【手続補正書】
【提出日】平成19年3月22日(2007.3.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
本発明化合物は、酢酸リュープロレリンなどのＧｎＲＨ超作動薬の投与時に認められる、一過性の血中テストステロン濃度の上昇（フレアー現象）を抑制するために用いることができる。本発明化合物は、酢酸リュープロレリン（Ｌｅｕｐｒｏｒｅｌｉｎ）、ゴナドレリン（Ｇｏｎａｄｒｅｌｉｎ）、ブセレリン（Ｂｕｓｅｒｅｌｉｎ）、トリプトレリン（Ｔｒｉｐｔｏｒｅｌｉｎ）、ゴセレリン（Ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ）、ナファレリン（Ｎａｆａｒｅｌｉｎ）、ヒストレリン（Ｈｉｓｔｒｅｌｉｎ）、デスロレリン（Ｄｅｓｌｏｒｅｌｉｎ）、メテレリン（Ｍｅｔｅｒｅｌｉｎ）、レシレリン（Ｌｅｃｉｒｅｌｉｎ）などのＧｎＲＨ超作動薬（好ましくは酢酸リュープロレリン）と併用して用いることができる。また、本発明化合物は、ステロイド性または非ステロイド性の抗アンドロゲン剤または抗エストロゲン剤、化学療法剤、ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬、α−レダクターゼ阻害薬、α−受容体阻害薬、アロマターゼ阻害薬、１７β−ヒドロキシステロイド脱水素酵素阻害薬、副腎系アンドロゲン産生阻害薬、りん酸化酵素阻害薬、ホルモン療法剤、細胞増殖因子またはその受容体の作用を阻害する薬剤などの少なくとも一種と併用することも有効である。該「化学療法剤」としては、イホスファミド（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、アドリアマイシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、ペプロマイシン（Ｐｅｐｌｏｍｙｃｉｎ）、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、シクロフォスファミド（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、５−ＦＵ、ＵＦＴ、メトレキセート（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、マイトマイシンＣ（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ  Ｃ）、マイトキサントロン（Ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）などがあげられる。該「ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬」としては、セトロレリクス（Ｃｅｔｒｏｒｅｌｉｘ）、ガニレリクス（Ｇａｎｉｒｅｌｉｘ）、アバレリクス（Ａｂａｒｅｌｉｘ）などの非経口投与ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬があげられる。該「副腎系アンドロゲン産生阻害薬」としては、例えばリアーゼ（Ｃ１７，２０−ｌｙａｓｅ）阻害薬などがあげられる。該「りん酸化酵素阻害薬」としては、例えばチロシンりん酸化酵素などがあげられる。該「ホルモン療法剤」としては、抗エストロゲン剤、黄体ホルモン剤（例、ＭＰＡなど）、アンドロゲン剤、エストロゲン剤、抗アンドロゲン剤などがあげられる。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
前立腺癌に対しては、ＧｎＲＨ超作動薬、抗アンドロゲン剤、抗エストロゲン剤、化学療法剤〔例、イホスファミド（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、ＵＦＴ、アドリアマイシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、ペプロマイシン（Ｐｅｐｌｏｍｙｃｉｎ）、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）など〕、ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬、アロマターゼ阻害薬、１７β−ヒドロキシステロイド脱水素酵素阻害薬、副腎系アンドロゲン産生阻害薬、りん酸化酵素阻害薬、ホルモン療法剤〔例、エストロゲン剤（例、ＤＳＢ、ＥＭＰなど）、抗アンドロゲン剤（例、ＣＭＡなど）など〕、細胞増殖因子またはその受容体の作用を阻害する薬剤などの薬剤と本発明の化合物との併用が挙げられる。乳癌に対しては、ＧｎＲＨ超作動薬、抗エストロゲン剤、化学療法剤〔例、シクロフォスファミド（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、５−ＦＵ、ＵＦＴ、メトレキセート（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、アドリアマイシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、マイトマイシンＣ（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ  Ｃ）、マイトキサントロン（Ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）など〕、ペプチド性ＧｎＲＨ拮抗薬、アロマターゼ阻害薬、副腎系アンドロゲン産生阻害薬、りん酸化酵素阻害薬、ホルモン療法剤〔例、抗エストロゲン剤（例、Ｔａｍｏｘｉｆｅｎなど）、黄体ホルモン剤（例、ＭＰＡなど）、アンドロゲン剤、エストロゲン剤など〕、細胞増殖因子またはその受容体の作用を阻害する薬剤などの薬剤と本発明の化合物との併用が挙げられる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
参考例１０
２−［Ｎ−（２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−エトキシカルボニル］アミノ−４−メチル−５−（４−ニトロフェニル）チオフェン−３−カルボン酸エチルエステル
2001278885.tif 000001
