(57)【要約】本発明は、成長ホルモン分泌誘導物質レセプターに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列、または前記アミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤に関する。本発明の肝障害の予防または治療剤は、肝炎、肝硬変、肝不全などの肝疾患の治療または予防に適した医薬として有用である。さらに、本発明の肝障害の予防または治療剤は、肝切除術後の肝再生・肝機能回復促進剤などとしても有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
成長ホルモン分泌誘導物質レセプターに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列、または前記アミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤。
【請求項２】
ポリペプチドの誘導体が、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列および前記アミノ酸配列の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列からなるポリペプチドのアミノ酸配列において、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が下記式（１）；
2004096260.tif 000048
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を有し、かつ成長ホルモン分泌誘導物質レセプターに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩であることを特徴とする請求の範囲第１項に記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項３】
アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が、式（２）
2004096260.tif 000049
｛式中、Ｒ３は、−Ｔ２−Ｐ２−Ｑ２（式中、Ｔ２は、Ｃ１−６アルキレン基、Ｃ２−６アルケニレン基、Ｃ１−４アルキレン−フェニレン基を表す。Ｐ２は、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＯ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ２は、置換されていてもよいＣ１−２０アルキル基、置換されていてもよいＣ２−２０アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を表す。）または−Ｐ２−Ｑ２（式中、Ｐ２およびＱ２は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を有することを特徴とする請求の範囲第２項に記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項４】
Ｔ２がＣ１−６アルキレン基、Ｐ２が−Ｏ−ＣＯ−、Ｑ２が置換されていてもよいＣ１−２０アルキル基であることを特徴とする請求の範囲第３項に記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項５】
Ｔ２がメチレンまたはエチレン、Ｐ２が−Ｏ−ＣＯ−、Ｑ２がＣ１−２０アルキル基であることを特徴とする請求の範囲第４項に記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項６】
Ｑ２がＣ７アルキル基であることを特徴とする請求の範囲第５項に記載の肝障害の予防または治療剤、
【請求項７】
配列番号１〜２２のアミノ酸配列が、配列番号１〜１０または２２のいずれかのアミノ酸配列であることと特徴とする請求の範囲第２項〜第６項のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項８】
ポリペプチドの誘導体が、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000050
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］
で示され、かつ成長ホルモン分泌誘導物質レセプターに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤。
【請求項９】
ポリペプチドの誘導体が、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000051
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつ成長ホルモン分泌誘導物質レセプターに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤。
【請求項１０】
Ｘが、式（４）；Ｈ２Ｎ−Ｘ１−ＣＯ−（Ｘ１は、置換基を有していてもよいＣ４アルキレン基、または前記Ｃ４アルキレン基の少なくとも１の炭素がＯ、ＮまたはＳで置き換えられている有機基を表す。）で示される請求の範囲第８または９に記載の肝障害の予防または治療剤、
【請求項１１】
ポリペプチドの誘導体が、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000052
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］
で示され、かつ成長ホルモン分泌誘導物質レセプターに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤。
【請求項１２】
ポリペプチドの誘導体が、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000053
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］で示される構造を有するポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつ成長ホルモン分泌誘導物質レセプターに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤。
【請求項１３】
カルボキシル末端に、更に塩基性アミノ酸が結合していることを特徴とする請求の範囲第１項〜第１２項のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項１４】
カルボキシル末端におけるカルボキシル基が、塩、エステルまたはアミドを形成していることを特徴とする請求の範囲第１項〜第１３項のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項１５】
肝障害が、肝炎、肝硬変および肝不全からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする請求の範囲第１項〜第１４項のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項１６】
肝炎が、ウィルス性肝炎、アルコール性肝炎、薬物性肝炎および自己免疫性肝炎からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする請求の範囲第１５項に記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項１７】
肝切除術後の肝再生・肝機能回復促進剤である請求の範囲第１項〜第１４項のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項１８】
肝障害が肝臓移植後の疾患であることを特徴とする請求の範囲第１項〜第１４項のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項１９】
一日あたりの０．００１〜１００ｍｇである請求の範囲第１項〜第１８項のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤。
【請求項２０】
ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列、または前記アミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体またはその塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法。
【請求項２１】
式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000054
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法。
【請求項２２】
式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000055
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法。
【請求項２３】
Ｘが、式（４）；Ｈ２Ｎ−Ｘ１−ＣＯ−（Ｘ１は、置換基を有していてもよいＣ４アルキレン基、または前記Ｃ４アルキレン基の少なくとも１の炭素がＯ、ＮまたはＳで置き換えられている有機基を表す。）で示される請求の範囲第２７項または第２２項に記載の肝障害の治療方法。
【請求項２４】
式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000056
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法。
【請求項２５】
式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000057
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法。
