【手続補正書】
【提出日】令和1年7月16日(2019.7.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む、操作された免疫細胞：
B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)である標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体；および
操作された免疫細胞において標的抗原の発現を低下させる遺伝子破壊。
【請求項２】
遺伝子破壊が、標的抗原をコードする遺伝子の破壊を含む、請求項1記載の操作された免疫細胞。
【請求項３】
以下を含む、操作された免疫細胞：
疾患特異的標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体であって、標的抗原に関連する関連抗原にも結合するか、または結合すると疑われる、遺伝子操作された抗原受容体；ならびに
関連抗原をコードする遺伝子の遺伝子破壊、および/あるいは操作された免疫細胞において関連抗原の発現を低下させるかもしくは抑制するか、または低下もしくは抑制することができる遺伝子破壊。
【請求項４】
標的抗原がB細胞成熟抗原(BCMA)であり、関連抗原が、異なるBCMAファミリーメンバーである、請求項3記載の操作された免疫細胞。
【請求項５】
BCMAファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、請求項4記載の操作された免疫細胞。
【請求項６】
操作された免疫細胞における標的抗原または関連抗原の発現が、破壊が無い免疫細胞における発現と比較して少なくとも50％、60％、70％、80％、90％、または95％少ない、請求項1〜5のいずれか一項記載の操作された免疫細胞。
【請求項７】
別の抗原に特異的に結合しかつ細胞に対して共刺激シグナルを誘導することができるキメラ共刺激受容体である、別の遺伝子操作された抗原受容体をさらに含む、あるいは、
第2の標的抗原に特異的に結合し、他の標的抗原の認識時に、細胞に対して阻害シグナルまたは免疫抑制シグナルまたは抑制シグナルを誘導することができるキメラ抑制性受容体である、別の遺伝子操作された抗原受容体をさらに含む、
請求項1〜6のいずれか一項記載の操作された免疫細胞。
【請求項８】
第2の標的抗原が、がん細胞の表面にも感染細胞の表面にも発現していない抗原であるか、またはその発現ががん細胞もしくは感染細胞でダウンレギュレートされている、請求項7記載の操作された免疫細胞。
【請求項９】
(a)第1の抗原に特異的に結合しかつ細胞に対して活性化シグナルを誘導することができる、第1の遺伝子操作された抗原受容体；および
(b)第2の抗原に特異的に結合する第2の遺伝子操作された抗原受容体、または、第2の抗原に特異的に結合しかつ細胞に対して共刺激シグナルを誘導することができるキメラ共刺激受容体である、第2の遺伝子操作された抗原受容体
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、第1の抗原または第2の抗原のうちの少なくとも1つが、B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)である、操作された免疫細胞。
【請求項１０】
第1の抗原または第2の抗原の一方が、腫瘍において発現している抗原である、請求項9記載の操作された免疫細胞。
【請求項１１】
第1の抗原または第2の抗原がBCMAである、請求項9または10記載の操作された免疫細胞。
【請求項１２】
第1の抗原または第2の抗原の一方が、BCMA関連ファミリーメンバーである、またはFcRH5、CS1、CD38、もしくはCD138である、請求項9〜11のいずれか一項記載の操作された免疫細胞。
【請求項１３】
BCMA関連ファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、請求項12記載の操作された免疫細胞。
【請求項１４】
第1の抗原をコードする遺伝子および/または第2の抗原をコードする遺伝子の破壊をさらに含み、破壊によって、操作された免疫細胞における第1の抗原および/または第2の抗原の発現が低下する、請求項9〜13のいずれか一項記載の操作された免疫細胞。
【請求項１５】
免疫細胞がT細胞またはNK細胞である、請求項1〜14のいずれか一項記載の操作された免疫細胞。
【請求項１６】
免疫細胞が、CD4+T細胞またはCD8+T細胞であるT細胞である、請求項1〜15のいずれか一項記載の操作された免疫細胞。
【請求項１７】
遺伝子操作された抗原受容体がキメラ抗原受容体(CAR)またはT細胞受容体（TCR）である、請求項1〜16のいずれか一項記載の操作された免疫細胞。
【請求項１８】
(a)BCMA、TACI、またはBAFF受容体である標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程;および
(b)免疫細胞において標的抗原の発現の抑制を行い、それによって、標的抗原の発現が抑制された、遺伝子操作された免疫細胞を生成する工程
を含み、工程(a)および(b)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、遺伝子操作された免疫細胞を生成する方法。
【請求項１９】
以下の工程：
