(57)【要約】  本発明の課題は、強い抗菌活性を示し、水に対して溶解性が優れた化合物またはその塩、並びに上記の化合物またはその塩を含有する、凍結乾燥製剤、ＬｐｘＣ阻害剤、および抗菌剤を 提供することである。本発明によれば、一般式［１］2018143162.tif 000027「式中、Ｒ１は、水素原子などを、Ｒ２は、水素原子などを、Ｒ３は、水素原子などを、Ｒ４は、水素原子などを、ｎは、０または１を表す。」で表される化合物またはその塩が提供される。
2018143162.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式［１］
【化１】
2018143162.tif 000026
「式中、Ｒ１は、水素原子、式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基またはヒドロキシル保護基を表し、Ｒ２は、水素原子、式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基またはヒドロキシル保護基を表し、または、Ｒ１およびＲ２は、一緒になって、置換されていてもよいＣ１−３アルキレン基または式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−で表される基を形成してもよく、
Ｒ３は、水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、
Ｒ４は、水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、
ｎは、０または１を表す。」
で表される化合物またはその塩。
【請求項２】
Ｒ１が、水素原子である、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項３】
Ｒ２が、水素原子である、請求項１または２に記載の化合物またはその塩。
【請求項４】
Ｒ３が、水素原子またはＣ１−３アルキル基である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物またはその塩。
【請求項５】
Ｒ４が、水素原子またはＣ１−３アルキル基である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物またはその塩。
【請求項６】
ｎが、０である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物またはその塩。
【請求項７】
ｎが、１であり、Ｒ３が、水素原子またはメチル基であり、Ｒ４が、水素原子である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物またはその塩。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物またはその塩を含有する凍結乾燥製剤。
【請求項９】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物またはその塩を含有するＬｐｘＣ阻害剤。
【請求項１０】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物またはその塩を含有する抗菌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ウリジルジホスホ−３−Ｏ−アシル−Ｎ−アセチルグルコサミンデアセチラーゼ（ＬｐｘＣ）に対して優れた阻害活性を有する（２Ｓ）−２−（（４−（（４−（（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル）フェニル）エチニル）ベンゾイル）（メチル）アミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ’，２−ジメチルマロンアミドのプロドラッグに関する。
【背景技術】
【０００２】
ＬｐｘＣは、リピドＡの合成を担う酵素である。リピドＡは、外膜形成に必須な成分であり、たとえば、グラム陰性菌の生存に必須である。従って、ＬｐｘＣの活性を阻害する化合物は、緑膿菌を含むグラム陰性菌に対して有効な抗菌剤になり得ることが強く期待される。
たとえば、優れたＬｐｘＣ阻害活性を有する（２Ｓ）−２−（（４−（（４−（（１Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル）フェニル）エチニル）ベンゾイル）（メチル）アミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ’，２−ジメチルマロンアミド（以下、「化合物Ａ」と称することもある。）が知られている（特許文献１）。【０００３】
薬物が薬効を発揮するためには、薬物が吸収部位で溶解することが必要である。そのため、水に溶解しにくい薬物を経口投与した場合、消化管からの吸収が十分でなく、薬効を発揮しにくいことがある。また、非経口投与、特に静脈内投与の場合、薬物は溶解した形で投与される必要がある。【０００４】
これまで、化合物Ａおよび可溶化剤を含む製剤が知られている（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１４／１４２２９８号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２０１６／０３９４３３号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の課題は、水に対して溶解性が優れ、ＬｐｘＣを阻害することによって緑膿菌をはじめとするグラム陰性菌およびその薬剤耐性菌に対して強い抗菌活性を示す化合物またはその塩、並びに上記の化合物またはその塩を含有する、凍結乾燥製剤、ＬｐｘＣ阻害剤、および抗菌剤を提供することにある 。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
このような状況下、本発明者らは、鋭意研究を行った結果、下記の一般式［１］で表される化合物またはその塩が、水に対して溶解性が優れ、緑膿菌をはじめとするグラム陰性菌およびその薬剤耐性菌に対して強い抗菌活性を示すことを見出し、本発明を完成させた。【０００８】
本発明は、以下を提供する。
［１］
一般式［１］
【化１】
2018143162.tif 000003
「式中、Ｒ１は、水素原子、式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基またはヒドロキシル保護基を表し、Ｒ２は、水素原子、式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基またはヒドロキシル保護基を表し、または、Ｒ１およびＲ２は、一緒になって、置換されていてもよいＣ１−３アルキレン基または式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−で表される基を形成してもよく、
Ｒ３は、水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、
Ｒ４は、水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、
ｎは、０または１を表す。」
で表される化合物またはその塩。【０００９】
［２］
Ｒ１が、水素原子である、［１］に記載の化合物またはその塩。
［３］
Ｒ２が、水素原子である、［１］または［２］に記載の化合物またはその塩。
［４］
Ｒ３が、水素原子またはＣ１−３アルキル基である、［１］〜［３］のいずれか一に記載の化合物またはその塩。
［５］
Ｒ４が、水素原子またはＣ１−３アルキル基である、［１］〜［４］のいずれか一に記載の化合物またはその塩。
［６］
ｎが、０である、［１］〜［３］のいずれか一に記載の化合物またはその塩。【００１０】
［７］
ｎが、１であり、Ｒ３が、水素原子またはメチル基であり、Ｒ４が、水素原子である、［１］〜［５］のいずれか一に記載の化合物またはその塩。
［８］
［１］〜［７］のいずれか一に記載の化合物またはその塩を含有する凍結乾燥製剤。
［９］
［１］〜［７］のいずれか一に記載の化合物またはその塩を含有するＬｐｘＣ阻害剤。
［１０］
［１］〜［７］のいずれか一に記載の化合物またはその塩を含有する抗菌剤。【００１１】
本発明は、さらに以下を提供する。
［Ａ］
（１）［１］〜［６］のいずれか一に記載の化合物またはその塩、および、
（２）糖類、糖アルコール類、ヒドロキシル基を有するアミノ酸類およびヒドロキシル基を有するカルボン酸類から選ばれる一種または二種以上、を含有する注射用製剤。
［Ｂ］
糖類が、トレハロース、マルトース、ブドウ糖、乳糖、白糖、果糖、デキストランおよびシクロデキストリンから選ばれる一種または二種以上であり、
糖アルコール類が、Ｄ−ソルビトール、キシリトール、イノシトール、イソマルトースおよびＤ−マンニトールから選ばれる一種または二種以上であり、
ヒドロキシル基を有するカルボン酸類が、乳酸、酒石酸およびクエン酸から選ばれる一種または二種以上であり、
ヒドロキシル基を有するアミノ酸類が、セリンおよびトレオニンから選ばれる一種または二種である、［Ａ］に記載の注射用製剤。【００１２】
［Ｃ］
（１）［１］〜［６］のいずれか一に記載の化合物またはその塩、および、
（２）糖類、糖アルコール類、ヒドロキシル基を有するアミノ酸類およびヒドロキシル基を有するカルボン酸類から選ばれる一種または二種以上、を含有する凍結乾燥製剤。
［Ｄ］
糖類が、トレハロース、マルトース、ブドウ糖、乳糖、白糖、果糖、デキストランおよびシクロデキストリンから選ばれる一種または二種以上であり、
