【手続補正書】
【提出日】平成20年3月10日(2008.3.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  腫瘍の増殖をインビトロで防止するための方法であって、腫瘍細胞を、該腫瘍細胞の増殖を防止するために有効な量のヘパリナーゼＩＩＩに曝して、該腫瘍の成長を防止する工程を包含する、方法。
【請求項２】  該ヘパリナーゼＩＩＩが、
（ａ）改変されたヘパリナーゼＩＩＩであるか；
（ｂ）ネイティブのヘパリナーゼＩＩＩであるか：
（ｃ）該腫瘍細胞にインビトロで投与されるか；または
（ｄ）抗癌剤と組み合わせて投与される、
請求項１記載の有効な量のヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項３】  腫瘍の増殖を防止する方法に使用するための有効な量のヘパリナーゼＩＩＩであって、ここで該方法は、有効な量のヘパリナーゼＩＩＩに腫瘍細胞を曝して、該腫瘍の成長を防止する工程を包含する。
【請求項４】  該ヘパリナーゼＩＩＩが、
（ａ）改変されたヘパリナーゼＩＩＩであるか；
（ｂ）ネイティブのヘパリナーゼＩＩＩであるか；
（ｃ）該腫瘍にインビボで注入されるか；
（ｄ）腫瘍を有する被験体に全身投与されるか；
（ｅ）腫瘍を有する被験体に経口投与されるか；
（ｆ）抗癌剤と組み合わせて投与されるか；
（ｇ）非転移性腫瘍を有する被験体に投与されて、該腫瘍が転移性になるのを防止するか；または
（ｈ）任意の付加的な抗癌剤を伴わずに被験体に投与される、
請求項３記載の有効な量のヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項５】  該腫瘍が、前立腺腫瘍および黒色腫からなる群より選択される、請求項１または請求項３記載の有効な量のヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項６】  腫瘍細胞の転移を防止する方法に使用するための有効な量のヘパリナーゼＩＩＩであって、ここで該方法は、該腫瘍細胞が関門を超えて浸潤するのを防止するのに有効な量のヘパリナーゼＩＩＩに腫瘍細胞を曝する工程を包含する。
【請求項７】  該ヘパリナーゼＩＩＩが、
（ａ）改変されたヘパリナーゼＩＩＩであるか；
（ｂ）ネイティブのヘパリナーゼＩＩＩであるか；または
（ｃ）抗癌剤と組み合わせてインビボで投与される、
請求項６記載の有効な量のヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項８】  該関門がインビボの細胞関門である、請求項６記載の有効な量のヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項９】  腫瘍細胞の転移をインビトロで防止する方法であって、該腫瘍細胞が関門を超えて浸潤するのを防止するのに有効な量有効な量のヘパリナーゼＩＩＩに腫瘍細胞を曝する工程を包含する、方法。
【請求項１０】  該ヘパリナーゼＩＩＩが、
（ａ）改変されたヘパリナーゼＩＩＩであるか；または
（ｂ）ネイティブのヘパリナーゼＩＩＩである、
請求項９記載の有効な量のヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項１１】  該関門が細胞外マトリックスで被覆された膜のインビトロの関門である、請求項９記載の有効な量のヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項１２】  腫瘍の処置のための治療剤を調製する方法であって、以下：
腫瘍の少なくとも一部を単離する工程；
該腫瘍の一部をヘパリナーゼＩＩＩで処理し、ＨＬＧＡＧフラグメントを生成する工程；および
ＨＬＧＡＧフラグメントを単離する工程、
を包含し、ここで、該ＨＬＧＡＧフラグメントが該治療剤である、方法。
