(57)【要約】  本発明は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するためのデータを取得する新規方法または該副作用の発症を予測する新規方法を提供する。  より詳細には、本発明は、上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することを含んでなる、副作用の発症を予測するためのデータを取得する方法または該副作用の発症を予測する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するためのデータを取得する方法であって、
前記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定すること
を含んでなる、方法。
【請求項２】
前記抗ＰＤ−１抗体がニボルマブである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗ＣＴＬＡ４抗体がイピリムマブである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記抗体医薬が抗癌剤である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記副作用が免疫関連副作用である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記マーカーがｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の組み合わせである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における前記マーカーのレベルと、前記抗体医薬投与前の対象から採取された生物学的試料における、対応するマーカーのレベルとの比較データを取得することを含んでなる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における前記マーカーのレベルまたは前記比較データが、副作用を発症する指標となる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における前記マーカーのレベルまたは前記比較データが、対象にステロイドを投与する指標となる、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記比較データが副作用を発症する指標となる、請求項８または９に記載の方法。
【請求項１１】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測する方法であって、
前記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定すること
を含んでなる、方法。
【請求項１２】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用をモニタリングする方法であって、
前記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定すること
を含んでなる、方法。
【請求項１３】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与された対象において、該抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するための、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５を含んでなるマーカー。
【請求項１４】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するための、抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分を含んでなる診断薬。
【請求項１５】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するための、抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分を含んでなる診断用キット。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の参照】
【０００１】
本特許出願は、２０１６年７月１日に出願された日本国特許出願２０１６−１３１９１３号に基づく優先権の主張を伴うものであり、かかる先の特許出願における全開示内容は、引用することにより本明細書の一部とされる。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測する新規な方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ガン細胞は、ガン細胞を攻撃する免疫細胞の活性を下げることにより、免疫細胞の攻撃を阻止している。この仕組みは「免疫チェックポイント」と呼ばれている。したがって、この「免疫チェックポイント」を阻害することにより、免疫細胞の働きを再び活発にしてガン細胞を攻撃することができる。免疫チェックポイント阻害薬は、ガン細胞により活性の下げられた免疫細胞を活性化させ、ガン細胞を攻撃させる薬である。【０００４】
免疫チェックポイント阻害薬として、具体的には、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体等が挙げられる。抗ＰＤ−１抗体であるニボルマブおよびペムブロリズマブは、悪性黒色腫の治療に有用であることが知られており、また、非小細胞肺癌や腎細胞癌に対する治療効果も報告されている（特許文献１、非特許文献１）。また、抗ＣＴＬＡ４抗体であるイピリムマブまたはトレメリムマブも、黒色腫および他の悪性腫瘍の治療に有用であることが知られている（特許文献２）。【０００５】
一方、免疫チェックポイント阻害薬の投与に起因する自己免疫関連の副作用の出現は従来の薬剤に比して多いことが知られている。例えば、抗ＰＤ−１抗体（ニボルマブ）または抗ＣＴＬＡ４抗体（イピリムマブ）を根治切除不能悪性黒色腫の患者に投与した場合のグレード３以上の有害事象の発生率が、ニボルマブ単独では１６．３％、イピリムマブ単独では２７．３％、ニボルマブとイピリムマブとの併用では５５．０％であることが報告されている（非特許文献１）。【０００６】
免疫チェックポイント阻害薬の投与に起因する副作用には、下垂体機能障害、自己免疫性大腸炎、間質性肺炎、重度肝障害等の生命にかかわる重篤な副作用が存在する。これら副作用の出現時期、進行速度等は予測できないため、患者が自宅で発症に気付かずに、受診時には致命的な状況であることも少なくない。【０００７】
したがって、免疫チェックポイント阻害薬の投与に起因する副作用の発症前において、発症の可能性（危険性）を予測できる技術的手段の開発が求められている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Larkin J, Chiarion-Sileni V, Gonzalez R, Grob JJ, Cowey CL, Lao CD, et al. Combined Nivolumab and Ipilimumab or Monotherapy in Untreated Melanoma. N Engl J Med 2015; 373: p.23-34.
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２０１６−０６４９８９号公報
【特許文献２】特表２０１５−５２６５２５号公報
【発明の概要】
【００１０】
本発明は、免疫チェックポイント阻害薬である、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象における副作用の発症の可能性（危険性）を予測する新たな技術的手段を提供することを目的とする。
【００１１】
本発明者らは、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することにより、前記抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測しうることを見出した。
【００１２】
本発明によれば、以下の発明が提供される。
（１）抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するためのデータを取得する方法であって、
上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定すること
を含んでなる、方法。
（２）上記抗ＰＤ−１抗体がニボルマブである、（１）に記載の方法。
（３）上記抗ＣＴＬＡ４抗体がイピリムマブである、（１）または（２）に記載の方法。
（４）上記抗体医薬が抗癌剤である、（１）〜（３）のいずれか一つに記載の方法。
（５）上記副作用が免疫関連副作用である、（１）〜（４）のいずれか一つに記載の方法。
（６）上記マーカーがｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の組み合わせである、（１）〜（５）のいずれか一つに記載の方法。
（７）上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における前記マーカーのレベルと、上記抗体医薬投与前の対象から採取された生物学的試料における、対応するマーカーのレベルとの比較データを取得することを含んでなる、（１）〜（６）のいずれか一つに記載の方法。
（８）上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における上記マーカーのレベルまたは上記比較データが、副作用を発症する指標となる、（７）に記載の方法。
