(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)：
【化１】
0004398150.tif 000011
［式中、
R1は、Hまたはハロゲンであり；
各R2は、独立にC1-4アルキルから選択され；
R3は、HまたはOであり；
R4は、HまたはC1-6アルキルであり；
R5は、C1-6アルキル、フェニル、1個以上のR6により置換されたフェニル、ナフチル、フェニルC1-6アルキル、ピリジル、イソオキサゾリル、1個または2個のC1-6アルキルにより置換されたイソオキサゾリル、チオフェニルまたはC1-6アルキルCO2C1-6アルキルであり；
R6は、ハロゲン、C1-6アルキル、1個以上のフッ素原子により置換されたC1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ、CO2H、CO2C1-6アルキルまたはCOC1-6アルキルであり；
R7〜R11はHであり；
【化２】
0004398150.tif 000012
は単結合であるか、またはR3がOの場合は二重結合である］
で表される化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項２】
R1がHまたは臭素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
各R2がエチルである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
R3がHである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
R4がHまたはメチルである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
R5が、C1-3アルキル、フェニル、1個〜3個のR6により置換されたフェニル、2-ナフチル、フェニルC1-2アルキル、3-ピリジル、2個のC1-2アルキルにより置換されたイソオキサゾリル、2-チオフェニルまたはC1-2アルキルCO2C1-2アルキルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
R6が、ハロゲン、C1-4アルキル、1個〜3個のFにより置換されたC1-3アルキル、C1-4アルコキシ、シアノまたはCO2C1-3アルキルである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
R1が式(I)で定義したナフタレン環の6位の位置にある、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
R1がHであり；各R2がエチルであり；R3がHであり；R4がHであり；R5がフェニル、1個〜2個のR6で置換されたフェニル、3-ピリジル、2-チオフェニルまたはC1-2アルキルCO2C1-2アルキルであり；R6がハロゲン、メチル、メトキシまたはCO2メチルであり；各R7〜R11のそれぞれが水素である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(4-フルオロフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(3,4-ジクロロフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(フェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(2-メチルフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(3-トリフルオロメチルフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(4-エチルフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(4-シアノフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(3-クロロフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(2-メトキシ-4-メチルフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(3-ブロモフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(3-メトキシフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(2-メチルフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(フェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(3-クロロフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(3-メトキシフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(5-ブロモ-2-メトキシフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(2,5-ジメトキシフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(2-フルオロフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(2,5-ジフルオロフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-{[4-(1,1-ジメチルエチル)フェニル]スルホニル}アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(3-ブロモフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(4-ブトキシフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(2-メトキシ-4-メチルフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-{[2,5-ビス(メトキシ)フェニル]スルホニル}-N-メチルアセトアミド；
2-{4-[6-ブロモ-4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(4-フルオロフェニル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(フェニルメチル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-(3-ピリジニルスルホニル)アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(3,5-ジメチル-4-イソオキサゾリル)スルホニル]アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-(メチルスルホニル)アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-[(2-フェニルエチル)スルホニル]アセトアミド；
