【手続補正書】
【提出日】平成20年8月8日(2008.8.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Ｃ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ）Δ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子。
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなるドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞。
【請求項２】
ａ）Δ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Ｃ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子。
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなるドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞。
【請求項３】
ａ）Δ９エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Δ８デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ）Δ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子。
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなるドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞。
【請求項４】
ａ）Δ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Δ９エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Δ８デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子。
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなるドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞。
【請求項５】
ａ）Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Ｃ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ） Δ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｇ）Ｃ16/18エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および、
ｈ）Δ１２デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路の遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなる、ドコサヘキサエン酸生産のための組換え生産宿主細胞であって、
背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種が、オロチジン−５’−リン酸デカルボキシラーゼ（Ｕｒａ３）、イソプロピルリンゴ酸デヒドロゲナーゼ（Ｌｅｕ２）、アシル−ｃｏＡオキシダーゼ（Ｐｏｘ３）、アシル−ＣｏＡオキシダーゼ（Ｐｏｘ２）、Δ１２デサチュラーゼ、およびリパーゼ１（Ｌｉｐ１）よりなる群から選択される酵素をコードするあらゆる天然遺伝子を欠いている組換え生産宿主細胞。
【請求項６】
ａ）ｉ．Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｉｉ．Δ９エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ８デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｉｉｉ．Δ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｉｖ．Δ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、Δ９エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ８デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
よりなる群から選択される少なくとも１組の遺伝子、および
ｂ）ｉ．Δ１２デサチュラーゼ、
ｉｉ．Δ９デサチュラーゼ、
ｉｉｉ．Ｃ14/16エロンガーゼ、
ｉｖ．Ｃ16/18エロンガーゼ
よりなる群から選択される酵素をコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｃ）（ｉ）ＤＧＡＴ１、ＤＧＡＴ２、およびＰＤＡＴよりなる群から選択されるジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ、
（ｉｉ）アシル−ＣｏＡ：１−アシルリゾホスファチジルコリンアシルトランスフェラーゼ（ＬＰＣＡＴ）、
（ｉｉｉ）グリセロール−３−リン酸アシルトランスフェラーゼ（ＧＰＡＴ）、
（ｉｖ）リゾホスファチジン酸アシルトランスフェラーゼ（ＬＰＡＡＴ）、
（ｖ）ホスホリパーゼＣ、および
（ｖｉ）ホスホリパーゼＡ2
よりなる群から選択される酵素をコードする少なくとも１つの遺伝子
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路の遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなる、ドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞であって、
（１）背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種が、Δ１２デサチュラーゼ活性を有するポリペプチドをコードするあらゆる天然遺伝子を欠いており、
（２）背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種が、リパーゼ１（Ｌｉｐ１−）、ペルオキシソームアシルＣｏＡオキシダーゼＡＣＯ３（Ｐｏｘ３−）、アシル−ＣｏＡオキシダーゼ２（Ｐｏｘ２−）、オロチジン−５’−リン酸デカルボキシラーゼ（Ｕｒａ３−）、サッカロピンデヒドロゲナーゼ（Ｌｙｓ５−）、リパーゼ２（Ｌｉｐ２−）、およびイソプロピルリンゴ酸デヒドロゲナーゼ（Ｌｅｕ２−）よりなる群から選択される酵素をコードするあらゆる天然遺伝子を欠いている組換え生産宿主細胞。
【請求項７】
ａ）請求項１、２、３、または４のいずれか一項に記載の生産宿主を培養して、ドコサヘキサエン酸を含んでなる微生物油が生成され、
ｂ）場合によりステップ（ａ）の微生物油を回収すること
を含んでなるドコサヘキサエン酸を含んでなる微生物油の生成方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法によって生成される微生物油。
【請求項９】
請求項７に記載の方法によって生成される有効量の微生物油を含んでなる食品。
【請求項１０】
請求項７に記載の方法によって生成される有効量の微生物油を含んでなる、メディカルフード、栄養補助食品、乳児用調製粉乳、および医薬品よりなる群から選択される製品。
【請求項１１】
請求項７に記載の方法によって生成される有効量の微生物油を含んでなる動物飼料。
【請求項１２】
有効量の微生物油を含んでなり、場合により請求項１、２、３または４のいずれか一項に記載の組換え宿主を含んでなる酵母バイオマスを含んでなる動物飼料。
【請求項１３】
請求項７に記載の方法によって生成される微生物油と食品とを組み合わせることを含んでなるドコサヘキサエン酸で栄養強化された食品の製造方法。
【請求項１４】
メディカルフード、栄養補助食品、乳児用調製粉乳、および医薬品よりなる群から選択される製品の製造方法であって、請求項７に記載の方法によって生成される微生物油と製品とを組み合わせることを含んでなるドコサヘキサエン酸で製品が栄養強化される方法。
【請求項１５】
請求項７に記載の方法によって生成される微生物油と動物飼料とを組み合わせることを含んでなるドコサヘキサエン酸で栄養強化された動物飼料の製造方法。
【請求項１６】
請求項１２に記載の動物飼料と飼料栄養素を含んでなる酵母バイオマスとを組み合わせることを含んでなるドコサヘキサエン酸を含んでなる動物飼料を飼料栄養素で栄養強化する方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７７５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７７５】
ここで報告された結果に基づいて、天然ＤＧＡＴ２および／またはＤＧＡＴ１および／またはＰＤＡＴの中断は、ＤＨＡをはじめとする高濃度のＰＵＦＡを生成するように遺伝子操作されたヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ  ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）株において（例えばＹ３０００株内で）、％ＰＵＦＡを実質的に増大させる有用な手段であることが考察される。事実、Ｙ．リポリティカ（ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）株Ｙ２２１４（Δ９エロンガーゼ／Δ８デサチュラーゼ経路を通じて、１４％のＡＲＡを生成し、野生型Ｙ．リポリティカ（ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ＃２０３６２に対する最終遺伝子型は、Ａｃｏ２−、Ｌｙｓ５−、２Ｘ  ＧＰＡＴ：：ＩｇＤ９ｅ：：ＰＥＸ２０、２Ｘ  ＴＥＦ：：ＩｇＤ９ｅ：：ＬＩＰ１、ＦＢＡＩＮｍ：：ＩｇＤ９ｅ：：ＯＣＴ、２Ｘ  ＦＢＡＩＮ：：Ｄ８ＳＦ：：ＰＥＸ１６、ＧＰＤ：：Ｄ８ＳＦ：：ＰＥＸ１６、ＧＰＡＴ：：ＭＡΔ５：：ＰＥＸ２０、ＦＢＡＩＮ：：ＭＡΔ５：：ＰＥＸ２０、ＹＡＴ１：：Ｉ．Ｄ５Ｓ：：ＬＩＰ１、ＧＰＭ／ＦＢＡＩＮ：：Ｉ．Ｄ５Ｓ：：ＯＣＴ、ＦＢＡＩＮ：：Ｆ．Ｄ１２Ｓ：：ＰＥＸ２０、およびＧＰＭ／ＦＢＡＩＮ：：ｒＥＬＯ２Ｓ：：ＯＣＴ）中の天然ＤＧＡＴ２遺伝子の中断は、パーセントＡＲＡの１．７倍の増大をもたらす（データ示さず）。本発明の主な特徴または態様を次に記載する。態様１．  ａ）Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Ｃ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ）Δ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子。
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなるドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞。
態様２．  ａ）Δ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Ｃ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子。
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなるドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞。
態様３．  ａ）Δ９エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Δ８デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ）Δ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子。
