【手続補正書】
【提出日】平成20年3月14日(2008.3.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
発現ベクターであって、該発現ベクターは、
プロモーター；
５’ＵＴＲ；
単一のスプライス供与部位；
イントロン；
第１スプライス受容部位；
第１ポリペプチドをコードする第１エキソン；
第２スプライス受容部位；および
第２ポリペプチドをコードする第２エキソン；
を含み、
ここで、該プロモーターは、該第１エキソンおよび該第２エキソンに作動可能なように連結されており；
ここで、細胞への侵入時に該単一のスプライス供与部位は該第１スプライス受容部位と共にスプライシングされて、該第１エキソンの転写を可能にするスプライシングされた転写物を形成し、そして該第２スプライス受容部位は該第２エキソンの転写を可能にするスプライシングされた転写物を形成し；そして
ここで、該第１ポリペプチドおよび該第２ポリペプチドは該スプライシングされた転写物から発現される、発現ベクター。
【請求項２】
前記プロモーターがＣＭＶプロモーターである、請求項１に記載のベクター。
【請求項３】
前記第１エキソンまたは第２エキソンに作動可能なように連結されたポリアデニル化シグナルをさらに含む、請求項１に記載のベクター。
【請求項４】
前記ベクターが１つまたはそれより多いさらなるスプライス受容部位およびさらなるポリペプチドをコードするさらなるエキソンをさらに含み：
細胞への侵入時に前記単一のスプライス供与部位は該さらなるスプライス受容部位と共にスプライシングされて、該さらなるエキソンの転写を可能にするさらなるスプライシングされた転写物を形成し；そして
該さらなるポリペプチドは該さらなるスプライシングされた転写物から発現される；
請求項１に記載のベクター。
【請求項５】
前記第１エキソンもしくは第２エキソンまたは両方が選択マーカーをコードする、請求項１に記載のベクター。
【請求項６】
前記第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドがマルチマーを形成する、請求項１に記載のベクター。
【請求項７】
前記マルチマータンパク質がヘテロ二量体、ヘテロ三量体またはヘテロ四量体である、請求項６に記載のベクター。
【請求項８】
前記第１ポリペプチドが前記第２ポリペプチドに対して約１０：１から約１：１０の頻度で発現される、請求項１に記載のベクター。
【請求項９】
前記第１ポリペプチドが前記第２ポリペプチドに対して約３：１から約１：３の頻度で発現される、請求項１に記載のベクター。
【請求項１０】
前記第１ポリペプチドが前記第２ポリペプチドに対して約１：１の頻度で発現される、請求項１に記載のベクター。
【請求項１１】
前記第１スプライス受容部位または前記第２スプライス受容部位が配列番号１〜２８からなる群から選択されるいずれか１つの配列を含む、請求項１に記載のベクター。
【請求項１２】
前記スプライス供与部位および前記第２スプライス受容部位がＣＭＶから誘導され、そして前記第１スプライス受容部位が配列番号１〜２８からなる群から選択されるいずれか１つの配列を含む、請求項１１に記載のベクター。
【請求項１３】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項１に記載のベクター。
【請求項１４】
配列番号２９を含む、請求項１に記載のベクター。
【請求項１５】
請求項１に記載のベクターを含有する、真核細胞。
【請求項１６】
前記ベクターが前記細胞の染色体ＤＮＡに組み込まれている、請求項１５に記載の細胞。
【請求項１７】
前記ベクターがエピソーム性である、請求項１５に記載の細胞。
【請求項１８】
前記細胞が哺乳動物細胞または酵母細胞である、請求項１５に記載の細胞。
【請求項１９】
前記細胞がベビーハムスター腎臓細胞、線維芽細胞、骨髄腫細胞、ＮＳ０細胞、ＰＥＲ．Ｃ６細胞またはＣＨＯ細胞を含む群から選択される、請求項１８に記載の細胞。
【請求項２０】
前記細胞がＣＨＯ細胞である、請求項１９に記載の細胞。
【請求項２１】
ポリペプチドを生成する方法であって、請求項１５に記載の細胞を培養物中で培養する工程、および該培養物から前記第１ポリペプチドおよび前記第２ポリペプチドを単離する工程を包含する、方法。
【請求項２２】
請求項２１に記載の方法により生成された、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチド。
【請求項２３】
