(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）で示される2,6-ジアミノヘプタンアミドのラセミ混合物に、 (2S)-アミノ酸アミドを立体選択的に加水分解する活性を有するミコプラナ属由来の微生物の生菌体又は該生菌体の処理物を作用させて、一般式（２）で示される (2S)-2,6-ジアミノヘプタン酸を生成せしめ、 (2R)-2,6-ジアミノヘプタンアミドを未反応のまま残すことを特徴とする光学活性 (2S)-2,6-ジアミノヘプタン酸の製造法。
【化１】
0004544385.tif 000002
【請求項２】
未反応の (2R)-2,6-ジアミノヘプタンアミドを強塩基性物質の存在下で加熱することによりラセミ化して、再度原料として使用する請求項１記載の方法。
【請求項３】
未反応の (2R)-2,6-ジアミノヘプタンアミドを加水分解して(2R)-2,6-ジアミノヘプタン酸を製造する請求項１記載の方法。
【請求項４】
一般式（１）及び一般式（２）のＸがメチル基である請求項１、２又は３記載の方法。
【請求項５】
一般式（１）で示される2,6-ジアミノヘプタンアミドのラセミ混合物に、 (2R)-アミノ酸アミドを立体選択的に加水分解する活性を有するロドコッカス属由来の微生物の生菌体又は該生菌体の処理物を作用させて、一般式（３）で示される (2R)-2,6-ジアミノヘプタン酸を生成せしめ、 (2S)-2,6-ジアミノヘプタンアミドを未反応のまま残すことを特徴とする光学活性 (2R)-2,6-ジアミノヘプタン酸の製造法。
【化２】
0004544385.tif 000003
【請求項６】
未反応の (2S)-2,6-ジアミノヘプタンアミドを強塩基性物質の存在下で加熱することによりラセミ化して、再度原料として使用する請求項５記載の方法。
【請求項７】
未反応の (2S)-2,6-ジアミノヘプタンアミドを加水分解して(2S)-2,6-ジアミノヘプタン酸を製造する請求項５記載の方法。
【請求項８】
一般式（１）及び一般式（３）のＸがメチル基である請求項５、６又は７記載の方法。
【請求項９】
一般式（１）で示される2,6-ジアミノヘプタンアミド。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、一般式（２）および（３）で示される光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸の製造法に関する。さらに詳しくは、2,6-ジアミノヘプタンアミドのラセミ混合物を生化学的に不斉加水分解して対応する光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を製造する方法に関する。光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸は、各種工業薬品、農薬、および医薬品の製造中間体として重要な物質である。
【０００２】
【従来の技術】
光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸は、分子内にカルボキシル基と２個のアミノ基を有し、それ自体光学活性な化合物であることから、光学活性な各種工業薬品、農薬、および医薬品の製造中間体として、重要な物質である。一般式（２）および（３）で示される2,6-ジアミノヘプタン酸で、式中のＸが水素の化合物のラセミ混合物の製造は、J.Am.Chem.Soc.,73, p4478,(1951) に記載されている。しかしながら、そこに記載されている製造法は、2-メチルシクロヘキサノンオキシムを出発原料とし、保護および脱保護工程を含む４工程により進行するため、非常に労力を要するものであり、また高価な試薬を使用するため、工業的に有利な方法とはいえない。また、ここで得られる2,6-ジアミノヘプタン酸はラセミ混合物であり、ここに記載された方法では光学活性体を得ることはできない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、従来技術における上記のような課題を解決し、各種工業薬品、農薬、および医薬品の製造中間体として非常に重要な光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を、少ない工程数で安価に製造するための製造法を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、少ない工程数で安価に光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を製造するための製造法に関して鋭意検討を行った結果、新規化合物である2,6-ジアミノヘプタンアミドを生化学的に加水分解して光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を製造する本発明に到達した。
【０００５】
すなわち本発明は、一般式（１）で示される2,6-ジアミノヘプタンアミドのラセミ混合物に、アミノ酸アミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物の生菌体または該生菌体の処理物を作用させて、一般式（２）で示される (2S)-2,6-ジアミノヘプタン酸または一般式（３）で示される(2R)-2,6- ジアミノヘプタン酸を生成せしめることを特徴とする光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸の製造法である。さらに、本発明によれば一般式（１）で示される2,6-ジアミノヘプタンアミドに、アミノ酸アミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物の生菌体または該菌体処理物を作用させて、光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を生成せしめることを特徴とする光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸の製造法において、未反応の光学活性アミノ酸アミドを回収し、回収した光学活性アミノ酸アミドをラセミ化して、再度原料として使用することも可能である。また、本発明によれば回収した光学活性アミノ酸アミドをさらに加水分解して、光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を製造することもできる。
