(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物、またはその塩または溶媒和物：
【化１】
0004511939.tif 000012
（式中：
環Ａはピリジン−２−イルまたはチアゾール−２−イルであり；ここで前記ピリジン−２−イルまたはチアゾール−２−イルはＲ４から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；
Ｒ１およびＲ２の１つは水素であり、他方は水素またはＣ１−４アルキルであり；ここでＲ１およびＲ２はＲ５から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；
Ｒ３はＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、カルボシクリル、ヘテロシクリル、カルボシクリルオキシおよびヘテロシクリルオキシから選択され；ここでＲ３は独立してＲ６から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；そしてここで前記ヘテロシクリルが−ＮＨ−部分を含む場合、該窒素はＣ１−４アルキルで置換されていても良く；
Ｒ４はハロ、カルボキシおよびＣ１−４アルキルから選択され；
Ｒ５およびＲ６は独立してハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）２アミノ、カルボシクリル、ヘテロシクリル、カルボシクリルオキシ、ヘテロシクリルオキシおよびカルボシクリリデニルから選択され；ここでＲ５およびＲ６は独立して１以上のＲ７で炭素上に置換されていても良く；そしてここで前記ヘテロシクリルが−ＮＨ−部分を含む場合、該窒素はＣ１−４アルキルで置換されていても良く；
Ｒ７はハロ、カルボキシ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノおよびＮ−メチル−Ｎ−エチルアミノから選択される）。
【請求項２】
環Ａが非置換であるかまたはカルボキシで置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２の１つが水素であり他方は水素またはＣ１−４アルキルである、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３がＣ１−４アルコキシから選択され、ここでＲ３が独立してＲ６から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良い、請求項１〜３のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３が２−フルオロベンジルオキシ、５−メチルイソオキサゾール−３−イルメトキシおよび２−チエン−３−イルエトキシから選択される、請求項１〜４のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６】
以下から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその塩または溶媒和物：
２−メチル−４−イソブトキシ−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
２−メチル−４−（２−フルオロフェニルメトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
２−メチル−４−イソブトキシ−６−［Ｎ−（５−カルボキシチアゾール−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
２−メチル−４−（５−メチルイソオキサゾール−３−イルメトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
４−（２−フルオロフェニルメトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
４−（５−メチルイソオキサゾール−３−イルメトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
２−メチル−４−（チエン−２−イルエトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；および
２−メチル−４−イソブトキシ−６−［Ｎ−（チアゾール−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン。
【請求項７】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその塩または溶媒和物の製造方法であって、以下を含む該方法（ここで、特記しない限り可変基は請求項１に記載のものである）：
式（ＩＩ）の酸：
【化２】
0004511939.tif 000013
またはその活性化誘導体と式（ＩＩＩ）の化合物：
【化３】
0004511939.tif 000014
の反応と、必要または所望によるその後の：
ｉ）式（Ｉ）の他の化合物への式（Ｉ）の化合物の変換；および／または
ｉｉ）任意の保護基の除去；および／または
ｉｉｉ）その塩または溶媒和物の形成。
【請求項８】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその塩または溶媒和物の製造方法であって、Ｒ４がカルボキシである式（Ｉ）の化合物のための、以下を含む該方法（ここで、特記しない限り可変基は請求項１に記載のものである）：
式（ＩＶ）の化合物：
【化４】
0004511939.tif 000015
（式中、ＲｘＣ（Ｏ）Ｏ−はエステル基であり、ＲｘはＣ１−６アルキルまたはベンジルである）の脱保護と、必要または所望によるその後の：
ｉ）式（Ｉ）の他の化合物への式（Ｉ）の化合物の変換；および／または
ｉｉ）任意の保護基の除去；および／または
ｉｉｉ）その塩または溶媒和物の形成。
【請求項９】
請求項８に記載の式（ＩＶ）の化合物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、インスリン分泌に対するグルコース閾値の減少をもたらす、グルコキナーゼ（ＧＬＫ）で媒介される疾患または症状の治療または予防に有用な化学化合物に関する。さらに、本化合物は、肝臓へのグルコース取り込みを増加させることにより血糖を低下させることが予測される。かかる化合物は、２型糖尿病および肥満症の治療において有用であることができる。本発明はまた、前記化合物の製造方法、前記化合物を含んでなる医薬組成物および前述の疾患におけるかかる化合物の使用にも関する。
【０００２】
膵臓β細胞および肝実質細胞における主要な細胞膜グルコース輸送体はＧＬＵＴ２である。生理的グルコース濃度下において、ＧＬＵＴ２が膜を横切ってグルコースを輸送する速度は、これらの細胞におけるグルコース取り込みの全体の速度に対して律速ではない。グルコース取り込み速度は、グルコキナーゼ（ＧＬＫ）により触媒される、グルコース−６−リン酸（Ｇ−６−Ｐ）へのグルコースのリン酸化速度により律速される［１］。ＧＬＫは、グルコースに対して高い（６〜１０ｍＭ）Ｋｍを有し、生理的濃度のＧ−６−Ｐにより阻害されない［１］。ＧＬＫの発現は、少数の組織および細胞型（最も代表的には膵臓β細胞および肝臓細胞（肝細胞））に限定されている［１］。これらの細胞においては、ＧＬＫ活性はグルコース利用に対して律速であり、したがってグルコース誘導性インスリン分泌および肝グリコーゲン合成の程度を制御する。これらのプロセスは全身のグルコース恒常性の維持に重要であり、糖尿病においては両方とも正常に機能していない［２］。
【０００３】
糖尿病の１つのサブタイプである若年発症２型糖尿病（ＭＯＤＹ−２）において、糖尿病はＧＬＫ機能喪失型変異により引き起こされる［３、４］。ＭＯＤＹ−２患者における高血糖は、膵臓および肝臓の両方におけるグルコース利用障害によって引き起こされる［５］。ＭＯＤＹ−２患者の膵臓におけるグルコース利用障害は、グルコース応答性インスリン分泌に対する閾値の上昇をもたらす。逆に、まれに起こるＧＬＫの活性化変異はこの閾値を低下させ、家族性高インスリン血症の原因となる［６、７］。ＭＯＤＹ−２糖尿病患者で観察されるＧＬＫ活性減少に加えて、２型糖尿病患者においては肝グルコキナーゼ活性もまた減少している［８］。重要なことには、ＧＬＫの全体または肝臓選択的過剰発現は、この疾患の食および遺伝モデルにおける糖尿病性表現型の発症を予防するかまたはくい止める［９〜１２］。その上、フルクトースを用いる２型糖尿病患者の急性期治療により、肝グルコース利用の促進を介して耐糖能が改善される［１３］。この効果は、以下に示すメカニズムにより、肝細胞における細胞質内ＧＬＫ活性のフルクトースで誘導される増加によって媒介されると考えられている［１３］。
【０００４】
肝ＧＬＫ活性は、ＧＬＫ制御タンパク質（ＧＬＫＲＰ）との結合により抑制される。ＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ複合体はＧＬＫＲＰに結合したフルクトース−６−リン酸（Ｆ６Ｐ）により安定化され、この糖リン酸がフルクトース−１−リン酸（Ｆ１Ｐ）で置換されることにより不安定化される。Ｆ１Ｐは、フルクトキナーゼで媒介される、食事中のフルクトースのリン酸化により生成される。その結果として、ＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ複合体の完全性および肝ＧＬＫ活性は、食後の状態ではＦ１Ｐが優位であるのに対し吸収後ではＦ６Ｐが増加しているように、栄養にしたがって調節される。肝細胞と対照的に、膵臓β細胞はＧＬＫＲＰの非存在下でＧＬＫを発現する。したがって、β細胞のＧＬＫ活性は、もっぱらその基質であるグルコースの利用可能性により調節される。小分子は、直接に、またはＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ複合体の不安定化を介してＧＬＫを活性化することが可能である。前者のクラスの化合物は、肝臓および膵臓の両方においてグルコース利用を促進すると予測されるが、後者はもっぱら肝臓において作用すると予測される。しかしながら、いずれかの特徴を有する化合物は、２型糖尿病が両方の組織におけるグルコース利用障害により特徴づけられるので、２型糖尿病の治療において治療上の利点を有することが予測される。
【０００５】
ＧＬＫおよびＧＬＫＲＰならびにＫＡＴＰチャンネルは、エネルギーバランスの調節および食物摂取の調節に重要な役割を持つ脳の領域である視床下部のニューロン中で発現されている［１４〜１８］。これらのニューロンは、食欲亢進および食欲抑制神経ペプチドを発現していることが見出され［１５、１９、２０］、周囲のグルコース濃度変化により抑制または活性化のいずれかを受ける視床下部内のグルコースセンシングニューロンと推測されている［１７、１９、２１、２２］。グルコース濃度変化を感知するニューロンの能力は、種々の遺伝的および実験的に誘導された肥満症モデルにおいて障害を受けている［２３〜２８］。グルコキナーゼの競合阻害剤であるグルコース類似体の脳室内（ｉｃｖ）注入により、やせたラットにおける食物摂取が促進される［２９、３０］。これと対照的に、グルコースのｉｃｖ注入により摂食行動が抑制される［３１］。したがって、ＧＬＫの小分子活性化剤は、ＧＬＫへの中枢効果を介して食物摂取および重量増を抑制することができる。したがって、ＧＬＫ活性化剤は糖尿病および肥満症を含む摂食障害の治療における治療的使用に有用であることができる。２型糖尿病の治療のために肝臓および／または膵臓におけるグルコース恒常性の正常化において作用する同一の化合物の効果に対して、視床下部効果は相加効果あるいは相乗効果である。したがってＧＬＫ／ＧＬＫＲＰシステムは、”糖尿肥満”標的としての見込みがある（糖尿病および肥満症の両方において利点を有する）と言うことができる。
【０００６】
