(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
架橋ポリ（メタ）アクリル酸（塩）粒子（Ａ）と、細胞接着性最小アミノ酸配列（Ｘ）を１分子中に少なくとも１個有する人工ポリペプチド（Ｐ）とからなり、
該（Ｐ）の含有量が、細胞培養用担体の乾燥重量を基準として、５００ｎｇ／ｇ〜５０ｍｇ／ｇであり、
保水量が１０〜３０ｇ／ｇであることを特徴とする細胞培養用担体。
【請求項２】
（Ａ）が、（メタ）アクリル酸及び／又は（メタ）アクリル酸のアルカリ金属塩を含む単量体水溶液を逆相懸濁重合して製造される粒子である請求項１記載の細胞培養用担体。
【請求項３】
（Ｘ）がＡｒｇ  Ｇｌｙ  Ａｓｐ配列である請求項１又は２に記載の細胞培養用担体。
【請求項４】
（Ｐ）が、さらに、補助アミノ酸配列（Ｙ）を１分子中に少なくとも１個有してなる人工ポリペプチドである請求項１〜３のいずれかに記載の細胞培養用担体。
【請求項５】
（Ｐ）が、（Ｘ）と（Ｙ）とを交互に化学結合してなる構造を有する請求項４に記載の細胞培養用担体。
【請求項６】
（Ｐ）が、化学結合及び／又は物理吸着で（Ａ）に結合している請求項１〜５のいずれかに記載の細胞培養用担体。
【請求項７】
架橋ポリ（メタ）アクリル酸（塩）粒子（Ａ）と、細胞接着性最小アミノ酸配列（Ｘ）を１分子中に少なくとも１個有する人工ポリペプチド（Ｐ）とを溶媒中で混合して細胞培養用担体を得る工程を含み、
該（Ｐ）の含有量が、細胞培養用担体の乾燥重量を基準として、５００ｎｇ／ｇ〜５０ｍｇ／ｇであり、
細胞培養用担体の保水量が１０〜３０ｇ／ｇであることを特徴とする細胞培養用担体の製造方法。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれかに記載の細胞培養用担体及び無血清培地を用いて、細胞を培養する工程を含む有用物質の生産方法。
【請求項９】
請求項１〜６のいずれかに記載の細胞培養用担体及び無血清培地を用いて、細胞を培養する工程を含む組織又は臓器の生産方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は細胞培養用担体に関する。さらに詳しくは、無血清培養の細胞増殖性に特に効果的な細胞培養用担体に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞培養用担体としては、動物由来のコラーゲンを有するデキストランビーズ（非特許文献１）、細胞接着シグナルを現す最小アミノ酸配列を有するポリペプチドを配したポリスチレンビーズ（特許文献１）等が知られている。
【０００３】
【非特許文献１】Microcarrier cell culture principles & methods（ファルマシアバイオテク（株）、１９９６年１０月１０日発行）２７〜３１頁等
【特許文献１】特開２００３−１８９８４８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかし、上記のビーズでは、無血清培養での細胞増殖性が不十分である。また、上記のデキストランビーズでは、動物由来成分を有するためウイルス等の感染因子の混入の危険性があるという問題がある。すなわち、本発明の目的は、無血清培養での細胞増殖性を向上させると共に、感染因子混入の危険性のない細胞培養用担体を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の細胞培養担体の特徴は、架橋ポリ（メタ）アクリル酸（塩）粒子（Ａ）｛以下、粒子（Ａ）と略する場合がある。｝と、細胞接着性最小アミノ酸配列（Ｘ）を１分子中に少なくとも１個有する人工ポリペプチド（Ｐ）とからなり、該（Ｐ）の含有量が、細胞培養用担体の乾燥重量を基準として、５００ｎｇ／ｇ〜５０ｍｇ／ｇであり、保水量が１０〜３０ｇ／ｇである点を要旨とする。
また、本発明の細胞培養用担体の製造方法の特徴は、粒子（Ａ）と、細胞接着性最小アミノ酸配列（Ｘ）を１分子中に少なくとも１個有する人工ポリペプチド（Ｐ）とを溶媒中で混合して細胞培養用担体を得る工程を含み、該（Ｐ）の含有量が、細胞培養用担体の乾燥重量を基準として、５００ｎｇ／ｇ〜５０ｍｇ／ｇであり、
細胞培養用担体の保水量が１０〜３０ｇ／ｇである点を要旨とする。
また、本発明の有用物質の生産方法は、上記の細胞培養用担体及び無血清培地を用いて、細胞を培養する工程を含む点を要旨とする。
また、本発明の組織又は臓器の生産方法は、上記の細胞培養用担体及び無血清培地を用いて、細胞を培養する工程を含む点を要旨とする。
【発明の効果】
【０００６】
本発明の細胞培養担体は、優れた細胞増殖性を発揮する。また、動物由来成分を含まないため、ウイルス等の感染因子混入の危険性がない。
本発明の細胞培養用担体の製造方法によると、上記の細胞培養用担体を容易に得ることができる。
本発明の有用物質の生産方法によると、優れた細胞増殖性を発揮するため、有用物質を大量に得ることができる。また、ウイルス等の感染因子の混入されていない有用物質を容易に得ることができる。
本発明の組織又は臓器の生産方法によると、優れた細胞増殖性を発揮するため、目的の組織や臓器を容易に得ることができる。また、ウイルス等の感染因子の混入されていない組織や臓器を容易に得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
＜架橋ポリ（メタ）アクリル酸（塩）粒子（Ａ）＞
（メタ）アクリル酸（塩）としては、アクリル酸、メタクリル酸、アクリル酸塩及びメタクリル酸塩を意味する。
アクリル酸塩及びメタクリル酸塩としては、アクリル酸又はメタクリル酸のアルカリ金属（リチウム、カリウム及びナトリウム等）塩、アルカリ土類金属（マグネシウム及びカルシウム等）塩及びアンモニウム塩等が用いられる。これらのうち、アルカリ金属塩が好ましく、さらに好ましくはナトリウム塩、リチウム塩及びカリウム塩、特に好ましくはナトリウム塩及びリチウム塩、最も好ましくはナトリウム塩である。
【０００８】
架橋ポリ（メタ）アクリル酸（塩）粒子（Ａ）は、（メタ）アクリル酸（塩）を主構成単位としてなるものであれば、（メタ）アクリル酸（塩）と共重合可能なその他のビニルモノマーとを共重合することができる。共重合可能なその他のビニルモノマーとしては、共重合性単量体（親水性ビニルモノマー及び疎水性ビニルモノマー）及び架橋性単量体等が含まれる。
共重合性単量体及び架橋性単量体としては、公知のもの（特開平１１−５８０８号公報、特開２００１−２９３５号公報、特開２００３−１６５８８３号公報、特開２００５−２４７９３１号公報、特開２００５−１８６０１５号公報等）が使用できる。
【０００９】
共重合性単量体を使用する場合、共重合性単量体単位の含有量（重量％）は、（メタ）アクリル酸（塩）単位の重量に基づいて、０．００１〜１０が好ましく、さらに好ましくは０．０１〜７、特に好ましくは０．０３〜５、最も好ましくは０．０５〜３である。
細胞増殖性の観点等から、共重合性単量体単位を含まないことが好ましい。
【００１０】
架橋性単量体のうち、細胞増殖性の観点等から、エチレン性不飽和基を２個以上有する架橋性単量体及び反応性官能基を２個以上有する架橋性単量体が好ましく、さらに好ましくは反応性官能基を２個以上有する架橋性単量体であり、特に好ましくはポリエチレンイミン、エチレングリコールジグリシジルエーテル、ジエチレングリコールジグリシジルエーテル、プロピレングリコールジグリシジルエーテル、グリセリン（ジ又はトリ）グリシジルエーテル、最も好ましくはエチレングリコールジグリシジルエーテルである。
【００１１】
架橋性単量体を使用する場合、架橋性単量体単位の含有量（重量％）は、（メタ）アクリル酸（塩）単位の重量に基づいて、０．００１〜５０が好ましく、さらに好ましくは０．００５〜１５、特に好ましくは０．０２〜５、最も好ましくは０．１〜２である。この範囲であると、細胞増殖性がさらに向上する。
【００１２】
粒子（Ａ）は、疎水性有機溶媒に、撹拌下、（メタ）アクリル酸（塩）、並びに必要により、共重合可能なその他のビニルモノマー、重合開始剤、連鎖移動剤及び／又はグラフト基材を連続的に供給して、公知の逆相懸濁重合させる方法（特開平１１−５８０８号公報、特開２００１−２９３５号公報、２００３−１６５８８３号公報、特開２００５−２４７９３１号公報及び特開２００５−１８６０１５号公報等）、（メタ）アクリル酸（塩）、並びに必要により、共重合可能なその他のビニルモノマー、重合開始剤、連鎖移動剤及び／又はグラフト基材を、公知の水溶液重合させる方法（特開２００５−０７５９８２号公報、特開２００５−０９５７５９号公報、特開２００５−０９７５６９号公報、特開２００５−１８６０１５号公報及び特開２００５−１８６０１６号公報等）等により製造することができる。
【００１３】
架橋ポリ（メタ）アクリル酸（塩）粒子（Ａ）は、必要に応じて、表面架橋剤により表面架橋処理を行うことができる。架橋ポリ（メタ）アクリル酸（塩）粒子の表面近傍を表面架橋剤で架橋処理することは、細胞増殖性の観点等で好適である。
【００１４】
表面架橋剤としては、例えば、特開昭５９−１８９１０３号公報等に記載の多価グリシジル（エチレングリコールジグリシジルエーテル及びグリセリンジグリシジルエーテル等が好ましい。）、特開昭５８−１８０２３３号公報及び特開昭６１−１６９０３号公報等に記載の多価アルコール、多価アミン、多価アジリジン及び多価イソシアネート、特開昭６１−２１１３０５号公報及び特開昭６１−２５２２１２号公報等に記載のシランカップリング剤、並びに特開昭５１−１３６５８８号公報及び特開昭６１−２５７２３５号公報等に記載の多価金属等が挙げられる。これらの表面架橋剤のうち、カルボキシル（塩）基と強い共有結合を形成して耐熱性に優れるという観点から、多価グリシジル、多価アミン及びシランカップリング剤が好ましく、さらに好ましくは多価グリシジル及びシランカップリング剤、特に好ましくは多価グリシジルである。
【００１５】
表面架橋処理をする場合、表面架橋剤の量（重量％）は、表面架橋剤の種類、架橋させる条件等により種々変化するが、表面架橋処理前の架橋ポリ（メタ）アクリル酸（塩）の重量に基づいて、０．００２〜８が好ましく、さらに好ましくは０．０１〜４、特に好ましくは０．０５〜２、最も好ましくは０．０５〜１である。
【００１６】
表面架橋処理を行う方法としては、従来公知の方法が適用できる（たとえば、特開平１１−５８０８号公報、特開２００１−２９３５号公報、特開２００３−１６５８８３号公報、特開２００５−２４７９３１号公報及び特開２００５−１８６０１５号公報）。
【００１７】
粒子（Ａ）は、必要により乾燥処理、粉砕処理及び／又は分級処理される。乾燥処理する方法は特に限定されず、５０〜２３０℃の温度の熱風で乾燥する方法、５０〜２３０℃に加熱されたドラムドライヤー等の使用による薄膜乾燥法、（加熱）減圧乾燥法、凍結乾燥法及び赤外線による乾燥法等が使用できる。粉砕処理する方法は特に限定されず、通常の装置（ハンマー式粉砕機、衝撃式粉砕機、ロール式粉砕機及びジェット気流式粉砕機等）を用いて粉砕できる。また分級処理する方法も特に限定されず、通常の装置（乾式振動篩い機、湿式振動篩い機及び風力分球機等）を用いて分級できる。
【００１８】
粒子（Ａ）の外形状は、球状、針状、扁平（楕円）状（紡錘状）、薄片状、ブドウ房状、不定形破砕状及び繊維状のいずれでもよいが、細胞増殖性の観点等から、球状及び扁平（楕円）状（紡錘状）が好ましく、さらに好ましくは球状である。すなわち、粒子（Ａ）の好ましい形態は、ビーズである。
【００１９】
粒子（Ａ）を生理食塩水で膨潤させて得た膨潤粒子の体積平均粒子径（μｍ）は、細胞増殖性の観点等から、１０〜２０００が好ましく、さらに好ましくは２５〜１０００、特に好ましくは５０〜５００、最も好ましくは１００〜３００である。
なお、膨潤粒子の体積平均粒子径は、粒子（Ａ）１重量部を生理食塩水（０．９重量％）１００重量部中に、２５℃で６０分間浸漬させることにより調製される膨潤粒子を、ＪＩＳ  Ｚ８８２５−１：２００１に準拠して、レーザー式粒度分布測定装置（例えば、堀場製作所製ＬＡ−９２０、分散媒：生理食塩水、測定温度：２５℃）により測定できる。
【００２０】
粒子（Ａ）の生理食塩水に対する保水量（ｇ／ｇ）（以下、保水量）は、細胞増殖性の観点等から、２〜５０が好ましく、さらに好ましくは５〜４０、特に好ましくは１０〜３０であり、最も好ましくは１０〜２５である。
なお、保水量は、次の方法により測定される。生理食塩水約１００ｍＬを入れたビーカーに、攪拌しながら乾燥した架橋ポリ（メタ）アクリル酸（塩）粒子１．０ｇを投入してあらかじめ膨潤させて膨潤粒子を得た後、目開き５３μｍのナイロン網で作製したティーバッグ（縦２０ｃｍ、横１０ｃｍ）に移し、過剰の生理食塩水中に６０分間浸漬する。次いで、膨潤粒子をティーバッグごと遠心脱水機に入れて、１５０Ｇで９０秒間遠心脱水を行い、余剰水を取り除く。遠心脱水後の重量（ｇ２）を測定し、次式から算出した値を保水量とする（参考：ＪＩＳ  Ｋ７２２３−１９９６）。
（保水量）＝（ｇ２）−１．０
【００２１】
粒子（Ａ）としては、市場から容易に入手でき、アクアパール（登録商標）シリーズ｛サンダイヤポリマー（株）｝、サンフレッシュ（登録商標）シリーズ｛三洋化成工業（株）｝、アクアキープ（登録商標）シリーズ｛住友精化（株）｝、アロンザップ（登録商標）シリーズ（東亜合成（株））及びアクアリック（登録商標）シリーズ（（株）日本触媒製）等が挙げられる。これらのうち、アクアパールシリーズ及びアクアキープシリーズが好ましく、さらに好ましくはアクアパールシリーズである。
【００２２】
＜人工ポリペプチド（Ｐ）＞
「細胞接着性」とは、特定の最小アミノ酸配列が細胞のインテグリンレセプターに認識され、細胞が基材に接着しやすくなる性質を意味する（大阪府立母子医療センター雑誌、第８巻 第１号、５８〜６６頁、１９９２年）。
細胞接着性最小アミノ酸配列（Ｘ）としては、「病態生理、第９巻 第７号、５２７〜５３５頁、１９９０年」や「大阪府立母子医療センター雑誌、第８巻 第１号、５８〜６６頁、１９９２年」に記載されているもの等が用いられる。
【００２３】
これらの最小アミノ酸配列（Ｘ）の中で、Arg Gly Asp配列、Leu Asp Val配列、Leu Arg Glu配列、His Ala Val配列、Arg Glu Asp Val配列（１）、Tyr Ile Gly Ser Arg配列（２）、Pro Asp Ser Gly Arg配列（３）、Arg Tyr Val Val Leu Pro Arg配列（４）、Leu Gly Thr Ile Pro Gly配列（５）、Arg Asn Ile Ala Glu Ile Ile Lys Asp Ile配列（６）、Ile Lys Val Ala Val配列（７）、Asp Gly Glu Ala 配列（８）、Gly Val Lys Gly Asp Lys Gly Asn Pro Gly Trp Pro Gly Ala Pro配列（９）、Gly Glu Phe Tyr Phe Asp Leu Arg Leu Lys Gly Asp Lys配列（１０）、Tyr Lys Leu Asn Val Asn Asp Ser配列（１１）、Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys配列（１２）、Asn Arg Trp His Ser Ile Tyr Ile Thr Arg Phe Gly配列（１３）、Thr Trp Tyr Lys Ile Ala Phe Gln Arg Asn Arg Lys配列（１４）、Arg Lys Arg Leu Gln Val Gln Leu Ser Ile Arg Thr（１５）及びPro His Ser Arg Asn（１６）からなる群より選ばれる少なくとも１種が好ましく、細胞接着性の観点等から、さらに好ましくはArg Gly Asp配列、Tyr Ile Gly Ser Arg配列（２）、Ile Lys Val Ala Val配列（７）、Arg Lys Arg Leu Gln Val Gln Leu Ser Ile Arg Thr（１５）及びPro His Ser Arg Asn（１６）からなる群より選ばれる少なくとも１種、特に好ましくはArg Gly Asp配列である。
