(57)【要約】水に対する溶解性に優れ、不純物含量の少ない新たなイリノテカン塩酸塩結晶多形の製造方法の提供。イリノテカンをアセトン、アセトニトリル及びテトラヒドロフランからなる群から選ばれる１種又は２種以上の溶媒と混合し、次いで塩酸を加え、晶出した結晶を採取することを特徴とする、粉末Ｘ線回折で９．１５°、１０．００°、１１．８０°、１２．２０°、１３．００°及び１３．４０°の回折ピーク（２θ）を有するイリノテカン塩酸塩ｃ形結晶の製造方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
イリノテカンをアセトン、アセトニトリル及びテトラヒドロフランからなる群から選ばれる１種又は２種以上の溶媒と混合し、次いで塩酸を加え、晶出した結晶を採取することを特徴とする、粉末Ｘ線回折で９．１５°、１０．００°、１１．８０°、１２．２０°、１３．００°及び１３．４０°の回折ピーク（２θ）を有するイリノテカン塩酸塩ｃ形結晶の製造方法。
【請求項２】
イリノテカン塩酸塩ｃ型結晶が、１７５７、１７１２及び１６６７ｃｍ−１にピークを有する赤外線吸収スペクトルを有するものである請求項１記載のイリノテカン塩酸塩ｃ形結晶の製造方法。
【請求項３】
イリノテカン塩酸塩ｃ形結晶が、イリノテカン塩酸塩１．５水和物結晶である請求項１又は２記載のイリノテカン塩酸塩ｃ型結晶の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、水への溶解性に優れ及び不純物含量の少ないイリノテカン塩酸塩のｃ形結晶の製造方法に関する。
【背景技術】  カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ、ＣＰＴ）は、中国原産の喜樹（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａ  ａｃｕｍｉｎａｔｉｏｎ）の葉や樹皮等に含有されるアルカロイドである。カンプトテシンは優れた抗腫瘍性を有するが、水に難溶性等の物質であるためカンプトテシンの半合成誘導体であるイリノテカン塩酸塩（７−エチル−１０−［４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノ］カルボニルオキシカンプトテシン塩酸塩：以下、ＣＰＴ−１１と記載することもある）（特公平３−４０７７号公報）が医薬品として開発された。イリノテカン塩酸塩は、カンプトテシンの高い抗腫瘍性を維持し、かつ毒性が軽減されており、抗腫瘍剤として広く使用されている。このイリノテカン塩酸塩は、生体内で代謝され、７−エチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン（ＳＮ−３８）（特公昭６２−４７１９３号公報）となり、活性が現れるとされている。
イリノテカン塩酸塩の患者への投与は、主に静注により行われる。このため、現在イリノテカン塩酸塩は、ソルビトールや生理食塩水により等張化した製剤として上市され、使用されている。この製剤化についてはこれまで種々の試みがなされており、例えば、カンプトテシン誘導体をコラーゲンと２−ヒドロキシエチルメタクリレートのコポリマーに含有させた徐放性製剤（特開平７−２７７９８１号公報）、カンプトテシン又はその誘導体をポリ乳酸−グリコール酸共重合体からなる担体に含有せしめた徐放性製剤（特開平１０−１７４７２号公報）等が報告されている。
【発明の開示】
従来、イリノテカン塩酸塩としては非晶質のものと、結晶質（ｂ形結晶）のものが使用されているが、非晶質のものは製剤製造時の湿度変動によって水分含量が変化し、溶解条件が一定でない等の問題がある。また結晶質のものは３水和物であるが、高温にしないと水に溶解しづらい等の点で問題があり、更に水に対する溶解性が優れ、不純物の少ない新規なイリノテカン塩酸塩結晶多形の製造方法の開発が望まれていた。
従って、本発明の目的は、水に対する溶解性に優れ、不純物含量の少ない新たなイリノテカン塩酸塩結晶多形の製造方法を提供することにある。
