(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物、
【化１】
0004425905.tif 000010
であって、
式中、
Ｒは、水素であり、
Ｒ’は、水素またはＣ1-4アルキルであり、
Ａは、アルコキシ、ニトロ、パーフルオロアルキル、フェノキシ、フェニル、フェニルアルコキシ、ベンゾイルオキシ、およびチオアルコキシから選択される１個または複数の基で置換されたフェニルであり、
Ｌは、二重結合またはＲ’が上記で定義のＮＲ’基を任意選択的に含む炭素原子１個から５個の鎖であるか、あるいは存在せず、
Ｘは、存在せず、
ｒおよびｍは、独立して、０、１または２であり、
Ｂは、フェニレンであることを特徴とする化合物。
【請求項２】
Ｌはメチレンまたはエチレンであることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ｍおよびｒはゼロであることを特徴とする請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ’は水素であることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［３−（３−メトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−メトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−エトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［３−（３，５−ビス−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオニルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−メチルスルファニル−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３−ニトロ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３−フェノキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（ジフェニル−４−イル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２，３−ジメトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
安息香酸の２−［２−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイル）−エチル］−フェニルエステル；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−ニトロ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２−フェノキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４，５−ジメトキシ−２−ニトロ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２−ベンジルオキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２−ニトロ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド、
から選択されることを特徴とする化合物。
【請求項６】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−メトキシフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミドであることを特徴とする請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
薬として使用することを特徴とする請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物を使用する方法であって、脊椎関節症、関節リウマチ、急性アルコール性肝炎、腸炎症症候群（クローン病および潰瘍性大腸炎）、喘息、糖尿病、心不全、脳内出血、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、糸球体腎炎、全身性エリテマトーデス、慢性肺閉塞症、肺線維症、多発性硬化症、敗血症、敗血症性ショックなどの疾患を治療するために、抗炎症活性および／または自己免疫活性を有する薬の調製に化合物を使用する方法。
【請求項９】
請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物を使用する方法であって、腫瘍性疾患および／または神経変性疾患を治療するための薬を調製に化合物を使用する方法。
【請求項１０】
請求項１から６のいずれか一項に記載の前記化合物、および抗腫瘍作用を有する少なくとも１種の活性成分を使用する方法であって、腫瘍性疾患および神経変性疾患を治療するための薬の調製に化合物を使用する方法。
【請求項１１】
適切な賦形剤および／またはビヒクルと混合した請求項１から６のいずれか一項に記載の前記化合物を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１から６のいずれか一項に記載の前記化合物、および抗腫瘍作用を有する少なくとも１種の活性成分を、適切な賦形剤および／またはビヒクルと混合して含むことを特徴とする医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒドロキサム酸誘導体、特に抗炎症活性および抗腫瘍活性を有するＮ−ヒドロキシベンズアミド誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗炎症活性および免疫抑制活性を有するヒドロキサム酸誘導体は、特許文献１に記載されている。これらの化合物は、炎症誘発性）サイトカイン、特にＴＮＦα（腫瘍壊死因子）およびインターロイキン−１βの産生を阻害することができるので、炎症性疾患および自己免疫疾患または腫瘍形成など、これらの物質の過剰な産生を伴う状態の治療に使用することができる。
【０００３】
特許文献１に記載されている化合物は、そこにカルバメート基または尿素基が結合しており、その１つがＮ−ヒドロキシ−カルボキシアミド（ヒドロキサム酸）基に結合している、２つの環状構造を含むことを特徴とする。
【０００４】
【特許文献１】米国特許第６，０３４，０９６号明細書
【非特許文献１】Expert Opin. Emerging Drugs (2002) 7(2): 235-246
【非特許文献２】Lancet (1999) 354(9194): 1932
【非特許文献３】Am. J. Gastroenterology (2001) 96(12): 3361-3367
【非特許文献４】Drugs of Today (2000) 36(5): 281-293
【非特許文献５】Heart Fail. Rev. (2001) 6(2): 143
【非特許文献６】Int. J. Biochem. Cell Biol. (2000) 32(8): 833
【非特許文献７】Stroke (2001) 32: 240-248
【非特許文献８】Drugs Today (1999) 35(12): 913
【非特許文献９】J. Autoimmun. (2003) 20(4): 303-312
【非特許文献１０】Pancreas. (2003) 26(4): E99-E104)
【非特許文献１１】TRENDS in Endocrinology & Metabolism (2001) 12 (7): 294-300
【非特許文献１２】Nature (2001) 413: 739-743
【非特許文献１３】J. Clinical Investigation (2003) 111: 539-552
【非特許文献１４】Remington's Pharmaceutical Sciences Handbook, XVII, ed. Mack Pub., N.Y., U.S.A.
