(57)【要約】【課題】キラーＴ細胞に対しての新規の観点での測定装置及び測定方法を提供する。【解決手段】血液による測定装置は、血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつキラーＴ細胞となった第１の割合を測定するキラーＴ細胞測定工程と、同じ血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつＰＤ１因子を発現したキラーＴ細胞の第２の割合を測定するＰＤ１キラー細胞検出工程と、に応じて測定結果を出力する。【選択図】図６
2019069449.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつキラーＴ細胞となった第１の割合を測定するキラーＴ細胞測定工程と、
同じ血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつＰＤ１因子を発現したキラーＴ細胞の第２の割合を測定するＰＤ１キラー細胞検出工程と、
に応じて測定結果を出力する
血液による測定装置。
【請求項２】
前記第１の割合の閾値は、３０％〜６０％の範囲である
請求項１に記載の測定装置。
【請求項３】
前記第１の割合の閾値は、４６．４％である
請求項２に記載の測定装置。
【請求項４】
前記第２の割合の閾値は、２％〜１２％の範囲である
請求項１〜３いずれか１項に記載の測定装置。
【請求項５】
前記第２の割合の閾値は、６．７６％である
請求項４に記載の測定装置。
【請求項６】
血液中から、ＣＤ８因子を発現したＴ細胞だけを抽出する工程を含む
請求項１〜５いずれか１項に記載の測定装置。
【請求項７】
血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつキラーＴ細胞となった第１の割合を測定するキラーＴ細胞測定工程と
同じ血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつＰＤ１因子を発現したキラーＴ細胞の第２の割合を測定するＰＤ１キラー細胞測定工程と、
に応じて測定結果を出力する出力工程を有する測定方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液を測定する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
キラーＴ細胞が免疫作用を奏しているということは知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１４−２１５２１０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、キラーＴ細胞に対しての新規の観点での測定方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の血液による測定装置は、血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつキラーＴ細胞となった第１の割合を測定するキラーＴ細胞測定工程と、同じ血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつＰＤ１因子を発現したキラーＴ細胞の第２の割合を測定するＰＤ１キラー細胞検出工程と、に応じて測定結果を出力する。【０００６】
好適には、前記第１の割合の閾値は、３０％〜６０％の範囲である。【０００７】
好適には、前記第１の割合の閾値は、４６．４％である。【０００８】
好適には、前記第２の割合の閾値は、２％〜１２％の範囲である。【０００９】
好適には、前記第２の割合の閾値は、６．７６％である。【００１０】
好適には、血液中から、ＣＤ８因子を発現したＴ細胞だけを抽出する工程を含む。【００１１】
本発明の血液による測定方法は、血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつキラーＴ細胞となった第１の割合を測定するキラーＴ細胞測定工程と、同じ血液中のＣＤ８因子を発現したＴ細胞中、ＣＤ８因子を発現しかつＰＤ１因子を発現したキラーＴ細胞の第２の割合を測定するＰＤ１キラー細胞測定工程と、に応じて測定結果を出力する出力工程を有する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、キラーＴ細胞に対しての新規の観点での測定装置及び測定方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の測定装置１の説明図である。
【図２】測定装置１の原理の説明図である。
【図３】測定方法の説明図である。
【図４】第１の割合の違いによる生存率の説明図である。
【図５】第２の割合の違いによる生存率の説明図である。
【図６】以上の４象限に表した説明図である。
【図７】、アルツハイマー病マウスに対する測定結果である。
【図８】免疫力が老化した人に対する測定結果である。
【図９】健康成人に対する測定結果である。
【図１０】高濃度の水素ガス（Ｈ２）を末期癌患者に吸引させた結果の説明図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
図１は、本発明の測定装置１の説明図である。
【００１５】
図１の様に、測定装置１は、人体（例えば、患者）から抽出した血液を装置内に取り込む血液搬入口２と、当該血液に後述する各種の測定、判断をした結果を出力する出力部３を有している。
【００１６】
図２は、測定装置１の原理の説明図である。
【００１７】
図２のように、血液中には（１）の様な樹状細胞が含まれている。
この（１）樹状細胞が、各種の刺激・指令・時間経過等によって、（２）のようなＴ細胞に一部変化する。
さらに、この（２）の様なＴ細胞は、各種の刺激・指令・時間経過等によって、（３）のようなＣＤ８因子を発現させたキラーＴ細胞（以下、「ＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞」という。）に変化する。なお、この際の各種の刺激の代表例が、病原菌・ウィルスの侵入及び癌の発生である。
この（３）のようなＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞は、病原菌・ウィルス及び癌細胞を攻撃する作用を奏している。
