(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0004568433.tif 000018
［式中、Ｒは水素又はメチルを表し；
Ｒ１及びＲ２は両方とも水素であるか、或いは共に結合を形成し；
Ｒ３は水素か、直鎖若しくは分枝のＣ１〜Ｃ５アルキル基か、ニトロ基、ヒドロキシ基、カルボキシル基、アミノ基、直鎖若しくは分枝のＣ１〜Ｃ５アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基及びシアノ基から選択される一種以上の置換基で任意に置換されていてもよいベンジル基か、又は
次式：
【化２】
0004568433.tif 000019
（式中、Ａは水素か、ニトロ基、ヒドロキシ基、カルボキシル基、アミノ基、直鎖若しくは分枝のＣ１〜Ｃ５アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基及びシアノ基から選択される一つ又は二つの置換基で任意に置換されていてもよいフェニル基か、又は、飽和若しくは不飽和であり、窒素、酸素及び硫黄から選択される１〜３のヘテロ原子を含み、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基、フェニル基、ヒドロキシ基、オキソ（＝Ｏ）基、ニトロ基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基、モノ−またはジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノカルボニル基及びＣ１〜Ｃ４アルキルカルボニル基から選択される一つ又は二つの置換基で置換されていてもよい５員又は６員複素環を示し；
Ｘ及びＹは同一でも異なっていてもよく、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２又はＮＲ４を表し、ここにおいてＲ４は水素、直鎖若しくは分枝鎖のＣ１〜Ｃ５アルキル基、Ｃ１〜Ｃ５アルコキシカルボニル基、又はベンジルオキシカルボニル基を示し；
ｒは１〜６の整数を示し；
ｍは１〜８の整数を示し；
ｎは０〜２の整数を示す）で表される鎖を示す］
で表わされる化合物又は薬学的に許容されるそれらの塩［但し、３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡオキシム及び３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−Ｏ−メチロキシムは除く］。
【請求項２】
Ｒ、Ｒ１及びＲ２が水素である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ3が次式：
【化３】
0004568433.tif 000020
（式中、Ｘ、Ｙ、Ａ、ｒ、ｍ及びｎの定義は請求項１に記載した通り）で表される鎖である請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３が次式：
【化４】
0004568433.tif 000021
（式中、ｒは２、ｍは２又は６、ｎは１、ＹはＮＲ４、ＸはＯ又はＮＲ４、Ｒ４は水素、そしてＡはフェニル又はチアゾリル）で表される鎖である請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
式（Ｉ）：
【化５】
0004568433.tif 000022

［式中、Ｒは水素又はメチルを表し；
Ｒ１及びＲ２は両方とも水素であるか、或いは共に結合を形成し；
Ｒ３は水素か、直鎖若しくは分枝のＣ１〜Ｃ５アルキル基か、ニトロ基、ヒドロキシ基、カルボキシル基、アミノ基、直鎖若しくは分枝のＣ１〜Ｃ５アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基及びシアノ基から選択される一種以上の置換基で任意に置換されていてもよいベンジル基か、又は
次式：
【化６】
0004568433.tif 000023

（式中、Ａは水素か、ニトロ基、ヒドロキシ基、カルボキシル基、アミノ基、直鎖若しくは分枝のＣ１〜Ｃ５アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基及びシアノ基から選択される一つ又は二つの置換基で任意に置換されていてもよいフェニル基か、又は、飽和若しくは不飽和であり、窒素、酸素及び硫黄から選択される１〜３のヘテロ原子を含み、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基、フェニル基、ヒドロキシ基、オキソ（＝Ｏ）基、ニトロ基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基、モノ−またはジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノカルボニル基及びＣ１〜Ｃ４アルキルカルボニル基から選択される一つ又は二つの置換基で置換されていてもよい５員又は６員複素環を示し；
Ｘ及びＹは同一でも異なっていてもよく、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２又はＮＲ４を表し、ここにおいてＲ４は水素、直鎖若しくは分枝鎖のＣ１〜Ｃ５アルキル基、Ｃ１〜Ｃ５アルコキシカルボニル基、又はベンジルオキシカルボニル基を示し；
ｒは１〜６の整数を示し；
ｍは１〜８の整数を示し；
ｎは０〜２の整数を示す）で表される鎖を示す］
で表わされる化合物又は薬学的に許容されるそれらの塩を含む抗炎症剤。
【請求項６】
Ｒ、Ｒ１及びＲ２が水素である請求項５に記載の抗炎症剤。
【請求項７】
Ｒ3が次式：
【化７】
0004568433.tif 000024

（式中、Ｘ、Ｙ、Ａ、ｒ、ｍ及びｎの定義は請求項１に記載した通り）で表される鎖である請求項５に記載の抗炎症剤。
【請求項８】
Ｒ３が次式：
【化８】
0004568433.tif 000025

（式中、ｒは２、ｍは２又は６、ｎは１、ＹはＮＲ４、ＸはＯ又はＮＲ４、Ｒ４は水素、そしてＡはフェニル又はチアゾリル）で表される鎖である請求項５に記載の抗炎症剤。
【請求項９】
前記化合物が、３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡオキシム及び３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−Ｏ−メチルオキシムから選択される請求項５に記載の抗炎症剤。
【請求項１０】
薬剤活性量の請求項５に記載の抗炎症剤を薬学的に許容される担体と共に含む抗炎症剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は抗炎症活性を有するマクロライド、より詳細には抗炎症活性を有するデス−ジメチルアミノマクロライド誘導体、薬学的に許容されるそれらの塩、及びそれらを活性成分として含む薬学的組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
多くの抗生物質、特にエリスロマイシンより誘導される原子数１４のマクロライド類は抗菌活性に加え抗炎症活性を有することが知られている［Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．、（１９９６）、６、４５４〜４６４］。
エリスロマイシンは、天然に産生されるマクロライド（メルクインデックス、第ＸＩＩ版、Ｎｏ．３７２０、６２５ページ）であり、グラム陽性菌、ある種のグラム陰性菌又はマイコプラズマによる感染症の治療に、非常に広範に臨床利用されてきた。
【０００３】
最近、科学界においてエリスロマイシンとその誘導体の抗炎症性及び免疫調節性の成分が注目されている［Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、（１９９８）、４１、Ｓｕｐｐｌ．Ｂ、３７〜４６］。
