(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）
【化１】
0004457132.tif 000010
〔式中、Ｒ１は水素原子又は炭素数１〜４のアルキル基を示し；
Ｒ２は水素原子、フェニル−Ｃ１−６アルキル基又はフェニルベンジル基を示し；
Ｒ３は、水素原子を示し；
Ｒ４は、水素原子又はフェニル−Ｃ１−６アルキル基を示し；
Ｒ５は、水酸基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を示し；
ｎは０〜１の整数を示す〕
で表されるマロン酸アミド誘導体又はその塩を含有する皮膚老化防止又は改善剤。
【請求項２】
一般式（１）中のＲ1 が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基又はｔ−ブチル基であり；
Ｒ２が水素原子、ベンジル基、フェネチル基又は４−フェニルベンジル基であり；
Ｒ３が水素原子であり；
Ｒ４が水素原子又はベンジル基であり；
Ｒ５が水酸基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基又はｔ−ブチルオキシ基である、
請求項１記載の皮膚老化防止又は改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は皮膚の老化防止又は改善効果や発毛抑制効果等を有する皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚老化に関する研究により、皮膚老化の原因として、加齢、乾燥、酸化、太陽光（紫外線）等による影響が主な因子に挙げられている。皮膚老化は、皮膚真皮におけるコラーゲンやエラスチンの減少、ヒアルロン酸をはじめとするムコ多糖類の減少、紫外線による細胞の損傷等により認知される。しかし、しわ発生防止等については、例えば、コラーゲン配合化粧料では充分な効果は得られていない。又、紫外線との関連性から紫外線照射により生じた皮膚の老化について種々研究されているが、未だに紫外線吸収剤、紫外線防御剤にかわる化粧料が開発されていない。
【０００３】
美的外観から特に手足等における体毛は無い方が好ましいとする傾向が高まり、各種の体毛除去方法、例えば、シェーバー、抜毛器等を用いる機械的除去方法、脱毛剤を用いた体毛を毛根から抜去する方法、除毛剤を用いてその化学的作用により体毛を除去する方法等が利用されている。しかしながら、これらの体毛除去方法は、皮膚に対して物理的又は化学的刺激を伴い、かつ、体毛除去の持続性には限界がある。そこで、体毛除去処理の軽減化が望まれている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、しわの発生等の皮膚の老化防止又は改善効果や発毛抑制効果等を有する皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、下記一般式（１）で表されるマロン酸アミド誘導体又はその塩を含有する皮膚外用剤を提供するものである。
【０００６】
【化１】
0004457132.tif 000002
【０００７】
〔式中、Ｒ1 は水素原子、アルキル基、アルケニル基又はアラルキル基を示し；
Ｒ2 は水素原子、又は置換基を有していてもよいアルキル、アルケニル若しくはアラルキル基を示し；
Ｒ3 は水素原子、アルキル基又はアルケニル基を示すか、Ｒ4 と一緒になって隣接する窒素原子とともに複素環を形成してもよい；
Ｒ4 は水素原子、又は置換基を有していてもよいアルキル、アルケニル若しくはアラルキル基を示すか、Ｒ3 と一緒になって前記の複素環を形成してもよい；
Ｒ5 は水酸基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基又はアミノ酸残基を示し；
ｎは０〜５の整数を示す〕
【発明の効果】
【０００８】
本発明の皮膚外用剤は優れた皮膚老化防止又は改善効果や発毛抑制効果等を有し、かつ合成が容易である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
一般式（１）中のＲ1 及びＲ3 におけるアルキル基又はアルケニル基としては炭素数１〜８のもの、特に炭素数１〜４のもの、さらに炭素数１〜４のアルキル基が好ましい。このうち、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基又はｔ−ブチル基が特に好ましい。アラルキル基としては、フェニルアルキル基、ビフェニルアルキル基、ナフチルアルキル基が挙げられるが、このうち、フェニル−Ｃ1-6アルキル基、ビフェニル−Ｃ1-6アルキル基が好ましく、ベンジル基がさらに好ましい。
Ｒ1 としては、水素原子、炭素数１〜８のアルキル基、フェニル−Ｃ1-6アルキル基又はビフェニル−Ｃ1-6アルキル基が特に好ましい。
Ｒ3 としては、水素原子が最も好ましい。
【００１０】
Ｒ2 及びＲ4 としては、水素原子、炭素数１〜１２の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル若しくはアルケニル基又はアラルキル基が好ましい。このうち、水素原子又は炭素数３〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル若しくはアルケニル基がより好ましく、中でも、水素原子、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基が特に好ましい。アラルキル基としては、フェニルアルキル基、ナフチルアルキル基が挙げられるが、このうち、フェニル−Ｃ1-6アルキル基が好ましく、ベンジル基、フェネチル基がさらに好ましい。
