(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚表皮屑片採取用器具を用いて皮膚表皮屑片を採取する前に予め皮膚に塗布する皮膚表皮屑片採取用プレ外用剤であって、水、水溶性高分子、皮膚柔軟剤及び表皮剥離促進剤としてグリコール酸０．０１〜５重量％を含み、ｐＨ４．０〜６．５、粘度１０００〜２００００ｍＰａ・ｓである皮膚表皮屑片採取用プレ外用剤。
【請求項２】
請求項１記載のプレ外用剤を適用した皮膚に対して使用する皮膚表皮屑片採取用カミソリであって、カミソリの刃を有する頭部と把持部からなり、頭部と把持部が一体成形され、それらの連結部に形成された切り込みにより、ピンセットで加える外力で把持部が頭部から脱離可能である皮膚表皮屑片採取用カミソリ。
【請求項３】
請求項１記載のプレ外用剤を皮膚に適用し、請求項２記載の皮膚表皮屑片採取用カミソリ又は尖端が鋭角な短繊維が台座に縦横に植え込まれている皮膚表皮屑片採取用器具を用いて美容目的で皮膚表皮屑片を採取する皮膚表皮屑片採取方法。
【請求項４】
プロビタミンＣ、保湿剤及び肌荒れ防止剤を含むケア用外用剤を、皮膚表皮屑片の採取後に皮膚に適用する請求項３記載の皮膚表皮屑片採取方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、痛みも出血もなく、痕跡も色素沈着も残らないように皮膚表皮細胞を採取するための皮膚表皮屑片採取方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
皮膚表皮細胞の採取は、生検（biopsy）等で行われている。ここで、生検とは病気の診断確定のために、生体から組織を取り、病理組織標本を作って通常顕微鏡下で検査することである。生体から組織を取る方法には、表面から細胞を擦過する方法（scraping biopsy）、病変を鋭匙で削り取る方法（shaving biopsy）、トレパンで丸く押し抜く方法（punch b.）、外科的にメスで病変の一部を切り取る方法（incisional biopsy）、全摘する方法（excisional biopsy）などがあるが、メスで病変の一部を切り取る方法と全摘する方法が皮膚の病理組織標本を作る上では最も良い。
【０００３】
いずれの採取方法を行う場合でも、盛期にある皮疹を採った場合に、新旧の組織が混在しているときは、両者を採ることが望ましい。また、病変部の他にできる限り周囲健皮部も含めて切除して、病変の移行部をも検査できるようにすることが好ましく、また、表皮・真皮・皮下組織の３要素が入るように採取することが好ましい。
【０００４】
このため、皮膚表皮細胞の採取は、被検者に痛みと、毛細血管が分断されることによる出血とをもたらしていた。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
ところで、皮膚表皮細胞のテロメア長（即ち、テロメアＤＮＡの長さ）は、近年、皮膚老化の新しい指標として注目され（Seiichi Y. et al., Fragrance Journal, (1999), 27, 69-75）、医療に加え、美容の分野でも皮膚表皮細胞のテロメア長を簡易かつ迅速に測定することへの要請が高まってきている。
【０００６】
しかしながら、これまでの皮膚表皮細胞のテロメア長の測定技術においては、100万個以上の皮膚表皮細胞を必要とし、その採取方法は外科的手術あるいは生検における大がかりな皮膚組織の摘出方法によっている。
【０００７】
そのため、痛みも出血もなく、痕跡も残らないように皮膚表皮細胞を採取し、テロメア長を簡易かつ迅速に測定できるようにする新たな手法の開発が望まれている。
【０００８】
また、テロメア長の測定以外にも、皮膚表皮細胞の遺伝子診断、酵素や生理活性物質の測定等のため、皮膚表皮細胞の採取を簡便にできるようにする要請は強い。
【０００９】
そこで、本発明は、皮膚表皮細胞を痛みも出血もなく、痕跡も色素沈着も残らないように採取できるようにする、新たな皮膚表皮屑片採取方法、及びそのために使用する皮膚表皮表皮屑片採取用器具あるいは外用剤を提供することを目的とする。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
