【手続補正書】
【提出日】令和1年11月6日(2019.11.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  Ｉ）またはムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  ＩＩ）の被験体における中枢神経系（ＣＮＳ）機能障害を低減または予防するための組み合わせ物であって、該組み合わせ物は、ヒトα−Ｌ−イズロニダーゼ（ｈＩＤＵＡ）またはヒトイズロン酸−２−スルファターゼ（ｈＩＤＳ）をコードする導入遺伝子を含むプロモーターなしドナーベクターと、
内因性アルブミン遺伝子に対して標的化されたジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）の対をコードする発現ベクターと
を含み、
該ドナーベクターおよび該発現ベクターは、該被験体に投与され、該導入遺伝子が、肝臓細胞内の該アルブミン遺伝子に、該アルブミン遺伝子の開裂後に組み込まれ、したがって、該コードされるｈＩＤＵＡまたはｈＩＤＳが該肝臓から発現および分泌され、さらに、該肝臓から分泌された該ｈＩＤＵＡまたはｈＩＤＳが該被験体の該中枢神経系（ＣＮＳ）において見出され、したがって、該ＣＮＳ機能障害が低減または予防されることを特徴とする、組み合わせ物。
【請求項２】
前記ＣＮＳ機能障害が、認知障害を含む、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項３】
前記被験体に、前記ドナーベクターおよび前記発現ベクターの投与の前および後に免疫抑制剤が投与されることを特徴とする、請求項１または請求項２に記載の組み合わせ物。
【請求項４】
前記導入遺伝子の発現により、前記被験体の脳内のグリコサミノグリカンのレベルがモジュレートされる、請求項１から３までのいずれかに記載の組み合わせ物。
【請求項５】
前記被験体におけるニューロンまたはグリア空胞化が低減または排除される、請求項１から４までのいずれかに記載の組み合わせ物。
【請求項６】
前記被験体におけるニューロンまたはグリア空胞化が、該被験体の脊髄における低減または排除された細胞活動である、請求項５に記載の組み合わせ物。
【請求項７】
学習能力の喪失が、処置されていない個体と比較して低下する、請求項１から６までのいずれかに記載の組み合わせ物。
【請求項８】
前記ＺＦＮの対が、表１に示されているジンクフィンガータンパク質を含む、請求項１から７までのいずれかに記載の組み合わせ物。
【請求項９】
前記ＺＦＮ発現ベクターおよび前記ドナーベクターが、アデノ随伴ベクター（ＡＡＶ）を含む、請求項１から８までのいずれかに記載の組み合わせ物。
【請求項１０】
前記ＺＦＮ発現ベクターおよび前記ドナーベクターＡＡＶが、静脈内注射によって投与されることを特徴とする、請求項９に記載の組み合わせ物。
【請求項１１】
前記被験体に投与される前記ＺＦＮ：ＺＦＮ：ドナー比が、１：１：８である、請求項１から１０までのいずれかに記載の組み合わせ物。
【請求項１２】
アルブミン遺伝子のイントロン１に組み込まれたｈＩＵＤＡまたはｈＩＤＳをコードするプロモーターなしドナーベクターを含み、該ｈＩＵＤＡまたはｈＩＤＳを発現および分泌する、Ｈｅｐ２Ｇ細胞。
【請求項１３】
請求項１２に記載のＨｅｐ２Ｇ細胞を含む細胞培養物であって、培養培地が前記ｈＩＵ
ＤＡまたはｈＩＤＳを含む、細胞培養物。
【請求項１４】
請求項１２に記載の細胞または請求項１３に記載の細胞培養物から分泌されたｈＩＵＤＡおよび／またはｈＩＤＳを含む医薬組成物。
【請求項１５】
ｈＩＵＤＡまたはｈＩＤＳタンパク質を、それを必要とする被験体に供給するための請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
ムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  Ｉ）またはムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  ＩＩ）の被験体における中枢神経系（ＣＮＳ）機能障害を低減または予防するための組成物であって、該組成物は、ヒトα−Ｌ−イズロニダーゼ（ｈＩＤＵＡ）またはヒトイズロン酸−２−スルファターゼ（ｈＩＤＳ）をコードする導入遺伝子を含むプロモーターなしドナーベクターを含み、該組成物は、該被験体に、内因性アルブミン遺伝子に対して標的化されたジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）の対をコードする発現ベクターと組み合わせて投与され、該導入遺伝子が、肝臓細胞内の該アルブミン遺伝子に、該アルブミン遺伝子の開裂後に組み込まれ、したがって、該コードされるｈＩＤＵＡまたはｈＩＤＳが該肝臓から発現および分泌され、さらに、該肝臓から分泌された該ｈＩＤＵＡまたはｈＩＤＳが該被験体の該中枢神経系（ＣＮＳ）において見出され、したがって、該ＣＮＳ機能障害が低減または予防されることを特徴とする、組成物。
【請求項１７】
ムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  Ｉ）またはムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  ＩＩ）の被験体における中枢神経系（ＣＮＳ）機能障害を低減または予防するための組成物であって、該組成物は、内因性アルブミン遺伝子に対して標的化されたジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）の対をコードする発現ベクターを含み、該組成物は、該被験体に、ヒトα−Ｌ−イズロニダーゼ（ｈＩＤＵＡ）またはヒトイズロン酸−２−スルファターゼ（ｈＩＤＳ）をコードする導入遺伝子を含むプロモーターなしドナーベクターと組み合わせて投与され、該導入遺伝子が、肝臓細胞内の該アルブミン遺伝子に、該アルブミン遺伝子の開裂後に組み込まれ、したがって、該コードされるｈＩＤＵＡまたはｈＩＤＳが該肝臓から発現および分泌され、さらに、該肝臓から分泌された該ｈＩＤＵＡまたはｈＩＤＳが該被験体の該中枢神経系（ＣＮＳ）において見出され、したがって、該ＣＮＳ機能障害が低減または予防されることを特徴とする、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
これらのおよび他の態様は、全体としての開示を踏まえて、当業者に容易に明らかである。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
ムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  Ｉ）またはムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  ＩＩ）の被験体における中枢神経系（ＣＮＳ）機能障害を低減または予防する方法であって、
該被験体に、ヒトα−Ｌ−イズロニダーゼ（ｈＩＤＵＡ）またはヒトイズロン酸−２−スルファターゼ（ｈＩＤＳ）をコードする導入遺伝子を含むプロモーターなしドナーベクターを投与するステップと、
内因性アルブミン遺伝子に対して標的化されたジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）の対をコードする発現ベクターを投与するステップと
を含み、
該導入遺伝子が、肝臓細胞内の該アルブミン遺伝子に、該アルブミン遺伝子の開裂後に組み込まれ、したがって、該コードされるｈＩＤＵＡまたはｈＩＤＳが該肝臓から発現および分泌され、さらに、該肝臓から分泌された該ｈＩＤＵＡまたはｈＩＤＳが該被験体の該中枢神経系（ＣＮＳ）において見出され、したがって、該ＣＮＳ機能障害が低減または予防される、方法。
（項目２）
前記ＣＮＳ機能障害が、認知障害を含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記被験体に、前記ドナーベクターおよび前記発現ベクターの投与の前および後に免疫抑制剤を投与するステップをさらに含む、項目１または項目２に記載の方法。
（項目４）
前記導入遺伝子の発現により、前記被験体の脳内のグリコサミノグリカンのレベルがモジュレートされる、項目１から３までのいずれかに記載の方法。
（項目５）
前記被験体におけるニューロンまたはグリア空胞化が低減または排除される、項目１から４までのいずれかに記載の方法。
（項目６）
前記被験体におけるニューロンまたはグリア空胞化が、該被験体の脊髄における低減または排除された細胞活動である、項目５に記載の方法。
（項目７）
学習能力の喪失が、処置されていない個体と比較して低下する、項目１から６までのいずれかに記載の方法。
（項目８）
前記ＺＦＮの対が、表１に示されているジンクフィンガータンパク質を含む、項目１から７までのいずれかに記載の方法。
（項目９）
前記ＺＦＮ発現ベクターおよび前記ドナーベクターが、アデノ随伴ベクター（ＡＡＶ）を含む、項目１から８までのいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記ＺＦＮ発現ベクターおよび前記ドナーベクターＡＡＶが、静脈内注射によって投与される、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記被験体に投与される前記ＺＦＮ：ＺＦＮ：ドナー比が、１：１：８である、項目１から１０までのいずれかに記載の方法。
（項目１２）
アルブミン遺伝子のイントロン１に組み込まれたｈＩＵＤＡまたはｈＩＤＳをコードするプロモーターなしドナーベクターを含み、該ｈＩＵＤＡまたはｈＩＤＳを発現および分泌する、Ｈｅｐ２Ｇ細胞。
（項目１３）
項目１２に記載のＨｅｐ２Ｇ細胞を含む細胞培養物であって、培養培地が前記ｈＩＵ
ＤＡまたはｈＩＤＳを含む、細胞培養物。
（項目１４）
項目１２に記載の細胞または項目１３に記載の細胞培養物から分泌されたｈＩＵＤＡおよび／またはｈＩＤＳを含む医薬組成物。
（項目１５）
ｈＩＵＤＡまたはｈＩＤＳタンパク質を、それを必要とする被験体に供給する方法であって、該被験体に項目１４に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。