(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式Ｉａの化合物：
【化３】
0004428926.tif 000044
またはその薬学的に受容可能な誘導体であって、ここで、
Ｒ３の隣の−−−は、単結合を表し；
Ｚは酸素であり；
Ｒ１は、−ＣＨ２Ｆであり；
Ｒ２は、ＣＨ２ＣＯ２ＨまたはそのＣ１−６アルキルエステルであり；
Ｒ３は、Ｃ１−４アルキル基であり；
Ｒ４は、水素であり；
環Ａは、カルバゾールである、
化合物。
【請求項２】
Ｒ２がＣＨ２ＣＯ２Ｈである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記化合物が、以下の化合物
【化４】
0004428926.tif 000045
0004428926.tif 000046
0004428926.tif 000047
0004428926.tif 000048
0004428926.tif 000049
0004428926.tif 000050
0004428926.tif 000051
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、医化学の分野にあり、そして細胞のアポトーシスおよび炎症を媒介するカスパーゼを阻害する新規化合物およびその薬学的組成物に関する。本発明はまた、本発明の化合物および薬学的組成物を使用して、カスパーゼ活性が関与する疾患を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
アポトーシス（すなわち、プログラム細胞死）は、生物体が望ましくない細胞を排除する主要な機構である。アポトーシスの調節不全は（過剰なアポトーシスまたはアポトーシスを起こし得ないことのいずれであっても）、多くの疾患（例えば、癌、急性炎症障害および自己免疫障害、虚血性疾患、ならびに特定の神経変性障害）に関与している（一般に、Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９８，２８１，１２８３−１３１２；Ｅｌｌｉｓら，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，７，６６３を参照のこと）。
【０００３】
カスパーゼは、アポトーシスおよび細胞の分解（ｄｉｓａｓｓｅｍｂｌｙ）のためのシグナル伝達経路において重要なメディエイタであるシステインプロテアーゼ酵素のファミリーである（Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，１９９８，５，Ｒ９７−Ｒ１０３）。これらのシグナル伝達経路は、細胞型および刺激に依存して変動するが、すべてのアポトーシス経路は、重要なタンパク質のタンパク質分解へと導く共通のエフェクター経路に収束するようである。カスパーゼは、シグナル伝達経路のエフェクター相およびその開始におけるさらなる上流の両方に関与する。開始事象に関与する上流のカスパーゼは活性化状態となり、次いで、アポトーシスのより後期の相に関与する他のカスパーゼを活性化させる。
【０００４】
最初に同定されたカスパーゼであるカスパーゼ−１は、インターロイキン変換酵素（すなわち、「ＩＣＥ」）としてもまた知られる。カスパーゼ−１は、前駆体インターロイキン−１β（「ｐＩＬ−１β」）を、Ａｓｐ−１１６とＡｌａ−１１７との間でのｐＩＬ−１βの特異的切断によって、プロ炎症活性形態へと変換する。カスパーゼ−１に加えて、他に１１個の既知のヒトカスパーゼもまた存在し、このすべてが、アスパルチル残基で特異的に切断する。これらはまた、切断部位のＮ末端側にある少なくとも４個のアミノ酸残基について、厳密な要件を有することが観察されている。
【０００５】
カスパーゼは、好ましいかまたは主に認識されるアミノ酸配列に依存して、３つの群に分類された。カスパーゼ１、４および５を含むカスパーゼの群は、切断部位のＮ末端側の４番目の位置で、疎水性の芳香族アミノ酸を好むことが示されている。カスパーゼ２、３および７を含む別の群は、切断部位のＮ末端側において１番目および４番目の位置の両方でアスパルチル残基を認識し、そして好ましくは、Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｘ−Ａｓｐの配列を認識する。カスパーゼ６、８、９および１０を含む第３の群は、主な認識配列において多くのアミノ酸を許容するが、４番目の位置で分枝状脂肪族側鎖を有する残基（例えば、バリンおよびロイシン）を好むようである。
【０００６】
カスパーゼはまた、その認識された機能に従って分類された。第１のサブファミリーは、カスパーゼ−１（ＩＣＥ）、４および５からなる。これらのカスパーゼは、プロ炎症性サイトカインのプロセシングに関与し、従って、炎症において重要な役割を果たすことが示されている。このクラスのなかの最も研究された酵素であるカスパーゼ−１は、タンパク質分解性切断によって、ＩＬ−１β前駆体を活性化する。従って、この酵素は、炎症応答において重要な役割を果たす。カスパーゼ−１はまた、抗原提示、Ｔ細胞活性化および細胞接着を調節する重要な免疫調節因子であるインターフェロンγの産生を刺激する、インターフェロンγ誘導因子（ＩＧＩＦまたはＩＬ−１８）のプロセシングに関与する。
【０００７】
残りのカスパーゼは、第２および第３のサブファミリーを形成する。これらの酵素は、アポトーシスへと導く細胞内シグナル伝達経路において中心的な重要な酵素である。１つのサブファミリーは、アポトーシス経路における開始事象（形質膜からのシグナルの変換を含む）に関与する酵素からなる。このサブファミリーのメンバーは、カスパーゼ−２、８、９および１０を含む。エフェクターカスパーゼ３、６および７から構成される他のサブファミリーは、アポトーシスによる組織的な細胞の分解および細胞の死を生じさせる、最終的な下流の切断事象に関与する。上流のシグナル変換に関与するカスパーゼは、下流のカスパーゼを活性化し、次いで、この下流のカスパーゼは、ＤＮＡ修復機構を不能にし、ＤＮＡを断片化し、細胞骨格を破壊し、そして最終的に、細胞を断片化する。
【０００８】
カスパーゼによって主に認識される４つのアミノ酸配列が、酵素基質について決定された。Ｔａｌａｎｉａｎら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２，９６７７−９６８２，（１９９７）；Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２，１７９０７−１７９１１，（１９９７）。カスパーゼによって主に認識される４つのアミノ酸配列に関する見識は、カスパーゼインヒビターを設計するために使用されている。可逆的なテトラペプチドインヒビターが調製されており、これは、ＣＨ３ＣＯ−［Ｐ４］−［Ｐ３］−［Ｐ２］−ＣＨ（Ｒ）ＣＨ２ＣＯ２Ｈ（ここでＰ２〜Ｐ４は、最適なアミノ酸認識配列を示し、そしてＲは、カスパーゼのシステインスルフヒドリルに結合し得るアルデヒド、ニトリルまたはケトンである）を有する。ＲａｎｏおよびＴｈｏｒｎｂｅｒｒｙ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．４，１４９−１５５（１９９７）；Ｍｊａｌｌｉら，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．３，２６８９−２６９２（１９９３）；Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎら，Ｎａｔｕｒｅ  ３７６，３７−４３（１９９５）。類似のテトラペプチド認識配列に基づく不可逆的なインヒビターが調製されており、ここでは、Ｒは、アシルオキシメチルケトン−ＣＯＣＨ２ＯＣＯＲ’である。Ｒ’は、２，６−ジクロロベンゾイルオキシのような必要に応じて置換されたフェニルにより例示され、そしてここでＲは、ＣＯＣＨ２Ｘであり、ここでＸは、ＦまたはＣｌのような脱離基である。Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙら，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３３，３９３４（１９９４）；Ｄｏｌｌｅら，Ｊ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３７，５６３−５６４（１９９４）。
【０００９】
細胞性アポトーシスの増加に関連付けられる、哺乳動物の種々の疾患状態を処置するためのカスパーゼインヒビターの用途が、ペプチド性カスパーゼインヒビターを用いて実証されている。例えば、げっ歯類モデルにおいて、カスパーゼインヒビターは、梗塞サイズを減少させ、そして心筋梗塞後の心筋細胞のアポトーシスを阻害すること、発作から生じる病変体積および神経学的欠損を減少させること、外傷性脳傷害における外傷後アポトーシスおよび神経学的欠損を減少させること、劇症性肝臓破壊を処置するにおいて有効であること、および内毒素性ショック後の生存を改善することが示されている。Ｙａｏｉｔａら，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，９７，２７６（１９９８）；Ｅｎｄｒｅｓら，Ｊ  Ｃｅｒｅｂｒａｌ  Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，１８，２３８，（１９９８）；Ｃｈｅｎｇら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０１，１９９２（１９９８）；Ｙａｋｏｖｌｅｖら，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１７，７４１５（１９９７）；Ｒｏｄｒｉｑｕｅｚら，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８４，２０６７（１９９６），Ｇｒｏｂｍｙｅｒら，Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．，５，５８５（１９９９）。
【００１０】
一般的に、上記のペプチド性インヒビターは、いくつかのカスパーゼ酵素に対して非常に効力を有する。しかし、この効力は、アポトーシスの細胞モデルにおいて常に示されるというわけではない。さらに、ペプチドインヒビターは代表的に、望ましくない薬理学的特性（例えば、経口吸収が乏しいこと、安定性が乏しいこと、および迅速な代謝が乏しいこと）によって特徴付けられる。ＰｌａｔｔｎｅｒおよびＮｏｒｂｅｃｋ，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，ＣｌａｒｋおよびＭｏｏｓ編（Ｅｌｌｉｓ  Ｈｏｒｗｏｏｄ，Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ，Ｅｎｇｌａｎｄ，１９９０）。
【００１１】
改変されたペプチドインヒビターに関する報告が存在する。ＷＯ  ９１／１５５７７およびＷＯ  ９３／０５０７１は、以下の式：
Ｚ−Ｑ２−Ａｓｐ−Ｑ１
のペプチドＩＣＥインヒビターを開示しており、ここでＺは、Ｎ末端の保護基であり；Ｑ２は、０〜４個のアミノ酸であり；そしてＱ１は、陰性の脱離基である。
【００１２】
ＷＯ  ９９／１８７８１は、以下の式：
【００１３】
【化３】
0004428926.tif 000002
のジペプチドカスパーゼインヒビターを開示しており、ここでＲ１は、Ｎ末端の保護基であり；ＡＡは、天然のα−アミノ酸またはβ−アミノ酸の残基であり；Ｒ２は、水素またはＣＨ２Ｒ４であり、ここでＲ４は、陰性の脱離基であり；そしてＲ３は、アルキルまたは水素である。