本発明者等は、物質が同じ化学構造をとりながら異なった融点、溶解性等の物理的な性質が異なる結晶多形に着目して、鋭意研究を進めたところ、今般、イリノテカンを特定の溶媒と混合し、次いで塩酸を加え、結晶を晶出させると、従来の水から結晶を晶出させたイリノテカン塩酸塩よりも水に対する溶解性が優れ、不純物含量の少ないイリノテカン塩酸塩の新たな結晶多形（ｃ形結晶）が得られることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、イリノテカンをアセトン、アセトニトリル及びテトラヒドロフランからなる群から選ばれる１種又は２種以上の溶媒と混合し、次いで塩酸を加え、晶出した結晶を採取することを特徴とする、粉末Ｘ線回折で９．１５°、１０．００°、１１．８０°、１２．２０°、１３．００°及び１３．４０°の回折ピーク（２θ）を有するイリノテカン塩酸塩ｃ形結晶の製造方法を提供するものである。
本発明の製造方法は操作が簡便で、製造されるｃ形結晶イリノテカン塩酸塩は、水に対する溶解性が優れ、分解物等の不純物含量も極めて少なく、製剤製造時に加温操作を必要としない、イリノテカン塩酸塩製剤の原薬として極めて有用である。
【図面の簡単な説明】  図１は得られたイリノテカン塩酸塩結晶の赤外線吸収スペクトルを示す図である。
図２は得られたイリノテカン塩酸塩結晶の粉末Ｘ線回折を示す図である。
図３は得られたイリノテカン塩酸塩結晶の熱分析（示差走査熱量測定）を示す図である。
図４は実施例３の薬用炭を使用した製造物の赤外線吸収スペクトルを示す図である。
図５は実施例３の薬用炭を使用した製造物の熱分析（示差走査熱量測定）を示す図である。
図６は純度試験のＨＰＬＣチャートを示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】  本発明で使用するイリノテカン（７−エチル−１０−［４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノ］カルボニルオキシカンプトテシン）は、特公平３−４０７７号公報に記載の方法で製造できる。
イリノテカンと混合する溶媒としては、アセトン、アセトニトリル及びテトラヒドロフランからなる群から選ばれる１種又は２種以上を混合して使用される。また、本発明で使用する溶媒は、無水であるのが好ましい。
イリノテカンと溶媒の混合重量比率は、特に限定されないが、ｃ形結晶の生成収率から、イリノテカン１重量部に対して溶媒が３０〜１０００重量部、更に５０〜６００重量部、特に７０〜５００重量部であるのが好ましい。
イリノテカンと溶媒を混合する際に、薬用炭、活性炭、セライト、シリカゲル等のろ過助剤を入れてろ過すると、原料中の不純物の除去が容易で好ましい。
イリノテカンと溶媒の混合物に、塩酸を加えイリノテカン塩酸塩を生成させて溶媒中に溶解させる。塩酸の添加量は、イリノテカンに対して理論上等モルであるが、１．０〜２．０モル倍量、更に１．０〜１．８モル倍量、特に１．０〜１．５モル倍量添加するのが、ｃ形結晶の生成収率から好ましい。添加温度は、特に限定されないが、５〜３０℃、特に１２〜２５℃であるのが好ましい。
塩酸添加後、イリノテカン塩酸塩のｃ形結晶の晶出を促進させるために、種結晶としてｃ形結晶を加えてもよい。結晶の晶出の条件は特に限定されないが、該混合液は、５〜３０℃、更に１０〜２５℃で、２〜２００時間、更に１０〜１２０時間攪拌するのが好ましい。
晶出したイリノテカン塩酸塩のｃ形結晶は、ろ過、遠心分離等の方法で採取することができる。
採取されたイリノテカン塩酸塩のｃ形結晶は、常法で、例えば、飽和塩化ナトリウム法、飽和硝酸アンモニウム水溶液等の方法で吸湿させてもよい。
このようにして得られたイリノテカン塩酸塩は、過飽和のイリノテカン塩酸塩水溶液から晶出させたｂ形結晶よりも、水に対する溶解性が優れたｃ形結晶である。すなわち、ｂ形結晶のｐＨ３．５における水に対する溶解度が１１．４ｍｇ／ｍＬであるのに対し、ｃ形結晶のそれは１００ｍｇ／ｍＬ以上である。
