(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロマトグラフィ測定を行うための試験片であるクロマトグラフィ試験片を有し、該クロマトグラフィ試験片に添加される被検査物質を定性または定量測定するためのクロマトグラフィ測定装置において、
前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の、上表面、側面、及び下表面が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われており、その下流側端部は、開放された上表面を有するものであることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項２】
請求項１に記載のクロマトグラフィ測定装置において、
少なくとも、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側に位置する標識試薬が保持された標識試薬保持部から、クロマト下流側に位置する特異的タンパク質が固定化された特異的タンパク質固定化部までの測定領域が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項３】
請求項１または請求項２に記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記クロマトグラフィ試験片は、複数の多孔質性材料を積層または連結してなることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項４】
請求項１または請求項２に記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記クロマトグラフィ試験片は、単層の多孔質性材料よりなることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項５】
請求項４に記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記単層の多孔質性材料がニトロセルロースであることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項６】
請求項１乃至請求項５の何れかに記載のクロマトグラフィ測定装置において、
液体不透過性シート材によって覆われていないクロマト下流領域を、通気性材料によって覆ったことを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項７】
請求項６に記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記通気性材料が不織布などの任意の多孔質性薄膜材料であることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項８】
請求項６に記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記通気性材料が網状組織であることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項９】
請求項１乃至請求項５の何れかに記載のクロマトグラフィ測定装置において、
液体不透過性シート材によって覆われていないクロマト下流領域上に、任意の空間を形成する空間形成部を備えたことを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項１０】
請求項９に記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記空間形成部におけるクロマト下流領域の端部あるいは平行側面あるいは空間形成部上表面の任意の部位に、空気の流入が可能なように間隙部を備えることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項１１】
請求項９または請求項１０に記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記空間形成部が液体不透過性の材料で形成されていることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項１２】
請求項１乃至請求項１１の何れかに記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記クロマトグラフィ試験片は、抗原抗体反応を利用した免疫クロマトグラフィ試験片であることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項１３】
請求項１乃至請求項１２の何れかに記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記クロマトグラフィ試験片が、乾式分析要素であることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【請求項１４】
請求項１乃至請求項１３の何れかに記載のクロマトグラフィ測定装置において、
前記クロマトグラフィ試験片が、ワンステップの試験片であることを特徴とするクロマトグラフィ測定装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、被検査物質を定性または定量測定するためのクロマトグラフィ測定装置に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来、水質検査や尿検査などの液体試料の化学試験もしくは臨床試験を実施する方法として、抗原抗体反応などを利用したクロマトグラフィ測定が汎用されている。このクロマトグラフィ測定とは、混合物をその構成成分に応じて分離する方法をいい、クロマトグラフィ測定に用いられるクロマトグラフィ測定装置は、一般に液体試料を添加する試料添加部と、液体試料の浸透により移動可能な標識試薬が保持された標識試薬保持部と、標識試薬とともに流れてきた液体試料中の分析対象物と特異的に結合するタンパク質が固定化された特異的タンパク質固定化部と、特異的な結合反応が行われる反応層と、流れてきた試料を吸水する吸水部とからなり、これらの構成部材を順にプラスチック等で構成された支持体上に積層あるいは連結させて並べた状態で構成される。
【０００３】
次に、この一般的なクロマトグラフィ測定装置を用いたクロマトグラフィ測定について説明する。
液体試料を試料添加部に添加すると、次に標識試薬保持部の領域に達する。次に、該標識試薬保持部の領域に保持された標識試薬が、前記液体試料の浸透により溶解され、前記液体試料とともに反応層の領域に浸透する。反応層の領域上には、特異的タンパク質固定化部があり、前記液体試料中に分析対象物を含む場合は、特異的タンパク質固定化部に固定化された特異的タンパク質が、分析対象物と標識試薬との複合体に対して呈色または発色を伴う結合反応を起こし、目視的な検出方式によって判定を行なうことができる。一方、前記液体試料中に分析対象物を含まない場合には、結合反応は起こらず、呈色または発色も見られない。最終的に、前記液体試料は、クロマトグラフィ測定装置の下端領域に設けられた吸水部により吸収され、反応は終了する。
【０００４】
このように、従来のクロマトグラフィ測定装置を用いたクロマトグラフィ測定は、検査結果の判定が非常に容易であることから、用途範囲が広く、さまざまな分析対象物の検査に利用することが可能である。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、上述の従来のクロマトグラフィ測定装置を用いたクロマトグラフィ測定では、クロマト展開時に添加した液体試料中の水分が、クロマトグラフィ測定装置の上表面及び側面から自然蒸発するため、測定領域に流出する分析対象物の量が不均一になるとともに、一定時間中にクロマトグラフィ測定装置上を流れる液体試料の量と標識試薬の量が一定とならず、正確なクロマトグラフィ測定を行うことができなかった。
【０００６】
また、従来のクロマトグラフィ測定装置は、支持体上に試料添加部、標識試薬保持部、特異的タンパク質固定化部、反応層、吸水部の構成部材を積層または連結させたシートを試験片大に切断して作製するため、試験片大に切断する際に支持体上に積層または連結された部材が剥離する問題点を有していた。
【０００７】
さらに、従来のクロマトグラフィ測定装置を用いて正確なクロマトグラフィ測定を行なうためには、前述した試料添加部、標識試薬保持部、特異的タンパク質固定化部、反応層、吸水部の構成部材が必要不可欠であり、削除することは不可能とされていた。そのため、クロマトグラフィ測定装置の作製には一定のコストがかかり、コスト高を招いていた。
【０００８】
本発明は、かかる問題点を解消するためになされたものであり、クロマトグラフィ測定装置において、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、低コストで高感度・高性能なクロマトグラフィ測定装置を提供することを目的としている。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
これらの問題を解決するために、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、クロマトグラフィ測定を行うための試験片であるクロマトグラフィ試験片を有し、該クロマトグラフィ試験片に添加される被検査物質を定性または定量測定するためのクロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の部分が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とするものである。
【００１０】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の、上表面が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とするものである。
