【手続補正書】
【提出日】平成20年5月13日(2008.5.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】システインカテプシン阻害剤としてのＮ-置換ペプチジルニトリル
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  下記式の化合物：
【化１】
2003533506.tif 000001
[式中、Ｒ１はアリールまたはビアリールであり;
Ｒ２は、アリール-低級アルキル、ビアリール-低級アルキル、ベンゾ縮合シクロアルキル、シクロアルキル-低級アルキル、ビシクロアルキル-低級アルキル、アリールオキシ-低級アルキル、またはアリール-Ｃ２-Ｃ７-アルキル（ここでＣ２-Ｃ７-アルキルはＹによって中断される。）であり;
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯまたはＮＲ６であり;
Ｒ３は、水素または低級アルキルであり；または
Ｒ２およびＲ３が互いに結合したときは、Ｃ２-Ｃ７-アルキレンまたはＹによって中断されるＣ２-Ｃ７-アルキレンであり;
Ｒ４は、水素または低級アルキルであり;
Ｒ５は、水素、所望により置換された低級アルキル、アリール-低級アルキル、ビアリール-低級アルキル、シクロアルキル-低級アルキル、ビシクロアルキル-低級アルキル、アリールオキシ-低級アルキル、またはアリール-Ｃ２-Ｃ７-アルキル（ここでＣ２-Ｃ７-アルキルはＹによって中断される。）であり；
Ｒ６は、水素、低級アルキルまたはアリール-低級アルキルである。]
またはそれらの医薬上許容し得る塩。
【請求項２】  式Ｉ：
【化２】
2003533506.tif 000002
[式中、Ｒ１はアリールまたはビアリールであり;
Ｒ２は、アリール-低級アルキル、ビアリール-低級アルキル、ベンゾ縮合シクロアルキル、シクロアルキル-低級アルキル、ビシクロアルキル-低級アルキル、アリールオキシ-低級アルキル、またはアリール-Ｃ２-Ｃ７-アルキル（ここでＣ２-Ｃ７-アルキルはＹによって中断される。）であり;
Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯまたはＮＲ６であり;
Ｒ３は、水素または低級アルキルであり；または
Ｒ２およびＲ３が互いに結合したときは、Ｃ２-Ｃ７-アルキレンまたはＹによって中断されるＣ２-Ｃ７-アルキレンであり;
Ｒ４は、水素または低級アルキルであり;
Ｒ５は、
-Ｘ-Ａｒ-Ｑ-Ｚ
（式中、Ｘは、低級アルキレン、低級アルキレンオキシまたはＹによって中断されるＣ２-Ｃ７-アルキレンであり；Ａｒは、単環式炭素環式または単環式複素環式アリーレンであり;Ｑは、直接結合、低級アルキレン、またはチオ−またはオキシ-低級アルキレンであり:Ｚは、ヒドロキシ、アシルオキシ、カルボキシル、または医薬上許容し得るエステルまたはアミドとして誘導体化されたカルボキシルであり；またはＺは、５-テトラゾリルであり；Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２またはＮＲ６であり；そしてＲ６は、水素、低級アルキルまたはアリール-低級アルキルである）である。]
の請求項１記載の化合物、またはそれらの医薬上許容し得る塩。
【請求項３】  式：
【化３】
2003533506.tif 000003
[式中、Ｒ１は、アリールまたはビアリールであり;
Ｒ'２は、アリール-低級アルキル、ビアリール-低級アルキル、ベンゾ縮合シクロアルキル、シクロアルキル-低級アルキルまたはビシクロアルキル-低級アルキルであり;
Ａｒは、単環式炭素環式または単環式複素環式アリーレンであり;
Ｘ'は、低級アルキレン、またはＯまたはＳによって中断されるＣ２-Ｃ７-アルキレンであり;
Ｑは、直接結合、低級アルキレン、またはチオ−またはオキシ-低級アルキレンであり；そして
Ｚ'は、カルボキシル、医薬上許容し得るエステルまたはアミドとして誘導体化されたカルボキシル、５-テトラゾリルまたはヒドロキシメチルである。]
の請求項２に記載の化合物、またはそれらの医薬上許容し得る塩。
【請求項４】  式ＩＩ[式中、Ｒ１はアリールであり；Ｒ'２はアリール-低級アルキルであり、Ｘ'はＣ１-Ｃ５-アルキレン、またはＸ'はＯまたはＳによって中断されるＣ２-Ｃ４-アルキレンであり；Ａｒは単環式炭素環式アリーレンであり;Ｑは、直接結合、オキシ-Ｃ１-Ｃ４-アルキレンまたはＣ１-Ｃ４-アルキレンであり；そしてＺ'は、カルボキシルまたは医薬上許容し得るエステルとして誘導体化されるカルボキシルである。]
の請求項３記載の化合物、またはそれらの医薬上許容し得る塩。
【請求項５】  式ＩＩ[式中、Ｒ１は単環式炭素環式アリールであり；Ｒ'２は炭素環式アリール-メチルであり；Ｘ'はＣ１-Ｃ３-アルキレンであり;またはＸ'はＯによって中断されるＣ１−Ｃ２-アルキレンであり；Ａｒは単環式炭素環式アリーレンであり；Ｑは直接結合であるかまたはオキシメチレンであり；Ｚ'はカルボキシル、医薬上許容し得るエステルとして誘導体化されるカルボキシル、または５-テトラゾリルである。]
の請求項３記載の化合物、またはそれらの医薬上許容し得る塩。
【請求項６】  式：
【化４】
2003533506.tif 000004
[式中、Ｒ'２、Ｘ'、Ａｒ、ＱおよびＺ'は、請求項３で定義した意義を持つ。ＷはＯ、ＣＨ２またはＮＲ６を示し、ここでＲ６は低級アルキルであり；そしてＲ７およびＲ８は、独立して水素または低級アルキルを示すかまたはＲ７およびＲ８は一体となってオキソを示す。]
の請求項３記載の化合物、またはそれらの医薬上許容し得る塩。
【請求項７】  式：
【化５】
2003533506.tif 000005
[式中、Ｒ１はアリールまたはビアリールであり;
Ｒ”２は、アリール-低級アルキル、ビアリール-低級アルキル、シクロアルキル-低級アルキルまたはビシクロアルキル-低級アルキルであり;
Ａｒは、単環式炭素環式または単環式複素環式アリーレンであり;
Ｘ”は、低級アルキレンであり;
Ｑ'は、直接結合であるかまたは低級アルキレンであり;
Ｚ”は、カルボキシル、医薬上許容し得るエステルとして誘導体化されるカルボキシル、または５-テトラゾリルである。]
の請求項１に記載の化合物、またはそれらの医薬上許容し得る塩である。
【請求項８】  式：
【化６】
2003533506.tif 000006
[式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５は、請求項２に定義された意義を持つ。]
の請求項２に記載の化合物、またはそれらの医薬上許容し得る塩。
【請求項９】  式：
【化７】
2003533506.tif 000007
[式中、Ｒ'１およびＲaはアリールであり；ＷはＯまたはＣＨ２であり；Ａｒ'はピリジレン、フラニレン、チエニレン、チアゾリレン、フェニレンまたは１〜３個のアルキルまたはハロによって置換されたフェニレンから選択されるアリーレンである。]
の請求項３に記載の化合物、またはそれらの医薬上許容し得るエステル。
【請求項１０】  請求項９記載の化合物であって、Ｒ'１およびＲaは、独立して、フタリジル、フェニルまたは、低級アルキル、ハロ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、アシルオキシ、アシル、カルボキシル、低級アルキルスルホニルまたはエステル化もしくはアミド化カルボキシルによって１、２または３置換されたフェニルであり；ＷはＯであり；Ａｒ'は、１,３-フェニレンまたはクロロまたはフルオロによって１または２置換された１,３-フェニレンである化合物、それらの医薬上許容し得る塩またはそれらの医薬上許容し得るエステル。
