(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：Ｍ1−Ｌ−Ｍ2で示される化合物、または薬剤に許容されるその塩を含むイムノフィリンの多量体化剤。但し、Ｍ1およびＭ2はそれぞれ独立して下記より選ばれたモノマーであり、
【化１】
0004470226.tif 000026
上記式中、
Ｘ＝Ｏ、ＮＨまたはＣＨ2；
Ｙ＝Ｏ、ＮＨもしくはＮＲ3であるか、またはＹはＲ2から原子９への単なる共有結合を表し；
Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3はそれぞれ独立してC1〜C20アルキルまたはアリールであり；
ここで、アルキルは、飽和または不飽和の直鎖、分岐鎖、環式、または多環式脂肪族炭化水素基を意味し、これらは１または２以上の炭素原子の代わりに酸素、イオウもしくは窒素を含有していてもよく、また場合によりヒドロキシ、C1〜C8アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイル、アミノ、N-アシルアミノ、ケトン、ハロゲン、シアノ、カルボキシル、およびアリールよりなる群から選ばれた１または２以上の官能基で置換されていてもよく；
アリールは、環式、複素環式、多環式、または複素多環式の不飽和C3〜C14基を意味し、これらはヒドロキシ、C1〜C8アルコキシ、C1〜C8分岐鎖もしくは直鎖アルキル、アシルオキシ、カルバモイル、アミノ、N-アシルアミノ、ニトロ、ハロゲン、トリフルオロメチル、シアノ、およびカルボキシルよりなる群から選ばれた１〜５個の基でさらに置換されていてもよく；
Ｌは、モノマーＭ1とＭ2中のＲ1とＲ2のいずれかへの共有結合によってモノマーＭ1とＭ2とを結合させるリンカーであり、Ｒ1とＲ2のいずれへ結合するかはＭ1とＭ2において同じである必要はなく；ＬはC2〜C20アルキル、アリール、またはジアルキルアリール基(ここでアルキルおよびアリールは上記の通り)である。
【請求項２】
前記化合物が、次式から選ばれたいずれかの式で示される、請求項１記載の多量体化剤。
【化２】
0004470226.tif 000027
式中、Ｘ’、Ｙ’、Ｒ1’およびＲ2’はそれぞれＸ、Ｙ、Ｒ1およびＲ2と同じ意味であり、ｎおよびｎ’は２である。
【請求項３】
各−ＹＲ2が炭素数１〜８の直鎖、分岐鎖または環式脂肪族基であるＭ1またはＭ2を含有する、請求項１または２に記載の多量体化剤。
【請求項４】
−ＹＲ2が、エチル、イソプロピル、tert−ブチル、tert−アミルまたはシクロヘキシルであるＭ1またはＭ2を含有する、請求項３記載の多量体化剤。
【請求項５】
−ＹＲ2が、ヒドロキシ、C1〜C8アルコキシ、C1〜C8分岐鎖もしくは直鎖アルキル、アシルオキシ、カルバモイル、アミノ、N-アシルアミノ、ニトロ、ハロゲン、トリフルオロメチル、シアノ、およびカルボキシルよりなる群から選ばれた１〜５個の基でさらに置換されていてもよいアリール基を含むＭ1またはＭ2を含有する、請求項１または２に記載の多量体化剤。
【請求項６】
−ＸＲ1が次式で示される基である、請求項３記載の多量体化剤。
【化３】
0004470226.tif 000028
上記式中、Ｒ4はフェニル、置換フェニル、またはヘテロ芳香族基であり；Ｒ5は場合により置換されていてもよい炭素数２〜８の直鎖、分岐鎖もしくは環式脂肪族基であり；Ｒ6は反応性官能基Ｒ7を有する芳香族またはヘテロ芳香族基であり、Ｒ7は−ＣＯＯＨ、−ＣＨＯ、Ｘ’Ｈ、またはＸ’Ｒ8でよく、ここでＸ’はＯ、Ｓ、または置換もしくは非置換のＮＨであり、Ｒ8は−(ＣＨ2)z−ＣＯＯＨ(ｚは１〜４の整数)である。
【請求項７】
次式で示されるＭ1またはＭ2を含有する、請求項６記載の多量体化剤。
【化４】
0004470226.tif 000029
式中、Arはフェニル、3,4−ジメトキシフェニル、3,4−(ＯＣＨ2Ｏ)-フェニル、3,4,5−トリメトキシフェニル、３−ピリジル、または３−インドリルである。
【請求項８】
ＦＫＢＰ組み換え体タンパク質を含有する遺伝子操作された細胞を含んでいる生体に、該組み換え体タンパク質を多量体化させると共にＦＫＢＰ系組み換え体タンパク質のリガンド媒介多量体化に基づく生物スイッチを活性化させるのに有効な量で投与するための薬剤の製造への、請求項１〜７のいずれか１項に記載の多量体化剤の使用。
【請求項９】
ＦＫＢＰ組み換え体タンパク質を含有する、生体外で培養中の遺伝子操作された細胞において、ＦＫＢＰ系組み換え体タンパク質のリガンド媒介多量体化に基づく生物スイッチを活性化させる方法であって、前記細胞に請求項１〜７のいずれか１項に記載の多量体化剤を該組み換え体タンパク質の多量体化に有効な量で投与することからなる方法。
【発明の詳細な説明】
発明の背景
イムノフィリン系の組み換え体タンパク質のリガンド媒介多量体化(ligand-medidated multimerization)に基づく生物スイッチの設計、製造および用途の態様は、Spencer等のScience 262:1019-1024(1993年11月12日)および国際特許出願PCT/US94/01660およびPCT/US94/08008(それぞれの全内容を参照としてここに援用する)に開示されている。多量体化剤の１種に、大環状天然物のFK506が合成リンカー部分を介して互いに共有結合した二量体に基づくものがある。得られる二量体(”FK1012”分子)は、イムノフィリン分子に対する高い結合親和性を特徴とする。しかし、これは大きく複雑な分子であり、製造に不便なことがある。イムノフィリン部分を含むキメラタンパク質を多量体化するための新規な方法および材料であって、多量体化しようとするイムノフィリンに対する高い結合親和性を保持するが、製造がより簡便で構造変化をより容易に受ける、より小さく、より単純な構造の多量体化剤を用いた方法および材料が望ましいであろう。
発明の説明
本発明は、N-オキサリル-ピペコリルおよびN-オキサリル-プロリル・リガンド部分に基づいたイムノフィリン類〔天然のイムノフィリンタンパク質ならびにイムノフィリン由来のドメイン(領域)を含んでいるキメラタンパク質を包含する〕を多量体化するための新規な方法および材料を提供する。(ここで用いた、「多量体化」なる用語は、二量体化とそれより高次の多量体化を包含する。)
本発明は、式Ｉで示されるイムノフィリン多量体化剤および薬学的に許容しうるその塩に関する。
0004470226.tif 000002
上記式中、M1およびM2はそれぞれ独立して式IIで示される部分である。
0004470226.tif 000003
上記式中、
ｎ＝１または２；
Ｘ＝０,NHまたはCH2；
Ｙ＝０,NH,NR3であるか、R2から原子９への直接結合、即ち、共有結合を表し；
R1、R2、及びR3は、それぞれ独立してC1〜C20アルキルまたはアリールであり；
ここで、アルキルとは、飽和および不飽和の両方の直鎖、分岐、環式、または多環式脂肪族炭化水素を含み、これらは１または２以上の炭素原子の代わりに酸素、イオウもしくは窒素を含有してもよく、また場合によっては、ヒドロキシ、C1〜C8アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイル、アミノ、N-アシルアミノ、ケトン、ハロゲン、シアノ、カルボキシル、およびアリール(特に記載しない限り、アルキル、アルコキシおよびアシル基は１〜６個の隣接する脂肪族炭素原子を含有するのが好ましい)よりなる群から選ばれた１または２以上の官能基で置換されていてもよく；
アリールとは、安定な環式、複素環式、多環式および複素多環式の不飽和C3〜C14部分を含み、例えば(これらに限定されないが)、フェニル、ビフェニル、ナフチル、ピリジル、フリル、チオフェニル、イミダゾイル、ピリミジニル、およびオキサゾイルがあり；該部分は、ヒドロキシ、C1〜C8アルコキシ、C1〜C8分岐もしくは直鎖アルキル、アシルオキシ、カルバモイル、アミノ、N-アシルアミノ、ニトロ、ハロゲン、トリフルオロメチル、シアノ、およびカルボキシルよりなる群から選ばれた１〜５個の基でさらに置換されていてもよく[例えば、Katritzkyの複素環化学便覧(Handbook of Heterocyclic Chemistry)参照]；
R1およびR2は、場合により、互いに結合、即ち共有結合して、大環状構造を形成してもよく(式IIに破線で示すように)；そして
Ｌは、R1またはR2への共有結合によってモノマーM1とモノマーM2とを共有結合で結合するリンカー部分であり、R1とR2のいずれへ結合するかはM1とM2において必ずしも同じでなくてよい。
リンカー部分(Ｌ)は、イムノフィリンタンパク質への結合に必須な要素を含有する必要はなく、非常に広範な種類の構造から選択すればよい。好ましいリンカー部分としては、C2〜C20アルキル、アリール、またはジアルキルアリール構造(ここで、アルキルおよびアリールは上記の通りである)が挙げられる。リンカー部分は好都合には、エーテル、アミド、尿素、カルバメートおよびエステルなどの官能基を介して、或いはアルキル−アルキル、アルキル−アリール、またはアリール−アリールの炭素−炭素結合を介して、モノマーM1とモノマーM2とに結合させることができる。さらに、リンカー部分は、式Ｉの多量体化剤の薬動態学的性質を高めるように最適化(例えば、鎖長および／または置換基の変化により)してもよい。
本発明化合物の１例において、-YR2は、炭素数１〜８の直鎖、分岐もしくは環式脂肪族部分(例えば、エチル、イソプロピル、tert-ブチル、tert-アミルおよびシクロヘキシルを含む)であり、-XR1は次式で示される部分である。
0004470226.tif 000004
上記式中、R4は芳香族もしくはヘテロ芳香族基、例えばフェニル、置換フェニル、インドリル、ピリジル等であり；R5は場合により置換されていてもよい炭素数２〜８の直鎖、分岐もしくは環式脂肪族部分であり、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル部分等を含み；R6はリンカー部分との共有結合が可能な反応性官能基R7を有する芳香族もしくはヘテロ芳香族部分である。R7は-COOH、-CHO、-XHまたはXR8でよく、ただしXはO、SまたはNH(これは場合により炭素数１〜８のアルキル基などの任意の置換基を有していてもよい)であり、R8は-(CH2)z-COOH(zは１〜４の整数)である。
次式は本発明化合物の３種類の典型的例を示すものであるが、これらに限定されるものではない：
0004470226.tif 000005
本発明の多量体化剤は好ましくは、イムノフィリンおよびカルシニューリン双方との三元複合体、またはイムノフィリンおよびFRAPとの三元複合体(Brown等、Nature,1994,369,756-758)に関与することができず、従って、FK506やラパマイシンのような免疫抑制能を有していない。さらに、この多量体化剤は、生理学的に許容でき(即ち、使用対象の細胞や生物に対する過度の毒性を持たず)、動物に経口投与でき(即ち、動物全般の遺伝子治療を含む用途において経口で活性であり)、および／または特定の用途に対して必要な場合に、細胞膜その他の膜を通過できる、ことがしばしば好ましいであろう。
本発明の多量体化剤は、PCT/US94/01617及びPCT/US94/08008に記載されたように、例えば、培地で増殖中、または遺伝子治療用途で行われるように完全な(まるごとの)生物体内で増殖中の操作細胞(engineered cells)において、所望の遺伝子の転写を活性化し、アポトーシスを作動させ、または他の生物的事象を誘発させるために使用できる。操作細胞は、FKBPドメインのような１または２以上のイムノフィリンドメインを含んでいるタンパク質をコードするＤＮＡを含み、かつ発現させることができる。但し、このドメインは、モノマーＭ(式II)に、または式IIやここで開示する多数の例に示されるようなモノマーを含む多量体化剤に、結合することができるものである。このような用途において、本発明の多量体化剤は、対応するリガンド結合性ドメインを含むタンパク質を多量体化するのに有効な量で(転写、アポトーシスまたはこの方法で誘発される他の生物的過程を監視することにより観察できる)、場合に応じて、操作細胞の培養物または操作細胞を含む生物体に投与される。完全な生物体に投与する場合は、多量体化剤を、この多量体化剤を、許容しうる獣医学的または薬学的希釈剤および／または賦形剤と共に含有する組成物として投与してもよい。ここで開示したモノマーは、ここに詳細に開示するように二量体化剤の合成に有用であるが、イムノフィリンまたは変性イムノフィリンに対するその結合親和性の観点からそれ自体でも有用である。これらのモノマーは、多量体化剤の効果を逆転もしくは阻止する(即ち、多量体化を防止、阻害または中断させる)のに有効な量で、操作細胞に、または操作細胞を含んでいる生物体に(完全な動物に投与する場合は好ましくは上記のように組成物で)投与することができる。
本発明の化合物は、N-オキサリル-ピペコリル、N-オキサリル-プロリルおよび関連モノマーの合成のための既知の方法を適用して製造することができる。例えば、Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938;Holt等，Biomed.Chem.Lett.,1993,4,315-320;Luengo等，Biomed.Chem.Lett.,1993,4,321-324;Yamashita等，Biomed.Chem.Lett.,1993,4,325-328;前掲のSpencer等の文献；PCT/US94/01617およびPCT/US94/08008を参照。また、欧州公開0 455 427 A1；欧州公開0 465 426 A1；米国特許第5,023,263号および国際公開第92/00278号も参照。
例えば、下記の反応式に示されるように多数の合成経路を経て、及び各種の順序で、モノマーを組み立て、二量体化すればよい。
0004470226.tif 000006
Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938参照。
0004470226.tif 000007
Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938参照。
0004470226.tif 000008
Yamashita等，Biomed.Chem.Lett.,1993,4,325-328参照。
0004470226.tif 000009
Yamashita等，Biomed.Chem.Lett.,1993,4,325-328参照。
ビス−ウィッティッヒ試薬は文献で周知である。例えばPaquette等，J.Amer.Chem.Soc.,1985,107,6598;Nicolaides,Synthesis,1977,127を参照。
0004470226.tif 000010
Holt等、J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938参照。
ビス−グリニャール試薬もまた、文献で周知である。Babudri等，J.Orgmet.Chem.,1991,405,53-58;およびFujisawa等，Bull.Chem.Soc.Jpn.,1983,56,345を参照。
ヘテロ二量体(即ち、M1≠M2の二量体)は、各モノマーをリンカーに段階的に結合させることにより製造できる。結合方法は各モノマーごとに異なっていてもよく、リンカーはモノマーの段階的結合を容易にするように、非対称のものでも、および／または異なる官能基を有していてもよい。例えば、次の反応式はヘテロ二量体の生成を例示する。
0004470226.tif 000011
本発明には、１〜４個のリンカー部分を用いて３〜５個の式IIのモノマーを結合させた式Ｉの化合物の多量体変更例も包含される。このような多量体化合物の例は、次の式IIIおよび式IVで示されるが、これらに限定されるものではない。
0004470226.tif 000012
突起(Bumps)
本発明はまた、FKBP12やその他の天然イムノフィリンへの結合を低下させ、好ましくは実質的に阻止するが、変異FKBPには結合する置換基(”突起”)を含有する化合物も包含する。変異FKBPは、PCT/US94/01617およびPCT/US94/08008に記載されているように製造され、選択した多量体化化合物への結合性に対してスクリーニグすることができる。このような突起を含有する多量体化剤により、FKBP12の固有のプール(集合体)による妨害を受けずに、変異FKBPへの、または操作FKBPドメインを含有するキメラへの、より選択性の高い結合が可能となり、これはある種の用途、特に完全な生物体内での使用に望ましい。好ましくは、本発明の突起を含むモノマーおよびその関連の多量体化剤は、FKBP12への結合能、および／またはFKBP12のロタマーゼ活性の阻害能が、FK506、FK520またはラパマイシンのいずれよりも少なくとも約一桁低い。このような分析法は当分野では周知である。例えば、上記のHolt等，J.Amer.Chem.Soc.を参照。阻害活性の低下の程度は、約二桁と大きくなることがあり、場合によっては約三桁を超える大きさになることもある。有用な突起置換基としては、これらに限られないが、アルキル、アリール、-O-アルキル、-O-アリール、置換もしくは非置換アミン、アミド、カルバミドおよび尿素(但し、アルキルおよびアリールは上で定義した通り)が挙げられる。PCT/US94/01617およびPCT/US94/08008を参照。このような置換基を含有するモノマーは、上述したリンカーおよび手法により二量体化でき、例えば下記の合成経路に示される。
0004470226.tif 000013
多数の置換プロリンおよびピペコリン酸誘導体が文献に記載されてきた。上記に類似した合成方法を用いて、置換プロリンおよびピペコリン酸誘導体を利用し、次に例示するように、C-2からC-9の位置に「突起」を持つモノマーを調製することができる。
0004470226.tif 000014
置換プロリンおよびピペコリン酸の代表例は、下記を参照。
Chung等，J.Org.Chem.,1990,55,270;Shuman等，J.Org.Chem.,1990,55,738;Hanson等，Tetrahedron Lett.,1989,30,5751;Bailey等，Tetrahedron Lett.,1989,30,6781。
本発明はまた、本来のFKBPに比べて変異FKBPに対する結合能を高める構造要素または置換基を含有する化合物も包含する。好ましくは、このような化合物は、FKBP12への結合能より変異FKBPへの結合能が少なくとも一桁の大きさで高く、場合によっては、変異FKBPへの結合能がFKBP12への結合能より三桁以上も高いであろう。例えば、変異FKBPへの結合能のこのような向上は、カルボン酸またはアミンを含有する化合物により達成することができる。この場合、変異FKBPは、相補性の基(ヒスチジン／アルギニンまたはアスパルテート／グルタメート)を適当な位置に含有していて、該化合物と変異FKBPとの間に塩橋を形成する。
本発明の種々の多量体化剤またはそれらの成分モノマーのFKBPもしくは他のイムノフィリンタンパク質に対する結合親和性は、FKBPの場合に用いられる慣用の方法を適用して測定することができる。例えば、実験者は、本発明の化合物が、既知のリガンドの対象タンパク質への結合と競合する能力を測定することができる。例、Sierkierka等，1989,Nature 341,755-757を参照(試験化合物は標識FK506誘導体のFKBPへの結合と競合する)。
