【手続補正書】
【提出日】平成31年1月24日(2019.1.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
５’ＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡＵＵＡＡ  ３’(配列番号１)、５’ＡＵＡＵＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡ  ３’（配列番号２）または５’ＣＵＣＡＧＧＡＵＵＵＡＡＡＡＵ  ３’（配列番号３）に実質的に相補性である相補性領域を含む、１５〜３５塩基長であるＲＮＡ分子。
【請求項２】
該ＲＮＡ分子が一本鎖(ｓｓ)ＲＮＡまたは二本鎖(ｄｓ)ＲＮＡである、請求項１に記載のＲＮＡ分子であって、所望により、該ＲＮＡ分子が、ＨＴＴ遺伝子短ｍＲＮＡの３’非翻訳領域(ＵＴＲ)を標的とし、
該ｄｓＲＮＡが、所望により、以下：
センス鎖およびアンチセンス鎖を含む、ここで、アンチセンス鎖が、所望により、５’ＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡＵＵＡＡ  ３’(配列番号１)、５’ＡＵＡＵＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡ  ３’(配列番号２)または５’ＣＵＣＡＧＧＡＵＵＵＡＡＡＡＵ  ３’(配列番号３)と実質的に相補性である、配列番号１、２または３の少なくとも１０、１１、１２または１３連続ヌクレオチドに相補的である、配列番号１、２または３と３未満のミスマッチを含む、または配列番号１、２または３と完全相補性である、相補性領域を含む；
３０〜３５塩基対長である；
平滑末端である；
少なくとも一つの一本鎖ヌクレオチドオーバーハングを含む；
天然に存在するヌクレオチドを含む；
所望により２’−Ｏ−メチル修飾ヌクレオチド、５’ホスホロチオエート基を含むヌクレオチドおよびコレステリル誘導体またはドデカン酸ビスデシルアミド基に結合した末端ヌクレオチドからなる群から選択される、少なくとも一つの修飾ヌクレオチドを含む；
所望により２’−デオキシ−２’−フルオロ修飾ヌクレオチド、２’−デオキシ修飾ヌクレオチド、ロックドヌクレオチド、脱塩基ヌクレオチド、２’−アミノ修飾ヌクレオチド、２’−アルキル修飾ヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ホスホロアミデート、非天然塩基含有ヌクレオチド、少なくとも一つの２’−Ｏ−メチル修飾ヌクレオチドおよび少なくとも一つの５’ホスホロチオエート基を含むヌクレオチドからなる群から選択される、少なくとも一つの修飾ヌクレオチドを含む；および
コレステロール部分を含む、
の１つ以上を含む、ＲＮＡ分子。
【請求項３】
請求項２に記載のｄｓＲＮＡおよび薬学的に許容される担体を含む、生物におけるハンチンチン(ＨＴＴ)遺伝子の発現を阻害するための医薬組成物、またはハンチントン病を処置または管理する方法であって、このような処置または管理を必要とする患者に治療有効量の請求項２に記載のｄｓＲＮＡを投与することを含む、方法。
【請求項４】
５’末端、３’末端を含み、標的に対する相補性を有し、ここで、
(１)ＲＮＡ分子は交互の２’−メトキシ−リボヌクレオチドおよび２’−フルオロ−リボヌクレオチドを含み；
(２)５’末端から２位および１４位のヌクレオチドは２’−メトキシ−リボヌクレオチドではなく；
(３)ヌクレオチドはホスホジエステル結合またはホスホロチオエート結合により結合し；そして
(４)３’末端から１〜６位または３’末端から１〜７位のヌクレオチドはホスホロチオエート結合により隣接ヌクレオチドと結合する、
請求項１に記載のＲＮＡ分子。
【請求項５】
５’末端、３’末端および標的に対する相補性を有し、第一オリゴヌクレオチドおよび第二オリゴヌクレオチドを含み、ここで、
(１)第一オリゴヌクレオチドは配列番号１に示す配列を含み；
(２)第一オリゴヌクレオチドの一部は第二オリゴヌクレオチドの一部と相補的であり；
(３)第二オリゴヌクレオチドは交互の２’−メトキシ−リボヌクレオチドおよび２’−フルオロ−リボヌクレオチドを含み；
(４)第二オリゴヌクレオチドの３’末端から２位および１４位のヌクレオチドは２’−メトキシ−リボヌクレオチドであり、そして
(５)第二オリゴヌクレオチドのヌクレオチドはホスホジエステル結合またはホスホロチオエート結合により結合する、
請求項２に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項６】
以下：
第二オリゴヌクレオチドが第二オリゴヌクレオチドの３’末端で疎水性分子と結合する；
第二オリゴヌクレオチドと疎水性分子の結合がポリエチレングリコールまたはトリエチレングリコールを含む；
第二オリゴヌクレオチドの３’末端から１位および２位のヌクレオチドが隣接ヌクレオチドにホスホロチオエート結合により結合する；および
