(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
フカス・セラタス（Fucus serratus）またはレッソニア・トラベルラタ（Lessonia trabelulate）から抽出された抽出物を有効成分として含有することを特徴とするエラスターゼ阻害剤。
【請求項２】
フカス・セラタス（Fucus serratus）またはレッソニア・トラベルラタ（Lessonia trabelulate）を水、メタノール、エタノール、プロパノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコールまたはこれらの混合液により抽出処理して得られた抽出物を有効成分として含有することを特徴とするエラスターゼ阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、人の皮膚の老化防止に有効なエラスターゼ阻害剤および皮膚外用剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
皮膚の老化に関する近年の研究によれば、外見的に老化が認められる皮膚において生じている組織レベルの変化としては皮膚真皮にあるコラーゲンおよびエラスチンの減少、ヒアルロン酸をはじめとするムコ多糖類の減少、表皮細胞の損傷などがある。
【０００３】
これらが並行して進行する皮膚老化の原因としては、一般的には加齢が最も重要なものであるが、乾燥、酸化、太陽光紫外線等も、皮膚老化にかかわる直接的な因子として挙げられる。
【０００４】
上述の皮膚老化現象の中でも特に顕著な結果をもたらすエラスチンの減少は、紫外線によるものと加齢に伴うものとがある。エラスチンは繊維状のコラーゲンに絡み付くようにして存在するコイル状の硬タンパク質であって、弾性体のように伸びたあと元に戻る性質があり、コラーゲンと協同して皮膚にハリや弾力を与えているものである。紫外線はこのエラスチンに特異的に作用するプロテアーゼであるエラスターゼの働きを活性化するので、紫外線を多量に浴びた皮膚ではエラスチンの分解が促進されることになり、その結果、皮膚はハリや弾力を失うに至る（Fragrance Journal，1997-4)。エラスターゼの作用は加齢によっても活発化して同様の結果を招く。
【０００５】
したがって、エラスターゼの過度の作用を抑制することができれば上記機構による皮膚老化の防止が可能になる。このような観点からエラスターゼ阻害作用を有する物質の探索が進められた結果、イジュ、ユーカリ、コミカンソウ等の抽出物が有効であることが確認された（特開平９−９５４２０，同９−８７１３７，同９−８７１３６）。しかしながら、これらの抽出物は安定性や使用感の点で、必ずしも満足できるものではなかった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、エラスターゼの過度の作用を抑制することにより皮膚老化を防止することを可能にする、安定性、使用感および安全性に優れた新規皮膚外用剤およびそのためのエラスターゼ阻害剤を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
上記目的の達成に成功した本発明は、エラスターゼ阻害物質が含まれていることを本発明者らが初めて確認した褐藻類のヒバマタ属、アスコフィラム属、レッソニア属またはダービリア属に属する海藻から抽出されたエラスターゼ阻害物質を有効成分とするエラスターゼ阻害剤、および、該エラスターゼ阻害剤を添加してなる皮膚外用剤を提供するものである。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明によるエラスターゼ阻害剤の原料となる上記海藻は、主に南米や欧州の一部の近海で生育しており、食用に利用されるほか、家畜の飼料、土壌改良剤等に利用されている。
【０００９】
入手が容易でエラスターゼ阻害物質抽出原料として好適なものの具体例としては、ヒバマタ属ではフカス・ヴエシクロスス（Fucus vesiculosus）、フカス・セラタス（Fucus serratus）、アスコフィラム属ではアスコフィラム・ノドスム(Ascophyllum nodosm)、レッソニア属ではレッソニア・トラベルラタ（Lessonia trabelulate）、ダービリア属ではダービリア・アンタルクテイカ（Durbillea antarctica）などがある。
【００１０】
これらの海藻に含まれていてエラスターゼ阻害作用を示す物質がいかなる化合物なのかは未だ確認されていないが、それは、水もしくは低級脂肪族アルコールまたはそれらの混合液を用いて容易に抽出することができる。抽出溶媒として好適な低級脂肪族アルコールは、メタノール、エタノール、プロパノール、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール等である。