糖アルコール類が、Ｄ−ソルビトール、キシリトール、イノシトール、イソマルトースおよびＤ−マンニトールから選ばれる一種または二種以上であり、
ヒドロキシル基を有するカルボン酸類が、乳酸、酒石酸およびクエン酸から選ばれる一種または二種以上であり、
ヒドロキシル基を有するアミノ酸類が、セリンおよびトレオニンから選ばれる一種または二種である、［Ｃ］に記載の凍結乾燥製剤。【００１３】
本発明は、さらに以下を提供する。
［ａ］
一般式［２］
【化２】
2018143162.tif 000004
「式中、Ｒ１およびＲ２は、上記と同様な意味を有する。」で表される化合物に、一般式［３］
【化３】
2018143162.tif 000005
「式中、Ｘａは、ハロゲン原子を表し、Ｘｂは、ハロゲン原子を表し、Ｘｃは、ハロゲン原子を表し、Ｘｄは、ハロゲン原子を表し、ｐは、０または１を表す。」で表される化合物を反応させた後、加水分解反応を行うことを特徴とする、一般式［１ａ］
【化４】
2018143162.tif 000006
「式中、Ｒ１およびＲ２は、上記と同様な意味を有する。」で表される化合物の製造法。【００１４】
［ｂ］Ｒ１が、水素原子である、［ａ］に記載の製造法。
［ｃ］Ｒ２が、水素原子である、［ａ］または［ｂ］に記載の製造法。
［ｄ］ｐが、１である、［ａ］〜［ｃ］のいずれか一に記載の製造法。
［ｅ］Ｘａ、Ｘｂ、ＸｃおよびＸｄが、塩素原子である、［ａ］〜［ｄ］のいずれか一に記載の製造法。【００１５】
本発明は、さらに以下を提供する。
＜ａ＞  一般式［１］
【化５】
2018143162.tif 000007
「式中、Ｒ１は、水素原子、式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基またはヒドロキシル保護基を表し、Ｒ２は、水素原子、式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基またはヒドロキシル保護基を表し、または、Ｒ１およびＲ２は、一緒になって、置換されていてもよいＣ１−３アルキレン基または式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−で表される基を形成してもよく、
Ｒ３は、水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、
Ｒ４は、水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し、
ｎは、０または１を表す。」
で表される化合物またはその塩を、対象に投与することを含む、ＬｐｘＣの阻害方法。
＜ｂ＞  上記一般式［１］で表される化合物またはその塩を、対象に投与することを含む、菌を抑制する方法。
＜ｃ＞  ＬｐｘＣ阻害の処置において使用するための、上記一般式［１］で表される化合物またはその塩。
＜ｄ＞  抗菌の処置において使用するための、上記一般式［１］で表される化合物またはその塩。
＜ｅ＞  ＬｐｘＣ阻害剤の製造のための、上記一般式［１］で表される化合物またはその塩の使用。
＜ｆ＞  抗菌剤の製造のための、上記一般式［１］で表される化合物またはその塩の使用。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の化合物は、強い抗菌活性を示し、水に対して溶解性が優れ、医薬として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明について詳述する。
本明細書において、特に断らない限り、「％」は、「質量％」を意味する。
本明細書において、特にことわらない限り、各用語は、次の意味を有する。
【００１８】
ハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。
Ｃ１−６アルキル基とは、たとえば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチルおよびヘキシル基などの直鎖状または分枝鎖状のＣ１−６アルキル基を意味する。
Ｃ１−３アルキル基とは、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピル基を意味する。
Ｃ２−６アルケニル基とは、たとえば、ビニル、アリル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、１，３−ブタジエニル、ペンテニルおよびヘキセニル基などの直鎖状または分枝鎖状のＣ２−６アルケニル基を意味する。
アリール基とは、たとえば、フェニルまたはナフチル基を意味する。
アルＣ１−６アルキル基とは、たとえば、ベンジル、ジフェニルメチル、トリチル、フェネチルおよびナフチルメチル基などのアルＣ１−６アルキル基を意味する。
【００１９】
Ｃ１−３アルキレン基とは、メチレン、エチレンまたはプロピレン基を意味する。
【００２０】
Ｃ１−６アルコキシ基とは、たとえば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシおよびヘキシルオキシ基などの直鎖状または分枝鎖状のＣ１−６アルキルオキシ基を意味する。
Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル基とは、たとえば、メトキシメチルおよび１−エトキシエチル基などのＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル基を意味する。
【００２１】
Ｃ２−１２アルカノイル基とは、たとえば、アセチル、プロピオニル、バレリル、イソバレリルおよびピバロイル基などの直鎖状または分枝鎖状のＣ２−１２アルカノイル基を意味する。
アロイル基とは、たとえば、ベンゾイルまたはナフトイル基を意味する。
アシル基とは、たとえば、ホルミル基、スクシニル基、グルタリル基、マレオイル基、フタロイル基、Ｃ２−１２アルカノイル基またはアロイル基を意味する。
【００２２】
Ｃ１−６アルコキシカルボニル基とは、たとえば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルおよび１，１−ジメチルプロポキシカルボニル基などの直鎖状または分枝鎖状のＣ１−６アルキルオキシカルボニル基を意味する。
アルＣ１−６アルコキシカルボニル基とは、たとえば、ベンジルオキシカルボニルおよびフェネチルオキシカルボニル基などのアルＣ１−６アルキルオキシカルボニル基を意味する。
アリールオキシカルボニル基とは、たとえば、フェニルオキシカルボニルまたはナフチルオキシカルボニル基を意味する。
【００２３】
Ｃ１−６アルキルスルホニル基とは、たとえば、メチルスルホニル、エチルスルホニルおよびプロピルスルホニル基などのＣ１−６アルキルスルホニル基を意味する。
アリールスルホニル基とは、たとえば、ベンゼンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニルまたはナフタレンスルホニル基を意味する。
【００２４】
シリル基とは、たとえば、トリメチルシリル、トリエチルシリルまたはトリブチルシリル基を意味する。
【００２５】
ヒドロキシル保護基としては、通常のヒドロキシル基の保護基として使用し得るすべての基を含み、たとえば、Ｗ．グリーン（W.Greene）ら、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第4版、第16〜299頁、2007年、ジョン・ウィリイ・アンド・サンズ社（John Wiley & Sons,INC.）に記載されている基が挙げられる。具体的には、たとえば、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、アルＣ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル基、アシル基、Ｃ１−６アルコキシカルボニル基、アルＣ１−６アルコキシカルボニル基、Ｃ１−６アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、シリル基、テトラヒドロフラニル基またはテトラヒドロピラニル基が挙げられる。これらの基は、置換基群Ａから選ばれる一つ以上の基で置換されていてもよい。
【００２６】
アミノ保護基としては、通常のアミノ基の保護基として使用し得るすべての基を含み、たとえば、Ｗ．グリーン（W.Greene）ら、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第4版、第696〜926頁、2007年、ジョン・ウィリイ・アンド・サンズ社（John Wiley & Sons,INC.）に記載されている基が挙げられる。具体的には、アルＣ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル基、アシル基、Ｃ１−６アルコキシカルボニル基、アルＣ１−６アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、Ｃ１−６アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基またはシリル基が挙げられる。これらの基は、置換基群Ａから選ばれる一つ以上の基で置換されていてもよい。
【００２７】
