(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
分子量１０００〜５０００の画分の割合が６０％〜７５．２％であるカゼイン分解物を含有することを特徴とするβ−カロチン退色防止剤。
【請求項２】
請求項１記載のβ−カロチン退色防止剤を、０．０１から１．０％添加することを特徴とするβ−カロチンの退色防止方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、乳蛋白質加水分解物を含有する色素退色防止剤及びこれと色素を含有する色素組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
色素の多くは、熱、光等により分解や変性を受け、退色しやすい性質を有する。従来退色を防止する手段として、天然由来のビタミンＣ、ビタミンＥ、もしくは合成の退色防止剤が用いられているが、充分な効果が得られていないのが現状である。
【０００３】
【発明が解決しようとしている課題】
色素の多くは、熱・光等により分解や変性を受け、退色しやすい。
この一方安全性の問題や、添加物の全面表示義務などの面から、天然退色防止剤への志向が高まっており、特に適用範囲のより広い水溶性退色防止剤の開発が望まれている。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
上記問題点を解決するために本発明者らは鋭意検討を重ねた結果、乳蛋白質加水分解物を含有させることにより、優れた退色防止効果を有する色素退色防止剤を得ることができること及びこの色素退色防止剤と色素を含有させることにより安全性が高く、退色安定性の優れた色素組成物が得られることを見い出し本発明を完成した。
【０００５】
【発明の実施の形態】
本発明における乳蛋白質は特に限定されるものではないが、好ましくはカゼインであり、他に牛乳、スキムミルクなど未精製のもの、又は乳清が原料として用いることができる。カゼインとしては、カゼインは各種酸カゼイン、カゼインナトリウム、カゼインカルシウム、カゼインマグネシウムを用いることができる。
【０００６】
本発明で乳蛋白質を加水分解する方法は、酸分解、アルカリ分解、酵素分解のいずれでもよいが、簡便性、安全性の面から、酵素分解が望ましい。
本発明で使用する乳蛋白質加水分解物の形態は乳蛋白質加水分解溶液または、乳蛋白質加水分解物粉末として得ることができる。通常、粉末化は凍結乾燥または噴霧乾燥すれば良い。
【０００７】
酵素分解で用いられる蛋白分解酵素は、特に限定されるものではないが結晶トリプシン（特開昭５７−５２６３９）、枯草菌バシルス属由来のプロテアーゼ（特開昭６２−１７１６４４）、アスペルギルス属由来のプロテアーゼ（特開平６−２１１６８８）があげられる。中性プロテアーゼ以外の酵素を用いることもできるが酵素処理時にｐＨ調整が必要であり処理後中性にすると塩が生成するため塩を除去しなければならないという欠点があるため中性プロテアーゼが好ましい。
【０００８】
本発明に配合する乳蛋白質分解物の製造方法は、公知のペプチドの製法と組み合わせることも可能である。例えば、酵素分解液に活性炭などの吸着剤を添加し脱色処理する工程や、電気透析等で脱塩処理する工程と組み合わせても良い。
ここで、酵素処理条件は、使用する蛋白質分解酵素の至適ｐＨや至適温度が選択される。また、酵素添加量、反応時間、酵素失活条件は用いる酵素の力価や活性の安定性により異なるが、後述の平均分子量が得られる条件が選択される。
本発明の乳蛋白分解物の平均分子量は特に限定されるものではないが、通常１，０００から５，０００の範囲が好ましい。ここで分子量の測定法については特に限定されるものではないが例えば、高速液体クロマトグラフィーを用いてゲル濾過クロマトグラフィーを行うことにより測定できる。測定条件についても限定されるものではないが、例えば分析用カラムに、スーパーロース１２（ファルマシア（株）製）を用い、リン酸緩衝液（ｐＨ＝７）を０．５ｍｌ／分の流速で流し、波長２２０ｎｍで検出するという方法により測定することができる。
【０００９】
本発明における退色とは、その物質が本来有する色の強度が低下または消失してしまうことをさす。本発明における退色をしやすい物質とは、色素、またはその誘導体もしくはそれらを含有する組成物をいう。
