(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ブタにおける、ブタ不妊症および呼吸症候群ウイルス（ＳＩＲＳＶ）、ブタ呼吸および生殖症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）、レリスタッドウイルス、またはブタ流産大量死症候群ウイルス（ＳＡＭＳＶ）、の感染症を処置するための医薬の製造における、チルミコシンまたはその生理学的に許容し得る酸付加塩の使用。
【請求項２】
化合物はチルミコシン・リン酸塩である、請求項１記載の使用。
【請求項３】
該ブタは精液採取前の雄ブタである、請求項１または２記載の使用。
【請求項４】
該ブタは受胎前の繁殖中の雌ブタである、請求項１または２記載の使用。
【請求項５】
該ブタは妊娠期間の繁殖中の雌ブタである、請求項１または２記載の使用。
【請求項６】
該ブタは新生ブタである、請求項１または２記載の使用。
【請求項７】
ブタにおける、ブタ不妊症および呼吸症候群ウイルス（ＳＩＲＳＶ）、ブタ呼吸および生殖症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）、レリスタッドウイルス、またはブタ流産大量死症候群ウイルス（ＳＡＭＳＶ）、の感染症を処置するための、チルミコシンまたはその生理学的に許容し得る酸付加塩を含有する獣医学製剤。
【請求項８】
化合物はチルミコシン・リン酸塩である、請求項７記載の獣医学製剤。
【請求項９】
該ブタは精液採取前の雄ブタである、請求項７または８記載の獣医学製剤。
【請求項１０】
該ブタは受胎前の繁殖中の雌ブタである、請求項７または８記載の獣医学製剤。
【請求項１１】
該ブタは妊娠期間の繁殖中の雌ブタである、請求項７または８記載の獣医学製剤。
【請求項１２】
該ブタは新生ブタである、請求項７または８記載の獣医学製剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
哺乳動物の病因であるウイルスは多数存在するが、養豚業に非常に厳しい課題を課するものは２、３しかない。これらは、ブタの不妊症および呼吸器症候群ウイルス（Ｓｗｉｎｅ  Ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｖｉｒｕｓ、ＳＩＲＳＶ）（これはブタの呼吸器および生殖器症候群ウイルス（Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ａｎｄ  Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｖｉｒｕｓ、ＰＲＲＳＶとしても知られており、以下、ＳＩＲＳＶと称する）；ヨーロッパのブタの個体群で見られるリリースタッドウイルス（Ｌｅｌｙｓｔａｄ  Ｖｉｒｕｓ）；および珍しい疾患であるブタの流産大量死症候群ウイルス（Ｓｗｉｎｅ  Ａｂｏｒｔｉｏｎ  Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｖｉｒｕｓ）（以下、ＳＡＭＳＶと称するが、ＳＩＲＳＶの変異体であると考えられる）を含む。
【０００２】
ブタの不妊症および呼吸器症候群については１９８７年に米国で最初に記載された。その病気は流産、未熟分娩、死産児、並びに授乳児や離乳児の死の損害および慢性的な不十分な行動を伴う呼吸器疾患を特徴とする。ある群れにおける臨床的徴候の激烈さは多数の因子（ストレス、同時発生の疾患、群管理および具体的なＳＩＲＳＶ菌株の毒性を含む）に依存する。そのウイルスは一生のいずれの段階のブタ（例えば育児中のブタ、仕上げ肥育されたブタ、雄ブタまたは繁殖中の雌ブタ）にも感染することができる。その病気の歴史は、該病気が米国内に現れるのとほぼ同時にヨーロッパに現れたことを示している。ヨーロッパのブタの臨床的徴候は、一般的にリリースタッドウイルスとして知られる動脈ウイルス（ａｒｔｅｒｉｖｉｒｕｓ）の菌株によっても引き起こされる。