{[({4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}アセチル)アミノ]スルホニル}酢酸エチル；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-(2-チエニルスルホニル)アセトアミド；
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-(2-チエニルスルホニル)アセトアミド；および
2-{4-[4,9-ビス(エトキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル]フェニル}-N-(2-ナフタレニルスルホニル)アセトアミド；
から選択される、請求項１に記載の式(I)で表される化合物。
【請求項１１】
N-{2-[4-(4,9-ジエトキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]アセチル}ベンゼンスルホンアミド；
N-{[4-(4,9-ジエトキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]アセチル}-4-フルオロベンゼンスルホンアミド；
またはその製薬上許容される塩。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか１項で定義した式(I)で表される化合物およびその製薬上許容される塩の調製方法であって、
(A)  式(II)：
【化３】
0004398150.tif 000013
で表されるスルホンアミドまたはその保護誘導体を、式(III)：
【化４】
0004398150.tif 000014
で表される酸またはその保護誘導体と結合させるステップ；または
(B)  式(I)で表される化合物を、式(I)で表される別の化合物に変換するステップ；または
(C)  式(I)で表される化合物の保護誘導体を脱保護化するステップ；および
場合により、ステップ(A)〜(C)のいずれか1により調製された式(I)で表される化合物を、その製薬上許容される塩に変換するステップ、
を含む、上記方法。
【請求項１３】
ヒトまたは動物の薬剤として用いるための、請求項１〜１１のいずれか１項で定義した式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナフタレン誘導体、それらの製造方法、それらを含む医薬組成物および薬剤におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
EP4受容体は7回膜貫通型受容体であり、その天然のリガンドはプロスタグランジンPGE2である。PGE2はまた、別のEP受容体(EP1型、EP2型およびEP3型)とも親和性がある。EP4受容体は、平滑筋の弛緩、炎症、リンパ球分化、骨代謝プロセス、アレルギー活性、睡眠促進、腎臓調節および胃または腸の粘液分泌に関係する。本発明者らは、高い親和性によりEP4受容体に結合する新規な化合物群を発見した。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明は、したがって、式(I)：
【化１】
0004398150.tif 000002
【０００４】
［式中、
R1は、H、ハロゲン、C1-6アルキル、S-C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、OCF3、OCH2CF3、O-シクロプロピル、OCH2-シクロプロピル、NH2、NHC1-6アルキル、N(C1-6アルキル)2、NO2、OH、CH2OC1-6アルキルまたはCH2OHであり；
各R2は、独立にC1-4アルキルから選択され；
R3は、HまたはOであり；
R4は、HまたはC1-6アルキルであり；
R5は、C1-6アルキル、フェニル、1個以上のR6により置換されたフェニル、ナフチル、フェニルC1-6アルキル、ピリジル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、1個または2個のC1-6アルキルにより置換されたイソオキサゾリル、チオフェニル、C1-6アルキルCO2C1-6アルキル、ピロリル、フラニル、チアゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアジアゾリル、イソチアジアゾリル、インドリル、インダゾリルおよびベンゾチオフェニルであり；
R6は、ハロゲン、C1-6アルキル、1個以上のフッ素原子により置換されたC1-6アルキル、C1-6アルコキシ、シアノ、CO2H、CO2C1-6アルキル、OH、NH2、NHC1-6アルキル、N(C1-6アルキル)2、S(O)nC1-6アルキル(この場合n=0、1または2である)、CONH2、CON(C1-6アルキル)2、COC1-6アルキルまたはNHCO(C1-6アルキル)であり；
R7〜R10は、それぞれ独立にH、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、1個以上のフッ素原子により置換されたC1-6アルコキシ、O-シクロプロピル、OCH2-シクロプロピル、S-C1-6アルキル、NH2、NHC1-6アルキル、N(C1-6アルキル)2、ハロゲン、NO2、OH、CH2OC1-6アルキル、CH2OHから選択され；
R11は、H、OH、ハロゲン、ジハロゲン、NH2、NHC1-6アルキル、N(C1-6アルキル)2、C1-6アルキル、C1-6ジアルキル、C1-6アルコキシ、NHCO(C1-6アルキル)、または=Oから選択され；
【化２】
0004398150.tif 000003
【０００５】
は単結合であるか、またはR3がOの場合は二重結合である］
で表される化合物およびその製薬上許容される誘導体を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
製薬上許容される誘導体とは、式(I)で表される化合物のいずれかの製薬上許容される塩または溶媒和物を意味するか、またはレシピエントへ投与したときに、式(I)で表される化合物またはその活性代謝物もしくは残基を(直接的または間接的に)提供することができるあらゆるその他の化合物を意味する。
【０００７】
式(I)で表される化合物を、化合物中のいずれかの官能基のところで修飾してその製薬上許容できる誘導体を提供できること、および式(I)で表される化合物を2箇所以上の位置で誘導体化できることは、当業者に理解されるであろう。
【０００８】
製薬的な使用について、上述の塩は生理学的に許容できる塩であるが、その他の塩を、例えば式(I)で表される化合物およびその生理学的に許容できる塩の調製に使用できることが明らかであろう。
【０００９】
