(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0004596651.tif 000013
（式中、
Ｒ1及びＲ2は独立して水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ニトロ、シアノ及びトリフルオロメチルから成る群から選択され、
Ｒ3及びＲ4は独立して水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、ニトロ、シアノ及びトリフルオロメチルから成る群から選択され、
Ｒ1及びＲ2のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、そして
Ｒ3及びＲ4のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、
ここで、
（ａ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−ブロモ又は４−クロロであるとき、Ｒ4は４−クロロ、４−フルオロ、又は４−ブロモであってはならず、
（ｂ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−フルオロであるとき、Ｒ4は４−フルオロ又は４−ブロモであってはならず、
（ｃ）Ｒ1が水素でありＲ4が２−フルオロであるとき、Ｒ2及びＲ3は４−フルオロであってはならず、
（ｄ）Ｒ1が水素でありＲ3が４−水素、４−クロロ又は４−ブロモでありＲ4が２−水素、２−クロロ又は２−フルオロであるとき、Ｒ2は４−水素、４−クロロ、４−フルオロ、又は４−ブロモであってはならず、及び
（ｅ）当該化合物が（Ｅ）−２−クロロ−４−フルオロスチリル−４−フルオロベンジルスルホン、（Ｅ）−２−クロロ−４−フルオロスチリル−４−クロロベンジルスルホン、（Ｅ）−２−クロロ−４−フルオロスチリル−４−ブロモベンジルスルホン、（Ｅ）−２，４−ジフルオロスチリル−４−クロロベンジルスルホン、又は（Ｅ）−２，４−ジフルオロスチリル−４−ブロモベンジルスルホンではないことを条件とする）
の化合物を含有する増殖性疾患の処置において使用するための薬剤。
【請求項２】
前記増殖性疾患は、癌、新生児の血管腫症、二次進行性多発性硬化症、慢性進行性骨髄変性疾患、神経線維腫症、神経節神経腫症、ケロイド形成、骨のパジェット病、胸部の線維嚢胞疾患、ペロニーズ＆ドュプレン線維症、再発狭窄症又は硬変であることを特徴とする請求項１の薬剤。
【請求項３】
前記癌は卵巣、胸部、前立腺、肺、腎臓、結腸直腸又は脳の癌であるか、又は前記癌は白血病である請求項２の薬剤。
【請求項４】
前記化合物は、（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−トリフルオロメチルベンジルスルホン、（Ｅ）−２−トリフルオロメチル−４−フルオロスチリル−２，４−ジクロロベンジルスルホン、（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−ニトロベンジルスルホン、及び（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−シアノベンジルスルホン、（Ｅ）−４−フルオロスチリル−３，４−ジクロロベンジルスルホン、（Ｅ）−４−フルオロスチリル−２，４−ジクロロベンジルスルホン、（Ｅ）−４−ニトロスチリル−４−フルオロベンジルスルホン、（Ｅ）−４−ニトロスチリル−４−ブロモベンジルスルホン、（Ｅ）−４−ニトロスチリル−４−シアノベンジルスルホン、（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−メトキシベンジルスルホン、（Ｅ）−４−クロロスチリル−４−メトキシベンジルスルホン、（Ｅ）−４−ブロモスチリル−４−メトキシベンジルスルホン、及び（Ｅ）−４−ニトロスチリル−４−メトキシベンジルスルホンから成る群から選択されることを特徴とする請求項１〜３のいずれかの項に記載の薬剤。
【請求項５】
式
【化２】
0004596651.tif 000014
（式中、
Ｒ1及びＲ2は独立して水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ニトロ、シアノ及びトリフルオロメチルから成る群から選択され、
Ｒ3及びＲ4は独立して水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、ニトロ、シアノ及びトリフルオロメチルから成る群から選択され、
Ｒ1及びＲ2のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、そして
Ｒ3及びＲ4のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、
ここで、
（ａ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−クロロであるとき、Ｒ4は４−クロロ、４−フルオロ、４−ブロモ、又は４−ニトロであってはならず、
（ｂ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−フルオロ又は４−ブロモであるとき、Ｒ4は４−フルオロ、４−ブロモ、又は４−クロロであってはならず、
（ｃ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−ニトロであるとき、Ｒ4は４−クロロ、４−ニトロ、４−ブロモ、又は４−フルオロであってはならず、
（ｄ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−メチルであるとき、Ｒ4は４−クロロ、４−ブロモ、４−フルオロ、又は２−クロロであってはならず、
（ｅ）Ｒ1が水素であるとき、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は全てがフルオロであってはならず、
（ｆ）Ｒ1が水素でありＲ3が２−フルオロであるとき、Ｒ2及びＲ4が共に４−クロロ、４−ブロモ及び４−フルオロから成る群から選択されてはならず、及び
（ｇ）当該化合物が（Ｅ）−２−クロロ−４−フルオロスチリル−４−フルオロベンジルスルホン、（Ｅ）−２−クロロ−４−フルオロスチリル−４−クロロベンジルスルホン、（Ｅ）−２−クロロ−４−フルオロスチリル−４−ブロモベンジルスルホン、（Ｅ）−２，４−ジクロロスチリル−４−フルオロベンジルスルホン、（Ｅ）−２，４−ジクロロスチリル−４−クロロベンジルスルホン、（Ｅ）−２，４−ジクロロスチリル−４−ブロモベンジルスルホン、（Ｅ）−２−クロロ−４−ブロモスチリル−４−フルオロベンジルスルホン、（Ｅ）−２−クロロ−４−ブロモスチリル−４−クロロベンジルスルホン、又は（Ｅ）−２−クロロ−４−ブロモスチリル−４−ブロモベンジルスルホンではないことを条件とする）
の化合物。
【請求項６】
