(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0004488663.tif 000009
[式中：
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、各々独立して、水素または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４であり；
ここに、
Ｒ４は、水素であり、および
ｍは０であり；および
Ｒ９は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ１０は、１つまたはそれ以上のアルキルで置換されていてもよいフェニル基であり；
ただし、
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３のうち１つが−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４であり、残りが水素であり、ここにＲ４は、上記と同意義である]
で示される化合物またはその医薬上許容される塩、水和物もしくは溶媒和物、および医薬上許容される担体を含む血小板減少症の治療用医薬組成物。
【請求項２】
化合物が：
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−[（５−ヒドロキシ−３−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アゾ]安息香酸；

４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−４−ヒドロキシ安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；

３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシ安息香酸；
２−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；

４−｛[３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；および
４−｛[１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
から選択されるか、またはその医薬上許容される塩、水和物もしくは溶媒和物 である請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
請求項１記載の 化合物および医薬上許容される担体を含む血小板生成を増加させるための医薬組成物。
【請求項４】
化合物が；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−[（５−ヒドロキシ−３−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アゾ]安息香酸；

４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−４−ヒドロキシ安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；

３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシ安息香酸；
２−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；

４−｛[３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；および
４−｛[１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
から選択されるか、またはその医薬上許容される塩、水和物もしくは溶媒和物である請求項３記載の医薬組成物。
【請求項５】
血小板減少症の治療に使用する医薬の製造における請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物の使用。
【請求項６】
請求項１記載の 化合物および医薬上許容される担体を含むＴＰＯ受容体を活性化するための医薬組成物。
【請求項７】
経口で投与される請求項１記載の医薬組成物。
【請求項８】
非経口で投与される請求項１記載の医薬組成物。
【請求項９】
請求項１記載の 化合物および医薬上許容される担体を含むＴＰＯ受容体を作用化するための医薬組成物。
【請求項１０】
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
４−｛[１−（４−ベンジルオキシフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（４−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（３−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−４−ヒドロキシ安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−トリフルオロメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシ安息香酸；
２−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
５−クロロ−３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸；
４−｛[３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−フェニルル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸メチル；および
４−｛[１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
から選択される 化合物またはその医薬上許容される塩、水和物もしくは溶媒和物 。
【請求項１１】
医薬上許容される担体または希釈剤および有効量の請求項１記載の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩、水和物もしくは溶媒和物 の効果ある量を含む医薬組成物の製造法であって、式（Ｉ）で示される化合物を医薬上許容される担体または希釈剤と一緒にすることを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、トロンボポイエチン（ＴＰＯ）模倣物および血小板形成および巨核細胞形成のプロモーターとしてのその使用に関する。
【０００２】
発明の背景
巨核細胞は、循環血小板の生産に関与する骨髄誘導細胞である。ほとんどの種にて骨髄細胞の０．２５％未満であるが、これらは典型的な骨髄細胞の体積より１０倍を超えて大きい。Kuter et al. Proc. Natl. Acad. Aci. USA 91:11104-11108(1994)参照。巨核細胞は、核内分裂として知られる工程を受け、したがって、これらは、これらの核を複製するが、細胞分裂を受けることができず、したがって、ポリープ細胞を生じさせる。血小板の数の減少に応答して、核内分裂速度は増加し、より高い倍数性の巨核細胞が形成され、巨核細胞の数は３倍にまで増加しうる。Harker J. Clin. Invent. 47: 458-465(1968)参照。対照的に、血小板の数の増加に応答して、核内分裂速度は減少し、より低い倍数性の巨核細胞が形成され、巨核細胞の数は、５０％に減少しうる。
大量の循環血小板が核内分裂速度および骨髄巨核細胞の数を調節することによる正確な生理学的フィードバック機構はわかっていない。現在、このフィードバックループを媒介することに関与する循環血小板形成因子をトロンボポイエチン（ＴＰＯ）であると考えられている。さらに具体的には、ＴＰＯは、血小板減少症を含む状況で主たる体液レギュレーターであることがわかっている。例えば、Metcalf Nature 369:519-520(1994)参照。ＴＰＯは、いくつかの研究で、血小板の数を増加させ、血小板の大きさを増大させ、受容動物の血小板に同位体の組み込みを増加させることが示されている。具体的には、ＴＰＯはいくつかの点：（１）巨核細胞の数および大きさの増大を生じさせる；（２）巨核細胞中のポリープの形態のＤＮＡ含有量の増加を生じさせる；（３）巨核細胞の核内分裂を増加させる；（４）巨核細胞の成熟の増大を生じさせる；および（５）小さなアセチルコリンエステラーゼ陽性細胞の形態で、骨髄細胞中の前駆細胞のパーセントの増加を生じさせる点で巨核細胞形成に影響すると考えられている。
【０００３】
