【手続補正書】
【提出日】平成18年4月24日(2006.4.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  吸水性高分子ゲルの中に、酵素で切断され得る分解性基によって薬剤を担体粒子に結合してなる薬剤結合粒子を包括固定してなることを特徴とする医療用高分子ゲル。
【請求項２】  薬剤結合粒子が、下記の一般式（Ｉ）；
【化１】
Ｘ−Ｓｐ1−Ｅ−Ｓｐ2−Ｇ               （Ｉ）
（式中、Ｘは担体粒子、Ｓｐ1は第１のスペーサー、Ｅは酵素で切断され得る分解性基、Ｓｐ2は第２のスペーサーおよびＧは薬剤を示す。）
で表される結合形態によって薬剤が担体粒子に結合している粒子である請求項１に記載の医療用高分子ゲル。
【請求項３】  担体粒子が、多孔性粒子である請求項１または２に記載の医療用高分子ゲル。
【請求項４】  担体粒子が、多孔性のアガロース粒子、デキストラン粒子および／またはセルロース粒子である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医療用高分子ゲル。
【請求項５】  吸水性高分子ゲルを形成し得る高分子素材の溶液または分散液中に、酵素で切断され得る分解性基によって薬剤を担体粒子に結合してなる薬剤結合粒子を混合した後、該高分子素材をゲル化することを特徴とする請求項１に記載の医療用高分子ゲルの製造方法。
【請求項６】  吸水性高分子ゲルを製造した後、酵素で切断され得る分解性基によって薬剤を担体粒子に結合してなる薬剤結合粒子を、該吸水性高分子ゲル中に挿入することを特徴とする請求項１に記載の医療用高分子ゲルの製造方法。
【請求項７】  薬剤結合粒子が、下記の一般式（Ｉ）；
【化２】
Ｘ−Ｓｐ1−Ｅ−Ｓｐ2−Ｇ               （Ｉ）
（式中、Ｘは担体粒子、Ｓｐ1は第１のスペーサー、Ｅは酵素で切断され得る分解性基、Ｓｐ2は第２のスペーサーおよびＧは薬剤を示す。）
で表される結合形態によって薬剤が担体粒子に結合している粒子である請求項５または６に記載の医療用高分子ゲルの製造方法。
【請求項８】  担体粒子が、多孔性粒子である請求項５〜７のいずれか１項に記載の医療用高分子ゲルの製造方法。
【請求項９】  担体粒子が、多孔性のアガロース粒子、デキストラン粒子および／またはセルロース粒子である請求項５〜８のいずれか１項に記載の医療用高分子ゲルの製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
【従来の技術】
従来、外傷や熱傷、潰瘍、褥瘡などの創傷の治療には、ガーゼおよび／または軟膏類が汎用されてきた。これらは滲出液を吸収し、かつ外部からの細菌などの侵入を防ぐ効果がある。さらに、近年では、創部からの滲出液中に存在する治癒を促進する種々の増殖因子を創部に保持して創部治癒促進効果を示す閉鎖性被覆材が注目されるようになり、ポリウレタンフイルム、ハイドロコロイド、アルギン酸ゲル、ポリビニルアルコールスポンジ、ポリビニルアルコール含水ゲルなどが使用されている。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
【課題を解決するための手段】
上記の目的を達成すべく本発明者らが更に検討を重ねた結果、スペーサーおよび酵素で切断され得る分解性基を介して薬剤をそのまま吸水性高分子ゲルに結合する代わりに、薬剤を、酵素で切断され得る分解性基を介して又は酵素で切断され得る分解性基とスペーサーを介して担体粒子に結合して薬剤結合粒子をつくり、その薬剤結合粒子を吸水性高分子ゲルの中に包括固定すると、それにより得られる医療用高分子ゲルは、酵素が産生される病巣において薬剤を選択的に放出でき、しかも病巣以外の部分に副作用を与えることなく、病巣の治癒効果を発現するのに十分な量の薬剤を病巣部位にムラなく放出し、上記した従来の医療用材料に比べて、より高い感染防止効果を有することを見出した。
さらに、本発明者らは、上記した医療用高分子ゲルは、吸水性高分子ゲルを形成し得る高分子素材の溶液または分散液の中に、酵素で切断され得る分解性基によって薬剤を担体粒子に結合した前記薬剤結合粒子を混合した後に該高分子素材をゲル化するか、または吸水性高分子ゲルを予め製造した後に、該ゲル中に、酵素で切断され得る分解性基によって薬剤を担体粒子に結合した前記薬剤結合粒子を挿入することによって、極めて簡便に且つ生産性良く、安価に製造できることを見出し、それらの知見に基づいて本発明を完成した。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
したがって、本発明は、吸水性高分子ゲルの中に、酵素で切断され得る分解性基によって薬剤を担体粒子に結合してなる薬剤結合粒子を包括固定してなることを特徴とする医療用高分子ゲルである。
そして、本発明は、吸水性高分子ゲルを形成し得る高分子素材の溶液または分散液中に、酵素で切断され得る分解性基によって薬剤を担体粒子に結合してなる薬剤結合粒子を混合した後、該高分子素材をゲル化することを特徴とする上記医療用高分子ゲルの製造方法である。
さらに、本発明は、吸水性高分子ゲルを製造した後、酵素で切断され得る分解性基によって薬剤を担体粒子に結合してなる薬剤結合粒子を、該吸水性高分子ゲル中に挿入することを特徴とする上記医療用高分子ゲルの製造方法である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
