【手続補正書】
【提出日】平成18年10月4日(2006.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  下式
【化１】
2000143691.tif 000001
（上式中、ＸはＯ、Ｓ、スルホニルまたはホスホノであり；Ｘ1 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ1 は連結基または結合であり；Ｘ2 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ2 は連結基または結合であり；Ａ1 とＡ2は各々水素であるか、またはＡ1 とＡ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｂ1 とＢ2 は各々水素であるか、またはＢ1 とＢ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｅ1 とＥ2 は各々水素であるか、またはＥ1 とＥ2 が一緒になって単結合を形成し、ただし、Ａ1 とＡ2 、またはＢ1 とＢ2 、またはＥ1 とＥ2 の少なくとも１つが各々水素である）を有する還元型コルチゾール接合体。
【請求項２】  ＸがＯでありそしてＸ1 がウシ血清アルブミンである、請求項１に記載の還元型コルチゾール接合体。
【請求項３】  Ｙ1 がメチレンカルボニルオキシである、請求項２に記載の還元型コルチゾール接合体。
【請求項４】  Ｘ2 がペルオキシダーゼであり、そしてＹ2 が（４−〔２，５−ジオキソ−３−｛（２−エチルカルボニル）スルファニル｝テトラヒドロ−１Ｈ−１−ピロリル〕メチル）−１−シクロヘキサンカルボニルである、請求項３に記載の還元型コルチゾール接合体。
【請求項５】  水性組成物中の請求項１に記載の還元型コルチゾール接合体。
【請求項６】  下式
【化２】
2000143691.tif 000002
（上式中、ＸはＯ、Ｓ、スルホニルまたはホスホノであり；Ｘ1 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ1 は連結基または結合であり；Ｘ2 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ2 は連結基または結合であり；Ａ1 とＡ2は各々水素であるか、またはＡ1 とＡ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｂ1 とＢ2 は各々水素であるか、またはＢ1 とＢ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｅ1 とＥ2 は各々水素であるか、またはＥ1 とＥ2 が一緒になって単結合を形成し、ただしＡ1 とＡ2 、またはＢ1 とＢ2 、またはＥ1 とＥ2 の少なくとも１つが各々水素である）
を有する還元型コルチゾール接合体の製造方法であって、
下式の化合物
【化３】
2000143691.tif 000003
を還元剤と反応させることを含んで成る方法。
【請求項７】  前記還元剤が水素化ホウ素塩である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】  ＸがＯであり、Ｘ1 がウシ血清アルブミンであり、そしてＹ1 がメチレンカルボニルオキシである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】  Ｘ2 がペルオキシダーゼである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】  Ｙ2 が（４−〔２，５−ジオキソ−３−｛（２−エチルカルボニル）スルファニル｝テトラヒドロ−１Ｈ−１−ピロリル〕メチル）−１−シクロヘキサンカルボニルであり、そしてＸ2 が西洋ワサビペルオキシダーゼである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】  下式
【化４】
2000143691.tif 000004
（上式中、ＸはＯ、Ｓ、スルホニルまたはホスホノであり；Ｘ1 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ1 は連結基または結合であり；Ｘ2 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ2 は連結基または結合であり；Ａ1 とＡ2は各々水素であるか、またはＡ1 とＡ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｂ1 とＢ2 は各々水素であるか、またはＢ1 とＢ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｅ1 とＥ2 は各々水素であるか、またはＥ1 とＥ2 が一緒になって単結合を形成し、ただしＡ1 とＡ2 、またはＢ1 とＢ2 、またはＥ1 とＥ2 の少なくとも１つが各々水素である）
を有する還元型コルチゾール接合体の製造方法であって、
