(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
メチレンビスオキサゾリジン誘導体及び１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸誘導体を含有することを特徴とする安定な殺菌剤組成物。
【請求項２】
前記組成物が、１２までのｐＨを有することを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記メチレンビスオキサゾリジン誘導体が、３，３’−メチレンビス（５−メチルオキサゾリジン）であることを特徴とする請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記カルバミン酸誘導体が、１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸メチル又はその塩、及び１−（ブチルカルバモイル）ベンズイミダーゾール−２−イルカルバミン酸メチルから選択されることを特徴とする請求項１〜３の何れか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物が、さらに殺菌剤として活性な化合物、添加剤及び／又は助剤を含有することを特徴とする請求項１〜４の何れか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物が、水性相及び／又は有機相を含有することを特徴とする請求項１〜５の何れか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記カルバミン酸誘導体の含有量が、１質量％を超えることを特徴とする請求項１〜６の何れか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記メチレンビスオキサゾリジン誘導体の含有量が、９９質量％以下であることを特徴とする請求項１〜７の何れか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物が、請求項１に記載の成分のみを含有することを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
作物保護用生成物、種処理用組成物、コンテナ防腐剤、切削液添加剤、燃料添加剤、低発泡性消毒剤、植物の刈り込み傷寄生虫制御用組成物、植物の刈り込み傷処理用組成物、外部用途用フィルム防腐剤及び内部用途用フィルム防腐剤、真菌による集落形成が非常に起こり得る場所に使用するための消毒剤、及び木材保護用組成物における請求項１〜９の何れか１項に記載の組成物の使用。
【請求項１１】
液体調製物において１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸誘導体の溶解性を増加させるためのメチレンビスオキサゾリジン誘導体の使用。
【請求項１２】
選択されるメチレンビスオキサゾリジン誘導体が、３，３’−メチレンビス（５−メチルオキサゾリジン）であることを特徴とする請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
前記カルバミン酸誘導体が、１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸メチル又はその塩、及び１−（ブチルカルバモイル）ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸メチルから選択されることを特徴とする請求項１１又は１２に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、工業製品に使用するための液体調製物又は防腐剤における１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸誘導体の溶解性を増加させるためのメチレンビスオキサゾリジン誘導体の使用に関する。
【０００２】
