【手続補正書】
【提出日】平成20年1月15日(2008.1.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物において少なくとも１つの生物学的に活性なタンパク質を発現する核酸構築物であって、以下：ａ）グリコシル化部位をコードする少なくとも１つの核酸配列およびｂ）生物学的に活性なタンパク質をコードする少なくとも１つの核酸配列を含む、核酸構築物。
【請求項２】
植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合糖タンパク質であって、以下：ａ）少なくとも１つの糖構成単位およびｂ）生物学的に活性な哺乳動物タンパク質を含み、該ａ）少なくとも１つの糖構成単位は、該ｂ）生物学的に活性な哺乳動物タンパク質と共有結合する、哺乳動物融合糖タンパク質。
【請求項３】
請求項２に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここで少なくとも１つの糖構成単位がｉ）Ｘ−ＨｙｐｎまたはＸ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎ、ここでｎは２〜約１０００であり、ｉｉ）Ｈｙｐｎ−Ｘ、ここでｎは、２〜約１０００であり、ｉｉｉ）（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、ここでｎは、１〜約１０００であり、およびｉｖ）（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、ここでｎは、１〜約１０００であるから選択される；
ここで、Ｘは、任意のアミノ酸である、哺乳動物融合糖タンパク質。
【請求項４】
請求項３に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここで前記糖構成成分Ｘ−Ｈｙｐｎ、Ｈｙｐｎ−Ｘ、（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎおよび（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎに関するＸは、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、ＧｌｙおよびＶａｌから選択される、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項５】
請求項４に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここでＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、ＴｈｒおよびＶａｌから選択される、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項６】
請求項３に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここで少なくとも１つの糖構成単位が該タンパク質のＮ−末端およびＣ−末端から選択される位置で共有結合する、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項７】
請求項３に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、少なくとも１つの糖構成単位が生物学的に活性な哺乳動物タンパク質の内部内に存在する、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項８】
請求項２に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、該生物学的に活性な哺乳動物タンパク質が成長ホルモン、成長ホルモンアンタゴニスト、成長ホルモン放出ホルモン、ソマトスタチン、グレリン、レプチン、プロラクチン、誘引活性タンパク質−１、インターロイキン１０、プレイオトロフィン、インターロイキン−７、インターロイキン−８、インターフェロンω、インターフェロンα２、インターフェロンγ、インターロイキン−１、線維芽細胞成長因子６、ＩＦＧ−１、インスリン様成長因子Ｉ、インスリン、エリスロポイエチン、ＧＭＣＳＦおよび任意のヒト化モノクローナル抗体から選択され、
ここで、前記糖構成単位は、ｉ）Ｘ−Ｈｙｐｎ、Ｘ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎ、またはＨｙｐｎ−Ｘ、ここでｎが２〜約１０００であり、および；ｉｉ）（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎまたは（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、ここでｎが１〜約１０００である、を含み；ここで、Ｘは、任意のアミノ酸である、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項９】
請求項８に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここで前記糖構成成分Ｘ−Ｈｙｐｎ、Ｈｙｐｎ−Ｘ、（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎおよび（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎに関するＸは、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、ＧｌｙおよびＶａｌから選択される、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項１０】
請求項９に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここでＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、ＴｈｒおよびＶａｌから選択される、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項１１】
