(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
筋萎縮性側索硬化症の治療薬を製造するためのイチョウ抽出物の使用。
【請求項２】
イチョウ抽出物が、フラボングリコシド類20〜30％、ギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ 2.5〜4.5％、ビロバライド２〜４％、プロアントシアニジン類10％未満並びにアルキルフェノール型の化合物10ppm未満を含有する抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項３】
イチョウ抽出物が、フラボングリコシド類20〜30％、ギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ 2.5〜4.5％、ビロバライド２〜４％、プロアントシアニジン類10％未満並びにアルキルフェノール型の化合物５ppm未満を含有する抽出物であることを特徴とする請求項２に記載の使用。
【請求項４】
イチョウ抽出物が、フラボングリコシド類24％、ギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ 3.1％、ビロバライド2.9％、プロアントシアニジン類6.5％並びにアルキルフェノール型の化合物１ppm未満を含有する抽出物であることを特徴とする請求項２に記載の使用。
【請求項５】
筋萎縮性側索硬化症の治療において同時に、別々に又は長期間にわたって治療に使用するための治療剤であって、イチョウ抽出物の少なくとも１種を、リルゾール、ガバペンチン、1-(2-ナフタ-2-イルエチル)-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン又はその製薬学的に許容し得る塩からなる群から選択される化合物の少なくとも１種と組み合わせて含有してなる治療剤。
【請求項６】
イチョウ抽出物の少なくとも１種をリルゾールと組み合わせて含有することを特徴とする請求項５に記載の治療剤。
【請求項７】
イチョウ抽出物の少なくとも１種を1-(2-ナフタ-2-イルエチル)-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジンと組み合わせて含有することを特徴とする請求項５に記載の治療剤。
【請求項８】
イチョウ抽出物の少なくとも１種をリルゾール及び1-(2-ナフタ-2-イルエチル)-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジンと組み合わせて含有することを特徴とする請求項５〜７のいずれか１項に記載の治療剤。
【請求項９】
追加成分としてビタミンＥを含有する請求項５〜８に記載の治療剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、筋萎縮性側索硬化症（ALSと略記する）の治療薬を製造するためのイチョウ(Ginkgo biloba)の抽出物の使用に関する。
【０００２】
イチョウの抽出物が心臓血管（特に、血小板の付着の軽減）の分野において、中枢神経（特に、神経保護活性）の分野において又は感覚神経系（特に、網膜保護）において活性をもつことが既に知られている。例えば、DeFeudisらの著作、Ginkgo Biloba Extract(EGb 761), Pharmaceutical Activities and Clinical Applications (Elsvier, Paris, 1991) 参照。これらの調製は、いくつかの特許の主題であり、これらの特許の中から欧州特許出願公開第431,535号公報及び同第431,536号公報並びに米国特許第5,389,370号公報を挙げることができる。
【０００３】
ALSの治療には、幾つかの化合物を使用することができる。これらの化合物として、特にリルゾール、ガバペンチン、1-(2-ナフタ-2-イルエチル)-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン又はビタミンＥを挙げることができる〔Gurney M.E.らの論文、Ann. Neurol., 39 (1996), 147-157；PCT国際公開第WO97/15304号明細書参照〕。
【０００４】
本出願人は今般、イチョウのある種の抽出物が、さらに、有用な新規な薬理学的性質、すなわちALSの症状を遅らせ、和らげる薬理学的性質をもつことを見出した。特に、本出願人は、ALSに罹っている遺伝子変性(genetically modified)マウスに対するこれらの抽出物の有益な効果を確認することができた。
【０００５】
従って、本発明は、ALSの治療薬を製造するためのイチョウ抽出物の使用を目的とする。
【０００６】