これらの最小アミノ酸配列（Ｘ）の両端には、他のアミノ酸｛アラニン（Ala）、グリシン（Gly）、セリン（Ser）、トレオニン（Thr）、バリン（Val）、ロイシン（Leu）、イソロイシン（Ile）、システイン（Cys）、メチオニン（Met）、フェニルアラニン（Phe）、チロシン（Tyr）、プロリン（Pro）、トリプトファン（Trp）、アスパラギン（Asn）、グルタミン（Gln）、アスパラギン酸（Asp）、グルタミン酸（Glu）、アルギニン（Arg）、リジン（Lys）及びヒスチジン（His）等｝を含んでいてもよい。
【００２４】
人工ポリペプチド（Ｐ）は、最小アミノ酸配列（Ｘ）を１分子中に少なくとも１個有すればよいが、細胞接着性の観点等から、１分子中に１〜５０個有するものが好ましく、さらに好ましくは２〜５０個、つぎに好ましくは３〜３０個、特に好ましくは４〜２０個有するもの、最も好ましくは５〜１５個有するものである。なお、２種以上の最小アミノ酸配列（Ｘ）が一分子中に含まれてもよい。
【００２５】
人工ポリペプチド（Ｐ）は、最小アミノ酸配列（Ｘ）以外に、人工ポリペプチド（Ｐ）の熱安定性向上の観点等から、補助アミノ酸配列（Ｙ）を有することが好ましい。
【００２６】
補助アミノ酸配列（Ｙ）としては、最小アミノ酸配列（Ｘ）以外のアミノ酸配列が使用でき、人工ポリペプチド（Ｐ）の熱安定性の観点等から、Gly 及び／又はAlaを有する配列が好ましい。
補助アミノ酸配列（Ｙ）としては、（Gly Ala）a 配列、（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）b配列、（Gly Ala Gly Ala Gly Tyr）c配列、（Gly Ala Gly Val Gly Tyr）ｄ配列、（Gly Ala Gly Tyr Gly Val）e配列、｛Asp Gly Gly (Ala)f Gly Gly Ala｝g配列、（Gly Val Pro Gly Val）h配列、（Gly）i配列、（Ala）j配列、（Gly Gly Ala）k配列、（Gly Val Gly Val Pro）ｍ配列、（Gly Pro Pro）ｎ配列、（Gly Ala Gln Gly Pro Ala Gly Pro Gly）ｏ配列、（Gly Ala Pro Gly Ala Pro Gly Ser Gln Gly Ala Pro Gly Leu Gln）ｐ配列及び／又は（Gly Ala Pro Gly Thr Pro Gly Pro Gln Gly Leu Pro Gly Ser Pro）ｑ配列を有する配列等が含まれる。これらのうち、（Gly Ala）a配列、（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）b配列、（Gly Ala Gly Ala Gly Tyr）c配列、（Gly Ala Gly Val Gly Tyr）d配列、（Gly Ala Gly Tyr Gly Val）e、｛Asp Gly Gly (Ala)f Gly Gly Ala｝g配列、（Gly Val Pro Gly Val）h配列、（Gly Val Gly Val Pro）ｍ配列及び／又は（Gly Pro Pro）ｎ配列を有するものが好ましく、さらに好ましくは（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）b配列、（Gly Val Pro Gly Val）h配列、（Gly Val Gly Val Pro）ｍ配列及び／又は（Gly Pro Pro）ｎ配列を有するもの、特に好ましくは（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）b配列を有するものである。
なお、aは５〜１００の整数、bは１〜３３の整数、ｃ、ｄ及びｅは２〜３３の整数、fは１〜１９４の整数、ｇは｛１｝〜｛２００／（６＋ｆ）｝の小数点以下を切り捨てした整数、hは２〜４０の整数、i及びjは１０〜２００の整数、kは３〜６６の整数、ｍは２〜４０の整数、ｎは３〜６６の整数、ｏは１〜２２の整数、ｐ及びｑは１〜１３の整数である。
【００２７】
補助アミノ酸配列（Ｙ）は、グリシン(Gly)及び／又はアラニン(Ala)を含むことが好ましい。グリシン（Gly）及びアラニン（Ala）を含む場合、これらの合計含有割合（％）は、補助アミノ酸配列（Ｙ）の全アミノ酸個数に基づいて、１０〜１００が好ましく、さらに好ましくは２０〜９５、特に好ましくは３０〜９０、最も好ましくは４０〜８５である。この範囲であると、熱安定性がさらに良好となる。
グリシン（Gly）及びアラニン（Ala）の両方を含む場合、これらの含有個数割合（Gly／Ala）は、０．０３〜４０が好ましく、さらに好ましくは０．０８〜１３、特に好ましくは０．２〜５である。この範囲であると、熱安定性がさらに良好となる。
【００２８】
補助アミノ酸配列（Ｙ）には、以上の例示の他に、他のアミノ酸｛アラニン（Ala）、グリシン（Gly）、セリン（Ser）、トレオニン（Thr）、バリン（Val）、ロイシン（Leu）、イソロイシン（Ile）、システイン（Cys）、メチオニン（Met）、フェニルアラニン（Phe）、チロシン（Tyr）、プロリン（Pro）、トリプトファン（Trp）、アスパラギン（Asn）、グルタミン（Gln）、アスパラギン酸（Asp）、グルタミン酸（Glu）、アルギニン（Arg）、リジン（Lys）及びヒスチジン（His）等｝を含んでいてもよい。
【００２９】
（Gly Ala）a配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（１７）〜（１９）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）b配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（２０）〜（２２）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Ala Gly Ala Gly Tyr）c配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（２３）〜（２５）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Ala Gly Val Gly Tyr）d配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（２６）〜（２８）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Ala Gly Tyr Gly Val）e配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（２９）〜（３１）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
｛Asp Gly Gly (Ala)f Gly Gly Ala｝g配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（３２）〜（３４）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Val Pro Gly Val）h配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（３５）〜（３８）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly）i配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（３９）〜（４１）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Ala）j配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（４２）〜（４４）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Gly Ala）k配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（４５）〜（４７）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Val Gly Val Pro）ｍ配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（４８）〜（５０）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Pro Pro）ｎ配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（５１）〜（５３）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Ala Gln Gly Pro Ala Gly Pro Gly）ｏ配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（５４）〜（５６）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Ala Pro Gly Ala Pro Gly Ser Gln Gly Ala Pro Gly Leu Gln）ｐ配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（５７）〜（５９）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
（Gly Ala Pro Gly Thr Pro Gly Pro Gln Gly Leu Pro Gly Ser Pro）ｑ配列を有する補助アミノ酸配列としては、配列番号（６０）〜（６２）で表されるアミノ酸配列等が挙げられる。
【００３０】
これらの補助アミノ酸配列のうち、配列番号（１７）、（１８）、（２０）、（２１）、（２２）、（２３）、（２４）、（２６）、（２７）、（２９）、（３０）、（３２）、（３３）、（３４）、（３５）、（３６）、（３８）、（３９）、（４０）、（４２）、（４３）、（４５）、（４６）、（４８）、（４９）、（５１）、（５２）、（５４）、（５５）、（５７）、（５８）、（６０）又は（６１）で表されるアミノ酸配列が好ましく、さらに好ましくは配列番号（１８）、（２０）、（２１）、（２２）、（２４）、（２７）、（３０）、（３４）、（３５）、（３６）、（３７）、（３８）、（４０）、（４３）、（４６）、（４９）、（５２）、（５５）、（５８）又は（６１）で表されるアミノ酸配列、特に好ましくは配列番号（２０）、（２１）又は（３８）で表されるアミノ酸配列である。
【００３１】
補助アミノ酸配列（Ｙ）を含む場合、（Ｙ）の含有個数は、熱安定性の観点等から、人工ポリペプチド（Ｐ）1分子中に、２〜５０が好ましく、さらに好ましくは３〜３０、特に好ましくは４〜２０、最も好ましくは５〜１５である。また、人工ポリペプチド（Ｐ）は、２種以上の補助アミノ酸配列（Ｙ）を含んでもよい。
【００３２】
人工ポリペプチド（Ｐ）は、分岐鎖を含んでいてもよく、一部が架橋されていてもよく、環状構造を含んでいてもよい。しかし、人工ポリペプチド（Ｐ）は、架橋されていないことが好ましく、さらに好ましくは架橋されていない直鎖構造、特に好ましくは環状構造を持たず架橋されていない直鎖構造である。なお、直鎖構造には、β構造（直鎖状ペプチドが折れ曲がってこの部分同士が平行に並び、その間に水素結合が作られる二次構造）も含まれる。
【００３３】
人工ポリペプチド（Ｐ）は、細胞接着性及び熱安定性の観点等から、最小アミノ酸配列（Ｘ）と補助アミノ酸配列（Ｙ）とが交互に化学結合してなる構造であることが好ましい。この場合、最小アミノ酸配列（Ｘ）と補助アミノ酸配列（Ｙ）との繰り返し単位（Ｘ−Ｙ）の数（個）は、細胞接着性の観点等から、１〜５０が好ましく、さらに好ましくは２〜４０、特に好ましくは３〜３０、最も好ましくは４〜２０である。
また、最小アミノ酸配列（Ｘ）と補助アミノ酸配列（Ｙ）との含有個数は同じでも異なっていてもよい。異なっている場合は、いずれかの含有個数が他方の含有個数より１個少ないことが好ましい｛この場合、補助アミノ酸配列（Ｙ）が少ないことが好ましい｝。人工ポリペプチド（Ｐ）中の最小アミノ酸配列（Ｘ）と補助アミノ酸配列（Ｙ）との含有個数割合（Ｘ／Ｙ）は、０．５〜２が好ましく、さらに好ましくは０．９〜１．４、特に好ましくは１〜１．３である。
また、人工ポリペプチド（Ｐ）の末端部分（最小アミノ酸配列（Ｘ）又は補助アミノ酸配列（Ｙ）からペプチド末端まで）に他のアミノ酸を含んでもよい。他のアミノ酸を含む場合、その含有個数は、人工ポリペプチド（Ｐ）１個当たり、１〜１０００個が好ましく、さらに好ましくは３〜３００、特に好ましくは１０〜１００である。
【００３４】
人工ポリペプチド（Ｐ）の重量平均分子量（以下、Ｍｗ）は、１，０００〜１，０００，０００が好ましく、さらに好ましくは２，０００〜７００，０００、特に好ましくは３，０００〜４００，０００、最も好ましくは４，０００〜２００，０００である。
なお、人工ポリペプチド（Ｐ）のＭｗは、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動）法により、測定サンプル｛ポリペプチド等｝を分離し、泳動距離を標準物質と比較する方法等の公知の方法によって求められる（以下、同じ）。
【００３５】
好ましい人工ポリペプチド（Ｐ）の一部を以下に例示する。
（１）最小アミノ酸配列（Ｘ）がArg Gly Asp配列（ｘ１）の場合
Arg Gly Asp配列（ｘ１）の１３個と（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）9配列（２１）（ｙ１）の１２個とを有し、これらが交互に化学結合してなる構造を有するＭｗ約１１万のポリペプチド｛「プロネクチンＦ」、プロネクチンは三洋化成工業（株）の登録商標（日本及び米国）である。三洋化成工業（株）製＜以下同じ＞｝；（ｘ１）の５個と（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）3配列（２０）（ｙ２）の５個とを有しこれらが交互に化学結合してなる構造を有するＭｗ約２万のポリペプチド（「プロネクチンＦ２」）；（ｘ１）の３個と（Gly Val Pro Gly Val）2 Gly Gly （Gly Ala Gly Ala Gly Ser）3配列（３８）（ｙ３）の３個とを有しこれらが交互に化学結合してなる構造を有するＭｗ約１万のポリペプチド（「プロネクチンＦ３」）等。
【００３６】
（２）最小アミノ酸配列（Ｘ）がIle Lys Val Ala Val配列（ｘ２）の場合
プロネクチンＦ、プロネクチンＦ２又はプロネクチンＦ３のArg Gly Asp配列（ｘ１）をIle Lys Val Ala Val配列（７）（ｘ２）に変更した「プロネクチンＬ」、「プロネクチンＬ２」、又は「プロネクチンＬ３」等。
【００３７】
（３）最小アミノ酸配列（Ｘ）がTyr Ile Gly Ser Arg配列（ｘ３）の場合
プロネクチンＦ、プロネクチンＦ２又はプロネクチンＦ３のArg Gly Asp配列（ｘ１）をTyr Ile Gly Ser Arg配列（ｘ３）に変更した「プロネクチンＹ」、「プロネクチンＹ２」、又は「プロネクチンＹ３」等。
【００３８】
また、（１）〜（３）のポリペプチドの他、宝酒造（株）製ＲｅｔｒｏＮｅｃｔｉｎ（リコンビナントヒトフィブロネクチンＣＨ−２９６）｛最小アミノ酸配列（Ｘ）としてArg Gly Asp配列（ｘ１）及びLeu Asp Val配列を含有するＭｗ約6万のポリペプチド｝、同ＲＧＤＳ−Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ｛最小アミノ酸配列（Ｘ）としてArg Gly Asp配列（ｘ１）を含有するＭｗ約３万のポリペプチド｝も好ましく使用できる｛ただし、これらのポリペプチドは天然に由来し、補助アミノ酸配列（Ｙ）が含まれていない。よって、熱安定性等が上記の（１）〜（３）よりも劣る。また、これらのポリペプチドのアミノ酸配列は特開平２−３１１４９８号に開示されている。｝。
【００３９】
人工ポリペプチド（Ｐ）は、人工的に合成されるものであり、例えば、有機合成法（固相合成法、液相合成法等）及び生化学的合成法［遺伝子組換え微生物（酵母、細菌、大腸菌等）］等によって製造する。すなわち、人工ポリペプチド（Ｐ）は、動物由来のコラーゲンやフィブロネクチン等の細胞接着性蛋白質を含まない。
