(57)【要約】本発明は、南瓜子、紅花、オオバコ及びスイカズラからなる組成物を投与することで、Ｃ型慢性肝炎患者の自覚症状、例えば全身倦怠感及び腹部膨満感などが消失するだけでなく、及び医師の診断による他覚症状、例えば肝腫大及び手掌紅斑なども軽減または消失させることができる。また、本発明組成物投与１ヶ月後乃至３ヶ月後と徐々にＣ型肝炎ウイルスＲＮＡ量の有意な減少が認められた。従って、本発明に係る組成物は、少なくとも、Ｃ型慢性肝炎治療用組成物として有用である。特に、Ｃ型慢性肝炎患者のうちＣ型慢性肝炎ウイルスＲＮＡ量が高値の患者に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
南瓜子、紅花、オオバコ、及びスイカズラからなるＣ型慢性肝炎ウイルスＲＮＡ量減少用組成物。
【請求項２】
南瓜子、紅花、オオバコ、及びスイカズラからなるＣ型慢性肝炎の症状改善あるいは軽減用組成物。
【請求項３】
南瓜子、紅花、オオバコ、及びスイカズラを有効成分とするＣ型慢性肝炎における肝硬変進展抑制用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、Ｃ型肝炎治療用組成物に関する。より具体的には、Ｃ型慢性肝炎ウイルスＲＮＡ量減少用組成物、Ｃ型慢性肝炎の症状改善または軽減用組成物、Ｃ型慢性肝炎における肝硬変進展抑制用組成物並びにそれらの調製方法に関する。
【背景技術】  Ｃ型肝炎の原因はＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ  ＲＮＡウイルス）であり、例えば血液などの体液を介して感染する。
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）は、その遺伝子型からいくつかのサブタイプに分類される。ＨＣＶ株を大きくタイプ１からタイプ６に分類し、またサブタイプとしてａ、ｂ、及びｃ等を併記し、１ａ、１ｂ、２ａ、２ｂ、３ａ、及び３ｂ等と命名する分類法が用いている（例えば、加藤宣之編・著：Ｃ型肝炎ウイルス、株式会社アイピーシー、東京、２０００、１６８頁）。
ＨＣＶに感染すると６０％の人が１〜２ヶ月の潜伏期を経過して急性肝炎を起こすが、Ｃ型肝炎では肝障害や症状が軽いものが多く、急性肝炎の時期がはっきりしないこともある。Ｃ型急性肝炎は高率に（６０〜７０％）慢性肝炎へと進む。当該慢性肝炎ではＡＳＴ［ａｓｐａｒｔａｔｅ  ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＧＯＴ；ｇｌｕｔａｍａｔｅ  ｏｘａｌｏａｃｅｔａｔｅ  ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ、ともいう）］、ＡＬＴ［ａｌａｎｉｎｅ  ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＧＰＴ；ｇｌｕｔａｍａｔｅ  ｐｙｒｕｖａｔｅ  ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ、ともいう）］は異常値を示し、２〜３年で当該数値がいったん正常値域に近くなるか、正常値域に戻る。この状態が、数年から十年続くので、ＨＣＶ感染から１０年以上経ってから、Ｃ型慢性肝炎と診断されることもある。２０〜３０年の期間に肝細胞の慢性的な壊死・炎症反応を繰り返すうちに肝炎から肝硬変に、さらに１０年で肝細胞癌へと進展するといわれている（例えば、熊谷直樹：Ｃ型肝炎、「毎日ライフ」２００２年９月号第２３頁参照、読売新聞社、２００２年発行）。
Ｃ型慢性肝炎患者のうち、自覚症状が認められるのは活動期のみである。症状としては、全身倦怠感、易疲労感、食思不振、悪心あるいは嘔吐などがある。さらに進行した肝硬変の患者になると、自覚症状をともなう患者の割合は約８０％に上昇し、腹部膨満感や皮膚掻痒感などの症状が付け加わってくる。腹痛や吐血あるいは下血などの症状も見られる。他覚症状は肝腫大が最も一般的であり、頻度は約６割といわれ、そのほか肝左葉腫大、脾腫、浮腫、腹水、手掌紅斑、あるいは黄疸などが現れてくる（例えば、加藤宣之編・著：Ｃ型肝炎ウイルス、株式会社アイピーシー、東京、２０００、１８９頁）。
Ｃ型肝炎の一般的治療方針は、肝機能を正常化して肝炎を鎮静化させて病気の進行を抑えることである。ウイルスが体内にいても肝炎を抑えれば病気の進行を抑えられるという考えに基づいて、肝炎の症状を改善、低減する目的で、ウルソデオキシコール酸（熊胆含有成分）、小柴胡湯（柴胡、黄ゴン、半夏、（乾）生薑、人参、大棗、甘草の７種の生薬を煎出して調製される漢方処方）、甘草含有成分のグリチルリチン酸を主体とする製剤［強力ネオミノファーゲンＣ（ＳＮＭＣ）］（商品名）を投与する療法も広く行われている。
