(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｉ）ヒト成長ホルモン１．４ｍｇ未満、マンニトール及びグリシンを含み、ヒト成長ホルモンとグリシン／マンニトールの重量比が１．５未満である凍結乾燥組成物を含み、乾燥成分重量／ケーキ容量の比が１２ｍｇ／ｍｌを超える第１チャンバ、及びｉｉ）注射可能容量が０．５ｍｌ未満の水性再構成溶液を含む第２チャンバからなることを特徴とする１回量注射器。
【請求項２】
第１チャンバにおける乾燥成分重量／ケーキ容量の比が１５ｍｇ／ｍｌを超えることを特徴とする請求の範囲第１項に記載の注射器。
【請求項３】
第１チャンバが緩衝物質、例えばリン酸ナトリウムを含むことを特徴とする請求の範囲第１項又は第２項に記載の注射器。
【請求項４】
第２チャンバが等張性成分を含むことを特徴とする請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の注射器。
【請求項５】
第１チャンバがマンニトール及び緩衝物質、例えばリン酸ナトリウムを含むことを特徴とする請求の範囲第１項〜第４項のいずれかに記載の注射器。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（序）
本発明は、１．４ｍｇ未満の量のタンパク質、アミノ酸及び安定剤を含み、タンパク質とアミノ酸／安定剤の重量比が１．５未満である凍結乾燥組成物を含む第１チャンバ及び注射可能容量が０．５ｍｌ未満の水性再構成溶液を含む第２チャンバからなり、第１チャンバにおける乾燥成分重量／ケーキ容量の比が１２ｍｇ／ｍｌを超える１回量注射器に関する。
【０００２】
（従来の技術）
液体中での保存に対してしばしば感受性であるタンパク質は、通常凍結乾燥され、注射のすぐ前に患者により再構成されている。
【０００３】
患者に対する治療量のタンパク質を含む注射器を製造する場合の重要な基準は、次の通りである：
−再構成前の粉末の許容され得る安定性。製剤は市販されている凍結乾燥製品と少なくとも同程度の良好な品質を有していなければならない。乾燥製品は室温で少なくともある時間保存され得なければならない、
−患者に対して例えば等張性溶液及び少ない注射容量を用いて与えたとき、痛みがない、
−許容され得る再構成時間。
【０００４】
分解を受けやすい物質を含む注射溶液を製造するためのデバイスは、米国特許第４，９６８，２９９号明細書に記載されており、ＫａｂｉＰｅｎ（登録商標）の名前で市販されている。ＫａｂｉＰｅｎ（登録商標）によって、患者は取り扱うのがかなり簡単なデバイスを得た。前記デバイスは、コンパートメントの１つに凍結乾燥粉末としてｈＧＨ（ヒト成長ホルモン）を含有し、他方のコンパートメントに再構成溶液を含有する２チャンバを有するアンプルＧｅｎｏｍｉｘ（登録商標）を含む。患者は使用前に製品を再構成する。次いで、再構成した製品は、２〜８℃で保存したとき３週間安定である。このデバイスは多用量注射器である。
【０００５】
注射容量が０．５ｍｌ以上の成長ホルモンに対する１回量デバイスのＫａｂｉＱｕｉｃｋ（登録商標）も市販されている。
【０００６】
国際特許出願公開第ＷＯ８９／０９６１４号パンフレット（ＧＥＮＥＮＴＥＣＨ）には、グリシン、マンニトール及び緩衝液を含むｈＧＨの安定化組成物が開示されており、好ましい実施態様ではポリソルベート８０のようなノニオン界面活性剤が添加されている。リン酸ナトリウムが緩衝物質として示唆されている。前記組成物は、凍結乾燥組成物の形態で及び再構成時に高い安定性を有する。ゲル濾過カラムを用いて緩衝液交換することにより成分の最終比が得られる。
【０００７】
患者に対して注射される容量やタンパク質の量についての記載はない。
【０００８】
国際特許出願公開第ＷＯ９１／１８６２１号パンフレット（ＧＥＮＥＮＴＥＣＨ）には、ＧＨ及びＩＧＦの安定性に対する担体としてマンニトールが一般的に記載されている。
【０００９】
国際特許出願公開第ＷＯ９４／０３１９８号パンフレット（ＧＥＮＥＮＴＥＣＨ）には、ＧＨ＋緩衝液＋界面活性剤＋マンニトールを含む水性組成物が開示されている。
【００１０】
注射可能容量が０．５ｍｌ未満であり、１回量あたりのタンパク質の量が少なく、製造上問題なく凍結乾燥により製造され得る１回量注射器を提供することが望まれている。
【００１１】
タンパク質量が少なく、注射容量の少ない１回量注射器を製造したとき、注射器の第１チャンバ内の溶液を凍結乾燥するときに問題が生ずることが認められた。
【００１２】
凍結乾燥したケーキのマトリックスが非凝集性であり、このため驚くことにブローアウトが生じた。ケーキはチャンバにおいて破裂し、よってタンパク質が損失した。このことは、製造上の理由で、また高価なタンパク質を含む薬剤を製造するときの経済的理由で許容できない。従って、この問題の解決策を見つけなければならない。
【００１３】
上記した問題は、ＫａｂｉＱｕｉｃｋまたは他の凍結乾燥製品を製造するときには生じない。これらの製品は高量のタンパク質及びアミノ酸を有することが判明した。１回量あたりのタンパク質が少ないときに生ずる問題が今回本発明により解決された。
