(57)【要約】【課題】実使用上の分解性、取り扱い性及び密着性を損なうことなく、優れた癒着防止性能を発揮することができる癒着防止材を提供すること。【解決手段】水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなる固形または半固形の基体に抗酸化物質としてアスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を含む癒着防止材とする。当該癒着防止材は、創傷面と創傷面の物理バリアとして基体が機能すると共に、創傷面における治癒が、基体から徐放されたアスコルビン酸またはその誘導体で促進されることにより、相乗効果的に癒着防止機能が効率よく発現する 【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなる固形または半固形の基体に抗酸化物質として、アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を含有させてなることを特徴とする癒着防止材。
【請求項２】
請求項１に記載の癒着防止材において、前記固形の基体は、フィルム状、シート状、及びメッシュ状のいずれか一つの中から選ばれる形態であり、
前記フィルム状、前記シート状及びメッシュ状の形態は、当該基体から実質的になる単層構造であるか、または、当該基体の基体層上にさらにポリ脂肪族エステルからなる被覆層を備えた積層構造を有するものであり、
または前記メッシュ状の形態は、固形の水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルの基体を棒状に形成した複合体からなる繊維状構造を有し、かつその目付けは０．８ｇ／ｍ2〜８３０ｇ／ｍ2であることを特徴とする癒着防止材。
【請求項３】
請求項１に記載の癒着防止材において、半固形の基体は、単層構造または積層構造を有し、コロイド状を含むゲル状の形態で、３７℃の粘度が１００Ｐａ・ｓから１,０００,０００Ｐa・ｓであることを特徴する癒着防止材。
【請求項４】
請求項２に記載の癒着防止材において、当該基体の基体層の上に被覆層を備えた積層構造は、その基体層の両面にそれぞれ被覆層を備えた両面被覆層及び基体層の３層で形成されていることを特徴とする癒着防止材。
【請求項５】
請求項４に記載の癒着防止材において、前記被覆層の厚みを、分光エリプソメータを用いて波長３８０ｎｍ〜９００ｎｍで測定したときの前記被覆層の光学厚みが５０ｎｍ以上７０００ｎｍ未満であることを特徴とする癒着防止材。
【請求項６】
請求項１に記載の癒着防止材において、アスコルビン酸及びその誘導体は、基体または基体層を構成する基材重量に対し０．１（ｗ／ｗ）％以上〜２０（ｗ/ｗ）％以下含有することを特徴とする癒着防止材。
【請求項７】
請求項１から請求項６のいずれかに記載の癒着防止材を、牛血漿に浸漬した場合、２４時間後に、ｐＨは７．５〜６．０となることを特徴とする癒着防止材。
【請求項８】
請求項２〜請求項７のいずれか１項に記載の癒着防止材において、
前記被覆層として、前記基体層の一方側の面に配置された第１被覆層と、前記基体層の他方側の面に配置された第２被覆層とを備え、前記第１被覆層及び第２被覆層が同一材料で構成されていることを特徴とする癒着防止材。
【請求項９】
請求項２〜請求項７のいずれか１項に記載の癒着防止材において、前記被覆層として、前記基体層の一方側の面に配置された第１被覆層と、前記基体層の他方側の面に配置された第２被覆層とを備え、前記第１被覆層と前記第２被覆層とが異なる材料で構成されていることを特徴とする癒着防止材。
【請求項１０】
請求項１〜請求項９のいずれか１項に記載の癒着防止材において、
前記水溶性高分子は、多糖類、蛋白質又は合成高分子であることを特徴とする癒着防止材。
【請求項１１】
前記基体を構成する水溶性高分子（Ａ）とポリ脂肪族エステル（Ｂ）の重量割合ω（＝Ａ／Ｂ）が１〜９９／９９〜１であることを特徴とする請求項１〜１０のいずれか１項に記載の癒着防止材。
【請求項１２】
水溶性高分子から実質的になる固形または半固形の基体に抗酸化物質として、アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を含有させ、またはさらに当該基体からなる基体層の両面にそれぞれポリ脂肪族エステルからなる被覆層を備えたことを特徴とする癒着防止材。
【請求項１３】
請求項１の抗酸化物質として、植物の脂溶性色素であるカロチノイド類またはポリフェノール類を含む植物由来の抗酸化物質を含有させてなることを特徴とする請求項２〜１２のいずれか１項に記載の癒着防止材。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癒着防止材に関する。特に水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなる固形または半固形の基体と当該基体に含有させた抗酸化物質として、アスコルビン酸またはその誘導体からなる癒着防止材に関する。
【背景技術】
【０００２】
本特許出願人は、生体内で（ａ）生体組織に貼り付けたときの分解性及び（ｂ）癒着防止性能に優れ、従来よりも（ｃ）濡れたときの取り扱い性及び（ｄ）生体組織に貼り付けたときの密着性に優れた癒着防止材を提供することを目的として特許文献１（特許第５６８６２９７号）において新規な癒着防止材の発明を開示した。
特許文献１に記載の癒着防止材の要旨は、基体層に水溶性高分子を使用し、当該基体層の少なくとも一方または両面に生体分解性のポリ脂肪族エステルを含む極薄膜（分光エリプソメータを用いて波長３８０ｎｍ〜９００ｎｍで測定したときの前記被覆層の光学厚みが、２７ｎｍ以上１６０ｎｍ未満のもの）からなる被覆層を配置したものである。
一方、特許文献２には、トレハロースを有効成分とし、抗酸化物質としてアスコルビン酸誘導体を含有する組織癒着防止液の発明が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特許第５６８６２９７号（特許請求の範囲、図１から図４）
【特許文献２】特許第４４４７６４０号（特許請求の範囲、請求項１から３）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
特許文献１に記載の発明は、生体内で（ａ）生体組織に貼り付けたときの分解性、（ｃ）濡れたときの取り扱い性及び（ｄ）生体組織に貼り付けたときの密着性等の幾つかの点で優れた特性を有する癒着防止材を提供する発明であるが、ただ、本発明者らがさらに検討したところ、より充分な（ｂ）癒着防止性能を確保するという点やその他の、さらに優れた癒着防止材を提供することを目的とする点で、まだ改善すべき課題がいくつか残されていることを認識した。
特許文献２に記載の組織癒着防止液は、スプレー方式のものであり、特許文献１に記載のフィルムないしシート状の癒着防止材とは剤型が異なり、その結果、癒着防止機能の発現機序が異なる。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
そこで本発明者は、以上の課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、次の発明に到達した。
［１］本発明にしたがえば、水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなる固形または半固形の基体に抗酸化物質として、アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を含有させてなることを特徴とする癒着防止材、が提供される。
［２］また、本発明にしたがえば、［１］に記載の癒着防止材において、前記固形の基体は、フィルム状、シート状、及びメッシュ状の中から選ばれるいずれか一つの形態であり、
