(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
オリーブ全体またはそれの一部の摩砕残留物から、オイルミル圧搾機で生成したオイルケーキ状物、三段階圧搾機からのくずまたは“二段階”システムとして知られる方法でオリーブから油を抽出して得られるオイルフットくずから３−β−ヒドロキシ−２８−カルボキシオレアネン酸（オレアノール酸）、２−α,３−β−ジヒドロキシ−２８−カルボキシオレアネン酸（マスリン酸）および付随する不純物を回収する方法において、１５％より少ない水含有量に予め乾燥した上記残留物、オイルケーキ状物またはくずの工業用物質（２）をヘキサンで抽出処理し、ヘキサン抽出液（３）から部分濃縮及び濾過及び／又は遠心分離により上記３−β−ヒドロキシ−２８−カルボキシオレアネン酸を沈殿物として分離し、他方、残留するヘキサン不溶性固体（５）を酢酸エチルで抽出処理し、酢酸エチル抽出液の濃縮及び濃縮で得られる不溶性固体をメタノールで洗浄し、得られるメタノール溶液（７）から分離される不溶性固体（８）をヘキサンで熱間洗浄し、得られるヘキサン溶液（１０）から濾過及び／又は遠心分離によって固体として２−α，３−β−ジヒドロキシ−２８−カルボキシオレアネン酸を得る、上記両方の酸を、８０％を超える純度で得ることを特徴とする、上記方法。
【請求項２】
請求項１に記載のメタノール洗浄で得られるメタノール溶液（７）を濃縮し、得られる固体（９）を加熱下での水で洗浄し、不溶性部分（１１）を溶液（１２）から濾過及び／又は遠心分離で分離し、塩基性水で熱間−又は冷間処理して溶液（１４）を得、該溶液から濾過及び／又は遠心分離によって分離される不溶の２−α，３−β−ジヒドロキシ−２８−カルボキシオレアネン酸塩を酸性媒体及び／又は酸性物質で処理して、遊離酸を８０％を超える純度で得る、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
オリーブの木の栽培は殆ど世界中の温暖な国において非常に重要である。この木は第一にオリーブ油のために使用されており、スペインは今日、１００万メートルトンを超える生産国である。古典的なオリーブの摩砕法およびオリーブ油の製法はいわゆる連続−および不連続“三段階（three-phase）”法の両方より成る。油の他にこれらの方法ではオイルフット（oil-foot）、水が添加されたかまたは添加されてないオリーブ水性留分、および油を追加的に回収するために一般に抽出される色々な種類の圧縮されたオリーブかすとして副生成物が生じる。三段階法の他にいわゆる“二段階法”も使用される。この方法では、油の他に、パルプ残留物および必ずではないが、プラント水と混合されたオリーブストーン（olive stone）を含む塊状物が得られ、これが“オイルフットかす”として知られ始めている副生成物を生じる。
オレアノール酸（３−β−ヒドロキシ−２８−カルボキシオレアネン酸）は植物界のいたるところに分布しているトリテルペン酸である。米国農学植物化学データーベース部門（The United States Department of Agriculture Phytochemical database;インターネットアドレスhttp://probe.nalusda.gov:8300/cgi-bin/browse/phytochemdb）は殆ど１００種の植物、中でもＯｌｅａ  ｅｕｒｏｐａｅａ中に存在することが確かに記述されており、更に沢山の証明済み植物活性［（堕胎性、抗う蝕性（anticariogenic）、受精阻止性（antifertility）、肝細胞抗毒性（antihepatotoxic）、抗炎症性、抗肉腫性（antisarcomic）、抗ガン性、強心性、利尿性、肝臓保護性（hepatoprotective）および子宮収縮性）］も記載されている。