【手続補正書】
【提出日】令和1年8月7日(2019.8.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも2つのサブユニットを任意の順序で含み、第1のサブユニットはPD-1に特異的であり、第2のサブユニットはLAG-3に特異的である、PD-1およびLAG-3の両方に結合する能力を有する融合ポリペプチド。
【請求項２】
第1のサブユニットが、PD-1に対する結合特異性を有する完全長免疫グロブリンまたはその抗原結合性ドメインを含み、第2のサブユニットが、LAG-3に対する結合特異性を有するリポカリンムテインを含む、請求項1記載の融合ポリペプチド。
【請求項３】
最大でも約1nMまたは約0.3nMのEC50値でPD-1に結合することができる、請求項1または2記載の融合ポリペプチド。
【請求項４】
最大でも約2nMまたは約1nMのEC50値でLAG-3に結合することができる、請求項1〜3のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
【請求項５】
第2のサブユニットが、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:1）と比較して、以下のアミノ酸残基突然変異
Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Ser, Phe, Gly, Ala, Asp or Glu; Glu 27 → Asp, ValまたはThr; Phe 28 → CysまたはAsp; Pro 29 → Phe, LeuまたはTrp; Glu 30 → Trp, AsnまたはTyr; Met 31 → Ile, Val, Asp, LeuまたはTyr; Asn 32 → Asp, Glu, Tyr, Trp, Val, ThrまたはMet; Leu 33 → Asp, GluまたはPro; Glu 34 → Val, TrpまたはHis; Val 36 → Ala; Asn 48 → Asp; Lys 52 → Glu, Ser, ArgまたはAsn; Val 53 → Ala; Met 55 → AlaまたはVal; Leu 56 → Asp, GlnまたはAsn; Ile 57 → Leu; Ser 58 → Phe, TrpまたはAsp; Arg 60 → PheまたはGlu; Cys 61 → Trp, Pro, LeuまたはTrp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; Val 85 → Ala; Ala 86 → Asp; Cys 101 → SerまたはPhe; Glu 104 → Tyr; Leu 105 → CysまたはGly; His 106 → Ala, Glu, Thr, Tyr, GlnまたはVal; Lys 108 → Tyr, Phe, ThrまたはTrp; Val 110 → GlyまたはAla; Arg 111 → Pro; Gly 112 → MetまたはThr; Lys 114 → TrpまたはAla; Lys 121 → Thr; Ser 140 → Gly;およびCys 153 → Ser
のうちの少なくとも1つを含むLAG-3特異的リポカリンムテインである、請求項1〜4のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
【請求項６】
第2のサブユニットが、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:1）と比較して、以下の突然変異アミノ酸残基の組
(a) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Glu; Leu 33 → Glu; Glu 34 → Trp; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Phe; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp;およびCys 153 → Ser;
(b) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Gly; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Asn; Met 55 → Ala; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; Lys 108 → Thr; Val 110 → Ala; Gly 112 → Thr; Lys 114 → Ala;およびLys 121 → Thr;
(c) Arg 26 → Phe; Glu 27 → Val; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Leu; Glu 30 → Tyr; Met 31 → Asp; Asn 32 → Val; Leu 33 → Pro; Leu 56 → Gln; Ser 58 → Trp; Arg 60 → Glu; Cys 61 → Leu; Cys 101 → Ser; Glu 104 → Tyr; Leu 105 → Cys; His 106 → Val; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp;およびCys 153 → Ser;
(d) Arg 26 → Glu; Glu 27 → Thr; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Trp; Glu 30 → Trp; Met 31 → Tyr; Asn 32 → Val; Leu 33 → Asp; Glu 34 → His; Leu 56 → Asn; Ile 57 → Leu; Ser 58 → Trp; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Gln; Lys 108 → Trp; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp;およびCys 153 → Ser;
(e) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp;およびCys 153 → Ser;
(f) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Glu; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp;およびCys 153 → Ser;