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなるドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞。
態様４．  ａ）Δ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Δ９エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Δ８デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子。
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなるドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞。
態様５．  遺伝子プールが、場合によりΔ１２デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子を含んでなる態様１、２、３または４のいずれか一項に記載の組換え生産宿主。
態様６．  背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種が、Δ１２デサチュラーゼ活性を有するポリペプチドをコードするあらゆる天然遺伝子を欠いている態様５に記載の組換え生産宿主。
態様７．  前記ω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子の少なくとも１つが、配列番号２１０〜２２１よりなる群から選択される核酸配列を有するプロモーター配列の制御下にある態様１、２、３または４のいずれか一項に記載の組換え生産宿主。
態様８．  前記Δ１２デサチュラーゼが、配列番号２９、３１、３３、３５、３６、３７、３９、４１、４３、４５、４６、４８〜５０よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有する態様５に記載の組換え生産宿主。
態様９．  前記Δ６デサチュラーゼが配列番号２および５よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、前記Ｃ18/20エロンガーゼが配列番号２３および２６よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有する態様１または２のどちらかに記載の組換え生産宿主細胞。
態様１０．  前記Δ９エロンガーゼが配列番号７０および２３よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、前記Δ８デサチュラーゼが配列番号７８、８０、および８２よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有する態様３または４のどちらかに記載の組換え生産宿主細胞。
態様１１．  前記Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子が、酵素基質として、
ａ）リノレン酸およびジホモ−γ−リノレン酸、
ｂ）α−リノレン酸およびエイコサテトラエン酸、および
ｃ）リノレン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、α−リノレン酸、およびエイコサテトラエン酸よりなる群から選択される少なくとも２つの脂肪酸を結合する二機能Δ５／Δ６デサチュラーゼポリペプチドをコードする態様１、２、３または４のいずれか一項に記載の組換え生産宿主。
態様１２．  前記二機能Δ５／Δ６デサチュラーゼポリペプチドが、配列番号１５および１８よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有する態様１１に記載の組換え生産宿主。
態様１３．  前記Δ５デサチュラーゼが、配列番号７、９、１２、１５、および１８よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、前記Ｃ20/22エロンガーゼが配列番号１０１および１０３よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、前記Δ４デサチュラーゼが配列番号１０５および１０７よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、態様１、２、３、または４のいずれか一項に記載の組換え生産宿主細胞。
態様１４．  前記Δ１７デサチュラーゼが、配列番号２０に記載のアミノ酸配列を有する態様１または３のどちらかに記載の組換え生産宿主細胞。
態様１５．  遺伝子プールが、場合によりΔ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子を含んでなる態様１または３のどちらかに記載の組換え生産宿主細胞。
態様１６．  前記Δ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子が、酵素基質としてオレイン酸およびリノール酸の双方を結合する二機能Δ１５／Δ１２デサチュラーゼポリペプチドをコードする態様２または４のいずれかに記載の組換え生産宿主。
態様１７．  前記二機能Δ１５／Δ１２デサチュラーゼポリペプチドが、配列番号５２に記載のアミノ酸配列を有する態様１６に記載の組換え生産宿主。
態様１８．  前記Δ１５デサチュラーゼが、配列番号５２、５４、５４、５６、５８、６０、６２、および６４〜６８よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有する態様２または４のいずれかに記載の組換え生産宿主。
態様１９．  遺伝子プールが、場合により
ａ）Δ９デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Ｃ16/18エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｃ）Ｃ14/16エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
よりなる群から選択されるω−３／ω−６脂肪酸生合成経路遺伝子を含んでなる態様１、２、３または４のいずれか一項に記載の組換え生産宿主。