このような活性についての臨床的研究や、インビボおよびインビトロ実験成果は多数文献記載されている。
【０００４】
マクロライドが有効であることが判明した例としては、汎細気管支炎［Ｔｈｏｒａｘ、（１９９７）、５２、９１５〜９１８］、気管支喘息［Ｃｈｅｓｔ、（１９９１）、９９、６７０〜６７３］、膵嚢胞性繊維症［Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ、（１９９８）、３５１、４２０］等の炎症性疾患の治療、マウスにおけるチモサン誘導性腹膜炎［Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、（１９９２）、３０、３３９〜３４８］やエンドトキシンによりラットの気管に誘導された好中球漸増［Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、（１９９４）、３８、１６４１〜１６４３］等の炎症の動物モデル、好中球［Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、（１９９７）、１５９、３３９５〜４００５］やＴ−リンパ球［Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、（１９９２）、５１、ＰＬ２３１〜２３６］等の免疫系細胞に関するインビトロでの研究、更にインターロイキン８（IL-8）［Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．、（１９９７）、１５６、２６６〜２７１］、インターロイキン５（IL-5）［ＥＰ第０７７５４８９号及び同０７１１５６４号（大正製薬株式会社）］等のサイトカインの調節が挙げられる。
【０００５】
例えばコルチコステロイド等の従来の抗炎症薬が有効でないことが判明している疾患に対するマクロライドの顕著な治療効果［Ｔｈｏｒａｘ、（１９９７）、５２、９１５〜９１８、既出］によって、この新たな有力な抗炎症剤群に対する関心が高まっている。
【０００６】
従来のマクロライドが強い抗菌活性を有するにもかかわらず、病原によらない慢性的炎症過程の治療における使用を拡大できない理由は、これに耐性を有する菌株が急速に発現するためである。
【０００７】
従って、抗炎症活性を有する一方で抗生物質的性質を示さないマクロライド構造を有する新規化合物を創出することが望まれる。
明確化のために、本願において採用した位置番号を示したエリスロマイシンの構造式を示す。
【０００８】
【化５】
0004568433.tif 000002
【０００９】
高い抗炎症活性を有するエリスロマイシン誘導体については既にその数種が文献記載されている。
例えば、既出の大正製薬のヨーロッパ特許出願においては、３、９、１１及び１２位を修飾したエリスロマイシン誘導体が、強力なＩＬ−５の合成阻害剤として権利請求されている。
ＥＰ第０２８３０５５号（サワ・プリヴァ（Sour Pliva））には、抗炎症剤として、クラジノースとデソサミンを有さない次式のアジスロマイシンのＮ−アルキル誘導体：
【００１０】
【化６】
0004568433.tif 000003
【００１１】
（式中、Ｒ1は水素、低級アルキル又は低級アルカノイルを、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、同一又は異なって、それぞれ水素又は低級アルカノイルを示す）が記載されている。
【００１２】
哺乳類のｍｄｒ−Ｐグリコプロテインの阻害によるインターロイキン１放出の抑制作用を示すエリスロマイシンの抗炎症剤としての使用は、スミス・クライン・ビーチャム社のＷＯ９２／１６２２６に権利請求されている。
文献記載のマクロライド誘導体の中で、少数のものは３’−デスジメチルアミノ−９−オキシイミノ誘導体である。このタイプの化合物への関心が限られている理由は、マクロライドに典型的なリボソーム結合活性にジメチルアミノ基が関連していることが知られている［テトラへドロン・レターズ、（１９９４）３５、３８３７〜３８４０］ためであると理解される。
米国特許第３，９２８，３８７号（ホフマン・ラ・ロッシュ社）は、抗生物質１７４５Ａ／Ｘの調製に有用な中間体として３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡオキシムを開示している。
ＥＰ第０２５４５３４号（ロビンソン、ウィリアム  Ｓ．）は、抗ウイルス活性を有する非常に広範な群のマクロライドを権利請求している。これらのうち、次式：
【００１３】
【化７】
0004568433.tif 000004
【００１４】
で表され、正確な化合物名を３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−Ｏ−メチルオキシムと称する化合物については、当該ＥＰ第０２５４５３４号明細書（１０ページ、４６行目）中では誤ってデスジメチルアミノエリスロマイシン９−Ｏ−メチルオキシムとして報告されている。
【００１５】
【課題を解決するための手段】
ここで本発明者らは、９−オキシイミノマクロライドのデソサミンの３’位かジメチルアミノ基を除去することにより、抗炎症活性を有し且つ基本的に抗生物質活性（抗性作用）を有さない化合物が得られることを見出した。
従って、本発明の一目的は、式（Ｉ）：
【００１６】
【化８】
0004568433.tif 000005
【００１７】
［式中、Ｒは水素又はメチルを示し；
Ｒ1及びＲ2は両方とも水素であるか、又は共に結合を形成し；
Ｒ3は水素か、直鎖若しくは分枝鎖のＣ１〜Ｃ５アルキル基か、ニトロ基、ヒドロキシ基、カルボキシル基、アミノ基、直鎖若しくは分枝のＣ１〜Ｃ５アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基及びシアノ基から選択される一種以上の置換基で任意に置換されていてもよいベンジル基か、又は次式：
【００１８】
【化９】
0004568433.tif 000006
【００１９】
（式中、Ａは水素か、ニトロ基、ヒドロキシ基、カルボキシル基、アミノ基、直鎖若しくは分枝鎖のＣ１〜Ｃ５アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基及びシアノ基から選択される一つ又は二つの置換基で任意に置換されていてもよいフェニル基か、又は飽和若しくは不飽和であり、窒素、酸素及び硫黄から選択される１〜３のヘテロ原子を含み、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基、フェニル基、ヒドロキシ基、オキソ（＝Ｏ）基、ニトロ基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基、モノ−またはジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルアミノカルボニル基及びＣ１〜Ｃ４アルキルカルボニル基から選択される一つ又は二つの置換基で置換されていてもよい５員又は６員複素環を示し；
Ｘ及びＹは同一でも異なっていてもよく、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ2又はＮＲ4を示し、ここにおいてＲ4は水素、直鎖若しくは分枝鎖のＣ１〜Ｃ５アルキル基、Ｃ１〜Ｃ５アルコキシカルボニル基、又はベンジルオキシカルボニル基を示し；
ｒは１〜６の整数を示し；
ｍは１〜８の整数を示し；
ｎは０〜２の整数を示す）で表される鎖を示す］で表わされる化合物及び薬学的に許容されるそれらの塩［但し、３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡオキシム（Ｒ1及びＲ2は結合；ＲはＨ；Ｒ3はＨ）及び３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−Ｏ−メチルオキシム（Ｒ1及びＲ2は結合；ＲはＨ；Ｒ3はＣＨ3）は除く］を提供することにある。
