(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
γ−リノレン酸とチオクト酸とを組み合わせてなる、糖尿病神経障害の治療または予防のための薬剤。
【請求項２】
更に、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、リボフラビン、ピリドキシン、ニアシンアミド、葉酸、ビタミンＣ、または同化可能な亜鉛、クロム、マグネシウムまたはセレンから選ばれる１種またはそれ以上の必須栄養素を含む請求項１に記載の薬剤。
【請求項３】
前記γ−リノレン酸およびチオクト酸が夫々１ｍｇ〜１００ｇ／日、かつ１：２０〜２０：１の重量比の投与のために提供される請求項１または２に記載の薬剤。
【請求項４】
前記γ−リノレン酸およびチオクト酸が夫々１０ｍｇ〜１０ｇ／日、かつ１：５〜５：１の重量比の投与のために提供される請求項３に記載の薬剤。
【請求項５】
前記γ−リノレン酸およびチオクト酸が夫々５０ｍｇ〜５ｇ／日、かつ１：３〜３：１の重量比の投与のために提供される請求項４に記載の薬剤。
【請求項６】
前記γ−リノレン酸およびチオクト酸が同時に又は別々に提供される請求項１〜５のいずれかに記載の薬剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
分  野
本発明は治療用および食餌療法用組成物に関する。
【０００２】
脂肪酸
γ−リノレン酸（ＧＬＡ）、その直接の代謝産物のジホモ−γ−リノレン酸（ＤＧＬＡ）、および或る種の状況下におけるＤＧＬＡの代謝産物のアラキドン酸（ＡＡ）は、皮膚疾患（たとえば湿疹および乾癬）、代謝疾患（とりわけ網膜症、神経障害、腎症および心臓血管の疾病のような糖尿病およびその合併症）、炎症性および自己免疫疾患（たとえばリウマチ性関節炎、変形性関節症、シェーグレン（Sjogren)症候群、全身性狼瘡、クローン（Crohn)病、潰瘍性大腸炎のような）、呼吸器疾患（ぜん息、肺高血圧症および肺線維症を含む）、神経および中枢神経炎の疾患（精神分裂症、アルツハイマーおよび脈管系または他のタイプの痴呆のような）、心臓血管系の疾患（高血圧および冠状および末梢動脈疾患のような）、腎臓の疾患（糸球体腎炎および他の炎症性および自己免疫疾病のような）、胃腸系の疾患（食道炎、胃炎、消化性潰瘍、クローン（Crohn)病および潰瘍性大腸炎のような）および内分泌性およびそのターゲットとなる器官の疾患（良性胸部疾患および良性前立腺疾患のような）を含む種々の疾患において特異な予防または治療効果を有する必須栄養素および必須栄養素または治療薬として広範囲な望ましい生物学的効果を有する。癌および前癌症状もまた、ＧＬＡおよびＤＧＬＡによる治療に感応する。ＧＬＡおよびＤＧＬＡはまた、動物の病気に有効であり、また疾患性および正常な皮膚のケアにおいて皮膚の血流および皮膚の平滑性を改善することが見出された。
【０００３】
ｎ−３系の他の必須脂肪酸、特にステアリドン酸（ＳＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）はまた、多くの望ましい栄養学的および治療上の効果を有し、本出願人によって出願された多くの先行特許は種々の条件下における必須脂肪酸のどちらかの、または両方の系の使用に関し、糖尿病の合併症に関するヨーロッパ特許出願（ＥＰＡ）第０２１８４６０号は１例である。
【０００４】
両方の系の必須脂肪酸はそれら自体良く知られており、それらの用語および関係を下記に示す。
【０００５】
【表１】
0004476479.tif 000002
【０００６】
