(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般化学式：
【化１】
0004584538.tif 000010
[式中、
Rは、RaRbN-(CH2)mであり、
mは2であり、そして
Nと一緒になったRaRbは、RaRbN-(CH2)mとして、以下：
【化２】
0004584538.tif 000011
【化３】
0004584538.tif 000012
からなる群より選ばれるサイクリックアミン環を形成し；
又はNと一緒になったRaRbは、サイクリックイミド環を形成し；
R2は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、トリ低級アルキルシリル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルカルボニルオキシメチル、1-ヒドロキシ-2-ニトロエチル、アルコキシカルボニルエチル、アミノカルボニル、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルメチル、ベンゾイルメチル、ベンジルカルボニルオキシメチル、又はモノ-又はジ-低級アルコキシメチル；
R3は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、CH2NR7R8（ここで-N-と一緒になったR7とR8は、サイクリックアミン環を表す）、CH2R9（ここでR9は低級アルコキシ、CN、アミノ低級アルコキシ、モノ-又はジ-低級アルキルアミノ低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アミノ低級アルキルチオ、又はモノ-又はジ-低級アルキルアミノ低級アルキルチオ）、又はNR10R11（ここでR10とR11のそれぞれは、独立的に水素、低級アルキル、フェニル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、又はモノ-又はジ-低級アルキルであり、又は-N-と一緒になったR10とR11は、サイクリックアミン環を表す）、ジアルキルアミノ・アルキル、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり；そして
R4は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノ低級アルキル、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、カルバモイルオキシ、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり、又はR5とR4は一緒になってメチレンジオキシを形成し；
R5は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり；
R6は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり；
ここで低級アルキルは、1〜6の炭素原子のアルキルを、そして低級アルコキシは、1〜6の炭素原子のアルコキシを示す。]
で表わされる化合物。
【請求項２】
Nと一緒になったRaRbはサイクリックイミド環を形成する、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化４】
0004584538.tif 000013
である、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
R2からR6のそれぞれは水素（H）あり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化５】
0004584538.tif 000014
である、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化６】
0004584538.tif 000015
である、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化７】
0004584538.tif 000016
である、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化８】
0004584538.tif 000017
である、請求項１記載の化合物。
【請求項８】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化９】
0004584538.tif 000018
である、請求項１記載の化合物。
【請求項９】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化１０】
0004584538.tif 000019
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化１１】
0004584538.tif 000020
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化１２】
0004584538.tif 000021
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化１３】
0004584538.tif 000022
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１３】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化１４】
0004584538.tif 000023
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１４】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化１５】
0004584538.tif 000024
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１５】
R2からR6のそれぞれは、水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化１６】
0004584538.tif 000025
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１６】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化１７】
0004584538.tif 000026
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１７】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化１８】
0004584538.tif 000027
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１８】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-CH2-CH2-が：
【化１９】
0004584538.tif 000028
である、請求項１記載の化合物。
【請求項１９】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化２０】
0004584538.tif 000029
である、請求項１記載の化合物。
【請求項２０】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化２１】
0004584538.tif 000030
である、請求項１記載の化合物。
【請求項２１】
R2からR6のそれぞれは水素（H）であり、そしてRaRbN-(CH2)mが：
【化２２】
0004584538.tif 000031
である、請求項１記載の化合物。
【請求項２２】
R2、R3、R4、R5およびR6のそれぞれは水素（H）である、請求項１記載の化合物。
【請求項２３】
RaRbNがサイクリックアミン環である、請求項２２記載の化合物。
【請求項２４】
RaRbNがサイクリックイミド環である、請求項２２記載の化合物。
【請求項２５】
R6は水素であり；
R4およびR5は一緒になってメチレンジオキシを形成し；そして
R2は水素である、請求項１記載の化合物。
【請求項２６】
R3は、ニトロ、アミノ、メチル、クロロ、シアノ、アセトキシ、又はアセチルアミノである、請求項２３記載の化合物。
【請求項２７】
R5とR6のそれぞれは水素であり；
R3は水素であり；
R2は、(3-クロロ-n-プロピル)ジメチルシリル、tert-ブチルジメチルシリル、アセトキシメチル、シアノ、エトキシカルボニルエチル、メチル、エチル又はn-プロピル；並びに
R4は、ヒドロキシ、アセトキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、クロロ、ブロモ、フルオロ、低級アルキル、低級アルコキシ、カルバモイルオキシ、又はホルミルである、請求項１記載の化合物。
【請求項２８】
R2がエチルであり；そして
R4はカルバモイルオキシである、請求項２７記載の化合物。
【請求項２９】
R4は、1-ピラジニルカルボニルオキシ、4-(1-プロピルアミノカルボニルメチル)-1-ピラジニル-カルボニルオキシ、又は4-(1-ピペリジオ)-1-ピペリジノカルボニルオキシである、請求項２８記載の化合物。
【請求項３０】
R2、R5およびR6のそれぞれは水素であり；
R3は、アミノ、ニトロ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキルアミノ、ジ-低級アルキルアミノ、低級アルキル、低級アルコキシ、1-ピペリジノ、1-モルフォリノ、アミノメチル、低級アルキルアミノメチル、シクロアルキルアミノメチル、ジ-低級アルキルアミノメチル、サイクリック・アミノメチル、アセトキシ、アセチルアミノ、低級アルコキシメチル、ωヒドロキシ低級アルキルアミノメチル、又はシアノメチルであり；並びに
R4は、ヒドロキシ、アセトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロ、ホルミル、低級アルコキシ、又はカルバモイルオキシである、請求項１記載の化合物。
【請求項３１】
R2、R3、R5とR6のそれぞれは水素であり；そして
R4は低級アルキルカルボニルオキシである、請求項１記載の化合物。
【請求項３２】
薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて、請求項１〜３１のいずれか１項記載の化合物を含む、温血動物のガン治療医薬組成物。
【請求項３３】
経口投与に好適である、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３４】
静脈内への投与に好適である、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３５】
筋肉内への投与に好適である、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３６】
請求項１〜３１のいずれか１項記載の化合物を含む、温血動物のガン治療のための医薬。
【請求項３７】
動物がヒトである、請求項３６記載の医薬。
【請求項３８】
化合物が経口により投与される、請求項３６又は３７記載の医薬。
【請求項３９】
化合物が静脈内により投与される、請求項３６又は３７記載の医薬。
【請求項４０】
化合物が非経口により投与される、請求項３６又は３７項記載の医薬。
【請求項４１】
請求項１記載の化合物の調製方法であって、
(a) 化学式R-C(O)Xの化合物、（式中Rは、請求項１にて定義されたようにRaRbN(CH2)2であり、Xは臭素、塩素、ヒドロキシ又は1〜11個の炭素のアルコキシである）；と
(b) 以下の化学式：
【化２３】
0004584538.tif 000032
[式中、R2、R3、R4、R5およびR6は、請求項１にて定義されている]
の化合物とを反応させること、
を含む、前記方法。
【請求項４２】
反応が、結合剤、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミドとハイドロクロライド、そして触媒としての4-(ジメチルアミノ)ピリジンの存在下にて行われる、請求項４１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、種々の型のガンを治療するために有益である新規なカンプトテシン誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
1966年にWall及び協働研究者によりCamptotheca acuminata(Nyssaceae)の木材又は樹皮から最初に単離された植物毒性のアルカロイド、(しばしば「CPT」と略される)カンプトテシンは、マウス白血球L1210系に対する抗腫瘍作用を有することが示された。その化合物が、20Ｓ構造にて、環Eに不斉中心を有するペンタサイクリック環系を有する。ペンタサイクリック環系が、ピロロ[3,4-b]キノリン(リングA,B,及びC)、結合ピリジン環D),及び20S-水酸基を有する6要素としてのラクトン(環E)を含む。カンプトテシンそれ自体は、水に良く溶ける。従って、初期段階に水に可溶なカルボン酸ナトリウム塩として臨床的に評価された。実際にこのカルボキシレート塩は、E環を開環しナトリウム塩を形成する化合物であることは、明らかである。このナトリウム塩は、極めて毒性が強く、抗癌性作用をほとんど有していない。従って初期のカンプトテシンに関する研究では、フェーズII試験開始以後、継続されていなかった。それが、複製及び転写などの分子事象の間、DNAのスイベル及び弛緩に必要な酵素、トポイソメラーゼを抑制することが見出された時、再度この化合物に関心を集めることになった。この分子の多くの合成及び修飾が文献に記載され、そして多年にわたり新しい誘導体が、調製されてきた。たとえばトポテカン(9-ジメチルアミノメチル-l0ーヒドロキシCPT)及びイリノテカン(7-エチル-10[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ] カルボニルオキシCPT)が、臨床的に有益な作用を示している。本発明では、種々のガンの治療に新たな1連の20Sエステルが明示された。新規の化合物は、CPT及びCPT誘導体より有意的に高い効能と有意的に低い毒性を有している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明の1つの観点は、以下の一般化学式(I)の化合物において、
【化１】
0004584538.tif 000002
ここでRは、RaRbN(CH2)mであり、mは、1-10の整数(好ましくは2)であり、そして各Ra及びRbは、独立してハロゲン、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ又はアミノから成る群から独立的に選択される1乃至5の置換基により独立的に置換された低級アルキル基；
ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ホルミル、低級アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、ベンジルオキシ、所望により置換ピペリジノ、低級アルコキシカルボニル、及び低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立的に選択される1乃至5の置換基にて所望により置換されるフェニル；
ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、及び低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立的に選択される1乃至5置の置換基にて、所望により置換される3乃至7炭素のシクロアルキル；
低級アルコキシであり；あるいは
RaRbは、Nと一緒になったサイクリック・アミン又はイミド環を形成し；
R2は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義した通りである）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、-C(O)H、低級アルコキシカルボニル、トリ-低級アルキルシリル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルカルボニルオキシメチル、置換ビニル、1-ヒドロキシ-2-ニトロエチル、アルコキシカルボニルエチル、アミノカルボニル、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルメチル、ベンゾイルメチル、ベンゾイルカルボニルオキシメチル又はモノ-又はジ-低級アルコキシメチルであり、