【００４０】
有機合成法に関しては、例えば、日本生化学会編「続生化学実験講座２、タンパク質の化学（下）」第６４１〜６９４頁（昭和６２年５月２０日；株式会社東京化学同人発行）に記載されている方法等が用いられる。生化学的合成法に関しては、例えば、特表平３−５０２９３５号公報に記載されている方法等が用いられる。人工ポリペプチド（Ｐ）を容易に合成できる点で、遺伝子組換え微生物による生化学的合成法が好ましく、特に好ましくは遺伝子組換え大腸菌を用いて合成する方法である。
【００４１】
本発明の細胞培養用担体において、粒子（Ａ）と人工ポリペプチド（Ｐ）とは、通常、化学結合（イオン結合、水素結合及び／又は共有結合等）及び／又は物理吸着（ファンデルワールス力による吸着）によって結合される。粒子（Ａ）と人工ポリペプチド（Ｐ）とが強固に結合される点で、化学結合が好ましく、さらに好ましくは共有結合である。
【００４２】
粒子（Ａ）に人工ポリペプチド（Ｐ）を共有結合させる方法としては、例えば、「ペプチド合成の基礎と実験、平成９年１０月５日、丸善株式会社発行」に記載の方法等が挙げられ、具体的には、以下の（１）〜（３）の通りである。
（１）人工ポリペプチド（Ｐ）のうち１級アミノ基又は２級アミノ基を有するものと粒子（Ａ）のカルボキシル基とを反応させる場合、カルボキシル基を予めカルボジイミド化合物と反応させ、アシルイソ尿素｛Ｒ’−Ｎ＝Ｃ（ＯＣＯＲ）−ＮＨ−Ｒ’（−ＯＣＯＲが細胞培養用担体に由来する部分）｝を得た後、人工ポリペプチド（Ｐ）のうち１級アミノ基又は２級アミノ基を有するものをこのアシルイソ尿素に加えることによって、粒子（Ａ）と人工ポリペプチド（Ｐ）とをアミド結合できる。
カルボジイミド化合物としては、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド及び１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩等が挙げられる。
【００４３】
（２）人工ポリペプチド（Ｐ）のうち１級アミノ基又は２級アミノ基を有するものと粒子（Ａ）のうちヒドロキシル基を有するもの｛共重合単量体として、ヒドロキシル基含有モノマーを用いたもの｝とを反応させる場合、粒子（Ａ）のヒドロキシル基を予めカルボニルジイミダゾール化合物と反応させ、イミダゾール誘導体｛Ｒ−Ｉｍ、Ｉｍはイミダゾリン環、Ｒが粒子（Ａ）に由来｝を得た後、人工ポリペプチド（Ｐ）のうち１級アミノ基又は２級アミノ基を有するものをこのイミダゾール誘導体に加えることによって、粒子（Ａ）と人工ポリペプチド（Ｐ）とをＮ−Ｃ結合できる。
カルボニルジイミダゾール化合物としては、Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール等が挙げられる。
【００４４】
（３）人工ポリペプチド（Ｐ）のうちヒドロキシル基を有するものと粒子（Ａ）のカルボキシル基とを反応させる場合、粒子（Ａ）のカルボキシル基を予めカルボジイミド化合物と反応させ、アシルイソ尿素を得た後、人工ポリペプチド（Ｐ）のうちヒドロキシル基を有するものをこのアシルイソ尿素に加えることによって、粒子（Ａ）とポリペプチドとをエステル結合できる。
【００４５】
人工ポリペプチド（Ｐ）を粒子（Ａ）に、物理吸着、イオン結合及び／又は水素結合させる方法としては、溶媒等に人工ポリペプチド（Ｐ）と粒子（Ａ）とを投入し、混合して作製する方法等が挙げられる。溶媒としては特に制限はないが、無機塩、有機酸塩、酸及び／又は塩基を０．００１〜５０重量％（好ましくは０．００５〜３０重量％、さらに好ましくは０．０１〜１０重量％）含有する水溶液等（特開２００３−１８９８４８等に記載）が使用できる。
これらの溶媒の中で、無機塩、酸及び／又は塩基を含有する水溶液、並びに水が好ましく、さらに好ましくは無機塩、酸及び／又は塩基を含有する水溶液、並びにイオン交換蒸留水、特に好ましくは無機塩、酸及び／又は塩基を含有する水溶液である。
【００４６】
人工ポリペプチド（Ｐ）の含有量は、細胞接着性を向上させる観点等より、細胞培養用担体の乾燥重量あたり、５ｎｇ／ｇ〜５００ｍｇ／ｇが好ましく、さらに好ましくは５０ｎｇ／ｇ〜５０ｍｇ／ｇ、次に好ましくは５００ｎｇ／ｇ〜５０ｍｇ／ｇ、次に好ましくは５００ｎｇ／ｇ〜２０ｍｇ／ｇ、特に好ましくは５００ｎｇ／ｇ〜５ｍｇ／ｇ、最も好ましくは５μｇ〜５ｍｇ／ｇである。
【００４７】
なお、細胞培養用担体の乾燥単位重量あたりの人工ポリペプチド（Ｐ）の含有量は、人工ポリペプチド（Ｐ）の含有量が５００μｇ／ｇを超える場合、例えば、Ｂｉｕｒｅｔ法（日本生化学会編「生化学実験講座１、タンパク質の化学Ｉ」第４５〜５５頁（１９７９
年１２月１１日；株式会社東京化学同人発行）等により求められる。
一方、人工ポリペプチド（Ｐ）の含有量が５００μｇ／ｇ以下の場合、例えば、Ｋｊｅｌｄａｈｌ法（日本生化学会編「生化学実験講座１、タンパク質の化学Ｉ」第４５〜５５
頁（１９７９年１２月１１日；株式会社東京化学同人発行）等により求められる。
また、免疫学的測定法（特開２００４−０４９９２１号公報等に記載）を利用して測定することもできる。具体的には、（１）人工ポリペプチド（Ｐ）の含有量が既知である細胞培養用担体｛Ｂｉｕｒｅｔ法やＫｊｅｌｄａｈｌ法等で人工ポリペプチド（Ｐ）の含有量が既知になった細胞培養担体｝を生理食塩水に浸漬し、人工ポリプチド（Ｐ）と結合する抗体に酵素を標識したもの（以下、酵素標識抗体）とを反応させ、この反応した酵素標識抗体の酵素量を吸光度測定し、検量線（人工ポリペプチド（Ｐ）の含有量とそれに対する吸光度）を作成する。（２）同様に検体（人工ポリペプチド（Ｐ）の含有量が未知である細胞培養用担体）の吸光度を測定する。（１）で得られた検量線と（２）で得られた吸光度から、検体の人工ポリペプチド（Ｐ）の含有量を求めることができる。
乾燥重量は、測定試料１ｇを減圧乾燥機の中に入れ、１２０℃、０．１ｋＰａ以下の条件で１時間乾燥して、計量することにより得られる。
【００４８】
本発明の細胞培養用担体は、細胞増殖性を高めるため、細胞増殖因子を含有させてもよい。細胞増殖因子としては、細胞の増殖を促進する物質、例えば、線維芽細胞増殖因子、トランスフォーミング増殖因子、上皮細胞増殖因子、肝細胞増殖因子、血小板由来増殖因子、インシュリン様増殖因子、血管内皮細胞増殖因子、神経成長因子、幹細胞因子、白血病阻害因子、骨形成因子、ヘパリン結合上皮細胞増殖因子、神経栄養因子、結合組織成長因子、アンジオポエチン、コンドロモジュリン、テノモジュリン、インターフェロン、インターロイキン、腫瘍壊死因子、コロニー刺激因子、アドレナモジュリン及びナトリウム利尿ペプチド等の生理活性ポリペプチド等が挙げられる（例えば、財団法人名古屋大学出版会発行「上田実編ティッシュエンジニアリング」（１９９９年）に記載）。これらの細胞増殖因子の中で、適用できる組織細胞の範囲が広く、細胞増殖性がより高くなるという観点等から、線維芽細胞増殖因子、トランスフォーミング増殖因子、上皮細胞増殖因子、肝細胞増殖因子、血小板由来増殖因子、インシュリン様増殖因子、血管内皮細胞増殖因子、骨形成因子、インターロイキン及び腫瘍壊死因子が好ましく、さらに好ましくは線維芽細胞増殖因子、上皮細胞増殖因子、インシュリン様増殖因子、血管内皮細胞増殖因子、インターロイキン及び腫瘍壊死因子である。
【００４９】
細胞増殖因子は、粒子（Ａ）に結合していることが好ましい。この結合は、粒子（Ａ）と人工ポリペプチド（Ｐ）との結合と同様に、化学結合及び／又は物理吸着が使用でき、好ましい化学結合及び／又は物理吸着も同様である。
【００５０】
細胞増殖因子を含む場合、この含有量は、細胞増殖性を向上させる観点等より、細胞培養用担体の乾燥重量あたり、１０ｐｇ／ｇ〜１０００μｇ／ｇが好ましく、さらに好ましくは１００ｐｇ／ｇ〜１００μｇ／ｇ、特に好ましくは１０００ｐｇ／ｇ〜１０μｇ／ｇである。
【００５１】
本発明の細胞培養用担体の外形状、体積平均粒子径及び保水量の好ましい範囲は、粒子（Ａ）の好ましい範囲と一致する。
【００５２】
本発明の細胞培養用担体は、必要に応じて滅菌処理を施してもよい。滅菌方法としては、放射線、エチレンオキサイドガス、プラズマ、γ線、アルコール、オートクレーブ、乾熱等を用いた滅菌方法が適用できる。これらは、１種の方法のみで行ってもよいし、２種以上を組み合わせてもよい。
【００５３】
本発明の細胞培養用担体に接着できる細胞（ＣＥ）としては細胞であれば制限がないが、本発明の細胞培養用担体を用いると細胞増殖性が高いため、医薬品等の有用物質生産や治療等に用いられる哺乳動物由来の正常細胞、哺乳動物由来の株化細胞及び昆虫細胞が適している。
哺乳動物由来の正常細胞としては、皮膚に関与する細胞（上皮細胞、線維芽細胞、血管内皮細胞及び平滑筋細胞等）、血管に関与する細胞（血管内皮細胞、平滑筋細胞及び線維芽細胞等）、筋肉に関与する細胞（筋肉細胞等）、脂肪に関与する細胞（脂肪細胞等）、神経に関与する細胞（神経細胞等）、肝臓に関与する細胞（肝細胞等）、膵臓に関与する細胞（膵ラ島細胞等）、腎臓に関与する細胞（腎上皮細胞、近位尿細管上皮細胞及びメサンギウム細胞等）、肺・気管支に関与する細胞（上皮細胞、線維芽細胞、血管内皮細胞及び平滑筋細胞等）、目に関与する細胞（視細胞、角膜上皮細胞及び角膜内皮細胞等）、前立腺に関与する細胞（上皮細胞、間質細胞及び平滑筋細胞等）、骨に関与する細胞（骨芽細胞、骨細胞及び破骨細胞等）、軟骨に関与する細胞（軟骨芽細胞及び軟骨細胞等）、歯に関与する細胞（歯根膜細胞及び骨芽細胞等）、血液に関与する細胞（白血球及び赤血球等）、及び幹細胞｛例えば、骨髄未分化間葉系幹細胞、骨格筋幹細胞、造血系幹細胞、神経幹細胞、肝幹細胞（oval cell、small hepatocyte等）、脂肪組織幹細胞、胚性幹（ＥＳ）細胞、表皮幹細胞、腸管幹細胞、精子幹細胞、胚生殖幹（ＥＧ）細胞、膵臓幹細胞（膵管上皮幹細胞等）、白血球系幹細胞、リンパ球系幹細胞、角膜系幹細胞、前駆細胞（脂肪前駆細胞、血管内皮前駆細胞、軟骨前駆細胞、リンパ球系前駆細胞、ＮＫ前駆細胞等）等｝等が挙げられる。
【００５４】
哺乳動物由来の株化細胞としては、３Ｔ３細胞、Ａ５４９細胞、ＡＨ１３０細胞、Ｂ９５−８細胞、ＢＨＫ細胞、ＢＯＳＣ２３細胞、ＢＳ−Ｃ−１細胞、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞、Ｃ−６細胞、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＣＶ−１細胞、Ｆ９細胞、ＦＬ細胞、ＦＬ５−１細胞、ＦＭ３Ａ細胞、Ｇ−３６１細胞、ＧＰ＋Ｅ−８６細胞、ＧＰ＋ｅｎｖＡｍ１２細胞、Ｈ４−II−Ｅ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＨｅＬａ細胞、ＨＥｐ−２細胞、ＨＬ−６０細胞、ＨＴＣ細胞、ＨＵＶＥＣ細胞、ＩＭＲ−３２細胞、ＩＭＲ−９０細胞、Ｋ５６２細胞、ＫＢ細胞、Ｌ細胞、Ｌ５１７８Ｙ細胞、Ｌ−９２９細胞、ＭＡ１０４細胞、ＭＤＢＫ細胞、ＭＤＣＫ細胞、ＭＩＡ ＰａＣａ−２細胞、Ｎ１８細胞、Ｎａｍａｌｗａ細胞、ＮＧ１０８−１５細胞、ＮＲＫ細胞、ＯＣ１０細胞、ＯＴＴ６０５０細胞、Ｐ３８８細胞、ＰＡ１２細胞、ＰＡ３１７細胞、ＰＣ−１２細胞、ＰＥＲ．Ｃ６細胞、ＰＧ１３細胞、ＱＧＨ細胞、Ｒａｊｉ細胞、ＲＰＭＩ−１７８８細胞、ＳＧＥ１細胞、Ｓｐ２／Ｏ−Ａｇ１４細胞、ＳＴ２細胞、ＴＨＰ−１細胞、Ｕ−９３７細胞、Ｖ７９細胞、ＶＥＲＯ細胞、ＷＩ−３８細胞、ψ２細胞、及びψＣＲＥ細胞等が挙げられる｛細胞培養の技術（日本組織培養学会編集、株式会社朝倉書店発行、１９９９年）｝。
【００５５】
昆虫細胞としては、カイコ細胞（ＢｍＮ細胞及びＢｏＭｏ細胞等）、クワコ細胞、サクサン細胞、シンジュサン細胞、ヨトウガ細胞（Ｓｆ９細胞及びＳｆ２１細胞等）、クワゴマダラヒトリ細胞、ハマキムシ細胞、ショウジョウバエ細胞、センチニクバエ細胞、ヒトスジシマカ細胞、アゲハチョウ細胞、ワモンゴキブリ細胞及びイラクサキンウワバ細胞（Ｔｎ−５細胞、ＨＩＧＨ  ＦＩＶＥ細胞及びＭＧ１細胞等）等が挙げられる｛昆虫バイオ工場（木村滋 編著、株式会社工業調査会 発行、２０００年）。
これらの細胞のうち、医薬品等の有用物質生産や治療等の観点から、哺乳動物由来の正常細胞及び哺乳動物由来の株化細胞が好ましい。そして、治療に有用な点で、さらに好ましくは平滑筋細胞、肝細胞、骨芽細胞、上皮細胞、線維芽細胞、血管内皮細胞及び幹細胞、特に好ましくは上皮細胞である。また、医薬品等の有用物質生産に有用な点で、さらに好ましくは３Ｔ３細胞、ＢＨＫ細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｌ−９２９細胞、ＭＤＣＫ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６細胞、ＶＥＲＯ細胞及びＷＩ−３８細胞、特に好ましくはＭＤＣＫ細胞及びＶＥＲＯ細胞である。
【００５６】
本発明の細胞培養用担体を用いる細胞培養方法に用いる培地（ＭＥ）としては、無血清培地（Ｇｒａｃｅ培地、ＩＰＬ−４１培地、Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ’ｓ培地、Ｏｐｔｉ−ＰＲＯTMＳＦＭ培地、Ｏｐｔｉ−ＭＥＭTMＩ培地、ＶＰ−ＳＦＭ培地、ＣＤ２９３培地、２
９３ＳＦＭＩＩ培地、ＣＤ−ＣＨＯ培地、ＣＨＯ−Ｓ−ＳＦＭＩＩ培地、ＦｒｅｅＳｔｙｌｅTM２９３培地、ＣＤ−ＣＨＯ  ＡＴＧTM培地及びこれらの混合培地等）；一般の培地（ＲＰＭＩ培地、ＭＥＭ培地、Ｅａｇｌｅ’ｓＭＥＭ培地、ＢＭＥ培地、ＤＭＥ培地、αＭＥＭ培地、ＩＭＥＭ培地、ＥＳ培地、ＤＭ−１６０培地、Ｆｉｓｈｅｒ培地、Ｆ１２培地、ＷＥ培地、ＡＳＦ１０３培地、ＡＳＦ１０４培地、ＡＳＦ３０１培地、ＴＣ−１００培地、Ｓｆ−９００ＩＩ培地、Ｅｘ−ｃｅｌｌ４０５培地、Ｅｘｐｒｅｓｓ−Ｆｉｖｅ培地、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ培地及びこれらの混合培地）；及びこれらの混合培地が挙げられる。
これらのうち、ヒトへの感染の可能性がある物質（血清に由来するウイルス等）の混入防止の観点等から、無血清培地が好ましく、さらに好ましくはＯｐｔｉ−ＰＲＯTMＳＦＭ培地、Ｏｐｔｉ−ＭＥＭTMＩ培地、ＶＰ−ＳＦＭ培地、ＣＤ２９３培地、２９３ＳＦＭＩ
Ｉ培地、ＣＤ−ＣＨＯ培地、ＣＨＯ−Ｓ−ＳＦＭII培地、ＦｒｅｅＳｔｙｌｅTM２９３培地、ＣＤ−ＣＨＯ  ＡＴＧTM培地及びこれらの混合培地、特に好ましくはＯｐｔｉ−ＰＲＯTMＳＦＭ培地、ＶＰ−ＳＦＭ培地、ＣＤ２９３培地、２９３ＳＦＭＩＩ培地、ＦｒｅｅＳｔｙｌｅTM２９３培地及びこれらの混合培地である。
【００５７】
また、これらの培地には、血清を添加することができるが、ヒトへの感染の可能性がある物質（血清に由来するウイルス等）の混入防止の観点等から、血清を添加しないことが好ましい。
血清としては、ヒト血清、及び動物血清（ウシ血清、ウマ血清、ヤギ血清、ヒツジ血清、ブタ血清、ウサギ血清、ニワトリ血清、ラット血清、及びマウス血清等）が含まれる。
血清を添加する場合、これらのうち、ヒト血清、ウシ血清、及びウマ血清が好ましい。また、動物血清の由来は、成体由来の血清、仔由来の血清、新生由来の血清、及び胎児由来の血清等が挙げられる。血清を添加する場合、これらのうち、仔由来の血清、新生由来の血清、及び胎児由来の血清が好ましく、さらに好ましくは新生由来の血清、及び胎児由来の血清、特に好ましくは胎児由来の血清である。血清を添加する場合、さらに血清は、非働化処理や、抗体の除去処理等を行ってもよい。
血清を使用する場合、血清の使用量（重量％）は、培地の重量に基づいて、０．１〜５０が好ましく、さらに好ましくは０．３〜３０、特に好ましくは１〜２０である。
【００５８】
培地中には、必要に応じて、細胞増殖因子を含有させることができる。細胞増殖因子を含有させることにより、細胞の増殖速度を高めたり、細胞活性を高めたりすることができる。
