【手続補正書】
【提出日】平成20年11月4日(2008.11.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの第一脂質成分、
少なくとも１つの第一ヘルパー脂質、および
ｉｎ  ｖｉｖｏ条件下で脂質組成物から除去できる遮蔽化合物
を含む、脂質組成物。
【請求項２】
前記遮蔽化合物が、ＰＥＧ、ＨＥＧ、ポリヒドロキシエチルスターチ（ポリＨＥＳ）、およびポリプロポレンを含む群より選択される、請求項１に記載の脂質組成物。
【請求項３】
前記遮蔽化合物が、ＰＥＧ２０００またはＰＥＧ５０００である、請求項２に記載の脂質組成物。
【請求項４】
前記組成物が、さらなる構成および／または第二ヘルパー脂質を含む、請求項１〜３のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項５】
前記脂質組成物が、核酸を含み、それにより該核酸が、好ましくは前記さらなる構成である、請求項１〜４のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項６】
前記核酸が、ＲＮＡｉ、ｓｉＲＮＡ、ｓｉＮＡ、アンチセンス核酸、リボザイム、アプタマー、およびスピゲルマー（ｓｐｉｅｇｅｌｍｅｒ）を含む群より選択される、請求項５に記載の脂質組成物。
【請求項７】
前記遮蔽化合物が、ＰＥＧとセラミドとのコンジュゲートである、請求項１〜６のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項８】
前記セラミドが、少なくとも１つの６〜１０の炭素原子、好ましくは８の炭素原子の短い炭素鎖置換基を含む、請求項７に記載の脂質組成物。
【請求項９】
前記セラミドが、第一ヘルパー脂質である、請求項７〜８のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項１０】
前記セラミドが、第二ヘルパー脂質である、請求項７〜８のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項１１】
前記遮蔽化合物が、前記核酸へ結合される、請求項５〜６のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項１２】
前記遮蔽化合物が、リンカー部分によって前記核酸に結合され、好ましくはリンカー部分によって前記核酸に共有結合される、請求項１１に記載の脂質組成物。
【請求項１３】
前記リンカー部分が、ｓｓＲＮＡ、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＲＮＡ、ｄｓＤＮＡ、ペプチド、Ｓ−Ｓリンカー、およびｐＨ感受性リンカーを含む群より選択される、請求項１２に記載の脂質組成物。
【請求項１４】
前記核酸が、ＲＮＡｉ、ｓｉＲＮＡ、およびｓｉＮＡを含む群より選択され、前記リンカーが、センス鎖の３’末端に結合される、請求項１１〜１３のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項１５】
前記遮蔽化合物が、ｐＨ感受性リンカーまたはｐＨ感受性部分を含む、請求項１〜６のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項１６】
前記リンカーまたは部分が、陰イオン性リンカーまたは陰イオン性部分である、請求項１５に記載の脂質組成物。
【請求項１７】
前記陰イオン性リンカーまたは陰イオン性部分が、酸性環境においてほとんど陰イオン性または中性ではなく、それにより好ましくは該酸性条件がエンドソームである、請求項１６に記載の脂質組成物。
【請求項１８】
前記ｐＨ感受性リンカーまたはｐＨ感受性部分が、オリゴ（グルタミン酸）、オリゴフェノラート、およびジエチレントリアミン五酢酸を含む群より選択される、請求項１５〜１７のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項１９】
前記第一脂質成分が、式（Ｉ）
【化１】
2008525514.tif 000001
（式中、Ｒ１およびＲ２は、アルキルを含む群より各々独立して選択され、
ｎは、１〜４の任意の整数であり、
Ｒ３は、リジル、オルニチル、２，４−ジアミノブチリル、ヒスチジル、および式（ＩＩ）
【化２】
2008525514.tif 000002
（式中、ｍは、１〜３の任意の整数であり、場合によりＮＨ３＋を欠き、そしてＹは、薬学的に許容される陰イオンである。）に記載のアシル部分を含む群より選択されるアシルである。）
に記載の化合物である、請求項１〜１８のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項２０】
Ｒ１およびＲ２が、ラウリル、ミリスチル、パルミチル、およびオレイルを含む群より各々独立して選択される、請求項１９に記載の脂質組成物。
【請求項２１】
Ｒ１が、ラウリルであり、Ｒ２が、ミリスチルであるか、または
Ｒ１が、パルミチルであり、Ｒ２が、オレイルである、請求項１９および２０のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項２２】
ｍが、１または２である、請求項１９〜２１のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項２３】
