(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
未精製パーム油からフィトステロールとスクアレンとビタミンＥとを抽出する方法であって：
(a)  未精製パーム油をパーム油メチルエステルに変換する工程と；
(b)  前記工程(a)で得られた未精製パーム油メチルエステルを３段階の短路蒸留することにより、植物栄養素を産出する工程と；
(c)  前記工程(b)から得られた植物栄養素濃縮物を鹸化するステップと；
(d)  フィトステロールを結晶化する工程と；
(e)  ビタミンＥ及びスクアレンを溶剤分配する工程と
を含むことを特徴とする、未精製パーム油からフィトステロールとスクアレンとビタミンＥとを抽出する方法。
【請求項２】
第１段階の短路蒸留が、７０℃〜１２０℃の温度及び１０ｍＴｏｒｒ〜５０ｍＴｏｒｒの圧力で実施される、請求項１に記載のフィトステロール、スクアレン及びビタミンＥを抽出する方法。
【請求項３】
第２段階の短路蒸留が、請求項２で得られた蒸留物において１３０℃〜２００℃の温度及び１ｍＴｏｒｒ未満の圧力で実施される、請求項１に記載のフィトステロールとスクアレンとビタミンＥとを抽出する方法。
【請求項４】
第３段階の短路蒸留が、請求項３で得られた蒸留物において１２０℃未満の温度と１ｍＴｏｒｒ未満の圧力で実施される、請求項１に記載のフィトステロールとスクアレンとビタミンＥとを抽出する方法。
【請求項５】
植物栄養素濃縮物の鹸化過程が、１０％濃度の水酸化カリウム又は水酸化ナトリウムを使用して、不活性ガスシール下で３０分〜１時間にわたってアルコール中で還流されることにより実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記不活性ガスが窒素である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
不鹸化物が、炭化水素溶剤と該炭化水素溶剤に対して異なる比率の短鎖アルコール及び水と混合される、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
不鹸化物が、２５：１：１の比率の炭化水素溶剤、短鎖アルコール及び水と混合され、６５℃〜８５℃の温度まで加熱され、そして１０℃〜３０℃の温度までゆっくり冷却されることにより、フィトステロールが結晶化される、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
結晶化されたフィトステロールを濾過したろ液が５：３の比の炭化水素溶剤及び短鎖アルコールと混合されることにより、非極性スクアレンが炭化水素層内に、極性ビタミンＥがアルコール層内に分配される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
炭化水素溶剤がヘプタン、ヘキサン及びイソオクタンを含み、短鎖アルコールがメタノール、エタノール、ブタノール及びイソプロパノールを含む、請求項７、８及び９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
未精製パーム油からフィトステロールとスクアレンとビタミンＥとを抽出する方法であって：
（i）  未精製パーム油をパーム油メチルエステルに変換する工程と；
（ii）  前記工程(i)で得られたメチルエステルにおいて、７０℃〜１２０℃の温度及び１０ｍＴｏｒｒ〜５０ｍＴｏｒｒの圧力で第１段階の短路蒸留を実施する工程と；
(iii)  前記工程(ii)で得られた蒸留物において、１３０℃〜２００℃の温度及び１ｍＴｏｒｒ未満の圧力で、第２段階の短路蒸留を実施する工程と；
(iv)  前記工程(iii)で得られた蒸留物において、１２０℃未満の温度及び１ｍＴｏｒｒ未満の圧力で、第３段階の短路蒸留を実施する工程と；
(v)  １０％濃度の水酸化カリウム又は水酸化ナトリウムを使用して、窒素シール下で３０分間にわたってアルコール中で還流することにより、前記工程(iv)で得られた蒸留物の鹸化を実施する工程と；
(vi)  前記工程(v)における不鹸化物を、２５：１：１の比の炭化水素溶剤、短鎖アルコール及び水と混合し、該混合物を６５℃〜８５℃の温度まで加熱し、そして２５℃〜３０℃の温度までゆっくり冷却することにより、フィトステロールを結晶化する工程と；