上記の目的を達成するため、本発明は、水、水溶性高分子、皮膚柔軟剤及び表皮剥離促進剤を含み、ｐＨ３．０〜７．５、粘度１０００〜２００００ｍＰａ・ｓである皮膚表皮屑片採取用プレ外用剤を提供する。
【００１１】
また、このプレ外用剤を皮膚に適用し、皮膚表皮屑片採取用器具を用いて皮膚表皮屑片を採取する皮膚表皮屑片採取方法を提供する。
【００１２】
さらに、皮膚表皮屑片採取用器具として、カミソリの刃を有する頭部と把持部からなり、把持部が頭部に脱離可能に連結している皮膚表皮屑片採取用カミソリを提供する。
【００１３】
本発明のプレ外用剤は柔軟剤及び表皮剥離促進剤を含有しているので、皮膚表皮屑片採取用器具を皮膚に用いる前にこのプレ外用剤を皮膚に適用すると、皮膚表皮が柔軟になり、また表面の角質層が剥離しやすくなるので、擦過あるいは粘着により皮膚表皮から皮膚表皮屑片を得ることが容易になる。
【００１４】
また、本発明のプレ外用剤は、水溶性高分子を含み、粘度１０００〜２００００ｍＰａ・ｓに調整されているので、予めこのプレ外用剤を皮膚へ適用した後にカミソリなどの皮膚表皮屑片採取用具を皮膚に用いると、皮膚表皮から擦過された、あるいは剥離した皮膚表皮屑片の飛散や落下を防止し、皮膚表皮屑片を皮膚表皮屑片採取用器具に付着させ、無駄なく回収することが可能となる。
【００１５】
したがって、プレ外用剤を予め皮膚に適用した後、皮膚表皮屑片採取用器具を用いて皮膚表皮屑片を採取する本発明の皮膚表皮屑片採取方法によれば、痛みも出血もなく、痕跡も色素沈着も残らないように皮膚表皮屑片を採取し、皮膚表皮屑片から皮膚表皮細胞を得ることが可能となる。
【００１６】
一方、皮膚表皮屑片採取用器具として、本発明の皮膚表皮屑片採取用カミソリを使用すると、皮膚の擦過により皮膚表皮屑片をカミソリの刃に付着させた後、カミソリの刃が設けられている頭部から把持部を極めて簡便に脱離させることができるので、カミソリの刃に付着した皮膚表皮屑片を所定の溶液に浸漬するなどの次工程の処理に頭部ごとかけることができる。
【００１７】
【発明の実施の形態】
以下、図面を参照しつつ本発明を詳細に説明する。なお、各図中、同一符号は同一又は同等の構成要素を表している。
【００１８】
本発明の皮膚表皮屑片採取方法は、特定のプレ外用剤を皮膚に適用し、皮膚表皮屑片採取用器具を用いて皮膚表皮屑片を採取する方法である。
【００１９】
ここで、皮膚表皮屑片とは、任意の部位の皮膚表面から、擦過、粘着材による剥離等の手法で採取されたものをいい、角化細胞等が含まれる。
【００２０】
プレ外用剤は、皮膚表皮への擦過、粘着等により皮膚表皮屑片を採取する場合に、皮膚表皮から皮膚表皮屑片の離脱あるいは剥離を容易にするため、また、皮膚表皮屑片を皮膚表皮屑片採取用器具に付着させて皮膚表皮屑片の飛散や落下を防止するため、皮膚への前処理として、皮膚に適用する化粧料である。
【００２１】
プレ外用剤は、水、水溶性高分子、皮膚柔軟剤及び表皮剥離促進剤を含み、ｐＨ３．０〜７．５、好ましくはｐＨ４．０〜６．５、粘度１０００〜２００００ｍＰａ・ｓに調整する。
【００２２】
プレ外用剤を、ｐＨ３．０〜７．５、好ましくはｐＨ４．０〜６．５という中性から弱酸性領域にすることにより、表皮の剥離効果を高めることができる。また、皮膚本来のｐＨに近いので、プレ外用剤が皮膚のｐＨバランスを崩さず、プレ外用剤を皮膚に穏やかに作用させることができる。この点、シェービングクリームやシェービングフォームが泡立ちを目的として石鹸を含有し、ｐＨがアルカリ性になっているのと異なる。
【００２３】
また、粘度を１０００ｍＰａ・ｓ未満とすると、皮膚表皮屑片の採取部位の皮膚からプレ外用剤が垂れ落ちたり、皮膚表皮屑片採取用器具に付着し難くなる。反対に、粘度が２００００ｍＰａ・ｓを超えると、皮膚表皮の所定の部位にプレ外用剤を塗布し難くなる。
【００２４】
水溶性高分子は、プレ外用剤の粘度を調節するために使用する。水溶性高分子としては、天然高分子、半合成高分子、合成高分子を含む種々の有機物水溶性高分子、無機物水溶性高分子等を単独であるいは複数種を併せて使用することができる。
