(57)【要約】インスリン抵抗性の改善、内臓脂肪型肥満、２型糖尿病、高脂血症、高血圧症などの生活習慣病の予防及び／又は改善に有効であるＰＰＡＲγリガンド活性を有する化合物であるグラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、ヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物を含有し、健康食品や保険機能食品などの飲食品、医薬品、医薬部外品又は化粧品などに利用することができる生活習慣病予防及び／又は改善用の組成物、あるいは体重増加抑制及び／又は改善用の組成物を提供することを課題とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体を溶解している油脂を含有し、かつ該化合物をその総量として約０．０１〜３０重量％含有する生活習慣病予防及び／又は改善用の油脂加工組成物。
【請求項２】
グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体を溶解している油脂を含有し、かつ該化合物をその総量として約０．０１〜３０重量％含有する体重増加抑制及び／又は改善用の油脂加工組成物。
【請求項３】
グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体を溶解している油脂を含有し、かつ該化合物をその総量として約０．０１〜３０重量％含有するインスリン抵抗性改善用の油脂加工組成物。
【請求項４】
グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体を、その総量として成人一人一日当たり約０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重を摂取できる量を含む請求の範囲第１項〜第３項のいずれか１項に記載の油脂加工組成物。
【請求項５】
油脂が中鎖脂肪酸トリグリセリド及び／又は部分グリセリドを含むグリセリン脂肪酸エステルである、請求の範囲第１項〜第４項のいずれか１項記載の油脂加工組成物。
【請求項６】
油脂が中鎖脂肪酸トリグリセリドを約５０重量％以上含むグリセリン脂肪酸エステルである、請求の範囲第１項〜第５項のいずれか１項記載の油脂加工組成物。
【請求項７】
油脂が部分グリセリドを約５０重量％以上含むグリセリン脂肪酸エステルである、請求の範囲第１項〜第５項のいずれか１項記載の油脂加工組成物。
【請求項８】
生活習慣病が内臓脂肪型肥満、２型糖尿病、高脂血症、および高血圧症からなる群より選ばれた少なくとも１種である、請求の範囲第１項記載の油脂加工組成物。
【請求項９】
生活習慣病が内臓脂肪型肥満及び／又は２型糖尿病である、請求の範囲第１項記載の油脂加工組成物。
【請求項１０】
飲食用である請求の範囲第１項〜第９項のいずれか１項記載の油脂加工組成物。
【請求項１１】
医薬用である請求の範囲第１項１〜第９項のいずれか１項記載の油脂加工組成物。
【請求項１２】
美容用である請求の範囲第１項〜第９項のいずれか１項記載の油脂加工組成物。
【請求項１３】
請求の範囲第１項〜第１２項のいずれか１項記載の油脂加工組成物を封入してなるソフトカプセル製剤。
【請求項１４】
グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体を、その総量として、カプセル当たりに約０．０１〜１５０ｍｇ含む請求の範囲第１３項記載のソフトカプセル製剤。
【請求項１５】
グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体が、グリキルリーザ・グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）由来である請求の範囲第１項〜第１４項のいずれか１項記載の油脂加工組成物。
【請求項１６】
グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体を、油脂に溶解することを含む、請求の範囲第１項ないし第１５項いずれか記載の組成物の製造方法。
【請求項１７】
有効量の請求の範囲第１項ないし第１５項いずれか記載の組成物を、必要のある哺乳動物対象に投与することを含む、哺乳動物の生活習慣病を予防及び／又は改善するための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの飲食品、又は医薬品、医薬部外品、化粧品などに使用することができる生活習慣病予防及び／又は改善用の油脂加工組成物、及び／又は体重増加抑制及び／又は改善用の油脂加工組成物に関する。
