【手続補正書】
【提出日】平成20年2月8日(2008.2.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
２またはそれ以上のタンデムに配向したＧＬＰ−１ポリペプチドを含むアルブミン融合蛋白質であって、該ＧＬＰ−１ポリペプチドが、アルブミン、アルブミン断片またはアルブミン変異体に融合された野生型ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−１断片、またはＧＬＰ−１変異体から選択され、該アルブミン断片またはアルブミン変異体が、非融合ＧＬＰ−１ポリペプチドの血清血漿半減期を増加させ、該融合蛋白質が、ＧＬＰ−１活性を有し、該アルブミン融合蛋白質がリーダー配列を含む、アルブミン融合蛋白質。
【請求項２】
該タンデムに配向したＧＬＰ−１ポリペプチドが、少なくとも１つのＧＬＰ−１断片配列に融合された少なくとも１つの野生型ＧＬＰ−１配列から選択される、請求項１記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項３】
該タンデムに配向したＧＬＰ−１ポリペプチドが、少なくとも１つのＧＬＰ−１変異体配列に融合された少なくとも１つの野生型ＧＬＰ−１配列から選択される、請求項１記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項４】
該タンデムに配向したＧＬＰ−１ポリペプチドが、少なくとも１つのＧＬＰ−１変異体配列に融合された少なくとも１つのＧＬＰ−１断片配列から選択される、請求項１記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項５】
少なくとも１つの該ＧＬＰ−１断片またはＧＬＰ−１変異体が、
（ａ）ＧＬＰ−１（９−３６）；
（ｂ）ＧＬＰ−１（７−３６）；または
（ｃ）ＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））
から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項６】
該ＧＬＰ−１断片またはＧＬＰ−１変異体が、２つのタンデムに配向したＧＬＰ−１（７−３６（Ａ８Ｇ））から選択される、請求項５記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項７】
該アルブミン融合蛋白質を発現するコンストラクトを含む宿主細胞から産生される請求項１記載のアルブミン融合蛋白質であって、ここで、該コンストラクトが表２に記載の以下のコンストラクト：
（ａ）コンストラクト番号３６１０；または
（ｂ）コンストラクト番号３６９６
から選択される、アルブミン融合蛋白質。
【請求項８】
アルブミンに融合された２またはそれ以上のタンデムに配向したＧＬＰ−１ポリペプチドを含む請求項１記載のアルブミン融合蛋白質であって、ここで、該ＧＬＰ−１ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：３８７のアミノ酸１〜３０；および
（ｂ）配列番号：３９０のアミノ酸１〜３０
からなる群より選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を含む、アルブミン融合蛋白質。
【請求項９】
該ＧＬＰ−１ポリペプチドが、少なくとも２つの（ａ）のアミノ酸配列を含む、請求項８記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項１０】
該ＧＬＰ−１ポリペプチドが、少なくとも２つの（ｂ）のアミノ酸配列を含む、請求項８記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項１１】
該ＧＬＰ−１ポリペプチドが、少なくとも１つの（ａ）のアミノ酸配列および少なくとも１つの（ｂ）のアミノ酸配列を含む、請求項８記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項１２】
アルブミンに融合された２またはそれ以上のタンデムに配向したＧＬＰ−１ポリペプチドを含む請求項１記載のアルブミン融合蛋白質であって、ここで、該アルブミン融合蛋白質が、
（ａ）配列番号：３１９のアミノ酸２５〜６６９；および
（ｂ）配列番号：３２２のアミノ酸２２〜６６６
からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、アルブミン融合蛋白質。
【請求項１３】
少なくとも２つの該タンデムに配向したＧＬＰ−１ポリペプチドが、アルブミン、アルブミン断片またはアルブミン変異体のＮ末端またはＣ末端で融合された、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項１４】
該アルブミンがヒトアルブミンである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項１５】
配列番号：１を含む請求項１〜１４のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項１６】
２またはそれ以上の該タンデムに配向したＧＬＰ−１ポリペプチドが、遺伝子工学的に、該アルブミン、そのアルブミン断片またはアルブミン変異体に融合された請求項１〜１５のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質をコードするポリヌクレオチド。
【請求項１８】
請求項１７記載の核酸を含むベクター。
【請求項１９】
請求項１８記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項２０】
酵母細胞または哺乳類細胞である、請求項１９記載の宿主細胞。
