【手続補正書】
【提出日】平成31年3月8日(2019.3.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１に少なくとも９０％同一の配列を有する組換えポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、１４位に対応する位置にＡｒｇ；３３位に対応する位置にＡｌａ；１１５位に対応する位置にＨｉｓ；２１４位に対応する位置にＡｓｐ；２１５位に対応する位置にＡｌａ；２１６位に対応する位置にＶａｌ；２１７位に対応する位置にＧｌｎ；２４３位に対応する位置にＨｉｓ；１３６位に対応する位置にＡｒｇ；２５３位に対応する位置にＨｉｓ及び２５５位に対応する位置にＡｒｇを含む、前記組換えポリペプチド。
【請求項２】
３１４位に対応する位置にＡｓｎを含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
配列番号１の配列を含む、請求項２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
３１４位に対応する位置にＴｈｒを含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項５】
前記ポリペプチドが、配列番号３の配列と少なくとも９５％同一である、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項６】
配列番号３の配列を含む、請求項５に記載のポリペプチド。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする配列を含むポリヌクレオチド分子。
【請求項８】
前記分子がｍＲＮＡである、請求項７に記載のポリヌクレオチド分子。
【請求項９】
前記分子が、配列番号２または配列番号４と少なくとも９０％または少なくとも９５％同一の配列を有する、請求項７に記載のポリヌクレオチド分子。
【請求項１０】
前記分子が、配列番号２または配列番号４の配列を有する、請求項７に記載のポリヌクレオチド分子。
【請求項１１】
請求項１に記載のポリペプチドまたは請求項７に記載のポリヌクレオチド分子を保有する宿主細胞。
【請求項１２】
前記細胞が、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｔ細胞、またはＮＫ細胞もしくはＴ細胞の前駆細胞である、請求項１１に記載の細胞。
【請求項１３】
細胞の遺伝子操作方法において使用するための、配列番号１または３のポリペプチドをコードする核酸を含む組成物であって：
前記方法は、
（ａ）前記細胞に、（ｉ）前記組成物；及び（ｉｉ）トランスポゾンリピートに隣接する選択した遺伝子因子をコードするＤＮＡを形質移入し；ならびに
（ｂ）一過性または安定なトランスポザーゼ活性に適した条件下で前記細胞をインキュベートし、それにより、前記選択した遺伝子因子を前記細胞のゲノムに組み込み、操作した細胞を産生することを含む、組成物。
【請求項１４】
細胞の遺伝子操作方法において使用するための、トランスポゾンリピートに隣接する選択した遺伝子因子をコードするＤＮＡを含む組成物であって：
前記方法は、
（ａ）前記細胞に、（ｉ）配列番号１または３のポリペプチドをコードする核酸；及び（ｉｉ）前記組成物を形質移入し；ならびに
（ｂ）一過性または安定なトランスポザーゼ活性に適した条件下で前記細胞をインキュベートし、それにより、前記選択した遺伝子因子を前記細胞のゲノムに組み込み、操作した細胞を産生することを含む、組成物。
【請求項１５】
前記選択した遺伝子因子が、抗体、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、またはキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする、請求項１３または１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記細胞への形質移入が、前記細胞を電気穿孔することを含む、請求項１３または１４に記載の組成物。
【請求項１７】
前記選択した遺伝子因子が、ＣＡＲをコードし、前記ＣＡＲが、膜結合サイトカインと共発現される、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
