(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトペルオキシダーゼ、チオシアン酸塩（ＳＣＮ-）および／またはヨウ化物（Ｉ-）；
過酸化水素供与系；および
油ベース；を含有する、植物病原微生物を制御するための組成物。
【請求項２】
水性溶液１リットルにつき、
少なくとも１０ｍｇのラクトペルオキシダーゼ；
少なくとも５０ Ｉ.Ｕ.のグルコースオキシダーゼ；
少なくとも０.０５％のグルコース；
少なくとも２５ｍｇのヨウ化物（Ｉ-）；
少なくとも５ｍｇのチオシアン酸塩（ＳＣＮ-）；
最大１％の油ベース
を含む、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
水性溶液１リットルにつき、
少なくとも５０ｍｇのラクトペルオキシダーゼ；
少なくとも１００ Ｉ.Ｕ.のグルコースオキシダーゼ；
少なくとも０.１％のグルコース；
少なくとも５０ｍｇのヨウ化物（Ｉ-）；
少なくとも１０ｍｇのチオシアン酸塩（ＳＣＮ-）；
最大０.４％の油ベース
を含む、請求項１または２の組成物。
【請求項４】
水性溶液１リットルにつき、
１０−１００ｍｇのラクトペルオキシダーゼ；
５０−１０００ Ｉ.Ｕ.のグルコースオキシダーゼ；
０.５−２０ｇのグルコース；
２５−２００ｍｇのヨウ化物（Ｉ-）；
５−５０ｍｇのチオシアン酸塩（ＳＣＮ-）；
０.０１−２％（v/v）の油ベース；
を含む、請求項１〜３のいずれか記載の組成物。
【請求項５】
水性溶液１リットルにつき、
５０−１００ｍｇのラクトペルオキシダーゼ；
１００−１０００ Ｉ.Ｕ.のグルコースオキシダーゼ；
１−２０ｇのグルコース；
５０−２００ｍｇのヨウ化物（Ｉ-）；
１０−５０ｍｇのチオシアン酸塩（ＳＣＮ-）；
０.４−２％の油ベース
を含む、請求項１〜４いずれか記載の組成物。
【請求項６】
水性溶液１リットルにつき、
３０−７０ｍｇのラクトペルオキシダーゼ；
１００−２５０ Ｉ.Ｕ.のグルコースオキシダーゼ；
１−１０ｇのグルコース；
５０−１００ｍｇのヨウ化物（Ｉ-）；
１０−２０ｍｇのチオシアン酸塩（ＳＣＮ-）；
０.２−１％（v/v）の油ベース
を含む、請求項１〜５いずれかに記載の組成物。
【請求項７】
油ベースが、少なくとも油と、水中油型エマルションを形成するために、水性溶液中で油を乳化する物質を含むことを特徴とする、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
水性溶液中の油を乳化する物質が油自体からなり、油が自己乳化性を有することを特徴とする、請求項７の組成物。
【請求項９】
油が、鉱物油、植物油および動物油よりなる群から選ばれることを特徴とする、請求項７または８の組成物。
【請求項１０】
植物油が、ピーナッツ油、胡麻油、菜種油、亜麻仁油、ヒマシ油、大豆油、トウモロコシ胚芽油、綿実油よりなる群から選ばれることを特徴とする、請求項９の組成物。
【請求項１１】
動物油が、ニシン油およびサバ油よりなる群から選ばれる魚油であることを特徴とする、請求項９の組成物。
【請求項１２】
鉱物油が、パラフィン油およびケロシンタイプ油よりなる群から選ばれることを特徴とする、請求項９の組成物。
【請求項１３】
組成物がさらに１以上の拡散剤をさらに含有することを特徴とする、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
拡散剤が非イオン性の表面張力低下物質であって、エトキシル化アルコールまたはホスファチジル脂質から選ばれることを特徴とする、請求項１３の組成物。
【請求項１５】
拡散剤の濃度が、水性溶液１ルットル当り０.０１−０.２％（v/v）であることを特徴とする、請求項１３または１４の組成物。
【請求項１６】
油ベースが、
８０−９０部の油；
５−１５部の乳化剤；
１−１０部のレシチン・フラクション
を少なくとも含むことを特徴とする、請求項１〜１５いずれかに記載の組成物。
【請求項１７】
