【手続補正書】
【提出日】平成31年3月22日(2019.3.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
核内受容体タンパク質の断片又はドメインを含む第１の天然に存在しないポリペプチドと、核内受容体タンパク質の異なる断片又はドメインを含む第２の天然に存在しないポリペプチドとを含む２つのポリペプチドであって、前記第１のポリペプチドが活性化リガンドに結合することができ、前記第２のポリペプチドが前記活性化リガンドの存在下で前記第１のポリペプチドと結合することができ、前記第１及び第２のポリペプチドの活性化リガンドにより誘導される結合が、活性化した機能的、生物学的、又は細胞シグナル伝達状態をもたらすように、前記第１及び第２のポリペプチドの各々が異種アミノ酸又はポリペプチド配列をさらに含む、２つのポリペプチド。
【請求項２】
一方又は両方の核内受容体タンパク質断片又はドメインが、節足動物核内受容体アミノ酸配列を含む、請求項１に記載の第１及び第２のポリペプチド。
【請求項３】
一方又は両方の核内受容体タンパク質断片又はドメインがグループＨ核内受容体アミノ酸配列を含む、請求項１又は２に記載の第１及び第２のポリペプチド。
【請求項４】
前記第１のポリペプチドの核内受容体アミノ酸配列が、エクジソン受容体（ＥｃＲ）リガンド結合ドメイン、ポリペプチド断片、又はその置換変異体を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド。
【請求項５】
前記第２のポリペプチド核内受容体タンパク質断片又はドメインが、哺乳動物核内受容体アミノ酸配列を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド。
【請求項６】
前記哺乳動物核内受容体タンパク質断片又はドメインが、ＲＸＲ核内受容体ポリペプチド断片又はその置換変異体を含む、請求項５に記載の第１及び第２のポリペプチド。
【請求項７】
前記第２のポリペプチド核内受容体タンパク質断片又はドメインが、無脊椎動物及び哺乳動物核内受容体アミノ酸配列又はその置換変異体のキメラを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド。
【請求項８】
前記第２のポリペプチド核内受容体タンパク質断片又はドメインが、無脊椎動物ＵＳＰ（ＲＸＲホモログ）及び哺乳動物ＲＸＲ核内受容体アミノ酸配列又はそれらの置換変異体のキメラを含む、請求項７に記載の第１及び第２のポリペプチド。
【請求項９】
ａ）節足動物核内受容体タンパク質の断片又はドメインを含む第１の天然に存在しないポリペプチドと、
ｂ）節足動物及び／又は哺乳動物核内受容体タンパク質の断片又はドメインを含む第２の天然に存在しないポリペプチドと
を含み、
前記第１及び第２のポリペプチドが、活性化リガンドと接触した後に活性化した機能的、生物学的又は細胞シグナル伝達状態を生ずることができる追加の異種配列を含む、リガンド誘導性ポリペプチドカップリング（ＬＩＰＣ）のための組成物。
【請求項１０】
前記核内受容体タンパク質断片又はドメインの少なくとも１つが、スプルースバッドワーム（トウヒノシントメハマキ）ＥｃＲ（「ＣｆＥｃＲ」）ＬＢＤ、カブトムシ（チャイロコメノゴミムシダマシ）ＥｃＲ（「ＴｍＥｃＲ」）ＬＢＤ、タバコスズメガＥｃＲ（「ＭｓＥｃＲ」）ＬＢＤ、ニセアメリカタバコガＥｃＲ（「ＨｖＥｃＲ」）ＬＢＤ、ユスリカ（キミドリユスリカ）ＥｃＲ（「ＣｆＥｃＲ」）ＬＢＤ、カイコガ（ボンビックス・モリ）ＥｃＲ（「ＢｍＥｃＲ」）ＬＢＤ、ミバエ（キイロショウジョウバエ）ＥｃＲ（「ＤｍＥｃＲ」）ＬＢＤ、蚊（ネッタイシマカ）ＥｃＲ（「ＡａＥｃＲ」）ＬＢＤ、クロバエ（ルシリア・カピタータ）ＥｃＲ（「ＬｃＥｃＲ」）ＬＢＤ、クロバエ（ルシリア・カプリナ）ＥｃＲ（「ＬｕｃＥｃＲ」）ＬＢＤ、地中海ミバエ（セラチチス・カピタータ）ＥｃＲ（「ＣｃＥｃＲ」）ＬＢＤ、バッタ（トノサマバッタ）ＥｃＲ（「ＬｍＥｃＲ」）ＬＢＤ、アブラムシ（モモアカアブラムシ）ＥｃＲ（「ＭｐＥｃＲ」）ＬＢＤ、シオマネキ（セルカ・プギレーター）ＥｃＲ（「ＣｐＥｃＲ」）ＬＢＤ、コナジラミ（シルバーリーフコナジラミ）ＥｃＲ（ＢａＥｃＲ）ＬＢＤ、ヨコバイ（ツマグロヨコバイ）ＥｃＲ（ＮｃＥｃＲ）ＬＢＤ、及びマダニ（アンブリオンマ・アメリカヌム）ＥｃＲ（「ＡｍａＥｃＲ」）ＬＢＤから成る群から選択されるエクジソン受容体ポリペプチドに由来する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド、又は請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記核内受容体タンパク質断片又はドメインの少なくとも１つが、配列番号１（ＣｆＥｃＲ−ＤＥＦ）、配列番号２（ＣｆＥｃＲ−ＣＤＥＦ）、配列番号３（ＤｍＥｃＲ−ＤＥＦ）、配列番号４（ＴｍＥｃＲ−ＤＥＦ）、配列番号５（ＡｍａＥｃＲ−ＤＥＦ）の核酸配列を含むポリヌクレオチド、又はこれと実質的に同一である機能的バリアントをコードするポリヌクレオチドによりコードされるエクジソン受容体ポリペプチドに由来する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド、又は請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の第１又は第２のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む単離ポリヌクレオチド。
