(57)【要約】【課題】  良好な自己集合機能を発現する新規な温度応答性化合物を提供すること【解決手段】  下記式（１）で表される温度応答性化合物。【化１】2017154991.tif 000041［式中、  Ｒは、それぞれ独立して、下記式（２）又は式（３）：【化２】2017154991.tif 000042（式中、※は結合位置を表し、ａは１乃至２０を表し、ｂは１乃至２０を表し、ｃは１乃至２０を表し、ｄは１乃至２０を表し、ｅは１乃至２０を表す。）で表される基を表し、  Ａは単結合を表すか、又は下記式（４）、式（５）若しくは式（６）：【化３】2017154991.tif 000043（式中、※は結合位置を表し、ｆは１乃至２０を表し、ｇは１乃至２０を表し、ｈは１乃至２０を表し、ｉは１乃至２０を表し、ｍは０乃至１０を表し、ｎは０乃至１０表す。）で表される基を表し、  Ｘは、機能性官能基を表す。］【選択図】なし
2017154991.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）で表される温度応答性化合物。
【化１】
2017154991.tif 000037
［式中、
Ｒは、それぞれ独立して、下記式（２）又は式（３）：
【化２】
2017154991.tif 000038
（式中、※は結合位置を表し、ａは１乃至２０を表し、ｂは１乃至２０を表し、ｃは１乃至２０を表し、ｄは１乃至２０を表し、ｅは１乃至２０を表す。）で表される基を表し、
Ａは単結合を表すか、又は下記式（４）、式（５）若しくは式（６）：
【化３】
2017154991.tif 000039
（式中、※は結合位置を表し、ｆは１乃至２０を表し、ｇは１乃至２０を表し、ｈは１乃至２０を表し、ｉは１乃至２０を表し、ｍは０乃至１０を表し、ｎは０乃至１０表す。）で表される基を表し、
Ｘは、機能性官能基を表す。］
【請求項２】
前記機能性官能基がキノリン構造を有する化合物から誘導される基、常磁性金属と配位子とからなるキレート錯体から誘導される基、及び有機ラジカル構造を分子内に有する化合物から誘導される基からなる群から選ばれる少なくとも１つの基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記Ａが単結合又は上記式（６）で表される基を表す、請求項１又は請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
前記機能性官能基が下記式（Ｘ１）乃至式（Ｘ６）で表される基からなる群から選ばれる少なくとも１つの基である、請求項１乃至請求項３のいずれか１項に記載の化合物。
【化４】
2017154991.tif 000040
（式中、※は結合位置を表し、ｋは０乃至２０を表し、ｌは０乃至２０を表す。）
【請求項５】
請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載の化合物を含む医療用材料。
【請求項６】
請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載の化合物を含むＭＲＩ造影剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、温度応答性化合物に関し、詳細には、温度応答性の新規な低分子化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、材料科学の分野では、光、熱、ｐＨ、磁場及び電気的刺激等の環境変化を感知して、それ自体が有する機能をコントロールするような刺激応答性化合物の研究開発が盛んに行われている。その中でも、低温では親水性で水によく溶解するが、ある温度以上になると疎水性となって水に溶解し難くなる現象（相転移現象）を示す温度応答性化合物は、薬物送達システム（ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍ：ＤＤＳ）や医療用材料等への応用が期待されている。【０００３】
しかしながら、温度応答性能を示す化合物の大多数は高分子化合物であり、代表的なものとして、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）（ＰＮＩＰＡＡｍ）（非特許文献１）やエラスチン様ポリペプチド（ｅｌａｓｔｉｎ−ｌｉｋｅ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓ：ＥＬＰｓ）（非特許文献２）等の高分子化合物が知られている。【０００４】
一方、低分子化合物に温度応答性能を発現させるためには、低温領域でナノサイズの両親媒性集合体を形成させ、さらに高温領域で疎水性集合体へと転移するような分子設計が必要であると考えられる。しかし、そのような分子設計は難しく、例えば、ベンゼン−１，３，５−トリウレア誘導体が温度応答性能を示すことは報告されているが（非特許文献１）、温度応答性能を示す低分子化合物の報告例は極めて少ない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｈ．Ｇ．Ｓｃｈｉｌｄ，Ｐｒｏｇ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．１９９２，１７，１６３．
【非特許文献２】Ｄ．Ｕｒｒｙ，Ｊ．Ｐｈｙｓ．Ｃｈｅｍ．Ｂ１９９７，１０１，１１００７．
【非特許文献３】Ｈ．Ｈａｙａｓｈｉ，Ｋ．Ｏｈｋｕｂｏ，Ｓ．Ｋａｒａｓａｗａ，Ｎ．Ｋｏｇａ，Ｌａｎｇｍｕｉｒ，２０１１，２７，１２７０９．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
温度応答性能を発現する低分子化合物は、温度変化により形態を変化させることができる。従って、該低分子化合物は、例えば、ヒトを含む哺乳類の体内に注入されたとき、体内でゲル又は固体になって、がん細胞を検出又は捕捉することが期待できる。【０００７】
さらに、温度応答性能を有する低分子化合物が自己集合機能も発現することができれば、該低分子化合物は自己集合してある程度の大きさになり、そして、ＥＲＰ効果によってがん細胞に選択的に集積することが期待できる。【０００８】
すなわち、温度応答性能及び自己集合機能を発現する低分子化合物は、例えば、がん細胞の検出、捕捉又は選択的治療用ツール等の医療用材料として用いることが期待できる。【０００９】
しかしながら、上述したように、温度応答性能を示す低分子化合物は極めて少なく、その上、温度応答性能を示すことが報告されている、上記のベンゼン−１，３，５−トリウレア誘導体でさえも、自己集合機能はほとんど発現しなかった。【００１０】
そこで、本発明の目的は優れた温度応答性能と自己集合機能とを発現する新規な低分子化合物を提供することである。【００１１】
本明細書では、「温度応答性能」とは、一般に化合物の水溶液が下限臨界溶液温度（Ｌｏｗｅｒ  Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：ＬＣＳＴ）を境にして、可逆的に水溶性から水不溶性に変化する性能をいう。具体的には、ＬＣＳＴ未満の温度では水によく溶解するが、ＬＣＳＴ以上の温度になると水に溶解し難くなり、ＬＣＳＴ未満の温度にすると再び水に溶解するという性能をいう。
また、「自己集合機能」とは、当初ランダムな状態にある物質（分子）群において、分子が適切な温度条件下で分子間の非共有結合性相互作用等により自発的に会合することにより、マクロな機能性集合体に成長する機能をいう。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記の課題を解決すべく鋭意研究を行った結果、２つのウレア基と、連結基を介して又は連結基を介さずに機能性官能基とをベンゼン環に置換した構造を有する化合物が、非特許文献３に開示されたような、３つのウレア基がベンゼン環に置換された構造を有する化合物に比べて、優れた温度応答性能と自己集合機能とを発現することを見出し、本発明を完成させた。【００１３】
すなわち、本発明は、第１観点として、下記式（１）で表される温度応答性化合物に関する。
【化１】
2017154991.tif 000003
［式中、
Ｒは、それぞれ独立して、下記式（２）又は式（３）：
【化２】
2017154991.tif 000004
（式中、※は結合位置を表し、ａは１乃至２０を表し、ｂは１乃至２０を表し、ｃは１乃至２０を表し、ｄは１乃至２０を表し、ｅは１乃至２０を表す。）で表される基を表し、
Ａは単結合を表すか、又は下記式（４）、式（５）若しくは式（６）：
【化３】
2017154991.tif 000005
（式中、※は結合位置を表し、ｆは１乃至２０を表し、ｇは１乃至２０を表し、ｈは１乃至２０を表し、ｉは１乃至２０を表し、ｍは０乃至１０を表し、ｎは０乃至１０表す。）で表される基を表し、
Ｘは、機能性官能基を表す。］【００１４】
第２観点として、前記機能性官能基がキノリン構造を有する化合物から誘導される基、常磁性金属と配位子とからなるキレート錯体から誘導される基、及び有機ラジカル構造を分子内に有する化合物から誘導される基からなる群から選ばれる少なくとも１つの基である、第１観点に記載の化合物に関する。
第３観点として、前記Ａが単結合又は上記式（６）で表される基を表す、第１観点又は第２観点に記載の化合物に関する。【００１５】
第４観点として、前記機能性官能基が下記式（Ｘ１）乃至式（Ｘ６）で表される基からなる群から選ばれる少なくとも１つの基である、第１観点乃至第３観点のいずれか１つに記載の化合物に関する。
【化４】
2017154991.tif 000006
（式中、※は結合位置を表し、ｋは０乃至２０を表し、ｌは０乃至２０を表す。）【００１６】
第５観点として、第１観点乃至第４観点のいずれか１つに記載の化合物を含む医療用材料に関する。
第６観点として、第１観点乃至第４観点のいずれか１つに記載の化合物を含むＭＲＩ造影剤に関する。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の化合物は、優れた温度応答性能と自己集合機能とを発現するという効果を奏する。【００１８】
本発明の化合物は、優れた温度応答性能と自己集合機能とを発現するという効果により、がん細胞の検出薬等の医療用材料として利用することができるという効果を奏する。【００１９】
本発明の化合物は、大きな常磁性体緩和促進効果により高い緩和能を有するＭＲＩ造影剤として利用することができるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は実施例２のＥＳＲ測定結果を示す図である。