カルボキシル保護基としては、通常のカルボキシル基の保護基として使用し得るすべての基を含み、たとえば、Ｗ．グリーン（W.Greene）ら、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第4版、第533〜643頁、2007年、ジョン・ウィリイ・アンド・サンズ社（John Wiley & Sons,INC.）に記載されている基が挙げられる。具体的には、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、アルＣ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル基またはシリル基が挙げられる。これらの基は、置換基群Ａから選ばれる一つ以上の基で置換されていてもよい。
【００２８】
リン酸保護基としては、通常のリン酸保護基として使用し得るすべての基を含み、たとえば、Ｗ．グリーン（W.Greene）ら、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第4版、第934〜985頁、2007年、ジョン・ウィリイ・アンド・サンズ社（John Wiley & Sons,INC.）に記載されている基が挙げられる。具体的には、Ｃ１−６アルキル基、アリール基またはアルＣ１−６アルキル基が挙げられる。これらの基は、置換基群Ａから選ばれる一つ以上の基で置換されていてもよい。
【００２９】
脂肪族炭化水素類としては、たとえば、ペンタン、ヘキサン、シクロヘキサンまたはデカヒドロナフタレンが挙げられる。
ハロゲン化炭化水素類としては、たとえば、塩化メチレン、クロロホルムまたはジクロロエタンが挙げられる。
アルコール類としては、たとえば、メタノール、エタノール、プロパノール、２−プロパノール、ブタノールまたは２−メチル−２−プロパノールが挙げられる。
エーテル類としては、たとえば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、エチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエーテルまたはジエチレングリコールジエチルエーテルが挙げられる。
【００３０】
ケトン類としては、たとえば、アセトン、２−ブタノンまたは４−メチル−２−ペンタノンが挙げられる。
エステル類としては、たとえば、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピルまたは酢酸ブチルが挙げられる。
アミド類としては、たとえば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドまたは１−メチル−２−ピロリドンが挙げられる。
ニトリル類としては、たとえば、アセトニトリルまたはプロピオニトリルが挙げられる。
芳香族炭化水素類としては、たとえば、ベンゼン、トルエンまたはキシレンが挙げられる。
【００３１】
本明細書において、置換基群は、次の意味を有する。
【００３２】
置換基群Ａ：ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１−６アルキル基、アリール基、Ｃ１−６アルコキシ基、オキソ基。
【００３３】
本発明の化合物において、好ましい化合物としては、以下の化合物が挙げられる。
【００３４】
Ｒ１は、水素原子、式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基またはヒドロキシル保護基である。
Ｒ１が、水素原子または式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基である化合物が好ましく、水素原子である化合物がより好ましい。
Ｒ２は、水素原子、式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基またはヒドロキシル保護基である。
Ｒ２が、水素原子または式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２で表される基である化合物が好ましく、水素原子である化合物がより好ましい。
Ｒ１が、水素原子であり、Ｒ２が、水素原子である化合物が好ましい。
【００３５】
別の態様として、Ｒ１およびＲ２は、一緒になって、置換されていてもよいＣ１−３アルキレン基または式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−で表される基である。
Ｒ１およびＲ２が、一緒になって形成するＣ１−３アルキレン基は、置換基群Ａから選ばれる１つ以上の基で置換されていてもよい。
Ｒ１およびＲ２が、一緒になって、式−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−で表される基である化合物が好ましい。
【００３６】
Ｒ３は、水素原子またはＣ１−６アルキル基である。
Ｒ３が、水素原子またはＣ１−３アルキル基である化合物が好ましく、水素原子またはメチル基である化合物がより好ましい。
Ｒ４は、水素原子またはＣ１−６アルキル基である。
Ｒ４が、水素原子またはＣ１−３アルキル基である化合物が好ましく、水素原子またはメチル基である化合物がより好ましく、水素原子である化合物がさらに好ましい。
Ｒ３が、水素原子またはメチル基であり、Ｒ４が、水素原子またはメチル基である化合物が好ましく、Ｒ３が、水素原子またはメチル基であり、Ｒ４が、水素原子である化合物がより好ましい。
【００３７】
ｎは、０または１である。
ｎが、０である化合物が好ましい。
【００３８】
別の態様として、本発明の化合物は、一般式［１ａ］
【化６】
2018143162.tif 000008
「式中、Ｒ１およびＲ２は、上記と 同様な意味を有する。」で表される化合物が好ましい。
Ｒ１およびＲ２の好ましい範囲は、上記と同様である。
【００３９】
本発明の化合物は、以下の表で表される化合物が好ましい。
【００４０】
【化７】
2018143162.tif 000009
【００４１】
【表１】
2018143162.tif 000010
【００４２】
一般式［１］の化合物の塩としては、通常知られているリン酸の塩を挙げることができる。
リン酸の塩としては、たとえば、ナトリウムおよびカリウムなどのアルカリ金属との塩；カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属との塩；アンモニウム塩；ならびにトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−ベンジル−β−フェネチルアミン、１−エフェナミンおよびＮ，Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミンなどの含窒素有機塩基との塩などが挙げられる。
【００４３】
上記した塩の中で、好ましい塩としては、薬理学的に許容される塩が挙げられる。
【００４４】
一般式［１］の化合物またはその塩において、異性体（たとえば、光学異性体、幾何異性体および互変異性体など）が存在する場合、本発明は、それらの異性体を包含し、また、溶媒和物、水和物および種々の形状の結晶を包含するものである。
【００４５】
本発明の化合物は、一つまたは二つ以上の医薬的に許容される担体、賦形剤または希釈剤と組み合せて医薬的製剤とすることができる。
上記の担体、賦形剤および希釈剤としては、たとえば、水、乳糖、デキストロース、フラクトース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、デンプン、ガム、ゼラチン、アルギネート、ケイ酸カルシウム、リン酸カルシウム、セルロース、水シロップ、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アルキルパラヒドロキシベンゾソルベート、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、グリセリン、ならびに、ゴマ油、オリーブ油および大豆油などの各種油などが含まれる。
また、上記の担体、賦形剤または希釈剤に、必要に応じて、一般に使用される増量剤、結合剤、崩壊剤、ｐＨ調整剤および溶解剤などの添加剤を混合し、常用の製剤技術によって、錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、液剤、乳剤、懸濁剤、軟膏剤、注射剤、皮膚貼付剤などの経口または非経口用医薬を調製することができる。
【００４６】
本発明の化合物の投与方法、投与量および投与回数は、患者の年齢、体重および症状に応じて適宜選択することができる。通常、成人に対しては、経口または非経口（たとえば、注射、点滴および直腸部位への投与など）投与により、１日、0.01〜1000mg／kgを１回から数回に分割して投与すればよい。
【００４７】
本発明の化合物は、注射剤として投与されることが好ましい。
本発明の化合物を含む医薬組成物は、液剤、凍結液剤または凍結乾燥製剤として提供されるのが好ましく、凍結乾燥製剤がより好ましい。
【００４８】
次に、本発明化合物の製造法について説明する。
本発明化合物は、自体公知の方法を組み合わせることにより製造されるが、たとえば、次に示す製造法にしたがって製造することができる。
【００４９】
［製造法１］
【化８】
2018143162.tif 000011
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｃ、Ｘｄおよびｐは、上記と同様な意味を有する。」
【００５０】
一般式［２］で表される化合物としては、たとえば、（Ｓ）−２−（４−（（４−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）フェニル）エチニル）−Ｎ−メチルベンズアミド）−Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ３，２−ジメチルマロンアミドが挙げられる。
一般式［３］で表される化合物としては、たとえば、オキシ塩化リンおよびジホスホリルクロリドなどが挙げられる。
