(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次に示す一般式（ＩＩ）に表される化合物からなる、アシルコエンザイムＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ活性阻害剤。
【化１】
0004585538.tif 000007
【請求項２】
一般式（ＩＩ）に表される化合物が、オスマンツシドＢ（化合物１）、イソシリンガライド３'−α−Ｌ−ラムノピラノシド（化合物２）又はオスマンツシドＤ（化合物３）である、請求項１記載のアシルコエンザイムＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ活性阻害剤。
【化２】
0004585538.tif 000008
【化３】
0004585538.tif 000009
【化４】
0004585538.tif 000010
【請求項３】
請求項１又は２記載のアシルコエンザイムＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ活性阻害剤から選ばれる１種以上を配合したアシルコエンザイムＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ活性阻害用の組成物（食品を除く）。
【請求項４】
形態が医薬品である請求項３記載の組成物。
【請求項５】
形態が化粧料である請求項３記載の組成物。
【請求項６】
用途が動脈硬化症又は動脈閉塞症の治療又は予防用である、請求項３又は４記載の組成物。
【請求項７】
用途が動脈アテロームの治療又は予防用である、請求項３又は４記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品や化粧品に有用なアシルコエンザイムＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ活性阻害剤及びそれを配合した組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
コレステロールは生体にとって重要な物質であり、このものは様々な酵素反応を介して色々な生体に必要な物質へと変換されている。従って、これらコレステロール関連物質の恒常性が崩れると様々な疾病の原因となる。かかるコレステロール関連物質の恒常性失調の疾患で近年最も問題になっているのは、アシルコエンザイムＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ活性（ＡＣＡＴ）の亢進に起因する動脈アテロームである。又、ＡＣＡＴの亢進により肌の脂質のバランスが崩れるとも言われている。
【０００３】
この様な疾病に対して、ＡＣＡＴ阻害作用を有する物質の投与が有効であることが見いだされ、トリメトキシフェニルドデカンアミドやアンドロステノン誘導体等の各種のＡＣＡＴ阻害剤が見いだされてきたが、細胞毒性やリポ蛋白、アポリポ蛋白の抑制などの好ましくない作用の為に、実用にはまだ至っていない。即ち、ＡＣＡＴ阻害作用を有する新たな物質が求められているのが現状である。
【０００４】
一方、後記一般式（ＩＩ）に示される化合物は既知物質であるが、これらの物質がＡＣＡＴ阻害作用を有していることは全く知られていなかった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明はこの様な状況を踏まえて為されたものであり、ＡＣＡＴ阻害作用を有する新たな物質を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記実状に鑑みて、本発明者らは各種漢方生薬についてＡＣＡＴ阻害作用を指標にスクリーニングを重ねた結果、苦丁茶の極性溶媒抽出物にその様な作用があることを見いだした。更に検討を重ねた結果、次に示す一般式（ＩＩ）に表される化合物がＡＣＡＴ阻害作用の有効物質の一つであることを見いだし発明を完成させた。以下、本発明について詳細に説明する。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、ＡＣＡＴ阻害作用を有する新たな物質が提供できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
【化１】
0004585538.tif 000002
【０００９】
（１）本発明のアシルコエンザイムＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ活性阻害剤（ＡＣＡＴ阻害剤）
本発明のＡＣＡＴ阻害剤は上記一般式（ＩＩ）に示される構造を有する化合物からなる。この様な化合物としては、例えば次に挙げるものが好適に例示できる。オスマンツシドＢ（化合物１）、イソシリンガライド３'−α−Ｌ−ラムノピラノシド（化合物２）又はオスマンツシドＤ（化合物３）である。
【００１０】
【化２】
0004585538.tif 000003
【００１１】
【化３】
0004585538.tif 000004
【００１２】
【化４】
0004585538.tif 000005
【００１３】
これらの化合物は、雲南苦丁茶（リグストラム プルプラセンス）又は四川苦丁茶（リグストラム ペドンクラレ）の植物体を極性溶媒で抽出し、シリカゲル、ＯＤＳ、イオン交換樹脂等を充填したカラムを用いて精製すれば容易に得ることが出来る。これらの植物体は中華材料店を通して入手することが出来る。植物体の使用部位としては、特段の限定はないが、入手がしやすく、本発明のコレステロールアシルトランスフェラーゼ活性阻害剤の含有量が多い、葉部を用いるのが好ましい。植物体よりこれらの化合物を得る方法であるが、抽出に用いる極性溶剤としては、水、メタノールやエタノール等のアルコール類、ジエチルエーテルやテトラヒドロフラン等のエーテル類、クロロホルムや塩化メチレン等のハロゲン化炭化水素類、アセトンやメチルエチルケトン等のケトン類、アセトニトリル等のニトリル類等が好適に例示できる。これらは一種を単独で用いても、二種以上を混合して用いても良い。最も好ましいものは、安全性上問題の少ない、水或いはアルコール類である。又、抽出の方法は、植物体、或いはその加工物に対して、１〜１０倍量の溶媒
