【手続補正書】
【提出日】平成31年4月26日(2019.4.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１に記載されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含むヒトインターロイキン−２（ＩＬ−２）変異タンパク質であって、Ｌ１２Ｇ、Ｌ１２Ｋ、Ｌ１２Ｑ、Ｌ１２Ｓ、Ｑ１３Ｇ、Ｅ１５Ａ、Ｅ１５Ｇ、Ｅ１５Ｓ、Ｈ１６Ａ、Ｈ１６Ｄ、Ｈ１６Ｇ、Ｈ１６Ｋ、Ｈ１６Ｍ、Ｈ１６Ｎ、Ｈ１６Ｒ、Ｈ１６Ｓ、Ｈ１６Ｔ、Ｈ１６Ｖ、Ｈ１６Ｙ、Ｌ１９Ａ、Ｌ１９Ｄ、Ｌ１９Ｅ、Ｌ１９Ｇ、Ｌ１９Ｎ、Ｌ１９Ｒ、Ｌ１９Ｓ、Ｌ１９Ｔ、Ｌ１９Ｖ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｅ、Ｄ２０Ｆ、Ｄ２０Ｇ、Ｄ２０Ｔ、Ｄ２０Ｗ、Ｍ２３Ｒ、Ｒ８１Ａ、Ｒ８１Ｇ、Ｒ８１Ｓ、Ｒ８１Ｔ、Ｄ８４Ａ、Ｄ８４Ｅ、Ｄ８４Ｇ、Ｄ８４Ｉ、Ｄ８４Ｍ、Ｄ８４Ｑ、Ｄ８４Ｒ、Ｄ８４Ｓ、Ｄ８４Ｔ、Ｓ８７Ｒ、Ｎ８８Ａ、Ｎ８８Ｄ、Ｎ８８Ｅ、Ｎ８８Ｆ、Ｎ８８Ｇ、Ｎ８８Ｍ、Ｎ８８Ｒ、Ｎ８８Ｓ、Ｎ８８Ｖ、Ｎ８８Ｗ、Ｖ９１Ｄ、Ｖ９１Ｅ、Ｖ９１Ｇ、Ｖ９１Ｓ、Ｉ９２Ｋ、Ｉ９２Ｒ、及びＥ９５Ｇから選択される少なくとも１つの変異を有し、インビトロアッセイ及びヒト化マウス（ＣＤ３４＋造血幹細胞で再構成されたＮＳＧマウス）の両方において、その他のＴ細胞またはＮＫ細胞と比較して制御性Ｔ細胞を優先的に刺激する、ヒトＩＬ−２変異タンパク質。
【請求項２】
前記変異タンパク質のアミノ酸配列が、Ｃ１２５ＡならびにＬ１２Ｇ、Ｌ１２Ｋ、Ｌ１２Ｑ、Ｌ１２Ｓ、Ｑ１３Ｇ、Ｅ１５Ａ、Ｅ１５Ｇ、Ｅ１５Ｓ、Ｈ１６Ａ、Ｈ１６Ｄ、Ｈ１６Ｇ、Ｈ１６Ｋ、Ｈ１６Ｍ、Ｈ１６Ｎ、Ｈ１６Ｒ、Ｈ１６Ｓ、Ｈ１６Ｔ、Ｈ１６Ｖ、Ｈ１６Ｙ、Ｌ１９Ａ、Ｌ１９Ｄ、Ｌ１９Ｅ、Ｌ１９Ｇ、Ｌ１９Ｎ、Ｌ１９Ｒ、Ｌ１９Ｓ、Ｌ１９Ｔ、Ｌ１９Ｖ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｅ、Ｄ２０Ｆ、Ｄ２０Ｇ、Ｄ２０Ｔ、Ｄ２０Ｗ、Ｍ２３Ｒ、Ｒ８１Ａ、Ｒ８１Ｇ、Ｒ８１Ｓ、Ｒ８１Ｔ、Ｄ８４Ａ、Ｄ８４Ｅ、Ｄ８４Ｇ、Ｄ８４Ｉ、Ｄ８４Ｍ、Ｄ８４Ｑ、Ｄ８４Ｒ、Ｄ８４Ｓ、Ｄ８４Ｔ、Ｓ８７Ｒ、Ｎ８８Ａ、Ｎ８８Ｄ、Ｎ８８Ｅ、Ｎ８８Ｆ、Ｎ８８Ｇ、Ｎ８８Ｍ、Ｎ８８Ｒ、Ｎ８８Ｓ、Ｎ８８Ｖ、Ｎ８８Ｗ、Ｖ９１Ｄ、Ｖ９１Ｅ、Ｖ９１Ｇ、Ｖ９１Ｓ、Ｉ９２Ｋ、Ｉ９２Ｒ、及びＥ９５Ｇから選択される１つの位置においてのみ、配列番号１に記載されるアミノ酸配列とは異なる、請求項１に記載のヒトＩＬ−２変異タンパク質。
【請求項３】
Ｆｃ及び請求項１又は２に記載のヒトＩＬ−２変異タンパク質を含む、Ｆｃ融合タンパク質。
【請求項４】
前記Ｆｃが、ヒトＩｇＧ１Ｆｃである、請求項３に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項５】
前記ヒトＩｇＧ１Ｆｃが、前記Ｆｃのエフェクター機能を変化させる１つ以上の変異を含み、前記ヒトＩｇＧ１が、Ｎ２９７に置換を含む、請求項４に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項６】
前記ヒトＩｇＧ  ＦｃのＣ末端リジンの置換または欠失を含む、請求項４又は５に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項７】
リンカーが、前記タンパク質の前記ＦｃとヒトＩＬ−２変異タンパク質部分とを接続し、前記リンカーが、ＧＧＧＧＳ（配列番号５）、ＧＧＮＧＴ（配列番号６）、又は、ＹＧＮＧＴ（配列番号７）である、請求項３〜６のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項８】
