(57)【要約】目、鼻、喉、耳、肛門、陰部等の粘膜や、創傷部位及び皮膚からの、緑膿菌、枯草菌、炭疽菌、大腸菌、黄色ぶどう球菌、ＭＲＳＡ等の感染性細菌やインフルエンザウイルス等のウイルスの体内への侵入を効果的に抑制するとともにその増殖を抑制することができる皮膚保護組成物；耐性菌による院内感染等を効果的に予防できる皮膚保護組成物；院内感染を含む細菌感染やウイルス感染の予防及び／又は治療用組成物；防腐剤；感染性細菌やウイルスの侵入を効果的に抑制するとともにその増殖を抑制することができる濾過装置を提供する。  ササエキス、又はササエキスと有機酸を有効成分として含有することを特徴とする、皮膚保護組成物、耐性菌による院内感染等を効果的に予防できる皮膚保護組成物；院内感染を含む細菌感染やウイルス感染の予防及び／又は治療用組成物；防腐剤；又は感染性細菌やウイルスの侵入を効果的に抑制することができる濾過装置。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ササエキスを有効成分として含有する皮膚保護組成物。
【請求項２】
ササエキスを有効成分として含有する細菌感染予防及び／又は治療用組成物。
【請求項３】
ササエキスを有効成分として含有するウイルス感染予防及び／又は治療用組成物。
【請求項４】
ササエキスを有効成分として含有する院内感染の予防及び／又は治療用組成物。
【請求項５】
さらに有機酸を含有する請求項１〜４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項６】
口腔組成物の形態にある請求項１〜５のいずれか１項記載の組成物。
【請求項７】
グミ、ゼリー、トローチ、キャンディー、チューインガム、ジャム、シャーベット、クリーム、あめ、カステラ、クッキー、チョコレート、せんべい等の菓子類、パン類、麺類、飲料水、錠剤、丸剤、洗口剤、嗽剤、歯磨き、皮膚貼付フイルム、咽頭部炎症治療用噴霧剤の形態にある請求項６記載の組成物。
【請求項８】
保護布の形態にある請求項１〜５のいずれか１項記載の組成物。
【請求項９】
ガーゼ、マスク、眼帯、生理帯、生理用ナプキン、包帯、トイレットペーパー、痔疾処置用ガーゼ、便座シート、靴の下敷き、耳栓、手袋、帽子、白衣、シーツ、布団カバー、枕カバー、カーテン、壁紙、カーペット、手術用縫合糸の形態にある請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
ガーゼの形態にある請求項８記載の組成物。
【請求項１１】
請求項１０記載のガーゼを含むマスク。
【請求項１２】
ササエキスを有効成分として含有する防腐剤。
【請求項１３】
有効成分がさらに有機酸を含有する請求項１２記載の防腐剤。
【請求項１４】
ササエキスを有効成分として含有する濾過装置。
【請求項１５】
有効成分がさらに有機酸を含有する請求項１４記載の濾過装置。
【請求項１６】
換気扇、エアコン、空気吸入口、空気排出口、網戸、空気清浄機、電気掃除機等の空気が通過する部位に使用されるフィルターの形態にある請求項１４又は１５記載の濾過装置。
【請求項１７】
請求項１４〜１６のいずれか１項記載の濾過装置を含む空気清浄機。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、皮膚保護組成物に関し、特に、目、鼻、喉、耳、肛門、陰部等の粘膜や、創傷部位からの感染性細菌やウイルスの体内への侵入を効果的に抑制するとともに、その増殖を抑制することができる皮膚保護組成物に関する。本発明はまた、防腐剤に関する。本発明はさらに、感染性細菌やウイルスの侵入を効果的に防止するとともに、その増殖を抑制することができる濾過装置に関する。
