(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロアントシアニジンと、アミノ酸またはジペプチドとしてはＬ−セリン、Ｌ−スレオニンおよびグリシル−Ｌ−セリンからなる群より選ばれるアミノ酸またはジペプチドのみを含有する化粧品。
【請求項２】
プロアントシアニジンと、アミノ酸またはジペプチドとしてはＬ−セリン、Ｌ−スレオニンおよびグリシル−Ｌ−セリンからなる群より選ばれるアミノ酸またはジペプチドのみを含有する医薬品。
【請求項３】
Ｌ−セリン、Ｌ−スレオニンまたはグリシル−Ｌ−セリンの濃度が化粧品中の０．００１〜１重量％の範囲である請求項１記載の化粧品。
【請求項４】
プロアントシアニジンの濃度が化粧品中の０．０１％〜２０重量％である請求項１または３記載の化粧品。
【請求項５】
プロアントシアニジンがブドウ属、リンゴ属、オオムギ属、カキ属、ココヤシ属、カカオ属、マツ属、コケモモ属、フラガリア属、インゲン属またはナンキンマメ属に属する植物由来のものである請求項１、３または４記載の化粧品。
【請求項６】
Ｌ−セリン、Ｌ−スレオニンまたはグリシル−Ｌ−セリンの濃度が医薬品中の０．００１〜１重量％の範囲である請求項２記載の医薬品。
【請求項７】
プロアントシアニジンの濃度が医薬品中の０．０１％〜２０重量％である請求項２または６記載の医薬品。
【請求項８】
プロアントシアニジンがブドウ属、リンゴ属、オオムギ属、カキ属、ココヤシ属、カカオ属、マツ属、コケモモ属、フラガリア属、インゲン属またはナンキンマメ属に属する植物由来のものである請求項２、６または７記載の医薬品。
【請求項９】
化粧品が化粧水、美容液、乳液、クリーム、パック、育毛トニックまたはシャンプーである請求項１および３〜５のいずれかに記載の化粧品。
【請求項１０】
ａ）プロアントシアニジンと、アミノ酸またはジペプチドとしてはＬ−セリン、Ｌ−スレオニンおよびグリシル−Ｌ−セリンからなる群より選ばれるアミノ酸またはジペプチドのみを含む水相成分、およびｂ）油相成分、をそれぞれ調製し、該水相成分に該油相成分を加える、または該油相成分に該水相成分を加えることを特徴とする請求項１および３〜５記載の化粧品の製造法。
【請求項１１】
化粧品が化粧水、美容液、乳液、クリーム、パック、育毛トニックまたはシャンプーである請求項１０記載の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、プロアントシアニジンを含有する組成物、該組成物を含有する飲料、食品、化粧品および医薬ならびにプロアントシアニジンの安定化方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
プロアントシアニジンは、多くの植物に含有され、強い抗酸化作用を有することが知られている物質であるが、酸化に対し不安定であり、酸素存在下、すみやかに酸化重合等が起こり、変色することが知られている。
従来知られているプロアントシアニジンの安定化方法としては、例えば、ワインにおいては、ピロ亜硫酸カリウムを配合する方法が、また、リンゴジュースにおいては、アスコルビン酸を配合する方法が主に用いられてきた。
【０００３】
また、特開平６−３３６４２０号公報には、プロアントシアニジンの経時的着色を防ぐために、亜硫酸水素ナトリウム、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジスルホン酸、ジエチレントリアミン五酢酸またはフィチン酸を配合した化粧料が開示されている。
また、ポリフェノールの安定化方法もしくは変色防止方法またはポリフェノールの安定化もしくは変色防止を目的とした組成物として、（１）特公平８−２８１９号公報には、ポルフィリン亜鉛錯体と有機還元剤を配合するポリフェノールの変色防止方法、（２）特開平５−１１２４４１号公報には、ポリフェノール化合物にしょ糖高級脂肪酸エステルを配合した皮膚化粧料、（３）特開平５−１６３１３１号公報には、ポリフェノール化合物にアルキルグルコシドを配合した皮膚化粧料、（４）特許第２７４４５７２号公報には、多価アルコールや糖類を配合するフェノール性水酸基を三つ以上含有するポリフェノール化合物含有皮膚外用剤組成物の変色防止方法が開示されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、プロアントシアニジンの安定性に優れた組成物、該組成物を含有する飲料、食品、化粧品および医薬ならびに酸化重合等による変色等を防ぐためのプロアントシアニジンの安定化方法を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明は以下の（１）〜（１７）に関する。
