(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
機械的な要因による損傷を受けた後に生じる血管内膜の平滑筋細胞増殖、再狭窄および血管閉塞からなる群から選択される過増殖性の血管疾患を予防するための医薬組成物であって、抗増殖有効量のラパマイシンと、医薬上許容される担体とからなり、血管損傷を受ける３日前から当日まで連日投与されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
機械的な要因による損傷を受けた後に生じる血管内膜の平滑筋細胞増殖、再狭窄および血管閉塞からなる群から選択される過増殖性の血管疾患を予防するための医薬組成物であって、抗増殖有効脳のラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せと、医薬上許容される担体とからなり、血管損傷を受ける３日前から当日まで連日投与されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項３】
経皮経管冠動脈形成術を受けることから生じる再狭窄を予防するための医薬組成物であって、抗再狭窄有効量のラパマイシンと、医薬上許容される担体とからなり、経皮経管冠動脈形成術を受ける３日前から当日まで連日投与されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項４】
経皮経管冠動脈形成術を受けることから生じる再狭窄を予防するための医薬組成物であって、抗再狭窄有効量のラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せと、医薬上許容される担体とからなり、経皮経管冠動脈形成術を受ける３日前から当日まで連日投与されることを特徴とする医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、過増殖性の血管疾患を予防するための医薬組成物に関する。さらに詳しくは、本発明は、機械的な要因による血管損傷を受けた後や、かかる血管損傷を生じる状況下にある哺乳動物において、血管内膜の平滑筋細胞過形成、再狭窄、血管閉塞などを予防するのに有用な医薬組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
心臓に栄養を供給する血管の部分的な閉塞によって起こる心臓病に罹患する患者は多い。このような患者における血管の閉塞がより重篤になると、高血圧、虚血性損傷、心発作、心筋梗塞などをきたす場合が多い。普通、血管閉塞の前には、血管内膜の平滑筋細胞過形成によって血管狭窄が生じる。血管内膜の平滑筋細胞過形成の基本的な原因は、血管の平滑筋が損傷を受けたり、内皮層の充全性が損なわれることである。この疾患の全過程は、その病因ゆえに、過増殖性の血管疾患と呼ぶことができる。動脈が損傷を受けた後に生じる血管内膜の肥厚化は、以下の３つの連続的な過程に分けることができる。すなわち、１）血管損傷後の平滑筋細胞増殖の開始、２）血管内膜への平滑筋細胞の移動、および３）基質の沈着を伴う血管内膜における平滑筋細胞のさらなる増殖である。血管内膜の肥厚化の病因に関する研究によると、動脈が損傷を受けた後には、血小板、内皮細胞、マクロファージ、平滑筋細胞などが、血流を介さず細胞間隙を通って隣接する細胞に作用する（paracrine）増殖因子や、増殖因子を産生する細胞自身に作用する（autocrine）増殖因子、例えば、血小板由来増殖因子、表皮増殖因子、インスリン様増殖因子、悪性化増殖因子など、ならびに、平滑筋細胞の増殖や移動をもたらすサイトカインを放出することが示されている。Ｔ細胞やマクロファージも、新しく形成された血管内膜へ移動する。［ハウデンシルド，シイ（Haudenschild, C.）、ラボラトリ・インベスティゲイション（Lab. Invest.）41巻：407頁（1979年）；クラウズ，エイ（Clowes, A.）、サーキュレイション・リサーチ（Circ. Res.）56巻：139頁（1985年）；クラウズ, エイ（Clowes, A.）、ジャーナル・オブ・カーディオバスキュラー・ファーマコロジー（J. Cardiovas. Pharm.）14巻（増補6）：S12頁（1989年）；マンダーソン, ジェイ（Manderson, J.）、アルテリオスクレロシス（Arterio.）9巻：289頁（1989年）；フォレスター, ジェイ（Forrester, J.）、ジャーナル・オブ・アメリカン・カレッジ・オブ・カーディオロジー（J. Am. Coll. Cardiol.）17巻：758頁（1991年）］。このような現象のカスケードは、動脈損傷に限らず、静脈や細動脈に対する損傷後にも発生する。
