(57)【要約】  本発明は、タンパク質の凝集を防止するために用いられるタンパク質凝集防止剤であって、スルホベタインモノマーを含有するモノマー成分を重合させてなるスルホベタインポリマーと、前記スルホベタインモノマーと、架橋性モノマーとを含有する重合性ポリマー成分を重合させてなる架橋ポリマーを含有することを特徴とするタンパク質凝集防止剤を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質の凝集を防止するために用いられるタンパク質凝集防止剤であって、スルホベタインモノマーを含有するモノマー成分を重合させてなるスルホベタインポリマーと、前記スルホベタインモノマーと、架橋性モノマーとを含有する重合性ポリマー成分を重合させてなる架橋ポリマーを含有することを特徴とするタンパク質凝集防止剤。
【請求項２】
モノマー成分が、さらにカルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物を含有する請求項１に記載のタンパク質凝集防止剤。
【請求項３】
スルホベタインモノマーが、式（Ｉ）：
【化１】
2017209121.tif 000005
（式中、Ｒ１は水素原子またはメチル基を示し、Ｒ２は炭素数１〜４のアルキレン基を示し、Ｒ３は炭素数１〜４のアルキル基を示し、Ｒ４は炭素数１〜４のアルキレン基を示し、Ｘは−ＮＨ−基または−Ｏ−基を示す）
で表わされるスルホベタインモノマーである請求項１または２に記載のタンパク質凝集防止剤。
【請求項４】
重合性ポリマー成分が、さらに疎水性モノマーを含有する請求項１〜３のいずれか一項に記載のタンパク質凝集防止剤。
【請求項５】
タンパク質の凝集を防止するために用いられ、架橋ポリマーを含有するタンパク質凝集防止剤の製造方法であって、
スルホベタインモノマーを含有するモノマー成分を重合させ、
生成したスルホベタインポリマーと、前記スルホベタインモノマーと、架橋性モノマーとを含有する重合性ポリマー成分を重合させることを含む方法。
【請求項６】
カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の存在下でモノマー成分を重合させる請求項５に記載の方法。
【請求項７】
スルホベタインモノマーが、式（Ｉ）：
【化２】
2017209121.tif 000006
（式中、Ｒ１は水素原子またはメチル基を示し、Ｒ２は炭素数１〜４のアルキレン基を示し、Ｒ３は炭素数１〜４のアルキル基を示し、Ｒ４は炭素数１〜４のアルキレン基を示し、Ｘは−ＮＨ−基または−Ｏ−基を示す）
で表わされるスルホベタインモノマーである請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
重合性ポリマー成分が、さらに疎水性モノマーを含有する請求項５〜７のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タンパク質凝集防止剤に関する。本発明のタンパク質凝集防止剤は、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集を防止することから、例えば、酵素の保存剤、抗体医薬、体内のアミロイド凝集抑制剤などの種々のタンパク質の凝集防止が望まれる用途に使用することが期待されるものである。
【背景技術】
【０００２】
酸性条件下でのタンパク質の凝集を防止することができるタンパク質凝集防止剤として、ポリオキシエチレンジスチレン化フェニルエーテル、ポリオキシエチレンミリスチルエーテルおよびポリオキシエチレン（１０）オクチルフェニルエーテルからなる群より選ばれた少なくとも１種の非イオン性界面活性剤を含むタンパク質凝集防止剤が提案されている（例えば、特許文献１参照）。【０００３】
前記タンパク質凝集防止剤は、界面活性剤が使用されていることから、酸性条件下である程度のタンパク質の凝集を抑制することができる。【０００４】
しかし、近年、界面活性剤を使用しなくてもタンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤の開発が望まれている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００６−３４３２０１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、前記従来技術に鑑みてなされたものであり、界面活性剤を使用しなくてもリゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、以下のものに関する：
［１］  タンパク質の凝集を防止するために用いられるタンパク質凝集防止剤であって、スルホベタインモノマーを含有するモノマー成分を重合させてなるスルホベタインポリマーと、前記スルホベタインモノマーと、架橋性モノマーとを含有する重合性ポリマー成分を重合させてなる架橋ポリマーを含有することを特徴とするタンパク質凝集防止剤。【０００８】
［２］  モノマー成分が、さらにカルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物を含有する前記［１］に記載のタンパク質凝集防止剤。
［３］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物が、式（ＩＩ）：
Ｒ５−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−Ｒ６      （ＩＩ）
（式中、Ｒ５はカルボキシル基を有していてもよいアルキル基を示し、Ｒ６はシアノ基を有していてもよいカルボキシル基含有アルキル基を示す）
である前記［２］に記載のタンパク質凝集防止剤。
［４］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物が、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸、４−［（２−カルボキシエチルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］−４−シアノペンタン酸、２−｛［（２−カルボキシエチル）スルファニルチオカルボニル］スルファニル｝プロパン酸、４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタン酸、２−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］プロパン酸、およびメチル−４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタン酸からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［２］に記載のタンパク質凝集防止剤。
［５］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物が、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸である前記［２］に記載のタンパク質凝集防止剤。【０００９】
［６］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の量が、モノマー成分中のスルホベタインモノマー１モルあたり、０．００３〜０．５モルである前記［２］〜［５］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［７］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の量が、モノマー成分中のスルホベタインモノマー１モルあたり、０．０１〜０．５モルである前記［２］〜［５］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［８］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の量が、モノマー成分中のスルホベタインモノマー１モルあたり、０．０３〜０．３モルである前記［２］〜［５］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。【００１０】
［９］  スルホベタインモノマーが、式（Ｉ）：【００１１】
【化１】
2017209121.tif 000002
【００１２】
（式中、Ｒ１は水素原子またはメチル基を示し、Ｒ２は炭素数１〜４のアルキレン基を示し、Ｒ３は炭素数１〜４のアルキル基を示し、Ｒ４は炭素数１〜４のアルキレン基を示し、Ｘは−ＮＨ−基または−Ｏ−基を示す）
で表わされるスルホベタインモノマーである前記［１］〜［８］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［１０］  Ｒ１が、水素原子である前記［９］に記載のタンパク質凝集防止剤。
［１１］  Ｒ２が、−（ＣＨ２）−基、−（ＣＨ２）２−基または−（ＣＨ２）３−基である前記［９］または［１０］に記載のタンパク質凝集防止剤。
［１２］  Ｒ２が、−（ＣＨ２）３−基である前記［９］または［１０］に記載のタンパク質凝集防止剤。
［１３］  Ｒ３が、メチル基、エチル基またはプロピル基である前記［９］〜［１２］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［１４］  Ｒ３が、メチル基またはエチル基である前記［９］〜［１２］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［１５］  Ｒ３が、メチル基である前記［９］〜［１２］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［１６］  Ｒ４が、−（ＣＨ２）−基、−（ＣＨ２）２−基または−（ＣＨ２）３−基である前記［９］〜［１５］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［１７］  Ｒ４が、−（ＣＨ２）３−基である前記［９］〜［１５］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［１８］  Ｘが、−ＮＨ−基である前記［９］〜［１７］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。【００１３】
［１９］  スルホベタインポリマーの数平均分子量が、３，０００〜１００，０００である前記［１］〜［１８］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［２０］  スルホベタインポリマーの数平均分子量が、５，０００〜５０，０００である前記［１］〜［１８］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。【００１４】