(g) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Glu; Leu 33 → Glu; Glu 34 → Trp; Val 36 → Ala; Asn 48 → Asp; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Val 85 → Ala; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Phe; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Ser 140 → Gly;およびCys 153 → Ser;
(h) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Glu; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Glu; Lys 108 → Phe; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp;およびCys 153 → Ser;
(i) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Glu; Leu 33 → Glu; Glu 34 → Trp; Val 36 → Ala; Lys 52 → Glu; Val 53 → Ala; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Phe; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp;およびCys 153 → Ser;
(j) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Val; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Glu; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Phe; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp;およびCys 153 → Ser;
(k) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Gly; Phe 28 → Asp; Met 31 → Leu; Asn 32 → Trp; Lys 52 → Ser; Met 55 → Ala; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Tyr; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Lys 114 → Ala;およびLys 121 → Thr;
(l) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Ala; Phe 28 → Asp; Met 31 → Leu; Asn 32 → Val; Lys 52 → Ser; Met 55 → Ala; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; Lys 108 → Thr; Val 110 → Ala; Gly 112 → Thr; Lys 114 → Ala;およびLys 121 → Thr;
(m) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Asp; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Ser; Met 55 → Ala; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Gln; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Lys 114 → Ala;およびLys 121 → Thr;
(n) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Glu; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Ser; Met 55 → Ala; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Lys 114 → Ala;およびLys 121 → Thr;
(o) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Gly; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Met; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Gln; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Lys 114 → Ala;およびLys 121 → Thr;または
(p) Arg 26 → Phe; Glu 27 → Val; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Leu; Glu 30 → Asn; Met 31 → Asp; Asn 32 → Tyr; Leu 33 → Pro; Leu 56 → Gln; Ser 58 → Trp; Arg 60 → Glu; Cys 61 → Pro; Cys 101 → Ser; Glu 104 → Tyr; Leu 105 → Cys; His 106 → Thr; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp;およびCys 153 → Ser
のうちの1つを含むLAG-3特異的リポカリンムテインである、請求項1〜5のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
【請求項７】
LAG-3特異的リポカリンムテインが、SEQ ID NO:13〜28からなる群より選択されるアミノ酸配列またはそのフラグメントもしくは変異体を含み、該フラグメントまたは変異体は、請求項5または6に定義したアミノ酸残基を含む、請求項1〜6のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
【請求項８】
LAG-3特異的リポカリンムテインが、SEQ ID NO:13〜28からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有する、請求項1〜6のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
【請求項９】
