【手続補正書】
【提出日】平成31年3月8日(2019.3.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物細胞の増殖を制御する方法であって、該動物細胞は、該動物細胞における１以上の遺伝子のコード又は非コード配列における遺伝的修飾を含み、該１以上の遺伝子の転写産物が分裂細胞によって発現され、
前記遺伝子修飾は、
ａ）該１以上の遺伝子に転写によって連結される、陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列、ここで前記方法は、該陰性選択マーカの誘導物質により前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を制御することを含む；及び
ｂ）前記１以上の遺伝子に作動可能に連結される外因性の誘導可能な転写活性化因子、ここで前記方法は、該動物細胞と前記外因性の誘導可能な転写活性化因子の誘導因子とを接触させることを含む、前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を制御することを含む、
の１つ又は複数を含む、前記方法。
【請求項２】
a)前記陰性選択マーカを含む前記遺伝子修飾動物細胞の前記増殖の制御は、
i)  前記陰性選択マーカの誘導物質の非存在下で、前記陰性選択マーカを含む前記遺伝子修飾動物細胞を維持することにより、前記陰性選択マーカを含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を可能にするステップ；及び
ii)  前記陰性選択マーカを含む前記動物細胞を前記陰性選択マーカの誘導物質に曝露することにより、前記陰性選択マーカを含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を除去又は阻害するステップ
の１つ又は複数を含む、或いは
b)前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含む前記遺伝子修飾動物細胞の前記増殖の制御は、
i)  前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含む前記遺伝子修飾動物細胞を前記外因性の誘導可能な転写活性化因子の誘導物質に曝露することにより、前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を可能にするステップ；又は
ii)  前記外因性の誘導可能な転写活性化因子の前記誘導物質の非存在下で、前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含む前記動物細胞を維持することにより、前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を阻止又は阻害するステップ
の１つ又は複数を含む、
請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記１以上の遺伝子のコード又は非コード配列における前記遺伝子修飾は、
ａ）前記陰性選択マーカを含むＤＮＡベクター；
ｂ）前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含むＤＮＡベクター；或いは
ｃ）前記陰性選択マーカ及び前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含むＤＮＡベクター
の１つ又は複数による前記１以上の遺伝子のコード又は非コード配列の内への挿入若しくは標的置換を実施するステップを含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記陰性選択マーカを含む前記１以上の遺伝子のコード又は非コード配列の前記遺伝子修飾は、同型接合性、異型接合性、半接合性若しくは化合物異型接合性であり、及び／又は前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含む前記１以上の遺伝子のコード又は非コード配列の遺伝子修飾は、前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含むよう修飾された対立遺伝子のみが前記１以上の遺伝子の機能性の転写産物を生成し得ることを確実にする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記１以上の遺伝子は、表２に列挙される１つ又は複数の遺伝子である、
前記１以上の遺伝子は、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、
前記１以上の遺伝子は、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数である、或いは
前記１以上の遺伝子は、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の２以上である、
請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
a) 前記陰性選択マーカは、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含み、或いは
b) 前記外因性の誘導可能な転写活性化因子は、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記陰性選択マーカが単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記外因性の誘導可能な転写活性化因子が、ｄｏｘ−架橋系である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記動物細胞が、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、シカ、エルク、スイギュウ、雄牛、ラクダ、ラマ、ウサギ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、又は非ヒト霊長類細胞からなる群より選択される哺乳動物細胞又は鳥類細胞である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記動物細胞が、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞である、或いはこれらに由来するものである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法に従って動物細胞集団の増殖を制御する方法。
