(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）
【化１】
0004490536.tif 000006
〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 はそれぞれ水素原子又はメチル基を示し、Ｘは炭素数１０〜１８の直鎖状のアルキレン基を示す〕で表されるシクロヘキセノン長鎖アルコール化合物を有効成分とする脳血管障害に基づく疾患の予防又は治療薬。
【請求項２】
脳血管障害が脳梗塞、脳出血、くも膜下出血又は脳浮腫である請求項１記載の予防又は治療薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、脳血管障害による脳虚血から脳神経細胞を保護し、病巣を著しく縮小し得る、脳血管障害に伴う疾患の予防又は治療薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】
本邦における脳梗塞などの脳血管障害による死亡は、急性期治療の向上に伴い、１９７０年を境に減少に転じた。しかし、発症率に関しては変化はないと考えられ、今後の高齢化を考慮すれば患者数はむしろ増加すると推察される。
【０００３】
脳梗塞、脳出血、くも膜下出血又は脳浮腫などの脳血管障害は、脳内の血流を低下させるため、脳が虚血状態に陥る。脳が虚血状態になると、細胞外のグルタミン酸濃度が上昇し、シナプス後部のグルタミン酸受容体が過剰な刺激を受け、細胞内のカルシウムイオン濃度が過剰に上昇して細胞障害が引起こされる。そして、神経細胞が脱落し痴呆などの症状をきたす。従って、脳血管障害に基づく疾患に対する治療成績の向上は如何に神経細胞の保護を目的とした急性期の治療を実施するか、急性期にどこまで症状の改善が行えるかにかかっている。しかし、現在臨床で用いられている治療薬は、抗血小板薬、抗凝固薬などであり、直接神経保護作用を有するものではない（脳と循環２，１３−１７，１９９７）。また、抗血小板薬、抗凝固薬などで治療した後、血液の再灌流によりＮＯなどの刺激物質が誘発され、脳細胞を傷害し神経・精神症状を引起こすことが知られている。従って、細胞内カルシウムイオン濃度の過剰な上昇を抑制あるいは排出を促進し、直接神経細胞を保護する薬剤の開発が望まれる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的は、上記の如き脳血管障害から脳神経細胞を保護する薬剤を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
斯かる実状に鑑み本発明者は鋭意研究を行った結果、本出願人がすでに特許出願したシクロヘキセノン長鎖アルコール化合物（ＷＯ９９／０８９８７）が、脳血管障害から脳神経細胞を有効に保護し、病巣を著しく縮小させる作用をも有することを見出し、本発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、次の一般式（１）
【０００７】
【化２】
0004490536.tif 000002
【０００８】
〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 はそれぞれ水素原子又はメチル基を示し、Ｘは炭素数１０〜２８の直鎖状又は分岐状のアルキレン又はアルケニレン基を示す〕
で表されるシクロヘキセノン長鎖アルコール化合物を有効成分とする脳血管障害に基づく疾患の予防又は治療薬を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
上記一般式（１）中、Ｘは炭素数１０〜２８の直鎖状又は分岐状のアルキレン又はアルケニレン基であるが、分岐状のアルキレン又はアルケニレン基の場合の側鎖としては炭素数１〜１０のアルキル基が挙げられる。当該側鎖アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、tert- ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、tert- ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基、などが挙げられ、このうち特にメチル基が好ましい。また直鎖状のアルキレン基又はアルケニレン基（少なくとも１つの炭素- 炭素二重結合を有するアルケン構造を意味する）への側鎖の置換は、３及び／又は７位が好ましい。これらのＸのうち、炭素数１０〜２８の直鎖状アルキレン基がより好ましく、炭素数１０〜１８の直鎖状アルキレン基が特に好ましい。また、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 はそれぞれ水素原子又はメチル基を示すが、少なくとも１個がメチル基である場合がより好ましい。
【００１０】
また、一般式（１）の化合物は、薬学的に許容される塩、又はその溶媒もしくは水和物の形態であってもよい。またこの化合物（１）には、各種の異性体が存在し得るが、これらの異性体も本発明に含まれる。
【００１１】
この化合物（１）は、例えば次の製法Ａ又は製法Ｂに従って製造することができる。
【００１２】
【化３】
0004490536.tif 000003
【００１３】
〔式中、Ｒ1a、Ｒ2a及びＲ3aは水素原子又はメチル基を示すが、少なくとも１個はメチル基を示し、Ｐｈはフェニル基を示し、Ｘ、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 は前記と同じ〕
