(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式：
【化１】
0004516694.tif 000011
式中：
Ｒ1は鎖
−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯＲ  （II）
の立体異性体形態を表し、
そして
Ｒ2は水素原子を表し、そしてＲ3は鎖
−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯＲ  （III）
の立体異性体形態を表すか
またはＲ2は鎖
−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯＲ  （II）
もしくは
−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯＲ  （III）
の立体異性体形態を表し、そしてＲ3は水素原子を表すかのいずれかであり、
そして
Ｒは−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋはアルキル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋはシクロアルキル基を表し、
ｉは０または１に等しい；
の生成物及びそれらの立体異性体形態並びに無機もしくは有機酸とのそれらの塩。
【請求項２】
一般式：
【化２】
0004516694.tif 000012
式中、
Ｒは−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋはアルキル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋはシクロアルキル基を表し、
ｉは０または１に等しい；
の請求項１に記載の生成物及びそれらの立体異性体形態または有機もしくは無機酸とそのような生成物との塩。
【請求項３】
一般式：
【化３】
0004516694.tif 000013
式中、
Ｒは−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋはアルキル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋはシクロアルキル基を表し、
ｉは０または１に等しい；
の請求項１または２に記載の生成物及び有機もしくは無機酸とそのような生成物との塩。
【請求項４】
一般式：
【化４】
0004516694.tif 000014
式中、
Ｒは−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋはアルキル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋはシクロアルキル基を表し、
ｉは０または１に等しい；
の請求項１〜３のいずれかに記載の生成物及び有機もしくは無機酸とのそれらの塩。
【請求項５】
Ｒが−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋがメチル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋがシクロヘキシル基を表し、
ｉが０または１に等しい；
請求項１〜４のいずれかに記載の生成物及び有機もしくは無機酸とのそれらの塩。
【請求項６】
４，４’−Ｏ，Ｏ−ジシクロヘキシロイル（−ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｏｙｌ−）−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジン、
４，４’−Ｏ，Ｏ−ジ（シクロヘキシルアセチル）−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジン：
から個々に選択される請求項１〜５のいずれかに記載の生成物及び無機もしくは有機酸とのそれらの塩。
【請求項７】
４，４’−Ｏ，Ｏ−ジシクロヘキシロイル−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジン及び無機もしくは有機酸とのその塩。
【請求項８】
一般式：
【化５】
0004516694.tif 000015
式中：
Ｒｉ1は鎖
−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2ＯＨ  （XI）
の立体異性体形態を表し、
そして
Ｒｉ2は水素原子を表し、そしてＲｉ3は鎖
−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2ＯＨ  （XII）
の立体異性体形態を表すか
またはＲｉ2は鎖
−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2ＯＨ  （XI）
もしくは
−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2ＯＨ  （XII）
の立体異性体形態を表し、そしてＲｉ3は水素原子を表す、
の生成物から、
式Ｒ−ＣＯＸ［ここで、Ｒは請求項１〜７で定義したとおりであり、そしてＸはハロゲン原子を表す］の対応するハロゲン化アシルとの反応により製造することを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の生成物の製造方法。
【請求項９】
反応を０〜４０℃の間の温度でピリジンの存在下で実施することを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
有効成分として請求項１〜７のいずれかに記載の１またはそれ以上の生成物及び１またはそれ以上の賦形剤を含んでなることを特徴とする薬剤。
【請求項１１】
糖尿病及び糖尿病の合併症の予防及び／または処置のための薬剤の製造における請求項１〜７のいずれかに記載の生成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は一般式（Ｉ）
