(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
0004519975.tif 000004
（式中、Ｒ１は、メチル、エチル、プロピル、ペンチル、ヘプチル、ウンデシル、ペンタデシル、ヘプタデシル、８−ヘプタデセニル、ヘプタデカ−８，１１−ジエニルまたはフェニルを意味する）のレチニルアシラートを製造する方法において、一般式（ＩＩ）：
【化２】
0004519975.tif 000005
（式中、Ｒ１は、上記で与えられた意味であり、Ｒ２は、水素を意味する）の化合物を、溶媒としての、同時に弱塩基としてのジメチルホルムアミドの存在下において、トリフルオロ酢酸無水物；Ｃ１−６−アルカンスルホン酸無水物；トリフルオロメタンスルホン酸無水物；場合により置換されたベンゼンスルホン酸無水物；五酸化リン；三酸化硫黄；および三酸化硫黄と、トリ（Ｃ１−６−アルキル）アミン、窒素含有ヘテロ芳香族化合物、またはジ（Ｃ１−６−アルキル）ホルムアミドとの錯体から選択される試薬で処理することを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、シクロアルケニルポリエンエステル、特にレチニルアシラート、すなわち３，７−ジメチル−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニルアシラート（これは、ビタミンＡ類の化合物、またはある場合には化合物自体の製造の中間媒体として商業的関心が高い）の製造のための新規な製造方法に関する。この方法は、対応する３，７−ジメチル−６−ヒドロキシ−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，７−トリエニルアシラートまたはその６−アシル化誘導体を、この目的のための試薬としては以前に知られていなかった、一定の酸無水物またはその錯体を用いて脱離および異性化することを含む。
【０００２】
すなわち、本発明は、一般式（Ｉ）：
【０００３】
【化３】
0004519975.tif 000002
【０００４】
（式中、Ｒ1は、場合により置換されたＣ1-23−アルキル；１〜５個の二重結合を特徴とするＣ2-23−アルケニル；場合によって芳香族により置換されたフェニル−Ｃ1-6−アルキル；または場合により置換されたフェニルを意味する）のレチニルアシラートを製造する方法であって、一般式（II）：
【０００５】
【化４】
0004519975.tif 000003
【０００６】
（式中、Ｒ1は、上記で与えられた意味であり、そしてＲ2は、水素原子またはＣＯＲ1を意味する）の化合物を、トリフルオロ酢酸無水物；Ｃ1-6−アルカンスルホン酸無水物；トリフルオロメタンスルホン酸無水物；場合により置換されたベンゼンスルホン酸無水物；五酸化リン；三酸化硫黄；および三酸化硫黄と、トリ（Ｃ1-6−アルキル）アミン、窒素含有ヘテロ芳香族化合物、またはジ（Ｃ1-6−アルキル）ホルムアミドとの錯体から選択される試薬で、溶媒として同時に弱塩基としてのジメチルホルムアミドの存在下において処理することを特徴とする。
【０００７】
「Ｃ1-23−アルキル」または「１〜５個の二重結合を特徴とするＣ2-23−アルケニル」（Ｒ1の意味）の用語において、そこで炭素原子の数により、直鎖のみならず、分岐鎖状のアルキルまたはアルケニル基であると理解されなければならない。Ｃ1-23−アルキル基の例として、メチル、エチル、プロピル、ペンチル、ヘプチル、ウンデシル、ペンタデシルおよびヘプタデシルがあり、Ｃ2-23−アルケニル基の例としては、８−ヘプタデセニルおよびヘプタデカ−８，１１−ジエニルがある。対応するアルカノイルおよびアルケノイル基（ＣＯＲ1）は、アセチル、プロピオニル、ブチリル、カプロイル、カプリル、ドデカノイル、パルミトイル、およびステアロイル、およびそれぞれオレイルおよびリノレイルである。Ｃ1-23−アルキルとしてのＲ1の意味として特に好ましいのはメチルである。Ｃ1-23−アルキルが置換される場合、置換基は特に３個までのＣ1-4−アルコキシ基であり、それらはそれぞれの場合において直鎖状または分岐鎖状であることができる。２個または３個のアルコキシ置換基は同じであるかまたは異なっていてもよい。
【０００８】
