(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式を有する化合物、またはその互変異体、または医薬的に許容できるその塩：
【化１】
0004451983.tif 000027
［式中、ＡはＣＨまたはＮで；ＢはＯＨ、ＮＨ2、Ｈ又はＮＨＲから選ばれ、Ｒはアルキルもしくはアラルキル基である；ＤはＯＨ、ＮＨ2、Ｈ又はＮＨＲから選ばれ、Ｒはアルキルもしくはアラルキル基である；ＸはＯＨである；ＹはＨである；Ｚは水素、ハロゲン、ヒドロキシ、ホスフェート、アルキルチオ、またはアルコキシから選ばれる］。
【請求項２】
Ｂおよび／またはＤの１つがＮＨＲで、ＲがＣ1−Ｃ4アルキルである請求項１の化合物。
【請求項３】
ＤがＨであるか、またはＢがＯＨであるかのどちらかであるか、またはその両方である請求項１の化合物。
【請求項４】
ＢがＯＨで、かつＤがＨ、ＯＨまたはＮＨ2である請求項１の化合物。
【請求項５】
ＺがＯＨ、Ｈまたはメチルチオである請求項４の化合物。
【請求項６】
ＺがＯＨである請求項５の化合物。
【請求項７】
以下から選ばれる請求項１の化合物、またはその互変異体、またはその医薬的に許容できる塩：
（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、
（１Ｒ）−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール、
（１Ｓ）−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、
（１Ｒ）−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール、
（１Ｓ）−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール、
（１Ｒ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール、
（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、
（１Ｒ）−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール、
（１Ｓ）−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、
（１Ｒ）−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール、
（１Ｓ）−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール、
（１Ｓ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、
（１Ｒ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール、
（１Ｓ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール、および
（１Ｓ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール。
【請求項８】
前記化合物が（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、またはその互変異体またはその医薬的に許容できる塩である請求項１の化合物。
【請求項９】
前記化合物が（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、またはその互変異体またはその医薬的に許容できる塩である請求項１の化合物。
【請求項１０】
下記の式を有する請求項１に記載の化合物、または医薬的に許容できるその塩：
【化２】
0004451983.tif 000028
【請求項１１】
下記の式を有する請求項１に記載の化合物、または医薬的に許容できるその塩：
【化３】
0004451983.tif 000029
【請求項１２】
プリンヌクレオシドホスホリラーゼの阻害に有効な下記の式（Ｉ）の化合物、またはその互変異体、または医薬的に許容できるその塩のある量および医薬的に許容できる担体または希釈剤を含む、Ｔ細胞機能を抑制する医薬組成物。
【化４】
0004451983.tif 000030
［式中、ＡはＣＨであり；ＢはＯＨであり；ＤはＯＨ、ＮＨ2、Ｈ又はＮＨＲから選ばれ、Ｒはアルキルもしくはアラルキル基である；ＸはＯＨである；ＹはＨである；ＺはＯＨまたはホスフェートである］。
【請求項１３】
化合物が、下記の式を有する化合物、または医薬的に許容できるその塩である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【化５】
0004451983.tif 000031
【請求項１４】
化合物が、下記の式を有する化合物、または医薬的に許容できるその塩である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【化６】
0004451983.tif 000032
【請求項１５】
少なくとも１つの寄生虫プリンヌクレオシドヒドラーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼおよび／またはプリンホスホリボシルトランスフェラーゼの阻害に有効な下記の式（Ｉ）の化合物、またはその互変異体、または医薬的に許容できるその塩のある量および医薬的に許容できる担体または希釈剤を含む、原虫感染の治療および／または予防のための医薬組成物：
【化７】
0004451983.tif 000033
［式中、ＡはＣＨであり；ＢはＯＨであり；ＤはＯＨ、ＮＨ2、Ｈ又はＮＨＲから選ばれ、Ｒはアルキルもしくはアラルキル基である；ＸはＯＨである；ＹはＨである；ＺはＯＨまたはホスフェートである］。
【請求項１６】
化合物が、下記の式を有する化合物、または医薬的に許容できるその塩である、請求項１５に記載の医薬組成物。
【化８】
0004451983.tif 000034
【請求項１７】
化合物が、下記の式を有する化合物、または医薬的に許容できるその塩である、請求項１５に記載の医薬組成物。
【化９】
0004451983.tif 000035
【請求項１８】
下記式を有する化合物、またはその互変異体、またはその医薬的に許容できる塩：
【化１０】
0004451983.tif 000036
［式中、ＡはＣＨであり；ＸはＯＨであり；ＹはＨであり；ＺはＯＨもしくはホスフェートであり；ＥはＣＯ2ＨもしくはＣＯＮＨ2であり；ＧはＮＨ2である］。
【請求項１９】
ＥがＣＯＮＨ2である、請求項１８の化合物。
【請求項２０】
ＺがＯＨである請求項１８の化合物。
【請求項２１】
前記化合物が（１Ｓ）−１−Ｃ−（３−アミノ−２カルボクスアミド−４−ピロリル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、またはその互変異体またはその医薬的に許容できる塩である、請求項１８の化合物。
【請求項２２】
プリンヌクレオシドホスホリラーゼの阻害に有効な下記の式の化合物、またはその互変異体、またはその医薬的に許容できる塩のある量および医薬的に許容できる担体または希釈剤を含む、Ｔ細胞機能を抑制する医薬組成物：
【化１１】
0004451983.tif 000037
［式中、ＡはＣＨであり；ＸはＯＨであり；ＹはＨであり；ＺはＯＨもしくはホスフェートであり；ＥはＣＯＮＨ2であり；ＧはＮＨ2である］。
【請求項２３】
前記化合物が（１Ｓ）−１−Ｃ−（３−アミノ−２カルボクスアミド−４−ピロリル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、またはその互変異体またはその医薬的に許容できる塩である請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
少なくとも１つの寄生虫プリンヌクレオシドヒドラーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼおよび／またはプリンホスホリボシルトランスフェラーゼの阻害に有効な下記の式の化合物、またはその互変異体、またはその医薬的に許容できる塩のある量および医薬的に許容できる担体または希釈剤を含む、原虫感染の治療および／または予防のための医薬組成物：
【化１２】
0004451983.tif 000038
［式中、ＡはＣＨであり；ＸはＯＨであり；ＹはＨであり；ＺはＯＨもしくはホスフェートであり；ＥはＣＯＮＨ2であり；ＧはＮＨ2である］。
【請求項２５】
前記化合物が（１Ｓ）−１−Ｃ−（３−アミノ−２カルボクスアミド−４−ピロリル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール、またはその互変異体またはその医薬的に許容できる塩である請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記原虫寄生体がプラスモジウム（Plasmodium）である、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記原虫寄生体がプラスモジウム（Plasmodium）である、請求項１５に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［関連出願との相互参照］
本出願は、米国特許第０８／９４９３８８号（１９７７年１０月１４日出願、この出願は参照により本明細書に含まれる）の一部継続出願である。
［技術分野］
本発明は、ある種のヌクレオシド類似体（アナログ）、これら化合物の医薬としての使用、これら化合物を含む医薬組成物、およびこれら化合物の製造方法に関する。
【０００２】
［発明の背景］
プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（ＰＮＰ）は、リボヌクレオシドおよびデオキシリボヌクレオシド（例えばグアニンおよびヒポキサンチンのそれらヌクレオシド）の加リン酸分解切断を触媒し、対応する糖−１−リン酸およびグアニン、ヒポキサンチンまたは他のプリン塩基を生じる。
【０００３】
プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠損患者は、ｄＧＴＰの蓄積および刺激Ｔリンパ球へのその毒性のために特有のＴ細胞免疫不全を示す。このため、ＰＮＰに対する阻害剤は免疫抑制性で、Ｔ細胞性悪性疾患に対して活性を有する。９−（３−ピリジルメチル）−９−デアザグアニンを用い、乾癬に対しては局所型、Ｔ細胞リンパ腫および免疫抑制に対しては経口型の臨床試験が現在進行している（Biocryst Pharmaceuticals, Inc)。この化合物はこの酵素に対してＩＣ50が３５ｎＭである。マウスの耳の接触過敏性腫脹アッセイによる動物実験では、経口投与量５０ｍｇ／ｋｇがその活性を得るために必要である。これは、人間の場合の投与量では７０ｋｇに対して約３．５グラムを意味するであろう。この阻害剤の場合、血液および哺乳類組織中でのその比較的高い酵素活性のためにＰＮＰの抑制は困難である。
【０００４】
ヌクレオシドおよびデオキシヌクレオシドヒドロラーゼはヌクレオシドおよびデオキシヌクレオシドの加水分解を触媒する。これらの酵素は哺乳類には見出されないが、いくつかの原虫性寄生虫のヌクレオシド再生に必要である。プリンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＰＰＲＴ）は、プリン塩基の５−ホスホ−α−Ｄ−リボース−１−ピロホスフェートへの移転を触媒し、プリンヌクレオチド５’−ホスフェートを生成する。原虫および他の寄生虫はＰＰＲＴを有し、これは基本的プリン再生経路に必要である。悪性組織もまたＰＰＲＴを有する。いくつかの原虫寄生虫はプリンヌクレオシドホスリラーゼを有し、これはまたプリン再生経路で機能する。ヌクレオシドヒドロラーゼの阻害剤、プリンヌクレオシドホスホリラーゼおよびＰＰＲＴは寄生虫の代謝を妨害することができ、したがって原虫性寄生虫に対して有用であると期待される。ＰＮＰおよびＰＰＲＴの阻害剤は悪性組織のプリン代謝を妨害することができ、したがって悪性組織に対して有用である。
ＰＮＰ、ＰＰＲＴおよび／またはヌクレオシドヒドロラーゼの非常に有効な阻害剤である医薬を提供することが本発明の目的である。
【０００５】
［発明の詳細な説明］
本発明の態様の１つは以下の式を有する化合物、またはその互変異体；またはその医薬的に許容できる塩を提供することである：
【０００６】
【化１３】
0004451983.tif 000002
【０００７】
式中、ＡはＣＨまたはＮで；ＢはＯＨ、ＮＨ2、Ｈ又はＮＨＲから選ばれ、Ｒはアルキルもしくはアラルキル基である；ＤはＯＨ、ＮＨ2、Ｈ又はＮＨＲから選ばれ、Ｒはアルキルもしくはアラルキル基である；ＸはＯＨである；ＹはＨである；Ｚは水素、ハロゲン、ヒドロキシ、ホスフェート、アルキルチオ、またはアルコキシから選ばれる。
【０００８】
好ましくは、Ｂおよび／またはＤのどちらかがＮＨＲである場合には、ＲはＣ1−Ｃ4アルキルである。
好ましくは、１つまたは２つ以上のハロゲンが存在する場合には、それらは塩素またはフッ素から選ばれる。
【０００９】
好ましくは、ＤはＨであるか、または、ＤがＨ以外の他のものである場合にはＢはＯＨである。
より好ましくは、ＢはＯＨで、ＤはＨ、ＯＨまたはＮＨ2で、ＸはＯＨまたはＨで、ＹはＨで、最も好ましくはＺはＯＨ、Ｈまたはメチルチオ、特にＯＨである。
Ｂおよび／またはＤがヒドロキシ基である場合、本明細書で用いられる式（Ｉ）の化合物は、対応するアミドのエノール型互変異体で、これはアミド形として広く存在していることは理解されよう。エノール型互変異体を表示することによって、より少数の構造式で本発明の化合物を表示することが可能になる。
【００１０】
本発明はまた以下の式をもつ化合物、またはその互変異体、またはその医薬的に許容できる塩を提供する。
【００１１】
【化１４】
0004451983.tif 000003
【００１２】
式中、ＡはＣＨであり；ＸはＯＨであり；ＹはＨであり；ＺはＯＨもしくはホスフェートであり；ＥはＣＯ2ＨもしくはＣＯＮＨ2であり；ＧはＮＨ2である。
好ましくは、ＥはＣＯＮＨ2でＧはＮＨ2である。
より好ましくは、ＥはＣＯＮＨ2で、ＧはＮＨ2で、ＸはＯＨで、ＹはＨで、最も好ましくは、ＺはＯＨである。
【００１３】
特に好ましいものは以下の化合物である．
１．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール
２．（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール
３．（１Ｒ）−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール
４．（１Ｓ）−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール
５．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール
【００１４】
６．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール
７．（１Ｒ）−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール
８．（１Ｓ）−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール
９．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール
１０．（１Ｒ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール
【００１５】
１１．（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール
１２．（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール
１３．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール
１４．（１Ｒ）−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール
１５．（１Ｓ）−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール
【００１６】
１６．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール
１７．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール
１８．（１Ｒ）−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール
１９．（１Ｓ）−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール
２０．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール
【００１７】
２１．（１Ｓ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール
２２．（１Ｒ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトール
２３．（１Ｓ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトール
２４．（１Ｓ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−３−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトール
２５．（１Ｓ）−１−Ｃ−（３−アミノ−２−カルボクスアミド−４−ピロリル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール
【００１８】
２６．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール５−ホスフェート
２７．（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール５ホスフェート
２８．（１Ｓ）−１−Ｃ−（３−アミノ−２−カルボクスアミド−４−ピロリル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール
【００１９】
最も好ましい化合物は、以下のＩｂ並びにＩｃ、それらの互変異体および医薬的に許容できる塩である。
【００２０】
【化１５】
0004451983.tif 000004
【００２１】
式（Ｉ）または式（Ｉａ）の化合物の生物学的利用可能性は、プロドラッグ形に変換することによって高めることができる。そのようなプロドラッグは式（Ｉ）または式（Ｉａ）と比較して親油性を改善することができ、それによって膜透過性の強化をもたらすことができる。特に有用なプロドラッグ形の１つはエステル誘導体である。その有用性は、これらエステル基の加水分解を触媒し、その作用部位近くまたはその作用部位に式（Ｉ）および式（Ｉａ）の化合物を遊離させる１つまたは２つ以上の普遍的細胞内リパーゼの作用に左右される。
【００２２】
プロドラッグのある形態では、式（Ｉ）または式（Ｉａ）の化合物の１つまたは２つ以上のヒドロキシ基はＯ−アセチル化が可能で、例えば５−Ｏ−ブチレートまたは２，３−ジ−Ｏ−ブチレート誘導体を生成することができる。
【００２３】
式（Ｉ）または式（Ｉａ）の化合物の５−ホスフェートエステル誘導体プロドラッグ形も生成し得、これは特に有用であろう。なぜらならば、５−ホスフェートの陰イオン性は細胞膜を通過する能力を制限するからである。そのような、５−ホスフェート誘導体は、非荷電ビス（アシロキシメチル）エステル誘導体に容易に変換できる。そのようなプロドラッグの有用性は、これらエステル基の加水分解を触媒し、その作用部位近くまたはその作用部位にホルムアルデヒドの分子並びに式（Ｉ）および式（Ｉａ）の化合物を遊離させる１つまたは２つ以上の普遍的細胞内リパーゼの作用に左右される。
【００２４】
そのようなリン酸付加炭水化物誘導体のアシロキシメチルエステルプロドラッグ形の有用性の具体的な例およびそれらの一般的製造方法は、例えば以下の文献に記載されている：Kang et al., Nucleosides Nucleotides 17:1089(1998); Jiang et al., J. Biol. Chem. 273:11017(1998); Li et al., Tetrahedron 53:12017(1997); Kruppa et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 7:945(1997)。
【００２５】
本発明の別の態様では、医薬的に有効な量の本発明の第一の態様の化合物を含む医薬組成物が提供される。
好ましくは、この医薬組成物は本発明の第一の態様の好ましい化合物から選ばれる化合物を含む。より好ましくは、この化合物は本発明の第一の態様のより好ましい化合物から選ばれる。最も好ましくは、この化合物は式ＩｂまたはＩｃの化合物である。
【００２６】
本発明のまた別の態様では、Ｔリンパ球活性レベルを低下させることが所望される疾患または病状の治療方法が提供される。この方法は、医薬的に有効な投与量の本発明の化合物を処置を必要としている患者に投与することを含む。
