(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
消化管の選択した部位に製剤を付着させるための腸溶性ポリマーフィルムからなる付着部位制御層、薬物と粘着剤とを収容するための薬物担持層、および薬物担持層の薬物を保護するための水不溶性ポリマーまたはワックス類から成るフィルムまたはカプセルからなる保護層を有し、薬物担持層が保護層と付着部位制御層との間に存在する、消化管用薬物送達経口製剤をカプセルに充填することにより調製される経口カプセル製剤。
【請求項２】
付着部位制御層、薬物担持層および保護層がそれぞれフィルム状であり、上記３層が積層して構成されている、請求項１に記載の経口カプセル製剤。
【請求項３】
付着部位制御層、薬物担持層および保護層の厚さがそれぞれ２０〜１００μｍである、請求項２に記載の経口カプセル製剤。
【請求項４】
保護層が半球形態を形成し、当該半球形態の保護層の内部空間に薬物担持層が存在し、当該半球形態の保護層の開口部分を付着部位制御層が被覆してなる、請求項１に記載の経口カプセル製剤。
【請求項５】
半球内部の深さが５０〜５００μｍであり、半球の開口部の内径が２０〜８００μｍであり、保護層および付着部位制御層の厚さがそれぞれ２０〜１００μｍである、請求項４に記載の経口カプセル製剤。
【請求項６】
薬物担持層が、薬物で含浸した多孔質シート状基材、または薬物を含有するゲルもしくはワックスのシートもしくはフィルムである請求項１に記載の経口カプセル製剤。
【請求項７】
薬物担持層が、吸収促進剤、プロテアーゼ阻害剤またはトランスポーター阻害剤から成る群から選択される１種以上の成分をさらに含む、請求項１に記載の経口カプセル製剤。
【請求項８】
薬物が生理活性蛋白質またはペプチドである、請求項１に記載の経口カプセル製剤。
【請求項９】
薬物がＧ−ＣＳＦ、インターフェロンまたはインジナビルである、請求項１に記載の経口カプセル製剤。
【請求項１０】
腸溶性カプセルである、請求項１に記載の経口カプセル製剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【技術分野】
本発明は、消化管用薬物送達経口製剤に関する。より詳細には、本発明は、消化管における低吸収性のためにバイオアベイラビリティが低い薬物のバイオアベイラビリティを改善するための消化管用薬物送達経口製剤に関する。
【０００２】
【背景技術】
経口投与後の薬物のバイオアベイラビリティが低い理由としては次の要因が考えられている。(１)通常の錠剤やカプセル剤などの経口製剤の経口投与の場合、消化管管腔側の薬物濃度と血流との間の濃度勾配は、経口製剤から薬物が放出された直後は増加するが、製剤が消化管の下部に移動していくと急速に低下し、薬物吸収条件にとって不利となる。(２)フロセミドなどの薬物は、小腸上部の限定された部位から吸収され(いわゆる、window-effect)、このような薬物の通常の製剤では吸収部位を通過した後には十分なバイオアベイラビリティを発揮することができない。(３)消化管に分泌された消化酵素などにより蛋白やペプチド薬物は著しい加水分解を受けるため、バイオアベイラビリティはわずか数％まで低下してしまう。(４)リトナビル、サキナビル、インジナビル、ネルフィナビルなどのＨＩＶプロテアーゼ阻害剤は、消化管から吸収された後、腸管の上皮細胞膜上に発現するＰ−ｇｐなどの排出蛋白により能動的に排出される。
【０００３】
window-effectによる薬物の低バイオアベイラビリティを改善するために、秋山らは、粘膜付着性顆粒製剤(Pharmaceutical Research, vol.12, pp.397-405, 1995)を開発した。
【０００４】
蛋白およびペプチドの経口投与後のバイオアベイラビリティを改善するための従来技術としては、胃および小腸における加水分解を防止することを主目的として、Saffran博士らによる大腸溶解性アゾポリマーコートインスリン錠剤、Cortex社によるエマルジョン化製剤、高田の経口製剤の調製技術、高田の大腸デリバリー化技術、リポゾーム化製剤(高田、Pharm. Tech. Japan, 1988, pp.1299-1307；高田、Pharm. Tech. Japan, 1991, pp.512-52；高田、Pharm. Tech. Japan, 1995, pp.1335-1344；胡ら、日本臨床、1998, pp.595-600)などが開発されている。
【０００５】
【発明の開示】
粘膜付着性顆粒製剤では、消化管管腔内に存在する消化酵素の攻撃から薬物分子を守ることはできない。また、上記のペプチド・蛋白経口製剤においても、小腸管腔内に存在する消化酵素の攻撃から蛋白やペプチドを完全に防御することは困難である。
本発明の目的は、ゲル形成ポリマー、並びに経口投与後、消化管粘膜に付着し、消化管管腔内に存在する消化酵素の透過を阻止する水不溶性のポリマーを用いて貼付剤を調製することにより、小腸管腔内の消化酵素の攻撃から貼付剤中の薬物分子を守り、粘膜に付着することにより長時間にわたり濃度勾配を維持することによりバイオアベイラビリティの改善を可能とする薬物送達用経口製剤（薬物送達システム（ＤＤＳ）製剤とも称する）を提供することである。
【０００６】
本発明者らは上記目的を達成するために鋭意検討を重ねた結果、それぞれ特定の役割を担う３つの層を含む消化管用薬物送達経口製剤を開発することに成功した。本発明はこの知見に基づいて完成したものである。
【０００７】
本発明によれば、消化管の選択した部位に製剤を付着させるための付着部位制御層、薬物と粘着剤とを収容するための薬物担持層、および薬物担持層の薬物を保護するための保護層を有し、薬物担持層が保護層と付着部位制御層との間に存在する、消化管用薬物送達経口製剤が提供される。
【０００８】
本発明の一態様によれば、付着部位制御層、薬物担持層および保護層がそれぞれフィルム状であり、上記３層が積層して構成されている消化管用薬物送達経口製剤が提供される。この態様において、付着部位制御層、薬物担持層および保護層の厚さはそれぞれ好ましくは２０〜１００μｍである。
【０００９】
