(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
0004553488.tif 000009
〔式中Ｒは下記基（１ａ）、（１ｂ）又は基（１ｃ）を示す〕
【化２】
0004553488.tif 000010
で表わされるカルボキシメチルガラクトース誘導体又はその塩。
【請求項２】
Ｒが基（１ａ）である請求項１に記載のカルボキシメチルガラクトース誘導体又はその塩。
【請求項３】
Ｒが基（１ｂ）である請求項１に記載のカルボキシメチルガラクトース誘導体又はその塩。
【請求項４】
Ｒが基（１ｃ）である請求項１に記載のカルボキシメチルガラクトース誘導体又はその塩。
【請求項５】
有効成分が請求項４に記載のカルボキシメチルガラクトース誘導体及びその塩からなる群から選ばれる少なくとも１種を有効成分として、製剤学的に許容される担体と共に含有する薬理組成物。
【請求項６】
セレクチンの細胞接着性抑制剤である請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
癌転移予防剤である請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
消炎剤である請求項５に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
技  術  分  野
本発明はカルボキシメチルガラクトース誘導体、更に詳しくは、細胞接着分子であるセレクチンに結合するリガンドとして作用し、セレクチンの関与する炎症、癌転移等の各種疾患の治療および予防に有用な、カルボキシメチルガラクトース誘導体に関する。
【０００２】
背  景  技  術
セレクチン、即ち、Ｅ−セレクチン（ＥＬＡＭ−１）、Ｐ−セレクチン（ＧＭＰ−１４０）およびＬ−セレクチン（ＬＥＣＡＭ−１）と、糖鎖との相互作用が各種の疾患に関わることが注目されている。上記ＬＥＣＡＭ−１は主として白血球に発現される接着分子であり、ＥＬＡＭ−１は主に血管内皮細胞上に発現される細胞接着分子であり、ＧＭＰ−１４０は主に血小板細胞上に発現される接着分子である。
【０００３】
癌細胞や脊椎細胞には、分子中にＬ−フコースを有するシアリルルイス−ａ（ＳＬｅａ）又はシアリルルイス−ｘ（ＳＬｅｘ）が表出しており、之等はインターロイキンー１（ＩＬ−１）や腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）の刺激により血管内皮細胞表面に出現する白血球接着因子（Ｌ−又はＥ−セレクチン）により特異的に認識される（例えばサイエンス、２５８巻、９６４−９６９頁、１９９２年）。言い換えれば、ＳＬｅａ又はＳＬｅｘを細胞表層に表現する癌細胞や骨髄細胞は血管内皮細胞に接着する。
【０００４】
一方、トロンビンにより活性化されたヒト血小板や血管内皮細胞は、Ｐ−セレクチンを発現し、これもＳＬｅａ又はＳＬｅｘを強く認識し、これらの糖鎖を細胞表層に表現する好中球や単球と接着する（サイエンス、２５８巻、９６４−９６９頁、１９９２年）。これらの現象は、炎症の進行、ガンの転移、血栓その他循環器の病気と関係があると考えられる。
【０００５】
従って、これらのセレクチンとＳＬｅａやＳＬｅｘとの結合をブロックして、その癌細胞、白血球細胞、血小板への接着を阻止することにより、セレクチンの関与する炎症、癌転移等を抑える種々の方策が提案されている（例えば米国特許第５８１７７４２号明細書、同第５６４８３４４号明細書、同第５８３７６８９号明細書、欧州特許出願公開（ＷＯ）第９２０２５２７号、同第９９２９７０５号、同第９７３１００７号、同第９７３１６２５号等参照）。特に複雑な疾患に対しては、各種のセレクチンに結合して細胞接着を抑えることのできるブロッカーが望ましいと考えられる。
【０００６】
ＥＬＡＭ−１のリガンドとして、ＳＬｅｘが報告されて以来、いくつかのＳＬｅｘ誘導体が報告されている。これらは何れも、酸性糖鎖であるシアル酸基を有している。酸性糖鎖シアル酸基に代わる基としてカルボキシメチル基又はスルホン酸エステル残基を有するオリゴ糖からなるＳＬｅｘ誘導体も数多く報告されている（例えば、カルボハイドレートリサーチ、３０３巻、１３１−１３３頁、１９９７年および特開平８−９９９８９号公報参照）。
【０００７】
しかしながら、もう一方のカルボキシメチル基を有するオリゴ糖からなるＳＬｅａに関する誘導体およびスルフォガラクトシル基に代わる置換基としてカルボキシメチルガラクトシル基を有するスルファチド誘導体の報告は、皆無である。
【０００８】
ＳＬｅｘおよびＳＬｅａがＥＬＡＭ−１、ＧＭＰ−１４０およびＬＥＣＡＭ−１に共通するリガンドであるのに対して、スルファチドもＧＭＰ−１４０およびＬＥＣＡＭ−１に選択的であり、それらのリガンドであり、抗炎症作用などを奏することが報告されいる（インターナショナル イミュノロジー、８巻、１９０５−１９１３頁、１９９６年）。
【０００９】
本発明の目的は、セレクチンファミリーに属する各種セレクチンとの結合性を有するリガンドとして機能するＳＬｅａの誘導体、特に、そのシアル酸部分をカルボキシメチルガラクトースに代えた新規な糖脂質誘導体およびスルフォガラクトシル基に代わる置換基としてカルボキシメチルガラクトシル基を有する新規なスルファチド誘導体を提供することにある。
【００１０】
本発明者等は、セレクチンのリガンドとして機能するＳＬｅａのアナログ（特によりセレクチンと強く接着してその細胞接着性をブロックするもの）を提供することを目的として、種々検討した結果、該ＳＬｅａのシアル酸部分をカルボキシメチルガラクトースに置換させて得られる新規な糖脂質誘導体および同様のカルボキシメチルガラクシル基を有する新規なスルファチド誘導体の合成に成功し、これらが上記目的に合致することを見いだした。本発明はこの知見に基づいて完成されたものである。
【００１１】
発  明  の  開  示
本発明によれば、一般式（１）
【００１２】
【化１】
0004553488.tif 000002
【００１３】
〔式中Ｒは下記基（１ａ）、（１ｂ）又は基（１ｃ）を示す〕
【００１４】
【化２】
0004553488.tif 000003
【００１５】
で表わされるカルボキシメチルガラクトース誘導体又はその塩が提供される。
【００１６】
本発明化合物は、ＥＬＡＭ−１、ＧＭＰ−１４０およびＬＥＣＡＭ−１のセレクチンに対して反応性を有し、これらセレクチンに結合するリガンドとして、これらセレクチンの細胞接着を抑制し、之等セレクチンの関与する各種疾患の治療および予防に、例えば各種炎症の抑制、癌の転移抑制等に有用である。
【００１７】
以下、本発明化合物の製造につき詳述する。一般式（１）で表わされる本発明化合物は、各種方法に従って製造できる。特に、以下の反応式（Ｉ）〜（IV）に示す方法に従って容易に製造できる。なお、以下の反応式およびその説明に用いられる略号は、次の通りである。
Ｂｚ：ベンゾイル基、
Ｂｎ：ベンジル基、
Ｍｅ：メチル基、
ＳＥ：２−（トリメチルシリル）エチル基、
ＴＢＤＰＳ：ｔ−ブチルジフェニルシリル基、
ＴＭＳＯＴｆ：トリメチルシリルトリフロロメタンスルフォネート、
ＴｆＯＨ：トリフルオロメタンスルフォン酸、
Ｐｈ３Ｐ：トリフェニルホスフィン、
ＴＢＡＦ：テトラブチルアンモニウムフルオライド、
ＷＳＣ：水溶性カルボジイミド、
ＮａＢＨ３ＣＮ：ナトリウムシアノボロハイドライド、
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸、
ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ−〔５，４，０〕−７−ウンデセン、Ｃｌ３Ｃ
ＣＮ：トリクロロアセトニトリル。
【００１８】
一般式（１）において、Ｒが基（１ａ）である本発明化合物は、下記反応式（Ｉ）に示す方法により製造できる。
【００１９】
【化３】
0004553488.tif 000004
【００２０】
上記反応式（Ｉ）によれば、まず、公知化合物（２）（カルボハイドレートリサーチ、３０３巻、１３１−１３３頁、１９９７年参照）と、式（３）で表わされる、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｅ）−２−アジド−３−Ｏ−（tert−ブチルジフェニルシリル）−４−オクタデセン−１，３−ジオール（化合物（３））とを、不活性溶媒、例えば塩化メチレン等に溶解し、脱水剤、例えばモレキュラシーブ等の存在下に、室温で約１〜１０時間攪拌した後、０℃付近まで冷却し、ＴＭＳＯＴｆを加え、０〜３０℃程度、好ましくはほぼ０℃で、約２乃至２４時間、好ましくは約１２時間前後攪拌することによって、化合物（４）が製造できる。上記において、化合物（２）に対する化合物（３）、脱水剤およびＴＭＳＯＴｆの使用割合は、特に限定されるものではないが、一般には、それぞれ０．５〜１．５倍モル量程度、２〜４倍モル量程度および０．０５〜０．５倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００２１】
