【手続補正書】
【提出日】平成20年7月15日(2008.7.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  細胞増殖生育因子少なくとも１種および細胞付着因子少なくとも１種を発現するように遺伝子的に形質転換された複数の内皮細胞および／または平滑筋細胞でコーティングされた管腔表面を有する合成管状要素を含む人工血管グラフト。
【請求項２】  前記複数の内皮細胞および／または平滑筋細胞の第１の部分は前記細胞増殖生育因子少なくとも１種を発現するように遺伝子的に形質転換され、そして更に前記複数の内皮細胞および／または平滑筋細胞の第２の部分は前記細胞付着因子少なくとも１種を発現するように遺伝子的に形質転換される請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項３】  前記管腔表面はポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、膨張ポリテトラフルオロエチレン（ｅＰＴＦＥ）、ポリエステル繊維、ダクロン（Ｄａｃｒｏｎ（商標））および処理済動物血管よりなる群から選択される物質からなる請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項４】  前記合成管状要素は血管の内断面積に実質的に等価な内断面積のものである請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項５】  前記合成管状要素の前記内断面積は約７〜７００ｍｍ２の範囲である請求項４に記載の人工血管グラフト。
【請求項６】  前記複数の内皮細胞は静脈セグメント、骨髄前駆細胞、末梢血幹細胞および循環内皮細胞よりなる群から選択される原材料に由来するものである請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項７】  前記複数の内皮細胞および／または平滑筋細胞は人工血管グラフトのレシピエントに由来するものである請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項８】  前記複数の内皮細胞および／または平滑筋細胞はヒトまたは動物のドナーに由来するものである請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項９】  前記複数の内皮細胞は前記内管腔表面に全面生育した単層を形成する請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項１０】  前記細胞増殖生育因子少なくとも１種がＶＥＧＦ、酸性または塩基性のＦＧＦおよびＨＧＦよりなる群から選択される請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項１１】  前記細胞付着因子少なくとも１種がＵＰ５０、ＤＡＮＣＥ、ビトロネクチン、アルブミン、Ｉ型コラーゲン、ＩＶ型コラーゲン、フィブロネクチンおよびラミニンである請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項１２】  前記複数の内皮細胞および／または平滑筋細胞を更に遺伝子的に形質転換してマーカーポリペプチド少なくとも１種を発現できるようにする請求項１に記載の人工血管グラフト。
【請求項１３】  遺伝的に形質転換されて細胞増殖生育因子少なくとも１種および細胞付着因子少なくとも１種を発現する形質転換された内皮細胞または平滑筋細胞。
【請求項１４】  さらに遺伝的に形質転換されてマーカーポリペプチド少なくとも１種を発現する請求項１３に記載の形質転換された内皮細胞または平滑筋細胞。
【請求項１５】  前記内皮細胞は静脈セグメント、骨髄前駆細胞、末梢血幹細胞または循環内皮細胞よりなる群から選択される原材料に由来するものである請求項１３に記載の形質転換された内皮細胞または平滑筋細胞。
【請求項１６】  前記内皮細胞または平滑筋細胞はヒトドナーおよび動物原材料よりなる群から選択される原材料に由来するものである請求項１３に記載の形質転換された内皮細胞または平滑筋細胞。
【請求項１７】  前記細胞増殖生育因子がＶＥＧＦ、酸性または塩基性のＦＧＦおよびＨＧＦよりなる群から選択される請求項１３に記載の形質転換された内皮細胞または平滑筋細胞。
【請求項１８】  前記細胞付着因子はＵＰ５０、ＤＡＮＣＥ、ビトロネクチン、アルブミン、Ｉ型コラーゲン、ＩＶ型コラーゲン、フィブロネクチンおよびラミニンである請求項１３に記載の形質転換された内皮細胞または平滑筋細胞。
【請求項１９】  人工血管グラフトを作成する方法であって：
（ａ）細胞増殖生育因子少なくとも１種および細胞付着因子少なくとも１種を発現するように内皮細胞および／または平滑筋細胞を遺伝子的に形質転換すること；および