（１）  プロアントシアニジンと、ヒドロキシル基を有するアミノ酸または該アミノ酸とを含むジペプチドを含有する組成物。
（２）  プロアントシアニジンと、ヒドロキシル基を有するアミノ酸とを含有する組成物。
（３）  プロアントシアニジンと、ヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドとを含有する組成物。
（４）  ヒドロキシル基を有するアミノ酸または該アミノ酸を含むジペプチドの濃度が全組成物中の０．００１〜１重量％の範囲である上記（１）記載の組成物。
（５）  プロアントシアニジンの濃度が全組成物中の０．０１〜２０重量％である上記（１）〜（４）のいずれかに記載の組成物。
（６）  ヒドロキシル基を有するアミノ酸がＬ−セリンもしくはＬ−スレオニンである上記（１）、（２）、（４）または（５）に記載の組成物。
（７）  ヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドがグリシル−Ｌ−セリンである上記（１）、（３）、（４）または（５）に記載の組成物。
（８）  プロアントシアニジンがブドウ属、リンゴ属、オオムギ属、カキ属、ココヤシ属、カカオ属、マツ属、コケモモ属、フラガリア属、インゲン属またはナンキンマメ属に属する植物由来のものである上記（１）〜（７）のいずれかに記載の組成物。
（９）  上記（１）〜（８）のいずれかに記載の組成物を含有する飲料。
（１０）  飲料が、果実酒、果汁飲料または健康ドリンクである上記（９）記載の飲料。（１１）  上記（１）〜（８）のいずれかに記載の組成物を含有する食品。
（１２）  上記（１）〜（８）のいずれかに記載の組成物を含有する化粧品。
（１３）  上記（１）〜（８）のいずれかに記載の組成物を含有する医薬。
（１４）  プロアントシアニジンにヒドロキシル基を有するアミノ酸を配合することを特徴とするプロアントシアニジンの安定化方法。
（１５）  プロアントシアニジンにヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドを配合することを特徴とするプロアントシアニジンの安定化方法。
（１６）  ヒドロキシル基を有するアミノ酸を含有するプロアントシアニジンの安定化剤。
（１７）  ヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドを含有するプロアントシアニジンの安定化剤。
【０００６】
【発明の実施の形態】
ヒドロキシル基を有するアミノ酸としては、セリン、スレオニン、チロシン等があげられ、中でもＬ−セリン、Ｌ−スレオニンが好ましい。ヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドとしてはグリシルセリン、グリシルスレオニン、グリシルチロシン等があげられ、中でもグリシル−Ｌ−セリンが好ましい。
【０００７】
ヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドは、水和物もしくは溶媒和物の形で存在していてもよい。
ヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドは、公知の方法により合成することも可能であるが、市販品として購入してもよい。
プロアントシアニジンとしては、下記の式（Ｉ）で表されるフラバン−７−オール誘導体が２個以上結合した化合物群等があげられる。
【０００８】
【化１】
0004574788.tif 000002
【０００９】
（式中、Ｒ2およびＲ3は、同一または異なって、水素原子、ヒドロキシル基、ガロイルオキシ基またはグルコピラノシルオキシ基を表し、Ｒ1、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7およびＲ8は、同一または異なって、水素原子またはヒドロキシル基を表す）式（Ｉ）で表されるフラバン−７−オール誘導体の好ましい具体例としては、カテキン、エピカテキン、ガロカテキン、エピガロカテキン、アフゼレチン、エピアフゼレチン等があげられる。