前記フィルム状、前記シート状及びメッシュ状の形態は、当該基体から実質的になる単層構造であるか、または、当該基体の基体層上にさらにポリ脂肪族エステルからなる被覆層を備えた積層構造を有するものであり、
または前記メッシュ状の形態は、固形の水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルの基体を棒状に形成した複合体からなる繊維状構造を有し、かつその目付けは０．８ｇ／ｍ2〜８３０ｇ／ｍ2であることを特徴とする癒着防止材、が提供される。【０００６】
［３］また、本発明にしたがえば、［１］に記載の癒着防止材において、半固形の基体は、コロイド状を含むゲル状の形態で、単層構造又は積層構造を有し、３７℃の粘度が１００Ｐａ・ｓから１,０００,０００Ｐa・ｓであることを特徴する癒着防止材、が提供される。
［４］また、本発明にしたがえば、［２］に記載の癒着防止材において、当該基体の基体層の上に被覆層を備えた積層構造は、その基体層の両面にそれぞれ被覆層を備えた両面被覆層及び基体層の３層で形成されていることを特徴とする癒着防止材、が提供される。【０００７】
［５］また、本発明にしたがえば、［４］に記載の癒着防止材において、前記被覆層の厚みを、分光エリプソメータを用いて波長３８０ｎｍ〜９００ｎｍで測定したときの前記被覆層の光学厚みが５０ｎｍ以上７０００ｎｍ未満であることを特徴とする癒着防止材、が提供される。
［６］また、本発明にしたがえば、［１］に記載の癒着防止材において、アスコルビン酸及びその誘導体は、基体または基体層を構成する基材重量（質量）に対し０．１（ｗ／ｗ）％以上〜２０（ｗ/ｗ）％以下含有することを特徴とする癒着防止材、が提供される。
［７］また、本発明にしたがえば、［１］から［６］のいずれかに記載の癒着防止材を、牛血漿に浸漬した場合、２４時間後に、そのｐＨは７．５〜６．０となることを特徴とする癒着防止材、が提供される。【０００８】
［８］また、本発明にしたがえば、［２］〜［７］のいずれか１項に記載の癒着防止材において、前記被覆層として、前記基体層の一方側の面に配置された第１被覆層と、前記基体層の他方側の面に配置された第２被覆層とを備え、前記第１被覆層及び第２被覆層が同一材料で構成されていることを特徴とする癒着防止材、が提供される。
［９］また、本発明にしたがえば、［２］〜［７］のいずれか１項に記載の癒着防止材において、前記被覆層として、前記基体層の一方側の面に配置された第１被覆層と、前記基体層の他方側の面に配置された第２被覆層とを備え、前記第１被覆層と前記第２被覆層とが異なる材料で構成されていることを特徴とする癒着防止材、が提供される。
［１０］また、本発明にしたがえば、［１］〜［９］のいずれか１項に記載の癒着防止材において、前記水溶性高分子は、多糖類、蛋白質又は合成高分子であることを特徴とする癒着防止材、が提供される。【０００９】
［１１］また、本発明にしたがえば、前記基体を構成する水溶性高分子（Ａ）とポリ脂肪族エステル（Ｂ）の重量割合ω（＝Ａ／Ｂ）が１〜９９／９９〜１であることを特徴とする［１］〜［１０］いずれか１項に記載の癒着防止材、が提供される。
［１２］また、本発明にしたがえば、水溶性高分子から実質的になる固形または半固形の基体に抗酸化物質として、アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を含有させ、またはさらに当該基体からなる基体層の両面にそれぞれポリ脂肪族エステルからなる被覆層を備えたことを特徴とする癒着防止材、が提供される。
［１３］また、本発明にしたがえば、前記［１］の抗酸化物質として、植物の脂溶性色素であるカロチノイド類またはポリフェノール類を含む植物由来の抗酸化物質を含有させてなることを特徴とする［２］〜［１２］いずれか１項に記載の癒着防止材、が提供される。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の癒着防止材は、基本的に、水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなる固形または半固形の基体に抗酸化物質として、アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を含有させてなる構成を有することを特徴とする。
本発明の癒着防止材はかかる構成を有することにより、
〈１〉創傷面と創傷面の物理バリアとしてポリ脂肪族エステル及び水溶性高分子からなる基体が機能すること、並びに、創傷面の治癒の促進が創傷面に継続的に徐放されるアスコルビン酸またはその誘導体で促進されることにより、相乗効果的に癒着防止機能がきわめて効率よく発現する。【００１１】
〈２〉また、基体の形状として、固形（フィルム状、シート状、メッシュ状）または半固形（コロイド状を含むゲル状の形態）を有するものとしており、しかもこのような形状の基体または基体層にアスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を含有させているので、上記物理バリア機能の確保、並びに、創傷面の治癒の促進効果を確実に当該創傷面に発現させることができる。基体または基体層に含有させたアスコルビン酸等は、粘性を有する溶液を形成する水溶性高分子と共に徐々に溶出して基体表面（創傷面近傍）にとどまり治癒の促進効果に貢献する。【００１２】
〈３〉さらにまた、固相もしくは半固形の基体にアスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を配合して用いる利点として、当該創傷面に対する持続的アスコルビン酸の徐放が可能になる。一般的に創傷の治癒には通常少なくとも２４〜４８時間、場合によっては１〜２週間必要であるといわれておりその所要期間にわたってアスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体が創傷面に連続的に徐放されて存在し続けるようにすることができる。【００１３】
なお特許文献１に記載の癒着防止材は、基体層の分解吸収性を速くすることを意図するあまりこれらアスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体の徐放を考慮しておらず、癒着防止材成分（創傷の治癒促進成分）としてアスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を加えた場合においても、十分な期間に渡って、当該アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体の徐放ができず充分な癒着防止効果が得られないおそれがある。
すなわち、特許文献１に記載の癒着防止材は、基体層が水溶性高分子からなるものであり、比較的速やかに当該基体層は水へ溶解し、分解吸収されてしまうのであるから、当該基体層からのアスコルビン酸の徐放を考慮する余地がない。
また特許文献２に記載の組織癒着防止液のように、液体状では同様に薬剤の徐放、創傷面への持続的な薬剤の徐放を考慮できておらず、本発明による癒着防止機能の発現機序は異なる。
この点に関して、本発明者らは鋭意検討した結果、後記する代表例にあらわす適切な形状な場合、最適な徐放性を確保することができることを確認できた。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、本発明の代表実施形態に係る癒着防止材１を説明するための図であり、図１（ａ）は癒着防止材１の斜視図、図１（ｂ）はその一部拡大断面図である。
【図２】図２は、癒着防止材１の基体層に添加したアスコルビン酸の徐放を経時的に評価したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
（定義）  
本発明の癒着防止材を明確に説明するため、本発明における「基体」、「基体層」、「被覆層」について以下の定義をおく。