この疾患には、Ｔ細胞の悪性疾患および自己免疫疾患（関節炎および狼瘡を含む）が含まれる。本発明のこの態様にはまた、器官移植の場合の免疫抑制および炎症性疾患に対する本化合物の使用が含まれる。本発明には、これらの処置を目的とする医薬の製造のための本化合物の使用が含まれる。
【００２７】
本発明の別の態様では、寄生虫感染、特に原虫寄生物によって惹起されるものの治療および／または予防方法が提供される。この原虫寄生物に含まれるものは、ジアルジア属（Giardia)、トリコモナス属（Trichomonas)、リーシュマニア属（Leishmania）、トリパノソーマ属（Trypanosoma)、クリシジア属（Crithidia)、ヘルペトモナス属（Herpetomonas）、レプトモナス属（Leptomonas）、ヒストモナス属（Histomonas）、エイメリア属（Eimeria)、イソポラ属（Isopora)、およびプラスモジウム属（Plasmodium）のものである。プラスモジウム属によって惹起される寄生虫感染の例はマラリアである。この方法は、本発明の化合物によって阻害されるヌクレオシドヒドロラーゼが局在する部位で本化合物の有効濃度を提供できる濃度で投与したとき、本発明の化合物によって阻害される１つまたは２つ以上のヌクレオシドヒドロラーゼを含むいずれかの寄生虫に有利に適用できる。
【００２８】
本発明のまた別の態様では、本発明の第一の態様の化合物を製造する方法が提供される。この方法は以下の（Ａ）−（Ｚ）および（ＡＡ）−（ＡＦ）の方法の１つまたは２つ以上を含むであろう。
【００２９】
方法（Ａ）：４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび５’−デオキシ−、５’−デオキシ−５’ハロゲノ−、５’−エーテル、および５’−チオ類似体とのアクセス
以下の式（ＩＩ）の化合物を連続的にＮ−クロロスクシンイミドと立体的に束縛された(hindered)塩基（例えばリチウムテトラメチルピペラジド）と反応させてイミンを生成し、続いてアセトニトリルの陰イオン（典型的にはアセトニトリルとｎ−ブチルリチウムとを処理して生成される）、さらにジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートと反応させる。
【００３０】
【化１６】
0004451983.tif 000005
【００３１】
［式中、Ｚ’は水素もしくはハロゲン原子、式ＳＱもしくはＯＱの基、またはトリアルキルシリルオキシ、アルキルジアリールシリルオキシ、または場合によって置換されたトリアリールメトキシ基で、Ｑは場合によって置換されたアルキル、アラルキルまたはアリール基である］（典型的にはＺ’はｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ、トリチルオキシまたは同様な基である。）
【００３２】
上記の反応で下記式（ＩＩＩ）の化合物が生成される。
【００３３】
【化１７】
0004451983.tif 000006
【００３４】
［式中、Ｚ’は上記で最初に示した式（ＩＩ）について規定されたとおりである］続いて９−デアザイノシンの製造のために用いられた方法（Lim et al., J. Org. Chem., 48:780(1983))にしたがって、式（ＩＩＩ）の化合物を（Ｍｅ2Ｎ）2ＣＨＯＢｕｔで縮合させ、弱酸性条件下で加水分解して下記式（ＩＶ）の化合物を得る。
【００３５】
【化１８】
0004451983.tif 000007
【００３６】
［式中、Ｚ’は最初に上記で示した式（ＩＩ）の規定のとおりである］さらに引続いて式（ＩＶ）の化合物を穏やかな塩基性条件下でグリシンの単純エステル（例えばエチルグリシネート）と縮合させ、クロロギ酸の単純エステル（例えばベンジルクロロホルメートまたはメチルクロロホルメート）との反応によって環状化させ、続いてベンジル基の場合は貴金属触媒（例えばＰｄ／Ｃ）の存在下で、または単純アルキル基（例えばメチル基）の場合は穏やかな塩基性条件下で水素添加分解によってピロール窒素で脱保護し、下記の式（Ｖ）の化合物を生成する。
【００３７】
【化１９】
0004451983.tif 000008
【００３８】
［式中、Ｚ’は上記で最初に示した式（ＩＩ）について規定したとおりで、Ｒはアルキル基である］典型的にはＲはメチルまたはエチル基である。この式（Ｖ）の化合物を続いてホルムアミジンアセテートと縮合させて下記式（ＶＩ）の化合物を生成する。
【００３９】
【化２０】
0004451983.tif 000009
【００４０】
［式中、Ｚ’は上記で最初に示した式（ＩＩ）について規定したとおりである］この式（ＶＩ）の化合物を酸性条件下で例えばトリフルオロ酢酸との処理によって完全に脱保護する。
Ｚ’がｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ基である式（ＩＩ）の化合物の製造方法は文献（Furneaux et al., Tetrahedron 53:2915(1997)）およびその中の参考文献によって詳述されている。
【００４１】
Ｚ’がハロゲン原子である式（ＩＩ）の化合物は、選択的Ｎ−アルキル−またはアラルキル−オキシカルボニル化（典型的にはジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート、ベンジルクロロホルメート、またはメチルクロロホルメートおよび塩基を用いる）、またはＮ−アシル化（典型的には無水トリフルオロ酢酸または塩基を用いる）によって、式（ＩＩ）の化合物（ここでＺ’はヒドロキシ基）から製造でき、下記の式（ＶＩＩ）の化合物が生成される。
【００４２】
【化２１】
0004451983.tif 000010
【００４３】
［式中、Ｒはアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基、または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｚ’はヒドロキシ基である］この式（ＶＩＩ）の化合物を続いて以下の（ｉ）または（ｉｉ）の工程に付す。
（ｉ）５−Ｏ−スルホニル化（典型的にはｐ−トルエンスルホニルクロリド、メタンスルホニルクロリドまたは無水トリフルオロメタンスルホン酸および塩基を用いる）して式（ＶＩＩ）の化合物［この場合、式中、Ｒはアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基または場合によって置換されたアルキル−またはアリール−カルボニル基で、Ｚ’は場合によって置換されたアルキル−またはアリール−スルホニルオキシ基である］を生成し、続いて求核性ハロゲン化物イオン供給源（例えばフッ化、塩化、臭化、またはヨウ化ナトリウム、リチウムまたはテトラアルキルアンモニウム）を提供することができる試薬を用いてスルホネート置換反応に付すか、または、
【００４４】
（ｉｉ）ジエチルアミノスルファートリフルオリド（ＤＡＳＴ）との反応によるか、またはジメチルホルムアミド中のメチルトリフェノキシホスホニウムイオダイドとの反応（例えばStoeckler et al., Cancer Res., 46:1774(1986)を参照のこと）によるか、または極性溶媒（例えばヘキサメチルホスホルアミド）中のチオニルクロリドまたはブロミドとの反応（Kitagawa & Ichino, Tetrahedron Lett. 87(1971))により、例えばミツノブ反応のように（例えばトリフェニルホスフィン、ジエチルアゾジカルボキシレートおよび上記のような求核性ハロゲン化物イオン供給源を用いて）第一ヒドロキシ基をハロゲン原子で直接置換できる試薬系に付して、式（ＶＩＩ）の化合物［この場合、式中、Ｒはアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基、または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｚ’はハロゲン原子である］を生成し、これを続いて、使用されているＮ−保護基について要求されるように酸もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解により選択的にＮ−脱保護する。
【００４５】
式（ＶＩＩ）の化合物［この場合、式中、Ｒはアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基、または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｚ’はヒドロキシ基である］はまた、式（ＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｚ’はトリアルキルシリルオキシ、アルキルジアリールシリルオキシまたは場合によって置換されたトリアリールメトキシ基である］から、上記のようにＮ−アルキルもしくはアラルキル−カルボキシル化またはＮ−アシル化に付し、続いて、使用されている５−Ｏ−保護基について要求されるように酸触媒加水分解もしくはアルコール分解、触媒性水素添加分解、またはフッ化物イオン供給源（例えばテトラブチルアンモニウムフルオリド）との処理によって選択的５−Ｏ−脱保護を実施して製造できる。
【００４６】
Ｚ’が水素原子である式（ＩＩ）の化合物は以下の（ｉ）または（ｉｉ）のどちらかから製造できる。
【００４７】
（ｉ）５−Ｏ−チオアシル誘導体の生成およびラジカルの脱酸素反応による式（ＶＩＩ）の５−ヒドロキシ化合物［式中Ｒはアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基、または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｚ’はヒドロキシ基である］、または
【００４８】
（ｉｉ）遊離ラジカル条件下で水素化物試薬（例えばトリブチルチンハイドリド）を用いるか、または触媒性水素添加分解（典型的にはパラジウム触媒上の水素を用いる）によって還元し、続いて、使用されているＮ−保護基について要求されるように酸もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解による式（ＶＩＩ）の５−デオキシ−５−ハロゲノ化合物［式中、Ｚ’は塩素、臭素またはヨウ素原子である］。
【００４９】
式（ＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｚ’は場合によって置換されたアルキルチオ、アラルキルチオ、またはアリールチオ基である］は、上記で述べた式（ＶＩＩ）の５−デオキシ−５−ハロゲノまたは５−Ｏ−スルホネート誘導体［式中Ｒはアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｚ’はハロゲン原子または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−スルホニルオキシ基である］と、対応する場合によって置換されたアルキルチオール、アラルキルチオールまたはアリールチオールのアルカリ金属またはテトラアルキルアンモニウム塩との反応、およびそれに続く使用されているＮ−保護基について必要とされる酸もしくはアルカリ触媒加水分解もしくはアルコール分解または触媒性水素添加分解による選択的Ｎ−脱保護によって製造できる（例えば以下を参照されたい：Montgomery et al., J. Med. Chem. 17:1197(1974)）。
【００５０】
式（ＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｚ’は式ＯＱの基であり、Ｑは場合によって置換されたアルキル、アラルキルまたはアリール基である］は、式（ＶＩＩ）の５−ヒドロキシ化合物［式中Ｒはアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｚはヒドロキシ基である］から、以下の（ｉ）または（ｉｉ）によって製造できる：
【００５１】
（ｉ）塩基の存在下でハロゲン化アルキルまたはアラルキルと反応（例えば、溶媒としてテトラヒドロフラン中でヨウ化メチルおよび水素化ナトリウム、または臭化ベンジルおよび水素化ナトリウム）させるか、または
【００５２】
（ｉｉ）引続いて（上記のように）５−Ｏ−スルホネート誘導体に変換させ、アルカリ金属または所望のフェノールのテトラアルキルアンモニウム塩と反応させ、その後、使用されているＮ−保護基について必要とされる酸もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解による選択的Ｎ−脱保護を実施する。
【００５３】
上記の変換反応は、炭水化物の反応で通常用いられる反応であることは理解されよう。これらの変換を達成するために、選択肢として多くの試薬および反応条件を用いることができ、これらの多くに関する参考文献は、専門家の定期的なレポート"Carbohydrate Chemistry"（vol.1-28, Royal Society of Chemistry刊）、特にハロゲノ糖、アミノ糖、チオ糖、エステル、デオキシ−糖およびヌクレオシドに関する章で見つけることができる。
【００５４】
方法（Ｂ）：２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン  ９−デアザグアノシンおよびその誘導体の製造で用いられた方法（例えば以下の文献を参照されたい：Montgomery et al., J. Med. Chem. 36:55(1993);Lim et al., J. Org. Chem. 48:780(1983);およびその中で引用された文献）にしたがって、式（Ｖ）の化合物［この場合、式中Ｚ’は最初に式（ＩＩ）について規定したとおりで、Ｒはアルキル基である］をベンゾイルイソチオシアネートと反応させ、続いて塩基（例えばＤＢＵまたはＤＢＮ）の存在下でヨウ化メチルと反応させて下記の式（ＶＩＩＩ）の化合物を生成する。
【００５５】
【化２２】
0004451983.tif 000011
【００５６】
［式中、Ｚ’はトリアルキルシリルオキシ、アルキルジアリールシリルオキシもしくは場合によって置換されたトリアリールメトキシ基、水素もしくはハロゲン原子、ＳＱもしくはＯＱ（ここでＱは場合によって置換されたアルキル、アラルキルまたはアリール基）で、Ｒはアルキル基である］典型的にはＺ’は、保護ヒドロキシ基の場合は、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ、トリチルオキシまたは同様な基で、Ｒはメチルまたはエチル基である。続いて、この式（ＶＩＩＩ）の化合物をアンモニアの存在下で環状化して分離可能な下記式（ＩＸ）の化合物の混合物を生成する。
【００５７】
【化２３】
0004451983.tif 000012
【００５８】
［式中、Ｄはアミノまたはメチルチオ基で、Ｚ’およびＲは上記に示した式（ＶＩＩＩ）の化合物について規定したとおりであるか、またはＺ’はヒドロキシ基である］この場合は、例えばｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ基はこの条件下では切断された。式（ＩＸ）の生成物［この場合、式中Ｄはアミノまたはメチルチオ基である］は、方法（Ａ）で設定した工程によって産生条件下で完全に脱保護される。
【００５９】
方法（Ｃ）：４−アミノピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン
式（ＩＶ）の化合物［この場合、式中Ｚ’は式（ＩＩ）について最初に規定したとおりである］を穏やかな塩基性条件下でアミノアセトニトリルと反応させ、クロロギ酸の単純エステル（典型的にはベンジルクロロホルメートまたはメチルクロロホルメート）と反応させて環状化させ、下記式（Ｘ）の化合物を生成する。
【００６０】
【化２４】
0004451983.tif 000013
【００６１】
［式中、Ｚ’はトリアルキルシリルオキシ、アルキルジアリールシリルオキシもしくは場合によって置換されたトリアリールメトキシ基、水素もしくはハロゲン原子、ＳＱまたはＯＱ（ここでＱは場合によって置換されたアルキル、アラルキル、またはアリール基である）で、Ｒはアラルキルまたはアルキル基である］典型的にはＺ’は、保護ヒドロキシ基の場合は、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ、トリチルオキシまたは同様な基で、Ｒはベンジルまたはメチル基である。続いて、この式（Ｘ）の化合物を、ベンジル基の場合は貴金属触媒（例えばＰｄ／Ｃ）の存在下で、また単純なアルキル基（例えばメチル基）の場合は穏やかな塩基性条件下で水素添加分解によってピロール窒素で脱保護し、（Ｖ）−＞（ＶＩ）−＞（Ｉ）または（Ｖ）−＞（ＶＩＩＩ）−＞（ＩＸ）−＞（Ｉ）の変換について上記で述べたように処理する。この方法は、９−デアザアデノシンおよびその類似体の製造で使用された方法に従うものである（Lim & Klein, Tetrahedron Lett. 22:25(1981); Xiang et al., Nucleosides Nucleotides 15:1821(1996))。
【００６２】
方法（Ｄ）：７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン（デービス（Daves)法）
式（ＩＩ）の化合物［上記に規定したとおり］を連続的にＮ−クロロスクシンイミドおよび束縛された塩基（例えばリチウムテトラメチルピペリジド）と反応させてイミンを生成し、続いてこれを、典型的にはブチルリチウムまたはマグネシウムを用いて下記式（ＸＩｂ）または（ＸＩｃ）の化合物から臭素またはヨウ素を抽出して生成された陰イオンで縮合させて生成物を得て、これを続いて（方法（Ａ）のように）酸性条件下で完全に脱保護する。
【００６３】
【化２５】
0004451983.tif 000014
【００６４】
［式中、Ｒ３は臭素またはヨウ素原子で、Ｒ４はテトラヒドロピラン−２−イル基である］式（ＸＩｂ）および（ＸＩｃ）の化合物並びにその混合物を製造する方法は以下の文献に記載されている：Zhang & Daves, J. Org. Chem. 57:4690(1992); Stone et al., J. Org. Chem. 44:505(1979)およびその中の引用文献。
【００６５】
この反応では保護基としてテトラヒドロピラン−２−イル基が好ましいが、他のＯ，Ｎ−保護基も用いることができること、さらに、式（ＸＩｂ）および（ＸＩｃ）の化合物の類似体（この場合、任意のヒドロキシまたはアミノ基のイオン化可能な水素原子は適切な保護基によって置換されている）を用いる、このピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン環の５位および／または７位にそれぞれ別個にヒドロキシ基、アミノ、アルキルアミノ、またはアラルキルアミノ基、または水素原子から選ばれる置換基をもつピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体の合成にもこの方法を適用できることは理解されよう。
【００６６】
方法（Ｅ）：７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン（ヨコヤマ法）
５−Ｏ−エーテル保護２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リボフラノース誘導体（この場合、５−エーテル置換基は、典型的にはトリアルキルシリル、アルキルジアリールシリル、場合によって置換されたトリアリールメチルまたは場合によって置換されたアラルキル基、特にｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル、トリイソプロピルシリル、トリチルまたはベンジル基である）を以下の連続反応に付す：
【００６７】
（ｉ）方法Ｄの式（ＸＩｂ）または（ＸＩｃ）の化合物から臭素またはヨウ素原子を抽出して生成した陰イオンと縮合させ；
（ｉｉ）得られたジオールを典型的にはスワーン（Swern)酸化またはジメチルスルホキシド系酸化剤を用いるその変法（例えば、ジクロロメタン溶液中のジメチルスルホキシドおよび無水トリフルオロ酢酸試薬の組み合わせを低温、典型的に−７８℃で用い、続いてトリエチルアミンを用い、さらに室温まで加温する）によって酸化してジケントンを生成し；
（ｉｉｉ）二重還元アミノ化によって１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール部分を、典型的にはメタノール中のナトリウムシアノボロハイドリドおよびギ酸アンモニウム、酢酸アンモニウムまたはベンズヒドリルアミンを用いて生成し；さらに
【００６８】
（ｉｖ）酸触媒加水分解（例えば７０％トリフルオロ酢酸水を用いる）および必要な場合（ベンズヒドリルアミンを用いて製造された生成物の場合、または場合によって置換されたアルキル基がイミノリビトール部分の一級ヒドロキシ基を保護するために用いられる場合）には、金属触媒（典型的にはパラジウム触媒）上での水素添加分解、または所望する場合（シリルエーテル保護基の場合）には、フッ化物イオン供給源として機能できる試薬（例えばテトラヒドロフラン中のテトラブチルアンモニウムフルオリドまたはメタノール中のフッ化アンモニウム）に暴露することによって保護基を除去する。この一連の反応を実施するために適した条件は、yokoyama et al., J. Org. Chem. 61:6079(1996)で報告され、酢酸アンモニウムまたはベンズヒドリルアミンによる二重還元アミノ化は、Furneaux et al., Tetrahedron 42:9605(1993)およびその中に引用された文献で見つけることができる。