【背景技術】  近年、食生活の欧米化や運動不足など生活環境の悪化による肥満者の数は増大し、肥満の増加に伴う生活習慣病が大きな社会問題として取り上げられるようになった。ここでの生活習慣病としては内臓脂肪型肥満、２型糖尿病、高脂血症、高血圧症などが挙げられ、これらはやがて動脈硬化症などの血管病を引き起こすマルチプル・リスク・ファクター症候群である。そこで肥満による体重増加を抑制し、これらの生活習慣病を予防及び／又は改善する効果を有する組成物が望まれており、その組成物の形態としては、日常的に摂取することができる健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの飲食品、又は医薬品、医薬部外品、化粧品などが望まれている。
マルチプル・リスク・ファクター症候群は、ＲｅａｖｅｎによるシンドロームＸ（Ｄｉａｂｅｔｅｓ，３７，１５９５〜１６０７，１９８８）、Ｋａｐｌａｎによる死の四重奏（Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１４９，１５１４〜１５２０，１９８９）、ＤｅＦｒｏｎｚｏによるインスリン抵抗性症候群（Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ，１４，１７３〜１９４，１９９１）、松澤による内臓脂肪症候群（Ｄｉａｂｅｔｅｓ／Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，１３，３〜１３，１９９７）と同じ病態概念であるメタボリックシンドロームと考えられ、これら症候群に共通する原因因子はインスリン抵抗性であると考えられている。
インスリン抵抗性の改善薬であるトログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾンなどのチアゾリジン誘導体は、核内レセプターであるペルオキシソーム増殖剤応答性受容体γ（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  γ：ＰＰＡＲγ）のリガンドとして働き、２型糖尿病患者におけるインスリン抵抗性を改善し、血糖低下作用を示すことが明らかにされている。さらに、これらチアゾリジン誘導体は、皮下脂肪を増加させるが内臓脂肪を低減させること、血中遊離脂肪酸低下作用、血圧低下作用、抗炎症作用などを示すことが明らかにされている（Ｍａｒｔｅｎｓ，Ｆ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ，Ｄｒｕｇｓ，６２，１４６３〜１４８０，２００２）。すなわち、ＰＰＡＲγリガンド活性を有する化合物は、インスリン抵抗性を改善し、内臓脂肪型肥満、２型糖尿病、高脂血症、高血圧症などの生活習慣病の予防及び／又は改善に有効である。
甘草はマメ科カンゾウ属（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ属）の植物であり、食用や医薬用（生薬）として利用されており、主な品種としてグリキルリーザ・グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ．ｇｌａｂｒａ）、Ｇ．ウラレンシス（Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ）、Ｇ．インフラータ（Ｇ．ｉｎｆｌａｔａ）などが挙げられる。いずれの品種にも親水性成分であるグリチルリチン（グリチルリチン酸）は含まれているが、疎水性成分のフラボノイドは品種によって特異的な化合物が含まれている。この品種特異的なフラボノイドは、甘草の品種同定に利用されることもある。
甘草から得られる抽出物のうち、甘草フラボノイドを多く含み、グリチルリチン含量が極微量である甘草疎水性抽出物は、マルチプル・リスク・ファクター症候群の予防及び／又は改善に有用であることが見出されている（ＷＯ０２／４７６９９）。
一方、甘草疎水性抽出物に含まれる甘草疎水性フラボノイドは、水にほとんど溶解せず、また、有機溶媒抽出物のままでは固結し易く、着色の進行も早いなど、経時的変化が著しいという性質があるため、利用し難い。それを解決するために、甘草疎水性フラボノイドを中鎖脂肪酸トリグリセリドに溶解し、その甘草疎水性フラボノイド製剤を酸化防止剤、抗菌剤、酵素阻害剤、着色料、抗腫瘍剤、抗アレルギー剤、抗ウイルス剤として利用している（特許２７９４４３３号）。しかし、特許２７９４４３３号では、化合物の限定がなく、また、生活習慣病の予防及び／又は改善剤としての利用、さらに体重増加抑制及び／又は改善作用は知られていない。