「基体」とは癒着防止材を構成する主要なマトリクス部材であり、水溶性高分子（Ａ）及びポリ脂肪族エステル（Ｂ）からなり、これにアスコルビン酸やアスコルビン酸誘導体（以下「アスコルビン酸等」ということがある。）を添加、含有させて癒着防止材を構成するものである。当該癒着防止材は生体内に置かれた場合、当該基体は、一定期間その形状を保持したままアスコルビン酸等を徐放するものである。
【００１６】
当該基体は、具体的には、生体内で臓器に貼附するために、通常単層構造または積層構造の層構造をとるが、特に単層構造をとる場合の基体を「基体層」といい、また、積層構造においては、当該「基体層」の表面（両面または片面）を覆うように形成された外層（「被覆層」ともいう。）を備える。通常、基体層は比較的厚い層であり、被覆層は基体層に比較して薄い層として構成される。
「被覆層」は後述するように、主として基体層からのアスコルビン酸等の徐放を制御する層であり、また、基体層を強度的に保持して癒着防止材が生体中に置かれた場合、形状を保持する機能を有する層である。
【００１７】
以上より、「基体」とは、アスコルビン酸等が添加されるマトリクス部材であり、これから当該抗酸化剤が徐放されるものであるから、「基体層」だけでなく被覆層」も「基体」に該当する（後記実施例５−６参照）。
また、本発明の癒着防止材のマトリクス部材は、定義より水溶性高分子（Ａ）及びポリ脂肪酸エステル（Ｂ）からなるものであるが、単層構造の場合は、当該層は、水溶性高分子（Ａ）及びポリ脂肪酸エステル（Ｂ）の２成分組成物（Ａ／Ｂ）から構成され、一方、積層構造の場合、例えば典型的には「基体層」と「被覆層」から構成されるとすると、「基体層」は実質的に水溶性高分子（Ａ）のみから構成され、「被覆層」は実質的にポリ脂肪酸エステル（Ｂ）のみから構成されるようにすることができる（後記実施例１−４参照）。
【００１８】
以下、本発明の癒着防止材について、図１に示す代表実施形態に基づいて説明する。ただし、本発明の実施形態は、図１に示す実施形態に限定されるものではなく、本発明を特徴づける中核的な発明特定事項を備える限り、種々の実施形態が可能である。
まず、本発明の概要について説明すると、本発明の癒着防止材は、水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなる、いわゆる固形の基体にアスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体（すでに述べたように、「アスコルビン酸等」という場合がある。）を含有させてなるものである。
癒着防止材の形態、具体的には固形の基体は、フィルム状、シート状及びメッシュ状の中から選ばれるいずれか一つであり、半固形の基体は、コロイド状を含むゲル状の形態である。
【００１９】
固形の基体がフィルム状、シート状の場合、その構造は基本的には単層構造からなる基体層であるが、所望により以下のように基体層の上にさらに被覆層を備えた、積層構造とすることができる。すなわち、このような積層構造の場合は、基体は、最も典型的には水溶性高分子からなる基体層と、その上に形成されるポリ脂肪族エステルからなる被覆層から構成されることになる。
なお、一般的にフィルム状とシート状の両者の区別は確定的なものではないが、本発明においては、厚みが２００μｍ未満のものをフィルム状とし、シート状とは厚みが２００μｍ以上のものをいうものとする。メッシュ状の場合は、固形の水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなる基体を棒状に形成した複合体からなる繊維状構造体であり、その目付けは、０．８ｇ／ｍ2〜８３０ｇ／ｍ2の範囲に設定される。
【００２０】
固形の基体が半固形の場合は、コロイド状を含むゲル状の形態であり、単層構造または積層構造を有し、その３７℃における粘度は１００Ｐａ・ｓから１，０００，０００Ｐａ・ｓであり、この範囲の物性のものは有効な物理バリア機能を発現する。
いずれの形態の基体においても、水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなるいわゆる固形または半固形の基体であって、アスコルビン酸等が含有され、それらが、創傷面と創傷面の物理バリアとなるとともに、当該創傷面に徐放されるアスコルビン酸等が創傷面の治癒の促進をすることによる相乗的な癒着防止機能が効率的に確実に発揮されることを基礎としたものである
【００２１】
［代表実施形態の説明］
図１は、本発明の代表実施形態に係る癒着防止材１を説明するために示す図である。本発明は下記の代表実施形態に限定されるものではない。あえて図示するまでもなく特許文献１の図２のような基体層の片面にのみ被覆層を形成した場合や、図４のような基体層の両面に被覆層を形成しこれを棒状に形成した複合体からなる繊維状（メッシュ状）構造の形態とすることもできる。
図１（ａ）は癒着防止材１の斜視図であり、図１（ｂ）は癒着防止材１の一部拡大断面図である。なお、図１（ａ）及び図１（ｂ）においては、発明の理解を容易にするため、基体層１０の層厚並びに基体層１０に対する第１被覆層２０及び第２被覆層３０の層厚をある程度誇張して表している。
【００２２】
代表実施形態に係る癒着防止材１は、図１に示すように、フィルム状からなる基体層１０と、所望により設けられる基体層１０の一方側の面に配置された第１被覆層２０と、基体層１０の他方側の面に配置された第２被覆層３０とを備えるものである。
【００２３】
（基体の基本構成）
本発明の癒着防止材においては、基体は、単層構造の場合は、水溶性高分子（Ａ）及び生体分解性のポリ脂肪族エステル（Ｂ）からなる二成分樹脂組成物（樹脂の均一混合物）からなり、積層構造の場合は、少なくとも水溶性高分子（Ａ）からなる基体層と生体分解性のポリ脂肪族エステル（Ｂ）からなる固形または半固形の被覆層を備えることを特徴とする。この点において、水溶性高分子のみ（単一成分）から構成される基体層をベースとする特許文献１に開示された従来のものとは根本的に異なる。
【００２４】
本発明における基体は、水溶性高分子及び生体分解性のポリ脂肪族エステルからなる二成分組成物の単層構造であるか、前記積層構造から構成されるものであるため、これが生体中に置かれた場合、ポリ脂肪族エステル部分は、（水溶性高分子部分とは異なり）速やかには分解せず、相当長期間層状（フィルム状又はシート状）の形態を保持している（フィルム形状保持部分）。一方、水溶性高分子部分は、形状保持部分である生体分解性のポリ脂肪族エステルと互いに混合しているか、または互いに接して存在するので（単一成分層の場合のように比較的速やかに溶解することが無く）当該基体の表面の生体液に接触している部分から徐々に溶出することになる。
このように基体から徐々に溶出する（徐放性）水溶性高分子成分は創傷面に対し治癒促進作用を奏するものである。
【００２５】
（抗酸化物質／アスコルビン酸等）
本発明の癒着防止材においては、このように構成された二成分組成物からなる単層構造の基体、または前記積層構造からなる基体に抗酸化物質として、アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を含有させてなるものであることを特徴としている。
本発明者らの検討によると、基体にアスコルビン酸等を配合し、当該基体から徐放させることを企図した場合、特許文献１記載のごとく、プルラン等水溶性高分子のみからなる基体層の場合は、上記したように基体層自体が比較的短時間で溶解してしまい、マトリックス層（形態保持層）としての機能を奏さなくなるので、十分な徐放性を実現することはできない。一方、本発明における水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなる二成分組成物からなる単層構造の基体、または、積層構造の基体の場合は、生体分解性のポリ脂肪族エステルがマトリックス（骨格形成）の機能を奏するので、基体は長時間その形態を保持する。
【００２６】