請求項８に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、該生物学的に活性な哺乳動物タンパク質がヒトタンパク質である、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項１２】
請求項８に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここで前記糖構成単位が（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎまたは（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎを含み、ここでＸは、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、ＧｌｙおよびＶａｌから選択される、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項１３】
請求項１２に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここでＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、ＴｈｒおよびＶａｌから選択される、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項１４】
請求項１３に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここで該タンパク質がヒト成長ホルモンであり、そして前記糖構成単位が（Ｓｅｒ−Ｈｙｐ）１０を含む、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項１５】
請求項２に記載の植物由来の生物学的に活性な哺乳動物融合タンパク質であって、ここで該融合糖タンパク質が少なくとも１個の炭水化物分子と共有結合する、哺乳動物融合タンパク質。
【請求項１６】
タンパク質分子の水溶解度を増加させる方法であって、以下：
ａ）少なくとも１つのグリコシル化部位およびｂ）少なくとも１つのタンパク質をコードする核酸配列を調製する工程；および
核酸構築物を融合糖タンパク質として発現する工程を包含し、
ここで、糖タンパク質の炭水化物成分が該糖タンパク質の分子量の約１０％以上を占める、方法。
【請求項１７】
請求項１６に記載のタンパク質分子の水溶解度を増加させる方法であって、ここで前記糖タンパク質の炭水化物成分が該糖タンパク質の分子量の約５０％以上を占める、方法。
【請求項１８】
請求項１７に記載のタンパク質分子の水溶解度を増加させる方法であって、ここで前記糖タンパク質の炭水化物成分が該糖タンパク質の分子量の約７５％以上を占める、方法。
【請求項１９】
請求項１８に記載のタンパク質分子の水溶解度を増加させる方法であって、ここで前記糖タンパク質の炭水化物成分が該糖タンパク質の分子量の約９０％以上を占める、方法。
【請求項２０】
生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、以下：
ａ）少なくとも１つのグリコシル化部位およびｂ）少なくとも１つの生物学的に活性なタンパク質を、糖タンパク質としてコードする少なくとも１つの核酸配列を植物において発現する工程を包含し、
ここで該糖タンパク質の分子量が約１０ｋＤ以上であり、そして該糖タンパク質の炭水化物成分が糖タンパク質分子量の約１０％以上を占める、方法。
【請求項２１】
請求項２０に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、ここで少なくとも１つの生物学的に活性なタンパク質がインスリン、インスリン様成長因子、ソマトスタチン、成長ホルモン放出ホルモン、グレリン、プロラクチン、胎盤ラクトゲン、成長ホルモンおよび成長ホルモンアンタゴニストから選択される、方法。
【請求項２２】
請求項２０に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、ここで前記糖タンパク質の分子量が約３５ｋＤ以上である、方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、ここで前記糖タンパク質の分子量が約４０ｋＤ以上である、方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、ここで前記糖タンパク質の分子量が約４５ｋＤ以上である、方法。
【請求項２５】
請求項２０に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、該糖タンパク質の薬物速度論的半減期が対応する野生型タンパク質の薬物速度論的半減期より大きい、方法。
【請求項２６】
請求項２０に記載の生物学的に活性な融合タンパク質分子を産生する方法であって、ここで少なくとも１つのグリコシル化部位がｉ）Ｘ−ＰｒｏｎまたはＰｒｏｎ−Ｘ、ここでｎは６〜約１００であり、およびｉｉ）（Ｘ−Ｐｒｏ）ｎまたは（Ｐｒｏ−Ｘ）ｎ、ここでｎは６〜約１００である；から選択され；ここでＸは、任意のアミノ酸である、方法。
【請求項２７】
請求項２６に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、ここでＸは、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、ＧｌｙおよびＶａｌから選択される、方法。
【請求項２８】
請求項２７に記載の生物学的に活性な融合タンパク質分子を産生する方法であって、ここでＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、ＴｈｒおよびＶａｌから選択される、方法。
【請求項２９】
請求項２０に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、該生物学的に活性なタンパク質が成長ホルモンであり、そして前記糖タンパク質が（Ｓｅｒ−Ｈｙｐ）１０を含む、方法。
