【手続補正書】
【提出日】平成31年4月2日(2019.4.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩＡの化合物または薬学的に許容されるその塩：
【化１】
2018517668.tif 000001
（式中：
Ｘａは、ＣＲ２ａであり；
Ｙａは、ＣＲ４ａであり；
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａ、及びＲ５ａは、各々独立してＨ、ＦまたはＣｌを表す、
ここで、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち２つがＣｌであり、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち１つがＦであり、かつＲ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち２つがＨを表すか、若しくは、
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち２つがＦであり、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち１つがＣｌであり、かつＲ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち２つがＨを表す）；または、
該化合物または薬学的に許容されるその塩は、
（Ｅ）−２−（３，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド、
（Ｅ）−２−（２，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド、及び
（Ｅ）−２−（２，３，４−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
から選択される。
【請求項２】
Ｒ１ａおよびＲ３ａの両方がＣｌを表す、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項３】
Ｒ１ａがＦまたはＣｌを表す、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項４】
該化合物がＥ−異性体形態である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項５】
（Ｅ）−２−（３，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３，５−ジクロロ−４−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３，４−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４−ジクロロ−５−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４−ジクロロ−３−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３−ジクロロ−４−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（４，５−ジクロロ−２−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−３，４−ジフルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−３，５−ジフルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
または薬学的に許容されるそれらの塩から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
（Ｅ）−２−（３，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミドまたは薬学的に許容されるその塩である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
（Ｅ）−２−（２，３，４−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミドまたは薬学的に許容されるその塩である、請求項５に記載の化合物。
【請求項８】
（Ｅ）−２−（２，３−ジクロロ−４−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミドまたは薬学的に許容されるその塩である、請求項５に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物。
【請求項１０】
式ＩＡの化合物または薬学的に許容されるその塩を含む、療法に使用するための医薬組成物：
【化２】
2018517668.tif 000002
（式中：
Ｘａは、ＣＲ２ａであり；
Ｙａは、ＣＲ４ａであり；
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、及びＲ４ａは、各々独立してＨ、ＦおよびＣｌから選択され、
ここで、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、及びＲ４ａのうち２つがＦおよびＣｌから選択され、かつＲ１ａ、Ｒ２ａ、及びＲ４ａのうち１つがＨを表し；
Ｒ３ａは、ＦまたはＣｌを表し；
Ｒ５ａは、Ｈを表す）。
【請求項１１】
ミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはプロテオスタシス障害に関連する障害の治療における使用のための請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
障害がアルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、他のポリグルタミン障害およびタウオパシーから選択される、請求項１１に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項１３】
１つ以上の他の活性剤と組み合わせる、請求項１０から１２のいずれか一項に記載の使用するため医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
