【手続補正書】
【提出日】令和1年10月2日(2019.10.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．任意に活性成分化合物を含むコア、
ｂ．少なくとも２つの層を含むシェル構造であって、前記少なくとも２つの層は、交互にタンパク質層及びポリフェノール層である該シェル構造及び
ｃ．前記コア及び前記シェル構造を結合する高分子電解質層であって、前記高分子電解質層は、前記タンパク質層又は前記ポリフェノール層に隣接して配置される該高分子電解質層
を含み、
前記シェル構造は、胃の条件下での分解に耐性があるが、１種以上の腸の酵素によって分解することが可能であるように選択され、
前記シェル構造の最外層は、ポリフェノール層である
コアシェル複合材。
【請求項２】
前記高分子電解質は、ポリ（Ｌ−リジン）、ポリ（Ｌ−アルギニン）、キトサン、デキストラン、デンプン、セルロース又はその誘導体から選択される請求項１に記載のコアシェル複合材。
【請求項３】
前記タンパク質は、アルファｓ１カゼイン、ペプシン、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、オボアルブミン、リゾチーム、ウシ血液由来のヘモグロビン、キモトリプシン、β−ラクトグロブリン、トリプシン、ユビキチン、レクチン、ラクトペルオキシダーゼ、ウサギの筋肉からのミオシン、アクチン、カッパ−カゼイン、ベータ−カゼイン、アルファラクトアルブミン、ウシ頸部靱帯からのエラスチン又はフェリチンから選択される請求項１又は２に記載のコアシェル複合材。
【請求項４】
前記タンパク質層は、胃の消化酵素によるタンパク質分解に耐性があり、３０％未満の前記胃の酵素で切断可能なアミノ酸残基対総アミノ酸残基の割合を有することを特徴とする上記請求項の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項５】
前記タンパク質層は、３５％を超える総切断可能残基対総アミノ酸残基の割合を有することを更に特徴とする請求項１〜４の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項６】
前記最外のポリフェノール層は、少なくとも１種の胃の消化酵素と反応し、それによって前記胃の消化酵素の層をそれに結合させることを特徴とする請求項１〜５の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項７】
前記胃の消化酵素がペプシンである請求項４に記載のコアシェル複合材。
【請求項８】
前記タンパク質は、ＢＳＡ又はペプシンから選択される請求項３〜７の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項９】
各ポリフェノール層は、独立に、没食子酸、カテキン類、エピカテキン類、プロアントシアニジン、アントシアニジン、ガロイル化カテキン類、フラボノイド、イソフラボノイド、ネオフラボノイド、フラボン、又はタンニンから選択されるか、又はその誘導体である上記請求項の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項１０】
前記最外のポリフェノール層は、タンニン、タンニン酸又はその誘導体である請求項１〜９の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項１１】
前記活性成分は、薬学的に活性な化合物又はその塩、食品添加物、多糖類、ホルモン、生物活性剤、タンパク質、酵素、ペプチド、ポリペプチド、プレバイオティクス、植物化学物質、プロバイオティクス、ビタミン、並びにそれらの混合物及び錯体からなる群から選択される上記請求項の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項１２】
前記シェル構造の総厚さは、５ｎｍから１００ｎｍまでである上記請求項の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項１３】
前記複合シェルは、実質的に球体の形状であり、約０．５μｍから約１０μｍまでの直径を有する上記請求項の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項１４】
前記胃の条件は、約ｐＨ３及び少なくとも１種の胃の酵素の存在によって特徴づけられる上記請求項の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項１５】
前記胃の酵素がペプシンである請求項１４に記載のコアシェル複合材。
【請求項１６】
前記腸の酵素は、膵臓又は小腸から分泌される１種以上の酵素である上記請求項の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項１７】
前記腸の酵素は、トリプシン、キモトリプシン、エラスターゼ、エンテロキナーゼ、カルボキシペプチダーゼ、アミノペプチダーゼ、ジペプチダーゼ及びその混合物の群から選択される請求項１６に記載のコアシェル複合体。
【請求項１８】
前記腸の酵素は、トリプシン、キモトリプシン又はその混合物である請求項１７に記載のコアシェル複合材。
【請求項１９】
ａ）少なくとも１つのタンパク質層及び少なくとも１つのポリフェノール層を交互に堆積し、それによってカプセル化された活性成分を包む多層のシェル構造を形成する工程を含み、
前記タンパク質層は、前記シェル構造が胃の条件下での分解に耐性があるが、１種以上の腸の酵素によって分解可能であるように選択され、