態様２０．  前記Ｃ16/18エロンガーゼが配列番号８４、８７、および９５よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、前記Ｃ14/16エロンガーゼが配列番号９８に記載のアミノ酸配列を有する態様１９に記載の組換え生産宿主。
態様２１．  遺伝子プールが、場合により
ａ）ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＤＧＡＴ１）、
ｂ）ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＤＧＡＴ２）、
ｃ）リン脂質：ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＰＤＡＴ）、
ｄ）アシル−ＣｏＡ：１−アシルリゾホスファチジルコリンアシルトランスフェラーゼ（ＬＰＣＡＴ）、
ｅ）グリセロール−３−リン酸アシルトランスフェラーゼ（ＧＰＡＴ）、および
ｆ）リゾホスファチジン酸アシルトランスフェラーゼ（ＬＰＡＡＴ）
よりなる群から選択されるアシルトランスフェラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子を含んでなる態様１、２、３または４のいずれか一項に記載の組換え生産宿主。
態様２２．  前記ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＤＧＡＴ１）が配列番号１２３、および１２５〜１２９よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、前記ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＤＧＡＴ２）が配列番号１３１、１３３、１３５、および１３７よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、前記リン脂質：ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＰＤＡＴ）が配列番号１１８に記載のアミノ酸配列を有し、前記グリセロール−３−リン酸アシルトランスフェラーゼ（ＧＰＡＴ）が配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を有し、前記リゾホスファチジン酸アシルトランスフェラーゼ（ＬＰＡＡＴ）が配列番号１０９、１１３、および１１６よりなる群から選択されるアミノ酸配列を有し、前記アシル−ＣｏＡ：１−アシルリゾホスファチジルコリンアシルトランスフェラーゼ（ＬＰＣＡＴ）が配列番号１２１に記載のアミノ酸配列を有する態様２１に記載の組換え生産宿主。
態様２３．  ａ）Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｂ）Ｃ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｃ）Δ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｄ） Δ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｅ）Ｃ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｆ）Δ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｇ）Ｃ16/18エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、および、
ｈ）Δ１２デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路の遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなる、ドコサヘキサエン酸生産のための組換え生産宿主細胞であって、
背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種が、オロチジン−５’−リン酸デカルボキシラーゼ（Ｕｒａ３）、イソプロピルリンゴ酸デヒドロゲナーゼ（Ｌｅｕ２）、アシル−ｃｏＡオキシダーゼ（Ｐｏｘ３）、アシル−ＣｏＡオキシダーゼ（Ｐｏｘ２）、Δ１２デサチュラーゼ、およびリパーゼ１（Ｌｉｐ１）よりなる群から選択される酵素をコードするあらゆる天然遺伝子を欠いている組換え生産宿主細胞。
態様２４．  ａ）ｉ．Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｉｉ．Δ９エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ８デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ１７デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｉｉｉ．Δ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、Δ６デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ18/20エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、
ｉｖ．Δ１５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、Δ９エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ８デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ５デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびＣ20/22エロンガーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子、およびΔ４デサチュラーゼをコードする少なくとも１つの遺伝子
よりなる群から選択される少なくとも１組の遺伝子、および
