(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロスタグランジン類、精製オリーブ油、リン脂質および水を含有してなる静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤。
【請求項２】
更に脂肪酸を含有する請求項第１項記載の静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤。
【請求項３】
脂肪球の最大粒子径が１μｍ以下である請求項第１項または第２項記載の静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤。
【請求項４】
プロスタグランジン類、精製オリーブ油、リン脂質および水を含有する混合物を超高圧ジェット流反転乳化法で乳化することを特徴とする静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤の製造法。
【請求項５】
超高圧ジェット流反転乳化法において、混合物をノズルから噴出させる際の圧力が５００〜３１００ｋｇ／ｃｍ2である請求項第４項記載の静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤の製造法。
【請求項６】
超高圧ジェット流反転乳化法において調製される脂肪乳剤は、乳化工程を通じ７０℃以下に保たれる請求項第４項または第５項記載の静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤の製造法。
【請求項７】
超高圧ジェット流反転乳化法におけるパス回数が２回以下である請求項第４項ないし第６項の何れかの項記載の静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は静脈注射可能なプロスタグランジン脂肪乳剤に関し、更に詳細には、脂肪乳剤を構成する脂肪粒子と有効成分であるプロスタグランジン類の安定性が高く、かつ静脈内投与しても安全なプロスタグランジン脂肪乳剤およびその製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
プロスタグランジン類（以下、単に「ＰＧ」と略すことがある）には種々の薬効を示すものが多く、その医薬用途への応用が研究されている。
【０００３】
しかしながら、例えばプロスタグランジン類のうち、プロスタグランジンＥ1等は、肺を通過する際に肺に存在する１５−ヒドロキシデヒドロゲナーゼにより不活性化されるとされており、静脈内投与は好ましくないとされていた。そこで近年、静脈内投与を可能とする技術として、大豆油等の油脂を用いてプロスタグランジン類を脂肪乳剤とする試みがなされている。
【０００４】
ところで、一般に医薬用油脂と水を含む脂肪乳剤を調製するためには、乳化剤として天然から得られるリン脂質が使用されるが、このリン脂質中には、ホスファチジルエタノールアミン（以下、「ＰＥ」という）が２０重量％程度含まれており、これが発熱、嘔吐及び悪寒のような悪影響等を及ぼす物質（以下、「発熱性物質等」という）として作用するという問題があった。そのため、医薬用のリン脂質としては、ＰＥを問題とならない程度まで除去したものを使用することが常識とされていた。
【０００５】
このような技術背景において、最近、ＰＥを除去した天然リン脂質を乳化剤とするプロスタグランジン類の脂肪乳剤が出願され、既に特許されている（特許第２１２７１６３号）。
【０００６】
この特許は、リン脂質中から発熱性物質等としてのＰＥでなく、ＰＥがプロスタグランジン類の不安定化成分として働くことに着目し、このＰＥを除去する点に特許性が認められたものである。しかし、実際には、ＰＥはリン脂質中で乳化安定成分としても働くため、これを単純に除去したリン脂質を用いた場合は、脂肪乳剤の経時的な乳化安定性が極端に悪くなって、保存中の粒子径の増大することが指摘されており（特開平４−３３８３３５号）、技術的に上記特許明細書に開示の通り問題が解決されたかは定かではない。
【０００７】
更に、上記特許では、油脂として大豆油を用いた例のみで試験されているに過ぎず、他の天然油脂においても、前記特許で想定するようなリン脂質中のＰＥによる安定性の低下がおこるかどうか、また、仮に安定性の低下が生じたとしても、リン脂質中からＰＥを除いたものを用いた場合にその安定性の低下を抑制できるかについては全く不明であった。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