本発明の別の態様によれば、保護層が半球形態を形成し、当該半球形態の保護層の内部空間に薬物担持層が存在し、当該半球形態の保護層の開口部分を付着部位制御層が被覆してなる、消化管用薬物送達経口製剤が提供される。この態様において、半球内部の深さは好ましくは５０〜５００μｍであり、半球の開口部の内径は好ましくは２０〜８００μｍであり、保護層および付着部位制御層の厚さは好ましくは２０〜１００μｍである。
【００１０】
好ましくは、薬物担持層は、薬物で含浸した多孔質シート状基材、または薬物を含有するゲルもしくはワックスのシートもしくはフィルムである。
好ましくは、薬物担持層は、吸収促進剤、プロテアーゼ阻害剤またはトランスポーター阻害剤から成る群から選択される１種以上の成分をさらに含む。
好ましくは、保護層は水不溶性ポリマーまたはワックス類から成るフィルムまたはカプセルである。
好ましくは、付着部位制御層は腸溶性ポリマーのフィルムである。
好ましくは、薬物は生理活性蛋白質またはペプチドである。
好ましくは、薬物はＧ−ＣＳＦ、インターフェロンまたはインジナビルである。
【００１１】
本発明の別の側面によれば、上記製剤をカプセルに充填することにより調製される経口カプセル製剤が提供される。経口カプセル製剤は、好ましくは、腸溶性カプセルである。
【００１２】
【発明を実施するための好ましい形態】
本発明の消化管用薬物送達経口製剤は、消化管の選択された特定の部位に製剤を付着させるための付着部位制御層、薬物と粘着剤とを含む薬物担持層、および薬物担持層の薬物を保護するための保護層を有し、薬物担持層が保護層と付着部位制御層との間に存在し、付着部位制御層が保護層に付着してもよいことを特徴とする。
【００１３】
本発明の製剤を経口投与した場合、付着部位制御層は消化管の選択された特定の部位において溶解する。このように付着部位制御層が消化管の選択された特定の部位において溶解することによって、薬物担持層が付着する消化管粘膜の部位は制御される。製剤を経口投与した後、保護層は、消化液が薬物担持層へ浸透し、薬物担持層が薬物を放出するのを防止すると同時に、製剤が消化管粘膜に付着した後も消化液および消化酵素が薬物担持層へ透過するのを防止する。経口投与された薬物のバイオアベイラビリティは、薬物分子を消化酵素の攻撃から保護し、かつ長時間にわたり濃度勾配を維持することにより改善される。
【００１４】
付着部位制御層は、薬物の早期のバースト放出を抑制するとともに、消化管の選択された特定の貼付(付着)部位において溶解する物質から成る。典型的には、付着部位制御層は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート(ＨＰ−５５R)、メタアクリル酸コポリマー(EudragitR  L)、メタアクリル酸コポリマー−ＬＤ(EudragitR  LD)、メタアクリル酸コポリマー−Ｓ(EudragitR  S)などのｐＨ依存性腸溶性ポリマーから成るものである。付着部位制御層の厚さは一般的には２０〜１００μｍであり、好ましくは３０〜７０μｍであり、より好ましくは４０〜５０μｍである。
【００１５】
薬物担持層は保護層と付着部位制御層の間に存在する中間層である。薬物担持層は薬物と粘着剤を含む。粘着剤は、付着部位制御層が消化管内の選択した部位で溶解した際に、薬物担持層を消化管粘膜に貼り付けるために使用される。
【００１６】
薬物担持層に収容される薬物の種類は特に限定されないが、経口投与した場合に低バイオアベイラビリティを有するものが好ましい。消化管、特に腸で吸収されるものが好ましい。具体例としては、生理活性蛋白質又はペプチド（例えば、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、インターフェロン−α、β及びγを含むインターフェロン、エリスロポエチン、インターロイキン類、成長ホルモン類、カルシトニン及びインスリン）、並びにオリゴ−又はポリ−ヌクレオチドを含むＤＮＡ又はＲＮＡ（ＤＮＡはプラスミドの形態でもよい）、芳香剤、抗原又は抗体（例えば、ボツリン毒素）及び細胞（例えば、膵臓ランゲルハンス島細胞）などを挙げることができる。より具体的には、例えば、Ｇ−ＣＳＦ、インジナビル及びインターフェロンを挙げることができる。
【００１７】
薬物担持層を消化管粘膜に貼り付けるための粘着剤は、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸・アクリル酸オクチルエステル共重合体、アクリル酸−２−エチルヘキシル・ビニルピロリドン共重合体、アクリル酸シルクブロイン共重合樹脂、アクリル酸メチル・アクリル酸−２−エチルヘキシル共重合樹脂、アラビヤゴム、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ポリイソプレン、ポリアクリレート、ポリアクリル酸ナトリウムなどのポリマーやゴム類に可塑剤を配合して、混合物を水で混練することにより調製することができる。例えば、HiviswakoR 103を０．８ｇ、ＰＥＧ  ４００を２５０μｌおよび精製水２ｍｌを混練することにより粘着剤を調製することができる。
【００１８】
薬物担持層として支持体を用いる場合、支持体の具体例としては、薬物で含浸した多孔質基材、例えばポリエステル繊維、薄布、ティッシュペーパーあるいは合成セルロース系ポリマーや腸溶性ポリマーで作成した合成紙またはフィルムなどを挙げることができる。
【００１９】
薬物担持層としてゲル層を用いる場合には、カルボキシビニルポリマーなどのゲル形成ポリマーの濃厚液に、薬物水溶液、薬物粉末、薬物の固体分散体、又はマイクロもしくはナノカプセル化薬物を混合することにより調製する。ゲル層の代わりに、親水性ワックス、例えばポリエチレングリコール４００(ＰＥＧ  ４００)に薬物と粘着剤、例えばHIVISWAKO 300を加えることにより調製した親水性ワックスの層を用いてもよい。薬物にナノ−又はマイクロ−カプセル化を施す場合には、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート(ＨＰ−５５R)をナノ、マイクロカプセル壁材として用いることにより、消化管壁付着後、速やかな薬物放出性が得られる。
【００２０】
