(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩（ＳＰＡ−Ｓ−８４３）を含む、抗腫瘍治療のための医薬製剤。
【請求項２】
白血病、リンパ腫、骨髄腫、黒色腫、癌腫、および肉腫からなる群から選択される腫瘍を治療するための、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項３】
Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩を、他の知られている抗腫瘍薬と併用する、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項４】
前記抗腫瘍薬が白金誘導体、ドキソルビシン、ビンクリスチン、メトトレキサートおよび５−フルオロウラシルで表される、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項５】
前記抗腫瘍薬がシスプラチンまたは５−フルオロウラシルで表される、請求項４に記載の医薬製剤。
【請求項６】
Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩を非経口経路で投与し、その用量が体重１キログラム当り１日に０．０２５〜３ｍｇの範囲である、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項７】
Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩を非経口経路で投与し、その用量が体重１キログラム当り１日に０．１５〜１．５ｍｇの範囲である、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項８】
Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩を、１〜１００ｍｇの量で含んでいる、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項９】
Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩を、５〜５０ｍｇの量で含んでいる、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項１０】
更に、抗酸化剤および安定剤としてアスコルビン酸／アスコルビン酸ナトリウムを含む、請求項１〜９に記載の医薬製剤。
【請求項１１】
Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩および知られている抗腫瘍剤が、同一の投与形態で封入されている、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項１２】
Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩および知られている抗腫瘍剤が別の投与形態で封入され、腫瘍治療中に逐次投与ができることを特徴とする、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項１３】
Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩を、腫瘍細胞に適用することからなる、腫瘍細胞の増殖をｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏで選択的に抑制する方法。
【請求項１４】
抗腫瘍剤を製造するための、Ｎ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドの二アスコルビン酸塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、腫瘍細胞の増殖を選択的に抑制するための、抗真菌性ポリエン、パートリシンの半合成誘導体の利用に関する。
【０００２】
【従来の技術】
パートリシン（partricin）はパートリシンＡおよびパートリシンＢの混合物であり（The Merck Index  第１２版、７１８１番）、S. aureofaciensの特定の株の培養から得られるポリエンで、非常に高い抗真菌活性を示す。
【０００３】
このような物質は治療に用いるには毒性が高いため、パートリシンそのものまたは個々の成分、特にパートリシンＡを原料として半合成的に構造上の修飾が施された。前記誘導体の例は、欧州特許出願ＥＰ−Ａ−０４３４９４３およびＥＰ−Ａ−０４８９３０８、ならびに米国特許３７８０１７３（the Merck Index  第１２版、５８９１番も参照のこと）および米国特許３９６１０４７他に記載されている。
