(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステルである化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物を、製薬的に許容される担体または希釈剤とともに含む医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の属する分野）
本発明は、非常に高い生物学的利用能を有するｓＰＬＡ２インヒビター化合物に関する。
【０００２】
（発明の背景）
ヒト非膵臓性の分泌性ホスホリパーゼＡ２（以後、「ｓＰＬＡ２」と称する）の構造および物理的性質は、二本の論文、すなわち「慢性関節リウマチ滑液に存在するホスホリパーゼＡ２のクローニングおよび組換え発現（Seilhamer, Jeffrey J.; Pruzanski, Waldemar; Vadas Peter; Plant, Shelley; Miller, Judy A.; Kloss, Jean; および Johnson, Lorin K.による"Cloning and Recombinant Expression of Phospholipase A2 Present in Rheumatoid Arthritic Synovial Fluid"）」、The Journal of Biological Chemistry, Vol. 264, No. 10, ４月５日発行, pp. 5335-5338, 1989; およびKramer, Ruth M.; Hession, Catherine; Johansen, Berit; Hayes, Gretchen; McGray, Paula; Chow, E. Pingchang; Tizard, Richard; および Pepinsky, R. Blakeによる「ヒト非膵臓性ホスホリパーゼＡ２の構造および性質（"Structure and Properties of a Human Non-pancreatic Phospholipase A2"）」、The Journal of Biological Chemistry, Vol. 264, No. 10, ４月５日発行, pp. 5768-5775, 1989（これらは引用によりその開示内容が本明細書中に包含される）に詳細に記載されている。
【０００３】
ｓＰＬＡ２は、膜リン脂質を加水分解する、アラキドン酸カスケードの律速酵素であると考えられている。したがって、ｓＰＬＡ２が媒介する脂肪酸放出（例えばアラキドン酸）を阻害し、哺乳類、特にヒトにおいて高い生物学的利用能を有する化合物の開発は重要である。このような化合物は、ｓＰＬＡ２の過剰生産によって誘導および／または維持される症状；例えば敗血性ショック、成人呼吸障害症候群、膵炎、外傷、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、慢性関節リウマチなどの全般的処置において価値を有する。
【０００４】
一般に経口投与することができる治療物質はその本質的な利用しやすさのために、非常に好ましく、高い商業的可能性を有する。
プロドラッグは、公知の治療剤の効能を改良するために時々用いられる治療剤の形態である。たとえば、マイコフェノール酸が、そのモルホリノエチル型プロドラッグに転換されることによって改良されることが報告されている（James J. Lipskyによる“ミコフェノール酸モフェチル（mofetil）”、The Lancet,  Vol348、１９９７年１１月１６日、p1357-1359を参照）。
【０００５】
米国特許第５，６５４，３２６号は特定のインドール型ｓＰＬＡ２インヒビターおよび関連するエステルプロドラッグを記載している。具体的には、この特許は（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸のメチルエステルを例示している。
【０００６】
より高度に利用可能なｓＰＬＡ２インヒビター、特に経口投与に適当なものを開発することが望ましい。
【０００７】
（発明の要旨）
本発明は、経口投与によって高い生物学的利用能を有する新規化合物、（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステルに関する。
【０００８】
本発明は、本発明新規化合物を含む医薬製剤に関する。
また本発明は、ｓＰＬＡ２を本発明新規化合物に接触させることによりｓＰＬＡ2媒介性の脂肪酸放出を阻害する方法に関する。
【０００９】
（発明の詳細な記述）
本発明の１Ｈ−インドール−３−グリオキシルアミド化合物：
