(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末Ｘ線回折図において下記の回折角(２θ)および相対強度を示す、3-[(1S)-1-(2-フルオロビフェニル-4-イル)エチル]-5-{[アミノ(モルフォリン-4-イル)メチレン]アミノ}イソキサゾールの結晶。
２θ（°）      相対強度(％)  
６．１          １００
１４．１            ５５
１６．０            ７４
１８．５            ３６
２０．０            ４３
２５．４            ３９      
【請求項２】
篩い下Ｄ５０％粒子径が１０μｍ以下である、粉砕された請求項１記載の3-[(1S)-1-(2-フルオロビフェニル-4-イル)エチル]-5-{[アミノ(モルフォリン-4-イル)メチレン]アミノ}イソキサゾールの結晶。
【請求項３】
請求項１または２記載の3-[(1S)-1-(2-フルオロビフェニル-4-イル)エチル]-5-{[アミノ(モルフォリン-4-イル)メチレン]アミノ}イソキサゾールの結晶を含有する医薬製剤。
【請求項４】
自己免疫疾患または炎症性疾患の治療薬または予防薬である請求項３記載の医薬製剤。
【請求項５】
3-[(1S)-1-(2-フルオロビフェニル-4-イル)エチル]-5-{[アミノ(モルフォリン-4-イル)メチレン]アミノ}イソキサゾールを親水性溶媒と水との混合溶媒から結晶化させることによる、請求項１記載の3-[(1S)-1-(2-フルオロビフェニル-4-イル)エチル]-5-{[アミノ(モルフォリン-4-イル)メチレン]アミノ}イソキサゾールの結晶の製造方法。
【請求項６】
親水性有機溶媒が2-プロパノール、メタノールまたはアセトンである請求項５記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、自己免疫疾患、炎症性疾患等の治療剤等として有用な結晶性イソキサゾール誘導体およびそれを含有する医薬製剤に関する。
背景技術
ＷＯ９８／４７８８０および特開平２０００−１８６０７７には、下記式１で表される３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−｛［アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾールが優れた自己免疫疾患、炎症性疾患等の治療剤等として有用であることが記載されている。
0004498679.tif 000002
しかし、これらの公報には式１のイソキサゾール誘導体について記載されているが、製剤工程で取り扱いが容易で安定な結晶性の式１のイソキサゾール誘導体およびそれを含有する医薬製剤についての記載はない。
また、医薬審第６４号（平成１２年２月１４日交付）で『含量が異なる経口固形製剤の生物学的同等性試験ガイドライン』が示され、含量が異なる経口固形製剤において、消化管の各ｐＨ値に対応するｐＨ１．２、３．０〜５．０および６．８の緩衝液、水などの各試験液で同等の溶出挙動を示すことが必要になった。溶出性の良好な製剤では、含量が異なっても同等の溶出挙動を示す製剤とすることは比較的容易であるが、式１のイソキサゾール誘導体のような水難溶性化合物の場合は水との親和性が低いため、その製剤の製造は一般に容易ではない。
発明の開示
本発明者らは、式１のイソキサゾール誘導体の製剤化を鋭意検討した。そして、式１のイソキサゾール誘導体には少なくとも２種の結晶型（α型結晶およびβ型結晶と称する）が存在することを見出した。式１のイソキサゾール誘導体は水難溶性であるため、製剤化に際して結晶を微粉砕することが望ましい。そこで、これらの結晶に対して、気流粉砕および水中に懸濁しながら粉砕する湿式粉砕を行った。試験例１〜４で行った試験結果を以下にまとめる。
（１）α型結晶の粉砕
気流粉砕では、粉砕装置内部へのα型結晶の固着が著しく、従って１回の粉砕で所望のサイズまで微細化することが困難で、数回にわたる繰り返し粉砕が必要であった。頻繁に固着物の除去操作が必要となるため、粉砕効率、収率は悪い。湿式粉砕法では、α型結晶が非常に嵩高くなり、水等への分散媒への分散が困難で、実質上製剤化に供することができなかった。高圧粉砕条件下での湿式粉砕では、水懸濁状態で処理している際、β型結晶に変化した。
