【手続補正書】
【提出日】平成31年2月20日(2019.2.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
眼細胞標的化ペプチドを含む改変アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質であって、前記標的化ペプチドは３〜１０のアミノ酸長であり、且つ前記標的化ペプチドはＡＡＶを眼細胞に標的化する前記カプシドタンパク質。
【請求項２】
前記標的化ペプチドが３、４、５、６または７のアミノ酸長である請求項１に記載のカプシドタンパク質。
【請求項３】
前記標的化ペプチドが、アミノからカルボキシへの方向、またはカルボキシからアミノへの方向で発現される、アミノ酸配列ＧＳＴＰＰＰＭ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １）またはアミノ酸配列ＧＥＴＲＡＰＬ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４）を有する１０以下のアミノ酸長の配列を含む請求項１に記載のカプシドタンパク質。
【請求項４】
前記標的化ペプチドが、アミノからカルボキシへの方向で、またはカルボキシからアミノへの方向で発現される、アミノ酸配列ＧＳＴＰＰＰＭ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １）またはアミノ酸配列ＧＥＴＲＡＰＬ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４）からなる請求項１に記載のカプシドタンパク質。
【請求項５】
前記標的化ペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ８の、Ｐ３４−Ａ３５、Ｔ１３８−Ａ１３９、Ａ１３９−Ｐ１４０、Ｇ４５３−Ｔ４５４、Ｎ５８７−Ｒ５８８及び／またはＲ５８８−Ｑ５８９の位置で、ＡＡＶ２カプシド残基の間に挿入される請求項１に記載のカプシドタンパク質。
【請求項６】
前記標的化ペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１の、Ｄ３８４、Ｇ３８５、Ｉ５６０、Ｔ５６１、Ｎ５６２、Ｅ５６３、Ｅ５６４、Ｅ５６５、Ｎ７０４及び／またはＹ７０５の位置で、ＡＡＶ９カプシド残基の後に挿入される請求項１に記載のカプシドタンパク質。
【請求項７】
前記標的化ペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０を含むかまたはそれからなる請求項１に記載のカプシドタンパク質。
【請求項８】
前記標的化ペプチドは罹患した眼細胞を標的とする請求項１または２に記載のカプシドタンパク質。
【請求項９】
前記標的化ペプチドは、網膜色素変性症、黄斑変性症、Ｌｅｂｅｒの先天性黒内障、早期発症重症網膜ジストロフィー、色覚異常、網膜分離症、眼白子症、眼皮膚白皮症、緑内障、シュタルガルト病、先天性脈絡膜欠如、加齢黄斑変性症、脊髄小脳失調症タイプ７（ＳＣＡＴ）、色盲、及びムコ多糖症（ＭＰＳ）ＩＶ及びＭＰＳ  ＶＩＩ等の角膜に影響を与えるリソソーム蓄積症、を有する被験体の眼細胞を標的とする、請求項８に記載のカプシドタンパク質。
【請求項１０】
前記ＡＡＶカプシドは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ−Ｒｈ７４（アカゲザル由来ＡＡＶ）、ＡＡＶＲｈ１０、またはこれらの血清型の改変カプシドである請求項１〜９のいずれか１項に記載のカプシドタンパク質。
【請求項１１】
前記ＡＡＶがＡＡＶ２カプシドである請求項１０に記載のカプシドタンパク質。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載のカプシドタンパク質をコードする核酸配列。
【請求項１３】
核酸配列ＧＧＧＴＣＧＡＣＧＣＣＧＣＣＴＣＣＴＡＴＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）を含む請求項１２に記載の核酸配列。
【請求項１４】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載のカプシドタンパク質を含有するＡＡＶウイルス。
【請求項１５】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載のカプシドタンパク質を含有するウイルスベクター。
【請求項１６】
前記ウイルスベクターが、さらに、目的の核酸をコードする核酸配列を含む請求項１５に記載のウイルスベクター。
【請求項１７】
前記目的の核酸が治療薬である請求項１６に記載のウイルスベクター。
【請求項１８】
前記治療薬が酵素またはＲＮＡｉ分子である請求項１７に記載のウイルスベクター。
【請求項１９】