【請求項２６】
カルボキシル末端に、更に塩基性アミノ酸が結合していることを特徴とする請求の範囲第２０項〜第２５項のいずれかに記載の肝障害の治療方法。
【請求項２７】
カルボキシル末端におけるカルボキシル基が、塩、エステルまたはアミドを形成していることを特徴とする請求の範囲第２０項〜第２６項のいずれかに記載の肝障害の治療方法。
【請求項２８】
肝障害が、肝炎、肝硬変および肝不全からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする請求の範囲第２０項〜第２７項のいずれかに記載の肝障害の治療方法。
【請求項２９】
肝炎が、ウィルス性肝炎、アルコール性肝炎、薬物性肝炎および自己免疫性肝炎からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする請求の範囲第２８項に記載の肝障害の治療方法。
【請求項３０】
肝切除術後の肝再生・肝機能回復促進剤である請求の範囲第２０項〜第２７項のいずれかに記載の肝障害の治療方法。
【請求項３１】
肝障害が肝臓移植後の疾患であることを特徴とする請求の範囲第２０項〜第２７項のいずれかに記載の肝障害の治療方法。
【請求項３２】
一日あたりの投与量が０．００１〜１００ｍｇである請求の範囲第２０項〜第３１項のいずれかに記載の肝障害の治療方法、
【請求項３３】
肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列、または前記アミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体またはその塩の使用。
【請求項３４】
肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000058
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項３５】
肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000059
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項３６】
Ｘが、式（４）；Ｈ２Ｎ−Ｘ１−ＣＯ−（Ｘ１は、置換基を有していてもよいＣ４アルキレン基、または前記Ｃ４アルキレン基の少なくとも１の炭素がＯ、ＮまたはＳで置き換えられている有機基を表す。）で示される請求の範囲第３４項または第３５項に記載の使用。
【請求項３７】
肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000060
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項３８】
肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000061
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項３９】
カルボキシル末端に、更に塩基性アミノ酸が結合していることを特徴とする請求の範囲第３４項〜第３８項のいずれかに記載の使用。
【請求項４０】
カルボキシル末端におけるカルボキシル基が、塩、エステルまたはアミドを形成していることを特徴とする請求の範囲第３４項〜第３９項のいずれかに記載の使用。
【請求項４１】
肝障害が、肝炎、肝硬変および肝不全からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする請求の範囲第３４項〜第４０項のいずれかに記載の使用。
【請求項４２】
肝炎が、ウィルス性肝炎、アルコール性肝炎、薬物性肝炎および自己免疫性肝炎からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする請求の範囲第４１項に記載の使用。
【請求項４３】
肝切除術後の肝再生・肝機能回復促進剤である請求の範囲第３４項〜第４０項のいずれかに記載の使用。
【請求項４４】
肝障害が肝臓移植後の疾患であることを特徴とする請求の範囲第３４項〜第４０項のいずれかに記載の使用。
【請求項４５】
一日あたりの投与量が０．００１〜１００ｍｇである請求の範囲第３４項〜第４４項のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は肝障害治療剤に関する。より、詳細には、成長ホルモン分泌誘導物質レセプター（ｇｒｏｗｔｈ  ｈｏｒｍｏｎｅ  ｓｅｃｒｅｔａｇｏｇｕｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ；以下、ＧＨＳ−Ｒと略称する。）に結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体を有効成分として含有し、肝炎、肝硬変もしくは肝不全などの肝疾患の治療もしくは予防、または肝切除術後の肝再生・肝機能の回復もしくは回復の促進に有用な医薬に関する。
【背景技術】  肝臓は多くの物質の代謝に重要な役割を担う生命維持に不可欠な臓器である。生体調節系により、肝臓は糖および脂質の血中レベルの恒常性を保つために主要な機能を担い、生体全体の組織にエネルギーを供給している。さらに、肝臓は多くのペプチドを合成して血中および組織に送りだしている。このように、肝臓は糖代謝、アミノ酸・タンパク代謝、脂質代謝などの生体物質代謝、代謝生成物の排泄、アンモニアなどの化学物質の解毒、ビタミン類の貯蔵など、生命維持に極めて重要な機能を担っている。
肝臓はウィルス感染、アルコール摂取や薬物摂取などが原因となって肝炎を発症し、慢性化すると、その一部は肝硬変に移行して死亡率が高くなることが知られている。肝炎、肝硬変または肝不全などの肝障害患者では肝臓の機能低下にともなうフィブリノーゲン減少、血小板減少、血液凝固時間の延長、血清中肝臓逸脱酵素の上昇などが生じることが知られている。このため、出血性の傾向が現れて患者が死亡に至る要因となっている（非特許文献１）。現在、グリチルリチン、グルタチオン、ビタミン剤などが肝機能改善のために用いられるが、慢性肝炎、アルコール性肝障害、脂肪肝、肝硬変または肝不全などの肝障害疾患の治療に適した治療薬はいまだに開発されておらず、高タンパク質・高カロリー食による食事療法が治療の中心である。肝臓疾患に苦しむ患者は国内で２００万人にも及び、肝硬変を経て肝癌で死亡する患者は年間２万人にも及ぶが、これまでのところ有効な治療法はない。ウィルス性肝炎に対しては、インターフェロンがよく用いられるが、全ての肝炎患者に対して効果を有するわけではなく、自殺が多発するなどの深刻な副作用が発現して問題となっている。
肝臓疾患に対しては上述したような薬物治療の他、エタノール注入法、ｍｉｃｒｏｗａｖｅ焼灼法もしくは肝動脈塞栓術などの内科的処置が施されるか、肝臓摘除術もしくは生体肝移植のような外科的処置が施されるかの治療が行われているのが現状である。前述の内科的処置または外科的処置の選択は、患者の年齢、身体状態、例えば癌の大きさや個数などの疾患の状態、肝機能などに応じ、医療現場においてケースバイケースで判断されるが、内科的処置が先行するのが普通である。外科的処置が行われる場合は、癌の個数が数個以内で限局し、残肝機能が保たれていることが前提となる。内科的処置を選択するにせよ、外科的処置を選択するにせよ、これらの処理後に肝機能の低下または異常を来すことが多い。特に、生体肝移植の場合は、提供者と被移植者の双方において、移植手術後に肝機能の低下または異常がしばしばみられる。現在、このような肝臓手術後における肝機能の低下または異常に対して、栄養状態管理などを施すことが行われているが、これを防止するまでには至っておらず、肝臓手術後における肝機能の低下または異常を防止または低減するための有効な治療が望まれている。
肝線維症、肝硬変モデル動物を用いて肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）（非特許文献２、非特許文献３）、インターフェロンα、βおよびγに肝線維症抑制作用が認められている（非特許文献４）。ＨＧＦには血管新生作用があり、副作用が懸念されている。また、成長ホルモン（ＧＨ）は肝臓に働いてＩｎｓｕｌｉｎ−ｌｉｋｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ−１（ＩＧＦ−１）産生を刺激して肝細胞増殖作用を誘導すること（非特許文献５、非特許文献６）、ＩＧＦ−１を肝細胞に作用させることによりＨＧＦを誘導することが報告されているが（非特許文献７）、肝障害に対して治癒効果を検討した成績は見当たらない。また、ＧＨには浮腫、インスリン抵抗性の悪化などの副作用が認められている。さらに、インスリンおよびＥｐｉｄｅｒｍａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ（ＥＧＦ）（非特許文献８）、Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ−α（ＴＧＦ−α）にも（非特許文献９）、肝細胞増殖活性（ＤＮＡへのチミジン取り込み）を有することが示されているが、肝障害改善作用は明らかではない。
一方、グレリンは胃から発見された２８残基のアミノ酸よりなるペプチドであり、３位セリンがオクタノイル基で修飾されている（特許文献１）。グレリンは成長ホルモン分泌誘導物質レセプター（Ｇｒｏｗｔｈ  Ｈｏｒｍｏｎｅ  Ｓｅｃｒｅｔａｇｏｇｕｅ−Ｒｅｃｅｐｔｏｒ；ＧＨＳ−Ｒ）（非特許文献１０）に働き、下垂体からのＧＨ分泌を亢進させる内因性の脳−消化管ホルモンであることが示され（非特許文献１１）、最近さらにグレリンが食欲を亢進させること、皮下投与することにより体重および体脂肪が増加することがマウスあるいはラットで示された（非特許文献１２、非特許文献１３、非特許文献１４）。しかし、グレリンを肝障害の予防または治療剤として用いることは知られていない。
【非特許文献１】      村上  雄一、吉村  和監修、「内科学書３」、１９８７年発行、発行所  中山書店
