(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＰＴＨ（１−３４）(配列番号２)、医薬として用いるためのポリオール安定化剤、および組成物のｐＨを３より大きく７までの範囲内に維持するための緩衝剤を含む、ヒト患者に非経口投与可能な状態の保存安定性のある無菌溶液(ここで、該溶液は凍結乾燥物から再構成されていない)の形の医薬組成物。
【請求項２】
該ポリオール安定化剤がマンニトールである請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
該緩衝剤がクエン酸塩、酢酸塩または酒石酸塩から選ばれる請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項４】
該緩衝剤が酢酸塩である請求項１または２記載の医薬組成物。
【請求項５】
ヒトＰＴＨ（１−３４）が１００μg/ml〜５００μg/mlの濃度で存在する請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
該溶液がさらに非経口的に許容される保存剤を含む請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
該溶液が皮下注射により患者に投与される請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項８】
ヒトＰＴＨ（１−３４）(配列番号２)、医薬として用いるためのポリオール安定化剤、および組成物のｐＨを３より大きく７までの範囲内に維持するための緩衝剤を含む、ヒト患者に非経口投与可能な状態の、保存安定性のある無菌溶液(ここで、該溶液は凍結乾燥物から再構成されていない)の形の医薬組成物を含む密封されたバイアルまたは密封されたカートリッジ。
【請求項９】
該ポリオール安定化剤がマンニトールである請求項８記載の密封されたバイアルまたは密封されたカートリッジ。
【請求項１０】
該緩衝剤がクエン酸塩、酢酸塩または酒石酸塩から選ばれる請求項８または９記載の密封されたバイアルまたは密封されたカートリッジ。
【請求項１１】
該緩衝剤が酢酸塩である請求項８または９記載の密封されたバイアルまたは密封されたカートリッジ。
【請求項１２】
ヒトＰＴＨ（１−３４）が１００μg/ml〜５００μg/mlの濃度で存在する請求項８〜１１のいずれかに記載の密封されたバイアルまたは密封されたカートリッジ。
【請求項１３】
該溶液がさらに非経口的に許容される保存剤を含む請求項８〜１２のいずれかに記載の密封されたバイアルまたは密封されたカートリッジ。
【請求項１４】
ａ）濃度２５０μｇ／ｍｌのヒトＰＴＨ（１−３４）(配列番号２)、
ｂ）溶液のｐＨを３より大きく６までの範囲に維持するための濃度０．４１ｍｇ／ｍｌの氷酢酸および濃度０．１０ｍｇ／ｍｌの酢酸ナトリウム（無水）、
ｃ）濃度４５．４ｍｇ／ｍｌのマンニトール、
ｄ）濃度３．０ｍｇ／ｍｌのｍ−クレゾール
を含む、ヒト患者に非経口投与可能な状態の、該患者に使用する前に凍結乾燥の工程を受けていない、保存安定性のある無菌医薬溶液を含む密封されたバイアルまたは密封されたカートリッジ。
【請求項１５】
ヒトＰＴＨ（１−３４）(配列番号２)、ポリオール安定化剤、溶液のｐＨを３より大きく６までの範囲に維持する緩衝系を混合し、
該溶液を、治療的有効量のＰＴＨを吸引することができるバイアルまたはカートリッジに封入することを含む、保存安定性のある無菌医薬溶液を含む密封されたバイアルまたは密封されたカートリッジの製造方法。
【請求項１６】
該ポリオール安定化剤がマンニトールである請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
該緩衝剤がクエン酸塩、酢酸塩または酒石酸塩から選ばれる請求項１５または１６記載の方法。
【請求項１８】
該緩衝剤が酢酸塩である請求項１５または１６記載の方法。
【請求項１９】
ヒトＰＴＨ（１−３４）が１００μｇ／ｍｌ〜５００μｇ／ｍｌの濃度で存在する請求項１５〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
