(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ、ＩＩ）で表されるナフタレン誘導型イソチオウロニウム化合物。
【化１】
0004512678.tif 000006
(式中、ＲはＨまたは低級アルキル基を、Ｒ’はＨまたはアルコキシ基いずれかを表し、ＸはＢｒ又はＰＦ6を表す。)
【化２】
0004512678.tif 000007
(式中、Ｒ、Ｒ’およびＸは請求項１に記載の式Ｉにおけるものと同じ意味を表す。Ａ、Ａ’は低級アルキル基を表わす。ビナフチル基はラセミ体もしくは光学活性体である。ＸはＢｒ又はＰＦ6を表す。)
【請求項２】
請求項１に記載の一般式（Ｉ、ＩＩ）で表されるナフタレン誘導型イソチオウロニウム化合物のアニオン種認識蛍光センサーとしての使用。
【請求項３】
アニオン種が少なくとも１つのオキソアニオン種であることを特徴とする請求項２に記載の蛍光センサーとしての使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、請求項１に記載の一般式（Ｉ、ＩＩ）で表される新規なナフタレン誘導型イソチオウロニウム化合物及び前記新規化合物のアニオン認識蛍光センサーとしての使用、特にカルボキシレートやホスフェートなどのオキソアニオン種を認識して蛍光発信するアニオン種認識蛍光センサーとしての使用、特に、臨床、生体分析、環境分析、生産管理等の分野での使用に関する。
【０００２】
【従来技術】
生体重要化学種の選択的錯体形成に伴って蛍光発信できる分子センサーの開発は基質-レセプター相互作用の分子論的解明に寄与する学術的興味のみならず、医療分析化学分野への適用等の実用面でも極めて重要である。これまでに主にアルカリ・アルカリ土類金属イオンに対する優れた蛍光センサーが開発されてきている（A.Minita and R.Y.Tsien,J.Biol.Chem.,1989,264,19449;I.Aoki,T.Sasaki,andS.Shinkai,Chem.Commun.,1992,730;G.Grynkiewicz,M.Poenie,and R.Y.Tsien,J.Biol.Chem.,1985,260,3440など）が、アニオンに対する関連センサー材料の開発例は少ない。これはアニオンが、カチオン種と比較してイオンサイズが大きいこと（同分子量および同電荷量で、対比した場合。）、アニオンは球状、直鎖状、平面状、四面体、八面体など様々な形状を持ち、カチオンがほとんどが球形であるのと極めて対称的であること、同程度のサイズのカチオンと比較して溶媒和されやすいこと、更にプロトン化を受けやすい性質を持つことなどにより、アニオンを認識するセンサーの分子設計を困難なものにしてきた（C.Seel,A.Galan, and J.de Mendoza,Top.Cur.Chem.,1995,175,102）。しかしながら、アミノ酸、ペプチド、ヌクレオチドにみられるように有機アニオン種は生体内で重要な役割を担っていることはよく知られている。そこで、リアルタイムにアニオン種の動態を検定できるセンサーは医療分析化学に分野において不可欠な材料といえる。こうした背景をうけて近年アニオン種を発光現象の変化などにより、光学的に観察できる光学センサーの開発が注目されている。
【０００３】
アニオン種の定量には、イオンクロマトグラフィー、イオン選択性電極、または比色分析が可能であるが、検出感度では蛍光分析技術が勝っており、特に微量成分の分析には重要な役割をしている。しかしながら、検出感度のよいことは、検定条件にも影響を受けやすいということが言える。そこで、アニオン認識部位（アニオン結合特異性部位）と蛍光機能部位がスムーズに相互作用しうる（特定のアニオン種に特異的に結合することと蛍光特性の変化の応答性が優れている）限りシンプルな分子構造が望まれる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の課題は、アニオン種を特異的に結合し、かつ蛍光特性の変化の応答性がよいアニオン検出用のセンサー化合物を提供することにある。