【手続補正書】
【提出日】平成31年1月18日(2019.1.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＦＡＳエンドドメインに融合された複数回貫通型膜貫通タンパク質を含むキメラタンパク質であって、前記複数回貫通型膜貫通タンパク質が細胞外リガンドに結合して、前記ＦＡＳエンドドメインの活性化をもたらし、前記複数回貫通型膜貫通タンパク質が、ＣＤ２０、またはアミノ末端エンドドメインもしくはカルボキシ末端エンドドメインを欠くその先端切除バージョンである、キメラタンパク質。
【請求項２】
前記細胞外リガンドが、リツキシマブ、オファツムマブまたはベルツズマブである、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項３】
前記アミノ末端エンドドメインを欠く先端切除バージョンのＣＤ２０のカルボキシ末端に融合されたＦＡＳエンドドメインを含む、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項４】
前記ＣＤ２０が、配列番号３として示されている全長配列を基準にして、突然変異Ｐ１７２Ｗを含む、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項５】
前記ＣＤ２０が、配列番号３、４、５または６として示されている配列を含む、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項６】
前記複数回貫通型膜貫通タンパク質が、前記細胞外リガンドに結合する異種リガンド結合ドメインを含む、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項７】
前記ＦＡＳエンドドメインが、配列番号２０として示されている配列を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載のキメラタンパク質をコードする、核酸配列。
【請求項９】
１つまたはそれより多い請求項８に記載の核酸配列と、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）またはキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸配列とを含む、核酸構築物。
【請求項１０】
請求項９に記載の核酸配列または請求項９に記載の核酸構築物を含む、ベクター。
【請求項１１】
目的のヌクレオチドも含む、請求項８に記載の核酸配列を含む、ベクター。
【請求項１２】
前記ベクターを標的細胞の形質導入に使用する場合、前記標的細胞が、請求項１〜７のいずれかに記載のキメラタンパク質およびキメラ抗原受容体またはＴ細胞受容体を共発現するように、前記目的のヌクレオチドがキメラ抗原受容体またはＴ細胞受容体をコードする、請求項１１に記載のベクター。
【請求項１３】
請求項１〜７のいずれかに記載のキメラタンパク質を発現する、細胞。
【請求項１４】
キメラ抗原受容体またはＴ細胞受容体も発現する、請求項１３に記載の細胞。
【請求項１５】
Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞または幹細胞である、請求項１３または１４に記載の細胞。
【請求項１６】
請求項１３〜１５のいずれかに記載の細胞を作製するための方法であって、請求項１０〜１２のいずれかに記載のベクターを単離された細胞に形質導入またはトランスフェクトする工程を含む、方法。
【請求項１７】
被験体における疾患を予防または処置するための、請求項１３〜１５のいずれかに記載の細胞を含む組成物。
【請求項１８】
前記細胞が、被験体から単離された細胞の試料に、請求項１０〜１２のいずれかに記載のベクターを形質導入またはトランスフェクトすることにより得られ、前記形質導入／トランスフェクトされた細胞が患者に投与されることを特徴とする、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
癌を処置するための、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
被験体への請求項１３〜１５のいずれかに記載の細胞の投与によって引き起こされる、前記被験体における病理学的免疫応答を予防および／または処置するための、前記複数回貫通型膜貫通タンパク質に結合することができる細胞外リガンドを含む組成物。
【請求項２１】
前記病理学的免疫応答が、以下の群：移植片対宿主病；オンターゲットオフ腫瘍毒性；免疫活性化症候群；およびリンパ増殖性障害から選択される、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
請求項１３〜１５のいずれかに記載の細胞を被験体に投与することによって引き起こされる、請求項２１に記載の、前記被験体における疾患を処置するための、前記複数回貫通型膜貫通タンパク質に結合することができる細胞外リガンドを含む組成物であって、前記被験体が、病理学的免疫応答を発症するまたは発症した兆候を示す場合、前記被験体に前記組成物が投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項２３】
造血幹細胞移植、リンパ球注入または養子細胞移入に使用するための、請求項１３〜１５のいずれかに記載の細胞を含む組成物。
【請求項２４】
被験体への請求項１３〜１５のいずれかに記載の細胞の投与によって引き起こされる病理学的免疫応答の予防または処置に使用するための、抗ＣＤ２０抗体を含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
他の自殺遺伝子が提案されており、例えば、全長ＣＤ２０は、Ｔ細胞上において発現された場合、Ｔ細胞を治療用抗ＣＤ２０抗体リツキシマブによる溶解に対して感受性にし得る（Ｉｎｔｒｏｎａ，Ｍら、（２０００）Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．１１，６１１−６２０）。抗体認識に関するこのテーマでは、他の自殺遺伝子も記載されており、ＲＱＲ８は、Ｔ細胞をＣＤ２０に対して感受性にするが、全長ＣＤ２０分子よりもコンパクトである（Ｐｈｉｌｉｐ，Ｂら、（２０１４）Ｂｌｏｏｄ  ｄｏｉ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ−２０１４−０１−５４５０２０）；先端切除バージョンのＥＧＦＲ（ｈｕＥＧＦＲｔ）は、細胞を抗ＥＧＦＲ  ｍＡｂによる溶解に対して感受性にする（Ｗａｎｇ，Ｘら、（２０１１）Ｂｌｏｏｄ  １１８，１２５５−１２６３）；細胞表面上において発現されたｍｙｃエピトープタグは、細胞を抗ｍｙｃ抗体による溶解に対して感受性にする（Ｋｉｅｂａｃｋら、（２００８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１０５，６２３−６２８）。これらの抗体依存性手法の主な限界は、作用する高い局所濃度における治療用抗体のバイオアベイラビリティへの依存性である。例えば、溶解抗体は、巨大病変に対して特に有効ではないことが公知であり、抗体に基づく自殺遺伝子の限界は、高い抗体濃度に達しない場所に常在する細胞が逃れることである。
