(57)【要約】簡便に調製することができ、長期にわたって保存することができ、作業効率が良好で、培養する生物の種類や培養条件を制限することなく広範な生物および条件下で培養することができ、また、再利用可能な生物培養装置を提供する。該静物培養装置は、培養基を保持した微多孔質体を含み、該微多孔質体の表面上で生物を培養する。
2004101736.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養基を保持した微多孔質体を含み、該微多孔質体の表面上で生物を培養する生物培養装置。
【請求項２】
微多孔質体が、該微多孔質体に対して５〜３００％（ｗｔ／ｗｔ）の培養基を保持する請求項１記載の生物培養装置。
【請求項３】
微多孔質体が有する毛細管力により保持される量の培養基を保持する請求項１または２記載の生物培養装置。
【請求項４】
土壌を含まない請求項１〜３いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項５】
微多孔質体の空隙径が５μｍ以下である請求項１〜４いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項６】
微多孔質体の空隙率が１０〜８０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）である請求項１〜５いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項７】
該微多孔質体が非金属無機質固体材料の焼成物であって、５〜５０％（ｗｔ／ｗｔ）の培養基を保持する請求項１〜６いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項８】
該微多孔質体が非金属無機質固体材料の焼成物であって、空隙率が１０〜５０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）である請求項１〜７いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項９】
該微多孔質体が連続気泡型プラスチックフォームであって、１０〜３００％（ｗｔ／ｗｔ）の培養基を保持する請求項１〜６いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項１０】
該微多孔質体が連続気泡型プラスチックフォームであって、空隙率が１０〜８０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）である請求項１〜６または９いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項１１】
無菌状態に密封した請求項１〜１０いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項１２】
培養する生物が微生物である請求項１〜１１いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項１３】
微生物が細菌、酵母または糸状菌である請求項１２記載の生物培養装置。
【請求項１４】
食品検査用である請求項１３記載の生物培養装置。
【請求項１５】
培養する生物が植物である請求項１〜１１いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項１６】
保持した培養基を乾燥させて培養基中の水分を実質的に除去した微多孔質体を含む生物培養装置であって、生物を培養する前に乾燥させた量の水分を添加した微多孔質体の表面上で生物を培養する生物培養装置。
【請求項１７】
培養基を保持した１またはそれを超える微多孔質体と、該微多孔質体を密閉可能な状態で保持する保持手段とを含み、該微多孔質体の表面上で生物を培養する生物培養装置。
【請求項１８】
（１）微多孔質体の毛細管力によって培養基を保持させた微多孔質体を滅菌し、あるいは、予め滅菌した微多孔質体に予め滅菌した培養基を無菌条件下で保持させ；
（２）検体を該微多孔質体と接触させ；ついで
（３）該微多孔質体を一定条件下で一定期間培養した後に、該微多孔質体上に形成されたコロニーを計数する
ことを含む微生物の検査方法。
【請求項１９】
工程（３）の培養を、−５０〜３００℃にて６ヶ月未満行う請求項１８記載の検査方法。
【請求項２０】
微生物が細菌、酵母または糸状菌である請求項１８または１９記載の検査方法。
【請求項２１】
食品に存在する微生物を検査する請求項１８〜２０いずれか１項記載の検査方法。
【請求項２２】
（１）微多孔質体の毛細管力によって培養基を保持させた微多孔質体を滅菌し、あるいは、予め滅菌した微多孔質体に予め滅菌した培養基を無菌条件下で保持させ；
（２）生物を該微多孔質体の表面に付着させ；ついで
（３）該微多孔質体を一定条件下で一定期間培養した後に、該微多孔質体が保持する培養基の量が該微多孔質体の毛細管力により保持される量となるように、該微多孔質体に培養基を順次補充することを含む生物培養方法。
【請求項２３】
培養する生物が微生物である請求項２２記載の生物培養方法。
【請求項２４】
微生物が細菌、酵母または糸状菌である請求項２２または２３記載の生物培養方法。
【請求項２５】
該生物が植物である請求項２２記載の生物培養方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、生物を培養するための生物培養装置および培養方法に関する。より詳細には、本発明は、食品などに存在する微生物を検査培養するための生物培養装置および培養方法に関する。また、本発明は、長期間にわたって生物を簡便かつ効率的に培養し得る生物培養装置および培養方法に関する。
【背景技術】  食品検査や、医療関連製品および衛生関連製品を取り扱う現場における衛生検査は、検体から採取した微生物を寒天平板培地上にプレートして培養したり、採取した微生物の懸濁液を溶解した寒天に混濁して培養し、出現したコロニーを肉眼または実態顕微鏡などで計数する方法が一般的に行われている。
このような微生物培養を目的とする微生物培養器材として、水分保持力を有する微生物培養器材および培地が開示されている（ＷＯ９７／０２４４３２参照）。
しかしながら、ＷＯ９７／０２４４３２に開示されている培地は乾燥培地であり、水分を加えることによって微生物が生育し得る培地となるが、加える水分量が明確に規定されていないため、水分量が変化すると培地濃度が変動して微生物にとって不適当な培地濃度となり得る。
また、ＷＯ９７／０２４４３２には、微生物は多孔質マトリックス層に浸透するが、粘性の高い水溶性ポリマーが被検液の水分で溶け出して多孔質マトリックス層に浸潤してゆく際に水溶性ポリマーが高粘度であるため、多孔質マトリックス層の表面に微生物が押出されて、正確なコロニーを計数できると記載されている。しかし、通常、多孔質マトリックス内の空隙は単純な構造を有していないと考えられるため、少なくとも一部分の微生物は空隙内に引っかかり、水溶性ポリマーによって押出されずに空隙内にとどまるために、正確なコロニー計数ができない可能性が高い。
また、多孔質炭素素材からなる生物培養用多孔質炭素材料が開示されている（日本国特許公開公報平成０９−１８８５７４号参照）。
しかしながら、特開平０９−１８８５７４号公報には、気孔径が５〜５０μｍと記載されており、また、微生物のサイズは１〜２μｍでありその５倍のサイズの空隙が必要であるとも記載されている。したがって、これらの記載からは多孔質炭素素材内の空隙中で微生物を培養するための培養器材であると考えられる。しかし、空隙中で微生物を増殖させる場合、基材が透明であればコロニーを目視で計数できるが、基材が不透明である場合には不可能であり、検査を目的とする培養装置としては不適当である。また、植物細胞または植物体を培養する場合にも、このサイズの気孔では根などの組織が気孔内に侵入してしまい、植え替えなどの作業の際に植物を損傷する危険性が高い。
従来、一般的に用いられている検査培養では、通常は寒天培地などの固体培地を用いているために、培地を溶解し、ペトリ皿などの容器に分注して固化させた後に使用しなければならず、また、培地を調製した後は培地中の水分が蒸散し易いために長期間保存することができず、培地調製後は比較的短時間のうちに使用する必要があった。また、かかる検査を行なう現場では、培地をその場で調製する作業は非常に効率が悪く、事実上不可能であった。また、乳酸菌などの生育ｐＨが酸性に強く傾いている微生物が検査対象となる場合は、かかるｐＨ領域で寒天培地を固化させて寒天平板培地にすることはできなかった。また、タバコ（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ  ｔａｂａｃｕｍ）の葯培養時などのように培養する生物によっては培地中に存在する寒天によって不定胚の分化が阻害される場合もあり、このような生物を従来の寒天培地で培養するには高純度の寒天や特別な処理が必要であった。また、通常、シャーレなどの容器に入れた寒天培地もしくは液体培地は、微生物などの培養後に滅菌されて廃棄されるが、これは環境汚染やコストなどの観点から有利でない。
さらに、将来、惑星間移動や宇宙ステーション内の実験などの無重力条件下における微生物および植物などの生物の培養ないし生育も想定されるが、そのような場合に溶解・加熱を調製に要する寒天培地や土壌を要する鉢植えは、安全性・酸素消費や重量増加に伴うコスト増の観点から困難であると考えられる。また、無重力条件下では、液体が球形となって浮遊するため振盪や攪拌などを必要とする液体培地も困難であり、生物の培養や生育に不都合となる場合が考えられる。
そこで、前記の課題を解決し得るような微生物などの検査に用いる培養装置に対する要望があった。また、同じ装置を用いて、短期間の検査培養のほか、微生物や植物を長期間にわたって培養し得る生物培養装置に対する要望があった。
【発明の開示】
本発明者らは、前記の問題点に鑑みて鋭意検討した結果、特定の微多孔質体が有する毛細管力により培養基を保持させ、その表面上で生物を培養し、所望により培養基を補充して培養を継続することによって前記の問題点を解決し得ることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、第１の態様において、培養基を保持した微多孔質体を含み、該微多孔質体の表面上で生物を培養する生物培養装置を提供する。