参考例９で得られた化合物（４９０ｍｇ，１．３０ｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）溶液に、炭酸カリウム（１９６ｍｇ，１．４２ｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（２３６ｍｇ，１. ４２ｍｏｌ）、２，６−ジフルオロベンジルクロリド（２３２ｍｇ，１．４２ｍｍｏｌ）を加え室温で５時間かくはんした。反応液を濃縮して得られた残渣をクロロホルムと食塩水で分配した。水層をクロロホルムで抽出し、抽出液をあわせて食塩水で洗浄し乾燥（ＭｇＳＯ４）後、溶媒を減圧下に留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してアモルファス結晶を得、メタノールから再結晶して黄色粉末状結晶（５２０ｍｇ，７９％）の標題化合物を得た。
ｍｐ：９１−９２℃．
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．１５−１．３５（６Ｈ，ｍ），２．４０（３Ｈ，ｓ），４．１５−４．２９（４Ｈ，ｍ），４．９７（２Ｈ，ｓ），６．８６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．２５−７．３２（１Ｈ，ｍ），７．５１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．２５（２Ｈ，ｄ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１７，１５９７，１５２４，１４７５，１３９２，１３４８ｃｍ−１．
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７４】
製剤例５
（１）実施例化合物１または実施例化合物４−２                  ５ｇ  
（２）乳糖・結晶セルロース（粒）                          ３３０ｇ  
（３）Ｄ−マンニトール                                      ２９ｇ  
（４）低置換度ヒドロキシプロピルセルロース                  ２０ｇ  
（５）タルク                                                ２５ｇ  
（６）ヒドロキシプロピルセルロース                          ５０ｇ  
（７）アスパルテーム                                          ３ｇ  
（８）グリチルリチン酸二カリウム                              ３ｇ  
（９）ヒドロキシプロピルメチルセルロース２９１０            ３０ｇ
（１０）酸化チタン                                            ３．５ｇ
（１１）黄色三二酸化鉄                                        ０．５ｇ
（１２）軽質無水ケイ酸                                        １ｇ
（１）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）および（８）を精製水に懸濁または溶解し、（２）の核粒にコーティングし素細粒を作製する。この素細粒上に（９）〜（１１）をコーティングしコーティング細粒を作り、（１２）と混合して化合物ＫＭ０５２８３細粒１％、５００ｇを作製する。これを５００ｍｇずつ分包する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７５】
試験例１
（１）１２５Ｉ−リュープロレリンの調製
３×１０−４Ｍ  リュープロレリン水溶液１０μｌ、および０．０１ｍｇ／ｍｌラクトパーオキシダーゼ１０μｌをチューブにとり、Ｎａ１２５Ｉ溶液を１０μｌ（３７ＭＢｑ）加え、かくはん後、０．００１％Ｈ２Ｏ２  １０μｌを加えて、室温で２０分間反応させた。０．０５％ＴＦＡ溶液を７００μｌ加えて反応を停止し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。ＨＰＬＣの条件を以下に示す。１２５Ｉ−リュープロレリンは保持時間２６〜２７分で溶出された。カラム：ＴＳＫｇｅｌ  ＯＤＳ−８０ＴＭ（ＴＭは登録商標であることを示す。以下同様。）
ＣＴＲ（４．６ｍｍｘ１０ｃｍ）溶離液：
溶媒Ａ（０．０５％ＴＦＡ）
溶媒Ｂ（４０％ＣＨ３ＣＮ−０．０５％ＴＦＡ）
０分（１００％溶媒Ａ）−３分（１００％溶媒Ａ）−７分（５０％溶媒Ａ＋５０％溶媒Ｂ）−４０分（１００％溶媒Ｂ）
溶出温度：室温
溶出速度：１ｍｌ／ｍｉｎ
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７８】
（４）１２５Ｉ−リュープロレリン結合阻害率の測定
上記（２）および（３）で調製したラットおよびヒトの膜画分をアッセイバッファーで希釈して、２００μｇ／ｍｌとし、チューブに１８８μｌずつ分注した。ラット下垂体前葉膜画分を使用した場合には、６０％のＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）に溶解した０．１ｍＭの化合物２μｌと、３８ｎＭの１２５Ｉ−リュープロレリン１０μｌとを同時に添加した。ヒトＧｎＲＨレセプター発現ＣＨＯ細胞膜画分を使用した場合には、６０％のＤＭＳＯに溶解した２ｍＭの化合物２μｌと、３８ｎＭの１２５Ｉ−リュープロレリン１０μｌとを同時に添加した。最大結合量を測定するために、６０％のＤＭＳＯ２μｌと、３８ｎＭの１２５Ｉ−リュープロレリン１０μｌとを添加した反応液を調製した。また、非特異的結合量を測定するために、６０％のＤＭＳＯに溶解した１００μＭのリュープロレリン２μｌと、３８ｎＭの１２５Ｉ−リュープロレリン１０μｌとを添加した反応液も同時に調製した。ラット下垂体前葉膜画分を使用した場合には４℃で９０分反応させ、ヒトＧｎＲＨレセプター発現ＣＨＯ細胞膜画分を使用した場合には２５℃で６０分反応させた。反応後、ポリエチレンイミン処理したワットマングラスフィルター（ＧＦ−Ｆ）を用いて反応液を吸引ろ過した。ろ過後、γ−カウンターを用いてろ紙上に残った１２５Ｉ−リュープロレリンの放射活性を測定した。
（ＴＢ−ＳＢ）／（ＴＢ−ＮＳＢ）×１００（ＳＢ：化合物を加えたときの放射活性、ＴＢ：最大結合放射活性、ＮＳＢ：非特異結合放射活性）を計算して、各被検物質の結合阻害率（％）を求めた。また、被検物質の濃度を変化させて阻害率を求め、５０％結合を阻害する被検物質の濃度（ＩＣ５０値）をＨｉｌｌプロットより算出した。結果を以下に示す。
2001278885.tif 000002