(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）［式中、各記号は明細書中に記載のとおりである。］で表されるヒドロキサム酸誘導体の新規用途に関し、より詳細には、該誘導体およびその薬理学上許容される塩を用いて虚血再灌流障害を予防または治療する方法ならびに臓器を保存する方法、ならびに虚血再灌流障害の予防または治療剤をスクリーニングする方法に関する。2004085396.tif 000132
2004085396.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
2004085396.tif 000087
［式中、Ｘは水素または水酸基の保護基を示し、
Ｒは水素、水酸基、アミノ、メルカプト、アルコキシ、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニル、アリールまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ〔ｌは１〜４のいずれかの整数であり、Ａは、（ａ）窒素原子によって結合し、（ｂ）該結合窒素原子に隣接しない位置にさらなるヘテロ原子として、窒素、酸素および硫黄から選ばれる少なくとも１種の原子を含有していてもよく、（ｃ）該結合窒素原子に隣接する一方または両方の炭素原子に関し、オキソによって置換され、および（ｄ）ベンゾ縮合するか、または１以上の他の炭素原子に関し、低級アルキルもしくはオキソによって置換されているか、および／または別の窒素原子に関し、低級アルキルもしくはフェニルによって置換されていてもよい５または６員環含窒素ヘテロ環を表す。〕を示し、
Ｒ２は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキルまたはアリールを示し、
Ｑは次の式（ＩＩ）〜（Ｖ）から選ばれる基を示す。
2004085396.tif 000088
〔式（ＩＩ）において、
ＹはＯ、ＮＲ７（Ｒ７はＲ２と同義）またはＳを示し、
ｎは１〜６のいずれかの整数を示し、
Ｒ３は水素、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキル、アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイル、低級アルキルアミノまたはジ低級アルキルアミノ基を示し、
Ｒ４はＯＲ８（Ｒ８は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを表す。）またはＮＲ１０Ｒ１１（Ｒ１０およびＲ１１は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、低級アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、
またはＲ１０およびＲ１１は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。）で表される基を示す。
式（ＩＩＩ）において、
Ｒ１２は天然または天然以外のα−アミノ酸の特性基であり、ここで存在する官能基は保護されていてもよく、
Ｒ６は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを示し、
Ｚは炭素数１〜６のアルキレン、フェニレンまたはナフタレンを示す。
式（ＩＶ）において、
Ｒａ３は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは
2004085396.tif 000089
（式中、Ｒａ１１は水素、アルキル、アリールアルキルまたはアルキルチオアルキルを示し、
Ｙａは−ＣＯ２Ｒａ１２、−ＣＯＮＲａ１２Ｒａ１２’または−ＣＯＲａ１２を示し｛Ｒａ１２およびＲａ１２’は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルまたはアリールを示し、またはＲａ１２およびＲａ１２’は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい｝、
ｍ１は０または１を示し、
ｎ１は０〜４のいずれかの整数を示す）で表される基を示し、
Ｒａ４はアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、−ＳＯ２Ｒａ１２、−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ１−ＮＲａ１２Ｒａ１２’｛ｑ１は１または２を示し、Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義｝、−ＣＯＮＨ−Ｚａ−Ｒａ１３｛Ｚａは炭素数２〜４のアルキレンを示し、Ｒａ１３は水酸基、アミノまたは−ＮＲａ１２Ｒａ１２’（Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義）を示す｝または
2004085396.tif 000090
（式中、Ｒａ１１、Ｙａ、ｍ１およびｎ１は前記と同義）で表される基を示し、
またはＲａ３およびＲａ４は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。
式（Ｖ）において、
Ｒｂ３は水素、アルキルまたは式
2004085396.tif 000091
で表される基を示し
〔式中、Ｑｂ１は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000092
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２およびｑ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示し、
Ｒｂ１７は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕、
Ｙｂは式
2004085396.tif 000093
で表される基を示す
〔式中、Ｑｂ２は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
Ｒｂ１８は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000094
から選ばれる基を示す
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示し、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕。
但し、（ｉ）Ｒｂ３が式（Ａ）
2004085396.tif 000095
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３はグアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたは
2004085396.tif 000096
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示す））で表される基以外の基のとき、Ｙｂは式（Ｂ）
2004085396.tif 000097
（式中、Ｑｂ２はベンゼン環を示し、Ｒｂ１８は
2004085396.tif 000098
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は１または２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示すか、またはＱｂ２はフラン環を示し、
Ｒｂ１８はアリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000099
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示す）で表される基を示す。
前記のアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アリール、ヘテロアリールは置換基を有していてもよい］〕で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩を有効成分として含有する虚血再灌流障害の予防または治療剤。
【請求項２】
式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000100
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは請求項１と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は請求項１と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、請求項１に記載の予防または治療剤。
【請求項３】
Ｒ１がフタルイミドメチルである、請求項２に記載の予防または治療剤。
【請求項４】
Ｒ２がイソブチルである、請求項２または３に記載の予防または治療剤。
【請求項５】
Ｒ３が水素である、請求項２〜４のいずれかに記載の予防または治療剤。
【請求項６】
Ｒ４がＮＨＣＨ３またはＮＨＣ６Ｈ５である、請求項２〜５のいずれかに記載の予防または治療剤。
【請求項７】
肺虚血再灌流障害の予防または治療剤である、請求項１〜６のいずれかに記載の予防または治療剤。
【請求項８】
請求項１に記載の式（Ｉ）（式中の各記号は請求項１と同義）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩を含有する臓器保存剤。
【請求項９】
式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000101
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは請求項１と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は請求項１と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、請求項８に記載の臓器保存剤。
【請求項１０】
臓器が心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、小腸または眼球である、請求項８または９に記載の臓器保存剤。
【請求項１１】
臓器が肺である、請求項１０に記載の臓器保存剤。
【請求項１２】
保存液の形態である、請求項８〜１１のいずれかに記載の臓器保存剤。
【請求項１３】
被験物質のＴＮＦα遊離阻害活性を測定することを含む、虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニング方法。
【請求項１４】
動物臓器移植モデルにおいて、移植した臓器の再灌流後、
（１）被験物質を投与したレシピエント動物の血中ＴＮＦα量を測定する工程と、
（２）被験物質を投与しないレシピエント動物の血中ＴＮＦα量を測定する工程と、
（３）工程（１）および（２）で得られたＴＮＦα量を比較する工程と
を含む、虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニング方法。
【請求項１５】
動物肺移植モデルにおいて、移植した臓器の再灌流後、
（１）被験物質を投与したレシピエント動物の血中または肺胞洗浄液中のＴＮＦα量を測定する工程と、
（２）被験物質を投与しないレシピエント動物の血中または肺胞洗浄液中のＴＮＦα量を測定する工程と、
（３）工程（１）および（２）で得られたＴＮＦα量を比較する工程と
を含む、虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニング方法。
【請求項１６】
有効量の式（Ｉ）
2004085396.tif 000102
［式中、Ｘは水素または水酸基の保護基を示し、
Ｒは水素、水酸基、アミノ、メルカプト、アルコキシ、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニル、アリールまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ〔ｌは１〜４のいずれかの整数であり、Ａは、（ａ）窒素原子によって結合し、（ｂ）該結合窒素原子に隣接しない位置にさらなるヘテロ原子として、窒素、酸素および硫黄から選ばれる少なくとも１種の原子を含有していてもよく、（ｃ）該結合窒素原子に隣接する一方または両方の炭素原子に関し、オキソによって置換され、および（ｄ）ベンゾ縮合するか、または１以上の他の炭素原子に関し、低級アルキルもしくはオキソによって置換されているか、および／または別の窒素原子に関し、低級アルキルもしくはフェニルによって置換されていてもよい５または６員環含窒素ヘテロ環を表す。〕を示し、
Ｒ２は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキルまたはアリールを示し、
Ｑは次の式（ＩＩ）〜（Ｖ）から選ばれる基を示す。
2004085396.tif 000103
〔式（ＩＩ）において、
ＹはＯ、ＮＲ７（Ｒ７はＲ２と同義）またはＳを示し、
ｎは１〜６のいずれかの整数を示し、
Ｒ３は水素、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキル、アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイル、低級アルキルアミノまたはジ低級アルキルアミノ基を示し、
Ｒ４はＯＲ８（Ｒ８は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを表す。）またはＮＲ１０Ｒ１１（Ｒ１０およびＲ１１は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、低級アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、
またはＲ１０およびＲ１１は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。）で表される基を示す。
式（ＩＩＩ）において、
Ｒ１２は天然または天然以外のα−アミノ酸の特性基であり、ここで存在する官能基は保護されていてもよく、
Ｒ６は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを示し、
Ｚは炭素数１〜６のアルキレン、フェニレンまたはナフタレンを示す。
式（ＩＶ）において、
Ｒａ３は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは
2004085396.tif 000104
（式中、Ｒａ１１は水素、アルキル、アリールアルキルまたはアルキルチオアルキルを示し、
Ｙａは−ＣＯ２Ｒａ１２、−ＣＯＮＲａ１２Ｒａ１２’または−ＣＯＲａ１２を示し｛Ｒａ１２およびＲａ１２’は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルまたはアリールを示し、またはＲａ１２およびＲａ１２’は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい｝、
ｍ１は０または１を示し、
ｎ１は０〜４のいずれかの整数を示す）で表される基を示し、
Ｒａ４はアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、−ＳＯ２Ｒａ１２、−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ１−ＮＲａ１２Ｒａ１２’｛ｑ１は１または２を示し、Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義｝、−ＣＯＮＨ−Ｚａ−Ｒａ１３｛Ｚａは炭素数２〜４のアルキレンを示し、Ｒａ１３は水酸基、アミノまたは−ＮＲａ１２Ｒａ１２’（Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義）を示す｝または
2004085396.tif 000105
（式中、Ｒａ１１、Ｙａ、ｍ１およびｎ１は前記と同義）で表される基を示し、
またはＲａ３およびＲａ４は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。
式（Ｖ）において、
Ｒｂ３は水素、アルキルまたは式
2004085396.tif 000106
で表される基を示し
〔式中、Ｑｂ１は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000107
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２およびｑ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示し、
Ｒｂ１７は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕、
Ｙｂは式
2004085396.tif 000108
で表される基を示す
〔式中、Ｑｂ２は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
Ｒｂ１８は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000109
から選ばれる基を示す
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示し、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕。
但し、（ｉ）Ｒｂ３が式（Ａ）
2004085396.tif 000110
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３はグアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたは
2004085396.tif 000111
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示す））で表される基以外の基のとき、Ｙｂは式（Ｂ）
2004085396.tif 000112
（式中、Ｑｂ２はベンゼン環を示し、Ｒｂ１８は
2004085396.tif 000113
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は１または２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示すか、またはＱｂ２はフラン環を示し、Ｒｂ１８はアリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000114
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示す）で表される基を示す。
前記のアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アリール、ヘテロアリールは置換基を有していてもよい〕］で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩をドナーまたはレシピエントに投与することを含む、虚血再灌流障害の予防または治療方法。
【請求項１７】
式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000115
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは請求項１と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は請求項１と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ１がフタルイミドメチルである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ２がイソブチルである、請求項１７または１８に記載の方法。
【請求項２０】
Ｒ３が水素である、請求項１７〜１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
Ｒ４がＮＨＣＨ３またはＮＨＣ６Ｈ５である、請求項１７〜２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
虚血再灌流障害が肺虚血再灌流障害である、請求項１６〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
請求項１６に記載の式（Ｉ）（式中の各記号は請求項１６と同義）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩を、それを必要とする対象に適用することを含む臓器の保存方法。
【請求項２４】
式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000116
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは請求項２３と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は請求項２３と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
臓器が心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、小腸または眼球である、請求項２３または２４に記載の方法。
【請求項２６】
臓器が肺である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
適用が式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩の投与である、請求項２３〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
適用が式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩を含む溶液への臓器の浸漬である、請求項２３〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
虚血再灌流障害の予防または治療用の医薬製造における、式（Ｉ）
2004085396.tif 000117
［式中、Ｘは水素または水酸基の保護基を示し、
Ｒは水素、水酸基、アミノ、メルカプト、アルコキシ、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニル、アリールまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ〔ｌは１〜４のいずれかの整数であり、Ａは、（ａ）窒素原子によって結合し、（ｂ）該結合窒素原子に隣接しない位置にさらなるヘテロ原子として、窒素、酸素および硫黄から選ばれる少なくとも１種の原子を含有していてもよく、（ｃ）該結合窒素原子に隣接する一方または両方の炭素原子に関し、オキソによって置換され、および（ｄ）ベンゾ縮合するか、または１以上の他の炭素原子に関し、低級アルキルもしくはオキソによって置換されているか、および／または別の窒素原子に関し、低級アルキルもしくはフェニルによって置換されていてもよい５または６員環含窒素ヘテロ環を表す。〕を示し、
Ｒ２は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキルまたはアリールを示し、
Ｑは次の式（ＩＩ）〜（Ｖ）から選ばれる基を示す。
2004085396.tif 000118
〔式（ＩＩ）において、
ＹはＯ、ＮＲ７（Ｒ７はＲ２と同義）またはＳを示し、
ｎは１〜６のいずれかの整数を示し、
Ｒ３は水素、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキル、アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイル、低級アルキルアミノまたはジ低級アルキルアミノ基を示し、
Ｒ４はＯＲ８（Ｒ８は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを表す。）またはＮＲ１０Ｒ１１（Ｒ１０およびＲ１１は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、低級アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、
またはＲ１０およびＲ１１は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。）で表される基を示す。
式（ＩＩＩ）において、
Ｒ１２は天然または天然以外のα−アミノ酸の特性基であり、ここで存在する官能基は保護されていてもよく、
Ｒ６は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを示し、
Ｚは炭素数１〜６のアルキレン、フェニレンまたはナフタレンを示す。
式（ＩＶ）において、
Ｒａ３は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは
2004085396.tif 000119
（式中、Ｒａ１１は水素、アルキル、アリールアルキルまたはアルキルチオアルキルを示し、
Ｙａは−ＣＯ２Ｒａ１２、−ＣＯＮＲａ１２Ｒａ１２’または−ＣＯＲａ１２を示し｛Ｒａ１２およびＲａ１２’は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルまたはアリールを示し、またはＲａ１２およびＲａ１２’は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい｝、
ｍ１は０または１を示し、
ｎ１は０〜４のいずれかの整数を示す）で表される基を示し、
Ｒａ４はアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、−ＳＯ２Ｒａ１２、−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ１−ＮＲａ１２Ｒａ１２’｛ｑ１は１または２を示し、Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義｝、−ＣＯＮＨ−Ｚａ−Ｒａ１３｛Ｚａは炭素数２〜４のアルキレンを示し、Ｒａ１３は水酸基、アミノまたは−ＮＲａ１２Ｒａ１２’（Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義）を示す｝または
2004085396.tif 000120
（式中、Ｒａ１１、Ｙａ、ｍ１およびｎ１は前記と同義）で表される基を示し、
またはＲａ３およびＲａ４は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。
式（Ｖ）において、
Ｒｂ３は水素、アルキルまたは式
2004085396.tif 000121
で表される基を示し
〔式中、Ｑｂ１は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000122
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２およびｑ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示し、
Ｒｂ１７は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕、
Ｙｂは式
2004085396.tif 000123
で表される基を示す
〔式中、Ｑｂ２は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
Ｒｂ１８は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000124
から選ばれる基を示す
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示し、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕。
但し、（ｉ）Ｒｂ３が式（Ａ）
2004085396.tif 000125
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３はグアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたは
2004085396.tif 000126
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示す））で表される基以外の基のとき、Ｙｂは式（Ｂ）
2004085396.tif 000127
（式中、Ｑｂ２はベンゼン環を示し、Ｒｂ１８は
2004085396.tif 000128
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は１または２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示すか、またはＱｂ２はフラン環を示し、
Ｒｂ１８はアリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000129
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示す）で表される基を示す。
前記のアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アリール、ヘテロアリールは置換基を有していてもよい〕］で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩の使用。
【請求項３０】
式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000130
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは請求項２９と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は請求項２９と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
Ｒ１がフタルイミドメチルである、請求項３０に記載の使用。
【請求項３２】
Ｒ２がイソブチルである、請求項３０または３１に記載の使用。
【請求項３３】
Ｒ３が水素である、請求項３０〜３２のいずれかに記載の使用。
【請求項３４】
Ｒ４がＮＨＣＨ３またはＮＨＣ６Ｈ５である、請求項３０〜３３のいずれかに記載の使用。
【請求項３５】
虚血再灌流障害が肺虚血再灌流障害である、請求項２９〜３４のいずれかに記載の使用。
【請求項３６】
臓器保存用の医薬製造における、請求項２９に記載の式（Ｉ）（式中の各記号は請求項２９と同義）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩の使用。
【請求項３７】
式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000131
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは請求項３６と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は請求項３６と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、請求項３６に記載の使用。
【請求項３８】
臓器が心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、小腸または眼球である、請求項３６または３７に記載の使用。
【請求項３９】
臓器が肺である、請求項３８に記載の使用。
【請求項４０】
医薬が保存液の形態である、請求項３６〜３９のいずれかに記載の使用。
【請求項４１】
請求項１に記載の虚血再灌流障害の予防または治療剤と該剤を虚血再灌流障害の予防または治療に使用し得るかまたは使用すべきであることを記載した書類とを含む商業的パッケージ。
【請求項４２】
請求項８に記載の臓器保存剤と該剤を臓器の保存に使用し得るかまたは使用すべきであることを記載した書類とを含む商業的パッケージ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は虚血再灌流障害の予防または治療剤、臓器保存剤および虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニング方法に関する。
【背景技術】  臓器移植手術において、移植臓器の虚血後の再灌流により生じる虚血再灌流障害を克服することが重要な課題となっている。肺移植手術では、一般的に、移植後の肺虚血再灌流障害に影響を与える因子として、虚血時間、肺保存液組成、保存温度、保存肺の換気条件等が重要とされている。
ヒトの肺移植における移植臓器の安全な虚血時間、すなわち移植臓器を保存液へ浸漬して保存可能な時間は、４〜５時間位とされている。現実には、虚血時間を１〜２時間以内に短縮した条件下で肺移植が行われているが、１０〜３０％の患者に生死に瀕する重篤な急性肺傷害が発生する。
移植肺保存液について改良が進められているが、ｍａｒｇｉｎａｌ  ｇｒａｆｔ（ドナーから摘出したｇｒａｆｔ肺のうち、遠隔輸送が必要で、虚血時間が長くなり、移植に耐えうるかどうかぎりぎりの肺）の救済という観点で最適化されたものはない。
移植後の肺虚血再灌流障害は、移植臓器の保存状態（虚血時間）により影響を受ける。移植後の肺虚血再灌流による急性肺傷害が軽減されれば、移植患者が長期生存する確率を高めることが可能となる。
そこで、移植後の虚血再灌流障害を効果的に予防または治療することができる薬剤および方法、ならびに移植後の虚血再灌流障害を予防することができる臓器保存液および方法が求められている。
さらに、虚血再灌流障害の予防または治療剤を探索するためのスクリーニング方法が確立されれば、虚血再灌流障害を予防もしくは治療することができる新規な薬剤または方法の提供に極めて有用である。
これまで肺移植後の虚血再灌流障害の評価方法としては、主に肺の酸素化能（ＰａＯ２）や血行動態（肺動脈圧（ＰＡ圧）の変化）、肺コンプライアンスの変化、肺湿乾重量比、肺病理組織学的検討が行われている。
従来報告されている実験系では、肺移植後、閉胸せず麻酔を続け、３０分あるいは１時間再灌流した後に、移植後の虚血再灌流障害を評価しているが（Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｊｕｒｙ  ｏｆ  ｒａｔ  ｌｕｎｇ，Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｊ．Ｅｐｐｉｎｇｅｒ；Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．，１５０：５，１７７３−１７８４，１９９７参照）、虚血再灌流障害における肺損傷を評価するには、この再灌流時間は不十分である。
従って、臓器移植（特に肺移植）後の虚血再灌流障害を評価することのできる評価系の提供は重要な意義がある。
一方、ある種のヒドロキサム酸誘導体がＴＡＣＥ（腫瘍壊死因子α変換酵素：ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ  α  ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ  ｅｎｚｙｍｅ）／ＭＭＰ（マトリックスメタロプロテイナーゼ：ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ）阻害剤として知られている（ＷＯ９９／４００６３、ＷＯ９９／６１４１２、ＷＯ０２／０６２１４参照）。しかしながら、ＴＡＣＥ／ＭＭＰ阻害剤を虚血再灌流障害の予防もしくは治療、または臓器保存に使用することはこれまで報告されていない。
