【手続補正書】
【提出日】令和1年8月22日(2019.8.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
同じ個体または同じもしくは異なる種由来の別の個体の髄核（ＮＰ）由来の１つまたは複数の成分を有効量含有する、個体の変性した椎間板の治療用組成物。
【請求項２】
前記ＮＰ由来成分が、脊索細胞、脊索細胞馴化培地、小さい軟骨細胞様細胞、コラーゲン原線維、プロテオグリカンおよび／またはアグリカンを含む、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
１つまたは複数の治療剤が、前記個体の前記変性した椎間板に提供される、請求項１または２記載の組成物。
【請求項４】
前記１つまたは複数の治療剤が、核酸、ペプチド、タンパク質、小分子またはその組合せを含む、請求項１、２または３記載の組成物。
【請求項５】
前記個体に、
ａ）線維芽細胞；
ｂ）脊索細胞；
ｃ）Ｔｉｅ２＋細胞；
ｄ）Ｔｉｅ２遺伝子産物；
ｅ）多血小板血漿（ＰＲＰ）；
ｆ）Ｓｏｘ９遺伝子産物；
ｇ）形質転換成長因子ベータ１（ＴＧＦＢ１）；
ｈ）結合組織成長因子（ＣＴＧＦ）；
ｉ）ＷＮＴ１誘導性シグナル伝達経路タンパク質１（ＷＩＳＰ１）、および／または
ｊ）ＷＩＳＰ２
のうち１つまたは複数の有効量を含む１つまたは複数の組成物を提供することを含む、請求項１から４のいずれか一項記載の組成物。
【請求項６】
前記ＮＰの細胞が、個体に提供する前にｅｘ  ｖｉｖｏで修飾される、請求項１から５のいずれか一項記載の組成物。
【請求項７】
前記線維芽細胞、脊索細胞および／またはＴｉｅ２＋細胞が、ｅｘ  ｖｉｖｏで修飾される、請求項５記載の組成物。
【請求項８】
細胞が、前記提供する工程の前に低酸素、機械的負荷またはその組合せに曝露される、請求項１から７のいずれか一項記載の組成物。
【請求項９】
前記機械的負荷が、断続的な静水圧、流体ずり応力、低酸素分圧、直接加圧またはその組合せを含む、請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
前記Ｔｉｅ２遺伝子産物が、１つまたは複数の前記細胞によって産生される、請求項１から９のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１１】
前記Ｓｏｘ９遺伝子産物が、１つまたは複数の前記細胞によって産生される、請求項１から９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記薬剤が、ＣＯＬ１Ａ１、ＣＯＬ１Ａ２、ＣＯＬ２Ａ１、ＣＯＬ３Ａ１、ＣＯＬ４Ａ１、ＣＯＬ４Ａ２、ＣＯＬ４Ａ３、ＣＯＬ４Ａ４、ＣＯＬ４Ａ５、ＣＯＬ４Ａ６、ＣＯＬ５Ａ１、ＣＯＬ５Ａ２、ＣＯＬ５Ａ３、ＣＯＬ６Ａ１、ＣＯＬ６Ａ２、ＣＯＬ６Ａ３、ＣＯＬ６Ａ４、ＣＯＬ６Ａ５、ＣＯＬ７Ａ１、ＣＯＬ８Ａ１、ＣＯＬ８Ａ２、ＣＯＬ９Ａ１、ＣＯＬ９Ａ２、ＣＯＬ９Ａ３、ＣＯＬ１０Ａ１、ＣＯＬ１１Ａ１、ＣＯＬ１１Ａ２、ＣＯＬ１２Ａ１、ＣＯＬ１３Ａ１、ＣＯＬ１４Ａ１、ＣＯＬ１５Ａ１、ＣＯＬ１６Ａ１、ＣＯＬ１７Ａ１、ＣＯＬ１８Ａ１、ＣＯＬ１９Ａ１、ＣＯＬ２０Ａ１、ＣＯＬ２１Ａ１、ＣＯＬ２２Ａ１、ＣＯＬ２３Ａ１、ＣＯＬ２４Ａ１、ＣＯＬ２５Ａ１、ＣＯＬ２６Ａ１、ＣＯＬ２７Ａ１、ＣＯＬ２８Ａ１、Ｇａｔａ４、Ｍｅｆ２Ｃ、Ｔｂｘ５、Ｓｏｘ５、Ｓｏｘ６、Ｓｏｘ９、ＦＧＦＲ２、ＶＥＧＦ、ＭＭＰ１４、フォークヘッド、ＣＤ１０、ＭＭＰ１３、ＷＮＴ１１、ＢＡＰＸ１、ＩＬ−１Ｒ１、ＩＧＦＢＰ５、ＭＭＰ１６、ＢＭＰ２、ＡＬＫ１、ＢＭＰ５、ＩＧＦ１、ＭＭＰ１３、ＡＤＡＭＴＳ５、ＢＣＬ１０、ＭＣＯＬＮ２、ＬＲＲＣ８Ｃ、ＰＴＧＦＲ、ＲＬＦ、ＭＡＴＮ１、ＰＤＰＮ、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＩＴＧＡ１０、ＴＨＢＳ３、ＳＣＹＬ１ＢＰ１、ＫＣＮＴ２、２４４５３３＿ａｔ、ＡＲＦ１、２２２３４８＿ａｔ、ＳＬＣ４Ａ５、ＨＳＰＣ１５９、ＲＨＯＱ、ＭＡＴＮ３、ＳＵＬＴ１Ｃ２、２３６２８９＿ａｔ、ＢＣＬ２Ｌ１１、ＦＬＪ１６００８、ＫＬＦ７、ＮＲＰ２、ＳＥＲＰＩＮＥ２、ＦＮ１、Ｂ３ＧＮＴ７、ＡＤＡＭＴＳ９、ＡＮＫＲＤ２８、ＧＡＬＮＴＬ２、ＩＲＡＫ２、ＳＥＴＤ５、ＦＮＤＣ３Ｂ、Ｂ３ＧＮＴ５、ＣＹＴＬ１、ＩＢＳＰ、２２９２２１＿ａｔ、ＰＥＴ１１２Ｌ、ＥＤＮＲＡ、１５６３４１４＿ａｔ、ＯＳＭＲ、Ｃ１ＱＴＮＦ３、ＺＦＹＶＥ１６、２２５６１１＿ａｔ、ＭＡＳＴ４、ＥＤＩＬ３、２３０２０４＿ａｔ、２３０８９５＿ａｔ、ＨＡＰＬＮ１、ＰＤＬＩＭ４、ｃｒ５ｑ３５  ＳＱＳＴＭ１、ＳＣＵＢＥ３、ＣＭＡＨ、２３６６８５＿ａｔ、ＢＭＰ６、ＵＬＢＰ２、ＬＲＰ１１、ＳＯＤ２、ＳＹＮＪ２、ＷＴＡＰ、ＨＩＧ２、ＫＩＡＡ１７１８、ＦＡＭ６２Ｂ、ＵＢＥ３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＳＬＣ２５Ａ３７、ＣｈＧｎ、ＲＢ１ＣＣ１、Ｃ８ｏｒｆ７２、ＥＩＦ２Ｃ２、ＨＡＳ２、ＴＲＰＳ１、ＷＩＳＰ１、２３５８２１＿ａｔ、ＰＴＫ２、ＺＣＣＨＣ７、ＲＰＳ６、ＧＬＩＳ３、ＳＬＣ２８Ａ３、１５５５８４１＿ａｔ、ＭＧＣ１７３３７、ＥＤＧ２、２２９２４２＿ａｔ、ＩＴＧＢ１、Ｃ１０ｏｒｆ４９、ＹＭＥ１Ｌ１、ＡＫＲ１Ｃ２、ＣＨＳＴ３、ＬＯＸＬ４、ＳＦＸＮ３、２２８９１０＿ａｔ、ＣＤ４４、ＦＯＳＬ１、ＲＥＬＡ、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ３、ＫＩＡＡ０９９９、ＡＳＡＭ、ＬＯＣ３９９９５９、ＥＴＮＫ１、ＳＯＸ５、ＣＨＳＴ１１、ＡＴＦ１、ＳＲＧＡＰ１、ＤＳＰＧ３、ＬＯＣ３３８７５８、ＫＩＡＡ０７０１、ＳＬＣ４１Ａ２、ＲＨＯＦ、ＦＺＤ１０、ＮＵＰＬ１、ＵＳＰ１２、ＵＦＭ１、ＬＥＣＴ１、ＧＰＣ６、ＥＲＯ１Ｌ、ＢＤＫＲＢ１、ＳＥＭＡ６Ｄ、ＬＡＣＴＢ、ＡＲＩＨ１、ＣＳＰＧ４、ＡＧＣ１、ＬＯＣ２８３８２４、ＶＡＳＮ、ＷＷＰ２、ＮＯＳ２Ａ、ＬＯＣ２０１１８１、���ＳＩ２、ＰＩＴＰＮＣ１、ＴＧＩＦ、１５５２２８８＿ａｔ、１５５２２８９＿ａ＿ａｔ、ＺＮＦ１４６、ＲＥＬＢ、ＭＩＡ、ＺＮＦ１６０、ＳＮＸ５、ＢＭＰ２、ＲＮＦ２４、ＨＳＵＰ１、ＭＡＴＮ４、ＢＩＣ、ＲＵＮＸ１、ＬＩＦ、ＲＰ４−７５６Ｇ２３．１、ＲＰＳ６ＫＡ３、ＴＮＭＤ、ＲＰ６−２１３Ｈ１９．１、およびその組合せからなる群から選択される遺伝子産物を含む、請求項３または４記載の組成物。
【請求項１３】
前記細胞が、前記個体に対して自家、同種異系または異種である、請求項１から１２のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１４】
前記変性した椎間板の検出をさらに含む、請求項１から１３のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１５】
前記変性した椎間板が、変性している疑いがある前記個体の椎間板のＮＰ中の脊索細胞のレベルを測定することによって検出される、請求項１４記載の組成物。
【請求項１６】
前記変性した椎間板が、構造的または非構造的に検出される、請求項１４記載の組成物。
【請求項１７】
非構造的検出が、生化学または分子手段を含む、請求項１６記載の組成物。
【請求項１８】
前記個体が、線維芽細胞、幹細胞および／または脂肪細胞の有効量も提供される、請求項１から１７のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１９】
それを必要とする個体の脊椎円板において軟骨を修復および／または再生する方法のための組成物であって、該方法が、
ａ）該個体の椎間板に線維芽細胞、幹細胞、脂肪細胞またはその組合せを提供する工程と；