該溶液がさらに非経口的に許容される保存剤を含む請求項１５〜１９のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
技術分野
本発明は、上皮小体ホルモンを含む医薬組成物に関する。より詳細には、本発明はテリパラチドＰＴＨ（１−３４）安定化溶液製剤に関する。
発明の背景
上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）は、骨を含む種々の組織に対する作用を介して血清カルシウムレベルを調節する哺乳動物上皮小体（副甲状腺）の分泌８４アミノ酸産物である。ある形のＰＴＨを用いたヒトでの試験により骨に対する同化作用が証明され、骨粗鬆症や関連骨障害の治療にＰＴＨを用いることに大きな興味が持たれるようになった。
例えば、すべての公表された報告により完全長ホルモンと生物学的に等価であるとみなされているウシおよびヒトホルモンのＮ−末端３４アミノ酸を用いると、上皮小体ホルモンは、皮下経路でパルス的に投与したとき、ヒトにおいて特に骨の成長を増強することが証明された。わずかに異なる形のＰＴＨであるヒトＰＴＨ（１−３８）は同様な結果を示した。
ＰＴＨ調製物は、新鮮または凍結乾燥ホルモンから再構成され、種々の形の担体、賦形剤、およびビークルが組み合わされる。ほとんどは、ホルモンを安定化させるために典型的には酢酸で酸性化した水または生理食塩水のような水ベースのビークルを用いて製造される。報告した製剤の大部分には安定化剤としてアルブミンも組み合わせる（例えば、Reeveら、Br.Med. J.,1980,280:6228; Reeveら、Lancet,1976,1:1035; Reeveら、Calcif.Tissue Res.,1976,21:469; Hodsmanら、Bone Miner;1990,9(2):137; Tsaiら、J.Clin.Endocrinol Metab.,1989,69(5):1024; Isaacら、Horm.Metab.Res.,1980,12(9):487; Lawら、J.Clin Invest.1983,72(3):1106; およびHulter,J.Clin Hypertens,1986,2(4):360参照）。他の報告された製剤では、凍結乾燥ホルモンと共にかまたは再構成ビークル中に存在するマンニトールのような賦形剤が組み合わされる。ヒトでの試験に用いられるそれらの代表的製剤には、再構成時にマンニトール、加熱不活化ヒト血清アルブミン、および吸着増強剤としてカプロン酸（プロテアーゼインヒビター）を含むヒトＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）（Reeveら、1976,Calcif.Tissue Res.,21,Suppl.,469-477参照);生理食塩水ビークルで再構成したヒトＰＴＨ（１−３８）調製物（Hodsmanら、1991,14(1),67-83参照）; およびｐＨを酢酸で調整しアルブミン含有水性ビークル中のウシＰＴＨ（１−３４）調製物が含まれる。ヒトＰＴＨ（１−８４）（配列番号１）については、２５０μｇヒト血清アルブミンおよび１．２５ｍｇ乳糖とともにアンプルに入れた１００ｎｇホルモンからなる国際基準調製品（１９８１）があり、ウシＰＴＨ（１−８４）については、０．０１Ｍ酢酸および０．１％ｗ／ｖマンニトール中の１０μｇ凍結乾燥ホルモンからなる国際基準調製品がある（Martindale,The Extra Pharmacoepia, The Pharmaceutical Press. London,第29版、1989、1338頁参照）。
【０００２】
ｈ−ＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）の凍結乾燥調製品の安定性を改善する最近の試みとして、糖と塩化ナトリウムを組み合わせて用いるものがEP619119に記載されている。米国特許第5496801号にも、マンニトールを賦形剤として、クエン酸塩供給源を非揮発性緩衝剤として含む、天然ホルモンＰＴＨ（１−８４）の凍結乾燥組成物が開示されている。