R3は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義した通りである）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、CH2NR7R8(ここでR7及びR8それぞれは、独立的にH-、1-6炭素のアルキル、所望による置換されるフェニル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、又はモノ-又はジ-アルキルアミノ低級アルキル、又はサイクリックアミノ-を表す-N-と共に示されるR7及びR8)、-C(O)H,CH2R9(ここでR9は低級アルコキシ、CN、アミノ低級アルコキシ、モノ-又はジ-低級アルキルアミノ低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アミノ低級アルキルチオ、又はモノ-又はジ-低級アルキルアミノ低級アルキルチオ)、又はNR10R11(ここでR10及びR11それぞれは、独立的に水素、低級アルキル、フェニル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、又はモノ-又はジ-低級アルキル又はサイクリックアミノ-を表すN-と共に示されるR10及びR11)、ジアルキルアミノアルキル、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり；そして
R4は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義した通りである）、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノ低級アルキル、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、カルバモイルオキシ、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり、又はR5と共にR4がメチレンジオキシであり；
R5は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義した通りである）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり；そして
R6は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義した通りである）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ又は低級アルキルカルボニルアミノである；
である前記一般化学式(I)の化合物。
【０００４】
本発明の他の観点は、温血動物のガンを治療するために有益な医薬組成物で、その組成物が、医薬的に受け入れ可能な賦形剤と組み合わせ、本明細書に明示された本発明の化合物を含む。
【０００５】
本発明の他の観点は、温血動物のガンを治療するための方法であり、その方法が、本明細書に明示された本発明の化合物の治療的に有効な量を投与することを含む。前記化合物が、適切な投与法により、たとえば経口、局所、又は非経口的な治療に有効な用量で投与される。
【０００６】
本発明の他の観点では、RはRaRbN(CH2)2で、Ra及びRbは本明細書に明示され、Xは、臭素、塩素、ヒドロキシ、1乃至11個の炭素のアルコキシである、前記一般化学式R-C(O)Xの化合物と、カンプトテシン(CPT)又はCPT類似体とを反応させることによる本発明の化合物を調製するための方法である。
【０００７】
本発明の他の観点は、明細書を正確に記載することにより、当業者に明らかになるであろう。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
詳細な説明
概要
一般的に、本発明は、CPT又はCPT類似体の(20S)エステルとして説明することができる。前に注記したように、CPTが、20の位置に水酸基を有する(S)立体異性体である。この水酸基を、本発明の方法に従いエステル化し、立体特異的に変換し収率よく該当する(20S)エステルを形成する。得られたエステルが、その鎖に電気陰性的要素を有するという点で固有であり、それは、カンプトテシン分子のE環の安定化に支援すると考えられる。本発明の新規な化合物が、一般的にマウスの腫瘍に活性において、十分耐性がある。これらは、種々の型のガン治療に有益であり、たとえば経口、局所又は非経口に投与するため、医薬調製物を調製するため処方することができる。
【０００９】
活性化を任意の特定機構による結びつけること又はその化合物の作用方法の理論的な説明を望まなければ、その20Sエステルが、CRT分子のE環を安定化することで、ある程度これらの効果を発揮すると考えられる。上記エステルは、E環に酵素アクセスを防止することによる立体障害を介し、エステル鎖における電子放出基(eiectron-withdrawing group)、すなわち窒素原子の存在により、そしてE環を切断するため結合を抑制する酵素、さらにその切断のための酵素活性で、CPT分子のE環末端の水素結合又はVan Der Walls力を促進させることをにより、これを実現するすることができる。
【００１０】
定義
用語「CPT」が、カンプトテシンに対する略語であり、(S)-4-エチル-4-ヒドロキシ-lH-ピラノ-[3',4':6,7]インドリジノ[1,2-b]キノリン-3,14(4H,12H)-ジオンとしても周知である。その化合物は、多くの供給資源例えばSigma Chemical Co.St.Louis,MOから容易に入手することができる。カンプトテシンの一般化学式、及びその数値付け方法が、以下のようである。すなわち：
【化２】
0004584538.tif 000003
この化合物は、本発明の化合物を作成ため、エステル化される20の位置に水酸基(hydroxy)を有す。
【００１１】
用語「アルキル」は、明示された数の炭素原子を有する１価の飽和脂肪族炭化水素遊離基を指している。たとえば、「C1-6のアルキル」又は「1乃至6の炭素のアルキル」又は、「alk 1-6」は、構造体に1乃至6個の炭素を含む任意のアルキル基を指している。「C1-20アルキル」は、1乃至20の炭素を有する任意のアルキル基を指す。アルキルは、直鎖(すなわちリニア(linear)又は分岐鎖にて可能である。代表例として、低級アルキル遊離基は、メチル, エチル, n-プロピル、n-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル、アミル、2級-ブチル、3級-ブチル、3級ペンチルなど、その側鎖変異体と共に、含む。高級アルキル基が、7以上の炭素のアルキル基を指す。これらは、n-ヘプチル、n-オクチル、n-ノニル、n-デシル、n-ドデシル、n-テトラデシル、n-ヘキサデシル、n-オクタデシル、n-エイコシルなどその側鎖変異体と共に、含む。それは、本発明の範囲内にある化合物の調製に有意に干渉することなく、そして化合物の効能を実質的に減少させることのない位置で置換基と、所望により置換することができる。アルキル基が、ハロ、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ又はアミノから成る群から選択されると独立的な1乃至5の置換基を所望により置換することができる。
【００１２】
用語「アルコキシ」は、一般化学式RO-の1価遊離基を指し、ここでRは、本明細書明に記されたアルキル基である。低級アルコキシ基が、1乃至6個の炭素原子のアルコキシ基を指し、高級アルコキシ基が、7以上の炭素原子のアルコキシ基を指す。代表的な低級アルコキシ遊離基は、メトキシ、エトキシ、n-プロピル、n-ブトキシ、n-ペンチルオキシ、n-ヘキシルオキシ、イソプロポキシ、イソブトキシ、イソペンチルオキシ、アミルオキシ、1級ブトキシ、2級ブトキシ、3級ブトキシ、3級ペンチルオキシなどを含む。有意的に高いアルコキシ遊離基が、本明細書の記載の有意的にアルキル遊離基に該当するものを含む。この遊離基が、本発明の範囲内にある化合物の調製に有意に干渉することなく、そして化合物の効能を実質的に減少させることのない位置にて置換基と、所望により置換することができる。ラジカル基が、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ又はアミノから成る群から選択させることのない独立的な1乃至5の置換基を所望により置換することができる。
【００１３】
用語「シクロアルキル」は、一般的に3個以上の炭素を形成するリングを有する1価のアリサイクリック飽和遊離基を指す。周知のシクロアルキル化合物は、最大で30以上の炭素原子を有する場合があり、一般的にリングに3から7個の炭素を有する。後記のものとして、たとえば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びシクロヘプチルを含む。遊離基を、本発明の範囲内に入る化合物の調製に有意的に干渉することなく、そしてその化合物の効能を有意的に減少させることない位置にて、置換基を選択的に置換することができる。シクロアルキル基を、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、及び低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立的に選択される1乃至5の置換基を選択的に置換する。
【００１４】
用語「ヒドロキシカルボニル」は、一般化学式-C(O)OHを有する1価の遊離基である。
【００１５】
用語「低級アルコキシカルボニル」は、一般化学式-C(O)OAlkを有する1価の遊離基で、ここにAlkが、低級アルキルである。
【００１６】
用語「低級アルキルカルボキシルオキシ」は、一般化学式-OC(O)Alkを有する1価の遊離基で、ここにAlkが、低級アルキルである。
【００１７】
用語「低級アルキルカルボニルアミノ」は、一般化学式-NHC(O)Alkを有する1価の遊離基で、ここにAlkが、低級アルキルである。
【００１８】
「ハロ」置換基は、塩素、臭素、沃素、及びフッ素から選択される一価ハロゲン化遊離基である。「ハロゲン化」化合物は、1又は複数のハロ置換基にて置換された化合物である。
【００１９】
「フェニル」は、ベンゼン環から水素を除くことで形成される遊離基である。フェニルが、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、カルボニル、ヒドロキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、ベンジルオキシ、所望により置換ピペリジノ、低級アルキルカルボニル、及び低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立的に選択される1乃至5の置換基を選択的に置換される。
【００２０】
「カルバモイルオキシ」は、R13R14NC(O)O-(すなわちアミノカルボニルオキシ）、ここでR13とR14は共に、窒素原子を有するシクロアミノを形成するか、又はR13とR14それぞれは、独立的に水素、低級アルキル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、低級シクロアルキル、フェニル(置換又は非置換）、又はベンジル(置換又は非置換）である。試料としては、アミノカルボニルオキシ,メチルアミノカルボニルオキシ,ジメチル アミノカルボニルオキシ,[4- (1-ピペリジノ)- 1-ピペリジノ]カルボニルオキシ, 1-モルホリノカルボニルオキシ,1-ピロロリジニル、1-ピペラジンカルボニルオキシ, 及び本明細書明示の他の物質を含む。
【００２１】
「5員環の複素環」は、炭素、及び少なくとも1つの他の元素、一般的に窒素、酸素又は硫黄を含む1価の、閉じた5員環の遊離基であり、全体的な飽和か、部分的飽和か、又は不飽和(すなわち天然の芳香族)でも可能である。一般的複素環は、2種以下の異種原子を含んでいる。1種の原子だけを伴う5員環の不飽和複素環の代表的例は、2-又は3-ピロロリル、2-又は3-フラニル、及び2-又は3-チオフェニルを含む。部分飽和又は全体的飽和に相当する遊離基は、3-ピロロリン-2-イル、2-又は3-ピリロロジニル、2-又は3-テトラヒドロフラニル、及び2-又は3-テトラヒドロチオフェニルを含む。2種の異種原子を有する代表的5員環不飽和複素環遊離基は、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリルなどを含む。さらに、全体的飽和又は部分的な飽和に相当する遊離基も、含まれる。複素環遊離基は、複素環リングの利用可能な炭素原子を介して結合される。遊離基を、本発明の範囲内に入る化合物の調製に有意的に干渉せず、そしてその化合物の効能を有意的に減少させない位置における置換基により選択的に置換することができる。その環が、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、及び低級アルキルカルボニルアミノから成る群から選択される1乃至2の置換基により選択的に置換される。
【００２２】
「6員環の複素環」は、炭素及び少なくとも他の1つの元素、一般的に窒素、酸素又は硫黄を含む閉じた6員環の1価遊離基であり、全体的な飽和か、部分的飽和か、又は不飽和(すなわち天然の芳香族)でも可能である。一般的に複素環は、2種以下の異種原子を含んでいる。1種の異種原子だけを伴う不飽和6員環の複素環の代表的な例は、2-、3-、又は4-ピリジリル、2H-ピラニル及び4H-ピラニルを含む。部分的な飽和又は全体的飽和に相当する遊離基が、2-,3-,又は4-ピペリジニル、2-,3-,又は4-テトラヒドロピラニルなどを含む。2種の異種原子を有する代表的な6員環不飽和複素環遊離基は、3-,又は4-ピリダジニル、2-,4-,又は5-ピリミジニル、2-ピラジニルなどを含む。さらに、全体的飽和又は部分的な飽和に相当する遊離基も含まれ、たとえば2-ピペラジンである。複素環遊離基が、複素環リングにおいて利用可能な炭素原子を介して結合される。遊離基を、本発明の範囲内に入る化合物の調製に有意的に干渉せず、そしてその化合物の効能を有意的に減少させない位置に置換基により選択的に置換することができる。その環が、所望によりハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、及び低級アルキルカルボニルアミノから成る群から選択される1乃至2の置換基により置換される。
【００２３】
「サイクリックアミノ」は、窒素、酸素、又は硫黄などのわずか1種の付加異種原子を有する飽和5-,6-又は7-員環サイクリックアミン環、又は別の単一カルボサイクリック環又は複数のカルボサイクリック環に縮合される5-,6-又は7-員環サイクリックアミンの1価遊離基である。代表的例として、たとえば1-ピロリジノ、1-ピペリジノ、モルフォリノ、ピペリジノ、3-ベンゾピペリジノなどを含む。これらは、置換、又は非置換でも良い。置換されていれば、これらは、一般的に低級アルキル、低級シクロアルキル、ヒドロキシ低級アルキル、フェニル(置換されているか、非置換）、ベンジル(置換されているか、非置換)、アミノカルボニルメチル、低級アルキルアミノカルボニルメチル、アミノ-又はジ-低級アルキルアミノ、サイクリックアミノ、又は5-又は6-員環複素環リングから選択されるわずか2置換基を有し得る。
【００２４】
「イミド環」は、サイクリックイミドで、前記環状構造の窒素が、それぞれカルボニル基の側に結合し、さらに炭素原子に結合して環を形成する。イミド環は、たとえばフタルイミド(それはベンゼン環に置換することができる）、マレイミド、1,8-ナフタルイミド(それがたとえば、3-ニトロ1,8-ナフタルイミド、4-ニトロナフタルイミド、4-ブロモ-ナフタルイミドなど）を含むことができる。その他の化合物は、当業者にて明らかになろう。
【００２５】
他の化学用語は、標準的な教科書及び辞書からの指針により当業者により理解されるよう、標準的な意味が提示される。
【００２６】
用語「MTD」は、最大許容用量に対する略語である。
【００２７】
用語「nM」は、ナノモルに対する略語である。
【００２８】
用語「ip」は、腹腔内に対する略語である。
本発明の化合物
【００２９】
本発明の1観点としては、一般化学式が以下の化合物である、すなわち；
【化３】
0004584538.tif 000004
ここでRは、RaRbN-(CH2)mであり、mは、1-10の整数(好ましくは2)であり、そしてRa及びRbそれぞれは、独立してハロ、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ又はアミノから成る群から独立的に選択される1乃至5の置換基により独立的に置換された低級アルキル基；
ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ホルミル、低級アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、低級アルキルカルボニル、ベンジルオキシ、所望により置換ピペリジノ、低級アルコキシカルボニル、及び低級アルキルカルボニルアミノから成る群から選択される1乃至5置換基にて独立して、選択的に置換されるフェニル；
ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、及び低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立的に選択される1乃至5の置換基により、選択的に置換される3乃至7の炭素のシクロアルキル；
低級アルコキシであり；あるいは
RaRbが、Nと一緒になったサイクリックアミン又はイミド環を形成し；
R2は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義した通りである）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、-C(O)H、低級アルコキシカルボニル、トリ低級アルキルシリル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルカルビニルオキシメチル、置換ビニル、1-ヒドロキシ-2-ニトロエチル、アルコキシカルボニルエチル、アミノカルボニル、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルメチル、ベンゾイルメチル、ベンゾイルカルボニルオキシメチル又はモノ-又はジ-低級アルコキシメチルであり、