【０００３】
内膜の肥厚化を起こす血管損傷は、生物学的または機械的のいずれによって誘発されるかに従って、大きく分類することができる。動脈硬化は、生物学的な要因によって生じて狭窄をきたす血管損傷のうち、ごく普通に見られる形態の一種である。血管平滑筋細胞の移動や増殖は、動脈硬化の病因において重要な役割を果たしている。動脈硬化の病変としては、単球／マクロファージや平滑筋細胞に由来する脂質含有「泡沫細胞」の大量蓄積が挙げられる。「泡沫細胞」領域の形成は、内皮充全性や基底膜破壊の終末と関連している。これらの現象がきっかけとなり、血管平滑筋細胞が急速かつ選択的に増殖し、新しい基底膜（細胞外基質）が盛んに形成されることによって、再狭窄が生じ、その結果、動脈経路の閉塞をきたす。［デイビーズ, ピイ・エフ（Davies, P.F.）、アルテロスクレロシス・ラボラトリ・インベスティゲイション（Artherosclerosis Lab. Invest.）55巻：5頁（1986年）］。
【０００４】
血管内膜の肥厚化をきたす機械的な要因による損傷は、バルーン血管形成術、血管手術、移植手術、ならびに、血管充全性を損なう他の同様の挿入法を施した後に生じる。バルーンカテーテルで損傷を受けた後における血管内膜の肥厚化は、バルーン血管形成術後に見られるヒト患者の動脈再狭窄の動物モデルについて研究されてきた。クラウズ（Clowes）、フェルンズ（Ferns）、レイディ（Reidy）らは、動脈を広げる動脈内カテーテルによる脱内皮化が、中膜平滑筋の最も内側の層に損傷を与え、最も内側の細胞を部分的に死滅させることもありうることを示している。［シュワルツ, エス・エム（Schwartz, S.M.）、ヒューマン・パソロジー（Human Pathology）18巻：240頁（1987年）；フィンガーレ, ジェイ（Fingerle, J.）、アテリオスクレロシス（Ateriosclerosis）10巻：1082頁（1990年）］。損傷後には、中膜平滑筋細胞の増殖が続き、それらの多くが内弾性膜の有窓部を通って内膜に移動し、増殖して新しい内膜病変を形成する。
【０００５】
血管狭窄は、血管造影法や超音波造影法［エヴァンス, アール・ジイ（Evans, R.G.）、ジャマ（JAMA）265巻：2382頁（1991年）］を用いて、検出・評価することができ、経皮経管冠動脈形成術（バルーンカテーテル挿入法）によって治療されることが多い。しかしながら、上記のごとく、血管形成術の際に受けた機械的な要因による血管損傷に対する応答によって起きる再狭窄の結果、血管形成術を行ってから数カ月以内に、これら患者の約３０〜４０％において血流減少が見られる。［ペパイン, シイ（Pepine, C.）、サーキュレイション（Circulation）81巻：1753頁（1990年）；ハードフ, アール（Hardoff, R.）、ジャーナル・オブ・アメリカン・カレッジ・オブ・カーディオロジー（J. Am. Coll. Cardiol.）15巻：1486頁（1990年）］。
【０００６】
血管形成術後に再狭窄を予防したり、血管内膜の平滑筋細胞増殖を低減する試みにおいては、血管形成術と同時またはそれ以後に、多数の薬剤が臨床上用いられてきた。再狭窄を予防したり、その程度を低減する試みに用いられた大抵の薬剤は、成功していない。以下に、好ましい臨床結果が報告された数種の薬剤を列挙する。すなわち、ロバスタチン（lovastatin）［サーニ, アール（Sahni, R.）、サーキュレイション（Circulation）80巻（増補）65頁（1989年）；ゲルマン, ジェイ（Gellman, J.）、ジャーナル・オブ・アメリカン・カレッジ・オブ・カーディオロジー（J. Am. Coll. Cardiol.）17巻：251頁（1991年）］；ＤＰ-１９０４などのトロンボキサンＡ2シンセターゼ阻害剤［ヤベ, ワイ（Yabe,Y.）、サーキュレイション（Circulation）80巻（増補）260頁（1989年）］；エイコサペンタン酸［ナイ, イー（Nye, E.）、オーストラリアン・アンド・ニュージランド・ジャーナル・オブ・メディスン（Aust. N.Z. J. Med.）20巻：549頁（1990年）］；シプロステン（ciprostene）（プロスタサイクリン類似体）［デンケ, デイ（Demke, D.）、ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ヘマトロジー（Brit. J. Haematol.）76巻（増補）：20頁（1990年）；ダリウス, エイチ（Darius, H.）、ヨーロピアン・ハート・ジャーナル（Eur. Heart J.）、12巻（増補）：26巻（1991年）］；トラピジル（血小板由来増殖因子）［オカモト, エス（Okamoto, S.）、サーキュレイション（Circulation）82巻（増補）：428頁（1990年）］；アンジオテンシン変換酵素阻害剤［ゴットリーブ, エヌ（Gottlieb, N.）、ジャーナル・オブ・アメリカン・カレッジ・オブ・カーディオロジー（J. Am. Coll. Cardiol.）17（増補Ａ）：181A頁（1991年）］；および低分子量ヘパリン［ド・ヴリース, シイ（de Vries, C.）、ヨーロピアン・ハート・ジャーナル（Eur. Heart J.）12巻（増補）：386頁（1991年）］。
【０００７】
平滑筋細胞の増殖や血管内膜の肥厚化を予防したり低減したりするための良好な薬剤を開発する試みにおいては、バルーンカテーテルに誘発された様々な哺乳動物の動脈損傷を、血管内膜の肥厚化やその結果として血管の狭細化をきたす血管損傷の標準的なモデルとして用いることが開発されてきた。［チェブルー, エイ（Chevru, A.）、サージェリー・ジネコロジー・アンド・オブステトリクス（Surg. Gynecol. Obstet.）171巻：443頁（1990年）；フィッシュマン, ジェイ（Fishman, J.）、ラボラトリ・インベスティゲイション（Lab. Invest.）32巻：339頁（1975年）；ハウデンシルド, シイ（Haudenschild, C.）、ラボラトリ・インベスティゲイション（Lab. Invest.）41巻：407頁（1979年）；クラウズ, エイ・ダブリュ（Clowes, A.W.）、ラボラトリ・インベスティゲイション（Lab. Invest.）49巻：208頁（1983年）；クラウズ, エイ・ダブリュ（Clowes, A.W.）、ジャーナル・オブ・カーディオバスキュラー・ファーマコロジー（J. Cardiovas. Pharm.）、14巻：S12頁（1982年）；およびフェルンズ, ジイ・エイ（Ferns, G.A.）、サイエンス（Science）253巻：1129頁（1991年）］。この標準的な動物モデルで多くの化合物が評価されてきた。免疫抑制剤であるシクロスポリンＡが評価され、矛盾する結果を与えている。ジョナサン（Jonasson）は、シクロスポリンＡが、動脈バルーンカテーテル挿入法を実施した後の血管内膜の増殖性病変をインビボで阻害するが、平滑筋細胞の増殖をインビトロで阻害しないことを報告した。［ジョナサン, エル（Jonasson, L.）、プロシーディングズ・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ（Proc. Natl. Acad. Sci.）85巻：2303頁（1988年）］。しかしながら、フェルンズ（Ferns）は、脱内皮化したウサギをシクロスポリンＡで処置した場合、インビボでの血管内膜増殖の有意な減少がまったく観察されないことを報告した。さらに、泡沫マクロファージが、内弾性膜に隣接する領域において、多数の空胞化した平滑筋細胞と共に、血管内膜に蓄積することが観察されたが、このことは、シクロスポリンＡが、動脈損傷の部位に形成する病変を変更・促進しうることを示している。［フェルンズ, ジイ・エイ（Ferns, G.A.）、サーキュレイション（Circulation）80巻（増補）：184頁（1989年）；フェルンズ, ジイ（Ferns, G.）、アメリカン・ジャーナル・オブ・パソロジー（Am. J. Path.）137巻：403頁（1990年）］。
【０００８】
ラパマイシンは、ストレプトマイセス・ハイグロスコピカス（Streptomyces hygroscopicus）によって産生される大環状トリエン系の抗生物質［米国特許第3,929,992号］であり、アルブミン抗原投与に応答して体液性（ＩｇＥ様）抗体の形成を予防し［マーテル, アール（Martel, R.）ら、カナディアン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー・アンド・ファーマコロジー（Can. J. Physiol. Pharm.）55巻：48頁（1977年）］、ネズミのＴ細胞活性化を阻害し［スタルッチ, エム（Staruch, M.）