【００１１】
エラスターゼ阻害物質を抽出するに当たり特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温ないし還流加熱下に任意の装置を用いて抽出することができる。簡単には、抽出溶媒を満たした処理槽に原料海藻を投入し、ときどき撹拌しながら可溶性成分を溶出させる。得られた抽出液を濃縮、乾燥すると、エラスターゼ阻害作用を有する抽出物が得られる。
【００１２】
上述のようにして得られた抽出液または抽出物はそのままでもエラスターゼ阻害剤として利用可能であるが、必要ならば、エラスターゼ阻害活性の向上や脱色・脱臭等を目的とする精製を施したり、任意の助剤と混合して製剤化してもよい。
【００１３】
本発明のエラスターゼ阻害剤は、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等の皮膚外用剤に配合して皮膚から吸収させることにより、皮膚の老化防止に役立たせることができる。配合可能な皮膚外用剤は、本発明のエラスターゼ阻害剤のみが主剤となるものに限られるわけではない。たとえば、アボガド油、パーム油、ピーナッツ油、牛脂、コメヌカ油、ホホバ油、カルナバロウ、ラノリン、流動パラフィン、スクワラン、オキシステアリン酸、イソステアリルアルコール等の油性成分；グリセリン、ソルビトール、ポリエチレングリコール、コラーゲン、ヒアルロン酸およびその塩、コンドロイチン硫酸およびその塩などの保湿剤；パラジメチルアミノ安息香酸アミル、ウロカニン酸、ジイソプロピルケイ皮酸エチル等の紫外線吸収剤等を１種以上含有し、さらにエリソルビン酸ナトリウム、セージエキス、パラヒドロキシアニソール等の酸化防止剤；ステアリル硫酸ナトリウム、セチル硫酸ジエタノールアミン、セチルトリメチルアンモニウムクロライド、イソステアリン酸ポリエチレングリコール、ステアリン酸グリセリル等の界面活性剤；エチルパラベン、ブチルパラベン等の防腐剤；オウバク、オウレン、シコン、シャクヤク、センブリ、バーチ、ビワ等の抽出物、グリチルリチン酸誘導体、グリチルレチン酸誘導体、サリチル酸誘導体、ヒノキチオール、酸化亜鉛、アラントイン等の消炎剤；胎盤抽出液、グルタチオン、ユキノシタ抽出物、アルビチン、アスコルビン酸誘導体等の美白剤；ニンジン、アロエ、ゼニアオイ、アイリス、ブドウ、ヨクイニン、ヘチマ、ユリ等の抽出物、ローヤルゼリー、感光素、コレステロール誘導体、各種アミノ酸類の賦活剤；サフラン、センキュウ、ショウキョウ、オトギリソウ、オノニス、ローズマリー、ニンニク等の抽出物；γ−オリザノール、デキストラン硫酸ナトリウム等の血行促進剤；硫黄、チアントール等の抗脂漏剤；香料、水、アルコール、カルボキシビニルポリマー等の増粘剤；チタンイエロー、カーサミン、ベニバナ赤、任意の助剤を含有するものに適宜配合することができる。
【００１４】
皮膚外用剤に対する本発明のエラスターゼ阻害剤の好適配合率は、未精製の標準的な抽出物からなるものの場合で約０.００１〜１０重量％である。
【００１５】
【実施例】
以下、実施例を示して本発明をさらに詳細に説明する。
【００１６】
製造実施例
原料海藻の乾燥粉末１００ｇを抽出溶媒１０００mlに投入し、還流抽出器で２時間加熱抽出する処理を２回行う。得られた抽出液を合わせて減圧下に濃縮し、さらに乾燥して、抽出物を得る。
【００１７】
先に例示した５種類の海藻について上記の抽出を行なった結果を表１に示す。なお、表中に略号で示した抽出溶媒の名称は次のとおりである。
Ａ：水；  Ｂ：８０％エタノール；  Ｃ：メタノール；  Ｄ：エタノール；
Ｅ：1,3-ブチレングリコール；  Ｆ：プロピレングリコール；  Ｇ：n-ヘキサン
【００１８】
【表１】
抽出物収率（対原料海藻重量％）
0004413292.tif 000002
【００１９】
得られた抽出物について、下記の試験法によりエラスターゼ阻害活性を試験した。試験結果を表２に示す。
【００２０】
試験法：９６穴マイクロプレートを用意し、１穴に対して試料溶液（溶媒：DMSO＋水）５０μl、基質溶液（N-SUCCINYL-ALA-ALA-ALA-p-NITROANILIDE，濃度１mM）１００μlおよびエラスターゼ溶液（ブタ膵臓由来エラスターゼ・TypeIII，シグマ社製品；濃度20μg/ml）５０μlを添加する。２５℃で５０分間反応させたのち、反応液を採取して４１５nmの吸光度を測定する。上記と同様の酵素反応と吸光度測定を、試料溶液の代わりに試料溶液と等量の溶媒のみを添加して行う。さらに、それぞれの場合について、エラスターゼ溶液を添加せずに同じ操作と測定を行う。
【００２１】
測定結果より、下記の式によりエラスターゼ阻害率を算出する。
エラスターゼ阻害率（％）＝〔１−（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）〕×１００
