【手続補正書】
【提出日】令和1年10月15日(2019.10.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
６．５〜８．０のｐＨを有しており、かつイリノテカン八硫酸スクロースを封入するイリノテカンリポソームの分散液を含む、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物であって、前記リポソームが、全リポソームリン脂質１ｍｍｏｌあたり、合計で５００ｍｇ（±１０％）の重量のイリノテカン部分に対応する比率で、コレステロールおよび１つまたは複数のリン脂質を含み、前記保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物は、２℃〜８℃の温度での最初の６か月の保管の間に、２０ｍｏｌ％未満のＬｙｓｏ−ＰＣを形成するほど安定化されている、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２】
０．８５〜１．２のイリノテカン／スルフェート化合物のグラム当量比を有することを特徴とする、請求項１に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３】
全リン脂質１ｍｏｌあたり、合計で５００ｇ±１０％のイリノテカン部分の質量に対応する比率で、コレステロールおよび１つまたは複数のリン脂質を含むリポソーム内に封入されたイリノテカン八硫酸スクロース（ＳＯＳ）を含む、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物であって、前記リポソーム型イリノテカン組成物は、２℃〜８℃の温度での前記リポソーム型イリノテカン組成物の最初の６か月の保管の間に、２０ｍｏｌ％未満のリゾホスファチジルコリン（ｌｙｓｏ−ＰＣ）を形成するほど安定化されており、前記リポソーム型イリノテカン組成物は、以下のステップ：
（ａ）０．４〜０．５Ｍのスルフェート濃度で、ＳＯＳの置換アンモニウム塩を封入する、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロールおよびメトキシ末端ポリエチレングリコール−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンを含むリポソームを形成するステップ、
（ｂ）前記リポソームを、約５５℃またはそれより高い温度でイリノテカンを含む溶液に接触させて、これにより、前記リポソーム内にイリノテカン八硫酸スクロースを封入するリポソームの調製物を形成するステップ、ならびに
（ｃ）工程（ｂ）からの前記リポソームの調製物のｐＨを、６．５〜７．５のｐＨになるように調整することを含む、少なくとも１つの追加のステップによって、前記保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物を得るステップ
を含む工程により得られることを特徴とする、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項４】
ステップ（ｂ）の温度が約６０℃またはそれより高いことを特徴とする、請求項３に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項５】
ステップ（ｂ）の温度が約７０℃またはそれより高いことを特徴とする、請求項３に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項６】
ステップ（ｂ）の温度が約５５℃〜約７０℃であることを特徴とする、請求項３に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項７】
ステップ（ｂ）の温度が約６０℃〜約７０℃であることを特徴とする、請求項３に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項８】
４．３ｍｇ／ｍｌのイリノテカン遊離塩基に等価なイリノテカン部分総含量を有することを特徴とする、請求項１から７のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項９】
２〜８℃の保管温度での９〜１２か月の保管時間後に、２０ｍｏｌ％未満のｌｙｓｏ−ＰＣを有することを特徴とする、請求項１から８のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１０】
保管時間後に、（１）リポソームと会合したイリノテカンの量、および（２）前記リポソームと会合していないイリノテカンの量が、非結合イリノテカンからリポソームを分離した後に、クロマトグラフィーによって決定されることを特徴とする、請求項１、２または９に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１１】
前記クロマトグラフィーが、６０ｍｇ  ３ｃｃ逆相カートリッジでのものであることを特徴とする、請求項１０に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１２】
等張性のＨＥＰＥＳ水性緩衝液を含み、前記ＨＥＰＥＳ水性緩衝液が、２〜２０ｍＭの濃度で存在することを特徴とする、請求項１から１１のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１３】
１３０〜１６０ｍＭの濃度で存在する塩化ナトリウムをさらに含むことを特徴とする、請求項１から１２のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１４】
前記リポソーム中に封入されている前記イリノテカンが、八硫酸スクロースの塩として、ゲル状態または沈殿状態にあることを特徴とする、請求項１から１３のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１５】
前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンが、ＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥであることを特徴とする、請求項１から１４のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１６】
合計で、６．８１ｍｇのＤＳＰＣ／ｍｌ、２．２２ｍｇのコレステロール／ｍｌおよび０．１２ｍｇのＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥ／ｍｌ、４．０５ｍｇ／ｍＬのＨＥＰＥＳ水性緩衝液および８．４２ｍｇの塩化ナトリウム／ｍＬを含むことを特徴とする、請求項１５に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１７】