アニオン種を効果的に結合（特異的に結合）するには、電子欠損型化学構造と、かつ水素結合ドナーグループ（ルイス酸）としての特性を併せ持つことがよいとされている。発明者らは、イソチオウロニウム基が、アニオン種に対して前記性質を満たすことを見出すと共に、またイソチオウロニウム基が蛍光特性を持つナフチル基と結合させた場合、分子内で縮合芳香族環であるナフチル基等の蛍光が、これに結合したイソチオウロニウム基により効果的に消光できる能力をもつことを発見した。更に、イソチオウロニウム基にオキソアニオンのようなアニオン種が結合すると、イソチオウロニウム基の電子欠損性が軽減される結果、ナフチル等の蛍光特性の回復（ＬＵＭＯ−ＨＯＭＯ間の電子遷移に伴う発光現象の回復）を引き起こすし、前記蛍光特性の変化をアニオン種の認識シグナル情報として読みとることができることを見出し、前記本発明の課題を解決したものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明の第１は、一般式（Ｉ、ＩＩ）で表されるナフタレン誘導型イソチオウロニウム化合物である。
【０００６】
【化３】
0004512678.tif 000002
【０００７】
〔式Ｉ中、ＲはＨまたは低級アルキル基（炭素数５程度までのアルキル基）を、Ｒ’はＨまたはアルコキシ基いずれかを表し、ＸはＢｒ又はＰＦ6を表す。〕
【０００８】
【化４】
0004512678.tif 000003
【０００９】
(式ＩＩ中、Ｒ、Ｒ’およびＸは前記式Ｉにおけるものと同じ意味を表す。Ａ、Ａ’は低級アルキル基、例えばメチル基を表す。ビナフチル基はラセミ体もしくは光学活性体である。)また、本発明の第２は、前記一般式（Ｉ、ＩＩ）で表されるナフタレン誘導型イソチオウロニウム化合物のアニオン種認識蛍光センサーとしての使用であるであり、好ましくは、アニオン種が少なくとも１つのオキソアニオン種であることを特徴とする前記蛍光センサーとしての使用である。
【００１０】
【本発明の実施の態様】
本発明をより詳細に説明する。
Ａ．前記本発明の前記式ＩおよびＩＩの化合物は、アセトニトリル、アルコールなどの有機溶剤はもとより、水を含む溶媒、例えば、水：エタノールの混合溶媒にも溶けるから（式２の化合物は水：エタノール＝１：１の溶媒に溶ける）、生体での観察にも利用でき可能性がある。また、一般式ＩＩのＡとＡ’とで環状ポリエーテル鎖を形成する（クラウンエーテル構造を形成する）化合物はアミノ酸類を認識する蛍光センサーとしての使用も可能である。
【００１１】
Ｂ．一般式Ｉの合成経路は下記の反応式Ｉで表すことができる。
【００１２】
【化５】
0004512678.tif 000004
【００１３】
式中ＲがＨ（１）の化合物を原料とし、Ｒ＝Ｂｒ（２）の化合物（２−ブロモメチルナフタレン）を経て２−アミノメチルナフタレンを得、この化合物にＣＨ3ＮＣＳを反応させて化合物（３）を得、化合物（３）にベンジルブロミドを反応させてブロモ塩とし、該ブロモ塩とＡｇＰＦ6とのカウンターアニオン交換することにより目的化合物（Ｉ）を得ることができる。
【００１４】
Ｃ．一般式ＩＩの合成経路は下記の反応式（ＩＩ）で表すことができる。
【００１５】
【化６】
0004512678.tif 000005
【００１６】
式（ａ’）中Ａ，Ａ’がＨ（１’）の化合物を出発原料とし、Ａ，Ａ’を所望の目的化合物（ＩＩ）を得るための置換基とし、例えばメチル基（Ｍｅ）（２’）とする。次いで、式（ｂ’）のＲとしてホルミル基（３’）を導入し、該ホルミル基を還元してヒドロキシメチル（４’）とし、該ヒドロキシ基をブロム置換（５’）し、以降は、アミノメチル化（６’）、Ｎ−メチルチオウレイドメチル化（７’）を経て、目的化合物（ＩＩ）を得る。また（１’）のＨをＣＨ2ＯＭｅの保護基に代え、式（ｂ’）のＲを化学修飾ことにより前記一般式ＩＩで定義した所望のＡ，Ａ’とすることができる。
【００１７】
【実施例】