［２１］  スルホベタインポリマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、５〜３０質量部である前記［１］〜［２０］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［２２］  スルホベタインポリマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、１０〜２５質量部である前記［１］〜［２０］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。【００１５】
［２３］  架橋性モノマーが、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物、炭素−炭素二重結合を２個以上有するアミン化合物、および炭素−炭素二重結合を２個以上有する芳香族化合物からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［１］〜［２２］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［２４］  架橋性モノマーが、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物および炭素−炭素二重結合を２個以上有するアミン化合物からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［１］〜［２２］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［２５］  架橋性モノマーが、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物および（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［１］〜［２２］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［２６］  架橋性モノマーが、エチレンジアクリレート、エチレンジメタクリレート、エチレングリコールジアクリレート、エチレングリコールジメタクリレート、プロピレングリコールジアクリレート、プロピレングリコールジメタクリレート、ジエチレングリコールジアクリレート、ジエチレングリコールジメタクリレート、ジプロピレングリコールジアクリレート、ジプロピレングリコールジメタクリレート、トリエチレングリコールジアクリレート、トリエチレングリコールジメタクリレート、トリプロピレングリコールジアクリレート、トリプロピレングリコールジメタクリレート、テトラエチレングリコールジアクリレート、テトラエチレングリコールジメタクリレート、テトラプロピレングリコールジアクリレート、テトラプロピレングリコールジメタクリレート、１，４−ブタンジオールジアクリレートおよび１，４−ブタンジオールジメタクリレートからなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［１］〜［２２］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［２７］  架橋性モノマーが、エチレングリコールジアクリレートおよびエチレングリコールジメタクリレートからなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［１］〜［２２］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。【００１６】
［２８］  架橋性モノマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、０．５〜１０質量部である前記［１］〜［２７］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［２９］  架橋性モノマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、１〜５質量部である前記［１］〜［２７］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。【００１７】
［３０］  重合性ポリマー成分が、さらに疎水性モノマーを含有する前記［１］〜［２９］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［３１］  疎水性モノマーが、アルキル基の炭素数が１〜１８の（メタ）アクリル酸アルキル、シクロアルキル基の炭素数が６〜１２の（メタ）アクリル酸シクロアルキルおよびアリール基の炭素数が６〜１２の（メタ）アクリル酸アリールからなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［３０］に記載のタンパク質凝集防止剤。
［３２］  疎水性モノマーが、アルキル基の炭素数が１〜１８の（メタ）アクリル酸アルキルである前記［３０］に記載のタンパク質凝集防止剤。
［３３］  疎水性モノマーが、アルキル基の炭素数が１〜６の（メタ）アクリル酸アルキルである前記［３０］に記載のタンパク質凝集防止剤。【００１８】
［３４］  疎水性モノマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、０．５〜１０質量部である前記［３０］〜［３３］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。
［３５］  疎水性モノマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、１〜５質量部である前記［３０］〜［３３］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤。【００１９】
［３６］  タンパク質と、溶媒または分散媒と、前記［１］〜［３５］のいずれか一つに記載のタンパク質凝集防止剤とを混合することを含む、タンパク質の凝集を防止する方法。
［３７］  タンパク質凝集防止剤に含有される架橋ポリマーの量が、タンパク質１質量部あたり、１０〜２００質量部となるように、タンパク質凝集防止剤を使用する前記［３６］に記載の方法。
［３８］  タンパク質凝集防止剤に含有される架橋ポリマーの量が、タンパク質１質量部あたり、５０〜１００質量部となるように、タンパク質凝集防止剤を使用する前記［３６］に記載の方法。
［３９］  タンパク質と、溶媒または分散媒と、タンパク質凝集防止剤とを含む混合物中のタンパク質の含有率が０．００１〜２０質量％となるように、タンパク質と、溶媒または分散媒と、タンパク質凝集防止剤とを混合する前記［３６］〜［３８］のいずれか一つに記載の方法。
［４０］  タンパク質と、溶媒または分散媒と、タンパク質凝集防止剤とを含む混合物中のタンパク質の含有率が０．０１〜１０質量％となるように、タンパク質と、溶媒または分散媒と、タンパク質凝集防止剤とを混合する前記［３６］〜［３８］のいずれか一つに記載の方法。【００２０】
［４１］  タンパク質の凝集を防止するために用いられ、架橋ポリマーを含有するタンパク質凝集防止剤の製造方法であって、
スルホベタインモノマーを含有するモノマー成分を重合させ、
生成したスルホベタインポリマーと、前記スルホベタインモノマーと、架橋性モノマーとを含有する重合性ポリマー成分を重合させることを含む方法。【００２１】
［４２］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の存在下でモノマー成分を重合させる前記［４１］に記載の方法。
［４３］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物が、式（ＩＩ）：
Ｒ５−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−Ｒ６      （ＩＩ）
（式中、Ｒ５はカルボキシル基を有していてもよいアルキル基を示し、Ｒ６はシアノ基を有していてもよいカルボキシル基含有アルキル基を示す）
である前記［４２］に記載の方法。
［４４］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物が、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸、４−［（２−カルボキシエチルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］−４−シアノペンタン酸、２−｛［（２−カルボキシエチル）スルファニルチオカルボニル］スルファニル｝プロパン酸、４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタン酸、２−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］プロパン酸、およびメチル−４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタン酸からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［４２］に記載の方法。
［４５］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物が、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸である前記［４２］に記載の方法。【００２２】
［４６］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の量が、モノマー成分中のスルホベタインモノマー１モルあたり、０．００３〜０．５モルである前記［４２］〜［４５］のいずれか一つに記載の方法。
［４７］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の量が、モノマー成分中のスルホベタインモノマー１モルあたり、０．０１〜０．５モルである前記［４２］〜［４５］のいずれか一つに記載の方法。
［４８］  カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の量が、モノマー成分中のスルホベタインモノマー１モルあたり、０．０３〜０．３モルである前記［４２］〜［４５］のいずれか一つに記載の方法。【００２３】
［４９］  スルホベタインモノマーが、式（Ｉ）：【００２４】
【化２】
2017209121.tif 000003
【００２５】
（式中、Ｒ１は水素原子またはメチル基を示し、Ｒ２は炭素数１〜４のアルキレン基を示し、Ｒ３は炭素数１〜４のアルキル基を示し、Ｒ４は炭素数１〜４のアルキレン基を示し、Ｘは−ＮＨ−基または−Ｏ−基を示す）
で表わされるスルホベタインモノマーである前記［４１］〜［４８］のいずれか一つに記載の方法。
［５０］  Ｒ１が、水素原子である前記［４９］に記載の方法。
［５１］  Ｒ２が、−（ＣＨ２）−基、−（ＣＨ２）２−基または−（ＣＨ２）３−基である前記［４９］または［５０］に記載の方法。
［５２］  Ｒ２が、−（ＣＨ２）３−基である前記［４９］または［５０］に記載の方法。