血小板（platelets）（血小板（thrombocytes））は、血餅化に必要であり、それらの数が非常に小さい場合、患者は異常な出血で死の危険性があり、ＴＰＯは、通常、種々の血液疾患、例えば、主に血小板欠損による疾患の診断および治療の両方で適用できる。現在のＴＰＯを用いる臨床試験は、ＴＰＯは患者に安全に投与できることを示している。加えて、最近の研究は、血小板減少症、特に化学療法、放射線療法または癌またはリンパ腫の治療としての骨髄移植から由来の特別な血小板減少症の治療でのＴＰＯ治療の効能の予測のための基盤を提供している。例えば、McDonald (1992) Am. J. Ped. Hematology/Oncology 14: 8-21(1992)参照。
ＴＰＯをコードする遺伝子はクローン化され、特徴付けられている。Kuter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 11104-11108 (1994); Barley et al., Cell 77: 1117-1124 (1994); Kaushansky et al., Nature 369: 568-571 (1994); Wending et al., Nature 369: 571-574 (1994); および Sauvage et al., Nature 369: 533-538 (1994)参照。トロンボポイエチンは、通常のＮ−末端アミノ酸配列を有する、２５ ｋＤａおよび３１ ｋＤａ見かけ分子量を有する、少なくとも２つの形態を有する糖蛋白質である。Bartley, et al., Cell 77: 1117-1124 (1994)参照。トロンボポイエチンが、Ａｒｇ−Ａｒｇ切断可能部位により分離された２つの別個の領域を有することは明らかである。アミノ末端領域は、ヒトおよびマウス中で高度に保存され、エリトロポイエチンおよびインターフェロン−ａおよびインターフェロン−ｂといくらかの相同性を有する。カルボキシ末端領域は、広い種の相違性を示している。
【０００４】
ＤＮＡ配列およびコードされたヒトＴＰＯ受容体（ＴＰＯ−Ｒ；またｃ−ｍｐｌとして知られている）のペプチド配列が記載されている。Vigon et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 5640-5644 (1992)参照。ＴＰＯ−Ｒは、細胞外ドメインの共通する構造設計により特徴付けられるＮ−末端部の保存Ｃ残基および膜貫通型領域に近接したＷＳＸＷＳモチーフを含む、ヘマトポイエチン成長因子受容体科の一員である。Bazan Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 6934-6938 (1990)参照。この受容体が造血において機能的な役割を演じることの証明は、その発現が、マウスの脾臓、骨髄または胎児性肝臓（Souyri et al. Cell 63: 1137-1147 (1190)参照）およびヒトの巨核細胞、血小板およびＣＤ３４＋細胞（Methia et al. Blood 82: 1395-1401 (1993)参照）に限定される観測を含む。さらに、巨核細胞形成の主要なレギュレーターとしてのＴＰＯ−Ｒの証明は、ＴＰＯ−Ｒ ＲＮＡに対してアンチセンスである合成オリゴヌクレオチドに対するＣＤ３４＋細胞の暴露が、赤血球または骨髄コロニーの形成に影響することなしに、巨核細胞コロニーの出現を有意に阻害する、という事実である。何人かの研究者は、核受容体が、Ｇ−ＣＳＦおよびエリトロポイエチンの受容体の状況と類似してホモダイマーとして機能すると仮定している。
血小板減少症を患っている患者の血小板レベルの遅い回復は、重大な問題であり、血小板再生産を促進することができる血液成長因子アゴニストの研究に対して緊急性を付与する。
ＴＰＯ模倣物として作用することにより血小板減少症を治療できる化合物を提供することは価値がある。
本明細書で開示されるように、ある種のヒドロキシ−１−アゾ−ベンゼン誘導体は、意外にも、ＴＰＯ受容体のアゴニストとして有用であり、これは強力なＴＰＯ模倣物であることをが見出された。
【０００５】
発明の概要
本発明は、式（Ｉ）：
【化６】
0004488663.tif 000002
【０００６】
[式中：
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ９は、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、−（ＣＨ２）ｐＯＲ４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、ニトロ、シアノ、ハロゲン、アリール、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ４、シクロアルキル、保護−ＯＨ、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、亜リン酸、スルホン酸、次亜リン酸および−ＳＯ２ＮＲ５Ｒ６から選択される基であり；
ここに、
ｐは０〜６であり；
ｎは０〜２であり；
Ｒ４は、水素、アルキル、シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ１２アリール、置換アルキル、置換シクロアルキルおよび置換Ｃ１−Ｃ１２アリールであり、および
Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、水素、アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、アリールから選択される基であるか、または、Ｒ５およびＲ６は、それらが結合する窒素と一緒になって、酸素および窒素から選択される他のヘテロ原子の１つまでを含む飽和５〜６員環を示し；
ｍは０〜６であり；および
Ｒ１０は、３〜１６個の炭素原子を含み、１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含んでいてもよい環式または多環式芳香環である；ただし、炭素原子が３個である場合、芳香環は、少なくとも２つのヘテロ原子を含み、炭素原子が４個の場合、芳香環は少なくとも１つのヘテロ原子を含み、アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、保護−ＯＨ、およびアルコキシ、アシルオキシ、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリールオキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシおよび保護−ＯＨから成る群から選択される１つまたはそれ以上の置換基に置換されたアルキルから成る群から選択される１つまたはそれ以上の置換基に置換されていてもよい；
ただし、
少なくとも１つのＲ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、スルホン酸、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、テトラゾール、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、亜リン酸または次亜リン酸であり、ここにＲ４、Ｒ５およびＲ６は、上記と同意義である；
ただし、
Ｒ１がカルボン酸である場合；Ｒ、Ｒ２およびＲ３は水素であり；およびＲ９はメチルであり；Ｒ１０は非置換フェニル以外の基である]
で示される化合物またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルに関する。
【０００７】
本発明は、血小板減少症の治療を必要とする対象の血小板減少症の治療方法であって、治療上有効量の式（ＩＩ）：
【化７】
0004488663.tif 000003
【０００８】
[式中：
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、−（ＣＨ２）ｐＯＲ４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、ニトロ、シアノ、ハロゲン、アリール、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ４、シクロアルキル、保護−ＯＨ、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、−ＮＲ５Ｒ６、亜リン酸、スルホン、次亜リン酸、および−ＳＯ２ＮＲ５Ｒ６から選択される基であり、
ここに、
ｐは０〜６であり；
ｎは０〜２であり；
Ｒ４は、水素、アルキル、シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ１２アリール、置換アルキル、置換シクロアルキルおよび置換Ｃ１−Ｃ１２アリールであり、および
Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、水素、アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、アリールから選択される基であり、または、Ｒ５およびＲ６は、それらが結合する窒素と一緒になって、酸素および窒素から選択される他のヘテロ原子を１つまで含む飽和５〜６員環を示し；
ｍは０〜６であり；および
ＡＲは、３〜１６個の炭素原子を含み、１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含んでいてもよい環式または多環式芳香環である；ただし、炭素原子数が３の場合、芳香環は、少なくとも２つのヘテロ原子を含み、および炭素原子数が４の場合、芳香環は、少なくとも１つのヘテロ原子を含み：アルキル、アリール、置換シクロアルキル、置換アリール、アリールオキシ、ヒドロキシ、アルコキシ、シクロアルキル、アシルオキシ、アミノ、Ｎ−アシルアミノ、ニトロ、シアノ、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ７Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ４、保護−ＯＨならびにアルコキシ、アシルオキシ、アリール、置換アリール、アミノ、Ｎ−アシルアミノ、オキソ、ヒドロキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ７Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ４、アリールオキシ、ニトロ、シアノ、ハロゲンおよび置換−ＯＨから成る群から選択される１つまたはそれ以上の置換基で置換されたアルキル、から成る群から選択される１つまたはそれ以上の置換基に置換されていてもよく、
ここに
Ｒ４は、水素、アルキル、シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ１２アリール、置換アルキル、置換シクロアルキルおよび置換Ｃ１−Ｃ１２アリールであり；および
Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ１２アリール、置換シクロアルキル、置換Ｃ１−Ｃ１２アリール、アルキル、またはアルコキシ、アシルオキシ、アリールオキシ、アミノ、Ｎ−アシルアミノ、オキソ、ヒドロキシ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ４、ニトロ、シアノ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ１２アリール、置換Ｃ１−Ｃ１２アリールおよび保護−ＯＨから成る群から選択される１つまたはそれ以上の置換基に置換されたアルキルであり、
または、Ｒ７およびＲ８は、結合する窒素と一緒になって、酸素および窒素から選択される他のヘテロ原子を１つまで含む飽和５〜６員環を示し、
ここにＲ４は、上記と同意義であり、およびｎは、０〜２である]
で示されるＴＰＯ模倣化合物またはその医薬上許容さえる塩、水和物、溶媒和物およびエステルを、上記した対象に投与することを特徴とする方法に関する。
【０００９】
また、本発明は、式（ＩＩ）で示される化合物が、ＴＰＯ受容体のアゴニストとして活性であるという知見に関する。
本発明のさらなる態様において、本発明のＴＰＯ模倣化合物の製造に有用な新規製造法および新規中間体を提供する。
本発明の方法に有用な医薬担体および化合物を含む医薬組成物は、本発明に含まれる。
また、本発明のＴＰＯ模倣化合物とさらなる活性成分との共投与の方法も、本発明に含まれる。
【００１０】
発明の詳細な説明
ＴＰＯ模倣物として活性な本発明の化合物を上記式（Ｉ）により定義する。
本発明の式（Ｉ）で示される化合物の中で好ましいものは、Ｒ１が、カルボン酸またはスルホン酸であり；Ｒ、Ｒ２およびＲ３が、各々独立して、水素、カルボン酸、Ｃ１−Ｃ１２アリール、スルホン酸、テトラゾール、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、ここに、Ｒ５およびＲ６は、上記式（Ｉ）の記載と同意義であり、亜リン酸、次亜リン酸、Ｃ１−６アルコキシ、ニトロ、Ｃ１−６アルキルおよびハロゲンから選択される基であり；ｍが０であり；Ｒ９がＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲンまたはＣ１−Ｃ１２アリールであり；およびＲ１０が、３〜１４個の炭素原子を含み、所望により、１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含んでいてもよく、ただし、炭素原子が３個である場合、芳香環は少なくとも２つのヘテロ原子を含み、炭素原子が４個である場合、芳香環は少なくとも１つのヘテロ原子を含み、所望により１つまたはそれ以上の：アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アリール、置換シクロアルキル、置換Ｃ１−Ｃ１２アリール、アルコキシ、トリフルオロメチル、シクロアルキル、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、ハロゲンおよび保護−ＯＨから成る群から選択される置換基で置換されていてもよい環状または多環式芳香環である；化合物およびその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルである。
【００１１】
本発明の式（Ｉ）で示される化合物の中の特に好ましいものは、Ｒ１がカルボン酸またはスルホン酸であり；Ｒ、Ｒ２およびＲ３が、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルコキシ、テトラゾール、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、ここに、Ｒ５およびＲ６は、上記式（Ｉ）の記載と同意義であり、亜リン酸、次亜リン酸、Ｃ１−６アルキルおよびハロゲンから選択される基であり；ｍが０であり；Ｒ９がＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲンまたはＣ１−Ｃ１２アリールであり；およびＲ１０が、１つまたはそれ以上の：アルキル、置換アルキル、アルコキシ、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシおよび保護−ＯＨから成る群から選択される置換基で置換されたフェニル；である化合物およびその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルである。
本発明の式（Ｉ）で示される化合物の中で最も好ましいものは、Ｒ１がカルボン酸またはスルホン酸であり；Ｒ、Ｒ２およびＲ３が、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルおよびハロゲンから選択される基であり；ｍが０であり；Ｒ９がＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシおよびＲ１０が、１〜３つの：アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、トリフルオロメチルおよびハロゲンから成る群から選択される置換基で置換されたフェニル；である化合物、その医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルである。
【００１２】
本発明の式（Ｉ）で示される化合物の中の好ましいものは；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
４−｛[１−（４−ベンジルオキシフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（４−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（３−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−４−ヒドロキシ安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−トリフルオロメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシ安息香酸；
２−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
５−クロロ−３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸；