を加え、室温であれば数日、沸点付近の温度であれば数時間浸漬すれば良い。必要に応じて攪拌を加えることもできる。この様な抽出物は濾過等で不溶物を除去した後、溶媒を溜去し、通常の方法に従って、カラムクロマトグラフィーで順次精製すれば、本発明のコレステロールアシルトランスフェラーゼ活性阻害剤を得ることが出来る。本発明のこれらの化合物は、中国の四川地方或いは雲南地方で日常飲料として用いている茶を原料にしている為、安全性が高く長期の連続投与が可能である。本発明のＡＣＡＴ阻害剤であるこれらの化合物の投与量は、食品或いは医薬組成物としての経口投与の場合１日成人１人当たり５〜５００ｍｇを数回に分けて投与するのが適当である。医薬組成物の注射剤として用いる場合は、１〜１００ｍｇが適当である。又、皮膚外用剤や化粧料として、皮膚、頭皮、毛髪に投与する場合は、０．０１〜１０重量％配合したものを適量、１日に一回ないしは数回塗布するのが好ましい。
【００１４】
（２）本発明の組成物（食品を除く）
本発明の組成物は、上記一般式（ＩＩ）に表される化合物から選ばれる一種以上を、配合されたことを特徴とする。これらの化合物を配合することによりＡＣＡＴを阻害し、コレステロールの恒常性の不調を正常に戻すことが出来る。即ち、血中のコレステロール量が多く高脂血症の人に医薬組成物として投与すれば血中のコレステロール量を低下せしめ、動脈硬化の人に医薬組成物として投与すればこれを改善し、動脈アテロームの人に医薬組成物として投与すればやはりこれを改善する。更に、未発症の人に同様に投与すれば、発症を未然に防ぐことが出来る。又、ＡＣＡＴの亢進により、脂性に偏った肌に塗布すれば、これを正常の状態に戻すことが出来る。
【００１５】
本発明の医薬組成物は、本発明のＡＣＡＴ阻害剤である、上記一般式（ＩＩ）に表される化合物と通常医薬組成物で用いられている製剤化の為の任意成分を含有する。任意成分としては、賦形剤、増量剤、結合剤、被覆剤、糖衣剤、安定剤、崩壊剤、着色剤、滑沢剤、ｐＨ調整剤、可溶化剤、分散剤、増粘剤、等張剤等が例示できる。これら任意成分と一般式（ＩＩ）の化合物を通常の方法により製剤化すれば本発明の医薬組成物が得られる。又、必要に応じて本発明の医薬組成物は、メバロチン等の高脂血症剤やクロロプロマジン等の循環器用薬を配合することも可能である。
【００１６】
本発明の化粧料は、ＡＣＡＴ阻害剤である、一般式（ＩＩ）の化合物と化粧料で通常用いられる任意成分を含有することを特徴とする。任意成分としては、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類、ホホバ油やゲイロウ等のエステル類、牛脂、オリーブ油等のトリグリセライド類、ステアリン酸、オレイン酸等の脂肪酸、セタノール、オレイルアルコール等の高級アルコール類、非イオン界面活性剤、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、多価アルコール類、防腐剤、紫外線吸収剤、抗酸化剤、ビタミン類、西洋、東洋、漢方の各種ハーブエキス等が例示できる。化粧料の種類としては、特段の限定はされず、例えば、化粧水、乳液、クリーム等の基礎化粧料、ファンデーションやリップカラー、ネイルカラー等のメークアップ化粧料、ボディーローションや汗抑え等のボディー用化粧料、石鹸やボディーシャンプー等の洗浄料、シャンプー、リンス、ヘアローション等の頭髪用化粧料等が挙げられる。これらの製造は通常の方法によれば良い。
【００１７】
以下に例を挙げて発明の実施の態様について説明するが、本発明がこれらの例のみに限定されないことは言うまでもない。
【００１８】
（参考使用例１）キャンディー
下記処方にしたがってキャンディーを作成した。即ち、Ａ成分を１５０℃で加熱溶解し１２０℃に冷却後、Ｂ成分を添加、攪拌後、均一としたものを成型、冷却してキャンディーとした。
Ａ
砂糖                                  ５９重量部
水飴                                  ３０重量部
Ｂ
クエン酸                                １重量部
化合物１                              １０重量部
【００１９】
（参考使用例２）キャンディー
下記処方にしたがってキャンディーを作成した。即ち、Ａ成分を１５０℃で加熱溶解し１２０℃に冷却後、Ｂ成分を添加、攪拌後、均一としたものを成型、冷却してキャンディーとした。
Ａ
砂糖                                  ５９重量部
水飴                                  ３０重量部
Ｂ
クエン酸                                １重量部
化合物２                              １０重量部
【００２０】
（参考使用例３）グミ
Ａ成分を１１０℃で加熱溶解させ、別途膨潤溶解させたＢ成分を添加し、更にＣ成分を流し込み攪拌し、型に流し込み一昼夜放置し、型から外してグミを得た。
Ａ
砂糖                                  ４０重量部
水飴                                  ４０重量部
Ｂ
ゼラチン                                ８重量部