［５３］  Ｒ３が、メチル基、エチル基またはプロピル基である前記［４９］〜［５２］のいずれか一つに記載の方法。
［５４］  Ｒ３が、メチル基またはエチル基である前記［４９］〜［５２］のいずれか一つに記載の方法。
［５５］  Ｒ３が、メチル基である前記［４９］〜［５２］のいずれか一つに記載の方法。
［５６］  Ｒ４が、−（ＣＨ２）−基、−（ＣＨ２）２−基または−（ＣＨ２）３−基である前記［４９］〜［５５］のいずれか一つに記載の方法。
［５７］  Ｒ４が、−（ＣＨ２）３−基である前記［４９］〜［５５］のいずれか一つに記載の方法。
［５８］  Ｘが、−ＮＨ−基である前記［４９］〜［５７］のいずれか一つに記載の方法。【００２６】
［５９］  スルホベタインポリマーの数平均分子量が、３，０００〜１００，０００である前記［４１］〜［５８］のいずれか一つに記載の方法。
［６０］  スルホベタインポリマーの数平均分子量が、５，０００〜５０，０００である前記［４１］〜［５８］のいずれか一つに記載の方法。【００２７】
［６１］  スルホベタインポリマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、５〜３０質量部である前記［４１］〜［６０］のいずれか一つに記載の方法。
［６２］  スルホベタインポリマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、１０〜２５質量部である前記［４１］〜［６０］のいずれか一つに記載の方法。【００２８】
［６３］  架橋性モノマーが、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物、炭素−炭素二重結合を２個以上有するアミン化合物、および炭素−炭素二重結合を２個以上有する芳香族化合物からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［４１］〜［６２］のいずれか一つに記載の方法。
［６４］  架橋性モノマーが、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物および炭素−炭素二重結合を２個以上有するアミン化合物からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［４１］〜［６２］のいずれか一つに記載の方法。
［６５］  架橋性モノマーが、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物および（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物からなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［４１］〜［６２］のいずれか一つに記載の方法。
［６６］  架橋性モノマーが、エチレンジアクリレート、エチレンジメタクリレート、エチレングリコールジアクリレート、エチレングリコールジメタクリレート、プロピレングリコールジアクリレート、プロピレングリコールジメタクリレート、ジエチレングリコールジアクリレート、ジエチレングリコールジメタクリレート、ジプロピレングリコールジアクリレート、ジプロピレングリコールジメタクリレート、トリエチレングリコールジアクリレート、トリエチレングリコールジメタクリレート、トリプロピレングリコールジアクリレート、トリプロピレングリコールジメタクリレート、テトラエチレングリコールジアクリレート、テトラエチレングリコールジメタクリレート、テトラプロピレングリコールジアクリレート、テトラプロピレングリコールジメタクリレート、１，４−ブタンジオールジアクリレートおよび１，４−ブタンジオールジメタクリレートからなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［４１］〜［６２］のいずれか一つに記載の方法。
［６７］  架橋性モノマーが、エチレングリコールジアクリレートおよびエチレングリコールジメタクリレートからなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［４１］〜［６２］のいずれか一つに記載の方法。【００２９】
［６８］  架橋性モノマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、０．５〜１０質量部である前記［４１］〜［６７］のいずれか一つに記載の方法。
［６９］  架橋性モノマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、１〜５質量部である前記［４１］〜［６７］のいずれか一つに記載の方法。【００３０】
［７０］  重合性ポリマー成分が、さらに疎水性モノマーを含有する前記［４１］〜［６９］のいずれか一つに記載の方法。
［７１］  疎水性モノマーが、アルキル基の炭素数が１〜１８の（メタ）アクリル酸アルキル、シクロアルキル基の炭素数が６〜１２の（メタ）アクリル酸シクロアルキルおよびアリール基の炭素数が６〜１２の（メタ）アクリル酸アリールからなる群から選ばれる少なくとも一つである前記［７０］に記載の方法。
［７２］  疎水性モノマーが、アルキル基の炭素数が１〜１８の（メタ）アクリル酸アルキルである前記［７０］に記載の方法。
［７３］  疎水性モノマーが、アルキル基の炭素数が１〜６の（メタ）アクリル酸アルキルである前記［７０］に記載の方法。【００３１】
［７４］  疎水性モノマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、０．５〜１０質量部である前記［７０］〜［７３］のいずれか一つに記載の方法。
［７５］  疎水性モノマーの量が、重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたり、１〜５質量部である前記［７０］〜［７３］のいずれか一つに記載の方法。
【発明の効果】
【００３２】
本発明によれば、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本発明のタンパク質凝集防止剤は、前記したように、タンパク質の凝集を防止するために用いられるタンパク質凝集防止剤であり、スルホベタインモノマーを含有するモノマー成分を重合させてなるスルホベタインポリマーと、前記スルホベタインモノマーと、架橋性モノマーとを含有する重合性ポリマー成分を重合させてなる架橋ポリマーを含有することを特徴とする。
【００３４】
架橋ポリマーは、例えば、スルホベタインモノマーを含有するモノマー成分を重合させて生成したスルホベタインポリマーと、前記スルホベタインモノマーと、架橋性モノマーとを含有する重合性ポリマー成分を重合させることによって調製することができる。
【００３５】
本発明において、スルホベタインポリマーを製造するために用いられるモノマー成分中に含有されるスルホベタインモノマーと、架橋ポリマーを製造するために用いられる重合性ポリマー成分中に含有されるスルホベタインモノマーとは、同じものでもよく、異なるものでもよい。これらスルホベタインモノマーは、同じものであることが好ましい。
【００３６】
スルホベタインモノマーとしては、例えば、式（Ｉ）：
【００３７】
【化３】
2017209121.tif 000004
【００３８】
で表わされるスルホベタインモノマーなどが挙げられる。しかし、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。式（Ｉ）で表わされるスルホベタインモノマーは、単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００３９】
式（Ｉ）において、Ｒ１は、水素原子またはメチル基であり、好ましくは水素原子である。
Ｒ２は、炭素数１〜４のアルキレン基である。炭素数１〜４のアルキレン基としては、例えば、メチレン基（−（ＣＨ２）−）、エチレン基（−（ＣＨ２）２−）、プロピレン基（例、−（ＣＨ２）３−）およびブチレン基（例、−（ＣＨ２）４−）が挙げられる。これらの基のなかでは、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、メチレン基、エチレン基およびプロピレン基が好ましく、−（ＣＨ２）−基、−（ＣＨ２）２−基および−（ＣＨ２）３−基がより好ましく、−（ＣＨ２）３−基がさらに好ましい。
【００４０】
Ｒ３は、炭素数１〜４のアルキル基である。炭素数１〜４のアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基およびブチル基が挙げられる。これらの基のなかでは、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、メチル基、エチル基およびプロピル基が好ましく、メチル基およびエチル基がより好ましく、メチル基がさらに好ましい。
【００４１】
Ｒ４は、炭素数１〜４のアルキレン基である。炭素数１〜４のアルキレン基としては、例えば、メチレン基（−（ＣＨ２）−）、エチレン基（−（ＣＨ２）２−）、プロピレン基（例、−（ＣＨ２）３−）およびブチレン基（例、−（ＣＨ２）４−）が挙げられる。これらの基のなかでは、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、メチレン基、エチレン基およびプロピレン基が好ましく、−（ＣＨ２）−基、−（ＣＨ２）２−基および−（ＣＨ２）３−基がより好ましく、−（ＣＨ２）３−基がさらに好ましい。
【００４２】
Ｘは、−ＮＨ−基または−Ｏ−基である。これらの基のなかでは、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、−ＮＨ−基が好ましい。
【００４３】
式（Ｉ）で表わされるスルホベタインモノマーとしては、例えば、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドメチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドメチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドエチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドエチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドプロピル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリルアミドブチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリルアミドブチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネートなどの３−［（３−（メタ）アクリルアミドアルキル）ジアルキルアンモニオ］アルカン−１−スルホネート；
【００４４】
