【手続補正書】
【提出日】平成18年7月27日(2006.7.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（１）：
【化１】
2001039953.tif 000001
［式（１）中、
Ｒ１は、Ｃｌ又はＣＣＨ３＝Ｎ−ＯＣＨ３であり；
Ｒ２は、Ｈ、メチル基又はナトリウムであり；
Ｒ３は、枝分かれしていてもよい炭素数１ないし３のアルキル基又はアルコキシ基であり；
Ａは、酸素原子又は硫黄原子であり；そして
ｎは、１ないし１０の整数である］
で表される構造を有する化合物。
【請求項２】
式（１）において、Ｒ１がＣＣＨ３＝Ｎ−ＯＣＨ３であり、Ｒ２がメチル基であり、Ｒ３がメトキシ基であり、そしてＡが酸素原子である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式（１）において、ｎが５である請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物と高分子化合物又は標識物質との結合体。
【請求項５】
請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物と高分子化合物を結合させることにより抗原を作製し、当該抗原を用いることにより、以下の式（２）：
【化２】
2001039953.tif 000002
［式（２）中、
Ｒ１は、Ｃｌ又はＣＣＨ３＝Ｎ−ＯＣＨ３であり；
Ｒ２は、Ｈ、メチル基又はナトリウムであり；
Ｒ３は、枝分かれしていてもよい炭素数１ないし３のアルキル基又はアルコキシ基であり；そして
Ａは、酸素原子又は硫黄原子である］
で表される構造を有する化合物に反応性を示す抗体を製造することを特徴とする、式（２）で表される構造を有する化合物に反応性を示す抗体又は抗原と結合可能なそのフラグメントの製造方法。
【請求項６】
式（２）において、Ｒ１がＣＣＨ３＝Ｎ−ＯＣＨ３であり、Ｒ２がメチル基であり、Ｒ３がメトキシ基であり、そしてＡが酸素原子である、請求項５に記載の製造方法。
【請求項７】
請求項４に記載の結合体を抗原として用いることにより製造された、式（２）の化合物に反応性を示す抗体又は抗原と結合可能なそのフラグメント。
【請求項８】
モノクローナル抗体である、請求項７に記載の抗体又は抗原と結合可能なそのフラグメント。
【請求項９】
モノクローナル抗体ＰＢＭ２４−１である、請求項７若しくは８に記載の抗体又は抗原と結合可能なそのフラグメント。
【請求項１０】
請求項７ないし９のいずれか１項に記載の抗体を産生するハイブリドーマ。
【請求項１１】
寄託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１７４８４で寄託されている、請求項１０に記載のハイブリドーマ。
【請求項１２】
請求項７ないし９のいずれか１項に記載の抗体又は抗原と結合可能なそのフラグメントを用いることを特徴とする、式（２）で表される化合物の免疫学的測定方法。
【請求項１３】
さらに、請求項１ないし３のいずれか１項に記載の化合物、又は請求項４に記載の結合体を用いることを含む、請求項１２に記載の免疫学的測定方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、メチル＝２−（４，６−ジメトキシピリミジン−２−イルオキシ）−６−（１−メトキシイミノエチル）ベンゾエート（以下、本明細書中「ピリミノバックメチル」と言う）のハプテン化合物、抗原、抗体及び抗原と結合可能なそのフラグメントに関する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
本発明はさらに、前記抗原、抗体及び抗原と結合可能なそのフラグメントを用いた免疫学的測定方法に関する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、ピリミノバックメチル及びその類縁化合物（以下、文脈により「ピリミノバックメチル類縁化合物」あるいは単に「ピリミノバックメチル」という）に反応する新規な抗体若しくは抗原と結合可能なそのフラグメント、及びその作製方法を提供することを目的とする。尚、本明細書において抗体の「フラグメント」とは、抗原と結合可能な抗体の一部分、例えばＦａｂ断片等を意味する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
本発明は、さらに、ピリミノバックメチルハプテンと高分子化合物との結合体を提供することを目的とする。
本発明は、さらにまた、前記抗体を産生するハイブリドーマを提供することを目的とする。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
本発明は、さらに、前記抗体若しくは抗原と結合可能なそのフラグメント及び／又は前記ピリミノバックメチルハプテンと高分子化合物若しくは標識物質との結合体を使用することを含む、ピリミノバックメチル類縁化合物の免疫学的測定方法を提供することを目的とする。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