【００１１】
Ｒ3 及びＲ4 が一緒になって形成する複素環としては、ピロリジン環、ピペリジン環等が挙げられるが、ピロリジン環が好ましい。
【００１２】
Ｒ5 におけるアルコキシ基又はアルケニルオキシ基としては、炭素数１〜８、特に炭素数１〜４のアルコキシ又はアルケニルオキシ基、さらに炭素数１〜４のアルコキシ基が好ましい。またアミノ酸残基としては、必須アミノ酸の残基が挙げられる。ここで当該アミノ酸のアミノ基と一般式（１）中のカルボニル基はアミド結合している。Ｒ5 としては、水酸基又は炭素数１〜４のアルコキシ基が好ましく、水酸基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｔ−ブチルオキシ基が特に好ましい。
ｎは、０又は１が最も好ましい。
【００１３】
一般式（１）のマロン酸アミド誘導体の塩としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アミン塩、アミノ酸塩、酸付加塩等が挙げられる。好ましくはアルカリ金属塩又はアミノ酸塩である。なお、一般式（１）の化合物は光学活性を有していてもよく、立体配置はＲ、Ｓのいずれでも、ラセミ体でもよい。また、本化合物は水和物の形態であってもよい。
【００１４】
一般式（１）の化合物のうち、特に好ましい化合物としては、次のようなものを例示できる。
【００１５】
【化２】
0004457132.tif 000003
【００１６】
一般式（１）で表される化合物は、例えば次式のようなNakanoらの方法（Chem. Lett., 505-8(1990)）により合成することができる。
【００１７】
【化３】
0004457132.tif 000004
【００１８】
（Ｒ1 〜Ｒ5 、ｎは前記と同じ）
すなわち、マロン酸ハーフエステル（２）とアミノ酸エステル（３）を脱水縮合剤の存在下で反応させる。必要に応じて水酸化ナトリウムなどの塩基を反応させて目的物を得る。又、一般式（１）で表される化合物は次式のKatsuki らの方法（Bull. Chem.Soc. Jpn., 49, 3287-3290(1976)）によっても合成することができる。
【００１９】
【化４】
0004457132.tif 000005
【００２０】
（Ｒ1 〜Ｒ5 、ｎは前記と同じ）
すなわち、マロン酸ハーフエステル酸クロリド（４）とアミノ酸エステル（３）を塩基の存在下で反応させる。必要に応じてハロゲン化アルキルによるアルキル化反応や水酸化ナトリウムなどの塩基による加水分解反応を行ない目的物を得る。
【００２１】
本発明の皮膚外用剤への上記一般式（１）の化合物又はその塩の配合量は特に制限はないが、全組成に対して、例えば、０．０００１〜４０重量％が好ましく、０．０１〜２０重量％が特に好ましい。
【００２２】
本発明の皮膚外用剤は、皮膚の老化で生じる、しわ、たるみ、はりの減少等の改善、防止、又は発毛抑制の目的で投与することが特に好ましい。
【００２３】
又、本発明の皮膚外用剤には、角化改善剤を配合して、さらにしわの発生等の皮膚の老化防止又は改善効果や発毛抑制効果等を向上させうる。この角化改善剤としてはスフィンゴシン誘導体等が挙げられる。
【００２４】
又、本発明の皮膚外用剤には、上記有効成分や上記角化改善剤以外に、本発明の効果を損なわない範囲で任意の成分を配合できる。例えば、精製水、植物抽出物、アルコール、キレート剤、各種油剤、界面活性剤、乳化剤、増粘剤、防腐剤、酸化防止剤、溶剤、薬効成分、粉体、色素、香料等を配合できる。又、本発明の皮膚外用剤には、必要に応じて既存の皮膚老化防止剤又は改善剤、既存の発毛抑制剤、紫外線吸収剤、紫外線防御剤、コラーゲン、保湿剤、抗炎症剤、抗酸化剤等を配合できる。
【００２５】
本発明の皮膚外用剤は、常法により種々の形態にでき、ローション状、乳液状、クリーム状、軟膏状、スティック状、有機溶媒や精製水等による溶液状、パック状、ゲル状等が好ましい。すなわち、本発明の皮膚外用剤はローション、オイルエッセンス、Ｏ／Ｗ型又はＷ／Ｏ型のクリーム、乳化型皮膚外用剤、パック、軟膏、ファンデーション、皮膚洗浄剤、トニック、浴用剤等として使用される。
【実施例】
【００２６】
［合成例１］化合物１の合成
グリシンエチルエステル塩酸塩１６．０５ｇ（１１４mmol）及びトリエチルアミン２３．２７ｇ（２２８mmol）をクロロホルム５０mLに溶解し、氷冷で５℃まで冷却した。そのままの温度でエチルマロン酸クロリド１０．００ｇ（５７mmol）を滴下し、滴下終了後、薄層クロマトグラフィーで原料消失を確認した後、５％リン酸水溶液を加えて反応を終了した。有機層を蒸留水及び飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。次いで溶媒を留去し、残留物をカラムクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル−ｎ−ヘキサン混合溶媒で溶出した。溶媒を留去して化合物１ ９．４０ｇ（収率７６％）を得た。
NMR(DMSO-d6)δ：2.48-2.51(m,6H), 3.30(d,2H,J=9Hz), 3.85(d,2H,J=6Hz),
4.02-4.20(m,4H), 8.49(t,1H,J=5Hz).