細胞増殖因子としては、線維芽細胞増殖因子、トランスフォーミング増殖因子、上皮細胞増殖因子、肝細胞増殖因子、血小板由来増殖因子、インシュリン様増殖因子、血管内皮増殖因子、神経成長因子、幹細胞因子、白血病阻害因子、骨形成因子、ヘパリン結合上皮細胞増殖因子、神経栄養因子、結合組織成長因子、アンジオポエチン、サイトカイン、インターロイキン、アドレナモジュリン及びナトリウム利尿ペプチド等の生理活性ペプチドが含まれる。これらのうち、適用できる細胞の範囲が広く、治癒期間がより短縮できるという観点から、線維芽細胞増殖因子、トランスフォーミング増殖因子、インシュリン様増殖因子及び骨形成因子が好ましく、さらに好ましくは線維芽細胞増殖因子、トランスフォーミング増殖因子及びインシュリン様増殖因子である。
細胞増殖因子を使用する場合、細胞増殖因子の含有量（重量％）は細胞増殖因子の種類によって異なるが、培地の重量に基づいて、１０-16〜１０-3が好ましく、さらに好ましくは１０-14〜１０-5、特に好ましくは１０-12〜１０-7である。
【００５９】
これらの培地には、さらに抗菌剤（アンホテリシンＢ、ゲンタマイシン、ペニシリン及びストレプトマイシン等）を含有させることができる。抗菌剤を含有させる場合、この含有量（重量％）は抗菌剤の種類によって異なるが、培地の重量に基づいて、１０-6〜１０が好ましく、さらに好ましくは１０-5〜１、特に好ましくは１０-4〜０．１である。
【００６０】
培地に分散させる細胞の濃度（個／ｍＬ）としては特に制限はないが、培地１ｍＬ当たり、１００〜１億が好ましく、さらに好ましくは１０００〜１千万、特に好ましくは１万〜１００万である。
細胞の個数の計数方法は公知の方法が使用でき、例えば、クリスタルバイオレットを用いた細胞核計数法で測定することができる｛細胞培養の技術（日本組織培養学会編集、株式会社朝倉書店発行、１９９９年）｝。
また、培地に投入する細胞培養用担体の乾燥重量（ｇ）は、培養する細胞の種類等によって適宜決定できるが、培地１Ｌ当たり、０．００５〜８００が好ましく、さらに好ましくは０．０２〜２００、特に好ましくは０．１〜４０である。
【００６１】
培養条件としては、特に制限は無く、二酸化炭素（ＣＯ2）濃度１〜２０体積％、５〜４５℃で１時間〜１００日間、必要に応じて１〜１０日毎に培地交換しなら培養する条件等が適用できる。好ましい条件としては、ＣＯ2濃度３〜１０体積％、３０〜４０℃、１〜２０日間、１〜３日毎に培地交換しながら培養する条件である。
【００６２】
細胞培養用担体から、細胞を剥離する方法は、公知の方法が使用でき、例えば、キレート剤（ＥＤＴＡ等）、非動物由来の蛋白質分解酵素｛植物由来の蛋白質分解酵素（パパイン等）｝、遺伝子組換えによる合成酵素（商品名：TrypLETM Select、インビトロジェン（株）製等）及び／又は動物由来の蛋白質分解酵素（トリプシンやコラゲナーゼ等）によって剥離させる方法が利用できる。
【実施例】
【００６３】
以下に実施例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるものではない。なお、特記しない限り、部は重量部、％は重量％を意味する。また、以下の記載において、実施例１９、２０、２２、２３、４９、５０及び５３はそれぞれ参考例１〜７であり、実施例４３、４４、４６及び４７はそれぞれ参考例８〜１１である。
＜実施例１＞
＜架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の準備＞
攪拌機、モノマー供給管、窒素ガス導入管、温度計、還流冷却器を備えた反応容器にシクロヘキサン６２４部、重合分散剤としてソルビタンモノステアレート３．１部を仕込み、窒素バブリングを３０分以上行って、溶存空気を追い出し７５℃まで昇温した。
別の反応器に８０％アクリル酸水溶液１７３部を仕込み、冷却しながら２８％水酸化ナトリウム水溶液２０７部を加えて中和した。この水溶液に架橋性単量体｛エチレングリコールジグリシジルエーテル｝４．５２部及び重合開始剤｛過硫酸カリウム｝０．２７８部、連鎖移動剤｛次亜リン酸ナトリウム｝０．０５３部を添加した後、窒素バブリングを行い、溶存空気を追い出しモノマー水溶液を得た。
得られたモノマー水溶液を上記の重合反応器のモノマー供給管より６．５ｍｌ／分の割合で連続的に重合反応器内の撹拌中（撹拌速度は５００ｒｐｍ）のシクロヘキサン液中に約１時間かけて供給してシクロヘキサン還流下で重合を行った。
次に共沸脱水によって１６０部の水を抜き出した後、含水ゲルポリマーを取り出し、更に１２０℃で２時間乾燥して、乾燥架橋ポリアクリル酸ナトリウム塩を得た。
乾燥架橋ポリアクリル酸ナトリウム塩を、目開きが６３μｍのふるい及び５３μｍのふるい（ＪＩＳ  Ｚ８８０１−１：２０００）により分級して、粒子径５３〜６３μｍの粒子｛架橋ポリアクリル酸ナトリウム塩粒子｝を得た。
次に、得られた粒子に対して、エチレングリコールジグリシジルエーテルを溶液濃度として２％含むメタノール／イオン交換水（体積比７０／３０）溶液７．５部を添加し均一混合した。次いで、メタノールを風乾した後に密閉容器に入れ、８０℃で１時間保持し、表面架橋を行った。その後、順風乾燥機中で１２０℃で３０分間乾燥させて、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）を得た。
【００６４】
＜人工ポリペプチド（Ｐ１）の準備＞
特表平３−５０２９３５号公報中の実施例記載の方法に準じて、Arg Gly Asp配列の１３個と(Gly Ala Gly Ala Gly Ser)９配列（２１）の１２個とを有しこれらが交互に化学結合してなる構造を有するＭｗ約１１万のペプチド「プロネクチンＦ」を製造し、人工ポリペプチド（Ｐ１）とした。
【００６５】
＜細胞培養用担体（Ｃ１）の調製＞
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の１ｇに、塩化ナトリウムを０．８５％で含有する０．０２Ｍ，ｐＨ７．２のリン酸緩衝液（以下、ＰＢＳ）の５０ｍＬを加え、３０分間放置して、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）を膨潤させた後、アスピレーターで余分なＰＢＳを吸引除去した。水溶性カルボジイミド（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド  ハイドロクロライド、（株）同仁化学研究所製）を６０ｍＭの濃度で含むＰＢＳ溶液の４０ｍＬを加え、ポリフッ化エチレン樹脂製攪拌羽で攪拌し、２時間反応させた。反応溶液を吸引除去した後、ＰＢＳの４０ｍＬを添加、吸引除去する洗浄操作を５回行った。
次に、人工ポリペプチド（Ｐ１）を６００μｇ／ｍＬの濃度で含むＰＢＳ溶液の４０ｍＬを加え、ポリフッ化エチレン樹脂製攪拌羽で攪拌し、２時間反応させた。反応溶液を吸引除去した後、ＰＢＳの４０ｍLを添加、吸引除去する洗浄操作を５回行い、さらにイオン交換水の４０ｍＬを添加、吸引除去する洗浄操作を２回行った。
最後に、減圧乾燥機の中に入れ、１２０℃、０．１ｋＰａ以下の条件での乾燥を４時間行い、本発明の細胞培養用担体（Ｃ１）を得た。この担体（Ｃ１）の保水量は１３ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１）には、２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。なお、人工ポリペプチドの含有量は、Ｂｉｕｒｅｔ法により作成した検量線を用いて、免疫学的測定法によって測定した。ただし、含有量が５００μｇ以下となることが予測される場合、Ｋｊｅｌｄａｈｌ法により作成した検量線を用いた｛以下、同様である。｝。
【００６６】
＜実施例２＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から１．８１部に変更すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ２）及び細胞培養用担体（Ｃ２）を得た。この担体（Ｃ２）の保水量は１８ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２）には、４ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００６７】
＜実施例３＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３）を得た。この担体（Ｃ３）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３）には、５ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００６８】
＜実施例４＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．０９部に変更すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ４）及び細胞培養用担体（Ｃ４）を得た。この担体（Ｃ４）の保水量は２３ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４）には、６ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００６９】
＜実施例５＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ２）｛特表平３−５０２９３５号公報中の実施例記載の方法に準じて製造した、Arg Gly Asp配列（ｘ１）の５個と（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）3配列（２０）（ｙ２）の５個とを有しこれらが交互に化学結合してなる構造を有するＭｗ約２万のポリペプチド（「プロネクチンＦ２」）｝を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ５）を得た。この担体（Ｃ５）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ５）には、２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ２）が含まれていた。
【００７０】
＜実施例６＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ３）｛特表平３−５０２９３５号公報中の実施例記載の方法に準じて製造した、Arg Gly Asp配列（ｘ１）の３個と（Gly Val Pro Gly Val）2 Gly Gly （Gly Ala Gly Ala Gly Ser）3配列（３８）（ｙ３）の３個とを有しこれらが交互に化学結合してなる構造を有するＭｗ約１万のポリペプチド（「プロネクチンＦ３」）｝を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ６）を得た。この担体（Ｃ６）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ６）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ３）が含まれていた。
【００７１】
＜実施例７＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ４）｛Arg Gly Asp配列（ｘ１）を有するＭｗ４９０のポリペプチド；Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）、株式会社ペプチド研究所製｝を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ７）を得た。この担体（Ｃ７）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ７）には、０．１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ４）が含まれていた。
【００７２】
＜実施例８＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」以外、実施例１に記載の方法と同様にして粒子（架橋ポリアクリル酸ナトリウム塩粒子）を得た。この粒子を表面架橋処理せずこのまま、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ５）とした。また、「細胞培養用担体の調製において、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ５）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ８）を得た。この担体（Ｃ８）の保水量は２２ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ８）には、５ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００７３】
＜実施例９＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ５）の準備＞
（１）人工ポリペプチド（Ｐ５Ａ）の調製
「ペプチド合成の基礎と実験」第１１４〜１１７貢（昭和６０年１月２０日、丸善株式会社発行）等に記載されているＤＣＣ法に準じて、人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させた架橋ポリペプチドを約５％の濃度で含む溶液を作製した。この溶液の１０ｍＬを、０．４５μｍのメンブレンフィルターでろ過した後、ゲルろ過カラム（商品名：Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇ、アマシャムバイオサイエンス（株）製）を用いて、濾液を分画した後、Ｍｗ約１０００の分画をえた｛流速：１ｍＬ／分、溶出液：ＰＢＳ、予め同じ条件でゲルろ過した分子量マーカーの溶出時間を指標に、Ｍｗ約１０００の分画を分取した。｝。このＭｗ約１０００の分画を、イオン交換水中で透析して脱塩した後、−２０℃、０．１ｋＰａ以下の条件で、凍結乾燥を２４時間行い、人工ポリペプチド（Ｐ５Ａ）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）を約２個有する。｝を得た。
（２）人工ポリペプチド（Ｐ５Ｃ）の調製
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ５Ａ）同士で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約２２０００の分画を分取すること」以外、人工ポリペプチド（Ｐ５Ａ）の調製と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ５Ｂ）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）を約４個有する。｝を得た。
ついで、「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ５Ｂ）同士で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約４０００の分画を分取すること」以外、人工ポリペプチド（Ｐ５Ａ）の調製と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ５Ｃ）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）を約８個有する。｝を得た。
（３）人工ポリペプチド（Ｐ５）の調製
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ５Ａ）と人工ポリペプチド（Ｐ５Ｃ）とをモル比１：１で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約５０００の分画を分取すること」以外、人工ポリペプチド（Ｐ５Ａ）の調製と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ５）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）を約１０個有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ９）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ５）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ９）を得た。この担体（Ｃ９）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ９）には、０．５ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ５）が含まれていた。