本発明の第１の態様によれば、簡便に調製することができ、長期間にわたって保存しておくことができ、温度や圧力、使用する培養基の種類およびｐＨや培養する生物の種類を制限することなく、滅菌して洗浄した後に再利用が可能な生物培養装置を提供できる。また、培養する生物は微多孔質体の表面上で増殖ないし生育するため、表面上の微生物のコロニーなどを計数することにより正確に検査することができ、また、培養した植物などを微多孔質体から無傷で分離することができる。さらに、宇宙空間などでの微生物ないし植物などの生物の培養ないし生育に関しても、安全性が高く、調製する際の酸素消費や重量増加に伴うコスト増を抑えることができ、培養基が微多孔質体から遊離することなく生物を好適に培養ないし生育することができる。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、微多孔質体が、該微多孔質体に対して５〜３００％（ｗｔ／ｗｔ）、より好ましくは７〜２５０％（ｗｔ／ｗｔ）、最も好ましくは８〜２００％（ｗｔ／ｗｔ）の培養基または水を保持する。これにより、第１の態様の利点に加えて、微多孔質体が保持する培養基の量を、培養する生物の種類、期間、培養後の用途に応じて適宜調整することができる。また、例えば、微多孔質体の表面に培養基が遊離して表面に置床した微生物などが流出することや、宇宙空間に運搬する際の重量増加をさらに抑えることができる。微多孔質体が保持し得る培養基が５％未満である場合には培養する生物が十分な培養基を利用することができなくなる可能性があるので好ましくない。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、微多孔質体が有する毛細管力により保持される量の培養基を保持する。これにより、前記の態様の利点に加えて、生物の培養に必要かつ十分な量の培養基のみを微多孔質体に保持させて生物を培養することができ、培養する生物が微多孔質体表面から流出することを防ぐことができる。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、土壌を含まない。これにより、前記の態様の利点に加えて、植物を生育させる場合、土壌による重量増加をも抑えることができ、また、生育した植物の根などを損傷することなく生物培養装置から分離することができる。また、土壌の緩衝能やイオン交換能などの化学的な不安定要素を排除もしくは制御することができる。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、微多孔質体の空隙径が５μｍ以下、より好ましくは３μｍ以下、さらにより好ましくは２μｍ以下、最も好ましくは１μｍ以下である。また、微多孔質体の空隙径分布は、好ましくは１μｍ以下の空隙が体積比で全空隙体積の７０％以上、より好ましくは８５％以上、さらに好ましくは９０％以上、最も好ましくは９５％以上存在する。これにより、前記の態様の利点に加えて、微生物などの生物は微多孔質体の内部に侵入することなく表面のみで増殖または生育するため、正確な微生物などの数を計数することができ、また、植物などを生育させる場合には、微多孔質体から分離する際に根などが引っかかって損傷することなく、無傷で分離することができる。空隙径が５μｍを超えると微生物が空隙内に侵入するためコロニーの正確な計数ができず、また植物の毛根などが侵入するため微多孔質体から分離する際に損傷するおそれがあるので好ましくない。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、微多孔質体の空隙率が１０〜８０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、さらに好ましくは１５〜６０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、最も好ましくは１８〜５０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）である。これにより、前記の態様の利点に加えて、微多孔質体に保持される培養基の量を制御することができ、また、微多孔質体自体の重量を抑えることができる。空隙率が１０％未満では生物の培養に好適な培養基を保持することができず、一方、８０％を超えると微多孔質体の強度が低下するため好ましくない。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、微多孔質体が、非金属無機質固体材料の焼成物である。これにより、前記の態様の利点に加えて、非金属無機質固体材料の焼成物を微多孔質体に用いることにより、成型性に優れ、軽量で、耐久性に優れた生物培養装置を得ることが可能となる。また、本発明の生物培養装置の微多孔質体が非金属無機質固体材料の焼成物である場合、好ましくは５〜５０％（ｗｔ／ｗｔ）、より好ましくは７〜２５％（ｗｔ／ｗｔ）、最も好ましくは８〜２０％（ｗｔ／ｗｔ）の水または培養基を保持し、好ましくは１０〜５０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、より好ましくは１５〜４０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、最も好ましくは１８〜３７％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）の空隙率を有する。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、微多孔質体が、連続気泡型プラスチックフォームである。これにより、前記の態様の利点に加えて、連続気泡型プラスチックフォームを微多孔質体に用いることにより、より成型性に優れ、種々の形状に形成でき、さらには軽量な微多孔質体とすることができるため、本発明の生物培養装置を多様な用途に適用できる。また、本発明の生物培養装置の微多孔質体が連続気泡型プラスチックフォームである場合、好ましくは、１０〜３００％（ｗｔ／ｗｔ）、より好ましくは２０〜２５０％（ｗｔ／ｗｔ）、最も好ましくは３０〜２００％（ｗｔ／ｗｔ）の培養基を保持し、好ましくは１０〜８０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、より好ましくは１５〜６０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、最も好ましくは１８〜５０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）の空隙率を有する。
また、前記の非金属無機質固体材料の焼成物や連続気泡型プラスチックフォームは薄く成型することもできるため、本発明の生物培養装置を、薄い形状のものとすることができ、培養面積および重量が制限される宇宙ステーションなどでの生物の培養ないし生育にも好適に適用することができる。
また、本発明の生物培養装置は、無菌状態に密封する。これにより、前記の態様の利点に加えて、長期間にわたる保存が可能であり、また、通常の環境下または無菌条件下で密閉した状態から取出すだけで簡便に生物培養装置を使用し得る。本発明の生物培養装置は、例えば、予め培養基を保持させた微多孔質体をレトルトパウチなどの簡易な密閉手段により無菌状態で密閉して保存しておき、現場で取出して微生物などを簡便に培養することができる。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、培養する生物が微生物である。これにより、前記の態様の利点に加えて、目的の微生物を培養し、その後、その存在を検査したり、単離することができる。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、微生物が細菌、酵母または糸状菌である。これにより、前記の態様の利点に加えて、より詳細な微生物を検査することができる。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、食品検査用である。これにより、前記の態様の利点に加えて、食品を摂取するヒトなどの動物に有害となり得る微生物などを定性的または定量的に検査することができる。あるいは、食品中に存在する有用な微生物などの存在を検査ないし単離することもできる。
また、本発明の生物培養装置は、好ましくは、培養する生物が植物である。これにより、前記の態様の利点に加えて、目的の植物を培養または生育させ、その後、所望により脱分化、再分化、形質転換などの処理を行なうことができる。
また、本発明は、第２の態様において、保持した培養基を乾燥させて培養基中の水分を実質的に除去した微多孔質体を含む生物培養装置であって、使用する前に乾燥させた量の水分、すなわち、微多孔質体が保持し得る水分量を添加することにより培養基を再生して生物を培養する生物培養装置を提供する。
本発明の第２の態様によれば、第１の態様の利点に加えて、さらに長期間にわたって保存することができ、より軽量な状態で輸送して、使用する前に所定量の水を添加するだけで簡便に使用することができる。
また、本発明は、第３の態様において、培養基を保持した１またはそれを超える微多孔質体と、該微多孔質体を密閉可能な状態で保持する保持手段とを含み、該微多孔質体の表面上で生物を培養する生物培養装置を提供する。
本発明の第３の態様によれば、第１の態様および第２の態様の利点に加えて、同一または異なる培養基を複数の微多孔質体に保持させて、複数の種類の生物を培養ないし生育することができ、また、複数の異なる条件下で１またはそれを超える種類の生物を培養ないし生育することができる。また、外部環境下での生物の採取に好適な持運びが可能な携帯性の生物培養装置とすることができる。
また、本発明は、第４の態様において、
（１）微多孔質体の毛細管力によって培養基を保持させた微多孔質体を滅菌し、あるいは、予め滅菌した微多孔質体に予め滅菌した培養基を無菌条件下で保持させ；
（２）検体を該微多孔質体と接触させ；ついで
（３）該微多孔質体を一定条件下で一定期間培養した後に、該微多孔質体上に形成されたコロニーを計数する
ことを含む微生物の検査方法を提供する。
本発明の第４の態様によれば、簡便に調製することができ、温度や圧力、使用する培養基の種類およびｐＨや培養する微生物の種類を制限することがない検査方法を提供できる。また、培養する微生物は微多孔質体の表面上で増殖ないし生育するため、表面上の微生物のコロニーなどを計数することにより正確に検査することができ、また、宇宙ステーションなどでの微生物の検査に関しても、安全性が高く、調製する際の酸素消費や重量増加に伴うコスト増を抑えることができ、無重力条件下でも培養基が微多孔質体から遊離することなく微生物を好適に培養することができる。
また、本発明の検査方法は、好ましくは、前記工程（３）の培養を−５０〜３００℃にて６ヶ月未満行う。これにより、短期間で検体に存在する微生物を検査することができる。
また、本発明の検査方法は、好ましくは、微生物が細菌、酵母または糸状菌である。これにより、培養基を利用することにより増殖し、コロニーを形成する微生物を検査することができる。
また、本発明の検査方法は、好ましくは、食品に存在する微生物を検査する。これにより、食品を摂取するヒトなどの動物に有害となり得る微生物を定性的または定量的に検査することができる。あるいは、食品中に存在する有用な微生物の存在を検査することもできる。
また、本発明は、第５の態様おいて、（１）微多孔質体の毛細管力によって培養基を保持させた微多孔質体を滅菌し、あるいは、予め滅菌した微多孔質体に予め滅菌した培養基を無菌条件下で保持させ；
（２）生物を該微多孔質体の表面に付着させ；ついで
（３）該微多孔質体を一定条件下で一定期間培養した後に、該微多孔質体が保持する培養基の量が該微多孔質体の毛細管力により保持される量となるように、該微多孔質体に培養基を順次補充することを含む生物培養方法を提供する。
本発明の第５の態様によれば、生物の培養に必要かつ十分な量の培養基のみを微多孔質体に保持させて生物を培養することができる。
また、本発明の生物培養方法は、好ましくは、培養する生物が微生物である。これにより、第５の態様の利点に加えて、目的の微生物を培養し、その後、その存在を検査したり、単離することができる。
また、本発明の生物培養方法は、好ましくは、微生物が細菌、酵母または糸状菌である。これにより、前記の態様の利点に加えて、より詳細な微生物を検査することができる。