【請求項１１】  請求項９記載の化合物であって、Ｒ'１はフタリジル、フェニル、または、ハロ、低級アルキルまたはエステル化もしくはアミド化カルボキシルによって１または２置換されたフェニルであり；Ｒaは３-トリルであり；ＷはＯであり；Ａｒ'は、１,３-フェニレンまたはクロロまたはフルオロによって１または２置換された１,３-フェニレンである化合物、それらの医薬上許容し得る塩またはそれらの医薬上許容し得るエステル。
【請求項１２】  請求項９記載の化合物であって、Ｒ'１はフェニルであり；Ｒaは３-トリルであり；ＷはＯであり；Ａｒ'は１,３-フェニレンまたはクロロまたはフルオロによって１または２置換された１,３-フェニレンである化合物、それらの医薬上許容し得る塩またはそれらの医薬上許容し得るエステル。
【請求項１３】  請求項１の化合物の有効量を、それらを必要とする哺乳類に投与することを含む、システインカテプシン活性を阻害する方法。
【請求項１４】  請求項１の化合物の有効なシステインカテプシン阻害活性量を、それらを必要とする哺乳類に投与することを含む、哺乳類におけるシステインカテプシン依存状態を処置する方法。
【請求項１５】  請求項２の化合物の有効なシステインカテプシン阻害活性量を、それらを必要とする哺乳類に投与することを含む、哺乳類におけるカテプシンＢ活性を阻害する方法。
【請求項１６】  １以上の医薬上許容し得る担体と共に、請求項１の化合物の有効なシステインカテプシン阻害量を含む、医薬組成物。
【請求項１７】  請求項１の化合物を製造する方法であって、
(a)式ＶＩ
【化８】
2003533506.tif 000008
[式中、Ｒ４およびＲ５は、ここで定義した意義を持つ]の化合物を、
式ＶＩＩ
【化９】
2003533506.tif 000009
[式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、請求項１に定義した意義を持つ]
の酸と、またはそれらの反応性誘導体と縮合させること、または
(b)式ＶＩＩＩ
【化１０】
2003533506.tif 000010
[式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、請求項１に定義した意義を持つ] の化合物を、Ｒ１基に対応する反応性アリール試薬と縮合させること、
および上記方法において、必要であれば、全ての干渉反応基を一時的に保護し、次いで本発明の得られた化合物を単離すること；および、所望により、何れかの得られた化合物を本発明の別の化合物に変換すること；および／または所望により、得られた化合物を塩に、もしくは得られた塩を遊離酸もしくは塩基または別の塩に変換すること、を含む方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
（背景技術）
システインカテプシン、例えば、カテプシンＢ、ＬおよびＳは、炎症、リウマチ様関節炎、骨関節炎、骨粗鬆症、腫瘍 (特に、腫瘍侵襲および腫瘍転移)、冠状動脈血管疾患、アテローム性動脈硬化 (アテローム性動脈硬化性プラーク破損および不安定化を包含する)、自己免疫疾患、呼吸器疾患 (喘息および慢性閉塞性肺疾患を包含する)、感染疾患および免疫介在疾患(移植拒絶反応を包含する)を含む様々な障害において関連のあるリソソーム酵素のクラスである。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
本発明の特定の態様は、式Ｉ化合物であって、化合物中、Ｒ５は、
-Ｘ-Ａｒ-Ｑ-Ｚ
（式中、Ｘは、低級アルキレン、低級アルキレンオキシまたはＹによって中断されるＣ２-Ｃ７-アルキレンであり；Ａｒは、単環式炭素環式または単環式複素環式アリーレンであり;Ｑは、直接結合、低級アルキレン、またはチオ−またはオキシ-低級アルキレンであり:Ｚは、ヒドロキシ、アシルオキシ、カルボキシル、または医薬上許容し得るエステルまたはアミドとして誘導体化されたカルボキシルであり；またはＺは、５-テトラゾリルであり；Ｙは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２またはＮＲ６であり；そしてＲ６は、水素、低級アルキルまたはアリール-低級アルキルである。）化合物；およびそれらの医薬上許容し得る塩を対象とする。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
本発明の特定の態様は、式ＩＩの化合物、
【化１２】
2003533506.tif 000011
[式中、Ｒ１は、アリールまたはビアリールであり;
Ｒ'２は、アリール-低級アルキル、ビアリール-低級アルキル、ベンゾ縮合シクロアルキル、シクロアルキル-低級アルキルまたはビシクロアルキル-低級アルキルであり;
Ａｒは、単環式炭素環式または単環式複素環式アリーレンであり;
Ｘ'は、低級アルキレンまたはＹ'によって中断されるＣ２-Ｃ７-アルキレンであり;
Ｙ'は、ＯまたはＳであり;
Ｑは、直接結合、低級アルキレン、またはチオ−またはオキシ-低級アルキレンであり；そして
Ｚ'は、カルボキシル、医薬上許容し得るエステルまたはアミドとして誘導体化されたカルボキシル、５-テトラゾリルまたはヒドロキシメチルである。]
およびそれらの医薬上許容し得る塩に関する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
本発明の特定の態様は、式ＩＩの化合物をであって、式中、Ｒ１はアリールであり；Ｒ'２はアリール-低級アルキルであり、Ｘ'はＣ１-Ｃ５-アルキレン、またはＸ'はＯまたはＳによって中断されるＣ２-Ｃ４-アルキレン；Ａｒは単環式炭素環式アリーレンであり;Ｑは、直接結合、オキシ-Ｃ１-Ｃ４-アルキレンまたはＣ１-Ｃ４-アルキレンであり；そしてＺ'は、カルボキシルまたは医薬上許容し得るエステルとして誘導体化されるカルボキシルである化合物;およびそれらの医薬上許容し得る塩を対象とする。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
本発明のさらに特定の態様は、式ＩＩの化合物であって、式中、Ｒ１は単環式炭素環式アリールであり；Ｒ'２は炭素環式アリール-メチルであり；Ｘ'はＣ１-Ｃ３-アルキレンであり;またはＸ'はＯによって中断されるＣ２-アルキレンであり；Ａｒは単環式炭素環式アリーレンであり；Ｑは直接結合であるかまたはオキシメチレンであり；Ｚ'はカルボキシル、医薬上許容し得るエステルとして誘導体化されるカルボキシル、または５-テトラゾリルである化合物およびそれらの医薬上許容し得る塩を対象とする。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
本発明の別の態様は式ＩＩＩ
【化１４】
2003533506.tif 000012
[式中、Ｒ１はアリールまたはビアリール;
Ｒ”２は、アリール-低級アルキル、ビアリール-低級アルキル、シクロアルキル-低級アルキルまたはビシクロアルキル-低級アルキルであり;
Ａｒは、単環式炭素環式または単環式複素環式アリーレンであり;
Ｘ”は、低級アルキレンであり;
Ｑ'は、直接結合であるかまたは低級アルキレンであり;
Ｚ”は、カルボキシル、医薬上許容し得るエステルとして誘導体化されるカルボキシル、または５-テトラゾリルである。]
の化合物およびそれらの医薬上許容し得る塩に関する。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
有機基または化合物と関連して上記および下記で引用される“低級”なる用語は、各々、分岐もしくは直鎖の、７個以下の、好ましくは４個以下の、有利には１個または２個の炭素原子を有するものを定義する。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
