(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記段階を含むことを特徴とする式（ＩＳ）：
0004560147.tif 000030
（ここで、Ｒ1は直鎖または分岐鎖を有する脂肪族または芳香族アシル基を表す）
で表されるＳ形態の2-メルカプトメチル-3-フェニル−プロパン酸のＳ-アシル誘導体の不斉合成方法：
ａ）水素化物の存在下で、式（Ｖ）：
0004560147.tif 000031
（ここで、Ｒ4は１〜４個の炭素原子を含むアルキル鎖を表す）
のマロン酸エステルを還元することによって式（VI）：
0004560147.tif 000032
のジオールを作り、
ｂ）無水酢酸とを反応させるか、または、酵素を用いて（VI）のジオールをジアセテートにし、得られたジアセテートを酵素を用いて式（VIIＳ）で表される（Ｓ）形態のモノアセテート（VIIＳ）：
0004560147.tif 000033
を作り、
ｃ）式（VIIＳ）のモノアセテートを酸化して式（IXＲ）：
0004560147.tif 000034
で表される酸を形成し、
ｄ）塩基性水溶液の存在下で、式（IXＲ）の化合物を鹸化することによって式（ＸＲ）：
0004560147.tif 000035
のヒドロキシ酸を形成し、
ｅ）アルキルアゾジカルボキシレート／トリフェニルホスフィン錯体の存在下で、ミツノブ（Mitsunobu）型反応に従って、式（ＸＲ）のヒドロキシ酸を式（ＸＩ）で表されるメルカプト酸：
R1SH                  （XI）
（ここで、Ｒ1は直鎖または分岐した脂肪族または芳香族アシル基を示す）
でチオアシル化することによって式（ＩＳ）の所望の酸を製造する。
【請求項２】
式（VI）のジオールから式（VIII）：
0004560147.tif 000036
のジアセテートを作り、次に、酵素の存在下で式（VIII）のジアセテートのエナンチオ選択的モノ加水分解によってモノアセテート誘導体にすることによってＳ形態のモノアセテートを得る請求項１に記載の方法。
【請求項３】
段階ａ）で使用する水素化物を水素化リチウムアルミニウムと水素化ホウ素ナトリウムから選択する請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ジオール（VI）のジアセチル化段階ｂ）で、4-ジメチルアミノピリジン／トリエチルアミン混合物および硫酸から選択される触媒を使用する請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
ジオール（VI）のジアセチル化反応段階ｂ）で使用する酵素がノボジム435（Novo Nordisk）である請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ジアセテート（VIII）のモノ加水分解で使用する酵素をプソイドモナスフルオレサンスから得られたリパーゼ（フルカ）およびリパーゼＰＳ（アマノ）から選択する請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
段階ｃ）で使用する酸化剤をジョーンズ試薬、過マンガン酸カリウムおよび硝酸の中から選択する請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
段階ｄ）で使用する塩基性水溶液を水酸化リチウム水溶液および水酸化ナトリウム水溶液から選択する請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ミツノブ型反応の段階ｅ）で使用するアゾジカルボン酸アルキルをアゾジカルボン酸ジイソプロピルおよびアゾジカルボン酸ジエチルから選択する請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
ミツノブ型反応の段階ｅ）で使用する式（XI）のメルカプト酸をチオ酢酸およびチオ安息香酸から選択する請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
下記の（ａ）〜（ｅ）の段階を含む請求項１〜１０のいずれか一項に記載の式（IaＳ）の（S）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸の製造方法：
0004560147.tif 000037
（ａ）水素化物を用いてマロン酸エステル（Ｖ）を還元し、
（ｂ）酵素ノボジム435（Novo Nordisk）の存在下で、酢酸ビニル中で式（VI）のジオールをジアセチル化した後、得られた式（VIII）のジアセテートをプロイドモナスフルオレサンスから得られたリパーゼ（フルカ）の存在下で、pH7リン酸塩緩衝剤中でモノ加水分解し、
（ｃ）ジョーンズ試薬（CrO3-H2SO4）を用いて、アセトン中で式（VIIＳ）のモノアセテートのアルコール官能基を酸化し、
0004560147.tif 000038
（ｄ）アルカリ性水溶液を用いてアセテート官能基を鹸化した後、酸性化によって、式（ＸＲ）：
0004560147.tif 000039
のヒドロキシ酸を遊離し、
（ｅ）式（ＸＲ）のヒドロキシ酸のアルコール官能基をトリフェニルホスフィン／アゾジカルボン酸ジイソプロピル錯体とチオ酢酸の存在下でミツノブ型反応によって置換することにより、式（IaＳ）の（Ｓ）形態の酸を得る。
【請求項１２】
下記段階を含むことを特徴とする式（ＩＲ）：
