【手続補正書】
【提出日】平成19年12月25日(2007.12.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  マトリックスに取り込まれた２つまたはそれ以上の細胞集団を含有してなる偽組織であって、該細胞集団は、各々、１つまたはそれ以上の特定のマーカーの数に関して互いに実質的に同一である２つまたはそれ以上の細胞を含み、該２つまたはそれ以上の細胞集団は１つまたはそれ以上の該特定のマーカーの数に関して１つの細胞集団とその他では異なる細胞を含み、少なくとも２つの細胞集団に由来する該細胞は、好ましくはマトリックス中で互いに混合され、より好ましくは実質的に均一な混合物中で混合される、偽組織。
【請求項２】  １つまたはそれ以上のマーカーが、脂質、リポ多糖、糖、タンパク質、ＣＤ−特徴付けありおよびなしの細胞膜構造体、細胞質、ヌクレオチドならびに核酸からなる群より選択される、請求項１記載の偽組織。
【請求項３】  マーカーが、好ましくは、免疫組織学的技術、免疫細胞学的技術、免疫蛍光を用いたハイブリダイゼーション技術および／または免疫酵素学的技術を用いることにより検出可能である、請求項１または２記載の偽組織。
【請求項４】  １つまたはそれ以上のマーカーが、Ｋｉ−６７等の増殖マーカー；エストロゲンレセプター、プロゲステロンレセプターまたはアンドロゲンレセプター等のホルモンレセプター；細胞骨格化合物；血液学的マーカー；ｃ−ｍｙｃ等のオンコジーン産物；細胞膜成分；核結合レセプター；遺伝子増幅、遺伝子欠失、点変異および転座等の染色体異常；ならびに感染性因子からなる群より選択される、請求項１、２および３いずれか記載の偽組織。
【請求項５】  少なくとも１つの細胞集団中の細胞が、インビトロで、培養され、回収され、および／または収集される培養細胞であり、該細胞集団の細胞が任意にトランスフェクトされ、該細胞集団の細胞が、好ましくは互いに実質的に等しく、より好ましくは該実質的に等しい細胞は単一の細胞株である、請求項１〜４いずれか記載の偽組織。
【請求項６】  ２つの異なる細胞集団に由来する細胞の比が１：１０9 〜１０9 ：１の間隔、好ましくは１：２０〜２０：１の間隔にある、請求項１〜５いずれか記載の偽組織。
【請求項７】  マトリックスの材料が、プラスチック、パラフィンおよびパラフィン誘導体、アガロース、非ヘパリン処理血清、コラーゲン、セルロース誘導体、キチン誘導体、キトサン誘導体ならびにそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１〜６いずれか記載の偽組織。
【請求項８】  該１つまたはそれ以上の細胞集団の該細胞が、マトリックスへの取り込みの前または後に固定化または安定化され、該固定化／安定化は、好ましくはホルマリン、グルタルアルデヒド、四酸化オスミウム、酢酸、エタノール、アセトン、ピクリン酸、クロロホルム、二クロム酸カリウムおよび塩化第二水銀からなる群より選択される１つまたはそれ以上の固定剤を用いて行われ、および／またはマイクロ波加熱もしくは凍結により安定化される、請求項１〜７いずれか記載の偽組織。
【請求項９】  １つまたはそれ以上の特定のマーカーの数および／または反応有効性に関して１つの細胞集団とその他とでは異なる細胞を含有する２つまたはそれ以上の細胞集団から構成される偽組織を含有してなる、マーカーを含有する細胞画分の定量および定性のための診断キット。
【請求項１０】  偽組織が請求項１〜８いずれかに規定されるものである、請求項９記載の診断キット。
【請求項１１】  マーカーの検出のための成分または成分のセットをさらに含有してなり、該成分または成分のセットが、好ましくは１つまたはそれ以上の抗体および／またはその活性な誘導体、ＤＮＡもしくはＲＮＡプローブ、合成オリゴ−ヌクレオチド、ＰＮＡ、ＬＮＡを含み、該成分が、好ましくは１つまたはそれ以上の酵素および／または蛍光化合物に連結され得、該成分のセットが、好ましくは酵素および酵素の検出のための試薬である、請求項９または１０記載の診断キット。
【請求項１２】  マーカーがＫｉ−６７タンパク質であり、マーカーの検出のための成分がＫｉ−６７タンパク質に対する抗体であり、該抗体が、好ましくはＭＩＢ（登録商標）ファミリーのメンバー、より好ましくはＭＩＢ（登録商標）−１である、請求項１１記載の診断キット。
【請求項１３】  請求項１〜８いずれかに規定される２つまたはそれ以上の偽組織を含有してなり、該２つまたはそれ以上の偽組織が、１つまたはそれ以上の特定のマーカーに関して、該特定のマーカーに対するマーカー陽性細胞の数の百分率として規定される異なるマーカー指数を有する、請求項９〜１１いずれか記載の診断キット。
【請求項１４】  ｉ）予め決定された質および／または量のマーカーを有する請求項１〜８いずれかに規定される偽組織を提供する工程；