【非特許文献２】      Ｍａｔｓｕｄａ  ｅｔ．ａｌ．，“Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ｒａｔｓ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｉｎｆｕｓｉｏｎ  ｏｎ  ｌｉｖｅｒ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ／ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ”，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２６，Ｎｏ．１，ｐ．８１−８９（１９９７）
【非特許文献３】      Ｔａｋａｈｉｒｏ  Ｕｅｋｉ  ｅｔ．ａｌ．，“Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｇｅｎｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｌｉｖｅｒ  ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ  ｉｎ  ｒａｔｓ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｖｏｌ．５，ｐ．２２６−２３０（１９９９）
【非特許文献４】      谷口博順ら、「インターフェロンの肝線維化抑制機構」、最新医学、５５巻、１８０３−１８０６頁（２０００）
【非特許文献５】      Ａｓａｋａｗａ  ｅｔ，ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｖｅｓｔｍｅｎｔ，ｖｏｌ．１２，ｐ．３４３−３４７（１９８９）
【非特許文献６】      Ｅｋｂｅｒｇ  ｅｔ．ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１３５，ｐ．５９−６７（１９９２）
【非特許文献７】      Ｓｋｒｔｉｃ  ｅｔ．ａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１３８，ｐ．４６８３−４６８９（１９９７）
【非特許文献８】      Ｒｉｃｈｍａｎ  ｅｔ．ａｌ．，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＵＳＡ，ｖｏｌ．７３，ｐ．３５８９−３５９３（１９７６）
【非特許文献９】      Ｅ．Ｍ．Ｗｅｂｂｅｒ  ｅｔ．ａｌ．，“Ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ  ｔｏ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ａｎ  ｉｎｉｔｉａｌ  ｐｒｉｍｉｎｇ  ｓｔｉｍｕｌｕｓ”，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．２，ｐ．４８９−４９７（１９９４）
【非特許文献１０】      Ａｎｄｒｅｗ  Ｄ．Ｈｏｗａｒｄ  ｅｔ．ａｌ．，“Ａ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｎ  Ｐｉｔｕｉｔａｒｙ  ａｎｄ  Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ  Ｔｈａｔ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｈｏｒｍｏｎｅ  Ｒｅｌｅａｓｅ”，Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２７３，ｐ．９７４−９７７（１９９６）
【非特許文献１１】      Ｍａｓａｙａｓｕ  Ｋｏｊｉｍａ  ｅｔ．ａｌ．，“Ｇｈｒｅｌｉｎ  ｉｓ  ａ  ｇｒｏｗｔｈ−ｈｏｒｍｏｎｅ−ｒｅｌｅａｓｉｎｇ  ａｃｙｌａｔｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｆｒｏｍ  ｓｔｏｍａｃｈ”，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．４０２，ｐ．６５６−６５９（１９９９）
【非特許文献１２】      Ｗｒｅｎ  ｅｔ．ａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１４１，ｐ．４３２５−４３２８（２０００）
【非特許文献１３】      Ｍａｓａｍｉｔｓｕ  Ｎａｋａｚａｔｏ  ｅｔ．ａｌ．，“Ａ  ｒｏｌｅ  ｆｏｒ  ｇｈｒｅｌｉｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｅｅｄｉｎｇ”，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．４０９，ｐ．１９４−１９８（２００１）
【非特許文献１４】      Ｍｉｔｓｕｙｏ  Ｓｈｉｎｔａｎｉ  ｅｔ．ａｌ．，“Ｇｈｒｅｌｉｎ，ａｎ  Ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｈｏｒｍｏｎｅ  Ｓｅｃｒｅｔａｇｏｇｕｅ，Ｉｓ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｏｒｅｘｉｇｅｎｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔｈａｔ  Ａｎｔａｇｏｎｉｚｅｓ  Ｌｅｐｔｉｎ  Ａｃｔｉｏｎ  Ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ  Ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ  Ｙ／Ｙ１  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｐａｔｈｗａｙ”，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，ｖｏｌ．５０，ｐ．２２７−２３２（２００１）
【特許文献１】      国際公開第０１／０７４７５号パンフレット
【発明の開示】
本発明は、肝障害の予防または治療剤を提供することを目的とする。より具体的には、本発明は、肝炎、肝硬変、肝不全などの肝疾患の治療または予防に適した医薬を提供することを目的とする。さらに、本発明は、肝切除術後の肝再生・肝機能回復促進剤などとして使用することができる肝細胞増殖促進作用を有する医薬を提供することを目的とする。
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意検討したところ、ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体が、肝炎、肝硬変、肝不全などの肝疾患に対し予防、進行緩和または治療効果を有するという知見を得た。さらに、本発明者らは、上記ポリペプチドの誘導体が肝細胞増殖促進作用を有し、その結果、肝臓手術後における肝機能低下の阻止、肝機能異常の防止または肝再生・肝機能の回復に有用であることも知見した。本発明者らはさらに検討を重ねて本発明を完成した。
すなわち、本発明は、
（１）  ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列、または前記アミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤、
（２）  ポリペプチドの誘導体が、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列および前記アミノ酸配列の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列からなるポリペプチドのアミノ酸配列において、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が下記式（１）；
2004096260.tif 000002
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を有し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩であることを特徴とする上記（１）に記載の肝障害の予防または治療剤、
（３）  アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が、式（２）
2004096260.tif 000003
｛式中、Ｒ３は、−Ｔ２−Ｐ２−Ｑ２（式中、Ｔ２は、Ｃ１−６アルキレン基、Ｃ２−６アルケニレン基、Ｃ１−４アルキレン−フェニレン基を表す。Ｐ２は、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＯ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ２は、置換されていてもよいＣ１−２０アルキル基、置換されていてもよいＣ２−２０アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を表す。）または−Ｐ２−Ｑ２（式中、Ｐ２およびＱ２は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を有することを特徴とする上記（２）に記載の肝障害の予防または治療剤、
（４）  Ｔ２がＣ１−６アルキレン基、Ｐ２が−Ｏ−ＣＯ−、Ｑ２が置換されていてもよいＣ１−２０アルキル基であることを特徴とする上記（３）に記載の肝障害の予防または治療剤、
（５）  Ｔ２がメチレンまたはエチレン、Ｐ２が−Ｏ−ＣＯ−、Ｑ２がＣ１−２０アルキル基であることを特徴とする上記（４）に記載の肝障害の予防または治療剤、
（６）  Ｑ２がＣ７アルキル基であることを特徴とする上記（５）に記載の肝障害の予防または治療剤、
（７）  配列番号１〜２２のアミノ酸配列が、配列番号１〜１０または２２のいずれかのアミノ酸配列であることと特徴とする上記（２）〜（６）のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤、
