(57)【要約】  粉体流動性及び溶解速度に優れた粉末フマル酸製剤を提供することを課題とし、フマル酸、親水性ノニオン系界面活性剤、及び、フマル酸に対して無水物換算で０．５質量％以上１０．０質量％未満の非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを含み、フマル酸が、親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールで被覆されていることを特徴とする粉末フマル酸製剤とその製造方法を提供することによって上記課題を解決する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分としてフマル酸を含有する粉末フマル酸製剤の製造方法であって、下記（１）乃至（３）の工程を含んでなる製造方法:
（１）フマル酸粉末、親水性ノニオン系界面活性剤、及び、フマル酸に対し、無水物換算で、０．５質量％以上１０．０質量％未満の非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶媒の存在下で混合し、フマル酸含有湿混合物を得る工程；
（２）得られたフマル酸含有湿混合物を乾燥させ、フマル酸粒子が、親水性ノニオン系界面活性剤、及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールで被覆されたフマル酸含有粒状組成物を得る工程；及び
（３）得られたフマル酸含有粒状組成物を必要に応じて粉砕、分級し、粉末フマル酸製剤とする工程。
【請求項２】
前記工程（１）において、フマル酸に対し、非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶媒存在下で混合した後に、親水性ノニオン系界面活性剤を添加、混合することを特徴とする請求項１記載の粉末フマル酸製剤の製造方法。
【請求項３】
前記非還元性二糖がトレハロースであり、前記二糖以下の糖アルコールが、ソルビトール及びマルチトールのいずれかであることを特徴とする請求項１又は２記載の粉末フマル酸製剤の製造方法。
【請求項４】
前記工程（１）において、混合する親水性ノニオン系界面活性剤の量が、フマル酸に対して、無水物換算で、０．１乃至３．０質量％であることを特徴とする請求項１乃至３のいずれかに記載の粉末フマル酸製剤の製造方法。
【請求項５】
前記工程（１）において、混合する親水性ノニオン系界面活性剤が、ポリグリセリン脂肪酸エステルであることを特徴とする請求項１乃至４記載の粉末フマル酸製剤の製造方法。
【請求項６】
前記工程（１）において、混合に用いる溶媒の量が、フマル酸に対して５０質量％以上であることを特徴とする請求項１乃至５のいずれかに記載の粉末フマル酸製剤の製造方法。
【請求項７】
前記（１）乃至（３）のいずれかの工程において、さらにフマル酸以外の有機酸、その誘導体又はそれらの塩を混合するか、又は、得られた粉末製剤にフマル酸以外の有機酸、その誘導体又はそれらの塩を混合することを特徴とする請求項１乃至６のいずれかに記載の粉末フマル酸製剤の製造方法。
【請求項８】
フマル酸、親水性ノニオン系界面活性剤、及び、フマル酸に対して無水物換算で０．５質量％以上１０．０質量％未満の非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを含み、フマル酸粒子が、前記親水性ノニオン系界面活性剤及び前記非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールで被覆されている粉末フマル酸製剤。
【請求項９】
前記非還元性二糖がトレハロースであり、前記二糖以下の糖アルコールが、ソルビトール及びマルチトールのいずれかであることを特徴とする請求項８記載の粉末フマル酸製剤。
【請求項１０】
前記親水性ノニオン系界面活性剤の含量が、フマル酸に対して、０．１乃至３．０質量％であることを特徴とする請求項８又は９記載の粉末フマル酸製剤。
【請求項１１】
前記親水性ノニオン系界面活性剤が、ポリグリセリン脂肪酸エステルであることを特徴とする請求項８乃至１０のいずれかに記載の粉末フマル酸製剤。
【請求項１２】
フマル酸以外の有機酸をさらに含有してなる請求項８乃至１１のいずれかに記載の粉末フマル酸製剤。
【請求項１３】
前記フマル酸以外の有機酸が、フマル酸の質量に対して２乃至１２倍量であることを特徴とする請求項１２記載の粉末フマル酸製剤。
【請求項１４】
前記フマル酸以外の有機酸が、アスコルビン酸であることを特徴とする請求項１２又は１３記載の粉末フマル酸製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フマル酸を有効成分として含む粉末フマル酸製剤の製造方法と、当該製造方法で得られる粉末フマル酸製剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
フマル酸は、酢酸、蓚酸に次ぐ強さの酸味を有する有機酸であり、その酸味の強さは、果汁飲料などに広く用いられているクエン酸やリンゴ酸の約１．５倍と言われている。また、酢酸及び蓚酸が揮発性であるのに対し、フマル酸は不揮発性であり、蓚酸が生理的に有害であるのに対し、フマル酸は無害であるという特徴を有している。さらに、フマル酸は比較的安価であり、且つ、除菌力が強いため、従来から主として酸味料などの食品添加物や食品の保存料として広く用いられている。しかしながら、フマル酸は、水に対する溶解度が非常に低く（２５℃の水に対する溶解度が０．６３ｇ／１００ｍｌ）、溶解速度が遅いため、短時間で水に分散溶解させることが困難である。このため、フマル酸を有効成分とする酸味料、保存料、除菌剤などの溶液状のフマル酸製剤の調製作業は効率が悪く、多大な労力を要するのが常であった。【０００３】
この欠点を改善すべく、フマル酸の水への溶解速度を改善する技術として、例えば、特許文献１には、フマル酸を含む疎水性粉末にポリグリセリン脂肪酸エステルを混合坦持させることが提案されている。また、特許文献２には、フマル酸の粒子を親水性ノニオン系界面活性剤で被覆することにより溶解速度の改善を図った除菌洗浄剤が開示されている。更に、特許文献３には、三糖類以上の多糖類を７５重量％含んでなる低デキストロース当量のマル卜デキストリン湿潤剤をフマル酸に対して２．５〜１０重量％含有させたフマル酸製剤が冷水中において高い溶解速度を示すことが開示され、また、特許文献４には、微粉末フマル酸と界面活性剤との均密混合物中に助剤としてグルコース又はスクロースを配合することを特徴とする溶解速度の改善されたフマル酸含有組成物の製造方法がそれぞれ開示されている。しかしながら、本発明者らが独自に得た知見によれば、特許文献１乃至４に示された方法の内、特許文献１及び２記載の方法では、フマル酸粒子の表面をポリグリセリン脂肪酸エステルやショ糖脂肪酸エステルなどで被膜するため、得られるフマル酸製剤が、これら界面活性剤の影響で凝集、固結しやすいという問題がある。一方、特許文献３記載の方法では、フマル酸製剤の分散溶解性が十分ではなく、さらに、特許文献４記載の方法では、粉末フマル酸と界面活性剤との混合物に、助剤としてグルコースやスクロースなどの糖をフマル酸に対して少なくとも１０質量％以上混合させることが必要であり、フマル酸に対し比較的多量の糖質を用いるため、製剤中のフマル酸の含量が少なくなり除菌効果などのフマル酸本来の作用効果が低下するという問題があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特公昭６２−１９１４６号公報
【特許文献２】特開２００３−１４７３９２号公報
【特許文献３】特公昭５７−５４１１０号公報