【００７４】
＜実施例１０＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ６）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ５）同士で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名：Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約１００００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ６）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）を約２０個有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ１０）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ６）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ１０）を得た。この担体（Ｃ１０）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１０）には、２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ６）が含まれていた。
【００７５】
＜実施例１１＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ７）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ５）と人工ポリペプチド（Ｐ６）とをモル比１：１で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約１５０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ７）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）を約３０個有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ１１）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ７）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ１１）を得た。この担体（Ｃ１１）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１１）には、２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ７）が含まれていた。
【００７６】
＜実施例１２＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ８）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ６）同士で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約２００００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ８）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）を約４０個有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ１２）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ８）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ１２）を得た。この担体（Ｃ１２）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１２）には、３ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ８）が含まれていた。
【００７７】
＜実施例１３＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ９）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ４）とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）からなるポリペプチドとをモル比１：１で反応させること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ９）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約１個とを有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ１３）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ９）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ１３）を得た。この担体（Ｃ１３）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１３）には、０．２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ９）が含まれていた。
【００７８】
＜実施例１４＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ１０）の準備＞
（１）人工ポリペプチド（Ｐ１０Ａ）の調製
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、Gly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）同士で反応させること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１０Ａ）｛Gly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）を約２個有する。｝を得た。
（２）人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｄ）の調製
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１０Ａ）同士で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約２０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｂ）｛Gly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）を約４個有する。｝を得た。
ついで、「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｂ）同士で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約３０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｃ）｛Gly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）を約８個有する。｝を得た。
ついで、「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１０Ａ）と人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｃ）とをモル比１：１で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約４０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｄ）｛Gly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）を約１０個有する。｝を得た。
（３）人工ポリペプチド（Ｐ１０）の調製
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ４）と人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｄ）とをモル比１：１で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約５０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１０）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約１０個とを有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ１４）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１０）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ１４）を得た。この担体（Ｃ１４）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１４）には、０．３ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１０）が含まれていた。
【００７９】
＜実施例１５＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ１１）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｄ）同士で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約８０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１１Ａ）｛Gly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）を約２０個有する。｝を得た。
ついで、「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ４）と人工ポリペプチド（Ｐ１１Ａ）とをモル比１：１で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約９０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１１）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約２０個とを有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ１５）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１１）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ１５）を得た。この担体（Ｃ１５）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１５）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１１）が含まれていた。
【００８０】
＜実施例１６＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ１２）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｄ）と人工ポリペプチド（Ｐ１１Ａ）とをモル比１：１で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約１３０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１２Ａ）｛Gly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）を約３０個有する。｝を得た。
ついで、「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ４）と人工ポリペプチド（Ｐ１２Ａ）とをモル比１：１で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約１３０００の分画を分取すること」以外は、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１２）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約３０個とを有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ１６）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１２）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ１６）を得た。この担体（Ｃ１６）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１６）には、２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１２）が含まれていた。
【００８１】
＜実施例１７＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ１３）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１１Ａ）と人工ポリペプチド（Ｐ１２Ａ）とをモル比１：１で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約２１０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１３Ａ）｛Gly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）を約５０個有する。｝を得た。
ついで、「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ４）と人工ポリペプチド（Ｐ１３Ａ）とをモル比１：１で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約２１０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１３）｛Gly Arg Gly Asp Ser配列（６３）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約５０個とを有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ１７）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１３）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ１７）を得た。この担体（Ｃ１７）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１７）には、２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１３）が含まれていた。