上皮小体ホルモンの市販品を開発するには、調製しやすく、許容し得る保存安定性を有する製剤を開発する必要がある。しかしながら、上皮小体ホルモンはタンパク質であり、伝統的な低分子量の薬剤よりはるかに不安定であるため、上皮小体ホルモン製剤には製薬業が通常遭遇しない課題がある。さらに、製剤化に成功している他のタンパク質のように、ＰＴＨは特に酸化、脱アミド化、および加水分解に対して感受性であり、生物活性を維持するにはそのＮ末端およびＣ末端配列が完全なままである必要がある。
本発明は、医薬的に有用なＰＴＨ調製物、特に、活性成分としてテリパラチド、ＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）を含む該調製物を提供することを目的とする。
【０００３】
発明の要約
本発明は、治療的有効量の上皮小体ホルモン（ＰＴＨ）を含む安定化溶液剤の形の医薬組成物を提供するものである。該溶液剤は保存安定性があり、ヒト患者に非経口投与可能な状態で、無菌の形でバイアルまたはカートリッジ中に保存することができよう。本発明溶液剤の利点は凍結乾燥の必要性がないことである。  したがって、本発明は、（ａ）治療的有効量の上皮小体ホルモン、（ｂ）有効量の安定化剤、（ｃ）組成物のｐＨを約３〜７内に維持するのに充分な量の緩衝剤、および（ｄ）バランス用の水を含む上皮小体ホルモン溶液剤である。
【０００４】
所望により、本溶液剤を凍結乾燥し、水の含量が２重量％である凍結乾燥粉末を形成してよい。
本発明の他の目的は、（ａ）治療的有効量の上皮小体ホルモン、（ｂ）約１〜２０ｗｔ−％の安定化剤、（ｃ）組成物のｐＨを約３〜７の範囲内に維持するのに充分な量の、酢酸塩または酒石酸塩供給源から選ばれる緩衝剤、（ｄ）約０．１〜２ｗｔ−％の非経口的に許容される保存剤、および（ｅ）バランス用の水を含む上皮小体ホルモン溶液剤である。
本発明のさらに別の目的は、（ａ）治療的有効量の、ＰＴＨ（１−３４）、ＰＴＨ（１−３７）、ＰＴＨ（１−３８）、およびＰＴＨ（１−４１）からなる群から選ばれる断片化上皮小体ホルモン、（ｂ）有効量の安定化剤、（ｃ）組成物のｐＨを約３〜７の範囲内に維持するのに充分な量の緩衝剤、および（ｄ）２ｗｔ−％以下の水を含む、再構成前の凍結乾燥粉末形の医薬組成物である。
【０００５】
詳細な説明
本発明は、ホルモン組成物および活性に対する保存安定性を有する上皮小体ホルモン溶液剤に関する。
該組成物または溶液剤は、活性成分として、完全長８４アミノ酸形の上皮小体ホルモン、特にヒトの体液から抽出するか、またはペプチド合成により組換え的に得られるヒト形のｈＰＴＨ（１−８４）（配列番号１）を含んでいてよい。例えば、米国特許第5208041号参照（この内容は本明細書の一部を構成する）。ｈＰＴＨ（１−８４）のアミノ酸配列は、Kimuraら、Biochem.Biophys,Res.Comm.中,114(2):493に記載されている(配列番号１）。
該組成物または溶液剤は、活性成分として、ヒトＰＴＨの断片もしくは断片の変異体、またはKimmelら、Endocrinology,1993,32(4):1577に記載の、卵巣切除ラット骨粗鬆症モデルにおいてヒトＰＴＨ活性を有するブタもしくはウシＰＴＨの断片もしくは断片の変異体を含んでいてもよい。
【０００６】
上皮小体ホルモン断片は、ＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）、ＰＴＨ（１−３７）、ＰＴＨ（１−３８）、およびＰＴＨ（１−４１）のような少なくとも最初の３４個のＮ末端残基を含むことが望ましい。他のＰＴＨ変異体形は、８位および／または１８位のメチオニン残基の、ロイシンもしくは酸化に対するＰＴＨの安定性を改善する他の疎水性アミノ酸による置換、および２５−２７領域のアミノ酸の、ヒスチジンもしくはプロテアーゼに対するＰＴＨの安定性を改善する他のアミノ酸のようなトリプリン非感受性アミノ酸による置換といったＰＴＨの安定性と半減期を改善する１〜５アミノ酸の置換を含んでいてよい。これらのＰＴＨは、本明細書で一般的に用いている用語「上皮小体ホルモン」に含まれる。好ましいホルモンは、テリパラチドとしても知られるヒトＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）である。該ホルモンは米国特許第4086196号（この内容は本明細書の一部を構成する）に記載のような既知の組換えもしくは合成法により得ることができよう。
