(57)【要約】本発明は多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物がβ−ラクタム系抗生物質の活性を増強させる特徴を利用した薬剤耐性菌感染症治療に関する。より具体的には、本発明は、多価フェノール誘導体または医薬的に許容され得るそれらの塩を含むβ−ラクタム系抗生物質の活性増強剤、およびβ−ラクタム系抗生物質および多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物を含む薬剤耐性菌感染症治療のための医薬組成物、および治療方法、医薬組成物の製造のための使用、消毒剤、および多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物を含む機能性食品を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
多価フェノール誘導体または医薬的に許容され得るそれらの塩を含むβ−ラクタム系抗生物質の活性増強剤。
【請求項２】
さらにタラ抽出物を含む、請求項１記載のβ−ラクタム系抗生物質の活性増強剤。
【請求項３】
有効成分として多価フェノール誘導体または医薬的に許容され得るそれらの塩を含むタラ抽出物を含むβ−ラクタム系抗生物質の活性増強剤。
【請求項４】
上記β−ラクタム系抗生物質が、オキサシリン、セファピリン、アンピシリン、ベンジルペニシリン、セフォキシチンである、請求項１〜３のいずれか１項記載の活性増強剤。
【請求項５】
上記多価フェノール誘導体が、式Ｉ：
2004066992.tif 000013
［式中、Ｒは低級アルキル、ＯＲ１（ここで、Ｒ１は低級アルキルである）、またはカテキンアニオンである］で示される多価フェノール誘導体である、請求項１〜４のいずれか１項記載の活性増強剤。
【請求項６】
上記多価フェノール誘導体が、式ＩＩ：
2004066992.tif 000014
［式中、ＲはＯＲ１（ここで、Ｒ１は低級アルキルである）、またはカテキンアニオンである］で示される多価フェノール誘導体である、請求項５記載の活性増強剤。
【請求項７】
上記多価フェノール誘導体が、メチルガレート、エチルガレート、ｎ−プロピルガレート、ｎ−ブチルガレート、ｎ−ペンチルガレート、ｎ−ヘキシルガレート、ｎ−ヘプチルガレート、ｎ−オクチルガレート、ｎ−ノニルガレート、ｎ−デシルガレート、ｎ−ウンデシルガレート、ｎ−ラウリルガレート、イソブチルガレート、イソアミルガレート、カテキンガレート、ガロカテキンガレートまたはエピカテキンガレートである、請求項６記載の活性増強剤。
【請求項８】
上記多価フェノール誘導体が、４，５−ジ−ガロイルキニン酸メチルエステルまたは３，４，５−トリ−ガロイルキニン酸メチルエステルである、請求項１〜４のいずれか１項記載の活性増強剤。
【請求項９】
β−ラクタム系抗生物質および請求項１〜８のいずれか１項に記載の活性増強剤を含む、薬剤耐性感染症治療のための医薬組成物。
【請求項１０】
有効成分として医薬的有効量のβ−ラクタム系抗生物質および請求項１〜８のいずれか１項に記載の活性増強剤を投与することを特徴とする薬剤耐性感染症の治療方法。
【請求項１１】
薬剤耐性感染症の治療のための医薬組成物の製造のためのβ−ラクタム系抗生物質、請求項１〜８のいずれか１項に記載の活性増強剤および適当な医薬添加物の使用。
【請求項１２】
β−ラクタム系抗生物質および請求項１〜８のいずれか１項に記載の活性増強剤を含む薬剤耐性菌用消毒剤。
【請求項１３】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の活性増強剤を含む機能性食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物がβ−ラクタム系抗生物質の活性を増強させる特徴を利用した薬剤耐性菌感染症治療のための医薬組成物に関する。さらに、多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物を有効成分とする薬剤耐性菌に対する抗菌作用を有する消毒剤又は機能性食品に関する。