また、薬物担持層にポリオキシエチレン硬化ひまし油誘導体、カプリン酸、ウルソデオキシコール酸などの吸収促進剤を配合することにより、薬物のバイオアベイラビリティをより高めることができる。あるいは、薬物担持層にアプロチニンなどの加水分解阻害剤を配合することにより、ペプチド・蛋白性薬物の加水分解をより効率良く抑制し、バイオアベイラビリティをより高めることができる。あるいは、薬物担持層にＰ−ｇｐなどの排出に関与するトランスポーターの阻害剤であるベラパミル、シクロスポリンなどを配合することにより、薬物のバイオアベイラビリティをより高めることができる。
【００２１】
なお、以下に説明する通り、本発明で用いる薬物担持層はフィルム状である場合と、保護層が形成する半球形態の内部空間に存在する場合とがある。薬物担持層がフィルム状である場合、フィルムの厚さは一般的には２０〜１００μｍであり、３０〜７０μｍであり、より好ましくは４０〜５０μｍである。
【００２２】
保護層（基底層）は薬物担持層の薬物を保護するために機能し、薬物担持層や消化酵素への薬物の透過を阻止するための水不溶性ポリマー、ワックス類又はこれらの混和物から成るフィルムもしくは壁（例えば、半球形態など）である。保護層は例えば、エチルセルロース、アミノアルキルメタアクリレートコポリマー(Eudragit RS)、酢酸セルロース、キチン、キトサンなどの水不溶性製剤用ポリマー、もしくはステアリン酸、ステアリルアルコール、サラシミツロウ、カカオ脂、ハードファット、精製セラック、ステアリン酸ポリオキシル４０、セタノール、ポリオキシエチルラウリルエーテルなどのワックス類を用いて調製することができる。保護層の厚さは一般的には２０〜１００μｍであり、３０〜７０μｍであり、より好ましくは４０〜５０μｍである。また、保護層が半球形態を形成する場合、半球の大きさは特に限定されない。例えば、半球内部の深さは５０〜５００μｍであり、半球の直径（口径）は２０〜８００μｍであり、好ましくは５０〜５００μｍであり、より好ましくは１００〜３００μｍである。
【００２３】
本発明によれば、薬物担持層は保護層と付着部位制御層との間に存在する。薬物担持層が保護層と付着部位制御層との間に存在する場合の例としては、例えば、（１）付着部位制御層、薬物担持層および保護層がそれぞれフィルム状であり、これら３層が順番に積層して構成されている場合（本書中以下、第１の形態の製剤と言う）や、（２）保護層が半球形態を形成し、この半球形態の内部空間に薬物担持層が存在し、半球形態の開口部分を付着部位制御層が被覆してなる場合（本書中以下、第２の形態の製剤と言う）、などが挙げられる。以下、本発明の代表例である上記第１の形態および第２の形態の製剤の調製方法について詳細に説明する。
【００２４】
第１の形態の製剤を調製するためには、先ず、保護層のためのフィルムを、上記した水不溶性ポリマーまたはワックス類を使用して形成する。より具体的には、水不溶性ポリマーまたはワックスをエタノールなどの有機溶媒に溶解し、得られた溶液をテフロン製枠にキャストし、溶媒を蒸発する。例えば、エチルセルロース５５０ｍｇ、クエン酸トリエチル１５０μｌを塩化メチレン：メタノール(４：１)の混合物５ｍｌに溶解し、得られた溶液をテフロン板上にキャストする。
【００２５】
次に、上記した通り、薬物担持層を保護層の上に形成する。粘着剤は保護層の上に塗布してから、薬物を含有する支持体を貼り付けて薬物担持層を形成してもよいし、あるいは、薬物と粘着剤（ゲル形成ポリマーなど）とを混合し、保護層の上に塗布してもよい。
【００２６】
付着部位制御層としては、上記した腸溶性ポリマーにて調製した厚さ２０〜１００μｍのフィルムを用いることができる。例えば、ＨＰ−５５R(信越化学社製)２２５ｍｇ、クエン酸トリエチル２５μｌを塩化メチレンとメタノール（４：１）の混合物５ｍｌに溶解し、得られた溶液をテフロン板上にキャストしてフィルムを形成する。別の例としては、EudragitR S100もしくはEudragitR L100 ２２５ｍｇとクエン酸トリエチル１５０μｌとを塩化メチレンとメタノール（４：１）の混合物５ｍｌに溶解し、得られた溶液をテフロン板上にキャストすることにより作成したフィルムも使用可能である。このようなフィルムを薬物担持層の上に粘着剤などを用いて貼り付けた後、３層フィルムを適当なサイズに切断することによって、本発明の第１の形態の製剤を作製することができる。また、保護層と付着部位制御層に挟まれた薬物担持層の端からの薬物などの漏出を防止するために、ステアリン酸微粉末など水不溶性物質をまぶすことにより製剤に封を施すことが好ましい。
【００２７】
フィルム貼付製剤のサイズとしては、製剤がゼラチンカプセルや腸溶性ポリマーで作成した腸溶性カプセルに充填できる限り、限定されない。例えば、サイズとしては、３ｍｍ×３ｍｍの正方形や、直径５ｍｍの丸型などでもよい。カプセル内に重ねて入れる場合のフィルム同士の癒着や接着を防止するために、ケイ酸マグネシウム粉末をふりかけて滑沢処理を施すことが望ましい。
【００２８】
一方、第２の形態の製剤を調製するためには、水不溶性ポリマーもしくはワックス類で調製したミニカプセルもしくはマイクロカプセルを半分に切断することによって、本発明で用いる半球形態の保護層を調製することができる。エチルセルロースやEudragit RS100などの水不溶性ポリマーを用いることによってミニカプセルもしくはマイクロカプセルを常法により調製し、次に、得られたカプセルを中央で２片に切断し、さらに内側を切削して、保護層として機能する“半球（おわん）”状の中空の半ミニカプセルもしくは半マイクロカプセルを調製する。薬物担持層を調製するためには、薬物とゲル形成ポリマーを混和して、半ミニカプセルもしくは半マイクロカプセル内に充填する。付着部位制御層は、腸溶性ポリマーで調製したフィルムを、ゲル形成ポリマー糊を用いて、半ミニカプセルもしくは半マイクロカプセルの上部に蓋をするように接着することによって形成することができる。あるいは、薬物と接着性ポリマーを含有するミニカプセル又はマイクロカプセルは、エチルセルロースやEudragitR RS100などの水不溶性ポリマーを用いて常法により調製し、得られたカプセルを中央で２片に切る。次いで、腸溶性ポリマーで調製したフィルムを、ゲル形成ポリマー糊を用いて、半ミニカプセルもしくは半マイクロカプセルの上部に蓋をするように接着することによって、付着部位制御層を形成することができる。
【００２９】