（２）β型結晶の粉砕
β型結晶を気流粉砕したところ、粉砕装置内部への固着がほとんどなく、製剤工程での取り扱いが容易であり、連続粉砕が可能であった。湿式粉砕法でも、容易に粉砕ができ、より微細で製剤化に供給可能な微粉末を製造することが可能であった。また、これらの粉砕化で結晶態の変化はなかった。
以上の試験結果から、β型結晶である本発明の結晶性の式１のイソキサゾール誘導体が、製剤工程での取り扱いが非常に容易であり、安定であることが見出された。
さらに、本発明者らは、式１のイソキサゾール誘導体に対して２．５重量倍以上の水溶性賦形剤を含有する経口製剤は良好な溶出性を有することを見出した。
以上の知見に基づき、本発明者らは本発明を完成するに至った。本発明は、以下のとおりである。
［１］  粉末Ｘ線回折図において下記の回折角（２θ）および相対強度を示す結晶性３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−｛［アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾール。
0004498679.tif 000003
［２］  篩い下Ｄ５０％粒子径が１０μｍ以下である、粉砕された［１］記載の結晶性３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−｛［アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾール。
［３］  ［１］または［２］記載の結晶性３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−｛［アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾールを含有する医薬製剤。
［４］  自己免疫疾患または炎症性疾患の治療薬または予防薬である［３］記載の医薬製剤。
［５］  ３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−｛［アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾールを親水性溶媒と水との混合溶媒から結晶化させることによる結晶性３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−｛［アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾールの製造方法。
［６］  親水性有機溶媒が２−プロパノール、メタノールまたはアセトンである［５］記載の製造方法。
［７］  ［１］または「２］記載の結晶性３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾール、それに対して２．５重量倍以上の水溶性賦形剤、崩壊剤、および水溶性結合剤を含有する経口製剤。
［８］  それぞれの含量が、経口製剤に対して以下の重量比である［７］記載の経口製剤。
結晶性３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−｛［アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾール：２５％以下、
水溶性賦形剤：３５〜９０％、
崩壊剤      ：１〜４０％、
水溶性結合剤：１〜５％。
［９］  水溶性賦形剤が乳糖、マンニトール、エリスリトール、キシリトールまたはこれらの混合物である［７］または［８］記載の経口製剤。
［１０］  崩壊剤がクロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、クロスポピドン、カルメロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、デンプンまたはこれらの混合物である［７］〜［９］のいずれか記載の経口製剤。
［１１］  水溶性結合剤がヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、プルランまたはこれらの混合物である［７］〜［１０］のいずれか記載の経口製剤。