【００１４】
ＷＯ  ９９／４７１５４は、以下の式：
【００１５】
【化４】
0004428926.tif 000003
のジペプチドカスパーゼインヒビターを開示しており、ここでＲ１は、Ｎ末端の保護基であり；ＡＡは、非天然のα−アミノ酸またはβ−アミノ酸の残基であり；そしてＲ２は、必要に応じて置換されたアルキルまたは水素である。
【００１６】
ＷＯ  ００／０２３４２１は、以下の式：
【００１７】
【化５】
0004428926.tif 000004
を有する（置換）アシルジペプチドアポトーシスインヒビターを開示しており、ここでｎは、０、１または２であり；ｑは、１または２であり；Ａは、特定の天然または非天然のアミノ酸の残基であり；Ｂは、水素原子、重水素原子、Ｃ１−１０の直鎖または分枝鎖のアルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、ナフチル、置換ナフチル、２−ベンゾオキサゾリル、置換２−オキサゾリル、（ＣＨ２）ｍシクロアルキル、（ＣＨ２）ｍフェニル、（ＣＨ２）ｍ（置換フェニル）、（ＣＨ２）ｍ（１−または２−ナフチル）、（ＣＨ２）ｍヘテロアリール、ハロメチル、ＣＯ２Ｒ１３、ＣＯＮＲ１４Ｒ１５、ＣＨ２ＺＲ１６、ＣＨ２ＯＣＯアリール、ＣＨ２ＯＣＯ（置換アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（置換ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ１７）Ｒ１８であり、ここでＲ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７およびＲ１８は、その出願において規定されており；Ｒ２は、水素、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、（ＣＨ２）ｍＮＨ２を含む群から選択され；Ｒ３は、水素、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキル、または置換フェニルアルキルであり；Ｘは、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｃ＝ＯＮＨまたはＣＨ２ＯＣＯＮＨであり；そしてＺは、酸素原子または硫黄原子である。
【００１８】
ＷＯ  ９７／２４３３９は、以下の式：
【００１９】
【化６】
0004428926.tif 000005
のインターロイキン−１β変換酵素のインヒビターを開示しており、ここでＲ１は、Ｈ、アルキル、アルコキシ、炭素環、複素環、および種々の他の基を表し；ＡＡ１およびＡＡ２は、単結合またはアミノ酸であり；そしてＹは、以下の式：
【００２０】
【化７】
0004428926.tif 000006
の基を表し、ここでＴｅｔ環は、テトラゾール環を表し；そしてＺは特に、アルキレン、アルケニレン、Ｏ、Ｓ、ＳＯおよびＳＯ２を表す。
【００２１】
ＥＰ  ６１８２２３は、以下の式：
Ｒ−Ａ１−Ａ２−Ｘ−Ａ３
のＩＣＥインヒビターを開示しており、ここでＲは、Ｈ、保護基、または必要に応じて置換されたＰｈＣＨ２Ｏ環であり；Ａ１は、α−ヒドロキシ−またはα−アミノ酸の残基であり；Ａ２は、α−ヒドロキシ酸残基またはα−アミノ酸であるか、あるいはＡ１およびＡ２は一緒に、プソイドジペプチドまたはジペプチド擬似体残基を形成し；Ｘは、Ａｓｐに由来する残基であり、ここでＡ３は、ＣＨ２Ｘ１ＣＯＹ１、ＣＨ２ＯＹ２、ＣＨ２ＳＹ３、またはＣＨ２（ＣＯ）ｍＹ６であり、ここで、Ｘ１は、ＯまたはＳであり、ｍは、０または１であり、そしてＹ１、Ｙ２、Ｙ３、およびＹ６は、必要に応じて置換された環式脂肪族基またはアリール基である。
【００２２】
ＷＯ  ９８／１６５０２は、特に、以下の式：
【００２３】
【化８】
0004428926.tif 000007
のＩＣＥインヒビターを開示しており、ここでＲ１およびＲ２は、この出願において記載される通りであり、そしてピロリジン環は、種々の基によって置換される。
【００２４】
ＷＯ  ９９／５６７６５は、以下の式：
【００２５】
【化９】
0004428926.tif 000008
のＩＣＥインヒビターを開示しており、ここでＲ’、Ｒ３、Ｒ４およびＹは、この出願において記載される通りであり、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＨ、（ＣＨ２）ｎ−置換アリール、（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−アリール、（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−置換アリール、（ＣＨ２）ｎ−Ｓ−アリール、（ＣＨ２）ｎ−Ｓ−置換アリール、（ＣＨ２）ｎ−Ｓ−ヘテロアリール、（ＣＨ２）ｎ−Ｓ−置換ヘテロアリール、（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ’−アリール、（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ’−置換アリール、（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ’−ヘテロアリール、（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ’−置換ヘテロアリール、（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリール、（ＣＨ２）ｎ−置換ヘテロアリールであり、各々のｎは、独立して０〜６である。
【００２６】
多くのカスパーゼインヒビターが報告されているが、これらが、治療的に有用となるための適切な薬理学的特性を有しているか否かは明らかでない。従って、インビボでアポトーシスの有効な阻害を提供するために、強力であり、安定であり、かつ膜を貫通する、低分子のカスパーゼインヒビターについての必要性が依然として存在する。このような化合物は、カスパーゼ酵素が役割を果たす上述の疾患を処置するにおいて、非常に有用である。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００２７】
（発明の要旨）
ここで、本発明の化合物およびその薬学的組成物は、カスパーゼおよび細胞性アポトーシスのインヒビターとして有効であることが見出された。これらの化合物は、以下の一般式Ｉ：
【００２８】
【化１０】
0004428926.tif 000009
を有する。ここで、
Ｒ３に隣接した−−−は、単結合または二重結合を表し、
Ｚは、酸素または硫黄であり；
Ｒ１は、水素、−ＣＨＮ２、−Ｒ、−ＣＨ２ＯＲ、−ＣＨ２ＳＲ、または−ＣＨ２Ｙであり；
Ｒは、Ｃ１−１２の脂肪族、アリール、アラルキル、ヘテロシクリル、またはヘテロシクリルアルキルであり；
Ｙは、陰性の脱離基であり；
Ｒ２は、ＣＯ２Ｈ、ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、またはそのエステル、アミドもしくは同配体であり；
Ｒ３は、カスパーゼのＳ２サブ部位（ｓｕｂ−ｓｉｔｅ）に嵌り得る基であり；
Ｒ４は、水素またはＣ１−６脂肪族基（これは、必要に応じて、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−、−ＮＨ−、または−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−によって割り込まれる）であるか、あるいはＲ３およびＲ４はその介在する原子と一緒になって、必要に応じて、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員環を形成し；
環Ａは、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜５個のさらなる環ヘテロ原子を有する、窒素を含有する単環式環系、二環式環系、または三環式環系であり；
環Ｂは、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜２個のさらなる環ヘテロ原子を有する、窒素を含有する５〜７員環であり；
Ｒ５は、Ｒ６、（ＣＨ２）ｎＲ６、ＣＯＲ６、ＣＯ２Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、ＣＯＮ（Ｒ６）２、またはＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２であり；
ｎは、１〜３であり；そして
各Ｒ６は独立して、水素、必要に応じて置換されたＣ１−４脂肪族基、必要に応じて置換されたＣ６−１０アリール基、または５〜１０個の環原子を有する単環式ヘテロアリール基もしくは二環式ヘテロアリール基である。
【００２９】
本発明の化合物は、アポトーシスの細胞モデルにおいて、優れた効力で、一定範囲のカスパーゼ標的にわたって阻害特性を有する。さらに、これらの化合物は、優れた細胞貫通特性および薬理学的特性を有し、かつその効能の結果として、カスパーゼが関与する疾患に対して優れた効力を有する。
【００３０】
（発明の詳細な説明）
本発明は、カスパーゼインヒビターとして有用な、新規な化合物およびその薬学的に受容可能な誘導体を提供する。本発明はまた、カスパーゼ活性を阻害するためおよびカスパーゼ媒介疾患を処置するために上記化合物を使用するための方法を提供する。これらの化合物は、一般式Ｉ：
【００３１】
【化１１】
0004428926.tif 000010
を有し、ここで、
Ｒ３の隣の−−−は、単結合または二重結合を表し；
Ｚは酸素または硫黄であり；
Ｒ１は、水素、−ＣＨＮ２、−Ｒ、−ＣＨ２ＯＲ、−ＣＨ２ＳＲ、または−ＣＨ２Ｙであり；
Ｒは、Ｃ１−１２脂肪族、Ｃ１−１２アリール、Ｃ１−１２アラルキル、Ｃ１−１２ヘテロシクリル、またはＣ１−１２ヘテロシクリルアルキルであり；
Ｙは、電気陰性脱離基であり；
Ｒ２は、ＣＯ２Ｈ、ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、またはそれらのエステル、アミドもしくはアイソスターであり；
Ｒ３は、カスパーゼのＳ２サブサイトへ適合し得る基であり；
Ｒ４は、水素であるか、または必要に応じて、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−、−ＮＨ−、もしくは−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−が割り込んだＣ１−６脂肪族基であるか、または、Ｒ３およびＲ４がそれらの介在原子と共に、必要に応じて、窒素、酸素、または硫黄から選択される０〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員環を形成し；
環Ａは、窒素、酸素、もしくは硫黄から選択される０〜５個のさらなる環ヘテロ原子を有する、窒素含有単環式環系、窒素含有二環式環系、または窒素含有三環式環系であり；
環Ｂは、窒素、酸素、または硫黄から選択される０〜２個のさらなる環ヘテロ原子を有する、窒素含有５〜７員環であり；
Ｒ５は、Ｒ６、（ＣＨ２）ｎＲ６、ＣＯＲ６、ＣＯ２Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、ＣＯＮ（Ｒ６）２、またはＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２であり；
ｎは１〜３であり；そして
各Ｒ６は、水素、必要に応じて置換されたＣ１〜４脂肪族基、必要に応じて置換されたＣ６〜１０アリール基、または５〜１０個の環原子を有する単環式ヘテロアリール基もしくは５〜１０個の環原子を有する二環式ヘテロアリール基から独立して選択される。