【００１１】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の、上表面、及び側面が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とするものである。
【００１２】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の、上表面、側面、及び下表面が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とするものである。
【００１３】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、少なくとも、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側に位置する標識試薬が保持された標識試薬保持部から、クロマト下流側に位置する特異的タンパク質が固定化された特異的タンパク質固定化部までの測定領域が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とするものである。
【００１４】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片は、複数の多孔質性材料を積層または連結してなることを特徴とするものである。
【００１５】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片は、単層の多孔質性材料よりなることを特徴とするものである。
【００１６】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記単層の多孔質性材料がニトロセルロースであることを特徴とするものである。
【００１７】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、液体不透過性シート材によって覆われていないクロマト下流領域を、通気性材料によって覆ったことを特徴とするものである。
【００１８】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記通気性材料が不織布などの任意の多孔質性薄膜材料であることを特徴とするものである。
【００１９】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記通気性材料が網状組織であることを特徴とするものである。
【００２０】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、液体不透過性シート材によって覆われていないクロマト下流領域上に、任意の空間を形成する空間形成部を備えたことを特徴とするものである。
【００２１】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記空間形成部におけるクロマト下流領域の端部あるいは平行側面あるいは空間形成部上表面の任意の部位に、空気の流入が可能なように間隙部を備えることを特徴とするものである。
【００２２】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記空間形成部が液体不透過性の材料で形成されていることを特徴とするものである。
【００２３】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片は、抗原抗体反応を利用した免疫クロマトグラフィ試験片であることを特徴とするものである。
【００２４】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片が、乾式分析要素であることを特徴とするものである。
【００２５】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片が、ワンステップの試験片であることを特徴とするものである。
【００２６】
【発明の実施の形態】
以下に、本発明の実施の形態について、図面を参照しながら説明する。
なお、ここで示す実施の形態はあくまでも一例であって、必ずしもこの実施の形態に限定されるものではない。
【００２７】
（実施の形態１）
以下に、本発明の実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置について、図１及び図２を用いて説明する。
図１は、本発明の実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置を示す図であり、図２は、該クロマトグラフィ測定装置の液体不透過性シート材を除いたクロマトグラフィ試験片である。
【００２８】
図１は、クロマトグラフィ試験片１に添加される被検査物質を定性または定量測定するためのクロマトグラフィ測定装置であり、前記クロマトグラフィ試験片１の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の部分が、液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆われている。
【００２９】
図２に示したクロマトグラフィ試験片１は、吸水性の大きい不織布などの多孔質性材料で構成され、液体試料を添加或いは塗布するための試料添加部２と、液体試料の浸透により移動可能な標識試薬が保持された標識試薬保持部３と、ニトロセルロースなどの多孔質性材料からなり、流れてきた液体試料中の分析対象物と特異的な結合反応が行われる反応層４と、反応層４の領域上に流れてきた液体試料中の分析対象物と特異的に結合するタンパク質が固定化された部位である特異的タンパク質固定化部５とからなる。
【００３０】
また、このクロマトグラフィ試験片１は、多孔質性材料からなる試料添加部２、反応層４の両部位がプラスチックなどで構成された支持体７上に積層または連結して構成され、当該多孔質性材料により構成された部材上に標識試薬保持部３、及び特異的タンパク質固定化部５が設けられた構造となっている。なお、本発明において、積層とは、異なる複数の材料が隣り合った部材とわずかでも重なり合った状態であることを示し、連結とは、異なる複数の材料が隣り合った部材と重なってはいないが密接した状態にあることを示す。
【００３１】
また、本発明にかかるクロマトグラフィ測定装置は、図１に示すクロマトグラフィ試験片１の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の部分が、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６により密着された状態で被覆されている。
【００３２】
なお、本発明において、任意の表面とは、好ましくは該クロマトグラフィ試験片１の上流側と下流側の二つの領域が同等かあるいは、下流側領域の方が広い状態を示すが、これ以外の状態でも何ら問題はない。
【００３３】
次に、本発明の実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置（図１参照。）を用いたクロマトグラフィ測定について説明する。
図１に示したクロマトグラフィ測定装置において、液体試料を試料添加部２に添加すると、次に標識試薬保持部３の領域に達する。次に、該標識試薬保持部３の領域に保持された標識試薬が、前記液体試料の浸透により溶解され、前記液体試料とともに反応層４の領域に浸透する。反応層４の領域上には、特異的タンパク質固定化部５があり、前記液体試料中に分析対象物を含む場合は、特異的タンパク質固定化部５に固定化された特異的タンパク質が、分析対象物と標識試薬との複合体に対して結合反応を起こし、特異的タンパク質固定化部５の領域に呈色反応が見られる。一方、前記液体試料中に分析対象物を含まない場合には、結合反応は起こらず、呈色反応も見られない。最終的に、前記液体試料はクロマトグラフィ試験片１の下端領域に浸透し、反応は終了する。
【００３４】
このとき、少なくとも、クロマトグラフィ試験片１の表面の、上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域を、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域での水分の蒸発を防ぐことができ、また、測定領域に浸透する液体試料の量を均一にし、さらに、一定時間に測定領域を流れる液体試料と標識試薬の濃度を一定にすることが可能となり、クロマトグラフィ測定を正確に行うことができる。
【００３５】
また、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域を液体不透過性シート材６で覆わないことにより、該クロマトグラフィ試験片１の下端の開放された領域である下端開放部に液体試料が浸透すると、徐々に水分が蒸発していく。前記下端開放部における液体試料の蒸発速度は、添加された液体試料の該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域への浸透速度に比べて速いため、液体試料は逆流することなく乾燥する。また、試料添加部２には液体試料が添加されており、該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域との水分割合を均等に保とうとして、前記液体試料は該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域へと展開され、反応層４では正確に反応が行われる。
【００３６】
