(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アニオン型が、以下の式（Ｉ）〜（Ｖ）：
【化１】
0004402835.tif 000025
【化２】
0004402835.tif 000026
の一つに相当する、
酸性型およびその医薬的に許容な塩の形態の合成多糖類。
【請求項２】
ナトリウムまたはカリウム塩の形態の請求項１の多糖類。
【請求項３】
式：メチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−３−Ｏ−メチル−２，６−ジ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシド、またはそのナトリウム塩である請求項１および２のいずれかによる多糖類。
【請求項４】
医薬的に許容な非毒性の不活性な賦形剤と組み合わせて、医薬的に許容な塩基との塩の形態または酸性型での、請求項１〜３のいずれか一つの多糖類を、活性成分として含有する医薬組成物。
【請求項５】
活性成分が少なくとも１つの医薬賦形剤と混合される、単位投与量の形態の請求項４の医薬組成物。
【請求項６】
各単位投与量が、０．１〜１００ｍｇの活性成分を含む請求項５の組成物。
【請求項７】
各単位投与量が、０．５〜５０ｍｇの活性成分を含む請求項６の組成物。
【請求項８】
凝固機能不全に関連した病状において用いられる請求項４〜７のいずれか一つに記載の医薬組成物。
【請求項９】
心臓血管および脳血管の系障害、動脈硬化症と糖尿病とに関連した血栓塞栓障害または、血小板崩壊後の再血栓症と、梗塞形成と、虚血性由来の痴呆と、末梢血管性疾患と、血液透析と、もしくは心房性細動とに関連したか、あるいはまた、大動脈冠動脈ブリッジ血管修復用材料の使用の間における血栓塞栓障害の治療および予防用の請求項４〜７のいずれか一つに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
血栓塞栓疾患の予防または治療用の請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
不安定な口峡炎、脳卒中または、血管形成、動脈血管内膜切除もしくは血管内人工器具設置の設置後の再狭窄の予防または治療用の請求項１０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ヘパリンの抗凝血性および抗血栓性薬理学的活性を有する、新規な合成多糖類に関する。
ヘパリンは、異種の天然の硫酸化多糖類であるグリコサミノグリカン（ＧＡＧｓ）の系統に属する。
ヘパリン製品は、１０から１００またはそれ以上の範囲にわたる、多数の単糖類単位からなる鎖の混合物である。この分子サイズの不均一性は、構成成分の単糖類の性質だけではなく、それらが有する置換基に関する構造的な不均一性に付随するものである(L. Roden :「The Biochemistry of Glycoproteins and Glycosaminoglycans」、Lennarz W.J.編集、 Plenum Press, New York and London, 267-371, 1980)。
【０００２】
天然のＧＡＧｓの各系統は、一般にある範囲の薬理学的な活性を有する。天産物から得ることができる製剤では全て組みあわされている。従って、例えば、ヘパリンおよびヘパラン硫酸は、幾つかの凝血因子に対して同時に起こる作用に関連した、抗血栓活性を有している。
ヘパリンは−特に抗トロンビンＩＩＩ（ＡＴ  ＩＩＩ）を介した−血液凝固カスケードに関係する２つの酵素、すなわち、第Ｘａ因子および第ＩＩａ因子（またはトロンビン）の阻害を触媒する。低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨｓ）の製剤は、４〜３０の単糖類からなる鎖を含み、トロンビンによりも第Ｘａ因子に対してより選択性を示すという性質を有する。
【０００３】
ある合成オリゴ糖、特にＥＰ第８４９９９号に記載のものは、トロンビンに活性を示さず抗トロンビンIIIを介して、第Ｘａ因子を選択的に阻害するという物性を有している。
第Ｘａ因子の阻害には、抗トロンビン結合領域（ＡＢＤ）を介する、ヘパリンのＡＴ  ＩＩＩへの結合が必要であり、第ＩＩａ因子（トロンビン）の阻害には、ＡＢＤを介するＡＴ  ＩＩＩへの結合、およびはっきりしない結合領域（ＴＢＤ）を介するトロンビンへの結合が必要であることが、知られている。
【０００４】
ヘパリンのＡＢＤに相当する合成オリゴ糖は公知であり、静脈血栓症において抗血栓活性があることが示されている。これらの化合物は、EP第529,715号およびEP第621,282号ならびに特許CA第2,040,905号に記載されている。
動脈血栓症の予防におけるこれらのオリゴ糖の効力は、やはりトロンビンを阻害する能力がないことにより、効力がない。
【０００５】
ＡＴ  ＩＩＩの活性化を介してトロンビンを阻害することが可能なヘパリン型グリコサミノグリカンの合成は、特許出願ＰＣＴ／ＦＲ９７／０１３４４号に記載されている。
その特許出願には、新規な生物学的に活性な多糖類誘導体が記載されている。特に、それらは抗凝血性で、抗血栓性である。さらに、これら多糖類が合成により得られるので、その構造を選択的に修飾することが可能である。特に、血小板第４因子（ＰＦ４）［血小板の活性化の際に解放され、血餅の領域においてヘパリンのかなりの中和を引き起こす］のような、ある塩基性タンパク質との相互作用に巻き込まれる、好ましくない硫酸スルフェート基を除去することが可能である。従って、強力な抗血栓剤および抗凝血剤であり、さらに、ヘパリンの効果、特にトロンビンへの効果を中和する、ＰＦ４のようなタンパク質の作用から生体内で逃れることができる多糖類が得られる。
【０００６】
これらの硫酸化およびアルキル化多糖類は、炭化水素骨格に結合するアルキル基および硫酸スルフェート基の配置に従い、強力な抗血栓剤および抗血栓剤でありうることが、特に示されている。
【０００７】
多糖類配列を形成することにより、正確にＧＡＧ−型活性を修飾し、ヘパリンの特性を有する非常に活性な生成物を得ることが可能であることが、より一般的に、見出されている。
【０００８】
しかし、特許出願ＰＣＴ／ＦＲ９７／０１３４４に記載されたある製品のヒトの治療における使用は、特に、これら製品が長い半減期を持つ際には、困難であることが証明できる。血栓の予防または治療の分野において、上記製品により、血液の流動性が回復または維持され、一方同時に出血（haemorrhage）の誘導を防止しなければならない。これに関連した機能の極めて重要な性質は、この平衡を得るために、短い半減期を有し、取扱いやすい化合物のみを用いるのが好ましいのである。
【０００９】
この理由は、偶発的な理由にあるにしても、出血が治療中の患者に引き起こりうることがよく知られているのである。また、抗血栓治療中の患者に、手術を行う必要性もありうる。これらの様々な理由のため、短い半減期を有する化合物を用いるのが好ましい。
【００１０】
本発明の合成多糖類の半減期は、ラットで測定した。その際、予期せぬことに、その半減期は分子の構造、特に、ＡＢＤ、ＴＢＤ（トロンビン結合領域)およびスペーサーの構造に影響されることが観察された。
【００１１】
従って、本発明は新規な合成多糖類に関し、その多糖類は特許出願ＰＣＴ／ＦＲ９７／０１３４４号の化合物と構造が類似しているが、特有の性質を有する。この理由は、これらの化合物は予期せぬことに１時間３０分より短い除去の半減期を有することである。その半減期はラットへの静脈内投与後、抗Ｘａ活性を用いて測定した。
【００１２】
これらの化合物は、３つの別個の配列：硫酸化された五糖類配列ＤＥＦＧＨ、非硫酸化された七糖類配列Ｚ（ＭＮ）3および硫酸化された四糖類配列ＶＷＸYからなる十六糖類である。
【００１３】
本発明の化合物は、酸性型、医薬的に許容なカチオンとの医薬的に許容な塩の形態の合成多糖類である。そのアニオン型は、以下の式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）および（Ｖ）：
【化３】
0004402835.tif 000002
【化４】
0004402835.tif 000003
の一つに相当する。
【００１４】
この発明は、その酸性型または医薬的に許容な塩のいずれかの型の多糖類を含む。酸性型では、−ＣＯＯ-および−ＳＯ3-官能基がそれぞれ−ＣＯＯＨおよび−ＳＯ3Ｈ型である。
表現「本発明の多糖類の医薬的に許容な塩」は、１以上の−ＣＯＯ-および／または−ＳＯ3-官能基が医薬的に許容な金属カチオンとイオン的に結合している多糖類を指すことを意図する。本発明の好ましい塩は、カチオンがアルカリ金属カチオンから選択されたものであり、より好ましくは、カチオンがＮａ+またはＫ+であるものである。
【００１５】
本発明はまた、本発明の多糖類の製造法にも関する。
原理的には、この方法は、先に報告した文献中で製造されたジ−またはオリゴ糖類シントンを用いる。特に、ＥＰ第３００，０９９号、ＥＰ第５２９，７１５号、ＥＰ第６２１，２８２号およびＥＰ第６４９，８５４号、ならびにC. van Boeckel, M. Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1993, 32, 1671-1690を参照するであろう。これらのシントンは、次いで共に結合し、本発明の十六糖類の完全に保護された前駆体を得、次いで選択的に脱保護され、硫酸化されて本発明の十六糖類を得る。
【００１６】
上記の結合反応において、「供与体」ジ−またはオリゴ糖は、そのアノマー炭素が活性化され、遊離のヒドロキシルを含んでいる「受容体」ジ−またはオリゴ糖と反応する。
【００１７】
本発明の十六糖類は、以下の操作順序に従って製造することができ、上記式（Ｉ）で表される糖単位にもあてはまる。
【００１８】
４’位にアルコール官能基を有するＧＨの保護された前駆体、ｐＧＨと、アノマー炭素が活性化されているＥＦの保護された前駆体、ｐＥＦは、最初に製造される。中間体ｐＧＨとｐＥＦは、共に反応し、ＥＦＧＨを与える。非還元末端単位の４位は、次いで脱保護され、前駆体ｐＥＦＧＨを与える。
【００１９】
同時に、部分ＹＺ（ＭＮ）3Ｄの前駆体、そのアノマー炭素が活性化された、ｐＹＺ（ＭＮ）3Ｄは、同じ計画に従って製造される。
四糖類ｐＥＦＧＨは、次いでｐＹＺ（ＭＮ）3Ｄと反応し、ＹＺ（ＭＮ）3ＤＥＦＧＨを与える。非還元末端単位は、脱保護され、前駆体ｐＹＺ（ＭＮ）3ＤＥＦＧＨを与える。
【００２０】
ＶＷＸの前駆体、ｐＶＷＸは、同時に製造される。
ｐＶＷＸとｐＹＺ（ＭＮ）3ＤＥＦＧＨとの反応は、従って十六糖類の直接的な前駆体を与える。それは脱保護と硫酸化されて、期待される十六糖類を与える。
【００２１】
当該分野の当業者には、幾つかの合成方法は、選択した受容体と供与体に依って可能であることは、明白である。例えば、供与体ＶＷＸＹＺ（ＭＮ）3Ｄを製造し、それをＥＦＧＨと結合させて、所望の十六糖類の前駆体を得ることが可能である。例えば、上記参照および「Monosaccharides, Their chemistry and their roles in natural products」（P.M. CollinsおよびR.J. Ferrier, J. Wiley & Sons, 1995）およびG.J. Boons, Tetrahedron, 1996, 52, 1095-1121を参照する。
【００２２】
本発明の化合物について、生化学および薬理学的研究を行い、それによるとそれら化合物は特許出願PCT/FR 97/01344号に記載の製剤に比べて非常に有利な性質をさらに有することが示された。
【００２３】
本発明の化合物は、ヘパリンのと同じかそれ以上の親和性を持ってＡＴ  ＩＩＩへ選択的に結合し、抗凝血性特性および抗血栓性特性を有し、それはヘパリンのより優れている。
【００２４】
式（Ｉ）〜（Ｖ）の製剤の全体の抗血栓性活性を、J. Reyersらによる「Thrombosis Research」（1980, 18, 669-674）に記載の方法に従い、トロンボプラスチンによる静脈うっ血と誘導のモデルにおいて、ならびに、Umetsuら、 Thromb. Haemost., 1978, 39, 74-83 により記載されるように、ラットの頚動脈および頚静脈の間に移植された短絡からなる動脈血栓症のモデルにおいて、ラットの静脈内または皮下的に測定する。これら２つの実験モデルにおいて、本発明の化合物のＥＤ50は、少なくとも、すでに公知の他の合成ヘパリン様のもの（１〜５０ｎｍｏｌ／ｋｇのＥＤ50）とおなじ次数またはそれ以下である。本発明の化合物は、従って、特に有利な作用の特異性と、特に有利な抗凝血性活性を有する。
【００２５】
それらの生化学的および薬理学的活性によって、本発明の化合物は、非常に有利な医薬品を構成する。それらの毒性は、この用途と完全に矛盾がない。それらは、また非常に安定であり、従って医薬的な特性の活性成分を構成するのに特に適している。
【００２６】
さらに、本発明の化合物は、血栓の過程の間に、血小板の活性化により放出される、ＰＦ４のような、大量のカチオン性血小板タンパク質で中和されない。本発明の化合物は、従って、動脈由来または静脈由来の血栓の治療および予防に、特に有利である。
【００２７】
それらは、不安定な口峡炎、脳卒中ならびに、血管形成、動脈血管内膜切除および血管内（endovascular）人工器具の設置の後の再狭窄のような、動脈硬化症と糖尿病とに関連した血栓塞栓障害;または血小板崩壊、梗塞形成、虚血性由来の痴呆の後の再血栓症（rethrombosis）と、末梢血管性疾患と、血液透析と、心房性細動とに関連したか、または、大動脈冠動脈ブリッジ血管修復用材料の使用の間における血栓塞栓障害のような、心臓血管系および脳血管系の障害の間に特に生じる凝固系のホメオスタシスの変異の後の病状において用いることができる。この生成物は、肺動脈塞栓症のような、静脈由来の血栓塞栓病状の予防または治療のために、さらに使用されてもよい。それらは、手術の間に生じるかまたは、癌および細菌感染症またはウイルス感染症のような他の病状に関連して生じる血栓症合併症を予防または治療するために使用してもよい。人工器具の設置の間に使用する場合、本発明の化合物は、人工器具を保護することができ、従ってそれらを血液と融和性にすることができる。特に、それらは血管内修復用材料(ステント)に結合する。この場合、EP第649,854号に記載のように、それらは非還元または還元末端に適当な腕を導入することにより、任意に化学的に修飾することができる。