(a)BCMA、TACI、またはBAFF受容体である標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程;および
(b)免疫細胞において関連抗原の発現の抑制を行い、それによって、関連抗原の発現が抑制された、遺伝子操作された免疫細胞を生成する工程であって、受容体が、標的抗原に関連する関連抗原にも結合するか、または結合すると疑われる、工程
を含み、工程(a)および(b)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、遺伝子操作された免疫細胞を生成する方法。
【請求項２０】
標的抗原がB細胞成熟抗原(BCMA)であり、関連抗原が、異なるBCMAファミリーメンバーである、請求項19記載の方法。
【請求項２１】
BCMAファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、請求項20記載の方法。
【請求項２２】
抑制を行う工程が、標的抗原または関連抗原をコードする遺伝子を破壊することを含む、請求項18〜21のいずれか一項記載の方法。
【請求項２３】
(c)別の抗原に特異的に結合しかつ細胞に共刺激シグナルを誘導することができるキメラ共刺激受容体である、別の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程
をさらに含み、工程(a)、(b)、および(c)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、請求項18〜22のいずれか一項記載の方法。
【請求項２４】
(a)第1の抗原に特異的に結合する第1の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程;および
(b)第2の抗原に特異的に結合する第2の遺伝子操作された抗原受容体、またはキメラ共刺激受容体でありかつ第2の抗原に特異的に結合する第2の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入し、それによって、操作された免疫細胞を生成する工程
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、少なくとも、第1の抗原または第2の抗原が、B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)であり、(a)および(b)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、遺伝子操作された免疫細胞を生成する方法。
【請求項２５】
第1の抗原または第2の抗原の一方が、腫瘍において発現している抗原である、請求項24記載の方法。
【請求項２６】
第1の抗原または第2の抗原がBCMAである、請求項24または25記載の方法。
【請求項２７】
第1の抗原または第2の抗原の一方が、BCMA関連ファミリーメンバーである、またはFcRH5、CS1、CD38、もしくはCD138である、請求項26記載の方法。
【請求項２８】
BCMA関連ファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、請求項27記載の方法。
【請求項２９】
(c)免疫細胞において第1の抗原および/または第2の抗原をコードする遺伝子の破壊を行う工程をさらに含む、請求項24〜28のいずれか一項記載の方法。
【請求項３０】
破壊が、特異的に前記遺伝子に結合またはハイブリダイズするDNA結合タンパク質またはDNA結合核酸、あるいは(a)DNA標的化タンパク質とヌクレアーゼを含む融合タンパク質、あるいは(b)RNAガイドヌクレアーゼを免疫細胞に導入することを含む、請求項22または29記載の方法。
【請求項３１】
DNA標的化タンパク質またはRNAガイドヌクレアーゼが、前記遺伝子に特異的な、ジンクフィンガータンパク質(ZFP)、TALタンパク質、またはクリスパー(CRISPR：clustered regularly interspaced short palindromic nucleic acid)を含む、請求項30記載の方法。
【請求項３２】
免疫細胞がT細胞またはNK細胞である、請求項18〜31のいずれか一項記載の方法。
【請求項３３】
免疫細胞が、CD4+T細胞またはCD8+T細胞であるT細胞である、請求項18〜32のいずれか一項記載の方法。
【請求項３４】
遺伝子操作された抗原受容体がキメラ抗原受容体(CAR)またはT細胞受容体(TCR)である、請求項18〜33のいずれか一項記載の方法。
【請求項３５】
請求項18〜34のいずれか一項記載の方法によって生成された、細胞。
【請求項３６】
請求項1〜17のいずれか一項記載の操作された免疫細胞または請求項35記載の細胞、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項３７】
(a)第1の抗原に特異的に結合する第1の遺伝子操作された抗原受容体を発現しかつ第2の抗原に特異的に結合する第2の操作された抗原受容体を発現しない、第1の操作された免疫細胞；ならびに
(b)遺伝子操作された抗原受容体を発現する、第2の操作された免疫細胞
