【手続補正書】
【提出日】令和1年8月7日(2019.8.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号1〜4の配列と少なくとも70％または80％同一であるアミノ酸配列を含有する緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）PcrVキャリアタンパク質に共有結合している抗原を含有するかまたはそれからなるコンジュゲートであって、前記抗原が緑膿菌PcrVキャリアタンパク質のアスパラギンアミノ酸残基に（直接またはリンカーを介して）連結しており、ここで前記アスパラギン残基は配列番号1〜4の配列と少なくとも70％または80％同一であるアミノ酸配列中に導入されたD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列の一部であり、Xはプロリン以外の任意のアミノ酸であり、前記アスパラギン残基は配列番号3のアミノ酸24〜166もしくはアミノ酸281〜317内もしくはアミノ酸317に相当する位置か、または配列番号4のアミノ酸1〜143もしくはアミノ酸258〜294内もしくはアミノ酸294に相当する位置にある、前記コンジュゲート。
【請求項２】
前記アスパラギン残基が、D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列の一部であり、ここでXはプロリン以外の任意のアミノ酸であり、ここで前記アスパラギン残基は配列番号5の配列または配列番号5と少なくとも80％の同一性を有する配列中に変異により導入されていない、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
PcrVペプチド配列を除去しこれをD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドに置換することにより、D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドがアミノ酸配列中に導入されている、請求項１〜２のいずれか1項に記載のコンジュゲートであって、好ましくはPcrVペプチド配列が1〜7個のアミノ酸を含有し、好ましくはPcrVペプチド配列が1個のアミノ酸を含有する、前記コンジュゲート。
【請求項４】
D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドが、配列番号3のアミノ酸残基24〜143または配列番号4のアミノ酸残基1〜120内の位置でアミノ酸配列中に導入されている、請求項１〜３のいずれか1項に記載のコンジュゲートであって、好ましくはD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドが、配列番号3のアミノ酸残基24〜48または配列番号4のアミノ酸残基1〜24内の位置でアミノ酸配列中に導入されている、前記コンジュゲート。
【請求項５】
少なくとも2、3または4個のD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列が、配列番号1〜4のいずれか1つの配列またはそれと少なくとも70％もしくは80％同一である配列中に導入されている、請求項１〜４のいずれか1項に記載のコンジュゲート。
【請求項６】
PcrVキャリアタンパク質が配列番号6〜62のうち少なくとも1つを含有する配列を有する、請求項１〜５のいずれか1項に記載のコンジュゲートであって、好ましくはPcrVキャリアタンパク質が配列番号6〜12および33のうち少なくとも1つを含有する配列を有し、好ましくはPcrVキャリアタンパク質が配列番号6〜12および33のうち少なくとも3つを含有する配列を有し、好ましくはPcrVキャリアタンパク質が配列番号6および／または配列番号9および／または配列番号11および／または配列番号33を含有する配列を有する、前記コンジュゲート。
【請求項７】
抗原が糖である、請求項１〜６のいずれか1項に記載のコンジュゲートであって、好ましくは抗原が細菌莢膜糖、または細菌性のリポ多糖もしくはリポオリゴ糖、好ましくは緑膿菌由来のリポ多糖であり、また好ましくは抗原が、緑膿菌由来のO抗原であり、場合によりO1、O2、O3、O4、O5、O6、O7、O8、O9、O10、O11、O12、O13、O14、O15、O16、O17、O18、O19またはO20であり、例えばO6またはO11である、前記コンジュゲート。
【請求項８】