【００２８】
本発明の化合物は、ポーラスバルーンで行われる動脈血管内膜切除の間、アジュバントとして用いることもできる。
本発明の化合物は非常に安定であり、従って医薬品の活性成分を構成するのに特に適している。
したがって、本発明の化合物は、上記の疾患の治療を意図する医薬品の製造のために用いることができる。
【００２９】
別の観点に従えば、本発明の主題は、従って、活性成分として上記で定義した合成多糖類を含有する医薬組成物である。
本発明は、１以上の不活性で適当な賦形剤と任意に組み合わせて、活性成分として、酸性型または医薬的に許容な塩の一つの形態の本発明の化合物を含む医薬組成物に関することが好ましい。通常、本発明の多糖類は凝固機能不全に関連した病状の治療に用いることができる。
【００３０】
各単位投与量において、活性成分は予想される１日投与量に適した量で存在する。通常、各単位投与量は予想される投与の用量と、例えば、錠剤、ゼラチンカプセル等、サシェット、ガラス瓶、シロップ剤等、滴剤、経皮吸収または粘膜吸収性パッチのような投与タイプに従って、単位投与量が０．１〜１００ｍｇの活性成分、好ましくは０．５〜５０ｍｇを含むように、適当に適合させられる。
【００３１】
本発明の化合物は、例えば、ジピリダモール（dipyridamole）、アスピリン、チクロピジン、クロピドグレル（clopidogrel）または糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ錯体の拮抗剤のような、例えば、抗血栓剤、抗凝血剤、抗-血小板-凝集剤のような、所望の治療に有用である１以上の他の活性成分との組み合わせで用いてもよい。
【００３２】
医薬組成物は、上記の疾患の治療のために、ヒトを含む哺乳動物に投与するために製剤化される。
【００３３】
そのようにして得られた医薬組成物は、例えば、注射用または飲用溶液、糖衣錠剤、普通の錠剤またはゼラチンカプセル剤のような、様々な形態で有利に存在する。注射用溶液は、好ましい医薬形態である。本発明の医薬組成物は、例えば腫瘍の手術の後、または血液凝固が崩壊した後見られる、細菌、ウイルスまたは酵素活性剤により誘導された、動脈硬化症、過剰凝血性状態のような、血管壁障害の予防的なまたは治療用処置に特に有用である。用量は患者の年齢、体重および健康状態、病気の性質および苦しさ、ならびに投与経路によって広範囲に変化しうる。この１回投与量は、筋肉投与または皮下投与で、連続投与または一定間隔をおいて、１日当たり約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇ、好ましくは１日当たり約０．５〜約５０ｍｇの用量の１またはそれ以上の投与からなる。
【００３４】
本発明の主題は、従って、任意に他の活性成分と組み合わせて、活性成分として上記の化合物の一つを含む医薬組成物でもある。これらの組成物は、消化ルートまたは非経口ルートを経て投与可能なように作られる。
【００３５】
経口投与、舌下投与、皮下投与、筋内投与、静脈内投与、経皮吸収投与、粘膜吸収投与、局所投与または直腸内投与のための本発明の医薬組成物において、有効成分は、標準的な医薬担体と混合して、動物やヒトに投与の単位形態で投与されてもよい。適当な投与単位形態は、錠剤、ゼラチンカプゼル剤、散剤、顆粒剤、および経口懸濁剤または経口水剤のような経口形態、舌下およびバッカル剤の投与形態、皮下、筋内、静脈内、鼻腔内または眼内の投与形態および直腸内の投与形態からなる。
【００３６】
固体組成物が錠剤の形態で調製されたとき、主な有効成分は、ゼラチン、デンプン、乳糖、ステアリンマグネシウム、タルク、アラビアゴム等のような医薬的な賦形剤と混合される。錠剤は、白糖または他の適当な材料でコーティングしてもよい。または、それらが持続性作用または遅効作用を有するような、かつそれらがあらかじめ所定の量の活性成分を連続的に遊離遊離されるように、それらを処理してもよい。
【００３７】
ゼラチンカプセル剤の製剤は、有効成分を賦形剤と混合し、軟または硬ゼラチンカプセル剤の中に得られた混合物を注入することにより、得られる。
【００３８】
水分散性散剤または顆粒剤は、分散剤もしくは湿潤剤と、またはポリビニルピロリドンのような懸濁化剤と、ならびに甘味料または風味増加剤とを混合した有効成分を含んでもよい。
【００３９】
直腸内投与には、直腸内温度で溶解する、例えばカカオ脂またはポリエチレングリコールのような結合剤と調製された座薬が用いられる。
【００４０】
非経口、鼻腔内または眼内投与には、例えばプロピレングリコールまたはブチレングリコールのような医薬的に適合性な分散剤および／または湿潤剤を含む、水性懸濁剤、等張食塩水または無菌注射用溶液を用いる。
【００４１】
粘膜吸収投与には、活性成分は、胆汁酸塩、親水性ポリマー［例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、デキストリン、ポリビニルピロリドン、ペクチン、デンプン、ゼラチン、カゼイン］、アクリル酸、アクリル酸エステルおよびそれらのコポリマー、ビニルポリマーまたはコポリマー、ビニルアルコール、アルコキシポリマー、ポリエチレンオキシドポリマー、ポリエーテルまたはそれらの混合物のような、プロモーターの存在下に製剤化されてもよい。
【００４２】
活性成分は、任意に１以上の担体または添加剤と共に、マイクロカプセルの形態に製剤化されてもよい。
【００４３】
活性成分は、例えば、α−、β−もしくはγ−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンまたはメチル−β−シクロデキストリンのようなシクロデキストリンとの複合体の形態であってもよい。
【００４４】
活性成分は、それを含むバルーンにより放出されても、血管内に導入された血管内増量剤により放出されてもよい。活性成分の医薬的な効力は、従って影響を受けない。
皮下投与は好ましいルートである。
【００４５】
以下の方法、製造法および図は、本発明の多糖類を得るために有用な様々な中間体の合成を説明するものである。
【００４６】
以下の略語を使用する：
ＴＢＤＭＳ：ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル；Ｌｅｖ：レブリノイル；Ｂｎ：ベンジル；Ｂｚ：ベンゾイル；ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー；Ｏｌｍ：トリクロロアセトイミドイル；ＬＳＩＭＳ：液体二次イオン質量分析；ＥＳＩＭＳ：エレクトロスプレー質量分析；ＴＭＳ：トリメチルシリル；ＴＳＰ：トリメチルシリルテトラ重プロピオン酸ナトリウム塩；Ｔｆ：トリフルオロメタンスルホン酸エステル；ＭＳ：モレキュラーシーブス；ＰＭＢ：ｐ−メトキシベンジル；ＭＰ：ｐ−メトキシフェニル；ＴＳ：トシル；ＥＴ：エチル；Ｐｈ：フェニル；Ｍｅ：メチル；Ａｃ：アセチル。
ダウエックス（登録商標）、セファデックス（登録商標）、キレックス（Chelex）（登録商標）およびトーヨーパール（Toyopearl）（登録商標）は、登録商標である。
【００４７】
以下に記載する方法、製造法および実施例において、イミデートの触媒カップリング、レブリン酸エステルの開裂、チオグリコシドの触媒カップリング、ｐ−メトキシベンジル基のけん化、メチル化および選択的脱保護、ベンジルエステルまたはエーテルの水素添加分解によるオリゴ-および多糖類の脱保護および硫酸化、エステルのけん化または硫酸化に関する通常の方法を、適当な中間体に、通常の方法を適用することにより、行うことができる。本発明の化合物の製造の例は、以下に、実例を目的に詳細に記載してある。
【００４８】
スキーム１−五糖類９の合成
【化５】
0004402835.tif 000004
【００４９】
製造例１
エチル  Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシド（２）
塩化ベンゾイル（２４．５ｍｌ，２１１ｍｍｏｌ）をピリジン（２０２ｍｌ）中の化合物１（１６．７ｇ，３５．２ｍｍｏｌ）(J. WestmanおよびM. Nilsson, J. Carbohydr. Chem., 1995, 14 (7), 949-960)の冷却（０℃）溶液に２０分間で滴下して加える。反応混合物を室温で２０時間攪拌する。ＴＬＣにより約５０％の変換が示される。混合物を水およびジクロロメタンで希釈する。抽出後、有機相を１０％炭酸水素ナトリウム溶液および水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮する。残渣を上記手順に基づき、塩化ベンゾイルで再処理する。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、２２ｇの化合物２を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．８０，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  トルエン／エタノール
【００５０】
製造例２
Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（４）
トルエン（１８ｍｌ）中のチオグリコシド２（１．０５ｇ，１．０５ｍｍｏｌ）、化合物３（２００ｍｇ，１．０５ｍｍｏｌ）(Jeanlozら, J. Org. Chem. 1961, 26, 3939-3944)および粉末４Åモレキュラーシーブ（１．１ｇ）の混合物を窒素雰囲気下で１５分間攪拌する。次いでこの混合物を−２０℃に冷却し、調製したばかりのＮ−ヨードスクシンイミド（１．１１ｍｍｏｌ）とトリフルオロメタンスルホン酸（０．１２５ｍｍｏｌ）の１／１  ｖ／ｖのジクロロメタン／ジオキサン（６ｍｌ）溶液を導入する。１０分後、赤色反応混合物を濾過し、ジクロロメタンで希釈し、抽出し、１０％チオ硫酸ナトリウム溶液、１０％炭酸水素ナトリウム溶液および水で連続的に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、次いで真空下で濃縮する。残渣の精製はシリカゲルカラムクロマトグラフィーで行い、１．２５ｇの化合物４を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５５，シリカゲル，４／６  ｖ／ｖ  ヘプタン／酢酸エチル
【００５１】
製造例３
Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（５）
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（約５０ｍｇ）を化合物４（１．２４ｇ，１．１１ｍｍｏｌ）の１／１  ｖ／ｖのメタノール／ジオキサン（７ｍｌ）溶液に加える。混合物を１時間攪拌し、次いでさらに５０ｍｇのカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを加える。その後混合物をさらに６０分間攪拌する。反応混合物をダウエックス（登録商標）５０ＷＸ８  Ｈ+樹脂で中和し、濾過し、真空下で濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィーの後、油状の６６５ｍｇの化合物５を単離する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５０，シリカゲル，８５／１５  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００５２】
製造例４
Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（６）
水素化ナトリウム（３８７ｍｇ，９．６５ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で化合物５の冷却（５℃）無水テトラヒドロフラン（８ｍｌ）溶液（６６０ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）に加える。ヨウ化メチル（０．５１ｍｌ，８．２２ｍｍｏｌ）を滴下して加え、混合物を室温で２０時間攪拌する。過剰の水素化ナトリウムをメタノールで失活させ、混合物を５０ｍｌの氷冷水に注ぐ。酢酸エチル（２０ｍｌで３回）で抽出した後、有機相を塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して６９０ｍｇの化合物６を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２５，シリカゲル，９５／５  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００５３】
製造例５
Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（７）
化合物６（６９０ｍｇ，１．０３ｍｍｏｌ）を８０％酢酸（７．３ｍｌ）に溶解し、４０℃で２０時間攪拌する。混合物を真空下で濃縮し、トルエンとともに蒸発させる。８／１／１のジクロロメタン／酢酸エチル／メタノールのシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、５６９ｍｇの化合物７を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４０，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００５４】