１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸メチル（カルベンダジム）は、殺真菌剤として当該技術分野において知られている。該活性化合物は、殺菌作用は有さず、水及びたいていの有機溶媒に実質的に不溶である。従って、塩の形成(例えば、ＨＣｌ、Ｈ2ＳＯ4、マロン ＡＳ ３(Ｍａｌｏｎ ＡＳ ３)（ベンゼンスルホン酸の４−Ｃ10-13−ｓｅｃ−アルキル誘導体を用いて）によってのみ、例えば液体濃縮物において使用可能な程度まで、調製物におけるカルベンダジムの溶解性を改良することができる。カルベンダジムの塩の例は、FR 2 405 018及びUS 4,046,906に記載されている。しかしながらその場合には、塩を形成させるのに、相当な反応費用が必要となる。従って、例えばカルベンダスルフ(carbendasulf)（カルベンダジムとモノ−Ｃ10-14−アルキルベンゼンスルホン酸の塩）を製造するためには、プロピレングリコール中でカルベンダジムとＭａｌｏｎ ＡＳ ３を４時間加熱する必要がある。さらに、この反応では副生成物が形成され、その結果活性を失う。上述の液体調製物におけるカルベンダジムの濃度は４質量％未満であり、しばらくたつと頻繁に沈殿がおこる。カルベンダジム及びカルベンダスルフは、実質的に水系に不溶である。
【０００３】
市販の製品パルメトール ＤＦ １９ フォルテ(Ｐａｒｍｅｔｏｌ ＤＦ １９ Ｆｏｒｔｅ)（カルベンダジム（殺真菌剤）とジウロン（１，１−ジメチル−３−（３，４−ジクロロフェニル）ウレア）（殺藻剤）を基にした水性分散体）のようなカルベンダジムを基にした水性分散体が知られている。しかしながら、そのような調製物は水に不溶である。また、限られた含有量のカルベンダスルフ（例えば市販の製品パルメトール ＤＦ １８）を有する安定なカルベンダスルフ含有濃縮物が当該技術分野で知られている。しかしながら、それらは低温に対して安定性が不十分で、水中にて透明な溶液は全く形成されない。
【０００４】
これまで、殺真菌剤として活性な化合物としてカルベンダジム又はカルベンダスルフを含有する水性調製物の調製は実現することができないか、又は経済的ではないと考えられきた。
【０００５】
３，３’−メチレンビス−（５−メチルオキサゾリジン）（商品名：Ｍａｒ ７１）のようなメチレンビスオキサゾリジン誘導体は、水溶性殺菌剤として用いられる；しかしながら、実際にはそれらはしばしば低殺真菌活性を有するのみである。
【０００６】
例えばＭａｒ ７１及び殺真菌剤Ｋａｔｈｏｎ ８９３（１，２−プロピレングリコール中のＮ−オクチルイソチアゾロンの調製物）の液体調製物が知られている。しかしながら、これらの製品はアルカリに対して十分に安定でなく、特に、殺真菌剤は、約９．５を超えるｐＨで分解し、さらに求核剤によって分解を受ける。
【０００７】
従って、本発明の目的は、液体調製物において１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸誘導体の溶解性を増加させ、優れた殺真菌活性又は殺藻活性に加えて、十分な殺菌活性、適切な場合には、殺ウイルス活性を有する組成物を提供することである。潤滑剤（濃縮物及び乳剤）を冷却する際に可能な応用であるという観点で、塗料、下塗り及びシール材料(seal materials)のような殺真菌性、殺藻性、殺菌性及び／若しくは殺ウイルス性の製品の仕上げ又はコーティングにおいて、用いられる基質はアルカリに対して十分に安定性を有するべきである。
【０００８】
この目的は、メチレンビスオキサゾリジン誘導体を用いて、液体調製物において１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸誘導体の溶解性を増加させることで達成される。
【０００９】
従って、本発明はまた、メチレンビスオキサゾリジン及び１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸誘導体を含有することを特徴とする安定な殺菌剤組成物を提供する。ここで殺菌剤組成物(microbicidal composition)は、殺藻剤組成物、殺菌剤組成物(bactericidal)、殺真菌剤組成物及び／又は殺ウイルス剤組成物を意味すると理解され得る。
【００１０】
さらに本発明は、かかる組成物の使用について提供する。
好ましい態様は、従属請求項の対象である。
驚くべきことに、メチレンビスオキサゾリジン誘導体の存在下において、１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸誘導体（カルベンダジム）の均一な透明の溶液が調製され得ることを見出した。