ＷＯ００／５８２９３およびＷＯ０１／４４２１６（Roche）において、一連のベンジルカルバモイル化合物がグルコキナーゼ活性化剤として記載されている。かかる化合物がＧＬＫを活性化するメカニズムは、ＧＬＫ活性がＮＡＤＨ産生と関連しているアッセイにおいて、かかる化合物の直接効果を測定し、ついでこれを光学的に測定することにより分析される（下記のインビトロアッセイの詳細を参照のこと）。本発明の化合物は、ＧＬＫを直接に活性化する場合もあり、あるいはＧＬＫＲＰとＧＬＫの相互作用を阻害することによりＧＬＫを活性化する場合もある。本発明の化合物の多くは、公知のＧＬＫ活性化剤と比較して良好な選択性を示すことができる。
【０００７】
国際出願番号：ＷＯ０３／０００２６７は、酵素であるグルコキナーゼ（ＧＬＫ）の活性化剤であるベンゾイルアミノピリジルカルボン酸のグループを記載しており、国際出願番号ＷＯ０３／０１５７７４は、グルコキナーゼ活性化剤としてベンゾイルアミノ複素環化合物のグループを記載しており、国際出願番号ＷＯ０３／０００２６２は、グルコキナーゼ活性化剤としてビニルフェニル誘導体のグループを記載している。
【０００８】
本発明によれば、式（Ｉ）の化合物またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグが提供される：
【０００９】
【化１】
0004511939.tif 000002
【００１０】
（式中：
環Ａはピリジン−２−イルまたはチアゾール−２−イルであり；ここで前記ピリジン−２−イルまたはチアゾール−２−イルはＲ４から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；
Ｒ１およびＲ２の１つは水素であり、他方は水素またはＣ１−４アルキルであり；ここでＲ１およびＲ２はＲ５から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；
Ｒ３はＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、カルボシクリル、ヘテロシクリル、カルボシクリルオキシおよびヘテロシクリルオキシから選択され；ここでＲ３は独立してＲ６から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；そしてここで前記ヘテロシクリルが−ＮＨ−部分を含む場合、該窒素はＣ１−４アルキルで置換されていても良く；
Ｒ４はハロ、カルボキシおよびＣ１−４アルキルから選択され；
Ｒ５およびＲ６は独立してハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）２アミノ、カルボシクリル、ヘテロシクリル、カルボシクリルオキシ、ヘテロシクリルオキシおよびカルボシクリリデニルから選択され；ここでＲ５およびＲ６は独立して１以上のＲ７で炭素上に置換されていても良く；そしてここで前記ヘテロシクリルが−ＮＨ−部分を含む場合、該窒素はＣ１−４アルキルで置換されていても良く；
Ｒ７はハロ、カルボキシ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノおよびＮ−メチル−Ｎ−エチルアミノから選択される）。
【００１１】
式（Ｉ）の化合物は、本発明の範囲内である塩を形成することができる。薬学的に許容される塩が好ましいが、他の塩も、例えば化合物の単離または精製などに有用であることができる。
【００１２】
”ハロ”という用語は、クロロ、ブロモ、フルオロおよびヨードを含み；好ましくはクロロ、ブロモおよびフルオロを含み；最も好ましくはフルオロを含む。
本明細書においては、”アルキル”という用語は、直鎖および分枝鎖の両方のアルキル基を含む。例えば”Ｃ１−４アルキル”および”Ｃ１−６アルキル”は、プロピル、イソプロピルおよびｔ−ブチルを含む。
【００１３】
”カルボシクリル”は、３〜１２原子を含む飽和、部分飽和または不飽和の、単環式または２環式炭素環であり；ここで−ＣＨ２−基は所望により−Ｃ（Ｏ）−で置換されることができる。好ましくは”カルボシクリル”は５〜６原子を含む単環式環または９〜１０原子を含む２環式環である。”カルボシクリル”の適切な例は、シクロプロピル、シクロブチル、１−オキソシクロペンチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、フェニル、ナフチル、テトラリニル、インダニルまたは１−オキソインダニルを含む。具体的には、”カルボシクリル”はシクロヘキシルまたはフェニルである。最も具体的にはフェニルである。
【００１４】
”ヘテロシクリル”は少なくとも１つの原子が窒素、硫黄または酸素から選択される３〜１２原子を含む飽和、部分飽和または不飽和の、単環式または２環式環であり、ここで−ＣＨ２−基は所望により−Ｃ（Ｏ）−で置換されていることができ、あるいは複素環中の硫黄原子はＳ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２に酸化されていることができる。‘ヘテロシクリル環は、窒素を介する結合が四級窒素を導く以外は、特記しない限り、炭素または窒素で結合していることができる。好ましくは”ヘテロシクリル”は飽和、部分飽和または不飽和の、単環式または２環式環であり、ここで各環は１〜３原子が窒素、硫黄または酸素である５〜６原子を含み、各環は、特記しない限り、炭素または窒素で結合していることができ、ここで−ＣＨ２−基は所望により−Ｃ（Ｏ）−で置換されていることができ、あるいは複素環中の硫黄原子はＳ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２基に酸化されていても良い。さらに好ましくは、”ヘテロシクリル”は飽和、部分飽和または不飽和の単環式環であり、ここで各環は１〜３原子が窒素、硫黄または酸素である５〜６原子を含む。さらに好ましくは、”ヘテロシクリル”は部分飽和または不飽和の単環式環であり、ここで各環は１〜２原子が窒素、硫黄または酸素である５〜６原子（好ましくは５原子）を含む。
【００１５】
”ヘテロシクリル”という用語の例および適切な例は、チアゾリジニル、ピロリジニル、ピロリニル、２−ピロリドニル、２，５−ジオキソピロリジニル、２−ベンゾオキサゾリノニル、１，１−ジオキソテトラヒドロチエニル、２，４−ジオキソイミダゾリジニル、２−オキソ−１，３，４−（４−トリアゾリニル）、２−オキサゾリジノニル、５，６−ジヒドロウラシニル、１，３−ベンゾジオキソリル、１，２，４−オキサジアゾリル、２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプチル、４−チアゾリドニル、モルホリノ、２−オキソテトラヒドロフラニル、テトラヒドロフラニル、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾチエニル、イソオキサゾリル、テトラヒドロピラニル、ピペリジル、１−オキソ−１，３−ジヒドロイソインドリル、ピペラジニル、チオモルホリノ、１，１−ジオキソチオモルホリノ、テトラヒドロピラニル、１，３−ジオキソラニル、ホモピペラジニル、チエニル、イソオキサゾリル、イミダゾリル、ピロリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イソチアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、ピラニル、インドリル、ピリミジル、チアゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリジル、４−ピリドニル、キノリルおよび１−イソキノロニルである。好ましくは、”ヘテロシクリル”という用語は、イソオキサゾリル、ピロリジニル、２−ピロリドニル、２，５−ジオキソピロリジニル、モルホリノ、テトラヒドロフラニル、ピペリジル、ピペラジニル、チオモルホリノ、テトラヒドロピラニル、チエニル、イミダゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，３，４−トリアゾリル、インドリル、チアゾリル、チアジアゾリル、ピラジニル、ピリダジニルおよびピリジルなどの単環式５〜６員複素環を言う。５／６および６／６二環系の好ましい例は、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ピリドイミダゾリル、ピリミドイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、フタラジニル、シンノリニルおよびナフチリジニルを含む。
【００１６】
Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−６アルキルの例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルを含み；Ｃ１−４アルコキシの例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシを含み；Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）アミノの例は、メチルアミノ、エチルアミノおよびイソプロピルアミノを含み；Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−４アルキル）２アミノの例は、ジメチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアミノおよびＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルアミノを含み；カルボシクリリデニルの例は、シクロペンチリデニルおよびおよび２，４−シクロヘキサジエン−１−イリデニルである。
【００１７】
前記の特定の式（Ｉ）の化合物が１以上の不斉炭素原子に基づいて光学活性形またはラセミ形で存在できる場合、本発明は、ＧＬＫを直接に活性化するかあるいはＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ相互作用を抑制する性質を有する、任意のかかる光学活性形またはラセミ形をその定義中に含むことが理解されなければならない。光学活性体の合成は、例えば光学活性出発物質からの合成またはラセミ体の分割などの、有機化学業界に公知の標準法により実施できる。特定の化合物は互変異性体で存在できるが、本発明は、ＧＬＫを活性化する本発明の化合物のありとあらゆる互変異性体に関することもまた理解されなければならない。
【００１８】
適切な式（Ｉ）の化合物は、以下のいずれか１つ以上が当てはまるものである。かかる例は、適切な場合には、前記または後記の定義、特許請求の範囲または実施態様のいずれかで使用することができる。
【００１９】
環Ａは、Ｒ４から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良いピリジン−２−イルである。
環Ａは、Ｒ４から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良いチアゾール−２−イルである。
【００２０】
環Ａは、ピリジン−２−イルまたはチアゾール−２−イルであり；ここで前記ピリジン−２−イルまたはチアゾール−２−イルは、Ｒ４から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く、ここでＲ４はカルボキシである。
【００２１】
環Ａは、非置換であるかまたはカルボキシで置換されている。
環Ａは、ピリジン−２−イル、５−カルボキシピリジン−２−イル、チアゾール−２−イルまたは５−カルボキシチアゾール−２−イルである。
【００２２】
環Ａは、５−カルボキシピリジン−２−イル、チアゾール−２−イルまたは５−カルボキシチアゾール−２−イルである。
Ｒ１は水素であり、かつＲ２はＣ１−４アルキルであり；ここでＲ２は、Ｒ５から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良い。
【００２３】