実施例１：本発明の（１）の化合物の合成Ａ．２−ブロモメチルナフタレン〔反応式１の（２）〕の合成アルゴン気流下、２−メチルナフタレン（1000mg、7.03mmol）、Ｎ−ブロモサクシンイミド（ＮＢＳ）（1314mg,7.38mmol）、およびベンジルパーオキサイド（5mg、0.02mmol）を乾燥四塩化炭素（12mL）に溶解させ、４時間加熱還流させた。その後、アゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）（12mg，0.07mmol）を加え、さらに２４時間加熱還流した。少量の水（5mL）を加え反応を失活させたのち、クロロホルム（150mL）−水（50mL）で抽出をおこない、有機相を水（100mL）で３回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を留去し、カラムクロマトグラフィー（ワコーゲルＣ−３００，展開溶媒：１０−２０％（ｖ／ｖ）ヘキサン−クロロホルム）にかけて、白色結晶1,218mgを得た。収率78％であった。
分析結果：1Ｈ ＮＭＲ（200MHz,CDC13,TMS）δ（ppm）４．６８（s,2H,CH2）、７．４７−７．５４（m,3H,Ar-H）、７．７６５−７．８８（m,4H,Ar-H）
Ｂ．２−アミノメチルナフタレンの合成アルゴン気流下、２−ブロモメチルナフタレン〔500mg,2.26mmol：反応式Ｉの（２）〕を乾燥ＤＭＦ（30mL）に溶かし、そこにカリウムフタルイミド（838mg,4.52mmol）を加え、９０℃で３時間加熱撹拌する。反応終了後、クロロホルム（150mL）−水（50mL）で抽出をおこない、有機相を水（100mL）で３回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。クロロホルム−ヘキサンで再沈をおこない中間体Ｎ−置換フタルイミド（590mg）を得る（収率92％）。この得られた中間体（51.3mg,0.18mmol）をＴＨＦ（0.5mL／EtOH（1.5mL）に溶かし、そこにヒドラジン・一水和物（0.1mL,2.1mmol）を加え５０℃で４−５時間加熱撹拝した。溶媒を留去し、クロロホルム（30mL）−水（20mL）で抽出をおこない有機相を水（20mL）で３回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。再び溶媒を留去して黄色オイル状の２−アミノメチルナフタレン（22mg）を得た。（収率77％）。
分析結果：1Ｈ ＮＭＲ（200MHz,CDC13,TMS）δ（ppm）１．６２（s,2H,NH2）、４．０４（s,2H,CH2）、７．４２−７．５２（m,3H,Ar-H）、７．７６（d,J=0.6Hz,1H，Ar-H）、７．８０−７．８５（m,3H,Ar-H）。
【００１８】
Ｃ．２−（Ｎ−メチルチオウレイド）メチルナフタレン〔反応式１の（３）〕の合成２−アミノメチルナフタレン（300mg,1.91mmol）をクロロホルム（7mL）に溶かし、そこにＣＨ3ＮＣＳ（419mg,5.73mmol）のクロロホルム溶液（3mL）を加えた。一昼夜室温で撹拌し、反応終了後、クロロホルム（100mL）−水（40mL）で抽出をおこない有機相を水（40mL）で３回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾操させた。溶媒を留去した後、クロロホルム−ジエチルエーテルで再沈をおこない目的物（299mg）を得た。（収率68％）。
分析結果：1Ｈ ＮＭＲ（300MHz,CDC13,TMS）δ（ppm）２．９７（d,J＝4.8Hz,3H,NH-CH3）、４．８１（d,J＝4.05Hz,2H,Ar-CH2−NH）、５．９６（brd,1H,NH）、６．１２（brd,1H,NH）、７．４３（dd,J=1.8,8.4Hz,1H,Ar-H）、7．46−7．52（m,2H,Ar-H）、７．７５（d,J=O.7Hz,1H,Ar-H）、７．８０−７．８５（m,3H,Ar-H）。
【００１９】