【００１１】
さらに、メチレンビスオキサゾリジン誘導体、及び適切な場合には他の活性化合物、添加剤及び／又は助剤を用いることにより、カルベンダジムの含有量が１０質量％を超え得る均一な透明の濃縮物を得ることが可能であることを見出した。
【００１２】
これら濃縮物を用いて、水で希釈することで、同様に透明で均一なすぐに使用可能な溶液を調製することができる。優れた殺菌作用に加えて、これらすぐに使用可能な希釈物は、すばらしい殺真菌活性及び殺藻活性及び／又は殺ウイルス活性を有する。
【００１３】
好都合なことに、得られる調製物のホルムアルデヒドの匂い及び放出が同時に、特にカルベンダジムが高含有量の際には、強力に減少される。
【００１４】
さらに該調製物は、かなりアルカリ及び低温に対して優れた安定性を有する。さらにそれらは十分高い緩衝能力を有し、アルカリ媒質中で保たれる。
【００１５】
本発明に従ったこれら調製物からのホルムアルデヒド及びホルムアルデヒド蓄積化合物の放出は、単一の成分に基づいた調製物（例えば、Ｍａｒ ７１）の放出よりも相当低い。さらに、カルベンダジムとともにメチレンビスオキサゾリジンを本発明に従って使用すると、相乗作用を引き起こす。
【００１６】
本発明に従った組成物は、一般に１２までのｐＨ、好ましくは１１までのｐＨ、さらに好ましくは１０までのｐＨを有する。
本発明に従った組成物を調製するために、３，３’−メチレンビス（５−メチルオキサゾリジン）（商品名Ｍａｒ ７１）を用いるのが好ましい。
【００１７】
好ましいカルバミン酸誘導体は、１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸メチル又はその塩（例えば、一塩酸塩、一臭化水素酸塩若しくはＭａｌｏｎ ＡＳ ３酸の塩）、及び１−（ブチルカルバモイル）ベンズイミダゾール−２−イルカルバミン酸メチルから選択される。
【００１８】
組成物は、さらに活性化合物、具体的にはＮ−ホルマール及び／若しくはＯ−ホルマール、添加剤、及び／又は助剤を含有してもよい。例えば、下記の物質を添加することが可能である：
・Ｎ−ホルマール（例えば、Ｇｒｏｔａｎ ＢＫ、アルファ，アルファ’，アルファ”−トリメチル−１，３，５−トリアジン−１，３，５−（２Ｈ，４Ｈ，６Ｈ）−トリエタノール、４，４−ジメチルオキサゾリジン、ジメチロールウレア、５−エチル−３，７−ジオキサ−１−アザビシクロ[３．３．０]オクタン、２−（ヒドロキシメチルアミノ）エタノール、メチレンビステトラヒドロ−１，３−ビスオキサジン、Ｎ−メチロールクロロアセトアミド、ビス（ヒドロキシメチル）−５，５−ジメチルヒダントイン、ジアゾリジニルウレア、Ｎａ−ヒドロキシメチルグリシナート、３，４，４−トリメチルオキサゾリジン）、Ｏ−ホルマール（例えば、プロピレングリコールへミホルマール、プロピレングリコールビスヘミホルマール、エチレングリコールビスヘミホルマール、ベンジルアルコールへミホルマール、ブチルジグリコールヘミホルマール）、複素環式化合物（例えば、１，２−ベンズイソチアゾリン−３−オン、５−クロロ−２−メチルイソチアゾリン−３−オン、２−メチルイソチアゾリン−３−オン、Ｎ−オクチルイソチアゾリン−３−オン、２−メルカプトピリジン Ｎ−オキシド又はその塩（ナトリウム若しくは亜鉛の塩）、ピリオンジスルフィド(pyrion disulphide)、チアベンザゾール、Ｎ−シクロヘキシルベンゾ（ｂ）チオフェン−２−カルボキシアミド １，１−ジオキシド）、ハロゲン化有機化合物（例えば、３−ヨードプロピニルブチルカルバメート、２−ブロモ−２−ニトロプロパン−１，３−ジオール、ジブロモジシアノブタン）のようなさらなる殺菌剤として活性な化合物；
・Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ−ニトロソヒドロキシルアミン又はその塩（例えば、Ｎａ、Ｋ若しくはＡｌの塩）のような他の活性な化合物；