R3は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義した通りである）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、CH2NR7R8(ここでR7及びR8それぞれは、独立的にH-、1-6炭素のアルキル、所望により置換されたフェニル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、又はモノ-又はジアルキルアミノ低級アルキル、又は-N-と共に提示されるR7及びR8がサイクリックアミノ-を表す)、-C(O)H,CH2CH2R9(ここでR9は低級アルコキシ、CN、アミノ低級アルコキシ、モノ-又はジ-低級アルキルアミノ低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アミノ低級アルキルチオ、又はモノ-又はジ-低級アルキルアミノ低級アルキルチオ)、又はNR10R11(ここでR10及びR11それぞれは、独立的に水素、低級アルキル、フェニル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、又はモノ-又はジ-低級アルキル又はN-と共に提示されるR10及びR11はサイクリックアミノを表す)、ジアルキルアミノアルキル、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり；
R4は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義)、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノ低級アルキル、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、カルバモイルオキシ、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり、又はR5と共にR4がメチレンジオキシであり；
R5は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義)、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであるであり；そして
R6は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、RC(O)O(Rは、前に定義)、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ又は低級アルキルカルボニルアミノである；
である一般化学式の化合物。
【００３０】
好ましき観点は、一般化学式(I)の化合物で、R2からR6のそれぞれは、H(又は以後優先して提示)、mは2、RaRbNは、サイクリックアミノ又はサイクリックイミド遊離基である。
【００３１】
他の好ましき観点は、一般化学式(I)の化合物で、R2からR6のそれぞれは、H(又は以後優先して提示)、mは2、RaRbNCH2-CH2は、以下のサイクリックアミノエチル又はサイクリックイミドエチル遊離基である：
【化４】
0004584538.tif 000005
【化５】
0004584538.tif 000006
【化６】
0004584538.tif 000007
【化７】
0004584538.tif 000008
【００３２】
本発明の他の観点は、上記のような化合物を含むが、ここでR2,R3,R4,R5及びR6それぞれは、水素だけ以外の置換基でも可能である。これらは、たとえば以後記載する好ましいサブグループを含む。
【００３３】
一般化学式(I)の化合物では、R6は水素であり、特にR4及びR5は共にメチレンジオキシ化合物であり、そしてR2は水素である。これらの化合物のうち、特に関心のある化合物は、R3は、ニトロ、アミノ、メチル、クロロ、シアノ、アセトキシ、又はアセチルアミノ化合物である。
【００３４】
一般化学式(I)の化合物では、R5及びR6のそれぞれは、水素であり、特にR3は水素であり、R2は((3-クロロ-n-プロピル)ジメチルシリル, tert-ブチルジメチルシリル,アセトキシメチル、シアノ、ホルミルエテニル、エトキシカルボニルエテニル、シアノエテニル、2,2-ジシアノエテニル、(2-シアノ-2-エトキシカルボニル)エテニル、エトキシカルボニルエチル、メチル、エチルであり、又はn-プロピルであり、そしてR4は、ヒドロキシ,アセトキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、クロロ、ブロモ、フルオロ、低級アルキル、高級アルキル、低級アルコキシ、カルボニルオキシであり又はホルミルである。これらのうち、R2はエチルであり、R4はカルバモイルオキシである化合物が、さらに関心がもたれる。好ましいカルバモイルオキシ置換基が、1-ピラジニルカルボニルオキシ、4-(i-プロピルアミノカルボノルメチル)-1-ピラジニル-カルボニルオキシ、又は[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノカルボニルオキシを含む。
【００３５】
一般化学式(I)の化合物における、R2、R5及びR6のそれぞれは、水素であり、たとえばR3が、アミノ、ニトロ、シアノ、ハロ、OH、低級アルキルアミノ、ジ-低級アルキルアミノ、低級アルキル、低級アルコキシ、1-ピペリジノ、1-モルホリノ、アミノメチル,低級アルキルアミノメチル、シクロアルキルアミノメチル,ジ-低級アルキルアミノメチル、サイクリックアミノメチル、アセトキシ、アセチルアミノ、低級アルコキシメチル,オメガヒドロキシ低級アルキルアミノメチル、シアノメチルであり、そしてR4は、ヒドロキシ、アセトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロ、ホルミル、低級アルコキシ、カルバモイルオキシである。
【００３６】
化合物におけるR2、R3、R5及びR6のそれぞれは、水素、及びR4は、-OC(O)Alkyl1-20である。
【００３７】
本発明の医薬組成物
本発明の観点は、温血動物のガンを治療するために有益な医薬組成物で、その組成物が、医薬的に受け入れ可能な賦形剤と組み合わせ、本明細書に定義された本発明の化合物を含む。その化合物は、経口、局所的に、経皮的、直腸に、吸入式にて、非経口(静脈注、筋肉注、又は腹腔内への注入）による投与など適切な組成物を提供すべく、周知の処方技術により調製される。本発明の組成物を調製する詳細な指針は、18版及び19版のRemington's Pharmaceutical文献により見出される。サイエンス(Sciences)にて、the Mack Publishing Co.,Easton,PA 18040にて公開。関連個所を引用により本明細書に組み入れる。
【００３８】
単一用量、又は複数用量の形態が考えられ、それぞれは、特定の臨床の設定における利点を提供する。単一用量は、ガン治療を行う場合に所望の効能を造り出すための計算された活性化合物の所定量を含む。複数用量の形状では、単一用量、又は断片用量の複数の用量が、所望の目的を実現するために必要な場合、特に有益となる場合がある。これらのいずれかの投与形態は、特定化合物の固有の特徴、実施されるべき特定の療法効果、ガン治療のための特定化合物を調製する技術に対し本質的にある何らかの制限することにより指示されるか、又は直接依存する明細を有することができる。
【００３９】
単一の投与量は、対象物にガン治療するための療法効果として十分な量を含み、そして約1.0乃至1000mgの化合物、たとえば約50乃至500mgを含むことができる。
【００４０】
前記化合物を、収集可能な錠剤、経口錠剤、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、トローチ、オブラート(wafer)、薬用ドロップなどを適切な処方形態で経口的に投与することが好ましい。一般にほとんど前記処方形態は、錠剤又はカプセル(「経口的な投与量単位」として個別に、収集的に設計された)。適切な処方形態は、適切な組成物を処方するために利用できる賦形剤に化合物の特徴を調和させるよう利用できる標準的な形成技術により調製される。錠剤又はカプセルは、一般化学式(I)化合物が、約50乃至約500mg含むことが好ましい。
【００４１】
その処方形態が、迅速に導入されるか又は調製物を逐次放出ができる。化合物を、ハード又はソフトカプセルによる包含、圧縮して錠剤とする又は飲料物、食品又は飼料中に組み入れることができる。最終的な組成物と調製物の割合(percentage)は、もちろん変化してよく、最終的形状、たとえば従来の錠剤の１と90重量%の間の範囲にて可能である。こうした治療として有益な組成物の量とは、適切な投与量が得られることである。本発明による好ましい組成物は、経口投与量単位の形状が、投与量単位に秤量すると5と1000mgの間の重量で、約5.0乃至約50重量%(%w)の間を含むよう調製される。
【００４２】
さらに経口投与単位として適切な処方形態は、ガム・トラガカント、アカシア、コーン・スターチ、ゲラチンなどの結合剤；ラクトース又はサッカロースなどの甘味料；コーン・スターチ、アルギン酸などの膨化剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、又はペパーミント、アカモノ油などの香料剤を含む。他の種々な物質は、被覆形状又は経口投与単位にて物理的形状を変形して提示することができる。経口投与単位が、シェラック、砂糖又はその両方にて被覆できる。シロップ又はエリキシルは、上記化合物、甘味料として砂糖、防腐剤としてメチル及びプロピルパラベン、染料、及び香料剤を含むことができる。任意の利用可能な物質を、医薬的に受け入れでき、そして実質的に無毒性にすべきである。賦形剤として有益な種類の詳細は、「Remington:The Science and Practice of Pharmacy」Mack  Printing  Company,Easton,PAの19版に見出される。具体的には、詳細な記載として章の91-93を参照。
【００４３】
化合物を、静脈内、筋肉内、皮下又は腹腔内に非経口として投与することができる。担体や賦形剤又は賦形剤の混合物は、たとえば種々の極性又は非極性溶媒、その適切な混合剤、又はオイルを含む溶媒又は分散培養液にて可能である。本明細書に使用される「担体」又は「賦形剤」は、医薬的に受け入れ可能な担体又は賦形剤を意味し、溶媒、分散剤、又は媒介剤、被覆剤、抗菌剤、イソ/ハイポ/優侵圧(hypertonic)剤、吸着変形剤のいずれか、又は全てを含む。こうした物質及び医薬的に活性な物質としての薬剤が、技術的に周知である。従来の媒介剤又は薬剤のいずれかが、活性成分と適合性のない範囲を除いて、治療としての組成物の使用が考えられる。さらに別の又は追加活性化成分は、最終組成物に組み入れることができる。
【００４４】
化合物の溶液を、水、エタノール、グリセロール、液体ポリエチレン・グリコール、種々のオイル、及び／又はその混合物及び当業者周知の他のものなど、適切な希釈剤にて調製することができる。
【００４５】
注射により注入できるように使用するために適切な医薬剤の形状が、無菌溶液、分散、乳化、及び無菌粉末を含む。最終成形物は、製造及び保存の状態下安定でなければならない。さらに最終医薬剤の形状は、汚染に対し保護しなければならず、そのため細菌又は菌類などの微生物の増殖を阻止できるものでなければならない。単一の静注、又は腹腔内に用量を投与することができる。選択肢として長時間ゆっくりと注入するか又は毎日、複数、短時間に注入かは、典型的に1乃至8日間使用できる。さらに別の日又は数日毎1度の投与用量として利用できる。
【００４６】
無菌の、注射による注入可能な溶液を、1又は複数の適切な溶媒に化合物を必要量で組み入れ、そこに上記の、必要なものとして当業者に周知の他の成分を添加することにより調製する。無菌の、注射による注入可能な溶液を、他に必要とされる種々の成分を伴う適切な溶媒に化合物を必要量で組み入れることにより調製する。次に濾出などの無菌処理が以下のように行われる。典型的に分散が、上に明示されたような分散培養液及び必要な他の成分も含む無菌担体に、上記化合物を組み入れることにより行われる。無菌粉末の場合、好ましい方法は、真空乾燥又は凍結乾燥し、そこに任意に必要成分が添加される。
【００４７】
注記したように、あらゆる場合における最終形状は、無菌でなければならず、そして中空針などの注射器により容易に通すことのできるようにしなければならない。溶媒又は賦形剤を適切に選択することにより、適切な粘性が実現されそして保持される。さらに、分子、つまりレシチンなどの分子、又は特定の被覆剤として分散における粒子サイズを適切に選択した使用成分、又は表面活性特性を有する物質の使用成分を利用することができる。
【００４８】
微生物の増殖を予防又は阻害することが、クロロブタノール、アスコルビン酸、パラベン、サルメロザル(thermerosal)など1又は複数の抗菌剤を添加することにより、実現することができる。さらに、糖又は塩などの緊張性を変える基剤を含むことも好ましい。
【００４９】
本発明の化合物が、傾向として水溶性であるが、幾つかの例でたとえば本発明の化合物がわずかな水溶性しかない場合、リポゾームの導入を行うことが、有益な場合がある。本系は、脂質小胞又はリポソーム中、その上又はそれによって、あるいはミセルにより本発明の化合物を組み込み、カプセル化、包含、トラップ処理により、本発明の化合物を抑制する。
【００５０】
リポゾームは、ガン患者に投薬剤を逐次的投与に用いられ、そしてドキソルビシン(doxorubicin)、ダウノルビシン(daunorubicin)、及びシスプラチナム(cisplatinum)複合体などの抗がん剤の導入に臨床的に有益であることを示している。Forssen,et al.,Cancer Res.1992,52:3255-3261;Perex-Soler,et al.,Cancer Res.1990,50:4260-4266;and,Khokhar,et al.,J.Med.Chem.1991,34:325-329を参照、そしてその全ては、引用によりこれらの内容を本明細書に組み入れられている。
【００５１】
同様にミセルは、患者に投薬剤を導入するため用いられてきた(Broden et al.,Acta Pharm Suec.19:267-284(1982))、そして上記ミセルが、薬剤の担体として及び標的薬剤導入として使用され(D.D.Lasic,Nature 335:279-280(1992);and,Supersaxo et al.,Pharm Res.8:1280-1291(1991))、それがガン投薬剤を含む(Fung et al.,Biomater.Aritif.Cells.Artif.Orans 16:439 et seq.(1988);and Yokoyama et al.,Cancer Res.51:3229-3236(1991))を参照、そしてその全ては、引用によりこれらの内容を本明細書に組み入れられている。
【００５２】
本発明の化合物を含むリポソーム及び／又はミセルは、ガン患者に典型的に静脈注射により投与することができる。さらに本発明に有益なリポソーマル組成物を調製するための指針が、本明細書に取り入れられている米国特許第6,096,336に見出すことができる。
本発明による治療方法
【００５３】
本発明の他の観点は、温血動物のガンを治療するための方法であり、その方法が、本明細書に定義されたように本発明の化合物の治療として有効な量を投与することを含む。本発明に有益な化合物が、経口、非経口(筋肉内、静脈内、皮下、腹腔内)、皮膚を通し、直腸から、吸入により、などの医薬的に受け入れ可能な投与経路により、治療として有効な用量におけるこれらの化合物の必要に応じ適切な対象物に投与される。
【００５４】
ガンという用語は、悪性の新形成腫瘍、組織の異常な塊、過剰な増殖、そして正常な組織と配列せず、変化をもたらす刺激が止った後も、同様の過激な形態を持続するものとして、一般に極めて広く定義できると考えられる。異常な塊は、目的もなく宿主上に養分を取り、そして実際に自律性があることが、加えられるであろう。さらにガンは、悪性腫瘍と考えられる。さらに新形成腫瘍の記載として、「Robbins Pathologic Basis of Disease,」Sixth Edition,by R.S.Cotran,V.Kumar,and T.Collins Chapter 8(W.B.Saunders Company)に見出される。８章における情報は、引用により本明細書に組み入れられる。以下の表Aは、ガンの型の例、すなわち本発明の化合物を投与することにより治療可能な悪性腫瘍、又は新形成腫瘍を提供する。
元の組織
表  A
1つの基質細胞型の化合物
間葉腫瘍
結合組織及び誘導体                    繊維肉腫
脂肪肉腫
軟骨肉腫
内皮及び関係組織
血管                                  血管肉腫
リンパ管                              リンパ管肉腫
中皮                                  中皮腫
脳被膜                                侵襲性髄膜腫
血液細胞及び関係細胞
造血細胞                              白血病