製薬上許容できる塩類として、Berge, Bighley and Monkhouse, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19に記載されているものがある。適当な製薬上許容できる塩類として、以下のものがある：無機酸類または有機酸類(好ましくは無機酸類)により形成される酸付加塩類(例えば塩酸塩類、臭化水素酸塩類、硫酸塩類および酢酸塩類)；およびアルカリ金属塩基類(アルカリ金属水酸化物類など)から形成されるアルカリ金属塩類(例えばナトリウム塩類)。さらに製薬上許容できる塩類の典型的な例として、マレイン酸、フマル酸、安息香酸、アスコルビン酸、パモ酸、コハク酸、ビスメチレンサリチル酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、プロピオン酸、酒石酸、サリチル酸、クエン酸、グルコン酸、アスパラギン酸、ステアリン酸、パルミチン酸、イタコン酸、グリコール酸、p-アミノ安息香酸、グルタミン酸、ベンゼンスルホン酸、シクロヘキシルスルファミン酸、リン酸および硝酸から形成されるものがある。
【００１０】
「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味するのに用いる。
【００１１】
基または基の一部としての「アルキル」という用語は、直鎖または分枝鎖アルキル基、例えばメチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチルまたはt-ブチル基を意味する。
【００１２】
基または基の一部としての「アルコキシ」という用語は、直鎖または分枝鎖アルキル基であって、該鎖に結合した酸素原子を有するもの、例えばメトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、i-プロポキシ、n-ブトキシ、s-ブトキシまたはt-ブトキシ基を意味する。
【００１３】
本発明の一態様において、R1は式(I)で定義したナフタレン環の6位の位置にある。
【００１４】
本発明の別の態様において、R1はHまたはハロゲンである。
【００１５】
本発明の別の態様において、R1はHまたは臭素である。
【００１６】
本発明の別の態様において、各R2はエチルである。
【００１７】
本発明の別の態様において、R3はHである。
【００１８】
本発明の別の態様において、R4はHまたはメチルである。
【００１９】
本発明の別の態様において、R5は、C1-3アルキル、フェニル、1個〜3個のR6により置換されたフェニル、2-ナフチル、C1-2アルキルフェニル、3-ピリジル、2個のC1-2アルキルにより置換されたイソオキサゾリル、2-チオフェニルまたはC1-2アルキルCO2C1-2アルキルである。
【００２０】
本発明の別の態様において、R6は、ハロゲン、C1-4アルキル、1個〜3個のFにより置換されたC1-3アルキル、C1-4アルコキシ、シアノまたはCO2C1-3アルキルである。
【００２１】
本発明の別の態様において、R7〜R11のそれぞれは水素である。
【００２２】
本発明は、上述の本発明の特定の態様の全ての組み合わせを包含することを理解すべきである。
【００２３】
本発明の特定の態様において、式(I)で表される化合物群(グループA)が提供される：式中、R1はHまたは臭素であり；各R2はエチルであり；R3はHであり；R4はHまたはメチルであり；R5はC1-3アルキル、フェニル、1個〜3個のR6で置換されたフェニル、2-ナフチル、C1-2アルキルフェニル、3-ピリジル、2個のC1-2アルキルで置換されたイソオキサゾリル、2-チオフェニルまたはC1-2アルキルCO2C1-2アルキルであり；R6はハロゲン、C1-4アルキル、1個〜3個のFで置換されたC1-3アルキル、C1-4アルコキシ、シアノまたはCO2C1-3アルキルであり；R7〜R11はそれぞれ水素である。
【００２４】
グループAの中で、さらに化合物群(グループA1)が提供される：式中、R1はHであり；各R2はエチルであり；R3はHであり；R4はHであり；R5はフェニル、1個〜2個のR6で置換されたフェニル、3-ピリジル、2-チオフェニルまたはC1-2アルキルCO2C1-2アルキルであり；R6はハロゲン、メチル、メトキシまたはCO2メチルであり；R7〜R11のそれぞれは水素である。
【００２５】
グループAおよびA1の中で、さらにR1が式(I)で定義したナフタレン環の6位の位置にある化合物群が提供される。
【００２６】
本発明は、全ての幾何異性、互変異性および光学異性形態並びにその混合物(例えばラセミ混合物)などの、式(I)の全ての異性体およびその製薬上許容される誘導体類を包含することを理解すべきである。
【００２７】
本発明の一態様において、次の化合物およびその製薬上許容される誘導体を提供する：
N-{[4-(4,9-ジエトキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]アセチル}-4-フルオロベンゼンスルホンアミド；および
N-{2-[4-(4,9-ジエトキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]アセチル}ベンゼンスルホンアミド。
【００２８】
本発明の化合物、特に式(I)で表される化合物は、医薬組成物中に用いることを意図しているため、それぞれ実質的に純粋な形態、例えば少なくとも50％の純度、より適当には少なくとも75％の純度、好ましくは少なくとも95％の純度(％は重量／重量基準である)で提供されることは明らかであろう。式(I)で表される化合物の不純物を含む調製物は、医薬組成物に用いる、より純度の高い形態を調製するために用いることができる。本発明の中間体化合物の純度はそれほど重要ではないが、式(I)で表される化合物については、実質的に純粋な形態が好ましいことは明らかであろう。好ましくは、可能であればいつでも、本発明の化合物は結晶形態で得られる。
【００２９】
本発明の化合物によっては、有機溶媒から結晶化または再結晶された場合、結晶化の溶媒が結晶生成物中に存在していてもよい。本発明はその範囲にこのような溶媒和物を含んでいる。同様に、本発明の化合物によっては、水を含む溶媒から結晶化または再結晶化することができる。このような場合、水和の水が形成され得る。本発明はその範囲に、化学量論的水和物並びに凍結乾燥のような工程により生成され得る様々な量の水を含む化合物を含んでいる。さらに、結晶化条件を変えることにより、異なった多様な形態の結晶性生成物を形成することができる。本発明はその範囲内に式(I)で表される化合物の全ての多形を含んでいる。
【００３０】
本発明の化合物は、EP4受容体と結合し、このためEP4受容体介在疾患の治療に有用である。
【００３１】
EP4受容体に結合できるという本発明の化合物の能力に鑑みて、本発明の化合物は以下の疾患の治療に有用である。すなわち、式(I)で表される化合物は、鎮痛薬として有用である。例えば、これらは慢性的な関節の痛み(例えばリウマチ様関節炎、骨関節炎、脊椎リウマチ、痛風性関節炎および若年性関節炎)、例えば疾患の変異の特徴および関節構造の保護；筋骨格系疼痛；腰の痛みおよび頸痛；捻挫および筋違い；神経障害性の痛み；交感神経で維持される痛み；筋炎；癌および線維筋痛に関連する痛み；偏頭痛に関連する痛み；インフルエンザまたはその他のウイルス感染(風邪など)に関連する痛み；リウマチ熱；腸の機能疾患 (非潰瘍性消化不良、非心臓性胸痛および過敏性腸症候群など)に関連する痛み；心筋虚血に関連する痛み；術後の痛み；頭痛；歯痛；および月経困難症などの治療に有用である。
【００３２】