【００２０】
本発明の更なる目的は、化合物３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡオキシム及び３’−デスジメチルアミノ−３’，４’−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−Ｏ−メチルオキシムの抗炎症剤としての使用にある。
【００２１】
【発明の実施の形態】
式Ｉで表される化合物は、抗生物質活性を有さない抗炎症性マクロライドであるため、炎症性疾患の治療に有用である。
直鎖若しくは分枝鎖のＣ１〜Ｃ５アルキル基とは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル及びイソペンチルより選択される基を意味する。
飽和若しくは不飽和であり、窒素、酸素及び硫黄から選択される１〜３のヘテロ原子を含む５員又は６員複素環とは、ピロール、チオフェン、フラン、イミダゾール、ピラゾール、チアゾール、イソチアゾール、イソキサゾール、オキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアゾール、チアジアゾール及びそれらの部分的又は完全に飽和された形態のような複素環を意味する。
【００２２】
式Ｉで表される化合物中、Ｒ、Ｒ1及びＲ2が水素である化合物が好ましい。
この化合物群中、Ｒ3が次式：
【００２３】
【化１０】
0004568433.tif 000007
【００２４】
（式中、Ｘ、Ｙ、Ａ、ｒ、ｍ及びｎの定義は既に記載した通り）で表される鎖である化合物が特に好ましい。
【００２５】
更により好ましい化合物としては、Ｒ3が次式：
【００２６】
【化１１】
0004568433.tif 000008
【００２７】
（式中、ｒは２、ｍは２又は６、ｎは１、ＹはＮＲ4、ＸはＯ又はＮＲ4、Ｒ4は水素、そしてＡはフェニル又はチアゾリル）で表される鎖である化合物が挙げられる。
【００２８】
式Ｉで表される化合物の薬学的に許容される塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、酢酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、コハク酸及びグルタル酸等の有機又は無機酸との塩が挙げられる。
【００２９】
本発明の目的物質である式Ｉで表される化合物は、（ａ）３’位のジメチルアミノ基の除去及び（ｂ）必要に応じたオキシムの官能化を含む合成スキームに従って調製される。
ジメチルアミノ基は、公知の方法に従い酸化、熱分解、及び任意の還元によって除去する。置換基Ｒ3に任意に存在する官能基による妨害を回避するために、ジメチルアミノ基の除去は式（ＩＩ）：
【００３０】
【化１２】
0004568433.tif 000009
【００３１】
（式中、Ｒは前述の定義の通り、Ｒ3’は水素又は直鎖若しくは分枝鎖のＣ１〜Ｃ５アルキル基）で表される中間体から出発することが好ましいことは、当業界の熟練した技術者にとって明白である。
酸化によって式ＩＩＩ：
【００３２】
【化１３】
0004568433.tif 000010
【００３３】
（式中、Ｒ及びＲ3’は前述の定義の通り）で表される対応するＮ−オキシドを得、これを熱分解し、必要に応じて還元して、次式：
【００３４】
【化１４】
0004568433.tif 000011
【００３５】
で表される本発明の目的物質である化合物がそれぞれ得られる（式Ｉ中、Ｒ3が水素又はＣ１〜Ｃ５アルキルである化合物）。
【００３６】
常法に従って、Ｒ3が水素以外のものである式Ｉの化合物は、Ｒ3’が水素である式Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの化合物から、オキシムの官能化により調製することができる。
【００３７】
官能化は一般に、式ＩＶ：
Ｒ3”−Ｗ      （ＩＶ）
（式中、Ｒ3”は水素を除きＲ3と同様の意味を有し、Ｗは脱離基であり、好ましくは塩素原子、臭素原子、又はメシル基である）で表される化合物との反応により行う。
Ｒ3が次式：
【００３８】
【化１５】
0004568433.tif 000012
【００３９】
（式中、Ｘ、Ｙ、Ａ、ｒ、ｍ及びｎは前述の定義の通り）で表される鎖である式Ｉの化合物の調製に特に好適な他の一合成経路においては、Ｒ3が水素である式Ｉの化合物と式（Ｖ）：
【００４０】
【化１６】
0004568433.tif 000013
【００４１】
（式中、Ｗ、Ｘ、Ｙ、ｍ及びｎは前述の定義の通り、Ｚは保護基を示す）で表される中間体とを反応させ、式ＶＩ：
【００４２】
【化１７】
0004568433.tif 000014
【００４３】
（式中、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2、Ｘ、Ｙ、Ｚ、ｒ及びｍは前述の定義の通り）で表される中間体を得て、保護基Ｚを除去した後、式ＶＩＩ：
【００４４】
【化１８】
0004568433.tif 000015
【００４５】
（式中、Ａ、Ｗ及びｎは前述の定義の通り）で表される誘導体と反応させ、式Ｉの化合物を得る。
【００４６】
ＹがＮＲ4である式Ｉの化合物は、式ＶＩＩの中間体の代わりに式ＶＩＩＩ：
Ａ−ＣＨＯ    （ＶＩＩＩ）
（式中、Ａは前述の定義の通り）で表されるアルデヒドを用いて、上記合成経路に従って、式ＶＩの中間体から保護基Ｚを除去して調製することができる。
【００４７】
更に、Ｒ1＝Ｒ2＝Ｈである式Ｉの化合物は、Ｒ1及びＲ2が結合を形成する対応する式Ｉの化合物を還元することにより調製することができる。
【００４８】
本発明の目的物質である式Ｉの化合物は、抗炎症活性を有し且つ抗生物質活性を欠くものである。
式Ｉの化合物の薬理学的活性は、インビトロ及びインビボ試験により、エリスロマイシン、クラリスロマイシン、ロキシスロマイシンのような抗炎症活性と抗生物質活性とを有する既知のマクロライドと比較して評価した。
抗炎症活性は、ＩＬ−８放出阻害及びスーパーオキシドアニオン放出阻害としてインビトロで評価し（実施例１１）、そして、ＬＰＳ反復投与後のＬＰＳ-誘導好中球増加の阻害としてインビボで評価した（実施例１２）。
全実験において、本発明の目的とする化合物は抗炎症剤として非常に活性であり、その抗炎症活性は対照化合物と同等あるいはそれ以上のものであった。
式Ｉの化合物を治療に適用するには、経口又は非経口投与に適した医薬形態とすることができる。
【００４９】
従って、本発明の他の対象は、治療有効量の式Ｉの化合物又はその塩を薬学的に許容される担体と共に含む医薬組成物である。
【００５０】
【実施例】
以下実施例により、本発明を更に詳しく説明する。
実施例１
［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−ヘキシル］−カルバミン酸ベンジルエステルの調製
国際出願公開第ＷＯ９６／１８６３３号の記載に従って調製した（６−ヒドロキシ−ヘキシル）−カルバミン酸ベンジルエステル（２５ｇ；９９．４７ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（３５０ｍＬ）に溶解して得た溶液を氷で約１０℃に冷却しつつ、これにまず、ＫＢｒ（１．１８ｇ；９．９４ｍｍｏｌ）の水溶液（水：２０ｍＬ）及びＴＥＭＰＯ（０．１５５ｇ；０．９９４ｍｍｏｌ）を加え、次に、温度を１０〜１２℃に維持しつつ、約１５〜２０分間かけて、ＮａＨＣＯ3（７．５ｇ；８９．２８ｍｍｏｌ）とＮａＣｌＯ（４．５％水溶液；１９７ｍＬ；１２５ｍｍｏｌ）とで調製した溶液を滴下した。
滴下終了の１５分後、相分離し、水相をＣＨ2Ｃｌ2（１００ｍＬ）で１回抽出に付した。合一した有機抽出物を食塩水（２０％ＮａＣｌ）で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。
