【手続補正書】
【提出日】令和1年9月10日(2019.9.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
微小作物を含むバイオマスを処理することによって作られる、高濃度タンパク質生成物であって、この処理方法は、
ブランチング溶液中、バイオマスの第１の部分をブランチングし、濡れたタンパク質濃縮物を作成することと；
分離した溶液から、前記第１の濡れたタンパク質濃縮物を分離することと；
前記第１の濡れたタンパク質濃縮物を乾燥させ、第１のタンパク質濃縮物のフレークおよび第１のタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つを作成することと、を含み、
前記第１のタンパク質濃縮物のフレークおよび前記第１のタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つは、乾燥質量基準（ＤＭＢ）で、少なくとも４０％のタンパク質を含み、タンパク質消化性補正アミノ酸スコア（ＰＤＣＡＡＳ）値が少なくとも０．９０である、高濃度タンパク質生成物。
【請求項２】
前記方法が、前記タンパク質濃縮物のフレークおよび前記タンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つを粉砕して、タンパク質濃縮物の粉状物を作成することをさらに含む、請求項１に記載の高濃度タンパク質生成物。
【請求項３】
前記ＰＤＣＡＡＳ値がヒスチジンによって制限されるか又は、
前記タンパク質濃縮物のフレークおよび前記タンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つが、
少なくとも０．９２のＰＤＣＡＡＳ；
少なくとも９０％の消化率；
ＤＭＢで１０％未満の灰分；
ＤＭＢで少なくとも３０％の食物繊維含量；
ＤＭＢで１％未満のシュウ酸含量；
３．２ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量；
ＤＭＢで７％未満の脂肪含量；
少なくとも７ｍｌ／ｇの水結合能；および
少なくとも３ｍｌ／ｇの油結合能
のうち少なくとも１つを有する、請求項１に記載の高濃度タンパク質生成物。
【請求項４】
前記タンパク質濃縮物のフレークおよび前記タンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つが、
ＤＭＢで０．２５％未満のシュウ酸含量；
１．７５ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量
のうち少なくとも１つを有する、請求項１に記載の高濃度タンパク質生成物。
【請求項５】
前記方法が、前記濡れたタンパク質濃縮物を溶媒抽出することをさらに含む、請求項１に記載の高濃度タンパク質生成物。
【請求項６】
前記タンパク質濃縮物のフレークおよび前記タンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つが、
少なくとも４５％のタンパク質含量；
少なくとも０．９２のＰＤＣＡＡＳ；
減少したクロロフィル濃度；
少なくとも９０％の消化率；
ＤＭＢで１０％未満の灰分；
ＤＭＢで少なくとも３０％の食物繊維含量；
ＤＭＢで１％未満のシュウ酸含量；
３．２ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量；
５％未満の脂肪含量；
少なくとも７ｍｌ／ｇの水結合能；および
少なくとも３ｍｌ／ｇの油結合能
のうち少なくとも１つを有する、か又は、
前記タンパク質濃縮物のフレークおよび前記タンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つが、
ＤＭＢで０．２５％未満のシュウ酸含量；
１．７５ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量
のうち少なくとも１つを有する、請求項５に記載の高濃度タンパク質生成物。
【請求項７】
微小作物が、ＬｅｍｎａおよびＷｏｌｆｆｉａのうち少なくとも１つを含む、請求項１に記載の高濃度タンパク質生成物。
【請求項８】
少なくとも１つの高濃度タンパク質生成物と少なくとも１つの媒体を含むタンパク質組成物であって、
前記少なくとも１つの高濃度タンパク質生成物が、タンパク質濃縮物のフレーク、タンパク質濃縮物の顆粒、タンパク質濃縮物の粉状物または乾燥し粉砕したタンパク質濃縮物のうち少なくとも１つを含み、
