(57)【要約】  本発明は、癌を患っているヒト患者において、ＥＧＦＲ阻害剤に対する癌細胞の耐性を判定する方法であって、上記ヒト患者から採取された上記癌細胞を含むサンプルを用いて、上記癌細胞のＢ−Ｒａｆタンパク質のアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基の変異の有無を決定する工程を有し、上記アミノ酸残基の変異がある場合に、上記癌細胞はＥＧＦＲ阻害剤に対して耐性であると判定する、方法を提供する。かかる方法によれば、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者をあらかじめ選別することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌を患っているヒト患者において、上皮性細胞成長因子受容体阻害剤に対する癌細胞の耐性を判定する方法であって、
前記ヒト患者から採取された前記癌細胞を含むサンプルを用いて、前記癌細胞のＢ−Ｒａｆタンパク質のアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基の変異の有無を決定する工程を有し、
前記アミノ酸残基の変異がある場合に、前記癌細胞は前記上皮性細胞成長因子受容体阻害剤に対して耐性であると判定する、方法。
【請求項２】
前記上皮性細胞成長因子受容体阻害剤が抗上皮性細胞成長因子受容体抗体薬である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アミノ酸残基の変異の有無の決定が、Ｂ−Ｒａｆタンパク質のアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基をコードする塩基配列の変異の検出を含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記塩基配列の変異の検出が、ＤＮＡシーケンシング、ポリメラーゼ連鎖反応、対立遺伝子特異的増幅、対立遺伝子特異的プローブでのハイブリダイゼーション、ミスマッチ切断解析、単鎖高次構造多型、変性勾配ゲル電気泳動又は温度勾配ゲル電気泳動により行われる、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記サンプルが、癌切除組織検体、生検検体、腹水浸潤癌細胞、血液循環癌細胞、血清又は血漿である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記癌が、大腸癌又は直腸癌である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記アミノ酸残基の変異がＩ３２６Ｖである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記塩基配列の変異がｃ．９７６Ａ＞Ｇである、請求項３又は４に記載の方法。
【請求項９】
前記癌細胞が野生型のＫＲＡＳ遺伝子を有する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌を患っているヒト患者において、上皮性細胞成長因子受容体阻害剤（以下、「ＥＧＦＲ阻害剤」という。）に対する癌細胞の耐性を判定する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌の治療薬として、ＥＧＦＲ阻害剤、例えばセツキシマブ及びパニツムマブ等の抗上皮性細胞成長因子受容体抗体薬（抗ＥＧＦＲ抗体薬）が知られている。これらＥＧＦＲ阻害剤は、癌細胞において、癌細胞の増殖に関与する上皮性細胞成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の働きを阻害する作用を有する。【０００３】
一方、癌患者の癌細胞がＫＲＡＳ遺伝子に変異を有する場合、癌細胞はＥＧＦＲ阻害剤に対して抵抗性を示すため、ＥＧＦＲ阻害剤の効果が低下することが知られている。ＥＧＦＲ阻害剤は皮膚障害などの副作用を有するため、ＥＧＦＲ阻害剤の投与によって高い治療効果が認められる癌患者にのみＥＧＦＲ阻害剤を投与することが好ましい。患者にとってＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効であるか否かを判別する方法として、患者の癌細胞のＫＲＡＳ遺伝子における変異の有無を調べる方法が知られている。【０００４】
例えば、特許文献１には、血液サンプル中に変異型のＫＲＡＳ遺伝子由来核酸又はそのタンパク質が検出された場合に、腫瘍がＥＧＦＲ阻害剤感受性ではない可能性が高いと判定するＥＧＦＲ阻害剤感受性予測方法が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１４／１４８５５７号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明者らは、癌細胞が野生型のＫＲＡＳ遺伝子を有する癌患者であっても、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない場合があることを見出した。【０００７】