本発明の化合物、（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ)酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステルは、構造式（Ｉ）：
【化２】
0004564669.tif 000002
によって示されるものである。
【００１０】
モルホリノ−Ｎ−エチルエステル化合物（Ｉ）は既知のｓＰＬＡ２インヒビター、（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸のエステル形態であり、以下の構造式（ＩＩ）によって示されるものである。
【化３】
0004564669.tif 000003
式（ＩＩ）で示される化合物は、米国特許第５，６５４，３２６号（これは引用によりその開示内容が本明細書中に包含される）の実施例９および欧州特許出願第９５３０２１６６．４号、公開第０ ６７５ １１０号（１９９５年１０月４日公開）に記載されている。
【００１１】
プロドラッグは、化学的または代謝的に開裂可能な基を有し、生理的条件下で治療的に有効な既知の化合物になる、治療剤の誘導体である。
本発明の発見は、式（Ｉ）の化合物が、経口投与時に、類縁の他のエステルタイププロドラッグと比べて高い生物学的利用能を有することである。
【００１２】
（本発明化合物の合成）
（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステル（上記の式Ｉの化合物）の合成では、出発物質として、（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸またはその塩（上記の式ＩＩの化合物）を用いる。この出発物質は米国特許第５，６５４，３２６号（これは引用によりその開示内容が本明細書中に包含される）の実施例９の反応工程式または方法によって製造することができる。同様の方法は欧州特許出願第９５３０２１６６．４号、公開第０ ６７５ １１０号（１９９５年１０月４日公開）に示されている。
式ＩＩの１Ｈ−インドール−３−グリオキシルアミド出発物質を製造する他の方法は、“４−置換１Ｈ−インドール−３−グリオキシルアミドの製造方法”と題する米国特許出願０９／１０５３８１（１９９８年６月２６日出願）これは引用によりその開示内容が本明細書中に包含される）に記載されている。
また、化学文献に記録され、周知である他の方法を用いて、出発物質を製造してもよい。
【００１３】
実施例１
以下の式ＩＩで示される化合物、[[３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸の製造：
【化４】
0004564669.tif 000004
パートＡ．  ２−エチル−４−メトキシ−１Ｈ−インドールの製造
シクロヘキサン中の１．３Ｍ sec−ブチルリチウム１４０ｍＬ（０．１８mol）の溶液を、ＴＨＦ２５０ｍＬ中のＮ−tert−ブトキシカルボニル−３−メトキシ−２−メチルアニリン（２１．３ｇ、０．０９mol）に、ドライアイス−エタノール浴で温度を−４０℃以下に保ちながらゆっくり加えた。この浴を除去し、温度を０℃にまで上げ、次いで浴を戻した。温度を−６０℃にまで冷却した後、等容量のＴＨＦ中のＮ−メトキシ−Ｎ−メチルプロパンアミド１８．５ｇ（０．１８mol）を滴加した。反応混合物を５分間攪拌し、冷却浴を除去し、さらに１８時間攪拌した。次いでこれをエーテル３００ｍＬおよび０．５Ｎ ＨＣ４００ｍＬの混合液に注いだ。有機相を分離し、水、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して粗１−[２−（tert−ブトキシカルボニルアミノ）−６−メトキシフェニル]−２−ブタノン２５．５ｇを得た。この物質をメチレンクロライド２５０ｍＬおよびトリフルオロ酢酸５０ｍＬに溶解し、総計１７時間攪拌した。この混合物を減圧下で濃縮し、残留油状物に酢酸エチルと水を加えた。酢酸エチルを分離し、食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４）し、濃縮した。残渣を２０％ＥｔＯＡｃ／へキサンで溶離するシリカゲルクロマトグラフィーに３回付し、２−エチル−４−メトキシ−１Ｈ−インドール１３．９ｇを得た。
元素分析（Ｃ１１Ｈ１３ＮＯとして)：
計算値：Ｃ，７５．４０；Ｈ，７．４８；Ｎ，７．９９
実測値：Ｃ，７４．４１；Ｈ，７．６４；Ｎ，７．９７。
【００１４】
パートＢ．  ２−エチル−４−メトキシ−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドールの製造