【００２７】
［合成例２］化合物２の合成
化合物１ ５．００ｇ（２３．０mmol）を無水テトラヒドロフラン５０mLに溶解した。これを、水素化ナトリウム１．１０ｇ（２７．６mmol）のテトラヒドロフラン３０mLに懸濁した溶液中に加え、５０℃に加熱した。さらにベンジルブロミド３．７４ｇ（２１．９mmol）をゆっくりと滴下しそのままの温度で３時間攪拌した後、反応を終了した。冷却後、反応溶液に５％リン酸水溶液を加え、酢酸エチル３００mLで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水及び飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。次いで溶媒を留去し、残留物をカラムクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル−ｎ−ヘキサン混合溶媒で溶出した。溶媒を留去して化合物２ ３．８９ｇ（収率５５％）を得た。
NMR(DMSO-d6)δ：1.10(t,3H,J=7Hz), 1.17(t,3H,J=7Hz),2.98(dd,1H,J=7,14Hz),
3.07(dd,1H,J=8,14Hz), 3.68(t,1H,J=8Hz),3.80(d,2H,J=6Hz), 4.02(q,2H,J=7Hz),
4.07(q,2H,J=7Hz), 7.06-7.35(m,5H),8.57(t,1H,J=6Hz).
【００２８】
［合成例３］化合物３の合成
化合物２ ３．００ｇ（９．８mmol）をメタノール３０mLに溶解した。水素化カリウム１．２０ｇ（２１．５mmol）を水１０mLに溶解したものを加え、室温で２時間攪拌し反応を終了した。メタノールを減圧留去した後、５％リン酸水溶液を加え、生成する結晶をろ過した。結晶を水洗し減圧乾燥し、化合物３ ２．１７ｇ（収率８８％）を得た。
NMR(DMSO-d6)δ：2.95(dd,1H,J=7,18Hz), 3.05(dd,1H,J=8,18Hz),3.60(t,1H,J=7Hz),
3.74(d,2H,J=6Hz), 7.07-7.38(m,5H), 8.41(t,1H,J=5Hz),12.55(bs,2H).
【００２９】
［合成例４〜６］
化合物４〜６を、表１に示すアミノ酸エステル、ハロゲン化アルキルを用い、合成例１〜３の方法に準じて合成した。
【００３０】
【表１】
0004457132.tif 000006
【００３１】
試験例１  ヘアレスマウスによるしわ形成抑制試験
ヘアレスマウス（HR／ICR ，実験開始時６週齢）の背部に、健康線用ランプ（東芝製、SE20）で、１回の照射量を１ＭＥＤ以下に調節してＵＶ−Ｂ照射し、直後に被験化合物を含む８０％エタノール溶液（被験体）を１００μＬを塗布した。この作業を２０週間にわたって行なった。照射エネルギー量はＵＶ−Radiometer（TOKYOOPTICAL社製、UVR-305/365D）を用いて測定した。また、コントロールとして８０％エタノールのみを塗布したものを同様に試験した。試験終了後、形成されたしわの度数を肉眼により下記の基準（しわスコア）で評価した。結果を表２に示す。
【００３２】
＜しわスコア＞
０：しわが無形成
１：しわがかすかに形成
２：しわが微量形成
３：しわが若干形成
４：しわが強固に形成
【００３３】
【表２】
0004457132.tif 000007
【００３４】
表２の結果から、一般式（１）の化合物は、顕著なしわ形成抑制作用を有し、優れた皮膚老化防止・改善効果を示した。
【００３５】
試験例２  ラットによる皮膚弾力性維持試験
３週齢のＳＤ系雄性ラットの両足底を４群に分け、被験物質（８０％エタノール溶液）塗布群、溶媒（８０％エタノール）塗布群、無処理群とした。ＵＶ−Ｂ（１ＭＥＤ以下）照射後、被験物質又は溶媒を１足当たり１０μＬを塗布した。この作業を、隔日、週３回、６週間にわたって行なった。
皮膚の弾力性測定はキュートメーターＳＥＳ５７５（クレージュ・カザカ社製）を用い、５００mbで３秒間吸引後、解放し、その後３秒間の計６秒間の変位を測定した。測定は１足当たり５回行ない、Ｕｅ値及びＵｆ値を求めた。
弾性繊維の直線性の解析はＳＥＭ写真の画像解析を用いたImokawa らの方法（J. Invest. Dermatol., 105, 254-258(1995)）によった。すなわち、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）用試料は、試験終了後、ラット足底をメルコックス（大日本インキ（株））にて還流固定後、ギ酸消化を行ないＳＥＭに供した。各試料ごとに採取１０００倍のＳＥＭ写真からそれぞれ代表的な１０枚を抽出し、拡大コピーをした後、均等に１６分割した。各領域で任意の弾性繊維を一本抽出し、透明フィルム上に一定太さの線（８ピクセル幅）でトーレスした。この弾性繊維をトーレスした線の占める面積をＡ、トーレスが囲まれる最小面積の長方形の縦長をＢ、横長をＣとして弾性繊維の直線性はＡ／（Ｂ×Ｃ）で表わされる。例えば、弾性繊維のトーレスが直線であれば直線性は１となる。結果を表３に示す。
【００３６】
【表３】
0004457132.tif 000008
【００３７】
表３の結果から、一般式（１）の化合物はＵＶ−Ｂによる皮膚の弾力性低下及びその原因となる弾性繊維の３次元構造の変性を強く予防する効果を示し、皮膚のはりを保持できる。
【００３８】
試験例３  マウスによる発毛抑制試験
生後６週齢のＣ3Ｈマウス１群５匹の背部毛を、電気バリカン及び電気シェーバーを用い、皮膚を傷つけないように２×４cm2 にわたり剃毛した。剃毛部位に試料を１日２回１００μＬずつ４週間にわたり塗布した。被験物質は溶媒（８０％エタノール）に溶解して表３に示す濃度に調整した。対称群には溶媒のみを塗布した。３週間後、再生毛を観察するために、剃毛部分を一定倍率で撮影し、画像解析装置を用いて再生毛面積比（再生毛面積／剃毛面積）を対象群と比較した。発毛抑制率は、対象群の再生毛面積比を１００としたときの相対値（％）で示した。結果を表４に示す。
