【手続補正書】
【提出日】平成20年1月21日(2008.1.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
大部分が２Ｓキャノーラタンパク質からなり、かつキャノーラタンパク質のミセルの生成および沈殿によって上澄み水溶液から得られたキャノーラタンパク質単離物と比較して、乾燥重量ベース（ｄ．ｂ．）（Ｎ×６．２５）で少なくとも９０重量％のタンパク質含量を有し、２Ｓキャノーラタンパク質の割合が増大しており、かつ７Ｓキャノーラタンパク質の割合が減少している、大部分が２Ｓキャノーラタンパク質からなるキャノーラタンパク質単離物。
【請求項２】
前記上澄み水溶液を加熱処理して得られる請求項１に記載のキャノーラタンパク質単離物。
【請求項３】
キャノーラ油糧種子粗粉から得られ、かつ１２Ｓ、７Ｓおよび２Ｓキャノーラタンパク質を含むキャノーラタンパク質水溶液に、１２Ｓおよび７Ｓキャノーラタンパク質を選択的に残留液中に保持し２Ｓタンパク質を透過液として膜を通過させる第１の選択的膜技術を施し、前記透過液に、２Ｓキャノーラタンパク質を選択的に保持し低分子量汚染物質を透過液として膜を通過させる第２の選択的膜技術を施し、第２の選択的膜技術による前記残留液を乾燥させる選択的膜手順から得られる請求項１または２に記載のキャノーラタンパク質単離物。
【請求項４】
乾燥重量ベース（ｄ．ｂ．）で少なくとも９０重量％（Ｎ×６．２５）のタンパク質含量を有し、単離物中に存在するキャノーラタンパク質の少なくとも８５重量％の２Ｓキャノーラタンパク質と１５重量％未満の７Ｓキャノーラタンパク質を含むキャノーラタンパク質単離物。
【請求項５】
単離物中に存在するキャノーラタンパク質の少なくとも９０重量％の２Ｓキャノーラタンパク質と１０重量％未満の７Ｓキャノーラタンパク質を含む請求項４に記載のキャノーラタンパク質単離物。
【請求項６】
少なくとも１００重量％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含量を有する請求項１から５のいずれかに記載のキャノーラタンパク質単離物。
【請求項７】
２Ｓキャノーラタンパク質の割合が増大しているキャノーラタンパク質単離物の調製方法であって、
（ａ）大部分が２Ｓタンパク質からなる、２Ｓタンパク質および７Ｓタンパク質の水溶液を用意するステップと、
（ｂ）前記水溶液を加熱処理して７Ｓキャノーラタンパク質の沈殿するステップと、
（ｃ）前記水溶液から沈殿した７Ｓタンパク質を除去するステップと、
（ｄ）少なくとも９０重量％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含量を有し、２Ｓキャノーラタンパク質の割合が増大しているキャノーラタンパク質単離物を回収するステップと
を含む方法。
【請求項８】
前記加熱処理ステップを、前記水溶液中に存在する７Ｓキャノーラタンパク質の少なくとも５０重量％、好ましくは少なくとも７５重量％を沈殿するのに十分な温度と時間の条件下で実施する請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記加熱処理ステップを、７０℃〜１００℃、好ましくは７５℃〜９５℃の温度で、２〜３０分間、好ましくは５〜１５分間、水溶液を加熱することによって実施する請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
２Ｓおよび７Ｓキャノーラタンパク質の前記水溶液が、キャノーラタンパク質のミセルの生成および沈殿によって濃縮された上澄み液であって、該キャノーラタンパク質ミセルの生成を、
（ａ）キャノーラ油糧種子粗粉を少なくとも５℃の温度で抽出し、前記キャノーラ油糧種子粗粉中のタンパク質を可溶化してタンパク質水溶液を形成するステップと、
（ｂ）前記タンパク質水溶液を残留油糧種子粗粉から分離するステップと、
（ｃ）前記タンパク質水溶液の濃度を少なくとも２００ｇ／Ｌに増大させ、同時に、選択的膜技術によってイオン強度を実質的に一定に保持して濃縮タンパク質溶液を提供するステップと、
（ｄ）前記濃縮タンパク質溶液を約１５℃未満の温度の冷水中に入れて希釈してタンパク質ミセルを生成させるステップと、
（ｅ）沈降したタンパク質ミセルの集団から上澄み液を分離するステップと