【０００３】
ＳＩＲＳＶの主な伝染は動物から動物である。ＳＩＲＳＶに感染したブタはそのウイルスを主に口−鼻分泌物中に流す。ウイルスは尿および糞便中にも流され得る。感染すると、雄ブタはＳＩＲＳＶを精液中に流し、そのウイルスを罹り易い雌ブタに伝染することがあり得る。繁殖中の雌ブタの生殖機能不全（例えば、流産のブタ、死産のブタおよび生まれながらに虚弱なブタ）はある群れの中で２〜３ヶ月間存続する。その群れは臨床的徴候の再発性エピソードを有し得る。研究は、ＳＩＲＳＶに最初に感染した雄ブタはウイルスを３５日間精液中に流し、ＳＩＲＳＶに感染した育児中のブタは２〜３ヶ月間流し、そして子宮に感染したブタは生後少なくとも６ヶ月間ウイルスを流し得ることを示している。
【０００４】
ブタの不妊症および呼吸器症候群、とブタの流産大量死症候群は、ＳＡＭＳＶに感染したブタがＳＩＲＳＶの臨床的症状に加えて、妊娠の全段階でのより高い流産率および雌ブタのより高い死亡率を示す点で異なる。
【０００５】
特定の化合物群である式Ｉの化合物はブタにおけるあるウイルスの感染を制御するのに使用できることを現在発見し、そしてこれは本発明の一態様である。従って、１態様で、本発明はブタにおけるウイルスの増殖を抑制するように適当された獣医学製剤であって、式Ｉの化合物またはそれらの生理学的に許容し得る塩、および生理学的に許容し得る担体を含む獣医学製剤を提供する。
【化１１】
0004555472.tif 000002
［式中、
Ｒは、式：
【化１２】
0004555472.tif 000003
の飽和もしくは不飽和の２級アミノ基であるか（式中の窒素原子は５〜１６個の環原子を含有する単環系、または８〜２０個の環原子を含有する二環系もしくは三環系から選ばれる炭素環系の一部である）、あるいは
該炭素原子の１つ以上がＣ1〜Ｃ4アルキル、Ｃ2〜Ｃ4アルケニル、Ｃ2〜Ｃ4アルキニル、Ｃ1〜Ｃ4アルコキシ、Ｃ1〜Ｃ4アルコキシカルボニル、ヒドロキシル、Ｃ1〜Ｃ4アルカノイルオキシ、ハロ、ハロ−Ｃ1〜Ｃ4アルキル、−Ｎ(Ｃ1〜Ｃ4アルキル)2、−Ｎ(ＣＨ2)m、
【化１３】
0004555472.tif 000004
シアノ、エチレンジオキシ、ベンジル、フェニル、または１〜３個の置換基（該置換基はニトロ、ハロ、Ｃ1〜Ｃ4アルキル、Ｃ1〜Ｃ4アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、またはモノ−もしくはジ−(Ｃ1〜Ｃ4アルキル)アミノから選ばれる）で置換されたフェニルで置換されたそのような基であり、
ｍは４〜７の整数である。
Ｒ1は、
【化１４】
0004555472.tif 000005
である。
Ｒ2は、水素、Ｃ1〜Ｃ5アルカノイル、１〜３個のハロ置換基を有するＣ1〜Ｃ5アルカノイル、ベンゾイル、フェニルアセチル、フェニルプロピオニル、あるいは１〜５個のハロもしくはメチル、または１〜２個のメトキシ、ニトロもしくはヒドロキシル置換基を有するベンゾイル、フェニルアセチルもしくはフェニルプロピオニルである。
Ｒ3は、ヒドロキシ、Ｃ1〜Ｃ5アルカノイルオキシ、１〜３個のハロ置換基を有するＣ1〜Ｃ5アルカノイルオキシ、ベンゾイルオキシ、フェニルアセトキシ、フェノキシアセトキシ、あるいは１〜５個のハロもしくはメチル、または１〜２個のメトキシ、ニトロもしくはヒドロキシル置換基を有するベンゾイルオキシ、フェニルアセトキシもしくはフェノキシアセトキシ、あるいは
【化１５】
0004555472.tif 000006
である。］
本発明は処置の必要なブタにおけるウイルスの増殖を抑制する方法であって、それらのブタに有効量の式Ｉの化合物またはそれらの生理学的に許容し得る塩を投与することを含む方法も提供する。
【０００６】
