(57)【要約】アントシアニンの含有量が高く、色素原料として有用な有色サツマイモを提供する。また紫系統色素として有用ま上記有色サツマイモの加工物、具体的には抽出組成物、及びその精製処理物（粗精製物を含む）を提供する。下記の特徴を有する有色サツマイモを用いる：（Ａ）色価（530nm）/gが１５以上、（Ｂ）吸光比（320nm／530nm）／gが１．５以上、（Ｃ）〔色価（530nm）/g〕×〔吸光比（320nm／530nm）/g〕が３０以上、（Ｄ）ゲノム配列の少なくとも二箇所にRtsp-1）が挿入されており、植物体の一部を被験材料として、配列番号１に記載する塩基配列と配列番号２に記載する塩基配列とからなるプライマーセット１、及び配列番号１に記載する塩基配列と配列番号３に記載する塩基配列とからなるプライマーセット２の少なくとも一方を用いて核酸増幅反応を行うと、500〜530bpの断片長からなる増幅産物が生成される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の特徴を有する有色サツマイモ：
（Ａ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕が１５以上、
（Ｂ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの吸光比（320nm／530nm）〔吸光比（320nm／530nm）／g〕が１．５以上、
（Ｃ）〔色価（530nm）/g〕×〔吸光比（320nm／530nm）/g〕の値が３０以上、
（Ｄ）ゲノム配列の少なくとも二箇所にLTR型レトロトランスポゾン（Rtsp-1）が挿入されており、植物体の一部を被験材料として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、及び配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２の少なくとも一方を用いて核酸増幅反応を行うと、500〜530bpの断片長からなる増幅産物が生成される。
【請求項２】
下記の特徴を有する有色サツマイモ：
（Ａ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕が１５以上、
（Ｂ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの吸光比（320nm／530nm）〔吸光比（320nm／530nm）／g〕が１．５以上、
（Ｃ）〔色価（530nm）/g〕×〔吸光比（320nm／530nm）/g〕の値が３０以上、
（Ｅ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕当たりの香気成分の総量が、既存品種アケムラサキにおける同色価（530nm）/g当たりの香気成分の総量の４０％以下である。
【請求項３】
さらに下記（Ｅ）の特徴を有する請求項１に記載する有色サツマイモ：
（Ｅ）色価（530nm）当たりの香気成分の総量が、既存品種アケムラサキにおける同色価（530nm）当たりの香気成分の総量の４０％以下である。
【請求項４】
母親系統（九系04208-2）及び父親系統（九系04222-50）に由来し、当該母親系統が下記（Ｄ）の特徴を有するサツマイモである、請求項１〜３のいずれかに記載する有色サツマイモ：
（Ｄ）ゲノム配列の少なくとも二箇所にLTR型レトロトランスポゾン（Rtsp-1）が挿入されており、植物体の一部を被験材料として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、及び配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２の少なくとも一方を用いて核酸増幅反応を行うと、500〜530bpの断片長からなる増幅産物が生成される。
【請求項５】
色素原料用有色サツマイモである請求項１〜４のいずれかに記載する有色サツマイモ。
【請求項６】
請求項１乃至５のいずれかに記載する有色サツマイモの抽出組成物またはその精製処理物。
【請求項７】
色素組成物である請求項６記載の有色サツマイモの抽出組成物またはその精製処理物。
【請求項８】
少なくとも色素YGM-0e、色素YGM-4b、色素YGM-5a、色素YGM-6、及び色素YGM-2のアントシアニン色素を含有し、これら各色素の含有割合が、下記条件のＨＰＬＣで検出されるピークの面積比として、下記（1）〜（4）のいずれか少なくとも１つを満たすものであることを特徴とする、有色サツマイモに由来する色素組成物：
(1)ａ／ｂ：0.3〜2
(2)ｃ／ｂ：2.3〜10
(3)ｃ／ｄ：1.2〜5
(4)ｅ／ａ：0.1〜4.5
ａ：色素YGM-0eのピーク面積
ｂ：色素YGM-4bのピーク面積
ｃ：色素YGM-5aのピーク面積
ｄ：色素YGM-6のピーク面積
ｅ：色素YGM-2のピーク面積
［ＨＰＬＣ条件］
ODS系逆相カラム（結合基：トリアコンチル基）：細孔径（14nm）、比表面積（300m2/g）、細孔容積（1.05mg/mL）、直径と長さ（φ4.6×250nm） 
カラム温度：40℃
移動相：(a）1v/v％  ギ酸水溶液、(b)アセトニトリル
グラジェント条件：0→15分（a）95%→82%、(b)5%→18%
15→45分（a）82%→30%、(b)18%→70%
45→55分（a）30%→20%、(b)70%→80%
55→60分（a）20%→0%、(b)80%→100%
流速：1.0mL/min
試料注入量：20μL
検出：フォトダイオードアレイ検出器（530nm）。
【請求項９】
波長530nm付近の極大吸収波長における色価をＥ10%1cm＝８０とした場合に含まれる香気成分の総量が、１２０ｐｐｍ以下であることを特徴とする、請求項８に記載の色素組成物。
【請求項１０】
上記有色サツマイモが請求項１乃至５のいずれかに記載する有色サツマイモである請求項８または９に記載する色素組成物。
【請求項１１】
下記（１）及び（２）または（１’）及び（２’）の工程を有する、食用有色サツマイモまたは食用有色サツマイモを原料に含む可食性組成物に含まれる、有色サツマイモの品種を判定する方法：
（１）食用有色サツマイモまたは食用有色サツマイモを原料に含む可食性組成物から調製されたDNAを鋳型として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、及び配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２の少なくとも一方を用いて核酸増幅反応を行う工程、及び
（２）上記核酸増幅反応によって500〜530bpの断片長からなる増幅産物の生成の有無を確認する工程；または
（１’）食用有色サツマイモまたは食用有色サツマイモを原料に含む可食性組成物から調製されたDNAを鋳型として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号４〜１０のいずれかに記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット３〜９の少なくとも一つを用いて核酸増幅反応を行う工程、及び
（２’）上記核酸増幅反応によって550〜650bpの断片長からなる増幅産物の生成の有無を確認する工程。
【請求項１２】
さらに下記（３）工程を有する請求項１１に記載する食用有色サツマイモの品種判定方法：
（３）（２）または（２’）工程の結果、該当する増幅産物の生成が認められた場合に、当該食用有色サツマイモまたは可食性組成物に含まれる有色サツマイモを、請求項１乃至５のいずれかに記載する有色サツマイモであると決定する工程。
【請求項１３】
下記（ａ）〜（ｉ）からなる群から選択される少なくとも１つのプライマーセットを含む、食用有色サツマイモの品種判定用試薬：
（ａ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、
（ｂ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２、
（ｃ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号４に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット３、
（ｄ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号５に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット４、
（ｅ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号６に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット５、
（ｆ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号７に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット６、
（ｇ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号８に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット７、
（ｈ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号９に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット８、
（ｉ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号１０に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット９。
【請求項１４】
請求項１１または１２に記載する品種判定方法を実施するための試薬である、請求項１３に記載する品種判定用試薬。
【請求項１５】
請求項１３または１４に記載する品種判定用試薬を含む、有色サツマイモ品種判定キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アントシアニンの含有量が高く、色素原料として有用な有色サツマイモに関する。また本発明は、当該有色サツマイモの加工物、具体的には抽出組成物、及びその精製処理物（粗精製物を含む）に関し、さらに当該加工物の例えば紫系統色素としての利用に関する。また本発明は有色サツマイモの品種判定方法、及びその試薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
有色サツマイモ（紅芋、紫サツマイモともいう）は、アントシアニンを多く含むサツマイモであり、従来、アケムラサキ、アヤムラサキ、及びムラサキマサリ等、アントシアニン含量を高めた有色サツマイモが育種改良され、商業的に広く流通し（非特許文献１）、様々な加工食品に利用されている。特に有色サツマイモ由来のアントシアニンは、赤キャベツ、ブドウ、紫トウモロコシ、赤ダイコン等に由来するアントシアニンに比べて、耐熱性、耐光性、及び色調の鮮やかさに優れているアントシアニンであることから、赤〜紫色の可食性色素として、食品加工分野等での利用が進んでいる。また当該アントシアニンには、抗酸化能、肝機能改善、血圧上昇抑制作用、抗変異原性、アンギオテンシンＩ変換酵素阻害作用、αグルコシダーゼ阻害作用、ウシ初期胚発生率低下抑制作用、血糖値上昇抑制作用、血管弛緩作用、血流量増加作用等といった優れた機能があることが報告されており、機能性食品への利用も期待されている。【０００３】
ところで、サツマイモ（甘藷）において、従来から転移活性を有するLTR型レトロトランスポゾンRtsp-1が同定されており（非特許文献２）、その挿入多型を利用したDNAマーカーを使用することでサツマイモの品種が特定できることが判明している。最近、次世代シーケンサーを用いた網羅的解析により代表的な有色サツマイモ品種やその親系統を中心とした38種類のサツマイモ品種・育種系統について、Rtsp-1挿入箇所の配列情報が報告されている（非特許文献３）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】農研機構  九州沖縄農研育成品種の入手先リスト（2016.4.18版）［平成28年8月6日検索］インターネット＜URL：http://www.naro.affrc.go.jp/karc/contents/files/seed_imo.pdf＞
【非特許文献２】Tahara, M., et al., Mol. Gen. Genomics 272: (2004) 116-127
【非特許文献３】Monden, Y., et al., DNA Res. 21 (2014), 491-498
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、色素（アントシアニン）含量が高く、色素原料用に適した有色サツマイモの新品種を提供することを目的とする。また本発明は当該有色サツマイモの加工物、具体的には抽出組成物、及びその精製処理物（粗精製物を含む）を提供することを目的とする。さらに本発明は、これらの加工物について、例えば紫統色の色素としての利用を提供することを目的とする。【０００６】
また本発明は食用有色サツマイモの品種、特に可食性組成物中に含まれる有色サツマイモの品種を判定する方法、並びにその判定に使用される試薬及び試薬キットを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは上記課題に鑑みて、新しい有色サツマイモを作出すべく鋭意検討を重ねていたところ、母親品種（九系04208-2）と父親品種（九系04222-50）とを交配選抜することで、目的とする紫系統の色素（アントシアニン）含量が高く、色素原料用に適した有色サツマイモを得ることに成功した。当該有色サツマイモは、既存の有色サツマイモと比べて色素含量が多いだけでなく、抗酸化作用を有するポリフェノール含量も多く、そのため色素を安定した状態で含有するという特徴を有する。また既存の食用有色サツマイモとは異なる部位にLTR型のレトロトランスポゾン（Rtsp-1）を有することから、新品種の有色サツマイモであることが確認された。このように当該新品種の有色サツマイモは、既存の食用有色サツマイモとは異なる特徴的な遺伝子配列を有することから、かかる遺伝子配列を指標とすることで、有色サツマイモまたは可食性組成物中に含まれる有色サツマイモについて、それが本発明の品種であるか否かを判定することが可能になる。【０００８】
本発明はかかる知見に基づいて完成したものであり、下記の実施形態を有するものである。【０００９】
（Ｉ）新規な有色サツマイモ
（Ｉ−１）下記（Ａ）〜（Ｃ）の特性に加えて、（Ｄ）及び（Ｅ）の少なくとも一方の特性を有する有色サツマイモ：
（Ａ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕が１５以上、
（Ｂ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの吸光比（320nm／530nm）〔吸光比（320nm／530nm）/g〕が１．５以上、
（Ｃ）〔色価（530nm）/g〕×〔吸光比（320nm／530nm）/g〕の値が３０以上、
（Ｄ）ゲノム配列の少なくとも二箇所にLTR型レトロトランスポゾン（Rtsp-1）が挿入されており、植物体の一部を被験材料として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、及び配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２の少なくとも一方を用いて核酸増幅反応を行うと、500〜530bpの断片長からなる増幅産物が生成される、
（Ｅ）色価（530nm）当たりの香気成分の総量が、既存品種アケムラサキにおける同色価（530nm）当たりの香気成分の総量の４０％以下である。【００１０】
（Ｉ−２）上記香気成分がブタノール（butanol）、イソアミルアルコール（isoamyl alcohol）、アセトイン（acetoin）、アセトール（acetol）、ノナナール（nonanal）、酢酸（acetic acid）、2-エチルヘキサノール（2-ethylhexanol）、ベンズアルデヒド（benzaldehyde）、イソブチル酸（isobutyric acid）、γ-ブチロラクトン（γ-butyrolactone）、メントール（menthol）、α-テルピネオール（α-terpineol）、グアイアコール（guaiacol）、フェネチルアルコール（phenethyl alcohol）、3,7-ジメチルオクト-1-エン-3,7-ジオール（3,7-dimethyloct-1-en-3,7-diol）、3-ヒドロキシ-2-ピロン（3-hydroxy-2-pyrone）、パントラクトン（pantolactone）、シス-1,8-テルピン（cis-1,8-terpin）、4-ビニルグアイアコール（4-vinylguaiacol）、5-（ヒドロキシメチル）フルフラール（5-(hydroxymethyl)furfural）、バニリン（vanillin）、ジンゲロン（zingerone）、及びバニリルアルコール（vanillyl alcohol）からなる２３種類の香気成分である、（Ｉ−１）に記載する有色サツマイモ。【００１１】