本発明の目的は、虚血再灌流障害の予防もしくは治療に有用な薬剤または方法を提供することである。また、本発明の目的は、移植後の虚血再灌流障害を効果的に予防することができる臓器保存剤または方法を提供することである。さらに、本発明の目的は、虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニング方法を提供することである。
【発明の開示】
本発明者らは、上記目的を達成するために鋭意研究を重ねた結果、後記式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、虚血再灌流障害の予防または治療、および臓器保存に有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明者らは、動物臓器移植モデルにおいて、血中または移植臓器中のＴＮＦα量は虚血再灌流障害の傷害度を示す指標と相関性があり、ＴＮＦα抑制作用を有する薬剤が虚血再灌流傷害を効果的に予防または治療しうることを見出した。
さらに、動物臓器移植モデルにおいて、ＴＮＦα量を指標とすることにより、虚血再灌流障害の評価が可能であり、この評価系が虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニングに有用であることを見出した。特に、動物肺移植モデルにおいて、血中または肺胞洗浄液（ＢＡＬ）中のＴＮＦα量を指標として肺損傷を評価することにより、肺虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニングが可能である。
本発明は、以下のとおりである。
〔１〕  式（Ｉ）
2004085396.tif 000003
［式中、Ｘは水素または水酸基の保護基を示し、
Ｒは水素、水酸基、アミノ、メルカプト、アルコキシ、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニル、アリールまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ〔ｌは１〜４のいずれかの整数であり、Ａは、（ａ）窒素原子によって結合し、（ｂ）該結合窒素原子に隣接しない位置にさらなるヘテロ原子として、窒素、酸素および硫黄から選ばれる少なくとも１種の原子を含有していてもよく、（ｃ）該結合窒素原子に隣接する一方または両方の炭素原子に関し、オキソによって置換され、および（ｄ）ベンゾ縮合するか、または１以上の他の炭素原子に関し、低級アルキルもしくはオキソによって置換されているか、および／または別の窒素原子に関し、低級アルキルもしくはフェニルによって置換されていてもよい５または６員環含窒素ヘテロ環を表す。〕を示し、
Ｒ２は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキルまたはアリールを示し、
Ｑは次の式（ＩＩ）〜（Ｖ）から選ばれる基を示す。
2004085396.tif 000004
〔式（ＩＩ）において、
ＹはＯ、ＮＲ７（Ｒ７はＲ２と同義）またはＳを示し、
ｎは１〜６のいずれかの整数を示し、
Ｒ３は水素、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキル、アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイル、低級アルキルアミノまたはジ低級アルキルアミノ基を示し、
Ｒ４はＯＲ８（Ｒ８は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを表す。）またはＮＲ１０Ｒ１１（Ｒ１０およびＲ１１は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、低級アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、
またはＲ１０およびＲ１１は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。）で表される基を示す。
式（ＩＩＩ）において、
Ｒ１２は天然または天然以外のα−アミノ酸の特性基であり、ここで存在する官能基は保護されていてもよく、
Ｒ６は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを示し、
Ｚは炭素数１〜６のアルキレン、フェニレンまたはナフタレンを示す。
式（ＩＶ）において、
Ｒａ３は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは
2004085396.tif 000005
（式中、Ｒａ１１は水素、アルキル、アリールアルキルまたはアルキルチオアルキルを示し、
Ｙａは−ＣＯ２Ｒａ１２、−ＣＯＮＲａ１２Ｒａ１２’または−ＣＯＲａ１２を示し
｛Ｒａ１２およびＲａ１２’は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルまたはアリールを示し、またはＲａ１２およびＲａ１２’は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい｝、
ｍ１は０または１を示し、
ｎ１は０〜４のいずれかの整数を示す）で表される基を示し、
Ｒａ４はアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、−ＳＯ２Ｒａ１２、−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ１−ＮＲａ１２Ｒａ１２’｛ｑ１は１または２を示し、Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義｝、−ＣＯＮＨ−Ｚａ−Ｒａ１３｛Ｚａは炭素数２〜４のアルキレンを示し、Ｒａ１３は水酸基、アミノまたは−ＮＲａ１２Ｒａ１２’（Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義）を示す｝または
2004085396.tif 000006
（式中、Ｒａ１１、Ｙａ、ｍ１およびｎ１は前記と同義）で表される基を示し、
またはＲａ３およびＲａ４は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。
式（Ｖ）において、
Ｒｂ３は水素、アルキルまたは式
2004085396.tif 000007
で表される基を示し
〔式中、Ｑｂ１は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000008
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２およびｑ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示し、
Ｒｂ１７は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕、
Ｙｂは式
2004085396.tif 000009
で表される基を示す
〔式中、Ｑｂ２は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
Ｒｂ１８は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000010
から選ばれる基を示す
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示し、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕。
但し、（ｉ）Ｒｂ３が式（Ａ）
2004085396.tif 000011
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３はグアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたは
2004085396.tif 000012
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示す））で表される基以外の基のとき、Ｙｂは式（Ｂ）
2004085396.tif 000013
（式中、Ｑｂ２はベンゼン環を示し、Ｒｂ１８は
2004085396.tif 000014
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は１または２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示すか、またはＱｂ２はフラン環を示し、
Ｒｂ１８はアリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000015
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示す）で表される基を示す。
前記のアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アリール、ヘテロアリールは置換基を有していてもよい］〕で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩を有効成分として含有する虚血再灌流障害の予防または治療剤。
〔２〕  式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000016
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは〔１〕と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は〔１〕と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、〔１〕に記載の予防または治療剤。
〔３〕  Ｒ１がフタルイミドメチルである、〔２〕に記載の予防または治療剤。
〔４〕  Ｒ２がイソブチルである、〔２〕または〔３〕に記載の予防または治療剤。
〔５〕  Ｒ３が水素である、〔２〕〜〔４〕のいずれかに記載の予防または治療剤。
〔６〕  Ｒ４がＮＨＣＨ３またはＮＨＣ６Ｈ５である、〔２〕〜〔５〕のいずれかに記載の予防または治療剤。
〔７〕  肺虚血再灌流障害の予防または治療剤である、〔１〕〜〔６〕のいずれかに記載の予防または治療剤。
〔８〕  〔１〕に記載の式（Ｉ）（式中の各記号は〔１〕と同義）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩を含有する臓器保存剤。
〔９〕  式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000017
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは請求項１と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は〔１〕と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、〔８〕に記載の臓器保存剤。
〔１０〕  臓器が心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、小腸または眼球である、〔８〕または〔９〕に記載の臓器保存剤。
〔１１〕  臓器が肺である〔１０〕に記載の臓器、保存剤。
〔１２〕  保存液の形態である、〔８〕〜〔１１〕のいずれかに記載の臓器保存剤。
〔１３〕  被験物質のＴＮＦα遊離阻害活性を測定することを含む、虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニング方法。
〔１４〕  動物臓器移植モデルにおいて、移植した臓器の再灌流後、
（１）被験物質を投与したレシピエント動物の血中ＴＮＦα量を測定する工程と、
（２）被験物質を投与しないレシピエント動物の血中ＴＮＦα量を測定する工程と、
（３）工程（１）および（２）で得られたＴＮＦα量を比較する工程と
を含む、虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニング方法。
〔１５〕  動物肺移植モデルにおいて、移植した臓器の再灌流後、
（１）被験物質を投与したレシピエント動物の血中または肺胞洗浄液中のＴＮＦα量を測定する工程と、
（２）被験物質を投与しないレシピエント動物の血中または肺胞洗浄液中のＴＮＦα量を測定する工程と、
（３）工程（１）および（２）で得られたＴＮＦα量を比較する工程と
を含む、虚血再灌流障害の予防または治療剤のスクリーニング方法。
〔１６〕  有効量の式（Ｉ）
2004085396.tif 000018
［式中、Ｘは水素または水酸基の保護基を示し、
Ｒは水素、水酸基、アミノ、メルカプト、アルコキシ、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニル、アリールまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ〔ｌは１〜４のいずれかの整数であり、Ａは、（ａ）窒素原子によって結合し、（ｂ）該結合窒素原子に隣接しない位置にさらなるヘテロ原子として、窒素、酸素および硫黄から選ばれる少なくとも１種の原子を含有していてもよく、（ｃ）該結合窒素原子に隣接する一方または両方の炭素原子に関し、オキソによって置換され、および（ｄ）ベンゾ縮合するか、または１以上の他の炭素原子に関し、低級アルキルもしくはオキソによって置換されているか、および／または別の窒素原子に関し、低級アルキルもしくはフェニルによって置換されていてもよい５または６員環含窒素ヘテロ環を表す。〕を示し、
Ｒ２は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキルまたはアリールを示し、
Ｑは次の式（ＩＩ）〜（Ｖ）から選ばれる基を示す。
2004085396.tif 000019
〔式（ＩＩ）において、
ＹはＯ、ＮＲ７（Ｒ７はＲ２と同義）またはＳを示し、
ｎは１〜６のいずれかの整数を示し、
Ｒ３は水素、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキル、アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイル、低級アルキルアミノまたはジ低級アルキルアミノ基を示し、
Ｒ４はＯＲ８（Ｒ８は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを表す。）またはＮＲ１０Ｒ１１（Ｒ１０およびＲ１１は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、低級アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、
またはＲ１０およびＲ１１は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。）で表される基を示す。
式（ＩＩＩ）において、
Ｒ１２は天然または天然以外のα−アミノ酸の特性基であり、ここで存在する官能基は保護されていてもよく、
Ｒ６は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを示し、
Ｚは炭素数１〜６のアルキレン、フェニレンまたはナフタレンを示す。
式（ＩＶ）において、
Ｒａ３は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは
2004085396.tif 000020
（式中、Ｒａ１１は水素、アルキル、アリールアルキルまたはアルキルチオアルキルを示し、
Ｙａは−ＣＯ２Ｒａ１２、−ＣＯＮＲａ１２Ｒａ１２’または−ＣＯＲａ１２を示し
｛Ｒａ１２およびＲａ１２’は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルまたはアリールを示し、またはＲａ１２およびＲａ１２’は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい｝、
ｍ１は０または１を示し、
ｎ１は０〜４のいずれかの整数を示す）で表される基を示し、
Ｒａ４はアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、−ＳＯ２Ｒａ１２、−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ１−ＮＲａ１２Ｒａ１２’｛ｑ１は１または２を示し、Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義｝、−ＣＯＮＨ−Ｚａ−Ｒａ１３｛Ｚａは炭素数２〜４のアルキレンを示し、Ｒａ１３は水酸基、アミノまたは−ＮＲａ１２Ｒａ１２’（Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義）を示す｝または
2004085396.tif 000021
（式中、Ｒａ１１、Ｙａ、ｍ１およびｎ１は前記と同義）で表される基を示し、
またはＲａ３およびＲａ４は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。
式（Ｖ）において、
Ｒｂ３は水素、アルキルまたは式
2004085396.tif 000022
で表される基を示し
〔式中、Ｑｂ１は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000023
