(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)
【化１】
0004589917.tif 000014
の化合物であって、
式中、
Ｒ１はＨもしくはＣ１〜Ｃ２アルキルであり；
Ｒ２はＣ１４〜Ｃ２２で、直鎖のもしくは枝分かれの、非置換アシルであり；
Ｒ３はエチレン、プロピレンもしくは枝分かれプロピレンであり；
ｘは２〜１２であり；
ｙは７〜１７であり；
そして(ｘ＋ｙ)の和は９〜１９であり、そして
ｚは２５〜５７である、
化合物。
【請求項２】
Ｒ１がＣ１〜Ｃ２アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の可溶化化合物および可溶化を必要とする化合物を含む製剤。
【請求項６】
可溶化を必要とする化合物が、２５℃の水中で３３ｍｇ／ｍｌ以下の溶解度を有する化合物である、請求項５に記載の製剤。
【請求項７】
医薬的に活性な成分と一緒に、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物を含む、請求項５もしくは６に記載の製剤。
【請求項８】
医薬品として使用するための、請求項７に記載の製剤。
【請求項９】
請求項５または６に記載の製剤の中の、または請求項７に記載の医薬製剤の中の界面活性剤としての、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｏ−アシル化、Ｏ−アルキル化もしくはＯ−アルケニル化ヒドロキシ脂肪酸でエステル化されるポリオキシアルキレングリコール(以下、時々ＰＯＡＧと言う)またはモノアルキル化ポリオキシアルキレングリコール、ならびにそれらの製造、製剤(医薬製剤を含んで)でのそれらの使用、および界面活性剤としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
選択性への高い要求と一緒に初期の医薬品の発見におけるＨＴＳ方法(高処理スクリーニング)の導入は、低水溶性を持つ候補医薬品の数を最近増加させてきている。投与量を最少にしかつ高い生物学的利用能を得るためには、適当な製剤が開発されるときに、医薬製剤者がそれらの化合物の溶解性を増加させる能力を有することは、大きい実用的重要性を持つ。これらの製剤は、新薬の開発の間のヒトにおける医学的効果の評価および動物での安全性試験、ならびに市販製品のための最終の医薬製剤としての両方で意図され得る。
【０００３】
低可溶性化合物の溶解性を増加させるために普通に使用される一つの方法は、界面活性剤の使用によりミセル系の中に化合物を溶解することである。[“工業薬剤学の理論および実際”第二版(“The Theory and Practice of Industrial Pharmacy” 2nd ed.) Lea & Febiger, 1976, p. 108-111。]
【０００４】
ミセル系での主な有利性は、広い組成範囲にわたる安定性、調製の簡易性、低粘度およびミセル系が光学的に澄明である熱力学的に安定な単一相である事実である。界面活性剤は、それらの化学的性質にしたがって、陰イオン性、例えば硫酸ラウリルナトリウム、陽イオン性、例えば臭化セチルトリメチルアンモニウム、双性イオン性、例えばアルキルベタイン、および非イオン性界面活性剤、例えばエトキシル化ソルビタンオレイン酸塩、に分割されることができる。
【０００５】
医薬品の応用での使用のための界面活性剤の選択は、投与経路にある程度依存し、そして大抵の界面活性化合物は医薬品の使用に十分には良く許容されないので、幾分限定される。注射の使用には、イオン性界面活性剤は、これらが低濃度において赤血球の溶血およびＴリンパ球細胞の破壊を引き起こすので、適していない。[“水性媒体中の溶解度および可溶化”(“Solubility & Solubilization in aqueous media.”), Yalkowsky, 1999]。注射の使用に最も許容される界面活性剤は、リン脂質および非イオン性界面活性剤である。経口の使用には、非イオン性界面活性剤が普通は好まれるが、イオン性界面活性剤が低濃度で使用されてきている。
【０００６】
医薬品の応用で使用される非イオン性界面活性剤には現在、エトキシル化ひまし油(Cremophor EL)、エトキシル化ソルビタン脂肪酸エステル、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(Tween 80)、ソルビタン脂肪酸エステル、例えばモノオレイン酸ソルビタン(Span 80)、エトキシル化ヒドロキシステアリン酸、例えばポリエチレングリコール６６０(１２−)ヒドロキシステアリン酸エステル(Solutol HS15)、エチレンおよびプロピレンオキシドブロック共重合体(Pluronic F68)ならびにグリセロールの脂肪酸エステル(Imwitor 742)のような物質／混合物が含まれる。
医薬品の応用で現在使用されている上述の非イオン性界面活性剤は、しかしながら、数多くの不利益を示す。
【０００７】
例えば、医薬製剤に利用可能な市販の非イオン性界面活性剤は、これらの製品の特性化を非常に困難にする、異なる分子の複雑な混合物であって、適切な品質(とりわけ医薬品の応用のための)を保証するために高価でかつ面倒な分析処理法を与える。
【０００８】
上皮細胞への副作用に関する最近の研究は、市販の非イオン性界面活性剤が可溶化に典型的に使用される濃度で上皮細胞へ重大な影響を有することを示してきている(Oesth, Karin、博士論文：“鼻医薬品送達の研究における水平ウッシングチャンバー方法”(The horizontal Ussing chamber method in studies of nasal drug delivery), 2002. Faculty of Pharmacy, Uppsala University)。
界面活性化合物は、注射で投与されるときに、低濃度で溶血をしばしば引き起こすことがまた周知である。
【０００９】
注射投与のために使用される現存の非イオン性界面活性剤系は、ポリエチレングリコール誘導体に全て基づいている。これらの界面活性剤を含有する、注射投与のための数個の医薬製品が市場にあるけれども、それらは全て、重篤な症例ではアナフィラキシーショックに至り得るヒスタミンの放出のような、全く重篤な副作用を受けている(Lorentz et al., Agents and Actions, Vo.l 12, 1/2, 1982)。
【００１０】
ヒスタミンの放出は、市販製品の中の不純物により引き起こされると信じられていて、使用される非イオン性界面活性剤は異なる分子の非常に複雑な混合物であるので、現存の製品を精製することは可能でない。またそのような状況では、任意の副作用を特定の分子に関連付けることは困難である。(“新規な界面活性剤”(“Novel Surfactants”). Holmberg editor. Marcel Dekker 1988. p. 279-97、の中でVulfsson。)
【００１１】
ＥＰ  ００１７０５９  Ａ１には、任意のモル比でのモノヒドロキシ脂肪酸とエチレンオキシドとの反応生成物が言及されている(Solutol[登録商標]型の化合物)。