また、本発明の生物培養方法は、好ましくは、培養する生物が植物である。これにより、前記の態様の利点に加えて、目的とする植物の細胞や組織を培養または植物体を生育させ、所望により脱分化、再分化、形質転換などの処理を行なうことができる。
本明細書中で用いる「生物」なる語には、一般的に、微生物、菌類、植物、および動物由来の組織または細胞が含まれ、ここに「微生物」なる語には細菌、酵母および糸状菌が含まれ、また、「植物」なる語には植物細胞および組織と植物体とが含まれ、植物細胞および植物組織には１またはそれを超える細胞や植物カルスなどが含まれ、植物体には未発芽状態の種子、発芽した幼植物、各種生育段階の植物、およびそれらの植物から分離した葉片、葯などの部分が含まれる。
また、本明細書で用いる「空隙」とは、生物培養装置の微多孔質体を水または培養基に浸漬することにより、水または培養基が侵入し得るすべての連通する孔を意味し、「空隙径」とはかかる孔の直径を意味し、「空隙率」とは微多孔質の体積に対するかかる孔が占める割合を意味する。
【図面の簡単な説明】  図１は、本発明の生物培養装置の一実施形態を示す斜視図である。
図２は、本発明に生物培養装置の別の実施形態を示す斜視図である。
図３は、本発明に生物培養装置の別の実施形態を示す斜視図である。
図４は、本発明の生物培養装置の別の実施形態を示す斜視図である。
図５は、本発明の生物培養装置を用いた培養０日後のシロイヌナズナｃｏｌｕｍｂｉａのリーフピースを示す図面代用写真である。
図６は、本発明の生物培養装置を用いた培養１０日後のカルス化したシロイヌナズナｃｏｌｕｍｂｉａのリーフピースを示す図面代用写真である。
図７は、本発明の生物培養装置を用いた培養２１日後のカルス化したシロイヌナズナｃｏｌｕｍｂｉａのリーフピースを示す図面代用写真である。
図８は、本発明の生物培養装置を用いた培養４日後の糸状菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）の菌叢を示す図面代用写真である。
図９は、本発明の生物培養装置を用いた培養１０日後の糸状菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）の菌叢を示す図面代用写真である。
図１０は、本発明の生物培養装置を用いた培養１３日後の糸状菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）の菌叢を示す図面代用写真である。
図１１は、本発明の生物培養装置を用いた培養０日後の糸状菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）の菌叢を示す図面代用写真である。
図１２は、本発明の生物培養装置を用いた培養１３日後の糸状菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）の菌叢を示す図面代用写真である。
図１３は、本発明の生物培養装置を用いた培養２１日後の糸状菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）の菌叢を示す図面代用写真である。
図１４は、本発明の生物培養装置を用いた培養２４日後の糸状菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）の菌叢を示す図面代用写真である。
図１５は、本発明の生物培養装置を用いた培養６日後の細菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）の菌叢を示す図面代用写真である。
図１６は、本発明の生物培養装置を用いた培養１３日後の細菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）の菌叢を示す図面代用写真である。
【発明を実施するための最良の形態】  つぎに、本発明に係る生物培養装置の実施形態を、図面に参照して説明する。
まず、本発明に係る生物培養装置の第１の実施形態は、図１に示すように、培養基を保持した微多孔質体１からなり、培養する生物２は、該微多孔質体１の表面に置床すると、微多孔質体に保持される培養基を吸収して増殖、脱分化、再分化、分化または生育することができる生物培養装置である。
本発明の生物培養装置に用いる培養基としては、目的に応じて種々のアミノ酸、ビタミン類、酵素類、抗生物質、浸透圧調整剤、緩衝剤、天然物質（酵母抽出物など）、不凍剤を添加し得る、微多孔質体が保持し得、かつ、目的とする生物を増殖、脱分化、分化、再生、保存、選択、分離、交雑、生育などし得るものであれば特に限定されるものではないが、例えば、ジャガイモ・蔗糖培地、ＢＬ培地、ＣＷ培地、ＣＣＦＡ改良培地、Ｂ−ＣＹＥα培地、ＷＹＯα培地、ＤＮエース培地、ＰＳラテックス培地、ＴＣＢＳ培地、ＢＧＬＢ培地、ＥＣ培地、ＣＶＴ寒天培地、ＥＭＢ培地、ＢＣＭ  Ｏ１５７培地、ＮＡＣ寒天培地、ＯＦ基礎培地、ブドウ糖リン酸ペプトン培地、ラッセル培地、クリグラー培地、ＴＳＩ培地、ＳＩＭ培地、シモンズ・クエン酸ナトリウム培地、マロン酸塩培地、尿素培地、クリステンゼン尿素培地、リジン鉄寒天培地、リジン脱炭素試験用培地、ＬＩＭ培地、ＯＩＭＬ培地、ＶＰＯＦ培地、ＳＳ培地、ＳＳ−ＳＢ培地、マッコンキー培地、ＤＨＬ培地、ブリリアントグリーン培地、ＸＬＤ培地、ラパポート培地、ハーナ・テトラチオン酸塩基礎培地、セレナイト基礎培地、ＳＢＧスルファ基礎培地、テトラチオネート液体培地、ＥＥＭブイヨン培地、ハートインフュジョン培地、ブレインハートインフュジョン培地、ＳＣＤ培地、ＳＣＤＬＰ培地、ＢＴＢ乳糖培地、ドリガルスキー培地、ＳＣＤＬＰブイヨン培地、乳糖ブイヨンＪＰ培地、メタン菌用の牛糞、高度好塩性細菌用のＭＳ−１（１．５％カザミノ酸、０．０１％システイン、０．０１％トリプトファン、０．０５％クエン酸ソーダ、０．２％コハク酸ソーダ、０．０５％  Ｋ２ＨＰＯ４、０．０５％  ＫＨ２ＰＯ４、３０．０１％  ＫＮＯ、２．０％  ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．００５％  ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、２２〜２６％  ＮａＣｌ）、ＭＳ−２（０．５％カザミノ酸、１．０％酵母エキス、０．５％ペプトン、０．３％クエン酸ソーダ、０．５％  ＫＣｌ、２．０％  ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．００５％  ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、２５％  ＮａＣｌ）およびＭＳ−３培地（１．０％酵母エキス、０．５％  ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ、０．５％  ＮＨ４Ｃｌ、２５％  ＮａＣｌ）、好アルカリ性高度好塩菌用のＭＳＡ−４培地（１．０％ペプトン、０．３％クエン酸ソーダ、２．０％  ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．２％  ＫＣｌ、５．０％  ＮａＣＯ３・１０Ｈ２Ｏ、２５％  ＮａＣｌ）、高温好酸性菌用のＹＳＧ培地、好熱性古細菌用のＭＨ−１（蒸留水１Ｌ中、Ｙｅａｓｔ  Ｅｘｔｒａｃｔ  １．０ｇ、Ｔｒｙｐｔｏｎｅ  １．０ｇ、ＮａＣｌ  ３０ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ３．５ｇ、ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ  ２．８ｇ、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．２ｇ、ＫＣｌ  ０．３３ｇ、ＮＨ４Ｃｌ  ０．２ｇ、ＮａＢｒ  ５０ｍｇ、Ｈ３ＢＯ３  ２０ｍｇ、ＫＨ２ＰＯ４  ０．５ｇ、ＳｒＣｌ・６Ｈ２Ｏ  ７．５ｍｇ、（ＮＨ４）２ＳＯ４  １０ｍｇ、Ｎａ２ＷＯ４・２Ｈ２Ｏ  ０．１ｍｇ、ＫＩ  ５０ｍｇ、ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ  ０．７５ｇ、ＮｉＣｌ２・６Ｈ２Ｏ  ２ｍｇ、Ｒｅｓａｚｕｒｉｎｅ  １ｍｇ、微量成分（蒸留水１Ｌ中、三酢酸ニトリロ  １．５ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ３ｇ、ＭｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．５ｇ、ＮａＣｌ  １ｇ、ＺｎＳＯ４���７Ｈ２Ｏ  ０．１８ｇ、ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ  １０ｍｇ、ＫＡｌ（ＳＯ４）２・７Ｈ２Ｏ  ２０ｍｇ、Ｈ３ＢＯ３  １０ｍｇ、Ｎａ２ＭｏＯ２・２Ｈ２Ｏ  １０ｍｇ、ＮｉＣｌ２・６Ｈ２Ｏ  ２５ｍｇ、Ｎａ２ＳｅｏＯ３・５Ｈ２Ｏ  ０．３ｍｇ）１０ｍｌ、Ｓｕｌｆｅｒ  ２５ｇ、Ｎａ２Ｓ・９Ｈ２Ｏ  ２５ｇ）、ＭＨ−２（０．０１％酵母エキス、０．０１％カザミノ酸、０．１％炭素源、０．０２％  ＮａＣｌ、０．０３％  ＫＨ２ＰＯ４、０．１３％  （ＮＨ４）２ＳＯ４、０．０２５％  ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．００５％  ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、グルコース）およびＭＨ−３培地（蒸留水１Ｌ中、Ｂａｃｔｏ  Ｐｅｐｔｏｎｅ  ５ｇ、Ｂａｃｔｏ  Ｙｅａｓｔ  Ｅｘｔｒａｃｔ  １ｇ、ＦｅＣ５Ｈ５Ｏ７  ０．１ｇ、ＮａＣｌ  １９．４５ｇ、ＭｇＣｌ２  ５．９ｇ、Ｎａ２ＳＯ４  ３．２４ｇ、ＣａＣｌ２  １．８ｇ、ＫＣｌ  ０．５５ｇ、ＮａＨＣＯ３  ０．１６ｇ、ＫＢｒ  ０．０８ｇ、ＳｒＣｌ２  ０．０３４ｇ、Ｈ３ＢＯ３  ０．０２２ｇ、ケイ酸ナトリウム  ０．００４ｇ、ＮａＦ  ０．００２４ｇ、ＮＨ４ＮＯ３  ０．００１６ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ０．００８ｇ、カゼインまたはデンプン  １０ｇ）などの細菌用の培地；目的に応じて種々のアミノ酸、ビタミン類、酵素類、抗生物質、浸透圧調整剤、緩衝剤、天然物質（酵母抽出物など）、不凍剤を添加し得る、改太田培地、濱田エビオス・ブドー糖培地、Ｍ培地、ＭＹＰ培地、ＰＤＡ培地、太田培地、モーゼルのｂ−培地、ウエゼルスとニーダプルエムの交配用最少培地、ケルイシュとダ・コスタの培地、グッディとルセトホールの培地、ツァペック培地、Ｙｅａｓｔ  ｉｎｆｕｓｉｏｎ培地、Ｗｉｃｋｅｒｈａｍ合成培地、ＭＹ培地、オートミール培地、改良Ｇｏｒｏｄｋｏｗａ培地、クリステンセンの尿素培地、Ｈｅｎｎｅｂｅｒｇ培地、Ｃｚａｐｅｋ−Ｄｏｘ培地、Ｕｓｃｈｉｎｓｋｙ培地、嫌気性菌チオグリコール酸塩培地、Ｋｌｅｙｎ酢酸ソーダ培地、酵母完全合成培地（Ｗｉｃｋｅｒｈａｍ）、コハク酸−硝酸塩培地、Ｇｏｒｏｄｋｏｗａ培地、コーンミール培地、硝酸塩培地、Ｆｏｗｅｌｌｓ酢酸ソーダ培地、Ｌｉｎｄｅｇｒｅｎ培地などの菌類培養用の培地；目的に応じて種々の植物ホルモン、アミノ酸、ビタミン類、抗生物質、浸透圧調整剤、緩衝剤、天然物質（酵母抽出物など）、酵素類、不凍剤を添加し得る、ＭＳ（Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ−Ｓｋｏｏｇ）培地、Ｂ５培地、Ｗ培地、ＮＴ培地、Ｋａｏ８Ｐ培地、ＬＳ培地、Ｈ培地、ＫＣ培地、ＨＢ培地、ＷＰＭ、カッサニスの培地、ニールセンの培地、ガルジーの培地、ニッシュ−ニッシュの培地、農試培地などの植物組織培養用の培地；ならびに水、または植物種子を発芽・生育させるために必要な硝酸態窒素、アンモニア態窒素、リン、カリウム、カルシウム、マグネシウム、鉄およびマンガン、銅、亜鉛、モリブデン、ホウ素などの無機要素、チアミン、ピリドキシン、ニコチン酸、ビオチン、葉酸などの各種ビタミン、ココナットミルク、カゼイン加水分解物、酵母抽出物などの天然物質、グルタミン酸、アスパラギン酸、アラニンなどの有機窒素源、オーキシン、サイトカイン、ジベレリンなどの植物生長調節物質、ブドウ糖、ショ糖、果糖、麦芽糖などの炭素源、カナマイシン、ハイグロマイシンなどの抗生物質、バスタなどの農薬などを含有する水溶液などの植物生育用の培地などが挙げられる。