アリールはまた、例えばＲ５に関連して、上記に定義されたように、複素環式または炭素環式芳香族環系を示し、それらはグループ-Ｑ-Ｚ（Ｑは、直接結合、低級アルキレン、またはチオ−またはオキシ-低級アルキレンであり；そしてＺはヒドロキシ、アシルオキシ、カルボキシルまたは医薬上許容し得るエステルまたはアミドとして誘導したカルボキシルであり;またＺは５-テトラゾリルである）によって置換されている。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
低級アルカノイルは、例えば、ホルミルを包含するＣ１-７-アルカノイルおよび好ましくはＣ２-４-アルカノイル、例えば、アセチルまたはプロピオニルを示す。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
医薬上許容し得るエステルとして誘導体化されるカルボキシルは、例えば、所望により、置換された低級アルキルエステル、例えば、低級アルコキシカルボニルである。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
医薬上許容し得るアミドとして誘導体化されるカルボキシルは、例えば、アミノカルボニル、モノ−もしくはジ−低級アルキルアミノカルボニルである。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
有益な効果は、広く当分野で知られ、本明細書中で説明されているイン・ビトロおよびイン・ビボの薬理学的試験で評価される。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
上記した特性は、ラット、マウス、イヌなどの哺乳類、または単離した器官および組織、さらに天然または、例えば組換え技術によって製造された哺乳類の酵素調製物を好都合に用いて、イン・ビトロおよびイン・ビボ試験で示され得る。該化合物は、イン・ビトロで、例えば、好ましくは水性溶液または懸濁液の形態などの溶液の形態で、およびイン・ビボで、例えば、懸濁液としてまたは水性溶液で、または固体のカプセル形態として経腸または非経腸で、有利には経口で、適用され得る。イン・ビトロの用量は約１０-５molar〜１０-９ molar濃度の範囲であってよい。イン・ビボの用量は、投与経路によって約０.１〜１００mg/kgの間で変化しうる。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
イン・ビトロアッセイは下記のように実施される：
(a)カテプシンＢについて:
マイクロタイター・ウェルに、アッセイ緩衝液中の２０ｕＭの阻害剤溶液（１００uＬ）、続いてアッセイ緩衝液中６.４ ｍＭ溶液Ｚ-Ａｒg-Ａｒg-ＡＭＣ基質 (Peptides International)（５０ｕＬ）を添加する。混合後、０.５４４ｎＭ アッセイ緩衝液中組換えヒトカテプシンＢ（５０ｕＬ）溶液をウェルに添加し、１０ｕＭ 最終阻害剤濃度を得る。酵素活性は、２０分間、３８０ｎＭの励起を用いて、４４０ｎＭで遊離アミノメチルクマリンの蛍光を測定することによって決定した。酵素阻害％は、阻害剤を含まない溶液の活性との活性の比較によって測定した。次いで、化合物をＩＣ５０を測定するために用量応答曲線分析に供する。
(b)カテプシンＬについて:
組換え体ヒトカテプシンＬを、本アッセイで使用する前に活性化する:１ｍＭ ＥＤＴＡ、３ｍＭ ＤＴＴおよび１５０ｍＭ ＮaＣlを含有する５０ ｍＭ 酢酸塩緩衝液(pＨ５.０)中カテプシンＬの５１０ｎＭ溶液（５００ｕＬ）に、６２５ｕＭ 硫酸デキストラン溶液（１０ｕＬ）(平均分子量=８０００)を添加し、得られる溶液を氷上で３０分間インキュベートする。次いで、この溶液（４ｕＬ）を４６ｕＬアッセイ緩衝液に希釈し、４０ｎＭ酵素溶液を得る。
このアッセイを行うために、アッセイ緩衝液中の２０ｕＭの阻害剤溶液（１００ｕＬ）をマイクロタイター・ウェルに添加する。Ｚ-ＰＨｅ-Ａｒg-ＡＭＣ (Peptides International)（５０ｕＬ）の２０ｕＭ溶液を添加する。混合後、アッセイ緩衝液中の組換えヒトカテプシンＬの活性化４０ｎＭ溶液（５０ｕＬ）を、ウェルに添加し、１０ｕＭの最終阻害剤濃度を得る。酵素活性は、２０分間、３８０ｎＭ励起を用いて、４４０ｎＭでの遊離アミノメチルクマリンの蛍光を測定することによって決定する。酵素阻害％は、阻害剤を含まない溶液の活性との活性の比較によって測定する。次いで、化合物を、ＩＣ５０値を決定するために、用量応答曲線分析に供する。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
(c)カテプシンＳについて:
マイクロタイター・ウェルに、アッセイ緩衝液中２０ｕＭの阻害剤溶液（１００ｕＬ）を加える。次いで、Ｚ-Ｖａｌ-Ｖａｌ-Ａｒｇ-ＡＭＣ基質 (Peptides International)の７００ｕＭ溶液（５０ｕＬ）を添加する。混合後、アッセイ緩衝液中組換えヒトカテプシンＳの５.２ｎＭ 溶液（５０ｕＬ）を、ウェルに加え、１０ｕＭの最終阻害剤濃度を得る。酵素活性は、２００分間で３８０ｎＭ 励起を用いて、４４０ｎＭで遊離アミノメチルクマリンの蛍光を測定することによって決定する。酵素阻害％は、阻害剤を含まない溶液の活性との活性の比較によって測定する。次いで、化合物を、ＩＣ５0値を決定するために用量応答曲線分析に供する。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６５】
本発明の化合物は下記のようにして製造される:
(a)式ＶＩ
【化１８】
2003533506.tif 000013
[式中、Ｒ４およびＲ５は、本明細書中で定義された意義を持つ。]の化合物を、
式ＶＩＩ
【化１９】
2003533506.tif 000014
[式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、本明細書に定義された意義を持つ。]
の酸と、またはそれらの反応性誘導体と縮合させ、または
(b)式ＶＩＩＩ
【化２０】
2003533506.tif 000015
[式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、本明細書に定義された意義を持つ。] の化合物を、Ｒ１基に対応する反応性アリール試薬と縮合させる、
そして上記過程において、もし必要なら、一時的に全ての干渉反応性基を保護し、次いで本発明の得られる化合物を単離する；所望により、何れかの得られた化合物を本発明の別の化合物中に変換する；および/または、所望により、得られた化合物を塩に、または得られた塩を遊離酸または塩基または別の塩に変換する。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
本明細書中で記載した方法で、本発明の化合物に変換される出発物質および中間体において、例えばアミノ、ヒドロキシおよびカルボキシル基として存在する官能基は、所望により製造的有機化学でよく知られた一般的な保護基によって保護される。保護ヒドロキシ、アミノおよびカルボキシル基は、穏やかな条件下で、別の望ましくない副反応をおこさずに遊離アミノ、ヒドロキシおよびカルボキシル基に変換され得るものである。例えば、カルボキシル保護基は、アリル、ベンジルまたは置換されたベンジル基などである。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