【背景技術】  最初の抗生物質であるペニシリンはβ−ラクタム環を有し、ブドウ球菌に対して優れた効力を発揮した。しかし、ペニシリンが利用されるようになってまもなくペニシリンを分解する酵素ペニシリナーゼ（β−ラクタマーゼ）を産生するペニシリン耐性菌が出現した。その後、メチシリンなどのペニシリナーゼ抵抗性ペニシリンやセフェム系の抗生物質が開発され、問題は解決されたかのように思われた。しかし、メチシリンが開発された１年後に、メチシリンに耐性を示す株ＭＲＳＡが出現し、その後、全ての抗生物質に耐性を示すＭＲＳＡが臨床レベルで分離された。すなわち、ＭＲＳＡは、ペニシリン系だけでなく、セフェム系抗生物質、アミノ配糖体系、マクロライド系、ニューキノロン系抗生物質にも広く耐性をもった多剤耐性黄色ブドウ球菌として、重大な社会問題となってきた。現在用いられているＭＲＳＡ感染症に対する抗生物質としてバンコマイシン（ＶＣＭ）等があるが、ＶＣＭの短時間殺菌作用は決して強力でなく聴毒性や腎毒性等の重篤な副作用の問題がある。従ってこのような耐性菌に対し有効な新規抗菌薬の開発が急務となっている。
【発明の開示】
本発明者らは副作用がないかあっても弱い生薬から抗ＭＲＳＡ活性を有する化合物を検索するうちに、タラ（Ｔａｒａ，Ｃａｅｓａｌｐｉｎｉａ  ｓｐｉｎｏｓａ）抽出物およびタラ抽出物から得られた多価フェノール誘導体がβ−ラクタム剤耐性を抑制し、感受性を誘導するという興味ある事実を発見した。本発明はこのような知見に基づいて完成されたものである。
本発明に用いられる「タラ」は、日本のタラノキとは別のペルー原産のマメ科のＴａｒａ（学名  Ｃａｅｓａｌｐｉｎｉａ  ｓｐｉｎｏｓａ）であり、このタラには、メラニン色素をつくる酵素チロシナーゼを抑制するエラグ酸が含まれ、シミ・ソバカスを防ぎ美白作用があることが知られている（例えば、ＬＩＯＮ生活情報、「日やけによるシミ・ソバカスを防ぐには」、［平成１４年１１月６日検索］、インターネット＜ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｌｉｏｎ．ｃｏ．ｊｐ／ｌｉｆｅ／ｌｉｆｅ３ｐ２．ｈｔｍ＞参照）。また、タラから抽出されたガロタンニンに脱臭作用があるとの開示もある（例えば、特開平９−３２７５０４号公報参照）。
しかし、タラ抽出物がβ−ラクタム系抗生物質との組み合わせによる耐性菌に対する増強活性は知られていない。
本発明の第１の態様は、多価フェノール誘導体または医薬的に許容され得るそれらの塩を含むβ−ラクタム系抗生物質の活性増強剤である。
本発明の第２の態様は、多価フェノール誘導体または医薬的に許容され得るそれらの塩を有効成分として含むタラ抽出物を含むβ−ラクタム系抗生物質の活性増強剤である。
本発明の「タラ」は、ペルー原産のマメ科のＴａｒａ（学名  Ｃａｅｓａｌｐｉｎｉａ  ｓｐｉｎｏｓａ）であり、全草中に多価フェノール誘導体を約０．２５％含む。タラ抽出物とはタラを適当な有機溶媒または水で抽出したものをいう。有機溶媒とは例えばメタノール、エタノールをいい、水との混液であってもよい。また、タラはどの部位であってもよい。多価フェノール誘導体は５０％エタノール抽出エキス中に約０．３２％含まれている。各種ガレート類は市販のものを用いることができる。
β−ラクタム系抗生物質は、好ましくは、オキサシリン、セファピリン、アンピシリン、ペニシリン、セフォキシチンであり、より好ましくは、オキサシリンおよびセファピリンである。
多価フェノール誘導体としては、式Ｉ：
2004066992.tif 000002
［式中、Ｒは低級アルキル、ＯＲ１（ここで、Ｒ１は低級アルキルである）、またはカテキンアニオンである］で示される多価フェノール誘導体を挙げることができる。
より具体的には、多価フェノール誘導体が、式ＩＩ：
2004066992.tif 000003
［式中、ＲはＯＲ１（ここで、Ｒ１は低級アルキルである）、またはカテキンアニオンである］で示されるガルス酸（没食子酸）誘導体であり、例えば、メチルガレート、エチルガレート、ｎ−プロピルガレート、ｎ−ブチルガレート、ｎ−ペンチルガレート、ｎ−ヘキシルガレート、ｎ−ヘプチルガレート、ｎ−オクチルガレート、ｎ−ノニルガレート、ｎ−デシルガレート、ｎ−ウンデシルガレート、ｎ−ラウリルガレート、イソブチルガレート、イソアミルガレート、カテキンガレート、ガロカテキンガレートおよびエピカテキンガレートを挙げることができる。好ましくは、メチルガレート、エチルガレート、ｎ−プロピルガレート、ｎ−ブチルガレート、ｎ−ペンチルガレート、ｎ−オクチルガレート、ｎ−ノニルガレート、ｎ−デシルガレート、イソブチルガレート、イソアミルガレート、カテキンガレート、ガロカテキンガレートおよびエピカテキンガレートであり、より好ましくは、ｎ−プロピルガレート、ｎ−ブチルガレート、ｎ−ペンチルガレート、イソアミルガレートおよびカテキンガレートである。