0004560147.tif 000040
（ここで、Ｒ1は直鎖または分岐鎖を有する脂肪族または芳香族アシル基を表す）
で表されるＲ形態の2-メルカプトメチル-3-フェニル−プロパン酸のS-アシル誘導体の不斉合成方法：
ａ）水素化物の存在下で、式（Ｖ）：
0004560147.tif 000041
（ここで、Ｒ4は１〜４個の炭素原子を含むアルキル鎖を表す）
のマロン酸エステルを還元することによって式（VI）：
0004560147.tif 000042
のジオールを作り、
ｂ）式（VI）のジオールを酵素の存在下で酢酸ビニルと反応させて式（VIIＲ）で表される（Ｒ）形態のモノアセテート（VIIＲ）：
0004560147.tif 000043
を作り、
ｃ）式（VIIＲ）のモノアセテートを酸化して式（IXＳ）：
0004560147.tif 000044
で表される酸を形成し、
ｄ）塩基性水溶液の存在下で、式（IXＲ）の化合物を鹸化することによって式（ＸＳ）：
0004560147.tif 000045
のヒドロキシ酸を形成し、
ｅ）アルキルアゾジカルボキシレート／トリフェニルホスフィン錯体の存在下で、ミツノブ（Mitsunobu）型反応に従って、式（ＸＲ）のヒドロキシ酸を式（ＸＩ）で表されるメルカプト酸：
R1SH                  （XI）
（ここで、Ｒ1は直鎖または分岐した脂肪族または芳香族アシル基を示す）
でチオアシル化することによって式（ＩＲ）の所望の酸を製造する。
【請求項１３】
段階ａ）で使用する水素化物を水素化リチウムアルミニウムと水素化ホウ素ナトリウムから選択する請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
モノアセテート（VIIＲ）を製造するために段階ｂ）で使用する酵素をリパーゼPS（アマノ）およびプソイドモナスフルオレサンスから得られたリパーゼ（フルカ）から選択する請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
段階ｃ）で使用する酸化剤をジョーンズ試薬、過マンガン酸カリウムおよび硝酸の中から選択する請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
段階ｄ）で使用する塩基性水溶液を水酸化リチウム水溶液および水酸化ナトリウム水溶液から選択する請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
ミツノブ型反応の段階ｅ）で使用するアゾジカルボン酸アルキルをアゾジカルボン酸ジイソプロピルおよびアゾジカルボン酸ジエチルから選択する請求項１２〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
ミツノブ型反応の段階ｅ）で使用する式（XI）のメルカプト酸をチオ酢酸およびチオ安息香酸から選択する請求項１２〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
下記の（ａ）〜（ｅ）段階を含む請求項１２〜１８のいずれか一項に記載の式（IaＲ）の（R）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（Ｒ1＝アセチル）の製造方法：
0004560147.tif 000046
（ａ）水素化物を用いて溶剤中でマロン酸エステルを還元して、対応するジオール（VI）を作り、
（ｂ）リパーゼPS（アマノ）の存在下で酢酸ビニル中で得られた（VI）のジオールのモノアセチル化を行い、
（ｃ）このようにして得られた式（VIIＲ）のモノアセテートのアルコール基をアセトン中でジョーンズ試薬（CrO３-H２SO４）を用いて酸化し、
（ｄ）アルカリ性水溶液を用いて酢酸基を鹸化し、酸性化によって、式（ＸＳ）：
0004560147.tif 000047
のヒドロキシ酸を遊離し、
（ｅ）式（ＸＳ）のヒドロキシ酸のアルコール官能基をトリフェニルホスフィン／アゾジカルボン酸ジイソプロピル錯体とチオ酢酸の存在下でミツノブ型反応に従って置換することによって式（ＩａＲ）の（Ｒ）構成の酸を得る。
【請求項２０】
式（II）：
0004560147.tif 000048
（ここで、
Ｒ1は水素原子、直鎖または分岐鎖を有する脂肪族または芳香族アシル基を示し、
Ｒ2は水素原子、低級アルキル基、フェニル基または低級フェニルアルキレン基を示し、
Ｒ3は、水素原子、低級アルキル基、低級ヒドロキシアルキレン基、フェニル基、低級フェニルアルキレン基、低級ヒドロキシフェニルアルキレン基、低級アミノアルキレン基、低級グアニジノアルキレン基、低級メルカプトアルキレン基、低級アルキル低級チオアルキレン基、低級イミダゾイルアルキレン基、低級インドリルアルキレン基、低級カルバミルアルキレン基、低級カルボキシアルキレン基を示しｎは０〜10である）
の光学活性なＮ−（メルカプトアシル）アミノ酸誘導体の製造方法において、
請求項１〜１１に記載の方法によって光学的に純粋な式（ＩＳ）のＳ形態の2-メルカプトメチル-3-フェニルプロパン酸のＳ-アシル誘導体を製造する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項２１】
上記化合物（IaＳ）を使用して下記の式（IV）の化合物を合成することを特徴とする請求項２０に記載の方法：
0004560147.tif 000049
【請求項２２】