３Åのモレキュラーシーヴ（３０ｇ）そして次に、氷水で冷却しながら、２−アミノエタノール（３５．９ｍＬ；０．５９７ｍｏｌ）をエタノール（６００ｍＬ）に溶解して得た溶液を、得られた溶液（約８００ｍＬ）に迅速に滴下した。
滴下が終了したら、混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、濾過した。
得られた溶液に、氷水で冷却し、窒素雰囲気下で撹拌しながら、ＮａＢＨ4（４．５４ｇ；１２０ｍｍｏｌ）を数回に分けて添加した。
添加終了後、反応混合物を室温で２時間撹拌し、その後、溶媒を蒸発させた。
残渣を水と酢酸エチルで回収し、相分離し、再び水相を、酢酸エチルで２回抽出に付した。
集めた有機抽出物を食塩水（２０％ＮａＣｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して固化寸前の油性残渣を得た。
残渣をヘキサンでトリチュレートし、濾過し、ヘキサンとエチルエーテルの混合物で洗浄し、［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−ヘキシル］−カルバミン酸ベンジルエステル（２６．２２ｇ；収率８９％）を白色固体として得た。
【００５１】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.33-7.25(m,5H,Ar);5.05(s,2H,COOCH2);
4.96(broad-t,1H,NH);3.63-3.58(m,2H,*CH2-OH);3.19-3.09(m,2H,CH2NCO);
2.72-2.67(m,N-*CH2-CH2O);2.59-2.52(m,4H,OH and CH3);
1.53-1.23(m,8H,4CH2).
【００５２】
実施例２
６−（ベンジルオキシカルボニルアミノ−ヘキシル）−（２−ヒドロキシ−エチル）−カルバミン酸ベンジルエステルの調製
水（８７ｍＬ）とＮａＯＨ（１Ｎ溶液；１７ｍＬ）と酢酸エチル（１８０ｍＬ）との混合物中に実施例１の記載に従って調製した［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−ヘキシル］−カルバミン酸ベンジルエステル（３１．５ｇ；０．１０７ｍｏｌ）を含む溶液に、０〜５℃に冷却し、温度とｐＨ（約８）を制御しながら、ベンジルクロロホルメートベンジルエステル（５０％トルエン溶液；４２．５ｍＬ；０．１２８ｍｏｌ）を酢酸エチル（８５．５ｍＬ）に溶解して得た溶液とＮａＯＨ（１Ｎ溶液；１２８ｍＬ；０．１２８ｍｏｌ）とを同時に滴下した。
滴下終了後、反応混合液を０〜５℃で３０分間撹拌した。次いで、冷却を止め、ｐＨを８に戻すためにＮａＯＨ（１Ｎ溶液；１５ｍＬ）を更に添加し、室温で終夜撹拌した。
反応液を相分離し、水相を酢酸エチルで更に一回抽出に付した。集めた有機抽出物を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して油状残渣を得た。
該残渣をクロマトグラフィー（溶離液；酢酸エチル：ペトロラタム、６０：４０〜７０：３０）を用いて精製し、油状物として６−（ベンジルオキシカルボニルアミノ−ヘキシル）−（２−ヒドロキシ−エチル）−カルバミン酸ベンジルエステル（４２．５ｇ；収率９２％）を得た。
【００５３】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.39-7.25(m,10H,Ar);
5.10 and 5.07(2s,4H,2COOCH2);3.71(broad signal,2H,*CH2-OH);
3.43-3.01(m,4H,2CH2NCO);1.57-1.19(m,8H,4CH2).
【００５４】
同様の方法を用いて、次の化合物群を得た：
（２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）−（２−ヒドロキシ−エチル）−カルバミン酸ベンジルエステル
原料：２−（２−アミノエチルアミノ）−エタノール
（収率３２％）
【００５５】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.33-7.28(m,10H,2Ph);
5.06 and 5.04(2s,4H,2CH2-Ph);3.73-3.34(broad m,8H,4CH2).
【００５６】
［２−（ベンジル−ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−エチル］−（２−ヒドロキシ−エチル）−カルバミン酸ベンジルエステル
原料：２−［２−（ベンジルアミノ）−エチルアミノ］−エタノール、国際出願公開第ＷＯ９６／１８６３３号の記載に従って調製。
（収率５０％）
【００５７】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):(very broad signals)7.42-7.13(m,15H,3Ar);
5.12 and 5.09(2s,4H,COOCH2*);4.55(s,2H,N-*CH2-Ph).
【００５８】
［２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−エチル］−カルバミン酸ベンジルエステル
原料：２−（２−アミノエトキシ）−エタノール
（収率８５％）
【００５９】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.36-7.28(m,5H,Ar);
5.18(broad signal,1H,NH);5.08(s,2H,Ph-*CHO);
3.74-3.34(m,8H,*CH2-*CH2-O-*CH2-*CH2-OH);2.13(broad-t,1H,OH).
【００６０】
実施例３
メタンスルホン酸２−［ベンジルオキシカルボニル−（６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−ヘキシル）−アミノ］−エチルエステルの調製
実施例２の記載に従って調製した６−（ベンジルオキシカルボニルアミノ−ヘキシル）−（２−ヒドロキシ−エチル）−カルバミン酸ベンジルエステル（１３．７８ｇ；３２．１５ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（１４０ｍＬ）に溶解して得た溶液に、トリエチルアミン（８．９５ｍＬ；６４．３１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を０〜５℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド（３．３６ｍＬ；４３．４１ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）に溶解して得た溶液に滴下した。
滴下終了後、混合物を室温で６０分間撹拌した。次いで、５％クエン酸水溶液、食塩水（２０％ＮａＣｌ）、５％ＮａＨＣＯ3水溶液、最後に再度食塩水の順で洗浄した。硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で蒸発を行なった後、褐色油状物としてメタンスルホン酸２−［ベンジルオキシカルボニル−（６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−ヘキシル）−アミノ］−エチルエステル（１６．３７ｇ；収率１００％）を得た。
【００６１】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.35-7.27(m,10H,Ar);
5.11 and 5.07(2s,4H,2COOCH2);4.36-4.19(m,2H,CH2OSO2);
3.57-3.51(m,2H,SO-CH2-*CH2N);3.32-3.07(m,4H,2CH2N);
2.91 and 2.85(2s-conformers, 3H,CH3);1.50-1.20(m,8H,4CH2).
