(57)【要約】 パーキンソン病の治療のための医薬であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを含み、脳内でメディアトフォアを発現させることができる医薬。【特許請求の範囲】
【請求項１】
パーキンソン病の治療のための医薬であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを含み、脳内でメディアトフォアを発現させることができる医薬。
【請求項２】
ベクターがアデノ随伴ウイルス（AAV）ベクターである請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
線条体に投与するための請求項１又は２に記載の医薬。
【請求項４】
メディアトフォアをコードする遺伝子とともに芳香族アミノ酸脱炭酸酵素をコードする遺伝子及び／又はチロシン水酸化酵素をコードする遺伝子を組み込んだベクターを含む請求項１ないし３のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項５】
メディアトフォアをコードする遺伝子とともに芳香族アミノ酸脱炭酸酵素をコードする遺伝子をコードする遺伝子を組み込んだベクターを含む請求項４に記載の医薬。
【請求項６】
芳香族アミノ酸脱炭酸酵素をコードする遺伝子及び／又はチロシン水酸化酵素をコードする遺伝子を組み込んだベクターとともに投与する請求項３に記載の医薬。
【請求項７】
パーキンソン病の治療のための医薬であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを含み、脳内のドーパミン放出を促進することができる医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はパーキンソン病の治療のための医薬に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
パーキンソン病は脳の中心部下方にある中脳黒質の部分の神経細胞が変性を起こして死滅する疾患である。中脳黒質は脳内の神経伝達物質であるドーパミンを産生していることから、パーキンソン病では脳内のドーパミンが不足し、ドーパミンによる抑制系の神経の支配が低下してアセチルコリンによる促進系の神経が支配的になり、大脳基底核の働きが強く現れて手足の振るえ、筋固縮、寡動・無動、姿勢障害などの錐体外路症状が生じる。パーキンソン病の薬物療法としては、初期においては促進系神経を抑制するための抗コリン剤などの投与が行なわれるが、抗コリン剤での改善が認められなくなった中期又は後期の段階では、ドーパミンアゴニストやドーパミン前駆物質であるL-ドーパ（L-Dopa）の投与が行なわれる。また、ドーパミン放出促進作用のある薬物としてアマンタジンなどの投与が行なわれる場合もある。【０００３】
パーキンソン病に対して遺伝子治療を行なう試みもなされている。例えば、L-チロシンからL-ドーパへの変換を行なうチロシン水酸化酵素（TH）又はL-ドーパからドーパミンへの変換を行なう芳香族アミノ酸脱炭酸酵素（AADC）などを発現する遺伝子をアデノ随伴ウイルスをベクターとして用いて脳内に導入する方法が提案されている。また、神経保護療法的アプローチとして神経栄養因子であるGDNF（glial cell line-derived neurotrophic factor）などを脳内で発現させることによりパーキンソン病の病態の進行を遅延させることができると期待されている（パーキンソン病の遺伝子治療については、総説として、実験医学, 20(9), pp.1296-1300, 2002; 神経進歩, 45(1), pp.92-103, 2001などを参照のこと）。もっとも、ドーパミンの放出を促進させる目的での遺伝子治療は従来全く試みられていない。【０００４】
一方、神経伝達物質の一つであるアセチルコリンの放出について、小胞に蓄えられたアセチルコリンが放出するメカニズム以外に、メディアトフォアと呼ばれる16000ダルトンのタンパク脂質の５量体により放出が制御されているとの報告がある（FEBS LETTERS, 261, pp.303-306, 1990; Life Science, 72, pp.2029-2038, 2003）。従来、このメディアトフォアがAPTaseの一群の要素の一つとなっていることが報告されているが（J. Biochem, 112, pp.212-219, 1992）、ドーパミンの放出に関与しているとの報告はない。
【非特許文献１】FEBS LETTERS, 261, pp.303-306, 1990
【非特許文献２】Life Science, 72, pp.2029-2038, 2003
