(57)【要約】本発明は、式2004078771.tif 000009で表される２−フルオロ−６−Ｏ−置換ケトライド誘導体又はその医薬上許容される塩である。本発明の化合物は、インフルエンザ菌並びにエリスロマイシン耐性肺炎球菌に対する強い抗菌力を有し、薬物相互作用の少ない新たな抗生物質として有用である。
2004078771.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
2004078771.tif 000008
で表される２−フルオロ−６−Ｏ−置換ケトライド誘導体又はその医薬上許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、抗生物質エリスロマイシンの新規誘導体に関する。
【背景技術】  エリスロマイシンＡはグラム陽性菌、マイコプラズマなどに起因する感染症の治療薬として広く使用されている抗生物質である。しかし、エリスロマイシンは胃酸で分解されるため、体内動態が一定しないという欠点があった。そこで酸に対する安定性を増した誘導体が検討され、その結果、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、ロキシスロマイシンなどの体内動態の安定したマクロライド剤が開発されてきた。外来の呼吸器感染症を治療領域とするこれらマクロライド剤は、特に臨床分離頻度の高いインフルエンザ菌並びに肺炎球菌に対し強い抗菌活性を有する必要がある。更に、市中肺炎からマクロライド耐性の肺炎球菌が高頻度に分離されている事から耐性肺炎球菌に有効である事も重要となっている。
近年、広範な研究の結果、インフルンザ菌並びにエリスロマイシン耐性肺炎球菌の両方に対し有効なマクロライドとしてＡｇｏｕｒｉｄａｓらは１９９５年にＨＭＲ３６４７（テリスロマイシン，ＥＰ６８０９６７号）を、次いでＯｒらは１９９８年にＡＢＴ−７７３（セスロマイシン，ＷＯ９８０９９７８号）を相次いで見出した。その後、更に薬効増強が図られた２−フルオロケトライド誘導体（ＷＯ０２／３２９１９号）が報告されている。一方、１４員環マクロライド抗生物質は、薬物相互作用を起こす事が知られている。従って、臨床において十分な治療効果を発揮することは勿論であるが、それと同時に薬物相互作用を起こし難いマクロライド剤である事も非常に重要となっている。１４員環マクロライド抗生物質が引き起こす薬物相互作用は、代謝に関与する分子種（Ｃｙｐ３Ａ４）が１４員環マクロライドを代謝し、この代謝されたマクロライドがＣｙｐ３Ａ４と不可逆的な結合をする事により引き起こされている。従って、ヒト型Ｃｙｐ３Ａ４に対して安定である事が重要とされている。
【発明の開示】
本発明の目的は、インフルエンザ菌並びにエリスロマイシン高度耐性肺炎球菌に対する優れた抗菌活性を有し、ヒト型Ｃｙｐ３Ａ４代謝に対し安定である新たなケトライド誘導体を提供することである。
本発明者等は、ケトライド誘導体について種々検討した結果、６位にある特定の縮合複素環基を有するプロパルギル基を導入し、更に２位にフッ素原子を導入したケトライド誘導体が優れた抗菌活性を有し、そしてヒト型Ｃｙｐ３Ａ４に対して安定であることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、式
2004078771.tif 000003
で表される２−フルオロ−６−Ｏ−置換ケトライド誘導体又はその医薬上許容される塩である。
【発明を実施するための最良の形態】  本発明の化合物は、ＷＯ９９２１８７１号およびＵＳ６１２４２６９号に記した方法により合成した５−Ｏ−デソサミニル−３，１１−ジデオキシ−２−フルオロ−１１−アミノ−３−オキソ−６−Ｏ−プロパルギルエリスロノリドＡ  １１，１２−サイクリックカーバメートに５−ヨード−３−（２−ピリミジル）イソキサゾール、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロリド（ＩＩ）、アセトニトリル及びトリエチルアミンを混合し、反応させることにより、得ることができる。