３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジメチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジエチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジプロピルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジブチルアンモニオ］エタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジエチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジプロピルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジブチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシメチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシメチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシエチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシエチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシプロピル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシプロピル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジメチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジエチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジプロピルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−アクリロイルオキシブチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネート、３−［（３−メタクリロイルオキシブチル）ジブチルアンモニオ］ブタン−１−スルホネートなどの３−［（３−（メタ）アクリロイルオキシアルキル）ジアルキルアンモニオ］アルカン−１−スルホネートなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらのスルホベタインモノマーは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００４５】
なお、本発明において、「（メタ）アクリルアミド」は、アクリルアミドまたはメタクリルアミドを意味する。アクリルアミドおよびメタクリルアミドは、それぞれ単独で用いてもよく、併用してもよい。
【００４６】
「（メタ）アクリロイルオキシ」は、アクリロイルオキシまたはメタクリロイルオキシを意味する。アクリロイルオキシおよびメタクリロイルオキシは、それぞれ単独で用いてもよく、併用してもよい。
【００４７】
「（メタ）アクリレート」は、アクリレートまたはメタクリレートを意味する。アクリレートおよびメタクリレートは、それぞれ単独で用いてもよく、併用してもよい。
【００４８】
また、「（メタ）アクリル酸」は、アクリル酸またはメタクリル酸を意味する。アクリル酸およびメタクリル酸は、それぞれ単独で用いてもよく、併用してもよい。
【００４９】
本発明においては、モノマー成分には、スルホベタインモノマー以外に、本発明の目的を阻害しない範囲内で水溶性モノマーを用いることができる。
【００５０】
水溶性モノマーは、２５℃の水１００ｇに対して５０ｇ以上の量で溶解する性質を有するモノマーを意味する。水溶性モノマーとしては、例えば、（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ビニルピロリドン、（メタ）アクリロニトリル、２−ヒドロキシエチル（メタ）アクリレート、２−ヒドロキシプロピル（メタ）アクリレート、４−ヒドロキシブチル（メタ）アクリレート、ポリエチレングリコール（メタ）アクリレート、メトキシポリエチレングリコール（メタ）アクリレート、エトキシポリエチレングリコール（メタ）アクリレート、ポリエチレングリコールジ（メタ）アクリレート、Ｎ−（メタ）アクリルモルホリド、Ｎ−メトキシメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ヒドロキシエチル（メタ）アクリルアミド、２−ヒドロキシエチルビニルエーテル、Ｎ，Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−モノメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−モノエチル（メタ）アクリルアミドなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの水溶性モノマーは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。これらの水溶性モノマーのなかでは、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から（メタ）アクリルアミド、Ｎ−ビニルピロリドンおよび（メタ）アクリロニトリルが好ましく、（メタ）アクリルアミドおよびＮ−ビニルピロリドンがより好ましい。
【００５１】
また、モノマー成分には、本発明の目的を阻害しない範囲内で、水不溶性モノマーが含まれていてもよい。水不溶性モノマーは、２５℃の水１００ｇに対して５０ｇ未満の量で溶解する性質を有するモノマーを意味する。
【００５２】
水不溶性モノマーとしては、例えば、アルキル（メタ）アクリレート、アルコキシ基含有（メタ）アクリレート、脂環基含有（メタ）アクリレート、アリール基含有（メタ）アクリレート、アリール基含有（メタ）アクリレート以外の芳香族系モノマーなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの水不溶性モノマーは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００５３】
アルキル（メタ）アクリレートとしては、例えば、メチル（メタ）アクリレート、エチル（メタ）アクリレート、ｎ−プロピル（メタ）アクリレート、イソプロピル（メタ）アクリレート、ｎ−ブチル（メタ）アクリレート、イソブチル（メタ）アクリレート、ｔｅｒｔ−ブチル（メタ）アクリレート、ｓｅｃ−ブチル（メタ）アクリレート、ｎ−ペンチル（メタ）アクリレート、ｎ−ヘキシル（メタ）アクリレート、ｎ−オクチル（メタ）アクリレート、イソオクチル（メタ）アクリレート、ｎ−ノニル（メタ）アクリレート、イソノニル（メタ）アクリレート、２−エチルヘキシル（メタ）アクリレート、デシル（メタ）アクリレート、ドデシル（メタ）アクリレート、トリデシル（メタ）アクリレート、テトラデシル（メタ）アクリレート、ヘキサデシル（メタ）アクリレート、オクタデシル（メタ）アクリレート、イソステアリル（メタ）アクリレート、エイコシル（メタ）アクリレート、ベヘニル（メタ）アクリレート、テトラヒドロフルフリル（メタ）アクリレートなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらのアルキル（メタ）アクリレートは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００５４】
アルコキシ基含有（メタ）アクリレートとしては、例えば、２−メトキシエチル（メタ）アクリレート、２−エトキシエチル（メタ）アクリレート、メトキシエチレングリコール（メタ）アクリレート、エチルカルビトール（メタ）アクリレートなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらのアルコキシ基含有（メタ）アクリレートは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００５５】
脂環基含有（メタ）アクリレートとしては、例えば、シクロヘキシル（メタ）アクリレート、ｔｅｒｔ−ブチルシクロヘキシル（メタ）アクリレート、イソボルニル（メタ）アクリレート、ジシクロペンタニル（メタ）アクリレート、ジシクロペンテニル（メタ）アクリレート、アダマンチル（メタ）アクリレート、ジシクロペンテニル（メタ）アクリレートなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの脂環基含有（メタ）アクリレートは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００５６】
アリール基含有（メタ）アクリレートとしては、例えば、ベンジル（メタ）アクリレート、フェノキシエチル（メタ）アクリレートなどの炭素数６〜１５のアリール基含有（メタ）アクリレートなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらのアリール基含有（メタ）アクリレートは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００５７】
アリール基含有（メタ）アクリレート以外の芳香族系モノマーとしては、例えば、スチレン、α−メチルスチレンなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの芳香族系モノマーは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００５８】
スルホベタインモノマー以外の水溶性モノマーおよび水不溶性モノマーの合計量は、全モノマー成分あたり、好ましくは５０モル％未満、より好ましくは３０モル％未満、さらに好ましくは１０モル％未満である。モノマー成分は、スルホベタインモノマー以外の水溶性モノマーおよび水不溶性モノマーを含有しないことが特に好ましい。
【００５９】
モノマー成分を重合させる際には、得られるスルホベタインポリマーの分子量を調製するために連鎖移動剤を用いることが好ましい。好適な連鎖移動剤としては、例えば、カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物などが挙げられる。
【００６０】
本発明において、カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の存在下でモノマー成分を重合させることができる。より具体的には、例えば、カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物をモノマー成分に含有させ、当該カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物を含有するモノマー成分を重合させることができる。