ｂ）ｉ．Δ１２デサチュラーゼ、
ｉｉ．Δ９デサチュラーゼ、
ｉｉｉ．Ｃ14/16エロンガーゼ、
ｉｖ．Ｃ16/18エロンガーゼ
よりなる群から選択される酵素をコードする少なくとも１つの遺伝子、および
ｃ）（ｉ）ＤＧＡＴ１、ＤＧＡＴ２、およびＰＤＡＴよりなる群から選択されるジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ、
（ｉｉ）アシル−ＣｏＡ：１−アシルリゾホスファチジルコリンアシルトランスフェラーゼ（ＬＰＣＡＴ）、
（ｉｉｉ）グリセロール−３−リン酸アシルトランスフェラーゼ（ＧＰＡＴ）、
（ｉｖ）リゾホスファチジン酸アシルトランスフェラーゼ（ＬＰＡＡＴ）、
（ｖ）ホスホリパーゼＣ、および
（ｖｉ）ホスホリパーゼＡ2
よりなる群から選択される酵素をコードする少なくとも１つの遺伝子
のω−３／ω−６脂肪酸生合成経路の遺伝子を含んでなる遺伝子プールを含んでなる、背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種を含んでなる、ドコサヘキサエン酸生成のための組換え生産宿主細胞であって、
（１）背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種が、Δ１２デサチュラーゼ活性を有するポリペプチドをコードするあらゆる天然遺伝子を欠いており、
（２）背景ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）種が、リパーゼ１（Ｌｉｐ１−）、ペルオキシソームアシルＣｏＡオキシダーゼＡＣＯ３（Ｐｏｘ３−）、アシル−ＣｏＡオキシダーゼ２（Ｐｏｘ２−）、オロチジン−５’−リン酸デカルボキシラーゼ（Ｕｒａ３−）、サッカロピンデヒドロゲナーゼ（Ｌｙｓ５−）、リパーゼ２（Ｌｉｐ２−）、およびイソプロピルリンゴ酸デヒドロゲナーゼ（Ｌｅｕ２−）よりなる群から選択される酵素をコードするあらゆる天然遺伝子を欠いている組換え生産宿主細胞。
態様２５．  宿主が全脂肪酸の％として少なくとも約５％のドコサヘキサエン酸を含んでなる微生物油を生成する態様１、２、３または４のいずれか一項に記載の組換え生産宿主。
態様２６．  宿主がドコサヘキサエン酸を含んでなる微生物油を生成し、微生物油があらゆるγ−リノール酸を欠いている態様２５に記載の組換え生産宿主。
態様２７．  ａ）態様１、２、３、または４のいずれか一項に記載の生産宿主を培養して、ドコサヘキサエン酸を含んでなる微生物油が生成され、
ｂ）場合によりステップ（ａ）の微生物油を回収すること
を含んでなるドコサヘキサエン酸を含んでなる微生物油の生成方法。
態様２８．  態様２７に記載の方法によって生成される微生物油。
態様２９．  油が少なくとも約５％のドコサヘキサエン酸を含有する態様２８に記載の微生物油。
態様３０．  油があらゆるγ−リノール酸を欠いている態様２８に記載の微生物油。
態様３１．  油がリノール酸、γ−リノレン酸、エイコサジエン酸、ジホモ−γ−リノール酸、アラキドン酸、α−リノレン酸、ステアリドン酸、エイコサトリエン酸、エイコサテトラエン酸、ドコサペンタエン酸、およびドコサヘキサエン酸よりなる群から選択される脂肪酸を含んでなる態様２８に記載の混合油。
態様３２．  態様２７に記載の方法によって生成される有効量の微生物油を含んでなる食品。
態様３３．  類似食品、肉製品、穀物製品、ベーカリー食品、スナック食品、および乳製品よりなる群から選択される態様３２に記載の食品。
態様３４．  態様２７に記載の方法によって生成される有効量の微生物油を含んでなる、メディカルフード、栄養補助食品、乳児用調製粉乳、および医薬品よりなる群から選択される製品。
態様３５．  態様２７に記載の方法によって生成される有効量の微生物油を含んでなる動物飼料。
態様３６．  ペットフード、反芻動物飼料、家禽飼料、および水産養殖飼料よりなる群から選択される態様３５に記載の動物飼料。
態様３７．  有効量の微生物油を含んでなり、場合により態様１、２、３または４のいずれか一項に記載の組換え宿主を含んでなる酵母バイオマスを含んでなる動物飼料。
態様３８．  酵母バイオマスが、タンパク質、脂質、炭水化物、ビタミン、ミネラル、および核酸よりなる群から選択される飼料栄養素を含んでなる態様３７に記載の動物飼料。
態様３９．  態様２７に記載の方法によって生成される微生物油と食品とを組み合わせることを含んでなるドコサヘキサエン酸で栄養強化された食品の製造方法。
態様４０．  メディカルフード、栄養補助食品、乳児用調製粉乳、および医薬品よりなる群から選択される製品の製造方法であって、態様２７に記載の方法によって生成される微生物油と製品とを組み合わせることを含んでなるドコサヘキサエン酸で製品が栄養強化される方法。
態様４１．  態様２７に記載の方法によって生成される微生物油と動物飼料とを組み合わせることを含んでなるドコサヘキサエン酸で栄養強化された動物飼料の製造方法。
態様４２．  態様３７に記載の動物飼料と飼料栄養素を含んでなる酵母バイオマスとを組み合わせることを含んでなるドコサヘキサエン酸を含んでなる動物飼料を飼料栄養素で栄養強化する方法。
態様４３．  飼料栄養素が、タンパク質、脂質、炭水化物、ビタミン、ミネラル、および核酸よりなる群から選択される態様４２に記載の方法。
態様４４．  ヒトまたは動物によって消費可能または使用可能な形態でドコサヘキサエン酸を含有する態様２７に記載の方法によって生成される微生物油を提供することを含んでなるエイコサペンタエン酸で強化された栄養補助食品をヒト、動物または水産養殖生物に提供する方法。
態様４５．  ドコサヘキサエン酸の欠乏症を処置するために、ヒトまたは動物によって消費可能または使用可能な形態でドコサヘキサエン酸を含有する態様２７に記載の方法によって生成される微生物油を提供することを含んでなる動物またはヒトにおけるドコサヘキサエン酸の欠乏症の処置方法。
態様４６．  ＡＴＣＣ名称ＡＴＣＣ＿＿＿＿＿＿を有する、ドコサヘキサエン酸生産に有用な組換え生産宿主ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ  ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｙ３０００。