【手続補正書】
【提出日】平成31年2月8日(2019.2.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリペプチドを連結するための方法であって、前記ポリペプチドがペプチド骨格と１又は２以上の反応性チオール基とを含むと共に、前記方法が、ラジカル媒介性チオール−エン反応を促進する条件下で、前記ポリペプチドの反応性チオール基を１又は２以上の反応性エン基を含むエン化合物と反応させることを含み、ここで、前記ポリペプチドの反応性チオール基の前記ラジカル媒介性チオール−エン反応に関する反応性が、システインチオール基の反応性の少なくとも２倍である、方法。
【請求項２】
前記方法が、前記ポリペプチドの反応性チオール基を、ラジカル開始剤及び前記エン化合物と反応させることを含む、請求項１に係る方法。
【請求項３】
前記ポリペプチドの反応性チオール基が、前記ポリペプチドのペプチド骨格から２以上の炭素原子により隔てられている、請求項１又は２に係る方法。
【請求項４】
前記ポリペプチドの反応性チオール基が、前記ポリペプチドのホモシステイン残基のチオール基、又は、前記ポリペプチドの２−アミノ−５−メルカプトペンタン酸残基のチオール基である、請求項１〜３の何れか一項に係る方法。
【請求項５】
前記ポリペプチドが２以上の反応性チオール基を含み、前記反応性チオール基が各々、前記ポリペプチドのペプチド骨格から２以上の炭素原子により隔てられている、請求項１〜４の何れか一項の方法。
【請求項６】
前記エン化合物が、１個の反応性エン基を含む、請求項１〜４の何れか一項の方法。
【請求項７】
前記ポリペプチドが、前記ポリペプチドのペプチド骨格から２以上の炭素原子により隔てられている１個の反応性チオール基を含む、請求項６に係る方法。
【請求項８】
前記ポリペプチドが、前記ポリペプチドのペプチド骨格から２以上の炭素原子により隔てられている１個の反応性チオール基を含み、前記エン化合物が、２以上の反応性エン基を含む、請求項１〜４の何れか一項に係る方法。
【請求項９】
前記方法が更に、第二のチオール化合物を、２以上の反応性エン基を含むエン化合物と反応させることを含むと共に、前記第二のチオール化合物が、２以上の反応性チオール基を含む、請求項８に係る方法。
【請求項１０】
請求項１〜９に係る方法で製造される連結されたポリペプチド。
【請求項１１】
生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマーを製造するための方法であって、反応性チオール化合物をラジカル開始剤及び反応性エン化合物と反応させることを含み、ここで、前記反応性チオール化合物が、ペプチド骨格と、分解性ペプチドと、前記ペプチド骨格から各々２以上の炭素原子により隔てられている２以上の反応性チオール基とを含み、前記反応性エン化合物が、２以上の反応性エン基を含むエン修飾生体適合性モノマーである、方法。
【請求項１２】
前記反応混合物に生物活性成分を加えることを更に含むと共に、前記生物活性成分が、前記生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマーのポリマーマトリックスと組み合わされる、請求項１１に係る方法。
【請求項１３】
請求項１１又は１２に係る方法で製造される、生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマー。
【請求項１４】
前記生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマーのポリマーマトリックスと組み合わされた生物活性成分を更に含む、請求項１３の生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマー。
【請求項１５】
式（Ａ）の化合物：
Ｐ−［Ｃｔ−Ｓ−Ｃ−Ｃ−Ｑ］ｘ
（式中、Ｐはポリペプチドであり、ｔ≧２であり、Ｃｔは少なくとも２つの炭素原子を含むリンカーであり、ｘは１又は１よりも大きい整数であり、Ｑは生物活性成分、ポリマー、捕捉部分、標識、炭水和物、核酸、又は第二のポリペプチドである）。
【請求項１６】
式（Ｂ）の化合物：
［Ｐ−Ｃｔ−Ｓ−Ｃ−Ｃ］ｙ−Ｑ
（式中、Ｐはポリペプチドであり、ｔ≧２であり、Ｃｔは少なくとも２つの炭素原子を含むリンカーであり、ｙは１又は１よりも大きい整数であり、Ｑは、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）；ポリグリコリド（ＰＧＡ）；ＰＬＡとＰＧＡとのコポリマー（ＰＬＧＡ）；ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）；ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）；ポリ（エチレンオキシド）；ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）ブロックコポリマー；ポロキサミン；ポリ無水物；ポリオルトエステル；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリジオキサノン；ポリカーボネート；ポリアミノカーボネート；ポリ（ビニルピロリドン）；ポリ（エチルオキサゾリン）；ポリウレタン；カルボキシメチルセルロース；ヒドロキシアルキル化セルロース；ポリペプチド；核酸；修飾核酸；ロックド核酸；多糖類；炭水和物；ヘパリン硫酸；コンドロイチン硫酸；ヘパリン、アルギン酸；及びそれらの組合せからなる群より選択される）。
【請求項１７】
式（Ｉ）の繰り返し単位を含むポリマー材料：
【化１】
2018507908.tif 000001