前記少なくとも１つの高濃度タンパク質生成物が、微小作物から抽出され、
前記少なくとも１つの高濃度タンパク質生成物が、乾燥質量基準（ＤＭＢ）で少なくとも４５％のタンパク質を含み、タンパク質消化性補正アミノ酸スコア（ＰＤＣＡＡＳ）値が少なくとも０．９０である、タンパク質組成物。
【請求項９】
前記ＰＤＣＡＡＳ値がヒスチジンによって制限される、請求項８に記載のタンパク質組成物。
【請求項１０】
前記タンパク質組成物が、シェイク、スムージー、栄養バーおよび動物飼料製品から選択される、請求項８に記載のタンパク質組成物。
【請求項１１】
前記少なくとも１つのタンパク質濃縮物のフレーク、タンパク質濃縮物の顆粒、タンパク質濃縮物の粉状物または乾燥し粉砕したタンパク質濃縮物が、
ＤＭＢで少なくとも５０％のタンパク質含量；
少なくとも０．９２のＰＤＣＡＡＳ；
減少したクロロフィル濃度；
少なくとも９０％の消化率；
ＤＭＢで１０％未満の灰分；
ＤＭＢで少なくとも３０％の食物繊維含量；
ＤＭＢで１％未満のシュウ酸含量；
３．２ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量；
ＤＭＢで５％未満の脂肪含量；
少なくとも７ｍｌ／ｇの水結合能；および
少なくとも３ｍｌ／ｇの油結合能のうち少なくとも１つを有するか、又は、
前記少なくとも１つのタンパク質濃縮物のフレーク、タンパク質濃縮物の顆粒、タンパク質濃縮物の粉状物または乾燥し粉砕したタンパク質濃縮物が、
ＤＭＢで０．２５％未満のシュウ酸含量；
１．７５ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量
のうち少なくとも１つをさらに有する、請求項８に記載のタンパク質組成物。
【請求項１２】
少なくとも１つの添加剤をさらに含むか、又は、
少なくとも１つの添加剤が、甘味料、親水コロイド安定剤、フレーバー、栄養成分、またはそれらの任意の組み合わせから選択される、請求項９に記載のタンパク質組成物。
【請求項１３】
タンパク質組成物の作成方法であって、
少なくとも１つの高濃度タンパク質性生物と少なくとも１つの媒体とを混合することを含み、
前記少なくとも１つの高濃度タンパク質性生物が、少なくとも１つのタンパク質濃縮物のフレーク、タンパク質濃縮物の顆粒、タンパク質濃縮物の粉体、又は、乾燥し粉砕したタンパク質濃縮物を含み、
前記少なくとも１つの高濃度タンパク質性生物が微小作物から抽出され、
前記少なくとも１つの高濃度タンパク質性生物が乾燥質量基準（ＤＭＢ）で、少なくとも４５％のタンパク質を含み、タンパク質消化性補正アミノ酸スコア（ＰＤＣＡＡＳ）値が少なくとも０．９０である、方法。
【請求項１４】
前記ＰＤＣＡＡＳ値がヒスチジンによって制御される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記タンパク質組成物が、シェイク、スムージー、栄養バー及び動物飼料製品から選択される、請求項１３に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
いくつかの実施形態において、第１のタンパク質濃縮物のフレークおよび第１のタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つが、少なくとも４５％のＤＭＢタンパク質を含んでいてもよく、このタンパク質は、タンパク質消化性補正アミノ酸スコア（ＰＤＣＡＡＳ）値が少なくとも０．８８である。いくつかの実施形態において、ＰＤＣＡＡＳ値は、ヒスチジンによって制限されてもよい。いくつかの実施形態によれば、方法は、タンパク質濃縮物のフレークおよびタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つを粉砕し、タンパク質濃縮物の粉状物を作成することをさらに含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、方法は、バイオマスの第１の部分を、第１の洗浄液、第２の洗浄液および第３の洗浄液のうちの少なくとも１つで洗浄することを含んでいてもよく、第１の洗浄液、第２の洗浄液および第３の洗浄液は、水、リサイクルされた流体およびオゾン処理された溶液から独立して選択されてもよい。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
