(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
甘草の葉より抽出された、皮膚の線維芽細胞によるコラーゲン産生を促進する作用を有する物質を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項２】
水、メタノール、エタノール、プロパノール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたはこれらの混合物からなる群から選ばれた溶媒を用いて甘草の葉を抽出処理して得られる抽出物を有効成分として含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項３】
請求項２に記載のコラーゲン産生促進剤を配合してなる皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、人の皮膚の線維芽細胞によるコラーゲンの産生を活発化する作用を有し皮膚の荒れ、シワ、弾性低下等を防止するのに有用なコラーゲン産生促進剤、およびそれを配合することにより皮膚の老化予防機能を付与した皮膚外用剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
近年、皮膚老化に関する研究が進んだ結果、皮膚の老化には加齢による新陳代謝の減衰によるもののほかに、紫外線、乾燥、酸化等の作用が複雑に関与していることが確認されている。
【０００３】
紫外線等外的因子の作用では、真皮層にあるコラーゲンとエラスチンに対する作用が皮膚の老化を最も加速する。すなわち、真皮層中では繊維状のコラーゲンとそれに絡み付くようにして存在するコイル状の硬タンパク質・エラスチンによって皮膚のハリや弾力性が良い状態に保たれているが、この張力保持機構が紫外線等の作用によって破壊されると、皮膚はシワやたるみを増し、老化した状態になる。また、コラーゲンはその分子中に水分を保持することができ、それにより皮膚をしっとりした状態に保つのにも役立っているから、外的因子によりコラーゲンが破壊されると肌は乾燥し、荒れた状態になる。
【０００４】
上述の機構による皮膚の老化を防止する手段としては、上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ）、プラセンターエキス、α−ヒドロキシ酸、レチノイン酸等、生理活性を有する物質を皮膚に適用する方法が知られているが、ＥＧＦやプラセンターエキスは動物由来蛋白質のため感作性を有する場合があり、β−ヒドロキシ酸は酸性が強く皮膚を刺激する性質があり、またレチノイン酸は安定性と安全性に難があった。
【０００５】
コラーゲンの分解等による皮膚の保湿性低下に関しては、天然保湿因子（ＮＭＦ）である糖、アミノ酸、有機酸、ピロリドンカルボン酸塩等の塗布、あるいはムコ多糖類、グリセリン等の保湿剤の塗布、油脂その他の疎水性化合物の塗布による皮膚からの水分蒸発の抑制等がある程度の効果をもたらす。しかしながら、これら保湿に限って有効な手段では表皮の角質の状態が改善されるだけであって、真皮内の張力保持機構の改善は期待できない。また、保湿剤も油脂も、概して使用感が悪く、皮膚障害を招くことさえある。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
そこで本発明の目的は、真皮層線維芽細胞におけるコラーゲンの合成を促進して老化した皮膚を真に若返らせるのに有効な物質を見いだし、化粧料等皮膚外用剤の構成成分として有用なコラーゲン産生促進剤を提供することにある。
【０００７】
本発明の他の目的は、真皮層におけるコラーゲンの産生を促進して老化した皮膚を若返らせる作用を有する皮膚外用剤を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明が提供することに成功したコラーゲン産生促進剤は、甘草の葉の部分より抽出され線維芽細胞によるコラーゲン産生を促進する作用を有する物質を有効成分とするものである。
【０００９】
本発明はまた、上記本発明によるコラーゲン産生促進剤を配合して皮膚老化予防作用を付与した皮膚外用剤を提供するものである。
【００１０】
【発明の実施の態様】
甘草（Licorice）は古代より薬用または甘味料原料として利用されている有用植物であるが、その場合利用されるのは根の部分だけである。グリチルリチンその他の有用成分は甘草の地上部には無く、したがって葉や茎の部分は従来まったく利用されていない。
【００１１】
これに対して本発明者らにより初めて確認されたコラーゲン産生促進性物質は甘草の葉部だけに含まれており、根部抽出物には無いものである。
【００１２】
コラーゲン産生促進物質は、含有率の差はあってもほとんどの甘草の葉部に含まれているので、本発明によるコラーゲン産生促進剤の原料とする甘草の種は限定されないが、甘草根エキスを採取するために通常利用されているGlycyrrhiza glabra L.，Glycyrrhiza uralensis Fisher, Glycyrrhiza inflata L. 等の葉部は入手が容易であり、これを利用することは資源の有効利用にもなるから、原料として好適なものである。
【００１３】
抽出原料とする甘草の葉は、採取したのち直ちに乾燥した保存葉のほうが品質が安定していて好ましいが、新鮮な生葉でも差し支えない。
【００１４】
