(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉａ）または式（Ｉｂ）
【化１】
0004497815.tif 000296
の化合物。
上記式（Ｉａ）または式（Ｉｂ）中、
Ｙは、カルボニル、スルホニル、または単結合であり、
ＡはＣＨまたはＮであり、
ｎは１であり、
ｋは２であり、
ｎ'は、１または２であり、
ｘは、０、１または２であり、
各Ｒ3は、独立して水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、または
【化２】
0004497815.tif 000297
（式中、ｗは１、２または３である）であり、
Ｒは（ｂ）および（ｄ）：
【化３】
0004497815.tif 000298
（式中、
各ＱおよびＶは、独立して、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、トリフルオロメチル、または−ＣＨ2ＯＣ1−Ｃ6アルキルであり、
ｐは、０、１または２であり、
Ｊは、水素、
【化４】
0004497815.tif 000299
（式中、各Ｒ73は、独立して、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、またはトリフルオロメチルであり、ｐは先に定義した通り）である）から成る群から選択され、
−Ｂ−は、（ａ）から（ｍ）：
（ａ）ｚが２、３、４、５、６または７である−(ＣＨ2)z−；
（ｂ）
【化５】
0004497815.tif 000300
（式中、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して、水素またはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、
Ｒ7およびＲ8は、それぞれ独立して、水素またはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、ただし、Ｒ7がＣ1−Ｃ3直鎖アルキルのとき、Ｒ8はＣ1−Ｃ3直鎖アルキルにはならない）；
【化６】
0004497815.tif 000301
【化７】
0004497815.tif 000302
から選択される基を表し、
Ｒ1は、
ａ）水素、
ｂ）場合によってヒドロキシによりモノ−またはジ−置換された飽和または不飽和Ｃ1−Ｃ6アルキル、または
ｃ）
【化８】
0004497815.tif 000303
（式中、各Ｇは、独立して、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、またはトリフルオロメチルであり、
各Ｒ9およびＲ10は、独立して、水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｔは０または１であり、そして
ｑは０または１である）であり、
Ｒ2は、飽和若しくは不飽和Ｃ1−Ｃ10アルキルから選択される基、トリフルオロメチル、または（ａ）−（ｓｓ）：
【化９】
0004497815.tif 000304
【化１０】
0004497815.tif 000305
【化１１】
0004497815.tif 000306
【化１２】
0004497815.tif 000307
【化１３】
0004497815.tif 000308
【化１４】
0004497815.tif 000309
【化１５】
0004497815.tif 000310
から選択される基であり、および、
Ｙが単結合のとき、Ｒ1およびＲ2は一緒になって基（ｔｔ）−（ｗｗ）：
【化１６】
0004497815.tif 000311
のいずれか１つの基を形成することができ、
ここで、ｅは３、４または５であり、
ｙは、０、１または２であり、
各Ｒ11およびＲ12は独立して水素またはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、
Ｄは（ａ）または（ｂ）：
（ａ）各Ｒ13およびＲ14が、独立して水素、ハロゲンまたはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、ｕが０、１、２または３である−(ＣＲ13Ｒ14)u−、
（ｂ）各Ｒ15およびＲ16が、独立して水素、Ｃ1−Ｃ3直鎖アルキルまたはアミノである−ＣＲ15＝Ｒ16−、
から選択される基であり、
ｏは０、１または２であり、
Ｍは、
（１）水素、
（２）Ｃ1−Ｃ8アルキル、
（３）Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、
（４）ヒドロキシ、
（５）トリフルオロメチル、
（６）トリフルオロメトキシ、
（７）−ＮＯ2、
（８）−ＣＮ、
（９）−ＳＯ2ＣＨ3、
（１０）ハロゲン、
【化１７】
0004497815.tif 000312
（式中、各Ｌは独立して水素または−ＮＲ67Ｒ68であり、ここで、Ｒ67およびＲ68はそれぞれ独立して水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはＣ1−Ｃ6アルコキシであり、上で定義したように、ｏは、０、１または２である）、
（１６）
【化１８】
0004497815.tif 000313
（式中、Ｔは水素またはハロゲンであり、ｒは０、１または２である）、
（１７）−ＮＲ69Ｒ70
（式中、Ｒ69およびＲ70はそれぞれ独立して水素またはＣ1−Ｃ6アルキルである）、
（１８）−ＳＯ2ＮＨ2、
から選択される基であり、
各Ｒ17およびＲ18は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｓは、０、１または２であり、
Ｒ53は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、アミノまたはＣ1−Ｃ3アルコキシであり、
Ｒ54は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、アミノ、−ＳＯ2ＮＨ2またはＣ1−Ｃ3アルコキシであり、
各Ｒ19およびＲ20は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｖは、０、１または２であり、
Ｘは、ＯまたはＳであり、
各Ｒ21およびＲ22は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｄは、０、１または２であり、
Ｒ23は以下の（ａ）−（ｈ）：
（ａ）水素、
（ｂ）Ｃ1−Ｃ6アルキル、
（ｃ）ハロゲン、
（ｄ）ヒドロキシ、
（ｅ）Ｃ1−Ｃ3アルコキシ、および
【化１９】
0004497815.tif 000314
から選択される基であり、
Ｒ55は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
各Ｒ25およびＲ26は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｆは、０、１または２であり、
Ｒ27は以下の（ａ）−（ｅ）：
（ａ）水素、
（ｂ）Ｃ1−Ｃ6アルキル、
（ｃ）ハロゲン、
（ｄ）−ＳＣＨ3、および
（ｅ）
【化２０】
0004497815.tif 000315
（式中、Ｘ1はＯまたはＳであり、Ｒ28は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルである）
から選択される基であり、
ｊは上で定義したように０または１であり、
各Ｒ56、Ｒ57およびＲ58は独立して水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｗは、ＣＨ2、ＣＨＯＨまたはＣ＝Ｏであり、
各Ｒ29およびＲ30は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｇは０または１であり、
Ｘ2はＯまたはＳであり、
各Ｒ31は独立して水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ1−Ｃ6アルコキシまたは−ＮＲ71Ｒ72であり、ここでＲ71およびＲ72はそれぞれ独立して水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
ｏは上で定義したように０、１または２であり、
Ｒ32は水素、ハロゲンまたはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ33は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはＣ1−Ｃ3アルコキシであり、
Ｒ34は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは−ＣＨ2ＣＯ2Ｃ1−Ｃ6アルキルであり、
各Ｒ35およびＲ36は独立して水素またはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、
ｈは０または１であり、
Ｒ37は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ41は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ベンジル、アシル、トシル、ピリジルまたは場合により、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換基によりモノ−またはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ59およびＲ60は、水素、メチル、または場合によって、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1
−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換
基によりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ42は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、トリフルオロメチルまたはフェノキシであり、
Ｒ43は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはベンジルであり、
Ｒ61は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ44は水素、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、フェニルまたはアシルであり、
Ｒ38は水素、メチル、または場合によって、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換基によりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ45は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｓ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、または場合によって、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換基によりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ46は水素またはハロゲンであり、
Ｒ62は水素、ハロゲンまたはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ47はＳＭｅ、ＳＯＭｅまたはＳＯ2Ｍｅであり、
Ｒ48は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、トリフルオロメチル、ピリジル、チオフェニル、または場合によって、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換基によりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ63は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ49はメチル、トリフルオロメチル、フェニルまたは−ＣＨ2ＳＰｈであり、
Ｒ50は水素、メチル、アシルまたはベンジルであり、
ｉは０または１であり、
ｙは上で定義したように０、１または２であり、
ｐは上で定義したように０、１または２であり、
各Ｒ74は独立して水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシまたはハロゲンであり、
Ｒ51は水素、ヒドロキシ、メチル、メトキシ、塩素または−ＳＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ52は水素、フェニルまたはチオフェンであり、
Ｒ39は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ40は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、フェニルまたはベンジルであり、
ｂは１、２、３または４であり、
各Ｒ64およびＲ65は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｕは上で定義したように０、１、２または３であり、
各Ｒ66は独立して水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、または場合により、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル若しくはトリフルオロメチルによりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ75は水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはフラニルであり、
ｃは１または２であり、
ｗは上で定義したように１、２または３であり、
Ｒ76は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
各Ｒ77およびＲ78は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
各Ｒ79およびＲ80は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
Ｒ81はＣ1−Ｃ6アルキル、またはハロゲンにより場合により置換されたフェニルであり、
各Ｒ82およびＲ83は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
Ｒ84は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
ｊは上で定義したように０または１であり、
各Ｒ85およびＲ86は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
Ｒ87はフェニルまたはベンジルであり、それぞれＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシまたはハロゲンにより場合によりモノ−またはジ−置換されることができ、
Ｒ88は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、または場合によりＣ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン若しくは以下の基（ａ）−（ｃ）：
【化２１】
0004497815.tif 000316
のうちの１つによりモノ−若しくはジ−置換されたベンジルであり、そして
ｙは上で定義したように０、１または２である。
【請求項２】
Ｙがカルボニルであり、Ｒが基（ｂ）（式中、Ｑが水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、または−ＣＨ2ＯＣ1−Ｃ6アルキルであるもの）である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｂが基（ａ）である請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｂが基（ｂ）である請求項２記載の化合物。
【請求項５】
ｚが４であるである請求項３記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＲ8が水素である請求項４記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ2が基（ａ）、（ｂ）、（ｌ）、（ｓ）、（ｎ）または（ｌｌ）である請求項３記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ2が基（ａ）、（ｂ）、（ｌ）、（ｓ）、（ｎ）または（ｌｌ）である請求項４記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ2が基（ａ）である請求項７記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ2が基（ａ）であり、ここでｙが０または１であり、ｅが５である請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ2が基（ｂ）である請求項７記載の化合物。
【請求項１２】
Ｍが水素、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは基（１５）であり；Ｄが基（ａ）（式中、各Ｒ13およびＲ14が独立して水素、ハロゲンまたはＣ1
−Ｃ3直鎖アルキルであり、ｕが０または１であるもの）；または基（ｂ）（式中、Ｒ15
およびＲ16が水素であるもの）である請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ2が基（ｌ）である請求項７記載の化合物。
【請求項１４】
ｇが０または１であり、Ｒ31が水素である請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ2が基（ｓ）である請求項７記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ61が水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはハロゲンである請求項１５記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ2が基（ｎ）である請求項７記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ33が水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはＣ1−Ｃ6アルコキシであり、Ｒ34が水素またはＣ1−Ｃ6アルキルである請求項１７記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ2が基（ｌｌ）である請求項７記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ66が水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはハロゲンである請求項１９記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ2が基（ａ）である請求項８記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ2が基（ａ）であり、ここでｙが０または１であり，ｅが５である請求項２１記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ2が基（ｂ）である請求項８記載の化合物。
【請求項２４】
Ｍが水素、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは基（１５）であり；Ｄが基（ａ）（式中、各Ｒ13およびＲ14が独立して水素、ハロゲンまたはＣ1
−Ｃ3直鎖アルキルであり；ｕが０または１であるもの）；または基（ｂ）（式中、Ｒ15
およびＲ16が水素であるもの）である請求項２３記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ2が基（ｌ）である請求項８記載の化合物。
【請求項２６】
ｇが０または１であり、Ｒ31が水素である請求項２５記載の化合物。
【請求項２７】
Ｒ2が基（ｓ）である請求項８記載の化合物。
【請求項２８】
Ｒ61が水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはハロゲンである請求項２７記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒ2が基（ｎ）である請求項８記載の化合物。
【請求項３０】
Ｒ33が水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはＣ1−Ｃ6アルコキシであり、Ｒ34が水素またはＣ1−Ｃ6アルキルである請求項２９記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ2が基（ｌｌ）である請求項８記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒ66が水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはハロゲンである請求項３１記載の化合物。
【請求項３３】
ビフェニル−４−カルボン酸［４−（４−チエノ［２，３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル−ピペラジン−１−イル）−ブチル］−アミドである請求項１記載の化合物。
【請求項３４】
請求項１記載の化合物または薬理学的に許容可能なその塩を含有する、ドーパミンＤ3受容体の活性調節剤。
【請求項３５】
治療的に有効な量の請求項１記載の化合物または製剤学的に許容可能なその塩を含有する、中枢神経系障害治療剤。
【請求項３６】
中枢神経系障害が、精神異常、物質依存症、薬物乱用、運動障害、痴呆症、不安障害、睡眠障害、気分障害および悪心から選択される請求項３５記載の治療剤。
【請求項３７】
精神異常が統合失調症である請求項３６記載の治療剤。
【請求項３８】
請求項１記載の化合物または製剤学的に許容可能なその塩を、１またはそれ以上のドーパミンＤ1、Ｄ2、Ｄ4、Ｄ5、または５ＨＴ3受容体拮抗剤と共に含有する請求項３５記載の治療剤。
【請求項３９】
有効量の請求項１記載の化合物および製剤学的に許容可能な担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項４０】
有効量の請求項１記載の化合物および製剤学的に許容可能な担体または希釈剤を、１またはそれ以上のドーパミンＤ1、Ｄ2、Ｄ4、Ｄ5、または５ＨＴ3受容体拮抗剤と共に含む医薬組成物。
【請求項４１】
その化合物中に含まれる１またはそれ以上の原子が放射性核種である請求項１記載の化合物。
【請求項４２】
放射性同位体でラベルした請求項４１記載の化合物を含有する、哺乳動物中のニューロン機能診断剤。
【請求項４３】
単光子放出コンピュータ断層撮影に使用するための請求項４２記載の診断剤。
【請求項４４】
式（IIａ）または式（IIｂ）：
【化２２】
0004497815.tif 000317
（式中、Ｒ、Ｒ3、Ａ、ｎ、ｎ'、ｘ、ｋ、ＢおよびＲ1は請求項１の式(Ｉａ)または式(Ｉｂ)中で定義されたとおり）の化合物と、式（III）：
【化２３】
0004497815.tif 000318
（式中、「ＬＧ」は塩素、臭素またはヨウ素から選択される適した離脱基であり、Ｒ2は請求項１の式(Ｉａ)または式(Ｉｂ)中で定義されたとおり）の化合物とを反応させる工程を含む、請求項１記載の化合物の製造方法。
【請求項４５】
式（IVａ）または式（IVｂ）：
【化２４】
0004497815.tif 000319
（式中、Ｒ3、Ｒ、ｘ、ｋ、Ａ、ｎおよびｎ'は請求項１の式(Ｉａ)または式(Ｉｂ)中で定義されたとおり）の化合物と、式（Ｖ）：
【化２５】
0004497815.tif 000320
（式中、「ＬＧ」は塩素、臭素、ヨウ素およびメシルから選択される適した離脱基であり、Ｂ、Ｒ1およびＲ2は請求項１の式(Ｉａ)または式(Ｉｂ)中で定義されたとおり）の化合物とを反応させる工程を含む、請求項１記載の化合物の製造方法。
【請求項４６】
治療学的に有効な量の請求項１記載の化合物を含有する、腎機能障害治療剤。
【請求項４７】
Ｒが基（ｂ）である請求項１記載の化合物。
【請求項４８】
Ｒが基（ｄ）である請求項１記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明はドーパミンＤ3受容体に選択的に結合する新しい複素環誘導体に関する。現在利用可能な抗精神病剤（神経弛緩剤）の治療効果は一般的にＤ2受容体の遮断を介して発揮されると考えられているが、この機序はまた多くの神経弛緩剤に備わっている望ましくない錐体外副作用（ｅｐｓ）の原因であると考えられている。理論に制約されないが、ドーパミンＤ3受容体の遮断は顕著なｅｐｓを伴うことなく有益な抗精神病活性を与えると考えられる（例えばＳｏｋｏｌｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９０；３４７；１４６−１５１；およびＳｃｈｗａｒｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１６，Ｎｏ．４，２９５−３１４，１９９３参照）。この受容体は情緒および認識機能に関わる脳の領域において大量に存在している。ドーパミンＤ3受容体に選択的に結合する化合物は特定の中枢神経系の障害の治療において有用である。これらの中枢神経系の障害には以下の適応症が包含される。
【０００２】
１）精神病（統合失調症を含む）−例えば、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９０，３（４），６５９−６６；Ｃｌｉｎ  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９３，１６（４），２９５−３１４；Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９７，１６（６），３７５−８４；Ａｍ  Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，１９９９，１５６（４），６１０−６１６；Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  （Ｂｅｒｌ），１９９５，１２０（１），６７−７４参照。
【０００３】
２）物質依存および薬物乱用−例えば、Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ，１９９７，８（９−１０），２３７３−２３７７；Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ，１９９６，２７８（３），１１２８−３７；Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ  Ｍｏｌ  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ，１９９７，４５（２），３３５−９参照。
【０００４】
３）気分障害（躁病、抑鬱症および双極性障害）−例えば、Ｃｌｉｎ  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９８，２１（３），１７６−８０；  Am  J  Med  Genet，１９９８，８１（２），１９２−４；J  Clin  Psychiatry，１９９５，５６（１１），５１４−５１８；J  Clin  Psychiatry，１９９５，５６（９），４２３−４２９；Am  J  Med  Genet，１９９５，６０（３），２３４−２３７；Pharmacopsychiatry，１９９９，３２（４），１２７−１３５；J  Affect  Disord，１９９９，５２（１−３），２７５−２９０；Am  J  Psychiatry，１９９９，１５６（４），６１０−６１６．
【０００５】
４）運動障害（パーキンソン病、振せん麻痺、神経弛緩剤誘発遅発性ジスキネジーおよびジル・ド・ラ・ツレット症候群を含む）−例えば、Ｃｌｉｎ  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０００，２３（１），３４−４４；Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９９，３８５（１），３９−４６参照。
【０００６】
５）睡眠障害（睡眠発作を含む）−Ｄ3アゴニストであるピラミペキソールは睡眠発作を誘発する。Ｄ3拮抗剤はこの望ましくない副作用を逆行させるために有用である。Ａｕｓｔ  Ｆａｍ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ， １９９９， ２８（７），７３７；Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，１９９９，５２（９），１９０８−１９１０参照。
【０００７】
６）不安障害（強迫性障害を含む）−例えば、Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｂｅｈａｖ，１９９７，６３（１），１３７−１４１；Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，１９９５，５６（９），４２３−４２９；Ｊ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２０００，２５（２），１８５；Ｊ  Ａｆｆｅｃｔ  Ｄｉｓｏｒｄ，１９９９，５６（２−３），２１９−２２６参照。
【０００８】
７）悪心−ドーパミン拮抗剤は単独および５ＨＴ３拮抗剤と組み合わせて使用される。例えばＳｕｐｐｏｒｔ  Ｃａｒｅ  Ｃａｎｃｅｒ，１９９８，６（１），８−１２； Ｓｕｐｐｏｒｔ  Ｃａｒｅ  Ｃａｎｃｅｒ，２０００，８（３），２３３−２３７；Ｅｕｒ  Ｊ  Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｏｌ，１９９９，１６（５），３０４−３０７参照。
８）痴呆症−例えばＢｅｈａｖ  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ，２０００，１０９（１），９９−１１１；Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９９，８９（３），７４３−７４９参照。
ドーパミンＤ3受容体リガンドはまた腎機能障害の治療にも有用である。例えばＷＯ２０００６７８４７号参照。
【０００９】
本発明の範囲内の一部の化合物が開示され、そして、米国特許第５，８０１，１７６号において特許請求されており、開示されたもの全てが参照により本明細書中に組み込まれる。例えば、６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン類は明細書中で、抗精神病薬として有効なものであるとして開示されている。
【００１０】
【発明の開示】
本発明はドーパミンＤ3受容体の選択的モジュレーターである化合物のクラスおよびその製剤学的に許容可能な塩に関する。化合物はドーパミンＤ3受容体のアゴニスト、部分的アゴニスト、拮抗剤またはアロステリックモジュレーターとして機能し、種々の治療用途に有用である。
【００１１】
別の態様では、本発明は、ドーパミンＤ3受容体活性が関連している中枢神経系障害の治療の必要な患者における該障害の治療方法に関し、該方法は前記障害の緩解のための本明細書記載の化合物の治療有効量を患者に投与することを包含する。これらの化合物により治療できる中枢神経系の障害には、精神異常、物質依存症、薬物乱用、運動障害（例えばパーキンソン病、振せん麻痺、神経弛緩剤誘発遅発性ジスキネジー、ジル・ド・ラ・ツレット症候群およびハンチントン病）、悪心、痴呆症、不安障害、睡眠障害、概日リズム障害、気分障害が包含される。
【００１２】
また別の態様では、本発明はドーパミンＤ1、Ｄ2、Ｄ4、Ｄ5または５ＨＴ受容体拮抗剤の１種またはそれ以上と組み合わせて製剤学的に許容可能な担体または希釈剤と共に本明細書記載の化合物の有効量を含有する医薬組成物に関する。腎機能障害をこれらの化合物で治療することもできる。
【００１３】
さらに別の態様では、本発明は、有効量の本明細書中に記載されている化合物および薬剤学的に許容可能な担体または希釈剤を含む医薬組成物に関し、これは任意で１またはそれ以上のドーパミンＤ1、Ｄ2、Ｄ4、Ｄ5、または５ＨＴ3受容体拮抗剤と共に含んでいてもよい。
更に別の態様では、本発明は本明細書に記載する化合物のクラスの調製のための方法に関する。
更に本発明に包含されるものは、ドーパミンＤ3受容体の造影剤としてのこれらの新しい化合物の使用方法である。造影剤としてのこれらの化合物の使用方法、造影剤の中間体および製造方法も記載する。
【００１４】
本発明によれば、下記式Ｉ：
【化７４】
0004497815.tif 000002
［式中、
Ｙは、カルボニル、スルホニル、または単結合であり、
ＡはＣＨまたはＮであり、
ｎは、１または２であり、
ｎが２のとき、ｋは０であり、
ｎが１のとき、ｋは０または２であり、
ｘは、０、１または２であり、
各Ｒ3は、独立して水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、または
【化７５】
0004497815.tif 000003
（式中ｗは１、２または３である）であり、
【００１５】
Ｒは（ａ）−（ｅ）：
【化７６】
0004497815.tif 000004
（式中：
各Ｑ、Ｚ、ＶおよびＵは、独立して、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、トリフルオロメチル、または−ＣＨ2ＯＣ1−Ｃ6アルキルであり、
ｐは、０、１または２であり、
Ｒ4は、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲンまたはフェニルであり、
Ｊは、水素、
【化７７】
0004497815.tif 000005
（式中、各Ｒ73は、独立して、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、またはトリフルオロメチルであり、ｐは先に定義した通り）である）
から成る群から選択され、
【００１６】
−Ｂ−は、（ａ）から（ｍ）：
（ａ）ｚが２、３、４、５、６または７である−(ＣＨ2）z−、
（ｂ）
【化７８】
0004497815.tif 000006
（式中、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して、水素またはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、
Ｒ7およびＲ8は、それぞれ独立して、水素またはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、ただし、Ｒ7がＣ1−Ｃ3直鎖アルキルのとき、Ｒ8はＣ1−Ｃ3直鎖アルキルにはならない）、
【００１７】
【化７９】
0004497815.tif 000007
【化８０】
0004497815.tif 000008
から選択される基を表し、
【００１８】
Ｒ1は、
ａ）水素、
ｂ）場合によりヒドロキシによりモノ−またはジ−置換された飽和または不飽和Ｃ1−Ｃ6アルキル、または
ｃ）
【化８１】
0004497815.tif 000009
（式中、各Ｇは、独立して、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、またはトリフルオロメチルであり、
各Ｒ9およびＲ10は、独立して、水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｔは０または１であり、そして
ｑは０または１である）であり、
【００１９】
Ｒ2は、飽和若しくは不飽和Ｃ1−Ｃ10アルキルから選択される基、トリフルオロメチル、または（ａ）−（ｓｓ）：
【化８２】
0004497815.tif 000010
【００２０】
【化８３】
0004497815.tif 000011
【００２１】
【化８４】
0004497815.tif 000012
【００２２】
【化８５】
0004497815.tif 000013
【００２３】
【化８６】
0004497815.tif 000014
【００２４】
【化８７】
0004497815.tif 000015
【００２５】
【化８８】
0004497815.tif 000016
から選択される基であり、および、
【００２６】
Ｙが単結合のとき、Ｒ1およびＲ2は一緒になって基（ｔｔ）−（ｗｗ）：
【化８９】
0004497815.tif 000017
のいずれか１つの基を形成することができ、
【００２７】
ここで、ｅは３、４または５であり、
ｙは、０、１または２であり、
各Ｒ11およびＲ12は独立して水素またはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、
Ｄは（ａ）または（ｂ）：
（ａ）各Ｒ13およびＲ14が、独立して水素、ハロゲンまたはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、ｕが０、１、２または３である−(ＣＲ13Ｒ14）u−、
（ｂ）各Ｒ15およびＲ16が、独立して水素、Ｃ1−Ｃ3直鎖アルキルまたはアミノである−ＣＲ15＝Ｒ16−、
から選択される基であり、
ｏは０、１または２であり、
【００２８】
Ｍは、
（１）水素、
（２）Ｃ1−Ｃ8アルキル、
（３）Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、
（４）ヒドロキシ、
（５）トリフルオロメチル、
（６）トリフルオロメトキシ、
（７）−ＮＯ2、
（８）−ＣＮ、
（９）−ＳＯ2ＣＨ3、
（１０）ハロゲン、
【００２９】
【化９０】
0004497815.tif 000018
（式中、各Ｌは独立して水素または−ＮＲ67Ｒ68であり、ここで、Ｒ67およびＲ68はそれぞれ独立して水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはＣ1−Ｃ6アルコキシであり、上で定義したように、ｏは、０、１または２である）、
【００３０】
（１６）
【化９１】
0004497815.tif 000019
（式中、Ｔは水素またはハロゲンであり、ｒは０、１または２である）、
（１７）−ＮＲ69Ｒ70
（式中、Ｒ69およびＲ70はそれぞれ独立して水素またはＣ1−Ｃ6アルキルである）、
（１８）−ＳＯ2ＮＨ2、
から選択される基であり、
【００３１】
各Ｒ17およびＲ18は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｓは、０、１または２であり、
Ｒ53は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、アミノまたはＣ1−Ｃ3アルコキシであり、
Ｒ54は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、アミノ、−ＳＯ2ＮＨ2またはＣ1−Ｃ3アルコキシであり、
各Ｒ19およびＲ20は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｖは、０、１または２であり、