【特許文献４】特公昭４２−２２１８４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、上記従来技術が持つ欠点を解決するために為されたもので、水などの溶媒に対して優れた溶解性を示し、製造工程において凝集、固結し難く、調製作業が容易であるとともに、除菌効果などのフマル酸本来の作用効果を満足できるレベルで保持している粉末フマル酸製剤の製造方法、及び、当該製造方法により得られる粉末フマル酸製剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題の解決策を検討する過程で、フマル酸粒子の表面をグリセリン脂肪酸エステルなどの親水性ノニオン系界面活性剤を被覆するという特許文献１又は２に開示された方法で粉末フマル製剤を調製すると、フマル酸粉末の溶解速度は向上するものの、製造工程で粉末フマル酸製剤が凝集して篩の通過性が低下し、粉末製剤の製造における作業性が低下し、最終製品としての粉末フマル酸製剤の収率が著しく低下することを見出した。さらに、本発明者らは、特許文献４の開示にしたがって、フマル酸粒子の表面を親水性ノニオン系界面活性剤及び糖質で被覆すると、粉体流動性及び水への分散溶解性に優れた粉末フマル酸製剤が得られるものの、製造工程中で組成物全体が固化、固結し、その後の粉末化の工程に大きな負担を与えるという従来知られていない新たな課題が存在することを見出した。これらの知見に基づいて更に検討を加えたところ、粉末フマル酸製剤の製造において添加する糖質の量をフマル酸に対して無水物換算で０．５質量％以上１０質量％未満の範囲に調整すると、製剤の製造工程（乾燥工程）において粒状組成物が強固に固結することなく、容易に粉末フマル酸製剤が製造できることを見出し、本発明の製造方法を確立した。【０００７】
すなわち、本発明は、有効成分としてフマル酸を含有する粉末フマル酸製剤の製造方法であって、
（１）フマル酸粉末、親水性ノニオン系界面活性剤、及び、フマル酸粉末に対し、無水物換算で、０．５質量％以上１０．０質量未満％の非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶媒の存在下で混合し、フマル酸含有湿混合物を得る工程；
（２）得られたフマル酸含有湿混合物を乾燥させ、フマル酸粒子が親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールで被覆されたフマル酸含有粒状組成物を得る工程；及び
（３）得られたフマル酸含有粒状組成物を必要に応じて粉砕、分級し、粉末フマル酸製剤とする工程；
を含む粉末フマル酸製剤の製造方法を提供することによって上記の課題を解決するものである。【０００８】
さらに、本発明は、上記の製造方法によって製造された粉末フマル酸製剤を提供することによって上記の課題を解決するものであり、上記製造方法によって製造された粉末フマル酸製剤は、水などの溶媒に対する溶解性、特に溶解速度に優れているとともに、有効成分であるフマル酸を、フマル酸本来の作用効果が十分に満足されるレベルで発揮される濃度で含んでおり、さらには、凝集、固結し難いので、保存や流通過程においても、粉末としての流動性を安定して保持するという特徴を有している。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の製造方法によれば、有効成分であるフマル酸本来の除菌効果などを満足できるレベルで保持しつつ、安定した粉体流動性と優れた溶解速度を有する粉末フマル酸製剤を工業的に容易かつ大量、安価に安定して提供することができる。また、本発明の製造方法により得られる粉末フマル酸製剤は、粉体流動性及び溶解速度に優れる高品質の粉末フマル酸製剤である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、有効成分としてフマル酸を含有する粉末フマル酸製剤の製造方法であって、下記（１）乃至（３）の工程を含んでなる製造方法に係るものである:
（１）フマル酸粉末、親水性ノニオン系界面活性剤、及び、フマル酸粉末に対し、無水物換算で、０．５質量％以上１０．０質量未満％の非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶媒の存在下で混合し、フマル酸含有湿混合物を得る工程；
（２）得られたフマル酸含有湿混合物を乾燥させ、フマル酸粒子が親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールで被覆されたフマル酸含有粒状組成物を得る工程；及び
（３）得られたフマル酸含有粒状組成物を必要に応じて粉砕、分級し、粉末フマル酸製剤とする工程。
【００１１】
＜本発明の粉末フマル酸製剤の製造方法＞
本発明の粉末フマル酸製剤の製造方法について、その概要を述べるならば、フマル酸粉末に、親水性ノニオン系界面活性剤と非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶媒の存在下で、均一に混合することにより、フマル酸粒子を親水性ノニオン系界面活性剤と非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールとで被覆した後、乾燥させることにより溶媒を除去し、得られる粒状組成物を必要に応じて粉砕、分級して粉末フマル酸製剤を製造する方法である。
【００１２】
本発明の製造方法において、原料として用いるフマル酸粉末は、市販のものを用いることができる。市販されているフマル酸粉末は、通常、白色の結晶性の粉末で、においがなく、強い酸味を有している。市販のフマル酸粉末としては、例えば、日本触媒株式会社販売の商品名『フマル酸』、扶桑工業株式会社販売の商品名『フマル酸』などが使用できる。製剤の有効成分として用いるフマル酸の粒度には特に限定はないが、粒度が小さい程、水に対する分散性、溶解速度が向上する。従って、原料とする市販のフマル酸の粒度が比較的大きい場合には、予め粉砕し、フマル酸の粒度を、通常、１５０μｍ以下、望ましくは７５μｍ以下に調整するのが好適である。フマル酸の粒度が１５０μｍを超えると水に対する溶解速度が低下する傾向がある。
【００１３】
本発明の製造方法においてフマル酸粉末に添加する界面活性剤としては、ノニオン系界面活性剤が好ましく、フマル酸粒子の表面を被覆して、水に対するフマル酸の分散性、溶解速度を向上させる点から、親水性のノニオン系界面活性剤が親油性のノニオン系界面活性剤よりも好ましい。親水性ノニオン系界面活性剤としては、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステルなどが挙げられ、とりわけ、ポリグリセリン脂肪酸エステルがフマル酸の溶解速度の改善効果が高いため好適である。また、親水性ノニオン系界面活性剤としては、親水／親油バランス（Ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｅ−Ｌｉｐｏｐｈｉｌｅ  Ｂａｌａｎｃｅ、以下、「ＨＬＢ」と略称する。ＨＬＢは、０から２０までの値を取り、０に近いほど親油性が高く２０に近いほど親水性が高くなる。）が１４乃至１８の範囲のものを使用することが好ましく、ＨＬＢが１４乃至１８の範囲の親水性ノニオン系界面活性剤を使用する場合には、水に対するフマル酸の溶解速度の改善効果が最も高くなるという利点が得られる。また、上述の親水性ノニオン系界面活性剤は、いずれも食品添加物として指定されている安全な物質であるので、これを添加しても、得られる本発明の粉末フマル酸製剤を例えば食品用の除菌洗浄剤として利用することを妨げないという利点も有している。
【００１４】
本発明の製造方法において、フマル酸粒子の被覆に用いる親水性ノニオン系界面活性剤の添加量は、水に対するフマル酸の分散性、溶解速度を向上させる限り特に制限はなく、フマル酸粉末に対して、無水物換算で、通常、０．１乃至３．０質量％、望ましくは０．３乃至１．０質量％、より望ましくは０．５質量％程度とするのが好適である。親水性ノニオン系界面活性剤の添加量が多い程、粉末フマル酸製剤の溶解速度の改善効果に優れ、通常、０．１質量％以上であれば十分な効果が得られる。一方、添加量が多くなりすぎると、フマル酸粒子が凝集し易くなるという不都合が生じるので、親水性ノニオン系界面活性剤の添加量は３．０質量％以下とするのが好ましい。
【００１５】
本発明の製造方法において、フマル酸粒子の被覆に用いる糖質としては、非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールが挙げられる。非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールの中では、粉末フマル酸製剤の凝集性、篩通過性の改善効果の観点から、トレハロース、ソルビトール、マルチトールが好ましい。トレハロース、ソルビトール又はマルチトールを用いることにより、粉末フマル酸製剤中のフマル酸の水に対する溶解速度を向上させるとともに、粉末フマル酸製剤の凝集性、篩通過性を改善することができる。ここで、トレハロース、ソルビトール及びマルチトールは、いずれも還元性のアルデヒド基を有しておらず反応性が低いため、得られる粉末フマル酸製剤が着色し難いという利点も有している。
【００１６】
