(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体麹を用いた穀物酢の製造方法であって、培養原料として、表面の全部が穀皮で覆われた穀類を含む液体培地で白麹菌又は黒麹菌を培養して液体麹を得、該液体麹を使用することを特徴とする穀物酢の製造方法。
【請求項２】
表面の全部が穀皮で覆われた穀類が、玄麦又は玄米である、請求項１記載の穀物酢の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、穀物酢の製造方法に関し、詳しくは液体麹を用いた穀物酢の製造方法に関する。なお、本発明において穀物酢とは、日本農林規格（JAS）による分類でいう穀物酢を指す。つまり主原料である穀物（米を除く）の使用量が１リットル中４０ｇ以上である狭義の穀物酢と、主原料の米の使用量が１リットル中４０ｇ以上である米酢と、の両者を意味する。
【背景技術】
【０００２】
醸造酢のうちの穀物酢の製造において、でん粉質原料を糖化してアルコール発酵を行なうために用いられる麹は、従来、穀類表面上に麹菌を生育させた固体麹が用いられてきた（例えば、非特許文献１参照）。
固体麹は、伝統的な製造方法で得られるものであるが、固体培養という特殊な培養形態であるため、大規模製造に不向きである。
【０００３】
一方、液体培地で麹菌を培養することにより得られる液体麹は、培養制御が容易であることから、効率的な生産に適した培養形態であると言える。
しかし、この液体麹は、醸造酢の製造に必要な酵素活性が十分に得られないことが当業者に知られているため、これまで実製造に使用された例はない。
【０００４】
【非特許文献１】醸造・発酵食品の事典、第４６０頁、株式会社朝倉書店２００２年１月１５日発行
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、穀物酢の製造に必要な酵素活性を十分に有する液体麹を開発し、当該液体麹を使用して効率的な穀物酢の製造方法を確立することである。
【０００６】
穀物酢の製造に使用する麹には、グルコアミラーゼ等の糖質分解関連酵素の活性が高いことが要求されるが、さらにアルコール発酵におけるもう一つの鍵酵素である耐酸性α−アミラーゼの活性が高いことも必要である。しかし、かかる酵素活性の高い液体麹を、液体培地で麹菌を培養して得るという技術は未だ開示されていない。すなわち、この耐酸性α−アミラーゼは、液体培養では生成されない酵素であると一般的に言われており、これまでに耐酸性α−アミラーゼの活性が高い液体麹は開発されていない。
【０００７】
従って、本発明の目的は、上記したように、グルコアミラーゼ等の糖質分解関連酵素と耐酸性α−アミラーゼの活性が高い液体麹を開発して、当該液体麹を用いる穀物酢の製造方法を確立することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、培養原料として、表面の全部又は一部が少なくとも穀皮で覆われた穀類を含む液体培地と、表面が外皮で覆われた豆類及び／又は芋類を含む液体培地と、細砕や粉砕などの前処理をしないアマランサス及び／又はキヌアを含む液体培地と、から選ばれた少なくとも１種の液体培地で麹菌を培養して得た液体麹を使用することで、効率よく穀物酢を製造できることを見出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、請求項１に係る本発明は、液体麹を用いた穀物酢の製造方法であって、培養原料として、表面の全部が穀皮で覆われた穀類を含む液体培地で白麹菌又は黒麹菌を培養して液体麹を得、該液体麹を使用することを特徴とする穀物酢の製造方法を提供するものである。
次に、請求項２に係る本発明は、表面の全部が穀皮で覆われた穀類が、玄麦又は玄米である、請求項１記載の穀物酢の製造方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、液体麹を用いた穀物酢の製造方法が提供される。
この方法によれば、従来の固体麹を用いた穀物酢の製造法により得られる穀物酢と同程度の品質を有し、官能的にも遜色のない穀物酢を製造することができる。
