【手続補正書】
【提出日】平成31年3月22日(2019.3.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも2つの二価結合ユニットまたはそのバリアントもしくは断片を含む、多量体結合分子であって；
各結合ユニットが、抗原結合ドメインと各々連結されている少なくとも2つの抗体重鎖定常領域またはその断片を含み；
少なくとも1つの抗原結合ドメインが、感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、またはそれらの組み合わせにおいて発現するB型肝炎ウイルス（HBV）抗原に特異的に結合し、かつ、
該結合分子が、HBV増殖の阻害、HBVクリアランスの増強、HBV感染力の制御、および／またはHBV成長の制御において、該HBV抗原に特異的に結合する抗原結合ドメインを含む参照IgG抗体よりも効力がある、
前記多量体結合分子。
【請求項２】
2つの二価IgA結合ユニットまたはその断片とJ鎖またはその断片もしくはバリアントとを含む二量体結合分子であって、各結合ユニットが、IgA定常領域またはその断片のアミノ末端側に位置付けられたVHと各々連結されている2つのIgA重鎖定常領域またはその断片と、免疫グロブリン軽鎖定常領域のアミノ末端側に位置付けられたVLを各々が含む2つの免疫グロブリン軽鎖とを含み、該IgA重鎖定常領域またはその断片の各々がCα3-tpドメインを含む、請求項1記載の結合分子。
【請求項３】
それぞれ5つまたは6つの二価IgM結合ユニットまたはその断片を含む五量体または六量体結合分子であって、各結合ユニットが、定常領域またはその断片のアミノ末端側に位置付けられたVHと各々連結されている2つのIgM重鎖定常領域またはその断片と、免疫グロブリン軽鎖定常領域のアミノ末端側に位置付けられたVLを各々が含む2つの免疫グロブリン軽鎖とを含み、かつ該IgM重鎖定常領域またはその断片の各々がCμ4-tpドメインを含む、請求項1記載の結合分子。
【請求項４】
1つまたは複数のIgM重鎖定常領域またはその断片が、Cμ3ドメイン、Cμ2ドメイン、Cμ1ドメイン、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、請求項3記載の結合分子。
【請求項５】
五量体であり、かつ、J鎖またはその断片もしくはそのバリアントをさらに含む、請求項3または4記載の結合分子。
【請求項６】
J鎖またはその断片もしくはそのバリアントが、アミノ酸配列SEQ ID NO:54またはその機能的断片もしくはそのバリアントを含む、請求項5記載の結合分子。
【請求項７】
J鎖またはその断片もしくはそのバリアントが、異種ポリペプチドをさらに含む修飾J鎖であり、該異種ポリペプチドが、該J鎖またはその断片もしくはそのバリアントに直接的または間接的に融合されている、請求項2、請求項5、または請求項6記載の結合分子。
【請求項８】
前記異種ポリペプチドが、前記J鎖もしくはその断片もしくはそのバリアントのN末端、該J鎖もしくはその断片もしくはそのバリアントのC末端、または該J鎖もしくはその断片もしくはそのバリアントのN末端およびC末端の両方に融合されている、請求項7記載の結合分子。
【請求項９】
前記異種ポリペプチドが、抗体またはその抗原結合断片であり、かつ該抗原結合断片が、Fab断片、Fab'断片、F(ab')2断片、Fd断片、Fv断片、単鎖Fv（scFv）断片、ジスルフィド結合Fv（sdFv）断片、またはそれらの任意の組み合わせを含む、請求項7または8記載の結合分子。
【請求項１０】
前記異種ポリペプチドが、CD3εに特異的に結合することができる、請求項7〜9のいずれか一項記載の結合分子。
【請求項１１】
前記修飾J鎖が、アミノ酸配列SEQ ID NO:68（V15J）またはSEQ ID NO:71（J15V）を含む、請求項10記載の結合分子。
【請求項１２】
前記IgM重鎖定常領域がヒトIgM定常領域である、請求項3〜11のいずれか一項記載の結合分子。
【請求項１３】
感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、またはそれらの組み合わせにおいて発現するB型肝炎ウイルス（HBV）抗原に特異的に結合する少なくとも3個、少なくとも4個、少なくとも5個、少なくとも6個、少なくとも7個、少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、または少なくとも12個の抗原結合ドメインを含み、かつ少なくとも2個、少なくとも3個、少なくとも4個、少なくとも5個、または少なくとも6個、少なくとも7個、少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、または少なくとも12個の抗原結合ドメインが同一である、請求項1〜12のいずれか一項記載の結合分子。
【請求項１４】
前記HBV抗原が、B型肝炎表面抗原（HBsAg）、プレコア抗原、コア抗原、X-抗原、またはそれらの任意の組み合わせであり、かつHBsAgが、プレS1領域、プレS2領域、またはS領域、もしくはそれらの断片を含む、請求項1〜13のいずれか一項記載の結合分子。
【請求項１５】
前記少なくとも2個、少なくとも3個、少なくとも4個、少なくとも5個、または少なくとも6個、少なくとも7個、少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、または少なくとも12個の抗原結合ドメインが、抗体重鎖可変領域（VH）および抗体軽鎖可変領域（VL）を含み、該VHおよび該VLが、それぞれ、VHおよびVLアミノ酸配列SEQ ID NO:1およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:2およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5およびSEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:8、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10およびSEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14およびSEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16およびSEQ ID NO:21、SEQ ID NO:17およびSEQ ID NO:22、SEQ ID NO:18およびSEQ ID NO:23、SEQ ID NO:19およびSEQ ID NO:24、SEQ ID NO:20およびSEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:27、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:28、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:29、SEQ ID NO:30およびSEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32およびSEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34およびSEQ ID NO:35、SEQ ID NO:34およびSEQ ID NO:36、SEQ ID NO:37およびSEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39およびSEQ ID NO:40、SEQ ID NO:41およびSEQ ID NO:42、SEQ ID NO:43およびSEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45およびSEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47およびSEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49およびSEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51およびSEQ ID NO:52、SEQ ID NO:62およびSEQ ID NO:6、SEQ ID NO:73およびSEQ ID NO:74、もしくはSEQ ID NO:75およびSEQ ID NO:76の、HCDR1、HCDR2、およびHCDR3領域、もしくは1つもしくは2つの単一アミノ酸置換を含有するHCDR1、HCDR2、およびHCDR3領域、ならびにLCDR1、LCDR2、およびLCDR3領域、もしくは1つもしくは2つの単一アミノ酸置換を含有するLCDR1、LCDR2、およびLCDR3領域を含む、または、VHアミノ酸配列SEQ ID NO:12もしくはSEQ ID NO:13のHCDR1、HCDR2、およびHCDR3領域、もしくは1つもしくは2つの単一アミノ酸置換を含有するHCDR1、HCDR2、およびHCDR3領域を含む、請求項1〜14のいずれか一項記載の結合分子。
【請求項１６】
前記少なくとも2個、少なくとも3個、少なくとも4個、少なくとも5個、または少なくとも6個、少なくとも7個、少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、または少なくとも12個の抗原結合ドメインが、抗体重鎖可変領域（VH）および抗体軽鎖可変領域（VL）を含み、該VHおよび該VLが、それぞれ、SEQ ID NO:1およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:2およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5およびSEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:8、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10およびSEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14およびSEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16およびSEQ ID NO:21、SEQ ID NO:17およびSEQ ID NO:22、SEQ ID NO:18およびSEQ ID NO:23、SEQ ID NO:19およびSEQ ID NO:24、SEQ ID NO:20およびSEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:27、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:28、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:29、SEQ ID NO:30およびSEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32およびSEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34およびSEQ ID NO:35、SEQ ID NO:34およびSEQ ID NO:36、SEQ ID NO:37およびSEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39およびSEQ ID NO:40、SEQ ID NO:41およびSEQ ID NO:42、SEQ ID NO:43およびSEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45およびSEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47およびSEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49およびSEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51およびSEQ ID NO:52、SEQ ID NO:62およびSEQ ID NO:6、SEQ ID NO:73およびSEQ ID NO:74、もしくはSEQ ID NO:75およびSEQ ID NO:76と少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%もしくは100%同一であるアミノ酸配列を含む、または前記少なくとも1つの抗原結合ドメインが抗体VHを含み、該VHが、SEQ ID NO:12もしくはSEQ ID NO:13と少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%もしくは100%同一のアミノ酸配列を含む、請求項1〜15のいずれか一項記載の結合分子。
