【手続補正書】
【提出日】令和1年5月13日(2019.5.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
イメージング剤の分解を、がんがｍａｍｍａｌｉａｎ  ｔａｒｇｅｔ  ｏｆ  ｒａｐａｍｙｃｉｎ  ｃｏｍｐｌｅｘ  １（ｍＴＯＲＣ１）阻害剤療法による処置に適するのかの指標とする方法であって、前記方法は、
（ａ）がん細胞試料を提供するステップと；
（ｂ）前記がん細胞試料を、
（ｉ）ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法；および
（ｉｉ）前記イメージング剤の分解時に検出用シグナルを生成することが可能な前記イメージング剤であって、前記イメージング剤がポリペプチドを含む、前記イメージング剤
と接触させるステップと；
（ｃ）分解シグナルを検出するステップと；
（ｄ）前記イメージング剤の分解が、前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させていない対照がん細胞試料と比較して、前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させた前記がん細胞試料において増大するのかを決定するステップ
とを含み、
前記イメージング剤の分解が、前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させていない対照がん細胞試料と比較して、前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させた前記がん細胞試料において増大しない場合、前記がんは、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法による処置に適する、方法。
【請求項２】
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法との接触後の前記がん細胞試料における前記イメージング剤の分解における増大が、非がん性対照試料と前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法との接触後の前記非がん性対照試料における前記イメージング剤の分解における増大を超えない場合にのみ、前記がんが、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法による処置に適する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
イメージング剤の分解を、がんがｍａｍｍａｌｉａｎ  ｔａｒｇｅｔ  ｏｆ  ｒａｐａｍｙｃｉｎ  ｃｏｍｐｌｅｘ  １（ｍＴＯＲＣ１）阻害剤療法による処置に適さないのかの指標とする方法であって、前記方法は、
（ａ）がん細胞試料を提供するステップと；
（ｂ）前記がん細胞試料を、
（ｉ）ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法；および
（ｉｉ）前記イメージング剤の分解時に検出用シグナルを生成することが可能な前記イメージング剤であって、前記イメージング剤がポリペプチドを含む、前記イメージング剤
と接触させるステップと；
（ｃ）分解シグナルを検出するステップと；
（ｄ）前記イメージング剤の分解が、前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させていない対照がん細胞試料と比較して、前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させた前記がん細胞試料において増大するのかを決定するステップ
とを含み、
前記イメージング剤の分解が、前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させていない対照がん細胞試料と比較して、前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させた前記がん細胞試料において増大する場合、前記がんは、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法による処置に適さないがんとして識別される、方法。
【請求項４】
前記がん細胞試料が、前記がん細胞試料の前記イメージング剤との接触の前に前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触されることを特徴とする、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記がんが、発がん性のＲａｓの活性化を含むのかを決定するステップをさらに含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
発がん性のＲａｓの活性化を含む前記がんが、発がん性のＲａｓの突然変異またはＲａｓ抑制性タンパク質の活性の低下を含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記イメージング剤が、マクロピノサイトーシス基質を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記マクロピノサイトーシス基質がアルブミンである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記イメージング剤が蛍光部分を含み、前記検出用シグナルが蛍光の変化である、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法が、第１世代のｍＴＯＲＣ１阻害剤または第２世代のｍＴＯＲＣ１阻害剤を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法が、ラパマイシン、エベロリムス、テムシロリムス、ウミロリムス、ゾタロリムス、デフォロリムス、ウォルトマンニン、ＴＯＰ−２１６、ＴＡＦＡ９３、ＣＣＩ−７７９、ＡＢＴ５７８、ＳＡＲ５４３、アスコマイシン、ＦＫ５０６、ＡＰ２３５７３、ＡＰ２３４６４、ＡＰ２３８４１、ＫＵ−００６３７９４、ＩＮＫ−１２８、ＥＸ２０４４、ＥＸ３８５５、ＥＸ７５１８、ＡＺＤ−８０５５、ＡＺＤ−２０１４、Ｐａｌｏｍｉｄ  ５２９、Ｐｐ−２４２、ＯＳＩ−０２７、およびこれらの組合せからなる群から選択されるｍＴＯＲＣ１阻害剤を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法が、細胞外タンパク質の取込みまたはリソソーム分解を遮断する作用物質を含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記がん細胞試料が、栄養物質が枯渇した培地中にある、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