上記に鑑み、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン及びヒスパグラブリジンＢは、ＰＰＡＲγリガンド活性を有しているため、これらはインスリン抵抗性を改善し、内臓脂肪型肥満、２型糖尿病、高脂血症、高血圧症などの生活習慣病の予防及び／又は改善に有効である。しかし、該化合物は、水への溶解性や安定性が良くないことから、飲食品や医薬品などへの利用が困難であるという欠点があった。よって、本発明は、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物を含有し、健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの飲食品、又は医薬品、医薬部外品、化粧品などに利用することができる生活習慣病予防及び／又は改善用の組成物、及び／又は体重増加抑制及び／又は改善用の組成物を提供することを課題とする。
【発明の開示】
本発明者らは、上記実情に鑑み鋭意研究を行った結果、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢまたはその塩、エステルもしくは配糖体をある種の油脂に特異的に溶解することにより、これらの化合物の安定性が向上し、また、飲食品、医薬品、医薬部外品、化粧品などへの加工性も向上することを見出し、さらに過栄養下での体重増加を抑制する作用を有することを見出し、本発明を完成させるに至った。
すなわち、本発明の第１側面は、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体を溶解している油脂を含有することを特徴とする生活習慣病予防及び／又は改善用の油脂加工組成物、本発明の第２はグラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体を溶解している油脂を含有することを特徴とする体重増加抑制及び／又は改善用の油脂加工組成物に関する。
【発明を実施するための最良の形態】  以下に、本発明の実施の形態を詳しく説明する。
本発明の生活習慣病予防及び／又は改善用の油脂加工組成物、さらに体重増加抑制及び／又は改善用の油脂加工組成物は、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物またはその塩、エステルもしくは配糖体を溶解している油脂を含有することを特徴としている。ここで述べる油脂加工組成物とは、該化合物を溶解した油脂、及びその油脂を含有してなる飲食用、医薬用、医薬部外用、化粧用等の組成物である。すなわち、該化合物を油脂に溶解した組成物、及びこれに他の対象物を混合してなる組成物、さらにはこれを加工してなる飲食用、医薬用、医薬部外用、化粧用等の組成物のいずれも油脂加工組成物に含まれる。該化合物の中でも、グラブリジンを含有し、かつグラブレン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物を含有することが好ましい。さらに、グラブリジン及びグラブレンを含有し、かつグラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物を含有することがより好ましい。とりわけ、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢを全て含有していることが最も好ましい。その総量としては、油脂加工組成物中に約０．０１〜３０重量％含有していることが好ましく、さらに約０．１〜３０重量％含有していることがより好ましく、とりわけ約１〜１０重量％含有していることが特に好ましい。約３０重量％以上では該化合物を油脂に溶解できない場合がある。また、約０．０１重量％以下では本発明の効果が充分に発揮されない場合がある。該化合物は、トログリタゾンやピオグリタゾンなどのチアゾリジン誘導体と同様に、ＰＰＡＲγリガンド活性を有していることから、インスリン抵抗性を改善し、メタボリックシンドロームを構成する内臓脂肪型肥満、２型糖尿病、高脂血症、高血圧症などの生活習慣病の予防及び／又は改善に有効である。
また本発明の油脂加工組成物に含まれるグラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢは、高脂肪・高糖分食の摂取等の過栄養が引き起こす肥満による体重増加の抑制及び／又は改善に有効である。
本発明で使用されるグラブリジン（ｇｌａｂｒｉｄｉｎ）、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン（３’−ｈｙｄｒｏｘｙｌ−４’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌｇｌａｂｒｉｄｉｎ）、４’−Ｏ−メチルグラブリジン（４’−Ｏ−ｍｅｔｈｙｌｇｌａｂｒｉｄｉｎ）、ヒスパグラブリジンＢ（ｈｙｓｐａｇｌａｂｒｉｄｉｎ  Ｂ）はイソフラバン（ｉｓｏｆｌａｖａｎ）に分類されるフラボノイドであり、下記一般式（１）にて表される化合物である。
2005011672.tif 000002