以上のように、本実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置によれば、クロマトグラフィ試験片１の、その上流側と下流側の両端部以外の部分の表面の、少なくとも、標識試薬保持部３から特異的タンパク質固定化部５までの領域を、液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、展開された液体試料を、該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域において吸水性に富んだ部材を用いて吸水することなく、クロマト展開を行うことが可能となる。また、前記クロマトグラフィ試験片１は、試料添加部２と、標識試薬保持部３と、特異的タンパク質固定化部５と、反応層４とからなり、さらに、これらの構成部材を支持する支持体７を有するクロマトグラフィ測定装置としたことで、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、低コストで高感度・高性能なクロマトグラフィ測定装置を実現することができる。
【００３７】
なお、本発明のクロマトグラフィ測定装置において、反応層４上にある特異的タンパク質固定化部５の領域が一つの場合について説明したが、必ずしも一つである必要はなく、任意の数の特異的タンパク質固定化領域が反応層４の領域上に存在してもよい。また、クロマトグラフィ測定で用いられる反応成分として、特異的結合タンパク質を用いて説明したが、これに限定されず、例えば、酵素のように反応の前後において何らかの変化を生じる物質をクロマトグラフィ測定に用いる反応成分として用いてもよい。
【００３８】
また、支持体７の構成例として、プラスチックなどを例としてあげたが、ビニールテープやＰＥＴ（Polyethylene  Terephthalate）などの任意の液体不透過性材料が好ましい。また、試料添加部２、標識試薬保持部３、反応層４の構成例としてあげた不織布やニトロセルロースは一例であり、任意の多孔質性担体により構成されていても何ら問題はない。
【００３９】
また、本発明において、クロマトグラフィ測定装置を構成するクロマトグラフィ試験片１は、ニトロセルロースやガラス繊維濾紙のような、任意の複数の多孔質性材料を積層または連結して構成される。このような材料からなるクロマトグラフィ試験片１は、例えば、抗原抗体反応のような任意の測定原理を用いて、ある特定物質を分析検出し、定量することができる。また、水や水溶液、尿、血液、体液、固体及び粉体や気体を溶かした溶液などの液体試料を測定することができ、その用途としては、尿検査や妊娠検査、水質検査、便検査、土壌分析、食品分析などがある。
【００４０】
（実施の形態２）
以下に、本発明の実施の形態２にかかるクロマトグラフィ測定装置ついて、図３及び図４を用いて説明する。
図３は、本実施の形態２にかかるクロマトグラフィ測定装置を示す図であり、図４は、該クロマトグラフィ測定装置の液体不透過性シート材を除いたクロマトグラフィ試験片である。
【００４１】
図３は、クロマトグラフィ試験片１に添加される被検査物質を定性または定量測定するためのクロマトグラフィ測定装置であり、前記クロマトグラフィ試験片１の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の部分が、液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆われている。
【００４２】
図４は、液体試料添加部２を設けず、反応層４上に直接液体試料を添加或いは塗布することにより、クロマトグラフィ試験片の基本的な構成部材を反応層４のみの単層により構成する点においてのみ、図２を用いて説明した実施の形態１にかかるクロマトグラフィ試験片１と異なる。そのため、前述した実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置と同じ構成要素については、同じ符号を付し、説明を省略する。
【００４３】
次に、本発明の実施の形態２にかかるクロマトグラフィ測定装置（図３参照。）を用いたクロマトグラフィ測定について説明する。
図３に示したクロマトグラフィ測定装置において、液体試料を反応層４に添加すると、次に標識試薬保持部３の領域に達する。次に、該標識試薬保持部３の領域に保持された標識試薬が、前記液体試料の浸透により溶解され、前記液体試料とともに特異的タンパク質固定化部５の領域へ浸透する。前記液体試料中に分析対象物を含む場合は、特異的タンパク質固定化部５に固定化された特異的タンパク質が、分析対象物と標識試薬との複合体に対して結合反応を起こし、特異的タンパク質固定化部５の領域に呈色反応が見られる。一方、前記液体試料中に分析対象物を含まない場合には、結合反応は起こらず、呈色反応も見られない。最終的に、前記液体試料は、クロマトグラフィ試験片１の下端領域に浸透し、反応は終了する。
【００４４】
このとき、少なくとも、クロマトグラフィ試験片１の表面の、上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域を、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域での水分の蒸発を防ぐことができ、また、測定領域に浸透する液体試料の量を均一にし、さらに、一定時間に測定領域を流れる液体試料と標識試薬の濃度を一定にすることが可能となり、クロマトグラフィ測定を正確に行うことができる。
【００４５】
また、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域を液体不透過性シート材６で覆わないことにより、該クロマトグラフィ試験片１の下端の開放された領域である下端開放部に液体試料が浸透すると、徐々に水分が蒸発していく。前記下端開放部における液体試料の蒸発速度は、添加された液体試料の該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域への浸透速度に比べて速いため、液体試料は逆流することなく乾燥する。
【００４６】
さらに、反応層４上に直接液体試料を添加或いは塗布することにより、試料添加部２を設けることなく、クロマトグラフィ試験片１は、基本的な部材を反応層４のみの単層の多孔質性材料で構成することができるので、クロマトグラフィ測定装置を構成する構成部材数を削減することができる。また、単層の多孔質性材料がニトロセルロースで構成される場合には、液体試料の添加量は極微量で十分であり、検体微量化クロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【００４７】
以上のように、本実施の形態２によれば、試料添加部２を設けずに、単層の多孔質性材料よりなるクロマトグラフィ試験片１の、その上流側と下流側の両端部以外の部分の任意の表面を、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がないので、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、低コストで高感度・高性能なクロマトグラフィ測定装置を実現することができる。
【００４８】
なお、試料添加部２を設けずに、反応層４上に直接液体試料を添加或いは塗布するクロマトグラフィ測定装置について説明したが、反応層４は、多孔質性材料によって構成されているため液体試料の添加量は、極微量で十分に測定を行うことができる。
【００４９】
（実施の形態３）
以下に、前述した実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置において、クロマトグラフィ試験片１の液体不透過性シート材６による被覆状態について図５及び図６を用いて説明する。
【００５０】
図５及び図６は、図１におけるクロマトグラフィ測定装置の液体不透過性シート材６による被覆状態を説明するための図である。図５は、図１に示したクロマトグラフィ測定装置を液体試料の浸透方向（以下、クロマト方向と称する。）に対して平行に切断した切断図、図６は、図１に示したクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して垂直に切断した切断図である。
なお、前述した実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置と同じ構成要素については、同じ符号を付し、説明を省略する。
【００５１】
このとき、少なくとも、クロマトグラフィ試験片１の表面の、上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域の、上表面、及び側面を、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域での水分の蒸発を防ぐことができ、また、測定領域に浸透する液体試料の量を均一にし、さらに、一定時間に測定領域を流れる液体試料と標識試薬の濃度を一定にすることが可能となり、クロマトグラフィ測定を正確に行うことができる。
【００５２】
また、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域を液体不透過性シート材６で覆わないことにより、該クロマトグラフィ試験片１の下端の開放された領域である下端開放部に液体試料が浸透すると、徐々に水分が蒸発していく。前記下端開放部における液体試料の蒸発速度は、添加された液体試料の該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域への浸透速度に比べて速いため、液体試料は逆流することなく乾燥する。また、試料添加部２には液体試料が添加されており、該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域との水分割合を均等に保とうとして、前記液体試料は該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域へと展開され、反応層４では正確に反応が行われる。
【００５３】
以上のように、本実施の形態３にかかるクロマトグラフィ測定装置によれば、少なくとも、クロマトグラフィ測定装置の表面の、その上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域の上表面及び側面をプラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域における水分の蒸発を防ぐことができるので、クロマト展開が均一に行われ、クロマトグラフィ測定が正確に行われるとともに、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域に液体試料を吸収する吸水部を設ける必要性がないので、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、低コストで高感度・高性能なクロマトグラフィ測定装置を実現することができる。