Ｒ１はＣ１−４アルキルであり、かつＲ２は水素であり；ここでＲ１は、Ｒ５から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良い。
Ｒ１およびＲ２の１つは水素であり、かつ他方は水素またはＣ１−４アルキルである。
【００２４】
Ｒ１は水素またはＣ１−４アルキルであり、かつＲ２は水素である。
Ｒ１およびＲ２は両方とも水素である。
Ｒ１はメチルまたは水素であり、かつＲ２は水素である。
【００２５】
Ｒ３はＣ１−４アルコキシおよびカルボシクリルオキシから選択され；ここでＲ３は独立してＲ６から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；ここで：Ｒ６はハロ、カルボシクリル、ヘテロシクリル、カルボシクリリデニルから選択され；ここでＲ６は１以上のＲ７で炭素上に置換されていても良く；ここで：Ｒ７はハロおよびメチルから選択される。
【００２６】
Ｒ３はＣ１−４アルコキシから選択され；ここでＲ３は独立してＲ６から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；ここで：Ｒ６はカルボシクリルおよびヘテロシクリルから選択され；ここでＲ６は１以上のＲ７で炭素上に置換されていても良く；Ｒ７はハロおよびメチルから選択される。
【００２７】
Ｒ３はメトキシ、エトキシ、ｉｓｏ−ブトキシ、フェノキシおよびベンゾシクロペント−１−イルオキシから選択され；ここでＲ３は独立してＲ６から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；ここで：Ｒ６はフルオロ、フェニル、イソオキサゾリル、チエニルおよびシクロペンチリデニルから選択され；ここでＲ６は１以上のＲ７で炭素上に置換されていても良く；ここで：Ｒ７はフルオロおよびメチルから選択される。
【００２８】
Ｒ３はメトキシ、エトキシおよびｉｓｏ−ブトキシから選択され；ここでＲ３は独立してＲ６から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；ここで：Ｒ６はフェニル、イソオキサゾリルおよびチエニルから選択され；ここでＲ６は１以上のＲ７で炭素上に置換されていても良く；ここでＲ７はフルオロおよびメチルから選択される。
【００２９】
Ｒ３は２−フルオロベンジルオキシ、５−メチルイソオキサゾール−３−イルメトキシ、２−チエン−３−イルエトキシ、シクロペンチリデニルメトキシ、１−シクロペンチリデニルエトキシ、フェノキシ、ベンゾシクロペント−１−イルオキシおよび２−フェニル−２，２−ジフルオロエトキシから選択される。
【００３０】
Ｒ３は２−フルオロベンジルオキシ、５−メチルイソオキサゾール−３−イルメトキシおよび２−チエン−３−イルエトキシから選択される。
したがって、本発明の他の側面において、式（Ｉ）の化合物（上記の）またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグが提供される（式中、環Ａはピリジン−２−イルまたはチアゾール−２−イルであり；ここで前記ピリジン−２−イルまたはチアゾール−２−イルはＲ４から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く、ここで：
Ｒ４はカルボキシであり；
Ｒ１はメチルまたは水素であり、かつＲ２は水素であり；そして
Ｒ３はＣ１−４アルコキシから選択され；ここでＲ３は独立してＲ６から選択される１以上の基で炭素上に置換されていても良く；ここで：
Ｒ６はカルボシクリルおよびヘテロシクリル；好ましくはフェニル、チエニルまたはイソオキサゾリルから選択され、ここでＲ６は１以上のＲ７で炭素上に置換されていても良く；ここで：
Ｒ７はハロおよびメチルから選択される）。
【００３１】
したがって、本発明の他の側面において、式（Ｉ）の化合物（上記の）またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグが提供される（式中、
環Ａは５−カルボキシピリジン−２−イル、チアゾール−２−イルまたは５−カルボキシチアゾール−２−イルであり；
Ｒ１はメチルまたは水素であり、かつＲ２は水素であり；そして
Ｒ３は２−フルオロベンジルオキシ、５−メチルイソオキサゾール−３−イルメトキシおよび２−チエン−３−イルエトキシから選択される）。
【００３２】
本発明の他の側面において、好ましい本発明の化合物は：
２−メチル−４−イソブトキシ−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
２−メチル−４−（２−フルオロフェニルメトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
２−メチル−４−イソブトキシ−６−［Ｎ−（５−カルボキシチアゾール−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
２−メチル−４−（５−メチルイソオキサゾール−３−イルメトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
４−（２−フルオロフェニルメトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
４−（５−メチルイソオキサゾール−３−イルメトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；
２−メチル−４−（チエン−２−イルエトキシ）−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン；および
２−メチル−４−イソブトキシ−６−［Ｎ−（チアゾール−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン
またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグを含む。
【００３３】
本発明の化合物はプロドラッグの形で投与することができる。プロドラッグは、生物前駆体（bioprecursor）すなわち体内で分解可能で本発明の化合物を産生する薬学的に許容される化合物である（例えば本発明の化合物のエステルまたはアミド、特にインビボで加水分解可能なエステル）。種々の形のプロドラッグが当該技術分野で知られている。かかるプロドラッグ誘導体の例は、以下を参照のこと：
a)Design of Prodrug, edited by H. Bundgaard, (Elsevier、1985) and Methods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, edited by K. Widder, et al. (Acacemic Press, 1985);
b)A Textbook of Drug Design and Development, edited by Krogsgaard-Larsen; 
c)H. Bundgaard, Chapter 5 ”プロドラッグの設計と応用”, by H. Bundgaard p. 113-191 (1991);
d)H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);
e)H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); and
f)N. Kakeya, et al., Chem Pharm Bull, 32, 692 (1984)。
上記の文献の内容を本願に引用して援用する。
【００３４】
プロドラッグの例は、以下の通りである。カルボキシまたはヒドロキシ基を含む本発明の化合物のインビボで加水分解可能なエステルは、例えば、人体または動物体中で加水分解されて元の酸またはアルコールを生成する、薬学的に許容されるエステルである。薬学的に許容されるカルボキシに対する適切なエステルは、メトキシメチルなどのＣ１−Ｃ６アルコキシメチルエステル、ピバロイルオキシメチルなどのＣ１−Ｃ６アルカノイルオキシメチルエステル、フタリジルエステル、１−シクロカルボニルオキシエチルなどのＣ３−Ｃ８シクロアルコキシカルボニルオキシＣ１−Ｃ６アルキルエステル；５−メチル−１，３−ジオキソレン−２−オンイルメチルなどの１，３−ジオキソレン−２−オンイルメチルエステル；およびＣ１−６アルコキシカルボニルオキシエチルエステルを含む。
【００３５】
ヒドロキシ基を含む本発明の化合物のインビボで加水分解可能なエステルは、インビボ加水分解の結果として元のヒドロキシ基（単数または複数）を生成する、リン酸エステル（ホスホラミドン環状エステルを含む）などの無機酸エステルならびにa−アシルオキシアルキルエーテルおよび関連化合物を含む。a−アシルオキシアルキルエーテルの例は、アセトキシメトキシおよび２，２−ジメチルプロピオニルオキシ−メトキシを含む。ヒドロキシに対するインビボで加水分解可能なエステルを形成する基の選択肢は、アルカノイル、ベンゾイル、フェニルアセチル、置換ベンゾイル、置換フェニルアセチル、アルコキシカルボニル（アルキル炭酸エステルを生成する）、ジアルキルカルバモイルおよびＮ−（ジアルキルアミノエチル）−Ｎ−アルキルカルバモイル（カルバメートを生成する）、ジアルキルアミノアセチルならびにカルボキシアセチルを含む。
【００３６】
本発明の化合物の薬学的に許容される適切な塩は、例えば、十分な塩基性を有する本発明の化合物の酸付加塩であり、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸またはマレイン酸などの無機酸または有機酸との酸付加塩である。さらに、十分な酸性を有する本発明のベンゾオキサジノン誘導体の薬学的に許容される適切な塩は、ナトリウム塩またはカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩またはマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩またはメチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリンもしくはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンなどとの塩などの生理学的に許容されるカチオンを生成する有機塩基との塩である。
【００３７】
本発明のさらなる特徴は、薬学的に許容される希釈剤または担体とともに、上記で定義した式（Ｉ）の化合物またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグを含んでなる医薬組成物である。
【００３８】
本発明の他の側面によれば、医薬としての使用のための、上記で定義した式（Ｉ）の化合物が提供される。
さらに本発明によれば、ＧＬＫ媒介性疾患（特に２型糖尿病）の治療のための、医薬の製造における使用のための式（Ｉ）の化合物が提供される。
【００３９】
本化合物は、かかる使用のための医薬組成物として適切に製剤化される。
本発明の他の側面によれば、ＧＬＫ媒介性疾患（特に２型糖尿病）の治療を必要とする哺乳動物に、式（Ｉ）の化合物またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの有効量を投与することによる、かかる疾患の治療方法が提供される。
【００４０】
本発明の化合物または組成物により治療できる特定の疾患は：低血糖症の深刻なリスクを伴わない２型糖尿病における血糖低下（および１型の治療の可能性）、脂質代謝異常、肥満症、インスリン抵抗性、代謝症候群Ｘ、耐糖能異常を含む。
【００４１】
上記のように、ＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ系は”糖尿肥満”の有力な標的（糖尿病および肥満症の両方において利点を有する）ということができる。したがって、本発明の他の側面によれば、糖尿病および肥満症の併用治療または予防における使用のための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの使用が提供される。