さらに、種々の原料や麹菌株を用いた麹菌培養物を組み合わせて製造した液体麹を使用することにより、穀物酢のバラエティー化を図ることが極めて容易となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明の穀物酢の製造に用いる液体麹は、本発明者らが提案した方法（特願２００４−３５０６６１号明細書、同２００４−３５２３２０号明細書、同２００４−３５２３２４号明細書、同２００４−３７８４５３号明細書）により得られる。
すなわち、この方法は、表面の全部又は一部が少なくとも穀皮で覆われた穀類、表面が外皮で覆われた豆類及び／又は芋類、細砕や粉砕などの前処理をしないアマランサス及び／又はキヌア等の原料を添加して調製された液体培地で麹菌の培養を行なうことにより、液体麹を製造する工程を包含する。具体的には、この方法では、前記した原料を使用して麹菌を培養するため、当該穀類中のでん粉の糖化に時間がかかり、培養系への糖の放出速度が抑制され、液体麹の酵素活性が増強される。しかも、グルコアミラーゼと耐酸性α−アミラーゼが同時にバランスよく生成、蓄積される。
【００１２】
本発明においては、液体麹の培養原料として用いる穀類としては、大麦、米、小麦、そば、ヒエ、アワ、キビ、コウリャン、トウモロコシ等を挙げることができる。これらの原料の形状としては、表面の全部又は一部が少なくとも穀皮で覆われていることが必要であって、未精白物、または少なくとも穀皮が穀粒の表面に残されている程度までに精白された精白歩合以上のもの等を用いることができ、玄米、玄麦なども使用できる。米の場合には、玄米は勿論のこと、籾殻が全部付いているものでもよいし、籾殻が一部付いているものでもよい。
例えば、穀類が大麦の場合、未精白の精白歩合１００％のもの、或いは未精白の精白歩合を１００％とし、この未精白の精白歩合（１００％）から大麦の穀皮歩合（一般的には７〜８％）を差し引いた割合、すなわち９２〜９３％程度の精白歩合以上のものである。
【００１３】
ここで、精白歩合とは、穀類を精白して残った穀類の割合を言い、例えば精白歩合９０％とは、穀類の表層部の穀皮等を１０％削り取ることを意味する。また、本発明において、玄麦とは、未精白の麦から穀皮が穀粒の表面に残されている程度までに精白されたものであり、精白歩合９０％以上のものを含む。また、穀皮とは、穀類の粒の表面を覆っている外側部位のことを言う。
【００１４】
本発明において、液体麹の培養原料として用いる豆類や芋類としては、大豆、小豆、サツマイモ等を挙げることができる。これらの培養原料は、外皮の汚れを洗い落とすのみで、裁断、粉砕処理などの加工は全く行なわないものである。
【００１５】
本発明において、液体麹の培養原料として用いるアマランサスは、ヒユ科ヒユ属植物の総称で、穀類のなかでは蛋白質含量が高く、アミノ酸の一つであるリジンの含量は大豆に匹敵する。また、精白米に比べても、カルシウム、鉄分、繊維質を多く含む高栄養価穀物であり、原産国は、中南米諸国、インド、ヒマラヤ、ネパールの特定地域である。一方、キヌアは、アガサ科の一年草であり、主にペルー南部やボリビア西部のアンデス山脈などの高地で栽培されており、ミネラル、ビタミン、蛋白質、食物繊維を豊富に含んでいる。
培養原料のアマランサスとキヌアは、単独で用いてもよく、或いは組み合わせて用いてもよい。これらは、細砕や粉砕などの前処理をすることなく、液体培地の調製に用いる。
【００１６】
上記の培養原料は、単独で、或いは２種以上を組み合わせて、以下の液体培地の調製に用いる。
すなわち、上記の培養原料は、水と混合して液体培地を調製する。原料の配合割合は、麹菌の培養中にグルコアミラーゼ及び耐酸性α−アミラーゼが選択的に生成、蓄積される程度のものに調整される。
例えば、大麦を培養原料とした場合には、水に対して大麦を１〜２０％（ｗ／ｖｏｌ）添加した液体培地に調製される。また、無精白の大麦を用いた場合には、さらに好ましくは８〜１０％（ｗ／ｖｏｌ）添加した液体培地に調製され、９５％精白した大麦を原料とした場合には、さらに好ましくは１〜４％（ｗ／ｖｏｌ）添加した液体培地に調製される。
次に、籾殻を除いた玄米を培養原料とした場合には、水に対して玄米を１％（ｗ／ｖｏｌ）から２０％（ｗ／ｖｏｌ）、好ましくは５％（ｗ／ｖｏｌ）から１３％（ｗ／ｖｏｌ）、より好ましくは８％（ｗ／ｖｏｌ）から１０％（ｗ／ｖｏｌ）を添加した液体培地に調製される。