（式中、Ｘはポリペプチドであり、ｔ≧２であり、Ｃｔは少なくとも２つの炭素原子を含むリンカーであり、Ｙは、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）；ポリグリコリド（ＰＧＡ）；ＰＬＡとＰＧＡとのコポリマー（ＰＬＧＡ）；ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）；ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）；ポリ（エチレンオキシド）；ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）ブロックコポリマー；ポロキサミン；ポリ無水物；ポリオルトエステル；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリジオキサノン；ポリカーボネート；ポリアミノカーボネート；ポリ（ビニルピロリドン）；ポリ（エチルオキサゾリン）；ポリウレタン；カルボキシメチルセルロース；ヒドロキシアルキル化セルロース；ポリペプチド；核酸；修飾核酸；ロックド核酸；多糖類；炭水和物；ヘパリン硫酸；コンドロイチン硫酸；ヘパリン、アルギン酸；及びそれらの組合せからなる群より選択される）。
【請求項１８】
式（II）の繰り返し単位を含むポリマー材料：
【化２】
2018507908.tif 000002
（式中、Ｘはポリペプチドであり、ｔ≧２であり、Ｃｔは、少なくとも２つの炭素原子を含むリンカーであり（即ち、Ｘは、少なくとも２つのチオエーテル部分に対し、炭素原子２個又はそれ以上の長さのリンカーを介して連結されている）、Ｙは、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）；ポリグリコリド（ＰＧＡ）；ＰＬＡとＰＧＡとのコポリマー（ＰＬＧＡ）；ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）；ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）；ポリ（エチレンオキシド）；ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）ブロックコポリマー；ポロキサミン；ポリ無水物；ポリオルトエステル；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリジオキサノン；ポリカーボネート；ポリアミノカーボネート；ポリ（ビニルピロリドン）；ポリ（エチルオキサゾリン）；ポリウレタン；カルボキシメチルセルロース；ヒドロキシアルキル化セルロース；ポリペプチド；核酸；修飾核酸；ロックド核酸；多糖類；炭水和物；ヘパリン硫酸；コンドロイチン硫酸；ヘパリン、アルギン酸；及びそれらの組合せからなる群より選択され、ここで
【化３】
2018507908.tif 000003
は、式（II）のポリマー部分の別のサブ単位のチオエーテル部分に対する付着点を表す）。
【請求項１９】
式（III）の繰り返し単位を含むポリマー材料：
【化４】
2018507908.tif 000004
（式中、Ｘはポリペプチドであり、ｔ≧２であり、Ｃｔは、少なくとも２つの炭素原子を含むリンカーであり（即ち、Ｘは、少なくとも２つのチオエーテル部分に対し、炭素原子２個又はそれ以上の長さのリンカーを介して連結されている）、Ｙは、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）；ポリグリコリド（ＰＧＡ）；ＰＬＡとＰＧＡとのコポリマー（ＰＬＧＡ）；ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）；ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）；ポリ（エチレンオキシド）；ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）ブロックコポリマー；ポロキサミン；ポリ無水物；ポリオルトエステル；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリジオキサノン；ポリカーボネート；ポリアミノカーボネート；ポリ（ビニルピロリドン）；ポリ（エチルオキサゾリン）；ポリウレタン；カルボキシメチルセルロース；ヒドロキシアルキル化セルロース；ポリペプチド；核酸；修飾核酸；ロックド核酸；多糖類；炭水和物；ヘパリン硫酸；コンドロイチン硫酸；ヘパリン、アルギン酸；及びそれらの組合せからなる群より選択され、ここで
【化５】
2018507908.tif 000005
は、式（III）のポリマー部分の別のサブ単位のチオエーテル部分に対する付着点を表す）。
【請求項２０】
式（Ｃ）の化合物：
Ｐ−［Ｃｔ−Ｓ−Ｃ−Ｃ−Ｑ］ｘ
（式中、Ｐはポリペプチドであり、Ｃｔは、少なくとも１つの炭素原子を含むリンカーであり、ｔ≧１であり、ｘは１又は１よりも大きい整数であり、Ｑは生物活性成分（例えば、薬物、毒素、又は殺虫剤）、ポリマー部分（例えばＰＥＧ）、捕捉部分（例えばビオチン）、標識（例えば蛍光標識、発色団、又は蛍光団）、糖又は炭水和物、核酸、又は第二のポリペプチドであり、ここでＣｔリンカーを含むＰの残基の各々は、天然アミノ酸残基、稀少アミノ酸残基、非天然アミノ酸残基、アミノ酸類似体残基、又はアミノ酸模倣体残基からなる群より選択されうる（但し、前記Ｃｔリンカーを含む天然アミノ酸残基は、システイン残基ではない））。
【請求項２１】
式（Ｄ）の化合物：
［Ｐ−Ｃｔ−Ｓ−Ｃ−Ｃ］ｙ−Ｑ