【請求項３０】
請求項２９に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、ここで（Ｓｅｒ−Ｈｙｐ）１０が前記成長ホルモンのＣ−末端に共有結合する、方法。
【請求項３１】
請求項２９または請求項３０のいずれか１項に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、ここで前記成長ホルモンがヒト成長ホルモンである、方法。
【請求項３２】
グリコシル化ヒト成長ホルモンを含む注入可能な薬学的処方物であって、マンニトール、ソルビトール、トレハロース、グルコース、グリシン、ロイシン、トリロイシン、ヒスチジンおよびリン脂質から選択される少なくとも１つの賦形剤を除く、処方物。
【請求項３３】
請求項３２に記載の注入可能な薬学的処方物であって、ここで前記グリコシル化ヒト成長ホルモンが、ｉ）Ｘ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎ、Ｘ−Ｈｙｐｎ、またはＨｙｐｎ−Ｘ、ここでｎが６〜約１００であり、および；ｉｉ）（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎまたは（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、ここでｎが６〜約１００である、を含み；
ここで、Ｘは、糖構成単位Ｘ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎにおける任意のアミノ酸であり、そして、該糖構成成分Ｘ−Ｈｙｐｎ、Ｈｙｐｎ−Ｘ、（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎおよび（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎに関するＸはＬｙｓ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、ＧｌｙおよびＶａｌから選択される、処方物。
【請求項３４】
請求項３３に記載の注入可能な薬学的処方物であって、ここで前記グリコシル化成長ホルモンが（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎまたは（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎを含み、ここでｎが６〜約２０であり；ＸがＬｙｓ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、ＧｌｙおよびＶａｌから選択される、処方物。
【請求項３５】
請求項３４に記載の注入可能な薬学的処方物であって、ここでＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、ＴｈｒおよびＶａｌから選択される、処方物。
【請求項３６】
約１０ｍｇ／ｍｌ以上の溶解度を示すグリコシル化ヒト成長ホルモンの凍結乾燥粉末処方物であって、ここで該処方物は、マンニトール、ソルビトール、トレハロース、グルコース、グリシン、ロイシン、トリロイシン、ヒスチジンおよびリン脂質から選択される少なくとも１つの賦形剤を除く、処方物。
【請求項３７】
請求項３６に記載の凍結乾粉末処方物であって、ここで該処方物は、マンニトール、ソルビトール、トレハロース、グルコース、グリシン、ロイシン、トリロイシンおよびリン脂質を除く、処方物。
【請求項３８】
タンパク質の植物産生において収率を増加させる方法であって、以下：
ａ）少なくとも１つのシグナルペプチド核酸をコードする配列、ｂ）少なくとも１つのグリコシル化部位核酸をコードする配列、およびｃ）少なくとも１つのタンパク質核酸をコードする配列を含む核酸該構築物を調製する工程；ならびに
糖タンパク質として核酸構築物を発現する工程を包含する、方法。
【請求項３９】
請求項３８に記載の方法であって、ここで少なくとも１つのグリコシル化部位がｉ）Ｘ−ＰｒｏｎまたはＰｒｏｎ−Ｘ、ここでｎは、２〜約１０００であり、およびｉｉ）（Ｘ−Ｐｒｏ）ｎまたは（Ｐｒｏ−Ｘ）ｎ、ここでｎは、１〜約１０００である、から選択され；ここでＸは、任意のアミノ酸である、方法。
【請求項４０】
請求項３９に記載の方法であって、ＸがＧｌｙ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、およびＶａｌから選択される、方法。
【請求項４１】
請求項４０に記載の方法であって、ＸがＳｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、およびＶａｌから選択される、方法。
【請求項４２】
請求項３８に記載の方法であって、前記核酸構築物が緑色蛍光タンパク質をコードする核酸配列を除く、方法。
【請求項４３】
請求項４２に記載の方法に従って産生したタンパク質。
【請求項４４】
少なくとも１つの糖構成単位を含むアミノ酸配列に共有結合したヒト成長ホルモン分子であって、ここで該糖構成単位がｉ）Ｘ−ＨｙｐｎまたはＸ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎ、ここでｎは、４〜約１００であり、ｉｉ）Ｈｙｐｎ−Ｘ、ここでｎは、４〜約１００であり、ｉｉｉ）（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、ここでｎは、４〜約１００であり、およびｉｖ）（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎ、ここでｎは、４〜約１００である、から選択され；ここでＸは、糖構成単位Ｘ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎにおいて任意のアミノ酸であり、そしてここで糖構成単位Ｘ−Ｈｙｐｎ、Ｈｙｐｎ−Ｘ、（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、および（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎに関するＸがＳｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、およびＶａｌから選択される、ヒト成長ホルモン分子。