【００１０】
プロアントシアニジンにおいては、該フラバン−７−オール誘導体の炭素が他の該フラバン−７−オール誘導体の炭素と単結合または酸素原子を介したエーテル結合（エーテル結合の場合、該フラバン−７−オール誘導体のヒドロキシル基の部分を介している場合もある）等で結合されており、この結合に係わる炭素は、結合可能なものであれば、どの炭素でもあってもよい。また、該フラバン−７−オール誘導体の構造単位は、各々、同一であっても異なっていてもよい。
プロアントシアニジンにおける該フラバン−７−オール誘導体間の結合の形態の一例を以下の式（ＩＩ−ａ）、式（ＩＩ−ｂ）および式（ＩＩ−ｃ）により示す。
【００１１】
【化２】
0004574788.tif 000003
【００１２】
（式中、Ｒ2a、Ｒ2b、Ｒ2c、Ｒ2d、Ｒ2e、Ｒ2f、Ｒ3a、Ｒ3b、Ｒ3c、Ｒ3d、Ｒ3eおよびＲ3fは、同一または異なって、水素原子、ヒドロキシル基、ガロイルオキシ基またはグルコピラノシルオキシ基を表し、Ｒ1b、Ｒ1d、Ｒ1f、Ｒ4a、Ｒ4b、Ｒ4c、Ｒ4d、Ｒ4e、Ｒ4f、Ｒ5a、Ｒ5c、Ｒ5d、Ｒ5e、Ｒ6a、Ｒ6b、Ｒ6c、Ｒ6d、Ｒ6e、Ｒ6f、Ｒ7a、Ｒ7b、Ｒ7c、Ｒ7d、Ｒ7e、Ｒ7f、Ｒ8a、Ｒ8b、Ｒ8c、Ｒ8d、Ｒ8eおよびＲ8fは、同一または異なって、水素原子またはヒドロキシル基を表す）
プロアントシアニジンとしては、該フラバン−７−オール誘導体の構造単位を、好ましくは２〜１０個、さらに好ましくは２〜４個もつものが使用される。
【００１３】
フラバン−７−オール誘導体の２量体としては、例えばエピカテキン−（４β→８）−カテキン等のエピカテキンとカテキンの結合体、エピカテキン−（４β→６）−エピカテキン、エピカテキン−（４β→８）−エピカテキン（プロシアニジンＢ−２）等のエピカテキンの２量体、カテキン−（４α→８）−カテキン等のカテキンの２量体等があげられ、フラバン−７−オール誘導体の３量体としては、例えばエピカテキン−（４β→８）−エピカテキン−（４β→８）−エピカテキン、エピカテキン−（４β→８）−エピカテキン−（４β→６）−エピカテキン等のエピカテキンの３量体、カテキン−（４α→８）−カテキン−（４α→８）−カテキン等のカテキンの３量体、エピカテキン−（４β→８）−エピカテキン−（４β→８）−カテキン等のエピカテキンとカテキンの混合３量体等があげられる。
【００１４】
また、前記で説明した化合物に没食子酸やグルコース、ラムノース等の糖類が付加した化合物も本発明におけるプロアントシアニジンに包含される。
プロアントシアニジンは、種々の光学異性体等の異性体をもつが、それら全ておよびそれらの混合物も本発明におけるプロアントシアニジンに包含される。
プロアントシアニジンは、ブドウ属、リンゴ属、オオムギ属、カキ属、ココヤシ属、カカオ属、マツ属、コケモモ属、フラガリア属、インゲン属、ナンキンマメ属等に属するブドウ、リンゴ、オオムギ、カキ、ヤシ、カカオ、マツ、ブルーベリー、イチゴ、アズキ、ピーナッツ等の各種の植物から抽出精製して得られる他、それらの抽出物の発酵産物、例えばワイン、リンゴ酒、ビール等から、またそれらを精製することによっても得られる。
【００１５】
植物からの抽出精製は、次のような公知の方法で行うことができる。
原料である植物の果実、種子、葉、茎、根、根茎等を、適当な時期に採取した後、そのままか、通常空気乾燥等の乾燥工程に付し、抽出原料とする。
上記の乾燥した抽出原料からのプロアントシアニジンの抽出は、公知の方法［ケミカル  アンド  ファーマシューティカル  ブリテン(Chemical & Pharmaceutical Bulletin), 38, 321 (1990)および同, 40, 889-898 (1992)］に準じて行うことができる。すなわち、原料を粉砕もしくは細切した後、溶媒を用いて抽出を行う。抽出溶媒としては、水、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール類、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類等の親水性もしくは親油性の溶媒を、単独もしくは混合溶媒として用いることができる。抽出温度は、通常０〜１００℃、好ましくは５〜５０℃である。