前記ＩＬ−２変異タンパク質が、哺乳動物細胞中で発現される場合、前記Ｆｃ融合タンパク質のグリコシル化を変化させるアミノ酸の付加、置換、または欠失をさらに含む、請求項３〜７のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項９】
前記ＩＬ−２変異タンパク質が、Ｔ３置換又はＳ５変異を含む、請求項８に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１０】
前記Ｆｃ融合タンパク質が、Ｆｃ二量体を含む、請求項３〜９のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１１】
前記Ｆｃ融合タンパク質が、２つのＩＬ−２変異タンパク質又は単一のＩＬ−２変異タンパク質を含む、請求項１０に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１２】
請求項１又は２に記載のヒトＩＬ−２変異タンパク質をコードする、単離核酸。
【請求項１３】
抗体のＦｃ部分及び請求項１又は２に記載のヒトＩＬ−２変異タンパク質をコードする、単離核酸。
【請求項１４】
前記Ｆｃが、ヒトＩｇＧ１Ｆｃである、請求項１３に記載の単離核酸。
【請求項１５】
前記ヒトＩｇＧ１Ｆｃが、前記Ｆｃのエフェクター機能を変化させる１つ以上の変異を含み、前記ヒトＩｇＧ１が、Ｎ２９７に置換を含む、請求項１４に記載の単離核酸。
【請求項１６】
前記ヒトＩｇＧ  ＦｃのＣ末端リジンの置換または欠失をコードする、請求項１４又は１５に記載の単離核酸。
【請求項１７】
抗体の前記Ｆｃ部分と前記ヒトＩＬ−２変異タンパク質とを接続するリンカーをさらにコードし、前記リンカーが、ＧＧＧＧＳ（配列番号５）、ＧＧＮＧＴ（配列番号６）、又はＹＧＮＧＴ（配列番号７）である、請求項１３〜１６のいずれかに記載の単離核酸。
【請求項１８】
前記ＩＬ−２変異タンパク質が、哺乳動物細胞中で発現される場合、前記ＩＬ−２変異タンパク質を含むタンパク質のグリコシル化を変化させるアミノ酸の付加、置換、または欠失をさらに含む、請求項１３〜１７のいずれかに記載の単離核酸。
【請求項１９】
前記ＩＬ−２変異タンパク質が、Ｔ３置換又はＳ５変異を含む、請求項１８に記載の単離核酸。
【請求項２０】
プロモーターに作動可能に連結される請求項１２〜１９のいずれかに記載の単離核酸を含む、発現ベクター。
【請求項２１】
請求項１２〜１９のいずれかに記載の単離核酸を含む、宿主細胞。
【請求項２２】
前記単離核酸が、プロモーターに作動可能に連結される、請求項２１に記載の宿主細胞。
【請求項２３】
ヒトＩＬ−２変異タンパク質の作製方法であって、前記プロモーターが発現される条件下で請求項２２に記載の宿主細胞を培養することと、前記培養物から前記ヒトＩＬ−２変異タンパク質を採取することとを含む、方法。
【請求項２４】
Ｆｃ融合タンパク質の作製方法であって、前記プロモーターが発現される条件下で請求項２２に記載の宿主細胞を培養することと、前記培養物から前記Ｆｃ融合タンパク質を採取することとを含む、方法。
【請求項２５】
Ｔ細胞集団内における非制御性Ｔ細胞に対する制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の比率の増加方法であって、Ｔ細胞集団を有効量の請求項１又は２に記載のヒトＩＬ−２変異タンパク質又は請求項３〜１１のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質と接触させることを含む、方法。