形成された生成物は、ポリエチレングリコール(ＰＥＧ)およびモノヒドロキシ脂肪酸のモノエステルもしくはジエステルまたはエストリドの混合物であり、後者は、ヒドロキシ脂肪酸のカルボキシル基およびヒドロキシル基が脱水されて、オリゴマーを形成する、ヒドロキシ脂肪酸の直鎖オリゴマーポリエステルについての一般名として普通知られている。ＥＰ  ００１７０５９  Ａ１の生成物は二つもしくはそれ以上のモノヒドロキシ脂肪酸を含み、そこではエストリドのモノヒドロキシ脂肪酸は、他の脂肪酸のヒドロキシル基にもしくはモノヒドロキシ脂肪酸の上述のヒドロキシル基に取り付けられたＰＥＧ鎖のヒドロキシル基に直接に取り付けられるかのいずれかであり得る。これらの反応生成物は、医薬の目的のための溶解エンハンサーとして特に使用されると述べられている。これらの種類の化合物では、生じた合成生成物は常に化合物の混合物であるであろう。Solutol HS 15はそのような生成物である。短いＰＥＧ鎖(ポリオキシアルキレングリコール、即ちＰＯＡＧ、鎖の一型)はＥＰ  ００１７０５９  Ａ１にクレームされた化合物の特色的な特徴である。
【００１２】
ＵＳ  ６,３６５,６３７は、ヒドロキシル化カルボン酸のエステルもしくはアミドの、とりわけ医薬の目的のための、可溶化剤としての使用をクレームしている。これらの化合物は全て短いＰＥＧ鎖を有する。さらに、合成における単量体の、二量体の、三量体のおよび高級の重合酸を含む市販品質の、ＵＳ  ６,３６５,６３７に記載されたような、二量化脂肪酸の任意使用は、高純度の化合物を得ることを望むときには、欠点である。
【発明の開示】
【００１３】
［発明の説明］
したがって、複雑な混合物である、または、例えば上皮細胞の相互作用、ヒスタミン放出もしくは溶血、として見られる副作用を誘発する潜在性のある、上述の不利益を有しない、新しい効率的な非イオン性界面活性化合物の必要性がある。
【００１４】
或る副作用は市販製品の中の不純物により引き起こされると信じられているので、そして使用される非イオン性界面活性剤は異なる分子の非常に複雑な混合物であるので、現存の製品を精製することは可能でない(“新規な界面活性剤”(“Novel Surfactants”). Holmberg editor. Marcel Dekker 1988. p. 279-97、の中でVulfsson。)。それ故に、低溶解性の医薬品分子の溶解剤としての使用のために、高度の可溶化能力を有する新しい“無毒の”かつ明確に規定される界面活性剤の必要性がある。そのような化合物は、医薬および他の分野の両方で使用を有し得る。
界面活性剤を高純度の化合物として製造できる、合成方法もまた必要である。
【００１５】
さらに、一般的に製剤での使用のために、しかし特に医薬製剤での使用のために、副作用に関して改良されたプロフィールを持ち、そして界面活性剤として高度の可溶化能力を有する化合物の必要性がある。
【００１６】
ポリオキシアルキレングリコール(ＰＯＡＧ)もしくはモノアルキル化ＰＯＡＧ[そこでは、ＰＯＡＧ(もしくはその誘導体)は特定の平均鎖長を有する]でエステル化された、Ｏ−アシル化もしくはＯ−アルキル化／Ｏ−アルケニル化ヒドロキシ脂肪酸(ヒドロキシ脂肪酸は以下でまた“ＨＦＡ”と言う)である化合物は、特に低溶血活性および上皮細胞(ＣＡＣＯ−２細胞)との相互作用の欠如に関して、従来の技術の化合物より良好な耐容性を有することが今や驚くべきことに見出されている。さらに、それらは明確に規定される化合物として作成され得て、それらは可溶化剤として非常に有効である。そのような化合物は、錠剤、カプセル、散剤、分散剤、乳剤、坐剤のような直腸製剤のようなとりわけ医薬製剤においておよびまた液剤において有利に使用され得る。加えて、それらは、例えば、固体分散剤を作成するための媒体、吸着エンハンサー、乳剤およびマイクロエマルジョンでの乳化剤、固体分散剤での分散薬剤、自己乳化系での乳化剤、錠剤打錠での滑沢剤、顆粒化製造法での湿潤剤、噴霧乾燥組成物でのビークル等として使用され得て、また本発明で意図される、任意の特定の投与経路に限定されない、使用である。
【００１７】
また、先に形成されたＯ−アシルＨＦＡもしくはＯ−アルキルＨＦＡ／Ｏ−アルケニルＨＦＡ(またはそのようなＨＦＡのエステルもしくはそれらの誘導体)をＰＯＡＧもしくはアルキルＰＯＡＧ(例えば、平均分子量の１２００を持つポリエチレングリコールモノメチルエーテルとしてまた知られる、ＭｅＰＥＧ１２００)と加水分解酵素を用いて結合する酵素工程を伴う製造法があって、当該酵素は、Ｏ−アシル／アルキル／アルケニル−ＨＦＡ(もしくは相当する誘導体)上の現存するエステルまたはエーテル結合との如何なる反応を触媒すること無しに、ＨＦＡ誘導体のカルボキシル基およびＰＯＡＧもしくはＰＯＡＧ誘導体の末端ヒドロキシル基との間のエステル形成を、触媒する能力を有することが見出されている。例として、カンジダ・アンタークチカ(Candida antarctica)からのリパーゼＢもしくは同等体を使用することができる。この酵素はさらに均一な反応生成物を得るために使用されることに特に有益である。もう一つの利点は、有機溶媒の無いこのエステル化工程のための反応を使用することを可能にすることである。
【００１８】
［発明の詳細な説明］
さらに良い耐容性、低溶血活性、さらに高純度で製造される可能性および高度の可溶化能力を驚くべきことに有する、本発明の化合物は、下の式(Ｉ)に記載されるような化学構造を有する；
【化１】
0004589917.tif 000002
【００１９】
化合物は、ポリ(オキシアルキレン)グリコール[さらに短い形でＰＯＡＧ]もしくはモノアルキル化ポリ(オキシアルキレン)グリコールとカルボキシル基末端上でエステル結合を形成するアシル化／アルキル化／アルケニル化ヒドロキシ脂肪酸に基づく。
【００２０】
ＰＯＡＧ鎖の外側の末端上に位置するＲ１基は、ＨもしくはＣ１〜Ｃ４アルキルであり得る。本発明の一つの態様において、Ｒ１はＨであり、あるいはＲ１はＣ１〜Ｃ４アルキルである。本発明の一つの好ましい実施態様において、Ｒ１はＨもしくはＣ１〜Ｃ２アルキルである。本発明のさらに好ましい実施態様において、Ｒ１はＣ１〜Ｃ２アルキルである。最も好ましい実施態様において、Ｒ１はメチルである。
【００２１】
用語のＰＯＡＧは、とりわけＰＥＧ類として普通に知られている、ポリ(オキシエチレン)グリコールおよび、ＰＰＧ類として普通に知られている、ポリ(オキシプロピレン)グリコールを含む。オキシプロピレン単位は直鎖もしくは枝分かれであり得る。
かくして、Ｒ３はエチレン、プロピレンもしくは枝分かれプロピレンの中で選ばれる。
【００２２】
本発明で用いられるＰＯＡＧ鎖は、好ましくは、１１００〜２００００の平均分子量のポリ(エチレン)グリコールとみなされる。さらに好ましいのは、平均分子量の１１００〜１００００を持つＰＯＡＧを使用することであり、最も好ましいのは、１１００〜２５００の平均分子量を持つＰＯＡＧを使用することであって、全てのこれらの平均分子量はポリ(エチレン)グリコールについて計数される。
これらの平均分子量は、アルキルで誘導体化されたＰＯＡＧ類の中の如何なるアルキル基の重量も除外するとして計数される。
使用されるポリ(オキシアルキレン)グリコールもしくはモノアルキル化ポリ(オキシアルキレン)グリコールは、純粋な、単分散のもしくは多分散の市販の品質を持つ。
【００２３】
ポリオキシアルキレングリコール(例えばＰＥＧ)鎖の平均分子量に与えられる上の範囲限度は、２５〜４５５、好ましくは２５〜２２８、そして最も好ましくは２５〜５７であるｚの値に相当する。
【００２４】
下の表１は、ｚならびに、ＰＥＧおよびＰＰＧについての平均分子量との間の関係を、それぞれ示す。
【００２５】
【表１】
0004589917.tif 000003
【００２６】
本発明の化合物のヒドロキシ脂肪酸部分の中の炭素鎖は、ヒドロキシ基からの酸素はｘが２〜１８であって、ｙが１〜１７であるように位置する一方で、ヒドロキシ脂肪酸の炭素鎖の長さを規定する、(ｘ＋ｙ)の和は３〜１９であることを特徴とする。
