(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末Ｘ線回折法で主な回折角（２θ）として、１５．７°、１７．１°、１８．２°、１９．４°及び２２．４°を示す、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースからなる糖質複合体結晶。
【請求項２】
Ｄ−プシコースとＤ−フラクトースとの組成比が約１：２乃至１：４である請求項１記載の糖質複合体結晶。
【請求項３】
Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースからなる糖液から、請求項１又は２記載の糖質複合体結晶を生成せしめ、これを採取することを特徴とする糖質複合体結晶の製造方法。
【請求項４】
糖質複合体結晶を生成させる際の糖液の溶媒が水、又は、水とエタノールとの混合液であることを特徴とする請求項３記載の糖質複合体結晶の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、複合体結晶性糖質とその製造方法並びに用途に関し、詳細には、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する新規な複合体結晶性糖質とその製造方法並びに用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】
単糖は、炭素鎖が３以上の炭水化物の総称で、天然界には４０以上の数多くの単糖類が、代謝産物や生合成産物として遊離体や誘導体、さらに、複合糖質やオリゴ糖、多糖などさまざまな形態で存在している。単糖類で産業上最も重要なものはＤ−グルコースで、その製造はアミラーゼなどの酵素で澱粉を加水分解する方法により既に工業的規模で確立されており、食品、化粧品、医薬品など産業上最も広く大量に使用されている。さらに、Ｄ−グルコースをイソメラーゼで変換することによって製造されているＤ−フラクトースも産業上重要な糖質である。その他に、酢酸菌によるソルビトールからのＬ−ソルボース製造、β−ガラクトシダーゼによるラクトースからのＤ−ガラクトースの製造、酸加水分解によるキシランからのＤ−キシロースの製造など、幾つかの単糖の製造は工業的に実施されているが、それ以外の多くの単糖類は、原料や生成反応、収率など工業的且つ経済的の制約のために工業的大量製造が困難で、産業上での利用がほとんど行われていない。
【０００３】
本発明者らは、このような高価で少量しか取り扱えない単糖に注目し、それら糖質を希少糖質と名付け、長年の間、希少糖質の生成反応について鋭意研究を続けている。その研究過程で、先に、本発明者らは、新規なエピ化酵素であるＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼ（「Ｄ−タガトース・３−エピメラーゼ」とも云う）を発見し、本酵素がＤ−タガトースとＤ−ソルボース間の相互変換反応、Ｄ−プシコースとＤ−フラクトース間の相互変換反応、Ｄ−キシルロースとＤ−リブロース間の相互変換反応並びにＬ−キシルロースとＬ−リブロース間の相互変換反応を触媒することを明らかにし、『バイオサイエンス・バイオテクノロジー・アンド・バイオケミストリー（Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．）』、第５８巻、２１６８乃至２１７１頁（１９９４年）に報告した。本酵素の発見により、本発明者らが目指している希少糖質の生成反応の実用化は大きく前進し、特に、Ｄ−プシコースの製造においては顕著なものがあった。
【０００４】
Ｄ−プシコースは、一般的には甘蔗廃ミツ中に少量存在することが知られており、Ｄ−フラクトースに似た良質の甘味を持っているとともに、難発酵性の糖質で低カロリー性糖質として最適で、産業上、特に食品産業において期待されている糖質の１つである。『カーボハイドレイト・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．）』、第１０１巻、３４８乃至３４９頁（１９８２年）に見られるように、従来Ｄ−プシコース生成については、有機化学的なエピ化反応でＤ−フラクトースから、最適条件でも変換率約８％の収率でしかＤ−プシコースが生成しないことが報告されていた。しかも、『カーボハイドレイト・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．）』、第７０巻、２０９乃至２１６頁（１９７９年）に見られるように、その反応中には副反応も起こり、反応液からの精製も煩雑で精製収率もよくないことが知られている。一方、本発明者らが発見したＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼを用いたＤ−プシコースの生成反応は、Ｄ−フラクトースからの変換率は約２０乃至２５％と高く、しかも、副反応はほとんど起こらず、実質的に、反応物中の糖質は生成したＤ−プシコースと残存するＤ−フラクトースのみで、反応物からのＤ−プシコースの分離精製も可能で、また、残存するＤ−フラクトースを収率よく再利用することもできる。Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼによるＤ−プシコース生成反応の基質のＤ−フラクトースは、砂糖やフルクタンを酸加水分解及び／又はβ−フルクトフラノシダーゼによる酵素分解することによって得ることができ、更に有利には、澱粉から安価で大量に工業製造されているＤ−グルコースをＤ−キシロースイソメラーゼでＤ−フラクトースに変換し製造することができる。本発明者らは、『ジャーナル・オブ・ファーメンテイション・アンド・バイオエンジニアリング（Ｊｏｕｎａｌ  ｏｆ  Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）』、第８０巻、１０１頁（１９９５年）に開示したように、既に工業的に使用されているＤ−キシロースイソメラーゼと、本発明者らが発見したＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼとを組み合わせて、Ｄ−グルコースから直接Ｄ−プシコースを製造する方法を開発し、Ｄ−プシコースを連続的に製造する製造方法の道を拓いている。
【０００５】
Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼによるＤ−フラクトースからのＤ−プシコース生成は可逆反応で、Ｄ−プシコースの生成率が約２０乃至２５％で平衡に達し、反応の基質のＤ−フラクトースが約８０乃至７５％残存する。そのため、Ｄ−プシコース結晶を得るためには、反応物を樹脂カラム分画などしてＤ−プシコースとＤ−フラクトースとを分離する方法や、反応物中のＤ−フラクトースを酵母処理などして反応物中に残存するＤ−フラクトースを発酵消費させＤ−プシコースを得る方法などを用いてＤ−プシコースの純度を上げた後、結晶化しなければならず、Ｄ−プシコースの工業的利用を目的とした場合、精製工程や精製収率、結晶化収率などに未解決の課題が残っていた。
【０００６】
このような背景のもと、Ｄ−プシコース含有糖質の工業的製造において経済的に有利な方法として、Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼの反応物からＤ−プシコースを分離・精製することなく、Ｄ−プシコースとＤ−フラクトースを含む糖液をそのまま用い、この糖液から結晶性糖質を高収率で得ることが強く望まれている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する糖液から結晶性糖質を高収率で採取しうる新規な方法を確立し、併せて、その方法で得られる結晶性糖質の特性を解明するとともに斯かる結晶性糖質の製造方法並びに用途を提供することを課題とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼ反応によって得られるＤ−プシコースとＤ−フラクトースとを含む混合物から結晶性糖質を高収率で得ることを目指して鋭意研究を続けた。
【０００９】
その結果、Ｄ−プシコースとＤ−フラクトースとを含む混合物から、全く新規な複合体結晶性糖質が生成することを見出し、更に、この結晶性糖質がＤ−プシコースとＤ−フラクトースとの組成比として約１：２乃至１：４の新規複合体結晶であることを見出し、加えて、この複合体結晶性糖質の製造方法並びに用途を確立して本発明を完成した。
【００１０】
すなわち、本発明は、上記の課題を、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質と、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する糖液から、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質を生成せしめ、これを採取することを特徴とする複合体結晶性糖質の製造方法並びに、斯かる複合体結晶性糖質を含有せしめた組成物により解決するものである。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本発明でいうＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質とは、粉末Ｘ線回折法で、Ｄ−プシコース結晶及びＤ-フラクトース結晶のいずれとも異なるＸ線回折パターンを示す、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する結晶性糖質を意味する。本発明に用いる原料の糖質は、Ｄ−プシコースとＤ−フラクトースとを含む混合糖質であって、斯かる複合体結晶性糖質が製造できるものであればよい。
【００１２】
このような混合糖質を製造するには、Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼをＤ−フラクトースに作用させエピ化反応して、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースの混合物を調製することが有利に実施できる。調製される糖質のＤ−プシコースとＤ−フラクトースとの割合は、通常、固形物当たりそれぞれ約２０乃至２５％と約８０乃至７５％である。必要ならば、この割合のＤ−プシコースとＤ−フラクトースとの混合糖質を、Ｄ−プシコースにＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼを作用させて製造することも随意である。また、無機及び／又は有機触媒を用いてＤ−フラクトースをエピ化してＤ−プシコース及びＤ−フラクトースの混合物を製造することも可能である。その場合、通常、Ｄ−プシコースの純度が低いため、Ｄ−プシコースを添加したり、溶媒分画、膜分離、カラム分画、酵母処理、酵素処理などしてＤ−フラクトースを除去しＤ−プシコースの純度を高めたりすることも可能である。勿論、単純にＤ−プシコースとＤ−フラクトースとを任意の割合で配合して、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースの混合物を調製してもよい。
【００１３】
本発明は、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する糖液から、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質を生成せしめ、これを採取して、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質を製造できればよく、その製造方法は、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する糖質、望ましくは、Ｄ−プシコースとＤ−フラクトースとの組成比が約１：２乃至１：４の高濃度溶液、望ましくは、固形分濃度７０乃至９５％（ｗ／ｗ）（以下特にことわらない限り、本明細書においては「％（ｗ／ｗ）」を単に「％」と記す。）の水溶液を、例えば、助晶缶にとり、これに種晶としてＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質を適量、望ましくは、０．０１乃至１０％程度を含有せしめ、混合、助晶してマスキットとし、これを粉末化して採取すればよい。この際、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する糖液にエタノールなど親水性有機溶媒を加え、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の生成を促進させることもできる。
【００１４】
