【手続補正書】
【提出日】平成31年3月4日(2019.3.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
循環Ｔｒｏｐ−２＋腫瘍細胞を単離し、検出し、または特徴付ける方法であって、
ａ）Ｔｒｏｐ−２＋癌を有する疑いのある対象由来の血液に、抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその抗原結合性断片を露出させることと、
ｂ）前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその断片を、前記Ｔｒｏｐ−２＋循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）に結合させることと、
ｃ）前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその断片に結合した前記ＣＴＣを検出すること
を含む方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、更に、前記ＣＴＣを濃縮または単離することを含む方法。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の方法であって、前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその断片が磁気ナノ粒子に結合される方法。
【請求項４】
請求項３に記載の方法であって、更に、磁場を用いて前記磁性ナノ粒子に結合したＣＴＣを正常細胞から分離することを含む、方法。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法であって、前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその断片が、軽鎖ＣＤＲ配列のＣＤＲ１（ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ、配列番号１）、ＣＤＲ２（ＳＡＳＹＲＹＴ、配列番号２）、及びＣＤＲ３（ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ、配列番号３）、並びに重鎖ＣＤＲ配列のＣＤＲ１（ＮＹＧＭＮ、配列番号４）、ＣＤＲ２（ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ、配列番号５）及びＣＤＲ３（ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ、配列番号６）を含むＲＳ７抗体である方法。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法であって、前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体が、マウスＲＳ７、ｈＲＳ７、ＭＡＢ６５０、Ｋ５−７０、Ｋ５−１０７、Ｋ５−１１６−２−１、Ｔ６−１６、Ｔ５−８６、ＢＲ１１０、ＡＲ４７Ａ６．４．２、３Ｅ９、６Ｇ１１、７Ｅ６、１５Ｅ２、１８Ｂ１、ＰＤ０８０１９、ＰＤ０８０２０、ＰＤ０８０２１、７７２２０、ＫＭ４０９７、ＫＭ４５９０、Ａ１、Ａ４、１６２−２５．３、１６２−４６．２、およびＰｒ１Ｅ１１からなる群から選択される、方法。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法であって、前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体が、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体またはヒト抗体である、方法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法であって、前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体が、放射性同位元素、色素、造影剤、発光剤、化学発光剤、蛍光剤、及び増強剤からなる群から選択される少なくとも１つの診断剤に結合される、方法。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法であって、更に、腫瘍関連抗原に結合する第２の抗体またはその抗原結合性断片に前記ＣＴＣを露出させることを含み、ここで前記第２の抗体またはその断片は、放射性同位体、色素、造影剤、発光剤、化学発光剤、蛍光剤、及び増強剤からなる群から選択される少なくとも１つの診断剤に結合される、方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法であって、前記第２の抗体またはその断片が、Ｔｒｏｐ−２、ＥｐＣＡＭ、サイトケラチン（ＣＫ）及びＣＤ４５からなる群から選択されるＴＡＡに結合する、方法。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法であって、前記ＣＴＣが、蛍光顕微鏡法、ＦＩＳＨ（蛍光ｉｎ−ｓｉｔｕハイブリダイゼーション）、免疫組織化学、ＦＡＣＳ（蛍光活性化された細胞の選別）、フローサイトメトリー、マイクロ流体アッセイ、及びＲＴ−ＰＣＲからなる群から選択される方法により検出される、方法。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法であって、更に、蛍光標識抗体により、上皮癌マーカーについて前記ＣＴＣを分析することを含む、方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法であって、前記ＣＴＣが、ＦＩＳＨ（蛍光インサイチューハイブリダイゼーション）により上皮癌マーカーについて分析される、方法。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法であって、更に、ＲＴ−ＰＣＲにより上皮癌マーカーについてＣＴＣを分析することを含む、方法。