、ファセブ（FASEB）3巻：3411頁（1989年）］、組織不適合性の囓歯類における臓器移植組織の生存期間を延ばし［モリス, アール（Morris, R.）、メディカル・サイエンス・リサーチ（Med. Sci. Res.）17巻：877頁（1989年）］、哺乳動物における移植時の拒絶反応を阻害する［カルネ, アール（Calne, R.）ら、欧州特許出願第401,747号］ことが示されている。ラパマイシンは、Ｇ１-Ｓ界面における、カルシウム依存の、カルシウム非依存の、サイトカイン非依存の、および本質的なＴおよびＢ細胞の分裂を遮断する。ラパマイシンは、ＩＬ-１によって誘発されるγ-インターフェロン産生を阻害し、かつ、γ-インターフェロンによって誘発される膜抗原の発現をも阻害する。［モリス, アール・イー（Morris, R.E.）、トランスプランテーション・レヴューズ（Transplantation Rev.）6巻：39頁（1992年）］。ラットにおける冠動脈移植片アテローム硬化（ＣＧＡ）を予防するのにラパマイシンを用いることは、メイザー（Meiser）によって開示されている［ジャーナル・オブ・ハート・アンド・ラング・トランスプランテーション（J. Heart Lung Transplantation）9巻：55頁（1990年）］。移植手術後における動脈の肥厚化（ＣＧＡとして知られている）は、移植組織の生存を制限する要素であり、移植組織レシピエントの免疫系による移植血管に対する慢性的な免疫学的応答によって生じる。［デック, ジイ（Dec, G.）、トランスプランテーション・プロシーディングズ（Transplantation Proc.）23巻：2095頁（1991年）およびダン, エム（Dunn, M.）、ランセット（Lancet）339巻：1566頁（1992年）］。
【０００９】
本発明は、ＣＧＡを予防するためにラパマイシンを用いるのとは異なるが、それは、ＣＧＡがレシピエント自身の血管に対する損傷とは関係なく、拒絶反応型の応答だからである。本発明は、本来の血管に対する血管損傷に関する。血管内膜の平滑筋細胞増殖は、免疫系に関係するのではなく、増殖因子によるものである。例えば、バルーンカテーテルの損傷後における動脈内膜の肥厚化は、増殖因子（ＰＧＤＦ、ｂＦＧＦ、ＴＧＦｂ、ＩＬ-１など）に誘発された平滑筋細胞の増殖や移動によって起こると考えられている。［イップ, ジェイ・エイチ（Ip, J.H.）、ジャーナル・オブ・アメリカン・カレッジ・オブ・カーディオロジー（J. Am. Coll. Cardiol.）、15巻：1667頁（1990年）］。フェルンズ（Ferns）は、バルーンカテーテル挿入法の実施後における無胸腺ヌードラット由来の動脈と、正常ラット由来の動脈との間には、血管内膜の肥厚化に差がないことを見い出したので、免疫応答系がバルーンカテーテル挿入法の実施後における動脈内膜の肥厚化に関係していないことも示している。［アメリカン・ジャーナル・オブ・パソロジー（Am. J. Pathol.）138巻：1045頁（1991年）］。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明は、機械的な要因による損傷を受けた後に生じる血管内膜の平滑筋細胞増殖、再狭窄および血管閉塞からなる群から選択される過増殖性の血管疾患を予防するための医薬組成物を提供する。かかる医薬組成物は、抗増殖有効量のラパマイシン、または、ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せと、医薬上許容される担体とからなり、血管損傷を受ける前に投与される。
【００１１】
本発明の医薬組成物は、過増殖性の血管疾患を予防または処置する必要のある哺乳動物に、経口的、非経口的、血管内、鼻腔内、気管支内、経皮的、直腸内などの投与経路で、あるいは、この医薬組成物を満たした血管ステントを介して、血管疾患の発生する前に先立って投与される。
【００１２】
このように、ラパマイシンは、機械的な要因による血管損傷を受けた後や、かかる血管損傷を生じる状況下にある哺乳動物において、血管内膜の平滑筋細胞過形成、再狭窄、血管閉塞などを予防するのに有用である。機械的な要因による血管損傷としては、経皮経管冠動脈形成術などのカテーテル挿入法や血管かき取り法、血管手術、移植手術、レーザー処置法などの血管内膜や内皮の充全性を損なう挿入法によって起こる血管損傷が挙げられるが、これらに限定されることはない。特に、ラパマイシンは、経皮経管冠動脈形成術を受けた後における再狭窄の予防に特に有用である。