多量体化剤のキメラタンパク質を多量体化する能力は、細胞系検定において、この多量体化により引き起こされる事象の発生を測定することにより測定することができる。例えば、１または２以上のイムノフィリン由来リガンド結合ドメインと、多量体化により生物学的反応を起こしうる１または２以上のエフェクタードメインとを含むキメラタンパク質をコードするＤＮＡを含み、かつこのＤＮＡを発現しうる細胞を用いることができる。キメラタンパク質の多量体化に応答する調節要素(即ち、プロモーター)の転写制御下でリポーター遺伝子をさらに含んでいる細胞を用いるのが好ましい。例示の成分の設計および調製と、こうして操作する細胞におけるその使用は、PCT/US94/01617に記載されている。細胞は培養で増殖および維持する。多量体化剤を培地に添加し、リポーター遺伝子産物の存在を測定する。陽性の結果、すなわち多量体化は、リポーター遺伝子産物の出現により観察されるようにリポーター遺伝子の転写に相関している。
実施例
合成の概要、第Ｉ部
官能基を含有するキラルアルコールの合成を次のように行った。非置換のキラルアルコール１を、Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938に報告の方法に従って3-ヒドロキシベンズアルデヒドから５工程で調製した。
0004470226.tif 000015
１当量のNaHの存在下で１を3-N-Boc-アミノプロピルブロマイドでアルキル化すると、２が好収率で得られた。同様に、１をブロモ酢酸tert-ブチルでアルキル化して３を得た。
0004470226.tif 000016
左側のフェニル環に置換基を有するキラルアルコールは、次式に示すようにカルコン化学を利用して調製した。
0004470226.tif 000017
ピリジンまたはインドールを含有するキラルアルコールは、上と同様のカルコン化学を用いるが、次に示すように多少変更して調製した：
0004470226.tif 000018
カルボン酸23は、L-ピペコリン酸から、Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938による文献記載の方法に従って４工程で調製した。
0004470226.tif 000019
DCC/DMAPを用いて23を２と結合させ、次いでトリフロオロ酢酸でBoc-基を除去すると、アミンモノマー24が好収率で得られる。同様にしてカルボン酸モノマー25〜30を調製した。
0004470226.tif 000020
次に、得られたモノマー24および25〜30を用いて、種々の二量体を合成した。アミン24をジスクシンイミジルジカルボンキシレートで処理して、二量体31〜34、37および38を得た。24をベンゼン-1,3-ジスルホニルクロリドと反応させて、36を得た。24をトリエチレングリコールビス(クロロホルメート)と結合させて39を得た。化合物34をヨウ化メチル処理すると定量的収率で35が得られた。
0004470226.tif 000021
酸25〜30を、それらの活性化スクシンイミジルエステルに変換し、次いで種々のジアミンと結合させると、二量体40〜63が得られた(RaおよびRb基は種々のモノマーMを表す)。
0004470226.tif 000022
40の母体構造に基づいているが、特定のリンカーおよびAr部分を含有する化合物64〜67は、ここに記載の方法を適用して調製した。この４種類の化合物の構造をＮＭＲおよびＭＳ分光分析により確認した。この４種類はすべて下記に説明するような細胞系転写検定法において活性であることが見出された。
0004470226.tif 000023
合成の詳細
一般的方法
陽子および炭素磁気共鳴スペクトル(1H,13C NMR)は、ブルカー(Bruker)ARX-300分光計に記録した。化学シフトはMe4Si(δ 0.0)に対するppm(δ)で報告する。試薬はすべて分析級であり、納入されたままで使用した。無水溶媒類は、アルドリッチ(Aldrich)社から確実に密封されたビンで購入した。クロマトグラフィーは、TLC用シリカゲル60G(メルク)と、移動相として記載した溶媒とを使用した短カラムクロマトグラフィーである。HPLCは、4.6mm×250mmのダイセル「キラセルOD」カラムと、85：15のヘキサン−プロパノールの移動相(特に記載しない場合)とを使用し、流量１ml／分で、210nmでのUV検出により行った。融点は未補正の値である。
官能基含有キラルアルコールの調製
(1R)-3-フェニル-1-(3-(3-tert-ブチロキシカルバミルプロピル)オキシフェニル)プロパン-1-オール(2)
(1R)-3-フェニル-1-(3-ヒドロキシフェニル)プロパン-1-オール(１、98％ee、1.47g、6.45mmol、Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938に報告された方法に従って、3-ヒドロキシベンズアルデヒドから５工程で調製)を、DMF(30mL)中のNaH(鉱油中の60％分散液、310mg、7.74mmol)懸濁液に添加した。次いで、3-tert-ブチロキシカルバミルプロピルブロマイド(3.07g、12.9mmol)を添加し、得られた混合液を窒素下40℃で一晩攪拌した。水(50mL)を加えて反応を停止させ、混合物をEtOAc(250mL)で抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、減圧濃縮した。得られた混合物をEt2O(150mL)に再溶解し、2N NaOH(2×100mL)で洗浄して未反応の１(生成物２と同じRf値をもつ)を除去した。次いで有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、減圧濃縮した。クロマトグラフィー(シリカゲル、30％EtOAc／ヘキサン)により無色油状物として２を得た(1.9ｇ、収率77％、キラセルHPLCで96％ee：保持時間は(1R)-鏡像異性体が19.0分、(1S)-鏡像異性体が15.7分)：1H NMR(CDCl3,300MHz)7.40-6.85(m,9H),4.76(t,J=5.3Hz,1H),4.12(t,J=5.9Hz,2H),3.42(t,J=6.3Hz,2H),2.80(m,2H),2.10-1.85(m,6H),1.53(s,9H);13C NMR(CDCl3,75MHz)159.4,156.4,146.8,142.1,129.9,128.83,128.78,126.2,118.8,114.0,112.4,74.2,66.1,40.8,32.4,30.0,28.2。MS(FAB):(M+Na)+408。
(1R)-3-フェニル-1-(3-(2-tert-ブチロキシ-2-オキソエチル)オキシフェニル)プロパン-1-オ−ル(3)
(1R)-3-フェニル-1-(3-ヒドロキシフェニル)プロパン-1-オール(１、98％ee、1.7g、7.46mmol、Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938に報告の方法に従って3-ヒドロキシベンズアルデヒドから５工程で調製)を、DMF(50mL)中のNaH(鉱油中の60％分散液、358mg、8.95mmol)懸濁液に添加した。ブロモ酢酸tert-ブチル(2.4mL、14.9mmol)を次いで添加し、得られた混合物を窒素下40℃で一晩攪拌した。水(50mL)で反応を停止し、混合物をEtOAc(250mL)で抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、減圧濃縮した。クロマトグラフィー(シリカゲル、20％EtOAc／ヘキサン)により無色油状物として３を得た(1.64ｇ、収率64％、キラセルHPLCで96％ee：保持時間は(1R)-鏡像異性体が42.2分、(1S)-鏡像異性体は30.6分)：1H NMR(CDCl3,300MHz)7.22-6.71(m,9H),4.58(t,1H),4.44(s,2H),2.68-2.59(m,2H),2.05-1.93(m,2H),1.41(s,9H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)168.4,158.6,146.8,142.1,130.0,128.8,128.7,126.2,119.5,114.1,112.6,82.7,74.1,66.1,40.8,32.4,28.4。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値365.1729、実測値365.1721。
3,4-ジメトキシ-3’-ヒドロキシカルコン(4)
3,4-ジメトキシベンズアルデヒド(16.6ｇ、100mmol)のEtOH(75mL)溶液を3-ヒドロキシアセトフェノン(13.6ｇ、100mmol)で処理し、得られた溶液を氷浴中で0℃に冷却した。KOH(28ｇ、500mmol)水溶液200mLをゆっくり添加し、得られた鮮赤色溶液を室温で一晩(16時間)攪拌し続けた。次いで混合物を濃HClの滴下によりpH5の酸性にし、得られた懸濁液をEtOAc(２×200mL)で抽出した。有機抽出液を合わせて、飽和NaCl溶液(２×100mL)で洗浄し、MgSO4で乾燥し、濾過し、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、30％→50％EtOAc／ヘキサン)処理して、粗生成物を得た。この粗製固体をEtOAcから晶析し、13.9ｇ(49％)の黄色固体を得た：IR(単味)3420,1650,1575,1510,1265,1140cm-1；1H NMR(CDCl3,300MHz)7.80(d,J=15.6Hz,1H),7.68(s,1H),7.59(d,J=7.7Hz,1H),7.42-7.36(m,2H),7.24(dd,J=8.3,1.8Hz,1H),7.16-7.13(m,2H),6.90(d,J=8.3Hz,1H),6.82(s,1H),3.95(s,3H),3.94(s,3H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)191.3,157.0,152.0,149.7,146.1,140.1,130.2,128.8,123.8,121.2,120.7,120.3,115.7,11.6,110.7,56.4。
3,4,5-トリメトキシ-3’-ヒドロキシカルコン(5)
3,4,5-トリメトキシベンズアルデヒドから(4)と同様に調製。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、30％→50％EtOAc／ヘキサン)により2.61ｇ(17％)の黄色固体を得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)9.80(s,1H),7.82(d,J=15.6Hz,1H),7.70-7.63(m,2H),7.48(s,1H),7.39(略 t,J=7.9Hz,1H),7.23(s,2H),7.08(d,J=7.6Hz,1H),3.87(s,6H),3.73(s,3H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)189.5,158.1,153.5,144.7,140.1,139.5,130.6,130.1,121.8,120.5,119.9,115.0,106.9,60.5,56.5。
3’-ヒドロキシ-3,4-メチレンジオキシカルコン(6)
ピペロナールから(4)と同様に調製。粗製固体(26.7ｇ、100％)を、クロマトグラフィーによる精製または同定を行わずに次の反応過程に直接送った。
3-(3,4-ジメトキシフェニル)-1-(3-ヒドロキシフェニル)プロパン-1-オン(7)
EtOAc:アセトン(1:1)混合物(40mL)中の3,4-ジメトキシ-3’-ヒドロキシカルコン(4)(10ｇ、35.2mmol)の溶液を、10％Pd担持炭素(500mg)で処理し、この混合物を圧力40〜50psiのH2で３時間水素化した。反応混合物を、アセトンを用いてセライトのパッドに通して濾過し、濾液を濃縮して粗製固体を得た。この粗製固体をEtOAcを用いて摩砕し、濾過して、7.83ｇ(78％)の白色固体を得た。これは1H NMR分析でほぼ90％の純度のものであることが分かった：1H NMR(CDCl3,300MHz)7.56(s,1H),7.55(d,J=2.2Hz,1H),7.53-7.33(m,1H),7.10(dd,J=7.9,2.4Hz,1H),6.80-7.79(m,3H),6.61(s,1H),3.86(s,3H),3.86(s,3H),3.28(t,J=7.9Hz,2H),3.02(t,J=7.9Hz,2H),；13C NMR(CDCl3,75MHz)200.6,156.9,149.3,147.8,138.6,134.2,130.3,121.2,120.6,115.0,112.4,111.8,56.3,41.2,30.3。
1-(3-ヒドロキシフェニル)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル)プロパン-1-オン(8)
3,4,5-トリメトキシ-3’-ヒドロキシカルコン(5)から(7)と同様にして調製。粗生成物のフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、40％→50％EtOAc／ヘキサン)により1.37ｇ(68％)の白色固体を得た：IR(単味)3395,2940,1680,1590,1505,1455,1240,1125cm-1；1H NMR(CDCl3,300MHz)7.54-7.52(m,2H),7.34(略 t,J=8.1Hz,1H),7.10(dd,J=7.9,2.2Hz,1H),6.48(s,2H),6.08(s,1H),3.85(s,9H)3.30(t,J=7.3Hz,2H),3.02(t,J=7.7Hz,2H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)200.0,156.7,153.6,138.7,137.4,136.7,130.3,120.9,115.0,105.8,61.3,56.5,41.0,31.0。
1-(3-ヒドロキシフェニル)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル)プロパン-1-オン(9)
3’-ヒドロキシ-3,4-メチレンジオキシカルコン(6)から(7)と同様にして調製。粗生成物をEtOAc／ヘキサンから晶析して4.10ｇ(41％)の白色固体を得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)9.73(s,1H),7.43(d,J=7.8Hz,1H),7.34-7.29(m,2H),7.02(dd,J=8.0Hz,1H),6.88(m,1H),6.80(d,J=7.9Hz,1H),6.71(d,J=7.9Hz,1H),5.96(s,2H),3.26(t,J=7.6Hz,2H),2.84(t,J=7.5Hz,2H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)199.4,158.0,147.5,145.7,138.4,135.4,130.1,121.5,120.5,119.3,114.4,109.2,108.4,101.0,40.2,29.7。
1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4-ジメトキシフェニル)プロパン-1-オン(10)
無水DMF(10mL)中のNaH(279mg、6.98mmol)の60％鉱油懸濁液を氷浴で０℃に冷却し、固体の3-(3,4-ジメトキシフェニル)-1-(3-ヒドロキシフェニル)プロパン-1-オン(7)(2ｇ、6.98mmol)を一度に添加した。得られた黄色溶液を５分間攪拌した後、ブロモ酢酸tert-ブチル(1.18mL、7.33mmol)を添加した。攪拌を０℃で15分間続けた後、反応混合物を室温に昇温させ、ジエチルエーテル(50mL)と水(50mL)との間で分配した。有機層を飽和NaCl溶液(２×50mL)で洗浄し、MgSO4で乾燥し、濾過し、蒸発させ、フラュシュクロマトグラフィー処理(シリカゲル、30％EtOAc／ヘキサン)して、2.30ｇ(82％)の無色透明油状物を得た：IR(単味)2980,1750,1685,1590,1515,1260,1155cm-1；1H NMR(CDCl3,300MHz)7.59(d,J=7.7Hz,1H),7.49(s,1H),7.39(appt,J=8.0Hz,1H),7.14(dd,J=8.2,2.6Hz,1H),6.81-6.79(m,3H),4.58(s,2H),3.89(s,3H),3.88(s,3H),3.28(t,J=7.3Hz,2H),3.02(t,J=7.8Hz,2H),1.51(s,9H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)199.2,168.0,158.6,149.3,147.8,138.7,134.2,130.1,121.8,120.6,113.5,112.2,111.8,108.1,83.0,66.1,56.2,41.1,30.2,28.4。
1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル)プロパン-1-オン(11)
1-(3-ヒドロキシフェニル)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル)プロパン-1-オン(8)から(10)と同様にして調製。粗生成物のフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、30％→40％EtOAc／ヘキサン)により1.30ｇ(96％)の無色透明油状物を得た：IR(単味)2955,1750,1684,1590,1455,1230,1150,1125cm-1；1H NMR(CDCl3,300MHz)7.59(d,J=7.7Hz,1H),7.49(s,1H),7.39(略 t,J=7.9Hz,1H),7.14(dd,J=8.2,2.6Hz,1H),6.47(s,2H),4.58(s,2H),3.86(s,6H),3.84(s,3H),3.28(t,J=7.3Hz,2H),3.01(t,J=7.8Hz,2H),1.50(s,9H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)199.1,168.0,158.5,153.6,138.6,137.4,136.8,130.1,121.8,120.4,113.6,105.8,83.0,66.1,61.2,56.5,41.0,31.0,28.4。
1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル)プロパン-1-オン(12)
