【手続補正書】
【提出日】平成20年9月29日(2008.9.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アンチセンス鎖が腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）ｍＲＮＡと相補的であることを特徴とする、約１０ｂｐから約４９ｂｐの二本鎖の領域を形成するセンス鎖とアンチセンス鎖を含む二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）分子。
【請求項２】
前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖が、約１５ｂｐから約３５ｂｐの長さの二本鎖領域を形成する、請求項１に記載の前記ｄｓＲＮＡ分子。
【請求項３】
前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖が、約２１ｂｐから約３０ｂｐの二本鎖領域を形成する、請求項１に記載の前記ｄｓＲＮＡ分子。
【請求項４】
アンチセンス鎖が、ＵＡＧＧＧＵＣＧＧＡＡＣＣＣＡＡＧＣＵＵＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５）の核酸配列を含む腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ）ｍＲＮＡに相補的である、請求項１記載の前記ｄｓＲＮＡ分子。
【請求項５】
ＴＮＦ−αｍＲＮＡが、次の配列：
ＧＣＧＵＧＧＡＧＣＵＧＡＧＡＧＡＵＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ： １０９）；
ＧＣＣＵＧＵＡＧＣＣＣＡＵＧＵＵＧＵＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１０）； 
ＧＧＵＡＵＧＡＧＣＣＣＡＵＣＵＡＵＣＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１１）； 
ＣＣＡＧＧＧＡＣＣＵＣＵＣＵＣＵＡＡＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１２）；
ＧＣＣＣＧＡＣＵＡＵＣＵＣＧＡＣＵＵＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１３）；
ＵＧＡＣＡＡＧＣＣＵＧＵＡＧＣＣＣＡＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１４）； 
ＧＧＵＣＵＡＣＵＵＵＧＧＧＡＵＣＡＵＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１５）； 
ＣＣＣＡＧＧＧＡＣＣＵＣＵＣＵＣＵＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１６）； 
ＡＡＵＣＧＧＣＣＣＧＡＣＵＡＵＣＵＣＧＡＣＵＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１７）；  ＡＡＵＧＧＣＧＵＧＧＡＧＣＵＧＡＧＡＧＡＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１８）；  
ＡＡＣＣＵＣＣＵＣＵＣＵＧＣＣＡＵＣＡＡＧ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １１９）；
ＡＡＣＵＧＡＡＡＧＣＡＵＧＡＵＣＣＧＧＧＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２０）；  
ＡＡＵＣＵＣＧＡＣＵＵＵＧＣＣＧＡＧＵＣＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２１）；
ＡＡＧＧＧＵＧＡＣＣＧＡＣＵＣＡＧＣＧＣＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２２）；  
ＡＡＵＣＡＧＣＣＧＣＡＵＣＧＣＣＧＵＣＵＣ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２３）；      ＡＡＣＣＣＡＵＧＵＧＣＵＣＣＵＣＡＣＣＣＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２４）；      ＡＡＧＣＵＣＣＡＧＵＧＧＣＵＧＡＡＣＣＧＣ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２５）；      ＡＡＧＵＣＡＧＡＵＣＡＵＣＵＵＣＵＣＧＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２６）；      ＡＡＧＧＧＡＣＣＵＣＵＣＵＣＵＡＡＵＣＡＧ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２７）； 
ＣＣＵＣＡＧＣＣＵＣＵＵＣＵＣＣＵＵＣＣＵＧＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２８）；  ＡＡＵＣＣＵＣＡＧＣＣＵＣＵＵＣＵＣＣＵＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １２９）； 
ＡＡＣＣＡＡＵＧＣＣＣＵＣＣＵＧＧＣＣＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １３０）； 
ＣＵＧＡＵＵＡＡＧＵＵＧＵＣＵＡＡＡＣＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １３１）； 
ＣＣＧＡＣＵＣＡＧＣＧＣＵＧＡＧＡＵＣＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １３２）；
ＣＵＵＧＵＧＡＵＵＡＵＵＵＡＵＵＡＵＵＵＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １３３）； 
ＡＡＧＣＣＵＧＵＡＧＣＣＣＡＵＧＵＵＧＵＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １３４）；
ＣＵＧＡＡＡＧＣＡＵＧＡＵＣＣＧＧＧＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １３６）；
ＡＧＧＣＧＧＵＧＣＵＵＧＵＵＣＣＵＣＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １３７）； 
ＣＣＡＣＣＡＣＧＣＵＣＵＵＣＵＧＣＣＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １３８）；
ＡＧＧＧＡＣＣＵＣＵＣＵＣＵＡＡＵＣＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １３９）； 