【００２５】
ここで、天然の有機物水溶性高分子としては、例えば、グアーガム、ローカストビンガム、クインスシード、カラーギナン、ガラクタン、アラビアガム、トラガカントガム、ペクチン、マンナン、デンプン等の植物系（多糖類系）高分子；キサンタンガム、デキストラン、サクシノグルカン、カードラン、ヒアルロン酸等の微生物系（多糖類系）高分子；  ゼラチン、カゼイン、アルブミン、コラーゲン等の動物系（タンパク類系）高分子を挙げることができる。
【００２６】
半合成の有機物水溶性高分子としては、セルロース系、デンプン系、アルギン酸系、その他多糖類系誘導体を使用することができ、このうちセルロース系の半合成高分子の有機物水溶性高分子としては、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロースなどを挙げることができる。デンプン系の半合成高分子の有機物水溶性高分子としては、可溶性デンプン、カルボキシメチルデンプン、メチルデンプンなどを挙げることができる。アルギン酸系の半合成高分子の有機物水溶性高分子としては、アルギン酸プロピレングリコールエステル、アルギン酸塩などを挙げることができる。
【００２７】
合成の有機物水溶性高分子としては、ビニル系として、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメチルエーテル、カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸ソーダなどを挙げることができ、その他として、ポリエチレンオキシド、エチレンオキシド・プロピレンオキシドブロック共重合体等を挙げることができる。
【００２８】
また、無機物水溶性高分子としては、ベントナイト、ラポナイト、微粉酸化ケイ素、コロイダルアルミナなどを使用することができる。
【００２９】
一方、皮膚柔軟剤は、皮膚を柔軟にし、なめらかさを与えて、皮膚表皮屑片の採取を容易にするために含有させる。皮膚柔軟剤としては、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、高級アルコール類、エステル油類、シリコーン油類、植物油、その他の油性成分を使用することができる。
【００３０】
より具体的には、ロウ類としては、カルナウバロウ、キャンデリラロウ、ホホバ油、コメヌカロウ、サトウキビロウなどの植物系のロウ類、ミツロウ、ラノリン、鯨ロウ、セラックロウ、ラフィー油、羊毛脂などの動物系のロウ類を使用することができる。
【００３１】
炭化水素類としては、流動パラフィン、流動イソパラフィン、パラフィン、マイクロクリスタリン、ワセリンなどの石油系の炭化水素類；オゾケライト、セレシンなどの天然に産出する鉱物系の炭化水素類；ポリエチレン、α−オレフィンオリゴマー、ポリブテン、合成スクワラン、軽質イソパラフィン、軽質流動イソパラフィン、ポリエチレン末などの合成系の炭化水素類；スクワレン、スクワランなどの動物系の炭化水素類；オリーブ油、コメヌカ油、ゴマ油などの植物油から得られたスクワレン、及びこれらのスクワランなどの植物系の炭化水素類を挙げることができる。
【００３２】
脂肪酸類としては、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、ウンデシレン酸等を挙げることができる。
【００３３】
高級アルコール類としては、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ベヘニルアルコール、イソステアリルアルコール、オクチルドデカノール、ヘキシルデカノールなどを挙げることができる。
【００３４】
エステル油類としては、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ブチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸エチル、ステアリン酸ブチル、オレイン酸エチル、リノール酸エチル、リノール酸イソプロピルなどの直鎖脂肪酸と低級アルコールとのエステル類；
