(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中の呼吸している微生物の増殖を検出するための組成物であって、
（ａ）トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物、
（ｂ）下式のヒドロキシル官能性シリコーン化合物、
ＸnＲ(3-n)ＳｉＯ（ＲＸＳｉＯ）mＳｉＲ(3-n)Ｘn
式中、
Ｒは独立してＣ1〜Ｃ20の炭化水素基を表し、
Ｘは独立してヒドロキシル基またはＲ1基を表し、
ｎは１または２の数であり、
ｍは２５℃における粘度が約１ミリパスカル秒から約５００ミリパスカル秒となるに十分な数であり、また、
Ｒ1は任意選択で１個から２０個の炭素原子で置換される不飽和脂肪族炭化水素、
（ｃ）有機ケイ素ポリマー、
（ｄ）有機水素ケイ素化合物、
（ｅ）触媒、および、任意選択で
（ｆ）充填剤、
を含むことを特徴とする組成物。
【請求項２】
前記組成物のｐＨを約７．０の中性に保つのに十分な量で添加された酸を含むことを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
試料中の呼吸している微生物の増殖を検出するための組成物を調製する方法であって、
（ｉ）トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物と下式のヒドロキシル官能性シリコーン化合物、
ＸnＲ(3-n)ＳｉＯ（ＲＸＳｉＯ）mＳｉＲ(3-n)Ｘn
式中、
Ｒは独立してＣ1〜Ｃ20の炭化水素基を表し、
Ｘは独立してヒドロキシル基またはＲ1基を表し、
ｎは１または２の数であり、
ｍは２５℃における粘度が約１ミリパスカル秒から約５００ミリパスカル秒となるに十分な数であり、また、
Ｒ1は任意選択で１個から２０個の炭素原子で置換される不飽和脂肪族炭化水素、
の溶液を形成するステップ、
（ｉｉ）前記溶液に有機ケイ素ポリマーを添加して混合物を形成するステップ、
（ｉｉｉ）触媒の存在下、前記混合物に有機水素ケイ素化合物を添加してエラストマーを形成するステップ、および
（ｉｖ）前記エラストマーに充填剤を添加するステップ、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項４】
前記充填剤がヒュームドシリカであって、かつ前記方法がさらに、前記組成物のｐＨを約７．０の中性に保つのに十分な量で添加された酸を含むことを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
地球環境中には、我々人間と絶えず相互作用し合っている多数の微生物が存在する。その相互作用は、例えばワイン、酢または抗生物質などを製造する発酵作用のようにときとして有益なこともあれば、何の変化ももたらさないこともあり、また感染性諸疾患の場合のように有害なことさえある。これら微生物は広く存在しているため、その代謝活性の検出、同定および研究は依然必要とされている。
【０００２】
【従来の技術】
この四半世紀のうちに微生物学の学問分野は著しい変化を遂げてきたが、微生物の挙動を検出し、同定し、また分析するために利用されている方法の多くは、依然として時間のかかる方法である。抗菌物質感受性の研究分野を例に挙げると、抗菌性化合物の効力を示すために、米国では多くの病院がいまだに微生物の増殖の有無を目視で判断する方法に依存した検査を用いている。このような検査の中で最も一般的な検査はＢａｕｅｒ−ｋｉｒｂｙ  Ｄｉｓｃ法であるが、この検査では、結果が得られるまでに微生物の増殖に１８時間から２４時間の培養期間を通常要する。
【０００３】
抗菌物質感受性を検査する別の方法としてはブロス微量希釈法があり、例えば、有機体を同定し抗菌物質感受性を検査するＳｃｅｐｔｏｒ（登録商標）システム（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ診断計測システム、メリーランド州スパークス）などの例を挙げることができる。このシステムでは複数の低容積クプラ（１クプラ当り約０．４ｍｌ）を備えた使い捨てプラスチックパネルが使用され、各クプラは、クプラ表面上で乾燥した、異なる検査化合物または濃度の異なる検査化合物を含む。検査する有機体を所望の検査培地に懸濁し、アリコートを検査パネルの個々のクプラに入れる。パネル上で乾燥した試薬は試料に溶解し、その系を、有機体と試薬とが相互作用できて増殖が目視で認められるだけの充分な時間として一晩（１８時間から２４時間）培養する。引き続き、増殖の有無を見るためにパネルを目視で検査し、そこから検査された有機体の感受性に関する情報を得る。ウェルを追加して有機体を同定しやすくする。しかし、すでに指摘したように、この検査方法では長期の培養期間が必要である。