油がピーナッツ油、乳化剤がICI Atlas1087(商標）、レシチン・フラクションがNathin 130（商標）、拡散剤が Volpo T7(商標）であることを特徴とする、請求項１６の組成物。
【請求項１８】
組成物がさらに１以上の接着剤を含むことを特徴とする、請求項１〜１７いずれかに記載の組成物。
【請求項１９】
接着剤が、デンプン、ガム類およびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）からなる群から選ばれることを特徴とする、請求項１８の組成物。
【請求項２０】
水性溶液１リットルにつき、
７０ｍｇのラクトペルオキシダーゼ；
２５０ Ｉ.Ｕ.のグルコースオキシダーゼ；
２.５ｇのグルコース；
１００ｍｇのヨウ化物（Ｉ-）；
２０ｍｇのチオシアン酸塩（ＳＣＮ-）；
８５部のピーナッツ油、１０部のICI Atlas1086(商標）乳化剤および５部のNathin 130（商標）レシチン・フラクションからなる０.４％（v/v）の油ベース；および
０.０５％（v/v）の Volpo T7(商標）拡散剤を含む、請求項１〜１９いずれかに記載の組成物。
【請求項２１】
植物、草木およびその部分に対する植物病原性細菌および／または真菌を制御するための、請求項１〜２０いずれかに記載の組成物。
【請求項２２】
濃縮形態の、請求項１〜２０のいずれかに記載の組成物。
【請求項２３】
植物、草木およびその部分に請求項１〜２２のいずれかに記載の組成物を適用することを含む、植物、草木およびその部分に対する植物病原性細菌および／または真菌を制御する方法。
【請求項２４】
組成物が、噴霧、スプリンクラー、噴射、上方噴霧、散水、浸漬、滴下灌漑の手段で適用されることを特徴とする、請求項２３の方法。
【請求項２５】
請求項１〜２０のいずれかに記載の組成物を形成するためのキットであって、少なくともラクトペルオキシダーゼを含む酵素組成物； 少なくともグルコースオキシダーゼおよびグルコース、チオシアン酸塩および／またはヨウ化物を含む過酸化水素供与組成物； および少なくとも油を含む油組成物を含み、この３組成物は、請求項１〜２１のいずれかに記載の組成物が得られるような比率で使用前に互いに混合されるべきである、キット。
【請求項２６】
植物病原微生物を制御するための、請求項２５に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、草木などの植物の病原性の細菌および／または真菌を制御する組成物、およびその組成物を適用する方法に関する。
【０００２】
（背景技術）
細菌および／または真菌などの微生物に対しては、種々のタイプの農薬（殺微生物剤）がある。その多くは合成薬剤であって、ヒト、動物および環境に対して障害を与える可能性がある。これらの薬剤には、制御対象の微生物が耐性を有することになるという欠点がしばしばある。従って、関連病原菌を制御する新しい薬剤が待たれている。
【０００３】
いくつかの殺真菌剤について知られているところによると、その効力は温度に関連し、また一定の湿気にも依存する。野外で生育するような草木を処置するのに、このような使用上の制限条件は大きい欠点となる。同様の問題が温室で農作物を栽培する場合にも生じる。
【０００４】
従って、本発明の目的は、上記したような欠点がなく、草木の病原性細菌および真菌をその場で制御するのに用い得る新しい農薬（殺微生物剤）を提供することである。
【０００５】
（発明の開示）
（発明が解決しようとする技術的課題）
本発明の目的を達成するための組成物は、ラクトペルオキシダーゼ、チオシアン酸塩（ＳＣＮ-）および／またはヨウ化物（Ｉ-）、および過酸化水素供与系、特にグルコースオキシダーゼおよびグルコースを含む。グルコースオキシダーゼ／グルコース系に加えて、他の水素供与系も使用でき、例えば、過炭酸ナトリウムや安定化過酸化水素が使用できる。
【０００６】
本発明のこの新しい薬剤の利点は、耐性が生じるおそれが非常に少ないか、まったくないことである。さらに、この薬剤は天然のものに基礎を置いている。
