【手続補正書】
【提出日】平成19年11月6日(2007.11.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
核酸分子を含む細胞であって、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項２】
核酸分子を含む細胞であって、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項３】
核酸分子を含む細胞であって、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項４】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項１に記載の細胞。
【請求項５】
前記３’スプライシング領域がピリミジン部位をさらに含む、請求項１に記載の細胞。
【請求項６】
前記核酸分子が前記５’スプライシング部位の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全配列をさらに含む、請求項１、２又は３に記載の細胞。
【請求項７】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項１、２又は３に記載の細胞。
【請求項８】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項１、２又は３に記載の細胞。
【請求項９】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項１、２又は３に記載の細胞。
【請求項１０】
前記標的プレｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項１、２又は３に記載の細胞。
【請求項１１】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１、２又は３に記載の細胞。
【請求項１２】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１、２又は３に記載の細胞。
【請求項１３】
組換えベクターを含む細胞であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記ベクターが発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項１４】
組換えベクターを含む細胞であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記ベクターが発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項１５】
組換えベクターを含む細胞であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記ベクターが発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項１６】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項１３に記載の細胞。
【請求項１７】
前記３’スプライシング領域がピリミジン部位をさらに含む、請求項１３に記載の細胞。
【請求項１８】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１３、１４又は１５に記載の細胞。
【請求項１９】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項１３、１４又は１５に記載の細胞。
【請求項２０】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項１３、１４又は１５に記載の細胞。
【請求項２１】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項１３、１４又は１５に記載の細胞。
【請求項２２】
前記標的プレｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項１３、１４又は１５に記載の細胞。
【請求項２３】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１３、１４又は１５に記載の細胞。
【請求項２４】
細胞中でキメラＲＮＡ分子を生成する方法であって、核酸分子の一部分が標的プレｍＲＮＡの一部分にトランススプライシングされて細胞中でキメラＲＮＡを形成する条件下において、細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡと核のスプライシング要素によって認識される核酸分子を接触させることを含み、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む方法。
【請求項２５】
細胞中でキメラＲＮＡ分子を生成する方法であって、核酸分子の一部分が標的プレｍＲＮＡの一部分にトランススプライシングされて細胞中でキメラＲＮＡを形成する条件下において、細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡと核のスプライシング要素によって認識される核酸分子を接触させることを含み、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む方法。
【請求項２６】
細胞中でキメラＲＮＡ分子を生成する方法であって、細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡと核のスプライシング要素によって認識される核酸分子を接触させることを含み、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される方法。
【請求項２７】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
前記３’スプライシング領域がピリミジン部位をさらに含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項２４、２５又は２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項２４、２５又は２６に記載の方法。
【請求項３１】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項２４、２５又は２６に記載の方法。
【請求項３２】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項２４、２５又は２６に記載の方法。
【請求項３３】
前記標的プレｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項２４、２５又は２６に記載の方法。
【請求項３４】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項２４、２５又は２６に記載の方法。
【請求項３５】
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子であって、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される核酸分子。
【請求項３６】
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子であって、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される核酸分子。
【請求項３７】
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子であって、前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される核酸分子。
【請求項３８】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項３５に記載の核酸分子。
【請求項３９】
前記３’スプライシング領域がピリミジン部位をさらに含む、請求項３５に記載の核酸分子。
【請求項４０】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項３５、３６又は３７に記載の核酸分子。
【請求項４１】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項３５、３６又は３７に記載の核酸分子。
【請求項４２】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項３５、３６又は３７に記載の核酸分子。
【請求項４３】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項３５、３６又は３７に記載の核酸分子。
【請求項４４】
前記標的プレｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項３５、３６又は３７に記載の核酸分子。
【請求項４５】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項３５、３６又は３７に記載の核酸分子。
【請求項４６】
真核生物の発現ベクターであって、前記ベクターが
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識されるベクター。
【請求項４７】
真核生物の発現ベクターであって、前記ベクターが
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識されるベクター。
【請求項４８】
真核生物の発現ベクターであって、前記ベクターが
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるプレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１ミラノ変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識されるベクター。
【請求項４９】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項４６に記載のベクター。
【請求項５０】
前記核酸分子がピリミジン部位をさらに含む、請求項４６に記載のベクター。
【請求項５１】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項４６、４７又は４８に記載のベクター。
【請求項５２】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項４６、４７又は４８に記載のベクター。