しかし、何よりも病気の進行を食い止める為に体内からＨＣＶを排除することを目的とした「インターフェロン（ＩＦＮ）療法」の開発が精力的に行われてきた。抗ウイルス剤と使用されるＩＦＮにはαとβがあり、ｎＩＦＮα（天然型インターフェロンα）、ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＩＦＮα（遺伝子組換え型インターフェロンα）、ｎＩＦＮβ（天然型インターフェロンβ）とｃｏｎｓｅｎｓｕｓＩＦＮα［コンセンサスインターフェロンα：インターフェロンアルファコン−１（遺伝子組換え）］が使用されている。これらＩＦＮの使用によりウィルスを完全に除去した著効例、一般肝機能が改善された有効例も報告されており、さらにＩＦＮの使用により肝癌の発ガン率が低下する進展抑制効果も認められている。
ＨＣＶに対する抗ウイルス作用を示すＩＦＮ以外の物質としては、ラクトフェリンが挙げられる。ラクトフェリンは、１本のポリペプチド鎖にガラクトースやマンノースなどからなる糖鎖が結合した分子量約８０，０００の糖蛋白質で鉄結合性のトランスファミリーに属する。ラクトフェリンの作用機序は細胞外に存在するウイルスを中和し、感染できなくすると考えられている。
一方、南瓜子、オオバコ、またはスイカズラの１種以上を飼料に添加することにより、寄生虫、細菌及びウイルス病の特に自然感染を防ぎ、生体防御力の強化と共に肉質、卵質を改善する旨が開示されている。さらには、南瓜子、オオバコ、スイカズラ、紅花の４種の生薬を配合した飼料について採卵鶏の健康状態、生存率、卵質の向上、抗ロイコチトゾーン病効果、ウズラの抗ニューカッスル病効果、腸内コクシジウム、ブドウ球菌数抑制効果が開示されている（例えば、米国特許５，８８２，６７２号参照）。
ニホンカボチャ等のウリ科植物からインターフェロン誘起剤の製造方法が開示されている（例えば、米国特許４，４２１，７４６号参照）。西洋南瓜（スーダン薬用植物）のメタノール抽出物がＨＣＶプロテアーゼ阻害効果を示し、その阻害活性は４７．４±０．０％であったことが報告されているが、該文献にはｉｎ  ｖｉｖｏにおいてＣ型肝炎ウイルスを低下させるということについては開示も示唆もされていない（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（２０００）１４，５１０−５１６）。また、オオバコ（Ｐｌａｎｔａｇｏ  ｍａｊｏｒ  Ｌ．）がＣ型肝炎かどうかは不明であるが、肝炎ウィルスの治療に使われているとの報告例もあるが、実際に効果があるかどうかについては開示も示唆もない（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，（１９９０）Ｖｏｌ．ＸＶＩＩＩ，Ｎｏｓ．１−２，ＰＰ．３５−４３）。紅花から抽出したインターフェロン誘起剤の抗ウイルス活性及び抗腫瘍活性が開示されている（例えば、米国特許４，４５６，５９７号参照）。また、金銀花、あるいは車前子等からインターフェロン誘起剤が抽出され、ヒト及び動物のウイルス感染症の予防及び治療に有用であることが開示されている（例えば、米国特許４，４６９，６８５号参照）。南瓜子と紅花の２種の生薬を配合することからなるマクロファージ活性化剤が開示されている（例えば、特開平１１−１１６４９８号参照）。南瓜子、紅花、オオバコ及びスイカズラの４種の生薬を配合することからなる好中球活性化剤が開示されている（例えば、特開２０００−２８１５８４参照）。しかしながら、これらの文献には、本発明の有効成分である各生薬についてインターフェロン誘起作用、マクロファージ活性化作用、好中球活性化作用、あるいは、ＩｇＥ抗体産生抑制作用などが開示されているが、抗Ｃ型肝炎ウイルス活性については何ら開示も示唆もされていない。
Ｃ型慢性肝炎のうち、特にタイプ１ｂでＣ型肝炎患者の血液中のウイルス量が高い（一般的には１００ＫＩＵ／ｍｌ以上を指す）場合は「難治性Ｃ型慢性肝炎」と呼ばれ、これらの症例に対する治療法の更なる開発が望まれている（例えば、熊谷直樹：Ｃ型肝炎、毎日ライフ９月号、読売新聞社、東京、２００２）。なお、最近発売された最も根治率の高いとされているインターフェロンアルファコン−１でも、ウイルス量が、８５０ＫＩＵ／ｍｌ以下にならないと、根治は望めないとされており、またウイルス量が低ければ低いほどインターフェロン療法の治療効果が良いことが分かっている（厚生省「非Ａ非Ｂ型肝炎研究班」１９９５年報告、別冊医学のあゆみ「肝障害の発症・進展機序をさぐる」１９９９年２月５日発行、医歯薬出版株式会社発行、肝胆膵４３，（２），ｐｐ．２８１−２８８，２００１参照）。したがって、インターフェロン療法の導入前においては、出来るだけウイルス量が出来るだけ低い状態であることが望ましいとされている。