２−エチル−４−メトキシ−１Ｈ−インドール（４．２ｇ、２４mmol）をＤＭＦ３０ｍＬ中の６０％水素化ナトリウム／鉱油９６０ｍｇ（２４mmol）に加えた。１．５時間後、ベンジルブロミド２．９ｍＬ（２４mmol）を加えた。４時間後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーに付し、２０％ＥｔＯＡｃ／へキサンで溶出させ、２−エチル−４−メトキシ−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール３．１ｇ（収率４９％）を得た。
【００１５】
パートＣ．  ２−エチル−４−ヒドロキシ−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドールの製造
２−エチル−４−メトキシ−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール３．１ｇ（１１．７mmol）を、室温にて５時間攪拌しながら１Ｍ ＢＢｒ３／ＣＨ２Ｃｌ２ ４８．６ｍＬで処理することにより、Ｏ−脱メチル化し、次いで、減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）した。減圧下で濃縮した後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーに付し、２０％ＥｔＯＡｃ／へキサンで溶出させ、２−エチル−４−ヒドロキシ−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール１．５８ｇ（収率５４％）を得た。ｍｐ８６〜９０℃。
元素分析（Ｃ１７Ｈ１７ＮＯとして)：
計算値：Ｃ，８１．２４；Ｈ，６．８２；Ｎ，５．５７
実測値：Ｃ，８１．０８；Ｈ，６．９２；Ｎ，５．４１。
【００１６】
パートＤ．  [[２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル]オキシ]酢酸メチルエステルの製造
２−エチル−４−ヒドロキシ−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール（１．５６ｇ、６．２mmol）を、ＤＭＦ２０ｍＬ中の６０％ ＮａＨ／鉱油２４８ｍｇ（６．２mmol）に加え、０．６７時間攪拌した。次いで、メチルブロモアセテート０．６ｍＬ（６．２mmol）を加え、攪拌を１７時間維持した。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル溶液を食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーに付し、２０％ＥｔＯＡｃ／へキサンで溶出させ、[[２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル]オキシ]酢酸メチルエステル１．３７ｇ（収率６９％）を得た。８９〜９２℃。
元素分析（Ｃ２０Ｈ２１ＮＯ３として)：
計算値：Ｃ，７４．２８；Ｈ，６．５５；Ｎ，４．３３
実測値：Ｃ，７４．０３；Ｈ，６．４９；Ｎ，４．６０。
【００１７】
パートＥ．  [[３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル]オキシ]酢酸メチルエステルの製造
メチレンクロライド１０ｍＬ中の[[２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル]オキシ]酢酸メチルエステル１．３６ｇ（４．２mmol）にオキサリルクロライド（０．４ｍＬ、４．２mmol）を加え、混合物を１．５時間攪拌した。混合物を減圧下で濃縮し、残渣をメチレンクロライド１０ｍＬにとった。無水アンモニアを０．２５時間通気し、混合物を１．５時間攪拌し、減圧下で蒸発させた。残渣を酢酸エチル２０ｍＬとともに攪拌し、混合物をろ過した。ろ液を濃縮し、[[３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル]オキシ]酢酸メチルエステルおよびアンモニウムクロライドの混合物１．３７ｇを得た。この混合物は、１７２〜１８７℃で融解した。
【００１８】
パートＦ．  [[３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル]オキシ]酢酸の製造
[[３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル)−１Ｈ−インドール−４−イル]オキシ]酢酸メチルエステル７８８ｍｇ（２mmol）、１Ｎ ＮａＯＨ １０ｍＬおよびメタノール３０ｍＬの混合物を加熱し、還流温度で０．５時間維持し、室温で０．５時間攪拌し、減圧下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃおよび水にとり、水層を分離し、１Ｎ ＨＣｌでｐＨ２〜３に酸性化した。沈澱をろ過し、酢酸エチルで洗浄して、[[３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル]オキシ]酢酸５５９ｍｇ（収率７４％）を得た。融点２３０〜２３４℃。
