【手続補正書】
【提出日】平成31年4月8日(2019.4.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
また、本発明は腎臓特異的クラステリンを検出する方法を提供する。該方法は、クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントおよび腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、他のクラステリンアイソフォーム（例えば、血漿クラステリン、血清クラステリン、または血液由来の、非腎臓特異的クラステリン）の炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子と、試料を接触させることを含んでなる。腎臓特異的クラステリンと、クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントと、腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、他のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子との複合体が検出される。腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、他のクラステリンアイソフォーム（例えば、血漿クラステリン、血清クラステリン、または血液由来の、非腎臓特異的クラステリン）の炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子は、１つ以上のレクチンまたは１つ以上のＮ−アセチルグルコサミンに特異的に結合する分子であることができる。１つ以上のレクチンは、Ｎ−アセチルグルコサミンに特異的に結合するレクチンであることができる。レクチンは、インゲンマメ白血球凝集素（ＰＨＡ−Ｌ）、小麦胚芽凝集素（ＷＧＡ）、ＷＧＡ１、ＷＧＡ２、ＷＧＡ３、ｓＷＧＡ、インゲンマメ凝集素−Ｅ（ＰＨＡ−Ｅ）、トマトレクチン（ＬＥＬ）、シロバナヨウシュチョウセンアサガオレクチン（ＤＳＬ）、インゲンマメ凝集素（ＰＳＡ）、またはドリコスレクチン（ＤＢＡ）とすることができる。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
本発明の実施形態では、腎臓特異的クラステリンに特異的に結合し、血漿または血清クラステリンに特異的に結合しないレクチンが使用される。本発明の実施形態では、Ｎ−アセチルグルコサミンに特異的に結合するレクチンが本発明で有用である。そのようなレクチンとしては、例えば、ＷＧＡ（小麦胚芽凝集素）、ＷＧＡ１、ＷＧＡ２、ＷＧＡ３、ｓＷＧＡ、ＤＳＬレクチン（シロバナヨウシュチョウセンアサガオレクチン）、マンノース結合レクチン、ＰＨＡ−Ｌ（インゲンマメ白血球凝集素）、ＰＨＡ−Ｅ（インゲンマメ赤血球凝集素）、およびＬＥＬ（トマトレクチン）が挙げられる。使用できる他のレクチンとしては、例えば、ジャカリン、ＳＴＬレクチン（ジャガイモ）、ＬＣＡレクチン（レンズマメ）、ＰＳＡレクチン（インゲンマメ凝集素）、ＥＣＬレクチン（アメリカデイゴ）、ＲＣＡレクチン（トウゴマ）、ＤＢＡレクチン（ドリコス）、ＳＢＡレクチン（ダイズ）、およびＣＯＮＡレクチン（コンカナバリン）が挙げられる。レクチンは、例えば、Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社から市販されている。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
腎臓特異的クラステリンを検出する方法であって、クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントおよび腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子と、試料とを接触させること、ならびに腎臓特異的クラステリンと、前記クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントと、前記腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子との複合体を検出することを含んでなる、方法。
【請求項２】
前記腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子が１つ以上のレクチンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に結合しない１つ以上の分子が、Ｎ−アセチルグルコサミンに特異的に結合する分子である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記１つ以上のレクチンが、Ｎ−アセチルグルコサミンに特異的に結合するレクチンである、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記１つ以上のレクチンが、インゲンマメ白血球凝集素（ＰＨＡ−Ｌ）、小麦胚芽凝集素（ＷＧＡ）、ＷＧＡ１、ＷＧＡ２、ＷＧＡ３、ｓＷＧＡ、インゲンマメ凝集素−Ｅ（ＰＨＡ−Ｅ）、トマトレクチン（ＬＥＬ）、シロバナヨウシュチョウセンアサガオレクチン（ＤＳＬ）、インゲンマメ凝集素（ＰＳＡ）、ジャカリンレクチン、ＳＴＬレクチン（ジャガイモ）、ＬＣＡレクチン（レンズマメ）、アメリカデイゴレクチン（ＥＣＬ）、トウゴマレクチン（ＲＣＡ）、ＳＢＡレクチン（ダイズ）、ＣＯＮＡレクチン（コンカナバリン）、またはドリコスレクチン（ＤＢＡ）である請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントが支持体に固相化されている、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記試料および腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない検出可能にラベルされた１つ以上の分子が、前記支持体に加えられている、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない検出可能にラベルされた１つ以上の分子がレクチンである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子が支持体に固相化されている、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記試料および検出可能にラベルされた１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントが、前記支持体に加えられている、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子がレクチンである、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記１つ以上の抗体もしくはその抗原結合性フラグメント、前記腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に結合しない１つ以上の分子、または両方が、検出可能な標識で標識されている、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記１つ以上のレクチンが血清クラステリンおよび血漿クラステリンに特異的に結合しない、請求項２に記載の方法。