この酸およびそれのグリコシドの潜在的な植物活性に関して連載的に公表されている。白血病細胞の増殖の抑制剤（Essady,D.,Najid,A.Simo,A.,Denizot,Y.,Chulia,A,J.,およびDelage,C.,;”Mediators of Inflammation”（1991）3,181-184］、低血糖症の抑制剤（Yoshikawa,M.,Matsuda,H.,Harada,E.,Mukarami,T.,Wariishi,N.,Marakami,N.およびYamahara,J.,”Chemical & Pharamaceutical Bulletin”（1994）42、1354-1356）、抗腫瘍性（antitumoral）（Ohigashi,H.,Mukarami,A.,およびKoshimizu,K.”ACS Symposium Series”（1994）547,251-261）、過敏症ショックでの拮抗作用発生物（Zhang,L.R.およびMa,T.X.;”Acta Pharamcologica Sinica”（1995）16,527-530）、肝臓保護剤（Lin,Y.P.,Parkinson,A.およびKlaasen,C.D.;”Journal of Pharmacology and Exerimental Therapeutics（1995）275,768-774;Connolly,J.D.およびHill,R.A.Natural Product Reports”12,609-638（1995）および抗炎症剤（Recio,M.D.,Griner,R.M.,Manez,S.And Rios,J.L.;”Plana Medica”（1995）61、182-185としての活性が事実研究されて来た。オレアノール酸の薬学的活性の特異な評価が公表されている（Liu,J.”Journal of Ethnopharamacology”（1995）49、57-68）。クラタエゴリック酸（crataegolic acid）とも称されるマスリン（Maslinic）酸（２−α、３−β−ジヒドロキシ−２８−カルボキシオレアネン酸）は自然界での分布が遙かに少なく、１０種ぐらいの植物に認められる（インターネットアドレスhttp://probe.nalusda.gov:8300/cgi-bin/browse/phytochemdb）。不足しているために広範囲に研究出来なかったにもかかわらず、抗ヒスタミン-および抗炎症活性を有することは公知である。Ｏｌｅａ  ｅｕｒｏｐａｅａの果物の表面のワックス部分からオレアノール酸およびマスリン酸を、クロロホルムで予め洗浄したオリーブからメタノール抽出することによって分離することが開示されている（Bianchi,G.,Pozzi,N.,およびVlahov,G.;”Phytochemistry”（1994）37、205-207）。この種の酸の分離は高速向流クロマトグラフィー（ＨＳＣＣＣ）によって説明されている（Du,Q.Z.,Xiong,X.P.およびIto,Y.,”Journal of Liquid Chromatography”（1995）18、1997-2004）。
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発明の説明
古典的な圧縮法の“三段階”法によって得られる圧縮されたオリーブかすであるオイルケーキ状物――いわゆる“二段階”系から得られるオイルフットくず（oil-foot refuse）、および広義では、全オリーブまたはそれの元の皮残さを含めたその一部の加工段階からのあらゆる残留物――を、それらが含む油を回収する続く加工段階を行いまたは行わずに、予備洗浄を行いまたは行わずに、圧縮されたオリーブ残さの加工工業の通例の方法でのヘキサン（または他のあらゆる溶剤または溶剤混合物）で抽出するために適当な湿分含有量が達成されるまで、適当に乾燥し、非極性溶剤（好ましくはヘキサン）で抽出し、溶剤を除いた後に良く知られた圧縮オリーブかす油を得る。