(57)【要約】エストロゲンまたはその代謝物などの性ステロイドホルモン、その誘導体、構造類似体、エストロゲン作用物質またはＳＥＲＭ又はノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）を含有する点眼剤または洗眼剤等の形態にある各種疾患の治療剤。優れた治療効果を有し、副作用の低減された、眼に適用する疾患治療剤を提供できる。
2004091630.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
性ステロイドホルモン、エストロゲン作用を有する物質またはセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲンを含有する、眼に適用する疾患治療剤。
【請求項２】
性ステロイドホルモンがエストロゲン、テストステロン、プロゲステロン、アンドロゲン並びにそれらの誘導体及び代謝物からなる群から選択される請求項１に記載の治療剤。
【請求項３】
性ステロイドホルモンが１７β−エストラジオールまたはその誘導体若しくは代謝物である請求項１または２に記載の治療剤。
【請求項４】
性ステロイドホルモンが水可溶化された性ステロイドホルモンである請求項１〜３のいずれか１項に記載の治療剤。
【請求項５】
性ステロイドホルモンが環状デキストリンにより包接された性ステロイドホルモンである請求項１〜４のいずれか１項に記載の治療剤。
【請求項６】
性ステロイドホルモンがヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、スルホニル−β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、δ−シクロデキストリン、又はヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、により包接された性ステロイドホルモンである請求項１〜５のいずれか１項に記載の治療剤。
【請求項７】
性ステロイドホルモンが２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンにより包接された性ステロイドホルモンである請求項１〜６のいずれか１項に記載の治療剤。
【請求項８】
エストロゲン作用を有する物質またはセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲンがヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、スルホニル−β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、δ−シクロデキストリン、又はヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、特にヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンにより包接されて水可溶化されている請求項１に記載の治療剤。
【請求項９】
点眼剤、洗眼剤、軟膏、結膜注射剤またはコンタクトレンズ吸着剤の形態にある請求項１〜８のいずれか１項に記載の治療剤。
【請求項１０】
疾患が緑内障、高眼圧緑内障、正常眼圧緑内障、中心性網脈絡膜炎、老人性黄斑変性症、黄斑円孔、白内障、老人性白内障、眼底出血、網膜中心動脈閉塞症、眼底動脈硬化症、光視症、糖尿病性網膜症、網脈絡膜萎縮、網脈絡膜血管新生病変、卵巣除去による白内障、ＴＧＦβによる白内障、黄斑線維増殖症、黄斑上膜、網膜裂孔，網膜剥離、増殖性網膜症、網膜色素変性症、角膜炎、角膜混濁、角膜ビラン、角膜上皮剥離、角膜潰瘍、角膜内皮細胞変性や脱落、角膜変性症、流行性角結膜炎、霰粒腫、虹彩炎、ぶどう膜炎、自己免疫疾患、網脈絡膜炎、虹彩毛様体炎、眼精疲労、各種疾患による視野狭窄、視神経萎縮、視神経炎、（前部）虚血性視神経症、動体視力低下、色覚異常、老眼、近視、遠視および乱視並びに中枢神経疾患、精神病、ヒステリー、脳下垂体異常およびホルモンのアンバランスによる疾患、遺伝子異常による疾患並びに免疫異常による疾患からなる群から選択される請求項１〜９のいずれか１項に記載の治療剤。
【請求項１１】
眼に適用する疾患治療剤の製造における、有効成分としての性ステロイドホルモン、エストロゲン作用を有する物質またはセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲンの使用。
【請求項１２】
性ステロイドホルモンがエストロゲン、テストステロン、プロゲステロン、アンドロゲン並びにそれらの誘導体及び代謝物からなる群から選択される請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
性ステロイドホルモンが、１７β−エストラジオールまたはその誘導体若しくは代謝物である請求項１１または１２に記載の使用。
【請求項１４】
性ステロイドホルモンが水可溶化された性ステロイドホルモンである請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１５】
性ステロイドホルモンが環状デキストリンにより包接された性ステロイドホルモンである請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１６】
性ステロイドホルモンがヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、スルホニル−β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、δ−シクロデキストリン又はヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリンにより包接された性ステロイドホルモンである請求項１１〜１５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１７】
性ステロイドホルモンが２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンにより包接された性ステロイドホルモンである請求項１１〜１６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１８】
エストロゲン作用を有する物質またはセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲンがヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、スルホニル−β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、δ−シクロデキストリン、又はヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、特にヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンにより包接されて水可溶化されている請求項１１に記載の使用。
【請求項１９】
疾患が緑内障、高眼圧緑内障、正常眼圧緑内障、中心性網脈絡膜炎、老人性黄斑変性症、黄斑円孔、白内障、老人性白内障、眼底出血、網膜中心動脈閉塞症、眼底動脈硬化症、光視症、糖尿病性網膜症、網脈絡膜萎縮、網脈絡膜血管新生病変、卵巣除去による白内障、ＴＧＦβによる白内障、黄斑線維増殖症、黄斑上膜、網膜裂孔，網膜剥離、増殖性網膜症、網膜色素変性症、角膜炎、角膜混濁、角膜ビラン、角膜上皮剥離、角膜潰瘍、角膜内皮細胞変性や脱落、角膜変性症、流行性角結膜炎、霰粒腫、虹彩炎、ぶどう膜炎、自己免疫疾患、網脈絡膜炎、虹彩毛様体炎、眼精疲労、各種疾患による視野狭窄、視神経萎縮、視神経炎、（前部）虚血性視神経症、動体視力低下、色覚異常、老眼、近視、遠視および乱視並びに中枢神経疾患、精神病、ヒステリー、脳下垂体異常およびホルモンのアンバランスによる疾患、遺伝子異常による疾患並びに免疫異常による疾患からなる群から選択される請求項１１〜１８のいずれか１項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、性ステロイドホルモン、エストロゲン作用を有する物質またはセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）を含有する眼に適用する疾患治療剤、特に点眼剤／洗眼剤等の形態にある、眼に適用する疾患治療剤に関する。
【背景技術】  エストロゲン単独、またはエストロゲンとプロゲステロン併用の内服によるホルモン補充療法（ＨＲＴ）により、老人性黄斑変性症（ＡＭＤ）、黄斑円孔、緑内障、糖尿病性網膜症、老人性白内障などの各種眼疾患の症状の改善の可能性が報告されている。
しかし、ＨＲＴは、エストロゲン（またはエストロゲンとプロゲステロン）を全身投与するため、乳癌、子宮癌、女性化乳房、インポテンツなどの重篤な副作用を引き起こす場合がある。したがって、ＨＲＴは、治療の可能性があるにもかかわらず、各種の疾患、特に眼疾患の治療には容易に用いることができなかった。