３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−フェニルル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸メチル；および
４−｛[１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
およびその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルである。
【００１３】
本発明は、上記式（ＩＩ）により定義されるＴＰＯ模倣化合物の効果ある量を必要とする対象に投与することを特徴とする血小板減少症の治療方法に関する。
式（ＩＩ）で示される化合物の中で好ましいものは、Ｒ１がカルボン酸またはスルホン酸であり；Ｒ、Ｒ２およびＲ３が、各々独立して、水素、カルボン酸、Ｃ１−Ｃ１２アリール、スルホン酸、テトラゾール、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、ここにＲ５およびＲ６は、上記式（ＩＩ）と同意義であり、亜リン酸、次亜リン酸、Ｃ１−６アルコキシ、ニトロ、Ｃ１−６アルキルおよびハロゲンから選択される基であり；ｍが０であり；ＡＲが３〜１４個の炭素原子を含み、所望により、１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含んでいてもよく、ただし、炭素原子が３個の場合、芳香環は少なくとも２つのヘテロ原子を含み、炭素原子が４個の場合、芳香環は少なくとも１つのヘテロ原子を含み、所望により、１つまたはそれ以上の：アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アリール、置換シクロアルキル、置換Ｃ１−Ｃ１２アリール、アリールオキシ、ヒドロキシ、アルコキシ、シクロアルキル、アミノ、ニトロ、シアノ、ハロゲンおよび保護−ＯＨから成る群から選択される置換基で置換されていてもよい環状または多環式芳香環である；化合物およびその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルである。
式（ＩＩ）で示される化合物の中で特に好ましいものは、Ｒ１がカルボン酸またはスルホン酸であり；Ｒ、Ｒ２およびＲ３が、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルコキシ、テトラゾール、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、ここに、Ｒ５およびＲ６は、上記式（ＩＩ）と同意義であり、亜リン酸、次亜リン酸、Ｃ１−６アルキルおよびハロゲンから選択される基であり；ｍが０であり；およびＡＲが、３〜１４個の炭素原子を含み、所望により、１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含んでいてもよく、ただし、炭素原子が３個の場合、芳香環は少なくとも２つのヘテロ原子を含み、炭素原子が４個の場合、芳香環は少なくとも１つのヘテロ原子を含み、所望により、１つまたはそれ以上の：アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アリール、置換Ｃ１−Ｃ１２アリール、アリールオキシ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、ハロゲンおよび保護−ＯＨから成る群から選択される置換基で置換されていてもよい環状または多環式芳香環である；化合物およびその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルである。
【００１４】
式（ＩＩ）で示される化合物の最も好ましいものは、Ｒ１が、カルボン酸またはスルホン酸であり；Ｒ、Ｒ２およびＲ３が、各々独立して、水素、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルおよびハロゲンから選択される基であり；ｍが０であり；およびＡＲが、１〜３つの：アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アリール、置換Ｃ１−Ｃ１２アリール、ヒドロキシ、アルコキシおよびハロゲンから成る群から選択される置換基で置換されていてもよいナフタレン、フェニルおよびピラゾールから選択される基である；化合物およびその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルである。
【００１５】
式（ＩＩ）で示される化合物の中で好ましいものは；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−[（５−ヒドロキシ−３−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アゾ]安息香酸；
４−｛[１−（４−ベンジルオキシフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（４−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（３−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−４−ヒドロキシ安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−トリフルオロメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシ安息香酸；
２−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
５−クロロ−３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸；
３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸メチル；および
４−｛[１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
およびその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルである。
【００１６】
式（Ｉ）で示される化合物は、本発明の医薬組成物に含まれ、本発明の方法で使用される。
式（ＩＩ）で示される化合物は、本発明の医薬組成物に含まれ、本発明の方法で使用される。
本明細書で使用される用語「保護ヒドロキシ」または「保護−ＯＨ」は、Theodora W.による「Protective Groups In Organic Synthesis」Greene, Wiley-Interscience, 1981, New Yorkに記載されているような技術の従来の保護基により保護されうるアルコール性またはカルボン酸−ＯＨ基を意味する。また、保護ヒドロキシ基を含む化合物は、本発明の医薬活性な化合物の製造における中間体として有用である。
本明細書で使用される用語「アリール」は、別に定義されない限り、１〜１４個の炭素原子を含み、所望により、１〜５個のヘテロ原子を含んでいてもよく、ただし、炭素原子が１個の場合芳香環は少なくとも４つのヘテロ原子を含み、炭素原子が２個の場合芳香環は少なくとも３つのヘテロ原子を含み、炭素原子が３個の場合芳香環は少なくとも２つのヘテロ原子を含み、炭素原子が４個の場合芳香環は少なくとも１つのヘテロ原子を含む環状または多環式芳香環を意味する。
本明細書で使用される用語「Ｃ１−Ｃ１２アリール」は、別に定義されない限り、フェニル、ナフタレン、３，４−メチレンジオキシフェニル、ピリジン、ビフェニル、キノリン、ピリミジン、キナゾリン、チオフェン、フラン、ピロール、ピラゾール、イミダゾールおよびテトラゾールを意味する。
【００１７】
本明細書で使用される用語「置換された」は、別に定義されない限り、対象化学基が、１つまたはそれ以上の：ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アシルオキシ、アルキル、アミノ、Ｎ−アシルアミノ、ヒドロキシ、−（ＣＨ２）ｇＣ（Ｏ）ＯＲ１１、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ１２、ニトロ、シアノ、ハロゲン、トリフルオロメチルおよび保護−ＯＨから成る群より選択され、ここにｇは０〜６であり、Ｒ１１は水素またはアルキルであり、ｎは０〜２であり、およびＲ１２は水素またはアルキルである、置換基を有することを意味する。
本明細書で使用される用語「アルコキシ」は、アルキルが本明細書に記載されたものであり、−ＯＣＨ３および−ＯＣ（ＣＨ３）２ＣＨ３を含む−Ｏアルキルを意味する。
本明細書で使用される用語「シクロアルキル」は、別に定義されない限り、非芳香族、不飽和または飽和、環状または多環式Ｃ３−Ｃ１２を意味する。