水                                      ５重量部
Ｃ
クエン酸                                ２重量部
化合物３                                ５重量部
【００２１】
（参考使用例４）グミ
Ａ成分を１１０℃で加熱溶解させ、別途膨潤溶解させたＢ成分を添加し、更にＣ成分を流し込み攪拌し、型に流し込み一昼夜放置し、型から外してグミを得た。
Ａ
砂糖                                  ４０重量部
水飴                                  ４０重量部
Ｂ
ゼラチン                                ８重量部
水                                      ５重量部
Ｃ
クエン酸                                ２重量部
化合物２                                ５重量部
【００２２】
（参考使用例５）パン
下記の処方にしたがってパンを作成した。即ち、処方成分を全て秤込み、良く混練りし４０℃で１時間一次発酵させた後、１５分のベンチタイムをとり、成型し４０℃で４５分二次発酵させ、２３０℃のオーブンで蒸気入れをしながら２５分焼いてパンを得た。
強力粉                              ５００重量部
ドライイースト                        １０重量部
溶かしバター                          ５０重量部
塩                                      ８重量部
砂糖                                  １５重量部
３８℃のぬるま湯                    ３２０重量部
化合物１                              １０重量部
化合物２                              １０重量部
【００２３】
（例１）顆粒剤
下記の処方にしたがって顆粒剤を作成した。即ち、処方成分を秤量し、Ａ部をグラッド造粒装置に投入し低速で混合し、高速回転でＢ部を噴霧しながら造粒した。これを４０℃で４８時間送風乾燥し篩過して顆粒剤を得た。
Ａ
結晶セルロース                        ４０重量部
乳糖                                  ４０重量部
アルミニウムステアレート                ２重量部
ヒドロキシプロピルメチルセルロース      ８重量部
化合物１                              １０重量部
Ｂ
５０％エタノール水溶液                ２０重量部
【００２４】
（例２）顆粒剤
下記の処方にしたがって顆粒剤を作成した。即ち、処方成分を秤量し、Ａ部をグラッド造粒装置に投入し低速で混合し、高速回転でＢ部を噴霧しながら造粒した。これを４０℃で４８時間送風乾燥し篩過して顆粒剤を得た。
Ａ
結晶セルロース                        ４０重量部
乳糖                                  ４０重量部
アルミニウムステアレート                ２重量部
ヒドロキシプロピルメチルセルロース      ８重量部
化合物２                              １０重量部
Ｂ
５０％エタノール水溶液                ２０重量部
【００２５】
（例３）顆粒剤
下記の処方にしたがって顆粒剤を作成した。即ち、処方成分を秤量し、Ａ部をグラッド造粒装置に投入し低速で混合し、高速回転でＢ部を噴霧しながら造粒した。これを４０℃で４８時間送風乾燥し篩過して顆粒剤を得た。
Ａ
結晶セルロース                        ４０重量部
乳糖                                  ４０重量部
アルミニウムステアレート                ２重量部
ヒドロキシプロピルメチルセルロース      ８重量部
化合物１                                ５重量部
化合物２                                ５重量部
Ｂ
５０％エタノール水溶液                ２０重量部
【００２６】
（例４）顆粒剤
下記の処方にしたがって顆粒剤を作成した。即ち、処方成分を秤量し、Ａ部をグラッド造粒装置に投入し低速で混合し、高速回転でＢ部を噴霧しながら造粒した。これを４０℃で４８時間送風乾燥し篩過して顆粒剤を得た。
Ａ
結晶セルロース                        ４０重量部
乳糖                                  ４０重量部
アルミニウムステアレート                ２重量部
ヒドロキシプロピルメチルセルロース      ８重量部
化合物３                                ５重量部
メバロチン                              ５重量部
Ｂ
５０％エタノール水溶液                ２０重量部
【００２７】
（例５）化粧水
下記処方に従って化粧水を作成した。即ち、処方成分を秤量し、８０℃で加熱攪拌溶解し、冷却して化粧水を得た。
化合物１                            ０．１重量部
エタノール                          ８    重量部
１，３−ブタンジオール              ８    重量部
グリセリン                          ４    重量部