本発明において、医薬上許容される塩とは、細菌感染症の化学療法および予防において使用される塩を意味する。それらは、たとえば酢酸、プロピオン酸、酪酸、ギ酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、ステアリン酸、コハク酸、エチルコハク酸、ラクトビオン酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パラトルエンスルホン酸、ラウリル硫酸、リンゴ酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、アジピン酸、システイン、Ｎ−アセチルシステイン、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、ヨウ化水素酸、ニコチン酸、シュウ酸、ピクリン酸、チオシアン酸、ウンデカン酸、アクリル酸ポリマー、カルボキシビニルポリマーなどの酸との塩を挙げることができる。
本発明の化合物は、経口投与又は非経口投与され、成人を治療する場合で５０〜１０００ｍｇであり、これを１日２〜３回に分けて投与する。この投与量は、患者の年齢、体重および症状によって適宜増減することができる。
経口投与する場合は、賦形剤、結合剤、滑沢剤、抗酸化剤、コーティング剤、界面活性剤、可塑剤、着色剤、矯味矯臭剤などを混合して、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤などの製剤として投与され、非経口投与する場合は、注射剤、点滴剤などの製剤として投与される。製剤化する際には、通常の製剤化の方法が使用できる。
【実施例】  次に、実施例及び試験例にて本発明を更に詳細に説明する。
【実施例１】  ５−Ｏ−デソサミニル−３，１１−ジデオキシ−２−フルオロ−１１−アミノ−６−Ｏ−［３−［３−（２−ピリミジル）イソキサゾリル−５−イル］−２−プロピニル］−３−オキソエリスロノリドＡ  １１，１２−サイクリックカーバメートの合成
ＷＯ９９２１８７１号およびＵＳ６１２４２６９号に記した方法により合成した５−Ｏ−デソサミニル−３，１１−ジデオキシ−２−フルオロ−１１−アミノ−３−オキソ−６−Ｏ−プロパルギルエリスロノリドＡ  １１，１２−サイクリックカーバメート５．５ｇ（８．４ｍｍｏｌ）、５−ヨード−３−（２−ピリミジル）イソキサゾール２．４ｇ（８．８ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロリド（ＩＩ）０．２９ｇ（０．４ｍｍｏｌ）、アセトニトリル４５ｍｌ、トリエチルアミン９ｍｌを混合し、系内をアルゴン置換した後室温で１時間、６０度で１４時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮して得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール：２５％アンモニア水＝１９：１：０．１）、次いでＮＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）により精製し、イソプロピルエーテルにて固化、濾取、乾燥して標記化合物  ５．６ｇ（収率８３％）を得た。
ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：０．９３（ｔ，Ｊ＝７．４６Ｈｚ，３Ｈ）１．１３−１．１９（ｍ，３Ｈ）１．１８（ｄ，Ｊ＝７．０１Ｈｚ，３Ｈ）１．２０−１．７０（ｍ，２Ｈ）１．２５（ｄ，Ｊ＝６．０９Ｈｚ，３Ｈ）１．３４（ｄ，Ｊ＝７．３１Ｈｚ，３Ｈ）１．５２（ｓ，３Ｈ）１．５６（ｓ，３Ｈ）１．６２−２．０５（ｍ，２Ｈ）１．６８−１．８８（ｍ，２Ｈ）１．８１（ｄ，Ｊ＝２１．３２Ｈｚ，３Ｈ）２．２７（ｓ，６Ｈ）２．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．２６，１０．２８，３．６５Ｈｚ，１Ｈ）２．６９（ｍ，１Ｈ）２．９４（ｍ，１Ｈ）３．１９（ｄｄ，Ｊ＝１０．０５，７．３１Ｈｚ，１Ｈ）３．５５（ｍ，１Ｈ）３．６６（ｍ，１Ｈ）３．７１（ｓ，１Ｈ）３．８４（ｄｄ，Ｊ＝４４．７７，１７．３６Ｈｚ，２Ｈ）４．１７（ｄｄ，Ｊ＝１０．２０，１．３７Ｈｚ，１Ｈ）４．３４（ｄ，Ｊ＝７．３１Ｈｚ，１Ｈ）５．０７（ｄｄ，Ｊ＝１０．０５，２．７４Ｈｚ，１Ｈ）５．６５（ｓ，１Ｈ）７．３２（ｓ，１Ｈ）７．３５（ｔ，Ｊ＝４．８７Ｈｚ，１Ｈ）８．８９（ｄ，Ｊ＝４．８７Ｈｚ，２Ｈ）
試験例１：試験管内抗菌活性測定
被験化合物は、実施例１の化合物と比較化合物１としてＷＯ０２／３２９１９号の実施例２３記載の化合物（５−Ｏ−デソサミニル−３，１１−ジデオキシ−２−フルオロ−１１−アミノ−６−Ｏ−［３−［３−（５−ピリミジル）イソキサゾリル−５−イル］−２−プロピニル］−３−オキソエリスロノリドＡ  １１，１２−サイクリックカーバメート）及び比較化合物２としてアジスロマイシンのエリスロマイシン耐性肺炎球菌及びインフルエンザ菌に対する抗菌活性を、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ（ＮＣＣＬＳ）ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓに準じた微量液体希釈法による最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）で評価した。各々羊血液寒天培地およびチョコレート寒天培地で一夜培養した肺炎球菌及びインフルエンザ菌をＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ  ｂｒｏｔｈ（ＭＨＢ）で０．５ＭｃＦａｒａｎｄ相当に懸濁し、これらを１０倍に希釈（約１０７ＣＦＵ／ｍｌ）して接種用菌液とした。これらの菌液５ｍｌを３％馬溶血液添加の２価イオン濃度調整済みＭＨＢおよびＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｔｅｓｔ  ｍｅｄｉｕｍに約５×１０５ＣＦＵ／ｍｌの菌量となるように感受性試験用マイクロプレートに接種した。これらを３５℃、通常環境下で２０時間培養後に各化合物のＭＩＣを測定した。結果を表１に示す。実施例１の化合物はエリスロマイシン耐性肺炎球菌に対し比較化合物と同様強い抗菌活性を示した。インフルエンザ菌に対しては比較化合物２の１／２であって比較化合物１の２倍の抗菌活性を示した。本発明の化合物は、エリスロマイシン耐性肺炎球菌及びインフルエンザ菌の両方に有用であることが示された。
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試験例２：インフルエンザ菌による肺炎に対する治療効果
インフルエンザ菌による肺炎に対する治療効果について、インフルエンザ菌によるマウス肺炎モデルで評価した。被験化合物及びインフルエンザ菌は、試験例１と同様である。インフルエンザ菌を、５％馬脱繊維血液添加Ｂｒａｉｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｉｎｆｕｓｉｏｎ  Ｂｒｏｔｈで３７℃一夜培養し、これを接種菌液（約５．０×１０８ＣＦＵ／ｍｌ）とした。麻酔した体重１８〜２２ｇのＩＣＲ系雄性マウスに接種菌液０．０５ｍｌを経気道的に接種することにより、感染を惹起した。菌液接種１８および４２時間後に経口ゾンデを用いて各被験化合物１００ｍｇ／ｋｇを経口投与した（各群５匹）。各被験化合物は５％アラビアゴム溶液に用時懸濁し、希釈した。なお、コントロール群には５％アラビアゴム溶液のみを投与した。最終投与２４時間後にマウスを屠殺し、肺を摘出後、２ｍｌの滅菌生理食塩液を加えてホモジナイズした。滅菌生理食塩液で１０倍希釈系列を作製し、チョコレート寒天培地に塗布して３７℃一夜培養後、生じたコロニー数から生菌数を算出した。なお、検出限界は２．３０ｌｏｇ１０ＣＦＵ／ｍｌである。結果を表２に示す。被験化合物１００ｍｇ／ｋｇの投与群において、本発明の実施例１の化合物、比較化合物１及び比較化合物２はコントロールに比べいずれも強い抗菌活性を示した。よって、本発明の化合物は、比較化合物１及び比較化合物２と同様にインフルエンザ菌による肺炎の治療に有用であることが示された。