【００５１】
一般式［１ａ］で表される化合物は、一般式［２］で表される化合物に、塩基の存在下、一般式［３］で表される化合物を反応させた後、加水分解反応に付すことによって製造することができる。
【００５２】
（１−１）一般式［２］で表される化合物と一般式［３］で表される化合物の反応
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、たとえば、脂肪族炭化水素類、ハロゲン化炭化水素類、アルコール類、エーテル類、ケトン類、エステル類、アミド類、ニトリル類、芳香族炭化水素類、ジメチルスルホキシドおよび水が挙げられ、これらは混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、エーテル類が挙げられる。
溶媒の使用量は、一般式［２］で表される化合物に対して、1〜50倍量（v/w）であればよく、2〜10倍量（v/w）が好ましい。
この反応に使用される塩基としては有機塩基が挙げられ、たとえば、ピリジンが挙げられる。
塩基の使用量は、一般式［２］で表される化合物に対して、1〜50倍モルであればよく、1〜5倍モルが好ましい。
この反応は、-50〜100℃、好ましくは、-30〜30℃で、30分間〜12時間実施すればよい。
【００５３】
（１−２）加水分解反応
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、たとえば、脂肪族炭化水素類、ハロゲン化炭化水素類、アルコール類、エーテル類、ケトン類、エステル類、アミド類、ニトリル類、芳香族炭化水素類、ジメチルスルホキシドおよび水が挙げられ、これらは混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、エーテル類が挙げられる。
溶媒の使用量は、一般式［２］で表される化合物に対して、1〜50倍量（v/w）であればよく、2〜10倍量（v/w）が好ましい。
加水分解反応は、酸を用いる加水分解反応が好ましい。
この反応に使用される酸としては無機酸が挙げられ、たとえば、塩酸が挙げられる。
酸の使用量は、一般式［２］で表される化合物に対して、1〜50倍モルであればよく、1〜5倍モルが好ましい。
この反応は、-50〜100℃、好ましくは、-30〜30℃で、30分間〜12時間実施すればよい。
【００５４】
［製造法２］
【化９】
2018143162.tif 000012
「式中、Ｒａは、リン酸保護基を表し、Ｘｅは、臭素原子またはヨウ素原子を表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、上記と同様な意味を有する。」
【００５５】
一般式［４］で表される化合物としては、たとえば、リン酸ジｔｅｒｔ−ブチル（（（（２Ｓ）−２−（（４−クロロベンゾイル）（メチル）アミノ）−２−メチル−３−（メチルアミノ）−３−オキソ）プロパノイル）アミノ）オキシメチルが挙げられる。
一般式［５］で表される化合物としては、たとえば、（４Ｓ）−４−（４−エチニルフェニル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソランが挙げられる。
【００５６】
（２−１）
一般式［６］で表される化合物は、塩基の存在下または不存在下、銅触媒存在下または不存在下、配位子の存在下または不存在下、パラジウム触媒の存在下、一般式［５］で表される化合物を一般式［４］で表される化合物と反応させることにより製造することができる。
この反応は、国際公開第２０１１／１３２７１２号パンフレットなどに記載された方法またはそれに準じた方法で行えばよい。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、脂肪族炭化水素類、ハロゲン化炭化水素類、アルコール類、エーテル類、ケトン類、エステル類、アミド類、芳香族炭化水素類、ジメチルスルホキシドおよび水が挙げられ、これらは混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、エーテル類が挙げられる。
この反応において、所望により用いられる塩基としては、たとえば、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、ピリジン、ジメチルアミノピリジンおよびトリエチルアミンなどの有機塩基；水素化ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウムおよび炭酸ナトリウムなどの無機塩基などが挙げられる。好ましい塩基としては、トリエチルアミンが挙げられる。
塩基の使用量は、一般式［４］で表される化合物に対して1〜50倍モルであればよく、1〜10倍モルが好ましい。
この反応において、所望により用いられる銅触媒としては、たとえば、臭化銅およびヨウ化銅などが挙げられる。
銅触媒の使用量は、一般式［４］で表される化合物に対して0.01〜50倍モルであればよく、0.1〜5倍モルが好ましい。
【００５７】
この反応において、所望により用いられる配位子としては、たとえば、トリ−ｔ−ブチルホスフィン、トリシクロヘキシルホスフィン、トリフェニルホスフィン、トリトリルホスフィン、トリブチルホスファイト、トリシクロヘキシルホスファイト、トリフェニルホスファイト、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン、２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジメトキシビフェニル、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル、２−（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニルおよび２−（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）ビフェニルが挙げられ、これらは組み合わせて使用してもよい。
配位子の使用量は、一般式［４］で表される化合物に対して0.00001〜1倍モルであればよく、0.001〜0.1倍モルが好ましい。
【００５８】
この反応において、用いられるパラジウム触媒としては、たとえば、パラジウム−炭素およびパラジウム黒などの金属パラジウム；塩化パラジウムおよび塩化パラジウム（ＩＩ）ナトリウム三水和物などの無機パラジウム塩；酢酸パラジウムなどの有機パラジウム塩；テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド、ビス（アセトニトリル）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド、ビス（ベンゾニトリル）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）ジクロリド、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド、ビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド、ビス（トリ−ｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド、（１，３−ビス（２，６−ジイソプロピルフェニル）イミダゾリデン）（３−クロロピリジル）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド、およびビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−ジメチルアミノフェニル）ホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリドなどの有機パラジウム錯体；並びにポリマー担持ビス（アセタート）トリフェニルホスフィンパラジウム（ＩＩ）およびポリマー担持ジ（アセタート）ジシクロヘキシルフェニルホスフィンパラジウム（ＩＩ）などのポリマー固定化有機パラジウム錯体などが挙げられ、これらは組み合わせて使用してもよい。
パラジウム触媒の使用量は、一般式［４］で表される化合物に対して0.00001〜1倍モルであればよく、0.001〜0.1倍モルが好ましい。
【００５９】
一般式［５］で表される化合物の使用量は、一般式［４］で表される化合物に対して、1〜50倍モルであればよく、1〜5倍モルが好ましい。
この反応は、-50〜200℃、好ましくは-10〜50℃で10分間〜48時間実施すればよい。
この反応は、好ましくは不活性気体（たとえば、窒素、アルゴン）雰囲気下、実施すればよい。
【００６０】
（２−２）
一般式［１ｂ］で表される化合物は、一般式［６］で表される化合物を脱保護することにより製造することができる。
脱保護反応は、たとえば、グリーンズ・プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Greene's Protective Groups in Organic Synthesis）第5版、第1203〜1262頁、2014年、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ社（John Wiley & Sons,INC.）に記載の方法により行うことができる。
【００６１】
次に本発明化合物の製造の原料である一般式［４］の化合物の製造法について説明する。
【００６２】
［製造例Ａ］
【化１０】
2018143162.tif 000013
「式中、Ｒｂは、アミノ保護基を表し、Ｒｃは、カルボキシル保護基を表し、Ｘｆは、ハロゲン原子を表し、Ｘｇは、ハロゲン原子を表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ＲａおよびＸｅは、上記と同様な意味を有する。」