製造例６
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（８）
１−ベンジルオキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（２２７ｍｇ，１．０５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．１５ｍｍｏｌ）を化合物７のジクロロメタン溶液（５６０ｍｇ，０．９６ｍｍｏｌ）に加え、次いで混合物を室温で２０時間攪拌する。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１０％炭酸水素ナトリウム溶液および水で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発乾固する。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、６００ｍｇの化合物８を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５０，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００５５】
製造例７
Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（９）
化合物４の製造例に記載の手順に基づき、化合物８を化合物９に変換する。カップリング反応を５℃で行う。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５０，シリカゲル，２／８  ｖ／ｖ  ヘプタン／酢酸エチル
【００５６】
スキーム２−七糖類１４の合成
【００５７】
【化６】
0004402835.tif 000005
【００５８】
製造例８
Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１０）
化合物５の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物９を化合物１０に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００５９】
製造例９
Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１１）
化合物６の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物１０を化合物１１に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５０，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００６０】
製造例１０
Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１２）
化合物７の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物１１を化合物１２に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００６１】
製造例１１
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１３）
化合物８の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物１２を化合物１３に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４０，シリカゲル，７．０／１．５／１．５  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００６２】
製造例１２
Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１４）
化合物１３と二糖類２のカップリング反応を化合物９の製造例に記載の手順に従って行い、化合物１４を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４０，シリカゲル，７．０／１．５／１．５  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００６３】
スキーム３−九糖類１９の合成
【００６４】
【化７】
0004402835.tif 000006
【００６５】
製造例１３
Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１５）
化合物５の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物１４を化合物１５に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６０，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００６６】
製造例１４
Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］2−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１６）
化合物６の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物１５を化合物１６に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．７０，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００６７】
製造例１５
Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］2−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１７）
化合物１６（５．０５ｇ，２．０ｍｍｏｌ）の８０％酢酸（５０ｍｌ）溶液を、４０℃で２０時間攪拌する。混合物を真空下で濃縮し、トルエンと共に蒸発させる。残渣を酢酸エチルに溶解し、水で抽出する。水相をジクロロメタンで抽出し、有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発乾固して２．６８ｇの化合物１７を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５０，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００６８】
製造例１６
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］2−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１８）
化合物８の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物１７を化合物１８に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．８０，シリカゲル，７．０／１．５／１．５  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００６９】
製造例１７
Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］2−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（１９）
トルエン（２２ｍｌ）中のチオグリコシド２（１．９７ｇ，２．０ｍｍｏｌ，３．５ｅｑ）、七糖類１８（０．８６ｇ，０．５７ｍｍｏｌ）および粉末４Åモレキュラーシーブの混合物を窒素雰囲気下で１５分間攪拌する。その後Ｎ−ヨードスクシンイミド（４９６ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ−メタンスルホン酸（０．８０８ｍｍｏｌ）を含有する調製したばかりの１／１  ｖ／ｖのジクロロメタン／ジオキサン（１２ｍｌ）溶液を室温で滴下して加える。１０分後、反応混合物を濾過し、ジクロロメタンで希釈し、抽出し、１０％チオ硫酸ナトリウム溶液および１０％炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下で濃縮する。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１．０９ｇの化合物１９を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．８０，シリカゲル，６／２／２  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００７０】
スキーム４−九糖類２５の合成
【００７１】
【化８】
0004402835.tif 000007
【００７２】
製造例１８
Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−［（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）］2−（１→４）−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−グルコピラノース（２０）
化合物５の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物１９を化合物２０に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２５，シリカゲル，５．０／２．５／２．５  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００７３】
製造例１９
Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（２１）
化合物６の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物２０を化合物２１に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５０，シリカゲル，６／２／２  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００７４】
製造例２０
Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（２２）
化合物７の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物２１を化合物２２に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２０，シリカゲル，６／２／２  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００７５】
製造例２１
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−グルコピラノシル）−（１→４）］3−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（２３）
化合物８の製造例に記載のものと同様の手順に基づき、化合物２２を化合物２３に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２０，シリカゲル，６／２／２  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン−酢酸エチル／エタノール
【００７６】
製造例２２
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−１，６−アンヒドロ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノース（２４）
１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（４８ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）、レブリン酸（２９ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（４ｍｇ，０．０３３ｍｍｏｌ）を化合物２３（３２０ｍｇ，０．１６７ｍｍｏｌ）のジオキサン（１ｍｌ）溶液に加える。反応混合物を窒素雰囲気下、室温で３時間攪拌する。次いでジクロロメタンおよび水を加え、抽出した後、有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過して濃縮する。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、３１２ｍｇの化合物２４を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５０，シリカゲル，６／２／２  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００７７】
製造例２３
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−１，６−ジ−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α，β−Ｄ−グルコピラノース（２５）