【００４２】
本発明の他の側面によれば、肥満症の治療または予防における使用のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物、またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの使用が提供される。
【００４３】
本発明の他の側面によれば、肥満症および糖尿病の治療を必要とする哺乳動物に、式（Ｉ）の化合物、またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの有効量を投与することによる、かかる疾患の併用治療のための方法が提供される。
【００４４】
本発明の他の側面によれば、肥満症の治療を必要とする哺乳動物に、式（Ｉ）の化合物、またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの有効量の投与による、肥満症の治療のための方法が提供される。
【００４５】
本発明の組成物は、経口投与（例えば錠剤、ロゼンジ剤、硬もしくは軟カプセル剤、水性もしくは油性サスペンジョン、エマルジョン、分散性粉剤もしくは顆粒剤、シロップ剤またはエリキシル剤で）、局所投与（例えばクリーム剤、軟膏、ゲル、または水性もしくは油性の溶液もしくはサスペンジョンで）、吸入投与（例えば細粒粉剤または液体噴霧剤で）、通気投与（例えば細粒粉剤で）または非経口投与（例えば静脈内、皮下、筋肉内もしくは筋肉内投与のための滅菌水性もしくは油性の溶液または直腸投与のための座剤で）のために適切な形であることができる。
【００４６】
本発明の組成物は、当業界に公知の通常の医薬品賦形剤を用いて慣用法で製造することができる。したがって、経口投与用の組成物は、例えば、１以上の着色剤、甘味剤、風味剤および／または保存剤を含むことができる。
【００４７】
錠剤のための薬学的に許容される適切な賦形剤は、例えばラクトース、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウムまたは炭酸カルシウムなどの不活性希釈剤、コーンスターチもしくはアルゲン酸などの顆粒化剤および崩壊剤；デンプンなどの結合剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクなどの滑沢剤；ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはプロピルなどの保存剤ならびにアスコルビン酸などの抗酸化薬を含む。錠剤は、その崩壊とそれに続く消化管内での活性成分の吸収を修飾するために、あるいはその安定性および／または外観を改善するために、いずれの場合においても、通常のコーティング剤および当業界に公知の方法を用いて、コーティングされていなくともあるいはコーティングされていても良い。
【００４８】
経口投与のための組成物は、活性成分が炭酸カルシウム、リン酸カルシウムもしくはカオリンなどの不活性固体希釈剤と混合されている硬ゼラチンカプセル剤、または活性成分が落花生油、流動パラフィン、もしくはオリーブ油などの水またはオイルと混合されている軟ゼラチンカプセル剤の形であることができる。
【００４９】
水性サスペンジョンは、一般的に、微細粉末状の活性成分と共に、１以上の、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガントガムおよびアカシアゴムなどの縣濁化剤；レシチンもしくはアルキレンオキシドと脂肪酸の縮合物（例えばステアリン酸ポリオキシエチレン）、もしくはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールの縮合物（例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール）、もしくは脂肪酸およびヘキシトールから誘導される部分エステルとエチレンオキシドの縮合物（モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトールなど）、もしくはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールの縮合物（例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール）、もしくは脂肪酸およびヘキシトールから誘導される部分エステルとエチレンオキシドの縮合物（モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトールなど）、もしくは脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導される部分エステルとエチレンオキシドの縮合物（例えばモノオレイン酸ポリエチレンソルビタン）などの分散剤または湿潤剤を含む。水性サスペンジョンはまた、１以上の、防腐剤（ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはプロピルなど、抗酸化薬（アスコルビン酸など）、着色剤、風味剤、および／または甘味剤（ショ糖、サッカリンまたはアスパルテームなど）を含むことができる。
【００５０】
油性サスペンジョンは、活性成分を植物油（落花生油、オリーブ油、ゴマ油もしくはヤシ油など）、または鉱油（流動パラフィンなど）中に縣濁化させることにより製剤化できる。油性サスペンジョンはまた、蜜蝋、固形パラフィンまたはセチルアルコールなどの増粘剤を含むことができる。味の良い経口製剤を提供するために、上記のような甘味剤および風味剤を添加することができる。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤の添加により保存することができる。
【００５１】
水を加えることによる水性サスペンジョンの製造に適切な分散性粉剤および顆粒剤は、一般的に、分散剤または湿潤剤、縣濁化剤および１以上の防腐剤とともに活性成分を含む。適切な分散剤または湿潤剤および縣濁化剤は、既に上記で述べたもので例示される。甘味剤、風味剤および着色剤などの追加の賦形剤もまた存在させることができる。
【００５２】
本発明の医薬組成物は、水中油形エマルジョンの形であることもできる。油相は植物油（オリーブ油もしくは落花生油など）、もしくは鉱油（例えば流動パラフィンなど）またはこれらの任意の混合物であることができる。適切な乳化剤は、例えば、アカシアゴムもしくはトラガントガムなどの天然に存在する増粘剤、大豆、レシチンなどの天然に存在するホスファチド、脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導されるエステルもしくは部分エステル（モノオレイン酸ソルビタンなど）、およびポリオキシエチレンモノオレイン酸ソルビタンなどの前記部分エステルとエチレンオキシドの縮合物であることができる。エマルジョンはまた甘味剤、風味剤および保存剤を含むことができる。
【００５３】
シロップ剤およびエリキシル剤は、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、アスパルテームまたはショ糖などの甘味剤と製剤化することができ、これらはまた粘滑剤、防腐剤、風味剤および／または着色剤を含むこともできる。
【００５４】
医薬組成物はまた、滅菌注射用水性または油性サスペンジョンであることができ、これらは、前記の適切な分散剤または湿潤剤および縣濁化剤の１以上を用い、公知の方法にしたがって製剤化することができる。滅菌注射剤はまた、無毒の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射用溶液またはサスペンジョン（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液）であることができる。
【００５５】
吸入投与のための組成物は、エアゾール含有微細固体または液体飛沫のいずれかで、活性成分を投薬するように用意された通常の加圧エアゾールの形であることができる。揮発性フッ化炭化水素または炭化水素などの通常のエアゾール噴射剤を使用することができ、所定量の活性成分を投薬するためのエアゾール装置が好都合に設計される。
【００５６】
製剤に関するさらなる情報のために、読者は、Chapter 25.2 in Volume 5 of Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990. を参照されたい。
【００５７】
１以上の賦形剤と混合して単回製剤を作製する活性成分の量は、治療受容者および特定の投与経路にしたがって必然に変化する。例えば、ヒトへの経口投与のための製剤は、一般的に、例えば、適切かつ好便な量の賦形剤（全組成物の約５〜約９８重量％の範囲で変化できる）と混合した０．５ｍｇ〜２ｇの活性成分を含む。単位用量形は、一般的に約１ｍｇ〜約５００ｍｇの活性成分を含む。投与経路および投与計画についてのさらなる情報に関して、読者はChapter 25.3 in Volume 5 of Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board)、Pergamon Press 1990. を参照されたい。
【００５８】
式（Ｉ）の化合物の治療または予防目的のための投与量は、疾患の性質もしくは重篤度、動物もしくは患者の年齢および性別、ならびに投与経路によって、医学の公知の原則にしたがって、必然的に変化する。
【００５９】
治療または予防目的のための式（Ｉ）の化合物の使用において、分割量での投与が所望される場合、例えば０．５ｍｇ〜７５ｍｇ／体重（ｋｇ）の範囲の１日量が投与されるように化合物が投与される。一般に、非経口経路が用いられる場合、低めの投与量が投与される。したがって、例えば、静脈内投与のためには、例えば、０．５ｍｇ〜３０ｍｇ／体重（ｋｇ）の範囲の投与量が一般的に用いられる。同様に、吸入投与のためには、例えば、０．５ｍｇ〜２５ｍｇ／体重（ｋｇ）の範囲の投与量が用いられる。しかしながら、経口投与が好ましい。
【００６０】
本明細書に記載のＧＬＫ活性の上昇は、単独療法で適用できるが、あるいはまた、本発明の対象に加えて、１以上の他の物質および／または治療を含むこともできる。かかる併用療法は、治療の各成分の同時、順次または分離投与により達成できる。同時治療は、単一錠剤または分離錠剤で行うことができる。例えば、糖尿病の治療において、化学療法は以下の治療カテゴリーを含むことができる：
１）インスリンおよびインスリン類似体；
２）スルホニル尿素（例えばグリベンクラミド、グリピジド）および食後血糖調節薬（例えばレパグリニド、ナテグリニド）を含むインスリン分泌促進剤；
３）ＰＰＡＲｇアゴニストを含むインスリン抵抗性改善薬（例えばピオグリタゾンおよびロシグリタゾン）；
４）肝グルコース放出抑制薬（例えばメトホルミン）；
５）腸からのグルコースの吸収を減少させるようにデザインされた薬剤（例えばアカルボース）；
６）長期にわたる高血糖の合併症の治療のためにデザインされた薬剤；
７）抗肥満薬（例えばシブトラミンおよびオルリスタット）；
８）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤などの抗脂質代謝異常薬（スタチン系薬剤、例えばプラバスタチン）；ＰＰＡＲaアゴニスト（フィブラート、例えばゲムフィブロジル）；胆汁酸排泄促進薬（コレスチラミン）；コレステロール吸収抑制剤（植物スタノール、合成阻害剤）；胆汁酸吸収抑制剤（ＩＢＡＴｉ）ならびにニコチン酸および類似体（ナイアシンおよび徐放性製剤）；
９）β遮断薬（例えばアテノロール、インデラル）；ＡＣＥ阻害剤（例えばリシノプリル）；カルシウムアンタゴニスト（例えばニフェジピン）；アンジオテンシン受容体アンタゴニスト（例えばカンデサルタン）、aアンタゴニストおよび利尿薬（例えばフロセミド、ベンゾチアジド）などの降圧剤；