「場合により芳香族に置換されたフェニル（optionally aromatically substituted phenyl）」の用語は、フェニル基が、例えばアルキル、アルコキシおよびニトロ基およびハロゲン原子から選択される一つ以上の置換基により置換されているか、または置換されていないことを意味する。該置換基は、好適には３個までであり、１〜３個のＣ1-4−アルキル基、１〜３個のＣ1-4−アルコキシ基、１〜２個のニトロ基および１〜３個のハロゲン原子から選択される。これは「場合により置換されたフェニル」基に同じく適用される。３または４個の炭素原子でのいずれのアルキルまたはアルコキシ置換基も直鎖状または分岐鎖状であってもよく、いずれのハロゲン原子もフッ素、塩素、臭素、またはヨウ素であってよい。
【０００９】
含まれる脱離および異性化の反応を促進するために、本発明の工程で用いられる試薬に関しては、Ｃ1-6−アルカンスルホン酸無水物は、メタン−、エタン−、プロパン−、ブタン−、ペンタン−、およびヘキサン−スルホン酸であって、３〜６の炭素原子のアルカン部分が直鎖状または分岐鎖状のアルカン部分を持ってもよいことを特徴としているもののいかなる１つであってよい。もし、「場合により置換されたベンゼンスルホン酸無水物」が置換されるならば、置換基は、例えばアルキル、アルコキシおよびニトロ基、ならびに、その、もしくはそれぞれのハロゲン原子がフッ素、塩素、臭素またはヨウ素であることができるハロゲン原子、から選択される１つ以上の置換基である。該置換基は、好ましくは３個までであって、１〜３個のＣ1-4−アルキル基、１〜３個のＣ1-4−アルコキシ基、１〜２個のニトロ基、および１〜３個のハロゲン原子から選択される。３個または４個の炭素原子のいずれのアルキルまたはアルコキシ基も、直鎖状であるかまたは分岐鎖状であることができる。
【００１０】
三酸化硫黄とトリ（Ｃ1-6−アルキル）アミンまたはジ（Ｃ1-6−アルキル）ホルムアミドとの錯体の場合に、アルキル基は、直鎖状または分岐鎖状であってよく、そして同じかまたは異なってよい。そのようなアルキル基類の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert.ブチル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルである。トリアルキルアミンそれ自体−および同時に好適なトリアルキルアミンの例としては、トリメチルアミン、トリエチルアミンおよびＮ−エチルジイソプロピルアミンである。ジアルキルホルムアミドの例であり、および好適なものは、ジメチルホルムアミドである。三酸化硫黄と窒素含有へテロ芳香族化合物との錯体においては、そのような化合物は、特に少なくとも１つの環窒素原子を特徴とする複素環類である。ピコリンおよびキノリンのようなピリジンおよびピリジン誘導体が例である。そのような窒素含有へテロ芳香族化合物は、また、重合体担体（polymeric carrier）に結合もできる（「ポリマー結合」）。ピリジンは、これらのうちでもっとも好ましいものである。重合体担体に結合したピリジンの例としては、ポリ−（４−ビニルピリジン）であり、三酸化硫黄とのそのアダクトが市販品として手に入る。
【００１１】
本発明の工程における、三酸化硫黄化合物の錯体の使用は、遊離体三酸化硫黄および窒素含有化合物からのその簡単な製造のおかげで都合がよく、ならびに、これのみで用いられた場合の活性な三酸化硫黄と比べて、取り扱いがより容易である。錯体は一部は知られており、市販のものが手に入る場合もある。それらは、三酸化硫黄を、例えば、希釈したトリアルキルアミン、窒素含有へテロ芳香族化合物またはジアルキルホルムアミド、希釈剤として用いられている塩化メチレン中に導入することにより、容易に得ることができる。
【００１２】
本発明の工程での使用に対し、好ましい試薬は、五酸化リン、三酸化硫黄および三酸化硫黄錯体である。
【００１３】