【０００４】
長期の培養期間を要するという問題を解決する一つの方法は、コロニーの増殖ではなく微生物の代謝活性をモニターすることである。血液培地中の有機体の増殖は、濁度の変化の検出、密閉培養バイアルの圧力変化の検出、二酸化炭素などの代謝産物への放射性基質の取り込みの検出、二酸化炭素生産量の測定、または酸素消費量の測定などの種々の方法でモニターすることができる。一例として、光散乱光学的手段を備えた装置を用い、種々の抗菌性化合物の存在下で微生物のサイズまたは数の変化を測定して感受性の確定が行われてきた。これらの原理を利用した市販の計器の例として、Ｖｉｔｅｃシステム（ＢｉｏＭｅｒｉｅｕｘ社）が挙げられる。このシステムでは、多くの有機体と薬剤の組み合せについて、微生物の抗菌物質感受性に関する情報が６時間以内にもたらされるとされる。それ以外の組み合せについては、この機械装置でも、有機体の抗菌物質感受性の判定が下されるまでに１８時間もの時間がかかることがある。
【０００５】
Ｂａｕｅｒ−ｋｉｒｂｙ法は今もなお使用されているため、これを基にして、ある種の試料については４時間から６時間で表示することができるような改良型が開発されてきた。しかし、改良型システムは、検査プレート上に発色色素（ｃｏｌｏｒ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｄｙｅ）の展開液を噴霧する必要があり、この上なく「破壊的」である。したがって、その後の再培養および表示は不可能となり、仮に迅速な検査技法がうまくいかない場合には、その後において標準的な評価を行うために実験を継続することはできない。
【０００６】
増殖している有機体中に存在するアデノシン三リン酸（「ＡＴＰ」）の量に基づく生物発光法では、ある種の組成物に関しては４時間半で抗菌物質感受性検査の結果が得られるという記述がある（Ｗｈｅａｔ他）。しかし、この方法はしばしば面倒になりがちであり、その適用性の広さについては証明されていない。
【０００７】
その他の方法は、微生物による酸素消費量を、ｐＨおよび／またはヘモグロビンの色の変化を測定するによってモニターする方法、または液体検査培地の総酸化還元電位に応じて変色するトリフェニルテトラゾリウムクロライドおよびリザズリンなどの色素を使用してモニターする方法に関するものである。
【０００８】
微生物による溶存酸素の消費量を、微生物の代謝の標識としてモニターする方法が長年研究されている。例えば、Ｃ．Ｅ．Ｃｌｉｆｔｏｎは、１９３７年にワールブルク（Ｗａｒｂｕｒｇ）フラスコを用い、数日間にわたって微生物の酸素消費量をモニターした。この方法による酸素濃度変化の測定は手間どり、面倒なものであった。
【０００９】
微生物の増殖は、例えば、ＢＡＣＴＥＣ（登録商標）血液培養基解析システム（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ診断計測システム、メリーランド州スパークス）中などの、血液培養バイアルの底に置いたセンサーの蛍光出力によってモニターすることもできる。最初、ＢＡＣＴＥＣ（登録商標）蛍光血液培養基（ｂｌｏｏｄ  ｃｕｌｔｕｒｅ）解析システムでは、二酸化炭素の生成量を測定していた。後に、同システムは、酸素消費量を測定するようになった。
【００１０】
気体がセンサーを透過し易くなるようにセンサーマトリックスとしてシリコーンポリマーを使用した、二酸化炭素と酸素の両者を測定するＢＡＣＴＥＣ（登録商標）システムが考案されている。シリコーンを使用するのは、シリコーンがすべての合成ポリマーの中で最も気体透過率が高いものの一つであることが理由である。ＢＡＣＴＥＣ（登録商標）システムでは、トリス−（４，７−ジフェニル−１，１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物を有するルテニウム化合物の蛍光出力の変化によって、酸素消費量を検出する。この化合物は波長４４０ナノメートル（ＮＭ）の光で励起すると、波長６２０ＮＭの光（蛍光）を放つ。蛍光発光は酸素の存在下で止まるかまたは消滅する。微生物の検出は、微生物が密閉培養バイアル中で増殖する際、微生物はバイアル内の酸素を消費しまたは枯渇させ、その結果微生物の増殖に比例して光の出力が増すという理論に基づいている。