(vii)  前記工程(vi)で得られたフィトステロールを濾過したろ液を、ヘプタン、ヘキサン及びイソオクタンから成る群から選択された炭化水素溶剤、及び、メタノール、エタノール、ブタノール及びイソプロパノールから成る群から選択された短鎖アルコールと、炭化水素溶剤と短鎖アルコールとの比５：３で混合し、これにより、非極性スクアレンを炭化水素層内に、そして極性ビタミンＥをアルコール層内に分配する工程と；
(viii)  前記２つの層を分離し、続いて、前記工程(vii)で選択された炭化水素溶剤を短鎖アルコール層内に添加し、そして前記工程(vii)で選択された短鎖アルコールを炭化水素層内に添加することにより、さらにビタミンＥとスクアレンとを分配する工程と；
（ix)  前記炭化水素層からスクアレンを抽出し、そして前記アルコール層からビタミンＥを抽出する工程と
を含むことを特徴とする、未精製パーム油からフィトステロールとスクアレンとビタミンＥとを抽出する方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
本発明は、未精製パーム油からフィトステロール、スクアレン及びビタミンＥを抽出することに関する。より具体的には、本発明は、未精製パーム油からフィトステロール、スクアレン及びビタミンＥを抽出するための統合的方法に関する。
【発明の背景】
【０００２】
パーム油は７００〜１０００ｐｐｍのビタミンＥ、３００〜６２０ｐｐｍのフィトステロール、及び２５０〜７３０ｐｐｍのスクアレンを含有する。本発明は、未精製パーム油から天然発生的なビタミンＥ、フィトステロール及びスクアレンを回収する方法に関する。
【０００３】
ビタミンＥは、天然発生的な脂溶性抗酸化物質、すなわち或る特定の植物性油に見出されるトコフェロール及びトコトリエノールから成る群である。トコトリエノールは、パーム油、小麦胚種油、ココナツ油及びトウモロコシ油に主に発生する。トコトリエノールは、トコフェロールよりも高い抗酸化活性を有する。このことは生化学研究において示されている(Serbinova他(1991年)、Pokomy,J (1987年)、Jacobsberg他(1978))。ヤシ油中に見出される総ビタミンＥの８０％を構成する支配的なビタミンＥ型として、トコトリエノールは、低コレステロール血効果を有することでも知られている(Tan他(1991)及びQureshi他(1991)）。
【０００４】
フィトステロールは、側鎖内の第２４位置でアルキル化されていることを除けば、コレステロールと構造的に類似する。植物中に圧倒的に多く見出される最も豊富なフィトステロール型は、β-シトステロール、スチグマステロール及びカンペステロールである。これらの化合物は、食物の天然成分であり、米国消費量に関して、１００〜５００ｍｇ/日の量で消費される(Weirauch, JL Gradner, JM 1978、「植物由来食品のステロール含量(Sterol content of foods of plant origin) J. Am. Diet. Assoc. 73:39-47))。β-シトステロールを採用して行われた研究では、β-シトステロールが血中コレステロール量を有意に低減することが判った(Farguhar, J W 他、1956年、Circulation ,1477-87)。パーム油はフィトステロールが豊富であり、このフィトステロールは６０％がβ-シトステロールであり、残り３８％はスチグマステロール及びカンペステロールである。したがってパーム油はフィトステロールの天然源の回収を可能にする。
【０００５】
スクアレンは種々の深海サメ肝油の主要成分である。このスクアレンは、フリーラジカルが衰弱作用を発揮し始める前に、身体からフリーラジカルをスカベンジすることができる強力な抗酸化物質である。試験により示されたように、スクアレンはこれが栄養補助食品として摂取された場合、発癌に対する予防効果を有することが実証されている。
【０００６】
スクアレンはパーム油中の副次的成分のうちの１つとして存在する。スクアレンは、高濃度で与えられた場合に価値のある抗酸化物質として回収することができる。
