【手続補正書】
【提出日】令和1年10月24日(2019.10.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンプル中の第１の分析物および第２の分析物の存在または不在を検出するための方法であって、第１の分析物のみが固有の抗原またはエピトープを有することを除いて前記２つの分析物は同一であり、以下の順序で以下の工程：
ａ）第１の検出タグを用いて第１の分析物にタグ付けするために、第１の分析物に抗体のような第１の検出剤をコンジュゲートする工程；
ｂ）第１の分析物を捕捉し、かつサンプルから第１の分析物を完全に枯渇させるために、第１の分析物の固有の抗原またはエピトープに抗体のような第１の捕捉剤をコンジュゲートする工程；
ｃ）第２の検出タグを用いて第２の分析物にタグ付けするために、第１の分析物を完全に枯渇させた前記サンプル中の第２の分析物に抗体のような第２の検出剤をコンジュゲートする工程；
ｄ）第１の分析物を完全に枯渇させた前記サンプルから第２の分析物を捕捉するために、第２の分析物に抗体のような第２の捕捉剤をコンジュゲートする工程；
ｅ）前記抗体のような第１の捕捉剤および前記抗体のような第２の捕捉剤の部位それぞれにおいて前記第１の検出タグおよび前記第２の検出タグの存在または不在を検出し、それにより、前記サンプル中の第１の分析物および第２の分析物の存在または不在を検出する工程
を含むイムノアッセイを含んでなる、方法。
【請求項２】
前記抗体のような第１の検出剤および前記抗体のような第２の検出剤が、前記サンプル中でまたは前記サンプルとともに自由に移動できる遊離した抗体のような第１の検出剤および抗体のような第２の検出剤であり、かつ、前記抗体のような第１の捕捉剤および前記抗体のような第２の捕捉剤が、基体上の所定の部位に固定された固定化された抗体のような第１の捕捉剤および抗体のような第２の捕捉剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗体のような第１の捕捉剤の濃度が前記抗体のような第１の検出剤の濃度以上であり、好ましくは、１：１〜５：１の間、より好ましくは、１．５：１〜３：１の間の比にある、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記方法が、サンプル流れ方向に、サンプルアプリケーションパッド（３）、第１のコンジュゲーションパッド（１０）、少なくとも１本の第１のテストライン（１１）および任意選択により少なくとも１本の第１のコントロールライン（１２）を有するニトロセルロースメンブレン（４）、第２のコンジュゲーションパッド（２０）、少なくとも１本の第２のテストライン（２１）および任意選択により少なくとも１本の第２のコントロールライン（２２）を有するニトロセルロースメンブレン（４’）、ならびに吸収パッド（５）を含んでなるラテラルフローアッセイストリップ（１）を用いたラテラルフローイムノクロマトグラフィーアッセイであり；
その第１のコンジュゲーションパッド（１０）が、前記抗体のような第１の検出剤を含有し、その第１のテストライン（１１）が、前記抗体のような第１の捕捉剤によって形成され、その第２のコンジュゲーションパッド（２０）が、前記抗体のような第２の検出剤を含有し、かつ、その第２のテストライン（２１）が、前記抗体のような第２の捕捉剤によって形成され、その任意選択の少なくとも１本の第１のコントロールライン（１２）が、前記抗体のような第１の検出剤に特異的に結合する第１の抗体のような対照剤を含有し、その任意選択の少なくとも１本の第２のコントロールライン（２２）が、前記抗体のような第２の検出剤に特異的に結合する抗体のような第２の対照剤を含有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記第１の分析物が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）であり、かつ、前記第２の分析物が、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ）である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記抗体のような第１の検出剤および前記抗体のような第１の捕捉剤が、ペニシリン結合タンパク質２ａ（ＰＢＰ２ａ）の異なるエピトープに特異的であり；かつ、前記抗体のような第２の検出剤および前記抗体のような第２の捕捉剤が、ペニシリン結合タンパク質２（ＰＢＰ２）の異なるエピトープに特異的である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記サンプルが、生物試料、環境試料または食品試料から採取される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記イムノアッセイを実施する前に、前記サンプルが、ＩｇＧ抗体コーティングされた磁性ビーズを用いて、黄色ブドウ球菌を単離濃縮することによって前処理され、前記ＩｇＧ抗体が、そのＦａｂ領域で磁性ビーズに結合しており、黄色ブドウ球菌のプロテインＡと特異的に相互作用するように、そのＦｃ領域は使われていない状態である、請求項５〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
