【手続補正書】
【提出日】令和1年9月17日(2019.9.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性化された樹状細胞組成物の免疫療法有効性を決定するためのインビトロの方法であって、該方法は、
ｉ）活性化された樹状細胞を調製する工程；
ｉｉ）インターロイキン６（ＩＬ−６）、インターロイキン８（ＩＬ−８）、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）および／もしくは腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）の相対量を決定する工程；
ｉｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの該決定された量と閾値量とを比較する工程；ならびに
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が低い免疫療法有効性の組成物であること；あるいはＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２およびＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を上回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が高い免疫療法有効性の組成物であることを決定する工程
を包含する方法。
【請求項２】
活性化されたＤＣ集団の免疫療法有効性を増大させるためのインビトロの方法であって、該方法は、請求項１に記載の工程（ｉ）から（ｉｉｉ）を含み、さらに、
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回るか否かを決定する工程；ならびに
ｖ）該活性化されたＤＣによるＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全ての生成を誘導して、増大した免疫療法有効性を有する活性化されたＤＣ集団を形成するように、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全ての量を、該閾値量を上回るようにし得る薬剤の十分な量を添加する工程、
を包含する方法。
【請求項３】
患者に由来する活性化された樹状細胞組成物の免疫療法有効性を決定する、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの相対量を、活性化された樹状細胞の投与に応答する患者を選択するための指標とする方法であって、該方法は、請求項１に記載の工程（ｉ）から（ｉｉｉ）を含み、さらに、
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が低い免疫療法有効性の組成物であること、あるいはＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２およびＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を上回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が高い免疫療法有効性の組成物であることを決定する工程を包含し、該閾値を上回るそれら患者が、応答する患者として選択される、方法。
【請求項４】
患者に由来する活性化された樹状細胞組成物の免疫療法有効性を決定する、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの相対量を、活性化された樹状細胞の投与に応答しない患者を選択するための指標とする方法であって、該方法は、請求項１に記載の工程（ｉ）から（ｉｉｉ）を含み、さらに、
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が低い免疫療法有効性の組成物であること、あるいはＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２およびＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を上回る場合には、活性化された樹状細胞組成物が高い免疫療法有効性の組成物であることを決定する工程を包含し、該閾値を下回るそれら患者が、応答しない患者として選択される、方法。
【請求項５】
増大した免疫療法有効性を有する活性化された樹状細胞を生成するための樹状細胞成熟化薬剤を選択するための方法であって、該方法は、請求項１に記載の工程（ｉ）から（ｉｉｉ）を含み、さらに、
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が低い免疫療法有効性の組成物であること、あるいはＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２およびＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を上回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が高い免疫療法有効性の組成物であることを決定し、そして閾値を上回る活性化された樹状細胞の生成を誘導する該樹状細胞成熟化薬剤を選択する工程
を包含する方法。
【請求項６】
前記活性化された樹状細胞は、約５０〜約２００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−６；約５００〜約２０００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−８；少なくとも約３０〜約７０ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＴＮＦα；少なくとも約７５〜約１００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ４０サブユニット；および約１〜３ｎｇ／１００万個細胞／２４時間の生物学的に活性なＩＬ−１２  ｐ７０を生成する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記活性化された樹状細胞は、約７５〜約１５０ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−６；約７５０〜約１５００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−８；少なくとも約１００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ４０；少なくとも約１〜３ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ７０；および少なくとも約３０〜７０ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＴＮＦαを生成する、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記活性化された樹状細胞は、約１００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−６、および１０００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−８、少なくとも約１００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ４０；少なくとも約２ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ７０；ならびに少なくとも約３０ｎｇのＴＮＦαを生成する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記活性化された樹状細胞は、以下のインビトロでの工程：