【図２】図２は実施例３の濃度依存性の検討結果を示す図である。
【図３】図３は実施例４の温度応答性の検討結果を示す図である。
【図４】図４は実施例５の動的光散乱法（ＤＬＳ）による測定結果を示す図である。
【図５】図５は実施例６の透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）による観察結果を示す図である［（ａ）１ｍＭを２５℃で調製したサンプル、（ｂ）５ｍＭを６０℃で調製したサンプル。（ｃ）（ａ）における球状ナノ微粒子のサイズと数を目視でカウントし、その結果を棒グラフとして示したもの］。
【図６】図６は実施例７のゼータ電位測定結果を示す図である。
【図７】図７は実施例８の水プロトン緩和能におけるＴ1緩和時間の測定結果を示す図である［（ａ）７Ｔで測定したｐＨ７．０のサンプルの測定結果、（ｂ）７Ｔで測定したｐＨ５．０のサンプルの測定結果、（ｃ）７Ｔで測定したｐＨ９．０のサンプルの測定結果、（ｄ）１Ｔで測定したｐＨ７．０のサンプルの測定結果、（ｅ）左は１Ｔで測定したｐＨ７．０のサンプルのファントム画像、右はサンプル配置］。
【図８】図８は実施例８の水プロトン緩和能におけるＴ2緩和時間の測定結果を示す図である［（ａ）７Ｔで測定したｐＨ７．０のサンプルの測定結果、（ｂ）左は１Ｔで測定したｐＨ７．０のサンプルのファントム画像、右はサンプル配置］。
【図９】図９はピレンの蛍光強度とＧｄ−Ｅｇ−ＵＢＤの濃度との関係を示す図である［（ａ）０〜１０μＭ、（ｂ）１５〜２００μＭ）］。
【図１０】図１０はＧｄ−Ｅｇ−ＵＢＤの濃度変化に対するピレンの蛍光強度比Ｉ3／Ｉ1を示す図である。
【図１１】図１１はピレンの蛍光強度とＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤの濃度との関係を示す図である［（ａ）０〜１０μＭ、（ｂ）１５〜２００μＭ）］。
【図１２】図１２はＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤの濃度変化に対するピレンの蛍光強度比Ｉ3／Ｉ1を示す図である。
【図１３】図１３はＧｄ−Ｅｇ−ＵＢＤを用いた動的光散乱法（ＤＬＳ）による測定結果を示す図である。
【図１４】図１４はＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤを用いた動的光散乱法（ＤＬＳ）による測定結果を示す図である。
【図１５】図１５は実施例１３の走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）による観察結果を示す図である。
【図１６】図１６は実施例１４のＴ1強調画像を示す図である［（ａ）Ｇｄ−ＤＯＴＡのＴ1強調画像、（ｂ）Ｇｄ−ＡＬ−ＵＢＤのＴ1強調画像、（ｃ）Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤのＴ1強調画像）］。
【図１７】図１７はＴ1強調画像から算出したＴ1緩和時間の逆数と濃度との関係を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
［温度応答性化合物］
本発明の化合物は、２つのウレア基と、連結基を介して又は連結基を介さずに機能性官能基とがベンゼン環に置換された構造を有することを特徴としており、具体的には、下記式（１）で表される温度応答性化合物である。
【００２２】
【化５】
2017154991.tif 000007
［式中、
Ｒは、それぞれ独立して、下記式（２）又は式（３）：
【化６】
2017154991.tif 000008
（式中、※は結合位置を表し、ａは１乃至２０を表し、ｂは１乃至２０を表し、ｃは１乃至２０を表し、ｄは１乃至２０を表し、ｅは１乃至２０を表す。）で表される基を表し、
Ａは単結合を表すか、又は下記式（４）、式（５）若しくは式（６）：
【化７】
2017154991.tif 000009
（式中、※は結合位置を表し、ｆは１乃至２０を表し、ｇは１乃至２０を表し、ｈは１乃至２０を表し、ｉは１乃至２０を表し、ｍは０乃至１０を表し、ｎは０乃至１０表す。）で表される基を表し、
Ｘは、機能性官能基を表す。］
【００２３】
本発明の化合物は温度応答性能及び自己集合機能を発現させるために、Ｒが表す上記式（２）で表される基において、アルキル基を導入してある程度の疎水性を持たせ、これにより、ファンデルワールス力による自己集合機能をより発現させる観点から、アルキル鎖の長さを表すａとしては、好ましくは４乃至１０であり、より好ましくは６乃至８である。
また、温度応答性能を発現させるために、低温では水分子が分子の周りに強く付着し、高温では脱水和させる必要があるので、超分子的な相互作用が働くこと、特に水素結合部位を有する必要があることから、水との水素結合部位であるエチレングリコール鎖の長さを表すｂとしては、好ましくは２乃至１５であり、より好ましくは３乃至６であり、またｃとしては、好ましくは２乃至１５であり、より好ましくは３乃至６である。
【００２４】
また、Ｒが表す上記式（３）で表される基においても、上記式（２）で表される基と同様に、アルキル鎖の長さを表すｄとしては、好ましくは４乃至１０であり、より好ましくは６乃至８である。また水との水素結合部位であるエチレングリコール鎖の長さを表すｅとしては、好ましくは３乃至１５であり、より好ましくは４乃至６である。
【００２５】
Ａは単結合又は上記式（４）、式（５）若しくは式（６）で表される基を表す。
前記式（４）及び式（５）で表される基は上記式（２）及び（３）で表される基と同様に、水との水素結合部位であるエチレングリコール鎖を有する。ｆとしては、好ましくは３乃至１５であり、より好ましくは４乃至６であり、またｇとしては、好ましくは３乃至１５であり、より好ましくは４乃至６である。またｈとしては、好ましくは１乃至５であり、より好ましくは１乃至２である。またｉとしては、好ましくは２乃至１０であり、より好ましくは３乃至６である。
また、前記式（６）で表される基において、ｍとしては、好ましくは０乃至５であり、より好ましくは０乃至３である。またｎとしては、好ましくは０乃至５であり、より好ましくは０乃至３である。
【００２６】
温度応答性能及び自己集合機能をより発現させる観点から、Ａが単結合を表す場合、本発明の化合物としては、Ｒが上記式（２）で表される基を表し且つＸが機能性官能基を表す化合物が好ましい。なお、斯かる場合、Ｘが表す機能性官能基はベンゼン環に直接結合する。
Ａが上記式（４）で表される基を表す場合、本発明の化合物としては、Ｒが上記式（３）で表される基を表し且つＸが機能性官能基を表す化合物が好ましい。
Ａが上記式（６）で表される基を表す場合、本発明の化合物としては、Ｒが上記式（３）で表される基を表し且つＸが機能性官能基を表す化合物が好ましい。
【００２７】
また、上記式（４）、式（５）若しくは式（６）で表される基としては、下記式（４’）、式（５’）若しくは式（６’）で表される基が好ましい。
【化８】
2017154991.tif 000010
（式中、※１はウレア基との結合位置を表し、※２は機能性官能基との結合位置を表す。ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｍ及びｎの定義は上記と同じである。）
【００２８】
Ｘが表す機能性官能基としては、キノリン構造を有する化合物から誘導される基、常磁性金属と配位子とからなるキレート錯体から誘導される基、及び有機ラジカル構造を分子内に有する化合物から誘導される基からなる群から選ばれる少なくとも１つの基が好ましく、その中でも、Ｘとしては、常磁性金属と配位子とからなるキレート錯体から誘導される基及び有機ラジカル構造を分子内に有する化合物から誘導される基が特に好ましい
【００２９】
具体的には、キノリン構造を有する化合物としては、２，４−ジ（トリフルオロメチル）キノリンが挙げられる。
【００３０】
また、上記キレート錯体としては、Ｇｄ−ＤＴＰＡ［ジエチレントリアミン五酢酸のガドリニウム錯体］、Ｇｄ−ＤＯＴＡ［１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸のガドリニウム錯体］、Ｇｄ−ＤＴＰＡ−ＢＭＡ［ジエチレントリアミノ五酢酸ビスメチルアミドのガドリニウム錯体］、Ｇｄ−ＨＰＤＯ３Ａ｛［１０−（２−ヒドロキシプロピル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン］−１，４，７−三酢酸のガドリニウム錯体｝及びＧｄ−ＤＯ３Ａ［１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸のガドリニウム錯体］などのガドリニウム錯体；マンガン−ポルフィリン誘導体錯体が挙げられる。
【００３１】
さらに、上記有機ラジカル構造としては下記の基が挙げられる。
【化９】
2017154991.tif 000011
（式中、※は結合位置を表す。ｋは０乃至２０を表し、好ましくは０乃至１０を表し、より好ましくは１乃至３を表す。ｌは０乃至２０を表し、好ましくは０乃至１０を表し、より好ましくは１乃至３を表す。）
【００３２】
その中でも、上記機能性官能基としては、下記式（Ｘ１）乃至（Ｘ６）で表される基が好ましく、下記式（Ｘ１）又は（Ｘ６）で表される基が特に好ましい。
【化１０】
2017154991.tif 000012
（式中、※は結合位置を表し、ｋ及びｌの定義は上記と同じである。）
【００３３】
［温度応答性化合物の製造方法］
本発明の温度応答性化合物の製造方法としては特に限定されないが、例えば、Ｒが上記式（２）で表される基である本発明の化合物は、次のように製造することができる。
該式（２）で表される基に対応する両親媒性側鎖は、水溶性部位のエチレングリコール鎖と疎水性部位のアルキル鎖を連結させることで、末端に一級アミンを有する両親媒性側鎖として合成する。該両親媒性側鎖がウレア基を介してベンゼン環と連結するために、イソシアン酸ベンゼンと上記で得られた一級アミンとをカップリングさせることで、二つの両親媒性側鎖がウレア基で連結したベンゼン環を合成する。そして、機能性官能基Ｘと上記ベンゼン環を連結させることで、本発明の温度応答性化合物が得られる。
【００３４】