【背景技術】  緑膿菌、枯草菌、炭疽菌、大腸菌、黄色ぶどう球菌等の感染性細菌やインフルエンザウイルス等のウイルスは、空気中に浮遊し、ヒトや動物の粘膜や創傷部位から体内に侵入し、ヒトや動物に重篤な感染症を引き起こす。このような細菌感染症に対しては種々の抗生物質が使用されてきている。しかし、抗生物質が多用された結果、従来の抗生物質が全く効かないメシチリン耐性黄色ぶどう球菌（ＭＲＳＡ）等の種々の抗生物質耐性菌が出現している。その結果、病院内で患者や医者、看護士等が耐性菌に感染し、場合によっては死亡に至る例も少なくない。
一方、最近米国において、炭疽菌を含む郵便物が政治家やマスコミ関係者等に送りつけられ、これを無防備で開封した複数の当事者が炭疽菌に感染し、死亡者も出るに至り、社会的な恐怖を引き起こしている。そして公共業務に携わる者のみならず一般市民の間でもこのような生物兵器に対する適切な防御手段が緊急に望まれる事態に立ち至っている。
【発明の開示】
従って、本発明の目的は、目、鼻、喉、耳、肛門、陰部等の粘膜や、創傷部位及び皮膚から緑膿菌、枯草菌、炭疽菌、大腸菌、黄色ぶどう球菌、ＭＲＳＡ、ガス壊疽菌、破傷風菌、ボツリヌス菌等の感染性細菌やヘルペスウイルス、インフルエンザウイルス、コロナウイルス等のウイルスの体内への侵入を効果的に抑制するとともに、その増殖を抑制することができる皮膚保護組成物を提供することである。
本発明の他の目的は、いわゆる耐性菌による院内感染等を効果的に予防できる皮膚保護組成物を提供することである。
本発明の他の目的は、院内感染を含む細菌感染やウイルス感染の予防及び／又は治療用組成物を提供するものである。
本発明のさらに他の目的は、防腐剤を提供することである。
本発明のさらに他の目的は、感染性細菌やウイルスの侵入を効果的に抑制するとともに、その増殖を抑制することができる濾過装置を提供することである。
本発明は、以下の皮膚保護組成物、細菌感染やウイルス感染の予防及び／又は治療用組成物、防腐剤及び濾過装置を提供するものである。
１．ササエキスを有効成分として含有する皮膚保護組成物。
２．ササエキスを有効成分として含有する細菌感染予防及び／又は治療用組成物。
３．ササエキスを有効成分として含有するウイルス感染予防及び／又は治療用組成物。
４．ササエキスを有効成分として含有する院内感染の予防及び／又は治療用組成物。
５．さらに有機酸を含有する上記１〜４のいずれか１項記載の組成物。
６．口腔組成物の形態にある上記１〜５のいずれか１項記載の組成物。
７．グミ、ゼリー、トローチ、キャンディー、チューインガム、ジャム、シャーベット、クリーム、あめ、カステラ、クッキー、チョコレート、せんべい等の菓子類、パン類、麺類、飲料水、錠剤、丸剤、洗口剤、嗽剤、歯磨き、皮膚貼付フイルム、咽頭部炎症治療用噴霧剤の形態にある上記６記載の組成物。
８．保護布の形態にある上記１〜５のいずれか１項記載の組成物。
９．ガーゼ、マスク、眼帯、生理帯、生理用ナプキン、包帯、トイレットペーパー、痔疾処置用ガーゼ、便座シート、靴の下敷き、耳栓、手袋、帽子、白衣、シーツ、布団カバー、枕カバー、カーテン、壁紙、カーペット、手術用縫合糸の形態にある上記８記載の組成物。
１０．ガーゼの形態にある上記８記載の組成物。
１１．上記１０記載のガーゼを含むマスク。
１２．ササエキスを有効成分として含有する防腐剤。
１３．有効成分がさらに有機酸を含有する上記１２記載の防腐剤。
１４．ササエキスを有効成分として含有する濾過装置。
１５．有効成分がさらに有機酸を含有する上記１４記載の濾過装置。
１６．換気扇、エアコン、空気吸入口、空気排出口、網戸、空気清浄機、電気掃除機等の空気が通過する部位に使用されるフィルターの形態にある上記１４又は１５記載の濾過装置。
１７．上記１４〜１６のいずれか１項記載の濾過装置を含む空気清浄機。
【発明を実施するための最良の形態】  以下本発明を詳細に説明する。
ササエキス