あるいは、第２の形態の製剤を大量に調製するためには、先ず、第１の形態の製剤で用いる保護層を作製する場合と同様に、水不溶性ポリマーまたはワックス類を使用してフィルムを形成する。得られたフィルムを、花道用の剣山などのように規則的に並んだ多数のミクロン単位の突起物の上に載せる。マイクロ機械技術により作製した金型をフィルムを載せるための物体として使用してもよい。フィルムを高温で加熱下で数時間放置し、その後冷却することによって深さ５０〜５００μｍ、口径２０〜８００μｍのマイクロ容器状の多数の孔を有するフィルムを作製することができる。
【００３０】
フィルム上に形成されたマイクロ容器状の孔に薬物を充填するためには、固相法と液相法の２通りがある。固相法では、薬物と粘着剤とを混和した後、得られた混合物を、マイクロ容器状の孔に固体状態で一定量で入れる。液相法では、粘着剤を固相法により孔に注入し、薬物溶液をマイクロインジェクターにより孔に注入する。
【００３１】
次いで、付着部位制御層（腸溶性ポリマーで調製したフィルム）を、マイクロ容器状の孔の上部に被覆するように設置する。粘着剤を予め付着部位制御層に塗布した後、薬物を収容したマイクロ容器状の孔を有するフィルムに適用することによって、付着部位制御層とマイクロ容器状の孔を有するフィルムとを接着することができる。薬物が耐熱性を有する場合には、加温圧着法により、薬物を収容したマイクロ容器状の孔を有するフィルムに付着部位制御層を接着することができる。
【００３２】
こうして得られた、薬物を収容した多数の孔を有し、その孔を被覆するように付着部位制御層が設置されているフィルムを、個々の孔ごとに細断することによって本発明の第２の形態の製剤を作製することができる。細断は、顕微鏡下、機械的またはレーザーを用いて行うことができる。
以下の実施例により本発明をさらに具体的に説明する。しかし、本発明は実施例によって限定されることはない。
【００３３】
実施例
実施例Ａ
材料
Ｇ−ＣＳＦ溶液（５００μｇｍＬ-1）はキリンビール社（東京、日本）から得た。ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（HP-55）は、信越化学（東京、日本）から得た。Eudragit S100 及びL100 （Rohm Pharm, Darmstadt, ドイツ）は、（株）樋口商会（東京、日本）から得た。カルボキシビニルポリマー（Hiviswako 103）、エチルセルロース（EC, 10cp）及びクエン酸トリエチルは、和光純薬（大阪、日本）から得た。ポリオキシエチレン硬化（60μmol）ヒマシ油誘導体（HCO-60）は、日光ケミカル（東京、日本）から得た。ポリエチレングリコール（PEG）400, スダンブラック、サッカロース及びクエン酸は、ナカライテスク社（京都、日本）から得た。フルオレセイン（ＦＬ）、メタノール及びジクロロメタンは、関東化学（東京、日本）から得た。ケイ酸マグネシウムは協和化学（高松、日本）から得た。ゼラチンカプセル（＃０）は、吉田商店（姫路、日本）から得た。雄ビーグル犬（１０．０〜１２．５ｋｇ）を本実験では使用し、市販飼料(Labo D stock)の標準固形食は日本農産（横浜、日本）から得た。ラットはＳＬＣ（浜松、日本）から得た。他の材料は全て試薬等級のものであり、入手したものをそのまま使用した。
【００３４】
消化管粘膜付着送達システムの調製
基底層（保護層）は、可塑剤含有ＥＣ溶液からキャスティング／溶媒蒸発技術により調製した。５５０ｍｇのＥＣを塩化メチレンとメタノール（４：１）の混合物５ｍｌに溶解し、１５０ｍｇのクエン酸トリエチルを可塑化ＥＣに添加することによって、可塑化したポリマー溶液（１１％, Ｗ／Ｖ）を調製した。ラットの消化管における保持／通過のための試験フィルムを調製するために、３．５ｍｇのスダンブラックを混合物に添加した。可塑化したＥＣ溶液をテフロン板（１０×１０ｃｍ）上にキャストし、溶媒を６℃で１２時間蒸発させた。板から除去した後、同じサイズの薬物担持層（セルロース膜）を、８０℃で熱結合することにより付着させた。その後、薬物担持層を有する基底層を１．０×１０．０ｃｍに切断した。ＥＣフィルム自体の厚さは４８．３±２．７μｍであり、全体の厚さは１１５．３±０．９μｍであった。
【００３５】
ｐＨ感受性表面層（付着部位制御層）も、腸溶性ポリマーHP-55、Eudragit L100 及びS100を各々用いて同様の方法で調製した。即ち、５５０ｍｇのHP-55及び５０μｌのクエン酸トリエチルを塩化メチレンとメタノール（４：１）の混合物１０ｍｌに溶解した。同様に、５５０ｍｇのEudragit L100 又はEudragit S100 を、１００μｌのクエン酸トリエチルを添加した塩化メチレンとメタノール（１：１）の混合物１０ｍｌに溶解した。各溶液をテフロンプレート（１０×１０ｃｍ）にキャストし、ｐＨ感受性フィルムを６℃で１２時間調製した。プレートから除去した後、ｐＨ感受性フィルムを１．０×１０．０ｃｍに切断した。腸溶性フィルムの厚さは、ＨＰ−５５については３９．０±２．５μｍであり、Eudragit L100については３６．３±２．２μｍであり、Eudragit S100については３７．７±２．２μｍであった。粘膜付着接着剤は、０．８ｇのHiviswako 103、２５０μｌのPEG 400及び２ｍｌの水を混合することによって調製した。十分に混練した後、接着剤をｐＨ感受性表面層の上に均一に塗布した。
【００３６】
薬物の充填は以下の通り行った。先ず、薬物担持層を、クエン酸(１００、１５０又は２００ｍｇ)及びHCO-60 （５０又は１００ｍｇ）を含有する４００μｌの溶液で湿らし、５０℃で２時間乾燥した。その後、薬物溶液を薬物担持層に充填した。ＦＬ試験用に２００μｌのＦＬ溶液（１５０ｍｇ／ｍｌ）を充填した。Ｇ−ＣＳＦ試験用に１８０μｌ又は２５０μｌのＧ−ＣＳＦ溶液（濃度は５００μｇ／ｍｌ）を充填した。シートを冷蔵庫で１２時間十分に乾燥した後、ｐＨ感受性表面層をHiviswako 接着剤を用いて薬物担持層に付着させた。３層のフィルムを小片（３．０×３．０ｍｍ）に切断し、小フィルムを微粉砕したステアリン酸及びケイ酸マグネシウムで処理し、フィルムの端を覆い、フィルムが互いに張り付くのを防いだ。最後に、フィルムを#0 HP-55 カプセルに充填し、賦形剤として粉末化シュークロースを添加した。HP-55カプセルは以下の通り作製した。HP-55を塩化メチレン及びメタノール（４：１）混合物に溶解した。得られた４．０ｗ／ｖ％の溶液を#0 ゼラチンカプセル本体とフタの各々に充填した。蒸発後、HP-55のフタと本体をゼラチン層を溶解することによって得た。