【００１７】
豆類を培養原料とした場合には、水に対して豆類を１〜１０％（ｗ／ｖｏｌ）、好ましくは大豆であれば８〜１０％（ｗ／ｖｏｌ）、小豆であれば１〜２％（ｗ／ｖｏｌ）添加した液体培地に調製される。また、芋類を培養原料とした場合には、水に対して芋類を１〜１０％（ｗ／ｖｏｌ）添加した液体培地に調製される。
【００１８】
また、例えば、アマランサスを培養原料とした場合は、水に対して１．５％（ｗ／ｖｏｌ）から１５％（ｗ／ｖｏｌ）、好ましくは２％（ｗ／ｖｏｌ）から１０％（ｗ／ｖｏｌ）、より好ましくは２％（ｗ／ｖｏｌ）から８％（ｗ／ｖｏｌ）を添加した液体培地に調製される。一方、キヌアの場合は、水に対して１．５％（ｗ／ｖｏｌ）から７％（ｗ／ｖｏｌ）、好ましくは２％（ｗ／ｖｏｌ）から６％（ｗ／ｖｏｌ）、より好ましくは２％（ｗ／ｖｏｌ）から４％（ｗ／ｖｏｌ）を添加した液体培地に調製される。
【００１９】
このように、使用する培養原料の精白度、使用する麹菌株、培養原料の種類等によって、最適な配合使用量は異なるので、適宜選択すればよい。
【００２０】
適量の上記原料を添加した液体培地で麹菌を培養すると、グルコアミラーゼ、及び耐酸性α−アミラーゼの酵素がバランスよく高生産され、穀物酢醸造に使用するのに十分な酵素活性を有する液体麹が得られる。
なお、培養原料の使用量が上限値を超えると、培養液の粘性が高くなり、麹菌を好気培養するために必要な酸素や空気の供給が不十分となり、培養物中の酸素濃度が低下して、培養が進み難くなるので好ましくない。一方、培養原料の使用量が下限値に満たないと、目的とする酵素が高生産されない。
【００２１】
上記原料に含まれるでん粉は、培養前に予め糊化しておいてもよい。でん粉の糊化方法については特に限定はなく、蒸きょう法、焙炒法等、常法に従って行なえばよい。後述する液体培地の殺菌工程において、高温高圧滅菌等により、でん粉の糊化温度以上に加熱する場合は、この処理によりでん粉の糊化も同時に行なわれる。
【００２２】
液体培地には、前述の原料の他に、栄養源として有機物、無機塩等を適宜添加するのが好ましい。
これらの添加物は、麹菌の培養に一般に使用されているものであれば特に限定はないが、有機物としては米糠、小麦麩、コーンスティープリカー、大豆粕、脱脂大豆等を、無機塩としてはアンモニウム塩、硝酸塩、カリウム塩、酸性リン酸塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等の水溶性の化合物を挙げることができ、２種類以上の有機物及び／又は無機塩を同時に使用してもよい。これらの添加量は、麹菌の増殖を促進する程度であれば特に限定はないが、有機物としては０．１〜５％（ｗ／ｖｏｌ）程度、無機塩としては０．１〜１％（ｗ／ｖｏｌ）程度添加するのが好ましい。
このようにして得られる麹菌の液体培地は、必要に応じて滅菌処理を行なってもよく、処理方法には特に限定はない。例としては、高温高圧滅菌法を挙げることができ、１２１℃で１５分間行なえばよい。
【００２３】
滅菌した液体培地を培養温度まで冷却後、麹菌を液体培地に接種する。
本発明で用いる麹菌は、糖質分解酵素生産能を有する麹菌、好ましくはグルコアミラーゼ生産能、耐酸性α−アミラーゼ生産能を有する麹菌であり、例えば、アスペルギルス・カワチ（Aspergillus kawachii）等に代表される白麹菌、アスペルギルス・アワモリ（Aspergillus awamori）やアスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）等に代表される黒麹菌等が挙げられる。これら白麹菌と黒麹菌は、請求項２に記載したように、それぞれ単独で用いてもよいし、或いは両者を併用してもよい。また、培地に接種する麹菌の形態は任意であり、胞子又は菌糸を用いることができる。
【００２４】
これらの麹菌は、一種類の菌株による培養、又は同種若しくは異種の二種類以上の菌株による混合培養のどちらでも用いることができる。これらは、胞子又は前培養により得られる菌糸のどちらの形態のものを用いても問題はないが、菌糸を用いる方が対数増殖期に要する時間が短くなるので好ましい。麹菌の液体培地への接種量には特に制限はないが、液体培地１ｍｌ当り、胞子であれば１×１０４〜１×１０６個程度、菌糸であれば前培養液を０．１〜１０％程度接種することが好ましい。