これら酸は天然には全てシス型構造であり、相当するオクタデカン酸、エイコサン酸またはドコサン酸の誘導体として組織的に、たとえばｚ, ｚ−オクタデカ−９，12−ジエン酸またはｚ，ｚ，ｚ，ｚ，ｚ，ｚ−ドコサ−４，７，10，13，16，19−ヘキサエン酸と命名される。しかしながら、夫々18：2 n-6 または22：6 n-3 のような、全炭素原子数、不飽和中心の数および鎖末端から不飽和がはじまるまでの炭素原子数による呼称も便利である。ある場合には、イニシャル、たとえばＥＰＡ、および名称の短縮形、たとえばエイコサペンタエン酸が慣用名として用いられる。更に、６−脱飽和工程以後の酸は非公式に“６−脱飽和”酸として知られている。
【０００７】
ジスルフィド
チオクト酸（ＴＡ）としても知られているα−リポ酸は、全く異なるタイプの化学的存在物である。ピルビン酸からアセチルコエンチームＡの形成の際に、またはα−オキソグルタル酸からスクシニルコエンチームＡの形成の際に、および他の酸化還元反応の過程で、ＴＡは体内でジヒドロリポ酸（ＤＨＬ）へ変換される。ＤＨＬをリポ酸デヒドロゲナーゼによってＴＡに戻すこともでき、補因子ＮＡＤを必要とする。ＴＡおよびＤＨＬは体内において急速に相互変換するので、同等物と考えられてきた。構造は下記のとおりであり、
【０００８】
【化１】
0004476479.tif 000003
【０００９】
Ｒ、Ｓおよびラセミ体を有する。本願明細書においては、チオクト酸は異性体として純粋なＳ−またはＳ−α−リポ酸、α−リポ酸のラセミ体またはＲ−およびＳ−異性体のいずれかの混合物を、従って還元形を含むチオクト酸に関連する化合物を意味する。
【００１０】
ＴＡおよび関連する遊離ジスルフィド化合物は強親油性であり、体内において酸化還元対を形成しうる抗酸化剤であり、糖尿病、特に糖尿病性神経障害の合併症の治療において治療上の価値のあることが見出されている。かかる合併症は脂質および蛋白質の過剰な酸化比率と関係すると信じられ、ＴＡ／ＤＨＬ酸化還元対は多くの種類の遊離紀の中和において重要であると思われていた。更に、この酸化還元対はα−トコフェロールおよびアスコルビン酸塩のような他の重要な抗酸化剤を再生使用することができ、細胞内グルタチオンの増加をもたらすことができる。糖尿病合併症に加えて、ＴＡはインスリンに対する感度を高め、糖尿病前症症候群Ｘおよび肥満症において重要であることの証拠がある。
【００１１】
ＴＡに類似の機能を有するＴＡの代謝物は、リポ酸のようにＲおよびＳ異性体を有するテトラノルリポ酸（ＴＡＬＡ）、ビスノルリポ酸（ＢＡＬＡ）および８−ヒドロキシ−ビスノルリポ酸（８ＢＡＬＡ）である。
【００１２】
α−リポ酸およびその還元形の糖尿病および他の症状における抗酸化性およびその結果としてすでに提案された臨床的用途は抗酸化剤ハンドブック（Handbook of Antioxidants) 〔イ．カダナス（E. Cadanas) およびエル・パッカー（L. Packer)編集、１９９６年、ニューヨーク、マルセル・デッカー（Marcel Dekkar)発行〕第１８章、第５４５〜５９１頁にパッカー・ウィット（Packer Witt)およびトリチュラー（Tritschler) によって論じられている。更に本出願人の先行特許出願ＰＣＴ  ＧＢ９６／０１０５３（ＷＯ９６／３４８４６）は脂肪酸／１，３−プロパンジオール誘導体抗酸化剤およびこれらの、かかる抗酸化剤が有益である心臓血管障害、癌および炎症性疾患を含む疾病への使用を開示している。開示された特定のジエステルは、ＧＬＡまたはＤＨＡおよびリポ酸のそれである。関連する化合物、形式的にはジヒドロキシメタンの誘導体が出願人の更なる明細書ＰＣＴ  ＧＢ９６／０１０５２（ＷＯ９６／３４８５５）に開示されている。しかしながら、これら出願においては、脂肪酸およびリポ酸の部分を含む化合物が用いられることが強調され、脂肪酸およびリポ酸を独立した分子として同時に投与することも、また特別の目的であることも記載されていない。ヘキスト（Hoeckst)の米国特許第５，０４３，３２８号には、リポ酸がプロスタグランジン代謝に関連して、胃腸の疾患および皮膚および皮下組織機能不全において抗酸化剤として記載されている。