さらに好ましくは、ｘの値が２〜１５であって、ｙの値が４〜１７である一方で、(ｘ＋ｙ)の和は６〜１９である。
最も好ましくは、ｘの値が２〜１２であって、ｙの値が７〜１７である一方で、(ｘ＋ｙ)の和が９〜１９である。
【００２７】
ＨＦＡ残基上のヒドロキシ基の中の酸素は、Ｒ２基(Ｒ２はＣ１４〜Ｃ２２で、直鎖のもしくは枝分かれの、アシル、アルキルもしくはアルケニルである)に結合し(エステル結合またはエーテル結合を介して)、ここでアシル、アルキルもしくはアルケニルは、一つもしくはそれ以上の以下のもの(独立して選択される)；ハロゲン、シアノ、カルボキシ、カルバモイル、カルバモイル(Ｃ１〜Ｃ４)アルキル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、メルカプト、ニトロ、アミノ、(Ｃ１〜Ｃ４)アルキルアミノ、フェニル、ナフチル、フェニルオキシ、ナフチルオキシ、(Ｃ１〜Ｃ４)アルキルチオ、もしくは(Ｃ１〜Ｃ４)アルキルスルフィニル、で任意にさらに置換され得る。
【００２８】
一つの実施態様において、Ｒ２は未置換である。もう一つの実施態様において、Ｒ２は一つのもしくは二つの、好ましくは一つの、置換基により置換される。
本発明のもう一つの第二の実施態様において、ＰＯＡＧ鎖の外の末端に位置するＲ１基はＣ１〜Ｃ４アルキルである。本発明の一つのさらに好ましい第二の実施態様において、Ｒ１はＣ１〜Ｃ２アルキルである。特に最も好ましい第二の実施態様において、Ｒ１はメチルである。
【００２９】
用語のＰＯＡＧは、ポリ(オキシエチレン)グリコールおよびポリ(オキシプロピレン)グリコールを含む。オキシプロピレン単位は直鎖もしくは枝分かれであり得る。
かくして、Ｒ３はエチレン、プロピレンもしくは枝分かれプロピレンの中で選ばれる。
【００３０】
本発明で用いられるＰＯＡＧ鎖は、好ましくは、１１００〜２００００の平均分子量のポリ(エチレン)グリコールとみなされる。さらに好ましいのは、１１００〜１００００の平均分子量を持つＰＯＡＧを使用することであり、最も好ましいのは、１１００〜２５００の平均分子量を持つＰＯＡＧを使用することであって、全てのこれらの平均分子量はポリ(エチレン)グリコールについて計数される。
これらの平均分子量は、アルキルで誘導体化されたＰＯＡＧ類の中の如何なるアルキル基の重量も除外するとして計数される。
使用されるポリ(オキシアルキレン)グリコールもしくはモノアルキル化ポリ(オキシアルキレン)グリコールは、純粋な、単分散のもしくは多分散の市販の品質を持つ。
【００３１】
ポリオキシアルキレングリコール(例えばＰＥＧ)鎖の平均分子量に与えられる上の範囲限度は、好ましくは２５〜４５５、さらに好ましくは２５〜２２８、そして最も好ましくは２５〜５７であるｚの値に相当する。
上の表１は、ｚならびに、ＰＥＧおよびＰＰＧについての平均分子量との間の関係を、それぞれ示す。
【００３２】
本発明の化合物のヒドロキシ脂肪酸部分の中の炭素鎖は、ヒドロキシ基からの酸素はｘが２〜１８であって、ｙが１〜１７であるように位置する一方で、ヒドロキシ脂肪酸の炭素鎖の長さを規定する、(ｘ＋ｙ)の和が３〜１９であることを特徴とする。
さらに好ましくは、ｘの値が２〜１５であって、ｙの値が４〜１７である一方で、(ｘ＋ｙ)の和が６〜１９である。
最も好ましくは、ｘの値が２〜１２であって、ｙの値が７〜１７である一方で、(ｘ＋ｙ)の和が９〜１９である。
【００３３】
ＨＦＡ残基上のヒドロキシ基の中の酸素は、Ｒ２基(Ｒ２はＣ１４〜Ｃ２２で、直鎖のもしくは枝分かれの、アシル、アルキルもしくはアルケニルである)に結合し(エステル結合またはエーテル結合を介して)、ここでアシル、アルキルもしくはアルケニルは、一つもしくはそれ以上の以下のもの；ハロゲン、シアノ、カルボキシ、カルバモイル、カルバモイル(Ｃ１〜Ｃ４)アルキル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、メルカプト、ニトロ、アミノ、(Ｃ１〜Ｃ４)アルキルアミノ、フェニル、ナフチル、フェニルオキシ、ナフチルオキシ、(Ｃ１〜Ｃ４)アルキルチオ、もしくは(Ｃ１〜Ｃ４)アルキルスルフィニル、で任意にさらに置換され得る。
一つの第二の実施態様において、Ｒ２は未置換である。もう一つの第二の実施態様において、Ｒ２は一つのもしくは二つの、好ましくは一つの、置換基により置換される。
【００３４】
［合成］
ヒドロキシ脂肪酸のエステル誘導体化
合成は、例えば、ヒドロキシ脂肪酸もしくはそのＣ１〜Ｃ４アルキルエステルから出発することにより実施され得る。必要であれば、ヒドロキシ脂肪酸の出発原料は適当な方法、例えば抽出もしくはクロマトグラフ方法により精製され得る。これは本発明の最良の結果を得るために有益である。
【００３５】
脂肪酸のヒドロキシ基のエステル化は、例えば塩化アシルで実施され得る。二つの反応物を、適当な濃度、例えば塩化アシルに関して１.５当量で、適当な溶媒、例えばピリジンを含有するメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル(ＭＴＢＥ)の中で混合する。
【００３６】
この生成物の精製は、抽出により例えば為され得る。適当には、生成物を弱酸性溶液、例えば１％硫酸で先ず洗浄して、次いで、弱塩基性溶液、例えば飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄する。必要であれば、さらなる精製を、クロマトグラフ方法、例えば分取シリカゲルクロマトグラフィーを用いて為し得る。
当分野で公知の他の方法を用いて、脂肪酸のヒドロキシル基のエステル化を同様に達成することができる。
【００３７】
ヒドロキシ脂肪酸のエーテル誘導体化
合成は、例えば、ヒドロキシ脂肪酸のエステルから出発することにより実施され得る。必要であれば、ヒドロキシ脂肪酸エステルは適当な方法、例えば抽出もしくはクロマトグラフ方法により精製され得る。これは本発明の最良の結果を得るために有益である。
【００３８】
脂肪酸のヒドロキシル基のアルコールとのエーテル化は、例えば二工程で実施され得る。第一の工程は、適当な溶媒、例えばピリジンを含有するジクロロメタンの中で、アルコールを、塩化トルエン−４−スルホニルと、適当な濃度、例えば塩化トルエン−４−スルホニルに関して１.５当量で反応させることから成り得る。生成したアルコールのトルエン−４−スルホン酸エステルの精製は、例えば抽出により為され得る。適当には、生成物を、次いで、弱酸性溶液、例えば１％硫酸で洗浄する。必要であれば、さらなる精製を、クロマトグラフ方法、例えば分取シリカゲルクロマトグラフィーを用いて為し得る。
【００３９】
第二の工程は、アルコールのトルエン−４−スルホン酸エステルをヒドロキシ脂肪酸エステルと、溶媒、塩基および触媒の適当な系の中で、例えば、アルコールのトルエン−４−スルホン酸エステルに関して、１当量の炭酸カリウムおよび０.０５当量のヨウ化ナトリウムを含有するアセトニトリルの中で、反応させることから成り得る。生成したアルキルオキシ酸エステルの精製は、抽出により例えば為され得る。適当には、生成物を、次いで、弱酸性溶液、例えば１％硫酸で洗浄する。必要であれば、さらなる精製を、クロマトグラフ方法、例えば分取シリカゲルクロマトグラフィーを用いて為し得る。
当分野で公知の他の方法を用いて、脂肪酸のヒドロキシル基のエーテル化を同様に達成することができる。
【００４０】
ＰＯＡＧもしくはＰＯＡＧ誘導体とのエステル化