（８）  式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000004
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤、
（９）  式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000005
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤、
（１０）  Ｘが、式（４）；Ｈ２Ｎ−Ｘ１−ＣＯ−（Ｘ１は、置換基を有していてもよいＣ４アルキレン基、または前記Ｃ４アルキレン基の少なくとも１の炭素がＯ、ＮまたはＳで置き換えられている有機基を表す。）で示される前記（８）または（９）に記載の肝障害の予防または治療剤、
（１１）  式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000006
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤、
（１２）  式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000007
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤、
（１３）  カルボキシル末端に、更に塩基性アミノ酸が結合していることを特徴とする上記（１）〜（１２）のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤、
（１４）  カルボキシル末端におけるカルボキシル基が、塩、エステルまたはアミドを形成していることを特徴とする上記（１）〜（１３）のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤、
（１５）  肝障害が、肝炎、肝硬変および肝不全からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする上記（１）〜（１４）のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤、
（１６）  肝炎が、ウィルス性肝炎、アルコール性肝炎、薬物性肝炎および自己免疫性肝炎からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする上記（１５）に記載の肝障害の予防または治療剤、
（１７）  肝切除術後の肝再生・肝機能回復促進剤である上記（１）〜（１４）のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤、
（１８）  肝障害が肝臓移植後の疾患であることを特徴とする上記（１）〜（１４）のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤、または
（１９）  一日あたりの投与量が０．００１〜１００ｍｇである上記（１）〜（１８）のいずれかに記載の肝障害の予防または治療剤、
に関する。
また、本発明は、
（２０）  ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列、または前記アミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体またはその塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法、
（２１）  式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000008
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法、
（２８）  式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000009
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法、
（２３）  Ｘが、式（４）；Ｈ２Ｎ−Ｘ１−ＣＯ−（Ｘ１は、置換基を有していてもよいＣ４アルキレン基、または前記Ｃ４アルキレン基の少なくとも１の炭素がＯ、ＮまたはＳで置き換えられている有機基を表す。）で示される前記（２１）または（２２）に記載の肝障害の治療方法、
（２４）  式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000010
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法、
（２５）  式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000011
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法、
（２６）  カルボキシル末端に、更に塩基性アミノ酸が結合していることを特徴とする上記（２０）〜（３５）のいずれかに記載の肝障害の治療方法、
（２７）  カルボキシル末端におけるカルボキシル基が、塩、エステルまたはアミドを形成していることを特徴とする上記（２０）〜（２６）のいずれかに記載の肝障害の治療方法、
（２８）  肝障害が、肝炎、肝硬変および肝不全からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする上記（２０）〜（２７）のいずれかに記載の肝障害の治療方法、
（２９）  肝炎が、ウィルス性肝炎、アルコール性肝炎、薬物性肝炎および自己免疫性肝炎からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする上記（２８）に記載の肝障害の治療方法、
（３０）  肝切除術後の肝再生・肝機能回復促進剤である上記（２０）〜（２７）のいずれかに記載の肝障害の治療方法、
（３１）  肝障害が肝臓移植後の疾患であることを特徴とする上記（２０）〜（２７）のいずれかに記載の肝障害の治療方法、または
（３２）  一日あたりの投与量が０．００１〜１００ｍｇである上記（２０）〜（３１）のいずれかに記載の肝障害の治療方法、
に関する。
また、本発明は、
（３３）  肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列、または前記アミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体またはその塩の使用、
（３４）  肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000012
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用、
（３５）  肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000013
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体を表す。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用、
（３６）  Ｘが、式（４）；Ｈ２Ｎ−Ｘ１−ＣＯ−（Ｘ１は、置換基を有していてもよいＣ４アルキレン基、または前記Ｃ４アルキレン基の少なくとも１の炭素がＯ、ＮまたはＳで置き換えられている有機基を表す。）で示される前記（３４）または（３５）に記載の使用、
（３７）  肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000014
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］
で示され、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用、
（３８）  肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000015
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］で示されるポリペプチドの誘導体に、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用、
（３９）  カルボキシル末端に、更に塩基性アミノ酸が結合していることを特徴とする上記（３４）〜（３８）のいずれかに記載の使用、
（４０）  カルボキシル末端におけるカルボキシル基が、塩、エステルまたはアミドを形成していることを特徴とする上記（３４）〜（３９）のいずれかに記載の使用、
（４１）  肝障害が、肝炎、肝硬変および肝不全からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする上記（３４）〜（４０）のいずれかに記載の使用、
（４２）  肝炎が、ウィルス性肝炎、アルコール性肝炎、薬物性肝炎および自己免疫性肝炎からなる群から選ばれる１以上の疾患であることを特徴とする上記（４１）に記載の使用、
（４３）  肝切除術後の肝再生・肝機能回復促進剤である上記（３４）〜（４０）のいずれかに記載の使用、
（４４）  肝障害が肝臓移植後の疾患であることを特徴とする上記（３４）〜（４０）のいずれかに記載の使用、または
（４５）  一日あたりの投与量が０．００１〜１００ｍｇである上記（３４）〜（４４）のいずれかに記載の使用、
に関する。
また、本発明は、
（４６）  ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択される１のアミノ酸配列もしくは前記アミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換または付加したアミノ酸配列からなるポリペプチドの誘導体、またはそれらの薬理学的に許容される塩を含有することを特徴とする肝障害の予防または治療剤、
（４７）  ポリペプチドの誘導体が、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸配列からなるペプチドである上記（４６）に記載の肝障害の予防または治療剤、