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２およびｑ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示し、
Ｒｂ１７は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕、
Ｙｂは式
2004085396.tif 000024
で表される基を示す
〔式中、Ｑｂ２は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
Ｒｂ１８は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000025
から選ばれる基を示す
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示し、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕。
但し、（ｉ）Ｒｂ３が式（Ａ）
2004085396.tif 000026
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３はグアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたは
2004085396.tif 000027
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示す））で表される基以外の基のとき、Ｙｂは式（Ｂ）
2004085396.tif 000028
（式中、Ｑｂ２はベンゼン環を示し、Ｒｂ１８は
2004085396.tif 000029
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は１または２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示すか、またはＱｂ２はフラン環を示し、
Ｒｂ１８はアリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000030
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示す）で表される基を示す。
前記のアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アリール、ヘテロアリールは置換基を有していてもよい〕］で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩をドナーまたはレシピエントに投与することを含む、虚血再灌流障害の予防または治療方法。
〔１７〕  式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000031
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは請求項１と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は請求項１と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、請求項１６に記載の方法。
〔１８〕  Ｒ１がフタルイミドメチルである、請求項１７に記載の方法。
〔１９〕  Ｒ２がイソブチルである、請求項１７または１８に記載の方法。
〔２０〕  Ｒ３が水素である、請求項１７〜１９のいずれかに記載の方法。
〔２１〕  Ｒ４がＮＨＣＨ３またはＮＨＣ６Ｈ５である、請求項１７〜２０のいずれかに記載の方法。
〔２２〕  虚血再灌流障害が肺虚血再灌流障害である、請求項１６〜２１のいずれかに記載の方法。
〔２３〕  〔１６〕に記載の式（Ｉ）（式中の各記号は〔１６〕と同義）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩を、それを必要とする対象に適用することを含む臓器の保存方法。
〔２４〕  式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000032
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは〔２３〕と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は〔２３〕と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、〔２３〕に記載の方法。
〔２５〕  臓器が心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、小腸または眼球である、〔２３〕または〔２４〕に記載の方法。
〔２６〕  臓器が肺である、〔２５〕に記載の方法。
〔２７〕  適用が式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩の投与である、〔２３〕〜〔２６〕のいずれかに記載の方法。
〔２８〕  適用が式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩を含む溶液への臓器の浸漬である、〔２３〕〜〔２６〕のいずれかに記載の方法。
〔２９〕  虚血再灌流障害の予防または治療用の医薬製造における、式（Ｉ）
2004085396.tif 000033
［式中、Ｘは水素または水酸基の保護基を示し、
Ｒは水素、水酸基、アミノ、メルカプト、アルコキシ、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニル、アリールまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ〔ｌは１〜４のいずれかの整数であり、Ａは、（ａ）窒素原子によって結合し、（ｂ）該結合窒素原子に隣接しない位置にさらなるヘテロ原子として、窒素、酸素および硫黄から選ばれる少なくとも１種の原子を含有していてもよく、（ｃ）該結合窒素原子に隣接する一方または両方の炭素原子に関し、オキソによって置換され、および（ｄ）ベンゾ縮合するか、または１以上の他の炭素原子に関し、低級アルキルもしくはオキソによって置換されているか、および／または別の窒素原子に関し、低級アルキルもしくはフェニルによって置換されていてもよい５または６員環含窒素ヘテロ環を表す。〕を示し、
Ｒ２は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキルまたはアリールを示し、
Ｑは次の式（ＩＩ）〜（Ｖ）から選ばれる基を示す。
2004085396.tif 000034
〔式（ＩＩ）において、
ＹはＯ、ＮＲ７（Ｒ７はＲ２と同義）またはＳを示し、
ｎは１〜６のいずれかの整数を示し、
Ｒ３は水素、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキル、アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイル、低級アルキルアミノまたはジ低級アルキルアミノ基を示し、
Ｒ４はＯＲ８（Ｒ８は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを表す。）またはＮＲ１０Ｒ１１（Ｒ１０およびＲ１１は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、低級アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、
またはＲ１０およびＲ１１は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。）で表される基を示す。
式（ＩＩＩ）において、
Ｒ１２は天然または天然以外のα−アミノ酸の特性基であり、ここで存在する官能基は保護されていてもよく、
Ｒ６は水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを示し、
Ｚは炭素数１〜６のアルキレン、フェニレンまたはナフタレンを示す。
式（ＩＶ）において、
Ｒａ３は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは
2004085396.tif 000035
（式中、Ｒａ１１は水素、アルキル、アリールアルキルまたはアルキルチオアルキルを示し、
Ｙａは−ＣＯ２Ｒａ１２、−ＣＯＮＲａ１２Ｒａ１２’または−ＣＯＲａ１２を示し｛Ｒａ１２およびＲａ１２’は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキルまたはアリールを示し、またはＲａ１２およびＲａ１２’は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい｝、
ｍ１は０または１を示し、
ｎ１は０〜４のいずれかの整数を示す）で表される基を示し、
Ｒａ４はアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、−ＳＯ２Ｒａ１２、−ＣＯ−（ＣＨ２）ｑ１−ＮＲａ１２Ｒａ１２’｛ｑ１は１または２を示し、Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義｝、−ＣＯＮＨ−Ｚａ−Ｒａ１３｛Ｚａは炭素数２〜４のアルキレンを示し、Ｒａ１３は水酸基、アミノまたは−ＮＲａ１２Ｒａ１２’（Ｒａ１２およびＲａ１２’は前記と同義）を示す｝または
2004085396.tif 000036
（式中、Ｒａ１１、Ｙａ、ｍ１およびｎ１は前記と同義）で表される基を示し、
またはＲａ３およびＲａ４は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい。
式（Ｖ）において、
Ｒｂ３は水素、アルキルまたは式
2004085396.tif 000037
で表される基を示し
〔式中、Ｑｂ１は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000038
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２およびｑ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示し、
Ｒｂ１７は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕、
Ｙｂは式
2004085396.tif 000039
で表される基を示す
〔式中、Ｑｂ２は芳香族炭化水素環または芳香族ヘテロ環を示し、
Ｒｂ１８は水素、ハロゲン、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシ、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す）、カルバモイル、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホ、アリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000040
から選ばれる基を示す
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示し、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）〕。
但し、（ｉ）Ｒｂ３が式（Ａ）
2004085396.tif 000041
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３はグアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたは
2004085396.tif 000042
から選ばれる基を示す
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示す））で表される基以外の基のとき、Ｙｂは式（Ｂ）
2004085396.tif 000043
（式中、Ｑｂ２はベンゼン環を示し、Ｒｂ１８は
2004085396.tif 000044
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は１または２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示すか、またはＱｂ２はフラン環を示し、
Ｒｂ１８はアリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000045
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示す）で表される基を示す。
前記のアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アリール、ヘテロアリールは置換基を有していてもよい〕］で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩の使用。
〔３０〕  式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000046
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは〔２９〕と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は〔２９〕と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、〔２９〕に記載の使用。
〔３１〕  Ｒ１がフタルイミドメチルである、〔３０〕に記載の使用。
〔３２〕  Ｒ２がイソブチルである、〔３０〕または〔３１〕に記載の使用。
〔３３〕  Ｒ３が水素である、〔３０〕〜〔３２〕のいずれかに記載の使用。
〔３４〕  Ｒ４がＮＨＣＨ３またはＮＨＣ６Ｈ５である、〔３０〕〜〔３３〕のいずれかに記載の使用。
〔３５〕  虚血再灌流障害が肺虚血再灌流障害である、〔２９〕〜〔３４〕のいずれかに記載の使用。
〔３６〕  臓器保存用の医薬製造における、〔２９〕に記載の式（Ｉ）（式中の各記号は〔２９〕と同義）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩の使用。
〔３７〕  式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体が、式（ＶＩ）
2004085396.tif 000047
［式中、Ｒ１は水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アルケニルまたは−（ＣＨ２）ｌ−Ａ（ｌおよびＡは〔３６〕と同義）を示し、
Ｘ、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は〔３６〕と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体である、〔３６〕に記載の使用。
〔３８〕  臓器が心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、小腸または眼球である、〔３６〕または〔３７〕に記載の使用。
〔３９〕  臓器が肺である、〔３８〕に記載の使用。
〔４０〕  医薬が保存液の形態である、〔３６〕〜〔３９〕のいずれかに記載の使用。
〔４１〕  〔１〕に記載の虚血再灌流障害の予防または治療剤と該剤を虚血再灌流障害の予防または治療に使用し得るかまたは使用すべきであることを記載した書類とを含む商業的パッケージ。
〔４２〕  〔８〕に記載の臓器保存剤と該剤を臓器の保存に使用し得るかまたは使用すべきであることを記載した書類とを含む商業的パッケージ。
【図面の簡単な説明】  図１は、実験例１における血中ＴＮＦα量の測定結果を示すグラフである。
図２は、実験例１におけるＢＡＬ液中ＴＮＦα量の測定結果を示すグラフである。
図３は、実験例１における再灌流後の移植肺のＢＡＬ液中白血球分画（細胞数）の測定結果を示すグラフである。
図４は、実験例１における肺内水分量（Ｗ／Ｄ  ｒａｔｉｏ）の結果を示すグラフである。
図５は、実験例１における肺微小血管透過性の指標（Ｄｒｙ  Ｔ／Ｐ  ｒａｔｉｏ）の結果を示すグラフである。
図６は、実験例１における肺胞上皮透過性の指標（Ｂ／Ｐ  ｒａｔｉｏ）の結果を示すグラフである。
図７は、実験例１における移植肺の病理組織学的検討（Ｈ．Ｅ．染色）の結果を示す顕微鏡写真である。
発明の詳細な説明
本発明の虚血再灌流障害の予防または治療剤および臓器保存剤の有効成分として用いられる式（Ｉ）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩〔以下、ヒドロキサム酸誘導体（Ｉ）ともいう〕は、ＷＯ９９／４００６３、ＷＯ９９／６１４１２、ＷＯ０２／０６２１４に記載された化合物であり、これらの刊行物に記載された方法またはそれに類似する方法によって製造することができる。
本発明で用いられるヒドロキサム酸誘導体（Ｉ）の好適な例としては、以下の誘導体が挙げられる。
Ａ．ＷＯ０２／０６２１４に記載の式（ＶＩ）
2004085396.tif 000048
［式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｙ、ｎ、Ｒ３およびＲ４は前記と同義。］で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
Ｂ．ＷＯ０２／０６２１４に記載の式（ＶＩＩ）
2004085396.tif 000049
［式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ１２、Ｒ６およびＺは前記と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩。
Ｃ．ＷＯ９９／４００６３に記載の式（ＶＩＩＩ）