1-(3-ヒドロキシフェニル)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル)プロパン-1-オン(9)から(10)と同様にして調製。粗生成物のフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、20％→30％EtOAc／ヘキサン)により5.04ｇ(89％)の無色透明油状物を得た：IR(単味)2980,1750,1685,1490,1445,1245,1155,1040cm-1；1H NMR(CDCl3,300MHz)7.58(dd,J=6.7,1.1Hz,1H),7.48(s,1H),7.39(略 t,J=8.0Hz,1H),7.17-7.13(m,1H),6.89-6.69(m,4H),5.94(s,2H),4.58(s,2H),3.25(t,J=7.8Hz,2H),2.99(t,J=7.8Hz,2H),1.51(s,9H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)199.0,168.0,158.5,148.1,146.3,138.6,135.4,130.1,121.8,121.5,120.6,113.4,109.3,108.7,101.2,83.0,66.1,41.1,20.3,28.4。
(R)1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4-ジメトキシフェニル)プロパン-1-オール(13)
−20℃の1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4-ジメトキシフェニル)プロパン-1-オン(10)(3.0ｇ、7.49mmol)のTHF(5mL)溶液を、−20℃の(+)-B-クロロジイソピノカンフェニルボラン(2.9ｇ、8.99mmol)のTHF(10mL)溶液で処理した。得られた混合液を−20℃の冷凍庫内に48時間静置した後、この混合物を蒸発させ、ジエチルエーテル(25mL)、次いでジエタノールアミン(8mL)で処理した。得られた粘稠な混合物を室温で３時間攪拌した後、ジエチルエーテルを用いてセライトのパッドに通して濾過した。得られた曇った濾液を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、30％→40％EtOAc／ヘキサン)処理して、2.72ｇ(90％)の無色透明の油状物を得た(キラセルHPLC、25％i-PrOH／ヘキサンで95％ee：保持時間はR-鏡像異性体が44.4分、S-鏡像異性体が35.7分)：IR(単味)3525,2935,1750,1515,1150cm-1；1H NMR(CDCl3,300MHz)7.30-7.25(m,2H),6.99-6.73(m,5H),4.68(m,1H),4.53(s,2H),3.88(s,3H),3.87(s,3H),2.72-2.63(m,2H),2.12-1.97(m,2H),1.50(s,9H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)168.4,158.5,149.3,147.6,146.9,134.8,130.0,120.6,119.5,114.0,112.6,112.2,111.7,82.7,74.1,66.1,56.3,56.2,41.0,32.0,28.4。
(1R)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル)-1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-プロパン-1-オール(14)
窒素下で−23℃の化合物11(1.30ｇ、3.0mmol)のTHF(5mL)溶液に、(+)-B-クロロジイソピノカンフェニルボラン(1.64ｇ、5.1mmol)のTHF(10mL)冷(−23℃)溶液を添加した。この混合物を冷凍庫内に３日間静置した。次いで、この混合物を減圧濃縮し、残渣をジエチルエーテル(60mL)に再溶解した。このエーテル溶液を室温で激しく攪拌しながらジエタノールアミン(0.86mL、9.0mmol)で３時間処理した。析出した白色沈殿を濾去し、濾液を減圧濃縮した。シリカクロマトグラフィー(50〜100％EtOAc／ヘキサン)により1.3ｇ(99％)の無色油状物を得た(98.1％ee、キラセルHPLC,20％i-PrOH／ヘキサンによる、保持時間はR-鏡像異性体が46.4分、S-鏡像異性体が40.0分)：1H NMR(CDCl3,300MHz)7.28(t,J=7.8Hz,1H),6.96(m,2H),6.82(m,1H),6.41(s,2H),4.69(t,J=6.2Hz,1H),4.52(s,2H),3.85(s,6H),3.83(s,3H),2.65(m,2H),2.05(m,2H),1.50(s,9H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)168.4,158.6,153.5,146.8,137.9,136.6,130.0,119.5,114.0,112.7,105.7,82.8,74.1,66.0,61.2,56.5,40.8,32.8,28.4。
(R)1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル)プロパン-1-オール(15)
1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル)プロパン-1-オン(12)から(13)と同様にして調製。粗生成物のフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、20％→25％EtOAc／ヘキサン)により3.84ｇ(96％)の無色透明の油状物を得た：IR(単味)3440,1750,1490,1440,1245,1150,1040cm-1；1H NMR(CDCl3,300MHz)7.30-7.24(m,1H),6.98-6.93(m,2H),6.82(dd,J=8.2,2.5Hz,1H),6.75-6.64(m,3H),5.93(s,2H),4.67-4.63(m,1H),4.53(s,2H),2.68-2.60(m,2H),2.10-1.95(m,3H),1.51(s,9H)；13C NMR(CDCl3,75MHz)168.4,158.5,148.0,146.9,146.0,136.0,130.0,121.5,119.5,114.1,112.5,109.3,108.5,101.1,82.7,73.9,66.1,41.1,32.1,28.4。
3’-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)アセトフェノン(16)
０℃の無水DMF(50mL)中のNaH(鉱油中の60％分散液、1.47ｇ、36.7mmol)懸濁液に、固体の3’-ヒドロキシアセトフェノン(5.0ｇ、36.7mmol)を加えた。この混合物を窒素下で10分間攪拌して透明な黄色溶液を生成させた。次いで、ブロモ酢酸tert-ブチル(6.23mL、38.5mmol)を添加し、混合物を０℃で５分間、次いで室温で20分間攪拌した。TLCは出発物質が残存していないことを示した。混合物をEtOAc(250mL)と水(100mL)との間で分配させた。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、乾燥し(MgSO4)、減圧濃縮した。シリカクロマトグラフィー(20％EtOAc／ヘキサン)により7.6ｇ(83％)の白色結晶を得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)7.60-7.14(m,4H),4.59(s,2H),2.60(s,3H),1.51(s,9H);13C NMR(CDCl3,75MHz)198.0,168.0,158.6,138.9,130.1,122.3,120.6,113.5,83.0,66.1,28.4,27.0。
3-(3-ピリジル)-1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-2-プロペン-1-オン(17)
化合物16(4.0ｇ、16mmol)、ニコチンアルデヒド(1.89mL、20mmol)、およびピペリジン(4.0mL、40mmol)の無水EtOH(65mL)中の混合物を、16時間還流加熱した。混合物を冷却し、減圧濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(30〜60％EtOAc／ヘキサン)により、未反応のニコチンアルデヒドと化合物17(両者ともTLCでのRf値は同じ)の混合物を得た。この混合物を濾紙つき漏斗内でヘキサンにより洗浄すると、1.73ｇ(32％)の精製17が黄色結晶として得られた：1H NMR(CDCl3,300MHz)8.87(d,J=2.1Hz,1H),8.66(dd,J=4.8,1.5Hz,1H),7.97(d,J=7.9Hz,1H),7.80(d,J=16.7Hz,1H),7.66(d,J=7.6Hz,1H),7.60(d,J=15.9Hz,1H),7.55(s,1H),7.46(t,J=7.8Hz,1H),7.38(dd,J=7.9,4.8Hz,1H),7.20(dd,J=8.2,2.6Hz,1H),4.62(s,2H),1.52(s,9H);13C NMR(CDCl3,75MHz)189.7,175.0,168.0,158.7,151.6,150.5,141.4,139.5,134.9,131.0,130.2,124.2,122.3,120.6,114.1,83.1,66.2,28.4。
1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3-インドリル)-2-プロペン-1-オン(18)
化合物16(2.0ｇ、8.0mmol)と3-インドールカルボキシアルデヒド(967mg、6.66mmol)のピペリジン(4mL)中の混合物を６時間還流加熱した。反応混合物を冷却し、pH7のリン酸緩衝液(25mL)およびEtOAc(50mL)で処理した。有機部分を飽和NaHCO3溶液(２×50mL)、次いで飽和NaCl溶液(２×25mL)で洗浄した。次いで有機層をMgSO4で乾燥し、濾過し、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、50％EtOAc／ヘキサン)処理して、1.47ｇ(59％)の黄色固体を得た：IR(単味)1730,1650,1560,1240,1150cm-1;1H NMR(MeOH,300MHz)8.06(d,J=15.5Hz,1H),7.94-7.91(m,1H),7.76(s,1H),7.62(dd,J=6.7,1.1Hz,1H),7.52-7.42(m,4H),7.40-7.17(m,3H),4.61(s,2H),1.42(s,9H);13C NMR(MeOH,75MHz)192.9,170.5,160.2,142.4,142.1,139.8,134.2,131.3,127.2,124.5,123.0,121.7,120.7,117.4,115.3,113.7,84.0,67.2,28.7。
3-(3-ピリジル)-1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-プロパン-1-オン(19)
化合物17(1.70ｇ、5.0mmol)と10％Pd/C(85mg)のEtOAc(70mL)中の混合物を、パール(Parr)装置内で42psiのH2下に15時間水素化した。得られた混合物をセライトで濾過し、濾液を減圧濃縮した。シリカクロマトグラフィー(50〜60％EtOAc／ヘキサン)処理により1.70ｇ(100％)の無色油状物を得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)8.54(d,J=2.0Hz,1H),8.48(dd,J=4.8,1.5Hz,1H),7.70-7.10(m,6H),4.58(s,2H),3.31(t,J=7.3Hz,2H),3.09(t,J=7.4Hz,2H),1.50(s,9H);13C NMR(CDCl3,75MHz)198.3,168.0,158.6,150.4,148.1,138.4,136.9,136.4,130.2,123.7,121.8,120.7,113.5,83.0,66.1,40.2,28.4,27.5。
1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3-インドリル)プロパン-1-オン(20)
1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3-インドリル)-2-プロペン-1-オン(18)から(19)と同様にして調製。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、20％→30％EtOAc／ヘキサン)により468mg(80％)の白色固体を得た：IR(単味)1735,1680,1230,1150cm-1;1H NMR(MeOH,300MHz)7.60-7.55(m,2H),7.43-7.32(m,3H),7.16-6.99(m,4H),4.57(s,2H),3.39-3.32(obs t,2H),3.16(t,J=7.2Hz,2H),1.47(s,9H);13C NMR(MeOH,75MHz)202.5,170.4,160.0,140.2,138.6,131.3,129.0,123.5,122.9,122.7,121.5,120.0,119.7,115.6,114.6,112.6,84.0,67.1,41.0,28.7,21.6。
(1R)-3-(3-ピリジル)-1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)プロパン-1-オール(21)
窒素下、−23℃の化合物19(1.70ｇ、4.98mmol)のTHF(10mL)溶液に、(+)-B-クロロジイソピノカンフェニルボラン(3.2ｇ、9.97mmol)のTHF(20mL)冷(−23℃)溶液を添加した。混合物を冷凍庫内に３日間静置した。次いで、この混合物を減圧濃縮し、残渣をジチルエーテル(100mL)に再溶解した。このエーテル溶液を室温で激しく攪拌しながらジエタノールアミン(1.44mL、15.0mmol)で３時間処理した。析出した白色沈殿を濾去し、濾液を減圧濃縮した。シリカクロマトグラフィー(50〜100％EtOAc／ヘキサン)処理して、1.41ｇ(82％)の無色油状物を得た(97.5％ee、キラセルHPLC、25％i-PrOH／ヘキサンによる、保持時間はR-鏡像異性体が78.5分、S-鏡像異性体が52.1分)：1H NMR(CDCl3,300MHz)8.42(m,2H),7.55-6.80(m,6H),4.65(dd,J=7.8,5.1Hz,1H),4.52(s,2H),2.75(m,2H),2.05(m,2H),1.49(s,9H);13C NMR(CDCl3,75MHz)175.1,168.4,158.6,150.3,147.7,146.8,137.5,136.3,130.0,123.7,119.4,114.1,112.5,108.0,82.8,73.5,66.0,40.5,29.5,28.4。
(R)1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3-インドリル)プロパン-1-オール(22)
1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3-インドリル)プロパン-1-オン(20)から(21)と同様にして調製。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、20％→30％EtOAc／ヘキサン)により258mg(55％)の黄色味を帯びた油状物を得た(＋95％ee、キラセルHPLC、20％i-PrOH／ヘキサンによる、保持時間はR-鏡像異性体が54.2分、S-鏡像異性体が50.7分)：IR(単味)3410,2930,1735,1455,1230,1150,1080cm-1;1H NMR(MeOH,300MHz)7.51(d,J=7.8Hz,1H),7.33(d,J=8.1,1H),7.25(略 t,J=7.9,1H),7.11-6.92(m,5H),6.82-6.78(m,1H),4.67(t,J=5.8Hz,1H),4.54(s,2H),2.85-2.77(m,2H),2.18-2.06(m,2H),1.47(s,9H);13C NMR(MeOH,75MHz)170.8,159.9,148.9,138.6,130.8,129.2,123.2,122.6,120.8,119.9,116.4,114.9,113.7,112.6,83.8,75.0,67.0,41.3,28.7,22.9。
官能基含有モノマーの調製
(1R)-3-フェニル-1-[3-((3-アミノプロピル)オキシ)フェニル]-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート・トリフルオロ酢酸塩(24)
アルコール２(385mg、1.0mmol)のCH2Cl2(3mL)溶液を、(2S)-1-(1,2-ジオキソ-3,3-ジメチルペンチル)-2-ピペリジンカルボン酸(23、255mg、1.0mmol、Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938による文献記載の方法に従って、L-ピペコリン酸から４工程で調製)で、次いで1,3-ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC、247mg、1.2mmol)および4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(DMAP、85mg、0.70mmol)で、窒素雰囲気下に処理した。得られた鮮黄色の懸濁液を一晩攪拌した。次いで混合物をガラス綿で濾過し、クロマトグラフィー(シリカゲル、20％EtOAc／ヘキサン)処理して、(1R)-3-フェニル-1-[3-((3-tert-ブチロキシカルバミルプロピル)オキシ)フェニル]-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(524mg、84％)を無色油状物として得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.35-6.90(m,9H),5.80(t,J=5.9Hz,1H),5.32(d,J=5.0Hz,0.82H,回転異性体Ａのピペコレートα-H),4.80(br.s,1H),4.02(t,J=6.1Hz,2H),3.40-3.25(m,3H),3.12(td,J=13.0,3.3Hz,1H),2.60(m,2H),2.35(d,J=14Hz,1H),2.28(m,1H),2.07(m,1H),1.96(t,J=6.3Hz,2H),1.80-1.60(m,5H),1.43(s,9H),1.22(s,3H),1.20(s,3H),0.88(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物),208.2,170.1,167.6,159.4,156.4,141.7,141.3,130.1,128.9,128.7,126.5,119.4,114.7,113.2,113.0,66.1,57.1,51.7,47.1,44.5,38.3,32.9,32.1,30.0,28.8,26.8,25.4,24.9,24.0,23.8,23.5,21.6,9.1。MS(FAB):(M+Na)+645,(M+H)+623。