ｅＩＦ２αのαサブユニットのリン酸化は、種々のストレスに対する防御の第一線であり、アンフォールドタンパク質応答（ＵＰＲ）および統合ストレス応答（ＩＳＲ）の２つの部分的にオーバーラップするシグナル伝達経路の中心的な要素である。ｅＩＦ２αリン酸化を元に戻すために、哺乳動物細胞は２つのｅＩＦ２αホスファターゼを有する。ｅＩＦ２αホスファターゼは、約２００の他のホスファターゼと触媒サブユニットＰＰ１ｃを共有する二量体ホロ酵素であり、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ（Ｎｏｖｏａら、Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、１５３、１３４５〜１３５５、２００１）ストレス誘導性タンパク質または構成的に発現されるＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ（Ｊｏｕｓｓｅら、Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、１６３、７６７〜７７５、２００３）の２つの関連した調節サブユニットのうちの１つに結合される。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ阻害はＰＰＰ１Ｒ１５ＡおよびＰＰ１から構成されるストレス誘発性ｅＩＦ２αホスファターゼを選択的に阻害し、一方で、高度に関連する、構成的なホスファターゼＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ−ＰＰ１には害を及ぼさない。ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ阻害は、ストレスを受けた細胞におけるｅＩＦ２αリン酸化を延長し、これによりストレスを受けた細胞において長期的な翻訳の減弱がもたらされる。結果として、シャペロン有効性がストレスを受けた細胞において増加する。その理由は、新しく合成されたタンパク質のフォールディングの補助に通常関与するシャペロンは翻訳が低下した場合に有効となるからである。これにより、タンパク質フォールディングが支持され、細胞をタンパク質プロテオスタシス欠陥からレスキューする。したがって、原理的に、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ阻害剤は、タンパク質のミスフォールディングストレスが関与する哺乳動物疾患を処置し得る。ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ／ＧＡＤＤ３４ノックアウトマウスが野生型マウスとほとんど区別不能であるのでＰＰＰ１Ｒ１５Ａの阻害は安全と予想されることから、哺乳動物におけるＰＰＰ１Ｒ１５Ａの阻害は魅力的な治療可能性を有する（Ｍａｒｃｉｎｉａｋら、Ｇｅｎｅｓ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、１８、３０６６〜３０７７、２００４）。しかし、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ阻害剤で処置できる治療適応の数は、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａが発現され、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａが疾患作用機序に存在する疾患に限定されると予想される。したがって、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａの阻害は、強力かつ安全であり得るが、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａが関与する疾患に限定される。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８５】
プロドラッグ
本発明は、プロドラッグ形態の本発明の化合物、すなわち、任意の例示的な化合物による活性親薬物をインビボで放出する共有結合化合物をさらに含む。そのようなプロドラッグは、概して、ヒトまたは哺乳類対象への投与時に修飾を元に戻せるように１つまたは複数の適切な基が修飾された本発明の化合物である。元に戻すことは通常、そのような対象において自然に存在する酵素によって実施されるが、元に戻すことをインビボで実施するために、そのようなプロドラッグと一緒に第２の薬剤を投与することが可能である。そのような修飾の例は、エステル（例えば、上述したもののいずれか）を含み、ここで、元に戻すことはエステラーゼ等によって行われ得る。他のそのような系は、当業者には公知である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８８】
療法適用
本明細書において記載される化合物は、種々の疾患および障害を処置することおよび予防することにおいて、潜在的な療法適用を有する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８９】
本発明の１つの態様は、療法における使用のための式ＩＡの化合物に関する。
本発明の別の態様は、対象に、治療有効量の本発明の化合物を投与するステップを含む、ミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはタンパク質ホメオスタシスの撹乱に関連する障害を有する対象を処置する方法に関する。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９１】
本発明のさらなる態様は、対象に、治療有効量の本発明の化合物を投与するステップを含む、対象における、ミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはタンパク質ホメオスタシスの撹乱に関連する障害を予防する方法に関する。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９３】
本発明の別の態様は、ミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはタンパク質ホメオスタシスの撹乱に関連する障害の処置または予防における使用のための、式ＩＡおよび式ＩＢの化合物に関する。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９５】
本発明のさらに別の態様は、ミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはタンパク質ホメオスタシスの撹乱に関連する障害の処置または予防のための医薬の製造における、式ＩＡおよび式ＩＢの化合物の使用に関する。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９７】