ｂ）該個体の椎間板に髄核（ＮＰ）由来の１つまたは複数の成分を提供する工程と；
ｃ）該個体の椎間板に、
１）Ｔｉｅ２＋細胞；
２）Ｔｉｅ２遺伝子産物；
３）多血小板血漿（ＰＲＰ）；
４）ＰＲＰ＋細胞；
５）Ｓｏｘ９遺伝子産物；
６）Ｓｏｘ９＋細胞；
７）ＴＧＦＢ１遺伝子産物；
８）ＴＧＦＢ１＋細胞；
９）ＣＴＧＦ遺伝子産物；
１０）ＣＴＧＦ＋細胞；
１１）ＷＩＳＰ１遺伝子産物；
１２）ＷＩＳＰ１＋細胞；
１３）ＷＩＳＰ２遺伝子産物；および／または
１４）ＷＩＳＰ２＋細胞
のうち１つまたは複数を提供する工程と
を含み、
該組成物が、同じ個体または同じもしくは異なる種由来の別の個体の髄核（ＮＰ）由来の１つまたは複数の成分を有効量含有する、組成物。
【請求項２０】
前記ＮＰの前記１つまたは複数の成分が、脊索細胞、小さい軟骨細胞様細胞、コラーゲン原線維および／またはアグリカンを含む、請求項１９記載の組成物。
【請求項２１】
工程ａ）が、工程ｂ）および／またはｃ）の前に行われる、請求項１９または２０記載の組成物。
【請求項２２】
前記個体が、線維芽細胞、幹細胞および／または脂肪細胞の有効量も提供される、請求項１９から２１のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２３】
それを必要とする個体の脊椎円板において軟骨を修復および／または再生する方法のための組成物であって、該方法が、
ａ）、ｂ）および／またはｃ）に挙げた組成物のうち１つまたは複数を、ａ）、ｂ）および／またはｃ）に挙げた組成物の別の１つまたは複数と組み合わせて、
ａ）線維芽細胞、幹細胞、脂肪細胞またはその組合せ；
ｂ）髄核（ＮＰ）由来の１つまたは複数の成分；
ｃ）
１）Ｔｉｅ２＋細胞；
２）Ｔｉｅ２遺伝子産物；
３）多血小板血漿（ＰＲＰ）；
４）ＰＲＰ＋細胞；
５）Ｓｏｘ９遺伝子産物；および
６）Ｓｏｘ９＋細胞；
７）ＴＧＦＢ１遺伝子産物；
８）ＴＧＦＢ１＋細胞；
９）ＣＴＧＦ遺伝子産物；
１０）ＣＴＧＦ＋細胞；
１１）ＷＩＳＰ１遺伝子産物；
１２）ＷＩＳＰ１＋細胞；
１３）ＷＩＳＰ２遺伝子産物；および／または
１４）ＷＩＳＰ２＋細胞
のうち１つまたは複数の混合物
を作製する工程と；
該個体に該混合物を提供する工程と
を含み、
該組成物が、該混合物を含む、組成物。
【請求項２４】
前記混合物が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで生成される、請求項２３記載の組成物。
【請求項２５】
前記混合物が、ｉｎ  ｖｉｖｏで生成される、請求項２３記載の組成物。
【請求項２６】
前記混合物が、注射、開口切開を介する挿入、カテーテル、またはその組合せによって前記個体に送達される、請求項２３から２５のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２７】
前記個体が、線維芽細胞、幹細胞および／または脂肪細胞の有効量も提供される、請求項２３から２６のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２８】
変性過程を発病していない人間の椎間板由来の、またはその中に見いだせる細胞混成物の有効量を含有する、個体において老化した椎間板の状態を改善するための組成物。
【請求項２９】
前記細胞混成物が、線維芽細胞；幹細胞；脂肪細胞；脊索細胞；Ｔｉｅ２＋細胞；ＰＲＰ＋細胞；Ｓｏｘ９＋細胞；ＴＧＦＢ１＋細胞；ＣＴＧＦ＋細胞；ＷＩＳＰ１＋細胞、ＷＩＳＰ２＋細胞またはその組合せを含む、請求項２８記載の組成物。
【請求項３０】
前記個体が、Ｔｉｅ２遺伝子産物；多血小板血漿（ＰＲＰ）；Ｓｏｘ９遺伝子産物；ＴＧＦＢ１遺伝子産物；ＣＴＧＦ遺伝子産物；ＷＩＳＰ１遺伝子産物；ＷＩＳＰ２遺伝子産物；またはその組合せのうち１つまたは複数を提供される、請求項２８または２９記載の組成物。