【０００２】
【化６】
0004516694.tif 000002
【０００３】
の新規な生成物及び無機もしくは有機酸とのそれらの塩、それらの製造、それらを含んでなる製薬学的組成物、並びに抗糖尿病薬としてのそれらの使用に関する。
【０００４】
一般式：
【０００５】
【化７】
0004516694.tif 000003
【０００６】
式中、
Ｒ1は水素原子を表し、そしてＲ2は式：
−ＣＨ2−ＣＨＯＨ−ＣＨＯＨ−ＣＨ2ＯＨ  （Ａ）
−ＣＨＯＨ−ＣＨＯＨ−ＣＨＯＨ−ＣＨ2ＯＨ  （Ｂ）
の鎖を表すか
またはＲ1は式（Ａ）の鎖を表し、そしてＲ2は水素原子を表すかのいずれかである、の低血糖特性を示す生成物は、出願ＷＯ ９７／２８８１３に開示されている。
【０００７】
しかしながら、先行技術において、これらの生成物に関する構造改変のために、本発明の一般式（Ｉ）の生成物が、抗血糖活性並びにバイオアベイラビリティ及び／または毒性の両方の点で非常に改善された特性を示すことを予測させるものはなかった。
【０００８】
本発明は一般式（Ｉ）
【０００９】
【化８】
0004516694.tif 000004
【００１０】
式中：
Ｒ1は鎖
−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯＲ  （II）
の立体異性体形態を表し、
そして
Ｒ2は水素原子を表し、そしてＲ3は鎖
−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯＲ  （III）
の立体異性体形態を表すか
またはＲ2は鎖
−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯＲ  （II）
もしくは
−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯＲ  （III）
の立体異性体形態を表し、そしてＲ3は水素原子を表すかのいずれかであり、
そして
Ｒは−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋはアルキル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋはシクロアルキル基を表し、
ｉは０または１に等しい；
の生成物及びそれらの立体異性体並びに無機もしくは有機酸とのそれらの塩に関する。
【００１１】
「アルキル」という用語は：メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルまたはヘキシルのような、１〜６個の炭素原子を含んでなる飽和した直鎖または分枝鎖の炭化水素基を意味すると理解される。
【００１２】
「シクロアルキル」という用語は：シクロペンチルまたはシクロヘキシルのような、５または６個の炭素原子を含んでなる飽和した環式炭化水素基を意味すると理解される。
【００１３】
かくして、本発明は一般式
【００１４】
【化９】
0004516694.tif 000005
【００１５】
式中、
Ｒは−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋはアルキル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋはシクロアルキル基を表し、
ｉは０または１に等しい；
の生成物及びそれらの立体異性体または有機もしくは無機酸とそのような生成物との塩に関する。
【００１６】
本発明によれば、好ましくは、以下の一般式：
【００１７】
【化１０】
0004516694.tif 000006
【００１８】
式中、
Ｒは−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋはアルキル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋはシクロアルキル基を表し、
ｉは０または１に等しい；
を有する生成物及び有機もしくは無機酸とそのような生成物との塩が提供される。
【００１９】
さらにより好ましくは、本発明は一般式（IX）
【００２０】
【化１１】
0004516694.tif 000007
【００２１】
式中、
Ｒは−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋはアルキル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋはシクロアルキル基を表し、
ｉは０または１に等しい；
の生成物及び有機もしくは無機酸とそのような生成物との塩に関する。
【００２２】
さらにより有利な態様として、本発明は、
Ｒが−（Ａｌｋ）i−（Ｃｙｃｌｏａｌｋ）基を表し、
ここで：
Ａｌｋがメチル基を表し、
Ｃｙｃｌｏａｌｋがシクロヘキシル基を表し、
ｉが０または１に等しい；
一般式（IX）の生成物及び有機もしくは無機酸とのそれらの塩に関する。
【００２３】
本発明の生成物は：
４，４’−Ｏ，Ｏ−ジシクロヘキシロイル（ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｏｙｌ）−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジン、
４，４’−Ｏ，Ｏ−ジ（シクロヘキシルアセチル）−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジン：
及び無機もしくは有機酸とのそれらの塩から個々に非常に都合よく選択することができる。
【００２４】
特に：４，４’−Ｏ，Ｏ−ジシクロヘキシロイル−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジン及び無機もしくは有機酸とのその塩。
【００２５】
本発明によれば、Ｒが上記定義のとおりである一般式（Ｉ）の生成物は、一般式：
【００２６】