【００３２】
本明細書中で使用される場合、他のように示されない限り、以下の定義が適用される。用語「脂肪族」とは、本明細書中で使用される場合、完全に飽和されているかまたは１つ以上の不飽和単位を含む、直鎖Ｃ１〜Ｃ１２炭化水素または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ１２炭化水素を意味する。脂肪族基は、置換または非置換の、直鎖状、分枝鎖状または環状の、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基、ならびにそれらのハイブリッド（例えば、（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキル、または（シクロアルキル）アルケニル）を包含する。単独で使用されるかより長い部分の一部として使用される用語「アルキル」とは、１〜１２個の炭素原子を含む、直鎖および分枝鎖の両方を指す。用語アルキルがより長い部分の一部として使用される（アラルキルまたはヘテロアラルキルにおけるような）場合、そのアルキル部分は、好ましくは、１〜６個の炭素を含む。
【００３３】
用語「ハロゲン」とは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩを意味する。用語「アリール」とは、５〜１４個の原子を有する単環式芳香環基または多環式芳香環基（例えば、フェニル、ナフチル、およびアントリル）を指す。
【００３４】
用語「複素環式基」は、飽和および不飽和の単環式または多環式の環系であって、１個以上のヘテロ原子を含有し環の大きさが３員〜９員であるものを指す。このような基には、例えば、フラニル、チエニル、ピロリル、ピロリニル、ピロリジニル、ジオキソラニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピラニル、ピリジニル、ピペリジニル、ジオキサニル、モルホリニル、ジチアニル、チオモルホリニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピペラジニル、トリアジニル、トリチアニル、インドリジニル、インドリル、イソインドリル、インドリニル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンズチアゾリル、プリニル、キノリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、１，８−ナフチリジニル、プテリジニル、キヌクリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、またはフェノキサジニルがある。「ヘテロアリール」とは、芳香族である複素環式環を指す。本発明の化合物は、安定な化合物として天然に存在し得る化合物に限定されることが理解される。
【００３５】
用語「炭素環式基」は、３〜１４個の炭素の、飽和した単環式または多環式の炭素環系を指し、これらは、アリール基または複素環式基に縮合され得る。例には、シクロヘキシル、シクロペンチル、シクロブチル、シクロプロピル、インダニル、テトラヒドロナフチルなどが挙げられる。
【００３６】
単独で使用されるかまたはより長い部分の一部として使用される用語脂肪族、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、または炭素環式は、置換された基または置換されていない基を指す。置換される場合、これらの基は、１つ以上の置換基を含み得る。適切な置換基の例としては、ハロゲン、−Ｒ、−ＯＲ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＳＲ、保護されたＯＨ（例えば、アシルオキシ）、フェニル（Ｐｈ）、置換Ｐｈ、−ＯＰｈ、置換−ＯＰｈ、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−Ｎ（Ｒ）２、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮ（Ｒ）２、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯ２Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯＲ、−ＣＯＮＨＲ、−ＣＯＮ（Ｒ）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ、−ＳＯＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ２ＮＨＲ、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ、＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮＨＲ、＝ＮＮＲ２、＝Ｎ−ＯＲ、＝ＮＮＨＣＯＲ、＝ＮＮＨＣＯ２Ｒ、＝ＮＮＨＳＯ２Ｒ、または＝ＮＲが挙げられ、ここで、Ｒは、脂肪族基であるか、または好ましくは１〜６個の炭素原子を有し、より好ましくは１〜４個の炭素原子を有する置換脂肪族基である。
【００３７】
複素環式環上の置換可能な窒素は、必要に応じて置換され得る。その窒素上での適切な置換基としては、Ｒ、ＣＯＲ、Ｓ（Ｏ）２Ｒ、およびＣＯ２Ｒが挙げられ、ここで、Ｒは、脂肪族基であるか、または好ましくは１〜６個の炭素原子を有し、より好ましくは１〜４個の炭素原子を有する置換脂肪族基である。
【００３８】
窒素および硫黄は、その酸化形態であり得、そして窒素は、四級化形態であり得る。
【００３９】
用語「電気陰性脱離基」は、当業者に公知の定義を有する（Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９２を参照のこと）。電気陰性脱離基の例には、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アリール基およびアルキルスルホニルオキシ基、トリフルオロメタンスルホニルオキシ、ＯＲ、ＳＲ、−ＯＣ＝Ｏ（Ｒ）、−ＯＰＯ（Ｒ７）（Ｒ８）が挙げられ、ここで、Ｒは、脂肪族基、アリール基、アラルキル基、複素環式基またはヘテロシクリルアルキル基であり、そしてＲ７およびＲ８は、独立して、ＲまたはＯＲである。
【００４０】
Ｒ２基がエステル形態またはアミド形態である場合、本発明の化合物は、対応するカルボン酸へと代謝切断される。このカルボン酸は、活性カスパーゼインヒビターである。これらは、代謝切断されるので、そのエステル基またはアミド基の正確な性質は、本発明の働きにとって重要ではない。Ｒ２基の構造は、比較的単純なジエチルアミドからステロイドエステルまでの範囲であり得る。Ｒ２カルボン酸のエステルの例としては、Ｃ１〜１２脂肪族（例えば、Ｃ１〜６アルキルまたはＣ３〜１０シクロアルキル）、アリール（例えば、フェニル）、アラルキル（例えば、ベンジルまたはフェネチル）、ヘテロシクリルまたはヘテロシクリルアルキルが挙げられるが、これらに限定されない。適切なＲ２複素環式環の例としては、１つまたは２つのヘテロ原子を有する５〜６員の複素環式環（例えば、ピペリジニル、ピペラジニル、またはモルホリニル）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４１】
Ｒ２カルボン酸のアミドは、一級であっても、二級であっても、三級であってもよい。そのアミド窒素上の適切な置換基としては、Ｒ２エステルアルコールについて上記された脂肪族基、アリール基、アラルキル基、複素環式基またはヘテロシクリルアルキル基から独立して選択される１つ以上の基が挙げられるが、これらに限定されない。同様に、他のプロドラッグは、本発明の範囲内に含まれる。一般的に、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ（１９９６）、１９、１７１〜２０２中のＢｒａｄｌｅｙ  Ｄ．Ａｎｄｅｒｓｏｎ、「Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ＣＮＳ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」を参照のこと。
【００４２】
Ｒ２カルボン酸、Ｒ２エステル、およびＲ２アミドのアイソスターまたはバイオアイソスターは、親カルボン酸または親エステルと類似の生体特性を備えた新規化合物を作製するために、原子または原子群の交換から得られる。このバイオアイソスター置換は、物理化学的または位相幾何学的に基づき得る。カルボン酸についてのアイソスター置換の一例は、ＣＯＮＨＳＯ２（アルキル）であり、例えば、ＣＯＮＨＳＯ２Ｍｅである。
【００４３】
Ｒ３は、既知のカスパーゼのＳ２サブサイトへと適合し得る任意の基であり得る。そのような基は、報告されている多くのカスパーゼインヒビターから公知である（ＷＯ９１／１５５７７、ＷＯ９３／０５０７１、ＷＯ９９／１８７８１、ＷＯ９９／４７１５４、ＷＯ００／０２３４２１、ＷＯ９７２４３３９、ＥＰ６１８２２３、ＷＯ９８１６５０２（これらはすべて上記されている）を参照のこと）。さらに、Ｓ−２サブサイトを含むカスパーゼ酵素のいくつかの構造もまた、公知である。そのカスパーゼ構造に対する言及としては、以下が挙げられる：Ｂｌａｎｃｈａｒｄ  Ｈら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３０２（１）、９〜１６（２０００）；Ｗｅｉ  Ｙら、Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．７（６）：４２３〜３２（２０００）；Ｌｅｅ  Ｄら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７５（２１）：１６００７〜１４（２０００）；Ｂｌａｎｃｈａｒｄ  Ｈら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ｆｏｌｄ  Ｄｅｓ．７（９）：１１２５〜３３（１９９９）；Ｏｋａｍｏｔｏ  Ｙら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．（Ｔｏｋｙｏ）４７（１）：１１〜２１（１９９９）；Ｍａｒｇｏｌｉｎ  Ｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２（１１）７２２３〜８（１９９７）；Ｗａｌｋｅｒ  ＮＰら、Ｃｅｌｌ  ７８（２）：３４３〜５２（１９９４）；およびＷｉｌｓｏｎ  ＫＰら、Ｎａｔｕｒｅ  ３７０（６４８７）：２７０〜５（１９９４）。
【００４４】
基がそのＳ−２サブサイトに適合するか否かは、考慮される特定のカスパーゼに依存する。そのサブサイトのサイズは、Ｃ４脂肪族基のサイズまでの基を許容するカスパーゼ３の小Ｓ−２サブサイトから、約１４０ダルトンまでの分子量を有する基（例えば、ナフチル基）を許容する比較的大きなサブサイトまでの範囲である。Ｒ３基のサイズは、電気的性質とともに、そのインヒビターのカスパーゼ選択性に影響する。上記に提供される参考文献から、基が、カスパーゼのＳ−２サブサイトに都合良く適合し得るか否かを、例えば、標準的分子モデリングプログラム（例えば、ＱｕａｎｔａまたはＭａｃｒｏｍｏｄｅｌ）を使用することによって、当業者は容易に確認し得る。
【００４５】