一方本発明においては、基体中に配合されたアスコルビン酸等は、基体表面から溶出するのであるが、当該二成分組成物からなる単層構造の基体、または、積層構造からなる基体においては、上記したように、たとえば水溶性高分子部分が、形状保持部分である生体分解性ポリ脂肪族エステルと互いに混合しているか、互いに接して存在し、当該基体の表面から徐々に溶出することになる。当該溶出する水溶性高分子部分とともに、（この部分に含有されている）アスコルビン酸等も共に溶出すると考えられる。このように基体から溶出する水性高分子成分とともにアスコルビン酸等は徐々に溶出し、創傷面において常に存在するので、高い治癒促進作用を奏すると考えられる。
【００２７】
（徐放性の制御）
本発明において基体中に含有させたアスコルビン酸等の徐放メカニズムは上記のようなものと考えられることから、アスコルビン酸等の徐放速度も広範囲に制御することができる。すなわち、水溶性高分子（Ａ）及び生体分解性のポリ脂肪族エステル（Ｂ）からなる二成分組成物からなる単層構造の基体、または、積層構造において、水溶性高分子（Ａ）の割合を大きくすればするほど、当該水溶性高分子の溶出量（溶出速度）が大きくなる。（但し、水溶性高分子の割合をあまり大きくすると、生体分解性のポリ脂肪族エステル（Ｂ）が減少するのでフィルム状の形態保持力は低下する。）
一方、ポリ脂肪族エステル（Ｂ）の割合を増加させると、フィルム状等の基体の形態は長時間安定的に保持されるが、逆に水溶性高分子（Ａ）、ひいてはアスコルビン酸等の溶出速度は低下する。以上の点を考慮して、その目的に応じて、最適な徐放性を実現することができる。
【００２８】
かかる観点から、本発明においては、前記基体を構成する水溶性高分子（Ａ）とポリ脂肪族エステル（Ｂ）の重量割合ω（＝Ａ／Ｂ）が１〜９９／９９〜１、より好ましくはω（＝Ａ／Ｂ）を２０〜８０／８０〜２０、さらに好ましくはω（＝Ａ／Ｂ）を３０〜７０／７０〜３０であることが望ましい。水溶性高分子（Ａ）の割合がこれよりあまり少ないと、その溶出速度が小さく、また配合したアスコルビン酸等の徐放速度がきわめて少なくなる。一方、ポリ脂肪族エステル（Ｂ）の量がこれよりあまり大きいと、形状保持性は向上するが、水溶性高分子（Ａ）及びアスコルビン酸等の徐放性が少なくなりすぎる。
【００２９】
本発明の癒着防止材は、単層構造の場合、最も代表的には、基体は水溶性高分子及び生体分解性のポリ脂肪族エステルから構成され、積層構造の場合、基体層１０は、上記のように、通常水溶性高分子から構成され、被覆層は、生体分解性のポリ脂肪族エステルから構成されている。まず、水溶性高分子について説明する。
【００３０】
（水溶性高分子）
水溶性高分子としては、多糖類、蛋白質又は合成高分子を好ましく用いることができる。
【００３１】
多糖類としては、例えば、デンプン、アミロース、アミロペクチン、グリコーゲン、グルコマンナン、デキストリン、グルカン、フルクタンなどの動植物の貯蔵多糖類；セルロース、ペクチン、キチンなどの動植物の構造多糖類；カラギーナン、アガロースなどの海藻由来の多糖類；プルランなどの微生物多糖類；ローカストビーンガム、グアーガムなどの植物ゴム多糖類；ヘパリン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、へパラン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸などのグリコサミノグリカン；その他これら多糖類の誘導体を好適に用いることができる。
【００３２】
蛋白質としては、例えば、ゼラチン、カゼイン、コラーゲンなどを好適に用いることができる。
【００３３】
合成高分子としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルアルコール誘導体、ポリアクリル酸系水溶性ポリマー、ポリアクリルアミド、ポリアクリルアミド誘導体、ポリエチレンオキシド、ポリエチレンオキシド誘導体、ポリビニルピロリドン、ポリビニルピロリドン誘導体、ポリアミド系ポリマー、ポリアルキレンオキシド系ポリマー、ポリエーテルグリコール系ポリマー、無水マレイン酸共重合体系ポリマーなどを好適に用いることができる。
癒着防止材全体のしなやかさを高める観点から言えば、例示した水溶性高分子のなかでも、プルランを特に好適に用いることができる。
【００３４】
（ポリ脂肪族エステル）
つぎにポリ脂肪族エステルについて説明する。本発明で使用するポリ脂肪酸エステルは好ましくは生体分解性のものであって、このようなポリ脂肪族エステルとしては、例えば、ポリ（ラクチド）類；ポリ（グリコリド）類；ポリ（ラクチド−ε−グリコリド）類；ポリ（乳酸）類；ポリ（グリコール酸）類；ポリ（乳酸−ε−グリコール酸）類；ポリカプロラクトン類；ポリエステルアミド類；ポリアンヒドリド類；ポリオルトエステル類；ポリシアノアクリレート類；ポリエーテルエステル類；ポリ（ジオキサノン）類；ポリ（アルキレンアルキレート）類；ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、その他これらの共重合体；ポリマーアロイなどを好適に用いることができる。特に、生体内適合性及び生体分解性に優れることから、ポリ（乳酸）類、ポリ（グリコール酸）類、ポリカプロラクトン類、及びこれらの共重合体のうちの少なくとも１種を用いることが好ましい。特に好ましくは乳酸／グリコール酸／ε−カプロラクトンの三元共重合体（ＬＡ／ＧＡ／ε−ＣＬＴ）で、分子量２０，００〜３００，０００程度のものが好適である。
【００３５】
（基体層厚み）
基体または基体層１０（以下単に基体層１０という場合がある。）の層厚ＬＤは、例えば、１μｍ〜５０００μｍ、に設定されている。
フィルム状の癒着防止材の場合は、基体層１０の層厚は２００μｍ未満、好ましくは１μｍ〜１５０μｍ、さらに好ましくは１０μｍから１００μｍ、最も好ましくは３０μｍ〜８０μｍである。
シート状の癒着防止材の場合は、基体層１０の層厚は２００μｍ以上に形成する。好ましくは２００μｍから５０００μｍ、より好ましくは３００μｍ〜３０００μｍ、さらに好ましくは５００〜２０００μｍ、最も好ましくは８００〜１０００μｍである。基体層１０の厚みは、ノギス、マイクロゲージ等直接接触による測定のほか、赤外線膜厚計、静電容量式厚み計、レーザ変位センサー等適当なものを採用して測定することが可能である。
【００３６】
（アスコルビン酸、アスコルビン酸誘導体）
本発明においては抗酸化成分として、アスコルビン酸またはその誘導体を癒着防止材から徐放させる最も好ましいものとして使用し、これを基体または基体層（または場合によってはさらに被覆層にも）含有させる。
アスコルビン酸( ascorbic acid）は、栄養素ビタミンＣとしてはたらく、ラクトン構造を持つ有機化合物の１種で、化学式は以下に示すとおりである。(ＩＵＰＡＣ命名法)では、フランの誘導体と見なして、(R)-3,4-ジヒドロキシ-5-（(S)-1,2-ジヒドロキシエチル）フラン-2(5H)-オンと表される。分子量は176.13 g/mol、融点は190℃、沸点は553℃の、光学活性化合物である。本発明では、ビタミンＣとして知られているＬ体、すなわちＬ−アスコルビン酸を好適に使用することができる。
【００３７】
【化１】
2017149897.tif 000003
【００３８】
本発明においては、その他に使用可能なアスコルビン酸誘導体として、アスコルビン酸カルシウム、アスコルビン酸ナトリウム、リン酸−Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム、リン酸−Ｌ−アスコルビン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アスコルビルエチル等などが含まれる。
【００３９】
（ｐＨ値）
アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体は、癒着防止材全体、または基体層の重量（質量）に対して、少なくとも０．１（ｗ/ｗ）％以上〜２０（ｗ/ｗ）％以下、通常０．５（ｗ/ｗ）％以上〜１０（ｗ/ｗ）％以下、好ましくは１．０（ｗ/ｗ）％以上〜９．０（ｗ/ｗ）％以下、さらに好ましくは１．５（ｗ/ｗ）％以上〜８．０（ｗ/ｗ）％以下添加するのが望ましい。
アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を、上記の割合で基体または基体層に添加、含有させた本発明の癒着防止材を１００×１００ｍｍ／３０ｍＬ牛血漿に浸漬した場合、２４時間後に、そのｐＨは７．５〜６．０となる。これは創傷面の治癒を促進するために最も好ましいｐＨである。
【００４０】
このことは、本発明の癒着防止材を生体内に配置した場合、その基体または基体層中に含有させたアスコルビン酸等が徐放され続ける限り、癒着防止材の配置部分近傍のｐＨは、初期の値から変化せず、治癒に最適の７．５〜６．０の値を維持することができることを意味する。このように本発明の癒着防止材は、徐放性を目的に応じて広範囲に変化させることが可能であると共に、創傷面近傍を長期間一定の所望のｐＨを維持することができる。
【００４１】
この点についてさらに敷衍すると、本発明においては、水溶性高分子部分が、基体の表面から徐々に溶出するとアスコルビン酸等も共に溶出する。特筆すべきは、溶出した水溶性高分子であるプルラン等は粘性のある溶液を形成するので当該溶液はアスコルビン酸等を溶解したまま基体表面を覆うようにその位置にとどまると推定されることである。そして粘性ある水溶性高分子溶液中のアスコルビン酸等の濃度は基体中の濃度Ｃｍ*とほぼ等しい筈である。（基体中にＣｍ*＝８％配合させた場合は、溶出水溶性高分子溶液中の濃度もほぼ８％となると考えるのが合理的である。）
このようにしてアスコルビン酸等を含有するプルラン等の粘性溶液が創傷部を安定的に覆っているので、当該創傷部はアスコルビン酸とプルラン等の相乗的効果で保護されることにより癒着防止効果が促進されると考えられる。
本発明の基体の形成は所定のアスコルビン酸等樹脂組成物をフィルム押出法、シート押出法で形成してもよいし、また当該樹脂組成物の溶液から流延法などにより形成してもよい。
【００４２】
（他の抗酸化物質）
本発明においては、アスコルビン酸等が最も効果を有するが、所望により、アスコルビン酸等の代わりに、例えば以下の抗酸化剤を用いることができる。すなわち、ビタミンＥ；α−カロチン,β−カロチン，γ−カロチン，リコピン，キサントフィル等植物の脂溶性色素であるカロチノイド類；フラボノイド，カテキン，タンニン，アントシアニン，イソフラボン，ケルセチン等植物の花や葉・樹皮・茎等に含まれるポリフェノール類を含む植物由来の抗酸化物質（SOD用物質）等を用いることもできる。
【００４３】
（被覆層）
本発明においては、基本的に、上記したような、水溶性高分子（Ａ）とポリ脂肪酸エステル（Ｂ）の組成物からなる基体から実質的になる単層構造であり、被覆層を備えなくてもアスコルビン酸等の徐放性を奏することができる。ただし所望により、当該基体からなる基体層上にさらにポリ脂肪族エステルからなる被覆層を備えた積層構造を有するものとすることができる。このような積層構造の場合は、すでに述べたように、最も典型的な場合は、基体は、実質的に水溶性高分子からなる基体層と、その上に形成されるポリ脂肪族エステルからなる被覆層から構成されることになる。この場合のポリ脂肪酸エステルからなる被覆層の機能は、基本的に、水溶性高分子からなる基体層に添加したアスコルビン酸の徐放性の制御である。被覆層が存在しない場合は、短時間で水溶性高分子とともにアスコルビン酸も短時間で溶出してしまい十分な時間に渡ってその徐放性を確保することが困難になる。
すなわち、積層構造の場合は、図１に示すように、基体層１０の一面に被覆層２０（第１被覆層）を、他の面に被覆層３０（第２被覆層）を形成することができる。
【００４４】
（被覆層の構成成分）
被覆層としての第１被覆層２０及び第２被覆層３０は、好ましくは、ともに生体分解性ポリ脂肪族エステルから構成されている。すなわち、基体の構成成分であるポリ脂肪族エステルと同じものを使用することができる。念のため、煩を厭わずに再度例示する。ポリ脂肪族エステルとしては、例えば、ポリ（ラクチド）類、ポリ（グリコリド）類；ポリ（ラクチド−ε−グリコリド）類；ポリ（乳酸）類；ポリ（グリコール酸）類；ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）類；ポリカプロラクトン類；ポリエステルアミド類；ポリアンヒドリド類；ポリオルトエステル類；ポリシアノアクリレート類；ポリエーテルエステル類；ポリ（ジオキサノン）類；ポリ（アルキレンアルキレート）類；ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、その他これらの共重合体；ポリマーアロイなどを好適に用いることができる。特に、基体層を構成する場合と同様にして、生体内適合性及び生体分解性に優れることから、ポリ（乳酸）類；ポリ（グリコール酸）類；ポリカプロラクトン類；及びこれらの共重合体のうちの少なくとも１種を用いることが好ましい。特に好ましくは前記した特に好ましくは乳酸／グリコール酸／ε−カプロラクトンの三元共重合体（ＬＡ／ＧＡ／ε−ＣＬＴ）である。なお、代表実施形態において、第１被覆層２０及び第２被覆層３０は、これら例示した材料の中から同じ材料で構成されていることが好ましい。
【００４５】
（被覆層にもアスコルビン酸を含有させる場合）
なお、基本的に、被覆層はこれらポリ脂肪族エステル（Ｂ）から構成されるが、後記するように当該被覆層の強度保持を目的とする場合は、比較的厚い被覆層を形成する。その場合は、所望により当該被覆層にアスコルビン酸等を含有させてもよい。被覆層に含有させることにより特に癒着防止材を創傷部にセットした場合の初期段階においての徐放を確実に行うことができる。但し、被覆層の厚みＬｄは、すでに述べたように基体層の厚みＬＤに比較してはるかに薄いので、当該被覆層に含有させるアスコルビン酸等の総量をそれほど大きくすることはできず、あまり長時間（長期間）徐放を続けることは困難であり、一義的には、基体層に含有させたアスコルビン酸等の補助的効果を奏させるために行うことが好ましい。
【００４６】
単層構造については、基体層のみにアスコルビン酸を添加することになるが、その場合、アスコルビン酸は水溶性多糖類に含まれるためその徐放は比較的速やかに行われる。また、薄い被覆層を形成することにより、後記実施例３−４に記載されているように、当該アスコルビン酸の溶出速度φは適宜に制御され所望の徐放率を実現することができる。
一方、積層構造の場合について、後記する実施例５−６のように、被覆層を通常より厚く形成した場合は、基体層と被覆層の両方にアスコルビン酸を添加することが好ましい。アスコルビン酸が被覆層にも含まれる場合は被覆層部分の徐放率（溶出速度）φは以下のように進行すると考えられる。
【００４７】
すなわち、被覆層へのアスコルビン酸の添加量（濃度Ｃｍ*）を一定とし、被覆層の厚み（Ｌｄ）を変えた場合、被覆層厚みＬｄが薄いほど初期段階においての徐放が速くなるが、より短い時間で被覆層内のアスコルビン酸が枯渇してしまう。一方被覆層厚みＬｄが厚いほど徐放は緩慢となるが、被覆層内のアスコルビン酸の総量はより多いので長時間徐放が継続すると考えられる。
また、被覆層の厚みＬｄが一定で、被覆層へのアスコルビン酸の添加量（濃度）Ｃｍ*を変えた場合について考察すると、濃度Ｃｍ*が高いほど初期段階においての徐放が速くなり、濃度Ｃｍ*が低いほど徐放は緩慢となる。
以上のように被覆層の厚みＬｄ、アスコルビン酸の添加量（濃度）Ｃｍ*を適宜調整することにより、徐放速度、徐放持続時間等を任意に変更することが可能となるので、治療方法の選択肢を大幅に広げることができる。
被覆層へのアスコルビン酸の含有量（濃度）Ｃｍ*は、０．０１（ｗ／ｗ）％以上〜１．０（ｗ／ｗ）％以下、好ましくは０．０２（ｗ／ｗ）％以上〜０．８（ｗ／ｗ）％以下、さらに好ましくは０．１（ｗ／ｗ）％以上〜０．５（ｗ／ｗ）％以下添加するのが望ましい。
