(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
黒米又は紫米の玄米または糠より抽出されたプラーク形成抑制物質を有効成分として含有することを特徴とするプラーク形成抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、う蝕の原因となるグルカンを合成する酵素・グルコシルトランスフェラーゼの活性を阻害して虫歯の発生を防ぐ作用があるグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、口腔内微生物の生育場所となるプラークの形成を抑制して歯周病を防ぐ作用があるプラーク形成抑制剤、ならびにう蝕予防作用を付与した口腔用剤および飲食物に関するものである。
【０００２】
なお、この明細書では、人が飲食する物だけでなく、う蝕を起こすことがある家畜や愛玩動物の飼料または餌も包含する意味で飲食物という。
【０００３】
【従来の技術】
う蝕の発生には口腔内の微生物、特にストレプトコッカス・ミュータンスが産生する酵素・グルコシルトランスフェラーゼが関与している。すなわち、口腔内に残った飲食物中のショ糖の一部がグルコシルトランスフェラーゼの作用によって水不溶性かつ付着性の強いグルカンに変化し、それが口腔内微生物と共に歯の表面に付着してプラーク（歯垢）を形成する。そして、歯垢内の微生物が食物中の糖を代謝して酸を作り、この酸が歯のエナメル質を脱灰し侵食するのがう蝕である。
【０００４】
したがって、う蝕を防ぐには、歯の表面に付着した歯垢を歯磨き等を用いて除くだけでなく、口腔におけるストレプトコッカス・ミュータンスの増殖やグルコシルトランスフェラーゼの作用を阻害することによってグルカンの生成を防止し、ひいてはプラークが生じないようにするのが最も有効である。
【０００５】
このような観点から、近年、グルコシルトランスフェラーゼ阻害作用を有する物質やプラーク形成を抑制する物質を含有させることによりう蝕予防作用を付与した口腔用剤や飲食物が提供されるようになった。このような用途に適したものとして従来知られているグルコシルトランスフェラーゼ阻害物質は、ムタステイン、生薬タンニン類、エラグ酸、緑茶ポリフェノール、ウーロン茶抽出物等である。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、安全性が高い天然物を原料とする新規なグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤、およびそれらを添加してう蝕予防作用を付与した口腔用剤と飲食物を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明により提供されたう蝕予防に有効な製剤および飲食物は次のとおりである。
【０００８】
▲１▼  有色素米の玄米または糠より抽出されたグルコシルトランスフェラーゼ阻害物質を有効成分として含有することを特徴とするグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤。
【０００９】
▲２▼  有色素米の玄米または糠より抽出されたプラーク形成抑制物質を有効成分として含有することを特徴とするプラーク形成抑制剤。
【００１０】
▲３▼  上記▲１▼のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤または（および）上記▲２▼のプラーク形成抑制剤を含有することを特徴とする口腔用剤。
【００１１】
▲４▼  上記▲１▼のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤または（および）上記▲２▼のプラーク形成抑制剤を含有することを特徴とするう蝕予防性飲食物。
【００１２】
▲５▼  有色素米の糠を有効成分として含有することを特徴とするう蝕予防剤。
【００１３】
ここで“有色素米”とは、果皮の部分（搗精すると糠となって剥落する部分）にアントシアニンその他の赤色系色素を含み、それにより玄米が淡赤色〜紫黒色である米を意味する。高度の搗精を施すと白くなるものもあるが、上述のような果皮の着色があることによって、現代日本人が主食とする白米（しろごめ）とは明確に区別されているものである。
【００１４】
【発明の実施の形態】
有色素米は、古代人にとっては、また地域によっては、主食であった可能性もあるが、現代では、日常的にこれを食しているのはアジアのごく一部の地域にすぎない。しかし、近年その特徴的な色や風味を現代の食生活にも生かそうとする試みがなされており、その結果、幾つかの新品種も開発されて小規模ながら国内でも栽培されるようになった。
【００１５】