【化１２】
0004516694.tif 000008
【００２７】
式中：
Ｒｉ1は鎖
−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2ＯＨ  （XI）
の立体異性体形態を表し、
そして
Ｒｉ2は水素原子を表し、そしてＲｉ3は鎖
−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2ＯＨ  （XII）
の立体異性体形態を表すか
またはＲｉ2は鎖
−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2ＯＨ  （XI）
もしくは
−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2ＯＨ  （XII）
の立体異性体形態を表し、そしてＲｉ3は水素原子を表す、
の生成物から、
式Ｒ−ＣＯＸ［ここで、Ｒは上記定義のとおりであり、そしてＸは塩素のようなハロゲン原子を表す］の対応するハロゲン化アシルとの反応により得ることができる。
【００２８】
この反応は、０〜４０℃の間の温度で、有機または無機塩基、好ましくはピリジンの存在下で実施される。
【００２９】
Ｒが上記定義のとおりであり、そしてＸが塩素のようなハロゲン原子を表す式Ｒ−ＣＯＸのハロゲン化アシルは、市販されているかまたは常法に従って対応する酸Ｒ−ＣＯＯＨから場合により製造することができ：特に、塩化アシルは、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒またはこれら２つの溶媒の混合物中で塩化オキサリルとの反応により対応する酸から製造することができる。
【００３０】
ハロゲン化アシルはその場で（ｉｎ  ｓｉｔｕ）都合よく製造することができる。
【００３１】
一般式（Ｘ）の生成物は以下の方法で製造することができる：
一般式（Ｘ）の生成物の立体異性体形態は、本発明の製造方法により使用する以下の反応物の立体異性体形態から得られる。
【００３２】
Ｒｉ1が−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2ＯＨ鎖（XI）の立体異性体を表し、Ｒｉ2が水素原子を表し、そしてＲｉ3が−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2ＯＨ鎖（XII）の立体異性体形態を表す式（Ｘ）の生成物の立体異性体は、一般式：
ＣＨＯ−ＣＨＯＨ−Ｒｉ1  （ＸIII）
式中、
Ｒｉ1は式（Ｘ）におけると同じ意味を有する、
の右旋性または左旋性系列のアルドースまたは２つのアルドースの混合物とギ酸アンモニウムとの反応により得ることができる。
【００３３】
この反応は、好ましくは、１５℃〜１００℃の間の温度で、好ましくは水性媒質中で実施することができる。
【００３４】
アルドースは市販されているかまたは：
ａ）市販されているアルドースから
- エピ化反応により、Ａｄｖ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｃｈｅｍ．，１３，６３，（１９５８）に記述されている方法の適用または応用により、特に、２０〜４０℃の間の温度で、希水酸化ナトリウム水溶液（０．０３〜０．０５％）を用いて塩基性媒質中で、
- 鎖伸長反応により、“Ｔｈｅ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ”，Ｗ．Ｐｉｇｍａｎ  ａｎｄ  Ｄ．Ｈｏｒｔｏｎ編集，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＩＡ巻，１３３（１９７２）に記述された方法の適用または応用により、そして特に出発するアルドースのシアノヒドリンを生成せしめ（例えば、１０〜３０℃の間の温度で、そして９近辺のｐＨで、水酸化ナトリウムの存在下で、水溶液中シアン化ナトリウムとの反応により）、次いでかくして生成するニトリル官能基をＯｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｉ巻，４３６頁及びIII巻，８５頁に記述された方法の適用または応用により（例えば、２０℃〜反応混合物の還流温度の間の温度で、水溶液中、濃硫酸または塩酸を用いて）対応する酸に加水分解し、次いでカルボン酸官能基をＪ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，７１，１２２（１９４９）に記述された方法の適用または応用により、特に２０℃〜反応混合物の沸騰温度の間の温度で、水溶液中、アルカリ金属の水素化ホウ素化物（例えば水素化ホウ素ナトリウム）を用いて、対応するアルデヒドに還元することにより、
- 鎖短縮反応により、“Ｔｈｅ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ”、Ｗ．Ｐｉｇｍａｎ  ａｎｄ  Ｄ．Ｈｏｒｔｏｎ編集，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＩＢ巻，１９８０，９２９頁またはＣｈｅｍ．Ｂｅｒ．，８３，５５９（１９５０）に記述された方法の適用または応用により、そして特にＯｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ＩＩ巻，３１４頁に記述された方法の適用または応用により（例えば、２０〜５０℃の間の温度で、水溶液中で且つ炭酸ナトリウムのような塩基の存在下で、ヒドロキシルアミン塩酸塩を用いて）アルドースのアルデヒド官能基を対応するヒドロキシルアミンに転化し、次いで５０〜８０℃の間の温度で、水溶液及び脂肪族アルコール（例えばイソプロピルアルコール）中、二酸化炭素及び炭酸水素ナトリウムのような塩基の存在下で３，４−ジニトロフルオロベンゼンとの反応により、