前記治療薬が、アタキシン７  ｍｉｒＲＮＡ、網膜色素上皮特異的６５ｋＤａタンパク質（ＲＰＥ  ６５）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）阻害剤または可溶性ＶＥＧＦ受容体１（ｓＦｉｆ１）、（Ｒａｂエスコートタンパク質−１）ＲＥＰ１、Ｌ−オプシン、ロドプシン（Ｒｈｏ）、ホスホジエステラーゼ６（３（ＰＤＥ６Ｉ３）、ＡＴＰ結合カセット，サブファミリーＡ，メンバー４（ＡＢＣＡ４）、レシチンレチノールアシルトランスフェラーゼ（ＬＲＡＴ）、網膜変性，遅い／ペリフェリン（ＲＤＳ／ペリフェリン）、チロシンタンパク質キナーゼＭｅｒ（ＭＥＲＴＫ）、イノシン−５プライムモノホスフェートデヒドロゲナーゼ，Ｉ型（ＩＭＰＤＨＩ）、グアニル酸シクラーゼ２Ｄ（ＧＵＣＹ２Ｄ）、アリール−炭化水素相互作用タンパク質様１（ＡＩＰＬ１）、網膜色素変性ＧＴＰアーゼレギュレーター相互作用タンパク質１（ＲＰＧＲＩＰＩ）、イノシン−５−プライムモノホスフェートデヒドロゲナーゼ，Ｉ型（ＩＭＰＤＨ１グアニンヌクレオチド結合タンパク質、アルファト形質導入活性ポリペプチド２（ＧＮＡＴ２）、環状ヌクレオチド依存性チャネルベータ３（ＣＮＧＢ３）、レチノサチシン１（Ｒｓ１）、眼球白内障１型（ＯＡ１）、眼皮膚白皮症型１（ＯＣＡ１）チロシナーゼ、Ｐ２１  ＷＡＦ−１／Ｃｉｐｌ、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、エンドスタチンアンギオスタチン、アリールスルファターゼＢ、または１３−グルクロニダーゼである請求項１７に記載のウイルスベクター。
【請求項２０】
請求項１４に記載のＡＡＶウイルスまたは請求項１５〜１９のいずれかに１項に記載のウイルスベクター及び担体を含む組成物。
【請求項２１】
請求項１４に記載のＡＡＶウイルスまたは請求項１５〜１９のいずれかに１項に記載のウイルスベクター及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２２】
請求項１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターによって形質導入された、またはそれを含む細胞。
【請求項２３】
前記細胞が哺乳動物細胞である請求項２２に記載の細胞。
【請求項２４】
前記細胞がヒト細胞である請求項２３に記載の細胞。
【請求項２５】
前記細胞が非哺乳動物細胞である請求項２３に記載の細胞。
【請求項２６】
前記細胞がインビトロであり、前記任意に細胞が眼細胞である請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の細胞。
【請求項２７】
前記細胞がインビボであり、任意に前記細胞が眼細胞である請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の細胞。
【請求項２８】
哺乳動物の眼疾患を治療するための、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターまたは請求項２２〜２７のいずれか１項に記載の細胞を含む組成物。
【請求項２９】
前記哺乳動物がヒトである請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記疾患が、網膜色素変性症、黄斑変性症、Ｌｅｂｅｒの先天性黒内障、早期発症重症網膜ジストロフィー、色覚異常、網膜分離症、眼白子症、眼皮膚白皮症、緑内障、シュタルガルト病、先天性脈絡膜欠如、加齢黄斑変性症、ＳＣＡＴ、色盲、またはＭＰＳ  ＩＶ及びＭＰＳ  ＶＩＩ等の角膜に影響を与えるリソソーム蓄積症である請求項２８または２９に記載の組成物。
【請求項３１】
請求項１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターを含む、被験体の眼への薬剤の送達のための組成物であって、眼細胞は前記組成物を形質導入されることを特徴とし、前記形質導入された眼細胞が前記治療薬を発現し、前記組成物が前記被験体の眼に送達される、組成物。
【請求項３２】
前記細胞が形質導入された眼細胞であり、前記形質導入された眼細胞が、網膜外網状層（ＯＰＬ）内にあるか、それを含む請求項２８に記載の組成物。
【請求項３３】
医学的処置または診断に使用するための、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターを含む組成物。
【請求項３４】
哺乳動物の眼疾患を治療するために有用な医薬を調製するための、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターの使用。
【請求項３５】
医学的処置または診断に使用するための、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の細胞を含む組成物。
【請求項３６】
哺乳動物の眼疾患を治療するために有用な医薬を調製するための、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の細胞の使用。
【請求項３７】
哺乳動物の眼疾患の予防的または治療的処置に使用するための、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターを含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４１】
