(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
すべての立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物としての式Ｉ
【化１】
0004464560.tif 000013
［式中、Ｒ1は（Ｃ3〜Ｃ7）−シクロアルキル、フェニル、あるいはＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１または２個の同一または異なるヘテロ原子を含有する５−員または６−員の芳香族複素環の基であり、ここでフェニル基および複素環基は未置換であるか、または（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ、ベンジルオキシ、フェノキシ、ベンジル、フェニル、トリフルオロメチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、（(Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ）カルボニル、アミノカルボニル、ニトロ、アミノ、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルアミノ、ジ−（(Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル）アミノおよび（(Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル）カルボニルアミノからなる群より選択される１個以上の同一または異なる基により置換され；
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は互いに独立して水素、ハロゲン、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルまたは（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシであり；
Ｒ6は未置換、あるいは（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ、フェノキシおよびトリフルオロメチルからなる群より選択される１個以上の同一または異なる基により置換されるフェニルであり；
Ｒ7はＲ6と独立してＲ6の定義の１つを意味するか、または水素である］
の化合物またはその生理学的に許容しうる塩（但し、Ｒ1が未置換フェニルであり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ7が水素である場合、Ｒ6は同時に未置換フェニルまたは３,４−ジメトキシフェニルではない）。
【請求項２】
Ｒ1は未置換フェニル、または（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルおよびハロゲンからなる群より選択される１または２個の同一または異なる基により置換されるフェニルである、すべての立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物としての請求項１記載の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容しうる塩。
【請求項３】
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は互いに独立して水素、フッ素、塩素またはメチルである、すべての立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物としての請求項１または２記載の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容しうる塩。
【請求項４】
Ｒ6は未置換、あるいは（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、ハロゲンおよび（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシからなる群より選択される１または２個の同一または異なる基により置換されるフェニルである、すべての立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物としての請求項１〜３の何れかの項記載の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容しうる塩。
【請求項５】
Ｒ6はハロゲンおよび（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシからなる群より選択される１または２個の同一または異なる基により置換されるフェニルである、すべての立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物としての請求項１〜４の何れかの項記載の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容しうる塩。
【請求項６】
Ｒ7は水素である、すべての立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物としての請求項１〜５の何れかの項記載の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容しうる塩。
【請求項７】
Ｒ1は未置換フェニルまたはフルオロフェニルであり；
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は水素であり；
Ｒ6はメトキシフェニルまたはクロロフェニルであり；そして
Ｒ7は水素である、すべての立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物としての請求項１〜６の何れかの項記載の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容しうる塩。
【請求項８】
式IIの安息香酸またはその活性誘導体を式IIIのアミンと反応させる、あるいは式IVのフタルイミドを式Ｖの有機金属化合物と反応させる
【化２】
0004464560.tif 000014
［式II、III、IVおよびＶにおいて、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7は請求項１〜７で定義された通りであり、そしてＭはＬｉ、ＭｇＣｌ、ＭｇＢｒまたはＭｇＩである］ことからなる請求項１〜７の何れかの項記載の式Ｉの化合物の製造法。
【請求項９】
請求項１〜７の何れかの項記載の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容しうる塩を含有する薬剤。
【請求項１０】
可溶性グアニル酸シクラーゼを活性化するための請求項９記載の薬剤。
【請求項１１】
請求項１〜７の何れかの項記載の１種以上の式Ｉの化合物またはその生理学的に許容しうる塩、並びに薬学的に好適な担体を含有する医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は病気、例えば高血圧症、狭心症、心不全、血栓症またはアテローム性動脈硬化症のような心臓血管疾患の治療および予防において有用な薬学的に活性な化合物である式Ｉ
【化３】
0004464560.tif 000002
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7は下記で定義される通りである）の置換イソインドロン誘導体に関する。式Ｉの化合物はサイクリックグアノシン一リン酸(cGMP)の体内産生を調節することができ、一般に乱れたcGMPバランスと関係がある病気の治療および予防において好適である。さらに、本発明は式Ｉの化合物の製造法、上記の病気の治療や予防およびこれらの薬剤の製造におけるそれらの使用、並びに式Ｉの化合物を含有する医薬製剤に関する。
