(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0004564954.tif 000049
式中、
Ａｒは、１個ないし３個の置換基により置換されていてもよいアリールを表し
［ここで、該置換基は、アルキル、アルコキシ、ホルミル、カルボキシル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、トリフルオロメチル、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミノカルボニルおよびニトロからなる群から相互に独立して選択される（ここで、アルキルは、１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、該置換基は、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ヒドロキシルおよびアリールからなる群から相互に独立して選択される）か、
または、アリール基上の置換基の２個は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、１,３−ジオキソラン、シクロペンタン環またはシクロヘキサン環を形成し、第三の置換基が存在すれば、それらから独立して上述の基から選択される］、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、
Ｒ２は、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、
Ｒ３は、アルキル、アルコキシ、シアノ、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルを表すか、または、
基Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、他の２つはそれらが結合している炭素原子と一緒になって１,３−ジオキソラン、シクロペンタン環またはシクロヘキサン環を形成し、
Ｒ４は、水素またはアルキルを表し、
Ｒ５は、水素またはアルキルを表すか、または、
基Ｒ４およびＲ５は、ピペラジン環中で相互に直接向き合っている炭素原子に結合し、１個または２個のメチル基により置換されていることもあるメチレン架橋を形成する、
の化合物またはそれらの塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物。
【請求項２】
Ａｒが、１個または２個の置換基により置換されていてもよいフェニルを表し、ここで、該置換基は、メチル、メトキシ、フッ素および塩素からなる群から相互に独立して選択され、
Ｒ１が、水素、メチル、メトキシ、フッ素または塩素を表し、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、メチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シアノ、フッ素、塩素、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、
Ｒ４が、水素を表し、そして、
Ｒ５が、水素を表す、
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、水素、メチル、メトキシまたはフッ素を表すことを特徴とする、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がメチルまたはメトキシを表すことを特徴とする、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がフェニル環の結合点に対するオルト位を介してフェニル環に結合していることを特徴とする、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２が水素を表すことを特徴とする、請求項１および請求項３ないし請求項５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３が、トリフルオロメチル、塩素、メチル、イソプロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルを表すことを特徴とする、請求項１および請求項３ないし請求項６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ３が、トリフルオロメチル、塩素またはメチルを表すことを特徴とする、請求項１ないし請求項６のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１がフェニル環の結合点に対するオルト位を介してフェニル環に結合し、そしてＲ３が、フェニル環の結合点に対するメタ位を介してフェニル環に結合し、その位置がＲ１の位置と向かい合うことを特徴とする、請求項１ないし請求項８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、式
【化２】
0004564954.tif 000050
（式中、Ａｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、請求項１で定義した通りであり、そして、
Ｒ６は、アルキル、好ましくはメチルまたはエチルを表す）
の化合物を、塩基と反応させることを特徴とする、方法。
【請求項１１】
疾患の処置および／または予防のための、請求項１ないし請求項９のいずれかに記載の化合物。
【請求項１２】
疾患の処置および／または予防のための医薬を製造するための、請求項１ないし請求項９のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１３】
ウイルス感染の処置および／または予防のための医薬を製造するための、請求項１ないし請求項９のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１４】
ウイルス感染がヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）、またはヘルペスウイルス科のグループの他の代表例による感染であることを特徴とする、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
請求項１ないし請求項９のいずれかに記載の化合物を、さらなる活性化合物と組み合わせて含む医薬。
【請求項１６】
さらなる活性化合物が、抗ウイルス活性化合物であることを特徴とする、請求項１５に記載の医薬。
【請求項１７】
抗ウイルス活性化合物がガンシクロビルまたはアシクロビルであることを特徴とする、請求項１６に記載の医薬。
【請求項１８】
請求項１ないし請求項９のいずれかに記載の化合物を、不活性、非毒性の医薬的に適する補助剤と組み合わせて含む医薬。
【請求項１９】
ウイルス感染の処置および／または予防のための、請求項１５に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ジヒドロキナゾリン類およびそれらの製造方法、疾患の処置および／または予防のためのそれらの使用、並びに疾患の処置および／または予防のための医薬を製造するためのそれらの使用、特に抗ウイルス剤としての、特にサイトメガロウイルスに対する使用に関する。
【０００２】
ジヒドロキナゾリン類の合成は、Saito T. et al. Tetrahedron Lett., 1996, 37, 209-212 および Wang F. et al. Tetrahedron Lett., 1997, 38, 8651-8654 に記載されている。
【０００３】
抗ウイルス活性を有する様々な構造の物質が市販されている；しかしながら、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、フォスカーネットおよびシドフォビルを使用する現在利用可能な治療は、ひどい副作用、例えば腎毒性、好中球減少または血小板減少を伴う。加えて、耐性の発生が常に起こり得る。従って、有効な治療のための新規物質が望ましい。
【０００４】
従って、本発明の１つの目的は、ヒトおよび動物におけるウイルス感染疾患の処置のための、同等かまたは改善された抗ウイルス作用を有する新規化合物を提供することである。
【０００５】
驚くべきことに、本発明に関するジヒドロキナゾリン類は、抗ウイルス作用を有することが判明した。
【０００６】
本発明は、式
【化１】
0004564954.tif 000002
式中、
Ａｒは、１個ないし３個の置換基により置換されていてもよいアリールを表し
［ここで、該置換基は、アルキル、アルコキシ、ホルミル、カルボキシル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、トリフルオロメチル、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミノカルボニルおよびニトロからなる群から相互に独立して選択される（ここで、アルキルは、１個ないし３個の置換基により置換されていてもよく、該置換基は、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ヒドロキシルおよびアリールからなる群から相互に独立して選択される）か、
または、アリール基上の置換基の２個は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、１,３−ジオキソラン、シクロペンタン環またはシクロヘキサン環を形成し、第三の置換基が存在すれば、それらから独立して上述の基から選択される］、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、
Ｒ２は、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、
Ｒ３は、アルキル、アルコキシ、シアノ、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルを表すか、または、
基Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、他の２つはそれらが結合している炭素原子と一緒になって１,３−ジオキソラン、シクロペンタン環またはシクロヘキサン環を形成し、
Ｒ４は、水素またはアルキルを表し、そして、
Ｒ５は、水素またはアルキルを表すか、または、
基Ｒ４およびＲ５は、ピペラジン環中で相互に直接向き合っている炭素原子に結合し、１個または２個のメチル基により置換されていることもあるメチレン架橋を形成する、
の化合物およびそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物を提供する。
【０００７】
本発明による化合物は、以下で言及される式（Ｉ）に包含される化合物がまだ塩、溶媒和物および塩の溶媒和物ではない場合、式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、以下で実施態様（複数も可）として言及される化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物である。