ｂ）対応するアリルアルコールから、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２０，９４９（１９８３）に記述された方法の適用または応用により、そして特にチタン（IV）イソプロポキシドのようなチタン（IV）錯体及び場合により純粋な酒石酸ジアルキル（例えば酒石酸ジエチル）錯体の存在下でｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシドを用い、続いてナトリウムチオフエノレート（ｓｏｄｉｕｍ  ｔｈｉｏｐｈｅｎｏｌａｔｅ）、無水酢酸中のパラ−クロロ過安息香酸及び水素化ジイソプロピルアルミニウムとの逐次反応により、
得ることができる。
【００３５】
式（ＸIII）の糖の立体異性体は、６個の炭素原子を含んでなるアルドースの立体異性体であることができ；好適に使用されるものは、Ｄ−グルコース、Ｄ−グロース、Ｄ−マンノ−ス、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−アロース、Ｄ−アルトロース、Ｄ−イドース、Ｄ−タロース、Ｌ−グルコース、Ｌ−マンノ−ス、Ｌ−ガラクトース、Ｌ−アロース、Ｌ−アルトロース、Ｌ−イドース、Ｌ−タロースまたはＬ−グロースである。
【００３６】
Ｒｉ1が−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2ＯＨ鎖（XI）の立体異性体形態を表し、Ｒｉ2が−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2ＯＨ鎖（XI）の立体異性体形態を表し、そしてＲ3が水素原子を表す式（Ｘ）の生成物の立体異性体は、一般式：
ＣＨＯ−ＣＨ（ＮＨ2）−Ｒｉ1  （ＸIV）
式中、Ｒｉ1は一般式（Ｘ）と同じ意味を有する、
の場合により塩酸塩のような付加塩の形態のアミノアルドースまたは２種のアミノアルドースの混合物の塩基性媒質中での処理により得ることができる。
【００３７】
この反応は好ましくは２０℃近辺の温度で実施され、そして好ましくはアンモニア水溶液、より詳細には２８％溶液を使用する。
【００３８】
式（ＸIV）のアミノアルドースは市販されているかまたは例えば以下の文献に記述された方法の適用または応用により製造することができる：
（ａ）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｃｈｅｍ．，７，２９（１９７６）、これは塩基性媒質（例えばナトリウムエトキシド）中でニトロメタンを用いて対応するアルドースのアルデヒド官能基をニトロエチレン基に転化し、次いで得られる生成物を２０℃〜３０℃の間の温度でアンモニア飽和水溶液で、２０℃〜３０℃の間の温度で水溶液中Ｂａ（ＯＨ）2で、そして最後に２０℃〜３０℃の間の温度で希硫酸（１０〜１５％）で逐次処理することにある、
（ｂ）“Ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏ  Ｓｕｇａｒ”、Ｒ．Ｗ．Ｊｅａｎｌｏｚ編集、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９６９，１頁または“Ｔｈｅ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ”、Ｗ．Ｐｉｇｍａｎ  ａｎｄ  Ｄ．Ｈｏｒｔｏｎ編集，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＩＢ巻，１９８０，６６４頁、これは対応するアルドースのアルデヒド官能基を第一級芳香族アミン（例えばアニリン）からイミノ基に転化し、続いて０℃〜２０℃の間の温度でシアン化水素酸と、そして２０℃〜５０℃の間の温度でエーテル（例えばテトラヒドロフラン）または脂肪族アルコール（例えばエタノールもしくはメタノール）のような溶媒中でパラジウムの存在下で水素と逐次反応させることにある。
【００３９】
式（ＸIV）のアミノアルドースの立体異性体は、Ｄ−グルコサミン、Ｄ−ガラクトサミン、Ｌ−グルコサミンまたはＬ−ガラクトサミンのような６個の炭素原子を含んでなるアミノアルドースの立体異性体であることができ；好ましく用いられるものは、場合により塩酸塩のような付加塩の形態の、Ｄ−グルコサミンまたはＤ−ガラクトサミン、そして特にＤ−グルコサミンである。
【００４０】
Ｒｉ1が−（ＣＨＯＨ）3−ＣＨ2ＯＨ鎖（XI）の立体異性体形態を表し、Ｒｉ2が−ＣＨ2−（ＣＨＯＨ）2−ＣＨ2ＯＨ鎖（XII）の立体異性体形態を表し、そしてＲｉ3が水素原子を表す式（Ｘ）の生成物の立体異性体は、一般式：
ＣＨＯ−ＣＨ（ＮＨ2）−Ｒｉ1  （ＸIV）
式中、
Ｒｉ1は一般式（Ｉ）におけると同じ意味を有する、
のアミノアルドースまたは２種のアミノアルドースの混合物のいずれかから、酸性媒質、より詳細には酢酸媒質中で、そして好ましくは１５℃〜１００℃の間の温度で反応を実施しながら、あるいは一般式：
ＨＯＣＨ2ＣＯ−Ｒｉ1  （ＸＶ）
式中、
Ｒｉ1は一般式（Ｘ）におけると同じ意味を有する、
のケトースまたは２種のケトースの混合物から、ギ酸アンモニウムとの反応により、そして好ましくは１５℃〜１００℃の間の温度でそして好ましくは水性媒質中で反応を実施しながら得ることができる。
【００４１】
式（ＸＶ）のケトースは市販されているかまたは例えば以下のものに記述された方法の適用または応用により製造することができる：
ａ）Ａｄｖ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｃｈｅｍ．，１３，６３，（１９５８）、これは２０〜５０℃の間の温度で、水溶液中または純粋な相中で、対応するアルドースを水酸化カルシウム、水酸化ナトリウム、ピリジンもしくはキノリンのような塩基または硫酸のような酸のいずれかと反応させることにある、
