【誤訳訂正書】
【提出日】平成20年2月8日(2008.2.8)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  免疫学的アッセイシステムであって、
フィルタープレートを有するフィルター導管であって、該フィルター導管はアッセイサンプルを含むことが可能である、フィルター導管；
該フィルター導管が配置され得るインキュベーターであって、該インキュベーターは、該アッセイサンプルおよび１種以上の試薬が反応する間に該フィルター導管を収容する、インキュベーター；
該インキュベーターに近接しているサンプル分離システムであって、該サンプル分離システムは、該アッセイサンプルおよび該試薬を種々の成分へと分離するように設計されている、サンプル分離システム；
該サンプル分離システムおよびフィルター導管に近接した、画像獲得システムであって、該画像獲得システムは、該フィルター導管内の該フィルタープレートより上の該アッセイ混合物を光学的に分析して該アッセイ混合物の成分と試薬との間の相互作用の存在を検出するように設計されている、画像獲得システム；ならびに
該フィルター導管、該インキュベーター、該サンプル分離システムおよび該画像獲得システムの到達距離内にロボットアームを含む、ロボットピペッターであって、該ロボットピペッターは、該フィルター導管と、該インキュベーターと、該サンプル分離システムと、該画像獲得システムとの間で、該サンプルまたは該試薬を移すように設計されている、ロボットピペッター；
を備える、システム。
【請求項２】  請求項１に記載のシステムであって、洗浄器をさらに備え、該洗浄器は、前記アッセイサンプルを、該サンプルが前記フィルター導管内に配置されている間に洗浄するように設計されている、システム。
【請求項３】  請求項１に記載のシステムであって、前記フィルター導管は、複数の細孔を備える不活性材料を備えるフィルターを備える、システム。
【請求項４】  請求項３に記載のシステムであって、前記フィルター導管は、アッセイサンプルを、該サンプルがフィルター材料と接触するように保持する構成である、システム。
【請求項５】  請求項３に記載のシステムであって、前記フィルター材料の細孔が、約０．０１ミクロン〜約５０ミクロンの大きさを含む、システム。
【請求項６】  請求項３に記載のシステムであって、前記フィルター材料は、約３ミクロン〜約５ミリメートルの厚みを有する、システム。
【請求項７】  請求項３に記載のシステムであって、前記フィルター材料は、
ポリエステルメッシュ、ナイロンメッシュ、トラック−エッチングされたポリカーボネート膜、酢酸セルロース膜、およびポリ二フッ化ビニリデンフィルター膜からなる群より選択される、システム。
【請求項８】  前記サンプル分離システムが遠心機である、請求項１に記載のシステム。
【請求項９】  前記サンプル分離システムが減圧システムである、請求項１に記載のシステム。
【請求項１０】  前記画像獲得システムがフローサイトメーターである、請求項１に記載のシステム。
【請求項１１】  前記画像獲得システムがカメラである、請求項１に記載のシステム。
【請求項１２】  免疫学的アッセイ方法であって、
フィルター導管内で免疫学的なサンプルと試薬との混合物をインキュベートする工程；
該フィルター導管内の該サンプルと試薬との混合物をフィルタープレートより上の成分とフィルタープレートより下の成分とに分離する工程；ならびに
該フィルター導管内の該フィルタープレートより上の成分を光学的に分析して、該成分間の相互作用の存在を決定する工程
を包含する、方法。
【請求項１３】  前記分析する工程の前であって前記分離する工程の後、ターンテーブル機構に前記フィルター導管を移す工程をさらに包含する請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】  細胞の成分を含むサンプルを前記フィルター導管内に配置する第一工程；および
抗体試薬を該サンプルに添加する第二工程、
をさらに包含し、
前記サンプルと試薬との混合物を分離する工程は、該サンプル混合物を細胞の成分と液体成分とに分離することを含み、そして
前記フィルター導管を分析する工程は、前記フィルターより上に残る細胞の成分を分析することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】  免疫学的アッセイ方法であって、
血漿または血清などの抗体含有サンプルを含むサンプルを、フィルタープレートを有するフィルター導管内に配置する第一工程；
赤血球または合成ビーズなどの抗原キャリア試薬を該抗体含有サンプルに添加する第二工程；
フィルター導管内で免疫学的なサンプルと試薬との混合物をインキュベートする工程；
該フィルター導管内の該サンプルと試薬との混合物を、該フィルタープレートより上の成分と該フィルタープレートより下の成分とに分離する工程であって、該サンプルと試薬との混合物を分離する工程が、該サンプル混合物を抗原キャリア成分と液体成分とに分離することを包含する、工程；および