元素分析（Ｃ２１Ｈ２０Ｎ２Ｏ５として)：
計算値：Ｃ，６５．９６；Ｈ，５．８０；Ｎ，７．３３
実測値：Ｃ，６６．９５；Ｈ，５．５５；Ｎ，６．９９。
【００１９】
上記方法によって製造した式（ＩＩ）のインドール出発物質で出発し、酸または塩形態の出発物質をエステル化することによって、本発明の（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステル化合物を製造する。化学業界において慣用の、任意のエステル形成方法を用いてもよい。本発明の化合物を製造するのに用いられる適当な手法の１つは以下のものである。
【００２０】
実施例２
（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステルの製造
塩化メチレン１５０ｍＬを含むフラスコ中に、４−（２−クロロエチル）モルホリン塩酸塩（Aldrich Chemical Co., Milwaukee, Wisconsin USA; Item No.Ｃ4220-3から入手可能）０．１８８ｍＬ（１４．９mmol）、ジシクロヘキシルカルボジイミド３．０７ｇ（１４．９mmol）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール２．０ｇ（１５０mmol）および（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸５．６５ｇ（１４．９mmol）を攪拌しながら加えた。スラリーを室温にて２０時間攪拌し、次いで、ろ過した。得られる溶液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で１回洗浄した。有機総を分離し、乾燥、ろ過、減圧下で濃縮して、式Ｉの所望生成物７．０ｇ（９５％）
【００２１】
（本発明の方法で用いるのに適当な製剤）
本発明の方法において用いる式（Ｉ）のｓＰＬＡ2阻害剤を投与して、処置される哺乳類の体内でｓＰＬＡ2と接触させる。
本発明の化合物の好ましい投与経路は、化合物そのままとしてか、あるいは医薬製剤中の活性化合物としての経口投与である。
ｓＰＬＡ2インヒビターを単独で投与することもできるが、一般には、選択された投与経路および標準的医薬実施に基づいて選択される製薬的担体または希釈剤とともに投与する。
「製薬的に許容される」とは、担体、希釈剤または賦形剤が、製剤中、式（ＩＩ）のｓＰＬＡ2インヒビター（活性化合物）と化学反応を起こさず、処置される患者に対して無毒でなければならないことを意味する。
【００２２】
医薬製剤には、当該技術分野に既知の任意の適当な担体を用いることができる。このような製剤中、担体は固体、液体、または固体と液体の混合物であってよい。固形担体は、香料、滑沢剤、可溶化剤、懸濁化剤、結合剤、錠剤崩壊剤およびカプセル化材料として作用することもある、１つまたはそれ以上の物質であり得る。
【００２３】
経口投与用の錠剤には、適当な賦形剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムを、崩壊剤、例えばメイズ、スターチまたはアルギン酸、および／または結合剤、例えばゼラチンまたはアカシア、および滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクとともに含ませることができる。錠剤は、ｓＰＬＡ2インヒビターを必要な結合性を有する担体と適当な割合で混合し、所望の形およびサイズに成形される。
滅菌液状形態の製剤には、懸濁剤、乳剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。活性化合物を製薬的に許容される担体、例えば滅菌水、食塩水、デキストロース溶液、滅菌有機溶媒またはこれらの混合物に溶解または懸濁させることができる。
【００２４】
活性化合物を、カプセル剤、錠剤および粉末剤のような固形投与剤形、またはエリキシル剤、シロップ剤および懸濁剤のような液状投与剤形で投与することができる。また、滅菌液状投与剤形で非経口投与することもできる。また、鼻腔スプレーまたは肺吸入剤の剤形で吸入投与することもできる。また、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、ローション剤、溶液剤、スプレー剤、エアロゾル剤、リポソーム剤またはパッチ剤として局所投与することもできる。通常、活性化合物の投与に用いられる投与剤形には、当分野の標準的参考文献である、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company に記載されている適当な担体、希釈剤、保存剤または他の賦形剤が含まれる。
