【手続補正書】
【提出日】平成31年4月11日(2019.4.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）非細胞透過性タンパク質、
（ｉｉ）ホスホロチオエート核酸、及び
（ｉｉｉ）前記ホスホロチオエート核酸を前記非細胞透過性タンパク質に結合させる非共有結合リンカー
を含む細胞透過性コンジュゲートであって、
前記非共有結合リンカーが、ビオチンドメインに非共有結合しているビオチン結合ドメインを含み、
前記ホスホロチオエート核酸が、前記非細胞透過性タンパク質の細胞内送達を増強する、細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２】
前記ビオチン結合ドメインがアビジンドメインである、請求項１に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項３】
前記ビオチン結合ドメインがストレプトアビジンドメインである、請求項１に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項４】
前記ストレプトアビジンドメインが複数のビオチンドメインに結合する、請求項３に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項５】
前記ストレプトアビジンドメインが約４つのビオチンドメインに結合する、請求項４に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項６】
前記ビオチン結合ドメインが前記非細胞透過性タンパク質に共有結合している、請求項１〜５のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項７】
複数のビオチン結合ドメインが前記非細胞透過性タンパク質に結合している、請求項１〜６のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項８】
前記ビオチンドメインが前記ホスホロチオエート核酸に結合している、請求項１〜７のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項９】
前記ビオチンドメインが前記ホスホロチオエート核酸に共有結合している、請求項８に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１０】
複数のホスホロチオエート核酸が前記ビオチンドメインに結合している、請求項８又は９に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１１】
前記ホスホロチオエート核酸が約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００又はそれよりも多い核酸残基長である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１２】
前記ホスホロチオエート核酸が約１０〜約３０核酸残基長である、請求項１１に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１３】
前記ホスホロチオエート核酸が約２０核酸残基長である、請求項１１に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１４】
前記非細胞透過性タンパク質が２５ｋＤ超の分子量を有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１５】
前記非細胞透過性タンパク質が約２５ｋＤ〜約７５０ｋＤの分子量を有する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１６】
前記非細胞透過性タンパク質が抗体である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１７】
前記抗体がＩｇＧ抗体である、請求項１６に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１８】
前記抗体がＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ又はＩｇＥ抗体である、請求項１６に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項１９】
前記抗体がＦｖ断片である、請求項１６に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２０】
前記抗体がヒト化抗体である、請求項１６〜１９のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２１】
前記非細胞透過性タンパク質が細胞内標的に結合する、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２２】
前記細胞内標的が、自己免疫疾患、炎症性疾患、代謝障害、発達障害、循環器疾患、肝疾患、腸疾患、感染症、内分泌疾患、神経障害、及びがんからなる群から選択される疾患の標的である、請求項２１に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２３】
前記細胞内標的が、シグナル伝達分子又は転写因子である、請求項２１又は２２に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２４】
前記シグナル伝達分子がホスファターゼ又はキナーゼである、請求項２３に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２５】
前記細胞内標的が、がん標的である、請求項２１に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２６】
前記細胞内標的が、ＳＴＡＴ３、及びＳｒｃからなる群から選択される、請求項２１に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２７】
前記細胞内標的が、リン酸化Ｓｒｃである、請求項２１に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２８】
前記非細胞透過性タンパク質が、前記タンパク質に結合している標識、小分子又は機能的核酸をさらに含む、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項２９】
前記細胞透過性コンジュゲートが細胞内標的に結合している、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート。