次に、得られる化合物（４）を、不活性溶媒、例えばベンゼン等に溶解し、Ｐｈ３Ｐを加えて１０〜４０℃程度、好ましくはほぼ３０℃で、約１２時間乃至９６時間攪拌して、その有するアジド基をアミノ基に還元して化合物（５）を製造する。上記において、Ｐｈ３Ｐの使用割合は、原料化合物（４）に対して１〜３倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００２２】
上記化合物（５）は、常法に従い単離することもできるが、本方法では特に単離することなく、反応溶液又はその濃縮物として、引き続く反応に供することができる。
【００２３】
引き続く反応は、化合物（５）の適当な溶媒溶液、例えば上記反応溶液濃縮物に、ステアリン酸および縮合剤であるＷＳＣ、即ち１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩を加え、室温にて１２時間程度攪拌することにより実施でき、かくして化合物（６）が製造できる。上記において、ステアリン酸および縮合剤（ＷＳＣ）の使用割合は、原料化合物（５）に対して３〜５倍モル量程度および３〜５倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００２４】
該化合物（６）は、次いでこれを適当な溶媒、例えば塩化メチレン等に溶解させ、ＴＢＡＦを加えて、室温で２４時間程度攪拌して保護基（ＴＢＤＰＳ）をはずし、更に反応混合物を濃縮した後、メタノールに溶解させ、触媒量のナトリウムメチラートを加えて約４０℃で２４時間程度攪拌し、更に水を加えて２４時間程度攪拌して加水分解させ、全ての保護基をはずすことによって、一般式（１）中、Ｒが基（１ａ）である本発明化合物（１ａ）に誘導できる。上記において、ＴＢＡＦの使用割合は、原料化合物（６）に対して０．１〜１．０倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００２５】
一般式（１）中、Ｒが基（１ｂ）である本発明化合物は、下記反応式（II）および（III）に示す方法に従い製造できる。
【００２６】
【化４】
0004553488.tif 000005
【００２７】
この反応式（II）には、本発明化合物（１ｂ）の製造のための重要な中間体である化合物（１４）の製造を示してある。
【００２８】
反応式（II）においては、まず、化合物（２）と公知化合物（８）（カルボハイドレートリサーチ、３０３巻、１３１−１３３頁、１９９７年）とを、ハロゲン化炭化水素溶媒、例えば塩化メチレン等に溶解し、適当な脱水剤、例えばモレキュラシーブ等の存在下に、室温又はその付近の温度下で、約５時間攪拌し、次いで、０℃程度まで冷却後、ＴＭＳＯＴｆを加え、０〜３０℃程度、好ましくは０℃程度で約２〜２４時間、好ましくはほぼ１２時間攪拌することによって、化合物（９）が製造できる。上記において、化合物（２）に対する化合物（８）、脱水剤およびＴＭＳＯＴｆの使用割合は、それぞれ１．０〜２．０倍モル量程度、１〜３倍モル量程度および０．０５〜０．５倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００２９】
次いで、化合物（９）を不活性溶媒、例えばテトヒドロフラン等のエーテル溶媒に溶解し、適当な脱水剤、例えばモレキュラシーブの存在下に、室温又はその付近の温度で、約３時間攪拌後、０℃程度まで冷却し、ＮａＢＨ３ＣＮを加え、室温又はその付近の温度で約３０分〜２時間攪拌して、化合物（１０）を導く。上記において、脱水剤およびＮａＢＨ３ＣＮの使用割合は、原料化合物（９）に対して１〜３倍モル量程度および５０〜５００倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００３０】
次に、化合物（１０）と公知化合物（１１）（カルボハイドレートリサーチ、３０３巻、１３１−１３３頁、１９９７年）とを、芳香族炭化水素溶剤、例えばベンゼン等に溶解し、ＴｆＯＨを加え、０〜２０℃程度、好ましくは１０℃近傍で、約１〜２４時間、通常約１２時間攪拌して、化合物（１２）を製造する。上記において、化合物（１１）およびＴｆＯＨの使用割合は、原料化合物（１０）に対して１〜３倍モル量程度および０．５〜１．５倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００３１】
かくして得られる化合物（１２）を、アルコール類、例えばメタノール等に溶解し、パラジウム炭素を触媒とする接触還元法によって選択的に保護基であるベンジル基をはずして、化合物（１３）を製造する。この接触還元反応は常法、例えば、カルボハイドレートリサーチ、３０３巻、１３１−１３３頁（１９９７年）に記載の方法に従い実施することができる。
【００３２】
更に、化合物（１３）を適当な不活性溶媒、例えばピリジン等に溶解し、塩化ベンゾイルを加え、室温又はその付近の温度下で、約３〜１２時間攪拌することによって、全水酸基をベンゾイル基で保護した、所望の化合物（１４）を製造することができる。上記において、塩化ベンゾイルの使用割合は、原料化合物（１３）に対して１０〜２０倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００３３】
かくして得られる中間体化合物（１４）を出発原料として、下記反応式（III）に示すように、Ｒが基（１ｂ）である本発明化合物を製造できる。
【００３４】
【化５】
0004553488.tif 000006
【００３５】
この反応式（III）には、前記反応式（II）で得られる中間体化合物（１４）から本発明化合物（１ｂ）までの製造を示してある。
【００３６】
この方法によれば、化合物（１４）を塩化メチレンに溶解し、約０〜１０℃、好ましくはほぼ０℃で、ＴＦＡを作用させて、該化合物の保護基（ＳＥ）をはずすことによって、化合物（１５）を得る。上記において、トリフルオロ酢酸の使用割合は、原料化合物（１４）に対して１〜１０倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００３７】
該化合物（１５）を、次いで不活性溶媒、例えば塩化メチレン等に溶解し、これにＤＢＵの存在下に、Ｃｌ３ＣＣＮを反応させることにより化合物（１６）を製造できる。上記において、ＤＢＵおよびＣｌ３ＣＣＮの使用割合は、原料化合物（１５）に対してそれぞれ１〜３倍モル量程度および１０〜１００倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００３８】
かくして得られた化合物（１６）と２−（テトラデシル）−１−ヘキサデカノールとを塩化メチレンに溶解し、ＴＭＳＯＴｆの存在下に反応させることによって、化合物（１７）が製造できる。上記において、２−（テトラデシル）−１−ヘキサデカノールおよびＴＭＳＯＴｆの使用割合は、原料化合物（１６）に対して１〜３倍モル量程度および１〜３倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００３９】
最後に、化合物（１７）をメタノールに溶解させ、ナトリウムメチラートを加えて加水分解することによって保護基をはずし、一般式（１）においてＲが基（１ｂ）である本発明化合物（１ｂ）を製造することができる。上記において、ナトリウムメチラートの使用割合は、原料化合物（５）に対して０．０１〜０．１倍モル量程度の範囲から選択されるのが好ましい。
【００４０】
上記化合物（１６）と２−（テトラデシル）−１−ヘキサデカノールとの反応において、化合物（１６）に代えて、前記反応式（Ｉ）において用いた原料化合物（２）を用いて、下記反応式（IV）に示すような方法に従って、一般式（１）中、Ｒが基（１ｃ）である本発明化合物を製造することができる。
【００４１】
【化６】
0004553488.tif 000007
【００４２】
該反応式（IV）によれば、化合物（２）と２−（テトラデシル）−１−ヘキサデカノールとの反応は、化合物（２）に対して１〜１０倍モル量程度、好ましくは１〜３倍モル量程度の２−（テトラデシル）−１−ヘキサデカノールを用いて、塩化メチレンなどのハロゲン化炭化水素溶媒中、化合物（２）に対して触媒量乃至等モル量、好ましくは０．１〜３倍モル量程度のトリメチルシリルトリフロロメタンスルホネート（ＴＭＳＯＴｆ）の存在下に実施され、０℃〜室温程度の温度条件下、８〜２４時間程度、好ましくは１２時間前後で完結する。