【００６３】
（Ａ−１）
一般式［７］で表される化合物としては、たとえば、リン酸ジｔｅｒｔ−ブチルクロロメチルが挙げられる。
一般式［１０］で表される化合物は、一般式［７］で表される化合物をＮ−ヒドロキシフタルイミドと反応させた後、脱保護することにより、製造することができる。この反応は、たとえば、第4版実験化学講座、第20巻、第344〜345頁、1992年、丸善に記載の方法またはそれに準じた方法で製造することができる。
【００６４】
（Ａ−２）
一般式［１１］で表される化合物としては、たとえば、（２Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニル（メチル）アミノ）−３−エトキシ−２−メチル−３−オキソプロピオン酸が挙げられる。
一般式［１２］で表される化合物は、一般式［１０］で表される化合物を、縮合剤の存在下、塩基の存在下または不存在下、一般式［１１］で表される化合物と反応させることにより製造することができる。この反応は、たとえば、国際公開第２０１１／１３２７１２号パンフレットに記載の方法またはそれに準じた方法で製造することができる。
【００６５】
（Ａ−３）
一般式［１３］で表される化合物は、一般式［１２］で表される化合物を脱保護することによって製造することができる。この反応は、たとえば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第4版、第16〜299頁、2007年、ジョン・ウィリイ・アンド・サンズ社（John Wiley & Sons，INC.）に記載の方法などによって行うことができる。
【００６６】
（Ａ−４）
一般式［１５］で表される化合物は、一般式［１３］で表される化合物を、縮合剤の存在下、塩基の存在下または不存在下、メチルアミンと反応させることにより製造することができる。この反応は、たとえば、国際公開第２０１１／１３２７１２号パンフレットに記載の方法またはそれに準じた方法で製造することができる。
【００６７】
（Ａ−５）
一般式［１６］で表される化合物としては、たとえば、４−ヨードベンゾイルクロリドが挙げられる。
一般式［４］で表される化合物は、一般式［１６］で表される化合物を、塩基の存在下または不存在下、一般式［１５］で表される化合物と反応させることにより製造することができる。この反応は、たとえば、国際公開第２０１１／１３２７１２号パンフレットに記載の方法またはそれに準じた方法で製造することができる。
【００６８】
上記した製造法で使用される化合物において、保護し得る置換基、たとえば、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基などを有している化合物は、予めこれらの基を通常の保護基で保護しておき、反応後、自体公知の方法でこれらの保護基を脱離することもできる。
【００６９】
［製造法３］
【化１１】
2018143162.tif 000014
「式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲａは、上記と同様な意味を有する。」
【００７０】
一般式［２］で表される化合物としては、たとえば、（Ｓ）−２−（４−（（４−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）フェニル）エチニル）−Ｎ−メチルベンズアミド）−Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ３，２−ジメチルマロンアミドが挙げられる。
【００７１】
（３−１）
一般式［１７］で表わされる化合物は、一般式［２］で表される化合物を、加水分解反応に付すことによって製造することができる。
この反応で使用される溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、たとえば、脂肪族炭化水素類、ハロゲン化炭化水素類、アルコール類、エーテル類、ケトン類、エステル類、アミド類、ニトリル類、芳香族炭化水素類、ジメチルスルホキシドおよび水が挙げられ、これらは混合して使用してもよい。好ましい溶媒としては、二トリル類が挙げられる。
溶媒の使用量は、一般式［２］で表される化合物に対して、1〜50倍量（v/w）であればよく、2〜10倍量（v/w）が好ましい。
加水分解反応は、酸を用いる加水分解反応が好ましい。
この反応に使用される酸としては無機酸が挙げられ、たとえば、塩酸が挙げられる。
酸の使用量は、一般式［２］で表される化合物に対して、1〜50倍モルであればよく、1〜5倍モルが好ましい。
この反応は、-50〜100℃、好ましくは、-30〜50℃で、30分間〜3日間実施すればよい。
【００７２】
（３−２）
一般式［１０］で表される化合物は、製造例Ａに記載の方法で製造することができる。
一般式［１８］で表される化合物は、一般式［１７］で表される化合物を、縮合剤の存在下または不存在下、一般式［１０］で表される化合物と反応させることによって製造することができる。
この反応は、たとえば、国際公開第２０１１／１３２７１２号パンフレットに記載の方法またはそれに準じた方法によって行うことができる。
【００７３】
（３−３）
一般式［１ｂ］で表される化合物は、一般式［１８］で表される化合物を脱保護することによって製造することができる。この反応は、たとえば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第4版、第16〜299頁、2007年、ジョン・ウィリイ・アンド・サンズ社（John Wiley & Sons，INC.）に記載の方法などによって行うことができる。
【００７４】
次に、本発明の医薬組成物の製造法について説明する。
【００７５】
［製造法４］凍結乾燥製剤
本発明の化合物を含む水溶液を、凍結乾燥することにより、凍結乾燥製剤とすることができる。
この工程は、通常実施される凍結乾燥の方法に従って行えばよい。たとえば、「医薬品の実際」第１１巻、製剤の単位操作と機械、仲井由宣編、第３８８〜３９６頁（１９８８年、廣川書店）に記載の「１５．２凍結乾燥の実際」に従い、行うことができる。
【００７６】
本発明の凍結乾燥製剤には、溶解性、外観の改良または保存安定性改善のための添加物を加えることができる。
添加物としては、たとえば、アミノ酸類、ポリエーテル類、糖類、糖アルコール類、塩類、ヒドロキシル基を有するカルボン酸類、尿素、エチル尿素、クレアチニン、ニコチン酸アミド、トロメタモール、精製大豆レシチン、卵白アルブミン、ウシ血清アルブミンおよびポリソルベート８０などが挙げられ、これらは、一種または二種以上を混合して用いることができる。
【００７７】
添加物として使用されるアミノ酸類としては、たとえば、グリシン、Ｌ−アラニン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−バリン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−イソロイシン、タウリン、ＤＬ−メチオニン、Ｌ−セリン、Ｌ−トレオニン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム、アセチルトリプトファンおよびＬ−ヒスチジンなどが挙げられる。
添加物として使用されるポリエチレングリコール類としては、たとえば、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコール４００、ポリエチレングリコール６００、ポリエチレングリコール４０００およびポリエチレングリコール６０００などが挙げられる。
【００７８】
添加物として使用される糖類としては、たとえば、トレハロース、マルトース、ブドウ糖、乳糖、白糖、果糖、デキストランおよびシクロデキストリンなどが挙げられる。
添加物として使用される糖アルコール類としては、たとえば、Ｄ−ソルビトール、キシリトール、イノシトール、イソマルトースおよびＤ−マンニトールなどが挙げられる。
添加物として使用される塩類としては、たとえば、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、Ｌ−酒石酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、安息香酸ナトリウムおよびカプリル酸ナトリウムなどが挙げられる。
添加物として使用されるヒドロキシル基を有するカルボン酸としては、たとえば、乳酸、酒石酸およびクエン酸などが挙げられる。
好ましい添加物としては、糖類、糖アルコール類、ヒドロキシル基を有するアミノ酸類およびヒドロキシル基を有するカルボン酸類が挙げられる。
ヒドロキシル基を有するアミノ酸類としては、たとえば、Ｌ−セリンまたはＬ−トレオニンが挙げられる。より好ましい添加物としては、Ｄ−ソルビトール、ブドウ糖、Ｄ−トレオニンおよびクエン酸が挙げられる。
【００７９】
また、本発明の製剤は、必要に応じ、通常使用される浸透圧調節剤、pH調節剤、緩衝剤、可溶化剤、安定化剤、界面活性剤、無痛化剤および／または保存剤などを添加してもよい。
浸透圧調節剤としては、たとえば、塩化ナトリウム、グリセリンおよびプロピレングリコールなどが挙げられる。
pH調節剤および／または緩衝剤としては、たとえば、塩酸、リン酸、硫酸、メタンスルホン酸、酢酸、乳酸、マレイン酸、クエン酸、酒石酸、アスコルビン酸および安息香酸などの酸；炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸三ナトリウム、クエン酸二ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウムおよび亜硫酸ナトリウムなどの塩；水酸化ナトリウム、トロメタモール、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｌ−アルギニンおよびＬ−リジンなどの塩基が挙げられる。