【請求項１３】  該ＨＬＧＡＧフラグメントの配列を決定する工程をさらに包含する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】  腫瘍を有する被験体を処置して腫瘍を治療する方法において使用するための治療的該ＨＬＧＡＧフラグメントであって、ここで該方法は、該被験体に該フラグメントを投与する工程を包含する。
【請求項１５】  該被験体に投与される治療用ＨＬＧＡＧフラグメントが、
（ａ）該腫瘍がヘパリナーゼＩＩＩに接触されるときに同定される該ＨＬＧＡＧフラグメントの配列に基づき生成された合成ＨＬＧＡＧフラグメントであるか；または
（ｂ）該腫瘍がヘパリナーゼＩＩＩに接触されるときに産生される、単離されたＨＬＧＡＧフラグメントである、
請求項１４記載の治療用ＨＬＧＡＧフラグメント。
【請求項１６】  薬学的に受容可能なキャリア中に、腫瘍細胞の転移を防止するために有効な量のヘパリナーゼＩＩＩまたは治療用ＨＬＧＡＧフラグメント、
および該ヘパリナーゼＩＩＩを該腫瘍に標的化するための標的化分子を含む組成物であって、ここで、該ヘパリナーゼＩＩＩまたは治療用ＨＬＧＡＧフラグメントが、該標的化分子に連結されている、組成物。
【請求項１７】  該ヘパリナーゼＩＩＩが、
（ａ）改変されたヘパリナーゼＩＩＩであるか；または
（ｂ）ネイティブのヘパリナーゼＩＩＩである、
請求項１６記載の組成物。
【請求項１８】  該標的化分子が、腫瘍細胞の表面上の抗原に対して特異的に結合する化合物である、請求項１６記載の組成物。
【請求項１９】  薬学的に受容可能なキャリア中に、腫瘍細胞の転移を防止するために有効な量のヘパリナーゼＩＩＩまたは治療用ＨＬＧＡＧフラグメント、
および抗癌性化合物を含む組成物。
【請求項２０】  実質的に純粋なヘパリナーゼＩＩＩであって、配列番号２の成熟ペプチドのアミノ酸配列を有するポリペプチドか、または酵素機能に非必須である残基にそれらの保存的な置換を有するポリペプチドを含み、ここで、Ｈｉｓ３６、Ｈｉｓ１０５、Ｈｉｓ１１０、Ｈｉｓ１３９、Ｈｉｓ１５２、Ｈｉｓ２２５、Ｈｉｓ２３４、Ｈｉｓ２４１、Ｈｉｓ４２４、Ｈｉｓ４６９、およびＨｉｓ５３９からなる群より選択される少なくとも１つのヒスチジン残基が、アラニン、セリン、チロシン、スレオニン、およびリジンからなる群より選択される残基で置換されている、ヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項２１】  該ポリペプチドが、
（ａ）Ｈｉｓ１１０およびＨｉｓ２４１からなる群より選択されるヒスチジン残基に少なくとも１つの置換を有するか；
（ｂ）Ｈｉｓ１１０での置換を有するか；または、
（ｃ）Ｈｉｓ２４１での置換を有する、
請求項２０に記載の実質的に純粋なヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項２２】  実質的に純粋なヘパリナーゼＩＩＩであって、
（ａ）改変された生成物プロフィールを有する改変されたヘパリナーゼＩＩＩを含む、ここで、該改変されたヘパリナーゼＩＩＩの改変された生成物プロフィールは、ネイティブのヘパリナーゼＩＩＩのネイティブの生成物プロフィールと少なくとも１０％異なる；または
（ｂ）改変されたヘパリナーゼＩＩＩ  Ｋｃａｔ値を有する硫酸ヘパラン基質を切断し得る改変されたヘパリナーゼＩＩＩを含む、ここで、該改変されたヘパリナーゼＩＩＩ  Ｋｃａｔ値は、ネイティブのヘパリナーゼＩＩＩ  Ｋｃａｔ値と少なくとも１０％異なる、ヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項２３】  請求項２０〜請求項２２のいずれか１項に記載の実質的に純粋なヘパリナーゼＩＩＩの滅菌処方物および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的調製物。
【請求項２４】  固定化された実質的に純粋な改変されたヘパリナーゼＩＩＩであって、請求項２０〜請求項２２のいずれか１項に記載の改変されたヘパリナーゼＩＩＩおよび固体支持体を含み、ここで、該改変されたヘパリナーゼＩＩＩが、該固体支持体に固定されている、ヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項２５】  ヘパリン様グリコサミノグリカンをインビトロで特異的に切断する方法であって、ヘパリン様グリコサミノグリカンと、請求項２０または請求項２２のいずれか１項に記載の改変されたヘパリナーゼＩＩＩを接触される工程を包含する、方法。
