(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検試料のＣ反応性蛋白（ＣＲＰ）、リウマチ因子（ＲＦ）または抗ストレプトリジンＯ抗体価（ＡＳＯ）を免疫学的に測定するために用いる標準試料であって、グルコースを標準物質の濃度又は量に比例させて含有させることを特徴とする標準試料。
【請求項２】
被検試料のＣ反応性蛋白（ＣＲＰ）、リウマチ因子（ＲＦ）または抗ストレプトリジンＯ抗体価（ＡＳＯ）を免疫学的に測定するために用いる標準試料の調製法であって、グルコースを標準物質の濃度又は量に比例させて含有させることを特徴とする標準試料の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、臨床検査の分野で用いられる標準試料及びその調製法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
試料中の被検物質を測定する場合、通常既知濃度の標準物質を含む標準試料の測定値を元に検量線を求めて、被検物質の濃度を求める方法が行なわれている。
この時に用いる標準試料の濃度は、異なった濃度の２種類以上の標準試料を用いることが多く行なわれている。異なった濃度の２種以上の標準試料の値付けは、既知濃度の一次標準試料を元に被検物質の測定試薬を用いて測定し、値付けが行なわれている。この方法では、測定の感度及び再現性において、とりわけ低値領域、すなわち用いる測定方法の測定限界付近の値は不正確になった。
【０００３】
【解決しようとする課題】
本発明の課題は、異なった濃度の標準試料の値を正確に値付けする方法を提供することである。
【０００４】
【解決する手段】
本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、被検試料のＣ反応性蛋白（ＣＲＰ）、リウマチ因子（ＲＦ）または抗ストレプトリジンＯ抗体価（ＡＳＯ）を免疫学的に測定するために用いる標準試料中にグルコースを標準物質の濃度又は量に比例させて含有させることにより、標準試料を調製すれば、正確な値付けが可能であることを見出し本発明を完成させるに至った。
【０００５】
本発明は、被検試料のＣ反応性蛋白（ＣＲＰ）、リウマチ因子（ＲＦ）または抗ストレプトリジンＯ抗体価（ＡＳＯ）を免疫学的に測定するために用いる標準試料であって、グルコースを標準物質の濃度又は量に比例させて含有させることを特徴とする標準試料に関するものである。
【０００６】
本発明は、被検試料のＣ反応性蛋白（ＣＲＰ）、リウマチ因子（ＲＦ）または抗ストレプトリジンＯ抗体価（ＡＳＯ）を免疫学的に測定するために用いる標準試料の調製法であって、グルコースを標準物質の濃度又は量に比例させて含有させることを特徴とする標準試料の調製方法にも及ぶ。
【０００７】
より具体的な実施態様を基に、さらに本発明を詳細に説明する。
被検物質Aの標準試料を調製するに当たり、例えば５種類の濃度の標準試料、最も高濃度を１０とし、次いで８、６、４、０を調製する場合、濃度１０の試料を調製して、順次希釈して調製する方法が一般的に行なわれる。本発明では、この濃度１０の試料に、測定には影響を及ぼさない物質、例えば色素を所定濃度含ませておき、色素を含まない液で順次希釈する。このようにすれば、色素の濃度と、標準物質の濃度は比例するので標準物質の濃度を全ての濃度域で測定しなくとも、色素の濃度を、吸光光度計で測定するだけで、正確な標準試料の濃度が求められる。すなわち、色素濃度を測定するだけで、標準試料の濃度が求められることになる。このようにすれば、測定方法の感度、再現性による不正確さを回避して、正確な値付けが可能になる。
【０００８】
標準物質は特に限定されるものではないが、通常の臨床検査で測定されているものとして、Ｃ反応性蛋白（ＣＲＰ）、リウマチ因子（ＲＦ）、抗ストレプトリジンO抗体価（ＡＳＯ）、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、Ｃ３、Ｃ４、トランスフェリン、ヘモペキシン、ＡＴ−ＩＩＩ、プラスミノゲン、α１−アシッドグリコ蛋白、リポ蛋白、抗ウイルス抗体、β２−ミクログロブリン等数多く存在する。
【０００９】