本明細書で使用されるシクロアルキルおよび置換シクロアルキル置換基の例は：シクロヘキシル、４−ヒドロキシ−シクロヘキシル、２−エチルシクロヘキシル、プロピル４−メトキシシクロヘキシル、４−メトキシシクロヘキシル、４−カルボキシシクロヘキシルおよびシクロペンチルを含む。
本明細書で使用される用語「アシルオキシ」は、アルキルが本明細書に記載されているものである−ＯＣ（Ｏ）アルキルを意味する。本明細書で使用されるアシルオキシ置換基の例は：−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ３、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ３）２および−ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）３ＣＨ３を含む。
本明細書で使用される用語「Ｎ−アシルアミノ」は、アルキルが本明細書に記載されているものである−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）アルキルである。本明細書で使用されるＮ−アシルアミノ置換基の例は：Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ３）２および−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）３ＣＨ３を含む。
本明細書で使用される用語「アリールオキシ」は、Ｃ６−Ｃ１２アリールが、所望により１つまたはそれ以上の：アルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、トリフルオロメチル、アシルオキシ、アミノ、Ｎ−アシルアミノ、ヒドロキシ、−（ＣＨ２）ｇＣ（Ｏ）ＯＲ１１、−Ｓ（Ｏ）ｎＲ１２、ニトロ、シアノ、ハロゲンおよび保護−ＯＨ、ここにｇは０〜６であり、Ｒ１１は水素またはアルキルであり、ｎは０〜２であり、およびＲ１２は水素またはアルキルである、から成る群から選択される置換基により置換されていてもよいフェニル、ナフチル、３，４−メチレンジオキシフェニル、ピリジルまたはビフェニルである−ＯＣ６−Ｃ１２アリールを意味する。本明細書で使用されるアリールオキシ置換基の例は：フェノキシ、４−フルオロフェニルオキシおよびビフェニルオキシを含む。
【００１８】
本明細書で使用される用語「ヘテロ原子」は、酸素、窒素または硫黄を意味する。
本明細書で使用される用語「ハロゲン」は、臭素、ヨウ素、塩素、およびフッ素から選択される置換基を意味する。
本明細書で使用される用語「アルキル」およびその誘導語および全ての炭素鎖中のものは、直鎖または分枝鎖、飽和または不飽和の炭化水素鎖を意味し、別に定義されない限り、炭素鎖は、１〜１２個の炭素原子を含むことを意味する。本明細書で使用されるアルキル置換基の例は：−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）３、−（ＣＨ２）３−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ２および−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ３を含む。
本明細書で使用される用語「治療」およびその誘導体は、予防的または治療的療法を意味する。
限定するものではないが、特許および特許出願を含み、この明細書に述べられる全ての出版物は、全て出典明示し本明細書に組み入れる。
【００１９】
式（ＩＩ）で示される化合物は、本発明の医薬組成物に含まれ、本発明の方法で使用される。−ＣＯＯＨまたは−ＯＨ基が存在する場合、医薬上許容されるエステルが使用でき、例えば、−ＣＯＯＨに関しては、メチル、エチル、ピバロイルオキシメチル等および−ＯＨに関しては、酢酸塩、マレイン酸塩等が使用でき、これらのエステルは、遊離の維持またはプロドラッグ形成としての使用に対して、溶解度または加水分解特性の修飾に関して、当業者に公知のものである。
式（ＩＩ）で示される新規化合物は、下記のスキームＩおよびＩＩに示されるように、または類似の方法で製造され、ここに、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ＡＲおよびｍは、式（ＩＩ）の定義と同意義である；ただし、「Ｒ」およびｍ置換基およびＡＲは、スキームＩおよびＩＩの工程を無効にするいずれのそのような置換基をも含まない。全ての出発物質は、市販品であるか、市販品である出発物質から当業者により容易に製造できる。
【００２０】
スキーム１
【化８】
0004488663.tif 000004
ｉ）４−アミノ−１−ベンゼンスルホン酸、ＮａＮＯ２、ＮａＨＣＯ３、水；ｉｉ）ＮａＨＳＯ３、水；ｉｉｉ）ＮａＮＯ２、ＨＣｌ、水；ｉｖ）ＡＲ、ＮａＨＣＯ３、水
【００２１】
スキームＩは、式（ＩＩ）で示される化合物の形成の要点を述べている。スキームＩで使用されるジアゾ化合物（ｂ）は、３−ヒドロキシベンゼン化合物（ａ）から、適当な塩基、好ましくは炭酸水素ナトリウム存在下で、（ａ）を硫酸４−ベンゼンジアゾニウムで処理することにより製造される。化合物（ｂ）の水中の亜硫酸水素ナトリウムでの還元で、２−アミノヒドロキシベンゼン化合物（ｃ）を得た。化合物（ｃ）は、亜硝酸ナトリウムおよび適当な酸、例えば、硝酸、硫酸、または好ましくは塩酸と、適当な水性溶媒、例えば、水または好ましくはエタノール−水混合物中での反応によりジアゾ化され、ジアゾニウム化合物（ｄ）を生成する。化合物（ｅ）は、塩基、好ましくは炭酸水素ナトリウムまたは酸、好ましくは塩酸の存在下で、化合物（ｄ）と、適当なアリール種とのカップリング反応により製造される。
【００２２】
スキームＩＩ
【化９】
0004488663.tif 000005
ｉ）ＮａＨＮＯ２、ＨＣｌ、水ついでＳｎＣｌ２、水；ｉｉ）ＡｃＯＨ、加熱
【００２３】
スキームＩＩは、スキームＩで使用されるピラゾールの形成の要点を述べている。４−メチルアニリンのようなアミン化合物（ｆ）は、適当な水性溶媒系、例えば、水またはエタノール−水混合物中で、亜硝酸ナトリウムおよび適当な酸、例えば塩酸、硝酸または硫酸の作用によりジアゾ化され、ついで、系内で、塩化スズで還元され、ヒドラジン化合物（ｇ）を得る。ついで、ヒドラジンを、ベータ−ケトエステル、例えばアセト酢酸エチル化合物（ｈ）と、適当な溶媒、例えば酢酸またはエタノール中、適当な温度、典型的には０〜１００℃で縮合させ、対応するピラゾール、本明細書記載の化合物（Ｉ）を得る。
本明細書記載のような、血小板減少症の治療は、血小板の生成の増加により達成される。
本明細書で使用される用語「共投与」およびその誘導体は、本明細書記載のＴＰＯ模倣化合物および化学療法誘導血小板減少症および骨髄移植を含む血小板減少症および血小板生成の低下を伴う他の症状の治療で知られているさらなる活性成分または複数の成分の同時投与または個々の逐次投与のいずれかを意味する。好ましくは、投与が同時でない場合、化合物は、互いに接近した時間で投与される。さらに、化合物が同一の剤形で投与されるかどうかは問題ではなく、例えば、ある化合物は、局所投与でき、他の化合物は経口投与できる
本発明の医薬活性化合物は、ＴＰＯ模倣物として活性であるので、これらは、血小板減少症および他の血小板生成の低下を伴う症状の治療において、治療的有用性を示す。
【００２４】
ＴＰＯ模倣物としての効力の決定において、以下の分析を使用した。
【００２５】
ルシフェラーゼ分析
本発明の化合物を、Lamb, et al., Nucleic Acids Research 23: 3283-3289(1995)およびSeidel, et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA 92: 3041-3045(1995)記載のようにルシフェラーゼ分析で、そこで利用されているＨｅｐＧ２細胞の代わりに、ＴＰＯ−反応ＢａＦ３細胞系（Vigon et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1992, 89, 5640-5644）を用いることにより、ＴＰＯ受容体模倣物としての能力に関して試験した。マウスＢａＦ３細胞は、ＴＰＯ受容体を発現し、一次的ネズミおよびヒト骨髄細胞に観察されるＳＴＡＴ（転写のトランスデューサーアクチベータ）活性の型に厳密に適合した。
また、本発明の最も好ましい化合物のいつくかは、インビトロでのネズミ３２Ｄ−ｍｐｌ細胞系（Bartley, T. D. et al., Cell, 1994, 77, 1117-1124）を使用する増殖分析で活性であった。３２Ｄ−ｍｐｌ細胞は、Ｔｐｏ−Ｒを発現し、その生存時間は、ＴＰＯの存在に依存している。また、同様に、本発明の最も好ましい化合物のいくつかは、ヒト骨髄細胞から由来の巨核細胞の成熟を促進することに陽性であった。この分析において、精製されたヒトＣＤ３４＋前駆細胞は、液体培地中、テスト化合物と一緒に、１０日間インキュベートされ、ついで、膜貫通型糖蛋白ＣＤ４１（ｇｐＩＩｂ）、巨核細胞マーカーを発現する細胞の数を、フロー・サイトメトリー（Cwirla, S. E. et al Science, 1997, 276, 1696-1699参照）により測定した。