【００１１】
最初のＢＡＣＴＥＣ（登録商標）蛍光血液培養基解析システムは、トリス−（４，７−ジフェニル−１，１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物をエタノール溶液からシリカゲルの表面上に堆積させること（ｄｅｐｏｓｉｔｉｎｇ）により、開発されたものである。エタノールを除去した後、得られた粉末を湿分硬化性液状シリコーンポリマーに混ぜ合わせ、次いでそれを好適な容器に添加する。硬化後（すなわち、液状ポリマーを固体に変換した後）、培地とヘッドスペースガス（例えば、二酸化炭素、酸素、窒素など）を容器に加えてふたをする。
【００１２】
現在のＢＡＣＴＥＣ（登録商標）蛍光血液培養基解析システムでは、トリス−（４，７−ジフェニル−１，１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物をエタノール溶液からシリカゲル上に堆積させることが必要である。次いで、この被覆シリカゲルは、シリコーンポリマーと不均一に混合される。このようにして造られたセンサーは、二相センサーまたは不均一センサーと呼ばれている。被覆シリカゲルは、混合していないと、処理の間にシリコーンポリマー混合物から沈澱してしまう。今まで、シリコーンに直接にトリス−（４，７−ジフェニル−１，１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物を添加して、機能的なセンサーを造ることはできなかった。
【００１３】
トリス−（４，７−ジフェニル−１，１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物をエタノール溶液からシリカゲル上に堆積させるステップ、およびシリコーンポリマーから被覆シリカが相分離するのを防ぐためによく混合を行うステップの両ステップが必要であるために、不均一センサーの使用は費用が高くつき、時間がかかり、大規模製造には適さない。
【００１４】
【発明が解決しようとする課題】
したがって、当技術分野で欠けており、しかし今や本発明によって解決しようとする課題は、試料中の微生物検出において、トリス−（４，７−ジフェニル−１，１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物をエタノールからシリカゲル上に堆積させる処理ステップを必要としない、機能的な均一センサーを提供することである。
【００１５】
【課題を解決するための手段】
１．本発明は、試料中の呼吸している微生物の増殖を検出するための、
（ａ）トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物、
（ｂ）ヒドロキシル官能性（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）有機化合物、
（ｃ）有機ケイ素ポリマー、
（ｄ）有機水素ケイ素化合物（ｏｒｇａｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｓｉｌｉｃｏｎｃｏｍｐｏｕｎｄ）、
（ｅ）触媒、および任意選択で
（ｆ）充填剤
を含む組成物を提供する。
【００１６】
２．本発明はさらに、試料中の呼吸している微生物の増殖を検出するための、
（ａ）トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物、
（ｂ）ヒドロキシル官能性シリコーン化合物、
（ｃ）有機ケイ素ポリマー、
（ｄ）有機水素ケイ素化合物、
（ｅ）触媒、および任意選択で
（ｆ）充填剤
を含む組成物を提供する。
【００１７】
３．本発明はさらに、前記組成物のｐＨを約７．０の中性に保つのに十分な量添加された酸を含む前記２に記載の組成物を提供する。
【００１８】
４．本発明はさらに、前記ヒドロキシル官能性シリコーン化合物が、下式
ＸnＲ(3-n)ＳｉＯ（ＲＸＳｉＯ）mＳｉＲ(3-n)Ｘn
式中、
Ｒは独立してＣ1〜Ｃ20の炭化水素基を表し、
Ｘは独立してヒドロキシル基またはＲ1基を表し、
ｎは１または２の数であり、
ｍは２５℃における粘度が約１ミリパスカル秒から約５００ミリパスカル秒となるに十分な数であり、また、
Ｒ1は任意選択で１個から２０個の炭素原子で置換される不飽和脂肪族炭化水素、
を有する前記２に記載の組成物を提供する。
【００１９】