本発明を実施するために本発明者らに知られている最良の形態を含む本発明の実施形態が本明細書に記載されている。これらの実施形態の変形は、前述の説明を読むことにより当業者には明らかになるであろう。本発明者らは、当業者がこのような変形を適切に使用することを期待しており、本発明者らは本発明が本明細書に具体的に記載されたものとは別の方法で実施されることを意図する。従って、本発明は、適用法によって許容されるように、本明細書に添付された特許請求の範囲に記載された主題のすべての改変及び均等物を含む。さらに、本明細書中で他に指示されない限り、または文脈によって明らかに否定されない限り、それらのすべての可能な変形での上述の要素の任意の組合せが本発明に包含される。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
眼細胞標的化ペプチドを含む改変アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質であって、前記標的化ペプチドは３〜１０のアミノ酸長であり、且つ前記標的化ペプチドはＡＡＶを眼細胞に標的化する前記カプシドタンパク質。
（項目２）
前記標的化ペプチドが３、４、５、６または７のアミノ酸長である項目１に記載のカプシドタンパク質。
（項目３）
前記標的化ペプチドが、アミノからカルボキシへの方向、またはカルボキシからアミノへの方向で発現される、アミノ酸配列ＧＳＴＰＰＰＭ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １）またはアミノ酸配列ＧＥＴＲＡＰＬ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４）を有する１０以下のアミノ酸長の配列を含む項目１に記載のカプシドタンパク質。
（項目４）
前記標的化ペプチドが、アミノからカルボキシへの方向で、またはカルボキシからアミノへの方向で発現される、アミノ酸配列ＧＳＴＰＰＰＭ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  １）またはアミノ酸配列ＧＥＴＲＡＰＬ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ４）からなる項目１に記載のカプシドタンパク質。
（項目５）
前記標的化ペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：  ８の、Ｐ３４−Ａ３５、Ｔ１３８−Ａ１３９、Ａ１３９−Ｐ１４０、Ｇ４５３−Ｔ４５４、Ｎ５８７−Ｒ５８８及び／またはＲ５８８−Ｑ５８９の位置で、ＡＡＶ２カプシド残基の間に挿入される項目１に記載のカプシドタンパク質。
（項目６）
前記標的化ペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１の、Ｄ３８４、Ｇ３８５、Ｉ５６０、Ｔ５６１、Ｎ５６２、Ｅ５６３、Ｅ５６４、Ｅ５６５、Ｎ７０４及び／またはＹ７０５の位置で、ＡＡＶ９カプシド残基の後に挿入される項目１に記載のカプシドタンパク質。
（項目７）
前記標的化ペプチドが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０を含むかまたはそれからなる項目１に記載のカプシドタンパク質。
（項目８）
前記標的化ペプチドは罹患した眼細胞を標的とする項目１または２に記載のカプシドタンパク質。
（項目９）
前記標的化ペプチドは、網膜色素変性症、黄斑変性症、Ｌｅｂｅｒの先天性黒内障、早期発症重症網膜ジストロフィー、色覚異常、網膜分離症、眼白子症、眼皮膚白皮症、緑内障、シュタルガルト病、先天性脈絡膜欠如、加齢黄斑変性症、脊髄小脳失調症タイプ７（ＳＣＡＴ）、色盲、及びムコ多糖症（ＭＰＳ）ＩＶ及びＭＰＳ  ＶＩＩ等の角膜に影響を与えるリソソーム蓄積症、を有する被験体の眼細胞を標的とする、項目８に記載のカプシドタンパク質。
（項目１０）
前記ＡＡＶカプシドは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ−Ｒｈ７４（アカゲザル由来ＡＡＶ）、ＡＡＶＲｈ１０、またはこれらの血清型の改変カプシドである項目１〜９のいずれか１項に記載のカプシドタンパク質。
（項目１１）
前記ＡＡＶがＡＡＶ２カプシドである項目１０に記載のカプシドタンパク質。
（項目１２）
項目１〜１１のいずれか１項に記載の前記改変カプシドをコードする核酸配列。
（項目１３）
核酸配列ＧＧＧＴＣＧＡＣＧＣＣＧＣＣＴＣＣＴＡＴＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）を含む項目１２に記載の核酸配列。
（項目１４）
項目１〜１１のいずれか１項に記載のカプシドタンパク質を含有するＡＡＶウイルス。
（項目１５）
項目１〜１１のいずれか１項に記載のカプシドタンパク質を含有するウイルスベクター。
（項目１６）
前記ウイルスベクターが、さらに、目的の核酸をコードする核酸配列を含む項目１５に記載のウイルスベクター。
（項目１７）