【００１４】
（本発明）
本発明者らは、低量のタンパク質及び少ない注射可能容量を有する所望の１回量注射器を製造するための１つの可能な方法は、添付の請求の範囲に従って成長ホルモンの量、乾燥物含量、及びタンパク質及び追加成分の含量の比を組み合わせることであることを今回知見した。
【００１５】
従って、本発明は、１．４ｍｇ未満の量のタンパク質、アミノ酸及び安定剤を含み、タンパク質とアミノ酸／安定剤の重量比が１．５未満である凍結乾燥組成物を含む第１チャンバ及び注射可能容量が０．５ｍｌ未満の水性再構成溶液を含む第２チャンバからなり、第１チャンバにおける乾燥成分重量／ケーキ容量の比が１２ｍｇ／ｍｌを超える１回量注射器に関する。
【００１６】
新規な組成物を含む本発明の新規デバイスは、問題なく製造することができ、良好な安定性で保存することができる。
【００１７】
タンパク質とアミノ酸／安定剤の重量比は、好ましくは１．３以下である。水性再構成溶液は、好ましくは０．３ｍｌ未満の注射可能容量を有する。溶液は保存剤及び／または緩衝液を含み得る。
【００１８】
安定剤は、増量剤マトリックスビルダー及び／またはケーキ形成剤、例えばマンニトールを指すが、アミノ酸ではない。アミノ酸は好ましくはグリシンであるが、アラニンのような他のアミノ酸を使用することもできる。
【００１９】
等張性成分は、注射溶液の適当なオスモル濃度を達成するための物質を指す。
【００２０】
タンパク質は、好ましくはヒト及び動物であり得る組換えまたは天然の成長ホルモンであり、例えばヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、ウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）及びブタ成長ホルモン（ｐＧＨ）である。
【００２１】
ｈＧＨは、１９１個のアミノ酸の一本鎖からなるタンパク質である。分子は２つのジスルフィド橋により架橋され、モノマー形態は２２ｋＤａの分子量を有する。
【００２２】
２種の治療上有用な組換えｈＧＨ製剤が市販されている。真正な製剤は例えばＰｈａｒｍａｃｉａ  ＆  Ｕｐｊｏｈｎ  ＡＢのＧｅｎｏｔｒｏｐｉｎ（登録商標）であり、Ｎ−末端に追加のメチオニン残基を有するアナログは例えばＳｏｍａｔｏｎｏｒｍ（登録商標）である。ｈＧＨは下垂体機能不全コビト症またはターナー症候群の患者において線形成長を刺激するために使用されており、他の適応症も示唆されている。
【００２３】
（実施例）
本発明を下記実施例で説明する。これらの実施例には、各種組成物及び容量が凍結乾燥されている組成物Ａ〜Ｋが含まれている（下表参照）。
【００２４】
以下の実施例では、組換え産生したｈＧＨを使用した（ＧＨ）。
【００２５】
充填用ｈＧＨ溶液は、バルク溶液精製方法の最終ゲル濾過工程から得る。最終賦形剤濃度を調整するために緩衝液を添加し、その後溶液を適当なタンパク質濃度に緩衝液で希釈する。
ケーキ容量は、凍結乾燥前の分散容量を指す。使用した溶媒は水である。
例Ｆ、Ｉ及びＫが本発明例である。
【００２６】
【表１】
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【００２７】
組成物Ａ及びＢでは、ブローアウトが生じた。
ブローアウトの問題を避けるために、マンニトールを添加して重量／ケーキ容量比を高めた（下表参照）。
【００２８】
【表２】
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【００２９】
しかしながら、ブローアウトの問題は残った。組成物Ｃ、Ｄ及びＥでは、ブローアウトが生じた。
重量／ケーキ容量比を高めるために、ケーキ容量を低下させた。
【００３０】
【表３】
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【００３１】
ケーキ容量を低下させると、ケーキ外観が良好になるという結果を得た。成長ホルモンの量が少ない場合、充填容量を低下させることにより重量／ケーキ容量比を上昇させなければならないとの結論であった。マンニトールの量を増加させることにより重量／ケーキ容量比を上昇させても成功しない。
これらの結果は、２つ以上の実験で確認された（下表参照）。
【００３２】
【表４】
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【００３３】
結論：
重量／ケーキ容量を上昇させるためにはケーキ容量を低下させなければならないという観察が確認された。ケーキ容量を少なくすると、ケーキの外観が良好になる。従って、成長ホルモン量が少ない場合、充填容量を低下させることにより重量／ケーキ容量比を上昇させなければならない。マンニトール量を増加させて重量／ケーキ容量比を上昇させることは成功しない。
このことは、タンパク質とアミノ酸／安定剤の重量比が１．５未満である組成物に対して有効である。