【００３７】
ビーグル犬での薬物動態試験
３頭の雄ビーグル成犬を各実験において一晩１２時間絶食させたが、水の摂取は自由とした。実験の途中、試験調製物の投与後４時間までは水は付与しなかった。各ビーグル犬には、全試験において1個の試験カプセルを経口投与した。投与の４時間後に、市販飼料の固形食（４５０ｇ）と水を与えた。試験期間中、他に飼料は与えなかった。実験は全て一日の同じ時間に行い、日周性による影響を排除した。投与は、２０ｍｌの水を用いて、午前１０時３０分に行った。薬物投与の３０分前に、対照血液試料（０．５ｍｌ）を頸静脈から採取した。各犬には、３０ｍｇのＦＬ又は１２５μｇのＧ−ＣＳＦを含む１個のカプセルを投与した。試験調製物の経口投与後に、０．５ｍｌの血液試料を、ＦＬ試験用に０、１、２、３、４、５及び６時間後に、Ｇ−ＣＳＦ試験用に０、１、１．５、２、３、４、６及び８時間後に頸静脈から採取した。Ｇ−ＣＳＦのELISAアッセイについての血液試料は、ＥＤＴＡ中に回収した。ＦＬアッセイ用の血漿画分又はＧ−ＣＳＦアッセイ用の血清画分は、血液試料を１２，０００ｒｐｍで５分間遠心することによって得た。これらの血漿及び血清試料は直ぐに冷凍庫で−８０℃で分析するまで凍結した。1週間後、ＦＬ又はＧ−ＣＳＦのｉｖ溶液を同じ犬に静脈注射した。試験溶液の濃度は、ＦＬについては１．０ｍｇ／ｍｌであり、Ｇ−ＣＳＦについては５００μｇ／ｍｌであった。ｉｖ投与量は、各々ＦＬは１０ｍｇ、Ｇ−ＣＳＦは１２５μｇ／ｋｇとした。投与後、血液試料を０、５、１０、２０、３０、４０分、１及び２時間後に回収した。血漿試料も分析するまで−８０℃で保存した。
【００３８】
ビーグル犬におけるＧ−ＣＳＦの薬物動態研究
１２５μｇ又は９０μｇのＧ−ＣＳＦを含有する試験用の消化管粘膜付着送達システムを２週間後に同じビーグル犬に経口投与し、０．５ｍｌの血液試料を０、１、２、３、４、５、６、８、１０及び１２時間後に頸静脈から採取した。最後の血液採取の直後に、全部の血液試料を用いて全白血球細胞（ＷＢＣ）数の分析を行った。さらに、血液試料を投与後２４時間の翌朝にも回収しＷＢＣ数を測定した。
【００３９】
ラット消化管におけるフィルムの保持及び通過の測定
体重３００〜３５０ｇの雄Wistarラットを実験前の１２時間絶食させた。水は自由に摂取させた。軽いエーテル麻酔下で、腹部を切開し、大きさ１．０×２．０ｍｍの１０片の試験フィルムを、幽門付近の胃上の切り込みを通じて十二指腸に投与した。消化管における小フィルムを検出するために、フィルムの基底層を黒色色素であるスダンブラックで染色した。腹部縫合後、各ラットをケージで飼育した。投与の１、２、３、４、５及び６時間後に、ラットを殺した。胃及び小腸全長を単離し、胃及び小腸を共にシート上で広げた。幽門括約筋から回盲接合部までの全小腸を５つの部分に分割し、消化管中に残存したフィルムを目視により検出し、記録した。その後、デジタルカメラDC-3Z (リコー、東京、日本)で写真をとり、画像を捕捉し、CapViewソフトウエア(ロジテック、東京、日本)を用いてデジタル化し、 PhotoDeluxeソフトウエア(Adobe)を用いて分析した。写真は、デジタルカラープリンター（ソニー、東京、日本）を用いて印刷した。
【００４０】
アッセイ方法
血漿ＦＬ濃度
血漿中のＦＬ濃度を分光蛍光測定法で測定した。２００μｌの犬血漿試料に、０．５ｍｌのメタノールを添加した。十分混合した後、得られた混合物を１２，０００ｒｐｍで５分間遠心した。上清に、１ｍｌの０．１ＮのＮａＯＨ溶液及び２ｍｌの蒸留水を添加し、蛍光強度を島津RF-500 分光蛍光光度計を用いて励起波長４６８ｎｍ及び螢光波長５１２ｎｍにて測定した。
【００４１】
Ｇ−ＣＳＦの酵素結合免疫吸収アッセイ（ＥＬＩＳＡ）
血清Ｇ−ＣＳＦ濃度を酵素結合免疫吸収アッセイ法で以下の通り測定した。１００μｌのタンパク質溶液を平底９６穴プレートの各ウエルに添加した後、１００μｌの血清試料、又は、既知の量のＧ−ＣＳＦを対照犬血清に添加して調製したＧ−ＣＳＦ標準溶液を各ウエルに添加した。９６穴プレートを室温で３時間インキュベートした。インキュベーション後、９６穴プレートを緩衝液で洗浄した。アルカリホスファターゼに結合したＧ−ＣＳＦに対するポリクローナル抗体２００μｌを各ウエルに添加し、２時間インキュベートした。洗浄後、５０μｌのＮＡＤＰＨを添加し、１時間インキュベートした。エタノール及びＩＮＴ−バイオレットを含む５０μｌの緩衝溶液を添加し、０．５時間インキュベートした。２Ｎの硫酸を添加した後、各ウエルの光学濃度をマイクロプレートリーダーを用いて４９０ｎｍで測定した。本アッセイでは、３次元log-logit 変換を組み合わせた加重最小平方回帰法を使用した。
【００４２】
全白血球細胞（ＷＢＣ）数
循環血液中ＷＢＣ数を測定することによってＧ−ＣＳＦの薬理学的作用を評価した。２０μｌのＥＤＴＡで処理した血液試料を希釈し、ストロマ化剤を用いて溶血した後、ＷＢＣの測定に使用した。ストロマ化した血液細胞を、自動マイクロセルカウンター(Sysmex F-500)を用いて計数した。１つの血液試料について３回の測定を行った。ＷＢＣ数は、薬物投与後の各時点におけるＷＢＣ数を各々の値、即ち、投与前のＷＢＣ数で割ることによって決定した相対値として表す。
【００４３】
データ分析
以下の薬物動態パラメーターを血漿薬物濃度−時間データから求めた。Cmaxは最大薬物濃度であり、TmaxはCmax に到達するのに要した時間であり、これらの値は測定値として得た。静脈及び経口投与後の血漿又は血清中薬物濃度−時間曲線（ＡＵＣ）下の面積、及び一次モーメント（first-moment）曲線下の面積を、直線台形公式を用いて最終測定時点まで計算した。経口投与後の平均残留時間(MRT)は、AUMC/AUCにより計算した。バイオアベイラビリティ（ＢＡ）は以下の数式によりDosei.v., AUCi.v., 及びAUCoral から計算した：BA=AUCoral・Dosei.v./AUCi.v.・Doseoral.