眼疾患である緑内障の発症は、今まで、４０才以上の３０人に１人といわれていた。しかし、２００２年の日本緑内障学会の調査報告では、４０才以上の１７人に１人という結果がでており、緑内障の患者が増加している。高齢化社会を向かえて、今後も緑内障をはじめとする眼疾患の患者の増大が予想される。
今までの緑内障等の眼疾患治療用点眼剤は、眼圧を低下させるが、視野狭窄の改善効果が不充分であり、また、眼の充血や角膜びらんを引き起こす場合があった。また、一日に何度も点眼する必要があり、煩わしかった。
本発明の目的は、ＨＲＴの問題点である副作用の問題を克服した、点眼等による疾患の治療剤を提供することである。
また、本発明の目的は、視野の改善、眼圧の低下等の治療効果の持続期間が長く、一日１回または２〜３日に１回の点眼回数ですむ、緑内障、白内障等の眼疾患の根本的な治療剤を提供することである。
【発明の開示】
本発明は、性ステロイドホルモン、エストロゲン作用を有する物質またはセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）を含有する、眼に適用する疾患治療剤である。
本発明の疾患治療剤に含有される性ステロイドホルモンは、おもに卵巣、精巣などの生殖腺や胎盤で合成、分泌されるホルモンであり、本発明においては、その作用を持つ合成物質や誘導体及び代謝物も含まれる。性ステロイドホルモンは、アンドロゲン、エストロゲン、ゲスターゲンに大別される。炭素数１８〜２１の性ステロイドホルモンが好ましい。
アンドロゲンとして、例えば、テストステロン、アンドロステンジオン、デヒドロエピアンドロステロン、アンドロステロン、アンドロスタンジオン、メチルテストステロンおよびその誘導体又は構造類似体が例示され、テストステロンおよびその誘導体又は構造類似体が好ましい。
エストロゲンとして、１７β−エストラジオール、エストロン、エストリオール、エキリン、エキレニン、エチニルエストラジオールおよび植物性エストロゲン等およびその誘導体、代謝物などが例示され、１７β−エストラジオールおよびその誘導体、代謝物が好ましい。エストロゲン誘導体や代謝物の他には、エストロゲン作用を有する物質やエストロゲンの構造類似体も含まれ、以下の化合物を例示できる。
エストロゲン誘導体には、ノンフェミナイジングエストロゲンとその誘導体なども含まれる。例えば、ＵＳＰ第５，５２１，１６８に記載されている下式：
2004091630.tif 000003
（式中、Ｒ１はＨ，ＯＨ，ＯＲ２又はＲ２であり、Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ３は、ＯＨ，＝Ｏ又はＲ１であり、Ｒ４は、Ｒ１，Ｃ≡ＣＨ又はＣ＝ＣＨ２である）の化合物、特に２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオール、２−メトキシエストラジオール３−メチルエーテル、２−メトキシエストロン及び２−ヒドロキシエストロンなどが挙げられる。また、ＷＯ  ０２／４００３２  Ａ２に記載されている下式：
2004091630.tif 000004
（式中、炭素６と７、８と９、又は９と１１の間で芳香環Ａと共役する１以上の二重結合を有し得、その場合Ｒ８及びＲ９の一方又は両方は存在せず、ｎは、１〜４であり、Ｒ８及びＲ９は，存在する場合、水素又はアルキルであり、Ｒ１３は、水素、置換又は非置換ヒドロカルビル、ハロゲン、アミド、スルフェート又はニトレートであり、Ｒ１４は、水素又はアルキルであり、Ｒｚは、置換又は非置換のシクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル又はヘテロシクロアルエニルである）の化合物、特にＺＹＣ−１，２，４，９，１０，１１，１２，１３，２７及び２８等が挙げられる。また、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ９，２８２−２９３（２００２）に記載のＺＹＣ−５が挙げられる。
ゲスターゲンとして、プロゲステロンおよびその誘導体又は構造類似体が好ましい。
性ステロイドホルモンは、エストロゲン、テストステロン、プロゲステロンおよびアンドロゲン並びにこれらの誘導体、代謝物及び構造類似体からなる群から選択される１種以上が好ましい。
性ステロイドホルモンとして特に好ましいのは、１７β−エストラジオールおよびその誘導体、代謝物、構造類似体である。
１７β−エストラジオールなどの性ステロイドホルモンは、水に混合すると懸濁液となる。したがって、本発明の疾患治療剤においては、１７β−エストラジオールなどの性ステロイドホルモンを水溶性化するか、あるいは、性ステロイドホルモンを界面活性剤により水に対して可溶化することが好ましく、特に効果の点から、１７β−エストラジオールまたはその誘導体、代謝物を水溶性化することが好ましい。
１７β−エストラジオールは、疎水性で水に対して溶解性が低いため、蒸留水で溶いても大小不同の凝集塊を作り、粒子径が大きくなり、保存安定性が悪く、目的とする濃度の設定が困難となる。したがって、１７β−エストラジオール等の水に難溶性の物質から目的の濃度設定が出来て安定した点眼剤を作るには何らかの工夫が必要である。薬剤の安定性を確保して、角膜及び結膜の生理化学的及び生物学的特性を傷害しない安全で有益な方法が必要である。又、使用時に刺激や不快感を与えたりしない必要がある。
従来、難溶性の物質から点眼剤を作るには、添加物、油、アルコール等を加えたり、点眼剤の粘性を上げるなどの方法が試みられているが、点眼時に不快感が生じるなどの欠点があった。
これに対して、本発明においては、シクロデキストリンを用いて薬剤を包接化し、これを水溶化して用いる方法を取るのが好ましい。シクロデキストリンは、グルコースのオリゴサッカライドで、外側が親水性で内側（ｃａｖｉｔｙ）が疎水性であり、疎水性の薬剤たとえば１７β−エストラジオールとの包接物を作ることにより水溶性化し安定化でき、使用時不快感がないものも得られるので、点眼剤を作るのに適している。シクロデキストリンには一般的にα、β、γの３種類があることが知られている。
シクロデキストリンの中で、β−シクロデキストリンは、溶血性の問題や水溶性の低さから腎毒性などの問題があるので、下記のようなβ−シクロデキストリンの誘導体を用いることが賢明である。
β−シクロデキストリン誘導体には、親水性シクロデキストリンと疎水性シクロデキストリンがあるが、点眼剤には親水性のものが適している。親水性シクロデキストリンには、メチル化シクロデキストリンとヒドロキシアルキル化シクロデキストリンがあるが、メチル化シクロデキストリンには、後述の動物及びヒトでの実験の結果から、目に対する刺激性、角膜や結膜に対する障害や溶血性の問題から適切ではないことが分かった。これに対して、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリンは、安全性が高く、目に対する刺激性もなく角膜上皮障害もなく点眼剤作製に優れている。
ヒドロキシアルキル化シクロデキストリンには、ヒドロキシエチルシクロデキストリン、ヒドロキシプロピルシクロデキストリンなどが含まれ、特に２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが、包接物の水溶性や薬剤安定性に優れ、刺激性や生体毒性も少ない点から、最も好ましい。
γ−シクロデキストリン及びその誘導体も好ましく使用できる。α−シクロデキストリンは、１７β−エストラジオールの包接による水溶性化はあまり高くないので、γ−シクロデキストリンの方が好ましい。
ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、スルホニル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、δ−シクロデキストリンも用いる事が出来る。
１７β−エストラジオールなどの性ステロイドホルモンの水溶性化は、例えば、常法により、性ステロイドホルモンをゲスト化合物として、α−、β−またはγ−シクロデキストリンなどの環状化合物またはその誘導体等のホスト化合物に包接することによって行なうことができる。水溶性化された性ステロイドホルモンは、水に対する溶解性が良好であり、点眼により眼内組織に薬剤を効果的に移行、浸透させるため、治療効果が高く、全身の血中濃度を低く抑えることができるので副作用が少なく、また、使用感がよく異物感がないので、特に点眼剤に適している。
水溶性化された１７β−エストラジオールは、点眼により眼内の目的部位に移行し、細胞を活性化することを確認した（後述の実施例参照）。
本発明の疾患治療例に含有されるエストロゲン作用を有する物質またはセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター（ＳＥＲＭ）には、例えば、ラロキシフェン、アルゾキシフェンなどがある。
