【手続補正書】
【提出日】令和1年10月31日(2019.10.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、軽鎖、重鎖、及び前記重鎖のＣ末端を前記軽鎖のＮ末端に連結させるポリペプチドリンカーを含み、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの重鎖が、完全長の配列番号：３に対して少なくとも９９％の同一性を有する第１のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの軽鎖が、完全長の配列番号：４に対して少なくとも９９％の同一性を有する第２のヌクレオチド配列によってコードされ、かつ
前記ポリペプチドリンカーが、ｆｕｒｉｎ切断部位と配列番号：５５のアミノ酸配列を有するグリコシル化ペプチドとを含む、
前記ポリヌクレオチド。
【請求項２】
前記ポリペプチドリンカーが、完全長の配列番号：３８に対して少なくとも９５％の同一性を有する第３のヌクレオチド配列によってコードされる、請求項１に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３】
前記ポリペプチドリンカーが、配列番号：３８の第３のヌクレオチド配列によってコードされる、請求項１に記載のポリヌクレオチド。
【請求項４】
前記第１のヌクレオチド配列が配列番号：３であり、かつ
前記第２のヌクレオチド配列が配列番号：４である、
請求項１〜３のいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項５】
前記ポリペプチドリンカーが、配列番号：３８の第３のヌクレオチド配列によってコードされる、請求項４に記載のポリヌクレオチド。
【請求項６】
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターエレメントをさらに含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７】
前記プロモーターエレメントが、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の上流の肝臓特異的プロモーター配列である、請求項６に記載のポリヌクレオチド。
【請求項８】
前記肝臓特異的プロモーター配列と、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列との間に位置するイントロン配列をさらに含む、請求項７に記載のポリヌクレオチド。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子に感染した、宿主細胞。
【請求項１２】
哺乳類の宿主細胞内に請求項１〜８のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを導入する段階を含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を作製するための方法であって、前記ポリヌクレオチドが前記哺乳類宿主細胞において複製能力がある、前記方法。
【請求項１３】
血友病Ａを治療するための方法であって、それを必要とする患者に対し、請求項１０に記載のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を投与する段階を含む、前記方法。
【請求項１４】
宿主細胞に形質導入するための方法であって、前記宿主細胞を請求項１０に記載のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子と接触させる段階を含む、前記方法。
【請求項１５】
完全長の配列番号：１に対して少なくとも９９％の同一性を有するヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチドであって、
配列番号：１９に対するアミノ酸置換Ｉ１０５Ｖ、Ａ１２７Ｓ、Ｇ１５１Ｋ、Ｍ１６６Ｔ、及びＬ１７１Ｐを有する第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
【請求項１６】
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、軽鎖、重鎖、及び前記重鎖のＣ末端を前記軽鎖のＮ末端に連結させるポリペプチドリンカーを含み、かつ
前記ポリペプチドリンカーが、前記重鎖と前記軽鎖の間に挿入される配列番号：５５のアミノ酸配列を有するグリコシル化ペプチドを含む、
請求項１５に記載のポリヌクレオチド。
【請求項１７】
配列番号：９４の配列を含む、請求項１５に記載のポリヌクレオチド。
【請求項１８】
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターエレメントをさらに含む、請求項１５〜１７のいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項１９】
前記プロモーターエレメントが、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の上流の肝臓特異的プロモーター配列である、請求項１８に記載のポリヌクレオチド。
【請求項２０】
前記肝臓特異的プロモーター配列と、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列との間に位置するイントロン配列をさらに含む、請求項１９に記載のポリヌクレオチド。
【請求項２１】
請求項１５〜２０のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
【請求項２２】
請求項１５〜２０のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子。
【請求項２３】
請求項１５〜２０のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子に感染した、宿主細胞。
【請求項２４】
哺乳類の宿主細胞内に請求項１５〜２０のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを導入する段階を含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を作製するための方法であって、前記ポリヌクレオチドが前記哺乳類宿主細胞において複製能力がある、前記方法。
【請求項２５】
血友病Ａを治療するための方法であって、それを必要とする患者に対し、請求項２２に記載のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を投与する段階を含む、前記方法。
【請求項２６】
宿主細胞に形質導入するための方法であって、前記宿主細胞を請求項２２に記載のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子と接触させる段階を含む、前記方法。
【請求項２７】
第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、軽鎖、重鎖、及び前記重鎖のＣ末端を前記軽鎖のＮ末端に連結させるポリペプチドリンカーを含み、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、配列番号：１９に対するアミノ酸置換Ｉ１０５Ｖ、Ａ１２７Ｓ、Ｇ１５１Ｋ、Ｍ１６６Ｔ、及びＬ１７１Ｐを有し、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの重鎖が、完全長の配列番号：３に対して少なくとも９９％の同一性を有する第１のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの軽鎖が、完全長の配列番号：４に対して少なくとも９９％の同一性を有する第２のヌクレオチド配列によってコードされ、かつ
前記ポリペプチドリンカーが、ｆｕｒｉｎ切断部位と配列番号：５５のアミノ酸配列を有するグリコシル化ペプチドとを含む、
前記ポリヌクレオチド。
【請求項２８】
前記ポリペプチドリンカーが、完全長の配列番号：３８に対して少なくとも９５％の同一性を有する第３のヌクレオチド配列によってコードされる、請求項２７に記載のポリヌクレオチド。
【請求項２９】
前記ポリペプチドリンカーが、配列番号：３８の第３のヌクレオチド配列によってコードされる、請求項２７に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３０】