（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−トリフルオロメチルベンジルスルホン、（Ｅ）−２−トリフルオロメチル−４−フルオロスチリル−２，４−ジクロロベンジルスルホン、（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−ニトロベンジルスルホン、及び（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−シアノベンジルスルホン、（Ｅ）−４−フルオロスチリル−３，４−ジクロロベンジルスルホン、（Ｅ）−４−フルオロスチリル−２，４−ジクロロベンジルスルホン、（Ｅ）−４−ニトロスチリル−４−フルオロベンジルスルホン、（Ｅ）−４−ニトロスチリル−４−ブロモベンジルスルホン、（Ｅ）−４−ニトロスチリル−４−シアノベンジルスルホン、（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−メトキシベンジルスルホン、（Ｅ）−４−クロロスチリル−４−メトキシベンジルスルホン、（Ｅ）−４−ブロモスチリル−４−メトキシベンジルスルホン、及び（Ｅ）−４−ニトロスチリル−４−メトキシベンジルスルホンから成る群から選択されることを特徴とする請求項５の化合物。
【請求項７】
式
【化３】
0004596651.tif 000015
（式中、
Ｒ1及びＲ2は独立してフッ素、臭素又はヨウ素から選択されるか、又は
Ｒ1が水素でありＲ2がＣＦ3である）
の化合物又はその塩。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願に関する相互参照
１９９９年４月２日に出願された米国仮特許出願第６０／１２７,６８３号及び１９９９年７月１５日に出願された同第６０／１４３,９７５号の出願日の特典を３５Ｕ.Ｓ.Ｃ.１１９（ｅ）によりここに主張する。上記仮出願の全開示は参照により本明細書に援用する。
【０００２】
発明の分野
本発明は癌の処置のための組成物及び方法に関するものである。
【０００３】
発明の背景
トランスメンブランレセプターにて受容される細胞外シグナルは、シグナル変換経路によって細胞内に伝達され（ペレック（Pelech）ら、Science ２５７：１３３５（１９９２））、これは、例えば細胞の増殖、分化又はアポトーシスの誘導など、広範な生理学的プロセスに結びつけられてきた（デイビス（Davis）ら、J. Biol. Chem. ２６８：１４５５３（１９９３））。マイトジェン（分裂誘発因子）活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ：Mitogen Activated Protein Kinase）カスケードは、主要なシグナル系であり、これにより細胞は、細胞外（extracellular）の刺激（合図）を細胞内（intracellular）の応答に変換する（ニシダ（Nishida）ら、Trends Biochem. Sci. １８：１２８（１９９３）；ブルマー（Blumer）ら、Trends Biochem. Sci. １９：２３６（１９９４））。このカスケードの多くのステップは、異なる種にて発見されたＭＡＰキナーゼに対して保存されており、又相同である。
【０００４】
哺乳動物細胞において、細胞外シグナル調節キナーゼ類（ＥＲＫ：Extracellular-Signal-Regulated Kinase）、ＥＲＫ−１及びＥＲＫ−２は、典型的、且つＭＡＰＫファミリーの最も良く研究されたメンバーであり、その全てが上流二重特異性キナーゼ（upstream dual specificity kinase）によるトレオニン及びチロシン残基におけるリン酸化で活性化されるという独特の特性を有する（ポサダ（Posada）ら、Science ２５５：２１２（１９９２）；ビッグス（Biggs III）ら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA ８９：６２９５（１９９２）；ガーナー（Garner）ら、Genes Dev. ６：１２８０（１９９２））。
【０００５】
最近の研究によって、ｃ−Ｊｕｎ  ＮＨ２−末端キナーゼ１及び２（ＪＮＫ−１及びＪＮＫ−２））として知られる、ＭＡＰＫ類の更なるサブグループが同定され、これは異なる基質特異性を有し、又これらは異なる刺激により調節される（ヒビ（Hibi）ら、Genes Dev. ７：２１３５（１９９３））。ＪＮＫ類はストレス活性化プロテインキナーゼ類（ＳＰＫ：stress-activated protein kinase）のメンバーである。ＪＮＫ類はＵＶ照射、前炎症性サイトカイン及び環境ストレスでの細胞の処理によって活性化されることが示されてきた（デリジャルド（Derijard）ら、Cell １０２５（１９９４））。活性化されたＪＮＫは、ｃ−Ｊｕｎ蛋白質のアミノ末端に結合し、これをｓｅｒ６３及びｓｅｒ７３においてリン酸化することによって、蛋白質の転写活性を増加する（アドラー（Adler）ら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA ８９：５３４１（１９９２）；クウォック（Kwok）ら、Nature ３７０：２２３（１９９４））。
【０００６】
推定されたＪＮＫ類の一次シーケンスの分析は、これらがＥＲＫ類と遠い関係にあることを示す（デイビス（Davis）、Trends Biochem. Sci. １９：４７０（１９９４））。ＥＲＫ類とＪＮＫ類の双方は、外部刺激に応答するなかでＴｙｒ及びＴｈｒにおいてリン酸化され、その結果活性化する（デイビス（Davis）、Trends Biochem. Sci. １９：４７０（１９９４））。このリン酸化（Ｔｈｒ及びＴｙｒ）位置は、それらの活性化において臨界的な役割を演じ、ＥＲＫ類とＪＮＫ類の間で保存されている（デイビス（Davis）、Trends Biochem. Sci. １９：４７０（１９９４））。しかし、これらのリン酸化の位置は、別個の二重リン酸化モチーフの中に位置している：Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ（ＪＮＫ）及びＴｈｒ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ（ＥＲＫ）。ＭＡＰＫ類及びＪＮＫ類の外部シグナルによるリン酸化は、幾つかの成長因子レセプター類及び他のシグナル変換分子類を包含する蛋白質の多くのファミリーを構成する、蛋白質チロシンキナーゼ類（ＰＴＫ：protein tyrosine kinase）の活性化を含むことが多い。
【０００７】
蛋白質チロシンキナーゼ類は、良く定義された化学反応、即ち、チロシン残基のリン酸化を触媒する酵素である（ハンター（Hunter）ら、Annu Rev Biochem ５４：８９７（１９８５））。特にレセプターチロシンキナーゼ類は、これらキナーゼ類の基質ドメインに対する遮断薬（ブロッカー）類が、効果的且つ選択的な抗増殖作用物質（剤）を産するのに適当であることから、薬剤設計の魅力的なターゲット（標的）である。抗増殖作用物質としての蛋白質チロシンキナーゼブロッカー類の使用可能性は、クエルセチンがＰＴＫブロッカーとして示唆された１９８１年という早い時期に認識された（グラジアニ（Graziani）ら、Eur. J. Biochem. １３５：５８３−５８９（１９８３））。