リンパ球組織                          悪性リンパ腫
筋肉
平滑筋                              平滑筋肉腫
straited                            横紋筋肉腫
上皮腫瘍
層化された鱗状                      鱗状細胞又は表皮細胞
皮膚又は付属器官の基底細胞          基底細胞悪性腫瘍
上皮ライニング腺又は管              腺ガン
乳頭腫ガン
嚢胞腺ガン
呼吸経路                            気管支原性悪性腫瘍
気管支腺腫(ガン腫)
神経外胚葉                          悪性黒色腫
腎上皮細胞                          腎細胞悪性腫瘍
肝細胞                              肝細胞悪性腫瘍
尿路上皮細胞(移行型)                移行型白血球
栄養胚葉                            絨毛ガン
精巣上皮細胞(生殖細胞)              精上皮腫
胚悪性腫瘍
2以上の神経形成細胞-混合腫瘍−
--通常1種の胚芽層から誘導される
唾液腺                              元の唾液腺の混合悪性腫瘍
胸部                                悪性嚢腫肉腫葉状
腎機能素因                          Wilms腫瘍
2以上の神経形成細胞型---
---2以上胚芽
層----奇形形成
性腺又は胚静止における全能性細胞      未熟奇形腫、奇形ガン
【００５５】
したがって本発明の化合物は、白血病、及び結腸、結腸-直腸、卵巣、乳房、前立腺、肺、腎臓、さらには黒色腫などの固形腫の治療に有益である。適用される投与用量範囲は、投与経路及び年齢、体重、及び治療患者の状態に依存する。化合物が、たとえば、筋肉内、静脈内の非経口経路又は1時に多く(bolus)注入することで投与できる。
【００５６】
本明細書に用いられているように、本発明のCPT誘導体の「治療的に有効な量」は、ガンの増殖を阻止するか、ガンを遅らせるか、又は悪性腫瘍細胞を殺傷しそして悪性腫瘍の退化及び軽減させる、すなわちこうした腫瘍の容量又はサイズを減少させるか、又は腫瘍を完全に除去させる化合物量の意味を意図している。
【００５７】
ヒトを含む哺乳動物の場合、有効量が、本体表面積に基づいて投与することができる。投与との相互関係は、動物の種々のサイズ及び種に対して変り、そしてヒトに対し(本体表面性mg/m2に基づき)ては、E.J.Freireichet al.,Cancer Chemother.Rep.,50(4):219(1966)に記載されている。本体表面積は、個体の高さ及び体重(たとえば、Scientific Tables,Geigy Pharmaceuticals,Ardsley,N.Y.pp.537-538(1970)を参照)からおおよそであるが決定することができる。適切な投与量範囲は、本発明の化合物を、本体表面積m2当り1乃至1000mg当量、たとえば50乃至500mg/m2である。
【００５８】
あらゆる投与経路に対し、投与量を投与する正確なタイミングを、最適な結果を得るよう変えることができる。一般的にCPT誘導体に対する担体としてIntralipid20を使用する場合、患者に到達するCPT誘導体の実際の投与量が、有意的に少なくなる。これには、主にIntralipid20の懸濁であるが、注射器、注射針、調製容器の壁によってある程度のロスが要因となる。綿実油などの担体が用いられる場合、CPT誘導体が注射器などの表面にそんなに多く付着されないから、こうした上記ロスが、支配的になるほどではない。
【００５９】
本発明により提供される方法の別の重要な特徴は、本明細書教示により投与されるCPT誘導体の全体にわたる見かけ上比較的低い毒性に関する。総体的毒性は、種々の基準を用いて判断することができる。たとえば、対象者の体重が、最初に記録された体重(すなわち治療前)を10%越えて減少すると、毒性の徴候の1つであると考えることができる。さらに、対象物の全体的な移動性及び活動性によるロス、ならびに下痢又は膀胱炎の徴候が、さらに毒性の証明として解釈することができる。
本発明の方法
【００６０】
本発明の他の観点は、カプトテンシン(CPT)又はそのCPT類似体と一般化学式R-C(O)Xの化合物とを反応させることによる本発明の化合物を調製するための方法であり、ここでRは、RaRbN(CH2)mであり、Ra及びRbは本明細書に定義され、そしてXは、たとえば臭素、塩素、水酸基、1-11の炭素のアルコキシ(たとえば-O(CH2)nCH3であり、nは、1-10の整数であり）、又はR-C(O)O-(Rは前に定義されている)である。好ましくは、Xは、OH基である。RaRbN(CH2)mC(O)Xとして示される化合物は、アミノアルカノイック・アシッド、又はアミノアルカノイック・アシッド誘導体として言及することができ、たとえばmが2であると、「アミノプロピオン酸」又は「アミノプロピオン酸誘導体」である。こうしたアミノアルカノイック・アシッド(たとえばアミノプロピオン酸)が、得られる1つの方法は、適切なアミノRaRbNH又はイミドRaRbNH(又はこれらの酸付加塩)と、オメガ-ハロ置換のアルカノイック・アシッド(たとえば3-ハロプロピオニック・エステル)とを反応させ、次いでそのエステルを加水分解し、酸を形成することである。好ましいハロゲン化プロピオン酸・エステルの例は、3-ブロモプロピオン酸、3-クロロプロピオン酸、又は3-イオドプロピオン酸のエチル・エステルを含む。別の該当するアルキル・エステル(たとえばメチル、プロピルなどが有益であるが、エチルが好ましい）がある。3-ブロモプロピオン酸のエチル・エステルが好ましい。幾つかの例において、該当するアミノプロピオン酸から酸ハロゲン化物を調製することは、有益となる。酸ハロゲン化物は、該当するアミノプロピオン酸とハロゲン化剤(たとえばSOCl2,PCl3,POCl5,PBr3など）とを反応させて得られる。酸塩素化物が好ましい。いったん酸又はその誘導体が調製されると、CPTと反応してCPTの(S)-20-エステルを、すなわち本発明の化合物を形成する。この反応の順位が以下のように構成することができる。
1.RaRbNH  +Hal(CH2)m-C(O)X    →RaRbN(CH2)m-C(O)X ・・・・・(X=OH,アルコキシ)
（A)        （B)                  （C)
2.    (C)    →RaRbN(CH2)m-C(O)OH ・・・・・・・・（X=アルコキシ)
（D)
2'    (C)    →RaRbN(CH2)m-C(O)Halo  ・・・・・・(Halo=Cl,Br)(X=OH)
（D')
3. (D又はD')+CPT(又は類似体)     →RaRbN(CH2)m-C(O)O-20CRT
(又は                            その類似体)  （I)
【００６１】
工程1における反応条件は、用いられる正確な反応物に依存して変化する。一般的に有益な溶媒が、水溶性又は非水溶性にても可能である。好ましくは溶媒が、低級アルカノール(エタノールが好ましい)などの水と相溶性のある極性有機溶媒である。他の有益な極性溶媒の例は、メタノール、プロパノール、アセトン、及びジメチルホルムアミド(DMF)である。この反応が、一般的に炭酸水素ナトリウムなどのアルカリ塩の存在下行われる。反応温度は、反応物、及び溶媒により変化し、約20℃乃至180℃の範囲で、遊離アミンがなくなるまで、すなわちこれ以上検知されなくなるまで、好ましくは還流温度である。反応が完了するための必要な時間は、一般的に約20時間以下で、好ましくは約6時間以下である。
【００６２】
工程2における一般化学式(C)の化合物は、加水分解反応を一般的に2段階で行われ、一般化学式(D)の化合物に変換される。この工程のための反応条件は、反応される化合物により変化する。一般的に変換に有益な溶媒は水溶性で、好ましい溶媒は水だけか、水に相溶性のある有機溶媒のいずれかである。特に有益な溶媒の例は、水とジオキサンの混合液である。反応の第1段階のpHは、たとえば10から14の範囲、好ましくは約12から14の範囲の塩基である。アルカリ土類水酸化物などの適切な無機塩基、たとえば水酸化ナトリウムが有益である。反応温度が、約0°乃至60℃の範囲、好ましくは約20℃乃至約25℃の範囲である。反応の完了に必要な時間は、一般的に10時間以下、好ましくは約4時間以下である。次にその混合物を、pH 4以下、たとえばpH 3で、塩酸など適切にて酸性化し、必要であれば標準的な化学合成法に従って酢酸エチルなどの適切な溶媒で抽出した。しばしば結果として得られるプロピオン酸を、固体として析出させ、それを濾出する。
【００６３】
工程2'における一般化学式Cの化合物(すなわちアミノプロピオン酸)を、適切な条件下、SOCl2,PCl3,PCl5,PBr3などのハロゲン化剤と反応させることにより、該当する酸ハライドに変換する。
【００６４】
本方法の工程３における一般化学式(D)又は(D')の化合物が、20-(S)の立体異性体として、本発明の化合物を形成するための適切な条件下、約等モルにて、CPT又はCPT類似体と反応する。その反応が、適切な溶媒、好ましくは非水性、非極性の溶媒の存在下、カルボジイミド化合物などの、たとえばジイソプロピルカルボジイミド、好ましくは1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチル・カルボジイミド・ハイドロクロライド(EDCI)及び4-(ジメチルアミノ)ピリジン(DMAP)などの適切なカップリング剤の存在下行われる。本工程における有益な例としては、ハロゲン化アルカン(たとえばジクロロメタン又はトリクロロメタン)及びDMFを含む。ジクロロメタンが特に有益である。反応温度が、約20℃乃至約40℃の範囲、好ましくは約20℃乃至約25℃の範囲である。この反応を完了させるために必要な時間は、一般的には約20時間以下にて、通常約10時間より短時間である。なを注意すべきことは、R2-R6の１つは、RがRaRbN(CH2=)2と共にRaRbN(CH2)2-C(O)-である一般化学式(I)化合物が、R2-R6の１つ(特にR4)は、ヒドロキシであるCPT類似体と反応させることにより得られる。この場合、前記化合物(たとえば10ヒドロキシCPT)を、2モル当量のアミノプロピオン酸と反応させて、2置換CPT誘導体を与える。
【００６５】
本発明の好ましい化合物を調製する別の方法は、適切な無水物により開始し、そしてそれをプロピオン酸イミドに変換し、さらにCPTまたはCPT類似物と反応させて、上記反応順序の工程3に従う本発明の化合物を与える。この無水物の変換を以下のように表示することができる。
Anhydride          → RaRbN(CH2)2COOH
（E)    βアラニン      (D)
【００６６】
一般的に無水物を、適切な溶媒及び触媒の存在下βアラニンと反応させる。適切な溶媒は、極性の、アルコール、アセトン、ジオキサンなどの水に相溶性のある溶媒を含む。エタノールが好ましい。適切な触媒がジメチルアミノピリジン(DMAP)である。一般的に、前記反応が、10時間より短くたとえば約3時間、還流温度にて行われる。水を追加すると、化合物を沈積させさらにそれを乾燥させ、その結果プロピオン酸イミドが与えられ、(D)と指定される。次にその化合物を、CPTまたはCPT類似物と反応させて本発明の化合物を与える。
【００６７】
上記反応順序の工程1において、一般化学式(A)に示される適切なアミンには、以下の化合物が含まれる：
1-(3-トリフルオロメチル)フェニルピペラジン;
1-(4-ベンジル)ピペラジン;
1-[4-(3-メトキシフェニル)]ピペラジン;
1-[4-(4-ニトロフェニル)]ピペラジン;
1-(4-フェニル)ピペラジン;
1-[4-(2-クロロフェニル)]ピペラジン (塩酸塩として);
1-[4-(4-フルオロフェニル)]ピペラジン;
3-[4-(4-アセチルフェニル)ピペラジン;
4-ベンジルピペリジン;
ピペリジン;
ピペラジン;
モルホリン；など。
【００６８】
当業者がこの明細書の指示によりその他の代表的アミンを認識でき得る。
【００６９】
工程2における、下記を含む化学式(C)により示される適切な3-サイクリックアミノプロピオン酸エステルであり、化学式(C)では：
エチル 3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネート;
エチル 3-(4-ベンジル- l -ピペラジニル)プロピオネート;
エチル 3-[4-(4-ニトロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネート;
エチル 3-(4-フェニル- l -ピペラジニル)プロピオネート;
エチル 3-[4-(2-クロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネート;
エチル 3-[4-(4-フルオロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネート; 1
エチル 3-(4-ベンジル-l-ピペリジノ)プロピオネート;
エチル 3-[4-(4-アセチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネート; など。
【００７０】
工程3における、適切なCPT類似体が、この文献に記載されているように7,9,10,11又は12の位置に置換されたCPTである化合物である。CPTの類似体が、技術的に周知な置換物質により置換することができ、本明細書の開示により提示され、当業者により調製することができる。こうした類似体の作成方法を教示する代表的文献又はこうした類似体が調達できるところが、以下の文献に見出される(引用により本明細書に取り入れられる)：
1.J.Med.Chem.1998,41,31-37
2.J.Med.Chem.2000,43,3970-3980
3.J.Med.Chem.1993,36,2689-2700
4.J. Med. Chem.1991, 34, 98-107
5.J. Med.Chem.2000,43,3963-3969
6.Chem.Pharm.Bull.39(10)2575-2580(1991)
7.Chem.Pharm.Bull.39(6)1446-1454(1991)
8.ANTIMICROBIAL AGENTS 及び CHEMOTHERAPY,Dec.1999,p.2862-2868
9.European Journal of Cancer,Vol.34,No.10,pp.1500-1503,1998
10.CANCER RESEARCH55,753-760,February 15,1995
11.Anti-Cancer Drug Design(1998),13,145-157
12.Bioorganic & Medicinal Chemistry Letter 8(1998)415-418
【００７１】
適切なCTP類似体には、下記のものを含み、この場合のカッコに入れた数、後の名称が上記記載の文献記事に言及されたものである：
カンプトテシン(CPT);
(20S)-7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ)カルボニルオキシ)-CPT (AKA-イリノテカン(irinotecan));
(20S)-9-ニトロCPT(1);
(20S)-7-クロロ-n-プロピルジメチルシリルCPT(2);
(20S)-10-ヒドロキシ-7-クロロ-n-プロピルジメチルシリルCPT(2);
(20S)-10-アセトキシ-7-クロロ-n-プロピルジメチルシリルCPT(2);
(20S)-7-tert-ブチルジメチルシリルCPT(2};
(20S)-10-ヒドロキシ-7-tert-ブチルジメチルシリルCPT(2};
(20S)-10-アセトキシ-7-tert-ブチルジメチルシリルCPT(2);
(20S)-9-ヒドロキシCPT(3);
(20S)-9-アミノCPT(3);
(20S)-10-アミノCPT(3);
(20S)-9-アミノ-l0-ヒドロキシCPT(3);
(20S)-9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT(3);
(20S)-9-メチル-アミノCPT;
(20S)-9-メチルCPT(3);
(20S)-9-ジメチル-アミノCPT;
(20S)-9-クロロCPT(3);
(20S)-9-ジメチルアミノ-l0-ヒドロキシCPT(AkA トポテカン(topotecan));
(20S)-9-フルオロCPT(3);
(20S)-9-ピペリジノCPT;
(20S)-9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT (3);
(20S)-9-モリホリノメチルCPT (4);
(20S)-10-ヒドロキシCPT(3);
(20S)-9,10-ジクロロCPT(3);
(20S)-10-ブロモCPT(3);
(20S)-10-クロロCPT(3);
(20S)-10-メチルCPT(3);
(20S)-10-フルオロCPT(3);
(20S)-10-ニトロCPT(3);
(20S)-10,11-メチレンジオキシCPT(3);
(20S)-10-ホルミルCPT(3);
(20S)-10-ノニルカルボニルオキシCPT(12);
(20S)-10-ウンデシルカルボニルオキシCPT(12);
(20S)-10-ペンタデシルカルボニルオキシCPT(12);