【請求項１３】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、及び請求項１〜１１のいずれか一項に記載の第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド。
【請求項１４】
請求項１２又は１３に記載のポリヌクレオチドの１つを含むベクター。
【請求項１５】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド若しくは組成物、請求項１２若しくは１３に記載のポリヌクレオチド、又は請求項１４に記載のベクターを宿主細胞に導入するステップと、前記宿主細胞を活性化リガンドと接触させるステップとを含む、細胞シグナル伝達を誘導する方法。
【請求項１６】
ａ）請求項１〜１１のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド若しくは組成物、請求項１２若しくは１３に記載のポリヌクレオチド、又は請求項１４に記載のベクターを宿主細胞に導入するステップと、
ｂ）前記宿主細胞を活性化リガンドと接触させるステップと、
ｃ）リガンドにより誘導される生物学的活性又はポリペプチドオリゴマー化の絶対量又は相対量を定量するステップと
を含む、リガンドにより誘導される細胞シグナル伝達を測定する方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３３】
[000]本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された、その全体が参照により本明細書に組み込まれる配列表を含有する。２０１６年３月２４日に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーは０１００−００１３ＷＯ１＿ＳＬ．ｔｘｔと名付けられ、サイズは１９２，８３７バイトである。
本発明は以下の態様を含み得る。
［１］
核内受容体タンパク質の断片又はドメインを含む第１の天然に存在しないポリペプチド
と、核内受容体タンパク質の異なる断片又はドメインを含む第２の天然に存在しないポリ
ペプチドとを含む２つのポリペプチドであって、前記第１のポリペプチドが活性化リガン
ドに結合することができ、前記第２のポリペプチドが前記活性化リガンドの存在下で前記
第１のポリペプチドと結合することができ、前記第１及び第２のポリペプチドの活性化リ
ガンドにより誘導される結合が、活性化した機能的、生物学的、又は細胞シグナル伝達状
態をもたらすように、前記第１及び第２のポリペプチドの各々が異種アミノ酸又はポリペ
プチド配列をさらに含む、２つのポリペプチド。
［２］
一方又は両方の核内受容体タンパク質断片又はドメインが、節足動物核内受容体アミノ
酸配列を含む、請求項１に記載の第１及び第２のポリペプチド。
［３］
一方又は両方の核内受容体タンパク質断片又はドメインがグループＨ核内受容体アミノ
酸配列を含む、請求項１又は２に記載の第１及び第２のポリペプチド。
［４］
前記第１のポリペプチドの核内受容体アミノ酸配列が、エクジソン受容体（ＥｃＲ）リ
ガンド結合ドメイン、ポリペプチド断片、又はその置換変異体を含む、請求項１〜３のい
ずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド。
［５］
前記第２のポリペプチド核内受容体タンパク質断片又はドメインが、哺乳動物核内受容
体アミノ酸配列を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチ
ド。
［６］
前記哺乳動物核内受容体タンパク質断片又はドメインが、ＲＸＲ核内受容体ポリペプチ
ド断片又はその置換変異体を含む、請求項５に記載の第１及び第２のポリペプチド。
［７］
前記第２のポリペプチド核内受容体タンパク質断片又はドメインが、無脊椎動物及び哺
乳動物核内受容体アミノ酸配列又はその置換変異体のキメラを含む、請求項１〜６のいず
れか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド。
［８］
前記第２のポリペプチド核内受容体タンパク質断片又はドメインが、無脊椎動物ＵＳＰ
（ＲＸＲホモログ）及び哺乳動物ＲＸＲ核内受容体アミノ酸配列又はそれらの置換変異体
のキメラを含む、請求項７に記載の第１及び第２のポリペプチド。