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、第1の抗原または第2の抗原のうちの少なくとも1つが、B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)である、組成物または組み合わせ。
【請求項３８】
第1の抗原または第2の抗原がBCMAである、請求項37記載の組成物または組み合わせ。
【請求項３９】
第1の抗原または第2の抗原の一方が、BCMA関連ファミリーメンバーである、またはFcRH5、CS1、CD38、もしくはCD138である、請求項38記載の組成物または組み合わせ。
【請求項４０】
BCMA関連ファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、請求項39記載の組成物または組み合わせ。
【請求項４１】
疾患または状態を処置するための方法において使用するための医用薬剤の製造における、請求項1〜17のいずれか一項記載の細胞、請求項36記載の組成物、または請求項37〜40のいずれか一項記載の組成物もしくは組み合わせの、使用。
【請求項４２】
疾患または状態の処置において使用するための、請求項36記載の組成物または請求項37〜40のいずれか一項記載の組成物もしくは組み合わせ。
【請求項４３】
遺伝子操作された抗原受容体が、疾患または状態に関連する抗原に特異的に結合する、請求項41記載の使用または請求項42記載の組成物もしくは組み合わせ。
【請求項４４】
疾患または状態が腫瘍またはがんである、請求項42または43記載の使用または組成物もしくは組み合わせ。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１４】
IV．例示的な態様
本明細書において提供される態様の中には以下のものがある。
１．
以下を含む、操作された免疫細胞：
ユニバーサル腫瘍抗原である標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体；および
操作された免疫細胞において標的抗原の発現を低下させる遺伝子破壊。
２．
ユニバーサル腫瘍抗原が、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素(hTERT)、サバイビン、マウス二重微小染色体2ホモログ(MDM2)、チトクロムP450 1B1(CYP1B)、HER2/neu、ウィルムス腫瘍遺伝子1(WT1)、リビン、αフェトプロテイン(AFP)、がん胎児抗原(CEA)、ムチン16(MUC16)、MUC1、前立腺特異的膜抗原(PSMA)、p53、またはサイクリン(D1)である、態様1記載の操作された細胞。
３．
ユニバーサル腫瘍抗原がhTERTまたはサバイビンである、態様1または2記載の操作された細胞。
４．
以下を含む、操作された免疫細胞：
B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)である標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体；および
操作された免疫細胞において標的抗原の発現を低下させる遺伝子破壊。
５．
遺伝子破壊が、標的抗原をコードする遺伝子の破壊を含む、態様1〜4のいずれかの操作された免疫細胞。
６．
標的抗原が、操作された免疫細胞の細胞タイプにおいて天然に発現され得る遺伝子産物である、態様1〜5のいずれかの操作された免疫細胞。
７．
標的抗原が、休止T細胞、活性化T細胞、またはその両方によって発現される抗原である、態様1〜6のいずれかの操作された免疫細胞。
８．
標的抗原が、活性化T細胞によって発現されかつ減少したレベルで休止T細胞によって発現される抗原である、態様1〜7のいずれかの操作された免疫細胞。
９．
活性化T細胞による標的抗原の発現が、休止T細胞または非活性化T細胞と比較して50％超、60％超、70％超、80％超、90％超、95％超、もしくはそれより大きなレベル、および/または1倍、1.5倍、2倍、3倍、もしくはそれより大きなレベルである、態様8記載の操作された免疫細胞。
１０．
標的抗原が休止T細胞では発現していない、態様8または9記載の操作された免疫細胞。
１１．
以下を含む、操作された免疫細胞：
疾患特異的標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体であって、標的抗原に関連する関連抗原にも結合するか、または結合すると疑われる、遺伝子操作された抗原受容体；ならびに
関連抗原をコードする遺伝子の遺伝子破壊、および/あるいは操作された免疫細胞において関連抗原の発現を低下させるかもしくは抑制するか、または低下もしくは抑制することができる遺伝子破壊。
１２．
標的抗原がB細胞成熟抗原(BCMA)であり、関連抗原が、異なるBCMAファミリーメンバーである、態様11記載の操作された免疫細胞。
１３．
BCMAファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、態様12記載の操作された免疫細胞。
１４．
標的抗原が、操作された免疫細胞の細胞タイプにおいて天然に発現していない遺伝子産物であり、関連抗原が、操作された免疫細胞の細胞タイプにおいて天然に発現している遺伝子産物である、態様11〜13のいずれかの操作された免疫細胞。
１５．
免疫細胞がT細胞またはNK細胞である、態様1〜14のいずれかの操作された免疫細胞。
１６．