【０００２】
ｃＧＭＰはｃＧＭＰ依存性プロテインキナーゼ、ホスホジエステラーゼおよびイオンチャンネルの調節によって数多くの薬理効果をひき起こす重要な細胞内メッセンジャーである。例えば、平滑筋の弛緩、血小板活性化の阻害、および平滑筋細胞や白血球接着の増殖阻害である。ｃＧＭＰは数多くの細胞外および細胞内刺激に対する反応として粒子状および可溶性グアニル酸シクラーゼ(GC)により産生する。粒子状グアニル酸シクラーゼの場合、刺激は本質的に心房のナトリウム排泄増加ペプチドまたは脳のナトリウム排泄増加ペプチドのようなペプチド性メッセンジャーにより行なわれる。対照的に、細胞質ゾル性ヘテロダイマーヘムタンパク質である可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）は本質的に酵素的に生成する低分子量因子群により調節される。最も重要な刺激剤は一酸化窒素（ＮＯ）または密接に関連した化学種である。一酸化炭素またはヒドロキシル基のような他の因子の機能はまだ大部分が明白でない。５配位ヘム−ニトロシル錯体の形成によるＮＯとヘムの結合はＮＯによる活性化の活性化機構として論じられている。基本状態で鉄に結合しているヒスチジンの関連する放出は酵素をその活性配座に変換する。
【０００３】
活性な可溶性グアニル酸シクラーゼはそれぞれαおよびβサブユニットで構成される。配列、組織特異的分布および様々な発生段階の発現に関して互いに異なる幾つかのサブユニットサブタイプが開示されている。サブタイプα1およびβ1は主に脳および肺で発現するが、β2は特に肝臓および腎臓に存在する。サブタイプα2はヒト胎児脳で確認された。α3およびβ3と呼ばれるサブユニットはヒト脳から単離され、α1およびβ1と相同である。ごく最近の研究は触媒ドメインに挿入部を含有するα2iサブユニットを明示している。すべてのサブユニットは触媒ドメイン領域において大きな相同性を示す。多分、酵素は１個のヘテロダイマーあたり１個のヘムを含有し、それは
β1−Cys−78および／またはβ1−His−105を通して結合しており、調節中心の一部である。
【０００４】
病的な状態において、グアニル酸シクラーゼ活性化因子の生成を減らすことができ、またはそれらの分解をフリーラジカル発生の増加により促進することができる。ｃＧＭＰが関与するそれぞれの細胞反応の弱化によって減少したｓＧＣ活性化は例えば血圧の上昇、血小板の活性化または細胞増殖および細胞接着の増加をもたらす。結果として、内皮形成機能不全、アテローム性動脈硬化症、高血圧症、安定および不安定狭心症、血栓症、心筋梗塞、卒中または勃起性機能不全をもたらす。ｓＧＣの薬理的刺激によりｃＧＭＰ産生を正常化し、このような疾患の治療および予防を可能にすることができる。
【０００５】
ｓＧＣの薬理的刺激の場合、これまではその活性が中間体NO、例えば有機硝酸塩の放出に基づく化合物が殆んど排他的に使用されていた。この治療法の欠点は薬物耐性が現われ、活性が低下し、そのため必要な投与量が増加することである。
【０００６】
ＮＯ放出によって作用しない種々のｓＧＣ刺激剤は比較的多数の論文においてVeselyにより開示されている。しかしながら、その殆んどがホルモン、植物ホルモン、ビタミン、または例えばトカゲ毒のような天然化合物である化合物は一般に細胞溶解物のｃＧＭＰ生成において弱い作用しか示さない（D.L. VeselyのEur. J. Clin. Invest., 15, 258(1985年)；D.L. VeselyのBiochem. Biophys. Res. Comm., 88, 1244(1979年))。ヘムを含まないグアニル酸シクラーゼのプロトポルフィリンIXによる刺激はIgnarroらのAdv. Pharmacol., 26, 35(1994年)において明らかにされている。PettiboneらのEur. J. Pharmacol., 116, 307(1985年)はジフェニルヨードニウムヘキサフルオロホスフェートの抗高血圧作用を開示しており、これはｓＧＣの刺激によるものと示唆している。YuらのBrit. J. Pharmacol., 114, 1587(1995年) によれば、単離したラット大動脈に対して緩和作用を示すイソリキリチゲニンもまた、ｓＧＣを活性化する。Koらの「血液」, 84, 4226(1994年)；YuらのBiochem. J., 306, 787(1995年)；およびWuらのBrit. J. Pharmacol., 116, 1973(1995年) は１−ベンジル−３−（５−ヒドロキシメチル−２−フリル）−インダゾールのｓＧＣを刺激する活性を明らかにし、抗増殖および血小板阻害作用を証明している。EP-A-667345は血小板凝集阻害剤として種々のインダゾールを開示している。
【０００７】
種々の窒素−置換３−ヒドロキシイソインドール−１−オンが知られている。WinnおよびZauggのJ. Org. Chem., 33, 3779(1968年）はＲ1が未置換フェニルであり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ7が水素であり、そしてＲ6が未置換フェニルまたは３,４−ジメトキシフェニルである式Ｉの化合物を開示している。しかしながら、これらの化合物の薬理活性については報告されていない。驚くべきことに、今般、本発明の式Ｉの化合物はグアニル酸シクラーゼの強力な活性化をもたらし、そのため低いｃＧＭＰ濃度と関係がある疾患の治療および予防に好適であることを見い出した。
【０００８】
したがって、本発明はすべての立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物としての式Ｉ
【化４】
0004464560.tif 000003
［式中、Ｒ1は（Ｃ3〜Ｃ7）−シクロアルキル、フェニル、あるいはＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１または２個の同一または異なるヘテロ原子を含有する５−員または６−員の芳香族複素環の基であり、ここでフェニル基および複素環基は未置換であるか、または（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ、ベンジルオキシ、フェノキシ、ベンジル、フェニル、トリフルオロメチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、（(Ｃ1〜Ｃ4)−アルコキシ）カルボニル、アミノカルボニル、ニトロ、アミノ、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルアミノ、ジ−（(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル）アミノおよび（(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル）カルボニルアミノからなる群より選択される１個以上の同一または異なる基により置換され；
【０００９】
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は互いに独立して水素、ハロゲン、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルまたは（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシであり；