本発明の製造方法において、フマル酸粒子の被覆に用いる非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールの添加量は、フマル酸に対して、無水物換算で、通常、０．５質量％以上１０．０質量％未満とするのが好ましく、１．０乃至５．０質量％がより好ましい。非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールの添加量が１０．０質量％以上になると、製造工程において親水性ノニオン系界面活性剤及び上記糖質により被覆されたフマル酸粒子がブロック状に固化、固結し易く、粉砕が困難となり、製造における作業効率が低下するという不都合がある。また、非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールの添加量が０．５質量％未満になると粉末フマル酸製剤の凝集性、篩通過性の改善効果が得られ難い。
【００１７】
本発明の製造方法において、フマル酸含有湿混合物を得るために用いられる溶媒は、親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶解するものであれば特に限定はないが、得られる粉末フマル酸製剤を食品用の除菌洗浄剤などとして使用することを考慮すると、水又はエチルアルコールを用いるのが好ましく、水を用いるのがさらに好ましい。
【００１８】
本発明の製造方法において、用いる溶媒の量は、添加される親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶解する量であれば特に限定はないが、フマル酸に対して、通常、５０質量％以上であることが好ましく、８０質量％以上がより好ましい。用いる溶媒の量が５０質量％未満になると、混合時のフマル酸含有湿混合物の流動性が著しく低下し、混合作業に大きな負荷が掛かることから、均一な混合が困難になり、作業性が悪くなるので望ましくない。一方、用いる溶媒の量が多すぎると、フマル酸含有湿混合物を乾燥させ、溶媒を除去する工程で時間やエネルギーを多く必要とするため、コストを抑え作業効率を上げる上では、フマル酸に対して、３００質量％以下が好ましく、２００質量％以下がより好ましい。
【００１９】
本発明の製造方法では、フマル酸粉末に親水性ノニオン系界面活性剤溶液及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコール溶液を混合した後、溶媒を除去することにより、フマル酸粉末粒子を親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールで被覆する。この時、もしも使用するフマル酸粉末の粒径が大きすぎる場合には、親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを添加混合する前に、ミキサーなどにより予め１５０μｍ以下、より好ましくは７５μｍ以下程度に粉砕しておくことが好ましい。
【００２０】
フマル酸粉末に親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶媒の存在下で混合する工程は、それら三者を溶媒の存在下で同時に混合することによって行ってもよいが、フマル酸粉末に対し、適量の溶媒の存在下で、まず非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを混合した後、親水性ノニオン系界面活性剤を、さらに混合することによって行うのがより好ましい。これにより、フマル酸粒子の表面がまず、非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールにより被覆され、さらに親水性ノニオン系界面活性剤により被覆されるため、フマル酸含有粒状組成物の水に対する溶解速度の改善効果が向上する。
【００２１】
本発明の製造方法において、フマル酸粉末、親水性ノニオン系界面活性剤と非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶媒の存在下で混合する工程は、どのような手段を用いて行っても良く特に制限されないが、例えば、ブレンダー、ホモジナイザー、泡立て器、ペーストミキサー、ニーダー、エクストルーダー、混合撹拌機などの斯界で汎用される適宜の混合手段を用いて行うことができる。混合時の条件は、フマル酸粉末粒子が親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールにより被覆される条件であれば特に制限されず、必要に応じて加熱条件下で混合することもできる。
【００２２】
本発明の製造方法において、フマル酸粉末と親水性ノニオン系界面活性剤と非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを混合した後に得られる湿混合物から溶媒を乾燥し、除去することによりフマル酸含有粒状組成物とする工程は、どのような手段を用いて行っても良く特に限定されないが、例えば、噴霧乾燥法、ドラム乾燥法、減圧乾燥法、加熱乾燥法、凍結乾燥法などの斯界で汎用される適宜の手段を用いて行うことができる。乾燥条件は溶媒の種類などにより異なるが、溶媒が例えば水の場合には、減圧下、７０〜１００℃程度に加熱して減圧乾燥により除去するのがコストを抑え効率を上げる上で望ましい。
【００２３】
本発明の製造方法は、乾燥して得られたフマル酸含有粒状組成物を必要に応じて粉砕する工程を含んでいる。すなわち、得られたフマル酸含有粒状組成物の粒度が、粉末フマル酸製剤として求められる粒度条件を満たしていれば、乾燥して得られたフマル酸含有粒状組成物をそのまま粉末フマル酸製剤とすることができるが、得られたフマル酸含有粒状組成物の粒度が、粉末フマル酸製剤として求められる粒度よりも大きい場合には、これを適宜粉砕すれば良い。粉砕手段は、特に限定されないが、例えば、乳鉢、ミル、微粉砕機、アトマイザーなどの斯界で汎用される適宜の粉砕手段を用いて行うことができる。因みに、フマル酸粉末に対する非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールの添加量が無水物換算で１０質量％以上の場合には、フマル酸含有粒状組成物の全体が、強固に固化（ブロック化）、固結するため粉砕が困難となるが、本発明の製造方法においては、前記糖質の添加量が少ないため、そのような粉砕に関する問題は発生しない。
【００２４】
さらに、本発明の製造方法は、乾燥して得られたフマル酸含有粒状組成物若しくはその粉砕物を、必要に応じて分級し、粉末フマル酸製剤に求められる粒度分布に調整する工程を含んでいる。分級手段は、特に限定されないが、例えば、金網、試験用篩、振動篩、超音波振動篩などの斯界で汎用される適宜の分級手段を用いて行うことができる。水に対するフマル酸の分散性、溶解速度は、製剤の粒子の大きさも関係するため、分級により粒径を、通常、５００μｍ以下、望ましくは３００μｍ以下に調整するのが好適である。
【００２５】
＜本発明の粉末フマル酸製剤＞
本発明は、上述した本発明の製造方法によって製造される粉末フマル酸製剤、すなわち、フマル酸の粒子を親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールで被覆した粉末フマル酸製剤に係るものでもあり、当該粉末フマル酸製剤は製造方法における各種化合物の添加割合に相応して、フマル酸に対して、無水物換算で０．５質量％以上１０．０質量未満％の非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを含有している。
【００２６】
本発明の粉末フマル酸製剤は、上述したとおり、フマル酸の結晶性粉末を親水性ノニオン系界面活性剤と特定量の非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールとで被覆した形態にあることを特徴とする製剤である。
【００２７】
本発明の粉末フマル酸製剤には、必要に応じて、他の成分、例えば、キレート剤、増粘剤、乳濁剤、香料、着色剤等を適宜配合することができる。また、本発明の粉末フマル酸製剤には他の食用除菌剤を添加することもできる。他の食用除菌剤としては、例えば、次亜塩素酸ナトリウム、亜塩素酸ナトリウム、高度サラシ粉、過酸化水素などが挙げられる。
【００２８】
本発明の粉末フマル酸製剤には、フマル酸以外の有機酸、その誘導体又はそれらの塩を、適宜、組合せて用いることもできる。前記フマル酸以外の有機酸としては、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、コハク酸、乳酸、酢酸、プロピオン酸、ソルビン酸、安息香酸、アスコルビン酸などが挙げられ、これら有機酸の誘導体としては、具体的には、グリコシル誘導体、アシル化誘導体、又はリン酸化誘導体などが挙げられ、また、それらの塩としてはナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩などが挙げられる。とりわけ、抗菌力の向上及び／又は抗菌対象の拡大の観点から、フマル酸とクエン酸、リンゴ酸、酒石酸、アスコルビン酸との組合せが好ましく、特にアスコルビン酸又はその誘導体又はその塩との組合せが好ましい。フマル酸以外の有機酸、その誘導体又はそれらの塩の量は、フマル酸に対して、等量を超えることが好ましく、２倍量以上がより好ましい。用いるフマル酸以外の有機酸、その誘導体又はそれらの塩の量が、等量以下になると抗菌力の向上及び／又は抗菌対象の拡大の効果が低下するので望ましくない。一方、組み合わせるフマル酸以外の有機酸、その誘導体又はそれらの塩の量が多すぎると、粉末フマル酸製剤の凝集性、篩通過性の改善効果が得られ難くなるため、フマル酸に対して、２０倍量以下が好ましく、１２倍量以下がより好ましい。
【００２９】
フマル酸以外の有機酸、その誘導体又はそれらの塩は、上述した有効成分としてフマル酸を含有する粉末フマル酸製剤の製造方法における；
（１）フマル酸粉末、親水性ノニオン系界面活性剤、及び、フマル酸に対し、無水物換算で、０．５質量％以上１０．０質量未満％の非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールを溶媒の存在下で混合し、フマル酸含有湿混合物を得る工程；
（２）得られたフマル酸含有湿混合物を乾燥させ、フマル酸粒子が親水性ノニオン系界面活性剤及び非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールで被覆されたフマル酸含有粒状組成物を得る工程；及び
（３）得られたフマル酸含有粒状組成物を必要に応じて粉砕、分級し、粉末フマル酸製剤とする工程；
のいずれの工程において混合しても良く、例えば、（１）の工程においては、他の成分に追加して混合することができ、（２）の工程では、乾燥前又は乾燥途中の湿混合物、或いは乾燥後の粒状組成物に混合することができ、（３）の工程では、粉砕又は分級の前、途中、または後に混合することができる。さらには、（１）乃至（３）の工程を経て製造された粉末フマル酸製剤とフマル酸以外の有機酸、その誘導体又はそれらの塩を混合するようにしても良い。フマル酸以外の有機酸、その誘導体又はそれらの塩は、上述したいずれか一つのタイミングにその全量を一度に混合しても良いし、２つ以上に分けて複数のタイミングで混合しても良い。
【００３０】
本発明の粉末フマル酸製剤の使用用途は、特に限定されるものではないが、そのまま、又は、分散溶解、希釈して、さらに、エタノールなどのアルコール類、抗菌剤などを適宜含有せしめて食品の酸味料、保存料、除菌洗浄剤として、または、食品や食品工場等のタンク・ラインの洗浄剤として使用することができ、更には、一般的な除菌洗浄剤としても使用することができる。  
【００３１】
本発明の粉末フマル酸製剤を食品用除菌洗浄剤として用いる場合には、通常、これを水又は温水に均一に分散溶解し、フマル酸の濃度として、好ましくは０．０５〜１質量％、より好ましくは０．１〜０．５質量％程度の処理液として使用する。この処理液の濃度が０．０５質量％未満では、目的とする除菌効果が得られ難い。また、処理液の濃度が濃すぎる場合には、食品等に強く酸味が残り、風味を損なう恐れがある。この食品用除菌洗浄剤の処理液は、野菜類、果実類、魚介類、肉類などの食材の除菌用の処理液として使用することができる。  
【００３２】
例えば、本発明の粉末フマル酸製剤を野菜類、果実類、魚介類、肉類の食材の処理に用いる場合には、本発明の粉末フマル酸製剤をフマル酸の濃度として、０．０５〜１質量％程度に分散溶解した処理液に食材を浸漬して除菌する。浸漬時間は、目的に応じて適宜設定する。たとえば、キャベツなどの野菜類の場合では、３０秒〜１０分程度、イカ、タコ、エビなどの魚介類の場合は、１０秒〜１０分程度、鶏肉、豚肉、牛肉などの肉類の場合には、６０分程度、浸漬して除菌する。具体的な作業としては、野菜の場合であれば、水洗、カットした野菜を前記処理液に短時間浸漬した後、水ですすぎ調理に供する。このように野菜をはじめとする食材の除菌に用いた場合にも、本発明の粉末フマル酸製剤を溶解して得られる食品用除菌洗浄剤は、食品添加物として認められているフマル酸を主成分とするので、きわめて安全であると同時に、大腸菌、緑膿菌、サルモネラ菌等の食中毒菌に対して極めて強い除菌力を発揮することから、野菜類、果実類、魚介類、肉類などの食品による食中毒の発生を防止する目的で有効に使用することができる。
【００３３】
以下、各種実験に基づいて、本発明に係る粉末フマル酸製剤の製造方法及び当該製造方法によって得られる粉末フマル酸製剤について、より詳細に説明する。
【００３４】
本発明者らは、親水性を示す非イオン系の界面活性剤（親水性ノニオン系界面活性剤）でフマル酸粒子の表面を被覆することにより、溶解性を改善するという特許文献１、２に開示された従来技術を確認すべく以下の予備実験を行った。
【００３５】
＜予備実験１：親水性ノニオン系界面活性剤の添加が粉末フマル酸製剤の溶解性に及ぼす影響＞
（１）概要
フマル酸に、ＨＬＢが異なる各種親水性ノニオン系界面活性剤を添加し、それぞれが粉末フマル酸製剤の溶解性に及ぼす影響を調べた。
（２）実験方法
（ア）被験試料の調製
フマル酸粉末（商品名『フマル酸（微粉）』、純度９９．０質量％以上、扶桑化学工業株式会社販売）３．０ｇに、各種親水性ノニオン系界面活性剤、具体的には、ポリグリセリン脂肪酸エステル（商品名『ポエム  Ｊ−００２１』、ＨＬＢ１５．５、理研ビタミン株式会社販売）、ショ糖脂肪酸エステル（商品名『リョートーシュガーエステル』、ＨＬＢ１６．０、三菱化学フーズ株式会社販売）、ポリグリセリン脂肪酸エステル（商品名『リョートーポリグリエステル  Ｌ−７Ｄ』、ＨＬＢ１７、三菱化学フーズ株式会社販売）、ショ糖脂肪酸エステル（商品名『ＤＫエステルＳＳ』、ＨＬＢ１６．０、第一工業製薬株式会社販売）、又はポリオキシアルキル分岐デシルエステル（商品名『ノイゲン  ＸＬ−１０００』、ＨＬＢ１９．３、第一工業製薬株式会社販売）の濃度３ｍｇ／ｍＬの水溶液のいずれかを５ｍＬ添加し、混合した後、当該湿混合物をトレイに広げて、熱風循環式乾燥機にて７０℃で１５時間加熱することにより乾燥させた。次いで、得られた各フマル酸含有粒状組成物を乳鉢にて粉砕した後、目開き５００μｍの篩（商品名『ＴＨＥ  ＩＩＤＡ  ＴＥＳＴＩＮＧ  ＳＩＥＶＥ』、株式会社飯田製作所製造、以下の実験では、原則として同じ篩を使用した。）に通し、異なるＨＬＢ値を有する各種親水性ノニオン系界面活性剤を被覆した粉末フマル酸製剤の被験試料２乃至６を得た。原料として用いたフマル酸粉末に、親水性ノニオン系界面活性剤を添加せず、目開き５００μｍの篩を通す処理のみを行ったものを被験試料１とした。なお、得られた被験試料２〜６は、各種親水性ノニオン系界面活性剤を、それぞれ、フマル酸に対して、０．５質量％含有するものである。
【００３６】
（イ）溶解性試験
上記で得られた各種粉末フマル酸製剤について、フマル酸として３０ｍｇとなるように各被験試料を２０ｍＬ容ビーカーに秤取し、純水１０ｍＬを加えて、２分間撹拌した後、０．２２μｍ孔フィルターでろ過した。次いで、各ろ液を純水で１０倍に希釈した後、当該希釈液の波長２８０ｎｍにおける吸光度を測定し、別途３０ｍｇのフマル酸を純水１０ｍＬに完全に溶解させた水溶液の１０倍希釈液の波長２８０ｎｍにおける吸光度を１００％とし、各被験試料の相対フマル酸溶解率（％）を相対評価した。すなわち、０．１５ｍｇ／ｍＬの標準フマル酸水溶液の波長２８０ｎｍにおける吸光度の値（Ｘ）に対し、各被験試料の１０倍希釈液の波長２８０ｎｍにおける値（Ｙ）が占める百分率｛（Ｙ／Ｘ）×１００｝を求め、相対フマル酸溶解率とした。その結果を表１に示す。なお、試験した条件下では各種親水性ノニオン系界面活性剤の添加が波長２８０ｎｍにおける吸光度に及ぼす影響は無視できる程度であることは確認している。
【００３７】
【表１】
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【００３８】