前記活性成分は、前記堆積工程の前に高分子電解質によってカプセル化され、前記堆積工程は前記ポリフェノール層を最外層として堆積することを更に含む、
コアシェル複合材を調製する方法。
【請求項２０】
前記活性成分は、固体の支持体に吸収される請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記タンパク質層は、胃の消化酵素によるタンパク質分解に耐性があり、３０％未満の、前記胃の酵素によって切断可能残基対総アミノ酸残基の割合を有することを特徴とする請求項１９又は２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記タンパク質層は、３５％を超える総切断可能残基対総アミノ酸残基の割合を有することを特徴とする請求項１９〜２１の何れか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記固体の支持体は、多孔質構造を含む請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
前記方法は、前記堆積工程の前、間又は後に前記固体の支持体を除去する工程を更に含む請求項１９〜２３の何れか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記除去工程は、前記固体の支持体を化学的に分解することを含む請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記堆積工程（ａ）は、交互に、活性成分をタンパク質溶液に混合して前記タンパク質層を形成し、次いで、ポリフェノール溶液中に混合して前記タンパク質層上に前記ポリフェノール層を形成し、それによって前記多層のシェル構造を形成することを含む交互層堆積である請求項１９〜２５の何れか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記堆積工程は、前記高分子電解質層に隣接して前記タンパク質層を堆積することを含む請求項１９〜２６の何れか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記堆積工程は、前記高分子電解質層に隣接して前記ポリフェノール層を堆積することを含む請求項１９〜２６の何れか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記高分子電解質は、ポリ（Ｌ−リジン）、ポリ（Ｌ−アルギニン）、キトサン、デキストラン、デンプン、セルロース又はその誘導体から選択される請求項１９〜２８の何れか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記タンパク質は、アルファｓ１カゼイン、ペプシン、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、オボアルブミン、リゾチーム、ウシ血液由来のヘモグロビン、キモトリプシン、β−ラクトグロブリン、トリプシン、ユビキチン、レクチン、ラクトペルオキシダーゼ、ウサギの筋肉からのミオシン、アクチン、カッパ−カゼイン、ベータ−カゼイン、アルファラクトアルブミン、ウシ頸部靱帯からのエラスチン又はフェリチンから選択される請求項１９〜２９の何れか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記タンパク質は、ＢＳＡ又はペプシンから選択される請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
各堆積された前記ポリフェノール層は、独立に、没食子酸、カテキン類、エピカテキン類、プロアントシアニジン、アントシアニジン、ガロイル化カテキン類、フラボノイド、イソフラボノイド、ネオフラボノイド、フラボン、又はタンニンから選択されるか、又はその誘導体である請求項１９〜３１の何れか１項に記載の方法。
【請求項３３】
治療に用いるための請求項１〜１８の何れか１項に記載のコアシェル複合材。
【請求項３４】
医薬の製造における請求項１〜１８の何れか１項に記載のコアシェル複合材の使用であって、前記医薬はヒト又は動物の小腸へ活性成分を送達するように構成されている使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
第１の側面によれば、ａ）任意に活性成分化合物を含むコア、ｂ）少なくとも２つの層を含むシェル構造（前記少なくとも２つの層は、タンパク質層及びポリフェノール層である）、及びｃ）前記コア及び前記シェル構造を接続する高分子電解質層（前記高分子電解質層は、前記タンパク質層又は前記ポリフェノール層に隣接して配置されている）を含み、前記シェル構造は、胃の条件下での分解に耐性があるが、１種以上の腸の酵素によって分解可能であるように選択され、前記シェル構造の最外層はポリフェノール層であるコアシェル複合材が提供される。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
他の側面に従うと、上記のコアシェル複合材を調製する方法が提供され、当該方法はａ）少なくとも１つのタンパク質層及び少なくとも１つのポリフェノール層を交互に堆積し、それによって活性成分を包含する多層シェル構造を形成することを含み、前記タンパク質層は、前記シェル構造が胃の条件下で分解に耐性があるが、１種以上の腸の酵素によって分解することが可能であるように選択され、前記活性成分は、前記堆積工程の前に高分子電解質によってカプセル化され、前記堆積工程は前記ポリフェノール層を最外層として堆積することを更に含む。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