【００６９】
方法（Ｆ）：７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン（カルボダ（Kalvoda)法）
式（ＩＩ）の化合物［上記に最初に示した規定のとおり］を連続してＮ−クロロスクシンイミドおよび束縛された塩基（例えばリチウムテトラメチルピペラジド）と反応させてイミンを生成し、続いてトリメチルシアニドおよびルイス酸（典型的にはボロントリフルオリドジエチルエテレート）の混合物と反応させ、さらに酸触媒加水分解を実施して下記式（ＸＩＩ）の化合物を生成する。
【００７０】
【化２６】
0004451983.tif 000015
【００７１】
［式中、Ｚ’は水素もしくはハロゲン原子、ヒドロキシ基または式ＳＱもしくはＯＱの基（ここでＱは場合によって置換されたアルキル、アラルキルまたはアリール基）である］この式（ＸＩＩ）の化合物に、一連の選択的Ｎ−保護（典型的には無水トリフルオロ酢酸、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート、ベンジルクロロホルメートまたはメチルクロロホルメートおよび塩基を用いる）、およびアシルクロリドまたは無水物および塩基（典型的には無水酢酸またはピリジン中のベンゾイルクロリド）によるＯ−保護を実施して適切に保護された下記式（ＸＩＩＩ）の誘導体を得る。
【００７２】
【化２７】
0004451983.tif 000016
【００７３】
［式中、Ｒ１はアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基または場合によって置換されたアルキルもしくはアリール−カルボニル基で、Ｚ’は水素もしくはハロゲン原子、または式ＳＱもしくはＯＱの基（ここでＱは場合によって置換されたアルキル、アラルキルまたはアリール基）、または式Ｒ２Ｏの基（Ｒ２はアルキルカルボニルまたは場合によって置換されたアリールカルボニル基）である］典型的にはＲ１はトリフルオロアセチル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニル基で、Ｒ２はアセチルまたはベンゾイル基であろう。
【００７４】
続いて、カルボダ（Kalvoda, Collect. Czech. Chem. Commun., 43:1431(1978）が記載した方法にしたがい以下の一連の反応によって、得られた式（ＸＩＩＩ）の化合物のカルボン酸部分をピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン−７−オン−３−イル部分に変換する。
【００７５】
（ｉ）不活性溶媒中で触媒量のジメチルホルムアミドを用い典型的にはチオニルクロリドによって、カルボン酸部分を塩素化してアシルクロリドを生成し；
（ｉｉ）得られた塩化アシルを用いて、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルトリフェニルホスホレン（すなわちＰｈ3Ｐ＝ＣＨＣＯ2Ｂｕｔ）の存在下でシアン化水素をアシル化し、３−シアノ−２−プロペノエート誘導体を生成し；
（ｉｉｉ）ジアゾアセトニトリル（これはアミノアセトニトリルヒドロクロリドおよび亜硝酸ナトリウムから製造できる）を用い、同時にシアン化水素を除去して上記誘導体を付加環状化してピラゾール誘導体を生成し；
【００７６】
（ｉｖ）このピラゾール誘導体のｔｅｒｔ−ブチルエステルの酸触媒加水分解によってその対応するカルボン酸を得て；
（ｖ）カルボン酸部分を２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ基に変換する（すなわち生成物はカルバメートである）クルチウス反応（典型的にはトリエチルアミンの存在下でフェニルホスホリルアジドおよび２，２，２−トリクロロエタノールを用いる）を実施し；
（ｖｉ）典型的には塩化アンモニウム含有メタノール中の亜鉛ダストを用いて上記のトリクロロエチルカルバメートを還元的に切断し；
（ｖｉｉ）得られたエチル４−アミノ−３−置換−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレートを酢酸ホルムアミドと縮合させて、下記式（ＸＩＶ）の化合物を生成する。
【００７７】
【化２８】
0004451983.tif 000017
【００７８】
［式中、Ｒ１はアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｚ’は水素もしくはハロゲン原子、ＳＱもしくはＯＱ（ここでＱは場合によって置換されたアルキル、アラルキルもしくはアリール基）、または式Ｒ２Ｏの基（ここでＲ２はアルキルカルボニルまたは場合によって置換されたアリールカルボニル基）で、Ａは窒素原子で、Ｂはヒドロキシ基で、Ｄは水素原子である］続いて、式（ＸＩＶ）の化合物を、使用されているＯ−およびＮ−保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または水素添加分解によってＯ−脱保護およびＮ−脱保護する。
【００７９】
方法（Ｇ）：７−アミノピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン（ブキャナン（Buchanan) 法）
式（ＩＩ）の化合物［上記で最初に規定したとおり］をＮ−クロロスクシンイミドおよび束縛塩基（例えばリチウムテトラメチルピペラジド）と連続的に反応させてイミンを生成し、続いてブキャナン(Buchanan)と共同研究者(J. Chem. Soc., Perkin Trans. I:1077(1991)およびその中で引用された参考文献）によるホルミシンおよびその類似体を製造するために用いられた方法にしたがって、このイミンを以下の一連の反応によって７−アミノ−ピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン誘導体に変換する。
【００８０】
（ｉ）このイミンに３，３−ジエトキシプロピ−１−ニルマグネシウムブロミドまたは３，３−ジエトキシピロピ−１−ニルリチウムを添加し；
（ｉｉ）典型的には無水トリフルオロ酢酸、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート、ベンジルクロロホルメートまたはメチルクロロホルメートおよび塩基を用いてＮ−保護し；
（ｉｉｉ）穏やかに酸加水分解して酸感受性Ｏ−保護基を除去し、ジエチルアセタル部分をアルデヒド部分に変換し；
【００８１】
（ｉｖ）ヒドラジンと縮合させて３−置換プロピ−２−ナル誘導体を３−置換ピラゾール誘導体に変換し；
（ｖ）典型的には無水酢酸またはピリジン中のベンゾイルクロリドを用いてアシル化し：
（ｖｉ）典型的には硝酸アンモニウム、無水トリフルオロ酢酸およびトリフルオロ酢酸を用いてニトロ置換を実施し、３−置換１，４−ジニトロピラゾール誘導体を生成し；
（ｖｉｉ）シアンイオンを供給できる試薬、典型的にはエタノール水中のシアン化ナトリウムと反応させ、２つのニトロ基の１つにシネ置換をもたらし；
【００８２】
（ｖｉｉｉ）典型的にはナトリウムジチオナイトを用いるか、または金属触媒上で触媒性水素添加分解によって残存するニトロ基を還元し；
（ｉｘ）ホルムアミジンアセテートと縮合させて式（ＸＩＶ）の化合物［この場合、式中Ｒ１はアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリールカルボニル基で、Ｚ’は水素もしくはハロゲン原子、ＳＱもしくはＯＱ（ここでＱは場合によって置換されたアルキル、アラルキルまたはアリール基）、またはＲ２Ｏ基（ここでＲ２はアルキルカルボニルまたは場合によって置換されたアリールカルボニル基）で、Ａは窒素原子で、Ｂはアミノ基で、Ｄは水素原子である］を生成する。続いてこの式（ＸＩＶ）の化合物を、使用されているＯ−およびＮ−保護基に応じて酸−もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によってＮ−およびＯ−脱保護する。
【００８３】
方法（Ｈ）：２’−デオキシ−類似体
式（Ｉ）の化合物［この場合、式中ＸおよびＺはヒドロキシ基で、Ｙは水素原子で、Ａ、ＢおよびＤはこの式を上記で最初に示した箇所で規定したとおりである］の全体的な２’−脱酸素は以下の連続反応によって実施される：
【００８４】
（ｉ）式（Ｉ）のような化合物の１，４−ジデオキシ−１，４−イミノリビトール部分を選択的にＮ−アルキルもしくはアラルキル−オキシカルボニル化するか（典型的はジ−ｔｅｒｔ−ジカルボネート、ベンジルクロロホルメート、またはメチルクロロホルメートおよび塩基を用いる）、またはＮ−アシル化し（典型的には無水トリフルオロ酢酸および塩基を用いる）；さらに、
（ｉｉ）得られた生成物を１，３−ジクロロ−１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサンおよび塩基と反応させて３’，５’−Ｏ−保護を実施し、下記の式（ＸＶ）の化合物を生成し；
【００８５】
【化２９】
0004451983.tif 000018
【００８６】
［式中、Ｒ１はアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基、または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｒ２はＲ１と同じかまたは水素原子で、Ａ、ＢおよびＤは上記に最初に示した箇所で式（Ｉ）について規定したとおりである］
【００８７】
（ｉｉｉ）生じた式（ＸＶ）の化合物の２’−Ｏ−チオアシル化（典型的にはフェノキシチオノカルボニルクロリドおよび塩基を用いるか、または水素化ナトリウム、二硫化炭素およびヨウ化メチルを用いる）；
（ｉｖ）バートン(Barton)ラジカル脱酸素反応（典型的には水素化トリブチルチンおよびラジカル開始物質を用いる）；
【００８８】
（ｖ）フッ素イオンの供給源として作用できる試薬、例えばテトラヒドロフラン中のテトラブチルアンモニウムフルオリド、またはメタノール中のフッ化アンモニウムによるシリル保護基の切断；および
（ｖｉ）使用されている保護基に応じて酸−もしくはアルカリ−触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解により残存するＮ−およびＯ−保護基の切断。
この変換の重要な工程を誘導するために適した試薬および反応条件は下記の文献で見つけることができる：Robins et al., J. Am. Chem. Soc. 105:4059(1983); Solan & Rosowsky, Nucleosides Nucleotides 8:1369(1989); Upadhya et al., Nucleic Acid Res. 14:1747(1986)。
【００８９】
式（Ｉ）の化合物は、そのピロール環またはピラゾール環に、工程（ｉ）のアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル化またはアシル化、または工程（ｉｉ）のチオアシル化を、用いられた反応条件に応じて受けることができる窒素原子を有することは理解されよう。そのような誘導体が生成された場合は、得られた誘導体のピロールまたはピラゾールのＮ−置換基は、穏やかな酸性触媒もしくはアルカリ性触媒加水分解またはアルコール分解によって取り去ることができるほど十分に不安定であるか、あるいはイミノリビトール部分におけるその後の反応を妨害しないで最後の脱保護工程で除去可能であるかのどちらかである。所望の場合は、この手段は式（ＸＶ）の化合物［上記で規定されたとおりであるが、ただしピラゾロ−もしくはピロロピリミジン部分にＮ−保護基をさらに有する］に適用できる。そのようなＮ−保護化合物の製造に適した方法は、その２’−脱酸素を実施する方法およびＮ−脱保護に適した条件とともに以下の文献で見つけることができる：Ciszewski et al., Nucleosides Nucleotides 12:487(1993); Kambhampati et al., Nucleosides and Nucleotides 5:539(1986）。
【００９０】
方法（Ｉ）：２’−エピ−類似体
式（ＸＶ）の化合物［上記で最初に示した箇所で規定したとおり］を酸化し、続いて還元して式（Ｉ）の化合物全体のＣ−２’エピ化を実施して下記の式（ＸＶＩ）の化合物を生成する。
【００９１】
【化３０】
0004451983.tif 000019
【００９２】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａ、ＢおよびＤは上記で式（ＸＶ）を最初に示した箇所で規定したとおりである］この式（ＸＶＩ）の化合物は、式（ＸＶ）の出発物質アルコールとの混合物として存在するであろう。続いてこの式（ＸＶＩ）の化合物を、方法（Ｈ）の工程（ｖ）および（ｖｉ）で述べたように完全に脱保護する。
この変換の重要な工程を誘導するために適した試薬および反応条件は以下の文献で見つけることができる：Robins et al., Tetrahedron 53:447(1997）。
【００９３】
方法（Ｊ）：２’−デオキシ−２’−ハロゲノ−および２’−デオキシ−２’エピ−２’−ハロゲノ−類似体
式（ＸＶ）または（ＸＶＩ）の化合物［上記で最初にそれらを示した箇所で規定したとおり］を式（ＩＩ）の化合物［式中Ｚ’はハロゲン原子］の製造のために方法（Ａ）で述べた方法で反応させる。この方法は以下の（ｉ）または（ｉｉ）のいずれかを必要とする。
【００９４】
（ｉ）ハロゲンイオンによって２’−Ｏ−スルホニル化およびスルホネート置換を実施するか；または
（ｉｉ）例えばミツノブ反応またはジエチルアミノスルファートリフルオリド（ＤＡＳＴ）との反応によって、ハロゲン原子を用いて２’ヒドロキシ基を直接置換してＣ−２’で立体的化学構造が逆になっている化合物を生成し、続いてこれを方法（Ｈ）の工程（ｖ）および（ｖｉ）で述べたように完全に脱保護する。
【００９５】
式（ＸＶ）または（ＸＶＩ）の化合物は、そのピロール環またはピラゾール環に、用いられた反応条件に応じて工程（ｉ）のスルホニル化を受けることができる窒素原子を有することは理解されよう。そのような誘導体が生成された場合は、得られた誘導体のピロールまたはピラゾールＮ−スルホネート置換基は、穏やかな酸性触媒もしくはアルカリ性触媒加水分解またはアルコール分解によって取り去ることができるほど十分に不安定であるか、またはイミノリビトール部分におけるその後の反応を妨害しないで最後の脱保護工程で除去可能であるかのどちらかである。
【００９６】
所望の場合は、この手段は式（ＸＶ）または（ＸＶＩ）の化合物［上記で規定されたとおりであるが、ただしピラゾロ−またはピロロピリミジン部分にＮ−保護基をさらに有する］に適用できる。そのようなＮ−保護化合物の製造に適した方法は、２’−Ｏトリフレートの生成およびハロゲンイオンによる反転された置換を実施する方法並びにＮ−脱保護に適した条件とともに以下の文献で見つけることができる：Ciszewski et al., Nucleosides Nucleotides 12:487(1993); Kambhampati et al., Nucleosides and Nucleotides 5:539(1986）。
【００９７】
方法（Ｋ）：５’−デオキシ−、５’−デオキシ−５’−ハロゲノ−、５’−エーテル、および５’−チオ−類似体
式（ＶＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｒはアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基または場合によって置換されたアルキルもしくはアリール−カルボニル基で、Ｚ’はヒドロキシ基である］を式（ＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｚ’はハロゲンもしくは水素原子またはＳＱもしくはＯＱ（ここでＱは場合によって置換されたアルキル、アラルキル、またはアリール基）、１つから５つの炭素原子をもつアルキルチオ基である］に変換するために方法（Ａ）で述べた手順を用いて、下記式（ＸＶＩＩ）の化合物を生成する。
【００９８】
【化３１】
0004451983.tif 000020
【００９９】
［式中、Ｒはアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基、または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｚ’はヒドロキシ基で、Ａ、ＢおよびＤは上記で式（Ｉ）を最初に示した箇所で規定したとおりである］続いて、この式（ＸＶＩＩ）の化合物を、例えばトリフルオロ酢酸水による処理によって酸性条件下で完全に脱保護する。
【０１００】
式（ＸＶＩＩ）のそのような化合物は、式（Ｉ）の化合物［ＸおよびＺはともにヒドロキシ基で、Ｙは水素原子で、Ａ、ＢおよびＤは式（Ｉ）について上記で最初に示した箇所で規定した意味を有する］から、以下の２つの反応工程（これらは任意の順序で適用できる）で製造できる。
【０１０１】
（ｉ）１，４−ジデオキシ−１，４−イミノリビトール部分の選択的Ｎ−アルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル化（典型的にはジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート、ベンジルクロロホルメート、またはメチルクロロホルメートおよび塩基を用いる）、またはＮ−アシル化（典型的には無水トリフルオロ酢酸および塩基を用いる）；および
（ｉｉ）２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン化、この反応は例えば以下のような多様な試薬で実施できる：硫酸添加または無添加状態でのアセトンおよび無水硫酸銅；アセトンおよび硫酸；２，２−ジメトキシプロパンおよび酸触媒；または２−メトキシプロペンおよび酸触媒。
【０１０２】
式（Ｉ）または（ＸＶＩＩ）のそのような化合物は、そのピロール環またはピラゾール環に、用いられた反応条件に応じてスルホニル化、チオアシル化、アシル化、またはアラルキル−オキシカルボニル化を受けることができる窒素原子を有することは理解されよう。そのような誘導体が生成された場合は、得られた誘導体のピロールまたはピラゾールＮ−置換基は、穏やかな酸性触媒もしくはアルカリ性触媒加水分解またはアルコール分解によって取り去ることができるほど十分に不安定であるか、またはイミノリビトール部分におけるその後の反応を妨害しないで最後の脱保護工程で除去可能であるかのどちらかである。
【０１０３】
方法（Ｌ）：２−および４−アミノピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび５−および７−アミノピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
下記式（ＸＶＩＩＩ）の化合物を塩素化試薬で塩素化し、続いてこの塩素原子を以下の（ｉ）−（ｉｖ）の方法の１つによって求核性窒素で置換する。
【０１０４】
【化３２】
0004451983.tif 000021
【０１０５】
［式中、Ｒ１はアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基、または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｒ２はアルキルカルボニルまたは場合によって置換されたアリールカルボニル基で、ＸおよびＹは、それぞれ別個に水素もしくはハロゲン原子または式Ｒ２Ｏの基で、ただしＸまたはＹの１つがハロゲン原子または式Ｒ２Ｏの式から選ばれる場合は他のものは水素原子で、Ｚ’は式Ｒ２Ｏの基であるか、または、Ｘが式Ｒ２Ｏの基であるときはＺ’は水素もしくはハロゲン原子、または式Ｒ２Ｏの基、または式ＯＱもしくはＳＱの基で（Ｑは場合によって置換されたアルキル、アラルキルまたはアリール基）、Ａは窒素原子またはメチン基で、ＢまたはＤの１つはヒドロキシ基で、他のものは塩素、臭素または水素原子である］
【０１０６】
（ｉ）典型的には液体アンモニア、濃アンモニア水、またはアルコール（例えばメタノール）中のアンモニア溶液によるアンモニア分解；または
（ｉｉ）先ず最初に４−クロロフェニルホスホロジクロリデートをピリジン中の上記塩化物および１，２，４−トリアゾールの溶液に添加してトリアゾール誘導体に変換し、テトラゾール部分およびエステル保護基の両方を水酸化アンモニウムでアルカリ加水分解に付すか；または
【０１０７】
（ｉｉｉ）アジドイオン供給源（例えばアルカリ金属アジドまたはテトラアルキルアンモニウムアジド）と反応させ、得られた生成物を典型的には触媒性水素添加分解によって還元するか；または
【０１０８】
（ｉｖ）メタノール中のアルキルアミンまたはあるアルキルアミン（例えばメチルアミンまたはベンジルアミン）と反応させる。
【０１０９】
これらの条件は、Ｏ−エステル基が普遍的に切断できるように十分に塩基性であるが、続いて残存するいずれのＯ−またはＮ−保護基も、使用されている保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解、またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によって除去されなければならない。