対象における、ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｔａｒｇｅｔ  ｏｆ  ｒａｐａｍｙｃｉｎ  ｃｏｍｐｌｅｘ  １（ｍＴＯＲＣ１）阻害剤療法による処置に適するがんを検出するための組合せ物であって、前記組合せ物が、
ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法；および
イメージング剤の分解時に検出用シグナルを生成することが可能な前記イメージング剤であって、前記イメージング剤がポリペプチドを含む、前記イメージング剤
を含み、前記対象のがん性組織における分解シグナルが検出され；
前記イメージング剤の分解が、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させていない対照がん性組織と比較して、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法後の前記がん性組織において増大するのかが決定され、
前記イメージング剤の分解が、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させていない対照がん性組織と比較して、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法後の前記がん性組織において増大しない場合、前記がんが、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法による処置に適する、組合せ物。
【請求項１５】
ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法後の前記がん性組織における前記イメージング剤の分解における増大が、非がん性対照試料と前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法との接触後の前記非がん性対照試料における前記イメージング剤の分解における増大を超えない場合にのみ、前記がんが、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法による処置に適する、請求項１４に記載の組合せ物。
【請求項１６】
対象における、ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｔａｒｇｅｔ  ｏｆ  ｒａｐａｍｙｃｉｎ  ｃｏｍｐｌｅｘ  １（ｍＴＯＲＣ１）阻害剤療法による処置に適さないがんを検出するための組合せ物であって、前記組合せ物が、
ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法；および
イメージング剤の分解時に検出用シグナルを生成することが可能な前記イメージング剤であって、前記イメージング剤がポリペプチドを含む、前記イメージング剤
を含み、前記対象のがん性組織における分解シグナルが検出され；
前記イメージング剤の分解が、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させていない対照がん性組織と比較して、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法後の前記がん性組織において増大するのかが決定され、
前記イメージング剤の分解が、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法と接触させていない対照がん性組織と比較して、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法後の前記がん性組織において増大する場合、前記がんが、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法による処置に適さない、組合せ物。
【請求項１７】
ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法が、ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法による処置に適すると識別されるがんを含む対象に投与されることを特徴とする、請求項１４から１６のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１８】
前記がんが、発がん性のＲａｓの活性化を含むのかが決定される、請求項１４から１７のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１９】
発がん性のＲａｓの活性化を含む前記がんが、発がん性のＲａｓの突然変異またはＲａｓ抑制性タンパク質の活性の低下を含む、請求項１８に記載の組合せ物。
【請求項２０】
前記イメージング剤が、マクロピノサイトーシス基質を含む、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２１】
前記マクロピノサイトーシス基質がアルブミンである、請求項２０に記載の組合せ物。
【請求項２２】
前記イメージング剤が蛍光部分を含み、前記検出用シグナルが蛍光の変化である、請求項１４から２１のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２３】