の化合物２４（３１２ｍｇ，０．１５５ｍｍｏｌ）の無水酢酸（２．２５ｍｌ）、酢酸（５０μｌ）およびトリフルオロ酢酸（０．１４ｍｌ）の混合物溶液を室温で４時間攪拌する。トルエン（１０ｍｌ）を加えた後、混合物を濃縮し、トルエン（１０ｍｌで３回）と共に蒸発させる。シリカゲルカラムクロマトグラフィーの後、３２４ｍｇの化合物２５を単離する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６５，シリカゲル，６／２／２  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００７８】
スキーム 5 -九糖類27の合成
【００７９】
【化９】
0004402835.tif 000008
【００８０】
製造例２４
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α，β−Ｄ−グルコピラノース（２６）
化合物２５（３２４ｍｇ，０．１５３ｍｍｏｌ）およびモルホリン（２２．３μｌ，０．２５６ｍｍｏｌ）のトルエン（２ｍｌ）溶液を３５℃で４時間攪拌する。次に、モルホリン（２２．３μｌ）を再度加え、反応混合物を３５℃で２０時間攪拌する。混合物を水ですばやく冷却する。ジクロロメタンで抽出した後、有機相を０．１Ｎ塩酸および水で連続的に洗浄し、乾燥し、蒸発乾固する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーの後、２８０ｍｇの化合物２６を単離する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４５，シリカゲル，６／２／２  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００８１】
製造例２５
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α，β−Ｄ−グルコピラノース  トリクロロアセトイミデート（２７）
トリクロロアセトニトリル（３９μｌ，０．３９ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４．７ｍｇ）を化合物２６（１３８ｍｇ，０．０６６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１．５ｍｌ）溶液に加える。２時間攪拌した後、混合物を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、１５２ｍｇのイミデート２７を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５，シリカゲル，８／１／１  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【００８２】
スキーム６−二糖類３３の合成
【００８３】
【化１０】
0004402835.tif 000009
【００８４】
製造例２６
メチル−Ｏ−（４，６−Ｏ−イソプロピリデン−３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（２９）
化合物２８（２．５ｇ，３．５３ｍｍｏｌ）（M. Petitou ら., J. Med. Chem. 1997, 40, 1600）を５の合成と同様に処理し、シリカクロマトグラフィー後（２／１  シクロヘキサン／酢酸エチル）、２９（２．１ｇ，９８％）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３２，シリカゲル，２／１  ｖ／ｖ  シクロヘキサン／酢酸エチル
【００８５】
製造例２７
メチル−Ｏ−（４，６−Ｏ−イソプロピリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３０）
化合物２９（２．０ｇ，３．３ｍｍｏｌ）を化合物６の合成と同様に処理し、シリカクロマトグラフィー後（５／１  シクロヘキサン／酢酸エチル）、化合物３０（１．８３ｇ，８９％）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３８，シリカゲル，５／２  ｖ／ｖ  シクロヘキサン／酢酸エチル
【００８６】
製造例２８
メチル−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３１）
７０％トリフルオロ酢酸水溶液（３．１４ｍｌ）を化合物３０（１．７６ｇ，２．８４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１６ｍｌ）溶液に加える。５０分後、反応溶媒をジクロロメタンで希釈し、次いで中性になるまで水で洗浄する。その後有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過して濃縮する。残渣をシリカで精製し、化合物３１（１．４５ｇ，８８％）を得る。
［α］20D＝＋１０（ｃ＝１．０，ジクロロメタン）．
【００８７】
製造例２９
メチル−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３２）
２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ（３．３ｍｇ）、炭酸水素ナトリウム溶液（４ｍｌ）、臭化カリウム（２２ｍｇ）およびテトラブチルアンモニウムクロリドを、化合物３１（１．１６ｇ）のジクロロメタン（６ｍｌ）溶液に加える。混合物を０℃に冷却し、飽和塩化ナトリウム溶液（４．４ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２．２ｍｌ）および次亜塩素酸ナトリウム（１．３Ｍ，５ｍｌ）の混合物を１５分間で加える。１時間攪拌した後、混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する（３回）。有機相を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、蒸発乾固して粗の化合物３２を得る。
Ｒｆ＝０．２２，シリカゲル，１０／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【００８８】
製造例３０
メチル−Ｏ−（ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３３）
化合物３２を窒素雰囲気下でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１１ｍｌ）に溶解する。炭酸水素カリウム（０．６７ｇ）および臭化ベンジル（１．０７ｍｌ）を混合物に加えて９０分間攪拌する。酢酸エチルおよび水を加え、抽出後に有機相を濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる精製で、０．９９ｇの化合物３３を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５８，シリカゲル，１／４  ｖ／ｖ  トルエン／ジエチルエーテル
【００８９】
スキーム７−四糖類３６の合成
【００９０】
【化１１】
0004402835.tif 000010
【００９１】
製造例３１
メチル−Ｏ−（ベンジル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート−（１→４）−Ｏ−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３５）
トルエン（１０ｍｌ）中の化合物３４（２７４ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）(M. Petitou, ら., J.Med. Chem., 1997, 40, 1600)および化合物３３（２００ｍｇ，０．２９ｍｍｏｌ）をモレキュラーシーブ（２２０ｍｇ）の存在下、テトラブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（トルエン中０．１５ｍｌの１ｍｏｌ溶液）と共に−２０℃で処理する。１０分間攪拌した後、反応混合物を中和し（ＮａＨＣＯ3）、濾過して濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、化合物３５（３３４ｍｇ，８０％）を得る。
［α］20D＝＋３１（ｃ＝０．７６，ジクロロメタン）
【００９２】
製造例３２
メチル−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−Ｏ−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３６）
化合物３５（３０８ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）をトルエン／エタノール混合物（１／２，４３ｍｌ）に溶解し、次いでヒドラジン酢酸塩（１０１ｍｇ，５ｅｑ）を加える。４５分間攪拌した後、混合物を濃縮し、次いでシリカカラムで精製し、化合物３６（１６２ｍｇ，８９％）を得る。
［α］20D＝＋２９（ｃ＝１．０５，ジクロロメタン）
【００９３】
スキーム８−多糖類３８の合成
【００９４】
【化１２】
0004402835.tif 000011
【００９５】
製造例３３
メチル  Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−］3−Ｏ−（６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−Ｏ−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３７）
２／１  ジエチルエーテル／ジクロロメタン混合物（２．８ｍｌ）中のイミデート２７（１７７ｍｇ，７６．６μｍｏｌ）および受容体３６（２０１ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）を化合物３５の合成と同様にしてトリフルオロメタンスルホン酸ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルエステル（１１．５μｌの１ｍｏｌジクロロメタン溶液と共に処理する。化合物をセファデックス（登録商標）ＬＨ−２０クロマトグラフィーカラム（１／１  ジクロロメタン／エタノール）、次いでシリカカラム（３／０．５／１  トルエン／アセトン／エタノール）、最後にシリカカラム（３／２  ジイソプロピルエーテル／エタノール）で精製し、誘導体３７（１１６ｍｇ，４４％）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３１，シリカゲル，３／０．５／０．４  ｖ／ｖ／ｖ  ジイソプロピルエーテル／アセトン／エタノール．
【００９６】
製造例３４
メチル  Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−］3−Ｏ−（６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−Ｏ−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（３８）
化合物３６の製造例に記載の手順に基づいて化合物３７（１１０ｍｇ，０．０３２ｍｍｏｌ）を化合物３８（９５ｍｇ，８９％）に転換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３２，シリカゲル，１／１  ｖ／ｖ  トルエン／アセトン
【００９７】
スキーム９−三糖類４３の合成
【００９８】
【化１３】
0004402835.tif 000012
【００９９】
製造例３５
Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１，２，３，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース（４０）
市販のマルトトリオース（７ｇ，１３．９ｍｍｏｌ）を酢酸ナトリウム（７ｇ，８５ｍｍｏｌ）の無水酢酸（７０ｍｌ）懸濁液に１５５℃で少しずつ加える。１５分後、溶液を冷却し、氷冷水（７００ｍｌ）に注ぎ入れる。酢酸エチルで抽出した後、有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過して濃縮し、１３．１ｇの化合物４０を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５３，シリカゲル，７／３  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／酢酸エチル
【０１００】
製造例３６
エチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシド（４１）
化合物４０（１３ｇ，１３．５ｍｍｏｌ）をトルエン（８０ｍｌ）に溶解する。エタンチオール（１．９７ｍｌ，２６．９ｍｍｏｌ）および三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（１３．７ｍｌの１ｍｏｌトルエン溶液）を窒素雰囲気下で加える。６０時間攪拌した後、混合物を水およびジクロロメタンで希釈する。抽出後、有機相を１０％炭酸水素ナトリウム溶液および水で洗浄し、乾燥し、濾過して濃縮する。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、８．６ｇの化合物４１を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６０，シリカゲル，７／３  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／酢酸エチル
【０１０１】
製造例３７
エチル  Ｏ−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシド（４２）