【非特許文献１５】Richter, L.S. and Desai M.C., Tetrahedron Letters (1996) 38(3): 321-322
【非特許文献１６】Biochem. Biophys. Acta, 1996, vol. 1296, p. 181
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
第１の環状構造に、特許文献１に記載されているもの以外の適切な置換基を導入することによって、ＴＮＦα阻害活性の効力を調節することが可能であり、代謝的に安定であり細胞毒性が極めて低い化合物を得ることが可能であることが分かった。したがって、これらの化合物は、ＴＮＦαおよび他の炎症誘発性サイトカインの産生が病理的役割を演じる炎症性疾患および／または自己免疫疾患の治療に有用に使用することができる。
【０００６】
さらに、本発明の化合物が、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）の阻害剤であり、したがって、これらの酵素の阻害が有用な様々な腫瘍、自己免疫、または神経変性の病理的状態の治療にも有用に使用できることが見出された。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の対象は、式（Ｉ）のヒドロキサム酸誘導体、
【０００８】
【化１】
0004425905.tif 000002
【０００９】
であって、
式中、
Ｒは、水素、Ｃ1-4アルキルまたはフェニルであり、
Ｒ’は、水素またはＣ1-4アルキルであり、
Ａは、アリール、またはＮ、ＳおよびＯからなる群から選択される１個もしくは２個以上のヘテロ原子を含む、任意選択的に部分的もしくは完全に不飽和の単環、二環、もしくは三環の残基であって、ハロアルキル、アルキルスルホニル、（シクロアルキル）アルキル、アルカノイル、カルボニルオキシ、アルコキシ、チオアルコキシ、チオフェノキシ、ニトロ、シアノ、オキソ、パーフルオロアルコキシ、パーフルオロアルキル、フェニル、フェノキシ、フェニルアルコキシ、ベンゾイルオキシ、フェニルアルキル、ベンゾイル、フェニルスルホニルの各基で置換することが可能であり、前記フェニル、フェノキシ、フェニルアルコキシ、フェニルアルキル、ベンゾイル、およびベンゾイルオキシの各置換基の芳香族環は、アルキル、アルコキシ、アルキルスルホニル、アミノ、シアノ、ヒドロキシ、ニトロ、パーフルオロアルコキシ、パーフルオロアルキル、フェニルスルホニル、チオアルコキシおよびハロゲンの各基で、任意選択的に置換されており、
Ｌは、任意選択的に二重結合またはＲ’が上記で定義のＮＲ’基を含む炭素原子１個から５個の鎖であり、
Ｘは、酸素原子、Ｒ’が上記で定義のＮＲ’基であるか、または存在せず、
ｒおよびｍは、独立して、０、１または２であり、
Ｂは、フェニルまたはシクロヘキシルである。
【００１０】
本発明の好ましい化合物では、
Ｒは、水素またはメチル、より好ましくは水素であり、
Ａはフェニルであり、好ましくは、アルコキシ、ニトロ、パーフルオロアルキル、フェノキシ、フェニル、フェニルアルコキシ、ベンゾイルオキシ、チオアルコキシから選択される１個または複数の基で置換されており、
Ｌはメチレンまたはエチレンであり、Ｘは存在せず、
ｍおよびｒはゼロに等しく、
Ｂはフェニルであり、
Ｒ’は水素である。
【００１１】
さらに、以下の化合物が特に好ましい。
【００１２】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−ブチリルアミノ）−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［３−（３−メトキシ−フェニル）−プロピオニルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−メトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−エトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［３−（３，５−ビス−トリフルオロメチル−フェニル）−プロピオニルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３，４，５−トリメトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−メチルスルファニル−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３−ニトロ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３−フェノキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（ジフェニル−４−イル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２，３−ジメトキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