グルコシルトランスフェラーゼ阻害作用を示す物質やプラーク形成抑制作用を示す物質は有色素米の果皮の部分に含まれているので、玄米または糠が抽出原料となる。抽出溶媒としては、メタノール、エタノール、イソプパノール、ブタノール等、炭素数１〜４の低級脂肪族アルコール；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール；アセトン等の低級脂肪族ケトン；水；またはこれらの混合物を用いることができ、常温または加温状態の溶媒に抽出原料を浸漬するだけでも効率よく抽出されて来る。
【００１６】
抽出液から濾過または遠心分離により固形物を除去したのち溶媒を留去し、必要ならばさらに乾燥する。得られる抽出液濃縮物およびその乾燥物は、ほとんどの場合、グルコシルトランスフェラーゼ阻害作用とプラーク形成抑制作用の両方の活性を示す。また、その活性は、そのままでもグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤あるいはプラーク形成抑制剤として使用可能なほど強い。しかし、さらに適宜の精製を施して活性を向上させてから利用に供してもよいことはもちろんである。
【００１７】
本発明によるグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤には、有色素米から抽出されたグルコシルトランスフェラーゼ阻害物質のほかに、任意の助剤、賦形剤、溶液として利用に供するための水または有機溶剤等を含有させることができる。プラーク形成抑制剤の場合も同様である。
【００１８】
本発明によるグルコシルトランスフェラーゼ阻害物質やプラーク形成抑制剤は、口腔用剤に添加してその作用を口腔におけるグルカン生成の防止とプラーク形成の抑制に利用することができる。添加対象として適当な口腔用剤の例としては、各種歯磨き類、マウスウォッシュ、トローチ、チューインガム、口腔用パスタ、歯肉マッサージクリーム、うがい剤、口中清涼剤等がある。
【００１９】
本発明によるグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤やプラーク形成抑制剤の添加により他の口腔用剤構成成分や口腔用剤製造法が制限されることはなく、たとえばリン酸水素カルシウム、炭酸カルシウム、不溶性メタリン酸ナトリウム、アルミノシリケート、無水ケイ酸、レジン等の研磨剤；長鎖アルキル硫酸ナトリウム、ラウリルスルホ酢酸ナトリウム、ラウリルジエタノールアマイド、ショ糖脂肪酸エステル等の界面活性剤；ＣＭＣ、ヒドロキシエチルセルロース、アルギン酸塩、カラゲナン、アラビアガム、ポリビニルアルコール等の粘結剤；ポリエチレングリコール、ソルビトール、グリセリン、プロピレングリコール等の粘稠剤；サッカリン、ステビオサイド類、グリチルリチン酸、ソーマチン、アスパルテーム等の甘味剤；デヒドロ酢酸、デヒドロ酢酸ナトリウム等の防腐剤；メントール、カルボン、オイゲノール、アネトール、ハッカ油、スペアミント油、ペパーミント油、ユーカリ油、ジンジャー油、アニス油等の香料；各種色素等、口腔用剤製造に通常使用される原料を製品の種類や用途に応じて任意に選択し、常法により製造することができる。
【００２０】
また、口腔用剤を製造する場合、他のグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤を併用してもよく、さらに、ストレプトコッカス・ミュータンスに対して有効な抗菌剤を添加してもよい。任意の抗炎症剤、抗菌剤、消臭剤等を添加することにより、口腔用剤として一層すぐれたものを提供することもできる。添加可能な抗炎症剤の例としては、アセンヤク、カンゾウ、ウワウルシ、オウゴン、コウキ、サイコ、サンザシ、シソ、シャクヤク、ソウハクヒ、キョウニン、タイソウ、チョウジ、トウニン、ニクズク、ボタンピ、クワの葉等の抽出物；アズレン、アラントイン、ウルソール酸、オレアノール酸、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸またはその誘導体；トコフェロール、トラネキサム酸等を挙げることができ、また、添加可能な抗菌剤の例としては、ゴバイシ、サイシン、サンショ、ショウキョウ、ディル、タイム、ローズマリー、油溶性甘草エキス等の抽出物；アスコルビン酸、ムタスティン、フミン酸、リノール酸、リノレン酸等を挙げることができる。さらに、併用可能な消臭剤の例としては、アマチャ、ウイキョウ、ウラジロガシ、ケイヒ、コショウ、メース、セージ、シソ、イチョウ、カキ葉、緑茶、ウーロン茶、トウガラシ、タマリンドハスク等の抽出物；ロジン、カキ渋、アクチゾル、クロロフィリン誘導体、エラグ酸、クロルヘキシジン、メイラード反応物等を挙げることができる。
【００２１】