第1のサブユニットがモノクローナル抗体である、請求項1〜8のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
【請求項１０】
モノクローナル抗体の重鎖の可変領域が、SEQ ID NO:59〜84、112〜117からなる群より選択され、モノクローナル抗体の軽鎖の可変領域が、SEQ ID NO:85〜111、118〜123からなる群より選択される、請求項9記載の融合ポリペプチド。
【請求項１１】
モノクローナル抗体の重鎖の可変領域が、SEQ ID NO:59〜84、112〜117からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有し、モノクローナル抗体の軽鎖の可変領域が、SEQ ID NO:85〜111、118〜123からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有する、請求項9記載の融合ポリペプチド。
【請求項１２】
モノクローナル抗体が以下のCDR配列
a. VH-CDR1: GYTFTDYE (SEQ ID NO: 163), VH-CDR2: IDPGTGGT (SEQ ID NO: 164), VH-CDR3: TSEKFGSNYYFDY (SEQ ID NO: 165), VL-CDR1: QTIVHSDGNTY (SEQ ID NO: 166), VL-CDR2: KVS,およびVL-CDR3: FQGSHVPLT (SEQ ID NO: 167);
b. VH-CDR1: GYTFTSYW (SEQ ID NO: 168), VH-CDR2: IDPSNSET (SEQ ID NO: 169), VH-CDR3: ARSRGNYAYEMDY (SEQ ID NO: 170), VL-CDR1: SSVSSNY (SEQ ID NO: 171), VL-CDR2: STS,およびVL-CDR3: HQWSSYPP (SEQ ID NO: 172); 
c. VH-CDR1: GYTFTDYW (SEQ ID NO: 173), VH-CDR2: IDTSDSYT (SEQ ID NO: 174), VH-CDR3: ARRDYGGFGY (SEQ ID NO: 175), VL-CDR1: QDISSY (SEQ ID NO: 176), VL-CDR2: YTS,およびVL-CDR3: QQYSELPW (SEQ ID NO: 177);
d. VH-CDR1: GYTFTDYN (SEQ ID NO: 178), VH-CDR2: IDPNNGDT (SEQ ID NO: 179), VH-CDR3: ARWRSSMDY (SEQ ID NO: 180), VL-CDR1: QGISNY (SEQ ID NO: 181), VL-CDR2: YTS,およびVL-CDR3: QQYSNLPW (SEQ ID NO: 182); 
e. VH-CDR1: GYSITSDYA (SEQ ID NO: 183), VH-CDR2: ITYSGSP (SEQ ID NO: 184), VH-CDR3: ARGLGGHYFDY (SEQ ID NO: 185), VL-CDR1: QSISDY (SEQ ID NO: 186), VL-CDR2: YAS,およびVL-CDR3: QNGRSYPY (SEQ ID NO: 187);または
f. VH-CDR1: GFSLTSYG (SEQ ID NO: 188), VH-CDR2: IWRGGNT (SEQ ID NO: 189), VH-CDR3: AASMIGGY (SEQ ID NO: 190), VL-CDR1: QSIVHSNGNTY (SEQ ID NO: 191), VL-CDR2: KVS,およびVL-CDR3: FQGSHVPL (SEQ ID NO: 192)
を有する、請求項9記載の融合ポリペプチド。
【請求項１３】
モノクローナル抗体が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、PDR001、MEDI0680、ピディリズマブ、ENUM-388D4、およびENUM-244C8からなる群より選択される、請求項9記載の融合ポリペプチド。
【請求項１４】
モノクローナル抗体がIgG4バックボーンを有する、請求項9記載の融合ポリペプチド。
【請求項１５】
IgG4バックボーンが、S228P、N297A、F234AおよびL235Aからなる群より選択される突然変異のうちのいずれか1つを有する、請求項14記載の融合ポリペプチド。
【請求項１６】
モノクローナル抗体がIgG1バックボーンを有する、請求項9記載の融合ポリペプチド。
【請求項１７】
IgG1バックボーンが、N297A、L234AおよびL235Aからなる群より選択される突然変異のうちのいずれか1つを有する、請求項16記載の融合ポリペプチド。
【請求項１８】
SEQ ID NO:4および5に示すアミノ酸、SEQ ID NO:4および9に示すアミノ酸、SEQ ID NO:4および6に示すアミノ酸、SEQ ID NO:4および10に示すアミノ酸、SEQ ID NO:3および7に示すアミノ酸、SEQ ID NO:3および8に示すアミノ酸、SEQ ID NO:3および11に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:3および12に示すアミノ酸を含む、請求項1〜17のいずれか一項記載の融合ポリペプチド。
【請求項１９】
請求項1〜18のいずれか一項記載のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
【請求項２０】
請求項19記載の核酸分子を含有する宿主細胞。
【請求項２１】
請求項1〜18のいずれか一項記載の融合ポリペプチドを生産する方法であって、該融合ポリペプチドをコードする核酸から出発して遺伝子工学的方法を使って融合ポリペプチドが生産される、方法。
【請求項２２】
免疫チェックポイントPD-1およびLAG-3を同時に阻害するのに使用するための、請求項1〜18のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
【請求項２３】
抗腫瘍リンパ球細胞活性を増加させるのに使用するための、請求項1〜18のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
【請求項２４】
対象における主要組織適合遺伝子複合体（MHC）クラスIIへのヒトLAG-3の結合を妨害するのに使用するための、請求項1〜18のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
【請求項２５】
癌または自己炎症の治療において使用するための、請求項1〜18のいずれか一項記載の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物。
【請求項２６】