【０００４】
これら誘導体のいくつかはその出発物質や治療における現在の参照標準、すなわちアムホテリシンＢと比べて、抗真菌剤としての活性が高く、毒性が非常に低いことが明らかとなった。
【０００５】
パートリシン誘導体は抗真菌活性が高く、同時に真菌および糸状菌に対して活性を示す濃度で真核細胞に受容されることから、これら誘導体の真菌による汚染が示唆されたため、このような汚染を妨げるために培養細胞上で行った実験中に、驚くことに、そしてこれが本特許出願の主題であるが、腫瘍細胞系統の中にこのような物質に対する感受性が非常に高いものがあることが判明した。また、非常に低濃度（しかし、少なくとも各培養細胞で抗真菌活性を示した濃度よりは一般に高かった）で暴露時間が限られている場合にも、細胞増殖の完全阻害が観察され、最終的に細胞の完全死が認められた。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
腫瘍細胞の増殖を選択的に抑制するための、抗真菌性ポリエン、パートリシンの半合成誘導体の利用についてここで述べる。
【０００７】
これら誘導体は他の知られている抗腫瘍薬剤と併用することもでき、特にこれらの薬剤に対する耐性がある場合や、耐性を生じた場合には有用である。
【０００８】
本発明は治療ならびに細胞培養システムに適用することができる。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明の利用および方法に適したパートリシン誘導体のクラスには、カルボキシル基のエステルおよびアミドで、場合によりマイコサミン残基の一級アミノ基がアシル基で置換されたものが含まれる。
【００１０】
我々が用いたパートリシンＡおよび／またはＢの誘導体は、欧州特許出願ＥＰ−Ａ−０４３４９４３、ＥＰ−Ａ−０４８９３０８、米国特許３７８０１７３、および米国特許３９６１０４７に記載されているものと同じで、実際にはマクロライド環Ｃ−１８カルボキシル基のエステルおよびアミドで、場合によりマイコサミン残基のアミノ基がアシル基で置換されたもの、およびそれらの薬理／製薬上容認できる有機および無機酸との塩である。
【００１１】
特に、欧州特許出願ＥＰ−Ａ−０４３４９４３（米国特許５２９６５９７に対応）に記載されているパートリシンＡおよび／またはＢのアミド誘導体は、マクロライド環のＣ−１８カルボキシル基の二級および三級アミドである。特許出願ＥＰ−Ａ−０４８９３０８（米国特許５２９８４９５に対応）に記載されているパートリシンＡおよび／またはＢでは、マクロライド環のＣ−１８カルボキシル基は無置換のこともあれば中性のＣ１−Ｃ６アルキルエステルもしくはアミドを形成しまた追加の塩基性窒素含有官能基を含むこともあり、マイコサミン部分の一級アミノ基が追加の塩基性窒素含有基を含む２−４炭素原子の脂肪酸のカルボキシル基とアミド結合を形成する。
【００１２】
本発明の利用および方法に適した他のパートリシン誘導体は、米国特許３７８０１７３および米国特許３９６１０４７に記載されている、パートリシンのアルキルエステル、例えばＣ１−Ｃ４アルキルエステル、特にパートリシン複合体のメチルエステル（mepartricin）およびパートリシンＡおよび／またはＢのメチルエステルである。
【００１３】
前記欧州特許の説明および例、それに対応する米国特許５２９６５９７および米国特許５２９８４９５の説明および例、前記パートリシンＡおよび／またはＢの誘導体の製法に関連する米国特許３７８０１７３および米国特許３９６１０４７の説明および例を本特許出願中で参考として援用する。
【００１４】
本発明の範囲にはパートリシンの通常の立体配置を有するパートリシンＡおよび／またはＢの誘導体、ならびに例えば紫外線または太陽光線照射によって得られることがある「すべてトランス」の立体配置を有するパートリシンＡおよび／またはＢの誘導体（Bruzzese T.他、Il Farmaco Ed. Sci.、４巻、３３１〜３３４ページ、１９７４年）の利用が含まれる。
【００１５】
本発明による利用に特に有用なパートリシンＡおよび／またはＢの誘導体は下記の化学式Ｉで表される。
【００１６】
【化１】
0004571248.tif 000002
【００１７】
上式で、Ｒ’は水素原子またはメチル基であり、
Ｒ１はアミノアシル基−ＣＯ（ＣＨ２）ｍＮＲ３Ｒ４であり、ただしｍは１、２、３のいずれかで、Ｒ３とＲ４は同じでも違ってもよいが水素原子またはＣ２−Ｃ３アルキル基、あるいはこれらが結合する窒素原子とＯ、Ｓ、およびＮからなる基から選んだ別のヘテロ原子を任意に含む５または６員環の複素環を形成し、複素環中の前記Ｎはメチルまたは２−ヒドロキシエチル基で置換されていてもよく、
