【手続補正書】
【提出日】平成18年2月21日(2006.2.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
励起光を生体分子試料に照射することにより、前記生体分子試料あるいは前記生体分子試料に標識として付加されている蛍光体から発せられる蛍光の強度やスペクトルを検出することにより生体分子試料の成分を判定する蛍光分析方法において、前記蛍光体として、励起光に対する吸収スペクトルと定義する縦軸に蛍光体の励起光吸収強度をとり横軸に蛍光体の励起光吸収波長をとってグラフとして表した励起光吸収強度−波長曲線が異なる少なくとも２種類の蛍光体が用いられ、前記２種類の蛍光体は、その吸収スペクトルが各吸収スペクトルのピーク位置でない位置で、一方の蛍光体の吸収スペクトルの傾斜が正であり他方の蛍光体の吸収スペクトルの傾斜が負であるように交差している蛍光体であり、前記励起光は、前記試料に照射されている間の少なくとも一部の時間にわたって波長が周期的に変化するように波長変調されている励起光であることを特徴とする蛍光分析方法。
【請求項２】
請求項１に記載の蛍光分析方法において、前記蛍光分析方法は、前記蛍光標識からの蛍光を波長分離した後、波長分離されたそれぞれの蛍光を光検出器により各蛍光に対応する電気信号に変換し、前記各電気信号を差動増幅器に導いて、同相ノイズを除去する蛍光検出手段を用いることを特徴とする蛍光分析方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の蛍光分析方法において、前記励起光は、λ１とλ２を正の数としたとき、前記２種類の蛍光体の吸収スペクトルの各ピーク値を与える各波長λ３とλ４の間にある特定波長λ０を挟んでλ０＋λ１からλ０−λ２の間で変化する波長変調を受けた励起光であり、前記波長λ０＋λ１とλ０−λ２は、いずれも、前記波長λ３とλ４のうちの短い方の波長よりも長く、かつ、前記波長λ３とλ４のうちの長い方の波長よりも短い波長であることを特徴とする蛍光分析方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の蛍光分析方法において、前記試料の励起に用いられる励起光の光源の分散補償に、斜め蒸着技術を用いて製造された多層膜を用いた分散補償素子が用いられていることを特徴とする蛍光分析方法。
【請求項５】
励起光を生体分子試料に照射することにより、前記生体分子試料あるいは前記生体分子試料に標識として付加されている蛍光体から発せられる蛍光の強度やスペクトルを検出することにより生体分子試料の成分を判定することができる蛍光分析装置において、前記装置は、前記蛍光体として、励起光に対する吸収スペクトルと定義する縦軸に蛍光体の励起光吸収強度をとり横軸に蛍光体の励起光吸収波長をとってグラフとして表した励起光吸収強度−波長曲線が異なる少なくとも２種類の蛍光体を用いることができるようになっているか前記蛍光体に対応する条件設定手段を有しており、前記２種類の蛍光体は、その吸収スペクトルが各吸収スペクトルのピーク位置でない位置で、一方の蛍光体の吸収スペクトルの傾斜が正であり他方の蛍光体の吸収スペクトルの傾斜が負であるように交差している蛍光体であり、前記励起光は、前記試料に照射されている間の少なくとも一部の時間にわたって波長が周期的に変化するように波長変調されている励起光であることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項６】
請求項５に記載の蛍光分析装置において、前記蛍光分析装置は、前記蛍光標識からの蛍光を波長分離した後、波長分離されたそれぞれの蛍光を光検出器により各蛍光に対応する電気信号に変換し、前記各電気信号を差動増幅器に導いて、同相ノイズを除去する蛍光検出手段を有することを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項７】
請求項５または６に記載の蛍光分析装置において、前記励起光は、λ１とλ２を正の数としたとき、前記２種類の蛍光体の吸収スペクトルの各ピーク値を与える両波長λ３とλ４の間にある特定波長λ０を挟んでλ０＋λ１からλ０−λ２の間で変化する波長変調を受けた励起光であり、前記波長λ０＋λ１とλ０−λ２は、いずれも、前記波長λ３とλ４のうちの短い方の波長よりも長く、かつ、前記波長λ３とλ４のうちの長い方の波長よりも短い波長であることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項８】
請求項５〜７のいずれか１項に記載の蛍光分析装置において、前記励起光の波長の変化が特定波長λ０を中心波長とする正弦波であることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項９】
請求項５〜８のいずれか１項に記載の蛍光分析装置において、前記装置は、生体分子試料における多光子吸収効果による蛍光発光を計測する装置であることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１０】
請求項５〜９のいずれか１項に記載の蛍光分析装置において、前記試料は、多光子吸収効果を有する有機色素あるいは蛍光タンパク質を標識として付加された生体分子を含む試料であることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１１】
請求項１０に記載の蛍光分析装置において、前記装置が、前記試料に２光子吸収効果を有する有機色素あるいは蛍光タンパク質を標識として複数付加された試料を用いることができ、複数の成分分析が可能な装置であることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１２】
請求項９〜１１のいずれか１項に記載の蛍光分析装置において、前記多光子吸収が２光子吸収であることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１３】
請求項５〜１２のいずれか１項に記載の蛍光分析装置において、前記装置が、前記蛍光の検出に蛍光色素あるいは蛍光タンパク質からの蛍光信号を前記励起光の前記波長変調の周波数と同期した位相検出を行うことを利用している装置であることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１４】
請求項５〜１３のいずれか１項に記載の蛍光分析装置において、前記試料からの蛍光検出に空間ビーム光学系により構成された蛍光波長の分離機能を有する光学装置を用いることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１５】
請求項５〜１４のいずれか１項に記載の蛍光分析装置において、前記試料からの蛍光検出に、前記試料からの蛍光を光ファイバ内を前記励起光と逆方向に進行させるように構成されているとともに、光ファイバカプラおよび光ファイバフィルタモジュールにより構成された蛍光波長の分離機能を有している光学装置を用いることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１６】
請求項１５に記載の蛍光分析装置において、前記光学装置が試料の平面全体をスキャンできる円盤型レンズアレイを有していることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１７】
請求項５〜１６のいずれか１項に記載の蛍光分析装置において、前記差動増幅器に入力される前記２種類の蛍光に基づく信号が、差動増幅を受ける前のいずれかの段階において、振幅が同じで位相が互いに逆位相の関係にある信号になるように制御手段によって制御されることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１８】
請求項５〜１７のいずれか１項に記載の蛍光分析装置において、前記試料の励起に用いられる励起光の光源の分散補償に、斜め蒸着技術を用いて製造された多層膜を用いた分散補償素子が用いられていることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項１９】
生体分子等あるいは標識として蛍光体等を付加した生体分子等の試料に励起光を照射して、前記励起光照射によって前記生体分子等あるいは前記生体分子等に標識として付加した蛍光体等から発せられる発光の強度やスペクトルを検出することにより生体分子等の成分を判定することができる分析装置において、前記励起光は、前記試料に照射されている間の少なくとも一部の時間帯において、その波長が、λ１とλ２を正の数としたとき、特定波長λ０を挟んでλ０＋λ１からλ０−λ２の間で周期的に変化する波長変調を受けた励起光であることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項２０】
請求項１９に記載の蛍光分析装置において、前記励起光は前記試料に照射されている間の全時間帯において、特定波長λ０を挟んでλ０＋λ１からλ０−λ２の間で変化する波長変調を受けていることを特徴とする蛍光分析装置。
【請求項２１】
請求項１９または２０に記載の蛍光分析装置において、前記励起光の波長の変化が特定波長λ０を中心波長とした正弦波であることを特徴とする蛍光分析装置。