具体的には、２−アミノエタノールを出発物質として、塩基性条件下トシル保護したトリエチレングリコールメチルエーテルと混合することで、アミノ基にトリエチレングリコールメチルエーテルが付加した１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８−トリオキサ−１１−アザトリデカン−１３−オール（ＴＥＧ2ＥＡ）を合成する。得られたＴＥＧ2ＥＡを塩基性条件下１，６−ジブロモヘキサンとカップリングすることで、２−（（６−ブロモヘキシル）オキシ）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）エタン−１−アミン（Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｂｒ）を得て、更にフタルイミドカリウムとのカップリング後、ヒドラジン一水和物の存在下加熱還流することで、両親媒側鎖の一級アミン体６−（（１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８−トリオキサ−１１−アザトリデカン−１３−イル）オキシ）ヘキサン−１−アミン（Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6ＮＨ2）を合成する。
【００３５】
別途５−ヨードイソフタル酸を出発物質として得られたジイソシアン酸とＥｇ3ＮＥｇ3Ｃ6ＮＨ2を混合することで、１位にヨード基、３と５位に両親媒性側鎖が連結したジウレアベンゼン体を合成する。これにパラジウム触媒下、機能性官能基である２，２，６，６−テトラメチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３−ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）―イルオキシルラジカルをカップリングすることで、機能性官能基であるＴＥＭＰＯラジカルが連結した温度応答性化合物である１，１’−（５−（１−オイル−２，２，６，６−テトラメチル−３−ジヒドロピリジン−４−イル）ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８，１４−テトラオキサ−１１−アザイコサン−２０−イル）ウレア）が得られる。
なお、上記の各合成に用いられる方法は、公知の方法を適宜選択して用いることができる。
【００３６】
［医療用材料］
上述したように、本発明の化合物は温度応答性能及び自己集合機能を発現するので、検出、捕捉又は選択的治療用ツール等の医療用材料として用いることができる。そのような医療用材料としては、例えば、がん検出薬、がん細胞の捕捉チップ及びがん細胞の選択的治療のための薬剤等が挙げられる。
【００３７】
［ＭＲＩ造影剤］
本発明の化合物は、種々の分野への応用が期待されるが、中でも常磁性部位を高密度に担持できる性質や大きさから、高い常磁性体緩和促進効果やガン細胞選択性などを有することが期待され、ＭＲＩ造影剤として有用である。
すなわち、本発明の温度応答性化合物を含むＭＲＩ造影剤もまた本発明の対象である。
【００３８】
本発明のＭＲＩ造影剤は、通常注射用蒸留水、生理食塩水、リンゲル液等の溶媒に分散、懸濁又は溶解等の状態で用いられ、さらに必要に応じて、薬理学的に許容され得る担体、賦形剤等の添加剤を含めることができる。
【００３９】
本発明の上記ＭＲＩ造影剤は、細胞などに適用し得るほか、血管（静脈、動脈）内投与、経口投与、直腸内投与、腟内投与、リンパ管内投与、関節内投与等によって生体内に投与することができ、好ましくは、水剤、乳剤又は懸濁液等の形態で静脈内投与や経口投与によって投与する。
【００４０】
上記ＭＲＩ造影剤に含められ得る添加剤としては、その投与形態、投与経路等によっても異なるが、具体的には、注射剤の場合には緩衝剤、抗菌剤、安定化剤、溶解補助剤、賦形剤等が単独又は組み合わせて用いられ、経口投与剤（具体的には水剤、シロップ剤、乳剤、懸濁液等）の場合、着色剤、保存剤、安定化剤、懸濁化剤、乳化剤、粘稠剤、甘味剤、芳香剤等が単独又は組み合わせて用いられる。各種添加剤は、通常当分野で用いられるものが使用される。
【００４１】
本発明の上記ＭＲＩ造影剤は、従来のＭＲＩ用造影剤に準じて投与、造影することができる。また上記ＭＲＩ造影剤は、ヒト以外にも各種動物用の造影剤としても好適に用いることができ、その投与形態、投与経路、投与量等は対象となる動物の体重や状態によって適宜選択する。
【００４２】
本発明のＭＲＩ造影剤の使用方法の一例として、体温を４２℃以上まで加温した後、造影剤を投与する方法が挙げられる。加熱すると正常細胞は血管拡張によって放熱することで平温に戻るのに対して、がん細胞はＬＣＳＴ以上の温度を維持しているため、造影剤は凝集しがん細胞への集積が促進され造影が可能となる。
【実施例】
【００４３】
次に実施例を挙げ本発明の内容を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
なお、実施例において、試料の調製及び物性の分析に用いた装置は下記の通りである。【００４４】
（１）赤外分光光度計（ＩＲ）
装置：日本分光社製  ４２０ＦＴ−ＩＲ
（２）核磁気共鳴装置（ＮＭＲ）
装置：ブルカーバイオスピン社製ＡＶＡＮＣＥ  ＩＩＩ  ５００
（３）質量分析装置（ＥＳＩ−ＭＳ）
装置：ブルカーダルトニクス社製  ｍｉｃｒｏＴＯＦ
（４）高分解能質量分析装置［ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）］
装置：ブルカーダルトニクス社製  ｍｉｃｒｏＴＯＦ
（５）電子スピン共鳴装置（ＥＳＲ）
装置：ブルカーバイオスピン社製ＥＭＸ  ＥＰＲ  Ｘ−ｂａｎｄ（９．４ＧＨｚ）
（６）透過度
装置：日本分光社製  Ｖ５７０
（７）動的光散乱光度計（ＤＬＳ）とゼータ電位測定装置
装置：マルバーン社製ゼーターサイザーナノ
（８）透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）
装置：ＦＥＩ社製  Ｔｅｃｎａｉ２０
（９）ＭＲＩ装置
装置：ブルカーバイオスピン社製１．０  Ｔ−ＭＲＩ  Ｓｃａｎｎｅｒ
（１０）分光蛍光光度計
装置：ＪＡＳＣＯ  ＦＰ８５００
（１１）走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）
装置：日本電子社製ＪＳＭ−６７０１Ｆ【００４５】
下記の反応スキーム１に従って、両親媒性側鎖を有する一級アミン体である６−（（１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８−トリオキサ−１１−アザトリデカン−１３−イル）オキシ）ヘキサン−１−アミン（Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6ＮＨ2）を合成した。そして、下記の反応スキーム２に従って、目的物質である１，１’−（５−（１−オイル−２，２，６，６−テトラメチル−３−ジヒドロピリジン−４−イル）ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８，１４−テトラオキサ−１１−アザイコサン−２０−イル）ウレア）（ＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕ）を合成した。【００４６】
【化１１】
2017154991.tif 000013
【００４７】
【化１２】
2017154991.tif 000014
【００４８】
以下、上記の反応スキーム１及び２の各反応について、詳細に説明する。【００４９】
［合成例１］１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８−トリオキサ−１１−アザトリデカン−１３−オール（ＴＥＧ2ＥＡ）の合成
【化１３】
2017154991.tif 000015
トシル保護したトリエチレングリコールメチルエーテル（ＴＥＧ−ＴＳ）３３ｇ（０．１０ｍｏｌ）、２−アミノエタノール２．５ｇ（４０ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ  ５０ｍＬに溶解させ、Ｋ2ＣＯ3  ２５ｇ（０．１８ｍｏｌ）を加えた後、６時間加熱還流した。室温に戻した後、吸引ろ過を行い、溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ）により精製後、無色透明液体１０．８ｇ（３０．６ｍｍｏｌ）を得た。【００５０】
収率：７５％
ＩＲ（ＮａＣｌ）３４７２，２８７３，１４５６，１３５２，１２９４，１２４５，１２００，１１０８，１０４５ｃｍ-1
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ３．６７−３．６０（ｍ，１２Ｈ），３．５９−３．５１（ｍ，１０Ｈ），３．３８（ｓ，６Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，４Ｈ），２．７２（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３５４．２５［Ｍ＋Ｈ］+
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）  Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ16Ｈ36ＮＯ7［Ｍ＋Ｈ］+：３５４．２４８６，Ｆｏｕｎｄ：３５４．２５１９【００５１】
［合成例２］２−（（６−ブロモヘキシル）オキシ）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）エタン−１−アミン（Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｂｒ）の合成
【化１４】
2017154991.tif 000016
１，６−ジブロモヘキサン１４．５ｇ（５９．４ｍｍｏｌ）を蒸留したテトラヒドロフラン（ｄｉｓｔ．ＴＨＦ）２５ｍＬに溶解させ、氷浴で撹拌した。この溶液に、ＮａＨ１．５ｇ（６４ｍｍｏｌ）をｄｉｓｔ．ＴＨＦ  ５ｍＬに溶解させた溶液を滴下した後、ＴＥＧ2ＥＡ  ７．３ｇ（２１ｍｍｏｌ）をｄｉｓｔ．ＴＨＦ  １０ｍＬに溶解させた溶液を滴下した。その後、徐々に室温まで昇温しながら一晩撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて反応を停止させた後、ジエチルエーテルで抽出を行った。ＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ）により精製を行い、無色透明液体７．２２ｇ（１４．０ｍｍｏｌ）を得た。【００５２】