本発明において、マスキットから複合体結晶性糖質の粉末を製造するには、例えば、噴霧乾燥方法、流動造粒方法、ブロック粉砕方法など適宜用いることができる。噴霧乾燥方法の場合には、通常、固形分濃度７０乃至８５％、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の晶出率５乃至５０％程度のマスキットを高圧ポンプでノズルから噴霧し、結晶含有粉末糖質が溶融しない温度、例えば、４０乃至７５℃の温風で乾燥し、次いで２５乃至４０℃で約１乃至２４時間、晶出、熟成すればよい。また、ブロック粉砕方法は、通常、固形分濃度８５乃至９５％、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の晶出率１乃至３０％程度のマスキットを約１乃至１０日間静置し、全体をブロック状に晶出固化させ、これを粉砕又は切削などの方法によって粉末化し、乾燥すればよい。
【００１５】
このようにして得られる本発明の複合体結晶性糖質の粉末は、非晶質糖質と比べ、吸湿性が低く、固結せず、流動性良好であるので、取り扱い容易であり、その包装、輸送、貯蔵など管理に要する物的、人的経費が大幅に削減できる。また、複合体結晶性糖質の粉末は、吸湿性が低い糖質であるので、粉末混合甘味料、固形混合甘味料、チョコレート、チューインガム、即席ジュース、即席スープ、顆粒、錠剤などの製造が容易に、有利に実施できる。更に、本発明の複合体結晶性糖質は、糖質の持つ性質、例えば、甘味性、ボディー付与性、照り付与性、保湿性、他糖の晶出防止、適度な粘性などの性質を兼備しているので、広く、飲食物、化粧品、医薬品など各種組成物に有利に利用できる。
【００１６】
本発明の複合体結晶性糖質を甘味料として利用する場合は、例えば、粉飴、グルコース、マルトース、異性化糖、スクロース、トレハロース、蜂蜜、メープルシュガー、ソルビトール、キシリトール、ラクチトール、マルチトール、ジヒドロカルコン、ステビオシド、α−グリコシルステビオシド、ラカンカ甘味物、グリチルリチン、Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル、サッカリン、グリシン、アラニンなどのような他の甘味料の一種又は二種以上の適量と混合して使用してもよく、またデキストリン、澱粉、乳糖などのような増量剤と混合して使用することもできる。
【００１７】
また、本発明の複合体結晶性糖質は、そのままで、又は必要に応じて増量剤、賦形剤、結合剤などと混合して顆粒、球状、錠剤、棒状、板状、立方体などに成形して使用することも随意である。
【００１８】
本発明の複合体結晶性糖質の甘味は、酸味、塩から味、渋味、旨味、苦味など、各種の物質の他の呈味とよく調和し、普通一般の飲食物の甘味付、呈味改良に、また品質改良などに有利に利用できる。例えば、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、もろみ、ひしお、フリカケ、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、中華の素、天つゆ、麺つゆ、ソース、ケチャップ、焼き肉のタレ、カレールウ、シチューの素、スープの素、ダシの素、複合調味料、みりん、新みりん、テーブルシュガー、コーヒーシュガーなど各種調味料への甘味料として、また、呈味改良剤、品質改良剤などとして有利に利用できる。
【００１９】
また、例えば、せんべい、あられ、おこし、餅類、まんじゅう、ういろう、あん類、羊羹、水羊羹、錦玉、ゼリー、カステラ、飴玉などの各種和菓子、パン、ビスケット、クラッカー、クッキー、パイ、プリン、バタークリーム、カスタードクリーム、シュークリーム、ワッフル、スポンジケーキ、ドーナツ、チョコレート、チューインガム、キャラメル、キャンデーなどの各種洋菓子、アイスクリーム、シャーベットなどの氷菓子、果実のシロップ漬、氷蜜などのシロップ類、フラワーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペーストなどのペースト類、ジャム、マーマレード、シロップ漬、糖菓などの果実、野菜の加工食品類、パン類、麺類、米飯類、人造肉などの穀類加工食品類、福神漬、べったら漬、千枚漬、らっきょう漬などの漬物類、たくあん漬の素、白菜漬の素などの漬物の素類、ハム、ソーセージなどの畜産製品類、魚肉ハム、魚肉ソーセージ、カマボコ、チクワ、天ぷらなどの魚肉製品、ウニ、イカの塩辛、酢コンブ、さきするめ、ふぐのみりん干しなどの各種珍味類、のり、山菜、するめ、小魚、貝などで製造される佃煮類、煮豆、ポテトサラダ、コンブ巻などの惣菜食品、乳製品、魚肉、畜肉、果実、野菜の瓶詰め、缶詰類、合成酒、果実酒、洋酒、リキュールなどの酒類、コーヒー、ココア、ジュース、炭酸飲料、乳酸飲料、乳酸菌飲料などの清涼飲料水、プリンミックス、ホットケーキミックスなどのプレミックス粉類、即席ジュース、即席コーヒー、即席汁粉、即席スープなど即席飲食品などの各種飲食物への甘味料として、また、呈味改良剤、品質改良剤などとして有利に利用できる。
【００２０】
また、家畜、家禽、その他蜜蜂、蚕、魚などの飼育動物のための飼料、餌料などの嗜好性を向上させる目的で使用することもできる。また、作物、野菜、花卉、観葉植物、庭園の草木、芝、果樹などの植物活性化剤として、水耕栽培などに利用する植物活性化剤として、更には、生長点培養、微生物・細胞培養の培地栄養物や浸透圧調整剤などとして有利に利用できる。その他、タバコ、練り歯磨き、口紅、リップクリーム、内服液、トローチ、肝油ドロップ、口中清涼剤、口中香錠、うがい薬など各種固形状、ペースト状、液状の嗜好物、化粧品、医薬品などへの呈味改良剤、矯味剤として、さらには品質改良剤などとして有利に利用できる。
【００２１】
更に、本発明の複合体結晶性糖質に、例えば、ビタミン剤、抗生物質、乳酸菌などを混合して各種形状に成形、例えば顆粒成形機にかけて顆粒に、打錠機にかけて錠剤にし、各種用途に使用することも自由である。
【００２２】
以上述べたような飲食品、嗜好物、飼料、餌料、化粧品、医薬品などの各種組成物に本発明の複合体結晶性糖質を含有せしめる方法は、その製品が完成するまでの工程で本発明の複合体結晶性糖質を０．１％以上、望ましくは０．５％以上含有せしめればよく、例えば、混和、混捏、溶解、融解、浸漬、浸透、散布、塗布、被覆、噴霧、注入、晶析、固化などの公知の方法が適宜選ばれる。
【００２３】
以下、本発明を実験で詳細に説明する。
【００２４】
【実験１】
〈Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する糖液の調製〉
【００２５】
【実験１−１】
〈Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼの調製〉
Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼは、『バイオサイエンス・バイオテクノロジー・アンド・バイオケミストリー（Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．）』、第５８巻、２１６８乃至２１７１頁（１９９４年）に記載の方法に準じて調製した。即ち、シュードモナス・チコリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｃｉｃｈｏｒｉｉ）ＳＴ−２４株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−２７３６）を０．２６％（ｗ／ｖ）硫酸アンモニウム、０．２４％（ｗ／ｖ）リン酸一カリウム、０．５６％リン酸（ｗ／ｖ）二カリウム、０．０１％（ｗ／ｖ）硫酸マグネシウム七水塩、０．０５％（ｗ／ｖ）酵母エキス、１％（ｗ／ｖ）Ｄ−グルコース、０．０５％（ｗ／ｖ）Ｄ−タガトース、及び水からなる液体培地４Ｌ中で３０℃で通気攪拌培養し、培養６０時間後、遠心分離して菌体を集め、５０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で洗浄した。その洗浄菌体（湿重量６３．５ｇ）を同じ緩衝液に懸濁し、活性アルミナを用いて破砕した後、遠心分離して、上清（６６０ｍＬ）を回収した。後述する方法で調べたところ、上清中にＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼの活性は３２０単位認められ、その比活性は０．２単位／ｍｇ蛋白質であった。
【００２６】
その上清に、６．６ｍＬの１Ｍ塩化マグネシウム水溶液と、ポリエチレングリコール６０００を濃度１０％（ｗ／ｖ）となるように加え、溶解させ、１時間緩やかに攪拌した後、遠心分離して上清を回収した。更に、その上清にポリエチレングリコール６０００を最終濃度４０％（ｗ／ｖ）になるように加え、溶解させ、１時間緩やかに攪拌した後、遠心分離して沈殿物を回収した。その沈殿物に５０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）を加え、溶解し、粗酵素液を調製した。粗酵素液中にはＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼの活性は２２０単位認められ、その比活性は０．９２単位／ｍｇ蛋白質であった。
【００２７】
さらに、酵素蛋白の精製を行うために、粗酵素液に２０ｍＬの『ＤＥＡＥ−Ｔｏｙｏｐｅａｒｌゲル』（東ソー株式会社製造）を加え酵素をゲルに吸着させ、５０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で洗浄した後、２００ｍＬの０．１Ｍ塩化カリウムを含む同緩衝液で酵素をゲルから溶出させ、ＵＦ膜で脱塩した。この酵素液を、『ＤＥＡＥ−Ｔｏｙｏｐｅａｒｌゲル』を用いたカラム（内径２ｃｍ×長さ１２ｃｍ）に吸着させ、０Ｍから０．１Ｍ塩化カリウムを含む緩衝液のリニアーグラジエントで酵素を溶出させ、活性画分を集め回収した。その活性画分に濃度２Ｍになるよう硫酸アンモニウムを加え溶解した後、これを２Ｍ硫酸アンモニウム、５０ｍＭトリス塩酸緩衝液で予め平衡化しておいた『Ｅｔｈｅｒ−Ｔｏｙｏｐｅａｒｌゲル』（東ソー株式会社製造）のカラム（内径２ｃｍ×長さ１０ｃｍ）に供し、酵素を吸着させ、２Ｍから０．５Ｍの硫酸アンモニウムのリニアーグラジエントで溶出させ、活性画分を集め回収し、ＵＦ膜で脱塩して、精製酵素液を調製した。得られた精製酵素活性は５．１単位、比活性は２０単位／ｍｇ蛋白質で、ポリアクリルアミドゲル電気泳動で単一のバンドを示す均一な酵素標品であった。
【００２８】
なお、Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼの活性は、Ｄ−タガトース・３−エピメラーゼ活性を指標とする以下の方法により求めた。すなわち、２００ｍＭ  Ｄ−タガトースを含む５０ｍＭ  トリス塩酸緩衝液（１００μＬ）に酵素液１００μＬを加え、３０℃で６０分間反応させた後、沸騰水中で反応を停止した。反応停止液を遠心分離した後、上清中のＤ−ソルボース量を、カラム『ＧＬ−Ｃ６１１』（日立製造）を用いた高速液体クロマトグラフィー（以下、「ＨＰＬＣ」という。）で定量した。酵素活性の１単位は、１分間に１μｍｏｌのＤ−ソルボースを生成する酵素量と定義した。
【００２９】
【実験１−２】
〈組換えＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼの調製〉
組換えＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼは、『ジャーナル・オブ・ファーメンテイション・アンド・バイオエンジニアリング（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）』、第８４巻、３４８頁（１９９７年）に記載の方法に準じて調製した。即ち、『ジャーナル・オブ・ファーメンテイション・アンド・バイオエンジニアリング（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）』、第８３巻、５２９頁（１９９７年）に記載しているＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼ遺伝子ＤＮＡをプラスミドベクターｐＴｒｃ９９Ａに組換え、Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼ高発現プラスミドｐＩＫ−０１を作製した。この高発現プラスミドｐＩＫ−０１を宿主の大腸菌ＪＭ１０５株に形質転換して、Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼ高発現大腸菌ＪＭ１０５（ｐＩＫ−０１）株を得た。この組換え大腸菌を１％（ｗ／ｖ）ＮＺアミン  タイプＡ（和光純薬株式会社販売）、０．５％（ｗ／ｖ）酵母エキス、０．５％（ｗ／ｖ）塩化ナトリウム、０．５％（ｗ／ｖ）硫酸マグネシウム・７水塩、０．１％（ｗ／ｖ）カザミノ酸、１００μｇ／ｍＬアンピシリン及び水からなる液体培地２Ｌ中で３７℃で通気攪拌培養し、培養液の濁度（液層１ｃｍ当たりの波長６６０ｎｍの吸光度）が１．５に達した時に、最終濃度１ｍＭになるようにＩＰＴＧを添加して、更に、１４時間培養を続けた。この培養物を遠心分離して菌体を集め、５０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で洗浄した。この菌体を同じ緩衝液で懸濁した後、超音波で菌体を破砕し、遠心分離して上清を回収した。酵素活性を測定したところ、上清中には本酵素活性は約５，７３０単位認められた。この上清を実験１−１と同様にポリエチレングリコール分画して、部分精製した組換えＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼを約４，０５０単位得た。
