(57)【要約】  新たな抗炎症剤の提供。  肝臓水解物を有効成分とする抗炎症剤。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
肝臓水解物を有効成分とする抗炎症剤。
【請求項２】
肝臓水解物を有効成分とする炎症性サイトカイン産生抑制剤。
【請求項３】
肝臓水解物を有効成分とするＩＬ−１産生抑制剤。
【請求項４】
肝臓水解物を有効成分とする炎症改善用食品組成物。
【請求項５】
肝臓水解物を有効成分とする炎症性サイトカイン産生抑制用食品組成物。
【請求項６】
肝臓水解物を有効成分とするＩＬ−１産生抑制用食品組成物。
【請求項７】
抗炎症剤製造のための肝臓水解物の使用。
【請求項８】
炎症性サイトカイン産生抑制剤製造のための肝臓水解物の使用。
【請求項９】
ＩＬ−１産生抑制剤製造のための肝臓水解物の使用。
【請求項１０】
炎症性疾患を治療するための肝臓水解物。
【請求項１１】
炎症性サイトカインの産生を抑制するための肝臓水解物。
【請求項１２】
ＩＬ−１の産生を抑制するための肝臓水解物。
【請求項１３】
肝臓水解物の有効量を投与することを特徴とする炎症性疾患の治療方法。
【請求項１４】
肝臓水解物の有効量を投与することを特徴とする炎症性サイトカインの産生抑制方法。
【請求項１５】
肝臓水解物の有効量を投与することを特徴とするＩＬ−１の産生抑制方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、安全性の高い抗炎症剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
超高齢化社会により、慢性炎症が関係している糖尿病、肥満等の代謝性疾患及び動脈硬化等の循環器疾患等の生活習慣病の予防・治療に対する取り組みの重要性は大きくなっている。実際、糖尿病に対して、IL-1βシグナルの阻害やＮＦ-κＢ阻害作用が開発されている。関節リウマチに代表される慢性炎症性疾患においては、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１、ＩＬ−６等の炎症性サイトカインが異常に多く産生、分泌されており、これらの炎症性サイトカイン阻害薬は優れた抗炎症剤として有用である。例えば、ＴＮＦ−α阻害薬としては、インフリキシマブ等の抗体医薬が関節リウマチの治療薬として使用されている（非特許文献１）。また、ＩＬ−６阻害薬としては、抗体医薬トリシズマブが使用されている（非特許文献２）。更に、ＩＬ−１阻害薬としては、アナキンラ、リロナセプト、カナキヌマブ等のタンパク製剤や抗体医薬が開発されている（非特許文献３）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】関節リウマチ（ＲＡ）に対するＴＮＦ阻害薬ガイドライン（一般社団法人日本リウマチ学会）
【非特許文献２】薬学雑誌１２９（６）  ６６７−６７４（２００９）
【非特許文献３】日本内科学会雑誌第１００巻第１０号  ｐ．２９８５−２９９０（平成２３年１０月１０日）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、従来の炎症性サイトカイン阻害薬のほとんどは抗体医薬に代表される生物学的製剤であり、肝機能の異常、感染症、アナフィラキシー等の副作用が生じることが報告されており、非特許文献１のように使用ガイドラインが作成されている。
従って、本発明の課題は、安全性が高く、広く使用できる新たな炎症性サイトカイン阻害に基づく抗炎症剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
そこで本発明者は、種々の成分を用いて炎症性サイトカインの産生に対する作用を検討してきたところ、慢性肝疾患における肝機能の改善、二日酔の改善等に広く用いられてきた肝臓水解物が強いＩＬ−１産生抑制作用を有することから、炎症性サイトカインの産生を抑制し、抗炎症剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。【０００６】