【０００７】
ラクトペルオキシダーゼの抗微生物作用自体は公知であり、例えば、ヨーロッパ特許第０５１４４１７および国際出願ＷＯ９７／２６９０８に記載されている。しかし、これらは、化粧品の保存やヒトおよび動物の医療目的にこのいわゆるＬＰ系（ラクトペルオキシダーゼ系）を適用することに関する。草木やその部分における微生物感染の処置は、ヒトや動物におけるのとまったく異なる（そしてしばしば非常に多様な）条件でなされるので、ラクトペルオキシダーゼに基づく既知系が、植物病原菌に対しその場での殺生物作用をも有するかどうかは明確ではない。
【０００８】
上記したように、農産物や樹木などの植物の多くは、野外で生育し、風、雨、日光、温度変化などの気象条件の支配を受ける。これらのすべての因子は酵素を基とする系の効力を低下し得る。酵素は化学農薬に比べると比較的敏感である。このことから当業者は、ラクトペルオキシダーゼを基とする農薬の有用性と広範な適用性をすぐには評価しないであろう。
【０００９】
本発明の好ましい実施態様において、油ベースも本組成物に添加される。組成物中に比較的少量の油ベースを含有すると、組成物の効果がさらに驚くべき程度に改善される。
【００１０】
油を入れる目的は、植物の葉などの部分における組成物の優れた分布とその蒸発の防止である。蒸発は水性組成物ではよく起きる。この組成物の活性は具体的な温度および相対湿度に依存しない。組成物に対する耐性が生じる可能性は小さい。この系には、抗生物質などが有するような微生物に対する特殊な作用がないからである。植物、動物およびヒトの細胞は、この系に感受性がない。
【００１１】
本発明の組成物は、例えば、水性溶液１リットルにつき、少なくとも１０ｍｇのラクトペルオキシダーゼ；少なくとも５０Ｉ．Ｅのグルコースオキシダーゼ；少なくとも０．０５％のグルコース；少なくとも２５ｍｇのヨード化物（Ｉ-）；少なくとも５ｍｇのチオシアン酸塩（ＳＣＮ-）；所望により最大１％の油ベースを含む。最大０．２％の拡散剤が所望によりさらに存在し得る。  本発明の組成物は、好ましくは、水性溶液１リットルにつき、少なくとも５０ｍｇのラクトペルオキシダーゼ；少なくとも１００Ｉ．Ｅのグルコースオキシダーゼ；少なくとも０．１％のグルコース；少なくとも５０ｍｇのヨウ化物（Ｉ-）；少なくとも１０ｍｇのチオシアン酸塩（ＳＣＮ-）；所望により最大０．１％の油ベースを含む。最大０．１％の拡散剤が所望によりさらに存在し得る。
【００１２】
組成物の優れた活性が得られるのは、組成物が水性溶液１リットルにつき、１０−１００ｍｇ、好ましくは３０−７０ｍｇのラクトペルオキシダーゼ；５０−１０００Ｉ．Ｅ、好ましくは１００−２５０Ｉ．Ｅのグルコースオキシダーゼ；０．０５−２％、好ましくは０．１−１％のグルコース；２５−２００ｍｇ、好ましくは５０−１００ｍｇのヨウ化物（Ｉ-）；５−５０ｍｇ、好ましくは１０−２０ｍｇのチオシアン酸塩（ＳＣＮ-）；所望により０．０１−２％、好ましくは０．２−１％の油ベースを含む。所望により加えられる拡散剤は、０．０１−０．２％、好ましくは０．０５−０．０７である。
【００１３】
油ベースは、少なくとも油と水性溶液中の油を乳化する物質とから常になり、水中油型エマルションを形成する。乳化する物質は、単独の乳化剤であり得るが、油自体で形成されることもある。この場合、油が自己乳化性を有す。この自己乳化性油の製造は、油の修飾、例えばエトキシル化によりなされる。当業者は、その専門知識を基に特定の油に最も適した乳化剤を選択できる。
【００１４】
油ベースに使用される油は、鉱物油、植物油、動物油の群から選ばれる。あるいは、１以上のこれらの群に由来する１以上の油の混合物である。推奨される油は、抗微生物作用を大なり小なりすでに本来有しているものである。
【００１５】
植物油の例としては、ピーナッツ油、胡麻油、種油、亜麻仁油、ヒマシ油、大豆油トウモロコシ胚芽油、綿実油がある。これらのうちピーナッツ油が本発明の目的に特に適していることが分かった。