下記の（ｆ）と（ｇ）の段階をさらに含む請求項２０または２１に記載の方法：
（ｆ）塩素化剤を用いて酸（ＩＳ）の塩化物（XIIＲ）：
0004560147.tif 000050
を形成し、
ｇ）塩基の存在下で、酸塩化物（XIIＲ）と式（XIII）：
0004560147.tif 000051
のアミノエステルとを反応させる。
【請求項２３】
式（II）：
0004560147.tif 000052
（ここで、
Ｒ1は水素原子、直鎖または分岐鎖を有する脂肪族または芳香族アシル基を示し、
Ｒ2は水素原子、低級アルキル基、フェニル基または低級フェニルアルキレン基を示し、
Ｒ3は、水素原子、低級アルキル基、低級ヒドロキシアルキレン基、フェニル基、低級フェニルアルキレン基、低級ヒドロキシフェニルアルキレン基、低級アミノアルキレン基、低級グアニジノアルキレン基、低級メルカプトアルキレン基、低級アルキル低級チオアルキレン基、低級イミダゾイルアルキレン基、低級インドリルアルキレン基、低級カルバミルアルキレン基、低級カルボキシアルキレン基を示しｎは０〜10である）
の光学活性なＮ−（メルカプトアシル）アミノ酸誘導体の製造方法において、
請求項１２〜１９に記載の方法によって光学的に純粋な式（ＩＲ）のＲ形態の2-メルカプトメチル-3-フェニルプロパン酸のＳ-アシル誘導体を製造する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項２４】
上記化合物（IaＲ）を使用して下記の式（III）の化合物を合成することを特徴とする請求項２３に記載の方法：
0004560147.tif 000053
【請求項２５】
下記の（ｆ）と（ｇ）の段階をさらに含む請求項２３または２４に記載の方法：
（ｆ）塩素化剤を用いて酸（ＩＲ）の塩化物（XIIＳ）：
0004560147.tif 000054
を形成し、
ｇ）塩基の存在下で、酸塩化物（XIIＳ）と式（XIII）：
0004560147.tif 000055
のアミノエステルとを反応させる。
【発明の詳細な説明】
本発明は、2-メルカプトメチル-3-フェニルプロパン酸のS-アシル誘導体のエナンチオ選択合成方法と、N-（メルカプトアシル）アミノ酸誘導体の不斉合成へのその使用に関するものであり、特に、一般式（Ｉ）で表される光学的に純粋な誘導体の新規合成方法に関するものである：
0004560147.tif 000002
（ここで、
Ｒ1は直鎖または分岐した脂肪族基または芳香族アシル基を示す）
本発明方法で得られる式（Ｉ）の誘導体は、式（II）で表される光学活性なN-（メルカプトアシル）アミノ酸誘導体の合成に有用である：
0004560147.tif 000003
（ここで、
Ｒ1は水素原子、直鎖または分岐した脂肪族基または芳香族アシル基を示し、
Ｒ2は水素原子、低級アルキル基、フェニル基または低級フェニルアルキレン基を示し、
Ｒ3は水素原子、低級アルキル基、低級ヒドロキシアルキレン基、フェニル基、低級アルキレンフェニル基、低級ヒドロキシフェニルアルキレン基、低級アミノアルキレン基、低級グアニジノ−アルキレン基、低級メルカプトアルキレン基、低級アルキル低級チオアルキレン基、低級イミダゾリルアルキレン基、低級インドリルアルキレン基、低級カルバミルアルキレン基、低級カルボキシアルキレン基を示し、
ｎは０〜10である）
低級アルキル基とは１〜６個の炭素原子、好ましくは１〜４個の炭素原子を含む直鎖または分岐したアルキル基を意味する。
低級アルキレン基とは１〜６個の炭素原子、好ましくは１〜４個の炭素原子を含むアルキレン基を意味する。
式（II）で表される好ましい化合物は以下の式（III）および（IV）に対応する化合物であり、本発明方法はこれらの化合物に特に好適に適用することができる：
0004560147.tif 000004
すなわち、ベンジルN-（R）-［2-アセチルチオメチル-1-オキソ-3-フェニル-プロピル］グリシネート、
0004560147.tif 000005
すなわち、ベンジルN-（S）-［2-アセチルチオメチル-1-オキソ-3-フェニル-プロピル］グリシネート。
式（II）の化合物は優れた薬理学的特性、特に、特定の酵素例えば中性エンドペプチダーゼ（EC 3.4.24.11）やアンジオテンシン転化酵素（EC 3.4.24.11）に対して抑制作用を有している。従って、式（II）の化合物の投与によってこれら酵素の活性を抑制あるいは無くすことができるが、これはエンケファリン、心房性ナトリウム利尿因子の不活性化およびアンジオテンシンＩのアンジオテンシンIIへの転化によるものである。治療ではこれら化合物は抗分泌、腸または抗高血圧作用を示し、慢性心臓疾患の治療に用いられる。さらに、この化合物は骨粗鬆症の治療にも用いることができる（WO 94/21242号）。
式（II）の化合物、特に式（III）および（IV）の化合物の製造法と治療への応用はフランス国特許第2,623,498号に記載されている。
式（Ｉ）の化合物は式（II）の化合物の製造時に使用するできる。
式（Ｉ）の化合物はいわゆる不斉炭素を含み、この炭素は二つの形態ＲまたはＳを有することができ、従って、不斉炭素の形態に対応する（ＩＲ）および（ＩＳ）で示すことのできる二つの鏡像体（エナンチオマー）として存在する：
0004560147.tif 000006
式（Ｉ）の誘導体の不斉合成方法は新規である。