安息香酸の２−［２−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイル）−エチル］−フェニルエステル；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−ニトロ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２−フェノキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４，５−ジメトキシ−２−ニトロ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２−ベンジルオキシ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド；
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２−ニトロ−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド。
【００１３】
本発明の第１の態様である一般式（Ｉ）の化合物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏにおいてナノモル濃度で、ＴＮＦαの産生、および他の炎症誘発性サイトカインの産生を阻害することができる。
【００１４】
本発明の第２の態様は、ＴＮＦαの過剰な産生および／または他の炎症誘発性サイトカインの過剰な産生を特徴とする、例えば、脊椎関節症（例えば、非特許文献１参照）、関節リウマチ（例えば、非特許文献２参照）、急性アルコール性肝炎（例えば、非特許文献３参照）、クローン病および潰瘍性大腸炎などの腸炎症症候群（例えば、非特許文献４参照）、心不全（例えば、非特許文献５参照）、喘息（例えば、非特許文献６参照）、脳内出血（例えば、非特許文献７参照）、乾癬（例えば、非特許文献８参照）、糖尿病（例えば、非特許文献９および１０参照）などの、炎症性および自己免疫性の病理的状態を治療するために、単独または他の活性成分と組合せた、一般式（Ｉ）の化合物の使用から構成される。
【００１５】
本発明の第３の態様では、一般式（Ｉ）の化合物は、ヒストン脱アセチル化酵素活性の阻害剤である。
【００１６】
したがって、本発明のさらなる態様は、腫瘍の病理的状態（例えば、非特許文献１１参照）、神経変性の病理的状態（例えば、非特許文献１２参照）、および自己免疫の病理的状態（例えば、非特許文献１３参照）を治療するために、単独または他の活性成分と組合せた、一般式（Ｉ）の化合物の使用から構成される。
【００１７】
また、この化合物（Ｉ）は、ヒストン脱アセチル化酵素の阻害剤であり、したがって、単独でまたは他の抗腫瘍活性成分と組合せて、腫瘍性疾患に有用となりうる。抗腫瘍効果をできるだけ高めるには、この化合物（Ｉ）を、例えば抗増殖活性成分などのＨＤＡＣ阻害以外の作用機構を有する抗腫瘍活性成分と組合せて投与することが好ましい。
【００１８】
したがって、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物も本発明の対象である。これらの組成物は、経口投与、筋肉内投与、または静脈内投与のための、カプセル、錠剤、コーティング錠、クリーム、軟膏または薬びんの形態とすることができる。
【００１９】
上記の医薬組成物では、式（Ｉ）の化合物は、単独でまたは他の活性成分と組合せて、任意選択的に、例えば非特許文献１４に記載されたような通常の賦形剤またはビヒクルと混合することができる。
【００２０】
式（Ｉ）の化合物は、参照により本明細書に組み込まれている特許文献１に記載の方法によって調製することができる。あるいは、本発明の化合物は、Ｎ−ヒドロキシアミド用の市販されている特別な樹脂の１つを使用して、「固相」有機合成によって調製することができる。例えば、ジビニルベンゼンで架橋し、ｐ−アルコキシベンジル残基からのＯ−アルキル化ヒドロキシルアミン基で官能化したポリスチレン樹脂（Ｗａｎｇ型樹脂）を使用することができる（例えば、非特許文献１５参照）。
【００２１】
この樹脂に存在するアミン基を、適切な縮合剤の存在下、適切に保護されたアミノ酸によってアシル化して、式の中間体を得ることができる。
【００２２】
Ｇ−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｂ−（ＣＨ2）r−ＣＯＮＨＯ−樹脂（ＩＩ）
（式中、Ｇは適切な保護基であり、ｍ、ｒおよびＢは一般式（Ｉ）で定義された意味を有する）
保護基Ｇを除去した後、式（ＩＩＩ）の酸を用いて、活性化した後、または適切な縮合剤の存在下において、アミン基をさらにアシル化することができる。
【００２３】
【化２】
0004425905.tif 000003
【００２４】
（式中、Ｒ、Ａ、ＬおよびＸは、一般式（Ｉ）で定義された意味を有する）  最後に、中力価の酸（例えば、トリフルオロ酢酸）での処理、ろ過、およびおそらく最後の精製を行うことによって、本発明の生成物を樹脂から外すことができる。
【００２５】
以下、本発明の対象をさらに説明するだけの目的を有し、決して本発明を限定する意図はない、いくつかの実施例を用いて、本発明を例証する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
以下の略語を、以下に記載の実施例で使用する。 
ＡＣＮ      アセトニトリル
ＰＶＤＦ    ポリ二フッ化ビニリデン
ＤＣＭ      ジクロロメタン
ＤＭＦ      ジメチルホルムアミド
ＨＯＡｔ    １−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＡＴＵ    Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−ｌ−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウムヘキサフルオロリン酸塩