本発明に関する工程は、同時に溶媒としても弱塩基としても働くジメチルホルムアミドの存在下で実施される。しかしながら、一般的には非プロトン性有機溶媒である、付加的な溶媒も存在することができる。該溶媒は、極性または非極性非プロトン性有機溶媒であってよく、好適には、ペンタン、ヘキサン、ヘプタンまたはオクタンのような、５〜１０個の炭素原子の脂肪族炭化水素；場合によってアルキル置換された、シクロヘキサン、メチルシクロヘキサンまたはデカリンのような、１０個までの炭素原子の脂環式炭化水素；ベンゼンまたはトルエンのような芳香族炭化水素；塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロメタンのようなハロゲン化脂肪族炭化水素；ニトロメタンのようなニトロ化脂肪族炭化水素；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、tert．ブチルメチルエーテルまたは１，２−ジメトキシエタンのような脂肪族エーテル、テトラヒドロフラン、メチルフランまたは１，４−ジオキサンのような環状エーテル、アセトニトリルのような脂肪族ニトリル、トリエチルアミンまたはＮ−エチルジイソプロピルアミンのような脂肪族アミン；それぞれＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドまたは１−メチル−２−ピロリドンのような脂肪族または脂環式アミド（ジメチルホルムアミドそのものに加えて）；ジメチルスルホキシド；テトラメチレンスルホン（スルホラン）、または１以上の前記の溶媒の混合物である。好適な付加的溶媒は脂肪族エーテル、環状エーテル、特にテトラヒドロフランおよびジメチルスルホキシドである。
【００１４】
もし、ジメチルホルムアミドと非プロトン性有機溶媒の混合物が用いられるならば、溶媒混合物の全量に対するジメチルホルムアミドの量は、好都合には全体の少なくとも１０％であり、好適には少なくとも２０％である。好ましい溶媒混合物は、ジメチルホルムアミドおよび、非プロトン性有機溶媒としてテトラヒドロフランまたはジメチルスルホキシドを含むものである。
【００１５】
そこに含まれる脱離および異性化反応を促進するための、本願発明の工程に合わせて用いられる試薬の量は、好適には用いられた式IIの出発物質のモル当量あたり約１〜約３モル当量である。好ましくは、この量はおよそ２〜３モル当量である。
【００１６】
式IIの出発物質の量に関連して、用いられたジメチルホルムアミドの量は、好都合にはモルあたり約１〜約１０リットルである。
【００１７】
本願発明の工程は、好都合には、およそ−５０℃から＋５０℃で達成され、好ましくはおよそ−３５℃からおよそ＋２０℃である。
【００１８】
本願発明の工程は、好都合には望む温度において、ジメチルホルムアミドまたはジメチルホルムアミドを含む溶媒混合液中で、式IIの出発物質に対して脱離および異性化反応を促進する試薬を加えることによって実施される。付加および引き続く反応の間、反応液は好都合には攪拌される。さらには、付加および引き続く反応は、好都合には、窒素またはアルゴンのような、不活性ガス雰囲気下で行われる。反応の進行の定期的な検査は、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）および順相液体高速クロマトグラフィー（ＮＰ−ＨＰＬＣ）のような既知の分析技術によってなされてよい。反応が完結した後（通常２０時間以内で成し遂げられる、さらに特定すると１０時間以内である）、好都合には、混合液をトリアルキルアミンのような有機塩基、好適にはトリエチルアミン、または固体もしくは水和物の（aqueous）無機塩基でクエンチする。望むならばクエンチした混合液を数時間放置して、そして続いて例えば冷却ヘキサンで抽出して反応生成物を単離して、必要に応じて既知の方法を用いて精製してもよい。
【００１９】
式IIの出発物質は、本発明の工程において、式IIの単体化合物として、または２種類以上のそのような化合物の混合物として、異性体に関しても、Ｒ2の意味（水素またはＣＯＲ1）に関しても、用いてよい。例えば、Ｒ2が水素を意味する式IIの化合物と、Ｒ2が、アセチルのようなＣＯＲ1を意味するものを、出発物質として用いてよい。
【００２０】
