【手続補正書】
【提出日】平成20年2月8日(2008.2.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
産生細胞でレトロウイルスベクターゲノムをレトロウイルス粒子中に構築して、標的細胞中に複製欠損レトロウイルスを作製することができるレトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードするヌクレオチド配列の使用であって、前記ヌクレオチド配列は前記産生細胞における発現について最適化されたコドンであることを特徴とする使用。
【請求項２】
産生細胞でレトロウイルスベクターゲノムをレトロウイルス粒子中に構築して、標的細胞中のレトロウイルスベクターゲノムのパッケージングを防止することができるレトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードするヌクレオチド配列の使用であって、前記ヌクレオチド配列は前記産生細胞における発現について最適化されたコドンであることを特徴とする使用。
【請求項３】
産生細胞でｇａｇヌクレオチド配列の少なくとも一部を含むレトロウイルスベクターゲノムをレトロウイルス粒子中に構築して、レトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードする前記ヌクレオチド配列とｇａｇヌクレオチド配列の少なくとも一部との間の組換えを防止することができるレトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードするヌクレオチド配列の使用であって、レトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードする前記ヌクレオチド配列は前記産生細胞での発現について最適化されたコドンであることを特徴とする使用。
【請求項４】
前記レトロウイルスゲノムは、目的のヌクレオチド（ＮＯＩ）をさらに含む請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
前記レトロウイルス粒子は、レンチウイルス粒子である請求項１〜４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項６】
前記レトロウイルス粒子は、実質的にＨＩＶ−１に由来する、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
前記コドン最適化ヌクレオチド配列が配列番号１５に記載の配列を有する、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記レトロウイルス粒子が実質的にＥＩＡＶに由来する、請求項５に記載の使用。
【請求項９】
前記コドン最適化ヌクレオチド配列が配列番号１６に記載の配列を有する、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
（ｉ）レトロウイルスゲノムと、
（ｉｉ）レトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードするヌクレオチド配列と、
（ｉｉｉ）（ｉｉ）のヌクレオチド配列によってコードされない他の必須のウイルスパッケージング成分をコードするヌクレオチド配列と
によって産生細胞をトランスフェクトするステップを含み、レトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードする前記ヌクレオチド配列が前記産生細胞における発現のために最適化されたコドンであることを特徴とする、複製欠損レトロウイルスの産生方法。
【請求項１１】
ａ．（ｉ）レトロウイルスゲノムと、
（ｉｉ）レトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードするヌクレオチド配列と、
（ｉｉｉ）１つまたは複数の（ｉｉ）のヌクレオチド配列によってコードされない他の必須のウイルスパッケージング成分をコードするヌクレオチド配列と
によって産生細胞をトランスフェクトしてレトロウイルス粒子を産生するステップと、
ｂ．ステップ（ａ）のレトロウイルス粒子により標的細胞をトランスフェクトするステップと
を含み、
レトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードする前記ヌクレオチド配列が前記産生細胞における発現のために最適化されたコドンであることを特徴とする、標的細胞におけるレトロウイルスゲノムのパッケージングの防止方法。
【請求項１２】
（ｉ）ｇａｇヌクレオチド配列の少なくとも一部を含むレトロウイルスゲノムと、
（ｉｉ）レトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードするヌクレオチド配列と、
（ｉｉｉ）（ｉｉ）のヌクレオチド配列によってコードされない他の必須のウイルスパッケージング成分をコードするヌクレオチド配列と
によって産生細胞をトランスフェクトするステップを含み、
レトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードする前記ヌクレオチド配列が前記産生細胞における発現のために最適化されたコドンであることを特徴とする、ウイルスゲノムのレトロウイルス粒子中での構築に必要なウイルスポリペプチドをコードするヌクレオチド配列とレトロウイルスベクターゲノムとの間の組換えの防止方法。
