(57)【要約】摘出した臓器又は組織から突出する血管（１１，１３）の断端から、臓器から見て近位側に離間した位置を締め付けることにより、血管（１１，１３）と灌流液流通用のカニューレ（２１，２３）とを締結し、灌流を行う。これにより、生体の血管との吻合を行う上記血管（１１，１３）の断端からカニューレ（２１，２３）を固定している締結位置が離間することとなり、臓器又は組織から突出する血管（１１，１３）に対してカニューレ（２１，２３）を様々な姿勢に動かしながら、生体の血管との方向を行うことができ、灌流状態を維持したまま吻合の作業を行うことが可能となる。このように、動脈と静脈を、少なくとも１系統ずつ有する臓器及び組織について、灌流した状態を維持しながら生体の血管との吻合を行うことができる。
2018037836.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
動脈及び静脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する臓器又は組織を灌流する方法であって、
ａ）前記動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、
ｂ）前記静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、
ｃ）前記供給管から灌流液を流入させ、前記臓器又は組織を経由し、前記排出管を介して排出する灌流工程と
を備え、
前記工程ａ）と前記工程ｂ）は、前記切開又は離断部分より、前記臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、前記血管及び前記供給管または前記排出管を締結する灌流方法。
【請求項２】
動脈及び静脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する臓器又は組織への灌流状態を維持しながら、生体の血管と吻合する方法であって、
ａ）前記動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、
ｂ）前記静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、
ｃ）前記供給管から灌流液を流入させ、前記臓器又は組織を経由し、前記排出管を介して排出する灌流工程と、
ｄ）前記工程ｃ）による前記臓器又は組織の灌流状態を維持しながら、生体の血管へ前記動脈及び前記静脈を吻合する吻合工程と
を備え、
前記工程ａ）と前記工程ｂ）は、前記切開又は離断部分より、前記臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、前記血管及び前記供給管または前記排出管を締結する血管吻合方法。
【請求項３】
請求項２に記載の血管吻合方法であって、
前記工程ｄ）は、
ｄ１）前記動脈又は前記静脈と前記生体の血管との間で、前記動脈又は前記静脈に接続された前記供給管又は前記排出管を避けながら縫合糸を掛け渡す掛け渡し工程と、
ｄ２）前記臓器又は組織の灌流を停止し、前記動脈及び前記静脈から、前記供給管及び前記排出管を抜去する灌流停止工程と、
ｄ３）前記動脈又は前記静脈と、前記生体の血管との間に掛け渡された縫合糸を牽引し、前記動脈又は前記静脈と、前記生体の血管を縫合する縫合工程と
を備える血管吻合方法。
【請求項４】
静脈及び動脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する臓器又は組織を灌流する方法であって、
ｐ）前記静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、
ｑ）前記動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、
ｒ）前記供給管から灌流液を流入させ、前記臓器又は組織を経由し、前記排出管を介して排出する灌流工程と
を備え、
前記工程ｐ）と前記工程ｑ）は、前記切開又は離断部分より、前記臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、前記血管及び前記供給管または前記排出管を締結する灌流方法。
【請求項５】
静脈及び動脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する臓器又は組織への灌流状態を維持しながら、生体の血管と吻合する方法であって、
ｐ）前記静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、
ｑ）前記動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、
ｒ）前記供給管から灌流液を流入させ、前記臓器又は組織を経由し、前記排出管を介して排出する灌流工程と、
ｓ）前記工程ｒ）による前記臓器又は組織の灌流状態を維持しながら、生体の血管へ前記静脈及び前記動脈を吻合する吻合工程と
を備え、
前記工程ｐ）と前記工程ｑ）は、前記切開又は離断部分より、前記臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、前記血管及び前記供給管または前記排出管を締結する血管吻合方法。
【請求項６】
請求項５に記載の血管吻合方法であって、
前記工程ｓ）は、
ｓ１）前記静脈又は前記動脈と前記生体の血管との間で、前記静脈又は前記動脈に接続された前記供給管又は前記排出管を避けながら縫合糸を掛け渡す掛け渡し工程と、
ｓ２）前記臓器又は組織の灌流を停止し、前記静脈及び前記動脈から、前記供給管及び前記排出管を抜去する灌流停止工程と、
ｓ３）前記静脈又は前記動脈と、前記生体の血管との間に掛け渡された縫合糸を牽引し、前記静脈又は前記動脈と、前記生体の血管を縫合する縫合工程と