カプリル酸セチル、ラウリル酸ヘキシル、ミリスチン酸デシル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸セチル、パルミチン酸セチル、ステアリン酸ステアリル、オレイン酸デシル、オレイン酸オレイル、リシノール酸セチルなどの直鎖脂肪酸と直鎖高級アルコールとのエステル類；
ラウリン酸イソステアリル、ミリスチン酸イソトリデシル、ミリスチン酸イソセチル、ミリスチン酸イソステアリル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸２−エチルヘキシル、パルミチン酸イソセチル、パルミチン酸イソステアリル、ステアリン酸２−エチルヘキシル、ステアリン酸イソセチル、オレイン酸イソデシル、オレイン酸オクチルドデシル、リシノール酸オクチルドデシルなどの直鎖脂肪酸と分枝アルコールとのエステル類；
イソステアリン酸エチル、イソステアリン酸イソプロピルなどの分枝脂肪酸と低級アルコールとのエステル類；
２−エチルヘキサン酸セチル、２−エチルヘキサン酸セトステアリル、２−エチルヘキサン酸ステアリル、イソステアリン酸ヘキシルなどの分枝脂肪酸と直鎖高級アルコールとのエステル類；
ジオクタン酸エチレングリコール、ジオレイン酸エチレングリコール、ジカプリル酸プロピレングリコール、ジ（カプリル・カプリン酸）プロピレングリコール、ジカプリン酸プロピレングリコール、ジオレイン酸プロピレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジオクタン酸ネオペンチルグリコール、トリカプリル酸グリセリル、トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル、トリ（カプリル・カプリン酸）グリセチル、トリウンデシル酸グリセリル、トリイソパルミチン酸グリセリル、トリイソステアリン酸グリセリル、トリ２−エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリトール、テトラミリスチン酸ペンタエリスリトール、テトライソステアリン酸ペンタエリスリトールなどの脂肪酸と多価アルコールとのエステル類；
ネオペンタン酸オクチルドデシル、オクタン酸イソセチル、オクタン酸イソステアリル、イソペラルゴン酸２−エチルヘキシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、ジメチルオクタン酸オクチルドデシル、イソパルミチン酸２−エチルヘキシル、イソステアリン酸イソセチル、イソステアリン酸イソステアリル、イソステアリン酸オクチルドデシルなどの分枝脂肪酸と分枝アルコールとのエステル類；
乳酸ラウリル、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、乳酸オクチルドデシル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸トリオクチル、クエン酸トリイソセチル、クエン酸トリオクチルドデシル、リンゴ酸ジイソステアリル、ヒドロキシステアリン酸２−エチルヘキシルなどの水酸基を持つエステル類；
コハク酸ジ２−エチルヘキシル、アジピン酸ジイソプロピル、アジピン酸ジイソブチル、アジピン酸ジオクチル、セバシン酸ジエチル、セバシン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジオクチルなどの二塩基酸のエステル類；
ステアリン酸コレステリル、イソステアリン酸コレステリル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、オレイン酸ジヒドロコレステリル、イソステアリン酸フィトステリル、オレイン酸フィトステリルなどのステロール類のエステル類；
１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸イソセチル、１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸ステアリル、１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸イソステアリル、酢酸ポリオキシエチレン（３）ポリオキシプロピレン（１）セチルエーテル、酢酸ポリオキシエチレン（３）ポリオキシプロピレン（１）イソセチルエーテルなどのその他のエステル類を挙げることができる。