驚くべきほど純粋な生成物を高収率で与える、ＨＦＡのエステル化もしくはエーテル化の後の一つの非常に有利な次工程は、得られたＨＦＡ誘導体をポリオキシアルキレングリコール、もしくはモノアルキル化ポリオキシアルキレングリコールと加水分解酵素を用いてエステル化するときであって、この酵素は、Ｏ−アシル／アルキル／アルケニル−ＨＦＡ上に現存するエステルまたはエーテル結合との如何なる反応も触媒すること無しに、ＨＦＡ誘導体のカルボキシル基およびＰＯＡＧもしくはＰＯＡＧ誘導体の末端ヒドロキシル基との間のエステル形成を触媒する能力を有している。これは以下において時々短く“酵素的ＰＯＡＧ化”と言う。例として、カンジダ・アンタークチカからのリパーゼＢもしくは同等体を使用することができる。本発明の処理法で用いられる酵素の最も好ましい形は、カンジダ・アンタークチカからのリパーゼＢ酵素の固定化形である。
【００４１】
酵素的ＰＯＡＧ化工程は、エステル化の間に形成される水もしくは如何なる他の揮発性の共生成物を除去するための真空の使用と組合せて有利に実施される。この酵素的ＰＯＡＧ化工程は、如何なる有機溶媒の存在無しに、即ち無溶媒反応工程で、有利に実施され得る。
【００４２】
反応をＨＰＬＣを用いることによりモニターすることができる。好ましい選択は、蒸発光散乱検出器を用いる、逆相クロマトグラフィーを選ぶことである。
カンジダ・アンタークチカからのリパーゼＢを利用するときの反応温度は、典型的には５０〜９０℃である。
【００４３】
［製剤］
本発明の化合物を、製剤中に異なる目的のために組み込んで、それにより上述のようなそれらの利益を利用し得る。
そのような目的には、界面活性剤、可溶化剤、洗剤、分散液のための分散剤、固体の分散剤、乳化剤、担体、凍結乾燥添加剤、噴霧乾燥添加剤および湿潤剤；としての使用が含まれる。
【００４４】
本発明の化合物を、それらの存在により悪影響を受けない任意の他の化合物と組合せて使用することができる。特に、水中でやや溶けにくいかもしくは溶けにくい(米国薬局方２４，２０００から、１０頁に示された定義にしたがって)化合物と組合せてそれらを使用することが予測される。これは、同一の定義にしたがって、やや溶けにくい、溶けにくい、極めて溶けにくい、殆ど溶けないおよび事実上溶けない、を含む。かくして、それは、水中で３３ｍｇ／ｍｌに相当する、溶媒中でおよそ０.０３３ｍｇ／ｍｇ以下の溶解度を有する化合物を含む。本発明に関する溶媒は、２５℃で、一気圧における水である。
【００４５】
［医薬製剤］
本発明の化合物を、当分野で既知の任意の目的のために医薬製剤中に組み込んで、それにより上述のようなそれらの利益を利用し得る。そのような目的には、限定するものではないが、界面活性剤、可溶化剤、乳化剤、担体、固体の分散剤、分散液のための分散剤、湿潤剤、滑沢剤、凍結乾燥添加剤、噴霧乾燥添加剤等；としてそれらを使用することが含まれる。
【００４６】
それら自体では、それらは、非経腸製剤(例えば、皮下の、静脈の、筋肉内の、腹腔内の、動脈内の、脳血管内の)、経口製剤、直腸製剤、局所製剤、口腔製剤、舌下製剤に含まれ得るが、この列挙は如何なる点で限定されていることを意図しない。
好ましい製剤は、経口、局所、直腸もしくは非経腸である。さらに好ましい製剤は、経口もしくは非経腸である。最も好ましいのは非経腸製剤である。
【００４７】
本発明の化合物との使用に適する経口製剤の非限定的な例は、錠剤、発泡錠、カプセル剤、顆粒剤、ペレット剤、散剤、サシェ剤、分散剤、懸濁剤、乳剤、マイクロエマルジョン、自己乳化系および液剤である。
本発明にしたがう化合物の使用において、配合者は、共溶媒、緩衝剤、ポリマー、崩壊剤、充填剤／希釈剤、安定化剤および防腐剤のような、種々の添加物を含む必要があり得る。
【００４８】
本発明の化合物を、それらの存在により悪影響を受けない任意の医薬的に活性な成分(薬物)もしくはビタミンとの組合せで使用することができる。特に、水中でやや溶けにくいかもしくは溶けにくい(米国薬局方２４，２０００から、１０頁に示された定義にしたがって)薬物もしくはビタミンと組合せてそれらを使用することが予測される。これは、同一の定義にしたがって、やや溶けにくい、溶けにくい、極めて溶けにくい、殆ど溶けないおよび事実上溶けない、を含む。かくして、それは、水中で３３ｍｇ／ｍｌに相当する、溶媒中でおよそ３３ｍｇ／ｍｇ以下の溶解度を有する薬物もしくはビタミンを含む。本発明に関する溶媒は、２５℃で、一気圧における水である。
【００４９】
さらなる実施態様にしたがって、医薬製剤は本発明にしたがう一つもしくはそれ以上の化合物を含み得て、一つ以上の医薬的に活性な成分をまた含み得る。さらに医薬製剤(本発明を利用する)が一つもしくはそれ以上のビタミンを含むことが可能である。意図されるもう一つの態様は、一つもしくはそれ以上の医薬的に活性な成分との一つもしくはそれ以上のビタミンの組合せが本発明の製剤に使用され得ることである。
【００５０】
本発明にしたがう医薬製剤の好ましい実施態様は、プロトンポンプ阻害剤、カルシウムチャネル遮断剤、アドレナリン作動性β−遮断薬、麻酔薬、ステロイド、抗酸化剤、レニン阻害剤、アルカロイド、細胞分裂停止剤、抗凝血剤、脂質調節剤、抗うつ薬、神経弛緩薬、免疫抑制剤、免疫調節薬、抗生物質および非ステロイド抗炎症剤：の中で選択される一つもしくはそれ以上の薬物もしくは医薬的に活性な成分を含む。
【００５１】
以下の実施例は、本発明を例示するために提供される。
【実施例１】
【００５２】
ＰＥＧ６００モノ−１２−ラウロイルオキシ−ステアリン酸エステルの合成
一般に、反応は方式；
１２−ヒドロキシステアリン酸→１２−ヒドロキシステアリン酸エチル→１２−ラウロイルオキシ−ステアリン酸エチル→ＰＥＧ６００モノ−１２−ラウリルオキシ−ステアリン酸エステル
に従った。
【００５３】
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル
工業級１２−ヒドロキシステアリン酸(Aldrichから購入した)をヘキサンでの抽出により＞９９％に精製した。
精製１２−ヒドロキシステアリン酸１５０ｍｍｏｌ(４５ｇ)および硫酸５ｍｍｏｌ(０.５ｇ)をジムロート冷却器付きの５００ｍｌ−丸底フラスコの中でエタノール３００ｍｌ中に溶解して、７８℃で２０時間還流した。生成物を溶媒の蒸発および引き続くメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル(以後ＭＴＢＥ)３００ｍｌの中への溶解により単離した。溶液を水(３×１００ｍｌ)で抽出して、次いで、蒸発した。生成物を９６％の単離収率(４７.８ｇ)で回収した。
【００５４】
１２−ラウロイルオキシ−ステアリン酸エチル
得られた１２−ヒドロキシステアリン酸エチル２０ｍｍｏｌ(６.５７ｇ)およびピリジン３０ｍｍｏｌ(２.４ｇ)をジムロート冷却器および乾燥管付きの２５０ｍｌ−丸底フラスコの中でＭＴＢＥ２００ｍｌ中に５０℃で溶解した。攪拌下に、１９.４ｍｍｏｌ(４.２４ｇ)の塩化ラウロイル(Sigma Aldrichから)をゆっくりと加えて、５時間反応させた。温度を２５℃に下げて、水１００ｍｌを加えることにより、反応を停止した。
溶液を５０ｍｌ部の１％硫酸水溶液で三回抽出して、引き続いて飽和重炭酸ナトリウム水溶液(９０ｇ／ｌ、３×５０ｍｌ)および最後に水(３×５０ｍｌ)で抽出を行った。残存する溶媒を蒸発により除去した。
放出されたラウリル酸を０.１％酢酸添加のシクロヘキサン中の５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより除去した。その後、溶媒を蒸発した。１２−ラウロイルオキシ−ステアリン酸エチルを７１％(７.１ｇ)の単離収率で回収した。
