【手続補正書】
【提出日】平成20年5月16日(2008.5.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  誘導性プロモーターの制御下にて組換えタンパク質産物を産生するための方法であって、該誘導性プロモーターはａｒａＢプロモーターであり、該方法は、
（ａ）細菌宿主細胞中へ、該誘導性プロモーターの制御下にて組換えタンパク質産物をコードする発現ベクターを導入する工程であって、該宿主細胞は、該宿主細胞中への該プロモーターのアラビノース誘導物質の能動輸送のための系において遺伝的に欠損があり、該系は、ａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系であるかまたはａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系である、工程；および
（ｂ）該誘導物質を用いて該産物の発現を誘導する工程、
を包含する、方法。
【請求項２】  誘導性プロモーターの制御下にて組換えタンパク質産物を産生するための方法であって、該誘導性プロモーターはａｒａＢプロモーターであり、該方法は、
（ａ）細菌宿主細胞を培養する工程であって、該宿主細胞は、該宿主細胞中への該誘導性プロモーターのアラビノース誘導物質の能動輸送のための系において遺伝的に欠損があり、該系は、ａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系であるかまたはａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系であり、該宿主細胞は、該誘導性プロモーターの制御下にて組換えタンパク質産物をコードする発現ベクターを含む、工程；および
（ｂ）該誘導物質を用いて該産物の発現を誘導する工程、
を包含する、方法。
【請求項３】  請求項２に記載の方法であって、前記組換えタンパク質産物は、前記細菌宿主細胞のペリプラズムもしくは細胞質において蓄積されるか、または培養培地中に分泌される、方法。
【請求項４】  請求項２に記載の方法であって、前記組換えタンパク質産物の発現は、培養培地における誘導物質の濃度に比例する、方法。
【請求項５】  請求項１〜４のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記誘導物質はＬ−アラビノースである、方法。
【請求項６】  請求項１〜５のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞はアラビノース上で増殖し得ない、方法。
【請求項７】  請求項１〜５のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記アラビノースの濃度は０．００００１％（ｖ／ｖ）〜１０％（ｖ／ｖ）である、方法。
【請求項８】  請求項１〜７のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞はＥ．ｃｏｌｉである、方法。
【請求項９】  請求項１〜８のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞は、ａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系において欠損がある、方法。
【請求項１０】  請求項１〜８のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞は、ａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系において欠損がある、方法。
【請求項１１】  請求項１〜８のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞は、ａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系とａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系との両方において欠損がある、方法。
【請求項１２】  請求項１〜１１のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記輸送系は、Ｅ．ｃｏｌｉに由来するか、またはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ種、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ種、Ｐｒｏｔｅｕｓ種およびＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ種を包含するＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ科に由来する、方法。
【請求項１３】  請求項１〜１２のうちのいずれか１項に記載の方法であって、
前記誘導された宿主細胞から前記産物を回収する工程
をさらに包含する、方法。
【請求項１４】  請求項１〜１３のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記組換えタンパク質産物は、動物由来のタンパク質産物、植物由来のタンパク質産物、哺乳動物タンパク質産物、またはヒトタンパク質産物であり、該組換えタンパク質産物は、レポーター遺伝子産物でもマーカー遺伝子産物でもない、方法。
【請求項１５】  請求項１４に記載の方法であって、前記組換えタンパク質産物は、治療用薬剤、予防用薬剤、または診断用薬剤である、方法。
【請求項１６】  誘導性プロモーターの制御下にて組換えタンパク質産物を産生し、そして該産物の発現を同期的に誘導するための方法であって、該誘導性プロモーターはａｒａＢプロモーターであり、該方法は、
（ａ）細菌宿主細胞を培養する工程であって、該宿主細胞は、該宿主細胞中への誘導性プロモーターのアラビノース誘導物質の能動輸送のための系において遺伝的に欠損があり、該系は、ａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系であるかまたはａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系であり、該宿主細胞は、該誘導性プロモーターの制御下にて組換えタンパク質産物をコードする発現ベクターを含む、工程；および
（ｂ）該宿主細胞による該産物の発現を同期的に誘導するのに有効な濃度の誘導物質を用いて該産物の発現を誘導する工程、
を包含する、方法。
【請求項１７】  誘導性プロモーターの誘導物質により誘導される細菌細胞増殖阻害を減少させるための方法であって、該誘導性プロモーターはａｒａＢプロモーターであり、該方法は、
（ａ）細菌宿主細胞を培養する工程であって、該宿主細胞は、該宿主細胞中へのアラビノース誘導物質の能動輸送のための系において遺伝的に欠損があり、該系は、ａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系であるかまたはａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系であり、該宿主細胞は、該誘導性プロモーターの制御下にて組換えタンパク質産物をコードする発現ベクターを含む、工程；および