【００２５】
活性化合物および粉末化担体、例えばラクトース、スクロース、マンニトール、スターチ、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などを含有するゼラチンカプセル剤を製造してもよい。同様の希釈剤を用いて錠剤および粉末剤を成形することもできる。錠剤およびカプセル剤の両者を、薬物を何時間にもわたって放出し続ける、徐放性製剤として製造することができる。成形された錠剤を糖またはフィルムでコーティングし、いかなる不快な味をも遮断し、環境から錠剤を保護するか、あるいは胃腸管で選択的に崩壊させるため、腸溶性コーティングすることができる。
【００２６】
水、適当な油状物、食塩水、デキストロース水溶液（グルコース）、および関連する糖溶液およびグリコール、例えばプロピレングリコールまたはポリエチレングリコールは非経口溶液剤用に適当な担体である。非経口投与用の溶液剤には、活性化合物、適当な安定化剤、および必要ならば、緩衝物質を含ませる。抗酸化剤、例えば重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムまたはアスコルビン酸は、単独で適当な安定化剤であり、またそれらを組み合わせたものも適当な安定化剤である。また、クエン酸、およびその塩およびＥＤＴＡナトリウムを用いてもよい。さらに非経口溶液には、保存剤、例えば塩化ベンザルコニウム、メチルパラベンまたはプロピルパラベンおよびクロロブタノールを含ませることができる。
本発明の範囲内の製剤には、ｓＰＬＡ2インヒビターを、標的疾患の処置用の治療的に有効な補助物質、例えば他のｓＰＬＡ2インヒビター、ロイコトリエンアンタゴニストまたはシクロオキシゲナーゼインヒビターの治療有効量と混合したものが含まれる。
【００２７】
（本発明の方法で用いられる活性化合物の割合および重量）
医薬製剤の０．１〜９９．９重量％の濃度の式（Ｉ）の化合物を用いることができる。
医薬製剤は単位投与剤形であるのが好ましい。単位投与剤形は、１カプセルまたは１錠剤自体であるか、あるいはこれらの適当数であり得る。組成物の単位用量中の活性化合物の量は、関与する具体的処置にしたがって、約０．１〜約１０００ｍｇまたはそれ以上に変化させ、調節することができる。
内部投与に適当な組成物（投与剤形）には、単位当たり約１ｍｇから約５００ｍｇの活性化合物を含ませる。
【００２８】
有用な医薬組成物の例およびその成分の割合を以下に例示する：
カプセル剤：標準的２ピースゼラチン硬カプセルそれぞれに、粉末化活性化合物５０ｍｇ、ラクトース１７５ｍｇ、タルク２４ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム６ｍｇを充填して、カプセル剤を製造することができる。
ゼラチン軟カプセル剤：大豆油中の活性化合物の混合物を調製し、ポジティブ置換ポンプによってゼラチン中に注入して、活性化合物各５０ｍｇを含むゼラチン軟カプセルを製造する。このカプセルを石油エーテル中で洗浄し、乾燥する。
錠剤：常法により錠剤を調製し、投与単位が活性化合物５０ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム６ｍｇ、微結晶セルロース７０ｍｇ、コーンスターチ１１ｍｇおよびラクトース２２５ｍｇとなるようにすることができる。適当にコーティングして、味をよくし、あるいは吸収を遅延させてもよい。経口投与用の錠剤には、適当な賦形剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムを、崩壊剤、例えばメイズ、スターチまたはアルギン酸、および／または結合剤、例えばゼラチンまたはアカシア、および滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、またはタルクとともに含ませてもよい。錠剤には、約１〜約９９重量％の活性成分、すなわち本発明の新規化合物を含ませるのが好ましい。適当な固形担体は炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖ラクトース、ペクチン、デキストリン、スターチ、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ワックスおよびココア脂である。
【００２９】
懸濁剤：懸濁剤水溶液を経口投与用に調製し、各５ｍＬが微粉砕された活性化合物２５ｍｇ、カルボキシメチルセルロースナトリウム２００ｍｇ、安息香酸ナトリウム５ｍｇ、ソルビトール溶液、Ｕ.Ｓ.Ｐ．１．０ｇおよびバニリン０．０２５ｍｇを含むようにする。
