(57)【要約】  TSP1の機能を阻害することで血管新生を促進することができ、重症下肢虚血などの疾患の治療または予防に有用である化合物の提供。  式（Ｉ）【化１】2018052002.tif 000173 ［式中、Ａは、連結基Ａ１〜Ａ６から選択され、Ｘａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在せず；Ｘａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；Ｘａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；Ｘａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、またはｍＳであり；Ｘａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒであり；Ｘａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；Ｘａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基であり；Ｘａａ８は、芳香族アミノ酸残基であり；Ｘａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基であり；Ｘａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基であり；Ｘａａ１１は、芳香族アミノ酸残基であり；Ｘａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基である］で表される大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩など。
2018052002.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2018052002.tif 000146
［式中、Ａは、連結基
【化２】
2018052002.tif 000147
から選択され、
ここで、
【化３】
2018052002.tif 000148
は、Ｘａａ１のＮ末端アミノ基への結合点を示すか、またはＸａａ１が存在しない場合にはＸａａ２のＮ末端アミノ基への結合点を示し、
【化４】
2018052002.tif 000149
は、Ｘａａ１２のＣ末端カルボニル基への結合点を示し、
【化５】
2018052002.tif 000150
は、Ｘａａ１のα炭素への結合点を示すか、またはＸａａ１が存在しない場合にはＸａａ２のα炭素への結合点を示し、
Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ１−３アルキルであり、
Ｒ１０はアミノまたはヒドロキシであり、
ｎは０〜３の整数であり、
ｉおよびｊはそれぞれ独立に１〜３の整数であり、
ｋおよびｌはそれぞれ独立に０〜３の整数であり、
ｍは１〜７の整数であり；
Ｘａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、またはｍＳであり；
Ｘａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ８は、芳香族アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ１１は、芳香族アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
ここで、脂肪族アミノ酸は、式（ＩＩａ）
【化６】
2018052002.tif 000151
（式中、Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６シクロアルキルである）で表されるアミノ酸であり；
芳香族アミノ酸は、式（ＩＩｂ）
【化７】
2018052002.tif 000152
（式中、Ｒ４は、フェニル、チエニル、ナフチル、インドリル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエニルから選択される芳香族基であり、該芳香族基は、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン原子、ヒドロキシ、Ｃ１−３アルコキシからなる群より独立して選択される１以上の置換基により置換されていてよく、ｐは０〜３の整数である）で表されるアミノ酸であり；
塩基性アミノ酸は、式（ＩＩｃ）
【化８】
2018052002.tif 000153
［式中、Ｒ５は、
式−（ＣＨ２）ｑａＮＨ２（式中、ｑａは１〜６の整数である）、
式
【化９】
2018052002.tif 000154
（式中、Ｒ６は水素原子またはＣ１−３アルキルであり、ｑｂは１〜６の整数である）、
式−（ＣＨ２）ｑｃＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２（式中、ｑｃは１〜６の整数である）、または
式
【化１０】
2018052002.tif 000155
（式中、ｑｄおよびｑｅはそれぞれ独立して１〜３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸であり；
中性アミノ酸は、式（ＩＩｄ）
【化１１】
2018052002.tif 000156
［式中、Ｒ７は、式−（ＣＨ２）ｒａＮＨＣＯＮＨ２（式中、ｒａは１〜６の整数である）または式−（ＣＨ２）ｒｂＳＨ（式中、ｒｂは１〜３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、ＭＯ１、ＭＯ２、Ｐｒｏ、３ＨｙＰ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、ｍＳ、ＭＳ、Ｔｈｒ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、またはＰｅｎであり；
酸性アミノ酸は、式（ＩＩｅ）
【化１２】
2018052002.tif 000157
［式中、Ｒ８は、式−（ＣＨ２）ｓＣＯＯＨ（式中、ｓは１〜６の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である］
で表される大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２】
Ｘａａ４がＳｅｒである、請求項１に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項３】
Ｘａａ５がＧｌｙである、請求項１または２に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項４】
Ｘａａ８が、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項５】
Ｘａａ８がＴｒｐである、請求項４に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項６】
Ｘａａ１１が、Ｔｒｐまたは２Ｎａｌである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項７】
Ｘａａ１１がＴｒｐである、請求項６に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項８】
Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在しない、請求項１〜７のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項９】
Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在しない、請求項８に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１０】
Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１１】
Ｘａａ２が２Ｎａｌである、請求項１０に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１２】
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１３】
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇである、請求項１２に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１４】
Ｘａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１５】
Ｘａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒである、請求項１４に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１６】
Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐである、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１７】
Ｘａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１８】
Ｘａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐである、請求項１７に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項１９】
Ｘａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐｈｇ、またはＶａｌである、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２０】
Ｘａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌである、請求項１９に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２１】
Ｘａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅである、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２２】
Ｘａａ１２がＶａｌである、請求項２１に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２３】
Ａが、連結基
【化１３】
2018052002.tif 000158
である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２４】
Ａが
【化１４】
2018052002.tif 000159
である、請求項２３に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２５】
Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり；
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり；
Ｘａａ４がＳｅｒであり；
Ｘａａ５がＧｌｙであり；
Ｘａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２であり；
Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
Ｘａａ８がＴｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり；
Ｘａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１１がＴｒｐまたは２Ｎａｌであり；
Ｘａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅであり；
Ａが、連結基
【化１５】
2018052002.tif 000160
である、請求項１に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２６】
Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２が２Ｎａｌであり；
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇであり；
Ｘａａ４がＳｅｒであり；
Ｘａａ５がＧｌｙであり；
Ｘａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒであり；
Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
Ｘａａ８がＴｒｐであり；
Ｘａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐであり；
Ｘａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１１がＴｒｐであり；
Ｘａａ１２がＶａｌであり；
Ａが
【化１６】
2018052002.tif 000161
である、請求項２５に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２７】
【化１７】
2018052002.tif 000162
【化１８】
2018052002.tif 000163
【化１９】
2018052002.tif 000164
【化２０】
2018052002.tif 000165
【化２１】
2018052002.tif 000166
【化２２】
2018052002.tif 000167
【化２３】
2018052002.tif 000168
【化２４】
2018052002.tif 000169
【化２５】
2018052002.tif 000170
【化２６】
2018052002.tif 000171
【化２７】
2018052002.tif 000172
で表される化合物からなる群より選択される、請求項２６に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む医薬組成物。
【請求項２９】
重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防のための、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
請求項１〜２７のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む、血管新生促進剤。
【請求項３１】
請求項１〜２７のいずれか一項に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩の治療または予防有効量をヒトに投与することを含む、疾患または症状の治療または予防のための方法。
【請求項３２】
疾患または症状が、重症下肢虚血または末梢動脈疾患である、請求項３１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血管新生抑制物質（thrombospondin 1/TSP1)の機能を阻害することで血管新生を促進することができ、重症下肢虚血などの疾患の治療または予防に有用である大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩に関する。
【背景技術】
【０００２】
重症下肢虚血（CLI）は、下肢への血流障害によって安静時疼痛が生じ、下肢末梢に潰瘍や壊死が生じた状態である。Fontaine分類ではIIIおよびIV、Rutherford分類では4-6に分類される（非特許文献１）。【０００３】
CLIは予後が不良で、死亡率が高いことが問題となっており、CLI患者に対しては、虚血組織での血管再生などにより血管システムを再構築し、酸素および栄養分を虚血組織に送り届けることによって、下肢の潰瘍・壊死の進展を抑制する治療が検討されている（非特許文献２）。これまでに、血管新生を促進する増殖因子を用いた遺伝子治療も試みられているが、動物実験とは異なり、臨床試験では有効性を示すに到っていない。そのような臨床試験成績から、血管新生抑制因子にも焦点が当てられ、血管新生促進因子と血管新生抑制因子とのバランスが重要であるといった仮説が立てられている（非特許文献３および４）。【０００４】
血管新生に対して抑制的に作用することが報告されている糖タンパク質thrombospondin 1 (TSP1)は、活性化血小板から放出され、内皮細胞、平滑筋細胞、腎メサンギウム細胞、尿細管細胞、および有足細胞を含む多くの細胞で合成され、分泌されることが報告されている（非特許文献５〜７）。TSP1は末梢血管障害患者の血液およびCLI患者の下肢骨格筋中でその発現が亢進していることから、CLI患者下肢における潰瘍・壊死の進展への関与が示唆されている（非特許文献８および９）。TSP1がラット下肢虚血-再灌流後の血流回復を抑制すること、TSP1欠損マウスにおいて下肢虚血後の血管新生が亢進することから、TSP1は下肢虚血後の血流回復に対して抑制的に働いていると考えられる（非特許文献１０および１１）。また、TSP1欠損マウスでは、創傷部位での血流が増加し、創傷サイズの縮小も亢進したことから、CLI患者で認められる傷に対して、TSP1の機能を阻害することにより創傷治癒効果が期待できる（非特許文献１２）。【０００５】
TSP1は血管新生阻害作用以外にも様々な薬理作用を示し、多くの疾患に関与していると考えられる。TSP1は血小板から分泌されて線溶系PAI-1レベルを増加させ、血栓形成を亢進させる（非特許文献１３）。肥満でインスリン抵抗性が生じている患者でTSP1レベルは増加し、TSP1はマクロファージに作用して、肥満により誘発される炎症反応を促進し、インスリン抵抗性を増悪させる（非特許文献１４および１５）。TSP1は腎有足細胞のアポトーシスを促進して、細胞機能の低下を誘発する（非特許文献１６）。TSP1は非食細胞上のsignal-regulatory protein-αに結合してNADPH oxidaseを活性化し、血管弛緩作用を抑制することにより、腎臓での虚血再灌流傷害を誘発する（非特許文献１７）。これらの結果から、TSP1阻害により、心筋梗塞、肥満患者における炎症反応やインスリン抵抗性、さらには虚血再灌流傷害を含む腎障害が改善される可能性がある。また、TSP1によって産生された血小板由来のマイクロパーティクルが、鎌型赤血球患者においてvaso-occlusive crisisを誘発する（非特許文献１８および１９）。さらには、TSP1が単核球の遊走・接着を亢進して、大動脈瘤における炎症反応が増強されることが報告されている（非特許文献２０）。TSP1は、癌細胞の細胞増殖、接着、浸潤への作用を介して、癌の抑制や促進に関与している可能性が報告されている（非特許文献２１）。
一方、TSP1とCD47受容体との結合を阻害する物質として、抗体（特許文献１）やポリペプチド（特許文献２）が知られている。しかしながら、TSP1に結合する大環状ポリペプチドについてはこれまで知られていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】WO 2008/060785
【特許文献２】US 2014/296477
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Kinlay S. Circ Cardiovasc Interv. 2016; 9: e001946.
【非特許文献２】Davies MG. Methodist Debakey Cardiovasc J. 2012; 8: 20-27.
【非特許文献３】Hellsten Y, Hoier B. Biochem. Soc. Trans. 2014; 42: 1616-1622.
【非特許文献４】Olfert IM. Microcirculation 2016; 23: 146-156.
