(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
0004503835.tif 000005
[式中、Ｒ１は、水素または２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチルである]の化合物および／または該化合物の薬理学的に認容性の塩ならびに肺表面活性物質を含有する、ＩＲＤＳおよびＡＲＤＳの治療のための組成物。
【請求項２】
４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン−酢酸および／またはその薬理学的に認容性の塩ならびに肺表面活性物質を含有する、ＩＲＤＳまたはＡＲＤＳの治療のための組成物。
【請求項３】
肺表面活性物質として、リン脂質の混合物を含有する、請求項１または２記載の組成物。
【請求項４】
天然の肺表面活性物質中に存在するリン脂質を含有する、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
肺表面活性タンパク質を付加的に含有する、請求項３または４記載の組成物。
【請求項６】
ＳＰ−Ｂおよび／またはＳＰ−Ｃおよび／またはそれらの修飾された誘導体を含有する、請求項５記載の組成物。
【請求項７】
肺の洗浄により得られる肺表面活性物質を含有する、請求項１記載の組成物。
【請求項８】
Ｒ１が水素または２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチルである式Ｉの化合物および／または該化合物の薬理学的に認容性の塩ならびに肺表面活性物質の、ＩＲＤＳおよびＡＲＤＳの制御を目的とする医薬品を製造するための使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
技術分野
本発明は、新生児呼吸窮迫症候群（ＩＲＤＳ）および急性または成人型呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）と称される病状の治療のための新規組成物に関する。
【０００２】
従来技術
成人型呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）とは、深刻なガス交換障害（特に動脈低酸素症）に関連する場合に、様々な病因による急性で広汎の浸潤性肺疾患を示す言葉である。新生児呼吸窮迫症候群（ＩＲＤＳ）と多くの共通した臨床的および病理学的特徴を有することから、ＡＲＤＳという表現を使用する。ただし、ＩＲＤＳの場合には、早産により誘起される肺表面活性物質障害が主要因であるのに対し、ＡＲＤＳでは、様々な病因による肺疾患が誘起する肺表面活性物質の機能不全である。
【０００３】
例えばＡＲＤＳを誘起する引き金となるのは（Harrison's Principles of Internal Medicine 第10版、1983 McGraw-Hill Int. Book Compに従って引用）、広汎性の肺汚染（例えばウイルス、細菌、真菌に起因する）、胃液のようなものの吸引または溺死に近い状態、毒または刺激物（例えば塩素ガス、窒素酸化物、煤煙）の吸入、直接のまたは間接の傷害（例えば多発性骨折または肺挫傷）、肺以外の炎症に対する全身反応（例えば出血性膵炎、グラム陰性菌敗血症）、大量の血液の輸血または場合により心−肺バイパス後の輸血である。
【０００４】
死亡率は５０〜６０％であり（Schuster Chestの調査1995, 107：1721〜26）、ＡＲＤＳ患者の予後に関しては今もって非常に悪い。
【０００５】
ＡＲＤＳの治療には、主に、体外膜型酸素化装置（ＥＣＭＯ：Zapol and Lemaire Adult Respiratory Distress Syndrome, Marcel Dekker Inc. 1991）のような早期に可能な種々の形態の換気処置が含まれる（例えばＰＥＥＰ（終末呼気陽圧）、呼吸気の酸素濃度の増加、ＳＩＭＶ（患者の自発呼吸に一致させた間欠的強制換気；（Harrison's Principles of Internal Medicine 第10版、1983 McGraw-Hill Int. Book Comp））。
【０００６】
標的を絞って様々な換気技術を使用しても死亡率は僅かに低下するにすぎず、悪循環を引き起こす危険性を孕んでいる。加圧および高ＦｉＯ２（Fraction of Inspired Oxygen＝吸酸素分画；呼吸器中の酸素の割合）での換気により、肺自体が損傷を受け、その結果、血液を十分に酸素化するにはより高い圧力およびより高いＦｉＯ２が必要となる。
【０００７】