配列番号1〜4の配列と少なくとも70％または80％同一であるアミノ酸配列を有するPcrVタンパク質であって、前記アミノ酸配列はD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有し、ここでXはプロリン以外の任意のアミノ酸である、前記PcrVタンパク質。
【請求項９】
Xがプロリン以外の任意のアミノ酸であるD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列が、配列番号3のアミノ酸23〜166もしくはアミノ酸281〜317内またはアミノ酸317の位置にあるか、または、Xがプロリン以外の任意のアミノ酸であるD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列が、配列番号4のアミノ酸1〜143もしくはアミノ酸258〜294内またはアミノ酸294にある、請求項８に記載のPcrVタンパク質。
【請求項１０】
PcrVペプチド配列を除去しこれをD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドに置換することにより、D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドがアミノ酸配列中に導入されている、請求項８または９に記載のPcrVタンパク質であって、好ましくは、除去されるPcrVペプチド配列が１〜７個のアミノ酸を含有し、好ましくは、除去されるPcrVペプチド配列が1個のアミノ酸を含有する、前記PcrVタンパク質。
【請求項１１】
D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドが、配列番号3のアミノ酸残基24〜143または配列番号4のアミノ酸残基1〜120内の位置でアミノ酸配列中に導入されている、請求項８〜１０のいずれか1項に記載のPcrVタンパク質。
【請求項１２】
D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドが、配列番号3のアミノ酸残基24〜48または配列番号4のアミノ酸残基1〜24内の位置でアミノ酸配列中に導入されている、請求項１１に記載のPcrVタンパク質。
【請求項１３】
少なくとも2、3または4個のD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列が、配列番号1〜4のいずれか1つの配列またはそれと少なくとも80％同一な配列中に導入されている、請求項８〜１２のいずれか1項に記載のPcrVタンパク質。
【請求項１４】
配列番号6〜62のうち少なくとも1つを含有するアミノ酸配列を有する、請求項８〜１３のいずれか1項に記載のPcrVタンパク質であって、好ましくは配列番号6〜12および33のうち少なくとも1つを含有するアミノ酸配列を有し、好ましくは配列番号6〜12および33のうち少なくとも3つを含有するアミノ酸配列を有し、好ましくは配列番号6および／または配列番号9および／または配列番号11および／または配列番号33を含有するアミノ配列を有する、前記PcrVタンパク質。
【請求項１５】
前記アミノ酸配列がPcrVタンパク質の精製に有用なペプチドタグを含有する、請求項８〜１４のいずれか1項に記載のPcrVタンパク質であって、好ましくはペプチドタグがアミノ酸配列のC末端に位置しており、好ましくはペプチドタグが6ヒスチジン残基を含有する、前記PcrVタンパク質。
【請求項１６】
前記アミノ酸配列が、PcrVタンパク質を細菌のペリプラズムへ指向させることが可能なリーダー配列を含む、請求項８〜１５のいずれか1項に記載のPcrVタンパク質であって、好ましくは、リーダー配列が、配列番号63と少なくとも80％同一なアミノ酸配列を有する、前記PcrVタンパク質。
【請求項１７】
請求項１〜７のいずれか1項に記載のコンジュゲートまたは請求項８〜１６のいずれか1項に記載のPcrVタンパク質、および薬学的に許容可能な賦形剤を含有する、免疫原性組成物。
【請求項１８】
追加的な抗原をさらに含む、請求項１７に記載の免疫原性組成物。
【請求項１９】
追加的な抗原が、O抗原とキャリアタンパク質のコンジュゲート、細菌莢膜多糖とキャリアタンパク質のコンジュゲート、LOSとキャリアタンパク質のコンジュゲート、およびタンパク質からなる群から選択される、請求項１８に記載の免疫原性組成物。
【請求項２０】
コンジュゲートまたはPcrVタンパク質を薬学的に許容可能な賦形剤と混合するステップを含む、請求項１７〜１９のいずれか1項に記載の免疫原性組成物を作製する方法。
【請求項２１】
請求項１〜１６のいずれか1項に記載のコンジュゲートまたはPcrVタンパク質を含む、感染症の治療用の組成物。