【請求項１５】
請求項９に記載の方法であって、前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体がＲＳ７抗体であり、前記第２の抗体が、ＲＳ７とは異なるエピトープに結合する抗Ｔｒｏｐ−２抗体である、方法。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法であって、前記Ｔｒｏｐ−２＋癌が、膵臓癌、トリプルネガティブ乳癌、転移性結腸直腸癌、ＨＥＲ＋、ＥＲ＋、プロゲステロン＋乳癌、転移性非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、転移性膵臓癌、転移性食道癌、転移性尿路上皮癌、転移性腎細胞癌、転移性胃癌、転移性前立腺癌及び転移性小細胞肺癌を含む転移性Ｔｒｏｐ−２陽性癌からなる群から選択される、方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法であって、前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその断片が、エクスビボで血液試料に露出される、方法。
【請求項１８】
請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法であって、前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその断片が、インビボで血液試料に露出される、方法。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法であって、Ｔｒｏｐ−２＋ＣＴＣの存在は転移性癌のための診断に役立つ、方法。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法であって、前記対象がヒト対象である、方法。
【請求項２１】
請求項９に記載の方法であって、前記第２の抗体は、ＭＮ−１４（抗−ＣＥＡＣＡＭ５）、ＰＡＭ４（抗−ＭＵＣ５ａｃ）、ＬＬ１（抗−ＣＤ７４）、Ｌ２４３（抗−ＨＬＡ−ＤＲ）、Ｍｕ−９（抗−ＣＳＡｐ）、ＩＭＭＵ３１（抗−ＡＦＰ）、トラスツズマブ（抗−ＨＥＲ２）、セツキシマブ（抗−ＥＧＦＲ）、パニツムマブ（抗−ＥＧＦＲ）及びＲ１（抗−ＩＧＦ−１Ｒ）からなる群から選択される、方法。
【請求項２２】
抗Ｔｒｏｐ−２抗体での治療に応答する患者を選別する方法であって、
ａ）抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその抗原結合性断片を、Ｔｒｏｐ−２＋癌を有することが疑われる対象からの血液に露出させることと、
ｂ）前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその抗原結合性断片を、Ｔｒｏｐ−２＋循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）に結合させることと、
ｃ）前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体またはその断片に結合したＣＴＣを検出することと
を含む、方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の方法であって、更に、前記ＣＴＣにおけるＴｒｏｐ−２のコピー数を分析することを含む、方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の方法であって、高コピー数のＴｒｏｐ−２を有するＴｒｏｐ−２＋ＣＴＣ存在が治療用抗Ｔｒｏｐ−２抗体に対する応答を予測し、ここでの高コピー数とは細胞当たり３以上である、方法。
【請求項２５】
請求項２２に記載の方法であって、更に、循環系におけるＴｒｏｐ−２＋ＣＴＣの存在をモニタリングして、治療用抗Ｔｒｏｐ−２抗体に対する腫瘍の応答を決定することを含む、方法。
【請求項２６】
請求項２２〜２５のいずれか一項に記載の方法であって、前記抗Ｔｒｏｐ−２抗体での治療が、抗体、抗体断片、薬物、毒素、ホルモン、免疫調節物質、アポトーシス促進剤、抗血管新生剤、ホウ素化合物、光活性剤及び放射性核種からなる群から選択される少なくとも１つの治療剤に複合体化された抗Ｔｒｏｐ−２抗体による治療である、方法。
【請求項２７】
請求項２６に記載の方法であって、前記薬物は、アントラサイクリン、カンプトテシン、チューブリン阻害剤、メイタンシノイド、カリケアマイシン、アウリスタチン、ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン誘導体、アルキルスルホネート、ニトロソ尿素、トリアゼン、葉酸類似体、タキサン、ＣＯＸ−２阻害剤、ピリミジン類似体、プリン類似体、抗生物質、酵素阻害剤、エピポドフィロトキシン、白金配位錯体、ビンカアルカロイド、置換尿素、メチルヒドラジン誘導体、副腎皮質抑制剤、ホルモンアンタゴニスト、代謝拮抗物質、アルキル化剤、有糸分裂阻害剤、抗血管新生剤、チロシンキナーゼ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ９０）阻害剤、プロテオソーム阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、及びアポトーシス促進剤からなる群から選択される、方法。
【請求項２８】