（９）上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における上記マーカーのレベルまたは上記比較データが、対象にステロイドを投与する指標となる、（７）に記載の方法。
（１０）前記比較データが副作用を発症する指標となる、請求項８または９に記載の方法。
（１１）抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測する方法であって、
上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定すること
を含んでなる、方法。
（１２）上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における前記マーカーのレベルと、上記抗体医薬投与前の対象から採取された生物学的試料における、対応するマーカーのレベルとを比較することを含んでなる、（１１）に記載の方法。
（１３）上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における前記マーカーのレベルが、あらかじめ設定された閾値から外れた場合には副作用を発症する可能性が高いと予測する、（１２）に記載の方法。
（１４）抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用をモニタリングする方法であって、
上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定すること
を含んでなる、方法。
（１５）抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与された対象において、該抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するための、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５を含んでなるマーカー。
（１６）抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するための、抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分を含んでなる診断薬。
（１７）抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するための、抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分を含んでなる診断用キット。
【００１３】
本発明によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することにより、上記抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測することができる。本発明の方法は、予め副作用の発症を予測して薬剤を投与し、副作用の発症を防止、抑制もしくは遅延、または副作用を軽減する上で有利である。また、本発明の方法を用いることにより、副作用の発症を予測して、副作用による障害を減らすことができる。また、本発明の方法を用いることにより、簡便な手段で、上記抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】Ａは、ニボルマブを投与した患者毎のニボルマブ投与前後の血清中のｓＣＤ１６３濃度の変化を示すグラフである。Ｂは、ニボルマブを投与した患者毎のニボルマブ投与前後の血清中のＣＸＣＬ５濃度の変化を示すグラフである。
【図２】ｓＣＤ１６３濃度の増減比データに基づき作成したＲＯＣ曲線を示す。
【発明の具体的説明】
【００１５】
データを取得する方法／副作用の発症を予測する方法
本発明の方法は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することを一つの特徴としている。ここで、用いるマーカーはｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の組み合わせが好ましい。かかる方法によれば、得られたデータに基づいて、副作用の発症を予測することができる。
【００１６】
本発明の方法は、上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における上記マーカーのレベルと、前記抗体医薬投与前の対象から採取された生物学的試料における、対応するマーカーのレベルとの比較データを取得することを含んでなる。ここで、比較データとは、例えば、上記レベルの差または比をいう。また、上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における上記マーカーのレベルまたは上記比較データが、副作用を発症する指標となる。さらに、上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料における上記マーカーのレベルまたは上記比較データが、対象に薬剤、好ましくはステロイド、を投与する指標となる。上記副作用を発症する指標または対象に薬剤、好ましくはステロイド、を投与する指標としては、上記比較データが好ましい。マーカーのレベルについては後述する。
【００１７】
ｓＣＤ１６３、ＣＸＣＬ５
本発明の、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象における、該抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するためのマーカーは、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５を含んでなる。
本発明における「ＣＤ１６３」は、１本鎖の膜貫通型タンパク質で、スカベンジャーレセプターシステイン−リッチファミリーのメンバーであり、「Ｍ１３０」と相互に使用される。また、「ｓＣＤ１６３（可溶型ＣＤ１６３）」は、ＣＤ１６３が切断されて可溶型となったものである。本発明における「ｓＣＤ１６３」は、ｓＣＤ１６３の改変体、アイソフォーム、および種ホモログを含んでよい。
本発明における「ＣＸＣＬ５」は、好中球／単球走化性タンパク質であって、ＣＸＣモチーフのＮ末端側にＥＬＲモチーフを有するＥＬＲ＋グループのメンバーであり、「ＬＩＸ」および「ＧＣＰ−２」と相互に使用され、ＣＸＣＬ５の改変体、アイソフォーム、および種ホモログを含んでよい。
【００１８】
また、生物学的試料におけるｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルとは、例えば、生物学的試料における上記マーカーの濃度または量であり、好ましくは、生物学的試料におけるｓＣＤ１６３の濃度、またはＣＸＣＬ５の濃度である。なお、測定するｓＣＤ１６３の濃度としては、例えば、１ｎｇ／ｍＬ〜５００ｎｇ／ｍＬの範囲の濃度が挙げられる。また、測定するＣＸＣＬ５の濃度としては、例えば、１０ｐｇ／ｍＬ〜１００００ｐｇ／ｍＬ、１０ｐｇ／ｍＬ〜５０００ｐｇ／ｍＬの範囲の濃度が挙げられる。
【００１９】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体
本発明における「抗体」は、全長抗体であって、ジスルフィド結合で連結された少なくとも２個の重鎖（Ｈ）と２個の軽鎖（Ｌ）を含む糖タンパク質を含む。各重鎖は、重鎖可変領域（以下、ＶＨと略すこともある。）と重鎖定常領域とから構成されている。重鎖定常領域は、３個のドメインＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３から構成されている。各軽鎖は、軽鎖可変領域（以下、ＶＬと略すこともある。）と軽鎖定常領域から構成されている。軽鎖定常領域は、１個のドメインＣＬで構成されている。ＶＨおよびＶＬ領域はさらに、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される変異性の高い領域に小分割され、それらには、フレームワーク領域（ＦＲ）と称され、より保存性の高い領域が散在している。上記重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含んでいる。
かかる「抗体」としては、例えば、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二重特異性抗体、低分子化抗体、ドメイン抗体、合成抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体複合体、一本鎖抗体、抗体誘導体、抗体類似体、およびそのそれぞれの抗原結合断片が挙げられる。
【００２０】
本発明における抗体の「抗原結合断片」（または、単に「抗体断片」ともいう）とは、特異的に抗原（例えば、ＰＤ−１）に結合する能力を保持する抗体の１個以上の断片を示すものである。抗体の「抗原結合断片」に含まれる結合断片の例として、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインから構成される１価の断片であるＦａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域中ジスルフィド架橋で結合した２個のＦａｂ断片を含む２価の断片であるＦ（ａｂ´）２断片、（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインから構成されるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体のシングルアームのＶＬおよびＶＨドメインで構成されるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインから構成されるｄＡｂ断片、または（ｖｉ）単離相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。さらに、Ｆｖ断片の２個のドメインであるＶＬおよびＶＨは別々の遺伝子によりコードされているが、それらは、組み換え技術を用いてそれらを単一タンパク質鎖として作製できる合成リンカーにより連結でき、この鎖中では、ＶＬおよびＶＨ領域が対となって１価の分子を形成できる（単一鎖のＦｖ（ｓｃＦｖ））。このような単一鎖の抗体も、抗体の「抗原結合断片」に含まれる。