【００５５】
ＰＥＧ６００モノ−１２−ラウロイルオキシ−ステアリン酸エステル
得られた１２−ラウロイルオキシ−ステアリン酸エチル７.５ｍｍｏｌ(３.７ｇ)およびＰＥＧ６００の７５ｍｍｏｌ(４５ｇ)を２５０ｍｌ−丸底フラスコの中でＣ．アンタークチカからの固定化リパーゼＢ(Novozymes A/S DenmarkからのNovozym 435)の５０ｍｇと真空(＜１ｍｍＨｇ)下に６０℃で１６時間攪拌して混合した。
【００５６】
反応を、Supelco Discovery C18−カラム(内径４.６ｍｍ×１５０ｍｍ)での逆相ＨＰＬＣ、分離中０.５％酢酸添加の９５：５メタノール：水混合液の１ｍｌ／分、を用いてモニターした。検出をSedex 45蒸発光散乱検出器(Sedere, Alfortville, France)で３０℃および２ｂａｒの空気圧において行った。
【００５７】
その後、酵素をろ過により除去して、生成物を、室温で行う以外はＩＳＯ−２２６８[“界面活性剤(非イオン性)―ポリエチレングリコールおよび非イオン性活性物質(付加物)の測定―Weibull方法”、国際標準機構(“Surface active agents (non-ionic) - Determination of polyethylene glycols and non-ionic active matter (adducts) - Weibull method”, International Standard Organization)、ＩＳＯ  ２２６８：１９７２]にしたがって酢酸エチルおよび飽和食塩水溶液で抽出し、引き続いて溶媒の蒸発、乾燥酢酸エチル中への溶解、ろ過および蒸発を行った。ＰＥＧ６００モノ−１２−ラウロイルオキシ−ステアリン酸エステルを９３％(７.２ｇ)の単離収率で回収した。
【実施例２】
【００５８】
ＰＥＧ６００モノ−１２−プロピオニルオキシ−ステアリン酸エステルの合成
一般に、反応は方式；
１２−ヒドロキシステアリン酸→１２−プロピオニルオキシ−ステアリン酸→ＰＥＧ６００モノ−１２−プロピオニルオキシ−ステアリン酸エステル
に従った。
【００５９】
１２−プロピオニルオキシ−ステアリン酸
工業級１２−ヒドロキシステアリン酸(Aldrichから購入した)をヘキサンでの抽出により＞９９％に精製した。
精製１２−ヒドロキシステアリン酸１０ｍｍｏｌ(３.０ｇ)およびピリジン２５ｍｍｏｌ(２.０ｇ)をジムロート冷却器および乾燥管付きの２５０ｍｌ−丸底フラスコの中でＭＴＢＥ１５０ｍｌ中に５０℃で溶解した。攪拌下に、１３ｍｍｏｌの塩化プロピオニル(Sigma Aldrichから)をゆっくりと加えて、１９時間反応させた。温度を２５℃に下げて、水５０ｍｌを加えることにより、反応を停止した。
溶液を１％硫酸水溶液(３×２５ｍｌ)で抽出して、引き続いて飽和重炭酸ナトリウム水溶液(９０ｇ／ｌ、３×２５ｍｌ)および水(３×２５ｍｌ)で抽出を行った。残存する溶媒を蒸発により除去した。１２−プロピオニルオキシ−ステアリン酸を９７％(３.４７ｇ)の単離収率で回収した。
【００６０】
ＰＥＧ６００モノ−１２−プロピオニルオキシ−ステアリン酸エステル
１２−プロピオニルオキシ−ステアリン酸９.９ｍｍｏｌ(３.７ｇ)およびＰＥＧ６００の９９ｍｍｏｌ(５９.５ｇ)を２５０ｍｌ−丸底フラスコの中でＣ．アンタークチカからの固定化リパーゼＢ(Novozymes A/S DenmarkからのNovozym 435)の５０ｍｇと真空(＜１ｍｍＨｇ)下に６０℃で２１時間攪拌して混合した。
酵素をろ過により除去して、生成物を、室温で行う以外はＩＳＯ−２２６８[１９７２]にしたがって酢酸エチルおよび飽和食塩水溶液で抽出し、引き続いて溶媒の蒸発、乾燥酢酸エチル中への溶解、ろ過および蒸発を行った。ＰＥＧ６００モノ−１２−プロピオニルオキシ−ステアリン酸エステルを７８％(７.５ｇ)の単離収率で回収した。
【実施例３】
【００６１】
ＰＥＧ１５００モノ−１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステルの合成
一般に、反応は方式；
１２−ヒドロキシステアリン酸→１２−ヒドロキシステアリン酸エチル→１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エチル→ＰＥＧ１５００モノ−１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステル
に従った。
１２−ヒドロキシステアリン酸は同一の供給源からであって、先行する実施例でのように精製した。
【００６２】
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル
は実施例１にしたがって得られた。
【００６３】
１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エチル
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル１０ｍｍｏｌ(３.２９ｇ)およびピリジン１５ｍｍｏｌ(１.２ｇ)をジムロート冷却器および乾燥管付きの２５０ｍｌ−丸底フラスコの中でＭＴＢＥ１００ｍｌ中に５０℃で溶解した。攪拌下に、９.７ｍｍｏｌの塩化ステアロイル(２.９４ｇ)をゆっくりと加えた。温度を２５℃に下げて、水５０ｍｌを加えることにより、反応を１５時間後に停止した。溶液を１％硫酸水溶液(３×２５ｍｌ)で抽出して、残存する溶媒を蒸発により除去した。
放出されたステアリン酸を０.１％酢酸で強化されたシクロヘキサン中の５％〜１０％の酢酸エチルのグラジエントで溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより除去して、引き続いて溶媒の蒸発を行った。
１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エチルを８１％(４.７ｇ)の単離収率で回収した。
【００６４】
ＰＥＧ１５００モノ−１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステル
１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エチル７.８ｍｍｏｌ(４.７ｇ)を５００ｍｌ−丸底フラスコの中でＰＥＧ１５００の１００ｍｍｏｌ(１５０ｇ)および固定化Ｃ．アンタークチカリパーゼＢの５０ｍｇと真空(＜１ｍｍＨｇ)下に７５℃で３９時間攪拌して混合した。
酵素をろ過により除去して、生成物を、ＩＳＯ−２２６８[１９７２]にしたがって、室温で酢酸エチルおよび飽和食塩水溶液で抽出して、引き続いて溶媒の蒸発、乾燥酢酸エチル中への溶解、ろ過および蒸発を行った。ＰＥＧ１５００モノ−１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステルを７１％(１１.４ｇ)の単離収率で回収した。
【実施例４】
【００６５】
ＰＥＧ１５００モノ−１２−オレオイルオキシ−ステアリン酸エステルの合成
一般に、反応は方式；
１２−ヒドロキシステアリン酸→１２−ヒドロキシステアリン酸エチル→１２−オレオイルオキシ−ステアリン酸エチル→ＰＥＧ１５００モノ−１２−オレオイルオキシ−ステアリン酸エステル
に従った。
１２−ヒドロキシステアリン酸は同一の供給源からであって、先行する実施例でのように精製した。
【００６６】