【請求項２１】
該酵母が、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｋ．ｌａｃｔｉｓまたはＰ．ｐａｓｔｏｒｉｓ
である、請求項２０記載の宿主細胞。
【請求項２２】
該酵母がグリコシル化欠損である、請求項２０または２１記載の宿主細胞。
【請求項２３】
該酵母がグリコシル化およびプロテアーゼ欠損である、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載の宿主細胞。
【請求項２４】
該哺乳類細胞が、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、またはＮＳ０細胞である、請求項２０記載の宿主細胞。
【請求項２５】
グリコシル化された、またはグリコシル化されていない請求項１〜１６のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項２６】
酵母中で発現される請求項１〜１６および２５のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項２７】
該酵母が、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｋ．ｌａｃｔｉｓまたはＰ．ｐａｓｔｏｒｉｓである、請求項２６記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項２８】
該酵母がグリコシル化欠損である、請求項２６または２７記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項２９】
該酵母がグリコシル化およびプロテアーゼ欠損である、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項３０】
哺乳類細胞により発現される請求項１〜１６および２５のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項３１】
該哺乳類細胞が、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、またはＮＳ０細胞である、請求項３０記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項３２】
リーダー配列が、
（ａ）ＨＳＡリーダー配列のプレプロ領域；
（ｂ）キラー毒素リーダー配列；
（ｃ）ＨＳＡ／Ｋｅｘ２リーダー配列；
（ｄ）酵母接合因子アルファシグナル配列；
（ｅ）修飾ＨＳＡ／ｋｅｘ２リーダー配列；
（ｆ）ＭＰＩＦ−１リーダー配列；および
（ｇ）コンセンサスリーダー配列
からなる群より選択される、請求項１〜１６および２５〜３１のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項３３】
リーダー配列が、配列番号：１１２のアミノ酸をコードする修飾ＨＳＡ／Ｋｅｘ２リーダー配列である、請求項３２記載のアルブミン融合蛋白質。
【請求項３４】
請求項１〜１６および２５〜３３のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質および医薬上許容される担体を含む組成物。
【請求項３５】
（ａ）少なくとも１つの請求項１８記載のベクターを含む宿主細胞を形質転換すること；
（ｂ）アルブミン融合蛋白質の発現に適当な条件で宿主細胞を培養すること；および
（ｃ）アルブミン融合蛋白質を単離すること
を含むアルブミン融合蛋白質を産生する方法。
【請求項３６】
さらに、単離されたアルブミン融合蛋白質がリーダー配列を除去するためのプロセシングを受ける、請求項３５記載の方法。
【請求項３７】
請求項１〜１６、２５〜３３および３６のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質の有効量を投与することを含む、疾患、病態、または障害がある患者を処置する方法であって、該疾患、病態、または障害が、高血糖、糖尿病、尿崩症、インスリン抵抗性、インスリン欠乏、脂質異常症、高ケトン血症、肥満症、代謝性障害、体重抑制、食欲抑制、認識機能障害、および記憶喪失、シンドロームＸ、および／または心疾患、感染症、網膜症、潰瘍、免疫障害、および血管障害を伴う糖尿病から選択される、方法。
【請求項３８】
請求項１〜１６、２５〜３３および３６のいずれか一項に記載のアルブミン融合蛋白質の有効量を該患者に投与することを含む、インスリン合成および放出を刺激する、インスリン取り込みに対する脂肪、筋肉もしくは肝組織感受性を亢進する、グルコース取り込みを刺激する、消化作用を遅延する、または患者のグルカゴンの分泌を阻害する方法。
【請求項３９】
コンストラクト番号３６１０を含む宿主細胞から産生されるアルブミン融合蛋白質の有効量を投与することを含む、疾患、病態、または障害がある患者を処置する方法であって、該アルブミン融合蛋白質が、配列番号：３１９のアミノ酸２５〜６６９を含み、該疾患、病態、または障害が、高血糖、糖尿病、尿崩症、インスリン抵抗性、インスリン欠乏、脂質異常症、高ケトン血症、肥満症、代謝性障害、体重抑制、食欲抑制、認識機能障害、および記憶喪失、シンドロームＸ、および／または心疾患、感染症、網膜症、潰瘍、免疫障害、および血管障害を伴う糖尿病から選択される、方法。
【請求項４０】
コンストラクト番号３６１０を含む宿主細胞から産生されるアルブミン融合蛋白質の有効量を該患者に投与することを含む、インスリン合成および放出を刺激する、脂肪、筋肉もしくは肝組織感受性を亢進する、グルコース取り込みを刺激する、消化作用を遅延する、または患者のグルカゴンの分泌を阻害する方法であって、該アルブミン融合蛋白質が、配列番号：３１９のアミノ酸２５〜６６９を含む、方法。