イチョウ抽出物とは、イチョウ(Ginkgo biloba L.)の樹木の抽出によって得ることができる個々の化合物、特にフラボノイド化合物又はテルペン、例えばギンコライド又はビロバライド、あるいはこれらの混合物のうちの少なくとも一つを意味すると解釈される。使用するイチョウ抽出物はギンコライドを有効量含有するものであることが好ましい。本発明の使用については、例えばEGb 761又は
CP 401型の抽出物を選択することができる。
【０００７】
ギンコライドとは、イチョウの樹木から得られる天然のギンコライド及び合成ギンコライド並びにこれらの誘導体(例えば、アセチル化又はアルコキシル化反応によって得られるもの)及び製薬学的に活性な塩の全てを意味すると解釈される。使用するギンコライドは、例えばギンコライドＡ、ギンコライドＢ、ギンコライドＣ、ギンコライドＪ又はギンコライドＭであり得る〔これらの構造を下記の式で示す；これらの化合物は、イチョウの葉の抽出物から単離することができる − GINKOLIDES, Chemistry, Biology, Pharmacology and Clinical 
Perspectives, P. Braquet編、J.R. Prous Science Publishers発行、特に第１巻(1988年)及び第２巻(1989)参照〕。また、ギンコライドのグリコシル化誘導体あるいはギンコライドのアルコキシ化又はアセチル化誘導体も使用することができる〔Weber M.とVsella A.の論文、Helv. Chim. Acta, 80 (1997), 2352-2367参照〕。ギンコライドのアルコキシ化誘導体とは、少なくとも１個の直鎖又は分岐鎖アルコキシ基を水酸基の代わりに有するギンコライド誘導体を意味すると解釈される(これらの化合物はフランス国特許出願第FR 88.14392号明細書に記載されている)。同様に、ギンコライドのアセチル化誘導体とは、少なくとも１個のアセチル基を水酸基の代わりに有するギンコライド誘導体を意味すると解釈される。
【０００８】
0004510289.tif 000002
0004510289.tif 000003
【０００９】
EGb 761型の抽出物とは、次の文献：K. Drieu, La presse medicale, 31, 25 Septembre 1986, supplement consacre a l’extrait de Ginkgo Biloba (EGb 761)〕,1455-1457；又は欧州特許出願公開第431,535号公報及び同第431,536号公報に記載されている標準抽出物EGb 761の組成と実質的に同じ組成をもつ抽出物を意味すると解釈される。従って、EGb 761型の抽出物とは、フラボングリコシド類20〜30％、ギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ 2.5〜4.5％、ビロバライド２〜４％、プロアントシアニジン類10％未満並びにアルキルフェノール型の化合物10ppm未満、好ましくは５ppm未満を含有するイチョウ抽出物、特にフラボングリコシド類約24％、ギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ 3.1％、ビロバライド2.9％、プロアントシアニジン類6.5％並びにアルキルフェノール型の化合物１ppm未満を含有する抽出物を意味すると解釈される。CP 401型の抽出物とは、米国特許第
5,389,370号公報に記載されているような抽出物、特にフラボングリコシド類
40〜60％、ギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ 5.5〜８％並びにビロバライド５〜７％を含有する抽出物、特にフラボングリコシド類50％、ギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ 約７％並びにビロバライド６％を含有する抽出物を意味すると解釈される。
【００１０】
また、本発明は、ALSの治療薬を製造するための一般式(Ｉ)
0004510289.tif 000004
〔式中、Ｗ、Ｘ、Ｙ及びＺはそれぞれ独立してＨ原子、OH基、直鎖もしくは分岐鎖アルコキシ基又は基-O-Gs（但し、基-O-GsはGs-OHの残基であり、Gs-OHは単糖又は二糖あるいはこれらの誘導体又は類縁体のうちの一つを表す）を表す（但し、Ｗ、Ｘ、Ｙ及びＺのうちの少なくとも一つは基-O-Gsを表すものとする）〕で示される化合物の使用に関する。
【００１１】
好ましくは、本発明は、ALSの治療薬を製造するための一般式(Ｉ)
0004510289.tif 000005
〔式中、ＸはOH基又は基-O-Gs（但し、基-O-GsはGs-OHの残基であり、Gs-OHは単糖、二糖あるいはこれらの誘導体又は類縁体の一つを表す）を表し；且つ
ＷがOH基又は基-O-Gsを表し、ＹがＨ原子を表し且つＺがＨ原子を表すか；ＷがOH基又は基-O-Gsを表し、ＹがOH基又は基-O-Gsを表し且つＺがＨ原子を表すか；ＷがOH基又は基-O-Gsを表し、ＹがOH基又は基-O-Gsを表し且つＺがOH基又は基