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターエレメントをさらに含む、請求項２７〜２９のいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３１】
前記プロモーターエレメントが、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の上流の肝臓特異的プロモーター配列である、請求項３０に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３２】
前記肝臓特異的プロモーター配列と、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列との間に位置するイントロン配列をさらに含む、請求項３１に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３３】
請求項２７〜３２のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
【請求項３４】
請求項２７〜３２のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子。
【請求項３５】
請求項２７〜３２のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子に感染した、宿主細胞。
【請求項３６】
哺乳類の宿主細胞内に請求項２７〜３２のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを導入する段階を含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を作製するための方法であって、前記ポリヌクレオチドが前記哺乳類宿主細胞において複製能力がある、前記方法。
【請求項３７】
血友病Ａを治療するための方法であって、それを必要とする患者に対し、請求項３４に記載のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を投与する段階を含む、前記方法。
【請求項３８】
宿主細胞に形質導入するための方法であって、前記宿主細胞を請求項３４に記載のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子と接触させる段階を含む、前記方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２５】
記載の第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの一実施形態では、第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドは、それぞれの完全長配列（例えば、ＣＳ４０−ＦＬ−ＡＡｍ２３（配列番号１０４）、ＣＳ４０−ＦＬ−ＡＡｍ１２３、またはＣＳ４０−ＦＬ−ＡＡｍ２３４）と同一な配列を有する。
[本発明1001]
ＣＳ01−ＦＬ−ＮＡ（配列番号13）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1002]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＦＬ−ＮＡ（配列番号13）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1001のポリヌクレオチド。
[本発明1003]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ01−ＦＬ−ＮＡ（配列番号13）である、本発明1001のポリヌクレオチド。
[本発明1004]
第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、軽鎖、重鎖、及び前記重鎖のＣ末端を前記軽鎖のＮ末端に連結させるポリペプチドリンカーを含み、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記重鎖は、ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ（配列番号24）に対して少なくとも95％の同一性を有する第1のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記軽鎖は、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ（配列番号25）に対して少なくとも95％の同一性を有する第2のヌクレオチド配列によってコードされ、かつ
前記ポリペプチドリンカーは、ｆｕｒｉｎ切断部位を含む、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1005]
前記ポリペプチドリンカーが、ＢＤＬＯ01（配列番号5）に対して少なくとも95％の同一性を有する第3のヌクレオチド配列によってコードされる、本発明1004のポリヌクレオチド。
[本発明1006]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ（配列番号24）に対して少なくとも99％の同一性を有し、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ（配列番号25）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1004または1005のポリヌクレオチド。
[本発明1007]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ（配列番号24）であり、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ（配列番号25）である、本発明1004または1005のポリヌクレオチド。
[本発明1008]
ＣＳ04−ＦＬ−ＮＡ（配列番号1）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1009]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＦＬ−ＮＡ（配列番号1）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1004のポリヌクレオチド。
[本発明1010]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ04−ＦＬ−ＮＡ（配列番号1）である、本発明1004のポリヌクレオチド。
[本発明1011]
第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、軽鎖、重鎖、及び前記重鎖のＣ末端を前記軽鎖のＮ末端に連結させるポリペプチドリンカーを含み、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記重鎖は、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ（配列番号3）に対して少なくとも95％の同一性を有する第1のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記軽鎖は、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ（配列番号4）に対して少なくとも95％の同一性を有する第2のヌクレオチド配列によってコードされ、かつ
前記ポリペプチドリンカーは、ｆｕｒｉｎ切断部位を含む、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1012]
前記ポリペプチドリンカーが、ＢＤＬＯ04（配列番号6）に対して少なくとも95％の同一性を有する第3のヌクレオチド配列によってコードされる、本発明1011のポリヌクレオチド。
[本発明1013]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ（配列番号3）に対して少なくとも99％の同一性を有し、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ（配列番号4）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1011または1012のポリヌクレオチド。