【００４４】
Ｇ−ＣＳＦの経口投与後の薬理学的アベイラビリティー（ＰＡ）は以下の数式から計算した。
F=(AUC0-48,oral × Dosei.v.)/(AUC0-48,i.v. × Doseoral)
式中、AUC0-48,oral は、Ｇ−ＣＳＦ消化管粘膜付着送達システムの投与を受けた各犬の薬理学的作用−時間曲線の０時間から４８時間までの個々の面積である。AUC0-48,iv は、Ｇ−ＣＳＦ溶液を静脈内投与した全ての犬の薬理学的作用−時間曲線の０時間から４８時間までの平均面積である。Ｇ−ＣＳＦ溶液の静脈内投与の場合、薬理学的作用は０時間から作用が投与前の水準に戻った４８時間まで測定した。
【００４５】
統計処理
値は全て、平均±Ｓ．Ｅ．としてそのまま表示する。統計学的有意差は、ｐ＜０．０５の場合に再現可能であるとみなした（片側Ｔ−検定）。
【００４６】
結果
ＦＬで製剤化した消化管粘膜付着送達システムの薬物動態試験
消化管粘膜付着送達システムにおける経口投与後のＦＬの薬物動態を調べるために、３０ｍｇのＦＬを含む消化管粘膜付着送達システムを調製し、３頭のビーグル犬に投与した。
【００４７】
消化管粘膜付着送達システムに対する本試験では、３種類のｐＨ感受性表面層を使用した。それらはHP-55, Eudragit L100及びS100である。これら３種類の消化管粘膜付着送達システムの経口投与後に、血漿ＦＬ濃度と時間のプロフィールを図１に示す通り得た。HP-55及びEudragit L100 消化管粘膜付着送達システムの場合には共に、血漿ＦＬ濃度は犬への経口投与後１時間及び１．５時間で増加し始め、各々２時間及び３時間でピーク（Cmax）に達した。しかしながら、Eudragit S100 消化管粘膜付着送達システムの場合には、約２時間の吸収の時間の遅れが存在した。その後、血漿ＦＬ濃度は増加し始め、５時間でCmaxに達した。ノンコンパートメント薬物動態解析法によりこれらのデータを解析し、その結果を表１に示す。HP-55及びEudragit L100 消化管粘膜付着送達システムの間では、ＡＵＣ値について有意な差異はない。しかし、Eudragit S100 消化管粘膜付着送達システムからのＡＵＣは他のものよりも有意に小さかったが、これは、小腸下方部への送達のために吸収の時間の大きな遅れが存在し、ＦＬの吸収が経口投与後８時間以内に終わらなかったためである。この試験は予備的なものであったので、血液採取は８時間で行った。３種類の消化管粘膜付着送達システムからのＦＬのバイオアベイラビリティーを測定するために、ＦＬを同じ犬にｉｖ投与し、その結果を図１に示す。同量のＦＬのｉｖ注射後に得たＡＵＣ値を比較することによって、３種類の製剤からのＦＬのバイオアベイラビリティーは各々、７９．１±７．５９％、８５．１±７．８５％及び５６．１±８．１６％であると計算された。
【００４８】
【表１】
0004497725.tif 000002
【００４９】
Ｇ−ＣＳＦで製剤化した消化管粘膜付着送達システムの薬物動態試験
ＦＬを用いた試験に基づき、消化管粘膜付着送達システムをタンパク質に適用した。大腸送達システムを含む経口送達システムに製剤化したＧ−ＣＳＦの薬物動態評価について多くの研究を行ってきたので、Ｇ−ＣＳＦをモデルタンパク質として使用した。１２５μｇの量のＧ−ＣＳＦを３種類の消化管粘膜付着送達システムの中に製剤化し、犬に経口投与した。図２は、Ｇ−ＣＳＦの薬理学的活性の時間曲線を示す。投与後、ＷＢＣは、HP-55消化管粘膜付着送達システムの場合の投与前値と比較して１．４倍に増加した。しかし、ＷＢＣは、HP-55消化管粘膜付着送達システムよりもEudragit L100消化管粘膜付着送達システムにおいて、約１.７倍増加した。Eudragit S100消化管粘膜付着送達システムの場合には、ＷＢＣは、Eudragit L100 消化管粘膜付着送達システムの場合に見られたほどは増加しなかった。３種類の粘膜付着送達システムからのＧ−ＣＳＦの薬理学的アベイラビリティー（ＰＡ）を測定するために、同量のＧ−ＣＳＦを同一の犬に注射し、Ｇ−ＣＳＦの薬理学的活性をモニターした。挿入図は結果を示す。全ＷＳＣの増加倍率の面積を比較することによって、３種類の消化管粘膜付着送達システムのＰＡは、HP-55 消化管粘膜付着送達システムでは５．５％であり、 Eudragit L100 消化管粘膜付着送達システムでは２３％であり、そしてEudragit S100 消化管粘膜付着送達システムでは６．０％であった。
【００５０】
Ｇ−ＣＳＦの薬理学的作用の投与量依存性を調べるために、９０μｇのＧ−ＣＳＦをEudragit L100消化管粘膜付着送達システム中に製剤化し、同じ犬に経口投与した。結果を図に示す。全ＷＢＣの増加は、１２５μｇの投与量の試験から推測されるものよりも低く、最大増加量は投与前水準と比較して１.２倍であった。
【００５１】
消化管粘膜付着送達システムでは、界面活性剤（HCO-60）、及び有機酸（クエン酸）等の添加剤を製剤化した。従って、Ｇ−ＣＳＦの薬理活性に対する添加剤の影響を調べるために、クエン酸の添加量を２００ｍｇから１５０及び１００ｍｇに減少し、ここで界面活性剤 （HCO-60）の量は１００ｍｇで一定とした。図３に示す通り、クエン酸の製剤化量を２００ｍｇから１５０ｍｇに減少した場合、Ｇ−ＣＳＦのＰＡは減少した。しかし、ＰＡは、クエン酸の添加量を１５０ｍｇから１００ｍｇに減少しても有意には変化しなかった。一方、Ｇ−ＣＳＦのＰＡに対するＨＣＯ−６０の増大作用は、ＨＣＯ−６０の添加量を１００ｍｇから５０ｍｇに減少することにより明白に減少した。
【００５２】
犬への経口投与後のＧ−ＣＳＦの薬物動態試験
１２５μｇのＧ−ＣＳＦを含むEudragit L100消化管粘膜付着送達システムはＧ−ＣＳＦの最高のＰＡを示したので、同じ製剤を犬に投与し、血漿Ｇ−ＣＳＦ 濃度をELISA法で測定した。図４に示す通り、血漿Ｇ−ＣＳＦ濃度は経口投与後に増加し始め、１時間でピーク値である１００ｐｇ／ｍｌに達した。その後、血漿Ｇ−ＣＳＦ濃度は急速に減少した。これらの結果は、Ｇ−ＣＳＦ が消化管から吸収され、未変化体のまま全身循環に入っていることを強く示唆する。
【００５３】
ラットの消化管におけるフィルムの保持と通過の測定