Ｘは、ＯまたはＳであり、
各Ｒ21およびＲ22は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｄは、０、１または２であり、
【００３２】
Ｒ23は以下の（ａ）−（ｈ）：
（ａ）水素、
（ｂ）Ｃ1−Ｃ6アルキル、
（ｃ）ハロゲン、
（ｄ）ヒドロキシ、
（ｅ）Ｃ1−Ｃ3アルコキシ、および
【化９２】
0004497815.tif 000020
から選択される基であり、
【００３３】
Ｒ55は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
各Ｒ25およびＲ26は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｆは、０、１または２であり、
Ｒ27は以下の（ａ）−（ｅ）：
（ａ）水素、
（ｂ）Ｃ1−Ｃ6アルキル、
（ｃ）ハロゲン、
（ｄ）−ＳＣＨ3、および
（ｅ）
【化９３】
0004497815.tif 000021
（式中、Ｘ1はＯまたはＳであり、Ｒ28は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルである）から選択される基であり、
【００３４】
ｊは上で定義したように０または１であり、
各Ｒ56、Ｒ57およびＲ58は独立して水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｗは、ＣＨ2、ＣＨ2ＯＨまたはＣ＝Ｏであり、
各Ｒ29およびＲ30は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｇは０または１であり、
Ｘ2はＯまたはＳであり、
各Ｒ31は独立して水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ1−Ｃ6アルコキシまたは−ＮＲ71Ｒ72であり、ここでＲ71およびＲ72はそれぞれ独立して水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
ｏは上で定義したように０、１または２であり、
【００３５】
Ｒ32は水素、ハロゲンまたはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ33は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはＣ1−Ｃ3アルコキシであり、
Ｒ34は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは−ＣＨ2ＣＯ2Ｃ1−Ｃ6アルキルであり、
各Ｒ35およびＲ36は独立して水素またはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、
ｈは０または１であり、
Ｒ37は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ41は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ベンジル、アシル、トシル、ピリジルまたはフェニルであり、ここで前記フェニルは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換基によりモノ−またはジ−置換されており、
【００３６】
Ｒ59およびＲ60は、水素、メチル、または場合によりハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換基によりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ42は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、トリフルオロメチルまたはフェノキシであり、
Ｒ43は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはベンジルであり、
Ｒ61は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ44は水素、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、フェニルまたはアシルであり、
【００３７】
Ｒ38は水素、メチル、または場合によりハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換基によりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ45は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｓ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、または場合によりハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換基によりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ46は水素またはハロゲンであり、
【００３８】
Ｒ62は水素、ハロゲンまたはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ47はＳＭｅ、ＳＯＭｅまたはＳＯ2Ｍｅであり、
Ｒ48は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、トリフルオロメチル、ピリジル、チオフェニル、または場合によりハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシおよびＣ1−Ｃ6アシルから独立して選択された置換基によりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ63は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ49はメチル、トリフルオロメチル、フェニルまたは−ＣＨ2ＳＰｈであり、Ｒ50は水素、メチル、アシルまたはベンジルであり、
ｉは０または１であり、
ｙは上で定義したように０、１または２であり、
ｐは上で定義したように０、１または２であり、
【００３９】
各Ｒ74は独立して水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシまたはハロゲンであり、
Ｒ51は水素、ヒドロキシ、メチル、メトキシ、塩素または−ＳＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ52は水素、フェニルまたはチオフェンであり、
Ｒ39は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
Ｒ40は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、フェニルまたはベンジルであり、
ｂは１、２、３または４であり、
各Ｒ64およびＲ65は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
ｕは上で定義したように０、１、２または３であり、
【００４０】
各Ｒ66は独立して水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、または場合によりハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル若しくはトリフルオロメチルによりモノ−若しくはジ−置換されたフェニルであり、
Ｒ75は水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはフラニルであり、
ｃは１または２であり、
ｗは上で定義したように１、２または３であり、
Ｒ76は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
各Ｒ77およびＲ78は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
各Ｒ79およびＲ80は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
Ｒ81はＣ1−Ｃ6アルキル、またはハロゲンにより場合により置換されたフェニルであり、
【００４１】
各Ｒ82およびＲ83は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
Ｒ84は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり、
ｊは上で定義したように０または１であり、
各Ｒ85およびＲ86は独立して水素またはＣ1−Ｃ3アルキルであり、
Ｒ87はフェニルまたはベンジルであり、それぞれ場合によりＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシまたはハロゲンによりモノ−またはジ−置換されることができ、
【００４２】
Ｒ88は水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン、または場合によりＣ1−Ｃ6アルキル、ハロゲン若しくは以下の基（ａ）−（ｃ）：
【化９４】
0004497815.tif 000022
のうちの１つによりモノ−若しくはジ−置換されたベンジルであり、そして
ｙは上で定義したように０、１または２である。
【００４３】
ただし、Ｒが（ａ）であり；Ｙがカルボニルであり；ｎが１であり；ｋが０であり；Ｑが水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲンまたは−ＣＨ2ＯＣ1−Ｃ6アルキルであり；Ｒ1が水素または非置換Ｃ1−Ｃ6アルキルであり；Ｒ3が水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり；Ｒ4が水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり；Ｂが式（ａ）または（ｅ）の基であるときは；Ｒ2は飽和若しくは不飽和のＣ1−Ｃ10アルキルまたは以下の基：
（ａ）式中、ｙが１であるもの、
（ｂ）式中、Ｄが式（ａ）の基であり、ここでｕが０で、Ｍが水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、トリフルオロメチルまたは
【化９５】
0004497815.tif 000023
（式中ｒは０である）であるもの、
【００４４】
（ｃ）式中、ｓが０であるもの、
（ｄ）式中、ｖが０であるもの、
（ｅ）式中、ｄが０であるもの、
（ｆ）、
（ｇ）式中、ｆが０であるもの、
（ｈ）、
（ｉ）、
（ｊ）、
（ｋ）、
（ｌ）式中、ｇが０であるもの、
（ｍ）、
（ｎ）式中、ｈが０であるもの、
（ｏ）、
（ｓ）、
（ｘ）、
（ａａ）、
（ｃｃ）、
（ｄｄ）、
（ｅｅ）、
（ｆｆ）、
（ｉｉ）、または
（ｊｊ）
のいずれかであることはできない］の化合物が提供される。
【００４５】
本発明はラセミ体または純粋な立体異性体型の上記した式Ｉの化合物または製剤学的に許容可能なその塩に関する。
【００４６】
本明細書において使用する用語は以下のとおりの意味を有する。
ａ）「製剤学的に許容可能な塩」とは意図する使用のための患者の治療に適合する酸付加塩または塩基付加塩の何れかを意味する。
「製剤学的に許容可能な酸付加塩」とは式（Ｉ）の基本化合物またはその中間体の非毒性の有機または無機の酸付加塩を意味する。適当な塩を形成する代表的な無機酸は、塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸、および酸性金属塩、例えばオルトリン酸１水素ナトリウムおよび硫酸水素カリウムを包含する。適当な塩を形成する代表的な有機酸はモノ、ジおよびトリカルボン酸を包含する。このような酸の代表例は例えば酢酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタール酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、ケイヒ酸、サリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびスルホン酸類、例えばメタンスルホン酸および２−ヒドロキシエタンスルホン酸である。モノ−またはジ−酸塩の何れかを形成することができ、このような塩は水和形態、溶媒和形態または実質的に無水の形態の何れかで存在することができる。一般的にこれらの化合物の酸付加塩は水および種々の親水性有機溶媒により可溶であり、その遊離の塩基の形態と比較して一般的により高い融点を示す。
「製剤学的に許容可能な塩基付加塩」とは式（Ｉ）の化合物またはその中間体の非毒性の有機または無機の塩基付加塩を意味する。例としては、アルカリ金属またはアルカリ土類金属の水酸化物、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムまたはバリウムの水酸化物；アンモニアおよび脂肪族、脂環族または芳香族の有機アミン、例えばメチルアミン、トリメチルアミンおよびピコリンである、適切な塩の選択基準は当業者の知るとおりである。
【００４７】
ｂ）「立体異性体」とは空間におけるその原子の方向のみにおいて異なっている個々の分子の全ての異性体に対する一般的用語である。これには鏡像異性体（エナンチオマー）、幾何（シス／トランス）異性体および相互に鏡像とならないキラル中心１個またはそれ以上を有する化合物の異性体（ジアステレオマー）が包含される。
【００４８】
ｃ）「アルキル」とは、分枝鎖または直鎖のアルキルまたはアルキレン基を意味し、アルキルにおける炭素の数量により特定される化学式にあてはめられる例えば、Ｃ1−Ｃ6アルキルとは、適宜、炭素原子１、２、３、４、５または６個の分枝鎖または直鎖のアルキルまたはアルキレン、またはその範囲に含まれるもの、例えばＣ１−２、Ｃ１−３、Ｃ１−４、Ｃ１−５、Ｃ２−３、Ｃ２−４、Ｃ２−５、Ｃ２−Ｃ６、Ｃ３−Ｃ４、Ｃ３−５、Ｃ３−６、Ｃ４−５、Ｃ４−６、Ｃ５−６等を意味する。
【００４９】
ｄ）「患者」とは温血動物、例えばラット、マウス、イヌ、ネコ、モルモットおよび霊長類、例えばヒトを意味する。
ｅ）「治療」または「治療する」とは一次的または永久的に症状を緩解、症状の原因を排除すること、または、障害または状態と称される症状の出現を防止または遅延させることを意味する。
ｆ）「治療有効量」とは診断された障害または状態を治療するのに有効な化合物の量を意味する。
ｇ）「製剤学的に許容可能な担体」とは、医薬組成物、即ち患者に投与することができる剤形の形成を可能にするための、非毒性の、溶媒、分散液、添加剤、補助剤または他の活性成分と混合する材料である。このような担体の例は非経腸投与に典型的に用いられている製剤学的に許容可能な油脂である。
【００５０】
ｈ）「精神病」または「精神異常」とは人格の混乱および現実との接触の損失により特徴付けられる器質的および／または情緒的な起源の重い精神異常を患者が経験している状態を意味し、しばしば妄想、幻覚または錯覚を伴う。精神病という用語に含まれるものは統合失調症、分裂病様障害、分裂病性感情障害、妄想性障害、短期精神異常、共有精神病障害、その他特定できない精神異常、および、参照により本明細書に組み込まれるＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．  ＵＳＡにより１９９４年に刊行されたＤｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，  ４ｔｈ  ｅｄにおいて定義されている薬剤誘導精神異常である。
【００５１】
ｉ）「物質依存」とは患者が臨床的に重大な欠陥や困難をもたらすような病的なパターンの物質の使用を示している状態を意味する。これは忍容性、禁断症状および強迫的な薬剤摂取を通常はもたらす反復自己投与のパターンである。
ｊ）「薬物乱用」とは、薬剤の反復使用に関わる再発性の重大な悪い結果が認められる薬物の使用の病的なパターンを患者が示している状態を意味する。重要な役割義務の遂行不能の反復、身体的に有害な状況における反復使用、複数回の法的問題、および、再発する社会的および対人上の問題が有る。物質依存の判定基準と異なり、薬物乱用の判定基準には忍容性、禁断症状または強迫的な使用のパターンは含まれないどころか、反復使用の有害な結果だけが含まれる。
ｋ）「パーキンソン病」とは振せん、剛直、運動緩徐および姿勢不安定を特徴とする緩徐に進行する神経学的状態を意味する。他の徴候には抑鬱および痴呆が包含される。
【００５２】
ｌ）「振せん麻痺」とは、神経弛緩剤の使用に伴って発症するパーキンソン症候群の徴候または症状（即ち振せん、筋肉剛直または無運動）を患者が示す状態を意味する。
ｍ）「神経弛緩剤誘発遅発性ジスキネジー」とは、神経弛緩薬の使用に伴って発症した舌部、顎部、体躯または四肢の不随意運動を特徴とする疾患である。不随意運動は舞踏病状、アテトーシス様または律動性である。
ｎ）「ジル・ド・ラ・ツレット症候群」とは運動および発声のチックが認められる状態を意味する。（チックは突然生じる急速で再発性の非律動性のステレオタイプの運動または発声である。）攪乱により社会的、職業的または他の重要分野の機能において顕著な困難または多大な欠陥が生じる。１８歳未満に発症し、攪乱は薬剤の生理学的な作用や一般的医療状態によるものではない。
【００５３】
ｏ）「痴呆症」とは、記憶の欠陥を含む複数の認識不全の発症を特徴とする障害であり、一般的医療状態の直接的な生理学的作用によるか、薬剤の持続的作用によるか、または、複数の病因（例えば脳血管疾患とアルツハイマー病の複合作用）によるものである。記憶欠陥は痴呆症の診断のために必要であり、目立った早期の症状である。痴呆症は共通の症状呈示を有するが、病因は異なっている。診断基準については、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎのＤｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，  ４ｔｈ  ｅｄが参照できる。
ｐ）「不安障害」とは広場恐怖症を伴わないパニック障害、広場恐怖症を伴うパニック障害、パニック障害の病歴のない広場恐怖症、特異的恐怖症、社会嫌悪症、強迫性障害、外傷後ストレス障害、急性ストレス障害、全般性不安障害、一般的医療状態による不安障害、薬物誘発不安障害およびその他特定されない不安障害を包含する障害を意味し、Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，４ｔｈ  ｅｄの定義に準じるものである。
【００５４】
ｑ）「睡眠障害」とは、一次的睡眠障害、他の精神異常に関連する睡眠障害、一般的医療状態による睡眠障害、および、薬剤誘発睡眠障害を包含する障害を意味し、Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，  ４ｔｈ  ｅｄの定義に準じるものである。一次的睡眠障害はいかに記載する病因（すなわち、別の精神異常、一般的医療状態、または薬物）の何れも関与しないものである。一次的睡眠障害は条件付け因子と複合される場合が多い睡眠覚醒の発生または時期の機序の内因的な異常から生じるものと考えられる。一次的睡眠障害はさらに睡眠不全（睡眠の量、質または時期の異常を特徴とする）および錯眠（睡眠中、特定の睡眠段階または睡眠覚醒移行点と関わって生じる異常な挙動または生理学的事象を特徴とする）に細分できる。一次的睡眠障害の代表例は睡眠発作である。睡眠発作は新しい睡眠の反復する抵抗不可能な発作、脱力発作、および、睡眠と覚醒との間の移行期間への急速眼球運動（ＲＥＭ）睡眠要素の反復的介入を特徴とする。
【００５５】
ｒ）「気分障害」とは顕著な特徴として気分の攪乱を有する障害である。Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，  ４ｔｈ  ｅｄの定義によれば、気分障害は抑鬱性障害（「一極鬱病」）、双極性障害、および、病因に基づいた２種の障害、即ち一般的医療状態による気分障害および薬剤誘発気分障害に細分される。抑鬱性障害（即ち大鬱障害、気分変調障害およびその他特定されない抑鬱性障害）はそれらが躁病、混合型または軽躁病の病歴を有さないという事実により双極性障害と区別される。双極性障害（即ちＩ型双極性障害、ＩＩ型双極性障害、循環型障害およびその他特定されない双極性障害）には、通常は大鬱エピソードの存在（または病歴）を伴った躁病エピソード、混合エピソード、または軽躁エピソードの存在（または病歴）が含まれる。
【００５６】
ｓ）「概日リズム障害」とは、個人の環境およびその概日睡眠覚醒パターンにより必要とされる睡眠覚醒スケジュールの間のミスマッチによる過剰な眠気または不眠をもたらす睡眠崩壊の持続性または再発性のパターンを意味する。睡眠攪乱は社会的、職業的または他の重要な分野の機能における臨床的に重大な困難または欠陥を誘発する。攪乱は他の睡眠障害または他の精神異常の過程の間のみは起こらない。攪乱は薬物（例えば薬物乱用または薬剤療法）の直接の生理学的作用や一般的医療状態によっては起こらない。
【００５７】
本発明の好ましい化合物には、Ｒが基（ａ）であり、Ｒ4が水素であり、そしてＱがＣＦ3である式Ｉの化合物が含まれる。また、Ｒが基（ｂ）であり、Ｑが水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは−ＣＨ2ＯＣ1−Ｃ6アルキルである化合物もまた好ましい。
Ｙはカルボニルが好ましい。
−Ｂ−は、基（ａ）または（ｂ）から選択されるのが好ましい。Ｂが基（ａ）である場合は、ｚは更に好ましくは４である。−Ｂ−が基（ｂ）である場合は、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、およびＲ8は更に好ましくは水素である。
【００５８】
Ｒ2は好ましくは基（ａ）、（ｂ）、（ｌ）、（ｎ）、（ｓ）または（ｌｌ）から選択される。
Ｒ2が基（ａ）である場合は、ｙは更に好ましくは０または１であり、ｅは更に好ましくは５である。
Ｒ2が基（ｂ）である場合は、Ｍは更に好ましくは水素、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは基（１６）であり、そしてＤは更に好ましくは：
基（ａ）（ここで、各Ｒ13およびＲ14は、独立して水素、ハロゲンまたはＣ1−Ｃ3直鎖アルキルであり、そしてｕが０または１である）；または
基（ｂ）（ここでＲ15およびＲ16は水素である）である。
【００５９】
Ｒ2が（ｌ）である場合は、ｇは更に好ましくは０または１であり、Ｒ31は更に好ましくは水素である。
Ｒ2が（ｓ）である場合は、Ｒ61は更に好ましくは水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはハロゲンである。
Ｒ2が（ｎ）である場合は、Ｒ33は更に好ましくは水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはＣ1−Ｃ6アルコキシであり、Ｒ34は水素またはＣ1−Ｃ6アルキルである。
Ｒ2が（ｌｌ）である場合は、Ｒ66は更に好ましくは水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはハロゲンである。
【００６０】
本発明の特定の実施態様は、本明細書中の表に示す化合物を包含する。
本発明の好ましい実施態様は、増強されたＤ３力価を示す明細書中の表に記載した式Ｉの化合物である。特に好ましい化合物には以下のものが包含される。
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸｛４−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イル］−ブチル｝−アミド
４−エトキシ−Ｎ−｛４−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イル］−ブチル｝−ベンズアミド
ビフェニル−４−カルボン酸｛４−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イル］−ブチル｝−アミド
Ｎ−｛４−［４−（フルオロ−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イル］−ブチル｝−トリフルオロメチル−ベンズアミド
チオフェン−２−カルボン酸｛６−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イル］−ヘキシル｝−アミド
ビフェニル−４−カルボン酸［４−（４−チエノ［２，３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル−ピペラジン−１−イル）−ブチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
１Ｈ−インドール−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
ナフタレン−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
２−メチル−５−フェニル−フラン−３−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
（Ｅ）−Ｎ−｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−３−フェニル−アクリルアミド
５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１，４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
４−フルオロ−Ｎ−｛２Ｒ−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメンチル］−１Ｒ−シクロプロピルメチル｝−ベンゼンスルホンアミド（ＭＤＬ８３１４９５）
（３−イミダゾル−１−イル−プロピル）−｛（１Ｒ，２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピルメチル｝−アミン（ＭＤＬ８３３２５７）
【００６１】
本発明の化合物は種々の方法で調製してよい。スキームＩ〜VIは、式Ｉの化合物を調製するための種々の方法を記載している。
式（Ｉ）の化合物は以下に記載する工程の１つまたはそれ以上を、必ずしも特に記載した順序ではなく、これに従って、或いは、これらを組み合わせることにより合成することができる。合成工程の記載全体を通じて、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、ｎ、ＢおよびＡの定義は特段の記載がない限り前に記載したとおりであり、以下に記載する他の符号は特段の記載がない限りその対応する１回目の出現において定義されたものと同じ意味を有するものとする。
【００６２】
Ｙがカルボニルである式Ｉの化合物は、式（II）：
【化９６】
0004497815.tif 000024
［式中、Ｒ、Ｒ3、ｘ、ｋ、ｎ、Ｂ、およびＲ1は式Ｉにおいて定義したとおりである］の化合物と、下記式（III）：
【化９７】
0004497815.tif 000025
［式中、Ｒ2は式Ｉにおいて定義したとおりであり、そして、「ＬＧ」は塩素、臭素またはヨウ素から選択される適当な脱離基であるか、または、反応を適当なカップリング剤の存在下で実行させる場合の混合無水物、または「ＬＧ」はヒドロキシであってもよい］の化合物とを反応させる工程を包含する方法に従って調製してよい。
【００６３】
適当なカップリング剤は例えば、ＤＣＣ（１,３−ジシクロヘキシルカルボジイミド）、ＥＥＤＱ（２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリン）またはＴＯＴＵ｛Ｏ−［（エトキシカルボニル）シアノメチルレンアミノ］−Ｎ,Ｎ,Ｎ’,Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート｝である。
通常反応は、例えばアンバーライトＩＲＡ−６７またはトリエチルアミンなどの弱塩基の存在下で、例えばクロロホルムまたはテトラヒドロフランなどの有機溶媒中で、約６〜１８時間約２０℃〜約２５℃の温度で行なう。
【００６４】
或いは、式Ｉの化合物は式（IV）：
【化９８】
0004497815.tif 000026
［式中、Ｒ、Ｒ3、ｘ、ｋ、ｎ、およびＢは式Ｉにおいて定義したとおりである］の化合物と、下記式（Ｖ）：
【化９９】
0004497815.tif 000027
［式中、Ｒ1およびＲ2は式Ｉにおいて定義したとおりであり、「ＬＧ」は塩素、臭素、ヨウ素、メシル、トシル、ブロシル、トリフリル、ノシル、ノナフリルまたはトレシルから選択される適当な脱離基である］の化合物とを反応させる工程を包含する方法に従って調製してよい。
通常、この反応は、水と例えば炭酸カリウム、炭酸セシウム、またはトリエチルアミンのような塩基の存在下で、例えばテトラヒドロフランまたはアセトニトリルのような水混和性溶媒中で、約１２〜２４時間、約５０℃〜約７５℃の温度で行われる。
【００６５】
式（IV）の中間化合物が特に式（VI）の化合物である場合、化合物は、１）脱エステル化／脱カルボキシル化が実質的に完了して式（VIII）の化合物が得られるまで、式（VII）の化合物と１／２当量のピペラジンとを反応させる工程と、２）式（VIII）の化合物と追加のピペラジンとを反応させてアミノ基を置換し、式（VI）の化合物を提供する工程とを包含する方法に従って調製してよい。脱エステル化およびアミノ基の置換の両方で過剰のピペラジンが用いられた場合、過剰なピペラジンの作用により脱エステル化／脱カルボキシル化は進行し、（VI）のメチル基はＮ−メチルピペラジンと共に（VII）へ与えられる。その後の置換反応において、Ｎ−メチルピペラジン副生成物が（VII）との反応のためのピペラジンと競合し、この結果式（VIII）の化合物が（VIII）のＮ−メチル類縁体によって汚染されることが見出された。この副反応は、脱エステル化のために過剰のピペラジンではなく、約０.５当量のみを用いることによって避けることができる。この方法では、脱エステル化処理の間に発生する副生成物は、Ｎ−Ｎ’−ジメチルピペラジンであり、これは置換反応の間にピペラジンと競合しない。
【００６６】
【化１００】
0004497815.tif 000028
【００６７】
式（II）の化合物は、当該分野で知られている合成方法により調製してよい。出発物質は、市販品を用いるか、または当該分野で知られている合成方法により調製してよい。例えば、スキームＩはアミノ置換ベンゾチオフェンと市販の置換ピペラジンのカップリングを記載している。合成は未置換ピペラジン類縁体の場合と同様である。より立体障害の小さいピペラジン窒素はより反応性が高く、ベンゾ［ｂ］チオフェンカップリングにおいて単一の生成物を確実に与える。より立体障害の大きい窒素は適当なアルキル化剤によりアルキル化することができる。
【００６８】
【化１０１】
0004497815.tif 000029
【００６９】
ピペリジン置換化合物は以下に記載する反応スキームIIおよびIIIに示す合成方法と同様にして調製してよい。
【化１０２】
0004497815.tif 000030
【００７０】
【化１０３】
0004497815.tif 000031
種々の置換アザ−およびジアザシクロヘプタンの調製はＷＯ９７２５３２４号にＴｒｅｉｂｅｒ等が記載している。
【００７１】
Ｂとして示される変数が炭素環を含む式（Ｉ）の化合物の合成を反応スキームIVに示す。炭素環基を含まない化合物も合成スキームを利用し、必要な変更を加えながら調製できることは明らかである。
【００７２】
【化１０４】
0004497815.tif 000032
式中、Ｒ2は前述の通り定義され、αは１、２、３または４であり、そしてＮ’−は下記式：
【化１０５】
0004497815.tif 000033
であり、ここでＲ、Ａ、ｋ、Ｒ3、ｘおよびｎは前述の通り定義される。
【００７３】
スキームIVに一般的に記載されているジカルボキシレートおよびより進んだ段階の中間体の多くは市販されている。これらのうちの幾つかを表１に示す。この表は説明のみを目的としており、本発明の範囲を如何なる点においても限定する意図はない。
【００７４】
【表１】
0004497815.tif 000034
【００７５】
市販されていない場合は、適切な出発物質は標準的な合成方法を介して得てよい。
Ｙがスルホニルまたは単結合である式（Ｉ）の化合物は、以下に述べる実施例と同様の方法を介して合成できる。
【００７６】
式（Ｉ）の化合物がエナンチオマーの混合物として得られる場合は、これらは従来の方法、例えば分割剤存在下の結晶化、または、例えばキラルＨＰＬＣカラムを用いたクロマトグラフィーにより分離してよい。
式（Ｉ）の化合物はドーパミン受容体、特にＤ3受容体に対して親和性を示すことがわかっており、そして、このような受容体のモジュレートを必要とする疾患状況、例えば精神病状態の治療において有用であることが期待される。本発明の好ましい化合物はドーパミンＤ2受容体よりもドーパミンＤ3受容体に対してより高い親和性を有するものである。
【００７７】
本明細書中で先に述べたように、本発明の範囲内にある特定の化合物は、一般に米国特許第５,８０１,１７６号において開示されている。例えば、６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン類は明細書中で、抗精神病薬として有効なものであるとして開示されている。
抗精神病研究における大きな課題はより低い副作用を有する薬剤を製造する事である。アルファ−１受容体（以後、「α−１」と記載）における高い力価を有する抗精神病薬においては、起立性低血圧が共通した副作用である。この研究の重要な目的はα−１力価が低い薬剤を発見することである。
【００７８】
本明細書に記載した６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン類は以下の表に示すとおり６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン類よりも明確で幾分意外な利点を有する。６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン類は６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン類よりも明らかにα−１受容体における力価が高い。このことはベンゾ［ｂ］チオフェンの６位における置換のみが異なる類縁体対を比較することにより明らかにされる。各々の場合、以下の表に示されているように、６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェンは相当する６−トリフルオロメチル類縁体よりもより強力である。場合により６位の置換におけるこの小さい構造の相違がα−１力価の劇的な変化をもたらす。
【００７９】
【表２】
0004497815.tif 000035
【００８０】
【表３】
0004497815.tif 000036
【００８１】
【表４】
0004497815.tif 000037
【００８２】
【表５】
0004497815.tif 000038
【００８３】
【表６】
0004497815.tif 000039
【００８４】
【表７】
0004497815.tif 000040
【００８５】
【表８】
0004497815.tif 000041
【００８６】
小さな構造の相違がもたらすα−１力価への驚く効果の別の例を、以下の表に示す。ベンゾ［ｂ］チオフェンピペラジン類（ｎは１である）はベンゾ［ｂ］チオフェンホモピペラジン類（ｎは２であり、以下「ホモピペラジン」と称する）よりもα−１受容体における力価が高い。これらの化合物が互いに同族であるというだけであるにもかかわらず、ホモピペラジンではα−１受容体結合親和性において有意の低下が見られる。
【００８７】
【表９】
0004497815.tif 000042
【００８８】
【表１０】
0004497815.tif 000043
【００８９】
特に好ましい本発明の化合物はα−１受容体結合の傾向はより低いが、同時にドーパミンＤ2受容体よりもドーパミンＤ3受容体に対してより高い親和性を有する化合物である。
受容体親和性は以下に記載するような標準的な方法（プロトコール１−５）を用いて測定することができる。
【００９０】
プロトコール  １
クローニングされたヒトドーパミンＤ3受容体への［Ｎ−メチル−3Ｈ］スピロぺリドールの結合
目的
本試験はクローニングされたヒトドーパミンＤ3受容体に対する化合物のインビトロの活性を測定し、ヒトドーパミンＤ3受容体における推定神経精神剤の直接のドーパミン遮断特性を予測する。
【００９１】
方法
Ａ．クローニング
Ｄ3遺伝子はヒト線条体ｃＤＮＡライブラリ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）から単離した。遺伝子を配列決定し、発現ベクターＲＣ／ＲＳＶ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にサブクローニングした。ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞をＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  ＭａｎｎｈｅｉｍのＤＯＴＡＰ法を用いてＤ3／ＲＳＶプラスミド１０μｇで安定にトランスフェクトし、Ｇ４１８耐性の７２クローンを単離した。ｍＲＮＡおよび結合置換データを用いて、単一の高発現クローンを同定した。次にこのクローンを９６穴フォーマットアッセイを行なうために大型バッチにおいて生育させた。
【００９２】
Ｂ．細胞培養
１．プレート当たり約２〜３百万のＤ3細胞を有するプレート（１０cm）１枚を、約２分間、または、細胞がプレートから浮き上がるまで室温でトリプシンＥＤＴＡ １mlとともにインキュベートする。ＨａｍＦ１２＋１０％ウシ胎児血清＋１％ペニシリン／ストレプトマイシン＋Ｇ４１８（４００μｇ／ml）の培地４mlを懸濁細胞に添加し、その１mlを上記したものと同じ培地１９mlの入った各大型プレート（１５cm）に添加する。
２．大型プレート５枚を約３日間または細胞がコンフルエントとなるまで、３７℃５％ＣＯ2でインキュベートする。
３．これらのプレートがコンフルエントに達したら、１０枚の大型プレートに植え継ぐ。培地を吸引除去し、トリプシンＥＤＴＡ ２mlを各プレートに添加し、室温で２分間または細胞がプレートから浮き上がるまでインキュベートする。Ｆ１２培地（上記＃１と同様の培地）８mlを各プレートに添加し（合計１０ml）て細胞を懸濁させ、５mlをＦ１２培地１５mlの入った新しいプレート２枚に移す。
【００９３】
４．大型プレート１０枚を約２日間または細胞がコンフルエントとなるまで、３７℃５％ＣＯ2でインキュベートする。
５．大型プレート１０枚を大型プレート６０枚に分割する（Ｆ１２培地４mlを懸濁細胞に添加し、各々Ｆ１２培地１９mlの入った新しいプレート６枚に１mlづつ添加する以外は＃３と同様にトリプシンＥＤＴＡを用いる）。
６．プレートを約３日間または細胞がコンフルエントとなるまで、３７℃５％ＣＯ2でインキュベートする。
【００９４】
７．大型プレート６０枚をローラーボトル６０本に分割する（１００〜１５０百万個細胞／ボトル）。培地を吸引除去し、トリプシンＥＤＴＡ ２mlを各プレートに添加し、室温で約２分間または細胞がプレートから浮き上がるまでインキュベートする。Ｆ１２培地８mlを各プレートに添加して細胞を再懸濁させ、合計１０mlをＦ１２培地９０ｍｌの入ったローラーボトル１本に添加する。
８．ローラーボトル６０本を即座に横転させ、ローラーボトルインキュベーターに移す。これらを約３〜５日間３７℃５％ＣＯ2でインキュベートする。Ｆｏｒｍａインキュベーターにより３０〜４０％のモータースピードで細胞を回転させる。
