【手続補正書】
【提出日】令和1年10月25日(2019.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物EphA4ポリペプチドおよびXを含む、EphA4-Xであって、該哺乳動物EphA4ポリペプチドが、野生型哺乳動物EphA4ポリペプチドの配列に対して少なくとも1つのN-グリコシル化部位が除去された改変されたアミノ酸配列を含み、かつ該Xが、免疫グロブリンの一部、タンパク質およびポリエーテルからなる群から選択される、前記EphA4-X。
【請求項２】
前記XがFc部分である、請求項1に記載のEphA4-X。
【請求項３】
前記EphA4-Xが、配列番号：1に記載の参照アミノ酸配列を有するヒトEphA4-Fcに対するアミノ酸残基216、321および/または389においてアスパラギンのアミノ酸置換を含む、請求項1または2に記載のEphA4-X。
【請求項４】
前記アミノ酸置換が、アスパラギンからグルタミンへの置換である、請求項3に記載のEphA4-X。
【請求項５】
配列番号：2〜8からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1〜4のいずれか1項に記載のEphA4-X。
【請求項６】
配列番号：8に記載のアミノ酸配列を含む、請求項1〜5のいずれか1項に記載のEphA4-X。
【請求項７】
哺乳動物対象におけるEph媒介性シグナル伝達により悪化する疾患または状態の治療のための、請求項1〜6のいずれか1項に記載のEphA-Xを含む薬学的組成物。
【請求項８】
前記哺乳動物対象がヒトである、請求項7に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
前記疾患または状態が、中枢神経系（CNS）の疾患もしくは状態、全身性脈管構造の疾患もしくは状態、脳もしくは脊髄に対する外傷もしくは損傷、神経細胞の炎症、心筋梗塞、炎症状態、または癌である、請求項7または8に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
前記CNSの疾患または状態が、神経変性状態である、請求項9に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
前記神経変性状態が運動ニューロン疾患（MND）である、請求項10に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
前記脳に対する損傷が、卒中であるか、または外傷性脳損傷もしくは血栓溶解後の脳損傷である、請求項9に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
前記全身性脈管構造の疾患または状態が、虚血性再灌流傷害、器官再灌流傷害または炎症である、請求項9に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
前記虚血性再灌流傷害が、腸虚血性再灌流傷害、腎臓再灌流または肝再灌流である、請求項13に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
請求項1〜6のいずれか1項に記載の改変EphA4-Xと、1つまたは複数の薬学的に許容可能な担体、希釈剤および/または賦形剤とを含む、薬学的組成物。
【請求項１６】
哺乳動物対象におけるEph媒介性シグナル伝達により悪化する疾患または状態の治療のための医薬の製造における、請求項1〜6のいずれか1項に記載のEphA-Xの使用。
【請求項１７】
前記哺乳動物対象がヒトである、請求項16に記載の使用。
【請求項１８】
前記疾患または状態が、中枢神経系（CNS）の疾患もしくは状態、全身性脈管構造の疾患もしくは状態、脳もしくは脊髄に対する外傷もしくは損傷、神経細胞の炎症、心筋梗塞、炎症状態、または癌である、請求項16または17に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