〔グラブリジンはＲ１＝Ｈ、Ｒ２＝ＯＨ、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジンはＲ１＝ＯＨ、Ｒ２＝ＯＣＨ３、４’−Ｏ−メチルグラブリジンはＲ１＝Ｈ、Ｒ２＝ＯＣＨ３、ヒスパグラブリジンＢはＲ１〜Ｒ２が−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ３）２−Ｏ−で六員環を構成する。〕
本発明で使用されるグラブレン（ｇｌａｂｒｅｎｅ）は、イソフラブ−３−エン（ｉｓｏｆｌａｖ−３−ｅｎｅ）に分類されるフラボノイドであり、下記式（２）で表される化合物である。
2005011672.tif 000003
本発明で使用されるグラブロール（ｇｌａｂｒｏｌ）は、フラバノン（ｆｌａｖａｎｏｎｅ）に分類されるフラボノイドであり、下記式（３）で表される化合物である。
2005011672.tif 000004
グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢは、甘草の中でもグリキリーザ・グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）に特異的に含まれる成分であり、他品種にはほとんど含まれていない。ただし、Ｇ．グラブラと他品種との雑種においては含まれる場合もある。該化合物は、ＯＤＳなどの逆相カラムを用いたＨＰＬＣ分析により、他のフラボノイド成分と分離して検出、定量することができる。上記化合物の脂肪酸エステルなどのエステルもまた、本発明で好適に使用しうる。該エステルは、任意の有機または無機酸とで形成することができる。本発明の目的のために好適には、飲食用、医薬用または美容用に好適な酸を使用しうる。好ましくは脂肪酸を使用しうる。該脂肪酸は限定しないが、オレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸などの長鎖脂肪酸、および酢酸、酪酸などの短または中鎖脂肪酸が含まれる。
上記化合物の塩もまた、本発明で好適に使用しうる。上記化合物の溶液を、好適な飲食用、医薬用または美容用に許容される酸、例えば塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、シュウ酸、クエン酸、酒石酸、炭酸、またはリン酸の溶液と混合することによって形成しうる。さらに、上記化合物が酸性部分を有する場合、好適な飲食用、医薬用または美容用に許容されるその塩は、アルカリ金属塩、例えばナトリウム、カリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムまたはマグネシウム塩；および好適な有機配位子、例えば第四級アンモニウム塩とで形成される塩を含む。
上記化合物の１または２以上の水酸基を介して糖部分に結合されたその配糖体も、本発明で好適に使用しうる。該配糖体の糖部分は、任意の糖であり得る。該糖部分は限定されないが、単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類および多糖類を含みうる。
上記化合物は、少なくとも１つの不斉中心を有する場合、それらはエナンチオマーとして存在し得る。上記化合物が少なくとも２以上の不斉中心を有する場合、それらは、ジアステレオ異性体として存在し得る。そのような異性体およびその任意の割合の混合物は、本発明の範囲内に包含される。上記化合物は必要により置換されていてもよい。
本発明において、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢを得る方法は、特に限定されないが、Ｇ．グラブラ種の甘草より得ることができる。該化合物を甘草から得る場合、その方法は特に限定されないが、エタノール、酢酸エチル、アセトンなどの有機溶媒による抽出で得られる甘草疎水性抽出物に該化合物は含まれ、抽出物のまま使用してもよいが、さらにカラム処理、脱臭処理、脱色処理などにより粗精製又は精製したものを使用してもよい。勿論、該化合物は、その他植物等の天然由来、化学合成あるいは培養細胞などにより生合成した化合物のいずれも本発明において使用することができる。また、該化合物は、精製したものを使用することができるが、飲食品、医薬品、医薬部外品、化粧品などとして不適当な不純物を含有しない限り粗精製したものを使用することもできる。
本発明で使用される油脂は、中鎖脂肪酸トリグリセリドを含むグリセリン脂肪酸エステルであって、好ましくは中鎖脂肪酸トリグリセリドを約５０重量％以上含むグリセリン脂肪酸エステル、より好ましくは中鎖脂肪酸トリグリセリドを約７０重量％以上含むグリセリン脂肪酸エステルである。ここでの中鎖脂肪酸トリグリセリドは、炭素原子数約６〜１２の脂肪酸を構成脂肪酸とし、その脂肪酸の構成比率は特に限定されないが、炭素原子数約８〜１０の脂肪酸の構成比率は約５０重量％以上が好ましく、７約０重量％以上がより好ましい。とりわけ、約２０℃での比重が約０．９４〜０．９６、約２０℃での粘度が約２３〜２８ｃＰの中鎖脂肪酸トリグリセリドがさらに好ましい。また、中鎖脂肪酸トリグリセリドは、天然由来のものやエステル交換などにより調製したものなど、いずれも使用することができる。