【００３５】
シリコーン油類としては、メチルポリシロキサン、オクタメチルトリシロキサン、デカメチルテトラシロキサン、高重合メチルポリシロキサンなどのジメチルシリコーン油；
ジメチルシリコーン油のメチル基の一部をフェニル基で置換したメチルフェニルシリコーン油；
オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサシロキサン、メチルシクロポリシロキサンなどの環状ジメチルシリコーン油；
ジメチルシリコーン油のメチル基の一部を水素原子で置換したメチルハイドロジェンシリコーン油；
ステアロキシメチルポリシロキサン、セトキシメチルポリシロキサンなどのアルコール変性シリコーン油；
ジメチルシリコーン油のメチル基の一部を長鎖アルキル基に置き換えたアルキル変性シリコーン油；
Ｎ−（２−アミノエチル）アミノプロピル基またはＮ−（２−アミノエチル）アミノイソブチル基を持つアミノ変性シリコーンなどを挙げることができる。
【００３６】
植物油としては、アボガド油、アルモンド油、オリーブ油、ゴマ油、コメヌカ油、サフラワー油、大豆油、トウモロコシ油、ナタネ油、パーシック油、パーム核油、パーム油、ヒマシ油、ヒマワリ油、ブドウ種子油、綿実油、ヤシ油、ホホバ油などの植物油などを挙げることができる。
【００３７】
その他の油性成分としては、スフィンゴ脂質、セラミド、コレステロール及びその誘導体、リン脂質及びpoly[2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine(MPC)]、poly[2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine(MPC)-co-butyl methacrylate(BMA)]などのリン脂質誘導体などを挙げることができる。
【００３８】
上述の皮膚柔軟剤は、本発明の効果を損なわない範囲で１種以上を含有させることができる。また、２種以上を組み合わせて含有させる場合の各成分の比率はとくに制限されない。
【００３９】
本発明のプレ外用剤において、表皮剥離促進剤は、表皮の剥離を促し、有核細胞を含む皮膚表皮屑片の採取を容易にする。皮膚表皮剥離促進剤としては、乳酸、グリコール酸、サリチル酸、酢酸、ピルビン酸、クエン酸、グリセリン酸、リンゴ酸、酒石酸等のα−ヒドロキシ酸またはその塩を使用することが好ましい。ここで、α−ヒドロキシ酸は、１分子中にカルボキシル基とアルコール性水酸基とを持つ有機化合物のことである。
【００４０】
α−ヒドロキシ酸またはその塩の配合量は特に限定されないが、グリコール酸を使用する場合、好ましくは、プレ外用剤全量中に、０．００１〜１０重量％、さらに好ましくは、０．０１〜５重量％配合することが、表皮剥離促進効果の点から好ましい。この配合量が０．００１％未満になると表皮剥離促進効果を十分に得られない場合があり、１０％を超えて配合しても肌への刺激が強すぎ、さらには使用性が悪くなることがあるので好ましくない。
【００４１】
プレ外用剤において、表皮剥離促進剤は本発明の効果を損なわない範囲で１種以上を配合させることができる。また、２種以上を組み合わせる場合に各成分の比率はとくに制限されない。
【００４２】
プレ外用剤には、上記必須成分に加えて、その剤形に応じて本発明の所期の効果を損なわない範囲で、通常、化粧料に配合される、油性成分、界面活性剤、酸化防止剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、殺菌・防腐剤、ビタミン及びその誘導体、動植物抽出物等の一般的成分を適宜配合することができる。
【００４３】
プレ外用剤の剤形は、通常の皮膚外用剤と同様に、可溶化系、乳化系、ゲル系等幅広い形態を採ることができる。
【００４４】
本発明の皮膚表皮屑片採取方法は、上述のプレ外用剤を予め皮膚に適用し、皮膚表皮屑片採取用器具を用いて皮膚表皮屑片を採取する方法である。
【００４５】