【請求項２２】
請求項１〜１６のいずれか1項に記載のコンジュゲートまたはPcrVタンパク質を含む、緑膿菌感染の治療用の組成物。
【請求項２３】
前記治療がそれを必要とするヒト被験体の治療である、請求項２１または２２に記載の組成物。
【請求項２４】
請求項８〜１６のいずれか1項に記載のPcrVタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
【請求項２５】
配列番号1〜4のいずれか1つと少なくとも70％または80％同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を有する、PcrVタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
【請求項２６】
請求項２４または２５に記載のポリヌクレオチドを含有するベクター。
【請求項２７】
i) グリコシルトランスフェラーゼをコードする核酸；
ii) オリゴサッカリルトランスフェラーゼをコードする核酸；および
iii) 請求項８〜１６のいずれか1項に記載の緑膿菌PcrVタンパク質をコードする核酸
を含有する宿主細胞。
【請求項２８】
糖に連結している緑膿菌PcrVタンパク質を含有するバイオコンジュゲートを生産する方法であって、タンパク質の産生に好適な条件下で請求項２７に記載の宿主細胞を培養することを含む前記方法。
【請求項２９】
請求項２８に記載の方法により生産されるバイオコンジュゲートであって、緑膿菌PcrVタンパク質に連結している糖を含有する、前記バイオコンジュゲート。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０６】
様々な刊行物、特許および特許出願が本明細書中で引用され、それらの開示はその全体が参照により組み入れられる。
本発明は以下の実施形態を含む。
［１］  配列番号1〜4の配列と少なくとも70％または80％同一であるアミノ酸配列を含有する緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）PcrVキャリアタンパク質に共有結合している抗原を含有するコンジュゲートであって、前記抗原が緑膿菌PcrVキャリアタンパク質のアミノ酸残基に（直接またはリンカーを介して）連結している、前記コンジュゲート。
［２］  前記アミノ酸残基がアスパラギン残基ではない、上記［１］に記載のコンジュゲート。
［３］  前記アミノ酸残基がアスパラギン残基である、上記［１］に記載のコンジュゲート。
［４］  前記アスパラギン残基が、配列番号1〜4の配列と少なくとも80％同一であるアミノ酸配列中に導入されたD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列の一部ではなく、ここでXはプロリン以外の任意のアミノ酸である、上記［３］に記載のコンジュゲート。
［５］  前記アスパラギン残基が、配列番号1〜4の配列と少なくとも70％または80％同一であるアミノ酸配列中に導入されたD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列の一部であり、ここでXはプロリン以外の任意のアミノ酸であり、ここで前記アスパラギン残基は配列番号3のアミノ酸24〜166もしくはアミノ酸281〜317内またはアミノ酸317に相当する位置にある、上記［３］に記載のコンジュゲート。
［６］  前記アスパラギン残基が、配列番号1〜4の配列と少なくとも70％または80％同一であるアミノ酸配列中に導入されたD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列の一部であり、ここでXはプロリン以外の任意のアミノ酸であり、ここで前記アスパラギン残基は配列番号4のアミノ酸1〜143もしくはアミノ酸258〜294内またはアミノ酸294に相当する位置にある、上記［３］に記載のコンジュゲート。
［７］  前記アスパラギン残基が、D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列の一部であり、ここでXはプロリン以外の任意のアミノ酸であり、ここで前記アスパラギン残基は配列番号5の配列または配列番号5と少なくとも80％の同一性を有する配列中に変異により導入されていない、上記［３］に記載のコンジュゲート。