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル
は実施例１にしたがって得られた。
【００６７】
１２−オレオイルオキシ−ステアリン酸エチル
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル１０ｍｍｏｌ(３.２９ｇ)およびピリジン１５ｍｍｏｌ(１.２ｇ)をジムロート冷却器および乾燥管付きの２５０ｍｌ−丸底フラスコの中でＭＴＢＥ１００ｍｌ中に５０℃で溶解した。攪拌下に、９.７ｍｍｏｌの塩化オレオイル(２.９２ｇ)をゆっくりと加えた。温度を２５℃に下げて、水５０ｍｌを加えることにより、反応を１５時間後に停止した。溶液を１％硫酸水溶液(３×２５ｍｌ)で抽出して、残存する溶媒を蒸発により除去した。
放出されたオレイン酸を０.１％酢酸で強化されたシクロヘキサン中の５％〜１０％の酢酸エチルのグラジエントで溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより除去して、引き続いて溶媒の蒸発を行った。
１２−オレオイルオキシ−ステアリン酸エチルを８４％(４.９ｇ)の単離収率で回収した。
【００６８】
ＰＥＧ１５００モノ−１２−オレオイルオキシ−ステアリン酸エステル
１２−オレオイルオキシ−ステアリン酸エチル８.２ｍｍｏｌ(４.９ｇ)を５００ｍｌ−丸底フラスコの中でＰＥＧ１５００の１００ｍｍｏｌ(１５０ｇ)および固定化Ｃ．アンタークチカリパーゼＢの５０ｍｇと真空(＜１ｍｍＨｇ)下に７５℃で３９時間攪拌して混合した。
酵素をろ過により除去して、生成物を、ＩＳＯ−２２６８[１９７２]にしたがって、室温で酢酸エチルおよび飽和食塩水溶液で抽出して、引き続いて溶媒の蒸発、乾燥酢酸エチル中への溶解、ろ過および蒸発を行った。ＰＥＧ１５００モノ−１２−オレオイルオキシ−ステアリン酸エステルを８８％(１４.８ｇ)の単離収率で回収した。
【実施例５】
【００６９】
ＭｅＰＥＧ１２００  １２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルの合成
一般に、反応は方式；
１２−ヒドロキシステアリン酸→１２−ヒドロキシステアリン酸エチル→１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エチル→ＭｅＰＥＧ１２００  １２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステル
に従った。
【００７０】
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル
は実施例１にしたがって得られた。
【００７１】
１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エチル
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル１０ｍｍｏｌ(３.２８ｇ)およびピリジン１５ｍｍｏｌ(１.２ｇ)をジムロート冷却器および乾燥管付きの２５０ｍｌ−丸底フラスコの中でＭＴＢＥ１００ｍｌ中に５０℃で溶解した。攪拌下に、塩化パルミトイル９.７ｍｍｏｌ(２.６７ｇ)をゆっくりと加えて、１６時間反応させた。温度を２５℃に下げて、水５０ｍｌを加えることにより、反応を停止した。
溶液を１％硫酸水溶液(３×２５ｍｌ)で抽出して、引き続いて飽和重炭酸ナトリウム水溶液(９０ｇ／ｌ、３×２５ｍｌ)および水(３×２５ｍｌ)で抽出を行った。残存する溶媒を蒸発により除去した。
放出されたパルミチン酸を０.１％酢酸で強化されたシクロヘキサン中の５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより除去して、引き続いて溶媒の蒸発を行った。１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エチルを８７％(４.６ｇ)の単離収率で回収した。
【００７２】
ＭｅＰＥＧ１２００  １２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステル
一部の１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エチル３.７６ｇ(６.９７ｍｍｏｌ)を１００ｍｌ−丸底フラスコの中で７.７ｍｍｏｌのＭｅＰＥＧ１２００(９.２ｇ)およびNovozym 435の５０ｍｇと真空(＜１ｍｍＨｇ)下に７５℃で２００時間攪拌して混合した。
酵素をろ過により除去して、生成物を、ＩＳＯ−２２６８[１９７２]にしたがって、室温で酢酸エチルおよび飽和食塩水溶液で抽出して、引き続いて溶媒の蒸発、乾燥酢酸エチル中への溶解、ろ過および蒸発を行った。ＭｅＰＥＧ１２００  １２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルを８１％(９.７５ｇ)の単離収率で回収した。
【実施例６】
【００７３】
ＭｅＰＥＧ２０００  １２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルの合成
一般に、反応は方式；
１２−ヒドロキシステアリン酸→１２−ヒドロキシステアリン酸エチル→１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エチル→ＭｅＰＥＧ２０００  １２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステル
に従った。
【００７４】
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル
は実施例１にしたがって得られた。
【００７５】
１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エチル
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル１０ｍｍｏｌ(３.２８ｇ)およびピリジン１５ｍｍｏｌ(１.２ｇ)をジムロート冷却器および乾燥管付きの２５０ｍｌ−丸底フラスコの中でＭＴＢＥ１００ｍｌ中に５０℃で溶解した。攪拌下に、塩化パルミトイル９.７ｍｍｏｌ(２.６７ｇ)をゆっくりと加えて、１６時間反応させた。温度を２５℃に下げて、水５０ｍｌを加えることにより、反応を停止した。
溶液を１％硫酸水溶液(３×２５ｍｌ)で抽出して、引き続いて飽和重炭酸ナトリウム水溶液(９０ｇ／ｌ、３×２５ｍｌ)および水(３×２５ｍｌ)で抽出を行った。残存する溶媒を蒸発により除去した。
放出されたパルミチン酸を０.１％酢酸で強化されたシクロヘキサン中の５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより除去して、引き続いて溶媒の蒸発を行った。１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エチルを８７％(４.６ｇ)の単離収率で回収した。
【００７６】
ＭｅＰＥＧ２０００  １２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステル
一部の１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エチル３.７６ｇ(６.９７ｍｍｏｌ)を、１００ｍｌ−丸底フラスコの中で、７.７ｍｍｏｌのＭｅＰＥＧ２０００(１５.３ｇ)およびNovozym 435の５０ｍｇと、真空(＜１ｍｍＨｇ)下に７５℃で２００時間攪拌して混合した。