収率：６８％
ＩＲ（ＮａＣｌ）２９３２，２８６４，１４５７，１３５２，１３００，１２４５，１１９９，１１１４，１０２９ｃｍ-1
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ３．６６−３．６３（ｍ，８Ｈ），３．６２−３．５９（ｍ，４Ｈ），３．５６−３．５２（ｍ，８Ｈ），３．４８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），３．４２−３．３９（ｍ，４Ｈ），３．３８（ｓ，６Ｈ），２．８０−２．７５（ｍ，６Ｈ），１．８６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．５７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．４５（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．３６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ５３８．２３［Ｍ＋Ｎａ］+ 
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）  Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ22Ｈ46ＢｒＮＮａＯ7［Ｍ＋Ｎａ］+：５３８．２３５０，Ｆｏｕｎｄ：５３８．２３１７【００５３】
［合成例３］２−（１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８，１４−テトラオキサ−１１−アザイコサン−２０−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｐｈｔ）の合成
【化１５】
2017154991.tif 000017
Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｂｒ  ７．２２ｇ（１４．０ｍｍｏｌ）、フタルイミドカリウム３．９ｇ（２１ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）６０ｍＬに溶解させ、１１０℃で４時間加熱した。室温に戻した後、ジエチルエーテルで抽出を行った。ＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ）により精製を行い、無色透明液体６．４８ｇ（１１．１ｍｍｏｌ）を得た。【００５４】
収率：８０％
ＩＲ（ＮａＣｌ）２９３２，２８６３，１７７２，１７１４，１４６７，１４３６，１３９６，１３６９，１３０１，１２４９，１１９９，１１１３ｃｍ-1
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ７．８４（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），３．６５−３．５９（ｍ，１２Ｈ），３．５６−３．５３（ｍ，８Ｈ），３．４０−３．３８（ｍ，８Ｈ），２．８０−２．７４（ｍ，６Ｈ），１．６８（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．５５（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），１．４７−１．３５（ｍ，４Ｈ）
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ６０５．３４［Ｍ＋Ｎａ］+
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）  Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ30Ｈ50Ｎ2ＮａＯ9［Ｍ＋Ｎａ］+：６０５．３４０９，Ｆｏｕｎｄ：６０５．３３７７【００５５】
［合成例４］６−（（１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８−トリオキサ−１１−アザトリデカン−１３−イル）オキシ）ヘキサン−１−アミン（Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6ＮＨ2）の合成
【化１６】
2017154991.tif 000018
Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｐｈｔ  ６．５ｇ（１１ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物２．２ｇ（４４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ  １３０ｍＬに溶解させた後、４時間加熱還流した。室温に戻した後、溶媒留去した。得られた白色固体をジエチルエーテルに分散させ、セライトろ過を行い、溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＋５％トリエチルアミン）により精製することで、無色透明液体３．９２ｇ（８．６５ｍｍｏｌ）を得た。【００５６】
収率：７８％
ＩＲ（ＮａＣｌ）３３７１，２９２９，２８６２，１５７７，１４５８，１３５１，１３２８，１３０３，１２４９，１１９９，１１１３ｃｍ-1
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ３．６５−３．６２（ｍ，８Ｈ），３．６１−３．５９（ｍ，４Ｈ），３．５６−３．５２（ｍ，８Ｈ），３．４８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），３．３８（ｓ，６Ｈ），２．８０−２．７５（ｍ，６Ｈ），２．６８（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．５６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），１．３８−１．３０（ｍ，４Ｈ）
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１２６ＭＨｚ）δ７１．９７，７１．２２，７０．６５，７０．５５，７０．４２，６９．８２，６９．３６，５９．０５，５４．６７，５４．５９，４２．１６，３３．６６，２９．６９，２６．７３，２６．０７
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４５３．３５［Ｍ＋Ｈ］+
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）  Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ22Ｈ49Ｎ2Ｏ7［Ｍ＋Ｈ］+：４５３．３５３４，Ｆｏｕｎｄ：４５３．３５０５【００５７】
［合成例５］１，１’−（５−ヨード−１，３−フェニレン）ビス（３−（１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８，１４−テトラオキサ−１１−アザイコサン−２０−イル）ウレア（Ｉｏｄｏ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕ）の合成
【化１７】
2017154991.tif 000019
５−ヨードイソフタル酸５８４ｍｇ（２ｍｍｏｌ）をＳＯＣｌ2  ３０ｍＬに溶解させ、２時間加熱還流した。室温に戻した後、溶媒留去することで５−ヨードイソフタロイルジクロリドを得た。これをＴＨＦ  ４ｍＬに溶解させ、氷浴で撹拌した。そこへＮａＮ3 ８６０ｍｇ（１３ｍｍｏｌ）を水５ｍＬに溶解させた溶液を滴下し、氷浴で２時間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１５ｍＬを加え、トルエンで抽出を行った。ＭｇＳＯ4で乾燥し、溶液量が１５ｍＬ程度になるまで濃縮することで、５−ヨードイソフタロイルジアジドのトルエン溶液を得た。この溶液を１００℃で２時間加熱することで、１−ヨード−３，５−ジイソシアナトベンゼンのトルエン溶液を得た。５−ヨードイソフタロイルジクロリド、５−ヨードイソフタロイルジアジド及び１−ヨード−３，５−ジイソシアナトベンゼンの生成はＩＲで確認を行った。１−ヨード−３，５−ジイソシアナトベンゼンのトルエン溶液を氷浴で撹拌し、そこへＥｇ3ＮＥｇ3Ｃ6ＮＨ2  ２．０ｇ（４．４ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2  ８ｍＬに溶解させた溶液を滴下した。徐々に室温まで昇温しながら一晩撹拌した。溶媒留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ）により精製を行い、黄色透明液体１．２ｇ（０．９９ｍｍｏｌ）を得た。【００５８】
収率：５０％
ＩＲ（ＮａＣｌ）３４９１，３３４０，２９３０，２８６４，１６９５，１５９４，１５３８，１４４９，１３５１，１３０５，１２６１，１２０１，１１１１，１０２８ｃｍ-1
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）δ８．４４（ｓ，２Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．０６（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．５１−３．４６（ｍ，２４Ｈ），３．４４−３．４１（ｍ，１６Ｈ），３．４０−３．３５（ｍ，８Ｈ），３．２３（ｓ，１２Ｈ），３．０４（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），２．６５（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１２Ｈ），１．４８（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，４Ｈ），１．４１（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，４Ｈ），１．３２−１．２６（ｍ，８Ｈ）
13Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，１２６ＭＨｚ）δ１５５．３１，１４２．６３，１１８．９６，１０６．０７，９５．０１，７９．６４，７１．７６，７０．６０，７０．２８，７０．１７，７０．０７，６９．７１，６６．８２，５８．５１，５４．６３，３０．１３，２９．７１，２６．６７，２５．９３
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ５９６．３２［Ｍ＋２Ｈ］2+
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ52Ｈ101Ｎ6Ｏ16Ｉ［Ｍ＋２Ｈ］2+：５９６．３１５４，Ｆｏｕｎｄ：５９６．３１５４【００５９】
［実施例１］１，１’−（５−（１−オイル−２，２，６，６−テトラメチル−３−ジヒドロピリジン−４−イル）ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（１１−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エチル）−２，５，８，１４−テトラオキサ−１１−アザイコサン−２０−イル）ウレア）（ＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕ）の合成
【化１８】
2017154991.tif 000020
Ｉｏｄｏ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕ  ５９６ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）［Ｐｄ（ＰＰｈ3）4］２８．９ｍｇ（０．０２５ｍｍｏｌ）、２，２，６，６−テトラメチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３−ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−イルオキシ  ラジカル１６８ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）を三頸フラスコに入れ、窒素雰囲気下、脱気した１，４−ジオキサン４ｍＬを加えた後、３０分間Ｎ2バブリングを行った。そこへ１０％  Ｎａ2ＣＯ3ａｑ．  ４ｍＬを加え、９０℃で６時間加熱した後、飽和食塩水を加え、ＣＨＣｌ3で抽出を行った。ＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ）により精製後、褐色蝋状固体３４４ｍｇ（０．２８ｍｍｏｌ）を得た。【００６０】
収率：５７％
ＩＲ（ＮａＣｌ）３５１６，３３３９，２９２９，２８６２，１６９６，１６６８，１６０２，１５５８，１４５３，１３６０，１２４９，１２０１，１１１４，１０３３，８５０ｃｍ-1
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６＋アスコルビン酸，５００ＭＨｚ）δ８．３４（ｓ，２Ｈ），７．２９（ｔ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，２Ｈ），５．９８（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），５．７８（ｓ，１Ｈ），３．５２−３．４７（ｍ，４４Ｈ），３．３６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），３．２３（ｓ，１２Ｈ），３．０５（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），２．３０（ｓ，２Ｈ），１．４９（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，４Ｈ），１．４１（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，４Ｈ），１．３３−１．２７（ｍ，８Ｈ），１．２０（ｓ，６Ｈ），１．１２（ｓ，６Ｈ）
13Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６＋アスコルビン酸，１２６ＭＨｚ）δ１５５．６３，１４１．５７，１４１．２７，１３１．８２，１３０．２２，１０７．７６，１０５．８８，９１．７７，８８．３５，７３．７２，７１．７４，７０．６６，７０．１９，７０．０４，６８．４１，５８．５１，５４．２８，３０．２３，２９．６３，２６．６７，２５．９０
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ６０９．４２［Ｍ＋２Ｈ］2+
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ61Ｈ116Ｎ7Ｏ17［Ｍ＋２Ｈ］2+：６０９．４２０８，Ｆｏｕｎｄ：６０９．４２１【００６１】
［実施例２］ＥＳＲ測定
実施例１で得られたＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕの１ｍＭ水溶液を調製し、ＸバンドのＥＳＲ測定を２５℃で行った。得られた結果を図１に示す。
図１に示すように、窒素の核スピンに由来する三本線がｇ＝２．００８７付近に確認された。また、一番高磁場側のスペクトル強度の低下が観測され、分子の運動性の低下が示唆された。【００６２】
［実施例３］濃度依存性の検討
ホスフェートバッファー中ｐＨ５．０，７．０と９．０での濃度依存性（０．１〜５ｍＭ）について検討した。具体的には、ＥＳＲスペクトル強度と線幅から見積もった回転相関時間（τR）を算出し、濃度とτRとの相関性を求めた。得られた結果を図２に示す。
その結果、ｐＨ５．０と７．０では０．６６ｍＭ付近で、ｐＨ９．０では０．７６ｍＭ付近でτRの変局点が観測され、変局点以上の高濃度でτR値が大きくなった。このことから、変局点はＣＡＣ（臨界会合濃度）を示し、この濃度前後でＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕのモノマーが会合体を形成することが示唆された。表１にｐＨ、ＣＡＣとτR値をまとめた。【００６３】
【表１】
2017154991.tif 000021
【００６４】
［実施例４］温度応答性の検討
ＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕの水溶液中での温度応答性について、８００ｎｍの透過度から検討した。得られた結果を図３に示す。会合体を形成している濃度である２ｍＭ及び５ｍＭでは、３９℃付近で急激に透過度が低下し濁りが生じた。この温度はＬＣＳＴ（下限臨界溶液温度）であり、昇温によりＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕの水和されているオリゴエチレングリコール鎖が脱水し、自己集合化が促進されたことを意味する。一方、モノマー状態である０．５ｍＭでは、緩やかに透過度が下がり、ＬＣＳＴ値は２ｍＭ及び５ｍＭと比べて上昇し、４５℃付近に観測された。【００６５】
［実施例５］動的光散乱法（ＤＬＳ）による測定
会合体を形成している５ｍＭにおいて、動的光散乱法（ＤＬＳ）による測定を２０〜７０℃で行った。得られた結果を図４に示す。
ＬＣＳＴ前の温度である２０〜３８℃では流体力学直径（ＤH）が約５０ｎｍ付近を極大として観測されたのに対して、ＬＣＳＴ以上となるとマイクロメートルサイズの大きなサイズが観測された。これら結果はＬＣＳＴ前後での透過度変化に対応している。すなわちＬＣＳＴ前の透過度が高い溶液中では約５０ｎｍの微粒子が形成されているのに対して、ＬＣＳＴ後の溶液は、マイクロメートルサイズの大きな微粒子が形成されているため透過度が低下した。【００６６】
［実施例６］透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）による観察
透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）を用いて、ＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕの形態観察を行った。具体的には、２５℃で調製したＬＣＳＴ前のサンプルと６０℃で調製したＬＣＳＴ後のサンプル２種類について、それぞれ酢酸ウランによる陰染色したあと観察した。得られた結果を図５に示す。
ＬＣＳＴ前では２０〜８０ナノメートルサイズの球状ナノ微粒子が観測された［図５（ａ）］。また得られたサイズ分布についてはＤＬＳで得られたサイズとほぼ一致した。図５（ｃ）に目視でカウントした球状ナノ微粒子のサイズを棒グラスとしてまとめた。一方、ＬＣＳＴ後では１００ナノメートル以下のサイズを有する微粒子が沢山集まって出来る大きな微粒子の形成が観測された［図５（ｂ）］。【００６７】
［実施例７］ゼータ電位測定
ＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕ水溶液中で得られる微粒子の表面電荷についてゼータ電位を用いて温度依存性の検討を行った。５ｍＭサンプルについて２０〜７０℃まで測定した。図７にＤＬＳで得られたサイズの温度依存性とともにゼータ電位の温度依存性の結果をそれぞれ示す。
低温から昇温するに従って−１５ｍＶであった表面電位が徐々に小さくなり、ＬＣＳＴ値を境にプラス電荷を有する微粒子へと電荷変化が生じた。このことは低温で観測されているナノ微粒子は水和されているため、オリゴエチレングリコールが表面に位置しマイナスの電荷を示す。一方、ＬＣＳＴ後、脱水が生じオリゴエチレングリコールが疎水性を帯びるとプロトン化した三級アミンカチオンが表面に位置することでプラスの電荷を生じたことを示唆している。【００６８】
［実施例８］水プロトン緩和能の測定
ＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕの０．１〜１０ｍＭの縦緩和時間（Ｔ1）および横緩和時間（Ｔ2）を、ＮＭＲを用いてそれぞれ算出し、その値の逆数と濃度の関数から水プロトン緩和能ｒ1とｒ2を見積もった。７ＴではｐＨ５．０，７．０，９．０のサンプルを、また１ＴではｐＨ７．０のサンプルについて緩和時間測定し、緩和能を得た。なお、対照サンプルとして低分子ラジカルのｏｘｏＴＥＭＰＯを用いた。【００６９】
＜Ｔ1緩和時間測定＞
