(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
α−インターフェロンの製造方法において、
ｉ）末梢血液からの一次細胞であるヒト白血球をウイルスにより誘導し、
ii）その白血球を
ａ）テオフィリン、２−アミノ−５−ブロモ−６−メチル−４−ピリミジノールもしくはチミン、
ｂ）アセトン、２−ブタノン、１,３−ジメチル−２−イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド、Ｎ−エチル−２−ピロリジノン、４−メチル−２−ペンタノン、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン、２−ピロリジノン、テトラメチレンスルホキシドおよびＮ,Ｎ−ジメチルアセトアミドからなる群から選択される有機溶媒、
から選択されるエンハンサー、またはａ）からの化合物とｂ）からの有機溶媒の組み合わせで処置する工程からなる方法。
【請求項２】
白血球は単球である請求項１記載の方法。
【請求項３】
エンハンサーはウイルス誘導と同時にまたはその４時間までののちに添加する請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ウイルスはセンダイウイルスである請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
エンハンサーはテオフィリンである請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
エンハンサーは２−アミノ−５−ブロモ−６−メチル−４−ピリミジノールである請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
エンハンサーはチミンである請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
有機溶媒はアセトン、２−ブタノン、１,３−ジメチル−２−イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド、Ｎ−エチル−２−ピロリジノン、４−メチル−２−ペンタノン、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン、２−ピロリジノン、テトラメチレンスルホキシドおよびＮ,Ｎ−ジメチルアセトアミドのいずれかである請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
溶媒はＮ−メチル−２−ピロリジノンである請求項８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【技術分野】
本発明はウイルスによって誘導されたヒト白血球中におけるα−インターフェロンの製造方法を意図するものである。さらに特定すれば、本発明は、白血球をエンハンサーで処理するα−インターフェロンの製造方法に関する。
【０００２】
【背景技術】
インターフェロンは、それらの非特異的な抗ウイルスおよび抗増殖活性を特徴とするタンパク質ファミリーを構成し、その性質がそれらを抗ウイルスおよび抗癌剤として有用にしている。インターフェロンは様々な誘導物質の暴露されると動物細胞によって誘導されて放出され、その最も強力なものはウイルスである。インターフェロンは３つのタイプに分類される。すなわち、血清学的および構造的関係に基づいて、α−インターフェロン、β−インターフェロンおよびγ−インターフェロンである。インターフェロンの治療剤としての使用は１９７０年代に溯る。３種のインターフェロンのすべてが評価に付されたが、α−インターフェロンが治療目的で最も広く使用されてきた。ヒト起源のインターフェロンのうち、α−インターフェロンは数種のサブタイプに分けられ、それらは異なる遺伝子座またはそれらの対立遺伝子によってコードされているが、ヒトβ−およびγ−インターフェロンにはそれぞれ１つのサブタイプしかない。各サブタイプの機能はまだ明確ではなく、したがって、それらの抗ウイルスおよび抗新生物活性の分子的および細胞的な標的も完全には検討されていない。しかしながら、一部のインビトロ試験では、単一のサブタイプのみを使用した場合に比較し、異なるサブタイプの混合物を用いた場合により大きな生物学的効果が示されている（Fan, S.X., Skillman, D.R., Liao, M-J,, Testa, D. & Meltzer, M.S., 1993, AIDS Res. and Human Retrovir. 9, 1115-1122; Heim,A., Brehm, C., Stille-Siegener, M., Mueller, G., Hake, S., Kandolf, R. & Figulla, H-R., 1995, J.Mol.Cell Cardiol. 27, 2199-2208）。