対応する第一級アミドからの何らかのニトリル中間体の調製は、第一級アミドをニトリルに脱水素する当業者には既知の方法に従って、例えば、塩基存在下で塩化チオニルまたは塩化オキサリルを用いて、実施しうる。好ましい方法は、ＤＭＦ下で、室温で、もしくは室温以下で塩化オキサリルおよびピリジンによる処置を包含する。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６８】
式ＶＩＩＩの出発物質は、式ＩＸ
【化２１】
2003533506.tif 000016
（式中、Ｒ２およびＲ３は、本明細書中で定義された意義を持ち、Ｒpは、アミノ保護基、好ましくはt-ブトキシカルボニルである。）
の保護アミノ酸と式ＶＩのニトリルを縮合させることによって製造され得る。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７１】
式ＶＩＩのＮ-アリールアミノ酸は、Tetrahedron: Asymmetry 1996、7、3075に記載のようなＰｄ(Ｏａc)２、ＣｕＩ、ＴＥＢＡ、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、水、トリエチルアミンおよびトリ−o-トリルホスフィンの存在下での、アミノ酸またはアミノ酸塩酸塩と適当なアリールヨウ化物との反応によって製造され得る。ヨウ化アリールは、市販されているか、または標準的方法(ＮaＮＯ２、ＨＣl、ＫＩ)を用いて対応するアニリンから調製される。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７６】
方法(ｂ)の縮合は、式ＩＶの化合物の製造について下式で示すように、例えば、式ＶＩＩＩａのアミンと、トリ-アリールビスマスジアセテート(Chem. Rev. 1989、89、1487)またはアリールボロン酸(Tetrahedron Let.、1998、39、2933) との、酢酸第二銅によって触媒されるカップリングによって製造される。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８３】
本発明の医薬組成物は、カテプシン活性を阻害するために、またはカテプシン依存性疾患の処置のために、ヒトを含む哺乳類に、例えば、経口または直腸などの経腸、経皮、局所および非経口投与するのに適当な組成物であって、有効量の本発明の医薬的に活性な化合物を、単独で、もしくは１以上の医薬的に許容し得る担体と共に包含する。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８５】
本発明の医薬的に活性な化合物は、経腸または非経口用途のいずれかに適当な賦形剤または担体と結合または混合物の形で、それらの有効量を含む医薬組成物の製造において有用である。好ましくは、ａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニト−ル、ソルビトール、セルロースおよび/またはグリシン；b) 滑剤、例えば、シリカ、タルカム、ステアリン酸、そのマグネシウムまたはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール;また錠剤用に、c) 結合剤、例えば、マグネシウムアルミニウムシリケート、スターチペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび／またはポリビニルピロリドン；所望により d) 崩壊剤、例えば、スターチ、寒天、アルギン酸またはそのナトリウム塩、または発泡性混合物;および/または e) 吸収剤、着色剤、フレーバーおよび甘味料、
と共に活性成分を含む、錠剤およびゼラチンカプセルである。注入用組成物は、好ましくは水性等張溶液または懸濁液であり、座薬は脂肪性エマルジョンまたは懸濁液から製造されるのが有利である。該組成物は滅菌されていても、および/または付加物を含んでいてもよい。付加物は、例えば、保存剤、安定剤、湿潤剤または乳化剤などの補助薬、溶液助触媒、浸透圧を調節するための塩類および/または緩衝液である。さらに、また、それらは別の治療上有益な物質を含み得る。該組成物は、従来の、混合、顆粒化もしくは被覆方法に従って製造され、そして約０.１〜７５％、好ましくは約１〜５０％の活性成分を包含する。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８９】
医薬用配合物は、上記に定義された本発明の化合物単独でまたは他の治療用剤併用のいずれかで、有効なカテプシン阻害量を含有する。
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９２】
また、本発明は、哺乳類において、カテプシン、例えばカテプシンＢ、Ｌおよび／またはＳを阻害するため、本発明の化合物およびそれらの医薬上許容し得る塩、またはそれらの医薬的組成物を使用する方法、および本明細書中に記載のカテプシン、例えばカテプシンＢ、Ｌおよび／またはＳ依存疾患、例えば、炎症、リウマチ様関節炎および骨関節炎の処置方法に関する。
【手続補正２８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９８】
水素化ナトリウム(１９.４ g、鉱油中６０％、４８４.４ mmol)を、乾燥ヘキサン(２x３0 mL)で洗浄し、鉱油を除去し、次いで無水ＤＭＦ(３３０ mL)に懸濁した。０℃で、ＤＭＦ(１１０ mL)中のＮ-(t-ブトキシカルボニル)-Ｌ-セリン(４５.２ g、２２０.２ mmol)をこの懸濁溶液に、激しく攪拌しながら滴加した。混合物を、０℃でさらに５分間、次いで室温で３０分間攪拌した。この溶液を、０℃に冷却し、ＤＭＦ(１１０ mL)中アリル３-ヨードメチルベンゾエート(６６.６ g、２２０.２ mmol)の溶液を１５分間にわたって滴加した。次いで、混合物を、室温に３０分間暖めた。該反応混合物を、氷水(２.２ L)上に注ぎ、１Ｎ ＨＣｌ(２７０ mL)を用いてpＨ２酸性にした。該混合物をエーテルで抽出(１x６００ mL、次いで３x３００ mL)し、次いで合わせたエーテル抽出物を水(５ x ２００ ml)で洗浄し、次いで(ＭｇＳＯ４)乾燥させ、真空で蒸発させ、Ｏ-[３-(アリルオキシカルボニル)-ベンジル]-Ｎ-(t-ブトキシカルボニル)-Ｌ-セリンを黄色油状物として得た。
【手続補正２９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１００
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１００】
０℃で乾燥ＤＭＦ(５０ mL)に、塩化オキサリル(９.５５g、６.５６ mL、７５.２４ mmol)をゆっくりと添加した。次いで、混合物を０℃で５分間攪拌し、ピリジン(１２.２ mL、１５0.４８ mmol)を、一度に添加し、次いでＤＭＦ(５０ mL)中のＯ-[３-(アリルオキシカルボニル)-ベンジル]-Ｎ-(t-ブトキシカルボニル)-Ｌ-セリンアミド（１４.２２g、３７.６２ mmol)を添加した。該混合物を、０℃で、４５分間攪拌し、次いで酢酸エチル(６００ mL)で希釈し、飽和水性ＬｉＣｌ(３ x ６００ ml)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒の蒸発、続いてクロマトグラフィー(シリカ、３５％ ＥｔＯＡｃ/ヘキサン)に供し、(Ｓ)-２-t-ブトキシカルボニルアミノ-３-[(３-アリルオキシカルボニル)-ベンジルオキシ]-プロピオニトリルを透明な油状物質として得た。
【手続補正３０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０１】