［８］  PcrVペプチド配列を除去しこれをD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドに置換することにより、D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドがアミノ酸配列中に導入されている、上記［５］〜［７］のいずれかに記載のコンジュゲート。
［９］  PcrVペプチド配列が1〜7個のアミノ酸を含有する、上記［８］に記載のコンジュゲート。
［１０］  PcrVペプチド配列が1個のアミノ酸を含有する、上記［８］に記載のコンジュゲート。
［１１］  D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドが、配列番号3のアミノ酸残基24〜143または配列番号4のアミノ酸残基1〜120内の位置でアミノ酸配列中に導入されている、上記［５］〜［１０］のいずれかに記載のコンジュゲート。
［１２］  D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドが、配列番号3のアミノ酸残基24〜48または配列番号4のアミノ酸残基1〜24内の位置でアミノ酸配列中に導入されている、上記［１１］に記載のコンジュゲート。
［１３］  少なくとも2、3または4個のD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列が、配列番号1〜4のいずれか1つの配列またはそれと少なくとも70％もしくは80％同一である配列中に導入されている、上記［１］〜［１２］のいずれかに記載のコンジュゲート。
［１４］  PcrVキャリアタンパク質が配列番号6〜62のうち少なくとも1つを含有する配列を有する、上記［１］〜［１３］のいずれかに記載のコンジュゲート。
［１５］  PcrVキャリアタンパク質が配列番号6〜12および33のうち少なくとも1つを含有する配列を有する、上記［１４］に記載のコンジュゲート。
［１６］  PcrVキャリアタンパク質が配列番号6〜12および33のうち少なくとも3つを含有する配列を有する、上記［１５］に記載のコンジュゲート。
［１７］  PcrVキャリアタンパク質が配列番号6および／または配列番号9および／または配列番号11および／または配列番号33を含有する配列を有する、上記［１５または１６］に記載のコンジュゲート。
［１８］  抗原が化学コンジュゲーション法を使用して得られる化学結合により緑膿菌PcrVキャリアタンパク質に共有結合している、上記［１］〜［３］のいずれかに記載のコンジュゲート。
［１９］  化学コンジュゲーション法が、カルボジイミド化学、還元アミノ化（reductive animation）、シアニル化化学（例えばCDAP化学）、マレイミド化学、ヒドラジド化学、エステル化学およびN-ヒドロキシコハク酸イミド化学からなる群から選択される、上記［１８］に記載のコンジュゲート。
［２０］  抗原が、緑膿菌PcrVキャリアタンパク質上のアスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、システイン、チロシン、ヒスチジン、アルギニンまたはトリプトファンのアミノ酸に共有結合している、上記［１８または上記［１９］に記載のコンジュゲート。
［２１］  抗原が緑膿菌PcrVキャリアタンパク質に直接連結している、上記［１８］〜［２０］のいずれかに記載のコンジュゲート。
［２２］  抗原がリンカーを介して緑膿菌PcrVキャリアタンパク質に結合している、上記［１８］〜［２０］のいずれかに記載のコンジュゲート。
［２３］  リンカーが、4〜12個の炭素原子を有するリンカー、二官能性リンカー、末端に1または2個の反応性アミノ基を含有するリンカー、B-プロピオンアミド（B-proprionamido）、ニトロフェニルエチルアミン、ハロアシルハライド、6-アミノカプロン酸およびADHからなる群から選択される、上記［２２］に記載のコンジュゲート。
［２４］  抗原が糖である、上記［１］〜［２３］のいずれかに記載のコンジュゲート。
［２５］  抗原が細菌莢膜糖である、上記［２４］に記載のコンジュゲート。
［２６］  抗原が細菌性のリポ多糖またはリポオリゴ糖である、上記［２４］に記載のコンジュゲート。
［２７］  抗原が緑膿菌由来のリポ多糖である、上記［２６］に記載のコンジュゲート。
［２８］  抗原が緑膿菌由来のO抗原であり、場合によりO1、O2、O3、O4、O5、O6、O7、O8、O9、O10、O11、O12、O13、O14、O15、O16、O17、O18、O19またはO20であり、例えばO6またはO11である、上記［２７］に記載のコンジュゲート。