［９］
ａ）節足動物核内受容体タンパク質の断片又はドメインを含む第１の天然に存在しない
ポリペプチドと、
ｂ）節足動物及び／又は哺乳動物核内受容体タンパク質の断片又はドメインを含む第２の
天然に存在しないポリペプチドと
を含み、
前記第１及び第２のポリペプチドが、活性化リガンドと接触した後に活性化した機能的、
生物学的又は細胞シグナル伝達状態を生ずることができる追加の異種配列を含む、リガン
ド誘導性ポリペプチドカップリング（ＬＩＰＣ）系。
［１０］
一方又は両方の核内受容体タンパク質断片又はドメインがグループＨ核内受容体アミノ
酸配列を含む、請求項９に記載のＬＩＰＣ系。
［１１］
前記第１のポリペプチドが、エクジソン受容体（ＥｃＲ）リガンド結合ドメイン、ポリ
ペプチド断片、又はその置換変異体を含む、請求項９又は１０に記載のＬＩＰＣ系。
［１２］
前記第２のポリペプチドが哺乳動物核内受容体アミノ酸配列を含む、請求項９〜１１の
いずれか一項に記載のＬＩＰＣ系。
［１３］
前記第２のポリペプチドが、ＲＸＲ核内受容体ポリペプチド断片又はその置換変異体を
含む、請求項１２に記載のＬＩＰＣ系。
［１４］
前記第２のポリペプチドが、無脊椎動物及び哺乳動物核内受容体アミノ酸配列又はその
置換変異体のキメラを含む、請求項９〜１３のいずれか一項に記載のＬＩＰＣ系。
［１５］
前記第２のポリペプチドが、無脊椎動物ＵＳＰ（ＲＸＲホモログ）及び哺乳動物ＲＸＲ
核内受容体アミノ酸配列又はそれらの置換変異体のキメラを含む、請求項１４に記載のＬ
ＩＰＣ系。
［１６］
前記核内受容体タンパク質断片の少なくとも１つが、スプルースバッドワーム（トウヒ
ノシントメハマキ）ＥｃＲ（「ＣｆＥｃＲ」）ＬＢＤ、カブトムシ（チャイロコメノゴミ
ムシダマシ）ＥｃＲ（「ＴｍＥｃＲ」）ＬＢＤ、タバコスズメガＥｃＲ（「ＭｓＥｃＲ」
）ＬＢＤ、ニセアメリカタバコガＥｃＲ（「ＨｖＥｃＲ」）ＬＢＤ、ユスリカ（キミドリ
ユスリカ）ＥｃＲ（「ＣｆＥｃＲ」）ＬＢＤ、カイコガ（ボンビックス・モリ）ＥｃＲ（
「ＢｍＥｃＲ」）ＬＢＤ、ミバエ（キイロショウジョウバエ）ＥｃＲ（「ＤｍＥｃＲ」）
ＬＢＤ、蚊（ネッタイシマカ）ＥｃＲ（「ＡａＥｃＲ」）ＬＢＤ、クロバエ（ルシリア・
カピタータ）ＥｃＲ（「ＬｃＥｃＲ」）ＬＢＤ、クロバエ（ルシリア・カプリナ）ＥｃＲ
（「ＬｕｃＥｃＲ」）ＬＢＤ、地中海ミバエ（セラチチス・カピタータ）ＥｃＲ（「Ｃｃ
ＥｃＲ」）ＬＢＤ、バッタ（トノサマバッタ）ＥｃＲ（「ＬｍＥｃＲ」）ＬＢＤ、アブラ
ムシ（モモアカアブラムシ）ＥｃＲ（「ＭｐＥｃＲ」）ＬＢＤ、シオマネキ（セルカ・プ
ギレーター）ＥｃＲ（「ＣｐＥｃＲ」）ＬＢＤ、コナジラミ（シルバーリーフコナジラミ
）ＥｃＲ（ＢａＥｃＲ）ＬＢＤ、ヨコバイ（ツマグロヨコバイ）ＥｃＲ（ＮｃＥｃＲ）Ｌ
ＢＤ、及びマダニ（アンブリオンマ・アメリカヌム）ＥｃＲ（「ＡｍａＥｃＲ」）ＬＢＤ
から成る群から選択されるエクジソン受容体ポリペプチドに由来する、請求項１〜８のい
ずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド、又は請求項９〜１５のいずれか一項に
記載のＬＩＰＣ系。
［１７］
前記核内受容体タンパク質断片の少なくとも１つが、配列番号１（ＣｆＥｃＲ−ＤＥＦ
）、配列番号２（ＣｆＥｃＲ−ＣＤＥＦ）、配列番号３（ＤｍＥｃＲ−ＤＥＦ）、配列番
号４（ＴｍＥｃＲ−ＤＥＦ）、配列番号５（ＡｍａＥｃＲ−ＤＥＦ）の核酸配列を含むポ
リヌクレオチド、又はこれと実質的に同一である機能的バリアントをコードするポリヌク
レオチドによりコードされるエクジソン受容体ポリペプチドに由来する、請求項１〜８の
いずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド、又は請求項９〜１５のいずれか一項
に記載のＬＩＰＣ系。
［１８］
前記エクジソン受容体ポリペプチドの少なくとも１つが、配列番号６（ＣｆＥｃＲ−Ｄ
ＥＦ）、配列番号７（ＤｍＥｃＲ−ＤＥＦ）、配列番号８（ＣｆＥｃＲ−ＣＤＥＦ）、配
列番号９（ＴｍＥｃＲ−ＤＥＦ）、配列番号１０（ＡｍａＥｃＲ−ＤＥＦ）のポリペプチ
ド配列、又はこれと実質的に同一のポリペプチド配列を含む、請求項１６又は１７に記載
の第１及び第２のポリペプチド又はＬＩＰＣ系。
［１９］
前記エクジソン受容体ポリペプチド配列が、対応する野生型エクジソン受容体ポリペプ
チドと比べて約又は少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２
、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４個、又は
置換変異を含む、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド
又はＬＩＰＣ系。
［２０］
前記エクジソン受容体ポリペプチドが、アミノ酸残基の置換をもたらすコドン変異を含
むポリヌクレオチドによりコードされ、前記アミノ酸残基が、ａ）配列番号１７のアミノ