【００４３】
かくして得られる化合物（１８）を、次いでメタノールに溶解させ、触媒量乃至化合物（１８）に対して等モル量程度、好ましくは０．１〜０．２倍モル量程度のナトリウムメチラートを加えて、４０℃程度で２４時間前後攪拌し、更に水を加えて２４時間前後攪拌することによって、全エステル型保護基の加水分解による脱離反応を行なって、所望の一般式（１）中Ｒが基（１ｃ）である本発明化合物（１ｃ）を製造することができる。
【００４４】
本発明の一般式（１）の化合物は、薬学的に許容される塩とすることができる。かかる塩としては、アルカリ金属、例えば、ナトリウム、カリウム等や、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属の塩を例示できる。これらの塩の形成反応は常法によって行うことができる。
【００４５】
上記反応式に示す方法により得られる目的化合物は、通常の分離手段により容易に単離、精製することができる。該手段としては、例えば分配クロマトグラフィー、プレパラティブ薄層クロマトグラフィー、再結晶、溶媒抽出等を例示できる。
【００４６】
本発明化合物は、ＥＬＡＭ−１、ＧＭＰ−１４０、ＬＥＣＡＭ−１等のセレクチンに対して反応性を有し、従って、上記セレクチンに結合するリガンドとして、これらセレクチンの関与する各種疾患、例えば各種炎症やガン転移等の治療、予防に有用である。
【００４７】
従って、本発明は、また一般式（１）で表わされる本発明化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有し、これと共に製薬上許容される担体を含む医薬組成物をも提供するものである。
【００４８】
本発明医薬組成物は、通常上記有効成分化合物と共に製剤担体を用いて一般的な医薬製剤形態とされる。該製剤担体としては製剤の使用形態（経口投与か非経口投与か）に応じて、通常製剤化のために慣用される各種の添加剤、即ち、賦形剤、安定剤、防腐剤、溶解剤、充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤、甘味剤、着色剤、香昧剤、張度調整剤、緩衝剤、酸化防止剤等等を例示でき、これらは得られる製剤の投与単位形態に応じて適宜選択使用される。
【００４９】
本発明医薬組成物の投与経路は静脈注射が望ましいが、経口投与も可能であり、之等投与経路に応じた投与単位形態に調製できる。その代表的なものとしては錠剤、丸剤、散剤、粉末剤、脂肪乳剤、懸濁剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）、リポソーム剤、軟膏剤等が挙げられる。
【００５０】
錠剤の形態に成形するに際しては、上記製剤担体として例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、リン酸カリウム等の賦形剤、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム等の崩壊剤、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド等の界面活性剤、白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グリセリン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等を使用できる。
【００５１】
更に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
【００５２】
丸剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナラン、カンテン等の崩壊剤等を使用できる。
【００５３】
坐剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等を使用できる。カプセル剤は常法に従い通常本発明の有効成分化合物を上記で例示した各種の製剤担体と混合して硬質ゼラチンカプセル、軟質カプセル等に充填して調整される。
【００５４】
本発明医薬組成物が液剤、乳剤、懸濁剤等の注射剤として調製される場合、之等は殺菌され且つ血液と等張であるのが好ましく、之等の形態に成形するに際しては、希釈剤として例えば水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を使用できる。尚、この場合等張性の溶液を調整するに充分な量の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを本発明薬剤中に含有させてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。
【００５５】
更に、本発明薬剤中には、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他の医薬品を含有させることもできる。
【００５６】
本発明医薬組成物中に含有されるべき一般式（１）で表わされる化合物およびその塩（有効成分化合物）の量は、特に限定されず広範囲より適宜選択されるが、通常医薬組成物中に約１〜７０重量％程度含有されるものとするのがよい。
【００５７】
上記医薬組成物の投与方法は特に制限がなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等に応じて決定される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤およびカプセル剤は経口投与され、注射剤は単独で又はブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更に必要に応じ単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与され、坐剤は直腸内投与される。
【００５８】
上記医薬組成物の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等により適宜選択されるが、通常有効成分量が成人１日当り約１〜３０００ｍｇ程度とするのがよく、該製剤は１日に１回又は２〜４回に分けて投与することができる。
【００５９】
発明を実施するための最良の形態
以下に実施例を示し本発明を更に詳述する。尚、化合物番号および略号は、反応式（Ｉ）〜（IV）で用いた番号および略号で示した。
実施例１
〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−１）−（２Ｓ，３Ｒ，４Ｅ）−２−アジド−３−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）−４−オクタデセン−１，３−ジオール（４）の製造
化合物（２）（２５５ｍｇ，３７６μｍｏ１）および（２Ｓ，３Ｒ，４Ｅ）−２−アジド−３−Ｏ−（tert−ブチルジフェニルシリル）−４−オクタデセン−１，３−ジオール（３）（４１５ｍｇ，７３３μｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍｌ）に溶解し、モレキュラーシーブス４Å（２００ｍｇ）の存在下、室温にて５時間攪拌した。その後、０℃に冷却し、トリメチルシリルトリフロロメタンスルホネート（ＴＭＳＯＴｆ，５．７μｌ，３０μｍｏｌ）を加え、０℃にて１２時間攪拌した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ，ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／３）で反応終了を確認後、反応液をセライト濾過し、クロロホルムにて洗浄した。濾液と洗液は合わせ、飽和Ｎａ２ＣＯ３、Ｈ２Ｏの順で洗浄し、有機層はＮａ２ＳＯ４で脱水後、減圧濃縮した。その後、シリカゲルカラムクロマトログラフィーに供し、溶出液（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／５）よりアモルファス状化合物４（３００ｍｇ，７３％）を得た。
元素分析値：（Ｃ６４Ｈ７７Ｎ３Ｏ１１Ｓｉ（１０９２．４２）として）：
計算値：Ｃ７０．３７、Ｈ７．１０、Ｎ３．８５
実測値：Ｃ７０．３５、Ｈ７．０２、Ｎ３．５５
［α］Ｄ２５＝−５．７°（Ｃ＝２．５，ＣＨＣｌ３）
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３０７５−２８５０（ＣＨ）