【００６１】
カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物としては、例えば、式（ＩＩ）：
Ｒ５−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−Ｒ６      （ＩＩ）
（式中、Ｒ５はカルボキシル基を有していてもよいアルキル基を示し、Ｒ６はシアノ基を有していてもよいカルボキシル基含有アルキル基を示す）
で表わされるチオカルボニルチオ基含有化合物などが挙げられる。式（ＩＩ）で表わされるチオカルボニルチオ基含有化合物は、単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００６２】
式（ＩＩ）において、Ｒ５は、カルボキシル基を有していてもよいアルキル基であるが、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、炭素数１〜１８のアルキル基またはカルボキシル基を有していてもよい炭素数１〜４のアルキル基であることが好ましく、炭素数１〜１２のアルキル基またはカルボキシル基を有していてもよい炭素数１〜４のアルキル基であることがより好ましい。
【００６３】
Ｒ６は、シアノ基を有していてもよいカルボキシル基含有アルキル基であるが、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、シアノ基を有していてもよい炭素数１〜４のカルボキシル基含有アルキル基であることが好ましく、直鎖または分岐鎖を有していてもよい式：−Ｒ７−ＣＯＯＨ（式中、Ｒ７は炭素数１〜４のアルキレン基を示す）で表わされる基であることがより好ましい。
【００６４】
カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物としては、例えば、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸、４−［（２−カルボキシエチルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］−４−シアノペンタン酸、２−｛［（２−カルボキシエチル）スルファニルチオカルボニル］スルファニル｝プロパン酸、４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタン酸、２−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］プロパン酸、メチル−４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタン酸などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらのカルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物は、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。カルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物としては、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸が好ましい。
【００６５】
モノマー成分中のスルホベタインモノマー１モルあたりのカルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物の量は、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、好ましくは０．００３〜０．５モル、好ましくは０．０１〜０．５モル、より好ましくは０．０３〜０．３モルである。
【００６６】
モノマー成分を重合させる方法としては、例えば、塊状重合法、溶液重合法、乳化重合法、懸濁重合法などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの重合法のなかでは、溶液重合法が好ましい。
【００６７】
モノマー成分を溶液重合法によって重合させる場合には、例えば、モノマー成分、必要によりカルボキシル基を少なくとも１個有するチオカルボニルチオ基含有化合物などの連鎖移動剤を溶媒に溶解させ、得られた溶液を攪拌しながら重合開始剤を当該溶液に添加することによってモノマー成分を重合させることができるほか、重合開始剤を溶媒に溶解させ、得られた溶液を撹拌しながらモノマー成分を当該溶液に添加することによってモノマー成分を重合させることができる。
【００６８】
溶媒としては、例えば、水、親水性有機溶媒、水と親水性有機溶媒との混合溶媒などが挙げられるが、本発明は、当該溶媒の種類によって限定されるものではない。
【００６９】
親水性有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノールなどの炭素数が１〜４の１価の脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン；テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジグライムなどのエーテル；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンなどのアミド；ジメチルスルホキシド、スルホランなどのイオウ含有有機溶媒などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの親水性有機溶媒は、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。これらの親水性有機溶媒のなかでは、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、炭素数が１〜４の１価の脂肪族アルコールが好ましく、メタノール、エタノールおよびプロパノールがより好ましく、メタノールおよびエタノールがさらに好ましい。
【００７０】
溶媒の量は、特に限定されないが、通常、モノマー成分１００質量部あたり、５０〜４００質量部であることが好ましく、１００〜３５０質量部であることがより好ましい。
【００７１】
モノマー成分を重合させる際には、重合開始剤を用いることが好ましい。重合開始剤としては、例えば、アゾビスイソブチロニトリル、アゾイソブチロニトリル、アゾイソ酪酸メチル、アゾビスジメチルバレロニトリル、過酸化ベンゾイル、過硫酸カリウム、過硫酸アンモニウム、ベンゾフェノン誘導体、ホスフィンオキサイド誘導体、ベンゾケトン誘導体、フェニルチオエーテル誘導体、アジド誘導体、ジアゾ誘導体、ジスルフィド誘導体などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの重合開始剤は、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。重合開始剤の量は、特に限定されないが、通常、モノマー成分１００質量部あたり０．０５〜２０質量部程度であることが好ましい。
【００７２】
モノマー成分を重合させる際の重合反応温度および雰囲気については、特に限定がない。通常、重合反応温度は、５０〜１２０℃程度である。重合反応時の雰囲気は、例えば、窒素ガスなどの不活性ガス雰囲気であることが好ましい。また、モノマー成分の重合反応時間は、重合反応温度などによって異なるので一概には決定することができないが、通常、３〜２０時間程度である。
【００７３】
以上のようにしてモノマー成分を重合させることにより、スルホベタインポリマーが得られる。
【００７４】
スルホベタインポリマーの数平均分子量は、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、好ましくは３，０００〜１００，０００、より好ましくは５，０００〜５０，０００である。なお、スルホベタインポリマーの数平均分子量は、以下の実施例の欄（調製例１）に記載の方法に基づいて測定したときの値である。
【００７５】
モノマー成分を水性溶媒の存在下で溶液重合させることによってスルホベタインポリマーを調製した場合、当該スルホベタインポリマーを含有する反応溶液をそのままの状態でタンパク質凝集防止剤として用いることができるが、必要により、水、メタノール、エタノールなどの水溶性アルコール、これらの混合溶媒などの溶媒を用いてスルホベタインポリマーを洗浄してもよい。
【００７６】
次に、前記で得られたスルホベタインポリマー、前記スルホベタインモノマーおよび架橋性モノマーを含有する重合性ポリマー成分を重合させることにより、架橋ポリマーが得られる。
【００７７】
重合性ポリマー成分に用いられるスルホベタインモノマーとしては、モノマー成分に用いられるスルホベタインモノマーと同様のものを例示することができる。
【００７８】
重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたりのスルホベタインポリマーの量は、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、５〜３０質量部であることが好ましく、１０〜２５質量部であることがより好ましい。
【００７９】
架橋性モノマーとしては、例えば、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物、炭素−炭素二重結合を２個以上有するアミン化合物、炭素−炭素二重結合を２個以上有する芳香族化合物などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。架橋性モノマーは、単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００８０】
架橋性モノマーの具体例としては、例えば、メチレンビスアクリルアミド、メチレンビスメタクリルアミドなどのアルキレン基の炭素数が１〜４のアルキレンビス（メタ）アクリルアミドなどの（メタ）アクリロイル基を２個以上（好ましくは２個）有する（メタ）アクリルアミド化合物；エチレンジアクリレート、エチレンジメタクリレート、エチレングリコールジアクリレート、エチレングリコールジメタクリレート、プロピレングリコールジアクリレート、プロピレングリコールジメタクリレート、ジエチレングリコールジアクリレート、ジエチレングリコールジメタクリレート、ジプロピレングリコールジアクリレート、ジプロピレングリコールジメタクリレート、トリエチレングリコールジアクリレート、トリエチレングリコールジメタクリレート、トリプロピレングリコールジアクリレート、トリプロピレングリコールジメタクリレート、テトラエチレングリコールジアクリレート、テトラエチレングリコールジメタクリレート、テトラプロピレングリコールジアクリレート、テトラプロピレングリコールジメタクリレート、１，４−ブタンジオールジアクリレート、１，４−ブタンジオールジメタクリレート、１，６−ヘキサンジオールジアクリレート、１，６−ヘキサンジオールジメタクリレート、１，９−ノナンジオールジアクリレート、１，９−ノナンジオールジメタクリレート、２−ｎ−ブチル−２−エチル−１，３−プロパンジオールジアクリレート、２−ｎ−ブチル−２−エチル−１，３−プロパンジオールジメタクリレート、トリメチロールプロパントリアクリレート、トリメチロールプロパントリメタクリレート、ペンタエリスリトールトリアクリレート、ペンタエリスリトールトリメタクリレートなどの（メタ）アクリロイル基を２個以上（好ましくは２個または３個）有する（メタ）アクリレート化合物；ジアリルアミン、トリアリルアミンなどの炭素−炭素二重結合を２個以上（好ましくは２個または３個）有するアミン化合物；ジビニルベンゼン、ジアリルベンゼンなどの炭素−炭素二重結合を２個以上（好ましくは２個または３個）有する芳香族化合物などの多官能モノマーが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの架橋性モノマーは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００８１】