2004085396.tif 000050
［式中、Ｘ、Ｒ、Ｒ２、Ｒａ３、Ｒａ４は前記と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
Ｄ．ＷＯ９９／６１４１２に記載の式（ＩＸ）
2004085396.tif 000051
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒｂ３、Ｙｂは前記と同義］で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学的に許容される塩。
本発明で用いられるヒドロキサム酸誘導体の特に好適な例としては、以下の誘導体が挙げられる：
５−メチル−３（Ｒ）−［１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−（４−スルホメトキシフェニル）エチルカルバモイル］−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−｛１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−［４−（２−スルホエトキシ）フェニル］エチルカルバモイル｝−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−｛１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−［４−（３−スルホプロポキシ）フェニル］エチルカルバモイル｝−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−｛１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−［４−（４−スルホブトキシ）フェニル］エチルカルバモイル｝−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−｛１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−［４−（５−スルホペントキシ）フェニル］エチルカルバモイル｝−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−［１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−（４−スルホメトキシフェニル）エチルカルバモイル］−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−｛１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−［４−（２−スルホエトキシ）フェニル］エチルカルバモイル｝−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−｛１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−［４−（３−スルホプロポキシ）フェニル］エチルカルバモイル｝−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−｛１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−［４−（４−スルホブトキシ）フェニル］エチルカルバモイル｝−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−｛１（Ｓ）−メチルカルバモイル−２−［４−（５−スルホペントキシ）フェニル］エチルカルバモイル｝−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−｛１（Ｓ）−フェニルカルバモイル−２−［４−（３−スルホプロポキシ）フェニル］エチルカルバモイル｝−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（スルホメチルカルバモイル）エチルカルバモイル］−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（２−スルホエチルカルバモイル）エチルカルバモイル］−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（３−スルホプロピルカルバモイル）エチルカルバモイル］−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（４−スルホブチルカルバモイル）エチルカルバモイル］−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（５−スルホペンチルカルバモイル）エチルカルバモイル］−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（スルホメチルカルバモイル）エチルカルバモイル］ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（２−スルホエチルカルバモイル）エチルカルバモイル］ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（３−スルホプロピルカルバモイル）エチルカルバモイル］ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（４−スルホブチルカルバモイル）エチルカルバモイル］ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−２（ＲまたはＳ）−（２−ナフチルメチル）−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（５−スルホペンチルカルバモイル）エチルカルバモイル］ヘキサノヒドロキサム酸、
５−メチル−３（Ｒ）−［２−フェニル−１（Ｓ）−（４−スルホフェニルカルバモイル）エチルカルバモイル］−２（ＲまたはＳ）−フタルイミドメチルヘキサノヒドロキサム酸、またはそれらの薬理学的に許容される塩。
本明細書中で使用されている記号について以下に説明する。
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒａ３、Ｒａ４、Ｒａ１１、Ｒａ１２、Ｒａ１２’、Ｒｂ３、Ｒｂ１４、Ｒｂ１５、Ｒｂ１９およびＲｂ２０における「アルキル」とは、炭素数１〜１０の直鎖状または分岐状のアルキルであり、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−オクチル、ｎ−デシル等が挙げられる。
Ｒ３、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ１０およびＲ１１における「低級アルキル」とは、炭素数１〜６の直鎖状または分岐状のアルキルであり、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシル等が挙げられる。
Ｒ、Ｒ２、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒａ３、Ｒａ４、Ｒａ１２、Ｒａ１２’、Ｒｂ１４、Ｒｂ１５、Ｒｂ１６、Ｒｂ１９、Ｒｂ２０およびＲｂ２１における「アリール」とは、炭素数６〜１０個のアリールであり、例えばフェニル、ナフチル、またはオルト融合した二環式の基で８〜１０個の環原子を有し少なくとも一つの環が芳香環であるアリール（例えばインデニル等）等が挙げられ、好ましくはフェニルである。
Ｒ６、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒａ３、Ｒａ４、Ｒｂ１６およびＲｂ２１における「ヘテロアリール」とは、炭素原子および１〜４個のヘテロ原子（酸素、硫黄または窒素）を有する５〜６員環基、またはそれから誘導される８〜１０個の環原子を有するオルト融合した二環式ヘテロアリール、特にベンゼン環と縮合したベンゾ誘導体、もしくはプロペニレン、トリメチレンもしくはテトラメチレン基をそれに融合して導かれるもの、ならびにその安定なＮ−オキシド等であり、例えば、ピロリル、ピロリニル、フリル、チエニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、テトラゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、ピリジル、ピラニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、１，２，４−トリアジニル、１，２，３−トリアジニル、１，３，５−トリアジニル、１，２，５−オキサチアジニル、１，２，６−オキサチアジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、チアナフテニル、イソチアナフテニル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、イソインドリル、インドリル、インダゾリル、イソキノリル、キノリル、フタラジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、ベンゾオキサジニル等が挙げられ、好ましくはピリジルである。
Ｒ２、Ｒ７、Ｒａ３、Ｒａ４、Ｒａ１２およびＲａ１２’における「シクロアルキル」は、炭素数３〜７のシクロアルキルであり、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル等が挙げられる。
Ｒ２、Ｒ７、Ｒａ３およびＲａ４における「シクロアルキルアルキル」のシクロアルキル部は上記「シクロアルキル」と同様であり、アルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなシクロアルキルアルキルとしては、例えば、シクロプロピルメチル、２−シクロブチルエチル、シクロペンチルメチル、３−シクロペンチルプロピル、シクロヘキシルメチル、２−シクロヘキシルエチル、シクロヘプチルメチル等が挙げられる。
ＲおよびＲ１における「アルケニル」は、炭素数２〜６のアルケニルであり、例えば、ビニル、アリル、３−ブテニル、５−ヘキセニル等が挙げられる。
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒａ３、Ｒａ４、Ｒａ１１、Ｒａ１２、Ｒａ１２’、Ｒｂ１４、Ｒｂ１５、Ｒｂ１９およびＲｂ２０における「アリールアルキル」のアリール部は上記「アリール」と同様であり、アルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなアリールアルキルとしては、例えば、ベンジル、フェネチル、３−フェニルプロピル、１−ナフチルメチル、２−ナフチルメチル、２−（１−ナフチル）エチル、２−（２−ナフチル）エチル、３−（１−ナフチル）プロピル、３−（２−ナフチル）プロピル等が挙げられる。
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒａ３、Ｒａ４、Ｒａ１２、Ｒａ１２’、Ｒｂ１４、Ｒｂ１５、Ｒｂ１９およびＲｂ２０における「ヘテロアリールアルキル」のヘテロアリール部は上記「ヘテロアリール」と同様であり、アルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなヘテロアリールアルキルとしては、例えば、２−ピロリルメチル、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル、４−ピリジルメチル、２−チエニルメチル、２−（２−ピリジル）エチル、２−（３−ピリジル）エチル、２−（４−ピリジル）エチル、３−（２−ピロリル）プロピル等が挙げられる。
Ｒ、Ｒ１およびＲａ１１における「アルキルチオアルキル」のアルキルチオ部におけるアルキル部は上記「アルキル」と同様であり、残りのアルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなアルキルチオアルキルとしては、例えば、メチルチオメチル、エチルチオメチル、ｎ−プロピルチオメチル、イソプロピルチオメチル、ｎ−ブチルチオメチル、イソブチルチオメチル、ｓｅｃ−ブチルチオメチル、ｔｅｒｔ−ブチルチオメチル等が挙げられる。
ＲおよびＲ１における「アリールチオアルキル」のアリール部は上記「アリール」と同様であり、アルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなアリールチオアルキルとしては、例えば、フェニルチオメチル、１−ナフチルチオメチル、２−ナフチルチオメチル、３−フェニルチオプロピル、２−（１−ナフチル）チオエチル、２−（２−ナフチル）チオエチル、３−（１−ナフチル）チオプロピル、３−（２−ナフチル）チオプロピル等が挙げられる。
ＲおよびＲ１における「ヘテロアリールチオアルキル」のヘテロアリール部は上記「ヘテロアリール」と同様であり、アルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなヘテロアリールチオアルキルとしては、例えば、２−ピロリルチオメチル、２−ピリジルチオメチル、３−ピリジルチオメチル、４−ピリジルチオメチル、２−チエニルチオメチル、２−（２−ピリジル）チオエチル、２−（３−ピリジル）チオエチル、２−（４−ピリジル）チオエチル、３−（２−ピロリル）チオプロピル等が挙げられる。
ＲおよびＲ１における「アリールアルキルチオアルキル」のアリールアルキル部は上記「アリールアルキル」と同様であり、残りのアルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなアリールアルキルチオアルキルとしては、例えば、ベンジルチオメチル、フェネチルチオメチル等が挙げられる。
ＲおよびＲ１における「ヘテロアリールアルキルチオアルキル」のヘテロアリールアルキル部は上記「ヘテロアリールアルキル」と同様であり、残りのアルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなヘテロアリールアルキルチオアルキルとしては、例えば、２−ピロリルメチルチオメチル、２−ピリジルメチルチオメチル、３−ピリジルメチルチオメチル、４−ピリジルメチルチオメチル、２−チエニルメチルチオメチル等が挙げられる。
ＲおよびＲ１における「フタルイミドアルキル」のアルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなフタルイミドアルキルとしては、例えば、フタルイミドメチル、２−フタルイミドエチル等が挙げられる。
ＲおよびＲ１における−（ＣＨ２）ｌ−ＡにおけるＡは、窒素原子で結合している含窒素ヘテロ環であり、例えば、次のような基が挙げられる。
2004085396.tif 000052
［式中、−−−−−−はＲ’およびＲ’’がそれぞれ水素である場合は単結合であり、
Ｒ’およびＲ’’が一緒になって環を形成する場合は二重結合であり、
Ｒ’’’は水素、低級アルキルまたはフェニルを表し、
Ｑ’は−ＣＯ−、−ＣＨ２−、−ＣＨ（低級アルキル）−、−Ｃ（低級アルキル）２−、−ＮＨ−、−Ｎ（低級アルキル）−または−Ｏ−を表し、および
Ｔ’は−Ｏ−、−ＮＨ−または−Ｎ（低級アルキル）−を表す。］
当該含窒素ヘテロ環としては、例えば、２−オキソ−１−ピロリジニル、２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル、１，２−ジメチル−３，５−ジオキソ−１，２，４−トリアゾリジン−４−イル、３−メチル−２，５−ジオキソ−１−イミダゾリジニル、３，４，４−トリメチル−２，５−ジオキソ−１−イミダゾリジニル、２−メチル−３，５−ジオキソ−１，２，４−オキサジアゾリジン−４−イル、３−メチル−２，４，５−トリオキソ−１−イミダゾリジニル、２，５−ジオキソ−３−フェニル−１−イミダゾリジニルおよび２，６−ジオキソピペリジノ等が好ましく、式（ｉｉ）および（ｉｉｉ）の環、特に１，２−ジメチル−３，５−ジオキソ−１，２，４−トリアゾリジン−４−イル、３−メチル−２，５−ジオキソ−１−イミダゾリジニルまたは３，４，４−トリメチル−２，５−ジオキソ−１−イミダゾリジニルが特に好ましい。
前記のアリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、ヘテロアリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、例えば、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル（但し、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールチオアルキル、アリールチオアルキル、アリールアルキルチオアルキル、フタルイミドアルキルのアルキル部に置換することはない）、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、オキソ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシル、−ＣＯＯＲａ〔Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す。〕で表される基、カルバモイル、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、アリールアルキルオキシアルキル等から選ばれる１個以上の置換基により置換されていてもよい。ここで、「低級アルキル」、「アリールアルキル」および「アリール」は前記と同様である。
「ハロゲン」としては、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素が挙げられる。
「アルコキシ」とは、炭素数１〜６の直鎖状または分岐状のアルコキシであり、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ等が挙げられる。