【０００８】
最も良く理解されたＭＡＰＫ経路は、Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫキナーゼカスケードを構成する細胞外シグナル調節キナーゼ類を含む（ボーデウィジン（Boudewijn）ら、Trends Biochem. Sci. ２０，１８（１９９５））。一度この経路が異なる刺激によって活性化されると、ＭＡＰＫは、核の中に移動して遺伝子転写を活性化する幾つかの転写因子を含む種々の蛋白質をリン酸化する。この経路のネガティブ調節は、おそらくこれら事象のカスケードを阻止できる。
【０００９】
レセプターチロシンキナーゼ類をターゲットとし、又、Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫキナーゼカスケードを阻止する、新規な抗癌化学療法作用物質が必要とされている。一般にオンコプロテイン類（腫瘍蛋白質）（oncoprotein）、及び特にシグナル変換蛋白質は、その活性が細胞増殖にとって基本的なものである蛋白質のサブクラスを代表し、又その活性が増殖性疾患（proliferative disease）において大きく増幅されることから、化学療法のより選択的なターゲットに適当である。
【００１０】
腫瘍細胞を高度に選択的に死滅させ、正常細胞は死滅させない新しい抗癌治療法もまた必要である。
【００１１】
発明の要約
本発明の目的は、癌及びその他の増殖性疾患を処置する化合物、組成物及び方法を提供することである。生物学的に活性な化合物類は（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類の形にある。
【００１２】
本発明の目的は、高度に選択的に腫瘍細胞を死滅させるが、正常細胞は死滅させない化合物を提供することである。
【００１３】
本発明の他の目的は、（Ｅ）−スチリルベンジルスルホンの重合によって調製される新規なポリマーを提供することである。
【００１４】
本発明の更に他の目的は、抗癌活性を有する化合物類の調製に有用な中間体を提供することである。この中間体は、（Ｅ）−スチリルベンジルスルホニル酢酸を含む。
【００１５】
本発明の一実施態様によると、新規化合物は、式Ｉ
【００１６】
【化７】
0004596651.tif 000002
【００１７】
（式中Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は独立して水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ニトロ、シアノ及びトリフルオロメチルから成る群から選択され、
ここで、
（ａ）Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は全てが水素であってはならず、
（ｂ）Ｒ1、Ｒ2及びＲ3が水素であるとき、Ｒ4は、
（ｉ）２−若しくは４−クロロ、又は４−フルオロ、
（ｉｉ）２−ニトロ、３−ニトロ又は４−ニトロ、
（ｉｉｉ）４−メトキシ又は４−エトキシ、又は
（ｉｖ）４−メチル
であってはならず、
（ｃ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−クロロであるとき、Ｒ4は４−クロロ、４−フルオロ、４−ブロモ、４−ニトロ、４−イソプロピル又は４−エトキシであってはならず、
（ｄ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−フルオロであるとき、Ｒ4は４−フルオロ、４−ブロモ又は４−クロロであってはならず、
（ｅ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−ニトロであるとき、Ｒ4は４−クロロ、４−ニトロ、４−ブロモ、４−フルオロ、４−メチル又は４−メトキシであってはならず、
（ｆ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−メチルであるとき、Ｒ4は４−クロロ、４−ブロモ、４−フルオロ、４−メチル又は２−クロロであってはならず、
（ｇ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−ブロモであるとき、Ｒ4は４−フルオロ、４−ブロモ又は４−クロロであってはならず、
（ｈ）Ｒ1及びＲ2が水素であるとき、Ｒ3及びＲ4は２，４−ジクロロ、２，３−ジメトキシ又は３，４−ジメトキシであってはならず、
（ｉ）Ｒ1が水素であるとき、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は全てがフルオロであってはならず、及び
（ｊ）Ｒ1が水素でありＲ3が２−フルオロであるとき、Ｒ2及びＲ4が共に４−クロロ、４−ブロモ及び４−フルオロから成る群から選択されてはならないことを条件とする）
に従って提供される。
【００１８】
本発明の好ましい実施態様によれば、新規化合物は式Ｉに従って提供され、式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は独立して水素、クロロ、フルオロ、ブロモ、ニトロ、シアノ及びトリフルオロメチルから成る群から選択される。より好ましい実施態様によれば、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は独立して水素、クロロ、フルオロ及びブロモから成る群、最も好ましくは、水素、クロロ及びフルオロから成る群から選択される。
【００１９】
更に好ましい実施態様において、新規化合物は式Ｉに従って提供され、式中、（１）Ｒ1及びＲ2のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、それが結合しているフェニル環の２−、３−及び／又は４−位置に位置し、好ましくは、クロロ及びフルオロから選択され、最も好ましくは、クロロであり；及び/又は（２）式中、Ｒ3及びＲ4のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、それが結合しているフェニル環の２−及び／又は４−位置に位置し、好ましくは、クロロ及びフルオロから選択される。他の好ましい実施態様では、Ｒ1及びＲ2のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、及びＲ3及びＲ4のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、（ｉ）Ｒ2は４−ハロゲン又は４−シアノであり、そしてＲ4は４−ニトロであり；又は（ｉｉ）Ｒ2は４−Ｃ１〜Ｃ６アルコキシであり、そしてＲ4は４−ニトロ又は４−ハロゲンである。これらの実施態様では、好ましくは、Ｒ1及びＲ3は水素である。
【００２０】
本発明の他の実施態様において、医薬上許容しうるキャリアと、１つ以上の式ＩＩ
【００２１】
【化８】
0004596651.tif 000003
【００２２】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は独立して水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ニトロ、シアノ及びトリフルオロメチルから成る群から選択され、