Ｒ6は未置換、あるいは（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ、ベンジルオキシ、フェノキシ、ベンジル、フェニル、トリフルオロメチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、（(Ｃ1〜Ｃ4)−アルコキシ）カルボニル、アミノカルボニル、ニトロ、アミノ、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルアミノ、ジ−（(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル）アミノおよび（(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル）カルボニルアミノからなる群より選択される１個以上の同一または異なる基により置換されるフェニルであり；
Ｒ7はＲ6と独立してＲ6の定義の１つを意味するか、または水素である］
の化合物およびその生理学的に許容しうる塩（但し、Ｒ1が未置換フェニルであり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ7が水素である場合、Ｒ6は同時に未置換フェニルまたは３,４−ジメトキシフェニルではない）に関する。
【００１０】
アルキル基は直鎖状または分枝状である。このことはそれらが他の基、例えばアルコキシ基の一部である場合にもあてはまる。アルキル基の例はメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、sec−ブチルおよびｔ−ブチルである。ここで、「アルキル」なる用語は不飽和アルキル基、特に二重結合または三重結合を含有するアルキル基もまた包含する。このような基の例はビニル基、2-プロペニル基(アリル基)、２−ブテニル基、２−メチル-2-プロペニル基、エチニル基、２−プロピニル基（プロパルギル基）または３−ブチニル基である。
【００１１】
シクロアルキル基の例はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルであり、それらはすべて例えば１個以上の同一または異なる（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル基、特にメチルにより置換されていてもよい。置換シクロアルキル基の例は４−メチルシクロヘキシル、４−t-ブチルシクロヘキシルまたは２,３−ジメチルシクロペンチルである。
【００１２】
フェニル基は未置換であるか、あるいは１個以上、例えば２、３または４個の同一または異なる置換基を有する。置換基はどの位置にも存在しうる。好ましくは単−または二置換の置換フェニル基である。単置換フェニル基は２−位、３−位または４−位で置換され、二置換フェニル基では、その置換基は２,３−位、２,４−位、２,５−位、２,６−位、３,４−位または３,５−位に位置する。三置換フェニル基では、その置換基は２,３,４−位、２,３,５−位、２,３,６−位、２,４,５−位、２,４,６−位または３,４,５−位に位置する。
【００１３】
５−員および６−員の芳香族複素環の例はフラン、チオフェン、ピロール、ピラゾール、イミダゾール、１,３−オキサゾール、１,３−チアゾール、ピリジン、ピリダジン、ピリミジンおよびピラジンである。これらの複素環から誘導される基は何れかの炭素原子を通して結合しうる。例えば、チエニル基は２−チエニル基または３−チエニル基として、フリル基は２−フリル基または３−フリル基として、ピリジル基は２−ピリジル基、３−ピリジル基または４−ピリジル基として存在する。複素環は未置換であるか、あるいは１個以上、例えば２、３または４個の同一または異なる置換基を有する。複素環基は好ましくは未置換であるか、あるいは１または２個の同一または異なる基により置換され、特に未置換が好ましい。複素環の置換基は何れかの位置に存在し、例えば２−位を通して結合するフリル基またはチエニル基は３−位、４−位および／または５−位に、３−位を通して結合するフリル基またはチエニル基は２−位、４−位および／または５−位に、２−ピリジル基は３−位、４−位、５−位および／または６−位に、３−ピリジル基は２−位、４−位、５−位および／または６−位に、４−ピリジル基は２−位、３−位、５−位および／または６−位に存在する。複素環基の好ましい置換基は（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル基、特にメチル、および／またはハロゲン原子、特に塩素および／またはフッ素である。窒素複素環はＮ−オキシドとして、または第４塩、ピリジル基、例えばピリジンＮ−オキシドとして存在することもできる。
【００１４】
ニトロ基がフェニル基および／または複素環基の置換基として存在する場合、式Ｉの化合物の分子中のニトロ基の総数は２個以下である。フェニル基、フェノキシ基、ベンジル基またはベンジルオキシ基がフェニル基および／または複素環基の置換基として存在する場合、前記のベンゼン環は未置換であるか、あるいは（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、（(Ｃ1〜Ｃ4)−アルコキシ）カルボニル、アミノカルボニル、ニトロ、アミノ、（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルアミノ、ジ−（(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル）アミノおよび（(Ｃ1〜Ｃ4)−アルキル）カルボニルアミノからなる群より選択される１個以上、例えば２、３または４個の同一または異なる基により置換される。
ハロゲンはフッ素、塩素、臭素または沃素、好ましくはフッ素または塩素である。
【００１５】
本発明は式Ｉの化合物のすべての立体異性体を包含する。式Ｉの化合物に含まれるすべての不斉中心は互いに独立してS配置またはR配置を有する。本発明はすべての可能なエナンチオマーおよびジアステレオマー、並びにすべての比率の２種以上の立体異性体の混合物、例えばエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物もまた包含する。したがって、本発明は左旋性および右旋性対掌体としてエナンチオマー的に純粋な形態で、ラセミ体の形態で、そしてすべての比率の２種のエナンチオマーの混合物の形態でエナンチオマーを提供する。シス／トランス異性の場合、本発明はシス形、トランス形、およびすべての比率のこれらの形態の混合物を提供する。所望ならば、慣用の方法により混合物を分離することにより、例えばクロマトグラフィーまたは結晶化により、合成において立体化学的に均一な出発物質を使用することにより、あるいは立体選択的合成により個々の立体異性体の製造を行なうことができる。適当ならば、立体異性体の分離前に誘導化を行なうことができる。立体異性体混合物の分離は式Ｉの化合物の段階または合成の間の中間体の段階で行なうことができる。可動性の水素原子が存在する場合、本発明は式Ｉの化合物のすべての互変異性体もまた包含する。さらに、本発明は式Ｉの化合物、例えば式Ｉａ
【化５】
0004464560.tif 000004
の化合物のすべての環−鎖互変異性体もまた包含する。
【００１６】