７Ｔで測定したｐＨ７．０のサンプルについては、０．１〜１．０ｍＭではｒ1＝０．１７ｍＭｓ-1を示し、対照サンプルのｒ1＝０．１５ｍＭｓ-1との間に緩和能の差は見出されなかった。一方、高濃度の１．０〜１０．０ｍＭでは対照サンプルの１．４倍の数字のｒ1＝０．２１ｍＭｓ-1が得られた。このことはＣＡＣ未満の濃度では、ＴＥＭＰＯ−Ｅｇ3ＮＥｇ3Ｃ6Ｕは溶液中モノマーであるため、対照サンプルと同程度の緩和能であったのに対して、ＣＡＣ以上の濃度では、約５０ナノメートルサイズのナノ微粒子を形成することで緩和能（ｒ1）が大きくなることを意味する［図７（ａ）］。同様にｐＨを変化させたｐＨ５．０と９．０のサンプルでもＣＡＣ前後で緩和能（ｒ1）増加が観測された［図７（ｂ）、（ｃ）］。
一方、ｐＨ依存性については、ｐＨ７．０が最も大きなｒ1を示した。このことは、酸性やアルカリ性条件ではナノ微粒子内での電荷反発が生じるのに対して、中性ではその反発が小さく最も密に分子が詰まっていることを示唆する。
１Ｔで得られたｐＨ７．０のサンプルでも同様に対照サンプルに比べて１．３倍程度大きな緩和能（ｒ1）が得られた［図７（ｄ）］。１Ｔで得られたＴ1強調画像を図７（ｅ）に示す。得られた緩和能とｐＨの関係を表２に示す。【００７０】
【表２】
2017154991.tif 000022
【００７１】
＜Ｔ2緩和時間測定＞
７Ｔで得られたｐＨ７．０のサンプルのｒ2は、対照サンプルに比べ約１．７倍の値を示した。図８（ａ）に得られたｐＨ７．０の横緩和時間の逆数と濃度プロットを示す。１Ｔで得られたＴ2強調画像を図８（ｂ）に示す。またｒ2のｐＨ依存性を表３にまとめた。【００７２】
【表３】
2017154991.tif 000023
【００７３】
下記の反応スキーム３に従って、目的物質である１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−（５−ベンゼン−５−イル）−（４−Ｇｄ−ＤＯ３Ａ−１−オキサブタン−１−イル）（Ｇｄ−ＡＬ−ＵＢＤ）を合成した。
以下、上記の反応スキーム３の各反応について、詳細に説明する。【００７４】
【化１９】
2017154991.tif 000024
【００７５】
［合成例５］５−ヒドロキシイソフタル酸ジメチルの合成
【化２０】
2017154991.tif 000025
濃硫酸を含むメタノール中に５−ヒドロキシイソフタル酸１０．０ｇ（５４．９ｍｍｏｌ）を加えて７０℃で５時間攪拌した。得られた溶液を溶媒留去し白色固体を得た。残渣を酢酸エチル２００ｍＬに溶解し、炭酸水素ナトリウム水溶液２００ｍＬと水２００ｍＬで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒留去によって粗固体を得た。得られた固体をＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（１０：１）の溶媒を用いてカラムクロマトグラフィーで精製し、５−ヒドロキシイソフタル酸ジメチルの白色固体を８３％の収率で得た。【００７６】
ＩＲ（ＫＢｒ）３４４２，１７００，１６６２，１６０２，１２１２，９７５．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ８．２７（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｓ，２Ｈ），５．５１（ｓ，１Ｈ），３．９４（ｓ，６Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４４３．０９６６［２Ｍ＋Ｎａ］+．
得られた1Ｈ−ＮＭＲスペクトルは以前報告された５−ヒドロキシイソフタル酸ジメチルの１つと一致した。【００７７】
［合成例６］５−ベンジルオキシイソフタル酸ジメチルの合成
【化２１】
2017154991.tif 000026
５−ヒドロキシイソフタル酸ジメチル９．５ｇ（４５．２ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム１３．２ｇ（９５．８ｍｍｏｌ）をアセトン１９０ｍＬに溶解し、臭化ベンジル７．４ｍＬ（６２．４ｍｍｏｌ）を滴下し、３時間加熱還流を行った。析出した固体を溶解する目的でＭｅＯＨ７０ｍＬを加えてさらに１時間加熱還流を続けた。吸引ろ過後、得られた溶液を留去し、白色固体を得た。固体をヘキサン／酢酸エチル（１：１）の溶媒を用いてカラムクロマトグラフィーで精製し、５−ベンジルオキシイソフタル酸ジメチル（１３．３ｇ，４４．３ｍｍｏｌ）を白色固体として９８％の収率で得た。【００７８】
ＩＲ（ＫＢｒ）３０９８，２９５３，１７１８，１５９６，１４３０，１２５０，８８０．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ８．２９（ｔ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｓ，２Ｈ），３．９４（ｓ，６Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ６２３．１７９２［２Ｍ＋Ｎａ］+．
得られた1Ｈ−ＮＭＲスペクトルは以前報告された５−ベンジルオキシイソフタル酸ジメチルの１つと一致した。【００７９】
［合成例７］５−ベンジルオキシイソフタル酸の合成
【化２２】
2017154991.tif 000027
５−ベンジルオキシイソフタル酸ジメチル１３．３ｇ（４４．４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）１３３ｍＬに溶解し、５Ｍ塩酸水溶液を加え加熱還流を２時間行った。得られた溶液を水６４０ｍＬに加え中和し１５分間攪拌した。得られた固体を吸引ろ過し、真空ポンプで乾燥させた。得られた固体を再びＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2に溶解させ、ＭｇＳＯ4で乾燥後溶媒留去し、５−ベンジルオキシイソフタル酸（１１．４ｇ，４１．９ｍｍｏｌ）の白色固体を９４％の収率で得た。【００８０】
ＩＲ（ＫＢｒ）２９７６，１７００，１５９４，１４５７，１３７９，９５０．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ８．２４（ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）７．３８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３１（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ）．
ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ２７１．０６［Ｍ−Ｈ］-．【００８１】
［合成例８］１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−フェニルメチルオキシベンゼン（ｂｅｎｚｙｌ−ＵＢＤ）の合成
【化２３】
2017154991.tif 000028
５−ベンジルオキシイソフタル酸３．９５ｇ（１４．５ｍｍｏｌ）を６０ｍＬのチオニルクロライドへ溶解させ２時間加熱還流を行った。残渣をＴＨＦに溶解させ氷水中で攪拌した。得られた溶液に、ＮａＮ3（６．２２ｇ，９５．７ｍｍｏｌ）を溶解した水溶液６３ｍＬを加え２時間攪拌した。得られた溶液をトルエンで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。得られたベンジル−１，３−ベンゼンジカルボニルトリアジン誘導体溶液を真空ポンプで１００ｍＬになるまで留去した。この溶液を１００°Ｃで２時間加熱してベンジル−１，３−ベンゼンジイソシアナト誘導体を得た。この溶液に２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−アミン（Ｅｇ6Ｃ6ＮＨ2）（１３．２ｇ，３３．４ｍｍｏｌ）を溶解したＣＨ2Ｃｌ2溶液８４ｍＬを滴下し、氷水中で一晩攪拌した。得られた溶液を溶媒留去し、ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ（１０：１）の溶媒を用いたカラムクロマトグラフィーで精製し、１３．７ｇのｂｅｎｚｙｌ−ＵＢＤを９０％の収率で得た。【００８２】
ＩＲ（ｎｅａｔ  ｏｎ  ＮａＣｌ）３３４３，２９２６，２８１４，１６６９，１６１８，１５５０，１２５５，１１０７．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ７．４１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）６．９３（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｓ，２Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，２Ｈ）６．６５（ｓ，１Ｈ），５．４０（ｓ，１Ｈ），５．０４（ｓ，２Ｈ），３．６５−３．６１（ｍ，４０Ｈ），３．５７−３．５２（ｍ，８Ｈ），３．４５（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，４Ｈ），３．３５（ｓ，６Ｈ），３．２１（ｑ，Ｊ＝１２，６．６Ｈｚ，４Ｈ），１．５７−１．５４（ｍ，４Ｈ），１．５４−１．５８（ｍ，４Ｈ），１．３７−１．３６（ｍ，８Ｈ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１２６ＭＨｚ）δ１６０．０２，１５６．０９，１４１．１２，１３７．２５，１２８．４１，１２７．７０，１２７．５２，１０２．２０，９９．９６，７１．８７，７１．２１，７０．６４，７０．５１，７０．４７，６９．９６，６９．８０，５８．９６，３９．７８，２９．８６，２９．２７，２６．４６，２５．７２．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：  ｍ／ｚ  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ53Ｈ92Ｎ4Ｎａ2Ｏ17［Ｍ＋２Ｎａ］2+：５５１．３１２１  ｆｏｕｎｄ：５５１．３１２１．【００８３】
［合成例９］１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−ヒドロキシベンゼン（ＯＨ−ＵＢＤ）の合成
【化２４】
2017154991.tif 000029