エストロゲンの構造類似体、エストロゲン作用を有する物質、セレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）も水溶性化することにより、水溶性化された１７β−エストラジオールと同様に、眼内目的組織への移行を高め、治療目的部位の疾患治療に有効と考えられる。
本発明において治療可能な疾患は、特に限定されないが、例えば、緑内障、高眼圧の緑内障、正常眼圧緑内障、血管新生老人性黄斑変性症、老人性黄斑病変、中心性網脈絡膜炎、老人性黄斑変性症、黄斑円孔、白内障、老人性白内障、眼底出血、網膜中心動脈閉塞症、眼底動脈硬化症、光視症、糖尿病性網膜症、網脈絡膜萎縮、網膜および脈絡膜の血管新生病変、卵巣除去による白内障、ＴＧＦβによる白内障、黄斑線維増殖症（黄斑上膜）、網膜裂孔，網膜剥離、増殖性網膜症、網膜色素変性症、角膜炎、角膜混濁、角膜ビラン、角膜上皮剥離、角膜潰瘍、角膜内皮細胞変性や脱落、角膜変性症、流行性角結膜炎、霰粒腫、虹彩炎、ぶどう膜炎、自己免疫疾患、網脈絡膜炎、虹彩毛様体炎、眼精疲労、各種疾患による視野狭窄、視神経萎縮、視神経炎、（前部）虚血性視神経症、動体視力低下、色覚異常、老眼、近視、遠視、乱視などの屈折異常並びにアルツハイマー病、パーキンソン病、ＡＬＳなどの中枢神経疾患及び分裂病やそううつ病などの精神病、ヒステリー、脳下垂体異常およびホルモンのアンバランスによる疾患、遺伝子異常による疾患、免疫異常による疾患が含まれる。緑内障には、ポスナーシュロスマン症候群が含まれ、角膜変性症には、角膜内皮細胞変性及び脱落、角膜顆粒状変性症（グレノウタイプ１、グレノウタイプ２）、角膜帯状変性症が含まれる。
本発明の治療剤は、眼に直接適用するためのものであり、その形態は、例えば、点眼剤、洗眼剤、軟膏、結膜注射剤またはコンタクトレンズ吸着剤の形態であり得る。
本発明の眼疾患治療剤は、眼組織に性ステロイドホルモン、エストロゲン作用を有する物質またはセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）を直接投与するので、従来の循環系を通して治療するＨＲＴで生じる全身の血液中の性ステロイドホルモン等の濃度が高まることによる副作用を起こす心配がなく、効果の持続期間が長いため、少ない点眼回数で疾患を効果的に治療できる。眼圧を低下させるとともに、特に顕著に視野狭窄を改善することができるので、高眼圧の緑内障の治療だけでなく、今まで治療法がなかった正常眼圧緑内障の治療も特に効果的に行なえる。
【図面の簡単な説明】  図１は、実施例１の点眼剤Ａの写真である。
図２は、実施例１の点眼剤Ｂの写真である。
図３は、点眼剤Ａ〜Ｃの点眼後の１７β−エストラジオールの前房内移行濃度を経時的に示すグラフである。
図４は、実施例４のコントロール群（Ｃｏｎｔｒｏｌ）、紫外線照射前投与群（Ｐｒｅ  ０．０１ｇ／ｌ及び０．１ｇ／ｌ）及び紫外線照射後投与群（Ｐｏｓｔ  ０．０１ｇ／ｌ及び０．１ｇ／ｌ）のマウスの前眼部の写真である。
図５は、実施例５で蒸留水を点眼したマウスの網膜の顕微鏡写真である。
図６は、実施例５で水溶性の１７β−エストラジオール含有点眼剤を点眼したマウスの網膜の顕微鏡写真である。
図７は、網膜におけるエストロゲン受容体抗体陽性像である。
図８は、水晶体におけるエストロゲン受容体抗体陽性像である。
図９は、角膜におけるエストロゲン受容体抗体陽性像である。
図１０は、毛様体におけるエストロゲン受容体抗体陽性像である。
図１１は、エストロゲン未添加、抗体未添加の場合の網膜外顆粒細胞における像である。
図１２は、１７β−エストラジオール未添加、抗体添加の場合の網膜外顆粒細胞におけるエストロゲン受容体抗体陽性像である。
図１３は、１７β−エストラジオール添加、抗体未添加の場合の網膜外顆粒細胞における像である。
図１４は、１７β−エストラジオール添加、抗体添加の場合の網膜外顆粒細胞におけるエストロゲン受容体抗体陽性像である。
図１５は、点眼１７β−エストラジオール濃度（０〜１００μｇ／ｍｌ）とエストロゲン受容体の核移行細胞数を示す。
図１６は、１７β−エストラジオール点眼後のエストロゲン受容体の核移行細胞数の経時変化を示す。
図１７は、実施例９の患者の治療前の右目の視野を示す図である。
図１８は、実施例９の患者の治療前の左目の視野を示す図である。
図１９は、実施例９の患者の治療後の右目の視野を示す図である。
図２０は、実施例９の患者の治療後の左目の視野を示す図である。
図２１は、実施例１０の患者の治療前の右目の視野を示す図である。
図２２は、実施例１０の患者の治療前の左目の視野を示す図である。
図２３は、実施例１０の患者の治療後の右目の視野を示す図である。
図２４は、実施例１０の患者の治療後の左目の視野を示す図である。
図２５は、実施例１１の患者における点眼期間と視力の関係を示す図である。
図２６は、実施例１２の患者の点眼前後の近点の変化を示す図である。
図２７は、実施例１３の患者の治療前の右目の視野を示す図である。
図２８は、実施例１３の患者の治療前の左目の視野を示す図である。
図２９は、実施例１３の患者の治療後の右目の視野を示す図である。
図３０は、実施例１３の患者の治療後の左目の視野を示す図である。
図３１は、実施例２６の患者の動体視力を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】  本発明の治療剤は、この種の一般の薬剤と同様にして、慣用の製造方法により製造することができる。点眼剤、洗眼剤の場合、例えば、水溶性化された性ステロイドホルモン、エストロゲン作用を有する物質またはＺＹＣ−５、セレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）を滅菌蒸留水、ＢＳＳプラス、生理食塩水などに所定の濃度で溶解させることにより製造できる。
本発明の治療剤において、性ステロイドホルモン、エストロゲン作用を有する物質またはＺＹＣ−５、セレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）は、治療に有効な量含まれる必要がある。治療に有効な量は、液剤の場合、例えば０．１μｇ〜１００ｇ／ｌ、好ましくは０．５μｇ〜１ｇ／ｌ、特に好ましくは１μｇ〜５００ｍｇ／ｌの濃度であり、固形剤の場合、例えば０．１μｇ〜１００ｇ／ｋｇ、好ましくは０．５μｇ〜１０ｇ／ｋｇ、特に好ましくは１μｇ〜５ｇ／ｋｇの濃度であり得る。
本発明の治療剤は、剤中の性ステロイドホルモン、エストロゲン作用を有する物質またはセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター又はノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）の濃度や薬剤の投与回数、投与量を変えることにより、あるいは、薬剤の投与方法（例えば、点眼液、洗眼液、軟膏か）を選択することにより、効果の現れる時間や効果の持続時間を調節することができる。
本発明の治療には、必要により、慣用の添加剤、たとえば、賦形剤、担体、ｐＨ調整剤、等張剤、保存剤、グルタチオン、グルコース、各種の塩、安定剤、清涼化剤、抗酸化剤、防腐剤などを添加してもよい。
また、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース又はそのナトリウム塩、ポリピロリドン、ポリビニルピロリドン（これを加え加熱する）等を加えても良い。
【実施例】  次に実施例により本発明を説明するが、本発明は、これらの実施例に限定されるものではない。
【実施例１】  下記のようにして、１７β−エストラジオール及びそれと各種シクロデキストリンの包接物から点眼剤を調製した。各種シクロデキストリンは、ＳＩＧＭＡ社（ＭＯ，ＵＳＡ）製を用い、１７β−エストラジオールは、ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ社（独）製を用いた。
点眼剤Ａ：１７β−エストラジオールの点眼剤
１７β−エストラジオールを１ｍｇ／ｍｌの濃度で蒸留水に溶かした。放置しておくと大小不同の凝集塊を作り懸濁液となった。粘性を上げたり、アルコールを加えたりせずにこれを点眼剤Ａとした（図１）。
点眼剤Ｂ：２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと１７β−エストラジオールとの包接物の点眼剤
１３．３ｍＭの２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと３．６７ｍＭ（１ｍｇ／ｍｌ）の１７β−エストラジオールを包接して、これを蒸留水に溶解して透明で一様な水溶液を調製した（図２）。この水溶液を点眼剤Ｂとした（モル比（３．６２：１））。
点眼剤Ｃ：α−＋γ−シクロデキストリンと１７β−エストラジオールとの包接物の点眼剤
α−シクロデキストリンと３．６７ｍＭ（１ｍｇ／ｍｌ）の１７β−エストラジオールを包接して、これを蒸留水に溶解したところ、懸濁性が残った。この懸濁液にγ−シクロデキストリンを加えると、透明な水溶液になった。この水溶液を点眼剤Ｃとした。α−＋γ−シクロデキストリンの総量は２４．６ｍＭであった（モル比６．７：１）。
