(57)【要約】  本発明は、血液等と接触しても血小板やタンパク質の付着を抑制可能な生体成分付着抑制材料を提供することを目的とする。本発明は、生体成分と接触する面に飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子が固定された機能層を備える基材からなり、前記機能層の表面をＴＯＦ−ＳＩＭＳ装置で組成分析した際に検出される飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルの脂肪族鎖炭素数は、２〜２０であり、前記機能層の表面をＸＰＳ測定した際、エステル基由来のピークが存在する生体成分付着抑制材料を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体成分と接触する面に飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子が固定された機能層を備える基材からなり、
前記機能層の表面をＴＯＦ−ＳＩＭＳ装置で組成分析した際に検出される飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルの脂肪族鎖炭素数は、２〜２０であり、
前記機能層の表面をＸＰＳ測定した際、エステル基由来のピークが存在する、生体成分付着抑制材料。
【請求項２】
前記飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルは、飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステル単独重合体又は飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルを含有する共重合体由来であり、抗血栓性を有する、請求項１記載の生体成分付着抑制材料。
【請求項３】
前記飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルの脂肪族鎖炭素数は、２〜９である、請求項１又は２記載の生体成分付着抑制材料。
【請求項４】
前記機能層の表面をＸＰＳ測定した際、炭素由来の全ピーク面積を１００（原子数％）とした場合のエステル基由来の炭素ピークの面積百分率は、０．５〜２５（原子数％）である、請求項１〜３のいずれか一項記載の生体成分付着抑制材料。
【請求項５】
前記機能層の表面をＡＴＲ−ＩＲ測定した際、１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲と１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲の双方にピークが存在し、前記１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏと前記１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率（ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）の平均値は、０．０１〜１．０である、請求項１〜４のいずれか一項記載の生体成分付着抑制材料。
【請求項６】
前記１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲に存在するピークは、ポリスルホン系高分子の芳香族基由来である、請求項５記載の生体成分付着抑制材料。
【請求項７】
前記機能層の表面をＡＴＲ−ＩＲ測定した際、１６１７〜１７１０ｃｍ−１の範囲にピークが存在する、請求項５又は６記載の生体成分付着抑制材料。
【請求項８】
前記１６１７〜１７１０ｃｍ−１の範囲に存在するピークは、ビニルピロリドンユニット、ビニルカプロラクタムユニット、ビニルアセトアミドユニット又はアクリルアミドユニットを含有する親水性ポリマーのアミド結合由来である、請求項７記載の生体成分付着抑制材料。
【請求項９】
血液浄化用である、請求項１〜８のいずれか一項記載の生体成分付着抑制材料。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項記載の生体成分付着抑制材料を備える、血液浄化器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体成分付着抑制材料、及びそれを備える血液浄化器に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来の医療材料は、生体成分にとって異物として認識され、血小板やタンパク質の付着、さらには生体反応を惹起し、深刻な問題となっていた。また、従来の人工腎臓用モジュール等の血液浄化器では、血小板やタンパク質が血液浄化器中の材料表面に付着することによって、分画性能や透水性能の低下が起こっていた。特に、急性腎不全の治療に用いられる持続緩徐式血液浄化器では、１日ないし数日間もの連続使用が必要とされる。そのため、血小板やタンパク質の付着を抑制し、長時間の使用に耐えうる仕様にすることが重要である。【０００３】
また、医療材料以外についても、例えば、抗体精製等に用いられる分離用材料においては、抗体の分離材料表面への付着により、回収率が低下することが課題である。かかる問題に対して、これまで、医療材料の表面を親水化することによる解決が試みられており、様々な検討がなされている。【０００４】
特許文献１には、親水性高分子であるポリビニルピロリドンを、製膜原液の段階で混合させて成形することで、膜に親水性を与え、汚れを抑制したポリスルホン系高分子が開示されている。【０００５】
特許文献２には、ポリビニルピロリドン等の親水性高分子溶液と接触させた後、放射線架橋により不溶化した被膜層を形成させたポリスルホン系高分子の分離膜が開示されている。【０００６】
特許文献３及び４には、ビニルピロリドン／酢酸ビニル共重合体を表面に固定したポリスルホン系高分子の分離膜が開示されている。【０００７】
さらに、特許文献５には、脂溶性ビタミンとポリ（２−ヒドロキシアルキルメタクリラート）を表面に固定したポリスルホン系高分子の分離膜が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特公平２−１８６９５号公報
【特許文献２】特開平６−２３８１３９号公報
【特許文献３】特開２０１０−１０４９８４号公報
【特許文献４】特開２０１１−１７３１１５号公報
【特許文献５】国際公開２０１３／０１５０４６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、特許文献１及び２に記載の方法では、ポリビニルピロリドン等の親水性高分子と、疎水性高分子であるポリスルホン系高分子の相互作用が弱いために、被膜層を形成させることが困難であった。そのため、この方法で表面に親水性を付与するためには、製膜原液中の親水性高分子を多く用いる必要があることや、基材となる高分子と相溶性のある親水性高分子に限定する必要がある。【００１０】
一方、特許文献３及び４に記載の方法では、酢酸ビニルユニットが疎水性の基材と相互作用することで、共重合体の導入効率が高まり、効率的に親水化することができるが、市販高分子であるビニルピロリドン／酢酸ビニル共重合体を使用しており、血小板やタンパク質の付着を抑制するのに適した構造設計がまったく検討されていない。実際、本発明者が特許文献３及び４に記載の方法に基づいて医療材料を作製したところ、当該医療材料は、長時間、血液等と接触すると血小板やタンパク質が付着することがわかった。【００１１】
特許文献５に記載の方法は、抗酸化性能の向上を目的としており、抗血栓性については評価されていない。さらに、医療材料の表面を親水化する際には、高分子の配置や固定化等の表面設計が重要であるが、その点についてはまったく記載されていない。【００１２】
そこで本発明は、血液等と接触しても血小板やタンパク質の付着を抑制可能な生体成分付着抑制材料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
血液等に含まれるタンパク質は疎水性表面に付着しやすいため、医療材料の接触表面全体が親水性を有していることが重要とされている。これは、材料表面にタンパク質が接近することにより、タンパク質の高次構造が変化して、タンパク質内部にある疎水性部位が露出し、かかる疎水性部位が材料表面と疎水性相互作用することが原因と考えられる。【００１４】
一方で、ポリエチレングリコールやポリビニルアルコールのような親水性高分子で医療材料の接触表面を被覆した場合、タンパク質等の付着は抑制できないことが分かっている。これは、医療材料の接触表面の親水性が強すぎると、タンパク質の構造が不安定化するために、タンパク質の付着を充分に抑制することができないためと考えられる。【００１５】
本発明者らは上記課題を解決すべく、鋭意検討を進めた結果、血小板やタンパク質の付着が大きく抑制され、長時間血液等と接触しても使用可能となる、以下の生体成分付着抑制材料及び当該生体成分付着抑制材料を用いた血液浄化器を見出した。
（１）生体成分と接触する面に飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子が固定された機能層を備える基材からなり、前記機能層の表面をＴＯＦ−ＳＩＭＳ装置で組成分析した際に検出される飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルの脂肪族鎖炭素数は、２〜２０であり、前記機能層の表面をＸＰＳ測定した際、エステル基由来のピークが存在する、生体成分付着抑制材料。
（２）前記飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルは、飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステル単独重合体又は飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルを含有する共重合体由来であり、抗血栓性を有する、上記（１）記載の生体成分付着抑制材料。
（３）前記飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルの脂肪族鎖炭素数は、２〜９である、上記（１）又は（２）記載の生体成分付着抑制材料。
（４）前記機能層の表面をＸＰＳ測定した際、炭素由来の全ピーク面積を１００（原子数％）とした場合のエステル基由来の炭素ピークの面積百分率は、０．５〜２５（原子数％）である、上記（１）〜（３）のいずれか一項記載の生体成分付着抑制材料。
（５）前記機能層の表面をＡＴＲ−ＩＲ測定した際、１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲と１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲の双方にピークが存在し、前記１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏと前記１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率（ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）の平均値は、０．０１〜１．０である、上記（１）〜（４）のいずれか一項記載の生体成分付着抑制材料。
（６）前記１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲に存在するピークは、ポリスルホン系高分子の芳香族基由来である、上記（５）記載の生体成分付着抑制材料。
（７）前記機能層の表面をＡＴＲ−ＩＲ測定した際、１６１７〜１７１０ｃｍ−１の範囲にピークが存在する、上記（５）又は（６）記載の生体成分付着抑制材料。