【００２５】
麹菌の培養温度は、生育に影響を及ぼさない限りであれば特に限定はないが、好ましくは２５〜４５℃、より好ましくは３０〜４０℃で行なうのがよい。培養温度が低いと麹菌の増殖が遅くなるため雑菌による汚染が起きやすくなる。培養時間は２４〜７２時間で培養するのが好ましい。
培養装置は液体培養を行なうことができるものであればよいが、麹菌は好気培養を行なう必要があるので、酸素や空気を培地中に供給できる好気的条件下で行なう必要がある。
また、培養中は培地中の原料、酸素、及び麹菌が装置内に均一に分布するように撹拌をするのが好ましい。撹拌条件や通気量については、培養環境を好気的に保つことができる条件であればいかなる条件でもよく、培養装置、培地の粘度等により適宜選択すればよい。
【００２６】
上記の培養法で培養することにより、グルコアミラーゼ、及び耐酸性α−アミラーゼの酵素が同時にバランスよく生成され、穀物酢製造に使用できる酵素活性を有する液体麹となる。尚、本発明において液体麹とは、培養したそのものの他に、培養物を遠心分離等することにより得られる培養液、それらの濃縮物又はそれらの乾燥物等も包含するものとする。
【００２７】
上記の製造方法で得られた液体麹等は、本発明に係る穀物酢の製造に用いられる。穀物酢の製造にあたり、固体麹の代わりに当該液体麹等を用いること以外は、既知の製造方法にしたがって穀物酢を製造することができる。例えば、清酒の製造法と同様に、酒母や各もろみ仕込み段階において、固体麹の代わりに当該液体麹等を用いてアルコール発酵を行なう。
【００２８】
穀物酢の製造法の一例を示すと、まず原料として用いるでん粉質原料については、精米、玄米、外砕米、糠、大麦、小麦、麦芽、ヒエ、アワ、キビ、コウリャン、トウモロコシ等を挙げることができる。これらは単独で、或いは２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。なお、清酒製造時に副生する酒粕を所望により添加することができる。
【００２９】
上記でん粉質原料を糖化するために、前記した液体麹が、酵母、必要に応じて加える糖化酵素などと共に使用される。当該液体麹は、グルコアミラーゼ、耐酸性α−アミラーゼ等の酵素をバランスよく含んでいるため、でん粉質を分解して糖分を、タンパク質を分解してアミノ酸を生成する。これらは、アルコール発酵中にアルコールに変わるほか、酵母や酢酸菌の栄養源となり、さらには食酢の香味成分となる。
【００３０】
アルコール発酵終了後、ろ過を行なって残渣を除く。
次いで、アルコール含有液に種酢及び酒粕抽出液などを加えて、酢酸発酵を行なう。ここで酒粕抽出液は、酒粕に所定の水を加えて発酵させたのち、ろ過して得られるものである。
発酵終了後、熟成し、その後ろ過し、得られたろ液を殺菌処理して最終製品を得る。
本発明によって穀物酢製造における全工程を液相で行うことができる。
【実施例】
【００３１】
以下、本発明を実施例によってより具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００３２】
実施例１（玄麦液体麹を用いた穀物酢の製造）
（Ｉ）玄麦液体麹の製造
１）前培養方法；丸麦（国産２条大麦、搗精歩合70%）8gと水100mlを500mlバッフル付三角フラスコに張り込み、121℃、15分間オートクレーブ滅菌した。この前培養培地に白麹菌アスペルギルス・カワチ（Aspergillus kawachii）（NBRC 4308）を1×106個／mlになるように植菌し、37℃、24時間、100rpmで振とう培養した。
【００３３】
２）本培養方法；玄麦（国産２条大麦、搗精なし）2g、KNO3 0.2g、KH2PO4 0.3gと水100mlを500mlバッフル付三角フラスコに張り込み、121℃、15分間オートクレーブ滅菌した（2本準備した）。この本培養培地へ上記の前培養液を1mlずつ植菌し、37℃、72時間、100rpmで振とう培養して、玄麦液体麹を得た。
【００３４】
（ＩＩ）玄麦液体麹を用いたアルコール発酵
