(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
防カビ性能の評価試験の対象材に、少なくとも底部に開口部を有する筒状部材を前記底部を下側にして密着させて置き、この筒状部材の内部にカビ胞子懸濁液を含む液状体を入れた後、培養してカビの生育状況により前記評価試験の対象材の防カビ性能を評価することを特徴とする防カビ性能評価試験方法。
【請求項２】
前記液状体が培地を含む請求項１記載の防カビ性能評価試験方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、防カビ性能評価試験方法に関する技術分野に属し、特には、建築材料、電化製品、家具、自動車部品等に用いられる材料についての防カビ性能の評価試験方法に関する技術分野に属する。
【０００２】
【従来の技術】
防カビ性能の評価試験方法としては、ＪＩＳ  Ｚ  ２９１１に規定された評価試験方法（カビ抵抗性試験方法）が知られている。この方法は、防カビ性能の評価試験の対象材の試験片または試料（以下、試験片という）の表面にカビ胞子懸濁液を、試験片の表面積３０ｍｍ×３０ｍｍに対してカビ胞子懸濁液０．５ｍｌの割合で、噴霧器またはピペットでまきかける方法により接種し、２週間もしくは４週間の培養を行い、試験片の表面の菌糸の発育状態によって防カビ性能（カビ抵抗性）を評価するものである。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
ところが、前記従来の防カビ性能評価試験方法（カビ抵抗性試験方法）においては、良好な再現性を有して信頼性に優れたデータを得るには、試験片の表面積に対するカビ胞子懸濁液の割合、まきかける際の均一性、及び、長時間（２週間もしくは４週間）培養の際の湿度管理を再現性良く実施する必要があるので、良好な再現性を得ることが容易ではなく、良好な再現性が得られ難いという問題点がある。例えば、カビ胞子懸濁液をまきかける際の均一性が不充分である場合には、カビ胞子懸濁液が一個所に集中し、ひいては試験結果の信頼性が低下し、また、培養の際の湿度管理が不充分である場合には、培養途中で乾燥し、ひいては防カビ性能の無い評価試験対象材であっても菌糸の発育が認められず、誤った試験結果を得てしまうという問題点等がある。
【０００４】
また、前記従来の防カビ性能評価試験方法では培養時間が２週間もしくは４週間と長く、ひいては防カビ性能評価に長時間を要するため、より迅速に防カビ性能評価をし得る防カビ性能評価試験方法の出現が望まれている。
【０００５】
本発明は、このような事情に着目してなされたものであって、その目的は、前記従来の防カビ性能評価試験方法の場合に比較し、良好な再現性を得るのが容易である防カビ性能評価試験方法を提供しようとするものである。更には、良好な再現性を得るのが容易であると共に短時間で防カビ性能を評価し得るようにすることも目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
上記の目的を達成するために、本発明に係る防カビ性能評価試験方法は、請求項１〜２記載の防カビ性能評価試験方法としており、それは次のような構成としたものである。
【０００７】
即ち、請求項１記載の防カビ性能評価試験方法は、防カビ性能の評価試験の対象材に、少なくとも底部に開口部を有する筒状部材を前記底部を下側にして密着させて置き、この筒状部材の内部にカビ胞子懸濁液を含む液状体を入れた後、培養してカビの生育状況により前記評価試験の対象材の防カビ性能を評価することを特徴とする防カビ性能評価試験方法である（第１発明）。
【０００８】
請求項２記載の防カビ性能評価試験方法は、前記液状体が培地を含む請求項１記載の防カビ性能評価試験方法である（第２発明）。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明は、例えば次のような形態で実施する。