Ｄ．ナフタレンーイソチオウロニウム誘導体（1）の合成アルゴン気流下、２−（Ｎ−メチルチオウレイド）メチルナフタレン（338mg,1.47mmol）を乾燥エタノール（25mL）に溶かし、そこにベンジルブロミド（281mg,1.64mmol）の乾燥エタノール溶液（5mL）を加えた。３０−４０℃にて４−５時間加熱撹拝し、溶媒を留去した。メタノール−エチルエーテルで再沈をおこないブロモ塩５４４ｍｇを得た。（収率92％）。次にそのブロモ塩（200mg,0.50mmol）を乾燥エタノール（11mL）に溶かし、そこにＡｇＰＦ６（126.6mg,0.50mmol）の乾燥エタノール溶液（1.5mL）を加えてカウンターアニオンの交換をおこなった。逆相カラムクロマトグラフィー（MERCK Silicalgel 60 Silanized,展開溶媒：エタノール）でＡｇＢｒを除去し、溶媒を留去して目的物（232mg）を得た。（約100％収率）。
分析結果：1Ｈ ＮＭＲ（400MHz,CDC13,TMS）δ（ppm）３．０７（s,3H,CH3）、４．３２（s,2H,SCH2Ar）、４．６９（s.2H,ArCH2NH）、７．２５−７．２７（m,6H,Ar-H）、７，６７（brd,1H,Ar−H）、７．７６−７．８０（m,3H,Ar-H）；13Ｃ ＮＭＲ（100.7MHz,CDC13）δ（ppm）３１．０７（NHCH3）、３５．８９（SCH2Ph）、４８．５２（ArCH2NH）125.08,126.63,127.25,127.68,128.04,128.96,129.07,129.17,129.37,131.80,133.08 and 133.16（Ar-C）167.85（NH-C+-）;FAB-MS,m／z321〔M+−PF6-〕；Ａｎａｌ．Calcd for C20H21N2SPF6：C,51.50；H,4.54；N,6.01.Found：C,51.66；H,4.53；N,5.98．
【００２０】
実施例２
本発明の化合物の蛍光センサー特性化合物Ｉのアセトニトリル中での蛍光特性、およびアセテートイオンを添加した場合の蛍光特性の変化を図１に示す。図１から、化合物１からは、２−メチルナフタレンの同条件における蛍光強度に対して２％程度の微弱蛍光しか観測されない。このことは、化合物１の電子欠損部位であるイソチオウロニウム基が分子内で効率よくナフタレン部の一重項状態をクエンチしている（ＬＵＭＯ位に励起された電子は、ＨＯＭＯ位に遷移することなくイソチオウロニウムのＬＵＭＯ位に移る）ものと思われる。そこで、そのイソチオウロニウム基と親和性をもつと類堆されるアセテートイオンをゲストアニオン（分子認識されるイオンを一般にゲスト分子と呼ばれることと対応する）として添加したところ、ナフタレン環の持つ発光強度の著しい増大（回復）が観察される。そのスペクトル変化は、ほぼ化学量論比のゲストイオンの添加で飽和に達し、アニオンが存在しなかった場合の蛍光に対してして４１０％の蛍光強度の増大が見られた。
【００２１】
この錯体形成モチーフを直接観測するため、核磁気共鳴装置による解析を実施した。その結果、ＣＤ3ＣＮ中、アニオン結合部位近傍に位置する（●）Ｎａｐｈｔｙｌ−ＣＨ2、（○）ｂｅｎｚｙｌ−ＣＨ2−Ｓ、（△）ＮＨＣＨ3〔それぞれの（ＣＨ2）、（ＣＨ2）、（ＣＨ3）〕のプロトンのそれぞれが、アセテートイオン〔（ｎ−ブチル）4Ｎとの塩〕の添加に伴って最大０．２ｐｐｍの高磁場シフトをもたらした（図２）ことから、アセテートイオンはチオウロニウム部位に効率よく結合していることが確かめられた。
【００２２】
実施例３
アニオン種に対する応答性。
図３のアニオン種、ＡｃＯ-、（ｎ−ＢｕＯ）2Ｐ（Ｏ）Ｏ-、Ｃｌ-に対する化合物Ｉの応答挙動（錯体生成の平衡定数）から、前記アニオン種との結合定数Ｋａ（Ｍ-1）は、それぞれ1．2×107、5.5×104、Ｃｌ-では算出不可能、であることが分かった。このことから、はアセテートイオンに強力に結合できるばかりでなく、オキソアニオン種に対しての良好な選択性を発現したことから、それら化学種に対する発光型分子センサーとして有用であることが分かった。
【００２３】
実施例４
前記一般式（ＩＩ）のビナフチル誘導型イソチオウロニウム蛍光プローブの合成。
〔式（ＩＩ）中、Ｒ、Ｒ’、Ａ、Ａ’及びＸは前記したとおりである。〕
化合物（ＩＩ）は、イソチオウロニウム基を有するダイトピック蛍光レセプター（Ditopic Fluorescent Receptor）であり、α、ω−ジカルボキシレート類のレセプターとして機能し、これらの化合物を認識できる機能を持つ。
【００２４】
Ａ．２，２’−ジメトキシナフタレンの合成〔前記反応式ＩＩの（２’）の化合物〕