原則として、式IIの出発物質は、いかなる異性体的形態でもよく、そして実際には利用した出発物質は、２（Ｚ）−、４（Ｚ）−、７（Ｚ）、２（Ｅ）−、４（Ｅ）−、および７（Ｅ）−立体配置二重結合の種々の組み合わせ、ならびに６(Ｓ)−および６(Ｒ)−立体配置炭素原子（その６−炭素原子は水酸基またはアシルオキシ基ＯＲ2をともなう）を特徴としている。出発物質の入手可能性の観点から、通常は種々の混合物、または例えば２（Ｚ）−、４（Ｚ）−および７（Ｅ）−立体配置二重結合を特徴とする、特定の異性体的形態として、そのような混合物または特定の異性体的形態が一般的に用いられる。その（all−Ｅ）異性体は、容易に利用可能なのであれば、より望ましく出発物質として用いられる。しかしながら、本発明の工程の有利な点は式IIの出発物質のいかなる異性体を用いても、製造された式Iのレチニルアシラートは最も望ましい（all-Ｅ）異性体の高い比率を特徴とする、という結果にある。これに関連して、この工程を実施する温度が、該（all-Ｅ）異性体を支持する選択性に有意な影響を及ぼすことが証明されている：一般に、いかなる場合においても、温度が低いほど（all-Ｅ）異性体が高い比率で生産される。
【００２１】
本発明を以下の実施例によって説明する。
実施例１
酢酸（２Ｚ，４Ｚ）−３，７−ジメチル−６−ヒドロキシ−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニルからの酢酸（all-Ｅ）−３,７−ジメチル−９−(２′，６′，６′，−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル)−ノナ−２，４，６，８−テトラエニル〔酢酸（all-Ｅ）−ビタミンＡ〕の合成
【００２２】
酢酸（２Ｚ，４Ｚ）−３，７−ジメチル−６−ヒドロキシ−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニル１０２０mg（２．９４mmol）およびジメチルホルムアミド３０mlをマグネチックスターラーを備え、アルゴンで洗浄した１００ml丸底フラスコに入れた。攪拌され（３５０rpm）均一化された溶液を０℃に冷却して（氷浴）、５酸化リン１２５０mg（８．８２mmol）をその混合液にすばやく加えた。続いて、反応混合液を０℃で約１６時間攪拌した（３５０rpm）。その反応時間の後、得られた酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡをＲＰ−ＨＰＬＣに基づいて９１７．６mgであると計算した（用いた出発物質の量を基準とすると収率９４．９％、内訳：all−Ｅ：８３．８％、２Ｚ：１５．３％、２Ｚ，４Ｚ：１．０％）。次に０℃で混合液にトリエチルアミン３．０ml（２１．５２mmol）をすばやく加えてクエンチし、０℃で１５分間攪拌して（３５０rpm）、ｎ−ヘキサン約７０ml中に注ぎ、すばやく抽出した。ジメチルホルムアミド相を抽出の間冷却状態に保っておくために、すばやく層分離(layer separation)を実施した。この工程を、合計約４５０mlのｎ−ヘキサンで６回繰り返した。完全な抽出を確認するため、残りのジメチルホルムアミド層をＲＰ−ＨＰＬＣで分析した。次に、合わせた抽出物を真空中で４０〜４５℃で濃縮した。ジメチルホルムアミドをまだ含んでいる残渣（約１０ml；ｎ−ヘキサンがおよそ３％(v/v)を占める）をジメチルホルムアミドで正確に２０mlにして、酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡ含有率を調べた（較正ＲＰ−ＨＰＬＣ）。酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡの収量は８８０．２mg（用いた出発物質の量を基準にすると９１．０％；内訳：all−Ｅ：８３．６％、２Ｚ：１５．４％、２Ｚ，４Ｚ：１．０％）であった。ｎ−ヘキサン中における３２５nmでのＵＶ測定で、この結果を確認した。次に遮光状態の真空において５０℃で、ジメチルホルムアミドを除去して９６６．８mg（出発物質の９９．９％（w/w）、９６７．０mg＝１００％ w/w）の反応生成物を黄色のオイルとして得た。
【００２３】
例２
酢酸（２Ｚ，４Ｚ）−３，７−ジメチル−６−ヒドロキシ−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニルからの酢酸（all−Ｅ）−３，７−ジメチル−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル１）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニル〔酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡ〕の合成
【００２４】