ＴＦＡ      トリフルオロ酢酸
（一般的な精製方法）
特に指示のない限り、最後の精製のすべては、Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ質量分析計を備えた、Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ１８、５μｍ、１９×５０ｍｍカラムを用いて、Ｗａｔｅｒｓ  ＨＰＬＣ／ＭＳ調製システムで行った。
【００２７】
（操作条件）
ＥＳ＋セントロイドイオン化、走査時間１５分、走査ｍ／ｚ１２０〜１０００、コーン電圧１５Ｖ、ソース温度１２０℃、溶媒和温度２５０℃。
【００２８】
（ＨＰＬＣ溶離液）
Ａ＝Ｈ2Ｏ、Ｂ＝ＡＣＮ、Ｃ＝ＨＣＯＯＨ  １％（Ｈ2Ｏ中）
勾配：
【００２９】
【表１】
0004425905.tif 000004
【００３０】
精製すべき粗生成物のアリコート（３０〜５０ｍｇ）を、０．１ｍｌのＭｅＯＨに溶解し、０．４ｍｌのＡＣＮ／Ｈ2０混合物（１：１；ｖ／ｖ）で希釈した。この溶液を、０．４５μｍＰＶＤＦ膜でろ過し、上記の調製システムに注入した。各走行について、予期される分子イオン（［Ｍ＋Ｈ］+）に関連するピークに対応する分画を採取し、これを再び合わせて、濃縮乾燥した。
【実施例１】
【００３１】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−アセチルアミノ］−ベンズアミド
（ステップＡ）
ＨＯＡｔ（５５ｍｇ、０．４ミリモル）とＨＡＴＵ（１５２ｍｇ、０．４ミリモル）の無水ＤＭＦ（０．５ｍｌ）混合物に、次にジイソプロピルエチルアミン（０．１４ｍｌ、０．８ミリモル）を混合して、４−（９Ｈ−フルオレン−９−イル−メトキシカルボニルアミノ）−安息香酸（１５０ｍｇ、０．４ミリモル）の無水ＤＭＦ（０．５ｍｌ）溶液に加えた。この反応混合物を、室温で３０分間かき混ぜ、次いでヒドロキシルアミン（０．１ｇ；０．１ミリモル）で官能化したＷａｎｇ型ポリスチレン樹脂を含む反応器に移した。この懸濁液を室温で１６時間かき混ぜた。この樹脂を、ろ過し、順に、ＤＭＦ（５×２ｍｌ）、ＤＣＭ（２×２ｍｌ）、ＭｅＯＨ（２×２ｍｌ）、ＤＣＭ（２×２ｍｌ）、ＭｅＯＨ（２×２ｍｌ）、ＤＣＭ（２×２ｍｌ）およびＤＭＦ（５×２ｍｌ）で洗浄し、最後に、樹脂をろ過し真空乾燥した。
【００３２】
（ステップＢ）
Ａで得られた樹脂を、ピペリジンの２０％ＤＭＦ（１ｍｌ）溶液で膨潤させ、室温で１時間攪拌した後ろ過し、ＤＭＦ（５×２ｍｌ）で洗浄し、真空乾燥した。
【００３３】
（ステップＣ）
ＨＡＴＵ（３８１ｍｇ、１ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（２６２μｌ、１．５ミリモル）を、（４−トリフルオロメチル−フェニル）−酢酸（１８４ｍｇ、０．９ミリモル）の無水ＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に加えた。この反応混合物を、室温で３０分間攪拌した後、Ｂで得られた樹脂に加え、室温でさらに２０時間攪拌した。この樹脂を、ろ過し、順に、ＤＭＦ（５×２ｍｌ）、ＤＣＭ（２×２ｍｌ）、ＭｅＯＨ（２×２ｍｌ）、ＤＣＭ（２×２ｍｌ）、ＭｅＯＨ（２×２ｍｌ）、ＤＣＭ（５×２ｍｌ）で洗浄し、最後にろ過し真空乾燥した。
【００３４】
（ステップＤ）
Ｃで得られた樹脂を、ＴＦＡの５０％ＤＣＭ（１ｍｌ）溶液で膨潤させ、室温で１時間攪拌した後ろ過し、溶液を蒸発乾燥させた。残渣にｔ−ＢｕＯＭｅを吸収させ、５回再蒸発させた。こうして得られた粗生成物を、上記の一般的方法に従って、ＨＰＬＣ／ＭＳ調製システムによって精製した。
【００３５】
１０．５ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３３９．３（理論値３３９．１）
【実施例２】
【００３６】
Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニルブチリルアミノ）ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで３−フェニル酪酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００３７】
８．９ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝２９９．３（理論値２９９．１）
【実施例３】
【００３８】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［３−（３−メトキシフェニル）プロピオニルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで３−（３−メトキシフェニル）プロピオン酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００３９】
１５．７ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３１５．３（理論値３１５．１）
【実施例４】
【００４０】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−メトキシフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