を備える血管吻合方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、灌流状態を維持したまま臓器又は組織に血管を吻合する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
臓器移植や、臓器を生体外に取り出して腫瘍等を切除した後、生体に戻す部分切除術などでは、臓器を生体から摘出し、搬送して移植する。このような移植を行う場合や体外で部分切除を行う場合、臓器に対する血流が遮断されることによる阻血状態が問題となる。【０００３】
即ち、臓器への血流が停止することにより、「温阻血」の期間が生じる。温阻血状態の臓器では、ＡＴＰの枯渇による細胞の膨化障害やヒポキサンチンをはじめとした老廃物の蓄積が生じる。細胞内に蓄積したヒポキサンチンは、臓器への血流再開時には酸素化された灌流液によって急速に代謝される。この過程で、大量の活性酸素が生じることで組織障害を引き起こすことがある。また、細胞から分泌されるサイトカイン等によって、臓器が搬入されて接続された生体に全身性の急性ショックを惹起することもある。【０００４】
この問題に対し、臓器の機能を維持したまま長期間保存する、あるいは温阻血状態にある臓器を移植に適合する水準まで回復させる技術として、例えば特許文献１に記載の方法が提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】ＷＯ２０１４／０３８４７３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
特許文献１に於いて、臓器の機能を維持あるいは回復させるため、臓器を灌流回路に接続し、臓器に灌流液を供給しながら機能の維持・回復を行っている。【０００７】
この場合、ドナーから摘出された臓器は、レシピエントの体内に搬入（プットイン）され、血管等の管腔の吻合が開始される直前までは灌流回路に接続され、灌流状態が維持されているが、管腔の吻合が開始される時点で灌流回路から切り離されるため、温阻血状態に陥る。従って、レシピエントへのプットインから、臓器への血流再開までの時間が長引けば長引くほど温阻血状態に起因するレシピエントへの悪影響の問題が増大する。【０００８】
そこで、本発明は、レシピエントへのプットインから臓器への血流の再開まで灌流状態を維持する期間を増加させ、温阻血状態の影響を低減する灌流方法及びその灌流方法を用いた管腔の接続方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記課題を解決するため、この発明は、動脈及び静脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する臓器又は組織を灌流する方法であって、ａ）動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、ｂ）静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、ｃ）供給管から灌流液を流入させ、臓器又は組織を経由し、排出管を介して排出する灌流工程とを備え、工程ａ）と工程ｂ）は、切開又は離断部分より、臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、血管及び供給管または排出管を締結する。【００１０】
また、上記課題を解決するため、この発明は、動脈及び静脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する臓器又は組織への灌流状態を維持しながら、生体の血管と吻合する方法であって、ａ）動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、ｂ）静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、ｃ）供給管から灌流液を流入させ、臓器又は組織を経由し、排出管を介して排出する灌流工程と、ｄ）工程ｃ）による臓器又は組織の灌流状態を維持しながら、生体の血管へ動脈及び静脈を吻合する吻合工程とを備え、工程ａ）と工程ｂ）は、切開又は離断部分より、臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、血管及び供給管または排出管を締結する。【００１１】
また、吻合工程ｄ）は、ｄ１）動脈又は静脈と生体の血管の間で、動脈又は静脈に接続された供給管又は排出管を避けながら縫合糸を掛け渡す掛け渡し工程と、ｄ２）臓器又は組織の灌流を停止し、動脈及び静脈から、供給管及び排出管を抜去する灌流停止工程と、ｄ３）動脈又は静脈と、生体の血管との間に掛け渡された縫合糸を牽引し、動脈又は静脈と、生体の血管を縫合する縫合工程とを備えていてもよい。【００１２】
また、上記課題を解決するため、この発明は、静脈及び動脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する臓器又は組織を灌流する方法であって、ｐ）静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、ｑ）動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、ｒ）供給管から灌流液を流入させ、臓器又は組織を経由し、排出管を介して排出する灌流工程とを備え、工程ｐ）と工程ｑ）は、切開又は離断部分より、臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、血管及び供給管または排出管を締結する。【００１３】