本発明は上記課題に鑑みてなされたものであり、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者をあらかじめ選別することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、癌を患っているヒト患者において、ＥＧＦＲ阻害剤に対する癌細胞の耐性を判定する方法であって、上記ヒト患者から採取された上記癌細胞を含むサンプルを用いて、上記癌細胞のＢ−Ｒａｆタンパク質（以下、単に「Ｂ−Ｒａｆ」ともいう。）のアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基の変異の有無を決定する工程を有し、上記アミノ酸残基の変異がある場合に、上記癌細胞はＥＧＦＲ阻害剤に対して耐性であると判定する、方法である。【０００９】
本方法によれば、癌細胞のＢ−Ｒａｆのアミノ酸配列における、第３２６番目のアミノ酸残基という特定のアミノ酸残基の変異の有無を決定することによって、ＥＧＦＲ阻害剤に対する癌細胞の耐性を判定できるため、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者をあらかじめ選別することができる。【００１０】
上記ＥＧＦＲ阻害剤は抗上皮性細胞成長因子受容体抗体薬であってもよい。【００１１】
上記アミノ酸残基の変異の有無の決定は、Ｂ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基をコードする塩基配列の変異の検出を含んでいてもよい。【００１２】
上塩基配列の変異の検出は、ＤＮＡシーケンシング、ポリメラーゼ連鎖反応、対立遺伝子特異的増幅、対立遺伝子特異的プローブでのハイブリダイゼーション、ミスマッチ切断解析、単鎖高次構造多型、変性勾配ゲル電気泳動又は温度勾配ゲル電気泳動により行ってもよい。【００１３】
上記サンプルは、癌切除組織検体、生検検体、腹水浸潤癌細胞、血液循環癌細胞、血清又は血漿であってもよい。サンプルがこれらのサンプルであると、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。【００１４】
上記癌は、大腸癌又は直腸癌であることができる。癌が大腸癌又は直腸癌であると、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。【００１５】
上記アミノ酸残基の変異はＩ３２６Ｖであってもよい。変異がＩ３２６Ｖであると、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。【００１６】
上記塩基配列の変異はｃ．９７６Ａ＞Ｇであってもよい。変異がｃ．９７６Ａ＞Ｇであると、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。【００１７】
上記癌細胞は、野生型のＫＲＡＳ遺伝子を有することが好ましい。癌細胞が野生型のＫＲＡＳ遺伝子を有することで、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者をあらかじめ選別することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】実施例の結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下、本発明を実施するための形態について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の実施形態に限定されるものではない。
【００２１】
一態様では、本発明は、癌を患っているヒト患者（以下、「癌患者」ともいう。）において、ＥＧＦＲ阻害剤に対する癌細胞の耐性を判定する方法である。本態様に係る方法は、ヒト患者から採取された癌細胞を含むサンプルを用いて、癌細胞のＢ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基の変異の有無を決定する工程を有する。
【００２２】
本発明に係る方法を利用可能な癌としては、例えば、大腸癌、直腸癌、結腸癌、胃癌、肝臓癌、甲状腺癌、子宮癌、腎臓癌、すい臓がん、舌癌、前立腺癌、肺癌、皮膚癌、卵巣癌、胆嚢癌、頭頸部癌、精巣腫瘍、副腎癌、口腔癌、骨軟部腫瘍、脳腫瘍、悪性黒色腫、骨肉腫、軟骨肉腫、横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、白血病、悪性リンパ腫、及び、多発性骨髄腫が挙げられる。これらの中でも、癌が大腸癌又は直腸癌である場合、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。
【００２３】