【００２１】
本発明における「ＰＤ−１」は、免疫応答調節のシグナルを介する免疫レセプターであって、ＣＤ２８／ＣＴＬＡ−４ファミリーに属するＩ型膜タンパク質である。本発明における「ＰＤ−１」は、「ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＤｅａｔｈ１」、「ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＣｅｌｌＤｅａｔｈ１」、「タンパク質ＰＤ−１」、「ＰＤ１」、「ＰＤＣＤ１」、および「ｈＰＤ−１」と相互に使用され、ＰＤ−１の改変体、アイソフォーム、種ホモログ、およびＰＤ−１と少なくとも１個の共通エピトープを有するアナログを含んでよい。
【００２２】
本発明における「抗ＰＤ−１抗体」とは、本発明の効果を妨げない限り、特に限定されず、ＰＤ−１に特異的に結合する抗体であってよい。かかる抗体は、アミノ酸配列の構造の一部を特異的に認識する抗体でもあってもよく、全体構造を特異的に認識する抗体でもよい。また、上記抗体としては、特に限定されるものではないが、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、またはラムブロリズマブが挙げられ、好ましくはニボルマブ、またはペムブロリズマブである。
【００２３】
本発明における「ＣＴＬＡ４」は、Ｔ細胞の活性化を抑制する調節因子であって、「細胞毒性Ｔリンパ球関連抗原−４」、「ＣＴＬＡ−４」、「ＣＴＬＡ−４抗原」および「ＣＤ１５２」と相互に使用され、ヒトＣＴＬＡ４の改変体、アイソフォーム、種ホモログ、およびＣＴＬＡ４と少なくとも１個の共通エピトープを有するアナログを含んでよい。
【００２４】
本発明における「抗ＣＴＬＡ４抗体」とは、本発明の効果を妨げない限り、特に限定されず、ＣＴＬＡ４に特異的に結合する抗体であってよい。かかる抗体は、アミノ酸配列の構造の一部を特異的に認識する抗体でもあってもよく、全体構造を特異的に認識する抗体でもよい。また、上記抗体としては、特に限定されるものではないが、好ましくは、イピリムマブ、またはトレメリムマブである。
【００２５】
本発明における「ＰＤ−Ｌ１」は、ＰＤ−１のリガンドであって、「ＣＤ２７４」、「ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＣｅｌｌＤｅａｔｈ１Ｌｉｇａｎｄ１」、「ＰＤＣＤ１Ｌ１」、「Ｂ７−Ｈ」、および「Ｂ７Ｈ１」と相互に使用され、ＰＤ−Ｌ１の改変体、アイソフォーム、種ホモログ、およびＰＤ−Ｌ１と少なくとも１個の共通エピトープを有するアナログを含んでよい。
【００２６】
本発明における「抗ＰＤ−Ｌ１抗体」とは、本発明の効果を妨げない限り、特に限定されず、ＰＤ−Ｌ１に特異的に結合する抗体であってよい。かかる抗体は、アミノ酸配列の構造の一部を特異的に認識する抗体でもあってもよく、全体構造を特異的に認識する抗体でもよい。また、上記抗体としては、特に限定されるものではないが、好ましくは、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＲＧ７４４６）、またはアテゾリズマブである。
【００２７】
本発明における「抗体医薬」は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つのものである。上記抗体またはその抗原結合断片は、１種のみを対象に投与してもよく、２種以上を組み合わせて同時にまたは別々に対象に投与してもよい。２種以上の組み合わせの例としては、抗ＰＤ−１抗体と抗ＣＴＬＡ４抗体との組み合わせ等が挙げられる。上記抗体の投与方法としては、特に限定されるものではないが、静脈投与が好ましい。
【００２８】
本発明の対象は、好ましくはヒトであり、より好ましくは、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与により治療されうる疾患に罹患しているか、または該疾患に罹患する可能性のあるヒトである。ここで、「治療」には、確立された病態を治療することだけでなく、将来確立される可能性のある病態を予防することをも含む。
【００２９】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与により治療されうる疾患としては、特に限定されるものではないが、癌、肉腫、または悪性中皮腫が挙げられる。したがって、上記抗体医薬は、抗癌剤であってよい。癌、肉腫、または悪性中皮腫としては、具体的には、悪性黒色腫（メラノーマ）（例えば、転移性悪性悪性黒色腫、根治切除不能悪性黒色腫）、皮膚有棘細胞癌、乳房外パジェット病、またはメルケル細胞癌等の皮膚癌；腎癌（例えば、腎細胞癌、透明細胞カルシノーマ）；前立腺癌（例えば、ホルモン難治性前立腺アデノカルシノーマ）；乳癌；結腸癌；肺癌（例えば、非小細胞肺癌）；骨癌；膵癌；頭頚部癌；皮膚若しくは眼窩内悪性メラノーマ；子宮癌；卵巣癌；直腸癌；肛門部癌；胃癌；精巣癌；子宮癌；卵管のカルシノーマ；子宮内膜カルシノーマ；子宮頚部カルシノーマ；膣カルシノーマ；外陰部カルシノーマ；食道癌；小腸癌；大腸癌；内分泌系癌；甲状腺癌；副甲状腺癌；副腎癌；柔組織肉腫；多発性骨髄腫；尿道癌；陰茎癌；慢性若しくは急性白血病（例えば、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病）；小児固形癌；進行性固形癌；膀胱癌；腎臓若しくは尿管の癌；腎盂カルシノーマ；尿路上皮癌；中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍；リンパ腫（例えば、リンパ球性リンパ腫、原発性ＣＮＳリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫（ホジキン病）、Ｔ細胞リンパ腫）；胸膜悪性中皮腫；心膜悪性中皮腫；腹膜悪性中皮腫；腫瘍新脈管形成；脊椎腫瘍；脳幹グリオーム；下垂体アデノーマ；カポシ肉腫；扁平上皮癌；扁平細胞癌；アスベスト誘発癌を含む環境誘発癌；またはそれらの組み合わせが挙げられ、好ましくは、皮膚癌、より好ましくは、悪性黒色腫、皮膚有棘細胞癌、乳房外パジェット病、またはメルケル細胞癌である。
【００３０】
本発明における抗体医薬の投与に起因する副作用としては、特に限定されるものではないが、免疫関連副作用（免疫に関連すると推察される副作用：ｉｒＡＥ）が好ましい（例えば、医薬品インタビューフォーム  オプジーボ(R)点滴静注20mg・100mg、2016年4月改訂（第9版）、日本皮膚科学会悪性黒色腫の新薬に関する安全性検討委員会、抗CTLA-4抗体イピリムマブ(ヤーボイ(R))の特性と副作用への対応について、平成27年8月24日参照）。また、本発明の上記副作用の具体的な態様としては、間質性肺疾患、重症筋無力症、筋炎、大腸炎、１型糖尿病、肝機能障害（肝障害）、肝炎（例えば、自己免疫性肺炎）等の肺障害、下垂体機能低下症、下垂体炎等の下垂体機能障害、甲状腺機能低下症等の甲状腺機能障害、神経障害、腎障害、脳炎、副腎機能不全等の副腎障害、重度の皮膚障害、静脈血栓塞栓症、infusion reaction、乾癬、乾癬様皮疹、下痢（例えば、重度の下痢）、関節リウマチ、ブドウ膜炎、上強膜炎、滑膜包炎、放射性皮膚炎の増悪、慢性炎症性脱髄性多発神経炎（以下、脱髄性多発神経炎ともいう）、胆道障害または腎炎が挙げられ、好ましくは下垂体機能障害である。
また、免疫関連副作用（ｉｒＡＥ）は例えば投与後８週以降、または８〜１２週後に発症することが知られている。
免疫関連副作用は、「グレード」または「ｉｒＡＥ評価」により評価される。ここで、「ｉｒＡＥ評価」は、疾患の重篤度を表す指標であり、１〜３で表される。１とは、「ｉｒＡＥのため追加で治療介入を必要としない」という状態を示し、２とは、「ｉｒＡＥのため薬剤介入等が必要だが入院治療を必要としない、もしくは治療の中断を必要としない」という状態を示し、３とは、「ｉｒＡＥのため入院を伴う薬剤介入等が必要かつ治療の中断を要する」という状態を示す。なお、「ｉｒＡＥ評価」と「グレード」との対応は各疾患により異なる。
【００３１】
測定方法
本発明で用いることができる生物学的試料としては、血清、血漿、血液、または尿等が挙げられ、好ましくは血清である。
また、上記生物学的試料の採取時期は、副作用の発症を予防する観点から、上記副作用の発症前が挙げられる。上記副作用の発症前としては、例えば、上記抗体医薬の投与前、上記抗体医薬の投与後またはその両者が挙げられる。ここで、上記抗体医薬の投与前としては、上記抗体医薬を投与する前に加え、上記抗体医薬の投与時または投与直後も含んでいてもよい。さらに、上記抗体医薬の投与後としては、例えば、上記抗体医薬を投与してから１２週以内が挙げられ、好ましくは８週以内、さらに好ましくは６週以内である。また、上記抗体医薬の投与前、投与後は、それぞれ上記抗体医薬の１回目の投与前、１回目の投与後としてよい。
さらに、上記生物学的試料の採取時期は、モニタリングや後述の薬剤の効果の確認等の観点から、上記抗体医薬の投与後としては、上記抗体医薬を投与してからの期間は制限されず、さらに、投与後に２回以上測定してもよい。
【００３２】
ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５を測定するためには現在既知のあらゆる方法を採用することができる。例えば、免疫測定法、電気泳動法、ウエスタンブロッティング法、質量分析法等が挙げられ、好ましくは免疫測定法である。