ｂ）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，７（８），２１８５，（１９９６），Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１８（３３），７６５３（１９９６），Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６０（１３），４２９４（１９９５），Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，３３（３６），５１５７（１９９２），Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１３（１７），６６７８（１９９１），Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．，１００（５），７３７，（１９８８），Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５７，５８９９（１９９２）、これは、例えば、場合によりトランスケトラーゼのような酵素の存在下で、ヒドロキシピルボアルデヒド、１，３−ジヒドロキシアセトン、１，３−ジヒドロキシアセトンモノホスフェートまたはヒドロキシピルビン酸のいずれかを２位で置換されており且つ場合により光学的に純粋であってもよい２−ヒドロキシアセトアルデヒドと縮合することにある。一般に、この反応は、場合により塩基（例えば水酸化ナトリウム）、塩化バリウム、塩化マグネシウムまたは塩化亜鉛の存在下で、２０〜５０℃の間の温度で、水溶液中で実施される。２−ヒドロキシアセトアルデヒド基を有する誘導体は市販されているかまたはＰ．Ｃｏｌｌｉｎｓ  ａｎｄ  Ｒ．Ｆｅｒｒｉｅｒ，Ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，Ｔｈｅｉｒ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｒｏｌｅｓ  ｉｎ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ出版（１９９５）及びＭ．Ｂｏｌｓ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｂｕｉｌｄｉｎｇ  Ｂｌｏｃｋｓ，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ出版（１９９６）に記述された方法の適用または応用によりアルドースから製造することができる。
【００４２】
式（ＸIV）のアミノアルドースは、Ｄ−グルコサミン、Ｄ−ガラクトサミン、Ｌ−グルコサミンまたはＬ−ガラクトサミンのような６個の炭素原子を含んでなるアミノアルドースのものであることができ；好ましく用いられるものは、場合により塩酸塩のような付加塩の形態の、Ｄ−グルコサミンまたはＤ−ガラクトサミン、そして特にＤ−グルコサミンである。
【００４３】
式（ＸＶ）の生成物の立体異性体は、６個の炭素原子を含んでなるケトースのものであることができ；好ましく用いられるものは、Ｄ−プシコース、Ｄ−フルクトース、Ｄ−ソルボース、Ｄ−タガトース、Ｌ−プシコース、Ｌ−フルクトース、Ｌ−ソルボースまたはＬ−タガトースである。
【００４４】
上記の種々の方法により得られる反応混合物は、通常の物理的（例えば蒸発、抽出、蒸留、クロマトグラフィーもしくは結晶化）または化学的（例えば、塩の形成）方法に従って処理される。
【００４５】
式（Ｉ）の生成物は、場合により、アルコール、ケトン、エーテルまたは塩素化溶媒のような溶媒中で無機または有機酸の作用によりそのような酸との付加塩に転化することができる。これらの塩もまた本発明の一部を形成する。
【００４６】
製薬学的に許容しうる塩の例として、酢酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、安息香酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、メタンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、テオフィリン酢酸塩、サリチル酸塩、メチレンビス（β−オキシナフトエ酸塩）、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩及びリン酸塩のような、無機または有機酸との付加塩を挙げることができる。
【００４７】
式（Ｉ）の生成物は有益な薬理学的特性を示す。それらは低血糖タイプのものである。
【００４８】
式（Ｉ）の生成物の低血糖活性は、実施例３に記載するプロコトルに従って、正常血糖マウスにおけるグルコースの経口投与に対する高血糖応答に関して決定した。
【００４９】
本発明の一般式（Ｉ）の生成物は低い毒性を示す。それらのＬＤ50はマウスにおいて経口経路により２０００ｍｇ／ｋｇより大きい。
【００５０】
ヒト治療において、これらの生成物は、糖尿病、特にII型糖尿病（ＮＩＤ糖尿病）、肥満性糖尿病、約５０歳の年齢での糖尿病、後多血性（ｍｅｔａｐｌｅｔｈｏｒｉｃ）糖尿病、中高年層がかかる糖尿病及び軽い糖尿病の予防及び処置に有用である。これらは、これらがインシュリンの用量を徐々に減らすことを可能にするインシュリン依存型糖尿病、不安定型糖尿病、インシュリン抵抗性糖尿病におけるインシュリン治療の補足として、そして低血糖スルファミドが血糖の十分な低下をもたらさない場合にそれらの補足として用いることができる。これらの生成物はまた、高脂血症、脂質代謝障害、異常脂肪血症（ｄｙｓｌｉｐｅｍｉａｓ）及び肥満症のような糖尿病の合併症に用いることもできる。これらはまた、アテローム性動脈硬化症の損傷及びそれらの合併症（コロノパシー（ｃｏｒｏｎｏｐａｔｈｉｅｓ）、心筋梗塞症、心筋症、これら３つの合併症の左心室機能不全症への進行、様々な動脈症、跛行を伴う下肢の動脈炎並びに潰瘍及び壊疽への進行、脳血管機能不全症及びその合併症並びに血管起源の性交不能症）、糖尿病性網膜症及び全てのその症状発現（毛細管透過性の増加、毛細管血栓症及び拡張、微細動脈瘤、動静脈シャント、静脈拡張、点状及び班状出血、滲出物、班状水腫、増殖性網膜症の症状発現：血管新生、増殖性網膜炎瘢痕、硝子体の出血、網膜剥離）、糖尿病性白内障、様々な形態の糖尿病性ニューロパシー（末梢多発性ニューロパシー並びに感覚異常、知覚過敏及び痛みようなその症状発現、モノニューロパシー、神経根障害、自律性ニューロパシー、糖尿病性筋萎縮症）、糖尿病の足の症状発現（下肢及び足の潰瘍）、び漫性及び結節性の２つの型の糖尿病性ニューロパシー、アテローム症（アテローム斑からのコレステロールの除去を促進するＨＤＬリポタンパク質の増加、ＬＤＬリポタンパク質の減少、ＬＤＬ／ＨＤＬ比の減少、ＬＤＬの酸化の抑制、斑粘着性の減少）、高脂血症及び異常脂肪血症（高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、脂肪酸レベルの正規化、尿酸血症の正規化、Ａ及びＢアポタンパク質の正規化）、白内障、動脈高血圧症及びその結果の予防及び処置にも有用である。
