(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
窒素酸化物の還元除去能を有し、かつ下記表に示す菌学的性質を有するデニトロモナス・アロマティカスに属する微生物。
【表１】
0004411429.tif 000006
【表２】
0004411429.tif 000007
【請求項２】
下記表に示す菌学的性質を有する請求項１に記載の微生物。
【表３】
0004411429.tif 000008
【表４】
0004411429.tif 000009
【請求項３】
デニトロモナス・アロマティカスFERM  P−18113である請求項１に記載の微生物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新属デニトロモナスに属する微生物に関する。この微生物は、気体または水溶液中の窒素酸化物の窒素への還元による除去に有用である。
【０００２】
【従来の技術】
空気等の気体中あるいは廃液／排水等の水溶液中の窒素酸化物（ＮＯ３、ＮＯ２、ＮＯ、Ｎ２Ｏ等）の窒素への還元による除去は、環境保全において重要な課題の一つである。
【０００３】
窒素酸化物の還元除去能を有する微生物として、代表的には、Pseudomonas fluorescens、 Pseudomonas denitrificans、 Pseudomonas stutzeri、 Pseudomonas aeruginosa、 Achromobacter sp.、 Micrococcus denitrificans、 Micrococcus halodenitrificans、 Thiobacillus denitrificans、 Bacillus subtilis、 Spirillum sp.、 Actinomyces sp.、 Hyphyomicrobium sp.、 Alcaligenes faecalis、 Paracoccus denitirificans、 Azoarcus envisiiおよびZoogloea ramisera等が知られている。
【０００４】
しかるに、窒素酸化物の除去の近年高まる必要により、窒素酸化物の、より効率のよい除去、あるいは、窒素酸化物の存在状態がより多様となりつつある状況下においてより多様な（より広い選択範囲の）除去手段の開発が望まれる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
したがって、この発明の目的は、窒素酸化物の還元除去能を有する新たな微生物を提供しようとするものである。窒素酸化物の還元除去能を有する新たな微生物を提供することにより、窒素酸化物のより効率の良い除去手段の開発の道が開かれよう。また、窒素酸化物の除去手段がより多様になり、種々の制限下での窒素酸化物の除去手段の選択の範囲が広くなることが期待できよう。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
上記発明の課題についての研究において、窒素酸化物を窒素に還元して除去する新たな属に属する微生物が見出された。
【０００７】
すなわち、この発明は、デニトロモナス(Denitromonas)と命名した新属に属する微生物である。
【０００８】
この発明の特定の態様は、デニトロモナス・アロマティカス（Denitromonas aromaticus）と命名した微生物である。
【０００９】
【発明の実施の形態】
デニトロモナス・アロマティカスは、食品工場の活性汚泥曝気槽（種々の食品／食品素材の種々の工程からの排水が集中処理されている）から分離されたものである。
【００１０】
表１に、デニトロモナス・アロマティカスの菌学的性質を、デニトロモナス・アロマティカスと近縁のAzoarcus属のタイプカルチュアーAzoarcus envisii KB 740（IJSB 43: 574-584 (1993), IJSB 50: 649-659 (2000)）およびZoogloea属のタイプカルチュアーZoogloea ramigera ATCC 19544(Bergey’s manual of determinative bacteriology, 9th ed., p. 101 (1994), IJSB 43: 826-831 (1993))と比較して、示す。
【００１１】
【表５】
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【００１２】
デニトロモナス・アロマティカスは、さらに、次の炭素源の利用能を有する。利用能あり：ツイーン４０、ツイーン８０、コハク酸モノメチルエステル、β−ヒドロキシ酪酸、ブロモコハク酸、コハク酸、α−ケトグルタル酸、Ｄ，Ｌ―乳酸、Ｄ−アラニン、Ｌ−アラニン、Ｌ−プロリン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−プロリン、Ｌ−ピログルタミン酸、γ−アミノ酪酸