［１２］  錠剤である［７］〜［１１］のいずれか記載の経口製剤。
［１３］  自己免疫疾患または炎症性疾患の治療薬または予防薬である［７］〜［１２］のいずれか記載の医薬製剤。
［１４］  下記工程による［７］〜［１３］のいずれか記載の経口製剤の製造方法。
（１）水溶性賦形剤および崩壊剤を混合して混合物を調整する、
（２）［１］または［２］記載の結晶性３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−｛［アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾールを水溶性結合剤の水溶液に分散して懸濁液を調整する、
（３）（２）の懸濁液を（１）の混合物に散布して造粒物を調整する、そして
（４）（３）の造粒物を圧縮成形する。
［１５］  下記工程による［７］〜［１３］のいずれか記載の経口製剤の製造方法。
（１）［１］または［２］記載の結晶性３−［（１Ｓ）−１−（２−フルオロビフェニル−４−イル）エチル］−５−｛［アミノ（モルフォリン−４−イル）メチレン］アミノ｝イソキサゾール、水溶性賦形剤および崩壊剤を混合して混合物を調整する、
（２）水溶性結合剤の水溶液を調整する、
（３）（２）の水溶液を（１）の混合物に散布して造粒物を調整する、そして
（４）（３）の造粒物を圧縮成形する。
本発明の結晶性の式１のイソキサゾール誘導体（β型結晶）は、例えば、式１のイソキサゾール誘導体を、親水性溶媒と水との混合溶媒から結晶化させることで製造することができる。ここで、式１のイソキサゾール誘導体は、ＷＯ９８／４７８８０および特開平２０００−１８６０７７に記載された方法等で製造することができる。親水性溶媒としては、例えば、アルコール（２−プロパノール、エタノール、メタノール、ｔ−ブタノール等）、ケトン（アセトン、２−ブタノン等）、ニトリル（アセトニトリル、プロピオニトリル等）、アミド（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）およびこれらの混合溶媒等が挙げられ、好ましくは２−プロパノール、エタノール、メタノール等のアルコール、アセトン等のケトンが挙げられ、特に好ましくは２−プロパノールが挙げられる。芳香族炭化水素（トルエン、クロルベンゼン、ベンゼン等）、エーテル（ｔ−ブチルメチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジエチルエーテル等）、脂肪族炭化水素（シクロヘキサン、ヘキサン、ヘプタン等）、ハロゲン系溶媒（クロロホルム、塩化メチレン、１，２−ジクロロエタン等）、エステル（酢酸エチル等）を少量混合させることもできる。
親水性溶媒と水との混合溶媒の量は、使用する親水性溶媒の種類によって変化するが、その取扱いの点から、通常式１のイソキサゾール誘導体に対して約５〜約１００重量倍、好ましくは約１０〜約５０重量倍の範囲が挙げられる。親水性溶媒と水の重量比としては、使用する親水性溶媒の種類によって変化するが、例えば約１００：０〜約１：１０が挙げられ、好ましくは約１：１〜約１：５が挙げられる。結晶化に際しては、β型結晶の種晶を添加するのが望ましい。結晶化温度としては、例えば約７０〜約０℃の範囲が挙げられる。好ましくは、まず約７０〜約４０℃で溶解させ、段階的あるいは継続的に徐冷し、約２０〜約０℃で結晶化するのがよい。また、式１のイソキサゾール誘導体を親水性溶媒に溶解させ、後で水を添加して結晶化するのが好ましい。
純度の高い結晶性の式１のイソキサゾール誘導体を得るためには、一度リン酸塩等として結晶を単離した後、フリー化して結晶化するのがよい。その場合、式１のイソキサゾール誘導体の塩をフリー化し、反応溶媒が疎水性有機溶媒である場合は親水性有機溶媒に変換して、反応溶媒が親水性有機溶媒である場合はそのままで、同一反応槽中で結晶化することもできる。フリー化に使用する塩基としては、例えば水酸化アルカリ（水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等）、炭酸アルカリ（炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム等）等が挙げられ、その水溶液を用いることができる。