ここで、皮膚表皮屑片採取用器具としては、皮膚表皮屑片を出血しない程度に薄く採取できる限り特に制限はなく、インジェクター式カミソリ、両刃式カミソリ、片刃式カミソリ、使い捨て式カミソリ、カートリッジ式カミソリ等の種々のカミソリや、市販のセロハン粘着テープ等を使用することができるが、好ましくは、図１に示した皮膚表皮屑片採取用カミソリ１のように、カミソリの刃２を有する頭部３と把持部４からなり、頭部３と把持部４が一体成形され、かつ頭部３と把持部４との連結部に切り込み５が形成され、把持部４にピンセット等で外力を加えることにより把持部４が容易に頭部３から脱離するものが好ましい。このように把持部４を頭部３から脱離可能とすることにより、皮膚表皮を擦過した後、プレ外用剤で皮膚表皮屑片を刃２あるいはその周囲に付着させている状態で、頭部３ごと所定の溶液を入れた容器に移し、皮膚表皮屑片に行う次工程の処理を進めることができる。また、頭部３と把持部４とが容易に脱離する皮膚表皮屑片採取用カミソリ１を低コストに製造することができる。
【００４６】
皮膚表皮屑片採取用カミソリ１において、頭部３の刃２は、通常に市販されているカミソリの刃と同様の材質のもので良く、その大きさは５〜１０mm×２０〜５０mm程度とすることが好ましい。
【００４７】
頭部３と把持部４との角度θ1は、５〜９０度とすることが、皮膚を痛みも出血もなく、痕跡も残らないように擦過して皮膚表皮屑片を採取する上で好適である。
【００４８】
頭部３の形状は、正方形板状、長方形板状など、いかなる形状であってもよく、特に限定されない。大きさは、採取できるＤＮＡの量の関係から、長方形板状の場合には一辺が１０〜１５mm×２５〜５５mm程度であることが好ましい。
【００４９】
把持部４の大きさは、手で持つことができる程度であればよく、特に限定されない。具体的には、長さが３０〜１００mm、直径２〜８mmの円柱状、長軸半径が５〜２０mmかつ短軸半径が２〜１０mmの楕円状、または一辺３〜１５mmの角柱状などとすることができる。
【００５０】
本発明の皮膚表皮屑片採取用カミソリ１において、頭部３と把持部４とは、双方が脱離できるように連結されている限り、種々の態様をとることができる。例えば、頭部３と把持部４とは一体成形に限らず、別個に成形してもよい。頭部３と把持部４を別個に成形する場合に、これらを脱離可能に連結するためには、例えば、上記の頭部３の刃２のない面に把持部４の一端をはめ込むか、またはねじ込むように連結する。
【００５１】
皮膚表皮屑片採取用カミソリ１の頭部３や把持部４に使用する材料は特に限定されないが、入手及び成形が容易であり、成形品の滅菌が容易であり、低コストに製造できるようにする点から、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリアクリル、ポリ塩化ビニルなどのプラスチック、アルミニウム、スチール、ステンレスなどの金属を好適に使用することができる。特に、ポリプロピレンまたはアルミニウムなどで作製すると、皮膚表皮屑片採取用カミソリ１の製造コストが低くなり、滅菌が容易になるという利点がある。
【００５２】
皮膚表皮屑片採取用カミソリ１は、その作製後、無菌袋に詰め、例えば、γ線照射などによって滅菌して保管する。
【００５３】
皮膚表皮屑片採取用カミソリ１を用いて皮膚表皮から皮膚表皮屑片を採取する方法は、通常のカミソリと同様に、皮膚表皮屑片採取用カミソリ１を清浄にし、所定の部位に軽く当てて、この部位を数回軽く擦過する。これにより、微量の皮膚表皮屑片を採取することができる。
【００５４】
本発明の皮膚表皮屑片採取方法で使用する皮膚表皮屑片採取用器具としては、図２に示したように、尖端が鋭角な短繊維（ソーン）１２が台座（頭部）１３に縦横に植え込まれている皮膚表皮屑片採取用器具（ラスプ）１０も好ましく使用することができる（特願平１０−１５７７７３号明細書参照）。
【００５５】
この皮膚表皮屑片採取用器具１０の短繊維１２について、繊維径は１〜１０μｍとすることが好ましい。また、尖端角θ2は、痛みも出血もなく、痕跡が残らないように皮膚表皮屑片を採取する点から、３０度以下にすることが好ましく、０．２〜５度とすることがより好ましい（図２（ｃ）参照）。短繊維１２の材質については特に限定ないが、滅菌可能であることおよび製造コストの面から、ポリプロピレン、ポリアクリル、ポリエチレン等の合成樹脂繊維、アルミニウム、ステンレス等の金属繊維を使用することが好ましい。