本発明の有効成分であるササエキスの原料として使用するササは、特に限定されず、ササ属（Ｓａｓａ）に属するすべてのササが例示される。例えば、クマイザサ、クマザサ、チシマザサ、オクヤマザサ、エゾミヤマザサ、チマキザサ、ヤヒコザサ、オオバザサ、ミヤマザサ、センダイザサ、ユカワザサ、アボイザサ、オヌカザサ等が挙げられる。これらのうち、市販品の具体例としてはクマイザサ、クマザサ（チュウゴクザサ、ヒダザサ）等のエキスが挙げられる。例えば、北海道天塩山系で７〜１０月に採取されたクマイザサ、クマザサの水抽出物等が好ましい。
本発明に使用するササエキスは、ササの生葉又は乾燥葉、好ましくは乾燥葉を、１００〜１８０℃の水で、常圧又は加圧抽出して得られるものが好ましい。
抽出方法は特に限定されないが、例えば、特許第３２１２２７８号（特開平１１−１９６８１８号公報）に記載された方法を使用することができる。さらに具体的には、加圧熱水抽出機により１００〜１８０℃、５〜３０分処理してエキスを抽出し、該エキスを水分分離器により含水固形分（含水率４０〜７０％）と分離し、次に飽和水蒸気加熱処理機により該含水固形分を１００℃〜２００℃で５分〜６０分処理した後、再度加圧熱水抽出機により１００℃〜１８０℃で５〜３０分処理してエキスを抽出させ、第１回目と第２回目のエキスを合わせて使用する。また、ササ乾燥葉を例えば、６０〜１００℃の水で３０分〜１２時間程度抽出して得られるエキスも使用できる。
ササエキスを固形分で５０質量％含有する市販品としては、株式会社クロロランド・モシリ製「ＡＨＳＳ」等がある。
こうして得られるササエキスは硫黄成分を含有しており、その含有量は硫黄に換算して、ササエキスの固形分１ｇあたり約４〜１０ｍｇ、通常は約６〜９ｍｇである。硫黄成分のうち主たる成分は含硫アミノ酸と考えられる。
本発明の組成物は、ササエキス由来の硫黄成分を、硫黄に換算して１００ｇ当り、好ましくは４〜５００ｍｇ、さらに好ましくは８〜２５０ｍｇ、最も好ましくは１６〜１５０ｍｇ含有する。
また、ササエキスはタンニンを含んでおりその含有量はササエキスの固形分に対して５〜１５質量％程度である。
本発明の組成物は、ササタンニンを固形分濃度で好ましくは０．０５〜７．５質量％、さらに好ましくは０．１〜６質量％含有することが望ましい。
本発明の組成物は、ササエキスのみを有効成分とするものであっても良いし、これに適量の有機酸を併用することにより、その治療及び／又は予防効果をさらに向上させることができる。このような有機酸としては、リンゴ酸、クエン酸、乳酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酢酸、安息香酸、フェニル酢酸、サリチル酸、フェノール類等が挙げられる。
有機酸の使用量は、本発明の組成物中、好ましくは０．０１〜５質量％、さらに好ましくは０．０２〜３質量％、最も好ましくは０．０５〜１．５質量％である。
皮膚保護組成物、細菌感染及びウイルス感染予防及び／又は治療用組成物
本発明の皮膚保護組成物、細菌感染及びウイルス感染予防及び／又は治療用組成物は、目、鼻、喉、耳、肛門、陰部等の粘膜や、創傷部位及び皮膚からの感染性細菌やウイルスの体内への侵入を効果的に抑制し、院内感染を含む細菌感染やインフルエンザウイルス、ヘルペスウイルス、コロナウイルス等のウイルス感染を効果的に予防し、及び／又は治療するものである。
本発明は、ササエキスを有効成分として含有する皮膚保護組成物、細菌感染やウイルス感染の予防及び／又は治療用組成物の形態としては、皮膚保護布や口腔組成物が挙げられる。
皮膚保護布は、通気性を有する担体、例えば、シルク、綿、麻、羊毛等の天然繊維、ポリウレタン、ビニロン、ポリプロピレン、ナイロン、ポリエステル、アクリル等の合成繊維、半合成繊維あるいはこれらの２種以上の混合物の繊維自体又は糸、又はその織布、編布、不織布、紙等にササエキスを含浸、噴霧等の方法により含有させたものである。この明細書中「保護布」には、便宜上、布の他、繊維自体、糸、紙等も含むものとする。