該フィルター導管内の該フィルタープレートより上の成分を光学的に分析して、該成分間の相互作用の存在を決定する工程であって、該フィルター導管を分析する工程は、該フィルターより上に残る抗原キャリア成分を分析することを含む、工程、
を包含する、方法。
【請求項１６】  免疫学的アッセイ方法であって、
血漿または血清などの抗体含有サンプルを含むサンプルを、フィルタープレートを有するフィルター導管内に配置する第一工程；
赤血球または合成ビーズなどの抗原キャリア試薬を、該抗体含有サンプルに添加する第二工程；
フィルター導管内で免疫学的なサンプルと試薬との混合物をインキュベートする工程；
フィルター導管内のサンプルと試薬との混合物を、該フィルタープレートより上の成分と該フィルタープレートより下の成分とに分離する工程であって、該サンプルと試薬との混合物を分離する工程が、該サンプル混合物を抗原キャリア成分と液体成分とに分離することを含む、工程；ならびに
該フィルター導管内の該フィルタープレートより上の成分を光学的に分析して、該成分間の相互作用の存在を決定する工程であって、該フィルター導管を光学的に分析する工程は、該フィルターより上に残る抗原キャリア成分を分析することを含み、そして該フィルタープレートより上の成分を光学的に分析する工程が不明確な結果を生じる場合、以下の追加の工程：
該フィルター導管内の該フィルターより上に該抗原キャリア成分を捕らえることによって、該抗原キャリア成分を該液体成分から分離する工程；
該フィルターより上の成分を生理食塩液で洗浄する工程；
該抗原キャリア成分を該液体成分から分離する工程；
抗体試薬を該フィルター導管内の該フィルターより上に残っている該洗浄された抗原キャリア成分に添加する工程；
該フィルター導管内で該抗原キャリア成分および該抗体試薬をインキュベートする工程；
該フィルター導管内の該サンプルと試薬との混合物を該フィルターより上の成分と該フィルターより下の成分とに分離する工程；
該フィルターより上の抗原キャリア成分を生理食塩液で洗浄する工程；および
該フィルター導管内の該フィルターより上の成分または該フィルターより下の成分を光学的に分析して、該成分間の相互作用の存在を決定する工程、
が実行される、工程、
を包含する、方法。
【請求項１７】  前記洗浄する工程が、
塩類溶液、リン酸緩衝食塩水およびアッセイの間、細胞の成分の生存性を維持する他の生理食塩液からなる群より選択される生理食塩液を提供する工程；
約１０マイクロリットル〜約５ミリリットルの生理食塩液を前記サンプルに添加する工程；
該サンプルを、前記フィルターより上に残っている抗原キャリア成分と、該フィルターより下の液体成分とに分離する工程；ならびに
該添加する工程および該分離する工程を１回〜約１０回反覆する工程、
を包含する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】  フィルター導管内に免疫学的アッセイサンプルを配置する工程が、複数の細孔を備えている不活性材料を備えているフィルターを含んでいるフィルター導管内に免疫学的アッセイサンプルを配置することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】  前記フィルター導管内の前記サンプルと試薬との混合物を前記フィルターより上の成分と前記フィルターより下の成分とに分離する工程が、遠心システムを用いて該サンプルと試薬との混合物を分離する工程を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項２０】  遠心システムを用いて前記サンプルと試薬との混合物を分離する工程は、約１０×ｇ〜約１０，０００×ｇの速度で作動する遠心システムを用いて該サンプルと試薬との混合物を分離することを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】  遠心システムを用いて前記サンプルと試薬との混合物を分離する工程は、約５秒〜約５分の時間作動する遠心システムを用いて該サンプルと試薬との混合物を分離することを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】  前記フィルター導管内のサンプルと試薬との混合物を前記フィルターより上の成分と前記フィルターより下の成分とに分離する工程は、減圧システムを用いて該サンプルと試薬との混合物を分離する工程を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項２３】  減圧システムを用いて前記サンプルと試薬との混合物を分離する工程は、約−０．１インチＨｇ〜約−１００インチＨｇの圧力で作動する減圧システムを用いて該サンプルと試薬との混合物を分離することを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】  前記フィルターより上の成分または前記フィルターより下の成分を分析する工程が、フローサイトメーターを用いて該成分を分析することをさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項２５】  免疫学的アッセイシステムであって、