【非特許文献５】Jimenez B, Volpert OV, Crawford SE, et al. Nat Med. 2000; 6: 41-48.
【非特許文献６】Henkin J, Volpert OV. Expert Opin Ther Targets. 2011; 15(12): 1369-1386.
【非特許文献７】Murphy-Ullrich JE, Iozzo RV. Matrix Biol. 2012; 31(3): 152-154.
【非特許文献８】Smadja DM, d'Audigier C, Bieche I, et al. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2011; 31: 551-559.
【非特許文献９】Favier J, Germain S, Emmerich J, et al. J Pathol 2005; 207: 358-366.
【非特許文献１０】Isenberg JS, Romeo MJ, Abu-Asab M, et al. Circ Res. 2007; 100(5): 712-720.
【非特許文献１１】Csanyi G, Yao M, Rodriguez AI, et al. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2012; 32: 2966-2973.
【非特許文献１２】Soto-Pantoja DR, Shih HB, Maxhimer JB, et al. Matrix Biol. 2014; 37: 25-34.
【非特許文献１３】Prakash P, Kulkarni PP, Chauhan AK. Blood 2015; 125(2): 399-406.
【非特許文献１４】Varma V, Yao-Borengasser A, Bodles AM, et al. Diabetes. 2008; 57(2): 432-439.
【非特許文献１５】Li Y, Tong X, Rumala C, et al. PLoS One. 2011; 6(10): e26656.
【非特許文献１６】Cui W, Maimaitiyiming H, Zhou Q, et al. Biochim Biophys Acta. 2015; 1852(7): 1323-1333.
【非特許文献１７】Yao M, Rogers NM, Csanyi G, et al. J Am Soc Nephrol. 2014; 25(6): 1171-1186.
【非特許文献１８】Hagag AA, Elmashad G, Abd El-Lateef AE. Mediterr J Hematol Infect Dis. 2014; 6(1): e2014044.
【非特許文献１９】Camus SM, Gausseres B, Bonnin P, et al. Blood. 2012; 120(25): 5050-5058.
【非特許文献２０】Liu Z, Morgan S, Ren J, et al. Circ Res. 2015; 117(2): 129-141.
【非特許文献２１】Esemuede N, Lee T, Pierre-Paul D. et al., The role of thrombospondin-1 in human disease. J Surg Res. 2004;122(1):135-42.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、TSP1の機能を阻害することで血管新生を促進することができ、重症下肢虚血などの疾患の治療または予防に有用である化合物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究した結果、特定のアミノ酸配列を有する大環状ポリペプチドがTSP1に結合し、TSP1への細胞の接着を阻害することにより、TSP1の機能を阻害することを見出し、本発明を完成させた。【００１０】
すなわち、本発明は、以下の［１］〜［３４］を提供するものである。
［１］式（Ｉ）【００１１】
【化１】
2018052002.tif 000003
【００１２】
［式中、Ａは、連結基【００１３】
【化２】
2018052002.tif 000004
【００１４】
から選択され、
ここで、【００１５】
【化３】
2018052002.tif 000005
【００１６】
は、Ｘａａ１のＮ末端アミノ基への結合点を示すか、またはＸａａ１が存在しない場合にはＸａａ２のＮ末端アミノ基への結合点を示し、【００１７】
【化４】
2018052002.tif 000006
【００１８】
は、Ｘａａ１２のＣ末端カルボニル基への結合点を示し、【００１９】
【化５】
2018052002.tif 000007
【００２０】
は、Ｘａａ１のα炭素への結合点を示すか、またはＸａａ１が存在しない場合にはＸａａ２のα炭素への結合点を示し、
Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ１−３アルキルであり、
Ｒ１０はアミノまたはヒドロキシであり、
ｎは０〜３の整数であり、
ｉおよびｊはそれぞれ独立に１〜３の整数であり、
ｋおよびｌはそれぞれ独立に０〜３の整数であり、
ｍは１〜７の整数であり；
Ｘａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、またはｍＳであり；
Ｘａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ８は、芳香族アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ１１は、芳香族アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
ここで、脂肪族アミノ酸は、式（ＩＩａ）【００２１】
【化６】
2018052002.tif 000008
【００２２】
（式中、Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６シクロアルキルである）で表されるアミノ酸であり；
芳香族アミノ酸は、式（ＩＩｂ）【００２３】
【化７】
2018052002.tif 000009
【００２４】
（式中、Ｒ４は、フェニル、チエニル、ナフチル、インドリル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエニルから選択される芳香族基であり、該芳香族基は、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン原子、ヒドロキシ、Ｃ１−３アルコキシからなる群より独立して選択される１以上の置換基により置換されていてよく、ｐは０〜３の整数である）で表されるアミノ酸であり；
塩基性アミノ酸は、式（ＩＩｃ）【００２５】
【化８】
2018052002.tif 000010
【００２６】
［式中、Ｒ５は、
式−（ＣＨ２）ｑａＮＨ２（式中、ｑａは１〜６の整数である）、
式【００２７】
【化９】
2018052002.tif 000011
【００２８】
（式中、Ｒ６は水素原子またはＣ１−３アルキルであり、ｑｂは１〜６の整数である）、
式−（ＣＨ２）ｑｃＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２（式中、ｑｃは１〜６の整数である）、または
式【００２９】
【化１０】
2018052002.tif 000012
【００３０】
（式中、ｑｄおよびｑｅはそれぞれ独立して１〜３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸であり；
中性アミノ酸は、式【００３１】
【化１１】
2018052002.tif 000013
【００３２】
［式中、Ｒ７は、式−（ＣＨ２）ｒａＮＨＣＯＮＨ２（式中、ｒａは１〜６の整数である）または式−（ＣＨ２）ｒｂＳＨ（式中、ｒｂは１〜３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、ＭＯ１、ＭＯ２、Ｐｒｏ、３ＨｙＰ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、ｍＳ、ＭＳ、Ｔｈｒ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、またはＰｅｎであり；
酸性アミノ酸は、式【００３３】
【化１２】
2018052002.tif 000014
【００３４】
［式中、Ｒ８は、式−（ＣＨ２）ｓＣＯＯＨ（式中、ｓは１〜６の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である］
で表される大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２］Ｘａａ４がＳｅｒである、［１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［３］Ｘａａ５がＧｌｙである、［１］または［２］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［４］Ｘａａ８が、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷである、［１］〜［３］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［５］Ｘａａ８がＴｒｐである、［４］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［６］Ｘａａ１１が、Ｔｒｐまたは２Ｎａｌである、［１］〜［５］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［７］Ｘａａ１１がＴｒｐである、［６］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［８］Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在しない、［１］〜［７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［９］Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在しない、［８］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１０］Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦである、［１］〜［９］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１１］Ｘａａ２が２Ｎａｌである、［１０］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１２］Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇである、［１］〜［１１］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１３］Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇである、［１２］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１４］Ｘａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２である、［１］〜［１３］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１５］Ｘａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒである、［１４］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１６］Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐである、［１］〜［１５］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１７］Ｘａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔである、［１］〜［１６］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１８］Ｘａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐである、［１７］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［１９］Ｘａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐhｇ、またはＶａｌである、［１］〜［１８］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２０］Ｘａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐhｇ、またはＶａｌである、［１９］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２１］Ｘａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅである、［１］〜［２０］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２２］Ｘａａ１２がＶａｌである、［２１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２３］Ａが、連結基【００３５】
【化１３】
2018052002.tif 000015
【００３６】
である、［１］〜［２２］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２４］Ａが【００３７】
【化１４】
2018052002.tif 000016
【００３８】
である、［２３］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２５］Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり；
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり；
Ｘａａ４がＳｅｒであり；
Ｘａａ５がＧｌｙであり；
Ｘａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２であり；
Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
Ｘａａ８がＴｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり；
Ｘａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐhｇ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１１がＴｒｐまたは２Ｎａｌであり；
Ｘａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅであり；
Ａが、連結基【００３９】
【化１５】
2018052002.tif 000017
【００４０】
である、［１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２６］Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２が２Ｎａｌであり；
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇであり；
Ｘａａ４がＳｅｒであり；
Ｘａａ５がＧｌｙであり；
Ｘａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒであり；
Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
Ｘａａ８がＴｒｐであり；
Ｘａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐであり；
Ｘａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１１がＴｒｐであり；
Ｘａａ１２がＶａｌであり；
Ａが【００４１】
【化１６】
2018052002.tif 000018
【００４２】
である、［２５］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２７］
【００４３】
【化１７】
2018052002.tif 000019
【００４４】
【化１８】
2018052002.tif 000020
【００４５】
【化１９】
2018052002.tif 000021
【００４６】
【化２０】
2018052002.tif 000022
【００４７】
【化２１】
2018052002.tif 000023
【００４８】
【化２２】
2018052002.tif 000024
【００４９】
【化２３】
2018052002.tif 000025
【００５０】
【化２４】
2018052002.tif 000026
【００５１】
【化２５】
2018052002.tif 000027
【００５２】
【化２６】
2018052002.tif 000028
【００５３】
【化２７】
2018052002.tif 000029
【００５４】
で表される化合物からなる群より選択される、［２６］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［２８］［１］〜［２７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む医薬組成物。
［２９］重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防のための、［２８］に記載の医薬組成物。
［３０］［１］〜［２７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む、血管新生促進剤。
［３１］［１］〜［２７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩の治療または予防有効量をヒトに投与することを含む、疾患または症状の治療または予防のための方法。
［３２］疾患または症状が、重症下肢虚血または末梢動脈疾患である、［３１］に記載の方法。
［３３］重症下肢虚血、末梢血管障害、心筋梗塞、肥満により誘発される炎症、大動脈瘤における炎症、糖尿病性腎症、IgA腎症、慢性腎不全、急性腎不全、腎障害、虚血再灌流障害、狭心症、扁平上皮がん、乳がん、すい臓がん、鎌型赤血球病に伴う血管閉塞（vaso-occlusive crisis）、血管新生阻害、組織壊死、インスリン抵抗性、または一般的な創傷の治療または予防のための、［２８］に記載の医薬組成物。
［３４］疾患または症状が、重症下肢虚血、末梢血管障害、心筋梗塞、肥満により誘発される炎症、大動脈瘤における炎症、糖尿病性腎症、IgA腎症、慢性腎不全、急性腎不全、腎障害、虚血再灌流障害、狭心症、扁平上皮がん、乳がん、すい臓がん、鎌型赤血球病に伴う血管閉塞（vaso-occlusive crisis）、血管新生阻害、組織壊死、インスリン抵抗性、または一般的な創傷である、［３１］に記載の方法。
［３５］疾患または症状の治療または予防における使用のための［１］〜［２７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［３６］疾患または症状が、重症下肢虚血または末梢動脈疾患である、［３５］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。【００５５】
また本発明は、以下の［Ａ１］〜［Ａ２６］を提供するものである。
［Ａ１］式（Ｉ）【００５６】
【化２８】
2018052002.tif 000030
【００５７】
［式中、Ａは、連結基【００５８】
【化２９】
2018052002.tif 000031
【００５９】
から選択され、
ここで、【００６０】
【化３０】
2018052002.tif 000032
【００６１】
は、Ｘａａ１のＮ末端アミノ基への結合点を示すか、またはＸａａ１が存在しない場合にはＸａａ２のＮ末端アミノ基への結合点を示し、【００６２】
【化３１】
2018052002.tif 000033
【００６３】
は、Ｘａａ１２のＣ末端カルボニル基への結合点を示し、【００６４】
【化３２】
2018052002.tif 000034
【００６５】
は、Ｘａａ１のα炭素への結合点を示すか、またはＸａａ１が存在しない場合にはＸａａ２のα炭素への結合点を示し、
Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ１−３アルキルであり、
Ｒ１０はアミノまたはヒドロキシであり、
ｎは０〜３の整数であり、
ｉおよびｊはそれぞれ独立に１〜３の整数であり、
ｋおよびｌはそれぞれ独立に０〜３の整数であり、
ｍは１〜７の整数であり；
Ｘａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、またはｍＳであり；
Ｘａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒであり；
Ｘａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ８は、芳香族アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ１１は、芳香族アミノ酸の残基であり；
Ｘａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基であり；
ここで、脂肪族アミノ酸は、式（ＩＩａ）【００６６】
【化３３】
2018052002.tif 000035
【００６７】
（式中、Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６シクロアルキルである）で表されるアミノ酸であり；
芳香族アミノ酸は、式（ＩＩｂ）【００６８】
【化３４】
2018052002.tif 000036
【００６９】
（式中、Ｒ４は、フェニル、チエニル、ナフチル、インドリル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエニルから選択される芳香族基であり、該芳香族基は、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン原子、ヒドロキシ、Ｃ１−３アルコキシから選択される１以上の置換基により置換されていてよく、ｐは０〜３の整数である）で表されるアミノ酸であり；
塩基性アミノ酸は、式（ＩＩｃ）【００７０】
【化３５】
2018052002.tif 000037
【００７１】
［式中、Ｒ５は、
式−（ＣＨ２）ｑａＮＨ２（式中、ｑａは１〜６の整数である）、
式【００７２】
【化３６】
2018052002.tif 000038
【００７３】
（式中、Ｒ６は水素原子またはＣ１−３アルキルであり、ｑｂは１〜６の整数である）、
式−（ＣＨ２）ｑｃＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２（式中、ｑｃは１〜６の整数である）、または
式【００７４】
【化３７】
2018052002.tif 000039
【００７５】
（式中、ｑｄおよびｑｅはそれぞれ独立して１〜３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸であり；
中性アミノ酸は、式【００７６】
【化３８】
2018052002.tif 000040
【００７７】
［式中、Ｒ７は、式−（ＣＨ２）ｒａＮＨＣＯＮＨ２（式中、ｒａは１〜６の整数である）または式−（ＣＨ２）ｒｂＳＨ（式中、ｒｂは１〜３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、ＭＯ１、ＭＯ２、Ｐｒｏ、３ＨｙＰ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、ｍＳ、ＭＳ、Ｔｈｒ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、またはＰｅｎであり；
酸性アミノ酸は、式【００７８】
【化３９】
2018052002.tif 000041
【００７９】
［式中、Ｒ８は、式−（ＣＨ２）ｓＣＯＯＨ（式中、ｓは１〜６の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である］
で表される大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２］Ｘａａ４がＳｅｒである、［Ａ１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ３］Ｘａａ５がＧｌｙである、［Ａ１］または［Ａ２］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ４］Ｘａａ８が、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷである、［Ａ１］〜［Ａ３］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ５］Ｘａａ８がＴｒｐである、［Ａ４］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ６］Ｘａａ１１が、Ｔｒｐまたは２Ｎａｌである、［Ａ１］〜［Ａ５］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ７］Ｘａａ１１がＴｒｐである、［Ａ６］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ８］Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在しない、［Ａ１］〜［Ａ７］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ９］Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在しない、［Ａ８］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１０］Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦである、［Ａ１］〜［Ａ９］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１１］Ｘａａ２が２Ｎａｌである、［Ａ１０］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１２］Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇである、［Ａ１］〜［Ａ１１］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１３］Ｘａａ３が、Ｉｌｅである、［Ａ１２］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１４］Ｘａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２である、［Ａ１］〜［Ａ１３］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１５］Ｘａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒである、［Ａ１４］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１６］Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐである、［Ａ１］〜［Ａ１５］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１７］Ｘａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔである、［Ａ１］〜［Ａ１６］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１８］Ｘａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐである、［Ａ１７］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ１９］Ｘａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、またはＶａｌである、［Ａ１］〜［Ａ１８］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２０］Ｘａａ１０がＡｒｇ、Ｌｙｓ、またはＨｉｓである、［Ａ１９］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２１］Ｘａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅである、［Ａ１］〜［Ａ２０］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２２］Ｘａａ１２がＶａｌである、［Ａ２１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２３］Ａが、連結基【００８０】
【化４０】
2018052002.tif 000042
【００８１】
である、［Ａ１］〜［Ａ２２］のいずれかに記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２４］Ａが【００８２】
【化４１】
2018052002.tif 000043
【００８３】