・ジウロン（１，１−ジメチル−３−（３，４−ジクロロフェニル）ウレア）、Ｉｒｇａｒｏｌ １０５１（２−メチルチオ−４−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−６−シクロプロピルアミノ−ｓ−トリアジン）、テルブトリン（２−メルチオ−４−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−６−エチルアミノ−ｓ−トリアジン）のような殺藻剤；
・殺虫薬、ダニ駆除剤、殺線虫剤；
・ｐＨ調節又はｐＨ調整用物質（例えば、アミン又はアルカノールアミン、特に第一級アミン及び第三級アミン又はアルカノールアミン、酸、カルボン酸、塩、緩衝液）；
・匂いマスキング物質、匂い調節剤、芳香剤；
・着色剤；
・腐食作用に対する保護用添加剤；
・安定剤；
・水、アルコール、グリコール、グリコールエーテル等のような溶媒（例えば、エタノール、プロパノール、１，２−プロピレングリコール、トリエチレングリコール、１−メトキシプロパン−２−オール、ブチルジグリコール、フェノキシエタノール、フェノキシプロパノール）。
【００１９】
本発明に従った組成物は、水性相及び／又は有機相を含有することができる。それらは、液体、粘性液体又はペーストの形態で存在し得る。それらは、濃縮物又はすぐに使用可能な溶液の形態で存在し得る。
【００２０】
カルバミン酸誘導体の含有量は、一般に１質量％を超え、好ましくは５質量％を超え、さらに好ましくは１０質量％を超える。
メチレンビスオキサゾリジン誘導体の含有量は、一般に９９質量％以下、好ましくは９５質量％以下、さらに好ましくは９０質量％以下である。
また本発明に従った組成物は、他の物質を添加することなく、カルバミン酸誘導体及びメチレンビスオキサゾリシン誘導体のみを含有していてもよい。
【００２１】
本発明に従った組成物は、当該技術分野において既知の方法により一般に調製される。一般に、本発明に従った組成物を得るためには、濾過等の処理工程と合わせて、室温にて又は加熱しながら（例えば、１００℃まで）単に成分を混合すれば十分である。
【００２２】
本発明に従って得られる調製物は、液体殺菌製品及び水溶性殺菌製品のような工業製品に好都合に組み込まれることが可能であり、作物保護又は種処理（植物衛生）に用いられ得る。さらにそれらは、殺菌活性を有する工業用防腐剤、コンテナ防腐剤、切削液添加剤、燃料添加剤及びその他の工業用防腐剤に組み込まれ得る。またそれらは、消毒剤、特に殺菌活性を有する低発泡性(low-foam)消毒剤に用いることができる。またそれらは、植物の刈り込み傷寄生虫制御用組成物、植物の刈り込み傷処理用組成物、真菌による集落形成が非常に起こり得る場所に使用するための消毒剤、外部用途用フィルム防腐剤及び特に内部用途用フィルム防腐剤及び木材保護用組成物に用いることができる。
【００２３】
例えば上述のように、本発明に従った組成物の工業製品への組み込みは、すでに完成した組成物を添加することにより行われ得る。あるいは、本発明に従った組成物の成分を別々に、同時にあるいは異なる時間に工業製品に組み込むことにより添加が行われ得る。
【００２４】
ここで用いる濃度は、工業製品の質量に対して、一般に０．０１質量％よりも大きく、好ましくは０．０５質量％よりも大きく、さらに好ましくは０．１０質量％よりも大きい。
【００２５】
例
例１：殺真菌剤又は殺菌剤及び特定のＮ−ホルマールを基にした調製物
【表１】
0004545934.tif 000002
【００２６】
方法：
別個のバッチにて、試験濃度の活性化合物／生成物を住宅用塗料に組み込み、既知の試験方法を用いて、殺真菌剤仕上げ及び／又は殺藻剤仕上げを測定した。組み込み及び試験は、以下に示すＳＭ ０２２方法及びＳＭ ０２３方法に従って行った。
【００２７】
試験方法  ＳＭ−０２２
真菌の攻撃に対する耐性測定
真菌の攻撃に対する住宅用コーティングの耐性を測定するために、この実験方法を用いた。該方法において、試験基質として標準化ペーパー上の住宅用コーティングを用い、試験真菌としてアスペルギルス属ニガー（ＡＴＣＣ ６２７５）及びペニシリウム属フニクロスム(funiculosum)（ＡＴＣＣ ３６８３９）を用いた。実験は、デキストロース培地上にてペトリ皿の中で行った。
【００２８】
サンプル調製：
別個のバッチで、仕上げ用材料５０ｇを種々の濃度の試験用殺真菌剤と混合し、バスケットスターラーを用いて３〜５分間均質化させた。
試験対象物の調製：