式Ｉの化合物は米国特許第４,１８０,６９５号に記載されたマクロライド抗生物質である。特に有用な式Ｉの化合物はＲが
【化１６】
0004555472.tif 000007
であり、Ｒ1が（ａ）基であり、Ｒ2がＨであり、そしてＲ3がヒドロキシである化合物である。そのものは、ＵＳＡＮ（米国一般的名称組織、ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ａｄｏｐｔｅｄ  Ｎａｍｅｓ  ｏｒｇａｎａｉｚａｔｉｏｎ）によって与えられたチルミコシン（これは登録商標でない）で知られている。それは以下の構造式：
【化１７】
0004555472.tif 000008
を有する。式Ｉの化合物はそのままで、または生理学的に許容し得る塩の形態で使用可能である。
【０００７】
本発明は更に、ブタにおけるウイルスの増殖を抑制するのに適当な薬物を製造するための、式Ｉの化合物もしくはそれらの生理学的に許容し得る酸付加塩、またはそのどちらかを含有する獣医学組成物の使用を提供する。
【０００８】
用語「ウイルスの増殖を抑制する」とは、ウイルスの増殖または複製およびインビボでの広がりを防止することを意味する。用語「処置が必要な」とはＳＩＲＳＶ、リリースタッドウイルスまたはＳＡＭＳＶに感染したかまたは曝露させたブタを意味する。本発明での使用に好ましい式Ｉの化合物は、チルミコシンまたはそれらの生理学的に許容し得る酸付加塩である。本発明での使用においてより好ましい式Ｉの化合物はチルミコシンのリン酸塩である。
【０００９】
用語「有効量」とは、ＳＩＲＳＶ、リリースタッドウイルス、またはＳＡＭＳＶのブタでの増殖を抑制することのできる式Ｉの化合物の量を意味する。必要に応じて、本獣医学製剤および方法を、治療学的処置および／または予防学的処置のために使用可能である。一般的に、治療学的効果および／または予防学的効果を得るのに投与する化合物の具体的な量は重要ではない。例えば、その量は投与される化合物、種の独自性、投与経路および当該分野で公知の他の要因によって変わる。飼料を媒介して化合物を投与する場合、有効量は種、年齢および消費率などの詳細で変わる。しかしながら、約１〜４０００ｐｐｍに及ぶ規定食中の濃度は、一般的に１日用量としての化合物の有効量を提供する。多数の状況下で、１００〜５００ｐｐｍの範囲に及ぶ規定食濃度が効能を与える。その化合物は約１００〜３００ｍｇ／Ｌの濃度で水を飲むことで投与することもできる。
【００１０】
本発明の獣医学製剤を、様々な経路（経口、直腸、経皮、皮下、静脈内、筋肉内および鼻腔内を含む）で投与することができる。ブタにおけるウイルスの増殖を抑制するように適合された好ましい獣医学製剤は、有効量の式Ｉの化合物および標準的なブタの糧食を含む。本製剤はブタからブタに伝染するＳＩＲＳＶ、リリースタッドウイルスまたはＳＡＭＳＶを制御するのに特に有用である。
【００１１】
本発明の獣医学製剤は入手可能な成分を用いた公知の製法によって製造可能である。式Ｉの化合物は典型的に、１個またはそれより多い生理学的に許容し得る担体（例えば、通常の食料の成分、注射用の担体など）を用いて製剤化される。
【００１２】
以下の実施例は例示であり、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
実施例１
食料添加チルミコシン製剤
製剤例１
予め混合したチルミコシン、２００ｇ／ｋｇ
【表１】
0004555472.tif 000009
製剤例２
予め混合したチルミコシン、１００ｇ／ｋｇ
【表２】
0004555472.tif 000010
【００１３】
実施例２
ブタのＳＩＲＳＶに及ぼすチルミコシンのインビボ効果およびインビトロ効果
実験の設計：ＳＩＲＳＶなしであることが示された従来の８週齢の３０匹のブタを４つの別々のグループにランダムに分け、以下の通り処置した；
１．  チルミコシン２００ｐｐｍ；ＳＩＲＳＶ感染（２００，ｉｎｆ）