また、上記課題を解決するため、この発明は、静脈及び動脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する臓器又は組織への灌流状態を維持しながら、生体の血管と吻合する方法であって、ｐ）静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、ｑ）動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、ｒ）供給管から灌流液を流入させ、臓器又は組織を経由し、排出管を介して排出する灌流工程と、ｓ）工程ｒ）による臓器又は組織の灌流状態を維持しながら、生体の血管へ静脈及び動脈を吻合する吻合工程とを備え、工程ｐ）と工程ｑ）は、切開又は離断部分より、臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、血管及び供給管または排出管を締結する。【００１４】
また、吻合工程ｓ）は、ｓ１）静脈又は動脈と生体の血管との間で、静脈又は動脈に接続された供給管又は排出管を避けながら縫合糸を掛け渡す掛け渡し工程と、ｓ２）臓器又は組織の灌流を停止し、静脈及び動脈から、供給管及び排出管を抜去する灌流停止工程と、ｓ３）静脈又は動脈と、生体の血管との間に掛け渡された縫合糸を牽引し、静脈又は動脈と、生体の血管を縫合する縫合工程とを備えてもよい。【００１５】
なお、上記に挙げた本発明の一又は複数の特徴を任意に組み合わせた発明も、本発明の範囲に含まれる。
【発明の効果】
【００１６】
この発明によれば、臓器又は組織から突出する血管に対し、灌流液を供給・排出する管路の固定を、血管の断端から離間した位置で行う。このため、臓器又は組織との間で灌流液を供給・排出する管路を回避した上で血管同志に糸をかけることができる。予め血管同志に糸を掛けたまま管路を抜去して速やかに糸を牽引することで血管同志を縫合することが可能となる。これにより、生体内に臓器又は組織を搬入した後の温阻血状態の影響を低減することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】本発明におけるドナーの腎動脈及び腎静脈の処置の様子を示す図である。
【図２】本発明におけるドナーの腎動脈先端の処置の様子を示す拡大図である。
【図３】本発明におけるドナーの腎臓の処置が完了した状態を示す図である。
【図４】本発明における灌流装置を示す概略図である。
【図５】本発明におけるドナーの腎臓とレシピエントの血管との吻合の処置の様子を示す図である
【図６】本発明におけるドナーの腎臓とレシピエントの血管との吻合が完了した状態を示す図である。
【図７】本発明における吻合部を締め付けている状態を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明の一実施形態として、腎臓移植を例にあげて説明する。なお、以下の手順は、生体から一旦臓器を摘出し、生体外で腫瘍などの病変部を切除した上で、元の生体に臓器を戻す部分切除術にも適用可能である。
【００１９】
なお、本願において「ドナー」および「レシピエント」は、ヒトであってもよいし、非ヒト動物であってもよい。また、非ヒト動物は、マウスおよびラットを含む齧歯類、ブタ（ミニブタ含む）、ヤギおよびヒツジを含む有蹄類、イヌを含む食肉類、サル、ヒヒおよびチンパンジーを含む非ヒト霊長類、ウサギ、その他の非ヒトほ乳動物であってもよいし、ほ乳動物以外の動物であってもよい。
【００２０】
先ず、ドナーから移植用の腎臓の摘出を行い、灌流用のカニューレの挿入を行う。摘出は以下のステップ（Ｄ−１）からステップ（Ｄ−５）の手順で行うことができる。なお、以下の説明においては右腎臓に関する処置について示すが、左腎臓についても同様の処置を行う事が可能である。
【００２１】
（Ｄ−１）腎臓１０に接続する管腔である腎動脈１１、腎静脈１３及び尿管１５を切断し、腎臓１０をドナーから摘出する（図１参照）。
【００２２】
（Ｄ−２）図１は、ステップ（Ｄ−２）におけるドナーの腎動脈１１及び腎静脈１３の処置の様子を示す図である。図２は、ステップ（Ｄ−２）におけるドナーの腎動脈１１先端の処置の様子を示す拡大図である。図１に示すように、摘出したドナーの腎臓１０に灌流用のカニューレを接続する。即ち、腎動脈１１に対し、灌流液流入用カニューレ２１を接続し、腎静脈１３に灌流液流出用カニューレ２３を接続する。
【００２３】
それぞれのカニューレを接続する際、図２に示すように血管を結紮する。即ち、血管（図２では腎動脈１１）にカニューレ（図２では灌流液流入用カニューレ２１）を挿入した後、血管の断端近傍より腎臓から見て近位側を縫合糸（図２では縫合糸４１）等で結紮する。この際、結紮後、血管の断端をピンセット等で広げた幅が、血管に挿入されたカニューレの外径の２倍以上広がる位置を結紮する。例えば、血管の断端から５ｍｍ以上離れた位置を結紮する。ここで、血管が動脈である場合、上記結紮位置より腎臓から見て遠位側を、吻合端部領域３１と呼ぶ。また、血管が静脈である場合、上記結紮位置より腎臓から見て遠位側を、吻合端部領域３３と呼ぶ。
【００２４】
このように、腎動脈１１に灌流液流入用カニューレ２１を、及び腎静脈１３に灌流液流出用カニューレ２３を、それぞれの血管の断端から離間した位置で縫合糸４１及び縫合糸４３で結紮してそれぞれ固定することにより、後述するレシピエントの血管との吻合の際、それぞれのカニューレを様々な方向に移動させながら、双方の血管に糸を掛けることが容易になり、腎臓１０の灌流状態を維持しながら迅速にレシピエントの血管との吻合を行うことが可能となる。
【００２５】
なお、本実施形態では縫合糸４１により結紮する例を示した。しかしながら、カニューレを血管に固定する方法としては、着脱可能なベルトや伸縮性を有するバンド等により血管を押圧することにより血管とカニューレを締結する方法や、その他の方法が用いられてもよい。