【００５１】
本発明の薬剤は、純粋状態のまたは不活性もしくは生理学的に活性であることができる任意の他の製薬学的に適合する生成物と組み合わされる組成物の形態の本発明の生成物またはこれらの生成物の組み合わせからなる。本発明の薬剤は、経口的に、非経口的に、直腸にまたは局所的に用いることができる。
【００５２】
経口投与のための固体組成物として、錠剤、丸剤、散剤（ゼラチンカプセル剤、カシェー剤）または顆粒剤を用いることができる。これらの組成物では、本発明の有効成分をアルゴン気流下で澱粉、セルロース、ショ糖、ラクトースまたはシリカのような１またはそれ以上の不活性希釈剤と混合する。これらの組成物はまた希釈剤以外の物質、例えばステアリン酸マグネシウムもしくはタルクのような１またはそれ以上の潤滑剤、着色剤、コーティング（糖衣錠）または光滑剤を含んでなることもできる。
【００５３】
経口投与のための液体組成物として、水、エタノール、グリセロール、植物油または流動パラフィンのような不活性希釈剤を含有する製薬学的に許容しうる溶液、懸濁剤、乳剤、シロップ剤及びエリキシル剤を用いることができる。これらの組成物は希釈剤以外の物質、例えば湿潤剤、甘味料、増粘剤、香料または安定剤を含んでなることができる。
【００５４】
非経口投与のための滅菌組成物は、好ましくは、水性もしくは非水性形態の溶液、懸濁剤または乳剤であることができる。溶媒または賦形剤として、水、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、特にオリーブ油、注入可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチル、または他の適当な有機溶媒を用いることができる。これらの組成物はまた添加剤、特に湿潤剤、等張化剤、乳化剤、分散助剤及び安定剤を含有することもできる。滅菌は、いくつかの方法で、例えば無菌濾過により、組成物中に滅菌剤を含むことにより、放射線照射によりまたは加熱することにより実施することができる。それらはまた、使用時に滅菌水または任意の他の注入可能な滅菌媒質中に溶解することができる滅菌固体組成物の形態で製造することもできる。
【００５５】
直腸投与のための組成物は、活性生成物に加えて、ココアバター、半合成グリセリドまたはポリエチレングリコールのような賦形剤を含有する座薬または直腸投与カプセル剤である。
【００５６】
局所投与のための組成物は、例えば、クリーム、ローション、洗眼薬、うがい薬、点鼻薬またはエーロゾル剤であることができる。
【００５７】
用量は、所望の効果、処置の期間及び用いる投与経路により決まり；一般に、５０ｍｇ〜２００ｍｇの活性物質の範囲である単位用量で成人に対して経口経路により１日当たり１５０ｍｇ〜６００ｍｇの間である。
【００５８】
一般に、医師が、処置する被検者に固有の年齢、体重及び全ての他の因子に従って適切な投薬量を決定する。
【００５９】
以下の実施例４は、本発明の組成物を例示する。
【００６０】
本発明はまた、糖尿病及び糖尿病の合併症の処置及び／または予防に有用な製薬学的組成物の製造における一般式（Ｉ）の生成物の使用にも関する。
【００６１】
以下の実施例は、本発明により用いる製造方法をさらに詳細に且つ黙示の制限なしに例示するものである。本発明を実施するためにこれらの方法を適用または応用することは当業者の一般知識の一部である。
【００６２】
実施例１
４，４’−Ｏ，Ｏ−ジシクロヘキシロイル−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジン
【００６３】
【化１３】
0004516694.tif 000009
【００６４】
４Å分子ふるい上で乾燥させた７．５ｃｍ3のピリジン中３００ｍｇの２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジンの懸濁液に、アルゴン雰囲気下で約２０℃の温度で、０．３２８ｃｍ3の塩化シクロヘキサノイルを滴下して加える。白色の反応懸濁液を約２０℃の温度で１５時間撹拌する。反応媒質を３０ｃｍ3の酢酸エチル及び３０ｃｍ3の蒸留水で希釈する。沈降による分離後、有機相を２０ｃｍ3の塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、焼結ガラス漏斗を通して濾過し、次いで約４０℃の温度で減圧下（０．２ｋＰａ）で濃縮乾固させる。黄色の油状物を得、この油状物を４ ６０Ｆ２５４ Ｍｅｒｃｋシリカゲルプレート（厚さ＝０．５ｍｍ、２０ ｘ ２０ｃｍ）上で分取クロマトグラフィーにより精製し、溶出をジクロロメタン／メタノール（容量で９０／１０）混合物で実施する。所望の生成物のみを含んでなる画分をジクロロメタン／メタノール（用量で８０／２０）混合物で抽出し、焼結ガラス漏斗を通して濾過し、次いで約４０℃の温度で減圧下（０．５ｋＰａ）で濃縮乾固させる。このようにして２３．３ｍｇの４，４’−Ｏ，Ｏ−ジシクロヘキシロイル−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジンを白色の固体の形態で得る。
【００６５】
得られた生成物は以下の特性を有する：