(20S)-10-ヘプタデシルカルボニルオキシCPT(12);
(20S)-10-ノナデシルカルボニルオキシCPT(12);
(20S)-9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT(3);
(20S)-9-(4-メチルピペラジニルメチル)-10-ヒドロキシ(CPT)(4);
(20S)-9-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノメチル]-10-ヒドロキシCPT(4);
(20S)-9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
(20S)-9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT(3);
(20S)-9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
(20S)-9-アセトキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
(20S)-9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
(20S)-9-アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
(20S)-9-エトキシメチル-l0-ヒドロキシCPT(4);
(20S)-9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
(20S)-9-n-プロピルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(4);
(20S)-9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(4);
(20S)-9-シクロヘキシルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(4);
(20S)-9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(4);
(20S)-9-(トリメチルアンモニオ)メチル-l0-ヒドロキシCPT,メタンスルフォン酸(4);
(20S)-9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT(4);
(20S)-9-シアノメチル-l0-ヒドロキシCPT(4);
(20S)-CPT-7-アルデヒド(5);
(20S)-10-メトキシCPT-7-アルデヒド(5};
(20S)-7-アセトキシメチルCPT(5);
(20S)-7-アセトキシメチル-l0-メチルCPT(5);
(20S)-7-シアノ-l0-メトキシCPT(5);
(20S)-7-シアノCPT(5);
(20S)-7-ホルミルエテニルCPT(5);
(20S)-7-エトキシカルボニルエテニルCPT(5);
(20S)-7-シアノエテニルCPT(5);
(20S)-7-(2,2-ジシアノエテニル)CPT(5);
(20S)-7-(2-シアノ-2-エトキシカルボニル)エテニルCPT(5);
(20S)-7-エトキシカルボニルエチルCPT(5);
(20S)-7-エチルCPT(6);
(20S)-7-n-プロピルCPT(6);
(20S)-7-アセトキシメチルCPT(6);
(20S)-7-n-プロピルカルボニルオキシメチルCPT(6);
(20S)-7-エトキシカルボニルCPT(6);
(20S)-7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
(20S)-7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
(20S)-7-メチル-10-アミノカルボニルオキシCPT;
(20S)-7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
(20S)-7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ) エチル CPT; 及び
(20S)-7-エチル-l0-カルバモイルオキシ誘導体(たとえばCPTの)
(20S)-7-エチル-10-[4-(1-ピペリジノ)-ピペリジノ・カルボニルオキシCPT(7);
(20S)-7-エチル-10-(1-ピペラジン) カルボニルオキシCPT(7);
(20S)-7-エチル-l0-(4-i-プロピルアミノカルボニルメチルピペラジン) カルボニルオキシCPT
(20S)-7-エチル-l0-[4(1-ピロリジニル)ピペラジン]カルボニルオキシCPT (7);
(20S)-7-エチル-l0-[(4-(ジメチルアミノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシCPT(7);
(20S)-7-エチル-l0-[4-(ジ-n-プロピルアミノ)-1-ピペリジノル] カルボニルオキシCPT(7);
(20S)-7-エチル-l0-[(4-(ジ-n-ブチルアミノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシCPT (7);
(20S)-7-エチル-l0-[4-(1-ピロロリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシCPT(7);
(20S)-7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシCPT(7);
(20S)-7-エチル-l0-[N-メチル-N-2-(ジメチルアミノ)エチルアミノ] カルボニルオキシCPT(7)など。
【００７２】
その他の類似する化合物が、上記文献に開示される技術により、技術的認識段階にて適切に変更して調製できることが、当業者に認識できるであろう。
【００７３】
工程3における、下記のものを含む一般化学式（D)の3-アミノプロピオン酸:
3-フタルイミドプロピオン酸;
3-マレイミドプロピオン酸;
3-(3-ニトロ1,8-ナフタルイミド)プロピオン酸;
3-(4-ニトロ-1,8-ナフタルイミド)プロピオン酸;
3-(4-ブロモ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸;
3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジニル]-プロピオン酸;
3-[(4-ベンジル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-[4-(3-メトキシフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-[4-(4-ニトロフェニル}-1-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-(4-フェニル-l-ピペラジニル)プロピオン酸;
3-[4-(2-クロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-[4-(4-フルオロフェニリル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-(1-ピペリジノ)プロピオン酸;
3-[1-(4-ベンジル}ピペリジノ]プロピオン酸;
3-[4-(4-アセチルフェニル-l-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-[4-(3,4-ジクロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-[4-(3,4-メチレンジオキシフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-[4-(4-クロロフェニル)-1-ピペリジニル]プロピオン酸;
3-(4-ホルミル-l-ピペラジニル)プロピオン酸;
3-(4-エチル-l-ピペラジニル)プロピオン酸;
3-[4-(4-クロロフェニル)フェニルメチル-l-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-(4-シアノ-4-フェニル-l-ピペリジニル) プロピオン酸;
3-トランス-4-シナミル-l-ピペラジニル) プロピオン酸;
3-[4-(2-メチルフェニル)-1-ピペラジニル] プロピオン酸;
3-[4-(2,3-ジメチルフェニル)-1-ピペラジニル] プロピオン酸;
3-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]プロピオン酸;
3-[4-(2-ピリミジニル)-1-ピペラジニル] プロピオン酸;
3-(4-シクロヘキシル-l-ピペラジニル)プロピオン酸;
3-[4-(α-(2-ピリジル)ベンジル-l-ピペラジニル]プロピオン酸;
3-{4-モルホリノ)プロピオン酸;
3-(1-ピロリニル)プロピオン酸;
4-[4-{3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジニル]酪酸;
5-[4-{3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジニル]吉草酸など。
【００７４】
その他の類似する3-アミノプロピオン酸が、本発明の化合物を調製するため、市場による資源から得ることができるか、又は工程3に使用できるよう技術的に認められた方法により調製できることは、当業者が理解できるであろう。反応条件の指針に従って、一覧の化合物における一般化学式(D)に示される化合物と、CPT類似物の一覧に示される化合物とを反応させることにより、本発明の化合物を得ることができる。これらの化合物は、所望の特徴を有意的に高いか、又は低い程度で呈することになる。ファニリー内の好ましいサブグループの化合物となるように、本明細書における指針が提供される。
実施例
【００７５】
以下の実施例が、本発明の1部として含まれる代表的化合物を提供するために提示される。さらにその実施例がその化合物の利用性の決定を支援するin vitro及びin vivoアッセイにおける説明を提供する。実施例1乃至15のカプトセシン・エステルを、該当するアミノプロピオン酸及びカプトセシンによって調製した。この実施例を通して、一般化学式は、名称による化合物を適切なものとして使用する考えである(たとえば、NaHCO3を炭酸水素ナトリウムとする)。一般的に化合物の命名において、2種の方式が用いられる。各実施例の先頭のセクションにて用いられる1方の方式は、プロピオン酸のカンプトテシン20S-エステルとしての化合物を指すことである。使用されるもう一方の方式は、カンプトテシン-20-O-3-プロピオネートとしての化合物を指すことである。それぞれの方式は、同じ化合物を命名する手段である。たとえば、3-フタルイミドプロピオン酸 のカンプトテシン-20Sーエステルが、カンプトテシン-20-O-3-フタルイミドプロピオネートと同じ化合物である。
【実施例１】
【００７６】
本例は、2-フタルイミドプロピオン酸の非置換及び置換カンプトテシン-20S-エステルsの調製の仕方を説明する。
A.    3-フタルイミドプロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(000503)
【００７７】
カンプトテシン (l0mg,0.029mモル),3-フタルイミドプロピオン酸(12.7mg,0.058 mモル),EDCI(25 mg,0.13mモル),DMAP (2 mg, 0.02 mモル)及びジクロロメタン(3 ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、さらに ジクロロメタン(20ml)をその溶液に加えた。有機層を水(20ml)、飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgS04にて乾燥した。溶媒を減圧下にて除去した後、得られた固体をカラム クロマトグラフィによって分離(溶出液: CHC13: CH30H 9:1)して、mp158-161℃のカンプトテシン-20-O-3-フタルイミドプロピオネート、12 mgが得られた。
【００７８】
化学構造分析が、1HNMR(CDCl3、600MHz):δ8.39(s,1H, Ar-H),8.23(d,1H,Ar-H),7.95(d,IH,Ar-H),7.84(t,1H,Ar-H),7.80(s,2H,Ar-H),7.69(t,1H,Ar-H},7.63(s,2H,Ar-H),7.24(s,1H,Ar-H),5.67(d,1H,H17),5.40(d,1H,H17),5.28(s,2H,HS),4.00(t,2H,NCH2),2.98(m,2H,COCH2),2.25(d,2H,CH2),0.97(t,3H,CH3)である。
【００７９】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT (AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT;
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT (AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-10-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-10-ヒドロキシCPT;
7-エチル-10-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-10-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT; など.
【実施例２】
【００８０】
本例は、3-マレイミドプロピオン酸の非置換及び置換カンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-マレイミドプロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(010104)
【００８１】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-マレイミドプロピオン酸(10mg,0.059mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20ml)をその溶液に加えた。有機層を水(20ml)、飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgS04にて乾燥した。溶媒を減圧下にて除去した後、得られた固体をカラム クロマトグラフィによって分離(溶出液: CHC13:CH3OH9:1)して、mp243-245℃のカンプトテシン-20-O-3-マレイミドプロピオネート、6mgが得られた。
【００８２】
化学構造分析が、1NHMR(CDC13,600MHz):δ8.40(s,1H,Ar-H),8.24(d,1H,Ar-H),7.96(d,1H,Ar-H),7.85(t,1H,Ar-H),7.68(t,1H,Ar-H),7.26(s,1H,Ar-H),7.18(s,1H,Ar-H),6.67(s,1H,Ar-H),5.65(d,1H,H17),5.41(d,1H,H17),5.30(s,2H,H5),3.84(t,2H, NCH2),2.93(m,2H,COCH2),2.25(d,2H,CH2),0.97(t,3H, CH3)により行われた.
【００８３】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モツホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AKAイリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-10-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT;など.
【実施例３】
【００８４】
本例は、非置換及び置換3-(3-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-(3-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(0011177)
1.  3-(3-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸の合成
【００８５】
3-ニトロ-l,8-ナフタリック無水物(243mg,1.0モル),βアラニン (90mg,1.0モル),DMAP(10mg,0.1mモル)及びエタノール(15ml)の反応混合物を、3時間還流した。次に15mlの水を加えた。その混合物を濾出し、そしてその固体を水で洗浄し、次にオブンにて乾燥させ、mp250-255℃の灰色の固体として、224mgの3-(3-ニトロ-l,8-ナフタルイミド}プロピオン酸を与える。
【００８６】
化学構造分析は、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ9.39(d,1H,Ar-H),8.85(d,1H,Ar-H),8.70(d,1H,Ar-H),8.61(d,1H,Ar-H),8.00(t,1H,Ar-H),4.25(t,2H,NCH2),2.62(t,2H,COCH2)によって行われる。
2).