（Ｉ−３）母親系統（九系04208-2）及び父親系統（九系04222-50）に由来し、当該母親系統が上記（Ｉ−１）に記載する（Ｄ）と同一の特性を有するサツマイモである、（Ｉ−１）または（Ｉ−２）に記載する有色サツマイモ。
（Ｉ−４）色素原料用有色サツマイモである（Ｉ−１）〜（Ｉ−３）のいずれかに記載する有色サツマイモ。【００１２】
（II）有色サツマイモの加工処理物、及び色素組成物
（II−１）（Ｉ−１）〜（Ｉ−４）のいずれかに記載する有色サツマイモの抽出組成物またはその精製処理物。
（II−２）色素組成物である（II−１）記載の抽出組成物またはその精製処理物。【００１３】
（II−３）少なくとも色素YGM-0e、色素YGM-4b、色素YGM-5a、色素YGM-6、及び色素YGM-2のアントシアニン色素を含有し、これら各色素の含有割合が、下記条件のＨＰＬＣで検出されるピークの面積比として、下記（1）〜（4）のいずれか少なくとも１つを満たすものであることを特徴とする、有色サツマイモに由来する色素組成物：
(1)ａ／ｂ：0.3〜2
(2)ｃ／ｂ：2.3〜10
(3)ｃ／ｄ：1.2〜5
(4)ｅ／ａ：0.1〜4.5
ａ：色素YGM-0eのピーク面積
ｂ：色素YGM-4bのピーク面積
ｃ：色素YGM-5aのピーク面積
ｄ：色素YGM-6のピーク面積
ｅ：色素YGM-2のピーク面積
［ＨＰＬＣ条件］
ＯＤＳ系逆相カラム（結合基：トリアコンチル基）：細孔径（14nm）、比表面積（300m2/g）、細孔容積（1.05mg/mL）、直径と長さ（φ4.6×250nm）
カラム温度：40℃
移動相：(a）1v/v％  ギ酸水溶液、(b)アセトニトリル
グラジェント条件：0→15分（a）95%→82%、(b)5%→18%
15→45分（a）82%→30%、(b)18%→70%
45→55分（a）30%→20%、(b)70%→80%
55→60分（a）20%→0%、(b)80%→100%
流速：1.0mL/min
試料注入量：20μL
検出：フォトダイオードアレイ検出器（530nm）。【００１４】
（II−４）上記ピーク面積比が、下記のＨＰＬＣ装置及びカラムを用いて測定して得られる下記ａ〜ｅから算出されるものである（II−３）に記載する色素組成物：
ＨＰＬＣ装置：JASCO LC-2000Plusシリーズ（日本分光株式会社）
カラム：Develosil C30-UG-5（φ4.6×250nm）（野村化学株式会社）。【００１５】
ａ：保持時間 約17.52分に検出される色素YGM-0eのピーク面積
ｂ：保持時間 約22.07分に検出される色素YGM-4bのピーク面積
ｃ：保持時間 約22.23分に検出される色素YGM-5aのピーク面積
ｄ：保持時間 約22.84分に検出される色素YGM-6のピーク面積
ｅ：保持時間 約20.61分に検出される色素YGM-2のピーク面積。
（II−５）波長530nm付近の極大吸収波長における色価をＥ10%1cm＝８０とした場合に含まれる香気成分の総量が、１２０ｐｐｍ以下であることを特徴とする、（II−３）または（II−４）記載の色素組成物。
（II−６）上記有色サツマイモが（Ｉ−１）〜（Ｉ−４）のいずれかに記載する有色サツマイモである、（II−３）〜（II−５）のいずれかに記載する色素組成物。【００１６】
（III）サツマイモの品種判定方法、及びそれに使用する試薬
（III−１）下記（１）及び（２）または（１’）及び（２’）の工程を有する、食用有色サツマイモまたは食用有色サツマイモを原料に含む可食性組成物に含まれる、原料の食用有色サツマイモの品種を判定する方法：
（１）食用有色サツマイモまたは食用有色サツマイモを含む可食性組成物から調製されたDNAを鋳型として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、及び配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２の少なくとも一方を用いて核酸増幅反応を行う工程、及び
（２）上記核酸増幅反応によって500〜530bpの断片長からなる増幅産物の生成の有無を確認する工程；または
（１’）食用有色サツマイモまたは食用有色サツマイモを原料に含む可食性組成物から調製されたDNAを鋳型として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号４〜１０のいずれかに記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット３〜９の少なくとも一つを用いて核酸増幅反応を行う工程、及び
（２’）上記核酸増幅反応によって550〜650bpの断片長からなる増幅産物の生成の有無を確認する工程。【００１７】
（III−２）さらに下記（３）工程を有する（III−１）に記載する食用有色サツマイモの品種判定方法：
（３）該当する増幅産物の生成が認められた場合に、当該食用有色サツマイモまたは可食性組成物に含まれる食用有色サツマイモを、（I−１）〜（Ｉ−４）のいずれかに記載する有色サツマイモであると決定する工程。
（III−３）上記食用有色サツマイモが九州180号である、（III−２）に記載する方法。【００１８】
（III−４）下記（ａ）〜（ｉ）からなる群から選択される少なくとも１つのプライマーセットを有する有色サツマイモ品種判定用試薬：
（ａ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、
（ｂ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２、
（ｃ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号４に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット３、
（ｄ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号５に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット４、
（ｅ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号６に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット５、
（ｆ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号７に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット６、
（ｇ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号８に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット７、
（ｈ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号９に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット８、
（ｉ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号１０に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット９。
（III−５）（III−１）〜（III−３）のいずれかに記載する品種判定方法を実施するために使用される（III−４）に記載する有色サツマイモ品種判定用試薬。
（III−６）（III−４）または（III−５）に記載する有色サツマイモ品種判定用試薬を含む、有色サツマイモ品種判定キット。
（III−７）（III−１）〜（III−３）のいずれかに記載する品種判定方法を実施するために使用される（III−６）に記載する有色サツマイモ品種判定キット。
【発明の効果】
【００１９】
本発明の有色サツマイモは、アケムラサキ、アヤムラサキ、及びムラサキマサリといった従来の有色サツマイモと比較して、色素（アントシアニン）含量が多くて色価が高く、また色素を安定化させる抗酸化作用を有するクロロゲン酸含量も多いため、色素を調製するための色素原料用の紫サツマイモとして有用である。また当該有色サツマイモから調製される色素組成物（有色サツマイモ色素）は、食品などに添加した場合に影響を与える可能性のある香気成分の含有量が低く、また光及び熱に対して良好な安定性（色素残存率：高、色調変化：小）を有している。【００２０】
また本発明の有色サツマイモ品種判定用試薬及び判定キットによれば、上記本発明の有色サツマイモの品種を、従来の有色サツマイモと区別して判定することができる。このため、本発明によれば有色サツマイモを含む可食性組成物について、当該有色サツマイモが本発明の有色サツマイモの品種であるか否かを簡便且つ精度高く判定することが可能になる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】レトロトランスポゾンRtsp-１の概念図と、その挿入箇所であるゲノムDNA配列を遺伝子増幅するために使用するフォワードプライマー（pptプライマー）及びリバースプライマー（CL1836プライマー、CL1056プライマー）との位置関係を示す図である。
【図２】実施例２で得られた新品種（九州180号）の色素抽出物に含まれる香気成分のGC/MS分析結果を、既存品種（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ）の色素抽出物に含まれる香気成分の分析結果と併せて示す（実施例３）。
【図３】下左図：新品種（九州180号）の色素抽出物に含まれる23種の香気成分の総量を100とした場合の、既存品種（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ）の色素抽出物に含まれる同23種の香気成分の総量の相対量を示した図である。下右図：23種の香気成分の総量を色価（530nm）当たりに換算した結果を示す図である。
【図４】実施例２で得られた新品種（九州180号）の色素抽出物について主成分分析を行った結果を、既存品種（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ）の結果と併せて示す（実施例３）。
【図５】実施例２で調製した各品種（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ、九州180号）の色素抽出物について、波長530nmで検出したＨＰＬＣプロファイルを示す。図５Ａは各品種で検出されたピークの保持時間（分）とピーク面積を示し、図５Ｂは各ピーク面積について、総ピーク面積を100％とした場合の相対比（%）を示したものである（実施例４−１）。
【図６】各品種間（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ、九州180号）で、p-hydroxybenzoylated (cyanidin 3-sophoroside-5-glucoside)（YGM-Oc）、及びp-hydroxybenzoylated (peonidin 3-sophoroside-5-glucoside)（YGM-Oe）のピーク面積（相対比％）を比較した結果を示す（実施例４−１）。
【図７Ａ】各品種間（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ、九州180号）で、色素成分（ａ：YGM-0e、ｂ：YGM-4b、ｃ：YGM-5a、ｄ：YGM-6、ｅ：YGM-2）の含有割合（相対比）を比較した結果を示す。図７Ａはａ／ｂ（YGM-0e／YGM-4b）を、品種間で対比した結果である（実施例４−１）。
【図７Ｂ】各品種間（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ、九州180号）で、色素成分（ａ：YGM-0e、ｂ：YGM-4b、ｃ：YGM-5a、ｄ：YGM-6、ｅ：YGM-2）の含有割合（相対比）を比較した結果を示す。図７Ｂはｃ／ｂ（YGM-5a／YGM-4b）を、品種間で対比した結果である（実施例４−１）。
【図７Ｃ】各品種間（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ、九州180号）で、色素成分（ａ：YGM-0e、ｂ：YGM-4b、ｃ：YGM-5a、ｄ：YGM-6、ｅ：YGM-2）の含有割合（相対比）を比較した結果を示す。図７Ｃはｃ／ｄ（YGM-5a／YGM-6）を、品種間で対比した結果である（実施例４−１）。
【図７Ｄ】各品種間（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ、九州180号）で、色素成分（ａ：YGM-0e、ｂ：YGM-4b、ｃ：YGM-5a、ｄ：YGM-6、ｅ：YGM-2）の含有割合（相対比）を比較した結果を示す。図７Ｄはｅ／ａ（YGM-2／YGM-0e）を、品種間で対比した結果である（実施例４−１）。
【図８】実施例２で調製した各品種（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ、九州180号）の色素抽出物について、波長320nmで検出した紫外部成分のＨＰＬＣプロファイルを示す。図８Ａは各品種で検出されたピークの保持時間（分）とピーク面積を示し、図８Ｂは各ピーク面積を、波長530nmで検出した総ピーク面積で除した値を示したものである（実施例４−１）。
【図９】品種間で新品種（九州180号）に最も多く認められた紫外部成分のピークである保持時間約10.92分及び約24.44分で検出されるピーク、並びに新品種（九州180号）に最も少なく認められた紫外部成分のピークである保持時間約24.69分で検出されるピーク面積を、波長530nmで検出した総ピーク面積で除した値を、各品種間で比較した結果を示す（実施例４−１）。
【図１０】pptプライマー（配列番号１）とCL1836プライマー（配列番号２）を使用してRtsp-1挿入箇所のPCR増幅を行った対象のサツマイモの品種（27種）と、その結果を示す（実施例５）。
【図１１】pptプライマー（配列番号１）とCL1056プライマー（配列番号３）を使用してRtsp-1挿入箇所のPCR増幅を行った対象のサツマイモの品種（27種）と、その結果を示す（実施例５）。
【図１２】実施例６で精製調製した有色サツマイモ色素のGC/MS分析結果（クロマトグラム）を品種間（アヤムラサキ、アケムラサキ、新品種（九州180号））で比較したものである。
【図１３】実施例６で精製調製した各品種（アヤムラサキ、アケムラサキ、九州180号）の色素組成物について、波長530nmで検出したＨＰＬＣプロファイルを示す。図１３Ａは各品種で検出されたピークの保持時間（分）とピーク面積を示し、図１３Ｂは各ピーク面積について、総ピーク面積を100％とした場合の相対比（%）を示したものである（実施例８）。
【図１４】実施例６で精製調製した各品種（アヤムラサキ、アケムラサキ、九州180号）の間で、色素成分（ａ：YGM-0e、ｂ：YGM-4b、ｃ：YGM-5a、ｄ：YGM-6、ｅ：YGM-2）の含有割合（相対比）を比較した結果を示す。図１４Ａはａ／ｂ（YGM-0e／YGM-4b）、図１４Ｂはｃ／ｂ（YGM-5a／YGM-4b）、図１４Ｃはｃ／ｄ（YGM-5a／YGM-6）、図１４Ｄはｅ／ａ（YGM-2／YGM-0e）を、品種間で対比した結果である（実施例８）
【図１５】各品種（アヤムラサキ、アケムラサキ、九州180号）の色素組成物について、波長320nmで検出した紫外部成分のＨＰＬＣプロファイルを示す。図１５Ａは各品種で検出されたピークの保持時間（分）とピーク面積を示し、図１５Ｂは各ピーク面積を、波長530nmで検出した総ピーク面積で除した値を示したものである（実施例８）。
【図１６】品種間で新品種（九州180号）に最も多く認められた紫外部成分のピークである保持時間約10.92分、約24.44分及び約24.69分で検出されるピーク面積を、波長530nmで検出した総ピーク面積で除した値を、各品種間で比較した結果を示す（実施例８）。
【図１７】実施例１で作出した新品種（九州180号）を種芋として栄養繁殖により栽培して収穫した同遺伝子を有する有色サツマイモから調製した色素組成物（色素抽出液）について、波長530nmで検出したＨＰＬＣプロファイルを示す。図１７Ａは新品種で検出されたピークの保持時間（分）とピーク面積を示し、図１７Ｂは各ピーク面積について、総ピーク面積を100％とした場合の相対比（%）を示したものである（実施例１０）。