防カビ性能の評価試験の対象材（以下、評価試験対象材という）に、両端（上部、底部）に開口部を有する円筒を前記底部を下側にして密着させて置き、この筒状部材の内部にカビ胞子懸濁液を含む液状体を入れた後、一定期間培養して、カビの生育状況を観察し、このカビの生育状況により評価試験対象材の防カビ性能を評価する。
【００１０】
より具体的な例について、以下に説明する。円筒状のリングの片方の端面に真空グリースを塗り、このリングを、滅菌シャーレの中に置いた板状の評価試験対象材に前記リングの端面を下側にして密着させて置く。次に、このリング内にカビ胞子懸濁液を含む液状体を入れる。そうすると、この液状体はリング内で評価試験対象材の上に均一に広がる。次いで、滅菌シャーレに蓋をする。この後、一定温度で一定期間培養する。そして、カビの生育状況を観察し、このカビの生育状況により評価試験対象材の防カビ性能を評価する。このような形態で本発明が実施される。
【００１１】
以下、本発明について主にその作用効果を説明する。
【００１２】
本発明に係る防カビ性能評価試験方法は、前述の如く、防カビ性能の評価試験の対象材（以下、評価試験対象材という）に、少なくとも底部に開口部を有する筒状部材を前記底部を下側にして密着させて置き、この筒状部材の内部にカビ胞子懸濁液を含む液状体を入れた後、培養してカビの生育状況により前記評価試験対象材の防カビ性能を評価することとしている（第１発明）。
【００１３】
このように評価試験対象材の上に筒状部材を密着させて置くので、この評価試験対象材と筒状部材とにより容器が形成される。そして、この筒状部材の内部（即ち、前記容器の中）にカビ胞子懸濁液を含む液状体を入れるようにしているので、この液状体は筒状部材内で評価試験対象材の上（即ち、前記容器の底部）に均一に広がる。
【００１４】
このため、評価試験対象材の表面積に対する液状体（カビ胞子懸濁液を含む液状体）の割合を容易に一定にし得、その割合の再現性が良好である。又、評価試験対象材上での液状体の均一性に優れており、その再現性が良好である。又、培養の際に液状体が乾燥し難く、培養の際の湿度管理をし易く、その再現性が良好である。このとき、筒状部材の上に蓋をすることができ、そうすると、液状体の乾燥防止、湿度管理をよりし易くなる。
【００１５】
従って、本発明に係る防カビ性能評価試験方法によれば、従来の防カビ性能評価試験方法の場合に比較し、良好な再現性を得るのが極めて容易である。即ち、極めて容易に、良好な再現性を有して信頼性に優れたデータを得ることができるようになる。
【００１６】
また、本発明に係る防カビ性能評価試験方法によれば、液状体（カビ胞子懸濁液を含む液状体）の量を多くすることができ、また、培養の際に前記液状体が乾燥しないことに起因して、従来の防カビ性能評価試験方法の場合に比較し、カビの生育速度が高く、短時間で防カビ性能を評価し得る。
【００１７】
即ち、従来の防カビ性能評価試験方法の場合には、前述の如く、試験片（評価試験の対象材の試験片または試料）の表面にカビ胞子懸濁液を噴霧器またはピペットでまきかける方法により接種するので、試験片の表面でのカビ胞子懸濁液の量がもともと少なく、このため接種時にカビ胞子の数を多くすることが困難であり、また、ほぼ乾燥状態に近い湿潤状態で培養するものであり、従って、カビの生育速度が遅く、防カビ性能評価に長時間を要する。尚、培養途中で乾燥し、乾燥状態により近い状態で培養することもあり、この場合には更にカビの生育速度が遅くなる。
【００１８】