ｉ）末梢血からヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む細胞集団を単離する工程；
ｉｉ）ヒトＰＢＭＣを含む該細胞集団を、ヒト単球性樹状細胞前駆体に関して富化する工程；
ｉｉｉ）ヒト単球性樹状細胞前駆体に関して富化された該細胞集団を、有効量の樹状細胞分化薬剤を補充した組織培養培地とともに、該ヒト単球性樹状細胞前駆体を未成熟ヒト樹状細胞へと分化させるために十分な期間にわたって培養する工程；
ｉｖ）未成熟ヒト樹状細胞に関して富化された該細胞集団を、有効量の樹状細胞成熟化薬剤とともに培養する工程であって、該未成熟ヒト樹状細胞を活性化する工程；ならびに
ｖ）該活性化されたヒト樹状細胞を単離および洗浄する工程、
によって調製される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記活性化された樹状細胞は、以下のインビトロでの工程：
ｉ）ヒト単球性樹状細胞前駆体を含む細胞集団を単離する工程；
ｉｉ）ヒト単球性樹状細胞前駆体に関して富化された該細胞集団を、有効量の樹状細胞分化薬剤を補充した組織培養培地とともに、該ヒト単球性樹状細胞前駆体を未成熟ヒト樹状細胞へと分化させるために十分な期間にわたって培養する工程；
ｉｉｉ）未成熟ヒト樹状細胞に関して富化された該細胞集団を、有効量の樹状細胞成熟化薬剤とともに培養する工程であって、該未成熟ヒト樹状細胞を活性化する工程；ならびに
ｉｖ）該活性化されたヒト樹状細胞を単離および洗浄する工程、
によって調製される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記単球性樹状細胞前駆体は、皮膚、脾臓、骨髄、胸腺、リンパ節、臍帯血、または末梢血から得られる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記単球性樹状細胞前駆体細胞は、活性化されていない単球性樹状細胞前駆体である、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記単球性樹状細胞前駆体は、処置される個々の被験体から得られる、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記単球性樹状細胞前駆体は、前記処置される個々の被験体にＨＬＡマッチした健康な個々の被験体から得られる、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記樹状細胞分化薬剤は、いかなる他のサイトカインもなしのＧＭ−ＣＳＦ、またはＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−１３もしくはＩＬ−１５との組み合わせでのＧＭ−ＣＳＦである、請求項９および１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記樹状細胞成熟化薬剤は、不活性化カルメットゲラン桿菌（ＢＣＧ）、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）、リポポリサッカリド（ＬＰＳ）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）、イミダゾキノリン化合物、合成２本鎖ポリリボヌクレオチド、Ｔｏｌｌ様レセプター（ＴＬＲ）のアゴニスト、樹状細胞の成熟化を誘導することが公知の非メチル化ＣｐＧモチーフを含む核酸の配列、またはこれらの任意の組み合わせである、請求項９および１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記不活性化ＢＣＧは、全ＢＣＧ、ＢＣＧの細胞壁構成要素、ＢＣＧ由来リポアラビノマンナン、またはＢＣＧ成分を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記不活性化ＢＣＧは、熱不活性化ＢＣＧ、ホルマリン処理ＢＣＧ、または熱不活性化かつホルマリン処理ＢＣＧである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記有効量のＢＣＧは、約１０５〜１０７ｃｆｕ／ミリリットル  組織培養培地であり、前記有効量のＩＦＮγは、約１００〜約１，０００ユニット／ミリリットル  組織培養培地である、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記イミダゾキノリン化合物は、イミダゾキノリン−４−アミン化合物である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
前記イミダゾキノリン−４−アミン化合物は、４−アミノ−２−エトキシメチル−α，α−ジメチル−１Ｈ−イミダゾール［４，５−ｃ］キノリン−ｌ−５  エタノールまたは１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン、またはこれらの誘導体である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記合成２本鎖ポリリボヌクレオチドは、ポリ［Ｉ］：ポリ［Ｃ（１２）Ｕ］である、請求項１６に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
要旨
この要旨は、以下の詳細な説明においてさらに記載される単純化された形態で概念の選択を導入するために提供される。この要旨は、特許請求された主題の鍵となる特徴を同定することが意図されるのでもなければ、特許請求された主題の範囲を決定する一助として使用されることが意図されるのでもない。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
活性化された樹状細胞組成物の免疫療法有効性を決定するための方法であって、該方法は、
ｉ）活性化された樹状細胞を調製する工程；
