【手続補正書】
【提出日】平成30年11月30日(2018.11.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
疎水性ハプテン被検体を含有すると推測される未知の試料であって干渉物質を含有すると推測される未知の試料中の被検体の実際の濃度を決定するための方法であって、下記のステップを含有する方法。
（ａ）未知の試料について第一のアッセイ方法を実行し、前記未知の試料中の前記疎水性ハプテン被検体の測定濃度を得、前記未知の試料について第二のアッセイ方法を実行して前記未知の試料中の前記干渉物質の濃度を得るステップ；及び
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた前記疎水性ハプテン被検体の前記測定された濃度及び前記干渉物質の前記測定された濃度を利用する所定の補正式を適用して、前記未知の試料中の前記疎水性ハプテン被検体の実際の濃度を決定するステップ。
ここで、前記補正式は、
（ｉ）前記第一のアッセイ方法を用いて、前記干渉物質を含有する少なくとも２つの異なる試料について、前記疎水性ハプテン被検体の濃度を測定し、参照方法を用いて、前記少なくとも２つの異なる試料について、前記疎水性ハプテン被検体の濃度を測定するステップ；
（ｉｉ）前記第一のアッセイ方法と前記参照方法との間のバイアス（ここで、バイアスとは、異なる試料のそれぞれについて前記参照方法及び前記第一の方法によって決定された疎水性ハプテン被検体の濃度の間の相違である。）を決定するステップ；
（ｉｉｉ）前記少なくとも２つの異なる試料のそれぞれについて、前記干渉物質の濃度を測定するステップ；及び
（ｉｖ）前記バイアス及び前記少なくとも２つの異なる試料のそれぞれにおける干渉物質の濃度を用いて、回帰分析を行なうことにより、補正式を決定するステップ
を含む方法により、前以って決定される。
ここで、前記回帰分析は、回帰線を形成し該回帰線の傾き及び切片を使用して下記補正式を形成することを含む。
［Ａｎ］＝［ｍＡｎ］＋（ａ×［ｍＩＳ］＋ｂ）
（式中、［Ａｎ］は、前記未知の試料中の前記疎水性ハプテン被検体の実際の濃度、［ｍＡｎ］は、前記未知の試料中の前記疎水性ハプテン被検体の測定濃度、［ｍＩＳ］は、前記未知の試料中の前記干渉物質の測定濃度、ａは、前記回帰線の傾き、そして、ｂは、前記回帰線の切片である。）
【請求項２】
前記第一のアッセイ方法が下記のステップを含有する請求項１に記載の方法。
（ｉ）前記試料中の前記疎水性ハプテン被検体の測定濃度を決定するための試薬であって、疎水性ハプテン被検体の少なくとも１つの結合パートナーを含有する試薬を、前記試料を含有する媒体に添加するステップ、及び
（ｉｉ）前記疎水性ハプテン被検体が前記疎水性ハプテン被検体の前記結合パートナーに結合する条件下に、前記媒体をインキュベートするステップ。
【請求項３】
前記疎水性ハプテン被検体が、脂溶性ビタミン、ステロイドホルモン、治療薬物及び濫用薬物からなる群から選ばれる請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記疎水性ハプテン被検体が、ビタミンＤである請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記第一のアッセイ方法が下記のステップを含む請求項１に記載の方法。
アッセイ媒体中で、前記試料を、（ｉ）前記疎水性ハプテン被検体に結合して錯体を形成できる前記疎水性ハプテン被検体の抗体及び（ｉｉ）前記疎水性ハプテン被検体錯体又は前記抗体との結合に関して前記試料中の前記疎水性ハプテン被検体と競合する疎水性ハプテン被検体類似体の量に関連する信号を発生する信号発生システムの一員であって前記抗体に結合している信号発生システムの一員と、合一するステップ、
前記錯体を形成する条件下に前記アッセイ媒体をインキュベートするステップ、
前記錯体からの信号の量を測定するステップ、及び
信号の前記量を試料中の疎水性ハプテン被検体の測定濃度と関連付けるステップ。