［２９］  配列番号1〜4の配列と少なくとも70％または80％同一であるアミノ酸配列を有するPcrVタンパク質であって、前記アミノ酸配列はD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有し、ここでXはプロリン以外の任意のアミノ酸である、前記PcrVタンパク質。
［３０］  Xがプロリン以外の任意のアミノ酸であるD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列が、配列番号3のアミノ酸23〜166もしくはアミノ酸281〜317内またはアミノ酸317の位置にある、上記［２９］に記載のPcrVタンパク質。
［３１］  Xがプロリン以外の任意のアミノ酸であるD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列が、配列番号4のアミノ酸1〜143もしくはアミノ酸258〜294内またはアミノ酸294にある、上記［２９］に記載のPcrVタンパク質。
［３２］  PcrVペプチド配列を除去しこれをD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドに置換することにより、D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドがアミノ酸配列中に導入されている、上記［２９］〜［３１］のいずれかに記載のPcrVタンパク質。
［３３］  PcrVペプチド配列が１〜７個のアミノ酸を含有する、上記［３２］に記載のPcrVタンパク質。
［３４］  PcrVペプチド配列が1個のアミノ酸を含有する、上記［３２］に記載のPcrVタンパク質。
［３５］  D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドが、配列番号3のアミノ酸残基24〜143または配列番号4のアミノ酸残基1〜120内の位置でアミノ酸配列中に導入されている、上記［２９］〜［３４］のいずれかに記載のPcrVタンパク質。
［３６］
D/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列を含有するペプチドが、配列番号3のアミノ酸残基24〜48または配列番号4のアミノ酸残基1〜24内の位置でアミノ酸配列中に導入されている、上記［３５］に記載のPcrVタンパク質。
［３７］  少なくとも2、3または4個のD/E-X-N-X-S/Tコンセンサス配列が、配列番号1〜4のいずれか1つの配列またはそれと少なくとも80％同一な配列中に導入されている、上記［２９］〜［３６］のいずれかに記載のPcrVタンパク質。
［３８］  配列番号6〜62のうち少なくとも1つを含有するアミノ酸配列を有する、上記［２９］〜［３７］のいずれかに記載のPcrVタンパク質。
［３９］  配列番号6〜12および33のうち少なくとも1つを含有するアミノ酸配列を有する、上記［３８］に記載のPcrVタンパク質。
［４０］  配列番号6〜12および33のうち少なくとも3つを含有するアミノ酸配列を有する、上記［３９］に記載のPcrVタンパク質。
［４１］  配列番号6および／または配列番号9および／または配列番号11および／または配列番号33を含有するアミノ配列を有する、上記［３９または４０］に記載のPcrVタンパク質。
［４２］  前記アミノ酸配列がPcrVタンパク質の精製に有用なペプチドタグを含有する、上記［２９］〜［４１］のいずれかに記載のPcrVタンパク質。
［４３］  ペプチドタグがアミノ酸配列のC末端に位置している、上記［４２］に記載のPcrVタンパク質。
［４４］  ペプチドタグが6ヒスチジン残基を含有する、上記［２９］〜［４３］のいずれかに記載のPcrVタンパク質。
［４５］  前記アミノ酸配列が、PcrVタンパク質を細菌のペリプラズムへ指向させることが可能なリーダー配列を含む、上記［２９］〜［４４］のいずれかに記載のPcrVタンパク質。
［４６］  リーダー配列が、配列番号63と少なくとも80％同一なアミノ酸配列を有する、上記［４５］に記載のPcrVタンパク質。
［４７］  上記［１］〜［２８］のいずれかに記載のコンジュゲートまたは上記［２９］〜［４６］のいずれかに記載のPcrVタンパク質、および薬学的に許容可能な賦形剤を含有する、免疫原性組成物。
［４８］  追加的な抗原をさらに含む、上記［４７］に記載の免疫原性組成物。
［４９］  追加的な抗原が、O抗原とキャリアタンパク質のコンジュゲート、細菌莢膜多糖とキャリアタンパク質のコンジュゲート、LOSとキャリアタンパク質のコンジュゲートおよびタンパク質からなる群から選択される、上記［４８］に記載の免疫原性組成物。