【００２６】
また、上述のとおり、レシピエントの血管との吻合時には、カニューレを様々な方向に移動しながら縫合が行われる。従って、腎動脈１１および灌流液流入用カニューレ２１、あるいは、腎静脈１３および灌流液流出用カニューレ２３が一直線上に配置されない（即ち、縫合糸４１及び縫合糸４３で結紮された位置で折り曲げられる）状態でも腎臓１０に対する灌流が維持できることが好ましい。このため、例えば、少なくとも結紮された位置より腎臓１０から見て近位側（カニューレの先端側）に柔軟性がある、あるいは結紮位置よりも腎臓１０から見て近位側の部分の長さがカニューレの先端部の直径と略等しいか短い等の特徴を有することが好ましい。また、血管内壁を傷つけないため、先端部の角部に丸め処理が施される、あるいは先端部が球形であることが望ましい。
【００２７】
図３に、腎臓１０に対する灌流液流入用カニューレ２１及び灌流液流出用カニューレ２３の接続が完了した状態であって、特に腎静脈１３の周辺を拡大して示す。腎静脈１３には、灌流液流出用カニューレ２３を固定する縫合糸４３が、腎静脈１３の断端より、腎臓１０から見て近位側に離間した位置で結紮されている。このため、図３のように腎静脈１３の断端をピンセットで広げた場合、断端の開口の幅が挿入された灌流液流出用カニューレ２３の外径の２倍以上広げることが可能であることを示している。
【００２８】
上記のように、ステップ（Ｄ−１）およびステップ（Ｄ−２）は、動脈及び静脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する臓器又は組織である腎臓を灌流するにあたり、動脈の少なくとも１本（腎動脈１１）を切開または離断し、腎臓に対して灌流液を供給する供給管（灌流液流入用カニューレ２１）を接続する供給管接続工程を含む。また、ステップ（Ｄ−１）およびステップ（Ｄ−２）は、静脈の少なくとも１本（腎静脈１３）を切開又は離断し、腎臓から流出する灌流液を排出する排出管（灌流液流出用カニューレ２３）を接続する排出管接続工程を含む。また、供給管接続工程および排出管接続工程において、切開又は離断部位より、腎臓から見て近位側に離間した位置で、血管と供給管又は排出管を締結している。
【００２９】
（Ｄ−３）上記ステップ（Ｄ−１）からステップ（Ｄ−２）の手順によりドナーの腎臓と接続されたそれぞれのカニューレと、後述する灌流装置を接続した後にて灌流を開始する。即ち、灌流液流入用カニューレ２１から灌流液を流入させ、かつ、灌流液流出用カニューレ２３から灌流液を流出させる。
【００３０】
ステップ（Ｄ−３）は、供給管（灌流液流入用カニューレ２１）から灌流液を流入させ、腎臓を経由し、排出管（灌流液流出用カニューレ２３）を介して排出する灌流工程である。
【００３１】
上記ステップ（Ｄ−１）からステップ（Ｄ−３）において、ドナーからの移植用の腎臓の摘出手順で通常実施される措置（例えば、結合組織の除去、血管の剥離、血管切断のための血管の一時的な結紮又はクランプ、尿管の遮断および切断、移植用の腎臓への血液凝固剤の適用、手術部位の止血処置、等）は、当業者が必要に応じて適宜行うことができる。
【００３２】
図４に、本実施形態で用いる灌流装置の一例を示す。灌流装置１００は、腎臓１０を収容するリアクター１０１と、腎動脈１１に接続された灌流液流入用カニューレ２１に灌流液を供給する流入路１０３と、腎静脈１３に接続された灌流液流出用カニューレ２３から灌流液を回収する流出路１０７と、灌流液を貯留するリザーバ１０９で構成される。
【００３３】
流入路１０３には、灌流液を圧送するポンプ１１１と、灌流液を脱泡する脱泡部１１３と、灌流液の温度を調整する温調部１１５が介挿されている。
【００３４】
流出路１０７には、腎臓１０からの灌流液を回収するポンプ１３１と、灌流液に酸素及び二酸化炭素を付加するガス供給モジュール１３３が介挿されている。ガス供給モジュール１３３には酸素供給部１３５と二酸化炭素供給部１３７が接続されている。
【００３５】
なお、本発明においては、灌流液に、酸素及び二酸化炭素に加えてさらに窒素を付加してもよい。この場合、ガス供給モジュール１３３に、窒素を供給するための窒素供給部が接続される。
【００３６】
上記ステップ（Ｄ−１）からステップ（Ｄ−３）の手順によりドナーより摘出された腎臓１０は、灌流装置１００に接続され、リアクター１０１内に収容された状態で灌流による保存が行われる。なお、本実施形態においては、ドナーの腎臓１０と灌流装置１００の間で灌流液が循環して灌流処理が行われるが、ドナーの腎臓１０に対する灌流処理はこのような形態に限定されない。即ち、ドナーの腎臓１０を通過した灌流液がリザーバ１０９以外の容器に回収される、あるいはそのまま廃棄される構成をとっても良い。また、上記実施形態のように灌流液をポンプにより圧送する構成に代えて、点滴バッグのように重力によりドナーの腎臓１０に灌流液を送る方式を採用してもよい。
【００３７】
次にドナーの腎臓１０をレシピエントにプットインする。そして、以下の手順により血管吻合が行われる。
【００３８】
（Ａ−１）図５は、ステップ（Ａ−１）からステップ（Ａ−３）におけるドナーの腎臓とレシピエントの血管との吻合の処置の様子を示す図である。以下では、図５における紙面右側を「一方側」、紙面左側を「他方側」と称する。先ず、図５に示すように、腹部大動脈１０１の血管壁の一部をサテンスキー鉗子等の血管鉗子１０３で挟んで（サイドクランプ）血管内の血流から隔離し、血管鉗子１０３で挟まれた血管壁を切開する。同様に、下大静脈１１１の血管壁の一部をサテンスキー鉗子等の血管鉗子１１３で挟んで（サイドクランプ）血管内の血流から隔離し、血管鉗子１１３で挟まれた血管壁を切開する。
【００３９】