５．本発明はさらに、試料中の呼吸している微生物の増殖を検出するための組成物であって、シラノール官能性シリコーンポリマー中に溶けて溶液を形成しているトリス−（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物を含み、前記溶液を液状シリコーンポリマーに加え合わせた組成物を提供する。
【００２０】
６．本発明はさらに、試料中の呼吸している微生物の増殖を検出するための組成物を調製する方法であって、
（ｉ）トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物とヒドロキシル官能基の溶液を形成するステップ、
（ｉｉ）前記溶液に有機ケイ素ポリマーを添加して混合物を形成するステップ、
（ｉｉｉ）触媒の存在下、前記混合物に有機水素ケイ素化合物を添加してエラストマーを形成するステップ、および
（ｉｖ）前記エラストマーに充填剤を添加するステップ、
を含む方法を提供する。
【００２１】
７．本発明はさらに、前記ヒドロキシル官能基がヒドロキシル官能性シリコーン化合物であり、前記充填剤がヒュームドシリカであって、かつ、前記方法がさらに、前記組成物のｐＨが約７．０の中性に保たれるのに十分な量で添加される酸を含む前記６に記載の方法を提供する。
【００２２】
８．本発明はさらに、前記ヒドロキシル官能性シリコーン化合物が、下式
ＸnＲ(3-n)ＳｉＯ（ＲＸＳｉＯ）mＳｉＲ(3-n)Ｘn
式中、
Ｒは独立してＣ1〜Ｃ20の炭化水素基を表し、
Ｘは独立してヒドロキシル基またはＲ1基を表し、
ｎは１または２の数であり、
ｍは２５℃における粘度が約１ミリパスカル秒から約５００ミリパスカル秒となるのに必要十分な数であり、および
Ｒ1は任意選択で１個から２０個の炭素原子で置換される不飽和脂肪族炭化水素である
を有する前記７に記載の方法を提供する。
【００２３】
【発明の実施の形態】
本発明の組成物は、好適な溶媒を選択することによって、液状シリコーンポリマーにトリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物を直接添加することが可能となる、均一酸素センサーである。本組成物は、環境中の酸素濃度に応じて蛍光強度を変える。
【００２４】
驚くべきことに、本発明の出願者等は、トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物が、ＳＩ２０５の商品名でＢａｙｅｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎが製造しているシラノール（ヒドロキシル基がケイ素原子に結合している）官能性シリコーンポリマーに溶解することを発見した。本出願者等はさらに、トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物のＳＩ２０５溶液とシリコーンポリマーが相溶性であることを発見した。トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物のＳＩ２０５溶液をシリコーンポリマーに直接添加すると、血液培養基中の微生物の増殖を検出することが可能な酸素センサーが得られる。本発明の組成物によって開発したセンサーは、トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物を固体表面上すなわちシリカゲル上に堆積させる必要がない。シリカゲル上にトリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物を堆積させるという処理ステップが省かれたことで、新しい血液培養基製品の商品化が非常に容易になった。
【００２５】
実際には、発蛍光団原液（ｆｌｕｏｒｏｐｈｏｒｅ  ｓｔｏｃｋ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）は、トリス（４，７−ジフェニル−１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物を分配剤（ｄｉｓｐｅｎｓｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）に溶解することにより調製する。分配剤は、ヒドロキシル官能性有機化合物であってもヒドロキシル官能性シリコーン化合物であってもよい。分配剤がヒドロキシル官能性シリコーン化合物の場合、その成分は下式
ＸnＲ(3-n)ＳｉＯ（ＲＸＳｉＯ）mＳｉＲ(3-n)Ｘn