【００５６】
皮膚表皮屑片採取用器具１０の使用方法は、柄１４を持ち、短繊維１２をあらかじめプレ外用剤が適用された皮膚の採取部位に当て、皮膚を軽く擦ることにより皮膚表皮屑片を皮膚から擦り取るものであるが、皮膚の擦過後、皮膚表皮屑片をプレ外用剤が短繊維１２に付着させている状態で台座１３ごと所定の溶液を入れた容器に移し、皮膚表皮屑片に行う次工程の処理を進めることができるようにするため、台座１３から柄１４が外力で容易に脱離するよう、切り込み１５を入れておくことが好ましい（図２（ｂ）参照）。
【００５７】
本発明の皮膚表皮屑片採取方法において、皮膚表皮屑片の採取部位は、皮膚採取の目的に応じて、顔、上腕部、背部、臀部、大腿部、その他の各種部位とすることができる。例えば、細胞の光老化度等を調べる場合、顔等のように日光に曝されることが多い部位と、臀部等のように日光に曝されることが少ない部位とから皮膚表皮屑片を採取し、採取した皮膚表皮屑片から得たＤＮＡの各テロメア長を比較する。また、美容上の皮膚の老化度を評価する場合、頬骨頂部上、あるいは図３に示したように、起立位または座位での目尻の鉛直線Ｌ１と小鼻上端の水平線Ｌ２との交叉部位の皮膚等を選択することが好ましい（特願平１０−１５７７７３号明細書参照）。
【００５８】
本発明の皮膚表皮屑片採取方法において、皮膚表皮屑片採取用器具を用いて皮膚表皮屑片を採取した後には、その採取後の皮膚にケア用外用剤を適用することが好ましい。これにより、皮膚表皮屑片採取部位となった皮膚を癒し、肌荒れを防止することができる。
【００５９】
ケア用外用剤としては、市販のアフターシェービングローションと同様の処方の化粧料を使用することができるが、特に、プロビタミンＣ、保湿剤及び肌荒れ防止剤を含むケア用外用剤を含むものが好ましい。
【００６０】
ここでプロビタミンＣとは、L−アスコルビン酸の２位、３位、６位のＯＨ基の１つ、２つ、あるいは、全てに誘導基を導入したビタミンＣ誘導体をいう。プロビタミンＣは、色素沈着の防止、コラーゲン形成の促進、フリーラジカル生成促進、過酸化脂質抑制作用などの生理的・薬理的な効果を有する。
【００６１】
プロビタミンＣとしては、アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸グルコシド、モノステアリン酸アスコルビル、モノパルミチン酸アスコルビル、ジパルミチン酸アスコルビル、アスコルビン酸硫酸エステル２ナトリウムなどを好ましく用いることができるが、これらに限定されるものではない。また、これらプロビタミンＣは１種以上含有させることができる。２種以上を組み合わせて含有させる場合の各成分の比率には、特に制限はない。
【００６２】
ケア外用剤におけるプロビタミンＣの配合量は、ケア用外用剤に対して０．０１〜３０．０重量％、好ましくは０．１〜１０．０重量％である。この配合量が０．０１重量％未満であると、プロビタミンＣの配合効果が得られにくい。また、ケア用外用剤においてプロビタミンＣの配合量が３０．０重量％を超えると、沈殿や結晶が生じやすくなるため、好ましくない。
【００６３】
一方、ケア用外用剤において、保湿剤は皮膚の水分保持ために使用する。保湿剤としては、多価アルコール、糖類、生体高分子類、アミノ酸類、油性成分、動植物抽出物等を使用することができる。
【００６４】
また、ケア用外用剤において、肌荒れ防止剤としては、抗炎症剤、収れん剤、清涼化剤、ビタミンおよびその誘導体、ホルモン類、抗ヒスタミン剤、植物抽出物等を使用することが好ましい。
【００６５】
本発明の皮膚表皮屑片採取方法により得られた皮膚表皮屑片には、出血を伴う従来の皮膚の採取方法に比して、血液の混在や細胞外マトリックスの混入がないため、皮膚表皮屑片からＤＮＡを抽出した場合に、皮膚の採取量に対するＤＮＡの抽出量が、従来法の数倍程度以上に多くなる。
【００６６】
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づいて具体的に説明する。