９０×２７０ｍｍの面積を有するペーパーキャリア材料（Schleicher ＆ Schull No. 2589 B/X 24078）を試験材料でコーティングした。湿った状態の層の厚さが２５０μｍになるように、ナイフ塗布により塗料及び／又は下塗りサンプルをコーティングした。このナイフは、少なくとも６．５ｃｍ幅の開口部(opening)を有していた。下塗りの場合、実際には、層の厚さは粒子サイズに依存していた。次に、上述のコーティングしたキャリア材料（これ以降、試験体と称する）を５日間垂直にして乾燥させた。
【００２９】
試験体の前処理：
流速１１／分で７２時間、１５±５℃の水道水を試験体に給水し、次に２日間乾燥させた。給水用容器の流れの方向の断面積は１０００±５００ｃｍ2であった。
前処理した試験体から直径５ｃｍのサンプル体を打ち抜き、少なくとも１０ｋＧｙを用いてＣｏ60源で殺菌した。
【００３０】
試験プロトコル：
接種及びインキュベージョン
ペトリ皿にて凝固したサブローデキストロース寒天培地に芽胞懸濁液０．２ｍｌ（１０7芽胞／ｍｌ）を接種し、無菌のドリガルスキースパチュラ又はオフセット無菌ガラス棒を用いてプレートアウトした。
次に、一対のピンセットを用いて前処理したサンプル体を該培地の接種した表面上に平坦に配置させ、サンプル体の全表面が該培地の表面に確実に接触するようにした。次にこのサンプルを３０±２℃で３週間インキュベートした。他の試験微生物の場合、インキュベーション温度は最適に成長をするように変更する必要があった。
【００３１】
評価：
１、２及び３週間後に、真菌の成長に関してサンプル体を検査した。評価は、視覚的に、又はもしこれが外部からの感染を除外する必要がある場合には、拡大鏡を用いて行った。観察される外部の生物による集落形成の度合いが相当観察され、評価を妨害していた場合には、その実験は評価することができず、再度行った。サンプルの評価は、下記の評価段階を基準にして行った：
００−集落形成のない完全な平板*
０  −ゾーン形成（サンプルの周囲に集落形成はない）*
(０)−サンプルに至るまでの真菌集落形成*
１  −サンプルの端のみ集落形成されている*
２  −サンプルは、端から内部に集落形成されている（２５％未満）
３  −サンプル表面は個々のコロニーによって集落形成されている（２５から７５％）
４  −サンプル表面は広範囲にわたり集落形成されている（７５％以上、しかし、全表面ではない）
５  −サンプル表面は、完全に集落形成されている（１００％）
* 注釈：００、０、（０）及び１と評価されるサンプルは、「真菌の成長に対して効果的に仕上げられている」と言うことができる。
【００３２】
試験方法  ＳＭ−０２３
藻による集落形成に対する耐性の測定
藻の集落形成に対する住宅用コーティングの耐性を測定するために、この実験方法を用いた。この方法において、試験基質として標準化ペーパー上の住宅用コーティングを用い、試験藻としてクロレラ属フスカ(fusca)を用いる。さらに実際に関連性のある他の藻種の純粋培養を使用することが可能である。
実験は、寒天培地上にてペトリ皿の中で行った。
【００３３】
サンプル調製：
別個のバッチで、種々の濃度の試験する殺藻剤と仕上げ用材料５０ｇを混合し、バスケットスターラーを用いて３〜５分間均質化させた。
【００３４】
試験対象物の調製：
９０×２７０ｍｍの面積を有するペーパーキャリア材料（Schleicher ＆ Schull No. 2589 B/X 24078）を試験材料でコーティングした。湿った状態の層の厚さが２５０μｍになるように、ナイフ塗布により塗料及び／又は下塗りサンプルをコーティングした。このナイフは、少なくとも６．５ｃｍ幅の開口部を有していた。下塗りの場合、実際には、層の厚さは粒子サイズに依存していた。次に、コーティングしたキャリア材料（これ以降、試験体と称する）を５日間垂直にして乾燥させた。
【００３５】
試験体の前処理：
流速１１／分で７２時間、１５±５℃の水道水を試験体に給水し、次に２日間乾燥させた。給水用容器の流れの方向の断面積は１０００±５００ｃｍ2であった。
前処理した試験体から直径５ｃｍの３つのサンプル体を打ち抜き、少なくとも１０ｋＧｙを用いてＣｏ60源で殺菌した。
【００３６】
試験プロトコル：
接種及びインキュベーション
無菌状態で、サンプルを藻培地上に配置させ、サンプルの中心を各藻懸濁液５ｍｌで接種した。