前記の問題点の解決には様々な取り組み方法がある。これらの方法には、肺表面活性物質の代理形成（調査、例えばB. Lachmann, D. GommersおよびE.P. Eijking: Exogenous surfactant therapy in adults, Atemw- Lungenkrkh, 1993, 19：581〜91；T.J. Gregory等：Bovine Surfactant Therapy for Patients with Acute Respiratory Distress Syndrome, Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1997 Vol 155, 1309〜1315）ならびにプロスタグランジンＥ１（ＰＧＥ１：Abraham等、Crit Care Med 1996, 24：10〜15）またはグルココルチコステロイド（Bernard等、N Engl J Med 1987、317：1565〜70）のような単なる抗炎症性の治療までが含まれる。肺表面活性物質の投与はある程度の成功を収めたが（例えばWalmrath等、Am J Resp Crit Care Med 1996, 154：57〜62）、単なる抗炎症性の治療は、今のところほとんど成功していない。このことは、ＡＲＤＳに関する病理学的または組織病理学的所見に対し、相当の対照を成している。すなわち、広範の多形核白血球浸潤（調査、例えばThiel等、Anaesthesist 1996、45：113〜130）がＡＲＤＳ患者の肺および洗浄液にみられ、多くの炎症メディエーターが検出できる。リポソーム静脈投与形のＰＧＥ１（Abaham等、Crit Care Med 1996, 10〜15）およびホスファチジル酸の阻害を目的とした物質（例えばイソフィリン；Rice等、Proc Natl Acad Sci 1994, 91：3857〜61）または組み換えヒトインターロイキン1（ＩＬ−1）受容体拮抗剤（Fisher等、JAMA 1994, 271：1836〜43）は、なお研究中である。しかし、ＰＧＥ１およびＩＬ−1受容体拮抗剤はいずれも、その副作用のために臨床での利用を制限されており、臨床研究は終了されているかまたは成功を収めていない。
【０００８】
ＷＯ９６／０９８３１には、グルココルチコステロイドおよび肺表面活性物質を含む、ＡＲＤＳおよびＩＲＤＳの治療用組成物が記載されている。
【０００９】
ＥＰ−Ｂ−０４５１２１５には、薬理学的に活性な化合物を肺を経由して投与するための組成物が記載されている。これらの組成物には、薬理学的に活性な化合物および肺表面活性タンパク質を含有するリポソームが含まれる。これらの系は同様に、ＡＲＤＳおよびＩＲＤＳの治療を目的としている。ＥＰ−Ｂ−００５５０４１には、呼吸組織の疾患に対して活性な化合物および天然の肺表面活性物質を含有する、呼吸組織の疾患を治療するための吸入剤または輸液の製造が記載されている。ＡＲＤＳまたはＩＲＤＳの治療のための製造については開示されていない。
【００１０】
発明の説明
意外にも、式Ｉ：
【００１１】
【化２】
0004503835.tif 000002
【００１２】
[式中、Ｒ１は、水素または２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチルである]の化合物と肺表面活性物質とを組み合わせて投与することにより、ＩＲＤＳおよびＡＲＤＳの治療に相乗的な効果をもたらすことができる。
【００１３】
従って、本発明は、式Ｉの化合物（Ｒ１は前記の定義である）および／または該化合物の薬理学的に認容性の塩ならびに肺表面活性物質を含有する、ＩＲＤＳまたはＡＲＤＳの治療のための組成物を提供する。
【００１４】
本発明の更なる実施態様は、請求項に従う。
【００１５】
式Ｉの化合物の製造および、その抗炎症薬としての使用については、ＥＰ−Ｂ１−０００５５５９に記載されている。
【００１６】
式Ｉの化合物の薬理学的に認容性の塩で好適なものは、特にＲ１が水素であり、塩基を有する塩である。その例は、アルカリ金属（リチウム、ナトリウム、カリウム）またはカルシウム、アルミニウム、マグネシウム、チタン、アンモニウム、メグルミンまたはグルニジウム塩であり、塩の製造時には、等モル比または異なる比の塩基を使用する（一塩基性塩基または多塩基性塩基であるか、ならびにどの塩が所望されるかに依存する）。
【００１７】