具体的な形態としては、ガーゼ、マスク、眼帯、生理帯、生理用ナプキン、包帯、トイレットペーパー、痔疾処置用ガーゼ、便座シート、靴の下敷き、耳栓、水絆創膏等の衛生用品に分類される粘膜や皮膚に直接接触する保護布の他、白衣等の衣類、手袋、帽子、靴下、足袋等の衣料品小物、シーツ、布団カバー、枕カバー、ベッド用品等の寝具類、カーテン、壁紙、カーペット等の室内装飾品及び内装材料、手術用縫合糸等の医療材料等、皮膚に直接又は間接に接触する物品、まな板等の調理用具も挙げられる。
本発明のササエキスを含有する口腔組成物としては、例えば、グミ、ゼリー、トローチ、キャンディー、チューインガム、ジャム、シャーベット、クリーム、あめ、カステラ、クッキー、チョコレート、せんべい等の菓子類、パン類、麺類、飲料水、、錠剤、丸剤、洗口剤、嗽剤、歯磨き、皮膚貼付フイルム、咽頭部炎症治療用噴霧剤、等が挙げられる。
ササエキスを、皮膚保護布に含有させるには、例えば、保護布をササエキスの２〜２０質量％水溶液に含浸し、あるいは、保護布にササエキスの２〜２０質量％水溶液を噴霧し、乾燥すればよい。この際、ササエキスの含浸量又は噴霧量は、ササエキスの固形分で好ましくは２〜２０質量％、さらに好ましくは６〜１５質量％、最も好ましくは８〜１２質量％程度とするのが適当である。２質量％未満では、目的とする効果の発現が不十分であることがあり、また、２０質量％を超えると、皮膚や粘膜がひりひりすることがあり、また、効果のさらなる向上は少ないので不経済である。
本発明の皮膚保護組成物は、ササエキス由来の硫黄成分を、硫黄に換算して保護組成物１００ｇ当り、好ましくは８〜２００ｍｇ、さらに好ましくは２４〜１５０ｍｇ、最も好ましくは３２〜１２０ｍｇ含有する。
ササエキスを、例えば、グミ、ゼリー、トローチ、キャンディー、チューインガム、ジャム、シャーベット、クリーム、あめ、カステラ、クッキー、チョコレート、せんべい等の菓子類、パン類、麺類、飲料水、、錠剤、丸剤（例えば、笹丹）、洗口剤、嗽剤、歯磨き、皮膚貼付フイルム、等の口腔組成物に含有させるには、口腔組成物製造のいずれかの段階で、口腔組成物原料に対して、ササエキスの固形分で好ましくは２〜２０質量％、さらに好ましくは６〜１５質量％、最も好ましくは８〜１２質量％程度添加するのが適当である。２質量％未満では、目的とする効果の発現が不十分であることがあり、また、２０質量％を超えると、皮膚や粘膜がひりひりすることがあり、また、効果のさらなる向上は少ないので不経済である。
保護布又は口腔組成物にササエキスを含有させる際、又は含有させた後、７０〜９０℃、好ましくは７５〜８５℃の温度で３０分〜３時間、好ましくは１〜２時間加熱処理することが望ましい。加熱処理することにより、皮膚保護効果が格段に向上する。
本発明の口腔組成物には、剤型により適宜適切な慣用の成分を配合することができる。例えば、ぶどう糖、乳糖、蔗糖、水あめ、デキストリン、シクロデキストリン等の賦形剤、アラビアガム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、結晶セルロース、ガムベース等の結合剤、澱粉等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、蔗糖脂肪酸エステル等の滑沢剤、香料、クロロフィル、ハッカ、メントール等の清涼化剤等が挙げられる。
本発明の皮膚保護組成物を保護布の形態で使用する場合、粘膜や創傷部位に接触する部位の保護布（ガーゼ等）にササエキスを含有させておき、これを１日１〜３回程度交換すればよい。手術用縫合糸の形態で使用した場合、縫合患部からの細菌の侵入を効果的に抑制し、患部の炎症を抑制し、手術部位の回復を促進する。
病院等における院内感染防止のために本発明の皮膚保護組成物を保護布の形態で使用する場合、本発明の皮膚保護組成物の感染防止効果は長期間にわたり存続する。洗濯によりその効果が低減した場合には、適宜交換するか、ササエキスを再度含有させるための処理を行えば良い。