酢酸（２Ｚ，４Ｚ）−３，７−ジメチル−６−ヒドロキシ−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニル１０２０mg（２．９４mmol）およびジメチルホルムアミド３０mlをマグネチックスターラーを備え、アルゴンで洗浄した１００ml丸底フラスコに入れた。攪拌され（３５０rpm）均一化された溶液を０℃に冷却して（氷浴）、１：１−ジメチルホルムアミド−三酸化硫黄化合物９００．０mg（５．８８mmol）をその混合液にすばやく加えた。続いて反応混合液を０℃で約２０時間攪拌した（３５０rpm）。その反応時間の後、得られた酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡをＲＰ−ＨＰＬＣに基づいて９２６．０mgであると計算した（用いた出発物質の量を基準とすると収率９５．８％、内訳：all−Ｅ：８３．０％、２Ｚ：１５．７％、２Ｚ，４Ｚ：１．２％）。次に、０℃で混合液に冷却トリエチルアミン２．０ml（１４．３５mmol）をすばやく加えてクエンチし、０℃で１５分間攪拌して（３５０rpm）、ｎ−ヘキサン約７０ml中に注ぎ、すばやく抽出した。ジメチルホルムアミド相を抽出の間冷却状態に保っておくために、すばやく層分離(layer separation)を実施した。この工程を、合計約４５０mlのｎ−ヘキサンで６回繰り返した。完全な抽出を確認するため、残りのジメチルホルムアミド層をＲＰ−ＨＰＬＣで分析した。次に、合わせた抽出物を真空中で４０〜４５℃で濃縮した。ジメチルホルムアミドをまだ含んでいる残渣（約１０ml；ｎ−ヘキサンがおよそ３％(v/v)を占める）をジメチルホルムアミドで正確に２０mlにして、酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡ含有率を調べた（較正ＲＰ−ＨＰＬＣ）。酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡの収量は９０７．５mg（用いた出発物質の量を基準にすると９３．９％；内訳：all−Ｅ：８２．９％、２Ｚ：１５．９％、２Ｚ，４Ｚ：１．３％）であると計算した。ｎ−ヘキサン中における３２５nmでのＵＶ測定で、この結果を確認した。次に遮光状態の真空において５０℃で、ジメチルホルムアミドを除去して９５０．１mg（出発物質の９３．３％（w/w）、９６７．０mg＝１００％ w/w）の反応生成物を黄色のオイルとして得た。
【００２５】
例３
酢酸（２Ｚ，４Ｚ）−３，７−ジメチル−６−ヒドロキシ−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニルからの酢酸（all−Ｅ）−３，７−ジメチル−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル１）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニル〔酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡ〕の合成
【００２６】
酢酸（２Ｚ，４Ｚ）−３，７−ジメチル−６−ヒドロキシ−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニル１０２０mg（２．９４mmol）およびジメチルホルムアミド３０mlをマグネチックスターラーを備え、アルゴンで洗浄した１００ml丸底フラスコに入れた。攪拌され（３５０rpm）均一化された溶液を０℃に冷却して（氷浴）、ｐ−トルエンスルホン酸無水物１９２０mg（５．８８mmol）をその混合液にすばやく加えた。続いて反応混合液を０℃で約１６時間攪拌した（３５０rpm）。その反応時間の後、得られた酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡをＲＰ−ＨＰＬＣに基づいて９０９．４mgであると計算した（用いた出発物質の量を基準とすると収率９４．１％、内訳：all−Ｅ：８１．５％、２Ｚ：１７．２％、２Ｚ，４Ｚ：１．３％）。次に、０℃で混合液にトリエチルアミン２．０ml（１４．３５mmol）をすばやく加えて反応を抑え、０℃で１５分間攪拌して（３５０rpm）、ｎ−ヘキサン約７０ml中に注ぎ、すばやく抽出した。ジメチルホルムアミド相を抽出の間冷却状態に保っておくために、すばやく層分離(layer separation)を実施した。