上記化合物(200mg、0.32mmol)のCH2Cl2(5.0mL)溶液をトリフルオロ酢酸(1.0mL)で処理し、この混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をトルエン(150mL)で希釈し、減圧濃縮して、化合物24(203mg、100％)を無色のガム状物として得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.90(br.s,3H),7.30-6.70(m,9H),5.70(t,J=5.4Hz,1H),5.23(d,J=4.8Hz,1H),4.01(m,2H),3.30(d,J=12.8Hz,1H),3.13(m,3H),2.58(m,2H),2.40-2.00(m,4H),1.75-1.50(m,5H),1.35(m,2H),1.13(s,3H),1.12(s,3H),0.80(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.4,175.3,175.2,170.1,167.8,158.8,142.0,141.2,130.2,128.9,128.7,126.5,119.8,114.6,113.0,108.0,66.1,51.8,47.1,44.6,38.6,38.3,32.8,32.1,27.3,26.8,25.3,23.8,23.4,21.5,9.0。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値：523.3172、実測値：523.3162。
(1R)-3-フェニル-1-(3-(ヒドロキシカルボニルメトキシ)フェニル)-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(25)
アルコール３(342mg、1.0mmol)のCH2Cl2(3mL)溶液を、(2S)-1-(1,2-ジオキソ-3,3-ジメチルペンチル)-2-ピペリジンカルボン酸(23、255mg、1.0mmol、Holt等、J.Amer.Chem,Soc.,1993,115,9925-9938による文献記載の方法に従って、L-ピペコリン酸から４工程で調製)で、次いで1,3-ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC、247mg、1.2mmol)および4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(DMAP、85mg、0.70mmol)で、窒素雰囲気下に処理した。得られた鮮黄色の懸濁液を一晩攪拌した。次いで、混合物をガラス綿で濾過し、クロマトグラフィー(シリカゲル、20％EtOAc／ヘキサン)処理して、(1R)-3-フェニル-1-[3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル]-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(470mg、82％)を無色油状物として得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.50-6.90(m,9H),5.93(t,J=6.0Hz,1H),5.46(d,J=3.4Hz,0.83H,回転異性体Ａのピペコレートα-H),4.67(s,2H),3.50(d,J=12.9Hz,1H),3.32(td,J=12.5,3.0Hz,1H),2.75(m,2H),2.53(d,J=13.6Hz,1H),2.41(m,1H),2.22(m,1H),2.97-2.71(m,6H),1.62(s,9H),1.38(s,3H),1.35(s,3H),1.03(t,J=7.4Hz);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.3,175.0,170.0,168.0,167.5,158.5,141.7,141.2,130.2,128.9,128.7,126.5,120.2,114.7,113.6,82.8,66.1,51.6,47.1,44.5,38.2,32.9,32.0,28.4,26.8,25.3,24.0,23.4,21.6,9.2。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値：602.3094、実測値：602.3090。
上記tert-ブチルエステル(200mg、0.34mmol)のCH2Cl2(5.0mL)溶液を、トリフルオロ酢酸(1.0mL)で処理し、この混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をトルエン(150mL)で希釈し、減圧濃縮して、化合物25(177mg、99％)を無色ガム状物として得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.30-6.80(m,9H),5.75(m,1H),5.30(d,J=4.8Hz,1H),4.66(s,2H),3.35(d,J=9.27Hz,1H),3.19(td,J=12.4,2.9Hz,1H),2.69(m,2H),2.39(d,J=16.2Hz,1H),2.30(m,1H),2.10(m,1H),1.90-1.60(m,6H),1.50(m,1H),1.19(s,3H),1.17(s,3H),0.85(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.0,172.3,169.8,167.9,158.2,142.2,141.1,130.2,128.9,128.7,126.5,120.3,115.5,111.8,65.5,57.2,52.0,47.2,44.6,38.3,33.0,32.9,32.1,27.0,25.3,25.2,23.9,23.4,21.5,9.1。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値：546.2468、実測値：546.2461。
(1R)-3-(3,4-ジメトキシフェニル)-1-[3-(ヒドロキシカルボニルメトキシ)フェニル]-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(26)
(R)1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4-ジメトキシルフェニル)プロパン-1-オール(13)(805mg、2.0mmol)のCH2Cl2(4mL)溶液(０℃)を、(2S)-1-(1,2-ジオキソ-3,3-ジメチルペンチル)-2-ピペリジンカルボン酸(23、511mg、2.0mmol、Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938による文献記載の方法に従って、L-ピペコリン酸から４工程で調製)で、次いで4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(DMAP、１mg)および1,3-ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC、413mg、２mmol)で、窒素雰囲気下に処理した。得られた鮮黄色の懸濁液を２時間攪拌した後、ジエチルエーテル(20mL)で希釈した。その後、反応混合物を濾過し、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、25％→30％EtOAc／ヘキサン)処理して、993mg(78％)の無色透明な粘稠油状物を得た：IR(単味)2940,1735,1645,1515,1455,1225,1150cm-1;1H NMR(CDCl3,300MHz)7.20-7.17(m,2H),6.91-6.69(m,5H),5.73-5.68(m,1H),5.24(br s,1H),4.46(s,2H),3.79(s,3H),3.78(s,3H),3.29(br d,J=13.2Hz,1H),3.07(td,J=12.7,3.0Hz,1H),2.52-2.44(m,2H),2.29(br d,J=13.6Hz,1H),2.20-2.13(m,1H),2.04-1.95(m,1H),1.71-1.51(m,7H),1.41(s,9H),1.16(s,3H),1.14(s,3H),0.82(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)208.2,170.1,168.3,167.6,158.5,149.3,147.8,141.8,133.9,130.1,120.5,120.3,114.7,113.7,112.2,111.7,82.7,66.2,56.2,51.7,47.1,44.6,38.3,32.9,31.6,28.8,26.8,25.3,23.8,23.5,21.6,9.1。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値：662.3305、実測値：662.3301。
上記tert-ブチルエステル(460mg、0.72mmol)のCH2Cl2(5.0mL)溶液をトリフルオロ酢酸(1.0mL)で処理し、この混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をトルエン(150mL)で希釈し、減圧濃縮して、化合物26(420mg、100％)を黄色味を帯びた泡状物として得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)8.00(br.s,1H),7.35-6.70(m,7H),5.82(m,1H),5.33(d,J=4.5Hz,1H),4.71(m,2H),3.89(s,3H),3.87(s,3H),3.38(d,J=12.6Hz,1H),3.24(td,J=12.3,2.7Hz,1H),2.60(m,2H),2.45-2.05(m,3H),1.70(m,6H),1.45(m,2H),1.23(s,3H),1.21(s,3H),0.89(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.0,172.0,169.8,167.8,158.2,149.4,147.8,142.2,133.7,130.2,129.4,128.6,125.7,120.6,120.3,115.5,112.2,111.8,111.7,108.2,65.5,56.3,51.9,47.2,44.6,38.5,32.9,31.7,28.4,27.0,25.3,23.9,23.4,21.8,21.5,9.1。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値：606.2679、実測値：606.2692。
(1R)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル)-1-[3-(ヒドロキシカルボニルメトキシ)フェニル]-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(27)
アルコール14(650mg、1.5mmol)のCH2Cl2(5mL)溶液を、(2S)-1-(1,2-ジオキソ-3,3-ジメチルペンチル)-2-ピペリジンカルボン酸(23、382mg、1.5mmol)で、次いで1,3-ジシクロヘキシルカルボジイミド(370mg、1.8mmol)および4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(128mg、1.0mmol)で、窒素雰囲気下に処理した。得られた鮮黄色の懸濁液を一晩攪拌した。この混合物を次いでガラス綿で濾過し、クロマトグラフィー(シリカゲル、20〜30％EtOAc／ヘキサン)処理して、(1R)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル)-1-[3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル]-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(776mg、78％)を無色油状物として得た：1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.30-6.80(m,4H),6.37(s,2H),5.82(t,J=6.1Hz,1H),5.33(d,J=5.2Hz,1H),4.54(s,2H),3.85(s,6H),3.83(s,3H),3.38(d,J=12.6Hz,1H),3.16(td,J=12.8,3.1Hz,1H),2.60(m,2H),2.45-2.05(m,3H),1.70(m,6H),1.50(s,9H),1.45(m,2H),1.25(s,3H),1.23(s,3H),0.90(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,175.1,170.1,168.2 167.6,158.5,153.6,141.7,137.0,130.1,120.9,120.2,114.6,113.7,105.7,82.7,66.2,61.2,56.5,51.7,47.1,44.6,38.2,32.9,32.4,28.4,26.8,25.3,23.9,23.5,21.6,9.1。
上記tert-ブチルエステル(400mg、0.60mmol)のCH2Cl2(5.0mL)溶液をトリフルオロ酢酸(1.0mL)で処理し、混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をトルエン(150mL)で希釈し、減圧濃縮して、化合物27(358mg、98％)を白色の泡状物として得た:1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.30-6.80(m,4H),6.39(s,2H),5.82(m,1H),5.33(d,J=4.6Hz,1H),4.70(m,2H),3.86(s,6H),3.84(s,3H),3.38(d,J=12.6Hz,1H),3.22(td,J=12.8,3.1Hz,1H),2.60(m,2H),2.45-2.05(m,3H),1.70(m,6H),1.45(m,2H),1.23(s,3H),1.21(s,3H),0.89(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,175.0,171.7,169.8 167.8,158.2,153.6,142.1,136.9,130.2,129.4,128.6,125.7,120.3,115.5,111.8,107.9,105.8,65.6,61.2,56.5,52.0,47.2,44.6,38.3,32.9,32.5,27.0,25.3,23.8,23.4,21.5,9.1。MS(FAB):(M+Na)+計算値：636.2785、実測値：636.2756。
(R)1-(3-(ヒドロキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル)-1-プロピル・(2S)-1-(3,3’-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(28)
(R)1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル)プロパン-1-オール(15)(500mg、1.29mmol)のCH2Cl2(4mL)溶液(０℃)を、(2S)-1-(1,2-ジオキソ-3,3-ジメチルペンチル)-2-ピペリジンカルボン酸(23、330mg、1.29mmol、Holt等，J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938による文献記載の方法に従って、L-ピペコリン酸から４工程で調製)で、次いで4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(DMAP、１mg)および1,3-ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC、267mg、1.29mmol)で、窒素雰囲気下に処理した。得られた鮮黄色の懸濁液を２時間攪拌した後、ジエチルエーテル(20mL)で希釈した。反応混合物を濾過し、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、20％→30％EtOAc／ヘキサン)処理して、556mg(69％)の無色透明の油状物を得た：IR(単味)2970,1745,1700,1640,1490,1440,1245,1150cm-1;1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.32-7.26(m,1H),6.99-6.84(m,6H),5.93(s,2H),5.80-76(m,1H),5.33(d,J=4.6Hz,1H),4.55(s,2H),3.83(br d,J=12.9Hz,1H),3.16(td,J=12.3,3.1Hz,1H),2.63-2.50(m,2H),2.38(br d,J=13.7Hz,1H),2.26-2.16(m,1H),2.09-2.04(m,1H),1.81-1.57(m,7H),1.51(s,9H),1.26(s,3H),1.23(s,3H),0.91(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.0,168.3 167.6,158.5,148.1,146.2,141.7,135.0,130.1,121.5,120.2,114.9,113.6,109.2,108.6,101.2,82.7,66.2,51.7,47.1,44.5,38.3,32.9,31.6,28.4,26.8,25.3,23.8,23.5,21.6,9.1。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値：646.2992、実測値：646.3021。
上記tert-ブチルエステル(625mg、1.00mmol)のCH2Cl2(4.0mL)溶液をトリフルオロ酢酸(1.5mL)で処理し、混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をトルエン(150mL)で希釈し、減圧濃縮して、化合物28(483mg、85％)を無色透明の油状物として得た：IR(単味)3420,2940,1735,1700,1640,1490,1440,1245,1040cm-1;1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.12(d,J=6.7Hz,1H),6.92-6.81(m,3H),6.68-6.52(m,3H),5.86(s,2H),5.73(t,J=7.2Hz,1H),5.33(s,1H),4.40(s,2H),3.34.(d,J=12.2Hz,1H),3.19(t,J=12.0Hz,1H),2.54-2.46(m,2H),2.34(d,J=12.6Hz,1H),2.24-2.00(m,2H),1.73-1.32(m,7H),1.18(s,3H),1.16(s,3H),0.84(t,J=7.3Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.0,169.9,167.79,158.3,148.0,146.2,141.9,135.0,130.1,121.5,109.1,108.6,107.2,101.2,77.0,51.9,47.0,44.6,38.6,32.9,31.8,26.9,25.3,23.9,23.3,21.6,9.1。