１０）抗血栓剤、フィブリン溶解活性化剤および抗血小板剤などの止血モジュレーター；トロンビンアンタゴニスト；第Ｘａ因子阻害剤；第ＶＩＩａ因子阻害剤）；抗血小板剤（例えばアスピリン、クロピドグレル）；抗凝血物質（ヘパリンおよび低分子量類似体、ヒルジン）およびワルファリン；ならびに
１１）非ステロイド性抗炎症剤（例えばアスピリン）およびステロイド性抗炎症剤（例えばコルチゾン）などの抗炎症剤。
【００６１】
本発明の他の側面によれば、以下の実施例に記載されている最終生成物として製造される各化合物ならびにその塩、溶媒和物およびプロドラッグが提供される。
本発明の他の側面によれば、式（Ｉ）の化合物またはその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの製造方法であって、以下を含む該方法（ここで、特記しない限り可変基は式（Ｉ）に記載のものである）が提供される：
方法１）：式（ＩＩ）の酸：
【００６２】
【化２】
0004511939.tif 000003
【００６３】
またはその活性化誘導体と式（ＩＩＩ）の化合物：
【００６４】
【化３】
0004511939.tif 000004
【００６５】
の反応；または
方法２）Ｒ４がカルボキシである式（Ｉ）の化合物のための；式（ＩＶ）の化合物：
【００６６】
【化４】
0004511939.tif 000005
【００６７】
（式中、ＲｘＣ（Ｏ）Ｏ−はエステル基である）の脱保護と必要または所望によるその後の：
ｉ）式（Ｉ）の他の化合物への式（Ｉ）の化合物の変換；および／または
ｉｉ）任意の保護基の除去；および／または
ｉｉｉ）その塩、溶媒和物またはプロドラッグの形成。
【００６８】
適切な活性化酸誘導体は、酸ハロゲン化物（例えば酸塩化物）および活性エステル（例えばペンタフルオロエステル）を含む。このタイプの化合物とアミンとの反応は、当業界に公知である。
【００６９】
基ＲｘＯＣ（Ｏ）−はエステルである。Ｒｘのための適切な例は、Ｃ１−６アルキルおよびベンジルであり、特にメチルおよびエチルである。
前述の反応は、標準的な条件で実施できる。前述の中間体は、市販のものであるか、当該技術分野で知られているものか、あるいは公知の方法で製造できるものである。
【００７０】
本明細書に記載の中間体の一部は新規であり、したがって、本発明のさらなる特徴として提供される。例えば、式（ＩＩＩ）の化合物は、本発明のさらなる特徴として提供される。
【００７１】
製造プロセスの間、保護基の使用が有用な場合がある。保護基は、当該保護基の除去の必要に応じて、文献記載あるいは当業者に公知の任意の便利な方法により除去でき、かかる方法は、分子中の他の基の分解を最小限に抑えて保護基を除去するように選択される。
【００７２】
保護基の具体例を、便宜のため以下に示すが、ここで”低級”は、これに当てはまる基が、好ましくは、１〜４炭素原子を有することを意味する。これらの例は、網羅的ではないことが理解されなければならない。保護基の除去法の具体例が以下に示されている場合は、これらも同様に網羅的ではない。具体的に述べられていない保護基の使用および脱保護法は、もちろん本発明の範囲内である。
【００７３】
カルボキシ保護基は、エステルを形成する脂肪族もしくはアラリファティックアルコールまたはエステルを形成するシラノールの残余であることができる。（前記アルコールまたはシラノールは好ましくは１〜２０炭素原子を含む）。カルボキシ保護基の例は、直鎖または分枝鎖Ｃ１−１２アルキル基（例えばイソプロピル、ｔ−ブチル）；低級アルコキシ低級アルキル基（例えばメトキシメチル、エトキシメチル、イソブトキシメチル；低級脂肪族アシルオキシ低級アルキル基（例えばアセトキシメチル、プロピオニルオキシメチル、ブチリルオキシメチル、ピバロイルオキシメチル）；低級アルコキシカルボニルオキシ低級アルキル基（例えば１−メトキシカルボニルオキシエチル、１−エトキシカルボニルオキシエチル）；アリール低級アルキル基（例えばｐ−メトキシベンジル、ｏ−ニトロベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ベンズヒドリルおよびフタリジル）；トリ（低級アルキル）シリル基（例えばトリメチルシリルおよびｔ−ブチルジメチルシリル）；トリ（低級アルキル）シリル低級アルキル基（例えばトリメチルシリルエチル）；およびＣ２−６アルケニル基（例えばアリルおよびビニルエチル）を含む。
【００７４】
カルボキシル保護基の除去に特に適切な方法は、例えば、酸、金属または酵素触媒加水分解を含む。
ヒドロキシ保護基の例は、低級アルケニル基（例えばアリル）；低級アルカノイル基（例えばアセチル）；低級アルコキシカルボニル基（例えばｔ−ブトキシカルボニル）；低級アルケニルオキシカルボニル基（例えばアリルオキシカルボニル）；アリール低級アルコキシカルボニル基（例えばベンゾイルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル、ｏ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル）；トリ低級アルキル／アリールシリル基（例えばトリメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル）；アリール低級アルキル基（例えばベンジル）基；およびトリアリール低級アルキル基（例えばトリフェニルメチル）を含む。
【００７５】
アミノ保護基の例は、ホルミル、アラルキル基（例えばベンジルおよび置換ベンジル（例えばｐ−メトキシベンジル、ニトロベンジルおよび２，４−ジメトキシベンジル）、およびトリフェニルメチル）；ジ−ｐ−アニシルメチルおよびフリルメチル基；低級アルコキシカルボニル（例えばｔ−ブトキシカルボニル）；低級アルケニルオキシカルボニル（例えばアリルオキシカルボニル）；アリール低級アルコキシカルボニル基（例えばベンジルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル、ｏ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル；トリアルキルシリル（例えばトリメチルシリルおよびｔ−ブチルジメチルシリル）；アルキリデン（例えばメチリデン）；ベンジリデンおよび置換ベンジリデン基を含む。
【００７６】
ヒドロキシおよびアミノ保護基の除去のために適切な方法は、例えば、酸、塩基、金属または酵素触媒加水分解、またはｏ−ニトロベンジルオキシカルボニルなどの基の光加水分解またはシリル基に対してフッ素イオンを用いる加水分解を含む。
【００７７】
アミド基に対する保護基の例は、アラルコキシメチル（例えばベンジルオキシメチルおよび置換ベンジルオキシメチル）；アルコキシメチル（例えばメトキシメチルおよびトリメチルシリルエトキシメチル）；トリアルキル／アリールシリル（例えばトリメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル）；トリアルキル／アリールオキシメチル（例えばｔ−ブチルジメチルシリルオキシメチル、ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシメチル）；４−アルコキシフェニル（例えば４−メトキシフェニル）；２，４−ジ（アルコキシ）フェニル（例えば２，４−ジメトキシフェニル）；４−アルコキシベンジル（例えば４−メトキシベンジル）；２，４−ジ（アルコキシ）ベンジル（例えば２，４−ジ（メトキシ）ベンジル）；およびアルク−１−エニル（例えばアリル、ブト−１−エニルおよび置換ビニル（例えば２−フェニルビニル））を含む。
【００７８】
アラルコキシメチル基は、アミド基と適切な塩化アラルコキシメチルとを反応させることによりアミド基に導入することができ、接触水素化により除去できる。アルコキシメチル、トリアルキル／アリールシリルおよびトリアルキル／シリルオキシメチル基は、適切な塩化物をアミドを反応させることにより導入でき、酸により除去できる；あるいはシリル含有基の場合、フッ素イオンにより除去できる。アルコキシフェニルおよびアルコキシベンジル基は、好都合に、適切なハロゲン化物を用いるアリール化またはアルキル化により導入でき、硝酸第二セリウムアンモニウムを用いる酸化により除去できる。最後に、アミドと適切なアルデヒドを反応させることによりアルク−１−エニル基を導入でき、酸により除去できる。
【００７９】
生物学的試験：
式（Ｉ）の化合物の生物学的作用は、以下の方法で試験できる：
（１）ＧＬＫの酵素活性はＧＬＫ、ＡＴＰおよびグルコースをインキュベートすることにより測定できる。生成物の生成は、Ｇ−６−Ｐ脱水素酵素、ＮＡＤＰ／ＮＡＤＰＨ系へのアッセイを共役させ、３４０ｎｍにおける吸光度の増加を測定することにより測定できる（Matschinsky et al 1993）。
【００８０】
（２）ＧＬＫおよびＧＬＫＲＰ間の結合相互作用を測定するためのＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ結合アッセイ。本方法は、ＧＬＫおよびＧＬＫＲＰ間の相互作用をモジュレートすることによりＧＬＫをモジュレートする化合物を特定するために使用することができる。ＧＬＫＲＰおよびＧＬＫを、所望により試験化合物を存在させて、阻害濃度のＦ−６−Ｐとインキュベートし、ＧＬＫおよびＧＬＫＲＰ間の相互作用の程度を測定する。Ｆ−６−Ｐと置換するかあるいは他の何らかの方法でＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ相互作用を減少させる化合物を、生成するＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ複合体の量の減少により検出する。Ｆ−６−Ｐ結合を促進するかあるいは他の何らかの方法でＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ相互作用する化合物を、生成するＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ複合体の量の増加で検出する。かかる結合アッセイの具体例を以下に示す。
【００８１】
ＧＬＫ／ＧＬＫＲＰシンチレーション近接アッセイ
本発明の化合物は、以下に記載するＧＬＫ／ＧＬＫＲＰシンチレーション近接アッセイで試験する時、１０μｍ未満の活性を有することが見出された。ＷＯ０１／２０３２７（その内容を本願に引用して援用する）に記載されているようにして、組換えヒトＧＬＫおよびＧＬＫＲＰを、”添加するだけで測定が可能な（mix and measure）”９６ウェルＳＰＡ（シンチレーション近接アッセイ）を発色させるために用いた。ＧＬＫ（ビオチン化）およびＧＬＫＲＰを、阻害濃度の放射性標識［３Ｈ］Ｆ−６−Ｐ（Amersham Custom Synthesis TRQ8689）の存在下で、ストレプトアビジン結合ＳＰＡビード（Amersham）とインキュベートし、シグナルを得る。Ｆ−６−Ｐと置換するかあるいは他の何らかの方法でＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ結合相互作用を阻害する化合物は、このシグナルを消失させる原因となる。
【００８２】
結合アッセイは、室温で２時間行った。反応混合物は、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、２ｍＭ ＡＴＰ、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．５ｍＭ ＤＴＴ、組換えビオチン化ＧＬＫ（０．１ｍｇ）、組換えＧＬＫＲＰ（０．１ｍｇ）、０．０５ｍＣｉ［３Ｈ］Ｆ−６−Ｐ（Amersham）を混合して１００ｍｌの最終容量にした。インキュベーションに続いて、ＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ複合体形成の程度を、０．１ｍｇ／ウェルアビジン結合ＳＰＡビード（Amersham）を添加し、Packard TopCount NXTでシンチレーション計数して測定した。