ギ酸(１２５ mL)中(Ｓ)-２-t-ブトキシカルボニルアミノ-３-[(３-アリルオキシカルボニル)-ベンジルオキシ]-プロピオニトリル (１１.７８ g、３２.７２ mmol)を、室温で６時間攪拌し、その後ギ酸を２５℃で蒸発させた。次いで、残留物を水(５０ mL)に溶解し、飽和水性ＮaＨＣＯ３で塩基性化し、酢酸エチル(３ x １５０ mL)で抽出した。次いで、合わせた有機層を水(５０ mL)、ブライン(５０ mL)で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、蒸発させて、さらなる精製をせずに利用される (Ｓ)-２-アミノ-３-[３-(アリルオキシカルボニル)-ベンジルオキシ]-プロピオニトリルを淡黄色油状物質として得た。
【手続補正３１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０９】
ＣＨ２Ｃl２(５０ mL)中(Ｓ)-Ｎ-(t-ブトキシカルボニル)-プロパルギルグリシン(２.４４ g、１１.４５ mmol)の溶液にＮ-メチルホルホリン (３.７８ mL、３４.４ mmol)を一度に添加した。次いで、この溶液を-１０℃に冷却し、イソブチルクロロホルメートを、５分間滴加した。１５分間の攪拌後、アンモニアガスを反応混合物中に適当な激しさの速度で１５分間通気した。次いで、得られる乳白色の懸濁液を２時間にわたって室温にあたため、混合物を１Ｎ ＨＣl(２ x ２５ mL)、水性ＮaＨＣＯ３ (２５ mL)およびブライン(２５ mL)で洗浄し、次いで ＭｇＳＯ４で乾燥させた。溶媒の蒸発、続くクロマトグラフィー(シリカ、６５％ ＥｔＯＡｃ/ヘキサン)により(Ｓ)-Ｎ-(t-ブトキシカルボニル)-プロパルギルグリシンアミドを透明な油状物質として得た。
【手続補正３２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１０】
トリエチルアミン(２５ mL)中(Ｓ)-Ｎ-(t-ブトキシカルボニル)-プロパルギルグリシンアミド (１.１５ g、５.３３ mmol)、メチル ３-ブロモベンゾエート (１.１５ g、５.３３ mmol)、および Ｃu(Ｉ)Ｉ(０.０４１ g、０.２１４ mmol)の溶液を、Ｎ２で２〜３分間通気して脱酸素化した。次いで、ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウムジクロリド(０.０７５ g、０.１１ mmol)を一度に添加し、混合物を３時間還流し、その後溶媒を蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃ (１０ ml)に取出し、次いで１Ｎ ＨＣｌ(４０ mL)およびブライン(３０ mL)で洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥させた。残留物をクロマトグラフィー (シリカ、８０％ ＥｔＯＡｃ/ヘキサン)に供し、(Ｓ)-２-(t-ブトキシカルボニルアミノ)-５-(３-カルボメトキシフェニル)-４-ペンチン酸（pentynoic acid）アミドを淡黄色固体として得た。
【手続補正３３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１４】
ＴＨＦ(１００ mL)中(Ｓ)-２-t-ブトキシカルボニルアミノ-３-(３-アリルオキシカルボニルベンジルオキシ)-プロピオニトリル(８.０ g、２２.２２ mmol) の溶液にモリホリン(１９.４ mL、２２２ mmol)を添加した。窒素通気(２分間)による脱酸素化後、Ｐd(ＰＰＨ３)４(１.２８ g、１.１１ mmol) を一度に添加し、この溶液を１時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃ (２５０ mL)に取出し、１Ｎ ＨＣl (２５０ mL)、ブライン(１００ mL)で洗浄し、乾燥させ (ＭｇＳＯ４)、蒸発させ、残留物をクロマトグラフィー (シリカ、２％メタノール、ＣＨ２Ｃl２)に供し、(Ｓ)-２-t-ブトキシカルボニルアミノ-３-(３-カルボキシベンジルオキシ)-プロピオニトリルを淡黄色油状物質として得た。
【手続補正３４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１７】
ギ酸(２２ mL)中(Ｓ)-２-t-ブトキシカルボニルアミノ-３-{３-[１-(２-シアノエチル)-５-テトラゾリル]-ベンジルオキシ}-プロピオニトリル (３.４９ g、８.８ mmol)の溶液を室温で６時間攪拌し、その後ギ酸を２５℃で蒸発させた。次いで、残留物を水(５０ mL)中に溶解し、飽和水性ＮaＨＣＯ３で塩基性にし、、酢酸エチル(３ x １５０ mL)で抽出した。次いで、合わせた有機層を水(５０ mL)、ブライン(５０ mL)で洗浄し、乾燥させ (ＭｇＳＯ４)、蒸発させて、さらなる精製をせずに利用する(Ｓ)-２-アミノ-３-{３-[１-(２-シアノエチル)-５-テトラゾリル]-ベンジルオキシ}-プロピオニトリルを淡黄色油状物質として得た。
【手続補正３５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１９】
塩化チオニル (２００ mL)中２-フルオロ-５-メチル安息香酸(４１.０５ g、０.２６６ mol)混合物を４５分間還流し、その間にそれは均質になった。冷却後、塩化チオニルを蒸発させて、２-フルオロ-５-メチルベンゾイルクロリドを黄色液体として得て、それをＣＨ２Ｃl２ (５００ mL)に溶解し、０℃に冷却した。この溶液に、２-(トリメチルシリル)-エタノール(４８.６５ mL、４０.１４ g、０.３４ mol)、続いてトリエチルアミン (８５.８６ g、１１８.３ mL、０.８５ mol)を添加し、この溶液を室温で１時間あたためた。次いで、この溶液を１Ｎ ＨＣl (２ x ５００ mL)、水(１ x ２５０ mL)およびブライン(１ x １００ mL)で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ-４) させ、蒸発させ、クロマトグラフィー (シリカ、５％ ＥｔＯＡｃ/ヘキサン)に供し、(２-トリメチルシリル)-エチル２-フルオロ-５-メチルベンゾエートを黄色油状物質として得た。
【手続補正３６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２０】
ＣＣl４ (４００ mL)中(２-トリメチルシリル)-エチル ２-フルオロ-５-メチルベンゾエート (５５.４６ g、２１８ mmol) 溶液にＮＢＳ (３８.８６ g、２１８ mmol)およびＡＩＢＮ(０.１８ g、１.１ mmol)を添加し、得られる溶液を太陽灯照射に１.２５時間暴露した。冷却後、混合物をＣeliteにより濾過し、蒸発させ、(２-トリメチルシリル)-エチル ５-ブロモメチル-２-フルオロベンゾエートを、少量の出発物質およびジブロモメチル生成物と共に得た。
【手続補正３７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２３】
ＤＭＦ中(１２ mL)６-ヨードフタリド (１.０ g、３.８５ mmol)、(Ｓ)-３-メチルフェニルアラニン・ＨＣl (０.８３ g、３.８５ mmol) Ｋ２ＣＯ３ (０.５３ g、３.８５ mmol)、ＣｕＩ(７３ mg、０.３８ mmol)、ＴＥＢＡ (０.３２ g、１.３ mmol)、トリ-o-トリルホスフィン(０.２３ g、０.７７ mmol)、Ｐｄ(ＯＡＣ)２ (８６ mg、０.３８ mmol)、トリエチルアミン (２.１４ mL、１５.３８ mmol) および水(１.２ mL)の溶液を１００℃、１２時間加熱した。冷却後、この溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌ (１００ mL)、飽和ＬｉＣｌ (５０ mL)および水(１００ mL) で洗浄し、蒸発させ、クロマトグラフィー(２％ ＭｅＯＨ/ＣＨ２Ｃl２、０〜０.０５％酢酸)に供し、(Ｓ)-６-[(１-カルボキシ-２-(３-メチルフェニル)-エチルアミノ]-フタリドを淡茶褐色泡沫物質として得た。