【請求項１７】
アミノ酸配列SEQ ID NO:58を含むIgM重鎖およびアミノ酸配列SEQ ID NO:59を含む軽鎖を含む、またはアミノ酸配列SEQ ID NO:63を含むIgM重鎖およびアミノ酸配列SEQ ID NO:59を含む軽鎖を含む、請求項1〜16のいずれか一項記載の結合分子。
【請求項１８】
J鎖またはその機能的断片もしくはバリアントと、2つの重鎖および2つの軽鎖を各々が含む5つの結合ユニットとを含む、単離されたIgM抗体またはその断片であって、各重鎖またはその断片が、ヒトμ定常領域またはその断片、および重鎖可変領域アミノ酸配列SEQ ID NO:62を含み、かつ、各軽鎖が、ヒトκ定常領域および軽鎖可変領域アミノ酸配列SEQ ID NO:6を含み；前記抗体またはその断片が会合して、HBV表面抗原のプレS1領域に特異的に結合することができる五量体IgM抗体を形成することができ、該J鎖またはその断片もしくはバリアントが修飾J鎖であり、かつ該修飾J鎖が、アミノ酸配列SEQ ID NO:68（V15J）またはSEQ ID NO:71（J15V）を含む、前記単離されたIgM抗体またはその断片。
【請求項１９】
請求項1〜17のいずれか一項記載の結合分子または請求項18記載のIgM抗体の少なくとも1つのポリペプチドサブユニットをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドであって、該ポリペプチドサブユニットが、IgM重鎖定常領域と、感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、もしくはそれらの組み合わせにおいて発現するB型肝炎ウイルス（HBV）抗原に特異的に結合する抗体の結合ドメインの少なくとも抗体VH部分とを含み、かつ／または該ポリペプチドサブユニットが、感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、もしくはそれらの組み合わせにおいて発現するB型肝炎ウイルス（HBV）抗原に特異的に結合する抗体の結合ドメインの抗体VL部分を含む、前記ポリヌクレオチド。
【請求項２０】
患者におけるB型肝炎ウイルス（HBV）感染によって引き起こされたまたは悪化した疾患または状態を治療するための薬学的組成物であって、請求項1〜17のいずれか一項記載の結合分子または請求項18記載のIgM抗体を含み、該結合分子が、HBV増殖の阻害、HBVクリアランスの増強、HBV感染力の制御、および／またはHBV成長の制御において、HBV抗原に特異的に結合する抗原結合ドメインを含む参照IgG抗体よりも効力がある、前記薬学的組成物。
【請求項２１】
前記疾患または状態が、急性肝炎、慢性肝炎、肝臓炎、肝硬変、肝不全、肝細胞癌（HCC）、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項20記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
慢性感染細胞内でのB型肝炎ウイルス（HBV）の増殖、潜伏、または維持を制御するための薬学的組成物であって、請求項18記載のIgM抗体を含み、該IgM抗体が、2つの重鎖および2つの軽鎖を含む参照単一結合ユニット抗体よりも効力があり、各重鎖がVHアミノ酸配列SEQ ID NO:62を含み、各軽鎖がVLアミノ酸配列SEQ ID NO:6を含み、該IgM抗体がHBVとHBV感受性細胞との混合物に接触する、前記薬学的組成物。
【請求項２３】
以下の工程を含む、HBVサブウイルス粒子に対するよりも高い親和性、高いアビディティ、またはそれらの組み合わせで感染性B型肝炎ウイルス（HBV）ウイルス粒子の表面、HBV感染細胞の表面、またはそれらの組み合わせに結合する結合分子を同定するための方法：
（a）試験結合分子をHBVウイルス粒子と接触させて、該HBVウイルス粒子に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程；
（b）該試験結合分子をHBVサブウイルス粒子と接触させて、HBVサブウイルス粒子に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程；
（c）工程（a）と工程（b）の結果を比較する工程；および
（d）工程（a）で測定された該親和性または該アビディティが工程（b）で測定された該親和性または該アビディティより高い試験化合物を同定する工程。
【請求項２４】
前記試験結合分子が、請求項1〜17のいずれか一項記載の結合分子または請求項18記載のIgM抗体のいずれかである、請求項23記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
別の局面において、本開示は、HBVに感染していない細胞に対するよりも高い親和性、高いアビディティ、またはそれらの組み合わせでB型肝炎ウイルス（HBV）に感染した細胞の表面に結合する結合分子を同定するための方法を提供し、ここで、該方法は、（a）試験結合分子をHBV感染細胞と接触させて、HBV感染細胞に対する試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程；（b）試験結合分子をHBVに感染していない細胞と接触させて、HBVに感染していない細胞に対する試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程（ここで、非感染細胞は、感染していないこと以外はHBV感染細胞と同一である）；（c）工程（a）と工程（b）の結果を比較する工程；ならびに（d）工程（a）で測定された親和性またはアビディティが工程（b）で測定された親和性またはアビディティより高い試験化合物を同定する工程を含む。特定の局面において、HBV感染細胞は、ヒト細胞である。特定の局面において、試験結合分子は、本明細書において提供されている二量体、五量体、または六量体結合分子（例えば、IgM抗体）である。
[本発明1001]