（８）前記１６１７〜１７１０ｃｍ−１の範囲に存在するピークは、ビニルピロリドンユニット、ビニルカプロラクタムユニット、ビニルアセトアミドユニット又はアクリルアミドユニットを含有する親水性ポリマーのアミド結合由来である、上記（７）記載の生体成分付着抑制材料。
（９）血液浄化用である、上記（１）〜（８）のいずれか一項記載の生体成分付着抑制材料。
（１０）上記（１）〜（９）のいずれか一項記載の生体成分付着抑制材料を備える、血液浄化器。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の生体成分付着抑制材料は、血小板やタンパク質の付着を抑制することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００１８】
本発明の生体成分付着抑制材料は、生体成分と接触する面に飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子が固定された機能層を備える基材からなり、上記機能層の表面を飛行時間型二次イオン質量分析（以下、ＴＯＦ−ＳＩＭＳという場合がある）装置で組成分析した際に検出される飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルの脂肪族鎖炭素数は、２〜２０であり、上記機能層の表面をＸＰＳ測定した際、エステル基由来のピークが存在する。
【００１９】
「飽和脂肪族モノカルボン酸」とは、１つのカルボキシ基と、当該カルボキシ基の炭素原子に結合した飽和脂肪族炭化水素基とからなる物質を意味し、例えば、酢酸、プロパン酸、酪酸等が挙げられる。
【００２０】
「飽和脂肪族」とは、炭素−炭素間の結合が全て単結合からなり、芳香族基のような多重結合を含まないことを意味する。
【００２１】
「脂肪族鎖炭素数」とは、カルボン酸のカルボキシ基の炭素原子に結合している飽和脂肪族炭化水素基の炭素数を意味する。例えば、脂肪族鎖炭素数１とは酢酸のことを、脂肪族鎖炭素数２とはプロパン酸のことを指す。上記脂肪族鎖炭素数が少ないと飽和脂肪族モノカルボン酸の運動性が乏しく、タンパク質や血小板が付着しやすくなってしまう。一方で、上記脂肪族鎖炭素数が多いと飽和脂肪族モノカルボン酸の疎水性が高くなり、血小板やタンパク質との疎水性相互作用が大きくなる。その結果、血小板やタンパク質が付着してしまう。したがって、本発明の生体成分付着抑制材料において、前記飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルの脂肪族鎖炭素数は、２〜２０であり、好ましくは２〜９であり、より好ましくは２〜５である。
【００２２】
上記飽和脂肪族炭化水素基は、エチル基、ｎ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基等の直鎖構造のみならずイソプロピル基やターシャリーブチル基のような分岐構造や、シクロプロピル基、シクロブチル基のような環状構造、さらには、脂肪族鎖内にエーテル結合やエステル結合などを含んでいてもよい。ただし、末端にスルホン酸基やカルボキシ基等のアニオン性官能基を有する構造は除く。これは、脂肪族鎖末端のアニオン性官能基は、血小板やタンパク質の構造を不安定化させ、生体成分付着抑制材料表面への付着を誘起するばかりでなく、ブラジキニン活性化、補体活性化等好ましくない生体反応を誘発するためである。カルボン酸の製造コストの観点から、上記飽和脂肪族炭化水素基は、直鎖構造又は分岐構造が好ましく、直鎖構造がより好ましい。さらには、カルボン酸の入手容易性および重合の簡便性の観点から、上記飽和脂肪族炭化水素基は、炭素原子と水素原子のみから構成されることが好ましい。
【００２３】
「生体成分」とは、糖、タンパク質、血小板など生物由来の物質を意味する。好ましくは、血液、涙液、髄液など体液に含まれる物質であり、中でも抗血栓性を有する生体成分付着抑制材料としては、血液に含まれる物質が対象として好ましい。
【００２４】
「飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子」とは、飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステル単独重合体又は飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルを含有する共重合体を意味する。さらに、材料の生体成分付着抑制の観点から、飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルを含有する共重合体が好ましい。なお、枝部分が、飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニット、幹部分がその他のユニットからなるグラフト共重合体等を含む。
【００２５】
「固定」とは、高分子を基材と化学的または物理的に結合させることを意味し、その方法としては、例えば、放射線照射による架橋固定が挙げられる。
【００２６】
「機能層」とは、血液等の生体成分と接触する層を意味する。人工腎臓用中空糸膜を例に挙げると、血液が流れる中空糸膜内側が機能層となる。
【００２７】
「基材」とは、生体成分付着抑制材料を構成する成分のうち、体積含有量がもっとも高いものをいう。
【００２８】
「生体成分付着抑制材料」とは、生体成分の材料表面への付着が抑制される材料を意味する。当該材料が使用される製品としては、体内埋め込み又は体外循環で使用される医療材料、糖タンパクや抗体の精製に使用される分離用材料、体液中の成分の濃度等を測定する分析用材料等が挙げられる。生体成分付着抑制材料は、基材を少なくとも材料の一部として含む材料を意味し、基材単独及び適当な補強材に基材が固定化又は混合されたものを含む。
【００２９】
「抗血栓性」とは、生体成分の中でもタンパク質や血小板の付着が抑制されることを意味する。
【００３０】
「医療材料」とは、主には血液や体液に含まれる生体成分と接触して使用されるものを意味し、例えば、平膜、中空糸膜やチューブが挙げられる。そして、当該医療材料が使用される製品としては、例えば、分離膜を内蔵した、人工腎臓モジュール若しくは血漿分離器に代表される血液浄化器、血液回路、血液保存バッグ、カテーテル、ステント又はコンタクトレンズ等が挙げられる。
【００３１】
本発明の生体成分付着抑制材料は、抗血栓性を有することが好ましい。かかる場合、本発明の生体成分付着抑制材料は、特に血液や体液に含まれるタンパク質や血小板の付着抑制に優れていることから抗血栓性医療材料であることが好ましい。
【００３２】
本発明の生体成分付着抑制材料において、前記飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルは、飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステル単独重合体又は飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルを含有する共重合体由来であることが好ましい。すなわち、上記飽和脂肪族モノカルボン酸は生体成分付着抑制材料の機能層の表面においては、エステル結合を形成し、飽和脂肪族モノカルボン酸エステルとして存在していることが好ましい。カルボキシ基は、親水性が高く、血小板やタンパク質の構造を不安定化させてしまう。一方で、エステル基は親水性も疎水性も大きすぎないため、血小板やタンパク質の付着を誘起しにくい。本発明の生体成分付着抑制材料において、前記飽和脂肪族モノカルボン酸のイオンシグナルは、飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステル単独重合体又は飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルを含有する共重合体由来であり、抗血栓性を有することが好ましい。
【００３３】
上記ＴＯＦ−ＳＩＭＳ装置による組成分析とＸ線電子分光法（ＸＰＳ）測定を組み合わせることにより、上記飽和脂肪族モノカルボン酸エステルの、最表面１０ｎｍ程度の配置について、解析可能である。
【００３４】
まず、ＴＯＦ−ＳＩＭＳ装置による組成分析によって、上記飽和脂肪族モノカルボン酸エステルのカルボン酸イオン由来のピークが検出されるため、その質量（ｍ／ｚ）を分析することによって、カルボン酸の構造が明らかとなる。ＴＯＦ−ＳＩＭＳ装置による組成分析では、超高真空中においた試料表面にパルス化されたイオン（１次イオン）が照射され、試料表面から放出されたイオン（２次イオン）は一定の運動エネルギーを得て飛行時間型の質量分析計へ導かれる。同じエネルギーで加速された２次イオンのそれぞれは、質量に応じた速度で分析計を通過するが、検出器までの距離は一定であるため、そこに到達するまでの時間（飛行時間）は質量の関数となり、この飛行時間の分布を精密に計測することによって２次イオンの質量分布、すなわち質量スペクトルが得られる。
【００３５】
例えば、１次イオン種としてＢｉ３＋＋を用い、２次負イオンを検出する場合、ｍ／ｚ＝５９．０２のピークは、Ｃ２Ｈ３Ｏ２−、すなわち、酢酸（脂肪族鎖炭素数：１）に相当する。また、ｍ／ｚ＝７３．０４のピークは、Ｃ３Ｈ５Ｏ２−、すなわち、プロパン酸（脂肪族鎖炭素数：２）に相当する。
【００３６】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ装置による組成分析の条件は、以下の通りである。
【００３７】
測定領域を２００μｍ×２００μｍとし、１次イオン加速電圧を３０ｋＶ、パルス幅を５．９ｎｍとする。本分析手法における検出深さは数ｎｍ以下である。この際、総２次イオン強度に対するカルボン酸イオン強度が０．４％以下の場合は、ノイズと判断し、カルボン酸イオンは存在しないとする。
【００３８】
さらに、ＸＰＳ測定において、エステル基（ＣＯＯ）由来の炭素のピークがＣＨｘやＣ−Ｃのメインピーク（２８５ｅＶ付近）から＋４．０〜４．２ｅＶに現れるため、上記カルボン酸がエステル結合を形成していることがわかる。ＸＰＳの測定角としては９０°で測った値を用いる。測定角９０°で測定した場合、表面からの深さが約１０ｎｍまでの領域が検出される。この際、炭素由来の全ピーク面積に対するエステル基由来のピーク面積の割合が０．４％以下の場合は、ノイズと判断し、エステル基は存在しないとする。
【００３９】
上記二つの結果を合わせることで、機能層の表面、すなわち、生体成分と接触する面に飽和脂肪族モノカルボン酸エステルが配置されているか否かが明らかとなる。
【００４０】
生体成分付着抑制材料の機能層の表面の飽和脂肪族モノカルボン酸エステル量は、Ｘ線電子分光法（ＸＰＳ）を用いて、エステル基由来の炭素量を測定することによって求めることができる。本発明の生体成分付着抑制材料において、前記機能層の表面をＸＰＳ測定した際、炭素由来の全ピーク面積を１００（原子数％）とした場合のエステル基由来の炭素ピークの面積百分率は、０．５〜２５（原子数％）であることが好ましい。タンパク質や血小板の付着を抑制する効果を発揮するためには、前記エステル基由来の炭素ピークの面積百分率が、０．５（原子数％）以上が好ましく、１．０（原子数％）以上がより好ましく、１．５（原子数％）以上がさらに好ましい。一方で使用する生体成分付着抑制材料の種類にもよるが、飽和脂肪族モノカルボン酸エステル量が多すぎると、生体成分付着抑制材料本来の性能が低下することが見られる。例えば、人工腎臓等の血液浄化器では、高分子量が多すぎると分離性能が低下するため、エステル基由来の炭素ピーク面積百分率は、２５（原子数％）以下が好ましく、２０（原子数％）以下がより好ましく、１０（原子数％）以下がさらに好ましい。いずれの好ましい下限値もいずれの好ましい上限値と組み合わせることができる。
【００４１】