９．培地を注ぎ出し、細胞をＰＢＳで２回洗浄する。
１０．次に細胞をＰＢＳ２０ｍｌ中で掻き取り、ボトルを再度ＰＢＳ ５mlで洗浄して残存する細胞を除去する。細胞を氷中で保存した後に膜を調製する。
１１．Ｄ3ローラーボトル６０本の収量は約２６０〜５００mgの範囲となる。
注記：全組織培養試薬はＧｉｂｃｏ−ＢＲＬより入手。
【００９５】
Ｃ．膜調製物
細胞を冷リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）１００容量の入った２５０ml容の遠沈管に採取し、遠心分離する（１２００Ｇ、１０分、４℃）。培地を除去し、ＰＢＳ １００mlを各遠沈管に添加し、細胞を再懸濁し、再度遠心分離する。ＰＢＳを除去し最終ペレットを適切な量の１０％ＤＭＳＯ中氷上のポリトロンを用いて中程度の設定でホモゲナイズする。
【００９６】
Ｄ．ローリー蛋白試験
２００μＬの試料膜ホモジネートを１％ＳＤＳ２００μｌに添加し、回転混合し、５分間放置する。この混合物の一部（２５、５０および１００μｌ）を標準的なＢｉｏ−ＲａｄＤＣ蛋白試験プロトコル（キットカタログ番号５００−０１１２）に従い、試薬Ｓを用いて２連で試験する。吸光度の読み取りは７５０nmで行う（注：最も正確な蛋白ＯＤ読み取り値は０.１〜０.５単位である）。蛋白濃度は標準物質としてウシ血清アルブミンを用いて同時に作成した標準曲線を用いて計算する。
【００９７】
Ｅ．保存／凍結条件
蛋白濃度の測定とスカッチャード分析の後、蛋白を発現濃度（Ｂｍａｘ）に基づいた適切な容量となるまで１０％ＤＭＳＯを含有する蒸留水で希釈する。次に濃縮蛋白を１.５ml容のスクリューキャップ付きのエッペンドルフ試験管に分注し、−８０℃の冷凍庫に入れる。
【００９８】
Ｆ．結合試験試薬
１．０.５Ｍ  トリス緩衝液、ｐＨ７.７
ａ）４４.４ｇトリス塩酸
２６.５ｇトリス塩基
全量を１Ｌとする（０.５Ｍトリス緩衝液、ｐＨ７.７、３７℃）
ｂ）蒸留水で１：１０希釈（０.０５Ｍトリス緩衝液、ｐＨ７.７）
【００９９】
２．生理学的食塩類含有トリス緩衝液
ａ）保存緩衝液
ＮａＣｌ  ７.０１４ｇ
ＫＣｌ    ０.３７２ｇ
ＣａＣｌ2  ０.２２２ｇ
ＭｇＣｌ2  ０.２０４ｇ
全量を０.５Ｍトリス緩衝液で１００mlとする。
ｂ）蒸留水で１：１０希釈
これによりＮａＣｌ（１２０mM）、ＫＣｌ（５mM）、ＣａＣｌ2（２mM）およびＭｇＣｌ2（１mM）を含有する０.０５Ｍトリス塩酸ｐＨ７.７が得られる。
任意の操作：０.１％アスコルビン酸を添加しｐＨを確認する（酸化する化合物の試験の場合）。
【０１００】
３．ａ）０.５Ｍトリス中１.０％ポリエチレンイミン保存溶液（試薬１.ａ）
ｂ）蒸留水で１：１０希釈
４．［Ｎ−メチル−3Ｈ］−スピロペリドール（６０〜９０Ｃｉ／mmol）をＮｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒより入手する。カタログ番号＃ＮＥＴ−８５６
Ｋｉの測定用；各試験管に１５０μＬを添加した場合に１mlの試験液中０.４nMの終濃度となるように［3Ｈ］ＮＭＳＰを緩衝液２ｂ中２.７nMの濃度までとなる用に調製する。添加した総ＣＰＭの試料を実験に用いて総リガンド濃度を計算する。
【０１０１】
５．Ｓ（−）−エチクロプリドをＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌより入手する（ＲＢＩカタログ番号Ｅ−１０１）。Ｓ（−）−エチクロプリドの冷蔵した保存溶液（１ヶ月有効）を緩衝液２ｂ中３０μＭの濃度に調製する。１００μＬを３ウェルに添加し、非特異的結合を測定する（これにより終濃度は１ｍｌの試験液中３μＭとなる）。
【０１０２】
６．被験化合物
大部分の試験において、被験化合物の１００μＭの保存溶液を適当な溶媒（通常は＜０.１％酢酸）中に調製し、緩衝液２ｂで連続希釈することにより、１００μｌの薬剤を総量１ｍｌの試験液に添加した場合に終濃度が１０-5〜１０-8Ｍとなるようにする。通常、８段階の濃度が各試験に適しているが、薬剤の力価に応じてより高濃度または低濃度を用いてもよい。
【０１０３】
Ｇ．結合試験
７５０μＬ  組織
１５０μｌ［3Ｈ］ＮＭＳＰ
１００μＬベヒクル（総結合用）または３０μＭ（−）エチクロプリド（非特異的結合用）または適切な薬剤濃度
９６穴Ｐａｃｋａｒｄ  Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ  ＧＦ／Ｂを０.１％ポリエチルアミン（３、ｂより）中２５℃で１時間より長くインキュベートする。冷組織を最後に添加し、オービタルシェーカー上で数秒間混合し、次に振とう水浴中３０分間３７℃でインキュベートする。Ｐａｃｋａｒｄ  Ｕｎｉｆｌｔｅｒプレートで急速濾過することにより試験を停止する。次にフィルター膜を氷冷０.０５Ｍトリス緩衝液１５mlで洗浄する。次にフィルターを乾燥（ヒートランプ下約１５分、または、６０℃のオーブン中１５分間インキュベート）し、底部シールを適用する。次にＰａｃｋａｒｄ  Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ  ２０シンチレーションカクテル４０μｌを添加し、パーマネントトップシール（Ｐ型）を適用し、ヒートシールする。次にプレートを１時間オービタルシェーカー上で振とうし、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔ上に置き、各点につき少なくとも５分間計数する。総結合と３μＭＳ−（−）エチクロプリド存在下の結合との間の差として特異的結合を定義する。総結合は総添加リガンドの約１０％である。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ測定（Ｋｉ）は非直線回帰の上限および下限を０％および１００％抑制に固定しながら１部位競合曲線分析を用いてＰｒｉｓｍソフトウエアにより行なう。各薬剤濃度における％抑制は２連の測定の平均とする。
【０１０４】
プロトコール  ２
クローニングされたヒトドーパミンＤ2ロング受容体への［Ｎ−メチル−3Ｈ］スピロぺリドールの結合
目的
本試験はクローニングされたヒトドーパミンＤ2ロング（Ｄ2Ｌ）受容体に対する薬剤のインビトロの活性を測定し、ヒトドーパミンＤ2受容体における神経精神、心臓血管および腎臓の薬剤の直接のドーパミン置換特性を予測する。
【０１０５】
方法
Ａ．クローニング
Ｄ2Ｌ遺伝子はヒト線条体（尾状核／被殻）ｃＤＮＡライブラリから単離した。遺伝子を配列決定し、発現ベクターｐＲＣ／ＲＳＶ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にサブクローニングした。ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞を安定にトランスフェクトし、ゲネチシン（Ｇ４１８）耐性の７２クローンを単離した。ｍＲＮＡおよび結合データを用いて、単一の高発現細胞株を同定した（＃４４）。次にこの細胞株を９６穴フォーマットアッセイを行なうために懸濁培養物中において生育させた。
【０１０６】
Ｂ．細胞培養条件
１．接着ＣＨＯ細胞用の培地
ＨａｍＦ１２＋１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）＋４００μｇ／mlゲネチシン（Ｇ４１８）＋１０ml／Ｌペニシリン−ストレプトマイシン（ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ）
２．細胞を少なくとも１.５百万個の細胞が入手できる時点で懸濁液に移す（これにより５０mlのスピナーフラスコ当たり３００,０００細胞／mlが得られる；これは理想的な懸濁液密度である）。細胞をトリプシンでフラスコから取り出し、遠心分離（１０００ｇ）し、以下の新しい培地に再懸濁する。
５０％ＣＨＯ−ＳＦＭ II＋５０％ＨａｍＦ１２ｗ／１０％ＦＢＳ（ＦＢＳ終濃度５％）＋４００μｇ／ml Ｇ４１８＋ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ（１０ml／Ｌ）
【０１０７】
３．懸濁培養物に移した後、生育をモニタリングし、細胞の生存率をトリパンブルー排出能に基づいて評価する。細胞総数および生細胞数を血球計上の５区画上で測定し記録する。生細胞密度が６００,０００細胞／mlに達した時点で、容量を倍加する。
【０１０８】
４．５０／５０培地中で１週間生育させた後、細胞を遠心分離し、新しいスピナーフラスコに移し、７５％ＣＨＯ−ＳＦＭ II／２５％ＨａｍＦ１２＋１０％ＦＢＳ＋ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐおよびＧ４１８と交換する。その後３日おきに培地を以下の漸減量のＦＢＳを含有する新しい培地と交換する。
ＣＨＯ ＳＦＭ ml：Ｈａｍ Ｆ１２ ml ＦＢＳ終濃度
８７.５０：１２.５                    １.２５
９３.７５：６.２５                    ０.６２５
９９.００：１.００                    ０.１
【０１０９】
５．最終維持培養培地は以下のとおり調製する。
Ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐを１０ml、４００mg／ml（活性；終濃度；２００mg／ml）Ｇ４１８を０.５ml、そして、ＦＢＳを１ml含む保存混合物を混合し、濾過し、冷蔵する。この混合物の一容量（１１.５ml）を新しく開封した１ＬボトルのＣＨＯ−ＳＦＭ IIに添加する。
【０１１０】
Ｃ．膜調製物
細胞を冷リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）１００容量の入った２５０mlの遠沈管に採取し、遠心分離する（１２００Ｇ、１０分、４℃）。培地を除去し、ＰＢＳ １００mlを各遠沈管に添加し、細胞を再懸濁し、再度遠心分離する。ＰＢＳを除去し最終ペレットを適切な量のＰＢＳ中、氷上のポリトロンを用いて中程度の設定でホモゲナイズする。
【０１１１】
Ｄ．ローリー蛋白試験
２００μＬの試料膜ホモジネートを１％ＳＤＳ ２００μｌに添加し、回転混合し、５分間放置する。この混合物の一部（２５、５０および１００μｌ）を標準的なＢｉｏ−ＲａｄＤＣ蛋白試験プロトコル（キットカタログ番号５００−０１１２）に従い、試薬Ｓを用いて２連で試験する。吸光度の読み取りは７５０nmで行う（注：最も正確な蛋白ＯＤ読み取り値は０.１〜０.５単位である）。蛋白濃度は標準物質としてウシ血清アルブミンを用いて同時に作成した標準曲線を用いて計算する。
【０１１２】
Ｅ．保存／凍結条件
蛋白濃度の測定の後、蛋白を発現濃度（Ｂmax）に基づいた適切な容量となるまで１０％ＤＭＳＯを含有する蒸留水で希釈する。次に濃縮蛋白を１.５ml容のスクリューキャップ付きのエッペンドルフ試験管に分注し、−８０℃の冷凍庫に入れる。
【０１１３】
Ｆ．結合試験試薬
１．０.５Ｍ  トリス緩衝液、ｐＨ７.７
ａ）４４.４ｇトリス塩酸
２６.５ｇトリス塩基
全量を１Ｌとする（０.５Ｍトリス緩衝液、ｐＨ７.７、３７℃）
ｂ）蒸留水で１：１０希釈（０.０５Ｍトリス緩衝液、ｐＨ７.７）
【０１１４】
２．生理学的食塩類含有トリス緩衝液
ａ）保存緩衝液
ＮａＣｌ   ７.０１４ｇ
ＫＣｌ     ０.３７２ｇ
ＣａＣｌ2  ０.２２２ｇ
ＭｇＣｌ2  ０.２０４ｇ
全量を０.５Ｍトリス緩衝液で１００mlとする。
ｂ）蒸留水で１：１０希釈
これによりＮａＣｌ（１２０mM）、ＫＣｌ（５mM）、ＣａＣｌ2（２mM）およびＭｇＣｌ2（１mM）を含有する０.０５Ｍトリス塩酸ｐＨ７.７が得られる。
任意の操作：０.１％アスコルビン酸を添加しｐＨを確認する（酸化する化合物の試験の場合）。
【０１１５】
３．ａ）０.５Ｍトリス中１.０％ポリエチレンイミン保存溶液（試薬１.ａ）
ｂ）蒸留水で１：１０希釈
４．［Ｎ−メチル−3Ｈ］−スピロペリドール（６０〜９０Ｃｉ／mmol）をＮｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒより入手する。カタログ番号＃ＮＥＴ−８５６
Ｋｉの測定用；各試験管に１５０μＬを添加した場合に１mlの試験液中０．４ｎＭの終濃度となるように［3Ｈ］ＮＭＳＰを緩衝液２ｂ中２.７nMの濃度までとなる用に調製する。添加した総ＣＰＭの試料を実験に用いて総リガンド濃度を計算する。
【０１１６】
５．Ｓ（−）−エチクロプリドをＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌより入手する（ＲＢＩカタログ番号Ｅ−１０１）。Ｓ（−）−エチクロプリドの冷蔵した保存溶液（１ヶ月有効）を緩衝液２ｂ中３０μＭの濃度に調製する。１００μＬを３ウェルに添加し、非特異的結合を測定する（これにより終濃度は１mlの試験液中３μＭとなる）。
【０１１７】
６．被験化合物
大部分の試験において、被験化合物の１００μＭの保存溶液を適当な溶媒（通常は＜０.１％酢酸）中に調製し、緩衝液２ｂで連続希釈することにより、１００μｌの薬剤を総量１mlの試験液に添加した場合に終濃度が１０-5〜１０-8Ｍとなるようにする。通常、８段階の濃度が各試験に適しているが、薬剤の力価に応じてより高濃度または低濃度を用いてもよい。
【０１１８】
Ｇ．結合試験
７５０μＬ  組織
１５０μｌ［3Ｈ］ＮＭＳＰ
１００μＬベヒクル（総結合用）または３０μＭ（−）エチクロプリド（非特異的結合用）または適切な薬剤濃度
９６穴Ｐａｃｋａｒｄ  Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ  ＧＦ／Ｂを０．１％ポリエチルアミン（３、ｂより）中２５℃で１時間より長くインキュベートする。冷組織を最後に添加し、オービタルシェーカー上で数秒間混合し、次に振とう水浴中３０分間３７℃でインキュベートする。Ｐａｃｋａｒｄ  Ｕｎｉｆｌｔｅｒプレートで急速濾過することにより試験を停止する。次にフィルター膜を氷冷０.０５Ｍトリス緩衝液１５mlで洗浄する。次にフィルターを乾燥（ヒートランプ下約１５分、または、６０℃のオーブン中１５分間インキュベート）し、底部シールを適用する。次にＰａｃｋａｒｄ  Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ  ２０シンチレーションカクテル４０μｌを添加し、パーマネントトップシール（Ｐ型）を適用し、ヒートシールする。次にプレートを１時間オービタルシェーカー上で振とうし、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔ上に置き、各点につき少なくとも５分間計数する。
総結合と３μＭＳ−（−）エチクロプリド存在下の結合との間の差として特異的結合を定義する。総結合は総添加リガンドの約１０％である。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ測定（Ｋｉ）は非直線回帰の上限および下限を０％および１００％抑制に固定しながら１部位競合曲線分析を用いてＰｒｉｓｍソフトウエアにより行なう。各薬剤濃度における％抑制は２連の測定の平均とする。
【０１１９】
プロトコール  ３
ラット脳中での［3Ｈ］プラゾシン：α1−アドレナリン受容体の結合
目的：
［3Ｈ］プラゾシン結合試験は、向精神薬のα1−アドレナリン受容体結合特性を定量し、化合物の、副作用としての起立性低血圧および鎮静作用を引き起こす可能性を評価するのに利用することができる。
手順：
このアッセイ方法は、Ｍｏｒｒｏｗ  ａｎｄ  Ｃｒｅｅｓｅ（１９８６）に記載されている当初のα−アドレナリン受容体結合試験を変形から採用したものである。
【０１２０】
Ａ  試薬
１．０.５Ｍ  トリス緩衝液、ｐＨ７.７
５７.２ｇ  トリス塩酸
１６.２ｇ  トリス塩基
１リットルに調製（０.５Ｍ  トリス緩衝液、ｐＨ７.７）
蒸留Ｈ2Ｏに１：１０で希釈（０.０５Ｍトリス緩衝液、２５℃でｐＨ７.７）
【０１２１】
２．［７−メトキシ−3Ｈ］−プラゾシン（７１.８Ｃｉ／mmol；Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ）。ＩＣ50測定のため：［3Ｈ］プラゾシンを２nMの濃度にして、０.１５０mlを各チューブに添加する（１mlのアッセイボリューム中最終濃度０.１３nMになる）。
【０１２２】
３．フェントラミンを非特異的結合を測定するために用いる（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）。非特異的結合を測定するため、フェントラミンの１mM保存溶液を０.０１Ｎ氷酢酸で調製し、１００μＭに連続希釈した。
【０１２３】
４．被験化合物。ほとんどのアッセイで、１mM保存溶液を適した溶媒で調製し、アッセイでの最終濃度が１０-5から１０-9Ｍの範囲になるように連続希釈した。
【０１２４】
Ｂ．組織調製
ラットの脳組織は、生の試料からでも（雄Ｗｉｓｔａｒラット；２００−２５０ｇ）または冷凍の試料からでも（雄Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ；２００−２５０ｇ、Ｈａｒｌａｎ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄ．から；カタログ番号ＢＴ−４０３または皮質  カタログ番号ＢＴ−４５１）得ることができる。皮質を、湿潤質量の５０倍容量の冷却した５０mMトリス緩衝液（２５℃でｐＨ７.７）中で、Ｔｅｋｍａｒ  Ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ（セッティング８）を用いて１０−１５秒間ホモジナイズする。ホモジナイズしたものを４８,０００ｇで１０分間遠心分離にかけ（Ｓｏｒｖａｌｌ  ＲＣ−５遠心分離機ＳＳ−３４のヘッドで約２１,０００ｒｐｍ）、上清を捨て、ペレットを新鮮な５０mMトリス緩衝液に再懸濁し、再度×４８,０００ｇで１０分間遠心分離にかける。最終の組織濃度が緩衝液１.４９mlあたり１ｇ湿潤組織質量となるように、ペレットを新鮮な５０mMトリス緩衝液、ｐＨ７.７に再度懸濁する。アッセイでの最終タンパク質濃度は０.２−０.５mg／mlである。
【０１２５】
Ｃ．結合試験
０.１００mlビヒクル（総結合のため）、または１０μＭフェントラミン（非特異的結合のため）または適した薬物濃度
０.１５０ml    ［3Ｈ］プラゾシン保存溶液
０.７５０ml    組織懸濁液
添加の間試料チューブを氷上に維持し、そして回転させ、３０℃で３０分間インキュベートする。Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＦ／Ｂフィルターを通した急速真空ろ過により結合を停止し、氷冷却した０．０５Ｍトリス緩衝液５mlで３回洗浄する。フィルターを５ｍｌの液体シンチレーションカクテル中で測定する。特異的プラゾシン結合は、総結合と１０μＭフェントラミンにより示される結合との間の違いとして定義される。ＩＣ50計算は、１または２部位モデルに対する非線形回帰を用いて行った（ＧＲＡＰＨＰＡＤ−ＩＮＰＬＯＴ）。
【０１２６】
プロトコール  ４
ラット大脳皮質由来のアルファ−１アドレナリン受容体への［3Ｈ］プラゾシン結合
目的：
このインビボアッセイは、ラット大脳皮質由来の膜中でα1アドレナリン受容体サブタイプに対する親和性を示す化合物を特定するためのふるいとして設計された。これは被験化合物の、[3Ｈ]プラゾシンをα1部位から除去する能力を測定する。
【０１２７】
膜調製：
ラットの脳組織は、生のストックからでも（雄Ｗｉｓｔａｒラット；２００−２５０ｇ）または冷凍のストックからでも（雄Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ；２００−２５０ｇ、Ｈａｒｌａｎから；カタログ番号ＢＴ−４０３）得ることができる。皮質を切り、５０倍容量（湿潤質量）の氷冷した５０mMトリス緩衝液（２５℃でｐＨ７.７）中でホモジナイズする。ホモジナイズしたものを４８,０００ｇで１０分間遠心分離にかけ、ペレットを新鮮な５０mMトリス緩衝液に再懸濁し、二度目の遠心分離にかける。二度目のペレット（Ｐ2）を再懸濁し、１０mlあたり１１５mg湿潤質量の濃度にする。同等の懸濁を確実にするため、膜は添加直前に混合すべきである。
【０１２８】
試験の条件：
９６穴プレートあたり１クライオバイアル
[3Ｈ]−リガンド：
[3Ｈ]プラゾシン：０.８nM（ＮＥＮ、ＮＥＴ−８２３）
ＫD＝０.２５nM（２００μｌアッセイ）
【０１２９】
材料：
フェントラミンメシレート（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｔ．カタログ番号Ｐ−１３１）
９６穴平底プレート（Ｂｅｃｋｍａｎ）
ユニフィルター  ＧＦ／Ｂプレート（Ｐａｃｋａｒｄ）
ポリエチレンイミン（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｐ−３１３４）
ＴｏｍＴｅｃまたはＰａｃｋａｒｄ  Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ  １９６  細胞ハーベスター
Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔ  シンチレーションカウンター
【０１３０】
緩衝液：
Ａ：５０mMトリス塩酸；０.１％アスコルビン酸塩、ｐＨ７.７（インキュベーション緩衝液）
Ｂ：５０mMトリス塩酸；ｐＨ７.７
【０１３１】
手順：
アッセイの添加は以下の通り（示した順序で）：
総結合＝緩衝液Ａ５０μｌ＋[3Ｈ]プラゾシン５０μｌ＋膜１００μｌ
非特異的結合＝フェントラミン５０μｌ（最終１０μＭ）＋[3Ｈ]プラゾシン５０μｌ＋膜１００μｌ
試験化合物＝化合物５０μｌ＋[3Ｈ]プラゾシン５０μｌ＋膜１００μｌ
【０１３２】
評価する化合物を、ＤＭＳＯ中の１０mM保存溶液になるように、２４穴ポリスチレンプレートに量りとる。これを蒸留Ｈ2Ｏで０.５mM保存溶液に希釈する。５０μｌを２連でプレートへ添加して緩衝液Ａでの連続希釈を行い、所望の最終濃度にする。通常、９６穴プレート１枚を、１１化合物の４濃度（１０-6−１０-9Ｍ）での２連の評価に用いる。総結合および非特異的結合は、４連で測定する。通常、各アッセイに、標準を１つ試験する。
５０μｌ添加したときに、最終アッセイ容量２００μｌでの最終濃度が０.８nMになるように、[3Ｈ]プラゾシンを緩衝液Ａで調製する。最終濃度は、[3Ｈ]プラゾシンを９６穴プレートに添加する前に、試料をシンチレーションカウンター内に流して確認するべきである。
注意：作業台に長時間放置されるのを防ぐため、放射能物質は添加の直前に調製するべきである。
【０１３３】
Ｐａｃｋａｒｄ  ＧＦ／Ｂプレート前処理：
フィルタープレートは、０．０５％ポリエチレンイミンを含む氷冷緩衝液Ｂ（２００μｌ／２００ml）中で少なくとも３０分間あらかじめ浸しておき、ろ過効率を最大にし、フィルターブランク結合を最小にしておく。
インキュベーション＆ろ過：
緩衝液、化合物、[3Ｈ]プラゾシンおよび膜を添加したら（混合したら）、直ちに９６穴プレートを３７℃で４０分間インキュベートし、３−５分の間隔をあける。４０分後、Ｔｏｍｔｅｃ自動細胞ハーベスターを用いてプレートをろ過する。ろ過後、直ちに氷冷緩衝液Ｂで洗浄する（総容量約７ml）。
【０１３４】
乾燥＆測定：
各フィルタープレートを熱ランプ下で１５分間乾燥する。プレートの裏を密閉し、Ｐａｃｋａｒｄマイクロシンチ液４０μｌを各ウェルに添加する。Ｐａｃｋａｒｄ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター内で測定する前に、Ｐａｃｋａｒｄフィルムを用いて各プレートをヒートシールする。各プレートの２連の測定により、ＤＰＭ、ＣＰＭおよびＴＳＩＳデータがディスクおよびプリンターに送られるように、プログラムが書かれている。
【０１３５】
結果の分析：
ＤＰＭおよびＣＰＭの生データはディスク上で獲得され、そしてＬＡＮ上に存在する数種のソフトウェアパッケージ（Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｖｅｒ２．０、Ｅｘｃｅｌ）のうちの１つに取り込まれる。特異的結合は、総結合と１０μＭフェントラミン存在下での結合との間の違いとして定義される。総結合は、総添加リガンドの１０％未満である。１部位競合曲線分析を利用するソフトウェアは、ＩＣ50およびＫ1の計算に用いられる（Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ方程式）。非線形回帰の最大および最大は、不変的に０％阻害および１００％阻害で維持される。各薬物濃度における阻害パーセントは、２連測定の平均値である。
【０１３６】
チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）において発現したクローニングされたヒトアルファー−１Ａアドレナリン作動生受容体（α1a）への［3Ｈ］プラゾシン結合
目的：
このインビトロ試験はＣＨＯ細胞の膜フラグメントにおいて発現されたヒトα1aアドレナリン受容体サブタイプに対する親和性を示す化合物を同定するためのスクリーニングとして考案されている。試験ではα1a部位からの［3Ｈ］プラゾシンを置換する被験化合物の能力を測定する。
複数の血管α1−アドレナリン受容体（α1a、α1b、α1d）のインビトロ同定はインビボの心臓血管調節におけるこれらサブタイプの役割を明らかにする糸口を与えている（Ｖａｒｇａｓ  ａｎｄ  Ｇｏｒｍａｎ，１９９５）。非麻酔ラットにおける血液力学的試験によれば、血管内α1a受容体は末梢の耐性および全身性の動脈血圧の交感神経調節に関与する主要なサブタイプである（Ｐｉａｓｃｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９）。動脈血圧の維持における末梢α1a受容体の関与の別の証拠は選択的α1a拮抗剤５−ＭＵが覚醒イヌの安静時動脈血圧を用量依存的に降下させたという所見により明らかにされている（Ｐｉａｓｃｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９）。非可逆的拮抗剤であるクロロエチルクロニジンが静脈内投与された場合にラットにおける動脈血圧を降下できなかったことは動脈血圧の急性調節におけるα1bおよびα1d受容体の役割を否定する強力な証拠である（Ｖａｒｇａｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３）。
従って、α1aアドレナリン作動性受容体への化合物の結合は、化合物の副作用として起立性低血圧および沈静化を生じさせる能力の良好な尺度となると考えられる。プラゾシンはヒトα1a−アドレナリン受容体サブタイプの強力な拮抗剤であり、これはクローニングされており、そして、ＣＨＯ細胞の膜フラグメントにおいて発現する。
【０１３７】
ｈα1a受容体：
ヒトα1aｃＤＮＡのクローニングを行うために、先ずヒト前立腺ｃＤＮＡライブラリ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）をスクリーニングし、これからコード領域の一部を得た。次にこのＤＮＡフラグメントを用いてヒト白血球ゲノムライブラリ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）をスクリーニングし、コード配列の残りの部分を得た。後にこれらの２つのフラグメントを共にスプライスした。次に全体のコード配列を、元のゲノムコード配列を用いてＰＣＲ配列をマッチングさせることを含めて完全に配列決定し、これによりスプライス部位が正しく結合したことを確認した（Ｓｃｈｗｉｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５）。配列決定後、遺伝子を発現ベクターｐｃＤＮＡ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）内にサブクローニングした。次にプラスミドＤＮＡを用いてＣＨＯ細胞にトランスフェクトし、Ｇ４１８耐性クローンを単離した。ｈα1a受容体を高濃度で発現するクローン（ｍＲＮＡと受容体の結合のデータにより判断）を選択し、薬理学的に特性化した。
【０１３８】
培養培地：
接着α1a発現ＣＨＯ培養用の培地成分：
Ａ．ＨａｍＦ１２（Ｃｅｌｌｇｒｏ）
Ｂ．１０％０.２ミクロン濾過ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（Ｃｅｌｌｇｒｏ）
Ｃ．１％０.２ミクロン濾過ペニシリン−ストレプトマイシン  （Ｃｅｌｌｇｒｏ）
Ｄ．Ｇ４１８  ０.２ミクロン濾過（ゲネチシン４００μｇ／ml）（Ｃｅｌｌｇｒｏ）
細胞は確立された方法と操作法を用いて、１５０×２５ｍｍの培養プレート（１００プレートまでの規模）またはこれらのプレートとローラーボトル７０本との組み合わせにより培養する。１回の培養／採取サイクルは通常２週間を要し、１００〜４００ｍｇの蛋白が得られる。プレートまたはボトルは３７℃５％ＣＯ2でインキュベートする。
【０１３９】
保存：
細胞は機械的掻き取りにより採取し、ＰＢＳで洗浄し、２５０ml容のＣｏｒｎｉｎｇポリプロピレン遠沈管に採取し、遠心分離（１５００ｒｐｍ）し、重水中１０％ＤＭＳＯに再懸濁する（採取当たりの最終容量は約５０mL）。蛋白の測定はＢｉｏｒａｄ  ＤＣ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔを用いて行なう。最後に適切な容量を２ｍｌのＣｏｒｎｉｎｇ  クライオバイアル（１０mg／１−１.５ml）に分取し、これを−８０℃で保存する。
【０１４０】
現在のロットデータ：
α1a（クローン＃７）
バッチ１／１４／９８      ２４１８fmol／mg蛋白
Ｋｄ                      ０.１８nM
容量                      １.５ml／クライオバイアル
蛋白濃度                  約１０mg／１.５ml
【０１４１】
試験の条件：
９６穴プレートあたり０.５クライオバイアル（試験容量＝２００μＬ／ウェル）
［3Ｈ］リガンド：
［７−メトキシ−3Ｈ］−プラゾシン：１０nM（ＮＥＮ，ＮＥＴ−８２３）
７０−８７Ｃｉ／mmol
材料：
フェントラミンメシレート（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｔ．＃Ｐ−１３１）
９６穴平底プレート（Ｂｅｃｋｍａｎ）
Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ  ＧＦ／Ｂプレート（Ｐａｃｋａｒｄ）
ポリエチレンイミン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｐ−３１３４）
ＴｏｍＴｅｃまたはＰａｃｋａｒｄ  Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ  １９６セルハーベスター
Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンター
【０１４２】
緩衝液：
Ａ：５０mMトリス塩酸；０.１％アスコルベート、ｐＨ７.７（インキュベーション緩衝液）
Ｂ：５０mMトリス塩酸；ｐＨ７.７（洗浄緩衝液）
【０１４３】
操作法：
試験の添加物質は以下のとおりである（記載順）。
総結合＝５０μＬ緩衝液Ａ＋５０μＬ［3Ｈ］プラゾシン＋１００μｌ膜
非特異的結合＝５０μＬ１０μＭフェントラミン＋５０μｌ［3Ｈ］プラゾシン＋１００μｌ膜
被験化合物＝５０μＬ化合物＋５０μｌ［3Ｈ］プラゾシン＋１００μｌ膜
【０１４４】
評価すべき化合物を計量して２４穴ポリスチレンプレート中ＤＭＳＯ中の１０ｍＭ保存溶液とする。これを重水で０.５mMの保存溶液とする。緩衝液Ａを用いて連続希釈し、これより５０μｌをプレートに２連で添加し、これにより所望の終濃度とする。通常１枚の９６穴プレートを用いて１１化合物を４濃度（１０-6〜１０-9Ｍ）において２連で調べる。総結合および非特異的結合を４連で側定する。通常は各試験につき標準物質１回を測定する。
【０１４５】
［3Ｈ］ピラゾシンは、ウェル当たり５０μＬを添加した場合に２００μＬの最終試験容量中１.０nMの終濃度となるように緩衝液Ａ中に調製する。終濃度はシンチレーションカウンターで試料を測定することにより確認した後に、［3Ｈ］ピラゾシンを９６穴プレートに添加する。
注：放射性物質を長時間ベンチ上に放置することのないように、添加直前に調製しなければならない。
【０１４６】
Ｐａｃｋａｒｄ  ＧＦ／Ｂプレートの前処理：フィルタープレートは０.０５％ポリエチレンイミン（２００μ／２００ml）を含有する氷冷緩衝液Ｂ中に少なくとも３０分間予備浸積することにより、濾過効率を最大限とし、フィルターブランク結合を最小限にする。
インキュベーション＆濾過：緩衝液、化合物、［3Ｈ］ピラゾシンおよび膜を添加し（混合し）た後、９６穴プレートを３７℃で４０分間インキュベートし、３から５分間間隔を空ける。４０分でプレートをＴｏｍｔｅｃ  Ａｕｔｏｍａｔｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒを用いて濾過する。濾過直後に氷冷緩衝液Ｂ（総量約７ｍｌ）で洗浄する。
【０１４７】
乾燥および計数：各フィルタープレートをヒートランプ下で１５分間乾燥する。プレート背部をシールし、Ｐａｃｋａｒｄマイクロシンチ液をウェル当たり４０μＬ添加する。Ｐｃｋａｒｄフィルムを用いて、各プレートをヒートシールし、その後Ｐａｃｋａｒｄ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンターで計数する。ＤＰＭ、ＣＰＭおよびＴＳＩＳのデータをディスクとプリンターに送りながら２回各プレートを計数するプログラムが予めかかれている。
結果の分析：ＤＰＭおよびＣＰＭの生データをディスク上に取りこみ、ＬＡＮ上の幾つかのソフトウエアパッケージの１つに送る（Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｖｅｒ  ２.０，  Ｅｘｃｅｌ）。特異的結合は総結合および１０μＭフェントラミン存在下の結合の差として定義する。総結合は総添加リガンドの１０％未満である。１部位の競合曲線分析を用いるソフトウエアを用いてＩＣ50およびＫlの計算を行なう（Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式、１９７３）。非直線回帰の上限および下限を０％および１００％抑制に固定する。各薬剤濃度における％抑制は２連の測定の平均とする。
【０１４８】
参考文献：
Ｖａｒｇａｓ，  Ｈ．Ｍ  ａｎｄ  Ａ．Ｊ．  Ｇｏｒｍａｎ．  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ．  Ｖｏｌ．５７，  Ｎｏ．２５，  ｐｐ．２２９１−２３０８，  １９９５．
Ｍｏｒｒｏｗ，  Ａ．Ｌ．  ａｎｄ  Ｉ．Ｃｒｅｅｓｅ．  Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ２９：３２１−３３０，  １９８６．
Ｐｉａｓｃｉｋ，  Ｍ．Ｔ．，  Ｊ．Ｗ．Ｋｕｓｉａｋ，  ａｎｄ  Ｋ．Ｗ．Ｂａｒｒｏｎ．  Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  １１：１０１−１０７，  １９８９．
Ｖａｒｇａｓ，  Ｈ．Ｍ．，  Ｄ．Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ，  Ｌ．Ｚｈｏｕ，  Ｈ．Ｂ．Ｈａｒｔｍａｎ  ａｎｄ  Ａ．Ｊ．Ｇｏｒｍａｎ．  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．  ２６７：２６４−２７２，  １９９３．
【０１４９】
本発明の化合物の機能的活性（即ちそれらが拮抗剤、アゴニストまたは部分アゴニストであるかどうか）は以下に記載するマイクロフィジオメーター試験法を用いて用意に調べることができる。
ヒトドーパミンＤ3受容体を発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞をカプセルカップの表面上に生育させた。カップを収集し、マイクロフィジオメーター上部に載せ、緩衝液（ダルベッコの変性イーグル培地、重炭酸ナトリウム非添加、血清非含有）を安定なベースラインが得られるまで（４時間）カップ部品に灌流する。緩衝液灌流速度および溶液の交換はコンピューターにより制御する。細胞内酸性化速度は８個のカップの部品の各々において測定し、コンピューターにより記録する。被験化合物を含有する緩衝液（１０nM、１００nMおよび１μＭ）をカップ部品に２０分間灌流する。キンピロール（１０nM）（Ｄ3アゴニスト）および被験化合物（同濃度）を含有する緩衝液を更に１分間灌流する。その後、１０〜６０分の回復期間を設け、その際は緩衝液のみをカップに灌流する。キンピロールは酸性化速度を増大させる。被験化合物がＤ3拮抗剤である場合は、この増大は濃度依存的に抑制されるであろう。化合物番号８１５５４１および８１３７８２の試験は、これらの化合物がＤ3拮抗剤であることを示した。
【０１５０】
Ｄ3拮抗剤は例えば統合失調症、分裂感情性障害、精神抑鬱および躁病の治療において抗精神病薬として使用できる可能性がある。Ｄ3拮抗剤により治療してよい状態には、運動障害、例えばパーキンソン病、神経弛緩剤誘発振せん麻痺および遅発性ジスキネジー；鬱病；不安症；痴呆症；概日リズム障害および薬剤（例えばコカイン）依存性が包含される。
【０１５１】
本発明の更に別の実施態様によれば、ドーパミンＤ3受容体の活性をモジュレートする方法が提供され、該方法は細胞関連ドーパミンＤ3受容体を該ドーパミンＤ3受容体の活性をモジュレートするのに十分な濃度の式ＩＡの化合物または生理学的に許容されるその塩に接触させることを包含する。本明細書においては、「式ＩＡの化合物」は、条件すなわち「条件Ａ」が減免されており、そしてその代わりに以下の条件（以降「条件Ｂ」と称する）：
「ただし、Ｒが（ａ）であり；Ｙがカルボニルであり；ｎが１であり；ｋが０であり；Ｑが水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲンまたは−ＣＨ2ＯＣ1−Ｃ6アルキルであり；Ｒ1が水素または非置換Ｃ1−Ｃ6アルキルであり；Ｒ3が水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり；Ｒ4が水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり；Ｂが式（ａ）または（ｅ）の基であるときは；Ｒ2は式（ｘ）の基であることはできない」が挿入されていることを除き式Ｉの化合物を指すものである。
【０１５２】
本明細書においては、「ドーパミンＤ3受容体の活性をモジュレートする」という表現は種々の治療用途を指す。該治療用途とは、運動障害、精神病、不安障害、気分障害、痴呆、睡眠障害、概日リズム障害、物質依存、薬物乱用および悪心を含む状態または障害の治療を指す。
【０１５３】
本発明はまた、式ＩＡまたはＩＢまたは製剤学的に許容可能なその塩の治療有効量を、中枢神経系の状態または障害の治療の必要な患者に投与する事を包含する該治療方法を提供する。式ＩＢの化合物は本方法に適している。本明細書においては、「式ＩＢの化合物」とはその条件を除いて、即ち、「条件Ａ」がそこから減免されており、そして代わりに以下の条件（以降「条件Ｃ」と称する）：
「ただし、Ｒが（ａ）であり；Ｙがカルボニルであり；ｎが１であり；ｋが０であり；Ｑが水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、ハロゲンまたは−ＣＨ2ＯＣ1−Ｃ6アルキルであり；Ｒ1が水素または非置換Ｃ1−Ｃ6アルキルであり；Ｒ3が水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり；Ｒ4が水素またはＣ1−Ｃ6アルキルであり；Ｂが式（ａ）または（ｅ）の基であるときは；Ｒ2は飽和若しくは不飽和のＣ1−Ｃ10アルキルまたは以下の基：