点眼剤Ｄ：メチル−β−シクロデキストリンと１７β−エストラジオールとの包接物の点眼剤
１５ｍＭのメチル−β−シクロデキストリンと３．６７ｍＭ（１ｍｇ／ｍｌ）の１７β−エストラジオールを包接して、これを蒸留水に溶解し、透明で一様な水溶液を調製した。この水溶液を点眼剤Ｄ（モル比４．０９：１）とした。
１７β−エストラジオールを２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、α−＋γ−シクロデキストリン又はメチル−β−シクロデキストリンで包接すると水溶性が高まり透明で安定な点眼剤が調製できた（点眼剤Ｂ〜Ｄ）。
実施例２  角結膜組織に対する影響
実施例１で調製した点眼剤Ｂ〜Ｄの目に対する作用を見るために、ウサギ、マウス及び人に対して点眼を行い評価した。
点眼剤Ｂ（２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接物）を家兎（ダッチウサギ）の目に５０μｌ（１滴）を３０分おきに４回点眼したところ、特に問題は起きなかった。また、１日１回（５０μｌ）をマウスに８ヶ月、人に１１ヶ月点眼しても問題は生じなかった。
点眼剤Ｃ（α−＋γ−シクロデキストリン包接物）を人の目に点眼したところ、刺激はなかった。
点眼剤Ｄ（メチル−β−シクロデキストリン包接物）を家兎（ダッチウサギ）の目に５０μｌ（１滴）を３０分おきに４回点眼したところ：
３０分後に角膜ビランの数が増加し、角膜周囲の血管が充血した；
１時間で眼脂が出現し、ビランの面積が拡大した；
１時間３０分でビランの数が多く深くなった；そして
２時間目で充血が強くなり、角膜の周辺部の上皮に底辺２ｍｍ高さ３ｍｍの３角形の領域に角膜上皮全剥離、角膜潰瘍がおきたので実験を中止した。
さらに、点眼剤Ｄを人に１滴（５０μｌ）点眼したところ、強い刺激があり、流涙が起こり、違和感が５時間程、就寝時まで続いたが、翌朝には回復していた。
点眼剤Ｂ及びＣ、特に点眼剤Ｂは、点眼しても特に問題は起きず、点眼剤として最適であることが判明した。一方、点眼剤Ｄは、刺激が強く、角膜や結膜の生理化学的性質を変化させ、充血と角膜の病的な上皮剥離、角膜潰瘍を起こすため、点眼剤としては不適切であることが判明した。
実施例３  １７β−エストラジオールの前房内移行濃度
実施例１で調製した点眼剤Ａ〜Ｄの効果を見るため、点眼後の１７β−エストラジオールの前房内移行濃度の測定を家兎眼（ダッチウサギ：メス）を用いてブラインドで実験を行った。
午前１０時に各点眼剤を１滴（５０μｌ）点眼し、５分後にさらに１滴点眼した。点眼後、３０分、１時間、２時間、３時間目に２７ゲージ注射針と１ｍｌ注射器を用いて角膜を穿刺し、前房水を０．１ｍｌ採取し検体とした。検体をＣ１８カラム抽出後、ＤＰＣエストラジオール二抗体キット（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＵＳＡ）を用いて１７β−エストラジオール量を測定した。エストラジオール抗体とヨウ化エストラジオール１２５Ｉ試薬を用い、ガンマカウンターで放射能を測定する方法である。測定値はｐｇ／ｍｌに換算してある。結果を図３に示す。点眼直前の１７β−エストラジオールの前房内濃度は、平均１５３ｐｇ／ｍｌであった。
図３から分かるように、いずれの点眼剤も前房内の１７β−エストラジオール濃度は、点眼後３０分値が１番高く、以後減少している。２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンで包接した点眼剤Ｂの１７β−エストラジオール前房内濃度が一番高いことから、一番強く角膜、結膜を透過しているといえる。この結果から、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが１７β−エストラジオールの角膜、結膜透過に対するエンハンサーの働き、すなわち、角膜、結膜を透過しやすくする働きをしていると推定される。二番目に前房内の１７β−エストラジオール濃度が高いのは、α−＋γ−シクロデキストリン包接した点眼剤Ｃであった。α−デキストリンは１７β−エストラジオールの溶解性が低く、γ−デキストリンの働きの方が強いと思われる。点眼剤Ａ（懸濁液）は、前房内移行濃度が低く、透過性が悪かった。この結果となったのは、点眼剤Ａにおいては、大小不同の凝集塊が出来、粒子径が大きくなったことが一つの要因と考えられる。メチル−β−シクロデキストリンの包接の点眼剤Ｄは、１７β−エストラジオールの高い前房内移行濃度（点眼後３０分値：３６１７８ｐｇ／ｍｌ）を示したが、これは、メチル−β−シクロデキストリンにより角膜、結膜の生理化学的性質が変わり、病的な角膜、結膜からの透過であるからグラフからは除外した。
この実験結果から、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接物の点眼剤Ｂが最良であることが判明した。
実施例４  白内障治療（動物実験）
ＳＩＧＭＡ社（ＵＳＡ）製の水溶性１７β−エストラジオールの２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接物から調製した１７β−エストラジオール点眼剤（１７β−エストラジオール濃度０．１ｇ／ｌ及び０．０１ｇ／ｌ）による白内障の治療効果を見る動物実験をブラインドで行った。
コントロール群（Ｃｏｎｔｒｏｌ）：マウスの目（４眼）に紫外線ＵＶ−Ａ＋ＵＶ−Ｂ（各０．３６Ｊ：１００μＷ×１時間）を第１日、第３日、第５日の２２時〜２３時にかけてそれぞれ１回、合計３回照射した。ただし、各紫外線照射の１分前と１分後にＰＢＳ（リン酸バッファー生理的食塩水）を１滴（５０μｌ）点眼し、第２日、第４日、第６日、第７日、第８日、第９日及び第１０日にそれぞれ１回ＰＢＳを１滴点眼した。
紫外線照射前投与群（Ｐｒｅ  ０．１ｇ／ｌ及びＰｒｅ  ０．０１ｇ／ｌ）：マウスの目に紫外線ＵＶ−Ａ＋ＵＶ−Ｂ（各０．３６Ｊ：１００μＷ×１時間）を第１日、第３日、第５日の２２時〜２３時にかけてそれぞれ１回、合計３回照射した。ただし、各紫外線照射の１分前に１７β−エストラジオール濃度０．１ｇ／ｌ（４眼）又は０．０１ｇ／ｌ（４眼）の点眼剤１滴（５０μｌ）を点眼し、かつ紫外線照射１分後にＰＢＳを１滴点眼し、第２日、第４日、第６日、第７日、第８日、第９日及び第１０日にそれぞれ１回、１７β−エストラジオール濃度０．１ｇ／ｌ又は０．０１ｇ／ｌの点眼剤１滴（５０μｌ）を点眼した。
紫外線照射後投与群（Ｐｏｓｔ  ０．１ｇ／ｌ及びＰｏｓｔ  ０．０１ｇ／ｌ）：マウスの目に紫外線ＵＶ−Ａ＋ＵＶ−Ｂ（各０．３６Ｊ：１００μＷ×１時間）を第１日、第３日、第５日の２２時〜２３時にかけてそれぞれ１回、合計３回照射した。ただし、各紫外線照射の１分前にＰＢＳを１滴点眼し、かつ紫外線照射１分後に１７β−エストラジオール濃度０．１ｇ／ｌ（４眼）又は０．０１ｇ／ｌ（４眼）の点眼剤１滴（５０μｌ）を点眼し、第２日、第４日、第６日、第７日、第８日、第９日及び第１０日にそれぞれ１回、１７β−エストラジオール濃度０．１ｇ／ｌ又は０．０１ｇ／ｌの点眼剤１滴（５０μｌ）を点眼した。
第１０日の２２時に、前眼部の写真を撮影した（図４）。
図４から分かるように、マウスの目に紫外線ＵＶ−Ａ＋ＵＶ−Ｂを３日間照射すると、第１０日に、ＰＢＳのみを投与したコントロール群には白内障が現れて来たが、これに対して、１７β−エストラジオール含有点眼剤の照射前投与群及び照射後投与群には白内障の発生がほとんどないことが確認された。１７β−エストラジオールが高濃度の点眼剤の投与群の方が低濃度の点眼剤の投与群よりも白内障の出現がより少なく、薬理効果がより高かった。また、紫外線照射前投与群の方が照射後投与群より白内障の出現がより少なく、薬理効果がより強く現れていた。２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７βエストラジオールには、点眼による白内障の予防効果と治療効果の両方があることが確認された。
マウスの目に２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオール（１７β−エストラジオール濃度１０ｍｇ／ｌ）点眼剤を点眼して水晶体皮質の核をエストロゲンレセプターの抗体で免疫染色したところ、後述の通り、核周囲及び核内が染色され、１７β−エストラジオールが水晶体皮質細胞内に届いていることが確認された。
実施例５  エストロゲンレセプターの網膜外顆粒層細胞の核内への移行（動物実験）
月齢３ヶ月のオスのマウス（体重約２０ｇ）に、後述の実施例７のようにして調製した１７β−エストラジオール濃度１００ｍｇ／ｌの点眼剤１滴（５０μｌ）を第１日目に朝１回、第２日目に朝夕２回、第３日目に朝１回点眼した。３日間の点眼後のマウスの網膜の外顆粒層の細胞（視細胞）を試料とした。コントロールとして蒸留水を同様に点眼したマウスからの試料を用いた。
後述の実験方法により、試料を抗エストロゲンレセプタークローンＡＥＲ３１１（マウスモノクロナールＩｇＧ２ａＫ）（２００μｇ／２００μｌ）を用いて免疫染色し、顕微鏡（×１００）で観察した。その結果を図５および６に示す。