【００３３】
免疫測定法としては、例えば、免疫比濁測定法、酵素免疫測定法等が挙げられる。免疫測定法は、タンパク質等を抗原として測定する免疫測定法であって、抗体としては、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分を用いることができ、好ましくはそのポリクローナル抗体やモノクローナル抗体を用いることができる。抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分としては、市販品の抗体を用いることができ、また、周知の方法により、製造することもできる。また、抗ｓＣＤ１６３抗体または抗ＣＸＣＬ５抗体はそれぞれ、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５に特異的に結合しうる限り特に限定されず、アミノ酸配列の構造の一部を特異的に認識する抗体でもあってもよく、全体構造を特異的に認識する抗体でもよい。
【００３４】
免疫比濁測定法としては、生物学的試料におけるｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５と、抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分とを反応させて抗原抗体反応させ、その結果、発生する濁りの度合いからｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５のレベルを測定するものであれば、とくに限定されない。そのような方法として、ＴＩＡ法、ラテックス免疫比濁法、ネフェロメトリー法を例示することができる。ＴＩＡ法は、免疫比濁測定法において濁りの度合いを特定の吸光度において測定する方法である。また、ラテックス免疫比濁法は、免疫比濁測定法において、抗体として抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分をラテックス粒子に結合させたものを用いて測定する方法である。さらに、ネフェロメトリー法は、免疫比濁測定法において濁りの度合いを、一定角度以上の大きさに散乱した光を集めて散乱光として測定する方法である。
【００３５】
酵素免疫測定法としては、プレートを支持体とした、ＥＬＩＳＡ法等のＥＩＡ法を挙げることが出来る。はじめに固相に直接または間接的に抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分を一次抗体として結合させる。
ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５を酵素免疫測定法で測定する場合には、例えば、固相に結合した一次抗体に、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５を測定するための生物学的試料を加えて反応させる。一定時間反応させた後、固相を洗浄し二次標識抗体を加えて二次反応させる。固相を再度洗浄し、固相に結合した標識部分を測定する。
【００３６】
上記二次標識抗体を用いる免疫測定法において、標識物質としては西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）アルカリホスファターゼ等の酵素を用いることができる。例えば、ＨＲＰ標識抗体を利用した場合には基質に既知のＤＡＢ、ＴＭＢ、ＯＰＤ等を用いることができる。また、標識物質には、ＨＲＰのような酵素だけではなく、金コロイド、ユーロピウム等の標識金属やＦＩＴＣ、ローダミン、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、Ａｌｅｘａ、ＧＦＰ等の化学的、生物的各種蛍光物質、３２Ｐ、５１Ｃｒ等の放射性物質等標識可能なあらゆる物質が挙げられる。また、本発明で標識物質を用いる場合、アビジン−ビオチン系またはストレプトアビジン−ビオチン系を用いることもできる。その場合には、例えば、ビオチンで標識された二次標識抗体とともに、ＨＲＰ等の酵素で標識されたストレプトアビジンまたはアビジンを用いることができる。また、ルシフェラーゼ標識抗体による化学発光イムノアッセイ、蛍光色素標識抗体による蛍光イムノアッセイ、フローサイトメトリー法等を挙げることができる。
【００３７】
電気泳動法としては、一般的にはＳＤＳ−ＰＡＧＥ法を挙げることができる。そのほかにもセルロース・アセテートを支持体としたもの等がある。タンパク質の染色にはクマシー・ブリリアント・ブルー、ポンソーＳ染色、アミドブラック染色、直接酵素活性を利用する方法等がある。
【００３８】
また、ウエスタンブロッティング法による検出も有効である。すなわち、電気泳動をしたゲルをニトロセルロース膜やＰＶＤＦ膜等に転写し、次いで、一次抗体である抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分、さらに、二次標識抗体であるＨＲＰ標識抗ＩｇＧ等を反応させ、次いで、ＨＲＰ発色試薬で発色させ、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５に相当するバンドの発色度合いにより、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５を測定することができる。
【００３９】
質量分析法としては、例えば、質量分析器を使用した分析方法を挙げることができる。例えば、表面増強レーザー脱離イオン化（Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ）飛行時間型質量分析計（ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ法）、マトリックス支援レーザーイオン化（Ｍａｔｒｉｘ−Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ）飛行時間型質量分析計（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ法）、ＥＳＩ法（Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ  Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ）を用いる方法を例示できる。ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ法は、チップ表面の官能基に目的物質を均一に捕捉したまま不純物を除去し、レーザー光でイオン化するため、再現性のあるＳ／Ｎ比の高いイオンスペクトルが得られるので好ましい。
【００４０】
副作用の発症の予測
また、本発明においては、上述のような測定により得られたデータを用いて、上記抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測することができる。上記予測工程では、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与された（すなわち、投与後の）対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルと、投与前の対象から採取された生物学的試料における、対応するマーカーのレベルとを比較することが好ましい。
【００４１】
したがって、本発明の別の態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与する前の対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定する工程を含んでもよい。また、上記抗体医薬投与後に２回以上上記マーカーのレベルを測定している場合は、任意の２つの測定ポイントにおける上記マーカーのレベルを比較してもよい。
【００４２】
また、生物学的試料におけるｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルは、上記の測定方法により測定でき、ＥＬＩＳＡ法による測定が好ましい。
【００４３】
さらに、本発明の好ましい態様によれば、上記予測工程は、医師による判断を含まない。
【００４４】
さらに、本発明の別の態様によれば、副作用の発症の予測とは、副作用が発症する前にその発症を予測することに加えて、副作用のグレードが低い場合において副作用が発症していることの予測も含む。ここで、副作用のグレードが低いとは、好ましくは１〜２である。本発明の別の態様によれば、副作用の発症の予測とは、免疫関連副作用（ｉｒＡＥ）評価が低い場合において副作用が発症していることの予測も含む。ここで、ｉｒＡＥ評価が低いとは、好ましくは１〜２である。
【００４５】
副作用の発症の予測に際し、副作用を発症した対象（群）における上記抗体医薬の投与前後の生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルの差または比と、副作用を発症しない対象（群）における対応するマーカーのレベルの差または比について比較し、統計学的処理を行ってもよい。また、上記抗体医薬投与後に２回以上上記マーカーのレベルを測定している場合は、任意の２つの測定ポイントにおける上記マーカーのレベルの差または比を比較してもよい。その結果、副作用を発症した対象（群）と副作用を発症しない対象（群）との間に有意差がある場合には、用いた前記マーカーのレベルの差または比を、副作用の発症の可能性を予測する指標とすることができる。上記統計処理としては、Ｕ検定（ノンパラメトリカル）、または対応のあるｔ−検定（正規分布の場合）が挙げられる。
【００４６】
本発明の上記抗体医薬の投与に起因する副作用の発症の予測は、例えば、上記抗体医薬を投与後の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが、投与前の対象の生物学的試料におけるｓＣＤ１６３のレベルに比べて高い場合、副作用を発症する可能性が高いとの指標に基づいて行うことができる。