酵素をろ過により除去して、生成物を、ＩＳＯ−２２６８[１９７２]にしたがって、室温で酢酸エチルおよび飽和食塩水溶液で抽出して、引き続いて溶媒の蒸発、乾燥酢酸エチル中への溶解、ろ過および蒸発を行った。ＭｅＰＥＧ２０００  １２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルを８０％(１４.０ｇ)の単離収率で回収した。
【実施例７】
【００７７】
ＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミチルオキシ−ステアリン酸エステルの合成
一般反応経路は：パルミチルアルコール→トルエン−４−スルホン酸パルミチル→１２−パルミチルオキシ−ステアリン酸エチル→ＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミチルオキシ−ステアリン酸エステル、である。
【００７８】
トルエン−４−スルホン酸パルミチル
パルミチルアルコール１０ｍｍｏｌおよびピリジン２０ｍｍｏｌを乾燥ジクロロメタン１００ｍｌ中に溶解する。塩化トルエン−４−スルホニル１０ｍｍｏｌをゆっくりと加えて、混合液を攪拌しながら４０℃で１時間加熱する。反応物を室温に冷却して、冷水２５ｍｌを加えて、反応を中止する。混合物を冷１％硫酸水溶液３×２５ｍｌで洗浄して、ピリジンを除去して、引き続いて冷水３×２５ｍｌで洗浄および蒸発を行って、トルエン−４−スルホン酸パルミチルが得られる。
【００７９】
１２−ヒドロキシステアリン酸エチル
は実施例１にしたがって得られる。
【００８０】
１２−パルミチルオキシ−ステアリン酸エチル
トルエン−４−スルホン酸パルミチル１０ｍｍｏｌ、１２−ヒドロキシステアリン酸エチル１０ｍｍｏｌ、無水炭酸カリウム１０ｍｍｏｌおよびヨウ化ナトリウム０.５ｍｍｏｌを乾燥アセトニトリル１００ｍｌ中に溶解して、攪拌しながら８１℃で６時間加熱する。反応液を室温に冷却する。溶媒を蒸発して、生成物をＭＴＢＥ中に懸濁して、冷水３×５０ｍｌで洗浄する。溶媒を蒸発して、１２−パルミチルオキシ−ステアリン酸エチルが得られる。
【００８１】
ＰＥＧ１５００モノ−(１２−パルミチルオキシ−ステアリン酸エステル)
１２−パルミチルオキシ−ステアリン酸エチル１０ｍｍｏｌを５００ｍｌ−丸底フラスコの中でＰＥＧ１５００の１００ｍｍｏｌおよび固定化カンジダ・アンタークチカリパーゼＢの１００ｍｇと真空(＜１ｍｍＨｇ)下に７５℃で４０時間攪拌して混合する。
酵素をろ過により除去して、生成物を、ＩＳＯ−２２６８[１９７２]にしたがって、室温で酢酸エチルおよび飽和食塩水溶液で抽出して、引き続いて溶媒の蒸発、乾燥酢酸エチル中への溶解およびろ過を行う。溶媒を蒸発して、ＰＥＧ１５００モノ−(１２−パルミチルオキシ−ステアリン酸エステル)が得られる。
【実施例８】
【００８２】
ＢｕＰＰＧ２５００  １２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステルの合成
一般反応経路は：１２−ヒドロキシステアリン酸→１２−ヒドロキシステアリン酸エチル→１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エチル→ＢｕＰＰＧ２５００  １２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステル、である。
【００８３】
１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エチル
は実施例３にしたがって得られる。
【００８４】
ＢｕＰＰＧ２５００  １２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステル
１２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エチル１０ｍｍｏｌおよび１０.５ｍｍｏｌのＢｕＰＰＧ２５００(平均分子量２５００ｇ／ｍｏｌのポリプロピレングリコールモノブチルエーテル)を５００ｍｌ−丸底フラスコの中でNovozym 435の５００ｍｇと真空(＜１ｍｍＨｇ)下に７５℃で１００時間攪拌して混合する。
酵素をろ過により除去して、ＢｕＰＰＧ２５００  １２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステルが得られる。
【実施例９】
【００８５】
さらなる実施例
下の表２にしたがうさらに別の化合物を、実施例１〜６で上で記載されたように、同一の酵素を伴う、同一原理の経路を用いて合成した。
【００８６】
【表２】
0004589917.tif 000004
単離収率は、脂肪酸反応物に基づいて計算されている。
作成された化合物の幾つかは、実施例１０〜１２で記載されたように、試験した。
【実施例１０】
【００８７】
溶血性活性
化合物の溶血性活性を評価するための静的方法を用いた。手短に言えば、イヌの血液を赤血球の懸濁液に加工して、次いで、それを種々の濃度の界面活性剤でインキュベート(３７℃で４０分間)する。インキュベーションを遠心分離により終了させて、その後に、今や異なる量のヘモグロビンを含有する血漿を除去して、分析することができる。基準物質(Tween 80)と比較して、種々のＭｅＰＥＧ−およびＰＥＧモノ−１２−アシルオキシ−ステアリン酸エステルについて得られた結果を、表３〜４に要約している。
【００８８】
【表３】
0004589917.tif 000005
【００８９】
【表４】
0004589917.tif 000006
【表５】
0004589917.tif 000007
【００９０】
表３および表４に示されるように、短いＰＥＧもしくはＭｅＰＥＧ鎖(１１００以下の平均分子量)を持つモノエステルは、低濃度で溶血を引き起こした。例えば、ＰＥＧ６００モノ−１２−プロピオニルオキシ−ステアリン酸エステル、ＰＥＧ６００モノ−１２−ヘキサノイルオキシ−ステアリン酸エステルおよびＰＥＧ６００モノ−１２−オクタノイルオキシ−ステアリン酸エステルは、１ｍＭ以下の濃度で全溶血を引き起こした。ＭｅＰＥＧ５５０モノ−１２−ヒドロキシステアリン酸エステル(ＵＳ  ６,３６５,６３７  Ｂ１、Zirnstein et alに開示された化合物を代表する化合物)は、１ｍＭで重大な溶血をそして５ｍＭで全溶血を引き起こした。さらに、市販製品のTween 80は、５ｍＭ付近およびそれ以上の濃度で溶血を引き起こした。ＰＥＧ６００モノエステルと対照的に、より長いＰＥＧおよびＭｅＰＥＧ鎖を持つモノエステルは、５ｍＭで既に全溶血を引き起こしたＰＥＧ１５００モノ−１２−ラウロイルオキシ−ステアリン酸エステルを除いて、１０ｍＭまで全く如何なる溶血も引き起こさなかった。
【実施例１１】
【００９１】
上皮細胞の相互作用
経上皮電気抵抗(ＴＥＥＲ)としてモニターされるＣＡＣＯ−２細胞の形の上皮細胞との可能な相互作用を幾つかの化合物について研究した。手短に言えば、６０分の平衡時間後に、供与者側の緩衝溶液を特定の濃度の界面活性剤を含有する緩衝溶液と交換して、次いで、８時間後にＴＥＥＲを測定した。
【００９２】
表５に、異なる濃度で試験されたＰＥＧ１５００モノ−１２−アシルオキシ−ステアリン酸エステル、ＭｅＰＥＧ１２００  １２−アシルオキシ−ステアリン酸エステル、ＭｅＰＥＧ２０００  １２−アシルオキシ−ステアリン酸エステルおよび幾らかの基準物質についての結果を示す。８時間後でさえ、上皮細胞とのいくらかの相互作用を示すＴＥＥＲの実質的な減少があったＰＥＧ１５００モノ−１２−ラウロイルオキシ−ステアリン酸エステルを除いて、およそ１２００以上の平均分子量に相当する長さを有するＰＥＧ鎖もしくはＭｅＰＥＧ鎖を持つモノエステルについてＴＥＥＲの変化が観察されないことが表５から明白である。これは、あまり耐容されないSolutol HS 15の短いＰＥＧ鎖と対照的である。