本発明の化合物は、特に神経障害性の痛みの治療に有用である。神経障害性疼痛症候群は、以下のニューロンの障害により発生する可能性があり、その結果数ヶ月または数年、原因となる障害が治った後でさえ、痛みが持続することがある。ニューロンの障害は、末梢神経、後根、脊髄または脳のある領域で起こり得る。神経障害性疼痛症候群は、伝統的にそれらを誘発する疾患または事象にしたがって分類する。神経障害性疼痛症候群として以下のものがある：糖尿病性神経障害；坐骨神経痛；非特異的腰痛；多発性硬化症の痛み；線維筋痛；HIV関連神経障害；疱疹後の神経痛；三叉神経の神経痛；および身体外傷、切断、癌、毒素または慢性炎症による痛み。これらの状態は治療が困難であり、限定的な効能をもついくつかの薬剤が知られているが、完全な痛みの制御はめったに達成されない。神経障害性疼痛の症状は信じられないほど様々であり、しばしば自発的なうずくような痛みおよび電激痛、または継続的な灼熱痛として述べられる。さらに、「ピリピリする」などの通常痛みではない感覚を伴う痛み(掻痒感および異常錯感覚)、接触に対して感度が高くなること(感覚過敏)、害のない刺激(動的または静的または温度による異痛)の後の痛い感覚、害のある刺激に対して感度が高くなること(熱さ、冷たさ、機械的痛覚過敏)、刺激がなくなった後の継続的な痛みの感覚(痛覚過敏)または選択的感覚経路の不在または欠損(痛覚鈍麻)がある。
【００３３】
式(I)で表される化合物はまた、例えば以下の治療に有用である；炎症、例えば皮膚状態(例えば日焼け、火傷、湿疹、皮膚炎、乾癬症)；眼科疾患、例えば緑内障、網膜炎、網膜症、ブドウ膜炎および眼組織の急性損傷(例えば結膜炎)；肺疾患(例えば喘息、気管支炎、気腫、アレルギー性鼻炎、呼吸困難症候群ハト愛好家病、農夫肺、COPD)；胃腸管疾患(例えばアフタ性秩、クローン病、アトピー性胃炎、痘瘡様胃炎、潰瘍性大腸炎、腹腔疾患、限局性腸炎、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群、逆流性胃腸疾患)；臓器移植；炎症性要素をもつその他の状態(例えば血管疾患、偏頭痛、結節性動脈周囲炎、甲状腺炎、再生不良性貧血、ホジキン病、水腫、重症筋無力症、多発性硬化症、類肉腫症、ネフローゼ症候群、ベチェット症候群、多発性筋炎、歯肉炎、心筋虚血、発熱、全身性エリテマトーデス、多発性筋炎、腱炎、滑液包炎、およびシェーグレン症候群)。
【００３４】
式(I)で表される化合物はまた、自己免疫疾患、免疫欠損疾患または臓器移植などの免疫疾患の治療にも有用である。式(I)で表される化合物は、HIV感染の潜伏期間を長くするのにも効果がある。
【００３５】
式(I)で表される化合物は、異常な血小板機能(例えば閉塞性血管疾患)の治療にも有用である。
【００３６】
式(I)で表される化合物は、利尿作用をもつ薬剤の調製にも有用である。
【００３７】
式(I)で表される化合物は、インポテンスまたは勃起障害の治療にも有用である。
【００３８】
式(I)で表される化合物は、骨粗鬆症(特に閉経後骨粗鬆症)、高カルシウム血症、副甲状腺機能亢進症、パジェット病の骨疾患、骨溶解症、骨転移を伴うかあるいは伴わない悪性腫瘍の高カルシウム血症、関節リウマチ、歯周炎、変形性関節症、骨痛、骨減少、癌悪液質、結石症、結石症(特に尿石症)、充実性悪性腫瘍、痛風および強直性脊椎炎、腱炎および滑液包炎などの異常な骨代謝または吸収を特徴とする骨の疾患の治療にも有用である。別の態様において、式(I)で表される化合物は、骨吸収の抑制および／または骨生成の促進に有用であり得る。
【００３９】
式(I)で表される化合物はまた、NSAIDおよびCOX-2阻害剤の血行性副作用を緩和するのに有用である。
【００４０】
式(I)で表される化合物はまた、高血圧または心筋虚血などの心疾患；機能性または器官性静脈不全；静脈治療；痔；および動脈圧における急激な低下に関連するショック状態(例えば敗血症性ショック)の治療にも有用である。
【００４１】
式(I)で表される化合物はまた、痴呆などの神経変性疾患および神経変性、特に一時性変性痴呆(老人性痴呆、アルツハイマー病、ピック病、ハンティングトン舞踏病、パーキンソン病およびクロイツフェルト‐ヤーコプ病、ALS、運動ニューロン疾患など)；血管性痴呆(多発脳梗塞性痴呆など)；並びに頭蓋内腔占拠性病変に関連する痴呆；外傷；感染および関連した状態(HIV感染など)；代謝；毒素；酸素欠乏症およびビタミン欠乏症；および加齢に関連した軽度認識障害、特に加齢関連記憶障害の治療にも有用である。
【００４２】
式(I)で表される化合物はまた、神経防護作用の治療および脳梗塞、心臓停止、肺バイパス、外傷性脳損傷、脊髄損傷後の神経変性などの治療にも有用である。
【００４３】
式(I)で表される化合物はまた、耳鳴りの治療にも有用である。
【００４４】
式(I)で表される化合物はまた、依存を引き起こす薬剤に対する依存の予防または減少、耐性または逆耐性の予防または減少にも有用である。依存を引き起こす薬剤の例として、オピオイド(例えばモルヒネ)、CNS抑制剤(例えばエタノール)、精神刺激薬(例えばコカイン)およびニコチンがある。
【００４５】
式(I)で表される化合物はまた、I型糖尿病の合併症(例えば糖尿病性微小血管症、糖尿病性網膜症、糖尿病性関節症、黄斑変性症、緑内障)、ネフローゼ症候群、再生不良性貧血、ブドウ膜炎、川崎病、およびサルコイドーシの治療にも有用である。
【００４６】
式(I)で表される化合物はまた、腎機能障害(腎炎、特にメサンギウム増殖性糸球体腎炎、腎炎症候群)、肝機能障害(肝臓炎、肝硬変)、胃腸機能障害(下痢)および結腸癌の治療にも有用である。
【００４７】
本発明のある化合物は、強力で選択的なEP4受容体アンタゴニストであることがわかっている。したがって、本発明の別の態様において、EP4受容体拮抗作用により改善する疾患の治療における式(I)で表される化合物およびその製薬上許容される誘導体の使用を提供する。
【００４８】
治療に対する言及は、他に明言しなければ、立証された症状の治療および予防的治療の両方を含むことを理解すべきである。
【００４９】
本発明の別の態様にしたがい、本発明者らは、ヒトまたは動物の薬剤として用いるための式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体を提供する。
【００５０】
本発明の別の態様にしたがい、本発明者らは、EP4受容体におけるPGE2の作用に介在される状態の治療において使用するための式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導を提供する。
【００５１】
本発明の別の態様にしたがい、本発明者らは、EP4受容体拮抗作用により改善する状態の治療において使用するための式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体を提供する。
【００５２】
本発明のさらなる態様にしたがい、本発明者らは、EP4受容体におけるPGE2の作用により介在される状態に罹ったヒトまたは動物の患者の治療方法を提供し、この方法は、有効量の式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体を該患者に投与するステップを含む。
【００５３】
本発明のさらなる態様にしたがい、本発明者らは、EP4受容体アンタゴニストにより改善する状態に罹ったヒトまたは動物の患者の治療方法を提供し、この方法は、有効量の式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体を該患者に投与するステップを含む。
【００５４】