２．  チルミコシン４００ｐｐｍ；ＳＩＲＳＶ感染（４００，ｉｎｆ）
３．  未処置；ＳＩＲＳＶ感染（ウイルス）
４．  未処置；非感染（コントロール）。
【００１４】
ＳＩＲＳＶに曝露させる前の７日間、２００または４００ｐｐｍのチルミコシンでブタを処置した。感染後、処置を続けた。感染させたブタは、ＳＩＲＳＶ分離ＶＲ−２３３２を用いて実験的に感染させた。グループ１、２および３由来のブタはＳＩＲＳＶのＶＲ−２３３２菌株の１０5ＴＣＩＤ50を用いて鼻腔内感染させ、グループ４のブタは非感染コントロールとして放置した。それらのブタを臨床パラメーターの変化すなわち、体温、徴候の臨床スコア、食料の消費率および体重の増加率の変化を毎日追跡した。感染の１４または１６日後にブタを安楽死させた。接種処置の０、２、５、７、１０、１２および１４日後に血液試料を集めた。血液試料をウイルス分離（すなわち、存在および量）について調べた。血液中のウイルス量は定量的ＰＣＲアッセイにより測定した。組織中のウイルス分布は、免疫細胞化学およびウイルス特異的抗体やプローブを用いたイン シトゥーハイブリダイゼーションによって測定した。
【００１５】
実験の終点は、感染した動物の臨床的徴候、肉眼的および顕微鏡的病変、ウイルス血症およびウイルスの分布とした。
【００１６】
データ分析：比較実験は、規定時間外の動物について、同一グループの動物間でおよびグループ間で行なった。２つのグループの平均を比較するために、統計学的有意性はスチューデントの検定によって評価した。多数のグループに関するデータを比較するために、分散分析をシスタット（Ｓｙｓｔａｔ）、統計学的解析システム（ＳＡＳ）パッケージを用いて行なった。有意性は常にｐ＜０.０５であった。
【００１７】
結果：以下の格子図（グリッド）は、ブタの肺胞マクロファージ中でのＳＩＲＳＶの複製に及ぼすチルミコシンの影響の概要を示す。以下の
０μｇ／ｍＬのチルミコシン＝Ａ
０.１μｇ／ｍＬのチルミコシン＝Ｂ
１.０μｇ／ｍＬのチルミコシン＝Ｃ
１０μｇ／ｍＬのチルミコシン＝Ｄ
で処置した肺胞マクロファージの後代ウイルスの産出量を比較する。
【表３】
0004555472.tif 000011
従って、チルミコシンは、全ての用量の場合に肺胞マクロファージ中でのＳＩＲＳＶウイルスのインビトロ複製を抑制し、そして１０μｇ／ｍＬ用量の場合にはウイルスの複製を完全に停止させた。
【００１８】
平均体重の増加に関するグループ間での比較
【表４】
0004555472.tif 000012
平均を比較すると、４００ｐｐｍのチルミコシンで処置した全ての感染ブタは未処置の感染ブタよりも体重が増加していた。２００ｐｐｍのチルミコシンで処置したブタは未処置の感染ブタと比べて、体重の増加は少しも劣ることなく増加していた。
【００１９】
以下のグリッドは、肺潅注からの白血球の数を比較することにより測定した場合の、ＳＩＲＳＶ感染におけるチルミコシンの効果をまとめたものである。
【表５】
0004555472.tif 000013
平均を比較すると、チルミコシンで処置した全ての感染ブタは、肺胞からの白血球の数が未処置の感染ブタよりも少なかった。
【００２０】
ＳＩＲＳＶで誘発される病状に及ぼすチルミコシンの影響を、リンパ節（ＬＮ）肥大の激烈さ指数（スコア）を比較することにより測定した。
【表６】
0004555472.tif 000014
平均を比較すると、４００ｐｐｍまたは２００ｐｐｍのチルミコシンで処置した全ての感染ブタは、未処置の感染ブタよりもリンパ節肥大の激烈さは低かった。
【００２１】
ＳＩＲＳＶで誘発される病状に及ぼすチルミコシンの影響を、肺の病変の激烈さ指数を比較することにより測定した。
【表７】
0004555472.tif 000015
平均を比較すると、４００ｐｐｍまたは２００ｐｐｍのチルミコシンで処置した全ての感染ブタは、未処置の感染ブタよりも肺の病変の激烈さは低かった。