ここで、
（ａ）Ｒ4が２−クロロ又は４−クロロであるとき、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は全てが水素であってはならず、
（ｂ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−ブロモ又は４−クロロであるとき、Ｒ4は４−クロロ、４−フルオロ又は４−ブロモであってはならず、
（ｃ）Ｒ1及びＲ3が水素でありＲ2が４−フルオロであるとき、Ｒ4は４−フルオロ又は４−ブロモであってはならず、
（ｄ）Ｒ1が水素でありＲ4が２−フルオロであるとき、Ｒ2及びＲ3は４−フルオロであってはならず、
（ｅ）Ｒ1が水素でありＲ3が４−水素、４−クロロ、４−ブロモ、４−メチル又は４−メトキシであり、Ｒ4が２−水素、２−クロロ又は２−フルオロであるとき、Ｒ2は４−水素、４−クロロ、４−フルオロ又は４−ブロモであってはならないことを条件とする）
の化合物と、を含むことを特徴とする医薬組成物が提供される。
【００２３】
関連する発明によると、新規化合物は、式ＩＩＩ
【００２４】
【化９】
0004596651.tif 000004
【００２５】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は独立して水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ニトロ、シアノ及びトリフルオロメチルから成る群から選択され、
ここで、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のうち少なくとも１つはヨードであることを条件とする）
に従って提供される。
【００２６】
好ましい実施態様によると、式ＩＩＩ中のＲ1及びＲ2のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、それが結合しているフェニル環の２−又は４−位置に位置し；そしてＲ3及びＲ4のうち少なくとも１つは水素以外のものであり、それが結合しているフェニル環の２−又は４−位置に位置する。他の好ましい実施態様によると、式ＩＩＩ中のＲ2及びＲ4は水素であり、そしてＲ1及びＲ3はそれらが結合しているそれぞれのフェニル環の４−位置に位置する。更に他の好ましい実施態様によると、Ｒ1又はＲ3のうち１つはクロロ、フルオロ、ブロモ及びニトロから成る群から選択され、Ｒ1又はＲ3のうち他方はヨードである。
【００２７】
医薬上許容しうるキャリアと、１つ以上の上記式ＩＩＩの化合物であって、式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は式ＩＩＩについて上述したように規定される化合物と、を含むことを特徴とする医薬組成物をも提供される。
【００２８】
式Ｉ、ＩＩ又はＩＩＩのいずれかの化合物中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3又はＲ4がアルキル若しくはアルコキシ基である場合、その炭素鎖は有枝鎖又は直鎖でよいが、直鎖が好ましい。好ましくは、アルキル及びアルコキシ基は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル及びＣ１〜Ｃ４アルコキシを含み、最も好ましくはメチル及びメトキシである。
【００２９】
本発明の他の実施態様によれば、増殖性疾患、特に癌のために個体を処置する方法であって、前記個体に有効量の式ＩＩ又はＩＩＩに従う化合物を、単独で又は医薬上許容しうるキャリアと組み合わせて投与することを含むことを特徴とする方法が提供される。
【００３０】
本発明の他の実施態様において、癌に罹患する個体中の腫瘍細胞の成長を阻害する方法であって、前記個体に有効量の式ＩＩ又はＩＩＩに従う化合物を、単独で又は医薬上許容しうるキャリアと組み合わせて投与することを含むことを特徴とする方法が提供される。
【００３１】
他の実施態様において、癌に罹患する個体中の癌細胞、より好ましくは腫瘍細胞のアポトーシスを誘導する方法であって、前記個体に有効量の式ＩＩ又はＩＩＩに従う化合物を、単独で又は医薬上許容しうるキャリアと組み合わせて投与することを含むことを特徴とする方法が提供される。
【００３２】
本発明の更に他の実施態様において、構造式ＩＩ又はＩＩＩを有するベンジルスルホンは、ペンダント（垂下）ベンジルスルホン基群を有する新しいクラスのポリマーの合成におけるモノマーとして用いることができる。
【００３３】
本発明は、後述の構造式Ｖを有する置換されたベンジルスルホニル酢酸化合物系列をも提供する。置換されたベンジルスルホニル酢酸化合物は、後述の方法Ａによる式Ｉの新規な（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン化合物の合成における中間体として有用である。
【００３４】
発明の詳細な説明
本発明によると、ある種の（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン誘導体類は、正常細胞を死滅させることなく、選択的に種々の腫瘍細胞タイプを死滅させる。如何なる理論によっても制限されることを意図するものではないが、これらの化合物類は、ＭＡＰＫシグナル変換経路に作用し、それによって腫瘍細胞の成長及び生育力（生存率）に影響を及ぼすものと思われる。この細胞成長阻害は、ＥＲＫ及びＪＮＫタイプのＭＡＰＫの調節と関連付けられる。如何なる理論によっても束縛されることを意図するものではないが、本発明のスチリルスルホン類は、おそらくＥＲＫ−２のリン酸化能力をブロック（阻止）する。
【００３５】
本発明の化合物類は、細胞死を誘導することによって腫瘍細胞の増殖を阻害することが示された。これらの化合物類は、限定するものではないが、胸部（乳）、前立腺、卵巣、肺、結腸直腸、脳（即ち、神経膠腫（グリオーム））及び腎臓の腫瘍を含む広範囲の腫瘍タイプに対して有効であると思われる。これらの化合物類は、白血病細胞に対しても有効であると思われる。これらの化合物類は、腫瘍細胞を死滅させる濃度において正常細胞を死滅させない。
【００３６】
この化合物類は、限定するものではないが、新生児の血管腫症、二次進行性多発性硬化症、慢性進行性骨髄変性（myelodegenerative）疾患、神経線維腫症、神経節神経腫症（神経節細胞腫症）、ケロイド形成、骨のパジェット病、胸部の線維嚢胞疾患、ペロニーズ＆ドュプレン（Peronies and Duputren's）線維症、再発狭窄症及び硬変（症）を含む、癌ではない増殖性疾患の処置においても有用である。
【００３７】
本発明のスチリルベンジルスルホン化合物類による、この広範囲の腫瘍細胞の処理は、細胞増殖の阻害及びアポトーシス細胞死の誘導を導く。胸部腫瘍においては、この効果は、エストロジェンレセプター（ＥＲ）陽性、並びにエストロジェンレセプター陰性細胞に対して観察された。
【００３８】
本発明の化合物類で処理された腫瘍細胞は、細胞サイクルのＧ２／Ｍ相（期）に蓄積する。この細胞は、Ｇ２／Ｍ相を出るときにアポトーシスを経るらしい。スチリルスルホン類での正常細胞の処理は、アポトーシスに至らない。