【非特許文献３】J. Biochem, 112, pp.212-219, 1992
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の課題は、パーキンソン病の有効な治療手段を提供することにある。より具体的には、脳内においてドーパミンの放出を促進することによりパーキンソン病を有効に治療することができる遺伝子治療用の医薬を提供することが本発明の課題である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは上記の課題を解決すべく鋭意研究を行なった結果、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを脳内に導入してメディアトフォアを脳内で発現させることにより、ドーパミンの放出量が顕著に増加すること、及びこの組換えベクターを遺伝子治療のための医薬として用いることによりパーキンソン病を有効に治療できることを見出した。本発明は上記の知見を基にして完成されたものである。【０００７】
すなわち、本発明により、パーキンソン病の治療のための医薬であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを含み、脳内でメディアトフォアを発現させることができる医薬が提供される。また、本発明により、パーキンソン病の治療のための医薬であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを含み、脳内のドーパミン放出を促進することができる医薬が提供される。本発明の好ましい態様として、メディアトフォアをコードする遺伝子とともに芳香族アミノ酸脱炭酸酵素をコードする遺伝子及び／又はチロシン水酸化酵素をコードする遺伝子を組み込んだベクターを含む上記の医薬が提供される。さらに好ましい態様により、ベクターがアデノ随伴ウイルス（AAV）ベクターである上記の医薬が提供される。また、上記の医薬とドーパミン及び／又はL-ドーパとの組み合わせを含む医薬も本発明により提供される。【０００８】
別の観点からは、パーキンソン病の治療方法であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを患者に投与し、脳内でメディアトフォアを発現させる工程を含む方法、及びパーキンソン病の治療方法であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを患者に投与し、脳内でドーパミン放出を促進する工程を含む方法が提供される。さらに、パーキンソン病の治療方法であって、メディアトフォアをコードする遺伝子と芳香族アミノ酸脱炭酸酵素をコードする遺伝子及び／又はチロシン水酸化酵素をコードする遺伝子とを組み込んだベクターを患者に投与し、脳内でメディアトフォアと芳香族アミノ酸脱炭酸酵素及び／又はチロシン水酸化酵素を発現させる工程、及び該患者にドーパミン及び／又はL-ドーパを投与する工程を含む方法が提供される。
さらに別の観点からは、上記の医薬の製造のためのメディアトフォアをコードする遺伝子の使用も本発明により提供される。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の医薬は、パーキンソン病の遺伝子治療のための医薬として高い有効性を有している。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明の医薬の投与により線条体に放出されてくるドーパミン量を測定した結果を示した図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明の医薬は、パーキンソン病の治療のための医薬であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを含み、脳内でメディアトフォアを発現させることができることを特徴としている。
哺乳類動物のメディアトフォアをコードする遺伝子の配列は公知であり、例えば、ラット由来のメディアトフォアをコードする遺伝子配列がGenBank データベースに Accession No. D10874 として既に報告されている。従って、当業者はこの情報を基にして哺乳類動物のメディアトフォアをコードする遺伝子を容易に入手することが可能である。また、本明細書の実施例に具体的に記載した方法に従って哺乳類動物の大脳からメディアトフォアをコードするcDNAを容易に取得することができる。本発明の医薬はヒトを含む哺乳類動物の医薬として適用することができるが、ヒトのパーキンソン病の治療を行なうためには、ヒト由来のメディアトフォアをコードする遺伝子を用いることが望ましい。本発明の医薬に用いる遺伝子は、哺乳類動物の生体内において機能するメディアトフォアを発現できるものであればよい。メディアトフォアとしては、哺乳類動物由来の天然型メディアトフォアのほか、天然型メディアトフォアのアミノ酸配列に数個のアミノ酸の置換、挿入、及び／又は欠失を含む改変メディアトフォアであってもよい。本発明の医薬に用いる遺伝子としては、上記の天然型又は改変メディアトフォアをコードする任意の核酸配列を有する遺伝子を用いることができる。【００１２】