【００２６】
本発明の範囲中の医薬活性化合物は、これを必要とするヒトを含む哺乳類で、ＴＰＯ模倣物として有用である。
本発明の範囲の好ましい化合物のいくつかは、ルシフェラーゼ分析において、０．１〜１０μＭの濃度で、約４％〜１００％の対照の活性化を示した。また、本発明の好ましい化合物は、０．１〜１００μＭの濃度で、３２Ｄ−ｍｐｌ細胞の増殖を促進した。また、本発明の好ましい化合物は、ＣＤ４１巨核細胞分析において、０．１〜３０μＭで、活性であることが示された。
したがって、本発明は、血小板減少症および血小板の生成の低下を伴う症状の治療方法であって、上記式（ＩＩ）で示される化合物およびその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびエステルを、血小板生成を亢進するのに効果的な量にて投与することを特徴とする方法を提供する。また、式（ＩＩ）で示される化合物は、ＴＰＯ模倣物として作用するその能力が証明されたので、上記の疾患状態の治療方法を提供する。薬剤は、いずれかの従来の投与経路、限定するものではないが、静脈内、筋肉内、経口、皮下、皮内および非経口を含む経路によりそれを必要とする患者に投与することができる。
【００２７】
本発明の医薬活性化合物は、カプセル、錠剤または注入剤の形態のような従来の剤形に組み入れられる。固体または液体医薬担体が使用される。固体担体は、スターチ、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクシン、アカシア、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸を含む。液体担体は、シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、生理食塩水および水を含む。同様に、担体または希釈剤は、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルのような放出持続物質を単独またはワックスと共に含んでいてもよい。固体担体の量は様々であるが、好ましくは、投与ユニット当たり約２５ｍｇ〜約１ｇである。液体担体が使用される場合、製剤は、シロップ、エリキシル、乳濁液、ソフトゼラチンカプセル、アンプルのような滅菌注入液体または水性または非水性液体懸濁液の形態である。
医薬製剤は、混合、粉砕および圧搾、錠剤の形態に必要とされる場合、混合、充填および成分の溶解を含む薬化学の従来の技術に従って製造され、必要に応じて、所望する経口または非経口の生成物を得る。
【００２８】
上記の医薬製剤ユニット中の本発明の医薬活性な化合物の投与量は、効果があり、非毒性の量であり、好ましくは、０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、０．００１〜５０ｍｇ／ｋｇの活性化合物の範囲から選択される。ＴＰＯ模倣物を必要とするヒト患者の治療の場合、選択された投与量は、好ましくは１日１〜６回、経口または非経口で投与される。非経口投与の好ましい形態は、注入および継続的な注入による局所、直腸、経皮投与を含む。ヒト投与用の経口投与量は、好ましくは０．０５〜３５００ｍｇの活性化合物を含む。より少ない投与量の経口投与が好ましい。しかし、また、高投与量での非経口投与も、患者にとって安全および便宜的に使用できる。
最適用量は、当業者が容易に決定でき、使用する特定のＴＰＯ模倣物、製剤の強度、投与方法および病状の進行によって変化する。患者の年齢、体重、食事および投与回数を含む、治療される特定の患者に依存する付加的な因子は、投与量を調整する必要性をもたらす。
【００２９】
本発明のＴＰＯ模倣物の活性をヒトを含む哺乳類に誘導する方法は、その活性を必要とする対象に、本発明の医薬活性化合物の効果あるＴＰＯ模倣物量を投与することを特徴とする。
また、本発明は、ＴＰＯ模倣物としての使用用の医薬の製造における式（ＩＩ）で示される化合物の使用を提供する。
また、本発明は、治療に使用する医薬の製造における式（ＩＩ）で示される化合物の使用を提供する。
また、本発明は、血小板生成の向上に使用する医薬の製造における式（ＩＩ）で示される化合物の使用を提供する。
また、本発明は、血小板減少症に使用する医薬の製造における式（ＩＩ）で示される化合物の使用を提供する。
また、本発明は、式（ＩＩ）で示される化合物および医薬上許容される担体を含むＴＰＯ模倣物として使用する医薬組成物を提供する。
また、本発明は、式（ＩＩ）で示される化合物および医薬上許容される担体を含む、血小板減少症の治療に使用する医薬組成物を提供する。
また、本発明は、式（ＩＩ）で示される化合物および医薬上許容される担体を含む血小板生成の向上に使用する医薬組成物を提供する。
本発明の化合物を本発明に従って投与する場合、受け入れられない毒性効果は無いことが予想される。
加えて、本発明の医薬活性化合物は、さらなる活性成分、例えば、化学療法誘導血小板減少症および骨髄移植を含む血小板減少症および血小板の生成の低下を伴う他の症状の治療に知られている他の化合物、またはＴＰＯ模倣物と組み合わせて使用する場合、有用性を有することが知られている化合物と共に共投与できる。
【００３０】
予期される等価性−また、式（Ｉ）および（ＩＩ）で示される化合物が、２つの窒素原子の間にある二重結合が、下方の窒素原子およびＡＲ置換基の間に存在する互変異性形態で存在できることは当業者により理解できる。式（Ｉ）および（ＩＩ）で示される化合物の互変異性形態を、以下の式（ＩＩＩ）：
【００３１】
【化１０】
0004488663.tif 000006
【００３２】
[式中、「Ｒ」は、上記の定義と同意義である]
により例示する。全てのこのような化合物は、本発明の範囲に含まれ、本質的に、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物の定義に含まれる。
さらに工夫することなく、当業者は、先の記載を使用して、本発明を最大限利用できる。したがって、以下の実施例は、単に説明として解釈され、何ら本発明の範囲を限定するものではない。
【００３３】
実験の詳細
実施例１
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸の製造；
１Ｎの水性塩酸（１５．０ｍＬ）中の４−アミノ−３−ヒドロキシ安息香酸（０．７７ｇ、０．００５ｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、水（５．０ｍＬ）中の亜硝酸ナトリウム（０．３８ｇ；０．００５５ｍｏｌ）の溶液でゆっくりと処理した。添加後、溶液を０℃で１０分間撹拌した。ついで、３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オン（０．９４ｇ；０．００５ｍｏｌ）を一度に加えた。エタノール（１５．０ｍＬ）を加え、ついで、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を、溶液のｐＨが８になるまで（約１０ｍＬ必要）加えた。ついで、赤色の溶液を室温で１６時間撹拌した。
混合物を濾過し、固体を１０％の水酸化ナトリウム水溶液（５０．０ｍＬ）に溶解した。赤色の溶液を酢酸エチルで２度抽出し、ついで、６Ｎの水性塩酸で酸性化し、濾過し、赤色固体として標題化合物（１．６７ｇ；９５％）を得た。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３５１[Ｍ−Ｈ]
【００３４】
実施例２
３−ヒドロキシ−４−[（５−ヒドロキシ−３−メチル−１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アゾ]安息香酸の製造；
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに３−メチル−１−フェニル−３−ピラゾリン−５−オンを用いることを除いて、実施例１の方法に従って、標題化合物を赤色固体として製造した。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３５１[Ｍ−Ｈ]
【００３５】
実施例３
４−｛[１−（４−ベンジルオキシフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸の製造；
ａ）４−ベンジルオキシフェニルヒドラジン