【請求項１２】
細胞増殖を制御するための少なくとも１つの機構を含むように遺伝子修飾された動物細胞であって、該遺伝子修飾された動物細胞は、
該動物細胞における１以上の遺伝子のコード又は非コード配列における遺伝子修飾を含み、前記１以上の遺伝子の転写産物が分裂細胞によって発現され、前記遺伝子修飾は、
ａ）前記１以上の遺伝子に転写によって連結される陰性選択マーカと；
ｂ）前記１以上の遺伝子に作動可能に連結される外因性の誘導可能な転写活性化因子と、
の１以上を含む、前記動物細胞。
【請求項１３】
前記１以上の遺伝子のコード又は非コード配列の前記遺伝子修飾は、
ａ）前記陰性選択マーカを含むＤＮＡベクター；
ｂ）前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含むＤＮＡベクター；又は
ｃ）前記陰性選択マーカ及び前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含むＤＮＡベクター
の１つ又は複数による前記１以上の遺伝子のコード又は非コード配列の内への挿入若しくは標的置換を実施するステップを含む、請求項１２に記載の遺伝子修飾動物細胞。
【請求項１４】
前記陰性選択マーカを含む前記１以上の遺伝子のコード又は非コード配列の前記遺伝子修飾は、同型接合性、異型接合性、半接合性若しくは化合物異型接合性であり、及び／又は前記外因性の誘導可能な転写活性化因子含む前記１以上の遺伝子のコード又は非コード配列の前記遺伝子修飾は、前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含むよう修飾された対立遺伝子のみが前記１以上の遺伝子の機能性の転写産物を生成し得ることを確実にする、請求項１２又は１３に記載の遺伝子修飾動物細胞。
【請求項１５】
a)前記１以上の遺伝子は、表２に列挙される遺伝子の１つ又は複数である、
b)前記１以上の遺伝子は、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、
c)前記１以上の遺伝子は、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数である、或いは
d)前記１以上の遺伝子は、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の２以上である、
請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の遺伝子修飾動物細胞。
【請求項１６】
a)前記陰性選択マーカが、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含む、又は
b) 前記外因性の誘導可能な転写活性化因子が、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系である、
請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の遺伝子修飾動物細胞。
【請求項１７】
前記陰性選択マーカが単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、請求項１６に記載の動物細胞。
【請求項１８】
前記外因性の誘導可能な転写活性化因子が、ｄｏｘ−架橋系である、請求項１６に記載の動物細胞。
【請求項１９】
前記動物細胞は、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、シカ、エルク、スイギュウ、雄牛、ラクダ、ラマ、ウサギ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、又は非ヒト霊長類細胞からなる群より選択される哺乳動物細胞又は鳥類細胞である、請求項１２〜１８のいずれか一項に記載の遺伝子修飾動物細胞。
【請求項２０】
前記動物細胞は、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞である、或いはこれらに由来するものである、請求項１２〜１９のいずれか一項に記載の遺伝子修飾動物細胞。
【請求項２１】
請求項１２〜２０のいずれか一項に記載の遺伝子修飾動物細胞を含む集団。
【請求項２２】
動物細胞における１以上の遺伝子のコード又は非コード配列を修飾するためのＤＮＡベクターであって、前記１以上の遺伝子の転写産物は分裂細胞によって発現され、かつ、前記ＤＮＡベクターは、
a)前記１以上の遺伝子に転写によって連結される陰性選択マーカ、
b)前記１以上の遺伝子に作動可能に連結される外因性の誘導可能な転写活性化因子、又は
c)前記１以上の遺伝子に転写によって連結される陰性選択マーカ、及び前記１以上の遺伝子に作動可能に連結される外因性の誘導可能な転写活性化因子、
を含む、前記ＤＮＡベクター。
【請求項２３】
a)前記１以上の遺伝子は、表２に列挙される遺伝子の１つ又は複数である、
b)前記１以上の遺伝子は、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、
c)前記１以上の遺伝子は、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数である、或いは
d)前記１以上の遺伝子は、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の２以上である、
請求項２２に記載のＤＮＡベクター。
【請求項２４】
a)前記陰性選択マーカが、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含む、又は
b)前記外因性の誘導可能な転写活性化因子が、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系である、
請求項２２又は２３に記載のＤＮＡベクター。
【請求項２５】
前記陰性選択マーカが単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、請求項２４に記載のＤＮＡベクター。
【請求項２６】
前記外因性の誘導可能な転写活性化因子が、ｄｏｘ−架橋系である、請求項２４に記載のＤＮＡベクター。
【請求項２７】
a) 増殖している宿主細胞への前記陰性選択マーカを含むDNAベクターの組込みが、該宿主細胞を該陰性選択マーカの誘導物質に暴露したときに該増殖している宿主細胞の死を促進する、又は
b) 増殖している宿主細胞への前記外因性の誘導可能な転写活性化因子を含むDNAベクターの組込みが、該宿主細胞を該外因性の誘導可能な転写活性化因子の誘導物質に暴露したときに該宿主細胞の増殖を促進する、