ＰＰＰ１Ｒ１５ＡおよびＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ関連疾患は、ＰＰＰ１Ｒ１５ＡおよびＰＰＰ１Ｒ１５Ｂを阻害することによって改善させることができる疾患である。これらには、ミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはタンパク質ホメオスタシス（プロテオスタシス）の撹乱に関連する障害が含まれ、例えば、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、運動失調症および他のポリグルタミン障害ならびに網膜変性、緑内障、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）およびプリオン病；微小管結合タンパク質タウの凝集に関連する障害、ならびに、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症およびパーキンソン認知症症候群、嗜銀顆粒性疾患（ａｒｇｙｒｏｐｈｉｌｉｃ  ｇｒａｉｎ  ｄｉｓｅａｓｅ）、慢性外傷性脳症、大脳皮質基底核変性症、石灰沈着を伴うびまん性神経原線維変化病（ＤＮＴＣ）、ダウン症候群、家族性英国型認知症（ＦＢＤ）、家族性デンマーク型認知症（ＦＤＤ）、前頭側頭葉認知症（ｆｒｏｎｔｏｔｅｍｐｏｒａｌ  ｄｅｍｅｎｔｉａ）および１７番染色体連鎖パーキンソン症候群（ＦＴＤＰ−１７）、前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカ病、グアドループパーキンソン症候群（Ｇａｕｄｅｌｏｕｐｅａｎ  ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍ）、筋緊張性ジストロフィー、脳の鉄蓄積を伴う神経変性、Ｃ型ニーマンピック病、神経原線維変化を伴う非グアム型運動ニューロン病（ｎｏｎ−Ｇｕａｍａｎｉａｎ  ｍｏｔｏｒ  ｎｅｕｒｏｎ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｗｉｔｈ  ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙ  ｔａｎｇｌｅｓ）、ピック病、脳炎後パーキンソン症候群、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連性精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症（ｔａｎｇｌｅ−ｏｎｌｙ  ｄｅｍｅｎｔｉａ）、および球状のグリア封入を伴う白質タウオパシー；ミエリン障害、例えば、多発性硬化症、ペリツェウスメルツバッハー病、白質消失病、急性散在性脳脊髄炎、脳室周囲白質軟化症、脳室周囲白質傷害、脊髄癆、デビック病、視神経炎、進行性多巣性白質脳症、横断性脊髄炎、慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシー、抗ＭＡＧ末梢性ニューロパシー（ａｎｔｉ−ＭＡＧ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）、副腎脳白質ジストロフィー、副腎脊髄神経症、びまん性白質傷害（ｄｉｆｆｕｓｅ  ｗｈｉｔｅ  ｍａｔｔｅｒ  ｉｎｊｕｒｙ）、ギランバレー症候群、橋中央ミエリン溶解、白質ジストロフィーなどの遺伝性脱髄疾患、およびシャルコ−マリートゥース病；小胞体（ＥＲ）において作られる任意のタンパク質のミスフォールディングまたは輸送欠陥によって引き起こされる疾患、例えば、嚢胞性線維症、先天性甲状腺機能低下性甲状腺腫（ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  ｈｙｐｏｔｈｙｒｏｉｄ  ｇｏｉｅｔｅｒ）、家族性神経下垂体性糖尿病（ｆａｍｉｌｉａｌ  ｎｅｕｒｏｈｙｐｏｐｈｙｓｅａｌ  ｄｉａｂｅｔｅｓ）、骨形成不全を含むプロコラーゲン生合成障害、高コレステロール血症、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、リソソーム障害（ｌｙｓｏｍａｌ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、網膜色素変性症（ｒｅｔｉｎｉｓ  ｐｉｇｍｅｎｔｏｓａ）（ＲＰ）、および炎症性腸���患；代謝疾患、例えば、糖尿病、ウォルコットラリソン症候群、肥満症、インスリン抵抗性、高脂血症、脂肪肝およびアテローム性動脈硬化症；癌；老化；炎症；および関節リウマチ、１型糖尿病および白斑を含む他の障害が含まれる。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１３】
一実施形態において、疾患は、ミエリン障害である。
ミエリンは、中枢および末梢神経系の両方に豊富なタンパク質である。ミエリンは、末梢神経系中の中枢神経系中のオリゴデンドロサイトおよびシュワン細胞の２つの細胞型によって産生される。ミエリンは、軸索の周囲に鞘を形成して軸索に沿う電気的インパルスの伝導の速度を保証し、軸索からの電流の散逸を防止する。ミエリン機能は、神経系にとって必須である。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１６】
ＣＭＴ疾患は、いくつかの遺伝子中の変異によって引き起こされるミエリンニューロパシーのグループである。末梢性ミエリンタンパク質ＰＭＰ２２中の変異は、ＣＭＴの最も共通する原因である。ＰＭＰ２２（Ｔｒｅｍｂｌｅｒ−Ｊ）中の変異は、ＰＭＰ２２のミスフォールディングを引き起こし、末梢神経系中のミエリンにおける欠陥に起因して、マウスにおいてヒトにおけるＣＭＴに似た疾患をもたらす。出願人は、実施例１の化合物が、神経障害性マウスからの外植片におけるミエリン形成を改善することができることを実証した。出願人は、神経障害性マウスからの外植片におけるミエリン形成を改善することが、哺乳動物における有効性を予想することを実証した（Ｄａｓら  Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０１５）。したがって、実施例１の化合物は、哺乳動物におけるＣＭＴを処置することにおいて有用であり、さらに、機構が類似しており、ｅＩＦ２α経路が関与することが公知であり（ＬｉｎおよびＰｏｐｋｏ、Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．、１２、３７９〜３８５、２００９）、式（Ｉ）の化合物などのＰＰＰ１Ｒ１５ＡおよびＰＰＰ１Ｒ１５Ｂの阻害剤がＣＭＴ処置においても有用であると見込まれる他のミエリン障害を処置することにおいて有用である。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２４】
一実施形態において、疾患は、代謝疾患である。