【００４８】
（被覆層の厚み）
被覆層の機能は、基本的には、すでに述べたように徐放率（溶解速度）の制御である。
例えば後記実施例に示すように、生分解性であるポリ脂肪族エステルからなる被覆層を設けその厚みを光学厚みが５０ｎｍ以上８００ｎｍ以下、好ましくは７５ｎｍ以上６００ｎｍ未満程度の範囲で制御することにより、（基体層からの）アスコルビン酸の徐放性を変化させることができる。
さらに言えば、本発明においては、すでに述べたように、基本的には、基体層を構成する水溶性高分子（Ａ）とポリ脂肪族エステル（Ｂ）の重量割合ω（＝Ａ／Ｂ）を変えることにより、水溶性高分子（Ａ）の溶出速度（及び、ひいてはアスコルビン酸等の溶出速度）を制御することが可能であるが、さらに被覆層を形成し、その厚み（Ｌｄ）を上記の範囲で変化させることによってもより精妙に徐放性の制御を行うことができる。
【００４９】
被覆層（第１被覆層２０と第２被覆層３０）は、分光エリプソメータを用いて波長３８０ｎｍ〜９００ｎｍで測定したときの光学厚みは、基体層１０にアスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を添加する場合は、５０ｎｍ以上８００ｎｍ以下、好ましく７５ｎｍ以上６００ｎｍ未満に形成する。より好ましくは７５ｎｍ以上５００ｎｍ以下に形成する。
被覆層（第１被覆層２０と第２被覆層３０）の光学厚みが薄くても（５０−７５ｎｍ程度）、本発明においては基体層１０にアスコルビン酸等を添加しているので、充分な癒着防止性能が発揮できる。
【００５０】
なお、被覆層をあまり厚くしすぎる（例えば８００ｎｍ超）と生体中における被覆層の分解性能が低下する。また、基体層からのアスコルビン酸の生体中への溶出（拡散）が妨害されるようになるので、徐放性の維持の観点からは好ましくない。しかしながら、一方、基体層（ひいては癒着防止材）の強度の維持（形態の保持）の観点からは、被覆層自体が容易には破れない程度の強度を有するようにある程度の厚みを有していることが要求され、たとえば後記実施例５−６に示すように、基本的に８００〜７０００ｎｍ、好ましくは９００〜５０００ｎｍ、さらに好ましくは１０００〜３０００ｎｍ程度とすることが望ましい。このように被覆層の厚みは強度維持の観点からの考慮も必要である。
【００５１】
すなわち、サルやヒトのように二足歩行動物では、腹腔内圧の上昇や胃や腸等の臓器の移動によって癒着防止材の基体（又は被覆層）を構成するフィルム状やシート状の膜が破れる可能性がある。本発明らは、後述する実施例５−６によりサルを動物実験に使用して検討を重ねた結果、上記した程度に被覆層は厚くするほうが好ましいことが確認できた。
なお前記のように被覆層はあまり厚くすると分解性能の低下（アスコルビン酸徐放性の低下）が懸念されるが、サルやヒトのように二足歩行動物に適用して、被覆層の機械的強度を確保することを優先する場合は、上記程度の厚みであることが基本的に好ましい。この場合は、被覆層に配合するアスコルビン酸等の濃度Ｃｍ*を十分高くすることにより、その徐放性の低下を実質的に押さえることも可能である。
また、比較的厚い被覆層に水溶性高分子を含ませることにより、アスコルビン酸の徐放性の低下をある程度抑止することができる。
【００５２】
以上を踏まえて、総括的に、被覆層の厚みＬｄは、５０ｎｍ以上７０００ｎｍ以下、好ましくは１００ｎｍ以上５０００ｎｍ以下、さらに好ましくは１０００ｎｍ以上３０００ｎｍ以下に形成する。そして、この厚み範囲において、癒着防止材の置かれる腹腔内圧、力の環境、対象臓器の種類、所要徐放期間等の諸条件を考慮し、徐放性を優先するか、形態保持性を優先するかにより（但し、いずれにせよ、両者は考慮する必要がある。）被覆層の厚み（及び被覆層中に配合するアスコルビン酸濃度Ｃｍ*）を決定することが好ましい。
【実施例】
【００５３】
［実施例（Ａ）］
上述の図１に示すような代表実施形態に係る癒着防止材１の構成をもとに、基体層の材料に所定量のＬ-アスコルビン酸（和光純薬製社製）を添加して、フィルム状に成型した基体層の両面に同一材料からなる第１被覆層及び第２被覆層（以下、単に「被覆層」と省略する場合もある。）が配置され、前記したように、ｐＨが所定の範囲となるように調整したものを実施例の試料とした。（また、Ｌ-アスコルビン酸を添加しないものを比較例の試料とした。）【００５４】
（基体層の形成）
具体的には、まず、基体層の材料として水溶性高分子であるプルランを使用しこれに所定量のアスコルビン酸を添加して、１００ｍｍ×１２０ｍｍ×厚さ５０μｍのプルランからなる膜を流延法により成膜して、アスコルビン酸含有基体層を形成した（基体層中のアスコルビン酸濃度：Ｃｍ）。【００５５】
（被覆層の形成）
次に、常法であるディッピング法により、被覆層の形成を行った。すなわち、所定濃度に調整したポリ脂肪族エステルであるポリ乳酸−ポリグリコール酸−ポリε−カプロラクトンのトルエン溶液（以下、コーティング液という。）を作製し、当該コーティング液中に上記調製した基体層を浸し、当該基体層の両表面にポリ乳酸−ポリグリコール酸−ポリε−カプロラクトン三元共重合体からなる被覆層を形成した。ディッピング後に３０分〜１時間程度室温で乾燥させ、これを実施例に係る試料（試験片）とした。【００５６】
［比較例］
前記実施例の基体層にアスコルビン酸を添加しない（含まない）他は、前記実施例と同様にして癒着防止材を作製し、比較例に係る試料（試験片）とした。【００５７】
（被覆層の光学厚みの測定方法）
本発明における被覆層はきわめて薄膜であるため、光学厚み（Ｌｄ）で表示することが好ましい。
基体層に積層された被覆層の光学厚み（Ｌｄ）の測定は、分光エリプソメータ（ジェー・エー・ウーラム・ジャパン社製「ａｌｐｈａ−ＳＥ（米国登録商標）」）を用いた。なお、測定波長は、３８０ｎｍ〜９００ｎｍとした。【００５８】
（実施例１−３）（アスコルビン酸の添加濃度Ｃｍ*の検討）
上記したポリ乳酸−ポリグリコール酸−ポリε−カプロラクトンからなる被覆層の厚み（Ｌｄ）を３００ｎｍと固定し、基体層へのアスコルビン酸の添加濃度Ｃｍ（ｗ／ｗ）％を変え、牛血漿に浸漬後２４時間後のｐＨ（２４）を測定した。結果を表１に示した。すなわち、実施例１はアスコルビン酸の添加濃度Ｃｍ＝２．０（ｗ／ｗ）％で、ｐＨ（２４）＝７．０、実施例２はＣｍ＝４．０（ｗ／ｗ）％でｐＨ（２４）＝７．０、実施例３はＣｍ＝８．０（ｗ／ｗ）％でｐＨ（２４）＝６．０であった。【００５９】
（比較例１）（アスコルビン酸の添加無しの場合）
比較例１として、基体層にアスコルビン酸を添加しない（Ｃｍ＝０％）ほかは実施例１−３と同様の試験（被覆層の厚み（Ｌｄ）＝３００ｎｍ）を行った。牛血漿に浸漬後２４時間後のｐＨ（２４）＝７．３であった。結果を表１に示した。【００６０】
（実施例４）（被覆層の厚み（Ｌｄ）の検討）
被覆層の厚み（Ｌｄ）を７５ｎｍとする他は、実施例３と同じ試験を行った。結果は表２に示すように、Ｃｍ＝８．０％の場合、Ｌｄ＝３００ｎｍの場合のｐＨ（２４）＝６．０との差違は認められなかった。【００６１】
（比較例２−３）（被覆層の厚み（Ｌｄ）の検討）
被覆層の厚み（Ｌｄ）を７５ｎｍ（比較例２）又は６００ｎｍ（比較例３）とする他は、比較例１と同じ試験を行った。結果を比較例１（Ｌｄ＝３００ｎｍ）とともに表２に示す。基体層にアスコルビン酸の添加しない（Ｃｍ＝０％）比較例の場合は、被覆層の厚み（Ｌｄ）を７５ｎｍ→３００ｎｍ→６００ｎｍと変化させてもｐＨ（２４）＝７．３（一定）であった。
（アスコルビン酸添加量とｐＨ）【００６２】
【表１】
2017149897.tif 000004
（被覆層の光学厚みとアスコルビン酸添加量）【００６３】
【表２】
2017149897.tif 000005
【００６４】
［試験例Ｉ］（癒着防止性能評価）
本試験例Ｉは、癒着防止材の癒着防止性能を評価するための試験である（なお、本試験例Ｉは、本出願人らによる特許文献１の試験例２に対応する。）。