「アルキルチオ」におけるアルキル部は上記「低級アルキル」と同様であり、このようなアルキルチオとしては、例えば、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、イソプロピルチオ等が挙げられる。
「アシルオキシ」とは、炭素数２〜６の直鎖状または分岐状のアルカノイルオキシであり、例えば、アセチルオキシ、プロピオニルオキシ、ブチリルオキシ、バレリルオキシ、ピバロイルオキシ、ヘキサノイルオキシ等が挙げられる。
「アリールアルキルオキシアルキル」のアリールアルキル部は上記「アリールアルキル」と同様であり、残りのアルキル部は上記「低級アルキル」と同様である。このようなアリールアルキルオキシアルキルとしては、例えば、ベンジルオキシメチル、フェネチルオキシメチル等が挙げられる。
Ｒ１０およびＲ１１が隣接する窒素原子と一緒になって形成する「置換されていてもよいヘテロ環」は、炭素原子および少なくとも１個の窒素原子を有し、環内にさらなるヘテロ原子として、窒素、酸素および硫黄から選ばれる少なくとも１種の原子を含有していてもよく、環を構成する炭素原子に関し、オキソによって置換されていてもよい４〜７員環基であり、さらにはこれらヘテロ環を構成する隣接する２つの炭素原子を利用してベンゼン環等の芳香環が縮環してもよい。このようなヘテロ環には、例えばアゼチジノ、１−ピロリジニル、ピペリジノ、１−ピペラジニル、モルホリノ、チオモルホリノ、オキソチオモルホリノ、ジオキソチオモルホリノ、２−オキソ−１−キナゾリニル等が挙げられる。
なお、当該ヘテロ環が１−ピペラジニルの如く、環内にさらなるヘテロ原子として窒素原子を含有する場合、当該窒素原子上には低級アルキル（前記と同様）、アリールアルキル（前記と同様）、ヘテロアリールアルキル（前記と同様）、アリール（前記と同様）、ヘテロアリール（前記と同様）、−ＣＯＯＲａ（Ｒａは前記と同様）で表される基またはアシルが置換していてもよい。ここで、アシルとは−ＣＯＲａで表される基であり、Ｒａは前記と同様である。
Ｒ１２における天然または天然以外のα−アミノ酸の特性基とは、Ｈ２Ｎ−ＣＨ（Ｒ３０）−ＣＯＯＨで示される天然または天然以外のα−アミノ酸中の基Ｒ３０である。天然のα−アミノ酸から誘導される特性基の例は以下の通りであり、括弧内に対応するアミノ酸を示す：水素（グリシン）、メチル（アラニン）、イソプロピル（バリン）、イソブチル（ロイシン）、ベンジル（フェニルアラニン）、ｐ−ヒドロキシベンジル（チロシン）、ヒドロキシメチル（セリン）、メルカプトメチル（システイン）、１−ヒドロキシエチル（スレオニン）、２−メチルチオエチル（メチオニン）、カルボキシメチル（アスパラギン酸）、２−カルボキシエチル（グルタミン酸）、２−インドリルメチル（トリプトファン）、４−イミダゾリルメチル（ヒスチジン）、４−アミノブチル（リジン）、３−グアニジノプロピル（アルギニン）。天然以外のα−アミノ酸から誘導される特性基の例は以下の通りであり、括弧内に対応する天然以外のアミノ酸を示す：エチル（α−アミノ−ｎ−酪酸）、ｎ−プロピル（α−アミノ−ｎ−ペンタン酸）、ｎ−ブチル（α−アミノ−ｎ−ヘプタン酸）、ｎ−ヘプチル（α−アミノ−ｎ−ノナン酸）、シクロヘキシルメチル（シクロヘキシルアラニン）、フェニル（α−アミノ−フェニル酢酸）、２−フェニルエチル（ホモフェニルアラニン）、１−ナフチル（α−アミノ−１−ナフチル酢酸）、２−ナフチル（α−アミノ−２−ナフチル酢酸）、フェネチル（α−アミノ−３−フェニルブタン酸）、α−メチルベンジル（β−メチルフェニルアラニン）、α，α−ジメチルベンジル（β，β−ジメチルフェニルアラニン）等が挙げられる。
Ｒ１２に存在する任意の（反応性）官能基は、ペプチド化学において知られている方法で保護することができる。例えば、アミノ基はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルまたはイソボルニルオキシカルボニル基、あるいはフタルイミド基の形態で保護することができる。カルボキシル基はメチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル等の形態で保護することができる。ヒドロキシ基はｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル、またはテトラヒドロピラニルエーテルの形態で、またはアセテートの形態で保護することができる。メルカプト基は、ｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル、または同様な基により保護することができる。
Ｘにおける「水酸基の保護基」としては、例えば、アリールアルキル、アリール、ヘテロアリール、シリル（例えば、トリメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル等）、２−テトラヒドロピラニル等が挙げられる。当該アリールアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、例えば、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル（但し、アリールアルキルのアルキル部に置換することはない）、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、オキソ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシル、−ＣＯＯＲａ〔Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す。〕で表される基、カルバモイル、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、アリールアルキルオキシアルキル等から選ばれる１個以上の置換基を有していてもよい。本発明の化合物における水酸基の保護基としては、シリル、２−テトラヒドロピラニル、ベンジル等が好ましい。
Ｚにおける「アルキレン」とは、炭素数１〜６のメチレン鎖を示し、例えばメチレン、エチレン、プロピレン、ブチレンあるいはペンチレン等が挙げられる。
Ｚにおける「フェニレン」とは、−Ｃ６Ｈ４−で表される２価の芳香族炭化水素基を表し、例えば１，２−、１，３−あるいは１，４−フェニレンが挙げられる。
Ｚにおける「ナフタレン」とは、−Ｃ１０Ｈ６−で表される２価の芳香族炭化水素基を表し、例えば１，２−、１，４−、１，５−、２，５−、あるいは２，８−ナフタレン等が挙げられる。
前記Ｚにおけるフェニレンおよびナフタレンは、例えば、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル、アルコキシ、アシルオキシ、ヒドロキシスルホニル、ヒドロキシスルホニルオキシ等から選ばれる１個以上の置換基により置換されていてもよい。ここで「低級アルキル」、「アルコキシ」および「アシルオキシ」は前記と同様である。
Ｒａ３、Ｒａ４、Ｒａ１１、Ｒａ１２およびＲａ１２’における「アルキル」、「シクロアルキル」、「シクロアルキルアルキル」は、例えば、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、水酸基、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、低級アルキル（但し、アルキル、およびシクロアルキルアルキルのアルキル部に置換することはない）、アルコキシ、アルキルチオ、ホルミル、アシルオキシ、オキソ、フェニル、アリールアルキル、カルボキシル、−ＣＯＯＲａ〔Ｒａは低級アルキル、アリールアルキルまたはアリールを示す。〕で表される基、カルバモイル、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、アリールアルキルオキシアルキル等から選ばれる１個以上の置換基により置換されていてもよい。ことで、「低級アルキル」、「アルコキシ」、「アルキルチオ」、「アシルオキシ」、「アリールアルキル」、「アリール」および「アリールアルキルオキシアルキル」は前記と同様である。
またＲａ１２およびＲａ１２’における「アリール」は、
2004085396.tif 000053
［式中、Ｒａ１７は水素、低級アルキル（上記と同様）またはアリールアルキル（上記と同様）を示し、
Ｒａ１８およびＲａ１８’は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素または低級アルキル（上記と同様）を示し、または
Ｒａ１８およびＲａ１８は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
ｒ１は１〜６の整数を示し、
ｓ１は０〜６の整数を示し、
ｔ１は１〜６の整数を示す］からなる群より選ばれる置換基により置換されていてもよい。
Ｒａ３およびＲａ４、Ｒａ１２およびＲａ１２’、またはＲ１８およびＲ１８’が隣接する窒素原子と一緒になって形成する「置換されていてもよいヘテロ環」とは、前記Ｒ１０およびＲ１１における「置換されていてもよいヘテロ環」と同様である。
Ｒａ３およびＲａ４が
2004085396.tif 000054
で表される基である場合、それらは同一の基であっても異なる基であってもよい。またＲａ３におけるＲａ１２とＲａ４におけるＲａ１２は、同一であっても異なっていてもよく、Ｒａ３におけるＲａ１２’とＲａ４におけるＲ１２’は同一であっても異なっていてもよい。
Ｚａにおける「炭素数２〜４のアルキレン」は、炭素数２〜４の直鎖状または分岐状のアルキレンであり、例えば、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン、プロピレン、１，１−ジメチルエチレン等が挙げられる。
Ｑｂ１およびＱｂ２における「芳香族炭化水素環」としては、ベンゼン環、ナフタレン環、またはオルト融合した二環式の炭化水素環で８〜１０個の環原子を有し少なくとも一つの環が芳香環であるもの（例えばインデン等）等が挙げられる。好ましくはベンゼン環である。
Ｑｂ１およびＱｂ２における「芳香族ヘテロ環」としては、炭素原子および１〜４個のヘテロ原子（酸素、硫黄または窒素）を有する５〜６員環、またはそれから誘導される８〜１０個の環原子を有するオルト融合した二環式芳香族ヘテロ環、特にベンゼン環と縮合したベンゾ誘導体が挙げられる。芳香族ヘテロ環としては、例えば、ピロール、フラン、チオフェン、オキサゾール、イソオキサゾール、イミダゾール、チアゾール、イソチアゾール、ピラゾール、１，２，３−トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、テトラゾール、１，３，４−オキサジアゾール、１，２，４−オキサジアゾール、１，３，４−チアジアゾール、１，２，４−チアジアゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、１，２，４−トリアジン、１，２，３−トリアジン、１，３，５−トリアジン、１，２，５−オキサチアジン、１，２，６−オキサチアジン、ベンズオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンズイミダゾール、チアナフテン、イソチアナフテン、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、クロメン、イソインドール、インドール、インダゾール、イソキノリン、キノリン、フタラジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、ベンゾオキサジン等が挙げられる。好ましくは、ピロール、フラン、チオフェン、チアゾール、ピリジンである。
Ｒｂ１３およびＲｂ１８における「ハロゲン」、「低級アルキル」、「アルコキシ」、「アルキルチオ」、「アシルオキシ」、「アリールアルキル」および「アリールアルキルオキシアルキル」は前記と同様である。
Ｒｂ１４およびＲｂ１５、またはＲｂ１９およびＲｂ２０が隣接する窒素原子と一緒になって形成する「置換されていてもよいヘテロ環」とは、前記Ｒ１０およびＲ１１における「置換されていてもよいヘテロ環」と同様である。
Ｒｂ１４およびＲｂ１５、またはＲｂ１９およびＲｂ２０が隣接する窒素原子と一緒になって形成する「置換されていてもよいヘテロ環」の好適な例としては、１−ピロリジニル、ピペリジノ、モルホリノおよび４位の窒素原子が低級アルキルで置換されていてもよい１−ピペラジニルが挙げられる。
本発明の式（ＩＸ）において、より好ましい態様は次の通りである。
（ｉ）Ｒｂ３が式（Ａ）
2004085396.tif 000055
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３はグアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたは式
2004085396.tif 000056
で表される基を示す
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ１６はヒドロキシスルホニルオキシまたはスルホを示す））で表される基であり、かつＹｂがフリル、チエニル、ピロリル、ピリジル、チアゾリル、フェニル、アルコキシフェニル、または−ＮＲｂ１９Ｒｂ２０（式中、Ｒｂ１９およびｂＲ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれアルキルを示す）で置換されたフェニルであるか、または
（ｉｉ）Ｒｂ３がアルキルまたは
2004085396.tif 000057
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は０〜３のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１３は水素を示す）で表される基であり、かつＹｂが式（Ｂ）
2004085396.tif 000058
（式中、Ｑｂ２はベンゼン環を示し、
Ｒｂ１８は
2004085396.tif 000059
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は１または２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリール、ヘテロアリール、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示すか、またはＱｂ２はフラン環を示し、Ｒｂ１８はアリールアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000060
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素、アルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはアリールを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２２は水酸基、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたはカルボキシを示す）から選ばれる基を示す）で表される基である。
本発明の式（ＩＸ）において、特に好ましい態様は次の通りである。
（ａ）Ｒｂ３が
2004085396.tif 000061
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は１を示し、
Ｒｂ１３はグアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたは式
2004085396.tif 000062
で表される基を示す
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は１または２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素またはアルキルを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよい））で表される基であり、かつＹｂがフリル、チエニル、ピロリル、ピリジル、チアゾリル、フェニル、アルコキシフェニル、または−ＮＲｂ１９Ｒｂ２０（式中、Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれアルキルを示す）で置換されたフェニルである。
（ｂ）Ｒｂ３が
2004085396.tif 000063
（式中、Ｑｂ１はベンゼン環を示し、
ｍ２は１を示し、
Ｒｂ１３はグアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシ、スルホまたは式
2004085396.tif 000064
で表される基を示す
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は１を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素またはアルキルを示す））で表される基であり、かつＹがフリル、チエニル、ピロリル、ピリジル、チアゾリル、フェニル、アルコキシフェニル、または−ＮＲｂ１９Ｒｂ２０（式中、Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれアルキルを示す）で置換されたフェニルである。
（ｃ）Ｒｂ３がアルキルまたはベンジルであり、かつＹｂが式
2004085396.tif 000065
（式中、Ｑｂ２はベンゼン環を示し、
Ｒｂ１８は
2004085396.tif 000066
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は１または２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素またはアルキルを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はフェニルまたはピリジルを示す）から選ばれる基を示す）で表される基である。