Ｒ２は水酸基、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ＮＲ３Ｒ４アミノまたは−ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１Ｒ４アミノアルキルアミノ基であり、ただしｍ、Ｒ３、およびＲ４は前述の定義の通り、または置換−ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ５アルキルアミノ基であり、ただしｍは前述の定義の通りであり、Ｒ５は５または６員環の複素環で、複素環中のヘテロ原子は窒素原子であって、メチルまたはエチル基で置換されていてもよく、
Ｘは製剤上容認できる有機または無機酸の陰イオンであり、好ましくはアスパラギン酸、グルタミン酸、グリコール酸、グルクロン酸、グルコン酸、およびアスコルビン酸からなる基から選択され、
ｎは０、１、または２である。
【００１８】
我々の試験中に最も有効と判明した化合物のひとつはパートリシンＡ誘導体、すなわちＮ−ジメチルアミノ−アセチル−パートリシンＡ  ２−ジメチルアミノエチルアミドである。対応する塩、特に二アスコルビン酸塩（実験室コード（ＳＰＡ−Ｓ−８４３）に変換後、多くの天然ポリエンとは異なって本化合物は水溶性となり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの培養に容易に用いることができ、また同時に非経口投与による臨床適用のための製剤（注射用アンプル剤、輸液等）にも容易に利用できる。
【００１９】
ある種の腫瘍細胞系統に対する驚くほど顕著な毒性に関する前述の知見より、各腫瘍系統（例えば、白血病、リンパ腫、骨髄腫、癌腫、肉腫、その他の腫瘍）のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの細胞感受性を試験した後、抗腫瘍薬としての臨床におけるこれらの化合物の利用が予知できる。
【００２０】
これらの化合物の利用は、少なくとも膜ステロールとの相互作用（他のポリエンではよく見られる）が細胞膜を損傷させて、他の抗腫瘍薬の細胞内透過および蓄積に好都合になり、相乗作用をもたらすことを考えると、抗腫瘍活性がもっとよく知られている他の薬剤（白金誘導体、ドキソルビシン、ビンクリスチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル等）との組み合わせでも予知可能である。
【００２１】
【発明の実施の形態】
マウスＷＥＨＩ−３Ｂ（Ｄ＋）骨髄単球性白血病細胞に対するＳＰＡ−Ｓ−８４３細胞毒性の典型例（Pessina他、「Susceptibility of leukemia cell lines to quinolones and induction of resistance to ciprofloxacin in WEHI-3B (D+) leukemia cells」Cancer J.、６巻、２９１〜７ページ、１９９３年）をここで述べるが、これは発明の目的を限定するものではない。
【００２２】
物質：ＳＰＡ−Ｓ−８４３およびアムホテリシンＢを滅菌二回蒸留水に溶解し２０００μｇ／ｍｌの濃度とした。希釈標準溶液をペニシリン＋ストレプトマイシン（１００Ｕ／ｍｌ＋１００μｇ／ｍｌ）を補足したＭｃＣｏｙ培地中で調整し、１：２の連続希釈により２００μｇ／ｍｌから１．５６μｇ／ｍｌの濃度とした。
【００２３】
マウスＷＥＨＩ−３Ｂ（Ｄ＋）骨髄単球性白血病細胞を２５−ｃｍ２プラスチックボトル内で５％ＦＣＳ（Ｇｉｂｃｏ、米国）含有ＭｃＣｏｙ培地（Seromed、ドイツ）中での継代培養により維持した。
【００２４】
アムホテリシンＢを参照物質として比較した場合のＳＰＡ−Ｓ−８４３の毒性に対する細胞感受性を、次の異なる２法で調べた。
【００２５】
Ａ）マイクロタイター試験（ＭＴＴ）（Pessina他、「In vitro shor-term and long-term cytotoxicity of fluoroquinones on murine cell line」、Ｉｎｄ．  J. Exp. Biol.、３２巻、１１３〜８ページ、１９９４年）。
【００２６】
Ｂ）寒天クローン原性試験（Pessina他、「Inhibition of murine leukemia cell - WEHI-3B and L1210 - Proliferation by cholera toxin B subunity」、Biochem. Biophys. Acta、１０１３巻、２０６〜１１ページ、１９８９年）。
【００２７】
試験の説明