[本発明1014]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ（配列番号3）であり、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ（配列番号4）である、本発明1011または1012のポリヌクレオチド。
[本発明1015]
ＣＳ23−ＦＬ−ＮＡに対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1016]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＦＬ−ＮＡ（配列番号20）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1015のポリヌクレオチド。
[本発明1017]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ23−ＦＬ−ＮＡ（配列番号20）である、本発明1015のポリヌクレオチド。
[本発明1018]
第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、軽鎖、重鎖、及び前記重鎖のＣ末端を前記軽鎖のＮ末端に連結させるポリペプチドリンカーを含み、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記重鎖は、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ（配列番号22）に対して少なくとも95％の同一性を有する第1のヌクレオチド配列によってコードされ、
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドの前記軽鎖は、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡ（配列番号23）に対して少なくとも95％の同一性を有する第2のヌクレオチド配列によってコードされ、かつ
前記ポリペプチドリンカーは、ｆｕｒｉｎ切断部位を含む、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1019]
前記ポリペプチドリンカーが、ＢＤＬＯ23（配列番号7）に対して少なくとも95％の同一性を有する第3のヌクレオチド配列によってコードされる、本発明1018のポリヌクレオチド。
[本発明1020]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ（配列番号22）に対して少なくとも99％の同一性を有し、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡ（配列番号23）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1018または1019のポリヌクレオチド。
[本発明1021]
前記第1のヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ（配列番号22）であり、かつ
前記第2のヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡ（配列番号23）である、本発明1018または1019のポリヌクレオチド。
[本発明1022]
前記コードされたポリペプチドリンカーが、ＮＧ1−ＡＡ、ＮＧ4−ＡＡ、ＮＧ5−ＡＡ、ＮＧ6−ＡＡ、ＮＧ7−ＡＡ、ＮＧ9−ＡＡ、ＮＧ10−ＡＡ、ＮＧ16−ＡＡ、ＮＧ17−ＡＡ、ＮＧ18−ＡＡ、ＮＧ19−ＡＡ、ＮＧ20−ＡＡ、ＮＧ21−ＡＡ及びＮＧＶ−ＡＡからなる群から選択されるグリコシル化ペプチドに対して少なくとも92％の同一性を有するアミノ酸配列を有するグリコシル化ペプチドを含む、本発明1004、1011、及び1018のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1023]
前記コードされたポリペプチドリンカーが、ＮＧ1−ＡＡ、ＮＧ4−ＡＡ、ＮＧ5−ＡＡ、ＮＧ6−ＡＡ、ＮＧ7−ＡＡ、ＮＧ9−ＡＡ、ＮＧ10−ＡＡ、ＮＧ16−ＡＡ、ＮＧ17−ＡＡ、ＮＧ18−ＡＡ、ＮＧ19−ＡＡ、ＮＧ20−ＡＡ、ＮＧ21−ＡＡ及びＮＧＶ−ＡＡからなる群から選択されるグリコシル化ペプチドを含む、本発明1004、1011、及び1018のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1024]
前記グリコシル化ペプチドが、ＮＧ1−ＮＡ、ＮＧ4−ＮＡ、ＮＧ5−ＮＡ、ＮＧ6−ＮＡ、ＮＧ7−ＮＡ、ＮＧ9−ＮＡ、ＮＧ10−ＮＡ、ＮＧ16−ＮＡ、ＮＧ17−ＮＡ、ＮＧ18−ＮＡ、ＮＧ19−ＮＡ、ＮＧ20−ＮＡ、ＮＧ21−ＮＡ及びＮＧＶ−ＮＡからなる群から選択される配列に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドによってコードされる、本発明1022または1023のポリヌクレオチド。
[本発明1025]
前記グリコシル化ペプチドが、ＮＧ1−ＮＡ、ＮＧ4−ＮＡ、ＮＧ5−ＮＡ、ＮＧ6−ＮＡ、ＮＧ7−ＮＡ、ＮＧ9−ＮＡ、ＮＧ10−ＮＡ、ＮＧ16−ＮＡ、ＮＧ17−ＮＡ、ＮＧ18−ＮＡ、ＮＧ19−ＮＡ、ＮＧ20−ＮＡ、ＮＧ21−ＮＡ及びＮＧＶ−ＮＡのうち1つから選択される、ヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドによってコードされる、本発明1022または1023のポリヌクレオチド。
[本発明1026]
前記ポリペプチドリンカーが、ＢＤＬＮＧ1−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ3−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ5−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ6−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ9−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ10−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ16−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ17−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ18−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ19−ＮＡ、ＢＤＬＮＧ20−ＮＡ及びＢＤＬＮＧ21−ＮＡからなる群から選択される配列に対して少なくとも95％の同一性を有する第3のヌクレオチド配列によってコードされる、本発明1004、1011、及び1018のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1027]
ＣＳ04−ＦＬ−ＡＡ（配列番号2）に対して少なくとも95％の同一性を有するアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、本発明1001〜1021のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1028]
ＣＳ04−ＦＬ−ＡＡ（配列番号2）のアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、本発明1001〜1021のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1029]
ＣＳ01−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号26）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1030]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号26）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1029のポリヌクレオチド。
[本発明1031]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ01−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号26）である、本発明1029のポリヌクレオチド。
[本発明1032]
ＣＳ04−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号9）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1033]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号9）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1029のポリヌクレオチド。
[本発明1034]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ04−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号9）である、本発明1029のポリヌクレオチド。
[本発明1035]
ＣＳ23−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号28）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1036]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号28）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1029のポリヌクレオチド。
[本発明1037]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ23−ＳＣ1−ＮＡ（配列番号28）である、本発明1029のポリヌクレオチド。
[本発明1038]
ＣＳ01−ＳＣ1−ＡＡ（配列番号10）に対して少なくとも95％の同一性を有するアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、本発明1029〜1037のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1039]
ＣＳ01−ＳＣ1−ＡＡ（配列番号10）のアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、本発明1029〜1037のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1040]
ＣＳ01−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号27）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1041]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ01−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号27）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1040のポリヌクレオチド。
[本発明1042]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ01−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号27）である、本発明1040のポリヌクレオチド。
[本発明1043]
ＣＳ04−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号11）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1044]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ04−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号11）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1043のポリヌクレオチド。
[本発明1045]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ04−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号11）である、本発明1043のポリヌクレオチド。
[本発明1046]
ＣＳ23−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号29）に対して少なくとも95％の同一性を有するヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドであって、第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1047]
前記ヌクレオチド配列が、ＣＳ23−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号29）に対して少なくとも99％の同一性を有する、本発明1043のポリヌクレオチド。
[本発明1048]
前記ヌクレオチド配列がＣＳ23−ＳＣ2−ＮＡ（配列番号29）である、本発明1043のポリヌクレオチド。
[本発明1049]
ＣＳ01−ＳＣ2−ＡＡ（配列番号12）に対して少なくとも95％の同一性を有するアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、本発明1040〜1048のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1050]
ＣＳ01−ＳＣ2−ＡＡ（配列番号12）のアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子一本鎖ポリペプチドをコードする、本発明1040〜1048のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1051]
ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡからなる群から選択される配列に対して少なくとも95％の同一性を有する配列を含む、ポリヌクレオチド。
[本発明1052]
ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡからなる群から選択される配列に対して少なくとも99％の同一性を有する配列を含む、ポリヌクレオチド。
[本発明1053]
ＣＳ01−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ01−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ04−ＬＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＨＣ−ＮＡ、ＣＳ23−ＬＣ−ＮＡからなる群から選択される配列を含む、ポリヌクレオチド。
[本発明1054]
ＣＳ01−ＦＬ−ＡＡ（配列番号2）に対して少なくとも95％の同一性を有するアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、本発明1051〜1053のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1055]
ＣＳ01−ＦＬ−ＡＡ（配列番号2）のアミノ酸配列を含む第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする、本発明1051〜1053のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1056]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｆ328Ｓを含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1057]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｉ105Ｖ、Ａ127Ｓ、Ｇ151Ｋ、Ｍ166Ｔ、及びＬ171Ｐを含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1058]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、