この堆積工程は、逆に帯電した層を介在させてシェル構造を形成することを含み得る。堆積工程は、シェル構造の交互のタンパク質／ポリフェノール層を作製するための交互層（ＬＢＬ）堆積を含み得る。堆積工程は、シェルの所望の厚さ及びシェルの層の所望の数を達成するために必要に応じて繰り返され得る。有利には、本方法は、コアシェル複合材構造の簡単な合成を提供する。開示された方法は、更に、溶解／加水分解プロファイルを調節するための異なるタンパク質及び／又はポリフェノールの種々の組み合わせを許容する。これは、次に制御放出又は持続放出の薬学的担体としての潜在的な適用により、活性成分の送達速度の微調整を可能にする。このカスタマイズ可能な特性は、更に、例えば、シェル構造に、固有の／部位特異的酵素によって加水分解可能な特定のタンパク質を用いることによって、活性成分送達の意図した部位を妥当な正確さで選択することを許容する。他の側面において、治療に用いられるための本明細書の開示されたコアシェル複合材が提供される。他の側面において、本明細書に開示されたコアシェル複合材の医薬の製造における使用が提供され、前記医薬は、ヒト又は動物の小腸に活性成分を送達するように構成される。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８８】
前述の開示を読んだ後で、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、本発明の様々な他の改変及び適合が当業者に明らかであろうことが明確であろうし、そのような改変及び適合の全てが添付の特許請求の範囲の範囲内であることが企図されている。
以下に、本願出願の当初の特許請求の範囲に記載された発明を付記する。
［１］
ａ．任意に活性成分化合物を含むコア、
ｂ．少なくとも２つの交互の層を含むシェル構造であって、前記交互の層は、タンパク質層又はポリフェノール層から選択される該シェル構造及び
ｃ．任意に、前記コア及び前記シェル構造を結合する高分子電解質層であって、前記高分子電解質層は、前記タンパク質層又は前記ポリフェノール層に隣接して配置される該高分子電解質層
を含み、
前記シェル構造は、胃の条件下での分解に耐性があるが、１種以上の腸の酵素によって分解することが可能であるように選択される
コアシェル複合材。
［２］
前記シェル構造の最外層は、ポリフェノール層である、［１］に記載のコアシェル複合材。
［３］
前記高分子電解質は、ポリ（Ｌ−リジン）、ポリ（Ｌ−アルギニン）、キトサン、デキストラン、デンプン、セルロース又はその誘導体から選択される［１］又は［２］に記載のコアシェル複合材。
［４］
前記タンパク質は、アルファｓ１カゼイン、ペプシン、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、オボアルブミン、リゾチーム、ウシ血液由来のヘモグロビン、キモトリプシン、β−ラクトグロブリン、トリプシン、ユビキチン、レクチン、ラクトペルオキシダーゼ、ウサギの筋肉からのミオシン、アクチン、カッパ−カゼイン、ベータ−カゼイン、アルファラクトアルブミン、ウシ頸部靱帯からのエラスチン又はフェリチンから選択される［１］〜［３］の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［５］
前記タンパク質層は、胃の消化酵素によるタンパク質分解に耐性があり、３０％未満の前記胃の酵素で切断可能なアミノ酸残基対総アミノ酸残基の割合を有することを特徴とする上記の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［６］
前記タンパク質層は、３５％を超える総切断可能残基対総アミノ酸残基の割合を有することを更に特徴とする［１］〜［５］の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［７］
前記最外のポリフェノール層は、少なくとも１種の胃の消化酵素と反応し、それによって前記胃の消化酵素の層をそれに結合させることを特徴とする［２］〜［６］の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［８］
前記胃の消化酵素がペプシンである［５］に記載のコアシェル複合材。
［９］
前記タンパク質は、アルファｓ１カゼイン、ペプシン、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、オボアルブミン、リゾチーム、ウシ血液由来のヘモグロビン、キモトリプシン、β−ラクトグロブリン、トリプシン、ユビキチン、レクチン、ラクトペルオキシダーゼ、ウサギの筋肉からのミオシン、アクチン、カッパ−カゼイン、ベータ−カゼイン、アルファラクトアルブミン、ウシ頸部靱帯からのエラスチン又はフェリチンから選択される上記の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［１０］
前記タンパク質は、ＢＳＡ又はペプシンから選択される［９］に記載のコアシェル複合材。
［１１］
各ポリフェノール層は、独立に、没食子酸、カテキン類、エピカテキン類、プロアントシアニジン、アントシアニジン、ガロイル化カテキン類、フラボノイド、イソフラボノイド、ネオフラボノイド、フラボン、又はタンニンから選択されるか、又はその誘導体である上記の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［１２］