１，１’−ビ−２−ナフトール〔化合物（１’）〕(3000mg、10.5mmol),Ｋ2ＣＯ3(5792mg、41.9mmol)を乾燥アセトン（100mL）に溶かし、アルゴン雰囲気下で３０分間加熱還流させた。次に反応系を冷却後、水冷撹拌しつつヨウ化メチル(2.6mL,41.9mmol)を滴下し、遮光下で再び加熱還流させた。反応の終了を薄層クロマトグラフィーで確認したら、水冷撹拌しつつ少量の水（30mL）を加えて反応を失活させ、溶媒を減圧留去した。クロロホルム（250mL）１％（ｖ／ｖ）塩酸（150mL）で抽出をおこない、有機相を１％（ｖ／ｖ）塩酸（150mL）で2回、飽和ＮａＣｌ水溶液（100mL）で１回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去した後、クロロホルム−ヘキサンで再沈を行い白色粉末状の目的物を２９３５ｍｇ(収率89%）得た。
【００２５】
分析結果：1Ｈ ＮＭＲ（300MHz,CDCl3)δ（ppm)、３．７７（s,6H,OCH3）,７．１１（d,J=8.4Hz,2H,Ar-H）,７．２１（dt,J=1.5,6.8Hz,2H,Ar-H）,７．３２（dt,J=1.5,6.6Hz,2H,Ar-H）,７．４６（d,J=9.2Hz,2H,Ar-H）,７．８７（d,J=8.1Hz,2H,Ar-H）,７．９８（d,J=9.2Hz,2H,Ar-H)。
【００２６】
Ｂ．２，２’−ジメトキシ−３，３’−ジホルミル−１，１’−ビナフタレンの合成〔化合物（３’）〕
２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレン(2000mg,6.36mmol),Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン(8.2mL,54.7mmol)を乾燥エチルエーテル(75mL)に溶かし、０℃で撹拌した。そこにｎ−ブチルリチウムの１．５７Ｍヘキサン溶液（34.8mL,54.7mmol）をゆっくり滴下した。０℃のまま２時間撹拌し、その後室温で１７時間撹拌をおこなった。再び０℃にし、乾燥ＤＭＦ（8.4mL,108mmol）を加え、そのまま２時間撹拌した。飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液（50mL）を加え反応を失活させ、溶媒を留去した。クロロホルム（200mL）−水（150mL）で抽出をおこない有機相を水（100mL）で３回、飽和ＮａＣｌ水溶液（80mL）で１回洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去した後カラムクロマトグラフィー（ワコーゲルC-300,展開溶媒:1.5%(v/v)酢酸エチル−クロロホルム）にかけて、黄色オイル状の目的物１，８１６ｍｇを得た。（収率77%)分析結果：1Ｈ ＮＭＲ(200MHz,CDCl3）δ（ppm）３．５０（s,6H,OCH3)、７．３６−７．５４(m,4H,Ar-H),７．１８(d,J=8.2Hz,2H,Ar-H),８．０７（d,2H,J=8.2Hz,Ar-H),８．６２（s,2H,Ar-H),１０．５６(s,2H,CHO）。
【００２７】
Ｃ．３．３’−ビス（ヒドロキシメチル）−２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレンの合成〔化合物（４’）〕
アルゴン雰囲気下２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレン（260mg,0.70mmol)を乾燥エタノール（9.5mL）−乾燥ＴＨＦ（2mL）に溶かし、そこにＮａＢＨ４（93mg,2.46mmol）を加える。室温で４時間撹拌した後、混合物を減圧条件下で濃縮した。そこにクロロホルム（50mL）−１％（ｖ／ｖ）塩酸（50mL）を加え、３０分間撹拌した。クロロホルム（150mL）−１％（ｖ／ｖ）塩酸（100mL）で抽出をおこない有機相を水（100mL）で３回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去した。クロロホルム−ヘキサンで再沈し、白色粉末状の目的物を２１８ｍｇ（収率83%）得た。