前記のように、特許第２１２７１６３号により一応安定性を高めたプロスタグランジン類の脂肪乳剤が得られた如くであるが、この特許による脂肪乳剤には、保存中の粒子径の増大が指摘され、最悪の場合には末梢血管閉鎖の可能性もあることが判った。従って、より危険性が少なく、安定性の高いプロスタグランジン類を含む脂肪乳剤の開発が必要とされる。本発明は、このような課題を満足させるものである。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前記した状況を踏まえた上でプロスタグランジン類を含む脂肪乳剤で使用する油脂基剤や、脂肪乳剤の製造法について種々検討していたところ、従来、静脈内投与用の油脂基剤としては一般的でない精製オリーブ油（以下、「オリブ油」という）をプロスタグランジン類の脂肪乳剤の油脂成分として用いた場合は、リン脂質中のＰＥ含量により、プロスタグランジン類の安定性が殆ど影響されないこと、また、特定の方法により製造されたプロスタグランジン類の脂肪乳剤は粒子径の分布範囲の狭い脂肪球で構成され、医薬品として特に好ましいものであることを見出し、本発明を完成した。
【００１０】
すなわち本発明は、プロスタグランジン類、オリブ油、リン脂質および水を含有してなる静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤を提供するものである。
【００１１】
また本発明は、プロスタグランジン類、オリブ油、リン脂質および水を含有する混合物を超高圧ジェット流反転乳化法で乳化することにより、すなわち、上記混合物に高い圧力をかけて、ノズルから噴出させ、このノズルから噴出させる液と、反転して帰ってくる液とを衝突させるという方法により、静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤を製造する方法を提供するものである。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明の静脈内投与可能なプロスタグランジン脂肪乳剤（以下、「ＰＧ乳剤」という）は、プロスタグランジン類、オリブ油、リン脂質および水を含有してなるものである。
【００１３】
このＰＧ乳剤を構成する成分のうち、プロスタグランジン類としては、プロスタグランジンＥ1（ＰＧＥ1）、プロスタグランジンＡ2（ＰＧＡ2）、プロスタグランジンＤ2（ＰＧＤ2）、プロスタグランジンＥ2（ＰＧＥ2）、プロスタグランジンＦ1α（ＰＧＦ1α）、プロスタグランジンＩ2（ＰＧＩ2）およびこれらの誘導体等が挙げられる。
【００１４】
また、ＰＧ乳剤の油脂基剤として用いられるオリブ油は、市販のオリーブ油をアルコール洗浄、分子蒸留等の処理に付し、不純物として含まれる不けん化物等を除去、精製したものである。
【００１５】
更に、本発明で用いられるリン脂質としては、天然由来のリン脂質をそのままあるいは更に精製したものを用いることができる。具体的には、卵黄レシチン、大豆レシチン等を用いることができる。
【００１６】
なお、天然由来のリン脂質は、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、スフィンゴミエリン（ＳＭ）等を含有するものであるが、このうちＰＥは脂肪乳剤においては乳化の安定化に寄与することが知られており、レシチン中にある程度存在していた方がよい。
【００１７】
本発明のＰＧ乳剤には、上記各成分と水の他、脂肪酸を配合することができる。この脂肪酸は、乳化補助剤としての働きをするもので、本発明のＰＧ乳剤に優れた乳化安定性を与えるものである。この脂肪酸としては、天然、合成の何れでも良く、飽和酸、不飽和酸の何れでも良いが、不飽和中鎖脂肪酸が好ましく、オレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸等が挙げられる。オレイン酸を脂肪酸として使用する場合は、その純度が９９％以上であることが好ましい。
【００１８】