適切なＲ３基としては、水素、天然α−アミノ酸の側鎖、または約１４０ダルトンまでの分子量を有する置換された基もしくは非置換基（脂肪族基、アリール基、アラルキル基、複素環式基、およびヘテロシクリルアルキル基から選択される）が挙げられる。Ｒ３脂肪族基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、ペンチル、シクロペンチル、ヘキシル、およびシクロヘキシルが挙げられる。Ｒ３アリール基の例としては、フェニル、インデニル、およびナフチルが挙げられる。Ｒ３複素環式基の例としては、ピロリジニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペラジニル、ホモピペリジニル、およびキヌクリジニルが挙げられる。Ｒ３ヘテロアリール基の例としては、フラニル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、フラザニル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリル、イソインドリル、インドリニル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンズチアゾリル、プリニル、キノリニル、イソキノリニル、キノリジニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニル、クロマニル、およびイソクロマニルが挙げられる。各基は、上記の１つ以上の置換基を含み得る。
【００４６】
環Ａは、必要に応じて置換された、窒素含有単環系、窒素含有二環系、または窒素含有三環系であり、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜５個のさらなる環ヘテロ原子を有し、好ましくは０〜３個のさらなる環ヘテロ原子を有する。そのような環としては、置換または非置換の、インドール、イソインドール、インドリン、インダゾール、プリン、ジヒドロピリジン、ベンゾイミダゾール、イミダゾール、イミダゾリン、ピロール、ピロリジン、ピロリン、ピラゾール、ピラゾリン、ピラゾリジン、トリアゾール、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペラジン、カルバゾール、イミノスチルベン、フェノチアジン、フェノキサジン、ジヒドロフェナジン、ジヒドロシンノリン、ジヒドロキノキサリン、テトラヒドロキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ジヒドロナフチリジン、テトラヒドロナフチリジン、ジヒドロアクリジン、５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン、１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン、β−カルボリン、ピリド［４，３−ｂ］インドール、２，３，９−トリアザフルオレン、９−チア−２，１０−ジアザアントラセン、３，６，９−トリアザフルオレン、チエノ［３，２−ｂ］ピロール、またはジヒドロフェナントリジンが挙げられる。環Ａ上での適切な置換基としては、以下から独立して選択される１つ以上の基が挙げられる：ハロゲン、−Ｒ、−ＯＲ，−ＯＨ、オキソ、−ＳＨ、−ＳＲ、保護されたＯＨ（例えば、アシルオキシ）、フェニル（Ｐｈ）、置換Ｐｈ、−ＯＰｈ、置換−ＯＰｈ、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−Ｎ（Ｒ）２、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮ（Ｒ）２、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯ２Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯＲ、−ＣＯＮＨＲ、−ＣＯＮ（Ｒ）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ、−ＳＯＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ２ＮＨＲ、または−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ。ここで、各Ｒは、脂肪族基または置換脂肪族基から独立して選択される。このＲ基は、好ましくは１〜６個の炭素を有し、より好ましくは１〜４個の炭素を有する。
【００４７】
Ｒ２がＣＯＯＨである本発明の化合物は、γ−ケト酸であり、これは、開放形態１ａまたは環化ヘミケタール形態１ａ’のいずれかとして溶液中に存在し得る。本明細書中でのいずれかの異性体形態の提示は、もう一方を包含することになっている。同様に、環化はまた、Ｒ２がＣＨ２ＣＯＯＨである場合に生じ得、そのような環化異性体は、環開放形態が本明細書中に提示される場合に包含されることが理解される。
【００４８】
【化１２】
0004428926.tif 000011
同様に、本発明の特定の化合物は、互変異性形態または水和形態で存在し得、その化合物のそのような形態すべてが、本発明の範囲内にあることが、当業者に明らかである。他のように示されない限り、本明細書中に示される構造はまた、その構造のすべての立体化学形態（すなわち、各不斉中心についてのＲ配置およびＳ配置）を包含することになっている。従って、本発明の化合物の単一の立体化学異性体ならびにエナンチオマーおよびジアステレオマー混合物は、本発明の範囲内にある。他のように示されない限り、本明細書中に示される構造はまた、１つ以上の同位体濃縮された原子の存在のみ異なる化合物を包含するようになっている。例えば、重水素もしくはトリチウムによって水素が置換される以外、または１３Ｃ濃縮炭素もしくは１４Ｃ濃縮炭素によって炭素が置換される以外は、本発明の構造を有する化合物は、本発明の範囲内にある。
【００４９】
本発明の１つの実施形態は、式Ｉａの化合物に関する。別の実施形態は、式Ｉｂの化合物に関する。Ｚは酸素であることが好ましい。Ｒ３の隣の−−−は一重結合であることもまた好ましい。Ｒ３またはＲ４が水素以外である場合、一重結合を有することによって立体異性体を提供する。
【００５０】
好ましい本発明の立体異性体は、以下の配置を有する：
【００５１】
【化１３】
0004428926.tif 000012
本発明の別の実施形態は、以下の特性の１つ以上、好ましくは全てを有する、式Ｉａの化合物に関する：
（ｉ）Ｒ１は、水素、−Ｒ、−ＣＨ２ＯＲ、ＣＨ２ＳＲまたは−ＣＨ２Ｙである。より好ましくは、Ｒ１は、−ＣＨ２ＯＲ、−ＣＨ２ＳＲまたは−ＣＨ２Ｙである。さらにより好ましくは、Ｒ１は、−ＣＨ２Ｙである。最も好ましくは、Ｒ１は、−ＣＨ２Ｆである。
（ｉｉ）Ｒ２は、−ＣＯ２Ｈ、またはそのエステル、アミド、アイソスターである。
（ｉｉｉ）Ｒ３は、約１４０ダルトンまでの分子量を有する基、例えば、脂肪族基またはアラルキル基である。より好ましくは、Ｒ３は、ある範囲の既知のカスパーゼのＳ２サブサイトに適合するＣ１〜Ｃ４アルキル基である。
（ｉｖ）Ｒ４は、水素またはＣ１〜６アルキルであるか、あるいは、Ｒ３およびＲ４は一緒になって、窒素、酸素または硫黄より選択される０〜２個のヘテロ原子を有する５〜７個の環原子の環を形成する。
（ｖ）環Ａは、単環式、二環式または三環式の複素環式環系またはヘテロアリール環系であり、ここで、この系の各環は、５〜７個の環原子を有する。
【００５２】
環Ａは、式Ｉａの化合物の重要な特性である。環Ａ部分について、二環式または三環式の複素環式環またはヘテロアリール環は、単環式環より好ましい。よって、好ましい実施形態は、以下の特性の１つ以上、好ましくは、全てを有する化合物に関する：（ｉ）Ｚは、酸素である；（ｉｉ）Ｒ１は、−ＣＨ２ＯＲ、−ＣＨ２ＳＲまたは−ＣＨ２Ｙであり、より好ましくは、Ｒ１は−ＣＨ２Ｙであり、最も好ましくは、Ｒ１は、−ＣＨ２Ｆである；（ｉｉｉ）Ｒ２は、ＣＯ２Ｈまたはそのエステル、アミドもしくはアイソスターである；（ｉｖ）Ｒ３は、約１４０ダルトンまでの分子量を有する基、例えば、脂肪族基またはアラルキル基であり、より好ましくは、Ｒ３は、Ｃ１〜４アルキル基である；および／または（ｖ）環Ａは、二環式または三環式の複素環式環系またはヘテロアリール環系であり、ここで、この系の各環は、５〜７個の環原子を有する。
【００５３】
環Ａについて好ましい単環式環の例としては、トリアゾール、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、イミダゾール、ピロリジン、ピラゾールおよびピペラジンが挙げられる。環Ａについて好ましい二環式環の例としては、インドール、イソインドール、インドリン、インダゾール、ベンゾイミダゾール、チエノ［３，２−ｂ］ピロール、ジヒドロキノキサリン、ジヒドロシンノリン（ｄｉｈｙｄｒｏｃｉｎｎｏｌｉｎｅ）、ジヒドロナフチリジン、テトラヒドロナフチリジン、テトラヒドロキノリン、およびテトラヒドロイソキノリンが挙げられ、最も好ましくは、インドールまたはインドリンである。環Ａについて好ましい三環式環の例としては、カルバゾール、フェノチアジン、β−カルボリン、ピリド［４，３−ｂ］インドール、２，３，９−トリアザフルオレン、９−チア−２，１０−ジアザアントラセン、３，６，９−トリアザフルオレン、フェノキサジン、ジベンゾアゼピン、ジヒドロジベンゾアゼピン、ジヒドロフェナジン、ジヒドロアクリジンまたはジヒドロフェナントリジンが挙げられ、最も好ましくは、カルバゾール、フェノチアジンまたはジヒドロフェナントリジンである。
【００５４】
化合物Ｉの特定の例を、表１に示す。
【００５５】
（表１：式Ｉａの化合物の例）
【００５６】
【表１】
0004428926.tif 000013
0004428926.tif 000014
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本発明の好ましい実施形態は、式Ｉａの化合物に関し、ここで、環Ａは、窒素、酸素または硫黄より選択される１〜６個のヘテロ原子、好ましくは、１〜４個のヘテロ原子を有する三環式環系であり、ここで、この環系の末端の環は５〜７個の環原子を有し、中央の環は、５個または６個の環原子を有する。この実施形態の１つの局面は、式ＩＩ：
【００５７】
【化１４】
0004428926.tif 000020
の化合物に関し、
ここで、Ｘは、結合、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＣＨ２−または−ＮＨ−であり、そしてＲ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、上記されたとおりである。Ｘが−ＣＨ２−である場合、メチレン水素の各々は、必要に応じておよび独立して、−ＯＲ、−ＯＨ、−ＳＲ、保護されたＯＨ（例えば、アシルオキシ）、−ＣＮ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−Ｎ（Ｒ）２、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮ（Ｒ）２、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯ２Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯＲ、−ＣＯＮＨＲ、−ＣＯＮ（Ｒ）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ，、−ＳＯＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ２ＮＨＲ、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ、＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮＨＲ、＝ＮＮＲ２、＝Ｎ−ＯＲ、＝ＮＮＨＣＯＲ、＝ＮＮＨＣＯ２Ｒ、＝ＮＮＨＳＯ２Ｒまたは＝ＮＲ（ここで、Ｒは、Ｃ１〜４脂肪族基である）によって置換され得る。Ｘが−ＮＨ−である場合、ＮＨ水素は、アルキル、ＣＯ（アルキル）、ＣＯ２（アルキル）またはＳＯ２（アルキル）によって置換され得る。Ｒ１、Ｒ２およびＲ３について好ましい基は、上記されるとおりである。
