【手続補正書】
【提出日】平成30年11月22日(2018.11.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリヌクレオチド配列が、配列番号１０に記載される、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードするポリヌクレオチド。
【請求項２】
請求項１に記載のポリヌクレオチドによってコードされるＣＡＲポリペプチド。
【請求項３】
請求項１に記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
【請求項４】
前記ベクターが、発現ベクター、エピソームベクター、ウイルスベクター、レトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターである、請求項３に記載のベクター。
【請求項５】
前記レンチウイルスベクターが、ヒト免疫不全ウイルス１（ＨＩＶ−１）、ヒト免疫不全ウイルス２（ＨＩＶ−２）、ビスナ・マエディ（ＶＭＶ）ウイルス、ヤギ関節炎脳炎ウイルス（ＣＡＥＶ）、ウマ感染性貧血ウイルス（ＥＩＡＶ）、ネコ免疫不全ウイルス（ＦＩＶ）、ウシ免疫不全ウイルス（ＢＩＶ）、及びサル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）から本質的になる群から選択される、請求項３に記載のベクター。
【請求項６】
左（５’）レトロウイルスＬＴＲ、プサイ（Ψ）パッケージングシグナル、セントラルポリプリントラクト／ＤＮＡフラップ（ｃＰＰＴ／ＦＬＡＰ）、レトロウイルス輸送要素、請求項２６または請求項２７に記載のポリヌクレオチドに動作可能に連結されたプロモーター、及び右（３’）レトロウイルスＬＴＲを含む、請求項３〜５のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項７】
異種ポリアデニル化配列を更に含む、請求項６に記載のベクター。
【請求項８】
前記５’ＬＴＲの前記プロモーターが、異種プロモーターに置き換えられる、請求項６または請求項７に記載のベクター。
【請求項９】
前記異種プロモーターが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）プロモーターまたはサルウイルス４０（ＳＶ４０）プロモーターである、請求項８に記載のベクター。
【請求項１０】
前記５’ＬＴＲまたは３’ＬＴＲが、レンチウイルスＬＴＲである、請求項６〜９のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項１１】
前記３’ＬＴＲが、自己不活性型（ＳＩＮ）ＬＴＲである、請求項６〜９のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項１２】
前記ポリアデニル化配列が、ウシ成長ホルモンポリアデニル化またはシグナルウサギβ−グロビンポリアデニル化配列である、請求項６〜１１のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項１３】
請求項１に記載のポリヌクレオチドに動作可能に連結された前記プロモーターが、サイトメガロウイルス最初期遺伝子プロモーター（ＣＭＶ）、伸長因子１アルファプロモーター（ＥＦ１−α）、ホスホグリセリン酸キナーゼ１プロモーター（ＰＧＫ）、ユビキチンＣプロモーター（ＵＢＱ−Ｃ）、サイトメガロウイルスエンハンサー／ニワトリベータ−アクチンプロモーター（ＣＡＧ）、ポリオーマエンハンサー／単純ヘルペスチミジンキナーゼプロモーター（ＭＣ１）、ベータアクチンプロモーター（β−ＡＣＴ）、サルウイルス４０プロモーター（ＳＶ４０）、骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサー、負の制御領域欠失ｄｌ５８７ｒｅｖプライマー結合部位置換（ＭＮＤ）プロモーターからなる群から選択される、請求項６〜１２のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項１４】
請求項３〜１３のいずれか１項に記載のベクターを含む、エクスビボまたはインビトロの免疫エフェクター細胞。
【請求項１５】
前記免疫エフェクター細胞が、Ｔリンパ球及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞からなる群から選択される、請求項１４に記載のエクスビボまたはインビトロの免疫エフェクター細胞。
【請求項１６】
請求項１４または請求項１５に記載のエクスビボまたはインビトロの免疫エフェクター細胞及び生理学的に許容される賦形剤を含む、組成物。
【請求項１７】
ＣＡＲを含む免疫エフェクター細胞のエクスビボまたはインビトロでの生成方法であって、請求項３〜１３のいずれか１項に記載のベクターを、免疫エフェクター細胞内に導入することを含む、前記方法。
【請求項１８】
前記免疫エフェクター細胞が、Ｔリンパ球およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞からなる群から選択される、請求項１７に記載のエクスビボまたはインビトロでの方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７８】
特定の実施形態では、Ｂ細胞関連状態は、特発性血小板減少性紫斑病、または重症筋無力症、または自己免疫性溶血性貧血である。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