（ａ）式中、ｙが０であるもの、
（ｂ）式中、Ｄが式（ａ）の基であり、ここでｕが０で、Ｍが水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、トリフルオロメチルまたは
【化１０６】
0004497815.tif 000044
（式中ｒは０である）であるもの、
（ｄ）式中、ｖが０であるもの、
（ｅ）式中、ｄが０であるもの、
（ｆ）、
（ｇ）式中、ｆが０であるもの、
（ｈ）、
（ｉ）、
（ｊ）、
（ｋ）、
（ｌ）式中、ｇが０であるもの、
（ｍ）、
（ｎ）式中、ｈが０であるもの、
（ｏ）、
（ｓ）、
（ｘ）、
（ｅｅ）、
（ｆｆ）、
（ｉｉ）、または
（ｊｊ）
のいずれかであることはできない」
が挿入されていることを除き式Ｉの化合物を指すものである。
【０１５４】
本発明は更に、Ｄ1、Ｄ2、Ｄ4、Ｄ5または５ＨＴ受容体拮抗剤の１種またはそれ以上と組み合わせて式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの化合物または製剤学的に許容可能なその塩の治療有効量を中枢神経系の状態または障害の治療の必要な患者に投与することを包含する該治療の方法を提供する。式ＩＢの化合物は本方法に適している。
【０１５５】
上記した状態または障害に罹患した患者の治療においては、式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの化合物を、化合物が治療有効量で生体利用される何れかの形態または様式において、例えば経口、舌下、口内、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、鼻内、直腸、局所投与等の方法で投与することができる。製剤の当業者は治療すべき状態または疾患、疾患の段階、患者の状態および他の関連する状況に対して選択された化合物の特定の特性に応じて、投与の適切な形態および様式を決定することができる。例えば、参照により本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．  （１９９０）を参照できる。
【０１５６】
式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの化合物は単独または製剤学的に許容可能な担体と組み合わせた医薬組成物の形態で投与することができ、担体の比率および性質は選択された化合物の溶解度および化学的性質、選択された投与経路、標準的な薬学上の慣行および他の関連する基準により決定される。
【０１５７】
式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの化合物は例えば錠剤、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル、懸濁剤、溶液、シロップ剤、ウエハース剤、チユーインガム等の形態で経口投与してよく、そして、以下の補助剤、即ちバインダー、例えば微結晶セルロース、トラガカントガムまたはゼラチン、添加剤、例えば澱粉または乳糖、錠剤崩壊剤、例えばアルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、コーンスターチ等、潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウムまたはＳｔｅｒｏｔｅｘ、滑剤、例えばコロイド状二酸化ケイ素、甘味料、例えばスクロースまたはサッカリン、およびフレーバー剤、例えばペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジフレーバー等の１種またはそれ以上を含有してよい。単位剤形がカプセルの場合は、それは上記した種類の材料に加えて液体担体、例えばポリエチレングリコールまたは脂肪油を含有してよい。他の単位剤形はその投与単位の物理的形態を変化させる他の種々の材料、例えばコーティングを含有してよい。即ち、錠剤または丸薬は糖類、シェラックまたは他の腸溶性コーティング剤でコーティングしてよい。シロップは本発明の化合物の他に、甘味剤としてスクロースおよび特定の保存料、染料および着色料およびフレーバーを含有してよい。
【０１５８】
式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの化合物はまた局所投与してよく、そのような場合、担体は溶液、軟膏またはゲル基剤を適宜含有してよい。基剤は例えばワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、ミツロウ、鉱物油、希釈剤、例えば水およびアルコール、および乳化剤および安定化剤の１種またはそれ以上を含有してよい。
【０１５９】
溶液または懸濁液もまた１種またはそれ以上の以下の補助剤、即ち、注射用水、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒のような滅菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンのような抗細菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムのような抗酸化剤；エチレンジアミン４酢酸のようなキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩のような緩衝物質および塩化ナトリウムまたはデキストロースのような浸透圧調節剤を含有してよい。非経腸製剤はアンプル、使い捨てシリンジまたはマルチ用量のバイアルに封入することができる。
【０１６０】
式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの化合物の高親油性のエステル、アミドおよびカーバメートは、蓄積製剤として調製され投与される場合、例えば適切に選択された製剤学的に許容可能な油脂中において注射される場合は、哺乳動物において数日間または約１〜４週間の期間、除放性となることが可能である。好ましい油脂はゴマ油、綿実油、コーン油、ココナツ油、大豆油、オリーブ油等の植物起源のものであり、または、脂肪酸および多官能性アルコール、例えばグリセロールまたはプロピレングリコールの合成エステルである。
【０１６１】
式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの化合物の蓄積組成物は本発明の高親油性エステル、アミドまたはカーバメートを滅菌条件下に製剤学的に許容可能な油脂に溶解することにより調製される。油脂は所望の期間に渡り活性成分が放出されるように選択する。適切な油脂は従来技術を参照することにより、または、当業者により特に実験を行なうことなく容易に決定される。
【０１６２】
式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの化合物が治療上の作用を示す能力を発揮する用量の範囲は治療すべき特定の疾患または状態およびその重症度、患者、製剤、患者が罹患している他の基礎疾患、および、患者に投与している他の併用薬により異なる。一般的に、式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの化合物は約０.００１mg／kg患者体重／日〜約１００mg／kg患者体重／日の用量でその治療活性を示す。
更に別の態様では、本発明は特にＣＮＳ異常を診断するための、ＣＮＳにおけるドーパミンＤ3受容体の画像化のために有用な式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの新しい放射標識造影剤を提供する。
【０１６３】
式Ｉ、ＩＡまたはＩＢの放射標識（トリチル化および14Ｃ標識）型の化合物はドーパミンＤ3受容体への化合物の結合を測定するための放射リガンドとして有用である。それらはまた動物における化合物の代謝を調べるための標識親化合物として有用である。この目的のために好ましい物は、Ｒが基（ａ）であり、Ｑがトリフルオロメチルであり、ｐが１であり、Ｒ3が水素であり、Ｒ4が水素であり、ｎが１であり、ｋが０であり、Ｙがカルボニルであり、ＡがＮであり、そしてＡに結合しているＲの炭素原子が放射性核種14Ｃである式Ｉ、ＩＡ、またはＩＢの化合物である。この目的のための特に好ましい物は式ＩＣの化合物である。本明細書においては、「式ＩＣの化合物」とは、Ｒが基（ａ）であり、ここで、Ｑがベンゾチオフェン環系の６位で置換したトリフルオロメチルであり；ｐが１であり；Ｙがカルボニルであり、Ｒ4が水素であり、ＡがＮであり、ｎが１であり；ｋが０であり、Ｙがカルボニルであり、ｋが０であり、Ｒ3が水素であり、そしてＡに結合しているＲの炭素原子が放射性核種14Ｃである式Ｉの化合物を指す。式ＩＣの化合物は実施例３５に記載の方法と同様にして調製してよい。
【０１６４】
ドーパミン生成の不均衡は種々の精神および身体的障害、例えばパーキンソン病（ＰＤ）に関与している。即ち、このような不均衡を診断してモニタリングすること、および、脳の化学に影響する薬剤および物質の有効性をモニタリングすることが望ましい。インビボの生存脳を評価することができ、これにより脳の化学および脳の化学に影響する薬剤および物質の有効性をモニタリングできる新しく強力な造影法が開発されている。陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）および単光子放出コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）のような方法は、患者の脳における前シナプスおよび後シナプスの神経受容体に結合するリガンドを有する放射活性トレーサー物質を患者に投与することを包含する。放出（主に陽電子からはγ線、放射活性トレーサーからは光子が放出される）が測定される。これらの放出は神経受容体のブロッキングの占有性の数量と程度を示すものである。神経受容体の数および占有性またはブロッキングの程度は数学的モデルを用いて計算することができ、そして、個人内または個人間の対照と比較することにより薬剤応答の程度を調べる。患者を薬剤で更に治療するかどうかは比較の結果に基づく。しかしながら、これらの方法が有用であるためには、所望の受容体に対する高い特異性および親和性を有するリガンドが必要である。
【０１６５】
特定の放射活性リガンドはドーパミントランスポーターに対して選択的であり、このため、特に脳幹神経節および黒質に置けるドーパミンニューロンの選択的損失を特徴とするパーキンソン病（ＰＤ）患者に対して、インビボおよびインビトロのドーパミン機能の変化を調べるのに有用であると考えられている。
【０１６６】
本発明の別の態様はＣＮＳ造影剤としての本発明の化合物の利用方法に関する。造影方法は一般的に哺乳動物の外部から検出できるマーカー原子を有する化合物を投与することを包含する非侵襲性の診断方法である。一般的にこれらの方法は適当な製剤学的に許容可能な担体または希釈剤に溶解または分散した本発明の化合物を哺乳動物に投与することを包含する。本発明の化合物はドーパミンＤ3に選択的に結合し、これによりＣＮＳ受容体の造影を可能とし、とりわけ脳の化学、薬剤の有効性およびニューロン機能を評価する能力をもたらす。本発明を実施するために適する造影方法は、例えば、単光子放出コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）および陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）であるが、これらに限定されない。診断核医療において広範に用いられている放射性核種には、テクネチウム［99Ｔｃ］、ヨウ素［123Ｉ］、炭素［11Ｃ］およびフッ素［18Ｆ］が含まれる。
【０１６７】
本発明を下の非限定的な実施例および表によりさらに説明する。これらの実施例は説明を目的としており、本発明の範囲を如何なる点においても限定する意図はない。本明細書においては、以下の用語は指定した意味を有し、即ち、「ｇ」はグラム、「ｍｍｏｌ」はミリモル、「ｍｌ」はミリリットル、「℃」はセルシウス温度、「ＴＬＣ」は薄層クロマトグラフィー、「ＬＣ／ＭＳ］は液体クロマトグラフィー質量スペクトル分析、「ＡＰＣＩ」は常圧化学イオン化、「ｍｐ」は融点を意味する。
【０１６８】
【実施例】
実施例１
中間体置換ピペラジンの合成
【化１０７】
0004497815.tif 000045
実施例１（ａ）：中間体３−べンジル−ピペラジンの調製
乾燥ジエチルエーテル（５００ｍｌ）中の３−ベンジル−ピペラジン−２,５−ジオン（１４.９８ｇ、７３ｍｍｏｌ、一般的にHalpern and Westley, J.Org.Chem.1968, 33, 864の方法に従って調製）の懸濁液に、リチウムアルミニウムハイドライドの溶液（ジエチルエーテル中１Ｍ溶液を４００ｍｌ、４００ｍｍｏｌ、５.４当量）を滴下する。懸濁液を２３時間還流下に加熱し、次に０℃に冷却する。次に水（７０ｍＬ）を慎重に添加し、得られた懸濁液を室温に加温する。３時間後懸濁液を濾過し、固体をジエチルエーテル（１Ｌ）で洗浄する。濾液を真空下で濃縮し、黄色の結晶性固体として粗製の標題化合物（１１.４０ｇ、８８％）を得る。一部の試料（２ｇ）をシクロヘキサン、次にトルエンから再結晶し、微細な白色結晶として精製された標題化合物（０.８３ｇ）を得た。融点８０〜８１℃。
Ｃ11Ｈ16Ｎ2の計算値：７４.９６％Ｃ  ９.１５％Ｈ  １５.８９％Ｎ
実測値：７４.８４％Ｃ  ９.０１％Ｈ  １６.１５％Ｎ
【０１６９】
【化１０８】
0004497815.tif 000046
実施例１（ｂ）：−４０℃に冷却した無水ＴＨＦ（３００ｍｌ）中のＬＤＡ（２９５ｍｌ、０.５９ｍｏｌ、ヘプタン／ＴＨＦ／エチルベンゼン中２Ｍ）の溶液に、２−メチルピラジン（４８.５ｍｌ、０.５３１ｍｏｌ）を添加漏斗で滴下した。反応物を−２０℃まで昇温させ、９０分間攪拌し、その時点で無水ＴＨＦ（２００ｍｌ）中のベンズアルデヒド（５４ｍｌ、０.５３１ｍｏｌ）の溶液を添加漏斗で滴下した。添加終了後、反応物を室温に戻し、２０時間攪拌した。反応物を氷浴中で冷却し、飽和ＮＨ4Ｃｌ（５００ｍｌ）を添加した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ、２５０ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出液を乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮して暗ベージュ色の固体を得た。生成物をＥｔ2Ｏで摩砕し、収集し、そして一夜乾燥して明茶色の固体５６.０ｇ（５３％）を得た。融点８１〜８４℃。
ＭｅＯＨ（１.１Ｌ）および濃塩酸（２９０ｍｌ）中の上記固体（５６.０ｇ、０.２８ｍｏｌ）を２４時間還流下に攪拌した。反応物を室温に冷却し、濃縮して暗色液体とした。暗色液体を氷浴中で冷却し、水（１Ｌ）を添加した。得られた溶液をＮａ2ＣＯ3の飽和溶液で中和し、生成物をＥｔＯＡｃ（１Ｌ、２×５００ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出液を乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、濃縮して暗茶色の固体４６ｇを得た。固体をフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン中４０％ＥｔＯＡｃ）で精製し、茶色泡状物としてオレフィン２２.７ｇを得た。
１Ｌ容のＰａｒｒ振とうボトルを窒素パージし、ＥｔＯＨ（４５０ｍｌ）中の１０％Ｐｄ／Ｃ（４.５ｇ、Ｄｅｇｕｓｓａ型）および上記のオレフィン（２０.０ｇ、０.１１０ｍｏｌ）を添加した。反応物を３.５時間５０ｐｓｉで水素化し、その後反応物をセライトプラグを通して濾過し、エタノールで濯いだ。ボトルに再度新しい１０％Ｐｄ／Ｃ（４.５ｇ、Ｄｅｇｕｓｓａ型）、濾液および濃塩酸（１５ｍｌ）を添加した。反応物を１８時間５０ｐｓｉで水素化し、その後反応物を温ＭｅＯＨで希釈し、セライトプラグを通して濾過した。固体を温ＭｅＯＨで十分洗浄し、濾液を濃縮して２塩酸塩として最終生成物１１.２ｇ（３９％）を得た。融点２９７〜３００℃。
参照：Tetrahedron, 30, 1974, pp667-673およびTet.Lett.1979, pp4483-4486。
【０１７０】
【化１０９】
0004497815.tif 000047
【０１７１】
実施例１（ｃ）：ＤＢＵ（１４.０ｇ、９２ｍｍｏｌ）を周囲温度でＤＭＦ９２ｍｌ中のピペラジンジアセテート（１８.２ｇ、９２ｍｍｏｌ）およびアルデヒド（１２.３ｇ、９２ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。得られた混合物を５時間室温で攪拌した。沈殿した生成物を濾取し、生成物１７.１ｇを得た。
【化１１０】
0004497815.tif 000048
ＤＭＦ１２５ｍｌ中のモノアセテート（１７.０ｇ、６２.８ｍｍｏｌ）およびヒドラジン水和物（９.４ｇ、１８８.６ｍｍｏｌ）を２０時間室温で攪拌した。沈殿した固体を濾取し、水およびエタノールで洗浄し、生成物１３.７ｇを得た。
【化１１１】
0004497815.tif 000049
メタノール１.２Ｌ中のオレフィン（１３.６ｇ、５９.１ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（２.７ｇ、１０％Ｐｄ／Ｃ、Ｄｅｇｕｓｓａ型、５０％水）をＰａｒｒ水素化装置上４０ｐｓｉの水素下、水素取りこみが停止するまで振とうした。混合物をジクロロメタンで希釈し、セライトを通して濾過した。濾液を濃縮して生成物１２.１ｇを得た。
【化１１２】
0004497815.tif 000050
ＬＡＨの溶液（１５６ｍｌ、１５６ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１Ｍ）をＴＨＦ１００ｍｌ中のピペラジンジオン（１２.１ｇ、５２.１ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で滴下した。混合物を一夜還流下に加熱し、攪拌した。混合物を０℃に冷却し、ＴＨＦ２００ｍｌ中の水３８ｍｌを慎重に添加した。得られた混合物を１時間攪拌し、次に濾過し、濾過ケーキをＴＨＦで洗浄し、濾液を真空下で濃縮し、生成物７.４ｇを得た。
【０１７２】
実施例２
【化１１３】
0004497815.tif 000051
１−（６−（トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル）−ピペラジン塩酸塩
２ａ：２−カルボメトキシ−３−アミノ−６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン：
機械式攪拌機、窒素バブラー、および熱電対プローブを備えた２２Ｌの三口丸底フラスコに、２−ニトロ−４−トリフルオロメチルベンゾニトリル１.２０ｋｇ（５.５５モル）、メチルチオグリコレート５８９.３ｇ（４９６ｍｌ、５.５５モル）およびＮＭＰ４.３Ｌを添加する。得られた黄色溶液を２℃に冷却し、７８分かけて、水３.３６Ｌ中の水酸化リチウム１水和物４６６.０ｇ（１１.１１モル、２.０当量）から調製した溶液をゆっくり添加し、その間温度を２〜２０℃に維持する。茶色のスラリーを２時間かけて２１℃まで昇温させ、次に水８.０Ｌで希釈する（発熱を観察−＞２７℃）。４０分間攪拌し、１８℃に冷却し、生成物を濾取し、水１０Ｌですすぎ、次に周囲温度で風乾して淡黄色の固体として２−カルボメトキシ−３−アミノ−６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン１.２９５ｋｇ（８４.７％収率）を得る。ＨＰＬＣ分析による純度９９.８％。
【０１７３】
２ｂ：１−（６−（トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル）−ピペラジン塩酸塩
機械式攪拌機、窒素バブラー、および熱電対プローブを備えた１２Ｌの三口丸底フラスコに、実施例２ａの２−カルボメトキシ−３−アミノ−６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン１.１４ｋｇ（４.１４モル）、ピペラジン１９６.０ｇ（２.２８モル、０.５５当量）、ＮＭＰ４.０Ｌおよびキシレン５７０ｍｌを添加する。溶液を加熱し、４時間１７０〜１８０℃に維持した時点で、ＨＰＬＣによれば反応は約９８％完了している。茶色溶液を１６８℃に冷却し、次にピペラジン１.６０５ｋｇ（１８.６３モル、４.５当量）（温度−＞１０９℃）次いでｐ−トルエンスルホン酸１水和物１.５７５ｋｇ（２８.２８モル、２.０当量）（発熱を観察、１０９−＞１３０℃）を添加する。Dean-Starkトラップを冷却管に装着し、反応物を加熱して共沸混合物を採取する。水性の蒸留物合計４１０ｍｌを除去し、その間、ポット温度を１４５℃から１６５℃に昇温させる。ＧＣ／ＭＳおよびＨＰＬＣ分析で反応の進行をモニタリングする。約１６５℃で１４時間の後（ＨＰＬＣおよびＧＣ／ＭＳ分析によれば＞９９％の変換）、反応物を３０〜３５℃に冷却し、次に氷５ｋｇ、水１２Ｌおよびトルエン８.５Ｌの入った抽出器内に投入してクエンチングする。相を分離させ、有機抽出液を０.５Ｎ  ＮａＯＨ  １１Ｌ、ＮａＣｌ飽和水溶液２Ｌで洗浄し、次に１Ｎ  ＨＣｌ  ８Ｌで抽出する。酸性の水性抽出液を氷１ｋｇで希釈し、５０％ＮａＯＨ６２４ｇを添加することによりｐＨ１１.２にまで塩基性化する。得られた混合物をトルエン９.５Ｌで抽出する。トルエン抽出液をＮａＣｌ飽和水溶液２Ｌで洗浄し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過する。濾液を２２Ｌの三口丸底フラスコに入れ（Ｎ2、機械式攪拌機、窒素バブラー、温度制御プローブ）、２０〜２７℃で１Ｎのエーテル性ＨＣｌ合計３.７Ｌを添加することにより、混合物がコンゴレッド試験紙で陽性となるようにする。ＨＣｌ添加の間、トルエン合計２.５Ｌを添加することにより、形成した濃厚なスラリーの攪拌を促進する。４０分間周囲温度で攪拌し、スラリーを濾過し、トルエン４.５Ｌで洗浄する。風乾後、淡いピンクベージュ色の固体として３−ピペラジニル−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン塩酸塩１.１６５ｋｇ（８７％収率）を得る。ＧＣ／ＭＳによる純度９９.１％。
【０１７４】
実施例３
【化１１４】
0004497815.tif 000052
３−ピペリジニル−４−イル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール塩酸塩
【０１７５】
【化１１５】
0004497815.tif 000053
３ａ：４−（３−ブロモ−チオフェン−２−カルボニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエスエル
テトラヒドロフラン（１.０Ｌ）中の３−ブロモチオフェン（２１.０ｍｌ、０.２２４ｍｏｌ）の溶液を−７８℃、窒素下で攪拌し、ヘプタン／テトラヒドロフラン／エチルベンゼン中のリチウムジイソプロピルアミドの２.０Ｍ溶液（１１２ｍｌ、０.２２４ｍｏｌ）を４５分間で添加する。テトラヒドロフラン（８００ｍｌ）中の４−（Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルカルボキサミド）−１−ピペリジンカルボン酸１,１−ジメチルエチルエステル（ＵＳ５,１３４,１３９に従って調製）（７９.４ｇ、０.２９１ｍｏｌ）の溶液を２時間かけて滴下する。２時間攪拌し、塩化アンモニウム飽和溶液を添加し、更に０.５時間攪拌する。得られた固体を濾過し、濾液を水（８００ｍｌ）に注ぎ込む。水性の混合物をエーテルで抽出し、濃縮して暗色の液体を得る。液体を水（４００ｍｌ）に注ぎ込み、ＮａＣｌを添加し、水性の混合物をエーテルで抽出する。抽出液を水、食塩水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥する。濾過して濃縮し、粗生成物を得る。生成物をシリカゲル上のクロマトグラフィー（石油エーテル／エーテル、４：１）に付し、白色固体４１.５ｇ（５０％）を得る。
【０１７６】
【化１１６】
0004497815.tif 000054
３ｂ：４−［（３−ブロモ−チオフェン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
４−（３−ブロモ−チオフェン−２−カルボニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエスエル（実施例３ａ）（４１.５ｇ、０.１１ｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（１５.４ｇ、０.２３ｍｏｌ）およびピリジン（１９０ｍｌ）の混合物を周囲温度で一夜攪拌する。反応物を水（５００ｍｌ）に注ぎ込み、ジクロロメタンで抽出する（３回）。合わせた抽出液をＣｕＳＯ4飽和溶液（２回）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濃縮して緑色の固体を得る。固体をトルエン（１７５ｍｌ）に溶解し、３時間周囲温度で放置する。形成した結晶を収集し、トルエン（６０ｍｌ）で洗浄する。濾液を濃縮し、再度残留物をトルエンに溶解し、更に結晶の収集を継続し、総収量で２５ｇ（５８％）の標題化合物を薄緑色の固体として得る。
【０１７７】
【化１１７】
0004497815.tif 000055
３ｃ：４−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
２−メトキシエタノール（２００ｍｌ）中の４−［（３−ブロモ−チオフェン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（実施例３ｂ）（２５ｇ、６４.２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、水（２０ｍｌ）中の水酸化カリウム（７.２ｇ、１２８.４ｍｍｏｌ）の溶液を添加する。反応物を６０℃に加熱し、次に銅紛（１.２５ｇ）を添加する。６時間６０〜７０℃で、次に一夜周囲温度で攪拌する。反応混合物を水（５００ｍｌ）に注ぎ込み、ＥｔＯＡｃ（３回）で抽出する。濃縮して暗色の残留物とし、シリカゲル上のクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ、４：１）で精製し、白色固体９.８ｇ（５０％）を得る。
【０１７８】
３ｄ：３−ピペリジニル−４−イル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール塩酸塩
４−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（実施例３ｃ）（１.０ｇ、３.２ｍｍｏｌ）にエーテル性ＨＣｌ（１０ｍｌ）を添加し、次にメタノール（１ｍＬ）を添加して溶液とする。１時間周囲温度に放置し、次に融点２４０〜２４１℃の白色固体０.３４ｇを採取する。濾液より更に融点２６３〜２６５℃の白色固体０.２５ｇを採取する。両試料：ＭＳ、ｍ／ｚ＝２０９(Ｍ＋Ｈ)+
分析（試料の融点２６３〜２６５℃）
Ｃ10Ｈ12Ｎ2ＯＳ・ＨＣｌの計算値：４９.０８％Ｃ  ５.３５％Ｈ  １１.４５％Ｎ
実測値：４９.０３％Ｃ  ５.２９％Ｈ  １１.２５％Ｎ
【０１７９】
実施例４
【化１１８】
0004497815.tif 000056
１−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］−ジアゼパン
４ａ：３−アミノ−６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸
５０℃において、水（４５０ｍｌ）中の２−カルボメトキシ−３−アミノ−６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン（米国特許５,１４３,９２３号に記載のとおり調製）（９０.１ｇ、０.４ｍｏｌ）の攪拌溶液に２〜３分かけてＮａＯＨの５０％水溶液（６４ｇ、０.８ｍｏｌ）を添加する。反応物を７０〜７３℃に加熱し、そして３時間攪拌を継続する。１０％水性イソプロパノール（４５ｍｌ）を添加し、還流させる。イソプロパノールをＮ2下で除去し、Ｈ2Ｏ（３００ｍｌ）を添加する。反応混合物を７〜１０℃に冷却し、濃ＨＣｌ（８０ｍｌ）を添加する。Ｈ2Ｏ（６５０ｍｌ）を添加し、５〜７℃に冷却し、得られた固体を濾過し、濾過ケーキをＨ2Ｏ（２×１５０ｍｌ）で洗浄する。固体を真空下で３５℃で乾燥し、固体８０.６ｇ（９４.７％）を得る。融点１６０〜１６３℃、シリカゲル上のＴＬＣ（ジクロロメタン／メタノール、３：１）、Ｒf＝０.６９。
【０１８０】
４ｂ：１−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］−ジアゼパン
１−メチル−２−ピロリジノン（５ｍｌ）中の３−アミノ−６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（５.０ｇ、２４ｍｍｏｌ）の溶液を２時間１００℃に加熱し、次に、窒素気流を導入し、溶液を室温に冷却する。ホモピペラジン（９.５ｇ、９５ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸１水和物（９.０ｇ、４７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を４時間１４５℃に加熱する。その後、反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチル（３０ｍｌ）で希釈し、食塩水（３×１５ｍｌ）で洗浄する。有機相を分離し、ＭｇＳＯ4上で乾燥する。溶媒を蒸発させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、１００ｇＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ  ９：２、次にＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ  ９：２：０.１５）で精製し、黄色みを帯びた油状物３.９ｇ（６５％）を得る。ＬＣ／ＭＳ（LiChrospher ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ、ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）
ｔR＝１０.７４分、ｍ／ｚ＝２５０.３。
【０１８１】
実施例５
【化１１９】
0004497815.tif 000057
４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアザパン−１−イル］−ブチロニトリル
アセトニトリル（４００ｍＬ）中の１−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン（実施例４）（２３.７ｇ、９５ｍｍｏｌ）および４−ブロモブチロニトリル（２１.０ｇ、１４２ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（３９.３ｇ、２８４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流下で１０時間攪拌した。混合物をろ過し、溶媒を蒸発させ、残留物を酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）中に溶解した。水および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、有機相をＭｇＳＯ4で乾燥した。真空下で溶媒を蒸発させ、カラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡＣ／ＭｅＯＨ  ９：１）により粗生成物を精製し、所望の生成物１２.９ｇを黄色油状物として得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水（０.０５％／ＴＦＡ）−勾配２％→９８％（２０分）、流速：０.７５ｍＬ／分）、ｔR９.４６分、ｍ／ｚ＝３１７.３。
【０１８２】
実施例６
【化１２０】
0004497815.tif 000058
４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアザパン−１−イル］−ブチルアミン
ジエチルエーテル中のＬｉＡｌＨ4の溶液（１Ｍ、７２.５ｍＬ）を、室温で３０分かけて、乾燥ジエチルエーテル（２００ｍＬ）中の４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアザパン−１−イル］−ブチロニトリル（実施例５）（１１.５ｇ、３６.２ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。溶液を５時間加熱還流する。相を分け、水相をＥｔＯＡｃで再抽出する。合わせた有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒を真空化で除去する。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ  ９：２：０.２５）により精製し、無色の油状物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水（０.０５％／ＴＦＡ）−勾配２％→９８％（２０分）、流速：０.７５ｍＬ／分）、ｔR＝７.７９分、ｍ／ｚ＝３２１.３。
【０１８３】
実施例７
【化１２１】
0004497815.tif 000059
４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアザパン−１−イル］ペンタノ−ニトリル
実施例５の手順に従って、手順中ブチロニトリルをペンタノニトリルに置き換え、表題化合物を得た。（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水（０.０５％／ＴＦＡ）−勾配２％→９８％（２０分）、流速：０.７５ｍＬ／分）、ｔR＝１０.４分、ｍ／ｚ＝３３１.５。
【０１８４】
実施例８
【化１２２】
0004497815.tif 000060
４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアザパン−１−イル］ペンチルアミン
実施例６の手順に従って、手順中４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアザパン−１−イル］ペンタノニトリル（実施例７）に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ、（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水（０.０５％／ＴＦＡ）−勾配２％→９８％（２０分）、流速：０.７５ｍＬ／分）、ｔR＝８.３１分、ｍ／ｚ＝３３５.５。
【０１８５】
実施例９
【化１２３】
0004497815.tif 000061
１Ｈ−インドール−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
インドール−２−カルボン酸（５０７ｍｇ、３.１５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアザパン−１−イル］ブチルアミン（実施例６）（９２０ｍｇ、２.８６ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（２.５ｍＬ、１４.３ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（５０３ｍｇ、３.７２ｍｍｏｌ）およびモルホリノカルボジイミド（１.３５ｇ、３.２９ｍｍｏｌ）の溶液中に添加し、溶液を室温で一昼夜攪拌した。溶媒を真空化で除去し、残留物をＥｔＯＡｃ中に溶解した。有機相をエーテルおよび飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。溶媒を真空化で除去し、カラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ７：３）により粗生成物を精製し、無色の固体７１６ｍｇを得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝１９.８９分、ｍ／ｚ＝４６４.３。
【０１８６】
実施例１０
【化１２４】
0004497815.tif 000062
ナフタレン−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
２−ナフトイルクロリド（６００ｍｇ、３.１５ｍｍｏｌ）の溶液を、ピリジン−メチレンクロリド（１０ｍＬ、１：１）中の４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアザパン−１−イル］ブチルアミン（実施例６）（９２０ｍｇ、２.８６ｍｍｏｌ）の溶液にゆっくり添加し、溶液を室温で一昼夜攪拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物をＥｔＯＡｃ中に溶解し、有機相を水および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機相を合わせ、ＭｇＳＯ4で乾燥し、溶媒を真空下で除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ  ７：３）により精製し、固体１.２５ｇを得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝２１.１１分、ｍ／ｚ＝４７５.３。
【０１８７】
実施例１１
【化１２５】
0004497815.tif 000063
５−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例９の手順に従って、手順中インドール−２−カルボン酸を５−メトキシ−インドール−２−カルボン酸に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝１９.７５分、ｍ／ｚ＝４９４.６。
【０１８８】
実施例１２
【化１２６】
0004497815.tif 000064
５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例９の手順に従って、手順中インドール−２−カルボン酸を５−ヒドロキシ−インドール−２−カルボン酸に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝１９.７３分、ｍ／ｚ＝４８０.２。
【０１８９】
実施例１３
【化１２７】
0004497815.tif 000065
ベンゾフラン−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例９の手順に従って、手順中インドール−２−カルボン酸をベンゾフラン−２−カルボン酸に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝２０.８０分、ｍ／ｚ＝４６５.３。
【０１９０】
実施例１４
【化１２８】
0004497815.tif 000066
１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例９の手順に従って、手順中インドール−２−カルボン酸を１−メチル−インドール−２−カルボン酸に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝２１.３５分、ｍ／ｚ＝４７８.６。
【０１９１】
実施例１５
【化１２９】