ＸＰＳ測定の際は、生体成分付着抑制材料の機能層の表面の異なる２箇所について測定を行い、該２箇所の値の平均値を用いる。エステル基（ＣＯＯ）由来の炭素のピークは、Ｃ１ｓのＣＨやＣ−Ｃ由来のメインピークから＋４．０〜４．２ｅＶに現れるピークをピーク分割することによって求めることができる。炭素由来の全ピーク面積に対するエステル基由来のピーク面積の割合を算出することで、エステル基由来の炭素量（原子数％）が求まる。より具体的には、Ｃ１ｓのピークは、主にＣＨｘ，Ｃ−Ｃ，Ｃ＝Ｃ，Ｃ−Ｓ由来の成分、主にＣ−Ｏ，Ｃ−Ｎ由来の成分、π−π＊サテライト由来の成分、Ｃ＝Ｏ由来の成分、ＣＯＯ由来の成分の５つの成分から構成される。以上の５つの成分にピーク分割を行う。ＣＯＯ由来の成分は、ＣＨｘやＣ−Ｃのメインピーク（２８５ｅＶ付近）から＋４．０〜４．２ｅＶに現れるピークである。この各成分のピーク面積比は、小数第２位を四捨五入し、算出する。
【００４２】
ここで、上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子は、化学反応や架橋反応により基材に固定されていることが好ましい。生体成分付着抑制材料表面に血液などの生体成分が接触した場合、上記高分子が溶出することを防ぐためである。
【００４３】
上記飽和脂肪族モノカルボン酸エステルを固定する方法としては、特に限定されないが、例えば、基材とカルボン酸を混合し、成形時に縮合させる方法や、基材をカルボン酸又はカルボン酸エステル含有溶液に浸漬し、放射線照射や熱に起因する反応により、結合させる方法が挙げられる。特に、上記脂肪族鎖炭素数が２以上２０以下の飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子を用いる方法は、生体成分付着抑制材料への導入効率が良く、また、機能層の表面に配置しやすいことから、好適に用いられる。
【００４４】
ここで、「ユニット」とは、モノマーを重合して得られる単独重合体又は共重合体中の繰り返し単位を指す。例えば、カルボン酸ビニルエステルユニットとは、カルボン酸ビニルエステルモノマーを重合して得られる単独重合体中の繰り返し単位又はカルボン酸ビニルモノマーを共重合して得られる共重合体中のカルボン酸ビニルエステルモノマー由来の繰り返し単位を指す。
【００４５】
例えば、人工血管等に使用されるポリエチレンテレフタレートの平膜に高分子の水溶液を浸漬し、放射線照射を行うことにより、高分子が架橋固定化される。血小板の付着を抑制する観点から、上記高分子の水溶液の濃度は、０．０１ｐｐｍ以上であることが好ましく、０．１ｐｐｍ以上であることがより好ましい。血小板の付着数は４．３×１０３μｍ２面積あたり２０個以下であることが好ましく、１０個以下であることがより好ましい。血小板付着数の測定は後述する方法により行うことができる。また、血液回路の場合は、回路を構成するチューブ等における、主に血液等が接触する内表面に高分子を固定して用いることが好ましい。カテーテル、ステント等においても、主に血液等が接触する（金属）材料の表面に高分子を固定することが考えられる。
【００４６】
さらに、上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子を基材表面に固定する方法としては、化学反応による共有結合を利用してもよい。例えば、基材表面のヒドロキシ基やカルボキシ基、アミノ基、スルホン酸基、ハロゲン化アルキル基等の反応性基と、高分子の主鎖の末端や側鎖に導入された反応性基とを反応させることによって達成される。
【００４７】
基材表面に、反応性基を導入する方法としては、反応性基を有するモノマーを重合して表面に反応性基を有する基材を得る方法や、重合後、オゾン処理、プラズマ処理によって反応性基を導入する方法等が挙げられる。
【００４８】
上記高分子の主鎖の末端に反応性基を導入する方法としては、例えば、２，２’−アゾビス［２−メチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）プロピオンアミド］や４，４’−アゾビス（４−シアノ吉草酸）のような反応性基を有する開始剤を使用する方法等が挙げられる。
【００４９】
上記高分子の側鎖に反応性基を導入する方法としては、高分子の作用・機能を阻害しない程度において、メタクリル酸グリシジルやメタクリル酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルのような反応性基を有するモノマーを共重合する方法等が挙げられる。
【００５０】
上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子の数平均分子量は、小さすぎると、生体成分付着抑制材料の表面へ固定した場合に効果が十分発揮されない場合があり、血小板やタンパク質の付着が抑制されにくくなる場合があることから、１，０００以上が好ましく、５，０００以上がより好ましい。一方、高分子の数平均分子量の上限については特に制限はないが、数平均分子量が大きすぎると生体成分付着抑制材料表面への導入効率が低下する場合があることから、１,０００,０００以下が好ましく、５００,０００以下がより好ましく、１００,０００以下がさらに好ましい。なお、単独重合体又は共重合体の数平均分子量は、後述のとおり、ゲル浸透クロマトグラフィ（ＧＰＣ）により測定することができる。
【００５１】
飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステル単独重合体の具体例としては、ポリプロパン酸ビニル、ポリピバル酸ビニル、ポリデカン酸ビニル、ポリメトキシ酢酸ビニル等が挙げられるが、疎水性が強すぎないことから、ポリプロパン酸ビニル（脂肪族鎖炭素数：２）、ポリ酪酸ビニル（脂肪族鎖炭素数：３）、ポリペンタン酸ビニル（脂肪族鎖炭素数：４）、ポリピバル酸ビニル（脂肪族鎖炭素数：４）、ポリヘキサン酸ビニル（脂肪族鎖炭素数：５）が好ましい。
【００５２】
上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルと共重合させるモノマーとしては、特に限定されないが、例えば、メタクリル酸アルキル系モノマー、アクリル酸アルキル系モノマー、スチレン系モノマー等に代表される疎水性モノマーや、ビニルアルコールモノマー、アクリロイルモルホリンモノマー、ビニルピリジン系モノマー、ビニルイミダゾール系モノマー、ビニルピロリドンモノマー等に代表される親水性モノマーが挙げられる。この際、共重合体全体の親水性を制御する点から、親水性モノマーを共重合することが望ましい。中でも、カルボキシ基、スルホン酸基を有するモノマーに比べて、親水性が強すぎず、疎水性モノマーとのバランスが取りやすいことから、アミド結合、エーテル結合、エステル結合を有するモノマーが好ましい。特に、アミド結合を有するビニルアセトアミドモノマー、ビニルピロリドンモノマーやビニルカプロラクタムモノマーがより好ましい。このうち、ビニルピロリドンモノマーが、重合体の毒性が低いことから、さらに好ましい。カルボン酸ビニルエステルを含有する共重合体としては、例えば、ビニルアルコール／ペンタン酸ビニル共重合体、ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニル共重合体等が挙げられる。
【００５３】
ここで、「親水性モノマー」とは、それ単独の重合体が水に易溶であるモノマーと定義する。ここで、水に易溶とは、２０℃の純水１００ｇに対する溶解度が１ｇを超えることをいい、１０ｇ以上が好ましい。
【００５４】
生体成分付着抑制材料の生体成分付着抑制の観点から、上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルを含有する共重合体全体における上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルのモル分率は、１０％以上９０％以下が好ましく、２０％以上８０％以下がより好ましい。上記モル分率が多すぎると、共重合体全体の疎水性が大きくなり、タンパク質や血小板が付着しやすくなる。一方で、上記モル分率が少なすぎると、共重合体全体の親水性が大きくなり、血小板やタンパク質の構造不安定化・変性が誘起され、付着に至ることがある。なお、上記モル分率の算出方法は、例えば、核磁気共鳴（ＮＭＲ）測定を行い、ピーク面積から算出する。ピーク同士が重なる等の理由でＮＭＲ測定による上記モル分率の算出ができない場合は、元素分析により上記モル分率を算出してもよい。
【００５５】
なお、上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルを含有する高分子の作用・機能を阻害しない程度において、他のモノマー、例えば、ヒドロキシ基やカルボキシ基、グリシジル基のような反応性基を含有するモノマーが共重合されていてもよい。
【００５６】
上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルを含有する共重合体におけるユニットの配列としては、例えば、ブロック共重合体、交互共重合体又はランダム共重合体等が挙げられる。これらのうち、共重合体全体で親水性・疎水性の分布が小さいという点から、交互共重合体又はランダム共重合体が好ましい。なかでも、合成が煩雑でないという点から、ランダム共重合体がより好ましい。なお、少なくともモノマー配列の一部が秩序無く並んだ共重合体はランダム共重合体とする。
【００５７】
上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子は、例えば、アゾ系開始剤を用いたラジカル重合法に代表される連鎖重合法により合成できるが、合成法はこれに限られるものではない。
【００５８】
上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子は、例えば、以下の製造方法により製造されるが、この方法に限られるものではない。
【００５９】
飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルモノマーと、重合溶媒及び重合開始剤とを混合し、窒素雰囲気下で所定温度にて所定時間、攪拌しながら混合し、重合反応させる。必要に応じて、親水性モノマー、疎水性モノマーとともに共重合させる。反応液を室温まで冷却して重合反応を停止し、ヘキサン等の溶媒に投入する。析出した沈殿物を回収し、減圧乾燥することで、カルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子を得ることができる。
【００６０】
上記重合反応の反応温度は、３０〜１５０℃が好ましく、５０〜１００℃がより好ましく、７０〜８０℃がさらに好ましい。
【００６１】
上記重合反応の圧力は、常圧であることが好ましい。
【００６２】
上記重合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、１時間以上が好ましく、３時間以上がより好ましく、５時間以上がさらに好ましい。反応時間が短いと、高分子に大量の未反応モノマーが残存しやすくなる場合がある。一方、反応時間は２４時間以下が好ましく、１２時間以下がより好ましい。反応時間が長くなると、二量体の生成等副反応が起こりやすくなり、分子量の制御が困難になる場合がある。
【００６３】
上記重合反応に用いる重合溶媒は、モノマーと相溶する溶媒であれば特に限定はされず、例えば、ジオキサン若しくはテトラヒドロフラン等のエーテル系溶媒、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等のアミド系溶媒、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド系溶媒、ベンゼン若しくはトルエン等の芳香族炭化水素系溶媒、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、アミルアルコール若しくはヘキサノール等のアルコール系溶媒又は水等が用いられるが、毒性の点から、アルコール系溶媒又は水を用いることが好ましい。
