(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式１で表されるポリオール系化合物又はその塩類。
【化１】
0004535305.tif 000005
【請求項２】
請求項１のポリオール系化合物又はその塩類を有効成分とする抗酸化剤。
【請求項３】
請求項１のポリオール系化合物又はその塩類を添加した飲食品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規なポリオール系化合物に関する。また、本発明は、このポリオール系化合物を有効成分とする抗酸化剤、及びこの化合物を添加して抗酸化能を賦与した飲食品に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ヒトをはじめとする好気性生物にとって酸素は不可欠であるが、活性酸素と呼ばれる酸素分子由来のフリーラジカルは生体に障害をもたらすことが知られている。このような活性酸素による細胞や遺伝子の障害は、ガンや糖尿病等の生活習慣病の発生や進行に関係があり、また、老化の原因の一つであるともいわれている。
【０００３】
生体内には、脂質の過酸化によって生じた種々の酸化障害に対する酸化抑制酵素、例えば、スーパーオキシドジスムターゼやカタラーゼ等によって、過酸化物質を分解し、安定化する機構が存在する。また、これらの酵素による生体防御機構と共に、生体内の酸化抑制物質が酸化抑制的防御機構に重要な役割を果たしているものと推定されている。例えば、脂溶性の物質であるビタミンＥは生体膜を物理的に安定化したり、脂質の過酸化過程におけるフリーラジカルの連鎖反応の停止剤として作用する等、多くの報告がある。また、最近では、食品成分として摂取する天然の酸化抑制物質の検索が行われており、ゴマ種子由来のセサモリノール、セサミノール、茶カテキン等に含まれるエピガロカテキンガレートやコーヒー酸等、植物由来の成分について多くの研究がなされている。このように、植物中には酸化を抑制する成分が多量に存在することが明らかにされてきている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、抗酸化活性を有する化合物について鋭意研究を進めていたところ、コケ植物に由来する新規なポリオール系化合物を見出し、このポリオール系化合物が抗酸化活性を有することを確認して、本発明を完成するに至った。
したがって、本発明は、新規なポリオール系化合物を提供することを課題とする。また、本発明は、このポリオール系化合物を有効成分とする抗酸化剤、及びこのポリオール系化合物を添加した飲食品を提供することを課題とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明のポリオール系化合物は、次の化学式１で表される化合物又はその塩類である。
【化３】
0004535305.tif 000002
コケ植物から抽出・精製することによりその光学異性体である化学式２の化合物を調製することができる。
【化４】
0004535305.tif 000003
すなわち、適当な有機溶媒を用いてコケ植物から抽出した抽出物を各種クロマトグラフィーに供することにより、純度95％以上の化学式２で表されるポリオール系化合物を得ることができる。
ここで、本発明のポリオール系化合物の塩類とは、ナトリウム塩、カリウム塩等である。
【０００６】
又、該ポリオール系化合物又はその塩類が高い抗酸化活性を有することを確認したので、本発明では該ポリオール系化合物又はその塩類から抗酸化剤を製造することができる。
本発明の抗酸化剤は、化学式１又は２で表されるポリオール系化合物を有効成分とする。この抗酸化剤は、錠剤、タブレット、粉末等の製剤にして用いることができる。
また、本発明の抗酸化剤は、飲食品に添加して用いることもできる。本発明の抗酸化剤を添加することのできる飲食品としては、果汁飲料、牛乳、乳飲料、コーヒー飲料、ジュース、ゼリー、ビスケット、パン等である。
【０００７】
本発明の抗酸化剤は、ラジカルスカベンジャー活性を有することから、成人一日当たり 100μg 〜 1,000mgを一回又は数回に分けて摂取することにより、活性酸素や過酸化脂質による酸化的細胞障害を予防又は改善することができ、有用である。
【０００８】
【発明の実施の形態】
次に、本発明のポリオール系化合物の調製法を実施例１で説明する。
【実施例１】
〔ポリオール系化合物の調製法〕
(1) ツツイロゴケ (Jungermannia subulata) のカルス誘導