これに対し、本発明に係る防カビ性能評価試験方法の場合には、前記の如く、筒状部材内に液状体（カビ胞子懸濁液を含む液状体）を入れるので、液状体の量を多くすることができ、このため接種時にカビ胞子の数を多くし得、しかも、評価試験対象材の上に液状体の層が形成されており、このため液状体が乾燥せず、常にカビ生育に都合のよい湿潤状態で培養することができ、従って、従来の防カビ性能評価試験方法の場合に比較し、カビの生育速度が高く、短時間で防カビ性能を評価し得る。
【００１９】
前記液状体（カビ胞子懸濁液を含む液状体）がカビ胞子懸濁液の他に培地を含有していると、さらにカビの生育速度が高くなり、より一層短時間で防カビ性能を評価し得る（第２発明）。これは、上記培地の含有により、カビ生育のための栄養分を添加することになり、このためカビの生育速度がさらに高くなるからである。このとき、このカビの生育速度は培地による通常のカビの培養の場合と同様の極めて高い速度となる。
【００２０】
尚、カビ胞子懸濁液を含む液状体が培地を含有する場合、従来の防カビ性能評価試験方法では、培地中の栄養分が試験期間中ほぼ乾燥状態にあり、このためカビが栄養分を取り込み難い状態にある。一方、本発明に係る防カビ性能評価試験方法では、評価試験対象材の上に液状体の層が形成されており、このため栄養分が液状体中で均一に分散しており、しかもカビが栄養分を取り込むのに都合の良い状態にある。このため、液状体が培地を含有する場合、本発明に係る防カビ性能評価試験方法では、従来の防カビ性能評価試験方法と比較して、より高いカビ生育速度を得ることができるのである。
【００２１】
上記の如くカビ胞子懸濁液を含む液状体が培地を含有するようにした場合、良好な再現性を得るのが容易であるというだけでなく、極めて短時間で防カビ性能を評価し得るようにもなることになる。
【００２２】
本発明において、少なくとも底部に開口部を有する筒状部材とは、底部に開口部を必ず有する筒状部材のことである。この開口部の形状は特には限定されるものでなく、評価試験対象材に筒状部材の底部を下側にして置いたときに密着させることができるものであればよい。即ち、筒状部材の底部の全てが開口している必要はなく、例えば部分的に開口しているものであってもよい。また、評価試験対象材が平らな板である場合、筒状部材の底部は前記板に密着するような平面であればよく、評価試験対象材が曲面を有するものである場合には、筒状部材の底部は前記曲面に密着するような曲面の形状のものとしておけばよい。
【００２３】
評価試験の対象材に前記筒状部材を底部を下側にして密着させて置き、この筒状部材の内部にカビ胞子懸濁液を含む液状体を入れる。この液状体の入り口としては、前記筒状部材の上部にあることに限定されず、前記筒状部材の周壁部に設けられているものであってもよい。
【００２４】
前記筒状部材の形状については、特には限定されるものではなく、例えば、断面が円形あるいは楕円形である円筒、断面が四角形等である角筒のもの等を採用することができる。また、前記筒状部材の大きさについても、特には限定されるものではなく、例えば、内径：２ｃｍ、高さ：１ｃｍの円筒型のものを用いることができる。
【００２５】
前記筒状部材の構成材料としては、特には限定されるものではなく、例えば、ガラス、金属、プラスチック等を用いることができる。
【００２６】
評価試験対象材と前記筒状部材の底部とは、しっかり密着させて液洩れが生じないようにすることが望ましい。かかる密着のための手段としては、特には限定されるものではなく、例えば、真空グリース、接着剤等を用いて密着させる方法を用いることができる。
【００２７】
本発明において、評価試験対象材の材質としては、特には限定されるものではなく、例えば、ガラス、金属、木材、プラスチック等を評価試験対象材とすることができる。
【００２８】
評価試験対象材は、通常は防カビ性能を評価したい材料から切り出された試験片や試料であるが、これに限定されず、防カビ性能を評価したい材料そのものや実物を評価試験対象材とすることができる。