酸残基２０、２１、４８、５１、５２、５５、５８、５９、６１、６２、９２、９３、９
５、９６、１０７、１０９、１１０、１２０、１２３、１２５、１７５、２１８、２１９
、２２３、２３０、２３４、若しくは２３８、ｂ）配列番号１７のアミノ酸残基９５及び
１１０、ｃ）配列番号１７のアミノ酸残基２１８及び２１９、ｄ）配列番号１７のアミノ
酸残基１０７及び１７５、ｅ）配列番号１７のアミノ酸残基１２７及び１７５、ｆ）配列
番号１７のアミノ酸残基１０７及び１２７、ｇ）配列番号１７のアミノ酸残基１０７、１
２７、及び１７５、ｈ）配列番号１７のアミノ酸残基５２、１０７、及び１７５、ｉ）配
列番号１７のアミノ酸残基９６、１０７、及び１７５、ｊ）配列番号１７のアミノ酸残基
１０７、１１０、及び１７５、ｋ）配列番号１８のアミノ酸残基１０７、１２１、２１３
、若しくは２１７、又はｌ）配列番号１９のアミノ酸残基９１若しくは１０５に相当する
又は類似した位置にある、請求項１６〜１９のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリ
ペプチド又はＬＩＰＣ系。
［２１］
前記置換変異が、ａ）配列番号１７のＥ２０Ａ、Ｑ２１Ａ、Ｆ４８Ａ、Ｉ５１Ａ、Ｔ５
２Ａ、Ｔ５２Ｖ、Ｔ５２Ｉ、Ｔ５２Ｌ、Ｔ５５Ａ、Ｔ５８Ａ、Ｖ５９Ａ、Ｌ６１Ａ、Ｉ６
２Ａ、Ｍ９２Ａ、Ｍ９３Ａ、Ｒ９５Ａ、Ｖ９６Ａ、Ｖ９６Ｔ、Ｖ９６Ｄ、Ｖ９６Ｍ、Ｖ１
０７Ｉ、Ｆ１０９Ａ、Ａ１１０Ｐ、Ａ１１０Ｓ、Ａ１１０Ｍ、Ａ１１０Ｌ、Ｙ１２０Ａ、
Ａ１２３Ｆ、Ｍ１２５Ａ、Ｒ１７５Ｅ、Ｍ２１８Ａ、Ｃ２１９Ａ、Ｌ２２３Ａ、Ｌ２３０
Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｗ２３８Ａ、Ｒ９５Ａ／Ａ１１０Ｐ、Ｍ２１８Ａ／Ｃ２１９Ａ、Ｖ１０
７Ｉ／Ｒ１７５Ｅ、Ｙ１２７Ｅ／Ｒ１７５Ｅ、Ｖ１０７Ｉ／Ｙ１２７Ｅ、Ｖ１０７Ｉ／Ｙ
１２７Ｅ／Ｒ１７５Ｅ、Ｔ５２Ｖ／Ｖ１０７Ｉ／Ｒ１７５Ｅ、Ｖ９６Ａ／Ｖ１０７Ｉ／Ｒ
１７５Ｅ、Ｔ５２Ａ／Ｖ１０７Ｉ／Ｒ１７５Ｅ、Ｖ９６Ｔ／Ｖ１０７Ｉ／Ｒ１７５Ｅ、又
はＶ１０７Ｉ／Ａ１１０Ｐ／Ｒ１７５Ｅ置換変異、ｂ）配列番号１８のＡ１０７Ｐ、Ｇ１
２１Ｒ、Ｇ１２１Ｌ、Ｎ２１３Ａ、Ｃ２１７Ａ、又はＣ２１７Ｓ置換変異、及びｃ）配列
番号１９のＧ９１Ａ又はＡ１０５Ｐ置換変異から成る群から選択される、請求項１６〜２
０のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド又はＬＩＰＣ系。
［２２］
前記レチノイドＸ受容体ポリペプチドが、脊椎動物レチノイドＸ受容体ポリペプチド、
無脊椎動物レチノイドＸ受容体ポリペプチド（ＵＳＰ）、並びに脊椎動物及び無脊椎動物
ＲＸＲ由来のポリペプチド断片を含むキメラレチノイドＸポリペプチドから成る群から選
択されるポリペプチドを含む、請求項１６〜２１のいずれか一項に記載の第１及び第２の
ポリペプチド又はＬＩＰＣ系。
［２３］
前記キメラレチノイドＸ受容体ポリペプチドが、脊椎動物種レチノイドＸ受容体ポリペ
プチド断片、無脊椎動物種レチノイドＸ受容体ポリペプチド断片、及び非双翅類／非鱗翅
類無脊椎動物種レチノイドＸ受容体ポリペプチド断片から成る群から選択される少なくと
も２つの異なるレチノイドＸ受容体ポリペプチド断片を含む、請求項２２に記載の第１及
び第２のポリペプチド又はＬＩＰＣ系。
［２４］
前記キメラレチノイドＸ受容体ポリペプチドが、ＥＦドメインヘリックス１、ＥＦドメ
インヘリックス２、ＥＦドメインヘリックス３、ＥＦドメインヘリックス４、ＥＦドメイ
ンヘリックス５、ＥＦドメインヘリックス６、ＥＦドメインヘリックス７、ＥＦドメイン
ヘリックス８、ＥＦドメインヘリックス９、ＥＦドメインヘリックス１０、ＥＦドメイン
ヘリックス１１、ＥＦドメインヘリックス１２、Ｆドメイン、及びＥＦドメインβプリー
ツシートから成る群から選択される少なくとも１つのレチノイドＸ受容体ポリペプチド断
片を含むレチノイドＸ受容体ポリペプチドを含み、前記レチノイドＸ受容体ポリペプチド
断片が、前記第２のレチノイドＸ受容体ポリペプチド断片と異なる種のレチノイドＸ受容
体ポリペプチド又は異なるアイソフォームのレチノイドＸ受容体ポリペプチド由来である
、請求項２３に記載の第１及び第２のポリペプチド又はＬＩＰＣ系。
［２５］
前記キメラレチノイドＸ受容体ポリペプチドが、a）配列番号１１、b）配列番号１２の
ヌクレオチド１〜３４８及び配列番号１３のヌクレオチド２６８〜６３０、ｃ）配列番号
１２のヌクレオチド１〜４０８及び配列番号１３のヌクレオチド３３７〜６３０、ｄ）配
列番号１２のヌクレオチド１４６５及び配列番号１３のヌクレオチド４０３〜６３０、ｅ
）配列番号１２のヌクレオチド１〜５５５及び配列番号１３のヌクレオチド４９０〜６３
０、ｆ）配列番号１２のヌクレオチド１〜６２４及び配列番号１３のヌクレオチド５４７
〜６３０、ｇ）配列番号１２のヌクレオチド１〜６４５及び配列番号１３のヌクレオチド