２１００（Ｎ３）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
１．０２（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３ＣＨ２）
１．２７（ｓ，２２Ｈ，１１ＣＨ２）
２．７７−２．９０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３）
３．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＯＯＣＨ３）
４．２１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ５，６ａ＝８．６，Ｈ−６ａ）
４．３１−４．５４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６ｂ）
４．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝７．７，Ｈ−１）
４．８４−４．９５（ｍ，１Ｈ，Ｊ５，６ｂ＝６．８，Ｈ−５）
５．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２）
５．７２（near ｄ，１Ｈ，Ｈ−４）
７．２５−８．１６（ｍ，３０Ｈ，６Ｐｈ）。
【００６０】
実施例２
〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−１）−（２Ｓ，３Ｒ，４Ｅ）−２−オクタデカノイルアミノ−３−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）−４−オクタデセン−１，３−ジオール（６）の製造
化合物（４）（３００ｍｇ，２７４μｍｏｌ）をベンゼン（１．５ｍｌ）に溶解し、水（５０μｌ）およびトリフェニルホスフィン（１７３ｍｇ，５４８μｍｏｌ）を加え、３０℃にて３日間攪拌した。反応終了をＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／３）にて確認後、減圧濃縮して、化合物（５）をシロップとして得た。
【００６１】
次いでこのシロップをジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解し、ステアリン酸（２３１ｍｇ，８２２μｍｏｌ）および１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドハイドロクロライド（１５５ｍｇ，８２２μｍｏｌ）を加え、室温にて１２時間攪拌した。反応終了をＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／３）にて確認後、クロロホルムで抽出し、有機層を水で洗浄後、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。Ｎａ２ＳＯ４を濾別し減圧濃縮して得られたシロップをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／４）にて化合物（６）（３３３ｍｇ，９１％）を得た。
元素分析値：（Ｃ８１Ｈ１１３ＮＯ１２Ｓｉ（１１３２．８８）として）：
計算値：Ｃ７３．６５、Ｈ８．６２、Ｎ１．０６
実測値：Ｃ７３．６１、Ｈ８．４０、Ｎ１．０６
［α］Ｄ２５＝＋３．６°（Ｃ＝４．３，ＣＨＣｌ３）
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３４５０，３３８０（ＮＨ）
３０７５−２８５０（ＣＨ）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
１６８０，１５４０（amide）
７５０，７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．９２（ｄ，６Ｈ，ＣＨ３ＣＨ２）
１．２６（ｓ，５０Ｈ，２５ＣＨ２）
２．４２（ｔ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
３．４６（ｓ，３Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
２．８９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３）
４．２７−４．１４（ｔ，１Ｈ，Ｊ５，６ｂ＝６．０，Ｈ−６ｂ）
４．２８（ｔ，１Ｈ，Ｊ５，６ａ＝６．６，Ｊｇｅｍ＝１２．８，Ｈ−６ａ）
４．７２（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝７．７，Ｈ−１）
４．８５−４．９９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−５）
５．４１（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２）
５．７６（near ｄ，１Ｈ，Ｈ−４）
７．２７−８．３０（ｍ，３０Ｈ，６Ｐｈ）。
【００６２】
実施例３
〔３−デオキシ−３−Ｃ−（カルボキシメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−１）−（２Ｓ，３Ｒ，４Ｅ）−２−オクタデカノイルアミノ−４−オクタデセン−１，３−ジオール（１ａ）の製造
化合物（６）（１７６ｍｇ，１３０μｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却後、テトラブチルアンモニウムフルオライド（ＴＢＡＦ，１８８μｌ）を加え、室温にて２４時間攪拌した。反応終了をＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／２）にて確認後、減圧濃縮し、得られた残渣をメタノール（５ｍｌ）に溶解し、触媒量のソジウムメトキシドを加え、４０℃にて２４時間攪拌し、さらに水を加えて２４時間攪拌した。反応終了をＴＬＣ（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝５／４／１）にて確認後、イオン交換樹脂アンバーライトＩＲ−１２０（Ｈ＋）で反応液を中和し、樹脂を濾別した。次いで濾液と洗液を合わせて減圧濃縮し、得られたシロップをゲル濾過（セファデックスＬＨ−２０,ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝５／４／０．７）にて精製して、化合物（１ａ）（７８ｍｇ，９０％）を得た。
元素分析値（Ｃ４４Ｈ８３ＮＯ９（７７０．１５）として）：
計算値：Ｃ６８．６２、Ｈ１０．８６、Ｎ１．８２
実測値：Ｃ６８．４１、Ｈ１０．６６、Ｎ１．６５
［α］Ｄ２５＝−２５．０°（Ｃ＝０．１，ＣＨＣｌ３）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．９３（ｔ，６Ｈ，ＭｅＣＨ２）
１．１９（ｓ，５２Ｈ，２６ＣＨ２）
３．８４（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝８．７９，Ｈ−１）
４．０１（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２）。
【００６３】
実施例４
２−（トリメチルシリル）エチル  Ｏ−〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−３）−２−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド（９）の製造
化合物（２）（３５６ｍｇ，５２４μｍｏｌ）と化合物（８）（３１３ｍｇ，６８２μｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍｌ）に溶解し、モレキュラーシーブス４Å（６００ｍｇ）の存在下、室温にて５時間攪拌した。その後、０℃に冷却し、ＴＭＳＯＴｆ（１０μｌ，５２μｍｏｌ）を加え、０℃にて１２時間攪拌した。ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／２）で反応終了を確認後、反応液をセライト濾過し、クロロホルムにて洗浄した。濾液と洗液は合わせ、飽和Ｎａ２ＣＯ３、Ｈ２Ｏの順で洗浄し、有機層はＮａ２ＳＯ４で脱水後、減圧濃縮した。その後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／４）より化合物（９）（３９３ｍｇ，７５％）をシロップとして得た。