前記保管温度が約４℃であることを特徴とする、請求項１から１６のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１８】
２〜８℃の保管温度で６か月後に、１ｍｇ／ｍＬ未満のｌｙｓｏ−ＰＣを形成することを特徴とする、請求項１から１７のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項１９】
２〜８℃の保管温度で２１か月後に、２ｍｇ／ｍＬ以下のｌｙｓｏ−ＰＣを形成することを特徴とする、請求項１から１７のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２０】
前記ＳＯＳの置換アンモニウム塩が、トリエチルアンモニウムＳＯＳまたはジエチルアンモニウムＳＯＳであることを特徴とする、請求項１から１９のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２１】
１００ｐｐｍ未満の総量でトリエチルアンモニウムまたはジエチルアンモニウムを含むことを特徴とする、請求項２０に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２２】
３０〜１００ｐｐｍの総量でトリエチルアンモニウムまたはジエチルアンモニウムを含むことを特徴とする、請求項２０または２１に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２３】
ステップ（ａ）における前記スルフェート濃度が、０．４５Ｍ〜０．４７５Ｍの範囲であることを特徴とする、請求項３から２２のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２４】
ステップ（ｂ）において、約５５℃またはそれより高い温度でリポソームがイリノテカンを含む溶液と接触される時間が、約３０分間〜約６０分間であることを特徴とする、請求項３から２３のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２５】
前記時間が約３０分間であることを特徴とする、請求項２４に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２６】
前記リポソームが、動的光散乱法により決定すると、１１０ｎｍ±２０％の体積加重平均サイズを有し、前記サイズがキュムラント法によって決定されることを特徴とする、請求項１から２５のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２７】
ｌｙｓｏ−ＰＣの量が、全リポソームリン脂質に対するものであることを特徴とする、請求項１から２６のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２８】
２〜８℃の保管温度で最初の６か月後に、全リン脂質に対して１０ｍｏｌ％未満のｌｙｓｏ−ＰＣを有することを特徴とする、請求項２７に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項２９】
２〜８℃の保管温度で最初の６か月後に、全リン脂質に対して３ｍｏｌ％〜２０ｍｏｌ％のｌｙｓｏ−ＰＣを有することを特徴とする、請求項２７に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３０】
以下のステップ：
（ａ）約０．４５Ｍのスルフェート濃度を有する八硫酸スクロース（ＳＯＳ）の置換アンモニウム塩の溶液中で、脂質分散液を形成するステップであって、前記分散液中の脂質が、それぞれ３：２：０．０１５のモル比の１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロールおよびメトキシ末端ポリエチレングリコール（ＭＷ２０００）−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンを含む、ステップ、
（ｂ）前記脂質分散液を、６０〜７０℃の範囲の温度で少なくとも１つの０．１μｍの膜フィルターを通して押し出して、リポソームを形成するステップ、
（ｃ）前記リポソームの外側にある八硫酸スクロースの前記置換アンモニウム塩に由来するイオンを実質的に除去するステップ、
（ｄ）前記リポソームを、６０〜７０℃の範囲の温度でイリノテカン塩酸塩を使用した溶液に接触させて、全リン脂質１ｍｏｌあたり約５００ｇ±１０％の重量のイリノテカン部分を封入するリポソームの調製物を形成するステップ、
（ｅ）補足されていないイリノテカンを実質的に除去するステップ、ならびに
（ｆ）前記組成物のｐＨが約７．３になるように調整するステップ
を含む工程により作製される、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３１】
ＳＯＳの前記置換アンモニウム塩が、トリエチルアンモニウムＳＯＳまたはジエチルアンモニウムＳＯＳであることを特徴とする、請求項３０に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３２】
前記メトキシ末端ポリエチレングリコール−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンが、ＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥであることを特徴とする、請求項３０または３１に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３３】
ステップ（ｂ）における前記膜が、０．１μｍのポリカーボネート膜フィルターであることを特徴とする、請求項３０から３２のいずれか一項に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３４】
前記脂質分散液が、少なくとも２つの積層されている０．１μｍの膜フィルターを通して押し出されて、リポソームを形成することを特徴とする、請求項３０に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３５】
７．００〜７．５０のｐＨを有することを特徴とする、請求項１または２に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３６】
７．２５〜７．５０のｐＨを有することを特徴とする、請求項１、２、３または３５に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３７】