化合物５の製造例に記載の手順に従って化合物４１を化合物４２に変換する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．８０，シリカゲル，１３／７／１．６／４  ｖ／ｖ／ｖ／ｖ  酢酸エチル／ピリジン／酢酸／水
【０１０２】
製造例３８
エチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシド（４３）
化合物２の製造例に記載の手順に従って化合物４２を化合物４３に変換する。
【０１０３】
スキーム１０−多糖類４６の調製
【０１０４】
【化１４】
0004402835.tif 000013
【０１０５】
製造例３９
メチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−Ｏ−（６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−Ｏ−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（４４）
チオグリコシド４３（１７０ｍｇ，１０６．７μｍｏｌ）および受容体３８（９０ｍｇ，２７μｍｏｌ）を化合物４の手順に従って結合させる。生成物をまずセファデックス（登録商標）ＬＨ２０（１／１  ジクロロメタン／エタノール）のクロマトグラフィーで、次いでシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１２／１０  ｖ／ｖ  シクロヘキサン／アセトン）で精製し、８９．５ｍｇ（６８％）の化合物４４を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４３，シリカゲル，（１２／１０  ｖ／ｖ  シクロヘキサン／アセトン）
【０１０６】
製造例４０
メチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４））3−Ｏ−（６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−Ｏ−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（４５）
化合物４４（８０ｍｇ，０．０１６３ｍｍｏｌ）の酢酸（３ｍｌ）溶液を、炭上の１０％パラジウム（１６０ｍｇ）の存在下水素圧下（１０ｂａｒ）で処理する。濾過した後に溶液を濃縮し、化合物４５を得る。これを精製せずに以下の工程で使用する。
【０１０７】
製造例４１
メチル  Ｏ−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−Ｏ−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（４６）
メタノール（２．８ｍｌ）および５Ｎ水酸化ナトリウム溶液（０．６９ｍｌ）の混合物を化合物４５（７２ｍｇ，０．０１６ｍｍｏｌ）に加える。５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液をメタノール（１５０ｍｌ／ｍｍｏｌ）中のエステル溶液に加える（水酸化ナトリウム濃度が添加終了時に０．５Ｍになる量で）。２〜５時間後、水を導入し、混合物をセファデックス（登録商標）Ｇ−２５ゲルカラム（１．６×１１５ｃｍ）に通して、水で溶出する。溶出物を濃縮し、ダウエックス（登録商標）５０Ｈ+カラム（２ｍｌ）に通して凍結乾燥する。この段階で全ての保護基が除去されていることをプロトンＮＭＲによって確認する。必要に応じて生成物を再度水素化および／またはけん化に付す。このようにして化合物４６（３４ｍｇ，６８％、２段階）を得る。
【０１０８】
スキーム１１−二糖類５４の製造例
【０１０９】
【化１５】
0004402835.tif 000014
【０１１０】
製造例４２
メチル  Ｏ−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド（４８）
化合物４７（６０ｇ）（市販で入手可）を臭化ベンジル（５０．５ｍｌ）と共にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８５８ｍｌ）に溶解する。溶液を＋１０℃に冷却し、混合物を攪拌しながら２０％水酸化ナトリウム水溶液を滴下して加える。１時間後、反応温度を２０℃に上げて混合物をさらに２０時間攪拌する。次いで溶液を水、氷およびトルエンの混合物中に注ぎ入れ、抽出する。有機相を濃縮し、粗生成物を結晶化によって精製し、３０．０ｇの化合物４８［J.M. Kusterら、Justus Liebigs Ann. Chem. 1975, 2179-2189に記載］を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６０，シリカゲル，７／３  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル
【０１１１】
製造例４３
メチル  Ｏ−４，６−Ｏベンジリデン−２−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（４９）
化合物４８（２６．４ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２１１ｍｌ）に溶解し、＋５℃に冷却する。水素化ナトリウム（３．２ｇ）を窒素雰囲気下で加える。次に、ヨードメタン（１１．３ｇ）を滴下して加え、混合物を室温で１時間攪拌する。混合物を酢酸エチルで希釈し、水で２回洗浄し、濃縮して２８ｇの粗の化合物４９［M. Petitou ら. in J. Med. Chem. 1997, 40, 1600-1607に記載］を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．７０，シリカゲル（７／３  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル）
【０１１２】
製造例４４
メチル  Ｏ−２−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５０）
化合物４９（２８ｇ）をメタノール（４６８ｍｌ）に溶解する。ｐ−トルエンスルホン酸（１．３５ｇ）を加え、混合物を２０℃で２０時間攪拌する。混合物をトルエンで希釈し、濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる精製で２１ｇの化合物５０を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．０７，シリカゲル（６／４  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル）
【０１１３】
製造例４５
メチル  Ｏ−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５１）
化合物５０（１１．８ｇ）を窒素雰囲気下でジクロロメタン（１６０ｍｌ）に溶解する。トリメチルオキソニウムテトラフルオロボレート（７．０ｇ）および２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン（１０．６ｇ）を室温で加える。２時間後、混合物を水と氷の混合物中に注ぎいれ、ジクロロメタンで抽出する。有機相を炭酸水素ナトリウムで洗浄し、濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィーで粗生成物を精製し、１０．１ｇの化合物５１を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２５，シリカゲル（７／３  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル）．
【０１１４】
製造例４６
エチル  ２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−メチル−１−チオ−α−Ｌ−イドピラノース（５２）
１，２，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノース（塩化ベンゾイルを無水酢酸い代えてペルベンゾイル類似体のために記載されたように製造；Jaurandら. Bio. Med. Chem. Lett, 1992, 2, 897-900）（４８．４ｇ）をトルエン（１７５ｍｌ）に溶解する。エタンチオール（２０ｍｌ）およびフッ化ホウ素エーテル錯体（トルエン中１Ｍ，１３４ｍｌ）を窒素雰囲気下で加える。１時間攪拌した後、炭酸水素ナトリウム水溶液（４００ｍｌ）およびこの混合物を加え、混合物を１時間攪拌する。次いで混合物を酢酸エチルに注ぎ入れる。有機相を水で２回洗浄し、濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して２９．６ｇの化合物５２を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４５，シリカゲル（６／４  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル）．
【０１１５】
製造例４７
メチル  Ｏ−（２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５３）
化合物５１（１０．１ｇ）および化合物５２（１６．０ｇ）を窒素雰囲気下でトルエン（３０４ｍｌ）に溶解する。粉末モレキュラーシーブ（４Å）を加えた後、反応媒体を−２０℃に冷却する。０．１Ｍ  Ｎ−ヨードスクシンイミド溶液（１０．１ｇ）およびトリフルオロメタンスルホン酸（０．８０ｍｌ）の調製したばかりの１／１  ｖ／ｖ  ジオキサン／ジクロロメタン混合物溶液を窒素気流下で滴下して加える。１０分後、赤色反応混合物を濾過し、水性チオ硫酸ナトリウムおよび水性炭酸水素ナトリウムで連続的に洗浄する。有機相を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して２１．１ｇの化合物５３を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３０，シリカゲル（６／４  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル）．
【０１１６】
製造例４８
メチル  Ｏ−（３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５４）
化合物５３（２１．１ｇ）を２９５ｍｌのメタノール／ジオキサン混合物（１／１  ｖ／ｖ）に溶解し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを加える。３０分後、混合物をＨ+型ダウエックス（登録商標）５０ＷＸ８樹脂で中和し、真空下で濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィーで精製を行い、１２．７ｇの化合物５４を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．０８，シリカゲル（３／７  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル）
【０１１７】
スキーム１２−四糖類６２の製造例
【０１１８】
【化１６】
0004402835.tif 000015
【０１１９】
製造例４９
メチル  Ｏ−（４，６−Ｏ−イソプロピリデン−３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５５）
化合物５４（１２．７ｇ）を窒素雰囲気下でテトラヒドロフラン（６７ｍｌ）に溶解する。２，２−ジメトキシプロパン（１９ｍｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸を加え、次いで混合物を室温で１６時間攪拌する。次いで反応媒体を水性炭酸水素ナトリウムで希釈し、酢酸エチルで抽出し、溶媒を蒸発させた後に粗生成物を得る。これをシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、１０．４ｇの化合物５５を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５，シリカゲル（１／１  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル）．
【０１２０】
製造例５０
メチル  Ｏ−（４，６−Ｏ−イソプロピリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５６）
化合物５５（１０．４ｇ）をテトラヒドロフラン（１４０ｍｌ）に溶解し、１０℃に冷却する。水素化ナトリウム（油中１．３８ｇ；６０％分散液）およびヨードメタン（１．８４ｍｌ）を窒素雰囲気下で加える。４時間後、過剰の水素化ナトリウムをメタノールで失活させ、混合物をジクロロメタンで抽出して濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、１１．１ｇの化合物５６を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５５，シリカゲル（９５／５  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル）．
【０１２１】
製造例５１
メチル  Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５７）
化合物５６（１１．１ｇ）を７／３（ｖ／ｖ）酢酸／水の混合物に溶解し、一晩攪拌する。混合物をトルエン存在下で２回蒸発させ、シリカゲルクロマトグラフィーで精製して９．２ｇの化合物５７を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．０９，シリカゲル（１／１  ｖ／ｖ  トルエン  酢酸エチル）
【０１２２】
