【手続補正書】
【提出日】平成20年1月21日(2008.1.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
fugetactic活性を促進するのに有効な量の単離された熱ショックタンパク質(HSP)または熱ショックタンパク質様タンパク質(HSPLP)あるいはその断片と、医薬品として許容されるキャリヤーとを含む医薬組成物。
【請求項２】
HSPまたはHSPLPが、配列番号3〜7のいずれかのアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
fugetactic活性を促進するのに有効な量の単離されたL-プラスチンまたはL-プラスチン様タンパク質(LPLP)、あるいはその断片と、医薬品として許容されるキャリヤーとを含む医薬組成物。
【請求項４】
L-プラスチンを含むことを特徴とする請求項３記載の医薬組成物。
【請求項５】
L-プラスチンまたはLPLPが、配列番号8のアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項３記載の医薬組成物。
【請求項６】
HSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLPが、分泌型であることを特徴とする請求項１から５いずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項７】
分泌型のHSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLPが、シグナル配列または分泌配列を含むことを特徴とする請求項６記載の医薬組成物。
【請求項８】
対象において遊走細胞のfugetaxisを促進するための医薬の製造における、配列番号3〜8のHSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLP、あるいはその断片から成る薬剤の使用であって、該薬剤がそのような処置を必要とする対象に、対象中の特定部位から遠ざかる遊走細胞のfugetaxisを促進するのに有効な量で投与されることを特徴とする使用。
【請求項９】
前記薬剤が非fugetactic治療剤と同時投与されることを特徴とする請求項８記載の使用。
【請求項１０】
非fugetactic物質が、抗炎症剤または抗アレルギー剤であることを特徴とする請求項９記載の使用。
【請求項１１】
前記特定部位が、炎症部位、医療機器、人工補綴具、移植臓器または組織、自己免疫反応部位、あるいはアレルギー反応部位であることを特徴とする請求項８記載の使用。
【請求項１２】
前記医療機器、人工補綴具、あるいは移植臓器または組織が、異種、幹細胞由来、合成または同種異系移植片であることを特徴とする請求項１１記載の使用。
【請求項１３】
前記医療機器、人工補綴具、あるいは移植臓器または組織が、ステントであることを特徴とする請求項１１記載の使用。
【請求項１４】
前記自己免疫反応部位が、関節にあるかまたはその付近の部位であることを特徴とする請求項１１記載の使用。
【請求項１５】
前記医薬が、全身投与されることを特徴とする請求項８記載の使用。
【請求項１６】
HSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLPが、ターゲッティング分子に結合していることを特徴とする請求項８記載の使用。
【請求項１７】
遊走細胞が造血細胞であることを特徴とする請求項８記載の使用。
【請求項１８】
造血細胞が免疫細胞であることを特徴とする請求項１７記載の使用。
【請求項１９】
免疫細胞がT細胞であることを特徴とする請求項１８記載の使用。
【請求項２０】
fugetactic活性を阻害するのに有効な量の、HSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLPと選択的に結合する抗fugetactic物質と、医薬品として許容されるキャリヤーとを含む医薬組成物。
【請求項２１】
抗fugetactic物質が、配列番号1〜8のいずれかのアミノ酸配列またはその断片と結合していることを特徴とする請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２２】
HSPまたはHSPLPが、約84kDa、約86kDa、または約94kDaの分子量を有することを特徴とする請求項１または２０記載の医薬組成物。
【請求項２３】
HSPまたはHSPLPが、HSP60(シャペロニン)、HSP70およびHSP90より成る群から選択される熱ショックタンパク質(HSP)ファミリーのメンバーであることを特徴とする請求項１または２０記載の医薬組成物。