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試験例３
エリスロマイシン耐性肺炎球菌による肺炎に対する治療効果について、耐性肺炎球菌によるマウス肺炎モデルで評価した。被験化合物としては、実施例１の化合物及び比較化合物１としてＷＯ０２／３２９１９号の実施例２３記載の化合物（５−Ｏ−デソサミニル−３，１１−ジデオキシ−２−フルオロ−１１−アミノ−６−Ｏ−［３−［３−（５−ピリミジル）イソキサゾリル−５−イル］−２−プロピニル］−３−オキソエリスロノリドＡ  １１，１２−サイクリックカーバメート）を用いた。試験例１で用いたエリスロマイシン耐性肺炎球菌を３０％馬血清添加Ｔｏｄｄ−Ｈｅｗｉｔｔ  Ｂｒｏｔｈで３７℃数時間培養後、同培地で３００倍に希釈し、接種菌液（約５×１０５ＣＦＵ／ｍｌ）とした。麻酔した体重１８〜２２ｇのＣＢＡ／Ｊ系雄性マウスに接種菌液０．０５ｍｌを経鼻的に接種することにより、感染を惹起した。菌液接種４２および６８時間後に経口ゾンデを用いて各被験化合物１００ｍｇ／ｋｇを経口投与した（各群５匹）。各被験化合物は５％アラビアゴム溶液に用時懸濁し、希釈した。なお、コントロール群には５％アラビアゴム溶液のみを投与した。最終投与２４時間後にマウスを屠殺し、肺を摘出後、２ｍｌの滅菌生理食塩液を加えてホモジナイズした。滅菌生理食塩液で１０倍希釈系列を作製し、羊血液寒天培地に塗布して３７℃、５％炭酸ガス存在下で一夜培養後、生じたコロニー数から生菌数を算出した。なお、検出限界は１．３０ｌｏｇ１０ＣＦＵ／ｌｕｎｇである。結果を表３に示す。
本発明の実施例１の化合物は、１００ｍｇ／ｋｇ投与群において比較化合物と同程度の優れた治療効果を示した。
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試験例４：ヒト型Ｃｙｐ阻害試験
Ｃｙｐ阻害試験は被験化合物を添加した後、蛍光基質を添加する前に４５分間のプレインキュベーションを行った。その他はＣｒｅｓｐｉらの方法（Ｃｒｅｓｐｉ  ＣＬ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌｙｔ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９７，２４８，１８８−１９０）に準拠して行った。
被験化合物としては、試験例３と同様である。コントロールとして、クラリスロマイシンを用いた。その結果を表４に示す。
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実施例１の化合物の相互作用の強さはコントロールと比べほぼ同程度であったが、比較化合物の阻害作用は実施例１の化合物の約８６倍と非常に強かった。よって、比較化合物１に比べて、実施例１の化合物はＣｙｐ３Ａ４に対するＩＣ５０値が高く、薬物相互作用を起こす可能性が低いことが示された。
【産業上の利用可能性】  本発明の化合物は、エリスロマイシン耐性肺炎球菌及びインフルエンザ菌に対して優れた抗菌活性を有し、感染動物を用いた治療効果にも優れていること、更にはヒト代謝酵素に対しても安定な事から、本発明の化合物はヒトにおけるエリスロマイシン耐性肺炎球菌及びインフルエンザ菌感染症の治療剤として極めて有用である。
【国際調査報告】
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