ＭＴＴによる細胞毒性：本法はMossman T.（J. Immunol. Methods、６５巻、５５〜６３ページ、１９８３年）の方法をKriegler A.B.他（J. Immunol. Methods、１０３巻、９３〜１０２ページ。１９８７年）が改変したものに従い、３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル−２−Ｈ−臭化テトラゾリウム（MTT - Sigma、米国）を用いたマイクロタイター試験である。
【００２８】
すなわち、２薬剤それぞれを１：２で連続希釈した２μｇ／ｍｌから０．０１５μｇ／ｍｌの溶液５０μｌを９６穴平底マイクロタイタープレートに入れ、次に各ウェルに５０μｌの細胞懸濁液（６×１０３  ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）を加えた。培養液を空気＋５％ＣＯ２中３７℃で７日間インキュベートし、最後にＰＢＳ中５ｍｇ／ｍｌ濃度のＭＴＴ２０μｌを各ウェルに加えた。３７℃で３時間インキュベート後、ドデシルスルホン酸ナトリウム／ジメチルホルムアミド／酢酸／塩酸で調整した溶解緩衝液１００μｌで培養液を分解した。さらに一夜インキュベート後、６２０ｎｍの吸光度（ＯＤ）をマイクロプレートＬＰ２００検出器で測定した。細胞を含まないウェルの吸光度を増殖０％と考えた。薬剤を含まない培地中で細胞が増殖しているウェルの吸光度を増殖１００％と考えた。薬剤の細胞毒性をｉｎ  ｖｉｔｒｏで５０％細胞増殖阻害を引き起こす最低濃度（ＩＣ５０）で計算した。
【００２９】
寒天クローン原性試験による細胞毒性：ＷＥＨＩ−３Ｂ（Ｄ＋）細胞のクローン原性を、３５ｍｍペトリ皿で０．３ｍｌの完全強化培地（ＭｃＣｏｙ＋１０％ＦＣＳ、１０ｍＭピルビン酸ナトリウム、４％  ＮＥＡＡ（１０×）、４％  Ｍｅｍ  Ｖｉｔ（１００×））＋０．３％寒天中３００個の細胞を培養することにより試験した。
【００３０】
ＳＰＡ−Ｓ−８４３およびアムホテリシンＢ（１００μｌ）を２５から０．１９μｇ／ｍｌの連続希釈濃度でペトリ皿に予め加えておいた。対照プレートには１００μｌの培地を入れた。空気＋５％ＣＯ２中３７℃で７日間インキュベート後、コロニーを計数した。
【００３１】
結果
ＭＴＴ試験により評価した二剤の細胞増殖に対する細胞毒性を、対照試料で測定した吸光度値（未処理細胞、吸光度１１３３．５±４８）の％で表す。
【００３２】
図１に用量反応曲線を示す。線形回帰分析で確認したとおり、ＳＰＡ−Ｓ−８４３およびアムホテリシンＢの毒性は用量相関性の動態を示すが、ＷＥＨＩ−３Ｂ（Ｄ＋）細胞に対するＳＰＡ−Ｓ−８４３の細胞毒性はかなり高いようである。図２のヒストグラムで同じ細胞系統に対する二剤のＩＣ１０、ＩＣ５０およびＩＣ９０を示す。ＩＣ値間の差の検定より、ＳＰＡ−Ｓ−８４３のＩＣ１０、ＩＣ５０およびＩＣ９０は有意に低く、本剤の細胞毒性はアムホテリシンＢよりもかなり高いことが明らかである。
【００３３】
寒天試験で評価した二剤の細胞のクローン原性に対する細胞毒性試験の結果を、対照試料中で計数したコロニー数（未処理細胞、ＷＥＨＩ−３Ｂ（Ｄ＋）コロニー＝２１２±６２）のパーセントで表した。
【００３４】
図３にＳＰＡ−Ｓ−８４３の実質的に高い細胞毒性が確認できる用量反応曲線を示す。図４のヒストグラムでＩＣ１０、ＩＣ５０およびＩＣ９０の値を示す。
ここでも、ＷＥＨＩ−３Ｂ（Ｄ＋）細胞におけるアムホテリシンＢのＩＣ値はすべてＳＰＡ−Ｓ−８４３のＩＣ値よりも有意に高いことが明らかで、この結果から典型的なクローン原性試験でさえも試験中の細胞に対する細胞毒性がＳＰＡ−Ｓ−８４３で高いことが実質上確認できる。
【００３５】
全体として、前述の結果より、マウス骨髄単球性白血病細胞に対する二剤の細胞毒性試験ではいずれも、この細胞がすべての真核細胞に対する細胞毒性がよく知られているアムホテリシンＢよりもＳＰＡ−Ｓ−８４３に対して感受性が高いことがわかる。
【００３６】
ＳＰＡ−Ｓ−８４３は他のいくつかのパートリシン誘導体と同じく動物細胞では概して耐容性が高いと文献報告されているため、本知見はまったく驚くべきことである。例えば、米国特許５２９８４９５では、パートリシンＡの誘導体ＳＰＡ−Ｓ−８４３や他の誘導体の赤血球に対する溶解作用は１８μｇ／ｍｌ以上といった非常に高濃度で現れる（ＳＰＡ−Ｓ−８４３遊離塩基：完全溶解濃度−ＴＨＣ＞１８μｇ／ｍｌ）と報告されている。このように赤血球や他の哺乳動物細胞に対する細胞毒性が低いため、動物の全身毒性が低くなる。事実、ａ／ｍ米国特許で報告されているとおり、マウスで経静脈投与によりその５０％が死に至る用量（ＬＤ５０）は５８ｍｇ／ｋｇである。アムホテリシンＢではＴＨＣが２μｇ／ｍｌでマウスにおける経静脈ＬＤ５０が４．７７ｍｇ／ｋｇと報告されており（T. Bruzzese他、Eur. J. Med. Chem.、３１巻、９６５〜７２ページ、１９９６年）、対応する値間の差を指摘することができる。前述の解説および添付の図１〜図４によって示唆されるとおり、ＳＰＡ−Ｓ−８４３の毒性は、例えばＷＨＥＩ−３Ｂ（Ｄ＋）といった腫瘍細胞の場合には、かなり低い濃度で生じることもある。