【０００７】
該溶液剤または組成物に含まれる安定化剤には、糖類、好ましくは単糖類もしくは二糖類、例えば、グルコース、トレハロース、ラフィノース、もしくはショ糖を含むポリオール、例えば、マンニトール、ソルビトール、もしくはイノシトールのような糖アルコール、およびグリセリンもしくはプロピレングリコールのような多価アルコール、またはその混合物が含まれる。好ましいポリオールはマンニトールまたはプロピレングリコールである。ポリオールの濃度は全溶液剤の約１〜約２０ｗｔ−％、好ましくは約３〜１０ｗｔ−％の範囲であってよい。
本発明の溶液剤または組成物に用いる緩衝剤は、医薬的に許容される、水性溶液剤のｐＨ範囲を３〜７、好ましくは３〜６に維持することができるあらゆる酸もしくは塩混合物であってよい。有用な緩衝系は、例えば、酢酸塩、酒石酸塩、もしくはクエン酸供給源である。好ましい緩衝系は酢酸塩もしくは酒石酸供給源であり、最も好ましくは酢酸供給源である。緩衝剤の濃度は、約２ｍＭ〜約５００ｍＭ、好ましくは約２ｍＭ〜１００ｍＭの範囲であってよい。
【０００８】
本発明の安定化溶液剤もしくは組成物は、非経口的に許容される保存剤を含んでいてもよい。そのような保存剤には、例えば、クレゾール、ベンジルアルコール、フェノール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、クロロブタノール、フェニルエチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、チメロサール、および硝酸および酢酸フェニル水銀が含まれる。好ましい保存剤は、ｍ−クレゾールまたはベンジルアルコール、最も好ましくはｍ−クレゾールである。用いる保存剤の量は、全容液剤の約０．１〜約２ｗｔ−％、好ましくは約０．３〜約１．０ｗｔ−％の範囲であってよい。
すなわち、本発明は、例えば、推定有効期限が５℃で１５ヶ月以上の、マンニトール、酢酸塩、およびｍ−クレゾールを含む安定化テリパラチド溶液剤を提供する。
本発明の上皮小体ホルモン組成物は、所望により、上記の選ばれた上皮小体ホルモン、緩衝剤、および安定化剤を混合することにより製造される無菌水性ホルモン溶液の凍結乾燥によりもたらされる、含水量が２重量％以下の粉末形で提供されてよい。凍結乾燥粉末を製造する際に特に有用な緩衝剤は酒石酸塩供給源である。特に有用な安定化剤には、グリセリン、マンニトール、ショ糖、トレハロース、ラフィノース、またはそれらの混合物が含まれる。
【０００９】
本発明のＰＴＨ溶液剤および組成物は、医薬的有効量（この用語は、治療的にかまたは医学診断において有用な量について用いられる）のＰＴＨを含む。調製物中に含まれる上皮小体ホルモンの特定量は、選ばれたＰＴＨの種類と該調製物の意図した使用限界に基づいて予め決定することができる。ある応用では、該調製物は治療目的、詳細には骨粗鬆症の治療に用いられる。骨粗鬆症療法には、処方された治療方法を反映した単位用量、例として、ヒトＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）については２５μｇＰＴＨ／ｍＬ注射溶液〜１０００μｇ／ｍＬ注射溶液／患者の範囲内で、注射、望ましくは皮下注射により再構成調製物を投与することが含まれる（注射容量は０．０２〜１．３ｍＬが望ましい）。したがって、精製ＰＴＨを、望ましくは緩衝剤および賦形剤と組み合わせ、２５μｇ／ｍＬ〜１０００μｇ／ｍＬ、好ましくは１００μｇ／ｍＬ〜５００μｇ／ｍＬの濃度範囲のＰＴＨを含有する水性溶液を形成し、次いでこれを無菌ろ過し、使用するためのバイアルまたはカートリッジに充填する。
【００１０】