（Ａ−２）次に、ドナーの腎臓の腎動脈１１とレシピエントの腹部大動脈１０１との端側吻合を行う。吻合後に灌流液流入用カニューレ２１が配置される側の腎動脈１１の断端近傍（一方側）に両端針縫合糸１０５を掛け、併せて腎動脈１１の断端の反対側（他方側）にも両端針吻縫合糸をかける。その後、他方側の両端針縫合糸により、腎動脈１１の他方側と腹部大動脈１０１の血管鉗子１０３で挟まれた血管壁を連続縫合する。続いて、一方側の腎動脈１１と腹部大動脈１０１についても腹部大動脈１０１の血管鉗子１０３で挟まれた血管壁を連続縫合する。但し、一方側の縫合においては、灌流液流入用カニューレ２１近傍では灌流液流入用カニューレ２１を避けながら腎動脈１１と腹部大動脈１０１との間で糸を掛ける。そして、灌流液流入用カニューレ２１を抜去するまで糸を締め上げずにペアン鉗子等の鉗子１０７で両端針縫合糸１０５を挟んで術野内に留置しておく。
【００４０】
（Ａ−３）次に、ドナーの腎臓の腎静脈１３とレシピエントの下大静脈１１１との端側吻合を行う。吻合後に灌流液流出用カニューレ２３が配置される側の腎静脈１３の断端近傍（一方側）に両端針縫合糸１１５を掛け、併せて腎静脈１３の断端の反対側（他方側）にも両端針吻縫合糸をかける。その後、他方側の両端針縫合糸により、腎静脈１３の他方側と下大静脈１１１の血管鉗子１１３で挟まれた血管壁を連続縫合する。続いて、一方側の腎静脈１３と下大静脈１１１についても下大静脈１１１の血管鉗子１１３で挟まれた血管壁を連続縫合する。但し、一方側の縫合においては、灌流液流出用カニューレ２３近傍では灌流液流出用カニューレ２３を避けながら腎静脈１３と下大静脈１１１との間で糸を掛ける。そして、灌流液流出用カニューレ２３を抜去するまで糸を締め上げずにペアン鉗子等の鉗子１１７で両端針縫合糸１１５を挟んで術野内に留置しておく。
【００４１】
上記手順ステップ（Ａ−２）からステップ（Ａ−３）における血管吻合中も、灌流液が、灌流液流入用カニューレ２１からドナーの腎臓１０を通して灌流液流出用カニューレ２３へ継続して流通し、ドナーの腎臓１０の灌流状態が維持される。
【００４２】
図６は、上記ステップ（Ａ−１）からステップ（Ａ−３）の手順により腎動脈１１の腹部大動脈１０１への端側吻合、及び腎静脈１３の下大静脈１１１への端側吻合が完了した状態を示す図である。図６には、特に、腎静脈１３について、灌流液流出用カニューレ２３が留置された状態で両端針縫合糸１１５が掛けられ、灌流液流出用カニューレ２３が抜去されるまで両端針縫合糸１１５が緩められている状態が示されている。
【００４３】
（Ａ−４）次に、灌流液流入用カニューレ２１を抜去する。即ち、縫合糸４１を切断し、灌流液流入用カニューレ２１を抜去した後、鉗子１０７により挟まれている両端針縫合糸１０５を腎臓１０からみて遠位方向に牽引することで腎動脈１１と腹部大動脈１０１を密着させつつ、結紮する。その後、腹部大動脈１０１の血管壁を挟んでいる血管鉗子１０３を取り外し、腎臓１０への血流を再開するとともに、縫合部等からの出血がないかどうかを確認する。出血が確認された場合は追加で縫合等の処置を行う。
【００４４】
（Ａ−５）次に、灌流液流出用カニューレ２３を抜去する。即ち、縫合糸４３を切断し、灌流液流出用カニューレ２３を抜去する。その後、腎静脈からレシピエントの血液が流出するまで待機する。レシピエントの血液が流出してきたことを確認した後、鉗子１１７により挟まれている両端針縫合糸１１５を腎臓１０からみて遠位方向に牽引することで腎静脈１３と下大静脈１１１を密着させつつ、結紮する。続いて、下大静脈１１１の血管壁を挟んでいる血管鉗子１１３を取り外し、腎臓１０から下大静脈１１１への血流を再開するとともに、縫合部等からの出血がないかどうかを確認する。出血が確認された場合は追加で縫合等の処置を行う。
【００４５】
図７は、灌流液流出用カニューレ２３が抜去され、両端針縫合糸１１５を牽引することにより腎静脈１３と下大静脈１１１の縫合部を締め付けている状態を示す図である。ここでは、鉗子１１７により両端針縫合糸１１５を腎臓１０から離間する方向（図７において右斜め下方向）に牽引することにより、縫合部を締め付けている。
【００４６】
上記のように、ステップ（Ａ−１）からステップ（Ａ−５）は、ステップ（Ｄ−３）から開始された灌流工程による腎臓の灌流状態を維持しながら、生体（レシピエント）の血管へ動脈（腎動脈１１）および静脈（腎静脈１３）を吻合する吻合工程を含む。
【００４７】
より具体的には、ステップ（Ａ−２）およびステップ（Ａ−３）は、動脈（腎動脈１１）又は静脈（腎静脈１３）と生体（レシピエント）の血管との間で、動脈（腎動脈１１）又は静脈（腎静脈１３）と接続された供給管（灌流液流入用カニューレ２１）又は排出管（灌流液流出用カニューレ２３）を避けながら縫合糸を掛け渡す掛け渡し工程を含む。
【００４８】
ステップ（Ａ−４）およびステップ（Ａ−５）は、腎臓の灌流を停止し、動脈（腎動脈１１）及び静脈（腎静脈１３）から、供給管（灌流液流入用カニューレ２１）及び排出管（灌流液流出用カニューレ２３）を抜去する灌流停止工程を含む。また、ステップ（Ａ−４）およびステップ（Ａ−５）は、動脈（腎動脈１１）又は静脈（腎静脈１３）と、生体（レシピエント）の血管との間に掛け渡された縫合糸を牽引し、動脈（腎動脈１１）又は静脈（腎静脈１３）と生体（レシピエント）の血管を縫合する縫合工程を含む。
【００４９】
（Ａ−６）最後に、ドナーの腎臓１０の尿管１５をレシピエントの膀胱に端側吻合する。
【００５０】
なお、上記手順において、ドナーの腎臓の血管と吻合するレシピエントの血管は、吻合に用いるドナーの血管と同じ種類の血管であってもよく、異なる血管であってもよい。例えば、腎臓の同所性移植を行う場合には、ドナーの腎臓の血管と吻合するレシピエントの血管は、吻合に用いるドナーの腎臓の血管と同じ種類の血管であってよい。また、例えば、腎臓の異所性移植を行う場合には、ドナーの腎臓の血管と吻合するレシピエントの血管は、吻合に用いるドナーの腎臓の血管と異なる種類の血管であってよい。腎臓の異所性移植を行う場合に用いるレシピエントの血管の種類は、当業者が技術常識に基づいて適宜選択することができる。