【００６７】
実施例１
(1) プレ外用剤の調製
表１のＡ成分を加熱混合し、７０℃に保った。一方、Ｂ成分を加熱混合して７０℃に保ち、これとＡ成分の加熱混合物とを混合し、均一に乳化させた。得られた乳化物を冷却後、Ｃ成分のグリコール酸を加え、均一に混合し、乳液タイプのプレ外用剤を得た。
【００６８】
【表１】
0004470252.tif 000002
【００６９】
(2) ケア用外用剤の調製
表２のＤ成分を加熱混合し、７０℃に保った。一方、Ｅ成分を加熱混合して７０℃に保ち、均一に乳化し、乳液タイプのケア外用剤を得た。
【００７０】
【表２】
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【００７１】
(3)皮膚表皮屑片の採取
頬、大腿部及び臀部を皮膚表皮屑片の採取部位とした。この場合、頬としては、目尻の鉛直線Ｌ１と小鼻上端の水平線Ｌ２との交叉部位（図３）を選択した。
【００７２】
各採取部位は石鹸で十分に洗い、水で濯ぎ、さらに消毒用アルコール（約７０％）を含ませたコットンで拭き、(1)のプレ外用剤を３mg/cm2塗布した。
【００７３】
次に、各採取部位に、図１に示した皮膚表皮屑片採取用カミソリ１（頭部：約３×１０×３５mmの直方体状、把持部：直径約５mm、長さ約１００mmの円柱状、頭部と把持部の形成材料：ポリプロピレン、刃：７×３０mm、頭部と把持部との角度８０度）をあてて同一部位を軽く数回擦り、皮膚表皮屑片を採取した。
【００７４】
採取後、各採取部位には(2)で調製したケア用外用剤を５mg/cm2で塗布した。
【００７５】
(4)ＤＮＡの抽出
１００μＬのIso Quick DNA Extraction KitのReagent A(ORCA Reseach Inc.製)と１００μＬのReagent 1(ORCA Reseach Inc.製)を入れたマイクロチューブに、皮膚表皮屑片採集用カミソリ１に付着した皮膚表皮屑片を含むケア外用剤を回収し、よく混合した。さらに、１００μＬのReagent 1を添加し、よく混合した。その後、Iso Quick DNA Extraction Kit(ORCA Reseach Inc.製)により、ＤＮＡを抽出した。
【００７６】
この皮膚表皮屑片採集用カミソリ１によって、各採取部位から２〜７mgの表皮細胞が採取され、表皮細胞から６〜２１μgのＤＮＡを抽出できた。採取した表皮細胞に対する抽出されたＤＮＡの割合は、採取した表皮細胞中に血液の混在や多量の細胞外マトリックスの混入がないため、従来法に比して１．８〜３．５倍高く、効率よくＤＮＡ抽出ができた。また、皮膚表皮屑片を採取された被験者には、痛みも出血もなく、色素沈着も痕跡も残らなかった。
【００７７】
【発明の効果】
本発明の皮膚表皮屑片採取方法によれば皮膚表皮屑片を、痛みも出血もなく、痕跡も色素沈着も残らないように採取することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  本発明の皮膚表皮屑片採取用カミソリの斜視図（同図（ａ））、側面図（同図（ｂ））及び刃面側から見た斜視図（同図（ｃ））である。
【図２】  尖端が鋭角な短繊維が台座に縦横に植え込まれている皮膚表皮屑片採取用器具の斜視図（同図（ａ））、側面図（同図（ｂ））及び短繊維先端部の拡大図（同図（ｃ））である。
【図３】  皮膚の老化度を評価する場合の顔面の皮膚の採取部位の説明図である。
【符号の説明】
１    皮膚表皮屑片採取用カミソリ
２    刃
３    頭部
４    把持部
５    切り込み
１０    尖端が鋭角な短繊維が台座に縦横に植え込まれている皮膚表皮屑片採取用器具
１２    短繊維
１３    台座
１４    柄
１５    切り込み
【図１】
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【図２】
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【図３】
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