また、本発明で使用される油脂は、部分グリセリドを含むグリセリン脂肪酸エステルであって、好ましくは部分グリセリドを約５０重量％以上含むグリセリン脂肪酸エステル、より好ましくは部分グリセリドを約７０重量％以上含むグリセリン脂肪酸エステルである。ここでの部分グリセリドとは、ジグリセリド（１，２−ジアシルグリセロール、１，３−ジアシルグリセロール）又はモノグリセリド（１−モノアシルグリセロール、２−モノアシルグリセロール）であり、いずれを用いても良いし、両者が混合されたものを用いても良いが、加工性の観点からジグリセリドが好ましい。また、部分グリセリドは、天然由来のものやエステル交換などにより調製したものなど、いずれも使用することができる。
さらに、本発明で使用される油脂は、上記の中鎖脂肪酸トリグリセリドと部分グリセリドが混合されたものを用いても良いし、中鎖脂肪酸の部分グリセリドを用いることもできる。
本発明において、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢを油脂に溶解する方法は、特に限定されず、通常の撹拌又は混合などの操作により実施できる。該化合物を含む抽出物、あるいは該化合物の粗精製品を用いる場合、該化合物以外の不純物が含まれているため、撹拌又は混合などの操作により該化合物を油脂に溶解した後に、濾過又は遠心分離などの操作により油脂に不溶な不純物を除去することが望ましい。該化合物の精製品を用いる場合、容易に溶液を得ることができる。また、該化合物を含む抽出物、あるいは該化合物の粗精製品を用いる場合、予めエタノールなどの有機溶媒に溶解し、その溶液と油脂を混合した後に、有機溶媒を留去することもできる。
一般に、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢは、粉末状態において不安定であり、エタノールなどの有機溶媒へ溶解しても安定性は改善されない。しかし、該化合物を本発明で使用する油脂に溶解することによりその安定性を改善することができる。また、該化合物は難水溶性であることから、本発明で使用する油脂に溶解することによりその吸収性が向上することも期待できる。本発明の組成物は飲食用、医薬用または美容用に許容される担体を含む。該医薬用担体は、例えば経口、経腸、経皮、皮下、または非経腸投与のため好適な任意の不活性、有機または無機材料であり得、限定されないが水、ゼラチン、アラビアガム、ラクトース、微結晶性セルロース、スターチ、ナトリウムスターチグリコレート、燐酸水素カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、およびコロイド性二酸化ケイ素、などであることができる。そのような組成物はまた、他の薬理学的活性な剤、および慣行の添加物、例えば安定剤、湿潤剤、乳化剤、香味剤、および緩衝剤、などを含みうる。
本発明の生活習慣病予防及び／又は改善用の油脂加工組成物、及び／又は体重増加抑制及び／又は改善用の油脂加工組成物について、その形態は特に限定されず、健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの飲食品、又は医薬品、医薬部外品、化粧品などに利用することができる。例えば、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢよりなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物を溶解している油脂を、そのまま単独で調理用、ソフトカプセル製剤用、ローション用などとして利用することができる。また油性の対象物と自由に混和することができるため、目的に応じて他の油脂と混合して物性を調整することが可能である。この場合、他の油脂は食品又は医薬品であることが好ましく、その種類及び使用量は、個々の製品に要求される物性や使用温度域などの諸条件を考慮して決定され、その種類及び使用量を調整することにより稠度や融点などの特性をコントロールすることができる。例えば、コーン油、ナタネ油、ハイエルシンナタネ油、大豆油、オリーブ油、紅花油、綿実油、ヒマワリ油、米糠油、パーム油、パーム核油などの植物油、魚油、牛脂、豚脂、乳脂、卵黄油などの動物油、又はこれらを原料として分別、水添、エステル交換などを行った油脂、あるいはこれらの混合油を使用することができる。