である、［Ａ２３］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２５］Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり；
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり；
Ｘａａ４がＳｅｒであり；
Ｘａａ５がＧｌｙであり；
Ｘａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２であり；
Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
Ｘａａ８がＴｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり；
Ｘａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１１がＴｒｐまたは２Ｎａｌであり；
Ｘａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅであり；
Ａが、連結基【００８４】
【化４２】
2018052002.tif 000044
【００８５】
である、［Ａ１］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
［Ａ２６］Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２が２Ｎａｌであり；
Ｘａａ３が、Ｉｌｅであり；
Ｘａａ４がＳｅｒであり；
Ｘａａ５がＧｌｙであり；
Ｘａａ６がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒであり；
Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
Ｘａａ８がＴｒｐであり；
Ｘａａ９がＶａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐであり；
Ｘａａ１０がＡｒｇまたはＬｙｓであり；
Ｘａａ１１がＴｒｐであり；
Ｘａａ１２がＶａｌであり；
Ａが【００８６】
【化４３】
2018052002.tif 000045
【００８７】
である、［Ａ２５］に記載の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩。
【発明の効果】
【００８８】
本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、TSP1に結合し、TSP1への血管内皮細胞などの細胞の接着を阻害することができる。従って本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、TSP1の発現亢進により誘発される疾患または症状の治療または予防に有用である。また本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、血管新生促進剤として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００８９】
（定義）
本明細書中、天然アミノ酸は、天然に存在するタンパク質中に通常見出される未修飾のアミノ酸を意味し、具体的には、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンを意味する。なお、本明細書においては、天然アミノ酸の表記には、三文字表記または一文字表記を用いる場合がある（すなわち、アラニン：ＡｌａまたはＡ；アルギニン：ＡｒｇまたはＲ；アスパラギン：ＡｓｎまたはＮ；アスパラギン酸：ＡｓｐまたはＤ；システイン：ＣｙｓまたはＣ；グルタミン酸：ＧｌｕまたはＥ；グルタミン：ＧｌｎまたはＱ；グリシン：ＧｌｙまたはＧ；ヒスチジン：ＨｉｓまたはＨ；イソロイシン：ＩｌｅまたはＩ；ロイシン：ＬｅｕまたはＬ；リジン：ＬｙｓまたはＫ；メチオニン：ＭｅｔまたはＭ；フェニルアラニン：ＰｈｅまたはＦ；プロリン：ＰｒｏまたはＰ；セリン：Ｓｅｒ又はＳ；スレオニン：ＴｈｒまたはＴ；トリプトファン：ＴｒｐまたはＷ；チロシン：ＴｙｒまたはＹ；バリン：ＶａｌまたはＶ）。
【００９０】
本明細書中、非天然アミノ酸は、天然アミノ酸以外のアミノ酸を意味し、天然アミノ酸の修飾体も含まれる。本明細書中に記載する非天然アミノ酸の略語を以下に示す。
【００９１】
【化４４】
2018052002.tif 000046
【００９２】
なお、本明細書においてアミノ酸という場合、ポリペプチドの構成アミノ酸についてはアミノ酸残基を意味する。また特に明記しない限り、アミノ酸はＬ−アミノ酸を意味する。
【００９３】
本明細書中、脂肪族アミノ酸は、式（ＩＩａ）：
【００９４】
【化４５】
2018052002.tif 000047
【００９５】
（式中、Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６シクロアルキルである）で表されるアミノ酸である。
【００９６】
天然の脂肪族アミノ酸としては、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、およびＩｌｅが挙げられる。また非天然の脂肪族アミノ酸としては、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ａｈｐ、Ａｏｃ、Ａｌｇ、Ｂｔｇなどが挙げられるがこれらに限定されない。
【００９７】
本明細書中、芳香族アミノ酸は、式（ＩＩｂ）
【００９８】
【化４６】
2018052002.tif 000048
【００９９】
（式中、Ｒ４は、フェニル、チエニル、ナフチル、インドリル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエニルから選択される芳香族基であり、該芳香族基は、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン原子、ヒドロキシ、Ｃ１−３アルコキシからなる群より独立して選択される１以上の置換基により置換されていてよく、ｐは０〜３の整数である）で表されるアミノ酸である。
【０１００】
天然の芳香族アミノ酸としては、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、およびＴｒｐが挙げられる。また非天然の芳香族アミノ酸としては、２Ｎａｌ、４ＣＦ、ＤＣＦ、６ＣＷ、ＨＦ、Ｐｈｇなどが挙げられるがこれらに限定されない。
【０１０１】
本明細書中、塩基性アミノ酸は、式（ＩＩｃ）
【０１０２】
【化４７】
2018052002.tif 000049
【０１０３】
［式中、Ｒ５は、
式−（ＣＨ２）ｑａＮＨ２（式中、ｑａは１〜６の整数である）、
式
【０１０４】
【化４８】
2018052002.tif 000050
【０１０５】
（式中、Ｒ６は水素原子またはＣ１−３アルキルであり、ｑｂは１〜６の整数である）、
式−（ＣＨ２）ｑｃＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２（式中、ｑｃは１〜６の整数である）、または
式
【０１０６】
【化４９】
2018052002.tif 000051
【０１０７】
（式中、ｑｄおよびｑｅはそれぞれ独立して１〜３の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である。
【０１０８】
天然の塩基性アミノ酸としては、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、およびＡｒｇが挙げられる。また非天然の塩基性アミノ酸としては、３ＭＨ、ＡＭＦなどが挙げられるがこれらに限定されない。
【０１０９】
本明細書中、中性アミノ酸は、式（ＩＩｄ）
【０１１０】
【化５０】
2018052002.tif 000052
【０１１１】
［式中、Ｒ７は、式−（ＣＨ２）ｒａＮＨＣＯＮＨ２（式中、ｒａは１〜６の整数（例えば、１、２、３、４、５、または６）である）、または式−（ＣＨ２）ｒｂＳＨ（式中、ｒｂは１〜３の整数（例えば、１、２、または３）である）で表される基である］で表されるアミノ酸、Ｇｌｙ、Ｍｅｔ、ＭＯ１、ＭＯ２、Ｐｒｏ、３ＨｙＰ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、ｍＳ、ＭＳ、Ｔｈｒ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、またはＰｅｎである。
【０１１２】
天然の中性アミノ酸としては、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ａｓｎ、およびＧｌｎが挙げられる。また非天然の中性アミノ酸としては、ＭＯ１、ＭＯ２、３ＨｙＰ、ｍＳ、ＭＳ、Ａｌｂ、Ｃｉｔ、Ｈｃｔ、Ｈｃｙ、Ｃ(Ｏ)、Ｃ(Ｏ２)、Ｐｅｎなどが挙げられるがこれらに限定されない。
【０１１３】
本明細書中、酸性アミノ酸は、式（ＩＩｅ）
【０１１４】
【化５１】
2018052002.tif 000053
【０１１５】
［式中、Ｒ８は、式−（ＣＨ２）ｓＣＯＯＨ（式中、ｓは１〜６の整数である）で表される基である］で表されるアミノ酸である。
【０１１６】
天然の酸性アミノ酸としては、ＡｓｐおよびＧｌｕが挙げられる。
【０１１７】
本明細書中、Ｃ１−３アルキルは、１〜３個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルであり、例えば、メチル、エチル、１−プロピル、または２−プロピルである。
【０１１８】
本明細書中、Ｃ１−６アルキルは、１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルであり、例えば、メチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、１−ブチル、２−ブチル、２−メチル−１−プロピル、２−メチル−２−プロピル、１−ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、２−メチル−２−ブチル、３−メチル−２−ブチル、１−ヘキシル、２−ヘキシル、３−ヘキシル、２−メチル−１−ペンチル、３−メチル−１−ペンチル、２−エチル−１−ブチル、２,２−ジメチル−１−ブチル、または２,３−ジメチル−１−ブチルである。
【０１１９】
本明細書中、Ｃ２−６アルケニルは、２〜６個の炭素原子を有し、１以上の二重結合を含む直鎖または分枝鎖アルケニルであり、例えば、ビニル、１−プロペニル、２−プロペニル（アリル）、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、１−メチル−２−プロペニル、２−メチル−２−プロペニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、１−メチル−２−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル、３−メチル−２−ペンテニルなどが挙げられ、好ましくは、ビニル、２−プロペニル（アリル）、３−ブテニル、４−ペンテニル、５−ヘキセニルである。
【０１２０】
本明細書中、Ｃ３−６シクロアルキルは、３〜６個の炭素原子を有する環状アルキル基であり、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、または、シクロヘキシル基である。
【０１２１】
本明細書中、ハロゲン原子は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである。
【０１２２】
本明細書中、Ｃ１−３アルコキシは、１個の上記Ｃ１−３アルキル基で置換されたヒドロキシル基であり、例えば、メトキシ、エトキシ、１−プロポキシ、または２−プロポキシである。
【０１２３】
本明細書中、ＴＳＰ１阻害活性とは、ＴＳＰ１の血管新生阻害作用を含む１つ以上の作用を阻害する活性をいう。ＴＳＰ１阻害活性は、本願の実施例に示されるヒトＴＳＰ１および血管内皮細胞を用いた細胞接着阻害アッセイにより測定される。該アッセイにおいて、被験物質の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）が２００ｎＭ以下である場合、ＴＳＰ１阻害活性を有すると決定される。
【０１２４】
（本発明の大環状ポリペプチド）
本発明は、ＴＳＰ１阻害活性を有する新規大環状ポリペプチドに関する。
【０１２５】
一態様において、本発明に係る化合物は、式（Ｉ）
【０１２６】
【化５２】
2018052002.tif 000054
【０１２７】
で表される大環状ポリペプチドである（以下、本発明の大環状ポリペプチドという）。本発明の大環状ポリペプチドにおいては、Ｘａａ１〜Ｘａａ１２のアミノ酸、またはＸａａ１が存在しない場合にはＸａａ２〜Ｘａａ１２のアミノ酸が、アミド結合により連結されてポリペプチド鎖が形成されており、Ｎ末端アミノ酸（Ｘａａ１またはＸａａ２）とＣ末端アミノ酸（Ｘａａ１２）とが連結基：Ａを介して連結され大環状構造が形成されている。
【０１２８】
式（Ｉ）において、Ａは、アミノ酸構造を含む下記の連結基Ａ１〜Ａ６：
【０１２９】
【化５３】
2018052002.tif 000055
【０１３０】
から選択される。
【０１３１】
Ａにおいて、末端に記載されている
【０１３２】
【化５４】
2018052002.tif 000056
【０１３３】
は、Ｘａａ１のＮ末端アミノ基への結合点を示すか、またはＸａａ１が存在しない場合にはＸａａ２のＮ末端アミノ基への結合点を示し、
【０１３４】
【化５５】
2018052002.tif 000057
【０１３５】
は、Ｘａａ１２のＣ末端カルボニル基への結合点を示し、
【０１３６】
【化５６】
2018052002.tif 000058
【０１３７】
は、Ｘａａ１のα炭素への結合点を示すか、またはＸａａ１が存在しない場合にはＸａａ２のα炭素への結合点を示す。上記連結基に含まれるアミノ酸構造の不斉点はＲ体であってもＳ体であってもよい。
【０１３８】
一態様において、Ａは、
【０１３９】
【化５７】
2018052002.tif 000059
【０１４０】
である（以下、Ａ１という）。連結基Ａ１において、ｎは０〜３の整数（例えば、０、１、２、または３）であり、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ１−３アルキルであり、Ｒ１０はアミノまたはヒドロキシである。Ｃ１−３アルキルは、好ましくはメチルである。
【０１４１】
Ａ１の好ましい態様としては、Ｒ１およびＲ２がそれぞれ水素原子であり、Ｒ１０がアミノであり、ｎが０である、連結基
【０１４２】
【化５８】
2018052002.tif 000060
【０１４３】
が挙げられる（以下、Ａ１ａという）。Ａ１ａは、例えば、Ｘａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＣｙｓ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）の−ＳＨを、Ｘａａ１またはＸａａ２のＮ末端アミノ基に結合した−ＣＯＣＨ２Ｘ（ＸはＣｌなどの脱離基）と反応させることにより得ることができる。この場合、ＣｙｓはＬ−アミノ酸またはＤ−アミノ酸であってもよい。特に、Ａ１ａにおいてＸａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＣｙｓ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）がＬ−アミノ酸である場合の連結基を、Ａ１ａ１という。