で表され、
式中、
Ｒは独立してＣ1〜Ｃ20の炭化水素基を表し、
Ｘは独立してヒドロキシル基またはＲ1基を表し、
ｎは１または２の数であり、
ｍは２５℃における粘度が約１ミリパスカル秒から約５００ミリパスカル秒となるのに必要十分な数、および
Ｒ1は任意選択で１個から２０個の炭素原子で置換される不飽和脂肪族炭化水素である。
【００２６】
分配剤はＳＩ２０５であることが好ましいが、他の試薬を使用してルテニウム発蛍光団をシリコーンマトリックスに投入することもできる。
【００２７】
本発明で使用することができるその他の分配剤の例としては、ビニルエーテルキャップ有機ポリエーテル（ＤＶＥ−３）、およびエタノール（ＥｔＯＨ）またはウンデセニルアルコール（ＵＤＯＬ）などのアルコール類が挙げられる。
【００２８】
次いで、発蛍光団原液を、ケイ素に結合した硬化基を１分子当り平均で少なくとも２個有する有機ケイ素ポリマーに添加する。この硬化基は、ヒドロキシル基およびオレフィン炭化水素基から成る群より選択することが好ましい。得られた混合物を、ヒドロキシル基およびオレフィン炭化水素基と架橋結合するように作用する有機水素ケイ素化合物に添加し、液状混合物を「固体」エラストマーに変換する。
【００２９】
反応は触媒の存在下で最も良く進行するが、白金族金属を含有する触媒が好ましい触媒である。白金族金属を含有する触媒が最も好ましい。しかしながら、触媒はこのような族に限定されるものではなく、従来のいずれの触媒をも含むことができ、高温で加熱されるものでもあることは、当業者には明らかであろう。
【００３０】
本発明の組成物は充填剤を含んでいてもよい。充填剤はヒュームドシリカであることが好ましい。
【００３１】
本発明の組成物はまた、組成物をｐＨ約７．０と中性に保つために必要十分な量だけ添加される酸を含んでいてもよい。酸を添加することによって、酸素感度が増進する。
【００３２】
本発明の１パート均一配合物（ｏｎｅ−ｐａｒｔ  ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）を用いれば、配合したセンサーを硬化するにあたって、周囲温度または室温（約２５℃）に放置している間に、被覆シリカの沈降は生じない。したがって、室温での硬化する前の時間が制限されることはない。センサーの硬化は、約８５℃から約１００℃の温度範囲で約８時間から１６時間で達成される。
【００３３】
本願発明者等による１パート均一配合物の発見は、本発明がなされた時点で得られる知識を考慮すれば、驚くべきことである。ルテニウムジクロライド五水和物（「Ｒｕ」）色素は、ヘキサンまたはトルエンなどの通常の非極性有機溶媒には溶解しない。むしろ、アルコール類などのヒドロキシル官能性溶媒に溶解することが知られている。溶解度が良好であることは、溶質と溶媒との間の、本発明の場合にはＲｕ色素とアルコールのヒドロキシル基との間の、相互作用または引きつける力を示している。シリカが、不純物として未反応のシラノール基（Ｓｉ−ＯＨ）を常に含んでいるＳｉＯ2のマトリックスであることも知られている。本出願の発明者等は、Ｒｕ色素とシラノール基との間の相互作用により、Ｒｕ色素がアルコール（エタノール）溶液からシリカ表面に移動するものではないかとの仮説を立てた。本出願の発明者等は、分配剤として有用である点だけがもっぱら知られているＳＩ２０５が、シラノール基を有している点に留意した。
【００３４】
驚くべきことに、本出願の発明者等は、ＳＩ２０５をＲｕ色素の溶媒として利用できること、ならびにそれをＲｕ色素の宿主役をする液状シリカとして利用できることを発見した。得られた本発明は、Ｒｕ色素をシリコーンエラストマーに混ぜ込む処理作業を著しく簡素化し、改善したものである。この配合物は均一であるため沈降は起こらない。
【００３５】
以下に、本発明の好ましい実施形態をいくつか、例を用いて説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００３６】
【実施例】
例１：トリス（４，７−ジフェニル−１，１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物（「Ｒｕ」）のＳＩ２０５溶液を用いて配合した均一酸素センサー（ＨＯＳ）
Ｒｕを、センサーの形成に使用するシリコーンに添加する前に、Ｂａｙｅｒ  ＳＩ２０５に溶解する。センサーの性能を向上させるために、必要に応じて、Ｂａｙｅｒ  ＳＩ２０５を多めにセンサー配合物に直接添加することもできる。このセンサーの性能については、表１に記載する。ＳＩ２０５の最適濃度が存在する。ＳＩ２０５が多すぎると付着性が劣り（項目１、４と項目２、３、５を比較のこと）、硬化時間が長くなる（項目１および２）。