【０１１０】
適切な塩素化剤は、チオニルクロリド−ジメチルホルムアミド複合体（Ikehara & Uno, Chem. Pharm. Bull. 13:221(1965)）、四塩化炭素中のトリフェニルホスフィンおよび１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデセ−７−エン（ＤＢＵ）添加もしくは無添加ジクロロメタン（De Napoli et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1:15(1995)およびその中の引用文献）、ホスホリルクロリド（Imai, Chem. Pharm. Bull., 12:1030(1964))またはフェニルホスホリルクロリドおよび水素化ナトリウムである。
【０１１１】
そのようなアンモニア分解またはアルキルアミンとの反応に適した条件は、以下の文献で見つけることができる：Ikehara & Uno, Chem. Pharm. Bull. 13:221(1965); Robins & Tripp, Biochemistry 12:2179(1973); Marumoto et al., Chem. Pharm. Bull., 23:759(1975); Hutchinson et al., J. Med. Chem., 33:1919(1990)）。
テトラゾール誘導体を介してそのような塩化物をアミンに変換するために適切な条件は文献で見つけることができる（Lin et al., Tetrahedron 51:1055(1995))。
アジドイオンとの反応とそれに続く還元に適した条件は文献で見つけることができる（Marumoto et al., Chem. Pharm. Bull. 23:759(1975)）。
【０１１２】
式（ＸＶＩＩＩ）のような化合物は、選択的Ｎ−アルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル化（典型的にはジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート、ベンジルクロロホルメートまたはメチルクロロホルメートおよび塩基を用いる）、または１，４−ジデオキシ−１，４−イミノリビトール部分のＮ−アシル化、およびそれに続くＯ−アシル化（典型的には無水酢酸またはピリジン中のベンジルクロリドを用いる）によって式（Ｉ）の化合物から製造できる。そのような式（Ｉ）の化合物は、そのピロール環またはピラゾール環に、用いられた反応条件に応じてアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル化またはアシル化を受けることができる窒素原子を有することは理解されよう。そのような誘導体が生成された場合は、得られた誘導体のピロールまたはピラゾールＮ−置換基は、穏やかな酸性触媒もしくはアルカリ性触媒加水分解またはアルコール分解によって取り去ることができるほど十分に不安定であるか、またはイミノリビトール部分におけるその後の反応を妨害しないで最後の脱保護工程で除去可能であるかのどちらかである。
【０１１３】
上記の一連の塩素化、アミノ化−脱保護はまた式（ＸＶＩＩ）の化合物［Ｂはヒドロキシ基で、Ｄは水素原子で、Ｚ’は水素もしくはハロゲン原子、または式Ｒ２Ｏの基（Ｒ２はトリアルキルシリルオキシまたはアルキルジブリルシリルオキシ基）、または場合によって置換されたトリアリールメトキシ、アルキルカルボニルまたはアリールカルボニル基で、ＲおよびＡは、上記で式（ＸＶＩＩ）を最初に示した箇所で規定したとおりである］に適用できる。この一連の反応を誘導するための適切な条件は文献で見つけることができる（Ikehara et al., Chem. Pharm. Bull. 12:267(1964))。
【０１１４】
方法（Ｍ）：２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
下記（ｉ）および（ｉｉ）のどちらかを酸化する：
（ｉ）臭素水による式（ＸＶＩＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｒ２は水素原子；ＸおよびＹはそれぞれ別個に水素もしくはハロゲン原子、またはヒドロキシ基から選ばれるが、ただしＸまたはＹの１つがハロゲン原子またはヒドロキシ基である場合は他のものは水素原子で、Ｚ’はヒドロキシ基であるか、またはＸがヒドロキシ基の場合はＺ’は水素もしくはハロゲン原子、ヒドロキシ基、またはＯＱ（Ｑは場合によって置換されたアルキル、アラルキルまたはアリール基）であり、Ｂはヒドロキシ基またはアミノ基で、Ｄは水素原子で、Ｒ１およびＡは最初に上記で式（ＸＶＩＩＩ）を示した箇所で規定したとおりである］の酸化；または
【０１１５】
（ｉｉ）水または、基質の溶解性を改善するために水に混合可能な不活性溶媒を含有する水性溶媒混合物中の臭素または過マンガン酸カリウムとともに式（ＸＶＩＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｚ’は水素もしくはハロゲン原子、または式Ｒ２Ｏの基、またはＯＱ（Ｑは場合によってアルキル、アラルキル、またはアリール基）で、Ｂはヒドロキシ基またはアミノ基で、Ｄは水素原子で、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ、ＹおよびＡは上記で最初に式（ＸＶＩＩＩ）を示した箇所で規定したとおりである］を用いて、式（ＸＶＩＩＩ）の関連化合物［ただしＢおよびＤはここではヒドロキシ基である］を生成し、続いて使用されている保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によって一切のＯ−またはＮ−保護基を除去する。
【０１１６】
上記の工程（ｉ）で要求される式（ＸＶＩＩＩ）の化合物は、選択的Ｎ−アルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル化（典型的にはジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート、ベンジルクロロホルメートまたはメチルクロロホルメートおよび塩基を用いる）、または１，４−ジデオキシ−１，４−イミノリビトール部分のＮ−アシル化（典型的には無水酢酸および塩基を用いる）によって式（Ｉ）の化合物［この場合、式中ＺはＺ’であり、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ａ、ＢおよびＤは式（ＸＶＩＩＩ）の要求化合物で規定されたものである］から製造できる。これを続いて、Ｏ−アシル化（典型的には無水酢酸またはピリジン中のベンゾイルクロリドを用いる）によって、上記の工程（ｉｉ）で要求される対応する式（ＸＶＩＩＩ）の化合物に変換できる。そのような式（Ｉ）の化合物は、そのピロール環またはピラゾール環に、用いられた反応条件に応じてアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル化またはアシル化を受けることができる窒素原子を有することは理解されよう。そのような誘導体が生成された場合は、得られた誘導体のピロールまたはピラゾールＮ−置換基は、穏やかな酸性触媒もしくはアルカリ性触媒加水分解またはアルコール分解によって取り去ることができるほど十分に不安定であるか、またはその後の反応を妨害しないで最後の脱保護工程で除去可能であるかのどちらかである。
【０１１７】
方法（Ｎ）：４−アミノ−２−クロロピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび７−アミノ−５−クロロピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
典型的には生リン酸オキシクロリドを用いて、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物［この場合、式中ＢおよびＤはヒドロキシ基で、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ、Ｙ、Ｚ’およびＡは上記で式（ＸＶＩＩＩ）を最初に示した箇所で規定したとおりである］を塩素化して、対応する式（ＸＶＩＩＩ）のジクロロ誘導体［この場合、式中ＢおよびＤは塩素原子である］を生成し、続いてより反応性の高いクロロ置換基をアンモニア分解によって選択的に置換する。アンモニア分解は、典型的には加圧鉛容器中の無水液体アンモニアまたはメタノールアンモニアを用いて実施されるが、これは同時にＯ−エステル保護基を切断する。続いて、使用されている保護基に応じて、残存するＮ−保護基を酸触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解で除去し、式（Ｉ）の化合物（この場合、Ｂはアミノ基で、Ｄは塩素原子である）を生成する。
【０１１８】
上記の式（ＸＶＩＩＩ）のジクロロ−誘導体は、使用されている保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解によってＯ−およびＮ−保護基を除去して式（Ｉ）の化合物［この場合、式中ＢおよびＤは塩素原子］に変換できる。前述の式（ＸＶＩＩＩ）または式（Ｉ）の化合物中の塩素原子の１つは極めて反応性が高く、脱保護のために選択される条件は、この原子を巻き込む望ましくない反応を制限することができるように穏やかなものでなければならない。
この方法の重要な工程のために適した条件は以下の文献で見つけることができる：Upadhya et al., Nucleic Acid Res. 14:1747(1986); Kitagawa et al., J. Med. Chem. 16:1381(1973))。
【０１１９】
方法（Ｏ）：ジクロロ−化合物に由来する２−クロロ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび５−クロロ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
方法（Ｎ）の最初の反応の中間体として利用可能な式（ＸＶＩＩＩ）の化合物［この場合ＢおよびＤは塩素原子］を、必要に応じて可溶性を高めるために水に混合可能な不活性溶媒（例えばジオキサン）中で、典型的には水酸化カリウム水溶液または炭酸ナトリウム水溶液を用いて加水分解し、続いて、使用されている保護基に応じて酸触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によって残存するＮ保護基を除去し、式（Ｉ）の化合物（この場合Ｂはヒドロキシ基で、Ｄは塩素原子である）を生成する。
【０１２０】
方法（Ｐ）：アミノクロロ−化合物に由来する２−クロロ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび５−クロロ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
方法（Ｎ）塩素化およびアンモニア分解反応後の中間体として利用可能な式（ＸＶＩＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｂはアミノ基で、Ｄは塩素原子で、Ｒ１はアルキル−もしくはアラルキル−オキシカルボニル基または場合によって置換されたアルキル−もしくはアリール−カルボニル基で、Ｒ２は水素原子で、Ｚ’＝Ｚで、Ｘ、Ｙ、ＺおよびＡは上記で式（Ｉ）を最初に示した箇所で規定したとおりである］を、ニトロシルクロリドとの反応によって脱アミノ化し、続いて方法（Ｎ）で述べたように保護基を除去する。典型的な反応条件は文献で見つけることができる：Sanghvi et al., Nucleosides Nucleotides 10:1417(1991）。
【０１２１】
方法（Ｑ）：４−ハロゲノピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび７−ハロゲノピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
ハロゲノ−ホルミシン類似体を製造するために用いられた方法（Watanabe et al., J. Antibiotic, Ser. A19:93(1966))によって、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｒ１はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基で、Ｂはヒドロキシ基で、Ｄは水素原子で、Ｒ２、Ｘ、Ｙ、Ｚ’およびＡは上記で最初に式（ＸＶＩＩＩ）を示した箇所で規定したとおりである］を反応させる。この方法は下記の（ｉ）−（ｉｖ）を用いる連続的処理を伴う。
【０１２２】
（ｉ）亜リン酸ペンタスルフィドを用いて還流させながらピリミジンおよび水の中で加熱しメルカプト−誘導体を生成する；
（ｉｉ）ヨウ化メチルを用いてメチルチオ−誘導体を生成する；
（ｉｉｉ）単純アルコール中の塩基または単純アルコールの水溶液（例えばメタノール中のナトリウムメトキシド）を用いてＯ−保護基を除去する；
（ｉｖ）絶対アルコール中の塩素、臭素またはヨウ素を用いてハロゲノ−誘導体を生成し、続いてこれを酸水溶液（典型的には濃トリフルオロ酢酸溶液）と反応させてＮ−脱保護を実施する。
【０１２３】
方法（Ｒ）：ピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよびピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
方法（Ｌ）での最初の反応として用いられた塩素化反応から生じた塩化物中間体、または方法（Ｑ）の塩素化反応工程（ｉｖ）から得られた塩化物中間体、または方法（Ｑ）によって生成された式（Ｉ）の化合物（典型的には触媒として木炭上パラジウム上の水素を用い、場合によって遊離される酸を中和するために酸化マグネシウムを用いる）を水素添加分解によって切断し、続いて、使用されている保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解によって残存するＯ−またはＮ−保護基を切断する。
【０１２４】
方法（Ｓ）：Ｎ−アルキル化４−アミノピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび７−アミノピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
方法（Ｑ）の工程（ｉｉｉ）で製造されたＯ−脱保護メチルチオ−誘導体を、密封試験管または鉛容器の絶対メタノール中のアミン（例えばメチルアミン）とともに加熱し、続いて酸水溶液（典型的には濃トリフルオロ酢酸溶液）と反応させてＮ−保護基を除去する。この方法は、Ｎ−アルキル化ホルミシン類似体を製造するために用いられた（Watanabe et al., J. Antibiotic, Ser.A 19:93(1966))。または、式（Ｉ）の化合物［この場合、式中ＢまたはＤはアミノ基である］をトルエン中の１，２−ビス〔（ジメチルアミノ）メチレン〕ヒドラジンおよびトリメチルシリルクロリドと反応させ、アミノ基を１，３，４−トリアゾール基に変換し、加水分解してＯ−シリル基を切断し（例えばアセトニトリル水溶液中の酢酸を用いる）、極性溶媒（例えば水またはピリジン水溶液）中で１，３，４−トリアゾール基をアルキルアミンと置換する。この方法は、Ｎ，Ｎ−ジメチル−ホルミシンＡを製造するために用いられた（Miles et al., J. Am. Chem. Soc., 117:5951(1995))。または式（Ｉ）の化合物［この場合、式中ＢまたはＤはアミノ基である］を過剰のアルキルアミンとともに加熱して交換反応に付す。この方法はＮ−アルキル−ホルミシンＡ誘導体を製造するために用いられた（Hecht et al., J. Biol. Chem. 250:7343(1975))。
【０１２５】
方法（Ｔ）：２−クロロ−４−ヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび５−クロロ−７−ヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体  式（ＸＶＩＩＩ）のジヒドロキシ化合物［この場合、式中ＢおよびＤはヒドロキシ基で、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ、Ｙ、Ｚ’およびＡは上記で式（ＸＶＩＩＩ）が最初に示された箇所で規定したとおりである］を選択的に塩素化する。これは、２，４−ジヒドロキシピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン誘導体の４−ヒドロキシ基および５，７−ジヒドロキシピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン誘導体の７−ヒドロキシ基のはるかに強い反応性を利用している。続いて、方法（Ｎ）で述べた方法を用いて保護基を除去する。
【０１２６】
方法（Ｕ）：２−ハロゲノ−、４−ハロゲノ、および２，４−ジハロゲノ−ピロロ〔３，２−ｄ〕ピリミジン並びに５−ハロゲノ、７−ハロゲノ、および５，７−ジハロゲノ−ピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
式（ＸＶＩＩＩ）の化合物［この場合、式中ＢまたはＤの１つはアミノ基で、他のものはそれぞれ別個にアミノ基またはハロゲンもしくは水素原子から選ばれ、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ、Ｙ、Ｚ’およびＡは式（ＸＶＩＩＩ）が上記で最初に示された箇所で規定されたとおりである］をジアゾ化し、その後、以下の工程の１つを用いて反応させる。
【０１２７】
（ｉ）ハロゲンイオンの供給源の存在下で亜硝酸（亜硝酸ナトリウムからその場で製造される）と反応させる。フッ素原子によるアミノ基の置換のために、濃フッ化ホウ素酸水溶液（Gerster & Robins, J. Org. Chem. 31:3258(1966); Montgomery & Hewson, J. Org. Chem. 33:432(1968)）または低温（例えば−２５から−３０℃）でフッ化水素およびピリジン（Secrist et al., J. Med. Chem. 29:2069(1986))を、鉱酸およびフッ素イオン供給源として用いることができる；または
【０１２８】
（ｉｉ）亜硝酸アルキル（典型的には亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチルまたはｎ−ブチル）とハロゲンイオン供給源の存在下で非水性溶媒中で反応させる。塩素原子によるアミノ基の置換のために、塩素および塩化第一銅または三塩化アンチモンの組合わせ物を、溶媒としてクロロホルム中で用いることができる（Niiya et al., J. Med. Chem. 35:4557(1992）とその中の引用文献）；または
【０１２９】
（ｉｉｉ）光ハロゲン化と組み合わせながら、非水性溶媒中の亜硝酸アルキル（典型的に亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチルまたはｎ−ブチル）と反応させる。アミノ基の塩素による置換のために、臭素もしくはヨウ素原子、四塩化炭素、ブロモホルムまたはジヨードメタンを試薬および溶媒として用い、さらに白熱光源（例えば２００Ｗ電球）を用いて光ハロゲン化を実施し（Ford et al., J. Med. Chem. 38:1189(1995); Driscoll et al., J. Med. Chem. 39:1619(1996)；およびその中に引用された文献）、式（ＸＶＩＩＩ）の対応する化合物［この場合、式中Ｂはハロゲン原子、およびＤはハロゲン原子またはアミノ基］を生成し、続いて方法（Ｎ）で述べたように保護基を除去する。
【０１３０】
先ず最初にヒドロキシ基をチオール基に変換する場合は、同じ変換を式（ＸＶＩＩＩ）の対応する開始化合物［この場合、式中ＢまたはＤの１つはアミノ基で、他のものはヒドロキシ基である］に対して実施できる（Gerster & Robins, J. Org. Chem. 31:3258(1966))。この変換は、還流しながらピリミジンおよび水の中で加熱することによって四硫化燐と反応させて実施できる（方法（Ｑ）参照）。
【０１３１】
方法（Ｖ）：４−ヨード−ピラゾロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび７−ヨードピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
式（Ｉ）の対応するクロロ−類似体（この場合Ｂは塩素原子）を濃ヒドロヨウ素酸水溶液で処理し、続いて文献の方法を実施する（Gerster et al., J. Org. Chem. 28:945(1963)）。
【０１３２】
方法（Ｗ）：５’−デオキシ−５’−ハロゲノ−および５’−チオ−類似体  式（ＸＶＩＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｒ２は水素原子で、ＸおよびＹはそれぞれ別個に水素もしくはハロゲン原子、またはヒドロキシ基から選ばれるが、ただしＸまたはＹの１つがハロゲン原子またはヒドロキシ基の場合、他のものは水素原子で、Ｚはヒドロキシ基で、Ｒ１、Ａ、ＢおよびＤは最初に示された式（ＸＶＩＩＩ）について規定されたとおりである］を下記の（ｉ）−（ｉｉｉ）のいずれかと反応させる。