【請求項３０】
細胞透過性コンジュゲートを形成する方法であって、
非細胞透過性タンパク質をホスホロチオエート核酸に接触させるステップと、ここで、前記非細胞透過性タンパク質はビオチン結合対の第１のメンバーに結合しており、前記ホスホロチオエート核酸は前記ビオチン結合対の第２のメンバーに結合している、
それによってビオチンドメインとビオチン結合ドメインの間に非共有結合を含む細胞透過性コンジュゲートを形成するステップと
を含む、方法。
【請求項３１】
前記ビオチン結合対の前記第１のメンバーがビオチン結合ドメインである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記ビオチン結合対の前記第２のメンバーがビオチンドメインである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記ビオチン結合対の前記第１のメンバーがビオチンドメインである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記ビオチン結合対の前記第２のメンバーがビオチン結合ドメインである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
前記ホスホロチオエート核酸が共有結合反応性部分を含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３６】
請求項１〜２９のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲートを含む細胞。
【請求項３７】
請求項１〜２９のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート及び医薬として許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項３８】
１つ以上のホスホロチオエート核酸を第２の非細胞透過性タンパク質に結合させる第２の非共有結合リンカーを含む前記第２の非細胞透過性タンパク質をさらに含む、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記非共有結合リンカーがビオチンドメインに非共有結合しているビオチン結合ドメインを含む、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記第２の非細胞透過性タンパク質が細胞内標的に結合する、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記第２の非細胞透過性タンパク質が、請求項２１〜２７のいずれか一項に記載の前記非細胞透過性タンパク質に対して細胞内標的上の異なるエピトープに結合する、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
前記第２の非細胞透過性タンパク質が第２の細胞内標的に結合する、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記第２の非細胞透過性タンパク質が抗体である、請求項３８〜４２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
請求項１〜２９のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲート又は請求項３７に記載の医薬組成物及び使用説明書を含むキット。
【請求項４５】
１つ以上のホスホロチオエート核酸を第２の非細胞透過性タンパク質に結合させる第２の非共有結合リンカーを含む前記第２の非細胞透過性タンパク質をさらに含む、請求項４４に記載のキット。
【請求項４６】
請求項１〜２９のいずれか一項に記載のコンジュゲート及び前記第２の非細胞透過性タンパク質が別々の容器にある、請求項４５に記載のキット。
【請求項４７】
前記第２の非細胞透過性タンパク質が、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の非細胞透過性タンパク質に対して細胞内標的上の異なるエピトープに結合する、請求項４５又は４６に記載のキット。
【請求項４８】
前記第２の非細胞透過性タンパク質が第２の細胞内標的に結合する、請求項４５〜４７のいずれか一項に記載のキット。
【請求項４９】
前記第２の非細胞透過性タンパク質が、前記第２の非細胞透過性タンパク質及び医薬として許容される担体を含む医薬組成物として処方される、請求項４５〜４８のいずれか一項に記載のキット。
【請求項５０】
請求項１〜２９のいずれか一項に記載のコンジュゲート及び前記第２の非細胞透過性タンパク質が同時に投与される、請求項４５〜４９のいずれか一項に記載のキット。
【請求項５１】
請求項１〜２９のいずれか一項に記載のコンジュゲート及び前記第２の非細胞透過性タンパク質が順次に投与される、請求項４５〜４９のいずれか一項に記載のキット。
【請求項５２】
前記第２の非細胞透過性タンパク質が抗体である、請求項４５〜４９のいずれか一項に記載のキット。
【請求項５３】
第２の治療薬をさらに含む、請求項４５〜５２のいずれか一項に記載のキット。
【請求項５４】
自己免疫疾患、発達障害、炎症性疾患、代謝障害、循環器疾患、肝疾患、腸疾患、感染症、内分泌疾患、神経障害、及びがんからなる群から選択される疾患を治療するために用いられる、請求項４５〜５３のいずれか一項に記載のキット。
【請求項５５】
疾患ががんである、請求項５４に記載のキット。
【請求項５６】
コンジュゲートの非細胞透過性タンパク質が細胞内標的に結合し、細胞内標的がＳＴＡＴ３又はＳｒｃである、請求項４５に記載のキット。
【請求項５７】
コンジュゲートの非細胞透過性タンパク質が細胞内標的に結合し、細胞内標的がリン酸化Ｓｒｃである、請求項４５に記載のキット。
【請求項５８】
コンジュゲートの非細胞透過性タンパク質がＳＴＡＴ３に特異的に結合する抗体であり、第２の非細胞透過性タンパク質がＳＴＡＴ３の別のエピトープに特異的に結合する抗体である、請求項４５に記載のキット。
【請求項５９】
細胞（但し、ヒトの細胞を除く）を請求項１〜２９のいずれか一項に記載の細胞透過性コンジュゲートに接触させることを含む非細胞透過性タンパク質を細胞内に送達する方法。
【請求項６０】
前記非細胞透過性タンパク質が細胞質において核タンパク質に結合し、それによって非細胞透過性タンパク質−核タンパク質複合体を形成する、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記非細胞透過性タンパク質−核タンパク質複合体が細胞の核に入ることができない、請求項６０に記載の方法。