【００４７】
また、上記抗体医薬投与後の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３のレベルが、投与前の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３のレベルに比べて好ましくは１．２倍以上、より好ましくは１．５倍以上、さらに好ましくは１．６倍以上、さらにより好ましくは１．８倍以上、さらにより一層好ましくは２倍以上高い場合、副作用を発症する可能性が高いと予測することができる。また、上記抗体医薬投与後の対象から採取された生物学的試料におけるｓＣＤ１６３濃度が、投与前の対象の生物学的試料におけるｓＣＤ１６３濃度に比べて好ましくは１０ｎｇ／ｍＬ、より好ましくは１５ｎｇ／ｍＬ、さらに好ましくは２０ｎｇ／ｍＬ、さらにより好ましくは４０ｎｇ／ｍＬ以上高い場合、副作用を発症する可能性が高いと予測することができる。
【００４８】
本発明の上記抗体医薬の投与に起因する副作用の発症の予測は、例えば、上記抗体医薬を投与後の対象から採取された生物学的試料におけるＣＸＣＬ５のレベルが、投与前の対象の生物学的試料におけるＣＸＣＬ５のレベルに比べて高い場合、副作用を発症する可能性が高いとの指標に基づいて行うことができる。
【００４９】
また、上記抗体医薬投与後の対象から採取された生物学的試料におけるＣＸＣＬ５のレベルが、投与前の対象の生物学的試料におけるＣＸＣＬ５のレベルに比べて、好ましくは１．０５倍以上、より好ましくは１．１倍以上、さらに好ましくは１．２倍以上、さらにより好ましくは１．３倍以上高い場合、副作用を発症する可能性が高いと予測することができる。また、上記抗体医薬投与後の対象から採取された生物学的試料におけるＣＸＣＬ５の濃度が、投与前の対象の生物学的試料におけるＣＸＣＬ５の濃度に比べて、好ましくは５０ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは１００ｐｇ／ｍＬ、さらに好ましくは１５０ｐｇ／ｍＬ以上高い場合、副作用を発症する可能性が高いと予測することができる。
【００５０】
また、本発明の一つの態様によれば、対象において測定されたｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルが、上記抗体医薬の投与に起因する副作用の発症について、予め設定された閾値から外れる場合には、副作用を発症する可能性が高いと予測することができる。予め設定された閾値から外れる場合とは、例えば、上記マーカーのレベルが予め設定された閾値と同じもしくは該閾値より高い場合をいい、後述のように閾値が上限値と下限値を有する場合には、上記マーカーのレベルが該上限値と同じもしくは該上限値より高い、または下限値と同じもしくは該上限値より低い場合をいう。
【００５１】
上記の別の態様によれば、副作用を発症した対象（群）または副作用を発症しない対象（群）における上記抗体医薬投与前後のｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベル差またはレベル比から予め閾値を設定することができる。また、上記抗体医薬投与後に２回以上上記マーカーのレベルを測定している場合は、任意の２つの測定ポイントにおける上記マーカーのレベルの差または比に基づいて予め閾値を設定することができる。副作用の発症の予測は、上記閾値と、副作用の発症を予測する対象の対応するマーカーのレベル差またはレベル比とを比較することにより行ってもよい。
当業者であれば、副作用を発症した対象（群）、副作用を発症しない対象（群）または副作用を発症した対象（群）および副作用を発症しない対象（群）（以下、全対象（群）ともいう）の上記抗体医薬投与前後のｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択されるマーカーのレベル差またはレベル比から、閾値を適宜設定することができる。閾値としては、特に限定されるものではないが、例えば副作用を発症した対象（群）、副作用を発症しない対象（群）または全対象（群）の上記マーカーのレベル差または比の平均値、中央値、Ｘパーセンタイル値を使用することができ、好ましくは平均値である。ここでＸは任意の数値を選択することができ、３、５、１０、１５、２０、３０、４０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９７を適宜使用することができる。閾値は１つであってもよいし、副作用の種類、投与する抗体医薬の種類、抗体医薬を投与する対象の状態、測定するマーカーの種類等またはそれらの組合せに応じて複数設定することもできる。
また、閾値としては、例えば副作用を発症した対象（群）、副作用を発症しない対象（群）または全対象（群）から採取された生物学的試料における上記マーカーのレベル差または比の平均値、中央値、Ｘパーセンタイル値を中心に、特定の数値幅を設けることができる。中心の数値としては、平均値を用いることが好ましい。上記数値幅は、副作用を発症した対象（群）の上記抗体医薬投与前後の上記マーカーのレベル差または比と、副作用を発症しない対象（群）の上記抗体医薬投与前後の上記マーカーのレベル差または比とに基づいて決定できる。または、上記数値幅は、全対象（群）の上記抗体医薬投与前後の上記マーカーのレベル差または比に基づいて決定できる。上記数値幅として、例えば、全対象（群）の上記抗体医薬投与前後の上記マーカーのレベル差または比の標準偏差、標準誤差を用いることができる。また、全対象（群）の上記抗体医薬投与前後の上記マーカーのレベル差または比を用いてＲＯＣ曲線を作成し上限値および下限値を設定してもよい。また、上記閾値は、数値幅を有することから、上限値と下限値とが存在する。
また、閾値としては、副作用を発症した対象（群）の上記抗体医薬投与前後の上記マーカーのレベル差もしくは比と、副作用を発症しない対象（群）の上記抗体医薬投与前後の上記マーカーのレベル差もしくは比とに基づいて、または全対象（群）上記抗体医薬投与前後の上記マーカーのレベル差または比に基づいて特定の上限値および下限値を設定できる。ここで、前記上限値および前記下限値はそれぞれ独立して設定してもよく、前記上限値と下限値の絶対値が同じになるように設定してもよい。例えば、全対象（群）を用いてＲＯＣ曲線を作成し上限値および下限値を設定してもよく、また、全対象（群）における任意の２つのＸパーセンタイル値（Ｘの値は異なるものである）を上限値および下限値と設定してもよい。
【００５２】
上記閾値としては、例えば、上記抗体医薬投与後のＣＸＣＬ５のレベルの、抗体医薬投与前のＣＸＣＬ５のレベルに対する比が、好ましくは１．０５倍以上、より好ましくは１．１倍以上、さらに好ましくは１．３倍以上、さらにより好ましくは１．５倍以上である場合を有意とし、その比を閾値として用いることができる。また、例えば、上記抗体医薬投与後のｓＣＤ１６３のレベルの、抗体医薬投与前の対応するｓＣＤ１６３のレベルに対する比が、好ましくは１．３倍以上、より好ましくは１．５倍以上、さらに好ましくは１．６倍以上、さらにより好ましくは１．８倍以上、さらにより一層好ましくは２倍以上である場合を有意とし、その比を閾値として用いることができる。
さらに、閾値が、上記抗体医薬投与後のＣＸＣＬ５のレベルの、抗体医薬投与前のＣＸＣＬ５のレベルに対する比の全対象（群）の平均値を中心に特定の数値幅を設けた値である場合には、該数値幅は、例えば、２０〜７５％、好ましくは３０〜６０％、特に好ましくは４０〜５０％である。閾値が、上記抗体医薬投与後のＣＸＣＬ５のレベルの、抗体医薬投与前のＣＸＣＬ５のレベルに対する差の全対象（群）の平均値を中心に特定の数値幅を設けた値である場合には、該数値幅は、例えば、５０〜４００ｐｇ／ｍＬ、好ましくは７０〜２００ｐｇ／ｍＬ、特に好ましくは１００〜１５０ｐｇ／ｍＬである。また、閾値が、上記抗体医薬投与後のｓＣＤ１６３のレベルの、抗体医薬投与前のｓＣＤ１６３のレベルに対する比の全対象（群）の平均値を中心に特定の数値幅を設けた値である場合には、該数値幅は、例えば、１５〜５０％、好ましくは２０〜４０％、より好ましくは２５〜３５％である。閾値が、上記抗体医薬投与後のｓＣＤ１６３のレベルの、抗体医薬投与前のｓＣＤ１６３のレベルに対する差の全対象（群）の平均値を中心に特定の数値幅を設けた値である場合には、該数値幅は、例えば、１〜２５ｎｇ／ｍＬ、好ましくは２〜１０ｎｇ／ｍＬ、より好ましくは２．５〜５ｎｇ／ｍＬである。
また、上記抗体医薬投与後のＣＸＣＬ５のレベルの、抗体医薬投与前のＣＸＣＬ５のレベルに対する比を用いる場合の閾値として特定の上限値と下限値を設定する場合は、該上限値は、例えば、２０〜６０％、好ましくは３０〜５０％であり、該下限値は、例えば、−６０〜−２０％、好ましくは−５０〜−３０％である。上記抗体医薬投与後のＣＸＣＬ５のレベルの、抗体医薬投与前のＣＸＣＬ５のレベルに対する差を用いる場合の閾値として特定の上限値と下限値を設定する場合は、該上限値は、例えば、５０〜３００ｐｇ／ｍＬ、好ましくは１００〜２００ｐｇ／ｍＬであり、該下限値は、例えば、−３００〜−５０ｐｇ／ｍＬ、好ましくは−２００〜−１００ｐｇ／ｍＬである。また、上記抗体医薬投与後のｓＣＤ１６３のレベルの、抗体医薬投与前のｓＣＤ１６３のレベルに対する比を用いる場合の閾値として特定の上限値と下限値を設定する場合は、該上限値は、例えば、２０〜６０％、３０〜５０％、好ましくは３５〜４５％であり、該下限値は、例えば、−４０〜０％、−３０〜−１０％、好ましくは−２５〜−１５％である。また、上記抗体医薬投与後のｓＣＤ１６３のレベルの、抗体医薬投与前のｓＣＤ１６３のレベルに対する差を用いる場合の閾値として特定の上限値と下限値を設定する場合は、該上限値は、例えば、７．５〜２５ｎｇ／ｍＬ、好ましくは７．５〜１２．５ｎｇ／ｍＬであり、該下限値は、例えば、−１５〜２．５ｎｇ／ｍＬ、好ましくは−２．５〜２．５ｎｇ／ｍＬである。
