(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）、
【化１】
0004424838.tif 000006
（式中、Ｒ1は炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数６〜８のアリール基であり、Ｒ2は炭素数１〜４のアルキル基であり、Ｘはハロゲン原子である）
または下記一般式（II）
【化２】
0004424838.tif 000007
｛式中、Ｒ1は炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数６〜８のアリール基であり、−Ｒ3−で示される基は、−Ｃ（＝Ｏ）−基、−ＣＨ2−基、または−ＣＨ（ＯＨ）−基であり、Ｘはハロゲン原子である｝
で示される四級アンモニウム塩を液体クロマトグラフィーによって分離、分析する方法において、液体クロマトグラフィーの移動相として、アルカンスルホン酸塩、アレーンスルホン酸塩またはアルキル硫酸塩を含有させた移動相を用いて当該四級アンモニウム塩を分離することを特徴とする前記分析方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、アミド化合物及びエステル化合物を製造する際に縮合剤として好適に使用できる四級アンモニウム塩の分析方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
通常、四級アンモニウム塩の分析方法としては、液体クロマトグラフィーによる方法や1Ｈ−核磁気共鳴スペクトルの測定による方法等がある。
【０００３】
ところが、後出の一般式（Ｉ）または（II）で示される四級アンモニウム塩を、通常用いられる液体クロマトグラフィーによる分析方法、例えば、移動相にメタノールと水との混合溶液やアセトニトリルと水との混合溶液を使用した液体クロマトグラフィーにより分析すると、該四級アンモニウム塩が反応性を有して不安定であるため、分析中に該四級アンモニウム塩の分解が起こり、分解物のピークしか検出できなかった。
また、1Ｈ−核磁気共鳴スペクトルの測定による分析方法では操作が煩雑である上に、反応中の分析が難しいという問題がある。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
そこで、本発明は、後出一般式（Ｉ）または（II）で示される四級アンモニウム塩の簡便で、しかも安定的な分析方法を提供することを目的とする。
【０００５】
【発明を解決するための手段】
本発明者らは、かかる課題を解決すべく鋭意検討を行った。その結果、これら四級アンモニウム塩を液体クロマトグラフィーにて分離、分析する方法において、液体クロマトグラフィーの移動相として、アルキルスルホン酸塩、アリールスルホン酸塩またはアルキル硫酸塩を含有させた移動相を用いることで、該四級アンモニウム塩を分解させることなく安定して分離できることを見出し本発明を完成させるに至った。
【０００６】
即ち、本発明は、下記一般式（Ｉ）、
【０００７】
【化３】
0004424838.tif 000002
【０００８】
（式中、Ｒ1は炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数６〜８のアリール基であり、Ｒ2は炭素数１〜４のアルキル基であり、Ｘはハロゲン原子である）
または下記一般式（II）
【０００９】
【化４】
0004424838.tif 000003
【００１０】
｛式中、Ｒ1は炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数６〜８のアリール基であり、−Ｒ3−で示される基は、−Ｃ（＝Ｏ）−基、−ＣＨ2−基、または−ＣＨ（ＯＨ）−基であり、Ｘはハロゲン原子である｝
で示される四級アンモニウム塩を液体クロマトグラフィーによって分離、分析する方法において、液体クロマトグラフィーの移動相として、アルカンスルホン酸塩、アレーンスルホン酸塩またはアルキル硫酸塩を含有させた移動相を用いて当該四級アンモニウム塩を分離することを特徴とする前記分析方法である。
【００１１】
通常、アルカンスルホン酸塩等は、塩基性物質を液体クロマトグラフィーで分析する際に、分離を向上させるために用いられるが、本発明においては、分析対象である四級アンモニウム塩を安定化させることにより、分析中での分解を抑え、その分析を可能にしていると考えられる。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明における分析対象となる四級アンモニウム塩は、下記一般式（Ｉ）、
【００１３】
【化５】
0004424838.tif 000004
【００１４】
（式中、Ｒ1は炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数６〜８のアリール基であり、Ｒ2は炭素数１〜４のアルキル基であり、Ｘはハロゲン原子である）
または下記一般式（II）
【００１５】
【化６】
0004424838.tif 000005
【００１６】
｛式中、Ｒ1は炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数６〜８のアリール基であり、−Ｒ3−で示される基は、−Ｃ（＝Ｏ）−基、−ＣＨ2−基、または−ＣＨ（ＯＨ）−基であり、Ｘはハロゲン原子である｝
で示される化合物である。
【００１７】
前記一般式（Ｉ）または（II）中のＲ1は、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数６〜８のアリール基であり、前記一般式（Ｉ）中のＲ2は、炭素数１〜４のアルキル基である。
Ｒ1、Ｒ2における炭素数１〜４のアルキル基としてはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル、イソブチル基等を挙げる事ができ、Ｒ1における炭素数６〜８のアリール基としてはフェニル基、トリル基、キシリル基等を挙げる事ができる。これらの中でも、特に四級アンモニウム塩の合成が容易という意味において、アルキル基としてはメチル基、エチル基が、アリール基としてはフェニル基が好適に採用される。
【００１８】
また、前記一般式（II）中の−Ｒ3−で示される基は、−Ｃ（＝Ｏ）−基、−ＣＨ2−基、または−ＣＨ（ＯＨ）−基で示される二価の基である。これらの基の中でも、四級アンモニウム塩の吸湿性が低いという観点から、−ＣＨ（ＯＨ）−基が好適である。
【００１９】
また、前記一般式（Ｉ）または（II）中のＸは、ハロゲン原子を示し、ハロゲン原子としては、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等を挙げることができる。これらの中でも、特に四級アンモニウム塩の合成が容易という意味において、塩素が好適に採用される。
【００２０】