本発明のβ型結晶は、式１のイソキサゾール誘導体のリン酸塩またはα型結晶を、水中で一定時間、懸濁下で攪拌させることによっても得ることができる。リン酸塩の場合は、例えば５０℃で５時間程度攪拌することでβ型結晶が得られた。このことからも、β型結晶は、α型結晶に比較して熱力学的に安定であることが分かる。また、β型結晶の種晶を使用する限り、芳香族炭化水素（トルエン、ベンゼン等）、エーテル（ｔ−ブチルメチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジエチルエーテル等）、脂肪族炭化水素（シクロヘキサン、ヘキサン、ヘプタン等）、ハロゲン系溶媒（クロロホルム、塩化メチレン、１，２−ジクロロエタン等）、エステル（酢酸エチル等）等の疎水性有機溶媒からβ型結晶を製造することも可能である。例えばトルエンおよび２−プロパノールの混合溶媒に式１のイソキサゾール誘導体を溶解し、ヘキサン等を添加して結晶化することができる。
他方、α型結晶は、式１のイソキサゾール誘導体のリン酸塩を水に溶解させ、急冷することで得ることができる。
本発明の結晶性の式１のイソキサゾール誘導体は、これを医薬として用いるにあたり、経口的または非経口的（例えば、静脈内、皮下、もしくは筋肉内注射、局所的、経直腸的、経皮的、または経鼻的）に投与することができる。経口投与のための形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、散剤、液剤、シロップ剤または懸濁剤などが挙げられ、非経口投与のための形態としては、例えば、注射用水性剤もしくは油性剤、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、エアロゾル剤、坐剤、貼付剤などが挙げられる。これらの製剤は、従来公知の技術を用いて調製され、許容される通常の担体、賦形剤、結合剤、安定剤等を含有することができる。また、注射剤形で用いる場合には許容される緩衝剤、溶解補助剤、等張剤等を添加することもできる。
結晶性の式１のイソキサゾール誘導体の投与量、投与回数は、症状、年令、体重、投与形態によって異なるが、通常は成人（体重５０ｋｇ）に対して本発明化合物の有効成分量として、１日あたり約５〜２００ｍｇ、好ましくは１０〜５０ｍｇを１回または数回に分けて投与することができる。
結晶性の式１のイソキサゾール誘導体は、自己免疫疾患〔例えば、慢性関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、全身性強皮症、シェーグレン症候群、橋本病、重症筋無力症、バセドー病、アジソン病、若年型糖尿病（Ｉ型糖尿病）、自己免疫性血液性疾患（例えば、再生不良性貧血、溶血性貧血、突発性血小板減少症等）、潰瘍性大腸炎、慢性活動型肝炎、糸球体腎炎、間質性肺腺維症、多発性硬化症等〕、および炎症性疾患〔例えば、変形性関節炎、痛風、アトピー性皮膚炎、乾癬等〕等の疾患に対する治療薬・予防薬として有用である。
本発明の結晶性の式１のイソキサゾール誘導体、それに対して２．５重量倍以上の水溶性賦形剤、崩壊剤、および水溶性結合剤を含有させた経口製剤は、良好な溶出性を有する。好ましい経口製剤の形態としては、錠剤等が挙げられる。本経口製剤は、含量が異なってもｐＨ３．５の試験液で１５分で７５％以上の溶出性を示した。
好ましいこれらの重量比としては、例えば、経口製剤に対して以下の重量比のものが挙げられる。
結晶性の式１のイソキサゾール誘導体：２５％以下
水溶性賦形剤：３５〜９０％
崩壊剤      ：１〜４０％
水溶性結合剤：１〜５％
水溶性賦形剤としては、乳糖、ショ糖、フラクトオリド糖、パラチノース、ブドウ糖、マルトース、還元麦芽糖、粉飴、果糖、異性化乳糖、還元乳糖、蜂蜜糖等の糖、マンニトール、エリスリトール、キシリトール、マルチトール等の糖アルコール、およびこれらの混合物等が挙げられる。好ましい水溶性賦形剤としては、乳糖、マンニトール、エリスリトール、キシリトールまたはこれらの混合物等が挙げられる。