【００６４】
上記重合反応の重合開始剤としては、例えば、光重合開始剤や熱重合開始剤が用いられる。ラジカル、カチオン、アニオンいずれを発生する重合開始剤を用いてもよいが、モノマーの分解を起こさないという点から、ラジカル重合開始剤が好適に使用される。ラジカル重合開始剤としては、例えば、アゾビスイソブチロニトリル、アゾビスジメチルバレロニトリル若しくはアゾビス(イソ酪酸)ジメチル等のアゾ系開始剤又は過酸化水素、過酸化ベンゾイル、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシド若しくはジクミルペルオキシド等の過酸化物開始剤が使用される。
【００６５】
重合反応停止後、重合反応溶液を投入する溶媒としては、高分子が沈殿する溶媒であれば特に限定はされず、例えば、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、ノナン若しくはデカン等の炭化水素系溶媒又はジメチルエーテル、エチルメチルエーテル、ジエチルエーテル若しくはジフェニルエーテル等のエーテル系溶媒が用いられる。
【００６６】
本発明における基材となる高分子としては、特に限定されるものではないが、例えば、ポリスルホン系高分子、ポリスチレン、ポリウレタン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリフッ化ビニリデン、ポリアクリロニトリル、ポリメチルメタクリレート、ポリ塩化ビニル又はポリエステル等が挙げられる。中でも、生体成分付着抑制材料に十分な強度を持たせる観点から、基材となる高分子には芳香族基を有することが好ましい。特に、ポリスルホン系高分子は、平膜や中空糸膜を形成させやすく、また、上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子をコーティングしやすいため好適に用いられる。
【００６７】
上記生体成分付着抑制材料の機能層の表面の飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子の固定化量は、全反射赤外分光法（ＡＴＲ−ＩＲ）によっても定量可能である。なお、ＡＴＲ−ＩＲでは表面から深さ数マイクロメートルまでの組成分析の測定が可能である。
【００６８】
上記生体成分付着抑制材料の機能層の表面に飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子が含まれる場合、１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲にエステル基Ｃ＝Ｏ由来の赤外吸収ピークが表れる。また、基材が芳香族基を有する高分子からなる場合、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲に芳香族基Ｃ＝Ｃ由来の赤外吸収ピークが表れる。本発明の生体成分付着抑制材料において、前記１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲に存在するピークは、ポリスルホン系高分子の芳香族基由来であることが好ましい。ポリスルホン系高分子が好ましい理由については、後述のとおりである。
【００６９】
ＡＴＲ−ＩＲで飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子の表面固定化量を定量する際には、１７１１〜１７５１ｃｍ−１のエステル基Ｃ＝Ｏ由来の赤外吸収ピーク面積（ＡＣ＝Ｏ）の、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の芳香族基Ｃ＝Ｃ由来の赤外吸収ピーク面積（ＡＣ＝Ｃ）に対する比率（ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）を同一の生体成分付着抑制材料の機能層の表面における任意の３箇所で測定し、その平均値を高分子の表面固定化量とする。
【００７０】
本発明の生体成分付着抑制材料において、前記機能層の表面をＡＴＲ−ＩＲ測定した際、１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲と１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲の双方にピークが存在し、前記１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏと前記１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率（ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）の平均値は、０．０１〜１．０であることが好ましい。生体成分付着抑制材料へのタンパク質や血小板の付着を十分に抑制するためには、飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子の表面固定化量、つまり、（ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）の平均値が、０．０１以上であることが好ましく、０．０２以上であることがより好ましく、０．０３以上であることがさらに好ましい。飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子の表面固定化量の上限については、特に制限はないが、高分子の表面固定化量が多すぎると、溶出物が多くなる場合があるので、１．０以下であることが好ましく、０．９以下であることがより好ましく、０．８以下であることがさらに好ましい。いずれの好ましい下限値もいずれの好ましい上限値と組み合わせることができる。ただし、上記表面固定化量が０．００５以下である場合は、ノイズと判断し、カルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子は存在しないとする。
【００７１】
上記芳香族基を有する高分子としては、ポリスルホン系高分子、ポリスチレン、ポリエステル、ポリアミド等が挙げられる。このうち、ポリスルホン系高分子は、平膜や中空糸膜を形成させやすく、また、上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子をコーティングしやすいため好適に用いられる。なお、上記方法は、基材が芳香族基を有する高分子である場合の定量方法であるが、基材が異なる素材からなる場合は、別のピークを適宜選択し、算出すればよい。
【００７２】
上記芳香族基を有する基材は、一般的に疎水性が高いため、親水性ポリマーを含有させることがある。
【００７３】
上記親水性ポリマーは、親水性が極度に高くないことから、アミド結合を含有することが好ましい。
【００７４】
アミド結合を含有する親水性ポリマーとしては、例えば、ビニルカプロラクタム、ビニルピロリドン、ビニルアセトアミド、アクリルアミド又はそれらの誘導体を（共）重合して得られる親水性ポリマーが挙げられる。このうち、ポリスルホン系高分子など芳香族基を有する高分子との成形性・紡糸性が良く、中空糸膜を形成させる際には造孔剤の役割も果たすことから、ビニルピロリドンを重合して得られる親水性ポリマーが好適に用いられる。
【００７５】
ここで、「親水性ポリマー」とは、水に易溶である重合体と定義する。ここで、水に易溶とは、２０℃の純水１００ｇに対する溶解度が１ｇを超えることをいい、１０ｇ以上が好ましい。
【００７６】
生体成分付着抑制材料の表面にアミド結合を含有する親水性ポリマーが存在することは、ＡＴＲ−ＩＲ測定において１６１７〜１７１０ｃｍ−１の範囲にピークが観測されることで確認可能である。すなわち、本発明の生体成分付着抑制材料において、前記機能層の表面をＡＴＲ−ＩＲ測定した際、１６１７〜１７１０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することが好ましい。また、本発明の生体成分付着抑制材料において、前記１６１７〜１７１０ｃｍ−１の範囲に存在するピークは、ビニルピロリドンユニット、ビニルカプロラクタムユニット、ビニルアセトアミドユニット又はアクリルアミドユニットを含有する親水性ポリマーのアミド結合由来であることが好ましい。１６１７〜１７１０ｃｍ−１の範囲にピークが存在すること、すなわち、アミド結合を含有することや、アミド結合が上記各ユニット由来であることが好ましい理由については上述のとおりである。
【００７７】
生体成分付着抑制材料の表面のアミド結合を含有する親水性ポリマーの存在量は、アミド結合由来のピーク面積（ＡＮ−Ｃ＝Ｏ）と芳香族基のピーク面積（ＡＣ＝Ｃ）との比率（ＡＮ−Ｃ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）を同一の生体成分付着抑制材料の機能層の表面における任意の３箇所で測定し、その平均値を親水性ポリマーの存在量とする。親水性ポリマーの存在量、つまり、（ＡＮ−Ｃ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）の平均値は、０．０１以上が好ましく、０．１以上がより好ましく、０．５以上がさらに好ましい。また、上限は特に設けないが、親水性ユニットが多すぎると、生体成分付着抑制材料の表面からの溶出物が多くなることがあるため、親水性ポリマーの存在量（ＡＮ−Ｃ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）の平均値は、５０以下が好ましく、１０以下がより好ましく、５以下がさらに好ましい。いずれの好ましい下限値もいずれの好ましい上限値と組み合わせることができる。ただし、（ＡＮ−Ｃ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）の平均値が０．００５以下である場合は、ノイズと判断し、アミド結合を含有する親水性ポリマーは存在しないとする。
【００７８】
また、本発明の血液浄化器は、本発明の生体成分付着抑制材料を備える。
【００７９】
例えば、生体成分付着抑制材料の一形態である分離膜を形成する一成分として、血液成分の付着を抑制するために膜の表面（特に、血液と接触させることが多い内表面）に上記高分子を固定して、かかる分離膜をケーシングに内蔵してなる分離膜モジュールとしてもよい。分離膜の形態としては、血液浄化の効率の観点から中空糸膜が好ましい。
【００８０】
「血液浄化用途」とは、血液中の老廃物や有害物質を取り除くことを目的に使用されることを意味する。
【００８１】
「血液浄化器」とは、血液を体外に循環させて、血液中の老廃物や有害物質を取り除くことを目的とする医療材料を少なくとも一部に有する製品のことをいい、例えば、人工腎臓用モジュールや外毒素吸着カラム等が挙げられる。
【００８２】
血液浄化器は、慢性腎不全の治療に用いられる人工腎臓モジュールであれば約４時間、急性腎不全の治療に用いられる持続緩徐式血液濾過器であれば1日ないし数日間と、長時間血液に接触した状態で使用される。このため、血小板やタンパク質の付着により、分画性能や透水性能の低下が生じる。さらに、人工腎臓モジュールや持続緩徐式血液濾過器は、血液中の老廃物や有害物質を取り除くことを目的に、中空糸膜の内側から外側へ濾過がかけられるため、血小板やタンパク質の付着が特に起こりやすい。
【００８３】