【０００８】
本発明による化合物は、それらの構造に依存して、立体異性体（エナンチオマー、ジアステレオマー）で存在する。従って、本発明は、エナンチオマーまたはジアステレオマーおよびそれらの各々の混合物に関する。立体異性体的に純粋な成分は、そのようなエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物から、既知のやり方で単離できる。
本発明による化合物は互変体で存在でき、本発明はまた全互変体も提供する。
【０００９】
本発明に関する塩は、本発明による化合物の生理的に許容し得る塩である。しかしながら、それ自体は医薬適用に適さないが、例えば本発明による化合物の単離または精製に使用できる塩もまた提供される。
【００１０】
本発明による化合物の生理的に許容し得る塩には、無機酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩など、が含まれる。
【００１１】
本発明による化合物の生理的に許容し得る塩には、常套の塩基との塩、例えば、そして好ましくは、アルカリ金属塩（例えばナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えばカルシウムおよびマグネシウム塩）およびアンモニアまたは１個ないし１６個の炭素原子を有する有機アミン（例えば、そして好ましくは、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、アルギニン、リジン、エチレンジアミンおよびＮ−メチルピペリジンなど）から誘導されるアンモニウム塩など、も含まれる。
【００１２】
本発明に関して、溶媒和物は、固体または液体状態で溶媒分子との配位により錯体を形成する、本発明による化合物の形態である。水和物は、配位が水と起こる、溶媒和物の特別な形態である。
【００１３】
本発明のために、断りのない限り、置換基は以下の意味を有する：
アルキル自体、並びにアルコキシ、アルキルアミノ、アルキルカルボニルおよびアルコキシカルボニル中の「アルコ」および「アルキル」は、一般的に１個ないし６個、好ましくは１個ないし４個、特に好ましくは１個ないし３個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキル基であり、例えば、そして好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルである。
【００１４】
アルコキシは、例えば、そして好ましくは、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキソキシである。
【００１５】
アルキルアミノは、１個または２個のアルキル置換基（相互に独立して選択される）を有するアルキルアミノ基、例えば、そして好ましくは、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ｎ−ペンチルアミノ、ｎ−ヘキシルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノおよびＮ−ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノである。
【００１６】
アルキルカルボニルは、例えば、そして好ましくは、アセチルおよびプロパノイルである。
アルコキシカルボニルは、例えば、そして好ましくは、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ｎ−ペントキシカルボニルおよびｎ−ヘキソキシカルボニルである。
【００１７】
アリールは、一般的に６個ないし１４個の炭素原子を有する単環式ないし三環式の芳香族性炭素環式基；例えば、そして好ましくは、フェニル、ナフチルおよびフェナントレニルである。
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素、好ましくはフッ素および塩素である。
【００１８】
炭素原子上の記号＊は、該化合物が、この炭素原子の配置に関して、鏡像異性的に純粋な形態で存在することを意味し、このことは、本発明のために、９０％より高い鏡像体過剰率（＞９０％ｅｅ）を意味すると理解されるべきである。
【００１９】
式中、
Ａｒが、１個ないし３個の置換基により置換されていてもよいフェニルを表し
［ここで、該置換基は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、カルボキシル、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、トリフルオロメチル、フッ素、塩素、臭素、シアノ、ヒドロキシル、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノおよびニトロからなる群から相互に独立して選択されるか、
または、アリール基上の置換基の２個は、それらが結合している炭素原子と一緒になって１,３−ジオキソランを形成し、第三の置換基が存在すれば、それらから独立して上述の基から選択される］
Ｒ１が、水素、Ｃ１−Ｃ３−アルキル、Ｃ１−Ｃ３−アルコキシ、フッ素または塩素を表し、
Ｒ２が、水素、Ｃ１−Ｃ３−アルキル、Ｃ１−Ｃ３−アルコキシ、フッ素または塩素を表し、
Ｒ３が、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、シアノ、フッ素、塩素、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、
Ｒ４が、水素またはメチルを表し、そして、
Ｒ５が、水素を表す、
式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物が好ましい。
【００２０】
なかんずく、式中、
Ａｒが、１個または２個の置換基により置換されていてもよいフェニルを表し、ここで、該置換基は、メチル、メトキシ、フッ素および塩素からなる群から相互に独立して選択され、
Ｒ１が、水素、メチル、メトキシ、フッ素または塩素を表し、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、メチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シアノ、フッ素、塩素、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、
Ｒ４が、水素を表し、そして、
Ｒ５が、水素を表す、
式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物が特に好ましい。
【００２１】
なかんずく、式中、
Ａｒが、１個または２個の置換基により置換されていてもよいフェニルを表し、ここで、置換基は、メチル、メトキシ、フッ素および塩素からなる群から相互に独立して選択され、
Ｒ１が、水素、メチル、メトキシ、フッ素または塩素を表し、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、メチル、シアノ、フッ素、塩素、ニトロまたはトリフルオロメチルを表し、
Ｒ４が、水素を表し、そして、
Ｒ５が、水素を表す、
式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物が特に好ましい。
【００２２】
式中、Ｒ１が、水素、メチル、メトキシまたはフッ素を表す式（Ｉ）の化合物も好ましい。
なかんずく、Ｒ１がメチルまたはメトキシを表す式（Ｉ）の化合物が特に好ましい。
【００２３】
式中、Ｒ１がフェニル環の結合点に対するオルト位を介してフェニル環に結合している、式（Ｉ）の化合物も好ましい。本発明のために、基Ｒ１、Ｒ２およびＲ３により置換されているフェニル環の結合点は、式（Ｉ）に従い、ジヒドロキナゾリンの２個の窒素原子の一方に結合しているフェニル環の炭素原子を意味すると理解されるべきである。
【００２４】
式中、Ｒ１がメチルまたはメトキシを表し、そしてＲ１がフェニル環の結合点に対するオルト位を介してフェニル環に結合している式（Ｉ）の化合物が特に好ましい。
式中、Ｒ２が水素を表す式（Ｉ）の化合物も好ましい。
式中、Ｒ３が、トリフルオロメチル、塩素、メチル、イソプロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルを表す式（Ｉ）の化合物も好ましい。
なかんずく、Ｒ３が、トリフルオロメチル、塩素またはメチルを表す式（Ｉ）の化合物が特に好ましい。
【００２５】
式中、Ｒ１がフェニル環の結合点に対するオルト位を介してフェニル環に結合し、そしてＲ３が、フェニル環の結合点に対するメタ位を介してフェニル環に結合し、その位置がＲ１の位置と向かい合う、式（Ｉ）の化合物も好ましい。
【００２６】
式中、Ｒ１がフェニル環の結合点に対するオルト位を介してフェニル環に結合し、Ｒ３が、トリフルオロメチル、塩素またはメチルを表し、そしてＲ３が、フェニル環の結合点に対するメタ位を介してフェニル環に結合し、その位置がＲ１の位置と向かい合う、式（Ｉ）の化合物が特に好ましい。
式中、Ｒ４およびＲ５が水素を表す、式（Ｉ）の化合物も好ましい。
【００２７】
式中、Ａｒが１個または２個の置換基により置換されていてもよいフェニルを表し、ここで、該置換基が、メチル、メトキシ、フッ素および塩素からなる群から相互に独立して選択される、式（Ｉ）の化合物も好ましい。
【００２８】
基のそれぞれの組合せまたは好ましい組合せにおいて与えられる特定の基の定義はまた、各場合で与えられる基の組合せから独立して、所望により他の組合せの基の定義により置き換えられる。
上述の好ましい範囲の２つまたはそれ以上の組合せが、ことさら特に好ましい。
【００２９】
本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物の製造方法を提供する。その方法は、式
【化２】
0004564954.tif 000003
（式中、Ａｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、上記定義の通りであり、そして、
Ｒ６は、アルキル、好ましくはメチルまたはエチルを表す）
の化合物を、塩基と反応させることを含む。
【００３０】
この反応は、一般的に、不活性溶媒中、好ましくは室温ないし溶媒の還流温度の温度範囲で、大気圧で実施する。
【００３１】
適する塩基は、例えば、適するならば水性溶液中の、水酸化ナトリウム、水酸化リチウムもしくは水酸化カリウムなどのアルカリ金属水酸化物、または、炭酸セシウム、炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウムなどのアルカリ金属炭酸塩である；水中の水酸化ナトリウムが好ましい。
【００３２】