（ステップＡ）
４−メトキシフェニル酢酸（５ｇ）をクロロホルム（１５０ｍｌ）に懸濁させた。この懸濁液に塩化チオニル（１０．８ｇ）を加え、加熱還流して、透明な溶液を得た。４時間還流した後、溶媒を真空蒸発させ、残渣に別のクロロホルムを吸収させ、再び蒸発させた。この残渣をテトラヒドロフラン（１００ｍｌ）に溶かし、この溶液に、テトラヒドロフラン（１００ｍｌ）に溶かしたｐ−アミノ安息香酸（４．１ｇ）を加えた。反応混合物を室温に一晩放置した。次いで、この反応混合物を真空蒸発し、残渣を７０％エタノール（２５０ｍｌ）から結晶化させた。５．１ｇの生成物が得られ（収率６０％）、ＨＰＬＣ純度は９７％を超えていた。 
［Ｍ＋Ｈ］+＝２８６．３（理論値２８６．１）
（ステップＢ）
前のステップで得られた生成物（５ｇ）をクロロホルム（１５０ｍｌ）に懸濁させた。塩化チオニル（６．３ｇ）を懸濁液に加え、加熱還流して透明な溶液を得た。４時間還流した後、溶媒を真空蒸発させ、残渣に別のクロロホルムを吸収させ、再び蒸発させた。この残渣をテトラヒドロフラン（１００ｍｌ）に溶かし、テトラヒドロフラン（１００ｍｌ）中のヒドロキシルアミン水溶液（５０％ｗ／ｗ；６．５ｍｌ）に加えた。この反応混合物を室温に一晩放置した。次いで、この反応混合物を真空蒸発させ、残渣を７０％エタノール（１００ｍｌ）から結晶化させた。４．１４ｇの生成物が得られ（収率７８％）、ＨＰＬＣ純度は９９％を超えていた。融点＝１９７．６〜２００℃（dec.）；［Ｍ＋Ｈ］+＝３０１．３（理論値３０１．１）
【実施例５】
【００４１】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−エトキシフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（４−エトキシフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００４２】
１４．９ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３１５．３（理論値３１５．１）
【実施例６】
【００４３】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［３−（３，５−ビストリフルオロメチルフェニル）プロピオニルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで３−（３，５−ビストリフルオロメチルフェニル）プロピオン酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００４４】
１４．９ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝４２１．３（理論値４２１．１）
【実施例７】
【００４５】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（３，４，５−トリメトキシフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００４６】
１１．４ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３６１．４（理論値３６１．１）
【実施例８】
【００４７】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−メチルスルファニルフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（４−メチルスルファニルフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００４８】
１０．６ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３１７．４（理論値３１７．１）
【実施例９】
【００４９】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３−トリフルオロメチルフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（３−トリフルオロメチルフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００５０】
７．９ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３３９．３（理論値３３９．１）
【実施例１０】
【００５１】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３−ニトロフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（３−ニトロフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００５２】
１６．１ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３１６．３（理論値３１６．１）
【実施例１１】
【００５３】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（３−フェノキシフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（３−フェノキシフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００５４】