【０１３３】
（ｉ）三置換ホスフィンおよび二硫化物（例えばトリブチルホスフィンおよびジフェニルジスルフィド）；または
（ｉｉ）三置換ホスフィン（例えばトリフェニルホスフィン）および四臭化炭素；または
（ｉｉｉ）チオニルクロリドまたはブロミド。
さらに続いて、使用されている保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によってＮ−保護基を除去する。
チオ基またはハロゲン原子による５’−ヒドロキシ基のそのような選択的置換を誘導するために適した条件は、以下の文献で見つけることができる：Chern et al., J. Med. Chem. 36:1024(1993); Chu et al., Nucleosides Nucleotides 5:185(1986)。
【０１３４】
方法（Ｘ）：５’−ホスホ−ピラゾロ〔３，２−ｄ〕ピリミジンおよび５’−ホスホ−ピラゾロ〔４，３−ｄ〕ピリミジン類似体
式（ＸＶＩＩ）の化合物［この場合、式中Ｒ、Ｚ’、Ａ、ＢおよびＤは最初にそれらを示した箇所で規定されたとおりである］を下記の（ｉ）または（ｉｉ）の何れかと反応させる：
【０１３５】
（ｉ）ホスフィチル化剤、例えばＮ，Ｎ−ジエチル−１，５−ジヒドロ−２，４，３−ベンゾジオキサホスフェピン−３−アミンと反応させ、続いて、例えば３−クロル過安息香酸を用いて亜リン酸エステルを酸化してリン酸エステルを生成するか；または
（ｉｉ）リン酸化剤、例えばホスホリルクロリドまたはジベンジルクロロホスフェートと反応させ、さらに方法（Ａ）で述べたように例えば水素添加分解および酸性条件下での処理によって保護基を除去する。
【０１３６】
方法（Ｙ）：３−アミノピロール−２−カルボン酸および４−アミノ−１Ｈ−ピペラゾール−５−カルボン酸類似体
式（Ｖ）の化合物（最初に上記で規定したとおり）または方法（Ｆ）の工程（ｖｉ）で生成された中間体エチル４−アミノ−３−置換−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレートを、使用されているＯ−およびＮ−保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によって完全に脱保護する。
【０１３７】
方法（Ｚ）：３−アミノ−２−シアノピロールおよび４−アミノ−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾール
式（Ｘ）の化合物（最初に上記で規定したとおり）または方法（Ｇ）の工程（ｖｉｉｉ）で生成された中間体４−アミノ−５−シアノピラゾールを、使用されているＯ−およびＮ−保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によって完全に脱保護する。
【０１３８】
方法（ＡＡ）：３−アミノピロール−２−カルボクスアミドおよび４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボクスアミド類似体
式（Ｘ）の化合物（最初に上記で規定したとおり）または方法（Ｇ）の工程（ｖｉｉｉ）によって生成した中間体４−アミノ−５−シアノ−１Ｈ−ピラゾールのシアノ基を、簡便にはジメチルスルホキシド中の過酸化水素および炭酸カリウムとの反応によってカルボクスアミド基に変換し、続いて、得られた生成物を使用されているＯ−およびＮ−保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によって完全に脱保護する。
【０１３９】
方法（ＡＢ）：３−（チオ）カルバモイルピロールおよび４−（チオ）カルバモイル−１Ｈ−ピラゾール
式（Ｖ）もしくは式（Ｘ）の化合物（上記で最初に規定したとおり）、または方法（ＡＡ）で製造された保護カルボクスアミド−中間体、または方法（Ｆ）の工程（ｖｉ）によって生成された中間体エチル４−アミノ−３−置換−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレートを式ＲＮＣＯまたはＲＮＣＳ（ここでＲは式（Ｉ）の化合物で規定したとおり）のイソシアネートまたはイソチオシアネートと反応させ、続いて、得られた生成物を使用されているＯ−およびＮ−保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によって完全に脱保護する。
【０１４０】
方法（ＡＣ）：３−アミノピロール−２−カルボン酸および４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸類似体のエステル
式（Ｉａ）の化合物（この場合ＥはＣＯ2Ｈ）のカルボン酸基をエステルに変換する。これはエステル化について周知の多数の方法によって実施できる。簡便には、エステルは、アルコールの酸性溶液（例えば塩化水素エタノール）中でカルボン酸を反応させることによって生成できる。
【０１４１】
方法（ＡＤ）：３−アシルアミノピロールおよび４−アシルアミノ−１Ｈ−ピラゾール
式（Ｖ）または（Ｘ）の化合物（上記で最初に規定したとおり）、または方法（Ｆ）の工程（ｖｉ）によって生成した中間体エチル４−アミノ−３−置換−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレートを、アシル化剤（例えばベンゾイルクロリドのようなアシルクロリド、無水酢酸のような酸無水物）と塩基（例えばトリエチルアミン、炭酸カリウムまたはピリジン）の存在下で反応させ、続いて、得られた生成物を使用されているＯ−およびＮ−保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によって完全に脱保護する。
【０１４２】
方法（ＡＥ）：Ｎ−モノ−およびＮ，Ｎ−ジ−置換３−アミノ−ピロール−２−カルボクスアミドおよび４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボクスアミド類似体
式（Ｉａ）の化合物（ここでＥはＣＯ2Ｈ）のカルボン酸基をアミドに変換する。簡便には、アミドは、第一または第二アミンによるカルボン酸のカルボジイミド誘発縮合（例えばＮ，Ｎ−ジシルコヘキシカルボジイミドを用いる）によって生成できる。
【０１４３】
方法（ＡＦ）：Ｎ−モノ−およびＮ，Ｎ−ジ−置換３−アミノ−ピロール−２−カルボクスアミドおよび４−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボクスアミド類似体
式（Ｖ）の化合物（上記で最初に規定したとおり）、または方法（Ｆ）の工程（ｖｉ）によって生成した中間体エチル４−アミノ−３−置換−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレートを第一または第二アミンと縮合させ、さらに得られた生成物を使用されているＯ−およびＮ−保護基に応じて酸触媒もしくはアルカリ触媒加水分解またはアルコール分解または触媒性水素添加分解によって完全に脱保護する。
方法（Ｈ）、（Ｉ）、（Ｊ）、（Ｋ）および（Ｗ）に概略した方法は同様に式（Ｉａ）の化合物の合成に適用可能で、１，４−イミノ−ペンチトール部分に変化を有する類似体を生成できることは理解されよう。
【０１４４】
方法（ＡＧ）：アシルオキシメチルエステルプロドラッグ
式（Ｉ）または式（Ｉａ）の化合物の５−ホスフェートエステルを塩基（簡便には炭酸水素ナトリウム水溶液）の存在下でベンジルクロロホルメートと反応させ、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル誘導体を生成する。この誘導体を式ＲＣＯ2ＣＨ2Ｘ（ここでＲはアルキル基、例えばメチル、エチル、プロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルで、Ｘはクロリド、ブロミドまたはヨージド）のアシルオキシハライドと塩基の存在下で反応させ、５−ホスフェートビス（アシルオキシメチル）エステルを生成する。アセトキシメチルブロミドおよびジメチルホルムアミド中のジイソプロピルエチルアミンを用いるアセトキシメチルエステルの生成に適した条件は、以下の文献で見つけることができる：Kruppa et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 7:945(1997）。
【０１４５】
所望する場合、例えば前述のＮ−ベンジルオキシカルボニル誘導体を反応溶媒に十分に溶解できない場合には、この誘導体は、テトラブチルアンモニウムブロミドの存在下でアシルオキシメチルハライドとの反応の前に、文献（Kang et al., Nucleosides Nucleotides 17:1089(1998)）に記載された方法にしたがって、先ずメタノール中のトリブチルチンメトキシドとの反応によって対応するスタニル中間体、例えばビス（トリブチルスタニル）ホスフェート誘導体に変換してもよい。
【０１４６】
そのような５−ホスフェート基から、対応するビス（アシルオキシメチル）エステルへの変換は、所望する場合は式（Ｉ）または式（Ｉａ）の化合物のＯ−またはＮ−保護誘導体を、当該保護基をその後強い酸性または強い塩基性条件を用いることなく除去できる場合にかぎり利用して達成できることは理解されよう。典型的にはこれは、脱保護に水素添加分解条件を使用することを必要とし、したがってＯ−およびＮ−ベンジル、−ベンジルオキシメチルまたは−ベンジルオキシカルボニル基が好ましい。
【０１４７】
他の方法
本発明の化合物は、当業者には明らかなように他の方法によってもまた製造できる
【０１４８】
他の態様
本発明の化合物は遊離塩基の形としても塩の形としても共に有用である。" 医薬的に許容できる塩”という用語は、無機または有機酸に由来する無毒な塩に用いることを意図し、これには、例えば以下の酸に由来する塩が含まれる：塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、乳酸、フマール酸、コハク酸、酒石酸、グルコン酸、クエン酸、メタンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸。
【０１４９】
本発明の化合物は、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、ヌクレオシドヒドロラーゼ、および／またはホスホリボシルトランスフェラーゼの強力な阻害剤である。例えば、式（Ｉｂ）および式（Ｉｃ）の化合物のＩＣ50値は、ウシ脾臓ＰＮＰおよびヒト赤血球ＰＮＰの両方に対して０．１ｎＭ未満である。下記の実施例は、本阻害剤の有効性についてさらに詳細な説明を提供する。プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害活性は、プリン基質としてイノシンを用いる共役キサンチンオキシダーゼによって決定できる（H.M. Kalckar, J., Biol. Chem. 167:429-443(1947))。プリンホスホリボシルトランスフェラーゼ活性は、イノシン５’−ホスフェートを基質として用いる同じアッセイで検出される。緩徐な阻害剤結合開始は、文献（Merkler et al., Biochemistry 29:8358-64(1990))に記載された方法を用いて検出できる。寄生虫のヌクレオシドヒドロラーゼ活性は、とりわけＰＣＴ国際特許出願公告第ＷＯ９７／３１００８号およびその中に引用された文献に記載された方法によって測定できる。
【０１５０】
本発明の阻害剤の有効性は、血中および哺乳類組織中のＰＮＰの比較的高い活性のゆえに従来技術を越える重要な利点を提供する。上記で述べたように、９−（３−ピリジルメチル）−９−デアザグアニンの必要な投与量は成人の１回の投与につき３．５グラムのオーダーである。本発明は、極めて少量の化合物が要求されるという利点を提供する。これは、経費節減を可能にし、さらに望ましくない副作用を減少させるであろう。
【０１５１】
投与されるべき活性成分の量は、患者の性状並びに処置される疾患の性状および程度にしたがって大きく変動するであろう。典型的には、成人の用量は１ミリグラム未満から１０００ミリグラム、好ましくは０．１から１００ミリグラムの範囲であろう。活性化合物は、通常の医薬担体とともに投与でき、経口的、注射によりまたは局所的に投与されるであろう。
【０１５２】
好ましい投与ルートは経口投与である。このルートによる投与の場合、化合物は固形または液状調製物、例えば錠剤、カプセル、粉末、溶液、懸濁液および分散剤として製剤化される。本明細書に記載しなかった他の経口投与形の如き調製物は当技術分野で周知である。好ましい実施形態では、本発明の化合物は、通常の錠剤用主剤（例えばラクトース、スクロース、およびトウモロコシ澱粉）と結合剤、崩壊剤および潤滑剤とを合わせて錠剤化される。これらの賦形剤は当技術分野で周知である。結合剤は例えばトウモロコシ澱粉またはゼラチンで、崩壊剤はジャガイモ澱粉またはアルギン酸で、潤滑剤はステアリン酸マグネシウムであろう。他の成分、例えば着色剤および香料も包含させることができる。
【０１５３】
本発明で使用される液状形は、水またはエタノールのような担体を含み、さらに他の薬剤、例えば医薬的に許容できる界面活性剤または懸濁剤を含んでもよく、また含まなくてもよい。
【０１５４】
本発明の化合物はまた、生理的に許容できる希釈剤、例えば水または食塩水中で注射によって投与してもよい。希釈剤は、１つまたは２つ以上の他の成分、例えばエタノール、プロピレングリコール、油または医薬的に許容できる界面活性剤を含むことができる。
【０１５５】
本発明の化合物は皮膚または粘膜に適用できる。それらはクリーム中の成分として含まれるであろう。当該クリームは、皮膚または粘膜の通過を補助するために、好ましくは医薬的に許容できる溶媒を含む。適切なクリーム用主剤は当技術分野で周知である。
【０１５６】
本発明の化合物は徐放系の手段によって投与できる。例えば、本発明の化合物は徐々に溶解する錠剤または、天然もしくは合成ポリマーに由来する固体または多孔性もしくはマトリックス体を含むカプセルに包含させることができる。
【０１５７】
［実施例］
以下の実施例は本発明をさらに説明する。溶媒の比率は容量による。
【０１５８】
実施例１−  （１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールの調製
実施例１．１
ペンタン（４０ｍｌ）中の５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（Furneaux et al., Tetrahedron 53（1997）2915およびその中の参考文献）（２．０ｇ）の溶液をＮ−クロロスクシニミド（１．２ｇ）とともに１時間攪拌した。固体および溶媒を除去し、残渣をドライテトラヒドロフラン（４０ｍｌ）中に溶解して、−７８℃に冷却した。リチウムテトラメチルピペリジン（２５ｍｌ、テトラヒドロフラン中に０．４Ｍ）の溶液を徐々に滴下した。次にその結果生じた溶液をカニューレを介して−７８℃のリチウム化アセトニトリルの溶液［−７８℃のドライテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）中のブチルリチウム（２９．８ｍｌ、４１．８ｍｍｏｌ）の溶液に滴下し、その後４５分間攪拌し、次にテトラメチルピペリジン（０．６７ｍｌ、４ｍｍｏｌ）を付加することにより調製］に付加した。反応混合物を１５分間攪拌した後、水で制止して、水とクロロホルムの間に分配した。有機相を乾燥し、濃縮させた後、クロマトグラフィーは、（１Ｓ）−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１−Ｃ−シアノメチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（１）（０．８３ｇ）を生じた。
【０１５９】
実施例１．２
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（０．５９ｇ）を含有するジクロロメタン（２０ｍｌ）中の実施例１．１からの生成物（０．８０ｇ）の溶液を、室温で１６時間攪拌した。溶液を濃縮した後、クロマトグラフィーは、（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１−Ｃ−シアノメチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（２）（０．８９ｇ）を生じた。
【０１６０】
実施例１．３
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍｌ）中の実施例１．２からの生成物（０．８８ｇ）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブトキシビス（ジメチルアミン）メタン（１．５ｍｌ）を付加し、溶液を６５〜７０℃で１時間加熱した。トルエン（２０ｍｌ）を付加し、溶液を水で洗浄（ｘ３）して、脱水し、濃縮乾燥した。残渣を室温でテトラヒドロフラン／酢酸／水（１：１：１  ｖ／ｖ／ｖ、４０ｍｌ）に溶解した。１．５時間後、クロロホルム（５０ｍｌ）を付加し、混合物を水（ｘ２）、水性炭酸水素ナトリウムで洗浄し、次に脱水し、蒸発乾燥した。残渣のクロマトグラフィーは、（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１−Ｃ−（１−シアノ−２−ヒドロキシエテニル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（３）（０．６８ｇ）を生じた。
【０１６１】
実施例１．４
グリシンヒドロクロリドエチルエステル（０．７６ｇ）およびナトリウムアセテート（０．９ｇ）を、メタノール（１０ｍｌ）中の実施例１．３の生成物（０．５１ｇ）の攪拌溶液に付加した。混合物を室温で１６時間攪拌し、次に濃縮乾燥した。残渣のクロマトグラフィーは、（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１−Ｃ−［１−シアノ−２−（エトキシカルボニルメチルアミノ）エテニル］−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（４）（０．４８ｇ）をジアステレオマー混合物として生じた。
【０１６２】
実施例１．５
１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（１．５ｍｌ）およびベンジルクロロホルメート（０．７４ｍｌ）を含有するドライジクロロメタン（１２ｍｌ）中の実施例１．４からの生成物（０．２８ｇ）の溶液を８時間加熱還流した後、冷却し、希釈水性ＨＣｌ、水性炭酸水素ナトリウムで洗浄し、乾燥、濃縮した。残渣のクロマトグラフィーは、（１Ｓ）−１−Ｃ−［３−アミノ−１−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−２−エトキシカルボニル−４−ピロリル］−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（５）（０．２２ｇ）を生じた。
【０１６３】
実施例１．６
エタノール（１０ｍｌ）中の実施例１．５からの生成物（０．２２ｇ）の溶液を、水素雰囲気中で１０％Ｐｄ／Ｃ（５０ｍｇ）とともに３時間攪拌した。固体および溶媒を除去し、残渣を、ホルムアミドアセテート（０．４０ｇ）を含有するエタノール（１０ｍｌ）中に溶解し、溶液を８時間、加熱還流した。溶媒を除去し、残渣のクロマトグラフィーは、（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−［４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル］−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（６）（１５６ｍｇ）を生じた。
【０１６４】
実施例１．７
トリフルオロ酢酸（３ｍｌ）中の実施例１．６からの生成物（６６ｍｇ）の溶液を、室温で一夜放置した。溶液を濃縮し、水中の残渣の溶液をクロロホルムで洗浄（ｘ２）した後、蒸発させた。残渣をメタノールに溶解し、溶液がｐＨ〜７になるまでアンバーリストAmberlystＡ２１塩基樹脂で処理した。固体および溶媒を除去し、残渣を水に溶解して、余分量の水性ＨＣｌで処理した後、凍結乾燥した。エタノールによる残渣の粉砕は、（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール（７）ヒドロクロリド塩を白色固体（２５ｍｇ）として生じた。９０％エタノールから再結晶化し、結晶固体は黒ずんだが、しかし３００℃より低い温度では溶融しなかった。ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＣｌによるＤ2Ｏ、δ  ｐｐｍ）：13Ｃ（３３．２ｐｐｍでの内部アセトンと比較して）58.1（C-1’）,61.4（C-5’）,68.8（C-4’）,73.3（C-3’）,76.7（C-2’）,107.5（q）,121.4（q）,133.5（C-2）,135.0（q）,148.0（C-6）および155.4（q）;1Ｈ（２．２０ｐｐｍでの内部アセトンと比較して）,3.90（H-4’）,3.96（m, H-5’,5”）,4.44（dd,H-3’,J2',3',5.4Hz, J3',4',3.2Hz）,4.71（dd, J1',2', 9.0Hz,H-2’）,5.00（d, H-1’）,8.00（s, H-6）および9.04（s, H-2）.