当該ｃ形結晶は、粉末Ｘ線回折で９．１５°、１０．００°、１１．８０°、１２．８０°、１３．００°及び１３．４０°に回折ピーク（２θ）を有し、７．６０°、８．３０°、９．５５°、１１．００°及び１２，４０℃に回折ピーク（２θ）を有するｂ形結晶とは明らかに相違する新規な結晶多形である。また、ｃ形結晶は、１７５７、１７１２及び１６６７ｃｍ−１にピークを有する赤外線吸収スペクトル（ν）を有し、この点でも１７４８、１６８８および１６６３ｃｍ−１にピークを有するｂ形結晶とは相違する。また、ｃ形結晶は、イリノテカン塩酸塩１．５水和物である。なお、ここで粉末Ｘ線回折ピーク（２θ）は±０．２°の誤差を有し、赤外線吸収スペクトルは±５ｃｍ−１程度の誤差を有する。
本発明の製造方法で製造されたイリノテカン塩酸塩のｃ形結晶は、従来の製造方法で製造されたイリノテカン塩酸塩のｂ形結晶と同様に抗腫瘍剤として使用することができる。静脈内注射、皮下注射、筋肉内注射等の各種注射剤、経口投与等の種々の方法によって投与することができる。特に、静脈内投与、経口投与するのが好ましい。
投与量は、静脈内投与の場合は治療目的によっても異なるが、成人１日当り、５〜４００ｍｇ／人、特に２０〜２００ｍｇ／人であるのが好ましく、経口投与の場合は成人１日当り５０〜２０００ｍｇ／人、特に１００〜１０００ｍｇ／人であるのが好ましい。
経口投与の場合の製剤は、胃、腸管から吸収するのに適した形態、例えば錠剤、散剤、カプセル剤、軟カプセル剤、経口用液体製剤等製剤として水性懸濁液、溶液、シロップ等が例示され、注射用製剤としては、一定投与量のアンプルとするのが好ましい。これらの剤型中には、防腐剤等を使用してもよい。
【実施例】  以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例１】  イリノテカンをアセトニトリル又はアセトンに表１に記載の割合で懸濁し、６ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えて溶解させ、別途製造したｃ形結晶１ｍｇを加えて、２２℃で２５〜４６時間攪拌した。晶出した結晶をろ取し、減圧下で乾燥し、飽和塩化ナトリウム法で恒量になるまで（約８０時間）吸湿し、イリノテカン塩酸塩の結晶を得た。
表１に製造した結果を示す。
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得られたイリノテカン塩酸塩の結晶について赤外線吸収スペクトル測定、粉末Ｘ線回折及び熱分析を行った。結果を図１〜３に示す。
赤外線吸収スペクトル：１７５７ｃｍ−１、１７１２ｃｍ−１及び１６６７ｃｍ−１付近に強い吸収を示した（図１）。
粉末Ｘ線回折２θ：９．１５°、１０．００°、１１．８０°、１２．２０°１３．００°及び１３．４０°に回折ピークを有し、ｂ形結晶の特有の１１．００°に強度の大きい回折ピークは示さなかった（図２）。
熱分析（示差走査熱量測定）：ｂ形結晶に特有の９０℃付近の脱水に伴う吸熱ピークは認めなかった（図３）。
また、カールフィッシャー法による水分測定の結果、Ｎｏ．３は３．９６％であった。従って、上記で得られた結晶は１．５水和物（計算値：４．１５％）であった。
以上の結果より、上記Ｎｏ．１〜４で製造されたイリノテカン塩酸塩は結晶形が、従来の水から晶出させたｂ形とは違ったｃ形であることが確認された。
【実施例２】  実施例１で製造したイリノテカン塩酸塩の水への溶解性及び経時安定性を測定した。
なお、比較品として次法によりイリノテカン塩酸塩ｂ形結晶を製造した。
比較品  ｂ形結晶の製造：
イリノテカン１０ｇを精製水約１００ｍＬに懸濁し、攪拌しながら希塩酸（日局）約１０ｍＬを滴下し、加温して溶解した。この液をろ過し、ろ液に種晶を加え、室温で約５０時間攪拌し、結晶を晶出させた。晶出した結晶を吸引ろ過し、ろ取物を減圧下乾燥した。乾燥物を加湿器（飽和食塩水法）中に静置して加湿した。
溶解性測定法：
ｂ又はｃ型結晶を約０．５ｇ秤量し、製剤溶液に懸濁し、２２℃で３０分間振とう（１３０ｒ／ｍｉｎ）し、混合物をメンブランフィルター（０．４５μｍ）でろ過し、ろ液１ｍＬに製剤溶液を加えて２００ｍＬとした。１０μＬについて液体クロマトグラフィー法で、予め作成した検量線より溶解量を求めた。
なお、製剤溶液として、Ｄ−ソルビトール４５ｇを適量の注射用蒸留水に溶解し、次いで乳酸９００ｍｇを加え、更に水酸化ナトリウムでｐＨを３．５付近に調整し、注射用蒸留水を加えて１０００ｍＬとしたものを使用した。