１４．３ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３６３．４（理論値３６３．１）
【実施例１２】
【００５５】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（ジフェニル−４−イル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（ジフェニル−４−イル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００５６】
９．１ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３４７．３（理論値３４７．１）
【実施例１３】
【００５７】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２，３−ジメトキシフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（２，３−ジメトキシフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００５８】
１０．８ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３３１．３（理論値３３１．１）
【実施例１４】
【００５９】
安息香酸の２−［２−（４−ヒドロキシカルバモイル−フェニルカルバモイル）−エチル］フェニルエステル
この生成物は、ステップＣで安息香酸の２−（２−カルボキシエチル）フェニルエステルを用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００６０】
１８．１ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝４０５．４（理論値４０５．１）
【実施例１５】
【００６１】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４−ニトロフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（４−ニトロフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００６２】
７．２ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３１６．３（理論値３１６．１）
【実施例１６】
【００６３】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２−フェノキシフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（２−フェノキシフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００６４】
１４．２ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３６３．４（理論値３６３．１）
【実施例１７】
【００６５】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（４，５−ジメトキシ−２−ニトロフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（４，５−ジメトキシ−２−ニトロフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００６６】
８．６ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３７６．３（理論値３７６．１）
【実施例１８】
【００６７】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２−ベンジルオキシフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（２−ベンジルオキシフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００６８】
１０．１ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３７７．４（理論値３７７．１）
【実施例１９】
【００６９】
Ｎ−ヒドロキシ−４−［２−（２−ニトロフェニル）アセチルアミノ］ベンズアミド
この生成物は、ステップＣで２−（２−ニトロフェニル）酢酸を用いて、実施例１に記載の方法で調製された。
【００７０】
１２．５ｍｇが得られた。［Ｍ＋Ｈ］+＝３１６．３（理論値３１６．１）
【実施例２０】
【００７１】
ＴＮＦα産生の阻害−ｉｎ  ｖｉｔｒｏの測定
化合物を、最終濃度が１２０ｍＭとなるようにＤＭＳＯに溶かし、−８０℃で保存した。この母液を、ＦＣＳ１％およびＤＭＳＯ０．０１％を加えたＲＰＭＩ１６４０に希釈することによって試験用の溶液を調製し、これを０．２μｍのフィルターでろ過した。
【００７２】