元素分析値（Ｃ５５Ｈ６０Ｏ１５Ｓｉ（９８９.１４）として）：
計算値：Ｃ６６．７８、Ｈ６．１１
実測値：Ｃ６６．５５、Ｈ６．０８
［α］Ｄ２５＝−１８．２°（Ｃ＝０．７，ＣＨＣｌ３）
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３０７５−２８５０（ＣＨ）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．８４−０．９４（ｍ，２Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２Ｏ）
２．８４−２．８９（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
２．８４−２．８９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３ of Glc）
３．３５−３．４４（ｍ，２Ｈ，Ｊ５，６ａ＝１０．３Ｈｚ，Ｈ−２，５ of Glc）
３．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＯＯＣＨ３）
３．１７−３．５５（ｍ，１Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２Ｏ）
３．７４（ｔ，１Ｈ，Ｊ３，４＝９．１５Ｈｚ，Ｈ−４ of Glc）
３．８０（ｔ，１Ｈ，Ｈ−６ａ of Glc）
３．８９−３．９５（ｍ，１Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２Ｏ）
４．０６（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３ of Glc）
４．１０（ｔ，１Ｈ，Ｈ−６ of Glc）
４．３４−４．３８（ｍ，３Ｈ，Ｈ−５，６ａ，６ｂ of Gal）
４．４４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ of Glc）
４．６０（ｄｄ，２Ｈ，ＣＨ２Ｐｈ）
５．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝７．６９Ｈｚ，Ｈ−１ of Gal）
５．４８（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２ of Gal）
５．６１（ｓ，１Ｈ，ＰｈＣＨ）
５．７２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−４ of Gal）
７．２３−８．１５（ｍ，２５Ｈ，５Ｐｈ）。
【００６４】
実施例５
２−（トリメチルシリル）エチル  Ｏ−〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−３）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシド（１０）の製造
化合物（９）（４９ｍｇ，５０μｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍｌ）に溶解し、モレキュラーシーブス４Åを加えて３時間攪拌した。その後０℃まで冷却し、ソジウムシアノボロハイドライド（５０ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分間攪拌した。再度０℃まで冷却し、塩酸ガス飽和のジエチルエーテルを滴下した。
【００６５】
ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／２）で反応終了を確認後、トリエチルアミンで中和し、クロロホルム、水を加え、セライト濾過した。濾液と洗液は合わせて濃縮し、得られたシロップはクロロホルムで抽出し、飽和Ｎａ２ＣＯ３、Ｈ２Ｏの順で洗浄した。有機層はＮａ２ＳＯ４で脱水後、減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／３）より化合物（１０）（５９ｍｇ，７０％）をシロップとして得た。
元素分析値（Ｃ５５Ｈ６４Ｏ１４Ｓｉ（９７７.１９）として）：
計算値：Ｃ６７．６０、Ｈ６．６０
実測値：Ｃ６７．４６、Ｈ６．４０
［α］Ｄ２５＝＋２９．８°（Ｃ＝０．７，ＣＨＣｌ３）
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３６００−３３００（ＯＨ）
３０７５−２８５０（ＣＨ）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．８３−０．９９（ｍ，２Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２）
２．４６（ｄ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
２．９４−２．９８（ｍ，１Ｈ，Ｊ２，３＝１１．７１Ｈｚ，Ｊ３，４＝２．５６Ｈｚ，Ｈ−３ of Gal）
３．３０（ｔ，１Ｈ，Ｊ１，２，３＝７．６９Ｈｚ，Ｈ−３ of Glc）
３．４０（ｍ，１Ｈ，Ｊ３，４＝８．７９Ｈｚ，Ｈ−５ of Glc）
３．５０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
３．５９（ｔ，１Ｈ，Ｈ−３ of Glc）
３．６５−３．７１（ｍ，１Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２Ｏ）
３．９３（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３ of Glc）
３．９７−４．０２（ｍ，１Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２Ｏ）
４．６２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ of Glc）
５．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝８．０６Ｈｚ，Ｈ−１ of Gal）
５．５４（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２ of Gal）
５．７７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−４ of Gal）
７．１３−８．１９（ｍ，２５Ｈ，５Ｐｈ）。
【００６６】
実施例６
２−（トリメチルシリル）エチル  Ｏ−〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−３）−Ｏ−〔（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−フコピラノシル）−（１−４）〕−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシド（１２）の製造
化合物（１０）（３３ｍｇ，３０μｍｏｌ）と化合物（１１）（２１ｍｇ，４０μｍｏｌ）をベンゼン（１ｍｌ）に溶解し、モレキュラーシーブス４Å（３００ｍｇ）の存在下に室温にて５時間攪拌した。その後、０℃に冷却後、Ｎ−ヨードスクシンイミド（ＮＩＳ，２２．８ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）およびトリフルオロメタンスルホン酸（ＴｆＯＨ，２．４μｌ，２７μｍｏｌ）を加え、７℃にて１２時間攪拌した。ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／２）で反応終了を確認後、反応溶液にトリエチルアミンを加え、不溶物をセライト濾過し、クロロホルムにて洗浄した。濾液と洗液を合わせ、飽和Ｎａ２ＣＯ３、Ｈ２Ｏの順で洗浄し、有機層はＮａ２ＳＯ４で脱水後、減圧濃縮した。得られたシロップを、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／４）より化合物（１２）（３４ｍｇ，７２％）をアモルファスとして得た。
元素分析値（Ｃ８２Ｈ９０Ｏ１９Ｓｉ（１４０７.６９）として）：
計算値：Ｃ６９．９７、Ｈ６．４４
実測値：Ｃ６９．８７、Ｈ６．４４
［α］Ｄ２５＝−２９．６°（Ｃ＝０．７，ＣＨＣｌ３）
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３０７５−２８５０（ＣＨ）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．８６−０．９８（ｍ，２Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２）
