【手続補正書】
【提出日】平成17年12月28日(2005.12.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フローサイトメトリーを使用して細胞を選別する方法であって、以下の工程：
ａ．選別される細胞を供給する細胞供給源を確立する工程；
ｂ．選別前および選別後の細胞流体環境の両方で調整される該細胞のための、シース液環境を作製するためにシース液を化学的に調整し、そして該細胞を該シース液と混合する工程；
ｃ．フローサイトメーターにおいて、該細胞の特性を検出する工程；
ｄ．所望の特徴を有する細胞を識別する工程；ならびに
ｅ．該所望の特徴を有する細胞を収集する工程、
を包含する、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の細胞を選別する方法であって、前記細胞が、前記シース液に供される結果として供される、化学的変化を最小化する工程をさらに包含する、方法。
【請求項３】
請求項２に記載の細胞を選別する方法であって、前記細胞供給源を確立する工程が、非修復細胞の供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項４】
請求項３に記載の細胞を選別する方法であって、前記非修復細胞の供給源を確立する工程が、非転写ＤＮＡを有する細胞の供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項５】
請求項３に記載の細胞を選別する方法であって、前記非修復細胞の供給源を確立する工程が、非複製ＤＮＡを有する細胞の供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項６】
請求項２に記載の細胞を選別する方法であって、前記細胞供給源を確立する工程が、精子細胞の供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項７】
請求項２に記載の細胞を選別する方法であって、前記細胞供給源を確立する工程が、ウシ精子細胞の供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項８】
請求項２に記載の細胞を選別する方法であって、前記細胞供給源を確立する工程が、ウマ精子細胞の供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項９】
請求項６、７、または８のいずれか１項に記載の細胞を選別する方法であって、前記所望の特徴を有する低用量の前記精子細胞を用いて、哺乳動物を受精させる工程をさらに包含する方法であって、ここで、該低用量の精子細胞が、哺乳動物の種を人口受精させるために使用される、代表的な精子細胞数の５０％を超えない受精サンプルを含む、方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の細胞を選別する方法であって、前記低用量の精子細胞を使用して前記哺乳動物を受精させる工程が、１００万のウシ精子、１０００万のウシ精子、および１億のウマ精子からなる群より選択される用量の、約１０％未満の用量を使用する工程を包含する、方法。
【請求項１１】
請求項９に記載の細胞を選別する方法であって、前記低用量の前記精子細胞を使用して哺乳動物を受精させる工程が、約５０万未満の用量のウシ精子細胞を使用する工程を包含する、方法。
【請求項１２】
請求項９に記載の細胞を選別する方法であって、前記低用量の前記精子細胞を使用して哺乳動物を受精させる工程が、約３０万未満の用量のウシ精子細胞を使用する工程を包含する、方法。
【請求項１３】
請求項９に記載の細胞を選別する方法であって、前記低用量の前記精子細胞を使用して哺乳動物を受精させる工程が、約１０００万未満の用量のウマ精子細胞を使用する工程を包含する、方法。
【請求項１４】
請求項９に記載の細胞を選別する方法であって、前記受精サンプルが、約１００万と約３００万との間のウシ精子細胞を含む、方法。
【請求項１５】
請求項９に記載の細胞を選別する方法であって、前記受精サンプルが、約１０００万と約２０００万との間のウマ精子細胞を含む、方法。
【請求項１６】