本発明のさらなる態様にしたがい、本発明者らは、痛み、炎症、免疫、骨、神経変性または腎疾患を患っているヒトまたは動物の患者の治療方法を提供し、この方法は、有効量の式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体を該患者に投与するステップを含む。
【００５５】
本発明の別の態様にしたがい、本発明者らは、EP4受容体におけるPGE2の作用により介在される状態の治療のための治療薬の製造のための、式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体の使用を提供する。
【００５６】
本発明の別の態様にしたがい、本発明者らは、EP4受容体拮抗作用により改善される状態の治療のための治療薬の製造のための、式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体の使用を提供する。
【００５７】
本発明の別の態様にしたがい、本発明者らは、痛み、炎症、免疫、骨、神経変性または腎疾患などの状態の治療または予防のための治療薬の製造のための式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体の使用を提供する。
【００５８】
式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体は、医薬組成物の形態で投与するのが便利である。このような組成物を、従来の方法で用いるために、1以上の生理学的に許容される担体または賦形剤と混合して提供できることが便利である。
【００５９】
このように、本発明の別の態様において、本発明者らは、ヒトまたは動物の薬剤に使用するのに適した、式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体を含む医薬組成物を提供する。
【００６０】
式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体を、いずれかの適当な方法で投与するために製剤することができる。これらは、例えば、局所投与用または吸入による投与用、またはより好ましくは経口、経皮若しくは非経口投与用に製剤することができる。該医薬組成物を、式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体の制御された放出をもたらすような形態とすることができる。
【００６１】
経口投与のために、医薬組成物を、例えば、許容できる賦形剤と共に従来の方法により調製したタブレット(舌下タブレットなど)、カプセル、粉剤、溶液、シロップまたは懸濁液の形態とすることができる。
【００６２】
経皮投与のために、医薬組成物を、経皮イオン導入パッチなどの経皮パッチの形態で提供することができる。
【００６３】
非経口投与のために、医薬組成物を(例えば静脈内、血管内または皮下内)注射または持続性輸注として提供することができる。組成物を、油性または水性ビヒクル中懸濁液、溶液またはエマルションのような形態とすることができ、懸濁剤、安定剤および／または分散剤などの製剤薬を含むことができる。注射による投与のために、これらを好ましくは添加した防腐剤と共に単位容量形態または複数投与形態とすることができる。
【００６４】
この他、非経口投与のために、活性成分を適当なビヒクルと共に再構成するための粉剤とすることができる。
【００６５】
本発明の化合物をデポー製剤として製剤することもできる。このような長期間作用する製剤を埋め込み(例えば皮下または筋肉に)または筋肉注射により投与することができる。したがって、例えば本発明の化合物は、適当な高分子または疎水性物質(例えば許容できる油中エマルションとして)若しくはイオン交換樹脂と共に、またはやや溶けにくい誘導体、例えばやや溶けにくい塩として、製剤することができる。
【００６６】
本発明で用いるEP4受容体化合物を、他の治療薬、例えばCOX-2阻害剤(例えばセレコキシブ、ロフェコキシブ、バルデコキシブまたはペアコキシブ(parecoxib))；5-リポキシゲナーゼ阻害剤；NSAID(例えばジクロフェナク、インドメタシン、ナブメトンまたはイブプロフェン)；ロイコトリエン受容体アンタゴニスト；DMARD(例えばメトトレキサート)；アデノシンA1受容体アゴニスト；ナトリウムチャネル阻害薬(例えばラモトリジン)；NMDA受容体モジュレーター(例えばグリシン受容体アンタゴニスト)；ガバペンチンおよび関連化合物；三環系抗鬱薬(例えばアミトリプチリン)；神経安定抗癲癇薬；モノアミン作用性取り込み阻害剤(例えばベンラファキシン)；オピオイド鎮痛薬；局所麻酔薬；5HT1アゴニスト(例えばトリプタン)、例えばスマトリプタン、ナラトリプタン、ゾルミトリプタン、エレトリプタン、フロバトリプタン、アルモトリプタンまたはリザトリプタン；EP1 受容体リガンド；EP2受容体リガンド；EP3 受容体リガンド；EP1アンタゴニスト；EP2アンタゴニストおよびEP3アンタゴニストと組み合わせて用いることができる。化合物を他の治療薬と組み合わせて用いる場合、該化合物はいずれかの便利な経路により、連続的または同時に投与することができる。
【００６７】
本発明はしたがって、別の態様において、式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体をさらに単数または複数の治療薬と共に含む組み合わせを提供する。
【００６８】
上記の組み合わせを、医薬製剤の形態で用いるために便利に提示することができ、このため製薬上許容される担体または賦形剤と共に上記の組み合わせを含む医薬製剤は、本発明のさらなる態様を構成する。このような組み合わせの個々の構成要素を、医薬製剤と分けて、または一緒に、連続的または同時のいずれかで投与することができる。
【００６９】
式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される誘導体を、同じ疾患状態に対して活性がある第二の治療薬と組み合わせて用いる場合、各化合物の投与量は、化合物を単独で用いる場合と異なってもよい。適当な投与量を、当業者は容易に理解するだろう。
【００７０】
ヒトの治療用に提案されている式(I)で表される化合物またはその製薬上許容される塩の推奨される1日の投与量は、遊離塩基として計算して、1日に体重1kg当り0.01〜10mg、特に1日に体重1kg当り0.1〜3mgであり、これは1回または例えば1日に1回〜4回に分けて投与することができる。成人の投与量の範囲は、一般的に、遊離塩基として計算して、1日当り8〜1000mg、例えば1日当り20〜800mg、好ましくは1日当り35〜200mgである。
【００７１】
宿主、特にヒトの患者に投与する式(I)で表される化合物の正確な量は、担当医に責任がある。しかし、用いる投与量は、患者の年齢、性別、治療する正確な状態およびその重症度並びに投与経路などの多くの要因に拠る。
【００７２】
式(I)で表される化合物およびその製薬上許容される誘導体は、類似構造をもつ化合物の調製のために従来技術で知られたいずれかの方法により調製することができる。
【００７３】
式(I)で表される化合物およびその製薬上許容される誘導体は、以下のステップを含む方法により調節することができる：
(A)  式(II)：
【化３】
0004398150.tif 000004
【００７４】
で表されるスルホンアミドまたはその保護誘導体を、式(III)：
【化４】
0004398150.tif 000005