製造例５２
メチル  Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５８）
２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ（１３ｍｇ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１６ｍｌ）、臭化カリウム（８８ｍｇ）およびテトラブチルアンモニウムクロリド（１１７ｍｇ）を化合物５７（４．７ｇ）のジクロロメタン（２８ｍｌ）溶液に加える。混合物を０℃に冷却し、飽和塩化ナトリウム溶液（１７．８ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（８．８ｍｌ）および次亜塩素酸ナトリウム（１．３Ｍ；２０ｍｌ）の混合物を１５分間で加える。１時間攪拌した後、媒体を酢酸エチルで希釈し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発乾固して３．５ｇの粗化合物５８を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１４，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【０１２３】
製造例５３
メチル  Ｏ−（ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（５９）
化合物５８（３．５ｇ）を窒素雰囲気下でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２９ｍｌ）に溶解する。炭酸水素カリウム（１．７６ｇ）および臭化ベンジル（２．８５ｍｌ）を加え、混合物を４時間攪拌する。酢酸エチルおよび水を加え、抽出後に有機相を濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、３．４ｇの化合物５９を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４３，シリカゲル，４／６  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル
【０１２４】
製造例５４
メチル  Ｏ−（ベンジル  ４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（６１）
化合物５９（０．５３ｇ）および化合物６０（１．０ｇ）の混合物をトルエン存在下で蒸発させ、窒素雰囲気下でジクロロメタン（１６．２ｍｌ）に溶解する。粉末モレキュラーシーブ（４Å）を加えた後、混合物を−２０℃に冷却する。１５分間攪拌した後、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルエステル（化合物６０に対して１５ｍｏｌ％）を加える。１５分後、混合物を水性炭酸水素ナトリウムで処理する。モレキュラーシーブを濾過して除去した後、濾液をジクロロメタンで希釈し、水で洗浄し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーで精製して０．７５ｇの化合物６１を得る。
ＮＭＲ：Ｒｆ＝０．４５，シリカゲル（３／７  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル）
【０１２５】
製造例５５
メチル  Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３，６−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（６２）
化合物６１（０．７４ｇ）をピリジン（３．０ｍｌ）に溶解し、ピリジン（３．０ｍｌ）中の酢酸（４．１ｍｌ）およびヒドラジン水和物（０．４７ｍｌ）の混合物を室温で加える。９時間攪拌した後、ジクロロメタンおよび水を加える。有機相を分離し、塩酸溶液（１．０Ｎ）、水性炭酸水素ナトリウムおよび水で連続的に洗浄する。有機相を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、０．６６ｇの化合物６２を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２５，シリカゲル（９８／２  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール）
下記の反応スキーム１３に従って二糖類５５から以下の四糖類６８を調製する。
【０１２６】
スキーム１３−九糖類６８の製造例
【０１２７】
【化１７】
0004402835.tif 000016
【０１２８】
スキーム１４−二糖類７５の製造例
【０１２９】
【化１８】
0004402835.tif 000017
【０１３０】
製造例５６
メチル  ２−Ｏ−ベンジル−４，６−ジ−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド（６９）
化合物４８（２６．４ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２１１ｍｌ）に溶解し、５℃に冷却する。水素化ナトリウム（２．５ｇ）を窒素雰囲気下で加える。次に４−塩化メトキシベンジル（１３．３ｇ）を滴下して加え、混合物を室温で１時間攪拌する。混合物を酢酸エチルで希釈し、水で２回洗浄し、濃縮して４０．７ｇの化合物６９を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．８０，シリカゲル，７／３  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル
【０１３１】
製造例５７
メチル  ２−Ｏ−ベンジル  ３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７０）
化合物６９（３４．９ｇ）を６０％水性酢酸に溶解し、６０℃で４時間攪拌する。混合物をトルエンで希釈し、濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、２６．４ｇの化合物７０を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．０７，シリカゲル，７／３  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル
【０１３２】
製造例５８
メチル  ２−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７１）
化合物７０（２６．４ｇ）を窒素雰囲気下でジクロロメタン（２６３ｍｌ）に溶解する。トリメチルオキソニウムテトラフルオロボレート（１１．６ｇ）および２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン（１７．４ｇ）を室温で加える。４時間後、混合物を氷冷水に注ぎいれ、ジクロロメタンで抽出する。有機相を炭酸水素ナトリウムで洗浄し、濃縮する。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１８．５ｇの化合物７１を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２５，シリカゲル，７／３  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル
【０１３３】
製造例５９
メチル  Ｏ−（２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７２）
化合物７１（１７．５ｇ）および化合物５２（２８．２ｇ）を窒素雰囲気下でトルエン（５２５ｍｌ）に溶解する。４Åモレキュラーシーブを加えた後、反応を−２０℃に冷却する。１／１  ｖ／ｖ  ジオキサン／ジクロロメタン中の精製したばかりのＮ−ヨードスクシンイミド０．１Ｍ溶液（１７．４ｇ）およびトリフルオロメタンスルホン酸溶液（１．３８ｍｌ）を窒素連続気流下で滴下して加える。１０分後、赤色反応混合物を濾過し、チオ硫酸ナトリウムと水性炭酸水素ナトリウムで連続的に洗浄する。有機相を真空下で濃縮し、３０．０ｇの化合物７２を単離する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４５，シリカゲル，８／２  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／酢酸エチル
【０１３４】
製造例６０
メチル  Ｏ−（３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７３）
化合物７２（３０．０ｇ）を４６０ｍｌの１／１  ｖ／ｖ  メタノール／ジオキサンに溶解し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを加える。１５分後、混合物をダウエックス（登録商標）５０ＷＸ８Ｈ+樹脂で中和し、真空下で濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製を行い、１７．４ｇの化合物７３を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２５，シリカゲル  ９５／５  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【０１３５】
製造例６１
メチル  Ｏ−（４，６−Ｏ−イソプロピリデン−３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７４）
化合物７３（１７．４ｇ）を窒素雰囲気下でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７７ｍｌ）に溶解する。２，２−ジメトキシプロパン（２６ｍｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸を加え、次いで混合物を３０分間攪拌する。混合物を水性炭酸水素ナトリウムで希釈し、次いで酢酸エチルで抽出し、溶媒を蒸発させた後、１９．７ｇの化合物７４を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４５，シリカゲル，９５／５  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【０１３６】
製造例６２
メチル  Ｏ−（４，６−Ｏ−イソプロピリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７５）
化合物７４（１８．５ｇ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２４．４ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。水素化ナトリウム（１．４７ｇ；油中６０％分散液）およびヨードメタン（２．３６ｍｌ）を窒素雰囲気下で加える。１時間後、過剰の水素化ナトリウムをメタノールで失活させ、混合物をジクロロメタンで抽出して２０．０ｇの化合物７５を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．８５，シリカゲル，９５／５  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【０１３７】
スキーム１５−二糖類６０の合成
【０１３８】
【化１９】
0004402835.tif 000018
【０１３９】
製造例６３
メチル  Ｏ−（４，６−Ｏ−イソプロピリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７６）
化合物７５（１８．４ｇ）をジクロロメタン（８３８ｍｌ）および水（１６８ｍｌ）に溶解する。２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン（７．１ｇ）を加え、混合物を４℃で１８時間攪拌する。混合物を水性炭酸水素ナトリウムに注ぎいれ、ジクロロメタンで抽出する。有機相を濃縮して１２．７ｇの化合物７６を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４０，シリカゲル，９５／５  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【０１４０】
製造例６４
メチル  Ｏ−（４，６−Ｏ−イソプロピリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７７）
化合物７６（１０．５ｇ）を無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１７８ｍｌ）に溶解し、次いで窒素雰囲気下で０℃に冷却する。水素化ナトリウム（１．９１ｇ；油中６０％分散液）を加え、次いで臭化ベンジル（３．３ｍｌ）を滴下して加える。３０分後、反応を完了し、過剰の水素化ナトリウムをメタノールで失活させる。水を加え、混合物を酢酸エチルで２回抽出する。溶媒を蒸発させ、１３．６ｇの化合物７７を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５０，シリカゲル，１／１  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル
【０１４１】
製造例６５
メチル  Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシル）−（１→４）−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７８）