フィルタープレートを有するフィルター導管；
該フィルター導管内でサンプルと試薬との混合物をインキュベートするための手段；
該フィルター導管内の該サンプルと試薬との混合物を該フィルタープレートより上の成分と該フィルタープレートより下の成分とに分離するための手段；および
該フィルタープレートより上の、該フィルター導管内の成分を光学的に分析するための手段であって、該フィルター導管内のサンプルと該試薬との間の相互作用の存在を決定する、手段、
を備える、システム。
【請求項２６】  前記サンプルと試薬との混合物を分離するための手段が遠心機である請求項２５のシステム。
【請求項２７】  前記サンプルと試薬との混合物を分離するための手段が減圧システムである請求項２５のシステム。
【請求項２８】  前記フィルターより上の成分もしくは前記フィルターより下の成分、または該フィルターより上の成分と該フィルターより下の成分との両方を分析するための手段が、フローサイトメーターである、請求項２５に記載のシステム。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】発明の詳細な説明
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願についてのクロス・リファレンス
本願は、２０００年１月３１日に出願され、出願番号６０／１７９，２４８を付与された、発明の名称「Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ｕｓｉｎｇ  ＤＦＳ  Ｃｏｌｕｍｎｓ」の、同時係属中の米国仮特許出願に対する優先権を主張する。この米国仮特許出願は、完全に本願明細書に引用したものとする。
【０００２】
技術分野
本発明は、一般に免疫学的アッセイシステムに関して、より詳しくは免疫学的サンプルおよび免疫血液学的サンプルの成分を分離するためのシステムと方法に関する。
【０００３】
発明の背景
免疫学的アッセイは、抗体と抗原との間の反応を検出するように設計されている。これらのアッセイは、共通して、細胞（例えば、赤血球（ＲＢＣ）またはビーズ）を、抗原「キャリア」として使用する。適切なアッセイ構成において、抗原は、抗原キャリアと架橋して、もともとは個々の抗原キャリアおよび抗体であったものから、大きい三次元抗原抗体会合物を生成し得る。他の構成において、抗体は、抗原キャリアに架橋せずに結合する。
【０００４】
血液銀行の環境における免疫血液学テストは、輸液の前に輸液ドナーとレシピエントとの間の適合性を決定するためにＲＢＣおよび抗体を使用する。たとえば、レシピエントからの抗体がドナーからのＲＢＣを橋かけして（凝集させて）大きいＲＢＣ凝集物の形成を生じる場合、ドナーとレシピエントとは非適合性である。現在の市販のテスト試薬は、これらの凝集物と個々の凝集していないＲＢＣとを区別するように設計されている。たとえば、標準的な「チューブ・テスト」において、ＲＢＣは抗体と混合され、短時間（約３０秒）約１０００×ｇで遠心分離されて、抗原−抗体複合体の形成を高め、それから凝集していないＲＢＣと凝集したＲＢＣとを区別することを可能にするために手で穏やかに再懸濁される。チューブ・テストは、労働集約型であり、自動操作に適切ではなく、その結果、それらは個々の操作者の技量に依存するので、実験室ごとに標準化するのが困難である。
【０００５】
凝集したＲＢＣを識別するために用いる代替方法はスピン・カラム技術である。スピン・カラム技術は標準のクロマトグラフィの原理に基づく。この方法論の場合、均質マトリックス物質（たとえば、ビーズ、ゲルまたはポリアクリルアミド）で満たされるチューブが、個々のＲＢＣから凝集物を分離するために用いられる。慎重に管理された遠心力の下で大きい（「４＋」）凝集物がかろうじてマトリックスに入るように、このマトリックス物質は、指定された大きさの孔または細孔を有するように設計される。しかし、連続してより小さい凝集物（「３＋」〜「１＋」）が、次第に増加する程度でこのマトリックスに実際に入り、そして凝集していないＲＢＣがマトリックスに入るのみでなく、チューブの底部に完全に沈降もする。単一の均一なクロマトグラフィのマトリックスが、個々のＲＢＣを種々の大きさのＲＢＣ凝集物から効果的に分離するために、約１０分間の、比較的長い遠心実行が、８０×ｇという慎重に管理された低速の遠心条件の下で、実行されなければならない。最適の遠心条件からの偏差（たとえば、アッセイ実行を短縮する試みのより高い遠心速度）は、給血者とレシピエントとの間の適合性を決定するアッセイ能力を犠牲にして、ＲＢＣ分離を乏しくする。この方法論は、ある程度まで自動操作に適し、そして操作者の技量にさほど依存しない。
【０００６】