【００１４】
すなわち、シクロヘキセノン（２）又はメチル置換２−シクロヘキセン−１−オン（３）にベンゼンスルフィン酸塩を酸の存在下に反応させて化合物（４）とし、これにエチレングリコールを反応させてケタール体（５）を得、次いでω−ハロゲノアルカノール又はω−ハロゲノアルケノールを反応させて化合物（６）とし、これを酸処理して保護基を脱離せしめることにより化合物（１）が得られる。
【００１５】
ここで原料として用いられるメチル置換２−シクロヘキセン−１−オン（３）は、メチル置換シクロヘキサノンにブチルリチウムの存在下トリアルキルシリルハライドを反応させた後、パラジウム系触媒の存在下に酸化することにより得られる。
【００１６】
まず、シクロヘキセノン（２）又はメチル置換２−シクロヘキセン−１−オン（３）とベンゼンスルフィン酸塩、例えばベンゼンスルフィン酸ナトリウムとの反応は、塩酸、硫酸、リン酸等の酸の存在下、０〜１００℃の温度で５〜４０時間行うのが好ましい。
【００１７】
化合物（４）とエチレングリコールとの反応は、無水パラトルエンスルホン酸などの縮合剤の存在下５０〜１２０℃の温度で１〜１０時間行うのが好ましい。
【００１８】
ケタール体（５）に反応させるω−ハロゲノアルカノールとしては、ω−ブロモアルカノールが好ましい。ケタール体（５）とω−ハロゲノアルカノールとの反応は、ブチルリチウム等の金属化合物の存在下、低温条件で行うのが好ましい。
【００１９】
得られた化合物（６）からフェニルスルホニル基及びケタール保護基を脱離せしめるには、例えばパラトルエンスルホン酸等の酸を反応させることにより行うのが好ましい。
【００２０】
【化４】
0004490536.tif 000004
【００２１】
〔式中、Ｘ1 は炭素数９〜２７のアルキレン又はアルケニレン基を示し、Ａｃはアシル基を示し、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 及びＰｈは前記と同じ〕
すなわち、化合物（７）〔例えば、Synthesis, 1996, Nov. に準じて得られる〕にω−ブロモアルコールを反応させて化合物（９）とし、次いでフェニルスルホニル基を脱離せしめて化合物（１０）を得、このヒドロキシ基を保護して化合物（１１）とした後、酸化して化合物（１２）とし、次いでヒドロキシ保護基を脱離せしめることにより化合物（１ａ）が得られる。
化合物（７）と化合物（８）との反応は、ブチルリチウム等の金属化合物の存在下、低温条件で行うのが好ましい。
化合物（９）からフェニルスルホニル基を脱離せしめるには、例えばナトリウムアマルガムの存在下リン酸塩等を反応させることにより行われる。
化合物（１０）のヒドロキシ保護基としては、アセチル基等が好ましく、保護反応は例えば化合物（１０）に無水酢酸を反応させることにより行われる。
化合物（１１）の酸化反応は三塩化ルテニウム等の金属化合物の存在下、ｔ−ブチルヒドロパーオキサイド等のアルキルヒドロパーオキサイドを反応させることにより行われる。
化合物（１２）の保護基の脱離反応は、炭酸カリウム等の塩基の存在下に加水分解するのが好ましい。
【００２２】
化合物（１）は、脳梗塞、脳出血、くも膜下出血、脳浮腫等の脳血管障害に基づく疾患の予防又は治療薬の有効成分として有用である。
そして、化合物（１）の投与形態は特に限定されず、経口投与又は非経口投与（筋肉内、皮下、静脈内、坐薬など）のいずれでもよい。
【００２３】
経口用製剤を調製する場合、賦形剤、さらに必要に応じて、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、常法により、錠剤、被服錠剤、顆粒剤、カプセル剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、油性又は水性の懸濁液剤などとする。賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、ソルビット、結晶セルーロスなどが挙げられる。結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、エチルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。
【００２４】
崩壊剤としては、例えば、デンプン、寒天、ゼラチン未、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストラン、ペクチンなどが挙げられる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油などが挙げられる。着色剤としては、医薬品に添加することが許可されているものが使用できる。矯味矯臭剤としては、ココア末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、竜脳、桂皮末などが使用できる。これらの錠剤は、顆粒剤には、糖衣、ゼラチン衣、その他必要により適宜コーティングしてもよい。
【００２５】
注射剤を調製する場合、必要により、pH調整剤、緩衝剤、安定化剤、保存剤などを添加し、常法により、皮下、筋肉内、静脈内注射剤とする。注射剤は、溶液を容器に収納後、凍結乾燥などによって、固形製剤として、用事調製の製剤としてもよい。また、一投与量を容器に収納してもよく、また、多投与量を同一の容器に収納してもよい。