つぎに、本発明の生物培養装置に用いる微多孔質体１は、使用する培養基の種類によっても変動するが、好ましくは２０℃において５〜３００％（ｗｔ／ｗｔ）、さらに好ましくは７〜２５０％（ｗｔ／ｗｔ）、最も好ましくは８〜２００％（ｗｔ／ｗｔ）の培養基を保持し得、また、同量の水を保持する吸水能を有する。本発明の生物培養装置に用いる微多孔質体が後記する非金属無機質固体材料の焼成物である場合には、好ましくは５〜５０％（ｗｔ／ｗｔ）、より好ましくは７〜２５％（ｗｔ／ｗｔ）、最も好ましくは８〜２０％（ｗｔ／ｗｔ）の水または培養基を保持し、一方、微多孔質体がプラスチックフォームである場合には、好ましくは１０〜３００％（ｗｔ／ｗｔ）、より好ましくは２０〜２５０％（ｗｔ／ｗｔ）、最も好ましくは３０〜２００％（ｗｔ／ｗｔ）の水または培養基を保持する。また、本発明の生物培養装置に用いる微多孔質体は好ましくは１０〜８０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、より好ましくは１５〜６０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、最も好ましくは１８〜５０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）の空隙率を有する。本発明の生物培養装置に用いる微多孔質体が後記する非金属無機質固体材料の焼成物である場合には、好ましくは１０〜５０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、より好ましくは１５〜４０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、最も好ましくは１８〜３７％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）の空隙率を有し、一方、微多孔質体がプラスチックフォームである場合には、好ましくは１０〜８０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、より好ましくは１５〜６０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、最も好ましくは１８〜５０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）の空隙率を有する。このように、微多孔質体は連続する多数の空隙を含み、その毛細管力によって水を吸収して保持し得る。好ましくは、微多孔質体はそれが有する毛細管力によって保持し得る量の培養基を吸収して保持する。培養基を微多孔質体に保持させるためには、乾燥状態の微多孔質体を十分な量の培養基に数時間ないし数日間浸漬して取出した後に表面に付着した培養基を拭くなどして除去するか、または所定量の培養基を乾燥させた微多孔質体の表面から吸収させる。
微多孔質体は、好ましくは５μｍ以下、より好ましくは３μｍ以下、さらにより好ましくは２μｍ以下、最も好ましくは１μｍ以下の空隙径を有する空隙を含む。また、微多孔質体の空隙径分布は、好ましくは、１μｍ以下の空隙が体積比で全空隙体積の７０％以上、より好ましくは８５％以上、さらに好ましくは９０％以上、最も好ましくは９５％以上を占める。微多孔質体の空隙径分布は、０．３μｍ以下の空隙が３０〜５０％、０．３〜０．５μｍの空隙が１０〜２０％、０．５〜１μｍの空隙が２０〜４０％、１〜３μｍの空隙が５〜１５％を占める。また、微多孔質体は、通常、０．１〜３．０ｇ／ｃｍ３、好ましくは０．２〜２．５ｇ／ｃｍ３、最も好ましくは０．３〜２．２ｇ／ｃｍ３の嵩密度を有する。詳細には、微多孔質体が後記する非金属無機質固体材料の焼成物である場合には、好ましくは１．５〜３．０ｇ／ｃｍ３、好ましくは１．８〜２．５ｇ／ｃｍ３、最も好ましくは１．９〜２．２ｇ／ｃｍの嵩密度を有し、一方、微多孔質体が後記するプラスチックフォームである場合には、好ましくは０．１〜１．５ｇ／ｃｍ３、より好ましくは０．２〜１．０ｇ／ｃｍ３、最も好ましくは０．３〜０．７ｇ／ｃｍ３の嵩密度を有する。
この微多孔質体の空隙径、空隙率、空隙分布および嵩密度は、後記する微多孔質体の原料や製造条件によって制御することができる。また、このように、微多孔質体の空隙径、空隙率および空隙分布を製造条件によって制御することにより、前記した微多孔質体が有する毛細管力を調整し、微多孔質体が保持し得る培養基の量を変化させることができる。
また、微多孔質体は、前記の特性を有するものであればよいが、好ましくはオートクレーブなどの高温高圧滅菌処理や、強アルカリ性、強酸性、高温、低温、高塩濃度、加圧、減圧、有機溶媒、放射線照射または重力を加えるなどの種々の培養条件または培養基条件に耐性の材質からなり、例えば１０号土、磁器２号土（城山セラポット株式会社）、村上粘土（新潟県産）、ＰＣＴＧ  Ｎｏ．１土（東濃碍子株式会社）などの非金属無機質固体原料などを通常の方法に従って混練、成型、焼成することによって得られる非金属無機質固体材料や、ポリビニルアルコールフォーム、ポリウレタンフォーム、ポリスチレンフォーム、塩化ビニル樹脂フォーム、ポリエチレンフォーム、ポリプロピレンフォーム、フェノール樹脂フォーム、ユリア樹脂フォームなどの連続気泡型プラスチックフォーム材料を材質とするものが挙げられる。特に非金属無機質固体原料から、微多孔質であって、水分を吸収および放出し易い多孔質体を製造する場合には、例えば、ペタライト、アルミナなどを５０〜６０重量％含有させて焼成することが好ましい。なお、一般的に、前記のペタライトとしては、７６．８１重量％のＳｉＯ２、１６．９６重量％のＡｌ２Ｏ３、４．０３重量％のＬｉＯ２、０．２６重量％のＫ２Ｏ、１．９４重量％の不可避的不純物を含むものが好ましい。また、非金属無機質固体原料には、粉状無機質発泡体を含有させておいてもよい。さらに、本発明の生物培養装置に用いる微多孔質体は、吸水した場合においても実質的にその強度が低下しないもしくは形状が変化しない非金属無機質材料からなる。
非金属無機質固体原料の成型方法としては、例えば、鋳込み成型、押し出し成型、プレス成型、ろくろ成型などの当該技術分野で知られている成型方法が挙げられるが、特に大量生産およびコスト削減の見地から押し出し成型が好ましい。また、成型後の乾燥は、当該技術分野で知られている通常の方法および条件を用いて行うことができる。つづく成型体の焼成は、通常行われている条件および方法であれば特に限定されるものではないが、例えば、所望の空隙が得られやすい酸化焼成などを選択し得、焼成温度は１０００℃〜２０００℃、好ましくは１１００℃〜１５００℃、より好ましくは１１５０〜１３００℃、最も好ましくは１２５０℃である。非金属無機質固体原料の焼成温度が１０００℃未満である場合には硫黄成分が残留し易く、一方、２０００℃を超える場合には所望の培養基を保持する能力が得られない。
一方、連続気泡型プラスチックフォームを材料とする微多孔質体の成型方法としては、例えば、溶融発泡成型、固相発泡成型、注型発泡成型などの方法が挙げられる。
溶融発泡成型の主な工程は、溶融混練、未発泡シート成型、加熱発泡または押し出し発泡、冷却、裁断および加工である。固相発泡成型では、ポリマーを固相または固相に近い状態で発泡させる。また、注型発泡成型では、液体原料（モノマーまたはオリゴマー）を使用して大気中で反応させながら注型して発泡させる。また、連続気泡型プラスチックフォームを発泡させるためには、一般的に発泡剤が用いられる。
また、微多孔質体１は、培養の目的に応じて、プレート型、ディスク型、筒状型または柱状型などの形状とすることができるが、好ましくは取扱いやすく、効率的に生物を培養することができ、また、培養中にコンパクトに収納し得るディスク型の微多孔質体を用いる。
培養基は、微多孔質体１と接触することにより、微多孔質体が有する毛細管力により微多孔質体内部の連通孔を介して吸収され、その内部に保持され、微多孔質体の表面に置床された生物２に供給されて、生物の増殖、脱分化、分化、再生などを誘導することができる。
本発明の生物培養装置を用いて培養する生物２としては、例えば、光合成細菌（Ｒｈｏｄｏｓｐｉｌｌｕｍ  ｍｏｌｉｓｃｈｉａｎｕｍ、Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌａ、Ｒｈｏｄｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍ  ｖａｎｎｉｅｌｉｉ、Ｃｈｒｏｍａｔｉｕｍ  ｖｉｎｏｓｕｍ、Ｔｈｉｏｃａｐｓａ  ｒｏｓｅｏｐｅｒｓｉｃｉｎａ、Ｔｈｉｏｐｅｄｉａ  ｒｏｓｅａ、Ｃｈｌｏｒｏｂｉｕｍ  ｌｉｍｉｃｏｌａ、Ｃｈｌｏｒｏｂｉｕｍ  ｐｈａｅｏｖｉｂｒｉｏｉｄｅｓ、Ｐｅｌｏｄｉｃｔｙｏｎ  ｃｌａｔｈｒａｔｉｆｏｒｍｅ、紅色光合成細菌（Ｅｃｔｏｔｈｉｏｒｈｏｄｏｓｐｉｒａ  ｈａｌｏｐｈｉｌａ））、滑走細菌（Ｍｙｘｏｃｏｃｃｕｓ  ｆｕｌｖｕｓ、Ｍｙｘｏｃｏｃｃｕｓ  ｃｏｒａｌｌｏｉｄｅｓ、Ｍｙｘｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｔｉｐｉｔａｔｕｓ、Ｍｙｘｏｃｏｃｃｕｓ  ｘａｎｔｈｕｓ）、菌鞘細菌（Ｓｐｈｅａｒｏｔｉｌｕｓ  ｎａｔａｎｓ）、発芽細菌、付属器官をもつ細菌（Ｈｙｐｈｏｍｏｎａｓ  ｎｅｐｔｕｎｉｕｍ、Ｇａｌｌｉｏｎｅｌｌａ  ｆｅｒｒｕｇｉｎｅａ）、スピロヘータ（Ｓｐｉｒｏｃｈａｅｔａ  ｉｃｔｅｒｏｈａｅｍｏｒｒｈａｇｉａｅ、Ｓｐｉｒｏｃｈａｅｔａ  ｐａｌｌｉｄａ、Ｓｐｉｒｏｃｈａｅｔａ  ａｕｒａｎｔｉａ）、らせん状、わん曲型細菌、グラム陰性菌、好気性の桿菌、球菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｏｖａｌｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｇｌｕｃｏｎｉｃｕｍ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ｏｒｙｚａｅ、Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ  ｏｘｙｄａｎｓ）、空中窒素固定菌（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ  ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｍ、Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ、Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ、Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｍｅｌｉｌｏｔｉ、Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｐｈａｓｅｏｌｉ、Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｊａｐｏｎｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｍ）、Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｄａｃｅａｅ科（Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓ  ｍｅｔｈａｎｉｃａ）、酢酸菌（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ａｃｅｔｉ）、通性嫌気性桿菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｉｌ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ、腸チフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ）、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、ゲルトネル菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ）、赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃｅｓｃｅｎｓ、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｖｕｌｇａｒｉｓ、コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ）、腸炎ビブリオ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ））、嫌気性細菌（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅ  ｓ  ｓｕｃｃｉｎｏｇｅｎｅｓ）、好気性球菌、球桿菌（黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、表皮ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、腐性ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ）、化膿レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、Ｂ群レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、緑色レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｒｉｄａｎｓ）、肺炎球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、大腸レンサ球菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ）、ヘシュウム菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ）、アビュウム菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ａｖｉｕｍ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、セレウス菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）、嫌気性球菌（Ｎｅｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、グラム陰性の無機栄養型細菌（Ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ  ｅｕｒｏｐａｅａ、Ｎｉｔｒｏｓｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｃｅａｎｉ、Ｎｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ  ｈａｍｂｕｒｇｅｎｓｉｓ、Ｎｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ  ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｎｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ  ｗｉｎｏｇｒａｄｓｋｙｉ、Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｉｏｏｘｙｄａｎｓ）、グラム陽性菌、グラム陽性球菌（グルタミン酸生産菌（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｌｕｔａｍｉｃｕｓ）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｐｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｌａｃｔｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｂｏｖｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｌａｃｔｉｓ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｉｍａｅ、Ｓｐｏｒｏｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｉｎｕｌｉｎｕｓ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｏｌｙｍｙｘａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍａｅｒｃｅｒａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｙｃｎｏｔｉｃｕｓ、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、酪酸菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｕｔｙｒｉｕｍ）、アセトン・ブタノール菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ａｃｅｔｏｂｕｔｙｌｉｃｕｍ）、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｓｐｏｒｏｇｅｎｅｓ、ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）、ウェルシー菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、破傷風菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ）、イオウ還元細菌（Ｄｅｓｕｌｆｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ  ｒｕｍｉｍｉｓ）、有胞子八連球菌（Ｓｐｏｒｏｓａｒｃｉｎａ  ｕｒｅａｅ）、放線菌に関連のある細菌（ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｆａｓｃｉａｎｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｒａｔｈａｙｉ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｅｐｅｄｏｎｉｃｕｍ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｓｉｄｉｏｓｕｍ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｆｌａｃｃｕｍｆａｃｉｅｎｓ、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｂｏｖｉｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ  ｆａｒｃｉｎｉｃａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｇｒｉｓｅｕｓ、Ｓｔｒｅｐ��ｏｍｙｃｅｓ  ｒａｍｅｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｅｎｅｚｕｅｌａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｏｍｉｙａｅｎｓｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ａｕｒｅｏｆａｃｉｅｎｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ａｖｅｌｌａｎｅｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｌｕｔｉａｎｕｓ）、好熱性菌（Ａｅｒｏｐｙｒｕｍ  ｐｅｒｎｉｘ、Ａｑｕｉｆｅｘ  ａｅｏｌｉｃｕｓ、Ａｒｃｈａｅｏｇｌｏｂｓ  ｆｕｌｇｉｄｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｅｒｍｏｌｅｏｖｏｒａｎｓ、Ｍｅｔｈａｎｏｃｏｃｃｕｓ  ｊａｎｎａｓｃｈｉｉ、Ｍｅｔｈａｎｏｔｈｅｒｍｕｓ  ｆｅｒｖｉｄｕｓ、Ｐｙｒｏｂａｃｕｌｕｍ  ａｅｒｏｐｈｉｌｕｍ、Ｐｙｒｏｂａｃｕｌｕｍ  ｃａｌｉｄｉｆｏｎｔｉｓ、Ｐｙｒｏｂａｃｕｌｕｍ  ｉｓｌａｎｄｉｃｕｍ、Ｐｙｒｏｂａｃｕｌｕｍ  ｏｇｕｎｉｅｎｓｅ、Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆｕｒｉｏｓｕｓ、Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｈｏｒｉｋｏｓｈｉｉ、Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｋｏｄａｋａｒａｅｎｓｉｓ、Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｈｉｎｋａｊ、Ｐｙｒｏｌｏｂｕｓ  ｆｕｍａｒｉｉ、Ｒｈｏｄｏｔｈｅｒｍｕｓ  ｏｂａｍｅｎｓｉｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ  ｒｅｃｔｉｖｉｒｇｕｌａ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ  ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ  ｓｈｉｂａｔａｅ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ  ｓｈｉｂａｔａｅ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ  ｓｏｌｆａｔａｒｉｃｕｓ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ  ｔｏｋｏｄａｉｉ、Ｔｈｅｒｍｏａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｔｈｅｒｍｏｃｏｃｃｕｓ  ｃｅｌｅｒ、Ｔｈｅｒｍｏｃｏｃｃｕｓ  ｋｏｄａｋａｒａｅｎｓｉｓ、Ｔｈｅｒｍｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｉｔｏｒａｌｉｓ、Ｔｈｅｒｍｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｒｏｆｕｎｄｕｓ、Ｔｈｅｒｍｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｔｒａｉｎ、Ｔｈｅｒｍｏｐｌａｓｍａ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｍ、Ｔｈｅｒｍｏｐｌａｓｍａ  ｖｏｌｃａｎｉｕｍ、Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇａ  ｍａｒｉｔｉｍａ、Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇａ  ｎｅａｐｏｌｉｔａｎａ、Ｔｈｅｒｍｕｓ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、メタン生成菌（Ｍｅｔｈａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｆｏｒｍｉｃｉｃｕｍ、Ｍｅｔｈａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｈｅｒｍｏａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｍ、Ｍｅｔｈａｎｏｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒ  ａｒｂｏｒｉｐｈｉｌｕｓ、Ｍｅｔｈａｎｏｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒ  ｒｕｍｉｎａｎｔｉｕｍ、Ｍｅｔｈａｎｏｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒ  ｓｍｉｔｈｉｉ、Ｍｅｔｈａｎｏｃｏｃｃｕｓ  ｊａｎｎａｓｃｈｉｉ、Ｍｅｔｈａｎｏｃｕｌｌｅｕｓ  ｃｈｉｋｕｇｏｅｎｓｉｓ、Ｍｅｔｈａｎｏｐｙｒｕｓ  ｋａｎｄｌｅｒｉ、Ｍｅｔｈａｎｏｓａｅｔａ  ｃｏｎｃｉｌｉｉ、Ｍｅｔｈａｎｏｓａｒｃｉｎａ  ｂａｒｋｅｒｉ、Ｍｅｔｈａｎｏｓａｒｃｉｎａ  ｍａｚｅｉｉ、Ｍｅｔｈａｎｏｓｐｈａｅｒａ  ｓｔａｄｍａｎｉａｅ、Ｍｅｔｈａｎｏｔｈｅｒ  ｍｏｂａｃｔｅｒ  ｔｈｅｒｍａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）、好塩性菌（Ｈａｌｏａｒｃｕｌａ  ｊａｐｏｎｉｃａ、Ｈａｌｏａｒｃｕｌａ  ｍａｒｉｓｍｏｒｔｕｉ、Ｈａｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｈａｌｏｂｉｕｍ、Ｈａｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓａｌｉｎａｒｉｕｍ、Ｈａｌｏｆｅｒａｘ  ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ、Ｈａｌｏｆｅｒａｘ  ｖ���ｌｃａｎｉｉ、Ｈａｌｏｍｏｎａｓ  ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ、Ｎａｔｒｏｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｈａｒａｏｎｉｓ、Ｔｅｔｒａｇｅｎｏｃｏｃｃｕｓ  ｈａｌｏｈｉｌａ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ）、好冷性菌（Ｃｏｌｗｅｌｌｉａ  ｐｓｙｃｈｒｅｒｙｔｈｒａｅａ、Ｍｏｒｉｔｅｌｌａ  ｍａｒｉｎａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ  ｂｅｎｔｈｉｃａ）、好圧性菌（Ｍｏｒｉｔｅｌｌａ  ｊａｐｏｎｉｃａ、Ｍｏｒｉｔｅｌｌａ  ｙａｙａｎｏｓｉｉ、Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｒｏｆｕｎｄｕｍ、Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ  ｂｅｎｔｈｉｃａ、Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ  ｖｉｏｌａｃｅａ、Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ  ｏｎｅｉｄｅｎｓｉｓ）、好酸性菌（Ａｅｒｏｐｙｒｕｍ  ｐｅｒｎｉｘ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ  ｓｏｌｆａｔａｒｉｃｕｓ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ  ｔｏｋｏｄａｉｉ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ  ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ、Ｔｈｅｒｍｏｐｌａｓｍａ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｍ、Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ、Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｙｃｌｏｈｅｐｔａｎｉｃｕｓ、Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ａｃｉｄｉａｎｕｓ  ｂｒｉｅｒｌｅｙｉ）、好アルカリ性菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐａｓｔｕｒｉｉ、Ｅｘｉｇｕｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｕｒａｎｔｉａｃｕｍ）、放射線耐性菌（Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓ  ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）、静岡県の油田で採取された石油代謝細菌ＨＤ−１株（ＣＯ２固定型石油合成・分解細菌）、ＴＫ−１２２株、および有機溶媒耐性細菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐｕｔｉｄａ  ＩＨ−２０００株）などの細菌、ケカビ属（Ｍｕｃｏｒ）、クモノスカビ属（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）、ユミケカビ属（Ａｂｓｉｄｉａ）、ユゲカビ属（Ｐｈｙｃｏｍｙｃｅｓ）、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルス・オリザ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）およびアスペルギルス・タマリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｔａｍａｒｉｉ）などのコウジカビ属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、アオカビ属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、アカカビ属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、ツチアオカビ属（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、モニリア属（Ｍｏｎｉｌｉａ）、ならびに酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）などの糸状菌の菌体または細胞などの微生物、またはエノキタケ（Ｆｌａｍｍｌｉｎａ  ｖｅｌｕｔｉｐｅｓ）、シイタケ（Ｌｅｎｔｉｎｕｌａ  ｅｄｏｄｅｓ）、ブナシメジ（Ｈｙｐｓｉｚｙｇｕｓ  ｍａｒｍｏｒｅｕｓ）、ハタケシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｄｅｃａｓｔｅｓ）、ナメコ（Ｐｈｏｌｉｏｔａ  ｎａｍｅｋｏ）、ヒトヨタケ（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ  ａｔｒａｍｅｎｔａｒｉｕｓ）、クリタケ（Ｎａｅｍａ���ｏｌｏｍａ  ｓｕｂｌａｔｅｒｉｔｉｕｍ）、ホコリタケ（Ｌｙｃｏｐｅｒｄｏｎ  ｇｅｍｍａｔｕｍ）、マンネンタケ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）、スエヒロタケ（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｃｏｍｍｕｎｅ）、ヒラタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｏｓｔｒｅａｔｕｓ）、マイタケ（Ｇｒｉｆｏｌａ  ｆｒｏｎｄｏｓａ）、マツタケ（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ  ｍａｔｓｕｔａｋｅ）、ヤナギマツタケ（Ａｇｒｏｃｙｂｅ  ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）、カワラタケ（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ  ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）、ヌメリイグチ（Ｓｕｉｌｌｕｓ  ｌｕｔｅｕｓ）、ハナイグチ（Ｓｕｉｌｌｕｓ  ｇｒｅｖｉｌｌｅｉ）、アミハナイグチ（Ｂｏｌｅｔｉｎｕｓ  ｃａｖｉｐｅｓ）、オンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｓｈｉｍｅｊｉ）などの菌類、ドクゼリモドキ（Ａｍｍｉ  ｍａｊｕｓ）、タマネギ（Ａｌｌｉｕｍ  ｃｅｐａ）、ニンニク（Ａｌｌｉｕｍ  ｓａｔｉｖｕｍ）、セロリ（Ａｐｉｕｍ  ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ）、アスパラガス（Ａｓｐａｒａｇｕｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、テンサイ（Ｂｅｔａ  ｖｕｌｇａｒｉｓ）、カリフラワー（Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｏｌｅｒａｃｅａ  ｖａｒ．