まず、ツツイロゴケ (Jungermannia subulata) の胞子を胞子のうごとガーゼに包んで70％エタノールに５分間浸漬した後、１％次亜塩素酸ナトリウム水溶液に10分間浸漬して殺菌した。次に、水をよくきり，Ｂ５寒天培地上に胞子のうを置床した後、ピンセットで押し潰して中の胞子を培地に露出させた。
胞子は、発芽した後に原糸体に成長し、やがてカルス状となった。３か月後に増殖したカルスをＭＳＫ培地に移植し、以後、１か月毎に継代した。培養は、連続光照射下 (2,000 lux)、25℃で行った。
【０００９】
(2) ツツイロゴケ (Jungermannia subulata) カルスからの化学式２で表されるポリオール系化合物の分離・精製
ＭＳＫ寒天斜面培地で増殖させたカルス（乾燥重量 51.165g) をコーヒーミルで粉砕した後、メチルアルコールで抽出した(500ml×3)。次に、このメチルアルコール抽出物を濃縮乾固した後、水 (200ml)に懸濁し、ジエチルエーテル(200ml×2)、ｎ−ブタノール(200ml×3)で順次抽出した。このｎ−ブタノール抽出物を濃縮乾固した後、カラムクロマトグラフィー処理（Sephadex LH-20 (20g)、メチルアルコール溶出）、逆相ＨＰＬＣ分離（ＯＤＳ 2.5％ギ酸／20％アセトニトリル−水）で精製し、化学式２で表されるポリオール系化合物 50.4mg を得た。
【００１０】
この化学式２で表されるポリオール系化合物の各種スペクトルデータは、以下の通りである。
1H-NMR (270MHz, CD3OD): 7.56(1H, d, 15.8Hz), 7.52(1H, d, 15.8Hz), 7.09(1H, d, 8.6Hz), 7.09(1H, d, 2.0Hz), 7.05(1H, d, 2.0Hz), 6.90(1H, d, 2.0, 8.6Hz), 6.88(1H, d, 2.0, 8.6Hz), 6.81(1H, d, 8.6Hz), 6.40(1H, d, 15.8Hz), 6.28(1H, d,15.8Hz), 5.92(2H, s), 5.88(1H, m), 4.86(2H, m), 4.29(2H, d, 8.2Hz), 3.86(5H, m), 3.52(5H, m)
13C-NMR (68.5MHz, CD3OD): 168.9, 167.8, 150.0, 149.3, 148.6, 148.5, 147.1, 147.0, 130.9, 127.9, 123.6, 123.2, 117.9, 116.9, 116.7, 115.8, 115.7, 114.7, 103.5, 78.5, 77.7, 75.0, 71.5, 70.4, 67.5, 64.3, 63.7, 62.6
FAB-HR-MS
実測値  707.1826   [M+H]+    C32H35O18    計算値  707.1823
実測値  729.1645   [M+Na] +  C32H34O18Na  計算値  729.1643
実測値  745.1388   [M+K]+    C32H34O18K   計算値  745.1382
元素分析    分子式 C32H34O18
計算値  C: 54.39; H: 4.85; 0: 40.76
実測値  C: 54.41; H: 4.96; 0: 40.62
[α]D =-16.8 °(c 0.19, MeOH)
IRνmax cm-1 =3388, 1708, 1597, 1279
UVλmax MeOH(logε) =209(4.39), 213(4.43), 218(4.43), 237(4.31), 294(4.38),325(4.38)
【００１１】
次に，本発明のポリオール系化合物の抗酸化剤としての効果を確認した試験例を示す。以下、化学式２の光学異性体について具体的に効果を示すが、化学式１の光学異性体混合物でも同様の効果が予測される。
【試験例１】
実施例１で得られた化学式２で表されるポリオール系化合物の抗酸化活性について、大澤らの方法(J. Agric. Food Chem., vol.35, pp.809-812, 1987)により測定した。すなわち、ウサギ保存血液と等張液 (10mMリン酸緩衝液／ 152mM塩化ナトリウム、pH7.4)とを等量混和し、４℃、 1,500×g (3,500rpm)、20分間の遠心分離を３回行って洗浄した。次に、洗浄済みの血球に低張液 (10mMリン酸緩衝液、pH7.4)をよく混和し、４℃、20,000×g (11,000rpm) 、40分間の遠心分離を４回行った。そして、得られた緩い沈澱部分 (ゴースト) を用い、化学式２で表されるポリオール系化合物の抗酸化活性を検討した。