【００３０】
【実験１−３】
〈固定化Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼの調製〉
固定化Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼは、『ジャーナル・オブ・ファーメンテイション・アンド・バイオエンジニアリング（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）』、第８０巻、１０１頁（１９９５年）に記載の方法に準じて調製した。即ち、実験１−２の方法に従って調製した部分精製酵素の２００単位を、予め５０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で平衡化しておいた、湿重量３８．５ｇの『キトパールビーズＢＣＷ２５０３』（富士紡績株式会社製造）と混合し、２時間緩やかに懸濁して、酵素蛋白質をビーズに固定化した。固定化後、ジャケット付きのガラスカラム（内径２ｃｍ×長さ１８ｃｍ）に充填し、固定化Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼのカラムを作製した。
【００３１】
【実験１−４】
〈Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する糖液の調製〉
実験１−３の方法に従って作製した固定化Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼのカラムを４５℃で保温しながら、予め４５℃で保温した１０％（ｗ／ｖ）Ｄ−フラクトースを含む５０ｍＭトリス塩酸緩衝液を流速ＳＶ０．２でカラムに流した。カラムから溶出した約１Ｌの反応液約を集め回収した後、３５℃でエバポレーターで濃縮し、常法に従って活性炭処理し、メンブランで不溶物を取り除いた。この糖液を陽イオン交換樹脂『ダイアイオンＳＫ１Ｂ』（三菱化学株式会社製造）と陰イオン交換樹脂『アンバーライトＩＲＡ−４１１』（オルガノ株式会社製造）を用いて脱塩した後、３５℃でエバポレーターで固形分濃度約８０％まで濃縮し、約１２０ｍＬの濃縮糖液を得た。得られた濃縮糖液の糖組成をカラム『ＭＣＩ  ＣＫ０８ＥＣ』（三菱化学株式会社製造）を用いたＨＰＬＣで分析したところ、本濃縮液の糖質は、約２５％のＤ−プシコースと約７５％のＤ−フラクトースとからなることが判明した。
【００３２】
なお、上記で用いたカラムに代えて、実験１−１の方法で調製した精製酵素を実験１−３の方法に従って固定化して作製したＤ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼのカラムを用いて上記と同様に操作したところ、上記と同等の糖組成の濃縮糖液が得られた。
【００３３】
【実験２】
〈Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の調製〉
【００３４】
【実験２−１】
〈エタノール／水系における結晶の生成〉
実験１−４の方法に準じて調製した、約２５％のＤ−プシコースと約７５％のＤ−フラクトースからなる糖組成の、固形分濃度約８０％の濃縮糖液１３５ｇを、３００ｍＬ容のガラスビーカーに入れた１００ｍＬの試薬特級エタノール（純度９９．５％）にマグネチックスターラーで攪拌しながら加え、完全に混和した。その後、マグネチックスターラーの攪拌を止め、室温で３日間静置したところ、ガラスビーカー中の糖液全体がほぼ完全に固化した。この固状物を薬匙で削り取り、ガラス皿上で粉砕した後、４０℃で２４時間真空乾燥し、その乾燥物を乳鉢中で粉砕した。このようにして調製した粉末を、『ジャーナル・オブ・ジ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティー（Ｊｏｕｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ）』、第７８巻、２５１４頁（１９５６年）に報告されている方法に準じて、ＣｕＫα線を用いた粉末Ｘ線回折法で解析したところ、図１に示すＸ線回折パターンが得られた。対照として分析した、Ｄ−プシコース結晶粉末及びＤ−フラクトース結晶粉末のＸ線回折パターンをそれぞれ図２及び図３に示す。
【００３５】
図１に示す粉末Ｘ線回折パターンの結果から明らかなように、上記で得た固状物は、結晶に由来するＸ線回折パターンを与えた。また、図１乃至図３から明らかなように、上記の固状物のＸ線回折パターンはＤ−プシコース結晶及びＤ−フラクトース結晶のＸ線回折パターンのいずれとも全く異なっていた。主な回折角（２θ）としては、Ｄ−プシコース結晶が１５．３°、１８．８°、１９．５°、２８．４°及び２９．８°を示し（図２）、Ｄ−フラクトース結晶が１３．０°、１４．０°、１７．０°、２０．０°及び２０．７°を示す（図３）のに対して、上記の固状物は、１５．７°、１７．１°、１８．２°、１９．４°及び２２．４°を示した（図１）。この事実は、本実験においてエタノール／水系で生成した固状物が結晶性糖質であり、この結晶性糖質がＤ−プシコース結晶及びＤ−フラクトース結晶のいずれとも異なる、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する本発明の新規な複合体結晶性糖質であることを意味する。
【００３６】
【実験２−２】
〈エタノール／水系における結晶の生成〉
実験１−４の方法に準じて調製した、約２５％のＤ−プシコースと約７５％のＤ−フラクトースからなる糖組成の、固形分濃度約８０％の濃縮糖液に脱イオン水を加えて、固形物濃度約５５％、約６４％、及び約７３％の糖液を調製した。これらの糖液と脱イオン水を加えていない上記濃縮糖液のいずれか１３５ｇを、３００ｍＬ容のガラスビーカーに入れた７９ｇの試薬特級エタノール（純度９９．５％）にマグネチックスターラーで攪拌しながら加え、完全に混和した。これら混和物のそれぞれに、実験２−１の方法で得た本発明の複合体結晶性糖質粉末を種結晶として約１０ｍｇ添加し攪拌した。その後、マグネチックスターラーの攪拌を止め、室温（約２５℃）で３日間静置し、結晶の生成を観察した。その結果を表１に示す。
【００３７】