本発明の分析対象となる前記一般式（Ｉ）で示される四級アンモニウム塩を具体的に例示すると、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジイソプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジブトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジイソプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジブトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−イソブチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−イソブチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−イソブチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジイソプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−イソブチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジブトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−イソブチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−イソブチルモルホリニウムクロライド等を挙げることができる。
【００２１】
これらの中でも特に、合成が容易でしかも縮合剤として使用したときに高い縮合収率が期待できるため、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド、４−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−エチルモルホリニウムクロライド等が特に好適に採用される。
【００２２】
また、前記一般式（II）で示される四級アンモニウム塩を具体的に例示すると、１−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）キヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−オキソキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）キヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−オキソキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）キヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−オキソキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジイソプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）キヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジイソプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジイソプロポキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−オキソキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジブトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）キヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジブトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジブトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−オキソキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）キヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−オキソキヌクリジニウムクロライド等を挙げる事ができる。
【００２３】
これらの中でも特に、合成が容易でしかも高い縮合収率が期待できるため、１−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）キヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−オキソキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）キヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジエトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−オキソキヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）キヌクリジニウムクロライド、１−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウム）クロライド、１−（４，６−ジフェノキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−オキソキヌクリジニウムクロライド等が特に好適に採用される。
【００２４】
本発明においては、前記四級アンモニウム塩を液体クロマトグラフィーによって分離し、検出する。
【００２５】
液体クロマトグラフィーの移動相を構成する溶液としては、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトニトリル、アセトン、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン等の有機溶媒と水との混合溶液、特にメタノールと水との混合溶液、エタノールと水と混合溶液、アセトニトリルと水との混合溶液が好適に用いられる。本発明においては、これら溶液中にアルカンスルホン酸塩、アレーンスルホン酸塩またはアルキル硫酸塩（以下、添加塩ともいう）を含有させることが必須である。
【００２６】
アルカンスルホン酸塩、アレーンスルホン酸塩またはアルキル硫酸塩としては公知のものが何ら制限なく使用される。これらを具体的に例示すると、１−プロパンスルホン酸ナトリウム、１−ブタンスルホン酸ナトリウム、１−ペンタンスルホン酸ナトリウム、１−ヘキサンスルホン酸ナトリウム、１−ヘプタンスルホン酸ナトリウム、１−オクタンスルホン酸ナトリウム、１−ノナンスルホン酸ナトリウム、１−デカンスルホン酸ナトリウム、１−ウンデカンスルホン酸ナトリウム、１−ドデカンスルホン酸ナトリウム、１−トリデカンスルホン酸ナトリウム等のアルカンスルホン酸塩；２−ナフタレンスルホン酸ナトリウム等のアレーンスルホン酸塩；１−ドデシル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩が挙げられる。