【００５４】
なお、本実施の形態３では、前記実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置の液体不透過性シート材６による被覆状態について説明したが、前記実施の形態２にかかるクロマトグラフィ測定装置の上表面及び側面を液体不透過性シート材６により被覆したものについても本実施の形態３と同様の効果を得ることができる。
【００５５】
（実施の形態４）
以下に、前述した実施の形態１及び２にかかるクロマトグラフィ測定装置におけるクロマトグラフィ試験片１の液体不透過性シート材６による被覆状態について図７及び図８を用いて説明する。
【００５６】
図７及び図８は、図１に示したクロマトグラフィ測定装置の液体不透過性シート材６による被覆状態を説明するための図である。図７は、図１に示したクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して平行に切断した切断図、図８は、図１に示したクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して垂直に切断した切断図である。なお、前述した実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置と同じ構成要素については、同じ符号を付し、説明を省略する。
【００５７】
このとき、少なくとも、クロマトグラフィ試験片１の表面の、上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域の、上表面を、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域での水分の蒸発を防ぐことができ、また、測定領域に浸透する液体試料の量を均一にし、さらに、一定時間に測定領域を流れる液体試料と標識試薬の濃度を一定にすることが可能となり、クロマトグラフィ測定を正確に行うことができる。
【００５８】
また、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域を液体不透過性シート材６で覆わないことにより、該クロマトグラフィ試験片１の下端の開放された領域である下端開放部に液体試料が浸透すると、徐々に水分が蒸発していく。前記下端開放部における液体試料の蒸発速度は、添加された液体試料の該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域への浸透速度に比べて速いため、液体試料は逆流することなく乾燥する。また、試料添加部２には液体試料が添加されており、該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域との水分割合を均等に保とうとして、前記液体試料は該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域へと展開され、反応層４では正確に反応が行われる。
【００５９】
さらに、図８に示したように、液体不透過性シート材６は、クロマトグラフィ測定装置の上表面のみを密着された状態で被覆するため、クロマトグラフィ測定装置の作製時に液体不透過性シート材６をクロマトグラフィ試験片１の裏面まで巻き込む必要がなく、また、作製したクロマトグラフィシートをクロマトグラフィ試験片大に切断するときには、クロマトグラフィシート表面が液体不透過性シート材６により密着された状態で覆われているため切断時の部材の剥離を心配する必要もない。
【００６０】
以上のように、本実施の形態４にかかるクロマトグラフィ測定装置によれば、少なくとも、クロマトグラフィ測定装置の表面の、その上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域の上表面を、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域における水分の蒸発を防ぐことができるので、クロマト展開が均一に行われ、クロマトグラフィ測定が正確に行われるとともに、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域に液体試料を吸収する吸水部を設ける必要性がないので、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、低コストで高感度・高性能なクロマトグラフィ測定装置を実現することができる。
【００６１】
なお、本実施の形態４では、前記実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置の液体不透過性シート６による被覆状態について説明したが、前記実施の形態２にかかるクロマトグラフィ測定装置の表面を液体不透過性シート材６によって被覆したものについても本実施の形態４と同様の効果を得ることができる。
【００６２】
（実施の形態５）
以下に、本発明の実施の形態５にかかるクロマトグラフィ測定装置について、図９、図１０及び図１１を用いて説明する。
図９は、本発明の実施の形態５にかかるクロマトグラフィ測定装置を示す図である。また、図１０及び図１１は、図９に示したクロマトグラフィ測定装置の液体不透過性シート材６による被覆状態を説明するための図であり、図１０は、図９に示したクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して平行に切断した切断図、図１１は、図９に示したクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して垂直に切断した切断図である。
【００６３】
なお、図９に示すように本実施の形態５にかかるクロマトグラフィ測定装置は、液体不透過性シート材６によってクロマトグラフィ試験片１の上表面、側面、及び下表面を密着された状態で覆うため、支持体７を設ける必要性がない。つまり、本実施の形態５にかかるクロマトグラフィ測定装置の構成部材は、図１を用いて説明した実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置の構成部材と比較すると、支持体７を設けない点においてのみ異なる。従って、前述した実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置と同じ構成要素については、同じ符号を付し、説明を省略する。
【００６４】
次に、本発明の実施の形態５にかかるクロマトグラフィ測定装置（図９参照。）を用いたクロマトグラフィ測定について説明する。
図９に示したクロマトグラフィ測定装置において、液体試料を試料添加部２に添加すると、次に標識物保持部３の領域に達する。次に、該標識物保持部３の領域に保持された標識試薬が、前記液体試料の浸透により溶解され、前記液体試料とともに反応層４に浸透する。反応層４の領域上には、特異的タンパク質固定化部５があり、前記液体試料中に分析対象物を含む場合は、特異的タンパク質固定化部５に固定化された特異的タンパク質が、分析対象物と標識試薬との複合体に対して結合反応を起こし、特異的タンパク質固定化部５の領域に呈色反応が見られる。一方、前記液体試料中に分析対象物を含まない場合には、結合反応は起こらず、呈色反応も見られない。最終的に、前記液体試料はクロマトグラフィ試験片の下端領域に浸透し、反応は終了する。
【００６５】
このとき、少なくとも、クロマトグラフィ試験片１の表面の、上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域の、上表面、側面、及び下表面を、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域での水分の蒸発を防ぐことができ、また、測定領域に浸透する液体試料の量を均一にし、さらに、一定時間に測定領域を流れる液体試料と標識試薬の濃度を一定にすることが可能となり、クロマトグラフィ測定を正確に行うことができる。
【００６６】
また、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域を液体不透過性シート材６で覆わないことにより、該クロマトグラフィ試験片１の下端の開放された領域である下端開放部に液体試料が浸透すると、徐々に水分が蒸発していく。前記下端開放部における液体試料の蒸発速度は、添加された液体試料の該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域への浸透速度に比べて速いため、液体試料は逆流することなく乾燥する。また、試料添加部２には液体試料が添加されており、該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域との水分割合を均等に保とうとして、前記液体試料は該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域へと展開され、反応層４では正確に反応が行われる。
さらに、液体不透過性シート材６は支持体７の役割を兼ね備えているため、クロマトグラフィ測定装置を構成する構成部材数を削減できる。
【００６７】
以上のように、本実施の形態５にかかるクロマトグラフィ測定装置によれば、クロマトグラフィ試験片１の、上流側と下流側の両端部以外の部分の任意の表面をプラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域における水分の蒸発を防ぐことができるのでクロマト展開が均一に行われ、クロマトグラフィ測定が正確に行われるとともに、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域に液体試料を吸収する吸水部を設ける必要性がない。さらに、液体不透過性シート材６によってクロマトグラフフィ試験片１の、上表面、側面及び下表面を密着された状態で覆うことにより、支持体７を設ける必要性がないので、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、低コストで高感度・高性能なクロマトグラフィ測定装置を実現することができる。