ＵＧＡＣＡＡＧＣＣＵＧＵＡＧＣＣＣＡＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４０）； 
ＧＣＣＵＧＵＡＧＣＣＣＡＵＧＵＵＧＵＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４１）；
ＵＡＧＣＣＣＡＵＧＵＵＧＵＡＧＣＡＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４２）； 
ＣＣＡＡＵＧＣＣＣＵＣＣＵＧＧＣＣＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４３）； 
ＣＣＡＡＵＧＧＣＧＵＧＧＡＧＣＵＧＡＧ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４４）； 
ＧＧＣＧＵＧＧＡＧＣＵＧＡＧＡＧＡＵＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４５）； 
ＧＣＧＵＧＧＡＧＣＵＧＡＧＡＧＡＵＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４６）；
ＧＣＣＵＧＵＡＣＣＵＣＡＵＣＵＡＣＵＣ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４７）； 
ＣＣＵＣＣＵＣＵＣＵＧＣＣＡＵＣＡＡＧ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４８）；
ＧＧＵＡＵＧＡＧＣＣＣＡＵＣＵＡＵＣＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １４９）；
ＧＣＵＧＧＡＧＡＡＧＧＧＵＧＡＣＣＧＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５０）； 
ＧＡＧＡＡＧＧＧＵＧＡＣＣＧＡＣＵＣＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５１）； 
ＧＣＣＣＧＡＣＵＡＵＣＵＣＧＡＣＵＵＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５２）；
ＧＣＡＧＧＵＣＵＡＣＵＵＵＧＧＧＡＵＣ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５３）； 
ＧＧＵＣＵＡＣＵＵＵＧＧＧＡＵＣＡＵＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５４）； 
ＵＧＧＧＡＵＣＡＵＵＧＣＣＣＵＧＵＧＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５５）；
ＧＧＵＣＧＧＡＡＣＣＣＡＡＧＣＵＵＡＧ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５６）；
ＣＣＡＧＡＡＵＧＣＵＧＣＡＧＧＡＣＵＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５７）；
ＧＡＧＡＡＧＡＣＣＵＣＡＣＣＵＡＧＡＡ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５８）；
ＧＡＡＧＡＣＣＵＣＡＣＣＵＡＧＡＡＡＵ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １５９）；
ＣＣＡＧＡＵＧＵＵＵＣＣＡＧＡＣＵＵＣ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １６０）；
ＣＵＡＵＵＵＡＵＧＵＵＵＧＣＡＣＵＵＧ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １６１）；
ＵＣＵＡＡＡＣＡＡＵＧＣＵＧＡＵＵＵＧ  （ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １６２）；及び
より選択される配列を含む、請求項１記載のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項６】
ｄｓＲＮＡ分子がポリヌクレオチド送達促進ペプチドと共に製剤化される、請求項１のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項７】
前記ペプチドが、下記の配列：
KGSKKAVTKAQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 59); KKAVTKAQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 165); VTKAQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 166); AQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 167); KDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 168);
KKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 169); 
KRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 170);
RKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 171); 
SYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 172);
VYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 173)及び
YKVLKQ (SEQ ID NO: 174)、
からなる群から選択されることを、請求項６のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項８】
前記ペプチドが、ｄｓＲＮＡと複合又は共役していることを特徴とする請求項７のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項９】
前記製剤が、さらに、カチオン脂質を含む請求項７記載のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１０】
カチオン脂質が、非カチオン脂質と併用されることもある請求項９記載のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１１】
非カチオン脂質が中性脂質である請求項１０記載のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１２】