３種類の消化管粘膜付着送達システムの付着性を測定するために, ３種類の小型の着色生体付着性フィルム（１．０×２．０ｍｍ）を調製し、試験フィルムをラットの十二指腸に投与した。生体付着性フィルムの保持／通過を図５に示す通り腹腔切開によりモニターした。 HP-55生体付着性フィルムについては、投与したフィルムの大部分が小腸のセクション#1、即ち、十二指腸で投与後１時間及び２時間に検出された。さらに、フィルムは約３時間十二指腸に接着していた。しかし、投与の４時間後、１０枚のフィルムのうちの８枚は、ラットの小腸のセクション#2に移動し、その後、小腸の下部に移動した。Eudragit L100生体付着性フィルムの場合、フィルムは投与２時間以内に小腸#1から消失し、約２時間セクション#2に保持された。その後、フィルムは小腸セクション#3及び#4に徐々に移動した。一方、Eudragit S100生体付着性フィルムはセクション#1から#4に徐々に移動した。これには約３時間かかった。その後、フィルムはセクション#5に付着し、約３時間そこに保持された。
【００５４】
実施例Ｂ
実施例１
保護層（基底層）のＥＣフィルム(１６ｃｍ×１．６ｃｍ)にＨＩＶＩＳＷＡＫＯ  １０３糊を塗った。同じサイズのティッシュペーパーに薬液をしみこませた。薬液は、１．２５ｍｇ／ｍｌのＧ−ＣＳＦ溶液１００μｌ、ＨＣＯ−６０(ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油誘導体)１００ｍｇとクエン酸２００ｍｇを水２００μｌに溶解して調製した。ティッシュペーパーを乾燥後、前記ＥＣフィルムに貼り付けて薬物担持層（中間層）とした。同じサイズのＨＰ−５５製フィルムにＨＩＶＩＳＷＡＫＯ  １０３糊をぬり、中間層に貼り付けて付着部位制御層（表層）とした。得られた３層から成るフィルムを３．０×３．０ｍｍの小片に切断し、ケイ酸マグネシウム粉末で切断面を被覆した後、ＨＰ−５５製のカプセルに充填した。空隙部分に乳糖を充填することにより経口貼付ＤＤＳ製剤を得た。
【００５５】
実施例２
実施例１と同様に経口貼付ＤＤＳ製剤を作製したが、薬物担持層（中間層）を作成するときに、薬液中にウルソデオキシコール酸の１００ｍｇ、アプロチニン(加水分解酵素の阻害剤)の２０００単位を添加した。
【００５６】
実施例３
ゲル性の薬物担持層（中間層）を先ず作製した。インジナビル（１００ｍｇ）を水（０．８ｍｌ）とポリエチレングリコール400（１００μｌ）で混和した後、ＨＩＶＩＳＷＡＫＯ  １０３の３００ｍｇを加えた。得られた混合物をよく練って糊状とした。実施例１と同じサイズのＥＣフィルム(基底層)にインジナビル含有糊をぬりつけた。表層フィルムとしてＨＰ−５５フィルムをはりつけた。その後、実施例１と同様のケイ酸マグネシウム処理を行い、得られたフィルムを適量の乳糖と一緒に、サイズ０号のＨＰ−５５製腸溶性カプセルの２カプセルに充填した。
【００５７】
実施例４
実施例３と同様にインジナビルの経口貼付ＤＤＳ製剤を作製したが、薬物担持層（中間層）を作製するときにＰ−ｇｐトランスポーターの阻害剤であるシクロスポリン２００ｍｇを薬液に添加した。
【００５８】
実施例５
エチルセルロース(EC)（５５０ｍｇ）及びクエン酸トリエチル５０μｌを塩化メチレンとメタノール（４：１）の混合物５ｍｌに溶解した。得られた溶液を１０×１０ｃｍのテフロン板に流し込み、溶媒を蒸発させて、ECフィルムを作成した。ECフィルムを２００μｍの最大径と８０μｍの高さの突起を有する１７５℃に予め加温しておいた金型に載せて、１０分間プレスした。フィルムを室温に冷却して、マイクロ容器の形状を有するECフィルムを作成した。薬物としてＧ−ＣＳＦ（１００μｌ）、HCO−６０(ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油誘導体)５０ｍｇ及びクエン酸２００ｍｇを水１ｍｌに溶解して薬液を調製した。薬液を凍結乾燥し、粉末状の薬物をマイクロ容器の形状を有するECフィルムに乗せ、ステンレス製ヘラにてマイクロ容器内に均等に入れた。EC板上に残った粉末をステンレスブラシにて掃き取った。腸溶性ポリマーであるHP−５５製の表層フィルムを作成するために、HP−５５（３００ｍｇ）、クエン酸トリエチル５０μｌを塩化メチレンとメタノール（４：１）の混合物１０ｍｌに溶解した。得られた溶液を１５×１５ｃｍのテフロン板に流し込み、溶媒を蒸発させて、HP−５５フィルムを作成した。接着用の糊としては、０．８ｇのHIVISWAKO１０３、蒸留水２ｍｌ、２５０μｌのポリエチレングリコール４００を乳鉢内にて乳棒で攪拌した。HP−５５フィルムにこの接着用の糊をぬり、マイクロ容器の中に薬物を入れたECフィルムに貼り付けた。顕微鏡下、得られた層状のフィルムを、マイクロ容器の周りで約５００×５００ミクロンもしくは直径約５００ミクロンの円状に切断し、三層構造を有する不均一マイクロカプセル剤を得た。切断は、ＵＶレーザーマーキングマシンLYH-100AA （牛尾電気製）を用いてレーザーにより、ＹＡＧレーザー４倍高モジュール波、波長２６６ｎｍ、ビーム幅約３０μｍ及び出力１０５ｍＶ×０．７７秒で、記述表示「０」を追跡する方法で行った。
【００５９】
実施例６
常法(大山孝雄ら、移植vol.34, No.4, pp.174-185, 1999)により、ラット膵臓ランゲルハンス島を得る。膵臓ランゲルハンス島を分散させた１％カルボキシメチルセルロース液をマイクロインジェクター内に充填する。実施例５と同様に作成したECフィルム上のマイクロ容器内に顕微鏡下で膵臓ランゲルハンス島をマイクロインジェクターで注入する。実施例５で作成したのと同様にして、HP−５５フィルムを作成する。HIVISWAKO 103糊をHP−５５フィルムに塗布し、マイクロ容器の中に生細胞を入れたECフィルムに貼り付ける。得られた層状のフィルムを、顕微鏡下で、マイクロ容器の周りを約５００×５００ミクロンもしくは直径５００ミクロンの円状に切断し、三層構造を有する不均一マイクロカプセル剤を得る。
【００６０】
試験例１：インビボのバイオアベイラビリティの評価
方法
上述の実施例１〜４で調製した経口貼付ＤＤＳ製剤をビーグル犬に経口投与した。投与後、経時的に循環血液を採取し、Ｇ−ＣＳＦ製剤を用いた場合には薬効の指標として、循環血液中の白血球数を測定した。Ｇ−ＣＳＦ製剤及びインジナビル製剤の投与量は、各々１２５μｇ／犬、及び１００ｍｇ／犬とした。ビーグル犬は体重１０〜１１ｋｇの雄成犬を絶食条件下にて用いた。