したがって、上記欠点を伴わない代替的な自殺遺伝子が必要である。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
ＦＡＳエンドドメインに融合された複数回貫通型膜貫通タンパク質を含むキメラタンパク質であって、前記複数回貫通型膜貫通タンパク質が細胞外リガンドに結合して、前記ＦＡＳエンドドメインの活性化をもたらす、キメラタンパク質。
（項目２）
前記複数回貫通型膜貫通タンパク質が、ＣＤ２０、またはアミノ末端エンドドメインもしくはカルボキシ末端エンドドメインを欠くその先端切除バージョンである、項目１に記載のキメラタンパク質。
（項目３）
前記細胞外リガンドが、リツキシマブ、オファツムマブまたはベルツズマブである、項目２に記載のキメラタンパク質。
（項目４）
前記アミノ末端エンドドメインを欠く先端切除バージョンのＣＤ２０のカルボキシ末端に融合されたＦＡＳエンドドメインを含む、項目２に記載のキメラタンパク質。
（項目５）
前記ＣＤ２０が、配列番号３として示されている全長配列を基準にして、突然変異Ｐ１７２Ｗを含む、項目２に記載のキメラタンパク質。
（項目６）
前記ＣＤ２０が、配列番号３、４、５または６として示されている配列を含む、項目２に記載のキメラタンパク質。
（項目７）
前記複数回貫通型膜貫通タンパク質が、前記細胞外リガンドに結合する異種リガンド結合ドメインを含む、項目１に記載のキメラタンパク質。
（項目８）
前記ＦＡＳエンドドメインが、配列番号２０として示されている配列を含む、先行する項目のいずれかに記載のキメラタンパク質。
（項目９）
先行する項目のいずれかに記載のキメラタンパク質をコードする、核酸配列。
（項目１０）
１つまたはそれより多い項目９に記載の核酸配列と、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）またはキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸配列とを含む、核酸構築物。
（項目１１）
項目９に記載の核酸配列または項目１０に記載の核酸構築物を含む、ベクター。
（項目１２）
目的のヌクレオチドも含む、項目９に記載の核酸配列を含む、ベクター。
（項目１３）
前記ベクターを標的細胞の形質導入に使用する場合、前記標的細胞が、項目１〜８のいずれかに記載のキメラタンパク質およびキメラ抗原受容体またはＴ細胞受容体を共発現するように、前記目的のヌクレオチドがキメラ抗原受容体またはＴ細胞受容体をコードする、項目１２に記載のベクター。
（項目１４）
項目１〜８のいずれかに記載のキメラタンパク質を発現する、細胞。
（項目１５）
Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞または幹細胞である、項目１４に記載の細胞。
（項目１６）
項目１４または１５に記載の細胞を作製するための方法であって、項目１１〜１３のいずれかに記載のベクターを細胞に形質導入またはトランスフェクトする工程を含む、方法。
（項目１７）
項目１４または１５に記載の細胞を排除するための方法であって、前記複数回貫通型膜貫通タンパク質に結合する細胞外リガンドに前記細胞を曝露する工程を含む、方法。
（項目１８）
前記細胞外リガンドの結合が、前記ＦＡＳエンドドメインの活性化および前記細胞のアポトーシスをもたらす、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記細胞外リガンドの結合が、複数のキメラタンパク質の複数回貫通型膜貫通タンパク質の架橋をもたらして、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）をもたらす、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
前記細胞外リガンドが抗体であり、前記細胞外リガンドの結合が、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）をもたらす、項目１７に記載の方法。
（項目２１）
前記細胞外リガンドが、リツキシマブ、オファツムマブまたはベルツズマブである、項目１７〜２０のいずれかに記載の方法。
（項目２２）
被験体における疾患を予防または処置するための方法であって、項目１４または１５に記載の細胞を前記被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目２３）
以下：
（ｉ）項目１１〜１３のいずれかに記載のベクターを、被験体から単離された細胞の試料に形質導入またはトランスフェクトする工程、および
（ｉｉ）前記形質導入／トランスフェクトされた細胞を患者に投与する工程
を含む、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
癌を処置するための、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
被験体への項目１４または１５に記載の細胞の投与によって引き起こされる、前記被験体における病理学的免疫応答を予防および／または処置するための方法であって、前記複数回貫通型膜貫通タンパク質に結合することができる細胞外リガンドを前記被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目２６）
前記病理学的免疫応答が、以下の群：移植片対宿主病；オンターゲットオフ腫瘍毒性；免疫活性化症候群；およびリンパ増殖性障害から選択される、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
項目２２に記載の、被験体における疾患を処置するための方法であって、以下：
（ｉ）項目１４または１５に記載の細胞を前記被験体に投与する工程；
（ｉｉ）病理学的免疫応答の発症について、前記被験体をモニタリングする工程；および（ｉｉｉ）前記被験体が、病理学的免疫応答を発症するまたは発症した兆候を示す場合、前記複数回貫通型膜貫通タンパク質に結合することができる細胞外リガンドを前記被験体に投与する工程
を含む、方法。
（項目２８）
造血幹細胞移植、リンパ球注入または養子細胞移入に使用するための、項目１４または１５に記載の細胞。
（項目２９）
被験体への項目１４または１５に記載の細胞の投与によって引き起こされる病理学的免疫応答の予防または処置に使用するための、抗ＣＤ２０抗体。