【００６８】
なお、本実施の形態５では、前記実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置のクロマトグラフィ試験片１の構成を用いて説明したが、前記実施の形態２において説明した基本的な部材を反応層４のみの単層により構成したクロマトグラフィ試験片１についても本実施の形態５と同様の効果を得ることができる。
【００６９】
（実施の形態６）
以下に、本発明の実施の形態６にかかるクロマトグラフィ測定装置について、図１２を用いて説明する。
図１２は、本発明の実施の形態６にかかるクロマトグラフィ測定装置を示す図である。
【００７０】
図１２は、グロマトグラフィ試験片１に添加される被検査物質を定性または定量測定するためのクロマトグラフィ測定装置であり、前記クロマトグラフィ試験片１の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の部分が、液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆われている。
【００７１】
図１２に示すように、本発明の実施の形態６によるクロマトグラフィ測定装置は、液体不透過性シート６で覆われていないクロマト下流領域を通気性材料８により覆った点においてのみ、図１を用いて説明した実施の形態1によるクロマトグラフィ測定装置と異なる。そのため、前述した実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置と同じ構成要素については、同じ符号を付し、説明を省略する。
通気性材料８は、微細孔を持つメッシュ状の材料であればなんでもよく、好ましくは、吸水性の悪い材質のものが良い。
【００７２】
次に、本発明の実施の形態６にかかるクロマトグラフィ測定装置を用いたクロマトグラフィ測定について説明する。
図１２に示したクロマトグラフィ測定装置において、液体試料を試料添加部２に添加すると、次に標識試薬保持部３の領域に達する。次に、該標識試薬保持部３の領域に保持された標識試薬が、前記液体試料の浸透により溶解され、前記液体試料とともに反応層４の領域に浸透する。反応層４の領域上には、特異的タンパク質固定化部５があり、前記液体試料中に分析対象物を含む場合は、特異的タンパク質固定化部５に固定化された特異的タンパク質が、分析対象物と標識試薬との複合体に対して結合反応を起こし、特異的タンパク質固定化部５の領域に呈色反応が見られる。一方、前記液体試料中に分析対象物を含まない場合には、結合反応は起こらず、呈色反応も見られない。最終的に、前記液体試料はクロマトグラフィ試験片の下端領域に浸透し、反応は終了する。
【００７３】
このとき、少なくともクロマトグラフィ試験片１の表面の、上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域をプラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域での水分の蒸発を防ぐことができ、また、測定領域に浸透する液体試料の量を均一にし、更に一定時間に測定領域を流れる液体試料と標識試薬の濃度を一定にすることが可能となり、クロマトグラフィ測定を正確に行うことができる。
【００７４】
また、クロマトグラフィ試験片１の下流領域を液体不透過性シート材６で覆わず、通気性材料８で覆ったことにより、該クロマトグラフィ試験片１の下端領域に液体試料が浸透すると、徐々に水分が蒸発していく。前記下端領域における液体試料の蒸発速度は、添加された液体試料の該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域への浸透速度に比べて速いため、液体試料は逆流することなく乾燥する。前記通気性材料は、不織布などの任意の多孔質性薄膜材料であってもよく、この多孔質性薄膜材料は、多孔質のため通気性に優れており、厚さが１ｍｍ以下で、それ自体がもつ吸水性は低いものが好ましい。また、前記通気性材料が、網状組織であってもよく、ここで示す網状組織とは、繊維あるいは樹脂成型加工によって網目状に形成されたものを示し、それ自体の毛管活性または吸収性の有無は問題としない。この時の網目形状は、多辺形であればどの様な形状をとっていてもよく、その大きさは問わないが、網目が規則正しく配列されていることが好ましい。また、この網状組織は、好ましくは単層であることがよい。
【００７５】
また、試料添加部２には液体試料が添加されており、該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域との水分割合を均等に保とうとして、前記液体試料は該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域へと展開され、反応層４では正確に反応が行われる。
【００７６】
更に、図１２に示したように、通気性材料８はクロマト下流領域を覆っているため、試料添加部２が人目で見分けられるばかりでなく、下流領域の反応層４を直接手で触れることができない。その為、手に付着した物質により反応層４を汚染する恐れがなく、汚染によって生じる反応層４の吸水性悪化も懸念しなくて良いばかりか、液体試料が手に付着する恐れもないので、安全かつ衛生的に測定することができる。
【００７７】
以上のように、本実施の形態６にかかるクロマトグラフィ測定装置によれば、少なくとも、クロマトグラフィ測定装置の表面のその上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域を、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域における水分の蒸発を防ぐことができるので、クロマト展開が均一に行われ、クロマトグラフィ測定が正確に行われる。さらに、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域を通気性材料８で覆うことにより、水分蒸発を促すばかりでなく、試料添加部２を容易に見分けられ、汚染物質による反応層の吸水性悪化を防ぐことが可能となる。これにより、液体試料が手に付着することがなく、より安全かつ衛生的に使用可能な、低コストで高感度・高性能なクロマトグラフィ測定装置を実現することができる。
【００７８】
なお、本発明のクロマトグラフィ測定装置において、通気性材料８が下流領域を覆った場合について説明したが、前記実施の形態３から５で説明した下流領域の上表面及び側面を通気性材料８により覆ったものや、表面のみを通気性材料８により覆ったもの、或は、上表面、側面及び下表面を通気性材料８により覆ったもの等、通気性材料８が下流領域に存在すればいずれの形態を用いても良い。
【００７９】
また、本実施の形態６では、前記実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置のクロマトグラフィ試験片１の構成を用いて説明したが、前記実施の形態２において説明した基本的な部材を反応層４のみの単層により構成したクロマトグラフィ試験片１についても本実施の形態６と同様の効果を得ることができる。
【００８０】
（実施の形態７）
以下に、本発明の実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置について、図１３、図１４、図１５、図１６、図１７、図１８を用いて説明する。
図１３、図１６、図１７は、本発明の実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置を示す図であり、図１４と図１５は図１３に示すクロマトグラフィー測定装置をクロマト方向に対して垂直方向に切断した断面をクロマト下流方向から見た図である。また、図１８は図１６に示すクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して平行方向に切断した断面図である。
【００８１】
図１３、図１６、図１７は、クロマトグラフィ試験片１に添加される被検査物質を定性または定量測定するためのクロマトグラフィ測定装置であり、前記クロマトグラフィ試験片１の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の部分が、液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆われている。
【００８２】
図１３、図１６、図１７に示すように、本発明の実施の形態７によるクロマトグラフィ測定装置は、液体不透過性シート材６で覆われていないクロマト下流領域を空間形成材９により覆った点においてのみ、図１を用いて説明した実施の形態１によるクロマトグラフィ測定装置と異なる。そのため、前述した実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置と同じ構成要素については、同じ符号を付し、説明を省略する。
【００８３】
空間形成材９は、任意の液体不透過性の材料であり、透明あるいは半透明・不透明いずれの状態でもよいが、反応層４上に空間を形成し、維持できるだけの強度を備えた材料であることが好ましい。このとき、空間形成材９は、図１８に示すように、液体不透過性シート材６の端部と積層するように形成したり、或は、図示していないが、液体不透過性シート材６と連結するように形成してもよい。
【００８４】
空間形成部１１は、空間形成材９によって形成された空間であり、反応層４と任意の間隔をもち、空気の流入が可能な状態であることが好ましい。
間隙部１０は、図１３に示すようにクロマト下流末端に備えたり、図１６に示すようにクロマト平行側面に備える、あるいは図１７に示すように空間形成部１１表面上に備えるなど、空間形成材９の任意の部位に任意の数を備えても何ら支障はない。なお、ここで示す間隙部は、一つまたはそれ以上の任意の数で何ら問題はない。