【００７５】
で表される酸またはその保護誘導体と結合させるステップ；または
(B)  式(I)で表される化合物を、式(I)で表される別の化合物に変換するステップ；または
(C)  式(I)で表される化合物の保護誘導体を脱保護化するステップ；および
場合により、ステップ(A)〜(C)のいずれか１により調製された式(I)で表される化合物を、その製薬上許容される誘導体に変換するステップ。
【００７６】
式(I)で表される化合物およびその製薬上許容される誘導体の調製に適した方法を以下に述べ、これは本発明の別の態様を形成する。次のスキームにおいて、R1〜R11は、他に述べなければ上記の式(I)において定義した通りであり；CDIは1,1'-カルボニルジイミダゾールであり；DCMはジクロロメタンであり；DIPEAはN,N-ジイソプロピルエチルアミンであり；Halは臭素またはヨウ素などのハロゲンであり；Acはアセチルである。
【００７７】
次のスキーム１に関して、式(I)で表される化合物は、活性化剤(例えばCDI)およびヒンダード有機アミン塩基(例えばDIPEA)の存在下、適当な非プロトン性溶媒(例えばDCM)中で、式(III)で表される化合物を式(II)で表されるスルホンアミドと結合させることにより調製することができる。このような結合は、多くの有機テキスト(例えば‘Principles of Peptide Synthesis’ by Miklos Bodanszky (Springer Verlag、1984) 第2章。参照として本明細書に組み入れる)に記載されている。
【００７８】
好都合なことに、式(IV)で表される化合物の加水分解は、炭酸アルカリ(例えば炭酸カリウム)などの無機塩基を、アルコール水溶液などの適当な溶媒(例えばエタノール水溶液)中で、高温(例えば約60℃〜還流まで)で用いることで行われる。
【化５】
0004398150.tif 000006
【００７９】
R3がHである式(IV)で表される化合物は、適当な還元剤(例えば亜鉛)により、酢酸中高温で、還元によりR3が酸素である対応する式(IV)で表される化合物から合成することができる。
【００８０】
式(II)で表されるスルホンアミド類は、既知の化合物であるか、または‘Advanced Organic Chemistry’ by Jerry March、第4版(John Wiley & Sons、1992) 1269頁第2段、および1296頁第2段(参照として本明細書に組み入れる)のような文献に記載されている方法により調製することができる。
【００８１】
前駆体として式(I)で表される別の化合物を利用し、変換することにより式(I)で表される化合物を調製できることを当業者は理解するだろう。特に、アルキル化は当業者に周知であり、‘Advanced Organic Chemistry’のような多くの標準的な有機化学のテキストに記載されている。例えば、R4がC1-6アルキルである式(I)で表される化合物は、R4がHである式(I)で表される化合物をアルキル化することにより調製することができる。
【００８２】
式(I)で表される化合物の合成のいずれの段階であっても、分子中の1個以上の感受性基を保護し、望ましくない副反応を避けるべきであることが必要であるか、または望ましいことは、当業者には明らかであろう。式(I)で表される化合物の調製に用いる保護基は、従来の方法で用いることができる。例えば、Theodora W Green and Peter G M Wutsの"Protective Groups in Organic Synthesis"第２版(John Wiley and Sons, 1991)(参照により本明細書に組み入れる)を参照されたい。この文献は、このような基の除去についても説明している。
【００８３】
式(IV)で表される化合物は、R3が酸素である場合、例えば以下のスキーム2にしたがって調製することができる。
【化６】
0004398150.tif 000007
【００８４】
式(IX)で表されるフタル酸エステル類は、既知の化合物であるか、または従来の化学により、市販の原料から調製することができる。
【００８５】
上記の中間体のいくつかは新規な化合物であり、ここで形成されるすべての新規な中間体が本発明の別の態様を形成することを理解すべきである。
【００８６】
本発明の化合物の溶媒和物(例えば水和物)または塩を、上記方法のステップのうちのいずれか1の後処理手順の間に形成することができる。
【実施例】
【００８７】
以下の中間体および実施例は、本発明を説明するものであるが、いずれにせよ、本発明を限定するものではない。全ての温度は℃で表す。1H NMRスペクトルをBruker DPX400で400MHzにて得た。質量指定自動精製を、HP1100 HPLC、ギルソン・アスペック・オートサンプラー、HP1050メークアップポンプ、微量質量プラットフォーム質量分光計、LCパッキン・プレ・アキュレート・コンビ−ケム・フロー・プロセッサ(ACM-01-10)、スペルコ5um ABZ+ 5cm x 10mm IDカラムおよびギルソン・フラクション・コレクターを含むシステムを用いて行った。サンプルを、アセトニトリル：ジメチルスルホキシド(50:50)に溶解した。LC/MS中の化合物の保持時間に基づいて決定した適当な勾配溶離(例えば水中20〜50%アセトニトリルまたは30〜60%アセトニトリル)を用いた。このような勾配溶離の決定は、当業者に理解されるだろう。
【００８８】
中間体1
エチル1,4-ジヒドロキシ-2,3-ナフタレンジカルボキシレート
ナトリウム(60g、2.6mol)をエタノール(1.2リットル)に溶解し、混合物を40oCまで冷却した。ジエチルフタレート(960ml、4.83mol)を添加し、混合物を窒素下で温度が115oCに達するまで加熱した。コハク酸ジエチル(211.3g、1.21mol)を45分間にわたって滴下した。反応物を115℃でさらに45分間加熱し、室温まで冷却して、水に注いだ(1.2リットル)。酢酸エチル(1リットル)を添加して攪拌し、相を分離し、有機物を水酸化ナトリウム溶液(2N、1リットル)で抽出した。水相を合わせてpH 3に酸性化し、混合物を酢酸エチル(2 x 1リットル)で抽出した。有機物を合わせて炭酸水素ナトリウムの飽和溶液(2 x 1.5リットル)、次に塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、ろ過して真空下で溶媒を蒸発させた。残留物を5% 酢酸エチル／ヘキサンで溶離する2.5kgのバイオタージカラムを用いて精製し、標題の化合物を白色の固体(60g、16%)として得た。δH CDCl3 10.44, (2H, s), 8.34, (2H, m), 7.68, (2H, m), 4.37, (4H, q), 1.37, (6H, t)。
【００８９】
中間体2
エチル1,4-ジエトキシ-2,3-ナフタレンジカルボキシレート
エチル1,4-ジヒドロキシ-2,3-ナフタレンジカルボキシレート(30g、98.6 mmol)および炭酸カリウム(150g、1.09mmol)を、アセトン(600ml)中窒素下で攪拌した。ヨードエタン(150g、0.96mol)を添加し、混合物を還流で一晩攪拌した。反応物を冷却し、酢酸エチルで希釈してろ過した。ろ液を蒸発させて、茶色の油状物を残し、これをトルエンに溶解し、水酸化カリウム溶液(5%、150ml)および塩水で洗浄した。硫酸マグネシウム上で乾燥させ、溶媒を蒸発させて黄色の固体を得た。800gのバイオタージカラムを用いて精製し、標題の化合物を白色の固体(32g、90%)として得た。δH CDCl3 8.16, (2H, m), 7.60, (2H, m), 4.40, (4H, q), 4.18, (4H, q), 1.50, (6H, t), 1.40, (6H, t)。