【請求項５３】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項４６、４７又は４８に記載のベクター。
【請求項５４】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項４６、４７又は４８に記載のベクター。
【請求項５５】
前記標的プレｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項４６、４７又は４８に記載のベクター。
【請求項５６】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項４６、４７又は４８に記載のベクター。
【請求項５７】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項４６、４７又は４８に記載のベクター。
【請求項５８】
前記核酸分子の発現が肝細胞特異的プロモーターによって制御される、請求項４６、４７又は４８に記載のベクター。
【請求項５９】
被験体中でアポＡ−１変異体を発現させるための方法であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、及び
ｂ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記被験体に投与することを含み、前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される方法。
【請求項６０】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６２】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
前記標的プレｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項５４に記載の方法。
【請求項６４】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項５４に記載の方法。
【請求項６５】
核酸分子を含む細胞であって、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む細胞。
【請求項６６】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項６５に記載の細胞。
【請求項６７】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項６５に記載の細胞。
【請求項６８】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項６５に記載の細胞。
【請求項６９】
前記標的ｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項６５に記載の細胞。
【請求項７０】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項６５に記載の細胞。
【請求項７１】
組換えベクターを含む細胞であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記ベクターが発現する細胞。
【請求項７２】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項７１に記載の細胞。
【請求項７３】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項７１に記載の細胞。
【請求項７４】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項７１に記載の細胞。
【請求項７５】
前記標的ｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項７１に記載の細胞。
【請求項７６】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項７１に記載の細胞。
【請求項７７】
細胞中でキメラＲＮＡ分子を生成する方法であって、核酸分子の一部分が標的ｍＲＮＡの一部分にトランススプライシングされて細胞中でキメラＲＮＡを形成する条件下において、細胞内で発現される標的ｍＲＮＡと核酸分子を接触させることを含み、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む方法。
【請求項７８】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項７７に記載の方法。
【請求項８０】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項７７に記載の方法。
【請求項８１】
前記標的ｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項７７に記載の方法。
【請求項８２】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項７７に記載の方法。
【請求項８３】
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
【請求項８４】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項８３に記載の核酸分子。
【請求項８５】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項８３に記載の核酸分子。
【請求項８６】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項８３に記載の核酸分子。
【請求項８７】
前記標的ｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項８３に記載の核酸分子。
【請求項８８】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項８３に記載の核酸分子。
【請求項８９】
真核生物の発現ベクターであって、前記ベクターが
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現するベクター。
【請求項９０】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項８９に記載のベクター。
【請求項９１】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項８９に記載のベクター。
【請求項９２】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項８９に記載のベクター。
【請求項９３】
前記標的ｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項８９に記載のベクター。
【請求項９４】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項８９に記載のベクター。
【請求項９５】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項８９に記載のベクター。
【請求項９６】
前記核酸分子の発現が肝細胞特異的プロモーターによって制御される、請求項８９に記載のベクター。
【請求項９７】
被験体中でアポＡ−１変異体を発現させるための方法であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現される標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、アポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記被験体に投与することを含む方法。
【請求項９８】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＡ−１標的である、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
前記細胞内で発現される標的ｍＲＮＡがヒトアポＢ標的である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１００】
前記細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡがヒトアルブミン標的である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０１】
前記標的ｍＲＮＡが肝細胞内で発現される、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０２】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０３】
核酸分子を含む細胞であって、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項１０４】
核酸分子を含む細胞であって、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項１０５】
核酸分子を含む細胞であって、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項１０６】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項１０３に記載の細胞。
【請求項１０７】
前記３’スプライシング領域がピリミジン部位をさらに含む、請求項１０３に記載の細胞。
【請求項１０８】
前記核酸分子が前記５’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全配列をさらに含む、請求項１０３、１０４又は１０５に記載の細胞。
【請求項１０９】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１０３、１０４又は１０５に記載の細胞。
【請求項１１０】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１０３、１０４又は１０５に記載の細胞。
【請求項１１１】
組換えベクターを含む細胞であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記ベクターが発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項１１２】
組換えベクターを含む細胞であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記ベクターが発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項１１３】