【００１３】
なしとげた新規な研究。発明。
糖尿病、抗インスリン性、症候群Ｘおよび神経障害および網膜症のような糖尿病合併症を含む、前記した多くの症状の入手可能な治療および予防は到底満足できるものではない。我々はとって、糖尿病合併症に関連する試験において、上記２つの異なる方法を同時に用いることは価値のあることと思われた。ＧＬＡは、ＴＡ／ＤＨＬが酸化機構において主として作用すると信じられる微小循環において主として作用すると信じられるが、これら薬剤の同時使用が少なくとも付加的効果を有するか否かを見出すことは道理に合っていると思われた。
【００１４】
事実、神経伝導速度および神経血液流の測定において、単独で用いた二つの薬剤の効果の合計よりも著しく大きい、二つの薬剤を同時に用いたときの効果を有する劇的な、かつ予期せざる相乗作用が観察された。結果を図１および図２に示した。糖尿病の動物において神経伝道および神経血液流の両者が著しく影響された。単独ではほとんど効果を有しないＧＬＡおよびＴＡの相当量の共同投与によって完全に正常化された。
【００１５】
必須脂肪酸およびそれらのＴＡとの相乗作用による結果は完全に予期しないものであり、本出願人らはその結果を更に研究することに決定した。ビタミンＥはＴＡのように、親油性抗酸化剤であり、ＴＡよりも生理学的により重要であると一般に考えられている抗酸化剤である。しかしながらビタミンＥをＧＬＡと共に糖尿病の動物に投与してもＧＬＡのいかなる効果の増強も見られない。同様に多くの臨床試験において、アトピー性湿疹、胸部痛、リウマチ様関節炎および心臓血管疾患のような疾患においてＧＬＡの効果はビタミンＥとの共同投与によって高められないことを我々は明らかにした。従って、我々が観察した劇的な薬効増強を推測する如何なる理由も存在せず、我々はかかる増強が抗酸化剤効果によって説明できるとは思わない。
【００１６】
かかる増強効果を更に探究するための努力において、我々はＧＬＡ、ＥＰＡまたはＤＨＡのいずれかを抗酸化剤ビタミンＥ、ビタミンＣまたはＴＡと共に、またはこれら抗酸化剤なしでラットへ投与することの効果についての予備的実験を行った。各脂肪酸を２週間の間、餌に０．１重量％添加した。餌は他の添加物質を含まないか（対照）、またはビタミンＥ、ビタミンＣまたはＴＡの０．１重量％を含んでいた。２週間後に動物を殺し、血漿リン脂質および赤血球膜リン脂質における脂肪酸またはそれらの中間代謝物のレベルを決定した。ビタミンＥまたはビタミンＣのいずれも血漿または赤血球における脂肪酸のレベルに効果を与えなかった。従って我々はこの条件下では抗酸化剤それ自体はＧＬＡ、ＥＰＡまたはＤＨＡの代謝に何の効果もないと結論できる。同様にＴＡは血漿リン脂質脂肪酸組成に効果がない。これに対して、夫々の群において、関連する脂肪酸の赤血球リン脂質における濃度は１０〜２０％増加した。このことは必須脂肪酸の細胞膜への取り組みに、ＴＡがそれまで知られていない、かつ思いもよらない効果を有することを証明している。この効果は抗酸化活性に関係するとは思われない。
【００１７】