すなわち、本発明は、次の〔１〕〜〔１５〕を提供するものである。【０００７】
〔１〕肝臓水解物を有効成分とする抗炎症剤。
〔２〕肝臓水解物を有効成分とする炎症性サイトカイン産生抑制剤。
〔３〕肝臓水解物を有効成分とするＩＬ−１産生抑制剤。
〔４〕肝臓水解物を有効成分とする炎症改善用食品組成物。
〔５〕肝臓水解物を有効成分とする炎症性サイトカイン産生抑制用食品組成物。
〔６〕肝臓水解物を有効成分とするＩＬ−１産生抑制用食品組成物。
〔７〕抗炎症剤製造のための肝臓水解物の使用。
〔８〕炎症性サイトカイン産生抑制剤製造のための肝臓水解物の使用。
〔９〕ＩＬ−１産生抑制剤製造のための肝臓水解物の使用。
〔10〕炎症性疾患を治療するための肝臓水解物。
〔11〕炎症性サイトカインの産生を抑制するための肝臓水解物。
〔12〕ＩＬ−１の産生を抑制するための肝臓水解物。
〔13〕肝臓水解物の有効量を投与することを特徴とする炎症性疾患の治療方法。
〔14〕肝臓水解物の有効量を投与することを特徴とする炎症性サイトカインの産生抑制方法。
〔15〕肝臓水解物の有効量を投与することを特徴とするＩＬ−１の産生抑制方法。
【発明の効果】
【０００８】
肝臓水解物は、強いＩＬ−１産生抑制作用を有することから、炎症性サイトカインの産生を抑制し、抗炎症剤として有用である。また、肝臓水解物は、経口投与可能であり、副作用がほとんどなく、安全性、使用性も優れていることから、食品組成物としても使用できる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】肝臓水解物のＩＬ−１β産生に対する作用を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の抗炎症剤の有効成分は、肝臓水解物である。肝臓水解物は、肝臓加水分解物、肝臓エキス、肝臓分解エキス、肝水解物とも呼ばれるが、肝臓を消化酵素等により加水分解して得られるものであり、肝機能の改善薬として用いられているものである。原料である肝臓としては、ウシ、ブタ、カツオ、クジラ等の新鮮な肝臓が用いられる。得られた加水分解物は、濃縮して用いるのが好ましい。好ましくは、前記医薬品として定められている肝臓水解物が挙げられる。
【００１１】
肝臓水解物には、低分子ペプチドを主成分として各種アミノ酸、ヌクレオチド、ビタミン、ミネラル等を含む。より詳細には、アミノ酸１９〜７８質量％、ペプチド及びタンパク１７〜７３質量％、糖類１．８〜１１質量％、脂質０．００５〜０．０４質量％、核酸０．７〜２．５質量％、無機物１．６〜５．４質量％、ビタミン０．０３〜０．２質量％、グルタチオン０．８質量％以下を含むものが好ましい。また、アミノ酸２３〜６５質量％、ペプチド及びタンパク２０〜６１質量％、糖類２．２〜８．６質量％、脂質０．００６〜０．０３５質量％、核酸０．９〜２．１質量％、無機物１．９〜４．５質量％、ビタミン０．０４〜０．１５質量％、グルタチオン０．７質量％以下を含むものがより好ましく、アミノ酸２９〜５２質量％、ペプチド及びタンパク２５〜４９質量％、糖類２．８〜６．９質量％、脂質０．００８〜０．０３質量％、核酸１．１〜１．７質量％、無機物２．４〜３．６質量％、ビタミン０．０５〜０．１２質量％、グルタチオン０．６質量％以下を含むものが更に好ましい。
【００１２】
これらの成分のうち、アミノ酸組成としては、Ａｌａ １７〜６８mg／ｇ、Ａｒｇ ０．６〜４．４mg／ｇ、Ａｓｐ ９〜４８mg／ｇ、Ｃｙｓｔｉｎｅ ５mg／ｇ以下、Ｇｌｕ １８〜６３mg／ｇ、Ｇｌy １０〜３９mg／ｇ、Ｈｉｓ ３〜１７mg／ｇ、Ｉｌｅ １４〜５６mg／ｇ、Ｌｅｕ ２６〜９８mg／ｇ、Ｌｙｓ １５〜６５mg／ｇ、Ｍｅｔ ０．３〜２０mg／ｇ、Ｐｈｅ １３〜４６mg／ｇ、Ｐｒｏ １０〜４８mg／ｇ、Ｓｅｒ １２〜４９mg／ｇ、Ｔｈｒ １２〜４５mg／ｇ、Ｔｒｐ ３〜１３mg／ｇ、Ｔｙｒ １．６〜４１mg／ｇ、Ｖａｌ １８〜７１mg／ｇが好ましい。また、Ａｌａ ２１〜５７mg／ｇ、Ａｒｇ ０．８〜３．