天然の肺表面活性物質は、例えば肺胞の表面張力を減少させるという表面−活性特性を有する。肺表面活性物質の表面活性を測定するための簡易で迅速なｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験は；例えば、いわゆるヴィルヘルミーバランス[Goerke, J Biochim Biophys Acta, 344：241〜261（1974）, King R. J.およびClements J. A. Am J Physicol 233：715〜726（1972）]である。この方法により、ほぼ０ｍＮ／ｍの表面張力を獲得するための肺表面活性物質の作用として測定される、肺表面活性物質の質が明らかになる。
【００１８】
ヴィルヘルミーバランスの試験では、定義されたリン脂質濃度を有する肺表面活性物質の懸濁液を水溶液に注入する。リン脂質は、気体／液体相境界に分配され、いわゆる単一層を形成する。この単一層は、水の表面張力を低下させる。小さな白金シートを注意深く溶液へ入れる。白金シートを下方向へ引っ張る力を、鋭敏な変圧器を使用して測定する。この力は表面張力と比例しており、白金シートの大きさに依存する。肺表面活性物質の表面活性を測定する別の装置は、“パルセイティング  バブル  スルファクトメーター（Pulsating Bubble Surefactometer）”（Possmayer F., Yu S.およびWeber M., Prog Resp Res, Ed. v. Wichert, vol 18：112〜120（1984）]である。
【００１９】
肺表面活性物質組成物の活性をｉｎ  ｖｉｖｏ試験でも測定でき、例えば続く“薬理学”の項目に記載される。肺表面活性物質の活性については、例えば肺圧縮率、血液ガス交換または所望の呼吸圧を測定することにより確認できる。
【００２０】
本発明において、肺の表面活性物質は、本来の肺表面活性物質の機能を有する公知の様々な組成物および修飾体として理解される。例えば前記試験において活性である組成物が有利である。天然の、特にヒトの肺表面活性物質と比較して、このような試験で活性の上昇が見られた組成物が非常に有利である。リン脂質を含有する組成物だけでなく、リン脂質に加え、特に肺表面活性タンパク質を有する化合物であってよい。Curosurf （Ｒ）（Serono, PharmaGmbH, Unterschleissheim）、均質化したブタの肺に由来する純度の高い天然表面活性物質、Survanta （Ｒ）（Abbott GmbH, Wiesbaden）およびAlveofact （Ｒ）（Dr. karl Thomae GmbH Biberach）、いずれも牛の肺の抽出物、ならびにExosurf （Ｒ）（Deutsche Wellcome GmbH, Burgwedel）、助剤を併用した合成リン脂質のような購入可能な製造物も挙げられる。可能な肺表面活性タンパク質は、天然源から得られるタンパク質、例えば肺洗浄または羊水からの抽出物、ならびに遺伝子操作タンパク質の両方である。本発明において、ＳＰ−ＢおよびＳＰ−Ｃで示される肺表面活性タンパク質およびその修飾された誘導体は特に興味深い。これらの肺表面活性タンパク質のアミノ酸配列、それらの単離または遺伝子技術による製造は公知である（例えばＷＯ８６／０３４０８、ＥＰ−Ａ−０２５１４４９、ＷＯ８９／０４３２６、ＷＯ８７／０６９４３、ＷＯ８８／０３１７０、ＷＯ９１／００８７１、ＥＰ−Ａ−０３６８８２３およびＥＰ−Ａ−０３４８９６７）。幾つかのアミノ酸が交換されている点でヒトのＳＰ−Ｃと異なっている、ＳＰ−Ｃで示される肺表面活性タンパク質の修飾された誘導体は、例えばＷＯ９１／１８０１５およびＷＯ９５／３２９９２に記載されている。この明細書では、特にＷＯ９５／３２９９２に記載されている組み換えＳＰ−Ｃ誘導体、とりわけ４位および５位のシステインがフェニルアラニンに、３２位のメチオニンがイソロイシンに置換されている点でヒトＳＰ−Ｃと異なるものが強調されている（以下ｒＳＰ−Ｃ（ＦＦ／Ｉ）とする）。ＥＰ−Ｂ−０１００９１０、ＥＰ−Ａ−０１１０４９８、ＥＰ−Ｂ−０１４５００５およびＥＰ−Ｂ−０２８６０１１には、本発明の成分と同様に好適な肺表面活性タンパク質を有するかまたは有さないリン脂質組成物が記載されている。
【００２１】
本発明はさらに、ＩＲＤＳまたはＡＲＤＳの治療および／または予防に使用される医薬品の製造のための、本発明の組成物の使用に関する。
【００２２】
さらに、本発明は前記疾患の治療および／または予防のための医薬品を提供し、これは本発明の組成物を含有する。
【００２３】