表１に示したとおり、フマル酸粉末に対して５００μｍの篩を通す処理のみを行った被験試料１では、フマル酸粉末を完全溶解させた対照に対する相対フマル酸溶解率は８２．０％と低く、２分間の撹拌では十分に溶解しない（溶解速度が遅い）ことが確認された。一方、各種親水性ノニオン系界面活性剤を添加し、被覆処理した粉末フマル酸製剤（被験試料２乃至６）は相対フマル酸溶解率がいずれも９７．０％以上を示したことから、親水性ノニオン系界面活性剤の添加は、フマル酸の溶解速度を向上させる効果を奏することが確認された。また、試験した範囲内で親水性ノニオン系界面活性剤のＨＬＢの値は溶解速度に大きく影響を与えるものではなかったが、親水性ノニオン系界面活性剤の中では、ＨＢＬがそれぞれ１５．５及び１７．０であるポリグリセリン脂肪酸エステルを添加した被験試料２及び４が相対フマル酸溶解率１００％を示したことから、ＨＢＬとしては１４．０〜１８．０程度の範囲にあるのが好ましく、また、同じ親水性ノニオン系界面活性剤の中でも、ポリグリセリン脂肪酸エステルは、ショ糖脂肪酸エステルやポリオキシアルキル分岐デシルエステルよりも溶解速度の改善効果が優れていると考えられた。
【００３９】
親水性ノニオン系界面活性剤を添加することにより粉末フマル酸製剤（被験試料２乃至６）の水への溶解速度が改善されることは確認されたものの、これらの製剤（被験試料２乃至６）は凝集し易く、上記（ア）の被験試料の調製工程において、目開き５００μｍの篩を通過する十分な量の被験試料を得ることが困難であった。そこで、被験試料２乃至６の篩通過性を客観的に評価すべく下記の篩通過性試験を行った。
【００４０】
（ウ）篩通過性試験
上記（ア）で得られた被験試料１乃至６の一部を室温で３日間保存し、５００μｍの篩上に各３ｇずつ秤取し、当該篩をボルテックスミキサー（ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ  ＩＮＤＵＳＴＲＩＥＳ社製造、『ＭＯＤＥＬ  Ｇ５６０』）を用い、目盛５の強さで３０秒間振トウさせ、篩を通過した各被験試料の重量を測定し、篩通過性を評価した。すなわち、元の試料の重量（Ａ）に対し、篩を通過した各被験試料の重量（Ｂ）が占める百分率｛（Ｂ／Ａ）×１００｝を求め、篩通過率（％）として算出し、算出された各被験試料の篩通過率を下記の３段階で評価したものを表２に示す：
＋＋＋：３０秒間振トウ後の篩通過率  ５０％以上；
＋＋：３０秒間振トウ後の篩通過率  ２５〜５０％未満；
＋：３０秒間振トウ後の篩通過率  ２５％未満。
【００４１】
【表２】
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【００４２】
表２に示したとおり、フマル酸粉末に対して５００μｍの篩を通す処理のみを行った被験試料１及び各種の親水性ノニオン系界面活性剤を添加した粉末フマル酸製剤である被験試料２乃至６は、いずれも３０秒間振トウ後の篩通過率が２５％未満（＋）と篩通過性が著しく低かった。
【００４３】
＜予備実験２：ポリグリセリン脂肪酸エステルの添加量が粉末フマル酸製剤の溶解速度改善に及ぼす影響＞
続いて、溶解速度向上効果に優れていることが予備実験１で確認されたポリグリセリン脂肪酸エステル（ＨＬＢ１７）を用い、親水性ノニオン系界面活性剤の添加量がフマル酸の溶解速度改善に与える影響について、さらに以下の予備実験を行った。
【００４４】
（１）概要
フマル酸粉末に対するポリグリセリン脂肪酸エステル（ＨＬＢ１７）の添加量を種々替えて試験することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルの添加量が粉末フマル酸製剤の溶解速度改善に及ぼす影響について調べた。
（２）実験方法
（ア）被験試料の調製
フマル酸粉末（商品名『フマル酸（微粉）』、純度９９．０質量％以上、扶桑化学工業株式会社販売）３．０ｇに、ポリグリセリン脂肪酸エステル（商品名『リョートーポリグリエステル  Ｌ−７Ｄ』、ＨＬＢ１７、三菱化学フーズ株式会社販売）の濃度０．００６、０．３、０．６、３、６、１８、３０、又は４２ｍｇ／ｍＬの水溶液のいずれかを５ｍＬ混合し、湿混合物を調製した後、当該湿混合物をトレイに広げて、熱風循環式乾燥機にて７０℃で１５時間加熱することにより乾燥した。その後、乾燥物を乳鉢にて粉砕した後、目開き５００μｍの篩に通し、ポリグリセリン脂肪酸エステルで被覆した各種の粉末フマル酸製剤（被験試料７乃至１４）を得た。なお、得られた被験試料７乃至１４は、ポリグリセリン脂肪酸エステルを、フマル酸に対して、それぞれ０．００１、０．０５、０．１、０．５、１．０、３．０、５．０、及び７．０質量％含有するものである。
【００４５】
（イ）溶解性試験
上述した各種の粉末フマル酸製剤を、予備実験１：（２）の（イ）に記載したと同様の溶解性試験に供し、被験試料７乃至１４の相対フマル酸溶解率（％）を求めた。その結果を表２に示す。
【００４６】
【表３】
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【００４７】
表３に示したとおり、相対フマル酸溶解率は混合するポリグリセリン脂肪酸エステルの量が増加するにつれて向上し、量がフマル酸に対して１．０質量％以上（被験試料１１乃至１４）になると、２分間の撹拌により水に対して完全に溶解する程度にまで溶解速度が改善することが確認された。
【００４８】
また、本予備実験においても、ポリグリセリン脂肪酸エステルを加えると、粉末フマル酸製剤が凝集する現象が確認された。すなわち、ポリグリセリン脂肪酸エステルの量が増加するにつれて、フマル酸粒子の凝集の程度が大きくなる傾向が認められ、目開き５００μｍの篩を用いた場合の粉末の通過性が低下し、篩工程における粉末フマル酸製剤の回収率が著しく低下することが経験された。詳細は省略するが、得られた被験試料７乃至１４を予備実験１におけると同様の篩通過性試験に供したところ、いずれも３０秒間振トウ後の篩通過率が２５％未満（＋）と評価され、篩通過性が著しく低かった。
【００４９】
上記予備実験１、２の結果から、ポリグリセリン脂肪酸エステルなどの親水性ノニオン系界面活性剤でフマル酸粒子を被覆すると、フマル酸の溶解速度は向上するものの、製造工程で粉末フマル酸粒子が凝集して篩の通過性が低下し、製造工程における作業性、粉末フマル酸製剤の回収率が著しく低下することが判明した。また、この粉末フマル酸粒子の凝集性は、粉末フマル酸製剤の保存、流通の過程においても発現し、粉末フマル酸製剤の粉末としての流動性の喪失を招く懸念がある。これらの知見は、本発明者が独自に見出した新たな知見である。
【００５０】
＜実験１：糖質の種類がポリグリセリン脂肪酸エステルを配合した粉末フマル酸製剤の篩通過性に及ぼす影響＞
上記の新たな知見に基づき、溶解速度の向上と凝集、固結性の改善を両立させるべく、以下の実験を行った。
（１）概要
一定量のポリグリセリン脂肪酸エステルを配合した粉末フマル酸製剤に、各種糖質を添加し、糖質の種類が粉末フマル酸製剤の篩通過性に及ぼす影響について比較した。
（２）実験方法
（ア）被験試料の調製
フマル酸粉末（商品名『フマル酸（微粉）』、純度９９．０質量％以上、扶桑化学工業株式会社販売）２０．０ｇに、ポリグリセリン脂肪酸エステル（商品名『リョートーポリグリエステル  Ｌ−７Ｄ』、ＨＬＢ１７、三菱化学フーズ株式会社販売）の濃度１０質量％の水溶液を１ｇ、無水物換算で濃度１０質量％の各種糖質、具体的には、グルコース（試薬級、和光純薬工業株式会社販売）、スクロース（試薬級、和光純薬工業株式会社販売）、トレハロース（商品名『トレハ』、株式会社林原販売）、ソルビトール（試薬級、和光純薬工業株式会社販売）、マルチトール（試薬級、和光純薬工業株式会社販売）、マルトース（商品名『サンマルト（緑）』、株式会社林原販売）、ラクトース（試薬級、和光純薬工業株式会社販売）、又は澱粉部分分解物（商品名『パインデックス＃１』、松谷化学工業株式会社販売）を無水物換算で濃度１０質量％で含有する水溶液のいずれか１０ｇを添加し、さらに純水２５．１ｇを追加した後、ブレンダーを用いて３分間混合した後、得られた湿混合物を熱風循環式乾燥機中で７０℃、２０時間加熱することにより乾燥させ、各種乾燥物を得た。その後、乾燥物を乳鉢にて粉砕した後、目開き５００μｍの篩に通し、ポリグリセリン脂肪酸エステルとともに各種糖質で被覆した粉末フマル酸製剤（被験試料１５乃至２２）を得た。なお、得られた各種粉末フマル酸製剤（被験試料１５乃至２２）は、各種糖質を、フマル酸に対して、無水物換算で０．５質量％含有するものである。