【００３９】
（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類の合成
スチリルベンジルスルホン類は、１つ以上の二重結合が存在することによるｃｉｓ−ｔｒａｎｓ異性によって特徴付けられる。この化合物類は、カーン−インゴールド−プレログ法（Cahn-Ingold-Prelog system）［「有機化学命名法（Nomenclature of Organic chemistry）（ジョン・ウィリー  アンド  サンズ  インコーポレイテッド（John Wiley & Sons, Inc.）、ニューヨーク、ニューヨーク州、第４版、１９９２、ｐ．１２７〜１３８）」の「ＩＵＰＡＣ  １９７４  推奨（Recommendations）、セクションＥ：立体化学（Stereochemistry）」］に従って命名する。二重結合の周囲の立体（ステアリン）の関係は、「Ｚ」又は「Ｅ」として指示する。
【００４０】
（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類は、芳香族アルデヒド類と、ベンジルスルホニル酢酸類とのクネベナゲル縮合によって調製される。その手順は、レディー（Reddy）ら［レディーら、Acta. Chim. Hung. １１５：２６９（１９８４）；レディーら、Sulfur Letters １３：８３（１９９１）；レディーら、Synthesis ３２２（１９８４）；及びレディーら、Sulfur Letters ７：４３（１９８７）］によって記述されている。これら全開示を、参照により本明細書に援用する。
【００４１】
（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類は、下記の方法Ａ及びＢのいずれによっても調製することができる。
【００４２】
【化１０】
0004596651.tif 000005
【００４３】
方法Ａ
ベンジルチオ酢酸Ｖを、チオグリコール酸ナトリウムと塩化ベンジルＩＶとの反応によって形成する。ベンジルチオ酢酸Ｖを３０％過酸化水素で酸化し、対応するベンジルスルホニル酢酸ＶＩを得る。ベンジルアミン及び氷酢酸の存在下でＶＩと芳香族アルデヒドＶＩＩとをクネベナゲル反応によって縮合すると、（Ｅ）−スチリルベンジルスルホンＩ、ＩＩ又はＩＩＩが得られる。
【００４４】
方法Ｂ
ベンジルチオ酢酸Ｖを、適当なベンジルチオール酸ナトリウムＶＩＩＩとクロロ酢酸との反応によって形成する。Ｖから対応するベンジルスルホニル酢酸ＶＩへの酸化、及びその後のアルデヒドＶＩＩとのクネベナゲル縮合を、方法Ａと同様に行う。
【００４５】
式Ｖに従う置換されたベンジルスルホニル酢酸化合物類Ｖａ、Ｖｂ、Ｖｃ及びＶｄは、対応する塩化ベンジルとチオグリコール酸とを塩基性条件下で反応させることによって調製した（方法Ａ）。これらの化合物類は、新規な中間体類である。
【００４６】
【化１１】
0004596651.tif 000006
【００４７】
（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類は、ペンダント（垂下）アリール及びベンジルスルホン基群を有するポリマー類Ｘの合成におけるモノマーとして用いることができる。下記の式ＩＸにより規定されるスチリルベンジルスルホン類の、式Ｘのポリマーへの重合は、式ＩＸの化合物をフリーラジカルイニシエータ（開始剤）の存在下で２５０℃より高温に加熱することによって達成される。このイニシエータは、例えば過酸化ベンゾイルを含んでいてよい。
【００４８】
【化１２】
0004596651.tif 000007
【００４９】
式Ｘのポリマーの重合度「ｘ」は、約１０から約１５０までの範囲であり、５,０００から５０,０００ダルトンまでのオリゴマー又はポリマーを与える。その他の重合度もまた意図される。式ＩＸのモノマー中、及び式Ｘのポリマー中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、独立して水素、ハロゲン（即ち、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨード、最も好ましくは、フルオロ、クロロ及びブロモ）、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ニトロ、シアノ及びトリフルオロメチルから成る群から選択される。
【００５０】
（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類は、スチリルスルホン類に対する抗体を産生させる目的で、キャリア（担体）分子への結合を許す化学基で誘導体化することができる。適当な誘導体化の化学作用は、当業者には周知である。好ましくは、誘導体は、カルボン酸誘導体を含む。キャリアは、適当なホスト動物において免疫反応を起こすことができる十分な大きさを有する如何なる分子をも含み得る。そのような好ましい一キャリアは、キーホールリンペット（笠貝）ヘモシアニン（keyhole limpet haemocyanin:ＫＬＨ）である。
【００５１】
治療的投与
本発明の（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類は、医薬上許容しうるキャリアとの組み合わせにおいて医薬組成物の形態で投与しうる。そのような処方中、活性成分は０．１〜９９．９９重量％含んで良い。「医薬上許容しうるキャリア」とは、その処方中の他の成分及び受容者（レシピエント）への有毒性に適合する如何なるキャリア、希釈剤若しくは賦形剤をも意味する。
【００５２】
本発明の化合物類は、癌に罹患する個体（動物及びヒトを含む哺乳動物）に投与しうる。この化合物類は、癌でない増殖性疾患、即ち、良性指標を特徴とする増殖性疾患の処置においても有用である。このような疾患は、異常に高い割合で体にて細胞が作られる「細胞増殖性（cytoproliferative）」又は「過増殖性（hyperproliferative）」としても知られる。このような疾患には、限定されるものではないが、新生児の血管腫症、二次進行性多発硬化症、慢性進行性骨髄変性（myelodegenerative）疾患、神経線維腫症、神経節神経腫症（神経節細胞腫症）、ケロイド形成、骨のパジェット病、胸部の線維嚢胞疾患、ペロニーズ＆ドュプレン（Peronies and Duputren's）線維症、再発狭窄症及び硬変（症）が含まれる。
【００５３】
この化合物類は、経口及び非経口投与を含む如何なるルート（経路）によっても投与しうる。非経口投与は、例えば、静脈内、筋肉内、動脈内、腹腔内、鼻腔内、直腸、膣内、局所又は皮下投与を含む。活性作用物質は、好ましくは、選択された投与ルート及び標準的な医薬慣例に基づいて選択される医薬上許容しうるキャリアと共に投与される。
【００５４】
活性作用物質は、医薬調製の分野にて標準的な慣例に従った投薬型に処方される。ジェナーロ・アルフォンソ（Gennaro Alphonso）編、レミントン医薬科学（Remington's Pharmaceutical Sciences）、第１８版（１９９０）［マック  パブリッシング  コーポレーション（Mack Publishing Co.）、イーストン、ペンシルバニア州］を参照されたい。好適な投薬型は、例えば、錠剤（タブレット）、カプセル、溶液、非経口溶液、トローチ、坐剤（坐薬）、又は懸濁液を含む。