スピン・カラム技術は、カラムを作り出すコストに起因して、チューブ・テストよりかなり高価である。マトリックス物質は溶液であり、そして慎重に管理されたパッケージング、積込みおよび貯蔵条件が概して必要とされる。さらに、延長された（チューブ・テストの場合の約３０秒に対して約１０分）遠心工程を原因として、テストはチューブ・テストを用いるよりも遅い。アッセイ結果の解読も、操作者の訓練を必要とする。なぜなら、読出しが「アナログ」規模である（すなわち、マトリックスを通るＲＢＣの移動距離が代表的に推定されなければならない）からである。
【０００７】
このように、上記の欠陥および不十分さに取り組むという今まで取り組まれていなかったニーズが、産業において現存する。
【０００８】
発明の要旨
本発明は、免疫学的アッセイおよび免疫血液学的アッセイのためのシステムと方法を提供する。簡潔に記述すると、このアッセイシステムは、アッセイサンプルを収容し得るフィルター導管、このフィルター導管が配置され得るインキュベーター、このインキュベーターに近接したサンプル分離システム、このサンプル分離システムに近接した画像獲得システム、ならびにこれらのフィルター導管、インキュベーター、サンプル分離システムおよび画像獲得システムの到達距離内にロボットアームを備えているロボットピペッターを備える。このフィルター導管は、複数の細孔を備える不活性材料でできていてもよいフィルターを備える。
【０００９】
本発明は、また、免疫学的アッセイおよび免疫血液学的アッセイのための方法を提供するとして見られることができる。この免疫学的な方法は、サンプルとテスト試薬との間の相互作用を識別する。これらのサンプルおよびテスト試薬のうちの、一方が抗原キャリア（ＲＢＣまたはビーズ）含み、そして他方が抗体を含む。この事については、この方法は、以下の工程によって広く要約されることができる：フィルターを備えているフィルター導管内に免疫学的アッセイサンプルを配置する工程、このフィルター導管にテスト試薬を添加する工程、このフィルター導管内のサンプルと試薬との混合物をインキュベートする工程、フィルター導管内のサンプルと試薬との混合物をフィルターより上の成分とフィルターより下の成分とに分離する工程、およびフィルター導管を分析してサンプルと試薬との間の相互作用の存在を決定する工程。
代替の実施例において、上記フィルター導管を分析する工程が不明確な結果を生じる場合、上記方法はまた、フィルター導管内のサンプルを洗浄器内に置く工程、フィルター導管内のフィルターより上に抗原キャリアを捕らえることによって、抗原キャリアをサンプルの液体成分から分離する工程、フィルター導管内の抗原キャリアを減圧下または遠心により生理食塩液で洗浄して、抗原キャリアに結合していない過剰の抗体を除去する工程、抗体試薬をフィルター導管内の洗浄された抗原キャリアに添加する工程、フィルター導管内で混合物をインキュベートする工程、フィルター導管内のフィルターより上に抗原キャリアを捕らえることによって、抗原キャリアをこの混合物のサンプルの液体成分から分離する工程、およびフィルター導管を再度分析して、サンプルと試薬との間の相互作用の存在を決定する工程を包含し得る。
【００１０】
以下の図面および詳細な説明を考慮すると、本発明の他の方法、機能および利点が、当業者に明らかになる。全てのこの種の追加の方法、機能および利点が本明細書の範囲内に包含されること、本発明の範囲内であること、そして添付の請求の範囲によって保護されることが意図される。
【００１１】
好ましい実施例の詳細な説明
一般に、本発明は、免疫学的サンプルおよび免疫血液学的サンプルの成分を分離して分析するためのシステムと方法に関する。この事については、免疫学的アッセイシステムは、免疫学的アッセイの技術をより自動操作に適切にする同時に、現在のチューブ・テストおよびスピン・カラム技術の欠点を克服する。好適な実施例において、この免疫学的アッセイシステムは、フィルターにおける指定された大きさの複数の孔または細孔の存在に起因して不連続な分子量および大きさのカットオフを有する一つ以上のフィルターを備えているフィルター導管システムを備える機器である。
【００１２】
免疫学的なサンプルは、試薬と混ぜ合わせられて、フィルターより上に配置される。減圧または遠心の後、または、サンプルをフィルターに通す他の何らかの方法が適用され、サンプルの成分は、種々のフィルターによって、それらの大きさに従って互いから分離される。
本発明の免疫学的なシステムは、抗体と細胞との間、またはいくつかの場合において、抗体と合成ビーズ（これは、抗原キャリアとしてはたらくように改変および／または構成され得る）との間の相互作用を測定するために用いられ得る。免疫学的なシステムは、少なくとも２つの異なる方法で使用され得る。１つの方法において、患者サンプルの「細胞の成分」（たとえば、赤血球（ＲＢＣ）、白血球（ＷＢＣ）または血小板）は、「試薬抗体」と混合される。この混合物の成分は分離されて、それから細胞の成分と試薬抗体との間の相互作用の存在を決定するために分析される。他の方法において、免疫学的なシステムは、患者の抗体含有サンプル（たとえば、血漿または血清サンプル）を、合成のビーズまたは試薬細胞であり得る抗原キャリア（たとえば、ＲＢＣ、ＷＢＣ、または血小板）と混合するアッセイ方法において使用され得る。この混合物はそれから分離され、そしてそれらの成分は、抗体サンプルと試薬細胞または合成ビーズとの間の相互作用の存在を決定するために分析される。