【００８３】
（３）ＧＬＫＲＰおよびＦ−６−Ｐ間の結合相互作用を測定するためのＦ−６−Ｐ／ＧＬＫＲＰ結合アッセイ。この方法は、化合物の作用メカニズムに関するさらなる情報を提供するために使用することができる。ＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ結合アッセイで特定された化合物は、Ｆ−６−Ｐと置換するかあるいは他のいずれかの方法でＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ相互作用をモジュレートすることにより、ＧＬＫおよびＧＬＫＲＰの相互作用をモジュレートすることができる。例えば、タンパク質−タンパク質相互作用は、一般的に複数の結合部位を介して相互作用が起こる事が知られている。したがって、ＧＬＫおよびＧＬＫＲＰ間の相互作用を修飾させるは、いくつかの異なる結合部位の１以上と結合することにより作用できる。
【００８４】
Ｆ−６−Ｐ／ＧＬＫＲＰ結合アッセイは、Ｆ−６−Ｐを、そのＧＬＫＲＰ上の結合部位から置換することによりＧＬＫおよびＧＬＫＲＰの相互作用をモジュレートする化合物のみを特定する。
ＧＬＫの非存在下で、ＧＬＫＲＰを試験化合物および阻害濃度のＦ−６−Ｐとインキュベートし、Ｆ−６−ＰおよびＧＬＫＲＰ間の相互作用の程度を測定する。Ｆ−６−ＰのＧＬＫＲＰへの結合を置換する化合物は、形成されるＧＬＫＲＰ／Ｆ−６−Ｐ複合体の量の変化により検出できる。かかる結合アッセイの具体例を以下に記載する。
【００８５】
Ｆ−６−Ｐ／ＧＬＫＲＰシンチレーション近接アッセイ
ＷＯ０１／２０３２７（その内容を本願に引用して援用する）に記載されているようにして、組換えヒトＧＬＫおよびＧＬＫＲＰを、”添加するだけで測定が可能な（mix and measure）”９６ウェルＳＰＡ（シンチレーション近接アッセイ）を発色させるために用いた。阻害濃度の放射性標識［３Ｈ］Ｆ−６−Ｐの存在下で、ＦＬＡＧタグＧＬＫＲＰを、プロテインＡでコーティングしたＳＰＡビード（Amersham）および抗ＦＬＡＧ抗体でインキュベートする。シグナルが生成される。Ｆ−６−Ｐと置換する化合物は、このシグナルの消失の原因となる。このアッセイおよびＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ結合アッセイの組み合わせを用いて、Ｆ−６−Ｐを置換することによりＧＬＫ／ＧＬＫＲＰ結合相互作用を抑制する化合物を特定することが観測者に可能になる。
【００８６】
結合アッセイを室温で２時間実施した。反応混合物は、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、２ｍＭ ＡＴＰ、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．５ｍＭ ＤＴＴ、組換えＦＬＡＧタグＧＬＫＲＰ（０．１ｍｇ）、抗Ｆｌａｇ Ｍ２抗体（０．２ｍｇ）（IBI Kodak）、０．０５ｍＣｉ［３Ｈ］Ｆ−６−Ｐ（Amersham）を混合して１００ｍｌの最終容量にした。インキュベーションに続いて、Ｆ−６−Ｐ／ＧＬＫＲＰ複合体形成の程度を、０．１ｍｇ／ウェルプロテインＡ結合ＳＰＡビード（Amersham）を加え、Packard TopCount NXTでシンチレーション計数して測定した。
【００８７】
組換えＧＬＫおよびＧＬＫＲＰの産生：
ｍＲＮＡの調整
ヒト肝臓総ｍＲＮＡを、Sambrook J, Fritsch EF & Maniatis T, 1989. に記載されているようにして、４Ｍイソチオシアン酸グアニジン、２．５ｍＭクエン酸、０．５％サルコシル、１００ｍＭ ｂ−メルカプトエタノール中でポリトロンにより均質化し、ついで１３５，０００ｇ（最大）で５．７Ｍ ＣｓＣｌ、２５ｍＭ酢酸ナトリウムで遠心分離することにより調整した。ポリＡ＋ｍＲＮＡはFastTrack（登録商標）ｍＲＮＡ単離キット（Invitrogen）を用いて直接調整した。
【００８８】
ＧＬＫおよびＧＬＫＲＰ ｃＤＮＡ配列のＰＣＲ増幅
ヒトＧＬＫおよびＧＬＫＲＰ ｃＤＮＡは、Sambrook, Fritsch & Maniatis, 1989.に記載の確立された技術を用いて、ヒト肝臓ｍＲＮＡからＰＣＲで得た。Tanizawa et al 1991 and Bonthron, D.T. et al 1994 (後に、Warner, J.P. 1995 において訂正された）に記載のＧＬＫおよびＧＬＫＲＰ ｃＤＮＡ配列にしたがってＰＣＲプライマーをデザインした。
【００８９】
Bluescript IIベクターのクローニング
バクテリオファージＴ３およびＴ７プロモーター配列が側面に位置する複数の固有の制限部位；線状ファージ複製起点ならびにアンピシリン薬剤耐性マーカー遺伝子を含むポリリンカーＤＮＡフラグメントを有するｃｏｌＥＩに基づくレプリコンを含んでなる、Yanisch-Perron C et al (1985) により用いられたものと同様な組換えクローニングベクター系である、pBluescript II(Short et al 1998)を用いて、GLKおよびGLKRP cDNAを大腸菌にクローニングした。
【００９０】
形質転換
大腸菌の形質転換は、一般的にエレクトロポレーションで実施することができる。ＤＨ５ａまたはＢＬ２１（ＤＥ３）株の培養液４００ｍｌを、ＯＤ６００が０．５になるまでＬ−ブロス中で培養し、２，０００ｇの遠心分離で回収した。細胞を氷冷した脱イオン水中で２度洗浄し、アリコートにして−７０℃で保存した。ライゲーション混合物をMillipore V series（登録商標）膜（０．００２５ｍｍ）孔径）を用いて脱塩した。４０ｍｌの細胞を、０．２ｃｍエレクトロポレーションキュベット中氷上で１０分間、１ｍｌのライゲーション混合物またはプラスミドＤＮＡでインキュベートし、ついでGene Pulser（登録商標）装置（BioRad）を用い、０．５ｋＶｃｍ−１、２５０ｍＦ、２５０でパルスした。形質転換体を、１０ｍｇ／ｍｌのテトラサイクリンまたは１００ｍｇ／ｍｌのアンピシリンを加えたＬ−寒天上で選別した。
【００９１】
発現
ＧＬＫをE.coli BL21細胞内のベクターｐＴＢ３７５ＮＢＳＥより発現させ、Ｎ−末端メチオニンに直接隣接した６−Ｈｉｓタグを含む組換えタンパク質を産生させた。あるいはまた、他の適切なベクターは、ｐＥＴ２１（＋）ＤＮＡ， Novagen, Cat番号697703である。６−Ｈｉｓタグは、Qiagen（ｃａｔ番号３０２５０）から購入したニッケルニトリロ三酢酸アガロースを充填したカラム上で組換えタンパク質を精製するために用いた。
【００９２】
ＧＬＫＲＰは、E.coli BL21細胞内のベクターpFLAG CTC（IBI Kodak）から発現させ、Ｃ末端ＦＬＡＧタグを含む組換えタンパク質を産生させた。このタンパク質を、最初はＤＥＡＥセファロースイオン交換で精製し、ついでSigma-Aldrich（ｃａｔ番号Ａ１２０５）から購入したＭ２抗ＦＬＡＧイムノアフィニティカラム上で、ＦＬＡＧタグを利用して最終精製を行った。
【００９３】
ＧＬＫのビオチン化：
Sigma-Aldrich（ｃａｔ番号Ｂ２６４３）から購入したビオチンアミドカプロアートＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ビオチン−ＮＨＳ）と反応させることによりＧＬＫをビオチン化した。簡潔に言えば、標的タンパク質（ＧＬＫ）の遊離アミノ基を所定のモル比でビオチン−ＮＨＳと反応させて安定なアミド結合を生成させ、共有結合したビオチンを含む生成物を得る。結合していない過剰のビオチン−ＮＨＳを透析で生成物から除去する。具体的には、４ｍＬの２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．３、０．１５Ｍ ＫＣｌ、１ｍＭジチオスレイトール、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍＭ ＭｇＣｌ２（緩衝液Ａ）中の０．３１ｍｇのビオチン−ＮＨＳに７．５ｍｇのＧＬＫを加えた。この反応混合物をさらなる２２ｍｇのビオチン−ＮＨＳを含む１００ｍＬの緩衝液Ａに対して透析した。４時間後、過剰のビオチン−ＮＨＳを緩衝液Ａに対して十分に透析することにより除去した。
【００９４】
以下の実施例は、例示目的のものであって、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。例示された各化合物は、本発明の具体的かつ個々の側面を示す。以下の非限定的な実施例において、特記しない限り：
（ｉ）溜去は、減圧下でロータリーエバポレーターを用いて実施し、後処理は、乾燥剤などの残存固体を濾過などにより除去した後実施した；
（ｉｉ）操作は室温（すなわち１８〜２５℃の範囲）で、アルゴンまたは窒素などの不活性ガス雰囲気下で行った；
（ｉｉｉ）収率は、例として示したもので、必ずしも達成できる最大限ではない；
（ｉｖ）式（Ｉ）の最終生成物の構造は、核（通常はプロトン）磁気共鳴（ＮＭＲ）およびマススペクトル法により確認し；プロトン磁気共鳴化学シフト値は、特記しない限り、重水素化ジメチルスルホキシド中、δ値で測定したが、ピーク多重度は以下のように示す：ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｍ，多重線；ｂｒ，広い；ｑ，四重線、ｑｕｉｎ，五重線。
（ｖ）中間体は、通常完全には特徴づけず、純度は薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、赤外（ＩＲ）またはＮＭＲ分析により評価した；
（ｖｉ）クロマトグラフィーはシリカ（メルクシリカゲル６０，０．０４０〜０．０６３ｍｍ，２３０〜４００メッシュ）で行った；そして
（ｖｉ）”Bondelut”カラムと言う場合、シリカが６０ｍｌ使い捨てシリンジ中に入れられ、多孔性ディスクで支持された、１０ｇもしくは２０ｇもしくは５０ｇもしくは７０ｇの４０ミクロン粒子径のシリカを含むカラムのことをいい、”Mega Bond Elut SI”の商品名でVarian, Harbor City, California, USAから入手される;”Mega Bond Elut”は商標である；
（ｖｉｉ）以下の略語を用いる：
ＤＣＭ  ジクロロメタン；
ＤＭＦ  ジメチルホルムアミド；
ＬＣＭＳ  液体クロマトグラフィー／質量分析法；
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン。
【００９５】
実施例１
２−メチル−４−イソブトキシ−６−［Ｎ−（５−カルボキシピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン
２−メチル−４−イソブトキシ−６−［Ｎ−（５−メトキシカルボニルピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン（方法１；１２０ｍｇ，０．３１４ｍＭ）のメタノール／ＴＨＦ混合物（１ｍｌ＋４ｍｌ）溶液に、水酸化ナトリウム溶液（０．９４ｍｌの１Ｍ溶液，０．９４ｍＭ）を加え、得られた溶液を周囲温度で撹拌した。４時間後、反応混合物を水（５ｍｌ）で希釈し、減圧下で半量まで濃縮した。得られた混合物を１Ｍ ＨＣｌを用いてｐＨ６まで酸性化した。得られた固体沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥して淡黄色固体を得た。これをクロマトグラフ（１０ｇ Bondelut）にかけ、メタノール（０〜１０％勾配溶離）含有ＤＣＭで溶離し、表題化合物を無色固体で得た。NMR: 1.03 (d, 6H), 2.09 (sept, 1H), 2.45 (s, 3H), 3.97 (d, 2H), 6.66 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.31 (t, 2H), 8.87 (s, 1H), 11.10 (bs, 1H); m/z  367 (M+H)+.