請求項９に記載の細胞を選別する方法であって、前記哺乳動物の種を受精させるために使用される代表的な精子細胞数の５０％を超えない受精サンプルが、１０万を超えない精子細胞のウシ受精サンプル、２５万を超えない精子細胞のウシ受精サンプル、３０万を超えない精子細胞のウシ受精サンプル、５０万を超えない精子細胞のウシ受精サンプル、７０万を超えない精子細胞のウシ受精サンプル、１００万を超えない精子細胞のウシ受精サンプル、２００万を超えない精子細胞のウシ受精サンプル、３００万を超えない精子細胞のウシ受精サンプル、１００万を超えない精子細胞のウマ受精サンプル、５００万を超えない精子細胞のウマ受精サンプル、１０００万を超えない精子細胞のウマ受精サンプル、および２５００万を超えない精子細胞のウマ受精サンプルからなる群より選択される、方法。
【請求項１７】
請求項６に記載の細胞を選別する方法であって、前記所望の特徴を有する細胞を収集する工程が、収集容器を用いて該細胞を衝撃から緩衝する工程を包含する、方法。
【請求項１８】
請求項１７に記載の細胞を選別する方法であって、前記収集容器を用いて該細胞を衝撃から緩衝する工程が、該容器に広い開口部を提供する工程を包含する、方法。
【請求項１９】
請求項７に記載の細胞を選別する方法であって、人口受精のために、前記所望の特徴を有する収集細胞を使用する工程をさらに包含する、方法。
【請求項２０】
請求項８に記載の細胞を選別する方法であって、人口受精のために、前記所望の特徴を有する収集細胞を使用する工程をさらに包含する、方法。
【請求項２１】
請求項２に記載の細胞を選別する方法であって、前記細胞が、前記シース液に供される結果として供される化学的変化を最小化する工程が、該細胞が特に反応性である、少なくとも１種の過反応性の化学的組成物を含む、選別前および選別後の細胞流体環境を提供する工程を包含し、ここで、前記シース液を化学的に調整する工程が、該過反応性の化学的組成物に対する変化を最小化する、方法。
【請求項２２】
請求項２１に記載の細胞を選別する方法であって、該細胞が特に反応性である、少なくとも１種の過反応性の化学的組成物を含む、選別前および選別後の細胞流体環境を提供する工程が、代謝性化学組成物を提供する工程を包含する、方法。
【請求項２３】
請求項２１に記載の細胞を選別する方法であって、該細胞が特に反応性である、少なくとも１種の過反応性の化学的組成物を含む、選別前および選別後の細胞流体環境を提供する工程が、クエン酸を提供する工程を包含する、方法。
【請求項２４】
請求項１〜７に記載のいずれか１項に記載の細胞を選別するための方法であって、前記選別前および選別後の細胞流体環境の両方で調整される該細胞のためのシース液環境を作製するためにシース液を化学的に調整する工程が、約２．９％のクエン酸ナトリウムを含むシース液を確立する工程を包含する、方法。
【請求項２５】
請求項２４に記載の細胞を選別するための方法であって、前記選別される細胞を供給する細胞供給源を確立する工程が、周囲の流体環境中の化学組成物に対して過反応性である細胞を供給する、細胞供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項２６】
請求項１または８のいずれか１項に記載の細胞を選別する方法であって、前記選別前および選別後の細胞流体環境の両方で調整される前記細胞のためのシース液環境を作製するためにシース液を化学的に調整する工程が、ＨＥＰＥｓ緩衝化培地を含むシース液を確立する工程を包含する、方法。
【請求項２７】
請求項２６に記載の細胞を選別する方法であって、前記選別される細胞を供給する細胞供給源を確立する工程が、周囲の流体環境中の化学組成物に対して過反応性である細胞を供給する、細胞供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項２８】
請求項１、２、または６のいずれか１項に記載の細胞を選別する方法であって、１秒あたり少なくとも５００を選別する速度を超える速度で前記細胞を選別する工程をさらに包含する、方法。
【請求項２９】
請求項２８に記載の細胞を選別する方法であって、前記１秒あたり少なくとも５００を選別する速度を超える速度で前記細胞を選別する工程が、該細胞を１平方インチあたり少なくとも５０パウンドの圧力に供す工程をさらに包含する、方法。
【請求項３０】
請求項１に記載の細胞を選別する方法であって、前記選別される細胞を提供する細胞供給源を確立する工程が、前記選別前の流体環境を含み、前記所望の特徴を有する細胞を収集する工程が、前記選別後の流体環境を含む、方法。