ｉｉ）インターロイキン６（ＩＬ−６）、インターロイキン８（ＩＬ−８）、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）および／もしくは腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）の相対量を決定する工程；
ｉｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの該決定された量と閾値量とを比較する工程；ならびに
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が低い免疫療法有効性の組成物であること；あるいはＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２およびＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を上回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が高い免疫療法有効性の組成物であることを決定する工程
を包含する方法。
（項目２）
活性化されたＤＣ集団の免疫療法有効性を増大させるための方法であって、該方法は、
ｉ）活性化された樹状細胞集団を調製する工程；
ｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの相対量を決定する工程；
ｉｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの該決定された量と閾値量とを比較する工程；
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回るか否かを決定する工程；ならびに
ｖ）該活性化されたＤＣによるＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全ての生成を誘導して、増大した免疫療法有効性を有する活性化されたＤＣ集団を形成するように、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全ての量を、該閾値量を上回るようにし得る薬剤の十分な量を添加する工程、
を包含する方法。
（項目３）
活性化された樹状細胞の投与に応答する患者を、該患者に由来する活性化された樹状細胞組成物の免疫療法有効性を決定することによって選択するための方法であって、該方法は、
ｉ）活性化された樹状細胞を調製する工程；
ｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの相対量を決定する工程；
ｉｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの該決定された量と閾値量とを比較する工程；ならびに
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が低い免疫療法有効性の組成物であること、あるいはＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２およびＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を上回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が高い免疫療法有効性の組成物であることを決定し、そして該閾値を上回るそれら患者を、応答する患者として選択する工程を包含する方法。
（項目４）
活性化された樹状細胞の投与に応答しない患者を、該患者に由来する活性化された樹状細胞組成物の免疫療法有効性を決定することによって選択するための方法であって、該方法は、
ｉ）活性化された樹状細胞を調製する工程；
ｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの相対量を決定する工程；
ｉｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの該決定された量と閾値量とを比較する工程；ならびに
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が低い免疫療法有効性の組成物であること、あるいはＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２およびＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を上回る場合には、活性化された樹状細胞組成物が高い免疫療法有効性の組成物であることを決定し、そして該閾値を下回るそれら患者を、応答しない患者として選択する工程
を包含する方法。
（項目５）
増大した免疫療法有効性を有する活性化された樹状細胞を生成するための樹状細胞成熟化薬剤を選択するための方法であって、該方法は、
ｉ）未成熟樹状細胞と試験樹状細胞成熟化薬剤とを接触させることによって、活性化された樹状細胞を調製する工程；
ｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの相対量を決定する工程；
ｉｉｉ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαの該決定された量と閾値量とを比較する工程；ならびに
ｉｖ）ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２および／もしくはＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を下回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が低い免疫療法有効性の組成物であること、あるいはＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２およびＴＮＦαのうちの１種もしくはこれらの任意の組み合わせ、および／または全てが閾値を上回る場合には、該活性化された樹状細胞組成物が高い免疫療法有効性の組成物であることを決定し、そして閾値を上回る活性化された樹状細胞の生成を誘導する該樹状細胞成熟化薬剤を選択する工程
を包含する方法。
（項目６）
前記活性化された樹状細胞は、約５０〜約２００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−６；約５００〜約２０００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−８；少なくとも約３０〜約７０ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＴＮＦα；少なくとも約７５〜約１００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ４０サブユニット；および約１〜３ｎｇ／１００万個細胞／２４時間の生物学的に活性なＩＬ−１２  ｐ７０を生成する、項目１〜５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７）