コントロールではマウス網膜の外顆粒層の細胞（視細胞）の核にエストロゲンレセプターの移行が少ないことが確認されたが（図５参照）、水溶性１７β−エストラジオール含有点眼剤を点眼したマウスの網膜の外顆粒層の細胞（視細胞）では、レセプターは細胞の核内にコントロールにくらべより多く移行していることが確認された（図６参照）。この水溶化された点眼剤により、１７β−エストラジオールが眼内深層（網膜）にまで移行することが確認され、目的の細胞が活性化されることが証明された。
実施例６  分子生物学的実験（動物実験）
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンで包接することにより、１７β−エストラジオールは、点眼により眼内に充分に移行することが判ったので、分子生物学的により詳細な実験を行った。
（実験材料と方法）
＜実験材料＞
マウスはＣ５７ＢＬ／６（埼玉実験動物から購入）を使用した。解剖時の麻酔にはエーテルを使用した。
点眼剤は、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７−βエストラジオール（ＳＩＧＭＡ社ＭＯ，ＵＳＡ）から調製し、１７−βエストラジオール濃度０．０１〜１００μｇ／ｍｌで用いた。
抗エストロゲン受容体モノクローナル抗体クローンＡＥＲ３１１は、Ｕｐｓｔａｔｅ社（ＮＹ，ＵＳＡ）より購入した。二次抗体を含む免疫染色に必要な試薬は、ＶＥＮＴＡＮＡ社（ＡＺ，ＵＳＡ）より購入した。
＜凍結切片作製法＞
点眼して所定時間経過後にエーテルにて麻酔、安楽死後に一部視神経を含む眼球を摘出、２％パラホルムアルデヒドを含むＰＢＳ（リン酸バッファー生理的食塩水）で氷冷しながら１時間固定した。次いで、ドライアイスで冷却したイソペンタン上でＴＩＳＳＵ  ＭＯＵＮＴ（白井松器械）を用いて包埋した。薄切はクリオシュタット（ＬＥＩＣＡ  ＣＭ１９００，ＧＥＲＭＡＮＹ）を用い、後固定の為に５分間ＨＥ固定液（７９％エタノール、２０％ホルマリン、１％酢酸）に浸した。ＰＢＳで洗浄後に染色走査に供した。
＜免疫染色によるエストロゲン受容体の検出＞
薄切切片はＶＥＮＴＡＮＡ社のＨＸシステムを用いて免疫染色した。染色プロトコールはＤＡＢ  Ｎｏｎ−Ｐａｒａｆｆｉｎプロトコールを選択、ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｒ  ＣＣｌで抗原賦活化処理し、一次抗体としての抗体希釈液で４μｇ／ｍｌの濃度に希釈した抗エストロゲン受容体抗体で３２分間反応した。二次抗体とｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅ（ＤＡＢ）による発色はＶｅｎｔａｎａ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔを使用した。また、ｐｏｓｔ−ｃｏｕｎｔｅｒｓｔａｉｎにＢＬＵＩＮＧ  ＲＥＡＧＥＮＴを用いた。染色終了後エタノールとキシレンを用いて透徹し、ソフトマウント（和光純薬）を用いてマウントした。
＜染色切片の観察＞
免疫染色した切片の観察には正立顕微鏡を用い、画像をデジタル・カメラ（Ｎｉｋｏｎ  ＣｏｏｌＰｉｘ  ９００）で撮影、画像処理ソフト  Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐでパソコン上に表示して解析した。
（結果）
＜エストロゲン受容体の眼球内分布＞
エストロゲンの明確となっている作用機序としては、細胞内エストロゲン受容体のエストロゲンとの結合とによる活性化、核への移行、エンハンサーへの結合による特定遺伝子群の転写活性の増加が知られている。そこで、エストロゲンが作用するのに必要な受容体が眼球内のどこに存在するかを調べた。その結果、ＤＡＢによる発色で観察した所、外顆粒層を含む網膜（図７）、水晶体の一部（図８）、角膜（図９）、毛様体（図１０）で抗エストロゲン受容体抗体陽性像が得られた。毛様体では、バックグラウンドが強く、判別が難しかった。
点眼により１７β−エストラジオールが眼内深くまで移行し、各種眼底疾患、緑内障などの視神経疾患治療に有効であるか確認を行った。
＜１７β−エストラジオールの点眼による網膜エストロゲン受容体の核移行＞
前述のように網膜でエストロゲン受容体の存在が認められた。しかし、図７に示したようにその局在は細胞質であり、この状態は不活性型である。エストロゲンが結合すれば核への移行が起こることは培養細胞などでは多数報告されている。しかし、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいてエストロゲンがこの受容体の核移行を誘導し、これを組織切片の免疫染色で確認できるかはまったく不明である。そこで、まず、エストロゲンの点眼でこの網膜の受容体の核移行が認められるか調べた。
（１）  網膜にあるエストロゲン受容体の核移行
マウスに、エストロゲン（２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオール  １０μｇ／ｍｌ）の点眼剤を１滴（５０μｌ）１日目昼、２日目朝と夕、３日目朝の４回点眼し、最後の点眼１時間後に眼球を摘出して凍結、薄切後に抗エストロゲン受容体抗体で染色した。その結果、網膜外顆粒細胞では、一定の割合で核に移行した像を確認できた（図１１〜図１４）。この結果を基に以下、点眼１７β−エストラジオール濃度変化と添加後時間による変化を解析することにした。
（２）  点眼１７β−エストラジオール濃度による変化
網膜外顆粒細胞のエストロゲン受容体を核に移行させることが可能な点眼１７β−エストラジオール濃度を調べるために、（１）と同様に各濃度の２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオールを１日目昼、２日目朝と夕、３日目朝の４回点眼し、最後の点眼１時間後に眼球を摘出して凍結、薄切後に抗エストロゲン受容体抗体で染色した。図１５にその結果を示す。１７β−エストラジオール濃度０．０１μｇ／ｍｌ以上の点眼剤を点眼した場合には、ＰＢＳ（リン酸バッファー生理的食塩水）のみの点眼剤（１７β−エストラジオール０μｇ／ｍｌ）に比べて有意に受容体の核移行が認められた。核移行は、１７β−エストラジオール濃度１００μｇ／ｍｌまで用量依存的に増加した。
（３）  １７β−エストラジオール点眼後の変化
点眼した２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオールによるエストロゲン受容体の核移行がいつまで持続するかを調べる目的で１０μｇ／ｍｌの濃度の１７β−エストラジオールを１０分おきに３回点眼し、最初の点眼から２，８，２４，４８時間後にそれぞれ眼球を摘出して凍結、薄切後に抗エストロゲン受容体抗体で染色した。図１６にその結果を示す。この図から分かるとおり、点眼２時間後には３６％の網膜外顆粒細胞で核移行が見られたが、２４時間後及び４８時間後には２２％及び１９％となり、１７β−エストラジオール０μｇ／ｍｌ添加のコントロール１８％をやや上回るまで、移行した細胞数の低下が見られた。
１７β−エストラジオールの点眼により、用量依存的に網膜外顆粒細胞でその受容体が核に移行することが確認できた。この結果は、点眼により直接１７β−エストラジオールが眼内深層に作用することを明確に示している。しかし、その効果は１〜２日後には低下する。また核移行後のエストロゲン受容体は蛋白分解される。
（まとめ）
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオールの点眼による眼球への作用をモデル動物を用いて分子生物学的に確認することができた。これは、臨床応用でこの方法により、眼に対して１７β−エストラジオール等のエストロゲンを点眼により容易に作用させることが可能なことをデータとして示したものである。
０．０１μｇ／ｍｌ以上の１７β−エストラジオールを点眼した場合、ＰＢＳ点眼のコントロールに比べて、網膜外顆粒細胞のエストロゲン受容体の核内移行が有意に認められ、核内移行は、０．１μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌまでの濃度で用量依存的であり、０．１μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌの濃度又はそれ以上が１７β−エストラジオール含有点眼剤の好適濃度であることが判明した。
また、核内移行の時間的経過から長時間（２４時間以上）効果が続くので１〜２日に１回〜２回の投与で良く、点眼剤の投与回数が少なくて良い事が判った。
この実験から、点眼による各種眼底疾患、緑内障などによる視神経疾患治療が可能であることが想定され、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオール含有点眼剤は、各種疾患治療に対して優れた点眼治療薬であるといえる。
実施例７  点眼剤／洗眼剤の調製