６mg／ｇ、Ａｓｐ １１〜４０mg／ｇ、Ｃｙｓｔｉｎｅ ４mg／ｇ以下、Ｇｌｕ ２２〜５３mg／ｇ、Ｇｌｙ １３〜３２mg／ｇ、Ｈｉｓ ４〜１４mg／ｇ、Ｉｌｅ １７〜４７mg／ｇ、Ｌｅｕ ３２〜８２mg／ｇ、Ｌｙｓ １８〜５４mg／ｇ、Ｍｅｔ ０．４〜１７mg／ｇ、Ｐｈｅ １５〜３８mg／ｇ、Ｐｒｏ １２〜４０mg／ｇ、Ｓｅｒ １５〜４１mg／ｇ、Ｔｈｒ １４〜３８mg／ｇ、Ｔｒｐ ３．８〜１１mg／ｇ、Ｔｙｒ １．９〜３４mg／ｇ、Ｖａｌ ２１〜５９mg／ｇがより好ましく、Ａｌａ ２６〜４５mg／ｇ、Ａｒｇ １〜２．９mg／ｇ、Ａｓｐ １４〜３２mg／ｇ、Ｃｙｓｔｉｎｅ ３mg／ｇ以下、Ｇｌｕ ２７〜４２mg／ｇ、Ｇｌy １６〜２６mg／ｇ、Ｈｉｓ ５〜１１mg／ｇ、Ｉｌｅ ２１〜４０mg／ｇ、Ｌｅｕ ４０〜６６mg／ｇ、Ｌｙｓ ２２〜４３mg／ｇ、Ｍｅｔ ０．５〜１４mg／ｇ、Ｐｈｅ １９〜３１mg／ｇ、Ｐｒｏ １５〜３２mg／ｇ、Ｓｅｒ １８〜３３mg／ｇ、Ｔｈｒ １８〜３０mg／ｇ、Ｔｒｐ ４．８〜８．４mg／ｇ、Ｔｙｒ ２．４〜２７mg／ｇ、Ｖａｌ ２７〜４８mg／ｇが更に好ましい。
【００１３】
また、本発明においては、肝臓水解物の低分子量画分を用いることもできる。当該肝臓水解物の低分子量画分としては、分子量３０００以下の画分、例えば、前記の肝臓水解物から限外濾過膜等により分子量３０００以下の画分を採取したものを用いることができる。
【００１４】
後述の実施例に示すように、肝臓水解物及びその低分子画分は、炎症性サイトカインの一種であるＩＬ−１βの産生を強く抑制する作用及びＩＬ−１βのｍＲＮＡ発現を抑制する作用を有する。従って、肝臓水解物は、ＩＬ−１に代表される炎症性サイトカインの産生を抑制し、炎症性サイトカインが関与する炎症性疾患の治療薬及び炎症改善用飲食品組成物として有用である。ここで、ＩＬ−１等の炎症性サイトカインが関与する疾患としては、関節リウマチ、変形性関節症、炎症性腸疾患、敗血症、急性及び慢性骨髄性白血病、骨粗鬆症、生活習慣病等が挙げられる。
【００１５】
本発明の抗炎症剤は、経口投与、経皮投与、経腸投与、経静脈投与等によって投与できるが、経口投与がより好ましい。経口投与用の製剤としては、液剤、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤等が挙げられるが、液剤、錠剤が好ましく、液剤がより好ましい。
【００１６】
これらの経口投与製剤とするには、乳糖、マンニトール、トウモロコシデンプン、結晶セルロース等の賦形剤、セルロース誘導体、アラビアゴム、ゼラチン等の結合剤、カルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、非イオン界面活性剤等の溶解補助剤、矯味剤、甘味剤、安定化剤、pH調整剤、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン等を使用することができる。また、ヒドロキシメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、セルロースアセテートフタレート、メタクリレートコポリマー等の被覆剤を用いてもよい。
【００１７】
また、本発明の抗炎症剤には、他の有効成分を配合することもできる。他の有効成分としては、ビタミンＢ1類；チアミン、硝酸チアミン、塩酸チアミン、フルスルチアミン、ビスベンチアミン、ベンホチアミン、チアミンジスルフィド、ジセチアミン、チアミンプロピルジスルフィド及びこれらの誘導体、ビタミンＢ2類；リボフラビン及び誘導体並びにそれらの塩、ビタミンＢ3類；ナイアシン、ニコチン酸、ニコチン酸アミド及び誘導体並びにそれらの塩、ビタミンＢ5類；パンテノール、パントテン酸及び誘導体並びにそれらの塩、ビタミンＢ6類；ピリドキシン及び誘導体並びにそれらの塩、ビタミンＢ12類；シアノコバラミン及び誘導体並びにそれらの塩、その他のビタミン類；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＰ、ジクロロ酢酸ジイソプロピルアミン、タウリン、コンドロイチン