第１の分析物および第２の分析物を検出するために、請求項１〜８のいずれか一項に記載のイムノアッセイを実施するためのラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップであって、第１の分析物のみが固有の抗原またはエピトープを有することを除いて前記２つの分析物は同一であり、サンプル流れ方向に、サンプルアプリケーションパッド（３）、第１のコンジュゲーションパッド（１０）、少なくとも１本の第１のテストライン（１１）および任意選択により少なくとも１本の第１のコントロールライン（１２）を有するニトロセルロースメンブレン（４）、第２のコンジュゲーションパッド（２０）、少なくとも１本の第２のテストライン（２１）および任意選択により少なくとも１本の第２のコントロールライン（２２）を有するニトロセルロースメンブレン（４’）、ならびに吸収パッド（５）を含んでなり；
前記第１のコンジュゲーションパッド（１０）が、第１の検出タグを用いて前記第１の分析物にタグ付けするために、前記第１の分析物に対する抗体のような第１の検出剤を含有し；
前記第１のテストライン（１１）が、前記第１の分析物を捕捉しかつ前記サンプルからその第１の分析物を完全に枯渇させるために、前記第１の分析物に対する抗体のような第１の捕捉剤によって形成され；
前記第２のコンジュゲーションパッド（２０）が、第２の検出タグを用いて前記第２の分析物にタグ付けするために、前記サンプル中の前記第２の分析物に対する抗体のような第２の検出剤を含有し；
前記第２のテストライン（２１）が、第１の分析物を完全に枯渇させた前記サンプルから前記第２の分析物を捕捉するために、前記第２の分析物に対する抗体のような第２の捕捉剤によって形成され；
前記任意選択の少なくとも１本の第１のコントロールライン（１２）が、前記抗体のような第１の検出剤に特異的に結合する抗体のような第１の対照剤を含有し；
前記任意選択の少なくとも１本の第２のコントロールライン（２２）が、前記抗体のような第２の検出剤に特異的に結合する抗体のような第２の対照剤を含有する、ラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。
【請求項１０】
前記抗体のような第１の検出剤および前記抗体のような第２の検出剤が、前記サンプル中でまたは前記サンプルとともに自由に移動できる遊離した抗体のような第１の検出剤および抗体のような第２の検出剤であり、前記抗体のような第１の捕捉剤および前記抗体のような第２の捕捉剤がそれぞれ、前記第１のテストラインおよび前記第２のテストライン（１１、２１）の部位に固定された固定化された抗体のような第１の捕捉剤および抗体のような第２の捕捉剤であり、かつ、前記任意選択の第１のコントロールラインおよび第２のコントロールライン（１２、２２）の抗体のような剤が、前記第１のコントロールラインおよび前記第２のコントロールライン（１２、２２）の部位に固定されている、請求項９に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。
【請求項１１】
前記第１の分析物が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）であり、かつ、前記第２の分析物が、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ）である、請求項９または１０に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。
【請求項１２】
前記抗体のような第１の検出試薬および前記抗体のような第１の捕捉試薬が、ペニシリン結合タンパク質２ａ（ＰＢＰ２ａ）の異なるエピトープに特異的であり；かつ、前記抗体のような第２の検出試薬および前記抗体のような第２の捕捉試薬が、ペニシリン結合タンパク質２（ＰＢＰ２）の異なるエピトープに特異的である、請求項９〜１１のいずれか一項に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。
【請求項１３】
第１のコンジュゲーションパッド（１０）および第１のテストライン（１１）の少なくとも１つのさらなるセットが、第１のコンジュゲーションゾーン（１０）および第１のテストライン（１１）の第１のセットに続く、請求項９〜１２のいずれか一項に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。
【請求項１４】
サンプル中の第１の分析物および第２の分析物の存在または不在を検出するためのキットであって、請求項９〜１３のいずれか一項に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップを含んでなる、キット。
【請求項１５】
以下：
スワブからサンプルを溶出するための薬剤を含んでなる、患者からサンプルを採取するためのスワブ；
サンプル中の黄色ブドウ球菌の不在または存在を検出するためのＥｂｆイムノクロマトグラフィーディップスティック；
黄色ブドウ球菌を単離濃縮するためのＩｇＧ抗体コーティングされた磁性ビーズであって、前記ＩｇＧ抗体は、そのＦａｂ領域で磁性ビーズに結合しており、黄色ブドウ球菌のプロテインＡと特異的に相互作用するように、そのＦｃ領域は使われていない状態であり；洗浄工程および磁性ビーズからの黄色ブドウ球菌の溶出のための薬剤を含んでなる、磁性ビーズ；および
黄色ブドウ球菌の固定化および透過処理のための薬剤
の少なくとも１つをさらに含んでなる、請求項１４に記載のキット。