不活性溶媒は、例えば、１,２−ジメトキシエタン、ジオキサン、テトラヒドロフラン、グリコールジメチルエーテルまたはジエチレングリコールジメチルエーテルなどのエーテル類、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノールまたはｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール類、または溶媒類の混合物である；ジオキサンまたはテトラヒドロフランが好ましい。
【００３３】
式（ＩＩ）の化合物は、知られているか、または、式
【化３】
0004564954.tif 000004
（式中、Ｒ６は上記定義の通りである）
の化合物を、２段階の反応で、最初に式
【化４】
0004564954.tif 000005
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は上記定義の通りである）
の化合物と、次いで、式
【化５】
0004564954.tif 000006
（式中、Ａｒ、Ｒ４およびＲ５は、上記定義の通りである）
の化合物と反応させることにより製造できる。
【００３４】
反応の両段階とも、一般的に、不活性溶媒中、好ましくは室温ないし１００℃の温度範囲で、大気圧で実施する。第２段階では、適するならば、シリカゲルを反応混合物に添加する。この反応は、好ましくは、第１段階と第２段階の間に後処理をして実施する。
【００３５】
適する不活性溶媒は、例えば、塩化メチレン、トリクロロメタン、四塩化炭素、トリクロロエタン、テトラクロロエタン、１,２−ジクロロエタンまたはトリクロロエチレンなどのハロゲン化炭化水素類、ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、１,２−ジメトキシエタン、ジオキサン、テトラヒドロフラン、グリコールジメチルエーテルもしくはジエチレングリコールジメチルエーテルなどのエーテル類、ベンゼン、キシレン、トルエン、ヘキサン、シクロヘキサンもしくは鉱油留分などの炭化水素類、またはジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、アセトニトリルまたは酢酸エチルなどの他の溶媒、または溶媒類の混合物である；塩化メチレンが好ましい。
【００３６】
式（ＩＶ）の化合物は、既知であるか、または、対応する出発物質から既知方法により合成できる。
【００３７】
式（Ｖ）の化合物は、既知であるか、または、対応する出発物質から既知方法により、例えば、下記の合成スキームに従う Buchwald-Hartwig 反応 (C.G. Frost, P. Mendonca, J. Chem. Soc., Perkin Trans I, 1998, 2615-2623 に総説）により合成できる：
Buchwald-Hartwig 反応:
【化６】
0004564954.tif 000007
このために必要とされる出発物質は、既知であるか、または、対応する出発物質から既知方法により合成できる。
【００３８】
式（ＩＩＩ）の化合物は既知であるか、または、式
【化７】
0004564954.tif 000008
（式中、Ｒ６は上記定義の通りである）
の化合物を、トリフェニルホスフィンおよび四塩化炭素と反応させることにより製造できる。
【００３９】
この反応は、一般的に、不活性溶媒中、塩基の存在下、好ましくは室温ないし５０℃の温度範囲で、大気圧で実施する。
【００４０】
適する不活性溶媒は、例えば、ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、１,２−ジメトキシエタン、ジオキサン、テトラヒドロフラン、グリコールジメチルエーテルもしくはジエチレングリコールジメチルエーテルなどのエーテル類、ベンゼン、キシレン、トルエン、ヘキサン、シクロヘキサンまたは鉱油留分などの炭化水素類、またはジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、アセトニトリルまたはピリジンなどの他の溶媒である；アセトニトリルが好ましい。
【００４１】
適する塩基は、例えば、炭酸セシウム、炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウムなどのアルカリ金属およびアルカリ土類金属炭素塩、またはトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリンもしくはピリジンなどのアミン類である；トリエチルアミンが好ましい。
【００４２】
式（ＶＩ）の化合物は、既知であるか、または、対応する出発物質から既知方法により合成できる。
【００４３】
本発明による化合物の製造は、以下の合成スキームにより例示説明できる。
合成スキーム：
【化８】
0004564954.tif 000009
【００４４】
本発明による一般式（Ｉ）の化合物は、予想し得なかった驚異的な範囲の効果を示す。それらは、ヘルペスウイルス科（Herpes viridae）のグループ（ヘルペスウイルス類）の代表例、ことさらにサイトメガロウイルス類（ＣＭＶ）、特にヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）に対して、抗ウイルス効果を示す。
【００４５】
例として言及し得る適応症の領域は以下である：
１）ＡＩＤＳ患者におけるＨＣＭＶ感染の処置および予防（網膜炎、肺臓炎、消化管の感染）
２）しばしば生命を脅かすＨＣＭＶ肺臓炎または脳炎を発症させる骨髄および器官移植におけるサイトメガロウイルス感染、並びに消化管および全身的ＨＣＭＶ感染の処置および予防
３）新生児および乳児のＨＣＭＶ感染の処置および予防
４）妊婦の急性ＨＣＭＶ感染の処置
５）癌および癌治療に関連する免疫抑制患者のＨＣＭＶ感染の処置。
【００４６】
本発明はさらに、疾患、ことさらにウイルス感染、特に上述のウイルスによるもの、およびそれらに起因する感染性疾患の処置および／または予防のための本発明による化合物の使用を提供する。本明細書では以後、ウイルス感染は、ウイルス感染およびウイルス感染に起因する疾患の両方を意味すると理解されるべきである。
【００４７】
本発明はさらに、障害、特に上述の障害の処置および／または予防のための本発明による化合物の使用を提供する。
本発明はさらに、障害、特に上述の障害の処置および／または予防のための医薬を製造するための、本発明による化合物の使用を提供する。
【００４８】
本発明による化合物は、好ましくは、ヘルペスウイルス科のグループの代表例、特にサイトメガロウイルス類、特にヒトサイトメガロウイルスの感染の予防および／または処置に適する医薬の製造のために使用される。
【００４９】
本発明はさらに、抗ウイルス的有効量の本発明による化合物を使用する、障害、特に上述の障害の処置および／または予防方法を提供する。
【００５０】
本発明はさらに、特に上述の障害の処置および／または予防のための、少なくとも１種の本発明による化合物および少なくとも１種またはそれ以上のさらなる活性化合物を含む医薬を提供する。組合せに適する例として、そして好ましいものとして言及され得る活性化合物は：ガンシクロビルまたはアシクロビルなどの抗ウイルス活性化合物である。
【００５１】
本発明による化合物は、全身的および／または局所的に作用できる。この目的のために、それらは、例えば、経口で、非経腸で、肺に、鼻腔に、舌下に、舌に、頬側に、直腸に、皮膚に、経皮で、結膜もしくは耳経路で、またはインプラントもしくはステントとしてなど、適するやり方で投与できる。
これらの投与経路のために、活性化合物を適する投与形で投与することが可能である。
【００５２】
経口投与に適するのは、本発明による化合物を結晶および／または無定形および／または溶解形態で含む、先行技術で説明される通りに作用し、活性化合物を迅速におよび／または修飾された形態で送達する投与形、例えば、錠剤（非被覆および被覆錠剤、例えば腸溶性被覆、またはその溶解が遅くされるか、または不溶であり、本発明による化合物の放出を制御する被覆を施された錠剤）、口腔で迅速に崩壊する錠剤、またはフィルム／ウエハース（wafers）、フィルム／凍結乾燥剤、カプセル剤（例えばハードまたはソフトゼラチンカプセル剤）、糖衣錠剤、顆粒剤、ペレット剤、粉末剤、乳剤、懸濁剤、エアゾル剤または液剤である。
【００５３】
非経腸投与は、吸収段階を回避して（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰椎内）、または吸収を含めて（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内）行うことができる。非経腸投与に適する投与形は、なかんずく、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥剤または滅菌粉末剤形態の注射および点滴製剤である。
【００５４】
他の投与経路に適する例は、例えば、吸入用医薬形態（なかんずく、粉末吸入器、噴霧器）、点鼻薬／液／スプレー；舌に、舌下に、または頬側に投与するための錠剤、カプセル剤のフィルム／ウエハース、坐剤、眼または耳用製剤、膣用カプセル剤、水性液剤（ローション、震盪混合物）、親油性懸濁剤、軟膏、クリーム、経皮治療システム、ミルク、ペースト、フォーム、散剤、インプラントまたはステントである。
【００５５】
本発明による活性化合物は、上述の投与形に変換できる。これは、それ自体既知のやり方で、不活性、非毒性、医薬的に許容し得る補助剤と混合することにより行うことができる。これらの補助剤には、なかんずく、担体（例えば、微結晶セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例えば、液体ポリエチレングリコール類）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えば、ポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えば、アルブミン）、安定化剤（例えば、抗酸化剤、例えばアスコルビン酸など）、着色剤（例えば、無機色素、例えば酸化鉄など）および香味および／または臭気遮断剤が含まれる。
【００５６】
本発明はさらに、少なくとも１種の本発明による化合物を、通常１種またはそれ以上の不活性、非毒性、医薬的に適する補助剤と一緒に含む医薬および上記目的のためのそれらの使用を提供する。
【００５７】
一般に、静脈内投与で、体重で約０.００１ないし１０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０.０１ないし５ｍｇ／ｋｇの量を投与するのが、有効な結果を達成するために有利であり、経口投与の用量は、体重で約０.０１ないし５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０.１ないし２５ｍｇ／ｋｇであることが明らかになった。
【００５８】
それでもやはり、適するならば、体重、投与経路、活性化合物に対する個体の反応、製剤の様式および投与を行う時間または間隔に応じて、上述の量から逸脱することが必要となり得る。従って、上述の最小量より少なくても十分な場合もあり、上述の上限を超えなくてはならない場合もある。大量に投与する際には、それらを一日にわたって複数の個別用量に分割するのが望ましいことがある。