【００５８】
本発明の別の実施形態は、以下の特性の１つ以上、好ましくは全てを有する、式Ｉｂの化合物に関する：
（ｉ）Ｒ１は、水素、−Ｒ、−ＣＨ２ＯＲ、ＣＨ２ＳＲまたは−ＣＨ２Ｙである。より好ましくは、Ｒ１は、−ＣＨ２ＯＲ、−ＣＨ２ＳＲまたは−ＣＨ２Ｙである。さらにより好ましくは、Ｒ１は、−ＣＨ２Ｙである。最も好ましくは、Ｒ１は、−ＣＨ２Ｆである。
（ｉｉ）Ｒ２は、−ＣＯ２Ｈ、またはそのエステル、アミドもしくはアイソスターである。
（ｉｉｉ）Ｒ３は、約１４０ダルトンまでの分子量を有する基、例えば、脂肪族基またはアラルキル基である。より好ましくは、Ｒ３は、ある範囲のカスパーゼのＳ２サブサイトに適合するＣ１〜Ｃ４アルキル基である。
（ｉｖ）環Ｂは、窒素、酸素または硫黄より選択される０〜１個のさらなるヘテロ原子を有する、窒素を含有する５〜７員環である。
（ｖ）Ｒ５は、必要に応じて置換されたＣ１〜６脂肪族基、必要に応じて置換されたフェニルまたは必要に応じて置換されたベンジル基である。
【００５９】
式Ｉｂの化合物の特定の例を、以下の表２に示す。
【００６０】
（表２：式Ｉｂの化合物の例）
【００６１】
【化１５】
0004428926.tif 000021
本発明の化合物は、類似の化合物について当業者に公知の方法によって一般に調製され得、この方法は、以下の一般的なスキームおよび以下の調製例によって例示される。
【００６２】
（スキームＩ）
【００６３】
【化１６】
0004428926.tif 000022
試薬：（ａ）（ＣＯＣｌ）２／ＣＨ２Ｃｌ２；（ｂ）環Ａ；（ｃ）Ｈ２、Ｐｄ／Ｃ；（ｄ）ＥＤＣ、ＤＭＡＰ、ＨＯＢｔ、Ｒ２ＣＨ２ＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ（ＯＨ）Ｒ１；（ｅ）（ｉ）Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペリオジナン（ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）、（ｉｉ）ＴＦＡ／ＤＣＭ。
【００６４】
上記のスキームＩは、式Ｉａの化合物を得るための合成経路を示す。出発化合物１は、置換コハク酸誘導体に関する分野において公知の種々の一般的な方法によって得られ得る。キラル中心でＲ３基およびＲ４基を保有する所望の立体化学を得るための不斉アプローチについては、「Ｓｔｅｒｅｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ａｌｋｙｌａｔｉｏｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｈｉｒａｌ  Ｍｅｔａｌ  Ｅｎｏｌａｔｅｓ」、Ｅｖａｎｓ，Ｄ．Ａ．，Ａｓｙｍｅｔｒｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌ．３，Ｃｈａｐｔｅｒ  １  ｐａｇｅｓ  １−１１０；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｊ．Ｄ．Ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８３を参照のこと。工程（ａ）および（ｂ）において、１の酸クロリドが形成され、次いで、アミド２を提供するために遊離アミンとしての環Ａと結合される。工程（ｃ）は、カルボキシル酸３を提供するためのベンジルエステルの水素化分解を示す。あるいは、化合物３は、適切なジエステル化条件を使用して他のエステルより得られ得る。工程（ｄ）において、３は、アミド４を提供するためにアミノアルコールと結合される。Ｒ１およびＲ２の性質に依存して、アミノアルコールの代わりにアミノケトンが使用され得、このアミノケトンは、後の酸化工程を回避する。Ｒ１がＣＨ２Ｆであるフルオロメチルケトンの場合、対応するアミノアルコールは、Ｒｅｖｅｓｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９４，３５，９６９３の方法に従って得られ得る。最終的に、化合物４におけるヒドロキシル基は酸化され、そして得られる化合物は、Ｒ２の性質に従って適切に処理される。例えば、生成物ＩａはＲ２がカルボキシル酸であることを必要とする場合、４のＲ２は、好ましくはエステルであり、このスキーム中の最終工程は加水分解である。
【００６５】
本発明の化合物は、カスパーゼを阻害するように設計される。よって、本発明の化合物は、アポトーシス、ＩＬ−１βの放出またはカスパーゼの活性を直接阻害するその能力についてアッセイされ得る。これらの活性の各々についてのアッセイは、以下の試験章（ｔｅｓｔｉｎｇ  ｓｅｃｔｉｏｎ）に記載され、そしてまた当該分野において公知である。
【００６６】
本発明の１つの実施形態は、式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩、および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物に関する。
【００６７】
本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩がこれらの組成物に利用される場合、これらの塩は、好ましくは無機酸および無機塩基または有機酸または有機塩基から誘導される。このような酸塩としては、以下が挙げられる：アセテート、アジピラート、アルギネート、アスパルテート、ベンゾエート、ベンゼンスルホネート、ビスルフェート、ブチレート、シトレート、カンホレート、カンファースルフォネート、シクロペンタンプロピオネート、ジグルコネート、ドデシルスルフェート、エタンスルホネート、フマレート、グルコヘプタノエート、グリセロホスフェート、ヘミスルフェート、ヘプタノエート、ヘキサノエート、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホネート、ラクテート、マレエート、メタンスルホネート、２−ナフタレンスルホネート、ニコチネート、オキサレート、パモエート、ペクチネート、パースルフェート、３−フェニルプロピオネート、ピクレート、ピバレート、プロピオネート、スクシネート、タルトレート、チオシアネート、トシレートおよびウンデカノエート。塩基塩としては、以下が挙げられる：アンモニウム塩、アルカリ金属（例えば、ナトリウム塩およびカルシウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩およびマグネシウム塩）、有機塩基との塩（例えば、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）、およびアミノ酸との塩（例えば、アルギニン、リジンなど）。
【００６８】
また、塩基性窒素含有基は、以下のような因子で四級化され得る：低級アルキルハライド（例えば、塩化メチル、塩化エチル、塩化プロピルおよび塩化ブチル、臭化メチル、臭化エチル、臭化プロピルおよび臭化ブチル、ならびにヨウ化メチル、ヨウ化エチル、ヨウ化プロピルおよびヨウ化ブチル）；ジアルキルスルフェート（例えば、ジメチルスルフェート、ジエチルスルフェート、ジブチルスルフェートおよびジアミルスルフェート）、長鎖ハライド（例えば、塩化デシル、塩化ラウリル、塩化ミリチイルおよび塩化ステアリル、臭化デシル、臭化ラウリル、臭化ミリチイルおよび臭化ステアリル、ならびにヨウ化デシル、ヨウ化ラウリル、ヨウ化ミリチイルおよびヨウ化ステアリル）、アラルキルハライド（例えば、臭化ベンジルおよび臭化フェネチニルなど）。水または油に可能性または分散性の生成物を、これにより得る。
【００６９】
本発明の組成物および方法において利用される化合物はまた、選択的な生物学的な特性を増強するために適切な官能基を付加することによって改変され得る。このような改変は、当該分野において公知であり、そして以下が挙げられる：所定の生物学的系（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系）への生物学的な浸透を増加する改変；経口アベイラビリティを増強する改変；注射による投与を可能にする可溶性を増強する改変；代謝を変更する改変および排出速度を変更する改変。
【００７０】
これらの組成物において使用され得る薬学的に受容可能なキャリアとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：イオン交換体、アルミナ、アルミニウム、ステアレート、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝剤物質（例えば、ホスフェート、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム）、植物性飽和脂肪酸の部分的なグリセリド混合物、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三珪酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂。
【００７１】
好ましい実施形態に従って、本発明の組成物は、哺乳動物、好ましくは、ヒトに対する薬学的投与のために処方される。
【００７２】
本発明のこのような薬学的組成物は、経口的に、非経口的に、吸入スプレーによって、局所的に、直腸に、鼻に、口腔に、膣に、または移植されたリザーバを介して投与され得る。本明細書中で使用される場合、用語「非経口的」は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、髄腔内、肝内、病変内および頭蓋内の注射または注入技術を包含する。好ましくは、組成物は、経口または静脈内で投与される。
【００７３】
本発明の組成物の滅菌注射形態は、水性懸濁液または油性懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して、当該分野において公知の技術に従って処方され得る。この滅菌注射調製物はまた、非毒性の非経口的に受容可能な希釈剤または溶媒中の、滅菌注射可能な溶液または懸濁液（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液として）であり得る。使用され得る受容可能なビヒクルおよび溶媒は、水、リンガー液、および等張性塩化ナトリウム溶液である。さらに、滅菌された不揮発性油は、溶媒または懸濁媒体として慣用的に使用される。この目的について、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激の（ｂｌａｎｄ）不揮発性油が使用され得る。脂肪酸（例えば、オレイン酸およびそのグリセリド誘導体）は、天然の薬学的に受容可能な油（例えば、オリーブ油またはヒマシ油、特にこれらのポリオキシエチレート形態）として注射可能物の調製に有用である。これらの油溶液または油懸濁液はまた、長鎖アルコールの希釈剤または分散剤（例えば、カルボキシルメチルセルロース）、または乳濁液および懸濁液を含む薬学的に受容可能な投薬形態の処方において一般に使用される類似の分散剤を含み得る。薬学的に受容可能な固体、液体もしくは他の投薬形態の製造において一般に使用される、一般に使用される他の界面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ、Ｓｐａｎ）および他の乳化剤、またはバイオアベイラビリティ増強剤もまた、処方の目的に使用され得る。