【請求項４５】
少なくとも１つの糖構成単位を含むアミノ酸配列に共有結合したヒト成長ホルモンアンタゴニスト分子であって、ここで該糖構成単位がｉ）Ｘ−ＨｙｐｎまたはＸ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎ、ここでｎは、４〜約１００であり、ｉｉ）Ｈｙｐｎ−Ｘ、ここでｎは、４〜約１００であり、ｉｉｉ）（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、ここでｎは、４〜約１００であり、およびｉｖ）（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎ、ここでｎは、４〜約１００である、から選択され；ここでＸは、糖構成単位Ｘ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎにおいて任意のアミノ酸であり、そしてここで糖構成単位Ｘ−Ｈｙｐｎ、Ｈｙｐｎ−Ｘ、（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、および（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎに関するＸがＳｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、およびＶａｌから選択される、ヒト成長ホルモンアンタゴニスト分子。
【請求項４６】
成長ホルモン欠乏症または成長ホルモン不全症を患う患者を処置するための組成物であって、
グリコシル化ヒト成長ホルモン
を含む、組成物。
【請求項４７】
請求項４６に記載の患者を処置するための組成物であって、ここで前記成長ホルモンが請求項４４に記載のものである、組成物。
【請求項４８】
ヒト成長ホルモン過剰症または成長ホルモン活性過剰症を患う患者を処置するための組成物であって、
グリコシル化成長ホルモンアンタゴニスト
を含む、組成物。
【請求項４９】
請求項４８に記載の患者を処置するための組成物であって、ここで前記成長ホルモンアンタゴニストが請求項４５に記載のものである、組成物。
【請求項５０】
Ｉ型糖尿病またはＩＩ型糖尿病を患う患者を処置するための組成物であって、
グリコシル化インスリン
を含む、組成物。
【請求項５１】
請求項５０に記載の患者を処置するための組成物であって、ここで前記グリコシル化インスリンがｉ）Ｘ−ＨｙｐｎまたはＸ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎ、ここでｎは、４〜約１００であり、ｉｉ）Ｈｙｐｎ−Ｘ、ここでｎは、４〜約１００であり、ｉｉｉ）（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、ここでｎは、４〜約１００であり、およびｉｖ）（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎ、ここでｎは、４〜約１００である、から選択される糖構成単位を含み；ここでＸは、糖構成単位Ｘ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎにおいて任意のアミノ酸であり、そしてここで糖構成単位Ｘ−Ｈｙｐｎ、Ｈｙｐｎ−Ｘ、（Ｈｙｐ−Ｘ）ｎ、および（Ｘ−Ｈｙｐ）ｎに関するＸがＳｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、およびＶａｌから選択される、組成物。
【請求項５２】
哺乳動物においてアレルギー性免疫応答を予防するための組成物であって、
植物由来の融合糖タンパク質
を含み、該糖タンパク質は、ａ）少なくとも１つの糖構成単位およびｂ）生物学的に活性なタンパク質を含み、該ａ）少なくとも１つの糖構成単位は、該ｂ）生物学的に活性なタンパク質に共有結合し、ここで該少なくとも１つの糖構成単位がＸ−ＨｙｐｎおよびＸ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐｎから選択され、ここでｎは２〜約１０００であり、そしてここでＸは任意のアミノ酸である、組成物。
【請求項５３】
請求項５２に記載のアレルギー性免疫応答を予防するための組成物であって、ここでＸは、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、ＧｌｙおよびＶａｌから選択される、組成物。
【請求項５４】
生物学的に活性な融合タンパク質の半減期を増加させる方法であって、以下：
ａ）少なくとも１つのグリコシル化部位およびｂ）少なくとも１つの生物学的に活性なタンパク質を、糖タンパク質としてコードする少なくとも１つの核酸配列を植物において発現させる工程を包含し；
ここで該糖タンパク質の分子量が約１０ｋＤ以上であり、そして該糖タンパク質の炭水化物成分が該糖タンパク質の分子量の約１０％以上を占める、方法。
【請求項５５】
請求項５４に記載の生物学的に活性な融合タンパク質分子の半減期を増加させる方法であって、ここで少なくとも１つのグリコシル化部位がｉ）Ｘ−ＰｒｏｎまたはＰｒｏｎ−Ｘ、ここでｎは、６〜約１００であり、およびｉｉ）（Ｘ−Ｐｒｏ）ｎまたは（Ｐｒｏ−Ｘ）ｎ、ここでｎは、６〜約１００である、から選択され；ここでＸは、任意のアミノ酸である、方法。
【請求項５６】
請求項５５に記載の生物学的に活性な融合タンパク質分子を産生する方法であって、ここでＸが、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、ＧｌｙおよびＶａｌから選択される、方法。
【請求項５７】
請求項５６に記載の生物学的に活性な融合タンパク質を産生する方法であって、ここでＸが、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、およびＶａｌから選択される、方法。