崩壊剤としては、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、クロスポピドン、カルメロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、コンスターチ、結晶セルロース、カルメロース、カルメロースナトリウム、無水リン酸水素カルシウム、リン酸カルシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、合成ヒドロタルサイト、合成ケイ酸アルミニウム、およびこれらの混合物等が挙げられる。好ましい崩壊剤としては、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、クロスポピドン、カルメロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、トウモロコシデンプン等の天然デンプンおよびこれらの混合物等が挙げられる。
水溶性結合剤としては、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、プルラン、デンプン、デキストリン、ゼラチン、およびこれらの混合物等が挙げられる。好ましい水溶性結合剤としては、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、プルラン、およびこれらの混合物等が挙げられる。
本経口製剤は、例えば以下の製造方法１および製造方法２と同様にして製造することができる。なお、製造に際し、結晶性の式１のイソキサゾール誘導体は微粉砕されていることが好ましく、その篩い下Ｄ５０％粒子径は好ましくは約１０μｍ以下、さらに好ましくは約７μｍ以下が挙げられ、例えば約１〜約７μｍの範囲が挙げられる。
製造方法１
（１）水溶性結合剤水溶液の調整
水溶性結合剤を精製水に溶解することで水溶液を調整することができる。溶解する際の温度としては、例えば約２０℃〜約９０℃の範囲が挙げられ、好ましくは約２０℃〜約７０℃の範囲が挙げられる。精製水の使用量としては、例えば水溶性結合剤に対して約５〜約５０重量倍、好ましくは約１０〜約３０重量倍が挙げられる。
（２）結晶性の式１のイソキサゾール誘導体の水懸濁液の調整
結晶性の式１のイソキサゾール誘導体を（１）の水溶性結合剤水溶液に分散させることで、懸濁液を調整することができる。分散する際の温度としては、例えば約２０℃〜約９０℃の範囲が挙げられ、好ましくは約２０℃〜約４０℃の範囲が挙げられる。
（３）造粒物の調整
水溶性賦形剤、崩壊剤およびデンプンを含有させる時はデンプンを造粒機に仕込み、混合する。続いて（２）の水懸濁液を散布しながら造粒する。造粒する際の給気温度としては、例えば約５０℃〜約９０℃の範囲が挙げられ、好ましくは約６０℃〜約８０℃の範囲が挙げられる。造粒時間としては、例えば約３０〜約１８０分間、好ましくは約４０〜約１５０分間が挙げられる。造粒方法としては、例えば、流動層造粒（Ｆｌｕｉｄ  Ｂｅｄ  Ｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ）、回転造粒（Ｒｏｔｏ  Ｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ）等が挙げられる。それに応じて、流動層造粒機（Ｆｌｕｉｄ  Ｂｅｄ  Ｇｒａｎｕｌａｔｏｒ）、回転流動層造粒機（Ｒｏｔｏ  Ｆｌｕｉｄ  Ｂｅｄ  Ｇｒａｎｕｌａｔｏｒ）等が使用できる。
（４）造粒物の乾燥
（３）の造粒物を減圧下または常圧下で乾燥する。この乾燥は赤外線水分計で観測される乾燥減量値が、例えば約３重量％以内、好ましくは約２重量％以内になるように行うことが好ましい。
（５）滑沢剤の配合
（４）の乾燥造粒物をそのまま打錠して錠剤にすることもできるが、滑沢剤を配合した後、打錠するのがより好ましい。滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、硬化油、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、ベヘン酸グリセリン、ステアリン酸グリセリン、ステアリルフマル酸ナトリウム等が挙げられる。滑沢剤の配合量としては、例えば錠剤全重量に対して約０．３〜約３重量％、好ましくは約０．５〜約１．５重量％が挙げられる。滑沢剤の配合は、（４）の乾燥造粒物に滑沢剤を加えて混合することで実施できる。混合装置としては、例えば攪拌ミキサー［タンブル］（Ｄｉｆｆｕｓｉｏｎｍｉｘｅｒｓ［Ｔｕｍｂｌｅ］）等が挙げられ、具体的にはタンブラーブレンダー（Ｔｕｍｂｌｅ  Ｂｌｅｎｄｅｒ）、Ｖブレンダー（Ｖ  Ｂｌｅｎｄｅｒ）、ダブルコーン（Ｄｏｕｂｌｅ  Ｃｏｎｅ）、ビンタンブラー（Ｂｉｎ  Ｔｕｍｂｌｅｒ）等を使用できる。