少なくとも2つの二価結合ユニットまたはそのバリアントもしくは断片を含む、多量体結合分子であって；
各結合ユニットが、抗原結合ドメインと各々連結されている少なくとも2つの抗体重鎖定常領域またはその断片を含み；
少なくとも1つの抗原結合ドメインが、感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、またはそれらの組み合わせにおいて発現するB型肝炎ウイルス（HBV）抗原に特異的に結合し、かつ、
該結合分子が、該HBV抗原に特異的に結合する該抗原結合ドメインを含む参照用の単一の二価結合ユニットよりも効力がある、
前記多量体結合分子。
[本発明1002]
前記参照用の単一の二価結合ユニットがIgG抗体である、本発明1001の結合分子。
[本発明1003]
2つの二価IgA結合ユニットまたはその断片とJ鎖またはその断片もしくはバリアントとを含む二量体結合分子であって、各結合ユニットが、抗原結合ドメインと各々連結されている2つのIgA重鎖定常領域またはその断片を含む、本発明1001または本発明1002の結合分子。
[本発明1004]
分泌成分またはその断片もしくはバリアントをさらに含む、本発明1003の結合分子。
[本発明1005]
前記IgA重鎖定常領域またはその断片の各々が、Cα2ドメインまたはCα3-tpドメインを含む、本発明1003または本発明1004の結合分子。
[本発明1006]
1つまたは複数のIgA重鎖定常領域またはその断片がCα1ドメインをさらに含む、本発明1005の結合分子。
[本発明1007]
前記IgA重鎖定常領域がヒトIgA定常領域である、本発明1003〜1006のいずれかの結合分子。
[本発明1008]
各結合ユニットが、IgA定常領域またはその断片のアミノ末端側に位置付けられたVHを各々が含む2つのIgA重鎖と、免疫グロブリン軽鎖定常領域のアミノ末端側に位置付けられたVLを各々が含む2つの免疫グロブリン軽鎖とを含む、本発明1003〜1007のいずれかの結合分子。
[本発明1009]
それぞれ5つまたは6つの二価IgM結合ユニットまたはその断片を含む五量体または六量体結合分子であって、各結合ユニットが、抗原結合ドメインと各々連結されている2つのIgM重鎖定常領域またはその断片を含む、本発明1001または本発明1002の結合分子。
[本発明1010]
前記IgM重鎖定常領域またはその断片の各々が、Cμ3ドメインおよびCμ4-tpドメインを含む、本発明1009の結合分子。
[本発明1011]
1つまたは複数のIgM重鎖定常領域またはその断片が、Cμ2ドメイン、Cμ1ドメイン、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、本発明1009または本発明1010の結合分子。
[本発明1012]
五量体であり、かつ、J鎖またはその断片もしくはそのバリアントをさらに含む、本発明1009〜1011のいずれかの結合分子。
[本発明1013]
J鎖またはその断片が、アミノ酸配列SEQ ID NO:54またはその機能的断片を含む、本発明1003または本発明1012の結合分子。
[本発明1014]
J鎖またはその断片が、異種ポリペプチドをさらに含む修飾J鎖であり、該異種ポリペプチドが、該J鎖またはその断片に直接的または間接的に融合されている、本発明1003、本発明1012、または本発明1013の結合分子。
[本発明1015]
前記異種ポリペプチドが、ペプチドリンカーを介して前記J鎖またはその断片に融合されている、本発明1014の結合分子。
[本発明1016]
前記ペプチドリンカーが、5個以上25個以下のアミノ酸を含む、本発明1015の結合分子。
[本発明1017]
前記ペプチドリンカーが、
2018513680.tif 000001
からなる、本発明1016の結合分子。
[本発明1018]
前記異種ポリペプチドが、前記J鎖もしくはその断片のN末端、該J鎖もしくはその断片のC末端、または該J鎖もしくはその断片のN末端およびC末端の両方に融合されている、本発明1014〜1017のいずれかの結合分子。
[本発明1019]
前記異種ポリペプチドが結合ドメインを含む、本発明1015〜1018のいずれかの結合分子。
[本発明1020]
前記異種ポリペプチドの前記結合ドメインが、抗体またはその抗原結合断片である、本発明1019の結合分子。
[本発明1021]
前記抗原結合断片が、Fab断片、Fab'断片、F(ab')2断片、Fd断片、Fv断片、単鎖Fv（scFv）断片、ジスルフィド結合Fv（sdFv）断片、またはそれらの任意の組み合わせを含む、本発明1020の結合分子。
[本発明1022]
前記抗原結合断片がscFv断片である、本発明1021の結合分子。
[本発明1023]
前記異種ポリペプチドが、CD3εに特異的に結合することができる、本発明1019〜1022のいずれかの結合分子。
[本発明1024]
前記修飾J鎖が、アミノ酸配列SEQ ID NO:68（V15J）またはSEQ ID NO:71（J15V）を含む、本発明1023の結合分子。
[本発明1025]
前記修飾J鎖が、シグナルペプチドをさらに含む、本発明1024の結合分子。
[本発明1026]
前記修飾J鎖が、アミノ酸配列SEQ ID NO:67（V15J）またはSEQ ID NO:70（J15V）を含む、本発明1025の結合分子。
[本発明1027]
前記IgM重鎖定常領域がヒトIgM定常領域である、本発明1009〜1012のいずれかの結合分子。
[本発明1028]
各結合ユニットが、前記定常領域またはその断片のアミノ末端側に位置付けられたVHを各々が含む2つの重鎖と、免疫グロブリン軽鎖定常領域のアミノ末端側に位置付けられたVLを各々が含む2つの免疫グロブリン軽鎖とを含む、本発明1003〜1027のいずれかの結合分子。
[本発明1029]
少なくとも1つの結合ユニットが、感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、またはそれらの組み合わせにおいて発現するB型肝炎ウイルス（HBV）抗原に特異的に結合する2つの抗原結合ドメインを含み、かつ、該少なくとも1つの結合ユニット内の2つの重鎖が同一である、本発明1003〜1028のいずれかの結合分子。
[本発明1030]
前記少なくとも1つの結合ユニット内の2つの軽鎖が同一である、本発明1029の結合分子。
[本発明1031]
2つの軽鎖定常領域が、ヒトλ定常領域またはヒトκ定常領域である、本発明1029または本発明1030の結合分子。