本発明の医薬は、ベクターを用いてメディアトフォアをコードする遺伝子を脳内において発現させることができるように調製することができる。ベクターとしてはイン・ビボで直接脳内に遺伝子を導入できるベクターを用いることができ、ウイルスベクター又は非ウイルスベクターのいずれを用いてもよい。これらのうち、ウイルスベクターを用いることが好ましい。ウイルスベクターとしては、アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクター、レンチウイルスベクター、ヘルペスウイルスベクターなどが利用可能であるが、これらのうち、AAVベクターが好ましい。例えば、パーキンソン病を対象とする遺伝子治療薬として、例えば、AAVベクターを利用した医薬が開発されている（Avigen社）。AAVベクターは安全性が高く、比較的長期の遺伝子発現を期待できることから、本発明の医薬には特に好ましく用いられる。アデノ随伴ウイルスとしては、1型AAVウイルス（AAV1）、2型AAVウイルス（AAV2）、3型AAVウイルス（AAV3）、4型AAVウイルス（AAV4）、又は5型AAVウイルス（AAV5）などが知られているが、AAVベクターの製造にはいずれを用いることも可能である。例えば、AAV3の塩基配列はGene Bankに登録されており（NC_001729）、文献にも記載されている（Virology, 221, pp.208-217, 1996）。AAVベクターを利用した脳内への遺伝子導入については、Human Gene Therapy, 13, pp.345-354, 2002などを参照することができる。総説として、神経進歩, 45, pp.92-103, 2001又は実験医学, 20, pp.1296-1300, 2002などを参照することができる。これらの刊行物の開示及びこれらの刊行物に引用された文献の開示のすべてを参照により本発明の開示に含める。【００１３】
本発明の医薬の製造方法は特に限定されないが、AAVベクターを用いる場合には、以下の方法に従って組換えベクターを調製することができる。以下、本発明の好ましい態様としてAAVベクターを用いる場合について具体的に説明するが、本発明の範囲はAAVベクターを用いる場合に限定されることはない。メディアトフォア遺伝子をサイトロメガロウイルス(CMV)プロモーター領域とSV40のpolyA領域の間に挿入して3型AAV（AAV3）ウイルスゲノムの両端に存在するinverted terminal repeat (ITR)配列とともにプラスミドに組み込むことによりベクタープラスミドを調製する。上記のベクタープラスミド、パッケージングプラスミド（AAVの非構造蛋白質であるRepとカプシド蛋白であるVPを発現するためのプラスミド）、及びヘルパープラスミド（アデノウイルス由来の塩基配列でE2A、E4、及びVA領域を含む）の３種類のプラスミドをヒト腎由来のHEK293細胞にトランスフェクトすることにより、メディアトフォア遺伝子を含むAAVベクターを調製することができる。【００１４】
本発明の医薬には、チロシン水酸化酵素（TH）及び／又は芳香族アミノ酸脱炭酸酵素（AADC）をコードする遺伝子を組み込んでもよい。あるいは、本発明の医薬として、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターと、チロシン水酸化酵素（TH）及び／又は芳香族アミノ酸脱炭酸酵素（AADC）をコードする遺伝子を組み込んだベクターとの組み合わせからなる医薬を用いることもできる。AAVベクターを用いると複数の種類のベクターを一つの細胞に感染させることができるので、メディアトフォア遺伝子を含むAAVベクターと、チロシン水酸化酵素（TH）を含むAABベクター及び／又は芳香族アミノ酸脱炭酸酵素（AADC）を含むAAVベクターを同時に脳内に投与してこれらの遺伝子を同時に発現させることが可能である。さらに、本発明の医薬としては、メディアトフォアをコードする遺伝子とともに神経栄養因子（DGNFなど）をコードする遺伝子を組み込んだベクターを用いてもよく、あるいは本発明の医薬として、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターと神経栄養因子を組み込んだベクターとの組み合わせを用いてもよい。【００１５】