前記化合物が、好ましくは陰イオンＹ−と会合した陽イオン性脂質である、請求項１９〜２２のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項２４】
Ｙ−が、ハロゲニド、アセテート、およびトリフルオロアセテートを含む群より選択される、請求項１９〜２３のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項２５】
前記化合物が、
β−アルギニル−２，３−ジアミノプロピオン酸−Ｎ−パルミチル−Ｎ−オレイル−アミドトリヒドロクロリド
【化３】
2008525514.tif 000003
β−アルギニル−２，３−ジアミノプロピオン酸−Ｎ−ラウリル−Ｎ−ミリスチル−アミドトリヒドロクロリド
【化４】
2008525514.tif 000004
ε−アルギニル−リジン−Ｎ−ラウリル−Ｎ−ミリスチル−アミドトリヒドロクロリド
【化５】
2008525514.tif 000005
を含む群より選択される、請求項１９〜２４のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項２６】
前記組成物が、担体を含む、請求項１〜２５のうちのいずれか一項に記載の脂質組成物。
【請求項２７】
請求項１〜２６のうちのいずれか一項に記載の組成物と、薬学的に活性のある化合物と、好ましくは薬学的に許容され得る担体とを含む、薬学的組成物。
【請求項２８】
前記薬学的に活性のある化合物および／または前記さらなる構成体が、ペプチド、タンパク質、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、および核酸を含む群より選択される、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記タンパク質が、抗体であり、好ましくはモノクローナル抗体である、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記核酸が、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ＰＮＡ、およびＬＮＡを含む群より選択される、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３１】
前記核酸が、機能的核酸であり、それにより、好ましくは前記機能的核酸が、ＲＮＡｉ、ｓｉＲＮＡ、ｓｉＮＡ、アンチセンス核酸、リボザイム、アプタマー、およびスピゲルマーを含む群より選択される、請求項２８または３０のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
好ましくは、前記第一および／または前記第二ヘルパー脂質が、セラミドとは異なるという条件のもとで、前記第一ヘルパー脂質および／または第二ヘルパー脂質が、リン脂質およびステロイドを含む群より選択される、請求項１〜３１のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記第一および／または第二ヘルパー脂質またはヘルパー脂質成分が、１，２−ジフィタノイル−ｓｎ−グリセロ−３−フォスフォエタノールアミンおよび１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−フォスフォエタノールアミンを含む群より選択される、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記ヘルパー脂質成分の含有量が、前記組成物の全体的な脂質含有量の約２０〜約８０モル％である、請求項３２〜３３のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記ヘルパー脂質成分の含有量が、約３５〜約６５モル％である、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記脂質が、β−アルギニル−２，３−ジアミノプロピオン酸−Ｎ−パルミチル−Ｎ−オレイル−アミドトリヒドロクロリドであり、前記ヘルパー脂質が、１，２−ジフィタノイル−ｓｎ−グリセロ−３−フォスフォエタノールアミンである、請求項３３〜３５のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３７】
前記脂質が、前記組成物の全体的な脂質含有量の５０モル％であり、前記ヘルパー脂質が、５０モル％である、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
前記組成物が、さらに第二ヘルパー脂質を含む、請求項４〜３７のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３９】
前記第一および／または前記第二ヘルパー脂質が、ＰＥＧ部分、ＨＥＧ部分、ポリヒドロキシエチルスターチ（ｐｏｌｙＨＥＳ）部分及びポリプロピレン部分を含む群より選択される群を含み、該部分が、好ましくは約５００〜１００００Ｄａの、より好ましくは約２０００〜５０００Ｄａの分子量を与える、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４０】