ｂｏｔｒｙｔｉｓ）、メキャベツ（Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｏｌｅｒａｃｅａ  ｖａｒ．ｇｅｍｍｉｆｅｒａ）、キャベツ（Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｏｌｅｒａｃｅａ  ｖａｒ．ｃａｐｉｔａｔａ）、セイヨウアブラナ（Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｎａｐｕｓ）、ヒメウイキョウ（Ｃａｒｕｍ  ｃａｒｖｉ）、キク（Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ  ｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ）、ドクニンジン（Ｃｏｎｉｕｍ  ｍａｃｕｌａｔｕｍ）、オウレン（Ｃｏｐｔｉｓ  ｊａｐｏｎｉｃａ）、キクニガナ（Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ  ｉｎｔｙｂｕｓ）、カザリカボチャ（Ｃｕｒｃｕｒｂｉｔａ  ｐｅｐｏ）、アメリカチョウセンアサガオ（Ｄａｔｕｒａ  ｍｅｔｅｌｏｉｄｅｓ）、ニンジン（Ｄａｕｃｕｓ  ｃａｒｏｔａ）、カーネーション（Ｄｉａｎｔｈｕｓ  ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌｕｓ）、ソバ（Ｆａｇｏｐｙｒｕｍ  ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ）、ウイキョウ（Ｆｏｅｎｉｃｕｌｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ）、イチゴ（Ｆｒａｇａｒｉａ  ｃｈｉｌｏｅｎｓｉｓ）、ダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｍａｘ）、ヒヤシンス（Ｈｙａｃｉｎｔｈｕｓ  ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ）、サツマイモ（Ｉｐｏｍｏｅａ  ｂａｔａｔａｓ）、レタス（Ｌａｃｔｕｃａ  ｓａｔｉｖａ）、セイヨウミヤコグサ（Ｌｏｔｕｓ  ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔｕｓ）、ミヤコグサ（Ｌｏｔｕｓ  ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）、トマト（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ  ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ）、ムラサキウマゴヤシ（Ｍｅｄｉｃａｇｏ  ｓａｔｉｖａ）、タバコ（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ  ｔａｂａｃｕｍ）、イネ（Ｏｒｙｚａ  ｓａｔｉｖａ）、パセリ（Ｐｅｔｒｏｓｅｌｉｎｕｍ  ｈｏｒｔｅｎｓｅ）、エンドウ（Ｐｉｓｕｍ  ｓａｔｉｖｕｍ）、セイヨウバラ（Ｒｏｓａ  ｈｙｂｒｉｄａ）、ナス（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａ）、ジャガイモ（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）、コムギ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ  ａｅｓｔｉｖｕｍ）、トウモロコシ（Ｚｅａ  ｍａｙｓ）などの有用植物、キンギョソウ（Ａｎｔｉｒｒｈｉｎｕｍ  ｍａｊｕｓ）、シロイヌナズナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ  ｔｈａｌｉａｎａ）、クロトン（Ｃ���ｄｉａｅｕｍ  ｖａｒｉｅｇａｔｕｍ）、シクラメン（Ｃｙｃｌａｍｅｎ  ｐｅｒｓｉｃｕｍ）、ポインセチア（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ  ｐｕｌｃｈｅｒｒｉｍａ）、ガーベラ（Ｇｅｒｂｅｒａ  ｊａｍｅｓｏｎｉｉ）、ヒマワリ（Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓ  ａｎｎｕｕｓ）、ゼラニウム（Ｐｅｌａｒｇｏｎｉｕｍ  ｈｏｒｔｏｒｕｍ）、ペチュニア（Ｐｅｔｕｎｉａ  ｈｙｂｒｉｄａ）、セントポーリア（Ｓａｉｎｔｐａｕｌｉａ  ｉｏｎａｔｈａ）、セイヨウタンポポ（Ｔａｒａｘａｃｕｍ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）、トレニア（Ｔｏｒｅｎｉａ  ｆｏｕｒｎｉｅｒｉ）、シロツメクサ（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ  ｒｅｐｅｎｓ）、シンビジウム属（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ）などの観賞植物、インドセンダン（Ａｚａｄｉｒａｃｈｔａ  ｉｎｄｉｃａ）、ミカン属（Ｃｉｔｒｕｓ）、アラビアコーヒーノキ（Ｃｏｆｆｅａ  ａｒａｂｉｃａ）、ユーカリ属（Ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓ）、パラゴムノキ（Ｈｅｖｅａ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、セイヨウヒイラギ（Ｉｌｅｘ  ａｑｕｉｆｏｌｉｕｍ）、カラタチ（Ｐｏｎｃｉｒｕｓ  ｔｒｉｆｏｌｉａｔａ）、アーモンド（Ｐｒｕｎｕｓ  ａｍｙｇｄａｌｕｓ）、カナダポプラ（Ｐｏｐｕｌｕｓ  ｃａｎａｄｅｎｓｉｓ）、コノテガシワ（Ｂｉｏｔａ  ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ）、スギ（Ｃｒｙｐｔｏｍｅｒｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）、ドイツトウヒ（Ｐｉｃｅａ  ａｂｉｅｓ）、マツ属（Ｐｉｎｕｓ）、ブドウ（Ｖｉｔｉｓ  ｖｉｎｉｆｅｒａ）、リンゴ（Ｍａｌｕｓ  ｐｕｍｉｌａ）、アンズ（Ｐｒｕｎｕｓ  ａｒｍｅｎｉａｃａ）、カキ（Ｄｉｏｓｐｙｒｏｓ  ｋａｋｉ）、イチジク（Ｆｉｃｕｓ  ｃａｒｉｃａ）、ニホングリ（Ｃａｓｔａｎｅａ  ｃｒｅｎａｔａ）などの有用樹木などの種子、葉部、茎頂部、茎部、根部、葯、花糸、成長点（頂芽、側芽、茎頂、根端）、腋芽、りん片、子房、胚珠、胚、花粉、不定芽、不定胚、不定根などの植物組織もしくは植物細胞などが挙げられる。
本発明の生物培養装置は、前記したような生物を培養する工程を含む広範な分野への適用が可能であり、例えば、食品検査、水質検査、土壌検査、微生物の自然界からの分離、無菌苗の生産、食中毒検査、器具・機械などの細菌検査、水産物のウイルス検査、畜産物のウイルス検査、農産物のウイルス検査、飲料水検査、疫学調査、食料生産、酸素生産、アミノ酸・ビタミン類・酵素類の生産、抗生物質生産などに用いる生物の培養に適用し得る。
なお、本発明の生物培養装置は、本発明の効果からみて無菌条件下で種々の操作を行なうのが好ましく、無菌状態で密封して保存されていることが好ましい。
また、もう１の実施形態において、本発明の生物培養装置は、一旦前述のように培養基を保持させた微多孔質体から水分を実質的に除去し、生物の培養に使用する前にその除去した量の水分を添加して再生させることもできる。微多孔質体からの水分の除去は加熱、減圧、凍結乾燥など通常行われている方法を用いることができる。なお、ここで培養基の水分を実質的に除去するとは、培養基を保持した微多孔質体を加熱乾燥するか、または減圧条件に付す、好ましくは凍結乾燥に付して培養基中の大部分、好ましくは微多孔質体に保持される培養基重量の７０〜１００％の水分を除去した状態をいう。
さらに、もう１の実施形態において、本発明の生物培養装置は、前記の培養基を保持した１またはそれを超える微多孔質体と、該微多孔質体を密閉可能な状態で保持する保持手段とを含む生物培養装置とすることもできる。この実施形態の生物培養装置としては、例えば、図２に示すような培養基を保持した複数のディスク型の微多孔質体１とそれを密閉可能に保持し得る保持体３からなるラック型の生物培養装置が挙げられる。このラック型の生物培養装置は、使用する前または培養する期間は、微多孔質体１を層状に保持できるため、空間を有効に利用することができる。また、図３に示すような培養基を保持した複数のディスク型の微多孔質体１を密閉可能に保持し得るパレット型の生物培養装置ともし得る。このパレット型の生物培養装置においては、微多孔質体１は取り外しが可能であり、蓋を閉めることによって各々の区画内に独立して収容することができ、それによって、複数の種類の異なる生物や培地組成などの培養条件を変化させた状態で比較しつつ培養することができる。
また、本発明の生物培養装置は、図４に示すような微多孔質体がキャップ４によって密封される携帯性ペン型の生物培養装置とすることもできる。この携帯性ペン型の生物培養装置は、外部での生物の採取に適し、採取時にキャップを外して、培養基を保持した微多孔質体の先端部分を目的とする検体に接触させることにより生物を採取することができる。その後、再度キャップを被せて研究室などに持ち帰り、キャップを外してより規模の大きな培地などに微多孔質体の先端をストリークするなどして生物を移し、そこで培養することができる。この態様の生物培養装置でも、微多孔質体１は取り外しが可能であり、採取後に取り外して新たな微多孔質体を装着することが可能である。
また、本発明は、前記の生物培養装置を用いて微生物を定性的または定量的に検査する方法も提供する。最初に、前記の微多孔質体の毛細管力によって培養基を保持させた微多孔質体を滅菌するか、あるいは、予め滅菌した微多孔質体に予め滅菌した培養基を無菌条件下で保持させる。ついで、目的とする検体、すなわち、培養する微生物が存在する食品、河川水、海水、土壌、器具、機械、飲料水、水産物、畜産物、農産物、人体試料、ならびに動物および植物試料などの物体を該微多孔質体と直接接触させるか、または綿棒または白金針などを用いて該物体から分離した微生物などの生物を該微多孔質体に間接的に付着させる。あるいは、その綿棒または白金針などに付着した生物を水に懸濁し、その一定量を該微多孔質体に平板する。その後、目的の生物が付着した微多孔質体をかかる生物に適した条件下で一定の期間培養して、該微多孔質体の表面上に形成されたコロニーまたは細胞塊などを目視または実体顕微鏡などの下で観察または計数する。観察または計数する際には、所望により種々の色素を用いて生物を染色することもできる。
また、本発明の検査方法では、微多孔質体に保持させた培養基のみで培養を行なうため、培養する継続期間は−５０〜３００℃にて６ヶ月未満、好ましくは３ヶ月未満、より好ましくは３０日未満である。