請求項２２に記載の第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、薬学的に受容可能なキャリアをさらに含む、組成物。
【請求項２４】
処置を必要とする患者を処置するための、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
発現ベクターであって、該発現ベクターは、
プロモーター；
５’ＵＴＲ；
単一のスプライス供与部位；
イントロン；
第１スプライス受容部位；
第１抗体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードする第１エキソン；
第２スプライス受容部位；および
第２抗体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードする第２エキソン；
を含み、
ここで、該プロモーターは該第１エキソンおよび該第２エキソンに作動可能なように連結されており；
ここで、細胞への侵入時に該単一のスプライス供与部位は該第１スプライス受容部位と共にスプライシングされて、該第１エキソンの転写を可能にするスプライシングされた転写物を形成し、そして該第２スプライス受容部位は該２エキソンの転写を可能にするスプライシングされた転写物を形成し；そして
ここで、該第１抗体ポリペプチドまたはそのフラグメントおよび該第２抗体ポリペプチドまたはそのフラグメントは該スプライシングされた転写物から発現され、そして会合して、抗体または抗体フラグメントを形成する、発現ベクター。
【請求項２６】
前記第１エキソンもしくは前記第２エキソンまたは両方が抗体フラグメントをコードする、請求項２５に記載のベクター。
【請求項２７】
前記第１ポリペプチドが抗体重鎖またはそのフラグメントをコードし、そして前記第２ポリペプチドが抗体軽鎖またはそのフラグメントである、請求項２５に記載のベクター。
【請求項２８】
前記第１ポリペプチドが抗体軽鎖またはそのフラグメントであり、そして前記第２ポリペプチドが抗体重鎖またはそのフラグメントである、請求項２５に記載のベクター。
【請求項２９】
前記軽鎖もしくは重鎖または両方がネズミ、キメラ、ヒト化、ヒトまたは合成のものである、請求項２７に記載のベクター。
【請求項３０】
前記軽鎖もしくは重鎖または両方がネズミ、キメラ、ヒト化、ヒトまたは合成のものである、請求項２８に記載のベクター。
【請求項３１】
前記第１抗体ポリペプチドまたはそのフラグメントが前記第２抗体ポリペプチドまたはそのフラグメントに対して約３：１から約１：３の頻度で発現される、請求項２５に記載のベクター。
【請求項３２】
前記第１抗体ポリペプチドまたはそのフラグメントが前記第２抗体ポリペプチドまたはそのフラグメントに対して約１：１の頻度で発現される、請求項２５に記載のベクター。
【請求項３３】
前記第１スプライス受容部位または前記第２スプライス受容部位が配列番号１〜２８からなる群から選択されるいずれか１つの配列を含む、請求項２５に記載のベクター。
【請求項３４】
前記スプライス供与部位および前記第２スプライス受容部位がＣＭＶから誘導され、そして前記第１スプライス受容部位が配列番号１〜２８からなる群から選択されるいずれか１つの配列を含む、請求項３３に記載のベクター。
【請求項３５】
前記ベクターがウイルスベクターである、請求項２５に記載のベクター。
【請求項３６】
配列番号２９を含む、請求項２５に記載のベクター。
【請求項３７】
請求項２５に記載のベクターを含有する、真核細胞。
【請求項３８】
前記ベクターが前記細胞の染色体ＤＮＡに組み込まれている、請求項３７に記載の細胞。
【請求項３９】
前記ベクターがエピソーム性である、請求項３７に記載の細胞。
【請求項４０】
前記細胞が哺乳動物細胞または酵母細胞である、請求項３７に記載の細胞。
【請求項４１】
前記細胞がベビーハムスター腎臓細胞、線維芽細胞、骨髄腫細胞、ＮＳ０細胞、ＰＥＲ．Ｃ６細胞またはＣＨＯ細胞を含む群から選択される、請求項４０に記載の細胞。
【請求項４２】
前記細胞がＣＨＯ細胞である、請求項４１に記載の細胞。
【請求項４３】
抗体または抗体フラグメントを生成する方法であって、請求項３７に記載の細胞を培養物中で培養する工程、および該培養物から前記第１ポリペプチドおよび前記第２ポリペプチドを単離する工程を包含する、方法。
【請求項４４】
請求項４３に記載の方法により生成された、抗体または抗体フラグメント。
【請求項４５】
請求項４４に記載の抗体または抗体フラグメントを含み、薬学的に受容可能なキャリアをさらに含む、組成物。
【請求項４６】
処置を必要とする患者を処置するための、請求項４５に記載の組成物。