Ｇ−ＣＳＦ製剤の薬効薬理試験の結果を以下の表２に示す。
【００６１】
【表２】
0004497725.tif 000003
【００６２】
Ｇ−ＣＳＦ液剤は市販のＧ−ＣＳＦ注射剤をＨＰ−５５にて調製した腸溶性カプセルに充填した製剤である。
投与前におけるビーグル犬の循環血液中白血球数を基本(１００％)として、それ以降の白血球数の推移を相対的な値としてあらわす。
【００６３】
インジナビル製剤を投与した際の実験結果を以下の表３に示す。
【００６４】
【表３】
0004497725.tif 000004
【００６５】
実施例Ｃ
10,000,000ＩＵ／ｍｌのインターフェロン−αの溶液をＧ−ＣＳＦ溶液の代わりに使用した以外は実施例Ａと同様の方法で、インターフェロン−αを含有する消化管粘膜付着送達システムを調製し、ビーグル犬１頭当たり5,000,000ＩＵのインターフェロン−α（０．５ｍｌの溶液）を投与した。血清中インターフェロン−α濃度を実施例Ａと同様に評価した。得られたデータを以下の表４に示す。
【００６６】
【表４】
0004497725.tif 000005
【００６７】
実施例Ｄ
エチルセルロース(EC)（５５０ｍｇ）及び１５０μｌのクエン酸トリエチルを塩化メチレン及びメタノール（４：１）の混合物５ｍｌに溶解した。得られた溶液を９．０ｃｍ×９．０ｃｍのテフロンプレート上にキャストし、ＥＣフィルムを形成した。ＥＣフィルムを３．０ｃｍ×５．０ｃｍのアクリル性の枠上に置いた。１００ｍｇのポリアクリル酸、１ｇのHCO-60及び２ｇのクエン酸を水に溶解し、全量１０ｍｌの溶液を調製した。得られた溶液１．５ｍｌと、ＰＢＳ中に７５０μｇのｐ２４抗原及び１５０μｇのコレラ毒素を含有する溶液０．５２ｍｌとを添加した。試料を一晩冷蔵庫で保存し、フィルムを形成した。EudragitR Lで調製したフィルムをその上に付着させ、その後、得られた層状のフィルムをより小さいサイズの１５片に切断し、各断片をさらに１．０ｍｍ×１．０ｍｍに切断した。切断面は、ケイ酸マグネシウム粉末及びステアリン酸微粉末で被覆した。
【００６８】
【産業上の利用可能性】
遺伝子組み換え技術により有用な生理活性を有する各種の蛋白質やペプチドの大量生産が可能になったが、それらの投与経路は注射に限られている。患者のＱＯＬ(quality of life)を考えると、投与形態は経口剤が好ましい。しかし、蛋白やペプチドは、胃および小腸において胃酸、ペプシン、膵臓由来の蛋白分解酵素により消化管管腔内における加水分解を受けてしまう。
【００６９】
本発明によれば、保護層としての水不溶性ポリマーもしくはワックスが、消化管管腔側における消化酵素の攻撃を阻止する。また薬物担持層中に含まれる粘着剤（例えば、ポリアクリル酸系ポリマーなど）は、加水分解酵素に対して阻害作用を有し、消化管粘膜に存在する加水分解酵素による加水分解に対しても抵抗性を発揮することができる。さらに、各種の加水分解酵素阻害剤を配合することにより、薬物の効果をより強くかつ長く維持することができる。
【００７０】
また、吸収された後、消化管内へ再び排出される薬物のバイオアベイラビリティを改善することができる。シクロスポリンや、抗エイズ薬のプロアテーゼ阻害剤であるサキナビルは、消化管上皮細胞中に発現しているＰ−ｇｐにより消化管内へ再び排出されるために、バイオアベイラビリティが低いといわれている。Ｐ−ｇｐの阻害剤を通常の製剤で配合しても、製剤が消化管を下って移動していくため、薬物の吸収された部位で効率良く阻害をかけることができない。本発明の経口貼付型ＤＤＳ製剤にＰ−ｇｐの阻害剤を配合することにより、付着部位に排出トランスポータ阻害剤が長時間滞留でき、薬物のバイオアベイラビリティの改善が可能となる。
【００７１】
また、経口投与した抗原は十分に吸収されないため、十分な感作を達成することができない。本発明によれば、抗原を効率良く吸収させ、感作の効率を改善することができる経口ワクチンを開発することも可能になる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は、消化管（ＧＩ）粘膜送達システム中のフルオレセイン（ＦＬ）をビーグル犬に対して静脈内（１ｍｇ）及び経口（３０ｍｇ）投与した後の血漿フルオレセイン（ＦＬ）濃度曲線を示す。図中、□：ＨＰ−５５Rシステム、○：EudragitR L100システム、及び◇：EudragitR S100システム。各々の値は３又は４個の被験体の平均±Ｓ．Ｅ．を示す。
【図２】  図２は、消化管粘膜送達システム中のＧ−ＣＳＦをビーグル犬に対して静脈内及び経口投与した後の全白血球細胞（ＷＢＣ）動態を示す。図中、□：ＨＰ−５５Rシステム、○：EudragitR L100システム、及び◇：EudragitR S100システム。各々の値は３個の被験体の平均±Ｓ．Ｅ．を示す。
【図３】  図３は、EudragitR L100 消化管粘膜送達システム中のＧ−ＣＳＦ(１２５μｇ)をビーグル犬に対して経口投与した後のＷＢＣ動態に及ぼすＨＣＯ−６０R及びクエン酸の影響を示す。図中、△：ＨＣＯ−６０R／クエン酸（１００／１００）、□：ＨＣＯ−６０R／クエン酸（１００／１５０）、○：ＨＣＯ−６０R／クエン酸（１００／２００）、及び◇：ＨＣＯ−６０R／クエン酸（５０／２００）。各々の値は３個の被験体の平均±Ｓ．Ｅ．を示す。
【図４】  図４は、EudragitR L100 消化管消化管粘膜送達システム中のＧ−ＣＳＦをビーグル犬に対して経口(１２５μｇ)投与した後の血漿Ｇ−ＣＳＦの濃度／時間曲線を示す。各々の値は３個の被験体の平均±Ｓ．Ｅ．を示す。
【図５】  図５は、十二指腸内投与後におけるラットの腸管における、（ａ）ＨＰ−５５R、（ｂ）EudragitR L100、（ｃ）EudragitR S100−消化管粘膜送達システムの分布を示す。小腸は５つのセクションに分け、各セクションの長さは１２〜１５ｃｍとした。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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