(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
背中合わせにした２枚の試料を付着させた試料プレートに対し、それらを両側から挟むようにして２枚組で使用され、各前記試料プレートとの間に形成された隙間に試薬を導入することにより前記試料に前記試薬を付与する試薬付与パッドであって、
各前記試薬付与パッドは、前記試料プレートに対面する試薬供給面に開口する試薬供給口と、
前記試薬供給口と連通し、試薬を貯留する貯留部と、
前記試薬付与パッドの一端部に設けられた試薬を保持し得、前記試薬供給面に開放する溝で構成された試薬保持手段とを有し、
各前記試薬保持手段で各前記試薬を保持することにより、一方の前記試料プレート側に導入された一方の前記試薬が、他方の前記試料プレート側に回り込むのを防止したことを特徴とする試薬付与パッド。
【請求項２】
前記試薬保持手段が他端部にも設けられている請求項１に記載の試薬付与パッド。
【請求項３】
前記溝の幅は、０．０５〜２ｍｍである請求項１または２に記載の試薬付与パッド。
【請求項４】
前記溝の深さは、０．０５〜５ｍｍである請求項１ないし３のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【請求項５】
前記溝は、格子状に形成されている請求項１ないし４のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【請求項６】
前記溝は、幅方向の全体に渡って形成されている請求項１ないし５のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【請求項７】
前記溝は、厚さ方向の全体に渡って形成されている請求項１ないし６のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【請求項８】
各前記試薬は、互いに異なる請求項１ないし７のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、試料を付着させた試料プレートを重ね合わせ、該試料プレートとの間に形成した隙間に試薬を導入することにより試料に試薬を付与する試薬付与パッドに関する。
【０００２】
【従来の技術】
例えばＩＳＨ（In Situ Hybridization）法による遺伝子の機能解析を行う際などには、スライドガラス等の試料プレートに付着させた生物組織切片等の試料を様々な試薬を付与して処理する場合がある。そのような場合において、微量の試薬（薬液）で試料を処理することができる試薬処理装置が特開平９−２８１０１７号公報において本願出願人により提案されている。
【０００３】
同公報に開示された試薬処理装置は、試薬供給プレート（試薬付与パッド）なる部材を有し、これを試料を付着させたスライドガラスに重ね合わせ、それらの間に形成された隙間に試薬を導入することにより試料に試薬を付与するものである。
【０００４】
図４は、同公報に開示された試薬処理装置における試薬付与パッドによってスライドガラスに付着させた試料に試薬を付与した状態を示す縦断面図である。
【０００５】
図４に示す試薬付与パッド９は、ほぼ長方形の板状をなしており、その内部には、試薬を貯留可能な貯留部（貯留空間）９１が形成されている。また、試薬付与パッド９のスライドガラス７に対面する方の面である試薬供給面９２には、試薬供給口９３が開口しており、この試薬供給口９３は、貯留部９１の図４中下端部に連通している。また、貯留部９１は、試薬付与パッド９の図４中上端部で外部に開放しており、開口部９４が形成されている。
【０００６】
前記試薬処理装置においては、このような試薬付与パッド９を用いて次のように試薬を付与する。まず、図示しない分注ノズル等により開口部９４から試薬Ｒ１を貯留部９１内に注入する。このとき、表面張力の作用により、試薬供給口９３から貯留部９１内の試薬Ｒ１が漏れ出すことはない。
【０００７】
次いで、試薬Ｒ１を貯留した試薬付与パッド９をスライドガラス７に重ね合わせる。これにより、試薬付与パッド９とスライドガラス７との間には隙間が形成され、貯留部９１内に貯留された試薬Ｒ１は、試薬供給口９３から流出して、この隙間に毛管現象（表面張力）により自然に広がっていく。
【０００８】
このようにして、図４に示すように、試薬付与パッド９とスライドガラス７との隙間のほぼ全域に試薬Ｒ１が導入され、スライドガラス７に付着された試料Ｓ１に試薬Ｒ１が付与される。これにより、必要最小限の量の試薬で確実に試料を処理することができ、試薬の無駄がなく、高価で貴重な試薬を用いる場合には特に有効である。