【表１】
0004473980.tif 000002
【００３８】
表１に示すように、固形分濃度が約５０％の場合全体が固化し、約４６％の場合ビーカーの底に結晶の生成が認められたのに対し、約４０％以下の場合には結晶の生成は認められなかった。このことから、エタノール／水系においては、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する本発明の複合体結晶性糖質は、糖質の固形分濃度が少なくとも約４６％以上のとき生成され易いことが判明した。
【００３９】
結晶性糖質中に含まれる糖組成を調べるため、固形分濃度が約７３％で生成した結晶性糖質を濾紙上に広げ、吸引して分蜜し、更に、少量の８０％エタノール水で結晶性糖質を洗浄した後、ガラス皿上に広げ、４０℃で２４時間真空乾燥し、乳鉢中で粉砕し、約１０ｇの結晶性糖質粉末を得た。この結晶性糖質粉末の一部を水に溶かし、実験１−４と同様に、カラム『ＭＣＩ  ＣＫ０８ＥＣ』（三菱化学株式会社製造）を用いたＨＰＬＣで糖組成を測定したところ、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースをそれぞれ約２３％及び約７７％含むことが判明した。また、実験２−１と同様にして、上記の結晶性糖質のＸ線回折を測定したところ、主な回折角（２θ）として、１５．７°、１７．１°、１８．２°、１９．４°及び２２．４°を示す、図１と実質的に同じ回折パターンが得られた。これにより、固形分濃度約７３％のとき生成した結晶が、実験２−１で得た、固形分濃度約８０％のとき生成した本発明の複合体結晶性糖質と同一の結晶性糖質であることが確認された。更に、本実験による結晶性糖質の融点を示差走査熱量計ＤＳＣ−８２３０（株式会社リガク販売）で測定したところ、８６乃至８９℃に吸熱ピークが検出され、本発明の複合体結晶性糖質の融点は８６乃至８９℃と判断された。
【００４０】
これらの事実は、エタノール／水系で生成する、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する本発明の複合体結晶性糖質は、融点が８６乃至８９℃であることを意味している。なお、本複合体結晶性糖質は、図４に示すように、針状結晶であった。
【００４１】
【実験２−３】
〈水系における結晶の生成〉
実験１−４の方法に準じて調製した、約２５％のＤ−プシコースと約７５％のＤ−フラクトースからなる糖組成の、固形分濃度約８２％の濃縮糖液約１００ｇを２００ｍＬ容のガラスビーカーに入れ、更に、実験２−１の方法で調製したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する本発明の複合体結晶性糖質を種結晶として約１０ｍｇを添加した。緩やかにビーカーを振って種結晶を糖液中に漂わせた後、室温（約２５℃）で３日間静置した。その結果、ガラスビーカー中の糖液全体がほぼ完全に固化した。この固状物を薬匙で削り取り、ガラス皿上で粉砕した後、４０℃で２４時間真空乾燥し、乾燥物を乳鉢中で粉砕した。このようにして調製した糖質粉末を粉末Ｘ線回折法で解析したところ、図５に示すＸ線回折パターンが得られた。
【００４２】
図５に示す粉末Ｘ線回折パターンから明らかなように、上記で得た固状物は、結晶に由来するＸ線回折パターンを与えた。また、このＸ線回折パターンは、主な回折角（２θ）として１５．７°、１７．１°、１８．２°、１９．４°及び２２．４°を示し、図１に示す、エタノール／水系において生成した、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の場合と実質的に同じであることが判明した。この事実は、上記固状物が、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含む結晶性糖質であり、この結晶性糖質がＤ−プシコース結晶及びＤ−フラクトース結晶のいずれとも異なる、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する本発明の複合体結晶性糖質であることを意味する。また、この事実は、本実験例による、水系で生成したこの複合体結晶性糖質が、実験２−１においてエタノール／水系で生成した本発明の複合体結晶性糖質と結晶学的に同一であることを意味する。
【００４３】
【実験２−４】
〈水系における結晶の生成〉
実験１−４の方法に準じて調製した、約２５％のＤ−プシコースと約７５％のＤ−フラクトースからなる糖組成の、固形分濃度約８２％の濃縮糖液に脱イオン水を加えて、固形物濃度約６９％、約７２％、約７５％、及び約７９％の糖液を調製した。これらの糖液と脱イオン水を加えていない上記濃縮糖液のずれか５０ｇを１００ｍＬ容のガラスビーカーに入れた。それぞれのビーカーに、実験２−３の方法で得た本発明の複合体結晶性糖質粉末を種結晶として約１０ｍｇずつ添加し、緩やかに攪拌した。その後、室温（約２５℃）で３日間静置し、結晶の生成を観察した。その結果を表２に示す。
【００４４】
【表２】
0004473980.tif 000003
【００４５】
表２に示すように、固形分濃度が約７９％以上の場合、全体ないしは大部分が固化し、約７５％の場合、ビーカーの底に結晶の生成が認められたのに対し、約７２％以下の場合には結晶の生成は認められなかった。このことから、水系においては、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する本発明の複合体結晶性糖質は、糖質の固形分濃度が少なくとも約７５％以上で生成され易いことが判明した。
【００４６】
結晶性糖質中に含まれる糖組成を調べるため、固形分濃度が約７５％で生成した結晶性糖質を濾紙上に広げ、吸引して分蜜し、更に、少量の水で結晶性糖質を洗浄した後、ガラス皿上に広げ、４０℃で２４時間真空乾燥し、乳鉢中で粉砕し、約３ｇの結晶性糖質粉末を得た。この結晶性糖質粉末の一部を水に溶かし、実験１−４と同様に、カラム『ＭＣＩ  ＣＫ０８ＥＣ』（三菱化学株式会社製造）を用いたＨＰＬＣで糖組成を測定したところ、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースをそれぞれ約２５％及び約７５％含むことがわかった。また、実験２−３と同様にして、上記結晶性糖質のＸ線回折を測定したところ、主な回折角（２θ）として、１５．７°、１７．１°、１８．２°、１９．４°及び２２．４°を示す、図１及び図４と実質的に同じ回折パターンが得らた。これにより、固形分濃度約７５％のとき生成した結晶性糖質が、前述の固形分約８２％のとき生成した結晶性糖質、並びに、エタノール／水系で生成したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質と同一の結晶性糖質であることが確認された。なお、本実験による結晶性糖質の融点を実験２−２と同様に示差走査熱量計で測定したところ、８６乃至８９℃に吸熱ピークが検出され、本結晶性糖質の融点は８６乃至８９℃と判断された。