さらに、タラからＯＨがガルス酸で置換されたキニン酸（１，３，４，５−テトラヒドロキシシクロヘキサンカルボン酸）誘導体である、４，５−ジ−ガロイルキニン酸メチルエステル、３，４，５−トリ−ガロイルキニン酸、３，４，５−トリ−ガロイルキニン酸メチルエステル、３，４−ジ−ガロイルキニン酸の存在が確認され、これらにもβ−ラクタム系抗生物質の活性増強作用があり、特に、３，４，５−トリ−ガロイルキニン酸および４，５−ジ−ガロイルキニン酸メチルエステルが優れている。
本発明の第３の態様は、β−ラクタム系抗生物質および上記の活性増強剤を含む、薬剤耐性感染症治療のための医薬組成物である。
本発明の第４の態様は、タラ抽出物およびタラ抽出物より得られた多価フェノール誘導体とβ−ラクタム抗生物質を有効成分として含む薬剤耐性菌用消毒剤である。
本発明の第５の態様は、抗生物質の薬剤耐性菌に対する活性を増強させる多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物を含む薬剤耐性菌感染症の予防または改善のための機能性食品である。
【発明を実施するための最良の形態】  この明細書で用いられる「低級アルキル」は、飽和の直鎖または分枝状の炭素原子１〜１２個を含む炭化水素残基をいう。例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、ｎ−ウンデシル、ｎ−ラウリル、イソブチル、イソアミルをいう。また、「カテキンアニオン」は、例えば、カテキン、ガロカテキン、エピカテキンのアニオンをいう。
また、本発明の多価フェノール誘導体、抗生物質または抗菌薬には製薬上許容され得るそれらの塩が含まれる。製薬上許容され得る塩とは、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム等の塩、およびプロカイン、ジベンジルアミン等のアミン塩類や塩酸塩等の酸添加塩など、通常用いられる医薬的に許容可能な塩を意味する。また、他の医薬有効成分とともに処方することができる。
薬剤耐性菌としては、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、ペニシリナーゼ産生黄色ブドウ球菌、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、バンコマイシン耐性黄色ブドウ球菌（ＶＲＳＡ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）、基質特異性拡張型β−ラクタマーゼ（ＥＳＢＬＳｓ）などを挙げることができ、好ましくはＭＲＳＡであり、ペニシリナーゼ産性黄色ブドウ球菌であってもよい。
本発明に用いられるβ−ラクタム系抗生物質の例としては、ベンジルペニシリン、フェノキシメチルペニシリン、フェネチシリン、プロピシリン、アンピシリン、メチシリン、オキサシリン、クロキサシリン、フルクロキサシリン、ジクロキサシリン、ヘタシリン、タランピシン、バカンピシリン、レナンピシリン、アモキシシリン、シクラシリン、カルベニシリン、スルベニシリン、チカルシリン、カリンダシリン、カルフェシリン、ピペラシリン、メズロシリン、アスポキシシリン、セファロリジン、セファゾリン、セファピリン、セファセトリル、セフテゾール、セファログリシン、セファレキシン、セファトリジン、セファクロル、セフロキサジン、セファドロキシル、セファマンドール、セフォチアム、セファロチン、セフラジン、セフロキシム、セフォキシチン、セフォタキシム、セフチゾキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフトリアキソン、セフゾナム、セフタジジム、セフェピム、セフピロム、セフォゾプラン、セフォセリス、セフルプレナム、セフォペラゾン、セフピミゾール、セフピラミド、セフィキシム、セフテラムピボキシル、セフポドキシムプロキセチル、セフチブテン、セフェタメトピボキシル、セフジニル、セフジトレンピボキシル、セフカペンピボキシル、セフスロジン、セフォキシチン、セフメタゾール、ラタモキセフ、セフォテタン、セフプペラゾン、セフミノクス、フロモキセフ、アズトレオナム、カルモナム、イミペネム、パニペネム、メロペネム、ビアペネム、ファロペネム、リチペネムアコキシル、またはこれらの混合物を挙げることができ、好ましくはアンピシリン、ベンジルペニシリン、フェネチシリン、メチシリン、オキサシリン、カルベニシリン、セファピリン、セフラジン、セフロキシム、セフォキシチン、セフォタキシム、パニペネムであり、より好ましくは、アンピシリン、セファピリン、ベンジルペニシリン、オキサシリン、セフォキシチンまたはこれらの混合物である。
抗生物質は製薬上許容され得る塩の形態であってもよく、製薬上許容され得る塩とは、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム等の塩、およびプロカイン、ジベンジルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、メチルグルカミン、タウリン等のアミン塩類や塩酸塩等の酸付加塩および塩基性アミノ酸など、通常抗生物質の塩として用いられる医薬的に許容可能な塩を意味する。
本発明の多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物の投与形態としては、通常の抗生物質と同様に非経口投与、経口投与または局所投与があげられる。一般的には、注射剤による投与が好適である。この場合注射剤は常法により調製され、注射剤の形態として、適当なビヒクル、例えば滅菌した蒸留水、生理食塩水等で溶解される場合も含まれる。
また多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物は様々な投薬型でβ−ラクタム系抗生物質と組み合わせることによって経口投与することができる。例えば、錠剤、カプセル、糖などで被覆した錠剤、液状溶液または懸濁液の形態である。
予防・治療で用いる多価フェノール誘導体とβ−ラクタム系抗生物質との併用剤の合計投与量は、組み合わせる薬剤の種類や、その併用比、または年齢、体重、患者の症状および投与経路によって変えることができ、例えば、成人（体重５０ｋｇ）に対して投与する場合は、１回投与当たり、組み合わせた両薬剤の和で１０ｍｇ〜２ｇを１日に１回から３回経口投与する。これらの投与量および投与経路を変化させることによって最良の治療効果をあげるようにする。
本発明において、多価フェノール誘導体とβ−ラクタム系抗生物質を併用あるいは混合する際の重量比についても幅広い範囲で適用することが可能である。また、感染症の種類および重篤度、併用されるβ−ラクタム系抗生物質の種類によって併用比は変わるので、併用比は特に限定されないが、常用量の範囲内で組み合わせれば併用効果を期待できる濃度の組み合わせが実現できる。
本発明の医薬組成物は、通常、常法に従って調製され、医薬的に適切な形態で投与される。例えば、固体経口形態は、活性化合物と共に、ラクトース、デキストロース、サッカロース、セルロース、トウモロコシ澱粉およびジャガイモ澱粉などの希釈剤、シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸カルシウムおよび／またはポリエチレングリコールなどの滑沢剤、澱粉、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリジンなどの結合剤、澱粉、アルギン酸、アルギン酸塩、グリコール酸デンプンナトリウムなどの崩壊剤、発泡剤、色素、甘味料、例えばレシチン、ポリソルベート、ラウリル硫酸塩などの湿潤剤、および一般に非毒性および医薬的処方に用いられる薬学的に非活性な物質を含んでいてもよい。
上記医薬組成物は既知の方法、例えば混合、粒状化、錠剤化、糖衣、または被覆方法などにより製造される。