【００６２】
同様の方法を用いて、次の化合物群を得た：
メタンスルホン酸２−［２−（ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−エトキシ］−エチルエステル
原料：［２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−エチル］−カルバミン酸ベンジルエステル、実施例２の記載に従って調製。
（収率９８％）
【００６３】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.36-7.28(m,5H,Ar);
5.16(broad signal,1H,NH);5.08(s,2H,COOCH2);4.34-4.30(m,2H,SO3CH2);
3.72-3.67(m,2H,SO3-CH2-*CH2);3.60-3.34(m,4H,N-*CH2-*CH2);
2.98(s,3H,SO3CH3).
【００６４】
メタンスルホン酸２−［［２−（ベンジル−ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−エチル］−ベンジルオキシカルボニル−アミノ］−エチルエステル
原料：［２−（ベンジル−ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−エチル］−（２−ヒドロキシ−エチル）−カルバミン酸ベンジルエステル、実施例２の記載に従って調製。
（収率７２％）
【００６５】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.40-7.00(m,15H,3Ar);
5.13-5.01(broad signal,4H,2COOCH2);
4.51-3.30(broad-m,10H,4CH2N and CH2SO3);2.92-2.76(broad signal,3H,CH3).
【００６６】
メタンスルホン酸２−［ベンジルオキシカルボニル−（２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）−アミノ］−エチルエステル
原料：（２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）−（２−ヒドロキシ−エチル）−カルバミン酸ベンジルエステル、実施例２の記載に従って調製。
（収率１００％）
【００６７】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.35-7.27(m,10H,2Ar);
5.10 and 5.04(2s,4H,2COOCH2);4.41-4.15(m,2H,*CH2-MeSO2);
3.63-3.23(m,6H,N-*CH2-*CH2-N-*CH2);2.90(s-broad,3H,MeSO2).
【００６８】
実施例４
エリスロマイシンＡオキシムＮ−オキシドの調製
エリスロマイシンＡオキシム（３５．００ｇ；０．０４６７ｍｏｌ）をメタノール（１４００ｍＬ）に溶解して得た溶液に、温度を２０〜２５℃に維持しながら機械撹拌下、１時間かけて、Ｈ2Ｏ2（７２．００ｇ；タイター：３４％ｗ／ｖ；０．７２ｍｏｌ）の水溶液（水：７８０ｍＬ）を滴下した。滴下終了後、反応混合物を室温で２４時間撹拌し続けた。
Ｈ2Ｏ2（８ｍＬ）をさらに加えた後、さらに６時間撹拌し続けた。
水の量を一定（約７００ｍＬ）に維持しながら、約４０℃の減圧下でメタノールを蒸発させた。
濾過後、残渣を水で洗浄し、乾燥して、白色結晶固体としてエリスロマイシンＡオキシムＮ−オキシド（３６．３ｇ；収率９９％）を得た。
【００６９】
1H-NMR(200 MHz, DMSO-d6)δ(ppm):10.71-10.19(broad signal,2H,shifting H);  5.14-5.08(m,1H,H-13);4.72(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');
4.45(d,1H,JHH=7.0Hz,H-1').
【００７０】
実施例５
３’−デ（ジメチルアミノ）−３’，４’−デヒドロ−エリスロマイシンＡオキシム（化合物１）の調製
実施例４の記載に従って調製したエリスロマイシンＡオキシムＮ−オキシド（３０．００ｇ；３８．３ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（２３５ｍＬ）に溶解して得られた溶液を、予め加温したオイルバス（１７５〜１８０℃）で１５０℃に加温し、１５〜２０分間、機械撹拌下でその温度に保温した。
該溶液を冷却し、ジメチルホルムアミドを蒸発させた後、油性残渣を脱ミネラル（demineralized）水（５００ｍＬ）で回収し、加温し冷却した。濾別した固体をトリチュレートし、４０〜４５℃の温度の減圧下で乾燥し、粗生成物（２５．５ｇ）を得た。
該粗生成物を、まずアセトニトリル（１１０ｍＬ）で結晶化し、濾過し、水で洗浄し、５０℃にて減圧下で乾燥して結晶物質（２０ｇ）を得、それを再度メタノール／水（６５／３５；４００ｍＬ）で結晶化し、濾過し、４０〜５０℃で減圧下乾燥した。
結晶物質として化合物１（１０．３ｇ；収率３８．２％）を得た。
結晶化液からさらに生成物（３．７ｇ）を回収し、総収率は５１．８％であった。
【００７１】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):5.67-5.55(m,2H,*CH=*CH);
4.44(d,1H,JHH=7.0Hz,H-1');4.33-4.22(m,1H,H-5');4.13-4.04(m,1H,H-2');
3.84-3.73(m,1H,H-8);3.69(s,1H,H-11).
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):171.11(s,C-9);
132.2 and 126.1(2s,C3' and C-4').
【００７２】
実施例６
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡオキシム（化合物２）の調製
実施例５の記載に従って調製した化合物１（２０．００ｇ；２８．４ｍｍｏｌ）をエタノール（８５０ｍＬ）に溶解（若干の加熱によって完全に溶解）して得た溶液に、室温で酸化白金（０．６１５ｇ）を添加した。
得られた混合物をパー装置（Parr Apparatus：１．３６ａｔｍ）中で、水素添加に付したところ、即時に水素吸収が起った。
触媒を濾別しそして溶媒を減圧下蒸発させ、白色結晶の残留物をペトロラタムでトリチュレートし、濾過した。濾液を５０℃で減圧下乾燥して、化合物２（１９．８ｇ；収率９９％）を得た。
【００７３】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):5.05-4.98(m,1H,H-13);
4.94(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');4.23(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1');
3.44-3.30(m,1H,H-2');2.07-1.21(m,2H,H-3');1.65-1.45(m,2H,H-4').
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):171.2(s,C-9);104.7(s,C-1');31.8(s,C-3');
29.5(s,C-4').