【請求項６】
ビタミンＤ被検体を含有すると推測される未知の試料であって、コレステロールを含有すると推測される未知の試料中の前記ビタミンＤの実際の濃度を測定する方法であって、下記のステップを含む方法。
（ａ）未知の試料について第一のアッセイ方法を実行して前記未知の試料中の前記ビタミンＤの測定濃度を得、前記未知の試料について第二のアッセイ方法を実行してコレステロールの濃度を得るステップ；及び
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた前記ビタミンＤの測定濃度及びコレステロールの測定濃度を利用する所定の補正式を適用して、前記未知の試料中の前記ビタミンＤ被検体の実際の濃度を決定するステップ。
ここで、前記補正式は、下記のステップを含む方法により、前以って決定される。
（ｉ）少なくとも２つの異なる試料であって更にコレステロールを含有する試料について、前記第一のアッセイ方法を用いて、前記ビタミンＤ被検体の濃度を測定し、且つ、前記少なくとも２つの異なる試料について、参照方法を用いて、前記ビタミンＤ被検体の濃度を測定するステップ；
（ｉｉ）前記第一のアッセイ方法と前記参照方法との間のバイアスを決定するステップ、ここで、バイアスとは、異なる試料のそれぞれについて前記参照方法及び前記第一のアッセイ方法によって決定されたビタミンＤ被検体の濃度の間の相違であり、
（ｉｉｉ）前記少なくとも２つの異なる試料のそれぞれについて、コレステロールの濃度を測定するステップ；及び
（ｉｖ）前記バイアス及び前記少なくとも２つの異なる試料のそれぞれにおけるコレステロールの濃度を用いて、回帰分析を行なうことにより、補正式を決定するステップ。
ここで、前記回帰分析は、回帰線を形成し該回帰線の傾き及び切片を使用して下記補正式を形成することを含む。
［ビタミンＤ］＝［ｍ  ビタミンＤ］＋（ａ×［ｍ  コレステロール］＋ｂ）
（式中、［ビタミンＤ］は、前記未知の試料中の前記ビタミンＤ被検体の実際の濃度、［ｍ  ビタミンＤ］は、前記未知の試料中の前記ビタミンＤ被検体の測定濃度、［ｍ  コレステロール］は、前記未知の試料中のコレステロールの測定濃度、ａは、前記回帰線の傾き、そして、ｂは、前記回帰線の切片である。）
【請求項７】
前記第一のアッセイ方法が下記のステップを含む請求項６に記載の方法。
（ｉ）前記試料中の前記ビタミンＤ被検体の前記測定濃度を決定するための試薬であって、前記ビタミンＤの少なくとも１つの結合パートナーを含有する試薬を、前記試料を含む媒体に添加するステップ、及び
（ｉｉ）前記ビタミンＤ被検体を前記ビタミンＤ被検体の前記結合パートナーに結合させる条件下に、前記媒体をインキュベートするステップ。
【請求項８】
前記第一のアッセイ方法がイムノアッセイである請求項１又は６に記載の方法。
【請求項９】
前記試料が体排出物、体吸引物、体切除物又は体抽出物である請求項１又は６に記載の方法。
【請求項１０】
前記参照方法が質量分析法、液体クロマトグラフィ、電気泳動、マイクロ流体工学、顕微鏡検査法、分光学、化学的定量法及びイムノアッセイ並びにこれらの２以上の組合せからなる群から選ばれる請求項１又は６に記載の方法。
【請求項１１】
前記回帰分析が回帰線を形成し該回帰線から補正式を展開することを含む請求項１又は６に記載の方法。
【請求項１２】
前記第一のアッセイ方法が下記のステップを含む請求項６に記載の方法。
アッセイ媒体中で、前記試料を、（ｉ）前記ビタミンＤ被検体に結合して錯体を形成できる前記ビタミンＤ被検体の抗体及び（ｉｉ）前記ビタミンＤ被検体錯体又は前記抗体との結合に関して前記試料中の前記ビタミンＤ被検体と競合するビタミンＤ被検体類似体の量に関連する信号を発生する信号発生システムの一員であって前記抗体に結合している信号発生システムの一員と、合一するステップ、
前記アッセイ媒体を前記錯体を形成する条件下にインキュベートするステップ、
前記錯体からの信号の量を測定するステップ、及び
信号の前記量を試料中のビタミンＤ被検体の測定濃度と関連付けるステップ。