請求項２２〜２６のいずれか１項に記載のDNAベクター。
【請求項２８】
前記１以上の遺伝子の前記転写産物が、内因性である、細胞分裂中に発現される、及び／又は、細胞分裂に必須である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
被験体の処置に使用するための、請求項１２〜２０のいずれか１項に記載の遺伝子修飾された動物細胞。
【請求項３０】
被験体の処置に使用するための、請求項２１に記載の遺伝子修飾された細胞の集団。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７０】
Nagy A.et al.Manipulating the Mouse Embryo.(2003)
本発明は以下の実施形態を包含する。   
[１]  動物細胞の増殖を制御する方法であって、
−  動物細胞を用意するステップ；
−  前記動物細胞において、細胞分裂遺伝子座（ＣＤＬ）を遺伝子修飾するステップであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記ＣＤＬの前記遺伝子修飾は、
ａ）アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系であって、前記ＣＤＬをコードするＤＮＡ配列に転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列を含む、アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系と；
ｂ）ＣＤＬの調節の誘導性外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系であって、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含む、ＣＤＬの調節の誘導性外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系と
の１つ又は複数を含む、ステップ；
−  前記陰性選択マーカの誘導物質を用いて、前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を制御するステップ；及び／又は
−  前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の誘導物質を用いて、前記ＥＡＲＣ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を制御するステップ
を含む方法。   
[２]  前記ＡＬＩＮＫ修飾動物細胞の前記制御は、
−  前記陰性選択マーカの誘導物質の非存在下で、前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞を維持することにより、前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を可能にするステップ；及び
−  前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記動物細胞を前記陰性選択マーカの前記誘導物質に曝露することにより、前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖をアブレート又は阻害するステップ
の１つ又は複数を含む、実施形態１に記載の方法。   
[３]  前記ＥＡＲＣ修飾動物細胞の前記制御は、
−  前記ＥＡＲＣ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞を前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の誘導物質に曝露することにより、前記ＥＡＲＣ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を可能にするステップ；及び
−  前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の前記誘導物質の非存在下で、前記ＥＡＲＣ系を含む前記動物細胞を維持することにより、前記ＥＡＲＣ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を阻止又は阻害するステップ
の１つ又は複数を含む、実施形態１又は２に記載の方法。   
[４]  前記ＣＤＬの前記遺伝子修飾は、
ａ）前記ＡＬＩＮＫ系を含むＤＮＡベクター；
ｂ）前記ＥＡＲＣ系を含むＤＮＡベクター；及び
ｃ）前記ＡＬＩＮＫ系及び前記ＥＡＲＣ系を含むＤＮＡベクター
の１つ又は複数による前記ＣＤＬの標的置換を実施するステップを含む、実施形態１〜３のいずれかに記載の方法。   
[５]  前記ＣＤＬの前記ＡＬＩＮＫ遺伝子修飾は、同型接合性、異型接合性、半接合性若しくは化合物異型接合性であり、及び／又は前記ＥＡＲＣ遺伝子修飾は、機能性ＣＤＬ修飾がＥＡＲＣ修飾対立遺伝子を通してのみ生成され得ることを確実にする、実施形態１〜４のいずれかに記載の方法。   
[６]  前記ＣＤＬは、表２に列挙される１つ又は複数の遺伝子座である、実施形態１〜５のいずれかに記載の方法。   
[７]  前記ＣＤＬは、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、実施形態６に記載の方法。   
[８]  前記ＣＤＬは、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数であり、好ましくは、前記ＣＤＬはＣｄｋ１又はＣＤＫ１である、実施形態７に記載の方法。   
[９]  前記ＡＬＩＮＫ系は、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含み、好ましくは、前記ＡＬＩＮＫ系は単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、実施形態１〜８のいずれかに記載の方法。   
[１０]  前記ＥＡＲＣ系は、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系であり、好ましくは、前記ＥＡＲＣ系はｄｏｘ−架橋系である、実施形態１〜８のいずれかに記載の方法。   
[１１]  前記動物細胞は、哺乳動物細胞又は鳥類細胞である、実施形態１〜１０のいずれかに記載の方法。   