前記中性脂質が、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジフィタノイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰｈＰＥ）又はコレステロールである請求項１１のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１３】
前記ｄｓＲＮＡ分子が、さらに治療剤と併用して用いられるものであり、前記治療剤が、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、メソトレキセート、金化合物、Ｄ−ペニシラミン、抗マラリア剤、スルファサラジン、グルココルチコイド、インフリキシマブ、及びエントラセプトからなる群から選択される、請求項１記載のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１４】
ｄｓＲＮＡ分子が、約１０ｂｐから約４９ｂｐの領域で二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）分子を形成するセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、前記アンチセンス鎖が腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）ｍＲＮＡに相補的である、二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）分子に結合するペプチドを含む医薬組成物。
【請求項１５】
前記センス鎖と前記アンチセンス鎖が約１５ｂｐから約３５ｂｐの領域の二本鎖を形成する請求項１４記載のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１６】
前記センス鎖と前記アンチセンス鎖が約２１ｂｐから約３０ｂｐの領域の二本鎖を形成する請求項１４記載のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１７】
アンチセンス鎖が、核酸配列UAGGGUCGGAACCCAAGCUUA (SEQ ID NO: 135)の核酸配列を含む腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）ｍＲＮＡに相補的である請求項１４に記載のｄｓＲＮＡ分子。
【請求項１８】
前記ＴＮＦ−αｍＲＮＡが、GCGUGGAGCUGAGAGAUAA (SEQ ID NO: 109); GCCUGUAGCCCAUGUUGUA (SEQ ID NO: 110); GGUAUGAGCCCAUCUAUCU (SEQ ID NO: 111); CCAGGGACCUCUCUCUAAU (SEQ ID NO: 112); GCCCGACUAUCUCGACUUU (SEQ ID NO: 113); UGACAAGCCUGUAGCCCAU (SEQ ID NO: 114); GGUCUACUUUGGGAUCAUU (SEQ ID NO: 115); 及び CCCAGGGACCUCUCUCUAA (SEQ ID NO: 116)、からなる群から選択される配列を含む請求項１４に記載の組成物。
【請求項１９】
前記ＴＮＦ−αｍＲＮＡが、次の配列：
AAUCGGCCCGACUAUCUCGACUU (SEQ ID NO: 117);
AAUGGCGUGGAGCUGAGAGAU (SEQ ID NO: 118); AACCUCCUCUCUGCCAUCAAG (SEQ ID NO: 119); AACUGAAAGCAUGAUCCGGGA (SEQ ID NO: 120); AAUCUCGACUUUGCCGAGUCU (SEQ ID NO: 121); AAGGGUGACCGACUCAGCGCU (SEQ ID NO: 122); AAUCAGCCGCAUCGCCGUCUC (SEQ ID NO: 123); AACCCAUGUGCUCCUCACCCA (SEQ ID NO: 124); AAGCUCCAGUGGCUGAACCGC (SEQ ID NO: 125); AAGUCAGAUCAUCUUCUCGAA (SEQ ID NO: 126); AAGGGACCUCUCUCUAAUCAG (SEQ ID NO: 127); CCUCAGCCUCUUCUCCUUCCUGA (SEQ ID NO: 128); AAUCCUCAGCCUCUUCUCCUU (SEQ ID NO: 129); AACCAAUGCCCUCCUGGCCAA (SEQ ID NO: 130); CUGAUUAAGUUGUCUAAACAA (SEQ ID NO: 131); CCGACUCAGCGCUGAGAUCAA (SEQ ID NO: 132); CUUGUGAUUAUUUAUUAUUUA (SEQ ID NO: 133); AAGCCUGUAGCCCAUGUUGUA   (SEQ ID NO: 134);及び  UAGGGUCGGAACCCAAGCUUA         (SEQ ID NO: 135)、
からなる群から選択される配列を含む請求項１４記載の組成物。
【請求項２０】
前記ＴＮＦ−αｍＲＮＡが、
CUGAAAGCAUGAUCCGGGA (SEQ ID NO: 136); AGGCGGUGCUUGUUCCUCA (SEQ ID NO: 137); CCACCACGCUCUUCUGCCU (SEQ ID NO: 138); AGGGACCUCUCUCUAAUCA (SEQ ID NO: 139); UGACAAGCCUGUAGCCCAU (SEQ ID NO: 140); GCCUGUAGCCCAUGUUGUA (SEQ ID NO: 141); UAGCCCAUGUUGUAGCAAA (SEQ ID NO: 142); CCAAUGCCCUCCUGGCCAA (SEQ ID NO: 143); CCAAUGGCGUGGAGCUGAG (SEQ ID NO: 144); GGCGUGGAGCUGAGAGAUA (SEQ ID NO: 145); GCGUGGAGCUGAGAGAUAA (SEQ ID NO: 146); GCCUGUACCUCAUCUACUC (SEQ ID NO: 147);  CCUCCUCUCUGCCAUCAAG (SEQ ID NO: 148); GGUAUGAGCCCAUCUAUCU (SEQ ID NO: 149); GCUGGAGAAGGGUGACCGA (SEQ ID NO: 150); GAGAAGGGUGACCGACUCA (SEQ ID NO: 151); GCCCGACUAUCUCGACUUU (SEQ ID NO: 152); GCAGGUCUACUUUGGGAUC (SEQ ID NO: 153); GGUCUACUUUGGGAUCAUU (SEQ ID NO: 154); UGGGAUCAUUGCCCUGUGA (SEQ ID NO: 155); GGUCGGAACCCAAGCUUAG (SEQ ID NO: 156); CCAGAAUGCUGCAGGACUU (SEQ ID NO: 157); GAGAAGACCUCACCUAGAA (SEQ ID NO: 158); GAAGACCUCACCUAGAAAU (SEQ ID NO: 159); CCAGAUGUUUCCAGACUUC (SEQ ID NO: 160); CUAUUUAUGUUUGCACUUG (SEQ ID NO: 161); UCUAAACAAUGCUGAUUUG (SEQ ID NO: 162)、及び