【００７４】
本発明の薬学的組成物は、カプセル、錠剤、水性懸濁液または水溶液を含むがこれらに限定されない任意の経口的に受容可能な投薬形態中で、経口的に投与され得る。経口用途のための錠剤の場合において、一般に使用されるキャリアとしては、ラクトースおよびコーンスターチが挙げられる。潤沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）もまた、典型的に添加される。カプセル形態における経口投与について、有用な希釈剤としては、ラクトースおよび乾燥コーンスターチが挙げられる。水性懸濁液が経口用途に必要とされる場合、活性成分が、乳化剤および懸濁剤と合わせられる。所望ならば、特定の甘味料、矯味矯臭剤または着色料もまた添加され得る。
【００７５】
あるいは、本発明の薬学的組成物は、直腸投与のための坐剤の形態で投与され得る。これらは、薬剤を、室温で固体であるが直腸温では液体でありよって直腸内で融解して薬物を放出する適切な無刺激賦形剤と混合することにより、調製され得る。このような材料としては、カカオバター、蜜蝋およびポリエチレングリコールが挙げられる。
【００７６】
本発明の薬学的組成物はまた、特に、処置の標的が局所適用によって容易に接近可能な領域または器官を含む場合（眼、皮膚または下部腸管の疾患を含む）、局所的に投与され得る。適切な局所処方物は、これらの領域または器官の各々について容易に調製される。
【００７７】
下部腸管に関する局所適用は、直腸坐剤処方物（上記を参照のこと）または適切な浣腸処方物において、もたらされ得る。局所経皮パッチもまた使用され得る。
【００７８】
局所適用のために、薬学的組成物は、１以上のキャリア中に懸濁または溶解した活性成分を含む、適切な軟膏中に処方され得る。本発明の化合物の局所投与のためのキャリアとしては、鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化蝋および水が挙げられるが、これらに限定されない。あるいは、薬学的組成物は、１以上の薬学的に受容可能なキャリアに懸濁または溶解した活性成分を含む、適切なローション剤またはクリーム剤中に処方され得る。適切なキャリアとしては、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステル蝋、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７９】
眼での使用のためには、薬学的組成物は、ベンジルアルコニウムクロリドのような保存剤を含むかまたは含まないかのいずれかの、ｐＨを調整された等張性滅菌生理食塩水中の微小化された懸濁物、または好ましくは、ｐＨを調整された等張性滅菌生理食塩水中の溶液として処方され得る。あるいは、眼での使用のためには、薬学的組成物は、ワセリンのような軟膏中に処方され得る。
【００８０】
本発明の薬学的組成物はまた、鼻腔エアゾールまたは吸入によって投与され得る。このような組成物は、薬学的処方物の分野において周知の技術に従って調製され、そしてベンジルアルコールまたは他の適切な保存剤、バイオアベイラビリティを増強するための吸収促進剤、フルオロカーボン、および／または他の従来の可溶化剤もしくは分散剤を使用して、生理食塩水中で溶液として調製され得る。
【００８１】
上記の組成物は、以下に関する治療適用において特に有用である：ＩＬ−１媒介疾患、アポトーシス媒介疾患、炎症性疾患、自己免疫疾患、破壊的骨障害、増殖障害、感染症、変性疾患、細胞死に関連する疾患、過剰な食事アルコール摂取疾患、ウイルス媒介疾患、ブドウ膜炎、炎症性腹膜炎、変形性関節症、膵炎、喘息、成人呼吸促進症候群、糸球体腎炎、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、強皮症、慢性甲状腺炎、グレーヴズ病、自己免疫性胃炎、糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少、血小板減少、慢性活性肝炎、重症筋無力症、炎症性腸疾患、クローン病、乾癬、アトピー性皮膚炎、瘢痕、対宿主性移植片病、器官移植拒絶、骨粗鬆症、白血病および関連障害、骨髄形成異常症候群、多発性骨髄腫関連骨障害、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、転移性黒色腫、カポージ肉腫、多発性骨髄腫、出血性ショック、敗血症、敗血症性ショック、熱傷、細菌性赤痢、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンティングトン病、ケネディ病、プリオン病、大脳虚血、癲癇、心筋虚血、急性心臓疾患および慢性心臓疾患、心筋梗塞、うっ血性心不全、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈バイパス移植、棘筋萎縮、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、ＨＩＶ関連脳炎、加齢、脱毛、発作に起因する神経学的損傷、潰瘍性大腸炎、外傷性脳傷害、脊髄傷害、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｇ型肝炎、黄熱病、デング熱または日本脳炎（Ｊａｐａｎｅｓｅ  ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ）、種々の形態の肝臓疾患、腎臓疾患、多嚢胞（ポリアプティック；ｐｏｌｙａｐｔｉｃ）腎臓疾患、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ関連の胃腸潰瘍疾患および十二指腸潰瘍疾患、ＨＩＶ感染、結核および髄膜炎。これらの化合物および組成物はまた、冠状動脈バイパス移植に関連した合併症を処置する際に、そして種々の形態の癌の処置のための免疫治療の成分として有用である。
【００８２】
本発明のカスパーゼインヒビターはまた、細胞（例えば、組織および器官）の保存において有用である。細胞保存の方法は、化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体の溶液中に細胞を浸漬する工程を包含する。
【００８３】
上記の組成物中に存在する化合物の量は、実施例に記載のいずれかのアッセイによって測定した場合、疾患の重篤度またはカスパーゼ活性および／もしくは細胞アポトーシスの検出可能な減少を引き起こすために充分であるべきである。
【００８４】
本発明の化合物はまた、（臓器移植に、または血液製剤の保存に必要であり得るような）細胞を保存するための方法において有用である。カスパーゼインヒビターについての同様の使用は、報告されている（Ｓｃｈｉｅｒｌｅら，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９９９，５，９７）。本方法は、カスパーゼインヒビターを含む溶液を用いて、保存されるべき細胞または組織を処理する工程を包含する。必要とされるカスパーゼインヒビターの量は、所定の細胞型に関するインヒビターの有効度および細胞のアポトーシス細胞死を防ぐことが必要な時間の長さに依存する。
【００８５】
別の実施形態によれば、本発明の組成物は、別の治療剤をさらに含み得る。このような因子としては、血栓崩壊剤（例えば、組織プラスミノゲンアクチベーターおよびストレプトキナーゼ）が挙げられるが、これらに限定されない。第二の薬剤が用いられる場合、第二の薬剤は、本発明の化合物もしくは組成物を用いて、別個の投薬形態または単回投薬形態の一部のいずれかとして投与され得る。
【００８６】
任意の特定の患者についての特定の投薬量および処置レジメンが、用いる特定の化合物の活性、年齢、体重、全般的健康状態、性別、食事、投与時間、排泄速度、薬物の組合せ、ならびに処置医の判断および処置される特定の疾患の重篤度を含む種々の要因に依存することもまた理解されるべきである。活性成分の量はまた、組成物中の（存在する場合）特定の化合物および他の治療剤に依存する。
【００８７】
好ましい実施形態では、本発明は、上記の疾患のうちの１つを有する哺乳動物を処置する方法を提供し、この方法は、上記の薬学的に受容可能な組成物をこの哺乳動物に投与する工程を包含する。この実施形態では、患者が、別の治療剤またはカスパーゼインヒビターもまた投与される場合、これは、単回投薬形態で、または別個の投薬形態として、本発明の化合物と一緒に送達され得る。別個の投薬量形態として投与される場合、他方のカスパーゼインヒビターまたは薬剤は、本発明の化合物を含む薬学的に受容可能な組成物の投与の前に、投与と同時に、または投与後に投与され得る。
【００８８】
本発明がより完全に理解されるように、以下の調製実施例および試験実施例を記載する。これらの実施例は、例示の目的のためのみであり、そして本発明の範囲を限定するとは決して解釈されるべきではない。
【実施例】
【００８９】
（合成実施例）
以下の実施例は、本発明の選択された化合物についての合成手順を提供する。
【００９０】
（実施例１）
【００９１】
【化１７】
0004428926.tif 000023
（［３Ｓ／Ｒ（２Ｓ）］−３−［２−（カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタノイルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸）
（方法Ａ：（４Ｓ）−ベンジル−３−ペンタノイル−オキサゾリジン−２−オン）
【００９２】
【化１８】
0004428926.tif 000024
−７８℃の無水ＴＨＦ（２００ｍｌ）中の４（Ｓ）−（−）−ベンジル−２−オキサゾリジンオン（１０ｇ、５６．４３ｍｍｏｌ）の溶液を、攪拌しながら、ヘキサン中の２．５Ｍ  ｎ−ブチルリチウム溶液（２３．７０ｍｌ、５９．２６ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を−７８℃で３０分間攪拌し、その後、塩化バレリル（７．５７ｍｌ、６２．１０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、反応混合物を１５時間かけて周囲温度まで温め、その後、これをＮＨ４Ｃｌ溶液で希釈し、酢酸エチルで希釈し、そしてブラインで洗浄した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、そして濃縮してゴム状物を得た。これを、フラッシュクロマトグラフィー（４０／６０ヘキサン中１０％  ＥｔＯＡｃ）によって精製して、副題化合物（１４．６１ｇ、９９％）を無色のオイルとして得た：
【００９３】
【数１】
0004428926.tif 000025
（方法Ｂ：［４Ｓ（３Ｒ）］−３−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−カルボニル）−ヘキサン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル）
【００９４】
【化１９】
0004428926.tif 000026