【手続補正３８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２５】
(ｈ) (Ｓ)-２-(３-メトキシカルボニルフェニルアミノ)-３-(３-メチルフェニル)-プロピオン酸
【化３５】
2003533506.tif 000017
０.０４Ｍ 水性酢酸ナトリウム(７５０ mL)中Ｄ-３-メチルフェニルアラニン・ＨＣl (５.５ g、２５.５ mmol)および酢酸(１３.０ mL) の溶液に、水(１２.５ mL)中硝酸ナトリウム(５.２８ g、７６.５ mmol)溶液を３０分間にわたり滴加し、この溶液を３時間攪拌した。次いで、この溶液を、ＮaＣlで飽和させ、ＥｔＯＡｃ(３ x １５０ mL)で抽出した。合わせた有機層を、ブライン(３ x １５０ mL)で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、蒸発させて、(Ｒ)-２-ヒドロキシ-３-(３-メチルフェニル)-プロピオン酸を得た。
【手続補正３９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３４】
２:１:１のＴＨＦ/ＭｅＯＨ/水(２４ mL)中 (Ｓ)-２-[１-メトキシカルボニル-２-(３-メチルフェニル)]-エチルアミノベンズオキサゾール(４００ mg、１.１ mmol)の溶液にＬiＯＨ・Ｈ２Ｏを添加し、この溶液を１.５時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をジエチルエーテル(５０ mL)に溶解させ、水(５０ mL)で洗浄した。次いで、水層を、１Ｎ ＨＣｌ(ｐＨ２)で酸性化し、ＥｔＯＡｃ(３ x ３０ mL)で抽出した。有機層をブライン(２０ mL)で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、蒸発させ、(Ｓ)-２-[１-カルボキシ-２-(３-メチルフェニル)]-エチルアミノベンズオキサゾールを透明な油状物質として得た。
【手続補正４０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３６】
ＴＨＦ(１００ mL）中、２,６-ピリジン二カルボン酸 塩化物 (３.５１g、０.０１７２ mol)の攪拌溶液を、０℃に冷却し、次いで、アリルアルコール（１２mL、０.１７２ mol)およびＮＭＭ（７.１ mL、０.０６９ mol)を同時に添加した。この反応を、２５℃で２時間攪拌し、次いでＥt２Ｏ(１００ mL)で希釈し、水(１００ mL)で洗浄した。水相をＥt２Ｏ(２x５０ mL)で抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた。濾過および濃縮により、さらなる精製をせずに使用するジアリル２,６-ピリジン二カルボキシレートを透明な油状物質として得た。
【手続補正４１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３７】
ＴＨＦ(１５０ mL）中ジアリル ２,６-ピリジンジカルボキシレート(１７.１g、０.０６９ mol)およびアリルアルコール（１５０ mL）の混合物を室温で攪拌した。水酸化ホウ素ナトリウム(１.３２g、０.０３５ mol)を１０分間にわたって数回で添加し、この反応を室温で１５時間攪拌する。この反応を３０ mLの水、続いて１.０Ｎ ＨＣｌ(３０ mL)をゆっくりと添加して停止した。混合物を、５％水酸化アンモニウム（１００ mL）を含む分液漏斗に注ぎ、１:１の酢酸エチルジエチルエーテル(３ｘ１００ mL)で抽出した。合わせた有機分画をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、放置して固化させた黄色油状物質を得た。１:１ ジエチルエーテル/ ヘキサンでトリチュレートし、アリル ６-(ヒドロキシメチル)ピリジン-２-カルボキシレートを白色結晶固体として得た。
【手続補正４２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４１】
固体水酸化ナトリウム(２２.２g、０.５５４ mol) を、ＥｔＯＨ(３００ mL)中２-シアノ-４[{(tert-ブチルジメチルシリル)オキシ}メチル]ピリジンおよび水（５０ mL）に添加した。次いで、反応混合物を、１５時間、還流して暖めた。室温に冷却後、この溶液を６Ｎ ＨＣlの添加によってpＨ１-２に調整した。次いで、混合物を濃縮し、真空で乾燥させた。固体残留物を、エタノールで洗浄し、次いで真空で乾燥させ、粗製４-(ヒドロキシメチル)ピリジン-２-カルボン酸塩酸塩を黄褐色の固体として得た。粗製塩をＤＭＦ（２８０ mL）中に溶解し、次いで、炭酸カリウム１８.２ g (０.１３１ mol)、続いて臭化アリル（４.８ mL、０.０５５４ mol)を添加した。得られる混合物を、室温で４８時間攪拌し、次いで高真空下で濃縮した。この残留物を酢酸エチルに取出し、飽和ＬｉＣｌで３回洗浄し、最後にブラインで洗浄した。水洗浄を組合せて、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機層を、Ｎa２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。９７:３のＣＨ２Ｃl２-ＭeＯＨで抽出するシリカゲルクロマトグラフィーにより、アリル ４-(ヒドロキシメチル)ピリジン-２-カルボキシレートを暗色油状物として得た。
【手続補正４３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４４】
ギ酸(４７ mL)中Ｎ-[２-[３-(アリルオキシカルボニル)-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｎα-(t-ブトキシカルボニル)-Ｌ-フェニルアラニンアミド(４.３６ g, ８.３７ mmol)を、６時間室温で攪拌し、その後ギ酸を ２５℃で蒸発させた。次いで、残留物を水(５０ mL)に溶解し、飽和水性ＮaＨＣＯ３で塩基性化し、酢酸エチル(３ x ５０ mL)で抽出した。この合わせた有機層を水(５０ mL)、ブライン(５０ mL)で洗浄し、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、蒸発させ、さらなる精製をせずに利用するＮ-[２-[３-(アリルオキシカルボニル)-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｌ-フェニルアラニンアミドを透明な油状物質として得た。
【手続補正４４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４７】
実施例５
Ｎ-[２-[３-(アリルオキシカルボニル)-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｎα-(４-フルオロフェニル)-Ｌ-フェニルアラニンアミド
【化４３】
2003533506.tif 000018