GACCAACUGUCACUCAUU (SEQ ID NO: 163)、
からなる群から選択される配列を含むことを特徴とする請求項１４記載の組成物。
【請求項２１】
前記ペプチドが、KGSKKAVTKAQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 59); KKAVTKAQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 165); VTKAQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 166); AQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 167); KDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 168); KKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 169); KRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 170); RKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 171); SYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 172); VYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 173); 及び YKVLKQ (SEQ ID NO: 174)、
からなる群から選択される配列を含むことを特徴とする請求項１４記載の組成物。
【請求項２２】
さらに、カチオン脂質を含む請求項１４記載の組成物。
【請求項２３】
カチオン性脂質が、非カチオン脂質と併用されることもある請求項２２記載の組成物。
【請求項２４】
非カチオン性脂質が、中性脂質である請求項２３記載の組成物。
【請求項２５】
前記中性脂質が、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジフィタノイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰｈＰＥ）又はコレステロールである請求項２４の組成物。
【請求項２６】
炎症性疾患を治療又は予防に十分な量で被験者に請求項１記載のｄｓＲＮＡ分子を、投与することを含む炎症性疾患を治療又は予防する方法。
【請求項２７】
ｄｓＲＮＡ分子が、ポリヌクレオチド送達促進ペプチドと共に製剤化される請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
前記ペプチドが、下記の配列：
KGSKKAVTKAQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 59); KKAVTKAQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 165); VTKAQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 166); AQKKDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 167); KDGKKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 168); KKRKRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 169); KRSRKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 170); RKESYSVYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 171); SYSVYVYKVLKQ  (SEQ ID NO: 172); VYVYKVLKQ (SEQ ID NO: 173) and YKVLKQ (SEQ ID NO: 174)、からなる群から選択される配列を含む請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
前記ペプチドが、ｄｓＲＮＡに、複合又は共役している請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
さらに、カチオン脂質を含む請求項２８記載の方法。
【請求項３１】
前記カチオン脂質が、選択的に非カチオン脂質と併用されることもある、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記非チオン脂質が、中性脂肪である請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
前記中性脂質が、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジフィタノイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰｈＰＥ）又はコレステロールである請求項３２の方法。
【請求項３４】
被験者が、ヒトである請求項２６記載の方法。
【請求項３５】
前記ｄｓＲＮＡ分子が、被験者の血液循環に投与される請求項２６の方法。
【請求項３６】
前記ｄｓＲＮＡ分子が、静脈内に投与される請求項２６記載の方法。
【請求項３７】
前記ｄｓＲＮＡ分子が血液中の白血球に投与される請求項２６記載の方法。
【請求項３８】
前記白血球が単核球である請求項３７記載の方法。
【請求項３９】
前記ｄｓＲＮＡ分子が、さらなる治療剤と併用して投与され、前記さらなる治療剤が、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、メソトレキセート、金化合物、Ｄ−ペニシラミン、抗マラリア剤、スルファサラジン、グルココルチコイド、インフリキシマブ、及びエントラセプトからなる群から選択される請求項２６記載の方法。
【請求項４０】
前記炎症性疾患が、全身性疾患、リウマチ性関節炎、乾癬、及び、乾癬性関節炎からなる群から選択される請求項２６の方法。