【手続補正書】
【提出日】平成18年3月6日(2006.3.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
固体支持体をシラン無水物でコーティングして前記固体支持体表面に無水物官能基を導入する段階と、
前記無水物官能基を加水分解させて、カルボキシル基にする段階と、
前記カルボキシル基をカルボジイミド及びコハク酸イミドと反応させて、前記カルボキシル基を活性化する段階と、
前記活性化されたカルボキシル基を有する固体支持体と生体分子とを接触させて前記生体分子を前記固体支持体上に固定させる段階と、
を含む生体分子を固体支持体上に固定させる方法。
【請求項２】
前記固体支持体は、ガラス、シリコンウェーハ、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリエステル、ポリアクリレート及びポリウレタンよりなる群から選択される少なくとも一種であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記シラン無水物は、下記式（１）で示されることを特徴とする請求項１または２に記載の方法。
【化１】
2005201901.tif 000001
（式中、Ｒ１は、３価の直鎖もしくは分岐の脂肪族基または芳香族基であり、Ｒ’は、Ｃ１〜Ｃ２０の置換もしくは非置換のアルキレン基、アリーレン基、アリールアルキレン基またはアルキルアリーレン基であり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ２０のアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アルキルアリール基または水素原子であり、それぞれのＲ２は、同一であるかまたは異なる。）
【請求項４】
前記Ｒ１は、
【化２】
2005201901.tif 000002
であることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記シラン無水物は、３−（トリエトキシシリル）プロピルコハク酸無水物であることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記コーティングは、前記シラン無水物を０．０１質量％ないし９０質量％含む溶液を用いて行われることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記溶液は、下記式（３）で示されるシラン化合物をさらに含むことを特徴とする請求項６に記載の方法。
【化３】
2005201901.tif 000003
（式中、Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖もしくは分岐のアルキル基、アリール基、アリールアルキル基またはアルキルアリール基、または水素原子である。）
【請求項８】
前記シラン化合物は、前記シラン無水物１００質量部に対して０ないし０．０１質量部に含まれることを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記コーティングは、ディップコーティング法、スピン法、スプレイ法、及び化学気相蒸着法よりなる群から選択される少なくとも一種の方法によって行われることを特徴とする請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記加水分解は、２０℃〜１００℃の水溶液を用いて行われることを特徴とする請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記カルボジイミドは、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドまたはＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドであることを特徴とする請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記コハク酸イミドは、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドまたはＮ−ヒドロキシスルホコハク酸イミドであることを特徴とする請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記カルボジイミドおよび前記コハク酸イミドは、前記カルボジイミドおよび前記コハク酸イミドをそれぞれ２０ｍｍｏｌ／ｌ〜２００ｍｍｏｌ／ｌ含む溶液として用いられることを特徴とする請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記生体分子は、アミノ基を有することを特徴とする請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記生体分子は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ＰＮＡ、または蛋白質であることを特徴とする請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれかに記載の方法によって製造されるマイクロアレイ。
【請求項１７】
固体支持体をアミノシランでコーティングして前記固体支持体の表面にアミノ官能基を導入する段階と、
前記アミノ官能基をテトラカルボキシル二無水物と反応させて、無水物官能基を固体支持体表面に導入する段階と、
前記無水物官能基を加水分解させて、カルボキシル基にする段階と、
前記カルボキシル基をカルボジイミド及びコハク酸イミドと反応させて、前記カルボキシル基を活性化する段階と、
前記活性化されたカルボキシル基を有する固体支持体と生体分子とを接触させて前記生体分子を前記固体支持体上に固定させる段階と、
を含む生体分子を固体支持体上に固定させる方法。
【請求項１８】
前記コーティングは、アミノシラン化合物を０．０１質量％ないし９０質量％含む溶液を用いて行われることを特徴とする請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記アミノシラン化合物は、下記式（５）または（６）で示されることを特徴とする請求項１８に記載の方法、