【０００９】
このような試薬付与パッド９を有する試薬処理装置の中には、多くのスライドガラス７を効率良く配置して装置の小型化を図るために、図４に示すように２枚のスライドガラス７を背中合わせにして保持するものがある。
【００１０】
すなわち、このタイプの試薬処理装置においては、図４に示すように、試料Ｓ１、Ｓ２をそれぞれ付着させた２枚のスライドガラス７が背中合わせの状態とされ、それらの上端部においてホルダー８で支持されている。そして、この背中合わせとされた２枚のスライドガラス７を両側から２枚の試薬付与パッド９で挟むようにして、それぞれのスライドガラス７に対して試薬付与パッド９を重ねる。
これにより、試料Ｓ１、Ｓ２に対し試薬Ｒ１、Ｒ２をそれぞれ付与する。
【００１１】
この際、付与した試薬の量が多い場合などには、図４中の矢印Ａおよび矢印Ｂで示す箇所（図４中の下端部）に余剰の試薬が溜まることがあり、場合によってはＡ部に溜まった試薬Ｒ１とＢ部に溜まった試薬Ｒ２とが互いに反対側のスライドガラス７に回り込むことがある。このとき、試薬Ｒ１、Ｒ２が同じものである場合には問題ないが、異なる試薬である場合には、相互にコンタミネーション（汚染）を生じる。
【００１２】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、コンタミネーションを防止し、常に正確な処理を行うことができる試薬付与パッドを提供することにある。
【００１３】
【課題を解決するための手段】
このような目的は、下記（１）〜（８）の本発明により達成される。
【００１４】
（１）  背中合わせにした２枚の試料を付着させた試料プレートに対し、それらを両側から挟むようにして２枚組で使用され、各前記試料プレートとの間に形成された隙間に試薬を導入することにより前記試料に前記試薬を付与する試薬付与パッドであって、
各前記試薬付与パッドは、前記試料プレートに対面する試薬供給面に開口する試薬供給口と、
前記試薬供給口と連通し、試薬を貯留する貯留部と、
前記試薬付与パッドの一端部に設けられた試薬を保持し得、前記試薬供給面に開放する溝で構成された試薬保持手段とを有し、
各前記試薬保持手段で各前記試薬を保持することにより、一方の前記試料プレート側に導入された一方の前記試薬が、他方の前記試料プレート側に回り込むのを防止したことを特徴とする試薬付与パッド。
【００１５】
（２）  前記試薬保持手段が他端部にも設けられている上記（１）に記載の試薬付与パッド。
【００１７】
（３）  前記溝の幅は、０．０５〜２ｍｍである上記（１）または（２）に記載の試薬付与パッド。
【００１８】
（４）  前記溝の深さは、０．０５〜５ｍｍである上記（１）ないし（３）のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【００１９】
（５）  前記溝は、格子状に形成されている上記（１）ないし（４）のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【００２０】
（６）  前記溝は、幅方向の全体に渡って形成されている上記（１）ないし（５）のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【００２１】
（７）  前記溝は、厚さ方向の全体に渡って形成されている上記（１）ないし（６）のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【００２２】
（８）  各前記試薬は、互いに異なる上記（１）ないし（７）のいずれかに記載の試薬付与パッド。
【００２３】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の試薬付与パッドを添付図面に示す好適な実施形態に基づいて詳細に説明する。
【００２４】
図１は、本発明の試薬付与パッドの実施形態を示す斜視図（斜め下から見た図）である。なお、以下の説明では、図１中の下側を「一端」、上側を「他端」、上下方向を「長手方向」、左右方向を「幅方向」と言う。
【００２５】
図１に示す試薬付与パッド１は、生物組織切片等の試料Ｓ１が付着されたスライドガラス（試料プレート）７を重ねることにより、該スライドガラス７との間に形成された隙間に試薬（薬液）Ｒ１を導入し、これにより試料Ｓ１に試薬Ｒ１を付与するものであり、例えば、生物組織に対してＩＳＨ（In Situ Hybridization）法の処理を行う処理装置などに使用することができるものである。
【００２６】