水素雰囲気下、ｂｅｎｚｙｌ−ＵＢＤ（１３．１ｇ，１２．４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ溶液４６２ｍＬへ１．０ｇのＰｄ／Ｃ（Ｐｄ５％）を加え４８時間攪拌した。ろ過後、残渣を溶媒留去しＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ（５：１）の溶媒を用いてカラムクロマトグラフィーで精製を行い、１０．１ｇ（１０．４ｍｍｏｌ）のＯＨ−ＵＢＤを８４％の収率で得た。【００８４】
ＩＲ（Ｎｅａｔ  ｏｎ  ＮａＣｌ）３４７５，２９３０，２８６６，１６７２，１６１８，１５５６，１２４８，１１０６ｃｍ-1．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ８．０６（ｓ，１Ｈ），７．３６（ｓ，２Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），６．７３（ｓ，２Ｈ），５．５９（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），３．６４−３．６２（ｍ，４０Ｈ），３．５７−３．５３（ｍ，８Ｈ），３．４３（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，４Ｈ），３．３６（ｓ，６Ｈ），３．１６（ｑ，Ｊ＝１３，６．６Ｈｚ，４Ｈ），１．５７−１．５１（ｍ，４Ｈ），１．４８−１．４４（ｍ，４Ｈ），１．３２−１．３１（ｍ，８Ｈ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１２６ＭＨｚ）δ１５８．０５，１５６．３２，１４０．８６，１０１．６２，１０１．５８，７１．８８，７１．３２，７０．６１，７０．５４，７０．５０，７０．４５，６９．９４，５８．９６，３９．８８，２９．９５，２９．３５，２６．５７，２５．７５．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：  ｍ／ｚ  ｃａｌｃｄ．  ｆｏｒ  Ｃ46Ｈ86Ｎ4Ｎａ2Ｏ17［Ｍ＋２Ｎａ］2+：５０６．２８８６  ｆｏｕｎｄ：５０６．２８８３．【００８５】
［合成例１０］１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−（５−ベンゼン−５−イル）−（４−ブロモ−１−オキサブタン−１−イル）（Ｂｒ−ＡＬ−ＵＢＤ）の合成
【化２５】
2017154991.tif 000030
ＯＨ−ＵＢＤ９００ｍｇ（９３１μｍｏｌ）と１，３−ジブロモプロパン１．８８ｇ（９．３０ｎｍｏｌ）をアセトニトリル６０ｍＬに溶かし、炭酸カリウム１．２９ｇ（９．３０ｍｍｏｌ）を加え１０時間加熱還流した。ひだ折り濾過を行い、濾液を溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝１００：１〜２０：１）により精製することで淡黄色液体４６９ｍｇを得た。収率：４６％【００８６】
ＩＲ（ｎｅａｔ  ｏｎ  ＮａＣｌ）２９２５，２８６４，１６９６，１６１１，１５５９，１４５７，１４１９，１３４９，１２５７，１１０７，９４７，８４６ｃｍ-1．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ７．４１（ｓ，２Ｈ），６，９７（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），６．５６（ｓ，１Ｈ），５．５２（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），４．０７（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６５−３．６２（ｍ，４０Ｈ），３．５８−３．５３（ｍ，１０Ｈ），３．４６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４Ｈ），３．３６（ｓ，６Ｈ），３．２１（ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，４Ｈ），２．２６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），１．５７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，４Ｈ），１．５０（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），１．３６（ｍ，８Ｈ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１２６ＭＨｚ）δ１５９．９，１５６．１，１４１．１，１０２．０，９９．６，７７．３，７７．０，７６．８，７１．９，７１．２，７０．７，７０．５，７０．０，６５．３，５９．０，３９．８，３２．５，３０．２，３０．０，２９．３，２６．５，２５．７．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：  ｍ／ｚ  ｃａｌｃ．  ｆｏｒ  Ｃ49Ｈ91ＢｒＮ4Ｎａ2Ｏ17［Ｍ＋２Ｎａ］2+：５６７．２６６５  Ｆｏｕｎｄ：５６７．２７２８．【００８７】
［合成例１１］１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−（５−ベンゼン−５−イル）−（４−（ＤＯ３Ａ−（ＭｅＯ）3）−１−オキサブタン−１−イル）（ＤＯ３Ａ−ＡＬ−ＵＢＤ）の合成
【化２６】
2017154991.tif 000031
Ｂｒ−ＡＬ−ＵＢＤ１９８ｍｇ（１８２μｍｏｌ）と１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸トリメチル［ＤＯ３Ａ−（ＭｅＯ）3］７７．９ｍｇ（２００μｍｏｌ）をアセトニトリル５ｍＬに溶かし、炭酸カリウム２７．７ｍｇ（２００μｍｏｌ）を加え１５時間加熱還流した。ひだ折り濾過を行い、濾液を溶媒留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝１００：１〜１０：１）により精製することで淡黄色液体１２３ｍｇを得た。収率：４７％【００８８】
ＩＲ（ＫＢｒ）２９２７，２８６６，１７３５，１６８５，１６１４，１５５０，１４５７，１３５６，１２１０，１１０８ｃｍ-1．
1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ，５００ＭＨｚ）δ６．８７（ｓ，２Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），３．７３−３．５３（ｍ，５８Ｈ），３．５７（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，４Ｈ），３．５４−３．４７（ｍ，６Ｈ），３．４５−３．３２（ｍ，１１Ｈ），３．２１（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），３．１５−２．８９（ｍ，４Ｈ），２．８８−２．５７（ｍ，８Ｈ），２．２４−２．１３（ｍ，２Ｈ），１．６９−１．４９（ｍ，８Ｈ），１．４７−１．３４（ｍ，８Ｈ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１２６ＭＨｚ）δ１５９．９，１５６．１，１４１．１，１０２．０，９９．６，７７．３，７７．０，７６．８，７１．９，７１．２，７０．７，７０．５，７０．０，６５．３，５９．０，３９．８，３２．５，３０．２，３０．０，２９．３，２６．５，２５．７．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：  ｍ／ｚ  ｃａｌｃ．  ｆｏｒ  Ｃ66Ｈ123Ｎ8Ｏ23［Ｍ＋Ｈ］+：１３９５．８６９６  Ｆｏｕｎｄ：１３９５．８６２０．【００８９】
［実施例９］１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−（５−ベンゼン−５−イル）−（４−Ｇｄ−ＤＯ３Ａ）−１−オキサブタン−１−イル）（Ｇｄ−ＡＬ−ＵＢＤ）の合成
【化２７】
2017154991.tif 000032
ＤＯ３Ａ−ＡＬ−ＵＢＤ１１７ｍｇ（８１．４μｍｏｌ）をＮａＯＨ水溶液１０ｍＬ（ｐＨ＝１３）に溶解させ、室温下で一晩攪拌した。ＨＣｌ水溶液を加えｐＨ＝７．０に調整し、ＧｄＣｌ3・６Ｈ2Ｏ  ３４．２ｍｇ（９２．０μｍｏｌ）を水１０ｍＬに溶かした溶液をゆっくり滴下した。滴下に伴い低下するｐＨをＮａＯＨ水溶液を滴下することでｐＨ＝７．０付近に維持した。ｐＨ＝７．０に維持しながら一日攪拌した。凍結乾燥機を用いて乾燥することで、粘性白色化合物を得た。得られた化合物に対し透析チューブ（Ｍｗ＝１０００〜１５００）を用いて透析を行いフリーのＧｄイオンを除いた。キシレノールオレンジを用いたＵＶ測定によりＧｄイオンの流出完了を確認した。透析後の溶液を凍結乾燥機を用いて乾燥することで白色固体４０．９ｍｇを得た。収率：３３％【００９０】
ＩＲ（ＫＢｒ）２９２２，２８６７，１６８５，１６１０，１５５７，１４５７，１４１９，１２４９，１１０３，９４８，８４０ｃｍ-1．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：  ｍ／ｚ  ｃａｌｃ．  ｆｏｒ  Ｃ63Ｈ113Ｎ8ＮａＯ23［Ｍ＋Ｎａ］+：１５３０．７０６８  Ｆｏｕｎｄ：１５３０．７１６６．【００９１】
下記の反応スキーム４に従って、目的物質である１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−（５−ベンゼン−５−イル）−（４−Ｇｄ−ＤＯ３Ａ）−９−ブロモ−ジオキサオクタン−１−イル）（Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤ）を合成した。【００９２】
【化２８】
2017154991.tif 000033
【００９３】
［合成例１２］１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−（ベンゼン−５−イル）−（９−ブロモ−４，７−ジオキサオクタン−１−イル）（Ｂｒ−Ｅｇ−ＵＢＤ）の合成
【化２９】
2017154991.tif 000034
１，３−ジブロモプロパンの代わりに１，２−ビス（２−ブロモエトキシ）エタンを用いた以外は、合成例１０と同様の手法でＢｒ−Ｅｇ−ＵＢＤを合成した。収率：５４％【００９４】