【発明の開示】
本発明は、従来のＣ型肝炎治療法と併用可能で、かつ、これらと併用することにより、従来では治療困難とされてきたＣ型慢性肝炎の治療に有用な生薬を利用したものであって、南瓜子、紅花、オオバコ、及びスイカズラを有効成分とするＣ型慢性肝炎治療用組成物を提供することにある。より具体的には、Ｃ型慢性肝炎の症状進行抑制または症状改善用組成物、並びにこれらの組成物の調製方法を提供することにある。
本発明者等は、植物性生薬につき鋭意検討した結果、Ｃ型慢性肝炎患者、特に血液中Ｃ型慢性肝炎ウィルスＲＮＡ量が高値を示す患者に南瓜子、紅花、オオバコ及びスイカズラからなる組成物を投与した結果、驚くべきことに患者の自覚症状、代表的には全身倦怠感または腹部膨満感を改善すること、及び医師の診断による他覚症状、代表的には肝腫大又は手掌紅斑を改善することを確認し、本発明組成物投与１ヶ月後、３ヶ月後と徐々にＣ型肝炎ウイルスＲＮＡ量減少していることを見出した。
即ち、本発明の態様は、
・南瓜子、紅花、オオバコ、及びスイカズラからなるＣ型慢性肝炎ウイルスＲＮＡ量減少用組成物、
・南瓜子、紅花、オオバコ、及びスイカズラからなるＣ型慢性肝炎の症状改善あるいは軽減用組成物、及び
・南瓜子、紅花、オオバコ、及びスイカズラを有効成分とするＣ型慢性肝炎における肝硬変進展抑制療用組成物に関する。
また、上記Ｃ型慢性肝炎ウイルスＲＮＡ量減少用組成物、Ｃ型慢性肝炎症状改善または軽減用組成物、及びＣ型慢性肝炎における肝硬変進展抑制用組成物の調製方法に関する。
さらに、本発明は、従来の治療薬、好ましくはｎＩＦＮα、ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＩＦＮα、ｃｏｎｓｅｎｓｕｓＩＦＮα、ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ（ＰＥＧ−ＩＦＮ）、ＩＦＮβ、ＩＦＮ／ｒｉｂａｖｉｒｉｎ等との併用により、ウイルス量が５００ＫＩＵ／ＭＩ以上の高い値を示す患者における、インターフェロンによるＣ型慢性肝炎の根治を可能とする佐薬的な効力を示す組成物、換言すれば、Ｃ型慢性肝炎治療共力剤組成物に関する。
【図面の簡単な説明】  図１は、実施例２における各検査時のＨＣＶ−ＲＮＡ量（ＫＩＵ／ｍｌ）の平均値を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】  以下、本発明をさらに詳細に説明する。
まず、本発明において使用される生薬について説明する。
南瓜子は、ウリ科の植物南瓜（和名：ニホンカボチャＣｕｃｕｒｂｉｔａ  ｍｏｓｃｈａｔａ  Ｄｕｃｈ．）の種子であるが、本発明においては、南瓜子と同じ性質の作用効果を示す種子であれば、その類縁植物の種子をも包含するものである。南瓜子は、生のまま使用してもよいが、乾燥品の方が医薬、健康食品として保存上好ましく、また、種皮のみを用いてもよい。成分としてククルビチン、タンパク質、ビタミンＡ、Ｂ１、Ｂ２，Ｃを含み、またカロチン等も含まれている。
紅花（Ｃａｒｔｈａｍｕｓ  ｔｉｎｃｔｏｒｉｕｓ  Ｌ．）は、キク科植物の管状花を乾燥したものである。成分としてはカルサミン、サフラーイエロー、リグナン、ステロールを含む。
オオバコ（Ｐｌａｎｔａｇｏ  ａｓｉａｔｉｃａ  Ｌ．）は、オオバコ科の植物で、成熟した種子（車前子）または全草（車前）が用いられる。成分としては多糖類、Ｐｌａｎｔｅｎｏｌｉｃ  ａｃｉｄ、コハク酸、アデニン、Ａｕｃｕｂｉｎ、ＰｌａｎｔａｇｉｎｉｎやビタミンＡ、Ｂ１等を含む。
スイカズラ（Ｌｏｎｉｃｅｒａ  ｊａｐｏｎｉｃａ  ＴＨＵＮＢ．）は、スイカズラ科の花若しくは蕾（金銀花）、葉、茎あるいは全草（忍冬）のいずれもが使用可能である。成分としては蝋様物質、イノシトール、タンニン、サポニン、ロニセリン等を含む。
本発明では、これらの生薬を原末あるいは水または有機溶媒抽出エキスとして用いることができる。即ち、原末、溶媒製剤、粉剤、成型剤、浸出剤等として用いる。
有機溶媒としてはエタノール、アセトン等が用いられ、これらは水あるいは２種以上の有機溶媒と混合して用いてもよい。抽出は生薬に対し数倍量の溶媒を加え常温乃至加温下に抽出あるいは浸出を行う。各生薬単独で抽出したエキスを配合してもよく、あるいは、予め複数の生薬の原末を配合したものを抽出してエキスを得てもよい。また、生薬を原末として使用するときは、その生鮮、陰干し、あるいは乾燥したものを用い細断あるいは粉末として用いる。
上記生薬の原末あるいは水または有機溶媒抽出エキスは、そのまままたは公知の方法で各種の形態に調製して、医薬用組成物、健康食品、あるいは機能性食品（サプリメント）として利用できる。