[１２]  前記哺乳動物細胞は、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、シカ、エルク、スイギュウ、雄牛、ラクダ、ラマ、ウサギ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、又は非ヒト霊長類細胞であり、好ましくは、前記哺乳動物細胞はヒト細胞である、実施形態１１に記載の方法。   
[１３]  前記動物細胞は、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞である、実施形態１〜１２のいずれかに記載の方法。   
[１４]  前記動物細胞は、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞に由来する、実施形態１〜１２のいずれかに記載の方法。   
[１５]  実施形態１〜１４のいずれかに記載の方法に従って動物細胞集団の増殖を制御する方法。   
[１６]  細胞増殖を制御するための少なくとも１つの機構を含むように遺伝子修飾された動物細胞であって、
−  １つ又は複数の細胞分裂遺伝子座（ＣＤＬ）の遺伝子修飾
を含み、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記遺伝子修飾は、
ａ）アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系であって、前記ＣＤＬをコードするＤＮＡ配列に転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列を含む、アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系と；
ｂ）ＣＥＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系であって、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含む、ＣＥＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系と
の１つ又は複数である、動物細胞。   
[１７]  前記ＣＤＬの前記遺伝子修飾は、
ａ）前記ＡＬＩＮＫ系を含むＤＮＡベクター；
ｂ）前記ＥＡＲＣ系を含むＤＮＡベクター；
ｃ）前記ＡＬＩＮＫ系及び前記ＥＡＲＣ系を含むＤＮＡベクター
の１つ又は複数による前記ＣＤＬの標的置換を実施するステップを含む、実施形態１６に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[１８]  前記ＣＤＬの前記ＡＬＩＮＫ遺伝子修飾は、同型接合性、異型接合性、半接合性若しくは化合物異型接合性であり、及び／又は前記ＥＡＲＣ遺伝子修飾は、機能性ＣＤＬ修飾がＥＡＲＣ修飾対立遺伝子を通してのみ生成され得ることを確実にする、実施形態１６又は１７に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[１９]  前記ＣＤＬは、表２に列挙される遺伝子座の１つ又は複数である、実施形態１６〜１８のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２０]  前記ＣＤＬは、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、実施形態１９に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２１]  前記ＣＤＬは、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数であり、好ましくは、前記ＣＤＬはＣｄｋ１又はＣＤＫ１である、実施形態２０に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２２]  前記ＡＬＩＮＫ系は、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含み、好ましくは、前記ＡＬＩＮＫ系は単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、実施形態１６〜２１のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２３]  前記ＥＡＲＣ系は、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系であり、好ましくは、前記ＥＡＲＣ系はｄｏｘ−架橋系である、実施形態１６〜２１のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２４]  前記動物細胞は、哺乳動物細胞又は鳥類細胞である、実施形態１６〜２３のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２５]  前記哺乳動物細胞は、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、シカ、エルク、スイギュウ、雄牛、ラクダ、ラマ、ウサギ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、又は非ヒト霊長類細胞であり、好ましくは、前記哺乳動物細胞はヒト細胞である、実施形態２４に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２６]  前記動物細胞は、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞である、実施形態１６〜２５のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２７]  前記動物細胞は、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞に由来する、実施形態１６〜２５のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２８]  実施形態１６〜２７のいずれかに記載の細胞による遺伝子修飾動物細胞の集団。   
[２９]  細胞分裂遺伝子座（ＣＤＬ）の発現を修飾するためのＤＮＡベクターであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記ＤＮＡベクターは、
−  アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系
を含み、前記ＡＬＩＮＫ系は、前記ＣＤＬに転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列を含み、