【００１６】
動物油の場合、例えば、ニシン油やサバ油などの魚油が選ばれる。適当な鉱物油は、例えば、種々のタイプのパラフィン油やケロシンタイプ油である。
【００１７】
処理する表面への組成物の分布をさらに容易にするために、１以上の拡散剤を組成物または油ベースに加えることができる。この分野の当業者は適当な拡散剤の選択が容易にできる。この拡散剤は通常、非イオン性の表面張力低下物質である。エトキシ化アルコール、例えば Volpo T7（商標）およびホスファチジルリピド、例えば Nathin 130（商標）が推奨される。
【００１８】
本発明の組成物の特に適切な態様において、油ベースは、少なくとも８０−９０、好ましくは８５部の油；５−１５、好ましくは１０部の乳化剤；所望により１−１０、好ましくは５部のレシチン・フラクションからなる。所望により０．０１−０．２％、好ましくは０．０５％の拡散剤を水性溶液１ルットル当り組成物に添加できる。
【００１９】
好ましい態様において、本発明の組成物は、ピーナッツ油からなる油ベース、乳化剤 Atlas 1086 (ICI)（商標）などのポリオキシエチレン・ソルビトール・ヘキサオレエート、および Nathin (ENR)(商標）などのホスファチジルリピドからなるレシチン・フラクション、さらに volpo T7 (CRODA)（商標）などのエトキシ化アルコールを含む。
【００２０】
組成物の活性をその場で長くするために、１以上の接着剤を添加できる。接着剤によって、例えば、組成物の構成成分が雨などの状態のために植物から流出するのが防がれる。接着剤の選択もこの分野の当業者なら市販品から簡単に選択できる。例として、デンプン、キサンテンガムやアラビアゴムなどのガム類、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）がある。
【００２１】
組成物の適用は、噴霧、スプリンクラー、噴射、上方噴霧、散水、投入、滴下灌漑などの手段でなされる。組成物を適用するのに特に優れた方法は、低量法（霧状）と高量法の両方による噴霧である。滴下灌漑は鉱物ウールなどの生育基質の培養系に使用できる。本発明の薬剤は消毒滴下灌漑系でも使用できる。この２種の場合、油性基質の存在は最適の結果を得るために厳密には必ずしも必要でない。組成物を含有する浴への投入は、植物の部分、特に球根、塊茎、果実などの収穫可能な部分を処置するのに特に適当である。
【００２２】
本発明の組成物は種々の形で市販できる。推奨される形態は、酵素のラクトペルオキシダーゼの活性をできるだけ長引かせ得るものであり、これによって製品の在庫寿命が伸びる。酵素ラクトペルオキシダーゼの活性は、過酸化水素供与体が存在するとすぐに始まる。本例では、グルコースオキシダーゼ／グルコース系が過酸化水素供与体である。従って、推奨されるのは、少なくとも決まった形の適用においては、過酸化水素供与体と酵素ラクトペルオキシダーゼとは隔離することである。さらに、油ベースと拡散剤とも所望により別個に包装される。
【００２３】
本発明の特定の態様において、従って、組成物を形成するキットが形成される。キットは、少なくともラクトペルオキシダーゼおよび所望により接着剤からなる所望による濃縮の酵素組成物、少なくともグルコースオキシダーゼおよびグルコース、チオシアン酸塩および／またはヨウ化物および所望により他の添加剤からなる過酸化水素供与組成物、および少なくとも油、所望により乳化剤、所望により拡散剤および所望により他の添加剤からなる油組成物を含む。これらの３組成物は、本発明の組成物が得られるような比率で使用前に、互いに混合される。
【００２４】
本発明の組成物は、乾燥または非乾燥の濃縮形態で所望に応じて市販できる。それから最終組成物を得るのに水などで希釈または溶解する。
【００２５】