これら添加塩の中から、分析対象となる四級アンモニウム塩の構造、性質等に応じて、良好に分離できるものが適宜選択される。
【００２７】
添加塩の溶液への含有方法としては、例えば、調整した有機溶媒と水との混合溶液に添加塩を添加し、均一溶液となるように攪拌して溶解させればよい。
【００２８】
添加塩の含有量としては、移動相中１ｍｍｏｌ／ｌ〜１０ｍｍｏｌ／ｌ、好ましくは２ｍｍｏｌ／ｌ〜８ｍｍｏｌ／ｌとするのがよい。
【００２９】
移動相のｐＨは、２〜７．５であるのが好ましく、ｐＨを調節するために酢酸やリン酸等を添加してもよい。
【００３０】
カラムの充填剤としては、通常の液体クロマトグラフィー用の充填剤、例えばメチル基、プロピル基、ブチル基、ヘキシル基、オクチル基、オクタデシル基、フェニル基、シアノプロピル基、アミノプロピル基またはジオール基等の官能基を結合した多孔質球状シリカゲルまたは多孔質破砕状シリカゲルが使用できる。
分離時のカラム温度としては、通常、室温〜６０℃、好ましくは室温〜４０℃が採用される。
【００３１】
検出器としては通常の液体クロマトグラフィー用の検出器、例えば、紫外吸光光度計（ＵＶ）などが使用できる。
【００３２】
その他の液体クロマトグラフィーの操作方法、条件は、従来公知の方法に準じて行えばよい。
【００３３】
【実施例】
以下、実施例を掲げて本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に制限されるものではない。
【００３４】
製造例１
５００ｍｌの四つ口フラスコに２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン２１．９５ｇ（０．１２５ｍｏｌ）、酢酸エチル２５０ｍｌ、及び水６．７５ｇ（０．３７５ｍｏｌ）を加え、５〜１０℃で１０分間攪拌した。次に、４−メチルモルホリン１３．２５ｇ（０．１３１ｍｏｌ）を添加し、５〜１０℃で６時間反応させた。析出した結晶を吸引濾過し、酢酸エチル１００ｍｌで洗浄した後、室温で１６時間減圧乾燥し、前記一般式（Ｉ）で示される四級アンモニウム塩として４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライドの白色固体３２．６２ｇを得た。なお、該白色固体中の水分量は０．６質量％であり、収率は９３．８％であった。
【００３５】
実施例１
製造例１で得られた４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライドを、下記の分析条件で液体クロマトグラフィーにより分析したところ、リテンションタイム３．６分に目的のピークを検出した。その純度（水以外の成分のピーク面積に占める上記四級アンモニウム塩のピーク面積の割合）は面積％で９９．８％であった。
分析条件
カラム：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ−１８（５μｍ）
内径４．６ｍｍ  長さ１５０ｍｍ、
カラム温度：３５℃、
検出：ＵＶ２１０ｎｍ、
移動相：メタノール／水混合溶液（４０／６０容量％、５ｍｍｏｌ／ｌ  １−ヘキサンスルホン酸ナトリウム含有、ｐＨ６．６）、
流速：１ｍｌ／分、
注入量：２μｌ、
試料濃度：５ｍｇ／ｍｌ
実施例２
実施例１で分析したものと同じ４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライドを、下記の分析条件で液体クロマトグラフィーにより分析したところ、リテンションタイム１０．２分に目的のピークを検出した。その純度（水以外の成分のピーク面積に占める上記四級アンモニウム塩のピーク面積の割合）は面積％で９９．８％であった。
分析条件
カラム：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ−１８（５μｍ）
内径４．６ｍｍ  長さ１５０ｍｍ、
カラム温度：３５℃、
検出：ＵＶ２１０ｎｍ、
移動相：メタノール／水混合溶液（６０／４０容量％、５ｍｍｏｌ／ｌ  １−ドデシル硫酸ナトリウム含有、ｐＨ７．０）、
流速：１ｍｌ／分、
注入量：２μｌ、
試料濃度：５ｍｇ／ｍｌ
製造例２
５００ｍｌの四つ口フラスコに２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン１７．５５ｇ（０．５ｍｏｌ）、テトラヒドロフラン５００ｍｌを加え、室温下、１０分間攪拌した。次に、３−キヌクリジノール１２．７２ｇ（０．０２ｍｏｌ）を添加し、室温下、１時間反応させた。析出した結晶を吸引濾過し、テトラヒドロフラン１００ｍｌで洗浄した後、室温で１５時間減圧乾燥し、１−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライドの白色固体２９．４５ｇを得た。なお、該白色固体中の水分量は０．５質量％であり、収率は９６．８％であった。
【００３６】
実施例３
製造例２で得られた１−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−３−ヒドロキシキヌクリジニウムクロライドを、下記の分析条件で液体クロマトグラフィーにより分析したところ、リテンションタイム３．８分に目的のピークを検出した。その純度（水以外の成分のピーク面積に占める上記四級アンモニウム塩のピーク面積の割合）は面積％で９７．３％であった。
分析条件
カラム：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ−１８（５μｍ）
内径４．６ｍｍ  長さ１５０ｍｍ、
カラム温度：３５℃、
検出：ＵＶ２１０ｎｍ、
移動相：メタノール／水混合溶液（４０／６０容量％、５ｍｍｏｌ／ｌ  １−ヘキサンスルホン酸ナトリウム含有、ｐＨ６．６）、
流速：１ｍｌ／分、
注入量：２μｌ、
試料濃度：５ｍｇ／ｍｌ
比較例１
実施例１で分析したものと同じ４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライドを、下記の分析条件で液体クロマトグラフィーにより分析を行ったところ、リテンションタイム１．７分と５．０分にピークを検出した。１．７分のピークは、加水分解物の２，４−ジメトキシ−６−ヒドロキシ−１，３，５−トリアジンであり、５．０分のピークは、メタノールとの反応生成物の２，４，６−トリメトキシ−１，３，５−トリアジンであり、目的のピークは検出できなかった。
分析条件
カラム：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ−１８（５μｍ）
内径４．６ｍｍ  長さ１５０ｍｍ、
カラム温度：３５℃、
検出：ＵＶ２１０ｎｍ、
移動相：メタノール／水混合溶液（４０／６０容量％）、
流速：１ｍｌ／分、
注入量：２μｌ、
試料濃度：５ｍｇ／ｍｌ
【００３７】
【発明の効果】
本発明の四級アンモニウム塩の分析方法によれば、四級アンモニウム塩の分解を抑え、簡便に分離して分析することができる。