調製剤が、所望の量および濃度の緩衝剤、賦形剤、およびＰＴＨを含む水溶液として得られたら、所望の容量の該溶液剤を個々のバイアルに充填する。本発明の利点は、上記溶液剤を無菌水で調製してよく、凍結乾燥操作を受ける必要がないことである。
本発明の別の態様において、該調製物は、約１ｍＬ（０．８〜１．２ｍＬ）の再構成ビークルで再構成されるヒトＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）１００〜５００μｇの単位容器が得られる形で提供され、したがって、バイアルには、次の凍結乾燥のために水性ＰＴＨ調製物約１ｍＬが入れられる。
本発明の好ましい別の態様において、凍結乾燥されたＰＴＨ調製物は、ヒトＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）２５〜１０００μｇ／ｍＬ、マンニトール２〜８重量％、および無菌水で再構成したときに調製物を３．０〜６．５の範囲内に緩衝することができる量の酒石酸塩供給源を含む。本発明の具体的態様において、酒石酸塩緩衝剤はｐＨ３．５〜５．５に緩衝するのに充分な量で組み合わされる。
治療的使用に加え、本発明のＰＴＨ組成物は、医学的診断を助けるために、詳細には、低カルシウム血症患者における上皮小体機能低下症および偽上皮小体機能低下症の診断を確立するのを助けるために製剤化され、投与することができる。ＰＴＨ調製物の組成は、ＰＴＨの用量を除き、治療的使用について本明細書に記載した通りであろう。この診断目的には、２００国際単位のＰＴＨ活性に等しいヒトＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）の単回用量を静脈内注入するのが適当である。次に、投与したＰＴＨの影響、すなわち尿ｃＡＭＰレベルを測定することにより診断がなされるが、ｃＡＭＰの上昇は、偽上皮小体ホルモン機能低下症より上皮小体ホルモン機能低下症の病状の兆候を示している。
以下の実施例により本発明を例示するが、これにより限定されるものではない。
【００１１】
【実施例】
実施例１
ｒｈＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）０．１ｍｇ、マンニトール５０ｍｇ、ｍ−クレゾール２．５ｍｇ、酢酸０．５２ｍｇ、および酢酸ナトリウム０．１２ｍｇを蒸留水１ｍＬと混合して溶液剤を得る。
実施例２
ｒｈＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）０．２５ｍｇ、マンニトール４５．４ｍｇ、ｍ−クレゾール３ｍｇ、酢酸０．４１ｍｇ、および酢酸ナトリウム０．１ｍｇを蒸留水１ｍＬと混合して溶液剤を得る。
実施例１および２の本発明製剤を、安定化剤を含まず、主要な安定化剤として０．９％ＮａＣｌ、２０ｍＭ酢酸塩、および１０ｍＭ酢酸塩を含む溶液と比較した。一定時間後に残るｒｈＰＴＨ（１−３４）（配列番号２）の量（％）を測定することにより安定性を測定した。測定はＨＰＬＣで行った。結果を表１および２に示す。
【００１２】
【表１】
５０℃におけるｒｈＰＴＨ（１−３４）の化学的安定性に対する主要な安定化剤の効果
0004405666.tif 000002
【表２】
３０℃におけるｒｈＰＴＨ（１−３４）の安定性の比較
0004405666.tif 000003
【００１３】
実施例３
下記の実験は、本発明の安定化溶液剤から調製した凍結乾燥粉末製剤がＰＴＨ（１−３４）およびマンニトールのみから製造したコントロールより安定性が高いことを示すために実施した。
コントロール溶液および試料Ａ〜Ｏの溶液は、表３に示す成分と濃度を用い、先に記載のごとく調製した。次に、該溶液を凍結乾燥し、得られた凍結乾燥粉末製剤を１月間、４０℃に保存した。次に、各試料中に残存するＰＴＨ（１−３４）の量をＨＰＬＣにより測定した。結果を表３に示す。
【表３】
４０℃で１月間保存したＰＴＨ（１−３４）凍結乾燥製剤の安定性
0004405666.tif 000004
*  ２カ月における安定性は９６％であった。
【００１４】
【配列表】
0004405666.tif 000005
0004405666.tif 000006