（ｂ）該宿主細胞において該産物の発現を誘導するのに有効であるが、輸送熟練細胞と比較して該宿主細胞の増殖を阻害するのには有効ではない濃度の誘導物質を用いて、該産物の発現を誘導する工程、
を包含する、方法。
【請求項１８】  組換えタンパク質産物の収量を増加させるための方法であって、該方法は、
（ａ）細菌宿主細胞を培養する工程であって、該宿主細胞は、該宿主細胞中への誘導性プロモーターのアラビノース誘導物質の能動輸送のための系において遺伝的に欠損があり、該誘導性プロモーターはａｒａＢプロモーターであり、該系は、ａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系であるかまたはａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系であり、該宿主細胞は、該誘導性プロモーターの制御下にて該組換えタンパク質産物をコードする発現ベクターを含む、工程；および
（ｂ）該宿主細胞または該産物の収量を増加させるのに有効な濃度の誘導物質を用いて該産物の発現を誘導する工程、
を包含する、方法。
【請求項１９】  請求項１６〜１８のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記誘導物質はＬ−アラビノースである、方法。
【請求項２０】  請求項１６〜１９のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞はアラビノース上で増殖し得ない、方法。
【請求項２１】  請求項１６〜２０のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞はＥ．ｃｏｌｉである、方法。
【請求項２２】  請求項１６〜２１のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞は、ａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系において欠損がある、方法。
【請求項２３】  請求項１６〜２１のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞は、ａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系において欠損がある、方法。
【請求項２４】  請求項１６〜２１のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記宿主細胞は、ａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系とａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系との両方において欠損がある、方法。
【請求項２５】  請求項１６〜２４のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記輸送系は、Ｅ．ｃｏｌｉに由来するか、またはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ種、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ種、Ｐｒｏｔｅｕｓ種およびＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ種を包含するＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ科に由来する、方法。
【請求項２６】  請求項１６〜２５のうちのいずれか１項に記載の方法であって、前記組換えタンパク質産物は、動物由来のタンパク質産物、植物由来のタンパク質産物、哺乳動物タンパク質産物、またはヒトタンパク質産物であり、該組換えタンパク質産物は、レポーター遺伝子産物でもマーカー遺伝子産物でもない、方法。
【請求項２７】  請求項２６に記載の方法であって、前記組換えタンパク質産物は、治療用薬剤、予防用薬剤、または診断用薬剤である、方法。
【請求項２８】  誘導性プロモーターのアラビノース誘導物質の能動輸送系において欠損がある細菌宿主細胞であって、該誘導性プロモーターはａｒａＢプロモーターであり、該系は、ａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系であるかまたはａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系であり、該宿主細胞は、該誘導性プロモーターの制御下にて組換えタンパク質産物をコードする組換え発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項２９】  請求項２８に記載の宿主細胞であって、前記誘導物質はＬ−アラビノースである、宿主細胞。
【請求項３０】  アラビノース上で増殖し得ない、請求項２８または２９に記載の宿主細胞。
【請求項３１】  Ｅ．ｃｏｌｉである、請求項２８〜３０のうちのいずれか１項に記載の宿主細胞。
【請求項３２】  ａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系において欠損がある、請求項２８〜３１のうちのいずれか１項に記載の宿主細胞。
【請求項３３】  ａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系において欠損がある、請求項２８〜３１のうちのいずれか１項に記載の宿主細胞。
【請求項３４】  ａｒａＦＧＨ遺伝子によってコードされる高親和性アラビノース輸送系とａｒａＥ遺伝子によってコードされる低親和性アラビノース輸送系との両方において欠損がある、請求項２８〜３１のうちのいずれか１項に記載の宿主細胞。
【請求項３５】  請求項２８〜３４のうちのいずれか１項に記載の宿主細胞であって、前記輸送系は、Ｅ．ｃｏｌｉに由来するか、またはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ種、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ種、Ｐｒｏｔｅｕｓ種およびＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ種を包含するＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ科に由来する、宿主細胞。
【請求項３６】  請求項２８〜３５のうちのいずれか１項に記載の宿主細胞であって、前記組換えタンパク質産物は、動物由来のタンパク質産物、植物由来のタンパク質産物、哺乳動物タンパク質産物、またはヒトタンパク質産物であり、該組換えタンパク質産物は、レポーター遺伝子産物でもマーカー遺伝子産物でもない、宿主細胞。
【請求項３７】  請求項３６に記載の宿主細胞であって、前記組換えタンパク質産物は、治療用薬剤、予防用薬剤、または診断用薬剤である、宿主細胞。