但し、
Ａ：試料溶液添加，酵素添加時の吸光度
Ｂ：試料溶液添加，酵素無添加時の吸光度
Ｃ：試料無添加，酵素添加時の吸光度
Ｄ：試料無添加，酵素無添加時の吸光度
試料溶液の濃度を種々変更して上記阻害率の測定を行い、エラスターゼの活性を５０％阻害する試料溶液濃度を内挿法により求める。
【００２２】
【表２】
５０％阻害濃度（ppm）
0004413292.tif 000003
【００２３】
実施例１
下記組成の化粧水を常法により製造した。
フカス・ヴエシクロススの８０％エタノール抽出物  ０.１ｇ
グリセリン                      ４ｇ
1,3-ブチレングリコール          ４ｇ
エタノール                      ７ｇ
ＰＯＥ・オレイルアルコール      ０.５ｇ
メチルパラベン                  ０.０５ｇ
クエン酸                        ０.０１ｇ
クエン酸ソーダ                  ０.１ｇ
香料                            ０.０５ｇ
精製水                        残部（全量を１００mlとする）
【００２４】
実施例２
下記組成の化粧水を常法により製造した。
フカス・セラタスのエタノール抽出物  ０.１５ｇ
グリセリン                      ４ｇ
1,3-ブチレングリコール          ４ｇ
エタノール                      ７ｇ
ＰＯＥ・オレイルアルコール      ０.５ｇ
メチルパラベン                  ０.０５ｇ
クエン酸                        ０.０１ｇ
クエン酸ソーダ                  ０.１ｇ
香料                            ０.０５ｇ
精製水                        残部（全量を１００mlとする）
【００２５】
実施例３
下記組成のクリームを常法により製造した。
アスコフィラム・ノドスムの水抽出物  ０.１５ｇ
セトステリルアルコール              ３.５ｇ
スクワラン                        ４０ｇ
ミツロウ                            ３ｇ
還元ラノリン                        ５ｇ
エチルパラベン                      ０.３ｇ
ポリオキシエチレン                  ２ｇ
ステアリン酸モノグリセリド          ２ｇ
1,3-ブチレングリコール              ５ｇ
香料                                ０.０３ｇ
グリセリン                          ５ｇ
精製水                            残部（全量を１００mlにする）
【００２６】
実施例４
下記組成の乳液を常法により製造した。
レッソニア・トラベルラタの1,3-ブチレングリコール抽出物  ０.５ｇ
セチルアルコール                    ０.５ｇ
ミツロウ                            ２ｇ
POE(10)モノオレイン酸エステル       １ｇ
グリセリンモノステアリン酸エステル  １ｇ
ヒアルロン酸ナトリウム              ０.１ｇ
プロピレングリコール                ５ｇ
エタノール                          ３ｇ
エチルパラベン                      ０.３
香料                                ０.０３ｇ
精製水                            残部（全量を１００mlにする）
【００２７】
実施例５
下記組成のパックを常法により製造した。
ダービリア・アンタルクテイカのプロピレングリコール抽出物  ０.５ｇ
ポリビニルアルコール          １５ｇ
ポリエチレングリコール          ３ｇ
プロピレングリコール            ７ｇ
エタノール                    １０ｇ
メチルパラベン                  ０.０５ｇ
香料                            ０.０５ｇ
精製水                        残部（全量を１００mlにする）
【００２８】
【発明の効果】
上述のように、本発明によれば皮膚の老化防止に有効な新規エラスターゼ阻害剤および皮膚外用剤が提供された。本発明のエラスターゼ阻害剤の有効成分は、エラスターゼ阻害作用に優れているだけでなく、食品や飼料として利用されてきた海藻から抽出されるものであるから安全性にも優れている。