【００３９】
【表４】
0004457132.tif 000009
【００４０】
表４の結果から、一般式（１）の化合物は優れた発毛抑制効果を有していた。
【００４１】
配合例１
次に示す配合で皮膚老化改善用クリームを常法に従い製造した。
（重量％）
化合物２                                                ０．２
ステアリン酸                                            ２．０
セタノール                                              ４．０
スクワレン                                              ８．０
ワセリン                                                ５．０
硬化パーム油                                            ４．０
ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（20E.O.）  １．４
親油性モノステアリン酸グリセリン                        ２．４
ブチルパラベン                                          ０．１
グリセリン                                              ３．０
１０．０重量％水酸化カリウム                            ０．２
香料                                                    ０．１
精製水                                                バランス
合計                                                １００．０
【００４２】
配合例２
次に示す配合で皮膚老化防止・改善用パックを常法に従い製造した。
（重量％）
化合物３                                                ３．０
ポリビニルアルコール                                  ２０．０
グリセリン                                              ５．０
エタノール                                            １６．０
香料                                                    ０．１
色素                                                    ０．１
精製水                                                バランス
合計                                                １００．０
【００４３】
配合例３
次に示す配合で発毛抑制ローションを製造した。すなわちＡに属する成分を溶解し、これとは別にＢに属する成分を溶解した。ＡにＢを添加して均一に攪拌混合し、発毛抑制ローションを得た。
（重量％）
Ａ．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                      ０．８
エタノール                                        ３０．０
Ｂ．化合物４                                            １．０
ドデシル硫酸ナトリウム                              ０．１２
ドデシルメチルアミンオキシド                        ０．１８
イソプロピルアルコール                            １５．０
ベンジルアルコール                                １２．０
グリセリン                                          ２．０
精製水                                            バランス
合計                                            １００．０
【００４４】
配合例４
次に示す配合で発毛抑制エアゾールを製造した。すなわちＡに属する成分を均一に混合して容器に入れ、常法によりＢを容器に充填して発毛抑制エアゾールを製造した。
（重量％）
Ａ．化合物５                                            １．０
セタノール                                          １．２
プロピレングリコール                                ４．０
エタノール                                          ８．０
精製水                                            バランス
Ｂ．液化石油ガス（噴射剤）                              ４．０
合計                                            １００．０