一般式（Ｉ）で表される酸の二つの鏡像体（ＩＲ）および（IＳ）をキラルなアミンの酸を用いてラセミ混合物の分離によって得る方法は欧州特許第318,377号に記載されている。しかし、この分離方法では所望する鏡像体の最大50％しか得ることができない。
本発明の目的は、光学的に純粋な形態で2-メルカプトメチル-3-フェニルプロパン酸のS-アシル誘導体を製造する方法を提供することにある。
本発明の別の目的は上記のような光学的分離の問題のない方法を提供することにある。
本発明のさらに他の目的は2-メルカプトメチル-3-フェニル−プロパン酸のS-アシル誘導体を出発材料とする光学活性なN-（メルカプトアシル）アミノ酸誘導体の製造方法を提供することにある。
従って、本発明の対象は、下記の段階a）〜e）を含むことを特徴とする式（Ｉ）で表される2-メルカプトメチル-3-フェニル−プロパン酸のS-アシル誘導体の不斉合成方法にある：
0004560147.tif 000007
（ここで、Ｒ1は直鎖または分岐した、線状または枝分れ脂肪族アシル基、もしくは芳香族アシル基を示す）
ａ）水素化物の存在下で、式（Ｖ）のマロン酸エステル：
0004560147.tif 000008
（ここで、
Ｒ4は１〜４個の炭素原子を含むアルキル鎖を示す）
を還元することによって下記の式（ＶＩ）：
0004560147.tif 000009
のジオールを作り、
ｂ）式（VII Ｒ）および（VII Ｓ）で表される（Ｒ）形態および（Ｓ）形態のモノアセテート（VII）：
0004560147.tif 000010
を作り、
ｃ）式（VII Ｒ）および（VII Ｓ）のモノアセテートを酸化して式（IX  Ｓ）または（IX  Ｒ）：
0004560147.tif 000011
で表される酸を形成し、
ｄ）塩基性水溶液の存在下で、式（IXＳ）または（IXＲ）の化合物を鹸化することによって式（ＸＳ）または（ＸＲ）：
0004560147.tif 000012
のヒドロキシ酸を形成し、
ｅ）アルキルアゾジカルボキシレート／トリフェニルホスフィン錯体の存在下で、ミツノブ（Mitsunobu）型反応に従って、式（ＸＳ）またMは（ＸＲ）のヒドロキシ酸を式（ＸＩ）で表されるメルカプト酸：
Ｒ1 ＳＨ          （ＸＩ）
（ここで、Ｒ1は直鎖または分岐した脂肪族または芳香族アシル基を示す）
でチオアシル化することによって式（ＩＲ）または（ＩＳ）の所望の酸を製造する：
0004560147.tif 000013
本発明の他の対象は、式（II）で表される光学活性なN-（メルカプトアシル）アミノ酸誘導体の製造方法にある：
0004560147.tif 000014
（ここで、Ｒ1は水素原子、直鎖または分岐した脂肪族または芳香族アシル基を示し、
Ｒ2は低級アルキル基、フェニル基または低級フェニルアルキレン基を示し、
Ｒ3は水素原子、低級アルキル基、低級ヒドロキシアルキレン基、フェニル基、低級フェニルアルキレン基、低級ヒドロキシフェニルアルキレン基、低級アミノアルキレン基、低級グアニジノアルキレン基、低級メルカプトアルキレン基、低級アルキル低級チオアルキレン基、低級イミダゾリルアルキレン基、低級インドリルアルキレン基、低級カルバミルアルキレン基、低級カルボキシアルキレン基を示し、
ｎは０〜10である）
本発明方法は上記方法によって得られた光学的に純粋な形態の式（Ｉ）の2-メルカプトメチル-3-フェニルプロパン酸のS-アシル誘導体を使用する点に特徴がある。
本発明のさらに他の対象は上記方法で得られる光学的に純粋な形態の式（Ｉ）の2-メルカプトメチル-3-フェニルプロパン酸のS-アシル誘導体の上記の式（II）で表される光学活性なN-（メルカプトアシル）アミノ酸誘導体の合成での使用にある。
本出願人の知る限り、光学的分離の問題なしに光学的に純粋な形態の式（Ｉ）の誘導体を合成する方法は知られていない。
本発明方法の基本的特徴は出発原料として式（Ｖ）で表されるベンジルマロン酸エステルを使用する点にある：
0004560147.tif 000015
（ここで、Ｒ4は１〜４個の炭素原子を含むアルキル鎖）
次に、水素化リチウムアルミニウム等の水素化物を用いて、式（Ｖ）で表されるマロン酸エステルを還元することによって式（VI）で表されるジオールを製造する：
0004560147.tif 000016
なお、水素化ホウ素ナトリウムを使用することもできる。
式（VI）のジオールを、リパーゼPS（アマノ）またはプソイドモナスフルオレサンス（Pseudomonas fluorescens）（フルカ）から得られたリパーゼ等の酵素を用いて、酢酸ビニル中でモノアセチル化することによって（Ｒ）形態のモノ酢酸塩（VIIＲ）を得る：
0004560147.tif 000017
（Ｓ）形態のモノアセテートを得る場合には、例えば4-ジメチルアミノピリジン／トリエチルアミンまたは硫酸混合物等の触媒の存在下あるいはノボジム435（Novo Nordisk）等の酵素を用いて酢酸ビニル中で式（VI）のジオールをジアセチル化することによって式（VIII）のジアセテートを得る：
0004560147.tif 000018
次に、式（VIII）のジアセテートを、リパーゼPS（アマノ）またはプソイドモナスフルオレサンスから得られたリパーゼ（Fluka）等の酵素を用いてモノ加水分解して（Ｓ）形態成のモノアセテート（VII Ｓ）を得る：
0004560147.tif 000019