濃塩酸（４０．０ｍＬ）中の４−ベンジルオキシアニリン塩酸塩（１１．３ｇ；０．０４８ｍｏｌｅ）の溶液を０℃に冷却し、ついで、水（２０．０ｍＬ）中の亜硝酸ナトリウム（３．２８ｇ；０．０４８ｍｏｌｅ）の溶液を滴下して処理した。混合物を０℃でさらに１０分間撹拌した。ついで、濃塩酸（４０．０ｍＬ）中の二塩化スズ水和物（４０．０ｇ；０．１８ｍｏｌｅ）の冷（−１０℃）溶液に注いだ。混合物を室温に温まるまで１時間撹拌しながら放置した。
混合物を１０％の水酸化ナトリウム水溶液で塩基性化し、酢酸エチル（１Ｌ）を加え、混合物を濾過し望ましくないスズ残渣を除去した。ついで、有機層を乾燥し、蒸発し、黄色の固体として標題化合物（６．９ｇ；６７％）を得た。
融点１０５〜１０７℃
ｂ）１−（４−ベンジルオキシフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オン
氷酢酸（５０．０ｍＬ）中の実施例３ａ）の化合物（２．６ｇ；０．０１２ｍｏｌ）およびアセト酢酸エチル（１．６０ｍＬ；０．０１２ｍｏｌ）の溶液を撹拌し、１００℃で２４時間加熱した。溶媒を蒸発し、生成物をクロマトグラフィー（シリカゲル、５０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、標題化合物（２．０ｇ；６０％）を製造した。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ２８１[Ｍ＋Ｈ]
【００３６】
ｃ）４−｛[１−（４−ベンジルオキシフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（４−ベンジルオキシフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オンを用いることを除いて、実施例１の方法に従って、ついで、クロマトグラフィー（シリカゲル、１０％メタノール／酢酸エチル）により精製し、標題化合物を、茶色の粉末（１９％）として製造した。
融点＝２５８〜２６０℃（分解）
元素分析（Ｃ２４Ｈ２０Ｎ４Ｏ５・ＣＨ３ＯＨ）として、
計算値：Ｃ、６３．００；Ｈ、５．０８；Ｎ、１１．７６
実測地：Ｃ、６３．１７；Ｈ、４．６４；Ｎ、１１．４７
【００３７】
実施例４
４−｛[１−（４−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ-ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸の製造；
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（４−クロロフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オンを用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を赤色固体として製造した。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３７１、３７３[Ｍ−Ｈ]
【００３８】
実施例５
４−｛[１−（３−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸の製造；
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（３−クロロフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オンを用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を赤色固体として製造した。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３７１、３７３[Ｍ−Ｈ]
【００３９】
実施例６
４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸の製造；
ａ）１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−フェニル−３−ピラゾリン−５−オン
４−ベンジルオキシフェニルヒドラジンの代わりに３，４−ジメチルフェニルヒドラジンを用いることを除き、実施例３ｂ）の方法に従って、標題化合物を製造した（１６．０ｇ；６１％）。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ２６４[Ｍ＋Ｈ]
ｂ）４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オンを用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を橙色固体（１．５ｇ；８２％）として製造した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ６−ＤＭＳＯ）δ13.5 br s, 1H), 11.0 (s, 1H), 7.70 (m, 2H), 7.61 (dd, J = 8.2 および 2.1 Hz, 1H), 7.53 (m, 2H), 8.20 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.22 (s, 3H)
【００４０】
実施例７
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−４−ヒドロキシ安息香酸の製造；
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オンを、および４−アミノ−３−ヒドロキシ安息香酸の代わりに３−アミノ−４−ヒドロキシ安息香酸を用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を橙色固体（１．５ｇ；８２％）として製造した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ６−ＤＭＳＯ）δ13.5 br s, 1H), 11.7 (s, 1H), 8.13 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.69-7.59 (m, 3H), 7.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.20 (s, 3H)
【００４１】
実施例８
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸
ａ）１−（３−メチルフェニル）−３−フェニル−３−ピラゾリン−５−オン
４−ベンジルオキシフェニルヒドラジンの代わりに３−ジメチルフェニルヒドラジンを用いることを除き、実施例３ｂ）の方法に従って、標題化合物を製造した（２．８ｇ；９０％）。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ１８９[Ｍ＋Ｈ]
ｂ）３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（３−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（３−メチルフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オンを用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を橙色固体（０．８７ｇ；５０％）として製造した。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３５３[Ｍ＋Ｈ]
【００４２】
実施例９
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−トリフルオロメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸の製造；
ａ）３−フェニル−１−（４−トリフルオロメチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オン
４−ベンジルオキシフェニルヒドラジンの代わりに４−トリフルオロメチルフェニルヒドラジンを用いることを除き、実施例３ｂ）の方法に従って、標題化合物を製造した（３．３ｇ；９２％）。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ２４３[Ｍ＋Ｈ]
ｂ）３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−トリフルオロメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに３−フェニル−１−（４−トリフルオロメチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンを用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を橙色固体（０．８６ｇ；３５％）として製造した。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ４０７[Ｍ＋Ｈ]