有色素米の果皮から抽出されるグルコシルトランスフェラーゼ阻害物質およびプラーク形成抑制物質は、実用濃度では容易に水に溶ける。したがって、これを水性口腔用剤に配合するのに特に困難な点はない。その好適添加率は活性の強さや添加対象物によって異なるが、標準的な有色素米抽出物をそのまま虫歯予防チューインガムに配合する例について述べると、約０．００１〜５．０重量％が適量であり、特に好ましい配合率は約０．１〜１．０重量％である。
【００２２】
有色素米の果皮が含有するグルコシルトランスフェラーゼ阻害物質およびプラーク形成抑制物質が上述のように水溶性のものであることにより、その作用は有色素米の糠の状態でも発揮される。したがって、利用可能範囲は限られるものの有色素米の糠（活性を失わない範囲で加工されたものを含む）もまたう蝕防止のために利用可能である。
【００２３】
本発明によるグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤、プラーク形成抑制剤およびう蝕防止剤（有色素米の糠よりなるもの）は、口腔用剤に添加するだけでなく、飲食物、特にショ糖を含有する飲食物に添加して、口腔におけるグルカンおよびプラークの生成防止ひいてはう蝕の予防に利用することができる。添加対象飲食物として適当なものの例には、清涼飲料、菓子、パン、キャンディー、チューインガム、グミ、ゼリー、チョコレート、錠菓、ペットフード等がある。
【００２４】
【実施例】
以下、実施例を示して本発明を説明する。
製造実施例１
有色素米の玄米３００ｇを６０℃の抽出溶媒９００ｍｌに１時間浸漬して可溶性成分を抽出する。この処理を２回行い、得られた抽出液を濃縮乾固して、抽出物を得る。
【００２５】
有色素米として紫米２種類（中国広東産の華南紫および秋田産の朝紫）、黒米（長野産の黒優占）、赤米（九州産）、紅米（中国雲南産）を選び、抽出溶媒として水、７０％エタノールまたはエタノールを用いて上記抽出処理を行なった。
参考例として、“しろごめ”（コシヒカリ）の玄米についても同様の抽出処理を行なった。抽出物の収率は表１のとおりであった。
【００２６】
【表１】
0004585066.tif 000002
【００２７】
製造実施例２
製造実施例１で用いた玄米から得られた糠を原料にして、製造実施例１の場合と同様の抽出を行なった。なお、抽出は糠１００ｇに対して抽出溶媒５００ｍｌを用いて行なった。抽出物の収率は表２のとおりであった。
【００２８】
【表２】
0004585066.tif 000003
【００２９】
試験例１
製造実施例１，２で得られた抽出物のうち７０％エタノール抽出物について、下記の方法でグルコシルトランスフェラーゼ活性の阻害率を調べた。
【００３０】
グルコシルトランスフェラーゼ阻害率測定法：
２％ショ糖溶液（ｐＨ６．５の５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液使用）１．０ｍｌ
１％アジ化ナトリウム                                          ０．１ｍｌ
粗グルコシルトランスフェラーゼ液                                ５０μｌ
試料水溶液（濃度０．００５〜２ｍｇ／ｍｌ）                      ５０μｌ
５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ６．５）                    ０．１ｍｌ
【００３１】
上記各溶液を混合して得られた酵素反応液を試験管に入れ、試験管を３０度に傾けた状態にして、３７℃で２０時間静置する。その後、試験管をゆっくり傾けて反応上清を除き、酵素反応により生成して試験管に付着したグルカンを水で３回洗浄する。その後水２ｍｌを加え、超音波処理により上記グルカンを水中に分散させる。グルカン分散液および調製直後の上記酵素反応液について、波長５５０ｎｍの吸光度を測定する。また、コントロールとして、試料水溶液の代わりに水を加えた場合について同様の操作を行う。測定結果から、下記の計算式によりグルコシルトランスフェラーゼ活性の阻害率を算出する。
【００３２】
阻害率（％）＝〔１−（Ａ１−Ａ０）／（Ａ３−Ａ２）〕×１００
但し、Ａ０：試料を添加した場合の吸光度；酵素反応開始前
Ａ１：試料を添加した場合の吸光度；グルカン分散液
Ａ２：コントロール（酵素反応開始前）
Ａ３：コントロール（グルカン分散液）
上記試験の結果から、阻害率が５０％になる試料濃度を内挿法により求め、ＩＣ５０値として表示する（ＩＣ５０値が小さいほど酵素活性阻害作用が強い）。
その結果を表３，４に示す。
【００３３】
【表３】
玄米抽出物のグルコシルトランスフェラーゼ阻害作用
0004585066.tif 000004
【００３４】
【表４】
糠抽出物のグルコシルトランスフェラーゼ阻害作用
0004585066.tif 000005
【００３５】
試験例２
製造実施例１，２で得られた抽出物のうち７０％エタノール抽出物について、下記の方法でプラーク形成抑制作用を調べた。
【００３６】