請求項２６に記載の方法であって、前記薬物は、５−フルオロウラシル、アファチニブ、アプリジン、アザリビン、アナストロゾール、アントラサイクリン、アキシチニブ、ＡＶＬ−１０１、ＡＶＬ−２９１、ベンダムスチン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ボスチニブ、ブリオスタチン−１、ブスルファン、カリケアマイシン、カンプトテシン、カルボプラチン、１０−ヒドロキシカンプトテシン、カルムスチン、セレコキシブ、クロラムブシル、シスプラチン、ＣＯＸ−２阻害剤、イリノテカン（ＣＰＴ−１１）、ＳＮ−３８、カルボプラチン、クラドリビン、カンプトテカン、クリゾチニブ、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダサチニブ、ディナシクリブ（ｄｉｎａｃｉｃｌｉｂ）、ドセタキセル、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ＤＭ１、ＤＭ３、ＤＭ４、ドキソルビシン、２−ピロリノドキソルビシン（２−ＰＤｏｘ）、２−ＰＤｏｘのプロドラッグ形態（ｐｒｏ−２−ＰＤｏｘ）、シアノ−モルホリノドキソルビシン、ドキソルビシングルクロニド、エンドスタチン、エピルビシングルクロニド、エルロチニブ、エストラムスチン、エピドフィロトキシン（ｅｐｉｄｏｐｈｙｌｌｏｔｏｘｉｎ）、エルロチニブ、エンチノスタット、エストロゲン受容体結合剤、エトポシド（ＶＰ１６）、エトポシドグルクロニド、リン酸エトポシド、エキセメスタン、フィンゴリモド、フロクスウリジン（ＦＵｄＲ）、３´，５´−Ｏ−ジオレオイル−ＦｕｄＲ（ＦＵｄＲ−ｄＯ）、フルダラビン、フルタミド、ファルネシル−タンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、フラボピリドール、フォスタマチニブ（ｆｏｓｔａｍａｔｉｎｉｂ）、ガネテスピブ（ｇａｎｅｔｅｓｐｉｂ）、ＧＤＣ−０８３４、ＧＳ−１１０１、ゲフィチニ、ゲムシタビン、ヒドロキシ尿素、イブルチニブ、イダルビシン、イデラリシブ、イフォスファミド、イマチニブ、ラパチニブ、レノリダミド（ｌｅｎｏｌｉｄａｍｉｄｅ）、ロイコボリン、ＬＦＭ−Ａ１３、ロムスチン、メクロレタミン、メルファラン、メルカプトプリン、６−メルカプトプリン、メソトレキセート、ミトキサントロン、ミトラマイシン、マイトマイシン、ミトタン、モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）、モノメチルオーリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、ナベルビン、ネラチニブ、ニロチニブ、ニトロソ尿素、オラパリブ、プリコマイシン（ｐｌｉｃｏｍｙｃｉｎ）、プロカルバジン、パクリタキセル、ＰＣＩ−３２７６５、ペントスタチン、ＰＳＩ−３４１、ラロキシフェン、セムスチン、ＳＮ−３８、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、ＳＵ１１２４８、スニチニブ、タモキシフェン、テマゾロミド（ｔｅｍａｚｏｌｏｍｉｄｅ）、トランスプラチナ、サリドマイド、チオグアニン、チオテパ、テニポシド、トポテカン、ウラシルマスタード、バタラニブ、ビノレルビン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンカアルカロイド、及びＺＤ１８３９からなる群から選択される、方法。
【請求項２９】
請求項２６に記載の方法であって、前記薬物が、ＳＮ−３８、ｐｒｏ−２−ピロリノドキソルビシン（ｐｒｏ−２−ＰＤｏｘ）、パクリタキセル、カリケマイシン、ＤＭ１、ＤＭ３、ＤＭ４、ＭＭＡＥ、ＭＭＡＤ、及びＭＭＡＦからなる群から選択される、方法。
【請求項３０】
請求項２２〜２９のいずれか一項に記載の方法であって、前記癌は少なくとも１つの抗癌療法での治療に対して抵抗性である、方法。
【請求項３１】
請求項２２〜３０のいずれか一項に記載の方法であって、前記癌が膵臓癌である、方法。
【請求項３２】
請求項２６に記載の方法であって、前記免疫調節物質が、サイトカイン、幹細胞成長因子、リンホトキシン、造血因子、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、インターフェロン（ＩＦＮ）、インターロイキン、エリスロポエチン及びトロンボポエチンからなる群から選択される、方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の方法であって、前記サイトカインが、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン、ウシ成長ホルモン、副甲状腺ホルモン、チロキシン、インスリン、プロインスリン、リラキシン、プロリラキシン、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）、肝臓成長因子、プロスタグランジン、線維芽細胞成長因子、プロラクチン、胎盤ラクトゲン、ＯＢタンパク質、腫瘍壊死因子α、腫瘍壊死因子β、ミュラー管阻害物質、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチビン、血管内皮増殖因子、インテグリン、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、ＮＧＦ−β、血小板成長因子、ＴＧＦ−α、ＴＧＦ−β、インスリン様増殖因子−Ｉ、インスリン様成長因子−ＩＩ、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、骨誘導因子、インターフェロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、マクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）、ＩＬ−１、ＩＬ−１α、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＬ−２５、ＬＩＦ、ＦＬＴ−３、アンジオスタチン、トロンボスポンジン、エンドスタチン、腫瘍壊死因子及びリンホトキシンからなる群から選択される、方法。