【００８５】
次に、本発明の実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置を用いたクロマトグラフィ測定について説明する。
図１３及び図１６、図１７に示したクロマトグラフィ測定装置において、液体試料を試料添加部２に添加すると、次に標識試薬保持部３の領域に達する。次に、該標識試薬保持部３の領域に保持された標識試薬が、前記液体試料の浸透により溶解され、前記液体試料とともに反応層４の領域に浸透する。反応層４の領域上には、特異的タンパク質固定化部５があり、前記液体試料中に分析対象物を含む場合は、特異的タンパク質固定化部５に固定化された特異的タンパク質が、分析対象物と標識試薬との複合体に対して結合反応を起こし、特異的タンパク質固定化部５の領域に呈色反応が見られる。一方、前記液体試料中に分析対象物を含まない場合には、結合反応は起こらず、呈色反応も見られない。最終的に、前記液体試料はクロマトグラフィ試験片の下端領域に浸透し、反応は終了する。
【００８６】
このとき、少なくともクロマトグラフィ試験片１の表面の、上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域をプラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域での水分の蒸発を防ぐことができ、また、測定領域に浸透する液体試料の量を均一にし、更に一定時間に測定領域を流れる液体試料と標識試薬の濃度を一定にすることが可能となり、クロマトグラフィ測定を正確に行うことができる。
【００８７】
また、クロマトグラフィ試験片１の下流領域を液体不透過性シート材６で覆わず、空間形成材９で覆ったことにより、該クロマトグラフィ試験片１の下端領域に液体試料が浸透すると、徐々に水分が蒸発していく。空間形成材９には間隙部１０を有することで、前記下端領域における液体試料の蒸発速度は、添加された液体試料の該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域への浸透速度に比べて速いため、液体試料は逆流することなく乾燥する。また、試料添加部２には液体試料が添加されており、該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域との水分割合を均等に保とうとして、前記液体試料は該クロマトグラフィ試験片１の下流側領域へと展開され、反応層４では正確に反応が行われる。
【００８８】
更に、図１３及び図１６、図１７に示したように、空間形成材９はクロマト下流領域を覆っているため、試料添加部２が目視で見分けられるばかりでなく、下流領域の反応層４を直接手で触れることができない。その為、手に付着した物質により反応層４を汚染する恐れがなく、汚染によって生じる反応層４の吸水性悪化も懸念しなくて良いばかりでなく、液体試料が手に付着する恐れもないので、安全かつ衛生的に測定することができる。
【００８９】
以上のように、本実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置によれば、少なくとも、クロマトグラフィ測定装置の表面のその上流側に位置する標識試薬保持部３から、下流側に位置する特異的タンパク質固定化部５までの測定領域を、プラスチックテープなどからなる液体不透過性シート材６によって密着された状態で覆うことにより、該測定領域における水分の蒸発を防ぐことができるので、クロマト展開が均一に行われ、クロマトグラフィ測定が正確に行われる。さらに、クロマトグラフィ試験片１の下流側領域を空間形成材９で覆うことにより、水分蒸発を促すばかりでなく、試料添加部２を容易に見分けられ、汚染物質による反応層の吸水性悪化を防ぐことが可能となる。これにより、液体試料が手に付着することがなく、より安全かつ衛生的に使用可能な、低コストで高感度・高性能なクロマトグラフィ測定装置を実現することができる。
【００９０】
なお、本発明のクロマトグラフィ測定装置において、空間形成材９が下流領域を覆った場合について説明したが、具体的には、図１４に示すように、反応層４の表面に空間形成材９を形成するようにしてもよい。また、図１５に示すように、クロマトグラフィ測定装置の上表面及び側面に空間形成材９を形成する、あるいは、図示していないが、上表面、側面及び下表面に空間形成材９を形成する等、空間形成材９が下流領域に存在すればいずれの形態を用いても良い。
【００９１】
また、本実施の形態７では、前記実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置のクロマトグラフィ試験片１の構成を用いて説明したが、前記実施の形態２において説明した基本的な部材を反応層４のみの単層により構成したクロマトグラフィ試験片１についても本実施の形態７と同様の効果を得ることができる。
【００９２】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、その試験片が乾式分析要素であってもよい、ここで示す乾式分析要素とは、試験片を構成する試料添加部、反応層、吸水部などの部材がすべて乾燥状態にあり、これらの部材上に担持あるいは固定化されている試料試薬や特異的タンパク質などの試薬類も乾燥状態で構成されている試験片を示す。このように試験片を乾燥状態にすることにより、タンパク質などの変性を最低限抑えることができ、長期間の保存が可能である。
【００９３】
また、本発明のクロマトグラフィ測定装置は、ワンステップの試験片を有するものであってもよい。ここで示すワンステップとは、その測定操作において、試料溶液の前処理を必要とせず、試験片に試料溶液を点着するのみで、点着後に展開溶液を用いて試料溶液を展開したり、洗浄操作を行うなどを必要としない操作であるので、簡便に測定を行うことができる。
【００９４】
【実施例】
以下の実施例により、本発明を実施する方法をさらに詳細に説明する。なお、本発明は、以下の実施例になんら制約されるものではない。
（尿中ｈＣＧの定性）
ニトロセルロース膜中に抗ｈＣＧ−β抗体固定化ライン、及び抗ｈＣＧ−α抗体と金コロイドとの複合体の広いバンドを含む免疫クロマトグラフィ測定装置を製造した。このクロマトグラフィ測定装置を図１に示す。図中、クロマトグラフィ測定装置は、抗体が固定化された特異的タンパク質固定化部５と、それよりも前にある抗ｈＣＧ−α抗体と金コロイドとの複合体が含有された領域である標識試薬保持部３と、試料添加部２とを含む。
これらのクロマトグラフィ測定装置は、次のようにして製造した。
【００９５】
ａ）クロマトグラフィ測定装置の調製
リン酸緩衝溶液にて希釈して濃度調整をした抗ｈＣＧ−β抗体溶液を準備した。この抗体溶液を溶液吐出装置を用いて、ニトロセルロース膜上に塗布することにより、膜上に検出用の抗体固定化ラインが得られた。この膜を乾燥後、１％スキムミルクを含有するＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液中に浸漬して３０分間緩やかに振った。３０分後、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽に膜を移動し、１０分間緩やかに振った後に、別のＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝溶液槽にて更に１０分間緩やかに振り、膜の洗浄を行なった。２度洗浄を行った後に、膜を液槽から取り出して、室温で乾燥させた。
【００９６】
金コロイドは、０．０１％塩化金酸の還流中の１００℃溶液に１％クエン酸溶液を加えることによって調製した。還流を３０分間続けた後に、室温放置にて冷却した。０．２Ｍの炭酸カリウム溶液によって、ｐＨ９に調製した前記金コロイド溶液に、抗ｈＣＧ−α抗体を加えて数分間攪拌した後に、ｐＨ９の１０％ＢＳＡ（牛血清アルブミン）溶液を最終１％になる量だけ加えて攪拌することにより、抗体−金コロイド複合体（標識抗体）を調製した。前記標識抗体溶液を４℃、２００００Ｇで５０分間遠心分離することによって、標識抗体を単離して、それを洗浄緩衝液（１％ＢＳＡ・リン酸緩衝液）中に懸濁した後に、再度遠心分離を行って、標識抗体を洗浄単離した。この標識抗体を洗浄緩衝液で懸濁して、０．８μｍのフィルタを用いて濾過した後に、当初の金コロイド溶液量の１０分の１に調製して、４℃で貯蔵した。
【００９７】
前記標識抗体溶液を溶液吐出装置にセットして、抗ｈＣＧ−β抗体固定化乾燥膜上の抗体固定化位置から離れた位置に塗布した後に、膜を乾燥させた。これによって、抗体固定化膜上に標識抗体保持部３を持つクロマトグラフィ試験片１が得られた。
そして、このクロマトグラフィ試験片１を支持体７に貼り付けた後、クロマトグラフィ試験片１の、上流端部から１．５ｃｍ離れた位置から、下流端部から１．０ｃｍ離れた位置まで、透明テープ（Ｐ．Ｐテープ：日東電工製）にて反応層表面を密着された状態で覆うことによりクロマトグラフィ測定装置を得る。
【００９８】
ｂ）試料の調製
ｈＣＧを含まない人男性尿を用意した。この尿中に一定濃度のｈＣＧ溶液を加えることにより、さまざまな既知濃度のｈＣＧ溶液を調製した。
【００９９】
ｃ）クロマトグラフィ測定装置上の呈色度合の測定
クロマトグラフィ測定装置上の試料添加部にｈＣＧを含む尿を４０μｌ程度添加して、クロマトグラフィ試験片１の下流側へと展開処理して、抗原抗体反応をさせて抗体固定化部における呈色反応を行った。この測定装置への試料添加から５分後の呈色状況を目視にて判定した。
【０１００】
その結果、試料のクロマト展開は逆流することなく、順調に展開され、ｈＣＧの存在に伴う呈色反応が確認できた。
なお、本実施例においては、金コロイドを標識試薬として用いているが、呈色可能な標識試薬であれば、いかなる標識物を用いても良い。
また、本実施例におけるクロマトグラフィ測定装置は、上述のように、ニトロセルロースのような、任意の多孔質性材料を積層または連結して構成される試験片を用いたものである。このような材料からなる試験片は、例えば、抗原抗体反応のような任意の測定原理を用いて、ある特定物質を分析検出し、定性または定量することができる。
【０１０１】
【発明の効果】