【０００６】
【発明の実施の形態】
以下に本発明の詳細について説明する。
前記の一般式（１）、（２）および（３）で示される2,6-ジアミノヘプタンアミドおよび2,6-ジアミノヘプタン酸のＸは水素または炭素数１〜４の低級アルキル基であればよく、特に制限はないが、例えばメチル基、エチル基などが好適であり、メチル基である場合が特に好適である。
【０００７】
なお本発明において、一般式（１）で示される2,6-ジアミノヘプタンアミドの光学活性体は (2S)-および (2R)-2,6-ジアミノヘプタンアミド、一般式（２）および（３）で示される光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸はそれぞれ (2S)-および (2R)-2,6-ジアミノヘプタン酸と記載されるが、これら化合物を示す一般式中Ｘがメチル基である場合には６位の炭素原子が不斉炭素でなくなるため、以後これらはそれぞれ (S)- および (R)-2,6- ジアミノヘプタンアミド、 (S)- および (R)-2,6- ジアミノヘプタン酸とも記載する。
【０００８】
本発明の一般式（１）で示される2,6-ジアミノヘプタンアミドの代表例として、2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドなどがある。本発明の原料である一般式（１）で示される2,6-ジアミノヘプタンアミドは、その製法および品質等に特に制限はなく、例えばストレッカー法によって容易に得られる該当するα−アミノニトリル、即ち2,6-ジアミノヘプタンニトリルを部分加水分解する方法などによって得ることができる。α−アミノニトリルを部分加水分解する方法としては塩基性物質およびケトン類の存在下で水性媒体中でα−アミノニトリルを部分加水分解する方法、例えば特公昭５８−１７７４１号公報記載の方法が好ましい。この方法は、例えば、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムなどの無機塩基、ならびに、例えば水酸化テトラメチルアンモニウムのような有機第４級アンモニウム化合物などの有機塩基のような塩基性物質を用い、その使用量を、α−アミノニトリル１モルに対して０．０１モル以下の割合とし、反応液のｐＨが１４を越えるようにし、この反応系にアセトン、メチルエチルケトン、ジエチルケトン、メチルイソプロピルケトンおよびシクロヘキサノンなどのケトン類を添加し、かつ、反応温度を４０℃以下に保ち、該反応液のｐＨを１４を越えたｐＨに維持しながら加水分解反応を行うことを特徴とする方法である。このα−アミノニトリル加水分解反応生成液を濃縮してケトン類を除去して得られた粗2,6-ジアミノヘプタンアミド含有液を、そのまま、または必要に応じて蒸留もしくは再結晶等の手段によって精製を行った後、原料として使用することができる。
【０００９】
このほか、2,6-ジアミノヘプタンアミドは、後述のように、未反応の光学活性アミノ酸アミドを回収し、回収した光学活性アミノ酸アミドを強塩基性物質の存在下で加熱し、ラセミ化する方法によっても得ることができる。
【００１０】
本発明の2,6-ジアミノヘプタンアミドの生化学的加水分解に使用される微生物は、目的とする光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸に該当する2,6-ジアミノヘプタンアミドを立体選択的に加水分解する活性を有する微生物であれば良く、このような微生物として、例えば(2S)- アミノ酸アミドを加水分解する微生物として、シュードモナス属、クリプトコッカス属、ロツデロマイセス属、ロドスポリジウム属、ミコプラナ属およびパチソレン属等に属する微生物、具体的にはシュードモナス・ロゼア (Pseudomonas rosea)  NCIB 10605、クリプトコッカス・ラウレンテイ (Cryptococcus laurentii) ATCC 18803、クリプトコッカス・ネオホルマンス (Cryptococcus neoformans) ATCC 32045 、ロツデロマイセス・エロギスポラス (Lodderomyces elogisporus) IFO 1676、ロドスポリジウム・トルロイデス (Rhodosporidium toruloides) IFO 0871 、ロドスポリジウム・ジオボバダム (Rhodosporidium diobovatum) IFO 1828 、ミコプラナ・ディモルファ (Mycoplana dimorpha) IFO 13291(ATCC 4279)、ミコプラナ・ディモルファ (Mycoplana dimorpha) NCIB 9439 、ミコプラナ・ディモルファ (Mycoplana dimorpha) IFO 13213 、ミコプラナ・ブラタ (Mycoplana bullata) IFO 13290(ATCC 4278) 、ミコプラナ・ブラタ (Mycoplana bullata) NCIB 9440、ミコプラナ・ブラタ (Mycoplana bullata) IFO 13267、ミコプラナ sp (Mycoplana sp)IFO 13240 およびパチソレン・タンノフィラス (Pachysolen tannophilus) IFO 1007が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１１】
また(2R)- アミノ酸アミドを加水分解する微生物として、ロドコッカス属、シュードモナス属およびセラチア属等に属する微生物、具体的にはロドコッカス・エリスロポリス (Rhodococcus erythropolis) NR-23 (FERM P-8937) 、ロドコッカス・エリスロポリス (Rhodococcus erythropolis) NR-28 (FERM P-8938) 、ロドコッカス・エリスロポリス (Rhodococcus erythropolis) JCM 3201、シュードモナス・フローレツセンス (Pseudomonas fluorescens) IFO 12055、セラチア・マルセツセンス (Serratia marcescens) IAM 12143が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１２】