【００８２】
＜実施例１８＞
＜架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ６）の準備＞
アクリル酸ナトリウム８８部、アクリル酸２２．８５部、Ｎ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド０．２部及び脱イオン水２９３、ジクロロトリス（トリフェニルフォスフィン）ルテニウム０．００１部を攪拌・混合しながら、１〜２℃に保った。そして、この混合液中に窒素を流入して、混合液中の溶存酸素濃量を０．５ｐｐｍ以下とした。
引き続き、この混合液に、１％過酸化水素水溶液０．３部、０．２％アスコルビン酸水溶液０．８部及び２％の２，２’−アゾビスアミジノプロパンジハイドロクロライド水溶液０．８部を添加・混合して重合を開始させた。そして、反応液が８０℃に達した後、重合温度８０±２℃で約５時間重合することにより、含水樹脂（ゲル）を得た。
この含水樹脂（ゲル）４００部をミンチ機（目皿穴径：６ｍｍ、飯塚工業社製  １２ＶＲ−４００Ｋ）にて２５℃で５分間細断した後、通気型バンド乾燥機（１３５℃、２．０ｍ／秒；井上金属工業（株）製）で乾燥し、乾燥重合体を得た。
この乾燥重合体をジューサーミキサー（Ｎａｔｉｏｎａｌ  ＭＸ−Ｘ５３、松下電器（株）製）で粉砕し、目開きが６３μｍのふるい及び５３μｍのふるい（ＪＩＳ  Ｚ８８０１−１：２０００）により分級して、粒子径５３〜６３μｍの粒子｛架橋ポリアクリル酸ナトリウム塩粒子｝を得た。この１００部を高速攪拌（細川ミクロン製  高速攪拌タービュライザーミキサー：回転数２０００ｒｐｍ）しながらエチレングリコールジグリシジルエーテルの１％水／メタノール混合溶液（水／メタノールの重量比＝６０／４０）の１部をスプレー噴霧しながら添加・混合し、１４０℃で３０分間静置し加熱架橋（表面架橋）することにより架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ６）を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ１８）の調製＞
「架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ６）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ１８）を得た。この担体（Ｃ１８）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１８）には、１０ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００８３】
＜実施例１９＞
「２８％水酸化ナトリウム水溶液の使用量を２０７部から１１０部に変更すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ７）及び細胞培養用担体（Ｃ１９）を得た。この担体（Ｃ１９）の保水量は４ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ１９）には、０．１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００８４】
＜実施例２０＞
「架橋性単量体｛エチレングリコールジグリシジルエーテル｝の使用量を４．５２部から６．９１部に変更すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ８）及び細胞培養用担体（Ｃ２０）を得た。この担体（Ｃ２０）の保水量は７ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２０）には、０．５ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００８５】
＜実施例２１＞
「架橋性単量体｛エチレングリコールジグリシジルエーテル｝の使用量を４．５２部から０．０１６６部に変更すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ９）及び細胞培養用担体（Ｃ２１）を得た。この担体（Ｃ２１）の保水量は２８ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２１）には、８ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００８６】
＜実施例２２＞
「架橋性単量体｛エチレングリコールジグリシジルエーテル｝の使用量を４．５２部から０．０１１１部に変更すること」及び「エチレングリコールジグリシジルエーテルを溶液濃度として２％含むメタノール／イオン交換水溶液の使用量を７．５から２．５に変更すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１０）及び細胞培養用担体（Ｃ２２）を得た。この担体（Ｃ２２）の保水量は３９ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２２）には、１０ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００８７】
＜実施例２３＞
＜架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１１）の準備＞
「架橋性単量体｛エチレングリコールジグリシジルエーテル｝の使用量を４．５２部から０．０１１１部に変更すること」及び「表面架橋しなかったこと｛エチレングリコールジグリシジルエーテルを溶液濃度として２％含むメタノール／イオン交換水溶液を添加せず、８０℃で１時間保持しなかったこと｝」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１１）を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ２３）の調製＞
「架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１１）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ２３）を得た。この担体（Ｃ２３）の保水量は４８ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２３）には、１２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００８８】
＜実施例２４＞
「８０％アクリル酸水溶液１７３部の代わりに８０％メタクリル酸水溶液２０７部を使用すること」以外、実施例１８と同様にして、架橋ポリメタクリル酸塩粒子（Ａ１２）及び細胞培養用担体（Ｃ２４）を得た。この担体（Ｃ２４）の保水量は２０ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２４）には、４ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【００８９】
＜実施例２５＞
「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）｛特表平３−５０２９３５号公報中の実施例記載の方法に準じて製造した、Ile Lys Val Ala Val配列（７）（ｘ２）の１３個と（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）9配列（２１）（ｙ１）の１２個とを有しこれらが交互に化学結合してなる構造を有するＭｗ約１１万のポリペプチド（「プロネクチンＬ」）｝を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ２５）を調製した。この担体（Ｃ２５）の保水量は１３ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２５）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【００９０】
＜実施例２６＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から１．８１部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ２）及び細胞培養用担体（Ｃ２６）を調製した。この担体（Ｃ２６）の保水量は１８ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２６）には、３ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【００９１】
＜実施例２７＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ２７）を調製した。この担体（Ｃ２７）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２７）には、５ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【００９２】
＜実施例２８＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．０９部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ４）及び細胞培養用担体（Ｃ２８）を調製した。この担体（Ｃ２８）の保水量は２３ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２８）には、５ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【００９３】
＜実施例２９＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１５）｛特表平３−５０２９３５号公報中の実施例記載の方法に準じて製造した、Ile Lys Val Ala Val配列（７）（ｘ２）の５個と（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）9配列（２１）（ｙ１）の５個とを有しこれらが交互に化学結合してなる構造を有するＭｗ約２万のポリペプチド（「プロネクチンＬ２」）｝を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ２９）を調製した。この担体（Ｃ２９）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ２９）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１５）が含まれていた。
【００９４】
＜実施例３０＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１６）｛特表平３−５０２９３５号公報中の実施例記載の方法に準じて製造した、Ile Lys Val Ala Val配列（７）（ｘ２）の３個と（Gly Ala Gly Ala Gly Ser）9配列（２１）（ｙ１）の３個とを有しこれらが交互に化学結合してなる構造を有するＭｗ約１万のポリペプチド（「プロネクチンＬ３」）｝を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３０）を調製した。この担体（Ｃ３０）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３０）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１６）が含まれていた。
【００９５】
＜実施例３１＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１７）｛Ile Lys Val Ala Val配列（ｘ２）を有するＭｗ５２９のポリペプチド；Ile Lys Val Ala Val配列（７）、ＮＥＯＳＹＳＴＥＭ社製｝を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３１）を調製した。この担体（Ｃ３１）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３１）には、０．１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１７）が含まれていた。
【００９６】
＜実施例３２＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ５）及び細胞培養用担体（Ｃ３２）を調製した。この担体（Ｃ３２）の保水量は２２ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３２）には、６ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【００９７】
＜実施例３３＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ１８）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１７）を使用すること」以外、実施例９の「人工ポリペプチド（Ｐ５）の準備」と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１８）｛Ile Lys Val Ala Val配列（７）を約１０個有するポリペプチド｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ３３）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１８）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３３）を調製した。この担体（Ｃ３３）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３３）には、０．３ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１８）が含まれていた。
【００９８】
＜実施例３４＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ１９）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１８）を使用すること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名：Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約１００００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ１９）｛Ile Lys Val Ala Val配列（７）を約２０個有する。｝を得た。
＜細胞培養用担体（Ｃ３４）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１９）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３４）を調製した。この担体（Ｃ３４）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３４）には、０．７ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１９）が含まれていた。
【００９９】
＜実施例３５＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ２０）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１８）と人工ポリペプチド（Ｐ１９）とをモル比１：１で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約１５０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ２０）｛Ile Lys Val Ala Val配列（７）を約３０個有する。｝を作製した。