ドリガルスキースパチュラ又はオフセット無菌ガラス棒を用いて藻懸濁液の混合物を該表面に広げた。
２２±２℃で成長段階の間に、ペトリ皿中のコーティングしたサンプルを約１００ルクスの強度の光（通常の蛍光灯、タイプ Ｄ ６７ 昼光）を照射した。各々の場合において照射１２時間及び暗闇保存１２時間のサイクルで行った。
【００３７】
評価：
２週間後に藻によるサンプルの集落形成を検査し、評価した。評価は視覚的に行った。サンプルの評価は、下記の評価段階を基準にして行った：
群１：
・試験体上に藻の生長はない
・抑制ゾーンの形成又は試験体の端に至るまでの該培地上の藻の成長
この群の塗料は、「藻による集落形成に対して効果的に仕上げられている」という表現で特徴付けることができる。
群２：
・目に見える。
【００３８】
藻による試験体の集落形成
−      ＝  成長はみられない
＋      ＝  幾らか成長
＋＋    ＝  穏やかに成長
＋＋＋  ＝  強烈に成長
結果を下記表２及び３に示す。
【００３９】
【表２】
0004545934.tif 000003
【００４０】
【表３−１】
0004545934.tif 000004
【００４１】
【表３−２】
0004545934.tif 000005
【００４２】
結果：
変色：
使用濃度２質量％の４３１／０４３又はＭａｒ ７１又はカルベンダジムは、仕上げ塗料サンプルに何れの変色も生じなかった。使用濃度２質量％のＭａｒ ７１は、塗料サンプルにおいて幾つか塊の形成が見られた。
【００４３】
殺藻作用：
浸出によるストレスなしでは、４３１／０４３及びＭａｒ ７１（使用濃度０．５質量％〜２質量％）は優れた殺藻活性を示し、４３１／０４３の殺藻活性は、それ単独でのＭａｒ ７１の殺藻活性よりも優れていた。浸出によるストレスを伴うと、Ｍａｒ７１及び４３１／０４３は、実際にほとんど殺藻作用を示さなかったが、４３１／０４３は、表面上の成長の低減をもたらした。
浸出によるストレスがあってもなくても、カルベンダジムは、活性化合物濃度０．２質量％で（住宅用塗料及び試験物質の全組成物に対する活性化合物の濃度）、藻試験において殺藻作用を示さなかった。
【００４４】
殺真菌作用：
浸出によるストレスなしでは、４３１／０４３は使用濃度０．５〜２質量％で試験微生物ＡＮ及びＰＦに対して十分高い活性を示した。Ｍａｒ ７１は、実際に殺真菌活性を示さなかった。
【００４５】
概括：
浸出によるストレスなしでは、４３１／０４３は優れた殺藻活性及び試験微生物ＡＮ及びＰＦに対する十分な殺真菌作用を示した。浸出によるストレスがあると、藻及び真菌に対する活性は低減した。
【００４６】
例２
工業製品における活性
【表４】
0004545934.tif 000006
【００４７】
８０〜８５℃で５時間、得られた組成物に対して１０質量％のカルベンダジム及び９０質量％のＭａｒ ７１を維持して、サンプル４３１／０４３を調製した。次に、該混合物をザイツ濾過器に通して濾過し、黄渇色の透明な液体を得た。下記に記載するようにＢｏｋｏ試験を実施した：
別個のバッチにて、その都度種々の濃度の試験用防腐剤と保護されるべき水で希釈した切削液１００ｍｌを混合した。用いる成長コントロールは、その都度保護されていないサンプルであった。
【００４８】
防腐剤を組み込んでから２日後に、接種溶液１ｍｌを用いて初めて試験バッチを感染させた。用いる接種溶液は、下記に列挙する微生物の懸濁液であった（培地上で培養、続いて水で希釈した切削液に使用）。該接種溶液は、少なくとも１０7微生物／ｍｌの滴定濃度を有していた。
【００４９】
細菌  大腸菌(Escherichia coli)                  ＡＴＣＣ  １１２２９
肺炎桿菌(Klebsiella pneumoniae)           ＡＴＣＣ  ４３５２
緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)            ＡＴＣＣ  １５４４２
酵母  カンジダ属アルビカンス(albicans)          ＡＴＣＣ  １０２３１
ロドトルラ属ムシラギノサ
(Rhodotorula mucilaginosa)（ルブラ）  ＤＳＭ  ７０４０３
真菌  フザリウム属オキシスポクム(oxyspocum)     ＡＴＣＣ  ６２３１８。