【０００３】
現在、α−インターフェロンの工業的規模での製造には、３つの主要な方法がある。基本的には、すべて使用する細胞系の差である。原核システムでは単一のサブタイプ、ほとんど排他的にインターフェロンα２をコードする遺伝子が大腸菌に移入され、ここで、このタンパク質は細菌によって発現され、ついで収穫される（Wessmann, C., Hagata, S., Boll, W.ら, 1982, Phil. Trans. Royal Soc. London, Series B: Biol. Sci. 299, 7-28）。α−インターフェロンのこの製造方法を本明細書では「組換えインターフェロン」と呼ぶことにする。α−インターフェロンの高い効率での製造のためには細菌培養を使用することが可能であり、経済的に有利なヒト起源の細胞の代替物となっている。しかしながらわずか１種の単一サブタイプのみが産生され、真核細胞中で産生されるインターフェロンα２と異なり、タンパク質は修飾（たとえばグリコシル化）されない。組換えα−インターフェロン産物が遭遇する臨床的な欠点は、それらに一部の患者でα−インターフェロンに対する抗体を誘導する傾向があることである。これらの中和抗体は幾つかの報告で、組換えα−インターフェロンによる治療的処置にマイナスの影響を示した（Antonelli, G., Simeoni, E., Currenti, M., DePisa, F., Colizzi, V., Pistello, M. & Dianzani, F., 1997, Biother. 10, 7-14; Oeberg, K. & Alm, G., 1997, Biother. 10, 1-5）。
【０００４】
別法としてα−インターフェロンは、インビトロで増殖する確立された細胞系または例えば供血の副生物として得られる末梢白血球からの一次細胞、いずれかからのヒト細胞において製造することができる。これらの場合、α−インターフェロンサブタイプの混合物が得られるが、異なる細胞のソースからは異なるサブタイプパターンが産生される（Goren, T., Fisher, D.G.. & Rubinstein, M., 1986, J. Interferon Res. 6, 323-329）。確立された細胞系は、ヒト腫瘍またはたとえばエプスタイン−バーウイルス処置により不死化した細胞から誘導されるクローンである。これらの細胞は適当なメジウム中適当な条件下に、無限に分裂し増殖する。これに反し、インターフェロン産生一次細胞たとえば白血球は分裂せず、限りのあるライフスパンを有する。したがって、このような細胞は供給に限りがあり、それらの利用はネイティブな白血球α−インターフェロンの大規模な製造の制限因子である。したがって製造方法における収率を増大させる手段が必要である。
【０００５】
真核細胞系はきわめてわずかしかまたは全くα−インターフェロンを自発的には産生しない。したがって、細胞によるα−インターフェロンの産生を開始させるためには［誘発剤」の使用が必要である。その結果、様々なインビトロ細胞系またはインビボにおいてα−インターフェロンの産生を開始させるために多数の因子が報告されてきた。最も一般的な誘導剤は様々なウイルスであるが、合成有機物質もα−インターフェロン産生の誘導剤として働くことが示されている。その例の一部には、マウスにおいてインビボで  ｌｅｕ−エンケファリンおよびナロキソン（Gabrilovac, J., Ikic-Sutlic, M., Knezevic, N. & Poljak, L., 1996, Res.Exp.Med. 196, 137-144）、マウスインビボでネオビール（Mezentseva, M., Narovlyansky, A., Kondratieva, T. & Ershov, F., 1997, J.Interferon Res. 17, Suppl. 2, S94, Abstract）、ヒト、インビボでジピリダモール（Galabov, A.S. & Mastikova, M., 1984, Biomed.Pharmacoth. 38, 412-413）、ヒト、インビボで２−アミノ−５−ブロモ−６−メチル−４−ピリミジノール（２−ＡＢＭＰ）およびその誘導体（米国特許第 3,932, 617 号, Stringfellow, D.A., Vanderberg, H.C. &  Weed, S.D., 1980, J. Interferon Res. 1, 1-14）および様々な種においてインビボでアントラキノン誘導体（米国特許第 4,027,021 号）がある。エタノールが他の誘導剤なしでも Madin-Darby ウシ腎臓（ＭＤＢＫ）細胞にβ−インターフェロンの産生を誘導することが報告されている（Chelbi-Alix, M.K. & Chousterman, S., 1992, J.Biol.Chem. 267, 1741-1745）。