【００５１】
（イ）篩通過性試験
上述した各種の粉末フマル酸製剤を、予備実験１：（２）の（ウ）に記載したと同様の篩通過性試験に供し、各被験試料の篩通過性を求め、評価した。その結果を表４に示す。
【００５２】
【表４】
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【００５３】
表４に示したとおり、フマル酸粉末に対して、一定量のポリグリセリン脂肪酸エステルと各種糖質を添加混合処理し、フマル酸粒子をポリグリセリン脂肪酸エステルと各種糖質とで被覆して得られた粉末フマル酸製剤（被験試料１５乃至２２）は、対照の界面活性剤（ポリグリセリン脂肪酸エステル）のみで被覆して得られた粉末フマル酸製剤と比較すると、いずれも篩通過性が向上していることが確認された。当該篩通過性に関しては、糖質間でも違いが見られ、非還元性二糖のトレハロース（被験試料１７）、二糖以下の糖アルコールのソルビトール（被験試料１８）、及びマルチトール（被験試料１９）が、「＋＋＋：３０秒間振トウ後の篩通過率  ５０％以上」と評価され、特に優れた篩い通過性を示した。
【００５４】
さらに、糖質の添加量による粉末フマル酸製剤の篩通過性に与える影響を確認するために、実験１で特に優れた篩通過性を示したトレハロースを用いて以下の実験を行った。
【００５５】
＜実験２：糖質の添加量が粉末フマル酸製剤の篩通過性に及ぼす影響＞
（１）概要
配合する糖質としてトレハロースを選択し、トレハロースの添加量を種々異ならせた以外は実験１と同様にして被験試料を調製し、糖質の添加量の違いが粉末フマル酸製剤の篩通過性に及ぼす影響について比較した。
（２）実験方法
（ア）被験試料の調製
フマル酸粉末（商品名『フマル酸（微粉）』、扶桑化学工業株式会社販売）２０．０ｇに、ポリグリセリン脂肪酸エステル（商品名『リョートーポリグリエステルＬ−７Ｄ』、ＨＬＢ１７、三菱化学フーズ株式会社販売）の濃度１０質量％の水溶液を１ｇ、無水物換算で濃度０．１、０．２、０．６、１．０、２．０、４．０、１０．０、２０．０、４０．０又は６０．０質量％のトレハロース水溶液のいずれかを１０ｇ添加し、さらに、水溶液の水分の量を含めて、水の総量が３５．０ｇ（フマル酸に対して１７５質量％）となるように純水を追加した後、ブレンダーを用いて３分間混合し、得られた湿混合物を熱風循環式乾燥機中で７０℃、２０時間加熱することにより乾燥させ、各種乾燥物を得た。その後、乾燥物を乳鉢にて粉砕した後、目開き５００μｍの篩に通し、フマル酸粒子をポリグリセリン脂肪酸エステルとトレハロースとで被覆した粉末フマル酸製剤（被験試料２３乃至３２）を得た。なお、得られた各種粉末フマル酸製剤（被験試料２３乃至３２）は、トレハロースを、フマル酸に対して、それぞれ無水物換算で０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、１．０、２．０、５．０、１０．０、２０．０、及び３０．０質量％含有するものである。また、糖質による被覆効果を確認するための比較として、フマル酸粉末とポリグリセリン脂肪酸エステルを、水の存在下で、上記の量比で混合し、フマル酸粒子をポリグリセリン脂肪酸エステルのみで被覆した混合物粉末をまず調製し、これにトレハロースを単に粉末として混合することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルのみでフマル酸を被覆した粉末フマル酸とトレハロース粉末との混合物粉末（比較試料）を調製した。
【００５６】
（イ）篩通過性試験
上述した各種の粉末フマル酸製剤（被験試料２３乃至３２及び比較試料）に加えて、対照１として原料であるフマル酸粉末、対照２としてフマル酸粉末とポリグリセリン脂肪酸エステル混合物を、予備実験１：（２）の（ウ）に記載したのと同様の篩通過性試験に供し、各試料のフマル酸篩通過性を評価した。その結果を表５に示す。
【００５７】
【表５】
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【００５８】
表５に示したとおり、フマル酸粒子をポリグリセリン脂肪酸エステルとトレハロースとで被覆し調製した粉末フマル酸製剤（被験試料２３乃至３２）において、トレハロースの添加量がフマル酸に対して０．０５乃至０．３質量％（被験試料２３乃至２５）の場合、凝集性の改善効果は認められず、篩通過率は２５質量％未満（＋）若しくは５０質量％未満（＋＋）と低かった。一方、トレハロースの添加量が０．５乃至５．０質量（被験試料２６乃至２９）になると、粉末フマル酸製剤の篩通過率は改善され、５０質量％以上（＋＋＋）となり、凝集性の改善効果が認められた。
【００５９】
また、対照である原料のフマル酸粉末（対照１）や界面活性剤（ポリグリセリン脂肪酸エステル）のみを被覆させたもの（対照２）と比較すると、トレハロースの添加量がフマル酸に対して０．３質量％以上になると、粉末フマル酸製剤の篩通過性が向上することが確認された。当該効果はトレハロースの添加量が増加するにつれて増加した。なお、フマル酸粒子をポリグリセリン脂肪酸エステルのみで被覆した後、トレハロース粉末を単に混合して得られた比較試料においては、篩通過量の改善効果が確認されなかった。
【００６０】
なお、トレハロースの添加量が１０質量％（被験試料３０：表５において「＊」を付して示した）の場合、篩通過性が改善され、凝集性の改善効果が認められたものの、被験試料の調製工程において得られる乾燥物が固化する程度が強くなり、粉砕による粉末化が一部困難となった。さらに、トレハロース添加量が２０質量％、３０質量％の場合（被験試料３１及び３２：表５において「＊＊」を付して示した）には、被験試料の調製工程において得られる乾燥物がブロック状の塊となるほど固化し、粉砕が極めて困難となった。以上の結果から、フマル酸に対して、無水物換算で、１０質量％以上のトレハロースを添加して調製した剤は、粉砕が困難になり、粉末フマル酸製剤の製造工程における作業性が著しく低下することが明らかとなった。
【００６１】
従来、例えば特許文献４に示されるとおり、粉末フマル酸製剤の溶解速度及び安定性を向上させるためには、１０質量％以上という多量の糖質を添加することが必須とされていたが、上記のとおり、本発明者らが実験により確認したところによれば、溶解速度の向上と凝集性の改善を両立させるためには、非還元性二糖又は二糖以下の糖アルコールの添加量は、むしろ、フマル酸に対して１０質量％未満という少量の方が良いという結果となった。これは、従来の技術常識を覆す新たな知見である。
【００６２】
一般的に食品用除菌洗浄剤として利用されている有機酸としては、酢酸が知られており、酢酸は通常、グラム陽性菌よりもグラム陰性菌に対して効果的に作用することが知られている（『日本食品工業学会』、第４１巻、第１０号、６８７〜７０１頁、１９９４年）。当該抗菌作用の違いは、明らかになっていないものの、細胞膜と外膜の２つの脂質膜を有するグラム陰性菌と外膜を持たず、厚いペプチドグリカン層を有するグラム陽性菌との構造上の相違によるものと考えられる。そこで本発明者らは、抗菌力の向上及び／又は抗菌対象の拡大を意図し、モデル実験として、フマル酸とアスコルビン酸を組合せて実験したところ、意外にも、グラム陽性菌に対しても除菌効果があることが確認された。そこで、本発明者らは、フマル酸とアルコルビン酸とを組合せた時のアスコルビン酸の濃度の違いがグラム陽性菌に対する除菌作用に与える影響を確認すべく以下の実験を行った。
【００６３】
＜実験３：フマル酸とアスコルビン酸の組合せがグラム陽性菌に対する除菌効果に及ぼす影響＞
（１）概要
一定量のフマル酸を有する溶液に、濃度の異なるアスコルビン酸溶液を加え、フマル酸とアスコルビン酸の組合せた時のアスコルビン酸の濃度の違いがグラム陽性菌に対する除菌効果に及ぼす影響について比較した。
（２）実験方法
（ア）被験試料の調製
フマル酸粉末（商品名『フマル酸（微粉）』、扶桑化学工業株式会社販売）を濃度０．３質量％となるように純水に溶解したフマル酸含有水溶液１．５ｍＬに対し、別途調製したアスコルビン酸濃度０．６質量％のアスコルビン酸水溶液を１．５ｍＬ混合し、合計３ｍＬのフマル酸とアスコルビン酸の混合溶液（被験試料３３）を得た。得られた混合溶液（被験試料３３）は、フマル酸を０．１５質量％の濃度で含有するとともに、アスコルビン酸を０．３質量％の濃度で含有するものである。続いて、混合するアスコルビン酸水溶液の濃度を１．８又は３．６質量％と変えた以外は同様にして、２種のフマル酸とアスコルビン酸の混合溶液（被験試料３４及び３５）（各３ｍＬ）を得た。得られた混合溶液（被験試料３４及び３５）は、フマル酸を０．１５質量％の濃度で含有するとともに、アスコルビン酸をそれぞれ０．９及び１．８質量％の濃度で含有するものである。