【００５１】
また、上記手順において、移植用の腎臓をレシピエントに移植する手順において通常実施される処置（例えば、結合組織の除去、血管の剥離、血管の切断および吻合のための血管の一時的な結紮又はクランプ、血管の吻合、手術部位の止血処置、等）は、当業者が必要に応じて適宜行うことができる。
【００５２】
上記実施形態において、対象の臓器として腎臓を採用したが、本発明の対象は腎臓に限定されない。即ち、本発明における「臓器又は組織」とは、灌流することができる臓器又は組織であれば特に限定されず、例えば、心臓、肝臓、腎臓、肺、膵臓、胃、小腸、大腸、精巣、卵巣、眼球、歯とその周囲組織、毛髪とその周囲組織等が挙げられる。
【００５３】
また、上記実施形態において、臓器への灌流は、動脈に灌流液を供給し、静脈から灌流液を排出したが、本発明の対象はこれに限らない。即ち、心臓に対するランゲンドルフ灌流のように、静脈側に灌流液を供給し、動脈側から灌流液を排出するという構成も含まれる。
【００５４】
本発明において用いられるカニューレ及びチューブの形状、構造、サイズ、素材は限定されず、血管の種類に応じて当業者が適宜選択することができる。
【００５５】
本発明の灌流装置において用いられる灌流液は、通常移植用の腎臓の灌流に用いられる灌流液であればその組成は限定されない。灌流液には、市販の灌流液（例えばＬ−１５培地等）を用いることができる。なお、灌流液は、酸素運搬体が添加されたものであることが好ましい。灌流液中に酸素運搬体を含むことにより、移植用の腎臓の障害を抑えることができ、腎臓移植の成功率を向上させることができる。本発明に用いることができる酸素運搬体の例としては、赤血球又は人工赤血球を挙げることができる。本発明の灌流液に添加する赤血球は、ドナー又はレシピエントに輸血可能な血液型の赤血球であることが好ましく、ドナー又はレシピエント由来の赤血球であることがさらに好ましい。また、本発明の灌流液に添加する人工赤血球は、酸素を運搬する機能を有する分子であればよく、例えばパーフルオロカーボン、ヘモグロビン小胞体等を例示することができる。
【００５６】
本発明において、「移植用の腎臓」は、ドナーから摘出された腎臓に限定されず、例えば、ｉＰＳ細胞等の幹細胞から誘導された人工腎臓であってもよい。
【００５７】
本明細書において用いられる用語は、特に定義されたものを除き、特定の実施態様を説明するために用いられるのであり、発明を限定する意図ではない。
【００５８】
また、本明細書において用いられる「含む」との用語は、文脈上明らかに異なる理解をすべき場合を除き、記述された事項（部材、ステップ、要素、数字など）が存在することを意図するものであり、それ以外の事項（部材、ステップ、要素、数字など）が存在することを排除しない。
【００５９】
異なる定義が無い限り、ここに用いられるすべての用語（技術用語及び科学用語を含む。）は、本発明が属する技術の当業者によって広く理解されるのと同じ意味を有する。ここに用いられる用語は、異なる定義が明示されていない限り、本明細書及び関連技術分野における意味と整合的な意味を有するものとして解釈されるべきであり、理想化され、又は、過度に形式的な意味において解釈されるべきではない。
【符号の説明】
【００６０】
１０   腎臓
１１   腎動脈
１３   腎静脈
１５   尿管
２１   灌流液流入用カニューレ
２３   灌流液流出用カニューレ
３１   吻合端部領域
３３   吻合端部領域
４１   縫合糸
４３   縫合糸
１００ 灌流装置
１０１ リアクター
１０１ 腹部大動脈
１０３ 流入路
１０３ 血管鉗子
１０５ 両端針縫合糸
１０７ 流出路
１０７ 鉗子
１０９ リザーバ
１１１ ポンプ
１１１ 下大静脈
１１３ 脱泡部
１１３ 血管鉗子
１１５ 温調部
１１５ 両端針縫合糸
１１７ 鉗子
１３１ ポンプ
１３３ ガス供給モジュール
１３５ 酸素供給部
１３７ 二酸化炭素供給部
【図１】
2018037836.tif 000003
【図２】
2018037836.tif 000004
【図３】
2018037836.tif 000005
【図４】
2018037836.tif 000006
【図５】
2018037836.tif 000007
【図６】
2018037836.tif 000008
【図７】
2018037836.tif 000009
【手続補正書】
【提出日】平成31年2月7日(2019.2.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
動脈及び静脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する非ヒト動物の臓器又は組織を灌流する方法であって、
ａ）前記動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、
ｂ）前記静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、
ｃ）前記供給管から灌流液を流入させ、前記臓器又は組織を経由し、前記排出管を介して排出する灌流工程と
を備え、
前記工程ａ）と前記工程ｂ）は、切開又は離断部分より、前記臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、前記動脈または静脈と、前記供給管または前記排出管とを締結する灌流方法。
【請求項２】
動脈及び静脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する非ヒト動物の臓器又は組織への灌流状態を維持しながら、生体の血管と吻合する方法であって、