式Ｉの化合物が１個以上の酸性または塩基性基を含有する場合、本発明はその相当する生理学的または毒物学的に許容しうる塩、特に薬学的に使用可能な塩もまた提供する。したがって、酸性基を含有する式Ｉの化合物はこれらの基に関して例えばアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、またはアンモニウム塩として存在し、このような塩として本発明において使用することができる。このような塩の例はナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、生理学的に許容しうる第4アンモニウムイオンとの塩、あるいはアンモニアまたは生理学的に許容しうる有機アミン、例えばエチルアミン、エタノールアミン、トリエタノールアミンまたはアミノ酸との酸付加塩である。１個以上の塩基性基、すなわちプロトン付加することができる基を含有する式Ｉの化合物は無機または有機酸との酸付加塩の形態で、例えば塩化水素、臭化水素、リン酸、硫酸、硝酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、シュウ酸、酢酸、酒石酸、乳酸、サリチル酸、安息香酸、ギ酸、プロピオン酸、ピバル酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、スルファミン酸、フェニルプロピオン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、イソニコチン酸、クエン酸、アジピン酸などとの塩として存在し、本発明において使用することができる。式Ｉの化合物が同時に分子中に酸性および塩基性基を含有する場合、本発明は上記の塩形態の他に分子内塩またはベタインもまた包含する。塩は式Ｉの化合物から当業者によく知られている慣用の方法により、例えば有機または無機酸、あるいは溶媒または分散剤中の塩基と結合させることにより、でなければ他の塩からアニオン交換またはカチオン交換により得ることができる。本発明はまた、低い生理学的適合性のため直接薬剤として使用するのには適していないが、例えば化学反応または生理学的に許容しうる塩の製造のための中間体として使用することができる式Ｉの化合物の塩をすべて包含する。
【００１７】
さらに、本発明は式Ｉの化合物のすべての溶媒和物、例えば水和物またはアルコールとの付加物；式Ｉの化合物の誘導体、例えばエステル; プロドラッグおよび活性代謝物を包含する。
【００１８】
Ｒ1は好ましくは未置換フェニル、あるいは（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルおよびハロゲンからなる群より選択される１または２個の同一または異なる基により置換されるフェニルである。特に好ましくは、Rlは未置換フェニル、あるいは１または２個の同一または異なるハロゲン原子により置換されるフェニルである。とりわけ好ましくは、Ｒ1は未置換フェニルまたはフルオロフェニル、特に４−フルオロフェニルである。
【００１９】
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は好ましくは互いに独立して水素、ハロゲンまたは（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキルであり、特に好ましくは互いに独立して水素、フッ素、塩素またはメチルである。とりわけ好ましい態様において、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5基はすべて水素である。
【００２０】
Ｒ6は好ましくは未置換の、あるいは（Ｃ1〜Ｃ4）−アルキル、ハロゲンおよび（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシからなる群より選択される１または２個の同一または異なる基により、特に２および／または３位で置換されるフェニルである。特に好ましくは、Ｒ6はハロゲンおよび（Ｃ1〜Ｃ4）−アルコキシからなる群より選択される１または２個の同一または異なる基により置換されるフェニルである。とりわけ好ましくは、Ｒ6はメトキシフェニル、特に３−メトキシフェニルであるか、またはクロロフェニル、特に２−クロロフェニルである。
Ｒ7は好ましくは水素である。
【００２１】
好ましい式Ｉの化合物はその中に含まれる１個以上の基が好ましい意味を有するものであり、好ましい置換基定義のすべての組合せが包含される。すべての好ましい式Ｉの化合物のうち、本発明はすべてのそれらの立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物、並びにそれらの生理学的に許容しうる塩もまた包含する。
【００２２】
好ましい式Ｉの化合物群はＲ1が未置換フェニルまたはフルオロフェニル、特に４−フルオロフェニルであり；Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5が水素であり；Ｒ6がメトキシフェニル、特に3-メトキシフェニルであるか、またはクロロフェニル、特に２−クロロフェニルであり；Ｒ7が水素である、すべてのそれらの立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物、並びにそれらの生理学的に許容しうる塩としての化合物からなる。
【００２３】
本発明はまた、下記で説明されるような、それにより本発明の化合物が得られる式Ｉの化合物の製造法を提供する。本化合物は例えばDelceyらの「複素環」, 41, 1721(1995年)に記載の方法と同様にして、２−位がケト基により置換される式IIの安息香酸、または式IIの安息香酸の活性誘導体を式IIIの第１アミンと反応させることにより製造することができる。式IIおよびIIIにおいて、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7基は上記で定義された通りである。
【００２４】
【化６】
0004464560.tif 000005
【００２５】
出発物質として使用される式IIの２−ケト安息香酸および式IIIのアミンは商業的に入手可能であり、また文献に記載の標準法と同様にして製造することができる。式IIの化合物のカルボン酸基が高い反応性の活性誘導体に変換される場合、これは標準法により行なうことができる。活性化のために、酸基は例えばエステル、例えばメチルエステルまたはエチルエステルのようなアルキルエステル；フェニルエステル、クロロフェニルエステルまたはニトロフェニルエステルのようなアリールエステルに変換することができ、あるいは塩化アシルまたは臭化アシルのようなハロゲン化アシルに変換することができ、あるいはアゾリド、例えばカルボニルジイミダゾールを使用してイミダゾリドに変換することができ、あるいは例えばアルキルクロロホルメートと反応させることにより混合酸無水物に変換することができる。式IIIのアミンと反応させるためのカルボン酸基の活性化は例えばカルボジイミドまたはペプチド化学において慣用的に使用される他の試薬のような活性化剤を使用して行なうこともできる。活性化は別の工程または現場で行なうことができる。特に簡単で好ましい方法は塩化カルボニルへの変換による式IIのカルボン酸、特にＲ1が芳香族基、例えばフェニル基であるものの活性化である。塩化ベンゾイルを得るためのこの安息香酸の塩素化は例えば不活性溶媒または分散剤中で、あるいは溶媒なしで塩化チオニル、塩化リンまたは二塩化オキサリルを使用して塩化アシルを製造する標準法により行なうことができる。
【００２６】
式IIの化合物またはそれらの活性化誘導体と式IIIの化合物の反応は当業者によく知られている反応条件下でカルボン酸またはカルボン酸誘導体をアミンと反応させる標準法により行なうことができる。反応は好ましくは不活性溶媒または分散剤中で行なわれる。例えば、この製造法の好ましい別法に従って式IIの化合物の塩化アシルが使用される場合、反応は好ましくは非プロトン性溶媒または分散剤中で行なわれる。この場合、適当な溶媒または分散剤は例えばジエチルエーテル、ジプロピルエーテル、ジブチルエーテル、t-ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエーテル；エチレングリコールジメチルエーテルまたはジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエチレングリコールエーテル、ジ−およびトリエチレングリコールエーテル；酢酸エチルまたは酢酸ブチルのようなエステル；ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドンまたはヘキサメチルリン酸トリアミドのようなアミド；アセトニトリルのようなニトリル；ジメチルスルホキシドまたはスルホランのようなスルホキシドおよびスルホン；石油留分、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン、ジクロロベンゼン、塩化メチレンまたはクロロホルムのような炭化水素および塩素化炭化水素である。しかしながら、個々の場合および使用する式IIの化合物の誘導体に応じて、他の溶媒、例えば水またはアルコール、例えばメタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノールまたはブタノールもまた好適である。一般に２種以上の溶媒の混合物を使用することもできる。