（式中、Ｐはポリペプチドであり、Ｃｔは、少なくとも１つの炭素原子を含むリンカーであり、ｔ≧１であり、ここでＣｔリンカーを含むＰの残基の各々は、天然アミノ酸残基、稀少アミノ酸残基、非天然アミノ酸残基、アミノ酸類似体残基、又はアミノ酸模倣体残基からなる群より選択されうる（但し、前記Ｃｔリンカーを含む天然アミノ酸残基は、システイン残基ではない）と共に、ｙは１又は１よりも大きい整数（例えば２、３、４又はそれ以上）であり、Ｑは、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）；ポリグリコリド（ＰＧＡ）；ＰＬＡとＰＧＡとのコポリマー（ＰＬＧＡ）；ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）；ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）；ポリ（エチレンオキシド）；ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）ブロックコポリマー；ポロキサミン；ポリ無水物；ポリオルトエステル；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリジオキサノン；ポリカーボネート；ポリアミノカーボネート；ポリ（ビニルピロリドン）；ポリ（エチルオキサゾリン）；ポリウレタン；カルボキシメチルセルロース；ヒドロキシアルキル化セルロース；ポリペプチド；核酸；修飾核酸；ロックド核酸；多糖類；炭水和物；ヘパリン硫酸；コンドロイチン硫酸；ヘパリン、アルギン酸；及びそれらの組合せからなる群より選択される）。
【請求項２２】
式（IV）の繰り返し単位を含むポリマー材料（例えばチオール−エンヒドロゲル）：
【化６】
2018507908.tif 000006
（式中、Ｘはポリペプチドであり、ｔ≧１であり、Ｃｔは、少なくとも１つの炭素原子を含むリンカーであり、ここでＣｔリンカーを含むＸの各残基は、天然アミノ酸残基、稀少アミノ酸残基、非天然アミノ酸残基、アミノ酸類似体残基、又はアミノ酸模倣体残基からなる群より選択されうる（但し、前記Ｃｔリンカーを含む天然アミノ酸残基は、システイン残基ではない）と共に、Ｙは、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）；ポリグリコリド（ＰＧＡ）；ＰＬＡとＰＧＡとのコポリマー（ＰＬＧＡ）；ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）；ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）；ポリ（エチレンオキシド）；ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）ブロックコポリマー；ポロキサミン；ポリ無水物；ポリオルトエステル；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリジオキサノン；ポリカーボネート；ポリアミノカーボネート；ポリ（ビニルピロリドン）；ポリ（エチルオキサゾリン）；ポリウレタン；カルボキシメチルセルロース；ヒドロキシアルキル化セルロース；ポリペプチド；核酸；修飾核酸；ロックド核酸；多糖類；炭水和物；ヘパリン硫酸；コンドロイチン硫酸；ヘパリン、アルギン酸；及びそれらの組合せからなる群より選択される）。
【請求項２３】
式（Ｖ）の繰り返し単位を含むポリマー材料：
【化７】
2018507908.tif 000007
（式中、Ｘはポリペプチドであり、ｔ≧１であり、Ｃｔは、少なくとも１つの炭素原子を含むリンカーであり、ここでＣｔリンカーを含むＸの各残基は、天然アミノ酸残基、稀少アミノ酸残基、非天然アミノ酸残基、アミノ酸類似体残基、又はアミノ酸模倣体残基からなる群より選択されうる（但し、前記Ｃｔリンカーを含む天然アミノ酸残基は、システイン残基ではない）と共に、Ｙは、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）；ポリグリコリド（ＰＧＡ）；ＰＬＡとＰＧＡとのコポリマー（ＰＬＧＡ）；ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）；ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）；ポリ（エチレンオキシド）；ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）ブロックコポリマー；ポロキサミン；ポリ無水物；ポリオルトエステル；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリジオキサノン；ポリカーボネート；ポリアミノカーボネート；ポリ（ビニルピロリドン）；ポリ（エチルオキサゾリン）；ポリウレタン；カルボキシメチルセルロース；ヒドロキシアルキル化セルロース；ポリペプチド；核酸；修飾核酸；ロックド核酸；多糖類；炭水和物；ヘパリン硫酸；コンドロイチン硫酸；ヘパリン、アルギン酸；及びそれらの組合せからなる群より選択され、ここで
【化８】
2018507908.tif 000008
は、式（Ｖ）のポリマー部分の別のサブ単位のチオエーテル部分に対する付着点を表す）。
【請求項２４】
式（VI）の繰り返し単位を含むポリマー材料：
【化９】
2018507908.tif 000009
（式中、Ｘはポリペプチドであり、ｔ≧１であり、Ｃｔは、少なくとも１つの炭素原子を含むリンカーであり、ここでＣｔリンカーを含むＸの各残基は、天然アミノ酸残基、稀少アミノ酸残基、非天然アミノ酸残基、アミノ酸類似体残基、又はアミノ酸模倣体残基からなる群より選択されうる（但し、前記Ｃｔリンカーを含む天然アミノ酸残基は、システイン残基ではない）と共に、Ｙは、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）；ポリグリコリド（ＰＧＡ）；ＰＬＡとＰＧＡとのコポリマー（ＰＬＧＡ）；ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）；ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）；ポリ（エチレンオキシド）；ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）ブロックコポリマー；ポロキサミン；ポリ無水物；ポリオルトエステル；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリジオキサノン；ポリカーボネート；ポリアミノカーボネート；ポリ（ビニルピロリドン）；ポリ（エチルオキサゾリン）；ポリウレタン；カルボキシメチルセルロース；ヒドロキシアルキル化セルロース；ポリペプチド；核酸；修飾核酸；ロックド核酸；多糖類；炭水和物；ヘパリン硫酸；コンドロイチン硫酸；ヘパリン、アルギン酸；及びそれらの組合せからなる群より選択され、ここで