(i)下式の化合物
【化５】
2000143691.tif 000005
を還元剤と反応させ、それにより化合物ＩＡまたはＩＣを形成させ；そして
(ii)場合により、化合物ＩＡまたはＩＣを第一のカップリング剤と反応させて、下式の化合物
【化６】
2000143691.tif 000006
（上式中、Ｇ1 はカップリング基である）を形成させ；
(iii)場合により、Ｘ2 を第二のカップリング剤と反応させて、Ｘ2 −Ｇ2 （ここでＧ2 はカップリング基Ｇ1 と共に共有結合を形成することができるカップリング基であり、そしてＧ1 とＧ2 は同じであってもよい）を形成させ；
(iv)場合により、化合物ＩＡまたはＩＣをＸ2 −Ｇ2 （ここでＧ2 はＸ1 の官能基と共有結合することができる）と反応させて、還元型コルチゾール接合体ＩＢまたはＩＤを形成させ；
(v)場合により、化合物 IIIＡまたは IIIＣをＸ2 （ここでＧ1 はＸ2 の官能基と共有結合することができる）と反応させて、還元型コルチゾール接合体ＩＢまたはＩＤを形成させ；
(vi)場合により、化合物 IIIＡまたは IIIＣをＸ2 −Ｇ2 と反応させて、還元型コルチゾール接合体ＩＢまたはＩＤを形成させるという各段階を含んでなる方法。
【請求項１２】  ＸがＯであり、そしてＸ1 がウシ血清アルブミンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】  Ｙ1 がメチレンカルボニルオキシである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】  Ｘ2 がペルオキシダーゼであり、第一のカップリング剤が４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルであり、そして第二のカップリング剤がＳ−アセチルチオ酢酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】  コルチゾールについての競合アッセイの実施方法であって、
Ａ）コルチゾールを含む疑いのある試料を
i)コルチゾールを結合する固定化されたまたは固定化可能なレセプターと接触させ、それにより固定化されたまたは固定化可能なレセプターに結合したコルチゾールと、固定化されたまたは固定化可能なレセプターに結合しないコルチゾールとを形成させ、
ii)下式
【化７】
2000143691.tif 000007
（上式中、ＸはＯ、Ｓ、スルホニルまたはホスホノであり；Ｘ1 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ1 は連結基または結合であり；Ｘ2 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ2 は連結基または結合であり；Ａ1 とＡ2は各々水素であるか、またはＡ1 とＡ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｂ1 とＢ2 は各々水素であるか、またはＢ1 とＢ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｅ1 とＥ2 は各々水素であるか、またはＥ1 とＥ2 が一緒になって単結合を形成し、ただしＡ1 とＡ2 、またはＢ1 とＢ2 、またはＥ1 とＥ2 の少なくとも１つが各々水素であり、そしてＸ1 とＸ2 の少なくとも１つが標識された天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識である）
を有する還元型コルチゾール接合体と接触させ、それにより固定化されたまたは固定化可能なレセプターに結合した標識還元型コルチゾール接合体と、固定化されたまたは固定化可能なレセプターに結合しない標識還元型コルチゾール接合体とを形成させ；そして
Ｂ）試料中のコルチゾールの量の測度として、前記固定化されたまたは固定化可能なレセプターに結合した標識還元型コルチゾール接合体か、前記固定化されたまたは固定化可能なレセプターに結合しない標識還元型コルチゾール接合体のいずれかを検出する
という各段階を含んで成る方法。
【請求項１６】  ＸがＯであり、そしてＸ1 がウシ血清アルブミンである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】  Ｙ1 がメチレンカルボニルオキシであり、そしてＸ2 がペルオキシダーゼである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】  Ｙ2 が（４−〔２，５−ジオキソ−３−｛（２−エチルカルボニル）スルファニル｝テトラヒドロ−１Ｈ−１−ピロリル〕メチル）−１−シクロヘキサンカルボニルであり、そしてＸ2が西洋ワサビペルオキシダーゼである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】  前記固定化されたまたは固定化可能なレセプターに結合しない標識還元型コルチゾール接合体から、前記固定化されたまたは固定化可能なレセプターに結合した標識還元型コルチゾール接合体を分離することを更に含んで成る、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】  コルチゾールについての競合結合アッセイの実施方法であって、該方法は