注入剤：１０容量％のプロピレングリコールおよび水中、１．５重量％の活性化合物を攪拌して、注入投与に適当な非経口組成物を調製する。この溶液を一般に用いられる技術によって滅菌する。
鼻腔スプレー剤：各１ｍＬが活性化合物１０ｍｇ、メチルパラベン１．８ｍｇ、プロピルパラベン０．２ｍｇおよびメチルセルロース１０ｍｇを含む水溶液を調製する。この溶液を１ｍＬバイアルに分配する。製剤の０．１〜９９．９重量％濃度の活性化合物を用いることができる。
エアロゾル製剤は、気道表面において約１０-10〜１０-2モル／Ｌのインヒビター濃度を達成するのに十分なｓＰＬＡ2インヒビターを有する、約０．５〜約１０ミクロンのサイズの粒子に分散させることができる。
【００３０】
もちろん、既知の因子、例えば具体的な物質の薬物動力学的性質、およびその投与方法および経路；服用者の年齢、健康状態および体重；症状の性質および程度、同時に受けている処置の種類、処置の頻度、および所望の効果に基づいて、投与量は変化する。通常、活性化合物の一日の用量は約０．１〜２００ｍｇ／体重ｋｇとすることができる。普通には０．５〜５０、好ましくは１〜２５ｍｇ／ｋｇ／日を、一日１〜６回、分割投与するか、あるいは持続放出剤形で投与するのが、所望の結果を得るのに効果的である。
一般には、ｓＰＬＡ2インヒビターを、ヒトに投与して治療有効量を服用させる。治療有効量は、増加量の活性化合物を投与し、患者に対する効果を観察することによって個々の患者に対して都合よく決定することができる。
【００３１】
一般に、本化合物は、ｓＰＬＡ2インヒビターのヒト血液レベル濃度が１０〜３０００ナノグラム／ｍＬ、好ましくは１００〜８００ナノグラム／ｍＬとなるような方法および用量で投与しなければならない。
処置療法は、一回の服用から、何年もの服用ともなり得る。経口投与は患者の便宜および寛容性の面で好ましい。経口投与では、それぞれ約０．０１〜２５ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇである用量を一日当たり１〜４回投与する。
【００３２】
患者の苦痛を迅速に緩和することが必要とされる場合、しばしば非経口投与（特に静脈内投与）が好ましい。非経口投与では、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量を、一日を通して継続して、あるいは断続的に投与することができる。非経口投与用には、本化合物を、生理食塩水ビヒクル（例えば、０．９％生理食塩水、０．４５％生理食塩水など）、デキストロースビヒクル（例えば、５％デキストロース水溶液）または食塩水およびデキストロースビヒクルを組み合わせたもの（５％デキストロース中の０．９％生理食塩水）中で投与してもよい。
【００３３】
（本発明の方法における活性化合物の使用および割合）
本発明のもう１つの側面は、敗血性ショック、成人呼吸障害症候群、膵炎、外傷、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、慢性関節リウマチ、発作、急性気管支炎、慢性気管支炎、急性細気管支炎、慢性細気管支炎、骨関節炎（isteoarthritis）、痛風、脊椎関節障害（spondylarthropathris）、強直性脊椎炎、ライター症候群、乾癬関節症、腸障害性脊椎炎（enterapathric spondylitis）、若年性関節症、若年性強直性脊椎炎、反応性関節症、感染性または感染後関節炎、淋菌性関節炎（gonoccocal arthritis）、結核性関節炎、ウイルス性関節炎、真菌性関節炎、梅毒性関節炎、ライム病、「血管炎症候群」に伴う関節炎、結節性多発動脈炎、過敏症血管炎、Luegenec's 肉芽腫症、リウマチ性多発筋痛（polymyalgin rheumatica）、関節細胞動脈炎（joint cell arteritis）、カルシウム結晶沈着関節障害、偽性痛風、非関節性リウマチ、滑液のう炎、腱鞘炎（tenosynomitis）、上顆炎（テニス肘）、手根トンネル症候群、反復使用傷害（repetitive use injury）、神経炎性関節障害（neuropathic joint disease）（charco and joint）、関節血症、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、肥大性骨関節症、多中心網内系組織球症、surcoilosis、ヘモクロマトーシス、鎌状赤血球貧血および他の異常血色素症（hemoglobinopathries）、高リポタンパク血症、低ガンマグロブリン血症、上皮小体亢進症、先端巨大症、家族性デング熱、Behat's 病、全身性ループス erythrematosis、血友病、再発多発軟骨炎および嚢胞性繊維症の処置方法である。本方法は、このような疾患を有するヒトに、治療有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む。
