【手続補正書】
【提出日】平成20年9月16日(2008.9.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の工程を含むことを特徴とする、微生物がβ-ラクタマーゼを産生するかどうかの判定方法：
a)微生物の培養物を、有効量の下記の各々と混合してアッセイ培養物を調製する工程：
i) β-ラクタム含有抗生物質、
ii)β-ラクタマーゼが耐性であることが公知のβ-ラクタマーゼインヒビター、および、
iii) 非増殖抑制性の微生物易透化量で存在する前記微生物用の易透化剤；並びに、
b) 前記アッセイ培養物を、適切な培養条件下に且つ前記微生物と前記β-ラクタマーゼインヒビターおよび前記β-ラクタム含有抗生物質との相互作用を判定するのに十分な時間維持する工程；
ここで、陽性試験結果が公知の耐性を有するβ-ラクタマーゼの存在を指示する。
【請求項２】
前記公知の耐性を有するβ-ラクタマーゼがAmpC β-ラクタマーゼであり、陽性試験結果がAmpC β-ラクタマーゼの存在を指示する請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記β-ラクタム含有抗生物質が、ペニシリン又はセファロスポリン-タイプの抗生物質である請求項１又は２記載の方法。
【請求項４】
前記β-ラクタマーゼインヒビターが、クラブラン酸塩、スルバクタムまたはタゾバクタムである、請求項１又は２記載の方法。
【請求項５】
前記β-ラクタム含有抗生物質が、ペニシリン又はセファロスポリン-タイプの抗生物質であり、前記β-ラクタマーゼインヒビターが、約10〜約30μgの量で存在する、クラブラン酸塩、スルバクタムまたはタゾバクタムである、請求項３記載の方法。
【請求項６】
前記β-ラクタマーゼインヒビターが、約5〜約250μgの量で存在する、請求項１又は２記載の方法。
【請求項７】
前記β-ラクタマーゼインヒビターが、約5〜約50μgの量で存在する、請求項１又は２記載の方法。
【請求項８】
下記の工程を含むことを特徴とする、微生物がβ-ラクタマーゼを産生するかどうかの判定方法：
a)試験微生物の培養物を、有効量の下記の各々と混合してアッセイ培養物を調製する工程：
i) β-ラクタム含有抗生物質、
ii)β-ラクタマーゼが耐性であることが公知のβ-ラクタマーゼインヒビター、
iii) 非増殖抑制性の微生物易透化量で存在する前記試験微生物用の易透化剤、および、
iv) 前記β-ラクタム含有抗生物質に対して既知の感受性を有する微生物株；並びに、
b) 前記アッセイ培養物を、適切な培養条件下に且つ前記試験微生物と、前記微生物株、前記β-ラクタマーゼインヒビターおよび前記β-ラクタム含有抗生物質との相互作用を判定するのに十分な時間維持する工程；
ここで、陽性試験結果が公知の耐性を有するβ-ラクタマーゼの存在を指示する。
【請求項９】
下記の工程をさらに含む請求項１又は２記載の方法。
a) 非増殖抑制性の微生物易透化量の前記微生物用の易透化剤を含まない、前記微生物および前記β-ラクタム含有抗生物質を含む対照を調製する工程；
b) 前記対照を適切な条件下に且つ前記微生物と、前記β-ラクタマーゼインヒビターおよび前記β-ラクタム含有抗生物質との相互作用を判定するのに十分な時間維持する工程；および、
c) 前記アッセイ培養物中の前記微生物の増殖を前記対照中の前記微生物の増殖と比較する工程：
ここで、前記アッセイ培養物中のより顕著な増殖又は抑制領域の存在が公知の耐性を有するβ-ラクタマーゼの存在を指示する。
【請求項１０】
下記の工程をさらに含む請求項８記載の方法。
a) 非増殖抑制性の微生物易透化量の前記微生物用の易透化剤を含まない前記微生物、前記β-ラクタム含有抗生物質、および前記微生物株を含む対照を調製する工程；
b) 前記対照を適切な条件下に且つ前記微生物と、前記β-ラクタマーゼインヒビター、前記β-ラクタム含有抗生物質および前記微生物株との相互作用を判定するのに十分な時間維持する工程；および、
c) 前記アッセイ培養物中の前記微生物株の増殖を前記対照中の前記微生物株の増殖と比較する工程：
ここで、前記アッセイ培養物中のより顕著な増殖又は抑制領域の存在が公知の耐性を有するβ-ラクタマーゼの存在を指示する。
【請求項１１】
下記の工程をさらに含む請求項１、２、８、９又は１０記載の方法。
β-ラクタム含有抗生物質に対する前記微生物の感受性を判定する工程：
ここで、前記アッセイ培養物を適切な条件下に維持して前記微生物の感受性を判定し、前記アッセイ培養物中のより顕著な増殖が、公知の耐性を有するβ-ラクタマーゼによるβ-ラクタム含有抗生物質に対する前記微生物の耐性を指示する。
【請求項１２】
前記易透化剤が担体に溶解又は分散されている請求項１、２、８、９、１０又は１１記載の方法。
【請求項１３】
前記担体が固形担体である、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記固形担体がペーパーディスクである、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
前記担体が液体担体である、請求項１２記載の方法。
【請求項１６】
前記易透化剤が緩衝溶液である、請求項１、２、８、９、１０又は１１記載の方法。
【請求項１７】
前記易透化剤がTris/EDTAである、請求項１、２、８、９、１０又は１１記載の方法。
【請求項１８】
前記培養物を液体増殖培地中で調製する、請求項１、２、８、９、１０又は１１記載の方法。
【請求項１９】
前記培養物を固形増殖培地上で調製する、請求項１、２、８、９、１０又は１１記載の方法。
【請求項２０】
前記β-ラクタム含有抗生物質が、セファマイシン-、カルバペネム-、カルバセフェム-、モノバクタム-、ペニシリン-、セフォキシチン-およびセファロスポリン-タイプの抗生物質、またはこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１、２、８、９、１０又は１１記載の方法。
【請求項２１】
前記微生物と前記易透化剤を、前記アッセイ培養物の他の成分と混合する前に混合する、請求項１、２、８、９、１０又は１１記載の方法。
【請求項２２】
前記微生物が固形増殖培地上に接種され、前記易透化剤が固形担体上で調製され、前記微生物が前記固形担体上に適用され、前記β-ラクタム含有抗生物質およびβ-ラクタマーゼインヒビターが固形支持体上で調製され、前記混合が、前記固形増殖培地上の前記固形支持体に近接して前記固形担体を配置することにより行われ、抑制領域の変形が公知の耐性を有する前記β-ラクタマーゼの存在を指示する、請求項１又は２記載の方法。
【請求項２３】
前記微生物株が固形増殖培地上に接種され、前記易透化剤が固形担体上で調製され、前記微生物が前記固形担体上に適用され、前記β-ラクタム含有抗生物質およびβ-ラクタマーゼインヒビターが固形支持体上で調製され、前記混合が、前記固形増殖培地上の前記固形支持体に近接して前記固形担体を配置することにより行われ、抑制領域の変形が公知の耐性を有する前記β-ラクタマーゼの存在を指示する、請求項８記載の方法。
【請求項２４】
易透化剤含浸ディスクおよび請求項１、２、８、９、１０又は１１記載の方法の実施についての使用説明書を含む、β-ラクタマーゼが微生物によって産生されるかどうかの判定用キット。
【請求項２５】
さらに、β-ラクタム含有抗生物質を含浸した第２のディスクおよび請求項１、２、８、９、１０又は１１記載の方法の実施についての使用説明書を含む、請求項２４記載の判定用キット。