この工程を、合計約４５０mlのｎ−ヘキサンで６回繰り返した。完全な抽出を確認するため、残りのジメチルホルムアミド層をＲＰ−ＨＰＬＣで分析した。次に、合わせた抽出物を真空中で４０〜４５℃で濃縮した。ジメチルホルムアミドをまだ含んでいる残渣（約１０ml；ｎ−ヘキサンがおよそ３％(v/v)を占める）をジメチルホルムアミドで正確に２０mlにして、酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡ含有率を調べた（較正ＲＰ−ＨＰＬＣ）。酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡの収量は８９８．７mg（用いた出発物質の量を基準にすると９２．９％；内訳：all−Ｅ：８１．２％、２Ｚ：１７．５％、２Ｚ，４Ｚ：１．４％）であると計算した。ｎ−ヘキサン中における３２５nmでのＵＶ測定で、この結果を確認した。次に遮光状態の真空において５０℃で、ジメチルホルムアミドを除去して９６１．６mg（出発物質の９９．４％（w/w）、９６７．０mg＝１００％ w/w）の反応生成物を黄色のオイルとして得た。
【００２７】
例４
酢酸（２Ｚ，４Ｚ）−３，７−ジメチル−６−ヒドロキシ−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニルからの酢酸（all−Ｅ）−３，７−ジメチル−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル１）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニル〔酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡ〕の合成
【００２８】
酢酸（２Ｚ，４Ｚ）−３，７−ジメチル−６−ヒドロキシ−９−（２′，６′，６′−トリメチルシクロヘキサ−１′−エン−１′−イル）−ノナ−２，４，６，８−テトラエニル１０２０mg（２．９４mmol）およびジメチルホルムアミド３０mlをマグネチックスターラーを備え、アルゴンで洗浄した１００ml丸底フラスコに入れた。攪拌され（３５０rpm）均一化された溶液を−４５〜−５０℃に冷却して（氷浴）、トリフルオロメタンスルホン酸無水物５３４μl（９１３．６mg、３．２４mmol）をその混合液にすばやく加えた。続いて反応混合液を−４５〜−５０℃で約６時間攪拌した（３５０rpm）。その反応時間の後、得られた酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡをＲＰ−ＨＰＬＣに基づいて９０８．０mgであると計算した（用いた出発物質の量を基準とすると収率９３．９％、内訳：all−Ｅ：８８．３％、２Ｚ：１１．３％、２Ｚ，４Ｚ：０．４％）。次に、−４５〜−５０℃で混合液にトリエチルアミン１ml（７．１７mmol）をすばやく加えて反応を抑え、よく混合して０℃で２０分間（内部温度が０℃に達するまで）攪拌して（３５０rpm）、ｎ−ヘキサン約７０ml中に注ぎ、すばやく抽出した。ジメチルホルムアミド相を抽出の間冷却状態に保っておくために、すばやく層分離(layer separation)を実施した。この工程を、合計約４５０mlのｎ−ヘキサンで６回繰り返した。完全な抽出を確認するため、残りのジメチルホルムアミド層をＲＰ−ＨＰＬＣで分析した。次に、合わせた抽出物を真空中で４０〜４５℃で濃縮した。ジメチルホルムアミドをまだ含んでいる残渣（約１０ml；ｎ−ヘキサンがおよそ３％(v/v)を占める）をジメチルホルムアミドで正確に２０mlにして、酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡ含有率を調べた（較正ＲＰ−ＨＰＬＣ）。酢酸（all−Ｅ）−ビタミンＡの収量は８４０．８mg（用いた出発物質の量を基準にすると８７．０％；内訳：all−Ｅ：８８．０％、２Ｚ：１１．５％、２Ｚ，４Ｚ：０．５％）であると計算した。ｎ−ヘキサン中における３２５nmでのＵＶ測定で、この結果を確認した。次に遮光状態の真空において５０℃で、ジメチルホルムアミドを除去して９６２．８mg（出発物質の９９．６％（w/w）、９６７．０mg＝１００％ w/w）の反応生成物を黄色のオイルとして得た。