(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジフルクトース  ジアンヒドリドIVのみからなること、を特徴とするカルシウム吸収亢進剤。
【請求項２】
カルシウムとジフルクトース  ジアンヒドリドIVのみからなるものであって、カルシウムに対してジフルクトース  ジアンヒドリドIVを重量比で１倍以上含有すること、を特徴とするカルシウム吸収亢進剤。
【請求項３】
カルシウムとジフルクトース  ジアンヒドリドIV及び製剤化に必要な補助剤のみからなるものであって、カルシウムに対してジフルクトース  ジアンヒドリドIVを重量比で１倍以上含有すること、を特徴とするカルシウム吸収亢進剤。
【請求項４】
カルシウムの存在下、その吸収を亢進するジフルクトース  ジアンヒドリドIVを有効成分として含有してなること、を特徴とするカルシウム吸収亢進組成物。
【請求項５】
カルシウムの存在下、その吸収を亢進するジフルクトース  ジアンヒドリドIV及び製剤化に必要な補助剤を含有すること、を特徴とするカルシウム吸収亢進組成物。
【請求項６】
カルシウムとジフルクトース  ジアンヒドリドIVを含有し、カルシウムに対してジフルクトース  ジアンヒドリドIVを重量比で１倍以上含有すること、を特徴とするジフルクトース  ジアンヒドリドIV含有組成物。
【請求項７】
カルシウムとジフルクトース  ジアンヒドリドIVと製剤化に必要な補助剤を含有し、カルシウムに対してジフルクトース  ジアンヒドリドIVを重量比で１倍以上含有すること、を特徴とするカルシウム・ジフルクトース  ジアンヒドリドIV含有組成物。
【請求項８】
カルシウムとジフルクトース  ジアンヒドリドIVを含有する飲食品であって、飲食品の乾燥重量当たりでカルシウムを0.3重量％以上含有し、更にカルシウムに対してジフルクトース  ジアンヒドリドIVを重量比で１倍以上含有すること、を特徴とする飲食品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、カルシウム吸収亢進組成物に関するものであり、更に詳細には、ジフルクトース  ジアンヒドリドIVを有効成分として含有するカルシウム吸収亢進組成物に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
食生活が改善されたとはいえ、特に、日本人のカルシウム摂取量は栄養必要量を下回っており、その点の改良が求められている。しかしながら、日本人の平均的な食生活習慣では、充分なカルシウム量を摂取するのは相当困難であるのが現状である。
【０００３】
一方、最近になって、難消化性の二糖類であるジフルクトース  ジアンヒドリドIV（以下、ＤＦＡIVということもある）の工業的製法が開発され、安定供給が可能となり、これまで知られていなかったＤＦＡIVの生理的機能のうち、カルシウム吸収亢進作用が本報により初めて明らかになったものである。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、このような技術の現状に鑑み、カルシウムの必要量を通常の日本人の食事から摂取するのは相当困難であり、特に幼児、老齢者、病気中又は予後の患者のように充分な食事量が摂れない人にとっては非常に困難である点に改めて着目し、食事中のカルシウムを増量するのではなく、食事中のカルシウム含有量は従来どおりとしておき、ただし、食事中のカルシウムの体内での吸収を亢進せしめるシステム、換言すれば摂取したカルシウムを体内で有効利用するシステムを提供しようとするものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明は、上記課題を解決するためになされたものであって、本発明者らは、各方面から鋭意研究の結果、経口摂取したＤＦＡIVが体内でのカルシウムの吸収を亢進する作用を有することを見出し、そして更に研究の結果、オリゴ糖との併用も可能であることも発見し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち本発明は、ＤＦＡIVを有効成分とし、更に必要に応じてオリゴ糖を有効成分として含有するカルシウム吸収亢進組成物に関するものであり、本組成物は、医薬品としてもあるいは飲食品としても利用することができる。