水溶性の１７β−エストラジオール包接物（ＳＩＧＭＡ社（ＵＳＡ）製のＣｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ−ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ  １７β−ｅｓｔｒａｄｉｏｌ；２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンによる包接物で、包接物１ｇ当たり１７β−エストラジオール４５ｍｇを含む）を滅菌蒸留水に２．２ｇ／ｌ（１７β−エストラジオールを１００ｍｇ／ｌ）の濃度で溶解して、点眼剤／洗眼剤を調製した。
実施例８  眼圧に対する効果（動物実験）
実験には、生後８ヶ月から１０ヶ月の有色家兎（体重１．８〜２ｋｇ）を５匹（１０眼）用いた。
（１）眼圧の日内変動
家兎の眼圧の日内変動を測定した。平均値は、午前９時に１４ｍｍＨｇ、午後１時に１２ｍｍＨｇ、午後３時に１２ｍｍＨｇ、午後６時に１６ｍｍＨｇであった。
平均眼圧は１４±２ｍｍＨｇであった。
（２）点眼剤／洗眼剤の効果１
家兎の眼圧の日内変動に見られるように眼圧は夕方に上昇することから、午後１時に点眼剤／洗眼剤を投与してその効果を見た。点眼剤／洗眼剤で処理する前の家兎の眼圧は午後１時で１４ｍｍＨｇであった。
この家兎に対して、午後１時に実施例７で調製した１７β−エストラジオール点眼剤／洗眼剤を１眼当たり２５μｌ（１滴）点眼した。点眼３時間半後の午後４時半に点眼家兎の眼圧を測定したところ、１０ｍｍＨｇまで下がっており、また、この効果は少なくとも点眼５時間後の午後６時までは持続した。
別途、点眼していない家兎を午後１時に実施例７で調製した１７β−エストラジオール点眼剤／洗眼剤により洗眼した。最大の眼圧低下は、洗眼５０分後に現れた。眼圧の低下効果は、少なくとも洗眼５時間後まで持続した。
（３）点眼剤／洗眼剤の効果２
１眼のみが高眼圧の家兎を用いて実験した。（このデータは、平均の計算には使用しなかった。）
この家兎の点眼前の午後５時における眼圧は２４ｍｍＨｇであった。午後５時に家兎を実施例７で調製した１７β−エストラジオール点眼剤／洗眼剤で洗眼したところ、洗眼１５分後に眼圧が１５ｍｍＨｇまで下がった。この家兎を直ちに同じ点眼剤／洗眼剤で再度洗眼したところ、４５分後に眼圧が１３ｍｍＨｇまで下がった。
点眼剤／洗眼剤処理した家兎をそのまま放置して、翌日午前９時に眼圧を測定したところ１８ｍｍＨｇであり、前日の点眼剤／洗眼剤の効果が残っていた。この家兎に実施例７で調製した１７β−エストラジオール点眼剤／洗眼剤２５μｌ（１滴）を点眼したところ、点眼３時間１５分後に１３ｍｍＨｇまで眼圧が下がっていた。この時点で実施例７で調製した１７β−エストラジオール点眼剤／洗眼剤２５μｌを再度点眼したところ、再点眼３時間１５分後の眼圧は１３ｍｍＨｇであった。その後さらに同じ点眼剤／洗眼剤を２５μｌ点眼したところ、点眼１時間５０分後に眼圧は１２ｍｍＨｇであった。
その翌日（第３日目）の点眼前の眼圧は、午前９時で１０ｍｍＨｇであり、その時点で実施例７で調製した１７β−エストラジオール点眼剤／洗眼剤２５μｌを１回のみ点眼したところ、午後０時（点眼３時間後）の眼圧は９ｍｍＨｇであり、午後３時１５分の眼圧は１２ｍｍＨｇであり、午後６時の眼圧は１１ｍｍＨｇであった。点眼の効果は長時間持続することが分かった。
投与の翌日にも効果が残っていることから、エストロゲンの受容体が関与し、ＤＮＡのレベルの働きが関係しているのかもしれない。ＮＯの発生による可能性もある。これ以外のメカニズムも考えられる。
実施例９  正常眼圧緑内障患者の治療効果
患者は、正常眼圧緑内障と診断された７５才の女性である。
水溶性の１７β−エストラジオール包接物（ＳＩＧＭＡ社（ＵＳＡ）製のＣｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ−ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ  １７β−ｅｓｔｒａｄｉｏｌ；２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンによる包接物で、包接物１ｇ当たり１７β−エストラジオール４５ｍｇを含む）を滅菌蒸留水に２．２ｇ／ｌ（１７β−エストラジオールを１００ｍｇ／ｌ）の濃度で溶解して、点眼剤を調製した。
上記の患者に対して、１０日間毎日朝１回、点眼剤を１眼当たり１滴（２５μｌ）点眼した。
患者の眼圧は、点眼前に右１４ｍｍＨｇ、左１２ｍｍＨｇであったが、１０日間の点眼後に右１２ｍｍＨｇ、左９ｍｍＨｇであった。
患者の点眼前のＯｃｔｏｐｕｓ１−２−３による視野計測で視野欠損が確認されたが（図１７および１８）、１０日間の点眼により両眼とも非常によく改善された（図１９および２０）。臨床的に、点眼による正常眼圧緑内障の治療効果が確認された。
実施例１０  高眼圧の開放隅角緑内障の治療効果
患者は、高眼圧の開放隅角緑内障と診断された５４才の女性である。
水溶性の１７β−エストラジオール包接物（ＳＩＧＭＡ社（ＵＳＡ）製のＣｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ−ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ  １７β−ｅｓｔｒａｄｉｏｌ；２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンによる包接物で、包接物１ｇ当たり１７β−エストラジオール４５ｍｇを含む）を滅菌蒸留水に２．２ｍｇ／ｌ（１７β−エストラジオールを１００μｇ／ｌ）の濃度で溶解して、点眼剤を調製した。
患者に、１週間毎日朝１回、点眼剤を１滴（２５μｌ）点眼した。
患者の眼圧は、点眼前に右２３ｍｍＨｇ、左２４ｍｍＨｇであったが、１週間の点眼後に右１６ｍｍＨｇ、左１８ｍｍＨｇであった。
視野は、暗点があったが、右眼では軽度の欠損（図２１）がほぼ正常に回復し（図２３）、左眼では進行した欠損（図２２）が軽度改善した（図２４）。
点眼をさらに継続したところ、３週間目に、患者の眼圧は、点眼前に右２０ｍｍＨｇ、左１９ｍｍＨｇに上昇した。１００μｇ／ｌの１７β−エストラジオール濃度は、効果を表わす濃度の下限値に近いと考えられる。より高濃度にするか、または１日当たりの点眼回数を増加することにより効果的な治療が可能である。
臨床的に、点眼による高眼圧の開放隅角緑内障の治療効果が確認された。
実施例１１  白内障治療（臨床的治療効果）
白内障の患者に、実施例７で用いた水溶性の１７β−エストラジオール包接物を滅菌蒸留水に溶解して、１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの濃度の点眼剤を調製し、この１滴（５０μｌ）を毎日朝８時に１日１回点眼した所、視力の改善が得られた（図２５参照）。又、眼科診察用の細顕灯顕微鏡でも白内障の混濁が軽減するのが観察された。
実施例１２  老眼の治療効果
患者は、−２．５ジオプトリの軽度近視と−１．０Ｄの乱視のある老眼の５９才の男性である。
左眼にレンズによる矯正を行なわずに患者の近点を計測したところ２９ｃｍであった。
水溶性の１７β−エストラジオール包接物（ＳＩＧＭＡ社（ＵＳＡ）製Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ−ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ  １７β−ｅｓｔｒａｄｉｏｌ；２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンによる包接物で、包接物１ｇ当たり１７β−エストラジオール４５ｍｇを含む）を滅菌蒸留水に２．２ｇ／ｌ（１７β−エストラジオールを１００ｍｇ／ｌ）の濃度で溶解して、点眼剤を調製した。
患者に、朝９時に点眼剤を１眼当たり１滴（２５μｌ）点眼した。点眼前に２９ｃｍであった患者の近点は、点眼１時間後に２７ｃｍとなり、３時間後には２４ｃｍとなり、最大５ｃｍの屈折改善がみられた（図２６）。なお、遠点は、平均４１±２ｃｍであった。
臨床的に、点眼による老眼の治療効果が立証された。
実施例１３  網膜色素変性症治療
患者は８６才の女性で、すでに白内障の手術を受け人工水晶体挿入眼である。網膜色素変性症のために視野狭窄がおきている。この患者に実施例７で調製した１７β−エストラジオールを１００ｍｇ／ｌの濃度で含む点眼剤１滴（５０μｌ）を毎日１回（朝８時）に点眼投与を行った所、視野が徐々に改善した。点眼開始から７７日後に視力と視野が両方とも改善しているのが確認された。
点眼前の視力は    Ｖｄ＝０．４×ＩＯＬ（矯正視力０．６）
Ｖｓ＝０．８×ＩＯＬ（矯正視力０．８）
であったが７７日後には
Ｖｄ＝０．４×ＩＯＬ（矯正視力０．８）
Ｖｓ＝０．５×ＩＯＬ（矯正視力１．０）
と視力の改善が確認された。
又、ＯＣＴＯＰＵＳ  １−２−３静的視野計で計測した視野も点眼前と点眼開始から７７日後を比較すると改善しているのが確認された。（図２７〜３０参照）
実施例１４  霰粒腫の治療