[本発明1032]
感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、またはそれらの組み合わせにおいて発現するB型肝炎ウイルス（HBV）抗原に特異的に結合する少なくとも3個、少なくとも4個、少なくとも5個、少なくとも6個、少なくとも7個、少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、または少なくとも12個の抗原結合ドメインを含む、本発明1029〜1031のいずれかの結合分子。
[本発明1033]
少なくとも2個、少なくとも3個、少なくとも4個、少なくとも5個、または少なくとも6個、少なくとも7個、少なくとも8個、少なくとも9個、少なくとも10個、少なくとも11個、または少なくとも12個の抗原結合ドメインが同一である、本発明1032の結合分子。
[本発明1034]
前記HBV抗原が、感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、またはそれらの組み合わせにおいて、該HBV抗原が非感染性サブウイルス粒子上に発現するよりも高い密度で発現する、本発明1001〜1033のいずれかの結合分子。
[本発明1035]
前記HBV抗原が、B型肝炎表面抗原（HBsAg）、プレコア抗原、コア抗原、X-抗原、またはそれらの任意の組み合わせである、本発明1001〜1034のいずれかの結合分子。
[本発明1036]
前記HBV抗原がHBsAgであり、かつ、HBsAgが、S領域（S）；プレS2領域およびS領域；プレS1領域、プレS2領域、およびS領域；またはそれらの断片を含む、本発明1035の結合分子。
[本発明1037]
HBsAgが、プレS1領域、プレS2領域、およびS領域、またはそれらの断片を含む、本発明1036の結合分子。
[本発明1038]
それぞれVHおよびVLアミノ酸配列SEQ ID NO:1およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:2およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5およびSEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:8、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10およびSEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14およびSEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16およびSEQ ID NO:21、SEQ ID NO:17およびSEQ ID NO:22、SEQ ID NO:18およびSEQ ID NO:23、SEQ ID NO:19およびSEQ ID NO:24、SEQ ID NO:20およびSEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:27、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:28、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:29、SEQ ID NO:30およびSEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32およびSEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34およびSEQ ID NO:35、SEQ ID NO:34およびSEQ ID NO:36、SEQ ID NO:37およびSEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39およびSEQ ID NO:40、SEQ ID NO:41およびSEQ ID NO:42、SEQ ID NO:43およびSEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45およびSEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47およびSEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49およびSEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51およびSEQ ID NO:52、SEQ ID NO:62およびSEQ ID NO:6、SEQ ID NO:73およびSEQ ID NO:74、またはSEQ ID NO:75およびSEQ ID NO:76の、HCDR1、HCDR2、およびHCDR3領域、または1つもしくは2つの単一アミノ酸置換を含有するHCDR1、HCDR2、およびHCDR3領域、ならびにLCDR1、LCDR2、およびLCDR3領域、または1つもしくは2つの単一アミノ酸置換を含有するLCDR1、LCDR2、およびLCDR3領域を含む、本発明1001〜1037のいずれかの結合分子。
[本発明1039]
VHアミノ酸配列SEQ ID NO:12またはSEQ ID NO:13のHCDR1、HCDR2、およびHCDR3領域、または1つもしくは2つの単一アミノ酸置換を含有するHCDR1、HCDR2、およびHCDR3領域を含む、本発明1001〜1037のいずれかの結合分子。
[本発明1040]