（６）打錠
（５）の混合物を常法により打錠して錠剤にする。打錠装置としては、例えば錠剤プレス（Ｔａｂｌｅｔ  Ｐｒｅｓｓ）等を使用できる。打錠硬度としては、例えば約５０〜約２００Ｎが挙げられる。
（７）フィルムコーティング
（６）の錠剤は、必要によりフィルムコーティングすることができる。コーティング剤としては、例えばヒドロキシプロリルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン等の基材と、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、トリアセチン、クエン酸トリエチル、グリセリン、グリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール等の可塑剤とを組み合わせたもの等が挙げられる。また、必要に応じて酸化チタン、マンニトール等の添加剤を加えてもよい。コーティング装置としては、例えばコーティングパン等が挙げられ、具体的には通気式コーティングシステム（Ｐｅｒｆｏｒａｔｅｄ  Ｃｏａｔｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ）等が挙げられる。
（８）錠剤の乾燥
（７）の錠剤を減圧下または常圧下で乾燥する。この乾燥は赤外線水分計で観測される乾燥減量値が、例えば約３重量％以内、好ましくは約２重量％以内になるように行うことが好ましい。
製造方法２
（１）水溶性結合剤水溶液の調整
製造方法１の（１）と同様にして、水溶性結合剤水溶液を調整する。
（２）造粒物の調整
結晶性の式１のイソキサゾール誘導体、水溶性賦形剤、崩壊剤およびデンプンを含有させる時はデンプンを造粒機に仕込み、混合する。続いて（１）の水溶液を散布しながら造粒する。造粒する際の給気温度および造粒方法等としては、製造方法１の（３）の造粒と同様にして実施できる。
（３）造粒物の乾燥、滑沢剤の配合、打錠、フィルムコーティングおよび錠剤の乾燥
製造方法１の（３）〜（８）と同様にして、錠剤を製造することができる。
実施例
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
実施例１
β型結晶の製造
式１のイソキサゾール誘導体４．０ｇを２−プロパノール４０．０ｇに加えて５０℃で結晶を完全に溶解させた。同温度で、水７０ｇを加えて攪拌し、β型結晶の種晶を加えた。同温度で水３０ｇを２５分間かけて滴下し、さらに３５分間攪拌した。５５分間かけて２５℃まで徐冷し、同温度で１時間攪拌した。析出した結晶をろ取した。得られた結晶を１０％２−プロパノール水溶液で洗浄した後、減圧下で乾燥させ、式１のイソキサゾール誘導体のβ型結晶３．８８ｇ（収率９７％）を針状結晶として得た。
実施例２
β型結晶の製造
式１のイソキサゾール誘導体のα型結晶２５０ｇを、トルエン５００ｇおよび２−プロパノール１８７．５ｇに加えて６０℃で結晶を完全に溶解させた。溶液をろ過し、２−プロパノール６２．５ｇで洗浄した。ろ液と洗液を合わせ、この溶液に５０℃でヘキサン２３１ｇを滴下した。β型結晶の種晶を加え、さらにヘキサン２０１３ｇを滴下し、同温度で３０分間攪拌し、放冷し、２０〜３０℃で１時間攪拌した。析出した結晶をろ取した。得られた結晶をヘキサン１Ｌで洗浄した後、減圧下で乾燥させ、式１のイソキサゾール誘導体のβ型結晶２３７．５ｇ（収率９５％）を針状結晶として得た。
実施例３
β型結晶の製造