例えば、医薬用組成物あるいは機能性食品（サプリメント）は、通常の製剤化方法により経口用の錠剤、散剤、細粒剤、カプセル剤、丸剤、シロップ剤として提供される。製剤化の為に、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、緩衝剤、矯味剤、安定剤等を必要に応じて添加することもできる。少なくとも１つの不活性な希釈剤、例えば乳糖、マンニトール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムと混合される。組成物は常法に従って、不活性な希釈剤以外の添加剤、例えばステアリン酸マグネシウム、スターチ、タルクのような潤滑剤や繊維素グリコール酸カルシウムのような崩壊剤、ラクトースのような安定化剤、グルタミン酸またはアスパラギン酸のような溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤または丸剤は必要によりショ糖、ゼラチン、寒天、ペクチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートなどの糖衣または胃溶性若しくは腸溶性物質のフィルムで被膜してもよい。
また、本発明の有効成分である生薬の活性に悪影響を与えない範囲内であれば、水溶性ビタミン（カフェイン、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビオチン、カルニチン、パントテン酸、及びニコチン酸とその誘導体など）、脂溶性ビタミン（ビタミンＡ、ビタミンＥとその誘導体など）、アミノ酸（タウリン、アルギニンなどの）、東洋ハーブ（紫蘇、甘草、イチョウ、蒲公英、菊花、人参、桂皮など）、あるいは西洋ハーブ（ノコギリヤシ、セイヨウオトギリソウ、エキナシア、アニシード、アニュアルカモミル（カミツレ）、ローズマリー、ミント、ユーカリプタス、ラベンダー、ローズ（バラ）、ハイビスカス、アロエなど）を配合することもできる。さらに、使用方法などとの関係によっては、その他の有効成分として、ラクツロースなどのオリゴ糖等または市販の乳酸菌（ビフィズス菌）等を配合することもできる。
経口投与の為の液体組成物は、製薬学的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含み、一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水、エタノールを含む。この組成物は不活性な希釈剤以外に湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。
また、健康食品としては、飲料、あるいはゼリー、ビスケット、クッキー、キャンディー等菓子の形態で提供することができる。
本発明に係る組成物は、南瓜子及び紅花、さらにオオバコ、スイカズラあるいは紫蘇の生薬を有効成分として含有するが、特に南瓜子は２０〜６０質量％、紅花は１０〜４０質量％、その他の生薬については各々５〜７０質量％の範囲で含むのが好ましい。
本発明有効成分の投与法は、投与対象の年齢、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定されるが、通常、成人６０ｋｇ体重１日当たり生薬総量として０．５〜５ｇ、好ましくは１〜３ｇを、経口投与する。健康食品、サプリメントなどの場合にもこれに準じればよい。
本発明におけるＣ型慢性肝炎治療共力剤組成物とは、先にあげたＣ型肝炎の一般的治療方針の中で使用されるインターフェロンやウルソデオキシコール酸などの薬物と併用することにより相加的又は相乗的な効果を示すものである。本発明組成物と上記他の一般的Ｃ型肝炎治療薬との併用におけるそれぞれの投与の順序は、特に制限なく、同時に併用してもよく、また、本発明組成物を服用数ヵ月後に上記他の一般的Ｃ型肝炎治療薬のによる治療を開始してもよく、逆に上記他の一般的Ｃ型肝炎治療薬による治療を数ヵ月後に行った後、維持療法的に本発明組成物を服用することも出来る。
また、本発明は、ヒトのＣ型肝炎ウイルス性疾患の症状改善・軽減用だけでなく、犬あるいは猫等のコンパニオン動物の肝炎ウイルスに対する治療薬、症状改善・軽減用健康食品としても応用できる。
【実施例】  以下に実施例及び試験例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例等により何ら限定的に解釈されるべきものではない。
【実施例１】（１）Ｃ型慢性肝炎患者のＣ型肝炎ウイルスＲＮＡ量測定試験