0004497815.tif 000067
１Ｈ−インドール−５−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例９の手順に従って、手順中インドール−２−カルボン酸をインドール−５−カルボン酸に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝１８.３５分、ｍ／ｚ＝４６４.６。
【０１９２】
実施例１６
【化１３０】
0004497815.tif 000068
１Ｈ−インドール−６−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例９の手順に従って、手順中インドール−２−カルボン酸をインドール−６−カルボン酸に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝１９.２５分、ｍ／ｚ＝４６４.６。
【０１９３】
実施例１７
【化１３１】
0004497815.tif 000069
３−メチル−１Ｈ−インデン−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例９の手順に従って、手順中インドール−２−カルボン酸を３−メチルインデン−２−カルボン酸に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝２１.８６分、ｍ／ｚ＝４７７.６。
【０１９４】
実施例１８
【化１３２】
0004497815.tif 000070
９−オキソ−９Ｈ−フルオレン−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例９の手順に従って、手順中インドール−２−カルボン酸を９−フルオレノン−２−カルボン酸に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝２１.５７分、ｍ／ｚ＝５２７.３。
【０１９５】
実施例１９
【化１３３】
0004497815.tif 000071
Ｎ−｛４−［４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−４−（４−メチル−２,５−ジオキソ−イミダゾリジン−４−イル）−ベンズアミド
実施例９の手順に従って、手順中インドール−２−カルボン酸を４−（４−メチル−２,５−ジオキソ−イミダゾリジン−４−イル）−安息香酸に置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝１９.５２分、ｍ／ｚ＝５３７.４。
【０１９６】
実施例２０
【化１３４】
0004497815.tif 000072
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル）−アミド
実施例１０の手順に従って、手順中２−ナフトイルクロリドをベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボニルクロリドに置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝２１.２３分、ｍ／ｚ＝４８１.３。
【０１９７】
実施例２１
【化１３５】
0004497815.tif 000073
２−メチル−５−フェニル−フラン−３−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例１０の手順に従って、手順中２−ナフトイルクロリドを２−メチル−５−フェニル−フラン−３−カルボニルクロリドに置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝２２.０７分、ｍ／ｚ＝５０５.３。
【０１９８】
実施例２２
【化１３６】
0004497815.tif 000074
５−（４−クロロフェニル）−２−メチル−５−フラン−３−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例１０の手順に従って、手順中２−ナフトイルクロリドを２−メチル−５−（４−クロロフェニル）−フラン−３−カルボニルクロリドに置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝２２.８１分、ｍ／ｚ＝５３９.３。
【０１９９】
実施例２３
【化１３７】
0004497815.tif 000075
フラン−２−カルボン酸｛４−［４−（６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−アミド
実施例１０の手順に従って、手順中２−ナフトイルクロリドをフラン−２−カルボニルクロリドに置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝１８.８６分、ｍ／ｚ＝４１５.３。
【０２００】
実施例２４
【化１３８】
0004497815.tif 000076
Ｎ−｛４−［４−（６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−［１,４］ジアゼパン−１−イル］−ブチル｝−３−フェニル−アクリルアミド
実施例１０の手順に従って、手順中２−ナフトイルクロリドをシンナモイルクロリドに置き換え、表題化合物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ５μ、ＲＰ−１８、２５０ｍｍ  ＣＨ3ＣＮ／水−勾配２０％→１００％（２５分）、流速：１.５ｍＬ／分）、ｔR＝２０.３４分、ｍ／ｚ＝４５１.３。
【０２０１】
実施例２５
【化１３９】
0004497815.tif 000077
４−［６−（トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チエン−１−ピペラジンブタンアミンジヒドロクロリド
【０２０２】
【化１４０】
0004497815.tif 000078
２５ａ：４−（６−トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル）−１−ピペラジンブチル−ニトリル（Ｚ）−２−ブテンジオエート
１−（６−トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル）−ピペラジン（実施例１ｂ）（１０.１ｇ、３５.３ｍｍｏｌ）、４−ブロモブチロニトリル（６.２５ｇ、４２.３ｍｍｏｌ）、無水炭酸カリウム（８.００ｇ、５７.９ｍｍｏｌ）および無水アセトニトリル（８０ｍＬ）の混合物を１８時間還流した。スラリーをろ過し、不溶物をジクロロメタンで洗浄し（２×１５０ｍＬ）、そしてろ液を真空下で濃縮した。残留物をジクロロメタン（１２５ｍＬ）中にとり、５％ＮａＯＨ水溶液（７５ｍＬ）、水（７５ｍＬ）および乾燥（Ｋ2ＣＯ3）で洗浄した。真空下で濃縮し、粗生成物をシリカゲル上でクロマトグラフにかけ（ＥｔＯＡｃ）、琥珀色の油状物１０.３ｇ（８２％）を得た。油状物のエタン酸溶液（１.２ｇ、３.４０ｍｍｏｌ）にマレイン酸（４００ｍｇ、３.４５ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を真空下で濃縮し、粘性物質を得た。粘性物質をＥｔＯＡｃで摩砕して固体を得た。固体をメタノール／ＥｔＯＡｃから再結晶化し白色結晶１.０１ｇを得た。ｍｐ１５８〜１５９℃。
分析：
Ｃ21Ｈ22Ｆ3Ｎ3Ｏ4Ｓの計算値：５３.７３％Ｃ  ４.７２％Ｈ  ８.９５％Ｎ
実測値：５３.５７％Ｃ  ４.６５％Ｈ  ８.８６％Ｎ
【０２０３】
２５ｂ：４−（６−トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チエン−１−ピペラジンブタンアミン−ジヒドロクロリド
無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ、７０ｍＬ）中の４−（６−トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル）−１−ピペラジンブチル−ニトリル（実施例２５ａの遊離塩基）（９.００ｇ、２５.５ｍｍｏｌ）の溶液を、無水ＴＨＦ（１２０ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ4（１.０６ｇ、２７.９ｍｍｏｌ）の攪拌し冷却（３℃）した懸濁液に、Ｎ2雰囲気下で滴下した。温度を５分間３℃に維持し、次に周囲温度で２１時間攪拌した。混合物を０℃に冷却し、そしてＨ2Ｏ（１ｍＬ）、１５％ＮａＯＨ水溶液（１ｍＬ）、およびＨ2Ｏ（３ｍＬ）で続けて処理した。室温で２０分後、混合物をろ過し、不溶物をジクロロメタンで洗浄し（２×５０ｍＬ）、そしてろ液を真空下で濃縮した。残留物をジクロロメタン（１５０ｍＬ）中にとり、５％ＮａＯＨ水溶液（７５ｍＬ）、Ｈ2Ｏ（７５ｍＬ）および乾燥（Ｋ2ＣＯ3）で洗浄した。溶媒を真空下で除去し、残留物をシリカゲル上のクロマトグラフィーで精製し（エタノール／ＮＨ4ＯＨ、９５：５）、表題化合物の遊離塩基５.３２ｇ（５８％）を得た。エタノール中の遊離塩基（６８９ｍｇ）の溶液に、溶液が酸性（ｐＨ２〜３）になるまで、ＨＣｌを添加した。真空下で濃縮して粘性物質とし、粘性物質をエタノールで摩砕して黄色がかった白色の固体を得た。固体をメタノール／ＣＨＣｌ3から再結晶化し白色粉末４８５ｍｇを得た。ｍｐ２５６〜２５８℃。
分析：
Ｃ17Ｈ22Ｆ3Ｎ3Ｓ・２ＨＣｌの計算値：４７.４５％Ｃ  ５.６２％Ｈ  ９.７６％Ｎ
実測値：４７.１０％Ｃ  ５.６７％Ｈ  ９.６２％Ｎ
【０２０４】
実施例２６
【化１４１】
0004497815.tif 000079
ビフェニル−４−カルボン酸｛４−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イル］−ブチル｝−アミド塩酸塩
２５０ｍＬ丸底フラスコに乾燥アンバーライトＩＲＡ−６８（５.０ｇ）を充填し、アルゴンでパージした。ＣＨＣｌ3（３０ｍＬ）中の４−［６−（トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チエン−１−ピペラジンブタンアミン（実施例２５ｂの遊離塩基）（１.０ｇ、２.８ｍｍｏｌ）の溶液、続いてＣＨＣｌ3（１５ｍＬ）中の４−ビフェニルカルボニルクロリド（８４９ｍｇ、３.９ｍｍｏｌ）を添加した。さらにＣＨＣｌ3（２０ｍＬ）を加え、アルゴン下で２時間振とうした。ポリマー支持トリス（２−アミノエチル）アミン（５００ｍｇ）を添加して１.５時間振とうし、Ｈ2Ｏ（４ｍＬ）を加えてさらに１時間振とうした。樹脂をろ過して除去し、ろ過ケーキをＣＨＣｌ3で洗浄した。ろ液を濃縮し黄色がかった白色の固体１.５ｇを得た。固体をシリカゲル４０ｇ上でクロマトグラフにかけた（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ、９７：３）。適した画分を濃縮し、白色の固体として生成物８６０ｍｇを得た。化合物を熱い無水エタノールに溶解し、ろ過し、溶液が酸性になるまでエーテル含有ＨＣｌを加えた。溶液を濃縮して約２０ｍＬの容量にし、２、３個の種結晶を加え、溶液を周囲温度に１８時間おいた。得られた沈殿物を集め、所望の生成物７２５ｍｇ（４５％）を白色固体として得た。ｍｐ２５８〜２６１℃。
分析：
Ｃ30Ｈ30Ｆ3Ｎ3ＯＳ・ＨＣｌの計算値：６２.７６％Ｃ  ５.４４％Ｈ  ７.３２％Ｎ
実測値：６２.６９％Ｃ  ５.５４％Ｈ  ７.２８％Ｎ
【０２０５】
実施例２７
【化１４２】
0004497815.tif 000080
４−エトキシ−Ｎ−｛４−［−（６−トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル］−ブチル｝−ベンズアミド塩酸塩
ＣＨＣｌ3（１５ｍＬ）中の４−エトキシベンゾイルクロリド（０.７２３ｇ、３.９ｍｍｏｌ）を、ＣＨＣｌ3中の４−［６−（トリフルオロメチル）−ベンゾ［ｂ］チエン−１−ピペラジン−ブタンアミン（実施例２５ｂの遊離塩基）（１.０ｇ、２.８ｍｍｏｌ）および無水アンバーライトＩＲＡ−６８（５.０ｇ）の混合物に加えた。さらにＣＨＣｌ3（１５ｍＬ）を添加し、アルゴン下、周囲温度で２時間振とうした。ポリマー支持トリス（２−アミノエチル）アミン（５００ｍｇ）を添加して１.５時間振とうし、Ｈ2Ｏ（１ｍＬ）を加えてさらに１時間振とうし、ろ過した。ろ過ケーキをＣＨＣｌ3で完全に洗浄し、濃縮して、１.４ｇの白色固体にした、ＬＣ／ＭＳ、ｍ／ｚ＝５０６、(Ｍ＋Ｈ)+。固体をシリカゲル上でクロマトグラフにかけ（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ、２４：１）、表題化合物の遊離塩基０.８４ｇを得た。
上記固体を温かい無水エタノール（５０ｍＬ）に溶解し、ろ過し、溶液が酸性になるまでエーテル中の１Ｍ ＨＣｌを加えた。溶液を熱して還流させ、エタノール約１５ｍＬを除去し、溶液を冷やした。１８時間後生成物を集め、乾燥させて、白色固体として０.５９５ｇの塩酸塩を得た。ｍｐ２２８〜２３０℃。
分析
Ｃ26Ｈ30Ｆ3Ｎ3Ｏ2Ｓ・ＨＣｌの計算値：５７.６１％Ｃ  ５.７６％Ｈ  ７.７５％Ｎ
実測値：５７.８１％Ｃ  ５.８７％Ｈ  ７.６６％Ｎ
【０２０６】
実施例２８
【化１４３】
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１−（２,６−ジフルオロ−ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル）−ピペラジントリフルオロアセテート
【０２０７】
【化１４４】
0004497815.tif 000082
２８ａ：４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
ＣＨＣｌ3（１５ｍｌ）中のジ−ｔ−ブチルジカーボネート（５.１５ｇ、２３.６ｍｍｏｌ）の溶液を４５分かけて、ＣＨＣｌ3（５０ｍｌ）中の１−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン（米国特許５,１４３,９２３号に記載のとおり調製）（２.８ｇ、１１.８ｍｍｏｌ）、４−（ジメチル−アミノ）ピリジン（０.１６、１.３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４.３ｍｌ、３.２ｇ、２４.８ｍｍｏｌ）の−６５℃の溶液に滴下する。添加終了後、反応物を２０時間周囲温度で攪拌し、次に反応物を冷（５℃）５％水性ＮａＯＨ／ＥｔＯＡｃ（１５０／１５０ｍｌ）の混合物に注ぎ込む。生成物をＥｔＯＡｃに抽出し、抽出液を水、食塩水で洗浄し、濃縮して赤色油状物とする。粗製の油状物をシリカゲル上で精製（ＥｔＯＡｃ）し、赤色油状物３．６ｇを得る。ＬＣ／ＭＳ，ｍ／ｚ＝３３７(Ｍ＋Ｈ)+
【０２０８】
【化１４５】
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２８ｂ：４−（２−ブロモ−６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
ＣＨＣｌ3（３２.８ｍｌ）中の４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（実施例２８ａ）（１.００ｇ、２.９７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にＮ−ブロモスクシンイミド（０.５９ｇ、３.３ｍｍｏｌ）を添加し、３０分間還流する。室温に冷却し、濾過する。溶媒を蒸発させ、残留物をシリカゲル上のクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、９：１）で精製し、油状物０.５３ｇ（４３％）を得る。ＭＳ,ｍ／ｚ＝４１６(Ｍ＋Ｈ)+
別法として、ＣＣｌ4中の４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（実施例２８ａ）（２.２２６ｇ、６.６２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にＮ−ブロモスクシンイミド（１.３１９ｇ、６.６２ｍｍｏｌ）を添加し、２時間還流する。室温に冷却し、濾過する。溶媒を蒸発させ、残留物をシリカゲル上のクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、９：１）で精製し、油状物２.３４ｇ（９４％）を得る。
【０２０９】
【化１４６】
0004497815.tif 000084
２８ｃ：４−（２−フルオロ−６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
−６５℃の温度、窒素下で、無水ＴＨＦ（２４７ｍｌ）中の４−（２−ブロモ−６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（実施例２８ｂ）（１５.５９ｇ、３７.５５ｍｍｏｌ）の溶液を攪拌し、そして、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウム（２.５Ｍ、１９.５３ｍｌ、４８.８２ｍｍｏｌ）を滴下する。３０分攪拌し、次に、無水ＴＨＦ中のＮ−フルオロベンゼンスルホンイミド（１７.７６ｇ、５６.３３ｍｍｏｌ）を滴下する。周囲温度で一夜攪拌し、反応物を０℃に冷却し、飽和ＮａＣｌ溶液、次に水を添加する。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出し、抽出液を合わせ、水および食塩水で洗浄する。抽出液を乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濃縮して油状物１１.０ｇを得る。油状物をシリカゲル上のクロマトグラフィー（エーテル／石油エーテル、９：１）に付し、赤色油状物６.２８ｇ（５２％）を得る。ＭＳ，ｍ／ｚ，３５４(Ｍ＋Ｈ)+
【０２１０】
２８ｄ：１−（２,６−ジフルオロ−ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル）−ピペラジントリフルオロアセテート
トリフルオロ酢酸（２.２ｍｌ）中の４−（２−フルオロ−６−フルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（実施例２８ｃ）（２５０ｍｇ、０.７０ｍｍｏｌ）の溶液を３０分間周囲温度で攪拌する。トリフルオロ酢酸を蒸発させ、残留物をエーテルで処理する。懸濁液を周囲温度で２時間攪拌し、得られた白色固体を濾過してトリフルオロ酢酸塩１９１ｍｇ（５６％）を得る。ＭＳ，ｍ／ｚ＝２５５(Ｍ＋Ｈ)+
【０２１１】
実施例２９
【化１４７】
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４−［６−（２,６−ジフルオロ−ベンゾ［ｂ］チエン−１−ピペラジンブタンアミド
【化１４８】
0004497815.tif 000086
２９ａ：２−［４−［４−（６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）ピペラジン−１−イル］ブチリソインドール−１,３−ジオン
１−（２,６−ジフルオロ−ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル）−ピペラジン（実施例２８ｄの遊離塩）（１.４８ｇ、５.８ｍｍｏｌ）、ブロモブチルフタルイミド（１.６５ｇ、５.８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１.２ｍＬ）およびアセトニトリル（２５ｍＬ）の混合物を、アルゴン下で４時間、攪拌し還流した。反応物を冷却し、そしてジクロロメタンで希釈した。有機溶液を水、飽和Ｋ2ＣＯ3溶液で洗浄し、乾燥した（Ｋ2ＣＯ3）。溶媒を濃縮し、固体２.５５ｇを得た。固体をシリカゲル上でクロマトグラフにかけ（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ、４９：１）、固体２.１ｇを得た。ｍｐ１２３〜１２５℃；ＭＳ，ｍ／ｚ＝４５６(Ｍ＋Ｈ)+。
【０２１２】
２９ｂ：４−［６−（２,６−ジフルオロ−ベンゾ［ｂ］チエン−１−ピペラジンブタンアミン
無水エタノール（３０ｍＬ）中の２−［４−［４−（６−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）ピペラジン−１−イル］ブチリソインドール−１,３−ジオン（実施例２９ａ）（２.０５ｇ、４.５ｍｍｏｌ）の懸濁液をアルゴン下で攪拌し、ヒドラジン（０.５ｍＬ、１５.９ｍｍｏｌ）を添加した。２.５時間還流し、周囲温度まで冷やした。反応物を氷浴中で冷却し、１Ｍ ＨＣｌを加えてｐＨ約１にした。混合物をろ過し、ろ液を氷浴中で冷却し、５０％のＮａＯＨ水溶液を加えて塩基性にした。水性混合物をジクロロメタンで抽出し、抽出物をＨ2Ｏで洗浄し、Ｋ2ＣＯ3で乾燥して濃縮し、１.４ｇの油状物（放置により結晶化した）を得た。ＬＣ／ＭＳ、ｍ／ｚ＝３２６(Ｍ＋Ｈ)+。
【０２１３】
実施例３０
【化１４９】
0004497815.tif 000087
４−トリフルオロ−Ｎ−｛４−［−（２,６−ジフルオロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル］−ブチル｝−ベンズアミド塩酸塩
ＣＨＣｌ3（１〜２ｍＬ）中の４−（トリフルオロメチル）ベンゾイルクロリド（９０.５ｍｇ、０.４３ｍｍｏｌ）の溶液を、ＣＨＣｌ3（３.５ｍＬ）中の無水アンバーライトＩＲＡ−６８（０.５ｇ）および４−［６−（２,６−ジフルオロ−ベンゾ［ｂ］チエン−１−ピペラジンブタンアミン（実施例２９ｂ）（１００ｍｇ、０.３１ｍｍｏｌ）の混合物に加えた。反応混合物を５時間振とうし、そしてポリマー支持トリス（２−アミノエチル）アミン（１２０ｍｇ）を添加した。反応物の振とうを１８時間続けた後、ろ過した。フィルターケーキをＣＨＣｌ3でよくリンスし、ろ液を濃縮して、固体１３５ｍｇを得た。ＬＣ／ＭＳ（Ｙｍｃ００５−ＡＱ、４×５ｍｍ；水／ＣＨ3ＣＮ／酢酸、９４.５：５.０：０.５、１００％で１分間、そして水／ＣＨ3ＣＮ／酢酸、５.０：９４.５：０.５へ直線勾配→１００％（２分、４分間保持）、流速：１.０ｍＬ／分）、ｔR＝分、ｍ／ｚ＝４９８(Ｍ＋Ｈ)+。
【０２１４】
以下に記載するＨＰＬＣ条件を実施例３１〜３３で参照する。
ＨＰＬＣ条件Ｉ：
Ａ）９５／５／０.１％  水／アセトニトリル／ギ酸
Ｂ）５／９５／０.１％  水／アセトニトリル／ギ酸
カラム：ＹＭＣ  ＯＤＳ−Ａ  ４×５０ｍｍ、流速：２ｍＬ／分
初期ＨＰＬＣ条件は１００％（Ａ）を流速２ｍＬ／分で用いた。初期注入後、２分の時点でＨＰＬＣ条件が１００％Ｂとなる直線勾配とした。次にこれらの条件を３.４分維持し、その後、系を初期条件に戻し、次の分析のために平衡化した。
ＨＰＬＣ条件II：
Ａ）９５／５／０.１％  水／アセトニトリル／ギ酸
Ｂ）５／９５／０.１％  水／アセトニトリル／ギ酸
カラム：ＹＭＣ  ＯＤＳ−Ａ  ２×５０ｍｍ、流速：１ｍＬ／分
初期ＨＰＬＣ条件は１００％（Ａ）を流速１ｍＬ／分で用いた。初期注入後、２分の時点でＨＰＬＣ条件が１００％Ｂとなる直線勾配とした。次にこれらの条件を３.５分維持し、その後、系を初期条件に戻し、次の分析のために平衡化した。
【０２１５】
実施例３１
【化１５０】
0004497815.tif 000088
４−［４−（６−メチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−イル］−ブチルアミン
３１ａ：４−［１−（３−ブロモ−４−メチル−チオフェン−２−イル）−メタノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルの調製
【０２１６】
【化１５１】
0004497815.tif 000089
不活性条件下、リチウムジイソプロピルアミドの２.０Ｍ溶液（テトラヒドロフラン／ｎ−ヘプタン中）（２９.６５ｍｍｏｌ、１４.８３ｍｌ、１.０５当量）を乾燥テトラヒドロフラン（２７.３３ｍｌ）中の３−ブロモ−４−メチルチオフェン（２８.２４ｍｍｏｌ、５.００ｇ、１.００当量）の冷溶液（−７８℃）に添加する。１時間−７８℃で攪拌した後、４−（メトキシ−メチル−カルバモイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（２８.２４ｍｍｏｌ、７.６９ｇ、１.００当量）の溶液を滴下する。３時間−７８℃で攪拌し続ける。飽和塩化アンモニウム（水性、５５ｍｌ）で反応混合物をクエンチングし、室温に戻す。反応混合物を酢酸エチル：ジエチルエーテルの混合物（１：１、３回、４０ｍｌ）で抽出する。抽出液を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させる。残留物をｎ−ヘプタン：酢酸エチル混合物（４：１）を溶出剤とするフラッシュクロマトグラフィーで精製し、黄色の結晶性固体（９.８４ｇ）を得る。ＭＳ（ＣＩ、メタン）ｍ／ｅ３８８(ＭＨ+)，ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ）、ｍ／ｅ２８８（Ｍ−１００），保持時間２分４３秒、条件Ｉ。
【０２１７】
３１ｂ：４−［１−（３−ブロモ−４−メチル−チオフェン−２−イル）−１−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルの調製
【化１５２】
0004497815.tif 000090
ピリジン（４７.５ｍｌ）中の４−［１−（３−ブロモ−４−メチル−チオフェン−２−イル）−メタノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（２５.５４ｍｏｌ、９.８４ｇ、１.００当量）の攪拌溶液に水酸化アンモニウム塩酸塩（５０.６８ｍｍｏｌ、３.５２ｇ、２.００当量）を添加する。室温で一夜、７０℃で４時間攪拌する。反応混合物を冷却し、塩酸（３Ｍ溶液、１１５ｍｌ）を添加する。反応混合物をジクロロメタン（１１５ｍｌ）で抽出し、有機相を濾過し、水（１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し蒸発させる。得られた残留物をトルエンから再結晶させ、白色固体（４.８４ｇ）を得る。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ）、ｍ／ｅ４０３（ＭＨ+），保持時間２分３２秒、条件Ｉ。
【０２１８】
３１ｃ：４−（６−メチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルの調製
【化１５３】
0004497815.tif 000091
炭酸セシウム（３.７２ｍｍｏｌ、１.２１ｇ、１.５０当量）およびヨウ化銅（０.２５ｍｍｏｌ、４７ｍｇ、０.１０当量）を、２−メトキシエタノール（２５ｍｌ）中の４−［１−（３−ブロモ−４−メチル−チオフェン−２−イル）−１−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（２.４８ｍｍｏｌ、１.００ｇ、１.００当量）の攪拌溶液に添加する。得られた混合物を室温で一夜攪拌し、濾過して無機物を除去する。濾液を濃縮し、得られた油状物を酢酸エチル（７５ｍｌ）と水（２５ｍｌ）との間に分配する。水相を酢酸エチル（２×７５ｍｌ）で抽出し、合わせた有機相を塩化ナトリウム飽和溶液（水性、２５ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させる。残留物をｎ−ヘプタン：酢酸エチル（４：１）を溶出剤とするフラッシュクロマトグラフィーで精製し、白色固体（５８８ｍｇ）を得る。ＭＳ（ＣＩ，メタン）、ｍ／ｅ３２３（ＭＨ+）、ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ３４５（ＭＮａ+）、保持時間２.０５分、条件II。
【０２１９】
３１ｄ：６−メチル−３−ピペリジン−４−イル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール塩酸塩の調製
【化１５４】
0004497815.tif 000092
塩酸（４８.７５ｍｌ、ジエチルエーテル中１Ｍ溶液）およびメタノール（２.００ｍｌ）中の４−（６−メチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（８.８４ｍｍｏｌ、２.８５ｇ、１.００当量）の溶液を３.５時間室温で攪拌する。懸濁液を濾過し、白色固体を収集し、乾燥して所望の生成物（６５９ｍｇ）を得る。母液を一夜エージングさせ、濾過し、白色固体を収集し、乾燥して更に所望の生成物（１.２５２ｇ）を得る。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ２２３（ＭＨ+）、保持時間１.１４分、条件II。
【０２２０】
３１ｅ：４−［４−（６−メチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−イル］−ブチロニトリルの調製
【化１５５】
0004497815.tif 000093
アセトニトリル（１０.８４ｍＬ）および水（３.６０ｍＬ）に溶解した６−メチル−３−ピペリジン−４−イル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール塩酸塩（７.３８ｍｍｏｌ、１.９１ｇ、１.００当量）の攪拌溶液に、炭酸カリウム（１７.７２ｍｍｏｌ、２.４５ｇ、２.４０当量）、ヨウ化カリウム（０.７３ｍｍｏｌ、１２３ｍｇ、０.１０当量）、および４−ブロモブチロニトリル（８.８６ｍｍｏｌ、０.８８ｍＬ、１.２０当量）を添加した。得られた混合物を一昼夜、還流下で攪拌した。室温に冷やし、反応混合物をろ過して、集めた固体物質をジクロロメタンで洗浄し、ろ液を濃縮した。残留物をジクロロメタン（４５ｍＬ）中にとり、水酸化ナトリウム（水溶液、１８ｍＬ、２Ｍ）、水（１８ｍＬ）、飽和水酸化ナトリウム（水溶液、１８ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過して濃縮した。残留物を、ｎ−ヘプタン：酢酸エチル（０.５：９.５）の混合物から酢酸エチル（１００％）への勾配および溶出によりフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、所望生成物を茶色の油状物として得た（６６３ｍｇ）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ２９０（ＭＨ+）、保持時間１.１９分、条件II。
【０２２１】
３１ｆ：４−［４−（６−メチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−イル］ブチルアミンの調製
【化１５６】
0004497815.tif 000094
テトラヒドロフラン（乾燥、１２.８６ｍＬ）中の４−［４−（６−メチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−イル］ブチロニトリル（２.２８ｍｍｏｌ、６６０ｍｇ、１.００当量）に、不活性条件下で、水素化リチウムアルミニウム（３.４２ｍｍｏｌ、３.４２ｍＬ、１.５０当量、テトラヒドロフラン中の１.０Ｍ溶液）を添加した。得られた溶液を室温で２.５時間攪拌した。反応混合物に、水（０.１６ｍＬ）、水酸化ナトリウム（水溶液、０.１６ｍＬ、２Ｍ溶液）、そして水（０.５ｍＬ）を加えて反応を停止した。得られた懸濁液を、ジクロロメタン（１６ｍＬ）希釈し、３０分間勢いよく攪拌した。得られた混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のベッドを通してろ過して硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した後濃縮し、所望生成物を茶色の油状物として得た（４５７ｍｇ）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ２９４（ＭＨ+）、保持時間０.５６分、条件II。
【０２２２】
実施例３２
【化１５７】
0004497815.tif 000095
４−（５−メチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸
【０２２３】
３２ａ：４−［１−（３−ブロモ−５−メチル−チオフェン−２−イル）−メタノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルの調製
【化１５８】
0004497815.tif 000096
出発物質として２−ブロモ−５−メチルチオフェンを用いる以外は２２１１−１９５と本質的に同様にして調製する。更に、リチウムジイソプロピルアミド１.２０当量および４−（メトキシ−メチル−カルバモイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル１.２４当量を反応に用いる。従って、反応混合物の攪拌時間は変化する。フラッシュクロマトグラフィーによる残留物の精製では酢酸エチル：ｎ−ヘプタン（１：９）〜酢酸エチル：ｎ−ヘプタン（２：８）の混合物による勾配溶出を用い、黄色油状物を得る。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ３３２（Ｍ−５６）および３８８（ＭＨ+）、保持時間２.１５分、条件II。
【０２２４】
３２ｂ：４−［１−（３−ブロモ−５−メチル−チオフェン−２−イル）−１−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルの調製
【化１５９】
0004497815.tif 000097
出発物質として４−［１−（３−ブロモ−５−メチル−チオフェン−２−イル）−メタノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルを用い、そして、反応物を６時間７０℃で攪拌する以外は２２１１−１９６と本質的に同様にして調製する。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ３４７（Ｍ−５６）および４０３（ＭＨ+）、保持時間２.０３分、条件II。
【０２２５】
３２ｃ：４−（５−メチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸の調製
【化１６０】
0004497815.tif 000098
出発物質として４−［１−（３−ブロモ−５−メチル−チオフェン−２−イル）−１−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルを用いる以外は本質的に２２１１−１９８と同様にして調製する。更に異なる点２つは、１）ヨウ化銅０.０５当量を使用し、２）酢酸エチルと水との間の分配とその後の酢酸エチルによる抽出を必要としないことである。フラッシュクロマトグラフィーによる残留物の精製を酢酸エチル：ｎ−ヘプタン（１：４）の混合物を用いて行ない、白色固体を得る。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ３４５（ＭＮａ+）、保持時間２.１２分、条件II。
【０２２６】
実施例３３
【化１６１】
0004497815.tif 000099
５−メトキシメチル−３−ピペリジン−４−イル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール塩酸塩
３３ａ：（４−ブロモ−チオフェン−２−イル）−メタノールの調製
【０２２７】
【化１６２】
0004497815.tif 000100
不活性条件下、無水エタノール（１６ｍｌ）中の水素化ホウ素ナトリウム（１３.８２ｍｍｏｌ、０.５２３ｇ、２.０８当量）の溶液を冷（０℃）無水エタノール（３２ｍｌ）中の４−ブロモチオフェン−２−カルボキシアルデヒド（２６.５８ｍｍｏｌ、５.０８ｇ、１.００当量）の攪拌混合物に１５分かけて滴下する。得られた混合物を２.５時間室温で攪拌し、発泡が停止するまで氷酢酸を滴下する。得られた溶液を蒸発させ、残留物をジエチルエーテル（７５ｍｌ）に溶解し、水（１５ｍｌ）および食塩水（１５ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥する。濾過して蒸発させ、無色の油状物（５.１３ｇ）として生成物を得る。
【０２２８】
３３ｂ：４−ブロモ−２−メトキシメチル−チオフェンの調製
【化１６３】
0004497815.tif 000101
テトラヒドロフラン（乾燥、２５ｍｌ）中にヨウ化メチル（１.６５ｍｌ、２６.５７ｍｍｏｌ、１.００当量）および（４−ブロモ−チオフェン−２−イル）−メタノール（５.１３ｇ、２６.５７ｍｍｏｌ、１.００当量）を含有する溶液に水素化ナトリウム（７３７ｍｇ、２９.２３ｍｍｏｌ、１.１０当量、９５％）を添加する。得られた混合物を室温で一夜攪拌し、蒸発させる。残留物を水（１００ｍｌ）とジクロロメタン（１００ｍｌ）との間に分配する。水相をジクロロメタン（１００ｍｌ）で抽出し、有機相を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させて黄色油状物として所望の生成物を得る。
【０２２９】
３３ｃ：４−［１−（３−ブロモ−５−メトキシメチル−チオフェン−２−イル）−メタノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルの調製
【化１６４】
0004497815.tif 000102
テトラヒドロフラン（乾燥、２４.３０ｍｌ）中の４−ブロモ−２−メトキシメチル−チオフェン（５.２０ｇ、２５.１１ｍｍｏｌ、１.００当量）の攪拌冷（−７８℃）溶液にリチウムジイソプロピルアミド（１３.２０ｍｌ、２６.３７ｍｍｏｌ、１.０５当量）を添加する。１時間−７８℃で攪拌し、テトラヒドロフラン（乾燥、１６.４０ｍｌ）中の４−（メトキシ−メチル−カルバモイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（６.８４ｇ、２５.１１ｍｍｏｌ、１.００当量）の溶液を滴下する。得られた溶液を３時間−７８℃で攪拌する。反応物を飽和塩化ナトリウム（水性、５０ｍｌ）でクエンチングする。得られた混合物を室温に戻し、酢酸エチル：ジエチルエーテルの混合物（１：１、３×３５ｍｌ）で抽出する。抽出液を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させる。ｎ−ヘプタン：酢酸エチル（４：１）を溶出剤とするフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製し、黄色油状物（９.４７ｇ）として所望の生成物を得る。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ３６２（Ｍ−５６）および４１８（ＭＨ+）、保持時間２.０８分、条件II。
【０２３０】
３３ｄ：４−［１−（３−ブロモ−５−メトキシメチル−チオフェン−２−イル）−１−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルの調製
【化１６５】
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ピリジン（４２.４０ｍｌ）中の４−［１−（３−ブロモ−５−メトキシメチル−チオフェン−２−イル）−メタノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（９.４７ｇ、２２.６４ｍｍｏｌ、１.００当量）の攪拌溶液に塩酸ヒドロキシルアミン（２.２９ｇ、４５.２７ｍｍｏｌ、２.００当量）を添加する。得られた溶液を一夜室温で、次に、４時間７０℃で攪拌する。反応物を僅かに冷却し、塩酸（３Ｎ、１００ｍｌ）を添加し、得られた混合物をジクロロメタン（１００ｍｌ）で抽出する。抽出液を水（１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させて黄色油状物（９.４８ｇ）として所望の生成物を得る。