【００２８】
分析結果：1Ｈ ＮＭＲ(300MHz,DMSO-ｄ6）δ（ppm）３．２７（s,6H,OCH3）,４．７７（s,4H,CH2）,５．３７（brs,2H,OH),６．９４（d,J=8.5Hz,2H,Ar-H),７．２３（t,J=7.5Hz,2H,Ar-H),７．４０（t,J=7.4Hz,2H,Ar-H),７．９８（d,J=8.1Hz,2H,Ar-H),８．１１(s,2H,Ar-H)。
【００２９】
Ｄ．３．３’−ビス（ブロモメチル）−２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレンの合成〔化合物（５’）〕
アルゴン雰囲気下、３．３’−ビス（ヒドロキシメチル）−２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレン（300mg,0.80mmol)を乾燥ＴＨＦ（6mL）に溶かし、０℃で撹拌した。そこに三臭化リン(0.19mL,2.00mmol)を５分間かけて滴下した。室温に戻しそのまま３時間撹拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の終了を確認し、溶媒を留去した。クロロホルム（100mL)−水（100mL）で抽出をおこない、有機相を水（100mL)で３回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去した。カラムクロマトグラフィー（ワコーゲルC-300,展開溶媒1.5%(v/v)酢酸エチル−クロロホルム）にかけて、黄色オイル状の目的物３５５ｍｇを得た。(収率89%)分析結果：1Ｈ ＮＭＲ(300MHz,CDCl3)δ(ppm)３．３５(s,6H,OCH3),４．７３（d,J=9.6 Hz,2H,CH2）,４．９４（d,J=9,5Hz,2H,CH2）,７．２０（d,J=8.5Hz,2H,Ar-H),７．２８（dt,J=1.1,8.5Hz,2H,Ar-H),７．４２(dt,J=1.1,1.5Hz,2H,Ar-H),７．８８(d,J=8.1Hz,2H,Ar-H),８．０７(s,2H,Ar-H)。
【００３０】
Ｅ．３．３’−ビス（アミノメチル）−２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレンの合成〔化合物（６’）〕
アルゴン雰囲気下、３．３’−ビス（ブロモメチル）−２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレン（351mg,0.70mmol）を 乾燥ＤＭＦ(9mL)に溶かし、そこにカリウムフタルイミド（455mg,2.46mmol）を加える。９０℃で５時間加熱撹拌した後、溶媒を留去してクロロホルム（150mL）−水（150mL）で抽出をおこない有機相を水（100mL）で３回洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去した後、クロロホルム−ヘキサンで再沈をおこない白色のＮ−置換フタルイミド誘導体３９７ｍｇを得た。(収率95%)。得られたＮ−置換フタルイミド誘導体（700mg,1.11mmol）をＴＨＦ（10mL)／エタノール（20mL）に溶かし、そこにヒドラジン−水和物（0.6mL,12.4mmol）を加え加水分解をおこなった。反応終了後溶媒を留去し、クロロホルム（200mL）−水（150mL）で抽出をおこない、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去して目的物３５０ｍｇを得た。(収率80%)。
【００３１】
分析結果：1Ｈ ＮＭＲ（200MHz,CDCl3)δ（ppm）１．７６（s,4H,NH2）,３．３１（s,6H,OCH3）,４．０７５（d,J=14.8Hz,2H,CH2),4.18(d,J=14.8Hz,2H,CH2),7.11-7.22(m,4H,Ar-H),7.39(dt,J=1.4,6.8Hz,2H),7.88(d,J=8.0Hz,2H,Ar-H),7.94(s,2H,Ar-H).