2.  カンプトテシン-20-O-[3-(3-ニトロ-1,8-ナフタルイミド)プロピオネート]の合成
【００８７】
カンプトテシン(10mg,0.027mモル),3-(3-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)-プロピオン酸(18mg,0.058mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル), 及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、さらにジクロロメタン(20ml)をその溶液に加えた。有機層を、水(20ml)、飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、次にMgS04で乾燥した。溶媒を減圧下にて除去した後、得られた固体を、カラムクロマトグラフィにより分離し(溶出液: CHCI3:CH30H;9:1)、mp225-227℃の表題の化合物12mgが得られた。
【００８８】
B.本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AkA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AkA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-IO-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT;など。
【実施例４】
【００８９】
本例は、非置換及び置換3-(4-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸3-マレイミドプロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-(4-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(001128)
1.  3-(4-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸の合成
【００９０】
3-ニトロ-l,8-ナフタリック無水物(243mg,1.0モル),βアラニン (90mg,1.0モル),DMAP(10mg,0.1mモル)及びエタノール(15ml)の反応混合物を、3時間還流した。次に15mlの水を加えた。その混合物を濾出し、そしてその固体を水で洗浄し、次にオブンにて乾燥させ、mp220-222℃の灰色の固体として、227mgの3-(4-ニトロ-l,8-ナフタルイミド}プロピオン酸を与える。
【００９１】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ8.69(t,1H,Ar-H),8.60(m,2H,Ar-H),8.54 (d,1H,Ar-H),8.08(t,1H,Ar-H),4.25(t,2H,NCH2),2.62(t,2H,COCH2)によって行われる。
2.  カンプトテシン-20-O-[3-(4-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)プロピオネート]の合成
【００９２】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-(4-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)-プロピオン酸(13mg,0.041mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2 mg,0.02 mモル)及び ジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20 ml)を、その溶液に加えた。有機層を、水(20 ml), 飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgSO4で乾燥した。溶媒を減圧下に除去した後、得られた固体を、カラム クロマトグラフィ(溶出液: CHC13:CH30H9:1)により分離し、mp263-265℃のカンプトテシン-20-O-[3-(4-ニトロ-l,8-ナフタルイミド)プロピオネート] 10mgが得られた。
【００９３】
化学構造分析が、1HNMR(CDC13,600MHz):δ8.76(d,1H,Ar-H),8 69(d,1H,Ar-H},8.63(d,1H,Ar-H),8.40(s,1H,A.r-H),8.24(d,1H,Ar-H),8.18(d,1H,Ar-H),7.96(d,1H,Ar-H),7.89(t,1H,Ar-H),7.84(t,1H,Ar-H),7.69(t,1H,Ar-H),7.27(d,1H,Ar-H),5.65(d,1H,H17),5.42(d,1H,H17),5.28(s,2H,H5),4.52(t,2H,NCH2),2.96(dm,2H,COCH2),2.25(d,2H, CH2),0.93(t,3H, CH3)により行われる。
【００９４】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0ーヒドロキシCPT (AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-10-ヒドロキシCPT;
7-エチル-10-アセチルオキシCPT;
7-メチル-10-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT; 及び the line.
【実施例５】
【００９５】
本例は、非置換及び置換3-(4-ブロモ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-(4ブロモ-1,8-ナフタルイミド)プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(001220)
1.  3-(4-ブロモ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸の合成
【００９６】
4-ブロモ-l,8-ナフタリック無水物(277mg,1.0モル),βアラニン (120mg,1.3モル),DMAP(10mg,0.1mモル)及びエタノール(15ml)の反応混合物を、4時間還流した。その混合物を濾出し、そしてその固体をエタノールで洗浄し、次にオブンにて乾燥させ、mp220-225℃の灰色の固体として、300mgの3-(4-ブロモ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸を与える。
【００９７】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ8.58(t,2H,Ar-H),8.35(d,1H,Ar-H),8.24(d,1H,Ar-H),8.01(t,1H,Ar-H),4.25(t,2H,NCH2),2.59(t,2H,COCH2)により行われる。
2.  カンプトテシン-20-O-[3-(4-ブロモ-l,8-ナフタルイミド)プロピオネート]の合成。
【００９８】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-(4-ブロモ-l,8-ナフタルイミド)プロピオン酸(19mg,0.056mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロエタン(20ml)をその溶液に加えた。有機層を、水(20ml),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し,さらにMgSO4で乾燥した。その溶媒を減圧下除去した後、得られた固体を、カラム クロマトグラフィ(溶出液:CHC13: CH30H 9:1)にて分離し、mp250-252℃(dec)のカンプトテシン-20-0-[3-(4-ブロモ-l,8-ナフタルイミド)プロピオネート]12.3mgが得られた。
【００９９】
化学構造分析が、1HNMR(CDC13,600MHz):δ8.61(d,1H,Ar-H),8.49(d,1H,Ar-H),8.38(s,1H,Ar-H),8.36(d,1H,Ar-H),8.19(d,1H,Ar-H),7.94(m,2H,Ar-H),7.84(t,1H,Ar-H),7.75(t,1H,Ar-H),7.68(t,1H,Ar-H),7.29(s,1H,Ar-H),5.65(d,1H,H17),5.43(d,1H,H17),5.28(s,2H,H5),4.50(t,2H,NCH2),3.00(dm,2H,COCH2),2.25(d,2H,CH2),0.94(t, 3H,CH3)によって行われる。
【０１００】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノ CPT;
9-モルホリノ CPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル) アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ) エチル CPT;など
【実施例６】
【０１０１】
本例は、非置換及び置換3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  カンプトテシン-20S-エステル of 3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニル}-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(001101)
1.  3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸の合成
【０１０２】
1-(3-トリフルオロメチルフェニル)ピペラジン(510mg,2.2mモル),エチル3-ブロモプロピオネート(500mg,2.7mモル},炭酸水素ナトリウム (300mg,3.5mモル)及びエタノール(15ml)の反応混合物を、アミンが完全に消出するまで3時間還流した。その混合物を濾出した後、得られた固体を、5mlのジオキサン及び14mlの5%水酸化ナトリウム溶液にて溶解した。その混合物を室温にて1昼夜保存し、次に濃塩酸にて酸化した。固体を濾出し、水で洗浄し、さらに乾燥し、mp 228-230℃の白色固体として3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸、500mgが得られた。
【０１０３】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ7.47(t,1H,Ar-H),7.29(t,2H,Ar-H),7.15(d,1H,Ar-H),3.36(m,lOH,NCH2),2.89(t,2H,COCH2)により行われた。
2.  カンプトテシン-20-O-3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネートの合成
【０１０４】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸(19mg,0.063mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20ml)をその溶液に加えた。有機層を、水(20m1),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgS04で乾燥した。溶媒を減圧下にて除去し、得られた固体を、カラム クロマトグラフィ(溶出液: CHC13:CH30H9:1)にて分離し、mp 87-90℃のカンプトテシン-20-O-3-[4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1-ピペラジル]プロピオネート、11.4mgが得られた。
【０１０５】
化学構造分析が、1HNMR(CDC13,600MHz):δ8.35(s,1H,Ar-H),7.99(d,1H,Ar-H),7.89(d,1H,Ar-H),7.64(dt,2H,Ar-H),7.30(s,1H,Ar-H),7.17(t,1H,Ar-H),6.99(d,1H,Ar-H),6.93(s,1H,Ar-H),6.85(d,1H,Ar-H},5.69(d,1H,H17),5.42(d,1H,H17),5.28(s,2H,H5),3.22(m,6H,NCH2),2.71(m,6H,NCH2及びCOCH2),2.25 (d,2H,CH2),0.99(t,3H,CH3)によって行われる。
【０１０６】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10ーヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0ーヒドロキシCPT (AIiA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノ CPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT (AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-l0ーヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-10-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT;など.
【実施例７】
【０１０７】
本例は、非置換及び置換3-[(4-ベンジル)ピペラジン-l-イル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-[(4-ベンジル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(001204)
1.  3-[(4-ベンジル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸の合成
【０１０８】
1-(4-ベンジル)ピペラジン(380 mg,2.16mモル),エチル3-ブロモプロピオネート(500mg,2.7mモル),炭酸水素ナトリウム(300mg,3.5mモル)及びエタノール(15ml)の反応混合物を、アミンが完全に消失するまで6時間還流した。その混合物を濾出した後、得られた固体を、5mlのジオキサン及び14mlの5%水酸化ナトリウム溶液にて溶解した。その混合物を室温にて1昼夜攪拌し、次にそれを濃塩酸にて酸化した。その固体を濾出し、水で洗浄し、その後乾燥して、mp165-166℃の3-[(4-ベンジル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸、265mgが得られた。
【０１０９】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ7.38(m,4H,Ar-H),3.40-2.60(m,14H,NCH2及び COCH2)によって行われる。
2.  カンプトテシン-20-O-3-[(4-ベンジル)-l-ピペラジニル]プロピオネートの合成
【０１１０】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-[(4-ベンジル)ピペラジン-l-イル]プロピオン酸(14.3mg,0.058mモル), EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)nの混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20ml)をその溶液に加えた。有機層を、水(20ml),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、その後MgSO4で乾燥した。溶媒を減圧下にて除去した後、得られた固体をカラム・クロマトグラフィ(溶出液: CHC13: CH30H9:1)にて分離し、mp206-208℃(dec)のカンプトテシン-20-O-3-[(4-ベンジル)-1-ピペラジニル]プロピオネート、8mgが得られた。
【０１１１】
化学構造分析が、1HNMR(CDCl3,600MHz):δ8.40(s,1H,Ar-H),8.20(d,1H,Ar-H),7.95(d,1H,Ar-H),7.83(t,1H,Ar-H),7.68(t,1H,Ar-H),7.23(m,6H,Ar-H),5.67(d,1H,H17),5.42(d,1H,H17),5.29(q,2H,H5),3.40(s,2H,NCH2Ar),2.73(d,4H,NCH2CH2CO),2.52(bs,8H, NCH2),2.25(d,2H,CH2),0.98(t,3H,CH3)によって行われた。
【０１１２】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ}-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT;など。
【実施例８】
【０１１３】
本例は、非置換及び置換3-[4-(3-メトキシフェニル)-1-ピペラジニル] プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-[4-(3-メトキシフェニル)-1-ピペラジニル] プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(001129)
1.  3-[4-(3-メトキシフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸の合成
【０１１４】
1-(4-(3-メトキシフェニル))ピペラジン(384mg,2mモル),エチル3-ブロモプロピオネート(500mg,2.7mモル),炭酸水素ナトリウム(300mg,3.5mモル)及びエタノール(15ml)の反応混合物を、アミンが完全に消失するまで6時間還流した。 その混合物を濾出した後、得られた固体を、5mlのジオキサン及び14 mlの5%水酸化ナトリウム溶液にて溶解した。その混合物を室温にて1昼夜が攪拌し、次にそれを濃塩酸にて酸性化した。固体を濾出し、水で洗浄しその後乾燥させ、mp180-183℃の3-[4-(3-メトキシフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸、191mgが得られた。
【０１１５】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz);δ10.75(bs,1H,COOH),7.15(t,1H,Ar-H),6.58(d,1H,Ar-H),6.53(s,1H,Ar-H),6.44(d,1H,Ar-H),4.00-3.00(m,10H,NCH2),2.88(t,2H,COCH2)によって行われた。
2.  カンプトテシン-20-O-3-[4-(3-メトキシフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネートの合成