AAVベクターを用いたパーキンソン病の遺伝子治療については、例えば、神経進歩, 45, pp.92-103, 2001又は実験医学, 20, pp.1296-1300, 2002などに具体的に説明されており、これらの刊行物又はこれらの刊行物に引用された文献を参照することにより、脳内の線条体細胞に本発明の医薬を直接投与して該細胞内でメディアトフォアを発現させることができる。メディアトフォアが線条体細胞内で発現することによってドーパミンの放出が促進され、それによりパーキンソン病の症状の改善が達成できる。本発明の医薬の投与量は特に限定されないが、メディアトフォアが線条体細胞で十分に発現してドーパミン放出量が増加するように投与量を調節することが望ましい。このような投与量は、例えば、本明細書の実施例に具体的に説明したモデル動物実験を行なうことにより適宜決定することが可能である。メディアトフォアをコードする遺伝子とともに芳香族アミノ酸脱炭酸酵素（AADC）をコードする遺伝子を組み込んだベクターからなる本発明の医薬を線条体細胞に投与する場合、あるいはメディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターからなる本発明の医薬と芳香族アミノ酸脱炭酸酵素（AADC）をコードする遺伝子を組み込んだベクターとを線条体細胞に投与する場合には、ドーパミンの前駆物質であるL-ドーパを投与することによって、線条体細胞からのドーパミンの放出を促進させることが可能である。
【実施例】
【００１６】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されることはない。
例１
A.材料及び方法
(1)メディアトフォアのcDNAクローニング
Wister 系ラット大脳より全細胞RNA (total cellular RNA)を抽出し、ランダムプ ライマー (p(dN)6)を用いた逆転写酵素反応によってcDNA を合成した。次に、このcDNA を鋳型にしてポリメラーゼ鎖反応(PCR: polymerase chain reaction)を行い、メディアトフォアのcDNAを増幅した。プライマーとして、下記の2組のプライマーセットを連続して用いた。
5' -GAATTCCGGAGAATCTTCTTTCG-3'(MPS1)と5'-TTCTGGAATGAGGAGGGGTGA-3'(MPAS1)
5'-GCTCTCTCTCCCGTCGTCCT-3'(MPS2)と5'-CCTATCCTGTGACTGGTGGTG-3'(MPAS2)
得られたPCR 産物をプラスミド(pCR2.1-TOPO; Invitrogen 社)にTA クローニング法によって組込み、pCRMP と命名した。PCR 産物 の塩基配列を決定し、GenBank データベースに Accession No. D10874 として既に報告されている配列と比較したところ、蛋白コーディング領域と3'側非翻訳領域に１か所ずつ不一致が認められたが（D10874 の422番目のAがC 、566-569のTTTT が TTTTT )、推定されるアミノ酸配列は完全に一致することが確認された。【００１７】
(2)アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターの作製
(a)ベクタープラスミドの作製
市販のプラスミド(pIRES2-EGFP、Clontech社)から、サイトメガロウィルス(CMV)プロモーター、リボゾーム内部認識部位(IRES)、および緑色蛍光蛋白質(EGFP)の各塩基配列を制限酵素NotIで切り出し、アデノ随伴ウイルス(AAV)のDNA配列を含むプラスミドpAAVのinverted terminal repeats (ITR)と呼ばれるヘアピンDNA配列の間に挿入した。その後、上記のpCRMP から制限酵素EcoRI で切り出したメディアトフォアのcDNA 断片をCMVプロモーターとIRES配列との間に組込んだ (pAAV-MP)。【００１８】
(b)HEK 293細胞へのトランスフェクション
＜第１日目＞
225cm2フラスコに1.5×106のHEK293細胞をまき、10% FCS- DMEM/F12培地を使用して5%CO2、37℃で培養した。
＜第3日目＞
リン酸カルシウム法でトランスフェクションを行った。3種類のプラスミド(pAAV-RC, pHelper, pAAV MP、各25μg)と0.3M CaCl2とを混合した後に、2×HBS (80 mM NaCl, 50 mM Hepes buffer, 1.5 mM Na2HPO4 (pH7.10))を加え、DNA-リン酸カルシウムを作製した。フラスコ中の培養液をDNA-リン酸カルシウムを添加した培地と入れ換え、数時間培養した後に培地を交換した。