予め設定された閾値と、対象のレベル差またはレベル比とを比較することにより、対象が副作用を発症する可能性を予測、判定または決定することが可能になる。
【００５３】
また、上記の別の態様によれば、副作用を発症した対象（群）または副作用を発症しない対象（群）における上記抗体医薬投与後のｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルから予め閾値を設定することができる。副作用の発症の予測は、上記閾値と、副作用の発症を予測する対象の対応するマーカーのレベルとを比較することにより行ってもよい。
当業者であれば、副作用を発症した対象（群）または副作用を発症しない対象（群）の上記抗体医薬投与後のｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルから、閾値を適宜設定することができる。閾値としては、特に限定されるものではないが、例えば副作用を発症した対象（群）または副作用を発症しない対象（群）の上記マーカーのレベルの平均値、中央値、Ｘパーセンタイル値を使用することができ、好ましくは平均値である。ここでＸは任意の数値を選択することができ、３、５、１０、１５、２０、３０、４０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９７を適宜使用することができる。閾値は１つであってもよいし、副作用の種類、投与する抗体医薬の種類、抗体医薬を投与する対象の状態、測定するマーカーの種類等またはそれらの組合せに応じて複数設定することもできる。
また、閾値としては、例えば副作用を発症した対象（群）または副作用を発症しない対象（群）における上記抗体医薬投与後の生物学的試料における上記マーカーのレベルの平均値、中央値、Ｘパーセンタイル値を中心に、特定の数値幅を設けることができる。中心の数値としては、平均値を用いることが好ましい。上記数値幅は、副作用を発症した対象（群）の上記抗体医薬投与後の上記マーカーのレベルと、副作用を発症しない対象（群）の上記抗体医薬投与後の上記マーカーのレベルとに基づいて決定できる。また、上記閾値は、数値幅を有することから、上限値と下限値とが存在する。
また、閾値としては、副作用を発症した対象（群）の上記抗体医薬投与後の上記マーカーのレベルと、副作用を発症しない対象（群）の上記抗体医薬投与前後の上記マーカーのレベルとに基づいて、特定の上限値および下限値を設定できる。ここで、前記上限値および前記下限値はそれぞれ独立して設定してもよく、前記上限値と下限値の絶対値が同じになるように設定してもよい。
予め設定された閾値と、対象のレベルとを比較することにより、対象が副作用を発症する可能性を予測、判定または決定することが可能になる。
【００５４】
また、本発明の別の態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用をモニタリングする方法であって、抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することを含んでなる方法が提供される。かかる方法は、データを取得する方法、副作用の発症を予測する方法と同様の手法により実施することができる。かかるモニタリングは、対象における副作用の発症状況または副作用のグレードまたはｉｒＡＥ評価を経時的に確認する上で有利である。
【００５５】
本発明では、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象において、該抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するための、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５を含んでなるマーカーも提供される。上記マーカーはｓＣＤ１６３単独またはＣＸＣＬ５単独を用いてもよく、また、ｓＣＤ１６３とＣＸＣＬ５とを組み合わせてもよく、さらに、他のマーカーと組み合わせてもよい。かかるマーカーの態様は、データを取得する方法、副作用の発症を予測する方法に関する記載に準じて実施することができる。
【００５６】
本発明では、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象において、該抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するためにｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーを検出またはそのレベルを測定する診断薬も提供される。上記診断薬を用いることにより、例えば、上記に説明した各種の測定方法を行うことができる。上記測定方法としては、例えば、免疫測定法、電気泳動法、ウエスタンブロッティング法、質量分析法等が挙げられ、好ましくは免疫測定法である。ここで、免疫測定法としては、イムノクロマトグラフィー法も含まれる。
したがって、上記診断薬としては、例えば、抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分を含有させることができる。抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分としては、上記免疫測定法における抗体と同様のものを使用することができる。
かかる診断薬の態様は、データを取得する方法、副作用の発症を予測する方法に関する記載に準じて実施することができる。
【００５７】
また、本発明では、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象において、該抗体医薬に起因する副作用の発症を予測するために、ｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーを検出またはそのレベルを測定する診断用キットも提供される。これらのキットには、上記に説明した各種の測定方法を行うために、測定方法に応じて、各種の試薬を構成成分として含有させることができる。上記測定方法としては、例えば、免疫測定法、電気泳動法、ウエスタンブロッティング法、質量分析法等が挙げられ、好ましくは免疫測定法である。ここで、免疫測定法としては、イムノクロマトグラフィー法も含まれる。
したがって、上記診断用キットとしては、例えば、抗ｓＣＤ１６３抗体、抗ＣＸＣＬ５抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの成分を含有させることができる。上記キットには、更に、標識物質の発色系試薬等、実施する測定方法に応じて、周知の試薬を含有させることができる。
上記の診断用キットの態様は、データを取得する方法、副作用の発症を予測する方法または診断薬に関する記載に準じて実施することができる。
本発明の別の態様によれば、上記診断キットは、後述の、薬剤の予防投与の判断に用いるため、または投与した薬剤の効果を確認するために用いることもできる。本発明の別の好ましい態様によれば、上記診断キットは、後述の、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症の予測のための検査の計画を調整または決定するためのデータを取得するために用いることもできる。
【００５８】
また、本発明の別の態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定し、得られた副作用の発症の予測結果に基づき、該副作用の発症を予防、抑制もしくは遅延する方法、発症した副作用のグレードまたはｉｒＡＥ評価を低く保持する方法、または、発症した副作用を改善する方法が提供される。ここで、副作用のグレードまたはｉｒＡＥ評価が低いとは、好ましくは１〜２である。上述の、副作用の発症を予防、抑制もしくは遅延する方法、発症した副作用のグレードまたはｉｒＡＥ評価を低く保持する方法、または、発症した副作用を改善する方法としては、例えば、有効量の薬剤を投与すること、または、投与している上記抗体医薬の量の低減または上記抗体医薬の投与の中止または休止が挙げられる。投与される薬剤は、発症が予測された、または、発症した副作用に有用な薬剤が選択される。例えば、副作用が免疫関連副作用の場合には、副腎皮質ホルモン等のステロイド、免疫抑制剤が挙げられ、ステロイドとして、具体的には、コルチゾール（ヒドロコルチゾン、コルチゾン）、プレドニゾロン（メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン）、トリアムシノロン、デキサメタゾン、ベタメタゾンまたはそれらの塩等が挙げられる。投与される薬剤としては、好ましくは、血中半減期が３時間程度、生物学的半減期が１２〜３６時間である、中間型のステロイド、より好ましくはメチルプレドニゾロン、プレドニゾロンである。上記いずれかの別の好ましい態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定し、副作用の発症の予測結果に基づき、薬剤を予防投与するか否かの判断に用いる方法を含んでなる。
【００５９】
したがって、本発明の別の好ましい態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬を投与した対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定し、得られた副作用の発症の予測結果に基づき、該副作用の発症を予防、抑制もしくは遅延する方法、発症した副作用のグレードまたはｉｒＡＥ評価を低く保持する方法、または、発症した副作用を改善する方法であって、有効量の薬剤を、それを必要とする対象に投与する工程を含むものである。
【００６０】