ａ）展開区画、
ｂ）１または複数の試薬区画、
ｃ）支持体、並びに
前記区画の１区画または複数区画において一緒にまたは別々に、コルチゾールを結合する固定化されたレセプター、および場合により下式
【化８】
2000143691.tif 000008
（上式中、ＸはＯ、Ｓ、スルホニルまたはホスホノであり；Ｘ1 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ1 は連結基または結合であり；Ｘ2 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ2 は連結基または結合であり；Ａ1 とＡ2は各々水素であるか、またはＡ1 とＡ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｂ1 とＢ2 は各々水素であるか、またはＢ1 とＢ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｅ1 とＥ2 は各々水素であるか、またはＥ1 とＥ2 が一緒になって単結合を形成し、ただしＡ1 とＡ2 、またはＢ1 とＢ2 、またはＥ1 とＥ2 の少なくとも１組が各々水素であり、そしてＸ1 とＸ2 の少なくとも１つが標識された天然もしくは合成ポリマーであるか、または標識である）
を有する標識還元型コルチゾール接合体
を含んで成る乾式分析要素を使用し、
Ａ）前記乾式分析要素の展開区画を
i)コルチゾールを含む疑いのある試料と接触させ、それにより固定化されたレセプターに結合したコルチゾールと、固定化されたレセプターに結合しないコルチゾールとを形成させ、
ii)前記標識還元型コルチゾール接合体が乾式分析要素中に存在しない場合には、その標識還元型コルチゾール接合体と接触させ、それにより前記固定化されたレセプターに結合した標識還元型コルチゾール接合体と、前記固定化されたレセプターに結合しない標識還元型コルチゾール接合体とを形成させ、
Ｂ）試料中のコルチゾールの量の測度として、前記固定化されたレセプターに結合した標識還元型コルチゾール接合体か、前記固定化されたレセプターに結合しない標識還元型コルチゾール接合体のいずれかを検出する
という各段階を含んで成る方法。
【請求項２１】  ＸがＯであり、そしてＸ1 がウシ血清アルブミンである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】  Ｙ1 がメチレンカルボニルオキシである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】  Ｙ2 が（４−〔２，５−ジオキソ−３−｛（２−エチルカルボニル）スルファニル｝テトラヒドロ−１Ｈ−１−ピロリル〕メチル）−１−シクロヘキサンカルボニルであり、そしてＸ2が西洋ワサビペルオキシダーゼである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】  前記固定化されたレセプターに結合しない標識還元型コルチゾール接合体から、前記固定化されたレセプターに結合した標識還元型コルチゾール接合体を分離することを更に含んで成る、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】  抗コルチゾール抗体の産生方法であって、
Ａ）下式
【化９】
2000143691.tif 000009
（上式中、ＸはＯ、Ｓ、スルホニルまたはホスホノであり；Ｘ1 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ1 は連結基または結合であり；Ｘ2 は標識されたもしくは未標識の天然もしくは合成ポリマーであるかまたは標識であり；Ｙ2 は連結基または結合であり；Ａ1 とＡ2は各々水素であるか、またはＡ1 とＡ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｂ1 とＢ2 は各々水素であるか、またはＢ1 とＢ2 が一緒になって単結合を形成し、Ｅ1 とＥ2 は各々水素であるか、またはＥ1 とＥ2 が一緒になって単結合を形成し、ただしＡ1 とＡ2 、またはＢ1 とＢ2 、またはＥ1 とＥ2 の少なくとも１つが各々水素である）
を有する還元型コルチゾール接合体を用いて宿主動物を免疫し、それによりコルチゾールを結合する抗体を産生させ；
Ｂ）前記宿主動物の血清または血漿からコルチゾールを結合する抗体を単離し；または
Ｃ）抗体産生細胞を含有する脾臓、リンパ系組織または他の組織を取り出し；
Ｄ）前記抗体産生細胞を取り出し；
Ｅ）前記抗体産生細胞からハイブリドーマを作製し；
Ｆ）コルチゾールを結合する抗体を産生するハイブリドーマを選択し；そして
Ｇ）コルチゾールを結合する抗体を単離する
という各段階を含んで成る方法。