【００５９】
以下の試験および実施例において、パーセントのデータは、断りのない限り重量パーセントである；部は、重量部である。液体／液体溶液の溶媒比、希釈比および濃度のデータは、各場合で体積をベースとする。
【００６０】
Ａ．実施例
略号：
【表１】
0004564954.tif 000010
【００６１】
一般的なＬＣ−ＭＳおよびＨＰＬＣの方法：
方法１（ＨＰＬＣ）：器具：DAD 検出を有するHP 1100; カラム: Kromasil RP 18, 60 mm ｘ 2 mm, 3.5 μm；移動相Ａ：ＨＣｌＯ４５ｍｌ／水ｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；勾配：０分２％Ｂ、０.５分２％Ｂ、４.５分９０％Ｂ、６.５分９０％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ／分；温度：３０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ
【００６２】
方法２（ＨＰＬＣ、分取的分離）：カラム：CromSil C18, 250 ｘ 30；流速５０ｍｌ／分；ランごとの時間：３８分；２１０ｎｍで検出；移動相Ａ：水、移動相Ｂ：アセトニトリル；勾配：１０％Ｂ（３分）→９０％Ｂ（３１分）→９０％Ｂ（３４分）→１０％Ｂ（３４.０１分）
【００６３】
方法３（ＨＰＬＣ、エナンチオマーの分離）：市販の CSP: Daicel Chiralpak AD、イソヘキサンとアルコール（エタノールおよびイソプロパノールなど）の移動相混合物に８５：１５：０.０３（ｖ／ｖ／ｖ）の比でジエチルアミンを添加したものを使用する。
【００６４】
方法４（ＬＣＭＳ）：器具：４個の並行インジェクションのある Micromass TOF-MUX インターフェイス、Waters 600；カラム：YMC-ODS-AQ, 50 mm ｘ 2.1 mm, 3.0 μm；移動相Ａ：水＋０.０５％蟻酸、移動相Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％蟻酸；勾配：０.０分１００％Ａ→０.２分１００％Ａ→２.９分３０％Ａ→３.１分１０％Ａ→４.５分１０％Ａ；オーブン：室温；流速：０.８ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ
【００６５】
方法５（ＬＣＭＳ）：器具：Micromass Quattro LCZ, HP1100；カラム：Symmetry C18, 50 mm ｘ 2.1 mm, 3.5 μm；移動相Ａ：アセトニトリル＋０.１％蟻酸、移動相Ｂ：水＋０.１％蟻酸；勾配：０.０分１０％Ａ→４.０分９０％Ａ→６.０分９０％Ａ；オーブン：４０℃；流速：０.５ｍｌ／分；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ
【００６６】
方法６（ＬＣＭＳ）：器具：Finnigan MAT 900S, TSP: P4000, AS3000, UV3000HR；カラム：Symmetry C 18, 150 mm ｘ 2.1 mm, 5.0 μm；移動相Ｃ：水、移動相Ｂ：水＋３５％強度塩酸０.３ｇ、移動相Ａ：アセトニトリル；勾配：０.０分２％Ａ→２.５分９５％Ａ→５分９５％Ａ；オーブン：７０℃；流速：１.２ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ
【００６７】
方法７（ＨＰＬＣ）：器具：DAD 検出を有するHP 1100；カラム：Kromasil RP-18, 60 mm ｘ 2 mm, 3.5 μm；移動相Ａ：ＨＣｌＯ４５ｍｌ／水ｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；勾配０分２％Ｂ、０.５分２％Ｂ、４.５分９０％Ｂ、９分９０％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ／分；オーブン：３０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ
【００６８】
出発物質
一般法［Ａ］：２−ニトロ桂皮酸のメタノールによるエステル化
２−ニトロ桂皮酸５１７.７ｍｍｏｌを、最初にメタノール６００ｍｌに入れ、次いで濃硫酸２０滴を添加し、混合物を還流下で７２時間加熱する。反応終了後（反応をＴＬＣによりモニターする）、反応溶液を氷浴中で冷却する。形成される結晶を吸引濾過する。次いで母液をわずかに濃縮し、この操作の間に形成される結晶を吸引濾過する。両分画を合わせ、メタノールからＲＴで再結晶化する。
【００６９】
実施例１Ａ
メチル（２Ｅ）−３−（２−ニトロフェニル）プロペノエート
【化９】
0004564954.tif 000011
２−ニトロ桂皮酸１００.０ｇ（５１７.７ｍｍｏｌ）から出発し、一般法［Ａ］により生成物７２.６ｇ（理論値の６８％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.２１分
【００７０】
一般法［Ｂ］：２−ニトロ桂皮酸誘導体のニトロ基の還元
アルゴン下、ニトロ化合物２５ｍｍｏｌおよび塩化スズ（ＩＩ）二水和物１２５ｍｍｏｌを最初に２５０ｍｌの二口フラスコ中の無水エタノール６０ｍｌに入れる。この懸濁液を還流下で３０分間撹拌し、透明な溶液を形成させる。次いでその溶液を室温に放冷し、その後氷水に注ぐ。固体重炭酸ナトリウムまたは飽和炭酸ナトリウム溶液のいずれかを使用してｐＨをｐＨ＝７−８に合わせる。次いで酢酸エチル６０ｍｌを添加し、珪藻土（厚さ約１ｃｍの層）を通して沈殿したスズ塩を濾過する。有機相を分離し、水相を酢酸エチルで１回再抽出する。有機相を合わせ、飽和塩化ナトリウム溶液で１回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を元の体積の約半分に濃縮する。次いで、ニトロ化合物の重量の１％に相当する活性炭を添加し、混合物を還流下で３０分間加熱する（溶液の色が変化する）。活性炭を濾過し、溶媒を除去する。残渣を高真空下で乾燥させ、さらに精製せずに、次の段階に直接使用する。
【００７１】
実施例２Ａ
メチル（２Ｅ）−３−（２−アミノフェニル）プロペノエート
【化１０】
0004564954.tif 000012
ニトロ化合物１５.００ｇ（７２.３４ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｂ］により生成物１２.０５ｇ（理論値の９４％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法５）：Ｒｔ＝３.２９分
【００７２】
一般法［Ｃ］：置換アニリン類の Appel 反応によるイミノホスホラン類の合成
５０ｍｌの一口フラスコ中で、２−アミノ桂皮酸エステル１０.０ｍｍｏｌ、トリエチルホスフィン２０.０ｍｍｏｌ、四塩化炭素１００.０ｍｍｏｌおよびトリエチルアミン１００.０ｍｍｏｌをアセトニトリル２０ｍｌに溶解する。混合物を室温で２時間撹拌する。反応終了後（反応をＴＬＣまたは分析的ＨＰＬＣによりモニターする）、溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによりシクロヘキサン／酢酸エチル＝７：３を使用して精製する。
【００７３】
実施例３Ａ
メチル（２Ｅ）−３−｛２−［（トリフェニルホスホラニリデン）アミノ］フェニル｝プロペノエート
【化１１】
0004564954.tif 000013
アミン化合物２.００ｇ（１１.２８ｍｍｏｌ）から出発し、一般法［Ｃ］により、トリフェニルホスフィン５.９２ｇ（２２.５７ｍｍｏｌ）を使用して、生成物４.４２ｇ（理論値の９０％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法６）：Ｒｔ＝２.００分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【００７４】
一般法［Ｄ］：Buchwald-Hartwig 反応によるフェニルピペラジン類の合成
反応に備えるために、反応フラスコを高真空下で加熱することにより徹底的に乾燥させ、アルゴンで換気する。無水トルエン中のブロモアリール化合物１.０当量およびピペラジン６.０当量を、最初にフラスコに入れる（ブロモ化合物の０.２−０.３Ｍ溶液）。次いでトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム０.０１当量およびＢＩＮＡＰ０.０３当量を添加する。反応混合物を還流下で１６時間撹拌する。次いで混合物を水で１回抽出し、有機相を１Ｎ塩酸で２回抽出し、１Ｎ水性水酸化ナトリウム溶液を使用して水相をｐＨ８に合わせ、ジクロロメタンで３回抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去し、生成物を高真空下で終夜乾燥させる。
【００７５】
実施例４Ａ
Ｎ−（４−フルオロ−３−メチルフェニル）ピペラジン
【化１２】
0004564954.tif 000014
４−フルオロ−３−メチル−１−ブロモベンゼン５.０ｇ（２６.５ｍｍｏｌ）から出発し、一般法［Ｄ］により生成物４.５２ｇ（理論値の８３％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝３.５４分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１９５（Ｍ＋Ｈ）＋
【００７６】
一般法［Ｅ］：ジヒドロキナゾリン誘導体を得るための、イミノホスホランとイソシアネートの反応、およびその後のアミンとの反応
イミノホスホラン１.０当量をジクロロメタン２０ｍｌに溶解する（０.１−０.２Ｍ溶液）。次いで置換イソシアネート１.０５当量を添加し、混合物をＲＴで反応が終了するまで撹拌する。反応をＴＬＣにより、または分析的ＨＰＬＣによりモニターする。
【００７７】
次いでアミン１.０当量およびへら先の量のシリカゲルを得られたジクロロメタン中のカルボジイミドの溶液に添加し、混合物を室温で反応が完了するまで撹拌する。反応終了後（反応をＴＬＣまたはＨＰＬＣでモニターする）、混合物を濃縮し、ＲＰ相の分取ＨＰＬＣにより精製する。
【００７８】
ある種の場合では、ＮＭＲは様々な割合の非環式反応生成物の存在を示す。これらの場合では、環式および非環式生成物の混合物をジオキサンに溶かし、へら先量のシリカゲルを添加し、混合物を還流下で３０分間ないし１６時間撹拌する。シリカゲルを濾過し、溶液をさらなる反応に使用する。
【００７９】
実施例５Ａ
メチル｛２−［４−（４−フルオロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝アセテート
【化１３】
0004564954.tif 000015