【００２６】
本発明の化合物の医薬としての投与量は、ヒトの場合、成人１日当たり通常０．０１〜１０００mg、好ましくは、０．１〜１００mgの範囲で、１日量を１日１回、あるいは２〜４回に分けて投与する。
【００２７】
【実施例】
以下、実施例により本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００２８】
製造例１
国際公開公報（ＷＯ９９／０８９８７）の実施例１０（Example 10）の方法により、３−（１４−ヒドロキシテトラデシル）−４−メチル−２−シクロヘキセン−１−オンを製造した。
【００２９】
製造例２
国際公開公報（ＷＯ９９／０８９８７）の実施例２８（Example 28）の方法により、３−（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２，４，４−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−オンを製造した。
【００３０】
試験例１
化合物（１）の虚血時の神経細胞保護効果を試験した。脳が虚血状態になると、細胞外のグルタミン酸濃度が上昇し、シナプス後部のグルタミン酸受容体が刺激を受け、細胞内のカルシウムイオン濃度が過剰に上昇して神経細胞障害が引き起こされる。このため、グルタミン酸刺激による神経細胞内カルシウムイオン濃度の上昇を抑制する効果を検討した。
１８日胚のラット海馬から取り出した神経細胞の初代培養を７．５μＭのfura-2/AM で染色した後、蛍光顕微鏡画像処理装置に静置した。そして、グルタミン酸１mMの１分間刺激を神経細胞に与え、細胞内カルシウムイオン濃度の変化を測定した。化合物（１）はグルタミン酸刺激５分前に１０-7Ｍ与えた。細胞内カルシウムイオン濃度の変化の測定は、カルシウムイオン蛍光指示薬のfura-2/AM で細胞を染色して行った。fura-2/AM はグルタミン酸あるいは虚血による刺激で遊離するカルシウムイオンと結合することで蛍光を発し、その蛍光強度は細胞内カルシウムイオン濃度と比例する。それを蛍光顕微鏡画像処理装置（IX-70[Olympus]+Argus50 [浜松ホトニクス]）を用いて測定し、細胞内カルシウムイオン濃度の変化を観察した。結果を図１に示す。
【００３１】
化合物（１）非処置では、グルタミン酸刺激により、蛍光強度は次第に上昇した。その後、正常栄養液で洗浄したが、蛍光強度は若干下がるが高いレベルを維持した。
一方、１０-7Ｍの化合物（１）をグルタミン酸刺激５分前から処置した群では、蛍光強度の上昇は非処置群と比較して低く抑えられた。また、正常栄養液による洗浄でその蛍光強度は直ちに低下し、グルタミン酸刺激前とほぼ同じレベルに戻った。
【００３２】
試験例２
製造例２のシクロヘキセノン長鎖脂肪酸アルコール化合物について、ラット中大脳動脈永久閉塞モデルを用いて、虚血による梗塞巣の面積及び体積に対する影響を検討した。
【００３３】
８週齢のラットの中大脳動脈をバイポーラー凝固装置（MICRO-3D[瑞穂医科電機株式会社]）で電機凝固・閉塞した。製造例２の化合物０．３mg／kg、２mg／kg及び８mg／kgを中大脳動脈閉塞直後に腹腔内投与し、２４時間後、脳を摘出し厚さ２mmのスライスを作製した後、１％２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロリド（ＴＴＣ）で染色し写真撮影を行った。写真を画像解析し梗塞巣の面積を測定した。梗塞巣の体積は次の計算式より算出した。結果を図２に示す。
【００３４】
0004490536.tif 000005
【００３５】
その結果、化合物（１）を投与したものは、梗塞巣の面積及び体積の縮小が認められた。特に中間用量の２mg／kgに著明な脳保護作用が認められた。
【００３６】
試験例３
製造例２のシクロヘキセノン長鎖脂肪酸アルコール化合物について、ラット虚血再灌流モデルを用いて、梗塞巣の面積及び体積に対する影響を検討した。
【００３７】
８週齢のラットの中大脳動脈をナイロン栓で２時間閉塞した後、製造例２の化合物０．５mg／kg、２mg／kg及び８mg／kgを再灌流直前に腹腔内投与し、ナイロン栓を除去して再灌流を行った。閉塞２４時間後、脳を摘出し試験例２と同様の手法で梗塞巣の面積及び体積を測定した。結果を図３に示す。
その結果、化合物（１）を投与したものは、梗塞巣の面積及び体積の縮小が認められた。また、試験例２と同様に、中間用量の２mg／kgに著明な脳保護作用が認められた。
【００３８】
【発明の効果】
シクロヘキセノン長鎖脂肪酸アルコール化合物（１）は、細胞障害の一因である細胞内カルシウムイオンの上昇を抑制又は排出促進し、大脳動脈閉塞あるいは虚血再潅流による梗塞巣を縮小させる脳細胞保護作用を有する。従って、化合物（１）は脳梗塞、脳出血、くも膜下出血又は脳浮腫などの脳血管障害に基づく疾患の治療剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
【図１】細胞内カルシウムイオンの上昇比を示す図である。
【図２】虚血による脳梗塞巣の面積及び体積を示す図である。
【図３】虚血再灌流による脳梗塞巣の面積及び体積を示す図である。
【図１】
0004490536.tif 000007
【図２】
0004490536.tif 000008
【図３】
0004490536.tif 000009