【手続補正書】
【提出日】平成30年12月7日(2018.12.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
分裂促進ドメインおよび膜貫通ドメインをそれぞれが含む第１および第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質を含むウイルスエンベロープを有するレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターであって、前記分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質は、ウイルスエンベロープ糖タンパク質の一部ではなく、前記第１の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質はＣＤ３に結合し、前記第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質はＣＤ２８に結合する、レトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項２】
前記第１の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質が、ＯＫＴ３からの結合ドメインを含む、請求項１に記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項３】
前記第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質が、１５Ｅ８またはＴＧＮ１４１２からの結合ドメインを含む、請求項１に記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項４】
ＣＤ１３４またはＣＤ１３７に結合する分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質をさらに含む、請求項１から３のいずれかに記載のウイルスベクター。
【請求項５】
ＩＬ２、ＩＬ７およびＩＬ１５から選択されるサイトカインを含む、サイトカインに基づくＴ細胞活性化膜貫通タンパク質も含む、請求項１から４のいずれかに記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項６】
偽型ウイルスベクターを与える異種のウイルスエンベロープ糖タンパク質を含む、請求項１から５のいずれかに記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項７】
前記エンベロープ糖タンパク質が、ＲＤ１１４またはその変異体の１つであるＶＳＶ−Ｇ、テナガザル白血病ウイルス（ＧＡＬＶ）からであるか、もしくはアンホトロピックエンベロープ、麻疹エンベロープまたはヒヒレトロウイルスエンベロープ糖タンパク質である、請求項６に記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項８】
ウイルスエンベロープはまた、
捕捉部分に結合する結合ドメイン；および
膜貫通ドメイン
を含むタグ化タンパク質を含み、前記タグ化タンパク質は前記タグ化タンパク質の前記捕捉部分への結合を介した細胞上清からの前記ウイルスベクターの精製を容易にする、請求項１から７のいずれかに記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項９】
前記タグ化タンパク質の前記結合ドメインが、１つまたは複数のストレプトアビジン結合エピトープを含む、請求項８に記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項１０】
前記ストレプトアビジン結合エピトープがビオチン模倣体である、請求項９に記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項１１】
前記ビオチン模倣体が、パッケージング細胞によって産生されたストレプトアビジン捕捉レトロウイルスベクターを溶出するためにビオチンを使用することができるように、ビオチンよりも低い親和性でストレプトアビジンに結合する、請求項１０に記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項１２】
前記ビオチン模倣体が、ＳｔｒｅｐｔａｇＩＩ（配列番号３６）、Ｆｌａｎｋｅｄｃｃｓｔｒｅｔａｇ（配列番号３７）およびｃｃｓｔｒｅｐｔａｇ（配列番号３８）の群から選択される、請求項１１に記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項１３】
Ｔ細胞受容体またはキメラ抗原受容体をコードする核酸配列を含む、請求項１から１２のいずれかに記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項１４】
ウイルス様粒子（ＶＬＰ）である、請求項１〜１３のいずれかに記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
【請求項１５】
細胞表面で、分裂促進ドメインおよび膜貫通ドメインをそれぞれが含む第１および第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質を発現し、前記第１の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質はＣＤ３に結合し、前記第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質はＣＤ２８に結合し、その結果、宿主細胞によって産生されるレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターが請求項１から７までのいずれかに定義されたものとなる、宿主細胞。
【請求項１６】
細胞表面で、
捕捉部分に結合する結合ドメイン；および
膜貫通ドメイン
を含むタグ化タンパク質も発現し、前記タグ化タンパク質の、前記タグ化タンパク質の前記捕捉部分への結合を介した細胞上清からの前記ウイルスベクターの精製を容易にし、その結果、前記宿主細胞によって産生されたレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターが、請求項８から１２までのいずれかに定義されたものとなる、請求項１５に記載の宿主細胞。
【請求項１７】
下記の遺伝子：
ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび／またはｒｅｖのうちの１つまたは複数も含む、請求項１５または１６に定義された宿主細胞である、パッケージング細胞。
【請求項１８】
ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび必要に応じてｒｅｖ遺伝子を含み、ならびにレトロウイルスゲノムまたはレンチウイルスゲノムも含む、請求項１５または１６に定義された宿主細胞である、プロデューサー細胞。
【請求項１９】
請求項１５もしくは１６に記載の宿主細胞、請求項１７に記載のパッケージング細胞または請求項１８に記載のプロデューサー細胞を作製するための方法であって、第１および第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質をコードする核酸を細胞に形質導入またはトランスフェクトするステップを含む方法。
【請求項２０】
請求項１５から１８までのいずれかに記載の細胞内にレトロウイルスゲノムまたはレンチウイルスゲノムを発現させるステップを含む、請求項１から１４までのいずれかに記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターを作製するための方法。
【請求項２１】
Ｔ細胞またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が、第１および第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質によって活性化されるように、請求項１から１４までのいずれかに記載のレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターを前記Ｔ細胞またはＮＫ細胞に形質導入するステップを含む、活性化されたトランスジェニックＴ細胞またはＮＫ細胞を作製するための方法。
【請求項２２】
（ｉ）請求項１５または１６に定義された宿主細胞；
（ｉｉ）ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび必要に応じてｒｅｖを含む核酸；ならびに
（ｉｉｉ）レトロウイルスゲノム
を含む、請求項１から１４までのいずれかに定義されたレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターを作製するためのキット。
【請求項２３】
（ｉ）請求項１７に定義されたパッケージング細胞；および
（ｉｉ）レトロウイルスベクターゲノムまたはレンチウイルスベクターゲノム
を含む、請求項１から１４までのいずれかに定義されたレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターを作製するためのキット。
【請求項２４】
（ｉ）第１および第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質をコードする１つまたは複数の核酸；ならびに
（ｉｉ）レトロウイルスｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび必要に応じてｒｅｖ遺伝子を含む核酸
を含む、請求項１７に記載のパッケージング細胞を作製するためのキット。
【請求項２５】
（ｉ）第１および第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質をコードする１つまたは複数の核酸；
（ｉｉ）レトロウイルスｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび必要に応じてｒｅｖ遺伝子を含む核酸；ならびに
（ｉｉｉ）レトロウイルスベクターゲノムまたはレンチウイルスベクターゲノム
を含む、請求項１８に記載のプロデューサー細胞を作製するためのキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９４】
上記の明細書文中に述べられた全ての刊行物は、参照により本明細書に組み込まれる。本発明の範囲および主旨から逸脱することのない、本発明の記載された方法およびシステムの様々な改変および変更は、当業者には明らかであろう。本発明は、特定の好ましい実施形態に関連して記載されているが、特許請求される本発明は、そのような特定の実施形態に不当に限定されるべきではないことが理解されるべきである。実際に、分子生物学、細胞免疫学または関連分野の当業者に明らかである本発明を実施するために記載された形式の様々な改変は、以下の特許請求の範囲内にあることが意図される。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
（ｉ）分裂促進ドメインおよび膜貫通ドメインを含む分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質；ならびに／または
（ｉｉ）サイトカインドメインおよび膜貫通ドメインを含む、サイトカインに基づくＴ細胞活性化膜貫通タンパク質
を含むウイルスエンベロープを有するレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターであって、前記分裂促進性またはサイトカインに基づくＴ細胞活性化膜貫通タンパク質は、ウイルスエンベロープ糖タンパク質の一部ではない、レトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター。
（項目２）
ＣＤ３、ＣＤ２８、ＣＤ１３４またはＣＤ１３７に結合する分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質を含む、項目１に記載のウイルスベクター。
（項目３）
前記分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質が、ＯＫＴ３、１５Ｅ８、ＴＧＮ１４１２、ＯＸ４０Ｌまたは４１ＢＢＬからの結合ドメインを含む、項目２に記載のウイルスベクター。
（項目４）
前記ウイルスエンベロープ中に２つまたはそれを超える分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質を含む、項目１に記載のウイルスベクター。
（項目５）
ＣＤ３に結合する第１の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質およびＣＤ２８に結合する第２の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質を含む、項目４に記載のウイルスベクター。
（項目６）
ＩＬ２、ＩＬ７およびＩＬ１５から選択されるサイトカインを含む、サイトカインに基づくＴ細胞活性化膜貫通タンパク質を含む、前述の項目のいずれかに記載のウイルスベクター。
（項目７）
偽型ウイルスベクターを与える異種のウイルスエンベロープ糖タンパク質を含む、前述の項目のいずれかに記載のウイルスベクター。
（項目８）