【００９６】
実施例２〜７
適切なエステルから出発して、実施例１の手順で以下の化合物を製造した。
【００９７】
【表１】
0004511939.tif 000006
【００９８】
実施例８
２−アミノチアゾールを用いて、方法１の手順に従って、以下の化合物を製造した。
【００９９】
【表２】
0004511939.tif 000007
【０１００】
出発物質の製造方法
上記の実施例の出発物質は、市販されているか、あるいは公知の物質から標準的な方法で容易に製造できる。例えば、以下の反応は例示であって、上記反応において用いられる出発物質の一部の製造方法を制限するものではない。
【０１０１】
方法１
２−メチル−４−イソブトキシ−６−［Ｎ−（５−メトキシカルボニルピリジン−２−イル）カルバモイル］ベンゾフラン
塩化オキサリル（４１０ｍｇ，２８２μｌ，３．２２５ｍｍｏｌ，５当量）を、２−メチル−４−イソブトキシ−６−カルボキシベンゾフラン（方法２；０．１６０ｍｇ，０．６４５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍｌ）溶液に加え、反応混合物を周囲温度で４時間撹拌した。試薬を添加後、反応混合物を１６時間撹拌し、ついで４０℃に加温した。出発酸が残存している場合、溶媒を減圧下で除去し、残渣をニートの塩化オキサリルで処理した。ついで反応混合物を減圧下で濃縮し、ピリジン（５ｍｌ）に溶解した。得られた溶液に２−アミノピリジン−５−カルボン酸メチル（９８ｍｇ，０．６４５ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間撹拌後、赤みをおびた溶液を減圧下で濃縮し、得られた樹脂をＤＣＭに溶解し、クロマトグラフ（２０ｇ Bondelut，酢酸エチルを０〜１００％含有するヘキサンで溶離）にかけ、無色樹脂で表題化合物（１２２ｍｇ，収率４９．５％）を得た。これはゆっくり固化した；ＬＣ−ＭＳ ３８３ （Ｍ＋Ｈ）＋，純度９４．４％。
【０１０２】
方法２
２−メチル−４−イソブトキシ−６−カルボキシベンゾフラン
水酸化ナトリウム溶液（２．２８ｍｌの１Ｍ溶液，２．２８ｍｍｏｌ，３当量）を、２−メチル−４−イソブトキシ−６−メトキシカルボニルベンゾフラン（方法７；２００ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ；約１５ｍｏｌ％のイソブチルエステルを含む）のＭｅＯＨ（２．２８ｍｌ）／ＴＨＦ（２．２８ｍｌ）溶液に加えた。５０℃で２時間後、反応混合物を周囲温度で終夜撹拌し、ついで減圧下で半量まで濃縮した。得られた溶液を水で希釈し、ｐＨ５に酸性化し（１Ｍ ＨＣｌ）、得られた綿状沈殿を濾過し、乾燥して表題化合物を無色固体（１６５ｍｇ，８８％）で得た。 NMR: 1.02 (d, 6H), 2.06 (sept, 1H), 2.45 (s, 3H), 3.90 (d, 2H), 6.64 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 12.83 (bs, 1H); m/z 247 (M-H)-, ＬＣ−ＭＳにより純度９４．６％。
【０１０３】
方法３〜６
方法２の手順で、以下の化合物を製造した。
【０１０４】
【表３】
0004511939.tif 000008
【０１０５】
方法７
２−メチル−４−イソブトキシ−６−メトキシカルボニルベンゾフラン
２−メチル−４−ヒドロキシ−６−メトキシカルボニルベンゾフラン（方法１２；４１２ｍｇ，１．０ｍｍｏｌと仮定）を無水ＤＭＦ（１０ｍｌ）中で撹拌し、溶液を炭酸カリウム（６９０ｍｇ，５ｍｍｏｌ，５当量）および１−ヨード−２−メチルプロパン（４４２ｍｇ，２７６μｌ，２．４ｍｍｏｌ，２．４当量）で順次処理した。反応混合物を９０℃で３時間撹拌し、ついで冷却して水に注いだ。得られた混合物を酢酸エチルで２度抽出し、抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下で溜去して褐色オイルを得た。これをクロマトグラフ（５０ｇ Bondelut，酢酸エチルを０〜１００％含有するヘキサンで溶離）にかけ、約１５％の対応するイソブチルエステルの不純物を有する表題化合物を透明オイルで得た。NMR: 1.02 (d、6H)、2.06 (sept、1H)、2.45 (s、3H)、3.84 (s、3H)、3.91 (d、2H)、6.66 (s、1H)、7.24 (s、1H)、7.66 (s、1H);（スペクトルは、約１５ｍｏｌ％のイソブチルエステルに対応するシグナルも含んでいた）。
【０１０６】
方法８〜１１
方法７の手順で、以下の化合物を製造した。
【０１０７】
【表４】
0004511939.tif 000009
【０１０８】
方法１２
２−メチル−４−ヒドロキシ−６−メトキシカルボニルベンゾフラン
２−メチル−４−アセトキシ−６−メトキシカルボニルベンゾフラン（方法１４；１．２７５ｇ，５．１４ｍｍｏｌ）を、炭酸カリウム（１．４０８ｇ，１０．３ｍｍｏｌ，２当量）のＭｅＯＨ（１００ｍｌ）および水（２ｍｌ）縣濁液に加え、混合物を周囲温度で１時間撹拌した。上澄み液を不溶性物質からデカンテーションし、減圧下で溜去してクリーム色固体（２．１９ｇ，無機物の不純物を含むと推定）を得た。NMR: 2.35 (s, 3H), 3.56 (br s, 1H), 3.73 (s, 3H), 6.46 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.86 (s, 1H); m/z 205 (M-H)-,ＬＣ−ＭＳで純度８３％。
【０１０９】
方法１３
４−アセトキシ−６−メトキシカルボニルベンゾフラン（J Chem Soc (C); 1968, 867-9）から出発して、方法１２の手順で以下の化合物を製造した。
【０１１０】
【表５】
0004511939.tif 000010
【０１１１】
方法１４
２−メチル−４−アセトキシ−６−メトキシカルボニルベンゾフラン
Ｅ−３−メトキシカルボニル−４−（５−メチルフル−２−イル）−ブト−３−エン酸（方法１５；１．３９ｇ，６．２ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（６２０ｍｇ，６．３ｍｍｏｌ）の無水酢酸（１２．５ｍｌ）中の混合物を、１４０℃で１５分間加熱した。反応混合物を冷却し、水／酢酸エチル混合物中に注いだ。水層を分離し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインで順次洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し減圧下で溜去して、暗色の結晶性塊として粗生成物を得た。これをクロマトグラフ（５０ｇ Bondelut，酢酸エチルを０〜１００％含有するヘキサンで溶離）にかけ、表題化合物を黄白色固体（１．４２ｇ，９２％）で得た。NMR: 2.36 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 6.68 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.96 (s, 1H); m/z  247 (M-H)-, ＬＣ−ＭＳで純度９７．１％。
【０１１２】
方法１５
Ｅ−３−メトキシカルボニル−４−（５−メチルフル−２−イル）−ブト−３−エン酸
Ｅ−３−メトキシカルボニル−４−（５−メチルフル−２−イル）−ブト−３−エン酸ｔ−ブチルエステル（方法１６；１．３９ｇ，４．９６ｍｍｏｌ）のトリフルオロ酢酸／水（９０：１０ｖ／ｖの２０ｍｌ）溶液を、周囲温度で２０分間撹拌した。ついで、反応混合物をトルエン（３０ｍｌ）で希釈し、減圧下で溜去して褐色オイルを得た。トルエン（３０ｍｌ）でさらに共沸除去した後、これが固化した。イソヘキサンで粉末化し残渣を回収して、表題化合物を褐色固体（１．０５ｇ，９５％）で得た。NMR 2.33 (s, 3H), 3.65 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 6.29 (d, 1H), 6.85 (d, 1H), 7.41 (s, 1H), 12.34 (bs, 1H).
【０１１３】
方法１６
Ｅ−３−メトキシカルボニル−４−（５−メチルフル−２−イル）−ブト−３−エン酸ｔ−ブチルエステル
１−メトキシカルボニル−２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルホスホラン（JCS Perkin II, 1975, p1030;2.69g, 6 mmol, 1.2当量）および５−メチルフラン−２−アール（０．５ｍｌ，５ｍｍｏｌ）の無水トルエン（１０ｍｌ）溶液を、８０℃で４８時間撹拌し、ついで溶媒がなくなるまで溜去した。残渣をクロマトグラフ（５０ｇ Bondelut，１０％ｖ／ｖ酢酸エチルを含有するヘキサンで溶離）にかけ、表題化合物を褐色オイル（１．３９ｇ，１００％）で得た。NMR: 1.38 (s, 9H), 2.33 (s, 3H), 3.62 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 6.31 (d, 1H), 6.85 (d, 1H), 7.42 (s, 1H)．
【０１１４】
方法１７
２−メチル−４−（２−フルオロベンジルオキシ）−６−［Ｎ−（４−メトキシカルボニルフェニル）カルバモイル］ベンゾフラン
２−メチル−４−（２−フルオロベンジルオキシ）−１−ベンゾフラン−６−カルボン酸（方法３；０．６０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）および２−アミノピリジン−５−カルボン酸メチル（６１ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ，２当量）のピリジン（１ｍｌ）溶液をオキシ塩化リン（２０．５μｌ，０．２２ｍｍｏｌ，１．１当量）で処理し、反応混合物を周囲温度で１６時間撹拌した。反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで２度抽出した。抽出物をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し溜去して黄色樹脂を得た。これをクロマトグラフ（１０ｇ Bondelut，酢酸エチルを０〜１００％含有するヘキサンで溶離）にかけ、表題化合物を固体（６１ｍｇ，７０％）で得た。NMR: 2.46 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 5.37 (s, 2H), 6.66 (s, 1H)、7.25 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 7.62 (m, 2H), 7.91 (s, 1H), 8.36 (m, 2H), 8.91 (s, 1H), 11.20 (bs, 1H); m/z  435 (M+H)+，ＬＣ−ＭＳで純度１００％。
【０１１５】
方法１８〜２２
以下の化合物を方法１７の手順で製造した。
【０１１６】
【表６】
0004511939.tif 000011
【０１１７】
方法２３
２−メチル−４−（２−チエン−３−イルエトキシ）−６−メトキシカルボニルベンゾフラン
２−メチル−４−ヒドロキシ−６−メトキシカルボニルベンゾフラン（方法１２；１．２４ｇ，６．０ｍｍｏｌ）および２−（３−チエニル）エタノール（７６８ｍｇ，０．６７ｍｌ，６．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（ＤＣＭ，５０ｍｌ）溶液に、高分子担持トリフェニルホスフィン（２．５ｇ，約３ｍｍｏｌ／ｇ，１．５当量）を加え、この縣濁液をアルゴン雰囲気下で５℃に冷却した。これにアゾジカルボン酸ジｔ−ブチル（１．７２５ｇ，７．５ｍｍｏｌ，１．５当量）を加え、反応混合物を終夜撹拌して周囲温度に暖めた。ついで珪藻土を通過させて濾過し、ＤＣＭで洗浄し、濾液および洗浄液を減圧下で溜去して総量約５０ｍｌにした。これにトリフルオロ酢酸（２ｍｌ）を加え、溶液を減圧下で溜去して赤色オイルを得た。これをクロマトグラフ（７０ｇ Bondelut，酢酸エチルを０〜５０％含有するヘキサンで溶離）にかけ、赤色固体を得た。これを再度クロマトグラフ（前記と同様）にかけ、表題化合物を無色結晶性固体（１５０ｍｇ，収率８％）で得た。NMR: 2.46 (s, 3H), 3.10 (t, 2H), 3.83 (s, 3H), 4.33 (t, 2H), 6.64 (s, 1H), 7.12 (dd, 1H), 7.28 (s ,1H), 7.32 (d, 1H), 7.46 (dd, 1H), 7.66 (s, 1H).