【００４３】
実施例１０
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシ安息香酸の製造；
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オンを、４−アミノ−３−ヒドロキシ安息香酸の代わりに３−アミノ２−ヒドロキシ安息香酸を用いることを除いて、実施例１の方法に従って、標題化合物を橙色固体（０．４０ｇ；３２％）として製造した。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ６−ＤＭＳＯ）δ7.83 (m, 2H), 7.59 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.60 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H)
【００４４】
実施例１１
５−クロロ−３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸の製造；
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−メチル３−ピラゾリン−５−オンを、および４−アミノ−３−ヒドロキシ安息香酸の代わりに３−アミノ−５−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホン酸を用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を赤色固体（０．７４ｇ、３４％）として製造した。
融点２４０℃（分解）
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ４３７、４３５[Ｍ−Ｈ]
【００４５】
実施例１２
４−｛[３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸の製造；
ａ）３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オン
４−ベンジルオキシフェニルヒドラジンの代わりに３，４−ジメチルフェニルヒドラジンを、およびアセト酢酸エチルの代わりにｔｅｒｔブチル酢酸エチルを用いることを除き、実施例３ｂ）の方法に従って、標題化合物を製造した（２５．１ｇ；９９％）。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ２４５[Ｍ＋Ｈ]
ｂ）４−｛[３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに３−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンを用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を製造した（０．７１ｇ；７０％）。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ４０９[Ｍ＋Ｈ]
【００４６】
実施例１３
４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸の製造；
ａ）１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−フェニル−３−ピラゾリン−５−オン
４−ベンジルオキシフェニルヒドラジンの代わりに３，４−ジメチルフェニルヒドラジンを、およびアセト酢酸エチルの代わりにベンジル酢酸エチルを用いることを除き、実施例３ｂ）の方法に従って、標題化合物を製造した（１６．０ｇ；６１％）。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ２６５[Ｍ＋Ｈ]
ｂ）４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−フェニル−３−ピラゾリン−５−オンを用いるを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を赤色固体（１．０ｇ；７８％）として製造した。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ４２９[Ｍ＋Ｈ]
【００４７】
実施例１４
４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシベンゾエートの製造；
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（３，４−ジメチルフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オンを、および４−アミノ−３−ヒドロキシ安息香酸の代わりに４−アミノ−３−ヒドロキシベンゾエートを用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を赤色固体（０．０５９ｇ、１０％）として製造した。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３６７[Ｍ＋Ｈ]
【００４８】
実施例１５
４−｛[１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシベンゾエートの製造；
３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−３−ピラゾリン−５−オンの代わりに１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−３−メチル−３−ピラゾリン−５−オンを用いることを除き、実施例１の方法に従って、標題化合物を橙色固体（０．８９５ｇ、４５％）として製造した。
ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ３９５[Ｍ＋Ｈ]
元素分析（Ｃ２１Ｈ２２Ｎ４Ｏ４として）
計算値：Ｃ、６３．９５；Ｈ、５．６２；Ｎ、１４．２０
実測値：Ｃ、６３．６５；Ｈ、５．７５；Ｎ、１３．８３
【００４９】
実施例１６−カプセル組成物
本発明のＴＰＯ受容体のアゴニストを投与するための経口剤形を、標準的な２つ部を接合したハードゼラチンカプセルに下記の表Ｉに示される比率で成分を充填することにより製造した。
【００５０】
【表１】
0004488663.tif 000007
【００５１】
実施例１７−注射可能非経口組成物
本発明のＴＰＯ受容体のアゴニストを投与するための注射可能な剤形を、１．５重量％の４−｛[１−（４−ベンジルオキシフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸、１０容積％の水中のプロピレングリコール中のモノナトリウム塩（化合物２）を撹拌することにより製造した。
【００５２】
実施例１８−錠剤組成物
スクロース、硫酸カルシウム二水和物および本発明のＴＰＯ受容体のアゴニストを、下記の表ＩＩに示すように混合し、１０％ゼラチン溶液で示される比率で粒化した。湿った顆粒をスクリーンし、乾燥し、スターチ、タルクおよびステアリン酸と混合し、スクリーンし、錠剤に圧搾した。
【００５３】
【表２】
0004488663.tif 000008
【００５４】
本発明の化合物の中で好ましいものは以下のものである；
３−ヒドロキシ−４−｛[５−ヒドロキシ−３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝安息香酸；
４−｛[１−（４−ベンジルオキシフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
４−｛[１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸；
３−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−２−ヒドロキシ安息香酸；および
４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸。
化合物４−｛[１−（３，４−ジメチルフェニル）−５−ヒドロキシ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル]アゾ｝−３−ヒドロキシ安息香酸は、上記ルシフェラーゼ分析で、ＥＣ５０＝１．８μＭ、５０％ＴＰＯの活性を示した。
本発明の好ましい具体例を上記で説明したが、本発明は、本明細書に開示の説明そのものに制限されず、請求項の範囲内とするあらゆる修飾も保持することが理解される。