【０１４４】
Ａ１の好ましい別の態様としては、Ｒ１およびＲ２がそれぞれ水素原子であり、Ｒ１０がアミノであり、ｎが１である、連結基
【０１４５】
【化５９】
2018052002.tif 000061
【０１４６】
が挙げられる（以下、Ａ１ｂという）。Ａ１ｂは、例えば、Ｘａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＨｃｙ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）の−ＳＨを、Ｘａａ１またはＸａａ２のＮ末端アミノ基に結合した−ＣＯＣＨ２Ｘ（ＸはＣｌなどの脱離基）と反応させることにより得ることができる。この場合、ＨｃｙはＬ−アミノ酸またはＤ−アミノ酸であってもよい。特に、Ａ１ｂにおいてＸａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＨｃｙ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）がＬ−アミノ酸である場合の連結基を、Ａ１ｂ１という。
【０１４７】
連結基Ａ１の好ましい別の態様としては、Ｒ１およびＲ２がそれぞれメチルであり、Ｒ１０がアミノであり、ｎが０である、連結基
【０１４８】
【化６０】
2018052002.tif 000062
【０１４９】
が挙げられる（以下、Ａ１ｃという）。Ａ１ｃは、例えば、Ｘａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＰｅｎ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）の−ＳＨを、Ｘａａ１またはＸａａ２のＮ末端アミノ基に結合した−ＣＯＣＨ２Ｘ（ＸはＣｌなどの脱離基）と反応させることにより得ることができる。この場合、ＰｅｎはＬ−アミノ酸またはＤ−アミノ酸であってもよい。特に、Ａ１ｃにおいてＸａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＰｅｎ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）がＬ−アミノ酸である場合の連結基を、Ａ１ｃ１という。
【０１５０】
別の態様において、連結基Ａは、
【０１５１】
【化６１】
2018052002.tif 000063
【０１５２】
である（以下、Ａ２という）。Ａ２において、ｎは０〜３の整数（例えば、０、１、２、または３）であり、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ１−３アルキルであり、Ｒ１０はアミノまたはヒドロキシである。
【０１５３】
Ａ２の好ましい態様としては、Ｒ１およびＲ２がそれぞれ水素原子であり、Ｒ１０がアミノであり、ｎが０である連結基が挙げられる（以下、Ａ２ａという）。Ａ２ａは、例えば上記Ａ１ａのスルフィド基を酸化してスルホキシドとすることにより得ることができる。特に、Ａ１ａ１のスルフィド基を酸化してスルホキシドとした場合の連結基を、Ａ２ａ１という。
【０１５４】
別の態様において、Ａは、
【０１５５】
【化６２】
2018052002.tif 000064
【０１５６】
である（以下、Ａ３という）。Ａ３において、ｎは０〜３の整数（例えば、０、１、２、または３）であり、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に水素原子またはＣ１−３アルキルであり、Ｒ１０はアミノまたはヒドロキシである。
【０１５７】
Ａ３の好ましい態様としては、Ｒ１およびＲ２がそれぞれ水素原子であり、Ｒ１０がアミノであり、ｎが０である連結基が挙げられる（以下、Ａ３ａという）。Ａ３ａは、例えば上記Ａ１ａのスルフィド基を酸化してスルホンとすることにより得ることができる。特に、Ａ１ａ１のスルフィド基を酸化してスルホンとした場合の連結基を、Ａ３ａ１という。
【０１５８】
別の態様において、Ａは、
【０１５９】
【化６３】
2018052002.tif 000065
【０１６０】
である（以下、Ａ４という）。Ａ４において、ｉおよびｊはそれぞれ独立に１〜３の整数（例えば、１、２、または３）であり、Ｒ１０はアミノまたはヒドロキシである。
【０１６１】
ＡがＡ４である場合、Ｘａａ１またはＸａａ２は、
【０１６２】
【化６４】
2018052002.tif 000066
【０１６３】
［式中、Ｒ９は、式−（ＣＨ２）ｔＳＨ（式中、ｔは１〜３の整数（例えば、１、２、または３）である）で表される基である］で表されるアミノ酸の残基である。
【０１６４】
Ａ４の好ましい態様において、ｉおよびｊはそれぞれ１であり、Ｒ１０はアミノである（以下、Ａ４ａという）。Ａ４ａは、例えば、Ｘａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＣｙｓ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）の−ＳＨを、Ｘａａ１またはＸａａ２の−ＳＨと反応させることにより得ることができる。この場合、ＣｙｓはＬ−アミノ酸またはＤ−アミノ酸であってもよい。特に、Ｘａａ１２のＣ末端側にアミド結合したＣｙｓ（ただしカルボキシがアミドに変換されている）がＬ−アミノ酸であるＡ４ａを、Ａ４ａ１という。
【０１６５】
別の態様において、Ａは、
【０１６６】
【化６５】
2018052002.tif 000067
【０１６７】
である（以下、Ａ５という）。Ａ５において、ｋおよびｌはそれぞれ独立に０〜３の整数（例えば、０、１、２、または３）であり、Ｒ１０はアミノまたはヒドロキシである。連結基Ａ５は、例えば、Ｘａａ１２のＣ末端側にアミド結合した、側鎖に−（ＣＨ２）ｌＣＨ＝ＣＨ２を有するアミノ酸（カルボキシがアミドに変換されていてもよい）と、Ｘａａ１またはＸａａ２のＮ末端アミノ基に結合した―ＣＯ（ＣＨ２）ｋＣＨ＝ＣＨ２とのオレフィンメタセシスにより得ることができる。この場合、Ｘａａ１２のＣ末端側にアミド結合したアミノ酸はＬ−アミノ酸およびＤ−アミノ酸のいずれであってもよい。
【０１６８】
別の態様において、Ａは、
【０１６９】
【化６６】
2018052002.tif 000068
【０１７０】
である（以下、Ａ６という）。Ａ６において、ｍは１〜７の整数（例えば、１、２、３、４、５、６、または７）であり、Ｒ１０はアミノまたはヒドロキシである。Ａ６は、例えば、Ａ５におけるＣ−Ｃ二重結合を還元することにより得ることができる。
【０１７１】
式（Ｉ）において、Ｘａａ１は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、中性アミノ酸、または酸性アミノ酸の残基であるか、あるいは存在しない。好ましい態様において、Ｘａａ１は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず、より好ましくは、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在しない。
【０１７２】
式（Ｉ）において、Ｘａａ２は、芳香族アミノ酸または中性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘａａ２は、芳香族アミノ酸の残基であり、より好ましくは、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり、さらに好ましくは、２Ｎａｌである。
【０１７３】
式（Ｉ）において、Ｘａａ３は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘａａ３は、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり、より好ましくは、Ｉｌｅ、またはＡｒｇである。
【０１７４】
式（Ｉ）において、Ｘａａ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、またはｍＳである。好ましい態様において、Ｘａａ４は、Ｓｅｒである。
【０１７５】
式（Ｉ）において、Ｘａａ５は、ＧｌｙまたはＳｅｒである。好ましい態様において、Ｘａａ５は、Ｇｌｙである。
【０１７６】
式（Ｉ）において、Ｘａａ６は、塩基性アミノ酸または中性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘａａ６は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｃｉｔ、Ｓｅｒ、またはＭＯ２であり、より好ましくは、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒである。
【０１７７】
式（Ｉ）において、Ｘａａ７は、中性アミノ酸または酸性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘａａ７は、ＡｓｎまたはＡｓｐである。
【０１７８】
式（Ｉ）において、Ｘａａ８は、芳香族アミノ酸残基である。好ましい態様において、Ｘａａ８は、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり、より好ましくはＴｒｐである。
【０１７９】
式（Ｉ）において、Ｘａａ９は、脂肪族アミノ酸、中性アミノ酸、または芳香族アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘａａ９は、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり、より好ましくは、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐである。
【０１８０】
式（Ｉ）において、Ｘａａ１０は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または中性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘａａ１０は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり、より好ましくはＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌである。
【０１８１】
式（Ｉ）において、Ｘａａ１１は、芳香族アミノ酸残基である。好ましい態様において、Ｘａａ１１は、Ｔｒｐまたは２Ｎａｌであり、より好ましくは、Ｔｒｐである。
【０１８２】
式（Ｉ）において、Ｘａａ１２は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、または塩基性アミノ酸の残基である。好ましい態様において、Ｘａａ１２は、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅであり、より好ましくはＶａｌである。
【０１８３】
本発明の大環状ポリペプチドの好ましい態様としては、式（Ｉ）において、
Ａが連結基Ａ１ａ、Ａ１ｂ、またはＡ１ｃであり；
Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＣｙｓであるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＤＣＦであり；
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｔｌｅ、Ｔｒｐ、２Ｎａｌ、４ＣＦ、またはＡｒｇであり；
Ｘａａ４がＳｅｒであり；
Ｘａａ５がＧｌｙであり；
Ｘａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｃｉｔ、またはＭＯ２であり；
Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
Ｘａａ８がＴｒｐ、２Ｎａｌ、または６ＣＷであり；
Ｘａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、Ａｈｐ、またはＭｅｔであり；
Ｘａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡＭＦ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１１がＴｒｐまたは２Ｎａｌであり；かつ
Ｘａａ１２が、Ｖａｌ、Ｔｌｅ、またはＰｈｅである；
大環状ポリペプチドが挙げられる。
【０１８４】
本発明の大環状ポリペプチドのより好ましい態様としては、式（Ｉ）において、
Ａが連結基Ａ１ａであり；
Ｘａａ１が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであるか、あるいは存在せず；
Ｘａａ２が、２Ｎａｌであり；
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、またはＡｒｇであり；
Ｘａａ４が、Ｓｅｒであり；
Ｘａａ５が、Ｇｌｙであり；
Ｘａａ６が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＳｅｒであり；
Ｘａａ７が、ＡｓｎまたはＡｓｐであり；
Ｘａａ８が、Ｔｒｐであり；
Ｘａａ９が、Ｖａｌ、Ｎｌｅ、またはＡｈｐであり；
Ｘａａ１０が、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｐｈｇ、またはＶａｌであり；
Ｘａａ１１が、Ｔｒｐであり；かつ
Ｘａａ１２が、Ｖａｌである；
大環状ポリペプチドが挙げられる。
【０１８５】
本発明の大環状ポリペプチドのさらに好ましい態様としては、
【０１８６】
【化６７】
2018052002.tif 000069
【０１８７】
【化６８】
2018052002.tif 000070
【０１８８】
【化６９】
2018052002.tif 000071
【０１８９】
【化７０】
2018052002.tif 000072
【０１９０】
【化７１】
2018052002.tif 000073
【０１９１】
【化７２】
2018052002.tif 000074
【０１９２】
【化７３】
2018052002.tif 000075
【０１９３】
【化７４】
2018052002.tif 000076
【０１９４】
【化７５】
2018052002.tif 000077
【０１９５】
【化７６】
2018052002.tif 000078
【０１９６】
【化７７】
2018052002.tif 000079
【０１９７】
で表される化合物からなる群より選択される大環状ポリペプチドが挙げられる。ここに示されたポリペプチドは、後述する実施例２４、４０、４１、４２、４３、４４、４５、５８、６０、７５、７６、９５、９６、および９８〜１０１の化合物であり、Ａはいずれも連結基Ａ１ａ１である。
【０１９８】