【００１６】
抽出時間は、１時間以上１０日間程度であり、溶媒量は、乾燥原料あたり通常１〜３０倍重量、好ましくは５〜１０倍重量である。抽出操作は、攪拌によっても浸漬放置によってもよい。抽出操作は、必要に応じて２〜３回繰り返してもよい。
上記の操作で得られた粗抽出液から不溶性残渣を濾過もしくは遠心分離により取り除いた抽出液、あるいは植物の搾汁液や樹液からのプロアントシアニジンの精製方法（精製方法Ａ）は、公知の生薬の分離精製方法であればどのようなものでもよいが、二相溶媒分配法、カラムクロマトグラフィー法、分取高速液体クロマトグラフィー法等を単独または組み合わせて用いることが好ましい。例えば二相溶媒分配法としては、前記の抽出液から油溶性成分や色素をｎ−ヘキサン、石油エーテル等により抽出除去する方法、該抽出液からｎ−ブタノール、メチルエチルケトン等の溶媒と水との分配により、溶媒相へプロアントシアニジンを回収する方法等があげられる。カラムクロマトグラフィー法としては、担体としてアンバーライトＩＲ−１２０Ｂ、アンバーライトＩＲＡ−４０２等を用いるイオン交換カラムクロマトグラフィー法、担体として順相系シリカゲル、逆相系シリカゲル、ダイヤイオンＨＰ−２０、セパビーズＳＰ−２０７等を用いる吸着カラムクロマトグラフィー法、担体としてセファデックスＬＨ−２０等を用いるゲル濾過法等があげられ、これらを単独もしくは組み合わせて反復して使用することができる。分取高速液体クロマトグラフィー法としては、オクタデシルシリカ等を用いる逆相系のカラムを用いる方法、シリカゲル等を用いる順相系のカラムを用いる方法等があげられる。
【００１７】
上記精製方法により、塩類等水溶性のイオン性物質、糖類、多糖類等の非イオン性物質、油分、色素等が粗抽出液から除去され、プロアントシアニジンが精製される。
また、ブドウ種子抽出プロアントシアニジンは、アクタ  デルマト  ヴェネレオロジカ（ストックホルム）［Acta Derm. Venereol. (Stockh.)］, 78, 428 (1998)等に記載の方法に準じて精製することにより得ることができる。
プロアントシアニジンの合成法による製造方法としては、エピカテキンまたはカテキンの２量体の製造方法がジャーナル  オブ  ケミカル  ソサエティー  パーキン  トランサクション  Ｉ(Journal of the Chemical Society: Perkin Transactions I), 1535〜1543 (1983)に記載されており、該文献に記載の方法あるいはそれに準じて各種プロアントシアニジンを合成することができる。
【００１８】
プロアントシアニジンを含む植物抽出物のアルコール発酵産物は、次のような公知の方法で得ることができる。すなわち、ワイン、リンゴ酒等の単発酵式発酵酒の場合は、果汁を酵母によりアルコール発酵させて製造する。例えば、ブドウ果汁からの赤ワインの製造では、ブドウ果実を粉砕し酸化防止剤を加えた後、酒母を２〜５％添加し、７〜１０日間主発酵させる。次いで圧搾して果皮および沈殿物を除き、発酵栓をつけた洋だるに移して、約１０℃で残糖０．２%以下まで後発酵を行う。酒石、タンニン、タンパク質等の沈殿物をおりびきし、さらに数年間貯蔵熟成させて製造する。また、ビールのような複発酵式発酵酒の場合は、穀物の澱粉を原料とし、まずアミラーゼによる糖化を行い、次いでアルコール発酵させて製造する。例えば、オオムギを主原料としたビールの製造では、麦芽と水から麦汁を作り、酵母を加えて発酵させる。７〜１０℃で１０日間主発酵を行い、貯蔵タンクに移して、０〜２℃で６０日間後発酵を行わせる。後発酵終了後、濾過あるいは加熱殺菌を行い目的の発酵産物を得る。
【００１９】
上記のアルコール発酵産物からのプロアントシアニジンの精製方法としては、前記精製方法Ａで例示したのと同様の方法があげられる。
上記精製方法により、塩類等水溶性のイオン性物質、糖類、多糖類等の非イオン性物質、油分、色素等がアルコール発酵産物から除去される結果、プロアントシアニジンを精製することができる。
本発明において、プロアントシアニジンは、一種または二種以上混合してもよい。