【００５５】
非経口投与のために、活性作用物質は、適当なキャリア又は希釈剤、例えば、水、油（特に植物油）、エタノール、塩溶液、水性デキストロース（グルコース）及び関連する糖溶液、グリセロール、又はプロピレングリコール若しくはポリエチレングリコールなどのグリコールと混合しうる。非経口投与のための溶液類は、好ましくは、活性作用物質の水溶性塩を含む。安定化剤、抗酸化剤及び保存剤も又含みうる。好適な抗酸化剤は、亜硫酸、アスコルビン酸、クエン酸及びその塩、及びＥＤＴＡナトリウムを含む。好適な保存剤は、塩化ベンザルコニウム、メチル−又はプロピル−パラベン、及びクロルブタノールを含む。非経口投与のための組成物は、水性若しくは非水性溶液、分散液、懸濁液又は乳濁液（エマルジョン）の形をとることができる。
【００５６】
経口投与のために活性作用物質は、錠剤、カプセル、丸薬（ピル）、粉末、顆粒又は他の適当な経口投薬型の調製のための１つ以上の個体不活性成分と組み合わせうる。例えば、活性作用物質は、フィラー（充填剤）、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、溶解抑制剤、吸収促進剤、湿潤剤吸収剤又は滑剤などの、少なくとも１つの賦形薬と組み合わせることができる。錠剤の一実施態様によると、活性作用物質は、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール及び澱粉と組み合わせることができ、そして、伝統的な錠剤加工方法（tableting method）によって錠剤に形成することができる。
【００５７】
治療的利点を得るための、本発明に従った特定の化合物用量は、勿論患者の大きさ（背格好）、重さ、年齢、性別、疾患の性質及び段階、疾患の攻撃性、及び投与ルートを含む、個々の患者の特定の状況によって決定される。例えば、日々の用量として、約０．０５〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日を利用しうる。より高い又はより低い用量もまた意図される。
【００５８】
実施例
（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類の合成のための一般手順
Ａの部
メタノール（２００ｍｌ）中の水酸化ナトリウム溶液（８ｇ、０.２ｍｏｌ）に、チオグリコール酸（０.１ｍｏｌ）をゆっくり加え、形成した沈殿物を、フラスコの内容物の撹拌によって溶解する。その後、適当に置換された若しくは置換されていない塩化ベンジル（０.１ｍｏｌ）を段階的に加え、その反応混合物を２〜３時間還流する。冷ました内容物を粉砕氷上に注ぎ、希塩酸（２００ｍｌ）で中和する。生成した対応するベンジルチオ酢酸（０.１ｍｏｌ）を、１時間還流することによって、氷酢酸（１２５ｍｌ）中における３０％過酸化水素（０.１２ｍｏｌ）での酸化に供する。内容物を冷却し、粉砕氷上に注ぐ。分離した固形物を熱水から再結晶させ、対応する純粋なベンジルスルホニル酢酸を得る。
【００５９】
Ｂの部
氷酢酸（１２ｍｌ）中の、ベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）、適当に置換された若しくは置換されていない芳香族アルデヒド（１０ｍｍｏｌ）及びベンジルアミン（２００μｌ）の混合物を、２〜３時間還流する。内容物を冷却し、冷エーテル（５０ｍｌ）で処理する。沈殿した全ての生成物を濾過によって分離する。濾液を更にエーテルで希釈し、重炭酸ナトリウム飽和溶液（２０ｍｌ）、亜硫酸水素（重亜硫酸）ナトリウム飽和溶液（２０ｍｌ）、希塩酸（２０ｍｌ）、そして最後に水（３５ｍｌ）で洗浄する。脱水エーテル層のエバポレーションにより、スチリルベンジルスルホン類が固体物質として得られる。
【００６０】
下記の各例において、置換されたベンジルスルホニル酢酸は、上述の一般手順、Ａの部に従って製造した。全てのスチリルベンジルスルホン化合物類は、２−プロパノールから再結晶され、その純度は薄層クロマトグラフィーによって調べた。
【００６１】
例１
（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−トリフルオロメチルベンジルスルホン
４−トリフルオロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−フルオロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１６６〜１６８℃の表題の化合物が８２％の収率で得られた。
【００６２】
例２
（Ｅ）−４−クロロスチリル−４−トリフルオロメチルベンジルスルホン
４−トリフルオロメチルベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−クロロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１６４〜１６８℃の表題の化合物が８８％収率で得られた。
【００６３】
例３
（Ｅ）−４−ブロモスチリル−４−トリフルオロメチルベンジルスルホン
４−トリフルオロメチルベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ブロモベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１８１〜１８３℃の表題の化合物が８５％収率で得られた。
【００６４】
例４
（Ｅ）−４−フルオロスチリル−２，４−ジクロロベンジルスルホン
２，４−ジクロロベンジルスルホニル酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−フルオロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１４６〜１４８℃の表題の化合物が７８％の収率で得られた。
【００６５】
例５
（Ｅ）−４−クロロスチリル−２，４−ジクロロベンジルスルホン
２，４−ジクロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−クロロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１４８〜１４９℃の表題の化合物が８４％の収率で得られた。
【００６６】
例６
（Ｅ）−４−フルオロスチリル−３，４−ジクロロベンジルスルホン
３，４−ジクロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−フルオロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１２０〜１２２℃の表題の化合物が８２％の収率で得られた。
【００６７】
例７
（Ｅ）−４−クロロスチリル−３，４−ジクロロベンジルスルホン
３，４−ジクロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−クロロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１４９〜１５１℃の表題の化合物が８６％の収率で得られた。