【００１０】
本発明における色素とは、特に限定されるものではなく通常食品、医薬品、化粧品、の着色等に用いられるものであり、例えば、ビタミンＡ群、カロチノイド、アントシアニン、クロロフィルである。
ここでカロチノイドとして、例えばα−カロチン、β−カロチン、γ−カロチン、ルテイン、リコピン、ゼアキサンチン等が挙げられる。
またハイビスカス色素、赤キャベツ色素、ムラサキイモ色素、ブルーベリー色素のアントシアニン色素、ベニバナ色素等のフラボノイド色素、イモ色素、ドナリエラ色素、ニンジン色素、パーム由来色素等のカロチノイド色素、クロレラ色素、ウコン色素、ナフトキノン系色素等を用いることもできる。
ここで好ましい色素としては、退色防止効果の点より、ビタミンＡ、カロチノイド、アントシアニン及びクロロフィルが挙げられ、より好ましい色素としては、カロチノイドであり、なかでもβ−カロチンが最も好ましい。
【００１１】
本発明における色素組成物とは、退色しやすい色素及び乳蛋白質加水分解物を含有するものである。
本発明の組成物に含有される色素は上記色素群より選ばれる１種または２種以上、好ましくはよりなり、食品、医薬品、化粧品等に使用出来るものなら天然もしくは合成のどちらでもよく、その由来は特に問わない。
【００１２】
本発明における色素の退色の測定については、特に限定されるものではないが、例えば分光光度計を用いその色素の最大吸収波長における初めの吸光度を１００％とし、同じ波長についてその残存率を測定することが出来る。
【００１３】
本発明の組成物に含有される乳蛋白質分解物配合比は、特に限定するものではないが、退色安定な液性組成物を得るためには、組成物中０．００１〜５．０％がよく、好ましくは０．００５〜１．０％、特に好ましくは０．０１〜１．０％である。
以下に具体的に実施例及び比較例を示し、本発明品の有用性を示す。
【００１４】
実施例１
カゼインカルシウム５００ｇを水５リットルに懸濁させ、アスペルギルス属起源の中性プロテアーゼ（商品名：アマノＰ  天野製薬（株）製）１０ｇを添加し、４５℃で２０時間反応を行った。次に８０℃，３０分の加熱処理を行い、酵素を失活させて濾過した。濾液を噴霧乾燥し、カゼインカルシウム分解物を４５０ｇ得た。
得られたカゼインカルシウム分解物について、ウォーターズ高速液体クロマトグラフィー（日本ウォーターズリミテッド（株）製）を用いてゲル濾過クロマトグラフィーを行った。分析用カラムに、スーパーロース１２（ファルマシア（株）製）を用い、リン酸緩衝液（ｐＨ＝７）を０．５ｍｌ／分の流速で流し、２２０ｎｍで検出した。測定の結果、得られたカゼインカルシウム分解物の分子量１，０００〜５，０００の画分の割合は７５．２％であった。
【００１５】
実施例２
乳カゼイン５００ｇ、及びＫ２ＣＯ３１６５ｇを水５リットルに添加して攪拌下に均一に混合し、該混合物を９０℃で１５分間加熱殺菌した後、苛性ソーダによりｐＨ９．３に調整した。次いで、上記カゼインの水溶液にパンクレアチン７０ｇ及びバシラス・スブチリス由来のプロテアーゼＮ（天野製薬（株）製）７０ｇを添加して均一に混合し、温度５０℃で１６時間反応を行った。得られた分解液は８５℃で１０分以上過熱して酵素を失活させた後、５℃で１６時間以上放冷して沈殿を熟成させた。この沈殿物を遠心分離及び濾過により分離、除去して得られた分解液を濃縮し、乾燥して目的の低分子乳蛋白加水分解物１００ｇを得た。測定の結果、得られた乳カゼイン分解物の分子量１，０００〜５，０００の画分の割合は６０％であった。
【００１６】
実施例３
カゼインナトリウム５００ｇを水２．５リットルに溶解した（ｐＨ８．０）。この溶液に豚の結晶トリプシン（ノボ（株）製）を基質２．５ｇ添加し、ｐＨ７．０〜ｐＨ８．５、５０℃で３０分反応行った。
その後、直ちにｐＨを４．５に液を調整し白色の沈殿生じさせた。この沈殿を遠心分離により除去し、上清部に塩化カルシウムを対液２．０％。エタノールを終濃度５０％（Ｖ／Ｖ）添加し、攪拌後、一夜室温で保存した。上澄をデカンテーションにより除去した後、バスケット型円遠心機で乳蛋白加水分解物を回収した。沈殿を５０％エタノール、次いでエタノールで洗浄後、熱風乾燥機で乾燥し、乳蛋白加水分解物８５ｇを得た。測定の結果、得られたカゼインナトリウム分解物の分子量１，０００〜５，０００の画分の割合は７０％であった。