次に、式（VII Ｒ）または（VII Ｓ）のモノアセテートをジョーンズ試薬（CrO3-H2SO4）等の酸化剤を用いて、アセトン等の溶剤中で酸化することによって（Ｓ）形態の酸（IXＳ）または（Ｒ）形態の酸（IXＲ）を得る：
0004560147.tif 000020
酸化剤として、過マンガン酸カリウムまたは硝酸を用いることもできる。
式（VII Ｓ）または（VII Ｒ）の化合物を水酸化ナトリウムや水酸化リチウム水溶液等の塩基水溶液によって鹸化することによって（Ｓ）形態のヒドロキシ酸（ＸＳ）または（Ｒ）形態のヒドロキシ酸（ＸＲ）を得る：
0004560147.tif 000021
モノアセテート（VII Ｓ）および（VII Ｒ）の製造と、リパーゼＰの酸を用いた2-置換3-ヒドロキシプロピオン酸のエナンチオ選択合成はＫ．ツジ達の「Tett．Lett．」、30（45）、6189〜6192頁（1989年）およびＳ．アツウミ達の「Tett．Lett．」31（11）、1601〜1604頁（1990年）等で公知である。これらの化合物は2-置換3-アルキル（またはアリル）スルホニルプロピオン酸を出発原料とするレニン抑制剤の合成における中間体である。
次に、式（ＸＳ）または（ＸＲ）のヒドロキシ酸をミツノブ型反応（Ｏ．ミツノブ、Synthesis、１〜27頁、1991年）に従ってアルキルアゾジカルボキシレート／トリフェニルホスフィン錯体と、式（XI）：
Ｒ1 ＳＨ                  （XI）
（ここで、Ｒ1は、式（Ｉ）と同じ定義）
のメルカプト酸の存在下でチオアシル化して、（Ｒ）構成の式（ＩＲ）の酸または（Ｓ）形態の式（ＩＳ）の酸を得る。
ミツノブ型反応に使用するアルキルアゾジカルボキシレートはジイソプロピルアゾジカルボキシレートまたはジエチルアゾジカルボキシレートから選択するのが好ましい。
ミツノブ反応に使用するメルカプト酸（XI）はチオ酢酸およびチオ安息香酸から選択するのが好ましい。
本発明方法は、基Ｒ1＝ＣＨ3ＣＯ−に対応する式（IaＲ）と、式（IaＳ）の（R）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸および（S）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸の製造に特に適している：
0004560147.tif 000022
式（IaＲ）の（R）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸の合成に適用する場合の本発明方法は下記の段階を含む：
ａ）水素化リチウムアルミニウム等の水素化物を用いて、テトラヒドロフラン等の溶剤中でベンジルマロン酸ジメチル（Ｒ4＝ＣＨ3）等のマロン酸エステル（Ｖ）を還元し、
ｂ）得られたジオール（VI）をリパーゼPS（アマノ）またはプソイドモナスフルオレサンス（フルカ）から得られたリパーゼ等の酵素を用いて、酢酸ビニル等の溶剤中で、エナンチオ選択モノアセチル化し、
ｃ）得られたモノアセテートをジョーンズ試薬等の酸化剤の存在下で、アセトン等の溶剤中で酸化し、
ｄ）水酸化ナトリウム水溶液または水酸化リチウム溶液等の塩基性水溶液によって鹸化した後、例えば塩酸水溶液のような酸水溶液を用いて酸性化して式（ＸＳ）：
0004560147.tif 000023
のヒドロキシ酸を形成し、
ｇ）ヒドロキシ酸（ＸＳ）を例えばアルキルアゾジカルボキシレート／トリフェニルホスフィン錯体とチオ酢酸の存在下で、テトラヒドロフラン等の溶液中で、ミツノブ型求核性置換反応で酸（IaＲ）を得る。
式（IaＳ）の（S）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸の合成に適用する場合の本発明方法は下記の段階を含む：
ｂ）式（VI）のジオールのジアセチル化を例えば、4-ジメチルアミノピリジン／トリエチルアミン混合物または硫酸等の触媒の存在下で、無水酢酸の作用あるいはノボジム435（Novo Nordisk）等の酵素を用い、例えば酢酸ビニルの溶剤中で行う。
得られたジアセテートのエナンチオ選択単加水分解をリパーゼＰＳ（アマノ）またはプソイドモナスフルオレサンス（フルカ）から得られたリパーゼ等の酵素を用いて、例えば、0.1M pH7リン酸塩緩衝剤のような緩衝剤およびアセトン等の有機溶剤中で行い、
ｃ）得られたモノアセテートをジョーンズ試薬等の酸化剤の存在下でアセトン等の溶剤中で酸化し、
ｄ）水酸化ナトリウム水溶液または水酸化リチウム水溶液等の塩基性水溶液を用いて鹸化した後、例えば塩酸水溶液のような酸水溶液を用いて酸性化して式（ＸＲ）：
0004560147.tif 000024
のヒドロキシ酸を形成し、
ｅ）ヒドロキシ酸（ＸＲ）を例えばアルキルアゾジカルボキシレート／トリフェニルホスフィン錯体とチオ酢酸の存在下で、テトラヒドロフラン等の溶液中で、ミツノブ型求核性置換反応を行って酸（IaＳ）を形成する。
本発明方法によって得られる（Ｓ）形態の式（ＩＳ）あるいは（Ｒ）形態の式（ＩＲ）の光学的に純粋な酸は、式（II）の光学的に純粋なN-（メルカプトアシル）アミノ酸の合成において特に有利に用いられ、特に式（III）および（IV）で表されるアミノ酸誘導体の合成に適している。
式（Ｉ）の酸からのN-（メルカプトアシル）アミノ酸の製造法は公知で、例えば欧州特許第501,870号に記載されている。
このN-（メルカプトアシル）アミノ酸は下記の連続した段階で得ることができる：
ｆ）光学的に純粋な（ＩＲ）または（ＩＳ）形態の式（Ｉ）の酸を塩化チオニルまたは塩化オキサリル等の塩素化剤を用いて酸塩化物（XII Ｓ）または（XII Ｒ）：