本明細書はさらに、増加した血清半減期を有し、かつ、EphA4シグナル伝達拮抗作用を保持する少なくとも1つのN-グリコシル化部位の排除を伴う改変EphA4-Fc分子を教示する。改変されたヒトEphA4-Fc分子の例には、配列番号：2〜8、または配列番号：10〜16に記載のマウスのような非ヒト哺乳動物における同等物が含まれる。上述のとおり、本発明は、これらに限らないが、N-グリコシル化部位が除去されたEphA（例えば、EphA1〜A8）およびEphB（例えば、EphB1〜B6）などの任意の改変されたEphを包含する。薬学的組成物および治療キットも本明細書において考慮される。
[本発明1001]
哺乳動物対象においてEph媒介性シグナル伝達により悪化する疾患または状態を治療するための方法であって、該方法が、有効量のEphA4-Xの投与を含み、該EphA4が、少なくとも1つのN-グリコシル化部位を除去するように改変されており、Xが、免疫グロブリン分子の一部、タンパク質およびポリエーテルからなる群から選択される、方法。
[本発明1002]
Xが免疫グロブリン分子のFc部分である、本発明1001の方法。
[本発明1003]
前記FcがIgG4 FcまたはIgG1 Fcである、本発明1002の方法。
[本発明1004]
前記疾患または状態が、中枢神経系（CNS）の疾患または状態である、本発明1001の方法。
[本発明1005]
CNSの疾患または状態が、神経変性状態である、本発明1004の方法。
[本発明1006]
前記神経変性状態が運動ニューロン疾患（MND）である、本発明1005の方法。
[本発明1007]
前記疾患または状態が、脳または脊髄に対する外傷または損傷である、本発明1006の方法。
[本発明1008]
前記脳への損傷が、卒中であるか、または外傷性脳損傷もしくは血栓溶解後の脳損傷である、本発明1007の方法。
[本発明1009]
前記グリコシル化部位が改変されたEphA4-Xが、神経膠症、グリア性瘢痕、ニューロン炎症、または神経変性を予防または軽減する、本発明1006〜1008のいずれかの方法。
[本発明1010]
前記グリコシル化部位が改変されたEphA4-Xの有効量が、軸索の再生を促進するのに十分な量である、本発明1009の方法。
[本発明1011]
EphA4-Xが、少なくとも1つのN-グリコシル化部位を除去するように改変されたEphA4-Fcである、本発明1010の方法。
[本発明1012]
前記疾患または状態が、全身性脈管構造の疾患または状態である、本発明1001の方法。
[本発明1013]
前記全身性脈管構造の疾患または状態が、虚血性再灌流傷害、器官再灌流傷害または炎症である、本発明1012の方法。
[本発明1014]
前記虚血性再灌流傷害が、腸虚血性再灌流傷害、腎臓再灌流または肝再灌流である、本発明1013の方法。
[本発明1015]
前記疾患が、心筋梗塞、炎症状態または癌である、本発明1001の方法。
[本発明1016]
前記哺乳動物対象がヒトである、本発明1001の方法。
[本発明1017]
前記グリコシル化部位が改変されたEphA4-Fcが、配列番号：1記載のアミノ酸配列を引用してヒトEphA4-Fcのアミノ酸残基216、321および/または389でのアスパラギンのアミノ酸置換を含む、本発明1002または1016の方法。
[本発明1018]
前記アミノ酸置換が、アスパラギンからグルタミンへの置換である、本発明1017の方法。
[本発明1019]
前記改変されたEphA4-Fcが、配列番号：2〜8からなるリストから選択されるアミノ酸配列を含む、本発明1018の方法。
[本発明1020]
前記改変されたEphA4-Fcが、配列番号：8に記載のアミノ酸配列を含む、本発明1019の方法。
[本発明1021]
前記改変されたEphA4-Fcが、約5〜20μg/mLの血清EphA4-Fcを3〜10日間、供する量で投与される、本発明1017〜1020のいずれかの方法。
[本発明1022]
哺乳動物対象におけるEph媒介性シグナル伝達により悪化する疾患または状態の治療のための薬剤の製造におけるEphA4-Xの使用であって、該EphA4が、少なくとも1つのN-グリコシル化部位を除去するように改変されており、ここで、Xが、免疫グロブリン分子の一部、タンパク質およびポリエーテルからなる群から選択される、使用。
[本発明1023]