代謝疾患、例えば、糖尿病、肥満、インスリン抵抗性、高脂血症、脂肪性肝疾患、およびアテローム性動脈硬化症が、病理学的なＥＲストレスに関連することが公知であり、ＵＰＲの薬理学的なモジュレーターが、治療の利益を有し得ることが考えられる（ＣａｏおよびＫａｕｆｍａｎ、２０１２、Ｃｕｒｒ  Ｂｉｏｌ、ｖｏｌ．２２（１６））。しかし、ＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ阻害剤が以前に利用可能ではなく、ＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ阻害が有害であると予想されたのに加えて、ホスファターゼを阻害することが困難であったことから、ＰＰＰ１Ｒ１５Ｂが代謝疾患における治療標的であり得るかどうかは不確かであった。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２５】
本発明者らは、実施例１の化合物が、哺乳動物における代謝性障害を改善することができることを実証した（図１１）。したがって、ＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ阻害剤は、例えば、糖尿病、肥満、脂肪性肝疾患、およびアテローム性動脈硬化症に限定されない、代謝性障害を処置するため有用である。式（Ｉ）の化合物などのＰＰＰ１Ｒ１５ＡおよびＰＰＰ１Ｒ１５Ｂの阻害剤が、代謝性障害を処置することにおいて有用であることも期待される。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２６】
一実施形態において、本明細書において記載される化合物は、代謝性障害の処置における使用のためのものである。
好ましい実施形態において、代謝性障害は、糖尿病、肥満、脂肪性肝疾患、およびアテローム性動脈硬化症から選択される。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２９】
癌細胞は高い代謝要求を有し、これらの増殖は効率的なタンパク質合成に依存する。翻訳開始は、タンパク質ホメオスタシス、分化、増殖および悪性転換の制御に重要な役割を担う。翻訳開始を増加させることにより、癌の発生に寄与し、逆に、翻訳開始を減少させることにより、腫瘍成長を低減させることができた（Ｄｏｎｚｅら、１９９５、ＥＭＢＯ  Ｊ、１４、３８２８〜３４；Ｐｅｒｖｉｎら、２００８、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、６８、４８６２〜７４；Ｃｈｅｎら、２０１１、Ｎａｔ  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ、７、６１０〜６）。理論に縛られることを望まないが、ＰＰＰ１Ｒ１５ＡおよびＰＰＰ１Ｒ１５Ｂを阻害することにより、腫瘍細胞において翻訳が低減され、したがって、腫瘍成長を低減されることが考えられる。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４４】
有益な組合せは、特定の障害の治療において価値があることが公知であるかまたはそのように推測される薬剤を用いて試験阻害剤の阻害活性を研究することによって示唆され得る。この手順を使用して、薬剤の投与順序、すなわち、送達の前か、同時か、後かを決定することもできる。そのようなスケジューリングは、本明細書において同定される全ての活性剤の特色となり得る。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２８８】
実施例Ａ
タンパク質発現、精製および表面プラズモン共鳴による分析
タンパク質発現および精製
ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ３２５〜６３６およびＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ３４０〜６９８を発現させ、次の通り精製した：ＰＰＰ１Ｒ１５Ａの３２５〜６３６およびＰＰＰ１Ｒ１５Ｂの３４０〜６９８のアミノ酸をコードするｃＤＮＡをＨｉｓ−タグ化し、ｐＭＡＬ−ｃ５ｘにクローニングした。組換えＰＰＰ１Ｒ１５Ａ／ＢをＢＬ２１−Ｇｏｌｄ細胞において発現させ、ＨｉｓＴｒａｐ  ＨＰカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、続いてＭＢＰＴｒａｐ  ＨＰカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）におけるアフィニティークロマトグラフィーによって精製した。タンパク質を、ＢＯＬＴ  ＳＤＳ−ＰＡＧＥ  ４〜１２％Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓゲル（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で分析し、ＳｉｍｐｌｙＢｌｕｅ  ＳａｆｅＳｔａｉｎ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で染色した。ヒトＰＰ１γをコードするｃＤＮＡを、バキュロウイルストランスファーベクターｐＤＷ４６４にクローニングしてビオチンアクセプターペプチド（ＢＡＰ）を付加した。ベクターは、大腸菌ビオチンホロ酵素合成酵素（ＢｉｒＡ）もコードするため、ＢＡＰ−タグ化タンパク質をＳｐｏｄｏｐｔｅｒｅ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ９）昆虫細胞中でインビボでビオチン化することができる（Ｄｕｆｆｙら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２６２、１２２〜１２８、１９９８）。Ｂａｃ−ｔｏ−Ｂａｃバキュロウイルス発現系（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して組換えバクミドＤＮＡを生成し、Ｓｆ９昆虫細胞を使用してウイルスストックを増幅した。培養物を１，２００ｇで１５分間遠心分離することによって採取し、細胞ペレットを溶解緩衝剤（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．２％Ｔｒｉｔｏｎ、５％グリセロール、１ＰｉＣ錠剤（Ｒｏｃｈｅ）／５０ｍｌおよび０．２ｍＭ  ＰＭＳＦ）に再懸濁し、続いて穏やかに超音波処理した。タンパク質を最初に５ｍｌ  ＨｉＴｒａｐ  Ｑ  ＨＰカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、続いてＨｉＬｏａｄ  １６／６００  Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００カラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）において精製した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロットによって確認された陽性画分を、プールし、約１μＭに濃縮し、−８０℃で貯蔵した。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９０】