（４８）  ポリペプチドの誘導体が、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から１０番目までのアミノ酸配列、または前記アミノ酸残基１０個のアミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列からなるペプチドである上記（４６）に記載の肝障害の予防または治療剤、
（４９）  ポリペプチドの誘導体が、配列番号１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から１５番目までのアミノ酸配列、または前記アミノ酸残基１５個のアミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列からなるペプチドである上記（４６）に記載の肝障害の予防または治療剤、
に関する。
また、本発明は、ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列において、（ａ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列から選択される１のアミノ酸配列のアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸配列で、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が上記式（１）を有するポリペプチドの誘導体、（ｂ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列から選択される１のアミノ酸配列のアミノ末端の１番目から１０番目までのアミノ酸配列で、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が上記式（１）を有するポリペプチドの誘導体、（ｃ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列から選択される１のアミノ酸配列のアミノ末端の１番目から１５番目までのアミノ酸配列で、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が上記式（１）を有するポリペプチドの誘導体、（ｄ）アミノ末端の１番目から１０番目までのアミノ酸配列から選択される１のアミノ酸配列のアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列で、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が上記式（１）を有するポリペプチドの誘導体、または（ｅ）アミノ末端の１番目から１５番目までのアミノ酸配列から選択される１のアミノ酸配列のアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１ないし数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列で、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が上記式（１）を有するポリペプチドの誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする肝障害の予防または治療剤、または、上記（ａ）〜（ｅ）のいずれかのポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩をヒト等の哺乳動物に投与することを含む肝障害の治療方法、あるいは肝障害の予防または治療を目的とする医薬を製造するための、上記（ａ）〜（ｅ）のいずれかのポリペプチドの誘導体またはその薬理学的に許容される塩の使用などに関する。
【図面の簡単な説明】  第１図は、実施例１のフローチャートを示す。
第２図は、実施例１における生理食塩水投与群、グレリン３μｇ／ｋｇ投与群および３０μｇ／ｋｇ投与群の生存曲線を示す。
第３図は、実施例３において、ｋｉ−６７タンパクを免疫染色したラット肝細胞の光学顕微鏡写真を示す。Ａは生理食塩水投与群の写真であり、Ｂはグレリン投与群の写真である。
【発明を実施するための最良の形態】  本発明を説明するに際し、下記用語を以下のように定義する。
「アミノ酸」とは、同一分子内にアミノ基とカルボキシル基を有する化合物であり、例えば下記する天然アミノ酸または非天然アミノ酸のほか、天然アミノ酸のＤ−体、β−アミノ酸、γ−アミノ酸などあらゆるアミノ酸を含む。
「天然アミノ酸」とは、遺伝子によりコードされる２０種類のアミノ酸をいう。
「非天然アミノ酸」としては、α−アミノ酸におけるα炭素が修飾されている化合物が挙げられる。即ち、下記式（６）；
2004096260.tif 000016
（Ｒ’およびＲ”は、同一または異なってよく、天然アミノ酸に存在しない任意の置換基または水素原子を表す。ただし、Ｒ’およびＲ”がともに水素原子である場合を除く。）
で示される化合物が挙げられる。非天然アミノ酸はＬ−体であっても、Ｄ−体であってもよい。
「アルキル基」とは、直鎖、環状または分岐アルキル基を意味し、「Ｃ１−３５アルキル基」とは、１〜３５の炭素原子を有する直鎖、環状または分枝アルキル基を意味し、「Ｃ１−２０アルキル基」とは、１〜２０の炭素原子を有する直鎖、環状または分枝アルキル基を意味し、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ネオペンチル、シクロペンチル、１−メチルブチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、３，３−ジメチルブチル、ヘプチル、シクロヘプチル、１−メチルシクロヘキシル、１−プロピルブチル、オクチル、１−メチルヘプチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシルまたはノナデシルなどが挙げられる。「Ｃ１−６アルキル基」は、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ネオペンチル、１−メチルブチル、ヘキシル、イソヘキシルまたは１−メチルペンタンのような１〜６の炭素原子を有する直鎖状または分岐状の炭化水素基を意味し、「Ｃ１−４アルキル基」は、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルのような１〜４の炭素原子を有する直鎖状または分岐状の炭化水素基を意味し、「Ｃ１−１６アルキル基」は、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ネオペンチル、１−メチルブチル、ヘキシル、イソヘキシル、１−メチルペンタン、３，３−ジメチルブチル、ヘプチル、１−プロピルブチル、オクチル、１−メチルヘプチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシルまたはヘキサデシルのような１〜１６の炭素原子を有する直鎖状または分岐状の炭化水素基を意味し、「Ｃ３−８シクロアルキル基」は、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルのような３〜８の炭素原子を有する環状の炭化水素基を意味する。
「アルキレン基」とは１〜２０の、炭素原子を有する直鎖または分岐アルキレン基を意味し、例えば、メチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン、ヘプタメチレン、オクタメチレン、デカメチレン、ドデカメチレンまたはノナデカメチレンなどが挙げられる。「Ｃ１−６アルキレン」は、メチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレンまたはヘキサメチレンのような１〜６の炭素原子を有する直鎖状または分岐状の２価の炭化水素基を意味する。
「アルケニレン基」とは、２〜２０の炭素原子を有する直鎖または分岐アルケニレン基を意味し、「Ｃ２−６アルケニレン」は、ビニレン、プロペニレン、１−ブテニレン、２−ブテニレン、１−ペンテニレン、２−ペンテニレンまたは３−ペンテニレンなどの直鎖状または分岐状の２価の炭化水素基を意味する。
「アルキニレン基」とは、２ないし２０の炭素原子を有するアルキニレン基を意味し、「Ｃ２−６アルキニレン」は、エチニレン、プロピニレン、１−ブチニレン、２−ブチニレン、１−ペンチニレン、２−ペンチニレンまたは３−ペンチニレンなどの直鎖状または分岐状の２価の炭化水素基を意味する。
「アルケニル基」とは、２〜２０の炭素原子を有する直鎖または分岐アルケニル基を意味する。アルケニル基の例としては、例えばビニル、アリル、ｎ−プロペニル、イソプロペニル、ｎ−ブテニル、イソブテニル、ｓｅｃ−ブテニル、ｔｅｒｔ−ブテニル、ｎ−ペンテニル、イソペンテニル、ネオペンテニル、１−メチルプロペニル、ｎ−ヘキセニル、イソヘキセニル、１，１−ジメチルブテニル、２，２−ジメチルブテニル、３，３−ジメチルブテニル、３，３−ジメチルプロペニル、２−エチルブテニル、ヘプテニル、オクテニルまたはヘプタデカニルなどが挙げられる。
「アリール基」とは、６〜１４の炭素原子を有する芳香族の炭素環式環または環系を意味する。アリール基の例としては、例えばフェニル、１−もしくは２−ナフチル、ビフェニル、１−，２−もしくは９−アントリル、１−，２−，３−，４−もしくは９−フェナントリル、アセナフチル、アントラセニルまたはアズレニルなどが挙げられる。
「アラルキル基」とは、７〜１６の炭素原子を有する単環式アラルキルを意味する。アラルキル基の例としては、例えばベンジル、ｐ−メトキシベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、ｏ−ニトロベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ベンズヒドリル、トリチル、メチル−ナフチルまたはエチル−フェニルなどが挙げられる。