甘草葉抽出物中のいかなる化合物がコラーゲン産生促進作用を示すのかはまだ確認されていないが、有効成分は水または低級脂肪族アルコールを用いて甘草葉部から抽出することができる。疎水性有機溶媒では抽出されない。抽出溶媒として好ましいアルコールの具体例は、メタノール、エタノール、プロパノール、1,3-ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール等である。これらのアルコールと水との混合物は特に好ましい。
【００１５】
抽出は室温ないし還流加熱下に、任意の装置を用いて行うことができる。簡単には、抽出溶媒を満たした処理槽に粉砕した抽出原料を投入し、ときどき撹拌しながら可溶性成分を溶出させる。その後、濾過して抽出残渣を除き、抽出液を得る。得られた抽出液は淡色で、好ましくないにおいもないから、そのままでも本発明のコラーゲン産生促進剤として使用可能であるが、普通は濃縮液もしくはその乾燥物、またはそれらに簡単な精製処理を施してから利用する。必要ならば、保存や取り扱いを容易にするためさらにデキストリン、シクロデキストリン等のキャリヤー、保存料、その他任意の助剤を加えて粉末状、顆粒状、錠剤状等、任意の剤形の製剤とすることができる。
【００１６】
本発明によるコラーゲン産生促進剤は、経皮的に吸収されて線維芽細胞に達し、コラーゲンの産生を活発化して真皮層に十分なコラーゲンが補給されるようにする。上記作用を利用する最も簡単な方法は、このコラーゲン産生促進剤を化粧料その他任意の皮膚外用剤に配合することである。配合対象として適当な皮膚外用剤は、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、入浴剤等である。好適配合率は、標準的な甘草葉抽出物に換算して約０.０１〜１０重量％である。
【００１７】
本発明によるコラーゲン産生促進剤を配合する皮膚外用剤には、コラーゲン産生促進の妨げにならない限り、その皮膚外用剤の製造に通常使用される各種主剤および助剤を常法により配合することができる。また、ほかにも、甘草葉抽出物の効力を高めるのに有効な任意の助剤を含有させることができる。
【００１８】
本発明のコラーゲン産生促進剤と共に皮膚外用剤構成成分として利用可能なものの例には、アボガド油、パーム油、ピーナツ油、牛脂、コメヌカ油、米胚芽油、ホホバ油、カルナウバロウ、ラノリン、流動パラフィン、スクワラン、オキシステアリン酸、イソステアリルアルコール等の油性成分；グリセリン、1,3-ブチレングリコール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、コラーゲン、ヒアルロン酸およびその塩、コンドロイチン酸およびその塩、キチン、キトサン等の保湿剤；パラジメチルアミノ安息香酸アミル、ウロカニン酸、ジイソプロピルケイ皮酸エチル等の紫外線吸収剤；エリソルビン酸ナトリウム、パラヒドロキシアニソール等の酸化防止剤；ステアリル硫酸ナトリウム、セチル硫酸ジエタノールアミン、セチルトリメチルアンモニウムクロライド、イソステアリン酸ポリエチレングリコール、ステアリン酸グリセリン等の界面活性剤；エチルパラベン、プチルパラベン等の防腐剤；グリセロリン脂質、スフィンゴリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴ糖脂質等の複合脂質；スーパーオキサイドディスムターゼ、カタラーゼ、β−カロチン、油溶性甘草根抽出物、グラブリジン、リコカルコンＡ、バイカリン、バイカレイン、イチョウ葉抽出物、クジン抽出物、ハマメリス抽出物、黄杞抽出物その他の活性酸素消去作用を有する物質；アラントイン、グアイヤアズレン、カマズレン、ビサボロール、グリチルリチン酸およびその塩、グリチルレチン酸およびその誘導体、ステアリルイプシロンイミノカプロン酸、インドメタシン、酸化亜鉛、ヒノキチオール等の抗炎症作用物質；レチノール、レチナール、レチノイックアシッド、パントテン酸、パンテノール、リボフラビン、ピリドキシン、トコフェロール、アスコルビン酸、葉酸、ニコチン酸等のビタミンおよびその誘導体類；γ−オリザノール、デキストラン硫酸ナトリウム等の血行促進剤；硫黄、チアントール等の抗脂漏剤；アルニカ抽出物、インチンコウ抽出物、オウゴン抽出物、オウバク抽出物、オウレン抽出物、カミツレ抽出物、カンゾウ根水抽出物、サンシシ抽出物、シコン抽出物、シャクヤク抽出物、ボタンピ抽出物、ジュウヤク抽出物、シラカバ抽出物、西洋トチノキ種子抽出物、トウキンセンカ抽出物、ボタンピ抽出物、ムクロジ抽出物、シナノキ抽出物、ローズマリー抽出物、セイヨウノコギリ草抽出物、ヨモギ抽出物、岩白菜抽出物、ヨクイニン抽出物、アロエ抽出物、ビワ抽出物、モモ抽出物、センキュウ抽出物、セージ抽出物、トウキ抽出物、ヘチマ抽出物、セイヨウボダイジュ抽出物、オタネニンジン抽出物、トウガラシ抽出物、甜茶抽出物、茶抽出物、オトギリソウ抽出物、マロニエ抽出物、プルーン抽出物、コラーゲン、加水分解コンキオリン、エラスチン、ビトロネクチン、フィブロネクチン、プラセンターエキス、ローヤルゼリー、ビフィズス菌培養物、乳酸菌培養物、酵母エキス、レイシ菌糸体抽出物、ブクリョウ抽出物、褐藻抽出物、紅藻抽出物、緑藻抽出物等の、皮膚に対して何らかの好ましい作用を示すことが期待される植物抽出物、動物性抽出物、微生物由来成分または藻類抽出物；アミノ酸類；コレステロール類；植物ステロール類；リポプロテイン類；増粘剤（たとえばカルボキシビニルポリマー）；着色���（たとえばチタンイエロー、カーサミン、ベニバナ赤）等がある。
【００１９】