【００２７】
特に式IIの化合物の塩化アシルが使用される好ましい合成法において、反応は好ましくは生成する塩化水素と結合する塩基、例えばトリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、Ｎ−メチルモルホリンまたはピリジンのような第３アミンの存在下で行なわれる。
【００２８】
式Ｉの化合物を得るための式IIの化合物またはそれらの誘導体と式IIIの化合物の反応は一般に０℃〜１４０℃、好ましくは室温〜１４０℃、そして式IIの化合物の塩化アシルを使用する好ましい方法では特に好ましくは７０℃〜１４０℃の温度範囲で行なわれる。反応時間は個々の場合に応じて変わる; 一般に、反応は１〜１０時間で終了する。反応の進行は例えば反応混合物のクロマトグラフィー分析により監視することができる。得られる式Ｉの化合物は慣用の後処理工程、例えば抽出により反応混合物から単離することができ、所望ならば慣用の精製法、例えば結晶化、昇華またはクロマトグラフィーにより精製することができる。
【００２９】
別法の本発明の化合物の製造法では、式IVのフタルイミドを式Ｖの有機金属化合物、例えば有機リチウム化合物またはグリニャール化合物と反応させる。式IVおよびＶにおいて、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6およびＲ7基は上記で定義された通りであり、そしてＭは例えばＬｉ、ＭｇＣｌ、ＭｇＢｒまたはＭｇＩである。
【００３０】
【化７】
0004464560.tif 000006
【００３１】
式IVの出発物質は文献に記載の標準法と同様にして、例えばBahajajおよびVernonのJ. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1041(1996年); BoykinらのJ. Heterocycl. Chem. 28, 609(1991年)またはWanagのChem. Ber. 75, 719(1942年)に記載の方法に従って製造することができる。式Ｖの有機金属化合物は商業的に入手可能であり、また当業者によく知られている方法により、例えば有機ハロゲン化合物をマグネシウムまたはリチウムのような金属と反応させることにより、または金属置換により製造することができる。
【００３２】
式IVのフタルイミドと式Ｖの有機金属化合物の反応は一般に不活性溶媒または分散剤中で行なわれる。好ましい溶媒または分散剤はジエチルエーテル、ジプロピルエーテル、ジブチルエーテル、t-ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエーテル；エチレングリコールジメチルエーテルまたはジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエチレングリコールエーテル、ジ−およびトリエチレングリコールエーテルである。しかしながら、他の不活性溶媒、例えばペンタン、ヘキサン、ヘプタン、ベンゼンまたはトルエンのような炭化水素を使用することもできる。さらに、２種以上の溶媒の混合物を使用することもできる。
【００３３】
式IVおよびＶの化合物の反応は一般に−７５℃〜＋８０℃の温度で行なわれる。最も好ましい反応温度は個々の場合、例えば有機金属化合物の反応性に応じて変わる。多くの場合、最初に反応体を低い温度、例えば約−７０℃または約０℃で化合させ、次に反応混合物をより高い温度、例えば室温または約４０℃に加熱して反応を終了させることが好ましい。上記のようにして得られる式Ｉの化合物は慣用の後処理工程、例えば相分離および／または抽出を用いた水性後処理により反応混合物から単離することができ、所望ならば慣用の精製法、例えば結晶化、昇華またはクロマトグラフィーにより精製することができる。
【００３４】
個々の場合の状況に応じて、上記の方法により式Ｉの化合物を製造する際に保護基を使用することが有利または必要である。どの官能基を一時的に保護する必要があるか、そのためにはどの保護基が好適であるか、そしてどのように保護基を除去するかは当業者に知られており、標準的な有機化学の本、例えばHouben-Weylの「有機化学の方法」、または「有機反応」, John Wiley & Sonsに記載されている。例えば、酸基はベンジルエステルへの変換により保護することができ、そのベンジル基は後で接触水素添加により分解することができる。また、アミノ基はアシル化により保護することができる。官能基を最初に前駆体の形態で存在させ、式Ｉの化合物の分子骨格を合成した後にそれを標準法により所望の基に変換することもできる。例えば、ニトロ基はアミノ基の前駆体として有用である。
【００３５】
本発明の式Ｉの化合物は可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）の活性化を通してｃＧＭＰ濃度の増加に影響を与えるため、低いまたは減少したｃＧＭＰ濃度と関係がある、あるいはそれによりひき起こされる、あるいはその治療または予防において現在のｃＧＭＰ濃度の増加が望ましい疾患を治療および予防する有用な薬剤である。式Ｉの化合物によるｓＧＣの活性化は例えば下記の活性試験において調べることができる。
【００３６】
低いｃＧＭＰ濃度と関係がある、またはｃＧＭＰ濃度の増加が望ましく、その治療および予防において式Ｉの化合物を使用することができる疾患および病的状態は例えば心臓血管疾患、内皮性機能不全、心臓拡張性機能不全、アテローム性動脈硬化症、高血圧症、安定および不安定狭心症、血栓症、再発狭窄症、心筋梗塞、卒中、冠状動脈不全、亢進肺、勃起性機能障害、気管支喘息、慢性腎不全および糖尿病である。また、式Ｉの化合物は肝硬変の治療において、さらに学習または記憶障害を改善するために使用することができる。
【００３７】
式Ｉの化合物およびそれらの生理学的に許容しうる塩は薬剤として単独で、または互いに混合して、または医薬製剤の形態で動物、好ましくは哺乳動物、特にヒトに投与することができる。したがって、本発明はまた、薬剤として使用される式Ｉの化合物およびそれらの生理学的に許容しうる塩；乱れたｃＧＭＰバランスを正常化するためのそれらの使用；特に上記症候群の治療および予防におけるそれらの使用；さらに本目的のための薬剤の製造におけるそれらの使用を提供する。さらに、本発明は活性成分として有効量の少なくとも１種の式Ｉの化合物および／または生理学的に許容しうる塩を慣用の薬学的に好適な担体と共に含有する医薬製剤を提供する。本発明はまた、Ｒ1が未置換フェニルであり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ7が水素であり、そしてＲ6が未置換フェニルまたは３,４−ジメトキシフェニルである、可溶性グアニル酸シクラーゼの活性化剤としてすでに知られている式Ｉの化合物を提供する。したがって、本明細書全体を通して述べた式Ｉの化合物の薬理作用および使用に関する事柄はこれらの２種の化合物についてもあてはまる；すなわち本発明は例えば、活性成分として有効量の少なくとも１種のこれらの化合物および／または生理学的に許容しうる塩を慣用の薬学的に好適な担体と共に含有する薬剤および医薬製剤として使用される、すべての立体異性体およびすべての比率のそれらの混合物としてのこれらの化合物およびみ生理学的に許容しうる塩もまた提供する。