８才女児の右）霰粒腫に、実施例１１で調製した１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌ濃度の点眼剤１滴（５０μｌ）を朝１回点眼した所、１２日後に腫瘤は消失していた。
実施例１５  近視治療
１．１３才男児〔視力：Ｖｄ＝０．７（１．５×−０．５Ｄ）
Ｖｓ＝０．６（１．５×−０．５Ｄ）〕に
実施例７で用いた水溶性の１７β−エストラジオール包接物を蒸留水で溶解して調製した１７β−エストラジオール１００μｇ／ｌの濃度の点眼液１滴（５０μ１）を１日１回（朝８時）に点眼した所、９日後に視力が
Ｖｄ＝１．０（１．５×−０．２５Ｄ）
Ｖｓ＝１．０（１．５×−０．２５Ｄ）
に改善した。
２．１３才男児〔視力：Ｖｄ＝０．４（１．５×−０．７５Ｄ）
Ｖｓ＝０．３（１．５×−１．２５Ｄ）〕に
実施例１１で調製した１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの濃度の点眼剤を１滴（５０μｌ）を毎朝１回点眼した所、点眼４５日後に下記の様に視力改善が見られた。
Ｖｄ＝１．０（１．５×−０．５Ｄ）
Ｖｓ＝０．５（１．５×−１．０Ｄ）
実施例１６  老眼治療
治療前の矯正の近方視力（近方の矯正視力）
Ｖｄ＝０．６／３０ｃｍ×ＮＪＢ
Ｖｓ＝０．４／３０ｃｍ×ＮＪＢ
の老眼の４９才の男性に実施例１１で調製した１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの濃度の点眼剤１滴（５０μｌ）を１日１回朝点眼した所、１４日間の点眼後、近方矯正視力は以下の様に改善した。
Ｖｄ＝１．０／３０ｃｍ×ＮＪＢ
Ｖｓ＝０．７／３０ｃｍ×ＮＪＢ
実施例１７  眼底出血治療
右眼に眼底出血が見られる８０才の男性に、実施例１１で調製した１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの濃度の点眼剤を１滴（５０μｌ）１日１回朝８時に点眼し、同時にアドナ（商標）３０ｍｇを１日３回で内服させた所、４５日後には出血は消えていた。
実施例１８  角膜潰瘍治療
７６才の女性で、両眼に交互に再発をくりかえす角膜潰瘍があり、モーレンズ角膜潰瘍と診断された患者の右眼に、実施例１１で調製した１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの濃度の点眼剤１滴（５０μｌ）を１日２回朝８時と１７時に点眼した所、３週間で軽快した。自己免疫疾患の治療が可能と考えられる。
実施例１９  角膜変性症治療
１．顆粒状角膜変性症と診断された６３才の女性の左眼に、実施例１１で調製した１ｍｇ／ｌの濃度の１７β−エストラジオール点眼剤を１滴（５０μｌ）１日２回（８時と１５時）点眼した所、視力が２週間で改善した。
Ｖｓ＝０．６（ｎ・ｃ）→Ｖｓ＝０．４（０．８）
２．顆粒状角膜変性症と診断された６８才の女性に、同上の点眼液を１滴（５０μｌ）朝１回右眼に点眼した所、１週間で
Ｖｄ＝０．３（０．９）→Ｖｄ＝０．３（１．０）と視力改善が現れ、
２ヶ月後にＶｄ＝０．５（１．２）とかなり改善した。（  ）内は矯正視力を示す。
実施例２０  虹彩毛様体炎の治療
８５才の女性で、右眼に虹彩毛様体炎が見られた患者に、実施例１１で調製した１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの濃度の点眼剤を５０μｌ  １滴朝８時に点眼した所、１週間後に軽快した（前房内の炎症細胞が消失した）。
実施例２１  ポスナーシュロスマン症候群の治療
３６才の女性で、左眼に虹彩炎と眼圧上昇（Ｔｏｓ＝３６ｍｍＨｇ）が見られポスナーシュロスマン症候群と診断された患者に、実施例１１で調製した１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの濃度の点眼剤を５０μｌ  １回１滴朝８時に１週間点眼した所、虹彩炎がなくなり、眼圧も正常化（Ｔｏｓ＝１７ｍｍＨｇ）した。
実施例２２  中枢神経疾患治療
精神分裂病（統合失調症）と診断された８０才の女性に、実施例７で用いた水溶性の１７β−エストラジオール包接物を滅菌蒸留水に溶解して、１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの濃度の点眼剤を調製し、これを１日朝１回１滴（５０μｌ）点眼した所、下記のように、視力改善と精神状態の改善が得られた。
開始時        Ｖｄ＝０．１×ＩＯＬ（０．３）
Ｖｓ＝０．０９×ＩＯＬ（０．１）
↓    １ｍｇ／ｌ  朝１回１滴（５０μｌ）点眼
１４日後      Ｖｄ＝０．１×ＩＯＬ（０．４）
Ｖｓ＝０．１×ＩＯＬ（０．１）
よく見える様になったと本人が言った。
↓    １ｍｇ／ｌ  朝１回１滴（５０μｌ）
４２日後      Ｖｄ＝０．１５×ＩＯＬ（０．４）
Ｖｓ＝０．０９×ＩＯＬ（０．１）
元気が出て来たと本人が言った。
↓    １ｍｇ／ｌ  朝１回（５０μｌ）
７７日後      Ｖｄ＝０．３×ＩＯＬ（０．６）
Ｖｓ＝０．１×ＩＯＬ（０．１５）
↓    １ｍｇ／ｌ  ２回（５０μｌ）
１１５日後    Ｖｄ＝０．２×ＩＯＬ（０．４）
Ｖｓ＝０．０９×ＩＯＬ（０．２）
（  ）内は矯正視力を示す。
精神分裂症の患者治療に有効である事が確認された。他の中枢神経疾患治療、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、ＡＬＳ、精神病、精神分裂症、精神統合失調症、そううつ病等の治療にも有効であると考えられる。
実施例２３  網脈絡膜萎縮の治療
６５才の男性の右眼に実施例１１で調製した１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの点眼剤を１日１回５０μｌを１ヶ月投与したところ、視力（矯正不能）０．０８（ｎ・ｃ）が矯正視力０．２に改善し、７０才の女性の左眼に上記点眼剤を１日１回１滴（５０μｌ）を１ヶ月投与したところ、矯正視力０．１が矯正視力０．３に改善した。
実施例２４  糖尿病性網膜症の治療
糖尿病性網膜症を有する７４才の女性患者に、実施例１１で調製した１７β−エストラジオール１ｍｇ／ｌの点眼剤を毎日１日１回１滴（５０μｌ）を点眼投与した。投与開始から約２ヶ月後に眼底写真により眼底の斑状出血を観察したところ、やや改善されていた。投与開始から約１００日後には、眼底の斑状出血が治った。
実施例２５  黄斑円孔の治療
黄斑円孔をおこしかけており、視力が０．７の７６才の女性の左眼に、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオール含有点眼剤（１０ｍｇ／ｌ）の１滴（５０μｌ）を１日２回、１ヶ月間点眼し続けたところ、黄斑円孔が治癒し、視力が１．２に回復した。
実施例２６  動体視力の改善効果
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の６０才の男性の左眼に、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオール点眼剤（１０μｇ／ｍｌの１７β−エストラジオール濃度）５０μｌ（１滴）を１回点眼し、動体視力の測定をニデック動体視力計ＫＶ−１００を用い行った。３０分から１時間１５分の間で動体視力が急激に改善した。（図３１）
実施例２７  角膜内皮細胞の再生保護
コンタクトレンズ装用のため、内皮細胞が脱落減少した３０才の女性患者に実施例１１で調製した１７β−エストラジオール（１ｍｇ／ｌ）点眼剤１滴（５０μｌ）を点眼した所１０日間（１日１回点眼）で改善した。
右眼内皮細胞数（ｍｍ２当り）２８０１→３４１２
左眼内皮細胞数（ｍｍ２当り）２９０６→３４９６
測定器はＮＯＮＣＯＮ  ＲＯＢＯ（ＫＯＮＡＮ  ＩＮＣ）スペキュラーマイクロスコープを用いた。
実施例２８  光視症の改善
光視症を訴えた６２才の女性に、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオール点眼剤（１７β−エストラジオール濃度１０ｍｇ／ｌ（１０μｇ／ｍｌ））を１日１回１滴（５０μｌ）を３週間点眼した所症状が改善した。
実施例２９  流行性角結膜炎の治療
流行性角結膜炎に罹患した２６才の女性に、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオール点眼剤（１７β−エストラジオール濃度１ｍｇ／ｌ）を１日１回１滴（５０μｌ）投与した所、眼脂は増加したがビラン性表層角膜炎は４日目に治癒した。
実施例３０  眼精疲労の治療
コンピューター入力で目の疲労を訴えていた３０才の男性に、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオール点眼剤（１７β−エストラジオール濃度１０ｍｇ／ｌ）を１日１回（５０μｌ）投与した所、３週間で眼精疲労が改善した。
実施例３１  中心性網脈絡膜炎の治療