【００６４】
（イ）菌液の調製
グラム陽性菌としては、食中毒などの原因菌である黄色ブドウ球菌、スタフィロコッカス  オーレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）ＮＢＲＣ１２７３２株を用いた。当該試験菌の凍結乾燥アンプルに生理食塩水を加え、ニュートリエント寒天培地のスラントに１白金耳植菌し３７℃で２４時間培養した。次いで、当該スラント培地に生育した試験菌を、ニュートリエントブロス液体培地を１００ｍＬ入れた三角フラスコに１白金耳植菌し、３７℃で１５時間振トウ培養し種培養とした。得られた種培養液を新たなニュートリエントブロス液体培地を１００ｍＬ入れた三角フラスコに１．０％となるように植菌し、３７℃で４時間振トウ培養した。培養終了後、菌液５０ｍＬを回転数５，０００ｒｐｍで５分間の遠心分離を行い、上清を取り除いた上で、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を用いて３回洗浄を行った後に、波長６６０ｎｍの吸光度を測定し、菌数が５×１０６ＣＦＵ／ｍＬとなるようにＰＢＳを添加し、菌液を調製した。
【００６５】
（ウ）除菌試験
各種の被験試料溶液（３３乃至３５）それぞれ３ｍＬに、上記菌液３ｍＬを加えて、フマル酸濃度が０．０７５質量％、アスコルビン酸の濃度がそれぞれ０．１５、０．４５又は０．９０質量％含有する溶液を、３０℃の水浴中において、所定の時間（１、５、１０、２０分）保持し、それぞれの時点で１ｍＬをサンプリングし、９ｍＬのＰＢＳを用いて１０倍希釈系列（１０１倍、１０２倍、１０３倍、１０４倍）の溶液を作成し、当該希釈系列の溶液１ｍｌをそれぞれ滅菌済シャーレに分注し、ニュートリエント寒天培地１５ｍＬを加えて、３７℃で１８時間培養し、コロニー数を計測し、１ｍＬ当りの菌数を算出した。その結果を表６に示す。
【００６６】
【表６】
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【００６７】
表６に示したとおり、対照１（フマル酸濃度０．０７５％）、対照２（アスコルビン酸濃度０．９０％）では、処理開始時の菌数２．５×１０６ＣＦＵ/ｍＬに対して、処理時間５分後の菌数が、それぞれ、２．１×１０６ＣＦＵ/ｍＬ、２．３×１０６ＣＦＵ/ｍＬとほとんど変化がなく、処理時間２０分後でも、それぞれ、１．９×１０６ＣＦＵ/ｍＬ、１．５×１０６ＣＦＵ/ｍＬと若干の菌数減少が確認されたものの、当該濃度では、いずれもほとんど除菌効果を示さないことが確認された。一方、両者を組合せたフマル酸濃度０．０７５％、アスコルビン酸濃度０．１５乃至０．９０％の溶液（被験試料３３乃至３５）では、処理時間５分後の菌数が、それぞれ、７．７×１０５ＣＦＵ/ｍＬ、４．０×１０４ＣＦＵ/ｍＬ、２．０×１０４ＣＦＵ/ｍＬと、処理開始時の菌数から１／３〜１／１２５と明らかな菌数の減少が確認され、除菌効果が認められた。当該効果は、処理時間及びアスコルビン酸の含量が増加するにつれて、増加した。アスコルビン酸濃度が０．４５％、０．９０％の溶液（被験試料３４乃至３５）では、処理時間１０分後には、菌数が１０ＣＦＵ/ｍＬ未満となり、試験菌が完全に死滅することが確認された。
【００６８】
さらに発明者は、グラム陰性菌に対するフマル酸とアルコルビン酸の組合せによる除菌作用を確認すべく、以下の実験を行った。
【００６９】
＜実験４：フマル酸とアスコルビン酸の組合せがグラム陰性菌に対する除菌効果に及ぼす影響＞
（１）概要
一定量のフマル酸を含有する溶液に、濃度の異なるアスコルビン酸溶液を加え、フマル酸とアスコルビン酸の組合せ及びアスコルビン酸の濃度の違いがグラム陰性菌に対する除菌効果に及ぼす影響について比較した。
（２）実験方法
（ア）被験試料及び菌液の調製
実験３と同じ濃度になるように、一定量のフマル酸を含有する溶液に、濃度の異なるアスコルビン酸溶液を加えて調製したフマル酸とアスコルビン酸混合溶液（被験試料３３乃至３５）を使用し、グラム陰性菌としては、大腸菌、エシェリヒア・コリー（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）ＮＢＲＣ３３０１株を用いて、実験３と同様の条件で培養し、培養終了後、菌液５０ｍＬを回転数５，０００ｒｐｍで５分間の遠心分離を行い、上清を取り除いた上で、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を用いて３回洗浄を行った後に、波長６６０ｎｍの吸光度を測定し、菌数が５×１０６ＣＦＵ／ｍＬとなるようにＰＢＳを添加し、菌液を調製した。
【００７０】
（イ）除菌試験
３０℃の水浴中での保持時間を、４０秒（対照２のみ未測定）及び８０秒に変更した以外は、実験３と同じ処理を行い、１ｍＬ当りの菌数を算出した。その結果を表７に示す。
【００７１】
【表７】
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【００７２】
表７に示したとおり、対照２（アスコルビン酸濃度０．９０％）では、処理開始時の菌数２．５×１０６ＣＦＵ/ｍＬに対して、処理時間８０秒後の菌数が、１．４×１０６ＣＦＵ/ｍＬと若干の菌数減少が確認されたものの、当該濃度では、ほとんど除菌効果を示さないことが確認された。これに対して、対照１（フマル酸濃度０．０７５％）では、処理時間４０秒後の菌数が、２．６×１０５ＣＦＵ/ｍＬと菌数の減少が確認され、さらに処理時間８０秒後では、９．８×１０４ＣＦＵ/ｍＬとさらなる菌数減少が確認され、除菌効果が確認された。一方、両者を組合せたフマル酸濃度０．０７５％、アスコルビン酸濃度０．１５乃至０．９０％の溶液（被験試料３３乃至３５）では、処理時間４０秒後の菌数が、それぞれ、１．２×１０５ＣＦＵ/ｍＬ、７．２×１０４ＣＦＵ/ｍＬ、９．６×１０４ＣＦＵ/ｍＬと、処理開始時の菌数から１／２０〜１／３５と明らかな菌数の減少が確認され、除菌効果が認められた。当該濃度では、処理時間が増加するにつれて、除菌効果がさらに発揮され、処理時間８０秒後の菌数は、それぞれ、９．３×１０３ＣＦＵ/ｍＬ、６．２×１０３ＣＦＵ/ｍＬ、４．４×１０３ＣＦＵ/ｍＬと、更なる菌数の減少が確認された。
【００７３】
上記実験３及び４の結果から、フマル酸とアスコルビン酸を組み合わせることで、それぞれ単独で作用させるよりもグラム陽性菌及びグラム陰性菌に対して強い除菌効果が得られ、当該効果はアスコルビン酸の含量が増えるにつれて、増加することが明らかとなった。これらの知見は、本発明者が独自に見出した新たな知見である。
【００７４】
続いて、後述する実施例５に記載した方法でアスコルビン酸を含有する粉末フマル酸製剤を調製するとともに、別途、実施例１に記載した方法で粉末フマル酸製剤を調製し、両者を実験３及び４と同様の除菌効果比較試験に供した。その結果、グラム陰性菌に対する除菌効果を見る実験４では、実施例１及び５の方法で調製された粉末フマル酸製剤は、いずれも除菌効果が確認され、食品用除菌洗浄剤として有効であることが確認された。さらに、グラム陽性菌に対する除菌効果を見る実験３では、実施例１の方法で調製された粉末フマル酸製剤は除菌効果を示さなかったものの、アスコルビン酸を含む実施例５の方法で調製された粉末フマル酸製剤は優れた除菌効果を示し、幅の広い抗菌効果を示すことが判明した。
【００７５】
次に、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例１】
【００７６】
＜粉末フマル酸製剤＞
市販のフマル酸粉末（商品名『フマル酸（微粉）』、扶桑化学工業株式会社販売）２００質量部を乳鉢にて粉砕し、目開き５００μｍの篩を通し、粒径５００μｍ以下に調整した。一方、ポリグリセリン脂肪酸エステル（商品名『リョートーポリグリエステル  Ｌ−７Ｄ』、ＨＬＢ１７、三菱化学フーズ株式会社製）を水に添加、溶解し、１０質量％水溶液を１０質量部調製した。また、トレハロース（商品名『トレハ』、株式会社林原販売）を、水に溶解し、トレハロースの５０質量％水溶液２０質量部を調製した。前記の粉砕処理したフマル酸粉末１９９質量部をプラスチック容器に入れ、前記ポリグリセリン脂肪酸エステル水溶液及びトレハロース水溶液を同時に添加し、さらに、純水３３１質量部を加えて、ブレンダーを用いて混合し、湿混合物を得た。次いで、得られた湿混合物をトレイに広げ、熱風循環式乾燥機にて７０℃で２時間加熱することにより予備乾燥し、この乾燥物を一旦ほぐした後、更に減圧下で９５℃、３．５時間乾燥することにより水分を除去、乾燥した。得られた乾燥物を乳鉢にて粉砕し、目開き５００μｍの篩を通過させ、フマル酸９４．８質量％、ポリグリセリン脂肪酸エステル０．４８質量％、トレハロース４．８質量％を含有する粉末フマル酸製剤を得た。【００７７】