【０１６５】
【化３３】
0004451983.tif 000022
【０１６６】
実施例２−  （１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールの調製
実施例２．１
エタノール中の（１Ｓ）−１−Ｃ−［３−アミノ−１−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−２−エトキシカルボニル−４−ピロリル］−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（実施例１．５）（０．８７ｇ）の溶液を水素雰囲気中で１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）とともに１．５時間攪拌した。固体および溶媒を除去し、残渣（０．６１Ｇ）を生じた。ジクロロメタン（１０ｍｌ）中のこの残渣の一部（０．１２ｇ）の０℃の溶液に、ジクロロメタン中のベンゾイルイソチオシアネートの溶液（１ｍｌ中に３１ｍＬ）を付加した。０．５時間後、溶液を室温に温めて、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（８０ｍＬ）およびヨウ化メチル（１００ｍＬ）を付加した。さらに０．５時間後、反応溶液をシリカゲルカラムに直接適用し、溶離して、０．１６ｇの（１Ｓ）−１−Ｃ−［３−（Ｎ−ベンゾイル−Ｓ−メチルイソチオカルバモイル）アミノ−２−エトキシカルボニル−４−ピロリル］− Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトールを得た。
【０１６７】
実施例２．２
アンモニアで飽和したメタノール中のこのＳ−メチルイソチオカルバモイルアミノ誘導体（０．２０ｇ）の溶液を封管中で９５℃で１６時間加熱した。溶媒を除去し、残渣のクロマトグラフィーにより（１Ｓ）−１−Ｃ−［２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル］− Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトールを得た。
【０１６８】
実施例２．３
トリフルオロ酢酸中のこの保護化イミノリビトール（６４ｍｇ）の溶液を、室温で１６時間放置した。溶媒を除去し、水性メタノール中の残渣の溶液（１：１）を、溶液がｐＨ〜７になるまでアンバーリストAmberlystＡ２１塩基樹脂で処理した。固体および溶媒を除去し、水中の残渣の溶液を余分量のＨＣｌで処理した後、濃縮乾燥した。エタノールによる粉砕は、（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド塩（２４ｍｇ）を生じ、これは約２６０℃で黒ずんだが、しかし３００℃より低い温度では溶融しなかった。ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＣｌによるＤ2Ｏ、δ  ｐｐｍ）：13Ｃ（３３．１ｐｐｍでの内部アセトンと比較して）58.0（C-1’）,61.4（C-5’）,68.6（C-4’）,73.3（C-3’）,76.3（C-2’）,105.2（q）,114.8（q）,132.1（C-6）,135.3（q）,153.4（q）および156.4（q）;1Ｈ（２．２０ｐｐｍでの内部アセトンと比較して）,3.87（m, H-4’）,3.94（m, H-5’,5”）,4.40（dd,J2',3', 5.0Hz, J3',4',3.2Hz, H-3）,4.65（dd, J1',2', 9.1Hz,H-2’）,4.86（d, H-1’）および7.71（s, H-6）.
【０１６９】
実施例３〜２４
一般的説明に開示された方法により、以下の化合物が調製され得る：
３．（１Ｒ）−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールが、方法（Ｈ）を用いて実施例１の生成物から調製され得る。
４．（１Ｓ）−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例１の生成物から調製され得る。
５．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例１の生成物から調製され得る。
【０１７０】
６．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｍ）を用いて実施例１または２の生成物から調製され得る。
７．（１Ｒ）−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールが、方法（Ｈ）を用いて実施例６の生成物から調製され得る。
８．（１Ｓ）−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例６の生成物から調製され得る。
９．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例６の生成物から調製され得る。
１０．（１Ｒ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールが、方法（Ｈ）を用いて実施例２の生成物から調製され得る。
【０１７１】
１１．（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例２の生成物から調製され得る。
１２．（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例２の生成物から調製され得る。
１３．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｄ）、（Ｅ）および（Ｆ）により調製され得る。
１４．（１Ｒ）−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールが、方法（Ｈ）を用いて実施例１３の生成物から調製され得る。
１５．（１Ｓ）−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例１３の生成物から調製され得る。
【０１７２】
１６．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（７−ヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例１３の生成物から調製され得る。
１７．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｍ）を用いて実施例１３の生成物から調製され得る。
１８．（１Ｒ）−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールが、方法（Ｈ）を用いて実施例１７の生成物から調製され得る。
１９．（１Ｓ）−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例１７の生成物から調製され得る。
２０．（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（５，７−ジヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例１７の生成物から調製され得る。
【０１７３】
２１．（１Ｓ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｄ）の変法を用いて調製され得るが、この場合、式ＸＩｂまたはＸＩｃの化合物は、５位の水素原子が保護化アミノ基に置き換えられている対応化合物により置換される。
２２．（１Ｒ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，２，４−トリデオキシ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールが、方法（Ｈ）を用いて実施例２１の生成物から調製され得る。
２３．（１Ｓ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−イミノ−１，４，５−トリデオキシ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例２１の生成物から調製され得る。
２４．（１Ｓ）−１−Ｃ−（５−アミノ−７−ヒドロキシピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−３−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−５−メチルチオ−Ｄ−リビトールが、方法（Ｋ）を用いて実施例２１の生成物から調製され得る。
【０１７４】
実施例２５−  酵素阻害結果
実施例２５．１
プリンヌクレオシドホスホリラーゼの阻害。プリンヌクレオシドホスホリラーゼの阻害剤としての実施例１および２の生成物（それぞれ化合物ＩｂおよびＩｃ）の有効性を査定するために、酵素アッセイを実施した。アッセイは、ヒトＲＢＣおよび仔ウシ脾臓プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（例えばSigma, 純度９０％）を基質としてのイノシンとともリン酸緩衝液の存在下で使用し、キサンチンオキシダーゼ連結(coupled)反応を用いて、放出されたヒポキサンチンを検出した。
【０１７５】
材料。イノシンはSigmaから入手した。キサンチンオキシダーゼ（ＥＣ  １．１．３．２２、バターミルク）、ヒト赤血球（凍結乾燥粉末として）およびウシ脾臓（３．２Ｍアンモニウムスルフェート中）プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（ＥＣ  ２．４．２．１）は、Sigmaから購入した。粉末として得られたヒトプリンヌクレオシドホスホリラーゼを、１００ｍＭナトリウムホスフェート緩衝液（ｐＨ７．４）中で再構築し、急速凍結して、−８０℃で保存した。Uvikon 933二重紫外線／可視光線分光光度計（Kontron Instruments, San Diego, CA）上で、運動実験を実施した。
【０１７６】
タンパク質濃度。２８０ｎｍでＥ1cm１％＝９．６４［Stoelkler et al., Biochemistry, 32（1978）278］および３２，０００のモノマー分子量［Williams et al., Nucleic Acids Res. 12（1984）5779］を用いて、定量的紫外線吸光度に基づき、両アイソザイムについてタンパク質濃度を決定した。
【０１７７】
酵素アッセイ。連結キサンチンオキシダーゼ法（Kalckar, J. Biol. Chem. 167（1947）429; Kim et al., J. Biol. Chem., 243（1968）1763）を用いて分光測光的に酵素をアッセイした。２９３ｎｍで尿酸の生成をモニタリングした。４０ｍＭイノシン溶液は、尿酸およびリボース１−ホスフェートへのイノシンの完全転化時に、２９３ｍで０．５２３単位の吸光度変化を生じた。別記しない限り、標準アッセイ反応は、最終容量１．０ｍＬ中にイノシン（５００μＭ）、カリウムホスフェート（５０ｍＭ、ｐＨ７．５）、キサンチンオキシダーゼ（０．０６単位）およびプリンヌクレオシドホスホリラーゼを含有した。
【０１７８】
三分の一部位阻害。種々の量の化合物Ｉｂを含有する６．７ｎＭウシプリンヌクレオシドホスホリラーゼの反応混合物を、３０℃で１時間、前インキュベートした。基質（４０μＭイノシン、Ｋm値の３倍）の付加により反応を開始し、３０℃でアッセイした。０．６ｎＭ阻害剤（［化合物Ｉｂ］／［プリンヌクレオシドホスホリラーゼ］の濃度比＝０．０９）を含有する反応は、２９％阻害を示し、１ｎＭ阻害剤（［化合物Ｉｂ］／［プリンヌクレオシドホスホリラーゼ］＝０．１５）を含有するものは４４％阻害を示したが、一方３ｎＭ阻害剤（［化合物Ｉｂ］／［プリンヌクレオシドホスホリラーゼ］＝０．４４）を含有する反応は９６％の速度低減を有し、６ｎＭ阻害剤（［化合物Ｉｂ］／［プリンヌクレオシドホスホリラーゼ］＝８７％）を含有するものは９９％阻害を示した。これらの相互作用を図１に示す。
【０１７９】
プリンヌクレオシドホスホリラーゼは、３つのタンパク質サブユニットの各々に触媒部位を有するホモトリマーであることが知られている［Stoelkler et al., Biochemistry 32, （1978）278］。酵素サブユニットの濃度が６．７ｎＭである場合、プリンヌクレオシドホスホリラーゼの５０％阻害は約１．１ｎＭで起こる。この結果は、化合物Ｉｂがしっかり結合し、トリマー酵素の一部位との化合物Ｉｂの結合が完全阻害をもたらす、ということを立証する。
【０１８０】
プリンヌクレオシドホスホリラーゼと化合物Ｉｂとの複合体からの活性回復。プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（６．７μＭ）およびプリンヌクレオシドホスホリラーゼ活性の９６％を阻害するのに十分な化合物Ｉｂ（３μＭ）を３０℃で１時間インキュベートした。少量のこの溶液を、キサンチンオキシダーゼ（０．０６単位）を含有する５００μＭイノシンの緩衝化溶液中で１０００倍に希釈した。時間中の尿酸の生成をモニタリングし、進行曲線は図２の運動モデルに適合した。
【０１８１】
阻害剤を含有しない大量の溶液中での阻害化プリンヌクレオシドホスホリラーゼの希釈は、阻害されたプリンヌクレオシドホスホリラーゼからの化合物Ｉｂの放出速度を提供した。図２に示した実験条件下では、新しい酵素−阻害剤平衡の達成速度は５０００秒であり、緩慢緊密結合阻害剤を示している［Morrison and Walsh, Advances Enzymol. 61（1988）201］。速度定数ｋ6は、これらの実験条件下での複合体の解離に関する見掛けの一次速度定数の概算値で、この例では２．９ｘ１０-4秒-1である。
【０１８２】
阻害メカニズム。緩慢緊密結合阻害剤は一般に、動態論メカニズムに従う［Morrison and Walsh, Advances Enzymol. 61（1988）201］：
【０１８３】
【化３４】
0004451983.tif 000023
【０１８４】
式中、ＥＩは迅速に生成され、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ（Ｅ）と化合物Ｉｂ（Ｉ）の初期衝突複合体は、徐々により緊密な複合体ＥＩ*に異性化する。
【０１８５】
生成物形成曲線は、以下の積分速度等式１で記載される：
Ｐ＝ｖsｔ＋（ｖ0−ｖs）（１−ｅ-kt）／ｋ  ・・・（１）
式中、Ｐは生成物ヒポキサンチン（本アッセイ系では尿酸として観察される）の量であり、ｔは時間であり、ｖ0は初期速度であり、ｖsは最終定常速度であり、そしてｋは等式２で示される全体的（観察される）速度定数である：
ｋ＝ｋ６＋ｋ５[(Ｉ／Ｋi)／(１＋(Ｓ／Ｋm)＋(Ｉ／Ｋi））］・・・（２）
式中、Ｋmはプリンヌクレオシドホスホリラーゼに関するミカエリス複合体であり、Ｓはイノシン濃度であり、Ｉは化合物Ｉｂの濃度であり、そしてＫiは下記と同様である。緊密結合複合体の生成速度は、ｋ５であり、その解離速度はｋ６である。標準競合阻害に関する阻害定数（ｖ0に影響を及ぼす）であるＫiおよび全体的阻害定数（ｖsに影響を及ぼす）であるＫi*は以下のように定義される：
Ｋi＝ｋ４／ｋ３
Ｋi*＝Ｋi［ｋ6／（ｋ5＋ｋ6）］
【０１８６】
Ｋi*の決定。一連の阻害剤濃度での反応に関するｖsを測定し、ｖs対［Ｉ］をプロットし、そして曲線を競合阻害等式３に適合させることにより、Ｋi*を決定した：
【０１８７】
ｖs＝ＶmaxＳ／[Ｋm(１＋Ｉ／Ｋi*)＋Ｓ］・・・（３）
式中、Ｖmaxはプリンヌクレオシドホスホリラーゼに関する非阻害化反応速度であり、そして残りの項は前記と同様である。この分析の結果は、化合物Ｉｂに関する２．５±０．２ｘ１０-11Ｍ（２５±２ｐＭ）という全体的有効阻害定数（Ｋi*）を示す（図３）。
【０１８８】
Ｋi、ｋ5およびｋ6の近似値。緩慢な開始後に完全な阻害を引き起こす阻害剤濃度において、ｖ0はＩの一関数としてほとんど変化しないため、ｖ0および競合阻害等式（前記）から直接Ｋを算出するのは、化合物Ｉｂに関して難しい。この結果は、初期解離定数Ｋiが平衡解離定数Ｋi*よりはるかに大きいことを立証する。
【０１８９】
等式２を用いて、ｋ（等式１の曲線適合値から得られる値、図４）から、ｋ5およびＫiの近似値を算出した。ｋ6＜＜ｋ5［（Ｉ／Ｋi）／（１＋（Ａ／Ｋm）＋（Ｉ／Ｋi）］という知識を用いて、１／ｋ対１／［Ｉ］の二重逆数プロットがｙ切片＝１／ｋ5と（１／ｋ5）／［（Ｋi／ｋ5）＋（Ａ／Ｋm）］のｘ切片とを有する直線を生じるように、等式２は並べ換えられる。これらの値の等式２への置換がｋ6に関する近似値を生じる。図４は、５００μＭイノシンの存在下で、低濃度の酵素（０．８ｎＭ）が２００ｎＭの化合物Ｉｂと競合する場合に起こる緩慢開始緊密結合阻害を実証する。これらの条件下では、図４において阻害開始に関する見掛けの一次速度定数は２６×１０-4秒-1であった。
【０１９０】
図４の結果は、ヒト血清または組織中に認められる１００倍を上回るイノシン濃度でも、化合物Ｉｂは、緩慢開始阻害の数分後に酵素の９９％阻害を生じ得る、ということを立証する。図１〜４に示したタイプの実験の分析に基づいて、化合物Ｉｂとのウシプリンヌクレオシドホスホリラーゼに関する実験的な概算解離定数および速度を以下に示す：
Ｋm＝１５μＭ
Ｋi＝１９±４ｎＭ
Ｋi*＝２５±２ｐＭ
ｋ5＝１．４±０．２×１０-2秒-1
ｋ6＝１．８±０．５×１０-5秒-1
【０１９１】
ヒトプリンヌクレオシドホスホリラーゼの阻害。ウシプリンヌクレオシドホスホリラーゼの相互作用に関して前記したのと同様の試験を、ヒト赤血球からのプリンヌクレオシドホスホリラーゼ（ＰＮＰ）を用いて実施した。ヒトおよびウシＰＮＰと化合物Ｉｂとの相互作用に関する全体的阻害定数Ｋi*の値を以下に示す：
【０１９２】
0004451983.tif 000024
【０１９３】
化合物Ｉｃは化合物Ｉｂよりも有効なヒト酵素に対する阻害剤であるが、しかし化合物Ｉｂはウシ酵素の阻害ではわずかにより有効である。化合物ＩｂおよびＩｃは、従来報告されている化合物よりも両ＰＮＰ酵素の阻害において有効である。
【０１９４】
プリンヌクレオシドホスホリラーゼの阻害剤としての化合物ＩｂおよびＩｃの要約。阻害剤は、通常は、生体における機能的阻害を引き起こすようすべての触媒部位に結合することにより機能する。前記の三分の一部位阻害および緩慢開始緊密結合阻害は、化合物ＩｂおよびＩｃが、大量の余分な基質の存在下で機能することができるプリンヌクレオシドホスホリラーゼの非常に強力な阻害剤であることを示す。
動態論定数の決定方法は、Merkler, D.J., Brenowitz, M., and Schramm, V.L. Biochemistry 29（1990）8358-8364に詳細に示されている。
【０１９５】
実施例２５．２
ＰＮＰ阻害剤としての化合物Ｉｂの経口利用可能性およびin vivo効率。１０-7ｍｏｌの化合物Ｉｂ（２７μｇ）の１回経口用量を、食物とともに若い成熟雄マウスに投与した。図５に示した時点で尾から血液試料を採取した。０．２％トリトンＸ−１００（最終濃度０．１５％）を含有する食塩水中への血液の希釈は、血球溶解および酵素放出を生じた。前記のように基質としてイノシンおよびホスフェートを用いて、ＰＮＰ活性を測定した。結果は、化合物Ｉｂが血液中に吸収され、血球に取り込まれて、１４分の半減期（ｔ1/2）を有するＰＮＰ阻害を引き起こす、ということを立証した。血液試料を長期間にわたり採取し、ＰＮＰ活性に関して分析して、血中ＰＮＰの阻害剤に関し化合物Ｉｂについて生物学的ｔ1/2を決定した。血中ＰＮＰの活性は、１００時間のｔ1/2で回復した。これらの結果は、化合物Ｉｂが経口的に利用可能であり、長期間の生物学的有効性を有することを立証する。これらの試験は、本明細書中に記載した化合物が有望な薬理学的寿命を有することを立証する。
【０１９６】