（ｄ）Ｒｂ３がアルキルまたはベンジルであり、かつＹｂが式
2004085396.tif 000067
（式中、Ｑｂ２はベンゼン環を示し、Ｒｂ１８は
2004085396.tif 000068
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は１を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素またはアルキルを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって、１−ピロリジニル、ピペリジノ、モルホリノおよび４位の窒素原子が低級アルキルで置換されていてもよい１−ピペラジニルから選ばれるヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はフェニルまたはピリジルを示す）から選ばれる基を示す）で表される基である。
（ｅ）Ｒｂ３がアルキルまたはベンジルであり、かつＹｂが式
2004085396.tif 000069
（式中、Ｑｂ２はフラン環を示し、
Ｒｂ１８はフェニルアルキルオキシアルキルまたは
2004085396.tif 000070
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素またはアルキルを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２２は水酸基を示す）から選ばれる基を示す）で表される基である。
（ｆ）Ｒｂ３がアルキルまたはベンジルであり、かつＹｂが式
2004085396.tif 000071
（式中、Ｑｂ２はフラン環を示し、Ｒｂ１８はベンジルオキシメチルまたは
2004085396.tif 000072
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０または１のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれ水素またはアルキルを示し、
Ｒｂ２２は水酸基を示す）から選ばれる基を示す）で表される基である。
本発明における、別の好ましい態様としては、次のものが挙げられる。
Ｒｂ３における式
2004085396.tif 000073
で表される基の好ましい例としては、Ｑｂ１がベンゼン環であり、Ｒｂ１３が水素、グアニジノ、ヒドロキシスルホニルオキシまたは式
2004085396.tif 000074
で表される基
（式中、ｎ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｒ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は同一または異なっていてもよく、それぞれアルキルを示し、または
Ｒｂ１４およびＲｂ１５は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい）である基が挙げられる。
より好ましい例としては、Ｑｂ１がベンゼン環であり、Ｒｂ１３が水素である基が挙げられる。
Ｙｂにおける式
2004085396.tif 000075
で表される基の好ましい例としては、Ｑｂ２がベンゼン環、またはピロール、フラン、チオフェン、チアゾールおよびピリジンから選ばれる芳香族ヘテロ環であり、Ｒｂ１８が水素または式
2004085396.tif 000076
から選ばれる基
（式中、ｓ２およびｔ２は同一または異なっていてもよく、それぞれ１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれアルキルを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよく、
Ｒｂ２１はアリールまたはヘテロアリールを示し、
Ｒｂ２２は水酸基を示す）である基が挙げられる。
より好ましい例としては、Ｑｂ２がベンゼン環、またはピロール、フラン、チオフェン、チアゾールおよびピリジンから選ばれる芳香族ヘテロ環であり、Ｒｂ１８が水素または式
2004085396.tif 000077
で表される基
（式中、ｓ２は１〜５のいずれかの整数を示し、
ｕ２は０〜２のいずれかの整数を示し、
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は同一または異なっていてもよく、それぞれアルキルを示し、または
Ｒｂ１９およびＲｂ２０は隣接する窒素原子と一緒になって置換されていてもよいヘテロ環を形成してもよい）である基が挙げられる。
式（Ｉ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはそれらの薬理学上許容される塩は、不斉炭素を有する場合があるので、光学活性体もしくはラセミ体として存在することができ、当該ラセミ体は自体公知の手法により各光学活性体に分離することができる。また、ヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩がさらに付加的な不斉炭素を有している場合には、その化合物はジアステレオマー混合物として、もしくは単一のジアステレオマーとして存在することができ、これらもまた自体公知の手法により各々分離することができる。
また、ヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩は、多形（ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）を示すことができ、また、一より多くの互変異性体として存在することができ、さらに、溶媒和物として存在することができる。
従って、本発明は、前記のようないかなる立体異性体、光学異性体、多形体、互変異性体、溶媒和物（水和物を含む）、およびそれらの任意の混合物等を包含するものである。光学活性体、ラセミ体およびジアステレオマーも本発明の範囲に包含される。
式（Ｉ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）で表されるヒドロキサム酸誘導体の薬理学上許容される塩としては、例えば、アルカリ金属塩（リチウム、ナトリウム、カリウム等との塩）、アルカリ土類金属塩（カルシウム、マグネシウム等との塩）、アルミニウム塩、アンモニウム塩、有機塩基（トリエチルアミン、モルホリン、ピペリジン、トリエタノールアミン、トリスヒドロキシメチルアミノメタン、メグルミン等）との塩、天然α−アミノ酸（アラニン、フェニルアラニン、ヒスチジン、リジン、アルギニン等）との塩等が挙げられる。
また、その他の薬理学上許容される塩としては、例えば、無機酸付加塩（塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸等との塩）、有機酸付加塩（メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、シュウ酸、クエン酸、マロン酸、フマル酸、グルタル酸、アジピン酸、マレイン酸、酒石酸、コハク酸、マンデル酸、リンゴ酸等との塩）、アミノ酸（グルタミン酸、アスパラギン酸等）との塩等が挙げられる。さらに、結晶化のためにシュウ酸を用いて塩とすることもできる。
式（Ｉ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）で表されるヒドロキサム酸誘導体の好ましい態様としては、遊離酸あるいは薬理学上許容される塩が挙げられ、両形態において結晶化が可能であり、任意の誘導体およびその異性体を高純度かつ大量に製造することができる。
式（Ｉ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）で表されるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩の好ましい態様としては、式（Ｉ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）において、ＲまたはＲ１がフタルイミドメチルであるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩、式（Ｉ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）において、Ｒ２がイソブチルであるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩、式（ＶＩ）において、Ｒ３が水素であるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩、式（ＶＩ）において、Ｒ４がＮＨＣＨ３またはＮＨＣ６Ｈ５であるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩、式（ＶＩＩ）において、Ｒ１２がベンジルであるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩、式（ＶＩＩ）において、Ｒ６が水素であるヒドロキサム酸誘導体またはその薬理学上許容される塩等が挙げられる。
本発明のヒドロキサム酸誘導体は、公知の分離精製手段、例えば、濃縮、抽出、クロマトグラフィー、再沈殿、再結晶等の手段を適宜施すことによって、任意の純度のものとして採取できる。
また、当該ヒドロキサム酸誘導体の薬理学上許容される塩、溶媒和物（水和物を含む）も、公知の方法により製造できる。さらに、当該ヒドロキサム酸誘導体の各種異性体等も、公知の方法により製造できる。
本発明のヒドロキサム酸誘導体およびその薬理学上許容される塩は、哺乳動物（例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、ブタ、サル等）に対して、優れた虚血再灌流障害の予防または治療作用を有し、かつ低毒性である。
したがって、本発明のヒドロキサム酸誘導体およびその薬理学上許容される塩は、虚血再灌流障害の予防または治療剤および臓器保存剤として有用である。
本発明のヒドロキサム酸誘導体およびその薬理学上許容される塩を医薬品として用いる場合、薬理学上許容される担体等を用いて、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、注射剤、軟膏剤、点眼剤、点鼻剤、クリーム剤、エアロゾル剤等の形態で医薬組成物とし、経口的または非経口的に投与することができる。とりわけ、当該ヒドロキサム酸誘導体およびその薬理学上許容される塩は水溶性に優れているので、注射剤、点眼剤、点鼻剤、点滴用剤等の水溶性医薬組成物を調製するのに好適である。
本明細書において、非経口とは、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射あるいは点滴などを含むものである。注射用製剤、例えば無菌注射用水性懸濁物あるいは油性懸濁物は、適当な分散化剤または湿化剤及び懸濁化剤を用いて当該分野で公知の方法で調製されうる。その無菌注射用製剤は、また、例えば水溶液などの製剤上許容される非経口投与可能な希釈剤あるいは溶剤中の無菌の注射可能な溶液または懸濁液であってもよい。使用可能な希釈剤あるいは溶剤として許容されるものとしては、水、リンゲル液、等張食塩液などが挙げられる。さらに、通常、溶剤または懸濁化溶媒として、無菌の不揮発性油も用いられうる。このためには、本発明の趣旨に反しない限り、いかなる不揮発性油も脂肪酸も使用でき、例えば、天然あるいは合成あるいは半合成の脂肪油または脂肪酸、そして天然あるいは合成あるいは半合成のモノあるいはジあるいはトリグリセリド類が挙げられる。
直腸投与用の座剤は、その薬物と適当な低刺激性の補形剤、例えばココアバターやポリエチレングリコール類といった常温では固体であるが腸管の温度では液体で、直腸内で融解し、薬物を放出するものなどと混合して製造できる。
経口投与用の固形投与剤形としては、上記した粉剤、顆粒剤、錠剤、ピル剤、カプセル剤などが挙げられる。そのような剤形において、活性成分化合物は、少なくとも一つの添加物、例えばショ糖、乳糖、セルロース糖、マンニトール、マルチトール、デキストラン、デンプン類、寒天、アルギネート類、キチン類、キトサン類、ペクチン類、トラガントガム類、アラビアゴム類、ゼラチン類、コラーゲン類、カゼイン、アルブミン、合成または半合成のポリマー類またはグリセリド類と混合することができる。そのような剤形は、また慣用のさらに別の添加物を含んでもよい。別の添加物としては、例えば不活性希釈剤、マグネシウムステアレートなどの滑沢剤、パラベン類、ソルビン酸などの保存剤、アスコルビン酸、α−トコフェロール、システインなどの抗酸化剤、崩壊剤、結合化剤、増粘剤、緩衝化剤、甘味付与剤、フレーバー付与剤、パフューム剤などが挙げられる。錠剤およびピル剤は、さらに腸溶性コーティングすることもできる。
経口投与用の液剤としては、医薬として許容されるシロップ剤、エマルジョン剤、エリキシル剤、懸濁剤、溶液剤などが挙げられる。これらは、当該分野で通常用いられる不活性希釈剤、例えば水を含んでいてもよい。
上記製剤中には当該ヒドロキサム酸誘導体およびその薬理学上許容される塩を有効量配合する。
当該ヒドロキサム酸誘導体およびその薬理学上許容される塩の投与量は、投与ルート、患者の症状、体重あるいは年齢等によっても異なり、投与目的に応じて適宜設定することができる。通常、成人に静脈内投与する場合、０．００１〜１，０００ｍｇ／ｋｇ体重／日、好ましくは０．００５〜２５０ｍｇ／ｋｇ体重／日を、一日１〜数回に分けて投与する。
本発明の虚血再灌流障害の予防または治療剤は、移植手術において、ドナー、レシピエント、またはドナーとレシピエントの両方に投与することができる。例えば、臓器摘出手術前または手術中にドナーに投与することができる。投与方法としては、静脈内または動脈内に注射または持続投与する方法、摘出する臓器に注入する方法などが挙げられる。本発明の虚血再灌流障害の予防または治療剤は、臓器移植手術前、手術中または手術後にレシピエントに投与することができる。移植手術後にレシピエントに投与する場合、移植臓器の再灌流前、再灌流と同時に、または再灌流後に投与することができる。投与方法としては、静脈内または動脈内に注射または持続投与する方法、移植した臓器に注入する方法などが挙げられる。例えば、肺移植手術後のレシピエントに投与する場合、０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／時の速度で、再灌流の開始から０．５〜１５０時間にわたって静脈内に持続投与する方法が挙げられる。
本発明において、虚血再灌流障害には、臓器移植手術において移植臓器の虚血後の再灌流により生じる臓器の障害が含まれる。さらに臓器移植手術以外の虚血後の再灌流により生じる臓器の障害も含まれる。本発明において、移植臓器は、特に限定されないが、例えば、心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、小腸、眼球などが挙げられる。本発明は、好ましくは、肺移植後の肺虚血再灌流障害の予防または治療に適用することができる。
本発明の臓器保存剤は、保存液の形態であっても、あるいは粉末、錠剤または顆粒などの固体製剤の形態であって適当な溶液に溶解して使用する態様であってもよいが、好ましくは保存液の形態である。保存液の形態の臓器保存剤は、ヒドロキサム酸誘導体（Ｉ）を生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、クエン酸緩衝液などの生理的に許容される緩衝液や等張化液に溶解して調製することができる。
好ましくは、本発明の臓器保存剤は、臓器保存液として臨床的に使用されている保存液にヒドロキサム酸誘導体（Ｉ）を溶解することにより調製することができる。臨床的に使用されている臓器保存液としては、Ｅｕｒｏ−Ｃｏｌｌｉｎｓ液、ＵＷ液（商品名ＶｉａＳｐａｎ）、Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ−Ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎｅ−Ｋｅｔｏｇｌｕｔａｒａｔｅ（ＨＴＫ）液、Ｌｏｗ  ｐｏｔａｓｓｓｉｕｍ  ｄｅｘｔｒａｎ（ＬＰＤ）液、ＥＰ−４液、Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ液、Ｃｏｌｌｉｎｓ液、Ｓａｃｈｓ液、Ｃｅｌｓｉｏｒ液、Ｂｅｌｚｅｒ液などを使用することができる。
本発明の臓器保存剤中のヒドロキサム酸誘導体（Ｉ）の濃度は、保存液の形態の場合、通常、０．００１〜１００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．０２〜２０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｍｌである。
本発明の臓器保存剤のｐＨは生理的に許容される範囲に調整すればよく、通常、ｐＨ２〜８、好ましくはｐＨ３〜７である。
本発明の臓器保存剤は、さらに、製薬上許容される添加剤、希釈剤、賦形剤、安定化剤、等張化剤、緩衝剤などを含有してもよい。
本発明の臓器保存剤は、他の薬効成分を含有してもよい。他の薬効成分としては、ヘパリン、抗凝固剤、プロテアーゼ阻害剤、免疫抑制剤、抗酸化剤、抗炎症剤、抗生物質などが挙げられる。
本発明の臓器保存剤は、ドナーから摘出した臓器の保存液として使用することができる。保存液として使用する方法としては、摘出した臓器を保存液に浸漬する方法、摘出した臓器に保存液を灌流させる方法が挙げられる。本発明の臓器保存剤は、移植手術時の移植臓器の洗浄液としても使用することができる。移植手術には、ドナーからの臓器の摘出手術、レシピエントへの臓器の移植手術が含まれる。臓器保存剤を保存液または洗浄液として使用する場合、好ましくは０℃〜２５℃、より好ましくは０℃〜１０℃に冷却した状態で使用する。