【００３８】
薬剤は例えば丸剤、錠剤、ラッカー塗錠剤、糖衣錠、粒剤、硬質および軟質ゼラチンカプセル剤、水性、アルコール性または油性液剤、シロップ剤、乳剤または懸濁剤の形態で経口的に、あるいは例えば坐剤の形態で直腸的に投与することができる。しかしながら、投与は注射または注入用液剤の形態で非経口的に、例えば皮下的に、筋肉内的にまたは静脈内的に行なうことができる。他の適当な投与態様は例えば軟膏剤、チンキ剤、噴霧剤または経皮治療剤の形態での経皮または局所投与、あるいは鼻内噴霧剤またはエアゾル剤の形態での吸入投与であり、さらにマイクロカプセル剤、移植錠またはロッド剤投与である。好ましい投与態様は例えば治療する疾患およびその程度に応じて変わる。
【００３９】
通常、医薬製剤は０.５〜９０重量％の式Ｉの化合物および／またはそれらの生理学的に許容しうる塩を含有する。医薬製剤の製造はそれ自体知られている方法で行なうことができる。このために、１種以上の式Ｉの化合物および／またはそれらの生理学的に許容しうる塩は１種以上の固体状または液状の薬用担体物質および／または補助物質と共に、所望ならば治療または予防作用を有し、人間医学または獣医学において薬剤として使用することができる他の薬学的に活性な化合物と組み合わせて適当な投与形態または剤形にされる。医薬製剤は一般に１回の投与量あたり０.２〜５００mg、好ましくは１〜２００mgの式Ｉの活性化合物および／またはその生理学的に許容しうる塩を含有する。
【００４０】
丸剤、錠剤、糖衣錠および硬質ゼラチンカプセル剤を製造する場合、例えばラクトース、スターチ、例えばコーンスターチまたはスターチ誘導体、タルク、ステアリン酸またはその塩などを使用することができる。軟質ゼラチンカプセル剤および坐剤用担体物質は例えば脂肪、ロウ、半固体状および液状ポリオール、天然または硬化油などである。液剤、例えば注射剤、乳剤またはシロップ剤の製造に適した担体物質は例えば水、塩水、アルコール、例えばエタノール、グリセロール、ポリオール、スクロース、転化糖、グルコース、マンニトール、植物油などである。また、式Ｉの化合物およびそれらの生理学的に許容しうる塩を凍結乾燥し、得られる凍結乾燥物を例えば注射または注入用製剤を製造するのに使用することができる。マイクロカプセル剤、移植錠またはロッド剤に適した担体物質は例えばグリコール酸および乳酸のコポリマーである。
【００４１】
活性化合物および担体物質の他に、本発明の医薬製剤は慣用の添加剤、例えば充填剤、崩壊剤、結合剤、潤滑剤、湿潤剤、安定剤、乳化剤、分散剤、保存剤、甘味剤、着色剤、芳香剤または着香剤、濃稠化剤、希釈剤、緩衝剤、さらに溶剤、可溶化剤、デポー効果を達成するための物質、浸透圧を変える塩、コーチング剤または抗酸化剤を含有することができる。
【００４２】
投与される式Ｉの活性化合物および／またはその生理学的に許容しうる塩の投与量は個々の場合に応じて変動し、通常は最適な効果を達成する個々の状況に適合される。したがって、それは治療する疾患の性質および程度；治療する人間または動物の性別、年齢、体重および個々の反応性；使用する化合物の作用の効力および持続時間；その治療が急を要するものか、長期間にわたるものか、または予防的なものかどうか；あるいは他の活性化合物が式Ｉの化合物と共に投与されるかどうかで変わる。一般に、体重が約７５kgの成人に投与する場合、有効な結果を得るには１日の投与量は約０.０１〜１００mg／kg、好ましくは０.１〜１０mg／kg、特に０.３〜５mg／kg（それぞれ体重１kgあたりのmg数）が好適である。１日の投与量は１回で、または特に多量に投与される場合は数回、例えば２、３または４回に分けて投与することができる。個々の反応性に応じて、所定の１日量から上方または下方に逸脱させる必要がある場合もある。
【００４３】
式Ｉの化合物は可溶性グアニル酸シクラーゼを活性化する。この特性のため、人間医学および獣医学における薬学的に活性な化合物としての使用の他に、これらはグアニル酸シクラーゼに対するこのような効果が期待される生化学研究における科学ツールまたは補助手段として、さらに診断を目的として、例えば細胞または組織試料の試験管内診断において使用することもできる。さらに、式Ｉの化合物およびその塩はすでに上記したように、特に薬学的に活性な他の化合物の合成における中間体として使用することができる。
次の実施例により本発明を詳しく説明するが、本発明はこれらに制限されない。
【００４４】
【実施例】
実施例１
２−（２−（２−フルオロフェニル）エチル)-3-ヒドロキシ−３−フェニル−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
室温で１０mlの無水トルエン中の０.３１ｇ（２.２ミリモル）の２−（２−フルオロフェニル）エチルアミンおよび０.２２ｇ（２.２ミリモル）のトリエチルアミンを１０mlの無水トルエン中における０.４９ｇ（２.０ミリモル）の２−ベンゾイルベンゾイルクロライドの溶液と滴加混合した。反応混合物を３時間加熱還流した。冷却後、濁った溶液を２０mlの水と混合した。有機相を分離し、２０mlのトルエンで希釈し、１Ｍ塩酸で３回洗浄した。抽出を完了するため、合一した水相をジエチルエーテルで抽出した。合一した有機相を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液で３回、飽和塩化ナトリウム溶液で1回洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。残留物をトルエンから再結晶した。得られた無色の結晶性生成物を吸引ろ過し、乾燥した。収量：０.５３ｇ。融点：２０８℃。
【００４５】
相当するアミンを使用して表１に列挙した次の式Ｉｂの化合物を実施例１と同様にして製造した。
【化８】
0004464560.tif 000007
【００４６】
【表１】
0004464560.tif 000008
【００４７】
実施例１５
２−（２−（２,２−ジフェニルエチル）−３−ヒドロキシ−３−フェニル−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
２,２−ジフェニルエチルアミンを使用して本化合物を実施例１と同様にして製造した。収率：３２％。融点：２３０℃。
【００４８】
実施例１６
３−ヒドロキシ−２−（２−（４−ヒドロキシフェニル）エチル）−３−フェニル−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
室温で３０mlの無水トルエン中の１.４６ｇ（１０.６３ミリモル）の２−（４−ヒドロキシ−フェニル）エチルアミンおよび１.０８ｇ（１０.６３ミリモル）のトリエチルアミンを２０mlの無水トルエン中における２.０ｇ（８.１７ミリモル）の２−ベンゾイルベンゾイルクロライドの溶液と滴加混合した。反応混合物を３時間加熱還流し、冷却し、濁った溶液を２０mlの水と混合した。有機相を分離し、１Ｍ塩酸水溶液で３回洗浄し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。固体状残留物をシリカゲル６０上のカラムクロマトグラフィーにより精製した。トルエン／酢酸エチル（０〜２０％酢酸エチル）を使用してグラジエント溶離を行なった。回転蒸発器を使用して生成物を含有するフラクションを蒸発乾固した。残留物をジエチルエーテル中で懸濁し、吸引ろ過した。収量：０.２１ｇ。融点：１８８℃。
【００４９】
実施例１７
３−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