このようにして得られる油脂加工組成物は、サラダ油やフライ油などの液状油脂、マーガリンやショートニングなどの可塑性油脂としての利用や、油中水型エマルジョン、水中油型エマルジョンへ利用することができる。スプレードライなどにより粉体化して粉末油脂として利用してもよい。また、これらを原材料にして製造される飲食用の油脂加工組成物としては、ソフトカプセル、ハードカプセル、タブレット、チュアブル、バー、サシェットなど各種のタイプのサプリメント類、チューインガム、チョコレート、キャンディー、ゼリー、ビスケット、クラッカーなどの菓子類、アイスクリーム、氷菓などの冷菓類、乳飲料、清涼飲料、栄養ドリンク、美容ドリンクなどの飲料、うどん、中華麺、スパゲティー、即席麺などの麺類、蒲鉾、竹輪、半片などの練り製品、ドレッシング、マヨネーズ、ソースなどの調味料、パン、ハム、スープ、各種レトルト食品、各種冷凍食品などが例示され、ペットフードや家畜飼料などへも利用することができる。
さらに、栄養強化を目的として、ビタミンＡ，Ｃ，Ｄ，Ｅなどの各種ビタミン類を添加、併用してもよいし、呈味剤としての各種塩類、各種香料、乳関連物質、例えば、全脂粉乳、脱脂粉乳、発酵乳、乳脂肪などを添加、併用してもよい。また、上記以外の原材料として、通常の油中水型エマルジョン、水中油型エマルジョンに使用される酸化防止剤、着色剤などを全て使用することができる。
上記の油脂加工組成物をソフトカプセル製剤として利用する場合、カプセル当たりにグラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、およびヒスパグラブリジンＢからなる群より選ばれた少なくとも１つの化合物を、その総量として、約０．０１〜１５０ｍｇ、好ましくは約０．１〜１５０ｍｇ、さらに好ましくは約１〜５０ｍｇ含んでいることが望ましい。また目的に応じて、ビタミンＡ，Ｃ，Ｄ，Ｅなどの各種ビタミン類、ミツロウなどの製剤用基剤、乳化剤などをさらに添加してもよい。この場合、乳化剤としては特に限定されず、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリソルベート、リン脂質等が挙げられる。中でもグリセリン脂肪酸エステルが好ましく、さらに好ましくはポリグリセリン脂肪酸エステルである。ポリグリセリン脂肪酸エステルとしては、ジグリセリンモノオレイン酸エステルやポリグリセリン縮合リシノール酸エステルが特に好ましい。
本発明の生活習慣病予防及び／又は改善用の油脂加工組成物、及び／又は体重増加抑制及び／又は改善用の油脂加工組成物に含まれるグラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、ヒスパグラブリジンＢが、その生活習慣病予防及び／又は改善の効果、及び／又は体重増加抑制及び／又は改善の効果を発揮するために有効な量は、総量として成人一日一人当たり約０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは約０．１〜１ｍｇ／ｋｇ体重を摂取できる量の該化合物を油脂加工組成物中に含んでいることが望ましい。もっとも、該有効な量は、哺乳動物対象の年齢、体重、健康、性別、摂取の様式および時間、排出の割合、組成物の組み合わせ、および対象の状態の程度などに依存して異なり得るが、当業者周知の方法により実験的または経験的に決定することができる。本発明は、必要のあるまたはない哺乳動物対象に、本発明の組成物を投与することを含む、生活習慣病の予防および／または改善方法を提供する。該改善は、対象またはヘルスケア職業の判断におけるものであり得、および主観的（例えば意見）または客観的（例えば試験または診断方法によって測定可能である）ことができる。
【実施例】  以下に、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
［実施例１］
アフガン産甘草（Ｇ．グラブラ）９．８５ｋｇからエタノール抽出（４９．２５Ｌ、４５℃、２時間、２回抽出）、次いで濃縮により濃縮液４．４Ｌを得た。そのうち３Ｌをさらに濃縮して、活性炭処理、濃縮により甘草疎水性抽出物を含有したエタノール溶液８１１．２ｇを得た。濃縮液の残り１．４Ｌは比較例１に使用した。
上記のエタノール溶液６２９．２ｇ（甘草疎水性抽出物１２５．８ｇを含有する）と中鎖脂肪酸トリグリセリド（ＭＣＴ）であるアクターＭ−２（理研ビタミン（株）：脂肪酸組成はＣ８：Ｃ１０＝９９：１）１８７．６ｇを混合し、約８０℃に保温しながら約１時間撹拌した後、減圧濃縮によりエタノールを除去した。吸引ろ過により不溶分を分離して、ろ別後のろ液にＭＣＴ４５．７ｇをさらに添加し、油脂加工組成物としてＭＣＴ溶液２９７．０ｇを得た。
得られたＭＣＴ溶液１ｇをＨＰＬＣ用メタノールに溶解し、全量を１００ｍｌとした。この溶液を試料として下記の条件にてＨＰＬＣ分析を行った結果、ＭＣＴ溶液１ｇ当たりにグラブレン、グラブリジン、グラブロール、４’−Ｏ−メチルグラブリジンがそれぞれ６．６ｍｇ、３０．８ｍｇ、１２．６ｍｇ、３．７ｍｇ含まれていた（総量５３．７ｍｇ、含有量５．４重量％）。