架橋性モノマーのなかでは、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物、炭素−炭素二重結合を２個以上有するアミン化合物および炭素−炭素二重結合を２個以上有する芳香族化合物が好ましく、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物および炭素−炭素二重結合を２個以上有するアミン化合物がより好ましく、（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリルアミド化合物および（メタ）アクリロイル基を２個以上有する（メタ）アクリレート化合物がさらに好ましく、エチレンジアクリレート、エチレンジメタクリレート、エチレングリコールジアクリレート、エチレングリコールジメタクリレート、プロピレングリコールジアクリレート、プロピレングリコールジメタクリレート、ジエチレングリコールジアクリレート、ジエチレングリコールジメタクリレート、ジプロピレングリコールジアクリレート、ジプロピレングリコールジメタクリレート、トリエチレングリコールジアクリレート、トリエチレングリコールジメタクリレート、トリプロピレングリコールジアクリレート、トリプロピレングリコールジメタクリレート、テトラエチレングリコールジアクリレート、テトラエチレングリコールジメタクリレート、テトラプロピレングリコールジアクリレート、テトラプロピレングリコールジメタクリレート、１，４−ブタンジオールジアクリレートおよび１，４−ブタンジオールジメタクリレートが特に好ましく、エチレングリコールジアクリレートおよびエチレングリコールジメタクリレートが最も好ましい。これらの架橋性モノマーは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００８２】
重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたりの架橋性モノマーの量は、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、０．５〜１０質量部であることが好ましく、１〜５質量部であることがより好ましい。
【００８３】
なお、重合性ポリマー成分には、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果にさらに優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、疎水性モノマーが含まれていることが好ましい。疎水性モノマーは、単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００８４】
疎水性モノマーとしては、例えば、アクリル酸メチル、メタクリル酸メチル、アクリル酸エチル、メタクリル酸エチル、アクリル酸ブチル、メタクリル酸ブチル、アクリル酸イソブチル、メタクリル酸イソブチル、アクリル酸ｔｅｒｔ−ブチル、メタクリル酸ｔｅｒｔ−ブチル、アクリル酸ネオペンチル、メタクリル酸ネオペンチル、アクリル酸オクチル、メタクリル酸オクチル、アクリル酸ラウリル、メタクリル酸ラウリル、アクリル酸ラウリル、メタクリル酸ラウリル、アクリル酸ステアリル、メタクリル酸ステアリル、アクリル酸セチル、メタクリル酸セチルなどのアルキル基の炭素数が１〜１８の（メタ）アクリル酸アルキル；アクリル酸シクロヘキシル、メタクリル酸シクロヘキシルなどのシクロアルキル基の炭素数が６〜１２の（メタ）アクリル酸シクロアルキル；アクリル酸ベンジル、メタクリル酸ベンジルなどのアリール基の炭素数が６〜１２の（メタ）アクリル酸アリール；アクリル酸メトキシエチル、メタクリル酸メトキシエチル、アクリル酸メトキシブチル、メタアクリル酸メトキシブチルなどのアルコキシアルキル基の炭素数が２〜８の（メタ）アクリル酸アルコキシアルキル；Ｎ−メチルアクリルアミド、Ｎ−メチルメタアクリルアミド、Ｎ−エチルアクリルアミド、Ｎ−エチルメタクリルアミド、Ｎ−プロピルアクリルアミド、Ｎ−プロピルメタクリルアミド、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド、Ｎ−イソプロピルメタクリルアミド、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルアクリルアミド、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルメタクリルアミド、Ｎ−オクチルアクリルアミド、Ｎ−オクチルメタクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルメタクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチルメタクリルアミドなどのアルキル基の炭素数が１〜１２のアルキル（メタ）アクリルアミド：Ｎ−ブトキシメチルアクリルアミド、Ｎ−ブトキシメチルメタアクリルアミドなどのアルコキシ基の炭素数が１〜６のアルコキシ（メタ）アクリルアミド；アクリロイルモルホリン、メタクリロイルモルホリンなどの（メタ）アクリロイルモルホリン；ジアセトンアクリルアミド、ジアセトンメタクリルアミドなどのジアセトン（メタ）アクリルアミド；スチレン、メチルスチレンなどのスチレン系モノマー；イタコン酸メチル、イタコン酸エチルなどの（メタ）アクリル酸アルキルエステル以外のアルキル基の炭素数が１〜４の脂肪酸アルキル；Ｎ−ビニルピロリドン、Ｎ−ビニルカプロラクタムなどの窒素原子含有モノマーなどの単官能モノマーなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの疎水性モノマーは、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。
【００８５】
疎水性モノマーのなかでは、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、アルキル基の炭素数が１〜１８の（メタ）アクリル酸アルキル、シクロアルキル基の炭素数が６〜１２の（メタ）アクリル酸シクロアルキルおよびアリール基の炭素数が６〜１２の（メタ）アクリル酸アリールが好ましく、アルキル基の炭素数が１〜１８の（メタ）アクリル酸アルキルがより好ましく、アルキル基の炭素数が１〜６の（メタ）アクリル酸アルキルがさらに好ましい。
【００８６】
重合性ポリマー成分中のスルホベタインモノマー１００質量部あたりの疎水性モノマーの量は、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、０．５〜１０質量部であることが好ましく、１〜５質量部であることがより好ましい。
【００８７】
重合性ポリマー成分を重合させる方法としては、例えば、塊状重合法、溶液重合法、乳化重合法、懸濁重合法などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの重合法のなかでは、溶液重合法が好ましい。
【００８８】
重合性ポリマー成分を溶液重合法によって重合させる場合には、例えば、重合性ポリマー成分を水性溶媒に溶解させ、得られた溶液を攪拌しながら重合開始剤を当該溶液に添加することによって重合性ポリマー成分を重合させることができるほか、重合開始剤を水性溶媒に溶解させ、得られた溶液を撹拌しながら重合性ポリマー成分を当該溶液に添加することによって重合性ポリマー成分を重合させることができる。
【００８９】
水性溶媒は、水または水と水以外の親水性有機溶媒との混合溶媒である。水性溶媒における水の含有率は、通常、５０質量％以上、１００質量％以下である。
【００９０】
親水性有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノールなどの炭素数が１〜４の１価の脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン；テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジグライムなどのエーテル；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンなどのアミド；ジメチルスルホキシド、スルホランなどのイオウ含有有機溶媒などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの親水性有機溶媒は、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。これらの親水性有機溶媒のなかでは、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集抑制効果に優れたタンパク質凝集防止剤を得る観点から、炭素数が１〜４の１価の脂肪族アルコールが好ましく、メタノール、エタノールおよびプロパノールがより好ましく、メタノールおよびエタノールがさらに好ましい。
【００９１】
水性溶媒の量は、特に限定されないが、通常、重合性ポリマー成分１００質量部あたり、１００〜３０００質量部であることが好ましく、１０００〜２５０００質量部であることがより好ましい。
【００９２】
重合性ポリマー成分を重合させる際には、重合開始剤を用いることが好ましい。重合開始剤としては、例えば、アゾ系開始剤、過酸化物開始剤などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。
【００９３】
アゾ系開始剤としては、例えば、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、２，２’−アゾビス−メチルブチロニトリル、２，２’−アゾビス−２，４−ジメチルバレロニトリル、１，１’−アゾビス−シクロヘキサンカルボニトリル、ジメチル−２，２’−アゾビスイソブチレート、４，４’−アゾビス−（４−シアノ吉草酸）、２，２’−アゾビス−（２−アミジノプロペン）二塩酸塩、２−ｔｅｒｔ−ブチルアゾ−２−シアノプロパン、２，２’−アゾビス−（２−メチル−プロピオンアミド）２水和物、２，２’−アゾビス［２−（２−イミダゾリン−２−イル）プロペン］、２，２’−アゾビス（２，２，４−トリメチルペンタン）などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。