【００６８】
例８
（Ｅ）−４−ブロモスチリル−３，４−ジクロロベンジルスルホン
３，４−ジクロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ブロモベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１５４〜１５５℃の表題の化合物が８４％の収率で得られた。
【００６９】
例９
（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−ニトロベンジルスルホン
４−ニトロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−フルオロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１６０〜１６１℃の表題の化合物が７６％収率で得られた。
【００７０】
例１０
（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−シアノベンジルスルホン
４−シアノベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−フルオロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１５０〜１５１℃の表題の化合物が８２％収率で得られた。
【００７１】
例１１
（Ｅ）−４−クロロスチリル−４−シアノベンジルスルホン
４−シアノベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−クロロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１７３〜１７７℃の表題の化合物が８６％の収率で得られた。
【００７２】
例１２
（Ｅ）−４−ブロモスチリル−４−シアノベンジルスルホン
４−シアノベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ブロモベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１８３〜１８４℃の表題の化合物が７７％の収率で得られた。
【００７３】
例１３
（Ｅ）−３，４−ジフルオロスチリル−４−クロロベンジルスルホン
４−クロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び３，４−ジフルオロベンズアルデヒドの溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点２０４〜２０５℃の表題の化合物が７３％の収率で得られた。
【００７４】
例１４
（Ｅ）−３−クロロ−４−フルオロスチリル−４−クロロベンジルスルホン
４−クロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び３−クロロ−４−フルオロベンズアルデヒドの溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１８１〜１８３℃の表題の化合物が７８％の収率で得られた。
【００７５】
例１５
（Ｅ）−２−クロロ−４−フルオロスチリル−４−クロロベンジルスルホン
４−クロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び２−クロロ−４−フルオロベンズアルデヒドの溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１４９〜１５０℃の表題の化合物が６８％の収率で得られた。
【００７６】
例１６
（Ｅ）−２，４−ジクロロスチリル−４−クロロベンジルスルホン
４−クロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び２，４−ジクロロベンズアルデヒドの溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１６４〜１６５℃の表題の化合物が７８％の収率で得られた。
【００７７】
例１７
（Ｅ）−３，４−ジクロロスチリル−４−クロロベンジルスルホン
４−クロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び３，４−ジクロロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１７０〜１７１℃の表題の化合物が７３％の収率で得られた。
【００７８】
例１８
（Ｅ）−２，３−ジクロロスチリル−４−クロロベンジルスルホン
４−クロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び２，３−ジクロロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１７０〜１７１℃の表題の化合物が７２％の収率で得られた。
【００７９】
例１９
（Ｅ）−４−フルオロスチリル−４−ヨードベンジルスルホン
４−ヨードベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−フルオロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１７１〜１７３℃の表題の化合物が９８％の収率で得られた。（１ＨＮＭＲ，ＣＤＣｌ３）ｄ４.２７（ｓ，ＣＨ２）、６.６０（ｄ，＝ＣＨ，Ｊ＝１５.７Ｈｚ）、７.１８−７.８０（ｍ，９Ｈ，Ａｒｏｍａ（芳香族）＋＝ＣＨ）。
【００８０】
例２０
（Ｅ）−４−ヨードスチリル−４−フルオロベンジルスルホン
４−フルオロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ヨードベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１６８〜１７０℃の表題の化合物が５８％の収率で得られた。
【００８１】
例２１
（Ｅ）−４−ヨードスチリル−４−クロロベンジルスルホン
４−クロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ヨードベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１８１〜１８２℃の表題の化合物が７０％の収率で得られた。（１ＨＮＭＲ，ＣＤＣｌ３）ｄ４.２７（ｓ，ＣＨ２）、６.６０（ｄ，＝ＣＨ，Ｊ＝１５.７Ｈｚ）、７.１８−７.８０（ｍ，９Ｈ，Ａｒｏｍａ＋＝ＣＨ）。
【００８２】
例２２
（Ｅ）−４−ヨードスチリル−４−ブロモベンジルスルホン
４−ブロモベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ヨードベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点２０１〜２０３℃の表題の化合物が７１％の収率で得られた。
【００８３】
例２３