６０１〜６３０、並びにｈ）配列番号１２のヌクレオチド１〜７１７、配列番号１３のヌ
クレオチド６１３〜６３０の核酸配列を含むポリヌクレオチド、又はこれと実質的に同一
である機能的バリアントをコードするポリヌクレオチドによりコードされる、請求項２２
に記載の第１及び第２のポリペプチド又はＬＩＰＣ系。
［２６］
前記キメラレチノイドＸポリペプチドが、ａ）配列番号１４、ｂ）配列番号１５のアミ
ノ酸１〜１１６及び配列番号１６のアミノ酸９０〜２１０、ｃ）配列番号１５のアミノ酸
１〜１３６及び配列番号１６のアミノ酸１１３〜２１０、ｄ）配列番号１５のアミノ酸１
〜１５５及び配列番号１６のアミノ酸１３５〜２１０、ｅ）配列番号１５のアミノ酸１〜
１８５及び配列番号１６のアミノ酸１６４〜２１０、ｆ）配列番号１５のアミノ酸１〜２
０８及び配列番号１６のアミノ酸１８３〜２１０、ｇ）配列番号１５のアミノ酸１〜２１
５及び配列番号１６のアミノ酸２０１〜２１０、並びにｈ）配列番号１５のアミノ酸１〜
２３９、配列番号１６のアミノ酸２０５〜２１０のポリペプチド配列、又はこれと実質的
に同一のポリペプチド配列を含む、請求項２２に記載の第１及び第２のポリペプチド又は
ＬＩＰＣ系。
［２７］
一方又は両方の追加の異種配列が膜貫通ドメインを含む、請求項１〜２６のいずれか一
項に記載の第１及び第２のポリペプチド又はＬＩＰＣ系。
［２８］
前記膜貫通ドメインのうちの少なくとも１つがＩ型１回膜貫通ドメインである、請求項
２７に記載の第１及び第２のポリペプチド又はＬＩＰＣ系。
［２９］
請求項１〜２８のいずれか一項に記載の第１又は第２のポリペプチドをコードするポリ
ヌクレオチド配列を含む単離ポリヌクレオチド。
［３０］
請求項１〜２８のいずれか一項に記載の第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド
配列を含む第１のポリヌクレオチド、及び請求項１〜２８のいずれか一項に記載の第２の
ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド。
［３１］
請求項２９又は３０に記載のポリヌクレオチドの１つを含むベクター。
［３２］
請求項２９又は３０に記載のポリヌクレオチドの両方を含むベクター。
［３３］
前記ベクターが発現ベクターである、請求項３１又は３２に記載のベクター。
［３４］
請求項３１〜３３のいずれか一項に記載のベクターを含む宿主細胞。
［３５］
前記宿主細胞が哺乳動物Ｔ細胞である、請求項３４に記載の宿主細胞。
［３６］
前記宿主細胞がヒトＴ細胞である、請求項３４に記載の宿主細胞。
［３７］
請求項１〜２８のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド若しくはＬＩＰＣ
系、請求項２９若しくは３０に記載のポリヌクレオチド、又は請求項３１〜３３のいずれ
か一項に記載のベクターを宿主細胞に導入するステップと、前記宿主細胞を活性化リガン
ドと接触させるステップとを含む、細胞シグナル伝達を誘導する方法。
［３８］
前記活性化リガンドが、
ｃ）式：
【化１】
2018511602.tif 000001
（式中、
Ｅは、三級炭素を含有する（Ｃ４−Ｃ６）アルキル又は三級炭素を含有するシアノ（Ｃ３
−Ｃ５）アルキルであり；Ｒ１はＨ、Ｍｅ、Ｅｔ、ｉ−Ｐｒ、Ｆ、ホルミル、ＣＦ３、Ｃ
ＨＦ２、ＣＨＣｌ２、ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＭｅ、ＣＨ２ＣＮ、
ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、１−プロピニル、２−プロピニル、ビニル、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、シ
クロプロピル、ＣＦ２ＣＦ３、ＣＨ＝ＣＨＣＮ、アリル、アジド、ＳＣＮ、又はＳＣＨＦ
２であり；
Ｒ２はＨ、Ｍｅ、Ｅｔ、ｎ−Ｐｒ、ｉ−Ｐｒ、ホルミル、ＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＨＣｌ２
、ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＭｅ、ＣＨ２ＣＮ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、１
−プロピニル、２−プロピニル、ビニル、Ａｃ、Ｆ、Ｃｌ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、Ｏ−
ｎ−Ｐｒ、ＯＡｃ、ＮＭｅ２、ＮＥｔ２、ＳＭｅ、ＳＥｔ、ＳＯＣＦ３、ＯＣＦ２ＣＦ２
Ｈ、ＣＯＥｔ、シクロプロピル、ＣＦ２ＣＦ３、ＣＨ＝ＣＨＣＮ、アリル、アジド、ＯＣ
Ｆ３、ＯＣＨＦ２、Ｏ−ｉ−Ｐｒ、ＳＣＮ、ＳＣＨＦ２、ＳＯＭｅ、ＮＨ−ＣＮであり、
又はＲ３並びにＲ２及びＲ３が結合したフェニル炭素と連結されてエチレンジオキシ、酸
素がフェニル炭素に隣接しているジヒドロフリル環、若しくは酸素がフェニル炭素に隣接