以下、本発明について更に詳述する。
【０００７】
本発明に係る組成物の有効成分として使用するＤＦＡIV（difructose anhydride IV ）は、フルクトース２分子が２，６′及び６，２′で結合している２糖類（di-D-fructofuranose-2, 6′：6, 2′dianhydride ）であって、水への溶解性は高いが、甘味は蔗糖の約１／２を有する難消化性二糖類である。
【０００８】
ＤＦＡIVは、従来、効率的な工業的製法がなかったのであるが、最近になって、レバンにレバンフルクトトランスフェラーゼ（還元末端から二糖単位で切断する酵素、特にアースロバクター・ニコチノボランス（Arthrobacter nicotinovorans)(FERM P-15285 ）等アースロバクター属菌から高活性の酵素が得られる（特開平９−１５４５９４））を作用させることにより、高純度のＤＦＡIVを工業的に製造することが可能となり、このようにして製造されたＤＦＡIVを本発明の有効成分として使用することができる。また、市販されている製品も使用可能である。
【０００９】
本発明に係る組成物は、ＤＦＡIVを有効成分として含有するものであって、医薬品及び／又は飲食品（動物用飼餌料を含む）として利用することができ、例えば、ヒト又は動物用の医薬品、飲食品、調製粉乳、経腸栄養剤、健康飲食品、飼餌料添加物等として実用に供することができる。
【００１０】
本発明の組成物は、それ自体カルシウムを含有していてもよく、又は、それ自体はカルシウムを含有せず、カルシウム含有食品やカルシウム含有医薬との併用により、カルシウム含有食品やカルシウム含有医薬中のカルシウムの吸収を亢進するものであってもよい。本発明の組成物自体がカルシウムを含有する場合は、特に限定されないが、組成物中のカルシウムに対して重量比で１〜３倍以上、好ましくは５倍以上とするのがよい。しかしながら、長期間に亘って保健上ないし健康維持の目的で摂取する場合には、上記範囲よりも少量であってもよいし、また本有効成分は、安全性について問題がないので、上記範囲よりも多量に使用しても一向にさしつかえない。現にマウスを用いた１０日間の急性毒性試験の結果、１０００mg／kgの経口投与でも死亡例は認められなかった。
【００１１】
また、本組成物においては、ＤＦＡIVのほかに、オリゴ糖を更に併用してもよい。オリゴ糖としては、フラクトオリゴ糖、ラフィノースのほか、マルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルトヘキサオース等マルトオリゴ糖；イソマルトオリゴ糖；大豆オリゴ糖；フラクトオリゴ糖；ガラクトオリゴ糖；ペクチンオリゴ糖；マルチュロース；イソラフィノース；パラチノース；ラクチュロース；トレハロース；キシロオリゴ糖、その他が例示されるが、特にカルシウム吸収促進作用を有するオリゴ糖を使用すると好適であり、その使用量も従来どおりであって格別の限定はなく、この点も本発明の特徴のひとつである。
【００１２】
飲食品タイプの組成物として使用する場合には、本有効成分（その処理物）をそのまま、使用したり、他の食品ないし食品成分と併用したりして適宜常法にしたがって使用できる。本有効成分を用いる本発明に係る組成物は、固体状（粉末、顆粒状その他）、ペースト状、液状ないし懸濁状のいずれでもよいが、甘味料、酸味料、ビタミン剤その他ドリンク剤製造に常用される各種成分を用いて、健康ドリンクに製剤化することも可能である。
【００１３】