実施例３Ａ由来のイミノホスホラン５.０ｇ（１１.４３ｍｍｏｌ）、トリフルオロ−ｍ−トリルイソシアネート２.２５ｇ（１２.０ｍｍｏｌ）およびＮ−（４−フルオロフェニル）ピペラジン２.０６ｇ（１１.４３ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｅ］により生成物３.３１ｇ（理論値の３９％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.７２分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５２７（Ｍ＋Ｈ）＋
【００８０】
実施例６Ａ
メチル｛２−［４−（４−フルオロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝アセテート
【化１４】
0004564954.tif 000016
実施例５Ａ由来のメチルエステル３００ｍｇから出発して、エナンチオマーの分離（方法３に従う）によりエナンチオマーＡ１２５ｍｇを得る。
αＤ２０＝＋１９６.６（Ｃ＝０.５３,ＣＨＣｌ３）
【００８１】
実施例７Ａ
メチル｛２−［４−（４−フルオロ−３−メチルフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝アセテート
【化１５】
0004564954.tif 000017
実施例３Ａ由来のイミノホスホラン２００ｍｇ（０.４６ｍｍｏｌ）、トリフルオロ−ｍ−トリルイソシアネート９０ｍｇ（０.４８ｍｍｏｌ）および実施例４Ａ由来のフェニルピペラジン８９ｍｇ（０.４６ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｅ］およびクロマトグラフィー的精製（方法２）により、生成物１１２ｍｇ（理論値の４３％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.９６分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５４１（Ｍ＋Ｈ）＋
【００８２】
実施例８Ａ
メチル｛２−［４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−３−［２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロキナゾリン−４−イル｝アセテート
【化１６】
0004564954.tif 000018
実施例３Ａ由来のイミノホスホラン１５０ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニルイソシアネート７４ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）およびＮ−（４−フルオロフェニル）ピペラジン６１ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｅ］およびクロマトグラフィー的精製（方法２）により、生成物３４ｍｇ（理論値の１７％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.７３分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５４５（Ｍ＋Ｈ）＋
【００８３】
実施例９Ａ
メチル｛２−［４−（３−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル］−３−［２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロキナゾリン−４−イル｝アセテート
【化１７】
0004564954.tif 000019
実施例３Ａ由来のイミノホスホラン１５０ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニルイソシアネート７４ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−クロロフェニル）ピペラジン６７ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｅ］およびクロマトグラフィー的精製（方法２）により生成物９５ｍｇ（理論値の５０％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.９１分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５６１（Ｍ＋Ｈ）＋
【００８４】
実施例１０Ａ
メチル｛２−［４−（４−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−３−［４−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロキナゾリン−４−イル｝アセテート
【化１８】
0004564954.tif 000020
実施例３Ａ由来のイミノホスホラン１５０ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）、４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニルイソシアネート７４ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）およびＮ−（４−フルオロフェニル）ピペラジン６１ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｅ］およびクロマトグラフィー的精製（方法２）により、生成物１１１ｍｇ（理論値の５４％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.８７分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５４５（Ｍ＋Ｈ）＋
【００８５】
実施例１１Ａ
メチル｛２−［４−（３−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル］−３−［２−メチル−４−クロロフェニル］−３,４−ジヒドロキナゾリン−４−イル｝アセテート
【化１９】
0004564954.tif 000021
実施例３Ａ由来のイミノホスホラン１５０ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）、４−クロロ−２−メチルフェニルイソシアネート６０ｍｇ（０.３６ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−クロロフェニル）ピペラジン６７ｍｇ（０.３４ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｅ］およびクロマトグラフィー的精製（方法２）により、生成物９７ｍｇ（理論値の４６％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝５.０３分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５２３（Ｍ＋Ｈ）＋
【００８６】
実施例１２Ａ
２−イソシアナト−１−メトキシ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン
【化２０】
0004564954.tif 000022
２−メトキシ−５−トリフルオロメチルアニリン３ｇ（１５.６９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１００ｍｌに溶解し、１,８−ビス（ジメチルアミノ）ナフタレン６.７３ｇ（３１.３９ｍｍｏｌ）を添加する。０−５℃で、ジクロロメタン５０ｍｌに溶解したトリクロロメチルクロロホルメート２.２４ｇ（１１.３ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、混合物を０℃で３０分間、室温で６０分間撹拌する。０℃で、混合物を１Ｎ塩酸、氷水および重炭酸ナトリウム溶液で洗浄する。硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を蒸留により除去し、生成物を得る。次いで、イソシアネートをさらに精製せずに後の反応で使用する。
収量：３ｇ（理論値の８８％）
【００８７】
一般法［Ｇ］：カルボジイミドを得るためのイミノホスホランのイソシアネートとの反応
イミノホスホラン１.０当量を、ジクロロメタン２０ｍｌに溶解する（０.１−０.２Ｍ溶液）。次いでイソシアネート１.０５当量を添加し、混合物をＲＴで反応が終了するまで撹拌する。反応をＴＬＣまたは分析的ＨＰＬＣによりモニターする。次いで溶媒を減圧下で除去し、粗生成物をシリカゲルのクロマトグラフィーによりシクロヘキサン／ジクロロメタン混合物を使用して精製する。
【００８８】
実施例１３Ａ
（２Ｅ）−３−｛２−［（イミノメチレン）アミノ］フェニル｝アクリル酸メチルエステル１−メトキシ−２−メチル−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン
【化２１】
0004564954.tif 000023
実施例３Ａ由来のイミノホスホラン２.０ｇ（４.５７ｍｍｏｌ）および実施例１２Ａ由来のイソシアネート１.０４ｇ（４.８ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｇ］およびシクロヘキサン／ジクロロメタン（２：１ｖ／ｖ、次いで１：１ｖ／ｖ）を用いるクロマトグラフィーにより、生成物０.７９ｇ（理論値の３８％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝５.５２分
【００８９】
実施例１４Ａ
（２Ｅ）−３−｛２−［（イミノメチレン）アミノ］フェニル｝アクリル酸メチルエステル１−メトキシ−２−メチル−４−クロロベンゼン
【化２２】
0004564954.tif 000024
実施例３Ａ由来のイミノホスホラン２.０ｇ（４.５７ｍｍｏｌ）および２−メトキシ−５−クロロフェニルイソシアネート０.８８ｇ（４.８ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｇ］およびシクロヘキサン／ジクロロメタン（２：１ｖ／ｖ、次いで１：１ｖ／ｖ）を用いるクロマトグラフィーにより、生成物０.６７ｇ（理論値の３４％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝５.５３分
【００９０】
実施例１５Ａ
（２Ｅ）−３−｛２−［（イミノメチレン）アミノ］フェニル｝アクリル酸メチルエステル１−メトキシ−２−メチル−４−メチルベンゼン
【化２３】
0004564954.tif 000025
実施例３Ａ由来のイミノホスホラン２.０ｇ（４.５７ｍｍｏｌ）および２−メトキシ−５−メチルフェニルイソシアネート０.７８ｇ（４.８ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｇ］およびシクロヘキサン／ジクロロメタン（２：１ｖ／ｖ、次いで１：１ｖ／ｖ）を用いるクロマトグラフィーにより、生成物０.８５ｇ（理論値の５７％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝５.４５分