微小作物を含むバイオマスを処理する方法は、分離した溶液を希釈すること；分離した溶液を濾過すること；および分離した溶液をモニタリングすることのうち少なくとも１つを行うことによって、分離した溶液をリサイクルすることをさらに含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、方法は、ブランチング溶液中またはリサイクルされたブランチング溶液中、バイオマスの第２の部分をブランチングし、第２の濡れたタンパク質濃縮物を作成することと；分離した溶液から、第２の濡れたタンパク質濃縮物を分離することと；第２の濡れたタンパク質濃縮物を乾燥させ、第２のタンパク質濃縮物のフレークおよび第２のタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つを作成することとを含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、第２のタンパク質濃縮物のフレークおよび第２のタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つが、少なくとも４５％のＤＭＢタンパク質を含んでいてもよく、このタンパク質は、ＰＤＣＡＡＳ値が少なくとも０．８８である。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
本開示は、さらに、いくつかの実施形態において、微小作物（例えば、Ｌｅｍｎａ、Ｗｏｌｆｆｉａ）を含むバイオマスを処理することによって作られる高濃度タンパク質生成物に関し、この処理方法は、ブランチング溶液中、バイオマスの第１の部分をブランチングし、濡れたタンパク質濃縮物を作成することと；分離した溶液から、第１の濡れたタンパク質濃縮物を分離することと；第１の濡れたタンパク質濃縮物を乾燥させ、第１のタンパク質濃縮物のフレークおよび第１のタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つを作成することとを含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、第１のタンパク質濃縮物のフレークおよび第１のタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つが、少なくとも４５％のＤＭＢタンパク質を含んでいてもよく、このタンパク質は、ＰＤＣＡＡＳ値が少なくとも０．８８である。いくつかの実施形態によれば、ＰＤＣＡＡＳ値は、ヒスチジンによって制限されてもよい。いくつかの実施形態によれば、タンパク質濃縮物のフレークおよびタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つを粉砕し、タンパク質濃縮物の粉状物を作成してもよい。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
いくつかの実施形態において、タンパク質濃縮物のフレークおよびタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つが、少なくとも０．９２のＰＤＣＡＡＳ；少なくとも９０％の消化率；１０％未満ＤＭＢの灰分；少なくとも３０％の食物繊維含量；１％未満ＤＭＢのシュウ酸含量；３．２ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量；７％未満の脂肪含量；少なくとも７ｍｌ／ｇの水結合能；および少なくとも３ｍｌ／ｇの油結合能のうち少なくとも１つの特徴を有していてもよい。いくつかの実施形態において、タンパク質濃縮物のフレークおよびタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つは、０．２５％未満ＤＭＢのシュウ酸含量、１．７５ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量、またはその両方を有していてもよい。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