これらの微生物の培養は、通常資化しうる炭素源、窒素源、各微生物に必須の無機塩、栄養等を含有させた培地を用いて行われるが、高い酵素活性を得るために、培地に予めα−アミノ酸アミドを添加することも効果的である。この際に添加されるα−アミノ酸アミドは、目的とする2,6-ジアミノヘプタン酸に対応する2,6-ジアミノヘプタンアミドを用いることが好ましいが、一般的なα−アミノ酸アミド、例えばアラニンアミド、バリンアミド等でもよく、特に制限はない。培養時のpHは、４〜１０の範囲であり、温度は２０〜５０℃である。培養は１日〜１週間程度好気的に行われる。このようにして培養した微生物は、生菌体または該生菌体処理物、例えば培養液、分離菌体、菌体破砕物、さらには精製した酵素として反応に使用される。また、常法に従って、菌体または酵素を固定化して使用することもできる。
【００１３】
2,6-ジアミノヘプタンアミドの生化学的加水分解反応の条件は、2,6-ジアミノヘプタンアミド濃度１〜４０wt％、2,6-ジアミノヘプタンアミドに対する微生物の使用量は、乾燥菌体として重量比０．００５〜３、反応温度２０〜７０℃、pH５〜１３の範囲である。
【００１４】
2,6-ジアミノヘプタンアミドの生化学的加水分解反応で生成した光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸は、反応終了液から、例えば遠心分離あるいは濾過膜などの通常の固液分離手段により微生物菌体を除き、減圧濃縮後、有機溶媒を加えて光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を析出させ、析出した光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を濾取するといった方法、あるいは微生物菌体を除いた後、減圧下で水を除去し、残渣固体に有機溶媒を加えて未反応の光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドを溶解し、不溶の光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を濾取するといった方法により、容易に分離することができる。このとき光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を析出させるため、あるいは未反応の光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドを溶解させるために加える有機溶媒は、光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸の溶解度が低く、未反応の光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドの溶解度が高い溶媒であればよく、特に制限はないが、エタノール、2-プロパノール、2-メチル-1- プロパノール、1-ブタノールおよび2-ブタノール等のアルコール類が好適に使用される。また、微生物菌体を分離した反応終了液から、未反応の光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドを溶媒抽出などの方法により除いた後、残液から晶出などの方法によって光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を分離することもできる。このとき光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドを抽出する溶媒として、例えばヘキサン、ベンゼン、トルエンおよびキシレン等の非極性溶媒が挙げられる。このほか、反応終了液から微生物菌体を除いた後、イオン交換電気透析により光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸だけを選択的に分離回収する方法も有効である。
【００１５】
未反応の光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドは、前記の2,6-ジアミノヘプタンアミドの生化学的加水分解反応終了液から光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を分離した後の液の濃縮、あるいは微生物菌体分離後の反応終了液からの溶媒抽出などの方法により、容易に回収される。回収された光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドは、例えば酸または加水分解活性を有する微生物の生菌体あるいは該生菌体処理物を作用させて加水分解することにより、対応する光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸へ変換することができる。また、回収した光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドは、強塩基性物質の存在下で加熱することにより、容易にラセミ化し、ラセミ体の2,6-ジアミノヘプタンアミドとすることができる。光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドのラセミ化反応で使用される光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドは、前記の2,6-ジアミノヘプタンアミドの生化学的加水分解反応終了液から回収された光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドをそのまま、または必要に応じて再結晶等の操作によって精製を行った後に用いることができる。
【００１６】
