(57)【要約】      （修正有）【課題】熟練したユーザでなくても安定した量の微生物を容易に採取することのできる微生物採取器具を提供する。【解決手段】巻き数が２以上の螺旋状に巻回された金属線２３から成る筒状の微生物収容部２１を備えた微生物採取器具１０であって、微生物収容部が、１本の金属線の中間部を螺旋状に巻回して成るものであり、更に、棒状の柄部３０と、１本の金属線の中間部を挟んで両側の領域であって、微生物収容部から柄部の先端に向かって延伸する直線部２２と、柄部の先端に設けられ、直線部を固定する固定部３１と、を有する。【選択図】図１
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【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
巻き数が２以上の螺旋状に巻回された金属線から成る筒状の微生物収容部を備えた微生物採取器具。
【請求項２】
前記微生物収容部が、１本の金属線の中間部を前記螺旋状に巻回して成るものであって、
更に、
棒状の柄部と、
前記１本の金属線の前記中間部を挟んで両側の領域であって、前記微生物収容部から前記柄部の先端に向かって延伸する直線部と、
前記柄部の先端に設けられ、前記直線部を着脱自在に固定する固定部と、
を有する請求項１に記載の微生物採取器具。
【請求項３】
前記金属線の表面に、該金属線を構成する金属とは別の素材によるコーティングが施されている請求項１又は２に記載の微生物採取器具。
【考案の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本考案は、微生物採取器具に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、寒天培地等の固体培地上で培養した微生物（細菌又は真菌等）を採取する際には、白金耳とよばれる微生物採取器具が用いられる（例えば、特許文献１を参照）。白金耳は、一般的に、白金等の反応性の低い金属から成る針金の基部に棒状の柄を設けたものであり、該針金の先端部はループ状又は鈎状に曲げられていることが多い。なお、このような白金耳の代わりに、プラスチック棒から成る使い捨ての微生物採取器具が用いられることもある。
【０００３】
ところで、近年、微生物の分析手法として、ＭＡＬＤＩ（Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization：マトリクス支援レーザ脱離イオン化）質量分析法による、微生物の直接分析が広く行われるようになっている。ＭＡＬＤＩ質量分析法では、レーザ光を吸収しにくい試料又はレーザ光で損傷を受けやすい試料を分析するために、レーザ光を吸収しやすく且つイオン化しやすい物質をマトリクスとして試料に予め混合しておき、これにレーザ光を照射することで試料に含まれる化合物をイオン化して質量分析を行う。
【０００４】
ＭＡＬＤＩ質量分析法による微生物の直接分析では、一般的に、寒天培地等の固体培地上で培養した微生物を上述のような微生物採取器具で掻き取って採取し、採取した菌体をマトリクス溶液に懸濁することによってサンプルとマトリクスの混合溶液を調製する。そして、ピペット等を用いて前記混合溶液をサンプルプレートとよばれる金属製のプレート上に所定量滴下し、それを乾燥させた後に、サンプルプレートをＭＡＬＤＩ質量分析装置にセットして質量分析を行う。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平10-179136号公報
【考案の概要】
【考案が解決しようとする課題】
【０００６】
上記のようなＭＡＬＤＩ質量分析法による微生物の直接分析において分析の再現性を確保するためには、固体培地から常に一定量（例えば、1mg程度）の菌体を採取してサンプル調製を行う必要がある。しかしながら、固体培地で培養した菌体は、一般に粘性が高いため、従来の微生物採取器具を使用して安定した量の菌体を採取するためにはユーザ（サンプル調製を行う担当者）の熟練が必要であった。
【０００７】
本考案は上記の点に鑑みてなされたものであり、その目的とするところは、熟練したユーザでなくても安定した量の微生物を容易に採取することのできる微生物採取器具を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記課題を解決するために成された本考案に係る微生物採取器具は、巻き数が２以上の螺旋状に巻回された金属線から成る筒状の微生物収容部を備えたものである。