【図１８】上記有色サツマイモから調製した濃縮抽出液について、波長530nmで検出したＨＰＬＣプロファイルを示す。図１８Ａは新品種で検出されたピークの保持時間（分）とピーク面積を示し、図１８Ｂは各ピーク面積について、総ピーク面積を100％とした場合の相対比（%）を示したものである（実施例１０）。
【図１９Ａ】プライマーセット３を用いてPCR増幅した結果得られた増幅産物の電気泳動像を示す（実施例１１）。図中、Ａ〜Ｆレーンは、順番に九州180号、九系04222-50、九系04208-2、アケムラサキ、ムラサキマサリ、及びアヤムラサキの結果を示す（以下、図１９Ｂ〜Ｇにおいても同じ）。
【図１９Ｂ】プライマーセット４を用いてPCR増幅した結果得られた増幅産物の電気泳動像を示す（実施例１１）。
【図１９Ｃ】プライマーセット５を用いてPCR増幅した結果得られた増幅産物の電気泳動像を示す（実施例１１）。
【図１９Ｄ】プライマーセット６を用いてPCR増幅した結果得られた増幅産物の電気泳動像を示す（実施例１１）。
【図１９Ｅ】プライマーセット７を用いてPCR増幅した結果得られた増幅産物の電気泳動像を示す（実施例１１）。
【図１９Ｆ】プライマーセット８を用いてPCR増幅した結果得られた増幅産物の電気泳動像を示す（実施例１１）。
【図１９Ｇ】プライマーセット９を用いてPCR増幅した結果得られた増幅産物の電気泳動像を示す（実施例１１）。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
（Ｉ）有色サツマイモ
本発明が対象とする有色サツマイモは、下記（Ａ）〜（Ｃ）の特性に加えて、（Ｄ）及び（Ｅ）の少なくとも一方の特性を有することを特徴とする。
（Ａ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕が１５以上である。
（Ｂ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの吸光比（320nm／530nm）〔吸光比（320nm／530nm）/g〕が１．５以上である。
（Ｃ）前記〔色価（530nm）/g〕と前記〔吸光比（320nm／530nm）/g〕とを乗じた値｛〔色価（530nm）/g〕×〔吸光比（320nm／530nm）/g〕｝が３０以上である。
（Ｄ）ゲノム配列の少なくとも二箇所にLTR型レトロトランスポゾン（Rtsp-1）が挿入されており、植物体の一部を被験材料として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、及び配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２の少なくとも一方を用いて核酸増幅反応を行うと、500〜530bpの断片長からなる増幅産物が生成される。
（Ｅ）色価（530nm）当たりの香気成分の総量が、既存品種アケムラサキにおける同色価（530nm）当たりの香気成分の総量の４０％以下である。
【００２３】
なお、サツマイモ（薩摩芋、学名: Ipomoea batatas、別名：甘藷、唐芋、琉球薯とも称される）は、ヒルガオ科サツマイモ属の植物であるが、本発明において「サツマイモ」とは、当該ヒルガオ科サツマイモ属（Convolvulaceae科Ipomoea属）の植物（好ましくは、かんしょ種：Ipomoea batatas（L.）Lam）の食用部分である塊根を意味する。また本発明において「有色サツマイモ」とは、肉色（根塊内部）が紫色を呈するサツマイモを意味する。
【００２４】
以下、本発明の有色サツマイモの上記特徴について説明する。
【００２５】
（Ａ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）が１５以上である
これは本発明の有色サツマイモが濃い紫系統色を有していること、つまり紫系統色の色素成分を多く含有することを意味する。
【００２６】
なお、本発明において「有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）」（本発明において、単に〔色価（530nm）/g〕とも称する。）は、食品添加物公定書（第８版、日本厚生労働省）に記載された「色価測定法」に準じて測定される。
【００２７】
当該「食品添加物公定書」の「色価測定法」においては、「通例、色価は、着色料溶液の可視部での極大吸収波長における吸光度を測定し、10w/v％溶液の吸光度に換算した数値（Ｅ10%1cm）で表す」と定められている。紫系統色を有する有色サツマイモの場合、可視部での極大吸収波長は530nm付近に存在するため、本明細書において、530nm付近の極大吸収波長における吸光度から求められる色価を「色価（530nm）」と称する。530nmの波長の吸収はヒトに青がかった赤色（紫系統色）を知覚させるので、紫系統色のアントシアニン色素の評価に適している。すなわち、「色価（530nm）」と紫系統色の色素（アントシアニン色素）の含量と相関関係があり、色価が高ければ紫系統色の色素含量（アントシアニン色素含量）が高いことを意味する。
【００２８】
当該色価（530nm）の測定は、具体的には、分光光度計（V-560（日本分光社）、又はその同等品）を用いて、波長530nm付近の極大吸収波長、光路長10mmで、被験試料の吸光度を測定することによって実施される。ここで吸光度を測定する対象の被験試料は、吸光度が0.3〜0.7の範囲内に入るように調整された被験液である。
【００２９】
本発明の有色サツマイモの色価（530nm）/gの測定には、かかる被験液を次のようにして用意する。
【００３０】
［被験液の調製方法］
対象とする有色サツマイモ（生）約50gを5mm角にカットし、正確に秤量する（秤量αg）。次いで、これをビーカーに入れ、0.5w/w％の硫酸水溶液を加え全量を約250gとする（固液全量βg）。これを室温（25±5℃）の暗所で一日（約24時間）浸漬し、色素成分を抽出する。次いで、濾紙（ADVANTEC NO.5C）を用いて濾過し（固液分離）、濾液をMcIlvaine’s buffer（pH3.0）にて適宜希釈（γ倍）して、吸光度が0.3〜0.7の範囲内に入るように調整し、得られた希釈液を被験液として用いる。
【００３１】
［色価（530nm）/gの測定方法］
斯くして調製した被験液について、紫外可視分光光度計にて、波長530nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ530を測定する。またろ過後にわずかに残り得る濁りによる吸光度への影響を補正するため、併せて波長700nmにおける吸光度Ａ700（濁りの指標）を測定する。
有色サツマイモ1g湿重量あたりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕は、上記方法で得られた測定値から次式によって算出することができる。
【００３２】
[数１]
色価（530nm）/g＝ （Ａ530−Ａ700）×γ×β÷α÷10
Ａ530＝波長530nm付近の極大吸収波長での被験液の吸光度
Ａ700＝波長700nmでの被験液の吸光度
γ＝測定吸光度が0.3〜0.7の範囲に入るように調整した希釈倍率
β＝有色サツマイモ（湿重量）と抽出溶媒の全量（固液全量）
α＝有色サツマイモの湿重量
10＝10w/v％溶液の吸光度に換算するための数値。
【００３３】
このようにして算出される「色価（530nm）/g」の値の大小は、有色サツマイモ（塊根）に含まれる紫系統色の色素成分の量の多少を反映するものであり、有色サツマイモの紫系統色の色素原料としての特性・能力を適切に示すことができる。
【００３４】
本発明の有色サツマイモは、上記方法で測定される色価（530nm）/gが、通常１５以上であることを特徴とする。好ましくは１６以上、より好ましくは１８以上、更に好ましくは２０以上、特に好ましくは２２以上である。その上限は特に制限されないものの、通常４０以下、特に３０以下を例示することができる。一方、有色サツマイモの既存品種であるアヤムラサキ、アケムラサキ及びムラサキマサリの当該色価（530nm）は、実施例２に示すように、通常１２以下と、本発明の有色サツマイモの色価（530nm）よりも有意に低く、この点で本発明の有色サツマイモは既存品種の有色サツマイモと明らかに相違する。
【００３５】
なお、既存品種であるアヤムラサキ、アケムラサキ及びムラサキマサリはいずれも株式会社三和グリーン、株式会社上山種苗、及びアネット有限会社などから入手することができる（非特許文献１）。
【００３６】
（Ｂ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの吸光比（320nm／530nm）が１．５以上である
本発明において「吸光比（320nm／530nm）」は、「波長530nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ530」に対する「波長320nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ320」の割合（「波長320nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ320」／「波長530nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ530」）を意味する。
【００３７】
吸光度Ａ530は紫系統色の色素（アントシアニン色素等）の含量と相関関係があり、吸光度が高ければ紫系統色の色素の含量が高いことを意味する。一方、吸光度Ａ320はクロロゲン酸等のポリフェノール類の含量と相関関係があり、吸光度が高ければポリフェノール類の含量が高いことを意味する。両者の吸光度比に相当する「吸光比（320nm／530nm）」は「紫系統の色素の吸光度」に対する「ポリフェノール類の吸光度」の比を意味し、その有色サツマイモ1g湿重量あたりの値（本発明において、これを単に「吸光比（320nm／530nm）/g」とも称する。）が１．５以上とは、本発明の有色サツマイモに含まれる紫系統の色素量に対してポリフェノール類の含量が多いことを意味する。ポリフェノール類は抗酸化作用を有することから、有色サツマイモは、その中に含まれる紫系統の色素の量に対して抗酸化作用が高いことを意味する。
【００３８】
対象とする有色サツマイモについて「波長530nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ530」及び「波長320nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ320」の測定は、上記色価（530nm）の測定と同様に、具体的には、分光光度計（V-560（日本分光社）、又はその同等品）を用いて、波長530nm及び320nm付近の極大吸収波長、光路長10mmで、被験試料の吸光度Ａ530及び吸光度Ａ320を測定することによって実施される。ここで吸光度を測定する対象の被験試料は、吸光度が0.3〜0.7の範囲内に入るように調整された被験液である。
【００３９】
本発明の有色サツマイモの吸光度Ａ530及び吸光度Ａ320の測定に使用する被験液は、上記色価（530nm）の測定に使用される被験液と同様の方法で調製することができる。
【００４０】
調製した被験液について、紫外可視分光光度計にて、波長530nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ530、及び波長320nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ320、ならびにろ過後にわずかに残り得る濁りによる吸光度への影響を補正するため、併せて波長700nmにおける吸光度Ａ700を測定する。
【００４１】
有色サツマイモ1g湿重量あたりの吸光比（320nm／530nm）〔吸光比（320nm／530nm）/g〕は、上記方法で得られた測定値（Ａ320、Ａ530、Ａ700）から次式によって算出することができる。
【００４２】
[数２]
吸光比（320nm／530nm）/g ＝（Ａ320−Ａ700）÷（Ａ530−Ａ700）
Ａ530＝波長530nm付近の極大吸収波長での被験液の吸光度
Ａ320＝波長320nm付近の極大吸収波長での被験液の吸光度
Ａ700＝波長700nmでの被験液の吸光度。
【００４３】
このようにして算出される「吸光比（320nm／530nm）/g」の値の大小は、有色サツマイモ（塊根）に含まれる紫系統色の色素成分の単位量あたりの抗酸化作用（抗酸化能）の大小を反映するものであり、有色サツマイモ自身が有する抗酸化能に基づいて色素を安定に維持するという、紫系統色の色素原料としての有色サツマイモの特性・能力を適切に示すことができる。
【００４４】
本発明の有色サツマイモは、上記方法で測定される吸光比（320nm／530nm）/gが、通常１．５以上であることを特徴とする。好ましくは１．８以上、より好ましくは２以上である。その上限は特に制限されないものの、通常４以下、特に３以下を例示することができる。
【００４５】
（Ｃ）〔色価（530nm）/g〕×〔吸光比（320nm／530nm）/g〕の値が３０以上である
当該値は、上記（Ａ）で求められる「色価（530nm）/g」と上記（Ｂ）で求められる「吸光比（320nm／530nm）/g」を乗じることで算出することができる。当該値は有色サツマイモに含まれる安定化成分（例えばクロロゲン酸などのポリフェノール）の量の指標となるものである。
【００４６】
本発明の有色サツマイモは、かかる方法で求められる「色価（530nm）/g」×「吸光比（320nm／530nm）/g」の値が３０以上であることを特徴とする。好ましくは３３以上、より好ましくは４０以上、更に好ましくは４２以上、特に好ましくは４５以上である。その上限は特に制限されないものの、通常７０以下、特に６５以下を例示することができる。一方、有色サツマイモの既存品種であるアヤムラサキ、アケムラサキ及びムラサキマサリの当該値は、実施例２に示すように、３０未満と、本発明の有色サツマイモの当該値よりも有意に低く、この点で本発明の有色サツマイモは既存品種の有色サツマイモと明らかに相違する。
【００４７】
本発明が対象とする有色サツマイモには、少なくとも上記（Ａ）〜（Ｃ）の特性を有することを特徴とし、（Ａ）〜（Ｃ）の特性に加えて、さらに下記（Ｄ）の特性を有するもの（当該有色サツマイモを、説明の便宜上「有色サツマイモＤ」とも称する）、または（Ａ）〜（Ｃ）の特性に加えて、下記（Ｅ）の特性を有するもの（当該有色サツマイモを、説明の便宜上「有色サツマイモＥ」とも称する）が含まれる。また本発明の有色サツマイモには（Ａ）〜（Ｅ）のすべての特性を有するサツマイモも含まれ、当該有色サツマイモを、説明の便宜上「有色サツマイモＤＥ」とも称する。
【００４８】
（Ｄ）LTR型レトロトランスポゾンRtsp-1（CL1836及びCL1056）の挿入
LTR型レトロトランスポゾン（以下、単に「Rtsp-1」とも称する）は、配列の両末端にLTR（Long Terminal Report）と称される反復配列を有するLTR型のレトロトランスポゾンである。具体的には、図１に示すように、その両末端にLTRが存在し、5’側及び3’側のLTRのすぐ内側には逆転写の際に必要な配列であるPBS（primer binding site）及びPPT（poly purine truct）が存在する。この特徴から、レトロトランスポゾンの全長配列が不明であっても、上記逆転写領域の配列を同定すれば、TAIL PCR法またはSuppression PCR法などにより、その5’側または3’側への延長方向にあるLTR配列及びそれに隣接するゲノム配列を同定することが可能となる。
【００４９】
本発明の有色サツマイモＤ及びＤＥは、そのゲノム配列の少なくとも二箇所（CL1836及びCL1056）にRtsp-1が挿入されていることを特徴とする。本発明の有色サツマイモＤ及びＤＥのゲノム配列において、CL1836及びCL1056へのRtsp-1の挿入は、本発明の有色サツマイモＤ及びＤＥの植物体から調製したゲノムDNAを鋳型DNAとし、挿入されるRtsp-1に隣接するゲノム領域の塩基配列に基づいて設計されるプライマー（隣接プライマー）と、挿入されるRtsp-1の塩基配列に基づいて設計されるプライマーとを組み合わせたプライマーセットを用いて核酸増幅反応を行い、増幅産物が生じることを指標として確認することができる。つまり、サツマイモ等の植物体から調製した被験試料（ゲノムDNA）について、上記核酸増幅反応を実施して増幅産物が確認できた場合は、試験対象とした被験試料は本発明の有色サツマイモＤ又はＤＥに由来するものであると判断することができ（つまり対象とした植物体は本発明の有色サツマイモＤ又はＤＥの植物体）、増幅産物が確認できない場合は試験対象とした被験試料は本発明の有色サツマイモＤ又はＤＥのいずれにも由来するものではない（つまり対象とした植物体は本発明の有色サツマイモＤ又はＤＥの植物体ではない）と判断することができる。また被験試料が可食性組成物（例えば、食品添加物としての着色料、加工食品等）である場合、これを対象として上記核酸増幅反応を実施して増幅産物が確認できた場合は、当該可食性組成物中の原料に本発明の有色サツマイモＤ又はＤＥが使用されていると判断することができる。