＜第６日目＞
組換えウイルス(rAAV-MP)の回収を行った。0.5M EDTAを加えて細胞を剥がしTBS (100 mM Tris HCl, pH 8.0, 150 mM NaCl)に懸濁した。ドライアイスエタノールと37℃のウォーターバスを使用して凍結／融解を3回繰り返した。10,000×gで10分間遠心した後、上清を回収して粗大な細胞破片を除去した。【００１９】
(c)ウイルスの精製
塩化セシウムCsClの密度勾配による超遠心を行いrAAV-MPを精製した。超遠心チューブ内に4 Mおよび2.2 MのCsCl を重層し密度勾配を作製した。rAAV-MPを含む細胞破砕溶液を重層後、超遠心(25,000 rpm、3時間)を行った。屈折率を計測してRI:1.365-1.380のrAAV-MPを含む分画を回収した。この分画を再度CsCl溶液上に重層し、超遠心(38,000rpm、2時間)を行ってrAAV-MPを含む分画を得た。
(d)ベクター力価の測定  (リアルタイムPCR)
精製したrAAV-MPの10-2-10-6の希釈系列を作製した。pIRES2-EGFP (Clontech社)を制限酵素EcoRIで切断したフラグメントをスタンダードとした。プライマーとして下記のプライマーセットを用い、Applied Biosystems 7900HT Fast リアルタイムPCRシステム(Applied Biosystems社)で定量した。
5'-AAGGCTACGTCCAGGAGCGCA-3'(EGFP qPCR 270 Forward)
5'-AGGATGTTGCCGTCCTCCTTGA-3'(EGFP qPCR 390 Reverse)【００２０】
(3)マウス線条体へのAAVの接種
マウスをネンブタール(体重30gあたり200μl腹腔内投与)にて麻酔し、小動物固定装置を用いて固定した。体温コントローラーにて、マウス体温を37度に保持し、頭部の毛を刈った後、鼻側から後頭にかけて皮膚を切開した。実体顕微鏡下でBregmaより0.4 mm（マウスの週齢により異なる）尾側、正中線より2.0 mm 外側の頭蓋骨に、マイクロドリルを用いて径2〜3 mmの穴を開けた。骨の下の硬膜及びクモ膜は注射針にて穴を開けた。Virusをフレックスフィルマイクロシリンジ(WPI社製、10μl volume)に充填し、該フレックスフィルマイクロシリンジをマイクロマニピュレータに取り付けたウルトラマイクロポンプ2(WPI社製)にセットした。マイクロシリンジ針先をこの穴より約2 mm刺入した。ウイルスをウルトラマイクロポンプ２専用デジタルコントローラー Micro4 (WPI社製)を用いて、100 nl/minの速度で10分間、計1 μl注入した。切開した皮膚を縫合糸付き眼科用微小針で縫合し、固定装置からマウスをはずし、麻酔が覚醒するまでヒーティングパッド上に置いたケージ(安全キャビネット内)で観察した。その後、マウスケージを感染動物用ラックに戻した。【００２１】
(4)ドーパミンの測定
ドーパミンの測定は無麻酔・無拘束のマウス(体重26〜30ｇ、オス)を用いて脳マイクロダイアリシス法により行った。
(a)ガイドカニューレの頭蓋骨への固定
手術方法は基本的に小脳クモ膜下腔へのAAV接種の場合と同様に行った。マウスをネンブタール(体重30g当り15.5mg腹腔内投与)にて麻酔し、麻酔後頭部の毛を刈り、小動物脳定位固定装置に固定した。手術中は体温コントローラーにて体温を37℃に保持した。頭皮を正中切開し、実体顕微鏡下でBregmaより0.4 mm尾側，正中線より2.0 mm外側の頭蓋骨にマイクロドリルを用いて径2-3 mmの穴を開けた。頭骨の下の硬膜およびクモ膜を注射針先端にて注意深く切開した。頭蓋骨に微小ねじをアンカーとして取り付けた。脳定位固定装置の電極ホルダーに固定したガイドカニューレの先端をBregmaより0.4 mm尾側、正中線より2.0 mm外側、脳表面より深さ1.7 mmの位置に刺入した。その後、ガイドカニューレを歯科用セメントにて頭蓋に固定した。デンタルセメントが完全に固まったことを確認後、ガイドカニューレにダミーカニューレを挿入してキャップナットにて固定した。固定装置からマウスをはずし、麻酔から覚醒するまでヒーティングパッド上で観察した。マウスが完全に麻酔から覚醒後ケージに戻した。【００２２】
(b)脳マイクロダイアリシス