【０００７】
出願された関連特許には、国際公開第00/09535号パンフレット、英国特許第531226号明細書、同第549931号明細書、同第531224号明細書及び欧州特許第0541999号明細書が含まれる。これらの特許明細書は、ビタミンＥの回収、又はビタミンＥ及びフィトステロールの回収に重点を置いており、本発明において記載したような、ビタミンＥ、フィトステロール及びスクアレンを一緒に回収する統合的な方法には重点を置いていない。上記特許された発明は、１段式の真空蒸留で行われるものにすぎず、このような真空蒸留は、本発明において記載したような高分子量成分の除去には役立たない。したがって本発明の目的は、これらの高価値の副次化合物、すなわちビタミンＥ、フィトステロール及びスクアレンを精製し回収して、高純度の結晶化フィトステロールと共にそれぞれの画分を形成する方法を提供することである。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、高価値のパーム油植物栄養素、より具体的にはビタミンＥ、フィトステロール及びスクアレンを回収する統合的方法であって、パーム油を低級アルキルアルコールで、酸/アルカリによる触媒作用下でエステル化/エステル交換する工程と、アルキルエステルを多段真空蒸留する工程と、植物栄養素濃縮物を鹸化する工程と、フィトステロールを結晶化する工程と、最後にビタミンＥとスクアレンとを有機溶剤で分配する工程とを含む。
【０００９】
アルキルエステル及びグリセロールの生成の際にグリセリドのグリセロール部分をアルキル基と置換するための触媒として、水酸化ナトリウム及び水酸化カリウムを使用して、アルキルアルコール、好ましくはメタノール及びエタノール中で、未精製パーム油がエステル化された。使用されるアルキルアルコールのタイプは、生成されるアルキルエステルの揮発性に依存する。この場合好ましいのは、アルキル鎖長がより短い低沸点アルキルエステルである。
【００１０】
低沸点アルキルエステルは、多段真空蒸留、好ましくは後述するような種々異なる作業条件で３段短路蒸留（ＳＰＤ）された。第１の短路蒸留は、バルク状エステルの約９０％を蒸留する目的で行われ、最少量のビタミンＥ、フィトステロール及びスクアレンが蒸留されて蒸留物となる。適用された短路蒸留条件は、７０℃〜１２０℃の範囲の温度、及び１０ｍＴｏｒｒ〜５０ｍＴｏｒｒの範囲の圧力である。植物栄養素が濃縮された残留物は次いで第２短路蒸留され、カロチン、リン脂質、糖脂質、蝋、酸化生成物及びその他の長鎖炭化水素を含む不純物及び着色材料/顔料が除去された。作業条件は１３０℃〜２００℃の範囲の温度、及び１ｍＴｏｒｒ未満の範囲の圧力である。続いて、第２の短路蒸留から生じた蒸留物は第３短路蒸留され、これにより、ビタミンＥ、フィトステロール、スクアレン及びモノグリセリドの濃縮物が混合物の形で生成された。この場合作業温度は１３０℃未満であり、作業圧力は１ｍＴｏｒｒ未満である。精製された濃縮物は、これに続く分離過程及び精製過程において臨界的な固有の重い分子を含有していない。
【００１１】
精製された濃縮物に対して、水酸化物及びアルコールの存在において鹸化法が実施される。使用される水酸化物は、水酸化ナトリウム及び水酸化カリウムであり、これに対して使用されるアルコールはメタノール、エタノール及びイソプロパノールを含む。ヘプタン、ヘキサン、イソオクタン及び石油エーテルのような反応混合物の炭化水素溶剤抽出を用いて、不鹸化物が回収された。炭化水素層が、多量の水による洗浄によって中和され、ビタミンＥ、フィトステロール及びスクアレンだけを含有する不鹸化物が回収された。
【００１２】
好ましくは７０℃〜８５℃から２５℃〜３５℃への加熱・冷却過程により、水/アルコール/炭化水素系を使用して、不鹸化混合物からフィトステロールが晶出された。結晶化されたフィトステロールがろ過され、混合物の残分に炭化水素溶剤及びアルキルアルコールを導入することにより、より低い極性のスクアレンが炭化水素層内に、また比較的高極性のビタミンＥがアルキルアルコール層内に分配された。使用されるアルキルアルコールはメタノール及びエタノールを含み、使用される炭化水素溶剤はヘキサン、ヘプタン及びイソオクタンを含む。