前記少なくとも1つの抗原結合ドメインが、抗体重鎖可変領域（VH）および抗体軽鎖可変領域（VL）を含み、該VHおよび該VLが、それぞれ、SEQ ID NO:1およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:2およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4およびSEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5およびSEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:8、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10およびSEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14およびSEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16およびSEQ ID NO:21、SEQ ID NO:17およびSEQ ID NO:22、SEQ ID NO:18およびSEQ ID NO:23、SEQ ID NO:19およびSEQ ID NO:24、SEQ ID NO:20およびSEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:27、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:28、SEQ ID NO:26およびSEQ ID NO:29、SEQ ID NO:30およびSEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32およびSEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34およびSEQ ID NO:35、SEQ ID NO:34およびSEQ ID NO:36、SEQ ID NO:37およびSEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39およびSEQ ID NO:40、SEQ ID NO:41およびSEQ ID NO:42、SEQ ID NO:43およびSEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45およびSEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47およびSEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49およびSEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51およびSEQ ID NO:52、SEQ ID NO:62およびSEQ ID NO:6、SEQ ID NO:73およびSEQ ID NO:74、またはSEQ ID NO:75およびSEQ ID NO:76と少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%または100%同一であるアミノ酸配列を含む、本発明1001〜1037のいずれかの結合分子。
[本発明1041]
前記少なくとも1つの抗原結合ドメインが抗体VHを含み、該VHが、SEQ ID NO:12またはSEQ ID NO:13と少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%または100%同一のアミノ酸配列を含む、本発明1001〜1037のいずれかの結合分子。
[本発明1042]
アミノ酸配列SEQ ID NO:58を含むIgM重鎖およびアミノ酸配列SEQ ID NO:59を含む軽鎖を含む、本発明1001〜1041のいずれかの結合分子。
[本発明1043]
アミノ酸配列SEQ ID NO:63を含むIgM重鎖およびアミノ酸配列SEQ ID NO:59を含む軽鎖を含む、本発明1001〜1041のいずれかの結合分子。
[本発明1044]
HBV増殖の阻害、HBVクリアランスの増強、HBV感染力の制御、および／またはHBV成長の制御において、HBV結合抗原結合ドメインを含む参照単一結合ユニットよりも効力がある、本発明1001〜1042のいずれかの結合分子。
[本発明1045]
J鎖またはその機能的断片もしくはバリアントと、2つの重鎖および2つの軽鎖を各々が含む5つの結合ユニットとを含む、単離されたIgM抗体またはその断片であって、各重鎖またはその断片が、ヒトμ定常領域またはその断片、および重鎖可変領域アミノ酸配列SEQ ID NO:62を含み、かつ、各軽鎖が、ヒトκ定常領域および軽鎖可変領域アミノ酸配列SEQ ID NO:6を含み；前記抗体またはその断片が会合して、HBV表面抗原のプレS1領域に特異的に結合することができる五量体IgM抗体を形成することができる、前記単離されたIgM抗体またはその断片。
[本発明1046]
前記重鎖がアミノ酸配列SEQ ID NO:63を含み、かつ、前記軽鎖がアミノ酸配列SEQ ID NO:59を含む、本発明1045のIgM抗体またはその断片。
[本発明1047]
J鎖が、アミノ酸配列SEQ ID NO:54またはその機能的断片を含む、本発明1045または本発明1046のIgM抗体またはその断片。
[本発明1048]
J鎖またはその断片が、異種ポリペプチドをさらに含む修飾J鎖であり、該異種ポリペプチドが、該J鎖に直接的または間接的に融合されている、本発明1045〜1047のいずれかのIgM抗体またはその断片。
[本発明1049]
前記異種ポリペプチドが、ペプチドリンカーを介して前記J鎖またはその断片に融合されている、本発明1048のIgM抗体またはその断片。
[本発明1050]
前記ペプチドリンカーが、5個以上25個以下のアミノ酸を含む、本発明1049のIgM抗体またはその断片。
[本発明1051]
前記ペプチドリンカーが、
2018513680.tif 000002
からなる、本発明1050のIgM抗体またはその断片。
[本発明1052]
前記異種ポリペプチドが、前記J鎖もしくはその断片のN末端、該J鎖もしくはその断片のC末端、または該J鎖もしくはその断片のN末端およびC末端の両方に融合されている、本発明1049〜1051のいずれかのIgM抗体またはその断片。
[本発明1053]
前記異種ポリペプチドが結合ドメインを含む、本発明1048〜1052のいずれかのIgM抗体またはその断片。
[本発明1054]
前記異種ポリペプチドの前記結合ドメインが、抗体またはその抗原結合断片である、本発明1053のIgM抗体またはその断片。
[本発明1055]
前記抗原結合断片が、Fab断片、Fab'断片、F(ab')2断片、Fd断片、Fv断片、単鎖Fv（scFv）断片、ジスルフィド結合Fv（sdFv）断片、またはそれらの任意の組み合わせを含む、本発明1054のIgM抗体またはその断片。
[本発明1056]
前記抗原結合断片がscFv断片である、本発明1055のIgM抗体またはその断片。