ＰＥＧ部分を含む前記ヘルパー脂質が、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−フォスフォエタノールアミンおよび１，２−ジアルキル−ｓｎ−グリセロ−３−フォスフォエタノールアミンを含む群より選択される、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
前記ヘルパー脂質の前記ＰＥＧ部分が、２，０００〜５，０００Ｄａの分子量を、好ましくは２，０００Ｄａの分子量を有する、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】
前記組成物が、脂質成分としてβ−アルギニル−２，３−ジアミノプロピオン酸−Ｎ−パルミチル−Ｎ−オレイル−アミドトリヒドロクロリドを、第一ヘルパー脂質として１，２−ジフィタノイル−ｓｎ−グリセロ−３−フォスフォエタノールアミンを、および第二ヘルパー脂質として１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−フォスフォエタノールアミン−ＰＥＧ２０００を含む、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
前記第二ヘルパー脂質の含有量が、約０．０５〜４．９モル％、好ましくは約１〜２モル％である、請求項３８〜４２のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４４】
前記組成物が、約１〜１０モル％の、より好ましくは１〜７．５モル％の、および最も好ましくは１〜５モル％のＰＥＧおよび前記セラミドのコンジュゲートを含有する、請求項７〜１０および請求項１５〜４３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４５】
前記セラミドが、Ｃ８ｍであり、ＰＥＧが、ＰＥＧ２０００であり、ＰＥＧと前記セラミドとのコンジュゲートの含有量が、約１〜７．５モル％である、請求項４４に記載の組成物。
【請求項４６】
前記セラミドが、Ｃ８ｍであり、ＰＥＧが、ＰＥＧ５０００であり、ＰＥＧと前記セラミドとのコンジュゲートの含有量が、約１〜５モル％である、請求項４４に記載の組成物。
【請求項４７】
前記第一脂質成分の含有量が、約４２．５〜５０モル％であり、前記第一ヘルパー脂質の含有量が、約４２．５〜５０モル％であり、それにより、前記第一脂質成分、前記第一ヘルパー脂質、ならびにＰＥＧとセラミドとのコンジュゲートの含有量の合計が、１００モル％である、請求項４３〜４５のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４８】
前記機能的核酸が、二本鎖リボ核酸であり、前記組成物がさらに、核酸を、好ましくは、より好ましくは二本鎖リボ核酸である機能的核酸を、最も好ましくは、ＲＮＡｉ、ｓｉＲＮＡ、ｓｉＮＡ、アンチセンス核酸、およびリボザイムを含む群より選択される核酸であり、それにより好ましくは、陽イオン性脂質に対するＲＮＡｉのモル比が、約０〜０．０７５であり、好ましくは約０．０２〜０．０５であり、さらにより好ましくは０．０３７である、請求項１〜４７のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４９】
前記第一脂質成分および／または前記ヘルパー脂質の少なくとも一つおよび／または前記遮蔽化合物が、水性媒体中の分散物として存在する、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５０】
前記第一脂質成分および／または前記ヘルパー脂質の少なくとも一つおよび／または前記遮蔽化合物が、水混和性溶媒中の溶液として存在し、それにより好ましくは、前記溶媒が、エタノールおよびｔｅｒｔ−ブタノールを含む群より選択される、請求項１〜４８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５１】
薬物の製造のための、請求項１〜５０のうちのいずれか一項に記載の組成物の使用。
【請求項５２】
転移剤としての、請求項１〜５０のうちのいずれか一項に記載の組成物の使用。
【請求項５３】
前記転移剤が、薬学的に活性のある成分および／またはさらなる構成体を細胞、好ましくは哺乳類細胞、およびより好ましくはヒト細胞に転移させる、請求項５２に記載の使用。
【請求項５４】
下記工程：
−  細胞または膜を提供すること、
−  請求項１〜５０のうちのいずれか一項に記載の組成物を提供し、それにより前記組成物が前記薬学的に活性のある化合物および／または前記さらなる構成体を含むこと、および
−  前記細胞または前記膜を、請求項１〜５０のうちのいずれか一項に記載の組成物と接触させること
を含む、薬学的に活性のある化合物および／またはさらなる構成体を前記細胞内にか、または前記膜、好ましくは細胞膜を横切って転移させるための方法。
【請求項５５】
前記方法が、さらなる工程として、前記薬学的に活性のある化合物および／または前記さらなる構成体を前記細胞中でおよび／または前記膜を越えて検出することを含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
請求項１〜５０のいずれか一項に記載の脂質組成物及びｓｉＲＮＡを含むリポプレックス。