本発明の皮膚保護組成物を口腔組成物の形態で使用する場合、その摂取量は特に限定されないが、ササエキスの固形分として、２〜１５ｍｇ程度を、例えば、１日１〜５回、通常は１〜３回程度摂取すればよい。摂取量、摂取回数は目的に合わせて適宜増減すればよい。
本発明の皮膚保護組成物は、ササエキスを固形分で２〜２０質量％含有しており、従来、抗生物質が効かない耐性菌に対しても顕著な殺菌効果を示す。
また、本発明の皮膚保護組成物を口腔組成物として使用する場合、適宜、必要な際に、口に含んでおくことにより、極めて簡便に感染性細菌やウイルスの感染を予防し、またその増殖を抑制することができる。また、チューインガム、キャンディー等の徐放性形態の組成物はその効果を長時間にわたって発揮することができ有利である。
本発明の皮膚保護組成物は、軟膏、クリーム、ジェル、ゲル、ローション、オイル、石けん、シャンプー等の形態で使用することもできる。ササエキスを固形分で２〜２０質量％含有する軟膏、クリーム、ジェル、ゲル、ローションやオイル（例えば、ホホバオイル、グレープミードオイル、オリザオイル）を、皮膚等に塗布しておくことにより、極めて簡便に感染性細菌やウイルスの感染を予防し、またその増殖を抑制することができる。
防腐剤
本発明はまた、ササエキスを有効成分として含有する防腐剤を提供するものである。防腐剤として使用する際の形態は特に限定されない。防腐対象となる組成物としては、例えば、食品、飲料水、調味料、化粧品（ローションやオイルを含む）、創傷部位治療用噴霧剤、咽頭部炎症治療用噴霧剤等が挙げられる。これらの対象物にササエキスを固形分で好ましくは２〜２０質量％、さらに好ましくは６〜１５質量％、最も好ましくは８〜１２質量％程度含有させるのが適当である。２質量％未満では、目的とする防腐効果の発現が不十分であることがあり、また、２０質量％を超えても、効果のさらなる向上は少なく不経済であり、食品に添加した場合には、食品の味が変化してしまうことがあり好ましくない。
濾過装置
本発明はまた、ササエキスを有効成分として含有する空気の濾過装置を提供するものである。具体的な形態としては、換気扇、エアコン、カーエアコン、空気吸入口、空気排出口、網戸、空気清浄機、電気掃除機等の空気が通過する部位に使用されるフィルターが挙げられる。フィルターの素材は特に限定されないが、シルク、綿、羊毛、麻等の天然繊維、ポリウレタン、ポリプロピレン、ナイロン、ポリエステル、アクリル、ビニロン等の合成繊維、半合成繊維、ガラス繊維あるいはこれらの２種以上の混合物の織布、編布、不織布、紙等が挙げられる。これらのフィルターにササエキスの水希釈液を、含浸、噴霧等の方法により含有させ、乾燥すればよい。フィルター中のササエキスの含有量は、固形分で好ましくは２〜２０質量％、さらに好ましくは４〜１５質量％、最も好ましくは６〜８質量％程度とするのが適当である。２質量％未満では、目的とする殺菌、除菌、繁殖防止効果の発現が不十分であることがあり、また、２０質量％を超えても、効果のさらなる向上は少ないので不経済である。このフィルターを通過させると、空気中に存在する細菌類やウイルスは、濾過されるとともに、殺菌されるかあるいはその増殖が抑制されるので、フィルター上で細菌やウイルスが繁殖するのを防止することができる。
以下に参考例、実施例、試験例を示し、より詳細に本発明を説明するが、本発明はこれらに限定されないことは言うまでもない。なおこの明細書中「％」は、他に明記しない限り「質量％」である。
参考例１  ササエキスの製造
北海道天塩山系で９月に採集されたクマザサの乾燥葉を、加圧熱水抽出タンクに入れ、１２５℃で１０分処理し、冷却水で熱水を８０℃程度まで冷却し、エキスと含水固形分をスクリュープレスで分離して、含水率を約５０質量％とした。次に、約５０質量％含水固形分をオートクレーブに入れ、１８０℃で１０分、飽和水蒸気による加圧熱処理を行った。処理した含水固形分を、再度加圧熱水抽出タンクに入れて１１０℃で５分処理してエキスを抽出させた。第１回目と第２回目のエキスを合わせ、珪藻土濾過し、固形分５０質量％となるまで減圧濃縮し、１１０〜１３０℃の流動殺菌処理をしてササエキスを得た。