本発明のＰＧ乳剤は、１×１０-5から１×１０-2重量％、好ましくは、１×１０-4から１×１０-3重量％のＰＧ、５から５０重量％、好ましくは１０から２０重量％のオリブ油、０.０５から１０重量％、好ましくは０.５から５重量％のリン脂質、０から１重量％、好ましくは０.２から０.５重量％の脂肪酸と残部の水を用い、常法により乳化することによって製造することができる。また、更に必要に応じて通常医薬に用いられる安定化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤等を本発明の効果を損なわない範囲で添加することができる。
【００１９】
この乳化は、本発明のＰＧ乳剤が直接静脈内投与するものであるため、脂肪粒の最大粒子径が１μｍ以上とならないように行うことが好ましく、最大粒子径が０.７μｍを超えないよう行うことがより好ましい。最大粒径が、例えば１μｍ以上である場合は、末梢血管閉鎖等の問題が生じるおそれがある。
【００２０】
上記の好ましい粒径のＰＧ乳剤を得るための特に好ましい調製方法としては、マントンゴーリン法や、超高圧ジェット流反転乳化法（ＢＥＥ）が挙げられる。
このうち、マントンゴーリン法は、粗乳化液に高圧（３００〜１０００ｋｇ／ｃｍ2）をかけ、非常に狭い隙間から壁に衝突させ、常圧の中に噴出させることにより、分散媒等を切断させ微細なエマルジョンを形成させる方法であるが、脂肪球の最大粒子径が１μｍ以上とならないようにするためには、１０〜２０パスする必要があり、この過程で乳化液の温度が上昇することがある方法である。
【００２１】
一方、超高圧ジェット流反転乳化法（ＢＥＥ）は、粗乳化液に超高圧（５００〜３１００ｋｇ／ｃｍ2）をかけ、ノズルからの噴出する液を反転して帰ってくる液と衝突させることにより、エマルジョンを形成する方法であり、脂肪球の最大粒子径を１μｍ以上とならないようにするためには１〜２パスしか要さず、この過程での乳化液の温度上昇がほとんどない方法である。
【００２２】
また、脂肪球は、一般には粒子径分布を持っており、同じ平均粒子径で示されたとしても、粒径のばらつきが少なく、粒子径分布が狭いものがより好ましい。この点、マントンゴーリン法では段階的に粒子径を小さくしていくため、大きな径の粒子が混在するが、ＢＥＥでは、このようなことがなく、粒子径の分布範囲の狭い脂肪球を得ることができる。
【００２３】
そして、特にＰＧは熱に対する安定性が低いため、製造中での温度上昇を７０℃以下に抑えることが望ましいとされることや、乳化時のパス回数、粒子径範囲を総合検討すると、最も好ましいＰＧ乳剤は、前記成分を用い、ＢＥＥを用いて乳化したものとなる。
【００２４】
なお、特許第２１２７１６３号では、大豆油およびＰＥ除去未処理のレシチンを使用した場合、ＰＧの残存率は５０％に減少したことが報告されており、この問題を解消するためにＰＥをほぼ完全に排除している。しかし、レシチン中のＰＥは脂肪乳剤においては乳化の安定化に寄与することが知られており、安定性の面からはレシチン中に存在していた方がよい。
【００２５】
本発明においては、油脂基剤としてオリブ油を用いることにより、ダイズ油に見られるようなＰＥの存在によるＰＧの大幅な安定性の低下は認められない。従って、本発明の脂肪乳剤には、発熱性物質等としての問題が起こらない程度（１０％程度以下）の量のＰＥを含んでいることがより好ましい。
【００２６】
かくして得られた本発明のＰＧ乳剤は、配合したＰＧの有する薬効を十分にかつ安全に発揮するものであり、しかも保存した場合にあっても薬効は低下せず、その粒径もあまり大きくなるおそれのないものである。すなわち、オリブ油、リン脂質、水よりなり、有効成分としてＰＧＥ1を含むＰＧ乳剤を慢性動脈閉塞症の患者に投与した場合、四肢潰瘍が改善し、安全性の点でも問題はなかった。従って、本発明のＰＧ乳剤は、静脈投与して十分な効果が得られるものである。
【００２７】
【実施例】
次に実施例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に何ら制約されるものではない。
【００２８】
実 施 例  １
使用油脂基剤の相違によるＰＧＥ1安定性の比較：
オリブ油または精製ダイズ油（以下、「ダイズ油」という）を用い、下記方法によりプロスタグランジンＥ1 （ＰＧＥ1 ）を含有する脂肪乳剤を調製した。このＰＧＥ1含有脂肪乳剤について、下記方法によりその安定性を検討した。
【００２９】
なお、この試験においては、ＰＥを実質的に除去した卵黄リン脂質を用いる、脂肪乳剤中のプロスタグランジン安定化方法（特許第２１２７１６３号）が知られていることから、卵黄リン脂質中にＰＥを添加し、ＰＥ濃度変化による脂肪乳剤の安定性の変化も調べた。
【００３０】
（  脂肪乳剤の調製法  ）