【０００６】
α−インターフェロンの産生が、本明細書では「エンハンサー」と名付ける補助的試薬、すなわち誘導剤によって活性化された細胞におけるα−インターフェロンの産生を上昇させることはできるが、それ自体ではα−インターフェロンの産生を誘導しない化合物によって増大した例がある。エンハンサーの特徴はα−インターフェロンを誘導する物質の前または誘導が起こった後のいずれにも添加できることである。ヒト細胞におけるインターフェロン産生のエンハンサーとして報告されている物質には、たとえば、線維芽細胞に用いられたカルモジュリン阻害剤、トリフルオペラジン（Lin, H-Y. & Thacore, H.R., 1990, J.Interferon Res. 10,375-378）、リンパ芽球腫起源の細胞系に対しスティミュレーターとして用いられたデキサメサゾン（米国特許第 4,266,024 号）およびリンパ芽球腫細胞系においてスティミュレーターとして使用される酪酸ナトリウムも（欧州特許 0097 353, 欧州特許 0000520）がある。さらに、プリン誘導体であるテオフィリンがエンハンサーとして作用し、ポリＩ：Ｃにより誘導されたマウスＬｐａ細胞からのα−インターフェロンの収量を増大させ（Zahorska, R., Korbecki, M. & Barciszewski, J., 1995, Arch.Immunol.Ther.Exp. 43, 43-46）、ある種の合成有機化合物、好ましくはテトラメチル尿素（ＴＭＵ）（欧州特許 0 097 353）またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（米国特許第 4,266,024 号）の使用は誘導剤で処置したリンパ芽球腫細胞系からのα−インターフェロンの収量を増大させることが示されている。
【０００７】
本発明を招来するに至った研究では、インビボもしくは線維芽細胞またはリンパ芽球腫起源の細胞系に対して用いた場合誘発剤またはエンハンサーとして報告されている物質の一部につき、センダイウイルスによる誘導の前または後の両時点でα−インターフェロンの産生の上昇を補助するかをヒト白血球に対して試験したが、α−インターフェロンの収量に何らプラスの結果は認められなかった。一部の実験では、細胞系においてエンハンサーとして知られている化合物を添加した場合、ヒト白血球からのα−インターフェロンの産生に低下さえ認められた。たとえば、酪酸ナトリウムによる前処置はリンパ芽球腫細胞系においてα−インターフェロンの収量の増加を招くスティミュレーターとして記載されている（欧州特許 0 097 353, 欧州特許 0 000 520）。本研究では、類似の方法により一次白血球を酪酸ナトリウムで前処置すると、α−インターフェロンの収量に低下を招来し、これはα−インターフェロンタンパク質の産生系としての細胞系と一次細胞の間の基本的な差を指摘するものである。
【０００８】
したがって本発明の目的は、ウイルスによって誘導されたヒト白血球におけるα−インターフェロンの改良された製造方法を提供することにある。
【０００９】
【発明の概要】
本発明の目的は、特許請求の範囲に記載のα−インターフェロンの製造方法によって達成される。
【００１０】
本発明によれば、α−インターフェロンの製造方法において、
ｉ）ヒト白血球をウイルスにより誘導し、
ii）その白血球を
ａ）キサンチン、ピリミジノールおよびピリミジノンまたはそれらのいずれかの誘導体、
ｂ）非芳香族ケトン、脂肪族もしくは環状アミド、アルキル化脂肪族もしくは環状尿素誘導体および脂肪族もしくは環状スルホキシドからなる群から選択される有機溶媒、
から選択されるエンハンサー、またはａ）からの化合物とｂ）からの有機溶媒の組合わせで処置する工程からなる方法が提供される。
【００１１】