その結果、ＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞の割合が高ければ、大きな免疫力が働いていると一概にいえるのではないかと推測されていた。
【００１８】
それに対して、発明者は単にＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞の割合が高くても、ＰＤ１因子が発現したＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞（以下、「ＰＤ−１−Ｋｉｌｌｅｒ−Ｔ細胞」という）の割合によって、大きな影響があるのではないかとの推理のもと、以下のような臨床的結果を得た。
【００１９】
図３は、測定方法の説明図である。
【００２０】
人体から採取された血液の状態の説明図が（１）の状態である。
この血液中には、樹状細胞、Ｔ細胞、ＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞、ＰＤ−１−Ｋｉｌｌｅｒ−Ｔ細胞、その他の多くの細胞等が含まれている。
その血液を、図１の測定装置１のむ血液搬入口２に搬入する。そして、その後、パックスキャンという方法によって、Ｔ細胞、ＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞、ＰＤ−１−Ｋｉｌｌｅｒ−Ｔ細胞のみを選別する。
そのうえで、Ｔ細胞、ＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞、ＰＤ−１−Ｋｉｌｌｅｒ−Ｔ細胞の数を測定する。
より具体的には、Ｔ細胞、ＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞及びＰＤ−１−Ｋｉｌｌｅｒ−Ｔ細胞全体の数から、ＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞の個数の割合（以下、第１の割合）を測定・算出する。
同様にして、Ｔ細胞、ＣＤ８＋ＫｉｌｌｅｒＴ細胞及びＰＤ−１−Ｋｉｌｌｅｒ−Ｔ細胞全体の数から、ＰＤ−１−Ｋｉｌｌｅｒ−Ｔ細胞の個数の割合（以下、第２の割合）を測定・算出する。
【００２１】
図４は、第１の割合の違いによる生存率の説明図である。
【００２２】
複数の末期癌患者から、血液を抽出して、第１の割合を測定した。
第１の割合の閾値を４６．４％として、その閾値（第１の閾値）を超えた患者群との生存期間が、ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓ＞４６．４％の線である。
他方、第１の割合の閾値を４６．４％として、その閾値（第１の閾値）未満の患者群との生存期間が、ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓ＜４６．４％の線である。
生存割合が全く異なることが分かる。
具体的には、ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓ＞４６．４％の線では、約２０日前後で、生存率が約７５％程度に落ちるが、その後は安定していることが分かる。
他方、ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓ＜４６．４％の線では、約２２日前後で、生存率は１０％程度に落ちていることが分かる。
【００２３】
今回は、第１の閾値を４６．４％とした。その理由は、感度及び特異度が高かったため最適値として採用した。
今回は、第１の閾値を４６．４％としたが、この第１の閾値を変化させても４０％〜５０％の範囲であれば、ある程度適切に判断できると現在のところ判断している。
【００２４】
図５は、第２の割合の違いによる生存率の説明図である。
【００２５】
同様に複数の末期癌患者から、血液を抽出して、第２の割合を測定した。
第２の割合の閾値を６．７６％として、その閾値（第２の閾値）を超えた患者群の生存期間が、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓ＞６．７６％の線である。
他方、第２の割合の閾値を６．７６％として、その閾値（第２の閾値）未満の患者群の生存期間が、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓ＜６．７６％の線である。
生存割合が全く異なることが分かる。
具体的には、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓ＜６．７６％の線では、約１０日前後で、生存率が約９２％程度に落ちるが、その後は安定していることが分かる。
他方、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓ＞６．７６％％の線では、約３７日前後で、生存率はほぼ０％程度に落ちていることが分かる。
【００２６】
今回は、第２の閾値を６．７６％とした。その理由は、感度及び特異度が高かったため最適値として採用した。
今回は、第２の閾値を６．７６％としたが、この第２の閾値を変化させても４．５％〜１０％の範囲であれば、ある程度適切に判断できると現在のところ判断している。
【００２７】
このような結果が出る理由を以下の様に推測している。
ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓの割合が多いと、がん細胞を攻撃する力が強いということができる。そのため、多い患者は生存率が高いと予想される。
他方、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓは、その様なＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓの中で、がん細胞等が出す物質によって、ＰＤ１因子が発現したためＫｉｌｌｅｒ  Ｔ細胞の機能が抑制されているものである。
このＰＤ１因子は、キラーＴ細胞中のミトコンドリア機能が低下すると発現するものである。キラーＴ細胞が本来の力を発揮できなくしている原因であると考えている。
【００２８】
従来、ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓとＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓの割合を別個独立に検討していた。