免疫細胞が、CD4+T細胞またはCD8+T細胞であるT細胞である、態様1〜15のいずれかの操作された免疫細胞。
１７．
関連抗原が、休止T細胞、活性化T細胞、またはその両方によって発現される抗原である、態様11〜12のいずれかの操作された免疫細胞。
１８．
関連抗原が、活性化T細胞によって発現されかつ減少したレベルで休止T細胞によって発現される抗原である、態様11〜17のいずれかの操作された免疫細胞。
１９．
活性化T細胞による関連抗原の発現が、休止T細胞または非活性化T細胞と比較して50％超、60％超、70％超、80％超、90％超、95％超、もしくはそれより大きなレベル、および/または1倍、1.5倍、2倍、3倍、もしくはそれより大きなレベルである、態様18記載の操作された免疫細胞。
２０．
関連抗原が休止T細胞では発現していない、態様18または19記載の操作された免疫細胞。
２１．
活性化T細胞が、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40L(CD154)、および4-1BB(CD137)からなる群より選択されるT細胞活性化マーカーについて表面陽性である、ならびに/もしくはIL-2、IFNγ、およびTNF-αからなる群より選択されるサイトカインの細胞内発現を含有する、ならびに/または
休止T細胞が、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40L(CD154)、および4-1BB(CD137)からなる群より選択されるT細胞活性化マーカーについて表面陰性であるか、もしくはIL-2、IFNγ、およびTNF-αからなる群より選択されるサイトカインの細胞内発現を欠く、
態様8〜10または17〜19のいずれかの操作された免疫細胞。
２２．
操作された免疫細胞における標的抗原または関連抗原の発現が、破壊が無い免疫細胞における発現と比較して少なくとも50％、60％、70％、80％、90％、または95％少ない、態様1〜21のいずれかの細胞。
２３．
標的抗原が、がんにおける細胞表面で発現しているか、あるいは
標的抗原が、がんの細胞もしくは組織の表面で、またはがんの細胞もしくは組織の中で発現している、態様1〜22のいずれかの操作された免疫細胞。
２４．
がんが、血液がん、免疫がん、白血病、リンパ腫、および/または骨髄腫であり、骨髄腫が、任意で、多発性骨髄腫である、態様23記載の操作された免疫細胞。
２５．
遺伝子操作された抗原受容体がT細胞受容体(TCR)または機能的非TCR抗原認識受容体である、態様1〜24のいずれかの操作された免疫細胞。
２６．
遺伝子操作された抗原受容体が、標的抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)である、態様1〜25のいずれかの操作された免疫細胞。
２７．
遺伝子操作された抗原受容体が、主要組織適合遺伝子複合体(MHC)分子の状況において標的抗原のペプチドに特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインを含むキメラ抗原受容体(CAR)である、態様1〜26のいずれかの操作された免疫細胞。
２８．
遺伝子操作された抗原受容体が、操作された免疫細胞に対して活性化シグナルを誘導することができる、態様1〜27のいずれかの操作された免疫細胞。
２９．
遺伝子操作された抗原受容体が、ITAM含有モチーフを有する細胞内ドメインを含む、態様28記載の操作された免疫細胞。
３０．
細胞内シグナル伝達ドメインがCD3-ゼータ(CD3ζ)鎖の細胞内ドメインを含む、態様29記載の操作された免疫細胞。
３１．
遺伝子操作された受容体がCARであり、かつ共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、態様28〜30のいずれかの操作された免疫細胞。
３２．
共刺激シグナル伝達領域がCD28のシグナル伝達ドメインを含む、態様31記載の操作された免疫細胞。
３３．
別の抗原に特異的に結合しかつ細胞に対して共刺激シグナルを誘導することができるキメラ共刺激受容体である、別の遺伝子操作された抗原受容体をさらに含む、態様1〜32のいずれかの操作された免疫細胞。
３４．
第2の標的抗原に特異的に結合し、他の標的抗原の認識時に、細胞に対して阻害シグナルまたは免疫抑制シグナルまたは抑制シグナルを誘導することができるキメラ抑制性受容体である、別の遺伝子操作された抗原受容体をさらに含む、態様1〜32のいずれかの操作された免疫細胞。
３５．
第2の標的抗原が、がん細胞の表面にも感染細胞の表面にも発現していない抗原であるか、またはその発現ががん細胞もしくは感染細胞でダウンレギュレートされている、態様34記載の操作された免疫細胞。
３６．
第2の標的抗原がMHCクラスI分子である、態様34または35記載の操作された免疫細胞。
３７．
遺伝子操作された抗原受容体がキメラ抗原受容体(CAR)である、態様34〜36のいずれかの操作された免疫細胞。
３８．
CARが、標的抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、免疫チェックポイント分子のシグナル伝達部分を含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、態様37記載の操作された免疫細胞。
３９．