(1R)-3-(3-ピリジル)-1-(3-(ヒドロキシカルボニルメトキシ)フェニル)-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(29)
アルコール21(530mg、1.54mmol)のCH2Cl2(5mL)溶液を、(2S)-1-(1,2-ジオキソ-3,3-ジメチルペンチル)-2-ピペリジンカルボン酸(23、393mg、1.54mmol)で、次いで1,3-ジシクロヘキシルカルボジイミド(381mg、1.85mmol)および4-(ジメチルアミノ)-ピリジン(132mg、1.08mmol)で、窒素雰囲気下に処理した。得られた鮮黄色の懸濁液を一晩攪拌した。この混合物を次いでガラス綿で濾過し、クロマトグラフィー(シリカゲル、20〜60％EtOAc／ヘキサン)処理して、(1R)-3-(3-ピリジル)-1-[3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル]-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(860mg、96％)を無色油状物として得た:1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)8.46(m,2H),7.50-6.80(m,6H),5.80(t,J=6.1Hz,1H),5.32(d,J=5.0Hz,1H),4.54(s,2H),3.38(d,J=12.8Hz,1H),3.14(td,J=12.6,3.0Hz,1H),2.60(m,2H),2.36(d,J=13.7Hz,1H),2.25(m,1H),2.10(m,1H),1.75(m,4H),1.49(s,9H),1.45(m,2H),1.24(s,3H),1.22(s,3H),0.90(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,175.1,170.0,168.2,167.7,158.6,150.2,148.1,141.3,136.6,130.2,123.8,120.1,115.0,113.6,107.9,82.8,66.1,51.7,47.1,44.6,39.2,37.8,34.4,33.0,29.2,28.4,26.7,25.3,23.9,23.5,21.6,21.4,9.1。
上記tert-ブチルエステル(400mg、0.69mmol)のCH2Cl2(5.0mL)溶液をトリフルオロ酢酸(1.0mL)で処理し、混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をトルエン(150mL)で希釈し、減圧濃縮して、化合物29(424mg、96％、トリフルオロ酢酸塩)を白色の泡状物として得た:1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)8.75(s,1H),8.67(d,J=10.4Hz,1H),8.23(t,J=5.6Hz,1H),7.79(dd,J=7.9,5.6Hz,1H),7.35-6.75(m,4H),5.80(t,J=6.1Hz,1H),5.25(d,J=5.0Hz,1H),4.75(m,2H),3.35(d,J=13.2Hz,1H),3.14(td,J=12.6,3.0Hz,1H),2.75(m,2H),2.30(m,3H),1.70(m,6H),1.40(m,2H),1.22(s,6H),0.92(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.3,172.3,169.9,167.8,158.6,145.5,142.5,142.0,139.8,139.5,130.6,129.4,128.6,120.2,117.1,111.8,65.2,51.8,47.1,44.8,36.7,32.8,28.4,26.6,25.2,23.7,21.4,9.1。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値：547.2420、実測値：547.2415。
(1R)-3-(3-インドリル)-1-(3-(ヒドロキシカルボニルメトキシ)フェニル)-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)-2-ピペリジンカルボキシレート(30)
(R)1-(3-(tert-ブトキシカルボニルメトキシ)フェニル)-3-(3-インドリル)プロパン-1-オール(22)から、化合物28のエステルと同様にして、tert-ブチルエステルを調製した。フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、30％EtOAc／ヘキサン)により、492mg(76％)の無色透明の油状物を得た：IR(単味)3410,2970,1735,1700,1635,1455,1225,1150cm-1;1H NMR(CDCl3,300MHz)8.04(br s,1H),7.53(d,J=7.8Hz,1H),7.37(d,J=8.0Hz,1H),7.30-7.11(m,3H),7.01-6.84(m,4H),5.91-5.86(m,1H),5.35(d,J=4.8Hz,1H),4.54(s,2H),3.39(d,J=13.3Hz,1H),3.18(td,J=12.6,3.0Hz,1H),2.87-2.74(m,2H),2.41-2.18(m,3H),1.82-1.57(m,7H),1.50(s,9H),1.27(s,3H),1.24(s,3H),0.92(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)208.3,170.1,168.3,167.7,158.5,141.9,136.8,130.1,127.7,122.3,121.8,120.3,119.6,119.1,115.4,114.7,113,7,111.5,82.7,66.2,51.7,47.1,44.5,36.8,32.9,28.4,26.9,25.4,24.0,23.4.21.6,9.1。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値：641.3203、実測値：641.3193。
上記tert-ブチルエステル(112mg、0.18mmol)のCH2Cl2(5.0mL)溶液をトリフルオロ酢酸(1.0mL)で処理し、混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をトルエン(150mL)で希釈し、減圧濃縮して、化合物30(102mg、100％)を褐色の泡状物として得た:1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.90-6.70(m,10H),5.85(m,1H),5.35(m,1H),4.62(m,2H),3.40(m,1H),3.25(m,1H),2.80(m,2H),2.40-2.05(m,3H),1.85-1.45(m,12H),1.23(s,3H),1.21(s,3H),0.88(t,J=7.4Hz,3H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.0,175.0,169.8,167.9,158.2,142.3,130.2,129.4,128.6,125.7,122.5,119.7,119.1,115.3,111.6,108.0,65.5,52.0,47.2,44.6,32.9,27.0,25.3,23.9,23.4.21.6,9.1。HRMS(FAB):(M+Na)+計算値：585.2577、実測値：585.2561。
二量体化剤の製造
実施例１．  N,N’-ビス[3-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピルフェノキシ)プロピル]・1,4-フェニレンジアセタミド(31)
無水アセトニトリル(5.0mL)中の1,4-フェニレンジ酢酸(194mg、1.0mmol)とジスクシンイミジルカーボネート(512mg、2.0mmol)との混合物を、ピリジン(243μL、3.0mmol)で処理した。この混合物を室温で窒素下に一晩攪拌した。得られた懸濁液を、EtOAc(70mL)と水(50mL)との間で分配させた。有機層を分離し、1M Na2CO3、水、0.5N HCl、飽和食塩水で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、減圧濃縮して、1,4-フェニレンジ酢酸ジスクシンイミジルエステル(144mg、37％)を白色固体として得た。1H NMR(DMSO-d6,300MHz)7.34(s,4H),4.10(s,4H),2.80(s,8H)。
化合物24(102mg、0.16mmol)のCH2Cl2(2.0mL)溶液を上記の活性化ジエステル(31mg、0.080mmol)およびEt3N(67μL、0.48mmol)で処理した。この混合物を室温で一晩攪拌した。得られた透明な溶液をシリカゲルに含浸させ、蒸発乾固した。クロマトグラフィー(シリカゲル、50〜100％EtOAc／ヘキサン)により化合物31(60mg、62％)を白色固体として得た：融点55〜57℃;1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.32-7.15(m,16H),6.95(d,J=7.7Hz,2H),6.83(s,2H),6.74(m,2H),6.01(br.s,2H),5.80(t,J=5.8Hz,2H),5.32(d,J=4.9Hz,2H),3.98(t,J=5.7Hz,4H),3.52(s,4H),3.50-3.30(m,6H),3.22(td,J=12.4,2.6Hz,2H),2.67(m,4H),2.38(d,J=13.6Hz,2H),2.30(m,2H),2.12(m,2H),1.95(t,J=6.1Hz,4H),1.85-1.60(m,10H),1.50(m,4H),1.23(s,6H),1.21(s,6H),0.89(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,208.0,171.3,170.1,169.9,167.8,159.2,141.8,141.6,141.2,134.4,130.3,130.1,128.9,128.7,126.5,119.3,115.0,114.7,113.1,112.8,57.1,51.7,47.1,44.5,43.7,39.3,38.3,38.2,37.8,33.0,32.8,32.1,29.3,26.9,25.3,23.9,23.5,21.6,21.4,9.17,9.13。MS(FAB):(M+Na)+1225,(M+H)+1203。
実施例２．  N,N’-ビス[3-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピルフェノキシ)プロピル]・スベラミド(32)
1,4-フェニレンジ酢酸をスベリン酸に代えた以外は実施例１と同様の方法に従って、化合物32(54mg、56％)を白色固体として得た：融点44〜46℃;1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.35-6.85(m,18H),6.18(br.s,2H),5.86(t,J=5.9Hz,2H),5.39(d,J=4.9Hz,2H),4.12(t,J=5.9Hz,4H),3.60-3.40(m,6H),3.28(td,J=12.6,2.8Hz,2H),2.70(m,4H),2.47(d,J=13.8Hz,2H),2.35(m,2H),2.30-2.00(m,12H),1.95-1.70(m,14H),1.55-1.35(m,6H),1.30(s,6H),1.28(s,6H),0.96(t,J=7.5Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.3,170.0,167.8.159.3,141.8,141.2,130.2,128.9,128.7,126.5,119.4,114.7,113.0,66.4,51.7,47.1,44.5,38.3,37.7,32.8,32.1,29.3,28.7,26.9,25.8,25.3,23.9,21.6,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1205。
実施例３．  N,N’-ビス[3-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピルフェノキシ)プロピル]・ピリジン-2,6-ジカルボキサミド(33)
1,4-フェニレンジ酢酸をピリジン-2,6-ジカルボン酸に代えた以外は実施例１と同様の方法に従って、化合物33(44mg、54％)を白色固体として得た：融点60〜62℃;1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)8.34(d,J=7.7Hz,2H),8.00(t,J=7.7Hz,1H),7.99(br.s,2H,NHs),7.30-6.75(m,18H),5.77(t,J=5.7Hz,2H),5.30(d,J=4.8Hz,2H),4.02(m,4H),3.63(m,4H),3.35(d,J=12.7Hz,2H),3.20(td,J=12.7,2.8Hz,2H),2.60(m,4H),2.36(d,J=13.3Hz,2H),2.24(m,2H),2.05(m,6H),1.80-1.65(m,10H),1.50(m,4H),1.20(s,6H),1.18(s,6H),0.85(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.1,167.7,164.0,159.3,149.1,142.0,141.2,139.3,130.2,128.9,128.7,126.5,125.4,119.4,115.1,113.2,107.9,67.0,57.1,51.6,47.1,44.5,38.3,37.9,32.8,32.1,29.6,28.0,26.9,25.4,23.9,23.5,21.6,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1198,(M+H)+1176。
実施例４．  N,N’-ビス[3-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピルフェノキシ)プロピル]・ピリジン-3,5-ジカルボキサミド(34)
1,4-フェニレンジ酢酸をピリジン-3,5-ジカルボン酸に代えた以外は実施例１と同様の方法に従って、化合物34(32mg、39％)を白色固体として得た：融点62〜64℃;1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)9.09(d,J=1.8Hz,2H),8.42(d,J=1.9Hz,1H),7.30-6.80(m,20H),5.78(t,J=5.6Hz,2H),5.28(d,J=4.7Hz,2H),4.12(t,J=5.6Hz,4H),3.68(m,4H),3.36(d,J=13.0Hz,2H),3.18(td,J=13.4,3.4Hz,2H),2.60(m,4H),2.35(d,J=13.2Hz,2H),2.25(m,2H),2.05(m,6H),1.80-1.65(m,10H),1.50(m,4H),1.18(s,6H),1.16(s,6H),0.84(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.3,170.1,167.8,165.2,159.1,150.9,141.9,141.3,130.3,130.2,128.9,128.7,126.5,119.5,115.0,112.7,107.9,67.0,51.7,47.1,44.5,38.7,38.2,32.8,32.1,26.8,25.3,23.9,23.5,21.5,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1198,(M+H)+1176。
実施例５．  N,N’-ビス[3-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピルフェノキシ)プロピル]・N-メチルピリジニウム-3,5-ジカルボキサミド・ヨウダイド(35)
化合物34(10mg、8.5μmol)のアセトン(1.0mL)溶液を、MeI(60μL、10.2mmol)で処理した。混合物を室温で暗所に３日間放置したところ、TLC(100％EtOAc)は出発物質が全て基準化合物に転化していることを示した。得られた濃黄色溶液を減圧濃縮して、化合物35(11mg、100％)を黄色固体として得た。1H NMR(アセトン-d6,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)9.98(s,1H),9.62(s,2H),9.14(br.s,2H),7.20-6.70(m,20H),5.83(t,J=5.2Hz,2H),5.27(d,J=4.5Hz,2H),4.75(s,3H),4,18(t,J=6.4Hz,4H),3.67(q,J=6.1Hz,4H),3.45(d,J=13.4Hz,2H),3.25(m,2H),2.75(m,4H),2.20-1.90(m,10H),1.75(m,10H),1.50(m,4H),1.21.(s,6H),1.19(s,6H),0.85(t,J=7.5Hz,6H);13C NMR(アセトン-d6,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.7,170.8,168.2,162.1,160.6,148.7,143.3,142.6,130.8,129.6,127.2,119.8,115.6,113.9,104.0,77.8,67.2,52.5,47.6,45.3,39.4,38.1,33.6,32.8,27.6,26.1,24.2,23.8,22.4,9.5。MS(FAB):(M+Na)+1190。
実施例６．  N,N’-ビス[3-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピルフェノキシ)プロピル]・ベンゼン-1,3-ジスルホンアミド(36)