前記活性化された樹状細胞は、約７５〜約１５０ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−６；約７５０〜約１５００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−８；少なくとも約１００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ４０；少なくとも約１〜３ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ７０；および少なくとも約３０〜７０ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＴＮＦαを生成する、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記活性化された樹状細胞は、約１００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−６、および１０００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−８、少なくとも約１００ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ４０；少なくとも約２ｎｇ／１００万個細胞／２４時間のＩＬ−１２  ｐ７０；ならびに少なくとも約３０ｎｇのＴＮＦαを生成する、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記活性化された樹状細胞は、以下の工程：
ｉ）末梢血からヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む細胞集団を単離する工程；
ｉｉ）ヒトＰＢＭＣを含む該細胞集団を、ヒト単球性樹状細胞前駆体に関して富化する工程；
ｉｉｉ）ヒト単球性樹状細胞前駆体に関して富化された該細胞集団を、有効量の樹状細胞分化薬剤を補充した組織培養培地とともに、該ヒト単球性樹状細胞前駆体を未成熟ヒト樹状細胞へと分化させるために十分な期間にわたって培養する工程；
ｉｖ）未成熟ヒト樹状細胞に関して富化された該細胞集団を、有効量の樹状細胞成熟化薬剤とともに培養する工程であって、該未成熟ヒト樹状細胞を活性化する工程；ならびに
ｖ）該活性化されたヒト樹状細胞を単離および洗浄する工程、
によって調製される、項目１〜５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０）
前記活性化された樹状細胞は、以下の工程：
ｉ）ヒト単球性樹状細胞前駆体を含む細胞集団を単離する工程；
ｉｉ）ヒト単球性樹状細胞前駆体に関して富化された該細胞集団を、有効量の樹状細胞分化薬剤を補充した組織培養培地とともに、該ヒト単球性樹状細胞前駆体を未成熟ヒト樹状細胞へと分化させるために十分な期間にわたって培養する工程；
ｉｉｉ）未成熟ヒト樹状細胞に関して富化された該細胞集団を、有効量の樹状細胞成熟化薬剤とともに培養する工程であって、該未成熟ヒト樹状細胞を活性化する工程；ならびに
ｉｖ）該活性化されたヒト樹状細胞を単離および洗浄する工程、
によって調製される、項目１〜５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１）
前記単球性樹状細胞前駆体は、皮膚、脾臓、骨髄、胸腺、リンパ節、臍帯血、または末梢血から得られる、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
前記単球性樹状細胞前駆体細胞は、活性化されていない単球性樹状細胞前駆体である、項目９〜１１のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３）
前記単球性樹状細胞前駆体は、処置される個々の被験体から得られる、項目９〜１２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４）
前記単球性樹状細胞前駆体は、前記処置される個々の被験体にＨＬＡマッチした健康な個々の被験体から得られる、項目９〜１２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５）
前記樹状細胞分化薬剤は、いかなる他のサイトカインもなしのＧＭ−ＣＳＦ、またはＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−１３もしくはＩＬ−１５との組み合わせでのＧＭ−ＣＳＦである、項目９および１０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６）
前記樹状細胞成熟化薬剤は、不活性化カルメットゲラン桿菌（ＢＣＧ）、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）、リポポリサッカリド（ＬＰＳ）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）、イミダゾキノリン化合物、合成２本鎖ポリリボヌクレオチド、Ｔｏｌｌ様レセプター（ＴＬＲ）のアゴニスト、樹状細胞の成熟化を誘導することが公知の非メチル化ＣｐＧモチーフを含む核酸の配列、またはこれらの任意の組み合わせである、項目９および１０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１７）
前記不活性化ＢＣＧは、全ＢＣＧ、ＢＣＧの細胞壁構成要素、ＢＣＧ由来リポアラビノマンナン、またはＢＣＧ成分を含む、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記不活性化ＢＣＧは、熱不活性化ＢＣＧ、ホルマリン処理ＢＣＧ、または熱不活性化かつホルマリン処理ＢＣＧである、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記有効量のＢＣＧは、約１０５〜１０７ｃｆｕ／ミリリットル  組織培養培地であり、前記有効量のＩＦＮγは、約１００〜約１，０００ユニット／ミリリットル  組織培養培地である、項目１６〜１８のいずれか１項に記載の方法。
（項目２０）
前記イミダゾキノリン化合物は、イミダゾキノリン−４−アミン化合物である、項目１６に記載の方法。
（項目２１）
前記イミダゾキノリン−４−アミン化合物は、４−アミノ−２−エトキシメチル−α，α−ジメチル−１Ｈ−イミダゾール［４，５−ｃ］キノリン−ｌ−５  エタノールまたは１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン、またはこれらの誘導体である、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記合成２本鎖ポリリボヌクレオチドは、ポリ［Ｉ］：ポリ［Ｃ（１２）Ｕ］である、項目１６に記載の方法。