＜細胞培養用担体（Ｃ３５）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ２０）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３５）を調製した。この担体（Ｃ３５）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３５）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ２０）が含まれていた。
【０１００】
＜実施例３６＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ２１）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１９）同士で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約２００００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ２１）｛Ile Lys Val Ala Val配列（７）を約４０個有する。｝を作製した。
＜細胞培養用担体（Ｃ３６）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ２１）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３６）を調製した。この担体（Ｃ３６）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３６）には、２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ２１）が含まれていた。
【０１０１】
＜実施例３７＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ２２）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１７）とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）からなるポリペプチドとをモル比１：１で反応させること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ２２）｛Ile Lys Val Ala Val配列（７）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約１個とを有する。｝を作製した。
＜細胞培養用担体（Ｃ３７）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ２２）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３７）を調製した。この担体（Ｃ３７）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３７）には、０．２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ２２）が含まれていた。
【０１０２】
＜実施例３８＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ２３）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１７）と人工ポリペプチド（Ｐ１０Ｄ）とをモル比１：１で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約５０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ２３）｛Ile Lys Val Ala Val配列（７）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約１０個とを有する。｝を作製した。
＜細胞培養用担体（Ｃ３８）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ２３）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３８）を調製した。この担体（Ｃ３８）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３８）には、０．５ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ２３）が含まれていた。
【０１０３】
＜実施例３９＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ２４）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１７）と人工ポリペプチド（Ｐ１１Ａ）とをモル比１：１で反応させること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約９０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ２４）｛Ile Lys Val Ala Val配列（７）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約２０個とを有する。｝を作製した。
＜細胞培養用担体（Ｃ３９）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ２４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ３９）を調製した。この担体（Ｃ３９）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ３９）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ２４）が含まれていた。
【０１０４】
＜実施例４０＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ２５）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１７）と人工ポリペプチド（Ｐ１２Ａ）とをモル比１：１で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約１３０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ２５）｛Ile Lys Val Ala Val配列（７）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約３０個とを有する。｝を作製した。
＜細胞培養用担体（Ｃ４０）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ２５）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ４０）を調製した。この担体（Ｃ４０）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４０）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ２５）が含まれていた。
【０１０５】
＜実施例４１＞
＜人工ポリペプチド（Ｐ２６）の準備＞
「人工ポリペプチド（Ｐ４）同士で反応させる代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１７）と人工ポリペプチド（Ｐ１３Ａ）とをモル比１：１で反応させること」、「ゲルろ過カラムとして、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０ｐｇを使用する代わりに、商品名Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５ｐｇを使用すること」及び「Ｍｗ約１０００の分画の代わりに、Ｍｗ約２１０００の分画を分取すること」以外、実施例９（１）と同様にして、人工ポリペプチド（Ｐ２６）｛Ile Lys Val Ala Val配列（７）の約１個とGly Ala Gly Ala Gly Ser配列（６４）の約５０個とを有する。｝を作製した。
＜細胞培養用担体（Ｃ４１）の調製＞
「重合時の架橋性単量体のエチレングリコールジグリシジルエーテルの使用量を４．５２部から０．９０部に変更すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ２６）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）及び細胞培養用担体（Ｃ４１）を調製した。この担体（Ｃ４１）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４１）には、２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ２６）が含まれていた。
【０１０６】
＜実施例４２＞
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ６）を使用すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ４２）を調製した。この担体（Ｃ４２）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４２）には、８ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【０１０７】
＜実施例４３＞
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ７）｛実施例１９｝を使用すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ４３）を調製した。この担体（Ｃ４３）の保水量は４ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４３）には、０．１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【０１０８】
＜実施例４４＞
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ８）｛実施例２０｝を使用すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ４４）を調製した。この担体（Ｃ４４）の保水量は７ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４４）には、０．２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【０１０９】
＜実施例４５＞
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ９）｛実施例２１｝を使用すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ４５）を調製した。この担体（Ｃ４５）の保水量は２８ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４５）には、６ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【０１１０】
＜実施例４６＞
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１０）｛実施例２２｝を使用すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ４６）を調製した。この担体（Ｃ４６）の保水量は３９ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４６）には、１０ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【０１１１】
＜実施例４７＞
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１１）｛実施例２３｝を使用すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ４７）を調製した。この担体（Ｃ４７）の保水量は４８ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４７）には、１０ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【０１１２】
＜実施例４８＞
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１２）｛実施例２４｝を使用すること」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、実施例１と同様にして、細胞培養用担体（Ｃ４８）を調製した。この担体（Ｃ４８）の保水量は２０ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４８）には、２ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【０１１３】
＜実施例４９＞
水溶性カルボジイミド（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド  ハイドロクロライド、（株）同仁化学研究所製）を０．１ｍＭの濃度でＰＢＳに溶解させ、噴霧液（１）を得た。また、人工ポリペプチド（Ｐ１）を１μｇ／ｍＬの濃度でＰＢＳに溶解させ、噴霧液（２）を得た。
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）の１ｇに、噴霧液（１）０．４ｍＬをスプレー噴霧しながら、約２５℃で約２分間、スパチュラを用いて混合・攪拌した後、静置下で１時間反応させて、カルボジイミド結合粒子を得た。
引き続き、カルボジイミド結合粒子に、噴霧液（２）０．４ｍＬをスプレー噴霧しながら、約２５℃で混合・攪拌して１時間反応させて、人工ポリペプチド結合粒子を得た。その後、人工ポリペプチド結合粒子をＰＢＳ４０ｍＬを添加、吸引除去する洗浄操作を５回行い、さらにイオン交換水の４０ｍＬを添加、吸引除去する洗浄操作を２回行った。
最後に、減圧乾燥機の中に入れ、１２０℃、０．１ｋＰａ以下の条件での乾燥を４時間行い、本発明の細胞培養用担体（Ｃ４９）を得た。この担体（Ｃ４９）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ４９）には、５ｎｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【０１１４】
＜実施例５０＞
「水溶性カルボジイミドの濃度を０．１ｍＭから０．５ｍＭに変更したこと」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の濃度を１μｇ／ｍＬから５μｇ／ｍＬに変更したこと」以外、実施例４９と同様にして、本発明の細胞培養用担体（Ｃ５０）を得た。この担体（Ｃ５０）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ５０）には、５０ｎｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【０１１５】
＜実施例５１＞
「水溶性カルボジイミドの濃度を０．１ｍＭから２ｍＭに変更したこと」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の濃度を１μｇ／ｍＬから２０μｇ／ｍＬに変更したこと」以外、実施例４９と同様にして、本発明の細胞培養用担体（Ｃ５１）を得た。この担体（Ｃ５１）の保水量は２１ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ５１）には、５００ｎｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【０１１６】