可溶化剤としては、たとえば、マクロゴールおよび精製大豆レシチンなどが挙げられる。
【００８０】
安定化剤としては、たとえば、亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、ピロ亜硫酸カリウム、ピロリン酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、メタスルホ安息香酸ナトリウム、ナトリウムホルムアルデヒドスルホキシレート、エチレンジアミン、エデト酸ナトリウム、チオグリコール酸、グルコン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸カリウム、Ｌ−リジン−Ｌ−グルタマート、コンドロイチン硫酸ナトリウム、アルブミン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−システインおよびジブチルヒドロキシトルエンなどが挙げられる。
界面活性剤としては、たとえば、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコールおよびポリソルベートなどが挙げられる。
無痛化剤としては、たとえば、リドカイン、プロカイン、メプリルカインおよびベンジルアルコールなどが挙げられる。
保存剤としては、たとえば、クレゾール、フェノール、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、ベンザルコニウム塩化物およびベンゼトニウム塩化物などが挙げられる。
【００８１】
本発明の凍結乾燥製剤の製造において、滅菌処理などは、通常行われる手順に従って実施すればよい。
本発明の凍結乾燥製剤は、注射用水などで溶解し、注射用製剤として提供することができる。
凍結乾燥製剤から調製される注射用製剤のpHが3.0〜8.0であることが好ましく、3.5〜7.5であることがより好ましく、4.0〜6.5であることがさらに好ましい。
凍結乾燥製剤から調製される注射用製剤中の本発明の化合物の含有量は、1〜100mg/mLであることが好ましく、2〜50mg/mLであることがより好ましい。
本発明の化合物の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の形態、その他の条件などに応じて適宜決定されるが、通常成人に対して1日0.1〜1000mg/kgを投与すればよい。
【００８２】
本発明の液剤、凍結液剤および凍結乾燥製剤の製造は、有機溶媒を使用しないことが好ましい。そのため、これらの製剤は、残留溶媒が存在せず、人体に対して安全である。
【００８３】
本発明を実施例、参考例、比較例および試験例で説明するが、本発明はこれらにより、限定されるものではない。
【００８４】
特に記載のない場合、シリカゲルカラムクロマトグラフィーはフラッシュカラムクロマトグラフィーであり、その担体は、富士シリシア化学株式会社、Ｂ．Ｗ．シリカゲル、ＢＷ−３００；逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィーにおける担体は株式会社ワイエムシィ、ＯＤＳ‐Ａである。
溶離液における混合比は、容量比である。
ＮＭＲスペクトルはプロトンＮＭＲを示し、内部基準は以下の通りであり、δ値をppmで示した。
重クロロホルム（CDCL3）：テトラメチルシラン (0.00 ppm）
重ジメチルスルホキシド（DMSO-d6）：テトラメチルシラン (0.00 ppm）
重メタノール（CD3OD）：メタノール（CH3OH） (3.30 ppm)
重水(D2O)：水（H2O）（4.65 ppm）
【００８５】
ＮＭＲスペクトルにおいて、たとえば、[1.81],1.82(3H,s)の記載は、ジアステレオマー混合物の各ジアステレオマー由来のピークが、1.81および1.82にシングレットとして観測され、総プロトン数が3Hであることを示す。
【００８６】
各略号は、以下の意味を有する。
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化法
ＩＰＥ：ジイソプロピルエーテル
ＴＨＰ：テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル
ｓ：シングレット
ｄ：ダブレット
ｄｄ：ダブルダブレット
ｍ：マルチプレット
【００８７】
実施例１
【化１２】
2018143162.tif 000015
窒素雰囲気下室温にて、反応容器にアセトニトリル33mLおよびピリジン6.7mLを順次加えた。次いで氷冷下、反応混合物にジホスホリルクロリド10.5gを加えた。反応混合物を15分間撹拌した後、同一温度にて（Ｓ）−２−（４−（（４−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）フェニル）エチニル）−Ｎ−メチルベンズアミド）−Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ３，２−ジメチルマロンアミド10g、アセトニトリル50mLおよびピリジン1.68mLの混合物を加えた。同一温度にて、反応混合物を3時間撹拌した後、-30℃まで冷却した。同一温度にて、反応混合物に水20mLおよび濃塩酸20mLを順次加え、-15℃で2時間撹拌した。次いで、反応混合物を-35℃に冷却し、22%炭酸ナトリウム水溶液194mLを一括で加えた。10℃以下にてpH7.0〜7.5を維持するように反応混合物を撹拌しながら22%炭酸ナトリウム水溶液を5mLずつ3回加えた。反応混合物に酢酸エチル130mLを加え、固形物をろ取し、水20mLで洗浄して固形物１を得た。ろ液および洗液を併せ、水層を分取し、水溶液１を得た。
同様に、窒素雰囲気下室温にて反応容器にアセトニトリル100mLならびにピリジン20.1mLを順次加えた。氷冷下、反応混合物にジホスホリルクロリド31.5gを加えた。反応混合物を30分間撹拌した後、同一温度にて（Ｓ）−２−（４−（（４−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）フェニル）エチニル）−Ｎ−メチルベンズアミド）−Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ３，２−ジメチルマロンアミド30g、アセトニトリル150mLおよびピリジン5mLの混合物を加えた。同一温度にて、反応混合物を2時間撹拌した。反応混合物を-35℃に冷却し、水60mLおよび濃塩酸60mLを順次加えた。反応混合物を-20〜-15℃で3時間30分間撹拌した。次いで、反応混合物を-40℃に冷却し、22%炭酸ナトリウム水溶液580mLを一括で加えた。反応混合物を2℃にて20分間撹拌し、22%炭酸ナトリウム水溶液40mLを加えpH7.2に調整した。反応混合物に酢酸エチル400mLを加え、固形物をろ取し、水60mLで洗浄して固形物２を得た。ろ液および洗液を併せ、水層を分取し、水溶液２を得た。
次いで、得られた水溶液１および水溶液２を合わせて、アセトニトリルを加えた。外浴温度35〜40℃にて減圧下溶媒を留去し、液量を約250mLとした。得られた懸濁液の固形物をろ取し、水40mLで洗浄して固形物３を得た。ろ液および洗液を併せ、水溶液３を得た。
固形物１、固形物２および固形物３を併せて、メタノール300mLを加え、室温にて30分間撹拌した。混合物をろ過し、固形物をメタノール40mLで洗浄した。得られたろ液に水溶液３およびアセトニトリルを加え、外浴温度35℃以下にて減圧下溶媒を留去し、液量を約200mLとした。得られた水溶液を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー[溶離液；アセトニトリル：水＝5:95]で精製した。所望の化合物を含む分画を集め、外浴温度35℃以下にて減圧下溶媒を留去し、液量を約400mLとした。得られた水溶液に1mol/L塩酸を加え、pH7.3に調整した。得られた水溶液を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー[溶離液；アセトニトリル：水＝5:95]で精製した。所望の化合物を含む分画を集め、外浴温度35℃以下にて減圧下溶媒を留去し、液量を約100mLとし、水溶液４とした。
次いで、反応容器にエタノール4800mLを加えて撹拌し、室温にて水溶液４を20分間かけて加えた。得られた混合物を氷冷下1時間撹拌した後、同一温度にて固形物をろ取した。得られた固形物をエタノール100mLで洗浄した後、外浴温度10℃にて4時間減圧乾燥することで（（（Ｓ）−２−（４−（（４−（（Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル）フェニル）エチニル）−Ｎ−メチルベンズアミド）−２−メチル−３−（メチルアミノ）−３−オキソプロパンアミド）オキシ）ホスホン酸のナトリウム塩34.0gを白色固体として得た。
1H-NMR(600MHz,D2O)δ値：1.73(3H,s),2.65(3H,s),3.07(3H,s),3.58-3.64(2H,m),4.69(1H,dd,J=6.6,4.8Hz),7.30(2H,d,J=8.4Hz),7.43(2H,d,J=8.4Hz),7.49(2H,d,J=8.4Hz),7.56(2H,d,J=7.8Hz)；
MS（ESI）：518[M-H]-
【００８８】
参考例１
【化１３】