【００５０】
ここでゲノムDNAの調製に使用する植物体は、有色サツマイモ植物体の部位（葉、茎、塊根等）であればよく、特に制限されないが、好ましくは新鮮な葉である。
【００５１】
DNAの抽出方法は、植物からゲノムDNAを抽出する従来公知の方法を利用して行うことができる。例えば、CTAB（cetyltrimethyl ammonium bromide）法（早川孝彦（1997）タバコのDNA・RNA単離法、「新版植物のPCR実験プロトコール」島本功、佐々木卓治監修、秀潤社、49-56）、及び「遺伝子組換え食品の検査と分析のマニュアル」（JAS分析試験ハンドブック2002）などを参考に行うことができる。
【００５２】
上記核酸増幅反応に使用するプライマーセットとしては、上記目的が達成できるものであればよく、その限りにおいて制限されないが、一例を挙げると下記のものを挙げることができる。
【００５３】
【表１】
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【００５４】
ここで「pptプライマー」は、挿入されるRtsp-1のPPT領域の塩基配列に基づいて設計されたプライマーである。また「CL1836プライマー」及び「CL1053プライマー」は前述する隣接プライマーに相当する。当該隣接プライマーは、本発明の有色サツマイモに挿入された２つのRtsp-1（CL1836、CL1056）のそれぞれに隣接するゲノム領域の塩基配列に基づいて設計することができるが、当該領域の塩基配列の中で特異性の高い部分の塩基配列に基づいて設計されることが好ましい。
【００５５】
上記プライマーセット１及び２で示すように、Forwardプライマー（pptプライマー）とReverseプライマー（CL1836プライマー、CL1056プライマー）は、Rtsp-1挿入箇所について、Rtsp-1内部のPPT配列との間で約500〜530bpの増幅産物が生じるように設計されたプライマーである。具体的には、上記pptプライマー（配列番号１）とCL1836プライマー（配列番号２）からなるプライマーセット１を用いて本発明の有色サツマイモＤ又はＤＥのゲノムDNAを被験試料として核酸増幅反応を行うと、522bpの塩基配列からなる増幅産物を得ることができる。一方、上記pptプライマー（配列番号１）とCL1056プライマー（配列番号３）からなるプライマーセット２を用いて本発明の有色サツマイモＤ又はＤＥのゲノムDNAを被験試料として核酸増幅反応を行うと、512bpの塩基配列からなる増幅産物を得ることができる。
【００５６】
ここで核酸増幅反応は、公知の核酸増幅手段を適宜選択して使用することができる。具体的には、制限されないものの、例えばPCR法、multiplex-PCR法、ICAN法、UCAN法、LAMP法、プライマーエクステンション法などを挙げることができる。中でもPCR法、multiplex-PCR法が好適に使用することができる。
【００５７】
増幅産物の有無を確認する方法としては、制限されないものの、電気泳動法を例示することができる。ここで電気泳動法は、増幅産物の長さの違いを検出するものではなく、目的とするおよその大きさ（塩基長）、具体的には500〜530bp程度の増幅産物の有無が検出できるものであればよい。このため、例えばアガロースゲル電気泳動やポリアクリルアミド電気泳動などの簡便な電気泳動を慣用方法に従って用いることができる。具体的には、上記プライマーセット１または２を用いた核酸増幅反応を、本発明の有色サツマイモのゲノムDNAを被験試料として行った場合、電気泳動により、それぞれ約522bp及び約512bpの塩基長の増幅産物を確認することができる。
【００５８】
なお、かかる増幅産物の大きさ（塩基長）は、プライマーセットの設計に応じて適宜変わり得る。例えばReverseプライマーを、Forwardプライマーに相当するpptプライマーから遠い位置に設計することで増幅断片長は長くなり、逆に近い位置に設計することで増幅断片長は短くなる。かかる増幅断片長としては、制限されないものの、40bp〜1000bp程度、好ましくは40bp〜850bp、より好ましくは40bp〜700bpを挙げることができ、増幅産物の大きさがこのような塩基長になるようにプライマーセットを設計することが好ましい。
【００５９】
なお、CL1836及びCL1056へのRtsp-1の挿入は、本発明の有色サツマイモの他、既存のサツマイモ品種の中では、本発明の有色サツマイモの交配親である母親系統のサツマイモ（九系04208-2）にのみ認められている。当該母親系統のサツマイモ（九系04208-2）は九州沖縄農業研究センター（国立研究開発法人農業・食品産業総合研究機構）に保管されている種芋用のサツマイモ品種であり、食用（食品及び食品添加物としての用途を含む）として商業利用されるものではない。ちなみに本発明において「食用」とは食品または食品添加物として商業的に利用されるものであることを意味する。
【００６０】
また、当該サツマイモ（九系04208-2）の塊根内部組織に含まれる紫系統色の色素含量は少なく、サツマイモ１ｇ湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕は１５未満である。このことから、食用有色サツマイモのうちゲノム配列のCL1836又はCL1056の少なくとも一方の部位にRtsp-1が挿入されているものは、唯一本発明の有色サツマイモ（九州180号）のみである。また食用有色サツマイモのみならず、上記九系04208-2等の非食用有色サツマイモを含む有色サツマイモのうち、上記特性（Ａ）〜（Ｃ）を満たし、且つ当該特性（Ｄ）を満たす有色サツマイモは本発明の有色サツマイモ（九州180号）のみである。
【００６１】
このように、当該両部位（CL1836及びCL1056）の少なくとも一方におけるRtsp-1の挿入は、食用有色サツマイモのなかでは、本発明の有色サツマイモ固有の特徴であることから、複数の食用有色サツマイモの中から当該本発明の有色サツマイモを選別するための目印（指標）として有効に利用することができる。また、食用有色サツマイモから調製される着色料（色素組成物）や食用有色サツマイモを含む食品等の可食性組成物に含まれる原料サツマイモの品種を判定するための目印（指標）としても有効に利用することができる。
【００６２】
なお、本発明の有色サツマイモ固有のRtsp-1挿入を確認するための核酸増幅反応に使用されるプライマーセットは、上記２つに限定されず、例えば下記表に記載するプライマーセット３〜９を使用することもできる。  
【表２】
2018066575.tif 000003
【表３】
2018066575.tif 000004
【００６３】
（Ｅ）色価（530nm）当たりの香気成分の総量が、既存品種アケムラサキにおける色価（530nm）当たりの香気成分の総量の４０％以下である。
【００６４】
これは本発明の有色サツマイモＥ及びＤＥに含まれる香気成分の量が少ないことを意味する。より具体的には、有色サツマイモＥ及びＤＥに含まれる紫系統の色素あたりの香気成分の量が少ないことを意味する。
【００６５】
ここで対象とする香気成分は、ブタノール（butanol）、イソアミルアルコール（isoamyl alcohol）、アセトイン（acetoin）、アセトール（acetol）、ノナナール（nonanal）、酢酸（acetic acid）、2-エチルヘキサノール（2-ethylhexanol）、ベンズアルデヒド（benzaldehyde）、イソブチル酸（isobutyric acid）、γ-ブチロラクトン（γ-butyrolactone）、メントール（menthol）、α-テルピネオール（α-terpineol）、グアイアコール（guaiacol）、フェネチルアルコール（phenethyl alcohol）、3,7-ジメチルオクト-1-エン-3,7-ジオール（3,7-dimethyloct-1-en-3,7-diol）、3-ヒドロキシ-2-ピロン（3-hydroxy-2-pyrone）、パントラクトン（pantolactone）、シス-1,8-テルピン＋アルファ（cis-1,8-terpin）、4-ビニルグアイアコール（4-vinylguaiacol）、5-（ヒドロキシメチル）フルフラール（5-(hydroxymethyl)furfural）、バニリン（vanillin）、ジンゲロン（zingerone）、及びバニリルアルコール（vanillyl alcohol）からなる２３種類の香気成分である。
【００６６】
有色サツマイモＥ及びＤＥに含まれるこれらの香気成分の量は、GC/MS分析によって求めることができる。GC/MS分析に供する試料（GC/MS測定試料）の調製、及びGC/MS分析条件は下記の通りである。
【００６７】
［GC/MS測定試料の調製］
有色サツマイモ（塊根）約50gを5mm角にカットし、0.5%の硫酸水を加え、固液全量を約250gとする。これを室温（25±5℃）にて一日（約24時間）浸漬抽出した後、濾紙（ADVANTEC NO.5C）を用いて濾過を行い、色素抽出液を得る。得られた色素抽出液100gにジクロロメタン100mLを加え、室温下で液液抽出した後、有機層を回収する。次いで有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水し、エバポレーターで減圧濃縮し、得られた抽出物を、GC/MS測定試料とする。
【００６８】
［GC/MS分析条件］
ガスクロマトグラフ（GC）：Agilent 6890N（アジレント・テクノロジー(株)製）質量選択検出器（MSD）： Agilent 5975（アジレント・テクノロジー(株)製）カラム : Agilent J&W DB-WAX(60 m x 0.25 mm) （アジレント・テクノロジー(株)製）オーブン温度: 50℃(2 min)→220℃(3℃/min.)。
【００６９】
なお、ガスクロマトグラフ、質量選択検出器、及びカラムは、上記と同等の性能を有するものであればよく、上記に制限されるものではない。
【００７０】
上記２３種類の香気成分の総量は、上記GC/MS分析で得られるGC/MSスペクトルにおける２３種の香気成分のピーク面積の総和から求めることができる。
【００７１】
既存品種アケムラサキの塊根に含まれる香気成分の量も、有色サツマイモE及びDEと同様に、上記方法に従ってGC/MS測定試料を調製し、上記条件のGC/MS分析を行うことで求めることができる。
【００７２】
（Ｅ）でいう「色価（530nm）当たりの香気成分の総量」は、上記（Ａ）に記載の［被験液］の色価（530nm）を求め、前述する方法で得られる「香気成分の総量」を当該色価（530nm）で除することで求めることができる。
【００７３】
被験液の色価（530nm）は、次式によって算出することができる。
［被験液の色価（530nm）の測定方法］
[数３]
色価（530nm）=（Ａ530nm−Ａ700nm）×γ÷１０
Ａ530nm＝波長530nm付近の極大吸収波長での被験液の吸光度
Ａ700nm＝波長700nmでの被験液の吸光度    
γ＝測定吸光度が0.3〜0.7の範囲に入るように調整した希釈倍率
10＝10w/v％溶液の吸光度に換算するための数値。
【００７４】
本発明の有色サツマイモＥ及びＤＥは、（Ｅ）「色価（530nm）当たりの香気成分の総量」の値が、既存品種アケムラサキについて得られる値と比較して、４０％以下であることを特徴とする。好ましくは３８％以下、より好ましくは３６％以下、特に好ましくは３５％以下である。下限としては２０％、好ましくは１０％を挙げることができる。
【００７５】
このように、（Ｅ）では既存品種アケムラサキと対比した相対比が分かればよいため、上記「香気成分の総量」は、必ずしも香気成分の絶対量の総量を求める必要はなく、GC/MS分析で得られるピーク面積の総和を「香気成分の総量」の代替値として用いることもできる。
【００７６】
前述するように本発明の有色サツマイモは、上記（Ａ）〜（Ｄ）の特性を有するか、上記（Ａ）〜（Ｃ）及び（Ｅ）の特性を有するか、または上記（Ａ）〜（Ｅ）の特性を有することを特徴とする。好ましくは上記（Ａ）〜（Ｄ）の特性を有する有色サツマイモであリ、より好ましくは上記（Ａ）〜（Ｅ）の特性を有する有色サツマイモである。
【００７７】
これらの有色サツマイモは、制限されないものの、後述する実施例に記載する通り、母親系統（九系04208-2）及び父親系統（九系04222-50）を交配し、得られた交配個体から上記の少なくとも（Ａ）〜（Ｃ）の特性に加えて、（Ｄ）及び（Ｅ）の少なくとも１方の特性を指標として選抜することで作出することができる。なお、当該母親系統（九系04208-2）及び父親系統（九系04222-50）のサツマイモはいずれも九州沖縄農業研究センター（国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構）に保管されているサツマイモである。母親系統（九系04208-2）は本発明の有色サツマイモと同様に上記（Ｄ）の特徴を有する。但し、前述するように、当該母親系統（九系04208-2）のサツマイモは種芋であって食用（食品及び食品添加物としての用途を含む）としての商業利用に供されるものではない点で、また色価（530nm）/gが１５未満と本発明の特性（Ａ）を有しない点で、本発明の有色サツマイモとは相違する。なお、本発明の有色サツマイモのうち、上記（Ａ）〜（Ｅ）の特性を有する有色サツマイモは「九州180号」と命名されて、九州沖縄農業研究センター（国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構）に保管されている。
【００７８】
本発明の有色サツマイモは、上記（Ａ）〜（Ｄ）の特性を有するか、上記（Ａ）〜（Ｃ）及び（Ｅ）の特性を有するか、または上記（Ａ）〜（Ｅ）の特性を有するものであればよく、九州沖縄農業研究センターに保管されているサツマイモに特に限定されるものではない。実施例９で示すように、九州180号を種芋として栄養繁殖（無性繁殖）により通常の栽培条件で栽培して得られる、（Ｄ）の遺伝的特性を有する有色サツマイモもまた、上記（Ａ）〜（Ｃ）の特徴を備えている。従って、栄養繁殖により得られる九州180号の後継物もまた本発明の有色サツマイモに含まれる。
【００７９】
本発明の有色サツマイモは、（Ａ）の特性から分かるように紫系統の色素（アントシアニン色素）の含量が高く、また（Ｂ）の特性で示されるように当該紫系統の色素（アントシアニン色素）単位あたりの抗酸化能が高いことから、当該色素を安定して含有する。このため紫系統の色素（アントシアニン色素）の原料用サツマイモとして有効に利用することができる。
【００８０】
（II）有色サツマイモ由来の色素組成物、及びその調製方法
本発明はまた有色サツマイモを原料として調製される天然色素組成物を提供する。当該色素組成物は、波長530nm付近に極大吸収波長を有する紫系統色の色素（アントシアニン色素）を高い割合で含む紫系統の色を呈した色素組成物である。
【００８１】
具体的には、本発明の色素組成物は、アントシアニン色素として少なくとも色素YGM-0e、色素YGM-4b、色素YGM-5a、色素YGM-6、及び色素YGM-2を含有し、これら各色素の含有割合が、下記条件のＨＰＬＣで検出されるピークの面積比として、下記（1）〜（4）のいずれか少なくとも１つを満たすものであることを特徴とする：
(1)ａ／ｂ（YGM-0e／YGM-4b）：0.3〜2
(2)ｃ／ｂ（YGM-5a／YGM-4b）：2.3〜10
(3)ｃ／ｄ（YGM-5a／YGM-6）：1.2〜5
(4)ｅ／ａ（YGM-2／YGM-0e）：0.1〜4.5
ａ：色素YGM-0eのピーク面積
ｂ：色素YGM-4bのピーク面積
ｃ：色素YGM-5aのピーク面積
ｄ：色素YGM-6のピーク面積
ｅ：色素YGM-2のピーク面積。
【００８２】
［ＨＰＬＣ条件］
ＯＤＳ系逆相カラム（結合基：トリアコンチル基）：細孔径（14nm）、比表面積（300m2/g）、細孔容積（1.05mg/mL）、直径と長さ（φ4.6×250nm）
カラム温度：40℃
移動相：(a）1v/v％  ギ酸水溶液、(b)アセトニトリル
グラジェント条件：0→15分（a）95%→82%、(b)5%→18%
15→45分（a）82%→30%、(b)18%→70%
45→55分（a）30%→20%、(b)70%→80%
55→60分（a）20%→0%、(b)80%→100%
流速：1.0mL/min
試料注入量：20μL
検出：フォトダイオードアレイ検出器（530nm）。
【００８３】
なお、一例として、ＨＰＬＣ装置としてJASCO LC-2000Plusシリーズ（日本分光株式会社）を使用し、前記条件に適合したＯＤＳ系カラムとしてDevelosil（登録商標） C30-UG-5（φ4.6×250nm）（野村化学株式会社、日本）を使用した場合、色素YGM-0eのピークは保持時間 約17.52分、色素YGM-4bのピークは保持時間約22.07分、色素YGM-5aのピークは保持時間約22.23分、色素YGM-6のピークは保持時間約22.84分、及び色素YGM-2のピークは保持時間 約20.61分にそれぞれ検出される。但し、ＨＰＬＣにおける色素YGM-0e、色素YGM-4b、色素YGM-5a、色素YGM-6、及び色素YGM-2の同定は、それらの標準品のプロファイルと対比することで実施できる。このため、上記のＨＰＬＣ条件、特にＨＰＬＣ装置、カラム、及び検出器は、上記と同等の性能を有するものであればよく、上記に厳格に制限されるものではない。