（Ｅ）−４−クロロスチリル−４−ヨードベンジルスルホン
４−ヨードベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−クロロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点２００〜２０２℃の表題の化合物が８６％の収率で得られた。（１ＨＮＭＲ，ＣＤＣｌ３）ｄ４.２７（ｓ，ＣＨ２）、６.６０（ｄ，＝ＣＨ，Ｊ＝１５.７Ｈｚ）、７.１８−７.８０（ｍ，９Ｈ，Ａｒｏｍａ＋＝ＣＨ）。
【００８４】
例２４
（Ｅ）−４−ブロモスチリル−４−ヨードベンジルスルホン
４−ヨードベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ブロモベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点２１７〜２１９℃の表題の化合物が８８％の収率で得られた。
【００８５】
例２５
（Ｅ）−２−ニトロスチリル−４−ヨードベンジルスルホン
４−ヨードベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び２−ニトロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点２２７〜２２９℃の表題の化合物が６２％の収率で得られた。
【００８６】
例２６
（Ｅ）−４−ニトロスチリル−４−ヨードベンジルスルホン
４−ヨードベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ニトロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点２２７〜２２８℃の表題の化合物が６２％の収率で得られた。
【００８７】
例２７
（Ｅ）−４−ヨードスチリル−４−メトキシベンジルスルホン
４−メトキシベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ヨードベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点２０１〜２０３℃の表題の化合物が５６％の収率で得られた。
【００８８】
例２８
（Ｅ）−４−ヨードスチリル−２，４−ジクロロベンジルスルホン
２，４−ジクロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）及び４−ヨードベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）の溶液を上述の一般手順、Ｂの部に供した。融点１８１〜１８２℃の表題の化合物が６０％の収率で得られた。
【００８９】
下記の表１に示す追加の化合物を、上述と同様の合成方法によって調製した（Ｍ.Ｐ.＝融点）。
【００９０】
【表１】
0004596651.tif 000008
【００９１】
0004596651.tif 000009
【００９２】
胸部及び前立腺腫瘍細胞系に対する（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類の影響
Ａ．細胞
正常な線維芽細胞、及び胸部及び前立腺原発腫瘍細胞に対する（Ｅ）−スチリルベンジルスルホン類の影響を、下記の細胞系（ライン）の１種類以上を用いて試験した：胸部腫瘍細胞系ＭＣＦ−７及びＢＴ−２０；前立腺腫瘍細胞系ＤＵ−１４５；結腸直腸癌腫細胞系ＤＬＤ−１；非小細胞肺癌腫細胞系Ｈ１５７；及びＮＩＨ／３Ｔ３及びＨＦＬ細胞。ＭＣＦ−７はエストロジェン応答性の細胞系であり、一方ＢＴ−２０はエストロジェン非応答性の細胞系である。ＮＩＨ／３Ｔ３及びＨＦＬは、それぞれ正常なネズミ（murine）及びヒト線維芽細胞である。ＭＣＦ−７、ＢＴ−２０、ＤＬＤ−１及びＨ１５７は、ペニシリン及びストレプトマイシンを補充した１０％ウシ胎児（fetal bovine）血清含有ダルベッコ（Dulbecco's）修飾イーグル（Eagle's）培地（ＤＭＥＭ）中で成長させた。ＤＵ１４５は、ペニシリン及びストレプトマイシンを含む１０％ウシ胎児血清含有ＲＰＭＩ中で培養した。ＮＩＨ３Ｔ３及びＨＦＬ細胞は、ペニシリン及びストレプトマイシンを補充した１０％仔ウシ（calf）血清含有ＤＭＥＭ中で成長させた。全ての細胞培養を５％ＣＯ2の加湿雰囲気中で３７℃に維持した。
【００９３】
Ｂ．（Ｅ）−スチリルスルホン類での処理及び生育力検定
細胞を２.５ｍＭ濃度にて試験化合物で処理し、９６時間後に細胞の生育力（生存率）をトリパンブルー排除法（Trypan blue exclusion method）によって決定した。結果を表２に示す。各化合物の活性は、最低活性は５〜１０％の範囲内で、最高活性は８０％以上である、細胞誘導死の範囲（％死）として記録した。
【００９４】
正常細胞ＨＦＬ及びＮＩＨ３Ｔ３を、表２中の化合物と同一の化合物で、同一の濃度及び時間条件の下で処理した。正常細胞は５％の成長阻害を示したが、明らかな細胞死は示さなかった。
【００９５】
【表２】
0004596651.tif 000010
【００９６】
0004596651.tif 000011
【００９７】
0004596651.tif 000012
【００９８】
例６８
キーホールリンペット（笠貝）ヘモシアニンへの（Ｅ）−４−フルオロスチリル４−クロロベンジルスルホンの結合
４−クロロベンジルスルホニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）、４−フルオロベンズアルデヒド（１０ｍｍｏｌ）、氷酢酸（１５ｍｌ）及びピペリジン（０.５ｍｌ）を室温（２２℃）で磁気撹拌機上で５時間混合することによって、（Ｅ）−４−フルオロスチリル４−クロロベンジルスルホンのカルボン酸誘導体を合成した。その後、混合物をエーテルで希釈し、エーテル層を水で洗浄した。エーテル層をエバポレーションすると、半固体物質が得られ、それを２−プロパノールで処理すると白色固体が得られた。２−プロパノールで再結晶させると、２−（４−クロロベンジルスルホニル）−３−（４−フルオロフェニル）プロペン酸が白色結晶として得られた（収率３２％）。融点１１１〜１１２℃。
【００９９】
上記カルボン酸誘導体（１０ｍＭ）を、１０ｍＭの１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸（ＥＤＣ）及び１０ｍＭのＮ−ヒドロキシスクンアミド（ＮＨＳ）で処理することによって活性エステルとし、その後、５００ｍｇのＫＬＨを含むＫＬＨ水溶液１ｍｌと混合することによってＫＬＨに架橋結合させた。この混合物を室温で５〜６時間撹拌した。次いで、混合物をサイズ排除カラム（ＰＤ１０，ファルマシア（Pharmacia））に通過させることによって、ＫＬＨ結合物（conjugate）を分離した。その後、この結合物をウサギに注射し、抗体を産生させた。
【０１００】
合成、調製及び分析の手順に関して引用した全ての参考文献は、参照によって本明細書に援用する。
【０１０１】
本発明は、本発明の精神又は基本的な特質から逸脱することなく、他の特定の態様にて実施され得る。従って、本発明の範囲を示すためには、上述の詳細な説明より寧ろ添付の特許請求の範囲を参照されたい。