【００１３】
図１を参照しながら本発明を以下に説明する。下記の工程は、抽出法に関与する工程の例である。使用した量及びパラメータは一例であり、特に断りのない限り本発明を制限するものではない。
【例１】
【００１４】
２．５ｋｇのメタノールと５０ｇのＮａＯＨとを触媒として、５ｋｇの未精製パーム油をエステル化した。メチルエステルをグリセロールから分離して、水で洗浄することにより中和した。メチルエステルを９０℃の温度及び２０ｍＴｏｒｒの圧力で、第１短路蒸留した。次いで残留物を、１５０℃の作業温度及び１ｍＴｏｒｒの圧力で第２短路蒸留することにより、全ての着色材料/顔料を除去した。続いて、９０℃の温度及び１ｍＴｏｒｒの圧力で、僅かに黄味がかった蒸留物を第３短路蒸留して、ビタミンＥ、フィトステロール及びスクアレン（植物栄養素）の濃縮物を生成した。植物栄養素濃縮物の詳細な分析結果を表１に示す。
【００１５】
【表１】
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【例２】
【００１６】
例１又はその他の源から得られた、精製植物栄養素濃縮物３ｇを、５ｍｌの１０％ＫＯＨ及び２ｍｌのエタノールを使用して鹸化した。この混合物を３０分間にわたって窒素シール下で還流した。反応混合物を、１０ｍｌのエタノール、２０ｍｌの蒸留温水及び３０ｍｌのヘキサンと一緒に分離用漏斗に移した。この混合物を震盪し、室温まで冷却し、頂部にヘキサン層を、底部に水性層を残した。ヘキサン可溶性の不鹸化物を頂部から捕集し、これに対して水性層をさらに、９：１の比の３０ｍｌのヘキサン/水で５回抽出した。回収したヘキサン層を水で洗浄することにより中和し、そして溶剤全てを回転蒸発器及び真空ポンプ乾燥器により除去した。ビタミンＥ、フィトステロール及びスクアレンの回収率は８３％、９３％及び８６％である。詳細な分析結果を表２に示す。
【００１７】
【表２】
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【例３】
【００１８】
例２又はその他の源から得られた、精製植物濃縮物の鹸化から生じた不鹸化物０．４２ｇに、５ｍｌのエタノール、５ｍｌのヘキサン及び０．５ｍｌの蒸留水を添加した。この混合物を震盪して均質状態にし、沈降させて２つの層にした。頂部のヘキサン層を底部のエタノール/水層から分離した。回転蒸発器及び真空ポンプ乾燥器を用いて、溶剤を除去した。ヘキサン層中のスクアレン濃度は４１％であり、その回収率は９７％である。またエタノール層中のステロール濃度は６４．７％であり、その回収率は５２．９％である。ヘキサン層中のビタミンＥ濃度は１２％であり、エタノール層中のビタミンＥ濃度は２０．４％である。詳細な分析結果を表３に示す。
【００１９】
【表３】
0004424939.tif 000004
【例４】
【００２０】
例３又はその他の源から得られた精製植物濃縮物の鹸化から生じたフィトステロール濃度３９．４％の不鹸化物０．８ｇに、２．５ｍｌのヘキサン、０．１ｍｌのメタノール及び０．１ｍｌの蒸留水を添加した。この混合物を７０℃まで加熱して、２８℃までゆっくりと冷却した。形成された固体結晶を吸引によりろ過し、多量のヘキサンで洗浄した。ろ液中の溶剤を回転蒸発器により蒸発させ、真空ポンプで乾燥させた。フィトステロール濃度は９９％であり、回収率は６３．５％である。詳細な分析結果を表４に示す。
【００２１】
【表４】
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【例５】
【００２２】
例４又はその他の源から得られた精製植物濃縮物の鹸化から生じたフィトステロール濃度３９．４％の不鹸化物０．７３ｇに、３．５ｍｌのヘキサン、０．１ｍｌのメタノール及び０．１ｍｌの蒸留水を添加した。この混合物を７０℃まで加熱して、２８℃までゆっくりと冷却した。形成された固体結晶を吸引によりろ過し、多量のヘキサンで洗浄した。ろ液中の溶剤を回転蒸発器により蒸発させ、真空ポンプで乾燥させた。フィトステロール濃度は９９％であり、回収率は４１．７％である。詳細な分析結果を表５に示す。
【００２３】
【表５】
0004424939.tif 000006
【例６】
【００２４】