【請求項１４】
前記試料が尿試料である、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記検出することが、ラテラルフローアッセイ、化学発光標識サンドイッチアッセイ、および酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、競合アッセイ、凝集アッセイ、化学発光アッセイ、生物発光アッセイ、ゲル電気泳動免疫アッセイ法、免疫組織化学アッセイ、放射免疫定量アッセイ（ＲＩＡ）、無標識のバイオセンサーアッセイ、または免疫放射定量アッセイからなる群より選択される方法によって達成される、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記抗体が、血漿クラステリン、血清クラステリン、組換えクラステリン、腎臓特異的クラステリン、またはＭＤＣＫ由来クラステリンに特異的に結合する請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記腎臓特異的クラステリンが、ヒト、ネコ、またはイヌのものである請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
哺乳類の腎疾患、腎障害、または腎損傷を検出する方法であって、クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントおよび腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子と、哺乳類の試料を接触させること、ならびに腎臓特異的クラステリンと、クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントと、腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合しない１つ以上の分子との複合体を検出することを含んでなり、前記複合体が検出された場合、前記哺乳類が腎疾患、腎障害、または腎損傷を有する、方法。
【請求項１９】
前記哺乳類が腎疾患、腎障害、または腎損傷を有する場合に、腎治療または腎治療薬を前記哺乳類に施行することをさらに含んでなる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記腎疾患が尿路感染症である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記哺乳類が、ヒト、ネコ、またはイヌである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
１つ以上のクラステリンアイソフォームを他のタイプのクラステリンアイソフォームと識別する方法であって、クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントおよび前記１つ以上のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合し、前記他のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に結合しない１つ以上の分子と、試料を接触させること、ならびに前記クラステリンの１つ以上のアイソフォームと、クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントと、前記１つ以上のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に特異的に結合し、前記他のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に結合しない前記１つ以上の分子との複合体を検出することを含んでなる、方法。
【請求項２３】
前記１つ以上のクラステリンアイソフォームが腎臓特異的クラステリンであり、且つ前記他のクラステリンアイソフォームが血清クラステリンまたは血漿クラステリンである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記１つ以上のクラステリンアイソフォームが、ヒト、ネコ、またはイヌのクラステリンアイソフォームである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
１つ以上のクラステリン分子と、クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントと、１つ以上のレクチンとを含んでなる複合体。
【請求項２６】
１つ以上の腎臓特異的クラステリン分子と、クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントと、腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に結合しない１つ以上の分子とを含んでなる、請求項２５に記載の複合体。
【請求項２７】
固体支持体に固相化される請求項２５に記載の複合体。
【請求項２８】
クラステリンと特異的に結合する１つ以上の抗体またはその抗原結合性フラグメントおよび１つ以上の前記腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に結合しない１つ以上の分子を含んでなるキット。
【請求項２９】
前記１つ以上の抗体もしくはその抗原結合性フラグメント、前記腎臓特異的クラステリンの炭水化物部分に特異的に結合し、非腎臓特異的で、血液由来のクラステリンアイソフォームの炭水化物部分に結合しない１つ以上の分子、または両方が、検出可能な標識で標識されている、請求項２８に記載のキット。
【請求項３０】
前記検出可能な標識が、酵素、酵素結合体、蛍光化合物、化学発光化合物、放射性元素、直接的可視標識、または磁性粒子である、請求項２９に記載のキット。
【請求項３１】
クラステリンおよびクラステリンアイソフォームの検出を向上させる方法であって、１つ以上のクラステリン抗体またはその特異的結合性フラグメント、およびクラステリンの１つ以上の炭水化物部分に特異的に結合する１つ以上の分子と、試料を接触させることを含んでなる、方法。