0004560147.tif 000025
（ここで、Ｒ1は、式（Ｉ）と同じ定義）
に転化し、
ｇ）光学的に純粋な（XII Ｓ）または（XII Ｒ）の形態の式（XII）の酸塩化物をトリエチルアミンのような塩基の存在下で式（XIII）のアミノエステル：
0004560147.tif 000026
（ここで、Ｒ2、Ｒ3およびｎは式（ＩＩ）で定義のもの）
とカップリングさせて、光学的に純粋な式（II）の誘導体にする：
0004560147.tif 000027
以下、本発明の実施例を記載するが、本発明が下記実施例に限定されるものではない。
実施例１
段階ａ：
2-ベンジル-1,3-プロパンジオール（VI）
１リットルの三つ口円錐フラスコに入れた200mlの無水テトラヒドロフランに15g（395.2ミリモル）のリチウム水素アルミニュウムを添加する。22.5ｇ（101.3ｍモル）のベンジルマロン酸ジメチルと30mlの無水テトラヒドロフランから製造した溶液を攪拌しながら添加し、穏やかに還流する。反応物を３時間還流状態に維持する。混合物を氷浴で冷却し、140mlのテトラヒドロフランで希釈し、15mlの水、15mlの15％水酸化ナトリウム水溶液および45mlの水を順次添加して加水分解する。
室温で0.5時間攪拌すると反応物は乳白色になった。沈殿物を濾過で除去し、300mlのエチルエーテルで洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過、濃縮した。16ｇの固体が得られ、氷で冷却した200mlの石油エーテル中でこの生成物を粉砕する。濾過し、P2O5で真空乾燥すると、15ｇ（90.24ｍモル）の2-ベンジル-1,3-プロパンジオールを得る。
質量＝15ｇ
収率＝89％
融点＝68℃（コフラー）
ＩＲ（cm-1）：3255
1H NMR（CDCl3）：7.4〜7.0（ｍ，５Ｈ）；3.9〜3.5（ｍ，４Ｈ）；3.1（広幅ｓ，２Ｈ）；2.55（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７Hz）；2.1〜1.9（ｍ，１Ｈ）
13C NMR（CDCl3）：139.7；128.9；128.3；126.0；65.0；43.7；34.1
段階ｂ：
（R）-3-アセトキシ-2-ベンジルプロパノル（VII Ｒ）
４ｇ（24ｍモル）の2-ベンジル-1,3-プロパンジオール（段階ａ）の40mlの酢酸ビニル中の懸濁液に10mgのリパーズPS（アマノ）を添加し、混合物をこの温度で48時間攪拌する。反応物を濾過し、濃縮すると、（R）-3-アセトキシ-2-酢酸ベンジルプロパノールが油として得られる。
質量＝4.29ｇ
収率＝86％
〔α〕20D＝＋28.5°（CHCl3、ｃ＝1.15）
IR（cm-1：1735
1H NMR（CDCl3）：7.35〜7.10（ｍ，５Ｈ）；4.25〜4.0（ｍ，２Ｈ）；3.65〜3.40（ｍ，２Ｈ）；2.75〜2.50（ｍ，２Ｈ）；2.20〜2.0（ｍ，２Ｈ）；2.05（ｓ，３Ｈ）
13Ｃ  NMR（CDCl3）：190.7；138.1；128.9；128.4；126.2；63.6；61.9；42.5；34.2；20.8
段階ｃ：
（S）-2-ベンジル-3-アセトキシプロパン酸（IXＳ）
4.0ｇ（19.2ｍモル）の上記（R）-3-アセトキシ-2-ベンジルプロパノール（VII Ｒ）を80mlのアセトンに溶解し、０℃で、22.8mlのジョーンズ（Jones）試薬を滴下添加する。次に、混合物を０℃で10分間攪拌した後、この温度で10mlのイソプロパノールを添加する。攪拌を０℃で１時間続ける。
反応物を濾過し、濾液を40mlの水で希釈し、真空濃縮してアセトンを除去する。炭酸ナトリウム水素を用いて低温条件下で残留物をpH＝９まで塩基化する。その後、塩基性水性相を酢酸エチルで洗浄する（15mlで３回）。
次に、氷−水浴を用いて水性相を冷却し、濃縮した塩酸水溶液によってpH＝１まで酸性化する。この水性相を酢酸エチルで抽出する（15mlを３回）。抽出相を合せ、水で洗浄し（10mlで１回）、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮する。
（S）-2-ベンジル-3-アセトキシプロパン酸（IXＳ）が油として得られた。
質量＝2.8ｇ
収率＝65％
〔α〕20D＝＋11.5°（CHCl3、ｃ＝0.98）
IR（cm-1）：2960、1740、1705
1H NMR（CDCl3）：10.4（広幅ｓ，１Ｈ）；7.35〜7.1（ｍ，５Ｈ）；4.3〜4.15（ｍ，２Ｈ）；3.15〜2.95（ｍ，２Ｈ）；2.95〜2.75（ｍ，１Ｈ）；2.05（ｓ，３Ｈ）
13C NMR（CDCl3）：178.5；170.6；137.4；128.7；128.5；126.7；63.4；46.1；34.3；20.8
段階ｄ：
（S）-2-ベンジル-3-アセトキシプロパン酸（ＸＳ）
3.52ｇ（15.84ｍモル）の（S）-2-ベンジル-3-アセトキシプロパン酸（IXＳ）と、テトラヒドロフランと水との混合物（75／25）35mlとの溶液に、０℃で、2.64ｇ（62.9ｍモル）の一水和水酸化リチウムを添加する。この混合物を０℃でさらに１時間攪拌した後、22mlの３Ｍ塩酸水溶液を用いて酸性化し、エチルエーテルで抽出する（50mlで１回、15mlで２回）。