【００１３】
予防とは、感受性のある哺乳動物における過増殖性の血管疾患の進行を阻害したり、かかる血管疾患の発生を予防することを含むものとする。
【００１４】
本発明はまた、経皮経管冠動脈形成術を受けることから生じる再狭窄を予防するための医薬組成物を提供する。かかる医薬組成物は、抗再狭窄有効量のラパマイシン、または、ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せと、医薬上許容される担体とからなり、経皮経管冠動脈形成術を受ける前に投与される。
【００１５】
抗増殖性の代謝拮抗薬であるミコフェノール酸は、プリン生合成の新生経路における酵素であるイノシン一リン酸デヒドロゲナーゼやグアノシン一リン酸シンセターゼを阻害する。この結果、Ｇ１-Ｓ界面における細胞の蓄積を起こすＤＮＡ合成が阻害される。過増殖性の血管疾患を予防または処置するのに有用なラパマイシンを含む他の組合せは、当業者に明らかである。例えば、ラパマイシンを他の抗増殖性の代謝拮抗薬と組み合わせて用いることが挙げられるが、それに限定されることはない。
【００１６】
過増殖性の血管疾患に対するラパマイシンの効果は、血管内膜の平滑筋細胞が増殖し、それゆえ再狭窄が進行している哺乳動物に観察される過増殖効果に対抗するインビボでの標準的な薬理学的試験法で確立された。ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せは、インビボ試験法で評価された。試験法および得られた結果については、以下で説明する。
【００１７】
ラパマイシン単独、ならびに、ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せを、経皮経管冠動脈形成術を受けた後に生じるヒトの血管損傷およびそれから進行する再狭窄に対抗するインビボでの標準的な薬理学的試験法で評価した。試験化合物が再狭窄を阻害する能力は、バルーンカテーテル挿入法を実施した後に試験化合物で処理した哺乳動物における血管内膜の肥厚化を、同様の試験法を実施した後に処理していない対照の哺乳動物における血管内膜の肥厚化と比較することによって決定した。［チェブルー, エイ（Chevru, A.）、サージェリー・ジネコロジー・アンド・オブステトリクス（Surg. Gynecol. Obstet.）171巻：443頁（1990年）；フィッシュマン, ジェイ（Fishman, J.）、ラボラトリ・インベスティゲイション（Lab. Invest.）32巻：339頁（1975年）；ハウデンシルド, シイ（Haudenschild, C.）、ラボラトリ・インベスティゲイション（Lab. Invest.）41巻：407頁（1979年）；クラウズ, エイ・ダブリュ（Clowes, A.W.）、ラボラトリ・インベスティゲイション（Lab. Invest.）49巻：208頁（1983年）；クラウズ, エイ・ダブリュ（Clowes, A.W.）、ジャーナル・カーディオバスキュラー・ファーマコロジー（J. Cardiovas. Pharm.）、14巻：S12頁（1982年）；およびフェルンズ, ジイ・エイ（Ferns, G.A.）、サイエンス（Science）253巻：1129頁（1991年）］。
【００１８】
以下、用いた試験法について簡単に説明する。
ラットを、以下の表に示すように、処理グループと、ひとつの対照グループとに分割した。処理グループには、ラパマイシン単独、あるいは、ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せのいずれかを、バルーンカテーテル挿入法を実施する３日前（術前３日目）から与えた。０日目に、雄スプラーグ・ドーリー（Sprague-Dawley）ラットの左頚動脈に、膨張させた２Ｆｒバルーンカテーテルで損傷を与えた。術後１３日目までの期間にわたって、処置したラットを毎日処理し続けた。それゆえ、処理は術前３日目から術後１３日目まで行った。ひとつの非処理グループを、損傷を受けた対照として用い、処理を行わない場合における血管内膜の増殖量を確立した。これらグループのマウスは、０日目に、上記のようにバルーンカテーテル挿入法を受けたが、術前および術後のいずれにも薬剤処理を受けていない。右動脈は、すべてのグループにおいて損傷をうけない対照として用いた。１４日後に、これらのラットを殺し、動脈を取り出した。血管内膜や血管壁の平均面積は、生物形態計測法によって測定した。結果は、次式：
【００１９】
【数１】
0004514838.tif 000002
【００２０】