【００７４】
実施例７
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［ベンジルオキシ−カルボニル−（６−ベンジルオキシ−カルボニルアミノ−ヘキシル）−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物３）の調製
カリウムｔｅｒｔ−ブチラート（２．４５ｇ；１９．４８ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１２０ｍＬ）に溶解して得た９５％溶液に、窒素雰囲気下、温度を２５℃に維持し撹拌下、実施例６の記載に従って調製した化合物２（１２．５１ｇ；１７．７３ｍｍｏｌ）を添加した。
反応混合液を室温で３０分間撹拌し、次いで、実施例３の記載に従って調製したメタンスルホン酸２−［ベンジルオキシカルボニル−（６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−ヘキシル）−アミノ］エチルエステル（８．９８ｇ；１７．７３ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（６０ｍＬ）に溶解して得た溶液と１８−クラウン−６エーテル（４．６９ｇ；１７．７３ｍｍｏｌ）とを添加して、室温で終夜撹拌した。
減圧下で溶媒を蒸発させた後、残渣を酢酸エチルと食塩水（２０％ＮａＣｌ）との混合液を用いて取出し、相分離した。水相を酢酸エチルで再度抽出した。合一し、乾燥した有機抽出物を減圧下で濃縮し、粗生成物（２３．４ｇ）を得た。クロマトグラフィー（溶離液；ＣＨ2Ｃｌ2：ＣＨ3ＯＨ＝９７：３）により精製し、少量の不純物を含む化合物３（１５．４２ｇ）を得た。この化合物３をこれ以上精製せずに使用した。
【００７５】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.35-7.28(m,10H,Ar);5.14-5.06(m,1H,H-13);
5.11 and 5.07(2s,4H,2COOCH2);4.84(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');
4.28(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1').
【００７６】
同様の方法を用いて、次の化合物群を得た：
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−エトキシ］−エチル］−オキシム］（化合物４）
原料：メタンスルホン酸２−［２−（ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−エトキシ］−エチルエステル
（収率６２％）
【００７７】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.34-7.27(m,5H,Ar);
6.09(broad signal,1H,NH);5.13-5.05(m,1H,H-13);5.06(s,2H,COOCH2);
4.79(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');4.26(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1').
【００７８】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−メトキシ−エトキシ］−メチル］−オキシム］（化合物５）
原料：メトキシ−エトキシ−メチルクロリド
（収率３２．５％）
【００７９】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):5.21-5.12(m,2H,O-CH2-O);
5.12-5.05(m,1H,H-13);4.85(d,1H,JHH=5.4Hz,H-1'');
4.39(d,1H,JHH=7.5Hz,H-1');3.40(s,3H,CH2-O-*CH3);3.27(s,3H,H-3'').
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):172.5(s,C-9);97.44(s,NO-C-O);
32.12(s,C-3');29.84(s,C-4').
【００８０】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［［２−（ベンジル−ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−エチル］−ベンジルオキシカルボニル−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物１２）
原料：メタンスルホン酸２−［［２−（ベンジル−ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−エチル］−ベンジルオキシカルボニル−アミノ］−エチルエステル
【００８１】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.40-7.16(broad m.,15H,3Ph);
5.17-5.00(m,5H,2*CH2-Ph and H-13).
【００８２】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［［２−（ベンジルオキシカルボニル−アミノ）−エチル］−ベンジルオキシカルボニル−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物１３）
原料：メタンスルホン酸２−［ベンジルオキシカルボニル−（２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）−アミノ］−エチルエステル
（収率４２％）
【００８３】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.38-7.25(m,10H,2Ph);
5.11 and 5.05(2s,4H,2COOCH2);5.14-5.00(m,1H,H-13);
4.89-4.79(broad-m,1H,H1'');2.26(d,1H,JHH=7.4Hz,H1').
【００８４】
実施例８
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［（６−アミノ−ヘキシル）−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物６）の調製
実施例７の記載に従って得た化合物３（１５．４２ｇ；１３．８ｍｍｏｌ）をエタノール（１６０ｍＬ）に溶解した溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ（１．６ｇ）を添加した。
混合物をパー装置（Parr Apparatus；１．０２ａｔｍ）内で水素添加した。２時間後触媒を濾別し、溶媒を蒸発させた。
残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離液ＣＨ2Ｃｌ2：ＣＨ3ＯＨ：ＮＨ3＝８５：１５：１．５、次いで、８０：２０：２）で精製し、アモルファス（無定形）白色固体として化合物６（８．４８ｇ）を得た。
【００８５】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):5.07-5.00(m,1H,H-13);
4.79(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');4.21(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1').
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):171.8(s,C-9);71.6(s,=N-O-C);
49.43 and 49.0(2s,=N-O-C-*C-N-*C);41.1(s,C-NH2).
【００８６】
同様の方法を用いて、次の化合物群を得た：
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−（２−アミノ−エトキシ）−エチル］−オキシム］（化合物７）
原料：化合物４
（収率８５％）
【００８７】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):5.12-5.05(m,1H,H-13);
4.83(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');4.26(d,1H,JHH=7.5Hz,H-1').
【００８８】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［（２−ベンジルアミノ−エチル）−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物１４）
原料：化合物１２
（収率４８％）
【００８９】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.32-7.17(m,5H,Ph);5.08-5.00(m,1H,H-13);
4.74(d,1H,JHH=4.6Hz,H-1'');4.22(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1');
AB system:Va=3.80,Vb=3.76,Jab=13.7Hz,*CH2Ph.
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):171.3(s,C-9);105.0(s,C-1');32.2(s,C-3');
29.8(s,C-4').
【００９０】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［（２−アミノ−エチル）−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物１５）
原料：化合物１３
（収率７０％）
【００９１】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):5.08-5.00(m,1H,H-13);
4.76(d,1H,JHH=4.6Hz,H-1'');4.23(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1').
【００９２】
実施例９
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［６−［（チアゾール−２−イルメチル）−アミノ］−ヘキシル−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物８）の調製
実施例８の記載に従って調製した化合物６（３ｇ；３．５３ｍｍｏｌ）と９７％２−チアゾールカルブアルデヒド（０．４１２ｇ；３．５３ｍｍｏｌ）とモレキュラーシーブ（３Å、６．７５ｇ）とをエタノール（６０ｍＬ）に懸濁して得た懸濁液を３時間撹拌し続けた。
セライト上のモレキュラーシーブを濾別後、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．３ｇ）を混合物に添加し、パー水素添加装置（Parr Hydrogenator;１．０２ａｔｍ）で水素添加した。２０時間後、触媒を濾別し、溶媒を蒸発させた。
クロマトグラフィー（溶離液；ＣＨＣｌ3：ペトロラタム：トリエチルアミン＝９０：１０：１０）で残留物を精製し、アモルファス固体として化合物８（１．６６ｇ；収率４９．８％）を得た。
【００９３】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.66(d,1H,JHH=3.2Hz,CHN);7.22(d,1H,CHS);
5.08-5.02(m,1H,H-13);4.78(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');
4.21(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1');4.07(s,2H,*CH2-thiaz.).