また、本発明は、前記の生物培養装置を用いて生物を比較的長期間にわたって培養する方法も提供する。この培養方法では、前記の検査方法と同様に微多孔質体に目的の生物を付着させた後、かかる生物に適した条件下で培養し、一定の間隔で一定量の培養基を外部から補充する。添加する培養基の量は、微多孔質体の重量減少などを測定することによって求めることができる。
上述した本発明の培養方法では、順次、一定量の培養基を補充するため、原則的には永続的な培養が可能であるが、培養する継続期間は、対象となる生物にもよるが、通常−５０〜３００℃にて２年未満、好ましくは１年未満、より好ましくは６ヶ月未満である。
【実施例】  本発明に係る生物培養装置を用いて生物細胞の培養が可能であることを明確にするために、以下の装置および試料を用いて実験を行った。
植物組織の培養実験
（１）生物培養装置
村上粘土（新潟県産）にアルミナ（Ａｌ２Ｏ３）を５０重量％含有させて、１２５０℃で２４時間焼成させることによって製造した外径２．１ｃｍ、内径１．５ｃｍ、高さ６．５ｃｍの円筒型の微多孔質体（河鈴窯業合資会社製、製造番号ＣＰ０６５２１１５ＫＳ、水分保持率１８．０３％（ｗｔ／ｗｔ）、空隙率３６．８０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、嵩密度２．０４１（ｇ／ｃｍ３））を１Ｌ容量のビーカーに入れてその開口部をアルミホイルで密閉し、１６１℃にて２時間乾熱滅菌した。一方、ナフタレン酢酸（ＮＡＡ）およびベンジルアデニン（ＢＡ）を各々２ｐｐｍ含有する脱分化用ＭＳ液体培養基をオートクレーブで滅菌し、クリーンベンチ内で、前記の滅菌した微多孔質体を十分な量の該培養基に浸漬した。６時間放置して微多孔質体に培養基を保持させた後に、微多孔質体を培養基から取出して、表面に付着した余分な培養基を除去し、上記と同様の条件で乾熱滅菌した培養試験管に入れて生物培養装置−１とした。
ＰＣＴＧ  Ｎｏ．１土（東濃碍子株式会社）を１３００℃にて４８時間焼成させることによって製造した、直径８．０ｃｍ、厚さ０．８ｃｍのディスク型の微多孔質体（東濃碍子株式会社製、製造番号ＣＤ００８８０００  ＴＧ（Ｔ１）、水分保持率８．９５％（ｗｔ／ｗｔ）、空隙率１８．２０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、嵩密度２．０３ｇ／ｃｍ３）））に、前記と同様にしてＭＳ培養基を保持させ、ペトリ皿に入れて生物培養装置−２とした。
（２）供試材料
供試材料として、シロイヌナズナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ  ｔｈａｌｉａｎａ）ｃｏｌｕｍｂｉａの幼植物体および糸状菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）、ならびに細菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）を用いた。シロイヌナズナ幼植物体（５ｍｍ）は、流水で洗浄した後、７０％エタノール中に数秒間浸漬し、５％次亜塩素酸ナトリウム水溶液に１０分間浸漬して滅菌処理したリーフピースを用いた。
（３）培養
無菌条件下で円筒型の生物培養装置−１の上端部にシロイヌナズナのリーフピースを置床し、試験管の開口部を再度密閉して２６℃、３０００ｌｕｘ連続照明下で培養した。また、同様にして円筒型の生物培養装置−１の上端部に糸状菌を植菌し、同条件下で培養した。また、糸状菌はディスク型の生物培養装置−２の中央部にも植菌し、同条件下で培養した。さらに、細菌である枯草菌の懸濁液をディスク型の生物培養装置−２の中央部に塗布し、同条件下で培養した。
（４）結果
シロイヌナズナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ  ｔｈａｌｉａｎａ）ｃｏｌｕｍｂｉａリーフピース
上記のようにして生物培養装置−１に置床したシロイヌナズナ・リーフピースのカルス化の有無およびカルスの直径を表１および２に示す。また、培養０、１０および２１日後の状態を、各々、図５〜７に示す。
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糸状菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）菌叢
上記のようにして生物培養装置−１および−２に植菌した糸状菌の菌叢拡大の推移を表３および４に示す。また、円筒型の生物培養装置−１において培養した糸状菌の培養４、１０および１３日後の状態を、各々、図８〜１０に、ディスク型の生物培養装置−２において培養した糸状菌の培養０、１３、２１および２４日後の状態を、各々、図１１〜１４に示す。
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細菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）菌叢
上記のようにして生物培養装置−２に塗布した細菌の菌叢拡大の推移を表５に示す。また、ディスク型の生物培養装置−２において培養した細菌の培養６および１３日後の状態を、各々、図１５および１６に示す。
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これらの結果より、本発明の生物培養装置により、実際に、生物培養装置の形状に拘束されることなく、植物を脱分化させることができ、また、糸状菌および細菌を増殖させて菌叢を目視で検査できることが確認された。
産業上の利用分野
簡便に調製することができ、長期間にわたって保存しておくことができ、温度や圧力、使用する培養基の種類およびｐＨや培養する生物の種類を制限することなく、滅菌して洗浄した後に再利用が可能な生物培養装置を提供できる。また、表面上の微生物のコロニーなどを計数することにより正確に検査することができ、また、培養した植物などを微多孔質体から無傷で分離することができる。さらに、宇宙空間などでの微生物ないし植物などの生物の培養ないし生育に関しても、安全性が高く、調製する際の酸素消費や重量増加に伴うコスト増を抑えることができ、無重力条件下でも培養基が微多孔質体から遊離することなく生物を好適に培養ないし生育することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【手続補正書】
【提出日】平成17年3月14日(2005.3.14)
【手続補正００１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【書類名】特許請求の範囲
【請求項１】培養基を保持した微多孔質体を含み、ここに該微多孔質体が空隙径３μｍ以下の非金属無機質固体材料の焼成体であって、その表面上でのみ、動物もしくは植物の組織もしくは細胞または微生物を培養する生物培養装置。
【請求項２】微多孔質体が、該微多孔質体に対して５〜５０％（ｗｔ／ｗｔ）の培養基を保持する請求項１記載の生物培養装置。
【請求項３】微多孔質体が有する毛細管力により保持される量の培養基を保持する請求項１または２記載の生物培養装置。
【請求項４】土壌を含まない請求項１〜３いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項５】微多孔質体の空隙径が２μｍ以下である請求項１〜４いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項６】微多孔質体の空隙率が１０〜５０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）である請求項１〜５いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項７】７〜２５％（ｗｔ／ｗｔ）の培養基を保持する請求項１〜６いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項８】空隙率が１５〜４０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）である請求項１〜７いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項９】培養基を保持した微多孔質体を含み、ここに該微多孔質体が連続気泡型プラスチックフォームであって、１０〜３００％（ｗｔ／ｗｔ）の培養基を保持し、その表面上でのみ、植物の組織もしくは細胞または微生物を培養する生物培養装置。
【請求項１０】空隙率が１０〜８０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）である請求項９記載の生物培養装置。
【請求項１１】無菌状態に密封した請求項１〜８いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項１２】（削除）
【請求項１３】微生物が細菌、酵母または糸状菌である請求項１〜８いずれか１項記載の生物培養装置。
【請求項１４】食品検査用である請求項１３記載の生物培養装置。
【請求項１５】（削除）
【請求項１６】保持した培養基を乾燥させて培養基中の水分を実質的に除去した微多孔質体を含み、ここに該微多孔質体が空隙径３μｍ以下の非金属無機質固体材料の焼成体であって、培養する前に乾燥させた量の水分を添加した微多孔質体の表面上でのみ動物もしくは植物の組織もしくは細胞または微生物を培養する生物培養装置。
【請求項１７】培養基を保持した１またはそれを超える微多孔質体と、該微多孔質体を密閉可能な状態で保持する保持手段とを含み、ここに該微多孔質体が空隙径３μｍ以下の非金属無機質固体材料の焼成体であって、その表面上でのみ動物もしくは植物の組織もしくは細胞または微生物を培養する生物培養装置。
【請求項１８】（１）微多孔質体の毛細管力によって培養基を保持させた微多孔質体を滅菌し、あるいは、予め滅菌した微多孔質体に予め滅菌した培養基を無菌条件下で保持させ、ここに該微多孔質体は空隙径３μｍ以下であり；
（２）検体を該微多孔質体と接触させ；ついで
（３）該微多孔質体を一定条件下で一定期間培養して微生物を該微多孔質体の表面上でのみ培養した後に、該微多孔質体上に形成されたコロニーを計数することを含む微生物の検査方法。
【請求項１９】工程（３）の培養を、−５０〜３００℃にて６ヶ月未満行う請求項１８記載の検査方法。
【請求項２０】微生物が細菌、酵母または糸状菌である請求項１８または１９記載の検査方法。
【請求項２１】食品に存在する微生物を検査する請求項１８〜２０いずれか１項記載の検査方法。
【請求項２２】（１）微多孔質体の毛細管力によって培養基を保持させた微多孔質体を滅菌し、あるいは、予め滅菌した微多孔質体に予め滅菌した培養基を無菌条件下で保持させ、ここに該微多孔質体は空隙径３μｍ以下の非金属無機質固体材料の焼成体であり；
（２）動物もしくは植物の組織もしくは細胞または微生物を該微多孔質体の表面に付着させ；ついで
（３）該微多孔質体を一定条件下で一定期間培養して動物もしくは植物の組織もしくは細胞または微生物を該微多孔質体の表面上でのみ培養した後に、該微多孔質体が保持する培養基の量が該微多孔質体の毛細管力により保持される量となるように、該微多孔質体に培養基を順次補充することを含む生物培養方法。
【請求項２３】（削除）
【請求項２４】微生物が細菌、酵母または糸状菌である請求項２２記載の生物培養方法。




【国際調査報告】
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