通院中の試験開始時にＲＮＡ量が高値であったＣ型慢性肝炎患者２６名（男性１３名、女性１３名。２８〜８０（平均５９．０）歳を対象とした。本発明組成物の１つである商品インターパンチ（登録商標；（株）サンウエル製）を、１日２包（１．５ｇ／包）を３ヶ月間投与した。投与前、１ヶ月及び３ヶ月後の来院時に自覚症状、他覚症状、一般生化学所見及びＨＣＶ−ＲＮＡ量も測定した。
（２）試験結果
自覚症状として全身倦怠感のあった６例中４例、また腹部膨満感のあった１例中１例の症状が投与１ヶ月後でなくなった。他覚症状として肝腫大のあった１３例中２例が、また手掌紅斑があった６例中１例の症状が投与１ヶ月後になくなった。加えて自覚症状及び他覚症状が試験開始前より悪化していた患者はいなかった。一般臨床検査（血液学的検査（白血球数、赤血球数、ヘモグロビン量、ヘマトクリット値、血小板数、白血球像）、血液生化学的検査（総蛋白、アルブミン、Ａ／Ｇ、総ビリルビン、ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＺＴＴ、ＬＤＨ、アルカリフォスファターゼ、γ−ＧＴＰ、総コレステロール、ＴＧ、尿素窒素、クレアチニン、Ｎａ、Ｋ、Ｃｌ））では悪化した傾向は認められなかった（例えば、日本肝臓学会監修：慢性肝炎診療マニュアル、医学書院、東京、２００１、ＩＳＢＮ：４２６０１１９７７Ｘ）。投与前のＲＮＡ量を５００−８４９  ＫＩＵ／ｍｌ及び８５０ＫＩＵ／ｍｌ以上で層別に検討したところ、８５０ＫＩＵ／ｍｌ以上の患者（１３例）の平均値１４４７．７ＫＩＵ／ｍｌが投与１ヶ月後及び３ヶ月後においてそれぞれ９９３．６ＫＩＵ／ｍｌ及び９６１．８ＫＩＵ／ｍｌと有意な減少（ｐ＝０．０３２及びＰ＝０．０１５）を認めた。５００−８４９ＫＩＵ／ｍｌの患者（１３例）の平均値６４９．４ＫＩＵ／ｍｌは、投与３ヶ月後には５２７．５ＫＩＵ／ｍｌと減少し、減少傾向（Ｐ＝０．１０８）が認められた。
（３）結果についての考察
全身倦怠感がなくなることは生活活力の回復につながり、腹部膨満感も常に腹部の違和感を感じていることがなくなることで生理的あるいは精神的な圧迫感が消失するなど、Ｃ型慢性肝炎患者に対するＱｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ（以下ＱＯＬと称する。）の向上に寄与する。Ｃ型慢性肝炎患者における肝腫大は、医師はＣ型慢性肝炎の他覚症状を判断するに際して、最も多く観察できるとして注目している項目であり（Ｃ型慢性肝炎の臨床と経過、Ｍｅｄｉｃｉｎａ，３０（３），ｐｐ．４７４−４７７，１９９３参照）、上記の２例の症例で認められた肝腫大の消失は、Ｃ型慢性肝炎治療においては非常に意義のあるものである。
さらに本発明組成物には、ＨＣＶ−ＲＮＡ量を減少させる可能性が認められた。上記の症例においては、特に副作用は認められず、本願発明に係る組成物は、少なくとも、Ｃ型慢性肝炎患者へのインターフェロン療法の導入前に服用することでインターフェロンの治療効果を高めるのに有用であり、またＣ型慢性肝炎治療の際の共力剤組成物として有用であることが示唆された。
【実施例２】（１）被験者
実施例１で行った２６名を含むＣ型慢性肝炎の通院患者５０例（男性２６例、女性２４例、年齢２８〜８０歳、５９．０±１０．６歳、（平均±ＳＤ））を総登録症例として、オープンラベル試験を実施した。組入基準は担当医師が選定し、本人の承諾が得られた患者とした。ＨＣＶのセロタイプはグループ１が４０例、グループ２が９例、判定不能が１例であった。ＩＦＮ治療歴を有する患者は２４例であった。
本試験では服用状況不良４例、データ欠測４例、服用前６ヶ月以内のＩＦＮ投与３例、自己判断による服用中止２例、服用中ＩＦＮ投与開始１例、投与前より肝腫瘍の合併を認めており試験対象として不適切である判断された１例の計１５例を除外し、３５例（男性１７例、女性１８例、年齢２８〜８０歳、６０．５±１０．４歳、（平均±ＳＤ））を有効解析対象とした。有効性解析対象でのセロタイプはグループ１が２７例、グループ２が７例、判定不能が１例であり、試験開始前のＩＦＮ治療歴がある患者は１５例であった。
服用期間中に肝臓用の併用薬を使用した患者は２２例であった。試験開始前から１３例でウルソデオキシコール酸を使用していたが、服用期間中に新たに５例に投与された。グリチルリチン製剤はウルソ投与と併用で２例に、カンテック錠（商品名）とプロヘパール錠（商品名）と併用で１例使用された。タウリン散（商品名）はウルソデオキシコール酸投与と併用で１例で使用された。残る３例はアミノレバン（商品名）、小柴胡湯、あるいはプロヘパール錠の単独投与例がそれぞれ１例ずつであった。
（２）被験物質
被験物質としては、実施例１と同じインターパンチ（株式会社サンウエル製、東京、日本）を使用した。このインターパンチを各被験者に対して１日量２包１．５ｇ（４種類の植物の乾燥原末で合計１ｇ分のエキスを含む）を服用するように処方した。