1Ｈ ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ、ｄ６−（ＣＤ3）2ＳＯ 、ｐｐｍ単位のδ）：１．１０〜１．９５（ｍｔ、全部で２０Ｈ、シクロヘキシル  ＣＨ2）、２．３４（ｍｔ、２Ｈ、ＯＣＯＣＨ）、２．７６及び３．１２（２ｄｄ、それぞれＪ＝１４及び１０Ｈｚ並びにＪ＝１４及び３Ｈｚ、各１Ｈ：５α  ＣＨ2）、３．５０〜３．６５（ｍｔ、１Ｈ、５γ  ＣＨ）、３．６０（広幅ｔ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ、２β  ＣＨ）、３．７８（ｍｔ、１Ｈ、５β  ＣＨ）、３．８６（ｍｔ、１Ｈ、２γ  ＣＨ）、３．９５〜４．０５（ｍｔ、２Ｈ、５δ  ＣＨ2Ｏの１Ｈ及び２δ  ＣＨ2Ｏの１Ｈ）、４．２４（ｄｄ、Ｊ＝１１及び３Ｈｚ、１Ｈ、５δ  ＣＨ2Ｏのもう一つのＨ）、４．３０（ｄｄ、Ｊ＝１２及び２．５Ｈｚ、１Ｈ、２δ  ＣＨ2Ｏのもう一つのＨ）、４．６３（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ、２βのＯＨ）、４．８６（ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ、１Ｈ、５βのＯＨ）、４．９７（広幅ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、１Ｈ、２α  ＣＨ）、５．０５（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ、２γのＯＨ）、５．１１（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ、５γのＯＨ）、５．４０（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、１Ｈ、２αのＯＨ）、８．４３（広幅ｓ、１Ｈ、６の＝ＣＨ）、８．６７（広幅ｓ、１Ｈ、３の＝ＣＨ）。
【００６６】
２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジンは、酢酸の存在下でＤ−グルコサミンからまたはＡｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２５巻，１９７０，３１１−３４９に記述された方法の適用もしくは適応により製造することができる。
【００６７】
実施例２
４，４’−Ｏ，Ｏ−ジ（シクロヘキシルアセチル）−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジン
【００６８】
【化１４】
0004516694.tif 000010
【００６９】
４Å分子ふるい上で乾燥させた２ｃｍ3のジクロロメタン中３５０ｍｇのシクロヘキサン酢酸に、アルゴン雰囲気下で約２０℃の温度で、０．２６ｃｍ3の塩化オキサリルを滴下して加える。反応混合物を約２０℃の温度で１時間撹拌し、この期間の終わりに初期気体発生は存在しなくなる。
【００７０】
４Å分子ふるい上で乾燥させた７．５ｃｍ3のピリジン中３００ｍｇの２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジンの懸濁液に、アルゴン雰囲気下で約２０℃の温度で、上記で調製した酸塩化物溶液を滴下して加える。白色の反応懸濁液を約２０℃の温度で１７時間撹拌する。反応媒質を約２０℃の温度で空気流下である程度濃縮し、次いで４ ６０Ｆ２５４ Ｍｅｒｃｋシリカゲルプレート（厚さ＝０．５ｍｍ、２０ ｘ ２０ｃｍ）上で分取クロマトグラフィーにより精製し、溶出をジクロロメタン／メタノール（容量で９０／１０）混合物で実施する。所望の生成物のみを含んでなる画分をジクロロメタン／メタノール（用量で８０／２０）混合物で抽出し、焼結ガラス漏斗を通して濾過し、次いで約４０℃の温度で減圧下（０．５ｋＰａ）で濃縮乾固させる。このようにして３１．５ｍｇの４，４’−Ｏ，Ｏ−ジ（シクロヘキシルアセチル）−２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシルブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジンを白色の固体の形態で得る。
【００７１】
得られた生成物は以下の特性を有する：
1Ｈ ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ、ｄ６−（ＣＤ3）2ＳＯ 、ｐｐｍ単位のδ）：０．８５〜１．８０（ｍｔ、全部で２２Ｈ、シクロヘキシル  ＣＨ及びＣＨ2）、２．２０（ｍｔ、４Ｈ、ＯＣＯＣＨ2）、２．７６及び３．１３（２ｄｄ、それぞれＪ＝１４及び１０Ｈｚ並びにＪ＝１４及び３Ｈｚ、各１Ｈ：５α  ＣＨ2）、３．５０〜３．６５（ｍｔ、１Ｈ、５γ  ＣＨ）、３．６０（広幅ｔ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ、２β  ＣＨ）、３．７８（ｍｔ、１Ｈ、５β  ＣＨ）、３．８４（ｍｔ、１Ｈ、２γ  ＣＨ）、３．９５〜４．１０（ｍｔ、２Ｈ、５δ  ＣＨ2Ｏの１Ｈ及び２δ  ＣＨ2Ｏの１Ｈ）、４．２５（ｄｄ、Ｊ＝１１及び３Ｈｚ、１Ｈ、５δ  ＣＨ2Ｏのもう一つのＨ）、４．３０（ｄｄ、Ｊ＝１２及び２．５Ｈｚ、１Ｈ、２δ  ＣＨ2Ｏのもう一つのＨ）、４．６２（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ、２βのＯＨ）、４．８６（ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ、１Ｈ、５βのＯＨ）、４．９６（広幅ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、１Ｈ、２α  ＣＨ）、５．０５（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ、２γのＯＨ）、５．１１（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ、５γのＯＨ）、５．４１（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、１Ｈ、２αのＯＨ）、８．４３（ｄ、Ｊ＝１Ｈｚ、１Ｈ、６の＝ＣＨ）、８．６７（広幅ｓ、１Ｈ、３の＝ＣＨ）。