１．６１（ｄ，３Ｈ，ＣＨ３ of Fuc）
２．４８（ｄ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
２．８７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−３ of Gal）
３．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＯＯＣＨ３）
３．４５−３．５０（ｍ，１Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２）
５．６６（ｄ，１Ｈ，Ｈ−４ of Gal）
７．１４−８．１４（ｍ，４０Ｈ，８Ｐｈ）。
【００６７】
実施例７
２−（トリメチルシリル）エチル  Ｏ−〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−３）−Ｏ−〔α−Ｌ−フコピラノシル）−（１−４）〕−β−Ｄ−グルコピラノシド（１３）の製造
化合物（１２）（２３４ｍｇ，１６６μｍｏｌ）をメタノール（１６４ｍｌ）と酢酸（３６ｍｌ）に溶解し、Ｐｄ−Ｃ（２３４ｍｌ）を加えて水素ガス気流下室温にて６時間攪拌した。ＴＬＣ（ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３＝１／５）で反応終了を確認後、不溶物をセライト濾過し、メタノールにて洗浄した。濾液と洗液を合わせ、減圧濃縮した。得られたシロップを、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３＝１／２０）より化合物（１３）（１１９ｍｇ，８２％）をシロップとして得た。
元素分析値（Ｃ４７Ｈ６０Ｏ１９Ｓｉ（９５７.０６）として）：
計算値：Ｃ５８．９８、Ｈ６．３２
実測値：Ｃ５８．７８、Ｈ６．２７
［α］Ｄ２５＝−２７７．６°（Ｃ＝２．４，ＣＨＣｌ３）
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３０７５−２８５０（ＣＨ）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．８５−０．９８（ｍ，２Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２）
１．４３（ｄ，３Ｈ，ＣＨ３ of Fuc）
２．４３（ｄ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
２．８８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３ of Gal）
３．４３（ｓ，３Ｈ，ＣＯＯＣＨ３）
３．３８−３．５３（ｍ，１Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２）
５．００（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ of Fuc）
５．６８（ｄ，１Ｈ，Ｈ−４ of Gal）
７．２８−８．１２（ｍ，１５Ｈ，３Ｐｈ）。
【００６８】
実施例８
２−（トリメチルシリル）エチル  Ｏ−〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−３）−Ｏ−〔２，３，４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｌ−フコピラノシル）−（１−４）〕−２，６−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシド（１４）の製造
化合物（１３）（１２０ｍｇ，１２５μｍｏｌ）をピリジン（３ｍｌ）に溶解し、ベンゾイルクロライド（１．０９ｍｌ，１．０１ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１２時間攪拌した。ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／４）で反応終了を確認後、減圧濃縮し、クロロホルムで希釈した。このクロロホルム溶液を１Ｎ ＨＣｌ、Ｈ２Ｏの順で洗浄し、有機層はＮａ２ＳＯ４で脱水後、減圧濃縮した。得られたシロップを、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／４）より化合物（１４）（１６５ｍｇ，８９％）をアモルファスとして得た。
元素分析値（Ｃ８２Ｈ８０Ｏ２４Ｓｉ（１４７７.６０）として）：
計算値：Ｃ６６．６６、Ｈ５．４６
実測値：Ｃ６６．５３、Ｈ５．３７
［α］Ｄ２５＝−７３．４°（Ｃ＝１．２，ＣＨＣｌ３）
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３０７５−２８５０（ＣＨ）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．６８−０．８２（ｍ，２Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２）
１．５０（ｄ，３Ｈ，ＣＨ３ of Fuc）
２．５４−２．６７（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
２．９２−３．００（ｍ，１Ｈ，Ｊ３，４＝２．９３，Ｈ−３ of Gal）
３．３５−３．４１（ｍ，１Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２）
３．６４（ｓ，３Ｈ，ＣＯＯＣＨ３）
３．７１−３．７８（ｍ，１Ｈ，（ＣＨ３）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２）
４．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１，２，３＝１２．１，Ｈ−３ of Glc）
４．４７（ｔ，１Ｈ，Ｈ−２ of Glc）
４．５６（ｔ，１Ｈ，Ｊ５，６＝６．５９，Ｈ−５ of Gal）
４．７４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ of Fuc）
４．８９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ of Glc）
５．１６（ｑ，１Ｈ，Ｈ−６ of Gal）
５．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝８．０６，Ｈ−１ of Gal）
５．６２（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２ of Gal）
５．７９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−４ of Gal）
７．３８−８．３６（ｍ，４０Ｈ，８Ｐｈ）。
【００６９】
実施例９
Ｏ−〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−３）−Ｏ−〔（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｌ−フコピラノシル）−（１−４）〕−２，６−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシド（１５）の製造
化合物（１４）（１６５ｍｇ，１１２μｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却した後、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ，１ｍｌ）を加え室温にて１時間攪拌した。ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／２）で反応終了を確認後、氷浴中で酢酸エチルを加え、過剰な試薬を分解した。酢酸エチルで共沸した後、クロロホルムで抽出し、飽和Ｎａ２ＣＯ３、Ｈ２Ｏの順で洗浄し、有機層はＮａ２ＳＯ４で脱水後、減圧濃縮した。その後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／２）から化合物（１５）（１４４ｍｇ，９４％）をシロップとして得た。
元素分析値（Ｃ７７Ｈ６８Ｏ２４（１３７７.３７）として）：