請求項1〜18のいずれか一項記載の融合ポリペプチドと薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
本開示の融合ポリペプチドに含まれうる「リンカー」は、本明細書に記載する融合ポリペプチドの2つ以上のサブユニットを連結する。連結は共有結合または非共有結合による連結であることができる。好ましい共有結合による連結は、アミノ酸間のペプチド結合など、ペプチド結合によるものである。したがって好ましい一態様において、該リンカーは、1つまたは複数のアミノ酸、例えば1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20個、またはそれ以上のアミノ酸を含む。好ましいリンカーは本明細書に記載する。他の好ましいリンカーは化学リンカーである。
[本発明1001]
少なくとも2つのサブユニットを任意の順序で含み、第1のサブユニットはPD-1に特異的であり、第2のサブユニットはLAG-3に特異的である、PD-1およびLAG-3の両方に結合する能力を有する融合ポリペプチド。
[本発明1002]
第1のサブユニットが、PD-1に対する結合特異性を有する完全長免疫グロブリンまたはその抗原結合性ドメインを含み、第2のサブユニットが、LAG-3に対する結合特異性を有するリポカリンムテインを含む、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1003]
最大でも約1nMのEC50値でPD-1に結合することができる、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1004]
最大でも約0.3nMのEC50値でPD-1に結合することができる、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1005]
前記融合ポリペプチドに含まれるPD-1に特異的な抗体のEC50値と少なくとも同程度か、それより優れたEC50値でPD-1に結合することができる、本発明1002の融合ポリペプチド。
[本発明1006]
前記融合ポリペプチドに含まれるPD-1に特異的な抗体のEC50値より低いEC50でPD-1に結合することができる、本発明1002の融合ポリペプチド。
[本発明1007]
最大でも約2nMのEC50値でLAG-3に結合することができる、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1008]
最大でも約1nMのEC50値でLAG-3に結合することができる、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1009]
前記融合ポリペプチドに含まれるLAG-3に特異的なリポカリンムテインのEC50値と同等か、それより低いEC50値でLAG-3に結合することができる、本発明1002の融合ポリペプチド。
[本発明1010]
PD-1およびLAG-3に同時に結合する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1011]
最大でも約10nMのEC50値でPD-1およびLAG-3に同時に結合する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1012]
最大でも約0.6nMのEC50値でPD-1およびLAG-3に同時に結合する能力を有する、本発明1001の融合ポリペプチド。
[本発明1013]
EC50値が、本質的に実施例2、3または5に記載されるように酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）によって決定される、本発明1001〜1012のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1014]
主要組織適合遺伝子複合体（MHC）クラスIIへのLAG-3の結合を競合的に阻害する、本発明1001〜1013のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1015]
主要組織適合遺伝子複合体（MHC）クラスIIへのLAG-3の結合を競合的に阻害する融合ポリペプチドの能力が、本質的に実施例6に記載されるように蛍光活性化細胞選別（FACS）によって分析される、本発明1014のリポカリンムテイン。
[本発明1016]
T細胞応答を共刺激する能力を有する、本発明1001〜1015のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1017]
T細胞応答を共刺激する能力が、本質的に実施例7または8に記載される機能的T細胞活性化アッセイにおいて測定される、本発明1016の融合ポリペプチド。
[本発明1018]
T細胞の刺激の存在下でIL-2および/またはIFN-γの産生を誘導することができる、本発明1001〜1017のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1019]
IL-2および/またはIFN-γの産生を誘導する能力が、本質的に実施例7または8に記載されるように機能的T細胞活性化または殺滅アッセイにおいて測定される、本発明1018の融合ポリペプチド。
[本発明1020]
第2のサブユニットが、ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:1）の配列位置14、25〜34、36、48、52〜53、55〜58、60〜61、66、79、85〜86、101、104〜106、108、110〜112、114、121、140、および153に1つまたは複数の変異アミノ酸残基を含むLAG-3特異的リポカリンムテインである、本発明1001〜1020のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1021]
第2のサブユニットが、ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:1）と比較して、以下のアミノ酸残基突然変異
2018526989.tif 000001
のうちの少なくとも1つを含むLAG-3特異的リポカリンムテインである、本発明1001〜1020のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1022]
第2のサブユニットが、ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（SEQ ID NO:1）と比較して、以下のアミノ酸残基突然変異の組
2018526989.tif 000002
2018526989.tif 000003
のうちの1つを含むLAG-3特異的リポカリンムテインである、本発明1001〜1021のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1023]