【００２９】
評価試験対象材の形状としては、特には限定されるものではなく、例えば、板状、パイプ状のものを評価試験対象材とすることができる。尚、評価試験対象材が平らな板である場合、前記筒状部材の底部は前記板に密着するような平面であればよく、また、この平面は筒の中心軸に対して垂直であっても傾斜していてもよい。評価試験対象材が平らな板ではなく、曲面を有する板である場合には、前記筒状部材の底部は前記曲面に密着するような曲面の形状のものとしておけばよい。また、評価試験対象材がパイプである場合には、前記筒状部材の底部は前記パイプの表面に密着するような凹部を有する形状としておけばよい。
【００３０】
本発明において、カビ胞子懸濁液のカビの種類としては、特には限定されるものではなく、例えば、アスペルギルス属、ペニシリウム属、リゾパス属、クラドスポリウム属、ケトミウム属のもの等を用いることができる。
【００３１】
培養の温度としては、カビが生育しやすい温度である２５〜３０℃とすることが望ましいが、これに限定されるものではない。
【００３２】
カビ胞子懸濁液を含む液状体が培地を含有するようにする場合、この培地としては特には限定されるものではなく、カビが生育するものであればいかなるものでもよい。かかる培地としては、例えば、ポテトデキストロース液体培地、ポテトデキストロース寒天培地を挙げることができる。寒天培地を用いる場合、寒天の代わりにアガロースを用いることができる。寒天やアガロースの濃度については、特には限定されるものではないが、カビの生育培地として通常用いられる濃度である０．５〜２％（質量％）とすることが望ましい。
【００３３】
カビ胞子懸濁液を含む液状体の筒状部材内への添加量については、特に限定されるものではないが、評価試験対象材の上に厚み（深さ）：０．５〜２ｍｍとなる量とすることが望ましい。これは、これより少ない量（液状体の深さ：０．５ｍｍ未満）では、液状体が均一に広がり難く、一方、これより多い量（液状体の深さ：２ｍｍ超）では、評価試験対象材の表面から個々のカビ胞子までの距離の分布が大きく、正確な評価をすることが難しくなるからである。上記の如き液状体の量は、例えば内径：２ｃｍのガラスリング内に０．３ｍｌの液状体を添加した場合に得られる。尚、上記添加量については、液状体が培地を含有する場合と含有しない場合とで同様である。
【００３４】
培養する時間については、従来の防カビ性能評価試験方法の場合に比較してカビの生育速度が高いことに起因して、従来の防カビ性能評価試験方法の場合のように２〜４週間とする必要はなく、これよりも短時間でよくなり、例えば２〜３日間とすることができる。このため、短時間で防カビ性能を評価することができる。即ち、例えば、培養４８時間後及び７２時間後にカビの生育状況を観察し、評価試験対象材の防カビ性能を判定すればよい。
【００３５】
防カビ性能の判定基準については、特には限定されるものではなく、目的に応じて定めればよく、例えば、次のような６段階で評価する方法を採用することができる。
【００３６】
〔６段階評価〕
１：胞子が全面に発生している。
２：前記１と下記３の間の状態。
３：わずかに胞子の発生が認められる。
４：胞子は発生していないが、ほぼ全面に菌糸の生育が認められる。
５：胞子は発生していないが、わずかに菌糸の生育が認められる。
６：胞子の発生も菌糸の生育も認められない。
【００３７】
なお、本発明に係る防カビ性能評価試験方法の場合は、従来の防カビ性能評価試験方法の場合に比べ、評価試験対象材の上に多量の液状体（カビ胞子懸濁液を含む液状体）があり、このため、評価試験対象材の表面が充分に濡れていると共にカビ生育のための栄養が充分にある状態において、評価試験対象材の表面から徐々に該表面近傍の液状体に溶出する成分により、カビ生育がどの程度阻害されるかを調べていることになるといえる。