ここで標準物質とは測定値を得るために測定装置に対して値付を目的とする検量用試料や、検査や測定の精度管理に用いる試料である精度管理用物質をも含む意味である。また、標準物質は凍結乾燥品、凍結品、液状品であっても良い。
【００１０】
用いる標準物質の測定に影響を及ぼさない物質として、各種の色素、とりわけ水溶性の色素が用いられる。色素は直接、試料液に添加するか、或いは予め、蛋白質等に吸着させておいたものを加えることも可能である。色素は特に可視部或いは紫外部に吸収を有するものの他に、蛍光色素も用いることができる。具体例としては、フルオレセイン、ローダミン、Ｃｙ５、エチジウムブロマイド、メチレンブルー、チバクロンブルー、クーマシーブリリアントブルー、等が挙げられる。
【００１１】
別の実施態様の例として、例えば、免疫学的に測定される、ＣＲＰ、ＲＦ、ＡＳＯ等の標準試料にグルコース等を指標にすることも可能である。この場合、グルコース濃度を市販のグルコース測定試薬を用いて測定すれば良い。免疫学的測定では、低濃度域での感度不足、或いは再現性の悪さのため正確な測定値を得ることは困難であるが、グルコースの測定であれば、感度、再現性も免疫学的測定よりはるかに優れているので、信頼できる値が簡単に得ることが可能である。
【００１２】
さらに本発明は製造工程での標準物質の濃度の確認にも用いられる。つまり、例えば希釈が正常に実施され、目的とする濃度に標準物質が調製されたかを簡便にかつ迅速に知ることが出来る。従来は標準物質の濃度を測定していたが、測定には時間や煩雑な操作等手間がかかった。さらに、通常、測定に際し大型の測定装置が必要でありまた、高価な試薬が必要であった。しかし、本発明によれば、前記のように標準物質の測定に影響を及ばさない物質例えば色素やグルコースの濃度を測定することにより、標準物質の濃度の確認が可能となり、製造時間の短縮、コスト削減等が可能となる。また、このように製造された最終品の標準試料に含まれる標準物質の濃度は目的に応じ当該標準物質の測定試薬で確認することも可能である。
【００１３】
【実施例】
以下に実施例を挙げて本発明を更に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００１４】
【実施例１】
ＣＲＰの標準試料を調製した。市販のリコンビナントＣＲＰ抗原を
３０ｍｇ／ｄＬとなるように、１０ｍｇ／ｍＬの牛血清アルブミン及び０．１５Ｍの食塩を含むトリス緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解し、その溶液に色素チバクローンブルーを波長６５０ｎｍの吸光度が約１．８となるように溶解した。本溶液を原液として、１０ｍｇ／ｍＬの牛血清アルブミン及び０．１５Ｍの食塩を含むトリス緩衝液（ｐＨ７．５）で順次希釈操作を行ない、
１５ｍｇ／ｄＬ、７．５ｍｇ／ｄＬ、２ｍｇ／ｄＬ、０．５ｍｇ／ｄＬとなるように希釈調製した。各試料の波長６５０ｎｍでの吸光度及び、ＣＲＰ測定試薬でＣＲＰ濃度を実測した実測値及び吸光度の夫々とＣＲＰの理論値との相関を求めた。その結果を図１に示した。
その結果、色素の吸光度はＣＲＰ濃度の理論値と比例しているが、実測値は、低値領域では、理論値よりも高値に、一方高値側では理論値よりも低値に測定されている。従って、本発明の方法により、正確な値付けが可能になることが判った。
【００１５】
【発明の効果】
本発明は、被検試料のＣ反応性蛋白（ＣＲＰ）、リウマチ因子（ＲＦ）または抗ストレプトリジンＯ抗体価（ＡＳＯ）を免疫学的に測定するために用いる標準試料中にグルコースを標準物質の濃度又は量に比例させて含有させることにより、標準物質の値を正確に値付けする方法を提供することにある。さらに、本発明は当該方法を用いた標準試料も提供する。本発明により、ＣＲＰ、ＲＦまたはＡＳＯを免疫学的に測定するために用いる標準物質の正確な値付けが可能となり更に、製造の簡略化を行うことが可能となった。
【図面の簡単な説明】
【図１】  ＣＲＰの理論値と、吸光度及び実測測定値との関係を示した図である。図中−●−は、各試料の実測値を示し、−■−は、各試料の吸光度を示す。
【図１】
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