本発明によれば、上述のような化合物および／または有機溶媒の添加が、驚くべきことに白血球におけるウイルス誘導α−インターフェロン量を増大させることを発見した。マウスＬｐａ細胞の場合とは種が異なること、およびリンパ芽球腫細胞系の場合とは異なる細胞ソースであることを考慮すれば、また上述の実験における異なる細胞系の間の整合性の欠如を考慮すると、テオフィリンならびにジメチルスルホキシドのような溶媒がウイルス誘導一次白血球におけるα−インターフェロン産生を促進したことは驚くべきことであった。ピリミジン誘導体、２−アミノ−５−ブロモ−６−メチル−４−ピリミジノール（２−ＡＢＭＰ）もウイルス誘導一次白血球を用いる本発明によるα−インターフェロン産生のエンハンサーとして作用することが見いだされた。２−ＡＢＭＰは本発明に記載した実験系を用いてもウイルス誘導剤の不存在下にはα−インターフェロンを誘導しないので、文献に記載されたインビボα−インターフェロン誘導についての促進機構は、本発明において観察されるこの物質のα−インターフェロン産生促進作用と比較して、明らかに異なっている。これは、異なるヒト細胞系では異なる機構が効果を表すという証拠をさらに増強するものであり、細胞系または生物体への添加物の研究の非予見性を指示するものである。
【００１２】
上述のように、インビボ系および様々な細胞培養系の両者において、数種の誘発剤およびエンハンサーが用いられてきた。文献におけるデータは多くの場合、たとえば本発明の細胞系においては２−ＡＢＭＰはインターフェロンの誘発剤としては作用できない等、本発明の所見とはかけ離れていたので、本発明の細胞系の独特な性質をいくつか指摘しなければならない。末梢血液からの一次細胞は、インターフェロンの製造に関して記載された他のすべての細胞系とは異なり休止細胞集団である。これらの細胞は、バーキットリンパ腫細胞またはいわゆるリンパ芽球腫細胞の場合のように、ウイルスによって活性化されたり不死化されない。それらは固有のゲノム不安定性および調節されない遺伝子発現を示す腫瘍細胞系ではない。ヒト血液由来の白血球の混合物内では、単球が、センダイウイルス処理後におけるα−インターフェロンの主要な担い手であることが示された（Sandberg, K., Matsson, P. And Alm, G. (1990), J. Immunology 145, 1015-1020）。すなわち、本発明において用いられる細胞はα−インターフェロンの製造に使用される確立された細胞系とは生育状態、新生物の可能性、ウイルスゲノムの存在および細胞タイプに関して相異する。したがって試験された因子の影響は、他の細胞タイプと、分化、代謝状態またはウイルスゲノムからの干渉に関して同一であることは期待されない優先性が存在する。
【００１３】
【発明の詳述】
本発明によれば、キサンチン、ピリミジノールおよびピリミジノンもしくはそれらの誘導体の形態でのエンハンサーおよび／または各種の有機溶媒の添加は、ウイルスによって誘導されたヒト白血球におけるインターフェロンの産生を上昇させることが見いだされた。エンハンサーは単独でもまたは有機溶媒および上述の化合物との組合わせで、インターフェロンの収率を増大させることができる。ある種の条件では、これらのエンハンサーの組み合わせの効果は相乗的であり、これらの物質を別個に使用した場合に得られるよりも大きな効果を示す。
【００１４】
本発明に使用できるキサンチン誘導体は、脂肪族および／または芳香族置換基を有するキサンチンであり、たとえばテオフィリン、テオブロミン、エンプロフィリン、ヒポキサンチンおよび８−フェニルテオフィリンである。テオフィリンが好ましいエンハンサーである。使用できるピリミジノール誘導体は、例えば２−アミノ−５−ブロモ−６−メチル−ピリミジノールおよび２−アミノ−６−メチル−４−ピリミジノールであり、好ましい実施態様としては２−アミノ−５−ブロモ−６−メチル−ピリミジノールである。好ましいピリミジノン誘導体はチミンである。
【００１５】
本発明に使用できる有機溶媒は、非芳香族ケトン、脂肪族または環状アミド、アルキル化脂肪族または環状尿素誘導体および脂肪族または環状スルホキシドである。好ましい溶媒としては、アセトン、２−ブタノン、1,３−ジメチル−２−イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド、Ｎ−エチル−２−ピロリジノン、４−メチル−２−ペンタノン、Ｎ−メチル−２−ピロリジン（ＮＭＰ）、２−ピロリジノン、テトラメチレンスルホキシド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、２−ピロリジノンを挙げることができる。インターフェロンの産生に関して上述のａ）で与えられる最も好ましい化合物はテオフィリンおよび２−ＡＢＭＰである。最も好ましい溶媒はＮＭＰである。
【００１６】
使用できるウイルスは任意のウイルスであるが、好ましいウイルスは、精製されたヒト白血球のインターフェロン−αの最も強力な誘発物質のセンダイウイルスである。
【００１７】