【化１０】
2018507908.tif 000010
は、式（VI）のポリマー部分の別のサブ単位のチオエーテル部分に対する付着点を表す）。
【請求項２５】
ある状態又は障害を、それを必要とする対象において治療するための医薬組成物であって、請求項１０の修飾ポリペプチド；請求項１３の生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマーと組み合わされた生物活性成分；請求項１５の化合物；請求項１６の化合物；請求項１７のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項１８のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項１９のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項２０の化合物；請求項２１の化合物；請求項２２のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項２３のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；又は請求項２４のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分を含む医薬組成物。
【請求項２６】
請求項１０の修飾ポリペプチド；請求項１３の生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマーと組み合わされた生物活性成分；請求項１５の化合物；請求項１６の化合物；請求項１７のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項１８のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項１９のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項２０の化合物；請求項２１の化合物；請求項２２のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項２３のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；又は請求項２４のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分の使用であって、ある状態又は障害を、それを必要とする対象において治療するための医薬の製造における使用。
【請求項２７】
組織を再生する方法であって、請求項１３の生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマーに封入された細胞又は組織を、損傷又は欠損を有する組織の部位で放出することを含む方法。
【請求項２８】
生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマーを含む組成物 損傷又は欠損を有する組織の部位で産生することを更に含む、請求項２７に係る方法。
【請求項２９】
請求項１０の修飾ポリペプチド；請求項１３の生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマーと組み合わされた生物活性成分；請求項１５の化合物；請求項１６の化合物；請求項１７のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項１８のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項１９のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項２０の化合物；請求項２１の化合物；請求項２２のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項２３のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；又は請求項２４のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分を含むキット。
【請求項３０】
請求項１０の修飾ポリペプチド；請求項１３の生体適合性の架橋された分解性ヒドロゲルポリマーと組み合わされた生物活性成分；請求項１５の化合物；請求項１６の化合物；請求項１７のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項１８のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項１９のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項２０の化合物；請求項２１の化合物；請求項２２のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；請求項２３のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分；又は請求項２４のポリマー材料と組み合わされた生物活性成分を含む製品。