本発明の組成物でよく制御される真菌類は、とりわけ下記のものである。Botryotinia spp（ハイイロカビ）、例えば B.fuckeliana (アナテルフィックの Botrytis cinerea)、Didymella spp、例えば D. bryonia（カボチャの Mycospherella）、D. lycopersici（トマトの癌）、Puccunia spp（銹菌）、例えば P. horiana(日本白銹菌）、Sphaerotheca spp（真性ウドンコ病）、例えば S. fuliginea（キウリのウドンコ病）、S. pannose（バラのウドンコ病）、Erysiphe spp、Oidium spp、Leveillula taurica（真性ウドンコ病型）、Fusarium spp（斑点病および／または凋枯病）、Phytophtora spp（毛根病および／または根病）、Pythium spp（毛根の病）、Plasmopara、PeronosporaおよびSclerospora spp（綿毛状ウドンコ病型）、Rhizoctonia、Verticillium、Sclerotinia spp（斑点の原因）、RhizopusおよびPenicillium spp（（貯蔵）腐敗の原因）、Venturia spp（黒星病因）。
【００２６】
本発明の組成物で処理し得る細菌感染は、とりわけ次のものである。Erwinia chrysanthemi、Pseudomonas syringae、Xanthomonas campestris、Curtobacterium flaccumfaciens。
【００２７】
本発明の組成物および方法が使用できるのは、広い意味での植物保護および病原菌制御であって、例えば、農業、園芸、野菜栽培、観葉植物栽培，果実栽培、球根栽培、鉢植植物栽培、林業、室内植物の消費者用産物である。樹木自体に加えて、植物の部分も処置できる。球根、根茎、花、切り枝、果実などである。
【００２８】
植物保護および病原菌制御の意味は、本発明においては予防的および治療的な活動と理解される。大部分の事例において、すでに存在する病原菌を殺すことに関する。しかし、いくつかの他の事例では、植物部分の予防的処置もなされる。本発明の組成物は、活性となるのに遊離の水を必要とするが、乾燥した後に水を加えて活性とすることもできる。
【００２９】
本発明の組成物は、天然の農薬であるので、環境に優しい。
本発明はさらに、草木およびその部分についての植物病原性の細菌および／または真菌を制御する方法に関し、草木およびその部分に本発明の組成物を適用することを含む。
本発明は下記の実施例でさらに明かにされる。なお、実施例は説明のためにのみ示される。
【００３０】
（発明を実施するための最良の形態）
実施例１：Verticillium Lecanii に対する本発明の薬剤の直接的な活性
約１０×１０10個の胞子／ｇの濃度で、試験生物として使用される菌類のVerticillium Lecaniiの胞子粉末を使用した。１０gを秤り分け、１００mlの水に懸濁した。次いで、最短でも３０分間、その胞子を浸漬したままにしておく。
本発明の該薬剤（５００mｌ）を、表１に記載の成分で調製した。
【００３１】
【表１】
0004545311.tif 000002
【００３２】
水溶液をクエン酸でｐＨ６．５に調整した。次いで、胞子懸濁液（１０ｍｌ）を９０ｍｌの薬剤に添加した。続いて、ラクトペルオキシダーゼ系を、１、３、５および１５分で添加し、胞子に作用させ、各々の時点で１ｍｌを取出し、ラクトペルオキシダーゼ系を希釈するために水道水を用いて１０００ｘ希釈した。
【００３３】
３０μｌを希釈溶液から取出し、ＳＤＡ（Sabouraudデキストロース寒天）プレート上にピペットで移した。２４および４８時間後の胞子の発生（萌芽）率（％）を測定した。
【００３４】
この率（％）をブランク（対照）と比較した。ブランクは、水（９０ｍｌ）によって１０００ｘ希釈された１０ｍｌの胞子懸濁液と、ＳＤＡ上に置いた液滴（３０μｌ）を包含する。この実験を２１℃で実施した。
【００３５】
このやり方において、１分以内に本発明の薬剤によって、Verticillium Lecaniiが９９％殺生されたということが明らかになった。