【００１７】
試験例１
この試験は、乳蛋白質加水分解物のβ−カロチン溶液の退色防止効果を調べるために行った。
１）試料の調製
７０％ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート（レオドールＴＷ−０１２０：花王製）を含むβ−カロチン終濃度１ｍｇ／ｍｌのクロロホルム：メタノール＝２：１溶液を調製した。この溶液を乾固後、蒸留水、ＥｔＯＨを添加し最終濃度０．０５％となるように実施例１で得た乳蛋白質加水分解物を添加した。
２）試験方法
次に記載する方法により乳蛋白質加水分解物のβ−カロチン溶液の退色防止効果を試験した。
上記β−カロチン溶液を５０ｍｌ透明のガラス製サンプル瓶に入れ、８０℃で２０分間滅菌し密栓後、３０℃、７，８００ルクスで放置した。
３）試験結果
一ヶ月後に目視で比較したところ無添加のものは完全に退色していたのに対し、添加した方はほぼ同等の残存に残存していた。
よって、乳蛋白質分解物にはβ−カロチン溶液の退色防止効果があることが予想された。
【００１８】
試験例２
この試験は、乳蛋白質加水分解物のβ−カロチン溶液の退色防止効果を更に調べるために行った。
１）試料の調製
７０％ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート（レオドールＴＷ−０１２０：花王製）を含むβ−カロチン終濃度１ｍｇ／ｍｌのクロロホルム：メタノール＝２：１溶液を調製した。この溶液を乾固後、蒸留水、ＥｔＯＨを添加し最終濃度０．０５％となるように実施例１で得た乳蛋白質加水分解物を添加した。
２）試験方法
次に記載する方法により乳蛋白質加水分解物のβ−カロチン溶液の退色防止効果を試験した。
上記β−カロチン溶液を１０ｍｌ透明のガラス製サンプル瓶に入れ、密栓して３０℃、２，０００ルクスで放置した。このサンプル瓶から経時的にサンプリングを行い波長５４０ｎｍの吸光度を測定し、β−カロチン残存率を求めた。
３）試験結果
この試験の結果は図１に示した。図１から明らかなように０．１％の乳蛋白質加水分解物添加で、最もβ−カロチンの退色を防止することが認められた。乳蛋白加水分解物無添加のものは１５日目において透明になったのに対し０．０１％〜０．１％添加したものは明らかに色素が残っていた。
【００１９】
試験例３
この試験は、乳蛋白質加水分解物の紅麹色素溶液の退色防止効果を調べるために行った。
１）試料の調製
紅麹色素（ルビルカＳＴ：三菱化学フーズ（株）社製）５０ｐｐｍ溶液を調整した。この溶液に終濃度０ｐｐｍ、２．５ｐｐｍとなるように実施例１で得た乳蛋白加水分解物を添加した。
２）試験方法
次に記載する方法により乳蛋白質加水分解物の紅麹色素溶液の退色防止効果を試験した。
上記紅麹色素溶液を５０ｍｌ透明のガラス製サンプル瓶に入れ、密栓して３０℃、１０，０００ルクスで放置した。このサンプル瓶から経時的にサンプリングを行い波長４９０ｎｍの吸光度を測定し、色素残存率を求めた。
３）試験結果
この試験の結果は図２に示した。図２から明らかなように２．５ｐｐｍの乳蛋白質加水分解物添加で、紅麹色素の退色を防止することが認められた。乳蛋白加水分解物無添加のものは７日目においてほぼ無色透明になったのに対し、２．５ｐｐｍ添加したものは明らかに色素が残っていた。
【００２０】
【発明の効果】
本発明の乳蛋白質加水分解物を配合した組成物は次に示す特徴を有しており、産業上貢献大である。
１）本発明の乳蛋白質加水分解物を配合した組成物はビタミンの退色に対して非常に安定である。
２）本発明の乳蛋白質加水分解物を配合した組成物は色素の退色に対して非常に安定である。
【００２１】
【図面の簡単な説明】
【図１】乳蛋白質加水分解物のβ−カロチン溶液の退色防止効果を示した図である。
【図２】乳蛋白質加水分解物の紅麹色素溶液の退色防止効果を示した図である。
【図１】
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【図２】
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