皮膚から吸収された本発明のコラーゲン産生促進剤は、コラーゲンの産生力を増強して繊維状コラーゲンからなる皮膚張力保持構造を良好な状態に保ち、それにより、老化した皮膚のハリや弾力性を回復し、健康な肌も常に良好な状態に保つ。加えて、二次的な効果として、皮膚の保湿力を向上させ、肌荒れを改善する。したがって、本発明によるコラーゲン産生促進剤を配合した化粧料は若々しい肌を維持するのに極めて有効なものとなる。
【００２０】
【実施例】
以下、実施例を示して本発明をさらに詳細に説明する。
【００２１】
製造例１
甘草（Glycyrrhiza glabra）の乾燥葉の粗砕物３００ｇを抽出溶媒２０００mlに投入し、ゆるく撹拌しながら３時間、７０℃に保った。その後、濾過し、濾液を４０℃で減圧下に濃縮し、さらに減圧乾燥機で乾燥して甘草葉抽出物を得た。
４種類の抽出溶媒を用いて上記抽出を行なったところ、抽出物の収率は表１のとおりであった。
【００２２】
【表１】
0004563521.tif 000002
【００２３】
製造例２
製造例１で用いたものと同じ甘草葉粗砕物３００ｇを1,3-ブチレングリコール-水（１：１混合液）２０００mlに投入し、撹拌しながら８０℃に３時間保持したのち濾過して、固形分濃度３.８４重量％の抽出液１６００mlを得た。
【００２４】
製造例３
抽出溶媒をグリセリン-水（１：１混合液）に変更したほかは製造例２と同様にして、固形分濃度２.３７重量％の抽出液１７５０mlを得た。
【００２５】
製造例４
抽出溶媒をプロピレングリコール-水（１：１混合液）に変更したほかは製造例２と同様にして、固形分濃度３.６２重量％の抽出液１６４０mlを得た。
【００２６】
試験例１：コラーゲン産生促進作用の試験
製造例１による甘草葉抽出物からなるコラーゲン産生促進剤および製造例２〜４による甘草葉抽出液からなるコラーゲン産生促進剤について、下記の試験法によりコラーゲン産生促進作用を試験した。
【００２７】
試料溶液の調製：各試料を０.０５Ｍ・Mcllvain緩衝液（pＨ７.２）に溶解して、濃度を変えた２種類の試料溶液を調製する。
試験法：２カ月齢のヘアレスマウス（雌）４８匹を各群６匹の８群に分け、各マウスの背部皮膚に５０mJ/cm2の紫外線（ＵＶ−Ｂ）照射を週に４回の頻度で６週間にわたって続ける。その後、ＵＶ−Ｂ照射部位に、群ごとに異なる試料溶液０.１mlを、１日２回、５週間続けて塗布する（但し塗布日は１週間につき５日とする）。対照群には、試料を含まない上記緩衝液を同様に塗布する。試料溶液塗布開始から５週経過後、ＵＶ−Ｂ照射部位から１cm×１cmの皮膚組織を採取し、５０mM・トリス塩酸緩衝液（pＨ7.5，１Ｍ-ＮaＣl含有）１mlを加えて４℃で５分間ホモジナイズしたのち遠心分離する。得られた上清中のコラーゲン（塩可溶性コラーゲン）をSircol Collagen Assay Kit（Biocolor社製品）により定量する。試料を含まない緩衝液を塗布した対照群のコラーゲン量を基準値とする試験群コラーゲン量の百分率をコラーゲン産生促進率とする。
【００２８】
試験結果は表１のとおりで、本発明のコラーゲン産生促進剤によりコラーゲン産生が増加することが確認された。
【００２９】
【表１】
コラーゲン産生促進率（％，製造例１）
0004563521.tif 000003
【００３０】
【表２】
コラーゲン産生促進率（％，製造例２〜４）
0004563521.tif 000004
【００３１】
試験例２：試用試験
製造例１による試料１（甘草葉エタノール抽出物）を配合した下記組成の乳液を常法に従い調製した。
甘草葉エタノール抽出物                          １.０ｇ
セチルアルコール                                ０.５ｇ
ミツロウ                                        ２.０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（10E.O） １.０ｇ
モノステアリン酸グリセリル                      １.０ｇ
ヒアルロン酸                                    ０.１ｇ
プロピレングリコール                            ５.０ｇ
エタノール                                      ３.０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                        ０.３ｇ
香料                                            ０.０３
精製水                        残部（全量を１００mlとする）
【００３２】
上記組成の本発明乳液および甘草葉エタノール抽出物を含まないほかは上記と同じ組成の比較例を乳液製造の常法により製造し、下記の評価試験を行なった。
【００３３】
被験者：２１〜４１歳の女性多数の中から、下記判定１の評価基準で評点１または２に当たる肌荒れと判定された者２０名を選抜して被験者とした。
塗布試験：各被験者に、顔の右半分に本発明乳液を、左半分には比較例乳液を、朝夕各１回、３０日間塗布させた。
【００３４】
〔判定１：肌荒れ改善効果〕
塗布試験終了後、シルフロ（FLEXICL DEVELOPMENTS LTD製）によるレプリカ法を用いて顔の肌のレプリカをとり、５０倍の顕微鏡で皮紋の状態および角質剥離状態を観察し、下記評価基準で肌の状態を判定した。
【００３５】
0004563521.tif 000005
【００３６】
結果は表３に示したとおりで、本発明乳液を塗布した領域は比較例乳液を塗布した領域に比べて顕著に肌荒れが改善された。