によって表すことができる血管内膜の割合（％）として表す。
次表は、得られた結果を示す。
【００２１】
【表１】
0004514838.tif 000003
【００２２】
上記の表の結果は、頚動脈にバルーン血管形成術を実施した場合、ラパマイシンを術前３日目から術後１３日目まで投与することによって、術後に起こりうる頚動脈の再狭窄の進行が予防されたことを示している。術前３日目から術後３日目または０日目までしか処理しなかった場合の予防効果は低く、術後３日目から１３日目まで処理した場合には、再狭窄は予防されなかった。
【００２３】
変更した試験法では、ラパマイシン単独、あるいは、ラパマイシンおよびミコフェノール酸（ＭＰＡ）の組合せによる処理を、上記のように、１４日目に中止したが、ラットを直ちに殺さなかった。得られた結果を以下の表に示すが、この試験法では、０日目にラットの頚動脈にバルーンカテーテル挿入法を実施した後、４４日目に殺して生物形態計測法で調べた。処理方法は表に記載したとおりである。
【００２４】
【表２】
0004514838.tif 000004
【００２５】
これらの結果は、ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せによって術前３日目から術後１３日目まで処理した場合には、４４日目に再狭窄が効果的に予防されたが、血管形成術を実施する前に薬剤投与を行わなかった場合には、４４日目に再狭窄が効果的に予防されなかったことを示している。
【００２６】
０日目に、ラットの胸大動脈にバルーンカテーテル挿入法を実施した場合にも、上記と同様の結果が得られた。ラットは、１４日目または４４日目のいずれかに殺して調べた。ラパマイシン単独、あるいは、ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せを用いて得られた結果を以下の表に示す。
【００２７】
【表３】
0004514838.tif 000005
【００２８】
上記の表の結果は、術前３日目から術後１３日目までラパマイシンで処理した場合には、胸大動脈にバルーンカテーテル挿入法を実施してから４４日後に再狭窄の進行が完全に予防されたことを示している。ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せで同様に処理した場合にも、バルーンカテーテル挿入法を実施してから１４日後に再狭窄が完全に予防され、バルーンカテーテル挿入法を実施してから４４日後でも有意に予防された。
【００２９】
同様に、術前３日目から術後１３日までラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せで処理した場合には、ラットの腹大動脈にバルーンカテーテル挿入法を実施してから１４日後に再狭窄が完全に予防された。
【００３０】
【表４】
0004514838.tif 000006
【００３１】
上記の各表の結果は、ラパマイシンが、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、血管の内皮層を損なう挿入法、例えば、経皮経管冠動脈形成術、血管カテーテル挿入法、血管かき取り法、血管手術、レーザー処置法などを施した後に起こりうる再狭窄を予防するのに有用であることを示している。これらのデータは、ラパマイシンを、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、カテーテル挿入法の実施３日前から実施１３日後までに投与することによって、血管内膜の平滑筋細胞増殖を予防しながら、内皮を治癒することができることをも示している。ラパマイシンを、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、投与してから１３日後に、血管内膜の増殖が停止したことは、内皮層の回復後は血管内膜の増殖が停止するので、内皮層が再生したことを示している。内皮層が完全に回復していることは、以前にカテーテルを挿入した動脈からカテーテルを４４日目に取り出した後、この動脈を顕微鏡検査することによって、確認された。
【００３２】