燐酸２水素１ナトリウム              ０．１重量部
ＰＯＥ（６０）硬化ヒマシ油          ０．１重量部
香料                                ０．１重量部
メチルパラベン                      ０．２重量部
水                                ７９．４重量部
【００２８】
（例６）ファンデーション
下記処方に従ってファンデーションを作成した。即ち、処方成分をニーダーに秤込み、８０℃で加熱混練りし、金皿に充填し加熱プレスして成型し、コンパクトにはめ込みファンデーションをえた。
水                                      ５重量部
化合物２                                １重量部
グリセリン                              ５重量部
ＰＯＥ（４）オレート                    １重量部
カルナウバワックス                      ５重量部
キャンデリラワックス                    ５重量部
マイクロクリスタリンワックス            ５重量部
ひまし油                              １０重量部
スクワラン                            １０重量部
ベンガラ                                １重量部
黄色酸化鉄                              ５重量部
酸化チタン                            １５重量部
セリサイト                            １２重量部
タルク                                ２０重量部
【００２９】
（例７）シャンプー
下記処方に従ってシャンプーを作成した。即ち、処方成分を秤込み、８０℃で加熱攪拌し可溶化し、冷却してシャンプーを得た。
ＰＯＥ（１０）ラウリル硫酸ナトリウム  １０重量部
ラウリル硫酸ナトリウム                  ５重量部
ラウリルベタインナトリウム              ５重量部
ラノリン                                １重量部
１，３−ブタンジオール                  ８重量部
エチルパラベン                      ０．１重量部
化合物３                            ０．５重量部
水                                ７０．４重量部
【００３０】
（例８）浴用剤
下記処方に従って浴用剤を作成した。即ち、処方成分をヘンシルミキサーに秤込み高速回転で混合し、浴用剤を得た。
硫酸ナトリウム                        ５０重量部
炭酸水素ナトリウム                    ４０重量部
化合物１                                ５重量部
化合物２                                ５重量部
【実施例】
【００３１】
＜実施例１＞
製造例雲南苦丁茶１００ｇに水１ｌを加え、９０℃で３時間加熱し、濾過により不溶物を除去し、これをダイアイオンＨＰ−２０（三菱化成製）を充填したカラムに流した。このカラムに水、２０％エタノール、エタノールを順次３ｌづつ流し吸着物を溶出させた。この内のエタノールのフラクションを溶媒溜去させた後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒；クロロホルム：メタノール＝１００：０→５０：５０）、ＯＤＳカラムを装着した分取高速液体クロマトグラフィー（溶出溶媒：３５％アセトニトリル水溶液及び５０％メタノール水溶液）で精製し、化合物１を２１０ｍｇ、化合物２を３００ｍｇ及び化合物３を３１０ｍｇ得た。
【００３２】
＜実施例２＞
ＡＣＡＴ活性阻害作用の測定化合物１、２及び３のＡＣＡＴ活性阻害作用を測定した。即ち、チューブに８０μＭのウシ血清アルブミン水溶液４μｌ、２ｍＭジチオスレイトール水溶液０．８μｌ、１５０ｍＭ燐酸２水素１カリウムバッファー（ｐＨ７．）８μｌ、１２０μｇ／８μｌのラット肝ミクロソーム水分散液８μｌ、１００μＭの［１−14Ｃ］オレオイルＣｏＡ水溶液５μｌ、水１５．２μｌ、検体（化合物１、２又は３の水溶液）４μｌを秤込み、３０℃で５分インキュベートし、メタノール２００μｌ、コレステリルオレート１００μｇ、［７−14Ｃ］コレステリルオレート２μｌ、ヘキサン９００μｌを順次加え混合した。ヘキサン相０．６ｍｌを採取し窒素ガスで乾固しクロロホルムに溶かし薄層クロマトグラフ板にスポットし石油エーテル：ジエチルエーテル：酢酸＝８５：１５：３で展開した。沃素でコレステリルオレートを発色させ、切りとり液体シンチレーターで放射線量を測定し生成したコレステリルオレート量を算出し、（コントロールのコレステリルオレート量−検体存在時のコレステリルオレート量）×１００／（コントロールのコレステリルオレート量）の式からＡＣＡＴ阻害値（％）を算出した。結果を表１に示す。これより本発明のＡＣＡＴ阻害剤はＡＣＡＴ阻害作用に優れることが判る。
【００３３】
【表１】
0004585538.tif 000006
【００３４】
＜実施例３＞
使用テスト脂性に悩む２０名のパネラーを用いて、例５の化粧水及び例５の化粧水中の化合物１を水に置き換えた比較化粧水について、それぞれを１週間ずつ使用して使用テス
トして貰った。どちらの方が脂性を改善したかを問うたところ、１０名が例５の化粧水と答え、８名が同程度と答え、２名が比較化粧水が良いと答えた。これより本発明の化粧料は脂性肌に対応していることが判る。