（ｂ）前記内皮細胞および／または平滑筋細胞での前記管腔表面の十分なコーティングが得られるまで管腔表面を有する合成管状要素内部に前記内皮細胞および／または平滑筋細胞を培養すること、
を包含する方法。
【請求項２０】  工程（ａ）は前記内皮細胞および／または平滑筋細胞の第１の部分を前記細胞増殖生育因子少なくとも１種を発現するように遺伝子的に形質転換し、そして前記内皮細胞および／または平滑筋細胞の第２の部分を前記細胞付着因子少なくとも１種を発現するように遺伝子的に形質転換することによって実行される請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】  前記工程（ａ）は前記工程（ｂ）の前に行われる請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】  前記工程（ｂ）は前記工程（ａ）の前に行われる請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】  前記内皮細胞は静脈セグメント、骨髄前駆細胞、末梢血幹細胞および循環内皮細胞よりなる群から選択される原材料に由来するものである請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】  前記人工グラフトの前記管腔表面を流動力に供することを更に包含する請求項１９に記載の方法。
【請求項２５】  前記人工グラフトはバイパス手術に用いられる請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】  （ａ）細胞増殖生育因子をコードする第１のポリヌクレオチドセグメント；および
（ｂ）細胞付着因子をコードする第２のポリヌクレオチドセグメント
を包含する核酸発現構築物。
【請求項２７】  前記第１および前記第２のポリヌクレオチドセグメントの少なくとも１種を発現することを目的とするプロモーター配列少なくとも１種を更に包含する請求項２６に記載の核酸発現構築物。
【請求項２８】  前記第１のポリヌクレオチドセグメントは前記第２のポリヌクレオチドセグメントに転写可能に連結されており、前記第１および前記第２のポリヌクレオチドセグメントは前記プロモーター配列少なくとも１種の単一のプロモーター配列の転写制御下にある請求項２７に記載の核酸構築物。
【請求項２９】  前記第１および前記第２のポリヌクレオチドセグメントの間に介在するリンカー配列を更に包含する請求項２８に記載の核酸構築物。
【請求項３０】  前記リンカー配列はＩＲＥＳおよびプロテアーゼ切断認識部位よりなる群から選択される請求項２９に記載の核酸構築物。
【請求項３１】  前記プロモーター少なくとも１種は真核細胞において機能する請求項２６に記載の核酸発現構築物。
【請求項３２】  前記プロモーター少なくとも１種は構成プロモーター、誘導プロモーターおよび組織特異的プロモーターよりなる群から選択される請求項２６に記載の核酸発現構築物。
【請求項３３】  （ｃ）前記第１のポリヌクレオチドセグメントの発現を目的とする第１のプロモーター配列；および、
（ｄ）前記第２のポリヌクレオチドセグメントの発現を目的とする第２のプロモーター配列を更に包含する請求項２６に記載の核酸発現構築物。
【請求項３４】  前記第１のプロモーターおよび前記第２のプロモーターは構成プロモーター、誘導プロモーターおよび組織特異的プロモーターよりなる群から選択される請求項３３に記載の核酸発現構築物。
【請求項３５】  前記誘導プロモーターは同じエフェクター分子により調節可能である請求項３４に記載の核酸発現構築物。
【請求項３６】  マーカーポリペプチドをコードする別のポリヌクレオチドセグメント少なくとも１種を更に包含する請求項２６に記載の核酸発現構築物。
【請求項３７】  前記マーカーポリペプチドは選択ポリペプチドおよびレポーターポリペプチドよりなる群から選択される請求項３６に記載の核酸発現構築物。
【請求項３８】  前記別のポリヌクレオチドセグメント少なくとも１種は前記第１および前記第２のポリヌクレオチドセグメントの前記少なくとも１つに転写可能に連結されている請求項３６に記載の核酸発現構築物。
【請求項３９】  前記別のポリヌクレオチドセグメント少なくとも１種はリンカーセグメントを介して前記第１および前記第２のポリヌクレオチドセグメントの少なくとも１つに転写可能に連結されている請求項３６に記載の核酸構築物。
【請求項４０】  前記リンカー配列はＩＲＥＳおよびプロテアーゼ切断認識部位よりなる群から選択される請求項３９に記載の核酸構築物。
【請求項４１】  前記別のポリヌクレオチドセグメント少なくとも１種は前記第１および前記第２のポリヌクレオチドセグメントの少なくとも１つに転写可能に融合されている請求項３６に記載の核酸構築物。
【請求項４２】  （ａ）細胞増殖生育因子をコードする第１のポリヌクレオチドセグメントを含む第１の核酸発現構築物；および