ヒトＢＣＭＡポリペプチドの１つ以上のエピトープに結合するマウス抗ＢＣＭＡ（Ｂ細胞成熟抗原）抗体またはその抗原結合断片を含む細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、１つ以上の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、及び一次シグナル伝達ドメインを含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）。
（項目２）
前記ヒトＢＣＭＡポリペプチドに結合する前記マウス抗ＢＣＭＡ抗体または抗原結合断片が、Ｃａｍｅｌ  Ｉｇ、Ｉｇ  ＮＡＲ、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ）’２断片、Ｆ（ａｂ）’３断片、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ抗体（「ｓｃＦｖ」）、ビス−ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ミニボディ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ジスルフィド安定化Ｆｖタンパク質（「ｄｓＦｖ」）、及び単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ、ナノボディ）からなる群から選択される、項目１に記載のＣＡＲ。
（項目３）
前記ヒトＢＣＭＡポリペプチドに結合する前記マウス抗ＢＣＭＡ抗体または抗原結合断片が、ｓｃＦｖである、項目２に記載のＣＡＲ。
（項目４）
前記マウス抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１〜３のいずれか１つに記載される、１つ以上のＣＤＲを含む、項目１〜３のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目５）
前記マウス抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合断片が、配列番号４〜６のいずれか１つに記載される、１つ以上のＣＤＲを含む、項目１〜４のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目６）
前記マウス抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合断片が、配列番号７に記載される、可変軽鎖配列を含む、項目１〜５のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目７）
前記可変軽鎖配列が、配列番号１〜３に記載される、前記ＣＤＲ配列を含む、項目６に記載のＣＡＲ。
（項目８）
前記マウス抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合断片が、配列番号８に記載される、可変重鎖配列を含む、項目１〜７のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目９）
前記可変重鎖配列が、配列番号４〜６に記載される、前記ＣＤＲ配列を含む、項目８に記載のＣＡＲ。
（項目１０）
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体のアルファ、ベータまたはゼータ鎖、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ４５、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１５４及びＰＤ１からなる群から選択されるポリペプチドからのものである、項目１〜９のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目１１）
前記膜貫通ドメインが、ＣＤ８α、ＣＤ４、ＣＤ４５、ＰＤ１及びＣＤ１５４からなる群から選択される、ポリペプチドからのものである、項目１〜９のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目１２）
前記膜貫通ドメインが、ＣＤ８αからのものである、項目１〜１１のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目１３）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＡＲＤ１１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ）、ＣＤ８３、ＣＤ１３４（