【００９０】
中間体3
1,4-ジエトキシ-2,3-ナフタレンジカルボン酸
エチル1,4-ジエトキシ-2,3-ナフタレンジカルボキシレート(32g、89mmol)を水酸化ナトリウム(20g)のエタノール(200ml)および水(40ml)の溶液に添加し、1.5時間60℃で攪拌した。反応物を冷却し、高粘度の白色の懸濁液をろ過した。固体を酢酸エチル(200ml)と水(800ml)の混合物に溶解した。相を分離し、水相を塩酸(2M、120ml)で酸性化した。水相を酢酸エチル(2x)で抽出し、有機相を合わせて乾燥させた(MgSO4)。真空下で溶媒を蒸発させ、標題の化合物を白色の固体(25g、92%)として得た。δH [2H6] - DMSO 13.26, 2H, s), 15, 2H, m), 7.72, 2H, m) , 4.13, (4H, q) ,1.42,(6H, t)。
【００９１】
中間体4
1,4-ジエトキシ-2,3-ナフタレンジカルボン酸無水物
1,4-ジエトキシ-2,3-ナフタレンジカルボン酸(25g、82mmol)を、塩化チオニル(23.3g)のクロロホルム(150ml)溶液に添加し、還流で1時間攪拌した。得られた溶液を冷却し、蒸発させて乾燥させた。別のクロロホルムを添加し、蒸発を繰り返して、標題の化合物を黄色の固体(23.3g、99%)として得た。
【００９２】
δH [2H6] - DMSO 8.42, (2H, m) , 7.93, (2H, m), 4.53, (4H, q), 1.46, (6H, t)。
【００９３】
中間体5
エチル[4-(4,9-ジエトキシ-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]アセテート
1,4-ジエトキシ-2,3-ナフタレンジカルボン酸無水物(23.3g、81.5mmol)および(4-アミノフェニル)酢酸エチル(14.8g、82mmol)を、窒素下、酢酸(160ml)中で一晩還流させた。混合物を室温まで冷却し、水(1リットル)に注いだ。白色の固体をろ過し、水洗してジクロロメタン(800ml)に溶解した。溶液を水、塩水で洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、溶媒を真空下で蒸発させて、標題の化合物をオフホワイトの固体(33g、96%)として得た。
【００９４】
δH [2H6] - DMSO 8.40, (2H, m), 7.87, (2H, m), 7.42, (4H, s), 4.47, (4H, q), 4.12, (2H, q), 3.76, (2H, s), 1.45, (6H, t), 1.21, (3H, t)。
【００９５】
中間体6
エチル[4-(4,9-ジエトキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]アセテート
エチル4-(4,9-ジエトキシ-1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]アセテート(33g、73mmol)および亜鉛(90g、1.38mol)を酢酸中で66時間還流させた。追加の亜鉛(25g、0.38mol)を添加し、18時間還流を続けた。混合物を熱いままろ過し、ろ液を蒸発させて黄色の固体とした。この固体を、20%酢酸エチル／ヘキサンで溶離するBiotageカラム800gにより精製し、白色の固体を得て、これをエーテル中で粉砕して白色の固体を得た。エーテル残渣からの結晶化によりさらに画分を得た。全部で10.2g、32%の標題の化合物を得た。
【００９６】
δH CDCl3 8.42, (1H, d), 8.18, (1H, d), 7.88, (2H, d), 7.63, (2H, m), 7.38, (2H, d), 5.00, (2H, s), 4.51, (2H, q), 4.26, (2H, q), 4.18, (2H, q), 3.65, (2H, s), 1.57, (6H, m), 1.28, (3H, t)。
【００９７】
中間体7
[4-(4,9-ジエトキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]酢酸
エチル[4-(4,9-ジエトキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]アセテート(5.86g、13.5mmol)および炭酸カリウム(12g)をエタノール(146ml)と水(70ml)の混合物に添加し、加熱して2時間還流させた。溶液を室温まで冷却し、溶媒を真空下で蒸発させ、オフホワイトの固体を残した。この固体を水中でスラリー化し、水を真空下で蒸発させた。残留物を塩酸(2N)中で2時間攪拌し、ろ過して水洗した。固体を真空オーブン中、40℃で乾燥させ、標題の化合物を白色の固体(4.5g、82%)として得た。
【００９８】
δH [2H6] - DMSO 12.27, (1H, b), 8.25, (1H, d), 8.12, (1H, d), 7.86, (2H, d), 7.61, (2H, m), 7.27, (2H, d), 5.10, (2H, s), 4.34, (2H, q), 4.25, (2H, q), 3.54, (2H, s), 1.41, (3H, t), 1.37, (3H, t)。MS 406, [MH+]。
【００９９】
実施例1
N-{[4-(4,9-ジエトキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]アセチル}-4-フルオロベンゼンスルホンアミド
カルボニルジイミダゾール(13.2mg、0.081mmol)および[4-(4,9-ジエトキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-2H-ベンゾ[f]イソインドール-2-イル)フェニル]酢酸(30mg、0.074mmol)のジクロロメタン(2ml)溶液に、4-フルオロベンゼンスルホンアミド(14.3mg、0.081mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(10.5mg、0.81mmol)を添加した。混合物を周囲温度、窒素雰囲気下で一晩攪拌した。反応混合物をジクロロメタン(3ml)で希釈し、その後2Nの塩酸(5ml)で洗浄した。有機相を乾燥させ(MgSO4)、その後真空中で濃縮して茶色のゴム状物を得た。残留物を質量指定自動精製装置を用いて精製し、標題の化合物を白色の固体(14.7mg、35.3%)として得た。MH+ 563。
【０１００】
表１の実施例は、実施例１で述べた方法により調製した。
【化７】
0004398150.tif 000008
【表１】
0004398150.tif 000009
【０１０１】
生物学的データ
化合物がEP4受容体に結合する能力は、ヒトEP4シンチレーション近接アッセイで明らかにすることができる。
【０１０２】