【請求項２６】
（ａ）ＨＬＧＡＧフラグメント含有液体から活性なＨＬＧＡＧフラグメントを取り出す方法であるか；
（ｂ）細胞増殖を阻害するため方法であるか；または
（ｃ）ＨＬＧＡＧフラグメントを配列決定するための方法である、
請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】  ヘパリン様グリコサミノグリカンを改変されたヘパリナーゼＩＩＩと接触することを含む、ヘパリン様グリコサミノグリカンを特異的に切断する方法において用いるための請求項２０〜請求項２２のいずれか１項に記載の改変されたヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項２８】  該方法が、
（ａ）ＨＬＧＡＧフラグメント含有液体から活性なＨＬＧＡＧフラグメントを取り出す方法であるか；
（ｂ）新脈管形成を阻害するための方法であって、新脈管形成を阻害するのに有効量の該ヘパリナーゼＩＩＩが、その処置の必要な被験者に投与される方法であるか；または
（ｃ）細胞増殖を阻害するため方法である、
請求項２７に記載の改変されたヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項２９】  該ヘパリナーゼＩＩＩが、固体支持体に固定されている、
請求項２５に記載の方法または請求項２７に記載の改変されたヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項３０】  該ヘパリナーゼＩＩＩが、
（ａ）腫瘍へ投与されるか；
（ｂ）生物分解性、生物適合性のポリマー送達デバイス中で投与されるか；
（ｃ）注射用の薬学的に受容可能なビヒクル中で投与されるか；
（ｄ）腫瘍に成長する血管の数を減少させるために有効な量で投与されるか；
（ｅ）眼への局所適用のための薬学的に受容可能なビヒクル中で投与されるか；
（ｆ）異常な新生血管形成により特徴づけられる眼の疾患の症状を減少させるために有効な量で投与されるか；
（ｇ）局所投与に適した薬学的なビヒクル中で投与されるか；または
（ｈ）乾癬の症状を減少させるのに有効な量で投与される、
請求項２７に記載の改変されたヘパリナーゼＩＩＩ。
【請求項３１】  癌を有するか、癌を発症する危険を有する被験体を、該被験体に治療用ＨＬＧＡＧフラグメントを投与することにより、処置または防止するための方法において用いるための該治療用ＨＬＧＡＧフラグメント。
【請求項３２】  該治療用ＨＬＧＡＧフラグメントが、
（ａ）該ＨＬＧＡＧフラグメントの少なくとも５０％、好ましくは７５％、好ましくは９０％が、ニ硫酸化または三硫酸化されたジッサッカライドであるＨＬＧＡＧフラグメントの組成物であるか；または
（ｂ）一硫酸化または硫酸化されていないジッサッカライドを含まない、
請求項３１項に記載の治療用ＨＬＧＡＧフラグメント。
【請求項３３】  ＬＭＷＨを調製するための方法であって、ＨＬＧＡＧサンプルと、改変されたヘパリナーゼＩＩＩ分子を接触させて、ＬＭＷＨを生成する工程を包含する、方法。
【請求項３４】  請求項３３の方法により生成されたＬＭＷＨを含む組成物。
【請求項３５】  （ａ）凝固に関連する障害、この場合、凝固に関連する障害を処置または防止するのに有効な量の請求項３４の組成物を被験体に投与することを含む；
（ｂ）腫瘍、この場合、腫瘍を処置または防止するのに有効な量の請求項３４の組成物を被験体に投与することを含む；
（ｃ）乾癬、この場合、乾癬を処置または防止するのに有効な量の請求項３４の組成物を被験体に投与することを含む；または
（ｄ）新生血管形成、この場合、新生血管形成を処置または防止するのに有効な量の請求項３４の組成物を被験体に投与することを含む、
処置または防止する方法に用いるための有効量の請求項３４の組成物。