上記のデータから、ラパマイシン単独で、あるいは、ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せで、術前に投与を始め、術後も投与を継続することが特に好ましい。再狭窄を予防するのに必要な投与期間は患者によって異なる。経皮経管冠動脈形成術の場合、術前３日目またはそれ以前から投与を開始し、術後８日目またはそれ以後まで投与を継続することが好ましい。術前３日目またはそれ以前から投与を開始し、術後１３日目またはそれ以後まで投与を継続することがより好ましい。ラパマイシンを、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて用いて、血管カテーテル挿入法、血管かき取り法、血管手術、レーザー処置法などを施した後の再狭窄を予防する場合にも、同様の投与プロトコルを適用することができる。
【００３３】
インビボでの標準的な試験法の結果は、ラパマイシン単独、ならびに、ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せが、過増殖性の血管疾患を予防するのに有用であることを示している。
【００３４】
このように、ラパマイシン単独、ならびに、ラパマイシンおよびミコフェノール酸の組合せは、機械的な要因による血管損傷を受けた後や、かかる血管損傷を生じるような状況下で、血管内膜の平滑筋細胞増殖、再狭窄、血管閉塞などを治療するのに有用である。機械的な要因による血管損傷としては、経皮経管冠動脈形成術などのカテーテル挿入法や血管かき取り法、血管手術、移植手術、レーザー処置法などの血管内膜や内皮の充全性を損なう挿入法によって起こる血管損傷が挙げられるが、これらに限定されることはない。
【００３５】
ラパマイシンを、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、過増殖性の血管疾患の予防に用いる場合、それを必要とする哺乳動物に対して、そのまま、あるいは、医薬用担体と共に、処方することができる。医薬担体は、固形であっても、液状であってもよい。
【００３６】
固形担体は、香味剤、滑沢剤、可溶化剤、懸濁化剤、充填剤、潤滑剤、圧縮補助剤、結合剤または錠剤崩壊剤としても作用しうる一種またはそれ以上の物質を含有することができるが、それはカプセル化材料とすることもできる。散剤の場合、担体は、細かく粉砕された固体であって、やはり細かく粉砕された活性成分と混合されている。錠剤の場合、活性成分は、必要な圧縮性を有する担体と適当な割合で混合され、所望の形状および寸法に成形される。散剤および錠剤は、好ましくは９９％までの活性成分を含有する。適当な固形担体としては、例えば、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、砂糖、乳糖、デキストリン、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン、低融点ワックスおよびイオン交換樹脂が挙げられる。
【００３７】
液状担体は、液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤および加圧組成物を調製するのに用いられる。活性成分は、医薬上許容される液状担体（例えば、水、有機溶媒、両方の混合物、または医薬上許容される油脂）中に溶解または懸濁させることができる。液状担体は、他の適当な医薬用添加物（例えば、可溶化剤、乳化剤、緩衝化剤、保存剤、甘味料、香味剤、懸濁化剤、増粘剤、着色剤、粘度調節剤、安定化剤または浸透圧調節剤）を含有することができる。経口および非経口投与用の液状担体の適当な例としては、水（上記の添加剤、例えば、セルロース誘導体、好ましくはカルボキシメチルセルロースナトリウム溶液を部分的に含有する)、アルコール（一価アルコールおよび多価アルコール、例えば、グリコールを含む）およびそれらの誘導体、ならびに油（例えば、分別ヤシ油および落花生油）が挙げられる。非経口投与の場合、担体は、オレイン酸エチルおよびミリスチン酸イソプロピルなどの油状エステルとすることもできる。無菌の液状担体は、非経口投与用の無菌液状組成物に有用である。加圧組成物用の液状担体は、ハロゲン化炭化水素または他の医薬上許容される噴射剤とすることができる。
【００３８】
無菌の液剤または懸濁剤である液状医薬組成物は、例えば、筋肉内、腹腔内または皮下への注射によって投与することができる。無菌液剤は、静脈内投与することもできる。上記化合物は、液状または固形のいずれの組成物形態でも、経口投与することができる。
【００３９】