保護気体下、０℃で３０mlの無水テトラヒドロフラン中の２.０ｇ（７.１１モル）のＮ−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドをジエチルエーテル中における５.３７ｇ（１４.２２ミリモル）の４−フルオロフェニルマグネシウムブロミドの１Ｍ溶液と混合した。反応混合物を室温まで加温し、３時間後に２０mlの飽和重炭酸ナトリウム溶液と混合した。水相をジエチルエーテルで２回抽出した。合一した有機相を乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。固体状残留物をトルエンから再結晶した。これにより無色の針状結晶を得た。収量：２.２１ｇ。融点：１３４℃。
【００５０】
相当するフタルイミドおよび相当するグリニャール試薬を使用して表２に列挙した次の式Ｉｃの化合物を実施例１７と同様にして製造した。表２に示したように精製を行なった。
【００５１】
【化９】
0004464560.tif 000009
【００５２】
【表２】
0004464560.tif 000010
【００５３】
表２に記載の溶媒の意味：
(1)：ジエチルエーテル／ｔ−ブチルメチルエーテルから;
(2)：ジエチルエーテルから;
(3)：ジイソプロピルエーテルから;
(4)：ｎ−ヘプタン／ジエチルエーテルから。
【００５４】
実施例２７
３−ヒドロキシ−３−（４−メトキシフェニル）−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
１０mlの無水ジエチルエーテル中の１０４mg（４.２８ミリモル）のマグネシウム削り屑を０.７９g（４.２７ミリモル）の４−ブロモアニソールと混合した。１滴の臭素を加えて反応を開始した。約２時間後、マグネシウムは完全に溶解した。混合物を０℃まで冷却し、０.３ｇ（１.０７ミリモル）のＮ−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドを加えた。反応混合物を室温まで加温し、２時間後に５mlの飽和重炭酸ナトリウム溶液と混合した。水相をジエチルエーテルで２回抽出した。合一した有機相を乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。得られた油状物をクロマトグラフィーにより精製した。ジクロロメタン／メタノール（０〜２％メタノール）を使用してグラジエント溶離を行なった。無色の油状物として得られた生成物をジエチルエーテルとの共蒸発により発泡させた。収量：０.３２ｇ。融点：１１９℃。
【００５５】
実施例２８
３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−３−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
室温で、１０mlの無水ジエチルエーテル中の１７２mg（７.０８ミリモル）のマグネシウム削り屑を１.６ｇ（７.１１ミリモル）の４−トリフルオロメチルブロモベンゼンと混合した。１滴の臭素を加えて反応を開始した。約２時間後、マグネシウムは完全に溶解した。混合物を０℃まで冷却し、０.５ｇ（１.７８ミリモル）のＮ−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドを加えた。反応混合物を室温まで加温し、２時間後に５mlの飽和重炭酸ナトリウム溶液と混合した。水相をジエチルエーテルで２回抽出した。合一した有機相を乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。赤色の結晶性残留物をトルエンから再結晶した。これにより、無色の生成物を得た。収量：０.４９ｇ。融点：１６７℃。
【００５６】
実施例２９
３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−３−（４−ピリジル）−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
０.６９ｇ（３.５５ミリモル）の４−ブロモピリジン塩酸塩を最初に遊離塩基に変換した。次に、その塩を５mlの１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液に溶解し、溶液をジエチルエーテルで３回抽出し、合一した有機相を乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。残留物を5mlの無水ジエチルエーテルに溶解し、溶液を−７０℃でｎ−ヘキサン中の１.６Ｍブチルリチウム溶液（３.９８ミリモル）および１０mlの無水ジエチルエーテルの混合物に滴加した。混合物を−７０℃で３０分間攪拌し、次に１０mlの無水テトラヒドロフラン中における０.５ｇ（１.７８ミリモル）のＮ−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドの溶液を滴加した（黄色から褐色に変色した）。１時間後、反応混合物を室温まで加温し、１０mlの飽和塩化アンモニウム溶液と混合し、ジエチルエーテルで３回抽出した。合一した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で１回洗浄し、乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。結晶性残留物をジイソプロピルエーテル／エタノールから再結晶して無色の結晶性生成物を得た。収量：０.２８ｇ。融点：１９０℃。
【００５７】
実施例３０
３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−３−（３−ピリジル）−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
−７０℃で、無水ジエチルエーテル中の１.６Ｍブチルリチウム溶液（３.９９ミリモル）を無水ジエチルエーテル中における０.５６ｇ（３.５６ミリモル）の３−ブロモピリジンの溶液と滴加混合した。混合物の色は黄色に変わり、沈澱が生成した。−７０℃で１時間後、１０mlの無水テトラヒドロフラン中における０.５ｇ（１.７８ミリモル）のＮ−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドの溶液を滴加した。反応混合物を室温まで加温し、さらに1時間攪拌し、次に１０mlの飽和塩化アンモニウム溶液と混合した。混合物をジエチルエーテルで３回抽出した。合一した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で１回洗浄し、乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。無色の油状粗生成物をクロマトグラフィーにより精製した。ジクロロメタン／メタノール（０〜３％メタノール）を使用してグラジエント溶離を行なった。得られた無色の油状物は室温で放置すると固化した。収量：０.３４ｇ。融点：９７℃。
【００５８】
実施例３１
３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−３−（２−チエニル）−２，３−ジヒドロイソインドール−１−オン
０.３ｇ（１.０７ミリモル）のＮ−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドを１０mlの無水テトラヒドロフランに溶解し、０℃で０.１４ｇ（１.６ミリモル）の２−チエニルリチウムの１Ｍ溶液と滴加混合した。反応混合物を室温まで加温し、その後、攪拌を２時間続け、混合物を１０mlの飽和塩化アンモニウム溶液と混合した。混合物をジエチルエーテルで３回抽出し、合一した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で１回洗浄し、乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。油状粗生成物をクロマトグラフィーにより精製した。ジクロロメタン／メタノール（０〜１％メタノール）を使用してグラジエント溶離を行なった。収量：０.２ｇの油状物。