【００９１】
一般法［Ｈ］：キナゾリンを得るためのカルボジイミドのフェニルピペラジンとの反応
カルボジイミド１.０当量をジオキサンに溶解する（０.１−０.２５Ｍ溶液）。次いでフェニルピペラジン１.０当量を添加し、シリカゲルを混合物に添加し、混合物を溶媒の還流下で撹拌する。反応をＴＬＣまたは分析的ＨＰＬＣによりモニターする。次いで溶媒を減圧下で除去し、粗生成物を、シクロヘキサン／酢酸エチル混合物を使用するシリカゲルのクロマトグラフィーにより、または分取ＨＰＬＣ（方法２）により精製する。
【００９２】
実施例１６Ａ
メチル｛２−［４−（３−クロロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝アセテート
【化２４】
0004564954.tif 000026
実施例１３Ａ由来のカルボジイミド１６０ｍｇ（０.４３ｍｍｏｌ）および３−クロロフェニルピペラジン８３.６ｍｇ（０.４３ｍｍｏｌ）から出発し、一般法［Ｈ］により生成物１４８ｍｇ（理論値の６１％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.８８分
【００９３】
実施例１７Ａ
メチル｛２−［４−（３−メチルフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝アセテート
【化２５】
0004564954.tif 000027
実施例１３Ａ由来のカルボジイミド１５０ｍｇ（０.４０ｍｍｏｌ）および３−メチルフェニルピペラジン７０ｍｇ（０.４０ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｈ］により生成物１５９ｍｇ（理論値の７２％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.７９分
【００９４】
実施例１８Ａ
メチル｛２−［４−（３−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−クロロフェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝アセテート
【化２６】
0004564954.tif 000028
実施例１４Ａ由来のカルボジイミド１００ｍｇ（０.２９ｍｍｏｌ）および３−メトキシフェニルピペラジン５６ｍｇ（０.２９ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｈ］により生成物１１５ｍｇ（理論値の７４％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.７分
【００９５】
実施例１９Ａ
メチル｛２−［４−（４−フルオロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−クロロフェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝アセテート
【化２７】
0004564954.tif 000029
実施例１４Ａ由来のカルボジイミド１００ｍｇ（０.２９ｍｍｏｌ）および４−フルオロフェニルピペラジン５３ｍｇ（０.２９ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｈ］により生成物１０８ｍｇ（理論値の７１％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.６８分
【００９６】
実施例２０Ａ
メチル｛２−［４−（３−メチルフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−メチルフェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝アセテート
【化２８】
0004564954.tif 000030
実施例１５Ａ由来のカルボジイミド１６０ｍｇ（０.５０ｍｍｏｌ）および３−メチルフェニルピペラジン８７ｍｇ（０.５０ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｈ］により生成物２０５ｍｇ（理論値の８３％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.９３分
【００９７】
実施例２１Ａ
メチル｛２−［４−（３−クロロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−メチルフェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝アセテート
【化２９】
0004564954.tif 000031
実施例１５Ａ（ＷＴＢ３２９７）由来のカルボジイミド１６０ｍｇ（０.５０ｍｍｏｌ）および３−クロロフェニルピペラジン９８ｍｇ（０.５０ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｈ］により生成物２０７ｍｇ（理論値の８０％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝５.０４分
【００９８】
操作実施例
一般法［Ｆ］：キナゾリル酢酸エステル類の加水分解
キナゾリル酢酸エステル１.０当量をジオキサンに溶解し、１Ｎ水性水酸化ナトリウム溶液５.０当量を添加する。混合物を１００℃で１６時間撹拌し、反応終了後（反応を分析的ＨＰＬＣによりモニターする）、混合物を濃縮する。次いで残渣を水に溶かし、１Ｎ塩酸を使用してｐＨ５に合わせる。得られる沈殿を濾過し、少量の水およびジエチルエーテルで洗浄し、室温、高真空下で乾燥させる。生成物の純度が十分高くない場合、生成物をＲＰ相の分取ＨＰＬＣ（方法２）により精製する。
【００９９】
実施例１
｛２−［４−（４−フルオロ−３−メチルフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸
【化３０】
0004564954.tif 000032
実施例７Ａ由来のメチルエステル９８ｍｇ（０.１８１ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｆ］により生成物６６.４ｍｇ（理論値の６１％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.６９分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５２７（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 7.75 (s, 1H), 7.67, (d, 1H), 7.57-7.56 (m, 3H), 7.37 (dt, 1H), 7.22-7.15 (m, 2H), 6.87 (t, 1H), 6.73 (dd, 1H), 6.64-6.60 (m, 1H), 5.36-5.32 (m, 1H), 3.70-3.53 (m, 4H), 3.10-2.96 (m, 5H), 2.67 (dd, 1H), 2.18 (d, 3H).
【０１００】
実施例２
｛２−［４−（４−フルオロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸塩酸塩
【化３１】
0004564954.tif 000033
対応するメチルエステル３０ｍｇ（０.０５５ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｆ］により生成物２０ｍｇ（理論値の５６％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.５分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５３１（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 8.11 (d, 1H); 7.59-7.56 (m, 1H); 7.31-7.23 (m, 3H); 7.12 (d, 1H); 7.04 (t, 1H); 6.96 (t, 2H); 6.83-6.79 (m, 2H); 5.12 (t, 1H); 3.59-3.48 (m, 4H); 2.92-2.80 (m, 5H); 2.59 (dd, 1H).
【０１０１】
実施例３
｛２−［４−（３−クロロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸塩酸塩
【化３２】
0004564954.tif 000034
対応するメチルエステル９０ｍｇ（０.１６ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｆ］により、生成物２４ｍｇ（理論値の２６％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.６３分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５２７（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 7.87 (d, 1H); 7.50-7.48 (m, 1H); 7.26-7.21 (m, 2H); 7.17 (t, 1H); 7.14-7.12 (m, 1H); 7.05 (dd, 1H); 6.97 (dt, 1H); 6.84 (t, 1H); 6.80-6.77 (m, 2H); 5.01 (dd, 1H); 3.57-3.42 (m, 4H); 3.05-2.99, 2.97-2.85 (2x m, 4H); 2.79 (dd, 1H); 2.53 (dd, 1H).
【０１０２】
実施例４
｛２−［４−（４−フルオロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸塩酸塩
【化３３】
0004564954.tif 000035
対応するメチルエステル９５ｍｇ（０.１７ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｆ］により生成物２７ｍｇ（理論値の２６％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.５６分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５３１（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 7.64-7.62 (m, 1H); 7.58 (s, 1H); 7.36-7.31 (m, 1H); 7.24-7.16 (m, 2H); 7.11 (d, 1H); 7.05 (d, 1H); 7.01-6.95 (m, 3H); 6.91-6.87 (m, 2H); 5.12 (dd, 1H); 3.59-3.49 (m, 4H); 3.01-2.85 (m, 4H); 2.70 (dd, 1H); 2.53 (dd, 1H).