しているジヒドロピリル環を形成し；
Ｒ３はＨ、Ｅｔであり、又はＲ２並びにＲ２及びＲ３が結合したフェニル炭素と連結され
てエチレンジオキシ、酸素がフェニル炭素に隣接しているジヒドロフリル環、又は酸素が
フェニル炭素に隣接しているジヒドロピリル環を形成し；
Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６は、独立してＨ、Ｍｅ、Ｅｔ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ホルミル、ＣＦ３
、ＣＨＦ２、ＣＨＣｌ２、ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、１−プ
ロピニル、２−プロピニル、ビニル、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＳＭｅ、又はＳｅｔである）の化
合物、又は
ｄ）エクジソン、２０−ヒドロキシエクジソン、ポナステロンＡ、ムリステロンＡ、オキ
システロール、２２（Ｒ）ヒドロキシコレステロール、２４（Ｓ）ヒドロキシコレステロ
ール、２５−エポキシコレステロール、Ｔ０９０１３１７、５−アルファ−６−アルファ
−エポキシコレステロール−３−スルフェート、７−ケトコレステロール−３−スルフェ
ート、ファルネソール、胆汁酸、１，１−ビホスホネートエステル、若しくは幼若ホルモ
ンＩＩＩ
である、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド若しくはＬ
ＩＰＣ系、請求項２９若しくは３０に記載のポリヌクレオチド、請求項３１〜３３のいず
れか一項に記載のベクター、又は請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
［３９］
前記活性化リガンドが、式：
【化２】
2018511602.tif 000002
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、ａ）Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル；（Ｃ１−Ｃ
６）ハロアルキル；（Ｃ１−Ｃ６）シアノアルキル；（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキル
；（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル；ハロ、シアノ、ヒドロキシル、若
しくは（Ｃ１−Ｃ４）アルキルにより任意選択で置換された（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル；
ハロ、シアノ、ヒドロキシル、若しくは（Ｃ１−Ｃ４）アルキルにより任意選択で置換さ
れた（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル；ハロ、シアノ、ヒドロキシル、若しくは（Ｃ１−Ｃ４）
アルキルにより任意選択で置換された（Ｃ３−Ｃ５）シクロアルキル；又はｂ）置換基が
独立して１〜５Ｈ、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシル、（Ｃｉi−Ｃ６）アルキル、
若しくは（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシである非置換又は置換ベンジルであり；並びに
Ｒ５はＨ；ＯＨ；Ｆ；Ｃｌ；又は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシであり、
但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４がイソプロピルである場合、Ｒ５はヒドロキシルでは
なく；
Ｒ５がＨ、ヒドロキシル、メトキシ、又はフルオロである場合、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及び
Ｒ４のうちの少なくとも１つはＨではなく；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４のうちの１つのみがメチルであり、Ｒ５がＨ又はヒドロキシ
ルである場合、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４のうちの残りはＨではなく；
Ｒ４並びにＲ１、Ｒ２、及びＲ３のうちの１つが両方ともメチルである場合、Ｒ５はＨで
もヒドロキシルでもなく；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４が全てメチルである場合、Ｒ５はヒドロキシルではなく；
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３が全てＨであり、Ｒ５がヒドロキシルである場合、Ｒ４はエチル、
ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、アリル、又はベンジルではないことを条件とする）の化合物
である、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド若しくはＬ
ＩＰＣ系、請求項２９若しくは３０に記載のポリヌクレオチド、請求項３１〜３３のいず
れか一項に記載のベクター、又は請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
［４０］
前記活性化リガンドが、式：
【化３】
2018511602.tif 000003
（式中、Ｘ及びＸ’は独立してＯ又はＳであり；
Ｙは：
（ａ）置換基が独立して１〜５Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ
、（Ｃ２−Ｃ４）アルケニル、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキ
ル、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、若しくはニトロである置換若しくは非置換フェニル；
又は
（ｂ）置換基が独立して１〜４Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ
、（Ｃ２−Ｃ４）アルケニル、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキ
ル、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、若しくはニトロである置換若しくは非置換２−ピリジ
ル、３−ピリジル、若しくは４−ピリジル
であり；
Ｒ１及びＲ２は独立して：Ｈ；シアノ；シアノ置換若しくは非置換（Ｃ１−Ｃ７）分岐鎖
若しくは直鎖アルキル；シアノ置換若しくは非置換（Ｃ２−Ｃ７）分岐鎖若しくは直鎖ア
ルケニル；シアノ置換若しくは非置換（Ｃ３−Ｃ７）分岐鎖若しくは直鎖アルケニルアル
キルであり；又はＲ１及びＲ２の原子価は一緒になって、（Ｃ１−Ｃ７）シアノ置換若し
くは非置換アルキリデン基（ＲａＲｂＣ＝）（Ｒａ及びＲｂの非置換基炭素の合計は０〜
６である）を形成し；
Ｒ３はＨ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、又はシアノであり；
Ｒ４、Ｒ７、及びＲ８は独立して：Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコ
キシ、（Ｃ２−Ｃ４）アルケニル、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、（Ｃ１−Ｃ４）ハロア
ルキル、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、又はニトロであり；並びに
Ｒ５及びＲ６は独立して：Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ２−Ｃ４）アルケニル、（
Ｃ３−Ｃ４）アルケニルアルキル、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキ
ル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロであり、又は一緒
になってタイプ（−ＯＣＨＲ９ＣＨＲ１０Ｏ−）の連鎖として、Ｒ５及びＲ６が結合した
フェニル炭素と環を形成し；ここで、Ｒ９及びＲ１０は独立して：Ｈ、ハロ、（Ｃ１〜Ｃ
３）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ３）アルケニル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ（Ｃ１〜Ｃ３）ア
ルキル、ベンゾイルオキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル
、ハロ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ホルミル、ホルミル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、シアノ、
シアノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、カルボキシ、カルボキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ
１〜Ｃ３）アルコキシカルボニル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルカル
ボニル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルカノイルオキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アル