癒着防止性能を評価するにあたっては、実施例及び比較例に係る試料から試験片を作製し、試験片をブタ(Swine)の腹腔内に貼り付けて癒着の程度を観察及びスコア化することにより、癒着防止性能を評価した。【００６５】
（１）試験片の準備
上記した実施例１−４及び比較例１−３に係る試料を裁断して、１００ｍｍ×１２０ｍｍの長方形状の試験片を作製した。【００６６】
（２）試験方法（癒着モデルの作製）
まず、ブタを全身麻酔下で１５ｃｍの腹部正中切開によって開腹し、小腸を創外に露出させた。
次に、露出させた小腸の一定面積（１×５ｃｍ程度）について、ヤスリを用いて点状出血が生じるまで擦過した。
点状出血が生じた後は、正確に１０分間空気中に曝露した。そして小腸を腹腔内に戻し、切開した部分の真下に上記した試験片に係る癒着防止材を貼付した。腹壁を吸収性縫合糸（２−０）を用いて２層で連続縫合し、閉鎖し、癒着モデルを作製した。なお、実施例、比較例とも各群５例程度の例数とした。【００６７】
（３）試験方法（癒着程度の観察、癒着スコアの算出）
癒着モデル作製から１４日後、ブタを全身麻酔下で放血、犠牲死させ、開腹し正中創直下の癒着を肉眼観察し癒着の発生確率をもとめた。なお、本件下腹部の評価のため上腹部の肝臓の癒着は無視した。【００６８】
試験結果を以下、表３、表４に示す。表３と表４の見方は、例えば表３の「実施例１」（被覆層の厚み（Ｌｄ）３００ｎｍ、アスコルビン酸の添加濃度Ｃｍ＝２．０％）の欄が、表４の「癒着発生率σ：２０％（１／５）」（被覆層の厚み（Ｌｄ）３００ｎｍ、アスコルビン酸の添加濃度Ｃｍ＝２．０（ｗ／ｗ）％の欄）に対応し、表３の「比較例２」（被覆層の厚み（Ｌｄ）７５ｎｍ、アスコルビン酸の添加濃度Ｃｍ＝０％）の欄が、表４の「癒着発生率σ：７５％（３／４）」（被覆層の厚み（Ｌｄ）７５ｎｍ、アスコルビン酸の添加濃度Ｃｍ＝０％の欄）に対応する。【００６９】
【表３】
2017149897.tif 000006
【００７０】
【表４】
2017149897.tif 000007
【００７１】
（考察１）
（１）（アスコルビン酸の添加濃度Ｃｍの検討（ｉ））
表４より、被覆層の厚み（Ｌｄ）を３００ｎｍとした場合において、基体層へのアスコルビン酸を、所定の添加濃度Ｃｍ（２．０（ｗ／ｗ）％から８．０（ｗ／ｗ）％）と変えた実施例１（癒着発生率σが２０％）及び実施例２−３（癒着発生率σが０％）の結果を、同じ被覆層の厚み（Ｌｄ）が３００ｎｍであってアスコルビン酸を添加していない比較例１（癒着発生率σが６６％）と対比すると、実施例の場合は、癒着発生率が顕著に低減することが確認できた。また実施例１と実施例２−３を比較すると、アスコルビン酸の添加濃度Ｃｍが２．０（ｗ／ｗ）％から４．０〜８．０（ｗ／ｗ）％へと増加すると、癒着発生率σが２０％→０％へとさらに低減することが確認できた。
（２）（アスコルビン酸の添加濃度Ｃｍの検討（ｉｉ））
被覆層の光学厚み（Ｌｄ）を７５ｎｍに固定して、基体層へのアスコルビン酸を高濃度（Ｃｍ＝８．０（ｗ／ｗ）％）添加した実施例４（癒着発生率σ＝５０％）は、アスコルビン酸を添加していない比較例２（癒着発生率σ＝７５％）と比較して、癒着発生率σが低減することが確認できた。【００７２】
［試験例ＩＩ］
本試験例ＩＩは、癒着防止性能発現のためのアスコルビン酸の徐放性を評価するための試験である。すなわち基体層へのアスコルビン酸の添加濃度Ｃｍ＝８．０ｗ／ｗ％（一定）で、ただ被覆層の厚みＬｄが異なるもの（［実施例３］（Ｌｄ＝７５ｎｍ）及び[実施例]４（Ｌｄ＝３００ｎｍ））を比較し、最適な徐放が達成されているかどうかを確認した。
（１）試験片の準備
上記した実施例及び比較例に係る試料を裁断して、５０ｍｍ×５０ｍｍの正方形状の試験片を作製した。【００７３】
（２）試験方法
リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）１００ｍＬに、前述の実施例３（Ｌｄ＝７５ｎｍ）及び実施例４（Ｌｄ＝３００ｎｍ）の癒着防止材を１枚浸漬し、リン酸緩衝液中のアスコルビン酸濃度を経時的に２４時間まで測定した。アスコルビン酸の定量はビタミンＣ定量キット（コスモ・バイオ社製）を用い比色定量法にて行なった。
また癒着防止材に含まれるアスコルビン酸量が全量リン酸緩衝液に溶け出した時の濃度を１００％として各測定点の徐放率（φ）を求めた。
さらに試験に用いた材料は２４時間に形状を観察した。【００７４】
（試験結果）
試験結果を図２に示す。なお２４時時間を超えるデータはアスコルビン酸が分解してしまったため採取しなかった。
２４時間までのデータでは実施例４は徐放率φが６０〜７０％であり実施例３は徐放率φは２０〜３０％程度であった。両者を比較すると、被覆層厚みＬｄが薄い実施例４（Ｌｄ＝７５ｎｍ）は、被覆層厚みが大きい実施例３（Ｌｄ＝３００ｎｍ）より、徐放速度はずっと大きく経過時間Ｔ＝１０ｈｒにおいて７０％以上が溶出してしまっている。これに対して、より厚い被覆層を有する実施例３（Ｌｄ＝３００ｎｍ）は、徐放はずっと緩慢である（Ｔ＝２４ｈｒにおいてもφ＝３０％程度）ことがわかる。
しかしながらＴ＝１４日後の癒着発生率σについては、実施例３の癒着発生率σは０％であり、実施例４の５０％より遙かにすぐれた癒着防止効果が奏されている。これは実施例３においてはＴ＝１４日に渡って、最適に徐放速度が維持されているためと推定される。逆に実施例４の場合は徐放速度が大きすぎて短時間で当該基体層中のアスコルビン酸が枯渇してしまうためと思われる。
また、試験に用いた材料（試験片）は２４時間後にほぼゲル化しており形状は維持しているものの半固形といえるものであった。【００７５】
（考察２）
固形または半固形の材料を用いることによってその徐放率は異なることがわかった。より具体的には、生分解性であるポリ脂肪族エステル（Ｂ）からなる被覆層を設けその厚みを光学厚みが７５ｎｍ以上６００ｎｍ未満の範囲で制御することにより、（基体層に添加した）アスコルビン酸の徐放性を長時間に渡って維持するようにできる。このことは、適応する損傷の部位や損傷の深さによって材料特性を調整することが可能であることが示されている。また液性のもの（例えば特許文献２）のように直後に（全量が一時に）徐放されることはなく、本発明の基体層の形態を有する癒着防止材によれば、経時的（長期間、例えば実施例で示されたように１４日）に渡って徐放を維持することが可能である、すなわち長期間徐放が進んでいることが示された。【００７６】
［実施例（Ｂ）］
実施例（Ａ）と同様、図１に示すような実施形態に係る癒着防止材１の構成をもとに、基体層の材料に所定量のＬ-アスコルビン酸（和光純薬製社製）を添加して、フィルム状に成型した基体層の両面に、同様にＬ-アスコルビン酸を添加した第１被覆層及び第２被覆層（以下、同様に単に「被覆層」と省略する場合もある。）を配置したものを実施例の試料とした。（また、基体層、被覆層のいずれにもＬ-アスコルビン酸を添加しないものを比較例の試料とした。）【００７７】
（実施例５−６）（アスコルビン酸を添加した比較的厚い被覆層の形成）
（基体層の形成）
実施例（Ａ）と同様に、基体層の材料として水溶性高分子であるプルランを使用しこれに（Ｃｍ＝４（ｗ／ｗ）％となるように）所定量のアスコルビン酸を添加して、１００ｍｍ×１２０ｍｍ×厚さ（ＬＤ）５０μｍのプルランからなる膜を流延法により成膜して、アスコルビン酸含有基体層を形成した。【００７８】
（被覆層の形成）
次に、ディッピング法により、被覆層の形成を行った。すなわち、所定濃度に調整したポリ脂肪族エステルであるポリ乳酸−ポリグリコール酸−ポリε−カプロラクトンのトルエン溶液（以下、コーティング液という。）を作製し、当該コーティング液に所定量（Ｃｍ*＝０．４（ｗ／ｗ）％）となるようにアスコルビン酸を添加した。当該アスコルビン酸含有コーティング液中に上記調製した基体層を浸し、当該基体層の両表面にポリ乳酸−ポリグリコール酸−ポリε−カプロラクトン三元共重合体からなる被覆層を形成した。ディッピング後に３０分〜１時間程度室温で乾燥させた。この塗布工程（ディッピング）、乾燥工程を繰り返して行うことにより、実施例１−４に比較してより厚い膜厚（Ｌｄ）の被覆層（基体層の両面の第１外層、第２外層）（但し、Ｃｍ*＝０．４ｗ／ｗ％）を形成した。ここでは、被覆層の厚みＬｄ＝１０００ｎｍ（実施例５）、Ｌｄ＝３０００ｎｍ（実施例６）の試料（試験片）とした。【００７９】