【００３６】
実施例２：本薬剤が２４時間活性であった後のVerticillium Lecaniiに対する活性
この実験は、ラクトペルオキシダーゼ系を最初に２４時間、５００ｍｌのレトルト（蒸留器）で貯蔵し、その後に胞子懸濁液を添加する違いはあるが、実施例１に記載のように行った。これは、該系が２４時間後も依然活性であるかどうかを探索する目的であった。
【００３７】
この薬剤によって、およびその系が２４時間活性であった後でも、Verticillium Lectaniiは、なお１分以内に９９％殺生された。
【００３８】
実施例３：Verticillium Lecaniiに対するＩ-を含まない薬剤の活性
この実験は、ＫＩ（Ｉ−１）が存在しない薬剤を用いて実施例１に記載のように行った。酵素系を開始直後の胞子に対する活性のみをここでは試験した。
【００３９】
Verticillium Lecaniは、この組成物および態様によって２５％殺生されただけであった。これは、Ｉ-の添加が菌類に対する殺生物活性を顕著に増加させることを示す。
【００４０】
実施例４：Verticillium Lecaniiに対するＳＣＮ-を含まない薬剤の活性
この実験は、ＫＳＣＮ（ＳＣＮ-）が存在しないという違いはあるが、実施例１に記載のように行った。胞子に対する直接の活性を試験した。
Verticillium Lecaniiは、本発明の薬剤によって９９％殺生された。
【００４１】
実施例５：異なる温度でのVerticillium Lecaniiに対する薬剤の活性
この実験は、２つの異なる温度（３７℃±１０℃）以外は、実施例１に記載のように行った。
Verticillium Lecaniiは、本発明の薬剤によって１分以内に両温度で９９％殺生された。
【００４２】
実施例６：Botrytis cinereaに対する薬剤の活性
Verticillium Lecanii胞子の代わりにBotrytis cinerea胞子を用いて実施例１に記載のように行った。３０および６０分間のインキュベーションの後、胞子の生存数を測定した。
９９％以上のBotrytis cinerea胞子が３０分以内で該薬剤によって殺生された。
【００４３】
参考例１：Sphaerotheca fuliginea(キュウリウドンコ病原菌）に対する本発明の薬剤の直接的な効果
プラスチックのペトリ皿（直径９ｃｍ）を５つ用いて、バイオアセッセイのために使用した。各ペトリ皿を、８〜１０ｍｍ寒天の層で充填した。この寒天は、１リットルの水で寒天粉末（１０ｇ）を溶解させ、これを沸騰させて調製された。この後、この寒天をビーカーに移し、冷水浴中に静置した。この寒天溶液を約５０℃に冷却したときに、ペトリ皿に充填した。固体化する直前（３０〜４０℃で）に、打ちぬいた丸いキュウリの葉を寒天に並べた。打ちぬいた葉は、ペトリ皿と同じ直径を持ち、寒天に葉の裏面を下向きに並べる。この方法において、この葉の新鮮さを約１４日間保持することができる。
【００４４】
次に、打ちぬいた葉をSphaerotheca fuligineaによって接種した。新しいウドンコ病を持つキュウリの葉を、この目的のために十分な噴霧によってすすぎ流した。ウドンコ病胞子を有するすすぎ水をビーカーに集めた。打ちぬいた葉を有するバイオアッセイの各皿を、Badger sprayer(2バール)を用いて、このすすぎ水で噴霧した。これらの皿を空気中で乾燥させ、相対湿度(RH)７５％の空間に入れて蓋をする。RH７５％は、ＮａＣｌ（１５０ｇ）を水（１００ml）に溶解させることによって得られた。このＮａＣｌ溶液を、ガーゼで覆ったバイオアッセイ用シャーレを並べ得る密閉容器中に入れた。
【００４５】
打ちぬいた葉にウドンコ病原菌による接種１〜２日間後、バイオアッセイ皿を本発明の種々の薬剤を用いて噴霧した。水および化学噴霧は、対照として包含する。
【００４６】
バイオアッセイ皿をBadger 噴霧器(2バール)を用いて噴霧し、空気中で乾燥させた。密閉ペトリ皿を、ＲＨ７５％を有する飽和塩溶液の上に置いた。