2018143162.tif 000016
（２Ｓ）−２−（４−ヨード−Ｎ−メチルベンズアミド）−Ｎ１，２−ジメチル−Ｎ３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）マロンアミド1.00g、（２Ｓ）−２−（４−エチニルフェニル）−２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エタン−１−オール1.06g、ジクロロビストリフェニルホスフィンパラジウム（ＩＩ）143mgおよびヨウ化銅（Ｉ）77mgに、テトラヒドロフラン10mLを加えた。窒素雰囲気下、氷冷にて、反応混合物にトリエチルアミン1.1mLを加え、同一温度にて1時間攪拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液および酢酸エチルを加え、1mol/L塩酸でpH6.4に調整し、有機層を分取した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、有機層に塩基性シリカゲル（富士シリシア株式会社、DNH）0.15gを加え、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物をろ去後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー[溶離液；アセトン：クロロホルム＝50：50]で精製し、褐色泡状固体を得た。得られた固体に酢酸エチルならびにＩＰＥを加え、固形物をろ取し、（２Ｓ）−２−（４−（（４−（（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エチル）フェニル）エチニル）−Ｎ−メチルベンズアミド）−Ｎ１，２−ジメチル−Ｎ３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）マロンアミド1.08gを淡褐色固体として得た。
1H-NMR(400MHz,CDCL3)δ値：1.46-1.69(4H,m),1.69-1.86(9H,m),2.11-2.14(1H,m),[2.85]2.86(3H,d,J=3.9Hz),[3.17]3.20(3H,s),[3.01-3.04]3.29-3.32(1H,m),3.55-3.63(1H,m),[3.55-3.63]3.85-3.90(1H,m),3.65-3.75(4H,m),4.00-4.04(1H,m),[4.52-4.54]4.82-4.85(1H,m),[4.73-4.76]4.90-4.92(1H,m),[4.96]5.00(1H,s),7.33(1H,d,J=8.3Hz),7.39(1H,d,J=8.3Hz),7.49-7.59(6H,m),[6.98-6.99]7.62-7.63(1H,m),[10.10]10.50(1H,s)
【００８９】
比較例１
【化１４】
2018143162.tif 000017
（２Ｓ）−２−（４−（（４−（（１Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エチル）フェニル）エチニル）−Ｎ−メチルベンズアミド）−Ｎ１，２−ジメチル−Ｎ３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）マロンアミド303mgに、アセトニトリル3mLおよびピリジン162μLを加え、氷冷下撹拌した。同一温度にて、反応混合物にジホスホリルクロリド138μLを加えた。反応混合物を氷冷下１時間30分間撹拌した後、反応混合物を氷冷下にて炭酸水素ナトリウム841mgと水3mLの混合物中へ注いだ。反応混合物を同一温度にて30分間撹拌した後、濃塩酸でpHをpH1以下に調整した。反応混合物を同一温度にて1時間30分間撹拌した後、酢酸エチル10mLを加えた。次いで、反応混合物のpHを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および20%水酸化ナトリウム水溶液を用いてpH7.9に調整した。水層を分取し、減圧下1/3程度まで濃縮した。得られた混合物を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー[溶離液；アセトニトリル：水＝4:96]で精製し、凍結乾燥することにより（Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−（４−（（４−（（（Ｓ）−１−（ヒドロキシアミノ）−２−メチル−３−（メチルアミノ）−１，３−ジオキソプロパン−２−イル）（メチル）カルバモイル）フェニル）エチニル）フェニル）エチルホスフェートのナトリウム塩182mgを淡黄色粉末として得た。
1H-NMR(400MHz,D2O)δ値：1.66(3H,s),2.66(3H,s),3.03(3H,s),3.68-3.86(2H,m),4.80-4.83(1H,m),7.37(2H,d,J=8.0Hz),7.42(2H,d,J=7.8Hz),7.51(2H,d,J=8.0Hz),7.58(2H,d,J=7.8Hz);
MS(ESI)：564[M+2Na]+,518[M-H]-
【００９０】
比較例２
【化１５】
2018143162.tif 000018
（Ｓ）−２−（４−（（４−（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）フェニル）エチニル）−Ｎ−メチルベンズアミド）−Ｎ１−ヒドロキシ−Ｎ３，２−ジメチルマロンアミド200mgにアセトニトリル2mL加えた後、無水コハク酸80mgおよびピリジン129μLを順次加え、反応混合物を室温にて5時間半撹拌した。反応混合物に無水コハク酸40mgならびにピリジン32μLを順次加え、室温にて終夜撹拌した。反応混合物に酢酸エチルおよび水を加え、6mol/L塩酸でpH1.3に調整した。有機層を分取し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣に、テトラヒドロフラン3mL、水150μLおよびp-トルエンスルホン酸一水和物15mgを順次加えた。反応混合物を室温にて3時間30分間撹拌した後、水300μLを加えた。反応混合物を室温にて1時間30分間撹拌した後、水150μLを加え終夜静置した。反応混合物に酢酸エチルおよび水を加え、有機層を分取した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、不溶物をろ去し、減圧下溶媒を留去した。得られた残留物に酢酸エチルおよびＩＰＥを加え、固形物をろ取し、４−（（（Ｓ）−２−（４−（（４−（（Ｓ）−１，２−ジヒドロキシエチル）フェニル）エチニル）−Ｎ−メチルベンズアミド）−２−メチル−３−（メチルアミノ）−３−オキソプロパミド）オキシ）−４−オキソブタン酸195mgを白色固体として得た。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ値：1.84(3H,s),2.65-2.68(2H,m),2.76-2.82(2H,m),2.80(3H,d,J=2.0Hz),3.18(3H,s),3.61-3.63(2H,m),4.69-4.72(1H,m),7.41(2H,d,J=8.2Hz),7.51(2H,d,J=8.2Hz),7.56(2H,d,J=8.6Hz),7.61(2H,d,J=8.6Hz)；
MS(ESI):562[M+Na]+
比較例２の化合物は、実施例１の化合物と比較して不安定であり、100mmol/Lトリス塩酸緩衝液(pH7.4)中でも分解して容易に化合物Ａを生じた。
【００９１】
参考例２
【化１６】
2018143162.tif 000019
Ｎ-ヒドロキシフタルイミド1gにＮ，Ｎ-ジメチルホルムアミド10 mLを加えた。反応混合物を氷冷し、60%油性水素化ナトリウム294mgおよびジ-ｔｅｒｔ-ブチル（クロロメチル）ホスフェート1.9gを順次加えた。反応混合物を７０℃から８０℃の間で５時間撹拌した。反応混合物に60%油性水素化ナトリウム88mgを加え、６０℃から７０℃の間で２時間３０分撹拌した。反応混合物を冷却し、酢酸エチルおよび水を加え、有機層を分取した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、1mol/L塩酸および飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄した。無水硫酸ナトリウムで脱水乾燥後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー[溶離液勾配；ヘキサン：酢酸エチル＝１００：０〜０：１００]で精製し、ジ-ｔｅｒｔ-ブチル（（（１，３-ジオキソイソインドリン-２-イル）オキシ）メチル）ホスフェート0.99gを黄色油状物として得た。
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ値：1.44 (18H, s), 5.59 (2H, d, J=10.8 Hz), 7.72-7.80 (2H, m), 7.82-7.90 (2H, m)
【００９２】
参考例３
【化１７】
2018143162.tif 000020
ジ-ｔｅｒｔ-ブチル（（（１，３-ジオキソイソインドリン-２-イル）オキシ）メチル）ホスフェート0.79gにジクロロメタン30mLを加えた。氷冷下、反応混合物にメチルヒドラジン125μLを加え、同一温度にて１時間３０分撹拌した。固形物をろ過し、溶媒を減圧下留去した。残渣にジクロロメタン5mLを加え、固形物をろ過した。溶媒を減圧下留去し、（アミノオキシ）メチル  ジ-ｔｅｒｔ-ブチルホスフェート692mgを黄色油状物として得た。