Xが免疫グロブリン分子のFc部分である、本発明1022の使用。
[本発明1024]
FcがIgG4 FcまたはIgG1 Fcである、本発明1023の使用。
[本発明1025]
哺乳動物対象におけるEphA4媒介性シグナル伝達により悪化する疾患または状態の治療のための薬剤の製造における、少なくとも1つのN-グリコシル化部位を除去するように改変されたEphA4-Fcの使用。
[本発明1026]
前記疾患または状態が、中枢神経系（CNS）の疾患または状態である、本発明1022〜1025のいずれかの使用。
[本発明1027]
前記CNSの疾患または状態が、神経変性状態である、本発明1026の使用。
[本発明1028]
前記神経変性状態が、運動ニューロン疾患（MND）である、本発明1027の使用。
[本発明1029]
前記疾患または状態が、脳または脊髄または神経細胞の炎症に対する外傷または損傷である、本発明1026の使用。
[本発明1030]
前記脳への損傷が、脳卒中または外傷性脳損傷または血栓溶解後の脳損傷である、本発明1029の使用。
[本発明1031]
前記疾患または状態が、全身性脈管構造の疾患または状態である、本発明1022〜1025のいずれかの使用。
[本発明1032]
前記全身性脈管構造の疾患または状態が、虚血性再灌流傷害または器官再灌流である、本発明1031の使用。
[本発明1033]
前記虚血性再灌流傷害が、腸虚血性再灌流傷害、腎臓再灌流または肝再灌流である、本発明1032の使用。
[本発明1034]
前記疾患または状態が、心筋梗塞、炎症状態または癌である、本発明1022〜1027のいずれかの使用。
[本発明1035]
前記哺乳動物対象がヒトである、本発明1022〜1027のいずれかの使用。
[本発明1036]
前記EphA4-Xが、配列番号：1記載のアミノ酸配列を引用して、19アミノ酸シグナル配列の非存在下でアミノ酸位置を計算して、ヒトEphA4-Fcのアミノ酸残基216、321および/または389におけるアスパラギンのアミノ酸置換を含む改変されたEphA4-Fcである、本発明1035の使用。
[本発明1037]
前記アミノ酸置換が、アスパラギンからグルタミンへの置換である、本発明1036の使用。
[本発明1038]
前記改変されたEphA4-Fcが、配列番号：2〜8から選択されるアミノ酸配列を含む、本発明1037の使用。
[本発明1039]
前記改変されたEphA4-Fcが、配列番号：8に記載のアミノ酸配列を含む、本発明1038の使用。
[本発明1040]
少なくとも1つのN-グリコシル化部位を除去する改変されたアミノ酸配列を含むEphA4-Xであって、Xが免疫グロブリンの一部、タンパク質およびポリエーテルからなる群から選択される、EphA4-X。
[本発明1041]
少なくとも1つのN-グリコシル化部位を除去する改変されたアミノ酸配列を含むEphA4-Fc。
[本発明1042]
前記改変されたEphA4-Fcが、配列番号：1記載のアミノ酸配列を引用して、19アミノ酸シグナル配列の非存在下でアミノ酸位置を計算して、ヒトEphA4-Fcのアミノ酸残基216、321および/または389におけるアスパラギンのアミノ酸置換を含む、本発明1041の改変EphA4-Fc。
[本発明1043]
前記アミノ酸置換が、アスパラギンからグルタミンへの置換である、本発明1042の改変EphA4-Fc。
[本発明1044]
配列番号：2〜8からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、本発明1043の改変EphA4-Fc。
[本発明1045]
配列番号：8に記載のアミノ酸配列を含む、本発明1044の改変EphA4-Fc。
[本発明1046]
哺乳動物対象におけるEph媒介性シグナル伝達により悪化する疾患または状態の治療のための、本発明1041〜1045のいずれかの改変EphA4-Fc。
[本発明1047]
前記哺乳動物対象がヒトである、本発明1046の改変EphA4-Fc。
[本発明1048]
本発明1041〜1045のいずれかの改変EphA4-Fcと、1つまたは複数の薬学的に許容可能な担体、希釈剤および/または賦形剤と、を含む薬学的組成物。