【０２３１】
３３ｅ：４−（５−メトキシメチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステルの調製
【化１６６】
0004497815.tif 000104
２−メトキシエタノール（２３.３０ｍｌ）中の４−［１−（３−ブロモ−５−メトキシメチル−チオフェン−２−イル）−１−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１.００ｇ、２.３１ｍｍｏｌ、１.００当量）の攪拌溶液に炭酸セシウム（１.１３ｇ、３.４６ｍｍｏｌ、１.５０当量）およびヨウ化銅（４４ｍｇ、０.２３ｍｍｏｌ、０.１０当量）を添加する。得られた混合物を室温で一夜、または、３日まで攪拌し、セライトを通して濾過する。濾液を蒸発させ、残留物を酢酸エチル（７０ｍｌ）と水（２３ｍｌ）との間に分配し、分離する。水相を酢酸エチル（３×７０ｍｌ）で抽出し、有機相を合わせ、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させる。ヘキサン：酢酸エチルの混合物（４：１）を溶出剤とするフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製し、黄色油状物として所望の生成物を得る。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ３７５（ＭＮａ+）、保持時間１.９８分、条件II。
【０２３２】
３３ｆ：５−メトキシメチル−３−ピペリジン−４−イル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール塩酸塩の調製
【化１６７】
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４−（５−メトキシメチル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（２.２１ｇ、６.６８ｍｍｏｌ、１.００当量）および塩酸（ジエチルエーテル中１.０Ｍ、３５ｍｌ）の溶液を一夜攪拌して懸濁液を形成する。更に塩酸（ジエチルエーテル中１.０Ｍ、１０ｍｌ）を添加する。懸濁液を一夜攪拌し、濾過し、固体をエーテルで洗浄する。固体を収集し、乾燥し、暗青色固体として所望の生成物を得る。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｅ２５３（ＭＨ+）、保持時間１.１７分、条件II。
【０２３３】
実施例３４
【化１６８】
0004497815.tif 000106
概略：ガスクロマトグラフィー／質量分析はＨＰ  Ｍｏｄｅｌ  ５９７２システムを用いて以下の条件で実行した。：０.２５ｍｍ×３０ｍ、ＨＰ  ５ＭＳカラム、架橋した５％Ｐｈ  Ｍｅシリコン、フィルムの厚さ０.２５μ；インジェクター２５０℃；検出器２８０℃；５０℃で１分間、ランプで３００℃まで２０℃／分、３００℃で５分から１０分。質量スペクトルをＦｉｎｎｉｇａｎ  ＴＳＱ  ７００分光計で得た。
【０２３４】
２−カルボメトキシ−３−アミノ−６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン（Ｖ−２）：
機械式攪拌機、窒素バブラー、および熱電対プローブを備えた２２Ｌの三口丸底フラスコに、２−ニトロ−４−トリフルオロメチルベンゾニトリル１.２０ｋｇ（５.５５モル）、チオグリコール酸メチル５８９.３ｇ（４９６ｍＬ、５.５５モル）およびＮＭＰ４.３Ｌを入れた。得られた黄色の溶液を２℃まで冷却した後、水３.３６Ｌ中に水酸化リチウム一水和物４６６.０ｇ（１１.１１モル、２.０当量）を溶解して調製した溶液を７８分かけてゆっくりと添加した（この間、温度は２〜２０℃に維持した）。
茶色のスラリーを２時間かけて２１℃まで温め、次に水８.０Ｌ（Ｔexo−＞２７℃）で希釈した。４０分間攪拌した後１８℃に冷却し、生成物をろ過により集め、水１０Ｌでリンスし、そして周囲温度で空気乾燥して、２−カルボメトキシ−３−アミノ−６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン１.２９５ｋｇ（収率８４.７％）を淡黄色固体として得た。
【０２３５】
３−ピペラジニル−６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン塩酸塩（Ｖ−３ａ）：
機械式攪拌機、窒素バブラー、および熱電対プローブを備えた１２Ｌの三口丸底フラスコに、２−カルボメトキシ−３−アミノ−６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン（Ｖ−２）１.１４ｋｇ（４.１４モル）、ピペラジン１９６.０ｇ（２.２８モル、０.５５当量）、ＮＭＰ４.０Ｌおよびキシレン５７０ｍＬを入れた。溶液を加熱し、１７０〜１８０℃で４時間保持した。茶色の溶液を１６８℃に冷やし、そしてピペラジン１.６０５ｋｇ（１８.６３モル、４.５当量）（Ｔ−＞１０９℃）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物１.５７５ｋｇ（２８.２８モル、２.０当量）（観察外部温度、１０９―＞１３０℃）を添加した。Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップをコンデンサーに連結し、反応物を過熱して共沸性化合物を集めた。水性蒸留液計４１０ｍＬを除去し、ポットの温度を１４５℃から１６５℃まで上昇させた。約１６５℃で１４時間後、反応物を３０〜３５℃まで冷やし、次に、氷５ｋｇ、水１２Ｌおよびトルエン８.５Ｌを含む抽出機中で反応を停止した。相を分離した。有機抽出物を、０.５Ｎ  ＮａＯＨ  １１Ｌ、続いて飽和ＮａＣｌ水溶液２Ｌで洗浄し、次に１Ｎ  ＨＣｌ  ８Ｌで抽出した。酸性の水性抽出物を氷１ｋｇで希釈し、そして５０％ＮａＯＨ、６２４ｇを添加して、ｐＨ１１.２の塩基性にした。得られた混合物をトルエン９.５Ｌで抽出した。トルエン抽出物を飽和ＮａＣｌ水溶液２Ｌで洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、ろ過した。ろ液を２２Ｌの三口丸底フラスコ（Ｎ2、機械式攪拌機、ＴＣプローブ）に入れた。混合物がコンゴレッド指示用紙に陽性になるまで、エーテル含有１Ｎ  ＨＣｌ計３.７Ｌを２０〜２７℃で添加した。ＨＣｌの添加の際、計２.５Ｌのトルエンも加え、得られる粘度の高いスラリーの攪拌を良くする。周囲温度で４０分間攪拌した後、スラリーをろ過し、４.５Ｌのトルエンで洗浄する。空気乾燥後、１.１６５ｋｇの３−ピペラジニル−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン塩酸塩（Ｖ−３ａ）が淡いピンクベージュの固体として得られた（収率８７.１％）。
【０２３６】
Ｎ−（４−ヒドロキシブチル）−４−エトキシベンズアミド（Ｖ−５）：
機械式攪拌機、窒素バブラー、および熱電対プローブを備えた２２Ｌの三口丸底フラスコに、４−エトキシ安息香酸１.１６ｋｇおよびＴＨＦ１１Ｌを入れた。計１.４０３ｋｇの１,１’−カルボニルジイミダゾール（８.６５モル、１.２４当量）を周囲温度で（ＣＯ2値制御のため）４回に分けて添加し、活性酸への９８％の変換を達成した。黄色の溶液を−５℃まで冷却した後、ＴＨＦ０.５Ｌに４−アミノ−１−ブタノール６８４.５ｇ（７.６８モル、１.１０当量）を溶解して調製した溶液を５０分かけて添加した、この間温度を−７から−３℃に維持した。粘着性の混合物を室温まで温め、一昼夜攪拌した。淡黄色の溶液をオレンジ色の油状物３.２２ｋｇに濃縮し（４５℃、５０ｍｂａｒ）、これを１０％ＨＣｌ５.７ｋｇおよびＤＣＭ６Ｌと共に抽出機に充填した。水性の相をＤＣＭ３Ｌで抽出した。ＤＣＭ抽出物を合わせ、５Ｌの０.５Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、５ＬのＮａＨＣＯ3飽和水溶液で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、ろ過し、濃縮し（４５℃、２５ｍｂａｒ）、そして風乾して粗生成物１.５２ｋｇを白色固体として得た（９１.９％）。不純物は鹸化により除去した。機械式攪拌機、窒素バブラー、および熱電対プローブを備えた１２Ｌの三口丸底フラスコに、粗生成物１.５２ｋｇ、ＩＰＡ５.５Ｌおよび５０％ＮａＯＨ１５６.５ｇを入れた。混合物を３０分間５５〜７８℃に加熱した。３７℃に冷やした後、濁った溶液を水７.８ＬおよびＤＣＭ１７Ｌと共に抽出機に充填した。相を分離し、水相をＤＣＭ６Ｌで抽出した。有機相を合わせ、７.８Ｌの水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、ろ過し、濃縮し（５０℃、２５ｍｂａｒ）、そして風乾してＮ−（４−ヒドロキシブチル）−４−エトキシベンズアミド（Ｖ−５）１.４５３ｋｇをごつごつした白色固体として得た（８７.７％）。
【０２３７】
Ｎ−（４−ヒドロキシブチル）−４−エトキシベンズアミドメタンスルホン酸塩（Ｖ−６）：
機械式攪拌機、窒素バブラー、および熱電対プローブを備えた２２Ｌの三口丸底フラスコに、Ｎ−（４−ヒドロキシブチル）−４−エトキシベンズアミド（Ｖ−５）２.００ｋｇ（８.４３モル）、ジイソプロピルエチルアミン２.９４Ｌ（２.１８ｋｇ、１６.８５モル、２.００当量）およびＤＣＭ１１Ｌを入れた。白色のスラリーを６℃まで冷却し、メタンスルホニルクロリド７１８ｍＬ（１.０６２ｋｇ、９.２７モル、１.１０当量）を１.５時間かけて添加した、この間冷却してポットの温度を５〜１２℃に維持した。５〜１０℃で１０分間攪拌した後、淡い茶色の溶液を１４Ｌの１Ｎ  ＨＣｌを含む抽出機に入れて冷却した。相を分離した。有機抽出物を１４Ｌの１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、９ＬのＮａＨＣＯ3飽和水溶液で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、ろ過し、そして濃縮（３０℃、５０ｍｂａｒ）して風乾し、Ｎ−（４−ヒドロキシブチル）−４−エトキシベンズアミドメタンスルホン酸塩（Ｖ−６）２.６５ｋｇを淡いベージュの固体として得た（９９.７％）。
【０２３８】
Ｎ−［４−［４−（６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チエニル−３−イル）−１−ピペラジニル］ブチル］−４−エトキシベンズアミド（Ｖ−７、遊離塩基）：
機械式攪拌機、窒素バブラー、および熱電対プローブを備えた２２Ｌの三口丸底フラスコに、１.５００ｋｇ（４.６５モル）のＶ−３ａ、１.５０２ｋｇ（４.７６モル、１.０２５当量）のＮ−（４−ヒドロキシブチル）−４−エトキシベンズアミドメタンスルホン酸塩（Ｖ−６）、９ＬのＴＨＦ、３.１８Ｌの水、および１.２８ｋｇのＫ2ＣＯ3（９.２９モル、２.００当量）を入れた。二相の溶液を１８時間加熱還流し（６４℃）、そして室温まで冷やした。得られた粘度の高いスラリーを濃縮（４０℃、５０〜７５ｍｂａｒ）してＴＨＦ除去し、水１４Ｌで希釈して周囲温度で４時間攪拌し、ろ過し、水でリンスし、そして風乾して粗生成物２.３３ｋｇを得た（９９.３％）。この粗生成物を１２に分けてｎ−ＢｕＯＡｃから再結晶し（約１１５℃で溶解し、１２２℃まで加熱し、１００℃で再結晶し、０〜５℃で約３０分間寝かす）、そして風乾してＮ−［４−［４−（６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チエニル−３−イル）−１−ピペラジニル］ブチル］−４−エトキシベンズアミド（Ｖ−７、遊離塩基）２.０９ｋｇを白色のふわふわした固体として得た（８９.７％）。
【０２３９】
Ｎ−［４−［４−（６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チエニル−３−イル）−１−ピペラジニル］ブチル］−４−エトキシベンズアミドモノエタンスルホン酸（Ｖ−７）：
機械式攪拌機、窒素バブラー、および熱電対プローブを備えた２２Ｌの三口丸底フラスコに、１.９０３ｋｇ（３.７６４モル）のＶ−７の遊離塩基、および１２.２ＬのＴＨＦを入れた。白色のスラリーを３２℃まで温めた。ＴＨＦ１.８Ｌ中のメタンスルホン酸３６５.３ｇ（３.７０７、０.９８５当量）の溶液を一度に加えた。発熱が観測され（Ｔ−＞４０℃）、添加の最後に混合物は均質になった。２分後、沈殿が始まった。２０℃に冷却して３０分間攪拌した後、生成物をろ過により集め、ＴＨＦ２Ｌでリンスし、そして風乾してＮ−［４−［４−（６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チエニル−３−イル）−１−ピペラジニル］ブチル］−４−エトキシベンズアミドモノエタンスルホン酸（Ｖ−７）２.１６ｋｇを白色のふわふわした粉末として得た（９５.６％）。
【０２４０】
実施例３５
スキームＶＩ
【化１６９】
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一般的操作：シリカゲル６０Ｆ254（０.２５ｍｍ）を担持したＥ．ＭｅｒｃｋＴＬＣプレート上で分析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を行なった。放射性試料の分析に使用したＴＬＣプレートをＰ−１０ガス（１０％メタン、９０％アルゴン）を用いてＢＩＯＳＣＡＮシステム２０００イメージングスキャナ上で走査した。中間体の同定は未標識類縁体の標準試料を用いて放射性ＴＬＣおよび／または放射性ＨＰＬＣにおいて同時移行させることにより行なった。粒径４０〜６３μｍのシリカゲルを用いてフラッシュクロマトグラフィーを行なった。比放射能はＰａｃｋａｒｄ  Ｍｉｎａｘｉ  Ｔｒｉ−Ｃａｒｂ液体シンチレーション分析器（１６００ＴＲ型）上で、シンチレーションカクテルとしてＢｉｏ−Ｓａｆｅ IIを用いながら測定した。
化合物VI−２、VI−３、VI−４、VI−５およびVI−６の精製はＨＰＬＣ（条件：Ａ）でモニタリングし、これはＷａｔｅｒｓ  ６００コントローラー、Ｗａｔｅｒｓ  ９９６光ダイオードアレー検出器、ＭｉｌｌｅｎｉｕｍクロマトグラフィーマネージャーおよびＢｅｔａ−Ｒａｍ放射能フロースルーモニターシステム、２型（ＩＮ／ＵＳ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．）上で行なった。ＨＰＬＣ（条件：Ｂ）によるVI−７の最終純度の測定はＷａｔｅｒｓ  ５１０型ポンプ、Ｗａｔｅｒｓ  ６８０勾配コントローラー、Ｗａｔｅｒｓ  ７１５  Ｕｌｔｒａ  Ｗｉｓｐオートサンプラー、Ｗａｔｅｒｓ  ４８４ターナブル吸光度検出器およびＢｅｔａ−Ｒａｍ放射能フロースルーモニターシステム、２型（ＩＮ／ＵＳ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．）上で行なった。
【０２４１】
条件Ａ：ＹＭＣ  Ｂａｓｉｃ５μｍ、Ｃ１８、４.６×２５０ｍｍ、移動相Ａ：（ｖ／ｖ）５０／５０アセトニトリル／０.１Ｎギ酸アンモニウム、移動相Ｂ：（ｖ／ｖ）７５／２５アセトニトリル／０.１Ｎギ酸アンモニウム、流速１.０ｍＬ／分、２５４ｎｍでｕｖ検出
0004497815.tif 000108
【０２４２】
条件Ｂ：Ｕｌｔｒｅｍｅｘ  ５μｍ、Ｃ８、４.６×１５０ｍｍ、移動相（ｖ／ｖ／ｖ）５０／５０／０.２５アセトニトリル／０.０５Ｍリン酸カリウム緩衝液ｐＨ３.０／トリエチルアミン、流速１.０ｍｌ／分、２１０ｎｍでＵＶ検出
【０２４３】
［14Ｃ］シアン化銅（Ｉ）（ＶＩ−１）：
水（１３.３ｍｌ）中の硫酸銅（II）５水和物（４.１６ｇ、１６.６７ｍｍｏｌ）の溶液を７０℃に加熱し、７０℃の水（３.３ｍｌ）中のメタ重亜硫酸ナトリウム（１.９４ｇ、６.２８ｍｍｏｌ）の溶液を１分で添加した。即座に７０℃の水（３.３ｍｌ）中の［14Ｃ］シアン化カリウム（２４５.５ｍｇ、２００ｍＣｉ、３.７７ｍｍｏｌ、Ｓ.Ａ. ５３.０ｍＣｉ／ｍｍｏｌ）および未標識シアン化カリウム（０.８４ｇ、１２.９ｍｍｏｌ）の溶液を１分で添加した。白色固体が溶液から沈殿し、溶液の青色が消失した。７０℃で１０分間攪拌した後、混合物を熱時濾過し、固体を熱水（１５ｍｌ）およびエタノール（１５ｍｌ）で洗浄した。白色固体を２７時間４５分間真空下（０.１ｍｍＨｇ）で乾燥して９３.３％収率でVI−１（１.３９３ｇ、１８６.６ｍＣｉ）を得た。
【０２４４】
２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）−［７−14Ｃ］ベンゾニトリル（ＶＩ−２）：
１−メチル−２−ピロリジノン（ＮＭＰ、１０ｍｌ）中の［14Ｃ］シアン化銅（Ｉ）（ＶＩ−１）（１.３９３ｇ、１５.５５ｍｍｏｌ、１８６.６ｍＣｉ）の懸濁液に４−ブロモ−３−ニトロベンゾトリフロリド（６.３３ｇ、２３.４５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１時間１９０〜１９５℃で加熱した。酢酸エチル（２５ｍｌ）および水（２０ｍｌ）を室温で添加し、混合物をセライトを通して濾過した。濾液に更に水（２０ｍｌ）および酢酸エチル（２５ｍｌ）を添加し、水相を酢酸エチル（９０ｍｌ）で抽出した。水（５０ｍｌ）中に塩化鉄（III）（７.４６８ｇ、４６.０４ｍｍｏｌ）を溶解することにより調製した塩化鉄（III）溶液（５０ｍｌ）で有機抽出液を洗浄した。有機抽出液を更に水（３０ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム（１５ｍｌ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、溶媒を真空下に除去した。
残留物をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、９／１〜７／３）により精製し、得られた油状物をヘキサン（７０ｍｌ）に溶解した。溶媒を減圧下で除去し、残留物を１５時間４０分真空下で乾燥し、黄色固体としてＶＩ−２（３.０１ｇ、１６７.１３ｍＣｉ、８９.６％収率）を得た。放射性ＴＬＣ（ヘキサン／酢酸エチル、９／１）、Ｒf＝０.２１；ＨＰＬＣ（溶媒系Ａ）、ＲＣＰ９９.８６％（保持時間、９.２分）。
【０２４５】
［３−14Ｃ］−３−アミノ−２−カルボメトキシ−６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン（ＶＩ−３）：
ニトリル（ＶＩ−２）（３.０１ｇ、１３.９ｍｍｏｌ、１６７.１３ｍＣｉ）をＤＭＦ（１４ｍＬ）中に溶解し、メチルチオグリコレート（１.７８ｇ、１５.９４ｍｍｏｌ、９５％）を１分で添加した。混合物を０〜５℃に冷やし、水（９.２ｍｌ）中の水酸化リチウム（０.６８９ｇ、２８.７７ｍｍｏｌ）の溶液を１２分かけて滴下した。添加後、冷却槽をはずし、混合物を室温で４時間攪拌した。水（７０ｍｌ）を０〜５℃で加え、混合物を０〜５℃で１５分間攪拌した。固体を濾取し、水（２０ｍｌ）で洗浄し、真空下（０.１ｍｍＨｇ）で４０時間１５分間乾燥し、ＶＩ−３（３.４６９ｇ、１５１.２４ｍＣｉ、収率９０.４９％）を得た。放射性ＴＬＣ（ＣＨ2Ｃｌ2）、Ｒf＝０.３７２；ＨＰＬＣ（溶媒系Ａ）、ＲＣＰ９９.９２％（保持時間、１６.７２２分）。
【０２４６】
［３−14Ｃ］−３−アミノ−６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チオフェン（ＶＩ−４）：
ＮＭＰ（１４ｍＬ）中のベンゾ［ｂ］チオフェン（ＶＩ−３）（３.４６９ｇ、１２.６ｍｍｏｌ、１５１.２ｍＣｉ）の溶液に１−メチルピペラジン（６.６９ｇ、６６.７９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１４０〜１４５℃で５時間攪拌した。混合物を放置して室温に冷やし、水（６０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１４０ｍＬ）で抽出した。有機抽出液を水（３０ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、溶媒を真空下で除去した。残留物をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、１／１）により精製して緑がかった固体を得、これを真空下（０.１ｍｍＨｇ）で１４時間乾燥し、ＶＩ−４（６６ｇ、１４６.９５ｍＣｉ、収率９７.１６％）を得た。放射性ＴＬＣ（ヘキサン／酢酸エチル、１／５）、Ｒf＝０.４０７；ＨＰＬＣ（溶媒系Ａ）、ＲＣＰ９９.４４％（保持時間、１０.５５２分）。
【０２４７】
１−［６−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チエン−３−イル−［３−14Ｃ］ピペラジン（ＶＩ−５）：
ＮＭＰ（１７ｍＬ）中のベンゾ［ｂ］チオフェン（ＶＩ−４）（２.６６ｇ、１２.２４ｍｍｏｌ、１４６.９５ｍＣｉ）の溶液にピペラジン（４.３０９ｇ、５０.０２ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（４.７６ｇ、２５.０２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を２０時間２４分間１７０℃に加熱し、混合物を放置して室温に冷やし、水（６０ｍＬ）中の炭酸ナトリウム（４.７０ｇ、４４.３ｍｍｏｌ）の溶液に注いだ。混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、溶媒を真空下で除去した。残留物をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ、９／１／０.２）により精製し、生成物を真空下（０.１ｍｍＨｇ）で１１時間５０分間乾燥した。エタノール（無水、３０ｍＬ）を生成物に添加し、溶媒を減圧下で除去した。残留物を真空下（０.１ｍｍＨｇ）で２４時間５５分間乾燥し、ＶＩ−５（３.４４ｇ、１４４.１８ｍＣｉ、収率９８.１％）を油状物として得た。放射性ＴＬＣ（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ、９／１／０.２）、Ｒf＝０.４６；ＨＰＬＣ（溶媒系Ａ）、ＲＣＰ９９.８８％（保持時間、５.８０７分）。
【０２４８】
Ｎ−［４−［４−（６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チエン−３−イル）−［３−14Ｃ］−１−ピペラジニル］ブチル］−４−エトキシベンズアミド（ＶＩ−６）：
水（１０.５ｍＬ）および粉末炭酸カリウム（４.０７ｇ、２９.４５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（３５ｍＬ）中のベンゾ［ｂ］チオフェン（ＶＩ−５）（３.４４ｇ、１２.０１ｍｍｏｌ、１４４.１８ｍＣｉ）の溶液に添加した。炭酸カリウムが溶解するまで混合物を攪拌し、メシレート（ＶＩ−５ａ）（４.７ｇ、１４.９ｍｍｏｌ）を１０分で添加した。混合物を２１時間５０分加熱還流し、室温まで冷やし、そしてジクロロメタン（３００ｍＬ）および水（３５ｍＬ）に注いだ。水相をジクロロメタン（６０ｍＬ）で抽出した。有機相を水（６０ｍＬ）、飽和塩化ナトリウムｌ水溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、減圧下で（３５０ｍＬ）まで濃縮した。シリカゲル（３２ｇ）を加え、溶媒を真空で除去し、残留物を、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ、１０／０.５／０.２）で精製し、固体を得、これにエタノール（約１２５ＭＬ）を加え、溶媒を減圧下で除去した。白色固体（４.９８ｇ）を減圧下（０.１ｍｍＨｇ）で１３時間３５分乾燥し、酢酸エチル（２２５ｍＬ）中に還流下で溶解した。溶液を室温まで冷やし、０〜５℃で３時間維持した。結晶質の固体をろ過により集め、酢酸エチル（７０ｍＬ）で洗浄し、減圧下で３３時間乾燥してＶＩ−６（４.５ｇ、１０６.８ｍＣｉ、収率７４.１％）を得た。Ｒａｄｉｏ−ＴＬＣ（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ、１０／０.５／０.２）、Ｒf＝０.５９３；ＨＰＬＣ（システムＡ）、ＲＣＰ１００.０％（保持時間１６.３２４分）、ＨＰＬＣ（システムＢ）、ＲＣＰ９８.９２％（保持時間２７.８３８分）。
【０２４９】
Ｎ−［４−［４−（６−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チエン−３−イル−［３−14Ｃ］）−１−ピペラジニル］ブチル］−４−エトキシベンズアミドメタンスルホン酸塩（ＶＩ−７）：
ＴＨＦ（７０ｍＬ）中の遊離塩基（ＶＩ−６）（４.５０ｇ、８.９０ｍｍｏｌ、１０６.８ｍＣｉ）の懸濁液に、メタンスルホン酸（０.８４４ｇ、８.７８ｍｍｏｌ）を２分で加えた。固体を全て溶解し、無色澄明な溶液にした。５分の攪拌後、溶液から固体が出てきた。混合物を室温で４０分間攪拌した後、２４ｍＬの容量まで濃縮した。粘性の高いペーストにエーテル（１２０ｍＬ）を添加し、混合物を室温で３５分間攪拌した。ろ過して固体を集め、ＴＨＦ／エーテル（８／２、１５ｍＬ）で洗浄し、真空下（０.１ｍｍＨｇ）で１９時間２０分間乾燥して生成物（５.３５ｇ）を得た。この生成物をエタノール（無水）からの再結晶を２回行い、白色固体としてＶＩ−７（４.２２３ｇ、７７.２８１ｍＣｉ、収率７２.４％）を得た。Ｒａｄｉｏ−ＴＬＣ（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ、１０／０.５／０.２）、放射性ラベルされていないＶＩ−７のＲfに相当するシグナルピーク（Ｒf＝０.６０２）を示した。ＶＩ−７および放射性ラベルされていないＶＩ−７の1Ｈ、19ＦＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）のスペクトルは、重要な細目で一致し、構造が一致していた。
ＶＩ−７のＨＰＬＣ（Ｕｌｔｒｅｍｅｘ  ５μｍ、Ｃ８、４.６×１５０ｍｍ、移動性の相（ｖ／ｖ／ｖ）５０／５０／０.２５  アセトニトリル／０.０５Ｍ  リン酸カリウムバッファー、ｐＨ３.０／トリエチルアミン、流速１.０ｍＬ／分、２１０ｎｍでｕｖ検出）分析の結果、放射化学的純度１００％、化学的純度９９.９６％、保持時間８.９６分であった。
【０２５０】
比放射能
１２.６１ｍｇのＶＩ−７をバイアルに量り入れ、メタノールに溶解し、定量的に５０−ｍＬメスフラスコへ移し、容量までエタノールで希釈した。溶液を１００μＬに分注したもの６つを、Ｂｉｏ Ｓａｆｅ IITM液体シンチレーションカクテル中でカウントした。６試料の平均ｄｐｍ値は１,０２４,５６４ｄｐｍであり、１８.３Ｃｉ／ｍｇの比放射能だった（１１.０１ｍＣｉ／ｍｍｏｌ、６７７.１ＭＢｑ／ｇ）。
【０２５１】
実施例３６
【化１７０】
0004497815.tif 000109
ＢＯＣ保護ピペラジン−チエニルイソオキサゾールの合成
３−ブロモチオフェン−２−カルバルデヒドオキシム
エタノール（５０ｍｌ）中の３−ブロモチオフェン−２−カルバルデヒド（maybridge）（２８.７ｇ、０.１５ｍｏｌ）を、水（３０ｍｌ）およびエタノール（１００ｍｌ）中のヒドロキシアミン塩酸塩（１３.８ｇ、０.２モル）および水酸化ナトリウム（８ｇ、０.２モル）の溶液に一度に加えた。混合物を０℃で２時間攪拌し、一昼夜０℃で保持した。反応混合物を冷たい水（６００ｍｌ）で希釈し、沈殿した固体をろ過により集め、生成物２０.５ｇを得た（６７％）。水性の相をさらに酢酸エチルで抽出し、合わせた有機相を、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、真空で濃縮してさらに生成物６.９ｇを出した。
【０２５２】
３−ブロモチオフェン−２−ヒドロキシミドイルクロリド
ＤＭＦ（１００ｍｌ）中の３−ブロモチオフェン−２−カルバルデヒドオキシム（１０.８ｇ、５２.４ｍｍｏｌ）および塩化水素（１４.５ｍｌ、ジオキサン中４Ｍ）の溶液に、オキソン（ｏｘｏｎｅ）（１６.９ｇ、１.０５当量）を室温で一度に加えた。混合物を周囲温度で一昼夜攪拌した。反応の終りに、ＤＭＦ溶液を水に注ぎ、生成物を酢酸エチルで抽出した。有機相を、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、真空で濃縮して生成物１２.６８ｇを得、これを更なる精製を加えずに次の反応に用いた。
【０２５３】
（４−ｔ−ブトキシカルボニルピペラジニル）−３−ブロモ−２−チエニルメタノンオキシム
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ、７０ｍｌ）中の３−ブロモチオフェン−２−ヒドロキシミドイルクロリド（１６.４ｇ、６８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１００ｍｌ）中のＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン（１４ｇ、１.１当量）およびＤＡＢＣＯ（９.５ｍｇ、１.２５当量）の溶液に、０℃で２５分かけて滴下した。混合物を３.５時間攪拌した。反応の終りに、混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。粗成生物（３０.５ｇ）をＢｉｏｔａｇｅカートリッジ（シリカゲル４００ｇ）上でクロマトグラフにより精製し、ジクロロメタン中のメタノール（ＭｅＯＨ０〜５％）で溶出した。そうして得られた生成物は質量２４.６ｇだった（８５％）。
【０２５４】
（ｔ−ＢＯＣ−ピペラジン）−３−チエニルベンゾイソオキサゾール
メトキシエタノール（２００ｍｌ）中の（４−ｔ−ブトキシカルボニルピペラジニル）−３−ブロモ−２−チエニルメタノンオキシム（１０.３ｇ、２６.４ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（１０.７ｇ、３２.７ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（５００ｍｇ）の混合物を室温で一昼夜攪拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。水性溶液を酢酸エチルで３回抽出した。有機溶液（計６００ｍｌ）を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、油状物（約１０ｇ）に濃縮した。この物質をＢｉｏｔａｇｅカートリッジ（シリカゲル１２０ｇ、ジクロロメタン中の０〜８％メタノールで溶出）を用いてクロマトグラフにより精製した。そうして軽油として生成物が得られた（５.１ｇ、６２％）。
【０２５５】
実施例３７
【化１７１】
0004497815.tif 000110
【０２５６】
【化１７２】
0004497815.tif 000111
３−ブロモ−チオフェン−２−カルボン酸
−７２℃に冷却したＴＨＦ（３Ｌ）中の３−ブロモチオフェン（６００.０ｇ、３.６８ｍｏｌ）の溶液に、２時間かけてゆっくりＬＤＡ（１.９３Ｌ、３.８６ｍｏｌ、２Ｎ）を添加した。ＬＤＡの添加速度は反応温度が−６８℃を超えないようなものとする。添加終了後、溶液を更に４０分間攪拌する。次にジエチルエーテル（３Ｌ）を添加漏斗で添加し、その際温度が−６５℃以下に維持されるようにする。次に添加漏斗を分散管と交換し、ＣＯ2ガスを３時間溶液にバブリングする。次にドライアイス（５００ｇ）を添加し、混合物を一夜攪拌する。次に反応フラスコを氷浴にいれ、溶液のｐＨが１〜２となるまで過剰なバブリングを回避しながらゆっくり６Ｎ塩酸を添加する。次に得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。抽出液を食塩水で洗浄し、次にＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、蒸発させる。生成物を室温で真空下に乾燥し、オフホワイトの固体として５８５.１５ｇ（７７％）を得る。
【０２５７】
【化１７３】
0004497815.tif 000112
１−（３−ブロモ−チオフェン−２−カルボン酸）−２−（４−トルエンスルホニル）−ヒドラジン
ＤＣＭ（１.５Ｌ）中の酸（２８５.５３ｇ、１.３８ｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、触媒量のＮＭＰ（２ｍｌ）を添加した。次にチオニルクロリド（１０５.８ｍｌ、１.４５ｍｏｌ）を添加し、固体が完全に溶解するまで溶液を還流する。更に溶液を１時間還流し、室温に冷却し、蒸発させて薄茶色の固体を得る。粗製の物質を一夜真空下で乾燥する。茶色固体をトルエン（３.５Ｌ）に溶解し、ｐ−トルエンスルホンヒドラジン（４０２.２５ｇ、２.１６ｍｏｌ））を添加する。混合物を１００℃で８時間、次に室温で一夜攪拌する。得られた混合物を氷浴中で冷却し、得られた固体を濾取し、トルエンで洗浄した。次に固体を１時間１Ｎ塩酸中のスラリーとして攪拌した。固体を濾取し、大量の水で洗浄した。固体を４０℃、真空下で乾燥し、次にトルエン／イソプロピルアルコールから再結晶させ、所望の生成物４８４.２８ｇ（９３％）を得た。
【０２５８】
【化１７４】
0004497815.tif 000113
Ｎ−（（４−メチルフェニル）−スルホニル）−３−ブロモ−チオフェン−２−カルボヒドラゾニルクロリド
１−（３−ブロモ−チオフェン−２−カルボン酸）−２−（４−トルエンスルホニル）−ヒドラジン（６０.８０ｇ、０.１６１ｍｏｌ）をチオニルクロリド（７０.５ｍｌ、０.９６６ｍｏｌ）に添加した。得られた混合物を混合物が均質になるまで８０℃で攪拌した。次に溶液を３０分間７０℃で攪拌し、ヘプタン（３００ｍｌ）を２０分間かけて添加した。溶液をゆっくり室温に冷却し、次に更に５℃まで冷却した。固体を濾取し、ヘプタン（３×１００ｍｌ）で洗浄し、真空下で乾燥し、オフホワイトの固体として所望の生成物６２.１ｇ（９８％）を得た。
【０２５９】
【化１７５】
0004497815.tif 000114
３−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール
−３０℃に冷却したＤＭＦ（２００ｍｌ）中のＤＡＢＣＯ（１４.１８ｇ、１１２.１８ｍｏｌ）およびベンジルピペラジン（３５.３５ｇ、０.２００ｍｏｌ）の攪拌溶液に、カニューレを介してＴＨＦ（１００ｍｌ）中のＮ−（（４−メチルフェニル）−スルホニル）−３−ブロモ−チオフェン−２−カルボヒドラゾニルクロリド（６２.１ｇ、０.１５８ｍｏｌ）の溶液を添加した。添加は反応温度が−３０℃を超えないよに制御して行なう。添加終了後、沈殿が形成し、次に混合物を一夜室温で攪拌放置し、その時点で、Ｋ2ＣＯ3（６５.４１ｇ、０.４７３ｍｏｌ）およびＣｕＣｌ（１.０ｇ、０.０１０ｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１１０℃に加熱し、この温度で蒸留することによりＴＨＦを除去する。次に温度を１４０℃に上昇させ、混合物を６時間攪拌し、室温に冷却し、一夜攪拌する。次に混合物を水（１００ｍｌ）およびＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）に注ぎ込む。次にＥｔＯＡｃ相を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（３×５００ｍｌ）で抽出する。合わせたＥｔＯＡｃ相を水（５００ｍｌ）で洗浄し、次にセライトを通して濾過し、濃縮した。固体を濾取し、冷水、次いでＥｔＯＡｃ／ヘプタン（１：４）で洗浄し、真空下で乾燥し、オフホワイトの固体として所望の生成物６６.０５ｇ（９５％）を得た。
【０２６０】
【化１７６】
0004497815.tif 000115
３−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール
メチルアルコール（１.３３Ｌ）中のＫＯＨ(S)（５６.０９ｇ、２.６６ｍｏｌ）の攪拌混合物に３−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール（２４１ｇ、０.５３２ｍｏｌ）を添加する。混合物を１.２５時間還流下に加熱し、室温に冷却し、蒸発させる。残留物をＥｔＯＡｃ（１Ｌ）に溶解し、水（２Ｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濾過し蒸発させる。残留物をＥｔＯＡｃ／ヘプタンから再結晶させ、１２９ｇ（８１％）を得た。
【０２６１】
【化１７７】
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３−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−１−メチル−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール
ＴＨＦ（２.５Ｌ）中の３−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール（３１８.０ｇ、１.０７ｍｏｌ）の攪拌溶液に、１持間かけてＴＨＦ（１.５Ｌ）中のカリウムｔ−ブトキシド（１３４.４、１.２ｍｏｌ）の混合物を滴下し、その間反応温度を２５℃未満に維持した。添加終了後、混合物を−３０℃に冷却し、ＭｅＩ（６５.４ｍｌ、１.０５ｍｏｌ）を３０分間かけて滴下した。次に混合物を一夜かけてゆっくり室温に加温する。反応混合物に飽和ＮａＨＣＯ3（１Ｌ）をゆっくり添加する。次に溶液を蒸発させてＴＨＦを除去し、得られた水性の混合物をＥｔＯＡｃに溶解し、水および食塩水で洗浄する。ＥｔＯＡｃ抽出液を乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、濾過し、蒸発させる。粘稠な濃縮液をシリカゲルプラグを通して１：１ＥｔＯＡｃ／ヘプタンを用いて濾過し、蒸発させ、得られた粘稠な油状物を次に真空下に乾燥して固化させ、所望の生成物を多く含む１２：１の比率のレジオ異性体として３２６.０３ｇ（９８％）を得る。
【０２６２】
【化１７８】
0004497815.tif 000117
１−メチル−３−ピペラジン−１−イル−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール
ＤＣＭ（１.２５Ｌ）中に溶解した３−（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）−１−メチル−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾールと２−メチル類縁体（１８９.０ｇ、０.６０ｍｏｌ）の混合物の溶液に、１−クロロエチルクロロホルメート（７８.６ｍｌ、０.７２ｍｏｌ）を添加する。溶液を１時間還流下に加熱し、その時点で混合物を冷却し、溶媒を蒸発除去する。残留物をメタノール（１Ｌ）に溶解し、３０分間還流下に加熱する。冷却後、溶液をエーテル中１Ｎの塩酸（２００ｍｌ）、そして更にエーテル１Ｌで処理し、生成物を沈殿させる。固体を濾取し、冷エーテルで洗浄する。固体をメタノール（１Ｌ）から再結晶させ、塩酸塩を濾取し、エーテルで洗浄し、真空下で乾燥し、ＮＭＲによれば所望のレジオ異性体を大量に含むレジオ異性体の８０：１混合物として所望の生成物１２３.０４ｇ（８０％）を得る。
【０２６３】
実施例３８
【化１７９】
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トリチルオキシメチル−（１Ｒ,２Ｒ）−シクロプロパンカルボン酸エチルエステル