（比較例４）（アスコルビン酸の添加の無い場合）
なお、比較例として、実施例５−６と同様に、基体層（ＬＤ＝５０μｍ）の両側に被覆層（Ｌｄ＝１０００ｎｍ）を形成したが、いずれの層にもアスコルビン酸を全く添加しないもの（Ｃｍ＝０、Ｃｍ*＝０）を、比較例４にかかる試料（試験片）とした。【００８０】
［試験例III］（癒着防止性能評価）
本試験例IIIは、試験例Ｉと同様癒着防止材の癒着防止性能を評価するための試験であるが、対象の動物種を、よりヒトに近いものに変更した。その場合は、癒着防止材の適用される環境（腹腔内圧や臓器の移動の発生）がより過酷な条件であることを想定し、この環境に適合するかを確認する試験である。
癒着防止性能を評価するにあたっては、上記した実施例（Ｂ）及び比較例に係る試料から試験片を作製し、試験片をサル(Macaca fascicularis)の腹腔内に貼り付けて癒着の程度を観察し、かつ、癒着長さを測定することにより、癒着防止性能を評価した。【００８１】
（１）試験片の準備
上記した実施例５−６及び比較例４に係る試料を裁断して、１００ｍｍ×１２０ｍｍの長方形状の試験片を作製した。【００８２】
（２）試験方法（癒着モデルの作製）
まず、サルを全身麻酔下で８ｃｍの腹部正中切開によって開腹し、大腸を創外に露出させた。
次に、露出させた大腸の一定面積（３×４ｃｍ程度）について、ヤスリを用いて点状出血が生じるまで擦過した。
点状出血が生じた後は、正確に１０分間空気中に曝露した。そして大腸を腹腔内に戻し、切開した部分の真下に上記した試験片に係る癒着防止材を貼付した。腹膜、腹壁及び筋層をナイロン縫合糸（３−０）を用いて連続縫合し、皮下組織及び皮膚をナイロン縫合糸（４−０）で単純結紮し、閉鎖し癒着モデルを作製した。なお、実施例５−６、比較例４とも各群３例程度の例数とした。【００８３】
（３）試験方法（癒着程度の観察、癒着長さ割合の測定）
癒着モデル作製から１４日後、サルを全身麻酔下で開腹し正中創直下の癒着を肉眼観察し、癒着の発生確率、癒着長さ割合を求めた。【００８４】
（考察３）
癒着防止材の強度を高め確実に形態維持を行うための観点から、実施例１−４と同じ厚みのプルランからなる基体層（ＬＤ＝５０μｍ）に対してより厚いポリ脂肪酸エステルの被覆層を（その両面に）形成した場合は、当該厚い被覆層を形成することにより、基体層からのアスコルビン酸の徐放が妨げられると考えられた。しかしながら、その場合であっても（Ｌｄ＝１０００ｎｍ（実施例５）、Ｌｄ＝３０００ｎｍ（実施例６））、当該被覆層にもアスコルビン酸を含有させることにより、表５に示すように、癒着発生率σをかなり低下させることができることが示された。
（なお、貼附した癒着防止材の形状は１４日後にも、ほぼ当初の形態を保持していることが確認され、実施例で使用した程度の厚みの被覆層の備えることにより、癒着防止材は形態維持の点からは初期の目的を達成したことが確認された。）【００８５】
すなわち、実施例５において、被覆層の厚み（Ｌｄ）を１０００ｎｍとした場合、基体層のアスコルビン酸濃度Ｃｍ（４．０（ｗ／ｗ）％）に対し、被覆層のアスコルビン酸濃度Ｃｍを０．４（ｗ／ｗ）％とすることにより、癒着発生率σを６７％（２／３）、癒着長さ割合β（＝Ｉ*／Ｉ）を１５．５０％と低下させることができた。これは、比較例４の、同じ被覆層の厚み（Ｌｄ）を１０００ｎｍとした場合、基体層及び覆層にアスコルビン酸を添加していない場合の（濃度Ｃｍ＝０％、Ｃｍ*＝０％）、癒着発生率σが１００％（３／３）、癒着長さ割合β（＝Ｉ*／Ｉ）が８２．６０％であることと比較すると著しい癒着防止性能の向上評価できると考える。  【００８６】
また、実施例６においては、被覆層の厚み（Ｌｄ）をさらに厚く３０００ｎｍとしたものであるが、この場合でも、実施例５と同様に、基体層のアスコルビン酸濃度Ｃｍを４．０（ｗ／ｗ）％、被覆層のアスコルビン酸濃度Ｃｍ*を０．４（ｗ／ｗ）％とすることにより、癒着発生率σが３３％（１／３）、癒着長さ割合β（＝Ｌ*／Ｌ）が３３．３０％と比較例４と比較しても顕著に低下させることができることが示された。【００８７】
なお、さらに検討するに、表３の実施例２（基体（ＬＤ＝５０μｍ）のアスコルビン酸濃度Ｃｍ＝４．０（ｗ／ｗ）％、被覆層（厚みＬｄ＝３００ｎｍ、但し、アスコルビン酸濃度Ｃｍ* ＝０％）と比較してみると、癒着発生率σは表４（Ｃｍ＝４．０％の場合）では、０％（癒着無し）となっているのに対し、実施例５−６では癒着発生率σは皆無とはなっていないという差異が認められる。この差は、基本的に、試験に供した動物種（ブタとサル）の違いによりベースラインの癒着の発生頻度が異なることが大きな要因であり、また被覆層の厚み（Ｌｄ＝１０００又は３０００ｎｍ）を、癒着防止材としての強度を保持するために、ずっと厚く形成していること等の理由によるものであり、癒着防止材としての性能に由来する本質的な差ではないと考えられる。
この点においては、当該被覆層に添加するアスコルビン酸の濃度Ｃｍ* を０．４％→０．６％→０．８％→１．０％等とさらに増加させることにより、癒着発生率をσを十分に低減させうると考えられる。また、被覆層Ｌｄを現在は生体分解性のポリ脂肪酸エステル（Ｂ）のみにより構成しているが、被覆層Ｌｄにも少量の例えばアスコルビン酸と同程度のプルラン等の水溶性高分子（Ａ）を含有させることにより、よりアスコルビン酸の徐放を加速させる等の手段を採用することができ、癒着発生率σをさらに低減させうると考えられる。
【００８８】
【表５】
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【００８９】
なお特許文献１に記載の下記試験例１、試験例３、試験例４についても念のため対応する試験を行ったが、下記のように、実使用上、機能的に問題ないことがわかったので、あえて詳細は記載しない。すなわち、
（ｉ）（試験例１）（癒着防止材を生体組織に貼り付けたときの分解性評価）：
生体に貼り付けて強度を発現するまでの時間は若干長くなるが、機能に影響はない。
（ｉｉ）（試験例３）（癒着防止材が濡れたときの取り扱い性評価）：
試験例２において、ブタ及びサルの腹腔内での貼付を行ったが、問題なく貼付できた。
（ｉｉｉ）（試験例４）（生体組織に癒着防止材を貼り付けたときの密着性を評価）：
試験例２において、ブタ及びサルの腹腔内での貼付を行ったが、問題なく貼付できた。
【産業上の利用可能性】
【００９０】
本発明の癒着防止材は、基本的に、水溶性高分子（Ａ）及び生体分解性ポリ脂肪族エステル（Ｂ）からなる固形または半固形の基体に、抗酸化物質として、アスコルビン酸またはアスコルビン酸誘導体を含有させてなる構成を有しているので、創傷面と創傷面の物理バリアとして水溶性高分子及びポリ脂肪族エステルからなる基体が機能すると共に、創傷面における治癒が、基体から徐放されたアスコルビン酸またはその誘導体で促進されることにより、相乗効果的に癒着防止機能がきわめて効率よく発現するので医療分野における産業上の利用可能性はきわめて大きい。
【符号の説明】
【００９１】
１  癒着防止材
１０  基体層
２０  第１被覆層（第１外層）
３０  第２被覆層（第２外層）
Ｃｍ  基体層のアスコルビン酸等の濃度
Ｃｍ*  被覆層（外層）のアスコルビン酸等の濃度
ＬＤ  基体層の厚み
Ｌｄ  被覆層の厚み（光学厚み）
Ｉ    切開創長さ
Ｉ*    切開創の癒着長さ  
Φ    アスコルビン酸の徐放率（溶出速度）
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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