本発明の臓器保存剤が使用される臓器は、特に限定されず、例えば、心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、小腸、血管、皮膚、角膜、眼球などが挙げられる。好ましくは移植肺の保存液または洗浄液として使用される。
本発明のスクリーニング方法によれば、被験物質のＴＮＦα遊離阻害活性（ＴＡＣＥ阻害活性）を指標とすることにより、虚血再灌流障害の予防または治療剤をスクリーニングすることができる。
詳細には、ＴＮＦα遊離阻害活性の測定系で、被験物質の存在下および非存在下での遊離ＴＮＦα量を測定する。被験物質非存在下での遊離ＴＮＦα量と被験物質の存在下での遊離ＴＮＦα量を比較する。ＴＮＦα遊離阻害活性を有する被験物質を選択することにより、虚血再灌流障害の予防または治療剤をスクリーニングすることができる。
ＴＮＦα遊離阻害活性の測定方法は、特に限定されず、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏの測定方法を用いることができる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏの測定方法としては、例えば、ＷＯ９９／４００６３またはＷＯ９９／６１４１２に記載のｍｏｎｏｃｙｔｅ系培養細胞であるＴＨＰ−１細胞からのＴＮＦα遊離に対する阻害活性を測定する方法［参考：Ｎａｔｕｒｅ  ３７０，２１８−２２０（１９９４）］、ＬＰＳ処理したヒト全血のＴＮＦα遊離に対する阻害活性を測定する方法［参考：Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ  ８，１４１−１４６（１９８９）］などが挙げられる。
本発明のスクリーニング方法では、動物臓器移植モデルにおいて、血中ＴＮＦα量を指標とすることにより、虚血再灌流障害の予防または治療剤をスクリーニングすることができる。
詳細には、動物臓器移植モデルにおいて、移植した臓器の再灌流後のレシピエント動物の血中ＴＮＦα量を、被験物質を投与したレシピエント動物および被験物質を投与しないレシピエント動物について測定する。被験物質を投与したレシピエント動物におけるＴＮＦα量が、被験物質を投与しないレシピエント動物におけるＴＮＦα量と比較して抑制されている被験物質を選択することにより、虚血再灌流障害の予防または治療剤をスクリーニングすることができる。
肺虚血再灌流障害の予防または治療剤をスクリーニングする場合は、動物肺移植モデルにおいて、レシピエント動物の血中または肺胞洗浄液（ＢＡＬ）中のＴＮＦα量を、被験物質を投与したレシピエント動物および被験物質を投与しないレシピエント動物について測定する。被験物質を投与したレシピエント動物におけるＴＮＦα量が、被験物質を投与しないレシピエント動物におけるＴＮＦα量と比較して抑制されている被験物質を選択することにより、肺虚血再灌流障害の予防または治療剤をスクリーニングすることができる。
本発明のスクリーニング方法において使用される動物臓器移植モデルは、臓器移植の分野で使用されている動物モデルであれば、特に限定されない。例えば、心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、小腸、眼球などの各種臓器の移植動物モデルを使用することができる。好ましくは動物肺移植モデルを使用することができる。
動物臓器移植モデルに使用される動物は、特に限定されず、イヌ、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、ブタ、サル、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ウマ、ハムスター、スナネズミ、フェレット、ネコなどを使用することができる。
レシピエント動物に被験物質を投与する時期は、特に限定されず、移植臓器の再灌流前、再灌流と同時に、または再灌流後等任意の時期に被験物質を投与することができる。好ましくは、再灌流と同時に、または再灌流直後に被験物質をレシピエント動物に投与する。被験物質の投与時間は、特に限定されないが、再灌流の開始から０．５〜２４時間にわたる持続投与が好ましい。被験物質の投与方法としては、静脈内または動脈内に注射または持続投与する方法が挙げられる。
血中またはＢＡＬ中のＴＮＦα量の測定方法は、特に限定されず、公知の方法を用いることができる。例えば、後記実験例に記載するような抗ＴＮＦα抗体を用いるイムノアッセイ法などが挙げられる。
再灌流後０．５〜２４時間の時点で、レシピエント動物から血漿、移植臓器などのＴＮＦα測定用サンプルを採取することが、虚血再灌流障害の程度を評価する上で好ましい。
移植肺の肺胞洗浄液（ＢＡＬ）は常法に従って採取することができる。例えば、後記実験例に記載するような、カニューレを気管に挿入し、生理食塩水で気管、肺胞を洗浄する方法などが挙げられる。
本発明のスクリーニング方法では、ＴＮＦα量の他にも、ＢＡＬ中の白血球数、肺微小血管透過性の指標、肺胞上皮透過性の指標を用いることにより、肺移植後の肺虚血再灌流障害を評価することができる。肺微小血管透過性の指標および肺胞上皮透過性の指標は、レシピエント動物に標識物質で標識したトレーサーを投与し、血漿、肺組織またはＢＡＬ中のトレーサー量を測定することによって算出することができる。標識トレーサーとしては、例えば、１２５Ｉ標識ヒト血清アルブミン、５１Ｃｒ標識自家赤血球などを使用することができる。
【実施例】  以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
以下の実験例および製剤例で使用した化合物Ａは次の化合物である。
化合物Ａ：３−［４−（（２Ｓ）−２−［（２Ｒ）−２−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシカルバモイル−２−フタルイミドエチル］−４−メチルペンタノイル］アミノ−２−メチルカルバモイルエチル）フェノキシ］プロパンスルホネート  ナトリウム塩  １水和物
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実験例１
実験方法
近交系Ｌｅｗｉｓラット（１０週齢．体重３００〜３５０ｇ）をドナー、レシピエント双方に使用し、同所性左肺移植を行った。
ドナー肺の摘出のため、ドナー動物は、ネンブタール（４０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与により麻酔した。その後、人工換気（ｏｒａｌ  ｉｎｔｕｂａｔｉｏｎ．ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｒａｔｅ  ６０／ｍｉｎｕｔｅ．  ｔｉｄａｌ  ｖｏｌｕｍｅ  １０ｍｌ／ｋｇ．  ＰＥＥＰ  ２ｃｍ  Ｈ２Ｏ．  ＦｉＯ２  ０．４）下において、以下のような術式で移植肺を摘出した。すなわち、胸骨正中切開し、ヘパリン（１０００Ｕ／ｋｇ）を心注した。１４Ｇカテーテルを右心室から主肺動脈に挿入し、左房脱血のため、左心耳切開し、０℃の臓器保存液（１００ｍｌ／ｋｇ）を１８ｃｍ  Ｈ２Ｏの圧格差で主肺動脈から注入した。ｉｎｆｌａｔｅの状態で気管を結紮切離し、心肺をｅｎ−ｂｌｏｃに摘出した。摘出肺５葉のうち、肺右下葉及び後尾葉は、保存前肺とした。肺右上葉、中葉及び左葉は、ｔｒｉｍｉｎｇ後、冷却した臓器保存液（５０ｍｌ）に、吻合までの６時間、４℃で単純浸漬保存した。肺右上葉及び中葉は、保存後肺とし、左葉を移植肺として用いた。尚、臓器保存液（ドナーに注入する臓器保存液を含む）として、肺移植対照群ではＥｕｒｏ−Ｃｏｌｌｉｎｓ液を用い、化合物Ａ群では、化合物Ａ（１ｍｇ／ｍｌ）を含有するＥｕｒｏ−Ｃｏｌｌｉｎｓ液を用いた。
レシピエント側も同様に、ネンブタール（４０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与により麻酔した。人工換気下において、以下のような術式で肺移植を実施した。すなわち、左側方切開により、肺左葉を摘出した（レシピエント摘出肺）。ｃｕｆｆｉｎｇ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅを用いて、上記の移植肺と肺動脈・肺静脈・左主気管支を吻合した後、血流を再開し閉胸した。麻酔より覚醒した動物は、室内気で解剖時まで飼育した。再灌流後３時間目に透過性トレーサーとして１２５Ｉ標識ヒト血清アルブミン３７ｋＢｑを、再灌流３時間５０分後に肺血液トレーサーとして５１Ｃｒ標識自家赤血球１０ｋＢｑを尾静脈より静注した。再灌流４時間後にラットを犠牲死させ、血漿及び肺胞洗浄液（ＢＡＬ）の回収、肺損傷の評価を行った。化合物Ａ群には、生理食塩水に溶解した化合物Ａの溶液を３ｍｇ／ｋｇ／ｈｒの速度で尾静脈より持続投与した。肺移植対照群および偽手術群には、同容量の生理食塩水を投与した。化合物Ａの溶液または生理食塩水の投与は、再灌流の開始直後から４時間にわたって、ＳＹＲＩＮＧＥ  ＩＮＦＵＳＩＯＮ  ＰＵＭＰを用い、尾静脈より０．７５ｍｌ／ｈｒの速度で持続投与した。
評価項目は、以下のとおりである。
Ｉ．血中及びＢＡＬ中のＴＮＦα量
ＩＩ．ＢＡＬ中の細胞数および白血球像（好中球、単球、リンパ球）
ＩＩＩ．肺内水分量の指標：
Ｗｅｔ  ｔｏ  Ｄｒｙ  ｒａｔｉｏ（Ｗ／Ｄ  ｒａｔｉｏ）＝肺湿重量／肺乾燥重量
ＩＶ．肺微小血管透過性の指標：
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Ｖ．肺胞上皮透過性の指標：
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ＶＩ．肺病理組織像
血中およびＢＡＬ中のＴＮＦα量の測定
９６穴マイクロプレートに、０．０２％  ＮａＮ３（リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中）で１００倍希釈した抗ＴＮＦαモノクローナル抗体を１００μｌ／ｗｅｌｌ加え、４℃で一晩以上インキュベートを行う。ブロッキング緩衝液（ＰＢＳ中の５％スキムミルク）４００μｌで一回洗浄後、ブロッキング緩衝液４００μｌ／ｗｅｌｌを加えて４℃で一晩インキュベートを行う。反応液を除き、ＰＢＳ中の１％スキムミルクで５倍希釈したサンプルもしくは標品（ｓｔａｎｄａｒｄｒＴＮＦα）を１００μｌ／ｗｅｌｌ加え、３７℃で２時間インキュベートを行う。次に洗浄緩衝液（０．０１％  Ｔｗｅｅｎ２０  ／  ０．９％  ＮａＣｌ）で４回洗浄後、ＰＢＳ中の１％スキムミルクで１００００倍希釈した抗ＴＮＦαポリクローナル抗体を１００μｌ／ｗｅｌｌ加えて３７℃で１時間インキュベートを行う。次に洗浄緩衝液で４回洗浄後、ＰＢＳ中の１％スキムミルクで１００００倍希釈した抗ＩｇＧ−ＨＲＰ（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ  ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）  ｃｏｎｊｕｇａｔｅを１００μｌ／ｗｅｌｌ加え、３７℃で１時間インキュベートを行う。次に洗浄緩衝液で４回洗浄後、基質（ＯＰＤ）溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌ加えて遮光下室温にて３０分間放置する。最後に反応停止液を１００μｌ／ｗｅｌｌ加え、４９０ｎｍでの吸光度を、プレートリーダーを用いて測定する。各サンプル中のＴＮＦα濃度は、ｓｔａｎｄａｒｄ  ｒＴＮＦαを用いて作成した検量線より算定する。
ＢＡＬの採取および白血球数の測定
動物を放血致死させ、気管にカニューレを挿入する。次に、装着した気管カニューレを介して３７℃に加温した０．１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）含有生理食塩液５ｍＬを気道内に注入し、その後吸引する操作を４回繰り返して洗浄する。この洗浄を２回行い、全量を１０ｍＬにする。１０ｍＬに満たなかったサンプルは、さらに不足分を気道内に注入し、吸引操作を１回行ったものを加えて、全量を１０ｍＬにし、これをＢＡＬとする。
採取したＢＡＬは直ちに４℃で１５０×ｇ、１０分間遠心し、沈殿した細胞を１ｍＬの生理食塩液に浮遊させる。この細胞浮遊液１０μＬに１４０μＬのチュルク液を加えて染色し、血球計算盤を用いて、ＢＡＬ中の全白血球数を顕微鏡下で測定する。次に、サイトスピン  ３ＴＭを用いて室温にて４分間遠心し、塗抹標本を作製する。この標本をＤｉｆｆ−Ｑｕｉｃｋ染色し、好中球数およびその他の細胞を顕微鏡下に１００〜３００個カウントする。得られた成績は、ＢＡＬ中に存在する総細胞数として表す。
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統計学的処理
肺移植対照群と偽手術群との比較および肺移植対照群と化合物群との比較には、Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ  ｔ−ｔｅｓｔを行い、危険率５％以下のものを有意と判断した。
実験結果
肺移植対照群において、血中および移植肺ＢＡＬ中のＴＮＦα量は増加した。化合物Ａ群では、ＴＮＦα量が偽手術群レベルまで低下した（図１および２）。また、移植肺におけるＢＡＬ中の白血球浸潤も化合物Ａ群では著明に抑制された（図３）。
肺移植対照群において、肺内水分量の指標（Ｗ／Ｄ  ｒａｔｉｏ）は著明に増加した。化合物Ａ群では、Ｗ／Ｄ  ｒａｔｉｏの増加は有意に抑制された（図４）。
肺移植対照群において、肺損傷重傷度を最も忠実に反映する肺微小血管透過性の指標（Ｄｒｙ  Ｔ／Ｐ  ｒａｔｉｏ）は著明に増加した。化合物Ａ群では、Ｄｒｙ  Ｔ／Ｐ  ｒａｔｉｏの増加は有意に抑制された（図５）。
肺移植対照群において、肺損傷重傷度を最も忠実に反映する肺胞上皮透過性の指標（Ｂ／Ｐ  ｒａｔｉｏ）は著明に増加した。化合物Ａ群では、Ｂ／Ｐ  ｒａｔｉｏの増加は有意に抑制された（図６）。
また、病理組織学的にも、化合物Ａ群では、肺胞内への赤血球の流入が抑制されており、肺損傷が軽減されていることが示された（図７）。
以上の結果より、化合物Ａは、移植肺の保存液への添加または再灌流後のレシピエントへの投与により、肺移植後の虚血再灌流による急性肺障害を著明に軽減することが示された。
肺移植後の虚血再灌流障害における肺損傷は二相性であり、再灌流３０分後に好中球非依存的な小さな肺損傷が起こり、再灌流４時間後に好中球依存性の大きな肺損傷が起こる。
本発明における肺移植後虚血再灌流の急性肺障害の評価方法は、再灌流後４時間における好中球依存的な肺障害ピーク時における評価が可能である。また、アイソトープで標識されたトレーサーを用いることで、肺損傷重症度を最も忠実に反映する指標である肺微小血管透過性および肺胞上皮透過性の鋭敏な評価が可能である。
肺移植後虚血再灌流の急性肺障害におけるＴＮＦαの関与は、これまで一定の見解が得られていなかったが、肺損傷重症度を最も忠実に反映する上記評価方法を用いた結果、ＴＮＦα抑制作用を有する薬剤は、急性肺障害の軽減に繋がることが示唆された。すなわち、ＴＮＦα抑制作用を有する薬剤は、急性期の再灌流障害を軽減することにより、移植後患者の救命が期待できる。
また、移植保存液に関しては、化合物Ａの添加により、６時間の保存下でも急性肺障害が著明に軽減された。すなわち、化合物Ａを含有する臓器保存液は、長時間の虚血状態でも再灌流後の障害を軽減できる可能性があり、臨床上、ｍａｒｇｉｎａｌ  ｇｒａｆｔの救済という観点において大きな意義がある。
製剤例１
以下の成分を含有する錠剤を常法により製造した。
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製剤例２
以下の成分を含有するカプセルを常法により製造した。
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製剤例３
以下の成分を含有する軟膏剤を常法により製造した。
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製剤例４
以下の成分を含有する注射剤を常法により製造した。
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製剤例５
以下の成分を含有する点眼剤を常法により製造した。
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製剤例６
Ｅｕｒｏ−Ｃｏｌｌｉｎｓ液に化合物Ａを１ｍｇ／ｍｌの濃度となるように添加して、臓器保存液を調製する。
【産業上の利用可能性】  本発明の虚血再灌流障害の予防または治療剤および予防または治療方法は、ドナー、レシピエント、またはドナーとレシピエントの両方に適用することにより、虚血後の再灌流により生じる臓器障害を効果的に予防または軽減することが可能である。本発明を実施することにより、急性期の虚血再灌流障害が軽減され、移植後患者の救命が期待できる。
また、本発明の臓器保存剤および臓器保存方法は、移植臓器の保存に適用することにより、移植後の虚血再灌流障害を効果的に予防または軽減することが可能である。本発明を実施することにより、ｍａｒｇｉｎａｌ  ｇｒａｆｔ（ドナーから摘出したｇｒａｆｔ肺のうち、遠隔輸送が必要で、虚血時間が延長し、移植に耐えうるかどうかぎりぎりの肺）の救済が可能となる。
さらに、本発明の虚血再灌流障害の予防または治療剤および予防または治療方法と臓器保存剤および臓器保存方法とを併用することにより、それぞれを単独で適用するよりもより向上した効果が得られる。
本発明のスクリーニング方法は、新規な虚血再灌流障害の予防または治療剤の提供に有用である。
本出願は、日本で出願された特願２００３−８６４８２を基礎としておりその内容は本明細書にすべて包含される。
刊行物、特許文献等を含む、本明細書に引用されたすべての参考文献は、引用により、それらが個々に具体的に参考として援用されかつその内容全体が具体的に記載されているのと同程度まで、本明細書に援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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