免疫チェックポイント分子がPD-1またはCTLA4である、態様38記載の操作された免疫細胞。
４０．
(a)ユニバーサル腫瘍抗原である標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程;および
(b)免疫細胞において標的抗原の発現の抑制を行い、それによって、標的抗原の発現が抑制された、遺伝子操作された免疫細胞を生成する工程
を含み、工程(a)および(b)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、遺伝子操作された免疫細胞を生成する方法。
４１．
ユニバーサル腫瘍抗原が、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素(hTERT)、サバイビン、マウス二重微小染色体2ホモログ(MDM2)、チトクロムP450 1B1(CYP1B)、HER2/neu、ウィルムス腫瘍遺伝子1(WT1)、リビン、αフェトプロテイン(AFP)、がん胎児抗原(CEA)、ムチン16(MUC16)、MUC1、前立腺特異的膜抗原(PSMA)、p53、またはサイクリン(D1)である、態様40記載の方法。
４２．
ユニバーサル腫瘍抗原がhTERTまたはサバイビンである、態様40または41記載の方法。
４３．
(a)BCMA、TACI、またはBAFF受容体である標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程;および
(b)免疫細胞において標的抗原の発現の抑制を行い、それによって、標的抗原の発現が抑制された、遺伝子操作された免疫細胞を生成する工程
を含み、工程(a)および(b)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、遺伝子操作された免疫細胞を生成する方法。
４４．
標的抗原が、操作された免疫細胞の細胞タイプにおいて天然に発現され得る遺伝子産物である、態様40〜43のいずれかの方法。
４５．
標的抗原が、休止T細胞、活性化T細胞、またはその両方によって発現される抗原である、態様40〜44のいずれかの方法。
４６．
標的抗原が、活性化T細胞によって発現されかつ減少したレベルで休止T細胞によって発現される抗原である、態様40〜45のいずれかの方法。
４７．
活性化T細胞による標的抗原の発現が、休止T細胞または非活性化T細胞と比較して50％超、60％超、70％超、80％超、90％超、95％超、もしくはそれより大きなレベル、および/または1倍、1.5倍、2倍、3倍、もしくはそれより大きなレベルである、態様46記載の方法。
４８．
標的抗原が休止T細胞では発現していない、態様46または47記載の方法。
４９．
以下の工程：
(a)BCMA、TACI、またはBAFF受容体である標的抗原に特異的に結合する、遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程;および
(b)免疫細胞において関連抗原の発現の抑制を行い、それによって、関連抗原の発現が抑制された、遺伝子操作された免疫細胞を生成する工程であって、受容体が、標的抗原に関連する関連抗原にも結合するか、または結合すると疑われる、工程
を含み、工程(a)および(b)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、遺伝子操作された免疫細胞を生成する方法。
５０．
標的抗原がB細胞成熟抗原(BCMA)であり、関連抗原が、異なるBCMAファミリーメンバーである、態様49記載の方法。
５１．
BCMAファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、態様50記載の方法。
５２．
標的抗原が、操作された免疫細胞の細胞タイプにおいて天然に発現していない遺伝子産物であり、関連抗原が、操作された免疫細胞の細胞タイプにおいて天然に発現している遺伝子産物である、態様49〜51のいずれかの方法。
５３．
免疫細胞がT細胞またはNK細胞である、態様40〜52のいずれかの方法。
５４．
免疫細胞が、CD4+T細胞またはCD8+T細胞であるT細胞である、態様40〜53のいずれかの方法。
５５．
関連抗原が、休止T細胞、活性化T細胞、またはその両方によって発現される抗原である、態様49〜54のいずれかの方法。
５６．
関連抗原が、活性化T細胞によって発現されかつ減少したレベルで休止T細胞によって発現される抗原である、態様49〜55のいずれかの方法。
５７．
活性化T細胞による関連抗原の発現が、休止T細胞または非活性化T細胞と比較して50％超、60％超、70％超、80％超、90％超、95％超、もしくはそれより大きなレベル、および/または1倍、1.5倍、2倍、3倍、もしくはそれより大きなレベルである、態様56記載の方法。
５８．
関連抗原が休止T細胞では発現していない、態様56または57記載の方法。
５９．
活性化T細胞が、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40L(CD154)、および4-1BB(CD137)からなる群より選択されるT細胞活性化マーカーについて表面陽性である、ならびに/もしくはIL-2、IFNγ、およびTNF-αからなる群より選択されるサイトカインの細胞内発現を含有する、ならびに/または