-O-Gsを表すか；ＷがOH基又は基-O-Gsを表し、ＹがＨ原子を表し且つＺがOH基又は基-O-Gsを表すか；ＷがＨ原子を表し、ＹがOH基又は基-O-Gsを表し且つＺがOH基又は基-O-Gsを表すか；あるいはＷがOH基又は基-O-Gsを表し、Ｙが直鎖又は分岐鎖アルコキシ基を表し且つＺがＨ原子を表す（但し、Ｗ、Ｘ、Ｙ及びＺのうちの少なくとも一つは基-O-Gsを表すものとする）〕で示される化合物の使用に関する。
【００１２】
特に、本発明は、ALSの治療薬を製造するための一般式(Ｉ)
0004510289.tif 000006
〔式中、ＸはOH基又は基-O-Gs（但し、基-O-GsはGs-OHの残基であり、Gs-OHは単糖、二糖あるいはこれらの誘導体又は類縁体の一つを表す）を表し；且つＷがOH基又は基-O-Gsを表し、ＹがＨ原子を表し且つＺがＨ原子を表すか；ＷがOH基又は基-O-Gsを表し、ＹがOH基又は基-O-Gsを表し且つＺがＨ原子を表すか；あるいはＷがOH基又は基-O-Gsを表し、Ｙが直鎖又は分岐鎖アルコキシ基を表し且つＺがＨ原子を表す（但し、Ｗ、Ｘ、Ｙ及びＺのうちの少なくとも一つは基-O-Gsを表すものとする）〕で示される化合物の使用に関する。
【００１３】
直鎖又は分岐鎖アルコキシ基とは、明細書の記載においては、炭素原子を１〜６個有する直鎖状又は分岐状の炭素鎖をもつアルコキシ基を意味すると解釈される。単糖又は二糖の誘導体又は類縁体とは、N-アセチルグルコサミン、N-アセチルアロサミン、ガラクトサミン、マンノサアミン、N-トシルヒドラゾンなどのような化合物を意味すると解釈される。
【００１４】
前記の基-O-Gsは、Gs-OHがアベクオース、ラムノース、アラビノース、リボース、キシロース、2-デオキシリボース、グルコース、ガラクトース、マンノース、2-デオキシグルコース、フルクトース、フコース、N-アセチルグルコサミン、N-アセチルアロサミン、ガラクトサミン、マンノサミン、サッカロース、ラクトース、マルトース、セロビオース及びトレハロースからなる化合物群に属するものであるように選択されることが好ましい。基-O-Gsは、Gs-OHがグルコース及びラクトースからなる化合物群に属するものであるように選択されることがさらに好ましい。
【００１５】
ギンコライド又はアルコキシル化ギンコライドのグリコシル化誘導体（すなわち、これはギンコライド又はそのアルコキシル化誘導体のOH基のうちの少なくとも１個について行われたグリコシル化反応により得られるものである）を製造するための種々の方法は、下記の刊行物：Weber M.とVsella A.の論文、 Helv. 
Chim. Acta, 80 (1997), 2352-2367に記載されている。
【００１６】
本発明の態様によれば、イチョウ抽出物はまた、下記の化合物：すなわちリルゾール、ガバペンチン及び1-(2-ナフタ-2-イルエチル)-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン（SR-57746Aというコード名でも知られている）又はその製薬学的に許容し得る塩の中の少なくとも１つの化合物と組み合わせることができる。従って、本発明は、ALSの治療において同時に、別々に又は長期間にわたって治療に使用するための治療剤であって、イチョウ抽出物の少なくとも１種を、リルゾール、ガバペンチン、1-(2-ナフタ-2-イルエチ
ル)-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン及びその製薬学的に許容し得る塩からなる群から選択される化合物の少なくとも１種と組み合わせて含有してなる治療剤に関する。イチョウの少なくとも１種の抽出物は、リルゾールと組み合わせるか又は1-(2-ナフタ-2-イルエチル)-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジンと組み合わせることが好ましい。イチョウの少なくとも１種の抽出物は、リルゾール及び1-(2-ナフタ-2-イルエチル)-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジンと組み合わせることが特に好ましい。必要ならば、前記の治療剤は全て、ビタミンＥを含有することもできる。
【００１７】
同時に治療に使用するとは、本願明細書では、複数の有効成分を同一の経路で同時に投与することを意味すると解釈される。別々に療に使用するとは、特に複数の有効成分をほぼ同時に異なる経路で投与することを意味すると解釈される。長期にわたって治療に使用するとは、複数の有効成分を種々の時間で投与することを意味し、特に複数の有効成分のうちの一つを投与した後に他の一つ又は複数の成分の投与を開始する投与方法を意味すると解釈される。従って、複数の有効成分のうちの一つを数ヶ月投与し、その後に他の有効成分の１種又は複数を投与することができる。この場合には、同時の治療ではない。
【００１８】