本明細書における「ＥＧＦＲ阻害剤」は、ＥＧＦＲの発現又は活性を阻害する薬剤であれば特に制限されず、ゲフィチニブ、エルロチニブ等のＥＧＦＲを標的とする低分子化合物、抗ＥＧＦＲ抗体薬、ＥＧＦＲに対するアンチセンスオリゴヌクレオチド、アプタマー等のいずれであってもよい。抗ＥＧＦＲ抗体薬は、例えば、上皮性細胞成長因子（ＥＧＦ）とＥＧＦＲとの結合を阻害する抗体である。抗ＥＧＦＲ抗体薬としては、例えば、ＥＧＦＲの細胞外ドメインをエピトープとするモノクローナル抗体が挙げられる。抗ＥＧＦＲ抗体薬の具体例としては、セツキシマブ及びパニツムマブが挙げられる。ＥＧＦＲ阻害剤は、単独で使用されてもよく、複数のＥＧＦＲ阻害剤が併用されてもよい。
【００２４】
なお、本明細書における「抗体」は、ふたつの完全な軽鎖とふたつの完全な重鎖とを有する抗体分子だけでなく、抗原に結合することができる抗体断片も含む。抗体断片としては、例えば、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆａｂ及びＦｖが挙げられる。抗体としては、キメラ抗体、ヒト化抗体又は完全ヒト抗体のいずれかであることが好ましい。
【００２５】
また、本実施形態に係る方法は、ＥＧＦＲ阻害剤と他の抗癌剤とを併用する治療に対する癌細胞の耐性を判定する場合にも有効である。ＥＧＦＲ阻害剤と他の抗癌剤とを併用する治療としては、例えば、ＣＰＴ−１１＋Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ療法、ＩＲＩＳ＋Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ療法、ＦＯＬＦＯＸ（例えば、ｍＦＯＬＦＯＸ６）＋Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ療法、ＦＯＬＦＩＲＩ＋Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ療法、ＣＰＴ−１１＋Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ療法、ＩＲＩＳ＋Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ療法、ＦＯＬＦＯＸ（例えば、ｍＦＯＬＦＯＸ６）＋Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ療法、ＦＯＬＦＩＲＩ＋Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ療法、及びｓＬＶ５ＦＵ２＋Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ療法が挙げられる。
【００２６】
癌細胞を含むサンプルとしては、例えば、癌切除組織検体、生検検体、腹水浸潤癌細胞、血液循環癌細胞、血清、血漿、血液、糞便、尿、痰、髄液、胸腔内液、乳頭吸引液、リンパ液、細胞培養液、並びに、患者から採取されたその他の組織及び液体が挙げられる。ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者をより高い確実性で選別する観点から、癌細胞を含むサンプルは、癌切除組織検体、生検検体、腹水浸潤癌細胞、血液循環癌細胞、血清、又は血漿であることが好ましく、癌切除組織検体又は生検検体であることがより好ましい。また、癌細胞を含むサンプルが癌切除組織検体又は生検検体である場合、これらの検体は、凍結、アルコール固定、ホルマリン固定、パラフィン包理、又は、これらの処理を組み合わせた処理がされていてもよい。
【００２７】
本明細書において、「アミノ酸残基の変異」とは、タンパク質のアミノ酸配列中の特定のアミノ酸残基が、対応する野生型のアミノ酸配列中のアミノ酸残基とは異なるアミノ酸残基に置換されていることを意味する。例えば、配列番号１で示される野生型のＢ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基はイソロイシンであり、これがイソロイシン以外のアミノ酸残基に置換されていることを変異という。
【００２８】
Ｂ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基の変異は、イソロイシンが、フェニルアラニン、トレオニン、アスパラギン酸、リジン、セリン、アルギニン、メチオニン、グリシン、アラニン、バリン又はロイシンへ置換されたものであってもよい。アミノ酸残基の変異がこれらの変異である場合、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。中でも、変異が、イソロイシンからバリンへと置換された変異（Ｉ３２６Ｖ）である場合、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。
【００２９】
上記アミノ酸残基の変異の有無の決定は、公知の方法により行うことができる。変異の有無の決定は、例えば、Ｂ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基をコードする塩基配列の変異の検出を含んでいてもよい。