ＯＸ４０）、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）、ＣＤ１５０（ＳＬＡＭＦ１）、ＣＤ１５２（ＣＴＬＡ４）、ＣＤ２２３（ＬＡＧ３）、ＣＤ２７０（ＨＶＥＭ）、ＣＤ２７３（ＰＤ−Ｌ２）、ＣＤ２７４（ＰＤ−Ｌ１）、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＤＡＰ１０、ＬＡＴ、ＮＫＤ２Ｃ  ＳＬＰ７６、ＴＲＩＭ及びＺＡＰ７０からなる群から選択される、共刺激分子からのものである、項目１〜１２のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目１４）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８、ＣＤ１３４及びＣＤ１３７からなる群から選択される、共刺激分子からのものである、項目１〜１２のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目１５）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８、ＣＤ１３４及びＣＤ１３７からなる群から選択される、共刺激分子からのものである、項目１〜１２のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目１６）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８からのものである、項目１〜１２のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目１７）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ１３４からのものである、項目１〜１２のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目１８）
前記１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ１３７からのものである、項目１〜１２のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目１９）
ヒンジ領域ポリペプチドを更に含む、項目１〜１８のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目２０）
前記ヒンジ領域ポリペプチドが、ＣＤ８αのヒンジ領域を含む、項目１９に記載のＣＡＲ。
（項目２１）
スペーサー領域を更に含む、項目１〜２０のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目２２）
前記スペーサー領域ポリペプチドが、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４のＣＨ２及びＣＨ３領域を含む、項目２１に記載のＣＡＲ。
（項目２３）
シグナルペプチドを更に含む、項目１〜２２のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目２４）
前記シグナルペプチドが、ＩｇＧ１重鎖シグナルポリペプチド、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子受容体２（ＧＭ−ＣＳＦＲ２）シグナルポリペプチド、またはＣＤ８αシグナルポリペプチドを含む、項目２３に記載のＣＡＲ。
（項目２５）
配列番号９に記載される、アミノ酸配列を含む、項目１〜２４のいずれか１項に記載のＣＡＲ。
（項目２６）
項目１〜２５のいずれか１項に記載のＣＡＲをコードするポリヌクレオチド。
（項目２７）
ポリヌクレオチド配列が、配列番号１０に記載される、ＣＡＲをコードするポリヌクレオチド。
（項目２８）
項目２６または項目２７に記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
（項目２９）
前記ベクターが、発現ベクターである、項目２８に記載のベクター。
（項目３０）
前記ベクターが、エピソームベクターである、項目２８に記載のベクター。
（項目３１）
前記ベクターが、ウイルスベクターである、項目２８に記載のベクター。
（項目３２）
前記ベクターが、レトロウイルスベクターである、項目２８に記載のベクター。
（項目３３）
前記ベクターが、レンチウイルスベクターである、項目２８に記載のベクター。
（項目３４）
前記レンチウイルスベクターが、ヒト免疫不全ウイルス１（ＨＩＶ−１）、ヒト免疫不全ウイルス２（ＨＩＶ−２）、ビスナ・マエディ（ＶＭＶ）ウイルス、ヤギ関節炎脳炎ウイルス（ＣＡＥＶ）、ウマ感染性貧血ウイルス（ＥＩＡＶ）、ネコ免疫不全ウイルス（ＦＩＶ）、ウシ免疫不全ウイルス（ＢＩＶ）、及びサル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）から本質的になる群から選択される、項目２８に記載のベクター。
（項目３５）
左（５’）レトロウイルスＬＴＲ、プサイ（Ψ）パッケージングシグナル、セントラルポリプリントラクト／ＤＮＡフラップ（ｃＰＰＴ／ＦＬＡＰ）、レトロウイルス輸送要素、項目２６または項目２７に記載のポリヌクレオチドに動作可能に連結されたプロモーター、及び右（３’）レトロウイルスＬＴＲを含む、項目２８〜３４のいずれか１項に記載のベクター。
（項目３６）
異種ポリアデニル化配列を更に含む、項目３５に記載のベクター。
（項目３７）
Ｂ型肝炎ウイルス転写後調節要素（ＨＰＲＥ）またはウッドチャック転写後調節要素（ＷＰＲＥ）を更に含む、項目２８〜３６のいずれか１項に記載のベクター。
（項目３８）
前記５’ＬＴＲの前記プロモーターが、異種プロモーターに置き換えられる、項目３５〜３７のいずれか１項に記載のベクター。
（項目３９）
前記異種プロモーターが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）プロモーターまたはサルウイルス４０（ＳＶ４０）プロモーターである、項目３８に記載のベクター。
（項目４０）
前記５’ＬＴＲまたは３’ＬＴＲが、レンチウイルスＬＴＲである、項目３５〜３９のいずれか１項に記載のベクター。
（項目４１）
前記３’ＬＴＲが、１つ以上の改変を含む、項目３５〜４０のいずれか１項に記載のベクター。
（項目４２）