化合物７７を７７／３３（ｖ／ｖ）酢酸／水に溶解し、一晩攪拌する。混合物をトルエンと共に２回蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１１．５ｇの化合物７８を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．０９，シリカゲル，１／１  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチルＲｆ＝０．６８，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール．
【０１４２】
製造例６６
メチル  Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（７９）
２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジルオキシ（３３ｍｇ）、炭酸水素ナトリウム溶液（４０ｍｌ）、臭化カリウム（２１８ｍｇ）およびテトラブチルアンモニウムクロリド（２８９ｍｇ）を化合物７８（１１．６ｇ）のジクロロメタン（６０ｍｌ）溶液に加える。混合物を０℃に冷却し、飽和塩化ナトリウム溶液（４４ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２１．８ｍｌ）および次亜塩素酸ナトリウム（１．３Ｍ，５０ｍｌ）の混合物を１５分間で加える。１時間攪拌した後、混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する（３回）。有機相を塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発乾固して１３．４ｇの粗化合物７９を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１４，シリカゲル，９／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／メタノール
【０１４３】
製造例６７
メチル  Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（８０）
化合物７９を窒素雰囲気下でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１１０ｍｌ）に溶解する。炭酸水素カリウム（６．７ｇ）および臭化ベンジル（１０．７ｍｌ）を加え、混合物を９０分間攪拌する。酢酸エチルおよび水を加え、抽出した後，有機相を濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、９．９ｇの化合物８０を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４３，シリカゲル，４／６  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル
【０１４４】
製造例６８
メチル  Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（８１）
化合物８０（９．９ｇ）を３００ｍｌのメタノールに溶解し、窒素雰囲気下で還流加熱する。メタノール（６５．２ｍｌ）中の１Ｍナトリウムメトキシドを滴下して加え、混合物を攪拌して３時間還流加熱する。次いで混合物を室温まで冷却し、１Ｎ水酸化ナトリウム（２２．２ｍｌ）を加え、反応混合物をさらに９０分間攪拌する。ダウエックス（登録商標）５０ＷＸ８Ｈ+樹脂で中和して濾過した後、混合物を濃縮する。純粋な生成物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１９２ｍｌ）に溶解し、モレキュラーシーブを窒素雰囲気下で加える。炭酸水素カリウム（３．２ｇ）および臭化ベンジル（４．８ｍｌ）を加え、混合物を５時間攪拌する。酢酸エチルおよび水を加え、抽出し、２相を分離した後、有機相を濃縮する。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、６．１９ｇの化合物８１および１．８８ｇの出発化合物８０を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５５，シリカゲル，４／６  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル．
【０１４５】
製造例６９
メチル  Ｏ−（ベンジル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（８２）
化合物８１（６．２ｇ）を４０ｍｌのジオキサンに溶解する。レブリン酸（２．１ｇ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（３．７５ｇ）および４−ジメチルアミノピリジン（０．２ｇ）を加え、混合物を窒素雰囲気下で２時間攪拌する。ジエチルエーテル（９５ｍｌ）を加え、沈殿物を濾過して除去する。濾液を水性硫酸水素カリウムで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過して濃縮する。エーテル／ヘプタンから結晶化して６．２ｇの化合物８２を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２６，シリカゲル，９５／５  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／アセトン
【０１４６】
製造例７０
Ｏ−（ベンジル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−１，３−ジ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α，β−Ｄ−グルコピラノース（８３）
化合物８２（６．１ｇ）を無水酢酸（２５６ｍｌ）に窒素雰囲気下で溶解し、−２０℃に冷却する。無水酢酸（４９ｍｌ）中の硫酸（４．９ｍｌ）の混合物を３０分間で滴下して加える。６０分後、酢酸ナトリウムをｐＨが中性の混合物を得るまで加える。次いで酢酸エチルおよび水を加え、有機相を濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、４．２ｇの化合物８３を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２４，シリカゲル，８／２  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／酢酸エチル
【０１４７】
製造例７１
Ｏ−（ベンジル  ４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−３−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α，β−Ｄ−グルコピラノース（８４）
化合物８３（４．２ｇ）をテトラヒドロフラン（４２ｍｌ）に溶解し、ピペリジン（４．１ｍｌ）を加える。混合物を室温で一晩攪拌する。酢酸エチルを加え、混合物を０．５Ｎ塩酸で洗浄する。有機相を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、３．２ｇの化合物８４を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３３，シリカゲル，１／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／酢酸エチル
【０１４８】
製造例７２
Ｏ−（ベンジル  ４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−３−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α，β−Ｄ−グルコピラノース  トリクロロアセトイミデート（６０）
化合物８４（１．５９ｇ）を窒素雰囲気下で無水ジクロロメタンに溶解する。トリクロロアセトニトリル（１．１ｍｌ）および炭酸セシウム（７２ｍｇ）を加え、混合物を１時間攪拌する。炭酸セシウムを濾過して除去し、濾液を濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、１．５７ｇの化合物６０を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６０，シリカゲル，３／７  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル．
【０１４９】
スキーム１６−四糖類８６の合成
【０１５０】
【化２０】
0004402835.tif 000019
【０１５１】
製造例７３
メチル  Ｏ−（ベンジル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グリコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（８５）
化合物８０（３００ｍｇ）および化合物６０（４５５．６ｍｇ）の混合物をトルエンと共に蒸発させ、窒素雰囲気下でジクロロメタン（６ｍｌ）に溶解する。４Åモレキュラーシーブを加えた後、混合物を−２０℃に冷却する。２０分間攪拌した後、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルエステル（化合物６０に対して１５ｍｏｌ％）を加える。１０分後、混合物を水性炭酸水素ナトリウムで中和する。モレキュラーシーブを濾過除去した後、濾液をジクロロメタンで希釈し、水で洗浄し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して５６０ｍｇの化合物８５を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５０，シリカゲル，３／７  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル
【０１５２】
製造例７４
メチル  Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（ベンジル  ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシド（８６）
化合物８５（５３２．６ｍｇ）をピリジン（１．９ｍｌ）に溶解し、ピリジン（１．９ｍｌ）中の酢酸（２．４ｍｌ）と水和ヒドラジン（０．３ｍｌ）の混合物を室温で加える。９分間攪拌した後、ジクロロメタンと水を加える。有機相を単離し、０．１Ｎ塩酸、水性炭酸水素ナトリウムおよび水で連続的に洗浄する。有機相を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、４５１ｍｇの化合物８６を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４５，シリカゲル，３／７  ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル
【０１５３】
スキーム１７−単糖類９３の合成
【化２１】
0004402835.tif 000020
【０１５４】
製造例７５
１，６−アンヒドロ−４−Ｏ−ｐ−メトキシフェニル−２−Ｏ−トシル−β−Ｄ−グルコピラノース（８８）
エポキシド８７（２０ｇ，６７ｍｍｏｌ）（M. Cerny ら, Collect. Czech. Chem. Commun, 1961, 26, 2542）とｐ−メトキシフェニル（３３．３ｇ，２６８ｍｍｏｌ）の混合物をアルゴン下で９０℃に熱する。混合物が液体になったらＡｌＣｌ3（０．３ｇ，２．３５ｍｍｏｌ）を少しずつ加え、３０分攪拌した後、室温まで再冷却し、反応媒体をジクロロメタン（６００ｍｌ）で希釈し、トリエチルアミン（０．５ｍｌ）で中和し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１２０ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム水溶液、（３×６０ｍｌ）、１０％硫酸水素カリウム水溶液（５０ｍｌ）および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。次いで有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過して濃縮する。残渣をエーテルから析出させ、シリカクロマトグラフィーで精製して化合物８８（１９．４ｇ，６９％）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３７，シリカゲル，６／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／エチルエーテル
【０１５５】
製造例７６
１，６−アンヒドロ−４−Ｏ−ｐ−メトキシフェニル−３−Ｏ−メチル−２−Ｏ−トシル−β−Ｄ−グルコピラノース（８９）
ヨウ化メチル（５４ｍｌ，９５４ｍｍｏｌ）および酸化銀（１８．４ｇ，７９．５ｍｍｏｌ）を化合物８８（３．３６ｇ，７．９５ｍｍｏｌ）の無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍｌ）溶液に加える。１６時間攪拌した後、混合物を濾過し（セライト）、酢酸エチル（３００ｍｌ）で希釈し、水（３×１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮してシリカクロマトグラフィーで精製し、誘導体８９（３．２３ｇ，８０％）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３６，シリカゲル，２／３  ｖ／ｖ  シクロヘキサン／エチルエーテル
【０１５６】
製造例７７
１，６−アンヒドロ−４−Ｏ−ｐ−メトキシフェニル−３−Ｏ−メチル−２−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−マンノピラノース（９０）