本発明の大環状ポリペプチドが塩基性基を有する場合、酸と組み合わされて塩を形成することができ、これらの塩は、本発明に包含される。そのような塩としては、例えば、無機酸塩、有機酸塩、アミノ酸塩、およびスルホン酸塩が挙げられる。無機酸塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などが挙げられる。有機酸塩としては、例えば、酢酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、フタル酸塩、トリフルオロ酢酸塩などが挙げられる。アミノ酸塩としては、例えば、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩などが挙げられる。スルホン酸塩としては、例えば、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、２,４−ジメチルベンゼンスルホン酸塩、２,４,６−トリメチルベンゼンスルホン酸塩、４−エチルベンゼンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩などが挙げられる。本発明の大環状ポリペプチドの薬理上許容される塩の好ましい態様としては、酢酸塩、塩酸塩、またはトリフルオロ酢酸塩であり、より好ましくは、酢酸塩である。
【０１９９】
本発明の大環状ポリペプチドが酸性基を有する場合、塩基と組合わされて塩を形成することができ、これらの塩は、本発明に包含される。これらの塩としては、例えば、金属塩、無機アミン塩、有機アミン塩、およびアミノ酸塩が挙げられる。金属塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩などが挙げられる。無機アミン塩としては、例えば、アンモニウム塩が挙げられる。有機アミン塩としては、例えば、モルホリン塩、グルコサミン塩、エチレンジアミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、ジエタノールアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩などが挙げられる。アミノ酸塩としては、例えば、リジン塩、アルギニン塩などが挙げられる。
【０２００】
本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、結晶の形態で使用されてもよく、該結晶は、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩のみから形成されていても、共結晶や溶媒和物（例えば水和物）を形成していてもよい。本発明の大環状ポリペプチドおよびその薬理上許容される塩は、いずれかを単独でまたは２種以上を適宜組み合わせて用いてもよい。
【０２０１】
本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、それを構成する１個以上の原子が非天然の比率で同位体原子に置換された同位体化合物を形成することができる。同位体原子は、放射性または非放射性であり得、例えば、重水素（２Ｈ；Ｄ）、トリチウム（３Ｈ；Ｔ）、炭素−１４（１４Ｃ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）などである。放射性の同位体原子で標識された化合物は、疾患の治療または予防薬、研究用試薬（例えば、アッセイ用試薬）、診断薬（例えば、画像診断薬）などとして使用され得る。本発明は、放射性または非放射性の同位体化合物を包含する。
【０２０２】
本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、化学合成、無細胞翻訳系などの当該技術分野において知られている方法で製造することができる。例えば、本発明の大環状ポリペプチドの化学合成は、9-フルオニルメトキシカルボニル基（Fmoc基）をαアミノ基の保護基として用いる一般的な固相合成法に従って行うことができる。固相合成には、市販の自動合成機（例えばSyro II（Biotage Japan社）、Liberty Blue（CEM社）など）を用いることができる。
【０２０３】
例えば、連結基としてＡ１を有する本発明の大環状ポリペプチドは、例えば以下の方法に従って得ることができる。
【０２０４】
ペプチド自動合成機を用いて、固相支持体（例えば、Rink Amide Resin AM (Novaviochem社)、2-Chlorotrityl chloride resin(Novaviochem社)など）に、アミノ基の保護基（例えば、Fmoc基など）で保護されたアミノ酸をＣ末端側から順次連結する（Ｃ末端アミノ酸はチオールを有するアミノ酸である）。アミノ基の脱保護は当業者に知られた方法（例えば、Fmoc基の場合は20%ピペリジン／1-メチル-2-ピロリジノンなど）で行う。Ｎ末端のアミノ酸を連結し、アミノ基を脱保護した後、連結基を形成させるための基（例えば、クロロメチルカルボニル基など）を導入し（例えば、クロロ酢酸をＮ末端アミノ基と反応させ）、大環状ペプチドを形成する。その後、得られたペプチドをペプチドレジンから、常法（例えば、Rink Amide Resin AMを使用する場合には、トリフルオロ酢酸−エタンジチオール−トリイソプロピルシラン−水を使用する条件）により切断する。エーテル沈殿により粗ペプチドを回収したのち、常法（例えば、逆相高速液体クロマトグラフィー）により目的物を精製する。得られた目的物は常法により所望の塩に変換することができる。
連結基としてＡ４を有する本発明の大環状ポリペプチドは、例えば上記方法において最後にＮ末端のアミノ酸として−ＳＨを含むアミノ酸を連結することにより、さらに連結基を形成させるための基を導入することなく大環状ペプチドを形成することができる。
【０２０５】
連結基としてＡ２またはＡ３を有する本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、例えば、Ａ１を有する本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を酸化剤（例えば、m-クロロ過安息香酸、過酸化水素水またはジメチルジオキシラン）により酸化することにより得ることができる。
【０２０６】
例えば、連結基としてＡ５またはＡ６を有する本発明の大環状ポリペプチドは、例えば以下の方法に従って得ることができる。
【０２０７】
【化７８】
2018052002.tif 000080
【０２０８】
末端基Ｂ１およびＢ２を有するポリペプチドは、ペプチド自動合成機を用いて、固相支持体に、アミノ基の保護基（例えば、Fmoc基など）で保護されたアミノ酸をＣ末端側から順次連結し（Ｃ末端アミノ酸はオレフィンを有するアミノ酸である）、Ｎ末端のアミノ酸のアミノ基を脱保護した後、連結基を形成させるための基（例えば、２−プロペニル基など）を導入することにより調製することができる。
末端基Ｂ１およびＢ２を有するポリペプチドを調製した後に、適切な触媒（例えば、第２世代グラブス触媒）を使用してオレフィンメタセシス反応を行うことにより連結基としてＡ５を有する大環状ポリペプチドを調製することができる。該ポリペプチドを適切な条件下（例えば、水素、ウィルキンソン触媒）で還元反応に付すことにより、連結基としてＡ６を有する大環状ポリペプチドを得ることができる。
【０２０９】
本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、ＴＳＰ１阻害活性を有し、ＴＳＰ１への血管内皮細胞の接着を阻害することができるため、血管新生阻害剤として有用である。
【０２１０】
（医薬組成物）
本発明はさらに、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩を有効成分として含む医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、優れたＴＳＰ１阻害活性を有しており、ＴＳＰ１の発現亢進により誘発される疾患または症状（例えば、血管新生阻害に起因する疾患、血栓形成亢進に起因する疾患、炎症性疾患、腎臓細胞機能低下に起因する疾患、血管弛緩作用の抑制に起因する疾患、虚血性疾患、癌疾患などの疾患、および鎌型赤血球病に伴う血管閉塞（vaso-occlusive crisis）、血管新生阻害、組織壊死、インスリン抵抗性、一般的な創傷などの症状）の治療または予防に有用である。血管新生阻害に起因する疾患としては、例えば、重症下肢虚血、末梢血管障害などが挙げられる。血栓形成亢進に起因する疾患としては、例えば、心筋梗塞、末梢血管障害（PAD）などが挙げられる。炎症性疾患としては、例えば、肥満により誘発される炎症、大動脈瘤における炎症などが挙げられる。腎臓細胞機能低下に起因する疾患としては、例えば、糖尿病性腎症、IgA腎症、慢性腎不全、急性腎不全などが挙げられる。血管弛緩作用の抑制に起因する疾患としては、例えば、腎障害、虚血再灌流障害などが挙げられる。虚血性疾患としては、例えば、心筋梗塞、狭心症などが挙げられる。癌疾患としては、例えば、扁平上皮がん、乳がん、すい臓がんなどが挙げられる。ＴＳＰ１は、扁平上皮がん、乳がん、およびすい臓がんの進行を促進することが報告されている（例えば、前記非特許文献２１、第３９頁左欄、下から１４行〜右欄３行、およびTable 4参照）。好ましい態様において、本発明の医薬組成物は、重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防に有用であり、例えば、重症下肢虚血患者における創傷治癒の促進および重症下肢虚血に対する血管内治療の予後の改善に有用である。
【０２１１】
ＴＳＰ１は、重症下肢虚血患者の下肢骨格筋中でその発現が亢進していることが知られている。いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、本発明の医薬組成物は、ＴＳＰ１への血管内皮細胞の接着を阻害することにより、ＴＳＰ１によって阻害されている血管新生を促進することができると考えられる。それにより本発明の医薬組成物は、重症下肢虚血患者における創傷治癒を促進することができ、またカテーテルなどによる血管内治療と組み合わせた場合に当該治療の予後を改善する（例えば、再狭窄を予防する）ことができる。
【０２１２】
本発明において、疾患または症状の治療または予防には、該疾患の発症の予防、増悪または進行の抑制または阻害、該疾患に罹患した個体が呈する一つ以上の症状の軽減または増悪もしくは進行の抑制、二次性疾患の治療または予防などが含まれる。
【０２１３】
本発明の医薬組成物は、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩と、適宜の薬理学上許容される添加剤とを混合して製剤化することができる。例えば、本発明の医薬組成物は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤などの製剤として経口的に、または、注射剤、経皮吸収剤などの製剤として非経口的に投与することができる。
【０２１４】
これらの製剤は、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、乳化剤、安定剤、希釈剤、注射剤用溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、防腐剤、抗酸化剤などの添加剤を用いて、周知の方法で製造される。
【０２１５】
賦形剤としては、例えば、有機系賦形剤または無機系賦形剤が挙げられる。有機系賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖のような糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプンのようなデンプン誘導体；結晶セルロースのようなセルロース誘導体；アラビアゴムなどが挙げられる。無機系賦形剤としては、例えば、硫酸カルシウムのような硫酸塩が挙げられる。
【０２１６】
結合剤としては、例えば、上記の賦形剤；ゼラチン；ポリビニルピロリドン；ポリエチレングリコールなどが挙げられる。
【０２１７】
崩壊剤としては、例えば、上記の賦形剤；クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウムのような化学修飾された、デンプンまたはセルロース誘導体；架橋ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。
【０２１８】
滑沢剤としては、例えば、タルク；ステアリン酸；コロイドシリカ；ビーズワックス、ゲイロウのようなワックス類；硫酸ナトリウムのような硫酸塩；ラウリル硫酸ナトリウムのようなラウリル硫酸塩；上記の賦形剤におけるデンプン誘導体などが挙げられる。
【０２１９】
乳化剤としては、例えば、ベントナイト、ビーガムのようなコロイド性粘土；ラウリル硫酸ナトリウムのような陰イオン界面活性剤；塩化ベンザルコニウムのような陽イオン界面活性剤；ポリオキシエチレンアルキルエーテルのような非イオン界面活性剤などが挙げられる。
【０２２０】
安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベンのようなパラヒドロキシ安息香酸エステル類；クロロブタノールのようなアルコール類；フェノール、クレゾールのようなフェノール類などが挙げられる。
【０２２１】
希釈剤としては、例えば、水、エタノール、プロピレングリコールなどが挙げられる。
【０２２２】
注射剤用溶剤としては、例えば、水、エタノール、グリセリンなどが挙げられる。
【０２２３】
溶解補助剤としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、D-マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。
【０２２４】
懸濁化剤としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリンなどの界面活性剤；例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの親水性高分子などが挙げられる。
【０２２５】
等張化剤としては、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、D-マンニトールなどが挙げられる。
【０２２６】
緩衝剤としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩などの緩衝液などが挙げられる。
【０２２７】
無痛化剤としては、例えばベンジルアルコールなどが挙げられる。
【０２２８】
防腐剤としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸などが挙げられる。
【０２２９】
抗酸化剤としては、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸などが挙げられる。
【０２３０】
本発明の医薬組成物が投与される対象は、例えば、哺乳動物であり、好ましくはヒトである。
【０２３１】
本発明の医薬組成物の投与径路としては、経口投与および非経口投与のいずれでもよく、対象となる疾患に応じて好適な投与経路を選択すればよい。また投与経路は、全身投与および局所投与のいずれであってもよい。非経口投与としては、例えば、静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮内投与、皮下投与、腹腔内投与、経皮投与、骨内投与、関節内投与などを挙げることができる。本発明の医薬組成物の投与径路の好ましい態様は、静脈内投与、皮下投与、または経皮投与である。