【００９４】
過酸化物開始剤としては、例えば、過酸化ベンゾイル、メチルエチルケトンパーオキサイド、メチルイソブチルケトンパーオキサイド、アセチルアセトンパーオキサイド、シクロヘキサノンパーオキサイド、メチルシクロヘキサノンパーオキサイドなどのケトンパーオキサイド；１，１，３，３−テトラメチルブチルハイドロパーオキサイド、クメンハイドロパーオキサイド、ｔｅｒｔ−ブチルハイドロパーオキサイドなどのハイドロパーオキサイド；ジイソブチリルパーオキサイド、ビス−３，５，５−トリメチルヘキサノールパーオキサイド、ラウロイルパーオキサイド、ベンゾイルパーオキサイド、ｍ−トルイルベンゾイルパーオキサイドなどのジアシルパーオキサイド；ジクミルパーオキサイド、２，５−ジメチル−２，５−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ）ヘキサン、１，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシイソプロピル）ヘキサン、ｔｅｒｔ−ブチルクミルパーオキサイド、ジｔｅｒｔ−ブチルパーオキサイド、２，５−ジメチル−２，５−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ）ヘキセンなどのジアルキルパーオキサイド；１，１−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ−３，５，５−トリメチル）シクロヘキサン、１，１−ジｔｅｒｔ−ブチルペルオキシシクロヘキサン、２，２−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ）ブタンなどのパーオキシケタール；（４−ｔｅｒｔ−ブチルシクロヘキシル）パーオキシジカルボネートなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの重合開始剤は、それぞれ単独で用いてもよく、２種類以上を併用してもよい。重合開始剤の量は、特に限定されないが、通常、重合性ポリマー成分１００質量部あたり０．０５〜２０質量部程度であることが好ましい。
【００９５】
重合性ポリマー成分を重合させる際には、分子量を調整するために連鎖移動剤を用いてもよい。連鎖移動剤は、通常、重合性ポリマー成分と混合することによって用いることができる。連鎖移動剤としては、前記モノマー成分に用いられる連鎖移動剤と同様のものを例示することができる。連鎖移動剤の量は、特に限定されないが、通常、重合性ポリマー成分１００質量部あたり０．０１〜１０質量部程度であればよい。
【００９６】
重合性ポリマー成分を重合させる際の重合反応温度および雰囲気については、特に限定がない。通常、重合反応温度は、５０〜１２０℃程度である。重合反応時の雰囲気は、例えば、窒素ガスなどの不活性ガス雰囲気であることが好ましい。また、重合性ポリマー成分の重合反応時間は、重合反応温度などによって異なるので一概には決定することができないが、通常、３〜２０時間程度である。
【００９７】
以上のようにして重合性ポリマー成分を重合させることにより、架橋ポリマーを含有する反応溶液が得られる。なお、得られる架橋ポリマーは、架橋構造を有することから、その分子量の測定が困難である。
【００９８】
架橋ポリマーの平均粒子径は、好ましくは０．１ｎｍ〜１００μｍ、より好ましくは０．５ｎｍ〜１μｍ、さらに好ましくは１ｎｍ〜５００ｎｍである。この平均粒子径は、レーザー回析粒度分布測定装置〔（株）島津製作所製、品番：ＳＡＬＤ７０００〕で測定したときの値であり、体積平均径を意味する。
【００９９】
本発明のタンパク質凝集防止剤は、前記架橋ポリマーを含有するものである。本発明のタンパク質凝集防止剤は、例えば、架橋ポリマーを所望の含有率で含有するように、前記架橋ポリマーと水性溶媒とを混合してもよく、架橋ポリマーを含有する反応溶液に含まれている水性溶媒を蒸発させてもよい。
【０１００】
本発明のタンパク質凝集防止剤における架橋ポリマー（固形分）の含有率は、当該タンパク質凝集防止剤の用途などによって異なることから一概には決定することができないが、通常、３〜８０質量％程度である。本発明のタンパク質凝集防止剤における架橋ポリマー（固形分）の含有率は、溶媒をタンパク質凝集防止剤に添加したり、タンパク質凝集防止剤に含まれている溶媒を蒸発させたりすることによって容易に調整することができる。
【０１０１】
また、本発明のタンパク質凝集防止剤には、本発明の目的を阻害しない範囲内で、本発明のタンパク質凝集防止剤の使用目的に応じた添加剤などが含まれていてもよい。
【０１０２】
以上説明したように、本発明のタンパク質凝集防止剤は、タンパク質の凝集を抑制することができることから、例えば、酵素の保存剤、抗体医薬、体内のアミロイド凝集抑制剤などの種々のタンパク質の凝集防止が望まれる用途に使用することが期待されるものである。
【０１０３】
本発明は、タンパク質と、溶媒または分散媒と、上述のタンパク質凝集防止剤とを混合することを含む、タンパク質の凝集を防止する方法を提供する。この方法において、タンパク質凝集防止剤に含有される架橋ポリマーの量は、タンパク質１質量部あたり、好ましくは１０〜２００質量部、より好ましくは５０〜１００質量部である。
【０１０４】
溶媒または分散媒としては、例えば、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、水、トリスバッファー等が挙げられる。
タンパク質としては、例えば、リゾチーム、アルブミン、グロブリン、プロラミン、グルテリン、サイトカイン、インスリン、抗体、膜タンパク、糖タンパク等が挙げられる。
タンパク質と、溶媒または分散媒と、上述のタンパク質凝集防止剤とを含む混合物中のタンパク質の含有率は、好ましくは０．００１〜２０質量％、より好ましくは０．０１〜１０質量％である。
【実施例】
【０１０５】
次に、本発明を実施例に基づいてさらに詳細に説明するが、本発明は、かかる実施例のみに限定されるものではない。【０１０６】
調製例１
攪拌棒、ジムロート、温度計および窒素ガス導入管を備えた１Ｌ容のフラスコ内に、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート１２ｍｍｏｌ、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸０．６ｍｍｏｌおよび重合開始剤としてアゾビスイソブチロニトリル０．１２ｍｍｏｌをメタノール４５ｍＬおよび水１５ｍＬからなる混合溶媒６０ｍＬに溶解させることにより、溶液を得た。得られた溶液をフラスコ内に入れ、フラスコ内に窒素ガスを導入しながらフラスコ内の内容物を７０℃に昇温し、１時間撹拌した。その後、フラスコ内のモノマー成分を６時間重合させることにより、反応混合物を得た。得られた反応混合物を濾取し、メタノールおよび水を用いて洗浄し、乾燥させることにより、スルホベタインポリマーを得た。【０１０７】
次に、得られたスルホベタインポリマーの数平均分子量をゲルパーミエイションクロマトグラフィー（以下、ＧＰＣという）分析装置〔フェノメネックス社（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｉｎｋ）製、商品名：ＢｉｏＳｅｐｓ２０００〕および高速液体クロマトグラフィーデータシステム〔（株）島津製作所製、示差屈折率検出器〕で調べたところ、スルホベタインポリマーの数平均分子量は、５，５００であった。【０１０８】
なお、前記で得られたスルホベタインポリマーの数平均分子量をＧＰＣで調べる際に展開液として０．１Ｍ臭化ナトリウム水溶液（ｐＨ：７．４）を用いた。また、標準液として昭和電工（株）製のプルランを用いた。【０１０９】
調製例２
攪拌棒、ジムロート、温度計および窒素ガス導入管を備えた１Ｌ容のフラスコ内に、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート１２０ｍｍｏｌ、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸０．６ｍｍｏｌおよび重合開始剤としてアゾビスイソブチロニトリル０．１２ｍｍｏｌをメタノール４５ｍＬおよび水１５ｍＬからなる混合溶媒６０ｍＬに溶解させることにより、溶液を得た。得られた溶液をフラスコ内に入れ、フラスコ内に窒素ガスを導入しながらフラスコ内の内容物を７０℃に昇温し、１時間撹拌した。その後、フラスコ内のモノマー成分を６時間重合させることにより、反応混合物を得た。得られた反応混合物を濾取し、メタノールおよび水を用いて洗浄し、乾燥させることにより、スルホベタインポリマーを得た。【０１１０】
次に、得られたスルホベタインポリマーの数平均分子量を調製例１と同様にして調べたところ、当該スルホベタインポリマーの数平均分子量は、３６，２００であった。【０１１１】
実施例１
調製例１で得られたスルホベタインポリマー０．２ｇ、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート１．４７７ｇ、エチレングリコールジメタクリレート２２ｍｇ（２１μＬ）および重合開始剤として４，４’−アゾビス−（４−シアノ吉草酸）４ｍｇを純水５０ｍＬ中に溶解させることにより、溶液を得た。得られた溶液をフラスコ内に入れ、フラスコ内に窒素ガスを１時間導入しながらフラスコ内の内容物を７０℃に昇温し、撹拌した。その後、フラスコ内のモノマー成分を２４時間重合させることにより、反応混合物を得た。得られた反応混合物を濾取し、メタノールおよび水を用いて洗浄し、乾燥させることにより、架橋ポリマーを得た。【０１１２】
前記で得られた架橋ポリマーを水に溶かして、１０質量％の架橋ポリマー水溶液を調製した。なお、架橋ポリマーは水に溶解してナノゲル状態になり、見かけ上、均一な溶液が得られた。前記溶液をタンパク質凝集防止剤として用いた。得られたタンパク質凝集防止剤に、リゾチームを含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を添加し、混合して、溶液を得た（タンパク質（リゾチーム）１質量部あたりの架橋ポリマーの量：１００質量部、溶液中のタンパク質（リゾチーム）の含有率：０．０５質量％）。得られた溶液を目視によって観察したが、リゾチームの凝集が認められなかった。【０１１３】
前記で得られた溶液１００μＬおよびリゾチームによる溶菌作用を受けやすい菌（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓ）の０．２５ｍｇ／ｍＬリン酸緩衝生理食塩水２ｍＬをキュベットに入れ、十分に混合した。得られた混合物の吸光度を分光光度計〔（株）島津製作所、品番：ＵＶ−１６００ＰＣ〕で６００ｎｍの波長にて室温下で、撹拌前の吸光度と、６分撹拌した後の吸光度を測定し、加熱前の吸光度減少（＝撹拌前の吸光度−６分撹拌した後の吸光度）を求めた。【０１１４】