【００３８】
【実施例】
（実施例１）
評価試験対象材として防カビコートをしたアルミ板材、及び、防カビコートをしていないアルミ板材を用い、この防カビ性能の評価試験を行い、防カビコートの効果についての確認を行った。この詳細を、以下に説明する。
【００３９】
ポテトデキストロース寒天培地の上で２８℃にて７日間培養したアスペルギルス・ニガーの胞子を５白金耳かきとり、１０ｍｌの０．００５％（質量％）スルホこはく酸ジオクチルナトリウム（胞子を均一に分散させるための薬剤の一種）水に加え懸濁して、カビ胞子懸濁液を得た。
【００４０】
４０℃に保温しておいたポテトデキストロースアガロース培地（アガロース濃度：０．７質量％）５０ｍｌに対し、前記カビ胞子懸濁液０．２ｍｌを加えて混合し、カビ胞子懸濁液を含む液状体であって培地を含むもの（以降、カビ胞子懸濁培地という）を得た。
【００４１】
評価試験対象材のアルミ板材から３ｃｍ角のアルミ板材を切り取った。このアルミ板材をシャーレ内に置いた後、内径：２ｃｍ、高さ：１ｃｍのガラス製円筒型リング（上部および底部に開口部を有する円筒）の片方の端面（底部）に真空グリースを塗り、このリングを前記シャーレ内のアルミ板材の上に前記リングの端面を下側にして置き密着させた。
【００４２】
次に、上記リングの中に前記カビ胞子懸濁培地を０．３ｍｌ入れ、カビ胞子懸濁培地の厚み（深さ）が一定となるように揺すって広げた。次いで、直ぐにシャーレに蓋をした。そして、２８℃にて７２時間培養し、培養４８時間後及び７２時間後にカビの生育状況を観察し、これにより防カビ性能を評価した。この評価に際し、評価基準としては前述の６段階で評価する方法を採用した。即ち、下記のような６段階で評価する方法を採用した。尚、試験の再現性を評価するため、試験のｎ数（試験の繰り返し数）はそれぞれｎ＝３とした。
【００４３】
〔６段階評価〕
１：胞子が全面に発生している。
２：前記１と下記３の間の状態。
３：わずかに胞子の発生が認められる。
４：胞子は発生していないが、ほぼ全面に菌糸の生育が認められる。
５：胞子は発生していないが、わずかに菌糸の生育が認められる。
６：胞子の発生も菌糸の生育も認められない。
【００４４】
上記評価試験の結果を表１に示す。表１からわかるように、同一条件での防カビ性能の評価試験結果にばらつきがなく、再現性に極めて優れていた。
【００４５】
また、表１からわかるように、防カビコートをしていないアルミ板材においては、時間が経つにしたがってカビの増殖が認められ、培養７２時間後には胞子が全面に発生していた。これに対し、防カビコートをしたアルミ板材においては、培養７２時間後にも胞子の発生も菌糸の生育も認めらず、カビの生育は全く認められなかった。従って、防カビコートは防カビ性能に優れており、カビ生育抑制に優れた効果があることが確認された。
【００４６】
上記の結果より、本発明の実施例１に係る防カビ性能評価試験方法によれば、極めて容易に再現性に優れたデータを得ることができ、しかも４８〜７２時間という短時間で評価試験対象材の防カビ性能を評価することができることが確認された。
【００４７】
（試験１）
前記評価試験対象材に代えてガラス板を用いると共に前記カビ胞子懸濁培地に更に防カビ剤としてチアベンダゾールを添加し、この点を除き、実施例１と同様の試験を行い、防カビ剤のチアベンダゾールの防カビ性能についての評価を行った。この詳細を、以下に説明する。
【００４８】
ポテトデキストロース寒天培地の上で２８℃にて７日間培養したアスペルギルス・ニガーの胞子を５白金耳かきとり、１０ｍｌの０．００５％（質量％）スルホこはく酸ジオクチルナトリウムに加え懸濁して、カビ胞子懸濁液を得た。
【００４９】