LAG-3特異的リポカリンムテインが、SEQ ID NO:13〜28からなる群より選択されるアミノ酸配列またはそのフラグメントもしくは変異体を含み、該フラグメントまたは変異体は、本発明1020〜1022のいずれかに定義したアミノ酸残基を含む、本発明1001〜1022のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1024]
LAG-3特異的リポカリンムテインが、SEQ ID NO:13〜28からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有する、本発明1001〜1022のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1025]
1つのサブユニットが、本質的に図1に記載されるようにリンカーを介して別のサブユニットに連結されている、本発明1001〜1024のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1026]
ペプチド結合が、構造化されていない（Gly-Gly-Gly-Gly-Ser）3リンカー（SEQ ID NO:2）である、本発明1025の融合ポリペプチド。
[本発明1027]
第1のサブユニットがモノクローナル抗体である、本発明1001〜1026のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1028]
モノクローナル抗体の重鎖の可変領域が、SEQ ID NO:59〜84、112〜117からなる群より選択され、モノクローナル抗体の軽鎖の可変領域が、SEQ ID NO:85〜111、118〜123からなる群より選択される、本発明1027の融合ポリペプチド。
[本発明1029]
モノクローナル抗体の重鎖の可変領域が、SEQ ID NO:59〜84、112〜117からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有し、モノクローナル抗体の軽鎖の可変領域が、SEQ ID NO:85〜111、118〜123からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％の配列同一性を有する、本発明1027の融合ポリペプチド。
[本発明1030]
モノクローナル抗体が以下のCDR配列
2018526989.tif 000004
2018526989.tif 000005
を有する、本発明1027の融合ポリペプチド。
[本発明1031]
モノクローナル抗体が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、PDR001、MEDI0680、ピディリズマブ、ENUM-388D4、およびENUM-244C8からなる群より選択される、本発明1027の融合ポリペプチド。
[本発明1032]
モノクローナル抗体がIgG4バックボーンを有する、本発明1027の融合ポリペプチド。
[本発明1033]
IgG4バックボーンが、S228P、N297A、F234AおよびL235Aからなる群より選択される突然変異のうちのいずれか1つを有する、本発明1032の融合ポリペプチド。
[本発明1034]
モノクローナル抗体がIgG1バックボーンを有する、本発明1027の融合ポリペプチド。
[本発明1035]
IgG1バックボーンが、N297A、L234AおよびL235Aからなる群より選択される突然変異のうちのいずれか1つを有する、本発明1034の融合ポリペプチド。
[本発明1036]
SEQ ID NO:4および5に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:4および9に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:4および6に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:4および10に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:3および7に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:3および8に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:3および11に示すアミノ酸、またはSEQ ID NO:3および12に示すアミノ酸を含む、本発明1001〜1035のいずれかの融合ポリペプチド。
[本発明1037]
本発明1001〜1037のいずれかのポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
[本発明1038]
前記核酸分子の発現を可能にする制御配列に機能的に連結されている、本発明1037の核酸分子。
[本発明1039]
ベクター中またはファージミドベクター中に含まれている、本発明1037または1038の核酸分子。
[本発明1040]
本発明1037〜1039のいずれかの核酸分子を含有する宿主細胞。
[本発明1041]
本発明1001〜1036のいずれかの融合ポリペプチドを生産する方法であって、ムテインをコードする核酸から出発して遺伝子工学的方法を使って融合ポリペプチドが生産される、方法。
[本発明1042]
前記融合ポリペプチドが、細菌または真核宿主生物中で生産され、この宿主生物またはその培養物から単離される、本発明1041の方法。
[本発明1043]
免疫チェックポイントPD-1およびLAG-3を同時に阻害するための、本発明1001〜1036のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物の使用。
[本発明1044]
抗腫瘍リンパ球細胞活性を増加させるための、本発明1001〜1036のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物の使用。
[本発明1045]
免疫チェックポイントPD-1およびLAG-3を同時に阻害する方法であって、本発明1001〜1036のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物を適用する工程を含む、方法。
[本発明1046]
抗腫瘍リンパ球細胞活性を増加させる方法であって、本発明1001〜1036のいずれかの融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む組成物を適用する工程を含む、方法。
[本発明1047]
対象における主要組織適合遺伝子複合体（MHC）クラスIIへのヒトLAG-3の結合を妨害する方法であって、本発明1001〜1036のいずれかの1つまたは複数の融合ポリペプチドまたはそのような融合ポリペプチドを含む1つまたは複数の組成物を適用する工程を含む、方法。