化合物24(106mg、0.17mmol)のCH2Cl2(2.0mL)溶液をEt3N(71μL、0.51mmol)およびベンゼン-1,3-ジスルホニルクロライド(23mg、0.085mmol)で処理した。この混合物を室温で一晩攪拌した。得られた黄色い溶液を次いでシリカゲルに含浸させ、蒸発乾固した。クロマトグラフィー(シリカゲル、50％EtOAc／ヘキサン)により化合物36(64mg、61％)を白色固体として得た：融点58〜60℃;1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)8.39(d,J=6.3Hz,1H),8.03(dd,J=7.8,1.6Hz,2H),7.57(td,J=7.9,4.4Hz,1H),7.35-6.80(m,18H),5.81(m,2H),5.50(m,2H),5.36(d,J=4.4Hz,2H),3.95(m,4H),3.43(d,J=12.6Hz,2H),3.22(m,6H),2.65(m,4H),2.43(d,J=13.6Hz,2H),2.30(m,2H),2.15(m,2H),1.95(m,4H),1.90-1.65(m,12H),1.50(m,4H),1.25(s,6H),1.23(s,6H),0.90(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.5,170.1,167.8,159.0,142.1,141.9,141.3,131.1,130.5,130.1,128.9,128.7,126.5,125.8,119.5,114.8,112.7,65.7,57.2,51.8,47.1,44.6,41.2,38.4,32.9,32.8,32.1,29.5,26.8,25.3,23.9,23.4,21.6,9.2,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1269。
実施例７．  N,N’-ビス[3-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピルフェノキシ)プロピル]・5-アミノベンゼン-1,3-ジカルボキサミド(37)
5-アミノイソフタル酸(1.81ｇ、10mmol)とジオキサン(60mL)との混合物を、Na2CO3(4.24ｇ、40mmol)の水(60mL)溶液で、次いで(Boc)2O(3.5mL、15mmol)で処理した。この混合物を室温で16時間攪拌した。混合物にEtOAc(100mL)を加え、10％KHSO4(約100mL)を加えてpHを２にした。有機層を分離し、水層をEtOAc(２×100mL)で抽出した。EtOAc溶液を合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、減圧濃縮して、5-tert-ブチロキシカルバミル-ベンゼン-1,3-ジカルボン酸(2.8ｇ、100％)を得た。
アセトニトリル(20mL)中の上記ジカルボン酸(422mg、1.5mmol)とジスクシンイミジルカーボネート(768mg、3.0mmol)との混合物を、ピリジン(364μL、4.5mmol)で処理した。この混合物を室温で20時間激しく攪拌した。得られた懸濁液を、EtOAc(150mL)と0.5N HCl(50mL)との間で分配させた。有機層を分離し、水(50mL)、10％NaHCO3(２×50mL)、飽和食塩水で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、減圧濃縮した。クロマトグラフィー(シリカゲル、70％EtOAc／ヘキサン)により(5-tert-ブチロキシカルバミル)ベンゼン-1,3-ジカルボン酸のジスクシンイミジルエステル(193mg、27％)を白色固体として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)8.50(s,1H),8.44(s,2H),6.91(s,1H),2.89(s,8H),1.54(s,9H)。
化合物24(81mg、0.127mmol)のCH2Cl2(2.0mL)溶液に、上記の活性化ジエステル(30mg、0.064mmol)を添加し、次いでEt3N(53μL、0.38mmol)を滴下した。この混合物を室温で４時間攪拌した。得られた透明な溶液をシリカゲルに含浸させ、蒸発乾固した。クロマトグラフィー(シリカゲル、50〜70％EtOAc／ヘキサン)により、N-Boc-37(56mg、68％)を白色固体として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)8.01(s,2H),7.93(s,1H),7.35-6.85(m,21H),5.83(t,J=6.0Hz,2H),5.34(d,J=4.6Hz,2H),4.14(t,J=5.2Hz,4H),3.70(m,4H),3.42(d,J=12.8Hz,2H),3.22(t,J=10.2Hz,2H),2.65(m,4H),2.40(d,J=13.0Hz,2H),2.30(m,2H),2.15(m,6H),1.85-1.65(m,10H),1.57(s,9H),1.50(m,4H),1.25(s,6H),1.23(s,6H),0.91(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.4,170.1,167.8,166.8,159.3,153.1,141.7,141.3,139.9,136.1,130.1,128.8,128.7,126.5,119.7,119.4,115.0,112.8,66.7,51.7,47.1,44.5,38.4,38.2,32.8,32.1,29.4,28.7,26.8,25.3,23.4,21.5,9.1。
N-Boc-37(20mg、0.016mmol)のCH2Cl2(4.0mL)溶液をトリフルオロ酢酸(0.8mL)で処理し、混合物を室温で１時間攪拌した。混合物をトルエン(150mL)で希釈し、減圧濃縮して、化合物37のトリフルオロ酢酸塩(20mg、96％)を無色のガム状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.67(s,1H),7.45-6.90(m,22H),5.88(m,2H),5.40(d,J=4.6Hz,2H),4.80(br.s,4H),4.20(m,4H),3.75(m,4H),3.45(d,J=12.7Hz,2H),3.32(m,2H),2.75(m,4H),2.50-2.30(m,4H),2.20(m,6H),1.78(m,10H),1.50(m,4H),1.32(s,6H),1.30(s,6H),0.98(t,J=7.4Hz,6H)。MS(FAB):(M+H)+1190。
実施例８．  N,N’-ビス[3-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピルフェノキシ)プロピル]・(±)-2,6-ジアミノピメラミド(38)
5−アミノイソフタル酸を(±)-2,6-ジアミノピメリン酸に代えた以外は実施例７と同様の方法に従って、ジ-Boc-38(51mg、54％)を白色固体として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.35-6.50(m,20H),5.84(t,J=5.8Hz,2H),5.45-5.20(m,4H),4.08(t,J=5.4Hz,4H),3.55-3.30(m,6H),3.24(t,J=12.5Hz,2H),2.70(m,4H),2.42(d,J=13.0Hz,2H),2.35(m,2H),2.20(m,2H),2.05(m,4H),2.00-1.65(m,14H),1.50(m,4H),1.47(s,18H),1.28(s,6H),1.25(s,6H),0.94(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.3,170.1,159.3,141.8,141.3,130.1,128.9,128.7,126.5,119.3,113.1,80.4,66.7,51.7,47.1,44.5,38.3,32.8,32.1,29.5,28.74,28.72,26.9,25.3,24.0,23.4,21.6,9.1。
ジ-Boc-38(20mg、0.014mmol)のCH2Cl2(4.0mL)溶液をトリフルオロ酢酸(0.8mL)で処理し、混合物を室温で１時間攪拌した。混合物をトルエン(150mL)で希釈し、減圧濃縮して、化合物38のジ(トリフルオロ酢酸)塩(18.9mg、94％)を無色のガム状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.40-6.85(m,20H),5.85(m,2H),5.38(m,2H),4.05(m,6H),3.45-3.25(m,8H),2.70(m,4H),2.45(m,2H),2.40(m,2H),2.20(m,2H),2.05(m,4H),1.95-1.60(m,14H),1.50(m,4H),1.28(s,6H),1.27(s,6H),0.95(t,J=7.4Hz,6H)。MS(FAB):(M+H)+1199。
実施例９．  N,N’-ビス[3-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピルフェノキシ)プロピル]・トリエチレングリコール-1,10-ビスカルバメート(39)
化合物24(85mg、0.13mmol)のCH2Cl2溶液(０℃)に、Et3N、次いでトリエチレングリコール・ビス(クロロホルメート)を添加した。この混合物を０℃で１時間攪拌したところ、TLCは出発物質が残っていないことを示した。この混合物を減圧濃縮し、残渣をシリカでクロマトグラフィー処理(70〜80％EtOAc／ヘキサン)して、化合物39を無色のガム状物(40mg、48％)として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.25-6.70(m,18H),5.71(t,J=5.8Hz,2H),5.25(d,J=4.7Hz,2H),5.12(br.s,2H),4.15(t,J=4.4Hz,4H),3.95(t,J=5.9Hz,4H),3.60(t,J=4.8Hz,4H),3.75(s,4H),3.30(m,6H),3.10(td,J=12.7,3.0Hz,2H),2.50(m,4H),2.30(d,J=13.7Hz,2H),2.20(m,2H),2.05(m,2H),1.92(t,J=6.2Hz,4H),1.75-1.50(m,10H),1.35(m,4H),1.16(s,6H),1.13(s,6H),0.81(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.1,167.6,159.3,159.9,156.9,141.7,141.3,130.1,128.9,128.7,126.5,119.4,114.8,113.2,71.0,70.1,66.0,64.3,51.7,47.1,44.5,39.2,38.8,38.3,33.0,32.9,32.1,29.9,26.8,25.4,23.9,23.8,23.5,21.6,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1269。
実施例10．  1,4-キシリルジアミン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピル)フェノキシアセタミド](40)
カルボン酸25(104mg、0.20mmol)のアセトニトリル(2.0mL)溶液を、ジスクシンイミジルカーボネート(56mg、0.22mmol)およびピリジン(48μL、0.60mmol)で処理した。この混合物を室温で一晩攪拌した。混合物を次いでEtOAc(70mL)と水(50mL)との間で分配させた。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、減圧濃縮して、白色の泡状物(115mg、93％)を得た。この活性化スクシンイミジルエステルを、無水アセトニトリル(2.0mL)に再溶解した。得られた溶液を次いでトリエチルアミン(75μL、0.54mmol)で、次に1,4-キシリルジアミンのDMF溶液(0.32M,288μL、0.092mmol)で処理した。得られた懸濁液を室温で１時間攪拌したところ、TLCは出発物質が残っていないことを示した。この混合物をEtOAc(50mL)と水(20mL)との間で分配させた。有機層を分離し、0.5N HCl(水溶液)、飽和食塩水で洗浄し、乾燥し(Na2SO4)、減圧濃縮した。クロマトグラフィー(シリカゲル、70％EtOAc／ヘキサン)により、化合物40(42mg、40％)が白色固体として得られた：融点59〜61℃;1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.25-6.70(m,22H),5.69(m,2H),5.22(d,J=4.8Hz,2H),4.46(s,4H),4.43(d,J=3.9Hz,4H),3.27(d,J=13.2Hz,2H),3.06(td,J=12.6,2.6Hz,2H),2.50(m,4H),2.27(d,J=13.4Hz,2H),2.16(m,2H),2.00(m,2H),1.75-1.50(m,10H),1.35(m,4H),1.12(s,6H),1.10(s,6H),0.78(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.3,170.0,168.4,168.3,167.6,157.7,142.2,142.1,141.1,137.6,130.4,128.9,128.7,128.5,126.6,120.6,114.3,113.8,67.7,57.0,51.6,47.1,44.5,43.0,39.2,38.4,38.1,32.9,32.1,32.0,26.8,25.3,23.9,23.5,21.6,9.2。MS(FAB):(M+Na)+1169,(M+H)+1147。
実施例11．  1,4-ビス(3-アミノプロピル)ピペラジン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピル)フェノキシアセタミド](41)
1,4-キシリルジアミンを1,4-ビス(3-アミノプロピル)ピペラジンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物41(35mg、53％)を白色固体として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.55-6.90(m,20H),5.93(t,J=5.6Hz,2H),5.46(d,J=4.8Hz,2H),4.63(s,4H),3.70-3.50(m,6H),3.37(m,2H),2.95-2.20(m,24H),1.90(m,16H),1.60(m,4H),1.37(s,6H),1.35(s,6H),1.03(t,J=7.5Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.0,168.4,167.7,158.0,142.3,141.1,130.4,128.9,128.7,126.6,120.5,115.0,113.8,107.9,68.2,51.6,47.1,44.5,38.5,32.9,26.8,25.3,23.9,23.5,21.6,9.1。MS(FAB):(M+H)+1211。
実施例12．  3,3’-ジアミノ-N-メチルジプロピルアミン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピル)フェノキシアセタミド](42)
1,4-キシリルジアミンを3,3’-ジアミノ-N-メチルジプロピルアミンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物42(28mg、48％)を無色ガム状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.50-6.75(m,20H),5.76(t,J=5.8Hz,2H),5.29(d,J=4.8Hz,2H),4.45(s,4H),3.35(m,6H),3.17(td,J=12.6,2.7Hz,2H),2.60(m,4H),2.35(m,6H),2.25(m,2H),2.05(m,5H),1.70(m,14H),1.40(m,4H),1.20(s,6H),1.18(s,6H),0.86(t,J=7.5Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.0,168.4,167.7,158.0,142.2,141.1,130.4,128.9,128.7,126.5,120.3,115.0,114.6,113.7,108.0,67.9,56.4,51.6,47.1,44.5,38.4,33.0,32.9,32.1,26.8,25.3,23.9,23.5,21.6,21.4,9.1。MS(FAB):(M+H)+1156,(M+Na)+1178。
実施例13．  1,5-ジアミノペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピル)フェノキシアセタミド](43)
1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノペンタンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物43(18mg、30％)を無色ガム状物として得た。
1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.40-7.00(m,18H),6.80(br.s,NHs,2H),5.85(m,2H),5.33(d,J=4.7Hz,2H),4.50(s,4H),3.37(m,6H),3.20(td,J=12.7,2.7Hz,2H),2.65(m,4H),2.38(d,J=13.4Hz,2H),2.28(m,2H),2.14(m,2H),1.90-1.40(m,20H),1.24(s,6H),1.22(s,6H),0.90(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.0,168.3,167.7,157.8,142.2,141.2,130.4,128.9,128.7,126.5,120.5,114.2,113.9,67.8,51.6,47.1,44.5,39.2,38.4,32.9,32.0,29.6,26.8,25.4,24.4,23.9,23.5,21.6,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1135。
実施例14．  1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピル)フェノキシアセタミド](48)