４０℃に保温しておいたポテトデキストロースアガロース培地（アガロース濃度：０．７質量％）５０ｍｌに対し、前記カビ胞子懸濁液０．２ｍｌを加えて混合し、カビ胞子懸濁培地を得た。
【００５０】
上記カビ胞子懸濁培地を複数本の試験管に分注した後、１本の試験管を除き、それぞれの試験管内に防カビ剤としてチアベンダゾールをその濃度が１．２５、２．５、５、２０、４０ｍｇ／Ｌ（リットル）となるように添加し混合した。なお、上記１本の試験管については上記カビ胞子懸濁培地が入ったままである（チアベンダゾールは添加されていない）。
【００５１】
シャーレ内に３ｃｍ×３ｃｍのガラス板を置いた後、内径：２ｃｍ、高さ：１ｃｍのガラス製円筒型リングの片方の端面に真空グリースを塗り、このリングを前記シャーレ内のガラス板の上に置いて密着させた。
【００５２】
次に、上記リング内に前記カビ胞子懸濁培地（チアベンダゾールが添加されたもの）を０．３ｍｌ入れ、このカビ胞子懸濁培地の厚み（深さ）が一定となるように揺すって広げた。尚、一つのリング内には、チアベンダゾールが添加されていないカビ胞子懸濁培地を０．３ｍｌ入れた。
【００５３】
この後、直ぐにシャーレに蓋をした。そして、２８℃にて７２時間培養し、培養４８時間後及び７２時間後にカビの生育状況を観察し、これによりチアベンダゾールの防カビ性能を評価した。この評価に際し、評価基準としては前述の６段階で評価する方法を採用した。即ち、下記のような６段階で評価する方法を採用した。
【００５４】
〔６段階評価〕
１：胞子が全面に発生している。
２：前記１と下記３の間の状態。
３：わずかに胞子の発生が認められる。
４：胞子は発生していないが、ほぼ全面に菌糸の生育が認められる。
５：胞子は発生していないが、わずかに菌糸の生育が認められる。
６：胞子の発生も菌糸の生育も認められない。
【００５５】
上記評価試験の結果を表２に示す。この表２からわかる如く、チアベンダゾールの濃度が２．５ｍｇ／Ｌ以下の場合には、カビの増殖が認められ、培養７２時間後には胞子が全面に発生しており、防カビ効果がなく、チアベンダゾールの濃度が５ｍｇ／Ｌの場合には、若干のカビ生育抑制効果があり、チアベンダゾールの濃度が１０ｍｇ／Ｌの場合には、培養７２時間後にも胞子の発生も菌糸の生育も認めらず、カビの生育が完全に阻止された。これは、カビ生育を阻止するに必要なチアベンダゾールの最小濃度が１０ｍｇ／Ｌであることを示している。
【００５６】
一般的に、チアベンダゾールのアスペルギルス・ニガーに対する最小カビ生育阻止濃度（アスペルギルス・ニガーの胞子からのカビ生育を阻止するために必要なチアベンダゾールの最小濃度）として公知の値は、１０ｍｇ／Ｌである。前記評価試験の結果として得られたチアベンダゾールのカビ生育阻止最小濃度（１０ｍｇ／Ｌ）は、この公知の値と一致している。
【００５７】
従って、前記の如き試験によれば、４８〜７２時間という短時間で防カビ剤のカビ生育阻止最小濃度を正確に求めることができることが確認された。
【００５８】
以上の結果より、前記の如き試験によれば４８〜７２時間という短時間で防カビ剤の防カビ性能を正確に評価することができることの他に、本発明の実施例１に係る防カビ性能評価試験方法によれば４８〜７２時間という短時間で評価試験対象材の防カビ性能を正確に評価することができることが確認された。
【００５９】
【表１】
0004441060.tif 000002
【００６０】
【表２】
0004441060.tif 000003
【００６１】
【発明の効果】
本発明に係る防カビ性能評価試験方法によれば、従来の防カビ性能評価試験方法の場合に比較し、極めて容易に、良好な再現性を有して信頼性に優れたデータを得ることができるようになる。また、従来の防カビ性能評価試験方法の場合に比較し、カビの生育速度が高く、短時間で評価試験対象材の防カビ性能を評価し得るようになる。