【請求項２４】
HSPまたはHSPLPが、HSP90αおよびHSP90βより成る群から選択されるhsp90ファミリーのメンバーであることを特徴とする請求項１または２０記載の医薬組成物。
【請求項２５】
L-プラスチンまたはLPLPが、約65kDaの分子量を有することを特徴とする請求項３または２０記載の医薬組成物。
【請求項２６】
L-プラスチンまたはLPLPが、配列番号8のアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２７】
抗fugetactic物質が、単離ペプチド、抗体またはその抗原結合断片であることを特徴とする請求項２０記載記載の医薬組成物。
【請求項２８】
HSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLPが、分泌型であることを特徴とする請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項２９】
分泌型のHSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLPが、シグナル配列または分泌配列を含むことを特徴とする請求項２８記載の医薬組成物。
【請求項３０】
HSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLPが、腫瘍または腫瘍細胞株に由来することを特徴とする請求項１、３または２０記載の医薬組成物。
【請求項３１】
腫瘍または腫瘍細胞株が、血液腫瘍または血液腫瘍細胞株であることを特徴とする請求項３０記載の医薬組成物。
【請求項３２】
血液腫瘍または血液腫瘍細胞株が、白血病またはリンパ腫であることを特徴とする請求項３１記載の医薬組成物。
【請求項３３】
リンパ腫が胸腺腫であることを特徴とする請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３４】
血液腫瘍細胞株がEL4であることを特徴とする請求項３１記載の医薬組成物。
【請求項３５】
fugetactic活性が、造血細胞のものであることを特徴とする請求項２０記載の医薬組成物。
【請求項３６】
造血細胞が免疫細胞であることを特徴とする請求項３５記載の医薬組成物。
【請求項３７】
免疫細胞がT細胞であることを特徴とする請求項３６記載の医薬組成物。
【請求項３８】
対象において免疫反応を誘導または促進するための医薬の製造における請求項２０記載の医薬組成物の使用であって、該組成物が、そのような処置を必要とする対象に、対象中の特定部位で免疫細胞特異的fugetactic活性を阻害するのに有効な量で投与されることを特徴とする使用。
【請求項３９】
前記特定部位がアレルギー反応部位、感染部位または腫瘍部位であることを特徴とする請求項３８記載の使用。
【請求項４０】
前記医薬組成物が局所投与されることを特徴とする請求項８または３８記載の使用。
【請求項４１】
前記医薬組成物がが全身投与されることを特徴とする請求項３８記載の使用。
【請求項４２】
熱ショックタンパク質がターゲッティング分子に結合していることを特徴とする請求項４１記載の使用。
【請求項４３】
抗fugetactic物質が、ゲルダナマイシン、17-A-GA、ハービマイシンA、PU3、ノボビオシンまたはラジシコールであることを特徴とする請求項３８記載の使用。
【請求項４４】
fugetaxisを調節する抗fugetactic物質をスクリーニングする方法であって：
遊走細胞をHSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLPと混合することによってfugetactic活性の対照レベルを特定し；
遊走細胞をHSP、HSPLP、L-プラスチンまたはLPLPおよび候補化合物と混合することによってfugetactic活性の試験レベルを特定し；
fugetactic活性の対照レベルと試験レベルとを比較する；工程を含み、
試験レベルが対照レベルより低い場合に、候補化合物が抗fugetactic物質であることが示唆されることを特徴とするスクリーニング方法。
【請求項４５】
胸腺腫細胞株由来単離物を含む組成物であって、該単離物が、百日咳毒素で阻害可能なfugetactic活性を有し、プロテアーゼ分解性であり、約5kDaより大きな分子量を有し、さらに熱不活性化可能であることを特徴とする組成物。
【請求項４６】
前記単離物のfugetactic活性が、56℃で一時間の熱不活性化、37℃で一時間のプロテイナーゼK消化、ラジシコール、またはブレフェルジンAによって阻害されることを特徴とする請求項４５記載の組成物。
【請求項４７】