1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・二塩酸塩(アルドリッチ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物48(23mg、39％)を無色ガム状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.30-6.80(m,20H),5.80(m,2H),5.30(d,J=4.9Hz,2H),4.48(s,4H),3.50(br.s,8H),3.36(d,J=13.6Hz,2H),3.16(td,J=12.6,2.7Hz,2H),2.60(m,4H),2.36(d,J=13.8Hz,2H),2.26(m,2H),2.10(m,2H),1.80-1.60(m,10H),1.50(m,4H),1.20(s,6H),1.19(s,6H),0.87(t,J=7.5Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.0,168.5,167.7,157.8,142.2,141.1,130.4,128.9,128.7,126.5,120.5,114.6,113.7,108.1,69.9,67.8,51.6,47.1,44.5,39.1,38.4,32.9,32.0,26.8,25.3,23.9,23.5,21.6,21.4,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1137。
実施例15．  1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピル)フェノキシアセタミド](53)
1,4-キシリルジアミンを1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン(フルカ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物53(23mg、32％)を無色ガム状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.35-6.85(m,20H),5.80(t,J=5.7Hz,2H),5.33(d,J=4.9Hz,2H),4.51(s,4H),3.60(br.s,12H),3.40(d,J=12.3Hz,2H),3.20(td,J=12.6,2.8Hz,2H),2.65(m,4H),2.40(d,J=13.4Hz,2H),2.26(m,2H),2.10(m,2H),1.90-1.60(m,10H),1.50(m,4H),1.25(s,6H),1.22(s,6H),0.90(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.0,168.4,167.7,157.8,142.2,141.1,130.4,128.9,128.7,126.5,120.5,114.7,113.6,70.7,70.1,67.8,51.6,47.1,44.5,39.2,38.4,32.9,32.0,26.8,25.3,23.9,23.5,21.6,21.4,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1181。
実施例16．  1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-フェニル)プロピル)フェノキシアセタミド](59)
1,4-キシリルジアミンを1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカン(Dietrich,B.;Lehn,J.-M.;Sauvage,J.P.;Blanzat,J.,Tetrahedron,1973,29,1628の文献記載の方法を用いて調製)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物59(18mg、24％)を無色ガム状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.35-6.80(m,20H),5.77(t,J=6.0Hz,2H),5.30(d,J=4.9Hz,2H),4.48(s,4H),3.60(m,16H),3.35(d,J=13.5Hz,2H),3.16(td,J=12.6,2.9Hz,2H),2.65(m,4H),2.37(d,J=13.6Hz,2H),2.25(m,2H),2.05(m,2H),1.80-1.60(m,12H),1.50(m,4H),1.21(s,6H),1.19(s,6H),0.87(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.0,168.4,167.7,157.8,142.2,141.1,130.4,128.9,128.7,126.5,120.5,114.7,113.6,108.0,70.9,70.7,70.1,67.8,51.6,47.1,44.5,39.2,38.4,32.9,32.0,26.8,25.3,23.9,23.5,21.6,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1125。
実施例17．  1,5-ジアミノペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-ジメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](44)
酸モノマー25を26に代え、1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノペンタンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物44(58mg、49％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.35-6.65(m,16H),5.79(m,2H),5.33(d,J=4.8Hz,2H),4.49(s,4H),3.87(s,6H),3.86(s,6H),3.35(m,6H),3.20(m,2H),2.95(m,2H),2.60(m,4H),2.38(d,J=13.4Hz,2H),2.28(m,2H),2.10(m,2H),1.90-1.40(m,20H),1.23(s,6H),1.22(s,6H),0.90(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.0,168.3,168.2,167.7,157.8,149.3,147.8,142.3,133.8,130.4,120.6,114.2,113.9,112.2,111.8,108.0,67.8,56.3,56.2,51.6,47.1,44.5,39.2,38.6,38.3,32.9,31.6,29.6,26.8,25.3,24.4,23.8,23.6,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1255。
実施例18．  1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-ジメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](49)
酸モノマー25を26に代え、1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・二塩酸塩(アルドリッチ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物49(73mg、62％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.35-6.65(m,16H),5.79(m,2H),5.33(d,J=4.8Hz,2H),4.51(s,4H),3.87(s,6H),3.86(s,6H),3.55(br.s,8H),3.35(m,2H),3.20(m,2H),2.60(m,4H),2.38(d,J=13.4Hz,2H),2.28(m,2H),2.10(m,2H),1.90-1.40(m,20H),1.23(s,6H),1.22(s,6H),0.90(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.0,168.5,168.4,167.7,157.8,149.3,147.8,142.3,133.7,130.4,120.5,114.6,113.7,112.2,111.8,69.9,67.8,56.3,56.2,51.6,47.1,44.5,39.1,38.6,32.9,31.6,26.8,25.3,23.8,23.6,21.6,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1257。
実施例19．  1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-ジメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](54)
酸モノマー25を26に代え、1,4-キシリルジアミンを1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン(フルカ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物54(54mg、49％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.35-6.65(m,16H),5.79(m,2H),5.33(d,J=4.8Hz,2H),4.50(s,4H),3.87(s,6H),3.86(s,6H),3.59(br.s,12H),3.35(m,2H),3.20(m,2H),2.60(m,4H),2.38(d,J=13.4Hz,2H),2.28(m,2H),2.10(m,2H),1.90-1.40(m,20H),1.23(s,6H),1.22(s,6H),0.90(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.1,168.4,167.7,157.8,149.3,147.8,142.3,133.7,130.4,120.5,114.7,113.6,112.2,111.8,70.6,70.1,67.8,56.3,56.2,51.6,47.1,44.5,39.2,38.6,32.9,31.6,26.8,25.3,23.8,23.6,21.6,9.1。MS(FAB):(M+Na)+1301。
実施例20．  1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-ジメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](60)
酸モノマー25を26に代え、1,4-キシリルジアミンを1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカン(Dietrich,B.;Lehn,J.-M.;Sauvage,J.P.;Blanzat,J.,Tetrahedron,1973,29,1628の文献記載の方法を用いて調製)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物60(64mg、50％)を無色ガム状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)7.35-6.65(m,16H),5.79(m,2H),5.33(d,J=4.8Hz,2H),4.50(s,4H),3.87(s,6H),3.86(s,6H),3.61(m,16H),3.38(m,2H),3.20(m,2H),2.60(m,4H),2.38(m,2H),2.28(m,2H),2.10(m,2H),1.90-1.40(m,20H),1.23(s,6H),1.22(s,6H),0.90(t,J=7.4Hz,6H);13C NMR(CDCl3,75MHz)(単一ジアステレオマー、複数の回転異性体混合物)208.2,170.1,168.4,167.7,157.8,149.3,147.8,142.3,133.7,130.4,120.5,114.7,113.6,112.2,111.8,108.0,70.6,70.1,67.8,56.3,56.2,51.6,47.1,44.5,39.2,38.6,32.9,31.6,26.8,25.3,23.8,23.5,21.6,9.1。MS(FAB)：(M+Na)+1345。
実施例21．  1,5-ジアミノペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](45)
酸モノマー25を27に代え、1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノペンタンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物45(33mg、34％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1315。
実施例22．  1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](50)
酸モノマー25を27に代え、1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・二塩酸塩(アルドリッチ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物50(41mg、46％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1317。
実施例23．  1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](55)
酸モノマー25を27に代え、1,4-キシリルジアミンを1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン(フルカ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物55(37mg、38％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1361。
実施例24．  1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4,5-トリメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](61)
酸モノマー25を27に代え、1,4-キシリルジアミンを1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物61(27mg、32％)を白色発泡物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1405。
実施例25．  1,5-ジアミノペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](46)
酸モノマー25を28に代え、1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノペンタンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物46(42mg、42％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1223。
実施例26．  1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](51)
酸モノマー25を28に代え、1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・二塩酸塩(アルドリッチ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物51(39mg、34％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1225。
実施例27．  1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](56)
酸モノマー25を28に代え、1,4-キシリルジアミンを1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン(フルカ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物56(55mg、47％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1269。
実施例28．  1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-メチレンジオキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](62)
酸モノマー25を28に代え、1,4-キシリルジアミンを1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従い、化合物62(52mg、42％)を無色ガム状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1313。
実施例29．  1,5-ジアミノペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3-ピリジル))プロピル)フェノキシアセタミド](47)
酸モノマー25を29に代え、1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノペンタンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物47(64mg、58％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1137。
実施例30．  1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3-ピリジル))プロピル)フェノキシアセタミド](52)
酸モノマー25を29に代え、1,4-キシリルジアミンを1,5-ジアミノ-3-オキサペンタン・二塩酸塩(アルドリッチ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物52(52mg、55％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1139。
実施例31．  1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3-ピリジル))プロピル)フェノキシアセタミド](57)
酸モノマー25を29に代え、1,4-キシリルジアミンを1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン(フルカ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物57(48mg、47％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1183。
実施例32．  1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3-ピリジル))プロピル)フェノキシアセタミド](63)