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):172.0(s,S-C=N);171.7(s,C-8);142.4(s,CHN);
118.7(s,CHS);104.9(s,C-1');96.3(s,C-1'');71.7(s,N-O-C).
【００９４】
同様の方法で、次の化合物群を得た：
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［６−（ベンジルアミノ）−ヘキシルアミノ］−エチル］−オキシム］（化合物９）
原料：化合物６およびベンズアルデヒド
【００９５】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.27-7.17(m,5H,Ar);5.07-5.01(m,1H,H-13);
4.75(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');4.19(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1');3.73(s,2H,*CH2-Ph).
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):171.8(s,C-9);104.9(s,C-1');96.3(s,C-1'');
71.8(s,=N-O-C);53.8(s,N-*C-Ph);49.7,49.2 and 49.1(3s,3N-C).
【００９６】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［２−［（チアゾール−２−イルメチル）−アミノ］−エトキシ］−エチル］−オキシム］（化合物１０）
原料：化合物７および２−チアゾールカルブアルデヒド
【００９７】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.64(d,1H,JHH=3.2Hz,CHN);7.19(d,1H,CHS);
5.10-5.02(m,1H,H-13);4.78(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');
4.21(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1');4.13(s,2H,*CH2-thiaz.).
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):172.7(s,SC=N);171.5(s,C-9);142.4(s,CHN');
118.6(s,CHS);104.7(s,C-1');96.4(s,C-1'');50.7(s,N-*C-thiaz.).
【００９８】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［２−（ベンジルアミノ）−エトキシ］−エチル］−オキシム］（化合物１１）原料：化合物７およびベンズアルデヒド
【００９９】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.33-7.10(m,5H,Ar);5.12-5.04(m,1H,H-13);
4.78(d,1H,JHH=4.4Hz,H-1'');4.72(d,1H,JHH=7.4Hz,H-1');3.80(s,2H,NCH2).13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):171.5(s,C-9);104.8(s,C-1');96.5(s,C-1'');
69.4,70.8 and 72.4(3s,3OCH2);53.6(s,*C-Ph);48.2(s,O-C-*C-N).
【０１００】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［２−［（チアゾール−２−イルメチル）−アミノ］−エチル−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物１６）
原料：化合物１５および２−チアゾールカルブアルデヒド
【０１０１】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.62(d,1H,JHH=3.0Hz,N-*CH=CH);
7.18(d,1H,S-*CH=CH);4.18(d,1H,JHH=7.4Hz,H1').
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):172.6(s,SC=N);171.3(s,C-9);142.4(s,CHN);
118.6(s,CHS);104.9(s,C-1');96.4(s,C-1'');32.17(s,C-3');29.8(s,C-4').
【０１０２】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［６−［（２−フェニル−１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル）−アミノ］−ヘキシル−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物１７）
原料：化合物６および２−フェニル−１Ｈ−イミダゾール−４−カルブアルデヒド
【０１０３】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.86-7.21(m,5H,Ar);6.91(s,1H,CH-Imid.);
5.11-5.02(m,1H,H13);4.76(d,1H,JHH=4.2Hz,H1'');4.21(d,1H,JHH=7.4Hz,H1');
3.76(s,2H,*CH2-Imid.);3.23(s,3H,OMe).
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):171.7(s,C-9);104.8(s,C-1');96.3(s,C-1'');
32.1(s,C-3');29.9(s,C-4').
【０１０４】
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［６−［（１−メチル−２−フェニル−１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル）−アミノ］−ヘキシル−アミノ］−エチル］−オキシム］（化合物１８）
原料：化合物６および１−メチル−２−フェニル−１Ｈ−イミダゾール−４−カルブアルデヒド
【０１０５】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.57-7.31(m,5H,Ar);6.87(s,1H,CH-Imid.);
5.09-5.00(m,1H,H13);4.76(d,1H,JHH=4.2Hz,H1'');
4.20(d,1H,JHH=7.4Hz,H1');3.71(s,2H,*CH2-Imid.);3.62(s,3H,NMe);
3.21(s,3H,OMe).
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):171.8(s,C-9);104.9(s,C-1');96.3(s,C-1'');
32.1(s,C-3');29.7(s,C-4').
【０１０６】
実施例１０
３’−デ（ジメチルアミノ）−エリスロマイシンＡ  （Ｅ）−９−［Ｏ−［２−［２−［（チアゾール−２−イルメチル）−（メチル）−アミノ］−エトキシ］−エチル］−オキシム］（化合物１９）の調製
化合物１０（０．２３ｇ；０．２５８ｍｍｏｌ）と、ホルムアルデヒド（３７％ｗ／ｖ；４２μｌ；０．５１６ｍｍｏｌ）と、１０％Ｐｄ担持チャコール（２５ｍｇ）と、エタノール：水＝４：１の混合液（１０ｍＬ）とをパー装置（Parr Apparatus）に１．０２ａｔｍで充填した。２時間及び３時間後、ホルムアルデヒド（それぞれ４２μＬ、２１μＬ）を更に添加した。反応終了後（全６時間）、触媒を濾別し、溶媒を蒸発させた。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨ2Ｃｌ2：ＣＨ3ＯＨ＝９５：５）で精製し、アモルファスな固体として化合物１９を得た。
【０１０７】
1H-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):7.64(d,1H,JHH=3.6Hz,N-*CH=CH);
7.21(d,1H,S-*CH=CH);5.10-5.00(m,1H,H13);4.80(d,1H,JHH=4.6 Ha,H1'');
4.23(d,1H,JHH=7.4Hz,H1');3.94(s,2H,*CH2-Thiaz.).
13C-NMR(200 MHz, CDCl3)δ(ppm):172.0(s,SC=N);171.8(s,C-9);142.2(s,CHN);
119.3(s,CHS);104.9(s,C-1');96.4(s,C-1'');32.2(s,C-3');29.9(s,C-4').