ビオチン−ＰＰ１表面を使用した小分子とｅＩＦ２αホロホスファターゼ複合体の定常状態の結合定数の決定
わずかな変更を施して、同じ手順および条件を全ての結合実験に使用した。小分子を、１００％ＤＭＳＯ中に５０ｍＭ貯蔵溶液として貯蔵した。結合定数の決定の前、化合物の１２または８つの濃度のいずれかの連続希釈を、９６ウェルプレートのランニング緩衝剤で調製した。各々の化合物希釈系列より前に、調節サブユニットＲ１５ＡまたはＲ１５Ｂを、ランニング緩衝剤で１５μＭに希釈し、ビオチン−ＰＰ１表面に捕捉させ、センサーチップ表面にホロホスファターゼ複合体を形成させた。次いで、表面を再生することなく、化合物希釈系列をチップの表面上に注入した。センサーグラムをＢｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００査定ソフトウェアを使用して分析し、結合定数を定常状態モデルに基づいて決定した。運動実験は異なる濃度の化合物を使用して行い、それらそれぞれの平衡結合レベルを決定した。これらの平衡応答レベル（Ｒｅｑ）は、濃度に対してプロットされ、グローバルフィットを使用してフィッティングされ、これにより定常状態親和性定数を決定できる（すなわち、５０％飽和での濃度がＫＤである）（Ｆｒｏｓｔｅｌｌ−Ｋａｒｌｓｓｏｎら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、４３、１９８６〜１９９２、２０００）。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９５】
動物試験
全ての動物ケアおよび手順を、地域の倫理的な承認を受けた研究における動物の使用における規則（１９８６年の英国動物科学的処置法）に準拠して実施した。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０１】
ＤＲＧ培養
１３．５または発生時（Ｅ１３．５）における野生型またはＰｍｐ２２Ｔｒ−Ｊ（ＰＭＰ２２変異体）（Ｈｅｎｒｙら、Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．、４２、６８８〜７０６、１９８３）の胚から解剖した後根神経節（ＤＲＧ）を、４ｇ／ｌグルコース、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、２％Ｂ２７サプリメントおよび５０ｎｇ／ｍｌニューロン成長因子（ＮＧＦ）を補充した神経基礎（ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ）培地中でコラーゲンでコーティングしたカバーガラスにおいて７日間培養した。シュワン細胞を分化させ、ミエリン形成を誘導させるため、培養したＤＲＧを、次にＣ−培地（４ｇ／ｌグルコース、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１０％ＦＣＳ、５０ｎｇ／ｍｌ  ＮＧＦを補充したＭＥＭ培地）において維持した。Ｃ−培地を、新たに添加した５０μｇ／ｍｌアスコルビン酸±５ｎＭの実施例Ｉの化合物で１日おきに置き換え、シュワン細胞によるミエリン形成のために１４日間培養した。培養したＤＲＧを、次に４％パラホルムアルデヒド中で固定し、ＭＢＰ（ラットミエリン塩基性タンパク質、１／２５０希釈、ａｂ７３４９８）で免疫染色した。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１１】
アッセイ５：選択的なＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ阻害剤は、ストレス−回復の間のｅＩＦ２ａリン酸化を延長させる（図４）
本発明者らは、ＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ阻害剤が、ストレスに続いてｅＩＦ２αリン酸化を延長すると推論した。この活性を明らかにするため、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａが発現されない条件を探索して、交絡する効果を回避することが重要であった。本発明者らは、ＤＴＴによるストレス誘導の速い運動および可逆性（Ｂｅｒｔｏｌｏｔｔｉら、Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、２、３２６〜３３２、２０００；Ｊｏｕｓｓｅら、２００３）を利用し、１ｍＭ  ＤＴＴで３０分間処理し、洗い流した後に細胞中のｅＩＦ２αリン酸化をモニターした。ＤＴＴを洗い流した後に通常発生するｅＩＦ２αリン酸化における減退が遅延し、これがＰＰＰ１Ｒ１５Ａの何らかの実質的な誘導の前に発生することを本発明者らは見出した。したがって、本明細書において記載されるものなどのストレス−回復パラダイムの初期相におけるｅＩＦ２α脱リン酸化の動態の慎重なモニタリングを使用して他のＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ阻害剤を同定することができる。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１７】
実施例１の化合物は、哺乳動物における疾患を予防する（図９）
ＰＰＰ１Ｒ１５Ｂの阻害によりフォールディングを増加させることは、非常に広範囲のヒトの病理に利益がある可能性がある。このことを試験するため、本発明者らは、ミスフォールドしたタンパク質、変異体ハンチントンの蓄積によって引き起こされるプロテオスタシス疾患であるハンチントン病（ＨＤ）に注目した。変異体ハンチントンがＵＰＲを誘導することを示すいくつかの報告がある（ＤｕｅｎｎｗａｌｄおよびＬｉｎｄｑｕｉｓｔ、Ｇｅｎｅ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、２２、３３０８〜３３１９、２００８；Ｎｉｓｈｉｔｏｈら、Ｇｅｎｅｓ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、１６、１３４５〜１３５５、２００２）。しかし、本発明者らはハンチントン病のモデルにおいてＰＰＰ１Ｒ１５Ａを検出することができなかったことから、ＰＰＰ１Ｒ１５ＡがＨＤに関する治療標的ではないことが示唆された。ＨＤは現在まで救済法はないので、本発明者らは、ＨＤがＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ阻害によって予防できるかどうかを試験した。本発明者らは、２ｍｇ／ｋｇの実施例１の化合物でのＨＤマウスの処置が、運動能力機能障害を予防することを見出した（図９）。これは、ＰＰＰ１Ｒ１５Ｂが有効な治療標的であること、したがって、ＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ阻害が疾患の処置および予防において有用であることを示す。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３２０】