植物またはアルコール発酵産物から得られるプロアントシアニジンの具体的な例としては、ブドウ種子抽出物プロアントシアニジン、赤ワイン抽出精製物、リンゴ由来プロアントシアニジン、マツ由来プロアントシアニジン、精製プロアントシアニジンオリゴマー等があげられる。
【００２０】
本発明の組成物において、プロアントシアニジンの含有量は、用途等により特に限定されないが、例えば、飲料、食品、化粧品、医薬等の用途の組成物では、組成物の総量（処方全成分の総重量）に対して、好ましくは０．０１〜２０重量％であり、より好ましくは０．１〜１０重量％である。
本発明の組成物において、ヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドの含有量は、用途やプロアントシアニジンの種類等により適宜決められ、特に限定されないが、例えば、飲料、食品、化粧品、医薬等の用途の組成物では、組成物の総量（処方全成分の総重量）に対して、好ましくは０．００１〜１重量％、より好ましくは０．００５〜０．５重量％、さらに好ましくは０．０１〜０．３重量％である。
【００２１】
本発明の組成物は、例えば、亜硫酸水素ナトリウム、ピロ亜硫酸カリウム、アスコルビン酸、エリソルビン酸やトコフェロール類等の抗酸化剤を含有していてもよい。
また、本発明の組成物は、適宜、各用途に適した添加剤等を含有させることにより飲料、食品、化粧品、医薬品等の用途に使用することができる。
【００２２】
以下、本発明の組成物を含有する本発明の飲料、食品、化粧品、医薬品について説明する。
本発明の飲料の形態としては、果実酒等の酒類ならびにソフトドリンク、健康ドリンク、スタミナドリンク、ビタミンドリンク、果汁飲料等があげられる。
本発明の飲料は、（１）植物原料を搾汁しそのまま食するもの、例えば、リンゴジュース、ブドウジュース、ブルーベリージュース等の果汁飲料、（２）植物原料またはその加工品を熱水抽出して得られる飲料、例えば、麦茶、緑茶、ウーロン茶、紅茶、カキノハ茶、クコ茶等の各種茶類、（３）植物搾汁液をアルコール発酵することにより得られる飲料、例えば、ブドウ酒、リンゴ酒、ブルーベリー酒等の果実酒、ビール、発泡酒等のアルコール飲料、または（４）果実をアルコール浸けにしてエキス分を浸漬抽出することによって得られる飲料、例えば、カリン酒、ウメ酒等のプロアントシアニジンを含有する飲料に、ヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドを配合することにより得ることができる。また、ソフトドリンク、健康ドリンクおよびスタミナドリンクは、プロアントシアニジンと該アミノ酸またはジペプチドの他に、必要に応じて、例えば、蛋白質、糖類、脂肪、微量元素、ビタミン類、乳化剤、香料等を添加し、常法により製造することもできる。
【００２３】
本発明の食品の形態としては、錠剤、カプセル剤、粉末、丸剤、ゼリー、冷凍食品、粉末食品、シート状食品、瓶詰食品、缶詰食品、レトルト食品等の形態の他、自然流動食、半消化栄養食、成分栄養食等の加工形態等があげらる。
本発明の食品は、プロアントシアニジンとヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドに、食品に使用される一般的な原料、例えば、蛋白質、糖類、脂肪、微量元素、ビタミン類、乳化剤、香料等を添加し、常法により製造することができる。
【００２４】
また、本発明の食品としては、例えば、果実を加工して得られる製品、例えば、各種ジャム類や各種果実のシロップ浸け製品等があげられる。
本発明の化粧品の形態としては、液状製品、ゲル状製品、乳液状製品、クリーム等の固形状製品等をあげることができる。
本発明の化粧品は、プロアントシアニジンとヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドに、化粧品に使用される一般的な原料、例えば、固形油・半固形油、液体油、保湿剤、エモリエント剤、界面活性剤、水溶性高分子、油溶性高分子、有機または無機顔料、有機粉体、紫外線吸収剤、消炎剤、清涼剤、防腐剤、酸化防止剤、pH調整剤（クエン酸緩衝溶液等）、殺菌剤、ビタミン類、生薬類・生薬成分、皮膚柔軟剤、香料、色素、エタノール、精製水等を添加し、常法により製造することができる。
【００２５】
本発明の化粧品としては、例えば、化粧水、美容液、乳液、クリーム、パック、育毛トニック、シャンプー等があげられる。