非経口投与の場合、直腸への適用を意図した坐剤でも可能であるが汎用剤形は注射剤である。注射剤では液体製剤、用時溶解型製剤、懸濁製剤などの外観を異にする剤形があるが、基本的には活性成分を適当な方法により無菌化したのち、直接容器に入れ、密封する点で同一と考えられる。
最も簡単な製剤化法としては、活性成分を適当な方法により無菌化したのち、これを別々に、または物理的に混合した後、その一定量を分割製剤化する方法がある。液剤形態を選ぶ場合には活性成分を適当な媒体に溶解し、これを滅菌濾過したのち適当なアンプルまたはバイアルに充填、密封する方法をとることができる。
この場合汎用される媒体は注射用蒸留水であるが、本発明においては、これに拘束されるものではない。また必要ならば、塩酸プロカイン、塩酸キシロカイン、ベンジルアルコールおよびフェノールなどの局所麻酔作用を有する無痛化剤、ベンジルアルコール、フェノール、メチル、またはプロピルバクベン、およびクロロブタノールなどの防腐剤、クエン酸、酢酸、リン酸のナトリウム塩などの緩衝剤、エタノール、プロピレングリコール、塩酸アルギニンなどの溶解補助剤、Ｌ−システイン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−ヒスチジンなどの安定化剤、さらには等張化剤などの添加剤を添加することも可能である。
本発明の多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物はβ−ラクタム剤と混合して抗菌剤または殺菌剤として調製することができる。これらの抗菌剤または殺菌剤は、０．１〜１０（重量）％程度の濃度の多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物とβ−ラクタム剤の適量を含む。他の抗菌剤または殺菌剤をも含むことができる。ハサミ、メス、カテーテルなどの器具、患者の排出物の消毒、皮膚、粘膜、創傷の洗浄に用いる。
また、本発明の活性増強剤は薬剤耐性菌感染症を予防するための機能性食品の形態で適用することができる。
飲食品として使用する場合の形態については特に制限はなく、例えば、ドリンク剤、固形物、ゼリー状食品等があり、固形物には製剤として粉剤、顆粒剤、錠剤及びカプセル剤のいずれかの形態に加工したものが含まれる。また、前記多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物をうどん、そば等の麺類、クッキー、ビスケット、キャンディー、パン、ケーキ、その他の食品に、また、清涼飲料水、乳酸飲料その他種々の飲料に添加することもできる。
実験例
実験例１  オキサシリンに対するタラ抽出物の活性増強作用（ディスク拡散法）
タラのさやの部分１０ｇを５０％メタノール１００ｍｌで抽出後、濾過し、タラ抽出物を得た。抗菌活性の測定としてディスク拡散法を用いて行った。Ｂａｓｅ培地として、ＭＨＡ（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  Ａｇａｒ）及びオキサシリン（Ｏｘａｃｉｌｌｉｎ）（１０μｇ／ｍｌ）含有ＭＨＡを作成し、その上を前培養したＭＲＳＡ  菌株番号５、１×１０５ＣＦＵ／ｍｌを添加した半流動ＭＨＡでカバーした。直径６ｍｍのディスクを置き、その上にタラ抽出物１００μｇを添加し、３７℃で培養し、２４時間、４８時間後の阻止円の大きさを測定した。
結果
2004066992.tif 000004
表１からわかるように、対照の阻止円の大きさが２１ｍｍであったのに対して、オキサシリン含有では２４ｍｍと３ｍｍも阻止円の大きさが増大した。このことはタラの成分が抗生物質の感受性を高めていることを示している。
実験例２  オキサシリンに対する各種ガレートの活性増強作用
（寒天平板希釈法による）
日本化学療法学会の定める寒天平板希釈法に従ってＭＩＣ（ｍｉｎｉｍｕｍ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を測定した。感受性測定用培地としてＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  ＩＩ  Ａｇａｒ（ＭＨＡ）にＣａイオン５０ｍｇ／ｌ、Ｍｇイオン２５ｍｇ／ｌと２％ＮａＣｌを添加したＣＡＭＨＡを用いた。３７℃、一晩培養した菌液を生理食塩水で１０６ＣＦＵ／ｍｌになるよう希釈しミクロプランター（佐久間製作所）を用いて感受性測定用平板に接種し、３７℃、２４時間培養後、ＭＩＣを判定した。結果を表２−１および表２−２に示す。