【００３７】
【表１】
0004473365.tif 000002
【００３８】
1  対空気センサーシグナル応答とは、空気を含有する密閉ＢＡＣＴＥＣ（登録商標）バイアル中のセンサーの蛍光出力と定義される。その出力は、ＢＡＣＴＥＣ  ９０００シリーズ計器で測定される。
【００３９】
2  対窒素センサーシグナル応答とは、窒素を含有する密閉ＢＡＣＴＥＣ（登録商標）バイアル中のセンサーの蛍光出力と定義される。その出力は、ＢＡＣＴＥＣ  ９０００シリーズ計器で測定される。
【００４０】
3  動的範囲＝（対窒素センサー応答−対空気センサー応答）（対空気センサー応答）×１００
例２：イン−サイチュー（ｉｎ−ｓｉｔｕ）被覆処理を達成するために種々の溶媒を使用した酸素センサー配合物
Ｒｕをアルコール類またはＳＩ２０５などのデリバリー溶媒に溶解することにより、Ｒｕ原液を調製した。次いで、原液をシリコーンとヒュームドシリカに添加（表中縦の行：溶媒％および発蛍光団ｐｐｍを参照のこと）した。このようにして、混合によりシリカをＲｕでイン−サイチュー被覆した。粒径が小さく密度が低いゆえ、処理の間、シリカは懸濁液中に残留する。この点で、処理中に相分離が見られた従来の不均一センサーの技術とは異なる。
【００４１】
【表２】
0004473365.tif 000003
【００４２】
ＵＤＯＬ：ウンデセニルアルコ−ル
シリカ：Ｄｅｇｕｓｓａ  Ｒ８１２  ヒュームドシリカ
褐色顔料：センサーＩで使用したものと同じ顔料。顔料を添加する目的は、シグナルの一部を遮断して空気シグナルを弱めることである。
【００４３】
例３：センサーの付着性を改善する方法
Ｒｕ／ＳＩ２０５／シリカ配合物（表５に示す、７３℃／１５時間で硬化）におけるロット間の付着性のバラツキを改善するために、硬化温度を８３℃にまで高めた。高い硬化温度で配合したパイロットロットを数ロット製造した。付着性は許容できるものであった。これらの研究から、付着性は硬化温度を高くすると改善することが示される。
【００４４】
【表３】
0004473365.tif 000004
【００４５】
例４：対酸素応答の一致性を改善するためにセンサー配合物に酢酸を添加して調製したＨＯＳの例
１１％ＳＩ２０５（ＵＣＩ／（ＨＯＡｃ含有せず）配合物）を用いて配合したＨＯＳセンサーでは、異なるロットの原料、特にＳＩ２０５を使用したときに、バラツキが見られた。ＳＩ２０５剤の分析データシートから、アンモニアを比較的多く（４０ＰＰＭ）含有するロットが圧縮ＤＲとなることが分かった。圧縮ＤＲセンサーのスターティングシグナルは比較的高く、窒素シグナルは標準であった（ロット７Ｌ６Ｍ１およびロット７Ｌ６Ｍ１２）。アンモニア４０ＰＰＭまたは０ＰＰＭを含有するＳＩ２０５を用いて調製された配合物に酢酸（２００ｐｐｍ）を添加することによって、標準の性能と同等の性能が得られた（ロット７Ｌ６Ｍ１４およびロット７Ｌ６Ｍ１６）。この結果から、「ＵＣＩ」配合物に２００ｐｐｍの酢酸を添加することを要件とする最終配合物を得るに至った（表６を参照）。２００ｐｐｍの酢酸を添加することによって、酸素応答にバラツキのないセンサーが製造される。
【００４６】
【表４】
0004473365.tif 000005
【００４７】
＊  ロット３００Ｆ６０６２はアンモニアを４０ｐｐｍ含有していた。
【００４８】
ロット５１２１７Ｍはアンモニアを０ｐｐｍ含有していた。
【００４９】
【表５】
0004473365.tif 000006
【００５０】
【表６】
0004473365.tif 000007
【００５１】
本発明の範囲および精神から逸脱することなく、本発明に様々な変更および修正を加えることができることは、当業者にならば明らかであろう。前述の特定の実施形態は例示のために示したものにすぎず、本発明を限定するものではない。
【００５２】
【発明の効果】
本発明により、試料中の微生物検出において、従来の不均一センサーで必要であった、トリス−（４，７−ジフェニル−１，１０−フェナントロリン）ルテニウムジクロライド五水和物をエタノール溶液等からシリカゲル上に堆積させるステップ、およびシリコーンポリマーから被覆シリカが相分離して被覆シリカが沈降するのを防ぐために混合を行うステップを必要としない、機能的な均一センサーが得られた。