【考案の効果】
【０００９】
上記構成を有する本考案に係る微生物採取器具によれば、熟練したユーザでなくても安定した量の微生物を容易に採取することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本考案の一実施形態に係る微生物採取器具の構成を示す斜視図。
【図２】前記微生物採取器具の先端付近の形状を示す斜視図。
【図３】前記微生物採取器具によって微生物を採取した状態を示す斜視図。
【図４】前記微生物採取器具によって微生物を採取した後に、掻き取り部を構成する金属線を引き伸ばした状態を示す模式図。
【図５】採取した微生物をマトリクス溶液内に振り落としている様子を示す模式図。
【図６】１回目の微生物採取試験の結果を示す図。
【図７】２回目の微生物採取試験の結果を示す図。
【考案を実施するための形態】
【００１１】
本考案を実施するための形態について図面を参照しつつ説明する。図１は、本実施形態に係る微生物採取器具１０の全体構成を示す斜視図である。本実施形態に係る微生物採取器具１０は、掻き取り部２０と、棒状の柄部３０とを備えている。
【００１２】
図２に掻き取り部２０の拡大図を示す。掻き取り部２０は、コイル状の微生物収容部２１と、微生物収容部２１から柄部３０の先端に向かって延伸する直線部２２とを備えている。微生物収容部２１と直線部２２は、１本の金属線２３によって一体に構成されている。すなわち、１本の金属線２３の中間部を断面円形の棒等に螺旋状に２回転以上巻回することによって微生物収容部２１が形成され、金属線２３の両端（すなわち前記中間部を挟んで両側の部分）を、微生物収容部２１の軸方向から見て略同一の方向に延出させることによって直線部２２が形成される。
【００１３】
金属線２３の素材は特に限定されるものではなく、例えば、白金、ニクロム、コバルトクロム、ステンレス、銅等の種々の金属を用いることができるが、加工の容易性を鑑みて比較的柔らかい金属（例えば銅）を用いることが望ましい。なお、金属線２３の表面には、金属線２３を構成している金属以外の素材から成る被覆層を設けてもよい。例えば、金属線２３の表面に反応性の低い金属（例えば金）から成るコーティングを施すことによって金属線２３の酸化を防止したり、金属線２３の表面に撥水性のコーティングを施すことによって、採取した微生物が微生物収容部２１から離れやすくなるようにしたりすることができる。
【００１４】
金属線２３の線径は、特に限定されるものではないが、例えば、0.05mm〜0.8mmの範囲で、金属線２３の素材として用いる金属の柔らかさに応じた適当な太さとする。例えば、金属線２３として銅線を用いる場合には、その線径は0.2mm〜0.4mmとすることが望ましい。また、微生物収容部２１を構成するコイルの巻き数及び該コイルの内径は、採取すべき微生物の量に応じて決定されるが、例えば、巻き数は２〜８程度とし、内径は0.5mm〜5mm程度とする。
【００１５】
柄部３０は、例えば、アルミ又は真鍮などの金属等で構成された棒状の部材であって、先端に、掻き取り部２０を固定するための固定部３１を備えている。固定部３１は、例えば、縦方向に複数の切れ込み（図示略）が設けられた金属製の筒であるコレット３２と、コレット３２を外側から締め付けるナット等の締結部材３３とを備えたいわゆるコレットチャック機構等で構成されている。このような固定部３１に掻き取り部２０を固定する際には、コレット３２の内部に直線部２２（すなわち掻き取り部２０を構成する１本の金属線２３の両端部）を挿入した上で、締結部材３３によってコレット３２を外側から締め付ける。これにより、コレット３２に設けられた前記切れ込みを閉じさせて直線部２２を強固に固定することができる。なお、固定部３１は、このようなコレットチャック機構から成るものに限定されるものではなく、直線部２２を柄部３０に対して着脱自在に固定可能なものであれば、いかなるものであってもよい。
【００１６】
なお、微生物収容部２１を構成するコイルは、掻き取り部２０を柄部３０に固定していない状態では、該コイルの軸方向に隣接する金属線間に多少の隙間を有していてもよいが、固定部３１によって掻き取り部２０を柄部３０に固定した状態では、前記金属線間に隙間が生じないものとすることが望ましい。
【００１７】