こうして得られるかまたはヘキサンで希釈された油を残留物から除きそして濾過および／または遠心分離によってこの油から分離できる白色の沈殿物が生成し、非極性溶剤（好ましくはヘキサン）での適当な洗浄の後にオレアノール酸が得られる半固体生成物を得、これを所望の様に漂白処理してもよい。上述の通り既に抽出処理した“圧縮されたオリーブ残留物”を“超臨界”状態のもとでの液化ガスを含めたより極性の溶剤、好ましくは醋酸エチルで新たに抽出処理する。問題の抽出物の容積は好ましくは乾燥状態まで溶剤を除くことによって減少させる。こうして得られる抽出物を醋酸エチルよりも更に極性の溶剤、好ましくはメタノールにてまたは“臨界条件”のもとでの液化ガスにて処理し、溶液または、遠心分離および／または濾過によって該溶液から分離される粘性の沈殿物を得る。この方法は以下に記載する通り、この操作で得られるマスリン酸の量を増やすために繰り返してもよい。メタノールまたは液化ガスに不溶のこの生成物を次いで非極性溶剤、好ましくはヘキサンでそして好ましくは加熱下に洗浄し、マスリン酸である不溶の固体を得る。一方では逆の極性処理を実施し、その場合には溶解される生成物は主としてマスリン酸である。上述の醋酸エチル極性溶液を、場合によって乾燥させるまで濃縮してもよくそして、異なるｐＨ値での水での処理または連続処理に付す。塩基性水での処理の後に、洗浄水から分離されるる沈殿物、即ちマスリン酸塩が残る。酸性媒体、好ましくは鉱酸またはあらゆる種類のイオン交換処理でこの塩を続いて処理して遊離のマスリン酸を得る。
図１の説明
生成物１：あらゆる方法によって（オリーブの皮および付随物質を含む）オリーブの摩砕物から工業用物質を得る。
操作（Ａ）：ここでは好ましくは水を除き、生成物１の水含有量を１５％より少なくする（生成物２）。回転炉または交流乾燥を使用するのが有利である。例えば３５０ｋｇのこの生成物２を始めに得る。
操作（Ｂ）：生成物２のヘキサン抽出。これは連続的でもまたは不連続的でもよい。この操作で元の３５０ｋｇから約２１ｋｇ（約６％）が回収される。
操作（Ｃ）：ヘキサン不溶性固体（生成物５）の醋酸エチル抽出を上記の操作（Ｂ）から得る。この操作で元の生成物から更に約２４ｋｇが回収される（生成物２を基準として約６．５％）。
操作（Ｄ）：生成物３の部分濃縮および濾過および／または遠心分離による沈殿物の分離、または生成物３の十分な濃縮および続くヘキサンでの希釈、沈殿する（溶剤、例えばヘキサンで繰り返し洗浄されていてもよい）固体の濾過および／または遠心分離。溶剤が除かれた時に、油（１９．５ｋｇ）（生成物４）およびオレアノール酸（生成物２の０．０７％）が得られる溶液がこうして得られる。これを漂白工程に付す。
操作（Ｅ）：操作（Ｃ）からの醋酸エチル抽出物の濃縮および得られる固体（２４ｋｇ）のメタノール（７５ｋｇ）での洗浄、得られる溶液（生成物７）の不溶性固体（生成物８）からの濾過および／または遠心分離による分離。
（Ｆ）：（Ｅ）に記載した操作からの固体（８）をヘキサンで熱間洗浄し、得られる溶液（１０）から濾過および／または遠心分離によって残留固体（マスリン酸、生成物２を基準として０．０４〜０．２％）の分離。
（Ｇ）：操作（Ｅ）から得たメタノール溶液の濃縮および得られる固体の、好ましくは加熱下での水（７５ｋｇ）での洗浄、不溶性の部分（生成物１１）の溶液（１２）からの濾過および／または遠心分離による分離。
（Ｈ）：塩基性水（７５ｋｇ）、例えば５％の水酸化ナトリウムでの処理で、溶液（１４）を得、そして該溶液から濾過および／または遠心分離によって分離される殆ど不溶のマスリン酸塩性の物質。マスリン酸は次いで該塩を酸性媒体中で処理することによって遊離される（固体２を基準として０．１５〜０．３５％）。
本発明の方法の有利な実施例を以下に説明する。