光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドのラセミ化反応に使用される強塩基性物質とは、有機または無機の強塩基性物質であれば良く、代表例として水酸化テトラメチルアンモニウムおよび水酸化テトラエチルアンモニウムなどの有機第四級アンモニウム化合物ならびに水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメチラート、ナトリウムエチラート、ナトリウムアミドおよびナトリウムハイドライドなどのアルカリ金属化合物、ならびに水酸化バリウムなどのアルカリ土類金属化合物が挙げられる。なお、反応系内において上記の強塩基性物質に変化しうる物質、例えばナトリウムおよびカリウムなどのアルカリ金属単体、ならびにバリウムなどのアルカリ土類金属単体などをそれぞれ添加することも可能である。これら強塩基性物質の使用量は、光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミド１モルに対して０．００１〜０．５モルの割合であり、好適には０．０１〜０．１モルの割合である。
【００１７】
光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドのラセミ化反応は、溶媒を使用しないで行うこともできるが、溶媒を使用した場合には反応温度を低くすることができ、そのため副生成物が生成する危険性を低くすることができ、より好適である。この際に使用される溶媒としては、光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドおよび強塩基性物質のそれぞれに対して不活性であれば良く、例えばヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエンおよびキシレン等の炭化水素類、2-プロパノール、2-メチル-1- プロパノール、2-ブタノール、1-ブタノールおよび1-ペンタノール等のアルコール類、エーテル類ならびにイソブチロニトリルなどがある。溶媒の使用量に特に制限はないが、実用上、光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドの重量に対して１００倍より多くする必要はなく、１〜２０倍程度が好ましい。
【００１８】
ラセミ化反応液中の水分は少ないほど好ましいが、１wt％程度以下ならば殆ど支障はない。ラセミ化反応の温度は、２０〜２００℃、好適には５０〜１５０℃である。ラセミ化反応は、通常、常圧下で行われるが、減圧下または加圧下で行うことを妨げない。
【００１９】
ラセミ化反応終了後、生成した2,6-ジアミノヘプタンアミドを分離回収する方法は、例えば減圧下で溶媒を留去した後、冷却して結晶を析出させ、濾取または遠心分離などの通常の固液分離操作により分離回収する方法、あるいはラセミ化反応終了液へ水を添加して、2,6-ジアミノヘプタンアミドを水相へ溶出し、そのまま、あるいはpH調整後生化学的加水分解工程へ循環する方法があるが、後者の方が工業的には、より合理的である。
【００２０】
このようにして光学活性2,6-ジアミノヘプタンアミドをラセミ化し、2,6-ジアミノヘプタンアミドとし、生化学的加水分解反応系へ循環することにより、2,6-ジアミノヘプタンアミドの全量を目的とする光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸に変換することができる。本発明の方法によって、具体的には、例えば(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸等の(2S)-2,6- ジアミノヘプタン酸誘導体や(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸等の(2R)-2,6- ジアミノヘプタン酸誘導体を製造することが可能である。
【００２１】
【実施例】
以下、本発明を実施例によってさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
実施例１
2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドの製造
撹拌機、温度計およびpH電極を付した300m四ツ口フラスコに、蒸留水40g およびアセトン40g を入れ、５℃に冷却し、2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンニトリル35.7g(0.23mol)を加え、さらに40% 水酸化ナトリウム水溶液2.5g（水酸化ナトリウムとして1.0g、0.025mol）を、氷冷下、撹拌しながら添加した。40%水酸化ナトリウム水溶液添加後、反応液の温度は15℃に上昇した。反応混合物を10時間撹拌した後、 18%塩酸5.0g（塩酸として0.9g、0.025mol）を加え、エバポレーターで水およびアセトンを留去した。残渣に炭酸ジメチル100ml を加えて溶解し、不溶の固体を濾過して除いた。濾液の溶媒をエバポレーターで濃縮し、5℃に冷却して、析出した2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドの白色結晶を濾取した。得られた結晶の乾燥後の重量は32.9g （0.19mol ）、2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンニトリルに対する収率は83モル% であった。
【００２２】
実施例２
（ａ）(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸の製造
次の組成の培地を調製し、この培地200ml を1L三角フラスコに入れ、滅菌後、ミコプラナ  ブラタ（Mycoplana bullata ）NCIB 9440 を接種し、30℃で48時間振盪培養を行った。
培地組成  （pH7.0 ）
グルコース          10  g
ポリペプトン        5   g
酵母エキス          5   g
KH2PO4              2   g
MgSO4 ・7H2O        0.4 g
FeSO4 ・7H2O        0.01g
MnCl2 ・4H2O        0.01g
D,L-バリンアミド    5   g
蒸留水              1   L