我々が明らかにすることは、ＴＡが必須脂肪酸の細胞膜リン脂質への取り組みを高めうることである。このことは膜の構造に、および細胞信号伝達系への必須脂肪酸の取り組みに効果を及ぼし、糖尿病動物における神経機能および神経血液流に我々が観察した相乗効果を説明すると思われる。この効果はＧＬＡだけではなく全ての必須脂肪酸に適用できる一般的なものである。
【００１８】
本発明は広義にはＧＬＡおよび／または他の必須脂肪酸とＴＡまたは関連化合物との組成物、およびこれら組成物の治療または栄養物への使用または治療または栄養物のための組成物の製造に関する。関連する条件は本書に開示したが、とりわけ本発明は細胞膜必須脂肪酸濃度および／または、特に糖尿病合併症において、とりわけ障害のある神経機能（たとえば運動神経伝導速度）および血液流を改善することに関する。障害のある血液流は他の疾患、特に心臓および末梢循環の疾患においても重要である。膜へのＥＰＡ取り組みの障害は上述した多くの条件において重要な問題である。
【００１９】
本発明の詳細な記述
詳細には本発明は下記を提供する：
【００２０】
１．γ−リノレン酸とチオクト酸とを組み合わせてなる、糖尿病神経障害の治療または予防のための薬剤。
２．更に、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、リボフラビン、ピリドキシン、ニアシンアミド、葉酸、ビタミンＣまたは同化可能な亜鉛、クロム、マグネシウムまたはセレンから選ばれる１種またはそれ以上の必須栄養素を含む、前記薬剤。
【００２１】
３．前記γ−リノレン酸およびチオクト酸が夫々１ｍｇ〜１００ｇ／日、好ましくは１０ｍｇ〜１０ｇ／日、極めて好ましくは５０ｍｇ〜５ｇ／日の投与のために、かつ１：２０〜２０：１、より好ましくは１：５〜５：１、極めて好ましくは１：３〜３：１の重量比で提供される、前記薬剤。
４．前記γ−リノレン酸およびチオクト酸が同時に又は別々に提供される、前記薬剤。
【００２２】
上述したとおり、最も効果的な必須脂肪酸は６−脱飽和必須脂肪酸、とりわけＧＬＡ、ＡＡ、ＤＧＬＡ、ＳＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡまたはＤＨＡであり、好適には１mg〜１００ｇ／日、好ましくは１００mg〜１０ｇ／日および極めて好ましくは５０mg〜５ｇ／日の投与量範囲である。ＴＡ、ＢＡＬＡ、ＴＡＬおよび８ＢＡＬＡまたはこれらの還元形のようにジスルフィドが同様な投与量範囲で用いられる。必須脂肪酸：ジスルフィドの重量比は、たとえば１：２０〜２０：１であり、好ましくは１：５〜５：１、より好ましくは１：３〜３：１である。必須脂肪酸およびジスルフィドは更に、薬理学的に許容され、かつ血液または他の組織中における必須脂肪酸またはジスルフィド関連化合物の濃度を高めることができる、いずれかの適切に結合した化合物の形において夫々使用することができる。かかるプロドラッグはトリグリセリド、リン脂質、他のグリセリド、プロパンジオール誘導体、ジエム・ジオールおよび当業者に知られているその他の物質に含まれる。必須脂肪酸およびジスルフィドは一つの分子内に結合せしめられ、この分子の機能は必須脂肪酸およびジスルフィドの両方についてプロドラッグとして作用する。例は、本出願人らによるＰＣＴ出願ＧＢ９６／０１０５３（ＷＯ９６／３４８３６）に開示のようにして得られる１，３−プロパンジオール誘導体および本出願人らによるＰＣＴ出願ＧＢ９６／０１０５２（ＷＯ９６／３４８５５）に開示のようにして得られるジエム・ジオール誘導体である。
【００２３】