【００８４】
上記面積比として、(1)ａ／ｂ（YGM-0e／YGM-4b）は、前記の通り0.3〜2を挙げることができるが、好ましくは0.3〜1.5、より好ましくは0.3〜1.2の範囲をあげることができる。また(2)ｃ／ｂ（YGM-5a／YGM-4b）は、前記の通り2.3〜10を挙げることができるが、好ましくは2.4〜8、より好ましくは2.5〜7の範囲をあげることができる。さらに(3)ｃ／ｄ（YGM-5a／YGM-6）は、前記の通り1.2〜5を挙げることができるが、好ましくは1.2〜3、より好ましくは1.2〜2.5の範囲をあげることができる。さらにまた(4)ｅ／ａ（YGM-2／YGM-0e）は、前記の通り0.1〜4.5を挙げることができるが、好ましくは0.5〜4、より好ましくは0.8〜3.5の範囲をあげることができる。
【００８５】
本発明の色素組成物はこれら(1)〜(4)の少なくとも１つを満たすものであればよいが、好ましくは２以上、より好ましくは３以上、特に好ましくは全てを充足するものであることが好ましい。好ましくは(2)または(4)のいずれか少なくとも一方を満たすものである。(1)〜(4)の少なくとも２つを満たす場合、その組み合わせとしては、(2)と、(1),(3)及び(4)のいずれか１つとの組み合わせ、好ましくは(2)と(1)との組み合わせ、または(2)と(3)との組み合わせを例示することができる。また(4)と、(1),(2)及び(3)のいずれか１つとの組み合わせ、好ましくは(4)と(1)との組み合わせ、または(4)と(3)との組み合わせを例示することができる。
【００８６】
本発明の色素組成物は、上記色素YGM-0e、色素YGM-4b、色素YGM-5a、色素YGM-6、及び色素YGM-2の他、さらに色素YGM-1a、色素YGM-1b、色素YGM-3及び色素YGM-5bのいずれか少なくとも一つのアントシアニン色素を含むものであってもよい。好ましい色素組成物として、例えば上記色素YGM-0e、色素YGM-4b、色素YGM-5a、色素YGM-6、及び色素YGM-2の他、色素YGM-1a及びYGM-1bのいずれか一方（好ましくは両方）、並びに色素YGM-3及びYGM-5bのいずれか一方（好ましくは両方）を含む色素組成物を挙げることができる。
【００８７】
また本発明の色素組成物には香気成分の含有量が少ない色素組成物が含まれる。当該色素組成物は、色素製剤（染料）そのもの、または色素製剤（染料）を調製するための色素組成物として好適に用いることができる。特に本発明の色素組成物は食用有色サツマイモを原料として調製されるため、食品添加剤としての色素製剤（染料）または当該色素製剤を調製するための色素組成物として有用である。
【００８８】
かかる色素組成物は、前述する特性に加えて、波長530nm付近の極大吸収波長における色価（本発明では「Ｅ10%1cm（530nm）」とも称する）を８０〔Ｅ10%1cm（530nm）＝８０〕とした場合に含まれる香気成分の総量（濃度）が１２０ｐｐｍ以下であることを特徴とする。
【００８９】
ここで「波長530nm付近の極大吸収波長における色価〔Ｅ10%1cm（530nm）〕」とは、対象とする色素組成物の可視部での極大吸収波長（530nm）における吸光度を測定し（測定セル幅：1cm）、測定した吸光度を、色素組成物を10w/v％濃度で含む溶液の吸光度に換算した数値を意味する。
【００９０】
ここで対象とする香気成分は、エチルピルベート（1. ethyl pyruvate）、エチルラクテート（2. ethyl lactate）、トランスリナロールオキシド（フラノイド型）（3.trans-linalool oxide (furanoid)）、アセト酢酸エチル（4.ethyl acetoacetate）、シスリナロールオキシド（フラノイド型）（5.cis-linalool oxide (furanoid)）、2-エチルヘキサノール（6.2-ethylhexanol）、ベンズアルデヒド（7. Benzaldehyde）、マロン酸ジエチル（8.diethyl malonate）、レブリン酸エチル（9.ethyl levulinate）、γ-ブチロラクトン（10. gamma-butylolactone）、フェニルアセトアルデヒド（11.phenylacetaldehyde）、βアンゲリカラクトン（12.beta-angelica lactone）、フェニルアセトアルデヒドジエチルアセタール（13. Phenylacetaldehyde DEA）、5-エトキシジヒドロ-2(3H)-フラノン（14.5-ethoxydihydro-2(3H)-furanone）、2（5H）-フラノン（15. 2(5H)-furanone）、エチルニコチネート（16. ethyl nicotinate）、シクロテン（17.cyclotene）、グアイアコール（18.guaiacol）、2,3-ジヒドロ-5-ヒドロキシ-6-メチル-4H-ピラン-4-オン（19.2,3-dihydro-5-hydroxy-6-methyl-(4H)-pyran-4-one）、ベンジルアルコール（20.benzyl alcohol）、フェネチルアルコール（21. phenethyl alcohol）、3,7-ジメチル-1-オクタジエン-3,7-ジオール（22.3,7-dimethyl-1-octadiene-3,7-diol）、マルトール（23. maltol）、3-ヒドロキシ-2-ピロン（24. 3-hydroxy-2-pyrone）、1-(2-フラニル)-2-ヒドロキシエタノン（25. 1-(2-furanyl)-2-hydroxyethanone）、シス-1,8-テルピン（26. cis-1,8-terpin）、4-ビニルグアイアコール（27. 4-vinylguaiacol）、3,5-ジヒドロキシ-6-メチル-2,3-ジヒドロ-4(4H)-ピラノン（28. 3,5-dihydroxy-6-methyl-2,3-dihydro-4(4H)-pyranone）、スルフロール（29. Sulfurol）、エチルバニリルエーテル（30. ethyl vanillyl ether）、5-（ヒドロキシメチル）フルフラール（31. 5-(hydroxymethyl)furfural）、バニリン（32. vanillin）、エチルバニレート（33. ethyl vanillate）及びバニリルアルコール（34. vanillyl alcohol）からなる３４種類の香気成分である。なお、上記各化合物の英語表記の冒頭に記載する番号は、図１２の各クロマトグラムに示すピーク番号を意味する。
【００９１】
色素組成物に含まれるこれらの香気成分の量は、GC/MS分析によって求めることができる。GC/MS分析に供する試料（GC/MS測定試料）の調製、及びGC/MS分析条件は下記の通りである。
【００９２】
［GC/MS測定試料の調製］
色素組成物10gをイオン交換水200 mLで希釈した溶液に、内部標準物質として3-ヘプタノール10μg添加する。この溶液に、ジクロロメタン200 mLを添加し、室温下で液液抽出した後、有機層を回収する。有機層は無水硫酸ナトリウムで脱水し、エバポレーターで減圧濃縮して得られた抽出物を、GC/MS測定試料とする。
【００９３】
［GC/MS分析条件］
ガスクロマトグラフ（GC）：Agilent 6890N（アジレント・テクノロジー(株)製）質量選択検出器（MSD）： Agilent 5975（アジレント・テクノロジー(株)製）カラム : Agilent  J&W DB-WAX(60 m x 0.25 mm) （アジレント・テクノロジー(株)製）オーブン温度: 50℃(2 min)→220℃(3℃/min.)。
【００９４】
具体例としては実施例７を挙げることができる。但し、ガスクロマトグラフ、質量選択検出器、及びカラムは、上記と同等の性能を有するものであればよく、上記に制限されるものではない。
【００９５】
上記34種類の香気成分の総量は、上記GC/MS分析で得られるGC/MSスペクトルにおける34種の香気成分のピーク面積の総和から求めることができる。これにより、色素組成物１ｇあたりの香気成分の総量（濃度：μｇ／ｇ）を算出する。
【００９６】
本発明の色素組成物の波長530nm付近の極大吸収波長における色価〔Ｅ10%1cm（530nm）〕は、下記方法に従って求めることができる。
【００９７】
［Ｅ10%1cm（530nm）の算出方法］
色素組成物をMcIlvaine's buffer（pH3.0）にて適宜希釈（γ倍）し、紫外可視分光光度計V-560（日本分光社製）にて、530nm付近の極大吸収波長における吸光度Ａ530を測定する（測定セル幅：1cm）。得られた吸光度Ａ530から下記の計算式により、Ｅ10%1cm（530nm）を算出する。
【００９８】
[数４]
Ｅ10%1cm（530nm）＝Ａ530×γ÷10
10＝10 w/v％溶液の吸光度に換算するための数値。
【００９９】
波長530nm付近の極大吸収波長における色価を８０〔Ｅ10%1cm（530nm）＝80〕とした場合に含まれる香気成分の総量（濃度）は、以下の式に従って算出できる。
【０１００】
[数５]
（色素組成物における香気成分の総量（濃度））／（色素組成物の波長530nm付近の極大吸収波長における色価）×80。
【０１０１】
本発明の色素組成物は、波長530nm付近の極大吸収波長における色価を８０〔Ｅ10%1cm（530nm）＝80〕とした場合に含まれる香気成分の総量（濃度）が１２０ｐｐｍ以下であることが好ましく、より好ましくは１００ｐｐｍ以下、更に好ましくは８０ｐｐｍ以下、更により好ましくは７０ｐｐｍ以下である。
【０１０２】
本発明の色素組成物は、前述する本発明の有色サツマイモを抽出処理することで製造取得することができる（有色サツマイモの抽出組成物。これを「色素抽出液」とも称する）。また、本発明の有色サツマイモを抽出処理して得られる色素抽出液に対して、さらに吸着処理、イオン交換処理、酸処理、加熱処理、抽出処理及び膜分離処理のいずれか一種またはこれらの処理を任意に２種以上組み合わせて行うことによって製造取得することができる（精製処理物）。精製処理物は、色素製剤の原料として特に好適に使用することができる。
【０１０３】
有色サツマイモの色素抽出液は、有色サツマイモ（塊根部）をそのまま（生）若しくはその破砕物（粗末、細切物等）として溶媒抽出操作に供することで調製することができる。有色サツマイモを乾燥後、必要に応じて破砕して、粉体物等として溶媒抽出操作に付してもよい。
【０１０４】
当該抽出に用いられる溶媒としては、特に制限されないが、好適には水、アルコール、またはこれらの混合液を用いることができる。なお、アルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノール及びイソプロピルアルコール、ブタノール等の炭素数１〜４の低級アルコールを例示することができる。好ましくは水または含水アルコールである。なお、含水アルコールはアルコール含有量が６０容量％以下のものが好ましい。また、抽出に使用する溶媒として酸性溶液、具体的には、ｐＨ１〜４、好ましくはｐＨ１〜３の範囲に調整された酸性溶液を使用することができる。かかる酸性溶液は、抽出溶媒に塩酸、硫酸、硝酸若しくはリン酸等の無機酸、またはクエン酸、酢酸、リンゴ酸若しくは乳酸等の有機酸を配合することによって調製することができる。なお、抽出溶媒に配合する無機酸または有機酸の量は、上記ｐＨ範囲を有することを限度として、特に制限されないが、０．０１〜１０重量％の範囲で適宜調整されることが好ましい。
【０１０５】
抽出方法としては、一般に用いられる方法を任意に採用することができる。制限はされないが、例えば溶媒中に有色サツマイモ（塊根部）（そのまま若しくは粗末、細切物、又はそれらの乾燥物を含む）を冷浸、温浸等によって浸漬する方法、加温し攪拌しながら抽出を行い、濾過して抽出液を得る方法、またはパーコレーション法等を挙げることができる。好適な抽出方法は、酸性条件下での抽出である。より好適には、有色サツマイモ（生または乾燥物、好ましくは生）の細断物をｐＨ１〜４の酸性抽出溶媒中に室温条件下で浸漬して抽出する方法である。
【０１０６】
得られた抽出液は、必要に応じて濾過、共沈または遠心分離によって固形物を除去した後、吸着処理、イオン交換処理、酸処理、加熱処理、抽出処理及び膜分離処理のいずれか一種の処理に供することができる。
【０１０７】
吸着処理は、常法に従って行うことができ、例えば活性炭、シリカゲルまたは多孔質セラミックなどによる吸着処理；スチレン系のデュオライトＳ−８６１（商標Ｄｕｏｌｉｔｅ，Ｕ．Ｓ．Ａ．ダイヤモンド・シャムロック社製、以下同じ）、デュオライトＳ−８６２、デュオライトＳ−８６３又はデュオライトＳ−８６６；芳香族系のセパビーズＳＰ７０（商標、三菱化学（株）製、以下同じ）、セパビーズＳＰ２０７、セパビーズＳＰ７００、セパビーズＳＰ８２５；ダイヤイオンＨＰ１０（商標、三菱化学（株）製、以下同じ）、ダイヤイオンＨＰ２０、ダイヤイオンＨＰ２１、ダイヤイオンＨＰ４０、及びダイヤイオンＨＰ５０；あるいはアンバーライトＸＡＤ−４（商標、オルガノ製、以下同じ）、アンバーライトＸＡＤ−７、アンバーライトＸＡＤ−２０００などの合成吸着樹脂を用いた吸着処理を挙げることができる。
【０１０８】
色素抽出物に含まれる色素成分は、吸着処理後、これを吸着した樹脂担体を、例えば含水アルコールなどの適当な溶媒で洗浄することによって、回収取得することができる。含水アルコールとしては、通常１〜７０容量％程度、好ましくは２０〜６０容量％程度、及びより好ましくは３０〜５５容量％程度のエタノールを含有する水を好適に例示することができる。
【０１０９】
かくして得られる有色サツマイモの色素抽出液の吸着処理液は、さらにイオン交換処理に供することができ、さらに必要であれば酸処理、抽出処理または膜分離処理等の各種の処理に供することができる。
【０１１０】
イオン交換処理は、特に制限されず慣用のイオン交換樹脂（陽イオン交換樹脂または陰イオン交換樹脂）を用いて常法に従って行うことができる。具体的には陽イオン交換樹脂としては、制限されないが、ダイヤイオンＳＫ１Ｂ（商標、三菱化学（株）製、以下同じ）、ダイヤイオンＳＫ１０４、ダイヤイオンＳＫ１１０、ダイヤイオンＰＫ２０８、ダイヤイオンＰＫ２１２、ダイヤイオンＰＫ２１６、ダイヤイオンＷＫ１０、及びダイヤイオンＷＫ１１など、並びにアンバーライトＩＲＣ７６（商標、オルガノ株式会社製、以下同じ）、アンバーライトＦＰＣ３５００を挙げることができる。また陰イオン交換樹脂としては、制限されないがダイヤイオンＳＡ１０Ａ（商標、三菱化学（株）製、以下同じ）、ダイヤイオンＳＡ１２Ａ、ダイヤイオンＳＡ２０Ａ、ダイヤイオンＰＡ４１２、ダイヤイオンＷＡ１０、ダイヤイオンＷＡ２０などが例示される。
【０１１１】
また本発明で使用される酸処理は、有色サツマイモの色素抽出液または上記の各種処理（濾過処理等の固液分離処理、吸着処理、イオン交換処理等）が施された処理液をｐＨ１〜４、好ましくはｐＨ１〜３の酸性条件下に曝すことによって実施できる。酸処理は、具体的には上記処理液に酸を添加配合することによって簡便に行うことができる。かかる酸としては、食品添加物として通常使用される酸であれば特に制限されず、かかる中から任意に選択使用することができる。例えばクエン酸、酢酸、リンゴ酸、乳酸等の有機酸または硫酸、塩酸、リン酸、硝酸等の無機酸を例示することができる。好ましくは食品添加物として通常使用される無機酸を用いた酸処理である。かかる酸処理を行う温度条件は特に制限されず、通常５〜１００℃の範囲から適宜選択使用することができる。例えば２０〜１００℃や４０〜１００℃の範囲を例示することができる。酸処理時間も特に制限されず、通常１〜３００分の範囲から適宜選択することができる。一般に高温下での酸処理であればより短い処理時間で十分であり、例えば４０〜１００℃での酸処理の場合は５〜６０分の範囲から処理時間を採択することができる。なおこの時、処理液は撹拌してもしなくても特に制限されない。
【０１１２】
本発明で使用される加熱処理は、上記色素抽出液を１００℃以下の温度条件、具体的には８０〜９５℃の範囲の温度条件に曝すことで実施される。その後、必要に応じて不溶物を除去することができる。
【０１１３】
本発明において抽出処理とは、特に制限はされないが、炭酸ガス、エチレン、プロパン等の液体を有色サツマイモの色素抽出液若しくは上記の各種処理（吸着処理、イオン交換処理、酸処理または膜分離処理等）が施された処理液に臨界点以上の温度、圧力下の密閉系装置内で接触させる方法を挙げることができる。
【０１１４】