「分離膜」とは、血液や水溶液等の処理する液体に含まれる特定の物質を、吸着又は物質の大きさ等により、選択的に除去する膜を意味する。上記分離膜の製造方法としては、例えば、膜を形成した後に高分子をコーティングする方法が好ましく、高分子を溶液（好ましくは水溶液）として膜の表面に接触させる方法が用いられる。より具体的には、高分子の溶液を所定流量で流す方法、上記溶液に膜を浸漬させる方法が挙げられる。その他、膜を形成する原液に高分子を添加して、紡糸する方法において、意図的に高分子が膜表面に集まるように条件設定する方法も挙げられる。
【００８４】
上記分離膜の主原料は、ポリスルホン系高分子であることが好ましい。ここで、「ポリスルホン系高分子」とは、主鎖に芳香環、スルフォニル基及びエーテル基を有する高分子であり、例えば、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリアリールエーテルスルホン等が挙げられる。ここで、「主原料」とは、ポリスルホン系高分子全体に対して９０重量％以上含まれる原料を意味する。
【００８５】
上記分離膜の主原料として、例えば、次式（１）及び／又は（２）の化学式で示されるポリスルホン系高分子が好適に使用されるが、これらに限定されるものではない。式中のｎは、１以上の整数であり、３０〜１００が好ましく、５０〜８０がより好ましい。なお、ｎが分布を有する場合は、その平均値をｎとする。
【００８６】
【化１】
2018025772.tif 000002
【００８７】
［式中、ｎは、１以上の整数を表す。］
上記分離膜モジュールに用いることができるポリスルホン系高分子は、上記式（１）及び／又は（２）で表される繰り返し単位のみからなる高分子が好適ではあるが、本発明の効果を妨げない範囲で上記式（１）及び／又は（２）で表される繰り返し単位に由来するモノマー以外の他のモノマーと共重合した共重合体や、変性体であってもよい。上記の他のモノマーと共重合した共重合体における上記の他のモノマーの共重合比率は、ポリスルホン系高分子全体に対して１０重量％以下であることが好ましい。
【００８８】
上記分離膜モジュールに用いることができるポリスルホン系高分子としては、例えば、ユーデルポリスルホンＰ−１７００、Ｐ−３５００（ソルベイ社製）、ウルトラゾーン（登録商標）Ｓ３０１０、Ｓ６０１０（ＢＡＳＦ社製）、ビクトレックス（住友化学株式会社製）、レーデル（登録商標）Ａ（ソルベイ社製）又はウルトラゾーン（登録商標）Ｅ（ＢＡＳＦ社製）等のポリスルホン系高分子が挙げられる。
【００８９】
上記分離膜モジュールを製造する方法としては、その用途により種々の方法があるが、その一態様としては、分離膜の製造工程と、当該分離膜をモジュールに組み込む工程とにわけることができる。分離膜モジュールの製造において、放射線照射による処理は、分離膜をモジュールに組み込む工程の前に行ってもよいし、分離膜をモジュールに組み込む工程の後に行ってもよい。本発明における分離膜モジュールが医療用である場合、モジュールに組み込む工程の後に、放射線照射による処理としてγ線照射による処理を行うことは、滅菌も同時に行うことができる点で好ましい。
【００９０】
血液浄化器に用いられる中空糸膜モジュールの製造方法についての一例を示す。
【００９１】
血液浄化器に内蔵される中空糸膜の製造方法としては、例えば、次の方法がある。すなわち、ポリスルホンとポリビニルピロリドン（重量比率２０：１〜１：５が好ましく、５：１〜１：１がより好ましい）をポリスルホンの良溶媒（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン又はジオキサン等が好ましい）及び貧溶媒（水、エタノール、メタノール又はグリセリン等が好ましい）の混合溶液に溶解させた原液（濃度は、１０〜３０重量％が好ましく、１５〜２５重量％がより好ましい）を二重環状口金から吐出する際に内側に注入液を流し、乾式部を走行させた後凝固浴へ導く。この際、乾式部の湿度が影響を与えるために、乾式部走行中に膜外表面からの水分補給によって、外表面近傍での相分離挙動を速め、孔径拡大し、結果として透析の際の透過・拡散抵抗を減らすことも可能である。ただし、相対湿度が高すぎると外表面での原液凝固が支配的になり、かえって孔径が小さくなり、結果として透析の際の透過・拡散抵抗を増大する傾向がある。そのため、相対湿度としては６０〜９０％が好適である。また、注入液組成としてはプロセス適性から原液に用いた溶媒を基本とする組成からなるものを用いることが好ましい。注入液濃度としては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドを用いたときは、４５〜８０重量％が好適に用いられ、６０〜７５重量％の水溶液がより好適に用いられる。
【００９２】
ここで、良溶媒とは、２０℃において、対象とする高分子が１０重量％以上溶解する溶媒のことを意味する。貧溶媒とは、２０℃において、対象とする高分子が１０重量％未満溶解する溶媒のことを意味する。
【００９３】
中空糸膜をモジュールに内蔵する方法としては、特に限定されないが、例えば、次の方法がある。まず、中空糸膜を必要な長さに切断し、必要本数を束ねた後、筒状ケースに入れる。その後両端に仮のキャップをし、中空糸膜両端部にポッティング剤を入れる。このとき遠心機でモジュールを回転させながらポッティング剤を入れる方法は、ポッティング剤が均一に充填されるために好ましい方法である。ポッティング剤が固化した後、中空糸膜の両端が開口するように両端部を切断し、中空糸膜モジュールを得る。
【００９４】
中空糸膜の主原料に用いられるポリスルホン系高分子は、総じて疎水性が強いことから、そのまま中空糸膜として用いるとタンパク質等の有機物が付着しやすくなる。そこで、上記カルボン酸エステルユニットを含有する高分子を機能層の表面に固定した中空糸膜が好適に用いられる。特に、機能層の表面の親水性を向上させる観点から、上記親水性ユニットを共重合したカルボン酸エステルユニットを含有する高分子が好適に用いられる。機能層の表面への高分子の導入方法としては、例えば、高分子を溶解した溶液をモジュール内の中空糸膜に接触させる方法や、中空糸膜紡糸の際に、高分子を含んだ注入液を中空糸膜内側に接触させる方法が挙げられる。
【００９５】
上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子を溶解した水溶液をモジュール内の中空糸膜に通液させ、表面へ導入する場合、水溶液の高分子の濃度が小さすぎると十分な量の高分子が表面に導入されない。よって、上記水溶液中の高分子濃度は１０ｐｐｍ以上が好ましく、１００ｐｐｍ以上がより好ましく、３００ｐｐｍ以上がさらに好ましい。ただし、水溶液の高分子の濃度が大きすぎると、モジュールからの溶出物の増加が懸念されるため、上記水溶液中の高分子濃度は１００，０００ｐｐｍ以下が好ましく、１０，０００ｐｐｍ以下がより好ましい。
【００９６】
なお、上記飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子が水に所定の濃度溶解しない場合は、中空糸膜を溶解しない有機溶媒、又は、水と相溶し、かつ中空糸膜を溶解しない有機溶媒と水との混合溶媒に高分子を溶解させてもよい。上記有機溶媒又は混合溶媒に用いうる有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール又はプロパノール等のアルコール系溶媒が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００９７】
また、上記混合溶媒中の有機溶媒の割合が多くなると、中空糸膜が膨潤し、強度が低下する場合がある。したがって、上記混合溶媒中の有機溶媒の重量分率は６０％以下が好ましく、１０％以下がより好ましく、１％以下がさらに好ましい。
【００９８】
さらに、中空糸膜全体の親水性を向上させる観点から、ポリスルホン系高分子と親水性ユニットを含有する高分子を混合させ、紡糸することが好ましい。
【００９９】
上記生体成分付着抑制材料は、導入したカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子が使用時に溶出するのを防ぐため、高分子を表面に導入後、放射線照射や熱処理を行い不溶化し、固定することが好ましい。
【０１００】
上記放射線照射にはα線、β線、γ線、Ｘ線、紫外線又は電子線等を用いることができる。ここで、人工腎臓等の血液浄化器では出荷前に滅菌することが義務づけられており、その滅菌には近年、残留毒性の少なさや簡便さの点から、γ線や電子線を用いた放射線滅菌法が多用されている。したがって、医療用分離膜モジュール内の中空糸膜に本発明に用いられる高分子を溶解した水溶液を接触させた状態で放射線滅菌法を用いることは、滅菌と同時に該高分子の不溶化も達成できるため好ましい。
【０１０１】
上記生体成分付着抑制材料において、中空糸膜の滅菌と改質を同時に行う場合、放射線の照射線量は１５ｋＧｙ以上が好ましく、２５ｋＧｙ以上がより好ましい。血液浄化用モジュール等をγ線で滅菌するには１５ｋＧｙ以上が効果的なためである。また、上記照射線量は１００ｋＧｙ以下が好ましい。照射線量が１００ｋＧｙを超えると、高分子が３次元架橋やカルボン酸ビニルエステルユニットのエステル基部分の分解等を起こしやすくなり、血液適合性が低下する場合があるためである。
【０１０２】
放射線を照射する際の架橋反応を抑制するため、抗酸化剤を用いてもよい。抗酸化剤とは、他の分子に電子を与えやすい性質を持つ物質のことを意味し、例えば、ビタミンＣ等の水溶性ビタミン類、ポリフェノール類又はメタノール、エタノール若しくはプロパノール等のアルコール系溶媒が挙げられるが、これらに限定されるものではない。これらの抗酸化剤は単独で用いてもよいし、２種類以上混合して用いてもよい。抗酸化剤を上記医療用分離膜モジュールに用いる場合、安全性を考慮する必要があるため、エタノールやプロパノール等、毒性の低い抗酸化剤が好適に用いられる。
【０１０３】
人工腎臓用モジュール等の血液浄化器では、タンパク質や血小板が付着することによって、分画性能や透水性能が低下するのみならず、血液凝固が原因で中空糸膜内部に血液が流通できなくなり、体外循環を続けられなくなることがある。血小板やタンパク質の中空糸膜内部への付着は、特に血液に接してから６０分以内に顕著に起こることから、血液を６０分間循環させた後の中空糸膜内表面へのフィブリノーゲン相対付着量を測定することで、その性能を評価することができる。
【０１０４】
血液凝固や血液成分の活性化は、フィブリノーゲンの生体成分付着抑制材料表面への付着を起点として、開始するとされており、すなわち、フィブリノーゲンの付着量が少ないほど、抗血栓性の高い生体成分付着抑制材料ということができる。
【０１０５】
本発明において、中空糸膜のフィブリノーゲンの付着量は後述の方法により、測定できる。フィブリノーゲンの付着量は、血液によるバラつきが生じないようにするため、コントロールとして東レ社製人工腎臓“トレライト”ＣＸの中空糸膜の測定も同時に行い、その相対付着率として、算出を行う。
【０１０６】
本発明において、抗血栓性を有するとは、フィブリノーゲンの相対付着量が９０％以下であることをいい、好ましくは５５％以下である。生体成分付着抑制材料のフィブリノーゲンの相対付着量は、血液凝固、血液成分の活性化を抑制する観点から、２５％以下が好ましく、２０％以下がより好ましく、１５％以下がさらに好ましい。
【０１０７】
一方で、本発明の生体成分付着抑制材料は、分離用材料や分析用材料にも使用できる。分離用材料としては、例えば、抗体精製用分離膜が挙げられる。抗体精製用分離膜は、血清、腹水や細胞培養液からＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥといった抗体を精製するため、その他のタンパク質などの不純物を除去する目的で使用されるが、抗体が分離膜表面に付着することにより、回収率が低下してしまうことが課題である。本発明の生体成分付着抑制材料を使用することにより、回収率の低下を抑制することができる。例えば、ＩｇＧを精製する場合、分離膜の使用方法にもよるが、コストの観点から回収率は５０％以上好ましく、５５％以上がより好ましく、６０％以上がさらに好ましい。