キシレン（３００ｍｌ）中の水素化ナトリウム（１５.２０ｇ、３８０ｍｍｏｌ、６０％油分散液）の懸濁液に、過剰なガスの発生がなく、内部温度が５５℃未満に維持されるように制御しながらトリエチルホスホノアセテート（８５.０７ｇ、３７９ｍｍｏｌ）を添加した。添加終了後、混合物を２０分攪拌した時点で、黄色溶液をキシレン（３００ｍｌ）中の（Ｒ）−トリチルグリシジルエーテル（１００.０ｇ、３１６ｍｍｏｌ）の溶液にカニューレで添加した。得られた溶液を２時間１２５℃に加熱した。得られた溶液を室温に冷却し、１０％ＨＣｌ（３２０ｍｌ）を添加して酸性化し、そしてＥｔＯＡｃ（２×３００ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出液を食塩水（１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濾過し、蒸発させて、油状物として粗生成物１７５ｇを得た。物質は粗製のまま使用した。
【０２６４】
【化１８０】
0004497815.tif 000119
２Ｒ−ブロモメチル−シクロプロパン−１Ｒ−カルボン酸メチルエステル
ＣＨ2Ｃｌ2（２６０ｍｌ）中のトリフェニルホスフィン（１２４.７ｇ、１.３４ｍｏｌ）の溶液を５℃に冷却し、その後ＣＨ2Ｃｌ2（６５ｍｌ）中の臭素（２４.４ｍｌ、１.３４ｍｏｌ）の溶液を２０分間かけて添加し、その間温度を１２℃未満に維持する。混合物を１時間５℃で攪拌し、次に２Ｍ  ＨＣｌ／Ｅｔ2Ｏ（１６ｍｌ、３２ｍｍｏｌ）を添加し、次に粗製のトリチルオキシメチル−（１Ｒ,２Ｒ）−シクロプロパンカルボン酸エチルエステル（１２４ｇ、０.３２ｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で一夜攪拌し、そして飽和ＮａＨＣＯ3（６００ｍｌ）を添加した。混合物を分離し、水相をＣＨ2Ｃｌ2（２００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を水（４００ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濾過し、蒸発させた。残留物をヘプタン（２００ｍｌ）で希釈し、２回蒸発させて過剰なＣＨ2Ｃｌ2を除去した。残留物を３０分間放置した後、固体の不純物を濾去した。濾過ケーキをヘプタン（２×４００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機相を蒸発させて粗製の黄色液体９２.６８ｇを得た。粗製の液体を蒸留（ＢＰ＝８０〜８５℃／１.５torr）し、無色の液体５５.１９ｇ（２工程で８４％収率）を得た。
【０２６５】
実施例３９
【化１８１】
0004497815.tif 000120
４−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
無水ＴＨＦ（３００ｍｌ）中の４−フルオロベンゾトリフルオリド（２５ｇ、０.１５２Ｍ）の溶液を−６０℃に冷却し（ＩＰＡ／ＣＯ2バス）、−６０℃を越えないような最高速度でｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２.０Ｍ溶液を８４ｍｌ、０.１６８Ｍ−１.１当量）で処理した。反応物を３時間攪拌（温度を維持）し、次に−５５℃を超えないような最高速度で４−（メトキシ−メチル−カルバモイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（５１.８６ｇ、０.１９０Ｍ−１.２５当量、無水ＴＨＦ１３０ｍｌ中）の溶液で処理した。混合物を更に２時間攪拌した後、室温に戻し、０.５時間攪拌した。反応物を塩化アンモニウム飽和溶液（７５ｍｌ）でクエンチングし、ＴＨＦを減圧下で除去した。残留物を酢酸エチル（８００ｍｌ）に溶解し、１Ｎ塩酸（４００ｍｌ）、５％水性ＮａＨＣＯ3（４００ｍｌ）、水（４００ｍｌ）および食塩水（４００ｍｌ）で順次洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、濃縮して得られた茶色の油状物を酢酸エチルで摩砕して白色固体２７.６ｇ（４８％）を得た。
【０２６６】
【化１８２】
0004497815.tif 000121
４−［（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
ピリジン（２５ｍｌ）中の４−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（５ｇ、０.０１３Ｍ）の溶液を塩酸ヒドロキシルアミン（１.１１ｇ、０.０１５Ｍ−１.２当量）で処理した。反応物を１４時間Ｎ2下室温で攪拌し、次に氷水（２５０ｍｌ）に注ぎ込んだ。混合物を１時間０℃で攪拌し、次に生成物を濾過し、冷水（３×１５ｍｌ）で洗浄し、５０℃の真空オーブン中で乾燥した。白色固体（５.０３ｇ、９７％）を得た。
【０２６７】
【化１８３】
0004497815.tif 000122
４−（５−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
無水ＴＨＦ（５９ｍｌ）中の４−［（２−フルオロ−５−トリフルオロメチル−フェニル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（４.９６９ｇ、０.０１３Ｍ）の溶液をカリウムｔ−ブトキシド（ＴＨＦ中１Ｍ溶液１３.４ｍｌ、０.０１３３Ｍ−１.０５当量）で処理した。混合物を１時間周囲温度で攪拌し、次に２時間６５℃で加熱した。ＴＨＦを減圧下で除去した。残留物を酢酸エチル（１００ｍｌ）に溶解し、Ｈ2Ｏ（５０ｍｌ）および食塩水（５０ｍｌ）でそれぞれ洗浄した。次にＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、濃縮して得られた固体（５ｇ）をシリカ約１２０ｇ上（酢酸エチル／ヘプタン（３０：７０）で溶出）で精製し、白色固体として生成物を得た（２.６９ｇ、５７％）。
【０２６８】
【化１８４】
0004497815.tif 000123
３−ピペリジン−４−イル−５−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール
４−（５−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（２.６９ｇ、０.００７Ｍ）をＤＣＭ／トリフルオロ酢酸の５０：５０混合物（４ｍｌ）中に懸濁した。混合物を５０℃で３０分間加熱し、次に濃縮して生成物をＴＦＡ塩として得た。これをジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解し、Ｎａ2ＣＯ3飽和溶液（３×３ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、濃縮して油状物として生成物を得た（０.９１ｇ、４６％）。
【０２６９】
実施例４０
７−メトキシベンゾイソオキサゾリルピペリジン
【化１８５】
0004497815.tif 000124
４−（２−フルオロ−３−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
窒素下−７８℃の２−フルオロアニソール（６.００ｇ、４７.６ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（１２５ｍｌ）の攪拌溶液に、ブチルリチウム（ヘキサン中１.６Ｍ溶液３５ｍｌ、５６.０ｍｍｏｌ）を添加した。１３分間攪拌した後、Ｎ，Ｎ，Ｎ’,Ｎ’,Ｎ”−ペンタメチルジエチレントリアミン（１２.９ｍｌ、６１.８ｍｍｏｌ）を滴下し、反応物を−７８℃で攪拌した。１６８分後、無水ＴＨＦ（４０ｍｌ）中の４−（メトキシ−メチル−カルバモイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１６.８ｇ、６１.７ｍｍｏｌ）の溶液を２５分間かけて滴下した。反応物を３５分間−７８℃で、そして６５分間室温で攪拌した。反応物を酢酸エチル（４００ｍｌ）で希釈し、冷０.５Ｎ水性ＨＣｌ（２×２００ｍｌ）、５％水性炭酸カリウム（２００ｍｌ）、水（２００ｍｌ）および食塩水（２００ｍｌ）で順次洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、溶媒を除去して黄色油状物２０.１ｇを得た。生成物を２０％酢酸エチル／ヘプタンから３０％酢酸エチル／ヘプタンの１段階勾配を用いたシリカゲル（３５０ｇ）上のクロマトグラフィーに付し、白色固体として所望の生成物１２.０ｇ（７５％）を得た。
【０２７０】
【化１８６】
0004497815.tif 000125
４−［（２−フルオロ−３−メトキシ−フェニル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
４−（２−フルオロ−３−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１１.６ｇ、３４.４ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（２.８７ｇ、４１.３ｍｍｏｌ）およびピリジン（５０ｍｌ）の混合物を一夜窒素下室温で攪拌した。黄色の反応溶液を冷水（５００ｍｌ）に注ぎ込み、混合物を１５分間０℃でエージングした。生成物を濾取し、水で洗浄し、５０℃で真空下に乾燥し、白色粉末として所望の生成物１１.６ｇ（９６％）を得た。プロトンＮＭＲによれば生成物はＺ−およびＥ−異性体の２：１混合物であった。
【０２７１】
【化１８７】
0004497815.tif 000126
４−（７−メトキシ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ＭＤＬ８３１４７８）
窒素下ＴＨＦ（５０ｍｌ）中の４−［（２−フルオロ−３−メトキシ−フェニル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（５.００ｇ、１４.２ｍｍｏｌ）の室温混合物に、カリウムｔ−ブトキシド（１Ｍ  ＴＨＦ溶液１５.０ｍｌ、１５.０ｍｍｏｌ）を急速に添加し、反応物を４時間還流した。室温に冷却した後、反応物を酢酸エチル（２５０ｍｌ）で希釈し、水（１００ｍｌ）および食塩水（１００ｍｌ）で順次洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、濃縮してワックス状の固体を得た。固体を再結晶したが不純物を除去できなかったため、粗生成物を１０％酢酸エチル／ジクロロメタン〜４０％酢酸エチル／ジクロロメタンの１段階勾配溶出を用いたシリカ上のクロマトグラフィーに付し、白色粉末として所望の生成物３.０４ｇ（６４％）を得た。融点１３０〜１３２℃。
【０２７２】
【化１８８】
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７−メトキシ−３−ピペリジン−４−イル−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール塩酸塩（ＭＤＬ８３１５８７Ａ）
４−（７−メトキシ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（３.００ｇ、９.０３ｍｍｏｌ）、塩酸（１Ｍエーテル溶液３５ｍｌ、３５.０ｍｍｏｌ）およびメタノール（２５ｍｌ）の混合物を１８時間窒素下室温で攪拌した。エーテル（７５ｍｌ）を添加し、混合物を１５分間室温で攪拌し、生成物を濾取し、白色粉末として所望の生成物２.３７ｇ（９８％）を得た。融点＞２５０℃。
【０２７３】
実施例４１
７−トリフルオロメチルベンゾイソオキサゾールピペリジン
【化１８９】
0004497815.tif 000128
４−［（２−フルオロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ＭＤＬ８３２１６３）
４−（２−フルオロ−３−トリフルオロメチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（９.００ｇ、２４.０ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（２.００ｇ、２８.８ｍｍｏｌ）およびピリジン（５０ｍｌ）の混合物を一夜窒素下室温で攪拌した。黄色の反応溶液を冷水（５００ｍｌ）に注ぎ込み、混合物を１時間０℃でエージングした。生成物を濾取し、水で洗浄し、５０℃真空下で乾燥し、白色固体９.５４ｇを得た。固体を熱２５％酢酸エチル／ヘプタンで摩砕し、白色固体として所望の生成物８.５０ｇ（９１％）を得た。プロトンＮＭＲによれば生成物は異性体の３.８：１混合物であった。
【０２７４】
【化１９０】
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４−（７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ＭＤＬ８３２１５９
窒素下ＴＨＦ（２０ｍｌ）中の４−［（２−フルオロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１.４０ｇ、３.５９ｍｍｏｌ）の室温混合物にカリウムｔ−ブトキシド（１Ｍ  ＴＨＦ溶液を３.６０ｍｌ、３.６０ｍｍｏｌ）を１回で添加し、反応物を１.５時間６０℃で加熱した。一夜室温で放置した後、溶媒を除去し、残留物を酢酸エチル（６０ｍｌ）で希釈した。有機相を水（３０ｍｌ）および食塩水（３０ｍｌ）で順次洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、濃縮して琥珀色固体を得た。粗生成物を４０％酢酸エチル／ヘプタンを溶出剤とするシリカ上のクロマトグラフィーに付し、白色固体として所望の生成物０.９７ｇ（７３％）を得た。融点：１１１〜１１３℃。
【０２７５】
【化１９１】
0004497815.tif 000130
３−ピペリジン−４−イル−７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール（ＭＤＬ８３２１０６Ａ）。４−（７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１カルボン酸ｔ−ブチルエステル（８.００ｇ、２１.６ｍｍｏｌ）、ＨＣｌ（１Ｍエーテル溶液を１００ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）およびメタノール（５０ｍｌ）の混合物を一夜窒素下、室温で攪拌した。反応物を濃縮し、固体をメタノール／エーテルから摩砕して白色粉末として所望の生成物５.８４ｇ（８８％）を得た。融点：２４２〜２４３℃。
【０２７６】
実施例４２
７−トリフルオロメチルベンゾ［ｂ］チエニルピペリジン
【化１９２】
0004497815.tif 000131
４−（３−ヒドロキシ−２−メトキシカルボニル−７−トリフルオロメチル−２,３−ジヒドロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ＭＤＬ８３２７１２）
窒素下４−（２−フルオロ−３−トリフルオロメチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（９.００ｇ、２４.０ｍｍｏｌ）、メチルチオグリコレート（２.４０ｍｌ、２６.８ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（２００ｍｌ）の室温溶液に１回でＮａＨ（６０％油分散液を１.１５ｇ、２８.７ｍｍｏｌ）を添加した。ガスの発生が停止した後、反応物を５５℃で攪拌した。１００分後、反応物を室温に冷却し、酢酸エチル（５００ｍｌ）で希釈した。混合物を水（３００ｍｌ）および食塩水（３００ｍｌ）で順次洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、溶媒を除去して粘稠な白色固体を得た。２０％酢酸エチル／ヘプタンで摩砕して白色粉末として所望の生成物６.２０ｇ（５６％）を得た。
【０２７７】
【化１９３】
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３−ピペリジン−４−イル−７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル。ＤＣＭ（３０ｍｌ）中の４−（３−ヒドロキシ−２−メトキシカルボニル−７−トリフルオロメチル−２,３−ジヒドロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（６.００ｇ、１３.０ｍｍｏｌ）の室温溶液に、急速なガスの発生を伴いながらＴＦＡ（３０ｍｌ）を添加した。５分後、反応物を５.５時間４０℃で攪拌した。室温に冷却した後、反応物を２０％水性炭酸カリウム（４００ｍｌ）に注ぎ込み、ＤＣＭ（２×２００ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出液を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、溶媒を除去して濃厚な油状物を得た。高真空下で乾燥した後、所望の生成物４.３７ｇ（９８％）を白色の泡状物として得た。
【０２７８】
【化１９４】
0004497815.tif 000133
３−（１−アセチル−ピペリジン−４−イル）−７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル
窒素下３−ピペリジン−４−イル−７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（４.３７ｇ、１２.７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２.７０ｍｌ、１９.４ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（８０ｍｌ）の室温溶液にアセチルクロリド（１.１０ｍｌ、１５.５ｍｍｏｌ）を１回で添加し、反応物を室温で一夜攪拌した。反応物を酢酸エチル（３００ｍｌ）で希釈し、水（１５０ｍｌ）および食塩水（１５０ｍｌ）で順次洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、溶媒を除去した。残留物を１０％メタノール／酢酸エチルを溶出剤とするシリカ上のクロマトグラフィーに付し、白色固体として所望の生成物４.２８ｇ（８８％）を得た。融点：１５５.２℃。
【０２７９】
【化１９５】
0004497815.tif 000134
３−（１−アセチル−ピペリジン−４−イル）−７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸
ＴＨＦ（２５ｍｌ）中の３−（１−アセチル−ピペリジン−４−イル）−７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（４.１０ｇ、１０.６ｍｍｏｌ）の溶液に０.５Ｎ水性水酸化ナトリウム（２３.４ｍｌ、１１.７ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で攪拌した。１８時間後、反応物を１Ｎ  ＨＣｌ（２００ｍｌ）で酸性化し、混合物をＤＣＭ（２×１００ｍｌ）で抽出した。有機相を水（１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、濃縮して白色泡状物として所望の生成物４.１３ｇを得た。
【０２８０】
【化１９６】
0004497815.tif 000135
１−［４−（７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−イル］−エタノン（ＭＤＬ８３２８２３）
３−（１−アセチル−ピペリジン−４−イル）−７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（４.１３ｇ、１１.１ｍｍｏｌ）、銅紛（０.７０６ｇ、１１.１ｍｍｏｌ）およびキノリン（２０ｍｌ）の混合物を窒素下で２００℃に加熱した。１０分後、ガスの発生がなくなり、反応物を室温に冷却した。混合物を酢酸エチル（１００ｍｌ）で希釈し、セライトベッドで濾過し、濾液を１Ｎ  ＨＣｌ（２×１００ｍｌ）、５％水性炭酸カリウム（１００ｍｌ）、水（１００ｍｌ）および食塩水（１００ｍｌ）で順次洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、濃縮して琥珀色油状物を得た。油状物を１０％メタノール／酢酸エチルを溶出剤とするシリカ上のクロマトグラフィーに付し、黄褐色固体として所望の生成物２.６９ｇ（７４％）を得た。
【０２８１】
【化１９７】
0004497815.tif 000136
４−（７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン
１−［４−（７−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−イル］−エタノン（２.９５ｇ、９.０１ｍｍｏｌ）、濃ＨＣｌ（３０ｍｌ）およびエタノールの混合物を１８時間８０℃で加熱した。室温に冷却下後、反応物を２０％水性炭酸カリウム（１５０ｍＬ）で塩基性化し、混合物をＤＣＭ（２×１００ｍｌ）で抽出した。有機相を水（１００ｍｌ）で洗浄し、炭酸カリウム上で乾燥し、濾過し、濃縮して琥珀色ワックス状固体として所望の生成物２.４２ｇ（９４％）を得た。
【０２８２】
実施例４３
【化１９８】
0004497815.tif 000137
（１−ベンジル−ピペリジン−４−イル）−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−メタノンオキシム
（１−ベンジル−ピペリジン−４−イル）−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−メタノン（５.０ｇ、１３.６６ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（１.１ｇ、１６.３９ｍｍｏｌ）およびピリジン（５０ｍｌ）の混合物を一夜室温で攪拌し、次に混合物を蒸留してピリジン（３５ｍｌ）を除去した。固体の残留物をヘプタン、次いでエーテルで洗浄した。得られた固体をＮａＨＣＯ3の飽和溶液とＥｔＯＡｃとの間に分配した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濾過し、蒸発させた。固体の残留物を３：１ヘプタン／ＥｔＯＡｃで洗浄し、真空下で乾燥し、白色固体として所望の生成物２.１ｇ（４０％）を得た。
【０２８３】
【化１９９】
0004497815.tif 000138
３−（１−ベンジル−ピペリジン−４−イル）−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］イソオキサゾール
窒素下ＴＨＦ（２０ｍｌ）中の（１−ベンジル−ピペリジン−４−イル）−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−メタノンオキシム（２.１ｇ、５.５１ｍｍｏｌ）の室温混合物にカリウムｔ−ブトキシド（１Ｍ  ＴＨＦ溶液を５.７８ｍｌ、５.７８ｍｍｏｌ）を１回で添加した。得られた溶液を室温で６時間攪拌し、その後混合物を水（６０ｍｌ）と酢酸エチル（６０ｍｌ）との間に分配した。水相をＥｔＯＡｃ（６０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を水（３０ｍｌ）および食塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、濃縮して所望の生成物１.９ｇ（９６％）を得た。
【０２８４】
【化２００】
0004497815.tif 000139
３−ピペリジン−４−イル−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］イソオキサゾール塩酸塩
ＤＣＭ（２６ｍｌ）中の３−（１−ベンジル−ピペリジン−４−イル）−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］イソオキサゾール（１.９ｇ、５.２７ｍｍｏｌ）に１−クロロエチルクロロホルメート（０.６９ｍｌ、６.３３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を一夜室温で攪拌し、その後、揮発物質を真空下で除去した。残留物をメタノール（２５ｍｌ）に溶解し、得られた溶液を１時間還流下に加熱した。混合物を室温に冷却し、溶液を蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、固体の生成物を濾取し、白色固体として塩酸塩１.２ｇ（７４％）を得た。
【０２８５】
実施例４４
【化２０１】
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３−（１−ベンジル−ピペリジン−４−イル）−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（ＭＤＬ８３３８０３）
（１−ベンジル−ピペリジン−４−イル）−（２−フルオロ−４−トリフルオロメチル−フェニル）−メタノン（７.５ｇ、２０.５ｍｍｏｌ）、メチルチオグリコレート（２.０ｍｌ、２２.５ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１００ｍｌ）の室温溶液にＫ2ＣＯ3（５.６５ｇ、４１.０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を２４時間６０℃で攪拌し、室温に冷却し、酢酸エチル（５００ｍｌ）で希釈した。混合物を水（２×３００ｍｌ）および食塩水（３００ｍｌ）で順次洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、溶媒を除去して油状物を得た。油状物をクロマトグラフィー（ヘプタン中３０％ＥｔＯＡｃ）で精製し、固体として５.９１ｇ（６７％）を得た。
【０２８６】
【化２０２】
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４−（２−メトキシカルボニル−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル
ＤＣＭ（５０ｍｌ）中の３−（１−ベンジル−ピペリジン−４−イル）−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（５.９ｇ、１３.６ｍｍｏｌ）の溶液にメチルクロロホルメート（１.２６ｍｌ、１６.３ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた溶液を一夜攪拌し、その後揮発物質を真空下に除去した。残留物をヘプタンで洗浄し、白色固体として所望の生成物４.２ｇ（７７％）を得た。
【０２８７】
【化２０３】
0004497815.tif 000142
４−（２−カルボキシ−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル
ＴＨＦ（７.０ｍｌ）中の４−（２−メトキシカルボニル−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル（１.１ｇ、２.７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に１Ｎ  ＮａＯＨ（２.９７ｍｌ）を添加した。得られた混合物を室温で一夜攪拌し、その後混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、エーテル（１００ｍｌ）で洗浄した。水相に３Ｎ塩酸を添加して酸性化し、生成物をＥｔＯＡｃ（２×１５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濾過し、蒸発させて白色固体として所望の生成物９６０ｍｇ（９２％）を得た。
【０２８８】
【化２０４】
0004497815.tif 000143
４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル
キノリン（２８ｍｌ）中の４−（２−カルボキシ−６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル（４.３ｇ、１１.１ｍｍｏｌ）および銅（７０５ｍｇ、１１.１ｍｍｏｌ）の混合物を４５分間２００℃で加熱した。室温に冷却下後、混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）で希釈し、濾過した。濾液を５％塩酸（２×２０ｍｌ）、水（２０ｍｌ）および食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濾過し、蒸発させた。残留物をクロマトグラフィー（ヘプタン中３０％ＥｔＯＡｃ）で分離し、白色固体として所望の生成物３.１４ｇ（８２％）を得た。
【０２８９】
【化２０５】
0004497815.tif 000144
４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン臭化水素酸塩
ＨＢｒ（４５ｍｌ、酢酸中３０％）中の４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル（３.１ｇ、９.０ｍｍｏｌ）の混合物を２０時間室温で攪拌し、その後、揮発物質を真空下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃで洗浄し、生成物を濾取し、白色固体として所望の生成物３.０９ｇ（９４％）を得た。
【０２９０】
実施例４５
【化２０６】
0004497815.tif 000145
４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ＭＤＬ８１１７７８）
乾燥ジクロロメタン（１０.０ｍｌ）中の４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン（１.００ｇ、４５４ｍｍｏｌ）の攪拌した懸濁液にトリエチルアミン（０.９５ｍｌ、６.８２ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（５５ｍｇ、０.４５４ｍｍｏｌ）およびジ−ｔ−ブチルジカーボネート（１.９８ｇ、９.０９ｍｍｏｌ）を添加した。ジ−ｔ−ブチルジカーボネートの添加により数分間ガスが自発的に発生した。得られた溶液を１時間室温で攪拌し、その後溶液をＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍｌ）で希釈し、水（１０ｍｌ）、１０％水性塩酸（１０ｍｌ）、水（１０ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ3（１０ｍｌ）、水（１０ｍｌ）および食塩水（１０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濾過し蒸発させた。残留物をジエチルエーテルから再結晶させ、白色の結晶性固体として１.３１ｇ（９０％）を得た。融点：１１７〜１８８℃。
元素分析値
Ｃ17Ｈ21Ｎ2ＦＯ3の計算値：６３.７４％Ｃ  ６.６１％Ｈ  ８.７４％Ｎ
実測値：６３.６６％Ｃ  ６.６４％Ｈ  ８.７３％Ｎ
【０２９１】
【化２０７】
0004497815.tif 000146
４−（６−フルオロ−７−ヒドロキシ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ＭＤＬ８１１８２０）  −７８℃に冷却した乾燥テトラヒドロフラン（３１.３ｍｌ）中の４−（６−フルオロ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１.００ｇ、３.１３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、リチウムジイソプロピルアミド（１.７２ｍｌ、３.３５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を２時間−７８℃で攪拌し、その後トリメチルボレート（０.４４ｍｌ、３.８４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間−７８℃で攪拌し、次に３時間かけて室温に戻し、その後過酸化水素（２.００ｍｌ）および酢酸（１.００ｍｌ）を添加した。得られた混合物を一夜室温で攪拌し、その後飽和水性ＮＨ4Ｃｌ（２０ｍｌ）および１０％水性塩酸（２０ｍｌ）で混合物をクエンチングした。得られた混合物をＣＨ2Ｃｌ2（４×５０ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出液を食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濾過し、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（１：１；Ｅｔ2Ｏ／石油エーテル）により分離し、白色の結晶性固体としてフェノール０.６１９ｇ（５９％）を得た。融点１６９〜１７０℃。
元素分析値
Ｃ17Ｈ21Ｎ2ＦＯ4の計算値：６０.７０％Ｃ  ６.２９％Ｈ  ８.３３％Ｎ
実測値：６０.７２％Ｃ  ６.１５％Ｈ  ８.２２％Ｎ
【０２９２】
【化２０８】
0004497815.tif 000147
４−（６−フルオロ−７−メトキシ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ＭＤＬ８１１８４１）
Ｎ−メチル−２−ピロリドン（３３ｍｌ）中の４−（６−フルオロ−７−ヒドロキシ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１.２８ｇ、３.８０ｍｍｏｌ））の攪拌溶液にカリウムｔ−ブトキシド（２.０９ｇ、１７.１２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた暗赤色の溶液にヨードメタン（１.２０ｍｌ、１９.０２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた黄色溶液を室温で６時間攪拌し、その後水（５５ｍｌ）を添加して反応をクエンチングし、水性塩酸で酸性化した。得られた混合物をＥｔ2Ｏ（４×１００ｍｌ）で抽出した、合わせた抽出液を食塩水（１１０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濾過し、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（１：１；Ｅｔ2Ｏ／石油エーテル）で分離し、メチルエーテル１.２ｇを得た。白色固体生成物を１：１；Ｅｔ2Ｏ／石油エーテルから再結晶させて更に精製し、白色結晶性固体として９６３ｍｇ（７２％）を得た。融点９４〜９６℃。
元素分析値
Ｃ18Ｈ23Ｎ2ＦＯ4の計算値：６１.７０％Ｃ  ６.６２％Ｈ  ７.９９％Ｎ
実測値：６１.７５％Ｃ  ６.７３％Ｈ  ７.９４％Ｎ
【０２９３】
【化２０９】
0004497815.tif 000148
６−フルオロ−７−メトキシ−３−ピペリジン−４−イル−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール塩酸塩（ＭＤＬ８１１９９８）。ジエチルエーテル（１００ｍｌ）中の乾燥塩酸中の４−（６−フルオロ−７−メトキシ−ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（４.００ｇ、１１.４３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にメタノール（７.６２ｍｌ）を添加した。得られた溶液を５時間室温で攪拌し、その後白色固体が形成した。得られた懸濁液を濾過し、白色固体をエーテルで十分洗浄し、白色固体として所望の生成物１.７６ｇを得た。母液を沈殿させることにより更に０.９４ｇの生成物が得られ、合計２.７０ｇ（８３％）の所望の生成物が純粋な白色固体として得られた。融点２４６〜２４８℃。
【０２９４】
実施例４６
【化２１０】
0004497815.tif 000149
４−［（３−ブロモ−チオフェン−２−イル）−（メチル−ヒドラゾノ）−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
メチルヒドラジン（２ｍｌ）中の４−（チオフェン−２−カルボニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１.９６ｇ、５.２ｍｍｏｌ）の混合物を一夜７５℃に加熱した。次に過剰のメチルヒドラジンを真空ポンプで除去した。残留物をクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜８％ＭｅＯＨで溶出）で精製し、所望の生成物０.９５ｇ（４５％）を得た。
【０２９５】
【化２１１】
0004497815.tif 000150
４−（１−メチル−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール−３−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
４−［（３−ブロモ−チオフェン−２−イル）−（メチル−ヒドラゾノ）−メチル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（７００ｍｇ、１.７４ｍｍｏｌ）をメトキシエタノール（１０ｍｌ）中のＣｕＩ（２０ｍｇ）、ＣｓＣＯ3（６５０ｍｇ、１.１５当量）と混合した。混合物を２時間７０℃に加熱し、次に一夜室温で攪拌した。溶媒をロータリーエバポレーターで蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃに抽出し、次に食塩水で洗浄し、濃縮して油状物とした。この油状物をクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜１０％ＭｅＯＨで溶出）で精製し、所望の生成物５２０ｍｇ（６８％）を得た。
【０２９６】
【化２１２】
0004497815.tif 000151
１−メチル−３−ピペリジン−４−イル−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール塩酸塩（Ａ００２４３６２８７Ａ）
４−（１−メチル−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール−３−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（５２０ｍｇ、１.６ｍｍｏｌ）を４時間ＨＣｌ溶液（５ｍｌ、ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ）中室温で攪拌した。揮発物質を真空下で除去し、残留物をエーテルで摩砕（２回）し、所望の塩酸塩としてオフホワイトの固体３０４ｍｇ（７４％）を得た。
【０２９７】
実施例４７
【化２１３】
0004497815.tif 000152
４−｛（３−ブロモ−チオフェン−２−イル）−［（２,２,２−トリフルオロ−エチル）−ヒドラゾノ］−メチル｝−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
ｎ−ブタノール（２０ｍｌ）中の４−（チオフェン−２−カルボニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（２.３４ｇ、６.２４ｍｍｏｌ）の混合物にトリフルオロエチルヒドラジン（２.４３ｇ、１２.４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を一夜１１０℃で加熱した。次に揮発物質を真空下で除去した。残留物をクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜１０％ＭｅＯＨで溶出）で精製し、所望の生成物２.４１ｇ（９２％）を得た。
【０２９８】
【化２１４】
0004497815.tif 000153