【０１１８】
医薬組成物
ヒトにおける治療または予防的使用のための、本明細書に記載の本発明の代表的医薬製剤（活性成分を”化合物Ｘ”と呼ぶ）を以下に例示する：
（ａ）錠剤Ｉ                                                    ｍｇ／錠剤
化合物Ｘ..............................................................１００
ラクトースＰｈ．Ｅｕｒ...........................................１８２．７５
クロスカルメロースナトリウム........................................１２．０
トウモロコシデンプンペースト（５％ｗ／ｖペースト）...................２．２５
ステアリン酸マグネシウム..............................................３．０
（ｂ）錠剤ＩＩ                                                    ｍｇ／錠剤
化合物Ｘ................................................................５０
ラクトースＰｈ．Ｅｕｒ...........................................２２３．７５
クロスカルメロースナトリウム...........................................６．０
トウモロコシデンプン.................................................１５．０
ポリビニルピロリドン（５％ｗ／ｖペースト）...........................２．２５
ステアリン酸マグネシウム...............................................３．０
（ｃ）錠剤ＩＩＩ                                                ｍｇ／錠剤
化合物Ｘ..............................................................１．０
ラクトースＰｈ．Ｅｕｒ.............................................９３．２５
クロスカルメロースナトリウム..........................................４．０
トウモロコシデンプンペースト（５％ｗ／ｖペースト）..................０．７５
ステアリン酸マグネシウム..............................................１．０
（ｄ）カプセル剤                                          ｍｇ／カプセル剤
化合物Ｘ................................................................１０
ラクトースＰｈ．Ｅｕｒ............................................４８８．５
マグネシウム.........................................................１．５
（ｅ）注射剤Ｉ                                          （５０ｍｇ／ｍｌ）
化合物Ｘ.....................................................５．０％ｗ／ｖ
１Ｍ水酸化ナトリウム溶液...................................１５．０％ｖ／ｖ
０．１Ｍ塩酸（ｐＨを７．６に調節する）
ポリエチレングリコール４００.................................４．５％ｗ／ｖ
注射用蒸留水で１００％にする
（ｆ）注射剤ＩＩ                                            （１０ｍｇ／ｍｌ）
化合物Ｘ.......................................................１．０％ｗ／ｖ
リン酸ナトリウムＢＰ...........................................３．６％ｗ／ｖ
０．１Ｍ水酸化ナトリウム溶液.................................１５．０％ｖ／ｖ
注射用蒸留水で１００％にする
（ｇ）注射剤ＩＩＩ                            （１ｍｇ／ｍｌ，ｐＨ６に緩衝化）
化合物Ｘ.......................................................０．１％ｗ／ｖ
リン酸ナトリウムＢＰ.........................................２．２６％ｗ／ｖ
クエン酸.....................................................０．３８％ｗ／ｖ
ポリエチレングリコール４００...................................３．５％ｗ／ｖ
注射用蒸留水で１００％にする
（ｈ）エアゾール                                                  Ｉｍｇ／ｍｌ
化合物Ｘ............................................................１０．０
トリオレイン酸ソルビタン............................................１３．５
トリクロロフルオロメタン...........................................９１０．０
ジクロロジフルオロメタン...........................................４９０．０
（ｉ）エアゾールＩＩ                                                ｍｇ／ｍｌ
化合物Ｘ..............................................................０．２
トリオレイン酸ソルビタン..............................................０．２７
トリクロロフルオロメタン..............................................７０．０
ジクロロジフルオロメタン............................................２８０．０
ジクロロテトラフルオロエタン......................................１０９４．０
（ｊ）エアゾールＩＩＩ                                              ｍｇ／ｍｌ
化合物Ｘ..............................................................２．５
トリオレイン酸ソルビタン.............................................３．３８
トリクロロフルオロメタン.............................................６７．５
ジクロロジフルオロメタン..........................................１０８６．０
ジクロロテトラフルオロエタン........................................１９１．６
（ｋ）エアゾールＩＶ                                              ｍｇ／ｍｌ
化合物Ｘ...............................................................２．５
大豆レシチン...........................................................２．７
トリクロロフルオロメタン.............................................６７．５
ジクロロジフルオロメタン.........................................１０８６．０
ジクロロテトラフルオロエタン.......................................１９１．６
（ｌ）軟膏                                                              ｍｌ
化合物Ｘ............................................................４０ｍｇ
エタノール.........................................................３００μｌ
水.................................................................３００μｌ
１−ドデシルアザシクロヘプテン−２−オン.............................５０μｌ
プロピレングリコール.............................................１ｍｌにする
注
上記製剤は、医薬品業界に公知の慣用法で製造することができる。錠剤（ａ）〜（ｃ）は、慣用法により腸溶性コーティングすることができ、例えば酢酸フタル酸セルロースでコーティングすることができる。エアゾール製剤（ｈ）〜（ｋ）は、定量投与エアゾールディスペンサーと組み合わせて使用することができ、縣濁化剤であるトリオレイン酸ソルビタンおよび大豆レシチンは、モノオレイン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、ポリソルベート８０、オレイン酸ポリグリセロールまたはオレイン酸などの代替的な縣濁化剤で置き換えることができる。
【０１１９】
引用文献
1. Printz, R. L., Magnuson, M. A. and Granner, D. K. (1993) Annual Review of Nutrition 13, 463-96
2. DeFronzo, R. A. (1988) Diabetes 37, 667-87
3. Froguel, P., Zouali, H., Vionnet, N., Velho, G., Vaxillaire, M., Sun, F., Lesage, S., Stoffel, M., Takeda, J. and Passa, P. (1993) New England Journal of Medicine 328, 697-702
4. Bell, G. I., Pilkis, S. J., Weber, I. T. and Polonsky, K. S. (1996) Annual Review of Physiology 58, 171-86
5. Velho, G., Petersen, K. F., Perseghin, G., Hwang, J. H., Rothman, D. L., Pueyo, M. E., Cline, G. W., Froguel, P. and Shulman, G. I. (1996) Journal of Clinical Investigation 98, 1755-61
6. Christesen, H. B., Jacobsen, B. B., Odili, S., Buettger, C., Cuesta-Munoz, A., Hansen, T., Brusgaard, K., Massa, O., Magnuson, M. A., Shiota, C., Matschinsky, F. M. and Barbetti, F. (2002) Diabetes 51, 1240-6
7. Glaser, B., Kesavan, P., Heyman, M., Davis, E., Cuesta, A., Buchs, A., Stanley, C. A., Thornton, P. S., Permutt, M. A., Matschinsky, F. M. and Herold, K. C. (1998) New England Journal of Medicine 338, 226-30
8. Caro, J. F., Triester, S., Patel, V. K., Tapscott, E. B., Frazier, N. L. and Dohm, G. L. (1995) Hormone & Metabolic Research 27, 19-22
9. Desai, U. J., Slosberg, E. D., Boettcher, B. R., Caplan, S. L., Fanelli, B., Stephan, Z., Gunther, V. J., Kaleko, M. and Connelly, S. (2001) Diabetes 50, 2287-95
10. Shiota, M., Postic, C., Fujimoto, Y., Jetton, T. L., Dixon, K., Pan, D., Grimsby, J., Grippo, J. F., Magnuson, M. A. and Cherrington, A. D. (2001) Diabetes 50, 622-9
11. Ferre, T., Pujol, A., Riu, E., Bosch, F. and Valera, A. (1996) Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 93, 7225-30
12. Seoane, J., Barbera, A., Telemaque-Potts, S., Newgard, C. B. and Guinovart, J. J. (1999) Journal of Biological Chemistry 274, 31833-8
13. Moore, M. C., Davis, S. N., Mann, S. L. and Cherrington, A. D. (2001) Diabetes Care 24, 1882-7
14. Alvarez, E., Roncero, I., Chowen, J. A., Vazquez, P. and Blazquez, E. (2002) Journal of Neurochemistry 80, 45-53
15. Lynch, R. M., Tompkins, L. S., Brooks, H. L., Dunn-Meynell, A. A. and Levin, B. E. (2000) Diabetes 49, 693-700
16. Roncero, I., Alvarez, E., Vazquez, P. and Blazquez, E. (2000) Journal of Neurochemistry 74, 1848-57
17. Yang, X. J., Kow, L. M., Funabashi, T. and Mobbs, C. V. (1999) Diabetes 48, 1763-1772
18. Schuit, F. C., Huypens, P., Heimberg, H. and Pipeleers, D. G. (2001) Diabetes 50, 1-11
19. Levin, B. E. (2001) International Journal of Obesity 25
20. Alvarez, E., Roncero, I., Chowen, J. A., Thorens, B. and Blazquez, E. (1996) Journal of Neurochemistry 66, 920-7
21. Mobbs, C. V., Kow, L. M. and Yang, X. J. (2001) American Journal of Physiology - Endocrinology & Metabolism 281, E649-54
22. Levin, B. E., Dunn-Meynell, A. A. and Routh, V. H. (1999) American Journal of Physiology 276, R1223-31
23. Spanswick, D., Smith, M. A., Groppi, V. E., Logan, S. D. and Ashford, M. L. (1997) Nature 390, 521-5
24. Spanswick, D., Smith, M. A., Mirshamsi, S., Routh, V. H. and Ashford, M. L. (2000) Nature Neuroscience 3, 757-8
25. Levin, B. E. and Dunn-Meynell, A. A. (1997) Brain Research 776, 146-53
26. Levin, B. E., Govek, E. K. and Dunn-Meynell, A. A. (1998) Brain Research 808, 317-9
27. Levin, B. E., Brown, K. L. and Dunn-Meynell, A. A. (1996) Brain Research 739, 293-300
28. Rowe, I. C., Boden, P. R. and Ashford, M. L. (1996) Journal of Physiology 497, 365-77
29. Fujimoto, K., Sakata, T., Arase, K., Kurata, K., Okabe, Y. and Shiraishi, T. (1985) Life Sciences 37, 2475-82
30. Kurata, K., Fujimoto, K. and Sakata, T. (1989) Metabolism: Clinical & Experimental 38, 46-51
31. Kurata, K., Fujimoto, K., Sakata, T., Etou, H. and Fukagawa, K. (1986) Physiology & Behavior 37, 615-20