化合物ＩｂおよびＩｃによる原生動物ヌクレオシドヒドロラーゼの阻害。原生動物寄生虫は、イノシンのようなプリンヌクレオシドの加水分解を用いてヒポキサンチンのようなプリン塩基を提供して、ＲＮＡおよびＤＮＡ合成に不可欠な前駆体を提供する。原生動物寄生虫はプリン栄養要求体である。前記と同様の阻害方法を用いて、クリチジア属のCrithidia fasciculataからのヌクレオシドヒドロラーゼ［Parkin, et al., J. Biol. Chem. 266（1991）20658］およびトリパノソーマ属のTrypanosoma brucei bruceiからのヌクレオシドヒドロラーゼ［Parkin, J. Biol. Chem. (1996）21713］を、化合物ＩｂおよびＩｃによる阻害に関して試験した。化合物ＩｂによるC. fasciculataからのヌクレオシドヒドロラーゼの阻害は、図６に例示されている。同様の試験は、化合物ＩｂおよびＩｃが、C. fasciculataからの、ならびにT. brucei bruceiからのヌクレオシドヒドロラーゼに対するナノモル阻害剤であることを示した。化合物Ｉｃ（Ａ＝ＣＨ、Ｂ＝ＮＨ2、Ｄ＝Ｈ、Ｘ＝ＯＨ、Ｙ＝Ｈ、Ｚ＝ＯＨ）は両酵素のナノモル阻害剤であり、化合物Ｖａ（ＯＲ＝ＮＨ2、ｚ’＝ＯＨ、ＣＯ2Ｂｕ＝ＨまたはＨ2、そしてイソプロピリジン基は除去されて２個のヒドロキシル基を生成する）も両酵素のナノモル阻害剤である。結果を以下に要約する：
【０１９７】
【表１】
0004451983.tif 000025
【０１９８】
阻害剤は基質との直接競合で結合し、したがってＫi阻害定数は直接競合阻害値である。化合物は、容易に許容可能な薬理学的用量で原生動物寄生虫を阻害するのに十分な阻害をプリンヌクレオシドヒドロラーゼに提供する。
【０１９９】
使用される方法および材料は、基質としてｐ−ニトロフェニルリボシドを用いる公開済みＰＣＴ国際出願WO97/31008に記載されている。
【０２００】
実施例２５．３
化合物ＩｂおよびＩｃの５’−ホスフェートによるプリンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＰＰＲＴ）の阻害。原生動物寄生虫、ヒト組織および腫瘍は、プリン塩基の再生のためにＰＰＲＴを用いる。ＰＰＲＴ活性の妨害は、これらの系においてプリン代謝を崩壊すると期待される。ヒトおよびマラリア起源のＰＰＲＴの阻害に関して、５’−ホスホリル化化合物ＩおよびＩｃを分析した。マラリアＰＰＲＴを用いた化合物Ｉｂの５’−ホスフェートに関する緩慢開始阻害曲線を図７に示す。マラリアＰＰＲＴを用いた化合物Ｉｂの５’−ホスフェートに関するＫi*決定を図８に示す。化合物ＩｂおよびＩｃの５’−ホスフェートを用いたヒトおよびマラリアの両酵素の分析を以下に要約する。
【０２０１】
【表２】
0004451983.tif 000026
【０２０２】
十分な阻害試験は、阻害剤がＩＭＰと競合的であることを示した。両酵素に関する両阻害剤のナノモル阻害定数は、これらの阻害剤の容易に許容可能な薬理学的用量である。ヒトおよび／または寄生生物のヌクレオシドキナーゼ活性は、本明細書中に記載した１つ又はそれ以上の化合物をそれぞれの５’−ホスフェートに転化し得る、と考えられる。それにより、これらの化合物は、ＰＰＲＴ活性の細胞内妨害のための薬理学的用量の５’−ホスフェートの前駆体を提供する。化合物ＩおよびＩｃの細胞取込みは、マウスで、そしてヒト赤血球で実証されている。
【０２０３】
実施例２６−錠剤
実施例１の生成物４ｇを、ラクトース９６ｇおよびデンプン９６ｇと混合する。スクリーニングし、マグネシウムステアレート２ｇと混合した後、混合物を圧縮して、２５０ｍｇ錠剤を得る。
【０２０４】
実施例２７−ゼラチンカプセル
実施例１の生成物１０ｇを微粉砕し、タルク５ｇおよび微粉砕ラクトース８５ｇと混合する。粉末を硬質ゼラチンカプセルに充填する。
【０２０５】
実施例２８−  （１Ｒ）−１，２，４−トリデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールの調製
【０２０６】
実施例２８．１
トリフルオロ酢酸（２０ｍｌ）中の（１Ｓ）−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１−Ｃ−シアノメチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（１．９３ｇ）の溶液を、室温で一夜放置した。溶液を濃縮し、水中の残渣の溶液をクロロホルムで洗浄（ｘ２）した後、蒸発させて、（１Ｓ）−１−Ｃ−シアノメチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール（１．０ｇ）を、トリフルオロ酢酸塩として得た。
【０２０７】
実施例２８．２
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（２．０９ｇ）を含有するメタノール（２０ｍｌ）中の実施例３．１からの粗製生成物（１．０ｇ）の溶液を、トリエチルアミンの付加により中性ｐＨに調整し、室温で１６時間攪拌した。溶液を濃縮後、クロマトグラフィーにより（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−Ｃ−シアノメチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール（０．８０ｇ）を得た。
【０２０８】
実施例２８．３
１、３−ジクロロ−１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン（０．９ｍｌ）を、０℃でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）中の実施例３．２からの生成物（０．８ｇ）およびイミダゾール（０．７０ｇ）の溶液に滴下した。その結果生じた溶液を室温に温めて、トルエンで希釈し、水（ｘ３）で洗浄して、乾燥し、濃縮した後、クロマトグラフィーにより（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−Ｃ−シアノメチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトール（１．４ｇ）を得た。
【０２０９】
実施例２８．４
チオカルボニルジイミダゾール（０．９ｇ）を含有するトルエン（２０ｍｌ）中の実施例３．３からの生成物（１．５ｇ）の溶液を、９０℃で２時間攪拌した。溶液を濃縮後、クロマトグラフィーにより（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−Ｃ−シアノメチル−１，４−ジデオキシ−２−Ｏ−［イミダゾール（チオカルボニル）］−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトール（１．８ｇ）を得た。
【０２１０】
実施例２８．５
トルエン（５０ｍｌ）中の実施例２８．４からの生成物（１．８ｇ）の溶液に、トリ−ｎ−ブチルチンヒドリド（１．０ｍｌ）を付加し、溶液を８０℃で３時間加熱した。溶液を濃縮後、クロマトグラフィーにより（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−Ｃ−シアノメチル−１，２，４−トリデオキシ−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトール（０．７４ｇ）を得た。
【０２１１】
実施例２８．６
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）中の実施例３．５からの生成物（０．７４ｇ）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブトキシ−ビス（ジメチルアミノ）メタン（１．５ｍｌ）を付加し、溶液を６５〜７０℃で１時間加熱した。トルエン（２０ｍｌ）を付加し、溶液を水で洗浄（ｘ３）し、脱水して、濃縮乾燥した。残渣を室温でテトラヒドロフラン／酢酸／水（１：１：１ｖ／ｖ／ｖ、４０ｍｌ）中に溶解した。１．５時間後、クロロホルム（５０ｍｌ）を付加し、混合物を水（ｘ２）、水性炭酸水素ナトリウムで洗浄した後、脱水し、蒸発乾燥した。残渣のクロマトグラフィーは、（１Ｒ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−Ｃ−（１−シアノ−２−ヒドロキシエテニル）−１，２，４−トリデオキシ−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトール（０．６８ｇ）を生じた。
【０２１２】
実施例２８．７
グリシンヒドロクロリドエチルエステル（０．９０ｇ）およびナトリウムアセテート（１．０ｇ）を、メタノール（１０ｍｌ）中の実施例３．６の生成物（０．６８ｇ）の攪拌溶液に付加した。混合物を室温で１６時間攪拌し、次に濃縮乾燥した。残渣のクロマトグラフィーは、（１Ｒ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−Ｃ−［１−シアノ−２−（エトキシカルボニルメチルアミノ）エテニル］−１，２，４−トリデオキシ−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトール（０．８０ｇ）をジアステレオマー混合物として生じた。
【０２１３】
実施例２８．８
１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（３．６ｍｌ）およびベンジルクロロホルメート（１．７ｍｌ）を含有するドライジクロロメタン（２０ｍｌ）中の実施例３．７からの生成物（０．８０ｇ）の溶液を一夜加熱還流した後、冷却し、希釈水性ＨＣｌを用いて次に水性炭酸水素ナトリウムを用いて洗浄し、乾燥、濃縮した。残渣のクロマトグラフィーにより、（１Ｒ）−１−Ｃ−［３−アミノ−１−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−２−エトキシカルボニル−４−ピロリル］−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，４−トリデオキシ−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトール（０．７０ｇ）を得た。
【０２１４】
実施例２８．９
エタノール（１０ｍｌ）中の実施例２８．８からの生成物（０．２８ｇ）の溶液を、還流下でホルムアミジンアセテート（０．５０ｇ）とともに８時間攪拌した。溶媒を除去し、残渣のクロマトグラフィー処理により、（１Ｒ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，４−トリデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトール（１２０ｍｇ）を得た。
【０２１５】
実施例２８．１０
トリフルオロ酢酸（２ｍｌ）中の実施例２８．９からの生成物（１２０ｍｇ）の溶液を、室温で一夜放置した。溶液を濃縮し、水中の残渣の溶液をクロロホルムで洗浄（ｘ２）した後、蒸発させた。残渣をテトラヒドロフランに溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリドトリヒドレート（２００ｍｇ）で処理して、１時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、クロマトグラフィー処理により残渣を生じ、それをメタノール性ＨＣｌ中に再溶解した。その結果生じた沈殿を濾過して、（１Ｒ）−１，２，４−トリデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールヒドロクロリド塩を白色固体（１７ｍｇ）として得た。これは黒ずんでいたが、しかし３００℃より低い温度では溶融しなかった。ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、Ｄ2Ｏ、δｐｐｍ）：13Ｃ38.8（C-2’）,53.4（C-1’）,59.3（C-5’）,69.1（C-4’）,71.5（C-3’）,107.6（q）,118.6（q）,130.4（C-2）,135.9（q）,144.6（C-6）および153.7（q）;1Ｈ2.69（dd, J 14.3Hz, J 6.4Hz, H-2’）,2.60（ddd, J 14.3Hz, J 12.2Hx, J 5.7Hz, H-2”）,3.87（m, 3H, H-4’, H-5’）,4.57（m, 1H, H-3’）,5.26（dd,1H,J12.1 Hz, J6.4Hz, H-1’）,7.80（s, H-6）および8.65（s, H-2）.ＨＲＭＳ（ＭＨ+）Ｃ11Ｈ14Ｎ4Ｏ3に関する理論値：251.1144;実測値：251.1143.
【０２１６】
実施例２９−  （１Ｒ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，２，４−トリデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールの調製
実施例２９．１
エタノール（１０ｍｌ）中の（１Ｒ）−１−Ｃ−［３−アミノ−１−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−２−エトキシカルボニル−４−ピロリル］−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，４−トリデオキシ−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトール（実施例２８．８）（０．７８ｇ）の溶液を水素雰囲気中で１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）とともに１．５時間攪拌した。固体および溶媒を除去し、残渣（０．６２ｇ）を生じた。ジクロロメタン（１０ｍｌ）中のこの残渣の０℃の溶液に、ジクロロメタン中のベンゾイルイソチオシアネートの溶液（１０ｍｌ中に０．３０ｍｌ）を付加した。０．５時間後、溶液を室温に温めて、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（０．３２ｍｌ）およびヨウ化メチル（０．７０ｍｌ）を付加した。さらに０．５時間後、反応溶液をシリカゲルカラムに直接適用し、溶離して、０．６７ｇの（１Ｒ）−１−Ｃ−［３−（１−ベンズアミド−１−メチルチオメチレンアミノ）−２−エトキシカルボニル−４−ピロリル］− Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，４−トリデオキシ−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトールを得た。
【０２１７】
実施例２９．２
アンモニア（２０ｍｌ）で飽和したメタノール中の実施例２９．１からの生成物（０．６７ｇ）の溶液を封管中で１０５℃で１６時間加熱した。溶媒を除去し、残渣のクロマトグラフィーにより（１Ｒ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，４−トリデオキシ−１，４−イミノ−３，５−Ｏ−（１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル）−Ｄ−エリスロ−ペンチトールを得た。
【０２１８】
実施例２９．３
トリフルオロ酢酸（５ｍｌ）中の実施例２９．２からの生成物（３００ｍｇ）の溶液を、室温で１６時間放置した。溶媒を除去し、残渣をテトラヒドロフランに溶解して、テトラブチルアンモニウムフルオリドトリヒドレート（２００ｍｇ）で処理して、１時間攪拌した。溶媒を除去し、残渣をメタノール（５．０ｍｌ）中に溶解して、アセチルクロリド（０．７５ｍｌ）を滴下し、反応物を室温で１６時間放置した。反応物をエーテル（２５ｍｌ）で希釈し、その結果生じた結晶を濾過して、（１Ｒ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，２，４−トリデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−エリスロ−ペンチトールヒドロクロリド塩（８９ｍｇ）を得たが、これは３００℃より低い温度では溶融しなかった。ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、Ｄ2Ｏ、ｄｐｐｍ）：13Ｃ38.8（C-2’）,53.4（C-1’）,59.3（C-5’）,69.1（C-4’）,71.5（C-3’）,107.6（q）,118.6（q）,130.4（C-2）,135.9（q）,144.6（C-6）および153.7（q）;1Ｈ2.69（dd,1H, J 14.3Hz, J 6.3Hz, H-2’）,2.63（ddd, 1H, J 14.1 Hz, J 12.3 Hz, J 5.7Hz,  H-2”）,3.88（m, 3H, H-4’, H-5’）,4.55（m, 1H, H-3’）,5.14（dd,1H,J 12.2 Hz, J6.3Hz, H-1’）および7.63（s, H-6）.
【０２１９】
実施例３０−  （１Ｓ）−１，４，５−トリデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド塩の調製
実施例３０．１
ジクロロメタン（１０ｍｌ）中の実施例１．５からの生成物（０．４５ｇ）の溶液を、トリエチルアミン（０．４５ｍｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（２０ｍｇ）そして次にメタンスルホニルクロリド（０．１ｍｌ）で処理した。溶液を１時間攪拌後、２Ｍ水性ＨＣｌ、水性炭酸水素で洗浄し、慣用的に処理した。粗製生成物を、テトラブチルアンモニウムブロミド（１．５５ｇ）を含有するトルエン（１０ｍｌ）に溶解し、溶液を１００℃で２時間加熱した。冷却溶液を水で洗浄し、クロマトグラフィー処理後に、（１Ｓ）−１−Ｃ−（３−アミノ−１−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−２−エトキシカルボニル−４−ピロリル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−ブロモ−１，４，５−トリデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（０．２７ｇ）を得た。
【０２２０】
実施例３０．２
トリエチルアミン（０．１９ｍｌ）を含有するエタノール（１０ｍｌ）中の実施例３０．１からの生成物（０．２７ｇ）の溶液を２０％Ｐｄ（ＯＨ）2／Ｃ（０．１ｇ）とともに水素雰囲気中で１６時間攪拌した。固体および溶媒を除去し、クロマトグラフィーにより（１Ｓ）−１−Ｃ−（３−アミノ−２−エトキシカルボニル−４−ピロリル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，４，５−トリデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（０．１５ｇ）を得た。
【０２２１】
実施例３０．３
ホルムアミジンアセテート（０．１５ｇ）を含有するエタノール中の実施例３０．２からの生成物（７５ｍｇ）の溶液を還流下で４時間加熱した。溶媒を除去し、クロマトグラフィーにより（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，４，５−トリデオキシ−１−Ｃ−［４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル］−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（６９ｍｇ）を得た。
【０２２２】
実施例３０．４
実施例３０．３からの生成物（６９ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（５ｍｌ）中に溶解し、溶液を室温で１６時間放置した。溶媒を除去し、５０％水性メタノール（１０ｍｌ）中の残渣の溶液を、ｐＨが〜７になるまでアンバーリストAmberlystＡ２１塩基樹脂で処理した。固体および溶媒を除去し、残渣を余分量の水性ＨＣｌで処理した後、凍結乾燥して、（１Ｓ）−１，４，５−トリデオキシ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド塩（４６ｍｇ）を得た。13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＣｌによるＤ2Ｏ、ｄ  ｐｐｍ）：155.6（C）,147.1（CH）,137.4（C）,132.6（CH）,121.0（C）,108.2（C）,76.5（C-3）,75.6（C-2）,63.2（C-4）,58.2（C-1）,18.1（C-5）.
