用を検出し；
前記細胞をＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物と接触させ；そして
それにより前記ｓｉＲＮＡの前記副作用を阻害する
ことを含む方法。
１３. 前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物が、６〜２５個の連結ヌクレオチドから構成され、且つ前記ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖と実質的に相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、項１２に記載の方法。
１４. 対象を治療する方法であって、
ｓｉＲＮＡを前記対象に投与し；
ｓｉＲＮＡ活性について前記対象をモニターし；
前記ｓｉＲＮＡ活性が所望より高いならば、ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物を前記対象に投与する
ことを含む方法。
１５. 前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物が、６〜２５個の連結ヌクレオチドから構成され、且つ前記ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖と実質的に相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、項１４に記載の方法。
１６. 前記ｓｉＲＮＡ活性のモニターが、存在する標的ｍＲＮＡの量、存在する標的タンパク質の量、及び標的タンパク質の活性からなる群から選択されるパラメータを測定することを含む、項１４に記載の方法。
１７. 前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物の投与後にＲＥＶＥＲＳＩＲ活性を検出することをさらに含む、項１４に記載の方法。
１８. 前記対象が哺乳動物である、項１４に記載の方法。
１９. 前記対象がヒトである、項１８に記載の方法。
２０. 対象を治療する方法であって、
ｓｉＲＮＡを前記対象に投与し；
１つ又は複数の副作用について前記対象をモニターし；
１つ又は複数の副作用が望ましくないレベルに達するならば、ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物を前記対象に投与する
ことを含む方法。
２１. 前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物が、６〜２５個の連結ヌクレオチドから構成され、且つ前記ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖と実質的に相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、項２０に記載の方法。
２２. 前記対象が哺乳動物である、項２１に記載の方法。
２３. 前記対象がヒトである、項２２に記載の方法。
２４. 前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物が脂質製剤に封入される、項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
２５. 前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物が静脈内投与(ＩＶ)又は皮下投与(ＳＣ)により投与される、項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
２６. 前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物がリガンドと共役される、項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
２７. 前記ｓｉＲＮＡがリガンドと共役される、項１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
２８. ６〜２５個の連結ヌクレオチドから構成され、且つｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖と実質的に相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
２９. 前記修飾オリゴヌクレオチドが８〜１５個の連結ヌクレオチドから構成される、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３０. 前記修飾オリゴヌクレオチドが、前記アンチセンス鎖と少なくとも９０％の相補性を有する一本鎖オリゴヌクレオチドである、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３１. 前記修飾オリゴヌクレオチドが前記アンチセンス鎖のヌクレオチド２〜１６と実質的に相補的である、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３２. 前記修飾オリゴヌクレオチドが前記アンチセンス鎖と完全に相補的である、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３３. 前記修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも１つの修飾ヌクレオチド間結合を含む、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３４. 前記修飾オリゴヌクレオチドが、少なくとも１つの修飾ヌクレオチド間結合と、少なくとも１つの非修飾ヌクレオチド間結合とを含む、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３５. 前記修飾オリゴヌクレオチドが、３’末端ヌクレオチドと、最後から２番目のヌクレオシドとの間に非修飾ヌクレオチド間結合を含む、項３４に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３６. 前記修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも１つの修飾核酸塩基を含む、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３７. 前記修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも１つの修飾糖を含む、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３８. 前記少なくとも１つの修飾糖が二環式糖である、項３７に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
３９. 前記修飾オリゴヌクレオチドが少なくとも１つのヌクレオチドを含み、フルナオシルの２’位が、−[Ｃ(Ｒ１)(Ｒ２)]ｎ−、−[Ｃ(Ｒ１)(Ｒ２)]ｎ−Ｏ−、−[Ｃ(Ｒ１)(Ｒ２)]ｎ−Ｎ(Ｒ１)−、−[Ｃ(Ｒ１)(Ｒ２)]ｎ−Ｎ(Ｒ１)−Ｏ−、−[Ｃ(Ｒ１Ｒ２)]ｎ−Ｏ−Ｎ(Ｒ１)−、−Ｃ(Ｒ１)＝Ｃ(Ｒ２)−Ｏ−、−Ｃ(Ｒ１)＝Ｎ−、−Ｃ(Ｒ１)＝Ｎ−Ｏ−、−Ｃ(＝ＮＲ１)−、−Ｃ(＝ＮＲ１)−Ｏ−、−Ｃ(＝Ｏ)−、−Ｃ(＝Ｏ)Ｏ−、−Ｃ(＝Ｓ)−、−Ｃ(＝Ｓ)Ｏ−、−Ｃ(＝Ｓ)Ｓ−、−Ｏ−、−Ｓｉ(Ｒ１)２−、−Ｓ(＝Ｏ)Ｘ−及び−Ｎ(Ｒ１)−から独立に選択されるリンカーによって４’位に連結され、
式中、
ｘは、０、１、又は２であり；
ｎは、０、１、２、３、又は４であり；
各Ｒ１及びＲ２は、独立に、Ｈ、保護基、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換されたＣ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換されたＣ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換されたＣ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換されたＣ５〜Ｃ２０アリール、複素環式ラジカル、置換された複素環式ラジカル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、Ｃ５〜Ｃ７脂環式ラジカル、置換されたＣ５〜Ｃ７脂環式ラジカル、ハロゲン、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＣＯＯＪ１、アシル(Ｃ(＝Ｏ)−Ｈ)、置換されたアシル、ＣＮ、スルホニル(Ｓ(＝Ｏ)２−Ｊ１)、又はスルホキシル(Ｓ(＝Ｏ)−Ｊ１)であり；及び
各Ｊ１及びＪ２は、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換されたＣ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換されたＣ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換されたＣ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換されたＣ５〜Ｃ２０アリール、アシル(Ｃ(＝Ｏ)−Ｈ)、置換されたアシル、複素環式ラジカル、置換された複素環式ラジカル、Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、置換されたＣ１〜Ｃ１２アミノアルキル又は保護基である、請求項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
４０. 前記修飾オリゴヌクレオチドがリガンドと共役される、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
４１. 前記修飾オリゴヌクレオチドが、構造：
【化１０５】
2018504380.tif 000002
のリガンドと共役される、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
４２. 前記修飾オリゴヌクレオチドがリガンドと共役され、及び前記リガンドが前記修飾オリゴヌクレオチドの３’−末端に共役される、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
４３. 前記修飾オリゴヌクレオチドがリガンドと共役され、及び前記リガンドが、前記ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物中のデオキシ糖を有するヌクレオシドに共役される、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
４４. 前記デオキシ糖が２’−デオキシリボースである、項４３に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
４５. 前記ｓｉＲＮＡがｍＲＮＡ、ｐｒｅ−ｍＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｐｒｅ−マイクロＲＮＡにターゲティングされる、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
４６. 前記ｓｉＲＮＡがリガンドと共役される、項２８に記載のＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物。
４７. ＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物を含むキット。
４８. ｓｉＲＮＡとＲＥＶＥＲＳＩＲ化合物とを含むキット。