[本発明1057]
前記異種ポリペプチドが、CD3εに特異的に結合することができる、本発明1053〜1056のいずれかのIgM抗体またはその断片。
[本発明1058]
前記修飾J鎖が、アミノ酸配列SEQ ID NO:68（V15J）またはSEQ ID NO:71（J15V）を含む、本発明1057のIgM抗体またはその断片。
[本発明1059]
前記修飾J鎖が、シグナルペプチドをさらに含む、本発明1058のIgM抗体またはその断片。
[本発明1060]
前記修飾J鎖が、アミノ酸配列SEQ ID NO:67（V15J）またはSEQ ID NO:70（J15V）を含む、本発明1059のIgM抗体またはその断片。
[本発明1061]
本発明1001〜1044のいずれかの結合分子または本発明1045〜1060のいずれかのIgM抗体を含む、組成物。
[本発明1062]
本発明1001〜1044のいずれかの結合分子または本発明1045〜1060のいずれかのIgM抗体のポリペプチドサブユニットをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドであって、該ポリペプチドサブユニットが、IgM重鎖定常領域と、感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、またはそれらの組み合わせにおいて発現するB型肝炎ウイルス（HBV）抗原に特異的に結合する抗体の結合ドメインの少なくとも抗体VH部分とを含む、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1063]
前記ポリペプチドサブユニットが、
（a）VHアミノ酸配列SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:73、またはSEQ ID NO:75の、HCDR1、HCDR2、およびHCDR3ドメイン、または1つもしくは複数のHCDR中に1つもしくは2つの単一アミノ酸置換を含有するHCDR1、HCDR2、およびHCDR3ドメイン；あるいは
（b）SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:73、またはSEQ ID NO:75と少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%または100%同一のアミノ酸配列
を含むVHドメインのC末端に融合された、ヒトIgAもしくはIgM定常領域またはその断片
を含む、本発明1062のポリヌクレオチド。
[本発明1064]
本発明1001〜1044のいずれかの結合分子または本発明1045〜1060のいずれかのIgM抗体のポリペプチドサブユニットをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドであって、該ポリペプチドサブユニットが、感染性ウイルス粒子の表面上、HBV感染細胞の表面上、またはそれらの組み合わせにおいて発現するB型肝炎ウイルス（HBV）抗原に特異的に結合する抗体の結合ドメインの抗体VL部分を含む、前記ポリヌクレオチド。
[本発明1065]
前記ポリペプチドサブユニットが、
（a）VLアミノ酸配列SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:74、またはSEQ ID NO:76の、LCDR1、LCDR2、およびLCDR3ドメイン、または1つもしくは複数のLCDRに1つもしくは2つの単一アミノ酸置換を含有するLCDR1、LCDR2、およびLCDR3ドメイン；または
（b）SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO: 8、SEQ ID NO: 9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:74、またはSEQ ID NO:76と少なくとも80%、少なくとも85%、少なくとも90%、少なくとも95%または100%同一のアミノ酸配列
を含むVLのC末端に融合された、ヒト抗体軽鎖定常領域またはその断片
を含む、本発明1064のポリヌクレオチド。
[本発明1066]
本発明1062または本発明1063のポリヌクレオチド、および本発明1064または本発明1065のポリヌクレオチドを含む、組成物。
[本発明1067]
前記ポリヌクレオチドが単一ベクター上に含有される、本発明1066の組成物。
[本発明1068]
前記ポリヌクレオチドが別々のベクター上に位置付けられている、本発明1066の組成物。
[本発明1069]
J鎖またはその断片もしくはそのバリアントをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチドをさらに含む、本発明1066〜1068のいずれかの組成物。
[本発明1070]
前記ポリヌクレオチドが単一ベクター上に位置付けられている、本発明1069の組成物。
[本発明1071]
前記ポリヌクレオチドが少なくとも2つの別々のベクター上に位置付けられている、本発明1069の組成物。
[本発明1072]
本発明1067または本発明1070のベクター。
[本発明1073]
本発明1068または本発明1071のベクター。
[本発明1074]
本発明1062〜1065のいずれかのポリヌクレオチド、本発明1066〜1071のいずれかの組成物、または本発明1072もしくは本発明1073のベクターを含む宿主細胞であって、本発明1001〜1044のいずれかの結合分子、またはそのサブユニットを発現することができる、前記宿主細胞。
[本発明1075]
本発明1001〜1044のいずれかの結合分子または本発明1045〜1060のいずれかのIgM抗体を産生する方法であって、本発明1074の宿主細胞を培養する工程、および該結合分子を回収する工程を含む、前記方法。
[本発明1076]
慢性感染細胞内でのB型肝炎ウイルス（HBV）の増殖、潜伏、または維持を制御する方法であって、HBVとHBV感受性細胞との混合物を本発明1001〜1044のいずれかの結合分子と接触させる工程を含み、該結合分子が、HBV抗原に特異的に結合する抗原結合ドメインを含む参照単一結合ユニット抗体よりも効力がある、前記方法。
[本発明1077]