【００４７】
ウドンコ病原菌を接種した６〜７日後に、ウドンコ病の出現およびウドンコ病が現れている葉の百分率についてバイオアッセイ皿を調べた。必要で、可能であれば、打ちぬいた葉を再び本発明の薬剤で、ウドンコ病原菌接種７日後に噴霧した。２度目の噴霧５日後、打ちぬいた葉をもう一度調べた。５００ｍｌの薬剤を表２の成分で調製した。
【００４８】
0004545311.tif 000003
【００４９】
この濃度で、この薬剤は、Sphaerotheca fuligineaに対して約２０〜２５％の対照結果を与えた。
【００５０】
参考例２：種々のラクトペルオキシダーゼ濃度での薬剤の活性
この実験は、３０ｍg／ｌのラクトペルオキシダーゼの代わりに、濃度１００ｍg／ｌのラクトペルオキシダーゼ（５０ｍｇ／５００ｍｌ）を使用するという違いはあるが、参考例１に記載のように行った。
この濃度で、該薬剤は、Spharotheca fuligineaの約５５〜６５％の対照結果を与えた。
【００５１】
実施例７：種々のラクトペルオキシダーゼ濃度および油ベースでの薬剤の活性この実験は、参考例１に記載の成分に加えて、ピーナッツ油、乳化剤 Atlas 1086（商標）（ＩＣＩ）および拡散剤Nathin１３０（商標）＋VolpoＴ７（商標）からなる油ベースを添加する違いはあるが、参考例１に記載のように行った。油ベースを１：２５０の濃度で添加した。
【００５２】
３０ｍｇ／ｌラクトペルオキシダーゼ＋油ベースを有する薬剤は、Sphaerotheca fuligineaに対して約５０〜５５％の対照結果を与え、１００ｍｇ／ｌラクトペルオキシダーゼ＋油ベースを有する薬剤は、Sphaerotheca fuligineaに対して約８０〜９５％の対照結果を与えた。
【００５３】
化学対照は、Sphaerotheca fuligineaに対して約８０〜９５％の対照結果を与えた。水は、Sphaerotheca fuligineaに対する顕著な対照結果を示さなかった。
【００５４】
実施例８：キュウリ植物体でのSphaerotheca fuligineaに対する薬剤の活性を試験するための半野外実験
１０〜１５の若いキュウリ植物体を、温室に置いた密閉ケージ中に静置した。キュウリ植物体は、噴霧されず、ウドンコ病に耐性ではない。約６０ｃｍの高さで、４〜５枚のキュウリ植物体の葉を持つ。該植物体は、ウドンコ病の胞子溶液を該植物に噴霧することによって、１日目にウドンコ病を接種した（ウドンコ病胞子を得るためには参考例１を参照）。７日目に該植物体を本発明の薬剤、水または化学対照で処理した。処理は、約５バールで噴霧ランス（lance）によって、植物の上から噴霧した。８日目および次の日の植物体について、ウドンコ病損傷率（％）を調べた。必要であれば、本発明の種々の薬剤によって２回目の噴霧を１４日目に行った。
噴霧前の初期損傷は、本発明の薬剤で処理した植物に対して５０％であり、化学対照で処理した植物に対して５０％であった。
１０００mlの薬剤を表３の成分から調製した。
【００５５】
0004545311.tif 000004
【００５６】
この濃度での該薬剤は、Sphaerotheca fuligineaに対して約８０％の対照結果を与えた。化学対照は、Sphaerotheca fuligineaに対して約４０％の対照結果を与えた。
【００５７】
実施例９：キュウリ植物体でのSphaerotheca fuligineaに対する拡散剤の添加による該薬剤の活性を試験するための半野外実験
拡散剤を添加する違はあるが、実施例８に記載のように行った。拡散剤Volpo T7（商標）の濃度は０．０５％であった。噴霧前のウドンコ病による初期損傷は、３５〜４０％であった。
この濃度で、拡散剤を含まない薬剤は、水に関して約８５％のSphaerotheca fuligineaに対する対照結果を与えた。この濃度で、追加の添加物として拡散剤を有する薬剤は、Sphaerotheca fuligineaに対して約９９％の対照結果を与えた。