前記単離物が、20mMトリエタノールアミン緩衝液および0.25〜0.5M未満の濃度のNaClの存在下でDEAEカラムに有意に結合し、かつヘパリンに有意に結合しないことを特徴とする請求項４５記載の組成物。
【請求項４８】
前記単離物が、pH7.5で負に荷電していることを特徴とする請求項４５記載の組成物。
【請求項４９】
前記単離物の活性が、42℃で一時間の熱ショックによって有意にアップレギュレートされないことを特徴とする請求項４５記載の組成物。
【請求項５０】
前記単離物の分子量が約65kDaより大きいことを特徴とする請求項４５記載の組成物。
【請求項５１】
前記単離物の分子量が約80kDaより大きいことを特徴とする請求項５０記載の組成物。
【請求項５２】
前記単離物の分子量が約90kDaより大きいことを特徴とする請求項５１記載の組成物。
【請求項５３】
胸腺腫細胞株がEL4であることを特徴とする請求項４５記載の組成物。
【請求項５４】
fugetactic活性が、T細胞特異的であることを特徴とする請求項４５記載の組成物。
【請求項５５】
T細胞が、細胞傷害性Tリンパ球(CTL)であることを特徴とする請求項５４記載の組成物。
【請求項５６】
前記単離物が、EL4胸腺腫細胞の上清由来のものであることを特徴とする請求項４５記載の組成物。
【請求項５７】
上清が10倍希釈されていることを特徴とする請求項５６記載の組成物。
【請求項５８】
細胞のfugetaxisを刺激するのに有効な量の請求項４５記載の単離物と、医薬品として許容されるキャリヤーとを含む医薬組成物。
【請求項５９】
fugetaxisが造血細胞のものであることを特徴とする請求項５８記載の医薬組成物。
【請求項６０】
造血細胞が免疫細胞であることを特徴とする請求項５９記載の医薬組成物。
【請求項６１】
免疫細胞がT細胞であることを特徴とする請求項６０記載の医薬組成物。
【請求項６２】
胸腺腫細胞株が、顕著なアポトーシスまたは壊死を生じていないことを特徴とする請求項４５記載の組成物。
【請求項６３】
胸腺腫細胞株の95%より多くが生存していることを特徴とする請求項６２記載の組成物。
【請求項６４】
腫瘍細胞からfugetactic活性を有するポリペプチドを製造する方法であって：
腫瘍細胞を105〜106細胞/mLの密度でハイブリドーマ無血清培地中において培養し；
腫瘍細胞から上清を採取し；
採取した上清を0.2ミクロンフィルターでろ過し；
ろ過した上清を分画し；さらに
fugetactic活性について画分を分析する；工程を含む方法。
【請求項６５】
腫瘍細胞が腫瘍細胞株であることを特徴とする請求項６４記載の方法。
【請求項６６】
細胞株が胸腺腫細胞株であることを特徴とする請求項６５記載の方法。
【請求項６７】
胸腺腫細胞株がEL4であることを特徴とする請求項６６記載の方法。
【請求項６８】
請求項６４から６７いずれか１項記載の方法に基づき製造されたfugetactic活性を有するポリペプチド。
【請求項６９】
約84kDa、約86kDa、約94kDaまたは約65kDaの分子量を有することを特徴とする請求項６８記載のポリペプチド。
【請求項７０】
fugetactic活性が造血細胞特異的であることを特徴とする請求項６８記載のポリペプチド。
【請求項７１】
造血細胞が免疫細胞であることを特徴とする請求項７０記載のポリペプチド。
【請求項７２】
免疫細胞がT細胞であることを特徴とする請求項７１記載のポリペプチド。
【請求項７３】
熱不活性化可能でありかつプロテアーゼ分解性であることを特徴とする請求項６８記載のポリペプチド。
【請求項７４】
fugetactic活性が百日咳毒素で阻害可能であることを特徴とする請求項６８記載のポリペプチド。
【請求項７５】
腫瘍細胞の95%より多くが生存するように腫瘍細胞を培養する工程をさらに含むことを特徴とする請求項６４記載の方法。
【請求項７６】
fugetaxisを調節する抗fugetactic物質をスクリーニングする方法であって：
遊走細胞を請求項４５記載の単離物または請求項６８記載のポリペプチドと混合することによってfugetactic活性の対照レベルを特定し；
遊走細胞を請求項４５記載の単離物または請求項６８記載のポリペプチド、および候補化合物と混合することによってfugetactic活性の試験レベルを特定し、さらに
fugetactic活性の対照レベルと試験レベルとを比較する；工程を含み、
試験レベルが対照レベルより低い場合に、候補化合物が抗fugetactic物質であることが示唆されることを特徴とするスクリーニング方法。
【請求項７７】
遊走細胞が造血細胞であることを特徴とする請求項４４または７６記載の方法。
【請求項７８】
造血細胞が免疫細胞であることを特徴とする請求項７７記載の方法。
【請求項７９】
免疫細胞がT細胞であることを特徴とする請求項７８記載の方法。