７．３のｐＨを有することを特徴とする、請求項１、２、３、３５または３６に記載の保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
【請求項３８】
出願当初の本願明細書の記載、開示、もしくは例示に包含される、本発明の実施形態のいずれかの形態、または特許請求の範囲において使用可能ないずれかの請求項のカテゴリー、例えば、物質、もしくは工程、もしくは使用によって特徴づけられる発明。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７３】
本明細書に引用されている参照はすべて、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれている。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
７．００〜７．５０のｐＨを有しており、かつ無水イリノテカン遊離塩基のグラム量にして、全リポソームリン脂質１ｍｍｏｌあたり５００ｍｇ（±１０％）のイリノテカン部分およびリポソーム型イリノテカン組成物１ｍＬあたり４．３ｍｇのイリノテカン部分に等価なイリノテカン部分の濃度で、コレステロールおよびリン脂質１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）およびメトキシ末端ポリエチレングリコール（ＭＷ２０００）−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥ）からなるベシクル中にイリノテカン八硫酸スクロースを封入するイリノテカンリポソームの分散液を含む、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物であって、前記保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物は、４℃での最初の６か月の保管の間に、２０ｍｏｌ％未満のＬｙｓｏ−ＰＣを形成するほど安定化されている、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
（項目２）
７．００〜７．５０のｐＨを有しており、かつ無水イリノテカン遊離塩基のグラム量にして、全リポソームリン脂質１ｍｍｏｌあたり５００ｍｇ（±１０％）のイリノテカン部分およびリポソーム型イリノテカン組成物１ｍＬあたり４．３ｍｇのイリノテカン部分に等価なイリノテカン部分の濃度で、コレステロールおよびリン脂質１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）およびメトキシ末端ポリエチレングリコール（ＭＷ２０００）−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥ）からなる単層ラメラ二重層ベシクル中にイリノテカン八硫酸スクロースを封入するイリノテカンリポソームの分散液を含む、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物であって、前記保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物は、０．８５〜１．２のイリノテカン／スルフェート化合物のグラム当量比を有する、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
（項目３）
４℃での最初の６か月の保管の間に、２０ｍｏｌ％未満のＬｙｓｏ−ＰＣを形成するほど安定化されている、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物であって、前記保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物は、以下のステップ：
（ａ）０．４〜０．５Ｍのスルフェート濃度および５〜７の間のｐＨを有するＴＥＡ８ＳＯＳおよび／またはＤＥＡ８ＳＯＳから作製される溶液中で、脂質分散液を形成するステップであって、前記分散液中の脂質が、それぞれ約３：２：０．０１５のモル比のＤＳＰＣ、コレステロールおよびＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥである、ステップ、
（ｂ）前記脂質分散液を、少なくとも１つの０．１μｍの膜を通して６０〜７０℃の間で押し出して、リポソームを形成するステップ、
（ｃ）前記リポソームの外側にあるＴＥＡ８ＳＯＳおよび／またはＤＥＡ８ＳＯＳに由来するイオンを実質的に除去するステップ、
（ｄ）前記リポソームを６０〜７０℃の間の温度でイリノテカン遊離塩基またはイリノテカン塩を使用して作製される溶液に接触させて、これにより、イリノテカンを封入するリポソームの調製物を形成するステップ、
（ｅ）前記リポソームの外側にある前記ＴＥＡ８ＳＯＳおよび／またはＤＥＡ８ＳＯＳおよびイリノテカン成分に由来する物質を実質的に除去するステップ、ならびに
（ｆ）前記組成物のｐＨが７．０〜７．５になるように調整するステップ
を含む工程により作製される、保管安定化リポソーム型イリノテカン組成物。
（項目４）
以下のステップ：
（ａ）０．４〜０．５Ｍのスルフェート濃度および５〜７の間のｐＨを有するＴＥＡ８ＳＯＳから作製される溶液中で、脂質分散液を形成するステップであって、前記分散液中の脂質が、それぞれ約３：２：０．０１５のモル比のＤＳＰＣ、コレステロールおよびＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥである、ステップ、
（ｂ）前記脂質分散液を、少なくとも１つの０．１μｍの膜を通して６０〜７０℃の間で押し出して、リポソームを形成するステップ、
（ｃ）前記リポソームの外側にあるＴＥＡ８ＳＯＳに由来するイオンを実質的に除去するステップ、
（ｄ）前記リポソームを６０〜７０℃の間の温度でイリノテカン遊離塩基またはイリノテカン塩を使用して作製される溶液に接触させて、これにより、イリノテカンを封入するリポソームの調製物を形成するステップ、
（ｅ）前記リポソームの外側にある前記ＴＥＡ８ＳＯＳおよびイリノテカン成分に由来する物質を実質的に除去するステップ、ならびに
（ｆ）前記組成物のｐＨが７．０〜７．５になるように調整するステップ
を含む工程により作製される、項目１から３のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目５）
前記脂質分散液が、少なくとも２つの積層されている０．１μｍのポリカーボネート膜を通して押し出される、項目４に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目６）