−７８℃のＴＨＦ（１００ｍＬ）中の（４Ｓ）−ベンジル−３−ペンタノイルオキサゾリジン−２−オン（１４．２０ｇ、５４．３４ｍｍｏｌ）の溶液を、攪拌しながら、ＴＨＦ中のビス（トリメエチルシリル）アミドナトリウムの１Ｍ溶液（５９．８０ｍｌ、５９．７７ｍｍｏｌ）で１０分間処理した。反応混合物を−７８℃で３０分間攪拌し、その後、ブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（１０．４３ｍｌ、７０．６４ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、反応混合物をさらに３．５時間にわたって−７８℃で攪拌し、その後、これを、ＮＨ４Ｃｌ溶液で希釈し、酢酸エチルで希釈し、そしてＮａＨＣＯ３溶液およびブラインで順次洗浄した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、そして濃縮してゴム状物を得た。静置したところ、白色固体が形成され、そしてこれを４０／６０のＤＣＭ／ヘキサンから再結晶化して、副題化合物（１４．６２ｇ、７２％）を白色固体として得た：
【００９５】
【数２】
0004428926.tif 000027
（方法Ｃ：（２Ｒ）−２−プロピル−コハク酸１−ベンジルエステル４−ｔｅｒｔ−ブチルエステル）
【００９６】
【化２０】
0004428926.tif 000028
−２０℃のＴＨＦ（８０ｍｌ）中のベンジルアルコール（４．６２ｍｌ、４４．６４ｍｍｏｌ）の溶液を、攪拌しながら、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウムの２．５Ｍ溶液（１３．３６ｍｌ、３３．４８ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を４０分間かけて−５℃まで温め、その後、ＴＨＦ（２０ｍｌ）中の［４Ｓ（３Ｒ）］−３−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−カルボニル）−ヘキサン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８．３８ｇ、２２．３２ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を１５時間かけて周囲温度まで温め、その後、これをＮＨ４Ｃｌ溶液および酢酸エチルで希釈し、そしてブラインで洗浄した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、そして濃縮してゴム状物を得た。これを、フラッシュクロマトグラフィー（４０／６０ヘキサン中の１１％  ＥｔＯＡｃ）によって精製して、副題化合物（４．５６ｇ、６７％）を無色オイルとして得た：
【００９７】
【数３】
0004428926.tif 000029
（方法Ｄ：（２Ｒ）−２−プロピル−コハク酸１−ベンジルエステル）
【００９８】
【化２１】
0004428926.tif 000030
０℃の無水ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の（２Ｒ）−２−プロピル−コハク酸１−ベンジルエステル４−ｔｅｒｔ−ブチルエステルの攪拌した溶液（４．５６ｇ、１４．８８ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）の溶液で処理した。反応混合物を３時間かけて周囲温度まで温め、その後、減圧下で濃縮した。残渣を乾燥ＤＣＭに溶解し、その後、再度濃縮した。このプロセスを数回繰り返して過剰なトリフルオロ酢酸を除去して、副題化合物（３．７０ｇ、９９％）をゴム状物として残した：
【００９９】
【数４】
0004428926.tif 000031
（方法Ｅ：（２Ｒ）−２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタン酸ベンジルエステル）
【０１００】
【化２２】
0004428926.tif 000032
−７８℃の無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のカルバゾール（２．４９ｇ、１４．８８ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液を、ＴＨＦ（１４．８８ｍｌ、１４．８８ｍｍｏｌ）中のリチウムビス（トリメチルシリル）アミドの１．０Ｍ溶液で処理した。反応混合物を２時間かけて周囲温度まで温め、その後、−７８℃まで再度冷却した。
【０１０１】
０℃で攪拌しながら、無水ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の（２Ｒ）−２−プロピル−コハク酸１−ベンジルエステル（３．７０ｇ、１４．７８ｍｍｏｌ）の溶液を、塩化オキサリル（１．４３ｍｌ、１６．３７ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１４滴）で処理した。反応混合物を０℃で１時間にわたって攪拌し、その後、減圧下で濃縮した。残渣を無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中に溶解し、そして−７８℃の、予め調製したカルバゾールのリチウムアニオンに添加した。反応混合物を４０時間かけて周囲温度まで温め、その後、これを、ＮＨ４Ｃｌ溶液および酢酸エチルで希釈し、そして２Ｎ  ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３溶液およびブラインで順次洗浄した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、そして濃縮してゴム状物を得て、このゴム状物をフラッシュクロマトグラフィー（４０／６０ヘキサン中の１０％  ＥｔＯＡｃ）によって精製して副題化合物（４．５０ｇ、７６％）を、カルバゾールもまた含む半固体／オイルとして得た；
【０１０２】
【数５】
0004428926.tif 000033
（方法Ｆ：（２Ｒ）−２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタン酸）
【０１０３】
【化２３】
0004428926.tif 000034
ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）中の（２Ｒ）−２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタン酸ベンジルエステル（４．５０ｇ、１１．２６ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液を１０％炭素担持Ｐｄ（約４００ｍｇ）で処理し、次いで反応混合物を水素雰囲気下に配置した。１時間後、さらに１０％炭素担持Ｐｄ（約３００ｍｇ）を添加し、そして反応混合物を攪拌しながらさらに３時間にわたって水素下に配置し、その後、反応混合物を、セライトパッドを通して濾過し、そして濃縮して副題化合物（２．９４ｇ、８４％）を、カルバゾールをも含む白色固体として得た：
【０１０４】
【数６】
0004428926.tif 000035
（方法Ｇ：［３Ｓ／Ｒ，４Ｓ／Ｒ，（２Ｒ）］−３−［２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタノイルアミノ］−５−フルオロ−４−ヒドロキシ−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル）
【０１０５】
【化２４】
0004428926.tif 000036
（２Ｒ）−２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタン酸（２．９４ｇ、９．５０ｍｍｏｌ）、３−アミノ−５−フルオロ−４−ヒドロキシ−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．０７ｇ、９．９９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（１．４１ｇ、１０．４３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１．３４ｇ、１０．９７ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（４０ｍＬ）の攪拌した混合物を０℃になるまで冷却し、次いでＥＤＣ（２．００ｇ、１０．４３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１６時間の間、室温まで温め、次いで、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（４０／６０ヘキサン中３３％  ＥｔＯＡｃ）によって精製して、副題化合物（２．５１ｇ、５３％）を泡状体として得た：
【０１０６】
【数７】
0004428926.tif 000037
（方法Ｈ：［３Ｓ／Ｒ，（２Ｒ）］−３−［２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタノイルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル）
【０１０７】
【化２５】
0004428926.tif 000038
無水ＤＣＭ（６０ｍｌ）中の［３Ｓ／Ｒ，４Ｓ／Ｒ，（２Ｒ）］−３−［２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタノイルアミノ］−５−フルオロ−４−ヒドロキシ−ペンタノン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．５１ｇ、５．０３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液を、１，１，１−トリアセトキシ−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズヨードオキソール−３（１Ｈ）−オン（２．３５ｇ、５．５３ｍｍｏｌ）で、０℃で処理した。生じた混合液を、０℃で、３時間保存し、ＤＣＭで希釈し、次いで飽和水性チオ硫酸ナトリウム、ＮａＨＣＯ３溶液およびブラインで、連続して洗浄した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、そして濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の２５％の酢酸エチル４０／６０）によって精製し、オフホワイトの固体（１．４３７ｇ、５７％）として、副題の化合物を得た。
【０１０８】
【数８】
0004428926.tif 000039
（方法Ｉ：［３Ｓ／Ｒ，（２Ｒ）］−３−［２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタノイルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸）
【０１０９】
【化２６】
0004428926.tif 000040
無水ＤＣＭ（２０ｍｌ）中の［３Ｓ／Ｒ，（２Ｒ）］−３−［２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−ペンタノイルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．４３ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）溶液を、無水ＤＣＭ中のＴＦＡ溶液（１０ｍｌ）で、攪拌して処理した。この混合物を、０℃で、２時間攪拌し、次いで室温で２時間攪拌した。この混合液を、減圧下で濃縮し、次いで残渣を、乾燥ＤＣＭ中に溶解した。余分なトリフルオロ酢酸を除去するために、この工程を数回繰り返した。オフホワイトの固体を、Ｅｔ２Ｏ  ／  ４０／６０ヘキサンから再結晶化し、白い粉末として、表題の化合物を得た（７１ｍｇ）。