白血球の精製、細胞のインキュベーションおよびウイルスによる誘導は、ほぼCantellら（Cantell, K., Hirvonen, S., Kauppinen, H-L. & Myllylae, G. 1981, Methods in Enzymology 78, 29-38）の最初の方法に従って実施する。
【００１８】
本発明に使用されるヒト白血球はバフィーコートから、最初は成分の分画のための遠心分離、ついで吸引による血漿層および白血球分画の連続除去によって調製される。白血球分画を夾雑する残留赤血球細胞は２〜４容量の冷０.８３％塩化アンモニウムで２回分解し、各分解工程に続いて遠心分離を行って細胞を収集する。最終の白血球分画を基本メジウム、たとえばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）沈殿ヒト血漿を補充したＥＭＥＭ（イーグルの必須メジウム）中に再懸濁する。ＰＥＧ沈殿血漿はヒト血漿に最終濃度６％（w/w）までＰＥＧ 6000 を添加して調製する。沈殿後３〜５日間冷却室に置いたのち、上清を除去し、使用まで凍結して保存する。インキュベーションメジウムの温度は３６〜３７℃にセットして、連続撹拌を使用する。ヒトＰＥＧ沈殿血漿を濃度１〜５％（v/v）、好ましくは４％（v/v）に添加する。少量のα−インターフェロンを起爆工程としてインキュベーションメジウムに加える（通常は１００IU／mL）が、数千単位/mLまでの他の濃度も採用できる。ついでヒト白血球を約３〜１５×１０6／mL細胞の濃度に、好ましくは７〜１１×１０6／mL細胞の濃度に加える。異なる細胞濃度を用いても類似の増強効果が観察され、この効果はこの範囲外の細胞濃度でも見ることが可能である。起爆工程は通常１〜５時間、好ましくは１.５〜２時間行われる。
【００１９】
インターフェロンの誘導はセンダイウイルスを、一般に 1 L のインキュベーションメジウムあたり尿膜液からのウイルス３０mLの添加によって行われるが、これより少なくても多くても良好な誘導能力が認められ、最も好ましい範囲は細胞あたり赤血球凝集ウイルス粒子５００〜２０００である。ついで１〜４時間、好ましくは１〜２時間後にインキュベーション温度を２９〜３２℃に低下させる（Morser, J. & Shuttleworth, J., 1981, J.Gen.Virology 56, 163-174）。
【００２０】
エンハンサーの添加の至適なタイミングはエンハンサーにより変動するが、一般的にはα−インターフェロンの産生の増大は、物質を細胞と同時にまたは誘導後数時間まで、好ましくは温度を低下させる時間近くに添加した場合のいずれでも認められる。
【００２１】
インターフェロンの産生の増加に有効な添加物の濃度範囲は成分によって変動するが、毒性の最も低い溶媒の場合、プラスの効果は1mM〜０.３Ｍの範囲内で、好ましくは３mM〜５０mMの範囲内で、最も好ましくは５mM〜２０mMの範囲内において認めることができる。さらに毒性が高い溶媒では、適当な濃度はさらに限られた範囲内にある。テオフィリン、２−アミノ−５−ブロモ−６−メチル−４−ピリミジノールおよびチミンの場合、有効範囲は５μＭ〜０.５mM、好ましくは ２０μＭ〜０.１５mMである。これらの添加後、インキュベーションは絶えず撹拌しながら一夜進行させる。遠心分離工程は細胞を除去するために実施して、上清についてα−インターフェロンを定量するためＥＬＩＳＡにより分析する。
【００２２】
【実施例】
次に本発明を以下の非限定的実施例により図面を参照しながら例示する。
実施例１
センダイウイルス誘導ヒト白血球による各種有機溶媒とのインキュベーション後におけるα−インターフェロンの産生
バフィーコートから調製し、８〜１１×１０6細胞／mLの濃度で使用したヒト白血球を１.５ｇ／Ｌのトリシンおよび４％（v/v）ＰＥＧ沈殿血漿を補充した基本メジウム（ＥＭＥＭまたは改良ＥＭＥＭ）中でインキュベートする。実験は１００mLのガラス瓶中４０mL容量のメジウムを用い絶えず撹拌しながら実施する。センダイウイルス３０mL／Ｌの添加の前に細胞を１００IU／mLのα−インターフェロンにより３７℃で１.５時間プライミングする。１.５時間後、インキュベーション温度を３０℃に低下させ、インキュベーションメジウムに有機溶媒を加える。使用する溶媒はアセトン、ＤＭＳＯ（最終濃度：５mL／Ｌ）、２−ブタノン、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、ＮＭＰ、テトラメチレンスルホキシド（２.５mL／Ｌ）、ＴＭＵ（１.５mL／Ｌ）、２−ピロリジノン（１.２５mL／Ｌ）、４−メチル−２−ペンタノン、１,３−ジメチル−２−イミダゾリジノン、およびＮ−エチル−２−ピロリジノン（０.６mL／Ｌ）である。ついでインキュベーションを一夜進行させる。遠心分離工程によって細胞を除去し、上清をＥＬＩＳＡにより分析してα−インターフェロンを定量する。結果は図１Ａに示す。上記のインキュベーション条件は図１Ｂに示す例にも使用したが、この場合は一部の有機溶媒を５０〜１００μg／mLの 2-ＡＢＭＰと混合する。