ＣＨ２Ｃｌ２(１５ mL)中Ｎ-[２-[３-(アリルオキシカルボニル)-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｌ-フェニルアラニンアミド(０.６ g、１.４２ mmol)の溶液に４-フルオロフェニルボロン酸(０.３９８ g、２.８５ mmol)、酢酸銅(０.２６ g、１.４ mmol)およびピリジン(０.２３ mL、２.８５ mmol)を添加し、暗青色溶液を、室温で一晩混合する。次いで、この溶液をＣＨ２Ｃl２(３５ mL)で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ(５０ mL) およびブライン(５０ mL)で洗浄し、次いで、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、蒸発させ、クロマトグラフィー(シリカ、３０％ ＥｔＯＡｃ/ヘキサン)に供し、Ｎ-[２-[３-(アリルオキシカルボニル)-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｎα-(４-フルオロフェニル)-Ｌ-フェニルアラニンアミドを透明な油状物質として得る。
【手続補正４５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４９】
ＴＨＦ(５００ mL)中Ｎ-[２-[３-(アリルオキシカルボニル)-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｎα-フェニル-L-フェニルアラニンアミド (１２.４８ g、２５.１１ mmol)の溶液に、モルホリン(２１.９ mL、２５１ mmol)を添加し、この溶液をＮ２で５分間通気させ脱酸素化する。次いで、Ｐｄ(ＰＰＨ３)４を、一度に添加し、この溶液を室温で１０分間攪拌する。溶媒を蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃ(５００ mL)中に溶解し、１Ｎ ＨＣｌ(５００ mL)、ブライン(２００ mL)で洗浄し、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、蒸発させ、クロマトグラフィー(２％ -１０％ ＭｅＯＨ/ＣＨ２Ｃl２)に供し、Ｎ-[２-(３-カルボキシ-ベンジルオキシ)-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｎα-フェニル-Ｌ-フェニルアラニンアミドを白色固体として得る；融点１３５-１３７°。
【手続補正４６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５０】
実施例 ７
Ｎ-(５-(３-カルボキシフェニル)-１(Ｓ)-シアノペンチル]-３-メチル-Ｎα-(３-オキソ-１、３-ジヒドロ-イソベンゾフラン-５-イル)-Ｌ-フェニルアラニンアミド
【化４５】
2003533506.tif 000019
ピナコロン(１５ mL)中Ｎ-(５-(３-メトキシカルボニルフェニル)-１(Ｓ)-シアノペンチル]-３-メチル-Ｎα-(３-オキソ-１,３-ジヒドロ-イソベンゾフラン-５-イル)-Ｌ-フェニルアラニンアミド (０.３５４ g、０.６７ mmol)の溶液を、Ｎ２で５分間通気させて脱酸素化し、その後ＬｉＩ(０.９０ g、６.７４ mmol) を一度に添加する。次いで、この溶液を、１００℃で、２８時間加熱する。冷却後、それをＥｔＯＡｃ(１００ mL)で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ(１００ mL) およびブライン(５０ mL)で洗浄し、次いで乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、蒸発させ、クロマトグラフィー(２％ ＭｅＯＨ/ＣＨ２Ｃl２、０％〜０.０５％ 酢酸)に供し、Ｎ-(５-(３-カルボキシフェニル)-１(Ｓ)-シアノペンチル]-３-メチル-Ｎα-(３-オキソ-１,３-ジヒドロ-イソベンゾフラン-５-イル)-Ｌ-フェニルアラニンアミドを淡黄色固体として得る；融点 ９１-９４℃。
【手続補正４７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５１】
実施例 ８
Ｎ-[２-[３-(５-テトラゾリル)-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｎ-フェニル-フェニルアラニンアミド
【化４６】
2003533506.tif 000020
ＣＨ２Ｃl２ (１０ mL)中のＮ-[２-[３-(１-(２-シアノエチル)-５-テトラゾリル)-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｎα-フェニル-Ｌ-フェニルアラニンアミド(実施例１(e)の中間体を用いて、実施例１(g)および７に従って製造した)、１６０ mg、０.３０ mmol)の溶液にＤＢＵ(０.２２ mL、１.５ mmol)を一度に添加し、この溶液を室温で２時間攪拌し、その後この溶液を１Ｎ ＨＣｌ(３０ mL)、ブライン(３０ mL)で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、蒸発させ、クロマトグラフィー(２％ ＭｅＯＨ/ＣＨ２Ｃｌ２、０〜０.０５％ 酢酸) に供し、Ｎ-[２-[３-(５-テトラゾリル)-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｎα-フェニル-フェニルアラニンアミドをオフホワイトの固体として得る；融点 １２０-１２２℃。
【手続補正４８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５３】
(Ｓ)-２-アミノ-３-[３-[(２-トリメチルシリルエトキシ)-カルボニル]-４-フルオロ-ベンジルオキシ]プロピオニトリル(実施例１ｆ)およびＮ-フェニル-３-メチル-Ｌ-フェニルアラニン(実施例１gに従って製造した) の実施例７の縮合により、Ｎ-[２-[(３-((２-トリメチルシリル)-エトキシカルボニル)-４-フルオロ-ベンジルオキシ]-１(Ｓ)-シアノエチル]-３-メチル-Ｎα-フェニル-Ｌ-フェニルアラニンアミドを得た。
【手続補正４９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５８】
実施例 １３
(Ｓ,Ｓ)-Ｎ-フェニル-(３-メチルフェニル)-アラニル-Ｏ-(カルボキシメチル)-m-チロシンニトリル
【化５１】
2003533506.tif 000021
ＴＨＦ(８ ml)中(Ｓ,Ｓ)-Ｎ-フェニル-(３-メチルフェニル)-アラニル-Ｏ-((２-トリメチルシリルエトキシ)-カルボニル-メチル)-m-チロシンニトリル(２６０ mg) の溶液に室温でテトラブチルアンモニウムホルメート(ＴＨＦ中１Ｎ、５ ml)を添加する。反応混合物を３０分間攪拌し、次いでエーテル(２０ ml)およびＨＣｌ (１Ｎ、２０ ml)を添加する。この層を分離し、有機層を真空で蒸発させる。残留物をエーテル(２０ ml)に溶解し、飽和ＮaＨＣＯ３で抽出する。この合わせた水性層を１Ｎ ＨＣｌの添加により酸性化し、次いでエーテルで抽出する。この合わせた有機層を乾燥させ（Ｎa２ＳＯ４）、真空で蒸発させ、表題化合物を固体として提供する。ＭＳ実測値: Ｍ+１+: ４５８；m.p. ６３-６５℃。
【手続補正５０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５９】
出発物質を下記のように製造する:
t-ブチル３-(ヒドロキシメチル)-フェノキシアセテート
【化５２】