式１のイソキサゾール誘導体のリン酸塩１２．５ｇ（２５．４ｍｍｏｌ）に、水５６．３ｇ、２−プロパノール９３．８ｇ、およびトルエン９３．８ｇを加えて３０℃に加熱して結晶を完全に溶解させた。この溶液に５％炭酸ナトリウム水溶液４１．３ｇ（１９．５ｍｍｏｌ）を同温度で滴下し、さらに３０分間撹拌した後、分液した。有機層に活性炭０．１ｇを加えて３０℃で３０分間撹拌し、活性炭をろ過し、活性炭を２−プロパノール２８．２ｇで洗浄した。得られた溶液を全量が８２．４ｇになるまで減圧下で濃縮し、２−ブロパノール２８２ｇを加え、再度、全量が７５．５ｇになるまで減圧下で濃縮した。得られた溶液に２−プロパノール３４．５ｇを加えた（溶液中の残存トルエン量をガスクロマトグラフィーにて計測したところ２−プロパノールに対して０．２２％であった）。本溶液に５０℃でさらに水１７５ｇおよびトルエン１．３ｇを加えて、４３℃に冷却し、β型結晶の種晶６ｍｇを加え、水７５ｇを滴下して結晶を析出させた。さらに４３℃で１時間保温したのち０℃に冷却し、０℃で１時間保温して、析出した結晶をろ取した。得られた結晶を１０％  ２−プロパノール水溶液６０ｇで洗浄した後、減圧下で乾燥させ、式１のイソキサゾール誘導体のβ型結晶９．８ｇ（２４．９ｍｍｏｌ，収率９８％）を得た。
参考例１
α型結晶の製造
式１のイソキサゾール誘導体のリン酸塩２．０ｇ（４．１ｍｍｏｌ）に水４０ｇを加え、５０℃に加熱して溶解させた。同温度で１分間保温したのち、直ちに３０℃に冷却して結晶をろ取した。得られた結晶を減圧下で乾燥させて、式１のイソキサゾール誘導体のα型結晶１．２２ｇ（３．１ｍｍｏｌ，収率７６％）を鱗片状結晶として得た。
実施例４
β型結晶およびα型結晶の粉末Ｘ線回折
粉末Ｘ線回折パターンは、Ｘ線回折装置ＲＩＮＴ２５００Ｖ（理学電機製）により、Ｃｕ・Ｋαを用いて測定した。この粉末Ｘ線回折における回折角（２θ）の値は標準的な精度を表しており、±０．１程度である。実施例１のβ型結晶の粉末Ｘ線回折における回折角（２θ）、相対強度は上記の表１のとおりである。参考例１のα型結晶の粉末Ｘ線回折における回折角（２θ）、相対強度は表２に示すとおりである。
0004498679.tif 000004
試験例１
結晶の乾式気流粉砕方法−１
結晶をＡ−Ｏジェットミル（セイシン企業社製）に投入し、押し込み圧力０．４９ＭＰａ、粉砕圧力０．４９ＭＰａにて気流粉砕を行った。α型結晶、β型結晶の各７ｇを、投入速度約１０〜２０ｇ／時で手動投入した場合の装置内部固着量を表３に示す。なお、投入速度は固着量にあまり影響しないことが確認されている。
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上記の結果から、α型結晶は気流粉砕時に装置内に相当量固着するにもかかわらず、β型結晶は、気流粉砕時に装置内での固着が殆どないことがわかる。
試験例２
結晶の乾式気流粉砕方法−２
結晶をジェットオーミルＪＯＭ０１０１型（セイシン企業社製）に投入し、押し込み圧力及び粉砕圧力（押し込み圧力と粉砕圧力は同じに設定）０．４４Ｍｐａ〜０．４９ＭＰａにて気流粉砕を行った。α型結晶、およびβ型結晶を、投入速度約１〜２ｋｇ／時で手動投入した場合の粉砕品の粒度分布を表４に示す。粒度分布測定にはレーザー回折粒度分布計（乾式測定）を用いた。さらに微粉化するには、繰り返し粉砕、または粉砕圧力を高める必要があることが確認されている。
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上記の結果から、１回の粉砕ではα型結晶は製剤化できる粒子径にまで粉砕できないが、β型結晶は、α型結晶に比べて著しく小さい粒子径の粉砕品が得られ、製剤化に適した粒子径に粉砕できることがわかる。
試験例３
結晶の乾式気流粉砕方法−３
α型結晶を製剤化可能な粒子径に粉砕するために要する粉砕回数および作業時間を検討した。結晶をジェットオーミルに投入し、気流粉砕を行った。原体結晶を、投入速度約１〜２ｋｇ／時で手動投入した場合の粉砕品の回収率、作業時間を表５に示す。粉砕圧力は、固着量にあまり影響しないことが確認されている。
β型結晶粉砕品と同等の粒度になるまでα型結晶を繰り返して粉砕したところ、６回の繰り返し粉砕が必要であった。
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上記により、β型結晶は、より小さい粉砕圧力で、繰り返し粉砕を要することなく、粉砕品を得ることができた。その結果、回収率もα型結晶よりも優れていた。また作業時間を大幅に短縮することができた。このようにβ型結晶の粉砕効率は著しく優れている。