上記活性物質は、これら物質が如何に投与されるかを述べる指示に従って、同時にまたは別々に与えられる。別々の投薬形式で与えられるときには、二つの物質は夫々の包みで与えられる。これらは当業者に知られた処方に従って、経口、経腸、非経口、局所、直腸または膣経由で投与される。
【００２４】
活性物質はまた、栄養補給剤、医療用食品、機能性食品、栄養薬剤、またはミネラルおよびビタミンＡ、ＤおよびＥ、リボフラビン、ピリドキシン、ニアシンまたはニアシンアミド、葉酸のようなＢ群ビタミン、ビタミンＣ、または同化可能な亜鉛、クロム、マグネシウムまたはセレンを含む他の必須栄養素と共に通常の食品として与えられる。かかる栄養素は、いずれか適切な生物同化性の化学的形状で与えられる。
【００２５】
実  験
ストレプトゾトシンの投与によって糖尿病にしたラットの研究によって最初の実験的証拠を得た。これら動物において、ヒトの糖尿病合併症に類似する合併症が発生し、座骨神経に沿うインパルスの伝導速度の低下および座骨神経への血液流の低下によって特徴づけられた。血液流の低下は特に重要であり、網膜症、腎症、心臓の脈管動脈および末梢動脈疾患、不能症および脚部潰瘍を含む多くの糖尿病合併症に関連すると思われる。それはまた、炎症性疾患を含む、必須脂肪酸が有用な治療である、多くの他の疾患にも関連する。
【００２６】
ストレプトゾトシン（ＳＴＺ）を与えた動物の五つの群について試験をした。これら動物はＳＴＺを与えた後に血中グルコースの明白な上昇を示した場合にのみ研究の対照とした。１０匹の動物を正常対照動物とした。
【００２７】
１０匹の動物が糖尿病になったが治療しなかった。８匹の動物をＴＡのみで治療した。１１匹をＧＬＡのみで、１１匹をＴＡおよびＧＬＡの合併で治療した。ＧＬＡはほぼ２０mg／kg／日の投与量になるように餌に添加し、ＴＡは２０mg／kg／日の投与量で毎日の腹腔内注射によって与えた。脂肪は表面積に関連して代謝されるので、かつ表面積／容積比は大型動物におけるよりも小型動物において著しく大きいので、これら投与量は成人における約２〜３mg／kg／日の投与量とほぼ同等である。
【００２８】
動物をＳＴＺの腹腔内注射によって糖尿病にした。ラットはスプラグ・ドウレイ（Sprague Drawlay)種の雄であり、ＳＴＺ注射のとき生後１７週であった。ＳＴＺの後に動物は神経の損傷を発展させるために６週間放置し、次いで治療をしないか、２週間の間ＧＬＡまたはＴＡで治療するか、またはＧＬＡとＴＡの両方で２週間治療をした。２週間後に、動物に麻酔をかけ、運動神経伝導速度を座骨神経の会陰分枝において測定した。微小電極ポーラログラフィ水素クリアランスによって座骨神経血液流も測定した。
【００２９】
図は運動神経伝導速度および全神経血液流をプロットしたものである。ＴＡ単独およびＧＬＡ単独でも神経伝導速度および神経血液流において共に僅かの改善がもたらされた。しかしながら、これら投与量により改善されても正常値に復元したとは到底云えない。二つの化合物を同時添加したと推定して夫々の効果を合計しても正常値へはとても達しなかった。しかしながら、予期された添加効果とは対照的に、二つの化合物は協同で神経伝導速度および神経血液流の両者を効果的に正常化した。ＧＬＡ単独またはＡＬＡ単独の、先の投与量／応答研究からすると、ＧＬＡまたはＴＡの存在は他方の化合物の効果を約１０倍に増幅したと思われる。このことはパッカー（Packer) らが言及したＴＡ単独では神経伝導に効果がないこと（先の引用著書、第５７０〜５７２頁参照）と対象的である。
【００３０】
上述は、実際の疾患状態が化合物の投与によって注意をむけられるので、本発明を治療の見地から説明するものである。薬剤およびこれらの製造に関しては、本発明を下記実施例によって説明する。