なお、化学式２で表されるポリオール系化合物を初濃度で 0mM、0.01mM、 0.1mM、１mM及び10mMとなるように調製した後、上記した赤血球膜のゴーストと混合し、酸化剤を加えて酸化反応を行った。また、対照として、既知の抗酸化剤であるビタミンＥを用いて同様の処理を行った。
【００１２】
酸化反応後、ＴＢＡ反応を行い、532nm で吸光度を測定して酸化生成物を定量した。抗酸化活性は、サンプル無添加時の吸光度を 100％とし、各サンプルを添加したときの吸光度から、次式で定義されるゴースト酸化率を算出することで評価した。
ゴースト酸化率（％）＝（吸光度／サンプル無添加時の吸光度）× 100
このゴースト酸化率が低いほどゴーストの酸化が抑制されており、抗酸化活性が高いことを示している。なお、ゴースト無添加でＴＢＡ反応を行って得られた吸光度をブランク値とし、吸光度から差し引いた。
結果を表１に示す。
【００１３】
【表１】
0004535305.tif 000004
【００１４】
本発明のポリオール系化合物を添加すると、濃度依存的な抗酸化活性を示し、その活性は濃度10mM以上でビタミンＥ以上の活性を示した。したがって、化学式２で表されるポリオール系化合物は、抗酸化活性（ラジカルスカベンジャー活性）を有しており、活性酸素や過酸化脂質による酸化的細胞障害の予防又は改善に有用である。
なお、本発明のポリオール系化合物は、ビタミンＥに比べて水への溶解性が高いので、飲料等への利用に適している。さらに、化学式２で表されるポリオール系化合物の水溶液は安定性が高く、効果の持続性も良好である。化学式２の化合物は2mg/ml以上の水への溶解度を有し、酸性溶液において、室温で１週間放置しても変化しない。
【００１５】
【実施例２】
〔抗酸化剤を配合した飲料の製造〕
表２に示す配合で原料を混合した後、容器に充填し、加熱滅菌して、抗酸化能を賦与した飲料を製造した。
【表２】
─────────────────────────
混合異性化糖                  15.0  （重量％）
果汁                          10.0
クエン酸                       0.5
化学式２で表される化合物       0.0005
香料                           0.1
炭酸カルシウム                 0.5
水                            73.8995
─────────────────────────
【００１６】
【実施例３】
〔抗酸化剤の錠剤の製造〕
表３に示す配合で原料を混合した後、加圧成型して、抗酸化剤の錠剤を製造した。
【表３】
─────────────────────────
含水結晶ブドウ糖              93.495（重量％）
化学式２で表される化合物       0.005
カルシウム                     5.0
シュガーエステル               1.0
香料                           0.5
─────────────────────────
【００１７】
【実施例４】
〔抗酸化剤のタブレットの製造〕
表４に示す配合で原料を混合し、抗酸化剤のタブレットを製造した。
【表４】
───────────────────────────────
コーンスターチ                            49.15 （重量％）
含水結晶ブドウ糖                          47.34
結晶セルロース                             2.5
カルボキシメチルセルロースカルシウム       0.32
化学式２で表される化合物                   0.01
香料                                       0.68
───────────────────────────────
【００１８】
【発明の効果】
化学式１又は２で表される本発明のポリオール系化合物は、ビタミンＥと同等以上の抗酸化活性を有しており、また、水に対する溶解性及び安定性が良好であるという特徴を有している。したがって、このポリオール系化合物を有効成分として、錠剤、タブレット、粉末等に製剤化した抗酸化剤を提供することができ、また、この抗酸化剤を添加して抗酸化能を賦与した飲食品を提供することができる。