本発明におけるＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有し、配列番号：１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる選択されるポリペプチドの誘導体としては、
（ｉ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列において、アミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１または２個以上〔好ましくは数個（〜５個）〕のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列、（ｉｉ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列において、アミノ末端の１番目から４番目までの位置以外に、１または２個以上〔好ましくは数個（〜５個）〕のアミノ酸が付加したアミノ酸配列、（ｉｉｉ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列において、アミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外の１または２個以上〔好ましくは数個（〜５個）〕のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列、または（ｉｖ）それらを組み合わせたアミノ酸配列を含有するポリペプチドの誘導体などを用いてもよい。前記（ｉｉ）において付加されるアミノ酸、前記（ｉｉｉ）において置換されるアミノ酸は、非天然アミノ酸であってもよい。前記（ｉ）〜（ｉｖ）に記載のポリペプチドの誘導体は、ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性または成長ホルモンの分泌を誘導する活性を有することがより好ましい。
また、好ましくは配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列において一部のアミノ酸が欠失しているペプチドを用いてもよい。該ペプチドとしては、（ｖ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸配列からなるペプチド、（ｖｉ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から１０番目までのアミノ酸配列からなるペプチド、または（ｖｉｉ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列においてアミノ末端の１番目から１５番目までのアミノ酸配列からなるペプチドが挙げられる。
また、（ｖｉｉｉ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列におけるアミノ末端の１番目から１０番目までのアミノ酸配列において、上述したように、アミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１または２個以上〔好ましくは数個（〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列からなるペプチド、または（ｉｘ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列におけるアミノ末端の１番目から１５番目までのアミノ酸配列において、上述したように、アミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１または２個以上〔好ましくは数個（〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列からなるペプチドを用いてもよい。付加されるアミノ酸または置換されるアミノ酸は非天然アミノ酸であってもよい。前記（ｖｉｉｉ）または（ｉｘ）に記載のペプチドは、ＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性または成長ホルモンの分泌を誘導する活性を有することがより好ましい。
上記ポリペプチドの誘導体としては、好ましくは配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列において、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が、下記式（１）；
2004096260.tif 000017
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１は炭素数１〜２０の二価の炭化水素基を表す。Ｐ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−ＣＯ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＯ−、−ＣＳ−Ｓ−、−Ｓ−ＣＳ−、−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−、−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ４−ＣＯ−、−ＣＳ−ＮＲ４−ＣＳ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＳ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＳ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ１は、水素原子、置換されていてもよいＣ１−３５アルキル基、置換されていてもよいＣ２−３５アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を示す。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）もしくは−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）を表す。ただし、Ｒ１およびＲ２のいずれかがＱ１である場合、他方は−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝で示される基を有し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体（以下、ポリペプチドの誘導体Ｉという。）が、好ましい態様としてあげられる。
上記Ｔ１で示される「二価の炭化水素基」としては、炭素数が１ないし２０、好ましくは１〜１０、さらに好ましくは１〜６の直鎖または分岐アルキレン基、２ないし２０の直鎖または分岐アルケニレン基、２ないし２０の直鎖または分岐アルキニレン基などの二価の炭化水素基、フェニレン基またはそれらを組み合わせたもの（例えば、Ｃ１−６アルキレン−フェニレン、フェニレン−Ｃ１−６アルキレン、Ｃ１−４アルキレン−フェニレン−Ｃ１−４アルキレンなど）などが挙げられる。なかでも、Ｃ１−６アルキレン基、Ｃ２−６アルケニレン基、Ｃ２−６アルキニレン基、フェニレン基、Ｃ１−４アルキレン−フェニレン基が好ましい。とりわけＣ１−６アルキレン基が好ましい。
上記「二価の炭化水素基」は置換基を有していてもよい。「二価の炭化水素基」が有してもよい置換基としては、例えば置換されていてもよいＣ１−６アルキル基〔例えば、水酸基、チオール（例えば、メルカプト、メチルチオなど）、Ｃ７−１６アラルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基（例えば、フェニル、ナフチル、ヒドロキシフェニルなど）、複素環（例えば、インドール、イミダゾールなど）、カルボキシル、アミノ、グアニジノなどで置換されていてもよいアルキル基またはアルキル基など〕、Ｃ７−１６アラルキル基、Ｃ６−１４アリール基、置換されていてもよい水酸基（例、炭化水素基で置換されていてもよい水酸基など；好ましくは、Ｃ１−６アルキル基で置換されていてもよい水酸基、水酸基など）などが挙げられ、置換されていてもよいＣ１−６アルキル基が好ましい。置換基の位置および数は化学的に許容される限り特に限定されない。置換基の数は１ないし４個程度が好ましい。「フェニレン基」の置換基としては、例えば、ハロゲン原子（例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素など）、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基（例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシなど）、Ｃ１−４アルキルチオ基、水酸基、カルボキシル基、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、モノ−またはジ−Ｃ１−４アルキルアミノ基、メルカプト基、Ｃ１−４アシル基（例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリルなど）、Ｃ２−５アルコキシカルボニル基、スルホ基（−ＳＯ３Ｈ）、Ｃ１−４アルキルスルホニル基、カルバモイル基およびモノ−またはジ−Ｃ２−５アルキルカルバモイル基（例えば、Ｎ−メチルカルバモイル、Ｎ−エチルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバモイルなど）などから選ばれる１ないし４個が用いられる。
Ｐ１で示される基は、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＯ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）が好ましく、−Ｏ−ＣＯ−がとりわけ好ましい。
Ｑ１で示される「アルキル基」としては、Ｃ１−２０直鎖または分岐アルキル基が好ましく。より好ましくはＣ１−１６直鎖または分岐アルキル基が好ましく、とりわけＣ７アルキル基が好ましい。
Ｑ１で示される「アルケニル基」としては、好ましくは、Ｃ２−２０直鎖または分岐アルケニル基が好ましい。