2004066992.tif 000005
2004066992.tif 000006
結果
オキサシリンとの併用効果に関しては、多価フェノールの側鎖の炭素数が多くなるにつれて併用効果が強くなり、炭素数５個のｎ−ペンチルガレートはＭＲＳＡ  菌株番号２に関しては２５μｇ／ｍｌの濃度においてオキサシリンのＭＩＣ値を２５６μｇ／ｍｌから０．０６μｇ／ｍｌまで高めた。また、この併用効果は炭素数をさらに多くすると減少し、側鎖の炭素数４〜６が最も高い併用効果を示すことがわかった。これらの効果はＭＲＳＡのみでなく、ＭＳＳＡにおいても見られた。さらに多価フェノールの側鎖が枝別れしたイソブチルガレートや、イソアミルガレートにも強い併用効果が見られた。
なお、ＭＲＳＡ  菌株番号２に対するオキサシリン単独のＭＩＣは２５６であり、ｎ−ペンチルガレート単独のＭＩＣは、下記の表３−１に見られるように、６７．５であり、本来抗菌活性を示さない２５μｇ／ｍｌをオキサシリンと併用することによって、オキサシリンのＭＩＣが０．０６３になるのであるから、ｎ−ペンチルガレートには優れた増強活性があることがわかる。
実験例３  ガルス酸および各種ガレート単独の抗菌活性
（寒天平板希釈法による）
ガルス酸、各種ガレートおよび多価フェノール誘導体の単独のＭＲＳＡおよびＭＳＳＡに対するＭＩＣを実験例２と同様にして測定した。結果を表３−１および表３−２に示す。
2004066992.tif 000007
2004066992.tif 000008
結果
表３からわかるように、単独でのガルス酸および各種ガレートのＭＲＳＡおよびＭＳＳＡに対する抗菌活性は、側鎖の炭素数が多くなるにつれて、強くなり、炭素数９から１０のノニルガレート、デシルガレートが最も強く、ＭＩＣ値は１５．７μｇ／ｍｌだった。さらに炭素数が増えると活性は弱くなった。
実験例４  他のβ−ラクタム剤に対するイソアミルガレートの活性増強作用
（寒天平板希釈法による）
オキサシリンと強い併用効果がみられたイソアミルガレートと他のβ−ラクタム剤との併用効果を検討するために、実験例２と同様にしてＭＩＣを測定した。結果を表４に示す。
結果
2004066992.tif 000009
表４に示したように、ペニシリンＧ、セフォキシチン、アンピシリンおよびセファピリンにおいても強い併用効果がみられた。
実験例５  オキサシリンに対するガロイルキニン酸誘導体の活性増強作用
（寒天平板希釈法による）
タラから下記の既存物質の存在が確認されたので、オキサシリンとの併用効果について実験例２と同様にして、ＭＩＣを判定した。結果を表５に示す。
2004066992.tif 000010
2004066992.tif 000011
結果
オキサシリンとの併用効果に関しては、３，４，５−トリ−ガロイルキニン酸が最も強く、続いて４，５−ジ−ガロイルキニン酸メチルエステルが強く、３，４，５−トリ−ガロイルキニン酸メチルエステル、３，４−ジ−ガロイルキニン酸の併用効果は弱かった。
実験例６  オキサシリンに対する各種ガレートの活性増強作用
（ＭＩＣ（微量液体希釈法による）の測定およびＦＩＣ）
日本化学療法学会の定める微量液体希釈法に従って行った。感受性測定用培地としてＭＨＢ（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  ｂｒｏｔｈ）にＣａイオン５０ｍｇ／ｌ、Ｍｇイオン２５ｍｇ／ｌと２％ＮａＣｌを添加したＣＡＭＨＡを用いた。９６穴マイクロプレートに薬剤含有感受性測定用培地を１００μｌ分注し、３７℃、一晩培養した菌液を生理食塩水で希釈し、最終菌濃度５×１０５ＣＦＵ／ｗｅｌｌになるように添加した。３７℃、２４時間培養後、菌の発育の有無からＭＩＣを測定した。これらの結果からＦＩＣ（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）値を算出し、併用効果の強さを測定した。結果を表６に示す。
結果
2004066992.tif 000012