【請求項２６】
ＣＤ３＋ＦｏｘＰ３−細胞に対するＣＤ３＋ＦｏｘＰ３＋細胞の比率が増加する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
対象の末梢血中における非制御性Ｔ細胞に対する制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の比率を増加させるための医薬組成物であって、有効量の請求項１又は２に記載のヒトＩＬ−２変異タンパク質又は請求項３〜１１のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質を含む、医薬組成物。
【請求項２８】
ＣＤ３＋ＦｏｘＰ３−細胞に対するＣＤ３＋ＦｏｘＰ３＋細胞の比率が増加する、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
対象の前記末梢血中におけるナチュラルキラー（ＮＫ）細胞に対する制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の比率を増加させるための医薬組成物であって、有効量の請求項１又は２に記載のヒトＩＬ−２変異タンパク質又は請求項３〜１１のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質を含む、医薬組成物。
【請求項３０】
ＣＤ５６及び／またはＣＤ１６を発現するＣＤ３−ＣＤ１９−リンパ球に対するＣＤ３＋ＦｏｘＰ３＋細胞の比率が増加する、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
炎症性疾患または自己免疫疾患を有する対象を治療するための医薬組成物であって、治療有効量の請求項１又は２に記載のＩＬ−２変異タンパク質又は請求項３〜９のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質を含む、医薬組成物。
【請求項３２】
前記炎症性疾患または自己免疫疾患が、ループス、移植片対宿主病、Ｃ型肝炎誘発性血管炎、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、多発性硬化症、関節リウマチ、円形脱毛症、アテローム性動脈硬化症、乾癬、器官移植片拒絶、シェーグレン症候群、ベーチェット病、自然流産、アトピー性疾患、喘息、または炎症性腸疾患である、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
Ｆｃ融合タンパク質であって、前記Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列が、図２４に示されるヒトＩＬ−２変異タンパク質融合タンパク質のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である、前記Ｆｃ融合タンパク質。
【請求項３４】
対象における炎症状態または自己免疫状態の処置するための医薬組成物であって、有効量の請求項３３に記載のＦｃ融合タンパク質を含む、医薬組成物。
【請求項３５】
前記炎症状態または自己免疫状態が、ループス、移植片対宿主病、Ｃ型肝炎誘発性血管炎、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、多発性硬化症、関節リウマチ、円形脱毛症、アテローム性動脈硬化症、乾癬、器官移植片拒絶、シェーグレン症候群、ベーチェット病、自然流産、アトピー性疾患、喘息、または炎症性腸疾患である、請求項３４に記載の医薬組成物。