本発明の化合物を含有してなる医薬組成物は、固体の形態、例えば粉剤、顆粒、錠剤、カプセル剤、リポソーム又は座薬の形態であり得る。適当な固体支持体は、例えばリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、デキストリン、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリジン及びワックスであり得る。
【００１９】
また、本発明の化合物を含有してなる医薬組成物は、液状の形態で、例えば溶液、乳化液、縣濁液又はシロップの形態で提供することもできる。適当な液状支持体は、例えば水、有機溶媒例えばグリセロール又はグリコール類、及びこれらを水に種々の割合で混合した混合物であり得る。
【００２０】
本発明の医薬の投与は、局所経路、経口、腹腔経路によって行うことができるし、注射（筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射など）などによって行うことができる。
【００２１】
本発明に従って使用することができる有効成分の１日当たり投与量は、有効成分の種類及び治療すべき患者のALSの程度に応じて0.1mg〜10gである。イチョウの抽出物については、おおよそ１日当たり20〜200mgの投薬量を選択することが好ましい。リルゾールについては、好ましい投薬量はおおよそ１日当たり50〜
150mgであり、またガバペンチンについてはおおよそ１日当たり500〜3000mgである。1-(2-ナフタ-2-イルエチル)-4-(3-トリフルオロメチルフェニル)-1,2,3,6-テトラヒドロピリジンについては、好ましい投薬量はおおよそ１日当たり１〜５mg、好ましくは１〜３mgである。最後に、ビタミンＥはおおよそ１日当たり100〜500mgの投薬量で投与することが好ましい。
【００２２】
本明細書で使用する技術用語及び科学用語は全て、特に定義しない限りは、本発明が属する分野の通常の専門家によって普通に理解されている意味と同じ意味を有する。同様に、本明細書に挙げた刊行物、特許出願明細書、特許公報及びその他の参考文献は、全て参考文献として参照される。
【００２３】
ALSの治療におけるイチョウ抽出物の使用の利点を証明するために、下記の試験を行った。
【００２４】
薬理学の部
試験の説明
下記の試験では、マウスは遺伝子調節された(genetiquement modifiees)雄性マウスを１群12匹の２群に分けた；すなわち、
−  標準の食餌のみを与えた対照群である第１の群；と
−  前記の食餌と一緒にEGb 761を50mg/kg/日の投薬量で与えた（これはEGb 761を0.022％含有する食餌に相当する）第２の群；
とに分けた。
【００２５】
1）延命及び運動性能：
この試験では、動物の運動挙動を観察した。毎日、次の試験を行った：すなわち、前記のマウスを横臥の状態に置き、10秒間で起き上がることができなかったマウスを犠牲にした。次いで、その生存日数を、対照群の普通の食餌を与えた遺伝子調節された雄性マウスの生存日数と比較した。下記の結果が得られた：
−  対照群：生存日数  平均126日
−  EGb 761を含有する食餌を与えた群：生存日数  137.9日
【００２６】
2）“ロータロッド”試験：
この試験では、使用するマウスを次の３群に分けた；すなわち、
−  標準の食餌と一緒にEGb 761を50mg/kg/日の投薬量で与えた（これはEGb 761を0.022％含有する食餌に相当する）遺伝子調節された雄性マウスからなる第１の群；
−  標準の食餌のみを与えた遺伝子調節された雄性マウスからなる第２の群；
−  標準の食餌のみを与えた遺伝子調節されていない雄性マウスからなる第３の群；
に分けた。
【００２７】
マウスを、しがみつくことができるロッドを備えた踏み車に入れた。踏み車を１回転／分の速度で回転させ、次いでマウスが落下する迄、10秒毎に踏み車の速度を１回転／分づつ増大させた。試験を３回行った後に、マウスが踏み車にしがみついていた時間を記録した。マウスは100日目から試験を行った。
再現可能な結果を得るために、マウスに２日間この方法を練習させて学習させた後に、試験を行い結果を記録した。マウスが踏み車の１回転／分の回転速度でももはや捉まっていることができなくなった時に、試験を停止した。
【００２８】
下記の結果が得られた。結果は秒で表した。
0004510289.tif 000007
【００２９】
使用したマウス
前記の２種類の試験には、遺伝子調節されたマウスG93A、特に下記の文献：
Gurney M.E. et al., Ann. Neurol., 39 (1996), 147-157；及びGurney M.E. et al., Science., 264 (1994), 1772-1775に記載のマウスを使用した。
使用したマウスは第１の試験の開始時には50〜60日齢であり、前記の第２の試験の開始時には100日齢であった。
結論：
前記の試験により、ALSの治療においてイチョウの抽出物が極めて良好な活性を示すことが証明された。