患者におけるB型肝炎ウイルス（HBV）感染によって引き起こされたまたは悪化した疾患または状態を治療する方法であって、HBVに感染したまたはHBVに感染しやすい患者に本発明1001〜1044のいずれかの結合分子を投与する工程を含み、該結合分子が、HBV抗原に特異的に結合する抗原結合ドメインを含む参照単一結合ユニット抗体よりも効力がある、前記方法。
[本発明1078]
前記疾患または状態が、急性肝炎、慢性肝炎、肝臓炎、肝硬変、肝不全、肝細胞癌（HCC）、またはそれらの任意の組み合わせである、本発明1077の方法。
[本発明1079]
前記患者がHBV疾患症状を示し、該症状が、増加したウイルス負荷、ウイルス排出、腹痛、暗色尿、発熱、関節痛、食欲の喪失、吐き気および嘔吐、虚弱および疲労、黄疸、またはそれらの組み合わせである、本発明1077または本発明1078の方法。
[本発明1080]
慢性感染細胞内でのB型肝炎ウイルス（HBV）の増殖、潜伏、または維持を制御する方法であって、HBVとHBV感受性細胞との混合物を本発明1045〜1060のいずれかのIgM抗体と接触させる工程を含み、該IgM抗体が、2つの重鎖および2つの軽鎖を含む参照単一結合ユニット抗体よりも効力があり、各重鎖がVHアミノ酸配列SEQ ID NO:62を含み、各軽鎖がVLアミノ酸配列SEQ ID NO:6を含む、前記方法。
[本発明1081]
患者におけるB型肝炎ウイルス（HBV）感染によって引き起こされたまたは悪化した疾患または状態を治療する方法であって、HBVに感染したまたはHBVに感染しやすい患者に本発明1045〜1060のいずれかのIgM抗体を投与する工程を含み、該IgM抗体が、2つの重鎖および2つの軽鎖を含む参照単一結合ユニット抗体よりも効力があり、各重鎖がVHアミノ酸配列SEQ ID NO:62を含み、各軽鎖がVLアミノ酸配列SEQ ID NO:6を含む、前記方法。
[本発明1082]
前記疾患または状態が、急性肝炎、慢性肝炎、肝臓炎、肝硬変、肝不全、肝細胞癌（HCC）、またはそれらの任意の組み合わせである、本発明1081の方法。
[本発明1083]
前記患者がHBV疾患症状を示し、該症状が、増加したウイルス負荷、ウイルス排出、腹痛、暗色尿、発熱、関節痛、食欲の喪失、吐き気および嘔吐、虚弱および疲労、黄疸、またはそれらの組み合わせである、本発明1081または本発明1082の方法。
[本発明1084]
以下の工程を含む、非感染性ウイルス粒子に対するよりも高い親和性、高いアビディティ、またはそれらの組み合わせで、感染性ウイルス粒子の表面、ウイルス感染細胞の表面、またはそれらの組み合わせに結合する結合分子を同定するための方法：
（a）試験結合分子を感染性ウイルス粒子と接触させて、該感染性ウイルス粒子に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程；
（b）該試験結合分子を非感染性のウイルス粒子と接触させて、該非感染性粒子に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程；
（c）工程（a）と工程（b）の結果を比較する工程；および
（d）工程（a）で測定された該親和性または該アビディティが工程（b）で測定された該親和性または該アビディティより高い試験化合物を同定する工程。
[本発明1085]
以下の工程を含む、ウイルスに感染していない細胞に対するよりも高い親和性、高いアビディティ、またはそれらの組み合わせで、関心対象のウイルスに感染した細胞の表面に結合する結合分子を同定するための方法：
（a）試験結合分子をウイルス感染細胞と接触させて、該ウイルス感染細胞に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程；
（b）該試験結合分子をウイルスに感染していない細胞と接触させて、該非感染細胞に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程であって、該非感染細胞が、それが感染していないこと以外は該ウイルス感染細胞と同一である、工程；
（c）工程（a）と工程（b）の結果を比較する工程；および
（d）工程（a）で測定された該親和性または該アビディティが工程（b）で測定された該親和性または該アビディティより高い試験化合物を同定する工程。
[本発明1086]
以下の工程を含む、HBVサブウイルス粒子に対するよりも高い親和性、高いアビディティ、またはそれらの組み合わせで感染性B型肝炎ウイルス（HBV）ウイルス粒子の表面、HBV感染細胞の表面、またはそれらの組み合わせに結合する結合分子を同定するための方法：
（a）試験結合分子をHBVウイルス粒子と接触させて、該HBVウイルス粒子に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程；
（b）該試験結合分子をHBVサブウイルス粒子と接触させて、HBVサブウイルス粒子に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程；
（c）工程（a）と工程（b）の結果を比較する工程；および
（d）工程（a）で測定された該親和性または該アビディティが工程（b）で測定された該親和性または該アビディティより高い試験化合物を同定する工程。
[本発明1087]
以下の工程を含む、HBVに感染していない細胞に対するよりも高い親和性、高いアビディティ、またはそれらの組み合わせでB型肝炎ウイルス（HBV）に感染した細胞の表面に結合する結合分子を同定するための方法：
（a）試験結合分子をHBV感染細胞と接触させて、該HBV感染細胞に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程；
（b）該試験結合分子をHBVに感染していない細胞と接触させて、HBVに感染していない細胞に対する該試験結合分子の結合の親和性またはアビディティを測定する工程であって、該非感染細胞が、それが感染していないこと以外は該HBV感染細胞と同一である、工程；
（c）工程（a）と工程（b）の結果を比較する工程；および
（d）工程（a）で測定された該親和性または該アビディティが工程（b）で測定された該親和性または該アビディティより高い試験化合物を同定する工程。
[本発明1088]
前記HBV感染細胞がヒト細胞である、本発明1087の方法。
[本発明1089]
前記試験結合分子が、本発明1001〜1044の結合分子のいずれかである、本発明1087または1088の方法。