【００４７】
これらの事実は、水系で生成する、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する本発明の複合体結晶性糖質は、融点が８６乃至８９℃であることを意味している。なお、本複合体結晶性糖質は、図６に示すように、図４と同様の針状結晶であった。また、実験２−２ならびに本実験例に示した糖組成の測定結果は、本発明の複合体結晶性糖質は、Ｄ−プシコースとＤ−フラクトースの組成比が、通常、約１：２乃至１：４であることを示している。
【００４８】
【実験３】
〈複合体結晶性糖質の吸湿性〉
実験１−４の方法に準じて調製した、約２５％のＤ−プシコースと約７５％のＤ−フラクトースからなる糖組成の糖液を、エバポレーターを用いて減圧濃縮して固形分濃度約８５％にまで濃縮した。この濃縮糖液の約半量を、実験２−３の方法に準じて、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶を生成させて固化させた後、薬匙で削り取り軽く粉砕し、４０℃で２４時間真空乾燥し、その乾燥物を乳鉢中で粉砕して、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースをそれぞれ約２５％及び約７５％含む複合体結晶性糖質粉末を調製した。対照として、残りの糖質濃縮液をポリエチレン製のバットに広げ、４０℃で４８時間真空乾燥した後、乾燥物を乳鉢で粉砕して、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースをそれぞれ約２５％及び約７５％含む非晶出糖質粉末を調製した。これら粉末糖質をアルミ製容器にとり、相対湿度５３％、温度２５℃の環境に７日間放置して、その重量増加を測定するとともに流動性の可否を観察して吸湿性の程度を判定した。なお、流動性については、アルミ製容器を傾斜させた際の粉末糖質の流動状態を観察し、抵抗なく容易に流れ出すものを良とし、抵抗があり流動性が悪いものを不良とした。これらの結果は表３にまとめた。
【００４９】
【表３】
0004473980.tif 000004
【００５０】
表３の結果から明らかなように、対照の非晶出糖質粉末と比較して、本発明の複合体結晶性糖質粉末は、吸湿性が低く、流動性のよい粉末糖質であることが判明した。
【００５１】
以下、本発明のＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の製造方法を実施例Ａで、また、その用途を実施例Ｂで示す。
【００５２】
【実施例Ａ−１】
〈複合体結晶性糖質の製造〉
Ｄ−フラクトース（株式会社林原製造）１重量部を水２重量部に加熱溶解させた後、ｐＨ７．５、温度４０℃に調整し、これに実験１−１の方法に準じて調製した精製Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼをＤ−フラクトース１ｇ当たり２単位になるように加え、４８時間反応させた。反応後、反応液を１００℃で１０分間加熱して、酵素を失活させた。本溶液は、Ｄ−プシコースを固形分当たり約２０％を含有し、その他の固形分はＤ−フラクトースであった。この溶液を活性炭にて脱色し、Ｈ型、ＯＨ型、イオン交換樹脂で脱塩した。この糖液を固形分濃度約７５％に濃縮した後、同重量の純度９９．５％エタノールにゆっくり攪拌しながら加え、更に、実験２−１の方法に従って調製したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質を種晶として固形分重量比で１％加え、攪拌を続け助晶した。得られるマスキットを分蜜し、乾燥し、粉砕して、約２２％のＤ−プシコースと約７８％のＤ−フラクトースからなる糖組成の複合体結晶性糖質を原料当たりの固形分収率約５０％で得た。
【００５３】
本実施例による、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質は、種結晶として有利に用いることができるほか、飲食物、化粧品、医薬品、成形物などの各種組成物に有利に利用できる。
【００５４】
【実施例Ａ−２】
〈複合体結晶性糖質の製造〉
Ｄ−フラクトース１重量部を水４重量部に加熱溶解させた後、ｐＨ７．５、温度４５℃に調製し、これを、予め、実験１−３の方法に準じて調製した固定化Ｄ−ケトヘキソース・３−エピメラーゼを充填したジャケット付きステンレス製カラム（内径５．６ｃｍ×長さ１ｍ）に温度４５℃、流速ＳＶ０．１で通液して異性化反応を行い、約２４％のＤ−プシコースと約７６％のＤ−フラクトースからなる糖組成の糖液を得た。この糖液を活性炭にて脱色し、Ｈ型、ＯＨ型、イオン交換樹脂で脱塩した。この糖液を固形分濃度約８５％に濃縮した後、助晶缶にとり、実験２−１の方法に従って調製したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質を種晶として固形分重量比で１％加え、ゆっくり攪拌しながら助晶し、次いで、バットに取り出し、ブロックを作製した。ブロックは約２５℃で２日間静置し熟成させた後、切削型粉砕機で粉砕し、流動乾燥し、分級し、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質粉末を原料当たりの固形分収率約１００％で得た。
【００５５】
本品は、吸湿性が少なく、取り扱いが容易であり、甘味剤、呈味改良剤、品質改良剤、安定化剤、賦形剤などとして飲食物、化粧品、医薬品、成形物などの各種組成物に有利に利用できる。
【００５６】
【実施例Ａ−３】
〈複合体結晶性糖質の製造〉
実施例Ａ−２の方法に準じて調製したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する糖液を、同様に、脱色し、脱塩した。この糖液を固形分濃度約８０％に濃縮した後、助晶缶にとり、実験２−１の方法に従って調製したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質を種晶として固形分重量比で２％加え、ゆっくり攪拌しながら助晶し、晶出率約５０％のマスキットを得た。本マスキットを乾燥塔上のノズルより１５０ｋｇ／ｃｍ2の高圧で噴霧した。これと同時に７０℃の熱風を乾燥搭の上部より送風し、コンベアーの下より４０℃の温風を送りつつ、該結晶性糖質粉末を乾燥搭外に徐々に移動させて、取り出した。この結晶性糖質粉末を熟成搭に充填し、温風を送りつつ、２４時間熟成させ、結晶化と乾燥を完了し、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質粉末を原料当たりの固形分収率約９５％で得た。