いくつかの実施形態によれば、微小作物を含むバイオマスを処理する方法は、濡れたタンパク質濃縮物を溶媒抽出することを含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、濡れたタンパク質濃縮物を、振動ふるいを用い、分離した溶液から分離してもよい（例えば、溶媒抽出前）。溶媒抽出を含む方法によって生成される高濃度タンパク質生成物は、少なくとも５０％のタンパク質含量；少なくとも０．９２のＰＤＣＡＡＳ；減少したクロロフィル濃度；少なくとも９０％の消化率；１０％未満ＤＭＢの灰分；少なくとも３０％の食物繊維含量；１％未満ＤＭＢのシュウ酸含量；３．２ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量；５％未満の脂肪含量；少なくとも７ｍｌ／ｇの水結合能；および少なくとも３ｍｌ／ｇの油結合能といった特徴のうち少なくとも１つを有する、タンパク質濃縮物のフレークおよびタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つを作成してもよい。いくつかの実施形態において、溶媒抽出を含む方法によって作成されるタンパク質濃縮物のフレークおよびタンパク質濃縮物の顆粒のうち少なくとも１つは、０．２５％未満ＤＭＢのシュウ酸含量、１．７５ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量、またはその両方を有していてもよい。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
本開示のいくつかの実施形態は、微小作物を含むバイオマスを処理する方法に関し、この方法は、ブランチング溶液中、バイオマスの第１の部分をブランチングし、第１の濡れたタンパク質濃縮物を作成することと；分離した溶液から、第１の濡れたタンパク質濃縮物を分離することと；第１の濡れたタンパク質濃縮物を粉砕し、第１の粉砕した濡れたタンパク質濃縮物を作成することと；第１の粉砕した濡れたタンパク質濃縮物を乾燥させ、第１の粉砕した乾燥タンパク質濃縮物を作成することとを含む。いくつかの実施形態において、第１の粉砕した乾燥タンパク質濃縮物は、少なくとも４５％のＤＭＢタンパク質を含んでいてもよく、このタンパク質は、ＰＤＣＡＡＳ値が少なくとも０．８８である。いくつかの実施形態によれば、第１の粉砕した乾燥タンパク質濃縮物のＰＤＣＡＡＳ値は、ヒスチジンによって制限されてもよい。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
第１の粉砕した乾燥タンパク質濃縮物を作成するために、微小作物を含むバイオマスを処理する方法は、分離した溶液を希釈すること；分離した溶液を濾過すること；および分離した溶液をモニタリングすることのうち少なくとも１つを行うことによって、分離した溶液をリサイクルすることをさらに含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、方法は、ブランチング溶液中またはリサイクルされたブランチング溶液中、バイオマスの第２の部分をブランチングし、第２の濡れたタンパク質濃縮物を作成することと；分離した溶液から、第２の濡れたタンパク質濃縮物を分離することと；濡れたタンパク質濃縮物の第２の部分を粉砕し、第２の粉砕した濡れたタンパク質濃縮物を作成することと；第２の粉砕した濡れたタンパク質濃縮物を乾燥させ、第２の粉砕した乾燥タンパク質濃縮物を作成することとを含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、第２の粉砕した乾燥タンパク質濃縮物は、少なくとも４５％のＤＭＢタンパク質を含んでいてもよく、このタンパク質は、ＰＤＣＡＡＳ値が少なくとも０．８８である。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
さらに、本開示は、いくつかの実施形態において、微小作物（例えば、Ｌｅｍｎａ、Ｗｏｌｆｆｉａ）から抽出した少なくとも１つの高濃度タンパク質生成物と、少なくとも１つの媒体とを含むタンパク質組成物に関し、ここで、少なくとも１つの高濃度タンパク質生成物が、タンパク質濃縮物のフレーク、タンパク質濃縮物の顆粒、タンパク質濃縮物の粉状物または粉砕した乾燥タンパク質濃縮物のうち少なくとも１つを含み、少なくとも４５％のＤＭＢタンパク質を含み、このタンパク質のタンパク質消化性補正アミノ酸スコア（ＰＤＣＡＡＳ）値が少なくとも０．８８である。いくつかの実施形態によれば、ＰＤＣＡＡＳ値は、ヒスチジンによって制限されてもよい。タンパク質組成物は、いくつかの実施形態において、シェイク、スムージー、栄養バーおよび動物飼料製品から選択されてもよい。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