利用能弱い：α−ヒドロキシ酪酸、アラニンアミド、Ｌ−アラニルグリシン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−ロイシン、Ｌ−セリン
利用能なし：糖類。
【００１３】
グラム陰性の非発酵性細菌であるデニトロモナス・アロマティカスは、Class Proteobacteriaに含まれる。デニトロモナス・アロマティカスは、主要ユビキノンがＱ８であること、および１６ＳｒＤＮＡ塩基配列に基づく発生系統樹解析等の結果から、Class Proteobacteriaのβサブディビジョンに属する（Stackebrandt, E., eral., Int. J. Syst. Bacteriol., 38: 321, 1988）。しかるに、Class Proteobacteriaのβサブディビジョンにもデニトロモナス・アロマティカスを属せしめ得る属は見出されなかった。
【００１４】
詳しく述べると、デニトロモナス・アロマティカスは、表１に示すように運動性を有しない点で、Azoarcus属にもZoogloea属にも属さない。
【００１５】
また、デニトロモナス・アロマティカスの１６ＳｒＤＮＡ（５’端側の１．５ｋｂ）の塩基配列（配列番号１）と他の近縁の属の菌株の１６ＳｒＤＮＡの対応する部分の塩基配列との相同性を調べて、発生系統樹解析を行ったところ、デニトロモナス・アロマティカスは、Class Proteobacteriaのいずれにも属さず、Azoarcus属とZoogloea属（Zoogloea ramigera）の中間に位置する新属に属せしめるべきものであることがわかった（図１）。
【００１６】
さらに、デニトロモナス・アロマティカスの１６ＳｒＤＮＡと、Azoarcus envisii KB 740およびZoogloea ramigera ATCC 19544の１６ＳｒＤＮＡとの塩基配列相同性は、９４％以下であり（表１）、デニトロモナス・アロマティカスは、この点からも、Zoogloea属にもAzoarcus属にも属せしめることができない。
【００１７】
１６ＳｒＤＮＡの単離と塩基配列の決定は常法に従った。得られた塩基配列について、ＧＥＮＢＡＮＫのデータベースを用いて相同性分析を行った。
【００１８】
加えて、菌体内脂肪酸組成の解析の結果から（表１）、デニトロモナス・アロマティカスは、Azoarcus envisii KB 740とは特に脂肪酸１２：０を有しない点および１８：１が多い点で、Zoogloea ramigera ATCC 19544とは特に１８：１が多い点で異なり、Azoarcus属にもZoogloea属にも分類できないことがわかった。
【００１９】
菌体内脂肪酸組成の分析は、凍結乾燥菌体から脂肪酸を抽出して、質量分析により（ＥＩ／ＭＳ）行った。
【００２０】
以上の結果から、デニトロモナス・アロマティカスは、新属に属せしめるべきものであることがわかった。また、デニトロモナス・アロマティカスは、Class Proteobacteriaのβサブディビジョンに属する。この新属をデニトロモナス（Denitromonas）と命名した。デニトロモナス・アロマティカスをこの属のタイプカルチュアーとする。
【００２１】
デニトロモナス属の微生物は、したがって、以下の菌学的性質を有する。
【００２２】
【表６】
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デニトロモナス・アロマティカスは、工業技術院生命工学工業技術研究所に、ＦＥＲＭ  Ｐ−１８１１３として寄託された。
【００２３】
デニトロモナス属の微生物は、酸化窒素をＮ２に還元して除去する能力を有し、酸化窒素の除去に利用できる。例えば、医院で使用された笑気ガスの処理、硝酸等を含む工場排水の処理、高速道路トンネル内の空気中の酸化窒素の除去（例えば、デニトロモナス属微生物を含む調湿ベッド（土、樹脂など）中をトンネル内の空気を通して排気する）、窒素酸化物を含む排水／廃液からの窒素酸化物の除去などに利用できる。また、天然環境に存在する窒素酸化物の除去（例えば、湖水を飲料とするとき、湖水中の硝酸の除去）にも利用できよう。
【００２４】
【配列表】
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【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の微生物およびその近縁微生物の発生系統樹を示す図である。縦棒は各微生物の系統樹上の位置関係を示す。横棒は各微生物間の１６ＳｒＤＮＡの塩基配列の相同性を示す。目盛（０．０２）は、１６ＳｒＤＮＡの塩基配列の相同性について１００個の塩基中２個の塩基が相違したときの横棒の長さ（２．２ｃｍ）を示す。数字例えば「１００」は、相同性が同一とでた計算結果が１００回の計算中１００回でたことを示す。
【図１】
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