【００５８】
実施例１０：キュウリ植物体でのSphaerotheca fuligineaに対する拡散剤を含むおよび含まない薬剤の活性を試験するための野外実験
野外実験のために使用した方法は、完全に成長した植物体を温室内で使用し、噴霧をナップサック噴霧器または噴霧barrowどちらかによって実施する違いはあるが、実施例８の半野外試験に記載の方法と同様であった。
１０００ ｌの薬剤を表４の成分で調製した。
【００５９】
噴霧前のキュウリ植物体でのSphaerotheca fuligineaによる初期損傷は、８０〜９０％であった。拡散剤なしでまたは拡散剤を用いる処理を行った。
【００６０】
0004545311.tif 000005
【００６１】
拡散剤を有する薬剤は、Sphaerotheca fuligineaに対して約９０％の対照結果を与えた。拡散剤を含まない薬剤は、約７５％の対照結果を与えた。
【００６２】
実施例１１：ラクトペルオキシダーゼの種々の濃度による、キュウリ植物体でのSphaerotheca fuligineaに対する薬剤の活性
この実験は、ラクトペルオキシダーゼ（ＬＰ）濃度を次のように（７０ｍｇ／ｌ、６０ｍｇ／ｌおよび５０ｍｇ／ｌ）変える違いはあるが、実施例１０に記載のような方法で行った。
この実験において、ラクトペルオキシダーゼの種々の濃度には、違いは見出されなかった。この３つのＬＰ濃度の全ての対照結果は、約７５〜８５％であった。
【００６３】
実施例１２：パプリカ植物体でのLeveillula trauricaに対する薬剤の活性
この実験は、キュウリの代わりに、それと関連するウドンコ病原菌（Leveillula traurica）を持つパプリカを使用する違いはあるが、ナップサック噴霧器を用いる実施例１０に記載のような方法で行った。拡散剤は使用しなかった。
【００６４】
この濃度で、該薬剤は、パプリカでのウドンコ病原菌（Leveillula traurica）に対して約６０〜７０％の対照結果を与える。
【００６５】
実施例１３：トマト植物体上のOiduim lycopersicumに対する薬剤の活性
この実験は、キュウリの代わりに、それと関連するウドンコ病原菌（Oiduim lycopersicum）を持つトマトを使用する違いはあるが、ナップサック噴霧器を用いる実施例１０に記載のような方法で行った。
【００６６】
この濃度で、本発明の薬剤は、トマトでの病原菌（Leveillula traurica）に対して約８０〜８５％の対照結果を与える。
【００６７】
参考例３： Xsanthomonas campestrisに対する薬剤の活性
細菌溶液を、約１０8胞子／ｍｌ栄養培養基から調製した。５００ｍｌの薬剤を表５の成分から調製した。
【００６８】
0004545311.tif 000006
【００６９】
細菌懸濁液（１０ｍｌ）を９０ｍｌの薬剤に添加した。次いで、該薬剤を５、１０、１５および３０分、細菌に作用させ、各時点毎に１ｍｌを採取し、薬剤を希釈するために栄養培養基で１０００ｘ希釈した。
【００７０】
この希釈溶液からの０．１ｍｌを取り出し、ＮＵＡ(栄養寒天）上にピペットで移しかえ、培養した。７２時間後のプレートについて細菌増殖を調べた。これをブランクと比較した。
【００７１】
この実験を、２１℃の温度、約ｐＨ７．５で行った。細菌（Xanthomonas campestris）をこの実験において使用した。
【００７２】
このやり方において、本発明の薬剤によって５分以内でXanthomonas campestrisが１００％殺生された。
【００７３】
参考例４：Pseudomonas syringaeに対する薬剤の活性
この実験は、Xsanthomonas campestrisの代わりに細菌（Pseudomonas syringae）を試験する違いはあるが、参考例３に記載のように行った。
該成分およびこのやり方で５分以内で、Pseudomonas syringaeが１００％殺生された。