前記ＤＮＡベクターが１つ又は複数の宿主細胞に挿入される場合、前記ＤＮＡベクターを含む増殖宿主細胞は、前記ＤＮＡベクターを含む前記増殖宿主細胞が前記陰性選択マーカの誘導物質に曝露されると殺傷されることになる、ＤＮＡベクター。   
[３０]  細胞分裂必須遺伝子座（ＣＤＬ）の発現を修飾するためのＤＮＡベクターであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記ＤＮＡベクターは、
−  ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系
を含み、前記ＥＡＲＣ系は、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含み、
前記ＤＮＡベクターが１つ又は複数の宿主細胞に挿入される場合、前記ＤＮＡベクターを含む増殖宿主細胞は、前記ＤＮＡベクターを含む前記増殖宿主細胞が前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の誘導物質に曝露されなければ殺傷されることになる、ＤＮＡベクター。   
[３１]  細胞分裂必須遺伝子座（ＣＤＬ）の発現を修飾するためのＤＮＡベクターであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記ＤＮＡベクターは、
−  アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系であって、前記ＣＤＬに転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列である、アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系と；
−  ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系であって、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含む、ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系と
を含み、
前記ＤＮＡベクターが１つ又は複数の宿主細胞に挿入される場合、前記ＤＮＡベクターを含む増殖宿主細胞は、前記ＤＮＡベクターを含む前記増殖宿主細胞が前記陰性選択マーカの誘導物質に曝露され、且つ前記ＤＮＡベクターを含む前記増殖宿主細胞が前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の誘導物質に曝露されなければ殺傷されることになる、ＤＮＡベクター。   
[３２]  前記ＣＤＬは、表２に列挙される遺伝子座の１つ又は複数である、実施形態２９〜３１のいずれかに記載のＤＮＡベクター。   
[３３]  前記ＣＤＬは、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、実施形態３２に記載のＤＮＡベクター。   
[３４]  前記ＣＤＬは、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数であり、好ましくは、前記ＣＤＬはＣｄｋ１又はＣＤＫ１である、実施形態３３に記載のＤＮＡベクター。   
[３５]  前記ＡＬＩＮＫ系は、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含み、好ましくは、前記ＡＬＩＮＫ系は単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、実施形態２９又は３１に記載のＤＮＡベクター。   
[３６]  前記ＥＡＲＣ系は、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系であり、好ましくは、前記ＥＡＲＣ系はｄｏｘ−架橋系である、実施形態３０又は３１に記載のＤＮＡベクター。   
[３７]  １つ又は複数の細胞分裂必須遺伝子座（ＣＤＬ）を遺伝子修飾することにより、動物細胞の増殖を制御するためのキットであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記キットは、
−  アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系であって、前記ＣＤＬをコードするＤＮＡ配列に転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列を含む、アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系を含むＤＮＡベクター；及び／又は
−  ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系であって、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含む、ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系を含むＤＮＡベクター；及び／又は
−  ＡＬＩＮＫ系とＥＡＲＣ系とを含むＤＮＡベクターであって、前記ＡＬＩＮＫ系及び前記ＥＡＲＣ系は、それぞれ前記ＣＤＬに作動可能に連結されている、ＤＮＡベクター；並びに
−  前記ＤＮＡベクターの１つ又は複数を用いた動物細胞における前記ＣＤＬの標的置換の指示
を含むキット。   
[３８]  前記ＣＤＬは、表２に列挙される１つ又は複数の遺伝子座である、実施形態３７に記載のキット。   
[３９]  前記ＣＤＬは、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、実施形態３８に記載のキット。   
[４０]  前記ＣＤＬは、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数であり、好ましくは、前記ＣＤＬはＣｄｋ１又はＣＤＫ１である、実施形態３９に記載のキット。   
[４１]  前記ＡＬＩＮＫ系は、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含み、好ましくは、前記ＡＬＩＮＫ系は単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、実施形態３７〜４０のいずれかに記載のキット。   
[４２]  前記ＥＡＲＣ系は、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系であり、好ましくは、前記ＥＡＲＣ系はｄｏｘ−架橋系である、実施形態３７〜４０のいずれかに記載のキット。