本品は、フマル酸に対する糖質の量が無水物換算で１０質量％未満まで低減されており、製造工程中（乾燥後）で剤がブロック状に固まることはなく、粉砕に支障を来すことがないという利点を有する粉末であった。また、本品は、ポリグリセリン脂肪酸エステルとともにトレハロースを用いてフマル酸を被覆しているため、得られた粉末フマル酸製剤が凝集して篩で分級する際に支障となる現象も低減されていた。さらに、本品は、水への溶解速度も改善されていたことから、容易に食品用の除菌液などを調製することができる優れた性質を有する。
【実施例２】
【００７８】
＜粉末フマル酸製剤＞
市販のフマル酸粉末に、まずトレハロース水溶液を混合し、次いで、得られる混合物にポリグリセリン脂肪酸エステル水溶液を混合し、加える純水を１８１質量部に変更した以外は、実施例１と同様な操作を行い、フマル酸９４．８質量％、ポリグリセリン脂肪酸エステル０．４８質量％、トレハロース４．８質量％を含有する粉末フマル酸製剤を得た。【００７９】
本品は、フマル酸に対する糖質の量が無水物換算で１０質量％未満まで低減されており、製造工程中（乾燥後）で剤がブロック状に固まることはなく、粉砕に支障を来すことがないという利点を有する粉末であった。また、本品は、ポリグリセリン脂肪酸エステルとともにトレハロースを用いてフマル酸を被覆しているため、得られた粉末が凝集して篩で分級する際に支障となる現象も低減されていた。さらに、本品は、水への溶解速度も改善されていたことから、容易に食品用の除菌液などを調製することができる優れた性質を有する。
因みに、予備実験１：（２）の（イ）に記載したと同様の溶解性試験に供し、本品の水への溶解速度を実施例１で得た粉末フマル酸製剤と比較したところ、より短時間で、完全に溶解する性質を示した。
【実施例３】
【００８０】
＜粉末フマル酸製剤＞
フマル酸粒子を被覆する糖質として、トレハロースに替えてソルビトール（「試薬」、和光純薬工業株式会社販売）を用い、ソルビトールの５０質量％水溶液の量を１５質量部とし、加える純水を１４２．５質量部に変更した以外は実施例１と同様の処理を行い、フマル酸９５．９質量％、ポリグリセリン脂肪酸エステル０．４８質量％、ソルビトール３．６質量％を含有する粉末フマル酸製剤を得た。【００８１】
本品は、フマル酸に対する糖質の量が無水物換算で１０質量％未満まで低減されており、製造工程中（乾燥後）で剤がブロック状に固まることはなく、粉砕に支障を来すことがないという利点を有する粉末であった。また、本品は、ポリグリセリン脂肪酸エステルとともにソルビトールを用いてフマル酸を被覆しているため、得られた粉末が凝集して篩で分級する際に支障となる現象も低減されていた。さらに、本品は、水への溶解速度も改善されていたことから、容易に食品用の除菌液などを調製することができる優れた性質を有する。
【実施例４】
【００８２】
＜粉末フマル酸製剤＞
フマル酸粒子を被覆する糖質として、トレハロースに替えてマルチトール（商品名『結晶マルチトール』、三菱商事フードテック株式会社販売）を用い、マルチトールの５０質量％水溶液の量を２５質量部とし、更に、親水性ノニオン系界面活性剤としてショ糖脂肪酸エステル（商品名『リョートーシュガーエステル  Ｓ−１６７０』、ＨＬＢ１６、三菱化学フーズ株式会社製）を用い、ショ糖脂肪酸エステル１０質量％水溶液の量を２０質量部とした以外は実施例１と同様の処理を行い、フマル酸９３．２質量％、ショ糖脂肪酸エステル０．９４質量％、マルチトール５．８５質量％を含有する粉末フマル酸製剤を得た。【００８３】
本品は、フマル酸に対する糖質の量が無水物換算で１０質量％未満まで低減されており、製造工程中（乾燥後）に剤がブロック状に固まることはなく、粉砕に支障を来すことがないという利点を有する粉末であった。また、本品は、ショ糖脂肪酸エステルとともにマルチトールを用いてフマル酸を被覆しているため、得られた粉末が凝集して篩で分級する際に支障となる現象も低減されていた。さらに、本品は、水への溶解速度も改善されていたことから、容易に食品用の除菌液などを調製することができる優れた性質を有する。
【実施例５】
【００８４】
＜粉末フマル酸製剤＞
実施例１で得た粉末フマル酸製剤中のフマル酸１質量部に対して、６質量部のアスコルビン酸（試薬級、和光純薬工業株式会社販売）を加え、乳鉢にて粉砕混合し、目開き５００μｍの篩を通過させ、フマル酸以外の有機酸（アスコルビン酸）を含む粉末フマル酸製剤を得た。【００８５】
本品は、アスコルビン酸を比較的多く含んでいるが、ポリグリセリン脂肪酸エステルとともにトレハロースを用いてフマル酸粒子を被覆しているため、得られた粉末が凝集して篩で分級する際に支障となる現象が低減されていた。さらに、本品は、水への溶解速度も改善されていたことから、容易に食品用の除菌液などを調製することができる優れた性質を有する。
【実施例６】
【００８６】
＜粉末フマル酸製剤＞
実施例１で得た粉末フマル酸製剤中のフマル酸１質量部に対して、３質量部のアスコルビン酸２−グルコシド（試薬級、和光純薬工業株式会社販売）を加え、乳鉢にて粉砕混合し、目開き５００μｍの篩を通過させ、フマル酸以外の有機酸の誘導体（アスコルビン酸２−グルコシド）を含む粉末フマル酸製剤を得た。【００８７】
本品は、アスコルビン酸の誘導体であるアスコルビン酸２−グルコシドを比較的多く含んでいるが、ポリグリセリン脂肪酸エステルとともにトレハロースを用いてフマル酸粒子を被覆しているため、得られた粉末が凝集して篩で分級する際に支障となる現象が低減されていた。さらに、本品は、水への溶解速度も改善されていたことから、容易に食品用の除菌液などを調製することができる優れた性質を有する。
【実施例７】
【００８８】
＜野菜用除菌洗浄剤＞
実施例２で得た粉末フマル酸製剤を純水にフマル酸濃度０．３質量％となるように溶解し、野菜用除菌洗浄剤とした。本除菌洗浄剤にカット野菜を３０秒間以上浸漬処理することにより、カット野菜の一般生菌数を顕著に低下させることができる。
【実施例８】
【００８９】
＜肉用除菌洗浄剤＞
実施例３で得た粉末フマル酸製剤を純水にフマル酸濃度０．５質量％となるように溶解し、肉用除菌洗浄剤とした。本除菌洗浄剤にカットした鶏肉を２５℃で６０分間浸漬処理することにより、鶏肉の一般生菌数を顕著に低下させることができる。
【比較例１】
【００９０】
＜粉末フマル酸製剤＞
トレハロースの５０質量％水溶液の添加量を５０質量部とした以外は実施例１と同様の処理を行い、フマル酸８８．４質量％、ポリグリセリン脂肪酸エステル０．４４質量％、トレハロース１１．１質量％を含有する粉末フマル酸製剤を得た。
【００９１】
本品は、フマル酸に対する糖質の量が無水物換算で１０質量％を超えて、多く含有しており、製造工程中（乾燥後）に剤がブロック状に固化したため、粉砕が困難となり作業性が著しく低下した。
【比較例２】
【００９２】
＜粉末フマル酸製剤＞
トレハロースの５０質量％水溶液を添加しなかった以外は実施例１と同様の処理を行い、フマル酸９９．５質量％、ポリグリセリン脂肪酸エステル０．５質量％を含有する粉末フマル酸製剤を得た。
【００９３】
本品は、フマル酸粒子の表面に界面活性剤であるポリグリセリン脂肪酸エステルが被覆されているのみであり、フマル酸の溶解速度自体は向上しているものの、製造工程において粉末フマル酸製剤が凝集して篩の通過性が低下しており、粉末フマル酸製剤の製造における作業性及び製剤の回収率が著しく低下した。
【産業上の利用可能性】
【００９４】
以上述べたとおり、本発明によれば、粉体流動性及び溶解速度に優れた粉末フマル酸製剤を容易に製造することができる。本発明の製造方法により得られる粉末フマル酸製剤は、従来の粉末フマル酸製剤と比べ、粉体流動性に優れ、固結し難く、粉末製剤として取扱いが容易であって、水への溶解性（溶解速度）も良好であることから、酸味剤、保存剤、除菌剤などとして食品分野において有利に利用できる。本発明が斯界に及ぼす影響は斯くも甚大であり、本発明の産業上の利用可能性は極めて大きい。
【国際調査報告】
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