実施例：
いわゆる“二段階”法による摩砕オリーブから得られる１，０００ｋｇのオイルフットくずを最初に準備する。このオイルフットくずを、目的に合わせて改造した回転炉で乾燥し、約８％の湿分が達成されるまでそれが含む水の殆どを除き、それによって有利に使用され得る約３５０ｋｇの材料を得る。これを次いで圧縮されたオリーブかすの加工工業の通例の設備においてヘキサンで抽出処理する。ヘキサン抽出物は約６重量％の非揮発性物質を含有しており、その殆どは品質、性質および加工された圧縮オリーブかすの“履歴”に依存して非常に変化する割合のいわゆる圧縮されたオリーブかす油（５〜６％）より成る。こうして得られる油（約２１ｋｇ）を５０リットルのヘキサンで希釈しそして、遠心分離によって溶液から分離する白色沈殿物が生ずるまで室温で放置する。こうして得られる固体を連続的にヘキサンで洗浄する。その際にこの固体は遠心分離によって溶液から各段階で分離する。得られる溶液を乾燥しそして残留物を新しいヘキサンでの洗浄処理に付す。得られる固体を、少なくとも８５％の純度の０．１％のオレアノール酸に近い収率である得られた最初の固体に添加し、マスリン酸は脂肪残留物と一緒の主な付随物質（約１０％）である。オレアノール酸をクロロホルム／メタノール−混合物に溶解した後に、活性炭を添加し、そして数分煮沸し、濾過または遠心分離しそして乾燥して約３５０ｇ（乾燥オイルフットくずを基準として０．０７〜０．１％）の、８５％を超える純度の白色のオレアノール酸を得る（核磁気共鳴およびクロマトグラフィーによって検査した）。ヘキサンで既に抽出処理された固体オイルフットくず（約３２５ｋｇが残っている）を、ヘキサン抽出のための上述の設備で醋酸エチル抽出を行う。こうして得られる醋酸エチル溶液を約５０％の固形分含有量まで減圧濃縮しそして最後に噴霧乾燥して乾燥させ、約２４ｋｇの固体物質を得、これを１５０Ｌの沸騰メタノールで処理し、冷却放置しそして遠心分離する。得られる固体をヘキサンで熱間洗浄し、遠心分離によってヘキサン溶液から分離される洗浄された約１５０ｇの固体を得る。この固体をクロロホルム／メタノール−混合物に溶解しそして活性炭で漂白し、それによって約１３０ｇ（加工される乾燥オイルフットくずを基準として０．０４％）の白色の固体が得られ、このものは１０％のオレアノール酸を随伴する８５％を超える純度のマスリン酸である。メタノールに溶解する物質を、醋酸エチル抽出のための上記の方法によって乾燥させ、この処理をメタノールで繰り返し、約０．２％の収率がこの方法段階で達成されるまで、新しいロットのマスリン酸を得る。メタノールに溶解する物質（約２３ｋｇ）を、醋酸エチル抽出のための上述の方法を組み合わせることによって乾燥し、次いで７５Ｌの沸騰水で処理し、不溶性物質を水溶液から遠心分離によって分離する。更に熱処理を５％の重炭酸ナトリウム含有量の同じ容量の水で後から実施し、同様に残留固体から重炭酸塩水溶液を分離する。次いで不溶性部分を５％の水酸化ナトリウム含有量の同じ容量の水で処理する。水性相を、最初の乾燥オイルフットくずを基準として０．２〜０．５重量％（前の段階で得られるマスリン酸の収率にも依存している）であるマスリン酸ナトリウムを主として含むの褐色に着色した固体物質から分離する。予め摩砕されたこの固体を塩酸含有の酸性の水で続いて熱間処理することで遊離の酸が得られ、これを遠心分離によって分離しそして前述の様に活性炭で漂白する。マスリン酸を得る二つの相は、収率がオレアノール酸と一緒に、オリーブの種類、その熟成度、オイルフットくずの“履歴”に依存しておよび元のオイルフットくずを形成する全ての物質（パルプおよびストーン）の重量比に殊にに依存しているにもかかわらず、８５％を超える純度で約０．５％である。
【図１】
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