キル、アミノ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルアミノ（Ｃ１〜Ｃ３）ア
ルキル（−（ＣＨ２）ｎＲｃＲｅ）、オキシモ（−ＣＨ＝ＮＯＨ）、オキシモ（Ｃ１〜Ｃ
３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシモ（−Ｃ＝ＮＯＲｄ）、アルコキシモ（Ｃ１〜
Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）カルボキサミド（−Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆ）、（Ｃ１〜Ｃ
３）カルボキサミド（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）セミカルバジド（−Ｃ＝Ｎ
ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲｅＲｆ）、セミカルバジド（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノカルボニル
オキシ（−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲｇ）、アミノカルボニルオキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ペ
ンタフルオロフェニルオキシカルボニル、ペンタフルオロフェニルオキシカルボニル（Ｃ
１〜Ｃ３）アルキル、ｐ−トルエンスルホニルオキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アリール
スルホニルオキシ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）チオ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル
、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルスルホキシド（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキ
ルスルホニル（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、又は（Ｃ１−Ｃ５）三置換シロキシ（Ｃ１−Ｃ３
）アルキル（−（ＣＨ２）ｎＳｉＯＲｄＲｅＲｇ）であり；ここで、ｎ＝１〜３であり、
Ｒｃ及びＲｄは示された長さの直鎖又は分岐鎖炭化水素鎖を表し、Ｒｅ、ＲｆはＨ又は示
された長さの直鎖若しくは分岐鎖炭化水素鎖を表し、Ｒｇはハロ又は（Ｃ１−Ｃ３）アル
キルにより任意選択で置換された（Ｃ１−Ｃ３）アルキル又はアリールを表し、並びにＲ
ｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、及びＲｇは互いに独立であり、
但し、
ｉ）Ｒ９及びＲ１０が両方ともＨである場合、又は
ｉｉ）Ｒ９若しくはＲ１０のどちらかがハロ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、（Ｃ１−Ｃ３）
アルコキシ（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、又はベンゾイルオキシ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであ
る場合、又は
ｉｉｉ）Ｒ５及びＲ６が一緒になってタイプ（−ＯＣＨＲ９ＣＨＲ１０Ｏ−）の連鎖を形
成しない場合、
シアノ置換のものを除く、基Ｒ１又はＲ２のどちらか又は両方の炭素原子の数は４より大
きく、シアノ置換のものを除く、基Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３の合計の炭素原子の数は１０、
１１、又は１２であることを条件とする）の化合物である、請求項１〜２８のいずれか一
項に記載の第１及び第２のポリペプチド若しくはＬＩＰＣ系、請求項２９若しくは３０に
記載のポリヌクレオチド、請求項３１〜３３のいずれか一項に記載のベクター、又は請求
項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
［４１］
ａ）請求項１〜２８のいずれか一項に記載の第１及び第２のポリペプチド若しくはＬＩ
ＰＣ系、請求項２９若しくは３０に記載のポリヌクレオチド、又は請求項３１〜３３のい
ずれか一項に記載のベクターを宿主細胞に導入するステップと、
ｂ）前記宿主細胞を活性化リガンドと接触させるステップと、
ｃ）リガンドにより誘導される生物学的活性又はポリペプチドオリゴマー化の絶対量又は
相対量を定量するステップと
を含む、リガンドにより誘導される細胞シグナル伝達を測定する方法。