前記３’ＬＴＲが、１つ以上の欠失を含む、項目３５〜４１のいずれか１項に記載のベクター。
（項目４３）
前記３’ＬＴＲが、自己不活性型（ＳＩＮ）ＬＴＲである、項目３５〜４２のいずれか１項に記載のベクター。
（項目４４）
前記ポリアデニル化配列が、ウシ成長ホルモンポリアデニル化またはシグナルウサギβ−グロビンポリアデニル化配列である、項目３５〜４３のいずれか１項に記載のベクター。
（項目４５）
項目２６または項目２７に記載のポリヌクレオチドが、最適化されたコザック配列を含む、項目２８〜４４のいずれか１項に記載のベクター。
（項目４６）
項目２６または項目２７に記載のポリヌクレオチドに動作可能に連結された前記プロモーターが、サイトメガロウイルス最初期遺伝子プロモーター（ＣＭＶ）、伸長因子１アルファプロモーター（ＥＦ１−α）、ホスホグリセリン酸キナーゼ１プロモーター（ＰＧＫ）、ユビキチンＣプロモーター（ＵＢＱ−Ｃ）、サイトメガロウイルスエンハンサー／ニワトリベータ−アクチンプロモーター（ＣＡＧ）、ポリオーマエンハンサー／単純ヘルペスチミジンキナーゼプロモーター（ＭＣ１）、ベータアクチンプロモーター（β−ＡＣＴ）、サルウイルス４０プロモーター（ＳＶ４０）、骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサー、負の制御領域欠失ｄｌ５８７ｒｅｖプライマー結合部位置換（ＭＮＤ）プロモーターからなる群から選択される、項目３５〜４５のいずれか１項に記載のベクター。
（項目４７）
項目２８〜４６のいずれか１項に記載のベクターを含む、免疫エフェクター細胞。
（項目４８）
前記免疫エフェクター細胞が、Ｔリンパ球及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞からなる群から選択される、項目４７に記載の免疫エフェクター細胞。
（項目４９）
項目４７または項目４８に記載の免疫エフェクター細胞及び生理学的に許容される賦形剤を含む、組成物。
（項目５０）
項目１〜２５のいずれか１項に記載のＣＡＲを含む免疫エフェクター細胞の生成方法であって、項目２８〜４６のいずれか１項に記載のベクターを、免疫エフェクター細胞内に導入することを含む、前記方法。
（項目５１）
前記免疫エフェクター細胞を刺激し、前記細胞を、ＣＤ３に結合する抗体及びＣＤ２８に結合する抗体と接触させることによって、前記細胞の増殖を誘発し、それにより免疫エフェクター細胞の集団を生成することを更に含む、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
前記免疫エフェクター細胞が、前記ベクターを導入する前に刺激され、増殖を誘発される、項目５１に記載の方法。
（項目５３）
前記免疫エフェクター細胞が、Ｔリンパ球を含む、項目５１に記載の方法。
（項目５４）
前記免疫エフェクター細胞が、ＮＫ細胞を含む、項目５１に記載の方法。
（項目５５）
Ｂ細胞関連状態の治療を必要とする対象に、それを行う方法であって、前記対象に、治療有効量の項目４９に記載の組成物を投与することを含む、前記方法。
（項目５６）
前記Ｂ細胞関連状態が、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫、不確定な悪性度のＢ細胞増殖、リンパ腫様肉芽腫症、移植後リンパ増殖性障害、免疫調節性障害、関節リウマチ、重症筋無力症、特発性血小板減少性紫斑病、抗リン脂質抗体症候群、シャーガス病、グレーブス病、ウェゲナー肉芽腫症、結節性多発動脈炎、シェーグレン症候群、尋常性天疱瘡、強皮症、多発性硬化症、抗リン脂質抗体症候群、ＡＮＣＡ関連血管炎、グッドパスチャー病、川崎病、自己免疫性溶血性貧血及び急速進行性糸球体腎炎、重鎖病、原発性もしくは免疫細胞関連アミロイドーシス、または意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症である、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記Ｂ細胞関連状態が、Ｂ細胞悪性腫瘍である、項目５５に記載の方法。
（項目５８）
前記Ｂ細胞悪性腫瘍が、多発性骨髄腫（ＭＭ）または非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）である、項目５７に記載の方法。
（項目５９）
前記ＭＭが、顕性多発性骨髄腫、くすぶり型多発性骨髄腫、形質細胞性白血病、非分泌型骨髄腫、ＩｇＤ骨髄腫、骨硬化性骨髄腫、骨の孤立性形質細胞腫、及び髄外性形質細胞腫からなる群から選択される、項目５８に記載の方法。
（項目６０）
前記ＮＨＬが、バーキットリンパ腫、慢性リンパ球性白血病／小リンパ球性リンパ腫（ＣＬＬ／ＳＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、免疫芽球性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、及びマントル細胞リンパ腫からなる群から選択される、項目５８に記載の方法。
（項目６１）
前記Ｂ細胞関連状態が、形質細胞悪性腫瘍である、項目５５に記載の方法。
（項目６２）
前記Ｂ細胞関連状態が、自己免疫疾患である、項目５５に記載の方法。
（項目６３）
前記自己免疫疾患が、全身性エリテマトーデスである、項目６２に記載の方法。
（項目６４）
前記Ｂ細胞関連状態が、関節リウマチである、項目５５に記載の方法。
（項目６５）
前記Ｂ細胞関連状態が、特発性血小板減少性紫斑病、または重症筋無力症、または自己免疫性溶血性貧血である、項目５５に記載の方法。