硫酸、ローヤルゼリー、カフェイン、ウコン、マリアアザミ、タンポポ、セイヨウタンポポ、ゴボウ、ニンニク、キク、西洋ノコギリソウ、クチナシ、ゴマ、田七ニンジン、アスパラガス、タマネギ、チコリ、薬用サルビア、朝鮮アザミ（アーティチョーク）、クコ、マメ科・アヤメ科の植物、ミヤマウズラ、エルバ・デ・パサリーニョ、セテサングリア、アカメガシワ、紅茶、レスベラトロール、カテキン類、ベルベリン、ローズマリー、豆エキス、メトホルミン、ブロメライン、アルギニン、ブラックコホシュ、アイブライト、プロポリス、サメナンコツ、ニガハッカ、アルファルファ、アストラガルス、ベラドンナ、キバナアザミ、マリーゴールド、カモミール、デビルズクロウ、トウキ、エキナセア、エルダー、ユーカリ油、ナツシロギク、ショウガ、朝鮮ニンジン、ゴールデンシール、ツボクサ、ホップ、カバ、ラベンダー、カンゾウ、ノコギリヤシ、スピルリナ、セイヨウオトギリソウ、ティーツリー油、セイヨウカノコソウ、ワイルドヤム等が挙げられる。
【００１８】
また、本発明の抗炎症剤は、安全性も高く経口投与可能であることから、医薬品の外、医薬部外品、保健機能食品、スポーツ飲料、リハビリ用飲料、ペットフード等の機能性食品等の食品組成物としても使用可能である。
【００１９】
本発明の抗炎症剤における肝臓水解物の含有量は、投与形態によっても異なるが、通常、乾燥重量として０．００１〜１０質量％が好ましく、０．００１〜５質量％がより好ましい。また、本発明の抗炎症剤における肝臓水解物の１日投与量は、乾燥重量として１００mg〜１０７６mgが好ましく、３８３mg〜６２３mgがより好ましく、３５１mg〜６８０mgがさらに好ましい。
【実施例】
【００２０】
次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明は何らこれに限定されるものではない。【００２１】
製造例１
分子量３０００で分画が可能な限外濾過膜（ＭＩＣＲＯＣＯＮ(登録商標)Centrifugal Devices YM-3）のフィルター部分をリン酸バッファー（ＰＢＳ）で予洗いする。１００mg／mLの肝臓水解物（ゼリア新薬工業製）ストックをＰＢＳで１２mg／mLに希釈後、サンプルの一部を細胞添加用として保存しておく（分画前サンプル）。希釈した１２mg／mLのサンプル５００μＬを限外濾過膜に分注し、１２０００rpm，４℃，２６０minで遠心を行い、濾液分画（肝臓水解物低分子画分：under Molecular Weight 3000：uMW3k）を回収した。【００２２】
試験例１
ＲＡＷ２６４．７細胞の細胞数を１．５×１０6cells／dishに調整して播種し一晩培養した。分画前サンプル又は濾液分画を共にＥＭＥＭ培地で２０倍希釈した（終濃度約０．６mg／mL）。コントロールにはサンプルの代わりにＰＢＳをＥＭＥＭ培地で２０倍希釈した。培地で希釈した上記の各サンプル（コントロール・分画前・濾液分画）を各ｄｉｓｈ群に添加した。２４時間培養後、リポポリサッカライド（ＬＰＳ）が終濃度１．０μｇ／mLとなるように添加した。３時間静置し、ＲＮＡを回収し、逆転写反応によるｃＤＮＡ合成を行った。次いで、ＲＴ−ＲＣＲによるＥＥＦ１Ａ１、ＩＬ−１βの測定を行った。【００２３】
その結果を図１に示す。
ＬＰＳ刺激したＲＡＷ細胞において、肝臓水解物群と肝臓水解物のかわりにＰＢＳを添加したＣｏｎｔ群間で炎症関連遺伝子のｍＲＮＡ発現量を比較したところ、ＩＬ−１βは有意に低下し、肝臓水解物（ＰＬＨ：分画前）の炎症抑制効果が示唆された。また肝臓水解物低分子画分（ｕＭＷ３ｋ）群でも同様に、ＩＬ−１βのｍＲＮＡ発現量の有意な低下が見られた。
以上の結果から、肝臓水解物は抗炎症効果を有しており、肝臓水解物中の分子量３０００以下の低分子画分に抗炎症効果を示す生理活性物質が存在していることが示唆された。
【図１】
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【国際調査報告】
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