前記膜結合サイトカインが、ＩＬ−１５である、請求項１７に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３２】
本発明の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。しかしながら、詳細な説明及び特定の実施例は、本発明のある特定の実施形態を示してはいるが、これらは単に例示を目的としたものに過ぎず、なぜならば、この詳細な説明から、本発明の精神及び範囲内の様々な変更及び修正が、当業者には明らかになるであろうからである。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
配列番号１に少なくとも９０％同一の配列を有する組換えポリペプチドであって、前記ポリペプチドが、１３６位に対応する位置にＡｒｇ；２５３位に対応する位置にＨｉｓ及び／または２５５位に対応する位置にＡｒｇを有し、前記ポリペプチドが配列番号５の配列を含まない、前記組換えポリペプチド。
（項目２）
以下の特徴の１つ以上を有する、項目１に記載のポリペプチド：
（ａ）１４位に対応する位置にＡｒｇ；
（ｂ）３３位に対応する位置にＡｌａ；
（ｃ）１１５位に対応する位置にＨｉｓ；
（ｄ）２１４位に対応する位置にＡｓｐ；
（ｅ）２１５位に対応する位置にＡｌａ；
（ｆ）２１６位に対応する位置にＶａｌ；
（ｇ）２１７位に対応する位置にＧｌｎ；及び／または
（ｈ）２４３位に対応する位置にＨｉｓ。
（項目３）
前記（ａ）〜（ｈ）の特徴のうちの１、２、３、４、５、６、７または８つを有する、項目２に記載のポリペプチド。
（項目４）
２１４〜２１７位に対応する位置に配列ＤＡＶＱを含む、項目２に記載のポリペプチド。
（項目５）
３１４位に対応する位置にＡｓｎを含む、項目１に記載のポリペプチド。
（項目６）
前記ポリペプチドが、配列番号１の配列と少なくとも９５％同一である、項目５に記載のポリペプチド。
（項目７）
配列番号１の配列を含む、項目５に記載のポリペプチド。
（項目８）
３１４位に対応する位置にＴｈｒを含む、項目１に記載のポリペプチド。
（項目９）
前記ポリペプチドが、配列番号３の配列と少なくとも９０％または少なくとも９５％同一である、項目８に記載のポリペプチド。
（項目１０）
配列番号３の配列を含む、項目９に記載のポリペプチド。
（項目１１）
項目１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする配列を含むポリヌクレオチド分子。
（項目１２）
前記分子がＤＮＡである、項目１１に記載のポリヌクレオチド分子。
（項目１３）
前記ＤＮＡが前記ポリペプチドの発現用プロモーターを含む、項目１２に記載のポリヌクレオチド分子。
（項目１４）
前記ＤＮＡが哺乳類細胞における前記ポリペプチドの発現用プロモーターを含む、項目１２に記載のポリヌクレオチド分子。
（項目１５）
前記分子がｍＲＮＡである、項目１１に記載のポリヌクレオチド分子。
（項目１６）
５’‐キャップ、ＩＲＥＳモチーフ及び／またはポリ（Ａ）配列を含む、項目１５に記載のポリヌクレオチド分子。
（項目１７）
２０〜３００ヌクレオチドのポリ（Ａ）配列を含む、項目１６に記載のポリヌクレオチド分子。
（項目１８）
前記分子が、配列番号２または配列番号４と少なくとも９０％または少なくとも９５％同一の配列を有する、項目１１に記載のポリヌクレオチド分子。
（項目１９）
前記分子が、配列番号２または配列番号４の配列を有する、項目１１に記載のポリヌクレオチド分子。
（項目２０）
前記ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを細胞に形質移入し、前記ポリヌクレオチドから前記ポリペプチドを発現させることを含む、項目１に記載のポリペプチドの作製方法。
（項目２１）
項目１に記載のポリペプチドまたは項目１１に記載のポリヌクレオチド分子を保有する宿主細胞。
（項目２２）
前記細胞がヒト細胞である、項目２１に記載の細胞。
（項目２３）
前記細胞が、幹細胞または誘導多能性幹（ｉＰＳ）細胞である、項目２１に記載の細胞。
（項目２４）
前記細胞が免疫系細胞である、項目２１に記載の細胞。
（項目２５）