例５又はその他の源から得られた精製植物濃縮物の鹸化から生じたフィトステロール濃度３９．４％の不鹸化物０．６９ｇに、２．５ｍｌのヘキサン、０．０５ｍｌのメタノール及び０．１ｍｌの蒸留水を添加した。この混合物を７０℃まで加熱して、２８℃までゆっくりと冷却した。形成された固体結晶を吸引によりろ過し、多量のヘキサンで洗浄した。ろ液中の溶剤を回転蒸発器により蒸発させ、真空ポンプで乾燥させた。フィトステロール濃度は９９％であり、回収率は３６．８％である。詳細な分析結果を表６に示す。
【００２５】
【表６】
0004424939.tif 000007
【例７】
【００２６】
例６又はその他の源から得られた精製植物濃縮物の鹸化から生じたフィトステロール濃度５４．４％の不鹸化物０．７１ｇに、２．５ｍｌのヘキサン、０．１ｍｌのメタノール及び０．１ｍｌの蒸留水を添加した。この混合物を７０℃まで加熱して、２８℃までゆっくりと冷却した。形成された固体結晶を吸引によりろ過し、多量のヘキサンで洗浄した。ろ液中の溶剤を回転蒸発器により蒸発させ、真空ポンプで乾燥させた。フィトステロール濃度は９９％であり、回収率は４１％である。詳細な分析結果を表７に示す。
【００２７】
【表７】
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【例８】
【００２８】
フィトステロールの結晶化後、例５又はその他の溶剤から得られたろ液０．２９グラムに、５ｍｌのヘキサン及び２ｍｌのメタノールを添加した。この混合物を震盪して均質状態にし、沈降させて２つの層にした。頂部のヘキサン層を底部のメタノール層から分離した。回転蒸発器及び真空ポンプ乾燥器を用いて、溶剤を除去した。メタノール層中のビタミンＥ濃度は３１．３％であり、その回収率は５２．６％である。またヘキサン層中のスクアレン濃度は５１％であり、その回収率は８７．５％である。詳細な分析結果を表８に示す。
【００２９】
【表８】
0004424939.tif 000009
【例９】
【００３０】
フィトステロールの結晶化後、例７又はその他の溶剤から得られたろ液０．３４グラムに、５ｍｌのヘキサン及び３ｍｌのメタノールを添加した。この混合物を震盪して均質状態にし、沈降させて２つの層にした。頂部のヘキサン層を底部のメタノール層から分離した。回転蒸発器及び真空ポンプ乾燥器を用いて、溶剤を除去した。ヘキサン層中のビタミンＥ濃度は５１．２％であり、その回収率は５７．５％である。またヘキサン層中のスクアレン濃度は４４．２％であり、その回収率は９５．４％である。詳細な分析結果を表９に示す。
【００３１】
【表９】
0004424939.tif 000010
【例１０】
【００３２】
精製植物栄養素濃縮物から得られたフィトステロールを結晶化した後の不鹸化物のろ液を、連続的な有機溶剤分配により処理して、ビタミンＥ及びスクアレンの濃度を高めた。ろ液０．６ｇに５ｍｌのヘキサン及び３ｍｌのメタノールを添加した。混合物を１５℃まで１５分間にわたって冷却した。ヘキサン層をメタノール層から分離して分析した。続いて１ｍｌのヘキサンをメタノール層に添加し、１ｍｌのメタノールをヘキサン層に添加した。１５℃までさらに１５分間にわたって冷却した後、ヘキサン層及びメタノール層全てを分離した。全ての試料をビタミンＥ及びスクアレンの含量に関して分析した。メタノール層の第２の分配後のメタノール相中のビタミンＥ濃度は７９．３％であり、回収率は３４．９％である。ヘキサン層の第２の分配後のヘキサン相中のスクアレン濃度は７７．２％であり、回収率は６５．５％である。詳細な分析結果を表１０に示す。この方法を図２に示す。
【００３３】
【表１０】
0004424939.tif 000011
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】図１は、植物栄養素濃縮物の抽出法を示す概略図である。
【図２】図２は、連続的な有機溶剤分配による不鹸化物のろ液の処理を示す図である。
【図１】
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【図２】
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