エーテル相を合せ、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮する。得られた固体残留物を石油エーテルを用いて約５℃で混練する。この混合物を濾過・水切り・真空乾燥する。
質量＝2.45ｇ
収率＝86％
融点＝−14.3°（クロロフォルム中でｃ＝1.15）
IR（cm-1）：1705
1H NMR（CDCl3）：7.4〜7.1（ｍ，５Ｈ）；5.85（広幅ｓ，２Ｈ）；3.85〜3.6（ｍ，２Ｈ）；3.15〜2.95（ｍ，１Ｈ）；2.95〜2.75（ｍ，２Ｈ）
13C NMR（CDCl3）：178.3；138.2；128.8；128.5；126.5；61.9；48.8；33.9
光学的純度≧95％
段階ｅ：
（R）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（IaR）
3.16ｇ（12.05ｍモル）のトリフェニルホスフィンを30mlのテトラヒドロフランに溶かした溶液に、０℃で2.44ｇ（12.05ｍモル）のアゾジカルボン酸ジイソプロピルを滴下添加する。添加完了後、この温度で、混合物を30分間攪拌する。反応物を−10℃まで冷却し、1.45ｇ（8.05ｍモル）の（Ｓ）-2-ベンジル-3-ヒドロキシ−プロピオン酸（ＸＳ）と0.92ｇ（12.05ｍモル）のチオ酢酸とを10mlのテトラヒドロフランに溶かした溶液を滴下添加する。添加完了後、混合物を−10℃で１時間攪拌し、さらに室温で２時間攪拌する。
反応物を真空蒸発させ、25mlの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を添加した後、15mlの酢酸エチルを添加する。５分間激しち攪拌した後、混合物を放置して沈降分離し、水相を回収する。次に、20mlの飽和炭酸ナトリウム水素水溶液で有機相を再抽出する。塩基性水相を合せ、10mlの酢酸エチルで洗浄し、３mlの濃縮塩酸を用いてｐＨ１まで酸性化する。
次に、酸性水相を酢酸エチルで抽出する（２×15ml）。
有機相を合せ、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、（R）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（IaＲ）が油として得られる。
質量＝1.57ｇ
収率＝82％
〔α〕25D＝＋33.7°（CH3OH、ｃ＝0.98）
IR（cm-1）：1700
1H NMR（CDCl3）：9.5（広幅ｓ，１Ｈ）；7.40〜7.10（ｍ，５Ｈ）；3.20〜2.80（ｍ，５Ｈ）；2.30（ｓ，３Ｈ）
13C NMR（CDCl3）：195.1；179.3；137.3；128.8；128.4；126.4；46.8；46.8；37.3；30.3；29.4
ｅｅ≧95％
＊
（R）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（IaＲ）を得るための光学的精製
1.54ｇ（6.5ｍモル）の上記（Ｒ）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（IaＲ）と、15.4mlのエチルエーテルを50mlの丸底フラスコ中に入れ、混合物を溶解が完了するまで攪拌し、1.07ｇ（6.5ｍモル）のＤ（+）-エファードリンを室温で添加する。混合物を室温で１時間攪拌する。これを濾過し、生成物の水を切り、５mlの氷冷却したエチルエーテルで洗浄した後、真空乾燥すると白い塩が得られる。
質量＝2.41ｇ
収率＝92％
〔α〕25D＝＋48.4°（CH3OH、ｃ＝0.95）
この（+）-エファードリン塩を10mlのエチルエーテル中に懸濁させる。９mlの１Ｎ塩酸水溶液を添加し、塩が溶解するまで混合物を攪拌する。
混合物を放置し、沈降分離させ、エーテル相を回収する。有機相を硫酸マグニシウムで乾燥し、濾過し、真空下で濃縮すると、光学的に純粋な（R）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（IaＲ）が油として得られる。
質量＝1.37ｇ
収率＝89％
〔α〕25D＝＋35.7°（CH3OH、ｃ＝1.3）
実施例２
（S）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（IaS）
段階ａ：
2-ベンジル-1,3-プロパンジオールジアセテート（VIII）
1.89ｇ（11.37ｍモル）の2-ベンジル-1.3-プロパンジオール（VI）を10mlの酢酸ビニルに懸濁させた懸濁液に、29℃で、100mgのノボジム（Novozym 435）酵素を添加し、混合物をこの温度で24時間攪拌する。反応物を濾過し、濃縮すると、2-ベンジル-1.3-プロパンジオールジアセテート（VIII）が油として得られる。
質量＝2.79ｇ
収率＝98％
1H NMR（CDCl3）：7.35〜7.10（ｍ，５Ｈ）；4.15〜3.90（ｍ，４Ｈ）；2.75〜2.60（ｍ，２Ｈ）；2.40〜2.25（ｍ，１Ｈ）；2.05（ｓ，６Ｈ）
段階ｂ：
（S）-3-アセトキシ-2-ベンジルプロパノール（VII Ｓ）