前記細胞が、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｔ細胞、またはＮＫ細胞もしくはＴ細胞の前駆細胞である、項目２４に記載の細胞。
（項目２６）
前記細胞が、項目１に記載のポリペプチドを含む、項目２１に記載の細胞。
（項目２７）
前記細胞が、項目１に記載のポリペプチドをコードするｍＲＮＡを含む、項目２１に記載の細胞。
（項目２８）
細胞の遺伝子操作方法であって：
（ａ）前記細胞に、（ｉ）項目１に記載のトランスポザーゼポリペプチドまたは前記ポリペプチドをコードする核酸；及び（ｉｉ）トランスポゾンリピートに隣接する選択した遺伝子因子をコードするＤＮＡを形質移入し；ならびに
（ｂ）一過性または安定なトランスポザーゼ活性に適した条件下で前記細胞をインキュベートし、それにより、前記選択した遺伝子因子を前記細胞のゲノムに組み込み、操作した細胞を産生することを含む、前記遺伝子操作方法。
（項目２９）
項目２８に記載の方法であって、さらに：
（ｃ）前記操作した細胞を単離することを含む、前記方法。
（項目３０）
前記選択した遺伝子因子が、スクリーニング可能または選択マーカーである、項目２８に記載の方法。
（項目３１）
前記選択した遺伝子因子が、治療用ポリペプチドまたは阻害性核酸をコードする、項目２８に記載の方法。
（項目３２）
前記選択した遺伝子因子が、抗体、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする、項目２８に記載の方法。
（項目３３）
前記選択した遺伝子因子がＣＡＲをコードする、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記細胞がヒト細胞である、項目２８に記載の方法。
（項目３５）
前記細胞が幹細胞または誘導多能性幹（ｉＰＳ）細胞である、項目２８に記載の方法。
（項目３６）
前記細胞が免疫系細胞またはその前駆細胞である、項目２８に記載の方法。
（項目３７）
前記細胞がナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｔ細胞、またはＮＫ細胞もしくはＴ細胞の前駆細胞である、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記細胞への形質移入が、ポリマー、ポリペプチドまたは脂質ベースの形質移入試薬の使用を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３９）
前記細胞への形質移入が、細胞を電気穿孔することを含む、項目２８に記載の方法。
（項目４０）
項目２８に記載の方法であって、さらに：
（ａ）細胞の集団に、（ｉ）項目１に記載のトランスポザーゼポリペプチドまたは前記ポリペプチドをコードする核酸；及び（ｉｉ）トランスポゾンリピートに隣接する選択した遺伝子因子をコードするＤＮＡを形質移入し；ならびに
（ｂ）トランスポザーゼ活性に適した条件下で前記集団をインキュベートし、それにより、前記選択した遺伝子因子を前記細胞のゲノムに組み込み、操作した細胞の集団を産生することを含む、前記方法。
（項目４１）
項目４０に記載の方法であって、さらに：
（ａ）Ｔ細胞またはＴ細胞前駆細胞の集団に、（ｉ）項目１に記載のトランスポザーゼポリペプチドまたは前記ポリペプチドをコードする核酸；及び（ｉｉ）トランスポゾンリピートに隣接するＣＡＲまたはＴＣＲをコードするＤＮＡを形質移入し；ならびに
（ｂ）トランスポザーゼ活性に適した条件下で前記集団をインキュベートし、それにより、前記細胞のゲノム中に前記ＣＡＲを組み込み、操作したＴ細胞またはＴ細胞前駆細胞の集団を産生することを含む、前記方法。
（項目４２）
項目４１に記載の方法であって、さらに：
（ｃ）ＣＡＲまたはＴＣＲを発現するＴ細胞の増殖を選択的に促進する培地中で、前記操作した細胞を培養することを含む、前記方法。
（項目４３）
疾患を有するヒト対象におけるＴ細胞応答の提供方法であって：
（ａ）項目４１に従って、操作したＴ細胞またはＴ細胞前駆細胞の集団を取得し；
（ｂ）必要に応じて、ＣＡＲを発現するＴ細胞の増殖を選択的に促進する培地中で前記細胞を培養し；及び
（ｄ）ＣＡＲを発現するか、もしくはＴＣＲを発現するか、または遺伝子操作した有効量のＴ細胞またはＮＫ細胞または免疫細胞を前記対象に投与して、免疫応答を提供することを含む、前記提供方法。