この試薬付与パッド１は、全体形状として、図１中の上下方向に長い長方形の板状をなしている。
【００２７】
試薬付与パッド１の内部の他端部側には、試薬Ｒ１を貯留可能な貯留部（貯留空間）１１が形成されている。貯留部１１の容積は、特に限定されないが、通常の大きさのスライドガラス７に対して使用するものの場合には、例えば４０〜２５０μｌ程度とすることができる。
【００２８】
試薬付与パッド１のスライドガラス７に対面する方の面である試薬供給面１２には、試薬供給口（孔）１３が開口している。この試薬供給口１３は、試薬付与パッド１の長手方向中央よりもやや他端部寄りに配置されており、貯留部１１の一端部に連通している。また、試薬供給口１３の開口面積は、スライドガラス７に重ねない状態のときに、貯留部１１内の試薬Ｒ１が表面張力によって外部に流出しない程度に設定されている。貯留部１１に貯留された試薬Ｒ１は、試薬供給口１３からスライドガラス７との隙間に導入される。
【００２９】
貯留部１１は、試薬付与パッド１の他端部で外部に開放しており、開口部１４が形成されている。貯留部１１内には、この開口部１４から試薬を注入することができる。
【００３０】
試薬供給面１２における図１中の左端部および右端部には、それぞれ、試薬付与パッド１とスライドガラス７との間の隙間（間隔）を規定するスペーサーとしての機能を有する凸条１７が長手方向にそって形成されている。これにより、試薬供給面１２とスライドガラス７との間隔が好適な寸法に規定され、試薬Ｒ１が毛管現象（表面張力）により確実に導入されるとともに、スライドガラス７に付着された試料Ｓ１を損傷することがない。
【００３１】
試薬付与パッド１の構成材料は、特に限定されず、例えば各種樹脂材料や各種金属材料等を１種または２種以上組み合わせて使用することができる。
【００３２】
試薬付与パッド１の大きさは、特に限定されないが、通常のスライドガラス７に対して使用するものとしては、例えば、長さ３０〜８０ｍｍ程度、幅１０〜３０ｍｍ程度、厚さ２〜５ｍｍ程度とされる。
【００３３】
このような試薬付与パッド１の一端部には、余剰の試薬Ｒ１を保持し得る試薬保持手段としての溝１５が形成されている。これにより、試料Ｓ１を付着させたスライドガラス７と重ねて試薬を付与したときに、試薬付与パッド１とスライドガラス７との隙間から溢れ出した余剰の試薬Ｒ１が溝１５内に吸収・保持され、コンタミネーションを防止することができる。
【００３４】
本実施形態においては、厚さ方向の溝１５が好ましくは等間隔で１１列程度、幅方向の溝１５が好ましくは等間隔で３列程度形成されており、これらの溝１５は、幅方向および厚さ方向の全体に渡って形成されている。すなわち、溝１５は、格子状に形成されており、各々の溝１５は互いに連通（連続）している。
【００３５】
このような構成により、余剰の試薬Ｒ１が多量の場合でもこれを吸収・保持することができる。また、試薬Ｒ１の垂れが局所的に生じ、溝１５の一部から余剰の試薬Ｒ１が入り込んだ場合でも、その試薬Ｒ１は毛管現象により溝１５の全域に自然に広がり、溝１５全体の試薬保持能力が活用される。これにより、より確実にコンタミネーションを防止することができる。
【００３６】
溝１５の幅（図２中のＬで示す長さ）は、特に限定されないが、０．０５〜２ｍｍ程度であるのが好ましく、０．５〜１ｍｍ程度であるのがより好ましい。
【００３７】
また、溝１５の深さは、特に限定されないが、０．０５〜５ｍｍ程度であるのが好ましく、１〜３ｍｍ程度であるのがより好ましい。
【００３８】
溝１５の幅や深さが前記範囲にあることにより、余剰の試薬Ｒ１がより速やかに溝１５内に吸収されるとともに、吸収された試薬Ｒ１をより確実に保持することができる。
【００３９】
本実施形態の試薬付与パッド１には、溝１５と同様の溝１６が他端部にも形成されている。これにより、溝１６においても余剰の試薬Ｒ１が吸収・保持され、より確実にコンタミネーションを防止することができる。なお、溝１６は、貯留部１１の開口部１４を避けて形成されている。
【００４０】
次に、試薬付与パッド１の作用について説明する。
図２および図３は、それぞれ、図１に示す試薬付与パッド１の使用状態を示す縦断面図であり、図２は、スライドガラス７に重ねる前の状態を示しており、図３は、スライドガラス７に重ねた後の状態を示している。
【００４１】
図２に示すように、試薬Ｒ１を貯留部１１に貯留した試薬付与パッド１と、試薬Ｒ２を貯留部１１に貯留した試薬付与パッド１とは、試薬供給面１２同士を向かい合わせた状態で図示しない支持部材により支持されている。このとき、試薬供給口１３においては、試薬Ｒ１、Ｒ２の表面張力により、試薬Ｒ１、Ｒ２が漏れ出すことはない。