【０１０８】
また、分析用材料としては、例えば、血糖値センサーが挙げられる。血糖値センサーでは、血清などの体液中のグルコース濃度を測定するが、体液中のタンパク質のセンサー素子表面への付着により、グルコースを認識できず、感度が低下してしまうことが課題である。本発明の生体成分付着抑制材料を使用することにより、感度の低下を抑制することができる。
【実施例】
【０１０９】
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらの例によって限定されるものではない。
＜評価方法＞
（１）数平均分子量
水／メタノール＝５０／５０（体積比）の０．１Ｎ  ＬｉＮＯ３溶液を調製し、ＧＰＣ展開溶液とした。この溶液２ｍｌに、高分子２ｍｇを溶解させた。この高分子溶液１００μＬを、カラム（東ソーＧＭＰＷＸＬ）を接続したＧＰＣに注入した。流速０．５ｍＬ／ｍｉｎとし、測定時間は３０分間であった。検出は示差屈折率検出器ＲＩＤ−１０Ａ（島津製作所社製）により行い、溶出時間１５分付近にあらわれる高分子由来のピークから、数平均分子量を算出した。数平均分子量は、十の位を四捨五入して算出した。検量線作成には、Ａｇｉｌｅｎｔ社製ポリエチレンオキシド標準サンプル（０．１ｋＤ〜１２５８ｋＤ）を用いた。
（２）カルボン酸ビニルエステルユニットのモル分率
共重合体２ｍｇをクロロホルム−Ｄ、９９．７％（和光純薬０．０５Ｖ／Ｖ％ＴＭＳ有）２ｍｌに溶解し、ＮＭＲサンプルチューブに入れ、ＮＭＲ測定（超伝導ＦＴＮＭＲＥＸ−２７０：ＪＥＯＬ社製）を行った。温度は室温とし、積算回数は３２回とした。この測定結果から、２．７〜４．３ｐｐｍ間に認められるビニルピロリドンの窒素原子に隣接した炭素原子に結合したプロトン（３Ｈ）由来のピークとベースラインで囲まれた領域の面積：３ＡＰＶＰと、４．３〜５．２ｐｐｍ間に認められるカルボン酸ビニルエステルのα位の炭素に結合したプロトン（１Ｈ）由来のピークとベースラインで囲まれた領域の面積：ＡＶＣから、ＡＶＣ／（ＡＰＶＰ＋ＡＶＣ）×１００の値を算出し、カルボン酸ビニルエステルユニットのモル分率とした。なお、本方法はビニルピロリドンとカルボン酸ビニルエステルとの共重合体においてモル分率を測定する場合の例であり、他のモノマーの組み合わせからなる共重合体の場合は適宜、適切なプロトン由来のピークを選択してモル分率を求める。モル分率は、一の位を四捨五入して算出した。
（３）ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定
中空糸膜の場合は、片刃で半円筒状にそぎ切り、中空糸膜の機能層の表面（内側表面）の異なる箇所を３点測定した。平膜等、中空糸膜以外の場合も、必要に応じて機能層表面を露出させ、機能層の表面の異なる箇所を３点測定した。測定サンプルは、超純水でリンスした後、室温、０．５Ｔｏｒｒにて１０時間乾燥させた後、測定に供した。測定装置、条件は、以下の通りである。
測定装置：ＴＯＦ．ＳＩＭＳ  ５（ＩＯＮ−ＴＯＦ社製）
１次イオン：Ｂｉ３＋＋
１次イオン加速電圧： ３０ｋＶ
パルス幅： ５．９ｎｓ
２次イオン極性：負
スキャン数： ６４  ｓｃａｎ／ｃｙｃｌｅ
Ｃｙｃｌｅ  Ｔｉｍｅ: １４０μｓ
測定範囲：２００×２００μｍ２
質量範囲（ｍ／ｚ）： ０〜１５００
得られた質量ｍ／ｚのスペクトルから、カルボン酸イオンの生体成分付着抑制材料表面における存在の有無を確かめた。ただし、総２次イオン強度に対するカルボン酸イオン強度が０．４％以下の場合は、ノイズと判断し、カルボン酸は存在しないとする。
（４）Ｘ線電子分光法（ＸＰＳ）測定
中空糸膜の場合は、片刃で半円筒状にそぎ切り、中空糸膜の機能層の表面（内側表面）の異なる箇所を２点測定した。平膜等、中空糸膜以外の場合も、必要に応じて機能層表面を露出させ、機能層の表面の異なる箇所を２点測定した。測定サンプルは、超純水でリンスした後、室温、０．５Ｔｏｒｒにて１０時間乾燥させた後、測定に供した。測定装置、条件は、以下の通りである。【０１１０】
測定装置：  ＥＳＣＡＬＡＢ２２０ｉＸＬ（ＶＧ社製）
励起Ｘ線：  ｍｏｎｏｃｈｒｏｍａｔｉｃ Ａｌ Ｋα１,２ 線（１４８６．６ｅＶ）
Ｘ線径：  ０．１５ｍｍ
光電子脱出角度：  ９０°（試料表面に対する検出器の傾き）
Ｃ１ｓのピークは、主にＣＨｘ，Ｃ−Ｃ，Ｃ＝Ｃ，Ｃ−Ｓ由来の成分、主にＣ−Ｏ，ＣＮ由来の成分、π−π＊サテライト由来の成分、Ｃ＝Ｏ由来の成分、ＣＯＯ由来の成分の５つの成分から構成される。以上の５つ成分にピーク分割を行う。ＣＯＯ由来の成分は、ＣＨｘやＣ−Ｃのメインピーク（２８５ｅＶ付近）から＋４．０〜４．２ｅＶに現れるピークである。この各成分のピーク面積比を、小数第２位を四捨五入し、算出した。なお、ピーク分割の結果、ピーク面積百分率が０．４％以下であれば、検出限界以下とした。
（５）ＡＴＲ−ＩＲ測定
中空糸膜を片刃で半円筒状にそぎ切り、超純水でリンスした後、室温、０．５Ｔｏｒｒにて１０時間乾燥させ、表面測定用の試料とした。平膜等、中空糸膜以外の場合も、必要に応じて機能層表面を露出させ、超純水でリンスした後、室温、０．５Ｔｏｒｒにて１０時間乾燥させ、表面測定用の試料とした。この乾燥試料の機能層の表面を、ＪＡＳＣＯ社製ＩＲＴ−３０００を用いて顕微ＡＴＲ法により測定した。測定は視野（アパーチャ）を１００μｍ×１００μｍとし、測定範囲は３μｍ×３μｍで積算回数を３０回測定した。得られたスペクトルの波長１５４９〜１６２０ｃｍ−１で基準線を引き、その基準線とスペクトルの正の部分で囲まれた部分をポリスルホン由来芳香族基Ｃ＝Ｃ由来のピーク面積を（ＡＣ＝Ｃ）とした。同様に１７１１〜１７５１ｃｍ−１で基準線を引き、その基準線とスペクトルの正部分で囲まれた部分をエステル基由来のピーク面積を（ＡＣ＝Ｏ）とした。ただし、カルボン酸ビニルエステルユニットの種類やポリスルホン系高分子の種類によって、ピークが±１０ｃｍ−１程度シフトすることがありうるので、その場合は適宜、基準線を引きなおす。
上記操作を同一中空糸膜の異なる３箇所を測定し、（ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）の平均値を算出し、小数第３位を四捨五入した値を用いた。
また、１６１７〜１７１０ｃｍ−１のピークで基準線を引き、その基準線とスペクトルの正部分で囲まれた部分をエステル基由来のピーク面積を（ＡＮ−Ｃ＝Ｏ）とした。上記操作を同一中空糸膜の異なる３箇所を測定し、（ＡＮ−Ｃ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃ）の平均を算出し、小数第３位を四捨五入した値を用いた。
（６）平膜の血小板付着試験方法
１８ｍｍφのポリスチレン製の円形板に両面テープを貼り付け、そこに０．５ｃｍ四方に切り取った平膜を固定した。平膜表面に汚れや傷、折り目等があると、その部分に血小板が付着し、正しい評価ができないことがあるので、汚れ、傷、折り目のない平膜を用いた。筒状に切ったＦａｌｃｏｎ（登録商標）チューブ（１８ｍｍφ、Ｎｏ．２０５１）に該円形板を、平膜を貼り付けた面が、円筒内部にくるように取り付け、パラフィルムで隙間を埋めた。この円筒管内を生理食塩水で洗浄後、生理食塩水で満たした。ヒトの静脈血を採血後、直ちにヘパリンを５０Ｕ／ｍｌになるように添加した。上記円筒管内の生理食塩水を廃棄後、上記血液を、採血後１０分以内に、円筒管内に１．０ｍｌ入れて３７℃にて１時間振盪させた。その後、平膜を１０ｍｌの生理食塩水で洗浄し、２．５％グルタルアルデヒド生理食塩水で血液成分の固定を行い、２０ｍｌの蒸留水にて洗浄した。洗浄した平膜を２０℃、０．５Ｔｏｒｒにて１０時間減圧乾燥した。この平膜を走査型電子顕微鏡の試料台に両面テープで貼り付けた。その後、スパッタリングにより、Ｐｔ−Ｐｄの薄膜を平膜表面に形成させて、試料とした。この平膜の表面をフィールドエミッション型走査型電子顕微鏡（日立社製Ｓ８００）にて、倍率１５００倍で試料の内表面を観察し、１視野中（４．３×１０3μｍ2）の付着血小板数を数えた。５０個以上付着している場合は、血小板付着抑制効果が無いものとして、付着数は５０個とした。平膜中央付近で、異なる２０視野での付着血小板数の平均値を血小板付着数（個／４．３×１０3μｍ2）とした。なお、視野面積が異なる電子顕微鏡を用いる場合は、適宜、血小板付着数（個／４．３×１０3μｍ2）となるように換算すればよい。
（７）フィブリノーゲンの相対付着量測定
ＡＣＤ―Ａ液１５％添加ヒト新鮮血液４ｍＬを流速１ｍＬ／ｍｉｎで、中空糸膜モジュールに１時間循環させた。リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）を通液して２０分間洗浄した後、ミニモジュールから中空糸を１０ｃｍ相当切り出し、約２ｍｍ長に細切しエッペンチューブに入れた。ＰＢＳにて洗浄した（１ｍＬ×３回、血液が残っている場合には繰り返した）。トゥイーン−２０（片山化学）をＰＢＳで０．０５重量％になるように調整した（以下、ＰＢＳ−Ｔと略記）。スキムミルクを０．１重量％になるように、ＰＢＳ−Ｔに溶解させ、該溶液で３回洗浄した。抗ヒトフィブリノーゲン（ＨＰＲ）抗体を０．１重量％のスキムミルク／ＰＢＳ−Ｔ溶液で１００００倍に希釈し、１ｍＬ添加した後、室温にて２時間ローテーターで回転、撹拌させた。０．１重量％のスキムミルク／ＰＢＳ−Ｔ溶液で２回洗浄した後、０．１重量％のスキムミルク／ＰＢＳ溶液で２回洗浄した。ＴＭＢｏｎｅｓｏｌｕｔｉｏｎを１ｍＬ添加し、ミクロミキサーで撹拌した。発色具合をみて６Ｎの塩酸を２００μＬ添加し、反応停止した（後述のコントロールの吸光度が１〜１．５の範囲に入るように反応を制御する）。４５０ｎｍの吸光度を吸光度測定装置：マイクロプレートリーダーＭＰＲ−Ａ４ｉ（東ソー社製）により測定した。コントロール（“トレライト”ＣＸ）の吸光度（Ａｃ）と対象サンプルの吸光度（Ａｓ）から、フィブリノーゲンの相対付着量を下記式により求めた。
フィブリノーゲンの相対付着量（％）＝Ａｓ／Ａｃ×１００
なお、中空糸膜以外のフィブリノーゲンの相対付着量測定を行う場合には、血液中への浸漬等の方法により、サンプルの機能層にヒト新鮮血４ｍＬを１時間接触させ、リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）を用いてサンプルを洗浄する。その後、中空糸膜と同様に吸光度を測定し、フィブリノーゲンの相対付着量を算出する。コントロールには機能層に飽和脂肪族モノカルボン酸ビニルエステルユニットを含有する高分子が固定化する前の材料を用いる。
（８）抗体精製モデル試験方法
ＩｇＧ（ヒト血清由来、オリエンタル酵母工業）１００ｍｇを添加したヒト血漿１０ｍＬを準備し、抗体精製用分離膜モジュールに流速３ｍＬ／ｍｉｎ、濾過流速１．５ｍＬ／ｍｉｎ、ＰＢＳの補液流速１．５ｍＬ／ｍｉｎで１時間循環した。ＰＢＳ５ｍＬで分離膜内表面を洗浄し、その液を循環後の血漿に加え、回収液とした。ＩｇＧの回収率を（回収液に含まれるＩｇＧの重量）／（はじめの血漿中に含まれるＩｇＧの重量）×１００％で算出した。ＩｇＧの重量は、ＥＬＩＳＡキット（フナコシ社製）を用いてＩｇＧ濃度を測定し、液量の値をかけることにより算出した。【０１１１】
＜中空糸膜モジュールの製造方法＞