続いて、本実施形態に係る微生物採取器具１０を用いてＭＡＬＤＩ質量分析用のサンプル調製を行う際の手順について説明する。なお、本実施形態に係る微生物採取器具１０は、従来の微生物採取器具と同様に滅菌処理（例えば、火炎滅菌、オートクレーブ、乾熱滅菌、Ｘ線滅菌など）を施した上で使用される。まず、ユーザが微生物採取器具１０の柄部３０を把持し、予め固体培地上で培養しておいた微生物の菌体を掻き取り部２０で掻き取ることによって採取する。その際には、まず、微生物収容部２１から微生物の菌体がはみ出した状態となるまで掻き取り、その後、微生物収容部２１の両端からはみ出している菌体を別途用意した棒等ですり切ることによって、微生物収容部２１の内部（すなわち前記コイルによって形成される円筒状の空間）を前記菌体によって過不足なく満たされた状態とする。図３は、このときの微生物収容部２１及び採取された微生物菌体４０を示す模式図である。
【００１８】
次に、ユーザが固定部３１の締結部材３３を緩めて掻き取り部２０をコレット３２から引き抜くことによって、掻き取り部２０を固定部３１から取り外し、図４に示すように、掻き取り部２０を構成する金属線２３の両端（すなわち直線部２２）を互いに離間する方向（すなわち図中の白矢印で示す方向）引っ張ることによって、微生物収容部２１を構成するコイルをほどいて微生物菌体４０を露出させる。なお、固体培地から掻き取った微生物菌体は粘性が高いため、微生物収容部２１を構成するコイルを引き伸ばしても微生物菌体４０が金属線２３に付着したままの状態となる。その後、マトリクス溶液５０を収容した容器６０（例えば、マイクロチューブ）に、上記の金属線２３を軽く二つ折りにして挿入し、金属線２３をマトリクス溶液５０内で振り動かす。これにより、金属線２３に付着していた微生物菌体４０がマトリクス溶液５０内に振り落とされる。
【００１９】
その後は、容器６０をボルテックスミキサー等で攪拌することによって微生物菌体４０をマトリクス溶液５０に懸濁し、得られた懸濁液をピペット等を用いて所定量採取してＭＡＬＤＩ用のサンプルプレート（図示略）に滴下する。滴下された懸濁液が乾燥したらサンプルプレートをＭＡＬＤＩ質量分析装置のイオン源にセットしてＭＡＬＤＩ質量分析を実行する。
【００２０】
なお、連続して複数のサンプル調製を行う場合は、１つのサンプルの調製が終わるごとに使用済みの金属線２３を廃棄し、新たな掻き取り部２０を取り付けた微生物採取器具１０を用いて次のサンプル調製（微生物菌体４０の採取等）を行う。
【００２１】
以上のように、本実施形態に係る微生物採取器具１０によれば、コイル状に形成された微生物収容部２１の内部空間を微生物菌体４０で過不足なく満たすことにより、微生物収容部２１の容積に応じた量の微生物菌体４０を採取することができる。微生物収容部２１の容積は、金属線２３の線径、並びに微生物収容部２１を形成するコイルの内径及び巻き数に応じて決まるため、これらを一定とすることで、常に安定した量の微生物菌体を採取することが可能となる。また、これにより、安定した量の微生物菌体をＭＡＬＤＩ質量分析による直接分析に供することができるため、該分析の再現性を確保することができる。
【００２２】
また、本実施形態に係る微生物採取器具１０によれば、微生物菌体４０の採取後に掻き取り部２０を柄部３０から取り外し、金属線２３の両端を引っ張って微生物収容部２１を形成しているコイルを引き伸ばすことによって、微生物収容部２１内の微生物菌体４０を外部に露出させることができる。このため、この金属線２３をマトリクス溶液５０の入った容器６０に入れて振り動かすだけで、微生物菌体４０を容易にマトリクス溶液５０に添加することができる。
【００２３】
なお、ここでは、本実施形態に係る微生物採取器具１０を用いてＭＡＬＤＩ質量分析用のサンプル調製を行う場合を例に挙げて説明したが、本実施形態に係る微生物採取器具１０は、このほか、例えば、固体培地から液体培地への微生物の植え継ぎを行う際にも利用することができる。この場合も、固体培地から微生物菌体４０を採取した後は、上記同様に掻き取り部２０を柄部３０から外して金属線２３を引き延ばした上で、金属線２３を液体培地の入った培養容器に挿入して振り動かすことにより、微生物菌体４０を液体培地に容易に添加することができる。
【実施例】
【００２４】
以下、本考案に係る微生物採取器具の効果を確認するために行った微生物採取試験について説明する。まず、線径が0.25mmの純銅線の中間部を、直径1mmのピンに螺旋状に隙間なく4回巻くことによってコイル状の掻き取り部を作成し、これを金属棒から成る柄部に取り付けることによって本実施例に係る微生物採取器具を作成した。
【００２５】