ｃ形結晶である本発明のＮｏ．３は、製剤溶液を添加したところで溶解し、溶解量が１００ｍｇ／ｍＬ以上と極めて水に溶解し易いものであったのに対し、比較品のｂ形結晶は、溶解量が１１．４ｍｇ／ｍＬであった。本発明の製造方法で製造したｃ形結晶は、ｂ形結晶に比べて水に対する溶解性が極めて優れていることがわかる。
溶解状態経時変化：
ｂ又はｃ型結晶を３０ｍｇ／ｍＬとなるように製剤溶液に溶かし、メンブランフィルター（０．２２μｍ）でろ過し、ろ液を分注して遮光下２２℃で静置した。
本発明の製造方法で製造したｃ形結晶（Ｎｏ．３）は室温で容易に１〜２分間の振とうで溶解したが、ｂ形結晶は７０℃付近に加熱して数分間振とうしないと溶解しなかった。しかしながら、両者ともに、ろ液は３ヶ月以上安定で、淡黄色の色調変化及び析出物は認められなかった。
経時安定性試験：
ｃ形結晶（実施例１、Ｎｏ．３）を、遮光した気密容器（褐色ネジロバイアル；パラフィルムで密閉）に封入し、実験室内（約１５℃）及び冷蔵庫（５〜１０℃）に保存した後、赤外線吸収スペクトル、熱分析及びカールフィッシャー法で水分を測定したが、保存前と変化は認められなかった。
【実施例３】  イリノテカン１ｇをテトラヒドロフラン１２０ｍＬに加え、更に薬用炭０．２ｇを添加し又は添加しないで３０分間攪拌をした。メンブランフィルターで薬用炭を除去し、ろ液を攪拌しながら６ｍｏｌ／Ｌ塩酸をイリノテカンに対して１．０５モル倍量加え、実施例１と同様な処理をした。なお、恒量になるまでの吸湿時間は約１００時間であった。薬用炭を添加した系で得られた結晶の、赤外線吸収スペクトル及び熱分析（示差走査熱量測定）結果を図４及び５に示す。得られた結晶は、ｃ形結晶であることが確認された。
ｃ形結晶の収率は、薬用炭添加系で８５．６％、無添加系で１００％であった。
実施例４  純度試験
本発明の製造方法で製造したｃ形結晶及びｂ形結晶（実施例２  比較品）の純度試験を、次の測定法で行った。
純度試験：ｂ又はｃ型結晶０．０５ｇに０．０１ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素カリウム・メタノール・アセトニトリル混液（６：４：３）を加えて溶解し２０ｍＬとし試料溶液とした。この液１ｍＬを正確に量り、０．０１ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素カリウム・メタノール・アセトニトリル混液（６：４：３）を加えて正確に１００ｍＬとし標準溶液とした。試料及び標準溶液２０μＬについて、以下のＨＰＬＣ操作条件で、類縁物質の含量を測定した。
類縁物質の合計含有量（％）＝（試料のイリノテカン塩酸塩以外のピーク面積）÷（標準溶液のイリノテカン塩酸塩のピーク面積）
各類縁物質の含有量（％）＝（試料の各類縁物質のピーク面積）÷（標準溶液のイリノテカン塩酸塩のピーク面積）
ＨＰＬＣ操作条件：
移動相；０．００５ｍｏｌ／Ｌの１−デカンスルホン酸ナトリウム含有０．０１ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素カリウム・メタノール・アセトニトリル混液（６：４：３）
検出；紫外吸光光度計（測定波長  ２５４ｎｍ）
カラム；ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ−２（５μｍ；４．６ｍｍＩＤ×２５ｃｍ）
カラム温度；４０℃付近の一定温度
流速；約１ｍＬ／ｍｉｎ
純度試験を行った結果を図６及び表２に示す。
ＨＰＬＣ保持時間から、イリノテカン塩酸塩に含有される類縁物質は次のように帰属された。すなわち、保持時間（ＲＴ）６．４分：７−エチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン、１０．１分：分解物（Ｘ２）、１６．１分：分解物（Ｘ１）。
ｂ形結晶イリノテカン塩酸塩（比較品）は分解物（Ｘ２及びＸ１）が０．１７重量％であったが、本発明の製造方法で製造したｃ形結晶は０．０３〜０．０４重量％と低く純度が高いものであった。
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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