ＨＰＬＣ分析条件
分析カラムは、Ｊ’ｓｐｈｅｒｅ  ＯＤＳ−Ｈ８０，４．６×２５０ｍｍ（ワイエムシイ）をカラム温度４０℃にて使用した。移動相は、２０ｍＭリン酸水溶液に対してアセトニトリルの比率を分析開始から２０ｍｉｎまで３５％で一定とし、２０ｍｉｎ以降７５ｍｉｎ後に７０％となるように一定の比率で上昇させ、７５ｍｉｎから８０ｍｉｎまで８０％で一定とするグラジエント条件で、流速１ｍｌ／ｍｉｎとした。注入量は２０μｌとし、検出波長は２５４ｎｍとした。各化合物の保持時間は、グラブレンが４０．０ｍｉｎ、グラブリジンが５０．２ｍｉｎ、グラブロールが５８．３ｍｉｎ、４’−Ｏ−メチルグラブリジンが６６．８ｍｉｎであった。
（比較例１）
実施例１にて使用した濃縮液を乾固・粉砕して得られた甘草疎水性抽出物１００ｍｇをＨＰＬＣ用メタノールに溶解し、全量を１００ｍｌとした。この溶液を試料としてＨＰＬＣ分析を行った結果、甘草疎水性抽出物１ｇ当たりグラブレン、グラブリジン、グラブロール、４’−Ｏ−メチルグラブリジンはそれぞれ１６．５ｍｇ、９０．４ｍｇ、３４．１ｍｇ、９．３ｍｇ含まれていた。
（比較例２）
実施例１にて使用したエタノール溶液１００ｍｇをＨＰＬＣ用メタノールに溶解し、全量を２０ｍｌとした。この溶液を試料としてＨＰＬＣ分析を行った結果、エタノール溶液１ｇ当たりグラブレン、グラブリジン、グラブロール、４’−Ｏ−メチルグラブリジンはそれぞれ３．４ｍｇ、１８．７ｍｇ、７．１ｍｇ、１．９ｍｇ含まれていた。
保存安定性試験
上記のＭＣＴ溶液について、グラブレン、グラブリジン、グラブロール及び４’−Ｏ−メチルグラブリジンの保存安定性試験を加速試験として８０℃にて実施した。ＭＣＴ溶液を湯浴８０℃にて保温し、保存１時間、３時間及び５時間におけるグラブレン、グラブリジン、グラブロール、４’−Ｏ−メチルグラブリジンの含量をそれぞれ定量した。保存開始時における各化合物の含量を１００％とし、保存後／保存開始時の含量の比により、保存安定性を表した。
保存安定性の試験結果を表１に示す。なお表中の化合物１はグラブレン、化合物２はグラブリジン、化合物３はグラブロール、化合物４は４’−Ｏ−メチルグラブリジンを表す。
比較例１の甘草疎水性抽出物を用いて同様に保存安定性試験を行った。その結果を表２に示す。
比較例２のエタノール溶液を用いて同様に保存安定性試験を行った。その結果を表３に示す。
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ＭＣＴ溶液において化合物１〜４はいずれも安定であったのに対し、甘草疎水性抽出物及びそのエタノール溶液では特に化合物１及び２が不安定であり、保存時間に従って含量の減少が見られた。
これらの結果から、甘草疎水性抽出物及びそのエタノール溶液では化合物１及び２が不安定であるが、ＭＣＴ溶液では化合物１〜４のいずれも安定であることが示された。本試験は８０℃による加速試験であるため、室温付近の温度条件下ではさらに数日から数ヶ月は安定であることが判明した。
［実施例２］
実施例１と同様の製法により、甘草疎水性抽出物５１．９ｇを含有するエタノール溶液１０３．７ｇ及びＭＣＴ４６８．２ｇから、ＭＣＴ溶液４９７．４ｇを得た。このＭＣＴ溶液についてＨＰＬＣ分析を行った結果、ＭＣＴ溶液１ｇ当たりにグラブレン、グラブリジン、グラブロール、４’−Ｏ−メチルグラブリジンがそれぞれ１．２ｍｇ、１２．３ｍｇ、１．９ｍｇ、０．９ｍｇ含まれていた（総量１６．３ｍｇ、含有量１．６重量％）。
［実施例３］
内臓脂肪低減作用、体重増加抑制効果
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（雌、８週齢）に高脂肪・高糖分食を自由摂取にて８週間与え、食餌性の肥満状態にした。なお、高脂肪・高糖分食には、カゼイン２５重量％、コーンスターチ１４．８６９重量％、シュークロース２０重量％、大豆油２重量％、ラード１４重量％、牛脂１４重量％、セルロースパウダー５重量％、ＡＩＮ−９３ミネラル混合３．５重量％、ＡＩＮ−９３ビタミン混合１重量％、重酒石酸コリン０．２５重量％、第三ブチルヒドロキノン０．００６重量％、Ｌ−シスチン０．３７５重量％の組成である半固形化精製飼料（オリエンタル酵母（株））を用いた。
その後マウスを４群（各群１０匹）に分けＡ群、Ｂ群、Ｃ群、Ｄ群とし、実施例２のＭＣＴ溶液及びＭＣＴを表４のように添加した粉末高脂肪・高糖分食（成分は上記と同様で粉末形態）を飼料として、それぞれ自由摂取にて８週間与えた。なお、ＭＣＴにはアクターＭ−２（理研ビタミン（株））を用いた。
サンプル投与後のマウスをエーテル麻酔下で開腹し、腹大動脈から採血して屠殺した後、腸間膜周辺脂肪、腎臓周辺脂肪、子宮周辺脂肪を摘出し、重量を測定した。なお、腸間膜周辺脂肪重量、腎臓周辺脂肪重量、子宮周辺脂肪重量の和を腹腔内脂肪重量とした。各群の体重推移、及び脂肪重量を測定した結果を表５に示す。