【化１２】
2001039953.tif 000003
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
（ｄ）の工程に用いることのできるミエローマ細胞としては、例えば、Ｂａｌｂ／ｃマウス由来骨髄腫細胞株のＰ３／Ｘ６３−Ａｇ８（Ｘ６３）（Ｎａｔｕｒｅ，２５６，４９５−４９７（１９７５））、Ｐ３／Ｘ６３−Ａｇ８．Ｕ１（Ｐ３Ｕ１）（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８１，  １−７（１９８７））、Ｐ３／ＮＳＩ−１−Ａｇ  ４−１（ＮＳ−１）（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，６，５１１−５１９（１９７６））、Ｓｐ２／０−Ａｇ１４（Ｓｐ２／０）（Ｎａｔｕｒｅ，  ２７６，２６９−２７０（１９７８））、ＦＯ（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏ．Ｍｅｔｈ．，３５，  １−２１（１９８０））、ＭＰＣ−１１、Ｘ６３．６５３、Ｓ１９４等の骨髄腫株化細胞、あるいはラット由来の２１０．ＲＣＹ３．Ａｇ  １．２．３．（Ｙ３）（Ｎａｔｕｒｅ，  ２７７，１３１−１３３，（１９７９））等を使用できる。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０３】
４−エトキシカルボニルペンチルオキシ−６−メチル−２−メチルチオピリミジン（１）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３５ｍｌ中の４−メチル−２−メチルチオ−６（１Ｈ）ピリミドン１．６ｇ（１０ｍｍｏｌ）の溶液に、６０％の水素化ナトリウム０．４４ｍｌ（１１ｍｍｏｌ）を室温下に加え、５０℃で３０分間撹拌した。これに６−ブロモヘキサン酸エチル２．５ｇ（１１ｍｍｏｌ）を加え、１２０℃で１時間撹拌し、濃縮した。残渣に水５０ｍｌを加えトルエンで抽出した（３０ｍｌ×３）。トルエン層を水洗し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、２．０ｇ（収率６７％）の（１）を得た。
４−エトキシカルボニルペンチルオキシ−６−メチル−２−メチルスルホニルピリミジン（２）の合成
テトラヒドロフラン３０ｍｌ中の４−エトキシカルボニルペンチルオキシ−６−メチル−２−メチルチオピリミジン（１）１．８ｇ（６．０ｍｍｏｌ）へメタクロロ過安息香酸２．３ｇ（１３．３ｍｍｏｌ）を加え、室温下に２時間撹拌し、濃縮した。残渣に２０ｍｌの水を加え酢酸エチルで抽出した（３０ｍｌ×３）。酢酸エチル層を水洗し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、１．７ｇ（収率８５％）の（２）を得た。
６−［２−（２−メトキシカルボニル−３−（１−メトキシイミノエチル）フェノキシ）−６−メチルピリミジン−４−イルオキシ］ヘキサン酸エチル（３）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３０ｍｌ中の２−ヒドロキシ−６−（１−メトキシイミノエチル）安息香酸メチル１．５ｇ（６．７ｍｍｏｌ）、４−エトキシカルボニルペンチルオキシ−６−メチル−２−メチルスルホニルピリミジン（２）２．２ｇ（６．７ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム１．２ｇ（８．７ｍｍｏｌ）の懸濁液を９０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣に２０ｍｌの水を加え酢酸エチルで抽出した（３０ｍｌ×３）。酢酸エチル層を水洗し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、濾過、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、１．８ｇ（収率８６％）の（３）を得た。
６−［２−（２−メトキシカルボニル−３−（１−メトキシイミノエチル）フェノキシ）−６−メチルピリミジン−４−イルオキシ］ヘキサン酸（４）の合成
メタノール１０ｍｌ中の６−［２−（２−メトキシカルボニル−３−（１−メトキシイミノエチル）フェノキシ）−６−メチルピリミジン−４−イルオキシ］ヘキサン酸エチル（３）１．６ｇ（１．４ｍｍｏｌ）の溶液に、水１０ｍｌ中の水酸化ナトリウム０．２ｇ（５．０ｍｍｏｌ）の溶液を加え、室温で３時間撹拌した。減圧下にメタノールを留去し、残渣を１Ｎ塩酸でｐＨ６にし、酢酸エチルで抽出した（４０ｍｌ×３）。酢酸エチル層を水洗し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）で精製し１．１ｇ（収率７３％）の（４）を得た。