によって実施する請求項７から９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記加熱処理の前に、前記上澄み液を１００〜４００ｇ／Ｌ、好ましくは２００〜３００ｇ／Ｌのタンパク質濃度まで濃縮する請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記濃縮ステップを、分子量カットオフ約３，０００〜約１００，０００ダルトンを有する膜を用いた限外濾過によって実施し、前記加熱処理ステップの前に、限外濾過により得られた濃縮上澄み液をダイアフィルトレーションし、該ダイアフィルトレーションステップを、約３，０００〜約１００，０００ダルトンの分子量カットオフを有する膜を使用して、２〜２０容、好ましくは５〜１０容の水を用いて実施する請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
キャノーラタンパク質単離物の調製方法であって、
（ａ）キャノーラ油糧種子粗粉から得られ、１２Ｓ、７Ｓおよび２Ｓキャノーラタンパク質を含むキャノーラタンパク質水溶液を用意するステップと、
（ｂ）７Ｓおよび１２Ｓキャノーラタンパク質を残留液中に保持し２Ｓタンパク質を透過液として膜通過させて、濃縮タンパク質溶液を提供するのに効果的な選択的な膜技術を用いて水溶液のタンパク質濃度を増大させるステップと、
（ｃ）ステップ（ｂ）からの残留液を乾燥させて、大部分が７Ｓキャノーラタンパク質からなり、乾燥重量ベース（ｄ．ｂ．）で少なくとも９０重量％（Ｎ×６．２５）、好ましくは少なくとも１００ｗｔ％のタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物を提供するステップと、
（ｄ）２Ｓキャノーラタンパク質を残留液中に保持し、低分子量汚染物質を膜を通して透過液中で通過させるのに効果的な選択的膜技術を用いてステップ（ａ）からの透過液の濃度を増大させるステップと、
（ｅ）ステップ（ｄ）からの残留液を乾燥して、大部分が２Ｓタンパク質からなり、少なくとも９０重量％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物を提供するステップと
を含む方法。
【請求項１４】
前記キャノーラタンパク質水溶液を、少なくとも５℃の温度でキャノーラ油糧種子粗粉を抽出し、前記キャノーラ油糧種子粗粉中のタンパク質を可溶化して、５〜４０ｇ／Ｌのタンパク質含量と５〜６．８のｐＨを有するタンパク質水溶液を生成するステップと、残留油糧種子粗粉から該タンパク質水溶液を分離するステップとによって提供する請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ステップ（ｂ）を、前記水溶液を少なくとも２００ｇ／Ｌのタンパク質含量に濃縮し、同時に、約３０，０００〜約１５０，０００ダルトン、好ましくは約５０，０００〜約１００，０００ダルトンの分子量カットオフを有する限外濾過膜を用いて、イオン強度を実質的に一定に保持することによって実施して濃縮タンパク質溶液を提供し、該濃縮タンパク質溶液を２〜２０、好ましくは５〜１０容のダイアフィルトレーション溶液を用いたダイアフィルトレーションのステップにかける請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ステップ（ｄ）を、約３，０００〜約３０，０００ダルトン、好ましくは約５，０００〜約１０，０００ダルトンの分子量カットオフを有する膜を用いて、透過液の濃度を１００〜４００ｇ／Ｌ、好ましくは２００〜３００ｇ／Ｌのタンパク質濃度に増大させることによって実施して残留液を提供し、該残留液を、２〜２０、好ましくは５〜１０容のダイアフィルトレーション溶液を用いたダイアフィルトレーションのステップにかける請求項１３から１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
大部分が２Ｓキャノーラタンパク質からなる前記キャノーラタンパク質単離物が、少なくとも１００重量％のタンパク質含量を有する請求項７から１６のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
請求項１から６のいずれかに記載のキャノーラタンパク質単離物の水溶液、好ましくは該キャノーラタンパク質で強化したソフトドリンクの水溶液。