【００９３】
【表６】
0004589917.tif 000008
−は測定が実施されなかったことを意味する。
【実施例１２】
【００９４】
可溶化能力
二つの低溶解性(即ち、やや溶けにくいより以下)の医薬品分子、フェロジピンおよびグリセオフルビン、について本発明の化合物ならびに先行技術の化合物の可溶化能力を試験した。グリセオフルビンの水中の溶解度はおよそ８.１μｇ／ｍｌ、即ち２３μＭ[ Mosharraf and Nystroem, Int. J. Pharm., 1995, 122, 35-47]であり、そしてフェロジピンの水中の溶解度は０.０００８ｍｇ／ｍｌ(分子量＝３８４ｇ／ｍｏｌとして、２.１μＭ)である[Corswant et al, J.Pharm. Sci., 1998, 87(2), 200-8]。それぞれの界面活性剤の可溶化能力を、フェロジピン／グリセオフルビン濃度をＣＭＣ(臨界ミセル濃度)以上の界面活性剤濃度における界面活性剤濃度に対してプロットしたグラフの曲線の傾きから測定した。
グリセオフルビンについての可溶化能力
【数１】
0004589917.tif 000009
およびフェロジピンについての可溶化能力
【数２】
0004589917.tif 000010
式中
[Ｇ]＝グリセオフルビン濃度[Ｍ]
[Ｆ]＝フェロジピン濃度[Ｍ]
[Ｓ]＝界面活性剤濃度[Ｍ](ＣＭＣ以上)
【００９５】
結果を表６に要約する。これらの実験からの結論は、本発明のアシル化ＨＦＡ−ＰＥＧエステルは、先行技術基準、市販製品のSolutol HS 15、よりさらに良い可溶化能力を有することである。
【００９６】
【表７】
0004589917.tif 000011
【実施例１３】
【００９７】
フェロジピン注射溶液
ＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステル１２ｇを生理食塩水(注射用水中の０.９％ｗ／ｗＮａＣｌ)の９８８ｇの中に溶解する。フェロジピン３８０ｍｇを加えて、混合液を、全てのフェロジピンが溶解するまで、室温で攪拌する。溶液をガラスバイアルの中に無菌条件下に充填する。
【実施例１４】
【００９８】
フェロジピン５ｍｇを含有する徐放性錠剤
錠剤は親水性ゲルマトリックス原理にしたがって構築される。
第一に、フェロジピン(活性成分)、没食子酸プロピルおよび界面活性剤のＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルを含む、溶液Ｉ(下にしたがって)を作成した。
第二に、溶液ＩＩを調製した。
粉末(ＩＩＩ)を混合機の中で混合して、均一に成るまで、溶液Ｉで湿らせた。溶液ＩＩを加えて、均一に成るまで、混合を継続した。
得られた顆粒を乾燥オーブンの中で乾燥した。
その後に、それを粉砕して適当な粒子サイズ分布に篩い分けした。
【００９９】
得られた顆粒を粉末ＩＶ、滑沢剤、と混合して、混合を全部で３分間継続した。混合物を、９ｍｍの円形凹面きねを用いて、打錠機上で、２２７ｍｇの平均重量を有する錠剤に打錠した。
【０１００】
【表８】
0004589917.tif 000012
【０１０１】
７１Ｎの平均硬度を有する１７ｋＮで打錠された錠剤を、１００ｒｐｍで操作される、固定型バスケットを備えた、米国薬局方溶出第２装置(パドル)を用いて、フェロジピンの溶出について試験した。
溶出媒体として、０.４％臭化セチルトリメチルアンモニウムを添加した０.１Ｍリン酸緩衝液ｐＨ６.５の５００ｍｌを用いた。以下の結果が得られた。
【０１０２】
【表９】
0004589917.tif 000013
【０１０３】
得られた錠剤は、例えば着色ＨＰＭＣ溶液での被膜手順において、芯として使用され得る。
【実施例１５】
【０１０４】
フェロジピン５ｍｇを含有する徐放性錠剤
錠剤は親水性ゲルマトリックス原理にしたがって構築される。
錠剤は、実施例１４で使用された界面活性剤、ＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルがＭｅＰＥＧ２０００  １２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステルに交換されることを除いて、実施例１４にしたがって調製される。
【実施例１６】
【０１０５】
フェロジピン５ｍｇを含有する徐放性錠剤
錠剤は親水性ゲルマトリックス原理にしたがって構築される。
錠剤は、実施例１４で使用された界面活性剤、ＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルがＭｅＰＥＧ１２００  １２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルに交換されることを除いて、実施例１４にしたがって調製される。
【実施例１７】
【０１０６】
フェロジピン５ｍｇを含有する徐放性錠剤
錠剤は親水性ゲルマトリックス原理にしたがって構築される。
錠剤は、実施例１４で使用された界面活性剤、ＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルがＰＥＧ１５００モノ−１２−オレオイルオキシ−ステアリン酸エステルに交換されることを除いて、実施例１４にしたがって調製される。
【実施例１８】
【０１０７】
フェロジピン５ｍｇを含有する徐放性錠剤
錠剤は親水性ゲルマトリックス原理にしたがって構築される。
錠剤は、実施例１４で使用された界面活性剤、ＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステルがＢｕＰＰＧ２５００  １２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステルに交換されることを除いて、実施例１４にしたがって調製される。
【実施例１９】
【０１０８】
固体分散製剤
フェロジピン５ｇを溶融ＭｅＰＥＧ２０００  １２−ステアロイルオキシ−ステアリン酸エステル１５０ｇの中に溶解する。溶融物(継続して攪拌した)を硬質ゼラチンカプセルの中に充填する。カプセルを制御条件下に冷却する。
【実施例２０】
【０１０９】
非経腸使用のための乳化剤
フェロジピン０.５ｇおよび大豆レシチン１.０ｇを大豆油９８.５ｇの中に溶解する。ＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステル５ｇを注射用水８９５ｇの中に溶解する。粗い乳化液が、超タレックス攪拌機を用いて、油相を水相と攪拌することにより形成される。液滴のサイズは、高圧均一化によりさらに減少される。
【実施例２１】
【０１１０】
自己乳化性医薬品送達系(ＳＥＤＤＳ)
フェロジピン２ｇをMiglyol 812／ＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステル混合物(７０／３０ｗ／ｗ)の３００ｇの中に溶解する。次いで、混合液を軟質ゼラチンカプセルの中に充填する。
【実施例２２】
【０１１１】
坐薬製剤
フェロジピン５ｇをＰＥＧ１５００モノ−１２−パルミトイルオキシ−ステアリン酸エステル１７５ｇおよびＰＥＧ２０００の１７５ｇの溶融混合物の中に溶解して、錬剤を適切な型の中で成型する。