【００７２】
２−［（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）（１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）］−５−［（２’Ｓ，３’Ｒ）（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジンは、酢酸の存在下でＤ−グルコサミンからまたはＡｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２５巻，１９７０，３１１−３４９に記述された方法の適用もしくは適応により製造することができる。
【００７３】
実施例３
２２〜２６ｇの間の重さのスイスアルヒツマウスを２時間食物なしのままにしておく。この期間の終わりに血糖を測定し、その後すぐにグルコースの投与量（２ｇ／ｋｇ）を経口的に投与する。３０分後に血糖をもう一度測定する。１７０ｍｇ／ｄｌより多い高血糖により応答するマウスを選択し、本発明の生成物の低血糖活性を検出するために用いる。
【００７４】
このようにして選択したマウスを少なくとも１０匹の動物の群に分ける。数群に水またはメチルセルロース／ツィーンと水の混合物のような賦形剤中３〜５０ｍｇ／ｋｇの生成物の投与量を胃挿管により毎日１回与える。この処置は４日続く。４日目に、最後の処置の後に、動物にグルコースの投与量（２ｇ／ｋｇ）を与え、２０〜４０分後に血糖を測定する。グルコースの投与に対する高血糖応答の抑制パーセンテージを賦形剤で処置した群において測定した応答に対して計算する。
【００７５】
この試験において、本発明の生成物は１０％より大きいかまたはそれに等しい血糖の抑制パーセンテージを示す。
【００７６】
上記のプロトコルによる比較試験を本発明の実施例１の生成物及び抗糖尿病活性が出願ＷＯ ９７／２８８１３に開示されている対照生成物２−（１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−５−（２’，３’，４’−トリヒドロキシブチル）］ピラジンで実施した。
【００７７】
３ｍｇ／ｋｇでの投与後に得られた結果は、対照生成物に対して１４９％の実施例１の生成物の相対活性を示す。
【００７８】
実施例４
実施例４Ａ
以下の組成を有する、５０ｍｇの活性生成物の投与量を含む硬質ゼラチンカプセル剤を通常の技術に従って調製する：
- 活性生成物・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・５０ｍｇ
- セルロース・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１８ｍｇ
- ラクトース・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・５５ｍｇ
- コロイドシリカ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１ｍｇ
- ナトリウムカルボキシメチル澱粉・・・・・・・・・・１０ｍｇ
- タルク・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１０ｍｇ
- ステアリン酸マグネシウム・・・・・・・・・・・・・・１ｍｇ
実施例４Ｂ
以下の組成を有する、５０ｍｇの活性生成物の投与量を含む錠剤を通常の技術に従って調製する：
- 活性生成物・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・５０ｍｇ
- ラクトース・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１０４ｍｇ
- セルロース・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・４０ｍｇ
- ポリビドン・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１０ｍｇ
- ナトリウムカルボキシメチル澱粉・・・・・・・・・・２２ｍｇ
- タルク・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１０ｍｇ
- ステアリン酸マグネシウム・・・・・・・・・・・・・・２ｍｇ
- コロイドシリカ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・２ｍｇ
- ヒドロキシメチルセルロース、          ２４５ｍｇを含有する１個の完成    グリセロール、酸化チタン              したフィルム被覆錠剤になるよう    （７２／３．５／２４．５）混合物      な適当量
実施例４Ｃ
以下の組成を有する、５０ｍｇの活性生成物を含有する注入可能な溶液を調製する：
- 活性生成物・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・５０ｍｇ
- 安息香酸・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・８０ｍｇ
- ベンジルアルコール・・・・・・・・・・・・・・０．０６ｍｌ
- 安息香酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・８０ｍｇ
- ９５％のエタノール・・・・・・・・・・・・・・・０．４ｍｌ
- 水酸化ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・・２４ｍｇ
- プロピレングリコール・・・・・・・・・・・・・・１．６ｍｌ
- 水・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・４ｍｌになるように適当量