ドーパミンの測定実験は、マウスが手術による侵襲から完全に回復した後 (約5〜７日)に無麻酔・無拘束の条件で行った。実験当日、ガイドカニューレに取り付けたダミーカニューレをダイアリシスプローブ（株式会社エイコム製）で置換した後，マウスを直径40 cm、高さ50 cmの測定箱に十分適応させた。その後、シリンジポンプを用いてダイアリシスプローブ先端が位置する大脳線条体を透析液で灌流した（流速，1μL/min）。線条体から回収した透析液中のドーパミン濃度の経時変化を高速液体クロマトグラフィー・電気化学検出器によるオンライン分析システム（株式会社エイコム製）によって分析した。以下に述べる分析条件においてドーパミンの保持時間は約8.5分であった。実験は回収液中のドーパミンのピークが一定となり，安定したことを確認後開始した。【００２３】
以下に使用した分析条件，高速液体クロマトグラフィー移動相の調製及び透析液の組成を記す。
＜分析条件＞
分析カラム EICOMPAK CA-5ODS 2.1mm×150mm (株式会社エイコム)
プレカラム EICOM PREPAKSET-CA 3mmφ×4mm (株式会社エイコム)
移動相
80% 0.1M リン酸緩衝液(Na+) pH=6.0
20% メタノール
500mg/L 1‐オクタンスルホン酸ソーダ(SOS)
50mg/L   EDTA・2Na
流速  0.23 mL/min
分析温度 25℃
設定加電圧 ＋450mV vs Ag/AgCl
作用電極 グラファイト電極 WE-3G (株式会社エイコム)【００２４】
＜移動相の調製＞
a) 0.1M リン酸１ナトリウム溶液
NaH2PO4・2H2O 15.6gを超純水に溶解して1Lとした。
b) 0.1M リン酸２ナトリウム溶液
Na2HPO4・12H2O 35.8gを超純水に溶解して1Lとした。
c) a)液 1000 mL及びb)液160mLを混合した（pH 6.0となった）。
d) c)液800 mLと液クロ用メタノール200 mLをそれぞれ計り混合した。
e) EDTE・2Na を1g秤量して20 mLの超純水に溶解し（50 mg/mL）、冷蔵庫に保存した。この溶液をd)液1Lに対して1mL添加した。
f) 1‐オクタンスルホン酸ソーダ500 mgは用時秤量してEDTEと共にd)液1Lに添加して混合・溶解した。
＜透析液組成＞
透析液はNaCl (146 mM)、KCl (2.7 mM)、CaCl2 (1.2 mM)、MgCl2 (1.0 mM) の組成のものを使用した。これを冷蔵庫に保存し，使用時は室温に戻しよく脱気して使用した。【００２５】
B.結果
正方向と逆方向のメデアトフォアcDNAをウイルス発現ベクターにつなぎ、黒質に感染させたネズミを用いた。線条体を記してある濃度の塩化カリウムで環流し、あふれ出てくるドーパミン量を測定した。結果を図１に示した。メデアトフォアによりドーパミン放出量が増加することが示された。
【図１】
2007001010.tif 000002
【配列表】
2007001010000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成19年3月29日(2007.3.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
パーキンソン病の治療のための医薬であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを含み、脳内でメディアトフォアを発現させドーパミンの放出を促進することができる医薬。
【請求項２】
ベクターがアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターである請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
線条体に投与するための請求項１又は２に記載の医薬。
【請求項４】
メディアトフォアをコードする遺伝子とともに芳香族アミノ酸脱炭酸酵素をコードする遺伝子及び／又はチロシン水酸化酵素をコードする遺伝子を組み込んだベクターを含む請求項１ないし３のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項５】
メディアトフォアをコードする遺伝子とともに芳香族アミノ酸脱炭酸酵素をコードする遺伝子をコードする遺伝子を組み込んだベクターを含む請求項４に記載の医薬。
【請求項６】
芳香族アミノ酸脱炭酸酵素をコードする遺伝子及び／又はチロシン水酸化酵素をコードする遺伝子を組み込んだベクターとともに投与する請求項３に記載の医薬。
【請求項７】
パーキンソン病の治療のための医薬であって、メディアトフォアをコードする遺伝子を組み込んだベクターを含み、脳内のドーパミン放出を促進することができる医薬。
【国際調査報告】
2007001010.tif 000003
2007001010.tif 000004
2007001010.tif 000005
2007001010.tif 000006