（３）検査項目
自覚症状として悪心・嘔吐、腹痛、腹部膨満感、吐血・下血、皮膚掻痒感及び全身倦怠感の６項目、他覚症状は肝腫大、浮腫、腹水、手掌紅斑及び黄疸の５項目を評価した。自覚症状と他覚症状は、患者が来院時に担当医師が聞き取りまたは触診などにより確認しカルテに記録した。血液検査項目は、白血球数、赤血球数、血色素量、ヘマトクリット値、血小板数及び白血球百分比、生化学検査項目は、ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＡＬＰ、γ−ＧＴＰ、ＺＴＴ、ＬＤＨ、ＵＮ、クレアチニン、Ｎａ、Ｋ、Ｃｌ、総ビリルビン、総蛋白、アルブミン、総コレステロール及びＴＧ、尿検査項目は蛋白、糖及び潜血とした。また、ＨＣＶ−ＲＮＡ量をアンプリコア法にて定量した。通常の測定上限は８５０ＫＩＵ／ｍｌであるが、それ以上の値の場合には希釈法で再測定を実施した。以上の検査項目を服用前、服用１ヶ月後及び服用３ヶ月後に測定した。
（４）統計学的手法
血液検査、生化学検査、ＨＣＶ−ＲＮＡ定量及びＨＣＶ抗体価の推移についてはＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ  ｔ−ｔｅｓｔを用いた。併用薬の影響に関してはχ２検定で判定した。
（５）結果の考察
（ｉ）自覚症状及び他覚症状
本試験では、服用前に自覚症状として全身倦怠感を６例が自覚していたが、服用１ヶ月後には４例（６６．７％）、３ヶ月後にも４例の改善を認めた。腹部膨満感は２例が自覚していたが服用１ヶ月後に１例（５０％）、３ヶ月後には２例（１００％）とも改善を認めた。悪心・嘔吐は２例が自覚していたが、服用３ヶ月後に１例（５０％）の改善を認めた。
他覚症状に関しては、試験開始前の時点で、肝腫大が医師による触診で１６例に認められていたが、服用１ヶ月後に１例（６．３％）、３ヶ月後に２例（１２．５％）で改善が認められた。その他の症状については改善は認められなかったが、服用前に有していた自覚症状及び他覚症状が服用後に悪化した患者は認められなかった。これらの結果は、以下の表１に、まとめて示す。
（ｉｉ）血液学的検査・生化学検査・尿検査
血液学的検査項目では、変動は認められなかった。白血球百分比でも、服用による影響は認められなかった。血液学的検査の結果は、以下の表２に示す。
生化学検査では、ＺＴＴが服用前１７．５±７．６ＩＵ／Ｌであったが、服用３ヶ月後に１８．４±７．８ＩＵ／Ｌと有意な増加が認められた（ｐ＜０．０５）。Ｎａは服用前１４１．５±２．２ｍＥｑ／Ｌであったが、服用１ヶ月後では、１４２．７±２０ｍＥｑ／Ｌと有意な増加が認められたが（ｐ＜０．０１）、服用３ヶ月後には服用前と差がなくなった（１４１．１±２．２ｍＥｑ／Ｌ）。その他の肝機能、腎機能などの生化学検査項目に変動はなかった。この結果は、以下の表３に示す。
尿検査項目では、特に変動はなかった。
（ｉｉｉ）ＨＣＶ−ＲＮＡ定量及びＨＣＶ抗体価
ＨＣＶ−ＲＮＡ定量は、３５例全例を対象に服用前、服用１ヶ月後及び３ヶ月後に測定したが、測定時期間で比較した場合、平均±ＳＤはそれぞれ７３４．４±７１６．１ＫＩＵ／ｍｌ、６０５．１±４７１．１ＫＩＵ／ｍｌ、５７８．７±４３７．９ＫＩＵ／ｍｌであり、服用により経時的な減少は認められたが、その減少の割合には、統計学的有意差は認められなかった。しかし、ウイルス量を１００ＫＩＵ／ｍｌ未満、１００−４９９ＫＩＵ／ｍｌ、５００−８４９ＫＩＵ／ｍｌ及び８５０ＫＩＵ／ｍｌ以上の４つに層別解析をしたところ、図１に示すように８５０ＫＩＵ／ｍｌ以上の群（ｎ＝１２）で服用後１ヶ月及び３ヶ月で有意な減少が認められた（それぞれＰ＝０．０４４及びＰ＝０．０２４）。また、５００−８４９ＫＩＵ／ｍｌ群の患者（ｎ＝９）でも、服用３ヶ月後に有意な減少が認められた（Ｐ＝０．０２１）。さらに、服用前ウイルス量１．４ＫＩＵ／ｍｌであった一症例では、服用１ヶ月以降、ウイルスは検出感度以下となった。
ＨＣＶ抗体価は２５例の平均値で統計解析をしたが、服用前、服用１ヶ月後及び３ヶ月後はそれぞれ６６．４４±７．７８ＨＣＶ−Ａｂ  Ｉｎｄｅｘ、６７．１７±７．００ＨＣＶ−Ａｂ  Ｉｎｄｅｘ及び６６．８３±８．２３ＨＣＶ−Ａｂ  Ｉｎｄｅｘで変動はなく、上記のウイルス量により層別解析をかけても有意な変動は認められなかった。
また、ＨＣＶ−ＲＮＡ量の減少とＡＳＴ、ＡＬＴの変動との間に有意な相関性は認められなかった。さらに、ウルソを含む薬剤の併用の有無とＨＣＶ−ＲＮＡ量の増減についても有意差は認められなかった。自覚あるいは他覚症状の改善例とウイルス量との間にも一定の傾向は認められなかった。
（ｉｖ）有害事象