培養終了時、培養液の菌体濃度は5g/kg であった。この培養液100gから、遠心分離により、乾燥菌体0.5gに相当する生菌体を得た。この生菌体を100ml の蒸留水に懸濁し、1L三角フラスコに入れ、ここに2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドのラセミ混合物5.0g（29mmol）を加えて、40℃で5 時間振とうして加水分解反応を行った。反応後、反応液から遠心分離によって除菌し、エバポレーターで減圧にて水を除去した後、2-プロパノール100ml を加えて未反応の(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドを溶解し、不溶の(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸を白色固体として濾取した。得られた固体の乾燥後の重量は2.3g（13mmol）、2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する収率は46モル% 、(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する収率は91モル% であった。また、生成した(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸を光学分割用キラルカラムを用いた液体クロマトグラフィーにより分析した結果、光学純度は99%e.e. 以上であった。
【００２３】
（ｂ）(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドの回収
(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸の固体を濾取した後の濾液の溶媒を、エバポレーターで減圧下留去し、ジイソプロピルエーテル50mlを加えて不溶の固体を濾取し、未反応の(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドを白色固体として回収した。乾燥後の重量は2.2g（13mmol）、2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する回収率は44モル% 、(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する回収率は88モル% であった。また、回収した(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドを光学分割用キラルカラムを用いた液体クロマトグラフィーにより分析した結果、光学純度は99%e.e. 以上であった。
【００２４】
（ｃ）(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドのラセミ化
(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミド1.0g（5.8mmol ）を10mlの2-メチル-1- プロパノールに溶解し、ここに水酸化ナトリウム0.02g （0.5mmol ）を加えて110 ℃で30分間撹拌した。反応終了後、反応液を冷却し、ジイソプロピルエーテルを加え、析出した固体を濾取し、2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドを得た。乾燥後の固体の重量は0.91g （5.3mmol ）であり、回収率は91モル% であった。この固体を光学分割用キラルカラムを用いた液体クロマトグラフィーにより分析した結果、(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドのラセミ化率は98% であった。なお、この場合のラセミ化率は次のようにして算出した。
ラセミ化率(%)=(S)-アミド/((S)-アミド+(R)- アミド) ×2 ×100
ラセミ化率100%とは、(S)-アミドと(R)-アミドとが互いに等量であることを示す。
【００２５】
（ｄ）(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸の製造
（ａ）と同様の培地および方法で、ロドコッカス  エリスロポリス（Rhodococcus erythropolis）NR-28 (FERM P-8938) を培養し、培養液を遠心分離して、乾燥菌体0.1gに相当する生菌体を得た。50mlの三角フラスコに、(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミド1.0g（5.8mmol ）、水20mlおよび生菌体を入れ、40℃で5 時間加熱した。反応終了後の反応液の液体クロマトグラフィーでの分析結果から、収率89% 、光学純度99%e.e. 以上で(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸が得られた。
【００２６】
実施例３
実施例２のミコプラナ  ブラタ（Mycoplana bullata ）NCIB 9440 の培養液20g から遠心分離によって得た乾燥菌体0.1gに相当する生菌体を20mlの蒸留水に懸濁し、100ml 三角フラスコに入れ、ここに実施例２でラセミ化回収した2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミド0.5g(2.9mmol) および新たな2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドのラセミ混合物0.5g(2.9mmol) を加えて、40℃で5 時間振とうして加水分解反応を行った。反応後、実施例２と同様に後処理を行い、(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸を白色固体として得た。得られた固体の乾燥後の重量は0.45g(2.6mmol)、新たに加えた2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する収率は89モル% であった。また、生成した(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸を光学分割用キラルカラムを用いた液体クロマトグラフィーにより分析した結果、光学純度は99%e.e. 以上であった。