【０１１０】
【数８Ａ】
0004428926.tif 000041
（実施例２）
【０１１１】
【化２７】
0004428926.tif 000042
（［３Ｓ／Ｒ（２Ｓ）］−３−［２−（２−カルバゾール−９−イル−２−オキソ−エチル）−３−メチル−ブチリルアミノ］−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸）
この化合物を、方法Ａ−Ｉで記載した方法と同様の手順を用いて調製した。この生成物を、白い粉末（最終工程として７１％）として単離した。
【０１１２】
【数９】
0004428926.tif 000043
（試験方法）
（酵素アッセイ）
カスパーゼ阻害に関するアッセイは、ヒトの組換え精製したカスパーゼ−１、カスパーゼ−３、カスパーゼ−７またはカスパーゼ−８による、蛍光原基質の切断に基づく。このアッセイは、各々の酵素に対して特異的な基質を利用して、Ｇａｒｃｉａ−Ｃａｌｖｏら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３（１９９８），３２６０８〜３２６１３）で報告されたアッセイと本質的に同じ方法で実施される。カスパーゼ−１に対する基質は、アセチル−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−アミノ−４−メチルクマリンである。カスパーゼ−３、カスパーゼ−７およびカスパーゼ−８に対する基質は、アセチル−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−アミノ−４−メチルクマリンである。特定のインヒビター濃度における、酵素不活性化の測定された速度（ｋｏｂｓ）は、非線形最小自乗アッセイコンピュータプログラム（ＰＲＩＵＳ  ２．０；ＧｒａｐｈＰａｄ  ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して、Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙら（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３３（１９９４）、３９４３〜３９３９）によって導かれた式に、このデータを直接適用することによって算出される。２次反応速度定数を測定するために、ｋｉｎａｃｔ値、ｋｏｂｓ値をそれらの各々の阻インヒビター濃度に対してプロットし、その後、ｋｉｎａｃｔ値を、コンピュータ化された線形回帰によって算出した。試験される本発明の化合物の多くは、以下の活性を示した：カスパーゼ１に対するｋｉｎａｃｔ値は、２５，０００と１，５００，０００Ｍ−１ｓ−１との間；カスパーゼ３に対するｋｉｎａｃｔ値は、９，０００と１，５００，０００Ｍ−１ｓ−１との間；カスパーゼ８に対するｋｉｎａｃｔ値は、１０，０００と７００，０００Ｍ−１ｓ−１との間。
【０１１３】
（末梢血単核球（ＰＢＭＣ）混合集団からのＩＬ−１β分泌の阻害）
カスパーゼ−１によるプレ−ＩＬ−１βのプロセシングは、種々の細胞供給源を用いた細胞培養物中で、測定され得る。健康なドナーから得られたヒトＰＢＭＣは、多くのクラスの生理学的刺激物質に応答してインターロイキンおよびサイトカインのスペクトルを産出する、白血球および単核細胞の混合集団を提供する。
【０１１４】
（実験方法）
試験化合物を、ジメチルスホキシド（ＤＭＳＯ、Ｓｉｇｍａ  ♯Ｄ−２６５０）中に溶解し、１００ｍＭのストック溶液とする。これを、１０％  熱不活性化ＦＣＳ（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ  ＃１００９９−１４１）、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン（Ｓｉｇｍａ  ♯Ｇ−７５１３）、１００Ｕ  ペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌ  ストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ  ♯Ｐ−７５３９）を含むＲＰＭＩからなる、完全培地中に希釈する。試験化合物の最終濃度の範囲は、８回の希釈工程にわたって、１００μＭ未満〜６ｎＭである。試験化合物の最も高い濃度は、アッセイ中の０．１％ＤＭＳＯに相当する。
【０１１５】
ヒトＰＢＭＣを、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ髄鞘細胞分離培地（Ａｍｅｒｓｈａｍ，＃１７−１４４０−０２）の遠心分離を行うことで、血液バンクから得られる軟膜から単離し、細胞のアッセイを滅菌９６ウェル平底プレート（Ｎｕｎｃ）中で実施する。各々のウェルは、１００μｌの細胞懸濁液、１×１０５の細胞、５０μｌの希釈化合物および５０μｌのＬＰＳ（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｌ−３０１２）を含み、最終濃度は５０ｎｇ／ｍｌである。コントロールは、細胞＋／−ＬＰＳ刺激物および化合物と同じ方法で希釈されたＤＭＳＯの希釈液からなる。プレートを、５％ＣＯ２および湿度９５％の空気中で、３７℃、１６〜１８時間インキュベートする。
【０１１６】
１６〜１８時間後、プレートを１００×ｇ、１８℃で、１５分間遠心分離した後に、上澄みを回収し、それらのＩＬ−１β含有量についてアッセイした。上澄み中の、成熟ＩＬ−１βの測定を、製造業者の使用説明書に従って、Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅキット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて実施する。ポジティブコントロールのウェル中のＰＢＭＣについては、約６００〜１５００ｐｇ／ｍｌレベルの成熟ＩＬ−１βが観察された。
【０１１７】
化合物の阻害能力は、インヒビターの濃度であるＩＣ５０値によって表し得、この値は、ポジティブコントロールと比較した場合、上澄み中で、５０％の成熟ＩＬ−１βが検出されるインヒビターの濃度である。
【０１１８】
表５は、上記の方法で決定する場合、この発明の選択された化合物に対する、末梢血単核球由来のＩＬ−１β分泌の阻害を表す。
【０１１９】
選択された化合物を、このアッセイで試験し、０．０４μＭと２０μＭとの間のＩＣ５０値での、ＩＬ−１β放出の阻害を示した。。
【０１２０】
（抗−Ｆａｓ誘導アポトーシスアッセイ）
細胞のアポトーシスは、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）が、そのレセプターであるＣＤ９５（Ｆａｓ）に結合することで誘導され得る。ＣＤ９５は関連レセプターのファミリーの１つであり、カスパーゼ酵素カスケードの活性化を介して、細胞内のアポトーシスをトリガーし得る、致死（ｄｅａｔｈ）レセプターとして公知である。そのプロセスは、ＣＤ−９５レセプター−リガンド複合体の細胞質ドメインに、アダプター分子ＦＡＤＤ／ＭＯＲＴ−１が結合することによって開始する。次いで、カスパーゼ−８はＦＡＤＤと結合して活性状態となり、下流のカスパーゼの活性化およびその後の細胞死に関連する事象のカスケードを開始する。アポトーシスはまた、ＦａｓＬではなく抗体を使用して、細胞表面のＣＤ９５に架橋するために、ＣＤ９５を発現する細胞、例えば、Ｊｕｒｋａｔ  Ｅ６．１Ｔ細胞リンパ腫細胞株において誘導され得る。抗−Ｆａｓ−誘導アポトーシスはまた、カスパーゼ−８の活性化を介しても、トリガーされる。このことは、カスパーゼ−８−媒介アポトーシス経路の阻害について、化合物をスクリーニングするために、細胞に基づくアッセイの基礎を提供する。
【０１２１】
（実験方法）
Ｊｕｒｋａｔ  Ｅ６．１細胞を、ＲＰＭＩ−１６４０（Ｓｉｇｍａ  Ｎｏ）＋１０％ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ  Ｎｏ．１００９９−１４１）＋２ｍＭ  Ｌ−グルタミン（Ｓｉｇｍａ  Ｎｏ．Ｇ−７５１３）からなる、完全培地中で培養する。その細胞を、対数増殖期中に回収する。５〜８×１０５細胞／ｍｌの細胞（１００ｍ）を滅菌した５０ｍｌＦａｌｃｏｎ遠沈管に移し、１００×ｇ、室温で、５分間遠心する。上澄みを除去し、合わせた細胞のペレットを、２５ｍｌの完全培地中に再懸濁する。細胞を計数し、完全培地を用いて、２×１０６細胞／ｍｌに濃度を調整する。
【０１２２】
試験化合物を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（Ｓｉｇｍａ  Ｎｏ．Ｄ−２６５０）中に希釈し、１００ｍＭストック溶液とする。このストック溶液を、完全培地中に４００μＭに希釈し、次いで、細胞アッセイプレートに取りつける前に、９６−ウェルプレート中で順次希釈した。
【０１２３】
１００μｌの細胞懸濁液（２×１０６細胞）を、滅菌９６−ウェル丸底クラスタープレート（Ｃｏｓｔａｒ  Ｎｏ．３７９０）の各ウェルに添加する。適切に希釈した化合物溶液（５０μｌ）および抗−ＦａｓであるクローンＣＨ−１１（５０μｌ）（Ｋａｍｉｙａ  Ｎｏ．ＭＣ−０６０）（１０ｎｇ／ｍｌの最終濃度）を、ウェルに添加する。コントロールのウェルを、抗体マイナスおよび化合物マイナスだが、ビヒクルコントロールとしてＤＭＳＯの希釈液を含むように設定した。このプレートを、５％ＣＯ２および湿度９５％、３７℃、１６〜１８時間インキュベートする。
【０１２４】
細胞のアポトーシスを、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｎｏ．１５４４  ６７５由来の「細胞死検出アッセイ（Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ）」を用いて、ＤＮＡ断片化の定量により測定する。１６〜１８時間のインキュベーション後、アッセイプレートを、１００×ｇ、室温で、５分間遠心する。１５０μｌの上澄みを除去し、フレッシュな１５０μｌの完全培地と取り換える。次いで、細胞を回収し、そしてアッセイキットに提供された２００μｌの溶解緩衝剤を各々のウェルに添加する。完全な溶解を確実にするために、細胞を粉砕し、４℃、３０分間インキュベートする。次いで、このプレートを、１９００×ｇで、１０分間遠心し、そしてその上澄みを、提供されたインキュベーション緩衝剤中に、１：２０希釈した。次いで、この溶液のうち１００μｌを、キットとともに提供された製造業者の使用説明書に従って、アッセイする。最終基質の添加後２０分間、ＳＰＥＣＴＲＡｍａｘ  ｐｌｕｓ  ｐｌａｔｅ  ｒｅａｄｅｒ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）中で、ＯＤ４０５ｎｍを測定する。ＯＤ４０５ｎｍを、化合物の濃度に対してプロットし、その化合物に対するＩＣ５０値を、４パラメーター適合オプションを使用する、曲線のあてはめプログラムＳＯＦＴｍａｘ  Ｐｒｏ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅ）を使用して算出する。
【０１２５】
選択した化合物を、このアッセイで試験し、０．００１μＭと０．１５μＭとの間のＩＣ５０値でのＪｕｒｋａｔ細胞のＦａｓ−誘導アポトーシスの阻害が示された。
【０１２６】
発明者らは、本発明の複数の実施形態を記載する一方で、発明者らの基礎的な例を変更して、本発明の化合物および方法を利用する別の実施形態を提供しうることは、明らかである。それゆえ、本発明の範囲は、例として表される特定の実施形態ではなく、添付の特許請求により規定されることが、意図される。