前記最外のポリフェノール層は、タンニン、タンニン酸又はその誘導体である［２］〜［１１］の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［１３］
前記活性成分は、薬学的に活性な化合物又はその塩、食品添加物、多糖類、ホルモン、生物活性剤、タンパク質、酵素、ペプチド、ポリペプチド、プレバイオティクス、植物化学物質、プロバイオティクス、ビタミン、並びにそれらの混合物及び錯体からなる群から選択される上記の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［１４］
前記シェル構造の総厚さは、５ｎｍから１００ｎｍまでである上記の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［１５］
前記複合シェルは、実質的に球体の形状であり、約０．５μｍから約１０μｍまでの直径を有する上記の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［１６］
前記胃の条件は、約ｐＨ３及び少なくとも１種の胃の酵素の存在によって特徴づけられる上記の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［１７］
前記胃の酵素がペプシンである［１６］に記載のコアシェル複合材。
［１８］
前記腸の酵素は、膵臓又は小腸から分泌される１種以上の酵素である上記の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［１９］
前記腸の酵素は、トリプシン、キモトリプシン、エラスターゼ、エンテロキナーゼ、カルボキシペプチダーゼ、アミノペプチダーゼ、ジペプチダーゼ及びその混合物の群から選択される［１８］に記載のコアシェル複合体。
［２０］
前記腸の酵素は、トリプシン、キモトリプシン又はその混合物である［１９］に記載のコアシェル複合材。
［２１］
ａ）少なくとも１つのタンパク質層及び少なくとも１つのポリフェノール層を交互に堆積し、それによってカプセル化された活性成分を包む多層のシェル構造を形成する工程を含み、
前記タンパク質層は、前記シェル構造が胃の条件下での分解に耐性があるが、１種以上の腸の酵素によって分解可能であるように選択される
コアシェル複合材を調製する方法。
［２２］
前記活性成分は、任意に前記堆積工程の前に高分子電解質によってカプセル化され、更に、任意に、前記活性成分は、固体の支持体に吸収される［２１］に記載の方法。
［２３］
前記タンパク質層は、胃の消化酵素によるタンパク質分解に耐性があり、３０％未満の、前記胃の酵素によって切断可能残基対総アミノ酸残基の割合を有することを特徴とする［２１］又は［２２］に記載の方法。
［２４］
前記タンパク質層は、３５％を超える総切断可能残基対総アミノ酸残基の割合を有することを特徴とする［２１］〜［２３］の何れか１つに記載の方法。
［２５］
前記固体の支持体は、多孔質構造を含む［２２］に記載の方法。
［２６］
前記方法は、前記堆積工程の前、間又は後に前記固体の支持体を除去する工程を更に含む［２２］〜［２５］の何れか１つに記載の方法。
［２７］
前記除去工程は、前記固体の支持体を化学的に分解することを含む［２６］に記載の方法。
［２８］
前記堆積工程（ａ）は、交互に、活性成分をタンパク質溶液に混合して前記タンパク質層を形成し、次いで、ポリフェノール溶液中に混合して前記タンパク質層上に前記ポリフェノール層を形成し、それによって前記多層のシェル構造を形成することを含む交互層堆積である［２１］〜［２７］の何れか１つに記載の方法。
［２９］
前記堆積工程は、前記高分子電解質層に隣接して前記タンパク質層を堆積することを含む［２２］〜［２８］の何れか１つに記載の方法。
［３０］
前記堆積工程は、前記高分子電解質層に隣接して前記ポリフェノール層を堆積することを含む［２２］〜［２８］の何れか１つに記載の方法。
［３１］
前記堆積工程は、最外層として前記ポリフェノール層を堆積することを更に含む、［２１］〜［３０］の何れか１つに記載の方法。
［３２］
前記高分子電解質は、ポリ（Ｌ−リジン）、ポリ（Ｌ−アルギニン）、キトサン、デキストラン、デンプン、セルロース又はその誘導体から選択される［２１］〜［３１］の何れか１つに記載の方法。
［３３］
前記タンパク質は、アルファｓ１カゼイン、ペプシン、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、オボアルブミン、リゾチーム、ウシ血液由来のヘモグロビン、キモトリプシン、β−ラクトグロブリン、トリプシン、ユビキチン、レクチン、ラクトペルオキシダーゼ、ウサギの筋肉からのミオシン、アクチン、カッパ−カゼイン、ベータ−カゼイン、アルファラクトアルブミン、ウシ頸部靱帯からのエラスチン又はフェリチンから選択される［２１］〜［３２］の何れか１つに記載の方法。
［３４］
前記タンパク質は、ＢＳＡ又はペプシンから選択される［３３］に記載の方法。
［３５］
各堆積された前記ポリフェノール層は、独立に、没食子酸、カテキン類、エピカテキン類、プロアントシアニジン、アントシアニジン、ガロイル化カテキン類、フラボノイド、イソフラボノイド、ネオフラボノイド、フラボン、又はタンニンから選択されるか、又はその誘導体である［２１］〜［３４］の何れか１つに記載の方法。
［３６］
治療に用いるための［１］〜［２２］の何れか１つに記載のコアシェル複合材。
［３７］
医薬の製造における［１］〜［２２］の何れか１つに記載のコアシェル複合材の使用であって、前記医薬はヒト又は動物の小腸へ活性成分を送達するように構成されている使用。