また、本発明の別の好ましい態様によれば、投与した薬剤の効果を確認する方法であって、上述の薬剤が投与された対象から採取された生物学的試料において、ｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することを含んでなる方法が提供される。上記薬剤の効果を確認する方法は、副作用の発症を予測する方法に関する記載に準じて実施することができる。ここで、薬剤の効果を確認するために、マーカーのレベル差またはレベル比を用いる場合には、薬剤の効果を確認する対象における、上記薬剤投与後の対象からの生物学的試料における上記マーカーのレベルと、上記抗体医薬投与前の対象から採取された生物学的試料における上記マーカーのレベルとを用いてよい。上記薬剤の投与後としては、例えば、上記薬剤を投与してから１２週以内が挙げられ、好ましくは９週以内、さらに好ましくは６週以内である。上記薬剤の効果としては、例えば、副作用の発症を予防、抑制もしくは遅延すること、発症した副作用のグレードまたはｉｒＡＥ評価を低く保持すること、または、発症した副作用を改善することが挙げられる。
【００６１】
上記薬剤の有効量は、特に限定されず、薬剤の種類、純度、副作用の種類、程度、対象の種類、性質、性別、年齢、症状等に応じて当業者によって、適宜決定される。例えば、かかる有効量としては、０．１〜２０ｍｇ／体重ｋｇ／日、好ましくは１．０〜２０ｍｇ／体重ｋｇ／日を１回または数回等が挙げられる。
【００６２】
本発明の対象は、哺乳動物、例えば、げっ歯類、イヌ、ネコ、ウシ、霊長類などであり、好ましくはヒトであり、より好ましくは、癌、肉腫、または悪性中皮腫に罹患したヒトである。また、薬剤、好ましくはステロイド、を投与されたヒトであってもよい。
【００６３】
また、本発明の別の態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症の予測を補助する方法であって、上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することを含んでなる方法が提供される。
【００６４】
また、本発明の別の態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を診断する方法であって、上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することを含んでなる方法が提供される。
【００６５】
また、本発明の別の態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症の診断を補助する方法であって、上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することを含んでなる方法が提供される。
【００６６】
また、本発明の別の態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つ抗体医薬を投与された対象における、該抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するためのマーカーとしての、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５の使用が提供される。また、上記ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５は、好ましくは、上記対象から採取された生物学的試料中に含まれるものである。
【００６７】
また、本発明の別の態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つ抗体医薬を投与された対象において、該抗体医薬の投与に起因する副作用の発症を予測するためのマーカーの製造における、ｓＣＤ１６３またはＣＸＣＬ５の使用が提供される。
【００６８】
また、本発明の別の態様によれば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体およびそれらの抗原結合断片から選択される少なくとも一つの抗体医薬の投与に起因する副作用の発症の予測のための検査の計画を調整または決定するためのデータを取得する方法であって、上記抗体医薬を投与された対象から採取された生物学的試料においてｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルを測定することを含んでなる方法が提供される。通常、臨床検査は、上記抗体医薬の投薬間隔である２〜３週間毎に行われている。上記方法において、得られたデータに基づき、副作用を発症する可能性が高いと予測された場合には、通常より短い間隔、例えば、１週間毎〜週２回、に変更することができる。さらに、臨床検査項目も、副作用を発症する可能性が高いとの予測に伴い、通常の臨床検査項目から変更することができる。
【００６９】
上記の通常の臨床検査項目を以下に例示する。
プロトコル治療：０週（投与前）
・身体所見：ECOG, PS
・皮膚所見：皮膚転移巣の有無、大きさ、個数
・血液検査（血算）：赤血球、白血球、血小板、ヘモグロビン値、ヘマトクリット、白血球分画
・生化学検査：AST、ALT、γ-GTP、ALP、LDH、総ビリルビン、BUN、クレアチニン、CK、TSH、T3、T4、KL6、コルチゾール
・併用治療・支持療法：プロトコル治療中に実施した併用療法・支持療法の内容を記録する。
・自他覚所見：以下の項目について、CTCAE v4.0-JCOGでGradeを判定する。
胃腸障害、皮膚および皮下組織障害、精神障害、呼吸器、胸郭および縦隔障害
プロトコル治療：３週
・身体所見：ECOG, PS
・皮膚所見：皮膚転移巣の有無、大きさ、個数
・血液検査（血算）：赤血球、白血球、血小板、ヘモグロビン値、ヘマトクリット、白血球分画
・生化学検査：AST、ALT、γ-GTP、ALP、LDH、総ビリルビン、BUN、クレアチニン、CK、TSH、T3、T4、KL6、コルチゾール
・併用治療・支持療法：プロトコル治療中に実施した併用療法・支持療法の内容を記録する。
・自他覚所見：以下の項目について、CTCAE v4.0-JCOGでGradeを判定する。
胃腸障害、皮膚および皮下組織障害、精神障害、呼吸器、胸郭および縦隔障害
プロトコル治療終了時（６週）
・身体所見：ECOG, PS 
・皮膚所見：皮膚転移巣の有無、大きさ、個数
・血液検査（血算）：赤血球、白血球、血小板、ヘモグロビン値、ヘマトクリット、白血球分画
・生化学検査：AST、ALT、γ-GTP、ALP、LDH、総ビリルビン、BUN、クレアチニン、CK、TSH、T3、T4、KL6、コルチゾール
・胸部CT：間質性肺炎の有無、胸水の有無を検証
・自他覚所見：以下の項目について、CTCAE v4.0-JCOGでGradeを判定する。
胃腸障害、皮膚および皮下組織障害、精神障害、呼吸器、胸郭および縦隔障害
【００７０】
上記の「副作用を発症する可能性が高いと予測された場合」に短い間隔で測定する臨床検査項目を例示する。
末梢血、白血球分画、CRP
【００７１】
上述の、副作用の発症を予防、抑制または遅延する方法、発症した副作用のグレードまたはｉｒＡＥ評価を低く保持する方法、発症した副作用を改善する方法、副作用の発症の予測を補助する方法、副作用の発症を診断する方法、副作用の発症の診断を補助する方法、マーカーとしての使用、マーカーの製造のための使用、副作用の発症の予測のための検査の計画を決定するためのデータを取得する方法の態様はいずれも、データを取得する方法、副作用の発症を予測する方法と同様の手法により実施することができる。
【実施例】
【００７２】
以下、実施例により、本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術範囲は、これらの例示に限定されるものではない。なお、特に記載しない限り、本明細書に記載の単位や測定方法はJIS規格による。【００７３】
試験例１：ニボルマブ投与前後の患者の血清中のｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の測定
ニボルマブを投与した悪性黒色腫に罹患した患者８名を対象として行った。ニボルマブを投与した患者８名のうち７名には、ニボルマブ投与に起因する副作用は認められなかった。一方、１名の患者にはニボルマブ投与に起因する副作用が認められた。副作用の認められた患者は、黒色腫転移巣を有しており、３週間に一度２ｍｇ／ｋｇのニボルマブが投与された。ニボルマブ投与６ヶ月後に、ＭＲＩにて脳への転移、ＣＴスキャンにて全身への転移を検査した結果、脳に転移していると診断された。同時期に、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）レベルが増加し始め（２．８４μＩＵ／ｍＬ）、ニボルマブ投与８ヶ月後に血清中のＴＳＨレベルが７．０７μＩＵ／ｍＬであることが確認され、上記患者は下垂体機能性低下症に罹患していることが疑われた。そのため、上記患者に関し、コルチコトロピン放出ホルモン（ＣＲＨ）負荷試験を行ったところ、血清中副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）の低下（１．０ｎｇ／ｍＬ未満）およびコルチゾールの低下（０．８μｇ／ｄＬ）が認められたことから、上記患者はＡＣＴＨ欠損症と診断された。【００７４】
上記患者８名について、ニボルマブの投与前および投与６週後の血清を採取し、血清中のｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の濃度をＥＬＩＳＡ法にて測定した。具体的には、血清中のｓＣＤ１６３濃度測定はｓＣＤ１６３に特異的に結合する抗体を含むキットＨｕｍａｎ  ＣＤ１６３  ＤｕｏＳｅｔ（カタログ番号：ＤＹ１６０７）（Ｒ  ａｎｄ  Ｄ  ｓｙｓｔｅｍ、Ｍｉｎｎｅａｐｐｏｌｉｓ，ＭＮ）を用いて、プロトコールに従い行った。血清中のＣＸＣＬ５濃度測定はＨｕｍａｎ  ＣＸＣＬ５／ＥＮＡ−７８  ＤｕｏＳｅｔ  ＥＬＩＳＡ（カタログ番号：ＤＹ２５４）（Ｒ  ａｎｄ  Ｄ  ｓｙｓｔｅｍ、Ｍｉｎｎｅａｐｐｏｌｉｓ，ＭＮ）を用いて、プロトコールに従い行った。【００７５】