【０２３２】
本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、治療または予防に有効な量で対象に投与される。「治療または予防に有効な量」とは、特定の疾患、投与形態および投与径路につき治療または予防効果を奏する量を意味し、対象の種、疾患の種類、症状、性別、年齢、持病、その他の要素に応じて適宜決定される。
【０２３３】
本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩の投与量は、対象の種、疾患の種類、症状、性別、年齢、持病、その他の要素に応じて適宜決定され、ヒトの成人に対しては、通常、０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、好適には０．１〜１０ｍｇ／ｋｇを、１〜７日間に１回、または１日２回もしくは３回以上投与することができる。
【０２３４】
本発明の医薬組成物は、少なくとも１つの既知の治療剤または治療法と併用してもよい。例えば、重症下肢虚血の治療においては、カテーテルなどの血管内治療の前に、後に、または同時に、本発明の医薬組成物を投与することができる。
本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、薬剤溶出性ステント（ＤＥＳ）によって送達することができる。薬剤溶出性ステントとは、ステント表面に薬剤を担持させ、血管内留置後、薬剤が徐々に溶出されるようにしたステントをいう。
【０２３５】
また本発明は、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩の治療または予防有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む、疾患または症状の治療または予防のための方法に関する。
【０２３６】
本発明における「治療または予防有効量」とは、特定の疾患または症状、投与形態および投与径路につき治療または予防効果を奏する量を意味し、対象の種、疾患または症状の種類、症状、性別、年齢、持病、その他の要素に応じて適宜決定される。
【０２３７】
本発明における「対象」は、例えば、哺乳動物であり、好ましくはヒトである。
【０２３８】
本発明における「投与すること」には、経口投与および非経口投与が含まれ、全身投与および局所投与のいずれであってもよい。非経口投与としては、例えば、静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮内投与、皮下投与、腹腔内投与、経皮投与、骨内投与、関節内投与などを挙げることができる。本発明における「投与すること」の好ましい態様は、静脈内投与、皮下投与、または経皮投与である。
【０２３９】
本発明における「疾患または症状」としては、ＴＳＰ１の発現亢進により誘発される疾患または症状が挙げられる。本発明によれば、重症下肢虚血または末梢動脈疾患を治療または予防することができる。
【０２４０】
以下、実施例および試験例を挙げて、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲は、これらに限定されるものではない。
【実施例】
【０２４１】
（実施例１〜１０４）
実施例１〜１０４の大環状ポリペプチドの構造式を以下に示す。【０２４２】
【化７９】
2018052002.tif 000081
【０２４３】
【化８０】
2018052002.tif 000082
【０２４４】
【化８１】
2018052002.tif 000083
【０２４５】
【化８２】
2018052002.tif 000084
【０２４６】
【化８３】
2018052002.tif 000085
【０２４７】
【化８４】
2018052002.tif 000086
【０２４８】
【化８５】
2018052002.tif 000087
【０２４９】
【化８６】
2018052002.tif 000088
【０２５０】
【化８７】
2018052002.tif 000089
【０２５１】
【化８８】
2018052002.tif 000090
【０２５２】
【化８９】
2018052002.tif 000091
【０２５３】
【化９０】
2018052002.tif 000092
【０２５４】
【化９１】
2018052002.tif 000093
【０２５５】
【化９２】
2018052002.tif 000094
【０２５６】
【化９３】
2018052002.tif 000095
【０２５７】
【化９４】
2018052002.tif 000096
【０２５８】
【化９５】
2018052002.tif 000097
【０２５９】
【化９６】
2018052002.tif 000098
【０２６０】
【化９７】
2018052002.tif 000099
【０２６１】
【化９８】
2018052002.tif 000100
【０２６２】
【化９９】
2018052002.tif 000101
【０２６３】
【化１００】
2018052002.tif 000102
【０２６４】
【化１０１】
2018052002.tif 000103
【０２６５】
【化１０２】
2018052002.tif 000104
【０２６６】
【化１０３】
2018052002.tif 000105
【０２６７】
【化１０４】
2018052002.tif 000106
【０２６８】
【化１０５】
2018052002.tif 000107
【０２６９】
【化１０６】
2018052002.tif 000108
【０２７０】
【化１０７】
2018052002.tif 000109
【０２７１】
【化１０８】
2018052002.tif 000110
【０２７２】
【化１０９】
2018052002.tif 000111
【０２７３】
【化１１０】
2018052002.tif 000112
【０２７４】
【化１１１】
2018052002.tif 000113
【０２７５】
【化１１２】
2018052002.tif 000114
【０２７６】
【化１１３】
2018052002.tif 000115
【０２７７】
【化１１４】
2018052002.tif 000116
【０２７８】
【化１１５】
2018052002.tif 000117
【０２７９】
【化１１６】
2018052002.tif 000118
【０２８０】
【化１１７】
2018052002.tif 000119
【０２８１】
【化１１８】
2018052002.tif 000120
【０２８２】
【化１１９】
2018052002.tif 000121
【０２８３】
【化１２０】
2018052002.tif 000122
【０２８４】
【化１２１】
2018052002.tif 000123
【０２８５】
【化１２２】
2018052002.tif 000124
【０２８６】
【化１２３】
2018052002.tif 000125
【０２８７】
【化１２４】
2018052002.tif 000126
【０２８８】
【化１２５】
2018052002.tif 000127
【０２８９】
【化１２６】
2018052002.tif 000128
【０２９０】
【化１２７】
2018052002.tif 000129
【０２９１】
【化１２８】
2018052002.tif 000130
【０２９２】
【化１２９】
2018052002.tif 000131
【０２９３】
【化１３０】
2018052002.tif 000132
【０２９４】
また実施例１〜１０４の大環状ポリペプチドを構成する残基を表１〜４に示す。表中の１３番目のアミノ酸は、連結基を構成するアミノ酸であり、そのＣ末端はアミド基に変換されている。【０２９５】
【表１】
2018052002.tif 000133
【０２９６】
【表２】
2018052002.tif 000134
【０２９７】
【表３】
2018052002.tif 000135
【０２９８】
【表４】
2018052002.tif 000136
【０２９９】
表５〜７に示す通り、実施例１〜１０４の大環状ポリペプチドを下記の合成法１〜５により、またその酢酸塩を合成法６により、合成した。なお、化合物ＸＸＸａは、化合物ＸＸＸの酢酸塩を示す。【０３００】
【表５】
2018052002.tif 000137
【０３０１】
【表６】
2018052002.tif 000138
【０３０２】
【表７】
2018052002.tif 000139
【０３０３】
合成法１
自動合成機Syro II(Biotage Japan社)を用い、9-フルオニルメトキシカルボニル基（Fmoc基）をαアミノ基の保護基として用いる一般的な固相合成法に従って行った。
Rink Amide Resin AM (Novaviochem社)の88μmol相当を反応用ベッセルに加え、1-メチル-2-ピロリジノン中で、以下の１）および２）に従って順次アミノ酸を連結した。
１）CysおよびHis：N, N-ジイソプロピルカルボジイミド、1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール(HOAt)、Fmoc基で保護されたアミノ酸をそれぞれ3当量加えて反応させた。
２）その他のアミノ酸：O-（7-アザベンゾトリアゾール-1-イル）-N, N, N’, N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート(HATU)、N, N-ジイソプロピルアミン、Fmoc基で保護されたアミノ酸をそれぞれ3当量加えて反応させた。
Fmoc基の脱保護は20%ピペリジン／1-メチル-2-ピロリジノンで行った。
N末端のアミノ酸を連結し、Fmoc基を脱保護した後、1-メチル-2-ピロリジノン中で、N,N-ジイソプロピルカルボジイミド、1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール（HOAt）、クロロ酢酸をそれぞれ3当量加えて反応させた。
得られたペプチドレジンを1-メチル-2-ピロリジノンで3回、ジクロロメタンで3回洗浄して乾燥し、トリフルオロ酢酸−エタンジチオール−トリイソプロピルシラン−水（体積比で92.5: 2.5: 2.5: 2.5）を2mL加えて室温で3時間攪拌した。
エーテル沈殿により切断された粗ペプチドを回収し、tert-ブチルメチルエーテルで２回洗浄して乾燥した後、ジメチルスルホキシド（8mL）に溶解し、n-プロピルアミン（80μL）を加えて終夜静置した。酢酸（80μL）を加えた後、V10（Biotage Japan社）で反応液を濃縮し、Kinetex5u XB-C18（150 x 21.2 mm, Phenomenex社）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーで目的物を精製した。移動相として0.1%トリフルオロ酢酸を含む水−アセトニトリルを用いた。目的物のフラクションを凍結乾燥して、トリフルオロ酢酸塩として目的物を得た。【０３０４】
合成法２
合成法1に従って、目的物のフラクションを凍結乾燥した後、0.1N塩酸−アセトニトリルに溶解し再び凍結乾燥して、塩酸塩として目的物を得た。【０３０５】
合成法３
自動合成機Liberty Blue（CEM社）を用い、9-フルオニルメトキシカルボニル基（Fmoc基）をαアミノ基の保護基として用いる一般的な固相合成法に従って行った。
Rink Amide Resin AM (Bovaviochem社)の100μmol相当を反応用ベッセルに加え、N, N-ジメチルホルムアミド中でN, N-ジイソプロピルカルボジイミド、シアノ（ヒドロキシイミノ）酢酸エチル、Fmoc基で保護されたアミノ酸をそれぞれ5当量加えて反応させ、順次アミノ酸を連結した。
Fmoc基の脱保護は20%ピペリジン／N, N-ジメチルホルムアミドで行った。
N末端のアミノ酸を連結し、Fmoc基を脱保護した後、N, N-ジメチルホルムアミド中で、N, N-ジイソプロピルカルボジイミド、シアノ（ヒドロキシイミノ）酢酸エチル、クロロ酢酸をそれぞれ5当量加えて反応させた。
得られたペプチドレジンをN, N-ジメチルホルムアミドで3回、ジクロロメタンで3回洗浄して乾燥し、トリフルオロ酢酸−エタンジチオール−トリイソプロピルシラン−水（体積比で92.5: 2.5: 2.5: 2.5）を2mL加えて室温で3時間攪拌した。
エーテル沈殿により切断された粗ペプチドを回収し、tert-ブチルメチルエーテルで2回洗浄して乾燥した後、ジメチルスルホキシド（8ml）に溶解し、ｎ−プロピルアミン（80μL）を加えて終夜静置した。酢酸（80μL）を加えた後、V10（Biotage Japan社）で反応液を濃縮し、Kinetex5u XB-C18（150 x 21.2 mm, Phenomenex社）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーで目的物を精製した。移動相として0.1%トリフルオロ酢酸を含む水−アセトニトリルを用いた。目的物のフラクションを凍結乾燥した後、0.1N塩酸-アセトニトリルに溶解し再び凍結乾燥して、塩酸塩として目的物を得た。【０３０６】
合成法４
合成法２で得た大環状ポリペプチド塩酸塩（40.0mg, 24μmol）をアセトニトリル（5mL）、50mM炭酸水素アンモニウム水溶液（5mL）に溶解させた。m-クロロ過安息香酸の100mg/mLアセトニトリル溶液を64μL（24μmol）加えて攪拌し、室温で静置した。2時間後さらに15μL（6μmol）加えて1時間静置した。Kinetex5u XB-C18（150 x 21.2 mm, Phenomenex社）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーで目的物を精製した。移動相として0.1%トリフルオロ酢酸を含む水−アセトニトリルを用いた。目的物のフラクションを凍結乾燥して、トリフルオロ酢酸塩として目的物を得た。【０３０７】
合成法５
合成法２で得た大環状ポリペプチド塩酸塩（40.0mg, 24μmol）をアセトニトリル（5mL）、50mM炭酸水素アンモニウム水溶液（5mL）に溶解させた。m-クロロ過安息香酸の100mg/mLアセトニトリル溶液を127μL（48μmol）加えて攪拌し、室温で静置した。2時間後さらに64μL（24μmol）加えて1時間静置した。Kinetex5u XB-C18（150 x 21.2 mm, Phenomenex社）を用いた逆相高速液体クロマトグラフィーで目的物を精製した。移動相として0.1%トリフルオロ酢酸を含む水−アセトニトリルを用いた。目的物のフラクションを凍結乾燥して、トリフルオロ酢酸塩として目的物を得た。【０３０８】
合成法６
合成法１で得た目的物のトリフルオロ酢酸塩、または合成法２で得た目的物の塩酸塩を10%アセトニトリル水溶液に溶解し（5-10mM）、あらかじめ酢酸イオンに置換しておいたダウエックス（登録商標）(1x8 100-200メッシュ、1.2meq/ml、和光純薬工業株式会社)を50当量加えて2時間振とうした。ろ過した後、ろ液を凍結乾燥し、目的物を酢酸塩として得た。【０３０９】