2003533506.tif 000022
ＤＭＦ (５００ ml、無水物)中３-(ヒドロキシメチル)-フェノール(５０ g、０.４ mol)およびt-ブチルブロモアセテート (８６ g、０.４４ mol) の溶液に 室温でＫ２ＣＯ３ (１２２ g、０.８８ mol)を添加する。反応混合物を、力強く２時間攪拌し、混合物を氷水(２.５ L)に注ぎ、エーテル(３ x ５００ ml)で抽出する。この合わせたエーテル抽出物を、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空で蒸発させ、t-ブチル-３-(ヒドロキシメチル)-フェノキシアセテートを低融点の淡黄色固体として得る；融点５２-５６℃。
【手続補正５１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６２】
Ｏ-(t-ブトキシカルボニル-メチル)-m-チロシンエチルエステル
【化５５】
2003533506.tif 000023
−７８℃で新しく製造したＴＨＦ(２００ ml、無水物、Aldrich)中ＬＤＡ(０.２２ mol.) の溶液に、ＴＨＦ (２８０ ml)中Ｎ-(ジフェニルメチルレン)-グリシンエチルエステル(５２.６ g、０.１９７ mol)を１５分間にわたって滴加する。攪拌１０分後、ＴＨＦ(２８０ ml)中ヨウ化物(６８ g、０.１９７ mol)の溶液を１０分間にわたって滴加する。得られる混合物を、室温にあたため、１.５時間攪拌する。この反応を、飽和ＮａＣｌを添加によって停止し、混合物をエーテル(３ x ２５０ ml)で抽出する。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空で蒸発させる。
【手続補正５２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６３】
得られるイミンを、ＴＨＦ(１０Ｌ)中１５％水性クエン酸(１.０ Ｌ)と、室温で一晩攪拌する。混合物をエーテル(３ x ５００ ml)に抽出し、合わせた有機層をＮaＨＣＯ３ (飽和水性)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、次いで真空で蒸発させ、Ｏ-(t-ブトキシカルボニル-メチル)-m-チロシンエチルエステルを淡黄色油状物質として得る。ＭＳ実測値: Ｍ+１+: ３２４、２Ｍ+１+: ６４７。
(+/-)-Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｏ-(t-ブトキシカルボニル-メチル)-m-チロシンエチルエステル
【化５６】
2003533506.tif 000024
【手続補正５３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６４】
ベンジルクロロホルメート(２２.９ ml、０.１６ mol)をジクロロメタン(６７０ ml)中Ｏ-(t-ブトキシカルボニル-メチル)-m-チロシンエチルエステル(４３.２ g、０.１３３ mol)およびＮ-メチルホルホリン (２０.６ ml、０.１９ mol) の溶液に滴加する。得られる混合物を、室温に暖め、次いで１時間攪拌する。混合物を、ＣＨ２Ｃl２ (３ x ２５０ ml)で抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空で蒸発させる。残留物を、Ｓi-ゲルのクロマトグラフィーに供し、ヘキサン/ＥｔＯＡｃ４:１で抽出する。真空で溶媒の蒸発をＮ-ベンジルオキシカルボニル-Ｏ-(t-ブトキシカルボニル-メチル)-m-チロシンエチルエステルを無色油状物質として得る。ＭＳ実測値: Ｍ+１+: ４５８、Ｍ+１８+: ４７５、２Ｍ+１８+: ９３２。
【手続補正５４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６５】
(Ｓ)-Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｏ-(t-ブトキシカルボニル-メチル)-m-チロシン
【化５７】
2003533506.tif 000025
(+/-)-Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｏ-(t-ブトキシカルボニル-メチル)-m-チロシンエチルエステル(４４.７ g) を、アセトニトリル(３４０ ml)で溶解する。この溶液にＮaＨＣＯ３ (０.２Ｎ、水性溶液)、続いてアルカラーゼ(４.３ ml) 水性懸濁液を添加する。この混合物を、しっかりと一晩攪拌し、次いで溶媒を真空で蒸発させる。得られる水性混合物をエーテルで抽出する。水層を水性ＨＣl (２Ｎ)の添加によってpＨ１に酸性化し、次いでＣＨ２Ｃl２で抽出する。合わせたＣＨ２Ｃｌ２層を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空で除去し、(Ｓ)-Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｏ-(t-ブトキシカルボニル-メチル)-m-チロシンを無色油状物質として得る。ＭＳ実測値:  Ｍ+１８+: ４７５。
【手続補正５５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６６】
(Ｓ)-Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｏ-(t-ブトキシカルボニル-メチル)-m-チロシンアミド
【化５８】
2003533506.tif 000026
−１０℃でＣＨ２Ｃl２ (１８０ ml)中の上記酸(１９.３ g)および Ｎ-メチルホルホリン(１４.８ ml)の溶液に、別の漏斗でi-ブチルクロロホルメート(７.０ ml)を添加する。得られる混合物を１５分間攪拌し、次いでアンモニアガスを、混合物に通気させる。この反応を２時間攪拌し、次いで氷浴に冷却する。ＨＣl (１Ｎ、水性溶液)を添加し、過剰のアンモニアを中和する。混合物を、ＣＨ２Ｃl２で抽出し、合わせた有機層をＮaＨＣＯ３ (飽和、水溶液)で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、次いで、真空で蒸発させ、油状物として表題化合物を得る。ＭＳ実測値: M+１+: ４２９。
【手続補正５６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７０】
(Ｓ,Ｓ)-Ｎ-フェニル-(３-メチルフェニル)-アラニル-Ｏ-((２-トリメチルシリルエトキシ)-カルボニル-メチル)-m-チロシンニトリル
【化６２】
2003533506.tif 000027
室温でＣＨ２Ｃl２中(Ｓ)-Ｎ-フェニル-(３-メチルフェニル)-アラニン(３９８ mg)、Ｎ-メチルホルホリン(５８３ mg) および ＴＰＴＵ(９２７ mg)の溶液を、１０分間攪拌する。混合物に(Ｓ)-Ｏ-((２-トリメチルシリルエトキシ)-カルボニルメチル)-m-チロシンニトリル(５００ mg)を添加し、反応混合物を室温で１時間攪拌する。混合物を、１Ｎ ＨＣlの添加により酸性化し、次いでＣＨ２Ｃl２で抽出する。この合わせた有機層を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空で除去する。残留物を４:１、次いで２:１のヘキサン/ＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルのクロマトグラフィーに供する。Ｒf ０.４５での生成物を有する合わせた分画を真空で蒸発させ、表題化合物を得る。ＭＳ実測値: Ｍ+１８+: ５７６。