【０１０３】
実施例５
｛２−［４−（４−フルオロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸塩酸塩
【化３４】
0004564954.tif 000036
実施例５Ａ由来のメチルエステル３.３１ｇ（６.２９ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｆ］により生成物２.６８ｇ（理論値の８３％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.６２分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５１３（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 7.57 (s, 1H); 7.45 (t, 1H); 7.37-7.34 (t, 2H); 7.21 (t, 1H); 7.10 (d, 1H); 7.06 (d, 1H); 7.00-6.92 (m, 3H); 6.89-6.86 (m, 2H); 5.19 (m, 1H); 3.60-3.49 (m, 4H); 3.01-2.87 (m, 4H); 2.72 (dd, 1H); 2.54 (dd, 1H).
【０１０４】
実施例６
｛２−［４−（３−クロロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［４−クロロ−２−メチルフェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸
【化３５】
0004564954.tif 000037
対応するメチルエステル９０ｍｇ（０.１７２ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｆ］により生成物７１ｍｇ（理論値の７０％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.７５分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５０９（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 7.72-7.63 (m, 2H); 7.41-7.34 (m, 2H); 7.21-7.14 (m, 6H); 6.80-6.72 (m, 4H); 5.10-5.06 (m, 1H); 3.59 (s, 4H); 3.13-2.91 (m, 5H); 2.74-2.68 (m, 1H); 1.68 (s, 3H).
【０１０５】
実施例７
｛２−［４−（４−フルオロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸塩酸塩
【化３６】
0004564954.tif 000038
実施例６Ａ由来のメチルエステル１２０ｍｇ（０.２３ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｆ］により、生成物１００ｍｇ（理論値の８１％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.６２分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５１３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１０６】
表１の実施例８ないし２５は、一般法［Ｆ］に従って製造できる。
表１
【表２】
0004564954.tif 000039
【０１０７】
表１
【表３】
0004564954.tif 000040
【０１０８】
表１
【表４】
0004564954.tif 000041
【０１０９】
実施例２６
｛２−［４−（３−クロロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル）酢酸
【化３７】
0004564954.tif 000042
実施例１６Ａ由来のメチルエステル１３５ｍｇ（０.２４ｍｍｏｌ）から出発し、一般法［Ｆ］および分取ＨＰＬＣでの精製により、生成物１０６ｍｇ（理論値の８０％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.８２分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５５９（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 8.21 (s, 0.5H); 7.77 (sb, 0.5H); 7.52 (d, 1H); 7.22-7.07 (m, 5H); 6.98 (t, 1H); 6.79-6.76 (m, 2H); 6.71 (d, 1H); 4.96 (t, 1H); 3.76 (sb, 3H); 3.49-3.33 (m, 6H); 2.98-2.92 (m, 2H); 2.84-2.78 (m, 2H).
【０１１０】
実施例２７
｛２−［４−（３−メチルフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸
【化３８】
0004564954.tif 000043
実施例１７Ａ由来のメチルエステル１２０ｍｇ（０.２ｍｍｏｌ）から出発し、一般法［Ｆ］および分取ＨＰＬＣでの精製により生成物５５ｍｇ（理論値の４７％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法７）：Ｒｔ＝４.５７分
ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝５３７（Ｍ−Ｈ）−
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 8.23 (s, 0.4H); 7.77 (sb, 0.4H); 7.52 (d, 1H); 7.22-7.04 (m, 5H); 6.96 (t, 1H); 6.65-6.62 (m, 2H); 6.58 (d, 1H); 4.96 (t, 1H); 3.76 (sb, 3H); 3.49-3.33 (m, 4H); 2.92-2.68 (m, 5H); 2.56-2.51 (m, 1H).
【０１１１】
実施例２８
｛２−［４−（３−メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−クロロフェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル］酢酸
【化３９】
0004564954.tif 000044
実施例１８Ａ由来のメチルエステル１２０ｍｇ（０.２ｍｍｏｌ）、一般法［Ｆ］および分取ＨＰＬＣでの精製により、生成物５５ｍｇ（理論値の４７％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法１）：Ｒｔ＝４.４０分
ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝５１９（Ｍ−Ｈ）−
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 8.21 (s, 0.5H); 7.41 (sb, 0.5H); 7.22-7.16 (m, 3H); 7.11-7.06 (m, 2H); 6.98 (t, 1H); 6.95 (t, 1H); 6.71 (d, 1H); 6.41-6.37 (m, 2H); 6.34 (t, 1H); 4.93 (t, 1H); 3.71 (s, 3H); 3.66 (sb, 3H); 3.48-3.42 (m, 4H); 2.97-2.75 (m, 5H); 2.54-2.48 (m, 1H).
【０１１２】
実施例２９
｛２−［４−（４−フルオロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−クロロフェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸
【化４０】
0004564954.tif 000045
実施例１９Ａ由来のメチルエステル９４ｍｇ（０.１８ｍｍｏｌ）、一般法［Ｆ］および分取ＨＰＬＣでの精製により、生成物６ｍｇ（理論値の７％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法７）：Ｒｔ＝４.４３分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５０９（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 8.11 (s, 0.5H); 7.23-7.09 (m, 4H); 7.13-6.96 (m, 6.5H); 6.87-6.82 (m, 2H); 4.84 (t, 1H); 3.72 (s, 3H); 3.48-3.42 (m, 4H); 2.93-2.87 (m, 2H); 2.83-2.77 (m, 1H); 2.47 (dd, 1H). 溶媒のＨ２Ｏシグナルの下にさらなるプロトンが推定される（約 2.4-2.1 ppm）。
【０１１３】
実施例３０
｛２−［４−（３−メチルフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−メチルフェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸
【化４１】
0004564954.tif 000046