【発明の実施の形態】
以下に本発明について詳細に説明する。
まず、本発明の医療用高分子ゲルで用いる「酵素で切断され得る分解性基によって薬剤を担体粒子に結合してなる薬剤結合粒子」（以下単に「薬剤結合粒子」ということがある）について説明する。
本明細書中では、薬剤結合粒子について説明する際に、アミノ酸残基をアミノ酸について慣用されている略号によって記述することがある。その際に特に断らない限りＬ体のアミノ酸残基を示し、Ｄ体のアミノ酸残基の場合には略号の後（右側）に（Ｄ）を付記して記述する。また、本明細書では、常法にしたがってペプチドのアミノ酸配列を、そのＮ−末端のアミノ酸残基が左側に位置し、Ｃ−末端のアミノ酸残基が右側に位置するように記述する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
本発明の医療用高分子ゲルで用いる薬剤結合粒子は、薬剤が酵素で切断され得る分解性基によって担体粒子に結合している粒子である。本発明で用いる薬剤結合粒子としては、酵素で切断され得る分解性基（以下「酵素分解性基」という）によって薬剤が担体粒子に結合されている粒子であって且つ酵素が進入するのに十分な大きさの孔を有し、血液、血漿、細胞間液などの体液や生理食塩水などの体液類似液に溶解せず、生体適合性に優れる粒子であれば、いずれも使用できる。医療用高分子ゲルの使用目的、使用形態などに応じて、酵素分解性基に作用する酵素の種類が異なり、その酵素の分子サイズが変わるので、対象となる酵素の分子サイズに適した孔径を有する薬剤結合粒子を選択すれば良い。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
（４）薬剤結合粒子の吸水性高分子ゲルの中への包括固定：
（ｉ）  ２．３ｇのＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（株式会社ペプチド研究所製）を酢酸エチル１５０ｍｌに溶解し、撹拌しながら１０ｍｌの酢酸エチルに溶解した０．６ｇのエチレンジアミン（和光純薬株式会社製）を室温下に滴下した。滴下終了後、さらに１時間撹拌を続けた。析出した結晶を濾取し、減圧下に乾燥してエチレンジアミン２Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド塩２．９ｇ（収率１００％）を得た。
（ii）  アルギン酸ナトリウム（和光純薬株式会社製）の１重量％水溶液（粘度５００〜６００ｃｐ）の５５ｍｌに、上記（ｉ）で得られたエチレンジアミン２Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド塩２４２ｍｇと、１．７６ｇの１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩(株式会社ペプチド研究所製）を溶解した。この溶液に、上記（３）で得られたゲンタマイシンを結合した薬剤結合粒子１００ｍｇを加え、均一に分散した後、テフロン（登録商標）被覆アルミ製トレイ（１０ｃｍ×１０ｃｍ）に流延し、室温で静置した。約５１時間後に、含水ゲルが得られた。
（iii）  上記（ii）で得られた含水ゲルを、細胞間質液と同じ濃度（Ｃａイオン５ｍｅｑ、とＮａイオン１４３ｍｅｑ）になるように、塩化カルシウムと塩化ナトリウムを溶解した水溶液で十分に洗浄した後、純水で十分に洗浄し、次いで凍結乾燥して、スポンジ状のアルギン酸共有結合架橋ゲル中に薬剤結合粒子が包括固定された医療用高分子ゲル約０．５ｇを得た。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
《実施例２》［ゲンタマイシンを結合した薬剤結合粒子を包括固定してなるポリウレタンフィルムの製造］
親水性ポリウレタン（株式会社クラレ製「ＫＭ−０００２」）をジメチルホルムアミドに溶解して１０重量％溶液を調製した。実施例１の（３）で得られたゲンタマイシンを結合した薬剤結合粒子０．１ｇをこのポリウレタン溶液２ｇに添加し、テフロン（登録商標）被覆アルミ製トレイ（３ｃｍ×３ｃｍ）に流延した。これを純水１．５リットル中に浸漬して凝固させた後、十分量の純水で洗浄して、ゲンタマイシンを結合した薬剤結合粒子を包括固定してなるポリウレタンフィルムからなる医療用高分子ゲルを得た。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６４】
【発明の効果】
本発明の医療用高分子ゲルは、病巣部位において治癒効果を発現するのに十分な量の薬剤を、病巣部位にムラなく放出させることができる。
そして、本発明の医療用高分子ゲルは、酵素量に応じた薬剤放出特性を示すために、酵素が産生される病巣においてのみ治療に有効な薬剤を放出することができ、薬剤による副作用を最小限に抑制しながら病巣の治癒を極めて円滑に行うことができる。
さらに、本発明の方法による場合は、薬剤結合粒子（酵素分解性基で薬剤を担体粒子に結合した粒子）を予め調製しておき、その必要量を吸水性高分子ゲルの中に包括することができるため、均一な性能を有する医療用高分子ゲルを簡便に生産性よく製造することができる。