本発明の医薬品の形態としては、錠剤、カプセル剤、粉末、丸剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、シロップ剤、トローチ剤等があげられる。
本発明の医薬は、プロアントシアニジン、ヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチド、および必要に応じてその他の医薬に有効な成分を含有し、通常、賦形剤を用いて、常法により製剤化される。賦形剤としては、ソルビトール、ラクトース、グルコース、乳糖等の糖類、デキストリン、澱粉、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム等の無機物、結晶セルロース、蒸留水、ゴマ油、トウモロコシ油、オリーブ油、綿実油等があげられるが、一般に使用されている賦形剤であればいずれも用いることができる。製剤化する際には、結合剤、滑沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、希釈剤、緩衝剤、抗酸化剤、細菌抑制剤等の添加剤を用いてもよい。
【００２６】
本発明の組成物および該組成物を含有する本発明の飲料、食品、化粧品、医薬は、プロアントシアニジンの安定性に優れており、経時的なプロアントシアニジンの変色が少ない。
また、本発明は、プロアントシアニジンにヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドを配合することを特徴とするプロアントシアニジンの安定化方法も提供するが、該方法は、ヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドの配合量等の条件を前記の本発明の組成物および本発明の飲料、食品、化粧品、医薬の説明での記載に準じて設定することにより実施することができる。
【００２７】
また、本発明は、ヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドを含有するプロアントシアニジンの安定化剤も提供するが、ヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドの配合量等の条件は前記の本発明の組成物および本発明の飲料、食品、化粧品、医薬の説明での記載に準じて設定することができる。
【００２８】
次に、本発明の実施の形態について、実施例、試験例および参考例により具体的に示す。
【００２９】
【実施例】
以下において、（Ｗ／Ｗ）は、（重量／重量）を表し、（Ｖ／Ｖ）は、（容量／容量）を表す。
実施例１
以下の第１表に記載の各成分を攪拌混合し、固形物を溶解させて、本発明の組成物１〜１１を製造した。また、プロシアニジンＢ−２は、参考例３により製造した。
【００３０】
【表１】
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【００３１】
【表２】
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【００３２】
実施例２
以下の第２表に記載の各成分を攪拌混合し、固形物を溶解させて、本発明の組成物１２〜２０を製造した。また、プロシアニジンＢ−２は、参考例３により製造した。
【００３３】
【表３】
0004574788.tif 000006
【００３４】
【表４】
0004574788.tif 000007
【００３５】
実施例３
以下の第３表に記載の各成分を攪拌混合し、固形物を溶解させて、本発明の組成物２１〜２４を製造した。また、プロシアニジンＢ−２は、参考例３により製造した。
【００３６】
【表５】
0004574788.tif 000008
【００３７】
実施例４  リンゴジュースの製造
参考例１で得られたリンゴ混濁果汁液１００ｋｇにＬ−スレオニン１０ｇを加え、リンゴジュースバルクを得、紙パック容器に充填して最終製品とする。
【００３８】
実施例５  ブドウ酒の製造
参考例２で得られた樽詰めブドウ発酵液１００ｋｇにＬ−スレオニン１０ｇを加え、均一に攪拌溶解させ、製品とする。これを、ガラス容器に充填し、最終製品とする。
【００３９】
実施例６  ブルーベリージャムの製造
ブルーベリー                            １００      ｋｇ