酸モノマー25を29に代え、1,4-キシリルジアミンを1,11-ジアミノ-3,6,9-トリオキサウンデカンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従い、化合物63(58mg、55％)を無色ガム状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1227。
実施例33．  1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3-インドリル))プロピル)フェノキシアセタミド](58)
酸モノマー25を30に代え、1,4-キシリルジアミンを1,8-ジアミノ-3,6-ジオキサオクタン(フルカ社)に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物58(20mg、20％)を白色泡状物として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1259。
実施例34．  エチレンジアミン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-ジメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](64)
酸モノマー25を26に代え、1,4-キシリルジアミンをエチレンジアミン二塩酸塩に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物64(126mg、59％)を白色固体として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)及び13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1213。
実施例35．  エチレンジアミン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3-ピリジル))プロピル)フェノキシアセタミド](65)
酸モノマー25を29に代え、1,4-キシリルジアミンをエチレンジアミン二塩酸塩に代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物65(79mg、59％)を白色固体として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)及び13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+H)+1073。
実施例36．  N,N’-ジメチルエチレンジアミン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3,4-ジメトキシフェニル))プロピル)フェノキシアセタミド](66)
酸モノマー25を26に代え、1,4-キシリルジアミンをN,N’-ジメチルエチレンジアミンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物66(118mg、55％)を白色固体として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+Na)+1241。
実施例37．  N,N’-ジメチルエチレンジアミン・N,N’-ビス[2-(3-((1R)-1-((2S)-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソペンチル)ピペリジン-2-カルボニルオキソ)-3-(3-ピリジル))プロピル)フェノキシアセタミド](67)
酸モノマー25を29に代え、1,4-キシリルジアミンをN,N’-ジメチルエチレンジアミンに代えた以外は、実施例10と同様の方法に従って、化合物67(70mg、37％)を白色固体として得た。1H NMR(CDCl3,300MHz)および13C NMR(CDCl3,75MHz)は正しい。MS(FAB):(M+H)+1101。
合成の概要、第２部
0004470226.tif 000024
合成の詳細
(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-ヒドロキシ)ブチル-2-ピペリジンカルボン酸メチル(71)
エチルエステル類似物についてD.A.Holt等，J.Am.Chem.Soc.,1993,115,9925-9938に報告された方法に従って調製。
1H NMR(CDCl3)δ 5.25(dist d,J=5.2Hz,1H),3.78(s,3H),3.59-3.71(m,2H),3.49(br.d,J=13.8Hz,1H),3.37(t,J=6.4Hz,1H),3.18(td,J=12.9,3.3Hz,1H),2.32(br d,J=14.0Hz,1H),1.25-1.80(m,5H),1.23(s,6H)。MS(DCI/NaI)m/z 289(M+NH4),272(M+H)。
(2S)-1-{3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-[2-(トリメチルシリル)エトキシ]メトキシ}ブチル-2-ピペリジンカルボン酸メチル(72)
(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-ヒドロキシ)ブチル-2-ピペリジンカルボン酸メチル,71(1.80g、6.6mmol)、N,N’-ジイソプロピルエチルアミン(1.03ｇ、8.0mmol)、および2-(トリメチルシリル)エトキシメチルクロライド(1.33ｇ、8.0mmol)のジクロロメタン(25mL)溶液を室温で21.5時間攪拌した。この溶液を濃縮し、残渣をクロマトグラフィー処理(シリカゲル、ヘキサン−酢酸エチル10：１乃至６：１傾斜)して、標記化合物(2.60g)を無色液体として得た。
1H NMR(CDCl3)δ 5.22(br.d,J=5.1Hz,1H),4.62(s,2H),3.73(s,3H),3.49-3.71(m,5H),3.14(td,J=13.3Hz,3.4H,1H)),2.28(br d,J=14.0Hz,1H),1.18-1.77(m,5H),1.30(s,3H),1.27(s,3H),0.84-0.94(m,2H),0.00(s,9H)。MS(FAB+/NaI)m/z。
(2S)-1-{3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-[2-(トリメチルシリル)エトキシ]メトキシ}ブチル-2-ピペリジンカルボン酸(73)
(2S)-1-{3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-[2-(トリメチルシリル)エトキシ]メトキシ}ブチル-2-ピペリジンカルボン酸メチル、72(2.50ｇ、6.2mmol)、１N水酸化リチウム(9.3mL)およびメタノール(10mL)の混合物を０℃で30分間、次いで室温で７時間攪拌した。この混合物を１N HClで酸性にし、水で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。有機抽出液を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して、無色油状物(2.11ｇ)を得た。これをさらに精製せずに使用した。
1H NMR(CDCl3)δ 10.25(br s,1H),5.27(d,J=4.9Hz,1H),4.61(s,2H),3.68(dist.t,J=9.4,9.9Hz,1H),3.49-3.60(m,4H),3,11-3.20(m,1H),2.31(br d,J=13.7Hz,1H),1.36-1.79(m,5H),1.29(s,3H),1.27(s,3H),0.91(td,J=8.4,3.0Hz,2H),0.00(s,9H)。13C NMR(CDCl3)δ 207.5,176.9,168.7,96.4,75.0,66.6,52.5,48.8,45.3,27.7,26.2,23.9(2C),22.6,19.5,0.00。MS(FAB-)m/z 386(M-H)。
(1R)-1,3-ジフェニル-1-プロピル・(2S)-1-{3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-[2-(トリメチルシリル)エトキシ]メトキシ}ブチル-2-ピペリジンカルボキシレート(74)
(2S)-1-{3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-[2-(トリメチルシリル)エトキシ]メトキシ}ブチル-2-ピペリジンカルボン酸、73(1.00ｇ、2.6mmol)および(1R)-1,3-ジフェニル-1-プロパノール(0.72ｇ、3.4mmol)のジクロロメタン(10mL)溶液を、N,N-ジシクロヘキシルカルボジイミド(0.70ｇ、3.4mmol)および4-ジメチルアミノピリジン(0.22ｇ、1.8mmol)で処理した。得られた懸濁液を窒素雰囲気下に室温で17時間攪拌した。混合物を次いで少量の酢酸エチルで希釈し、濾過し、濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィーで処理して(シリカゲル、ヘキサン−酢酸エチル８：１)、標記化合物(1.33ｇ)を無色油状物として得た。
1H NMR(CDCl3)δ 7.14-7.32(m,10H),5.27-5.47(m,1H),5.08(br d,J=5.2Hz,1H),4.59(AB q,JAB=6.8Hz,2H),3.66(dd,J=9.2,8.6Hz,1H),3.48-3.62(m,3H),3.33(br d,J=13.1Hz,1H),2.70-2.92(m,5H),2.00(br d,J=11.5Hz,1H),1.21-1.49(m,5H),1.27(s,3H),1.25(s,3H),0.86-0.95(m,2H),0.00及び-0.22(2xs,9H)。
MS(FAB+/NaI)m/z 604(M+Na)。精密質量:C33H47NSiO6の計算値(M+Na)604.3070；実測値604.3073
(1R)-1,3-ジフェニル-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-ヒドロキシ)ブチル-2-ピペリジンカルボキシレート(75)
(1R)-1,3-ジフェニル-1-プロピル・(2S)-1-{3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-[2-(トリメチルシリル)エトキシ]メトキシ}ブチル-2-ピペリジンカルボキシレート、74(0.75ｇ、1.3mmol)および48wt% HF(0.5mL)のアセトニトリル(25mL)溶液を室温で４時間攪拌した後、10％炭酸水素ナトリウム水溶液と酢酸エチルとの間で分配させた。有機層を傾斜分離し、水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、残渣をクロマトグラフィー処理(シリカゲル、ヘキサン−酢酸エチル４：１乃至２：１傾斜)して、化合物75(0.45ｇ)を無色油状物として得た。
1H NMR(CDCl3)δ 7.10-7.27(m,10H),5.38-5.47(m,1H),5.04(br d,J=5.3Hz,1H),3.47-3.621(m,3H),3.29(br d,J=13.9Hz,1H),2.67-2.93(m,5H),2.00(br d,J=12.8Hz,1H),1.17-1.57(m,5H),1.15(s,3H),1.14(s,3H)。MS(FAB+/NaI)m/z 474(M+Na)。精密質量：C25H33NO5の計算値(M+Na)474.2256;実測値474.2273。
(1R)-1,3-ジフェニル-1-プロピル・(2S)-1-[3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-(1-スクシンイミジルオキシカルボニル)オキシ]ブチル-2-ピペリジンカルボキシレート(76)
((1R)-1,3-ジフェニル-1-プロピル・(2S)-1-(3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-ヒドロキシ)ブチル-2-ピペリジンカルボキシレート75(223mg、0.49mmol)のジクロロメタン(13mL)溶液を、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.8mL)およびN,N’-ジスクシンイミジルカーボネート(385mg)で処理し、混合物を室温で66時間攪拌した。混合物を次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して、黄色油状物(280mg)を得た。これをさらに精製せずに使用した。
1H NMR(C6D6)δ 7.11-7.32(m,10H),5.56-5.65(m,1H),5.36(br d,J=5.1Hz,1H),4.51(d,J=10.5Hz,1H),4.17(d,J=10.5Hz,1H),3.52(br d,J=13.4Hz,1H),2.71-3.11(m,5H),1.99(br d,J=14.4Hz,1H),1.70(brs,4H),1.01-1.38(m,11H)。
13C NMR(C6D6)δ 205.4,171.0,169.7,168.2,153.5,139.2(139.0),131.2,130.2,130.1,129.8,129.5,129.2,128.3(128.2),77.9,76.9,53.1,48.4,45.3,41.9,41.8,27.7,26.6(2C),26.3,23.5,22.5,22.3。MS(FAB+/NaI)m/z 615(M+Na),474,434。
精密質量:C32H36N2O9の計算値(M+Na)615.2319;実測値615.2299。
2,2-(エチレンジオキシ)ジエチルアミン・N,N’-{2,2-ジメチル-3,4-ジオキソ-4-{(2S)-2-[(1R)-1,3-ジフェニルプロピルオキシカルボニル]-1-ピペリジニル}ブチルカルバメート(77)
(1R)-1,3-ジフェニル-1-プロピル・(2S)-1-[3,3-ジメチル-1,2-ジオキソ-4-(1-スクシンイミジルオキシカルボニル)オキシ]ブチル-2-ピペリジンカルボキシレート、76(75mg、0.13mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(66.3μL)のアセトニトリル(4mL)溶液を、2,2’-(エチレンジオキシ)ジエチルアミン(9.3μL)で処理し、混合物を室温で21時間攪拌した。溶媒を除去し、残渣をクロマトグラフィー処理(シリカゲル、ヘキサン−酢酸エチル１：３乃至１：２傾斜)して、標記化合物(20mg)を無色油状物として得た。
1H NMR(CDCl3)δ 7.10-7.55(m,20H),5.48(br dd,J=12.2,6.1Hz,2H),5.20-5.35(br s,2H),5.09-5.18(m,2H),4.22(AB q,JAB=10.6Hz,4H),3.48-3.80(m,8H),3.20-3.45(m,6H),2.80-3.15(m,10H),1.98-2.08(m,2H),1.17-1.68(m,22H)。13C NMR(CDCl3)δ 205.3,170.1,166.9,156.6,137.6,137.3,129.7(2C),128.9,128.8,127.1,127.0,76.9,70.6,70.4,(69.9),(60.8),(56.9),51.6,47.3,(47.2),44.0,41.2,40.7,40.5,(40.2),(39.0),(28.1),26.8,25.2,(24.7),22.3,(22.2),21.8,(21.4),21.0,(20.8),14.6。
MS(FAB+/NaI)m/z 1125(M+Na)。
p-キシリレンジアミン・N,N’-{2,2-ジメチル-3,4-ジオキソ-4-{(2S)-2-[(1R)-1,3-ジフェニルプロピルオキシカルボニル]-1-ピペリジニル}ブチルカルバメート(78)
p-キシリレンジアミンのジメチルホルムアルデヒド溶液(0.1mM、0.5mL)を、化合物76(66mg、0.11mmol)およびトリエチルアミン(46μL)のアセトニトリル(1mL)溶液に、30分間かけて滴下した。混合物を次いで酢酸エチルと水との間で分配させ、有機層を傾斜分離し、水洗シ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して、黄色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー(シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル１：１)により、標記化合物(33mg)を無色油状物として得た。
1H NMR(C6D6)δ 7.34-7.55(m,24H),5.72-5.85(m,2H),5.64-5.68(m,2H),5.35-5.45(m,2H),4.77(AB q,JAB=10.8Hz,4H),4.46-4.57(m,4H),3.64(br d,J=12.2Hz,2H),2.92-3.25(m,10H),2.14(br d,J=13.2Hz,2H),1.20-1.75(m,22H)。
MS(FAB+/NaI)m/z 1113(M+Na)。
細胞系トランスフェクション検定
一般に、二量体化剤の検定を次のようにして行った。ヒト293細胞を、プラスミドPCGNNGF3およびPCGNNF3VP16(それぞれ３コピーのFKBP12に融合したGal4DNA結合ドメイン(aa 1-147)およびVP16活性化ドメイン(aa 411-490)に融合した３コピーのFKBP12を発現する)を用いてリン酸カルシウム法により一時的にトンラスフェクションした。これらの検定で用いたリポーター・プラスミド(G5IL2-SEAP)は、最小IL2プロモーターおよびこのプロモーターの上流に位置する5XGAL4結合サイトの制御下で分泌アルカリ性ホスファターゼ(SEAP)をコードする遺伝子を含んでいる。どの場合も、成長ホルモンを発現するプラスミドを、トランスフェクション効率を監視するための内部対照として使用した。
トランスフェクションから約16時間後に、培地を取り出し、細胞をPBSで２回洗浄した。細胞に、血清10％を含有するDMEM 2.5mLを再供給し、２時間後に、合成二量体化剤をエタノール・キャリアー溶液５μL中の適当な濃度で培地に直接添加した。この薬剤の添加から約24時間後に、100μLの培地を取り出してSEAP活性について検定し、別の100μLの培地を用いて成長ホルモン活性について検定した(トランスフェクション効率を標準化するために)。
この検定系における本発明の多量体化剤のサンプルの結果を、次の表に示すように0.1ないし104nMの多量体化剤の濃度で、hGH発現に対して標準化して、多量体化剤のプロトタイプであるFK1012(上掲のSpencer等，Scienceを参照)で認められた最大転写活性に対する％で表示した。本発明の多量体化剤は、キメラタンパク質の種類や系の他の成分(要素)の種類に応じて、その認められる活性がいくらか変動することは承知されたい。対象となる系の種類に応じて、多量体化剤の機能に基づいて実施者は多量体化剤を選択することが推奨される。
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