【０１１６】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-[4-(3-メトキシフェニル)-1-ピペラジン-l-イル]プロピオン酸(15.3mg,0.058mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20ml)をその溶液に加えた。有機層を、水(20ml),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び 塩水(20ml)にて洗浄し、その後MgS04で乾燥させた。その溶媒を減圧下にて除去した後、得られた固体を、カラム クロマトグラフィ(溶出液: CHCl3: CH30H 9:1)により分離し、mp98-100℃のカンプトテシン-20-O-3-[4-(3-メトキシフェニル)-1-ピペラジン-l-イル]プロピオネート、16mgが得られた。
【０１１７】
化学構造分析が、1HNMR (CDC13,600MHz):δ8.35(s,1H,Ar-H),8.06(d,1H,Ar-H),7.91(d,1H,Ar-H),7.71(t,1H,Ar-H),7.64(t,1H,Ar-H),7.31(s,1H,Ar-H),7.05(t,1H,Ar-H),6,60-6.30(m,3H,Ar-H),5.68(d,1H,H17),5.41(d,1H,H17),5.28(q,2H,H5),3.79(s,2H,NCH2),3.73(s,3H,OCH3),3.20(t,4H,NCH2),2.80-2.60(m,6H,NCH2,CH2C0),2.25(dm,2H, CH2),1.00(t,3H,CH3)により行われた。
【０１１８】
B.本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノlカルボニルオキシ)-CPT (AKAイリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-1O,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-10-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT; など。
【実施例９】
【０１１９】
本例は、非置換及び置換3-[4-(4-ニトロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-[4-(4-ニトロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(010105)
1.  3-[4-(4-ニトロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸の合成
【０１２０】
1-[4-(4-ニトロフェニル)]ピペラジン(414mg,2mモル),エチル3ブロモプロピオネート(500mg,2.7mモル),炭酸水素ナトリウム(300mg,3.5mモル)及びエタノール(15 ml)を、アミンが完全に消失するまで、6時間還流した。混合物を濾出した後、得られた固体を、5mlのジオキサン及び14mlの5%水酸化ナトリウム溶液にて溶解した。その混合物を、室温にて1昼夜攪拌し、次にそれを濃塩酸にて酸性化した。固体を、濾出し、そして水にて洗浄し、その後乾燥させて、mp250-252℃の3-[4-(4-ニトロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸、300 mgが得られた。
【０１２１】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ11.90(bs,1H,COOH),8.11(d,2H,Ar-H),7.14(d,2H,Ar-H),3.34(t,10H,NCH2),2.85(t,2H,COCH2)により行われた。
2.  カンプトテシン-20-O-3-[4-(4-ニトロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネートの合成
【０１２２】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-[4-{4-ニトロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸(I6mg,0.058mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20m1)をその溶液に加えた。有機層を、水(20ml),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgS04で乾燥させた。溶媒を減圧下にて除去し、得られた固体を、カラム クロマトグラフィ(溶出液:CHCl3:CH30H 9:1)によって分離し、mp255-257℃(dec)のカンプトテシン-20-O-3-[4-(4-ニトロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネート、9.4mgが得られた。
【０１２３】
化学構造が、1HNMR(CDCl3-d6,600MHz):δ8.34(s,1H,Ar-H),7.98(d,1H,Ar-H),7.91(d,2H,Ar-H),7.88(d,1H,Ar-H),7.63(m,2H,Ar-H),7.30(s,1H,Ar-H),6.56(d,2H,Ar-H),5.69(d,1H,H17),5.43(d,1H,H17),5.28(q,2H, H5),3.39,3.33(d,4H,NCH2),2.76-2.56(t,8H, NCH2),2.25(dm,2H,CH2),1.00(t,3H,CH3)により行われる。
【０１２４】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT (AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-10-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9- クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノエチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル) アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-10-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ) エチル CPT;など。
【実施例１０】
【０１２５】
本例は、非置換及び置換3-(4-フェニル-l-ピペラジニル)プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-(4-フェニル-l-ピペラジニル)プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(010108)
1.  3-(4-フェニル-l-ピペラジニル)プロピオン酸の合成
【０１２６】
1-(4-フェニル)ピペラジン(324mg,2mモル),エチル3-ブロモプロピオネート(500mg,2.7mモル),炭酸水素ナトリウム(300mg,3.5mモル)及びエタノール(15ml)の反応混合物を、アミンが完全に消失するまで6時間還流した。その混合物を濾出後、得られた固体を、5mlのジオキサン及び14m1の5%水酸化ナトリウム溶液にて溶解した。混合物を室温にて1昼夜攪拌し、次に濃塩酸にて酸性化した。固体を濾出し、水で洗浄し、次に乾燥させて、mp213-215℃の3-(4-フェニル-l-ピペラジニル)プロピオン酸、246mgが得られた。
【０１２７】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ7.26(t,2H,Ar-H),7.00(d,2H,Ar-H),6.87(t,1H,Ar-H),3.37 (t,lOH,NCH2),2.83(t,2H,COCH2)によって行われた。
2.  カンプトテシン-20-0-3-(4-フェニル-l-ピペラジニル)プロピオネートの合成
【０１２８】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-(4-フェニルピペラジン-l-イル)プロピオン酸(13.4mg,0.058mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20ml)を、その溶液に加えた。有機層を、水(20ml),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、更にMgS04で乾燥した。溶媒を減圧下にて除去した後、得られた固体を、カラムクロマトグラフィ(溶出液:CHCl3:CH3OH 9.1)により分離し、mp200-202℃のカンプトテシン-20-O-3-(4-フェニル-l-ピペラジニル)プロピオネート、10.4mgが得られた。
【０１２９】
化学構造分析が、1HNMR(CDC13,600MHz):δ8.34(s,1H,Ar-H),7.95(d,1H,A.r-H),7.91(d,2H,Ar-H),7.88(d,1H,Ar-H),7.63(m,2H,Ar-H),7.30(s,1H,Ar-H),6.56(d,2H,Ar-H),5.69(d,1H,H17),5.43(d,1H,HI7),5.28(q,2H,H5),3.39,3.33(d,4H,NCH2),2.76- 2.56(t,8H,NCH2),2.25(dm,2H,CH2),1.00(t,3H,CH3)によって行われた。
【０１３０】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-10-[4-(1-ピペリジノ}-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルsilyi-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-diメチルアミノ) エチル CPT;など。
【実施例１１】
【０１３１】
本例は、非置換及び置換3-[4-(2-クロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-[4-(2-クロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(010117)
1.  3-[4-(2-クロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸の合成
【０１３２】
1-[4-(2-クロロフェニル}]ピペラジンモノヒドロクロライド(466mg,2mモル),エチル 3-ブロモプロピオネート(500mg,2.7mモル),炭酸水素ナトリウム(300mg,3.5mモル)及びエタノール(15 ml)の反応混合物を、アミンが完全に消失するまで6時間還流した。その混合物を濾出した後、得られた固体を、5mlのジオキサン及び14mlの5%水酸化ナトリウム溶液にて溶解した。その混合物を、室温にて1昼夜攪拌し、次にそれを濃塩酸にて酸性化した。その固体を濾出し、水で洗浄し、さらに乾燥し、mp210-213℃の3-[4-(2-クロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸,246mgが得られた。
【０１３３】
化学構造分析が、1HNMR(D2O,600MHz):δ7.44(d,1H,Ar-H),7.29(t,1H,Ar-H),7.18(d,1H,Ar-H),7.10(t,1H,A.r-H),3.64-3.08(m,lOH,NCH2),2.85(t,2H, COCH2)によって行われる。
2.  カンプトテシン-20-O-3-[4-(2-クロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネートの合成
【０１３４】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-[4-(2-クロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸(15mg,0.056mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル) 及び ジクロロメタン (3 ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20 ml)の混合物を、その溶液に加えた。有機層を、水(20ml),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgSO4で乾燥した。その溶媒を、減圧下にて除去した後、得られた固体を、カラム クロマトグラフィ (溶出液: CHC13:CH30H 9:1)により分離し、mp190-192℃のカンプトテシン-20-O-3-[4-(2-クロロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネート、mgが得られた。
【０１３５】
化学構造分析が、1HNMR(CDCl3,600MHz):δ8.38(s,1H,Ar-H),8.07(d,1H,Ar-H),7.91(d,1H,Ar-H),7.71(t,1H,Ar-H),7.64(t,1H,Ar-H),7.30(s,1H,Ar-H),7.28(d,IH,Ar-H),6.98(t,IH,Ar-H),6.88(t,1H,Ar-H),6.70(d,1H,Ar-H),5.68(d,1H,H17),5.42(d,1H,H17),5.28(q,2H,H5),3.06(s,4H,NCH2),2.76-2.56{t,8H,NCH2),2.25(dm,2H,CH2),1.00(t,3H,CH3)により行われた。
【０１３６】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AKAトポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-10-(2-ジメチルアミノ)エチル CPT;など。
【実施例１２】
【０１３７】
本例は、非置換及び置換3-[4-(4-フルオロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-[4-(4-フルオロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(010124)
1.  3-[4-(4-フルオロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸の合成
【０１３８】
1-[4-{4-フルオロフェニル)]ピペラジン(360mg,2.0mモル),エチル3-ブロモプロピオネート(500mg,2.7mモル),炭酸水素ナトリウム(300mg,3.5mモル) 及びエタノール(15ml)の反応混合物を、アミンが完全に消失するまで、6時間還流し、得られた固体を、5mlのジオキサン及び14mlの5%水酸化ナトリウム水溶液にて溶解した。その混合物を、室温にて1昼夜攪拌し、次にそれを濃塩酸にて酸性化した。固体を濾出し、その後水で洗浄し、さらに乾燥してmp178-180℃の3-[4-(4-フルオロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸、482mgが得られた。
【０１３９】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ7.09(d,2H,Ar-H),7.04(t,2H,Ar-H),3.40-3.32(m,10H,NCH2),2.91(t,2H,COCH2)により行われた。
2.  カンプトテシン-20-O-3-[4-(4-フルオロフェニル)-1-ピペラジニル]-プロピオネートの合成
【０１４０】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-[4-(4-フルオロフェニル}-1-ピペラジニル]プロピオン酸(15mg,0.056mモル),EDCI(25 mg,0.13 mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20 ml)をその溶液に加えた。有機層を、 Organic layer was washed with 水(20ml),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgSO4で乾燥した。その溶媒を、減圧下にて除去し、得られた固体を、カラム・クロマトグラフィ(溶出液: CHC13:CH30H 9:1)にて分離し、mp162-165℃のカンプトテシン-20-O-3-[4-(4-フルオロフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネート、12mgが得られた。
【０１４１】
化学構造分析が、1HNMR(CDC13,600MHz)δ8.36(s,1H,Ar-H),8.05(d,1H,Ar-H),7.92(d,2H,Ar-H),7.72(t,1H,Ar-H),7.65(t,2H,Ar-H),7.28(s,1H,Ar-H),6.79(m,2H,Ar-H),6.65(m,2H,Ar-H},5.71(d,1H,H17},5.43(d,1H,H17),5.27(q,2H,H5),3.11(t,4H,NCH2),2.83-2.50(m,8H,CH2),2.25(dm,2H,CH2),0.95(t,3H,CH3)によって行われた。
【０１４２】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9- ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-10-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリニメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-10-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-10-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT;など。
【実施例１３】
【０１４３】
本例は、非置換及び置換カンプトテシン-20-O-3-(1-ピペリジノ)プロピオネートの調製方法を記載する。
A.  カンプトテシン-20-O-3(1-ピペリジノ)プロピオネート(001124)
【０１４４】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-(1-ピペリジノ)プロピオン酸(10mg,0.063mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20ml)を、その溶液に加えた。有機層を、水(20ml),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgSO4で乾燥した。その溶媒を減圧下にて除去した後、得られた固体を、カラム クロマトグラフィ(溶出液: CHC13: CH30H 9:1)により分離し、mp175-177℃のカンプトテシン-20-O-(1-ピペリジノ)プロピオネート5mgが、得られた。
【０１４５】
化学構造分析が、1HNMR(CDC13,600MHz):δ8.39(s,1H,Ar-H),8.20(d,1H,Ar-H),7.94(d,1H,Ar-H),7.83(t,1H,Ar-H),7.67(t,1H,Ar-H},7.26(s,1H,Ar-H),5.70(d,1H,H17),5.41(d,1H,H17),5.29(s,2H,H5),2.79(d,4H, NCH2),2.52(bs, 4H, NCH2CH2CO),2.25(d,2H,H18),1.62(6H,CH2),1.00(s,3H,CH3)により行われた。
【０１４６】