各群の摂餌量には差が認められなかったが、Ｂ群〜Ｄ群ではＡ群に比し有意な体重増加抑制効果が認められた。腸間膜周辺脂肪重量、腎臓周辺脂肪重量、子宮周辺脂肪重量及び腹腔内脂肪重量についても、Ａ群に比しＢ群〜Ｄ群では有意な減少が認められた。すなわちマウスに高脂肪・高糖分食を与えると食餌性肥満状態となるが、この食餌に実施例２のＭＣＴ溶液を１％以上添加して与えると、有意な体重増加抑制効果及び腹腔内脂肪蓄積抑制効果があることが判明した。
この結果から、グラブレン、グラブリジン、グラブロール、３’−ヒドロキシ−４’−Ｏ−メチルグラブリジン、４’−Ｏ−メチルグラブリジン、ヒスパグラブリジンＢを含むＭＣＴ溶液は、高脂肪・高糖分食の摂取という過栄養条件下における体重増加の抑制及び内臓脂肪の低減に有効であることが示された。
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［実施例４］
ソフトカプセル剤の製造（１）
実施例１のＭＣＴ溶液を、ロータリー式ソフトカプセル製造装置を用いてゼラチン皮膜に圧入し、内容量３５０ｍｇのソフトカプセル剤を得た。このカプセル当たりグラブレン、グラブリジン、グラブロール、４’−Ｏ−メチルグラブリジンはそれぞれ２．３ｍｇ、１０．８ｍｇ、４．４ｍｇ、１．３ｍｇ含まれていた（総量１８．８ｍｇ、含有量５．４重量％）。
ソフトカプセル剤の製造（２）
ＭＣＴ（アクターＭ−２、理研ビタミン）５７重量部にジグリセリンモノオレイン酸エステル（ＤＯ−１００Ｖ、理研ビタミン）３重量部を溶解し、これに実施例１のＭＣＴ溶液４０重量部を撹拌しながら添加して溶液を調製した。
この溶液を、ロータリー式ソフトカプセル製造装置を用いてゼラチン皮膜に圧入し、内容量３５０ｍｇのソフトカプセル剤を得た。このカプセル当たりグラブレン、グラブリジン、グラブロール、４’−Ｏ−メチルグラブリジンはそれぞれ０．９ｍｇ、４．３ｍｇ、１．８ｍｇ、０．５ｍｇ含まれていた（総量７．５ｍｇ、含有量２．１重量％）。
［実施例５］
粉末油脂の製造
デキストリン７０重量部、カゼインＮａ２０重量部を水４００重量部に溶解して水相を調製した。
調製した水相に撹拌しながら実施例１のＭＣＴ溶液１０重量部を添加し、ホモジナイザーにて乳化を行った後、本乳化液をスプレードライにて噴霧乾燥し、粉末油脂を得た。
［実施例６］
マーガリンの製造
硬化綿実油（商品名：スノーライト、鐘淵化学工業（株））８０重量部、実施例１のＭＣＴ溶液２０重量部、無塩バター（四つ葉乳業（株））１０重量部に、グリセリンモノ脂肪酸エステル（商品名：エマルジーＭＳ、理研ビタミン（株））０．２重量部、レシチン０．２重量部を添加し、６０℃に加熱溶解し油相を調製した。
調製された油相８４．９重量部に撹拌しながら水１５．１重量部を添加し、２０分間乳化を行った後、コンビネーターで冷却捏和してマーガリンを作製した。
［実施例７］
濃縮乳の製造
実施例１のＭＣＴ溶液１０重量部を７０℃に加温後、レシチン０．１重量部及びポリグリセリン脂肪酸エステル０．１重量部を順次溶解して油相を作製した。
脱脂粉乳２５重量部、グリセリン脂肪酸エステル０．１重量部、ショ糖脂肪酸エステル０．１重量部を６０℃の水６４．６重量部に溶解して水相を調製した。
調製した水相と油相を予備乳化した後、ＵＨＴ殺菌機にて１４５℃で４秒間殺菌した。次いで真空冷却した後、均質化機により１０ＭＰａの圧力で均質化し、さらに１０℃までプレート冷却して加工用濃縮乳を得た。
［実施例８］
マヨネーズの製造
醸造酢１０重量部、食塩１重量部、砂糖０．６重量部、マスタード粉末０．２重量部、グルタミン酸ナトリウム０．２重量部を混合器の中に加え、１５〜２０℃下で攪拌・混合し水相を調製した。その後、米白絞油６８重量部、実施例１のＭＣＴ溶液１０重量部に卵黄１０重量部を加え、攪拌乳化して得た乳化液（１０〜１５℃）を少しずつ加えながら１５〜２０℃下で攪拌し、予備乳化した。次いで、コロイドミルを用いて仕上げ乳化を行いマヨネーズを得た。
【産業上の利用可能性】  本発明によれば、健康食品や保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）などの飲食品、又は医薬品、医薬部外品、化粧品などに利用することができる生活習慣病予防及び／又は改善用の油脂加工組成物、及び／又は体重増加抑制及び／又は改善用の油脂加工組成物を得ることができる。本発明の油脂加工組成物は、インスリン抵抗性の改善、内臓脂肪型肥満、２型糖尿病、高脂血症、高血圧症などの生活習慣病の予防及び／又は改善、肥満すなわち体重増加の抑制及び／又は改善に有効である。
【国際調査報告】
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