ラパマイシンは、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、従来の坐剤の形態で直腸内に投与してもよい。鼻腔内または気管支内へ吸入または吹入による投与の場合、本発明の化合物は、水溶液または部分的水溶液に処方すればよく、次いで、エアロゾルの形態で利用することができる。ラパマイシンは、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、活性化合物と、この活性化合物に対して不活性であり、皮膚に対して毒性を有さず、しかも、皮膚を介して全身吸収用薬剤を血流中に送達するような担体とを含有する経皮貼付薬を用いて、経皮的に投与してもよい。このような担体は、クリーム剤や軟膏剤、パスタ剤、ゲル剤、ならびに密封用具などの数多くの形態をとる。クリーム剤や軟膏剤は、水中油型または油中水型のいずれかのタイプの粘稠液または半固形乳剤であればよい。活性成分を含有する鉱油または親水ワセリン中に分散させた吸収性粉末からなるパスタ剤も適当である。様々な密封用具、例えば、必要に応じて担体と共に活性成分を含有する貯蔵部を覆う半透膜や、活性成分を含有するマトリックスを用いて、活性成分を血流中に放出させればよい。他の密封用具は文献で知られている。
【００４０】
ラパマイシンは、バルーンカテーテル挿入法を実施している間に、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、血管内に投与するか、また、このラパマイシンを、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、満たした血管ステントを介して、投与することによって、損傷を受けた直後に局所的な効果を与えることができる。
【００４１】
ラパマイシンは、単独で、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、医薬上許容される賦形剤と共に処方した液剤、クリーム剤、またはローション剤として、局所的に投与してもよい。これら製剤は、一般的には０.１〜５％、好ましくは２％の割合で活性化合物を含有する。
【００４２】
用量に関する必要条件は、用いた特定の組成物、投与の経路、発現した症状の重篤度および治療中の特定の患者によって変化する。標準的な薬理学的試験法で得られた結果に基づいて、ラパマイシンを、単独の活性化合物として、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、静脈内投与する場合のラパマイシンの計画的な一日量は、０.００１〜２５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０.００５〜１０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０.０１〜５ｍｇ／ｋｇである。ラパマイシンを、単独の活性化合物として、あるいは、ミコフェノール酸と組み合わせて、経口投与する場合のラパマイシンの計画的な一日量は、０.００５〜５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０.０１〜２５ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０.０５〜１０ｍｇ／ｋｇである。ラパマイシンと組み合わせて静脈内投与に用いる場合のミコフェノール酸の計画的な一日量は、０.５〜７５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは５〜５０ｍｇ／ｋｇである。ラパマイシンと組み合わせて経口投与に用いる場合のミコフェノール酸の計画的な一日量は、１〜７５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１０〜５０ｍｇ／ｋｇである。
【００４３】
一般に、治療は、活性化合物の適量より少ない用量から開始する。その後、かかる状況下で至適な効果に達するまで用量を増大させる；経口的、非経口的、血管内、鼻腔内、気管支内、経皮的、または直腸内への投与に対する正確な用量は、治療を受ける個々の患者による経験に基づいて、投与する医師が決定する。一般的に、ラパマイシンは、通常、有害または有毒な副作用を起こすことなく、有効な効果を与える濃度で投与するのが最も望ましく、単一の単位量として投与することもできるし、必要なら、投与量を、１日に適当な回数だけ投与される便利な副単位に分割してもよい。
【００４４】
【発明の効果】
本発明によれば、過増殖性の血管疾患を予防するための医薬組成物が得られる。この医薬組成物は、機械的な要因による血管損傷を受けた後や、かかる血管損傷を生じる状況下にある哺乳動物において、血管内膜の平滑筋細胞過形成、再狭窄、血管閉塞などの血管疾患、特に、経皮経管冠動脈形成術を受けた後の再狭窄を効果的に予防することができる。