B.本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT (AKA イリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT; -
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCYT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノエチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノエチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-10-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT;など。
【実施例１４】
【０１４７】
本例は、非置換及び置換された3-[1-(4-ベンジル}ピペリジノ]プロピオネートのカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-[1-(4-ベンジル)ピペリジノ]プロピオネートのカンプトテシン-20S-エステル(010122)
1.  3-[1-(4-ベンジル)ピペリジノ]プロピオン酸の合成
【０１４８】
4-ベンジルピペリジン(350 mg, 2.0 mモル),エチル3-ブロモプロピオネート(500mg,2.7mモル),炭酸水素ナトリウム(300mg,3.5mモル)及びエタノール(15ml)の反応混合物を、アミンが完全に消失するまで6時間還流した。その混合物を濾出した後、得られた固体を、5mlのジオキサン及び14mlの5%水酸化ナトリウム溶液にて溶解した。その混合物を、室温にて1昼夜攪拌し、次にそれを濃塩酸にて酸性化した。固体を濾出しそして水で洗浄しさらに乾燥させて、mp214-215℃の3-[1-(4-ベンジル)ピペリジノ]プロピオン酸、346mgが得られた。
【０１４９】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ7.29(t,2H,Ar-H),7.19(m,3H,Ar-H),3.40(d,2H,NCH2),3.22(d,4H,CH2),2.86(m,5H,CH2CH2C0及びH4),2.56(s,2H,Ar-CH2),1.74(m,5H,CH2)により行われた。
2.カンプトテシン-20-O-3-[I-(4-ベンジル)ピペリジノ]プロピオネートの合成
【０１５０】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-[1-(4-ベンジル)ピペリジノ]プロピオン酸(14mg,0.056mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン (20 ml)をその溶液に加えた。有機層を、水(20 ml),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgSO4で乾燥した。その溶媒を減圧下にて除去し、得られた固体を、カラム・クロマトグラフィ(溶出液:CHC13;CH30H 9:1)により分離し、mp195-197℃のカンプトテシン-20-O-3-[1-(4-ベンジル)ピペリジノ]プロピオネート、10mg.が得られた。
【０１５１】
化学構造分析が、1HNMR(CDC13,600MHz):δ8.39(s,1H,Ar-H),8.22(d,1H,Ar-H),7.95(d,1H,Ar-H),7.83(t,1H,Ar-H),7.67(t,1H,Ar-H),7.22(m,3H,Ar-H),7.15(d,1H,Ar-H),7.04(d,2H,Ar-H),5.69(d,1H,H17),5.42(d,1H,H17),5.29(q,2H,H5},2.90(d,2H,NCH2),2.79(d,4H,NCH2),2.42(d,2H,Ar-CH2),2.25(dm,2H,CH2),1.94-1.20(m,5H,CH2CHCH2),1.00(t,3H,CH3)にて行われた。
【０１５２】
B.本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-10-ヒドロキシCPT(AkA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT(AkA イリノテカン(irinotecan))；
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-10-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノエチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-l0-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7- エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT;など。
【実施例１５】
【０１５３】
本例は、3-マレイミドプロピオン酸の非置換及び置換3-[4-(4-アセチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステルの調製方法を記載する。
A.  3-[4-(4-アセチルフェニル)-1-ピペラジニル] プロピオン酸のカンプトテシン-20S-エステル(010201)
1.  3-[4-(4-アセチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸の合成
【０１５４】
1-[4-(4-アセチルフェニル)]ピペラジン(408mg,2.0mモル),エチル3-ブロモプロピオネート(500mg,2.7mモル),炭酸水素ナトリウム(300mg,3.5mモル)及びエタノール(15 ml)の反応混合物を、アミンが完全に消失するまで、6時間還流した。その混合物を濾出した後、得られた固体を、5mlのジオキサン及び14mlの5%水酸化ナトリウム溶液に溶解した。その混合物を、室温にて1昼夜攪拌し、次にそれを濃塩酸により酸性化した。固体を濾出しそして水で洗浄しさらに乾燥させて、mp204-206℃の3-[4-(4-アセチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸、330mgが得られた。
【０１５５】
化学構造分析が、1HNMR(DMSO-d6,600MHz):δ7.86(d,2H,Ar-H),7.07(d,2H, Ar-H),3.40-3.32(m,10H,NCH2),2.82(t,2H,COCH2),2.48(s,3H,COCH3)にて行われた。
2.  カンプトテシン-20-O-3-[4-(4-アセチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネートの合成
【０１５６】
カンプトテシン(10mg,0.029mモル),3-[4-{4-アセチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオン酸(16mg,0.058mモル),EDCI(25mg,0.13mモル),DMAP(2mg,0.02mモル)及びジクロロメタン(3ml)の混合物を、室温にて20時間攪拌し、次にジクロロメタン(20ml)をその溶液に加えた。有機層を、水(20mI),飽和NaHC03水溶液(10ml)及び塩水(20ml)にて洗浄し、さらにMgSO4で乾燥した。溶媒を減圧下除去した後、得られた固体を、カラム・クロマトグラフィ(溶出液: CHC13:CH30H 9:1)にて分離し、mp218-220℃(dec)のカンプトテシン-20-O-3-[4-(4-アセチルフェニル)-1-ピペラジニル]プロピオネート、8.7mgが得られた。 
【０１５７】
化学構造分析が、1HNMR(CDC13,600MHz):δ8.34(s,1H,Ar-H),8.02(d,1H,Ar-H),7.88(d,1H,Ar-H),7.72(d,2H,Ar-H},7.62(m,2H,Ar-H),7.31(s,1H,A,r-H),6.66(d,2H,Ar-H),5.69(d,1H,H17),5.42(d,1H,H17),5.28(q,2H,H5),3.35(d,4H,NCH2),2.79-2.60(t,8H,NCH2),2.50(s,3H,COCH3),2.25(dm,2H,CH2),1.00(t,3H,CH3)にて行われた。
【０１５８】
B.  本例のパーツAにおけるカンプトテシン(CPT)を他のカンプトテシン類似物と置換することにより、本発明の他の化合物が調製される。カンプトテシン類似物の命名におけるカンプトテシンの標準の数値付けは、カンプトテシンの略字として用いられている「CPT」を使用する別のカンプトテシン類似物は、以下の物質を含む：
10,11-メチレンジオキシCPT;
9-ニトロCPT;
9-アミノCPT;
9-アミノ-10-ヒドロキシCPT;
9-メチル-アミノCPT;
9-ジメチル-アミノCPT;
9-ジメチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT(AKA トポテカン(topotecan));
9-ピペリジノCPT;
9-モルホリノCPT
7-エチル-l0-[4-(1-ピペリジノ)-1-ピペリジノ]カルボニルオキシ)-CPT (AKAイリノテカン(irinotecan));
7-t-ブチルジメチルシリルCPT;
7-t-ブチルジメチルシリル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ニトロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-メチル-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-クロロ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-シアノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルオキシ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アセチルアミノ-10,11-メチレンジオキシCPT;
9-アミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-メチルアミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-ジメチルアミノメチル-10-ヒドロキシCPT;
9-(2-ヒドロキシエチル)アミノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
9-モルホリノメチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-ヒドロキシCPT;
7-エチル-l0-アセチルオキシCPT;
7-メチル-10-アミノカルボニルオキシCPT;
7-n-プロピル-l0-ピペリジノカルボニルオキシCPT;
7-エチル-l0-(2-ジメチルアミノ)エチルCPT;など。
【実施例１６】
【０１５９】
試料を、細胞増殖のため、及びその細胞の増殖の及ぼすこれらのこれらの効果に対する本発明の化合物を試験するための方向つけを提供する。全ての細胞を、DCTDC Tumor Repository,NCI,NIHから購入した。
細胞コロニー形成アッセイ
【０１６０】
400個の細胞(HCT 116,PC-3)又は500個の細胞(VM46)を、10%のウシ胎児血清、及び100units/mlのペニシリン、及び100mg/mlのストレプトマイシンを含む2.7mlの培地(変更されたNcCoy's 5a培地)を含む60mmのペトリ皿(Petri dishes)のプレートに入れた。その細胞を、ペトリ皿(Petri dishes)の底部に着くように、CO2雰囲気のインキューベイタに、37℃、5時間インキューベイトした。薬剤を、最終濃度の5倍に、培地において作成され、さらに0.3mlの本ストック溶液を、皿における2.7mlの培地に加えた。次にその細胞を、薬剤を伴い37℃、72時間インキュベートした。インキュベートの終了時、薬剤含有培地を、デカンチング処理し、その皿を、4mlのHank's Balance Salt Solution(HBSS)により洗浄(rinsed)し、新たに5mlの培養液を加え、そしてその皿を、コロニー形成のためインキュベータに戻した。その細胞コロニーを、HXT116細胞及びPC-3細胞に対して7日間、VM46細胞に対して8日間それぞれインキュベートした後、コロニー計数器を用いて計数した。細胞の生存率(%)を計算し、HCT116の細胞に対して表1に示されている。
【０１６１】
ID50の値(コロニー形成を50%抑制を造り出す薬剤濃度)が、それぞれ試験する化合物に対し決定することができる。本例に記載された指針を、DU-145などの他の細胞に用いることができる。
表  １
【０１６２】
【表１】
0004584538.tif 000009
本表は、細胞株HCT116に対し実施例16で行われたin vitroにおける効能試験の結果を提供する。
【実施例１７】
【０１６３】
本例は、C3H/HeJマウスによる本発明の化合物のin vivoにおける毒性試験を行うための指針を提供する。
【０１６４】
本発明による化合物の急性毒性を、C3H/HeJマウス(体重18乃至22g)により評価した。MTD40(40日での最大許容投与量)値は、Gad and Chengelis(たとえば、「Acute Toxicology Testing」2ndEd.,Shayne O.Gad and Christopher P.Chengelis,pp.186-195(Academic Pressを参照)により記載された標準的な方法により決定された。この連続形式の研究において、2匹のマウスには、40及び100mg/kgの低用量と中位程度の用量が投与された。厳しく、且つ可逆のきかない毒性(安楽死が必要)が、これらの投与量にて全く生じない場合、新たな対の動物を、180mg/kgにて開始する、それは100mg/kgより1.8倍有意的に多い。順次投与量(3対の動物に約3用量、各薬剤用量に2匹のマウス)を、厳しく、且つ可逆のきかない毒性(安楽死が必要)が、引き起こるまで、係数1.8だけ増大させた。次に別の対の動物を、非致死として最も高い投与用量にて開始し、そして逐次投与する量として係数1.15だけ増大させた。この実験の結果は、2種の投与用量があり、１方は見かけ上の致死、もう一方では、厳しく、且つ可逆のきかない毒性が起こると、致死しそして安楽死が求められ、係数1.15により分けられている。6匹のマウスには、各投与量にて投与された。厳しく、且つ可逆のきかない毒性が、低い投与量で全く起こらないが、一方では少なくとも厳しく、且つ可逆のきかない毒性が、有意的に高い投与量で起こると、有意的に低い投与量がMTDであると考えられる。本発明の化合物は、C3H/HeJマウスに腹腔内に注射により注入して投与される。薬剤の毒性は、マウスを45日間毎日検査(checked)することにより評価した。報告されている毒性変数項目(parameters)が、MTD40と成り得る。MDTは、1方の治療群において厳しい、可逆のきかない毒性を生じないが、少なくとも一方の動物に厳しく、可逆のきかない毒性を示し、次に有意的に高い投与量を投与することにより安楽死となるような、最も高い投与用量として定義される。
【実施例１８】
【０１６５】
本実施例は、MTG-B腫瘍を有するC3H/HeJマウスによる本発明の化合物のin vivo における効能試験を行うための指針を提供する。
【０１６６】
本発明の化合物による研究が、MTG-B腫瘍を有するC3H/HeJマウスにより行われる。腫瘍は、マウスの脇腹に移植した後指数的に増殖し、7乃至10日までに、径が8mm(268.08mm3)に達した。その時点で治療が開始され、治療の最初の日を、計算のため日ゼロと定義し、プロットした。マウスが、1回による注入、と計画的なQ2Dx3(2日毎1/3MTDで3回の治療)の両方を用い、3種の薬剤用量レベル(1/3,1/2,1xMTD)にて、i.p.で注入される。8mm径の腫瘍を有するマウスのコントロール群を、担体だけで処理した。薬剤による治療後、マウスを日に2回観察した。腫瘍が1.5gに達すると、腫瘍を有する前記マウスを安楽死させた。抗ガン剤(T)にて治療されたマウスに対し日ゼロから測定された生存日数、及びコントロールマウス(C)として日ゼロから測定された生存日数が、記録された。腫瘍増殖抑制値(T/C%)を、式T/C%=(抗ガン剤Tで治療されたマウスの生存日数/コントロールマウスCの生存日数)ｘ100%を用いて計算した。
【０１６７】
腫瘍サイズは、毎日ノギスにより測定することができた。毎日の測定(mm)に固体腫瘍(長さL及び幅W)を2次元にして用い、1mm3=1mgという相互変換値に基づく腫瘍重量[腫瘍重量=(長さｘ幅2)/2]を計算した。腫瘍増殖の遅延(T-C値)を、1,000mgを到達するまでに治療群及びコントロール群の腫瘍に必要な平均時間(median)(日数)を計算することにより、決定した。腫瘍倍加時間(Td)を測定し、腫瘍細胞死は、細胞死(kill)=(T-C値)/(3.32ｘTd)の対数式により計算される。治療後の退化効果が、観察され記録することができた(完全な退化：触診の限定下での退化；部分的退化：腫瘍塊の50%を越える減少による退化)。
【０１６８】
一般的にコントロールマウスの生存時間は、6(6)日である。タキソールにて治療されたマウス(コントロールと比較して)の生存特別日数(extra days)に対し、本発明の化合物により治療したマウスの生存特別日数(extra days)の割合(コントロールと比較して)を、計算することができる。たとえば、マウスが、タキソールにて処理されたマウスが9日であることと比較して18日生存すると、CD/タキソール比が、18-6/9-6=12/3=4となる。
【実施例１９】
【０１６９】
本実施例は、異なる血液成分の存在下カンプトテシン誘導体のラクトン環(E)加水分解の反応速度決定するための指針を提供する。定量的C18逆相高性能液化クロマトグラフィ(HPLC)アッセイを用いることができる。説明は、以下の文献にて見出される。
J.Med.Chem.2000,43,3970-3980;
Anal. Biochem.1993,212,285-287;及び
Biochemistry 1994,33,10325-10336。
さらにJ.Med.Chem.1998,41,31-37を参照。
【実施例２０】
【０１７０】
本実施例は、トポイソメラーゼIの抑止を決定するための指針を提供する。本方法は、無傷細胞アッセイであり、Cancer Res.1986,46,2021-2026に見出される公開された方法を変更したものである。より最近の文献は、J.Med.Chem.1993,36 2689-2700の 2699にて見出すことができる。ここに前の方法を変更して、無傷細胞のトポイソメラーゼI介在されたDNAの切断量を定量するために用いられる。培地にて増殖するHL-60のDNAが、[3H]チミジンを組み入れることにより標識化される。上記細胞を、試験すべき化合物に暴露し、及び溶解し、そしてそのタンパク質を析出した。トポイソメラーゼIによる切断可能な複合成形物における放射活性のDNAを、タンパク質と共に共析出した。切断可能な複合成形物の量は、液体シンチレーション・カウンターによりそのペレットを計数することにより定量化される。
【図面の簡単な説明】
【０１７１】
本明細書は化学式の説明をしているが図面が入らない。