又は、ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓは単に多ければよい、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓは少なければよいと単純に考えていた。
しかしながら、発明者は、この２つの指標を別途独立に考えるのではなく、それぞれの数値で、４象限で考えるべきであることを発見した。
そして、どの象限にいるかによって、治療方針などを決定するべきであると考えている。
【００２９】
図６は、以上の４象限に表した説明図である。
【００３０】
図６の様に、ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓが第１の閾値を超え、かつ、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓが第２の閾値未満の象限をカテゴリー１（Ｃａｔ１）という。
ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓが第１の閾値を超え、かつ、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓが第２の閾値を超えている象限をカテゴリー２（Ｃａｔ２）という。
ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓが第１の閾値未満であり、かつ、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓが第２の閾値未満の象限をカテゴリー３（Ｃａｔ３）という。
ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓが第１の閾値未満であり、かつ、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓが第２の閾値を超えている象限をカテゴリー４（Ｃａｔ４）という。
【００３１】
そして、検討した結果、キラーＴ細胞が多く、かつ、ＰＤ１因子を発現している弱ったＴ細胞が少ない、カテゴリー１（Ｃａｔ１）の患者については、あらゆる治療方法が効果を有することを発見した。
他方、たとえ、キラーＴ細胞が多くても、ＰＤ１因子を発現して弱ったキラーＴ細胞が多い、カテゴリー２（Ｃａｔ２）の患者については、放射線療法などの両方よりもまずは免疫力回復させる（＝ＰＤ１因子の発現をなくす）免疫抑制解除をすることが必要であることになる。そしてその治療によって、カテゴリー１（Ｃａｔ１）に移行させる治療をおこなうという判断の基準となる。
このようなカテゴリー２（Ｃａｔ２）の患者については、オブジーボ（登録商標、以下、「がんの治療薬」という）の投与などが有効な治療方法と判断することも可能である。
【００３２】
キラーＴ細胞自体が少なく、かつ、弱ったＰＤ１因子を発現しているＴ細胞が少ない、カテゴリー３（Ｃａｔ３）の患者については、キラーＴ細胞自体を増やす、免疫賦活の治療が必要となると判断することが可能である。
他方、キラーＴ細胞が少なく、かつ、ＰＤ１因子を発現して弱ったキラーＴ細胞が多い、カテゴリー４（Ｃａｔ４）の患者については、極めて難しい治療方針とならざるを得ない。
【００３３】
以上の様なカテゴリー分類により、癌患者の予後や治療効果予測、治療法の選択、治療予測などを行うことが可能と考えられる。このカテゴリー分類が本発明の方法である。
【００３４】
図７は、アルツハイマー病マウスに対する測定結果である。
【００３５】
アルツハイマー病が発現していると、カテゴリー２（Ｃａｔ２）とカテゴリー４（Ｃａｔ４）が大多数であることが分かる。
このように、このような測定方法（象限を分ける方法）は、アルツハイマー病の発見についても有効であると推測される。
【００３６】
図８は、免疫力が老化した人に対する測定結果である。
【００３７】
免疫力が老化した場合には、カテゴリー２（Ｃａｔ２）とカテゴリー４（Ｃａｔ４）が大多数であることが分かる。
このように、このような測定方法（象限を分ける方法）は、免疫力老化の指標にもなりうることが推測される。
【００３８】
図９は、健康成人に対する測定結果である。
【００３９】
健康成人は、攻撃対象がいないため、キラーＴ細胞は見られない。その結果、カテゴリー３（Ｃａｔ３）とカテゴリー４（Ｃａｔ４）が大多数であることが分かる。
この結果と、図７及び図８との比較からも、この方法が、所定の病気や状態の判断材料として有望であることが分かる。
以上の、アルツハイマー、免疫力老化などは、測定可能な一部に過ぎない。
いろいろな病気や人の様々な状態を表す指標として有効であると考えている。
例えば、自己免疫性疾患の潰瘍性大腸炎、クローン病、アトピー性皮膚炎等の指標となりえる。
【００４０】
図１０は、高濃度の水素ガス（Ｈ２）を末期癌患者に吸引させた結果の説明図である。
【００４１】
図１０のように、３５人の患者に水素ガス吸入をさせた結果、２２例において、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓの低下がみられた。
そして、この、ＰＤ−１（＋）ＫｉｌｌｅｒＴｃｅｌｌｓの低下した症例２２例中１８例(８２%)で予後良好であった。
これによって、高濃度のＨ２吸引は治療に何らかの効果があり得ることが示唆された。
【００４２】
以上では、４つの領域に分割したが、さらに研究が進めば、例えば、６分割、９分割、１２分割などして病気や人の様々な状態を表す指標とすることも可能である。
【符号の説明】
【００４３】
１    ：測定装置
２    ：血液搬入口
３    ：出力部
【図１】
2019069449.tif 000003
【図２】
2019069449.tif 000004
【図３】
2019069449.tif 000005
【図４】
2019069449.tif 000006
【図５】
2019069449.tif 000007
【図６】
2019069449.tif 000008
【図７】
2019069449.tif 000009
【図８】
2019069449.tif 000010
【図９】
2019069449.tif 000011
【図１０】
2019069449.tif 000012
【国際調査報告】
2019069449.tif 000013
2019069449.tif 000014
2019069449.tif 000015
2019069449.tif 000016