仕込み配合は表１の通りとした。丸麦（国産２条大麦、搗精歩合70%）は、洗麦後、60分間浸漬、30分間水切り、60分間蒸煮したものを使用した。酵母は、焼酎酵母（鹿児島酵母）を用い、YPD培地で30℃、48時間静置培養したものを50μl植菌した。
上記（Ｉ）で得られた玄麦液体麹に、上記酵母、並びに上記の如く処理した丸麦、90％乳酸及び水を添加した。発酵条件は、25℃一定とし、10日間アルコール発酵させ、玄麦液体麹アルコール発酵液を得た。
【００３５】
【表１】
0004418783.tif 000002
【００３６】
（ＩＩＩ）玄麦液体麹アルコール醗酵液を用いた穀物酢の製造
１）使用酢酸菌；  Acetobacter aceti subsp. aceti（NBRC3284）を用いた。酢酸菌は普通ブイヨン+1%glucose培地で培養した。
２）仕込み；上記（ＩＩ）で得られた玄麦液体麹アルコール発酵液を遠心分離し、上清に上記酢酸菌を添加し、30℃で３ヶ月培養した。
３）おり下げ；培養後、表面の菌膜を取り除き、遠心分離して、最終製品を得た。
【００３７】
上記のようにして得られた穀物酢の酸度は６．５％であり、ｐＨは２．９であった。この穀物酢の官能評価を専門パネル６名で行ったところ、穀物酢として十分使用できる品質と判断された。
【００３８】
実施例２（玄米液体麹を用いた米酢の製造）
（Ｉ）玄米液体麹の製造
１）前培養方法；90%精白米8gと水100mlを500mlバッフル付三角フラスコに張り込み、121℃、15分間オートクレーブ滅菌した。この前培養培地に白麹菌アスペルギルス・カワチ（Aspergillus kawachii）（NBRC 4308）を1×106個／mlになるように植菌し、37℃、24時間、100rpmで振とう培養した。
２）本培養方法；玄米8gとKNO3 0.2g、KH2PO4 0.3gと水100mlを500mlバッフル付三角フラスコに張り込み、121℃、15分間オートクレーブ滅菌した。この本培養培地へ上記の前培養液を1mlずつ植菌し、37℃、72時間、100rpmで振とう培養して、玄米液体麹を得た。
【００３９】
（ＩＩ）玄米液体麹を用いたアルコール発酵
仕込み配合は表２の通りとした。米は、90％精米を用い、洗米後、30分間浸漬、30分間水切り、30分間蒸煮したものを使用した。酵母は、焼酎酵母（鹿児島酵母）を用い、YPD培地で30℃、48時間静置培養したものを50μl植菌した。
上記（Ｉ）で得られた玄米液体麹に、上記酵母、並びに上記の如く処理した米、90％乳酸及び水を添加した。発酵条件は、25℃一定とし、10日間アルコール発酵させ、玄米液体麹アルコール発酵液を得た。
【００４０】
【表２】
0004418783.tif 000003
【００４１】
（ＩＩＩ）玄米液体麹アルコール醗酵液を用いた米酢の製造
１）使用酢酸菌； Acetobacter aceti subsp. aceti（NBRC3284）を用いた。酢酸菌は普通ブイヨン+1%glucose培地で培養した。
２）仕込み；上記（ＩＩ）で得られた玄米液体麹アルコール発酵液を遠心分離し、上清に上記酢酸菌を添加し、30℃で３ヶ月培養した。
３）おり下げ；培養後、表面の菌膜を取り除き、遠心分離して、最終製品を得た。
【００４２】
上記のようにして得られた米酢の酸度は５．８％であり、ｐＨは２．８であった。この米酢の官能評価を専門パネル６名で行ったところ、米酢として十分使用できる品質と判断された。
【００４３】
以上から、本発明によれば、液体麹を用いて穀物酢を製造することが可能であることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明によれば、液体麹を用いた穀物酢の製造方法が提供される。
この方法によれば、従来の固体麹を用いた穀物酢の製造法により得られる穀物酢と同程度の品質を有し、官能的にも遜色のない穀物酢を製造することができる。
さらに、種々の原料や麹菌株を用いた麹菌培養物を組み合わせて製造した液体麹を使用することにより、穀物酢のバラエティー化を図ることが極めて容易となる。
従って、本発明は、穀物酢製造の効率化だけでなく、需要者の多様な要望に応じた製品を提供することにより、穀物酢の市場拡大に貢献することが期待される。