ａ）前記動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、
ｂ）前記静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、
ｃ）前記供給管から灌流液を流入させ、前記臓器又は組織を経由し、前記排出管を介して排出する灌流工程と、
ｄ）前記工程ｃ）による前記臓器又は組織の灌流状態を維持しながら、生体の血管へ前記動脈及び前記静脈を吻合する吻合工程と
を備え、
前記工程ａ）と前記工程ｂ）は、切開又は離断部分より、前記臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、前記動脈または静脈と、前記供給管または前記排出管とを締結する血管吻合方法。
【請求項３】
請求項２に記載の血管吻合方法であって、
前記工程ｄ）は、
ｄ１）前記動脈又は前記静脈と前記生体の血管との間で、前記動脈又は前記静脈に接続された前記供給管又は前記排出管を避けながら縫合糸を掛け渡す掛け渡し工程と、
ｄ２）前記臓器又は組織の灌流を停止し、前記動脈及び前記静脈から、前記供給管及び前記排出管を抜去する灌流停止工程と、
ｄ３）前記動脈又は前記静脈と、前記生体の血管との間に掛け渡された縫合糸を牽引し、前記動脈又は前記静脈と、前記生体の血管を縫合する縫合工程と
を備える血管吻合方法。
【請求項４】
静脈及び動脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する非ヒト動物の臓器又は組織を灌流する方法であって、
ｐ）前記静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、
ｑ）前記動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、
ｒ）前記供給管から灌流液を流入させ、前記臓器又は組織を経由し、前記排出管を介して排出する灌流工程と
を備え、
前記工程ｐ）と前記工程ｑ）は、切開又は離断部分より、前記臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、前記動脈または静脈と、前記供給管または前記排出管とを締結する灌流方法。
【請求項５】
静脈及び動脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する非ヒト動物の臓器又は組織への灌流状態を維持しながら、生体の血管と吻合する方法であって、
ｐ）前記静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、
ｑ）前記動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、前記臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、
ｒ）前記供給管から灌流液を流入させ、前記臓器又は組織を経由し、前記排出管を介して排出する灌流工程と、
ｓ）前記工程ｒ）による前記臓器又は組織の灌流状態を維持しながら、生体の血管へ前記静脈及び前記動脈を吻合する吻合工程と
を備え、
前記工程ｐ）と前記工程ｑ）は、切開又は離断部分より、前記臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、前記動脈または静脈と、前記供給管または前記排出管とを締結する血管吻合方法。
【請求項６】
請求項５に記載の血管吻合方法であって、
前記工程ｓ）は、
ｓ１）前記静脈又は前記動脈と前記生体の血管との間で、前記静脈又は前記動脈に接続された前記供給管又は前記排出管を避けながら縫合糸を掛け渡す掛け渡し工程と、
ｓ２）前記臓器又は組織の灌流を停止し、前記静脈及び前記動脈から、前記供給管及び前記排出管を抜去する灌流停止工程と、
ｓ３）前記静脈又は前記動脈と、前記生体の血管との間に掛け渡された縫合糸を牽引し、前記静脈又は前記動脈と、前記生体の血管を縫合する縫合工程と
を備える血管吻合方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
上記課題を解決するため、この発明は、動脈及び静脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する非ヒト動物の臓器又は組織を灌流する方法であって、ａ）動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、ｂ）静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、ｃ）供給管から灌流液を流入させ、臓器又は組織を経由し、排出管を介して排出する灌流工程とを備え、工程ａ）と工程ｂ）は、切開又は離断部分より、臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、動脈または静脈と、供給管または排出管とを締結する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