さらに本発明でいう膜分離処理とは、膜による濾過方法を広く意味するものであり、例えばメンブレンフィルター（ＭＦ）膜、限外濾過（ＵＦ）膜、逆浸透膜（ＮＦ）および電気透析膜などの機能性高分子膜を用いた濾過処理を挙げることができる。また膜分離処理としてはこれらの膜を利用した限外濾過法や逆浸透膜法などのほか、イオン選別膜による濃度勾配を利用した透析法、隔膜としてイオン交換膜を使用し電圧を印加する電気透析法などが知られている。工業的には逆浸透膜法による膜分離法が好ましい。かかる膜分離法に用いられる膜材料としては、天然、合成、半合成の別を問わず、例えばセルロース、セルロース・ジ−アセテート若しくはトリ−アセテート、ポリアミド、ポリスルホン、ポリスチレン、ポリイミド、ポリアクリロニトリルなどを挙げることができる。
【０１１５】
これらの各種処理は、１種単独で行っても、また２種以上を任意に組み合わせて行ってもよく、また同一処理を、同一もしくは異なる条件で、繰り返し実施してもよい。好ましい処理方法は、特に制限されないが、有色サツマイモの色素抽出液を、吸着処理、及びイオン交換処理（陽イオン交換処理）に供する方法である。
【０１１６】
本発明の有色サツマイモは、当該有色サツマイモに含まれる香気成分含量が従来品種に比べて大幅に低減されているため、本発明の有色サツマイモに由来する色素組成物は、異臭あるいは悪臭の原因となりえる有色サツマイモ由来の香気成分の量が少なく、これによって無臭か、または食品または食品添加物（例えば、着色料など）等の可食性組成物に配合してもその風味に殆ど影響しない程度の微臭の、有色サツマイモ由来の天然色素を提供することができる。
【０１１７】
また本発明の有色サツマイモに由来する色素組成物は、光や熱に対して比較的安定であり（耐光性、耐熱性）、その安定性は、耐光性及び耐熱性が比較的優れているとされる既存品種であるアヤムラサキに由来する色素組成物のそれと比較して同等以上であることを特徴とする。
【０１１８】
本発明の色素組成物は、好ましくは、水、エタノール、プロピレングリコールなどのアルコール、その他の溶媒に溶解若しくは分散（乳化）した溶液状態、若しくは乾燥状態（粉状、顆粒状、錠剤状、丸剤状など）の色素製剤として調製することができる。従って、本発明は上記の有色サツマイモ由来の色素組成物を含有する色素製剤を提供するものである。
【０１１９】
当該色素製剤は、上記本発明の有色サツマイモ由来の成分（色素成分を含む）だけからなるものであってもよいし、また上記本発明の有色サツマイモ由来の成分（色素成分を含む）に加えて、食品衛生上許容される担体や各種の添加剤が配合されていてもよい。かかる担体及び添加剤として、具体的には、例えばデキストリン、乳糖、粉末水飴の他、色素・色素製剤に通常用いられる保存剤（酢酸ナトリウム、プロタミンなど）、安定剤（燐酸ナトリウム、メタ燐酸ナトリウムなど）または酸化防止剤（ルチン、アスコルビン酸など）などの食品添加物を挙げることができる。
【０１２０】
本発明の色素製剤が各種担体や添加剤などを含有する場合、該色素製剤中に含まれる上記有色サツマイモ由来の色素成分からなる色素組成物の配合割合は、特に制限されないが、通常１〜９０重量％、好ましくは１０〜６０重量％を例示することができる。本発明の色素製剤は、食品、医薬品、医薬部外品、化粧品及び飼料などの紫系統色の着色料として、特に天然着色料として有用である。なお、飲食物における着色は、飲食物に人為的に色素製剤を添加して着色したものだけでなく、飲食物の材料に、本発明の有色サツマイモを使用することに起因して着色しているものまでもが広く包含される。
【０１２１】
（III）サツマイモの品種判定方法、それに使用する試薬
前述するように、ゲノムDNA配列のCL1836及びCL1056のいずれか一方の部位にRtsp-1が挿入されている食用有色サツマイモは、本発明の有色サツマイモだけである。なお、ここで食用とは、食品及び食品添加物としての用途を意味する。食品添加物としての用途として色素製剤（着色料、染料）を挙げることができる。
【０１２２】
このことから当該部位へのRtsp-1の挿入を目印（指標）として、複数の食用有色サツマイモの中から本発明の有色サツマイモを選別することができる。また食用有色サツマイモから調製される可食性組成物（着色料（色素組成物）等の食品添加物、及び加工食品等）の中に原料として含まれる食用有色サツマイモの品種を判定するための目印（指標）としても有効に利用することができる。
【０１２３】
従って、本発明は食用有色サツマイモまたは食用有色サツマイモを原料に含む可食性組成物に含まれる、原料の食用有色サツマイモの品種を判定する方法を提供するものである。当該方法は下記（１）及び（２）の工程または（１’）及び（２’）の工程を有する方法によって実施することができる。
【０１２４】
（１）食用有色サツマイモまたは食用有色サツマイモを含む可食性組成物から調製されたDNAを鋳型として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、及び配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２の少なくとも一方を用いて核酸増幅反応を行う工程、
（２）上記核酸増幅反応によって500〜530bpの断片長からなる増幅産物の生成の有無を確認する工程。
【０１２５】
（１’）食用有色サツマイモまたは食用有色サツマイモを含む可食性組成物から調製されたDNAを鋳型として、配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号４〜１０のいずれかに記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット３〜９からなる群から選択されるの少なくとも一つを用いて核酸増幅反応を行う工程、
（２’）上記核酸増幅反応によって550〜650bpの断片長からなる増幅産物の生成の有無を確認する工程。
【０１２６】
（１）工程または（１’）工程において、ゲノムDNAの調製に使用するサツマイモの部位は、その植物体の部位（葉、根茎、塊根等）であればよく、特に制限されないが、好ましくは新鮮な葉である。DNAの抽出方法は、有色サツマイモそのものを対象とする場合は、植物からゲノムDNAを抽出する従来公知の方法を利用して行うことができる。例えば、CTAB（cetyltrimethyl ammonium bromide）法（早川孝彦（1997）タバコのDNA・RNA単離法、「新版植物のPCR実験プロトコール」島本功、佐々木卓治監修、秀潤社、49-56）等を参考に行うことができる。また有色サツマイモを原料として調製された可食性組成物（例えば加工食品など）を対象とする場合、例えば「遺伝子組換え食品の検査と分析のマニュアル」（JAS分析試験ハンドブック2002）などを参考に行うことができる。
【０１２７】
上記核酸増幅反応に使用するプライマーセット１及び２を構成するForwardプライマー（pptプライマー）及びReverseプライマー（CL1836プライマー、CL1056プライマー）は、（I）（Ｄ）の項で説明した通り、Rtsp-1挿入箇所について、Rtsp-1内部のPPT配列との間で約500〜530bpの増幅産物が生じるように設計されたプライマーである。具体的には、上記pptプライマー（配列番号１）とCL1836プライマー（配列番号２）からなるプライマーセット１を用いて、対象とする被験試料から抽出調製したゲノムDNAを鋳型として核酸増幅反応を行うと、522bpの塩基配列からなる増幅産物を得ることができる。一方、上記pptプライマー（配列番号１）とCL1056プライマー（配列番号３）からなるプライマーセット２を用いて、対象とする被験試料から抽出調製したゲノムDNAを鋳型として核酸増幅反応を行うと、512bpの塩基配列からなる増幅産物を得ることができる。ここで核酸増幅反応は、前述の通り、公知の核酸増幅手段を適宜選択して使用することができる。
【０１２８】
また上記核酸増幅反応に使用するプライマーセット３〜９を構成するForwardプライマー（pptプライマー）及びReverseプライマー３〜９（CL103プライマー、Pattern228プライマー、Pattern238プライマー、Pattern264プライマー、Pattern275プライマー、Pattern290プライマー、CL121プライマー）は、Rtsp-1挿入箇所について、Rtsp-1内部のPPT配列との間で約550〜650bpの増幅産物が生じるように設計されたプライマーである。具体的には、これらのプライマーセット３〜９を用いて、対象とする被験試料から抽出調製したゲノムDNAを鋳型として核酸増幅反応を行うと、下記に示す塩基長の塩基配列からなる増幅産物を得ることができる。
【表４】
2018066575.tif 000005
【０１２９】
これらのプライマーセット１〜９は、いずれも本発明の品種判定方法を実施するための有色サツマイモ品種判定用試薬成分として有用であり、本発明はこれらを提供するものでもある。対象とする有色サツマイモのゲノムDNA配列のCL1836及びCL1056の両部位へのRtsp-1の挿入を確認するためには、核酸増幅反応に使用されるプライマーとして、好適には上記プライマーセット１と２の両方を使用することができる。
【０１３０】
（２）工程または（２’）工程において、増幅産物の有無を確認する方法としては、制限されないものの、電気泳動法を例示することができる。ここで電気泳動法は、増幅産物の長さの違いを検出するものではなく、目的とするおよその大きさ（塩基長）、具体的には500〜650bp程度の増幅産物の有無が検出できるものであればよい。このため、例えばアガロースゲル電気泳動やポリアクリルアミド電気泳動などの簡便な電気泳動を慣用方法に従って用いることができる。具体的には、上記プライマーセット１〜９のいずれかを用いた核酸増幅反応を行った場合、被験試料が本発明の有色サツマイモであるか、または被験試料に本発明の有色サツマイモが含まれている場合、電気泳動により、それぞれ使用するプライマーセットに応じた塩基長の増幅産物の生成を確認することができる。
【０１３１】
本発明の品種判定方法は、上記（２）工程または（２’）工程において、増幅産物の生成が認められた場合に、被験試料として使用した有色サツマイモ、または被験試料として使用した可食性組成物に含まれる有色サツマイモを、本発明の有色サツマイモであると決定する工程を有することができる。
【０１３２】
つまり、食用有色サツマイモの植物体から調製した被験試料（ゲノムDNA）について、上記核酸増幅反応を実施して、使用するプライマーセットに応じた塩基長を有する増幅産物が確認できた場合は、試験対象とした被験試料は本発明の有色サツマイモであると判断することができ（つまり対象とした植物体は本発明の有色サツマイモの植物体）、増幅産物が確認できない場合は試験対象とした被験試料は本発明の有色サツマイモに由来するものではない（つまり対象とした植物体は本発明の有色サツマイモの植物体ではない）と判断することができる。また被験試料が可食性組成物（例えば、食品添加物としての着色料、加工食品等）である場合、これを対象として上記核酸増幅反応を実施して増幅産物が確認できた場合は、当該可食性組成物中の原料に本発明の有色サツマイモが使用されていると判断することができる。
【０１３３】
前述するように、本発明が提供する下記のプライマーセットは、本発明の品種判定方法を実施するための食用有色サツマイモ品種判定用試薬成分として有用であり、本発明はこれらのプライマーセットの少なくとも１つ、好ましくは２以上を含む有色サツマイモ品種判定用キットを提供するものでもある。２以上のプライマーセットとしては、好ましくはプライマーセット１とプライマーセット２との組み合わせを挙げることができる。
（ａ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号２に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット１、
（ｂ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号３に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット２、
（ｃ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号４に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット３、
（ｄ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号５に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット４、
（ｅ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号６に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット５、
（ｆ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号７に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット６、
（ｇ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号８に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット７、
（ｈ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号９に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット８、
（ｉ）配列番号１に記載する塩基配列からなるフォワードプライマーと配列番号１０に記載する塩基配列からなるリバースプライマーとからなるプライマーセット９。
【０１３４】
当該キットには、プライマー以外に、対象とする被験試料（有色サツマイモ植物体、可食性組成物など）からDNAを抽出または精製するために使用する試薬や器具、及び核酸増幅反応に用いる試薬や器具、電気泳動に使用する試薬や器具等を含むことができる。
【実施例】
【０１３５】
以下、本発明の構成及び効果を、実施例をもとに説明する。但し、当該実施例は、本発明の構成及び効果を示すための例示であり、本発明はこれらの実施例になんら制限されるものではない。【０１３６】
実施例１  アントシアニン高含量有色サツマイモ品種の作出
母親品種としてサツマイモ九系04208-2と、父親品種としてサツマイモ九系04222-50とを交配した。なお、この母親品種及び父親品種はいずれも九州沖縄農業研究センター（国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構）に保管されている。交配は具体的には以下の手順に従って行った。台木用のキダチアサガオの種子を硫酸処理により硬実性を打破し、吸水させた後に播種を行った。播種から1〜2ヶ月間、本葉が15〜20枚程度になるまで生育させた。その後、本葉10枚程度を残してキダチアサガオの茎を切断し、くさび型にカットしたサツマイモを割接ぎした。クリップで固定後、ビニール袋で覆った。開花後、父親品種の葯をピンセットでつまんで、予め除雄した母親品種のめしべの柱頭に軽く押し当て、交配した。その後得られた種子を圃場に植えつけ、収量性、耐病性、色価、吸光比等のデータを基に優良系統を選抜した。交配の結果、得られた個体の塊根（イモ部分）の一部を採取し、分光光度計法により波長530nm付近の極大吸収波長の吸光度（色価（530nm）及び波長320nm付近の極大吸収波長の吸光度（色価（320nm））を分析定量したところ、予想外に、有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕及び色価（320nm）〔色価（320nm）/g〕の両方が高まっていた。当該色価（530nm）/gは、アントシアニン色素の含量を反映するものである。また、波長320nmの吸光度（色価（320nm））はクロロゲン酸等のポリフェノール類の吸光度に起因する。そこで、分光光度計法を用いて測定される分析定量値（色価（530nm）、色価（320nm））を用いて、上記で得られた複数の交配個体から、本発明の課題に相応しい、塊根部においてアントシアニン含量が多く、または／及び、ポリフェノール含量の多い、個体を選抜した。【０１３７】
以下、本実施例１で作出した新品種を「九州180号」と命名して、以下、各実験を行った（実施例２〜１１）。【０１３８】
実施例２  新品種（九州180号）の特性評価（その１）
実施例１で作出した新品種（九州180号）の塊根（有色サツマイモ）について、下記の特性を測定して、既存品種（アケムラサキ、アヤムラサキ、ムラサキマサリ）のそれらと比較した。
（a）波長530nmにおける吸光度（色価（530nm）/g）
有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕は有色サツマイモに含まれる紫系統の色素（アントシアニン色素等）の含量に対応する。つまり、当該色価（530nm）/gが高いと紫系統の色素含量が多いことを意味する。