フィコール−ハイパック勾配による分離によって、健康なドナーの「軟層」から末梢血単核細胞を得た。この細胞を、ウェル１個当り、ＦＣＳ１％を含むＲＰＭＩ１６４０に懸濁した細胞約５００，０００個の濃度で、９６ウェルプレートに展開し、様々な濃度（１０-6から１０-11Ｍ）の被試験化合物の存在下、３７℃でインキュベートした。
【００７３】
１時間後、ＬＰＳを加え（最終濃度が１０ｎｇ／ｍｌとなるように；大腸菌０５５：Ｂ５から得たもの）、このプレートを、３７℃でさらに２４時間インキュベートした。完了後、上澄み液を集め、ＥＬＩＳＡ（ＥＬＩＳＡ  Ｄｕｏｓｅｔ  Ｋｉｔ；Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ、ＵＳＡ）によるＴＮＦα含有量の測定に用いた。
【００７４】
ＴＮＦαの濃度は較正曲線を用いて計算した。ＩＣ50値（サイトカインの産生を５０％阻害する濃度）を得られた曲線から計算し、被試験化合物の個々の各濃度について阻害百分率を得た。
【００７５】
上記実施例に記載の化合物で得られた値を、下表に示した（これらの値は、異なるドナーの細胞を用いて行われ、少なくとも２つの測定で得られた結果の平均である）。
【００７６】
【表２】
0004425905.tif 000005
【実施例２１】
【００７７】
ＴＮＦα産生の阻害−ｉｎ  ｖｉｖｏの測定
本発明の化合物について、ＬＰＳの投与で誘起されたＴＮＦαの産生を阻害する能力をマウスで評価した。
【００７８】
致死量のＬＰＳ（大腸菌０５５：Ｂ５；２ｍｇ／ｋｇ）を、腹腔内経路によって動物（ＣＤ１マウスの雌）に投与した。投与後９０分で動物を殺し、血液中に存在するＴＮＦαをＥＬＩＳＡアッセイによって測定した。
【００７９】
メチルセロソルブ（水中０．５％）に懸濁させた試験化合物を、ＬＰＳを投与する６０分前に１ｍｇ／ｋｇの投与量で経口投与した。
【００８０】
結果を下表に示した。数値は、対照群と比較して、ＴＮＦα産生の阻害百分率として表されている。
【００８１】
【表３】
0004425905.tif 000006
【実施例２２】
【００８２】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの代謝抵抗
上記実施例に記載された化合物のいくつかについて、肝細胞のミクロソーム製剤のＳ９画分を用いてこれらの物質をインキュベートすることによって代謝抵抗を評価した。各化合物（６μｇ／ｍｌ）を、Ｓ９画分（タンパク質２ｍｇ／ｍｌ）を含有するリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）中、３７℃で３０分間インキュベートした。氷浴中で冷却し、０．２％のトリフルオロ酢酸を含有する等量の水／アセトニトリル（５０：５０）を加えることによって反応を停止させた。遠心分離の後、上澄み液のアリコートをＨＰＬＣによって分析し、無傷で残った産物の百分率を評価した。
【００８３】
３０分のインキュベーションの後に存在している未変化産物の百分率を下表に示した。
【００８４】
【表４】
0004425905.tif 000007
【実施例２３】
【００８５】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性
上記実施例に記載のいくつかの化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性を、市販の比色法（Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  ９６（登録商標）単一水溶液細胞増殖試験（Ａｑｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ）−Ｐｒｏｍｅｇａ）によって、ヒトＨＥＰ−Ｇ２肝がん細胞系で評価した。この方法では、テトラゾリウム塩を代謝してホルマザンを産生するその能力に基づいて、生きた細胞の数を評価する。産生したホルマザンの量は、生きた細胞の数に比例する。
【００８６】
ＨＰＥ−Ｇ２細胞を、１０％のウシ胎児血清とサプリメントを含有するＭ１９９培地（完全培地）に４×１０4細胞／ウェル（１００μｌ）の濃度で、９６ウェルを有するマイクロプレートに散布した。
【００８７】
２４時間のインキュベーション（３７℃、ＣＯ2５％、湿度９０％）の後、細胞を一回洗浄し、培地を、最終濃度１０-5、１０-6および１０-7Ｍで被試験物質を含有する２００μｌの完全培地と置き換えた。試験は３回行った。
【００８８】
このプレートを、さらに４８時間インキュベートした。その後、１００μｌの培地を除去し、ウェル１つ当り２０μｌの染料溶液をメーカーの取扱説明に従って加えた。３７℃で１時間インキュベーションした後、プレートリーダー（Ｖｉｃｔｏｒ２−Ｗａｌｌａｃｅ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して、光学濃度（λ＝４９０ｎｍ）を読み取った。
【００８９】
結果は、対照と比較して、ホルマザン産生の阻害百分率として表した。濃度１０-6Ｍで得られた値を、下表に示した。
【００９０】
【表５】
0004425905.tif 000008
【実施例２４】
【００９１】
ヒストン脱アセチル化酵素の酵素活性の阻害
ヒストン脱アセチル酵素の活性を阻害する本発明の化合物の能力を、マウスＨＡＤＣ−１酵素を用いて評価した。試験は、既に文献（例えば、非特許文献１６参照）に記載されている方法によって行った。ＩＣ50値（酵素の活性を５０％阻害する濃度）を、試験化合物の様々な濃度で得た阻害の百分率から求めた。これらの値を下表に示した。
【００９２】
【表６】
0004425905.tif 000009