いくつかの実施形態によれば、タンパク質組成物のタンパク質濃縮物のフレーク、タンパク質濃縮物の顆粒、タンパク質濃縮物の粉状物または粉砕した乾燥タンパク質濃縮物のうち少なくとも１つが、少なくとも５０％のタンパク質含量；少なくとも０．９２のＰＤＣＡＡＳ；減少したクロロフィル濃度；少なくとも９０％の消化率；１０％未満ＤＭＢの灰分；少なくとも３０％の食物繊維含量；１％未満ＤＭＢのシュウ酸含量；３．２ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量；５％未満の脂肪含量；少なくとも７ｍｌ／ｇの水結合能；および少なくとも３ｍｌ／ｇの油結合能のうち少なくとも１つを有していてもよい。いくつかの実施形態において、タンパク質組成物のタンパク質濃縮物のフレーク、タンパク質濃縮物の顆粒、タンパク質濃縮物の粉状物または粉砕した乾燥タンパク質濃縮物のうち少なくとも１つが、０．２５％未満ＤＭＢのシュウ酸含量；１．７５ｍｇ／１００ｇ未満のポリフェノール含量のうち少なくとも１つ、またはその両方をさらに有していてもよい。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０４】
タンパク質消化性補正アミノ酸スコア（ＰＤＣＡＡＳ）および消化率
いくつかの実施形態によれば、高濃度タンパク質生成物は、参照標準（例えば、カゼイン）と比較して、ＰＤＣＡＡＳが少なくとも０．８８、または少なくとも０．８９、または少なくとも０．９０、または少なくとも０．９１、または少なくとも０．９２、または少なくとも０．９３、または少なくとも０．９４、または少なくとも０．９５であってもよい。いくつかの実施形態において、高濃度タンパク質生成物は、ＰＤＣＡＡＳが０．８８〜０．９４、または０．９０〜０．９４、または０．９２〜０．９４であってもよい。ＰＤＣＡＡＳは、例えば、動物（例えば、ラット）モデルによって、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ酵素消化モデルによって評価されてもよい。ＰＤＣＡＡＳ値を計算することは、制限するアミノ酸に依存していてもよい。いくつかの実施形態によれば、高濃度タンパク質生成物のＰＤＣＡＡＳ値は、ヒスチジン組成物によって制限される場合がある。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２１】
油結合能
いくつかの実施形態において、高濃度タンパク質生成物は、高濃度タンパク質生成物１ｇ当たり約２ミリリットルの油（例えばコーン油）の油結合能（例えばトウモロコシ油）（ｍｌ／ｇ）を有していてもよく、または油結合能が約２．５ｍｌ／ｇ、または約３．０ｍｌ／ｇ、または約３．５ｍｌ／ｇ、または約４．０ｍｌ／ｇ、または約４．５ｍｌ／ｇ、または約５．０ｍｌ／ｇ、または約５．５ｍｌ／ｇであってもよい。いくつかの実施形態によれば、高濃度タンパク質生成物は、水結合能が少なくとも２ｍｌ／ｇ、または少なくとも２．５ｍｌ／ｇ、または少なくとも３．０ｍｌ／ｇ、または少なくとも３．５ｍｌ／ｇ、または少なくとも４．０ｍｌ／ｇ、または少なくとも４．５ｍｌ／ｇ、または少なくとも５．０ｍｌ／ｇ、または少なくとも５．５ｍｌ／ｇであってもよい。例えば、本明細書に記載の方法によって製造された高濃度タンパク質生成物は、以下の表３に要約される内容物を含んでいてもよい。
【表３】
2018532424.tif 000001
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６５】
３０以上の別々のサンプルをこの方法で処理した。各高濃度タンパク質フレークサンプルおよび各タンパク質濃縮物の粉状物サンプルについて、組成分析を行った。サンプルの典型的なアミノ酸プロフィールを表１２に示す。高濃度タンパク質のフレークの典型的な組成特徴を表１３に示す。試験したサンプルの大部分において、シュウ酸の濃度は０．２５％未満であった。サンプルの平均可溶性ポリフェノール濃度は、３．２ｍｇ／１００ｇ未満であった。ほとんどの場合、可溶性ポリフェノール濃度は、試験の検出限界未満であることが判明した。表１４は、処理されたＬｅｍｎａサンプルの栄養学的プロフィールを示す。
【表１２】
2018532424.tif 000002
【表１３】
2018532424.tif 000003
【表１４】
2018532424.tif 000004