【化４】
2005201901.tif 000004
（式中、Ｒ８は、酸素原子もしくは窒素原子を含んでいてもよい、アルキレン基、アリーレン基、アリールアルキレン基、またはアルキルアリーレン基であり、Ｒ９は、Ｃ１〜Ｃ２０のアルキル基、アリール基、アリールアルキル基もしくはアルキルアリール基または水素原子である。）
【請求項２０】
前記溶液は、下記式（３）で示されるシラン化合物をさらに含むことを特徴とする請求項１８または１９に記載の方法。
【化５】
2005201901.tif 000005
（式中、Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖もしくは分岐のアルキル基、アリール基、アリールアルキル基またはアルキルアリール基、または水素原子である。）
【請求項２１】
前記シラン化合物は、前記アミノシラン化合物１００質量部に対して０ないし０．０１質量部で含まれることを特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記コーティングは、ディップコーティング法、スピン法、スプレイ法、及び化学気相蒸着法よりなる群から選択される少なくとも一種の方法によって行われることを特徴とする請求項１７〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記テトラカルボキシル二無水物は、下記式（７）で示されることを特徴とする請求項１７〜２２のいずれかに記載の方法。
【化６】
2005201901.tif 000006
（式中、Ｒ１０は、酸素原子、フッ素原子を含んでいてもよい、４価の芳香族基、複素環基、脂環基または脂肪族基である。）
【請求項２４】
前記テトラカルボキシル二無水物は、ピロメリット酸二無水物、３，３’，４，４’−ビフェニルテトラカルボン酸二無水物、２，２’，３，３’−ビフェニルテトラカルボン酸二無水物、２，３，３’，４’−ビフェニルテトラカルボン酸二無水物、１，２，４，５−ベンゼンテトラカルボン酸二無水物、３，３’，４，４’−ベンゾフェノンテトラカルボン酸二無水物、２，２’，３，３’−ベンゾフェノンテトラカルボン酸二無水物、２，３，３’，４’−ベンゾフェノンテトラカルボン酸二無水物、ビス（３，４−ジカルボキシフェニル）エーテル二無水物、ビス（３，４−ジカルボキシフェニル）スルホン二無水物、１，４，５，８−ナフタレンテトラカルボン酸二無水物、１，２，５，６−ナフタレンテトラカルボン酸二無水物、２，３，６，７−ナフタレンテトラカルボン酸二無水物、２，２−ビス（３，４−ジカルボキシフェニル）−ヘキサフルオロプロパン二無水物、シクロブタンテトラカルボン酸二無水物、メチルシクロブタンテトラカルボン酸二無水物、及び１，２，３，４−テトラカルボキシブタン二無水物よりなる群から選択される少なくとも一種であることを特徴とする請求項１７〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
前記テトラカルボキシル二無水物は、前記テトラカルボキシル二無水物を０．０２質量％ないし９０質量％含む溶液として用いられることを特徴とする請求項１７〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記溶液における溶媒が、アセトン、メチルエチルケトン、ジメチルホルムアミド及びＮ−メチルピロリドンから選択される少なくとも一種であることを特徴とする請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記加水分解は、２０℃〜１００℃の水溶液を用いて行われることを特徴とする請求項１７〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記カルボジイミドは、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドまたはＮ，Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジイミドであることを特徴とする請求項１７〜２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記コハク酸イミドは、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドまたはＮ−ヒドロキシスルホコハク酸イミドであることを特徴とする請求項１７〜２８のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記カルボジイミドおよび前記コハク酸イミドは、前記カルボジイミドおよびコハク酸イミドをそれぞれ２０ｍｍｏｌ／ｌ〜２００ｍｍｏｌ／ｌ含む溶液として用いられることを特徴とする請求項１７〜２９のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
前記生体分子は、アミノ基を有することを特徴とする請求項１７〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
前記生体分子は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ＰＮＡ、または蛋白質であることを特徴とする請求項１７〜３１のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
請求項１７〜３２のいずれかの方法によって製造されるマイクロアレイ。
【請求項３４】
固体支持体をシラン無水物でコーティングする際に、１，２−ビス（トリエトキシシリル）エタンをさらに含むシラン無水物溶液で固体支持体をコーティングすることを特徴とする請求項１〜１５に記載の方法。
【請求項３５】
固体支持体をアミノシランでコーティングする際に、１，２−ビス（トリエトキシシリル）エタンをさらに含むアミノシラン溶液で固体支持体をコーティングすることを特徴とする請求項１７〜３２に記載の方法。