本発明の組成物は、気管内または気管支内投与のための液体としても吸入投与のための粉末としても使用可能である。組成物は有利に、当業者に公知の方法で製造され、場合により、さらに好適な製薬助剤を使用する。粉末形は、例えば水性懸濁液のような液体の肺表面活性物質と４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸または２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェンアセテートの水性懸濁液とを混合し、次いでこれを凍結乾燥させ、微粉にすることにより獲得される。場合により、肺表面活性物質と４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸または２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェンアセテートの溶液とを好適な溶剤、例えばtert−ブタノール中で凍結乾燥させ、次いで微粉化することもできる。肺表面活性物質の水性懸濁液と４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸水性懸濁液または２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェンアセテート懸濁液との混合物あるいは好適な溶剤、例えばアルコール（例えばメタノール、エタノール、２−プロパノール）、クロロホルム、ジクロロメタン、アセトンおよび付加的に少量の水を含有するそれらの混合物中の肺表面活性物質水性懸濁液と４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸または２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェンアセテートとの溶液の噴霧乾燥によっても粉末製品が得られる。吸入による投与も、本発明の組成物を含有する溶液または懸濁液を噴霧することにより実施する。本発明の組成物は、有利に、４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸または２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェンアセテートを１〜３０％含有する。
【００２４】
以下の実施例において、粉末製品の噴霧乾燥による製造について記載する。
【００２５】
例１：
１,２−ジパルミトイル−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン５.４６ｇ、１−パルミトイル−２−オレオイル−３−ｓｎ−ホスファチジルグリセロールアンモニウム２.３１ｇ、４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸０.９ｇ、パルミチン酸０.３８ｇ、塩化カルシウム０.２１ｇおよびｒＳＰ−Ｃ[組み換え肺表面活性タンパク質ＳＰ−Ｃ（ＦＦ／Ｉ）]０.１５ｇを２−プロパノール／水（９０：１０）５００ｍｌ中に溶解し、実験室用噴霧乾燥器（Buechi B 191）中で噴霧乾燥した。噴霧条件：乾燥用気体は窒素であり、吸込温度は１１０℃であり、吐出し温度は５８〜６２℃である。これにより細かい白色の粉末が得られる。
【００２６】
例２：
１,２−ジパルミトイル−３−ｓｎ−ホスファチジルコリン５.４６ｇ、１−パルミトイル−２−オレオイル−３−ｓｎ−ホスファチジルグリセロールアンモニウム２.３１ｇ、４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸０.０９ｇ、パルミチン酸０.３８ｇ、塩化カルシウム０.２１ｇおよびｒＳＰ−Ｃ[組み換え肺表面活性タンパク質ＳＰ−Ｃ（ＦＦ／Ｉ）]０.１５ｇを２−プロパノール／水（９０：１０）５００ｍｌ中に溶解し、実験室用噴霧乾燥器（Buechi B 191）中で噴霧乾燥した。噴霧条件：乾燥用気体は窒素であり、吸込温度は１１０℃であり、吐出し温度は５８〜６２℃である。これにより細かい白色の粉末が得られる。
【００２７】
本発明はまた、ＩＲＤＳまたはＡＲＤＳに苦しむヒトを含むほ乳類の治療方法を提供する。該方法は、本発明の組成物の１つを治療的に有効かつ薬理学的に許容される量で、罹患ほ乳類に投与することから成る。
【００２８】
さらに本発明は、ＩＲＤＳまたはＡＲＤＳの治療に使用する、本発明の組成物を提供する。
【００２９】
本発明の製造物を、例えば日に３〜４回で２〜４日間投与する。例えば、４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸６ｍｇおよびリン脂質５０ｍｇを含有する製造物を吸入または気管内あるいは気管支内投与により６時間間隔で６回投与する。
【００３０】
薬理学