（ｂ）細胞付着因子をコードする第２のポリヌクレオチドセグメントを含む第２の核酸発現構築物、
を含む核酸発現構築物系。
【請求項４３】  前記第１および前記第２の核酸発現構築物の少なくとも１つはマーカーポリペプチドをコードする更に別のポリヌクレオチドセグメント少なくとも１種を更に含む請求項４２に記載の核酸発現構築物系。
【請求項４４】  前記第１および前記第２のポリヌクレオチドセグメントの少なくとも１種を発現することを目的とするプロモーター配列少なくとも１種を更に包含する請求項４２に記載の核酸発現構築物系。
【請求項４５】  前記プロモーター配列少なくとも１種は真核細胞において機能する請求項４２に記載の核酸発現構築物系。
【請求項４６】  前記プロモーター配列少なくとも１種は構成プロモーター、誘導プロモーターおよび組織特異的プロモーターよりなる群から選択される請求項４２に記載の核酸発現構築物系。
【請求項４７】  前記マーカーポリペプチドは選択ポリペプチドおよびレポーターポリペプチドよりなる群から選択される請求項４３に記載の核酸発現構築物系。
【請求項４８】  前記別のポリヌクレオチドセグメント少なくとも１種は前記第１および前記第２のポリヌクレオチドセグメントの少なくとも１つに転写可能に連結されている請求項４３に記載の核酸発現構築物系。
【請求項４９】  管少なくとも１個に係合するスタンドを含むキットであって、前記管少なくとも１個は核酸発現構築物系を含み、前記核酸発現構築物系が：
（ａ）細胞増殖生育因子をコードする第１のポリヌクレオチドを含む第１の核酸発現構築物；および
（ｂ）細胞付着因子をコードする第２のポリヌクレオチドを含む第２の核酸発現構築物、
を含むキット。
【請求項５０】  管少なくとも１個に係合するスタンドを含むキットであって、前記管少なくとも１個は核酸発現構築物を含み、前記核酸発現構築物が：
（ａ）細胞増殖生育因子をコードする第１のポリヌクレオチド；および
（ｂ）細胞付着因子をコードする第２のポリヌクレオチド、
を含むキット。
【請求項５１】  遺伝子的に形質転換された内皮細胞および／または平滑筋を製造する方法であって：
（ａ）哺乳類組織原材料から内皮細胞および／または平滑筋細胞を得ること；および
（ｂ）細胞増殖生育因子少なくとも１種および細胞付着因子少なくとも１種を発現するように前記内皮細胞および／または平滑筋細胞を形質転換すること、
を包含する方法。
【請求項５２】  内皮細胞および平滑筋細胞でコーティングされた管腔表面を有する合成管状要素を包含する人工血管グラフトであって、前記内皮細胞および平滑筋細胞の少なくとも１つが細胞増殖生育因子少なくとも１種および細胞付着因子少なくとも１種を発現するように遺伝子的に形質転換されている人工血管グラフト。
【請求項５３】  ＵＰ５０およびＶＥＧＦを発現するように遺伝子的に形質転換されている複数の内皮細胞でコーティングされている管腔表面を有する合成管状要素を包含する人工血管グラフト。
【請求項５４】  ＵＰ５０およびＶＥＧＦを発現するように遺伝子的に形質転換されている複数の平滑筋細胞でコーティングされている管腔表面を有する合成管状要素を包含する人工血管グラフト。
【請求項５５】  ＵＰ５０および酸性または塩基性のＦＧＦおよびＨＧＦよりなる群から選択される細胞増殖生育因子を発現するように遺伝子的に形質転換されている複数の内皮細胞および／または平滑筋細胞でコーティングされている管腔表面を有する合成管状要素を包含する人工血管グラフト。
【請求項５６】  人工血管グラフトを製造するための方法であって：
（ａ）前記内皮細胞および／または平滑筋細胞をＵＰ５０およびＶＥＧＦを発現するように遺伝子的に形質転換すること；および
（ｂ）前記内皮細胞および／または平滑筋細胞での前記管腔表面の十分なコーティングが得られるまで、管腔表面を有する合成管状要素内で前記内皮細胞および／または平滑筋細胞を培養すること、
を包含する方法。
【請求項５７】  人工血管グラフトを製造するための方法であって：
（ａ）内皮細胞および平滑筋細胞を準備すること、ただし前記内皮細胞および平滑筋細胞の少なくとも１つはＵＰ５０およびＶＥＧＦを発現するように遺伝子的に形質転換されていること；および
（ｂ）その後、または、同時に、前記内皮細胞および平滑筋細胞での管腔表面の十分なコーティングが得られるまで、管腔表面を有する合成管状要素内で前記内皮細胞および前記平滑筋細胞を培養すること、
を包含する方法。
【請求項５８】  複数の内皮細胞でコーティングされた管腔表面および複数の平滑筋細胞でコーティングされた外部表面を有する合成管状要素を包含する人工血管グラフト。
【請求項５９】  前記複数の内皮細胞が細胞増殖生育因子少なくとも１種および細胞付着因子少なくとも１種を発現するように遺伝子的に形質転換されている請求項５８に記載の人工血管グラフト。
【請求項６０】  前記複数の平滑筋細胞が細胞付着因子少なくとも１種を発現するように遺伝子的に形質転換されている請求項５８に記載の人工血管グラフト。