左眼に視力低下があり中心性網脈絡膜炎がある１８才の男性患者に、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン包接１７β−エストラジオール（１０ｍｇ／ｌ）の点眼液の１滴（５０μｌ）を１日２回点眼したところ、１週間で視力が改善し、黄斑の浮腫も軽減した。
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【産業上の利用可能性】  本発明によれば、ＨＲＴの問題点である副作用の問題を克服し、治療効果の高い緑内障や白内障等の眼疾患や中枢神経疾患又は精神病の治療剤の提供が可能となる。
また、本発明によれば、効果の持続期間が長く、一日１回または２〜３日に１回の点眼回数ですむ、緑内障、白内障、眼底疾患等の眼疾患の治療剤が提供できる。眼圧を低下させるとともに、特に顕著に視野狭窄を改善することができるので、高眼圧の緑内障だけでなく、今まで治療法がなかった正常眼圧緑内障の治療も特に効果的に行える。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【手続補正書】
【提出日】平成16年8月18日(2004.8.18)
【手続補正００１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
【技術分野】
本発明は、性ステロイドホルモン（例えばエストロゲン）、セレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター、ノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）又はその他のエストロゲン作用を有する物質を含有する眼に適用する疾患治療剤、特に点眼剤／洗眼剤等の形態にある、眼に適用する疾患治療剤に関する。
【背景技術】
エストロゲン単独、またはエストロゲンとプロゲステロン併用の内服によるホルモン補充療法（ＨＲＴ）により、老人性黄斑変性症（ＡＭＤ）、黄斑円孔、緑内障、糖尿病性網膜症、老人性白内障などの各種眼疾患の症状の改善の可能性が報告されている。
しかし、ＨＲＴは、エストロゲン（またはエストロゲンとプロゲステロン）を全身投与するため、乳癌、子宮癌、女性化乳房、インポテンツなどの重篤な副作用を引き起こす場合がある。したがって、ＨＲＴは、治療の可能性があるにもかかわらず、各種の疾患、特に眼疾患の治療には容易に用いることができなかった。
眼疾患である緑内障の発症は、今まで、４０才以上の３０人に１人といわれていた。しかし、２００２年の日本緑内障学会の調査報告では、４０才以上の１７人に１人という結果がでており、緑内障の患者が増加している。高齢化社会を向かえて、今後も緑内障をはじめとする眼疾患の患者の増大が予想される。
今までの緑内障等の眼疾患治療用点眼剤は、眼圧を低下させるが、視野狭窄の改善効果が不充分であり、また、眼の充血や角膜びらんを引き起こす場合があった。また、一日に何度も点眼する必要があり、煩わしかった。
本発明の目的は、ＨＲＴの問題点である副作用の問題を克服した、点眼等による疾患の治療剤を提供することである。
また、本発明の目的は、視野の改善、眼圧の低下等の治療効果の持続期間が長く、一日１回または２〜３日に１回の点眼回数ですむ、緑内障、白内障等の眼疾


【手続補正００２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
患の根本的な治療剤を提供することである。
【発明の開示】
本発明は、性ステロイドホルモン（例えばエストロゲン）、セレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター、ノンフェミナイジングエストロゲン（ノンホルモナールエストロゲン）又はその他のエストロゲン作用を有する物質を含有する、眼に適用する疾患治療剤である。
本発明の疾患治療剤に含有される性ステロイドホルモンは、おもに卵巣、精巣などの生殖腺や胎盤で合成、分泌されるホルモンであり、本発明においては、その作用を持つ合成物質や誘導体及び代謝物も含まれる。性ステロイドホルモンは、アンドロゲン、エストロゲン、ゲスターゲンに大別される。炭素数１８〜２１の性ステロイドホルモンが好ましい。
アンドロゲンとして、例えば、テストステロン、アンドロステンジオン、デヒドロエピアンドロステロン、アンドロステロン、アンドロスタンジオン、メチルテストステロンおよびその誘導体又は構造類似体が例示され、テストステロンおよびその誘導体又は構造類似体が好ましい。
エストロゲンとして、１７β−エストラジオール、エストロン、エストリオール、エキリン、エキレニン、エチニルエストラジオール等およびその誘導体、代謝物などが例示され、１７β−エストラジオールおよびその誘導体、代謝物が好ましい。
その他のエストロゲン作用を有する物質として、植物エストロゲン等及びその誘導体、代謝物が例示される。
ノンフェミナイジングエストロゲンとしては、例えば、ＵＳＰ第５，５２１，１６８に記載されている下式：
2004091630.tif 000038
【手続補正００３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
デキストリンがあるが、メチル化シクロデキストリンには、後述の動物及びヒトでの実験の結果から、目に対する刺激性、角膜や結膜に対する障害や溶血性の問題から適切ではないことが分かった。これに対して、ヒドロキシアルキル化シクロデキストリンは、安全性が高く、目に対する刺激性もなく角膜上皮障害もなく点眼剤作製に優れている。
ヒドロキシアルキル化シクロデキストリンには、ヒドロキシエチルシクロデキストリン、ヒドロキシプロピルシクロデキストリンなどが含まれ、特に２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが、包接物の水溶性や薬剤安定性に優れ、刺激性や生体毒性も少ない点から、最も好ましい。
γ−シクロデキストリン及びその誘導体も好ましく使用できる。α−シクロデキストリンは、１７β−エストラジオールの包接による水溶性化はあまり高くないので、γ−シクロデキストリンの方が好ましい。
ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、スルホニル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、δ−シクロデキストリンも用いる事が出来る。
１７β−エストラジオールなどの性ステロイドホルモンの水溶性化は、例えば、常法により、性ステロイドホルモンをゲスト化合物として、α−、β−またはγ−シクロデキストリンなどの環状化合物またはその誘導体等のホスト化合物に包接することによって行なうことができる。水溶性化された性ステロイドホルモンは、水に対する溶解性が良好であり、点眼により眼内組織（特に網膜）に有効成分を効果的に移行、浸透させるため、治療効果が高く、全身の血中濃度を低く抑えることができるので副作用が少なく、また、使用感がよく異物感がないので、特に点眼剤に適している。
水溶性化された１７β−エストラジオールは、点眼により眼内の目的部位に移行し、細胞を活性化することを確認した（後述の実施例１〜６参照）。
本発明の疾患治療例に含有されるセレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター（ＳＥＲＭ）には、例えば、ラロキシフェン、アルゾキシフェンなどがある。
エストロゲンの構造類似体、セレクティブエストロゲンレセプターモジュレー




【手続補正書】
【提出日】平成17年5月20日(2005.5.20)
【手続補正００１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
環状デキストリンにより包接された、性ステロイドホルモン、セレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター、ノンフェミナイジングエストロゲン又はその他のエストロゲン作用を有する物質を含有する、点眼剤の形態にある慢性単純結膜炎を除く疾患の治療剤。
【手続補正００２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１１】
点眼剤の形態にある慢性単純結膜炎を除く疾患の治療剤の製造における、有効成分としての、環状デキストリンにより包接された、性ステロイドホルモン、セレクティブエストロゲンレセプターモジュレーター、ノンフェミナイジングエストロゲン又はその他のエストロゲン作用を有する物質の使用。
【国際調査報告】
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2004091630.tif 000041
2004091630.tif 000042
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2004091630.tif 000044
2004091630.tif 000045
2004091630.tif 000046
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