【００５０】
次に１週間に２回、試験バッチに接種し、１週間につき２回寒天平板培地上に平板培養し、第一の塗抹は新しい接種に先だって迅速に行われた。２５℃にて３日間接種した後に、塗抹上の微生物成長を評価した。念のため、陰性の塗抹はさらに２日間観察して再評価した。個々の製品濃度の防腐作用を、個々の塗抹の集落形成による半定量的な方法で、−、＋から＋＋＋の分類分けをして評価した。細菌、酵母及びカビによって、成長を区別した。
【００５１】
−      集落形成なし
＋      幾らか集落形成
＋＋    穏やかな集落形成
＋＋＋  強烈な集落形成
試験は、１２回の接種サイクルで通常行われるか、又は繰り返しの＋＋＋成長の後中断された。
【００５２】
試験条件：
カストロール(Castrol)から得られる切削液Ｓｈｅｌｌ Ｄｒｏｍｕｓ ＢＸ若しくはＡｌｍａｓｏｌ ＥＰ、又はコンスルタ(Consulta)から得られるＲｏｎｄｏｃｏｒ Ｋｏｍｐａｋｔをノルデルステッド市から得られる生水中の４質量％濃度の乳液として検査した。細菌の懸濁液若しくは真菌の懸濁液又は細菌と真菌の混合懸濁液を用いて接種を行った。
【００５３】
【表５】
0004545934.tif 000007
【００５４】
結果：
鉱油を基にした切削液（Ｓｈｅｌｌ Ｄｒｏｍｕｓ ＢＸ及びＡｌｍａｓｏｌ ＥＰ、アミン含有）中にて、Ｍａｒ７１、及びＭａｒ７１とカルベンダジムの調製物（９０質量％＋１０質量％）は、試験濃度範囲において細菌及び真菌類、及び細菌と真菌の混合培養に対して同様に効果的であった。Ｍａｒ７１及びカルベンダジムの組み合わせの利点が明らかとなった。
【００５５】
例３
Ｍａｒ７１、カルベンダジム及び他の殺生剤の調製
Ｍａｒ７１ ８００ｇ及びカルベンダジム１００ｇを攪拌しながら、７８℃から８０℃で９時間加熱した。わずかに濁った生成物を濾過し（予め調製した溶液(presolution)４３７／０９７）、その都度下記の殺生剤１０質量％と混合した（全データは、全組成物に対する質量パーセントで示す）。
【００５６】
0004545934.tif 000008
1)  ＝  １，２−プロピレングリコール中にＮ−オクチルイソチアゾロン４５質量％
2)  ＝  ヨードプロピニルブチルカルバメート
ザイツ濾過器を通して濾過した後、全ての溶液は透明な淡褐色であった。
【００５７】
例４
Ｍａｒ ７１及びカルベンダスルフを基にした調製物
0004545934.tif 000009
* １，２−プロピレングリコール中にカルベンダスルフ１０．５質量％
出発原料を混合した後、無色透明〜黄色がかった透明の溶液が得られる。
【００５８】
例５
Ｍａｒ ７１及びカルベンダジムの組成物の活性
調製物：
Ｇ ５６２０    カルベンダジム １質量％＋Ｍａｒ７１ ９９質量％
Ｇ ５６２１    カルベンダジム ２質量％＋Ｍａｒ７１ ９８質量％
Ｇ ５６２２    カルベンダジム ５質量％＋Ｍａｒ７１ ９５質量％
Ｇ ５６２３    カルベンダジム １０質量％＋Ｍａｒ７１ ９０質量％
Ｇ ５６２４    Ｍａｒ７１。
【００５９】
ＤＧＨＭ[衛生及び微生物学におけるドイツソサエティ(German Society for Hygiene and Microbiology)]に従った連続希釈試験を用いて、その都度完全に脱イオン化した水中に２質量％濃度の溶液を選択した細菌及び／又は酵母及び／又は真菌及び／又は藻に対して検査した。
【００６０】
２質量％濃度の水溶液のＭＩＣ値は下記の通りである：
0004545934.tif 000010
【００６１】
微生物に対する略語：
細菌：            ＰＳ  ＝  緑膿菌
ＥＣ  ＝  大腸菌
ＫＰ  ＝  肺炎桿菌
酵母：            ＣＡ  ＝  カンジダ属アルビカンス
ＲＭ  ＝  ロドトルラ属ムシラギノサ
真菌類：          ＦＯ  ＝  フサリウム属オキシスポルム
ＡＮ  ＝  黒色アスペルギルス
ＰＦ  ＝  ペニシリウム属フニクロスム
ＡＬ  ＝  アルテルナリア属アルテルナタ
藻類：            ＣＦ  ＝  クロレラ属フスカ。
【００６２】
下線を引いたＭＩＣ値は、Ｍａｒ ７１よりも効果的な調製物を意味する。特に幾つかの酵母及び真菌の場合に、本発明に従った調製物が単独のＭａｒ ７１よりもかなり効果的であった。