代謝疾患におけるＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ有効性の評価（図１１）
代謝疾患、例えば、糖尿病、肥満、脂肪性肝疾患、およびアテローム性動脈硬化症が、病理学的なＥＲストレスに関連することが公知であり、ＵＰＲの薬理学的なモジュレーターが、治療の利益を有し得ることが考えられる。本研究の前には利用可能なＰＰＰ１Ｒ１５Ｂ阻害剤は存在しなかったので、ＰＰＰ１Ｒ１５Ｂが代謝疾患における治療標的であり得るかどうかは不確かであった。本発明者らはこの可能性を試験して、実施例１の化合物での肥満マウスの処置が、これらの哺乳動物において病理学的な高い血液グルコースを低減させることを見出した（図１１）。これにより、実施例１の化合物での処置が、代謝性障害を改善できることが示される。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３２１】
１つの疾患モデルにおいて、実施例１の化合物での処置が有益であることが示されたので、本発明の化合物が、他の哺乳動物の代謝性障害、例えば、糖尿病、肥満、脂肪性肝疾患、およびアテローム性動脈硬化症に対し有益であることが明白である。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３２２】
実施例Ｂ
タンパク質発現および精製
ＭＢＰ−Ｒ１５Ａ３２５〜６３６−ＨｉｓおよびＭＢＰ−Ｒ１５Ｂ３４０〜６９８−Ｈｉｓを、発現させ、前の記載（Ｄａｓら  Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０１５）の通り精製した。ヒトＰＰ１γをコードするｃＤＮＡを、バキュロウイルストランスファーベクターｐＤＷ４６４にクローニングしてＮ末端ビオチンアクセプターペプチド（ＢＡＰ）を付加した。ベクターは、大腸菌ビオチンホロ酵素合成酵素（ＢｉｒＡ）もコードするため、ＢＡＰ−タグ化タンパク質をＳｐｏｄｏｐｔｅｒｅ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ９）昆虫細胞中でインビボでビオチン化（ｂｉｏ−ＰＰ１ｃ）することができる（Ｄｕｆｆｙら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２６２、１２２〜１２８、１９９８）。Ｂａｃ−ｔｏ−Ｂａｃバキュロウイルス発現系（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して組換えバクミドＤＮＡを生成し、Ｓｆ９昆虫細胞を使用してウイルスストックを増幅した。タンパク質を、Ｉｎｓｅｃｔ−Ｘｐｒｅｓｓ培地（Ｌｏｎｚａ）中でＳｆ９昆虫細胞を使用して産生した。ｂｉｏ−ＰＰ１ｃを、ＨｉＴｒａｐ  Ｑ  ＨＰカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）において陰イオン交換クロマトグラフィー（ｃｈｒｏｍｏｔｏｇｒａｐｈｙ）、続いてゲル濾過（ＨｉＬｏａｄ  １６／６００  Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００カラム、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）によって精製した。タンパク質を、ＢＯＬＴ  ＳＤＳ−ＰＡＧＥ  ４〜１２％Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓゲル（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で分析し、ＩｎｓｔａｎｔＢｌｕｅ（Ｅｘｐｅｄｅｏｎ）で染色し、ビオチン化ＰＰ１の存在をＰｉｅｒｃｅ  Ｈｉｇｈ  Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ−ＨＲＰ抗体（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用したウエスタンブロットによって確認した。これは部分的に純粋なタンパク質をもたらし、完全な精製は、ビオチンとストレプトアビジンの高親和性および特異性に起因して後の段階で達した（ＳＰＲチップにおいて）。
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３３２】
【表２６】
2018517668.tif 000003
本発明の態様は下記も含まれる。
態様１
式ＩＡ：
【化４０】
2018517668.tif 000004
（式中：
Ｘａは、ＮまたはＣＲ２ａであり；
Ｙａは、ＮまたはＣＲ４ａであり；
Ｒ１ａは、Ｈ、Ｆ、ＣｌまたはＢｒであり；
Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａ、Ｒ５ａは、各々独立してＨ、ＦまたはＣｌを表し；
但し：
ＸａおよびＹａがＣＨを表す場合：
Ｒ３ａおよびＲ５ａが両方ともＨを表すとき、Ｒ１ａはＦ、ＣｌまたはＢｒではなく；
Ｒ１ａがＣｌであり、Ｒ２ａがＨであるとき、Ｒ５ａはＦまたはＣｌではなく；
Ｒ１ａがＣｌであり、Ｒ５ａがＨであるとき、Ｒ３ａはＦではなく；
Ｒ１ａおよびＲ５ａが両方ともＨであるときまたはＲ１ａがＣｌであり、Ｒ５ａがＨであるとき、Ｒ３ａはＣｌではなく；
Ｒ１ａ、Ｒ３ａおよびＲ５ａは全てがＨではなく；または
Ｒ３ａがＨであり、Ｒ５ａがＦであるとき、Ｒ１ａはＣｌではなく；
ＸａがＣＨを表し、ＹａがＣＲ４ａ（式中、Ｒ４ａはＣｌである）を表す場合：
Ｒ１ａおよびＲ５ａは両方がＣｌではなく；
Ｒ１ａおよびＲ５ａがＣｌであるとき、Ｒ３ａはＣｌではなく；
ＸａがＣＲ２ａを表し、ＹａがＣＲ４ａを表し、Ｒ２ａおよびＲ４ａが両方ともＣｌである場合、Ｒ１ａ、Ｒ３ａおよびＲ５ａは全てがＨではない）
の化合物または薬学的に許容されるその塩。
態様２
ＸａがＣＲ２ａを表し、ＹａがＣＲ４ａを表し、Ｒ２ａおよびＲ４ａが各々独立してＨ、ＦまたはＣｌを表す、請求項１に記載の化合物。
態様３
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち３つがＣｌまたはＦを表し、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち２つがＨを表し、任意選択で、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち少なくとも１つがＦである、請求項１または２に記載の化合物。
態様４