【００４２】
試料Ｓ１、Ｓ２をそれぞれ付着させた２枚のスライドガラス７は、背中合わせの状態で、その上端部においてホルダー８に支持されている。２枚のスライドガラス７は、このような状態で、向かい合った２枚の試薬付与パッド１の間に挿入される。
【００４３】
図２に示す状態から、２枚の試薬付与パッド１は、それぞれ、図示しない移動機構によりスライドガラス７に近づくように移動し、スライドガラス７に重ね合わせられ、図３に示す状態となる。
【００４４】
これにより、試薬付与パッド１とスライドガラス７との間には隙間が形成され、貯留部１１内に貯留された試薬Ｒ１、Ｒ２は、それぞれ、試薬供給口１３から流出して、この隙間に毛管現象（表面張力）により自然に広がっていく。
【００４５】
このようにして、図３に示すように、試薬付与パッド１とスライドガラス７との隙間のほぼ全域に試薬Ｒ１、Ｒ２がそれぞれ導入され、各々のスライドガラス７に付着された試料Ｓ１、Ｓ２に試薬Ｒ１、Ｒ２がそれぞれ付与される。これにより、必要最小限の量の試薬で確実に試料を処理することができ、試薬の無駄がなく、高価で貴重な試薬を用いる場合には特に有効である。
【００４６】
また、試薬付与パッド１とスライドガラス７との隙間から図３中下端部に溢れ出した場合、余剰の試薬Ｒ１、Ｒ２は、それぞれ、試薬付与パッド１の溝１５内に吸収され、保持される。よって、図３中の矢印Ｃ部および矢印Ｄ部に試薬Ｒ１、Ｒ２が溜まることが防止（抑制）される。これにより、矢印Ｃ部と矢印Ｄ部との間で試薬が互いに回り込むことがなく、試薬Ｒ１と試薬Ｒ２とが互いに異なる場合であっても、コンタミネーションを防止して、正確な処理を行うことができる。
【００４７】
また、本実施形態においては、試薬付与パッド１の図３中上端部においても、溝１６によって余剰の試薬Ｒ１、Ｒ２が、それぞれ、吸収・保持され、矢印Ｃ部および矢印Ｄ部に流出する量が減少される。これにより、余剰量が多い場合であっても矢印Ｃ部および矢印Ｄ部に試薬Ｒ１、Ｒ２が溜まることがより確実に防止（抑制）され、より確実にコンタミネーションを防止することができる。
【００４８】
以上、本発明の試薬付与パッドを図示の実施形態について説明したが、本発明は、これに限定されるものではなく、試薬付与パッドを構成する各部は、同様の機能を発揮し得る任意の構成のものと置換することができる。
【００４９】
例えば、余剰の試薬を保持し得る試薬保持手段としては、溝に限らず、例えば凹部や孔部を形成したり、試薬を吸収し得る吸水部材を設置したり、これらを組み合わせたりするような構成であってもよい。
【００５０】
【発明の効果】
以上述べたように、本発明によれば、必要最小限の量の試薬で試料を処理することができ、試薬の無駄がない。
【００５１】
また、試薬付与パッドと試料プレートとの隙間から外部に溢れ出た余剰の試薬が試薬付与パッドの端部等に溜まることが防止（抑制）され、他の試薬付与パッドにより付与された他の試薬と相互にコンタミネーションを生じることがない。
これにより、相互に異なる試薬を付与する試薬付与パッドを組み合わせて使用する場合や、試薬の量が多い場合であっても確実にコンタミネーションを防止することができ、常に正確な処理を行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の試薬付与パッドの実施形態を示す斜視図（斜め下から見た状態）である。
【図２】図１に示す試薬付与パッドの使用状態を示す縦断面図（スライドガラスに重ねる前の状態）である。
【図３】図１に示す試薬付与パッドの使用状態を示す縦断面図（スライドガラスに重ねた後の状態）である。
【図４】従来の試薬付与パッドによってスライドガラスに付着させた試料に試薬を付与した状態を示す縦断面図である。
【符号の説明】
１            試薬付与パッド
１１          貯留部
１２          試薬供給面
１３          試薬供給口
１４          開口部
１５、１６    溝
１７          凸条
７            スライドガラス
８            ホルダー
９            試薬付与パッド
９１          貯留部
９２          試薬供給面
９３          試薬供給口
９４          開口部
Ｒ１、Ｒ２    試薬
Ｓ１、Ｓ２    試料
【図１】
0004528453.tif 000002
【図２】
0004528453.tif 000003
【図３】
0004528453.tif 000004
【図４】
0004528453.tif 000005