グラニュー糖                              ６０      ｋｇ
レモン汁                                    １      ｋｇ
Ｌ−セリン                                  ０．０３ｋｇ
（調製法）
洗浄したイチゴにグラニュー糖を加え３０分間加熱する。冷却後、レモン汁およびグリシル−Ｌ−セリンを加え、均一に混合する。ガラス容器に充填し、製品とする。
【００４０】
実施例７  飲料（健康ドリンク）の調製
ブドウ種子由来プロアントシアニジン（参考例４）  １．０ｇ
グリシル−Ｌ−セリン                            ０．１ｇ
安息香酸ナトリウム                              １．０ｇ
果糖                                          １０．０ｇ
香料（フルーツミックス）                        適量
色素（ブルーベリー色素）                        適量
精製水                                          適量
全量                                          １０００ｇ
（調製法）
上記混合物を均一に攪拌溶解させ、ボトルに充填後、加熱処理をし、製品とする。
【００４１】
0004574788.tif 000009
油相成分および水相成分をそれぞれ均一に溶解し、油相を水相に攪拌しながら加え、化粧水とする。
【００４２】
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油相成分および水相成分をそれぞれ８０℃に熱して均一にし、水相を油相に攪拌しながら加え、乳液とする。
【００４３】
0004574788.tif 000011
油相成分および水相成分をそれぞれ室温で均一にし、水相を油相に攪拌しながら加え、育毛トニックとする。
【００４４】
実施例１１  錠剤の調製
ブドウ種子由来プロアントシアニジン（参考例４）  １０．０ｇ
グリシル−Ｌ−セリン                              １．０ｇ
乳糖                                            ８９．０ｇ
乾燥コーンスターチ                                ２．０ｇ
タルク                                            １．８ｇ
ステアリン酸カルシウム                            ０．２ｇ
（調製法）
これらを均一に混合し、単発式打錠機で打錠して、直径７ｍｍ、重量２５０ｍｇの錠剤を製造する。
【００４５】
0004574788.tif 000012
これらを均一に攪拌溶解後、ガラス容器に充填、加熱処理をし、製品とする。
【００４６】
試験例１  プロアントシアニジンの経時的な着色変化の測定
実施例１〜３で得た組成物１〜１２、１４〜２０、２２〜２４を５０℃で１週間保存した後、組成物１〜１２、１４〜２０、２２〜２４およびこれらの対照群の吸光度を波長４００ｎｍ（光路長：１ｃｍ）で測定した。ここで、対照群とは、各組成物よりヒドロキシル基を有するアミノ酸またはヒドロキシル基を有するアミノ酸を含むジペプチドのみを除いた以外はそれぞれ各組成物と同じ成分を使用して製造した組成物のことである。
結果を第４〜６表に示す。
【００４７】
【表６】
0004574788.tif 000013
【００４８】
【表７】
0004574788.tif 000014
【００４９】
【表８】
0004574788.tif 000015
【００５０】
上記の結果より、対照群の組成物と比較して、本発明の組成物は、プロアントシアニジンの経時的な着色が少ないことがわかる。
【００５１】
試験例２  プロアントシアニジンの安定性試験
実施例２で得た組成物１２〜１４、１６〜１９、実施例３で得た組成物２２およびこれらの対照群を５０℃で１週間保存した後、以下の分析条件により、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にてプロシアニジンＢ−２含量を測定した。ここで、対照群とは、各組成物よりヒドロキシル基を有するアミノ酸のみを除いた以外はそれぞれ各組成物と同じ成分を使用して製造した組成物のことである。