実施例２０Ａ由来のメチルエステル１８１ｍｇ（０.３６ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｆ］および分取ＨＰＬＣでの精製により生成物１５８ｍｇ（理論値の８６％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法７）：Ｒｔ＝４.６３分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４８５（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 8.31 (s, 0.5H); 7.21-6.98 (m, 6H); 6.87-6.83 (m, 1H); 6.65-6.62 (m, 2H); 6.57 (d, 1H); 4.96-4.92 (m, 1H); 3.62 (sb, 3H); 3.47-3.38 (m, 4H); 2.93-2.87 (m, 2H); 2.23 (s, 3H). 溶媒のＨ２Ｏシグナルの下にさらなるプロトンのシグナルが推定される（約2.8-2.5 ppm）。
【０１１４】
実施例３１
｛２−［４−（３−クロロフェニル）−１−ピペラジニル］−３−［２−メトキシ−５−メチルフェニル］−３,４−ジヒドロ−４−キナゾリニル｝酢酸
【化４２】
0004564954.tif 000047
実施例２１Ａ由来のメチルエステル１８２ｍｇ（０.３６ｍｍｏｌ）から出発して、一般法［Ｆ］および分取ＨＰＬＣでの精製により、生成物１６０ｍｇ（理論値の８８％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法７）：Ｒｔ＝４.７８分
ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５０５（Ｍ＋Ｈ）＋
1H-NMR (400 MHz, CD3CN): δ [ppm] = 8.27 (s, 0.5H); 7.21-7.10 (m, 4.5H); 7.05-6.97 (m, 2H); 6.88-6.84 (m, 1H); 6.79-6.76 (m, 2H); 6.71 (d, 1H); 4.95-4.90 (m, 1H); 3.64 (sb, 3H); 3.46-3.36 (m, 4H); 3.00-2.93 (m, 2H); 2.83-2.76 (m, 2H); 2.21 (s, 3H). 溶媒のＨ２Ｏシグナルの下にさらなるプロトンのシグナルが推定される（約2.8-2.5 ppm）。
【０１１５】
Ｂ．生理活性の評価
インビトロの化合物の効果は、以下のアッセイで示すことができる：
抗ＨＣＭＶ（抗ヒトサイトメガロウイルス）細胞変性試験
試験化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の５０ミリモル濃度（ｍＭ）溶液として用いる。ガンシクロビル（登録商標）、フォスカーネット（登録商標）およびシドフォビル（登録商標）を参照化合物として使用する。各々２μｌの５０、５、０.５および０.０５ｍＭＤＭＳＯ原液を、列２Ａ−Ｈに入った９８μｌ分量の細胞培養培地に二重測定（duplicate determinations）用に添加した後、５０μｌ分量の培地で、９６ウェルプレートの列１１まで１：２希釈を実施する。列１および１２のウェルは、各々培地５０μｌを含有する。１ｘ１０４個の細胞（ヒト包皮線維芽細胞［ＮＨＤＦ］）懸濁液１５０μｌを、各ウェルにピペットで加え（列１＝細胞対照）、列２−１２には、ＨＣＭＶ感染および非感染ＮＨＤＦ細胞の混合物（Ｍ.Ｏ.Ｉ.＝０.００１−０.００２）、即ち、１０００個の非感染細胞につき１−２個の感染細胞、を加える。列１２（物質なし）は、ウイルス対照に供する。最終試験濃度は２５０−０.０００５μＭである。プレートを３７℃／５％ＣＯ２で６日間、即ち、ウイルス対照の全細胞が感染するまで（１００％細胞変性効果［ＣＰＥ］）、インキュベートする。次いでホルマリンおよびギムザ染料の混合物を添加することによりウェルを固定および染色し（３０分間）、二重蒸留水で洗浄し、乾燥用オーブン中、５０℃で乾燥させる。次いで、オーバーヘッド顕微鏡（Technomara の Plaque Multiplier）を使用してプレートを視覚的に評価する。
【０１１６】
試験プレートから以下のデータを得ることができる：
ＣＣ５０（ＮＨＤＦ）＝非処置細胞対照と比較して、細胞に対する可視的細胞分裂停止効果が明白でない物質濃度（μＭ）；
ＥＣ５０（ＨＣＭＶ）＝非処置ウイルス対照と比較してＣＰＥ（細胞変性効果）を５０％まで阻害する物資濃度（μＭ）；
ＳＩ（選択性指数）＝ＣＣ５０（ＮＨＤＦ）／ＥＣ５０（ＨＣＭＶ）。
【０１１７】
本発明の化合物の効果に関する代表的なインビトロのデータを表Ａに示す：
表Ａ
【表５】
0004564954.tif 000048
【０１１８】
本発明の化合物のＨＣＭＶ感染の処置に対する適合性は、以下の動物モデルで示すことができる：
ＨＣＭＶ異種移植 Gelfoam（登録商標）モデル
動物：
３−４−週齢の雌免疫不全マウス（１６−１８ｇ）、Fox Chase SCID または Fox Chase SCID-NOD または SCID ベージュを、育種業者（Taconic M+B, Jackson USA）から購入する。動物を、滅菌条件（寝床および飼料を含む）下、隔離飼育器中で飼育する。
【０１１９】
ウイルスの増殖：
ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）の Davis または AD169 株を、ヒト胚性包皮線維芽細胞（ＮＨＤＦ細胞）でインビトロで増殖させる。ＮＨＤＦ細胞を感染効率（Ｍ.Ｏ.Ｉ.）０.０１−０.０３で感染させた後、ウイルス感染細胞を５−１０日後に回収し、最小必須培地、１０％ＤＭＳＯを含む１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）の存在下、−４０℃で保存する。ウイルス感染細胞の連続１０倍希釈の後、コンフルエントのＮＨＤＦ細胞の２４ウェルプレートで、ニュートラルレッドでの生体染色の後、力価を測定する。
【０１２０】
スポンジの調整、移植、処置および評価：
１ｘ１ｘ１ｃｍのサイズのコラーゲンスポンジ（Gelfoam（登録商標）; Peasel & Lorey より、注文番号 407534; K.T. Chong et al., Abstracts of 39th Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1999, p. 439）を、リン酸緩衝塩水（ＰＢＳ）で最初に湿らせ、閉じこめられた気泡を脱気により除去し、次いでＭＥＭ＋１０％ＦＣＳ中で保存する。１ｘ１０６個のウイルス感染ＮＨＤＦ細胞（HCMV Davis または HCMV AD169 に感染、Ｍ.Ｏ.Ｉ.＝０.０１）を、感染の３時間後にはがし、２０μｌのＭＥＭ、１０％ＦＣＳの滴下で湿ったスポンジに添加する。約１６時間後、感染スポンジを、２５μｌのＰＢＳ／０.１％ＢＳＡ／１ｍＭ ＤＴＴで、５ｎｇ／μｌ塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）と共にインキュベートする。移植のために、免疫不全マウスをアベルチン（Avertin）またはケタミン／キシラジン／アゼプロマジン（azepromazine）混合物で麻酔し、カミソリを使用して背中の毛を除去し、表皮を１−２ｃｍ開き、緊張を解き（unstressed）、そして湿ったスポンジを背側の皮膚の下に移植する。手術の創傷を組織用糊で閉じる。移植６時間後、マウスを初めて処置できる（手術当日に一回処置する）。次の日から８日間にわたり、マウスを経口で物質により、１日３回（７.００時および１４.００時および１９.００時）、１日２回（８.００時および１８.００時）または１日１回（１４.００時）処置する。日用量は、例えば３または１０または３０または６０または１００ｍｇ／ｋｇ体重であり、投与体積は１０ｍｌ／ｋｇ体重である。２％ＤＭＳＯを含む０.５％強度 Tylose 懸濁液または０.５％強度 Tylose 懸濁液の形態で物質を処方する。移植９日後かつ最後の物質投与の１６時間後に、動物を無痛に犠牲にし、スポンジを取り出す。ウイルス感染細胞をコラーゲナーゼ切断（３３０Ｕ／１.５ｍｌ）によりスポンジから放出させ、ＭＥＭ、１０％ウシ胎児血清、１０％ＤＭＳＯの存在下、−１４０℃で保存する。評価は、ウイルス感染細胞の連続１０倍希釈の後、２４ウェルプレートのコンフルエントＮＨＤＦ細胞に対する力価を、ニュートラルレッドによる生体染色の後に測定することにより行う。プラセボ処置対照と比較した、物質処置後の感染性ウイルス粒子の数を測定する。
【０１２１】
Ｃ．医薬組成物の例示的実施態様
本発明の化合物は、以下のやり方で医薬製剤に変換できる：
錠剤：
組成：
実施例１の化合物１００ｍｇ、ラクトース（一水和物）５０ｍｇ、コーンスターチ（天然）５０ｍｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ２５）（BASF, Ludwigshafen, Germany より）１０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇ。
錠剤重量２１２ｍｇ。直径８ｍｍ、曲率半径１２ｍｍ。
製造：
有効成分、ラクトースおよびスターチの混合物を、ＰＶＰの５％強度水溶液（ｍ／ｍ）で顆粒化する。次いで顆粒を乾燥させ、ステアリン酸マグネシウムと５分間混合する。この混合物を、常套の打錠機を使用して打錠する（錠剤の形状は上記参照）。打錠に使用する打錠力のガイドラインは、１５ｋＮである。
【０１２２】
経口投与できる懸濁液：
組成：
実施例１の化合物１０００ｍｇ、エタノール（９６％）１０００ｍｇ、Rhodigel (FMC, Pennsylvania, USA のキサンタンゴム）４００ｍｇおよび水９９ｇ。
経口用懸濁液１０ｍｌは、本発明の化合物１００ｍｇの単回用量に等しい。
製造：
Rhodigel をエタノールに懸濁し、有効成分を懸濁液に添加する。撹拌しながら水を添加する。混合物を約６時間、ロジゲルの膨張が完了するまで撹拌する。
【０１２３】
静脈内投与できる溶液：
組成：
実施例１の化合物１ｍｇ、ポリエチレングリコール４００ １５ｇ、および注射用の水２５０ｇ。
製造：
本発明による化合物をポリエチレングリコール４００と一緒に撹拌しながら水に溶解する。溶液を濾過滅菌（孔直径０.２２μｍ）し、無菌条件下で加熱滅菌した点滴ビンに分配する。後者を点滴ストッパーおよびトリムキャップ（trimmed cap）で閉じる。