［５０］  コンジュゲートまたはPcrVタンパク質を薬学的に許容可能な賦形剤と混合するステップを含む、上記［４７］〜［４９］のいずれかに記載の免疫原性組成物を作製する方法。
［５１］  感染症の治療における使用のための、上記［１］〜［４６］のいずれかに記載のコンジュゲートまたはPcrVタンパク質。
［５２］  緑膿菌感染の治療における使用のための、上記［１］〜［４６］のいずれかに記載のコンジュゲートまたはPcrVタンパク質。
［５３］  治療がそれを必要とするヒト被験体のものである、上記［５１または５２］に記載の使用のためのPcrVのコンジュゲート。
［５４］  上記［１］〜［４６］のいずれかに記載のPcrVタンパク質のコンジュゲートをそれを必要とする患者に投与するステップを含む治療方法。
［５５］  治療が、場合によりヒト患者における、例えば緑膿菌感染などの、シュードモナス属感染のものである、上記［５４］に記載の方法。
［５６］  上記［２９］〜［４６］のいずれかに記載のPcrVタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
［５７］  配列番号1〜4のいずれか1つと少なくとも70％または80％同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を有する、PcrVタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
［５８］  上記［５６または５７］に記載のポリヌクレオチドを含有するベクター。
［５９］  iv) グリコシルトランスフェラーゼをコードする核酸；
v) オリゴサッカリルトランスフェラーゼをコードする核酸；および
vi) 上記［２９］〜［４６］のいずれかに記載の緑膿菌PcrVタンパク質をコードする核酸
を含有する宿主細胞。
［６０］  グリコシルトランスフェラーゼをコードする核酸がシュードモナス属のrfbクラスターに由来し、ここで前記核酸は場合により宿主細胞のゲノム中に安定的に挿入されている、上記［５９］に記載の宿主細胞。
［６１］  シュードモナス属が緑膿菌であり、場合により血清型O6またはO11である、上記［６０］に記載の宿主細胞。
［６２］  オリゴサッカリルトランスフェラーゼがカンピロバクター属に由来する、上記［５９］〜［６１］のいずれかに記載の宿主細胞。
［６３］  オリゴサッカリルトランスフェラーゼがC.ジェジュニ（C.jejuni）のPglBである、上記［６２］に記載の宿主細胞。
［６４］  緑膿菌PcrVタンパク質をコードする核酸が宿主細胞内のプラスミド中にある、上記［５９］〜［６３］のいずれかに記載の宿主細胞。
［６５］  ホルミルトランスフェラーゼ酵素をさらに含み、前記核酸は配列番号65に対して約もしくは少なくとも80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％もしくは99％の同一性もしくは相同性を有するタンパク質をコードするか、または前記核酸は配列番号65をコードする、上記［５９］〜［６３］のいずれかに記載の宿主細胞。
［６６］  wzyポリメラーゼをコードする核酸をさらに含み、前記核酸は配列番号66に対して約もしくは少なくとも80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％もしくは99％の同一性もしくは相同性を有するタンパク質をコードするか、または前記核酸が配列番号66をコードする、上記［５９］〜［６５］のいずれかに記載の宿主細胞。
［６７］  ホルミルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸および／またはwzyポリメラーゼをコードする核酸が宿主細胞のゲノム中に安定的に挿入されている、上記［６５］〜［６６］のいずれかに記載の宿主細胞。
［６８］  ホルミルトランスフェラーゼ酵素をコードする遺伝子および／またはwzyポリメラーゼをコードする遺伝子が宿主細胞内のプラスミド上に存在する、上記［６５］〜［６６］のいずれかに記載の宿主細胞。
［６９］  宿主細胞が大腸菌（E.coli）である、上記［５９］〜［６８］のいずれかに記載の宿主細胞。
［７０］  糖に連結している緑膿菌PcrVタンパク質を含有するバイオコンジュゲートを生産する方法であって、タンパク質の産生に好適な条件下で上記［５９］〜［６９］のいずれかに記載の宿主細胞を培養することを含む前記方法。
［７１］  上記［７０］に記載の過程により生産されるバイオコンジュゲートであって、緑膿菌PcrVタンパク質に連結している糖を含有する、前記バイオコンジュゲート。