【００３４】
本発明の化合物、（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステルは、哺乳類の体内で、（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸に変化するプロドラッグであると考えられている。この酸は、以下のデータ（米国特許第５，６５４，３２６号のアッセイ１および２より）によって示される既知のｓＰＬＡ2インヒビターである。
【００３５】
アッセイ１
発色アッセイ手法を用いて、組換えヒト分泌性ホスホリパーゼＡ2のインヒビターとしての（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸を評価した。本アッセイ方法の全般的説明は、（引用により、その開示内容が本明細書中に包含される）文献、Laure J. Reynolds, Lori L. Hughesおよび Edward A Dennis, "Analysis of Human Synovial Fluid Phospholipase A2 on Short Chain Phosphatidylcholine-Mixed Micelles: Development of a Spectrophotometric Assay Suitable for a Microtiterplate Reader", Analytical Biochemistry, 204, pp. 190-197, 1992 中に見出せる。
【表１】
表Ｉ
0004564669.tif 000005
結論：式（ＩＩ）で示される化合物はｓＰＬＡ2の阻害において高い活性を有する。
【００３６】
アッセイ２
モルモットの肺組織を用いる方法で、組換えヒト分泌性ホスホリパーゼＡ2のインヒビターとしての（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸（式ＩＩの化合物）を評価した。
最大応答の薬物誘導性の抑制を見積もるため、薬物の不存在および存在下で、ｓＰＬＡ2応答（１０μｇ／ｍＬ）を測定し、各対の組織について抑制％を計算した。
モルモット肺組織に対するヒト分泌性ホスホリパーゼＡ2阻害試験の結果
【表２】
表ＩＩ
0004564669.tif 000006
【００３７】
アッセイＩＩＩ
サル薬物動力学実験を用いて、本発明の化合物、（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステルの生物学的利用能を測定した。
データ分析：
血漿をＨＰＬＣでアッセイし、（遊離の酸として）種々のｓＰＬＡ2インヒビターの濃度を測定した。平均血漿濃度−時間プロファイルからＣｍａｘ（最大血漿濃度）およびＡＵＣ値を測定した。実験の結果を下記表３に示す。
【表３】
表３
0004564669.tif 000007
化合物番号：
１＝（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステル
２＝（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸メチルエステル
３＝（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−エチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸エチルエステル
４＝（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−メチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸モルホリノ−Ｎ−エチルエステル
５＝（（３−（２−アミノ−１，２−ジオキソエチル）−２−メチル−１−（フェニルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）酢酸メチルエステル
【００３８】
表３は、本発明化合物である化合物１、モルホリノ−Ｎ−エチルステルが、予想に反して、式ＩＩの親ｓＰＬＡ2インヒビターより生物学的に利用可能であり、また式ＩＩの親ｓＰＬＡ2インヒビターの２−メチル同族体より生物学的に利用可能であることを示す。
【００３９】
具体的態様によって本発明を上に説明したが、これらの具体例は、請求の範囲に記載の本発明の範囲を限定することを意図するものではない。