次に、前記で得られた混合物を９０℃の温度で３０分間加熱し、室温に冷却した後、前記と同様にして、加熱後の吸光度減少（＝撹拌前の吸光度−６分撹拌した後の吸光度）を求めた。【０１１５】
前記で求めた加熱前後の吸光度減少から、残存リゾチーム活性（％）を式：
［残存リゾチーム活性（％）］
＝（［加熱後の吸光度減少］÷［加熱前の吸光度減少］）×１００
に基づいて求めたところ、残存リゾチーム活性は、２５％であった。【０１１６】
実施例２
調製例１で得られたスルホベタインポリマー０．２ｇ、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート１．４７７ｇ、ブチルメタクリレート３９．７ｍｇ（４４．４μＬ）、エチレングリコールジメタクリレート２２ｍｇ（２１μＬ）および重合開始剤として４，４’−アゾビス−（４−シアノ吉草酸）４ｍｇを水５０ｍＬおよびメタノール１０ｍＬからなる混合溶媒６０ｍＬに溶解させることにより、溶液を得た。得られた溶液をフラスコ内に入れ、フラスコ内に窒素ガスを１時間導入しながらフラスコ内の内容物を７０℃に昇温し、撹拌した。その後、フラスコ内のモノマー成分を２４時間重合させることにより、反応混合物を得た。得られた反応混合物を濾取し、水を用いて洗浄し、乾燥させることにより、架橋ポリマーを得た。【０１１７】
前記で得られた架橋ポリマーを水に溶かして、１０質量％の架橋ポリマー水溶液を調製した。なお、架橋ポリマーは水に溶解してナノゲル状態になり、見かけ上、均一な溶液が得られた。前記溶液をタンパク質凝集防止剤として用いた。得られたタンパク質凝集防止剤に、リゾチームを含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を添加し、混合して、溶液を得た（タンパク質（リゾチーム）１質量部あたりの架橋ポリマーの量：１００質量部、溶液中のタンパク質（リゾチーム）の含有率：０．０５質量％）。得られた溶液を目視によって観察したが、リゾチームの凝集が認められなかった。【０１１８】
次に、前記タンパク質凝集防止剤によるタンパク質の凝集抑制効果を実施例１と同様にして調べた。その結果、残存リゾチーム活性は３１％であった。【０１１９】
実施例３
調製例１で得られたスルホベタインポリマー０．２ｇ、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート１．４７７ｇ、ブチルメタクリレート７９．５ｍｇ（８８．８μＬ）、エチレングリコールジメタクリレート２２ｍｇ（２１μＬ）および重合開始剤として４，４’−アゾビス−（４−シアノ吉草酸）４ｍｇを水５０ｍＬおよびメタノール１０ｍＬからなる混合溶媒６０ｍＬに溶解させることにより、溶液を得た。得られた溶液をフラスコ内に入れ、フラスコ内に窒素ガスを１時間導入しながらフラスコ内の内容物を７０℃に昇温し、撹拌した。その後、フラスコ内のモノマー成分を２４時間重合させることにより、反応混合物を得た。得られた反応混合物を濾取し、水を用いて洗浄し、乾燥させることにより、架橋ポリマーを得た。【０１２０】
前記で得られた架橋ポリマーをタンパク質凝集防止剤として用い、当該タンパク質凝集防止剤によるタンパク質の凝集抑制効果を実施例１と同様にして調べた。その結果、残存リゾチーム活性は４０％であった。【０１２１】
前記で得られた架橋ポリマーを水に溶かして、１０質量％の架橋ポリマー水溶液を調製した。なお、架橋ポリマーは水に溶解してナノゲル状態になり、見かけ上、均一な溶液が得られた。前記溶液をタンパク質凝集防止剤として用いた。得られたタンパク質凝集防止剤に、リゾチームを含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を添加し、混合して、溶液を得た（タンパク質（リゾチーム）１質量部あたりの架橋ポリマーの量：１００質量部、溶液中のタンパク質（リゾチーム）の含有率：０．０５質量％）。得られた溶液を目視によって観察したが、リゾチームの凝集が認められなかった。【０１２２】
実施例４
調製例２で得られたスルホベタインポリマー０．２ｇ、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート１．４７７ｇ、エチレングリコールジメタクリレート２２ｍｇ（２１μＬ）および重合開始剤として４，４’−アゾビス−（４−シアノ吉草酸）４ｍｇを純水５０ｍＬ中に溶解させることにより、溶液を得た。得られた溶液をフラスコ内に入れ、フラスコ内に窒素ガスを１時間導入しながらフラスコ内の内容物を７０℃に昇温し、撹拌した。その後、フラスコ内のモノマー成分を２４時間重合させることにより、反応混合物を得た。得られた反応混合物を濾取し、メタノールおよび水を用いて洗浄し、乾燥させることにより、架橋ポリマーを得た。【０１２３】
前記で得られた架橋ポリマーを水に溶かして、１０質量％の架橋ポリマー水溶液を調製した。なお、架橋ポリマーは水に溶解してナノゲル状態になり、見かけ上、均一な溶液が得られた。前記溶液をタンパク質凝集防止剤として用いた。得られたタンパク質凝集防止剤に、リゾチームを含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を添加し、混合して、溶液を得た（タンパク質（リゾチーム）１質量部あたりの架橋ポリマーの量：１００質量部、溶液中のタンパク質（リゾチーム）の含有率：０．０５質量％）。得られた溶液を目視によって観察したが、リゾチームの凝集が認められなかった。【０１２４】
次に、前記タンパク質凝集防止剤によるタンパク質の凝集抑制効果を実施例１と同様にして調べた。その結果、残存リゾチーム活性は３７％であった。【０１２５】
実施例５
調製例２で得られたスルホベタインポリマー０．２ｇ、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート１．４７７ｇ、ブチルメタクリレート３９．７ｍｇ（４４．４μＬ）、エチレングリコールジメタクリレート２２ｍｇ（２１μＬ）および重合開始剤として４，４’−アゾビス−（４−シアノ吉草酸）４ｍｇを水５０ｍＬおよびメタノール１０ｍＬからなる混合溶媒６０ｍＬに溶解させることにより、溶液を得た。得られた溶液をフラスコ内に入れ、フラスコ内に窒素ガスを１時間導入しながらフラスコ内の内容物を７０℃に昇温し、撹拌した。その後、フラスコ内のモノマー成分を２４時間重合させることにより、反応混合物を得た。得られた反応混合物を濾取し、水を用いて洗浄し、乾燥させることにより、架橋ポリマーを得た。【０１２６】
前記で得られた架橋ポリマーを水に溶かして、１０質量％の架橋ポリマー水溶液を調製した。なお、架橋ポリマーは水に溶解してナノゲル状態になり、見かけ上、均一な溶液が得られた。前記溶液をタンパク質凝集防止剤として用いた。得られたタンパク質凝集防止剤に、リゾチームを含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を添加し、混合して、溶液を得た（タンパク質（リゾチーム）１質量部あたりの架橋ポリマーの量：１００質量部、溶液中のタンパク質（リゾチーム）の含有率：０．０５質量％）。得られた溶液を目視によって観察したが、リゾチームの凝集が認められなかった。【０１２７】
次に、前記タンパク質凝集防止剤によるタンパク質の凝集抑制効果を実施例１と同様にして調べた。その結果、残存リゾチーム活性は５２％であった。【０１２８】
実施例６
調製例２で得られたスルホベタインポリマー０．２ｇ、３−［（３−アクリルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］プロパン−１−スルホネート１．４７７ｇ、ブチルメタクリレート７９．５ｍｇ（８８．８μＬ）、エチレングリコールジメタクリレート２２ｍｇ（２１μＬ）および重合開始剤として４，４’−アゾビス−（４−シアノ吉草酸）４ｍｇを水５０ｍＬおよびメタノール１０ｍＬからなる混合溶媒６０ｍＬに溶解させることにより、溶液を得た。得られた溶液をフラスコ内に入れ、フラスコ内に窒素ガスを１時間導入しながらフラスコ内の内容物を７０℃に昇温し、撹拌した。その後、フラスコ内のモノマー成分を２４時間重合させることにより、反応混合物を得た。得られた反応混合物を濾取し、水を用いて洗浄し、乾燥させることにより、架橋ポリマーを得た。【０１２９】
前記で得られた架橋ポリマーを水に溶かして、１０質量％の架橋ポリマー水溶液を調製した。なお、架橋ポリマーは水に溶解してナノゲル状態になり、見かけ上、均一な溶液が得られた。前記溶液をタンパク質凝集防止剤として用いた。得られたタンパク質凝集防止剤に、リゾチームを含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を添加し、混合して、溶液を得た（タンパク質（リゾチーム）１質量部あたりの架橋ポリマーの量：１００質量部、溶液中のタンパク質（リゾチーム）の含有率：０．０５質量％）。得られた溶液を目視によって観察したが、リゾチームの凝集が認められなかった。【０１３０】
次に、前記タンパク質凝集防止剤によるタンパク質の凝集抑制効果を実施例１と同様にして調べた。その結果、残存リゾチーム活性は６６％であった。【０１３１】
比較例１
調製例１で得られたスルホベタインポリマーを水に溶かして、１０質量％の架橋ポリマー水溶液を調製し、得られた溶液をタンパク質凝集防止剤として用いた。得られたタンパク質凝集防止剤に、リゾチームを含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を添加し、混合して、溶液を得た（タンパク質（リゾチーム）１質量部あたりのスルホベタインポリマーの量：１００質量部、溶液中のタンパク質（リゾチーム）の含有率：０．０５質量％）。【０１３２】
前記タンパク質凝集防止剤によるタンパク質の凝集抑制効果を実施例１と同様にして調べた。その結果、残存リゾチーム活性は２％であった。【０１３３】
以上の結果から、各実施例で得られたタンパク質凝集防止剤は、リゾチーム活性を維持し、タンパク質が凝集することを効果的に抑制することができることがわかる。
【産業上の利用可能性】
【０１３４】
本発明のタンパク質凝集防止剤は、リゾチーム活性を維持し、タンパク質の凝集を効果的に抑制することができることから、例えば、酵素の保存剤、抗体医薬、体内のアミロイド凝集抑制剤などの種々のタンパク質の凝集防止が望まれる用途に使用することが期待されるものである。【０１３５】
したがって、本発明のタンパク質凝集防止剤は、例えば、食品加工分野、抗体医薬分野、移植医療分野、酵素製造分野、製薬関連分野などの種々の分野で使用することが期待される。【０１３６】
本願は、日本で出願された特願２０１６−１０８８４６号を基礎としており、その内容は本願明細書に全て包含される。
【国際調査報告】
2017209121.tif 000007
2017209121.tif 000008
2017209121.tif 000009
2017209121.tif 000010
2017209121.tif 000011