【００５７】
本品は、吸湿性が少なく、取り扱いが容易であり、甘味剤、呈味改良剤、品質改良剤、安定化剤、賦形剤などとして飲食物、化粧品、医薬品、成形物などの各種組成物に有利に利用できる。
【００５８】
【実施例Ｂ−１】
〈甘味料〉
実施例Ａ−１の方法で得た複合体結晶性糖質１重量部に、α−グリコシルステビオシド（東洋精糖株式会社販売、商品名『αＧスイート』）０．０１重量部及びＬ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（味の素株式会社販売、商品名『アスパルテーム』）０．０１重量部を均一に混合し、顆粒成型機にかけて、顆粒状甘味料を得た。本品は、甘味の質が優れ、蔗糖の約３倍の甘味度を有し、甘味度当たりのカロリーは蔗糖の約１／３に低下している。本甘味料は、低カロリー甘味料として、また、カロリー摂取を制限している肥満者、糖尿病者などのための低カロリー飲食物などに対する甘味付けに好適である。
【００５９】
【実施例Ｂ−２】
〈粉末ジュース〉
噴霧乾燥により製造したオレンジ果汁粉末３３重量部に対して、実施例Ａ−２の方法で得た複合体結晶性糖質粉末５０重量部、蔗糖１０重量部、無水クエン酸０．６５重量部、リンゴ酸０．１重量部、Ｌ−アスコルビン酸０．１重量部、クエン酸ソーダ０．１重量部、プルラン０．５重量部、粉末香料適量をよく混合撹拌し、粉砕して微粉末にした。この微粉末を流動層造粒機に仕込み、排風温度４０℃とし、これに、同じ特許出願人による特開平８−７３５０４号公報に記載の方法で調製したトレハロース高含有シラップをバインダーとしてスプレーし、３０分間造粒し、計量、包装して製品を得た。本品は、果汁含有率約３０％の粉末ジュースである。本品は、異味、異臭がなく、高品質の粉末ジュースであった。
【００６０】
【実施例Ｂ−３】
〈チューインガム〉
ガムベース３重量部を柔らかくなる程度に加熱溶融し、これに結晶マルチトール粉末２重量部及び実施例Ａ−３の方法で得た複合体結晶性糖質粉末５重量部とを加え、更に適量の香料と着色料とを混合し、常法にしたがって、ロールにより練り合わせ、成形、包装して製品を得た。本品は、冷涼感を味わうことのできるチューインガムで、テクスチャー、風味とも良好である。
【００６１】
【実施例Ｂ−４】
〈フォンダント〉
実施例Ａ−２の方法に従って、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含む固形分濃度約８２％の濃縮糖液を調製した。この濃縮糖液を助晶缶にとり、これに実験２−１の方法に従って調製したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質を種晶として固形分重量比で５％加え、激しく撹拌しながら室温まで冷却した。更に、実施例Ａ−２の方法で得た複合体結晶性糖質の適量を添加した後、混合撹拌してフォンダントを得た。本品は、白色のペースト状で、口当たりもなめらかで冷涼感があり、上品な甘味を有し、各種製菓材料として有利に利用できる。
【００６２】
【実施例Ｂ−５】
〈アイスクリーム〉
油脂含量約４６％の生クリーム１８重量部、脱脂粉乳７重量部、全乳５１重量部、砂糖８重量部、実施例Ａ−２の方法で得た複合体結晶性糖質６重量部、ラクトスクロース含有粉末（登録商標『乳化オリゴ』）４重量部、黒練り胡麻３重量部、プルラン１重量部、及びアラビアガム２重量部の混合物を溶解し、７０℃で３０分間保って殺菌した後、ホモゲナイザーで乳化分散させ、次いで、３乃至４℃にまで急冷して一夜熟成した後、フリーザーで凍結させてアイスクリームを得た。本品は、適度な胡麻風味を呈する、口当たり良好で、オーバーランも適当な良質のアイスクリームであった。また、本品は、ビフィズス増殖活性を有する健康食品としても有利に利用できる。
【００６３】
【実施例Ｂ−６】
〈錠剤〉
アスピリン５０重量部に実施例Ａ−３の方法で得た複合体結晶性糖質粉末６重量部及びコーンスターチ８重量部を充分に混合した後、常法にしたがって、打錠機により打錠して、厚さ５．２５ｍｍ、１錠６８０ｍｇの錠剤を製造した。本品は、吸湿性が低く、物理的強度も充分にあり、しかも水中での崩壊は極めて良好であった。
【００６４】
【発明の効果】
上記から明らかなように、本発明の複合体結晶性糖質は、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質であって、この粉末は、吸湿性低く、流動性良好であり、取扱い容易である。従って、本発明の複合体結晶性糖質の確立は、Ｄ−プシコース及びＤ−フラクトースとを含有する糖質の商品価値を著しく向上することとなった。これが与える影響は、希少糖質を応用・利用しようとする精糖産業に大きく貢献できることはもちろんのこと、本発明の複合体結晶性糖質を利用する食品産業、化粧品産業、医薬品産業、農水畜産業など広範にわたり、その産業的意義は極めて高い。
【図面の簡単な説明】
【図１】エタノール／水系で生成したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の粉末Ｘ線回折パターンを示す図である。
【図２】結晶Ｄ−プシコースの粉末Ｘ線回折パターンを示す図である。
【図３】結晶Ｄ−フラクトースの粉末Ｘ線回折パターンを示す図である。
【図４】エタノール／水系で生成したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の顕微鏡観察像（倍率×３２５）をディスプレー上に表示した中間調画像である。
【図５】水系で生成したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の粉末Ｘ線回折パターンを示す図である。
【図６】水系で生成したＤ−プシコース及びＤ−フラクトースを含有する複合体結晶性糖質の顕微鏡観察像を（倍率×３２５）ディスプレー上に表示した中間調画像である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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