ｉｉ）細胞画分および偽組織をマーカー反応の検出のための成分または成分のセットに供する工程；
ｉｉｉ）偽組織の検出マーカー反応を用いることにより細胞画分のマーカーの質および／または量を測定する工程
を含む、インビトロ診断のために該マーカーによって標識される細胞画分のマーカー指数の定性的および／または定量的な測定のための解析方法。
【請求項１５】  請求項９〜１３いずれかに規定される診断キットを用いて行われる、請求項１４記載の解析方法。
【請求項１６】  １つまたはそれ以上のさらなるマーカーの定性的および／または定量的な測定の工程をさらに含み、該１つまたはそれ以上のさらなるマーカーが、該１つまたはそれ以上のさらなるマーカーについて異なるマーカー指数を有する少なくとも１つの細胞集団を含有する１つまたはそれ以上の偽組織を用いて測定される、請求項１４または１５記載の解析方法。
【請求項１７】  ｉ）１つまたはそれ以上の特定のマーカーの数に関して互いに実質的に同一である細胞を含有する第１の細胞集団を選択する工程；
ｉｉ）該１つまたはそれ以上の特定のマーカーの数に関して互いに実質的に同一である細胞を含有する第２の集団を選択する工程、ここで該第２の細胞集団の該細胞は、１つまたはそれ以上の該特定のマーカーの数に関して該第１の細胞集団の細胞とは異なる、
ｉｉｉ）第１および第２の細胞集団をマトリックスに取り込ませる工程、
を含む、偽組織の製造方法。
【請求項１８】  細胞の第２のグループ中の細胞の数と比較した細胞の第１のグループ中の細胞の数が予め測定され、好ましくは、１：１０9 〜１０9 ：１の間隔にあり、好ましくは、１：２０〜２０：１の間隔にある、請求項１７記載の偽組織の製造方法。
【請求項１９】  細胞を有するマトリックスを、好ましくは約１００μｍまで、より好ましくは５０ｎｍ〜１００μｍの厚みを有する切片、さらにより好ましくは８０〜１２０ｎｍの薄い切片であるか、または２〜５μｍの厚い切片に切断する工程をさらに含む、請求項１６または１７記載の偽組織の製造方法。
【請求項２０】  試料中の１つまたはそれ以上のマーカーの定量および／または定性のための請求項９〜１３いずれか記載の診断キットの使用。
【請求項２１】  増殖指数の測定のための請求項９〜１３いずれか記載の診断キットの使用。
【請求項２２】  癌の診断および治療におけるインビトロ診断のための請求項９〜１３いずれか記載の診断キットの使用。
【請求項２３】  試験試料のマーカー指数の検証のための請求項１〜８いずれかに規定された偽組織の使用。
【請求項２４】  請求項１〜８いずれか記載の偽組織および測定対象の分子の特異的検出のための検出物質を含む、分子の定量的および／または定性的な測定のための検出システム。
【請求項２５】  （ｉ）少なくとも２つの異なる細胞集団を含有する偽組織を提供する工程、ここで該細胞集団は、測定対象の少なくとも１つのマーカーの存在において異なり；該偽組織は、予め測定された質および／または量のマーカーを有する；
（ｉｉ）細胞画分および偽組織を、マーカー反応の検出のための成分または成分のセットに供する工程；
（ｉｉｉ）定性／定量のためのアッセイ内およびアッセイ間の標準として偽組織を用いることによって、細胞画分の少なくとも１つのマーカーの質および／または量を測定する工程
を含む、インビトロ診断のためのマーカーを含む細胞画分のマーカー指数の定量的および／または定性的な測定のための解析方法。
【請求項２６】  該マーカーが、抗体、酵素と連結された化合物、または蛍光化合物により検出される、請求項２５記載の方法。
【請求項２７】  抗体が、Ｋｉ−６７タンパク質に対するものである、請求項２５または２６記載の方法。
【請求項２８】  偽組織がマーカー指数のアッセイ内およびアッセイ間の標準化のために使用されることを特徴とする、インビトロ診断のためのマーカーを含有してなる細胞画分の定量および定性のための診断キット。
【請求項２９】  マーカーがＫｉ−６７タンパク質であり、マーカーの検出のための成分がＫｉ−６７タンパク質に対する抗体である、請求項２８記載の診断キット。
【請求項３０】  試料中の１つまたはそれ以上のマーカーの定量および／または定性のための請求項２８または２９記載の診断キットの使用。
【請求項３１】  増殖指数の測定のための請求項２８または２９記載の診断キットの使用。
【請求項３２】  インビトロ診断ならびに癌の診断および治療のための請求項２８または２９記載の診断キットの使用。
【請求項３３】  少なくとも２つの細胞集団に由来する細胞が、均一に分散されてマトリックス内で互いに混合され、アッセイ内およびアッセイ間の標準化のための測定対象のマーカーを含有する規定の量の細胞を有することを特徴とする、偽組織。
【請求項３４】  試験試料のマーカー指数の検証のための請求項３３記載の偽組織の使用。