休止T細胞が、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40L(CD154)、および4-1BB(CD137)からなる群より選択されるT細胞活性化マーカーについて表面陰性であるか、もしくはIL-2、IFNγ、およびTNF-αからなる群より選択されるサイトカインの細胞内発現を欠く、
態様45〜48および態様55〜58のいずれかの方法。
６０．
(b)の工程が、標的抗原または関連抗原をコードする遺伝子を破壊することを含む、態様40〜59のいずれかの方法。
６１．
破壊が、遺伝子をDNAレベルで破壊することを含み、および/または
破壊が可逆的でない、および/または
破壊が一過性でない、
態様60記載の方法。
６２．
破壊が、特異的に遺伝子に結合またはハイブリダイズするDNA結合タンパク質またはDNA結合核酸を免疫細胞に導入することを含む、態様60または61記載の方法。
６３．
破壊が、(a)DNA標的化タンパク質とヌクレアーゼを含む融合タンパク質、または(b)RNAガイドヌクレアーゼを導入することを含む、態様62記載の方法。
６４．
DNA標的化タンパク質またはRNAガイドヌクレアーゼが、遺伝子に特異的な、ジンクフィンガータンパク質(ZFP)、TALタンパク質、またはクリスパー(CRISPR：clustered regularly interspaced short palindromic nucleic acid)を含む、態様63記載の方法。
６５．
破壊が、特異的に遺伝子に結合するか、遺伝子を認識するか、または遺伝子とハイブリダイズする、ジンクフィンガーヌクレアーゼ(ZFN)、TAL-エフェクターヌクレアーゼ(TALEN)、または/およびクリスパー-Cas9の組み合わせを導入することを含む、態様40〜64のいずれかの方法。
６６．
標的抗原が、免疫細胞において天然に発現している遺伝子産物である、および/または標的抗原の発現が、遺伝子操作された抗原受容体を導入することによって誘導される、態様40〜65のいずれかの方法。
６７．
標的抗原が、操作された免疫細胞の細胞タイプにおいて天然に発現していない遺伝子産物であり、関連抗原が、操作された免疫細胞の細胞タイプにおいて天然に発現している遺伝子産物である、態様49〜65のいずれかの方法。
６８．
前記抑制が、操作された免疫細胞における標的抗原または関連抗原の発現を、抑制が無い方法によって生成された操作された細胞と比較して少なくとも50％、60％、70％、80％、90％、または95％低下させる、態様40〜67のいずれかの方法。
６９．
標的抗原が多発性骨髄腫において発現している、態様40〜68のいずれかの方法。
７０．
(c)別の抗原に特異的に結合しかつ細胞に共刺激シグナルを誘導することができるキメラ共刺激受容体である、別の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程
をさらに含み、工程(a)、(b)、および(c)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、態様40〜69のいずれかの方法。
７１．
遺伝子操作された抗原受容体がT細胞受容体(TCR)または機能的非TCR抗原認識受容体である、態様40〜70のいずれかの方法。
７２．
遺伝子操作された抗原受容体がキメラ抗原受容体(CAR)である、態様40〜71のいずれかの方法。
７３．
態様40〜72のいずれかの方法によって生成された、細胞。
７４．
(a)第1の抗原に特異的に結合する第1の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程;および
(b)キメラ共刺激受容体でありかつ第2の抗原に特異的に結合する第2の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入し、それによって、操作された免疫細胞を生成する工程
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、少なくとも、第1の抗原または第2の抗原がユニバーサル腫瘍抗原であり、(a)および(b)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、遺伝子操作された免疫細胞を生成する方法。
７５．
ユニバーサル腫瘍抗原が、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素(hTERT)、サバイビン、マウス二重微小染色体2ホモログ(MDM2)、チトクロムP450 1B1(CYP1B)、HER2/neu、ウィルムス腫瘍遺伝子1(WT1)、リビン、αフェトプロテイン(AFP)、がん胎児抗原(CEA)、ムチン16(MUC16)、MUC1、前立腺特異的膜抗原(PSMA)、p53、またはサイクリン(D1)である、態様74記載の方法。
７６．
ユニバーサル腫瘍抗原がhTERTまたはサバイビンである、態様74または75記載の方法。
７７．
(a)第1の抗原に特異的に結合する第1の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程;および
(b)キメラ共刺激受容体でありかつ第2の抗原に特異的に結合する第2の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入し、それによって、操作された免疫細胞を生成する工程