前記目的の核酸が治療薬である項目１６に記載のウイルスベクター。
（項目１８）
前記治療薬が酵素またはＲＮＡｉ分子である項目１７に記載のウイルスベクター。
（項目１９）
前記治療薬が、アタキシン７  ｍｉｒＲＮＡ、網膜色素上皮特異的６５ｋＤａタンパク質（ＲＰＥ  ６５）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）阻害剤または可溶性ＶＥＧＦ受容体１（ｓＦｉｆ１）、（Ｒａｂエスコートタンパク質−１）ＲＥＰ１、Ｌ−オプシン、ロドプシン（Ｒｈｏ）、ホスホジエステラーゼ６（３（ＰＤＥ６Ｉ３）、ＡＴＰ結合カセット，サブファミリーＡ，メンバー４（ＡＢＣＡ４）、レシチンレチノールアシルトランスフェラーゼ（ＬＲＡＴ）、網膜変性，遅い／ペリフェリン（ＲＤＳ／ペリフェリン）、チロシンタンパク質キナーゼＭｅｒ（ＭＥＲＴＫ）、イノシン−５プライムモノホスフェートデヒドロゲナーゼ，Ｉ型（ＩＭＰＤＨＩ）、グアニル酸シクラーゼ２Ｄ（ＧＵＣＹ２Ｄ）、アリール−炭化水素相互作用タンパク質様１（ＡＩＰＬ１）、網膜色素変性ＧＴＰアーゼレギュレーター相互作用タンパク質１（ＲＰＧＲＩＰＩ）、イノシン−５−プライムモノホスフェートデヒドロゲナーゼ，Ｉ型（ＩＭＰＤＨ１グアニンヌクレオチド結合タンパク質、アルファト形質導入活性ポリペプチド２（ＧＮＡＴ２）、環状ヌクレオチド依存性チャネルベータ３（ＣＮＧＢ３）、レチノサチシン１（Ｒｓ１）、眼球白内障１型（ＯＡ１）、眼皮膚白皮症型１（ＯＣＡ１）チロシナーゼ、Ｐ２１  ＷＡＦ−１／Ｃｉｐｌ、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、エンドスタチンアンギオスタチン、アリールスルファターゼＢ、または１３−グルクロニダーゼである項目１７に記載のウイルスベクター。
（項目２０）
項目１４に記載のＡＡＶウイルスまたは項目１５〜１９のいずれかに１項に記載のウイルスベクター及び担体を含む組成物。
（項目２１）
項目１４に記載のＡＡＶウイルスまたは項目１５〜１９のいずれかに１項に記載のウイルスベクター及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
（項目２２）
項目１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターによって形質導入された、またはそれを含む細胞。
（項目２３）
前記細胞が哺乳動物細胞である項目２２に記載の細胞。
（項目２４）
前記細胞がヒト細胞である項目２３に記載の細胞。
（項目２５）
前記細胞が非哺乳動物細胞である項目２３に記載の細胞。
（項目２６）
前記細胞がインビトロであり、前記任意に細胞が眼細胞である項目２２〜２５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目２７）
前記細胞がインビボであり、任意に前記細胞が眼細胞である項目２２〜２５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目２８）
項目１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターまたは項目２２〜２７のいずれか１項に記載の細胞を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物の眼疾患を治療する方法。
（項目２９）
前記哺乳動物がヒトである項目２８に記載の方法。
（項目３０）
前記疾患が、網膜色素変性症、黄斑変性症、Ｌｅｂｅｒの先天性黒内障、早期発症重症網膜ジストロフィー、色覚異常、網膜分離症、眼白子症、眼皮膚白皮症、緑内障、シュタルガルト病、先天性脈絡膜欠如、加齢黄斑変性症、ＳＣＡＴ、色盲、またはＭＰＳ  ＩＶ及びＭＰＳ  ＶＩＩ等の角膜に影響を与えるリソソーム蓄積症である項目２８または２９に記載の方法。
（項目３１）
項目１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターで眼細胞を形質導入して、形質導入された眼細胞が治療薬を発現し、薬剤を被験体の眼に送達することを含む、被験体の眼に薬剤を送達する方法。
（項目３２）
前記形質導入された眼細胞が、網膜外網状層（ＯＰＬ）内にあるか、それを含む項目２８に記載の方法。
（項目３３）
医学的処置または診断に使用するための、項目１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクター。
（項目３４）
哺乳動物の眼疾患を治療するために有用な医薬を調製するための、項目１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクターの使用。
（項目３５）
医学的処置または診断に使用するための、項目２２〜２５のいずれか１項に記載の細胞。
（項目３６）
哺乳動物の眼疾患を治療するために有用な医薬を調製するための、項目２２〜２５のいずれか１項に記載の細胞の使用。
（項目３７）
哺乳動物の眼疾患の予防的または治療的処置に使用するための、項目１５〜１９のいずれか１項に記載のウイルスベクター。