また、ＴＮＦαの濃度に関しても、ニボルマブの投与前および投与６週後の血清を採取し、血清中のＴＮＦαの濃度を、ＥＬＩＳＡ法にて測定した。具体的には、血清中のＴＮＦα濃度測定はＨｕｍａｎ  ＴＮＦａ  ＤｕｏＳｅｔ（カタログ番号：ＤＹ２１０）（Ｒ  ａｎｄ  Ｄ  ｓｙｓｔｅｍ、Ｍｉｎｎｅａｐｐｏｌｉｓ，ＭＮ）を用いて、プロトコールに従い行った。【００７６】
図１Ａ、Ｂに示される通り、ニボルマブ投与に起因する副作用が認められた１名の患者では、ニボルマブ投与に起因する副作用が認められなかった７名の患者に比べて、血清中のｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の濃度がアップレギュレートされた（検体数  ｎ＝３の場合、対応のあるｔ検定、p<0.05で有意差有り）。
なお、ＴＮＦαについては全ての患者で検出されなかった。【００７７】
試験例２：ニボルマブ投与前後の患者の血清中のｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の測定（４６症例）
試験例１と同様にニボルマブを投与した悪性黒色腫に罹患した患者４６名を対象とした。具体的には、患者１〜４６に、３週間に一度２ｍｇ／ｋｇまたは２週間に一度３ｍｇ／ｋｇニボルマブを投与した。上記患者４６名について、ニボルマブの投与前および投与６週後の血清を採取し、血清中のｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の濃度をＥＬＩＳＡ法にて測定した。なお、上記４６名の患者のうち、患者１〜８は試験例１の患者と同じ患者であり、試験例１の後に継続して診察を行った。
結果を表１に示す。【００７８】
【表１】
2018003995.tif 000002
【００７９】
患者４、５、および７は、試験例１の診察時点ではニボルマブ投与に起因する副作用が確認されていなかった。その後の診察により、患者４はニボルマブ投与８週後に、患者５はニボルマブ投与６０週後に、患者７はニボルマブ投与１６週後に、表１の副作用の発症が認められた。また、患者８はニボルマブ投与３０週後に下垂体炎の発症が認められた。【００８０】
上記表１の結果に基づき予め設定したカットオフ値（閾値）を指標として、以下の基準に従い陽性的中率、陰性的中率、および的中率を求めた。
具体的には、実際に副作用が認められた患者のうち、本試験においても副作用を発症する可能性が高いと判定された場合を「陽性」とし、副作用を発症する可能性が高いと判定されなかった場合を「偽陰性」とした。
実際に副作用が認められかった患者のうち、本試験においても副作用を発症する可能性が高いと判定されなかった場合を「陰性」とし、副作用を発症する可能性が高いと判定された場合を「偽陽性」とした。
本試験において副作用を発症する可能性が高いと判定された患者のうち実際に副作用が認められた患者、すなわち、陽性患者、の割合を陽性的中率とした。
本試験において副作用を発症する可能性が高いと判定されなかった患者のうち実際に副作用が認められなかった患者、すなわち、陰性患者、の割合を陰性的中率とした。
実際に副作用が認められた患者のうち、本試験において副作用を発症する可能性が高いと判定された患者の割合を感度とした。
実際に副作用が認められかった患者のうち、本試験において副作用を発症する可能性が高いと判定されなかった患者の割合を特異度とした。
全患者に対する陽性患者および陰性患者の割合を本試験における的中率とした。【００８１】
全４６症例の増減比データについて、ｓＣＤ１６３の平均値は１０．８％、ＣＸＣＬ５での平均値は０．０％であった。平均値を中心とした増減比データについて、ｓＣＤ１６３の標準偏差は３０．８％、ＣＸＣＬ５での標準偏差は４０．５％であった。【００８２】
１．ｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の標準偏差を基にした閾値設定
ｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の増減比データの平均値を中心に標準偏差（σ）から±１σで閾値を設定した。（設定された閾値：ｓＣＤ１６３の上限４２％下限−２０％、ＣＸＣＬ５の上限４１％下限−４１％）
ここで、測定されたＣＸＣＬ５の増減比が上記閾値の上限値以上もしくは下限値以下であるか、または、測定されたｓＣＤ１６３の増減比が上記閾値の上限値以上もしくは下限値以下である患者を、副作用を発症する可能性が高い患者とした。
上記基準に基づき、的中率等を求めた。
この結果を表２に示す。
【表２】
2018003995.tif 000003
【００８３】
２．ｓＣＤ１６３のＲＯＣ曲線を基にした閾値設定
４６症例のｓＣＤ１６３の増減比データとその平均値の差分の絶対値に基づいてＲＯＣ曲線を作成した。図２にＲＯＣ曲線を示す。
ＲＯＣ曲線の横軸は、（１−特異度）を表し、これは、偽陽性の割合と共に増大する。縦軸は、感度を表す。なお、作成にあたり、ｉｒＡＥ＝１を「陽性」としている。このＲＯＣ曲線で「感度−（１−特異度）」が最大となる点は０．２３１で、ＲＯＣ曲線下の面積（ＡＵＣ）は０．７４６であった。
ｓＣＤ１６３の平均値を中心に±２１．３％で閾値を設定した。
（設定された閾値は、ｓＣＤ１６３の上限３２％下限−１１％）
測定されたｓＣＤ１６３の増減比データが、上記閾値の上限値以上または下限値以下である患者を、副作用を発症する可能性が高い患者とした。
上記基準に基づき、的中率等を求めた。
この結果を表３に示す。
【表３】
2018003995.tif 000004
【００８４】
３．ｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５のＲＯＣ曲線を基にした閾値設定
さらに、２に記載のｓＣＤ１６３と同様に、ＣＸＣＬ５の増減比データとその平均値の差分の絶対値に基づいてＲＯＣ曲線を作成し、ＣＸＣＬ５の閾値も設定した。
（設定された閾値としては、ｓＣＤ１６３の上限３２％下限−１１％、ＣＸＣＬ５の上限４８％下限−４８％であった。）
ここで、測定されたＣＸＣＬ５の増減比が上記閾値の上限値以上もしくは下限値以下であるか、または、測定されたｓＣＤ１６３の増減比が上記閾値の上限値以上もしくは下限値以下である患者を、副作用を発症する可能性が高い患者とした。
上記基準に基づき、的中率等を求めた。
その結果、陽性的中率は７１．４％、陰性的中率は８８．９％、感度は９０．９％、的中率は７８．３％であり、上記２のｓＣＤ１６３のみの場合に比べて上昇した。一方、特異度は、上記２のｓＣＤ１６３のみの場合と同程度であった。【００８５】
４．ｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５で同じ閾値幅にて設定
ｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の閾値を、平均値を中心に±３２％に設定した。（閾値は、ｓＣＤ１６３の上限４３％下限−２１％、ＣＸＣＬ５上限３２％下限−３２％であった。）
ここで、測定されたＣＸＣＬ５の増減比が上記閾値の上限値以上もしくは下限値以下であるか、または、測定されたｓＣＤ１６３の増減比が上記閾値の上限値以上もしくは下限値以下である患者を、副作用を発症する可能性が高い患者とした。
上記基準に基づき、的中率等を求めた。
この結果を表４に示す。【００８６】
【表４】
2018003995.tif 000005
【図１Ａ】
2018003995.tif 000006
【図１Ｂ】
2018003995.tif 000007
【図２】
2018003995.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成30年12月28日(2018.12.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
また、本発明の一つの態様によれば、対象において測定されたｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５から選択される少なくとも一つのマーカーのレベルが、上記抗体医薬の投与に起因する副作用の発症について、予め設定された閾値から外れる場合には、副作用を発症する可能性が高いと予測することができる。予め設定された閾値から外れる場合とは、例えば、上記マーカーのレベルが予め設定された閾値と同じもしくは該閾値より高い場合をいい、後述のように閾値が上限値と下限値を有する場合には、上記マーカーのレベルが該上限値と同じもしくは該上限値より高い、または下限値と同じもしくは該下限値より低い場合をいう。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８２】
１．ｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の標準偏差を基にした閾値設定
ｓＣＤ１６３およびＣＸＣＬ５の増減比データの平均値を中心に±１標準偏差（σ）で閾値を設定した。（設定された閾値：ｓＣＤ１６３の上限４２％下限−２０％、ＣＸＣＬ５の上限４１％下限−４１％）
ここで、測定されたＣＸＣＬ５の増減比が上記閾値の上限値以上もしくは下限値以下であるか、または、測定されたｓＣＤ１６３の増減比が上記閾値の上限値以上もしくは下限値以下である患者を、副作用を発症する可能性が高い患者とした。
上記基準に基づき、的中率等を求めた。
この結果を表２に示す。
【表２】
2018003995.tif 000009
【国際調査報告】
2018003995.tif 000010
2018003995.tif 000011
2018003995.tif 000012
2018003995.tif 000013