表６から分かるように供試したＭＲＳＡ  ＣＯＬ株、菌株番号５共に抗菌活性、ならびにオキサシリンとの併用効果がみられた。すなわち、表６において、ＭＩＣは各種ガレートのＭＩＣであり、従って、単独での効果はオクチルガレート、ノニルガレート、デシルガレート、ウンデシルガレートが最も抗菌活性が強く、オキサシリンとの併用効果を示すＦＩＣ値ではブチルガレート、イソブチルガレートが最も併用効果を示すことがわかった。また、カテキンガレート、ガロカテキンガレートおよびエピカテキンガレートの併用効果はさらに強く特にカテキンガレートが強い併用効果を示した。
【実施例】  実施例１  タラ抽出物の製造
タラ（Ｃａｅｓａｌｐｉｎｉａ  ｓｐｉｎｏｓａ）１ｋｇを１０倍量の５０％エタノールで２時間、６０℃で抽出した。抽出後、濾過し、濾液を約４分の１まで６０℃で濃縮した。濃縮液と等量の酢酸エチルを加え、分液し、酢酸エチル層を濃縮乾固し、シリカゲルクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン−酢酸エチルで溶出させた。溶出した画分を濃縮乾固し、タラ抽出物約２．５ｇを得た。
実施例２（錠剤）
常法によりイソアミルガレート５０ｍｇ、オキサシリン５０ｍｇ、乳糖１ｇ、デンプン３００ｍｇ、メチルセルロース５０ｍｇ、タルク３０ｍｇを１０錠の錠剤に調製して白糖で糖衣する。
実施例３〜１８（錠剤）
イソアミルガレートに替えて、メチルガレート、エチルガレート、ｎ−プロピルガレート、ｎ−ブチルガレート、ｎ−ペンチルガレート、ｎ−ヘキシルガレート、ｎ−ヘプチルガレート、ｎ−オクチルガレート、ｎ−ノニルガレート、ｎ−デシルガレート、ｎ−ウンデシルガレート、ｎ−ラウリルガレート、イソブチルガレート、カテキンガレート、ガロカテキンガレートおよびエピカテキンガレートを用いて実施例１と同様にして錠剤を調製する。
実施例１９（注射剤）
メチルガレート５００ｍｇ、オキサシリン５００ｍｇからなる無菌混合物を滅菌バイアルに入れ密封する。使用時にこの混合物を生理食塩水に溶解し、注射剤とする。
実施例２０〜２７（注射剤）
メチルガレートに替えて、エチルガレート、ｎ−プロピルガレート、ｎ−ブチルガレート、ｎ−ペンチルガレート、イソブチルガレート、カテキンガレート、ガロカテキンガレートおよびエピカテキンガレートを用いて実施例１８と同様にして注射剤を調製する。
実施例２８（消毒剤）
イソアミルガレート、オキサシリン、エタノールおよび滅菌蒸留水を原料とする消毒剤である。これらの消毒剤は以下のような比率で調製する。
イソアミルガレート      ２５ｍｇ
オキサシリン            １０ｍｇ
エタノール            ５００ｍｌ
滅菌蒸留水            ５００ｍｌ
実施例２９（機能性食品）
タラのさやの部分１ｋｇに対し５０％エタノール１０ｌを入れ、加熱抽出し、濾過した液を適当な量まで濃縮し、スプレードライで粉末乾燥しエキスとする。このエキスに砂糖、密、液糖等の糖質を加えたものを用いて、クッキー等を作製する。また、このエキスを粉剤、錠剤にして機能性食品とすることができる。
【産業上の利用の可能性】
本発明の多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物と、β−ラクタム系抗生物質または抗菌薬を併用することにより、薬剤耐性菌に対するβ−ラクタム系抗生物質または抗菌薬の活性を増強する効果があると共に、使用するβ−ラクタム系抗生物質または抗菌薬の量を減らすことができ、未然にβ−ラクタム系抗生物質に対する耐性獲得の機会を減少させることが可能である。従って、本発明は多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物がβ−ラクタム系抗生物質の活性を増強させる特徴を利用した薬剤耐性菌感染症治療のための医薬組成物として、また、多価フェノール誘導体および／またはタラ抽出物を有効成分とする薬剤耐性菌に対する抗菌作用を有する消毒剤又は機能性食品にとして用いることができる。
【手続補正書】
【提出日】平成16年10月20日(2004.10.20)
【手続補正００１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（削除）
【請求項２】
（削除）
【請求項３】
（削除）
【請求項４】
（削除）
【請求項５】
（削除）
【請求項６】
（削除）
【請求項７】