【００３０】
本明細書において、「塩基配列の変異」とは、該塩基配列がコードするアミノ酸残基が、対応する野生型の塩基配列がコードするアミノ酸残基とは異なるように、塩基配列中の塩基の少なくとも一部が他の塩基に置換されていることを意味する（「ミスセンス変異」ともいう。）
【００３１】
Ｂ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基をコードする塩基配列の変異は、該塩基配列によってコードされるアミノ酸残基が、イソロイシンから、フェニルアラニン、トレオニン、アスパラギン酸、リジン、セリン、アルギニン、メチオニン、グリシン、アラニン、バリン又はロイシンへと変化したものであってもよい。塩基配列の変異がこれらの変異である場合、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。中でも、上記塩基配列の変異が、イソロイシンをコードする塩基配列からバリンをコードする塩基配列へと変異したもの（ｃ．９７６Ａ＞Ｇ）である場合、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない癌患者を、より高い確実性で選別することができる。
【００３２】
塩基配列の変異の検出は、公知の方法により行うことができる。塩基配列の変異の検出は、例えば、ＤＮＡシーケンシング、ポリメラーゼ連鎖反応、対立遺伝子特異的増幅、対立遺伝子特異的プローブでのハイブリダイゼーション、ミスマッチ切断解析、単鎖高次構造多型、変性勾配ゲル電気泳動、又は、温度勾配ゲル電気泳動により行ってもよい。これらの技術は、単独で使用してもよく、複数の技術を組み合わせて使用してもよい。
【００３３】
癌細胞のＢ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基に変異がある場合、癌細胞がＥＧＦＲ阻害剤に対して耐性であると判定することができる。
【００３４】
癌細胞のＢ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基の変異の有無と、癌細胞のＥＧＦＲ阻害剤に対する耐性との間のメカニズムは定かではないが、本発明者らは、これらが少なくとも以下のような機構で関連していると推測している。Ｂ−Ｒａｆは、癌細胞の増殖に関与する細胞内増殖シグナル伝達経路において、ＥＧＦＲの下流に存在する活性化因子である。ＥＧＦＲ阻害剤は、ＥＧＦＲの働きを阻害することでＥＧＦＲの下流に増殖シグナルが伝達されることを阻害し、癌の進行を抑える効果を有する。しかし、癌細胞のＢ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基に変異があると、ＥＧＦＲ阻害剤によりＥＧＦＲから下流に増殖シグナルが伝達されなくても、Ｂ−Ｒａｆが活性化し、Ｂ−Ｒａｆの下流へと増殖シグナルが伝達される。したがって、このような癌細胞にＥＧＦＲ阻害剤を投与しても、癌の進行を抑える効果が発揮されないか、又は、発揮されにくいものと考えられる。
【００３５】
本発明は、癌を患っているヒト患者において、ＥＧＦＲ阻害剤に対する癌細胞の耐性を決定する方法であって、ヒト患者から採取された癌細胞を含むサンプルを用いて、癌細胞のＢ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基の変異の有無を決定する工程を有し、アミノ酸残基の変異があることが、癌細胞が抗ＥＧＲ抗体薬に対して耐性であることを示す、方法、ともいえる。
【００３６】
一実施態様では、癌患者から採取された癌細胞は、野生型のＫＲＡＳ遺伝子を有してもよい。癌患者の癌細胞が野生型のＫＲＡＳ遺伝子を有していても、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない場合がある。本実施態様によれば、癌細胞が野生型のＫＲＡＳ遺伝子を有する癌患者に対するＥＧＦＲ阻害剤の有効性を評価することで、ＥＧＦＲ阻害剤による不要な副作用を回避することができる。本明細書において、野生型のＫＲＡＳ遺伝子とは、ＥＧＦＲ阻害剤に対する耐性を癌細胞に与える変異がないＫＲＡＳ遺伝子を意味する。当該変異は、ＫＲＡＳタンパク質の第１２番目及び第１３番目のアミノ酸の種類に変化をもたらす遺伝子変異である。
【００３７】
一実施態様では、癌患者は、ＥＧＦＲ阻害剤の投薬治療を受けようとする、又は受けた患者であってよい。本実施態様によれば、ＥＧＦＲ阻害剤に耐性である癌細胞を有する患者に対してＥＧＦＲ阻害剤の投薬治療を行うことを回避する、又は投与量を減少させることができる。これによって、ＥＧＦＲ阻害剤による副作用を回避または減少させることができる。
【００３８】