（ａ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に関して、アミノ酸ＡＩＥＰＲＳＦ755〜761の欠失、及び
（ｂ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対する、Ｎ754の後へのアミノ酸ＴＴＹＶＮＲＳＬ（配列番号33）の挿入
を含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1059]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、
（ａ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｆ328Ｓ、ならびに
（ｂ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｃ1918Ｇ及びＣ1922Ｇ
を含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1060]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｉ105Ｖ、Ａ127Ｓ、Ｇ151Ｋ、Ｍ166Ｔ、Ｌ171Ｐ、及びＦ328Ｓを含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1061]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、
（ａ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｆ328Ｓ、
（ｂ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に関して、アミノ酸ＡＩＥＰＲＳＦ755〜761の欠失、及び
（ｃ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対する、Ｎ754の後へのアミノ酸ＴＴＹＶＮＲＳＬ（配列番号33）の挿入
を含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1062]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、
（ａ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｉ105Ｖ、Ａ127Ｓ、Ｇ151Ｋ、Ｍ166Ｔ、及びＬ171Ｐ、
（ｂ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に関して、アミノ酸ＡＩＥＰＲＳＦ755〜761の欠失、及び
（ｃ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対する、Ｎ754の後へのアミノ酸ＴＴＹＶＮＲＳＬ（配列番号33）の挿入
を含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1063]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、
（ａ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｆ328Ｓ、
（ｂ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｃ1918Ｇ及びＣ1922Ｇ、及び
（ｃ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｉ105Ｖ、Ａ127Ｓ、Ｇ151Ｋ、Ｍ166Ｔ、及びＬ171Ｐ
を含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1064]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、
（ａ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｆ328Ｓ、
（ｂ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｃ1918Ｇ及びＣ1922Ｇ、
（ｃ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に関して、アミノ酸ＡＩＥＰＲＳＦ755〜761の欠失、及び
（ｄ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対する、Ｎ754の後へのアミノ酸ＴＴＹＶＮＲＳＬ（配列番号33）の挿入
を含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1065]
前記コードされた第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドが、
（ａ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｉ105Ｖ、Ａ127Ｓ、Ｇ151Ｋ、Ｍ166Ｔ、及びＬ171Ｐ、
（ｂ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｆ328Ｓ、
（ｃ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対するアミノ酸置換Ｃ1918Ｇ及びＣ1922Ｇ、
（ｄ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に関して、アミノ酸ＡＩＥＰＲＳＦ755〜761の欠失、及び
（ｅ）ＦＶＩＩＩ−ＦＬ−ＡＡ（配列番号19）に対する、Ｎ754の後へのアミノ酸ＴＴＹＶＮＲＳＬ（配列番号33）の挿入
を含む、本発明1001〜1055のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1066]
前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドに機能的に連結されたプロモーターエレメントをさらに含む、本発明1001〜1065のいずれかのポリヌクレオチド。
[本発明1067]
前記プロモーターエレメントが、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列の上流の肝臓特異的プロモーター配列である、本発明1066のポリヌクレオチド。
[本発明1068]
前記肝臓特異的プロモーター配列と、前記第ＶＩＩＩ因子ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列との間に位置するイントロン配列をさらに含む、本発明1067のポリヌクレオチド。
[本発明1069]
本発明1001〜1068のいずれかのポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター。
[本発明1070]
本発明1001〜1068のいずれかのポリヌクレオチドを含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子。
[本発明1071]
本発明1001〜1068のいずれかのポリヌクレオチドを含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子に感染した、宿主細胞。
[本発明1072]
哺乳類の宿主細胞内に本発明1001〜1068のいずれかのポリヌクレオチドを導入する段階を含む、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を作製するための方法であって、前記ポリヌクレオチドは前記哺乳類宿主細胞における複製能力がある、前記方法。
[本発明1073]
血友病Ａを治療するための方法であって、それを必要とする患者に対し、本発明1070のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子を投与する段階を含む、前記方法。
[本発明1074]
宿主細胞に形質導入するための方法であって、前記宿主細胞を本発明1070のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子と接触させる段階を含む、前記方法。