【００３２】
Ｆ．３，３’−ビス（Ｎ−メチルチオウレイドメチル)−２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレンの合成〔化合物（７’）〕
３，３’−ビス（アミノメチル）−２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレン（201mg,0.54mmol)をクロロホルム(4mL)に溶かし、そこにＣＨ3ＮＣＳ（236mg,3.23mmol）のクロロホルム溶液（2mL）を加えた。一昼夜室温で撹拌し、反応終了後、クロロホルム（100mL）−水（80mL）で抽出をおこなった。有機相を水（100mL）で３回洗浄し、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を留去した後、カラムクロマトグラフィー（ワコーゲルC-300,展開溶媒:３％メタノール−クロロホルム)にかける。クロロホルム−ヘキサンで再沈をおこない目的物１６５ｍｇを得た。(収率59%)。
【００３３】
分析結果：1Ｈ ＮＭＲ（300MHz,CDCl3)δ（ppm)３．００(d,J=4.8Hz,6H,NH-CH3),３．２７(s,6H,OCH3）,４．７６−５．１２（m,4H,ArCH2),６．３０−６．３４（m,2H,NH),６．５７（brs,2H,NH）,７．１２（d,J=8.5Hz,2H,Ar-H),７．２３−７．２８（m,2H,Ar-H）,７，４１（dt,J=1.1,7.0Hz,2H,Ar-H）,７．８８（d,J=8.1Hz,2H,Ar-H),８．００（s,2H,Ar-H);ＦＡＢ ＭＳ,m/e ５１８〔M+〕。
【００３４】
Ｇ．ビナフタレン−イソチオウロニウム誘導体(ＩＩ)アルゴン気流下、３，３’−ビス（Ｎ−メチルチオウレイドメチル)−２，２’−ジメトキシ−１，１’−ビナフタレン（150mg,0.29mmol）を乾燥エタノール（10mL）に溶かし、そこにベンジルブロミド(109mg,0.64mmol）の乾燥エタノール溶液（3mL）を加えた。３０−４０℃で４−５時間加熱撹拌し、溶媒を留去した後、逆相中圧カラムクロマトグラフィー（MERCK Silicagel 60 Silanaized (逆相シリカ),f=2cm,h=15cm,展開溶媒:50%(v/v)イソプロパノール-水)にかけ、目的のブロモ塩（130mg）を得た(収率52%）。このブロモ塩（73.5mg,0.085mmol）を乾燥エタノール（3mL）に溶かし、そこにＡｇＰＦ6（43.2mg,0.17mmol）の乾燥エタノール溶液（1.5mL）を加えてカウンター交換をおこなった。逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー(MERCK Silicalgel 60 Silanized,展開溶媒:エタノール）でＡｇＢｒを除去し、溶媒を留去後目的物(80mg)を得た。(収率95%)、分析結果；ＦＡＢ−ＭＳ、m/z845〔Ｍ+−２ＰＦ6-〕。
【００３５】
実施例５
ビナフタレン−イソチオウロニウム誘導体(ＩＩ)のα、ω−ジカルボキシレート類の認識特性を、アジピン酸塩（△）、グルタル酸塩（○）、ピメリン酸塩（▲）及びこはく酸塩（●）（いずれもｎ−Ｂｕ4Ｎ塩）に対する認識性を観察することによって行った。その結果を図４に示す。該特性曲線からα、ω−ジカルボキシレート類の蛍光プローブとして有用であることが分かる。
【００３６】
なお、一般式（ＩＩ）における、ＡとＡ’がポリエーテル基またはＡとＡ’とで環状ポリエーテル鎖を形成する基とで環状ポリエーテル鎖を形成（クラウンエーテル構造を形成）する基である化合物は、反応式（ＩＩ）における出発原料としてＡとＡ’がポリエーテル基またはＡとＡ’とで環状ポリエーテル鎖を形成する基をであるものを用いて合成できる。
【００３７】
【発明の効果】
以上述べたように、本発明の前記一般式（Ｉ、ＩＩ）で表されるナフタレン誘導型イソチオウロニウム化合物は、アニオン種、特に少なくともオキソアニオン種の認識蛍光センサーとして、また、一般式ＩＩにおけるＡ，Ａ’の基により導かれる構造によりアミノ酸認識蛍光センサーとして有用な化合物を提供するものであり、生体に於ける種々の成分検出、又は反応の解析に寄与するという優れた効果がもたらされる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 化合物Ｉのアセトニトリル中での蛍光特性およびアセテートイオンを添加した場合の蛍光特性の変化
【図２】 アセテートイオン結合部位近傍に位置する（●）Ｎａｐｈｔｙｌ−ＣＨ2、（○）ｂｅｎｚｙｌ−ＣＨ2−Ｓ、（△）ＮＨＣＨ3〔それぞれの（ＣＨ2）、（ＣＨ2）、（ＣＨ3）〕のプロトンのそれぞれのアセテートイオン〔（ｎ−ブチル）4Ｎとの塩〕の添加に伴う高磁場シフトを示す
【図３】 アニオン種、ＡｃＯ−（●）、（ｎ−ＢｕＯ）２Ｐ（Ｏ）Ｏ−（○）、Ｃｌ−（△）に対する化合物Ｉの応答挙動
【図４】 化合物(ＩＩ)のα、ω−ジカルボキシレート類の認識特性〔アジピン酸塩（△）、グルタル酸塩（○）、ピメリン酸塩（▲）及びこはく酸塩（●）（いずれもｎ−Ｂｕ4Ｎ塩）に対する認識性〕
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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