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、少なくとも、第1の抗原または第2の抗原が、B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)であり、(a)および(b)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、遺伝子操作された免疫細胞を生成する方法。
７８．
(a)第1の抗原に特異的に結合する第1の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入する工程;および
(b)第2の抗原に特異的に結合する第2の遺伝子操作された抗原受容体を免疫細胞に導入し、それによって、操作された免疫細胞を生成する工程
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、少なくとも、第1の抗原または第2の抗原が、B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)であり、(a)および(b)が同時にまたは任意の順序で連続して行われる、遺伝子操作された免疫細胞を生成する方法。
７９．
第1の抗原または第2の抗原の一方が、腫瘍において発現している抗原である、態様74〜78のいずれかの方法。
８０．
第1の抗原または第2の抗原がBCMAである、態様77〜79のいずれかの方法。
８１．
第1の抗原または第2の抗原の一方が、BCMA関連ファミリーメンバーである、態様80記載の方法。
８２．
BCMA関連ファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、態様81記載の方法。
８３．
第1の抗原または第2の抗原の一方が、FcRH5、CS1、CD38、またはCD138である、態様78〜82のいずれかの方法。
８４．
(c)免疫細胞において第1の抗原および/または第2の抗原の発現の抑制を行う工程をさらに含む、態様74〜83のいずれかの方法。
８５．
抑制を行う工程が、特異的に遺伝子に結合またはハイブリダイズするDNA結合タンパク質またはDNA結合核酸を免疫細胞に導入することを含む、態様84記載の方法。
８６．
抑制を行う工程が、特異的に遺伝子に結合するか、遺伝子を認識するか、または遺伝子とハイブリダイズする、ジンクフィンガーヌクレアーゼ(ZFN)、TAL-エフェクターヌクレアーゼ(TALEN)、または/およびクリスパー-Cas9の組み合わせを導入することを含む、態様84または85記載の方法。
８７．
前記抑制が、操作された免疫細胞における標的抗原の発現を、抑制が無い方法によって生成された操作された細胞と比較して少なくとも50％、60％、70％、80％、90％、または95％低下させる、態様84〜86のいずれかの方法。
８８．
態様74〜87のいずれかの方法によって生成された、細胞。
８９．
(a)第1の抗原に特異的に結合しかつ細胞に対して活性化シグナルを誘導することができる、第1の遺伝子操作された抗原受容体；および
(b)第2の抗原に特異的に結合しかつ細胞に対して共刺激シグナルを誘導することができるキメラ共刺激受容体である、第2の遺伝子操作された抗原受容体
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、第1の抗原または第2の抗原のうちの少なくとも1つがユニバーサル腫瘍抗原である、操作された免疫細胞。
９０．
ユニバーサル腫瘍抗原が、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素(hTERT)、サバイビン、マウス二重微小染色体2ホモログ(MDM2)、チトクロムP450 1B1(CYP1B)、HER2/neu、ウィルムス腫瘍遺伝子1(WT1)、リビン、αフェトプロテイン(AFP)、がん胎児抗原(CEA)、ムチン16(MUC16)、MUC1、前立腺特異的膜抗原(PSMA)、p53、またはサイクリン(D1)である、態様89記載の操作された免疫細胞。
９１．
ユニバーサル腫瘍抗原がhTERTまたはサバイビンである、態様89または90記載の操作された免疫細胞。
９２．
(a)第1の抗原に特異的に結合しかつ細胞に対して活性化シグナルを誘導することができる、第1の遺伝子操作された抗原受容体；および
(b)第2の抗原に特異的に結合しかつ細胞に対して共刺激シグナルを誘導することができるキメラ共刺激受容体である、第2の遺伝子操作された抗原受容体
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、第1の抗原または第2の抗原のうちの少なくとも1つが、B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)である、操作された免疫細胞。
９３．
(a)第1の抗原に特異的に結合する第1の遺伝子操作された抗原受容体;および
(b)第2の抗原に特異的に結合する第2の遺伝子操作された抗原受容体
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、第1の抗原または第2の抗原のうちの少なくとも1つが、B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)である、操作された免疫細胞。