７１歳女性に服用１ヶ月目に軽度の下痢を認めたが、服用を中断することなく、下痢は消失した。６０歳男性は服用３ヶ月目に腹部膨満感が認められたが、軽度であった。その他には、有害事象は認められなかった。
（ｖ）結果の考察
本試験で特筆すべき変化は、ウイルス量を１００ＫＩＵ／ｍｌ未満、１００−４９９ＫＩＵ／ｍｌ、５００−８４９ＫＩＵ／ｍｌ及び８５０ＫＩＵ／ｍｌ以上の４つに層別解析したところ、８５０ＫＩＵ／ｍｌ以上の患者では、服用後１ヶ月及び３ヶ月で有意な減少が認められ（ｐ＜０．０５）、５００−８４９ＫＩＵ／ｍｌの患者でも、服用３ヶ月後に有意な減少が認められたことである（ｐ＜０．０５）。
また、今回は５００ＫＩＵ／ｍｌ以下の低ウイルス量患者群において優位な低下は認められなかったものの、自然治癒する確率が極めてまれであるＣ型慢性肝炎において（Ｃ型慢性肝炎の臨床と経過、Ｍｅｄｉｃｉｎａ，３０（３），ｐｐ．４７４−４７７，１９９３参照）、一例でも本発明組成物の服用によりウイルスが検出感度以下になったということは驚くべきことであり、これは低ウイルス量の患者においても効果があることを示している。
今回の検討ではＨＣＶ−ＲＮＡ量が減少した例においてもＡＳＴ、ＡＬＴの低下は明らかでなく、ウイルス量の減少と肝機能指標との相関は確認できなかった。肝疾患の予後はＡＳＴ、ＡＬＴの低下が重要とする報告１４があるが、ウイルスの減少による臨床的有用性は現時点では明らかではない。しかし、ＩＦＮの著効率がウイルス量に依存することから、本願発明に係る組成物を、インターフェロンを含む他薬剤と併せて治療することにより、Ｃ型慢性肝炎の治療に際して有効であることが示唆された。
自覚症状においては症例数は少ないものの、服用３ヶ月後に全身倦怠感が６例中４例の患者で改善を認め、腹部膨満感は２例中２例、悪心・嘔吐は２例中１例で改善した。また他覚症状において触診によるものでは肝腫大は１６例認められたが、服用３ヶ月後に２例で認められなくなった。服用前に有していた自覚症状及び他覚症状が服用後に悪化していた患者は認められなかった。全身倦怠感が回復した患者が認められたことは、ＱＯＬの向上に寄与したと考えられる。
本試験では有害事象は２例で観察され、１例は服用１ヶ月目に軽度の下痢が観察された。しかし、服用継続下に下痢症状は回復し、一時的な反応であった。本試験で使用した健康食品にはビフィズス菌も配合されており、それによる影響も考えられる。もう１例の６０歳男性は服用３ヶ月目に腹部膨満感が認められたが、軽度であった。その他の患者には有害事象は認められず、さらに有効性解析除外例を含めた５０例とも、本発明組成物の服用による重篤な有害事象はなかったことが確認できた。
また、Ｃ型肝炎に広く用いられるＩＦＮでは、インフルエンザ様の発熱、関節痛、筋肉痛などの症状のほかに、脱毛、うつ症状、目の異常、食欲低下、体重減少などの副作用が観察されるが、今回の本発明組成物の服用から重篤な有害事象がないＣ型肝炎治療剤として期待される。
血液・生化学検査ではＺＴＴが３ヶ月後に有意な増加をしていた。ＺＴＴ値は免疫グロブリン（ＩｇＧ）を反映し、慢性肝疾患の経過観察における間葉系の反応の指標となるが、肝細胞の障害を直接示すものではない。一方、肝障害の指標であるＡＳＴ、ＡＬＴは増加しておらず、ＨＣＶ抗体も変動なく、アルブミンなど蛋白分画も変化は明らかでなかった。これらの所見から総合的に判断するとＺＴＴの増加に関しては患者の自己免疫性現象や肝硬変など何らかの重篤な変化を示唆するものではないと考えられた。また、Ｎａは服用１ヶ月後で有意な増加が認められたが（ｐ＜０．０１）、基準値内での変化であり、また３ヶ月後には服用前の値に回復しており、有意な副作用とは考えられなかった。
これらの結果から、本発明組成物をＣ型慢性肝炎患者に服用させた場合に、高ウイルス量の患者でも、早ければ服用１ヶ月後でウイルス量の減少が認められ、また全身倦怠感などの自覚症状や、肝腫大などの他覚症状も一部の症例で改善を認められた。血液・生化学的検査項目の悪化はなく、服用による重篤な有害事象もなく、Ｃ型慢性肝炎の治療の際に、本願発明に係る組成物を併せて治療することで、共力作用を示すことが示唆された。
2004078191.tif 000002
2004078191.tif 000003
2004078191.tif 000004
ＺＴＴは服用前と服用３ヶ月後のデータで統計学的な有意差な増加があった。
ナトリウムは服用前と服用１ヶ月後のデータで統計学的な有意差な増加があった。