1H-NMR(400MHz, CD3OD)δ値：1.51 (18H, s), 5.17 (2H, d, J=11.2 Hz)
【００９３】
参考例４
【化１８】
2018143162.tif 000021
（Ｓ）‐２‐（４‐（（４‐（（Ｓ）‐２，２‐ジメチル‐１，３‐ジオキソラン‐４‐イル）フェニル）エチニル）‐Ｎ‐メチルベンズアミド）‐Ｎ１‐ヒドロキシ‐Ｎ３，２‐ジメチルマロンアミド2.0gにアセトニトリル18mLおよび1mol/L塩酸8.3mLを加え、反応混合物を室温にて終夜撹拌した。次いで反応混合物を４０℃にて２時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、アセトニトリル9mLおよび1mol/L塩酸4.6mLを加え、室温にて終夜撹拌した。反応混合物にアセトニトリル9mLおよび1mol/L塩酸8.3mLを加え、４０℃にて４時間３０分撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、減圧下溶媒を留去した。得られた混合物にアセトニトリル20mLを加え、減圧下溶媒を留去し水を共沸した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー[溶離液；クロロホルム：メタノール＝１５：１]で精製し、（Ｓ）-２-（４-（（４-（（Ｓ）-１，２-ジヒドロキシエチル）フェニル）エチニル）-Ｎ-メチルベンズアミド）-２-メチル-３-（メチルアミノ）-３-オキソプロパン酸610mgを白色固体として得た。
1H-NMR(400MHz, DMSO-d6)δ値：1.66 (3H, s), 2.69 (2H, d, J=4.8 Hz), 3.02 (3H, s), 3.41-3.52 (2H, m), 4.57 (1H, t, J=6.0 Hz), 4.63-5.00 (1H, brs), 5.10-5.60 (1H, brs), 7.38-7.45 (2H, m), 7.48-7.60 (4H, m), 7.62-7.70 (2H, m), 8.40-8.50 (1H, m), 13.94 (1H, s)
【００９４】
参考例５
【化１９】
2018143162.tif 000022
（Ｓ）-２-（４-（（４-（（Ｓ）-１，２-ジヒドロキシエチル）フェニル）エチニル）-Ｎ-メチルベンズアミド）-２-メチル-３-（メチルアミノ）-３-オキソプロパン酸275mgに（アミノオキシ）メチル  ジ-ｔｅｒｔ-ブチルホスフェート597mg、Ｎ，Ｎ-ジメチルホルムアミド20mL、Ｎ，Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン181μLおよびＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート402mgを加え、室温にて３時間３０分間撹拌した。反応混合物に酢酸エチルおよび水を加え、有機層を分取した。有機層を10%クエン酸水溶液および飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで脱水乾燥した。溶媒を減圧下留去した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー[溶離液；クロロホルム：メタノール＝８０：２０]で精製し、ジ-ｔｅｒｔ-ブチル（（（（Ｓ）-２-（４-（（４-（（Ｓ）-１，２-ジヒドロキシエチル）フェニル）エチニル）-Ｎ-メチルベンズアミド）-２-メチル-３-（メチルアミノ）-３-オキソプロパンアミド）オキシ）メチル）ホスフェート210mgを無色油状物として得た。
1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ値：1.45 (9H, s), 1.51 (9H, s), 1.80 (3H, s), 2.87 (3H, d, J=4.8 Hz), 3.17 (3H, s), 3.58-3.85 (2H, m), 4.80-4.88 (1H, m), 5.31 (2H, d, J=14.8 Hz), 7.30-7.40 (2H, m), 7.48-7.65 (6H, m), 8.20-8.32 (1H, s), 11.34 (1H, s)
【００９５】
実施例２
【化２０】
2018143162.tif 000023
ジ-ｔｅｒｔ-ブチル（（（（Ｓ）-２-（４-（（４-（（Ｓ）-１，２-ジヒドロキシエチル）フェニル）エチニル）-Ｎ-メチルベンズアミド）-２-メチル-３-（メチルアミノ）-３-オキソプロパンアミド）オキシ）メチル）ホスフェート210mgにアセトン6mLおよび水6mLを加え、５０℃から６０℃にて４時間撹拌した。反応混合物にアセトニトリル20mLを加え、混合物を減圧下濃縮した。得られた混合物に26%アンモニア水52μLを加え、pH7.8に調整し、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー[溶離液；アセトニトリル：水＝１０:９０]で精製した。所望の化合物を含む分画を集め、凍結乾燥することにより（（（Ｓ）-２-（４-（（４-（（Ｓ）-１，２-ジヒドロキシエチル）フェニル）エチニル）-Ｎ-メチルベンズアミド）-２-メチル-３-（メチルアミノ）-３-オキソプロパンアミド）オキシ）メチル  ジハイドロジェン  ホスフェート91mgを白色固体の対応するアンモニウム塩として得た。
1H-NMR(400MHz, D2O)δ値：1.88 (3H, s), 2.83 (3H, s), 3.22 (3H, s), 3.73-3.84 (2H, m), 4.70-4.93 (1H, m), 5.08-5.30 (2H, m), 7.44-7.52 (2H, m), 7.57-7.77 (6H, m)；MS（ESI）：548[M-H]-
【００９６】
実施例４〜９
実施例１の化合物の10％水溶液520mgおよび以下の表２に示す添加剤をバイアルに充填した。
バイアルを-60℃に冷却し、内容物を凍結した。その後、真空下（50Pa以下）、棚温度-10℃に昇温し、同圧力、同温度で一次乾燥を行った。品温が-10℃以上になった後、棚温度を0℃に昇温し、同圧力、同温度で二次乾燥を行った。品温と設定温度がほぼ一致し、品温の変化がなくなったところで乾燥終了とし、密栓することで実施例４〜９の凍結乾燥製剤を得た。
【００９７】
【表２】
2018143162.tif 000024
【００９８】
試験例１  溶解度
実施例１および実施例２の化合物1.2mgをとり、撹拌しながら目視で溶解を確認できるまで生理食塩水を加え、溶解度を算出した。実施例１および実施例２の化合物の溶解度は、100mg/mLより上であった。
【００９９】
原体である化合物Ａの飽和溶解度は0.2mg/mLであり、実施例１および実施例２の化合物は、化合物Ａに比べ、水溶性が大きく改善した。
【０１００】
試験例２  マウスにおける多剤耐性緑膿菌尿路感染モデル試験
マウスはＩＣＲ系雌性ＳＰＦマウス（5週齢：1群5匹）を使用した。接種菌液は、ミュラー・ヒントン・アガー（Mueller-Hinton agar）平板上にて37℃一夜培養した緑膿菌臨床分離株（S-2838株）を滅菌生理食塩液に懸濁し、調製した。感染は、接種菌液0.2mL（約103CFU/mouse）をマウスの尿道内に接種し、惹起した。試験化合物は、滅菌生理食塩水で溶解し、感染2時間後に一回尾静脈内投与した。感染翌日の腎内生菌数を記録して平均値を算出した。
その結果、試験化合物として実施例１の化合物12.5mg/kgを投与した群および実施例２の試験化合物25mg/kgを投与した群は、試験化合物を投与しない対照群に比べ、4log CFU/kidney以上の腎内生菌数の低下が認められた。試験化合物として比較例１の化合物25mg/kgを投与した群は、試験化合物を投与しない対照群に比べ、4log CFU/kidney以上の腎内生菌数の低下は認められなかった。
実施例１および実施例２の化合物は、比較例１の化合物より、尿路感染モデルでの優れた抗緑膿菌活性が認められた。
【０１０１】
試験例３  保存安定性試験
実施例４〜９で得られた各凍結乾燥製剤を、25℃または-20℃で1か月保存した。
保存後の実施例１の化合物の純度をＨＰＬＣ法により測定し、残存率を以下の式によって求めた。結果を表３に示す。
残存率（％）＝（保存後の化合物ＡのＨＰＬＣ純度／試験開始時の化合物ＡのＨＰＬＣ純度）×100
【０１０２】
＜ＨＰＬＣ測定条件＞
検出器：液体クロマトグラフ1200シリーズ（アジレント・テクノロジ―）
測定波長：254nm
カラム：XBridge C18 4.6×150mm（Waters）
カラム温度：40℃
流速：1.0mL/分
移動相Ａ：水/（0.2mol/Lギ酸緩衝液(pH3)）＝90/10
移動相Ｂ：アセトニトリル/（0.2mol/Lギ酸緩衝液(pH3)）＝90/10
グラジエントサイクル:0min（Ａ液/Ｂ液＝90/10）、15min（Ａ液/Ｂ液＝70/30）、20min（Ａ液/Ｂ液＝0/100）、30min（Ａ液/Ｂ液＝0/100）
【０１０３】
【表３】
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【０１０４】
各凍結乾燥製剤の-20℃での1か月残存率は97％以上であり、良好な保存安定性を示した。特に、糖アルコールを添加した実施例４の凍結乾燥製剤は25℃でも1か月の残存率は、97％以上であり、良好な保存安定性を示した。
【産業上の利用可能性】
【０１０５】
本発明の化合物は、強い抗菌活性を示し、水に対して溶解性が優れ、医薬として有用である。
【国際調査報告】
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