（b）有色サツマイモ1g湿重量当たりの、波長530nm及び波長320nmにおける吸光度の比（吸光比（320nm/530nm）/g）。【０１３９】
波長530nmの吸光度は紫系統の色素（アントシアニン色素等）の吸光度に起因し、また波長320nmの吸光度はクロロゲン酸等のポリフェノール類の吸光度に起因する。このことから、吸光比（320nm/530nm）は単位色素当たりのポリフェノール類含量、言い換えれば単位色素当たりの抗酸化能を意味する。【０１４０】
（１）試験方法
（a）色価（530nm）/g、及び（b）吸光比（320nm/530nm）/gの求め方
新品種（九州180号）の塊根約50gを5mm角にカットし、秤量した後（秤量αg）、0.5%の硫酸水を加え、固液全量を約250gとした（固液全量βg）。これを室温（25±5℃）にて一日浸漬抽出した後、濾紙（ADVANTEC NO.5C）を用いて濾過を行い、色素抽出液を得た。【０１４１】
調製した色素抽出液をpH3.0 McIlvaine's bufferにて適宜希釈（γ倍）し、紫外可視分光光度計V-560（日本分光社製）にて、530nm及び320nm付近の極大吸収波長における吸光度A530及びA320、並びに700nmにおける吸光度A700を測定した。以下の計算式により、サツマイモ塊根の1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕、及び有色サツマイモ1g湿重量当たりの吸光比（320nm/530 nm）〔吸光比（320nm/530 nm）/g〕を算出した。また、（a）及び（b）を乗じることで、（c）〔色価（530nm）/g〕×〔吸光比（320nm/530nm）/g〕を算出した。【０１４２】
［数６］
（a）有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）
色価（530nm）/g ＝（A530-A700）×γ×β÷α÷10
（b）有色サツマイモ1g湿重量当たりの吸光比320 nm /530 nm 
吸光比（320nm/530 nm）/g ＝（A320-A700）÷（A530-A700）。【０１４３】
（２）試験結果
結果を表５に記載する。【０１４４】
【表５】
2018066575.tif 000006
【０１４５】
表５に示すように、九州180号は、既存の有色サツマイモと比較して、有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕が極めて高いことが判明した。有色サツマイモ1g湿重量当たりの吸光比（320nm/530nm）〔吸光比（320nm/530nm）/g〕は、既存の有色サツマイモとほぼ同等であった。このことから九州180号は、紫系統の色素（アントシアニン色素等）を非常に多く含んでいることがわかる。また、紫系統色素を多量に含みながらも、単位色素当たりの抗酸化能（吸光比（320nm/530nm））は既存の有色サツマイモと同様に高いことから、九州180号は、高含量の紫系統色素を安定な状態で保有しており、よって色素原料用有色サツマイモとして有用であると考えられた。【０１４６】
実施例３  新品種（九州180号）の特性評価（その２）
実施例１で作出した新品種（九州180号）の塊根（有色サツマイモ）について、下記の方法により香気成分分析を行い、既存品種（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ）と比較した。【０１４７】
（１）試験方法
（1-1）香気成分含量の測定
実施例２で得られた色素抽出物（色素抽出液）100gにジクロロメタン100mLを加え、室温下で液液抽出した後、有機層を回収した。有機層は無水硫酸ナトリウムで脱水し、エバポレーターで減圧濃縮して得られた抽出物を、GC/MS測定試料とした。【０１４８】
GC/MS分析条件は下記の通りである。
［GC/MS分析条件］
ガスクロマトグラフ（GC）：Agilent 6890N（アジレント・テクノロジー(株)製）
質量選択検出器（MSD）： Agilent 5975（アジレント・テクノロジー(株)製）
カラム : Agilent  J&W DB-WAX(60 m x 0.25 mm) （アジレント・テクノロジー(株)製）
オーブン温度: 50℃(2 min)→220℃(3℃/min.)。【０１４９】
（1-2）香気成分の主成分分析
GC/MS分析によって得られた延べ23の香気成分のピーク面積百分率を用いて、統計解析ソフトウエア（JMPver.10：SAS Institute Inc.)により主成分分析（PCA）を行った。【０１５０】
（２）試験結果
（2-1）香気成分含量
GC/MS分析結果を図２に示す。【０１５１】
GC/MS分析により23成分もの香気成分（揮発性成分）が得られた。【０１５２】
これらの香気成分の総量を求め、新品種（九州180号）と既存品種（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ）とを比較した結果（新品種の香気成分の総量を100とした場合の相対比）を図３（下左図）に示す。また各品種について、実施例２に記載する方法に従って色素抽出物を調製し、その色素抽出物の色価（530nm）を求めて、香気成分の総量を色価（530nm）当たりに換算した結果も図３（下右図）に併せて示す。【０１５３】
図３中の表に示すように、新品種から調製された色素抽出物（色素含有組成物）の色価（530nm）（＝5.2）は既存品種のそれ（1.9〜2.3）と比較して２倍以上と高く、有色サツマイモそのものに色素成分が沢山含まれていることが確認された。また新品種に含まれる香気成分の総量はさほど高いものではないが、上記の通り色価（530nm）が高いため、上記香気成分の総量を色価(530nm)当たりに換算すると、その値（色価(530nm)当たりの換算値：19）は既存品種の当該値（44〜125）よりも格段に低くなり、既存品種のなかでも最も低かったアヤムラサキの値（44）の１／２未満であることが確認された。【０１５４】
この結果から、新品種（九州180号）は、色素成分を多量に含みながらも、香気成分が比較的少ないため、香気の少ない色素を効率的に得るための色素原料として有用であることが確認された。【０１５５】
（2-2）香気成分の主成分分析
主成分分析（PCA）を行った結果を図４に示す。【０１５６】
新品種の特徴成分はzingerone、acetoin、isoamyl alcohol、及びisobutyric acidであった。【０１５７】
図４に示すように、主成分分析（PCA）によって得られた新品種（九州180号）の特徴成分は既存品種（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ）の特徴成分とは相違していた。【０１５８】
実施例４−１  新品種（九州180号）の特性評価（その３）
実施例２で調製した各品種（新品種：九州180号、既存品種：アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ）の塊根部の被験サンプル（0.5%硫酸水抽出物）をＨＰＬＣに供して、各品種（塊根部）に含まれている色素成分（有色サツマイモ由来アントシアニンを含む）を分析した。【０１５９】
（１）試験方法
実施例２で調製した色素抽出物を1％蟻酸水で色価（530nm）が1になるように希釈して、ＨＰＬＣ供試サンプルとし、これを下記条件のＨＰＬＣに供した。【０１６０】
［ＨＰＬＣ条件］
ＨＰＬＣ装置：JASCO LC-2000Plusシリーズ（日本分光株式会社）
カラム：Develosil（登録商標） C30-UG-5（φ4.6×250nm）（野村化学株式会社）
カラム温度：40℃
移動相：a）1v/v%  ギ酸水溶液、  b)アセトニトリル
グラジェント条件：0→15分（a）95%→82%、(b)5%→18%
15→45分（a）82%→30%、(b)18%→70%
45→55分（a）30%→20%、(b)70%→80%
55→60分（a）20%→0%、(b)80%→100%
流速：1.0mL/min
試料注入量：20μL
検出：フォトダイオードアレイ検出器（530nm、320nm）。【０１６１】
波長530nmで検出した新品種のＨＰＬＣプロファイル（色素成分のプロファイル）について、標準品（YGM-2、YGM-1a、YGM-1b、YGM-3、YGM-4b、YGM-5a、YGM-5b、YGM-6など）のプロファイルと対比することで各ピーク成分を同定するとともに、既存品種（アヤムラサキ、ムラサキマサリ、アケムラサキ）のＨＰＬＣプロファイルと比較した。【０１６２】
また波長320nmで検出することで、紫外部成分のＨＰＬＣプロファイルを作成し、上記と同様に新品種と既存品種とで対比した。【０１６３】
（２）試験結果
（2-1）波長530nmで検出した各品種のＨＰＬＣプロファイルを図５に示す。図５Ａは各品種で検出されたピークの保持時間とピーク面積を示し、図５Ｂは各ピーク面積について、総ピーク面積を100％とした場合の相対比（%）を示したものである。各図において「Others」とは、YGM-2、YGM-1a、YGM-1b、YGM-3、YGM-4b、YGM-5a、YGM-5b、及びYGM-6のいずれにも該当しない成分について、ピーク面積の総和（図５Ａ）、及び当該ピーク面積の総和について、波長530nmで検出した総ピーク面積を100％とした場合の相対比（％）の総和（図５Ｂ）を示す。【０１６４】
この結果から、品種間で新品種（九州180号）に最も多く認められた色素成分のピークは、保持時間15.61分及び17.52分で検出されるピークであった。なお、保持時間15.61分で検出される色素成分はp-hydroxybenzoylated (cyanidin 3-sophoroside-5-glucoside)（YGM-Oc）、保持時間17.52分で検出される色素成分はp-hydroxybenzoylated (peonidin 3-sophoroside-5-glucoside)（YGM-Oe）であると認められた。これらのピーク面積（相対比％）を各品種間で比較した結果を図６に示す。【０１６５】
また、色素成分（YGM-0e、YGM-4b、YGM-5a、YGM-6、及びYGM-2）の含有量（ピーク面積）に着目して、以下に示す２成分の相対比を算出した。【０１６６】
（相対比）
ａ／ｂ
ｃ／ｂ
ｃ／ｄ
ｅ／ａ
ａ：保持時間 約17.52分に検出される色素YGM-0eのピーク面積
ｂ：保持時間 約22.07分に検出される色素YGM-4bのピーク面積
ｃ：保持時間 約22.23分に検出される色素YGM-5aのピーク面積
ｄ：保持時間 約22.84分に検出される色素YGM-6のピーク面積
ｅ：保持時間 約20.61分に検出される色素YGM-2のピーク面積。【０１６７】
その結果を各品種で比較した結果を図７Ａ〜Ｄ、及び表６に示す。ａ／ｂ、ｃ／ｂ及びｃ／ｄの２成分の相対比は、いずれも各品種間で新品種（九州180号）が最も高い数値を示し、ｅ／ａの相対比は各品種間で新品種（九州180号）が最も低い数値を示すことが確認された。【０１６８】
【表６】
2018066575.tif 000007
【０１６９】
（2-2）各品種について波長320nmで検出した紫外部成分のＨＰＬＣプロファイルを図８に示す。図８Ａは各品種で検出されたピークの保持時間とピーク面積を示し、図８Ｂは各ピーク面積を、波長530nmで検出した総ピーク面積で除した値を示したものである。【０１７０】
この結果から、品種間で新品種（九州180号）に最も多く認められた紫外部成分のピークは、保持時間約10.92分及び約24.44分で検出されるピークであり、一方、新品種（九州180号）に最も小さく認められた紫外部成分のピークは、保持時間24.69分で検出されるピークであった。これらのピーク面積（ピーク面積を、波長530nmで検出した総ピーク面積で除した値）を各品種間で比較した結果を図９に示す。【０１７１】
実施例４−２  新品種（九州180号）の特性評価（その４）
2016年に収穫した新品種（九州180号）の塊根（有色サツマイモ）について、実施例４−１と同様にしてそれに含まれている色素成分（有色サツマイモ由来アントシアニンを含む）を分析した。またその比較として、2015年に収穫した既存品種（アヤムラサキ、アケムラサキ）の塊根（有色サツマイモ）、及び2016年に収穫した既存品種（アヤムラサキ）の塊根（有色サツマイモ）についても、同様にそれに含まれている色素成分を分析した。得られた結果から、色素成分（YGM-0e、YGM-4b、YGM-5a、YGM-6、及びYGM-2）の含有量（ピーク面積）に着目して、２成分の相対比（ａ／ｂ、ｃ／ｂ、ｃ／ｄ、ｅ／ａ）を算出した。結果を表７に示す。【０１７２】
【表７】
2018066575.tif 000008
【０１７３】
実施例５  新品種（九州180号）の遺伝子判定
サツマイモのレトロトランスポゾンRtsp-1については、岡山大学らにおける研究によって、サツマイモ品種間でゲノム挿入部位に大きな違いがあり、サツマイモの品種を識別するための指標として、またサツマイモ加工品の原料品種を判定するための指標となることが示されている（例えば大江夏子ら「レトロトランスポゾンを利用したサツマイモ加工品の原料品種判定」、育種学研究6:169〜177（2004）；藏之内利和ら「蒸切干用サツマイモの高品質化に関する研究」、作物研報（Bull. Natl. Inst. Crop Sci.）11,49-65（2010.3））。【０１７４】
このため、有色サツマイモの各品種（新品種及び既存品種）、これらの両親系統（交配親を含む）の27品種について（図１０及び図１１のそれぞれに記載する表参照）、植物体から抽出したゲノムDNAを対象にして、レトロトランスポゾンRtsp-1挿入部位を探索した。その結果、新品種（九州180号）及びその母親系統（九系04208-2）に固有のRtsp-1挿入部位が２箇所（CL1836、CL1056）あることが確認された。【０１７５】
（１）試験方法
（1-1）DNA抽出
サツマイモの各品種（植物体）のゲノムDNAは、CTAB（cetyltrimethylammonium bromide）法（早川孝彦（1997）タバコのDNA・RNA単離法．“新版植物のPCR実験プロトコール”島本功，佐々木卓治監修．秀潤社，東京,49-56．）を基本に、新鮮な葉100mgから抽出した。【０１７６】
具体的には、サツマイモ各品種のDNAは、それぞれ苗床から採取した未展開葉30〜50mgからDNeasy Plant Mini Kit (QIAGEN社)を用いて抽出した。【０１７７】
（1-2）Rtsp-1挿入箇所のPCR増幅
上記Rtsp-1挿入部位（CL1836及びCL1056）を含む領域を増幅対象としたPCRを、27品種のサツマイモを対象にして、表８記載のプライマーを使用して実施した。具体的には、PCRによるRtsp-1挿入箇所の増幅は、１×GoTaq Colorless Master Mix (Promega社), 4pmol Rtsp-1_pptプライマー（単に「pptプライマー」と称する）、4pmol挿入箇所プライマー（Reverseプライマー：CL1836プライマー、CL1056プライマー）、20ng DNAを含む10μLの反応液で行った（温度条件：94℃で2分間→［94℃で30秒間、58℃で30秒間、72℃で1分間］×30回→72℃で5分間）。また、抽出したDNAの品質を確認するため、II型澱粉合成酵素遺伝子（SSII）のプライマーを用いて同条件での増幅を行った。PCR増幅産物の電気泳動は、マイクロチップ電気泳動装置（MultiNA：島津製作所）を用いて行った。【０１７８】
【表８】
2018066575.tif 000009
【０１７９】
（２）試験結果
Forwardプライマーとしてpptプライマー（配列番号１）、ReverseプライマーとしてCL1836プライマー（配列番号２）を使用してPCRを行った結果を図１０に、Forwardプライマーとしてpptプライマー（配列番号１）、ReverseプライマーとしてCL1056プライマー（配列番号３）を使用してPCRを行った結果を図１１に示す。いずれの図において、209bpのバンドはPCR反応が確実に行われていることを確認するためのポジティブコントロールである。【０１８０】
図１０及び１１に示すように、上記Rtsp-1挿入部位（CL1836及びCL1056）は、いずれの有色サツマイモの既存品種とその交配親には存在せず、本発明の新品種（九州180号）及びその母親系統（交配親：04208-2）にのみ存在することが確認された。【０１８１】
実施例６  有色サツマイモ色素の調製
有色サツマイモをフードプロセッサにてカットし、これを0.3重量％濃度の硫酸水溶液（有色サツマイモに対して３倍容量）に浸漬した。次いで室温で１時間撹拌機を用いて撹拌し、次いで一晩静置して、有色サツマイモ中の色素成分を抽出した。【０１８２】
その後、抽出物をガーゼに取り出し、ガーゼ内に包んで絞ることで固液分離した。回収した抽出液を５０メッシュの篩に通液し、得られた色素抽出液を加熱し、次いで４０℃まで冷却し、一晩静置した。上澄み液（約1/2）と沈殿物（約1/2）を分離し、沈殿物はさらに遠心分離（10,000rpm、5分間）して上澄み液を回収して上記の上澄み液に合わせた。【０１８３】