【００３７】
このように、パートリシン誘導体の中にはある種の腫瘍細胞系統に対し予期せぬ高い選択的細胞毒性を示すものがあることから、これらの薬剤に、あるいは適当なｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性スクリーニングの後に、前記誘導体に対する細胞感受性によりある種の腫瘍治療のための選択的適応を付与することができる。抗腫瘍活性の選択性は、例えば、腫瘍治療のために選んだパートリシンＡおよび／またはＢの誘導体を用いて、腫瘍に冒されている同じ臓器または組織から得た腫瘍細胞および健常細胞に対しｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性試験を予備的に行うことによって評価する。腫瘍に冒されている同じ生物（例えば、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒト）から得た他の健常細胞も治療のために選んだパートリシン誘導体の細胞毒性に対し感受性であると考えられるため、このような細胞を用いても同様の比較ができるはずである。
【００３８】
すでに述べたとおり、パートリシン誘導体は他の抗腫瘍薬（例えば、白金誘導体、ドキソルビシン、ビンクリスチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル等）の補助薬としても用いることができる。
【００３９】
例えば、ある種の腫瘍細胞系統、または特にある細胞が、最も知られている抗腫瘍薬に対して耐性であったり、あるいは耐性を生じるかもしれないことが知られており、これによって腫瘍の再発、および化学療法の成功に著しい損害をきたすことがよくある。また、細胞壁ステロールとの複合体形成により細胞膜に作用するアムホテリシンＢのような薬剤（例えば、Kuwano他、「Techniques to reverse or circumvent drug resistance in vitro」、Prog. Clin. Biol. Res. ２２３巻、１６３〜７１ページ、１９８６年；Morikage他、「Reversal of cisplatin resistance with amphotericin B in a non-small cell lung tumor cell line」、Japan J. Cancer Res.、８２巻、７４７〜５１ページ、１９９１年）は抗腫瘍薬に耐性の細胞と相互作用し、それにより膜透過性を変えて細胞中に化学療法剤を蓄積させ、その後薬剤に対する細胞の感受性を回復させるものもあることが示唆されている。我々は、甲状腺髄様癌（ＴＭＣ）細胞に対するシスプラチン（ＣＰ）の化学療法作用を実験的に試験し、細胞毒性試験（ＭＴＴ）によりシスプラチンに対する癌細胞の耐性がＳＰＡ−Ｓ−８４３（２μｇ／ｍｌ）による予備治療で実質的に中和されることを確認した。
【００４０】
このような比較的低濃度にも関わらず、ＳＰＡ−Ｓ−８４３は耐性細胞に対するシスプラチンの細胞毒性を本来感受性の細胞に対するのと同程度まで強めることができた。結論として、ＳＰＡ−Ｓ−８４３とインキュベートすることによりシスプラチンの抗腫瘍活性を全ＴＭＣ細胞に対して細胞毒性を示す程度にまで増強することができた。通常の抗腫瘍薬による治療に反応しなくなった患者にパートリシン誘導体を前記抗腫瘍薬補助薬として適用した例として、１９９３年６月にＣ２期のＧ２腺腫のために大動静脈前リンパ腺切除を伴う左結腸半切除、脾摘、および左付属器摘出を受けた７１歳女性患者症例をこれにより報告する。患者は引き続き５−フルオロウラシルおよびフォリン酸による合併化学療法で治療した。
【００４１】
化学療法の後、腫瘍胎児性抗原（ＣＥＡ）の投与によりＣＥＡ濃度が２６２ｎｇ／ｍｌからほぼ正常濃度（５ｎｇ／ｍｌ）まで低下したことが明らかとなった。１９９７年２月、左副腎部に起源が共通の充実性組織の発生を伴う腫瘍の再発を見た。
【００４２】
患者に開腹術を施して全摘出を行い、その後５−フルオロウラシル（５００ｍｇ）およびフォリン酸（２５０ｍｇ）の緩速注入による化学療法を行った。治療はまず通常の計画に沿って行い（Ａ相）、３週間後に半合成ポリエンＳＰＡ−Ｓ−８４３（５０ｍｇ  ｉ．ｖ．）を合併投与した（Ｂ相）。
【００４３】
Ａ相の後にＣＥＡ−ＲＩＡ（ＲＩＡ＝ラジオイムノアッセイ）モノクローナル１段階キット（Boehringer Mannheim、ドイツ）を用いて行ったＣＥＡ分析（Disaia P.J.他、Am. J. Obster. Gynecol.、１２１巻、１５９〜１６３ページ、１９９３年）では、２７２ｎｇ／ｍｌという値が得られたが、Ｂ相の後では６５ｎｇ／ｍｌであった。