計算値：Ｃ６７．１５、Ｈ４．９８
実測値：Ｃ６７．１１、Ｈ４．８９
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３６００−３３００（ＯＨ）
３０７５−２８５０（ＣＨ）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
１．５０（ｄ，３Ｈ，ＣＨ３ of Fuc）
２．２３−２．４３（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
２．７３−２．８６（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３ of Gal）
３．３２（ｓ，３Ｈ，ＣＯＯＣＨ３）
５．７９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−４ of Gal）
７．１０−８．１６（ｍ，４０Ｈ，８Ｐｈ）。
【００７０】
実施例１０
Ｏ−〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−３）−Ｏ−〔（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｌ−フコピラノシル）−（１−４）〕−２，６−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル  トリクロロアセトイミデート（１６）の製造
化合物（１５）（５０ｍｇ，３６μｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却した後、トリクロロアセトニトリル（１１３μｌ，１．０８ｍｍｏｌ）、１，８−ジアザビシクロ〔５，４，０〕−７−ウンデセン（ＤＢＵ，２．８μｌ，１８μｍｏｌ）を加え、０℃にて３時間攪拌した。ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／２）で反応終了を確認後、そのままシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＣＨＣｌ３）より化合物（１６）（５５ｍｇ，９３％）をシロップとして得た。
元素分析値（Ｃ７９Ｈ６８Ｏ２４Ｃｌ３（１５２１.７６）として）：
計算値：Ｃ６２．３５、Ｈ４．５０、Ｎ０．９２
実測値：Ｃ６２．１１、Ｈ４．２４、Ｎ０．９０
［α］Ｄ２５＝−３５．２５°（Ｃ＝１．２，ＣＨＣｌ３）
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３３５０（ＮＨ）
３０７５−２８５０（ＣＨ）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
２．６６−２．８１（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
３．６６−３．７５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３）
３．８６（ｓ，３Ｈ，Ｊ２，３＝１１．９，ＣＯＯＣＨ３）
４．７３−４．８３（ｍ，２Ｈ，Ｊ５，６ａ＝５．８６，Ｈ−５，Ｈ−６ａ）
５．０７（ｔ，１Ｈ，Ｊ５，６ｂ＝６．０，Ｈ−６ｂ）
５．９３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝３．５，Ｈ−２）
６．２０（near ｄ，１Ｈ，Ｈ−４）
７．０９（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１）
７．５９−８．４７（ｍ，１５Ｈ，３Ｐｈ）
８．８７（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）。
【００７１】
実施例１１
２−（テトラデシル）ヘキサデシル  Ｏ−〔２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−３）−Ｏ−〔（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｌ−フコピラノシル）−（１−４）〕−２，６−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシド（１７）の製造
化合物（１６）（５９ｍｇ，３８μｍｏｌ）および２−（テトラデシル）ヘキサデカノール（１９ｍｇ，４３μｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍｌ）に溶解し、モレキュラーシーブス４Å（３００ｍｇ）の存在下、室温にて５時間攪拌した。その後０℃に冷却し、ＴＭＳＯＴｆ（１０μｌ，５２μｍｏｌ）を加え、０℃にて１２時間攪拌した。ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／２）で反応終了を確認後、反応液をセライト濾過し、クロロホルムにて洗浄した。濾液と洗液は合わせ、飽和Ｎａ２ＣＯ３、Ｈ２Ｏの順で洗浄し、有機層はＮａ２ＳＯ４で脱水後、減圧濃縮した。その後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／４）より化合物（１７）（３９３ｍｇ，７５％）をシロップとして得た。
元素分析値（Ｃ１０７Ｈ１２８Ｏ２４（１７９８.１８）として）：
計算値：Ｃ７１．４７、Ｈ７．１８
実測値：Ｃ７１．４６、Ｈ７．０３
［α］Ｄ２５＝−４４．７°（Ｃ＝０．３，ＣＨＣｌ３）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．９０（ｔ，６Ｈ，２ＣＨ３）
１．２６（ｓ，５２Ｈ，２６ＣＨ２）
１．３４（ｄ，３Ｈ，ＣＨ３ of Fuc）
２．２６−２．４０（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
２．９４−２．９７（ｍ，１Ｈ，Ｊ３，４＝２．９３，Ｈ−３ of Gal）
３．３８（ｓ，３Ｈ，ＣＯＯＣＨ３）
４．６９（ｍ，１Ｈ，Ｊ４，５＝５．８６，Ｈ−５ of Glc）
４．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝１２．１，Ｈ−１ of Glc）
４．９８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ２，３＝７．６９，Ｈ−３ ofGlc）
５．０９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４ of Glc）
５．１８（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２ of Glc）
５．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝８．０６，Ｈ−１ of Gal）
５．３５（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２ of Gal）
５．５７（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝３．６６，Ｈ−１ of Fuc）
５．６２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ２，３＝１０．６，Ｈ−２ ofFuc）
５．７３（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−４ of Fuc）
６．０７（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−３ of Fuc）
７．３８−８．３６（ｍ，４０Ｈ，８Ｐｈ）。
【００７２】
実施例１２
２−（テトラデシル）ヘキサデシル  Ｏ−〔３−デオキシ−３−Ｃ−（カルボキシメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル〕−（１−３）−Ｏ−〔α−Ｌ−フコピラノシル）−（１−４）〕−β−Ｄ−グルコピラノシド（１ｂ）の製造
化合物（１７）（８５ｍｇ，４７μｍｏｌ）をメタノール（１ｍｌ）に溶解し、触媒量のソジウムメトキサイドを加え、４０℃にて６０時間攪拌した。
【００７３】
ＴＬＣ（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝５／４／１）で反応終了を確認後、イオン交換樹脂アンバーライトＩＲ−１２０（Ｈ＋）で反応液を中和した。樹脂を濾別後、メタノールで洗浄し、濾液と洗液を合わせ減圧濃縮した。得られたシロップをゲル濾過（セファデックスＬＨ−２０，ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝５／４／０．７）にて精製して、化合物（１ｂ）（４０ｍｇ，９１％）を得た。