医薬品タイプの組成物として使用する場合、本有効成分は、種々の形態で投与される。その投与形態としては錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与をあげることができる。これらの各種製剤は、常法に従って主薬に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助剤を用いて製剤化することができる。
【００１４】
その使用量は症状、年令、体重、投与方法および剤形によって異なるが、通常は、成人に対して、１日当たり、静脈投与の場合は、体重１kg当たり、０．０１mg〜１０００mgを投与することができ、筋肉投与の場合は同じく０．０１mg〜１０００mgを投与することができ、また、経口投与の場合には同じく０．５〜２０００mg、好ましくは１〜１０００mgの範囲で投与するのがよい。
【００１５】
本発明に係る組成物は、下記する実施例からも明らかなように、すぐれたカルシウム吸収亢進効果を示し、体内におけるカルシウムの吸収を大幅に高めることができる。
以下、本発明の実施例について述べる。
【００１６】
実施例１．
（１）ＳＤ系の雄ラット（５週令、当初体重１００ｇ）を、次の組成からなる蔗糖ベースの基礎飼料で、１週間予備飼育した。
（基礎飼料）
カゼイン                            ２５０ｇ／kg
コーン油                              ５０ｇ／kg
ミネラルミックス                      ２９ｇ／kg
ビタミンミックス                      １５ｇ／kg
カルシウム                          ０．４５％Ｃａ
蔗糖で全量を１kgにする。
【００１７】
基礎飼料において、ミネラルミックスとしては、ＭＭ３の組成（J.Nutr., 119, 1018 (1989))を用い、ビタミンミックスとしてはＡＩＮ−７６の組成（J.Nutr., 107, 1340 (1977))を用い、カルシウム源としては炭酸カルシウムを用いた。
【００１８】
（２）予備飼育後、体重に応じて１群７匹ずつのラットに分け、各群のラットについて２週間の試験飼育を行った。
試験飼育中、各群のラットには、ＤＦＡIV（アースロバクター・ニコチノボランス(Arthrobacter nicotinovorans) の酵素より調製）、あるいは他のオリゴサッカライドとして、ラフィノース（固形分純度９７％、日本甜菜製糖（株）製）を、それぞれ３０ｇ／kg飼料含み、カルシウム３ｇ／kg飼料を含む蔗糖ベースの基礎飼料（試験飼料）を、それぞれ与えた。なお、コントロール群（対照群）には基礎飼料のみを与えた。
【００１９】
また、上記各飼料には、消化管各部位でのカルシウム吸収への寄与を検討するために、非吸収マーカーとして酸化クロムＣｒ2 Ｏ3 を０．５ｇ／kg飼料添加し、更に粉末セルロースとしてアビセル（Ａｖｉｃｅｌ、旭化成工業（株）製）を５０ｇ／kg飼料添加した。
【００２０】
（３）試験飼育最終３日間に出納試験を行い、見かけのカルシウム吸収率を算出した。なお、ラットの糞食によるカルシウム吸収率の上昇を防ぐために、試験飼育の最後の１週間は、糞食防止キャップをラットの肛門に装着した。また、消化管各部位におけるカルシウム吸収率も算出した。
【００２１】
（見かけのカルシウム吸収率の測定）
１．糞便の検査
バランス期間を３日間設け（１１〜１４日目）、３日間の糞を採取し、試験飼料及び糞中のＣａとマーカーとしてのＣｒを原子吸光法で測定し、Ｃａ／Ｃｒの比を算出し、ラットが吸収したＣａの割合を算出した。
【００２２】
すなわち、採取した糞全量を凍結乾燥した後、粉砕し、そのうち１００mgを、５mlの混酸（濃硝酸（１４Ｎ）：濃過塩素酸（６０％）＝３：１の溶液）で、試験管を用いて湿式灰化した。０．１Ｎの塩酸を適宜希釈した後、原子吸光分光分析（島津原子吸光分光光度計ＡＡ・６４００Ｆ：島津製作所製）により、ＣａとＣｒ濃度をそれぞれ測定し、見かけのカルシウム吸収率を次式から算出した。
見かけのＣａ吸収率（％）＝１００×｛１−（糞中Ｃａ：Ｃｒ）／（食餌中のＣａ：Ｃｒ）｝