９４．
第1の抗原または第2の抗原の一方が、腫瘍において発現している抗原である、態様89〜93のいずれかの操作された免疫細胞。
９５．
第1の抗原または第2の抗原がBCMAである、態様92〜94のいずれかの操作された免疫細胞。
９６．
第1の抗原または第2の抗原の一方が、BCMA関連ファミリーメンバーである、態様92〜95のいずれかの操作された免疫細胞。
９７．
BCMA関連ファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、態様96記載の操作された免疫細胞。
９８．
第1の抗原または第2の抗原の一方が、FcRH5、CS1、CD38、またはCD138である、態様92〜95のいずれかの操作された免疫細胞。
９９．
第1の遺伝子操作された抗原受容体がITAM含有配列を含む、態様89〜98のいずれかの操作された免疫細胞。
１００．
第1の遺伝子操作された抗原受容体がCD3-ゼータ(CD3ζ)鎖の細胞内シグナル伝達ドメインを含む、態様99記載の操作された免疫細胞。
１０１．
第1の遺伝子操作された抗原受容体が、T細胞共刺激分子に由来するシグナル伝達ドメインを含まない、態様99または100記載の操作された免疫細胞。
１０２．
受容体が、T細胞共刺激分子の細胞内シグナル伝達ドメインを含む、態様89〜101のいずれかの操作された免疫細胞。
１０３．
T細胞共刺激分子が、CD28および41BBからなる群より選択される1つまたは複数の分子を含む、態様102記載の操作された免疫細胞。
１０４．
第1の抗原をコードする遺伝子および/または第2の抗原をコードする遺伝子の破壊をさらに含み、破壊によって、操作された免疫細胞における第1の抗原および/または第2の抗原の発現が低下する、態様89〜103のいずれかの操作された免疫細胞。
１０５．
操作された免疫細胞における第1の抗原および/または第2の抗原の発現が、遺伝子破壊が無い免疫細胞における発現と比較して少なくとも50％、60％、70％、80％、90％、または95％低下する、態様104記載の操作された免疫細胞。
１０６．
免疫細胞がT細胞である、態様89〜105のいずれかの操作された免疫細胞。
１０７．
免疫細胞がCD4+T細胞またはCD8+T細胞である、態様106記載の操作された免疫細胞。
１０８．
第1の遺伝子操作された抗原受容体がT細胞受容体(TCR)または機能的非TCR抗原認識受容体である、態様89〜107のいずれかの操作された免疫細胞。
１０９．
第1の遺伝子操作された抗原受容体がキメラ抗原受容体(CAR)である、態様108記載の操作された免疫細胞。
１１０．
態様1〜39および態様89〜109のいずれかの操作された免疫細胞、ならびに薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
１１１．
(a)第1の抗原に特異的に結合する第1の遺伝子操作された抗原受容体を発現しかつ第2の抗原に特異的に結合する第2の操作された抗原受容体を発現しない、第1の操作された免疫細胞；ならびに
(b)遺伝子操作された抗原受容体を発現する、第2の操作された免疫細胞
を含み、第1の抗原および第2の抗原が別個であり、第1の抗原または第2の抗原のうちの少なくとも1つが、B細胞成熟抗原(BCMA)、CAMLタンパク質(TACI(transmembrane activator and CAML interactor))、またはB細胞活性化因子受容体(BAFF-R)である、組成物または組み合わせ。
１１２．
第1の抗原または第2の抗原がBCMAである、態様111記載の組成物または組み合わせ。
１１３．
第1の抗原または第2の抗原の一方が、BCMA関連ファミリーメンバーである、態様112記載の組成物または組み合わせ。
１１４．
BCMA関連ファミリーメンバーがTACIまたはBAFF-Rである、態様113記載の組成物または組み合わせ。
１１５．
第1の抗原または第2の抗原の一方が、FcRH5、CS1、CD38、またはCD138である、態様111または112記載の組成物または組み合わせ。
１１６．
薬学的組成物である、態様111〜115のいずれかの組成物または組み合わせ。
１１７．
態様1〜39および態様89〜109のいずれかの細胞、または態様111〜116のいずれかの組成物もしくは組み合わせを、疾患または状態を有する対象に投与する工程を含む、処置方法。
１１８．
1種または複数種の遺伝子操作された抗原受容体が、疾患または状態に関連する抗原に特異的に結合する、態様117記載の方法。
１１９．
疾患または状態ががんである、態様117または118記載の方法。
１２０．
疾患または状態を処置するための方法において使用するための医用薬剤の製造における、態様1〜39および89〜109のいずれかの細胞、態様110記載の組成物、または態様111〜116のいずれかの組成物もしくは組み合わせの、使用。
１２１．
疾患または状態の処置において使用するための、態様110記載の組成物または態様111〜116のいずれかの組成物もしくは組み合わせ。
１２２．
遺伝子操作された抗原受容体が、疾患または状態に関連する抗原に特異的に結合する、態様120記載の使用または態様121記載の組成物もしくは組み合わせ。
１２３．
疾患または状態が腫瘍またはがんである、態様121または122記載の使用、組成物、または組み合わせ。