【００１３】
図１は、本発明の免疫学的なシステム１００を表す。免疫学的なシステム１００は、アッセイサンプルを収容し得るフィルター導管１０５、フィルター導管が配置され得る任意のインキュベーター１１０、インキュベーター１１０に近接して配置されるかまたはインキュベーター１１０内に配置されるサンプル分離システム１１５、サンプル分離システム１１５に近接した任意の画像獲得システム１３０、ならびにフィルター導管１０５、インキュベーター１１０、サンプル分離システム１１５および／または画像獲得システム１３０への到達距離内のロボットのアームを備える任意のロボットピペッター１３５を備える機器である。免疫学的なシステム１００は、また、その中に配置される任意の洗浄器１４０、アッセイサンプルを保持するためのサンプル・ホルダ１４６を内部に配置した任意のターンテーブルシステム１４５を備えることができる。免疫学的なシステム１００は、必要に応じて、アッセイサンプルを含むチューブ１４７および／または試薬を含むチューブ１４８を更に備え得る。
【００１４】
免疫学的なシステム１００内に配置される任意のインキュベーター１１０は、フィルター導管１０５がその中に配置されることができる形状および大きさである。インキュベーターの多数の大きさおよび形状が使用され得るが、好適な実施例において、インキュベーター１１０は、複数のフィルター導管１０５またはフィルター導管のプレート１０６がその中に配置されることができるための形状および大きさである。インキュベーター１１０は、フィルター導管がインキュベーター１１０内に配置されている場合にこれらのフィルター導管を加熱することができる任意の加熱要素を更に含むことができる。
【００１５】
サンプル分離システム１１５はまた、フィルター導管１０５がその中に配置されることを可能にするための形状および大きさである。サンプル分離システムの多数の大きさおよび形状が使用され得るが、好適な実施例においては、複数のフィルター導管１０５および／またはフィルター導管のプレート１０６が、その中に配置され得る。サンプル分離システム１１５は、たとえば、減圧装置１２０、遠心機１２５および／または電場印加であり得るが、それらに限定されない。
【００１６】
サンプル分離システム１１５は、フィルター導管１０５がサンプル分離システム１１５内に配置されるときに、フィルター導管１０５内に配置されるアッセイサンプル１４７がフィルター１５０を通して吸引され（図２を参照する）、それによって、アッセイサンプルを大きさに基づいて種々の成分に分離する型のものである。
任意の画像獲得システム１３０は、たとえば、カメラ、フローサイトメーター、特別なレンズ（例えば顕微鏡）、または人間の眼でさえあり得るが、これらに限定されない。通常、アッセイサンプルは、サンプル分離システム１１５から取り出されたあと、画像獲得システム１３０によって分析される。
【００１７】
画像獲得システム１３０は、フィルター導管１０５内に配置されるフィルター１５０より上の材料の有無を決定するためにフィルター導管１０５の分析を可能にする。画像獲得システム１３０は、特にそれがフローサイトメーターという形をとるときに、また、フィルター１５０より上の材料の大きさを決定するため（たとえば、材料が個々の抗原キャリアの形態であるか抗体キャリアの凝集物の形態であるかを決定するため）、ならびに抗体がフィルターより上にある抗原キャリアに結合しているか否かを決定するために、使用され得る。
【００１８】
システムにおいて使用される任意のロボットピペッター１３５は、共通に公知の、当業者によって使用される型のものである。たとえば、Ｔｏｍｔｅｃ，Ｉｎｃ．（Ｈａｍｄｅｎ、コネティカット、米国）またはＣＲＳ  Ｒｏｂｏｔｉｃｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，オンタリオ、Ｃａｎａｄａ）により製造および市販されているロボットピペッターシステムが、本発明の一実施例に従って使われることができるが、これらに限定されない。
【００１９】
任意の洗浄器１４０は、画像獲得システム１３０からロボットピペッター  １３５のロボットアームの到達距離内に配置される。画像獲得システム１３０による、フィルター導管１０５内のフィルター１５０より上の材料の分析が、不明確な結果を生じる場合、アッセイサンプルは、フィルター導管１０５内に配置されて、洗浄器１４０内に配置され得る。洗浄器１４０は、フィルター導管１０５、複数のフィルター導管１０５および／またはフィルター導管のプレート１０６がその中に配置され得るような大きさおよび形状である。洗浄器１４０は、アッセイ混合物中に存在する抗原キャリアからフィルター導管１０５のフィルター１５０に通る全ての試薬を洗浄するに設計される。洗浄器１４０の多数の構成があってもよいが、好適な実施例において、洗浄器１４０は減圧装置１２０と同じシステムである。
【００２０】