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法が、前記イメージング剤の前に投与されることを特徴とする、請求項１４から２２のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２４】
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法が、第１世代のｍＴＯＲＣ１阻害剤または第２世代のｍＴＯＲＣ１阻害剤を含む、請求項１４から２３のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２５】
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法が、ラパマイシン、エベロリムス、テムシロリムス、ウミロリムス、ゾタロリムス、デフォロリムス、ウォルトマンニン、ＴＯＰ−２１６、ＴＡＦＡ９３、ＣＣＩ−７７９、ＡＢＴ５７８、ＳＡＲ５４３、アスコマイシン、ＦＫ５０６、ＡＰ２３５７３、ＡＰ２３４６４、ＡＰ２３８４１、ＫＵ−００６３７９４、ＩＮＫ−１２８、ＥＸ２０４４、ＥＸ３８５５、ＥＸ７５１８、ＡＺＤ−８０５５、ＡＺＤ−２０１４、Ｐａｌｏｍｉｄ  ５２９、Ｐｐ−２４２、ＯＳＩ−０２７、およびこれらの組合せからなる群から選択されるｍＴＯＲＣ１阻害剤を含む、請求項１４から２４のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２６】
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤療法が、細胞外タンパク質の取込みまたはリソソーム分解を遮断する作用物質を含む、請求項１４から２５のいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２７】
Ｒａｓタンパク質の発がん性の活性化を特徴とするがんを患う対象を処置するための組合せ物であって、
（ｉ）ｍＴＯＲＣ阻害療法と；
（ｉｉ）毒素療法
とを含む、組合せ物。
【請求項２８】
発がん性のＲａｓの活性を、がんが、単剤療法としてのｍＴＯＲＣ１阻害剤による処置に好適に応答する可能性が高いかの指標とする方法であって、前記方法は、前記がんに由来する試料を、Ｒａｓの発がん性の活性化についてアッセイするステップを含み、前記試料が、低度の発がん性のＲａｓ活性を有するか、または発がん性のＲａｓ活性を有さないと決定される場合、前記がんは、単剤療法としてのｍＴＯＲＣ１阻害剤による処置に好適に応答する可能性が高い、方法。
【請求項２９】
発がん性のＲａｓの活性を、がんが、単剤療法としてのｍＴＯＲＣ１阻害剤による処置に好適に応答しない可能性が高いかの指標とする方法であって、前記方法は、前記がんに由来する試料を、Ｒａｓの発がん性の活性化についてアッセイするステップを含み、前記試料が、発がん性のＲａｓ活性を有すると決定される場合、前記がんは、単剤療法としてのｍＴＯＲＣ１阻害剤による処置に好適に応答しない可能性が高い、方法。
【請求項３０】
がんを検出するための組成物であって、がん細胞によるマクロピノサイトーシスのための基質へとコンジュゲートさせたイメージング剤を含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５８】
同等物
当業者は、規定の実験だけを使用して、本明細書で記載される本発明の具体的な実施形態の多くの同等物を認識または確認することが可能であろう。本発明の範囲は、上記の記載に限定されることを意図するものではなく、以下の特許請求の範囲で明示される通りである。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
Ｒａｓタンパク質の発がん性の活性化を特徴とするがんを患う対象へと、
（ｉ）ｍＴＯＲＣ阻害療法と、
（ｉｉ）毒素療法と
を含む治療レジメンを投与するステップを含む方法。
（項目２）
ｍＴＯＲＣ阻害療法を、前記毒素療法の前に投与する、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記ｍＴＯＲＣ阻害療法が、ｍＴＯＲＣ１阻害剤を含む、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記がんが、固形腫瘍を含む、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記がんが、線維形成性および／または乏血管性である微小環境内に棲息する、項目１から４のいずれかに記載の方法。
（項目６）
前記がんが、転移性細胞を含む、項目１から５のいずれかに記載の方法。
（項目７）
前記がんが、膵臓がんである、項目１から６のいずれかに記載の方法。
（項目８）
前記Ｒａｓタンパク質が、Ｋ−Ｒａｓ、Ｈ−Ｒａｓ、Ｎ−Ｒａｓ、およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目１から７のいずれかに記載の方法。
（項目９）
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤が、ラパマイシン／シロリムス、エベロリムス、テムシロリムス、ウミロリムス、ゾタロリムス、デフォロリムス、ウォルトマンニン、ＴＯＰ−２１６、ＴＡＦＡ９３、ＣＣＩ−７７９、ＡＢＴ５７８、ＳＡＲ５４３、アスコマイシン、ＦＫ５０６、ＡＰ２３５７３、ＡＰ２３４６４、ＡＰ２３８４１、ＫＵ−００６３７９４、ＩＮＫ−１２８、ＥＸ２０４４、ＥＸ３８５５、ＥＸ７５１８、ＡＺＤ−８０５５、ＡＺＤ−２０１４、Ｐａｌｏｍｉｄ  ５２９、Ｐｐ−２４２、ＯＳＩ−０２７、およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目２から８のいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記毒素療法が、シクロホスファミド、クロランブシル、シスプラチン、ブスルファン、メルファラン、カルムスチン、ストレプトゾトシン、トリエチレンメラミン、マイトマイシンＣ、メトトレキサート、エトポシド、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシル、ダカルバジン、アクチノマイシンＤ、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ブレオマイシン、ミトラマイシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、パクリタキセル、パクリタキセル誘導体、細胞増殖抑制剤、デキサメタゾン、プレドニゾン、ヒドロキシウレア、アスパラギナーゼ、ロイコボリン、アミホスチン、ダクチノマイシン、メクロレタミン、ストレプトゾシン、シクロホスファミド、ロムスチン、リポソーマルドキソルビシン、ゲムシタビン、リポソーマルダウノルビシン、プロカルバジン、マイトマイシン、ドセタキセル、アルデスロイキン、カルボプラチン、オキサリプラチン、クラドリビン、カンプトテシン、ＣＰＴ１１（イリノテカン）、１０−ヒドロキシ７−エチル−カンプトテシン（ＳＮ３８）、フロクスウリジン、フルダラビン、イホスファミド、イダルビシン、メスナ、インターフェロンベータ、インターフェロンアルファ、ミトキサントロン、トポテカン、ロイプロリド、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、プリカマイシン、ミトタン、ペガスパルガーゼ、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、タモキシフェン、テニポシド、テストラクトン、チオグアニン、チオテパ、ウラシルマスタード、ビノレルビン、クロランブシル、およびこれらの組合せからなる群から選択される、項目１から９のいずれかに記載の方法。
（項目１１）
前記毒素療法を、低用量で投与する、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
毒素を、可溶性タンパク質へとコンジュゲートさせる、項目１から１０のいずれかに記載の方法。
（項目１３）
前記可溶性タンパク質が、アルブミンである、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記治療レジメンが、リソソーム阻害療法を含まない、項目１から１３のいずれかに記載の方法。
（項目１５）
前記治療レジメンが、Ｒａｓ阻害療法を含まない、項目１から１４のいずれかに記載の方法。
（項目１６）
単剤療法としてのｍＴＯＲＣ１阻害剤による処置に好適に応答する可能性が高いがんを識別するための方法であって、前記がんに由来する試料を、Ｒａｓの発がん性の活性化についてアッセイするステップを含み、前記試料が、低度の発がん性のＲａｓ活性を有するか、または発がん性のＲａｓ活性を有さないと決定される方法。
（項目１７）
単剤療法としてのｍＴＯＲＣ１阻害剤による処置に好適に応答しない可能性が高いがんを識別するための方法であって、前記がんに由来する試料を、Ｒａｓの発がん性の活性化についてアッセイするステップを含み、前記試料が、発がん性のＲａｓ活性を有すると決定される方法。
（項目１８）
Ｒａｓの発がん性の活性化が、遺伝子突然変異により引き起こされる、構成的に活性なＲａｓを含む、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記遺伝子突然変異が、突然変異したＲａｓタンパク質を含む、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記遺伝子突然変異が、Ｒａｓ抑制性タンパク質の発現または活性の低下を結果としてもたらす、項目１８に記載の方法。
（項目２１）
Ｒａｓの発がん性の活性化を、対立遺伝子特異的ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、ＰＣＲおよびサンガージデオキシシークエンシング、ＰＣＲおよびパイロシークエンシング、ＰＣＲおよび質量分析（ＭＳ）、ＰＣＲおよび一塩基伸長、マルチプレックスライゲーション依存型プローブ増幅（ＭＬＰＡ）、または蛍光ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）により検出する、項目１７から２０のいずれかに記載の方法。
（項目２２）
がんを検出するための組成物であって、がん細胞によるマクロピノサイトーシスのための基質へとコンジュゲートさせたイメージング剤を含む組成物。
（項目２３）
ｍＴＯＲＣ１阻害剤をさらに含む、項目２２に記載の組成物。
（項目２４）
前記がんを、ｉｎ  ｖｉｖｏの対象において検出する、項目２２から２３のいずれかに記載の組成物。
（項目２５）
前記イメージング剤が、金属性である、項目２２から２４のいずれかに記載の組成物。
（項目２６）
前記イメージング剤が、放射性標識されている、項目２２から２４のいずれかに記載の組成物。
（項目２７）
マクロピノサイトーシスのための前記基質が、可溶性タンパク質を含む、項目２２から２６のいずれかに記載の組成物。
（項目２８）
前記可溶性タンパク質が、アルブミンである、項目２７に記載の組成物。
（項目２９）
前記がんが、発がん性のＲａｓ活性を呈する、項目２２に記載の組成物。
（項目３０）
対象におけるがんを検出するための方法であって、
（ｉ）前記対象へと、ｍＴＯＲＣ１阻害剤を投与するステップと；
（ｉｉ）前記対象へと、検出用シグナルを誘発することが可能なイメージング剤を投与するステップと；
（ｉｉｉ）前記イメージング剤により誘発された前記シグナルを検出するステップとを含む方法。
（項目３１）
前記イメージング剤を、がん細胞によるマクロピノサイトーシスのための基質へとコンジュゲートさせる、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記イメージング剤を、可溶性タンパク質へとコンジュゲートさせる、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記可溶性タンパク質が、アルブミンである、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤を、前記イメージング剤の前に投与する、項目３０から３３のいずれかに記載の方法。
（項目３５）
前記ｍＴＯＲＣ１阻害剤を、前記対象へと、前記イメージング剤の少なくとも１、３、５、１２、または２４時間前に投与する、項目３０に記載の方法。