前記リポソームが、動的光散乱法により決定すると、１１０ｎｍの平均サイズを有し、サイズが、キュムラント法により決定される、項目１から５のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目７）
４．３ｍｇ／ｍｌの無水イリノテカン遊離塩基に等価なイリノテカン部分総含量を有する、項目１から６のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目８）
ステップ（ａ）において、前記リポソームが、０．４３〜０．４７Ｍの間のスルフェート濃度を有するＴＥＡ８ＳＯＳから形成され、
ステップ（ｄ）において、イリノテカン遊離塩基またはイリノテカン塩を使用して作製される前記溶液が、ＤＳＰＣ  １モルあたり、５００ｇ（±１０％）の無水イリノテカン遊離塩基に等価なイリノテカン部分含量を有しており、
ステップ（ｆ）において、前記組成物のｐＨが７．２〜７．３になるように調整する、
項目３から６のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目９）
約４℃で保管する前には、１ｍｏｌ％未満のｌｙｓｏ−ホスファチジルコリン（ｌｙｓｏ−ＰＣ）を含有し、約４℃で１８０日の保管後には、２０ｍｏｌ％またはそれより少ない（全リポソームリン脂質に対して）ｌｙｓｏ−ＰＣを含有する、項目１から８のいずれか一項に記載のリポソーム組成物。
（項目１０）
約４℃で６、９または１２か月の保管後に、２０ｍｏｌ％またはそれより少ない（全リポソームリン脂質に対して）ｌｙｓｏ−ホスファチジルコリン（ｌｙｓｏ−ＰＣ）を含有する、項目９に記載のリポソーム組成物。
（項目１１）
合計で、６．１〜７．５ｍｇのＤＳＰＣ／ｍｌ、２〜２．４ｍｇのコレステロール／ｍｌおよび０．１１〜０．１３ｍｇのＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥ／ｍｌを、いずれも水性等張緩衝液中に含む、項目１から１０のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目１２）
リポソーム型イリノテカンが、等張性のＨＥＰＥＳ水性緩衝液中に、２〜２０ｍＭの間の濃度で前記イリノテカンリポソームを含む、項目１から１１のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目１３）
１３０〜１６０ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムをさらに含む、項目１から１２のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目１４）
前記リポソーム中に封入されている前記イリノテカンが、八硫酸スクロースの塩として、ゲル状態または沈殿状態にある、項目１から１３のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目１５）
準弾性光散乱法によって測定すると、前記イリノテカンリポソームが９５〜１１５ｎｍの直径を有する、項目１から１４のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目１６）
合計で、６．８１ｍｇのＤＳＰＣ／ｍｌ、２．２２ｍｇのコレステロール／ｍｌおよび０．１２ｍｇのＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥ／ｍｌ、４．０５ｍｇ／ｍＬのＨＥＰＥＳ水性緩衝液および８．４２ｍｇの塩化ナトリウム／ｍＬを含む、項目１から１５のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目１７）
７．２５のｐＨを有し、準弾性光散乱法によって測定すると、前記イリノテカンリポソームが１１０ｎｍの直径を有する、項目１から１６のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目１８）
約４℃で６か月の保管後に、１ｍｇ／ｍＬ未満のｌｙｓｏ−ホスファチジルコリン（ｌｙｓｏ−ＰＣ）を形成する、項目１から１７のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目１９）
以下のステップ：
（ａ）約０．４５Ｍのスルフェート濃度および約６．５のｐＨを有するＴＥＡ８ＳＯＳの溶液中で脂質分散液を形成するステップであって、前記分散液中の脂質が、それぞれ、３：２：０．０１５のモル比の１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロールおよびメトキシ末端ポリエチレングリコール（ＭＷ２０００）−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥ）からなる、ステップ、
（ｂ）前記脂質分散液を、少なくとも１つの０．１μｍの膜を通して６０〜７０℃の間で押し出して、リポソームを形成するステップ、
（ｃ）前記リポソームの外側にあるＴＥＡ８ＳＯＳに由来するイオンを除去するステップ、
（ｄ）前記リポソームを６０〜７０℃の間の温度でイリノテカン塩酸塩三水和物を使用して作製される溶液に接触させて、全リポソームリン脂質１ｍｏｌあたり、約５００ｇ（±１０％）のイリノテカンを封入するリポソームの調製物を形成するステップ、
（ｅ）前記リポソームの外側にある前記ＴＥＡ８ＳＯＳおよびイリノテカン成分に由来する物質を除去するステップ、ならびに
（ｆ）前記組成物のｐＨが約７．３になるように調整するステップ
を含む工程により作製される、項目１から１８のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目２０）
合計で１００ｐｐｍ未満のＴＥＡを含む、項目１から１９のいずれかに記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目２１）
合計で３０〜１００ｐｐｍのＴＥＡまたはＤＥＡを含む、項目１から２０のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目２２）
約４℃で６か月の保管後に、前記イリノテカンのうちの少なくとも９８％が、前記イリノテカンリポソーム中に封入されている、項目１から２１のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。
（項目２３）
前記イリノテカンリポソーム内に、式（Ｉ）：
【化７】
2018530563.tif 000001
［式中、ｘは８である］
のイリノテカン組成物を含む、項目１から２２のいずれか一項に記載のリポソーム型イリノテカン組成物。