元素分析値（Ｃ５０Ｈ９４Ｏ１６（９５１.２９）として）：
計算値：Ｃ６３．１３、Ｈ９．９６
実測値：Ｃ６２．９２、Ｈ９．８３
［α］Ｄ２５＝−３３．３°（Ｃ＝１．０，ＣＨＣｌ３）
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．８４（ｔ，６Ｈ，２ＣＨ３）
１．２４（ｓ，５２Ｈ，２６ＣＨ２）
１．７３（ｄ，３Ｈ，ＣＨ３ of Fuc）
４．１８（ｄ，３Ｈ，Ｈ−１ of Glc）
４．５６（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ of Gal）
４．８２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ of Fuc）。
【００７４】
実施例１３
２−（テトラデシル）ヘキサデシル  ２，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−３−デオキシ−３−Ｃ−（メトキシカルボニルメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１８）の製造
化合物（２）（１１１ｍｇ，１６３μｍｏｌ）および２−（テトラデシル）ヘキサデカノール（１１３ｍｇ，２４４μｍｏｌ）をジクロロメタン（４ｍｌ）に溶解し、モレキュラーシーブス４Å（２００ｍｇ）の存在下、室温にて５時間攪拌した。その後、０℃に冷却し、ＴＭＳＯＴｆ（２．６μｌ，１３μｍｏｌ）を加え、０℃にて１２時間攪拌した。反応終了後、反応液をセライト濾過し、クロロホルムにて洗浄した。濾液と洗液は合わせ、飽和Ｎａ２ＣＯ３、Ｈ２Ｏの順で洗浄し、有機層はＮａ２ＳＯ４で脱水後、減圧濃縮した。その後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し、溶出液（ＡｃＯＥｔ／Ｈｅｘ＝１／１０）より化合物（１８）（１５８ｍｇ，９５％）をシロップとして得た。
元素分析値（Ｃ６０Ｈ８０Ｏ１０（９６９.３５）として）：
計算値：Ｃ７４．３５、Ｈ９．１５
実測値：Ｃ７４．１６、Ｈ９．１０
［α］Ｄ２５＝＋１４．０°（Ｃ＝０．９，ＣＨＣｌ３）
ＩＲνｍａｘ(film）ｃｍ−１
３０７５−２８５０（ＣＨ）
１７５０（ester of Methyl ester）
１７４０，１２４０（ester of Bz）
７１０（Ｐｈ）
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．８８（ｔ，６Ｈ，２ＣＨ３）
１．２３（ｓ，５２Ｈ，２６ＣＨ２）
２．４０−２．５９（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
２．８７−２．９２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３）
３．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３）
４．１５（ｍ，１Ｈ，Ｊ５，６ａ＝５．４９，Ｈ−５）
４．５３（ｔ，１Ｈ，Ｊｇｅｍ＝１１．２，Ｈ−６ａ）
４．６４（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−６ｂ）
４．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ１，２＝７．６９，Ｈ−１）
５．５３（ｄｄ，１Ｈ，Ｈ−２）
５．８７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−４）
７．２７−８．３０（ｍ，３０Ｈ，６Ｐｈ）。
【００７５】
実施例１４
２−（テトラデシル）ヘキサデシル  ３−デオキシ−３−Ｃ−（カルボキシメチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１ｃ）の製造
化合物（１８）（１７０ｍｇ，１７５μｍｏｌ）をメタノール（５ｍｌ）に溶解し、触媒量のソジウムメトキサイドを加え、４０℃にて２４時間攪拌した。更に水を加えて２４時間攪拌した。反応終了後、イオン交換樹脂アンバーライトＩＲ−１２０（Ｈ＋）で反応液を中和し、樹脂を濾別した。次いで、メタノールで洗浄し、濾液と洗液を合わせ減圧濃縮し、得られたシロップをゲル濾過（セファデックスＬＨ−２０，ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝５／４／０．７）にて精製して、化合物（１ｃ）（９５ｍｇ，８５％）を得た。
元素分析値（Ｃ３８Ｈ７４Ｏ７（６４３.００）として）：
計算値：Ｃ７０．９８、Ｈ１１．６０
実測値：Ｃ７０．９２、Ｈ１１．４９
［α］Ｄ２５＝＋６１．２１°（Ｃ＝１．８７，ＣＨＣｌ３）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：
０．８０（ｔ，６Ｈ，２ＣＨ３）
１．１９（ｓ，５２Ｈ，２６ＣＨ２）
３．２４（ｔ，１Ｈ，Ｊ１，２＝７．６９，Ｈ−２）
４．１２（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１）
以下、本発明カルボキシメチルガラクトース誘導体につき行なわれた生物活性試験につき詳述する。
【００７６】
＜結合阻害活性試験＞
実施例１４で得た本発明化合物（１ｃ）を供試化合物とした（以下、「本発明化合物」という）。また、対照化合物として、２−（テトラデシル）ヘキサデシル ３−Ｏ−スルフォ−β−Ｄ−ガラクトピラノシドＮａ塩（Chem. Pharm. Bull., 46 (5), p797-806 (1998)記載の化合物６ｃ、以下「対照化合物」という）およびＳＬｅＸ（同上文献参照）を用いた。
【００７７】
上記文献記載の方法に従い、固相化した組換えセレクチン−ＩｇＧ融合蛋白質に対する前骨髄性白血病細胞ＨＬ６０の結合反応系に被検化合物を加えて、その結合阻害活性を求めた。
【００７８】
即ち、２０ｎｇの精製したＰ−セレクチン−ＩｇＧをマイクロタイタープレート（９６ウェル、ヌンク マキシソープ）の各ウェルに固相化し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を加えて１００μｌとし、４℃で一夜放置した。過剰の液を吸引除去し、非特異的結合を抑えるために１％牛血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むＰＢＳを用いて１時間室温でブロッキングを施した。ブロッキング液を吸引除去した後、１００μｌの結合実験用緩衝液（ＲＰＭＩ１６４０）に溶かした被検化合物（０．３ｍＭ）と１ｍｌ当たり１０６細胞を含むＨＬ６０細胞結合実験用緩衝液１００μｌを各ウェルに加えた。プレートを５００回転／分、室温で２分間遠心した後、各ウェルを結合実験用緩衝液で満たした。プレートを接着テープで封印し、注意深く空気の泡を取り除いた。プレートの上下を逆さにして、５００回転／分で１０分間遠心して、結合していないＨＬ６０細胞を除去した。次に、接着テープを剥がし、緩衝液を吸引除去し、ウェルに結合した細胞を細胞数測定キット（ＷＳＴ−１分析キット、同仁科学社製）によって定量した（M.Ishiyama, M.Shiga, M.Mizoguchi and P.He, Chem.Pharm.Bull., 41,1118-1122(1994)）。
【００７９】
結合阻害率は、被検化合物無添加の対照試験によって得られた上記結合細胞数（Ｎ）および各被検化合物添加試験によって得られた細胞数（Ｍ）より、次式に従い算出される。
結合阻害率（％）＝１００×（Ｎ−Ｍ）／Ｎ
上記において、Ｐ−セレクチン−ＩｇＧ（２０ｎｇ）に代えて、Ｌ−セレクチン−ＩｇＧ（１００ｎｇ）およびＥ−セレクチン−ＩｇＧ（４０ｎｇ）のそれぞれを用いて同様にして、被検化合物の結合阻害率を求めた。
【００８０】
各セレクチンを用いて得られた結果（結合阻害率）を、各５ウェルの平均値±標準誤差（ＳＥ）にて、表１に示す。
【００８１】
【表１】
0004553488.tif 000008
【００８２】
表１より、本発明化合物は、ＳＬｅｘ及び公知のスルファチジル誘導体と比較して、セレクチンファミリーの細胞接着性を顕著に抑制することが明らかである。このことから、本発明化合物は、之等セレクチンファミリーが関与する炎症や癌の転移等に対する予防及び治療に有効であることが判る。