プラーク形成抑制作用の試験：あらかじめ秤量した試験管にショ糖２％を含むブレインハートインフュージョンブロス（日水製薬製）５．３５ｍｌを加える。加熱滅菌処理後、試料溶液０．１５ｍｌおよびストレプトコッカス・ミュータンス６７１５の培養液０．５ｍｌを添加し、３７℃で２０分間培養を行う。培養終了後、上清を静かに除き、試験管管壁のプラーク状付着物をそのまま蒸留水で３回洗浄した後１０５℃で５時間乾燥する。最後に試験管ごとに秤量して、管内のプラーク状付着物の乾燥重量ｗを求める。別に、空試験として、試料溶液の代わりに試料溶液の溶媒を用いて上記と同様の操作を行い、プラーク状付着物の乾燥重量Ｗを求める。測定されたプラーク状付着物の重量ｗおよびＷより、次式によりプラーク形成抑制率を算出する。
【００３７】
プラーク形成抑制率（％）＝（１−ｗ／Ｗ）×１００
試料溶液の濃度を段階的に変更して上記測定を行い、抑制率が５０％になる試料溶液の濃度ＩＣ５０を内挿法により求める。
その結果は表５，６のとおりであった。
【００３８】
【表５】
玄米抽出物のプラーク形成抑制作用
0004585066.tif 000006
【００３９】
【表６】
糠抽出物のプラーク形成抑制作用
0004585066.tif 000007
【００４０】
実施例１
下記の混合物を打錠機で打錠して、う蝕予防用口腔用剤を製造した。
紫米（朝紫）玄米７０％エタノール抽出物        １２０重量部
ラフィノース                                  １７２重量部
グリセリン脂肪酸エステル                          ８重量部
【００４１】
実施例２
下記の混合物を流動層造粒機で顆粒状に成形して、う蝕予防作用を有するインスタントティーを製造した。
黒米糠５０％エタノール抽出物                  ３００重量部
ラフィノース                                  ２９０重量部
ウーロン茶水抽出物                            １００重量部
難消化性デキストリン                          ８１０重量部
【００４２】
実施例３
小麦粉１ｋｇ、コーンスターチ１００ｇ、砂糖２５０ｇ、マーガリン１２５ｇ、食塩５ｇ、炭酸ソーダ２５ｇ、炭酸アンモニウム９ｇ、レシチン６ｇ、全卵７５ｇ、乳酸カルシウム５０ｇ、赤米糠５０％エタノール抽出物２ｇ、および水３５０ｇを混練してドウを調製し、以後、常法により延展、成形、焙焼を行なって、虫歯予防対策がなされたビスケットを製造した。
【００４３】
実施例４
異性化糖３３０ｇ、砂糖１４０ｇ、水２７０ｇを混合して加熱し、そこに、ゼラチン８０ｇおよび紅米玄米７０％エタノール抽出物１０ｇを水１５０ｇに溶かした溶液ならびに濃縮レモン果汁８ｇを混合し、型に流し込んで冷却することにより、う蝕予防性グミキャンディーを製造した。
【００４４】
実施例５
チューインガム試作用ミキサーにガムベース２５重量部および水あめ１４重量部を入れて混合し、さらに砂糖３５重量部、果糖２５重量部、紫米（朝紫）糠の水抽出物１４重量部、ステビア甘味料・マルミロン（丸善製薬株式会社製品）０．４重量部の混合物を数回に分けて加え、よく練り合わせた。次いでグリセリン１重量部を加え、充分混合したのちミキサーから取り出し、ローラーで圧延して、う蝕予防作用を有するチューインガムを製造した。
【００４５】
実施例６
次に示す組成のマウスウォッシュを製造した。
エタノール                      １５重量部
グリセリン                      １０重量部
アスコルビン酸                    ０．０５重量部
クエン酸ナトリウム                ０．２重量部
安息香酸ナトリウム                ０．２重量部
ラウリル硫酸ナトリウム            ０．２重量部
サッカリンナトリウム              ０．０５重量部
紫米玄米７０％エタノール抽出物    ０．２重量部
１−メントール                    ０．０５重量部
精製水                          残部
合計                          １００重量部
【００４６】
【発明の効果】
有色素米から抽出されるグルコシルトランスフェラーゼ阻害物質やプラーク形成抑制物質を有効成分とする本発明のう蝕防止用製剤は、食用の米を原料とするものであるから安全性が高く、体内に摂取されても心配がない。しかも、有色素米の玄米または糠から得られた抽出物のままでも強い作用を示すので、口腔用剤や飲食物に添加してう蝕予防作用を付与するのに必要な添加量がきわめて僅かで済む。したがって、本発明によればう蝕の予防が従来よりも容易になるとともに、有色素米の高度利用の道が開けることになる。