＜実施例５２＞
「架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）を使用すること」、「水溶性カルボジイミドの濃度を６０ｍＭから５００ｍＭに変更したこと」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の濃度を６００μｇ／ｍＬから５ｍｇ／ｍＬに変更したこと」以外、実施例１と同様にして、本発明の細胞培養用担体（Ｃ５２）を得た。この担体（Ｃ５２）の保水量は１９ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ５２）には、５０ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【０１１７】
＜実施例５３＞
「架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）を使用すること」、「水溶性カルボジイミドの濃度を６０ｍＭから５００ｍＭに変更したこと」及び「人工ポリペプチド（Ｐ１）の濃度を６００μｇ／ｍＬから２５ｍｇ／ｍＬに変更したこと」以外、実施例１と同様にして、本発明の細胞培養用担体（Ｃ５３）を得た。この担体（Ｃ５３）の保水量は１４ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ５３）には、５００ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【０１１８】
＜比較例１＞
架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ３）を比較用の細胞培養用担体（Ｃ５４）とした。この担体（Ｃ５４）の保水量は２１ｇ／ｇであった。
【０１１９】
＜比較例２＞
市販のコラーゲン結合デキストランビーズ（商品名：Ｃｙｔｏｄｅｘ３、アマシャムバイオサイエンス（株）製）を比較用の細胞培養用担体（Ｃ５５）とした。この担体（Ｃ５５）の保水量は９ｇ／ｇであった。
【０１２０】
＜比較例３＞
特開２００３−１８９８４８号公報の実施例１の記載を参考にして、以下のようにして、比較用の細胞培養担体（Ｃ５６）を得た。
スチレン９９％、ジビニルベンゼン１％を懸濁重合して得られたポリスチレンビーズを
次いで、人工ポリペプチド（Ｐ１）の４．５規定の過塩素酸リチウム水溶液｛人工ポリペプチド（Ｐ１）の濃度；１ｍｇ／ｍｌ｝をリン酸バッファー液（ＰＢＳ）で人工ポリペプチド（Ｐ１）の濃度が１５μｇ／ｍｌとなるように希釈し、人工ポリペプチド（Ｐ１）溶液を作製した。
人工ポリペプチド（Ｐ１）溶液の２５ｍｌに上記で得られたビーズを５ｇ加え、ポリフッ化エチレン樹脂｛テフロン（登録商標）｝製撹拌子で１２時間撹拌した。得られたビーズスラリーを振盪器上にセットしたステンレス製バットに移し、１００℃の熱風を吹きつけながら、２４時間振盪乾燥した。得られた乾燥ビーズをＰＢＳ５０ｍｌで２回洗浄し、乾燥することにより、比較用の細胞培養用担体（Ｃ５６）を得た。この担体（Ｃ５６）の保水量は０ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ５６）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【０１２１】
＜比較例４＞
攪拌機、モノマー供給管、窒素ガス導入管、温度計、還流冷却器を備えた反応容器にシクロヘキサン６２４部、重合分散剤としてソルビタンモノステアレート３．１部を仕込み、窒素バブリングを３０分以上行って、溶存空気を追い出し７５℃まで昇温した。
別の反応器にアクリルアミド１３８部及び水２４２部を仕込んだ。この水溶液に架橋性単量体｛Ｎ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド｝０．００９８部及び重合開始剤｛過硫酸カリウム｝０．２７８部、連鎖移動剤｛次亜リン酸ナトリウム｝０．０５３部を添加した後、窒素バブリングを行い、溶存空気を追い出しモノマー水溶液を得た。
得られたモノマー水溶液を上記の重合反応器のモノマー供給管より６．５ｍｌ／分の割合で連続的に重合反応器内の撹拌中（撹拌速度は５００ｒｐｍ）のシクロヘキサン液中に約１時間かけて供給してシクロヘキサン還流下で重合を行った。
次に共沸脱水によって１６０部の水を抜き出した後、含水ゲルポリマーを取り出し、更に１２０℃で２時間乾燥して、乾燥架橋ポリアクリルアミドを得た。
乾燥架橋ポリアクリルアミドを、目開きが６３μｍのふるい及び５３μｍのふるい（ＪＩＳ  Ｚ８８０１−１：２０００）により分級して、粒子径５３〜６３μｍの粒子｛架橋ポリアクリルアミド粒子｝を得た。
「架橋ポリアクリル酸塩粒子（Ａ１）の代わりに架橋ポリアクリルアミド粒子を使用すること」以外、実施例１と同様にして、比較用の細胞培養用担体（Ｃ５７）を得た。この担体（Ｃ５７）の保水量は４ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ５７）には、０．１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１）が含まれていた。
【０１２２】
＜比較例５＞
「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、比較例３と同様にして、比較用の細胞培養用担体（Ｃ５８）を得た。この担体（Ｃ５８）の保水量は０ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ５８）には、１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【０１２３】
＜比較例６＞
「人工ポリペプチド（Ｐ１）の代わりに、人工ポリペプチド（Ｐ１４）を使用すること」以外、比較例４と同様にして、比較用の細胞培養用担体（Ｃ５９）を調製した。この担体（Ｃ５９）の保水量は４ｇ／ｇであった。また、この担体（Ｃ５９）には、０．１ｍｇ／ｇの人工ポリペプチド（Ｐ１４）が含まれていた。
【０１２４】
＜細胞増殖性評価１＞
実施例１〜２４、実施例４９〜５３及び比較例１〜４の細胞培養用担体（Ｃ１）〜（Ｃ２４）及び（Ｃ４９）〜（Ｃ５７）について、生理食塩水で膨潤した細胞培養用担体を１５０Ｇで９０秒間遠心脱水を行い余剰水を取り除いたものの重量が４ｇになるように、各々の担体を作動容量１００ｍLのスピンナーフラスコに投入した。すなわち、担体（Ｃ１）は０．２９ｇ、担体（Ｃ２）は０．２１ｇ、担体（Ｃ３）は０．１８ｇ、担体（Ｃ４）は０．１７ｇ、担体（Ｃ５）〜（Ｃ７）は０．１８ｇ、担体（Ｃ８）は０．１７ｇ、担体（Ｃ９）〜（Ｃ１７）は０．１８ｇ、担体（Ｃ１８）は０．１８ｇ、担体（Ｃ１９）は０．８０ｇ、担体（Ｃ２０）は０．５０ｇ、担体（Ｃ２１）は０．１４ｇ、担体（Ｃ２２）は０．１０ｇ、担体（Ｃ２３）は０．０８ｇ、担体（Ｃ２４）は０．１９ｇ、（Ｃ４９）〜（Ｃ５１）は０．１８ｇ、（Ｃ５２）は０．２０ｇ、（Ｃ５３）は０．２７ｇ、担体（Ｃ５４）は０．１８ｇ、担体（Ｃ５５）は０．４０ｇ、担体（Ｃ５６）は４ｇ、担体（Ｃ５７）は０．８０ｇを各々スピンナーフラスコに投入した。
次に、各々のスピンナーフラスコへ、生理食塩水を１００ｍＬ／フラスコで加え、オートクレーブ滅菌（１２１℃、２０分間）した。オートクレーブ滅菌後、生理食塩水をアスピレータで吸引除去した後、無血清培地（商品名：ＶＰ−ＳＦＭ、インビトロジェン（株）製）に抗菌剤（商品名：ＰＳＡ、カスケード社製）を０．２％で含有させた無血清培地を５０ｍＬ／フラスコで添加し、１時間放置した後、培地を吸引除去し、再度、同じ無血清培地を１００ｍＬ／フラスコで添加した。スピンナーフラスコを３７℃、二酸化炭素ガス濃度５容量％のＣＯ2インキュベーターの中に２時間放置した後、予めプレ培養していたＶＥＲＯ細胞（大日本住友製薬（株）製）を細胞濃度が２０万個／ｍＬになるように無血清培地に播種した。３７℃、二酸化炭素ガス濃度５容量％のＣＯ2インキュベーターの中で、３０ｒｐｍの攪拌をしながら、７日間の培養を行った。尚、培養４日目、５日目及び６日目に培地の半分を交換した。培養７日目にサンプリングし、単位体積当たりの細胞核数をクリスタルバイオレットを用いた細胞核計数法により計数し、培地中の細胞濃度（万個／ｍＬ）を測定した。これらの結果を、細胞培養用担体の保水量と共に表１に示した。
【０１２５】
【表１】
0004593581.tif 000002
【０１２６】
表１の結果から、比較例１〜４の細胞培養用担体はＶＥＲＯ細胞が全く増殖していないのに対し、本発明の細胞培養用担体（実施例１〜２４及び４９〜５３）はＶＥＲＯ細胞が良く増殖していることが判明した。
【０１２７】
＜細胞増殖性評価２＞
「無血清培地（商品名：ＶＰ−ＳＦＭ、インビトロジェン（株）製）を無血清培地（商品名：Ｏｐｔｉ−ＰＲＯTMＳＦＭ、インビトロジェン（株）製）に変更したこと」及び「ＶＥＲＯ細胞をＭＤＣＫ細胞（大日本住友製薬（株）製）に変更したこと」以外、＜細胞増殖性評価１＞と同様にして、培地中の細胞濃度（万個／ｍＬ）を測定した。これらの結果を、細胞培養用担体の保水量と共に表２に示した。
【０１２８】
【表２】
0004593581.tif 000003
【０１２９】
表２の結果から、本発明の細胞培養用担体（実施例１〜２４及び４９〜５３）は、比較例１〜４の細胞培養用担体に比べ、ＭＤＣＫ細胞が格段に増殖していることが判明した。
【０１３０】
＜細胞増殖性評価３＞
実施例１〜２４、実施例４９〜５３及び比較例１〜４の細胞培養用担体（Ｃ１）〜（Ｃ２４）及び（Ｃ４９）〜（Ｃ５７）について、生理食塩水で膨潤した細胞培養用担体を１５０Ｇで９０秒間遠心脱水を行い余剰水を取り除いたものの重量が０．４ｇになるように、各々の担体を作動容量１０ｍＬのスピンナーフラスコに投入した。すなわち、担体（Ｃ１）は０．０２９ｇ、担体（Ｃ２）は０．０２１ｇ、担体（Ｃ３）は０．０１８ｇ、担体（Ｃ４）は０．０１７ｇ、担体（Ｃ５）〜（Ｃ７）は０．０１８ｇ、担体（Ｃ８）は０．０１７ｇ、担体（Ｃ９）〜（Ｃ１７）は０．０１８ｇ、担体（Ｃ１８）は０．０１８ｇ、担体（Ｃ１９）は０．０８０ｇ、担体（Ｃ２０）は０．０５０ｇ、担体（Ｃ２１）は０．０１４ｇ、担体（Ｃ２２）は０．０１０ｇ、担体（Ｃ２３）は０．００８ｇ、担体（Ｃ２４）は０．０１９ｇ、（Ｃ４９）〜（Ｃ５１）は０．１８ｇ、（Ｃ５２）は０．２０ｇ、（Ｃ５３）は０．２７ｇ、担体（Ｃ５４）は０．０１８ｇ、担体（Ｃ５５）は０．０４０ｇ、担体（Ｃ５６）は０．４ｇ、担体（Ｃ５７）は０．０８０ｇを各々スピンナーフラスコに投入した。
次に、各々のスピンナーフラスコへ、生理食塩水を１０ｍＬ／フラスコで加え、オートクレーブ滅菌（１２１℃、２０分間）した。オートクレーブ滅菌後、生理食塩水をアスピレータで吸引除去した後、血清培地｛Ｏｐｔｉ−ＭＥＭTMＩ培地（インビトロジェン（株
）製）に、牛インスリン（シグマアルドリッチ社製）を５μｇ／ｍＬ、ヒドロコルチゾン（シグマアルドリッチ社製）を４００ｎｇ／ｍＬ、イソプロテレノール（シグマアルドリッチ社製）を２５０ｎｇ／ｍＬ、ｒｈＥＧＦ（シグマアルドリッチ社製）を１０ｎｇ／ｍＬ 、牛胎児血清（インビトロジェン（株）製）を１０容量％及び抗菌剤（商品名：ＰＳＡ、カスケード社製）を０．２重量％で含有させた血清培地｝を５ｍＬ／フラスコで添加し、１時間放置した後、培地を吸引除去し、再度、同じ血清培地を１０ｍＬ／フラスコで添加した。スピンナーフラスコを３７℃、二酸化炭素ガス濃度５容量％のＣＯ2インキュベーターの中に２時間放置した後、予めプレ培養していた上皮細胞（商品名：ＮＨＥＫ（Ｆ）、倉敷紡績（株）製）を細胞濃度が２０万個／ｍＬになるように血清培地に播種した。３７℃、二酸化炭素ガス濃度５容量％のＣＯ2インキュベーターの中で、３０ｒｐｍの攪拌をしながら、７日間の培養を行った。尚、培養４日目、５日目及び６日目に培地の半分を交換した。培養７日目にサンプリングし、単位体積当たりの細胞核数をクリスタルバイオレットを用いた細胞核計数法により計数し、培地中の細胞濃度（万個／ｍＬ）を測定した。こららの結果を、細胞培養用担体の保水量と共に表３に示した。
【０１３１】
【表３】
0004593581.tif 000004
【０１３２】
表３の結果から、比較例１〜４の細胞培養用担体は上皮細胞が全く増殖していないのに対し、本発明の細胞培養用担体（実施例１〜２４及び４９〜５３）は上皮細胞が良く増殖していることが判明した。
【０１３３】
＜細胞増殖性評価４＞
実施例２５〜４８、比較例１〜２及び比較例５〜６の細胞培養用担体（Ｃ２５）〜（Ｃ４８）、（Ｃ５４）〜（Ｃ５５）及び（Ｃ５８）〜（Ｃ５９）について、生理食塩水で膨潤した細胞培養用担体を１５０Ｇで９０秒間遠心脱水を行い余剰水を取り除いたものの重量が４ｇになるように、各々の担体を作動容量１００ｍＬのスピンナーフラスコに投入した。すなわち、担体（Ｃ２５）は０．２９ｇ、担体（Ｃ２６）は０．２１ｇ、担体（Ｃ２７）は０．１８ｇ、担体（Ｃ２８）は０．１７ｇ、担体（Ｃ２９）〜（Ｃ３１）は０．１８ｇ、担体（Ｃ３２）は０．１７ｇ、担体（Ｃ３３）〜（Ｃ４１）は０．１８ｇ、担体（Ｃ４２）は０．１８ｇ、担体（Ｃ４３）は０．８０ｇ、担体（Ｃ４４）は０．５０ｇ、担体（Ｃ４５）は０．１４ｇ、担体（Ｃ４６）は０．１０ｇ、担体（Ｃ４７）は０．０８ｇ、担体（Ｃ４８）は０．１９ｇ、担体（Ｃ５４）は０．１８ｇ、担体（Ｃ５５）は０．４０ｇ、担体（Ｃ５８）は４ｇ、担体（Ｃ５９）は０．８０ｇを各々スピンナーフラスコに投入した。
各々のスピンナーフラスコへ、生理食塩水を１００ｍＬ／フラスコで加え、オートクレーブ滅菌（１２１℃、２０分間）した。オートクレーブ滅菌後、生理食塩水をアスピレータで吸引除去した後、ＰＢＳを５０ｍＬ／フラスコで添加し、１時放置した。
次に、ＰＢＳを、アスピレータで吸引除去し、ＭＥＭダルベッコ液体培地（大日本住友製薬（株）製）に１容量％の牛胎児血清（インビトロジェン（株）製）を加えた血清培地を５０ｍL／フラスコで添加し、１時間放置した後、培地を吸引除去し、再度、同じ血清培地を１００ｍL／フラスコで添加した。スピンナーフラスコを３７℃、二酸化炭素ガス濃度５容量％のＣＯ2インキュベーターの中に２時間放置した後、予めプレ培養していたＨＴ−１０８０細胞（大日本製薬（株）製）を細胞濃度が２０万個／ｍLになるように培地に播種した。３７℃、二酸化炭素ガス濃度５容量％のＣＯ2インキュベーターの中で、３０ｒｐｍの攪拌をしながら、７日間の培養を行った。尚、培養４日目、５日目および６日目に培地の半分を交換した。培養７日目にサンプリングし、単位体積当たりの細胞核数をクリスタルバイオレットを用いた細胞核計数法により計数し、培地中の細胞濃度（個／ｍＬ）を測定した。これらの結果を、細胞培養担体の保水量と共に表４に示した。
【０１３４】
【表４】
0004593581.tif 000005
【０１３５】
表４の結果から、比較例１〜２及び比較例５〜６の細胞培養用担体はＨＴ−１０８０細胞が全く増殖していないのに対し、本発明の細胞培養用担体（実施例２５〜４８）はＨＴ−１０８０細胞が良く増殖していることが判明した。
【産業上の利用可能性】
【０１３６】
本発明の細胞培養用担体は、無血清培養において優れた細胞増殖性を発揮することができ、またウイルス等の感染因子の混入の危険性がないため、細胞が関係する、研究開発、有用物質生産及び治療等に極めて有用である。
研究開発用としては、分化機能等の細胞機能評価用細胞の培養、動物実験（毒性試験、刺激性試験及び代謝機能試験等）の代替用細胞の培養、遺伝子や蛋白質導入用細胞の培養等に利用できる。
有用物質生産用としては、サイトカイン、血栓溶解剤、血液凝固因子製剤、ワクチン、ホルモン、抗生物質、抗体及び増殖因子等の生産用細胞の培養に利用できる。これらのうち、ワクチンの生産用細胞の培養に好適である。
治療用としては、皮膚、頭蓋骨、筋肉、皮膚組織、骨、軟骨、血管、神経、腱、靭帯、毛胞組織、粘膜組織、歯周組織、象牙質、骨髄、網膜、漿膜、胃腸管及び脂肪等の組織、並びに肺、肝、膵及び腎等の臓器の細胞培養に利用できる。
【配列表】
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