ＩＲ（ｎｅａｔ  ｏｎ  ＮａＣｌ）２９２７，２８６６，１６９０，１６１２，１５５８，１４５６，１３５１，１２５９，１１０９，９４５，８４８ｃｍ-1．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，５００ＭＨｚ）δ７．２９（ｓ，２Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，２Ｈ），６．６０（ｓ，１Ｈ），５．４４（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），４．１１（ｔ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，２Ｈ），３．８３−３．８２（ｍ，４Ｈ），３．８０−３．６７（ｍ，４４Ｈ），３．６５−３．５３（ｍ，８Ｈ），３．４８−３．４５（ｍ，６Ｈ），３．３６（ｓ，６Ｈ），３．２１（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，４Ｈ），１．５７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，４Ｈ），１．５１（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ）１．３７−１．３６（ｍ，８Ｈ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１２６ＭＨｚ）δ１６０．０，１５５．９，１４１．０，１０２．３，９９．９，７１．９，７１．２，７１．３，７０．８，７０．７，７０．６，７０．５，７０．０，６９．８，６７．４，５９．０，４０．０，３０．４，２９．８，２９．２，２６．３，２５．７．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：  ｍ／ｚ  ｃａｌｃ．  ｆｏｒ  Ｃ52Ｈ97Ｎ4ＢｒＮａ2Ｏ19［Ｍ＋２Ｎａ］2+：６０３．２８５７  Ｆｏｕｎｄ：６０３．２９０７．【００９５】
［合成例１３］１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−（ベンゼン−５−イル）−（４−（ＤＯ３Ａ）−（ＭｅＯ）3）−９−ブロモ−４，７−ジオキサオクタン−１−イル）（ＤＯ３Ａ−Ｅｇ−ＵＢＤ）の合成
【化３０】
2017154991.tif 000035
Ｂｒ−ＡＬ−ＵＢＤの代わりにＢｒ−Ｅｇ−ＵＢＤを用いた以外は、合成例１１と同様の手法でＤＯ３Ａ−Ｅｇ−ＵＢＤを合成した。収率：４３％【００９６】
ＩＲ（ＫＢｒ）２９２５，２８６６，１７３７，１６８５，１６１４，１５５１，１４５７，１３５５，１２１０，１１０９，９４８，８４６ｃｍ-1．
1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ，５００ＭＨｚ）δ６．９３（ｓ，２Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），４．１５（ｓ，２Ｈ），３．８８−３．４７（ｍ，７７Ｈ），３．３９（ｓ，６Ｈ），３．３５−３．２３（ｍ，４Ｈ），３．１９（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，４Ｈ），２．９７−２．７８（ｍ，４Ｈ），２．７８−２．５２（ｍ，８Ｈ），１．７２−１．５２（ｍ，８Ｈ），１．４４−１．３２（ｍ，８Ｈ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１２６ＭＨｚ）δ１５９．９，１５６．１，１４１．１，１０２．０，９９．６，７７．３，７７．０，７６．８，７１．９，７１．２，７０．７，７０．５，７０．０，６５．３，５９．０，３９．８，３２．５，３０．２，３０．０，２９．３，２６．５，２５．７．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：  ｍ／ｚ  ｃａｌｃ．  ｆｏｒ  Ｃ69Ｈ128Ｎ8Ｎａ2Ｏ25［Ｍ＋２Ｎａ］2+：７５７．４３８８  Ｆｏｕｎｄ：７５７．４３９９．【００９７】
［実施例１０］１，１’−（ベンゼン−１，３−ジイル）ビス（３−（２，５，８，１１，１４，１７，２０−ヘプタオキサヘキサコサン−２６−イル）ウレア）−５−（ベンゼン−５−イル）−（４−Ｇｄ−ＤＯ３Ａ）−９−ブロモ−４，７−ジオキサオクタン−１−イル）（Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤ）の合成
【化３１】
2017154991.tif 000036
ＤＯ３Ａ−ＡＬ−ＵＢＤの代わりにＤＯ３Ａ−Ｅｇ−ＵＢＤを用いた以外は、実施例９と同様の手法でＧｄ−Ｅｇ−ＵＢＤを合成した。収率：４３％【００９８】
ＩＲ（ＫＢｒ）２９２５，２８６８，１６８２，１６１０，１５５６，１５４８，１４５３，１４１７，１２４９，１１０７，９４８，８４２ｃｍ-1．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）：  ｍ／ｚ  ｃａｌｃ．  ｆｏｒ  Ｃ66Ｈ119Ｎ8Ｎａ2Ｏ25［Ｍ＋Ｎａ］+：８１３．８６６４  Ｆｏｕｎｄ：８１３．８７２９．【００９９】
［実施例１１］臨界ミセル濃度（ＣＭＣ：ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｍｉｃｅｌｌｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）の測定
実施例１０で得られたＧｄ−Ｅｇ−ＵＢＤの臨界ミセル濃度を見積もるために、分光蛍光光度計を用いてピレン含有溶液中の蛍光強度変化を追跡した（図９）。ピレン１μＭ溶液中に、生理食塩水を用いて種々の濃度に調整したＧｄ−Ｅｇ−ＵＢＤを滴下することで生じるピレンの１番目のピーク（Ｉ1）と３番目のピーク（Ｉ3）との蛍光強度比を濃度でプロットした。その結果、変曲点が３３．３μＭで観測されたことから、この濃度以上でミセルが形成されることが分かった（図１０）。
また、実施例９で得られたＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤについてもＧｄ−Ｅｇ−ＵＢＤと同様に、臨界ミセル濃度を求めた。その結果、変曲点が２３．８μＭで観測されたことから、この濃度以上でミセルが形成されることが分かった（図１１及び図１２）。【０１００】
［実施例１２］ミセルサイズの測定
Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤの自己集合化で得られたミセルのサイズを求めるために、動的光散乱法（ＤＬＳ）による測定を、０．２５ｍＭ生理食塩水中で３７〜４７℃の温度範囲で行った。その結果、３７℃では、約３０ｎｍサイズのＤH（流体力学直径）に対応するピークが観測され、昇温することで新たに１０００ｎｍサイズのピークが観測された。４７℃では１０００ｎｍサイズのピークのみとなった（図１３）。
また、Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤと同様に、Ｇｄ−ＡＬ−ＵＢＤの自己集合化で得られたミセルを用いたＤＬＳによる測定を０．２５ｍＭ生理食塩水中で行い、温度依存的なサイズ変化が観測された（図１４）。【０１０１】
［実施例１３］走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）による観察
走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）を用いて、Ｇｄ−ＡＬ−ＵＢＤの自己集合化で得られたナノ微粒子の形態観察を行った。その結果、０．２５ｍＭ生理食塩水中で、３０ｎｍ程度のナノ微粒子を基本とし、それらが集合化していることが明らかとなった（図１５）。ＳＥＭでは、水を含んだナノ微粒子が乾燥により脱水化するためＤHよりも小さくなった。【０１０２】
［実施例１４］ＭＲＩ造影剤としての有用性の検討
ＭＲＩ造影剤としての有用性を検討するために、生理食塩水を用いて種々の濃度に調整したＧｄ−Ｅｇ−ＵＢＤ及びＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤのＴ1強調画像を得た。対象化合物として市販造影剤Ｇｄ−ＤＯＴＡを用いて同様に画像を得た（図１６）。その結果、Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤとＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤとは濃度依存的に輝度の上昇が観測された。しかし、濃度が２．５ｍＭ以上になると輝度の低下が観測された。これは高濃度によるＴ2強調増大に伴う挙動である。また、Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤとＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤとの０．３１ｍＭにおける輝度は、Ｇｄ−ＤＯＴＡ０．５ｍＭにおける輝度に比べて高いことから、同じ濃度では、Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤとＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤとは、Ｇｄ−ＤＯＴＡよりもより高い輝度を示した。
また、得られた画像からＴ1緩和時間を算出し、その逆数であるＴ1-1を濃度でプロットし、傾きから水プロトン緩和能（ｒ1）を算出した。その結果、Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤのｒ1は８．３ｍＭ-1ｓ-1を示し、またＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤのｒ1は２０．１ｍＭ-1ｓ-1を示した。これらの水プロトン緩和能（ｒ1）はＧｄ−ＤＯＴＡの水プロトン緩和能（ｒ1）の数倍の大きさであるので、Ｇｄ−Ｅｇ−ＵＢＤ及びＧｄ−ＡＬ−ＵＢＤがＭＲＩ造影剤として有用であることが示された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【国際調査報告】
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