【００３７】
【表３】
0004563521.tif 000006
【００３８】
〔判定２・官能評価〕
使用感について、本発明乳液と比較例品を比較した場合の優劣を被験者全員に質問した。回答の集計結果は表４のとおりで、官能評価によっても前記機器による評価結果と合致する効果と優れた使用感が確認された。
【００３９】
【表４】
0004563521.tif 000007
【００４０】
実施例１
下記の組成の乳液を常法により製造した。
ホホバオイル                                    ４ｇ
オリーブオイル                                  ２ｇ
スクワラン                                      ２ｇ
セタノール                                      ２ｇ
モノステアリン酸グリセリル                      ２ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O）       ２.５ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O） ２ｇ
1,3-ブチレングリコール                          ３ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                        ０.１５ｇ
香料                                            ０.０５ｇ
甘草葉抽出物（製造例１・試料２）                ０.１ｇ
甘草葉抽出液（製造例３）                        １ｇ
精製水                        残部（全量を１００ｇとする）
【００４１】
実施例２
下記組成の化粧水を常法により製造した。
グリセリン                                      ３ｇ
1,3-ブチレングリコール                          ３ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O)  ０.５ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                        ０.１５ｇ
クエン酸                                        ０.１ｇ
クエン酸ソーダ                                  １ｇ
香料                                            ０.０５ｇ
甘草葉抽出物（製造例１・試料１）                ０.２ｇ
甘草葉抽出液（製造例３）                        ２ｇ
精製水                        残部（全量を１００ｇとする）
【００４２】
実施例３
下記組成のクリームを常法により製造した。
流動パラフィン                                  ５ｇ
サラシミツロウ                                  ４ｇ
セタノール                                      ３ｇ
スクワラン                                    １０ｇ
ラノリン                                        ２ｇ
ステアリン酸                                    １ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O)  １.５ｇ
モノステアリン酸グリセリル                      ３ｇ
1,3-ブチレングリコール                          ６ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                        １.５ｇ
香料                                            ０.１ｇ
甘草葉抽出物（製造例１・試料２）                ０.１ｇ
甘草葉抽出液（製造例２）                        １ｇ
精製水                        残部（全量を１００ｇとする）
【００４３】
実施例４
下記組成のパックを常法により製造した。
ポリビニルアルコール        １５ｇ
ポリエチレングリコール        ３ｇ
プロピレングリコール          ７ｇ
エタノール                  １０ｇ
パラオキシ安息香酸エチル      ０.０５ｇ
香料                          ０.０５ｇ
甘草葉抽出液（製造例４）      ５ｇ
精製水                      残部（全量を１００ｇとする）
【００４４】
【発明の効果】
上述のように、本発明によるコラーゲン産生促進剤はコラーゲン産生促進作用が優れているだけでなく使用感と安全性に優れているので、皮膚を内部から活性化して若々しい状態に保つための成分として化粧料等一般的な皮膚外用剤に配合するのに好適なものである。