４−［１−（２,２,２−トリフルオロ−エチル）−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール−３−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
４−｛（３−ブロモ−チオフェン−２−イル）−［（２,２,２−トリフルオロ−エチル）−ヒドラゾノ］−メチル｝−ピペリジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（２.３４ｇ、４.９８ｍｍｏｌ）をメトキシエタノール（２５ｍｌ）中のＣｕＩ（５０ｍｇ）、ＣｓＣＯ3（１.９ｇ、１.２当量）と混合した。混合物を１時間７５℃に加熱した。次に混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、濾過した。濾液を蒸発させ、残留物をクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜１０％ＭｅＯＨで溶出）で精製し、所望の生成物２.０３ｇ（＞９５％）を得た。
【０２９９】
【化２１５】
0004497815.tif 000154
３−ピペリジン−４−イル−１−（２,２,２−トリフルオロ−エチル）−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール塩酸塩（８３３９０６）
４−［１−（２,２,２−トリフルオロ−エチル）−１Ｈ−チエノ［３,２−ｃ］ピラゾール−３−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１.９ｇ、４.８７ｍｍｏｌ）を４時間ＨＣｌ溶液（６ｍｌ、ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ）中室温で攪拌した。揮発物質を真空下で除去し、残留物をエーテルで摩砕（２回）し、所望の塩酸塩としてオフホワイトの固体２.１ｇ（７４％）を得た。
【０３００】
実施例４８
【化２１６】
0004497815.tif 000155
３−ブロモ−チオフェン−２−カルバルデヒドオキシム
エタノール（５０ｍｌ）中の３−ブロモチオフェン−２−カルバルデヒド（２８.７ｇ、０.１５ｍｏｌ）を水（３０ｍｌ）およびエタノール（１００ｍｌ）中の塩酸ヒドロキシルアミン（１３.８ｇ、０.２ｍｏｌ）、水酸化ナトリウム（８ｇ、０.２ｍｏｌ）の溶液に１回で添加した。混合物を０℃で２時間攪拌し、一夜０℃に維持することにより沈殿を形成させた。混合物を冷水（６００ｍｌ）で希釈し、固体を濾取し、２０.５ｇ（６７％）を得た。水溶液を更に酢酸エチルで抽出した。有機相を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させて淡黄色固体として更に生成物６.９ｇを得た。総収量は２７.４ｇ（８９％）であった。
【０３０１】
【化２１７】
0004497815.tif 000156
３−ブロモ−チオフェン−２−（クロロ−カルバルデヒド）オキシム
ＤＭＦ（１００ｍｌ）中の３−ブロモ−チオフェン−２−カルバルデヒドオキム（１０.８ｇ、５２.４ｍｍｏｌ）、塩化水素（１４.５ｍｌ、ジオキサン中４Ｍ）の溶液にオキソン（１６.９ｇ、１.０５当量）を室温で１回で添加した。混合物を一夜室温で攪拌し、その後溶液を水に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。有機溶液を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発乾固させて、得られた黄色固体（１２.６８ｇ、定量的重量）を更に精製することなく次の反応に用いた。
【０３０２】
【化２１８】
0004497815.tif 000157
４−［（３−ブロモ−チオフェン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペラジン）−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
ＴＨＦ（７０ｍｌ）中の３−ブロモ−チオフェン−２−（クロロ−カルバルデヒド）オキシム（１６.４ｇ、６８ｍｍｏｌ）の溶液を２５分間かけて０℃でＤＭＦ（１００ｍｌ）中のＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン（１４ｇ、１.１当量）、ＤＡＢＣＯ（９.５ｇ、１.２５当量）の溶液に滴下した。混合物を３.５時間０℃で攪拌し、その後混合物を水に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。有機相を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させた。粗生成物（３０.５ｇ）をクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜５％ＭｅＯＨで溶出）で精製し、所望の生成物２４.６ｇ（８５％）を得た。
【０３０３】
【化２１９】
0004497815.tif 000158
４−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
メトキシエタノール（２００ｍｌ）中の４−［（３−ブロモ−チオフェン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−メチル］−ピペラジン）−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（１０.３ｇ，２６.４ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（１０.７ｇ、３２.７ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（５００ｍｇ）の混合物を一夜室温で攪拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。水溶液を３回酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相（合計６００ｍｌ）を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、蒸発させた。残留物をクロマトグラフィー（シリカゲル１２０ｇｍ、ジクロロメタン中０〜８％メタノールで溶出）で精製し、軽油状物として所望の生成物５.１ｇ（６２％）を得た。
【０３０４】
【化２２０】
0004497815.tif 000159
３−ピペラジン−１−イル−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール
４−チエノ［２,３−ｄ］イソオキサゾール−３−イル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（５.０ｇ、１６.２ｍｍｏｌ）を４時間ＨＣｌ溶液（２５ｍｌ、ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ）中で室温で攪拌した。揮発物質を真空下で除去し、残留物をエーテルで摩砕（２回）し、所望の塩酸塩としてオフホワイトの固体３.３ｇ（８４％）を得た。
【０３０５】
実施例４９
【化２２１】
0004497815.tif 000160
４−フルオロ−Ｎ−｛２Ｒ−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−１Ｒ−シクロプロピルメチル｝−ベンゼンスルホンアミド（ＭＤＬ８３１４９５）
ＴＨＦ（１.３５ｍＬ）中のＣ−｛(１Ｒ,２Ｒ)−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピル｝メチルアミン（１００ｍｇ、０.２７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（３ｍｇ、０.０３ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、４−フルオロベンゼンスルホニルクロリド（５３ｍｇ、０.２７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を室温で３時間攪拌し、混合物を濃縮した。残留物をクロマトグラフィーにより分画し（勾配溶出ＥｔＯＡｃ中５％から３０％のＭｅＯＨ）、所望の生成物９３ｍｇを得た（６５％）。
【０３０６】
実施例５０
（３−イミダゾール−１−イル−プロピル）−｛（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピルメチル｝−アミンの合成
【化２２２】
0004497815.tif 000161
【０３０７】
シクロプロピル中間体
【化２２３】
0004497815.tif 000162
５０ａ：トランス−シクロプロパン−１,２−ジカルボン酸モノメチルエステル  トランス−シクロプロパン−１,２−ジカルボン酸ジメチルエステル（５９.８ｇ、０.３７８ｍｏｌ）を１.０Ｎのリン酸緩衝液（１.５Ｌ、ｐＨ７）に懸濁し、ブタ肝エステラーゼ（２.２５ｍｌ、７５００単位）を添加し、反応を制御するためにｐＨメーターを用いてＮａＯＨの消費をモニタリングする。３時間後、１８９ｍｌの２Ｎ  ＮａＯＨの消費によりジエステルからモノメチルエステルへの完全な加水分解が示される。ｐＨ＝１となるまで５Ｎ塩酸を添加することにより透明な溶液を酸性化する。ジクロロメタン（５００ｍｌ）および珪藻土（２５ｇ）を添加することにより酵素を分離する。５分間攪拌し、次に混合物を濾過する。濾液をＮａＣｌで飽和させ、酢酸エチルで抽出する（５回）。抽出液を合わせ、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、蒸発させて固体５０.８ｇ（９３％）を得る、融点４６〜４７℃、ｍ／ｚ＝１４５(Ｍ＋Ｈ)+
５０ｂ：（Ｓ,Ｓ）−（＋）−シクロプロパン−１,２−ジカルボン酸モノメチルエステル
アセトン中のトランス−シクロプロパン−１,２−ジカルボン酸モノメチルエステル、即ち実施例５０ａ（１９.４６ｇ）を１回でキニン（４３.８ｇ）に添加する。反応物を還流下に加熱し、次にメチルシクロヘキサン（１５０ｍｌ）を添加する。アセトン／メチルシクロヘキサンから結晶化（５回）した後、ジアステレオマー塩６.２ｇが得られる（αD：＋１７３、ｃ：７.３ＣＨＣｌ3）。
５０ｃ：（Ｒ,Ｒ）−（−）−シクロプロパン−１,２−ジカルボン酸モノメチルエステル
上記５０ｂの濾液を濃縮し、残留物を１Ｎ  ＫＨＳＯ4溶液で処理して粗製の（Ｒ,Ｒ）エナンチオマー１２.０ｇを得る。この物質をアセトンに溶解し、１当量のキニジンを１回で添加する。反応物を還流下に加熱し、次にメチルシクロヘキサンを添加する。一夜結晶化の後、ジアステレオマー塩１０.３ｇが得られる（αD：−２３５、ｃ：８.５ＣＨＣｌ3）。
【０３０８】
【化２２４】
0004497815.tif 000163
５０ｄ：トランス−２−ヒドロキシメチル−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル
添加漏斗を用いてゆっくりボランメチルスルフィド複合体（１７７ｍｌ、０.３５４ｍｏｌ）を０℃でトランス−シクロプロパン−１,２−ジカルボン酸モノメチルエステル（実施例５０ａ）（２５.５ｇ，０.１７７ｍｏｌ）、ホウ酸トリメチル（６０.３ｍｌ、０.５３１ｍｏｌ）およびテトラヒドロフラン（１５０ｍｌ）の攪拌溶液に添加する。添加終了後、反応物を室温に戻し、更に２時間攪拌する。反応混合物を５０％塩化ナトリウム水溶液（１.５Ｌ）−濃ＨＣｌ（１０ｍｌ）の攪拌溶液に注ぎ込む。混合物を酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）で抽出し（３回）、抽出液を合わせ、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、溶媒を濃縮して無色の油状物２２.６ｇを得る。
５０ｅ：（Ｓ,Ｓ）−(＋)−２−ヒドロキシメチル−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル
実施例５０ｄの操作法に従って、そしてその（Ｓ,Ｓ）−(＋)−シクロプロパン−１,２−ジカルボン酸モノメチルエステル（実施例５０ｂ）を置き換えることにより、標題化合物を得る。αD：＋５４、ｃ：１.５ＣＨＣｌ3（Tetrahedron Asymmetry Vol.6, No.3, pp.683-684, 1995)。
５０ｆ：（Ｒ,Ｒ）−(−)−２−ヒドロキシメチル−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル
実施例５０ｄの操作法に従って、そしてその（Ｒ,Ｒ）−(−)−シクロプロパン−１,２−ジカルボン酸モノメチルエステル（実施例５０ｃ）を置き換えることにより、標題化合物（αD：−７８.６、ｃ：４.３ＣＨＣｌ3）を得る。
【０３０９】
【化２２５】
0004497815.tif 000164
５０ｇ：トランス−２−メタンスルホニルオキシメチル−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル
ジクロロメタン（３０ｍｌ）中のトリエチルアミン（７.７４ｍｌ、５６ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（０.０１３ｇ、０.１０６ｍｍｏｌ）を０〜５℃でトランス−２−ヒドロキシメチル−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル（実施例５０ｄ）（２.４ｇ、１８.６４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に滴下する。０.５時間後、反応混合物を水に注ぎ込み、混合物をジクロロメタンで抽出する（３回）。合わせた抽出液を１ＮのＫＨＳＯ4で洗浄し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、濃縮して得られた淡黄色の油状物４.２９ｇは０℃で保存すると固化する。ｍ／ｚ＝２０９(Ｍ＋Ｈ)+
【０３１０】
５０ｈ：（Ｓ,Ｓ）−（＋）−２−メタンスルホニルオキシメチル−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル
実施例５０ｇの操作法に従って、そしてその（Ｓ,Ｓ）−（＋）−２−ヒドロキシメチルシクロプロパンカルボン酸メチルエステル（実施例５０ｅ）を置き換えることにより標題化合物を得る（αD：＋７５、ｃ：４.７ＣＨＣｌ3）。
【０３１１】
５０ｉ：（Ｒ,Ｒ）−（−）−２−メタンスルホニルオキシメチル−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル
実施例５０ｇの操作法に従って、そしてその（Ｒ,Ｒ）−（−）−２−ヒドロキシメチルシクロプロパンカルボン酸メチルエステル（実施例５０ｆ）を置き換えることにより標題化合物を得る（αD：−７４.４，ｃ：５.９ＣＨＣｌ3）。
【０３１２】
【化２２６】
0004497815.tif 000165
５０ｊ：トランス−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル
アセトニトリル（６００ｍｌ）中の１−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン、即ち実施例２ｂの遊離塩基（２３.０ｇ、７１.３ｍｍｏｌ）、トランス−２−メタンスルホニルオキシメチル−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル（実施例５０ｇ）（１５.３ｇ、７３.５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４０ｍｌ、２８８ｍｍｏｌ）の混合物を１６時間還流下に加熱する。反応混合物を減圧下に濃縮し、得られた油状物をＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ）で希釈する。得られた沈殿（未反応の原料ピペラジン）を濾去し、濾液をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン／ＭｅＯＨ／トリエチルアミン、２０：２０：１）により精製する。適切な画分を濃縮し、無色の油状物１８.０ｇを得る。ｍ／ｚ＝４１３(Ｍ＋Ｈ)+。
【０３１３】
５０ｋ：（Ｓ,Ｓ）−（＋）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル
実施例５０ｊの操作法に従って、そしてその（Ｓ,Ｓ）−（＋）−２−メタンスルホニルオキシメチル−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル（実施例５０ｈ）を置き換えることにより標題化合物を得る（αD：＋４８、ｃ：２.８ＥｔＯＨ）。
５０Ｌ：（Ｒ,Ｒ）−（−）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル
実施例５０ｇ〜５０ｊの操作法に従って、そしてその（Ｒ,Ｒ）−（−）−２−メタンスルホニルオキシメチルシクロプロパンカルボン酸メチルエステル、即ち実施例５０ｉを置き換えることにより標題化合物を得る（αD：−４９.３、ｃ：３.５ＣＨＣｌ3）。
【０３１４】
【化２２７】
0004497815.tif 000166
（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロパンカルバルデヒド
無水ジクロロメタン（１０ｍｌ）中のオキサリルクロリド（６２μｌ、０.７２ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ2下で、攪拌しながら−７８℃に冷却した。そして、ジメチルスルホキシド（１０４μｌ、１.４４ｍｍｏｌ）、続いて無水ジクロロメタン（１０ｍｌ）中の｛（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピル｝−メタノール（０.１３５ｇ、０.３６ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。−７８℃で３５分間攪拌を続け、トリエチルアミン（１.０ｍｌ、７.３ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を４時間攪拌し、冷水浴を外し、ろ過して濃縮し、シリカゲル上でジクロロメタン／メタノール（９５：５）によりクロマトグラフィーで精製した。得られた純粋なアルデヒド、（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロパンカルバルデヒドをＮＭＲおよびＬＣ／ＭＳにより確認した。０.１０２ｇ、収率７６％。
【０３１５】
【化２２８】
0004497815.tif 000167
（３−イミダゾール−１−イル−プロピル）−｛（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピルメチル｝−アミン（ＭＤＬ８３３２５７）
無水ジクロロメタン（３ｍｌ）中の（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロパンカルバルデヒド（３６.８ｍｇ、０.１ｍｍｏｌ）および１−（３−アミノプロピル）イミダゾール（０.０２３５ｍｌ、２.１ｍｍｏｌ）の溶液を、無水ジクロロメタン（４ｍｌ）に浸されたポリマー支持ホウ化水素（０.８６３ｍｇ、３ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この混合物を室温で回転振とう機上で一昼夜振とうした。そして反応を水（２ｍｌ）で停止し、生成物を酢酸エチル（１０ｍｌ）で抽出し、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして真空で濃縮した。ジクロロメタン／メタノール（９５：５）溶出のシリカゲルクロマトグラフィーによって純粋な表題化合物、ＮＭＲおよびＬＣ／ＭＳにより確認した（３−イミダゾール−１−イル−プロピル）−｛（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピルメチル｝−アミン３６.２ｍｇを得た。収率７６％。
【０３１６】
実施例５１
【化２２９】
0004497815.tif 000168
シクロプロパンカルボン酸ｔ−ブチルエステル。窒素下０℃のエーテル２００ｍｌ中のカリウムｔ−ブトキシド１２.０ｇ（１０７.１ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に５分間かけてシクロプロパンカルボン酸塩化物１３.４ｇ（１２８.６ｍｍｏｌ）を添加した。０℃３０分の後、混合物を更に３０分間周囲温度で攪拌した。反応混合物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液に注ぎ込み、エーテルで抽出した。有機相を乾燥し、慎重に濃縮して所望のエステル生成物として黄色油状物１５.０ｇ（９９％）を得た。
【０３１７】
【化２３０】
0004497815.tif 000169
１−アリル−シクロプロパンカルボン酸ｔ−ブチルエステル
リチウムジイソプロピルアミドをアルゴン下０℃のＴＨＦ２００ｍｌ中のジイソプロピルアミン７.５ｇ（５８.１ｍｍｏｌ）および２.５Ｍｎ−ブチルリチウム２３.２ｍｌから生成した。０℃で３０分間攪拌した後、溶液を−７８℃とし、ここでＴＨＦ３０ｍｌ中のシクロプロパンカルボン酸ｔ−ブチルエステル７.５ｇ（５２.８ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下した。４時間後、ＴＨＦ３０ｍｌ中の臭化アリル１２.８ｇ（１０６ｍｍｏｌ）を透明黄金色溶液に１０分間かけて滴下した。反応物をゆっくり室温に戻した。１９時間後、反応物を塩化アンモニウム飽和水溶液に注ぎ込み、エーテルで抽出し、乾燥し、濃縮して得られた油状物をＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留（約２０分間、２０ｍｍＨｇ；６０〜７５℃オーブン）により精製し、透明無色の油状物として所望の生成物５.４ｇ（５６％）を得た。
【０３１８】
【化２３１】
0004497815.tif 000170
１−（２−オキソ−エチル）−シクロプロパンカルボン酸ｔ−ブチルエステル。窒素下メタノール５０ｍｌおよびジクロロメタン５０ｍｌ中の１−アリル−シクロプロパンカルボン酸ｔ−ブチルエステル５.７ｇ（３１.３ｍｍｏｌ）の溶液を−７８℃とし、ここでオゾンを１時間バブリングした。持続していた青色が消失するまで窒素をバブリングした。ピリジン３滴、次いでジメチルスルフィド２ｍｌを添加し、冷却バスを取り外した。２時間後反応物を塩化アンモニウム飽和水溶液に注ぎ込み、ジクロロメタンで抽出し、乾燥し、濃縮して油状物として所望のアルデヒドを定量的収率で得た。
【０３１９】
実施例５２
【化２３２】
0004497815.tif 000171
【０３２０】
【化２３３】
0004497815.tif 000172
｛（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピル｝−メタノール
０℃に冷却したＴＨＦ（７５ｍＬ）中の２Ｒ−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−１Ｒ−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル（５.０ｇ、１２.５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、水素化リチウムアルミニウム（１８.７５ｍＬ、１８.７５ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の１.０Ｍ溶液）を滴下した。得られた混合物を０℃で２時間攪拌し、水（１ｍＬ）、２Ｎ  ＮａＯＨ（１ｍＬ）および水（３ｍＬ）を続けて添加した。得られた混合物をＤＣＭ（９０ｍＬ）で希釈し、セライトプラグを通してろ過した。アルミニウム塩をＤＣＭで十分洗浄し、ろ液を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、ろ過後濃縮して所望の生成物４.６ｇを得た。
【０３２１】
【化２３４】
0004497815.tif 000173
メタンスルホン酸（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピルメチルエステル
Ｅｔ3Ｎ（８.５ｍＬ、６１.１ｍｍｏｌ）および無水ＣＨ2Ｃｌ2（１００ｍＬ）中の｛（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−１Ｒ−シクロプロピル｝−メタノール（３.７１２ｇ、１０.０３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、０℃、Ｎ2雰囲気下で、ＣＨ3ＳＯ2Ｃｌ（９３０μＬ、１２.０２ｍｍｏｌ）を滴下した。攪拌を０℃で２.５時間続けた。反応をＨ2Ｏ（２０ｍＬ）で止めた。次にＨ2Ｏ（６０ｍＬ）中のＫ2ＣＯ3（４.２８ｇ、３１.０１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物室温で１５分間攪拌し、次にＣＨ2Ｃｌ2で抽出し、食塩水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した。ろ過、濃縮および乾燥により、所望の生成物を得た（４.３０１ｇ、９６％）。
【０３２２】
【化２３５】
0004497815.tif 000174
１−［（１Ｒ,２Ｒ）−２−アジドメチル−シクロプロピルメチル］−４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）ピペラジン
メタンスルホン酸（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピルメチルエステル（３.９９５ｇ、８.９２ｍｍｏｌ）、ＮａＮ3（１.１６ｇ、１７.８５ｍｍｏｌ）および無水ＣＨ3ＣＮ（６０ｍＬ）の混合物を、４７℃、窒素雰囲気下で４時間攪拌し、そしてさらにＮａＮ3（５８０ｍｇ、８.９２ｍｍｏｌ）を添加した。４７℃でさらに４時間攪拌を続けた。室温に冷やした後、Ｃｅｌｉｔｅ５４５を通して混合物をろ過し、ＣＨ3ＣＮで洗浄した。ろ液と洗浄液を合わせ、濃縮し、次にＰｒｅｐＬＣ（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ−７０：３０、６０：４０、５０：５０、４０：６０、３０：７０、２０：８０、１００％ＥｔＯＡｃ）で分離した、所望の生成物を得た（１.５ｇ、４３％）。
【０３２３】
【化２３６】
0004497815.tif 000175
Ｃ−｛（１Ｒ,２Ｒ）−２−［４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）ピペラジン−１−イルメチル］−シクロプロピル｝メチルアミン
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中の、１−［（１Ｒ,２Ｒ）−２−アジドメチル−シクロプロピルメチル］−４−（６−トリフルオロメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）ピペラジン（１.４９５ｇ、３.７８ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ3（３.９７ｇ、１５.１５ｍｍｏｌ）およびＨ2Ｏ（２７３μＬ、１５.１７ｍｍｏｌ）の溶液を、４０℃、窒素雰囲気下で１８時間、そしてさらに５５℃で２３時間攪拌した。室温に冷やした後、混合物を濃縮し、次にフラッシュクロマトグラフィー（１００％ＥｔＯＡｃ, ｔｈｅｎ  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2／Ｅｔ3Ｎ−６０：４０：１０）で所望の生成物を得た（１.１４ｇ、８２％）。
【０３２４】
【表１１】
0004497815.tif 000176
【０３２５】
【表１２】
0004497815.tif 000177
【０３２６】
【表１３】
0004497815.tif 000178
【０３２７】
【表１４】
0004497815.tif 000179
【０３２８】
【表１５】
0004497815.tif 000180
【０３２９】
【表１６】
0004497815.tif 000181
【０３３０】
【表１７】
0004497815.tif 000182
【０３３１】
【表１８】
0004497815.tif 000183
【０３３２】
【表１９】
0004497815.tif 000184
【０３３３】
【表２０】
0004497815.tif 000185
【０３３４】
【表２１】
0004497815.tif 000186
【０３３５】
【表２２】
0004497815.tif 000187
【０３３６】
【表２３】
0004497815.tif 000188
【０３３７】
【表２４】
0004497815.tif 000189
【０３３８】
【表２５】
0004497815.tif 000190
【０３３９】
【表２６】
0004497815.tif 000191
【０３４０】
【表２７】
0004497815.tif 000192
【０３４１】
【表２８】
0004497815.tif 000193
【０３４２】
【表２９】
0004497815.tif 000194
【０３４３】
【表３０】
0004497815.tif 000195
【０３４４】
【表３１】
0004497815.tif 000196
【０３４５】
【表３２】
0004497815.tif 000197
【０３４６】
【表３３】
0004497815.tif 000198
【０３４７】
【表３４】
0004497815.tif 000199
【０３４８】
【表３５】
0004497815.tif 000200
【０３４９】
【表３６】
0004497815.tif 000201
【０３５０】
【表３７】
0004497815.tif 000202
【０３５１】
【表３８】
0004497815.tif 000203
【０３５２】
【表３９】
0004497815.tif 000204
【０３５３】
【表４０】
0004497815.tif 000205
【０３５４】
【表４１】
0004497815.tif 000206
【０３５５】
【表４２】
0004497815.tif 000207
【０３５６】
【表４３】
0004497815.tif 000208
【０３５７】
【表４４】
0004497815.tif 000209
【０３５８】
【表４５】
0004497815.tif 000210
【０３５９】
【表４６】
0004497815.tif 000211
【０３６０】
【表４７】
0004497815.tif 000212
【０３６１】
【表４８】
0004497815.tif 000213
【０３６２】
【表４９】
0004497815.tif 000214
【０３６３】
【表５０】
0004497815.tif 000215
【０３６４】
【表５１】
0004497815.tif 000216
【０３６５】
【表５２】
0004497815.tif 000217
【０３６６】
【表５３】
0004497815.tif 000218
【０３６７】
【表５４】
0004497815.tif 000219
【０３６８】
【表５５】
0004497815.tif 000220
【０３６９】
【表５６】
0004497815.tif 000221
【０３７０】
【表５７】
0004497815.tif 000222
【０３７１】
【表５８】
0004497815.tif 000223
【０３７２】
【表５９】
0004497815.tif 000224
【０３７３】
【表６０】
0004497815.tif 000225
【０３７４】
【表６１】
0004497815.tif 000226
【０３７５】
【表６２】
0004497815.tif 000227
【０３７６】
【表６３】
0004497815.tif 000228
【０３７７】
【表６４】
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【０３７８】
【表６５】
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【０３７９】
【表６６】
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【０３８０】
【表６７】
0004497815.tif 000232
【０３８１】
【表６８】
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【０３８２】
【表６９】
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【０３８３】
【表７０】
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【０３８４】
【表７１】
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【０３８５】
【表７２】
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【０３８６】
【表７３】
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【０３８７】
【表７４】
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【０３８８】
【表７５】
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【０３８９】
【表７６】
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【０３９０】
【表７７】
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【０３９１】
【表７８】
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【０３９２】
【表７９】
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【０３９３】
【表８０】
0004497815.tif 000245
【０３９４】
【表８１】
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【０３９５】
【表８２】
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【０３９６】
【表８３】
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【０３９７】
【表８４】
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【０３９８】
【表８５】
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【０３９９】
【表８６】
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【０４００】
【表８７】
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【０４０１】
【表８８】
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【０４０２】
【表８９】
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【０４０３】
【表９０】
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【０４０４】
【表９１】
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【０４０５】
【表９２】
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【０４０６】
【表９３】
0004497815.tif 000258
【０４０７】
【表９４】
0004497815.tif 000259
【０４０８】
【表９５】
0004497815.tif 000260
【０４０９】
【表９６】
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【０４１０】
【表９７】
0004497815.tif 000262
【０４１１】
【表９８】
0004497815.tif 000263
【０４１２】
【表９９】
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【０４１３】
【表１００】
0004497815.tif 000265
【０４１４】
【表１０１】
0004497815.tif 000266
【０４１５】
【表１０２】
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【０４１６】
【表１０３】
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【０４１７】
【表１０４】
0004497815.tif 000269
【０４１８】
【表１０５】
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【０４１９】
【表１０６】
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【０４２０】
【表１０７】
0004497815.tif 000272
【０４２１】
【表１０８】
0004497815.tif 000273
【０４２２】
【表１０９】
0004497815.tif 000274
【０４２３】
【表１１０】
0004497815.tif 000275
【０４２４】
【表１１１】
0004497815.tif 000276
【０４２５】
【表１１２】
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【０４２６】
【表１１３】
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【０４２７】
【表１１４】
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【０４２８】
【表１１５】
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【０４２９】
【表１１６】
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【０４３０】
【表１１７】
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【表１１８】
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【表１１９】
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【０４３３】
【表１２０】
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【０４３４】
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【表１２６】
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【表１３０】
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