ポリスルホン（テイジンアモコ社製ユーデルＰ−３５００）１８重量部、ポリビニルピロリドン（ＢＡＳＦ社製Ｋ３０）９重量部をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド７２重量部、水１重量部に加え、９０℃で１４時間加熱溶解した。この製膜原液を外径０．３ｍｍ、内径０．２ｍｍのオリフィス型二重円筒型口金より吐出し芯液としてＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド５７．５重量部、水４２．５重量部からなる溶液を吐出させ、乾式長３５０ｍｍを通過した後、水１００％の凝固浴に導き中空糸膜を得た。得られた中空糸膜の径は内径２００μｍ、膜厚４０μｍであった。プラスチック管に中空糸膜を５０本通し、両端を接着剤で固定した有効長１００ｍｍのプラスチック管ミニモジュールを作製した。上記高分子を溶解した水溶液を、上記ミニモジュールの血液側入口から透析液側入口に通液させた。さらに、０．１重量％エタノール水溶液を、上記中空糸膜モジュールの血液側入口から透析液側入口及び血液側入口から血液側出口へ通液後、２５ｋＧｙのγ線を照射して中空糸膜モジュールとした。
（実施例１）
ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体を以下の方法で作製した。ビニルピロリドンモノマー（和光純薬工業）１６．２ｇ、ヘキサン酸ビニルモノマー（東京化成工業）２０．８ｇ、重合溶媒としてイソプロパノール（和光純薬工業）５６ｇ、重合開始剤としてアゾビスジメチルブチロニトリル０．３５ｇを混合し、窒素雰囲気下、７０℃にて８時間撹拌した。反応液を室温まで冷却して、濃縮後、濃縮残渣をヘキサンに投入した。析出した白色沈殿物を回収し、５０℃で１２時間減圧乾燥を行い、ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体２５．０ｇを得た。１Ｈ―ＮＭＲの測定結果から、ヘキサン酸ビニルユニットのモル分率は４０％であった。ＧＰＣの測定結果から、数平均分子量が２,２００であった。【０１１２】
作製した上記ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体３００ｐｐｍを溶解した１．０重量％エタノール水溶液を、上記中空糸膜モジュールの製造方法により作製した中空糸膜モジュールの血液側入口から透析液側入口に通液させた。さらに、０．１重量％エタノール水溶液を、上記中空糸膜モジュールの血液側入口から透析液側入口及び血液側入口から血液側出口へ通液後、２５ｋＧｙのγ線を照射して中空糸膜モジュールを作製した。【０１１３】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面にヘキサン酸エステルが存在することが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１７１１〜１７５１ｃｍ−１、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することがわかった。ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、中空糸膜内表面の共重合体固定化量（１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏ、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃの平均値）は０．０３であることがわかった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った。その結果、表１に示すとおり、相対付着量は１２％であった。
（実施例２）
中空糸膜モジュール作製時の共重合体の濃度を３００ｐｐｍから５００ｐｐｍに変更した以外は、実施例１と同様の手段により中空糸膜モジュールを作製した。【０１１４】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面にヘキサン酸エステルが存在することが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１７１１〜１７５１ｃｍ−１、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することがわかった。ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、中空糸膜内表面の共重合体固定化量（１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏ、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃの平均値）は０．０８であることがわかった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った。その結果、表１に示すとおり、相対付着量は７％であった。
（実施例３）
ビニルピロリドン／プロパン酸ビニルランダム共重合体を以下の方法で作製した。ビニルピロリドンモノマー１９．５ｇ、プロパン酸ビニルモノマー１７．５ｇ、重合溶媒としてｔ−アミルアルコール５６ｇ、重合開始剤として２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）０．１７５ｇを混合し、窒素雰囲気下、７０℃にて６時間撹拌した。反応液を室温まで冷却して反応を停止し、濃縮後、ヘキサンに投入した。析出した白色沈殿物を回収し、減圧乾燥して、共重合体２１．０ｇを得た。【０１１５】
１Ｈ―ＮＭＲの測定結果から、プロパン酸ビニルユニットのモル分率は４０％であった。また、ＧＰＣの測定結果から、数平均分子量が１６，５００であった。【０１１６】
ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体の代わりにビニルピロリドン／プロパン酸ビニルランダム共重合体を用いた以外は、実施例１と同様の手段により、中空糸膜モジュールを作製した。【０１１７】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面にプロパン酸エステルが存在することが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１７１１〜１７５１ｃｍ−１、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することがわかった。中空糸膜内表面の共重合体固定化量（１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏ、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃの平均値）は０．０６であった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った。その結果、表１に示すとおり、相対付着量は５％であった。
（実施例４）
ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体の代わりにビニルピロリドン／吉草酸ビニルランダム共重合体（吉草酸ビニルユニットのモル分率４０％、数平均分子量３，９００）を用いた以外は、実施例１と同様の手段により中空糸膜モジュールを作製した。【０１１８】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面に吉草酸エステルが存在することが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１７１１〜１７５１ｃｍ−１、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することがわかった。中空糸膜内表面の共重合体固定化量（１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏ、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃの平均値）は０．０２であった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った結果、表１に示すとおり、相対付着量は２５％であった。
（実施例５）
ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体３００ｐｐｍの代わりにビニルアセトアミド／ピバル酸ビニルランダム共重合体１００ｐｐｍ（ピバル酸ビニルユニットのモル分率５０％、数平均分子量７，７００）を用いた以外は、実施例１と同様の手段により中空糸膜モジュールを作製した。【０１１９】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面にピバル酸エステルが存在することが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１７１１〜１７５１ｃｍ−１、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することがわかった。中空糸膜内表面の共重合体固定化量（１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏ、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃの平均値）は０．０６であった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った結果、表１に示すとおり、相対付着量は９％であった。
（比較例１）
ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体の代わりにポリビニルピロリドン（ＢＡＳＦ社製“Ｋ９０”）を用いた以外は、実施例１と同様の手段により中空糸膜モジュールを作製した。【０１２０】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面にカルボン酸エステルは存在しないことが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在するが１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲にはピークが存在しないことがわかった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った。その結果、表１に示すとおり、相対付着量は９０％であった。
（比較例２）
ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体の代わりにビニルピロリドン／酢酸ビニルランダム共重合体（ＢＡＳＦ社製“コリドンＶＡ６４”）を用いた以外は、実施例１と同様に中空糸膜モジュールを作製した。ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面に酢酸エステルが存在することが確認された。【０１２１】
また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１７１１〜１７５１ｃｍ−１、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することがわかった。中空糸膜内表面の共重合体固定化量（１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏ、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃの平均値）は０．０４であることがわかった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った結果、表１に示すとおり、相対付着量は６０％であった。
（比較例３）
ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体の代わりにビニルピロリドン／酢酸ビニルランダム共重合体（ＢＡＳＦ社製“コリドンＶＡ６４”）を用い、中空糸膜モジュール作製時の共重合体の濃度を３００ｐｐｍから１０００ｐｐｍに変更し、０．１重量％エタノール水溶液の代わりに全て水を用いた以外は、実施例１と同様の手段により中空糸膜モジュールを作製した。【０１２２】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面に酢酸エステルが存在することが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１７１１〜１７５１ｃｍ−１、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することがわかった。中空糸膜内表面の共重合体固定化量（１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏ、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃの平均値）は０．１２であった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った結果、表１に示すとおり、相対付着量は６５％であった。
（比較例４）
１．０重量％エタノール水溶液を、上記中空糸膜モジュールの製造方法により作製した中空糸膜モジュールの血液側入口から透析液側入口に通液させた。次に、０．１重量％エタノール水溶液を、上記中空糸膜モジュールの血液側入口から透析液側入口及び血液側入口から血液側出口へ通液後、２５ｋＧｙのγ線を照射して中空糸膜モジュールを作製した。【０１２３】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面にカルボン酸エステルは存在しないことが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在するが、１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲にはピークが存在しないことがわかった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った結果、表１に示すとおり、相対付着量は１１０％であった。
（比較例５）
１．０重量％エタノール水溶液の代わりに全て１．０重量％ヘキサノール水溶液を用いた以外は、比較例４と同様の手段により中空糸膜モジュールを作製した。【０１２４】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面にカルボン酸エステルは存在しないことが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在するが、１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲にはピークが存在しないことがわかった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った結果、表１に示すとおり、相対付着量は７３％であった。
（比較例６）
ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体の代わりにビニルピロリドン／酢酸ビニルブロック共重合体（酢酸ビニルユニットのモル分率４０％、数平均分子量４，６００）を用い、中空糸膜モジュール作製時の共重合体の濃度を３００ｐｐｍから３０ｐｐｍに変更した以外は、実施例１と同様の手段により中空糸膜モジュールを作製した。【０１２５】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、中空糸膜機能層の表面に酢酸エステルが存在することが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１７１１〜１７５１ｃｍ−１、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することがわかった。中空糸膜内表面の共重合体固定化量（１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏ、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃの平均値）は０．０４であった。作製した中空糸膜モジュールのフィブリノーゲン相対付着量測定を行った結果、表１に示すとおり、相対付着量は８３％であった。【０１２６】
【表１】
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【０１２７】
＜平膜の製造方法＞
高分子をクロロホルム（和光純薬工業）に溶解して、濃度１重量％に調整した。直径２ｃｍのスライドガラス上に、高分子溶液を１ｍＬ滴下し、２０℃で１時間、自然乾燥させた。γ線（２５ｋＧｙ）を照射し、高分子をガラス表面に架橋・固定化することにより、平膜を得た。
（実施例６）
上記高分子として、ポリプロパン酸ビニル単独重合体（数平均分子量１５，５００）を用い、上記平膜の製造方法により平膜を作製した。【０１２８】
得られた平膜のＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定を行った結果、プロパン酸エステルが存在することがわかった。血小板付着試験を行ったところ、表２に示すとおり、血小板付着数は６個であり、血小板の付着が大きく抑制されていることがわかった。
（実施例７）
上記高分子として、ビニルピロリドン／デカン酸ビニルランダム共重合体（デカン酸ビニルユニットのモル分率４０％、数平均分子量３５，０００）を用い、上記平膜の製造方法により平膜を作製した。【０１２９】
得られた平膜のＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定を行った結果、デカン酸エステルが存在することがわかった。血小板付着試験を行ったところ、表２に示すとおり、血小板付着数は１１個であり、血小板の付着が大きく抑制されていることがわかった。
（実施例８）
上記高分子として、ビニルピロリドン／ヘキサン酸ビニルランダム共重合体（ヘキサン酸ビニルユニットのモル分率４０％、数平均分子量２，２００）を用い、上記平膜の製造方法により平膜を作製した。【０１３０】
得られた平膜のＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定を行った結果、ヘキサン酸エステルが存在することがわかった。血小板付着試験を行ったところ、表２に示すとおり、血小板付着数は０個であり、血小板の付着が大きく抑制されていることがわかった。
（実施例９）
上記高分子として、ビニルピロリドン／プロパン酸ビニルランダム共重合体（プロパン酸ビニルユニットのモル分率４０％、数平均分子量１６,５００）を用い、上記平膜の製造方法により平膜を作製した。【０１３１】
得られた平膜のＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定を行った結果、プロパン酸エステルが存在することがわかった。血小板付着試験を行ったところ、表２に示すとおり、血小板付着数は１個であり、血小板の付着が大きく抑制されていることがわかった。
（実施例１０）
上記高分子として、ビニルアセトアミド／ピバル酸ビニルランダム共重合体（ピバル酸ビニルユニットのモル分率３０％、数平均分子量５,５００）を用い、上記平膜の製造方法により平膜を作製した。【０１３２】
得られた平膜のＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定を行った結果、ピバル酸エステルが存在することがわかった。血小板付着試験を行ったところ、表２に示すとおり、血小板付着数は２個であり、血小板の付着が大きく抑制されていることがわかった。
（比較例７）
高分子を固定していない未処理のスライドガラスについて、血小板付着試験を行った。【０１３３】
その結果、表２に示すとおり、血小板付着数は５０個であった。
（比較例８）
上記高分子として、ポリビニルピロリドン（ＢＡＳＦ社製“Ｋ３０”）を用い、上記平膜の製造方法により平膜を作製した。【０１３４】
得られた平膜のＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定を行った結果、カルボン酸エステルは存在しないことがわかった。血小板付着試験を行ったところ、血小板付着数は４７個であり、血小板の付着は抑制されていないことがわかった。
（比較例９）
上記高分子として、ビニルピロリドン／酢酸ビニルランダム共重合体（酢酸ビニルユニットのモル分率２０％、数平均分子量３，２００）を用い、上記平膜の製造方法により平膜を作製した。【０１３５】
得られた平膜のＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定を行った結果、酢酸エステルが存在することがわかった。血小板付着試験を行ったところ、血小板付着数は４３個であり、血小板の付着は抑制されていないことがわかった。【０１３６】
【表２】
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【０１３７】
＜抗体精製用分離膜モジュールの製造方法＞
芯液をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド６５重量部、水３５重量部とした以外は、中空糸膜モジュールの製造方法と同様に分離膜モジュールを作製した。
（実施例１１）
ビニルピロリドン／プロパン酸ビニルランダム共重合体（プロパン酸ビニルユニットのモル分率２０％、数平均分子量１２,５００）５０ｐｐｍを溶解した０．１重量％エタノール水溶液を、上記抗体精製用分離膜モジュールの製造方法により作製した分離膜モジュールの血液側入口から透析液側入口に通液させた。その後、２５ｋＧｙのγ線を照射して分離膜モジュールを作製した。【０１３８】
ＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定の結果から、分離膜機能層の表面にプロパン酸エステルが存在することが確認された。また、ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、１７１１〜１７５１ｃｍ−１、１６１７〜１７１０ｃｍ−１及び１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲にピークが存在することがわかった。ＡＴＲ−ＩＲの測定結果から、分離膜内表面の共重合体固定化量（１７１１〜１７５１ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｏ、１５４９〜１６２０ｃｍ−１の範囲のピーク面積ＡＣ＝Ｃとの比率ＡＣ＝Ｏ／ＡＣ＝Ｃの平均値）は０．０１であることがわかった。抗体精製モデル試験を行ったところ、ＩｇＧ回収率は７０％であった。
（比較例１０）
高分子の溶液を通液せずに、２５ｋＧｙのγ線を照射して分離膜モジュールを作製した。得られた分離膜のＴＯＦ−ＳＩＭＳ測定及びＸＰＳ測定を行った結果、カルボン酸エステルは存在しないことがわかった。抗体精製モデル試験を行ったところ、ＩｇＧ回収率は４５％であった。
【産業上の利用可能性】
【０１３９】
本発明の生体成分付着抑制材料は、生体適合性に優れ、血小板やタンパク質などの生体成分の付着を抑制できるため、医療材料や生体成分の分離用材料、分析用材料として好適に利用することができる。本発明の生体付着抑制材料は、特に、生体成分の付着を抑制することにより長時間の使用が可能となるため、血液浄化器の材料として好適に用いることができる。
【国際調査報告】
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