【０２２３】
実施例３１−  （１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４，５−トリデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド塩の調製
実施例３１．１
ベンゾイルイソチオシアネートの溶液（５ｍｌのジクロロメタン中の０．４ｍｌの０．３３ｍｌ）をジクロロメタン（５ｍｌ）中の実施例５．２からの生成物（７５ｍｇ）に０℃で付加した。１時間後、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（０．０６ｍｌ）およびヨウ化メチル（０．１ｍｌ）を付加し、溶液を室温で１時間攪拌した。次に、クロマトグラフィーにより、（１Ｓ）−１−Ｃ−［３−（１−ベンズアミド−１−メチルチオメチレンアミノ）−２−エトキシカルボニル−４−ピロリル］− Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，４，５−トリデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（０．１０ｇ）を得た。アンモニアで飽和したメタノール（５ｍｌ）中のこの物質の溶液を、封管中で９５℃で１６時間加熱した後、蒸発させた。クロマトグラフィー処理により、（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，４，５−トリデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（２８ｍｇ）を得た。
【０２２４】
実施例３１．２
実施例３１．１からの生成物（２８ｍｇ）を前記の実施例３０．４と同様に処理して、（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４，５−トリデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド塩（１６ｍｇ）を得た。13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＣｌによるＤ2Ｏ、ｄ  ｐｐｍ）：156.5（C）,153.5（C）,135.8（C）,131.7（CH）,114.9（C）,105.6（C）,76.7（C-3）,75.7（C-2）,63.4（C-4）,58.1（C-1）,18.4（C-5）.
【０２２５】
実施例３２−  （１Ｓ）−１−Ｃ−（４−アミノピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド塩の調製
実施例３２．１
アミノアセトニトリル（０．１２ｇ）およびナトリウムアセテート（０．２０ｇ）を含有するメタノール（５ｍｌ）中の実施例１．３からの生成物（０．１５ｇ）の溶液を還流下で４時間加熱した後、濃縮した。クロマトグラフィーにより、（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１−Ｃ−（１−シアノ−２−シアノメチルアミノ−エテニル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（０．１２ｇ）をジアステレオマー混合物として得た。１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（０．７ｍｌ）およびベンジルクロロホルメート（０．３３ｍｌ）を含有するジクロロメタン（１０ｍｌ）中のこの物質の溶液を、還流下で１時間加熱した。慣用的処理およびクロマトグラフィーにより、（１Ｓ）−１−Ｃ−（３−アミノ−１−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−２−シアノ−４−ピロリル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（０．１２５ｇ）を得た。
【０２２６】
実施例３２．２
エタノール（１０ｍｌ）中の実施例３２．１からの生成物（０．１２５ｇ）の溶液を、水素雰囲気中で１０％Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ）とともに０．５時間攪拌した。固体を除去し、ホルムアミジンアセテート（０．２１ｇ）を濾液に付加し、溶液を１６時間、加熱還流した後、濃縮した。残渣のクロマトグラフィーは、（１Ｓ）−１−Ｃ−（４−アミノピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル］−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（８０ｍｇ）を生じた。
【０２２７】
実施例３２．３
実施例３２．２からの生成物（８０ｍｇ）を前記の実施例３０．４と同様に処理して、（１Ｓ）−１−Ｃ−（４−アミノピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド塩（３５ｍｇ）を得た。13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＣｌによるＤ2Ｏ、ｄ  ｐｐｍ）：152.1（C）,146.2（CH）,140.7（C）,135.3（CH）,115.4（C）,107.7（C）,76.0（C-2）,73.1（C-3）,68.4（C-4）,61.3（C-5）,58.3（C-1）.
【０２２８】
実施例３３−  （１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール５−ホスフェートビス−アンモニウム塩の調製
テトラゾール（０．１０５ｇ）を含有するドライアセトニトリル（６ｍｌ）中の実施例２．２からの生成物（０．１３ｇ）を、ｔ．ｌ．ｃ．が完全反応を示すまでＮ，Ｎ−ジメチル−１，５−ジヒドロ−２，４，３−ベンゾジオキサホスフェピン−３−アミンを徐々に滴下しながら、室温で攪拌した後、メタクロロペル安息香酸（６０ｍｇ）を付加し、その後、ｔ．ｌ．ｃ．が初期生成物が完全に反応したことを示すまで、さらに少量の酸化体を付加した。クロロホルムを付加し、溶液を水性炭酸水素ナトリウムで洗浄し、乾燥して、濃縮した。クロマトグラフィーによりホスフェートエステル（１９０ｍｇ）を得て、これを水素雰囲気中で１０％Ｐｄ／Ｃ（８０ｍｇ）とともに１時間攪拌した。固体および溶媒を除去し、残渣をトリフルオロ酢酸（５ｍｌ）中に溶解し、室温で１６時間放置した。溶液を蒸発させて濃縮し、水中の残渣をアンバーリストＡ１５酸性樹脂のカラムに適用した。カラムを水で、次に２Ｍ水性アンモニアで洗浄して、生成物を溶離した。濃縮し、残渣を水で粉砕して、化合物Ｉｂの５’−ホフフェートと呼ばれる（１Ｓ）−１−Ｃ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール５−ホスフェートビス−アンモニウム塩（５０ｍｇ）を得た。13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＴＦＡ−Ｄ、ｄ  ｐｐｍ）： 146.9（C）,144.0（C）,127.0（C）,124.5（CH）,105.1（C）,95.6（C）,66.3（CH）,64.0（CH）,59.2（CH）,56.2（CH2）,50.2（CH）.
【０２２９】
実施例３４−  （１Ｓ）−１，４，５−トリデオキシ−５−フルオロ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド塩の調製
実施例３４．１
テトラヒドロフラン（１０ｍｌ）中の実施例１．２からの生成物（１．４８ｇ）の溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（６ｍｌ、ＴＨＦ中１Ｍ）を付加した。２時間後、溶液を蒸発させ、残渣のクロマトグラフィーにより（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−Ｃ−シアノメチル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（１．１５ｇ）を得た。トリエチルアミン（１．０ｍｌ）を含有するジクロロメタン（２０ｍｌ）中のこの物質０．８４ｇの溶液を、ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド（０．３６ｍｌ）を付加しながら、攪拌した。２時間後、メタノール（１ｍｌ）を付加し、溶液を蒸発させた。クロマトグラフィーにより、（１Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−Ｃ−シアノメチル−１，４，５−トリデオキシ−５−フルオロ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（０．３６ｇ）を得た。
【０２３０】
実施例３４．２
実施例３４．１からの生成物（０．３６ｇ）を、実施例１．３、そして次に前記の１．４および１．５に記載したのと同様の方法で処理し、（１Ｓ）− １−Ｃ−（３−アミノ−１−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−１，４，５−トリデオキシ−５−フルオロ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（０．２３ｇ）を得た。
【０２３１】
実施例３４．３
実施例３４．２からの生成物（０．１２ｇ）を前記の実施例１．６およびその後の１．７と同様に処理して、凍結乾燥後に、（１Ｓ）−１，４，５−トリデオキシ−５−フルオロ−１−Ｃ−（４−ヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド塩（４３ｍｇ）を得た。13Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＤＣｌによるＤ2Ｏ、ｄ  ｐｐｍ）：146.8（CH）,132.6（CH）,83.0（JC,F 169Hz, C-5）,76.1（C-2）,72.7（C-3）,66.4（JC,F 18Hz, C-4）,59.0（C-1）.
【０２３２】
実施例３５−  （１Ｓ）−１−Ｃ−（３−アミノ−２−カルボキサミド−４−ピロリル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールの調製
実施例３５．１
過酸化水素（０．５ｍｌ）をジメチルスルホキシド（１．０ｍｌ）中の実施例３２．１からの生成物（９０ｍｇ）およびカリウムカルボネート（５０ｍｇ）の溶液に滴下した。反応物を１０分間攪拌し、水（５０ｍｌ）で希釈して、エチルアセテート（３ｘ２０ｍｌ）で抽出し、併合有機層を乾燥し、濃縮した。その結果生じた残渣のクロマトグラフィーにより、（１Ｓ）− １−Ｃ−（３−アミノ−２−カルボキサミド−４−ピロリル）− Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（２０ｍｇ）を得た。
【０２３３】
実施例３５．２
トリフルオロ酢酸（１ｍｌ）中の実施例３５．１からの生成物（２０ｍｇ）の溶液を、室温で１６時間放置した。溶媒を除去し、水（２０ｍｌ）中の残渣をジクロロメタン（２ｘ５ｍｌ）で洗浄した。水性層を蒸発させて、クロマトグラフィーにより、（１Ｓ）− １−Ｃ−（３−アミノ−２−カルボキサミド−４−ピロリル）−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール（１０ｍｇ）を得た。ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、Ｄ2Ｏ）：13Ｃ  59.3（C-4’）,64.0（C-5’）,67.7（C-1’）,74.4（C-3’）,77.6（C-2’）,113.2（q）,124.1（C-5）,126.2（q）,141.0（q）および168.7（q）; ＨＲＭＳ（ＭＨ+）Ｃ10Ｈ17Ｎ4Ｏ4に関する理論値：257.12498;実測値：257.12535.
【０２３４】
実施例３６−  （１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールの調製
実施例３６．１
２、４−ジヒドロキシ−６−メチル−５−ニトロピリミジン（G.N. Mitchell and R.L. McKee, J. Org. Chem., 1974, 39, 176-179）（２０ｇ）を、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン（２０ｍｌ）を含有するホスホリルクロリド（２００ｍｌ）に懸濁し、混合物を２時間加熱還流した。黒色溶液を濃縮乾燥して、残渣を水（６００ｍｌ）およびエーテル（１５０ｍｌ）間に分配した。水性相をエーテル（１５０ｍｌ）でさらに抽出し、併合有機相を水性炭酸水素ナトリウムで洗浄し、慣用的に処理して、２，４−ジクロロ−６−メチル−５−ニトロピリミジン（２３．１ｇ）を得た。
【０２３５】
実施例３６．２
ベンジルアルコール（８０ｍｌ）中の実施例３６．１の生成物（１７ｇ）の溶液に、ベンジルアルコール（１９９ｍｌ）中のナトリウムベンジレートの１．１Ｍ溶液を付加した。室温で１時間後、エーテル（５００ｍｌ）を付加し、溶液を水で洗浄した。有機相を脱水し、高圧下で濃縮乾燥した。ドライＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセテート（２５ｍｌ）中の粗製残渣を１００℃で３時間加熱した後、溶液を濃縮乾燥した。エタノールによる残渣の粉砕、ならびに濾過により、２，４−ジベンジルオキシ−６−（２−ジメチルアミノビニル）−５−ニトロピリミジンを橙色固体（２４．５ｇ）として得た。
【０２３６】
実施例３６．３
発熱を制御するために冷却しながら、亜鉛ダスト（３０ｇ）を酢酸（３００ｍｌ）中の実施例３６．２からの生成物（２０ｇ）の溶液に付加した。その結果生じた混合物を次に２時間攪拌し、濾過して、濾液を濃縮乾燥した。残渣をクロロホルムと水性炭酸水素ナトリウムの間に分配し、有機層を脱水し、濃縮乾燥して、２，４−ジベンジルオキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジンの固体残渣（１５．２ｇ）を得た。
【０２３７】
実施例３６．４
水酸化ナトリウム（０．５ｇ、油中６０％分散液）をテトラヒドロフラン中の実施例３６．３からの生成物（２．０ｇ）の溶液に付加し、その後ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（１．３７ｇ）を付加して、混合物を１時間攪拌した。水を滴下して反応を制止し、次にエーテル（１００ｍｌ）および水（１５０ｍｌ）間に分配した。有機層を脱水し、濃縮乾燥した。ジクロロメタン（４０ｍｌ）中の残渣の溶液を、ｔ．ｌ．ｃ．分析が低極性物質への完全転化を示すまでＮ−ブロモスクシニミドを徐々に滴下しながら、攪拌した。溶液を水、水性炭酸水素ナトリウムで洗浄し、乾燥、濃縮した。残渣のクロマトグラフィーにより、２，４−ジベンジルオキシ−７−ブロモ−９−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルピロロ［３，２−ｄ］ピリミジンを白色固体（１．８ｇ）として得た。
【０２３８】
実施例３６．５
実施例１．１に記載したのと同様に、Ｎ−クロロスクシニミドによる塩素化とその後のリチウムテトラメチルピペリジンを用いた塩化水素の排除により、５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（０．３０ｇ）からイミンを調製したが、しかし、以下の修正を加えた：（ｉ）リチウムテトラメチルピペリジンの溶液の付加が完了したときに、石油エーテルを付加し、溶液を水で洗浄し、脱水して、濃縮乾燥した。（ｉｉ）シリカゲル上で残渣をクロマトグラフィー処理し、ヘキサン中の０．２％トリエチルアミンおよび３０％エチルアセテートで溶離して、精製イミン（０．２１５ｇ）を得た。エーテル（２ｍｌ）中のこのイミンの溶液を、ｔ．ｌ．ｃ．分析が出発物質とのリチウム交換が完了したことを示すまで、−７０℃でアニソール（２０ｍｌ）およびエーテル（３０ｍｌ）中の実施例３６．４からの生成物（０．７８６ｇ）の溶液へのブチルリチウム（ヘキサン中１．４Ｍ）の徐々の付加により調製された溶液に付加した。混合物を徐々に−１５℃に温めた後、水で洗浄して、乾燥、濃縮した。残渣のクロマトグラフィー処理により、（１Ｓ）−１−Ｃ−（２，４−ジベンジルオキシ−９−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−５−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（０．２２５ｇ）を得た。
【０２３９】
実施例３６．６
エタノール（５ｍｌ）中の実施例３６．５からの生成物（０．１０ｇ）の溶液を、水素雰囲気中で１０％パラジウム−オン−炭素（０．０５ｇ）とともに２時間攪拌した。固体および溶媒を除去し、水性濃塩酸（１ｍｌ）をメタノール（５ｍｌ）中の残渣の溶液に付加した。一夜放置後、溶液を濃縮、乾燥して、残渣をエーテルで抽出し、次にエーテルで粉砕して、濾過し、（１Ｓ）−１，４−ジデオキシ−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトールヒドロクロリド（０．０２５ｇ）を得た。13Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）、δ（ｐｐｍ）：159.8（C）,155.8（C）,137.1（C）,131.4（CH）,114.2（C）,104.1（C）,76.2（CH）,73.7（CH）,68.5（CH）,61.6（CH2）および58.5（CH）.
【０２４０】
実施例３７−  １，４−ジデオキシ−（１Ｓ）−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ−［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール５−ホスフェートビス−アンモニウム塩の調製
実施例３７．１
溶液テトラブチルアンモニウムフルオリド（１Ｍ、０．５ｍｌ）を、テトラヒドロフラン中の実施例３６．５からのビス−シリル化生成物（１１０ｍｇ）の溶液に付加した。２時間後、溶液をトルエンで希釈して、水（ｘ２）で洗浄し、脱水して、蒸発、乾燥した。その結果生じたシロップをメタノール中に溶解し、ｔｅｒｔ−ブトキシ無水カルボン酸（６５ｍｇ）を付加した。３０分後、反応混合物を濃縮乾燥し、クロマトグラフィー処理を施して、（１Ｓ）−１−Ｃ−（２，４−ジベンジルオキシピロロ−［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，４−ジデオキシ−１，４−イミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−リビトール（６４ｍｇ）を得た。
【０２４１】
実施例３７．２
実施例３７．２からの生成物（６４ｍｇ）を、実施例３３に詳述した方法により、１，４−ジデオキシ−（１Ｓ）−１−Ｃ−（２，４−ジヒドロキシピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−１，４−イミノ−Ｄ−リビトール  ５−ホスフェートビス−アンモニウム塩（１１ｍｇ）に転化した。13Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ2Ｏ）、δ（ｐｐｍ）：156.0（C）,151.9（C）,134.0（C）,127.3（CH）,110.9（C）,102.8（C）,75.1（CH）,70.4（CH）,65.1（CH）,61.9（CH2）および54.5（CH）.
【０２４２】
本発明の態様を実施例のみにより説明してきたが、本発明の範囲を逸脱せずに、修正ならびに付加が成され得る、と理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【図１】  実施例１の生成物（化合物Ｉｂ）の濃度範囲での時間に伴うプリンヌクレオシドホスホリラーゼ活性を示す。
【図２】  プリンヌクレオシドホスホリラーゼ活性進行曲線の動態論モデルとの適合を示す。
【図３】  ウシプリンヌクレオシドホスホリラーゼの化合物Ｉｂ阻害に関する極性適合法によるＫi*決定を示す。
【図４】  化合物Ｉｂによる緩慢開始阻害を示すウシプリンヌクレオシドホスホリラーゼに関する進行曲線を示す。
【図５】  マウス血液のＰＮＰ活性に及ぼす化合物Ｉｂの経口投与の影響を示す。
【図６】  原生動物ヌクレオシドヒドロラーゼを用いた化合物Ｉｂに関するＫi決定を示す。
【図７】  化合物Ｉｂの５’−ホスフェートによる緩慢開始阻害を示すプリンホスホリボシルトランスフェラーゼに関する進行曲線を示す。マラリア酵素の阻害。
【図８】  ヒトプリンホスホリボシルトランスフェラーゼの化合物Ｉｂ、５’−ホスフェート阻害に関するＫi*決定を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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