化合物８９（２７．４ｇ，６２．７ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３１５ｍｌ）に溶解する。次いでテトラブチルアンモニウムベンゾエート（３４１ｇ，９４０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を３時間１５０℃に維持する。室温に冷却した後、媒体を酢酸エチル（３００ｍｌ）で希釈し、中性になるまで水で洗浄し、乾燥して濃縮する。化合物９０に相当する残渣を直接以下の工程に使用する。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５３，シリカゲル，１０／１  ｖ／ｖ  ジクロロメタン／エチルエーテル
【０１５７】
製造例７８
１，６−アンヒドロ−４−Ｏ−ｐ−メトキシフェニル−３−Ｏ−メチル−β−Ｄ−マンノピラノース（９１）
ナトリウムメトキシド（１３．５ｇ，２５０ｍｍｏｌ）を上記粗残渣９０のジクロロメタン／メタノール（５４０ｍｌ，１／１）溶液に溶解する。１時間攪拌した後、反応媒体をジクロロメタン（５００ｍｌ）で希釈し、次いで３％塩酸水溶液および水で洗浄する。乾燥、濾過および濃縮後、残渣をシリカで精製して化合物９１（１０．５ｇ，２段階で５９％）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２９，シリカゲル，１／１  ｖ／ｖ  トルエン／エチルエーテル
【０１５８】
製造例７９
１，６−アンヒドロ−２−Ｏ−ベンジル−４−Ｏ−ｐ−メトキシフェニル−３−Ｏ−メチル−β−Ｄ−マンノピラノース（９２）
臭化ベンジル（６．２ｍｌ，５１．９ｍｍｏｌ）を化合物９１（９．８ｇ，３４．６ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１８０ｍｌ）溶液に加え、次いで０℃で９５％水素化ナトリウム（１．１６ｇ，４８．４ｍｍｏｌ）を加える。１６時間攪拌した後、メタノール（３ｍｌ）を０℃で加え、反応混合物を酢酸エチル（２００ｍｌ）で希釈し、水で洗浄し、乾燥し、濾過して濃縮する。化合物９２に相当する残渣を精製せずに以下の工程ですぐに使用するが、分析用の画分はシリカクロマトグラフィー後に得る。
［α］20D＝−４９（ｃ＝０．７３，ジクロロメタン）
【０１５９】
製造例８０
１，６−アンヒドロ−２−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−メチル−β−Ｄ−マンノピラノース（９３）
上記粗化合物９２をＴＨＦ／水混合物（３１１ｍｌ，１７／１）に溶解し、次いでアンモニウム硝酸セシウム（ammonium cerium nitrate）（７６ｇ，１３８ｍｍｏｌ）を０℃で加える。３０分間攪拌した後、反応混合物をジクロロメタン（１ｌ）で希釈し、次いで２％炭酸水素ナトリウム水溶液、その後水で洗浄する。乾燥、濾過および濃縮後、残渣をシリカで精製して化合物９３（６．６３ｇ，２工程で７２％）を得る。
［α］20D＝−６８（ｃ＝１．０２，ジクロロメタン）．
単糖類３から九糖類２４を得るためのものと同様の反応順序に従って、単糖類９３から下記の九糖類９４を得る。
【０１６０】
スキーム１８−九糖類９６の合成
【０１６１】
【化２２】
0004402835.tif 000021
【０１６２】
製造例８１
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−１，６−アンヒドロ−３−Ｏ−メチル−β−Ｄ−マンノピラノース（９５）
５％Ｐｄ／Ｃ（１０９ｍｇ）を化合物９４（７５９ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン／ｔ−ブタノール混合物（３．３ｍｌ，１／２）溶液に加える。１０ｂａｒで５５℃で１６時間攪拌した後、混合物を濾過して濃縮する。化合物９５は精製または特性付けをせずに以下の工程で使用する。
【０１６３】
製造例８２
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−１，６−アンヒドロ−２−Ｏ−ベンゾイル−３−Ｏ−メチル−β−Ｄ−マンノピラノース（９６）
塩化ベンゾイル（６２μｌ，０．５４ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（９ｍｇ，０．０７３ｍｍｏｌ）を化合物９５（７２６ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）の無水ピリジン（５．４ｍｌ）溶液に加える。６０℃で２時間攪拌した後、同量の塩化ベンゾイルを加え、３５分後に溶液を濃縮し、残渣をジクロロメタンに吸収し、１０％硫酸水素カリウム水溶液、２％炭酸水素ナトリウム水溶液および水で洗浄する。次いで有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、その後濃縮する。残渣をシリカで精製し、化合物９６（６８４ｍｇ，２工程で９０％）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５，シリカゲル，１／１  ｖ／ｖ  トルエン／アセトン
【０１６４】
スキーム１９−九糖類９９の合成
【０１６５】
【化２３】
0004402835.tif 000022
【０１６６】
製造例８３
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−１，６−ジ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンゾイル−３−Ｏ−メチル−α，β−Ｄ−マンノピラノース（９７）
化合物９６（６５７ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）を製造例２３のように無水酢酸（４．５ｍｌ）、酢酸（１００μｌ）およびトリフルオロ酢酸（０．１９ｍｌ）の混合物と処理する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーの後、化合物９７（４３２ｍｇ，９２％）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５３，シリカゲル，１／１  ｖ／ｖ  トルエン／アセトン
【０１６７】
製造例８４
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−６−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンゾイル−３−Ｏ−メチル−α，β−Ｄ−マンノピラノース（９８）
化合物９７（３８２ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）とベンジルアミン（７３６μｌ，６．７４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６ｍｌ）溶液を５時間攪拌する。次いで混合物を氷上に注ぎ，エチルエーテルで抽出した後、有機相を３％塩酸および水で連続的に洗浄し、乾燥し，濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィーの後、化合物９８（２４１ｍｇ）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３７，シリカゲル，６／２／２  ｖ／ｖ／ｖ  トルエン／酢酸エチル／エタノール
【０１６８】
製造例８５
Ｏ−（６−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−レブリノイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンゾイル−３−Ｏ−メチル−α，β−Ｄ−マンノピラノース  トリクロロアセトイミデート（９９）
トリクロロアセトニトリル（５７μｌ，０．５６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（５８ｍｇ）を化合物９８（２４１ｍｇ）のジクロロメタン（２．２ｍｌ）溶液に加える。１時間攪拌した後、混合物を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付してイミデート９９（２２１ｍｇ，２工程で５６％）を得る。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１９，シリカゲル，３／２  ｖ／ｖ  シクロヘキサン／アセトン
【０１６９】
実施例１
メチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−３−Ｏ−メチル−２，６−ジ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシド，ナトリウム塩（Ｉ）
十六糖類４６（３４ｍｇ，１１μｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍｌ）に溶解する。三酸化硫黄／トリエチルアミン錯体（１８０ｍｇ，０．８９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５５℃で２０時間攪拌する。トリエチルアミン／三酸化硫黄錯体（５ｍｏｌ／ｍｏｌヒドロキシル官能基）を硫酸化される化合物のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍｇ／ｍｌ）溶液に加える。５５℃で一日経過後、溶液をセファデックス（登録商標）Ｇ−２５カラム（１．６×１１５ｃｍ）上に置き、０．２Ｍ塩化ナトリウムで溶出する。生成物を含む画分を濃縮し、同カラムにて水で溶出して脱塩する。凍結乾燥後、白色粉末として化合物Ｉ（４７ｍｇ，８７％）を得る。
［α］20D＝＋６５（ｃ＝１．０水）．
【０１７０】
実施例２
メチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−Ｏ−（６−Ｏ−メチル−２，３−ジ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−３，６−ジ−Ｏ−メチル−２−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシド，ナトリウム塩（ＩＩ）
【０１７１】
実施例３
メチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−Ｏ−（３−Ｏ−メチル−２，６−ジ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−マンノピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−Ｏ−（６−Ｏ−メチル−２，３−ジ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−６−Ｏ−メチル−２，３−ジ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシド，ナトリウム塩（ＩＩＩ）
【０１７２】
実施例４
メチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−Ｏ−（３−Ｏ−メチル−２，６−ジ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−マンノピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−Ｏ−（６−Ｏ−メチル−２，３−ジ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−３，６−ジ−Ｏ−メチル−２−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシド，ナトリウム塩（ＩＶ）
【０１７３】
実施例５
メチル  Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］3−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−Ｏ−（６−Ｏ−メチル−２，３−ジ−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−メチル−２−Ｏ−スルホ−α−Ｌ−イドピラノシルウロン酸）−（１→４）−３，６−ジ−Ｏ−メチル−２−Ｏ−スルホ−α−Ｄ−グルコピラノシド，ナトリウム塩（Ｖ）
【０１７４】
実施例２から５の化合物は適当な四糖類を適当な九糖類と結合させ、次いで三糖類４１または４３（製造例３６または３８に記載）と結合させ、その後通常の脱保護および硫酸化反応を行うことによって同様に調製する。
実施例２の場合は、使用する四糖類は製造例５５に記載のもの（化合物６２）であり、使用する九糖類は製造例２５に記載のもの（化合物２７）である。
【０１７５】
実施例３の場合は，使用する四糖類は製造例７４に記載のもの（化合物８６）であり、使用する九糖類は製造例８５に記載のもの（化合物９９）である。
実施例４の場合は、使用する四糖類は製造例５５に記載のもの（化合物６２）であり、使用する九糖類は製造例８５に記載のもの（化合物９９）である。
実施例５の場合は、使用する四糖類は化合物６８であり、使用する九糖類は製造例２５に記載のもの（化合物２７）である。
【０１７６】
表１
1Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ，４．８０ｐｐｍ）Ｈ−１プロトンのδ（ｐｐｍ）：
ユニット１＝還元末端のユニット
ユニット１６＝非還元末端のユニット
【０１７７】
【表１】
0004402835.tif 000023
【０１７８】
表II「負イオンエレクトロスプレー」（ＥＳＩ）法
【０１７９】
【表２】
0004402835.tif 000024