麻酔ＳＤラット純粋な酸素および終末呼気陽圧（ＰＥＥＰ；ラットの酸素化を保証するため）により、人工的に換気し、内在性の肺表面活性物質が洗い出されるまで洗浄する[D. Haefner, R. Beume, U. Kilian, G. KraznaiおよびBurkhard Lachmann：Dose- response comparison of five lung surfactant (LSF) preparations in an animal model of adult respiratory distress syndrome (ARDS；D. Haefner, P. -G. Germann, D. Hauschke, Pulmonary Pharmacology (1994) 7, 319〜332]。このことは、動物の動脈酸素分圧（ＰａＯ2）の初期値５００〜５５０ｍｍＨｇ（純粋な酸素とＰＥＥＰの場合）が、５０〜１１０ｍｍＨｇの値にまで低下する事実により証明される。肺表面活性物質を処理していない対照群の動物は、観察期間中を通してＰａＯ２の低い値を保持している。このような値にまでＰａＯ2が低下して６０分後に、肺表面活性物質または肺表面活性物質と４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸とを一緒に気管内へ注入する。注入後３０、６０、９０および１２０分で、血液ガスを測定する。
【００３１】
下記の表１において、Ａは、最終洗浄の１時間後に肺表面活性物質を気管内注入し、１２０分後（８ｃｍＨ２Ｏの一定のＰＥＥＰ）のＰａＯ２の平均値（±標準偏差）をｍｍＨｇで示したものである。表には、４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸（Eltenac）を単独で静脈内投与した際の大凡の値のデータが示され、未処理の対照と比較される。Eltenacの単独投与がＰａＯ２に影響を及ぼさないことは、表より明かである。このことは、未処理の対照動物との比較により理解される。肺表面活性物質（２５または１００ｍｇ／ｋｇ）の投与は、ＰａＯ２を上昇させる。４−（２,６−ジクロロアニリノ）−３−チオフェン酢酸（Eltenac）と少量の肺表面活性物質（２５ｍｇ／ｋｇ）とを一緒に投与すると、肺表面活性物質１００ｍｇ／ｋｇまで、有意容量依存的にＰａＯ２の値が改善される。表２において、Ａは、肺表面活性物質とEltenacとを、用量を増加させながら一緒に気管内投与（i.tr.）した後のＰａＯ２値を示している。肺表面活性物質量２５ｍｇ／ｋｇにEltenac０.１〜０.３ｍｇ／ｋｇを添加すると、肺表面活性物質量２５ｍｇ／ｋｇの場合と比べてＰａＯ２値が改善される。このことから、Eltenacと肺表面活性物質とを一緒に投与することが予測し得ない非常に相加的な効果を導くことが分かる。従って、非常に高価な肺表面活性物質の一部を節約でき、あるいは各成分の向上した効果を得ることができる。さらに、静脈投与および気管内投与後のEltenacの効果の比較すると、肺表面活性物と一緒に気管内投与さた後の場合の方が、必要とされるEltenacの量は静脈投与後よりも著しく少量であることが分かる。
【００３２】
表１：
最終洗浄の１時間後に肺表面活性物質を気管内（i.tr.）投与して１２０分後のＰａＯ2値および洗浄直後に肺表面活性物質の気管内投与とEltenacの静脈内投与（i.v.）を行った場合を、未処理の対照群と比較し、対照群は最終洗浄後にEltenacを静脈投与しただけである。
【００３３】
【表１】
0004503835.tif 000003
【００３４】
表２：
最終洗浄の１時間後に肺表面活性物質およびEltenacを一緒に気管内投与(i.tr.）し、１２０分後のＰａＯ２値を未処理の対照群と比較し、対照群は最終洗浄後にEltenaを気管内投与しただけである。
【００３５】
【表２】
0004503835.tif 000004
【００３６】
実験後に実施したこれらの動物の肺の経時的調査により、成人型呼吸窮迫症候群の発生を示す、いわゆる硝子膜（ＨＭ）の多量な形成および炎症細胞の激しい流入[例えば多形核好中球（ＰＭＮＬ）]が認められる。ＰａＯ２値で表される効果も同様に、経時的調査において確認される。
【００３７】
このモデルで、Eltenacおよび肺表面活性物質（リン脂質混合物）から成り、肺表面活性タンパク質を有するまたは有しない本発明の製造物の調査において、酸素化および経時的変化（ＨＭ形成の阻害およびＰＭＮＬ流入の阻害）が、肺表面活性物質またはEltenacの単独投与と比較して、非常に相加的に改善されることが明かとなった。この予想もしない相乗効果は、ＩＲＤＳおよびＡＲＤＳの治療期間を短縮し、これらの症候群の高い死亡率を低下させることができる。