【００２３】
実施例２
センダイウイルス誘導ヒト白血球における有機溶媒の不存在下または存在下でのプリンおよびピリミジン誘導体とのインキュベーション後におけるα−インターフェロンの産生
実施例１を同一インキュベーション条件であるが、１種および２種のピリミジン誘導体を単独またはＮＭＰと組み合わせて添加して反復する。使用したプリンはテオフィリン（５０μg／mL）で、ピリミジンは２−ＡＢＭＰ（５０μg／mL）またはチミン（１４０μg／mL）である。結果は図２に示す。
【００２４】
実施例３
センダイウイルス誘導ヒト白血球における各種濃度のテオフィリンおよび有機溶媒とのインキュベーション後におけるα−インターフェロンの産生
実施例１の操作を、有機溶媒としてＤＭＳＯおよびプリンとしてテオフィリンを添加するほかは同様に反復する。ＤＭＳＯは２.５mL／Ｌまたは５mL／Ｌを添加する。テオフィリンの濃度は５μg／mL〜１００μg／mLの間を変動させる。結果は図３に示す。
【００２５】
実施例４
実験室規模のファーメンター中でインキュベートしたセンダイウイルス誘導ヒト白血球におけるα−インターフェロンの産生
小規模で得られる結果を実験室ファーメンターでの適当な条件を見いだすために用いてスケールアップを実施する。ＮＭＰおよびテオフィリンを加えたファーメンターにおけるα−インターフェロンの産生を、エンハンサーを加えなかった対照ファーメンターの場合と比較するために様々な実験を行う。実験は容器あたり２Ｌのメジウムを使用する実験室規模のファーメンターを用いて実施する。テオフィリンの量は５０μg／mLとし、一方、ＮＭＰの量は１.７５mL／Ｌ〜３mL／Ｌで変動させる。インキュベーション条件は実施例１と同様である。結果は図４に示す。
【００２６】
実施例５
２−ＡＢＭＰおよびＤＭＳＯとインキュベートしたヒト白血球におけるα−インターフェロンの産生。ウイルス誘導の効果。
実施例１を２−ＡＢＭＰとＤＭＳＯを組合わせたほかは同じインキュベーション条件で反復する。エンハンサー物質はセンダイウイルス誘導白血球および非誘導白血球の両者に添加してα−インターフェロンの産生に対する効果を比較する。２−ＡＢＭＰは５０μg／mLの濃度で加え、ＤＭＳＯの添加量は５mL／Ｌである。結果は表１に示す。
【００２７】
【表１】
0004584456.tif 000002
【００２８】
結論
本発明においては、様々な有機溶媒ならびに様々なプリン類およびピリミジン類の添加は、ウイルス誘導ヒト白血球におけるα-インターフェロンの産生を再現性よく上昇させることが示された。最大の上昇はプリンまたはピリミジン誘導体を有機溶媒と組み合わせた場合に得られる。
【図面の簡単な説明】
【図１Ａ】センダイウイルス誘導ヒト白血球におけるα−インターフェロンの産生に対するインキュベーションメジウムへの様々な有機溶媒の添加の効果を示す。産生されたα−インターフェロンの量は有機溶媒を加えない対照（＝１００％）の百分率として計算する。
【図１Ｂ】センダイウイルス誘導ヒト白血球におけるα−インターフェロンの産生に対するインキュベーションメジウムへの２−ＡＢＭＰと組み合わせた様々な有機溶媒の添加の効果を示す。産生されたα−インターフェロンの量はエンハンサーを加えない対照（＝１００％）の百分率として計算する。
【図２】センダイウイルス誘導ヒト白血球におけるα−インターフェロンの産生に対する様々なプリンおよびピリミジン誘導体の様々なＮＭＰ濃度での添加の効果を示す。産生されたα−インターフェロンの量はエンハンサーを加えない対照（＝１００％）の百分率として計算する。
【図３】センダイウイルス誘導ヒト白血球におけるα−インターフェロンの産生に対する様々な量のテオフィリンの様々なＤＭＳＯ濃度での添加の効果を示す。産生されたα−インターフェロンの量はエンハンサーを加えない対照（＝１００％）の百分率として計算する。
【図４】実験室規模のファーメンター中でのセンダイウイルス誘導ヒト白血球におけるα−インターフェロンの産生に対するインキュベーションメジウムへのＮＭＰおよびテオフィリンの添加の効果を示す。産生されたα−インターフェロンの量はエンハンサーを加えない対照（＝１００％）の百分率として計算する。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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