続いて、同一組成の２つの寒天培地（以下、第１寒天培地及び第２寒天培地とよぶ）を用いて同一条件下で大腸菌（Escherichia coli）を培養し、微生物の採取に不慣れな１名のユーザが、本実施例に係る微生物採取器具を用いて各寒天培地から大腸菌を採取した。大腸菌の採取は各寒天培地について８回ずつ行って各回における大腸菌の採取量を計測した。なお、大腸菌の採取量は、採取前における微生物採取器具の重量と、採取後（すなわち前記微生物収容部に菌体が収容された状態）における微生物採取器具の重量とをそれぞれ測定し、後者の値から前者の値を減算することによって算出した。
【００２６】
１回目の微生物採取試験（すなわち第１寒天培地を用いた微生物採取試験）の結果を図６に、２回目の微生物採取試験（すなわち第２寒天培地を用いた微生物採取試験）の結果を図７に示す。同図に示すように、１回目及び２回目の微生物採取試験の双方において、大腸菌採取量の測定値の標準偏差は±10％以内であった。このことから、本考案に係る微生物採取器具を用いることにより、熟練したユーザでなくても微生物の採取量の再現性を確保できることが確かめられた。
【００２７】
[種々の態様] 
上述した例示的な実施形態は、以下の態様の具体例であることが当業者により理解される。
【００２８】
（第１項）一態様に係る微生物採取器具は、巻き数が２以上の螺旋状に巻回された金属線から成る筒状の微生物収容部を備えている。
【００２９】
（第２項）第１項に記載の微生物採取器具は、前記微生物収容部が、１本の金属線の中間部を前記螺旋状に巻回して成るものであって、
棒状の柄部と、
前記１本の金属線の前記中間部を挟んで両側の領域であって、前記微生物収容部から前記柄部の先端に向かって延伸する直線部と、
前記柄部の先端に設けられ、前記直線部を着脱自在に固定する固定部と、
を更に有するであってもよい。
【００３０】
（第３項）第１項又は第２項に記載の微生物採取器具は、前記金属線の表面に、該金属線を構成する金属とは別の素材によるコーティングが施されているものであってもよい。
【００３１】
第１項に記載の微生物採取器具によれば、前記微生物収容部によって固体培地上の微生物を掻き取り、該微生物収容部の内部が微生物で過不足なく満たされた状態とすることによって、容易に一定量の微生物を採取することができる。
【００３２】
第２項に記載の微生物採取器具によれば、微生物の採取後に、掻き取り部を柄部から取り外して該掻き取り部を構成する１本の金属線の両端を引っ張ることにより、微生物収容部をほどくことができ、採取した微生物を容易にマトリクス溶液等の液体に添加することが可能となる。
【００３３】
第３項に記載の微生物採取器具によれば、前記コーティングによって掻き取り部に所望の性質（例えば、防錆性又は耐水性など）を付与することが可能となる。
【符号の説明】
【００３４】
１０…微生物採取器具
２０…掻き取り部
２１…微生物収容部
２２…直線部
２３…金属線
３０…柄部
３１…固定部
４０…微生物菌体
５０…マトリクス溶液
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年4月28日(2020.4.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】実用新案登録請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
巻き数が２以上の螺旋状に巻回された金属線から成る筒状の微生物収容部を備えた微生物採取器具。
【請求項２】
前記微生物収容部が、１本の金属線の中間部を前記螺旋状に巻回して成るものであって、
更に、
棒状の柄部と、
前記１本の金属線の前記中間部を挟んで両側の領域であって、前記微生物収容部から前記柄部の先端に向かって延伸する直線部と、
前記柄部の先端に設けられ、前記直線部を固定する固定部と、
を有する請求項１に記載の微生物採取器具。
【請求項３】
前記固定部が、
縦方向に複数の切れ込みを備えた筒状のコレットと、
該コレットを外側から締め付ける締結部材と、
を有し、
前記コレットの内部に前記直線部を挿入した上で、前記締結部材によって前記コレットを外側から締め付けて前記複数の切れ込みを閉じさせることによって前記直線部を固定するものである請求項２に記載の微生物採取器具。
【請求項４】
前記金属線の表面に、該金属線を構成する金属とは別の素材によるコーティングが施されている請求項１〜３のいずれかに記載の微生物採取器具。