油相としてオリブ油またはダイズ油を５０ｇ、ＰＥ濃度が０、５、１０重量％になるようにＰＥを添加した卵黄レシチン９ｇ、ＰＧＥ１  ３.５ｍｇ、水４２５ｇ及びグリセリン１１ｇを用い、これらをホモミクサーを用いて粗乳化した。更に、超高圧ジェット流反転乳化法を用いて２,７００ｋｇ／ｃｍ2の加圧下で平均粒子径が０.１５〜０.３μｍの脂肪乳剤を調整した。これを１０ｍｌ蓋付き試験管に充填し、被験試料とした。
【００３１】
（ 試 験 方 法 ）
１０ｍｌ 蓋付き試験管に充填した脂肪乳剤を、室温下、２００回／分で２時間３０分振とうし、振とう前後でのＰＧＥ1の残存率及び粒子径を測定し、安定性を検討した。ＰＧＥ1の定量は、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフ）法により行い、粒子径は、マイクロトラックＵＰＡ９２３０型粒度分布計（日機装（株））を用いて測定した。この結果を表１および表２に示す。
【００３２】
（  結  果  ）
ＰＧＥ1の残存率：
【表１】
0004421699.tif 000002
【００３３】
脂肪球粒径：
【表２】
0004421699.tif 000003
【００３４】
実 施 例  ２
本発明製剤の安定性確認：
（ 脂肪乳剤の調製法 ）
油相としてオリブ油を５０ｇ、ＰＥ濃度が０、１、２、２０重量％になるようにＰＥを添加した卵黄レシチン９ｇ、ＰＧＥ1 ３.５ｍｇ、水４２５ｇ及びグリセリン１１ｇを用い、これらをホモミクサーを用いて粗乳化した。更に、超高圧ジェット流反転乳化法を用いて２,７００ｋｇ／ｃｍ2の加圧下で平均粒子径が０.１５〜０.３μｍの脂肪乳剤を調整した。これを２ｍｌのアンプルに充填し、被験試料とした。
【００３５】
（ 試 験 方 法 ）
アンプルに充填した脂肪乳剤を、１２５℃で２.２分間加熱し、加熱前後でのＰＧＥ1の残存率を測定し、安定性を確認した。脂肪乳剤の加熱には、短時間の加熱が可能な機器としてマイクロ波分解装置（（株）ユニフレックス）を用いた。また、ＰＧＥ1の定量はＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフ）法により行った。この結果を表３に示す。
【００３６】
（  結  果  ）
ＰＧＥ1の残存率：
【表３】
0004421699.tif 000004
【００３７】
上記結果によれば、油脂基剤としてオリブ油を用いた場合、ＰＥ濃度０〜１０重量％において、振とう後のＰＧＥ1残存率は１００以上を示し、ＰＥ濃度によるＰＧＥ1含量低下は認められなかった。また、脂肪球の粒子径については、振とう後の平均粒子径、最大粒子径共に変化が認められなかった。また、脂肪球の粒子径については、ＰＥ濃度による違いは認められなかった。
【００３８】
これに対し、ダイズ油を使用した場合は、ＰＥ濃度０〜１０重量％において、振とう後のＰＧＥ1残存率が８６〜８９％を示し、ＰＥ濃度によるＰＧＥ1含量の低下に差は認められなかったが、オリブ油脂肪乳剤と比較するといずれのＰＥ濃度においてもＰＧＥ1含量が低下する傾向が認められた。脂肪球の粒径については、振とう後、いずれのＰＥ濃度においてもオリブ油と比較すると最大粒子径の増大傾向が認められた。また、平均粒子径については０重量％、１０重量％では振とう前後の変化率が１８、２９％を示しており、オリブ油のそれと比較すると明らかな差が認められた。
【００３９】
本発明のオリブ油を油脂基剤として使用したＰＧＥ1オリブ油脂肪乳剤中のＰＧＥ1の加熱後の安定性を確認した結果、ＰＥ濃度０〜２０重量％において、加熱後のＰＧＥ1残存率は８９〜９５％を示し、ＰＥ濃度によるＰＧＥ1含量低下に差は認められなかった。
【００４０】
以上より、油脂基剤としてオリブ油を用いた場合は、特許第２１２７１６３号の実験例と異なり、未精製卵黄リン脂質に該当するＰＥ濃度２０重量％の卵黄リン脂質を用いても、加熱による残存率の低下は認められなかった。
【００４１】
一方、振とう後では、ダイズ油において、粒子径の大きなバラツキが観察され、また、オリブ油と比較するとＰＧＥ1濃度の低下傾向も認められた。しかし、オリブ油では、振とう前後において脂肪球の粒子径及びＰＧＥ1濃度ともに変化が認められず、オリブ油を油相として使用した場合には、ＰＧＥ1の脂肪乳剤が乳化安定性及び主薬自体の安定性にも優れているものと判断された。
【００４２】
この結果は、脂肪乳剤におけるオリブ油とダイズ油の物性の相違を示すものと考えられた。
以    上