一実施態様では、癌患者から採取された癌細胞は、野生型のＫＲＡＳ遺伝子を有し、かつ野生型のＮＲＡＳ遺伝子を有してもよい。一般的に、癌細胞が野生型のＫＲＡＳ遺伝子を有し、かつ野生型のＮＲＡＳ遺伝子を有する癌患者には、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効であると考えられているが、このような患者のうちにも、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が有効でない患者がいる。本実施態様によれば、このような癌患者の中から、ＥＧＦＲ阻害剤が有効でない患者を判別することが出来る。本明細書において野生型のＮＲＡＳ遺伝子とは、ＥＧＦＲ阻害剤に対する耐性を癌細胞に与える変異がないＮＲＡＳ遺伝子を意味する。当該変異は、例えば、ＮＲＡＳタンパク質の第１２番目、第１３番目、第５９番目、第６１番目、第１１７番目又は第１４６番目のアミノ酸の種類に変化をもたらす遺伝子変異である。
【００３９】
一態様では、本発明は、癌の予後を判定する方法であり、すなわち、癌を患っているヒト患者から採取された癌細胞を含むサンプルを用いて、癌細胞のＢ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基の変異の有無を決定し、アミノ酸残基の変異がある場合に、予後不良と判定する方法である。
【００４０】
以上、本発明の特定の実施形態について詳細に説明したが、本発明は上記実施形態に限定されない。
【実施例】
【００４１】
以下、実施例に基づき発明を具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。【００４２】
（ＢＲＡＦ遺伝子における変異検出）
ＫＲＡＳタンパク質の第１２番目及び第１３番目のアミノ酸のコドンに変異のない大腸癌の患者に対して、Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ又はＣｅｔｕｘｉｍａｂを用いた療法（表１に示す）による治療を行った。患者の癌切除検体ホルマリン固定パラフィン包理検体を作製し、これを薄切して厚さ２０μｍの切片を２つ作製した。作製した２枚の切片をスライドガラスに貼付したものをＤＮＡ抽出用のサンプルとした。別途、厚さ４μｍの切片を作製し、作製した切片をスライドガラスに貼付したものを顕微鏡観察用のサンプルとした。患者２６人分（患者Ａ〜Ｚ）のサンプルを作製し、それぞれの患者のサンプルについて、以下のようにしてＢＲＡＦ遺伝子の塩基配列における変異を検出した。【００４３】
【表１】
2017187937.tif 000002
【００４４】
顕微鏡観察用のサンプルをヘマトキシリンエオジンで染色した。染色後のサンプルを顕微鏡で観察し、切片中、癌細胞を多く含む部位を特定した。ＤＮＡ抽出用のサンプルから、顕微鏡観察用のサンプルで特定した部位を剃刀で削り取り、削り取った部位からＤＮＡを抽出した。ＤＮＡの抽出は、ＢｉＯｓｔｉｃ  ＦＦＰＥ  Ｔｉｓｓｕｅ  ＤＮＡ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（商品名）を用いて行った。【００４５】
プローブとして、ＢＲＡＦ遺伝子の１８つのエキソン配列それぞれにおける連続した一部又は全部の配列（１００〜１３０塩基）、又はこれらの相補配列を含むプローブ核酸を用いて、検体のＤＮＡからＢＲＡＦ遺伝子を分離した。イルミナ社のＭｉＳｅｑシーケンサーによりＢＲＡＦ遺伝子の塩基配列を分析し、ＢＲＡＦ遺伝子の塩基配列における変異を検出した。【００４６】
患者Ａについては、ＢＲＡＦ遺伝子の塩基配列において、Ｂ−Ｒａｆのアミノ酸配列にＩ３２６Ｖの変異をもたらす変異（ｃ．９７６Ａ＞Ｇ）が検出された。患者Ｆ、Ｋ、Ｏ、及びＵについては、ＢＲＡＦ遺伝子の塩基配列において、Ｂ−Ｒａｆのアミノ酸配列に、それぞれ、Ｄ２２Ｎ、Ｖ６００Ｅ、Ｎ５８１Ｙ、Ｖ６００Ｅの変異をもたらす変異が検出された。その他の患者については、ＢＲＡＦ遺伝子の塩基配列において、Ｂ−Ｒａｆのアミノ酸配列に変異をもたらす変異が検出されなかった。【００４７】
（抗ＥＧＦＲ抗体薬による治療の効果）
患者Ａ〜Ｚについて、下式のように癌縮小インデックス（％）を算出した。【００４８】
癌縮小インデックス（％）＝（治療後の原発巣の直径＋治療後の転移巣の直径）／（治療前の原発巣の直径＋治療前の転移巣の直径）×１００−１００【００４９】
患者Ａ〜Ｚにおける、ＢＲＡＦ遺伝子の変異の有無と抗ＥＧＦＲ抗体薬による治療の効果との関係を図１及び表１、表２に示す。
【表２】
2017187937.tif 000003
【００５０】
図１及び表１、表２に示されるように、ＢＲＡＦ遺伝子の塩基配列において、Ｂ−Ｒａｆのアミノ酸配列の第３２６番目のアミノ酸残基に変異をもたらす変異が検出された患者Ａにおいては、癌の進行が認められ、患者Ａの癌細胞は抗ＥＧＦＲ抗体薬に対して耐性を有していた。
【図１】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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