図２は、図１の免疫学的なシステム１００のフィルター導管１０５の構成要素を表す。「フィルター導管」１０５とは、アッセイサンプルを収容し得、内部に配置される一つ以上のフィルターを備え得る導管を意味する。図２は、サンプル分離システム１１５に置かれる前（ａ）、およびサンプル分離システム１１５から取り出した後（ｂ）の、フィルター導管１０５を表示する。図２に示すように、フィルター導管１０５の内部に、一つ以上のフィルター１５０が配置される。フィルター１５０は、複数の細孔を備える不活性材料を含む。本発明の種々の実施例によれば、フィルター１５０の細孔径は、変化することができる。たとえば、フィルター１５０の細孔は、約０．０１ミクロン〜約５０ミクロンまでの範囲の大きさであり得る。フィルター１５０の細孔の大きさは、フィルター導管１０５の適用法に左右される。
【００２１】
フィルター１５０が、たとえば、個々の赤血球がフィルター１５０の細孔を通過することを可能にしながら、例えばＲＢＣ凝集物を保持するために用いることが求められる場合、本出願の一実施例において、細孔径の範囲は３ミクロン〜約４０ミクロンである。他の細孔径が使用され得るが、好適な実施例において、細孔径は約３ミクロンから約５ミクロンまで変動する。しかし、フィルター１５０が抗原キャリアを保持するが抗体含有流体を通すために使用される場合にフィルター導管１０５が抗原キャリア（ＲＢＣ、ＷＢＣ、血小板または合成ビーズ）から流体を濾別するために使用される場合、好適な実施例の細孔径の範囲は、約０．１ミクロン〜約３ミクロンである。この方法論のための最適の細孔径は、０．２ミクロンである。
【００２２】
フィルター１５０の厚さはまた、フィルター１５０の適用法に依存して、フィルター導管１０５の異なる実施例において変化することができる。たとえば、フィルター１５０の厚さは、約３ミクロン〜約５ｍｍの範囲であり得る。好適な実施例において、フィルター１５０は、約３ミクロン〜約１００ミクロンである。最適には、フィルター１５０の厚さは、約１０ミクロン〜約７５ミクロンである。
【００２３】
フィルター１５０のために使用される材料は、フィルター導管１０５の種々の実施例において、複数の細孔を備える任意の材料（好ましくは不活性材料）であり得る。フィルター１５０の材料は、フィルター１５０の適用法に依存して、変化し得る。フィルター１５０の機能が、個々のＲＢＣを通過させながらＲＢＣ凝集物を保持することである場合、フィルター材料は、たとえば、ポリエステルメッシュ、ナイロンメッシュまたはトラック−エッチングされたポリカーボネート膜であり得るが、これらに限定されない。この型の材料を有するフィルター１５０は、カンザスシティー（ミズーリ、米国）のＳｅｆａｒ社により製造および市販されている。フィルター１５０の適用法が、全てのＲＢＣを保つが他の抗体含有流体を通すことである場合、好適な実施例において、使用されるフィルター材料は、Ｃｏｍｉｎｇ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社（アクトン、マサチューセッツ、米国）により製造および市販されている、０．２ミクロンのポリ二フッ化ビニリデンフィルター膜である。あるいは、支持された酢酸セルロース膜（たとえば、Ｏｓｍｏｎｉｃｓ社（ミネアポリス、ミネソタ、米国）により製造および市販されているＡｃｅｔａｔｅ  ＰｌｕｓＴＭ膜）も、本出願のために使用され得る。
【００２４】
図２で分かるように、フィルター導管１０５は、複数のフィルター１５０を収容することができる。複数のフィルター１５０が使用される場合、第１のフィルター１５０より低い位置すなわち下に配置されるフィルター１５０’は、通常、好適な実施例において、より小さい孔のサイズのものであり、これによって、アッセイサンプルを大きさによってその種々の成分に分ける。図２で分かるように、アッセイサンプル１４７（必ずしも本発明の一部ではない）は、フィルター導管１０５内で、第１のフィルター１５０より上に配置される。（ｂ）において、サンプルの分離を行った後、サンプル１４７の抗原キャリア１５５の最大の大きさの凝集物は、第１のフィルター１５０より上に残る。サンプル１４７の凝集していないかまたはより小さい凝集物１５６は、第２のフィルター１５０’より上に残るかまたはこのフィルターを通過する。
【００２５】
図３は、減圧システム１２０を表す。これは、免疫学的なシステム１００のサンプル分離システム１１５の構成要素の１つの型である。減圧装置１２０は、図３において、その中に配置される複数のフィルター導管１０５またはフィルター導管のプレート１０６と一緒に示される。一つ以上のフィルター導管が含まれる減圧が、本発明の範囲内であると理解されなければならない。個々のフィルター導管１０５には、減圧管１６０が連結されており、そしてこの減圧管は減圧コントローラ１６５を通過し、この減圧コントローラは減圧ポンプ１７０に接続している。
【００２６】