（ＨＰＬＣ分析条件）
カラム：ＧＬサイエンス社製  Inertsil ODS-2（径４．６ｍｍ×長さ２５０ｍｍ）
移動相：アセトニトリル／０．０５％トリフルオロ酢酸（９／９１：容量比）
検出器：ＵＶ  ２８０ｎｍ
また、表中のプロシアニジンＢ−２の保持率は、以下の式で計算した。
【００５２】
プロシアニジンＢ−２の保持率＝Ａ／Ｂ×１００（％）
Ａ：試験前のプロシアニジンＢ−２の量
Ｂ：１週間後のプロシアニジンＢ−２の量
試験例２の結果を第７表および第８表に示す。
【００５３】
【表９】
0004574788.tif 000016
【００５４】
【表１０】
0004574788.tif 000017
【００５５】
上記の結果より、対照群の組成物と比較して、本発明の組成物は、プロアントシアニジンの安定性に優れていることがわかる。
【００５６】
参考例１  リンゴ混濁果汁液の製造
洗浄したフジリンゴ１トンを破砕器にかけ１０％アスコルビン酸水溶液を１０ｋｇ添加した。次に、プレス器により搾汁し、６０メッシュの篩いにかけた。次に、瞬間殺菌機を用い９５℃で２０秒間殺菌操作を行い、ただちに冷却した後、遠心分離を行い、リンゴ混濁果汁液を得た。
【００５７】
参考例２  樽詰めブドウ発酵液の製造
カベルネ  ソービニヨン種ブドウ果実１０ｔを破砕器にかけ、ピロ亜硫酸カリウム８００ｇを添加したのち、酒母を３％添加し、２０℃で１０日間主発酵を行った。次いで圧搾して果皮および沈殿物を除き、発酵栓をつけた洋だるに移して、１５℃で後発酵を行った。酒石、タンニン、タンパク質等の沈殿物をおりびきしながら、２年間貯蔵熟成した。
【００５８】
参考例３  リンゴジュースからのプロシアニジンＢ−２［エピカテキン−（４β→８）−エピカテキン］の精製方法
リンゴジュース２１１２０ｋｇを、水で平衡化したダイヤイオンＨＰ−２０樹脂（三菱化学社製）を充填したカラム（径６０ｃｍ×長さ８８．５ｃｍ：２５０Ｌ体積）に通塔し、１０００Ｌの脱塩水および５００Ｌの１５％（Ｖ／Ｖ）メタノール水溶液でカラムを洗浄した。次に、５００Ｌの４５％（Ｖ／Ｖ）メタノール水溶液で目的物を溶出させた。この溶出物を乾固し、９４５０ｇの乾固物を得た。
【００５９】
この乾固物の１４６５ｇを２５％（Ｖ／Ｖ）メタノール水溶液に溶解し、２５％（Ｖ／Ｖ）メタノール水溶液で平衡化したセファデックスＬＨ−２０（ファルマシア製）を充填したカラム（径１８ｃｍ×長さ３９．３ｃｍ：１０Ｌ体積）に通塔し、２０Ｌの２５％（Ｖ／Ｖ）メタノール水溶液、２０Ｌの５０％（Ｖ／Ｖ）メタノール水溶液で順次カラムを洗浄後、２０Ｌの７５％（Ｖ／Ｖ）メタノール水溶液で目的物を溶出させ、溶出物を乾固し、２３３ｇの乾固物を得た。
【００６０】
この乾固物の１１６ｇを脱塩水に溶解した後、分取高速液体クロマトグラフィー（１５０ｍｍφ×１０００ｍｍ：ＯＤＳカラム、メタノール／０．０００１％酢酸水溶液＝１２／８８）で分離した。このようにして、１６．５ｇのプロシアニジンＢ−２（純度９４％以上）を得た。得られたプロシアニジンＢ−２の1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲおよびマススペクトルは標品のものと一致した。また、プロシアニジンＢ−２の純度はＨＰＬＣにより試験例２に記載のものと同じ分析条件で調べた。
【００６１】
参考例４  ブドウ種子からのプロアントシアニジンの精製
アクタ  デルマト  ヴェネレオロジカ（ストックホルム）, 78, 428 (1998)に記載の方法により、シャルドネ種ブドウ種子よりプロアントシアニジンの抽出および精製操作を行い、平均重合度３．５、プロアントシアニジン構成単量体あたりのガロイル化率２５％（モル比）のブドウ種子由来プロアントシアニジンを得た。
ガロイル化率および平均重合度は、アクタ  デルマト  ヴェネレオロジカ（ストックホルム）, 78, 428 (1998)に記載の方法に準じて求めた。
【００６２】
【発明の効果】
本発明により、プロアントシアニジンの安定性に優れた組成物、該組成物を含有する飲料、食品、化粧品および医薬ならびに酸化重合等による変色等を防ぐためのプロアントシアニジンの安定化方法が提供される。