【００２７】
実施例４
（ａ）(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸の製造
実施例２と同様にロドコッカス  エリスロポリス（Rhodococcus erythropolis）NR-28 (FERM P-8938) を培養し、培養液を遠心分離して、乾燥菌体0.5gに相当する生菌体を得た。この生菌体を100ml の蒸留水に懸濁し、1L三角フラスコに入れ、ここに2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドのラセミ混合物5.0g（29mmol）を加えて、40℃で5 時間振とうして加水分解反応を行った。反応後、実施例２と同様に処理して(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸を白色固体として濾取した。得られた固体の乾燥後の重量は2.2g（13mmol）、2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する収率は44モル% 、(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する収率は87モル% であった。また、生成した(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸を光学分割用キラルカラムを用いた液体クロマトグラフィーにより分析した結果、光学純度は99%e.e. 以上であった。
【００２８】
（ｂ）(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドの回収
(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸の固体を濾取した後の濾液の溶媒を、実施例２と同様に処理して、未反応の(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドを白色固体として回収した。乾燥後の重量は2.0g（11mmol）、2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する回収率は40モル% 、(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する回収率は80モル% であった。また、回収した(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドを光学分割用キラルカラムを用いた液体クロマトグラフィーにより分析した結果、光学純度は99%e.e. 以上であった。
【００２９】
（ｃ）(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドのラセミ化
(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミド1.0g（5.8mmol ）を10mlの2-メチル-1- プロパノールに溶解し、ここに水酸化ナトリウム0.02g （0.5mmol ）を加えて110 ℃で30分間撹拌した。反応終了後、実施例２と同様に処理し、2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドを得た。乾燥後の固体の重量は0.88g （4.7mmol ）であり、回収率は88モル% であった。この固体を光学分割用キラルカラムを用いた液体クロマトグラフィーにより分析した結果、(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドのラセミ化率は95% であった。
【００３０】
（ｄ）(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸の製造
50mlの三角フラスコに、(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミド1.0g（5.8mmol ）、水20mlおよび乾燥菌体0.1g相当のミコプラナ  ブラタ（Mycoplana bullata ）の生菌体を入れ、40℃で5 時間撹拌した。反応終了後の反応液の液体クロマトグラフィーでの分析結果から、収率89% 、光学純度99％e.e.以上で(S)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸が得られた。
【００３１】
実施例５
実施例４のロドコッカス  エリスロポリス（Rhodococcus erythropolis）NR-28 (FERM P-8938) の培養液から遠心分離によって得た乾燥菌体0.1gに相当する生菌体を20mlの蒸留水に懸濁し、100ml 三角フラスコに入れ、ここに実施例４でラセミ化回収した2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミド0.5g(2.9mmol) および新たな2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドのラセミ混合物0.5g(2.9mmol) を加えて、40℃で５時間振とうして加水分解反応を行った。反応後、実施例４と同様に後処理を行い、(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸を白色固体として得た。得られた固体の乾燥後の重量は0.44g(2.5mmol)、新たに加えた2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタンアミドに対する収率は87モル% であった。また、生成した(R)-2,6-ジアミノ-6- メチルヘプタン酸を光学分割用キラルカラムを用いた液体クロマトグラフィーにより分析した結果、光学純度は99%e.e. 以上であった。
【００３２】
【発明の効果】
光学活性な各種工業薬品、農薬、および医薬品の製造中間体として非常に有用な光学活性2,6-ジアミノヘプタン酸を、少ない工程数で安価に製造することができる。