図３で示す減圧装置１２０の好ましい構成は、９６フィルター導管のプレート・フォーマットを使用する。他の構成が他の実施例において可能であるが、好適な実施例において、減圧システムの減圧装置１２０は、それぞれに各々のフィルター導管１０５に接触して、他のフィルター導管１０５の各々のフィルター１０５のそれぞれに圧力を付与するものである。本実施例において、導管プレート１０６の各々のフィルター導管１０５（図１）は、下方で個々のガスケットによって接触され、このガスケットは、個々の管１６０に接続され、この管は、フィルター導管１０５を減圧ポンプ１７０に接続する。このように、ポンプ１７０からフィルター導管１０６のプレートまでの管の９６のセグメント、および管１６０の各々のセグメントは、オンとオフを切り替えられる減圧圧力をそれぞれに有してもよい。しかし、減圧装置１２０がまた、いずれの１つの時点においても、フィルター導管１０５のサブセットに、減圧を付与することができるか、または複数のフィルター導管１０５もしくはフィルター導管プレート１０６の全てに同時にもまた減圧を付与することができると理解しなければならない。
【００２７】
減圧システムによって付与されることができる圧力は、約−０．１インチ水銀（インチＨｇ）〜約−１００インチ水銀まで変動することができる。好適な実施例において、圧力の範囲は、約−０．１インチＨｇ〜約−１０インチＨｇの間にある。最適には、減圧装置１２０によって維持される圧力は、約−０．１インチＨｇ〜約−３インチＨｇである。
【００２８】
図４は、遠心機１２５を表す。この遠心機は、サンプル分離システム１１５（免疫学的なシステム１００の構成要素）の他の型である。公知で、当業者によって使われる任意の型の遠心機システムも遠心機１２５として使用されることができると理解されなければならない。たとえば、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｉｎｃ（フラートン、カリフォルニア、米国）により製造および市販されている典型的遠心機は、フィルター導管１０５を保持するように遠心機が改変される限り、本発明の一実施例に従って使用されることができる。図４に示される遠心機１２５は、好適な実施例において使用される遠心の角度を示す。多数の角度が機能してもよいが、好適な実施例において、フィルター導管１０５は回転軸１７５に対して４５°の角度で配置される。
本発明の免疫学的なシステム１００の一実施例において、フィルター導管１０５、サンプル、およびフィルター１５０の配向は、サンプル分離システム１１５が、サンプルをフィルター１５０に接触させ得、そしてフィルター１５０の見かけの細孔径より小さいサンプルの成分がフィルター１５０を通過してフィルター１５０の下方の捕捉レザバまたは次のフィルター１５０’に入ることを可能にし、これによって、フィルターの細孔を通過するためには大きすぎるサンプルの成分と、フィルター導管内でフィルター１５０（およびおそらくフィルター１５０’）より上に残るサンプルの成分とを分離するような配向である。
【００２９】
また、免疫学的アッセイ方法は、本発明の範囲内である。免疫学的アッセイ方法１８０は、図５のフローチャートにおいて表される。免疫学的アッセイ方法１８０は、ブロック１８５に見られるように、フィルター導管１０５内に免疫学的アッセイサンプルを配置する、任意の工程を包含する。本発明の他の実施例において、免疫学的アッセイサンプルはまた、標準の試験管またはマイクロ遠心管に入れられ得る。他の導管が、方法１８０の他実施例において、アッセイサンプルを保持するために使用され得る。ブロック１９０は、アッセイ試薬をフィルター導管１０５に添加する次の任意の工程を示す。次の工程（ブロック１９５に示される）は、試薬とサンプルとを混合してサンプル混合物２００を形成する工程である。ブロック２０５は、サンプル混合物２００をインキュベートする任意の工程を示す。ブロック２０５のインキュベーション工程において、サンプル混合物２００は、約４℃〜約３７℃の範囲の温度でインキュベートされ得る。好適な実施例において、サンプル混合物２００は、およそ室温（２０℃〜２５℃）〜約３７℃の範囲の温度でインキュベートされる。サンプル混合物２００のインキュベーション時間は、インキュベーションしないことから約３０分までであり得る。好適な実施例において、インキュベーション時間は約２分〜約５分である。
【００３０】
任意のインキュベーション工程の後、ブロック２１０にて図示するように、次の任意の工程は、サンプル混合物２００をその種々の成分に分離することである。この工程は、サンプル分離システム１１５内にサンプル混合物２００を配置することによって通常果たされる。ブロック２１０の分離工程において使用されるサンプル分離システム１１５が遠心機１２５である場合、遠心機速度は通常約１０×ｇ〜１０，０００×ｇであるが、他の速度が使用され得る。好適な実施例において、遠心機の速度は、約１０００×ｇ〜約５０００×ｇである。最適には、遠心機の速度は、３０００×ｇである。遠心時間は、約５秒〜約５分の範囲であり得る。他の時間が使用され得るが、好適な実施例において、遠心時間は約１０秒〜約３０秒である。最適には、遠心時間は、約１５秒〜約２０秒である。
【００３１】