上記で得られた上澄み液１００００ｍＬに、ボディフィードとして濾過助剤（ラジオライト＃700：昭和化学工業株式会社製）を７５ｇ入れて、同じ濾過助剤をプリコートとして２５ｇ使用して、濾紙（ADVANTEC No.2, φ12.5cm）を用いて吸引濾過した。【０１８４】
吸引濾過により回収した濾液のうち、２００００色量分を秤量し、次の樹脂処理を実施した。【０１８５】
（樹脂処理）
合成吸着樹脂ダイヤイオンＨＰ−２０（樹脂量５００ｍＬ、ＳＶ＝３．０±０．２、三菱化学株式会社製）に付して、色素成分を吸着させ、該樹脂を水１５００ｍＬ（ＳＶ＝１．０±０．２）でよく洗浄した後、５０％エタノール水溶液５００ｍＬ（ＳＶ＝０．５±０．１）で脱離溶出させた。次いで、イオン交換樹脂アンバーライトFPC3500（樹脂量１００ｍＬ、ＳＶ１．５±０．２、オルガノ株式会社製）に付して、夾雑成分を吸着させ、樹脂通過液を樹脂処理液として回収した。【０１８６】
上記樹脂処理により得られた溶液を、濾紙（ADVANTEC No.5, φ12.5cm）を用いて吸引濾過し、回収した濾液を色価（530nm）が300以上になるように濃縮し、次いで９５容量％エタノール水溶液にて色価（530nm）が85、エタノール濃度が２０容量％になるように調整し、その後殺菌して、有色サツマイモ色素（色素組成物；精製処理物）とした。【０１８７】
実施例７  新品種（九州180号）由来有色サツマイモ色素の特性（その１）
実施例６で調製した有色サツマイモ色素（有色イモ色素）について、下記方法にて色価と香気成分含量を測定した。また比較として、有色サツマイモの既存品種としてアヤムラサキとアケムラサキからそれぞれ調製した有色イモ色素についても、同様に、色価と香気成分含量を測定した。【０１８８】
（１）色価の測定
上記実施例６で調製した有色サツマイモ色素（色素組成物）を被験試料として、色価を測定した。【０１８９】
色素組成物をpH3.0 McIlvaine's bufferにて適宜希釈（γ倍）し、紫外可視分光光度計V-560（日本分光社製）にて、530nm付近の極大吸収波長における吸光度A530を測定した。以下の計算式により、色価（530nm）を算出した。
色価（530nm）=A530×γ÷10。【０１９０】
（２）香気成分含量の測定
有色サツマイモ色素10gをイオン交換水200 mLで希釈した溶液に、内部標準物質として3-ヘプタノール10μg添加した。この溶液に、ジクロロメタン200 mLを添加し、室温下で液液抽出した後、有機層を回収した。有機層は無水硫酸ナトリウムで脱水し、エバポレーターで減圧濃縮して得られた抽出物を、GC/MS測定試料とした。【０１９１】
GC/MS分析条件は下記の通りである。【０１９２】
［GC/MS分析条件］
ガスクロマトグラフ（GC）：Agilent 6890N（アジレント・テクノロジー(株)製）
MSD：Agilent 5975（アジレント・テクノロジー(株)製）
カラム : Agilent  J&W DB-WAX(60 m x 0.25 mm) （アジレント・テクノロジー(株)製）
オーブン温度: 50℃(2 min)→220℃(3℃/min.)。【０１９３】
（３）試験結果
（3-1）香気成分含量
GC/MS分析結果を図１２に示す。【０１９４】
GC/MS分析により34成分もの香気成分（揮発性成分）が認められた（図１２）。【０１９５】
これらの香気成分の総量を求め、有色サツマイモ色素１ｇ当たりの香気成分の総量（濃度：μｇ／ｇ）を算出した。当該値について、新品種と既存品種とを比較した結果（新品種の香気成分の総量を100とした場合の相対比）を表９に示す。また各有色サツマイモ色素について、実施例６で調製した有色サツマイモ色素（色素組成物）の色価（530nm）を求めて、香気成分の総量を色価（530nm）当たりの量に換算した結果も併せて示す。【０１９６】
【表９】
2018066575.tif 000010
【０１９７】
表９に示すように、新品種から調製した有色サツマイモ色素に含まれる香気成分（34成分）の総量は、既存品種（アヤムラサキ、アケムラサキ）から調製したものよりも低いことが確認された。色価（530nm）当たりの香気成分総量０．７０は既存品種由来の色素の当該値よりも格段に低いことが確認された。【０１９８】
この結果から、新品種（九州180号）から調製される色素組成物は、色価（530nm）当たりの香気成分が少ないため、飲食物等の色素製剤として有用であることが確認された。【０１９９】
実施例８  新品種（九州180号）由来有色イモ色素の特性（その２）
実施例６で調製した有色サツマイモ色素（新品種：九州180号、既存品種：アヤムラサキ、アケムラサキ）の被験サンプル（色価85に調整した色素組成物）をＨＰＬＣに供して、各品種に含まれている色素成分（有色サツマイモ由来アントシアニンを含む）を分析した。【０２００】
（１）試験方法
実施例６で調製した被験サンプル１％蟻酸水溶液で色価（530nm）を1に希釈してＨＰＬＣ供試サンプルとし、これを下記条件のＨＰＬＣに供した。【０２０１】
［ＨＰＬＣ条件］
ＨＰＬＣ装置：JASCO LC-2000Plusシリーズ（日本分光株式会社）
カラム：Develosil C30-UG-5（φ4.6×250nm）（野村化学株式会社）カラム温度：40℃
移動相：a）1%v/v  ギ酸水溶液、
b)アセトニトリル
グラジェント条件：0→15分（a）95%→82%、(b)5%→18%
15→45分（a）82%→30%、(b)18%→70%
45→55分（a）30%→20%、(b)70%→80%
55→60分（a）20%→0%、(b)80%→100%
流速：1.0mL/min
試料注入量：20μL
検出：フォトダイオードアレイ検出器（530nm、320nm）。【０２０２】
波長530nmで検出したＨＰＬＣプロファイル（色素成分のプロファイル）について、標準品（YGM-2、YGM-1a、YGM-1b、YGM-3、YGM-4b、YGM-5a、YGM-5b、YGM-6など）のプロファイルと対比することで各ピーク成分を同定するとともに、既存品種のＨＰＬＣプロファイルと比較した。【０２０３】
また波長320nmで検出することで、紫外部成分のＨＰＬＣプロファイルを作成し、上記と同様に新品種と既存品種とで対比した。【０２０４】
（２）試験結果
（2-1）波長530nmで検出した各品種のＨＰＬＣプロファイルを図１３に示す。図１３Ａは各品種で検出されたピークの保持時間とピーク面積を示し、図１３Ｂは各ピーク面積について、総ピーク面積を100％とした場合の相対比（%）を示したものである。【０２０５】
この結果から、品種間で新品種（九州180号）由来色素に最も多く認められた色素成分のピークは、保持時間17.52分及び22.23分で検出されるピークであった。なお、保持時間17.52分で検出される色素成分はp-hydroxybenzoylated (peonidin 3-sophoroside-5-glucoside)（YGM-0e）であると認められた。また、保持時間22.23分で検出される色素成分はYGM-5aである。【０２０６】
色素成分（YGM-0e、YGM-4b、YGM-5a、YGM-6、及びYMG-2）の含有量（ピーク面積）に着目して、実施例４と同様に、２成分の相対比（ａ／ｂ（YGM-0ea/YGM-4b）、ｃ／ｂ（YGM-5a/YGM-4b）、ｃ／ｄ（YGM-5a/YGM-6）、及びｅ／ａ（YGM-2/YGM-0e）を算出した。その結果を各色素で比較した結果を図１４Ａ〜Ｄ、及び表１０に示す。これらの２成分の相対比ａ／ｂ、ｃ／ｂ及びｃ／ｄは、いずれも各色素間で新品種由来色素が最も高い値を示し、相対比ｅ／ａは、各色素間で新品種由来色素が最も低い値を示すことが確認された。【０２０７】
【表１０】
2018066575.tif 000011
【０２０８】
（2-2）各品種について波長320nmで検出した紫外部成分のＨＰＬＣプロファイルを図１５に示す。図１５Ａは各色素で検出されたピークの保持時間とピーク面積を示し、図１５Ｂは各ピーク面積を、波長530nmで検出した総ピーク面積で除した値を示したものである。【０２０９】
この結果から、品種間で新品種（九州180号）由来色素に最も多く認められた紫外部成分のピークは、保持時間10.92分、24.44分及び24.69分で検出されるピークであった。これらのピーク面積を波長530nmで検出した総ピーク面積で除した値を、各品種間で比較した結果を図１６に示す。【０２１０】
実施例９  新品種（九州180号）由来有色イモ色素の特性（その３）
実施例６で調製した色素組成物を用いて試験飲料を調製し、光および熱に対する色素残存率および色調変化を評価した。また比較のため、既存品種であるアヤムラサキについて同様に調製した色素組成物についても、同様にこれを用いて試験飲料を調製し、光及び熱に対する色素残存率および色調変化を測定した。【０２１１】
（１）試験飲料の調製
果糖ぶどう糖液糖（Brix75°）13.3重量％、クエン酸（無水）0.2重量％、クエン酸三ナトリウム0.052重量％、及び色素組成物（色価（530nm）＝80）0.03重量％を、飲料水に合計100重量％となるように添加配合し、Brix10°、ｐＨ3.0になるように調整した。調製した試験飲料を200mL容量のペットボトルに充填後、93℃達温ホットパックして殺菌処理を行った。【０２１２】
（２）試験方法
（ａ）耐光性試験
上記で調製した試験飲料を下記条件の照射器内にて５日間及び１０日間放置した。【０２１３】
照射器：CULTIVATION CHAMBER CLH-301（トミー精工製）
光源・照度：白色蛍光灯 10,000 lux
照射温度：30℃。【０２１４】
（ｂ）耐熱性試験
上記で調製した試験飲料を50℃の暗所に５日間及び１０日間放置した。【０２１５】
試験前と試験後のそれぞれにおいて波長530nm付近の極大吸収波長における吸光度を測定し、下式に基づいて色素残存率（％）を算出した。【０２１６】
色素残存率（％）＝（試験後の吸光度／試験前の吸光度）× 100。【０２１７】
また試験前と試験後のそれぞれにおいてマンセルHVC表色系にて色調を評価し、両者を比較した。【０２１８】
（３）試験結果
色素残存率（％）の結果を表１１に、色調変化を表１２に示す。【０２１９】
【表１１】
2018066575.tif 000012
【０２２０】
【表１２】
2018066575.tif 000013
【０２２１】
これからわかるように、耐光性（蛍光灯）及び耐熱性ともに、本発明の九州180号に由来する色素は、既存品種のアヤムラサキ由来の色素と比較して同様以上であることが確認された。、【０２２２】
実施例１０  アントシアニン高含有有色サツマイモ品種の作出及び特性評価
実施例１で作出した新品種（九州180号）を種芋とし、栄養繁殖（無性繁殖）により通常の栽培条件で栽培し、実施例１で作出した個体と同一の遺伝子情報を有するアントシアニン高含有有色サツマイモを収穫した。得られたアントシアニン高含有有色サツマイモ（九州180号）について、以下の方法に従って特性を評価した。【０２２３】
（１）実施例２に記載の方法に従って、有色サツマイモ（根塊）から調製した色素抽出液について、（ａ）有色サツマイモ1g湿重量当たりの波長530nm付近の極大波長における吸光度（色価（530nm）/g）、並びに（ｂ）有色サツマイモ1g湿重量あたりの吸光比（320nm/530nm）/gを測定した。結果を表１３に示す。【０２２４】
【表１３】
2018066575.tif 000014
【０２２５】
実施例２と同様に、得られたアントシアニン高含有有色サツマイモは、既存の有色サツマイモと比較して有色サツマイモ1g湿重量当たりの色価（530nm）〔色価（530nm）/g〕が高く、また、単位色素当たりの抗酸化能（吸光比（320nm/530nm）/g）は既存の有色サツマイモと同様に高いことから、高含有の紫系統色素を安定な状態で保有していることが示された。【０２２６】
（２）実施例４に記載の方法に従って、ＨＰＬＣを用いて有色サツマイモの根塊部に含まれている色素成分を分析し、ａ／ｂ、ｃ／ｂ、ｃ／ｄ及びｅ／ａの、各２成分の相対比を算出した。波長530nmで検出したＨＰＬＣプロファイルを図１７に、各２成分の相対比を表１４に示す。【０２２７】
【表１４】
2018066575.tif 000015
【０２２８】
（３）上記で得られたアントシアニン高含有有色サツマイモ（九州180号）から、以下の方法に従って濃縮抽出液を得た。【０２２９】
有色サツマイモ（九州180号）１３０ｋｇを、裁断機を用いて粉砕した後、０．３％の硫酸水を加え、固液全量を５００Ｌとした。これを室温にて1時間攪拌抽出した後、遠心分離により固体部を除去し、色素抽出液を得た。当該色素抽出液を色価２０まで濃縮し、濃縮抽出液を得た。【０２３０】
当該濃縮抽出液について、実施例４に記載の方法に従い、ＨＰＬＣを用いて色素成分を分析し、ａ／ｂ、ｃ／ｂ、ｃ／ｄ及びｅ／ａの、各２成分の相対比を算出した。波長530nmで検出したＨＰＬＣプロファイルを図１８に、各２成分の相対比を表１５に示す。【０２３１】
【表１５】
2018066575.tif 000016
【０２３２】
実施例１１  新品種（九州180号）の遺伝子判定
有色サツマイモの各品種（新品種：九州180号、既存品種：九系04222-50、九系04208-2、アケムラサキ、ムラサキマサリ、アヤムラサキ）について、実施例５と同様にして各植物体（新鮮な葉を使用）から抽出したゲノムDNAを対象として、表２及び表３に記載するプライマーセット３〜９を用いてPCR増幅を行った。
PCR増幅に使用した反応液は下記の通りである。【０２３３】
＜反応液＞
ExTaq                                    0.1 μL
10 x ExBuffer                            1.0 μL
dNTPs                                    0.8 μL
Forwardプライマー(pptプライマー)(1μM)   2.0 μL
各種のReverseプライマー(1μM)            2.0 μL
各種の有色サツマイモのDNA                1.0 μL
dH2O                                     3.1 μL    
合  計                                10.0 μL【０２３４】
また増幅反応は、94℃で4分間→［94℃で30秒間、64-65℃で30秒間、72℃で30秒間］×35回→72℃で15分間の温度条件で行った。得られた反応液をマイクロチップ電気泳動装置（MultiNA：島津製作所）に供して、PCR増幅産物の生成を確認した。プライマーセット３〜９を用いてPCR増幅した結果得られた増幅産物の電気泳動像を図１９Ａ〜図１９Ｇに示す。図中、Ａ〜Ｆレーンは、順番に九州180号、九系04222-50、九系04208-2、アケムラサキ、ムラサキマサリ、及びアヤムラサキの結果を示す。これらの結果から、プライマーセット３〜９を用いることで本発明の新品種（九州180号）を、既存品種と明確に区別して判定することができることを確認することができる。
【配列表フリーテキスト】
【０２３５】
配列番号１は、Forwardプライマー（pptプライマー）の塩基配列、配列番号２はReverseプライマー（CL1836プライマー）の塩基配列、配列番号３はReverseプライマー（CL1056プライマー）の塩基配列、配列番号４はReverseプライマー（CL103プライマー）の塩基配列、配列番号５はReverseプライマー（Pattern228プライマー）の塩基配列、配列番号６はReverseプライマー（Pattern238プライマー）の塩基配列、配列番号７はReverseプライマー（Pattern264プライマー）の塩基配列、配列番号８はReverseプライマー（Pattern275プライマー）の塩基配列、配列番号９はReverseプライマー（Pattern290プライマー）の塩基配列、配列番号１０はReverseプライマー（CL121プライマー）の塩基配列をそれぞそれ示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図１９Ｃ】
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【図１９Ｄ】
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【図１９Ｅ】
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【図１９Ｆ】
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【図１９Ｇ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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