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち３つがＣｌを表し、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち２つがＨを表す、請求項１または２に記載の化合物。
態様５
Ｒ３ａがＣｌまたはＦであり、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａがＨ、ＦおよびＣｌから独立に選択され、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち２つがＦおよびＣｌから選択され、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ４ａおよびＲ５ａのうち２つがＨを表す、請求項１または２に記載の化合物。
態様６
Ｒ５ａがＨを表す、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
態様７
Ｅ−異性体形態である、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
態様８
（Ｅ）−２−（（２，４−ジクロロピリミジン−５−イル）メチレン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３，５−ジクロロ−４−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３，４−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４−ジクロロ−５−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−ブロモ−３−クロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３，４−ジクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４−ジクロロ−３−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３−ジクロロ−４−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３−クロロ−４−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３−ジクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（４，５−ジクロロ−２−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−５−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（（２−クロロピリジン−３−イル）メチレン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（（２，６−ジクロロピリジン−３−イル）メチレン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３−クロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−３−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，５−ジクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−３，４−ジフルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−３，５−ジフルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３−クロロ−２−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３，６−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−４，５−ジフルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３，５−ジクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
または薬学的に許容されるその塩から選択される、請求項１に記載の化合物。
態様９
ＰＰＰ１Ｒ１５ＡおよびＰＰＰ１Ｒ１５Ｂの阻害によって軽減される病状の処置における使用のための、式ＩＢ：
【化４１】
2018517668.tif 000005
（式中：
Ｘｂは、ＮまたはＣＲ２ｂであり；
Ｙｂは、ＮまたはＣＲ４ｂであり；
Ｒ１ｂは、Ｈ、Ｆ、ＣｌまたはＢｒであり；
Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂ、Ｒ５ｂは、各々独立してＨ、ＦまたはＣｌを表し；
但し：
ＸｂおよびＹｂが両方ともＮを表す場合、Ｒ１ｂおよびＲ３ｂは両方がＣｌではなく；
ＸｂがＣＲ２ｂであり、Ｒ２ｂがＣｌである場合、Ｒ１ｂはＢｒではなく；
Ｒ３ｂおよびＲ４ｂが両方ともＨである場合、Ｒ１ｂおよびＲ２ｂは両方がＣｌではなく；
ＸｂがＣＲ２ｂであり、Ｒ２ｂおよびＲ３ｂが両方ともＨである場合、ＹｂがＣＲ４ｂであり、Ｒ４ｂがＦであるとき、Ｒ１ｂはＣｌではなく；
ＸｂがＣＲ２ｂであり、ＹｂがＣＲ４ｂである場合、Ｒ１ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂは全てがＨではなく；
ＸｂがＣＲ２ｂであり、ＹｂがＣＲ４ｂであり、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂがＨである場合、Ｒ１ｂはＣｌではなく；
ＸｂがＣＲ２ｂであり、ＹｂがＣＲ４ｂであり、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂおよびＲ４ｂがＨである場合、Ｒ５ｂがＦであるとき、Ｒ１ｂはＣｌではなく；
ＸｂがＣＲ２ｂ（式中、Ｒ２ｂはＣｌである）であり、ＹｂがＣＲ４ｂ（式中、Ｒ４ｂはＨである）である場合、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂがＨであり、またはＲ３ｂおよびＲ４ｂがＨであり、Ｒ５ｂがＣｌであるとき、Ｒ１ｂはＣｌではない）
の化合物または薬学的に許容されるその塩。
態様１０
ＸｂがＣＲ２ｂを表し、ＹｂがＣＲ４ｂを表し、Ｒ２ｂおよびＲ４ｂが各々独立してＨ、ＦまたはＣｌを表す、請求項９に記載の使用のための化合物。
態様１１