以上のように、本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、クロマトグラフィ測定を行うための試験片であるクロマトグラフィ試験片を有し、該クロマトグラフィ試験片に添加される被検査物質を定性または定量測定するためのクロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の部分が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とした。従って、添加された液体試料は、毛細管現象によりクロマト下流方向へ浸透してゆき、液体不透過性シート材で覆われた領域では、水分蒸発が行われることがなく、液体試料が開放部に達すると試料の水分蒸発が進み乾燥する。一方、試料添加部では、液体試料が保持されているため、液体試料は逆流することなくクロマト下流方向へと展開される。これにより、液体試料の浸透方向と浸透状況を均一にし、また一定時間に流れる液体試料と標識試薬が均一な濃度で流出することが可能となるばかりでなく、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１０２】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の、上表面が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とした。従って、添加された液体試料は、毛細管現象によりクロマト下流方向へ浸透してゆき、液体不透過性シート材で密着された状態で覆われた領域では、水分蒸発が行われることがなく、液体試料が開放部に達すると試料の水分蒸発が進み乾燥する。一方、試料添加部では、液体試料が保持されているため、液体試料は逆流することなくクロマト下流方向へと展開される。また、クロマトグラフィ測定装置の表面のみを液体不透過性シート材により被覆するため、クロマトグラフィ測定装置作製時に液体不透過性シート材をクロマトグラフィ試験片の裏面まで巻き込む必要がなく、また、作製したクロマトグラフィシートをクロマトグラフィ試験片大に切断するときには、クロマトグラフィシート表面が液体不透過性シート材により密着された状態で覆われているため切断時の部材の剥離を心配する必要もない。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１０３】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の、上表面、及び側面が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とした。従って、添加された液体試料は、毛細管現象によりクロマト下流方向へ浸透してゆき、液体不透過性シート材で密着された状態で覆われた領域では、水分蒸発が行われることがなく、液体試料が開放部に達すると試料の水分蒸発が進み乾燥する。一方、試料添加部では、液体試料が保持されているため、液体試料は逆流することなくクロマト下流方向へと展開される。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１０４】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側とクロマト下流側の両端領域以外の、上表面、側面、及び下表面が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とした。従って、添加された液体試料は、毛細管現象によりクロマト下流方向へ浸透してゆき、液体不透過性シート材で密着された状態で覆われた領域では、水分蒸発が行われることがなく、液体試料が開放部に達すると試料の水分蒸発が進み乾燥する。一方、試料添加部では、液体試料が保持されているため、液体試料は逆流することなくクロマト下流方向へと展開される。また、液体不透過性シート材が反応層支持体の役割を兼ね備えることもでき、クロマトグラフィ測定装置を構成する構成要素数の削減が計れる。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１０５】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、少なくとも、前記クロマトグラフィ試験片の、クロマト上流側に位置する標識試薬が保持された標識試薬保持部から、クロマト下流側に位置する特異的タンパク質が固定化された特異的タンパク質固定化部までの測定領域が、液体不透過性シート材により密着された状態で覆われていることを特徴とした。従って、試薬保持領域から特異的タンパク質保持領域の間では、添加された液体試料は反応を行いながら、毛細管現象によりクロマト下流方向へ浸透してゆき、液体不透過性シート材で密着された状態で覆われた領域では、水分蒸発が行われることがなく、液体試料が開放部に達すると試料の水分蒸発が進み乾燥する。一方、試料添加部では、液体試料が保持されているため、液体試料は逆流することなくクロマト下流方向へと展開される。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１０６】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片は、複数の多孔質性材料を積層または連結してなることを特徴とした。従って、添加された液体試料は、毛細管現象によりクロマト下流方向へ浸透してゆき、液体不透過性シート材で密着された状態で覆われた領域では、水分蒸発が行われることがなく、液体試料が開放部に達すると試料の水分蒸発が進み乾燥する。一方、試料添加部では、液体試料が保持されているため、液体試料は逆流することなくクロマト下流方向へと展開される。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１０７】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片は、単層の多孔質性材料よりなることを特徴とした。従って、添加された液体試料は、毛細管現象によりクロマト下流方向へ浸透してゆき、液体不透過性シート材で密着された状態で覆われた領域では、水分蒸発が行われることがなく、液体試料が開放部に達すると試料の水分蒸発が進み乾燥する。一方、試料添加部では、液体試料が保持されているため、液体試料は逆流することなくクロマト下流方向へと展開される。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなる。また、クロマトグラフィ試験片を構成する基本的な部材は単層であるため、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１０８】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記単層の多孔質性材料がニトロセルロースであることを特徴とした。従って、添加する液体量は極微量で十分であるばかりでなく、添加された液体試料は、毛細管現象によりクロマト下流方向へ浸透してゆき、液体不透過性シート材で密着された状態で覆われた領域では、水分蒸発が行われることがなく、液体試料が開放部に達すると試料の水分蒸発が進み乾燥する。一方、試料添加部では、液体試料が保持されているため、液体試料は逆流することなくクロマト下流方向へと展開されるという効果が、より効率よく行われる。これにより、必要とされてきた試料を吸収する吸水部を下流領域に設ける必要性がなくなる。また、クトマトグラフィ試験片を構成する基本的な部材は、単層であるため、構成部材の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、従来と同等以上の高感度・高性能な低コスト、検体微量化クロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１０９】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、液体不透過性シート材によって覆われていないクロマト下流領域を、通気性材料によって覆ったことを特徴とした。従って、添加された液体試料は、毛細管現象によりクロマト下流方向へ浸透してゆき、液体不透過性シート材で密着された状態で覆われた領域では水分蒸発が行われることがなく、液体試料が通気性材料で覆われた下流領域に達すると、試料の水分蒸発が進み乾燥する。一方、試料添加部では、液体試料が保持されているため、液体試料は逆流することなくクロマト下流方向へと展開される。また、下流領域を通気性材料で覆ったことにより、露出された反応層を直接手で触れることが出来ないため、手に付着した物質により反応層が汚染されることがなく、吸水性が維持される。また、試験片の下流領域を手で触った場合でも、液体試料が手に付着する事がない。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成材料の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、より安全かつ衛生的に使用可能な、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１１０】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記通気性材料が不織布などの任意の多孔質性薄膜材料であることを特徴とした。従って、通気性に優れた薄膜材料であるためそれ自体の吸水力が乏しく、液体試料が下流領域に達すると、試料の水分蒸発が進み乾燥することが可能であるばかりか、下流領域を通気性材料で覆ったことにより、露出された反応層を直接手で触れることが出来ないため、手に付着した物質により反応層が汚染されることがなく、吸水性が維持される。また、試験片の下流領域を手で触った場合でも、液体試料が手に付着する事がない。