このササエキス中の硫黄含有量は３８５０μｇ／ｍｌ（７．７ｍｇ／固形分１ｇ）であった。
参考例２  有機酸含有ササエキス
参考例１で製造したササエキス（固形分５０質量％）１００ｇにリンゴ酸０．５ｇ、１ｇ、１．５ｇ又は２ｇを加え、有機酸含有ササエキスを製造した。
実施例１  チューインガムの製造
恒温槽で３０分間６０℃に加温したガムベース１００ｇに、参考例１で製造したササエキス（固形分５０質量％）２〜１５ｇを加え２分間練合し、再び６０℃にて１０分間加温した。得られた練合物を放冷し、圧延して厚さ約１ｍｍの板状チューインガム（及び丸状等種々の型のチューインガム）を製造した。
実施例２  丸剤の製造
下記の組成（単位は質量％）の配合物をニーダーで均一に混合し、次いでこれを造粒機で成形して丸剤を製造した。
2004091640.tif 000002
実施例３  保護ガーゼ
シルク製のガーゼに、参考例１で製造したササエキス（固形分５０質量％）を水で１０倍に希釈した液を噴霧し、８０℃で１時間乾燥し、ササエキスを固形分で８．８質量％含有する保護ガーゼを製造した。
実施例４  保護ガーゼ
シルク製のガーゼに、参考例２で製造したササエキス（固形分５０質量％）を水で６倍に希釈した液に８０℃で１時間浸漬し、８０℃で１時間乾燥し、ササエキスを固形分で８質量％含有する保護ガーゼを製造した。
実施例５  保護マスク
実施例３又は４の保護ガーゼを、複数枚のガーゼからなるマスクの内側に挿入して保護マスクを製造した。
実施例６  空気清浄機
通常の空気清浄機に使用されているフィルターを、参考例２で製造したササエキス（固形分５０質量％）を水で６倍に希釈した液に８０℃で１時間浸漬し、８０℃で１時間乾燥し、ササエキスを固形分で８質量％含有するフィルターを製造した。これを空気清浄機に取り付けた。
試験例１  抗菌性試験
実施例３で製造した保護ガーゼ（ササエキス固形分８．８質量％含有）と、ササエキスを含有しないシルク製ガーゼ（対照ガーゼ）を用意した。
各ガーゼ（５×７ｃｍ）に、下記の菌液（菌数約５．０×１０４個／ｍｌ又は約５．０×１０５個／ｍｌ）を１ｍｌ滴下し、孵卵器中３７℃で１２時間静置培養した。培養終了後、ガーゼを液体培地１０ｍｌで十分洗浄し、被験液を作成した。これをプレインハート寒天平板培地にスパイラルシステム（ＮＡＳＡシステム、米国）を用いて塗布した。孵卵器中３７℃で１８時間静置培養した。プレインハート寒天平板上のコロニー数を計測した。結果を表１及び表２に示す。
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表１及び表２において括弧内の数字は、菌数を一般表示により示したものである。
本発明のササエキス含有ガーゼでは、１２時間培養後、菌数が約１０００分の１ないし１００００分の１に減少しているのに対し、ササエキスを含まないガーゼでは、菌数が約１００倍以上に増大している。これは、本発明のササエキス含有ガーゼが優れた抗菌性を有すること、特に抗生物質が効かない耐性菌ＭＲＳＡに対しても顕著な抗菌性を有することを示している。
試験例２  炭疽菌に対する増殖抑制試験
１．試験方法
使用菌株：炭疽菌３４−Ｆ２（毒素産生、莢膜非形成弱毒株）の芽胞液。０．１ｍｌ当り３４，０００個に調整し使用した。
被験液：ササエキス固形分５０質量％液
検査方法：上記被験液を滅菌蒸留水にて希釈し、２５％、１２．５％、６．２５％、３．２％、１．６％、０．８％、及び０．４％液を調整し、以下の２通りの検査を行った。対照として滅菌蒸留水を使用した。