Ｒ１ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂのうち３つがＣｌまたはＦを表し、Ｒ１ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂのうち２つがＨを表し、任意選択で、Ｒ１ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂのうち少なくとも１つがＦを表す、請求項９または１０に記載の使用のための化合物。
態様１２
Ｒ１ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂのうち３つがＣｌを表し、Ｒ１ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒ３ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂのうち２つがＨを表す、請求項９または１０に記載の使用のための化合物。
態様１３
Ｒ３ｂがＣｌまたはＦであり、Ｒ１ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂがＨ、ＦおよびＣｌから独立に選択され、Ｒ１ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂのうち２つがＦおよびＣｌから選択され、Ｒ１ｂ、Ｒ２ｂ、Ｒ４ｂおよびＲ５ｂのうち２つがＨである、請求項９または１０に記載の使用のための化合物。
態様１４
Ｒ５ｂがＨである、請求項９から１３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
態様１５
Ｅ−異性体形態である、請求項９から１４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
態様１６
（Ｅ）−２−（（４−クロロフェニル）メチレン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３，５−ジクロロ−４−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３，４−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４−ジクロロ−５−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３，４−ジクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４−ジクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，４−ジクロロ−３−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，３−ジクロロ−４−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３−クロロ−４−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（４，５−ジクロロ−２−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（（２−クロロピリジン−３−イル）メチレン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（（２，６−ジクロロピリジン−３−イル）メチレン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３−クロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−３−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２，５−ジクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−３，４−ジフルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−３，５−ジフルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（３−クロロ−２−フルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
（Ｅ）−２−（２−クロロ−４，５−ジフルオロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミド
または薬学的に許容されるその塩から選択される、請求項９に記載の使用のための化合物。
態様１７
（Ｅ）−２−（３，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミドまたは薬学的に許容されるその塩である、請求項１に記載の化合物または請求項９に記載の使用のための化合物。
態様１８
（Ｅ）−２−（２，４，５−トリクロロベンジリデン）ヒドラジン−１−カルボキシイミドアミドまたは薬学的に許容されるその塩である、請求項１に記載の化合物または請求項９に記載の使用のための化合物。
態様１９
ミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはプロテオスタシス障害に関連する障害の処置における使用のための、請求項１から８、１７または１８のいずれか一項に記載の化合物。
態様２０
障害がＰＰＰ１Ｒ１５ＡおよびＰＰＰ１Ｒ１５Ｂに関連する、請求項１９に記載の使用のための化合物。
態様２１
障害がミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはプロテオスタシス障害に関連する障害である、請求項９から１８のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
態様２２
障害がアルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、他のポリグルタミン障害およびタウオパシーから選択される、請求項１９から２１のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
態様２３
請求項１から９、１７または１８のいずれか一項に記載の化合物を、薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物。
態様２４
ミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはプロテオスタシス障害に関連する障害を処置する医薬の調製における、請求項１から８、１７または１８のいずれか一項に記載の式ＩＡの化合物の使用。
態様２５
請求項１から８、１７または１８のいずれか一項に記載の治療有効量の式ＩＡの化合物を投与するステップを含む、それを必要とする対象における、ミスフォールドしたタンパク質の蓄積またはプロテオスタシス障害に関連する障害を処置する方法。