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成材料の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、より安全かつ衛生的に使用可能な、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１１１】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記通気性材料が網状組織であることを特徴とした。従って、網状組織であるため通気性に優れている一方でそれ自体の吸水力が乏しく、液体試料が下流領域に達すると、試料の水分蒸発が進み乾燥することが可能であるばかりか、下流領域を通気性材料で覆ったことにより、露出された反応層を直接手で触れることが出来ないため、手に付着した物質により反応層が汚染されることがなく、吸水性が維持される。また、試験片の下流領域を手で触った場合でも、液体試料が手に付着する事がない。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成材料の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、より安全かつ衛生的に使用可能な、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１１２】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、液体不透過性シート材によって覆われていないクロマト下流領域上に、任意の空間を形成する空間形成部を備えたことを特徴とした。従って、下流領域に空間形成部を備えたことにより、露出された反応層を直接手で触れることが出来ないため、手に付着した物質により反応層が汚染されることがなく、吸水性が維持される。また、試験片の下流領域を手で触った場合でも、液体試料が手に付着する事がない。また、下流領域には空間が形成されているので液体試料が下流領域に達すると、試料の水分蒸発が進み乾燥することが可能である。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成材料の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、より安全かつ衛生的に使用可能な、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１１３】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記空間形成部におけるクロマト下流領域の端部あるいは平行側面あるいは空間形成部上表面の任意の部位に、空気の流入が可能なように間隙部を備えることを特徴とした。従って、下流領域に空間形成部を備えたことにより、露出された反応層を直接手で触れることが出来ないため、手に付着した物質により反応層が汚染されることがなく、吸水性が維持される。また、試験片の下流領域を手で触った場合でも、液体試料が手に付着する事がない。また、下流領域には空間が形成され、かつ任意の位置に間隙部が備えられているので通気性がよく、液体試料が下流領域に達すると、試料の水分蒸発が進み乾燥することが可能である。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成材料の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、より安全かつ衛生的に使用可能な、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１１４】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記空間形成部が液体不透過性の材料で形成されていることを特徴とした。従って、下流領域に液体不透過性材料を用いて空間形成部を備えたことにより、露出された反応層を直接手で触れることがないため、手に付着した物質により反応層が汚染されることがなく、吸水性が維持される。また、試験片の下流領域を手で触った場合でも、液体試料が手に付着する事がない。また、下流領域には空間が形成されているので液体試料が下流領域に達すると、試料の水分蒸発が進み乾燥することが可能である。これにより、下流領域に試料を吸収する吸水部を設ける必要性がなくなり、構成材料の削減を図り、かつ試験片作製工程を簡易化した、より安全かつ衛生的に使用可能な、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
【０１１５】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片は、抗原抗体反応を利用した免疫クロマトグラフィ試験片であることを特徴とした。従って、測定対象に対する抗体あるいは抗原を入手することで多くの測定対象を測定することが可能な、より安全かつ衛生的に使用できる、従来と同等以上の高感度・高性能な低コストのクロマトグラフィ測定装置を実現することが可能となる。
なお、ここで示す免疫クロマトグラフィ試験片とは、クロマト展開する担体上で、抗原抗体反応を利用して試料溶液中の被検物質の検出を行う試験片を示す。
【０１１６】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片が、乾式分析要素であることを特徴とした。従って、タンパク質などの変性を最低限抑えることが可能であり、測定装置を長期間保存することが可能である。
【０１１７】
本発明のクロマトグラフィ測定装置によれば、前記クロマトグラフィ測定装置において、前記クロマトグラフィ試験片が、ワンステップの試験片であることを特徴とした。従って、試料溶液の前処理を必要とせず、試験片に試料溶液を点着するのみでよいので、操作が簡便である。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置の構成を示す図である。
【図２】本発明の実施の形態１にかかるクロマトグラフィ測定装置の液体不透過性シート材を除いたクロマトグラフィ試験片の構成を示す図である。
【図３】本発明の実施の形態２にかかるクロマトグラフィ測定装置の構成を示す図である。
【図４】本発明の実施の形態２にかかるクロマトグラフィ測定装置の液体不透過性シート材を除いたクロマトグラフィ試験片の構成を示す図である。
【図５】本発明の実施の形態３にかかるクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して平行に切断した切断図である。
【図６】本発明の実施の形態３にかかるクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して垂直に切断した切断図である。
【図７】本発明の実施の形態４にかかるクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して平行に切断した切断図である。
【図８】本発明の実施の形態４にかかるクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して垂直に切断した切断図である。
【図９】本発明の実施の形態５にかかるクロマトグラフィ測定装置の構成を示す図である。
【図１０】本発明の実施の形態５にかかるクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して平行に切断した切断図である。
【図１１】本発明の実施の形態５にかかるクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して垂直に切断した切断図である。
【図１２】本発明の実施の形態６にかかるクロマトグラフィ測定装置の構成を示す図である。
【図１３】本発明の実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置の構成を示す図である。
【図１４】本発明の実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して垂直に切断した切断図である。
【図１５】本発明の実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して垂直に切断した切断図である。
【図１６】本発明の実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置の構成を示す図である。
【図１７】本発明の実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置の構成を示す図である。
【図１８】本発明の実施の形態７にかかるクロマトグラフィ測定装置をクロマト方向に対して平行に切断した切断図である。
【符号の説明】
１  クロマトグラフィ試験片
２  試料添加部
３  標識試薬保持部
４  反応層
５  タンパク質固定化部
６  液体不透過性シート材
７  支持体
８  通気性材料
９  空間形成材
１０  間隙部
１１  空間形成部
【図１】
0004430263.tif 000002
【図２】
0004430263.tif 000003
【図３】
0004430263.tif 000004
【図４】
0004430263.tif 000005
【図５】
0004430263.tif 000006
【図６】
0004430263.tif 000007
【図７】
0004430263.tif 000008
【図８】
0004430263.tif 000009
【図９】
0004430263.tif 000010
【図１０】
0004430263.tif 000011
【図１１】
0004430263.tif 000012
【図１２】
0004430263.tif 000013
【図１３】
0004430263.tif 000014
【図１４】
0004430263.tif 000015
【図１５】
0004430263.tif 000016
【図１６】
0004430263.tif 000017
【図１７】
0004430263.tif 000018
【図１８】
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