試験例４
結晶の湿式高圧粉砕方法
結晶を水とともにマイクロフルイダイザーＭ１１０Ｙ型（みづほ工業社製）に投入し、高圧粉砕を行った。結晶を投入した場合の粒度分布を表６に示す。ここでα型結晶は粉砕途中で固化した。また、固化したα型結晶の固化品の含水率は８０％程度であり、懸濁に用いた水を完全に取り込んだものであった。粒度分布測定は、めのう乳鉢で水に分散して行った。粒度分布測定にはレーザー回折粒度分布計（湿式測定）を用いた。
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上記のように、α型結晶は凝集固化するため製剤に不適当なものしか与えないが、一方、β型結晶の湿式粉砕品は、そのまま製剤化の次工程に移行、または乾燥することが可能な粒子径に粉砕することができることがわかった。
製剤例１
錠剤（２０ｍｇ錠）
下記処方に従い、マンニット、コーンスターチ及びクロスカルメロースナトリウムを流動層造粒機に仕込み、水難溶性の有効成分を水溶性高分子結合剤溶液に分散懸濁した結合液にてスプレー造粒し、得られた造粒物にステアリン酸マグネシウムを配合後、打錠し、錠剤（２０ｍｇ錠）を製造した。
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製剤例２
錠剤（４０ｍｇ錠）
下記処方に従い、マンニット、コーンスターチ及びクロスカルメロースナトリウムを流動層造粒機に仕込み、水難溶性の有効成分を水溶性高分子結合剤溶液に分散懸濁した結合液にてスプレー造粒し、得られた造粒物にステアリン酸マグネシウムを配合後、打錠し、錠剤（４０ｍｇ錠）を製造した。
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製剤例３
フィルムコーティング錠
製剤例１で調製した裸錠をハイコーターＨＣＴ３０Ｎ（フロイント産業）に仕込み、皮膜量が３ｍｇになるようにコーティングを行い、下表の処方を有するフィルムコーティング錠（２０ｍｇ錠）を得た。
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比較製剤例
水溶性賦形剤を水難溶性薬物に対して２．５重量倍未満で配合した錠剤（裸錠）  下記処方に従い、マンニット、コーンスターチ及びクロスカルメロースナトリウムを流動層造粒機に仕込み、水難溶性の有効成分を水溶性高分子結合剤溶液に分散懸濁した結合液にてスプレー造粒し、得られた造粒物にステアリン酸マグネシウムを配合後、打錠し、錠剤（４０ｍｇ錠）を製造した。
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試験例５
溶出試験
製剤例１〜３および比較製剤例で調製した錠剤の溶出試験を、日本薬局方溶出試験法第２法に従い、以下の条件で行った。
試験液：希釈マックイルベイン緩衝液（ｄｉｌｕｔｅｄ  ＭｃＩｌｖａｉｎｅ  ｂｕｆｆｅｒ、ｐＨ３．５）
パドル回転数：５０ｒｐｍ、試験液：９００ｍｌ
以下に錠剤１錠の溶出試験結果を溶出率（％）で示す。
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製剤例１の錠剤（２０ｍｇ錠）では、１５分で溶出率８５％以上であり、極めて良好な溶出性を示した。
製剤例２の錠剤（４０ｍｇ錠）は製剤例１の処方の２倍量で調製したものであるが、１５分での溶出率が７８％であった。製剤例１の溶出率と比較して１５分における溶出率は±１０％の範囲内にあり、同等の溶出挙動を示すことが明らかとなった。
製剤例３のフィルムコーティング剤は製剤例１の錠剤にフィルムコーティングを施したものであるが、１５分後の溶出率が８６％と、製剤例１と同じ値を示したことから、フィルムコーティングにより溶出率の変化は無いものと考えられた。
比較製剤例は水溶性賦形剤を水難溶性薬物に対して２．５倍未満で配合したものであるが、１５分後の溶出率が６５％であり、本製剤は製剤例１〜３の製剤と比べ溶出性が明らかに劣るものと考えられた。
産業上の利用の可能性
本発明により、製剤化工程を効率的に実施できる、抗炎症作用を有するイソキサゾール誘導体の結晶態を提供することができる。