実施例１〜１０４の大環状ポリペプチドの合成に用いた天然アミノ酸試薬を表８および９に示す。また実施例１〜１０４の大環状ポリペプチドの合成に用いたか、または用い得る非天然アミノ酸試薬とその調達先を表１０〜１２に示す。【０３１０】
【表８】
2018052002.tif 000140
【０３１１】
【表９】
2018052002.tif 000141
【０３１２】
【表１０】
2018052002.tif 000142
【０３１３】
【表１１】
2018052002.tif 000143
【０３１４】
【表１２】
2018052002.tif 000144
【０３１５】
各大環状ポリペプチドの精製に用いたＨＰＬＣ条件および保持時間を表５〜７に示す。ＨＰＬＣ条件１〜４は以下の通りである。【０３１６】
ＨＰＬＣ条件１
カラム：Kinetex 1.7u XB-C18(50 x 2.1 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水  B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：0.6 ml/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ１０％）、０．３３分（Ｂ１０％）、０．３４分（Ｂ２０％）、０．６６分（Ｂ２０％）、０．６７分（Ｂ３０％）、０．９９分（Ｂ３０％）、１．００分（Ｂ４０％）、１．３３分（Ｂ４０％）、１．３４分（Ｂ５０％）、１．６６分（Ｂ５０％）、１．６７分（Ｂ８０％）、２．５０分（Ｂ８０％）【０３１７】
ＨＰＬＣ条件２
カラム：Inertsil  ODS-3(150 x 4.6 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水  B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：1.0 mL/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ１０％)、２０．００分（Ｂ７０％)【０３１８】
ＨＰＬＣ条件３
カラム：Inertsil  ODS-3(150 x 4.6 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水  B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：1.5 mL/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ２５％)、８．００分（Ｂ７０％)【０３１９】
ＨＰＬＣ条件４
カラム：Inertsil  ODS-3(150 x 4.6 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水  B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：1.5 mL/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ５％)、８．００分（Ｂ７０％)【０３２０】
また得られた目的物の質量分析を、以下の条件でＬＣ−ＭＳまたはＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳにより行った。各大環状ポリペプチドのＭＳ実測値を表５〜７に示す。【０３２１】
ＬＣ−ＭＳ条件
Agilent 6530 Accurate-Mass Q-TOF LC/MS（Agilent Tecnology社）を用いて測定した。
カラム：Kinetex 1.7u XB-C18(50 x 2.1 mm)
移動相：A: 0.1% TFA-水  B: 0.1% TFA-アセトニトリル
温度：40℃
流速：0.6 ml/min
グラジエント：０．０１分（Ｂ１０％）、０．３３分（Ｂ１０％）、０．３４分（Ｂ２０％）、０．６６分（Ｂ２０％）、０．６７分（Ｂ３０％）、０．９９分（Ｂ３０％）、１．００分（Ｂ４０％）、１．３３分（Ｂ４０％）、１．３４分（Ｂ５０％）、１．６６分（Ｂ５０％）、１．６７分（Ｂ８０％）、２．５０分（Ｂ８０％）【０３２２】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ条件
4800  MALDI TOF/TOF（ABSCIEX社）を用いて測定した。マトリックスにはα−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮酸（CHCA）を用いた。【０３２３】
（試験例１）細胞接着阻害アッセイ
Ｉ．材料・試薬
・96 well Non-treated White with clear bottom (Coster, 3632)
・BrightMax adhesive sealing films (EXCEL Scientific WT50)
・プロテオセーブ（登録商標）SS 15mL (住友ベークライトMS-52150)
・Thrombospondin human platelet (Calbiochem 605225)
・HUVEC (KURABO KE-4109P10)
・EGM-2 MV (Lonza, CC-3202): HUVEC継代用
・Collagen coated dish (IWAKI 4020-010): HUVEC継代用
・Lipidure（登録商標）-BL802 (日油) 5% solution
・DMEM low glucose (GIBCO 11054-020)
・Albumin solution (35%) fraction V from Bovine (Sigma A7979)
・CellTiter-Glo (Promega G7572)【０３２４】
ＩＩ．アッセイ
＜Plate coat＞
Thrombospondin 1 vial (25 μg)をTBS (+2mM CaCl2、以下すべて同じ)に溶解し、200μg/ml溶液を調製し、プロテオセーブ（登録商標）15 mLチューブ中で10μg/mLになるようにTBSで希釈した。10μg/mL溶液を50μL/wellで96 well plateに分注し（吸着しやすいのでリザーバーは使用しなかった）、4℃で一晩静置した。
＜Plate blocking＞
Lipidure（登録商標）をTBSで10倍希釈し0.5% solutionを調製した。上記＜Plate coat＞でコートしておいたプレートのバッファーを捨て、使用するすべてのウェルに0.5% solutionを100μL/wellで分注し、室温で１時間静置した。
＜サンプルの希釈＞
希釈バッファー（DMEM +0.5% BSA）を用いて、各サンプルについて0.2μM溶液を調製した。0.2μM溶液2μLを希釈バッファー500μLで希釈し、希釈サンプルを調製した。Vehicle controlとしてDMSOを用い、サンプルと同様に希釈した。
＜サンプル分注＞
上記＜Plate blocking＞のプレートのブロッキング液を捨て、TBS 150μL/wellで3回洗浄した。3回目の洗浄液をアスピレーターで完全に吸い、希釈サンプルを50μL/well分注し、室温で15〜30分間静置した。
＜HUVEC播種＞
HUVECの維持には、EGM2-MV, collagen coated dishを使用した（10〜11継代で増殖が落ちるので、そこで使用終了した）。細胞を0.05% Trypsin EDTAで分散させ、DMEM 0.5% BSAで回収し、1000 rpmで3分間遠心した。上清を除いて、細胞をDMEM bufferで1回洗浄した。細胞をDMEM bufferに再懸濁し、細胞数をカウントし、10000 cells/50μLに希釈した。サンプルを分注してあるプレートに、細胞懸濁液を50μL/well分注し、軽く混ぜ、37℃で2.5時間インキュベーションした。
＜洗浄・検出＞
細胞の接着を確認した後、アスピレーターで培地を完全に除き、100μL/wellのDMEM 0.5% BSAを静かに分注した。アスピレーターでDMEM 0.5% BSAを完全に除き、50μL/wellのDMEM 0.5% BSAを分注した。プレートの底にwhiteシールを貼り、CellTiter-Glo（登録商標）50μL/wellを分注し、2分間撹拌した後、室温で8分間静置した。EnVision Xcite Multilabel Reader（Perkin Elmer社）により発光を検出した。【０３２５】
ＩＩＩ．結果
発光の測定値から、各大環状ポリペプチドによる細胞接着阻害についてIC50（nM）を算出した。得られた結果を表１〜４に示す。上記試験結果により、実施例1〜104の化合物はTSP1の血管内皮細胞への接着阻害作用を有し、重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防に有用であることが示された。【０３２６】
（試験例２）SPRによる相互作用解析
SPRによる相互作用解析は、Biacore T200（GEヘルスケア）を用いて行った。
Ｉ．Recombinant-hTSP1の固定化
NTA-Chip(GEヘルスケア：BR100532)に500μM NiCl2を流速5μL/minで1分間injectすることで、NTAを活性化させた。次いで、EDC/NHS mixtureを流速10μL/minで7分間injectすることで、デキストランのカルボキシル基を活性化させた。NTAおよびカルボキシル基が活性化された基板表面に対し、Recombinant-hTSP1を流速10μL/minで7分間injectすることで固定化した。Ethanolamineを流速10μL/minで7分間injectすることで、未反応の活性化カルボキシル基を不活化させた。
なお、10xHBS-P+(GEヘルスケア：BR100671)を1xに希釈し、かつ5mM CaCl2を添加したものを固定化bufferとして用いた。
EDC/NHS/Ethanolamineとしては、GEヘルスケアから販売されているAmine-coupling kit (BR100050)に含まれる試薬を使用した。【０３２７】
ＩＩ．検体の測定
測定Bufferは下記に示す組成で調製した。
50mM Tris-HCl pH7.5 / 150mM NaCl / 5mM CaCl2 / 0.05% Tween20 / 5% DMSO
測定は以下の順で実施した。
1) Startup
基板表面の平衡化のため、測定Bufferを下記の条件でinjectした。
Contact-time:60sec, Dissociate-time:120sec, 流速50ul/min, 温度:25℃
同条件を5回繰り返し平衡化させた。
2) Solvent Correction
Biacore T200はDMSO濃度の変化に対し敏感に反応することから、DMSOによる影響を補正するため、4%-4.4%-4.8%-5.2%-5.6%-6%のDMSO溶液をinjectした。
3) Sample測定
低解離性挙動を有する検体に対し有効なSingle-Cycle kinetics法を採用した。本手法は各濃度域を同一サイクル中でinjectするため、解析において低解離に伴うサイクル間の影響を無視できる点が優れている。
検体は3倍希釈系列で5濃度（100、33、11、3.7および1.2 nM）調製し、濃度の低い順から流速50μL/minで3分間、連続的にinjectした。また、最も高い濃度の希釈液をinjectした後、解離時間を20〜30分設けた。
なお、検体の測定前に、ベースライン作成のため測定Bufferのみを同条件でinjectした。【０３２８】
ＩＩＩ．解析
Biacore T100およびT200に付属のEvaluation softwareを用いて解析した。Solvent correction測定によって得られたDMSO補正曲線を適用した。検体測定データからベースラインデータを差し引いたものに対し、kinetics fittingを実施した。
結合速度定数(ka)および解離速度定数(kd)からKD値を算出した。得られた結果を表１〜４に示す。上記試験結果により、実施例1〜7、9〜13、24、28、40〜45、58、75の化合物はTSP1に直接結合することでTSP1の血管内皮細胞への接着阻害活性を示していることが確認された。したがって、本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、重症下肢虚血または末梢動脈疾患の治療または予防に有用であることが示された。【０３２９】
（試験例３）血流改善測定試験
7-9週齢の雄性C57BL/6マウスを日本チャールズ・リバー株式会社より購入し、FR-2固形飼料（株式会社フナバシファーム）を供与して1週間以上馴化させた。飼育室は午後7時消灯、午前7時点灯の12時間周期の明暗切り替えを行った。イソフルオレイン吸入麻酔下に、マウスの左大腿部を切開し、浅大腿動脈および静脈（深部大腿動脈のすぐ下から膝窩動脈および静脈まで）を結紮し、切除した。モデル作製後、被験物質（化合物24、28、40〜45、58）を20 mM乳酸および5% (w/v)ルトロール溶液に溶解し、１日１回腹腔内投与した。
（血流改善測定試験１）
ビヒクル投与群
化合物24（10 mg/kg）投与群
（血流改善測定試験２）
ビヒクル投与群
化合物28（10 mg/kg）投与群
（血流改善測定試験３）
ビヒクル投与群
化合物40（10 mg/kg）投与群
化合物41（10 mg/kg）投与群
（血流改善測定試験４）
ビヒクル投与群
化合物42（10 mg/kg）投与群
化合物43（10 mg/kg）投与群
化合物44（10 mg/kg）投与群
化合物45（10 mg/kg）投与群
（血流改善測定試験５）
ビヒクル投与群
化合物58（10 mg/kg）投与群
虚血肢（左）および非虚血肢（右）の血流を、レーザードップラー血流計（LDPI、PIM III、Perimed、Inc.）を用いて測定した。血流の値は、非虚血肢に対する虚血肢の比で評価した。
マウスの血流は、手術直後で最も低値を示し、その後、徐々に回復した。本動物モデルで検討したすべての被験物質は、ビヒクル処置と比較して、手術後の血流回復がより改善された。手術後7日目における被験物質投与群の血流は、ビヒクル処置マウスよりも高かった。結果を表１３に示す。【０３３０】
【表１３】
2018052002.tif 000145
【産業上の利用可能性】
【０３３１】
本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、ＴＳＰ１に結合し、ＴＳＰ１への血管内皮細胞などの細胞の接着を阻害することができる。従って本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、ＴＳＰ１の発現亢進により誘発される疾患または症状の治療または予防に有用である。また本発明の大環状ポリペプチドまたはその薬理上許容される塩は、血管新生促進剤として有用である。
【配列表フリーテキスト】
【０３３２】
配列番号１〜１０４：実施例１〜１０４の化合物のペプチド領域
配列番号１〜１０４：Ｃ末端カルボキシル基のアミド化
【配列表】
2018052002000001.app
【国際調査報告】
2018052002.tif 000174
2018052002.tif 000175
2018052002.tif 000176
2018052002.tif 000177