【００５９】
実施例３２
５,６−ジクロロ−３−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
０.４ｇ（１.１４ミリモル）の４,５−ジクロロ−Ｎ−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドを１０mlの無水テトラヒドロフランに溶解し、０℃でテトラヒドロフラン中における4-フルオロフェニルマグネシウムブロミド（１.７１ミリモル）の１Ｍ溶液と混合した。混合物を室温で３時間攪拌し、テトラヒドロフラン中における４−フルオロフェニルマグネシウムブロミド（1ミリモル）の１Ｍ溶液を再び加えた。１時間後、反応混合物を１０mlの飽和塩化アンモニウム溶液と混合した。有機相を分離し、水相をジエチルエーテルで３回抽出した。合一した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。無色の残留物をジエチルエーテル中で懸濁し、吸引ろ過した。収量：０.１３ｇ。融点：１６９℃。
【００６０】
実施例３３
４,５,６,７−テトラフルオロ−３−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
０.４ｇ（１.１３ミリモル）の３,４,５,６−テトラフルオロ−Ｎ−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドを１０mlの無水テトラヒドロフランに溶解し、０℃でテトラヒドロフラン中における４−フルオロフェニルマグネシウムブロミド（２.３ミリモル）の１Ｍ溶液と混合した。反応混合物を室温で３時間攪拌し、１０mlの飽和塩化アンモニウム溶液と混合し、有機相を分離し、水相をジエチルエーテルで３回抽出した。合一した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。無色の残留物をトルエンから再結晶した。収量：０.３２ｇ。融点：１６１℃。
【００６１】
実施例３４
４,７−ジフルオロ−３−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
０.２５ｇ（０.７９ミリモル）の３,６−ジフルオロ−Ｎ−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドを１０mlの無水テトラヒドロフランに溶解し、０℃でテトラヒドロフラン中における０.３１ｇ（１.５８ミリモル）の４−フルオロフェニルマグネシウムブロミドの１Ｍ溶液と混合した。反応混合物を室温で3時間攪拌し、１０mlの飽和塩化アンモニウム溶液と混合し、有機相を分離し、水相をジエチルエーテルで3回抽出した。合一した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。無色の残留物をジエチルエーテル中で懸濁し、吸引ろ過した。収量：０.１９ｇ。融点：１５２℃。
【００６２】
実施例３５
４,７−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−３−フェニル−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
０.１７ｇ（０.５３ミリモル）の３,６−ジフルオロ−Ｎ−（３−メトキシフェニル）エチル）フタルイミドを５mlの無水テトラヒドロフランに溶解し、０℃でテトラヒドロフラン中における０.１９ｇ（１.０７ミリモル）のフェニルマグネシウムブロミドの１Ｍ溶液と混合した。反応混合物を室温で３時間攪拌し、５mlの飽和塩化アンモニウム溶液と混合し、有機相を分離し、水相をジエチルエーテルで３回抽出した。合一した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。無色の残留物をジエチルエーテル中で懸濁し、吸引ろ過した。収量：０.０８５ｇ。融点：１４１℃。
【００６３】
実施例３６
３−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシ−２−（２−（３−メトキシフェニル）エチル）−４,５,６,７−テトラメチル−２,３−ジヒドロイソインドール−１−オン
０.２３ｇ（０.６８ミリモル）のＮ−（３−メトキシフェニル）エチル）−３,４,５,６−テトラメチル−フタルイミドを５mlの無水テトラヒドロフランに溶解し、０℃でテトラヒドロフラン中における０.２７ｇ（１.３６ミリモル）の４−フルオロフェニルマグネシウムブロミドの１Ｍ溶液と混合した。混合物を室温で３時間攪拌し、その後、テトラヒドロフラン中における４−フルオロフェニルマグネシウムブロミド（２ミリモル）の１Ｍ溶液を再び加えた。反応混合物を室温で１時間攪拌し、５mlの飽和塩化アンモニウム溶液と混合した。有機相を分離し、水相をジエチルエーテルで３回抽出した。合一した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥し、回転蒸発器を使用して蒸発乾固した。油状残留物をジイソプロピルエーテルから再結晶した。収量：０.１８ｇ。融点：１８１℃。
【００６４】
薬理試験
可溶性グアニル酸シクラーゼの活性化
本発明の化合物による、グアノシン三リン酸（ＧＴＰ）のサイクリックグアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）およびピロリン酸への変換を触媒する可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）の活性化をAmershamの酵素免疫測定法（ＥＩＡ）に従って定量した。このために、試験する物質を最初にマイクロタイタープレートにおいてｓＧＣと一緒にインキュベートし、次に生成したｃＧＭＰの量を測定した。
【００６５】
使用するｓＧＣをウシ肺から単離した（「酵素学の方法」、第195巻、第377頁を参照)。試験溶液（１００μl／ウェル）は５０mMのトリエタノールアミン（ＴＥＡ）緩衝剤（pH７.５）、３mMのＭｇＣｌ2、３mMの還元グルタチオン（ＧＳＨ）、０.１mMのＧＴＰ、１mMの３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）、適当に希釈した酵素溶液および試験する物質、または対照実験では溶媒を含有した。試験する物質をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、その溶液をＤＭＳＯ／水で希釈して試験混合物中における試験物質の最終濃度を５０μMとした。試験混合物中のＤＭＳＯ濃度は５％（v/v）である。ｓＧＣを加えて反応を開始した。反応混合物を３７℃で１５〜２０分間インキュベートし、次に氷冷し、停止試薬（５０mMのＥＤＴＡ, pH８.０）を加えて反応を停止した。５０μlの試料を採取し、Amersham cGMP-EIAキットのアセチル化プロトコルを使用するｃＧＭＰ含量測定に使用した。各試料の吸収量をマイクロタイタープレート読取装置において４５０nm（参照波長６２０nm）で測定した。同じ試験条件下で得られた標準曲線を使用してｃＧＭＰ濃度を測定した。試験物質によるｓＧＣの活性化は（試験物質の代わりに溶媒を使用する）対照実験で得られた基本的な酵素活性のｎ−倍刺激として表わす（式
【数１】
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を使用して計算した）。
【００６６】
次の測定値が得られた：
【表３】
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【００６７】
比較のために試験した化合物Ａは１−ベンジル−３−（５−ヒドロキシメチル−２−フリル）−インダゾール（C.-C. WuらのBrit. J. Pharmacol., 116,1973(1995年)）である。