【０１０８】
実施例１１
インビトロ薬理学的活性
Ａ）  インターロイキン８（ＩＬ−８）の放出
ＡＴＴＣ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、Ｍｄ）から得られたヒト内皮不死化細胞系（ＥＣＶ３０４）を、２０％ウシ胎児血清（ＧＩＢＣＯ）とペニシリン（１００Ｕ／ｍＬ）とストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）（ＳＩＧＭＡ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）とを添加した培地１９９改変アール塩（mod.  Earle's  salts）（ＧＩＢＣＯ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ、Ｎ．Ｙ．）中で、５％ＣＯ2の湿潤雰囲気下、３７℃で生育した。
この細胞系を９６穴プレートを用いて、融合単層が得られるまで培養した。
評価対象の化合物をＤＭＳＯに１０-2Ｍになるよう溶解して、培養媒体で希釈した。
評価を行う前に、対象化合物を上記細胞と共に１時間プレインキュベートした。
ＩＬ−８の放出をリポポリサッカライドＢ（大腸菌０５５：Ｂ５、Ｄｉｆｃｏ、Ｄｅｔｒｏｉｔ、Ｍｉ）（０．６６μｇ／ｍＬ；最終用量２００μＬ）の添加によって誘導した。
一晩後、上清を回収してＩＬ−８試験に用いた。
培養上清におけるＩＬ−８に対する特異的免疫反応性をＥＬＩＳＡキット（Ａｍｅｒｓｈａｍ、ＵＫ）を用いて測定した。
結果は、最高阻害率（効率）、および可能な場合は５０％の阻害効果が得られる濃度（ＩＣ50）として表した。
【０１０９】
Ｂ）  スーパーオキシドアニオンの放出
健常な被検者の静脈血から好中球をフィコール−ハイパック（Ficoll−Hypaque）を用いて遠心分離し、次いで、６％デキストランを用いて沈殿させ、赤血球は浸透圧破壊した。好中球を洗浄後、５％ウシ胎児血清とＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物（１．３４ｍｍｏｌ／Ｌ）とを添加したＲＰＭＩ−１６４０培地に再懸濁した。細胞を４℃で２４時間保持し、試験前に懸濁液を遠心分離に付し、ＨＢＳＳ（ハンクの平衡塩溶液）に再懸濁した。好中球調製物の活力度と純度をトリパンブルー及びタークブルー（Turk Blue）を用いた染色によって確認した。
スーパーオキシドアニオンをルシゲニン（Lucigenin；硝酸−ビス−Ｎ−メチルアクリジニウム）−増強化学発光法を用いて測定した。
試験化合物含有及び試験化合物非含有（対照系）ＨＢＳＳ９００μＬ中で好中球（２×１０6細胞／ｍｌ）を、３７℃で３０分間プレインキュベートした。
ルシゲニン（２ｍｍｏｌ／Ｌ）をＨＢＳＳに溶解した溶液（１００μＬ）および刺激剤としてＮ−ホルミル−Ｌ−メチオニル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニン（FLMP）を対照系に対し濃度１×１０-5Ｍとなるように上記懸濁液に添加後、スーパーオキシドアニオンの生成をルマック／３Ｍバイオカウンター（Lumac/3M  Bio-counter）を用いて計測した。
ＦＬＭＰはＤＭＳＯに溶解（１×１０-2Ｍ）し、更にＨＢＳＳで希釈した。被試験化合物を濃度が１０-2ＭとなるようＤＭＳＯに溶解した。この溶液から、更に低い濃度のＤＭＳＯ溶液を調製し、試験を行った。対照系のＤＭＳＯ含有量は１％未満であった。
【０１１０】
化合物の各試験濃度について、ピークにおける発光度（luminosity value）を対照化合物と比較した阻害率に変換した。
スーパーオキシドアニオンの生成を５０％阻害可能な濃度（ＩＣ50）を、得られた“用量−応答”曲線から算出した。
次に示す表は、式Ｉで表される全てのクラスを代表する数種の化合物についての結果をエリスロマイシン、クラリスロマイシン、及びロキシスロマイシンと比較したものである。
【０１１１】
【表１】
0004568433.tif 000016
【０１１２】
実施例１２
インビボ薬理学的活性
・動物
体重２００〜３００ｇの雄のＳＤ（Sprague-Dawley）ラットを用いた。
実験に使用されたラットには明らかに感染はなかった。被検体ラットを標準条件下で７日間保持した後、死に至らしめた。
・内毒素投与
ＬＰＳ（大腸菌リポ多糖）（内毒素；０５５：Ｂ５血清型；Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）を無菌生理食塩水に溶解し、腹腔内注射（i.p.）により用量６ｍｇ／ｋｇ（１ｍＬ／ｋｇ）で投与した。同様に、生理食塩水及び／又は担体（生理食塩水＋０．５％Ｔｗｅｅｎ２０）を対照動物検体に注射した。
【０１１３】
・化合物投与（予防処置）
各化合物を、腹腔内（i.p.）注射で、最初の六日間は一日２回、七日目はＬＰＳ投与の１時間前と同投与の５時間後に投与した。該化合物は０．５％Ｔｗｅｅｎ２０と共に生理食塩水に懸濁した。
【０１１４】
・気管支肺胞洗浄
ＬＰＳ注射の２４時間後、ネムブタールを過剰量投与（１００ｍｇ／ｋｇ、i.p.）してラットを致死せしめた。被検体ラットの気管にカニューレを挿入し（incannulated）、ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水；５ｍＬ）を２アリコート、３７℃で点滴注入することにより肺を洗浄し、洗浄液を即時回収した。再度、この洗浄液を注入した。この手順を各アリコートに対し合計３回ずつ繰り返した。
【０１１５】
・細胞のカウントと分画
ＢＡＬＦ（気管支肺胞洗浄液）（２００μＬ）を冷水（１ｍＬ）とイソトン（Isoton；１９ｍＬ）とで希釈した。コントラブス・オートライザー８００（Contraves autolyser 800）を用いて細胞総数を２回計数した。細胞総数が２０００未満の場合は、ＢＡＬＦを８００ｒｐｍで１０分間遠心分離に付して、細胞を上清から分離した。上清を除去し、少量のＰＢＳに細胞を再懸濁した。細胞学的評価にあたって、細胞を懸濁させた溶液（５０μＬ）をシャンドン・サイトスピン（Shandon Cytospin）遠心分離装置を用いて１３００ｒｐｍで１分間遠心分離した。細胞をスライドにアセトンで定着し、ディフクィック（DiffQuick）で染色した。各スライドについて無作為に細胞２００個をカウントすることにより、細胞の白血球分画(differential counts)を行った。細胞を形態学上の標準的規準に従い好中球、好酸球及び単核細胞に分類した。
【０１１６】
下記の表は式Ｉで表される全てのクラスを代表する数種の化合物に対する結果を示す。
【０１１７】
【表２】
0004568433.tif 000017
【０１１８】