ブロック２１５に示すように、任意の分離工程２１０の後、フィルター導管１０５は、フィルター１５０より上に残るアッセイサンプルと試薬との間の相互作用の有無を決定するために任意に分析されることができる。サンプルは、画像獲得システム１３０内にフィルター導管１０５を配置することによって分析される。アッセイサンプルと試薬との間の相互作用が、ブロック２１５の分析工程において、穫得システム１３０によって、フィルター１５０より上の材料において認められる場合、免疫学的アッセイ方法１８０は完了される。たとえば、アッセイサンプル中の細胞の成分と抗体試薬との間に相互作用が存在する場合、材料はフィルターより上に検出される。相互作用は、抗体による細胞の成分の凝集または集合の形で立証される。この凝集は、画像獲得システム１３０によって検出され得る。同様に、凝集の証拠の非共存は、相互作用が細胞の成分と抗体試薬との間に存在しなかったことを示す。同様に、このアッセイ方法は、画像獲得システム１３０によって、抗体成分による細胞の試薬の凝集の有無を検出することにより、アッセイサンプル中の抗体成分と細胞の試薬との間の相互作用を検出するために用いてもよい。
【００３２】
ブロック２１５の分析工程の結果が不明確であり、そして相互作用がフィルター導管１０５のフィルター１５０より上の材料において検出されない場合、免疫学的アッセイ方法１８０は、必要に応じて、サンプル混合物２００を洗浄器１４０で洗浄する工程２２０に進むことができる。以前に記載されたように、好適な実施例において、洗浄器１４０はまた、減圧装置１２０である。減圧は、種々の実施例に従って、様々な長さの時間にわたって付与されることができるが、好適な実施例において、全ての流体が減圧によりフィルター導管システム１０５のフィルター１５０を通過するまで、減圧は付与される。減圧が付与される時間の長さは、減圧圧力に依存するが、しばしば、約５秒〜約２分、またはサンプル混合物２００の液体成分がフィルター１５０を通してほとんどまたは完全に吸引される時間までである。
【００３３】
ブロック２２０の任意の洗浄工程において、サンプル混合物２００は、生理食塩液によって洗浄され得る。この塩溶液は、たとえば、塩類溶液（たとえば、０．９％の塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）溶液、リン酸塩緩衝食塩水、またはアッセイ方法の間、細胞の成分の生存性を維持する任意の生理食塩液）であり得るが、これらに限定されない。洗浄工程は、生理食塩液を提供する工程、サンプル混合物２００に約１０マイクロリットル〜約５ミリリットルの生理食塩液を添加する工程、フィルター１５０を通過してこのフィルターより下に残る液体成分から、フィルター１５０より上に残る抗原キャリア（細胞の成分または合成ビーズのいずれか）を分離する工程、およびサンプル混合物２００が適用法のために十分に洗浄されるまで、これらの添加工程および分離工程を１回〜約１０回反覆する工程を含むことができる。
【００３４】
ブロック２２０の任意の洗浄工程の後、任意の工程１９０で、免疫学的アッセイ方法１８０が再び開始する。工程１９０において、検定用試薬は、フィルター導管１０５のフィルター１５０より上に残る洗浄された抗原キャリアを添加される。任意の混合工程１９５に続いて、結果として生じるサンプル混合物２００は、ブロック２０５の任意のインキュベーション工程へ進む。ブロック２０５において、サンプル混合物２００は再びインキュベーター１１０に入れられる。インキュベーションの際に、サンプル混合物２００は、必要に応じて、ブロック２１０で示されるようにサンプル分離システム１３０に入れられ、それからブロック２１５に示されるように、任意に再び分析される。
【００３５】
アッセイサンプルが最初に標準の試験管またはマイクロ遠心管に入れられる本発明の実施例において、サンプルは、画像獲得システム１３０によって最初にアッセイされる。それから、画像獲得システム１３０のテスト結果が不明確であるならば、サンプル混合物２００はフィルター導管１０５に入れられ、ブロック２２０の洗浄工程へ進み、ブロック１９０におけるテスト試薬の添加、ブロック１９５におけるサンプルと試薬との混合、ブロック２０５のインキュベーション工程、ブロック２１０のサンプル分離工程、およびブロック２１５の分析工程が続く。
本発明の上記の実施例、特に、任意の「好ましい」実施例は、単なる実施の可能な実例であり、単に本発明の原理の明白な理解のために記載されるだけであることが強調されなければならない。
【００３６】
多数のバリエーションおよび改変は、本発明の精神および原理から実質的に逸脱することなく、本発明の上記の実施例に対してなされ得る。全てのこの種の改変およびバリエーションは、本開示および本発明の範囲内に含まれ、以下の特許請求の範囲によって保護されることが意図される。
本発明は、以下の図面を参照してよりよく理解され得る。図面の成分が必ずしも同一縮尺で描かれてはおらず、本発明の原理を明らかに具体的に説明する際に、強調がなされる。さらに、図面において、同じ参照番号は、数個の図にわたる対応する部品を指示する。