また、上記課題を解決するため、この発明は、動脈及び静脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する非ヒト動物の臓器又は組織への灌流状態を維持しながら、生体の血管と吻合する方法であって、ａ）動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、ｂ）静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、ｃ）供給管から灌流液を流入させ、臓器又は組織を経由し、排出管を介して排出する灌流工程と、ｄ）工程ｃ）による臓器又は組織の灌流状態を維持しながら、生体の血管へ動脈及び静脈を吻合する吻合工程とを備え、工程ａ）と工程ｂ）は、切開又は離断部分より、臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、動脈または静脈と、供給管または排出管とを締結する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
また、上記課題を解決するため、この発明は、静脈及び動脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する非ヒト動物の臓器又は組織を灌流する方法であって、ｐ）静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、ｑ）動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、ｒ）供給管から灌流液を流入させ、臓器又は組織を経由し、排出管を介して排出する灌流工程とを備え、工程ｐ）と工程ｑ）は、切開又は離断部分より、臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、動脈または静脈と、供給管または排出管とを締結する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
また、上記課題を解決するため、この発明は、静脈及び動脈が少なくともそれぞれ１本以上突出する非ヒト動物の臓器又は組織への灌流状態を維持しながら、生体の血管と吻合する方法であって、ｐ）静脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織に対して灌流液を供給する供給管を接続する供給管接続工程と、ｑ）動脈の少なくとも１本を切開又は離断し、臓器又は組織から流出する灌流液を排出する排出管を接続する排出管接続工程と、ｒ）供給管から灌流液を流入させ、臓器又は組織を経由し、排出管を介して排出する灌流工程と、ｓ）工程ｒ）による臓器又は組織の灌流状態を維持しながら、生体の血管へ静脈及び動脈を吻合する吻合工程とを備え、工程ｐ）と工程ｑ）は、切開又は離断部分より、臓器又は組織から見て近位側に離間した位置で、動脈または静脈と、供給管または排出管とを締結する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
この発明によれば、臓器又は組織から突出する血管に対し、灌流液を供給・排出する管路の固定を、血管の断端から離間した位置で行う。このため、臓器又は組織との間で灌流液を供給・排出する管路を回避した上で血管同士に糸をかけることができる。予め血管同志に糸を掛けたまま管路を抜去して速やかに糸を牽引することで血管同志を縫合することが可能となる。これにより、生体内に臓器又は組織を搬入した後の温阻血状態の影響を低減することが可能となる。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
上記ステップ（Ｄ−１）からステップ（Ｄ−３）において、ドナーからの移植用の腎臓の摘出手順で通常実施される処置（例えば、結合組織の除去、血管の剥離、血管切断のための血管の一時的な結紮又はクランプ、尿管の遮断および切断、移植用の腎臓への血液凝固剤の適用、手術部位の止血処置、等）は、当業者が必要に応じて適宜行うことができる。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
（Ａ−２）次に、ドナーの腎臓の腎動脈１１とレシピエントの腹部大動脈１０１との端側吻合を行う。吻合後に灌流液流入用カニューレ２１が配置される側の腎動脈１１の断端近傍（一方側）に両端針縫合糸１０５を掛け、併せて腎動脈１１の断端の反対側（他方側）にも両端針縫合糸をかける。その後、他方側の両端針縫合糸により、腎動脈１１の他方側と腹部大動脈１０１の血管鉗子１０３で挟まれた血管壁を連続縫合する。続いて、一方側の腎動脈１１と腹部大動脈１０１についても腹部大動脈１０１の血管鉗子１０３で挟まれた血管壁を連続縫合する。但し、一方側の縫合においては、灌流液流入用カニューレ２１近傍では灌流液流入用カニューレ２１を避けながら腎動脈１１と腹部大動脈１０１との間で糸を掛ける。そして、灌流液流入用カニューレ２１を抜去するまで糸を締め上げずにペアン鉗子等の鉗子１０７で両端針縫合糸１０５を挟んで術野内に留置しておく。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
（Ａ−３）次に、ドナーの腎臓の腎静脈１３とレシピエントの下大静脈１１１との端側吻合を行う。吻合後に灌流液流出用カニューレ２３が配置される側の腎静脈１３の断端近傍（一方側）に両端針縫合糸１１５を掛け、併せて腎静脈１３の断端の反対側（他方側）にも両端針縫合糸をかける。その後、他方側の両端針縫合糸により、腎静脈１３の他方側と下大静脈１１１の血管鉗子１１３で挟まれた血管壁を連続縫合する。続いて、一方側の腎静脈１３と下大静脈１１１についても下大静脈１１１の血管鉗子１１３で挟まれた血管壁を連続縫合する。但し、一方側の縫合においては、灌流液流出用カニューレ２３近傍では灌流液流出用カニューレ２３を避けながら腎静脈１３と下大静脈１１１との間で糸を掛ける。そして、灌流液流出用カニューレ２３を抜去するまで糸を締め上げずにペアン鉗子等の鉗子１１７で両端針縫合糸１１５を挟んで術野内に留置しておく。
【国際調査報告】
2018037836.tif 000010
2018037836.tif 000011
2018037836.tif 000012
2018037836.tif 000013