１）上記で作製した１０種の５０〜０％の被験液各１ｍｌに、炭疽菌３４−Ｆ２の芽胞液を０．１ｍｌ混合し、３７℃で２４時間静地後、その０．１ｍｌをＢｒａｉｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｉｎｆｕｓｉｏｎ（ＢＨＩ）寒天培地上に塗抹し、３７℃２４時間培養後、集落の発育を観察した。この際、滅菌蒸留水にて菌数の増減も観察した。
２）上記で作製した１０種の５０〜０％の被験液各１０ｍｌに、２倍濃度のＢＨＩ寒天を加え、寒天平板を作製した。それぞれの培地上に炭疽菌３４−Ｆ２の芽胞液０．１ｍｌを塗抹し、３７℃２４時間培養後、集落の発育を観察した。
２．結果
結果を下記の表３に示す。
2004091640.tif 000005
３．結論
試験したササエキスは炭疽菌芽胞体に対しての滅菌力は確認できなかったが、炭疽菌の増殖を強く抑制した。この結果、ササエキスを含有する本発明の皮膚保護組成物は、炭疽菌の増殖を抑え、結果的に炭疽菌による感染を防止できるものである。
試験例３  インフルエンザウイルスに対する抗ウイルス効果試験
１．試験方法
ウイルスは、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）ＨＦ株、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）ＵＷ株、インフルエンザウイルス（Ｉｎｆ．）Ａ／ＰＲ／８株、インフルエンザウイルスは（Ｉｎｆ．）Ａ／ＦＭ／１／４７株を用いた。使用培養細胞は、ＨＳＶはＶｅｒｏ細胞（アフリカミドリザル腎由来）、Ｉｎｆ．はＭＤＣＫ細胞（イヌ腎由来）を用いた。
抗ウイルス効果は、ウイルス液１０μｌを、参考例１で製造したササエキスを滅菌蒸留水で希釈したもの１ｍｌと混合後、２４ウエルプレート中、室温（２３±３℃）で培養した株化細胞に１０μｌ接種し、このプレートを３７℃でＣＯ２インキュベーター内で培養し、細胞変性効果（ＣＰＥ）の程度を次の基準によりより判定した。対照には蒸留水（ＤＷ）を用いた。
ＮＴ：試験せず、４＋：ウエル全面にＣＰＥ、３＋：ウエルの７５％以上でＣＰＥ、２＋：ウエルの５０〜７５％でＣＰＥ、＋：ウエルの２５〜５０％でＣＰＥ、±：ウエルの２５％以下でＣＰＥ、−：ＣＰＥ観察されず
電子顕微鏡サンプルは、培養細胞にウイルスを２０時間感染させ、希釈したササエキスで処理し、定法に従い固定観察した。
２．結果
単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）ＨＦ株、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）ＵＷ株、インフルエンザウイルス（Ｉｎｆ．）Ａ／ＰＲ／８株、インフルエンザウイルスは（Ｉｎｆ．）Ａ／ＦＭ／１／４７株に対する抗ウイルス効果を表４〜７に示す。
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ウイルスは、１０％濃度では５分間処理によって不活化され、１％濃度でも１時間処理によって不活化された。
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ウイルスは、１０％濃度では１分間処理によって不活化され、１％濃度でも１５分間処理によって不活化された。
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ウイルスは、０．５％濃度以上、３０分間処理によって不活化された。
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ウイルスは、０．５％濃度以上、３０分間処理によって不活化された。
３．結論
この結果から、インフルエンザウイルスに対するササエキスの抗ウイルス効果は、既存の製剤とは異なることが明確になったが、作用メカニズムは不明である。
【国際調査報告】
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