シンチレーション近接アッセイ(SPA)による放射性リガンド結合の数量化は伝統的な原理である。要約すると、受容体に対する化合物の親和性を、その受容体についての既知量の放射性標識リガンドと化合物の間の特異的競合により評価する。化合物の濃度が高いと、受容体に結合する放射性標識の量が減少する。このことにより、受容体を支持する膜でコーティングしたSPAビーズからのシンチレーションシグナルが減少する。このシグナルは、適当なシンチレーショカウンタにより検出することができ、得られたデータを適当な曲線フィットソフトウェアで解析することができる。
【０１０３】
ヒトEP4SPAアッセイ(本明細書中「アッセイ」と呼ぶ)は、セムリキ森林熱ウイルス(SFV)に感染したチャイニーズハムスター卵巣由来の樹立細胞株(CHO細胞)から調製した膜を利用する。ヒトEP4受容体の遺伝子配列を含む遺伝子組み換えSFV-1ウイルス粒子を、CHO細胞を感染させて、細胞膜における受容体タンパク質を発現させるのに用いた。洗浄して培地を除いた細胞を、ペプチダーゼ阻害剤を含むpH緩衝した培地でホモジナイズする。適当なバッファーは、以下の組成物である：50mM HEPES、1mM EDTA、25μg/mlバシトラシン、100μMロイペプチン、1mM PMSF、2μMペプスタチンA、pHをKOHで7.4に調整。細胞破片を低速遠心分離により除去した後、得られた上清を高速(48000g)遠心分離することにより膜のペレットを調製する。上記のような膜懸濁物は、使用するまで-80℃で保存しておくことができる。
【０１０４】
アッセイのためには、ヒトEP4受容体を発現する膜をpH緩衝した培地中で希釈し、膜がビーズに接着するのを容易にする適当な物質でコーティングしたSPAビーズと混合する。そのKd(親和値)に近い濃度でトリチウム化した放射性リガンドをその混合物と混合すると、膜タンパク質と選択したSPAビーズの濃度によって、1分間に少なくとも300補正計数(CCPM)のSPA結合シグナルが得られるはずである。非特異的結合(nsb)は、放射性標識リガンドと放射性標識していない飽和濃度のリガンドとの間の競合により測定することができる。EP4受容体リガンドの親和性を数量化するためには、化合物を96-ウェルプレートのウェルで段階的に希釈する。放射性リガンド、化合物、および非標識リガンドを次にSPA結合シグナルの測定に適した96-ウェルプレートに添加し、その後ビーズ／膜混合物を添加して結合反応を開始させる。室温で120分間インキュベーションすることにより平衡を達成することができ、その後シンチレーションを計数する。このように得られたデータを、特異的放射性リガンド結合の50%が置換される化合物の濃度(IC50)を数量化するために、コンピュータによる曲線フィットルーティンを用いて解析することができる。化合物の親和性(pKi)を、Cheng-Prusoff補正を用いることにより、IC50から計算することができる。適当な試薬およびプロトコルは次のものである：50mM HEPES、10mM MgCl2を含み、KOHでpHを7.4に調整した反応バッファー；小麦胚凝集素でコーティングしたSPAビーズ；放射性リガンドとしての1.25nM [3H]-プロスタグランジンE2；非標識リガンドとしての10μM プロスタグランジンE2；10μMで始まり0.3nMで終わる一連の３倍希釈の化合物。
【０１０５】
EP4受容体を中和する化合物の能力は、[125I]cAMPシンチレーション近接アッセイ(本明細書中、「cAMPアッセイ」と呼ぶ)で明らかにすることができる。cAMPアッセイでは、Receptor Biology, Inc. Beltsville, MD, USAから入手した組換えヒトEP4受容体を発現するHEK-293細胞を用いる。この細胞を、10%熱不活化-ウシ胎仔血清(FBS)および2mM L-グルタミンを含むダルベッコMEM培地(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)-HAM F12ミックス(DMEM-F12)中で培養した。細胞を新鮮培地に移すか、または視覚的に測定して90％コンフルエンシーに達したらアッセイに用いた。
【０１０６】
細胞をヴェルセンで処理することにより収穫し、新鮮培地に再懸濁し、さらに3μMインドメタシンを補った培地中で一晩培養し、96-ウェルプレートのウェル毎に約10,000個の細胞を得た。アッセイのためには、培地をアッセイ培地(300μMイソブチルメチルキサンチン(IBMX)および3μMインドメタシンを含むDMEM-F12)と置き換え、30分間培養した。この後、単一の濃度のアンタゴニストの存在下、全体のアゴニスト濃度−効果曲線が得られるように、アンタゴニストを様々な濃度で添加した。アンタゴニストを30分間細胞と平衡化させた。続いて細胞をアゴニストで15分間処理した。アッセイ培地の吸引により反応を止め、氷冷エタノールを添加した。全てのインキュベーションを5%二酸化炭素雰囲気中37℃で行った。IBMX、インドメタシンおよびビヒクル(DMSO)の濃度が一貫して一定であるように注意をはらった。Amersham, Buckinghamshire, UKより入手する専用キットを用いて、製造者の指示にしたがい、[125I]cAMPシンチレーション近接アッセイにより、各ウェルにおけるcAMPの量を次に測定した。
【０１０７】
cAMPアッセイからのデータを、ウェル毎のpmol cAMPとして表した。次に、次式の形態の4パラメータロジスティック式：
【数１】
0004398150.tif 000010
【０１０８】
を、最大効果(Em)、曲線中点(EC50)およびヒルスロープ(nH)を推定するために、E／[A]曲線データに当てはめた；式中の他の用語は、効果(E)および濃度([A])である。曲線パラメータの個々の推定値を各曲線より得た。アンタゴニスト親和性(pA2)の実験推定値は、次に以下の式を用いて得ることができた：
pA2 = log ((EC50B/EC50A)-1)-log[B]
(式中、EC50Aは、アンタゴニスト不在下における対照アゴニスト濃度−効果曲線の中点であり；EC50Bは、一定の濃度のアンタゴニストの存在下で得られるアゴニスト濃度効果曲線の中点であり；[B]は、用いたアンタゴニストの濃度である。)次に個々の実験から得られる推定値を平均して平均データを得た。したがって、引用した値は、n回の別々の実験の平均値± 標準偏差(s.d.)であり、それぞれ別々のcAMPアッセイから得られた。
【０１０９】
アンタゴニスト親和値(pKb)を厳密に推定するために、Arunlakshana and Schildの方法を用いた。要約すると、アンタゴニスト存在下および不在下におけるアゴニスト濃度／効果曲線の中点を、濃度比(CR)を計算するために用いる。濃度(-log[B])軸との交点と線の傾きを推定するために、アンタゴニストの濃度(-log[B])に対する(CR-1)のプロット上で直線回帰を行う。回帰の傾きが１とそれほど変わらなければ、1.0まで抑制することができる。この後者の状況で、濃度軸上の交点は、アンタゴニストの親和性(pKb)を示している。
【０１１０】
以下の実施例は、上記の手順を用いて決定したEP4受容体において7.0以上のpKiを有する：1、3、4、9、10、12、13、14、15、16、30、34、35および37。
【０１１１】
実施例1および3を上述のEP4アンタゴニストアッセイでテストしたところ、いずれも7.0以上の以上のpKbを有することが示された。
【０１１２】