0.25ｇ（１ｍモル）の上記2-ベンジル-1.3-プロパンジオールジアセテート（VIII）を9.9mlのアセトンと23.1mlのリン酸塩緩衝剤pH＝７との混合物中に溶解させた溶液中にプソイドモナスフルオレサンスから得られた130mgのリパーゼ（フルカ）を添加する。混合物を48時間30℃で加熱した後、溶液をエチルエーテルで抽出する（20mlを２回）。エーテル相を合せ、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮する。残留物をシリカ上でクロマトグラフィで精製する（エチルエーテル／石油エーテル溶離剤：７／３）と、80mgの油が得られる。
収率＝38％
〔α〕20D＝−27.1°（クロロフォルム中でｃ＝1.04）
スペクトル特性は、化合物（VII Ｒ）（実施例１、段階ｂ）と同じであった。
段階ｃ：
（R）-2-ベンジル-3-アセトキシプロパン酸（IXＲ）
実施例１の段階ｃに記載の手順と同じ手順で上記酢酸塩（VII Ｓ）を酸化して酸を得た。
収率＝68％
〔α〕20D＝−11.3°（クロロフォルム中でｃ＝1.0）
段階ｄ：
（R）-2-ベンジル-3-ヒドロキシプロパン酸（ＸＲ）
実施例１の段階ｄに記載の手順と同様に、上記段階ｃの生成物を水酸化リチウム水溶液で処理した。
収率＝91％
〔α〕20D＝＋14.1°（クロロフォルム中でｃ＝1.12）
光学的純度≧95％
段階ｅ：
（S）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（IaS）
実施例１の段階ｅに記載の手順と同じ手順で、ミツノブ型反応で上記ヒドロキシ酸をチオ酢酸で置換して（S）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（IaＳ）を得た。
ｅｅ≧95％
（-）-エファードリンによる処理後の収率＝70％
〔α〕25D＝−34.8°（メタノール中でｃ＝1.1）
実施例３
ベンジルN-（R）-［2-アセチルチオメチル-1-オキソ-3-フェニルプロピル〕グリシネート（III）
段階ｆ：
2-アセチルチオメチル-3-塩化フェニルプロパノイル（XIIS）
2.0ｇ（8.40ｍモル）の（R）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（IaＲ）（実施例１、段階ｅ）を丸底フラスコ中に入れ、氷−水浴でフラスコを冷却し、1.2ｇ（10.08ｍモル）の塩化チオニルを滴下添加する。室温で混合物を一晩攪拌する。
過剰の塩化チオニルを回転式蒸発器で蒸発させると2.15ｇの黄色っぽい油が得られる。
定量収率
〔α〕25D＝＋29.9°（クロロフォルム中でｃ＝1.20）
IR（cm-1）：1790〜1780、1695〜1685
1H NMR（CDCl3）：7.4〜7.1（ｍ，５Ｈ）；3.5〜2.8（ｍ，５Ｈ）；2.25（ｓ，３Ｈ）
段階ｇ：
ベンジルN-（R）-［2-アセチルチオメチル-1-オキソ-3-フェニルプロピル〕グリシネート（III）
６mlのジクロロメタン中のパラ−トルエンスルホン酸塩の形の2.83ｇ（8.40ｍモル）のグリシン酸ベンジルを、塩化カルシウム保護管付き三つ口フラスコに入れ、氷−水浴でフラスコを５℃まで冷却する。
５mlのジクロロメタン中の1.70ｇ（16.83ｍモル）の溶液を５〜15℃の温度で滴下添加する。混合物を10分間攪拌した後、５mlのジクロロメタン中に2.15ｇ（8.40ｍモル）の上記酸塩化物を溶かした溶液を15℃以下の温度で混合物に添加する。
混合物を室温に戻した後、さらに三時間攪拌する。
反応物を水（５mlで１回）、標準塩酸水溶液（５mlで１回）、炭酸ナトリウム水素水溶液（５mlで１回）および飽和塩化ナトリウム水溶液（５mlで１回）で洗浄する。
有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、3.2ｇの固体残留物が得られる。これを高温のイソプロパノール（12ml）中に溶解する。溶液が熱いうちに濾過し、氷−水浴で濾液を冷却する。固体を濾過で除去し、ジイソプロピルエーテルで洗浄し、水切りした後、五酸化リンで真空乾燥させる。得られた質量＝2.1ｇ
収率＝69℃
〔α〕20D＝＋24.5°（メタノール中でｃ＝1.0）
IR（nujol）（cm-1）：3280、1755、1695、1640
1H NMR（CDCl3）：7.40〜7.10（ｍ，10Ｈ）；6.15（広幅ｔ，１Ｈ）；5.25（ｓ，２Ｈ）；4.10〜3.5（開環AB，２Ｈ）；3.10〜2.55（ｍ，５Ｈ）；2.30（ｓ，３Ｈ）  13C NMR（CDCl3）：195.8；172.9；169.2；138.4；135.0；128.7；128.4；128.2；126.5；66.9；49.1；41.2；38.2；31.0；30.4
元素分析      C21H23O4NS
0004560147.tif 000028
実施例４：
ベンジルN-（S）-［2-アセチルチオメチル-1-オキソ-3-フェニルプロピル〕グリシネート（IV）
段階ｆ：
2-アセチルチオメチル-3-塩化フェニルプロパノイル（XIIR）
実施例３の段階ｆに記載の手順と同じ手順に従って（S）-2-アセチルチオメチル-3-フェニルプロパン酸（ＩａＳ）（実施例２の段階ｅ）を塩化チオニルで処理する。
定量収率
〔α〕25D＝−30.1°（クロロフォルム中でｃ＝1.37）
段階ｇ：
ベンジルN-（S）-［2-アセチルチオメチル-1-オキソ-3-フェニルプロピル〕グリシネート（IV）
案施例３の段階ｇに記載の手順と同じ手順に従って酸塩化物をグリシン酸ベンジルとカップリングする。
収率＝66％
〔α〕20D＝−24.9°（メタノール中でｃ＝1.0）
元素分析  C21H23O4NS
0004560147.tif 000029