第二オリゴヌクレオチドの３’末端から１位および２位のヌクレオチドおよび第二オリゴヌクレオチドの５’末端から１位および２位のヌクレオチドが隣接リボヌクレオチドにホスホロチオエート結合により結合する、
の１つ以上を含む、請求項５に記載の核酸。
【請求項７】
(ａ)細胞に請求項２に記載の二本鎖リボ核酸(ｄｓＲＮＡ)を導入し；
(ｂ)工程(ａ)で産生した細胞を、ＨＴＴ遺伝子のｍＲＮＡトランスクリプトを分解させるのに十分な時間維持し、それにより、細胞におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害する
ことを含む、細胞におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害する方法。
【請求項８】
以下：
該ｄｓＲＮＡが患者の脳に投与される；
該ｄｓＲＮＡが線条体内注入により投与される；
請求項２に記載のｄｓＲＮＡの脳への投与が、線条体におけるＨＴＴ遺伝子ｍＲＮＡの減少を引き起こす；および
請求項２に記載のｄｓＲＮＡの脳への投与が、皮質におけるＨＴＴ遺伝子ｍＲＮＡの減少を引き起こす、
の１つ以上を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
細胞におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害するためのベクターであって、５’ＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡＵＵＡＡ  ３’(配列番号１)、５’ＡＵＡＵＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡ  ３’（配列番号２）または５’ＣＵＣＡＧＧＡＵＵＵＡＡＡＡＵ  ３’（配列番号３）に実質的に相補性であるＲＮＡ分子をコードするヌクレオチド配列に操作可能に結合した制御配列を含み、ここで、該ＲＮＡ分子が１０〜３５塩基長であり、該ＲＮＡ分子が、該ＨＴＴ遺伝子を発現する細胞と接触したとき、該ＨＴＴ遺伝子の発現を少なくとも２０％阻害する、ベクター。
【請求項１０】
ＲＮＡ分子がｓｓＲＮＡまたはｄｓＲＮＡである、請求項９に記載のベクターであって、該ｄｓＲＮＡが、所望により、
センス鎖およびアンチセンス鎖を含み、ここで、アンチセンス鎖が５’ＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡＵＵＡＡ  ３’(配列番号１)、５’ＡＵＡＵＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡ  ３’（配列番号２）または５’ＣＵＣＡＧＧＡＵＵＵＡＡＡＡＵ  ３’（配列番号３）と実質的に相補性である相補性領域を含む、または
３０〜３５塩基対長である、
ベクター。
【請求項１１】
請求項１０に記載のベクターを含む、細胞。
【請求項１２】
５’ＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡＵＵＡＡ  ３’(配列番号１)、５’ＡＵＡＵＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡ  ３’(配列番号２)または５’ＣＵＣＡＧＧＡＵＵＵＡＡＡＡＵ  ３’(配列番号３)に実質的に相補性である相補性領域を含む、１５〜３５塩基長であるｄｓＲＮＡ分子であって、ＨＴＴ  ｍＲＮＡを標的とし、少なくとも一つの修飾ヌクレオチドを含む、ｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１３】
該修飾ヌクレオチドがホスファチジルコリン誘導体に結合した末端ヌクレオチドである、請求項１２に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項１４】
５’ＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡＵＵＡＡ  ３’(配列番号１)、５’ＡＵＡＵＣＡＧＵＡＡＡＧＡＧＡ  ３’(配列番号２)または５’ＣＵＣＡＧＧＡＵＵＵＡＡＡＡＵ  ３’(配列番号３)に実質的に相補性である相補性領域を含む、１５〜３５塩基長である２ＲＮＡ分子を含む二分岐ＲＮＡ化合物であって、２ＲＮＡ分子がリンカー、スペーサーおよび分岐点から独立して選択される１以上の部分により、互いに結合する、二分岐ＲＮＡ化合物。
【請求項１５】
所望により、以下：
該ＲＮＡ分子がアンチセンス分子またはＧＡＰＭＥＲ分子である；
該アンチセンス分子がアンチセンスオリゴヌクレオチドである；
該アンチセンス分子が相補性領域の分解を増強する、ここで、所望により、該分解がヌクレアーゼ分解である；および
該ヌクレアーゼ分解がＲＮａｓｅ  Ｈが介在する、
の１つ以上を含む、請求項１に記載のＲＮＡ分子。