前記エンベロープ糖タンパク質が、ＲＤ１１４またはその変異体の１つであるＶＳＶ−Ｇ、テナガザル白血病ウイルス（ＧＡＬＶ）、もしくはアンホトロピックエンベロープ、麻疹エンベロープまたはヒヒレトロウイルスエンベロープ糖タンパク質である、項目７に記載のウイルスベクター。
（項目９）
ウイルスエンベロープはまた、
（ｉｉｉ）捕捉部分に結合する結合ドメイン；および
膜貫通ドメイン
を含むタグ化タンパク質を含み、前記タグ化タンパク質は前記タグ化タンパク質の前記捕捉部分への結合を介した細胞上清からの前記ウイルスベクターの精製を容易にするタグ化タンパク質も含む、前述の項目のいずれかに記載のウイルスベクター。
（項目１０）
前記タグ化タンパク質の前記結合ドメインが、１つまたは複数のストレプトアビジン結合エピトープを含む、項目９に記載のウイルスベクター。
（項目１１）
前記ストレプトアビジン結合エピトープがビオチン模倣体である、項目１０に記載のウイルスベクター。
（項目１２）
前記ビオチン模倣体が、パッケージング細胞によって産生されたストレプトアビジン捕捉レトロウイルスベクターを溶出するためにビオチンを使用することができるように、ビオチンよりも低い親和性でストレプトアビジンに結合する、項目１１に記載のウイルスベクター。
（項目１３）
前記ビオチン模倣体が、ＳｔｒｅｐｔａｇＩＩ（配列番号３６）、Ｆｌａｎｋｅｄｃｃｓｔｒｅｔａｇ（配列番号３７）およびｃｃｓｔｒｅｐｔａｇ（配列番号３８）の群から選択される、項目１２に記載のウイルスベクター。
（項目１４）
Ｔ細胞受容体またはキメラ抗原受容体をコードする核酸配列を含む、前述の項目のいずれかに記載のウイルスベクター。
（項目１５）
ウイルス様粒子（ＶＬＰ）である、前述の項目のいずれかに記載のウイルスベクター。
（項目１６）
細胞表面で、
（ｉ）分裂促進ドメインおよび膜貫通ドメインを含む分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質；ならびに／または
（ｉｉ）サイトカインドメインおよび膜貫通ドメインを含む、サイトカインに基づくＴ細胞活性化膜貫通タンパク質
を発現し、その結果、宿主細胞によって産生されるレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターが項目１から８までのいずれかに定義されたものとなる、宿主細胞。
（項目１７）
細胞表面で、
（ｉｉｉ）捕捉部分に結合する結合ドメイン；および
膜貫通ドメイン
を含むタグ化タンパク質も発現し、前記タグ化タンパク質が、前記タグ化タンパク質の前記捕捉部分への結合を介した細胞上清からの前記ウイルスベクターの精製を容易にし、その結果、前記パッケージング細胞によって産生されたレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターが、項目９から１４までのいずれかに定義されたものとなる、項目１６に記載の宿主細胞。
（項目１８）
下記の遺伝子：ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび／またはｒｅｖのうちの１つまたは複数も含む、項目１６または１７に定義された宿主細胞である、パッケージング細胞。
（項目１９）
ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび必要に応じてｒｅｖ遺伝子を含み、ならびにレトロウイルスゲノムまたはレンチウイルスゲノムも含む、項目１６または１７に定義された宿主細胞である、プロデューサー細胞。
（項目２０）
項目１６もしくは１７に記載の宿主細胞、項目１８に記載のパッケージング細胞または項目１９に記載のプロデューサー細胞を作製するための方法であって、分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質および／またはサイトカインに基づくＴ細胞活性化膜貫通タンパク質をコードする核酸を細胞に形質導入またはトランスフェクトするステップを含む方法。
（項目２１）
項目１７から１９までのいずれかに記載の細胞内にレトロウイルスゲノムまたはレンチウイルスゲノムを発現させるステップを含む、項目１から１５までのいずれかに記載のウイルスベクターを作製するための方法。
（項目２２）
Ｔ細胞またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が、１つもしくは複数の分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質および／または１つもしくは複数のサイトカインに基づくＴ細胞活性化膜貫通タンパク質によって活性化されるように、項目１から１５までのいずれかに記載のウイルスベクターを前記Ｔ細胞またはＮＫ細胞に形質導入するステップを含む、活性化されたトランスジェニックＴ細胞またはＮＫ細胞を作製するための方法。
（項目２３）
（ｉ）項目１６または１７に定義された宿主細胞；
（ｉｉ）ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび必要に応じてｒｅｖを含む核酸；ならびに
（ｉｉｉ）レトロウイルスゲノム
を含む、項目１から１５までのいずれかに定義されたレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターを作製するためのキット。
（項目２４）
（ｉ）項目１８に定義されたパッケージング細胞；および
（ｉｉ）レトロウイルスベクターゲノムまたはレンチウイルスベクターゲノム
を含む、項目１から１５までのいずれかに定義されたレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターを作製するためのキット。
（項目２５）
（ｉ）分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質および／またはサイトカインに基づくＴ細胞活性化膜貫通タンパク質をコードする１つまたは複数の核酸；ならびに
（ｉｉ）レトロウイルスｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび必要に応じてｒｅｖ遺伝子を含む核酸
を含む、項目１８に記載のパッケージング細胞を作製するためのキット。
（項目２６）
（ｉ）分裂促進性Ｔ細胞活性化膜貫通タンパク質および／またはサイトカインに基づくＴ細胞活性化膜貫通タンパク質をコードする１つまたは複数の核酸；
（ｉｉ）レトロウイルスｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖおよび必要に応じてｒｅｖ遺伝子を含む核酸；ならびに
（ｉｉｉ）レトロウイルスベクターゲノムまたはレンチウイルスベクターゲノム
を含む、項目１９に記載のプロデューサー細胞を作製するためのキット。