【００３１】
実施例
下記は糖尿病合併症および他の目的に関して効果的な組成物の実施例を詳述するものである。
１．ＴＡ、ＴＡＬＡ、ＢＡＬＡまたは８−ＢＡＬＡそれ自体または夫々の還元形の１００mgおよびＧＬＡ、ＤＧＬＡ、ＡＡ、ＳＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡまたはＤＨＡの１００mgを共に夫々含む軟質または硬質ゼラチンカプセルを１〜４カプセル／日の投与量で用いた。
２．１日当り活性成分の投与量がチオクト酸関連化合物の０〜２００mgおよび脂肪酸の２０〜２００mgの範囲である以外は実施例１と同様なカプセル。
３．脂肪酸が誘導体、すなわちエチルまたは他のエステル；モノ、ジまたはトリグリセリド；リン脂質；アミドまたは体内において生物学的活性な脂肪酸を生じるいずれか他の誘導体として与えられる以外は実施例１または２と同様なカプセル。
４．ＧＬＡ、ＤＧＬＡ、ＡＡ、ＳＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡおよびＤＨＡから選ばれた脂肪酸の残基、およびチオクト酸の残基または関連化合物ＴＡＬＡ、ＢＡＬＡまたは８−ＢＡＬＡ自体または夫々の還元形の残基を有するジエステルを含み、このジエステルがＷＯ９６／３４８６の実施例５または１７に記述のようにして製造された１，３−プロパンジオールまたはＷＯ９６／３４８５５の実施例の記述により製造されたジヒドロキシメタンのジエステルであり、夫々の明細書が参照される実施例１または２記載のカプセル。
５．ＴＡ、ＴＡＬＡ、ＢＡＬＡまたは８−ＢＡＬＡ自体または夫々の還元形の５０、１００または２００mgを夫々含む錠剤またはカプセルが、ＬＡ、ＤＧＬＡ、ＡＡ、ＳＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡまたはＤＨＡの５０mg、１００mgまたは２００mgを夫々含む軟質または硬質ゼラチンカプセルと同一パックで、たとえばブリスターパックで提供され、夫々の投与形は１〜４単位／日の量で投与される。
６．各カプセル当りＴＡ５０mg、ＧＬＡまたはＤＧＬＡの１００mg、ＤＨＡの１００mg、アスコルビン酸の５０mg、Ｂ群ビタミンの推奨される１日当りの許容量およびピコリン酸塩としてのクロム３０mgが提供される、糖尿病またはいずれか他の疾患を有するヒトまたは動物に使用するための栄養補助剤。
７．カロリーおよび必須栄養素に加えて、各部分当りＧＬＡの１００mgおよびＴＡの１００mg、任意的にはＤＧＬＡ、ＡＡ、ＳＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡまたはＤＨＡも提供する、糖尿病または他の疾患を有する人に使用するための機能性食品。
８．ＴＡの０．１〜２．０％およびＧＬＡまたはＤＧＬＡの０．１〜１０．０％が皮膚軟化薬ベース中に組み込まれている、湿疹または乾癬のためのスキンケアまたは化粧品用製剤。
９．いずれかの季節に、創傷、心臓病または発作後のリハビリを含め、運動トレーニング中の選手または人によって使用するための食品または飲料であり、各部分当りＴＡの５０〜２００mgおよびＧＬＡまたはＤＧＬＡの５０〜２００mgを、任意的には他の必須栄養素および脂肪酸と共に提供する。
１０．馬または犬によって使用するための食品、飲料または補助剤であり、ＴＡの１〜５０mg／kg／日をＧＬＡまたはＤＧＬＡの１〜５０mg／kg／日と共に、任意的には他の必須栄養素および脂肪酸と共に提供する。
【図１】
0004476479.tif 000004
【図２】
0004476479.tif 000005