【実施例３】  南瓜子５．０ｇ、紅花３．０ｇ、オオバコ１．０ｇ、スイカズラ３．０ｇと乳糖６７ｇ及びデンプン１６ｇを堅形混合機にて均一に混合し、先にハイドロキシプロピルセルロース２ｇ、カプリン酸トリグリセライド５ｇを８５％エタノール４０ｇに溶解したもの練合溶媒とし、練合したのちバスケット型製粒機（スクリーン径１ｍｍ）にて造粒後、１４メッシュ篩を通過させ乾燥後円柱状顆粒とする。上記成分とマンニット、ヒドロキシプロピルセルロース、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、アスパルテーム及び香料を均一に混合し、顆粒剤１２包を得た（特開２０００−２３１５８４参照）。
以下、実施例４と同様に各種配合比（重量％）の組成物を調製することができる。
2004078191.tif 000005
【実施例４】  本発明組成物の１つである商品インターパンチ（登録商標；（株）サンウエル製）の調製例。
南瓜子、紅花、オオバコ、及びスイカズラの生薬原末を配合し、１０倍量の水で９５±５℃で３０分間抽出し、抽出液をろ過後濃縮し、還元麦芽糖、乳糖、デンプンなどの賦形剤・香料を添加し、造粒工程にかけて細粒とした。
2004078191.tif 000006
【実施例５】  安全性
本発明組成物処方Ａ：
成分（乾燥粉末の配合比）：南瓜子（５０％）、紅花（２０％）、オオバコ（１５％）及びスイカズラ（１５％）。
このものを、健常成人男性７名に２週間にわたり１日２回（１回当たり原生薬換算１．０ｇ）摂食させた。摂食開始前、開始後１及び２週目に採血を行い、一般臨床検査（血液学的検査（白血球数、赤血球数、ヘモグロビン量、ヘマトクリット値、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣ、血小板数、白血球像）、血液生化学的検査（総蛋白、アルブミン、Ａ／Ｇ、総ビリルビン、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣ、ＡＳＴ、ＡＬＴ、アルカリフォスファターゼ、□−ＧＴＰ、総コレステロール、中性脂肪、尿素窒素、尿酸、クレアチニン）及び免疫生化学検査（非特異的ＩｇＥ、非特異的ＩｇＧ、トランスフェリン））並びに医師による問診・聴打診、理学的検査（体温、脈拍、血圧）を実施し、本発明組成物処方Ａ摂食の安全性を検討した。また、細胞機能（単球（血液中マクロファージ）貪食能、好中球貪食能、ＮＫ細胞活性）並びにサイトカイン（ＩＬ２、４、６、８、１０、１２、ＩＦＮ−β、ＴＮＦ−α）を測定することにより、本健康食品の安全性を検討した。
その結果、２週間の摂食による試験実施期間中、自覚症状、他覚所見並びに免疫生化学検査を含む臨床検査値について、試験食品の摂取に起因すると考えられる有害事象は認められず、安全性に問題のないことが確認された。細胞機能並びにサイトカインに関しては顕著な変化は認められず、健常成人男性において本投与量・投与期間においては、測定可能な変化は捉えられないことが判明した。
【実施例６】  安全性
本発明組成物の１つであるインターパンチを健常成人男性に８年間摂取させた（摂取開始時は３１歳）。最初の２年間は処方例Ａの配合生薬原末を１日当たり平均１ｇ、その後は実施例処方Ａの健康食品を平均１日当たり原末換算で１ｇを摂取させた。その結果、摂取期間中一般血液性状、健康状態等に悪影響は認められなかった。
【産業上の利用可能性】  本発明は、前記実施例に示した如く南瓜子、紅花、オオバコ及びスイカズラからなる組成物がＣ型肝炎患者の自覚症状、例えば全身倦怠感及び腹部膨満感をなくすこと、及び医師の診断による他覚症状、例えば肝腫大の状態から正常な肝への状態に改善させ及び手掌紅斑をなくすことができ、また、前記組成物投与１ヶ月後乃至３ヶ月後と徐々にＣ型肝炎ウイルスＲＮＡ量が減少していたことから、少なくとも、Ｃ型慢性肝炎治療用組成物として有用であり、具体的にはインターフェロン治療の導入前に本組成物を服用することでインターフェロン治療の効果が高まることが期待できる。Ｃ型慢性肝炎患者の肝腫大というのは、医師は、肝炎進行状況診断の１つの指標としている。その肝腫大において、改善が認められたということは、Ｃ型慢性肝炎治療においては非常に意義のあるものであり、Ｃ型肝炎から肝硬変への進展抑制や肝硬変から肝ガンへの進展抑制用組成物として有用である。
また、本発明はＣ型肝炎患者のうち、特に、Ｃ型慢性肝炎ウイルスＲＮＡ量が高値の患者に有用である。加えて、本発明組成物は、Ｃ型肝炎ウイルスＲＮＡ量減少用組成物やＣ型慢性肝炎の症状改善・軽減用組成物として使用可能である。また、副作用の恐れが少なく、長期間常用することができ、あるいは従来のＣ型慢性肝炎治療剤、特にＣ型慢性肝炎治療剤との併用も可能である。
【図１】
2004078191.tif 000007
【国際調査報告】
2004078191.tif 000008
2004078191.tif 000009
2004078191.tif 000010
2004078191.tif 000011
2004078191.tif 000012