組換えベクターを含む細胞であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記ベクターが発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される細胞。
【請求項１１４】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項１１１に記載の細胞。
【請求項１１５】
前記３’スプライシング領域がピリミジン部位をさらに含む、請求項１１１に記載の細胞。
【請求項１１６】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１１１、１１２又は１１３に記載の細胞。
【請求項１１７】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１１１、１１２又は１１３に記載の細胞。
【請求項１１８】
細胞中でキメラＲＮＡ分子を生成する方法であって、核酸分子の一部分が標的プレｍＲＮＡの一部分にトランススプライシングされて細胞中でキメラＲＮＡを形成する条件下において、細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡと核のスプライシング要素によって認識される核酸分子を接触させることを含み、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む方法。
【請求項１１９】
細胞中でキメラＲＮＡ分子を生成する方法であって、核酸分子の一部分が標的プレｍＲＮＡの一部分にトランススプライシングされて細胞中でキメラＲＮＡを形成する条件下において、細胞内で発現される標的プレｍＲＮＡと核のスプライシング要素によって認識される核酸分子を接触させることを含み、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む方法。
【請求項１２０】
細胞中でキメラＲＮＡ分子を生成する方法であって、細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡと核のスプライシング要素によって認識される核酸分子を接触させることを含み、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される方法。
【請求項１２１】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２２】
前記３’スプライシング領域がピリミジン部位をさらに含む、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２３】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１１８、１１９又は１２０に記載の方法。
【請求項１２４】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１１８、１１９又は１２０に記載の方法。
【請求項１２５】
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子であって、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される核酸分子。
【請求項１２６】
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子であって、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される核酸分子。
【請求項１２７】
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子であって、前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される核酸分子。
【請求項１２８】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項１２５に記載の核酸分子。
【請求項１２９】
前記３’スプライシング領域がピリミジン部位をさらに含む、請求項１２５に記載の核酸分子。
【請求項１３０】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１２５、１２６又は１２７に記載の核酸分子。
【請求項１３１】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１２５、１２６又は１２７に記載の核酸分子。
【請求項１３２】
真核生物の発現ベクターであって、前記ベクターが
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）分岐点及び３’スプライシング受容体部位を含む３’スプライシング領域、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識されるベクター。
【請求項１３３】
真核生物の発現ベクターであって、前記ベクターが
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）３’スプライシング受容体部位、
ｃ）標的結合ドメインから３’スプライシング領域を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識されるベクター。
【請求項１３４】
真核生物の発現ベクターであって、前記ベクターが
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミンプレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）５’スプライシング部位、
ｃ）標的結合ドメインから５’スプライシング部位を隔てるスペーサー領域、及び
ｄ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現し、
前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識されるベクター。
【請求項１３５】
前記核酸分子が５’ドナー部位をさらに含む、請求項１３２に記載のベクター。
【請求項１３６】
前記核酸分子がピリミジン部位をさらに含む、請求項１３２に記載のベクター。
【請求項１３７】
前記核酸分子が前記３’スプライシング領域の片側又は両側と結合する１つ又は複数の相補配列を含む安全ヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１３２、１３３、又は１３４に記載のベクター。
【請求項１３８】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１３２、１３３、又は１３４に記載のベクター。
【請求項１３９】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項１３２、１３３、又は１３４に記載のベクター。
【請求項１４０】
前記核酸分子の発現が肝細胞特異的プロモーターによって制御される、請求項１３２、１３３、又は１３４に記載のベクター。
【請求項１４１】
被験体中でアポＡ−１変異体を発現させるための方法であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的プレｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、及び
ｂ）標的プレｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記被験体に投与することを含み、前記核酸分子が細胞内の核のスプライシング要素によって認識される方法。
【請求項１４２】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１４１に記載の方法。
【請求項１４３】
核酸分子を含む細胞であって、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む細胞。
【請求項１４４】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１４３に記載の細胞。
【請求項１４５】
組換えベクターを含む細胞であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記ベクターが発現する細胞。
【請求項１４６】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１４５に記載の細胞。
【請求項１４７】
細胞中でキメラＲＮＡ分子を生成する方法であって、核酸分子の一部分が標的ｍＲＮＡの一部分にトランススプライシングされて細胞中でキメラＲＮＡを形成する条件下において、細胞内で発現される標的ｍＲＮＡと核酸分子を接触させることを含み、前記核酸分子が
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む方法。
【請求項１４８】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１４７に記載の方法。
【請求項１４９】
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
【請求項１５０】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１４９に記載の核酸分子。
【請求項１５１】
真核生物の発現ベクターであって、前記ベクターが
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現するベクター。
【請求項１５２】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１５１に記載のベクター。
【請求項１５３】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項１５１に記載のベクター。
【請求項１５４】
前記核酸分子の発現が肝細胞特異的プロモーターによって制御される、請求項１５１に記載のベクター。
【請求項１５５】
被験体中でアポＡ−１野生型又は変異体を発現させるための方法であって、
ａ）核酸分子と細胞内で発現されるアルブミン標的ｍＲＮＡの結合を標的とする１つ又は複数の標的結合ドメイン、
ｂ）リボザイム活性を有する配列、及び
ｃ）標的ｍＲＮＡにトランススプライシングされるヌクレオチド配列であって、野生型アポＡ−１又はアポＡ−１変異体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を前記被験体に投与することを含む方法。
【請求項１５６】
前記アポＡ−１変異体がアポＡ−１ミラノである、請求項１５５に記載の方法。