【請求項３１】
請求項１に記載の細胞を選別する方法であって、前記選別される細胞を供給する細胞供給源を確立する工程が、シース液環境中の、化学組成物に対して過反応性である細胞供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項３２】
フローサイトメトリーによって細胞を選別する方法であって、以下の工程：
ａ．選別される細胞を供給する細胞供給源を確立する工程；
ｂ．該細胞のためのシース液環境を作製するためのシース液を確立し、そして該シース液を該細胞と混合する工程；
ｃ．フローサイトメターにおいて、該細胞の特性を検出する工程；
ｄ．所望の特徴を有する細胞を識別する工程；
ｅ．収集流体において、該所望の特徴を有する細胞を収集する工程；および
ｆ．該収集流体を該シース液で化学的に調整し、選別前の流体環境で調整される該細胞のための、最終収集流体環境を作製する工程、
を包含する、方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の細胞を選別する方法であって、前記細胞供給源を確立する工程は、該細胞に初期栄養分を提供する工程、そしてさらに該細胞に収集流体栄養分を提供する工程を包含する工程を包含し、そしてここで、前記収集流体中で前記所望の特徴を有する細胞を収集する工程が、該細胞を収集する該工程の完了後に、該初期栄養分および該収集流体栄養分を平均化する工程を包含する、方法。
【請求項３４】
請求項３３に記載の細胞を選別する方法であって、前記収集流体中で前記所望の特徴を有する細胞を収集する工程が、該収集する工程を開始する前に、約６％の卵黄を含むクエン酸塩収集流体を確立する工程を包含する、方法。
【請求項３５】
請求項３４に記載の細胞を選別する方法であって、前記細胞供給源を確立する工程が、ウシ精子細胞の供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項３６】
請求項３５に記載の細胞を選別する方法であって、前記所望の特徴を有する低用量の前記精子細胞を用いて哺乳動物を受精させる工程をさらに包含し、ここで、該低用量の精子細胞は、哺乳動物の種を人口受精させるために使用される、代表的な精子細胞数の５０％を超えない受精サンプルを含む、方法。
【請求項３７】
請求項３４に記載の細胞を選別する方法であって、該細胞のためのシース液環境を作製するためにシース液を確立する前記工程が、約２．９％のクエン酸ナトリウムを含有するシース液を確立する工程を包含する、方法。
【請求項３８】
請求項３２に記載の細胞を選別する方法であって、前記選別される細胞を供給する細胞供給源を確立する工程が、周囲の流体環境中の化学組成物に対して過反応性である細胞を供給する、細胞供給源を確立する工程を包含する、方法。
【請求項３９】
請求項３２または３６のいずれか１項に記載の細胞を選別する方法であって、前記所望の特徴を有する細胞を識別する工程が、１秒あたり５００を選別する速度を超える速度で、該所望の特徴を有する細胞を識別する工程を包含する、方法。
【請求項４０】
請求項３２に記載の細胞を選別する方法であって、前記所望の特徴を有する細胞を収集する工程が、収集容器を用いて該細胞を衝撃から緩衝する工程をさらに包含する、方法。
【請求項４１】
請求項１７または４０のいずれか１項に記載の細胞を選別する方法であって、前記収集容器を用いて前記細胞を衝撃から緩衝する工程が、該細胞とコレクターとの間の衝撃を回避するために、該コレクターをサイズ調製する工程を包含する、方法。
【請求項４２】
請求項１７または４０のいずれか１項に記載の細胞を選別する方法であって、前記収集容器を用いて前記細胞を衝撃から緩衝する工程が、幅広の収集管を提供する工程を包含する、方法。
【請求項４３】
請求項４２に記載の細胞を選別する方法であって、前記幅広の収集管を提供する工程が、少なくとも１５ｍｍの直径を有する収集管を提供する工程を包含する、方法。
【請求項４４】
請求項３９または４０のいずれか１項に記載の細胞を選別する方法であって、前記収集容器を用いて前記細胞を衝撃から緩衝する前記工程が、流動に適合した容器を提供する工程を包含する、方法。
【請求項４５】
請求項３２に記載の細胞を選別する方法であって、前記所望の特徴を有する細胞を識別する工程が、少なくとも３８μＭ量の染料を使用して染色された精子細胞を識別する工程を包含する、方法。