【００２３】
２．消化管各部位の検査
試験飼料を１４日間に与えた後、小腸（回腸）、大腸（盲腸、結腸）の各腸の内容物を採取し、試験飼料及び糞中のＣａとマーカーとしてのＣｒを原子吸光法で測定し、Ｃａ／Ｃｒの比を算出し、各腸におけるＣａ吸収の割合を算出した。
【００２４】
すなわち、ラット屠殺時に（１４日目）、消化管内容物（結腸、盲腸、回腸下部（回盲部から１０cm））を採取し、各々１０，２５又は１００mlにメスアップし（その際、内容物が均一になるよう、ポッターホモジナイザー（MINI D.C. STIRRER: EYELA）で充分攪拌した）、そのうち１mlを５mlの混酸で試験管を使って湿式灰化した。０．１Ｎの塩酸で、適宜希釈した後、原子吸光分光分析により、ＣａとＣｒ濃度を測定し、各消化管部位での見かけのカルシウム吸収率を次式から算出した。
【００２５】
各消化管部位での見かけのＣａ吸収率（％）＝１００×｛１−（消化管内容物中Ｃａ：Ｃｒ）／（食餌中Ｃａ：Ｃｒ）｝
得られた結果を図１に示す（図中、縦軸はＣｒによって測定した見かけのＣａ吸収率（％）を示す。）その結果から明らかなように、見かけのＣａの吸収率は、オリゴサッカライドを含む飼料を与えた群で、対照群に比して有意に高値を示し、その内ＤＦＡIV群が最も高値を示した。この吸収亢進は、回腸、盲腸及び結腸ともに寄与していた。
【００２６】
（消化管壁の重量測定及び消化管内容物の有機酸、pHの測定）
消化管壁の湿重量を測定し、これら消化管の内容物の有機酸をキャピラリ  イオンアナライザーで測定した（Takuya Suzuki, Hiroshi Hara, Takanori Kasai, and Fusao Tomita, Biosci. Biotechnol. Biochem., 62(5), 837-841, 1998)。
併わせて消化管の内容物のpHを測定した。
【００２７】
（消化管内容物のカルシウム可溶化率の測定）
上記のように採取、そしてメスアップした回腸、盲腸及び結腸の内容物のそれぞれ一部を超遠心分離機により１０，０００rpm 、２０分間遠心処理し、液相と固相に分離した。液相の一部をとり、除蛋白した後、適宜希釈し、次いで原子吸光分光分析によりカルシウム濃度を測定し、可溶化しているカルシウムとして評価した。
【００２８】
計算方法は以下のとおりである。
消化管内容物中カルシウム可溶化率（％）＝１００×（液相中のＣａ量）／（内容物中の全Ｃａ量）
消化管壁の重量測定及び消化管内容物の有機酸、pH及びカルシウム可溶化率の測定により得られた結果を図２に示す。その結果から明らかなように、ＤＦＡIVを与えることにより、盲腸及び結腸の消化管内容物の有機酸は増加し、pHは低下する一方、これら消化管の湿重量が増加した。さらに、Ｃａ可溶化率は、結腸においてＤＦＡIVを含む飼料を与えた群で高値を示した。
【００２９】
実施例２．
結晶グルコース４００重量部、ＤＦＡIV  １０重量部、クエン酸７重量部、Ｎａ−Ｃａｓｅｉｎａｔｅ  ７重量部、アスコルビン酸５重量部、硬化油３重量部を用い、常法にしたがってＣａ吸収亢進錠菓を製造した。
【００３０】
実施例３．
ＤＦＡIV  ５０重量部、精製炭酸カルシウム２０重量部、ラクトース１７８重量部、ステアリン酸マグネシウム２重量部を用い、これらの混合物を２５０mgずつ１号カプセルに充填し、１カプセル内に５０mgのＤＦＡIVを含有するＣａ吸収亢進カプセル剤を製造した。
【００３１】
【発明の効果】
本発明によれば、ＤＦＡIVに用いることにより、すぐれたＣａ吸収亢進効果が奏され、安全にＣａの体内への吸収を大幅に促進することが可能となった。
【図面の簡単な説明】
【図１】各種オリゴ糖による見かけのカルシウム吸収率の増加を示すグラフである。
【図２】各種オリゴ糖を与えた場合の回腸、盲腸及び結腸の湿重量及び各消化管におけるカルシウム可溶化率の増加を示すグラフである。
【図１】
0004601091.tif 000002
【図２】
0004601091.tif 000003