【００４４】
患者には現在、鎮痛を目的とする放射線療法を行っている。
【００４５】
通常の化学療法剤を単独で投与した場合には薬剤耐性が生じたのに対し、これら薬剤とポリエンとを併用すると薬剤感受性が回復したことは言及するに値するが、これはあるいはポリエンと細胞膜ステロールとの相互作用および細胞透過性の上昇によるものかもしれない。
【００４６】
前述のパートリシンＡおよび／またはＢのエステルおよびアミド誘導体は、腫瘍細胞が存在するかもしくは発生しやすい、またはその両方で、抗腫瘍治療が必要な動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトの治療法に用いることができる。
【００４７】
前記治療法に従い、前記動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトに投与すべきパートリシンＡおよび／またはＢの誘導体の用量は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトの体重および年齢、疾患の重症度（すなわち、動物の腫瘍細胞の量もしくは発生段階、またはその両方）によって異なり、特定のパートリシンＡおよび／またはＢの誘導体に対する腫瘍に冒されている動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトの反応、および前記パートリシンＡおよび／またはＢの誘導体の前記動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトへの投与を管理する人間の判断によって調整することができる。
【００４８】
一般に、効果的用量は１日に体重１ｋｇあたり約０．０２５から約３ｍｇ、好ましくは１日に体重１ｋｇあたり約０．１５から約１．５ｍｇの範囲である。前記用量を１回で投与してもよいし、２回以上に分割してもよい。前記用量を毎日投与してもよいし、病状および疾患の重症度に応じて間欠的（例えば２から７日おき）に与えてもよい。通常の投与経路は非経口経路で、静脈内投与、特に０．５から８時間で投与する点滴静注の形態が好ましい。抗腫瘍薬として用いるためのＳＰＡ−Ｓ−８４３製剤は活性成分を１から１００ｍｇ、好ましくは５から５０ｍｇ含み、通常の方法で製剤する。これらの製剤は好ましくはアスコルビン酸／アスコルビン酸ナトリウムを抗酸化剤および安定剤として含有し、固形すなわち凍結乾燥して保存することが多い。静注用の典型的な製剤の例を次に示すが、これに限定されるものではない。
【００４９】
ＳＰＡ−Ｓ−８４３    ２５ｍｇ
アスコルビン酸      ４．５ｍｇ
ラクトース          ２５０ｍｇ
滅菌二回蒸留水を適量加えて５ｍｌとする
溶液を一般には凍結乾燥し、使用前に５％ブドウ糖溶液に溶解して（５０−５００ｍｌ）緩速注入で投与する。
【００５０】
パートリシンＡおよび／またはＢの誘導体を他の抗腫瘍薬の抗腫瘍活性補助薬として用いる場合、通常の抗腫瘍薬と同時に投与することもできるし、逐次投与してもよい。それゆえ、製剤は単回投与形態中に両活性成分を含有してもよいし、同じ活性成分を別の投与形態に含んで使用時に単回投与形態として複合できるようにしてもよい（例えば、静脈内投与以外の投与のための溶液または懸濁液）。あるいは、２種の活性成分を別の投与形態に封入し、抗腫瘍療法中に逐次投与できるようにすることも可能である。
【００５１】
従って、前述の説明により、本発明の主な目的の一つは先に定義したパートリシンＡおよび／またはパートリシンＢの誘導体を腫瘍性疾患治療法で用いる医薬品製造のために利用することで、前記治療はパートリシンＡおよび／またはＢの誘導体を単独でまたは通常の抗腫瘍薬との組み合わせにより実施する。
【図面の簡単な説明】
【図１】ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの細胞増殖に対する細胞毒性の用量反応曲線を示す図である（ＭＴＴ試験）。
【図２】ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの細胞増殖試験で評価したＳＰＡ−Ｓ−８４３およびアムホテリシンＢのＩＣ値を示す図である。
【図３】細胞クローン原性に対する細胞毒性の用量反応曲線を示す図である（寒天試験）。
【図４】ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの細胞クローン原性試験で評価したＳＰＡ−Ｓ−８４３およびアムホテリシンＢのＩＣ値を示す図である。
【図１】
0004571248.tif 000003
【図２】
0004571248.tif 000004
【図３】
0004571248.tif 000005
【図４】
0004571248.tif 000006