（削除）
【請求項８】
（削除）
【請求項９】
（削除）
【請求項１０】
（削除）
【請求項１１】
（削除）
【請求項１２】
（削除）
【請求項１３】
（削除）
【請求項１４】
下式（ＩＩＩ）
2004066992.tif 000015
（式中、Ａは低級アルキルまたは次式（ＩＶ）
2004066992.tif 000016
で表される原子団を示し、ここでＲ１は水素原子若しくはガロイル基、Ｒ２はガロイル基をそれぞれ表す。）
で示される多価フェノール誘導体若しくは医薬的に許容され得るそれらの塩および／またはタラ抽出物を有効成分として含むβ−ラクタム系抗生物質の活性増強剤。
【請求項１５】
下式（Ｖ）
2004066992.tif 000017
（式中、Ａは低級アルキルまたは次式（ＩＶ）
2004066992.tif 000018
で表される原子団を示し、ここでＲ１は水素原子若しくはガロイル基、Ｒ２はガロイル基をそれぞれ表す。）
で示される多価フェノール誘導体若しくは医薬的に許容され得るそれらの塩および／またはタラ抽出物を有効成分として含むβ−ラクタム系抗生物質の活性増強剤。
【請求項１６】
上記β−ラクタム系抗生物質が、アンピシリン、ベンジルペニシリン、フェネチシリン、メチシリン、オキサシリン、カルベニシリン、セファピリン、セフラジン、セフロキシム、セフォキシチン、セフォタキシムおよびパニペネムのいずれかまたはこれらの混合物である、請求項１４から１５のいずれか１項に記載の活性増強剤。
【請求項１７】
下式（Ｖ’）
2004066992.tif 000019
（式中、Ａ’は低級アルキルを表す。）
で示される多価フェノール誘導体若しくは医薬的に許容され得るそれらの塩を有効成分として含む、請求項１４から１６のいずれか１項に記載の活性増強剤。
【請求項１８】
４，５−ジ−ガロイルキニン酸メチルエステルおよび／または３，４，５−トリ−ガロイルキニン酸メチルエステルを有効成分として含む、請求項１４から１６のいずれか１項に記載の活性増強剤。
【請求項１９】
タラ抽出物を有効成分として含む、請求項１４から１６のいずれか１項に記載の活性増強剤。
【請求項２０】
β−ラクタム系抗生物質および請求項１４から１９のいずれか１項に記載の活性増強剤を含む、薬剤耐性感染症治療のための医薬組成物。
【請求項２１】
有効成分として医薬的有効量のβ−ラクタム系抗生物質および請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の活性増強剤を投与することを特徴とする薬剤耐性感染症の治療方法。
【請求項２２】
薬剤耐性感染症の治療のための医薬組成物を製造するためのβ−ラクタム系抗生物質、請求項１４から２１のいずれか１項に記載の活性増強剤および医薬添加物の使用。
【請求項２３】
β−ラクタム系抗生物質および請求項１４から１９のいずれか１項に記載の活性増強剤を含む薬剤耐性菌用消毒剤。
【手続補正００２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
2004066992.tif 000020
表４に示したように、ペニシリンＧ、セフォキシチン、アンピシリンおよびセファピリンにおいても強い併用効果がみられた。
実験例５  オキサシリンに対するガロイルキニン酸誘導体の活性増強作用


【手続補正００３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
2004066992.tif 000021
表６から分かるように供試したＭＲＳＡ  ＣＯＬ株、菌株番号５共に抗菌活性、ならびにオキサシリンとの併用効果がみられた。すなわち、表６において、ＭＩＣは各種ガレートのＭＩＣであり、従って、単独での効果はオクチルガレート、ノニルガレート、デシルガレート、ウンデシルガレートが最も抗菌活性が強く、オキサシリンとの併用効果を示すＦＩＣ値ではブチルガレート、イソブチルガレートが最も併用効果を示すことがわかった。また、カテキンガレート、ガロカテキンガレートおよびエピカテキンガレートの併用効果はさらに強く特にカテキンガレートが強い併用効果を示した。




【国際調査報告】
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