【請求項１３】
前記レトロウイルスゲノムは、目的のヌクレオチド（ＮＯＩ）をさらに含む、請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１４】
前記レトロウイルス粒子は、レンチウイルス粒子である、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１５】
前記レトロウイルス粒子は、実質的にＨＩＶ−１に由来する、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
前記コドン最適化ヌクレオチド配列が配列番号１５に記載の配列を有する、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
前記レトロウイルス粒子が実質的にＥＩＡＶに由来する、請求項１４に記載の使用。
【請求項１８】
前記コドン最適化ヌクレオチド配列が配列番号１６に記載の配列を有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ｉｉｉ）ｅｎｖタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
配列番号１５または配列番号１６の配列を有するレトロウイルスｇａｇタンパク質およびｐｏｌタンパク質をコードするヌクレオチド配列。
【請求項２１】
前記ｉ）〜ｉｉｉ）の少なくとも１つが、１つまたは複数の機能的な補助遺伝子を含む、請求項１０〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ｉ）〜ｉｉｉ）は、任意の機能的な補助遺伝子を欠いている、請求項１０〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
ｉ）目的のヌクレオチド配列と、
ｉｉ）ウイルス粒子の構築に必要なウイルスポリペプチドをコードするヌクレオチド配列と
を含み、前記ヌクレオチド配列は請求項２０で定義されている、ウイルスベクター系。
【請求項２４】
ｉ）少なくとも１つの目的のヌクレオチド配列を含むウイルスゲノムと、
ｉｉ）前記ウイルスゲノムのウイルス粒子中への構築に必要なウイルスポリペプチドをコードするヌクレオチド配列と
を含み、前記ヌクレオチド配列は請求項２０で定義されている、ウイルス産生系。
【請求項２５】
前記ウイルスベクターがレトロウイルスベクターである、請求項２３または請求項２４に記載の系。
【請求項２６】
前記レトロウイルスベクターがレンチウイルスベクターである、請求項２５に記載の系。
【請求項２７】
前記レンチウイルスベクターが、実質的にＨＩＶ−１またはＥＩＡＶに由来する、請求項２３〜２６のいずれか１項に記載の系。
【請求項２８】
前記ｉ）〜ｉｉ）で定義の前記ヌクレオチド配列がエンベロープタンパク質も含む、請求項２３〜２７のいずれか１項に記載の系。
【請求項２９】
前記エンベロープ遺伝子がコドン最適化されている、請求項２８に記載の系。
【請求項３０】
前記目的のヌクレオチドが、治療遺伝子、マーカー遺伝子、および選択遺伝子から選択される、請求項２３〜２９のいずれか１項に記載の系。
【請求項３１】
１つまたは複数の機能的な補助遺伝子を含む、請求項２３〜３０のいずれか１項に記載の系。
【請求項３２】
任意の機能的な補助遺伝子を欠いている、請求項２３〜３０のいずれか１項に記載の系。
【請求項３３】
ウイルス粒子産生方法で使用される、請求項２３〜３２のいずれか１項に記載のウイルス系。
【請求項３４】
ｉ）請求項２４〜３３のいずれか１項で定義されたウイルスゲノムと、
ｉｉ）請求項２０で定義された１つまたは複数のヌクレオチド配列と、
ｉｉｉ）１つまたは複数の（ｉｉ）のヌクレオチド配列によってコードされない他の必須のウイルスパッケージング成分をコードするヌクレオチド配列と
を産生細胞に移入するステップを含むウイルス粒子の産生方法。
【請求項３５】
請求項２４〜３３のいずれか１項に記載の産生系または請求項３４に記載の方法によって産生される、ウイルス粒子。
【請求項３６】
ウイルス感染治療用の請求項２３〜３３のいずれか１項に記載のウイルス系または請求項３５に記載のウイルス粒子。
【請求項３７】
薬学的に許容可能なキャリアまたは希釈剤とともに請求項２３〜３３のいずれか１項に記載のウイルス系または請求項３５に記載のウイルス粒子を含む、薬学的組成物。
【請求項３８】
核酸配列がＲｅｖ独立性である請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３９】
核酸配列がＲＲＥ配列を含まない請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４０】
レトロウイルスのｇａｇタンパク質及びｐｏｌタンパク質をコードする核酸配列が、Ｒｅｖ独立性である請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４１】
レトロウイルスのｇａｇタンパク質及びｐｏｌタンパク質をコードする核酸配列が、ＲＲＥ配列を含まない請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４２】
核酸配列（ｉｉ）がＲｅｖ独立性である請求項２４に記載の系。
【請求項４３】
核酸配列（ｉｉ）がＲＲＥ配列を含まない請求項２４に記載の系。