Ｑ１で示される「アルキル基」または「アルケニル基」における置換されていてもよい置換基としては、例えばハロゲン原子；カルボキシ基；水酸基；アミノ基；ニトロ基；シアノ基；メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシなどＣ１−６アルコキシ基；ホルミルオキシ、アセトキシ、プロピオニルオキシなどのＣ７−１６アラルキルオキシ基；メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニルなどのＣ２−７アルコキシカルボニル基；Ｃ６−１４アリール基；メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、イソブチルチオなどのＣ１−６アルキルチオ基；メチルスルフィニル、エチルスルフィニルなどのＣ１−６アルキルスルフィニル基；メチルスルホニル、エチルスルホニルなどのＣ１−６アルキルスルホニル基；メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ブチルアミノなどのＣ１−６アルキルアミノ基；アセトアミド、プロピオニルアミドなどのアシルアミノ基などが挙げられる。該置換基の数は１〜５個程度、好ましくは１〜３個程度である。
Ｑ１で示される「シクロアルキル基」、「アリール基」または「アラルキル基」における、置換されていてもよい置換基としては、具体的には、Ｃ１−６アルキル基；水酸基；メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシなどのＣ１−６アルコキシ基；フッ素、塩素、臭素などのハロゲン原子；ニトロ基；シアノ基；Ｃ１−６アシル基；ホルミルオキシ、アセトキシ、プロピオニルオキシなどのＣ１−６アシルオキシ基；メルカプト基；メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、イソブチルチオなどのＣ１−６アルキルチオ基；アミノ基；メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ブチルアミノなどのＣ１−６アルキルアミノ基；ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、ジブチルアミノなどのジＣ１−６アルキルアミノ基；カルボキシ基；メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニルなどのＣ２−７アルコキシカルボニル基；アミド基；トリフルオロメチルなどのハロゲン化アルキル基；メチルスルホニル、エチルスルホニルなどのＣ１−６アルキルスルホニル基；アミノスルホニル基；Ｃ３−７シクロアルキル基；アセトアミド、プロピオニルアミドなどのアシルアミド基などが挙げられる。該置換基の位置および数は化学的に許容される範囲であれば特に限定されない。置換基の数は１乃至３個程度が好ましい。
Ｑ１で示される「Ｃ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基」は、上記炭素数１〜６のアルキル基と、上記炭素数３〜８のシクロアルキル基とが結合した置換基である。好ましくは、Ｃ１−４アルキレン−フェニレンである。「置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基」における置換基は、Ｃ１−６アルキル基部分が有していてもよいし、Ｃ３−８シクロアルキル基部分が有していてもよい。Ｃ１−６アルキル基部分の置換基としては上述のアルキル基の置換基と同一の置換基を例示でき、Ｃ３−８シクロアルキル基部分としては、上述のシクロアルキル基の置換基と同一の置換基を例示できる。
上記態様のポリペプチドの誘導体Ｉにおいては、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が、下記式（２）；
2004096260.tif 000018
｛式中、Ｒ３は、−Ｔ２−Ｐ２−Ｑ２（式中、Ｔ２は、Ｃ１−６アルキレン基、Ｃ２−６アルケニレン基、Ｃ１−４アルキレン−フェニレン基を表す。Ｐ２は、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＯ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）を表す。Ｑ２は、置換されていてもよいＣ１−２０アルキル基、置換されていてもよいＣ２−２０アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基を表す。）または−Ｐ２−Ｑ２（式中、Ｐ２およびＱ２は前記と同意義。）を表す。｝
で示される基を有することがより好ましい。
上記式（２）において、置換基Ｒ３が−Ｔ２−Ｐ２−Ｑ２の場合、置換基Ｔ２は、Ｃ１−６アルキレン基またはＣ１−４アルキレン−フェニレンが好ましく、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレンまたはメチレン−フェニレンがより好ましい。
上記式（２）において、置換基Ｒ３が−Ｔ２−Ｐ２−Ｑ２または−Ｐ２−Ｑ２の場合、置換基Ｐ２が−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｓ−Ｓ−、−ＣＯ−ＮＲ４−または−ＮＲ４−ＣＯ−（Ｒ４は、水素またはＣ１−４アルキル基を表す。）で、置換基Ｑ２が置換されていてもよいＣ１−２０アルキル基（好ましくはＣ１−１６アルキル基、とりわけ好ましくはＣ７アルキル基）または置換されていてもよいＣ２−２０アルケニル基であるか、置換基Ｐ２が−Ｏ−または−Ｓ−で、置換基Ｑ２が置換されていてもよいＣ１−２０アルキル基、置換されていてもよいＣ２−２０アルケニル基、置換されていてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ１−６アルキレン−Ｃ３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ６−１４アリール基または置換されていてもよいＣ７−１６アラルキル基であることが好ましい。該Ｑ２で示される基に置換してもよい置換基は、前記Ｑ１で示される基に置換する置換基と同じである。
上記態様のポリペプチドの誘導体Ｉにおけるアミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基としては、下記アミノ酸残基も好適である。まず、側鎖に水酸基を有するアミノ酸残基の水酸基がエステル、チオエステルまたはエーテルなどを形成しているアミノ酸残基が挙げられる。具体的には、側鎖の水酸基が−ＯＣＯ−Ｑ２、−ＯＣＳ−Ｑ２または−Ｏ−Ｑ２（Ｑ２は前記と同意義。）で表される置換基に変換されているセリン、トレオニン、チロシンまたはオキシプロリンなどが挙げられる。次に、側鎖にメルカプト基を有するアミノ酸残基のメルカプト基がチオエステル、チオエーテルまたはジスルフィドなどを形成しているアミノ酸残基が挙げられる。具体的には、−ＳＣＯ−Ｑ２、−ＳＣＳ−Ｑ２、−Ｓ−Ｑ２または−Ｓ−Ｓ−Ｑ２（Ｑ２は前記と同意義。）で表される置換基に変換されているシステインなどが挙げられる。次に、側鎖にアミノ基を有するアミノ酸残基の側鎖のアミノ基が、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミド、カルバモイルなどを形成しているアミノ酸残基が挙げられる。具体的には、側鎖のアミノ基が−ＮＲ４−ＣＯ−Ｑ２、−ＮＲ４−ＣＳ−Ｑ２、−ＮＨ（Ｑ２）、−Ｎ（Ｑ２）（Ｑ２’）、−ＮＲ４−ＣＯ−ＮＲ４−Ｑ２、−ＮＲ４−ＣＳ−ＮＲ４−Ｑ２（Ｑ２およびＲ４は前記と同意義。Ｑ２’は、Ｑ２と同一または異なってよく、Ｑ２と同意義）で表される置換基に変換されているリジンまたはアルギニンなどが挙げられる。次に、側鎖にイミノ基を有するアミノ酸残基のイミノ基が、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミド、カルバモイルなどを形成しているアミノ酸残基が挙げられる。具体的には、側鎖のイミノ基が、下記式；
2004096260.tif 000019
（式中、Ｑ２は前記と同意義。）
で表される置換基に変換されているヒスチジン、トリプトファン、プロリンまたはオキシプロリンなどが挙げられる。
アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基は、なかでも、側鎖の水酸基が−ＯＣＯ−Ｑ２、−ＯＣＳ−Ｑ２または−Ｏ−Ｑ２（Ｑ２は前記と同意義。）で表される置換基に変換されているセリン、トレオニン、チロシンまたはオキシプロリンであるか、側鎖のメルカプト基が−ＳＣＯ−Ｑ２、−ＳＣＳ−Ｑ２、−Ｓ−Ｑ２または−Ｓ−Ｓ−Ｑ２（Ｑ２は前記と同意義。）で表される置換基に変換されているシステインであることがより好ましい。さらに、アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基は、側鎖の水酸基が−ＯＣＯ−Ｑ２、−ＯＣＳ−Ｑ２または−Ｏ−Ｑ２（Ｑ２は前記と同意義。）で表される置換基に変換されているセリンであるか、側鎖のメルカプト基が−ＳＣＯ−Ｑ２（Ｑ２は前記と同意義。）で表される置換基に変換されているシステインであることがさらに好ましい。アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基は、側鎖の水酸基が−ＯＣＯ−Ｑ２（Ｑ２は前記と同意義。）で表される置換基に変換されているセリンが特に好ましい。
アミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基としては、側鎖の水酸基に脂肪酸がエステル結合したアミノ酸残基も好ましい態様として挙げられる。この場合、側鎖に水酸基を有するアミノ酸としては、セリン、トレオニン、チロシンまたはオキシプロリンが挙げられ、なかでもセリンまたはトレオニンが好ましく、セリンが特に好ましい。脂肪酸としては、飽和であっても、不飽和であってもよく、その炭素数は好ましくは２〜３６、より好ましくは２〜２１、さらに好ましくは２〜１７である。そのような脂肪酸としては、具体的には、酢酸、酪酸、イソ酪酸、吉草酸（ペンタン酸）、イソ吉草酸、ピバル酸、カプロン酸（ヘキサン酸）、オクタン酸（好ましくは、カプリル酸）、デカン酸（好ましくは、カプリン酸）、ドデカン酸（好ましくは、ラウリル酸）、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、リグノセリン酸などの飽和脂肪酸、ソルビン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、リシノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）等の不飽和脂肪酸が挙げられる。なかでも、酢酸、酪酸、カプロン酸（ヘキサン酸）、オクタン酸（好ましくは、カプリル酸）が好ましく、とりわけオクタン酸が好ましい。
上記ポリペプチドの誘導体Ｉとしては、ヒトなどのグレリンおよび、前記グレリンを構成する配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列において、配列番号１〜２２で表されるアミノ酸配列のアミノ末端から２番目または３番目のセリン、トレオニンまたはロイシンが上記式（１）を有し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体が好ましく挙げられる。
また、ポリペプチドの誘導体Ｉとしては、上記ヒトなどのグレリンを構成する配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列において、配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列のアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１または２個以上〔好ましくは数個（２〜５個）〕のアミノ酸が欠失、付加または置換、あるいはそれらを組み合わせたアミノ酸配列であって、アミノ末端から２番目または３番目が上記式（１）を有し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体であってもよい。前記において付加されるアミノ酸または／および置換されるアミノ酸は、非天然アミノ酸であってもよい。
また、本発明においては、上記ヒトなどのグレリンを構成する配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列において、（ａ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列におけるアミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体であって、アミノ末端から２番目または３番目が上記式（１）を有し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するもの、（ｂ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列におけるアミノ末端の１番目から１０番目までのアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体であって、アミノ末端から２番目または３番目が上記式（１）を有し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するもの、また、（ｃ）配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列におけるアミノ末端の１番目から１５番目までのアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体であって、アミノ末端から２番目または３番目が上記式（１）を有し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するものも好ましく用いることができる。
また、上記配列番号：１〜２２で表わされるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列において、（ｄ）アミノ末端の１番目から１０番目までのアミノ酸配列において、上述したように、アミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１または２個以上〔好ましくは数個（２〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体であって、アミノ末端から２番目または３番目が上記式（１）を有し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体、または（ｅ）アミノ末端の１番目から１５番目までのアミノ酸配列において、上述したように、アミノ末端の１番目から４番目までのアミノ酸残基以外で１または２個以上〔好ましくは数個（２〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列を有するポリペプチドの誘導体であって、アミノ末端から２番目または３番目が上記式（１）を有し、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するものも好ましく用いることができる。付加されるアミノ酸または置換されるアミノ酸は非天然アミノ酸であってもよい。
また、本発明においては、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは、アミノ酸残基、ジペプチドまたはトリペプチド相当の分子鎖長を有し、かつＣ、Ｈ、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選ばれる１種以上の原子からなる有機基を表し、
Ｙは、下記式（１）；
2004096260.tif 000020
｛式中、Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、−Ｔ１−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｔ１、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）、−Ｐ１−Ｑ１（式中、Ｐ１およびＱ１は前記と同意義。）または−Ｑ１（式中、Ｑ１は前記と同意義。）で示される基を表し、
Ｚは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体およびＱ１は前記と同意義。）を表す。｝
で、かつＧＨＳ−Ｒに結合することによって細胞内のカルシウムイオン濃度を上昇させる活性を有するポリペプチドの誘導体（以下、ポリペプチドの誘導体ＩＩという。）も、好ましく用いることができる。
上記式（３）のＸにおいて、アミノ酸残基相当の分子鎖長とは、式；
2004096260.tif 000021
（Ｒは天然アミノ酸のα炭素原子に結合している側鎖を表す。）
で示されるアミノ酸残基１個分のペプチドユニットであるＮ−Ｃ結合の長さとＣ−Ｃ結合の長さをあわせた長さに相当する分子鎖長を有する有機基をいう。当該分子鎖長としては、分子鎖長を構成する原子Ｃ，Ｏ，Ｎ，Ｓの結合様式により、±２０％程度、好ましくは±１０％程度の変動を含むものをいう。
ジペプチド相当の分子鎖長とは、式；
2004096260.tif 000022
（Ｒは前記定義に同じ。なお、Ｒは繰り返し単位ごとに同一であっても、異なってもよい。）
で示される上記アミノ酸残基２分子分のペプチドユニットに相当する分子鎖長および該鎖長を構成する原子Ｃ，Ｏ，Ｎ，Ｓの結合様式により、±２０％程度、好ましくは±１０％程度の変動を含むものをいう。トリペプチド相当の分子鎖長とは、式；
2004096260.tif 000023
（Ｒは前記定義に同じ。なお、Ｒは繰り返し単位ごとに同一であっても、異なってもよい。）
で示される上記アミノ酸残基３分子分のペプチドユニットに相当する分子鎖長および該鎖長を構成する原子Ｃ，Ｏ，Ｎ，Ｓの結合様式により、±２０％程度、好ましくは±１０％程度の変動を含むものをいう。なかでも、Ｘは、アミノ酸残基またはジペプチド相当の分子鎖長を有することが好ましく、ジペプチド相当の分子鎖長を有することがより好ましい。
Ｘとしては、式（４）；Ｈ２Ｎ−Ｘ１−ＣＯ−（Ｘ１は、置換基を有していてもよいＣ４アルキレン基、または前記Ｃ４アルキレン基の少なくとも１の炭素がＯ、ＮまたはＳで置き換えられている有機基を表す。）で示される有機基であることが特に好ましい。Ｘ１としては、−（Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６））４−（式中、Ｒ５およびＲ６は、同一または異なってよく、置換されていてもよいＣ１−６アルキル基または置換されていてもよいＣ２−６アルケニル基を表す。また、Ｒ５およびＲ６は、繰り返し単位ごとに同一であっても、異なってもよい。）で示される置換基、または前記置換基における４つの繰り返し単位のうち、少なくとも１単位が（ＮＲ７）（式中、Ｒ７は、置換されていてもよいＣ１−６アルキル基または置換されていてもよいＣ２−６アルケニル基を表す。）またはＯに置き換えられている置換基も挙げられる。具体的に、Ｘ１としては、例えば、−（ＣＨ２）３ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−、−（ＣＨ２）４−、−Ｃ（ＣＨ３）２−（ＣＨ２）３−または−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）２−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−ＣＨ２−などが挙げられる。
上記式（３）において、Ｙとしては上記ポリペプチドの誘導体Ｉのアミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が有する式（１）で示される基と同一の例が挙げられる。
上記式（３）において、Ｚとしては天然アミノ酸残基またはその光学異性体であれば特に限定されないが、疎水性天然アミノ酸またはそのＤ−体が好適である。疎水性天然アミノ酸としては、例えばロイシン、バリン、イソロイシン、トリプトファンまたはフェニルアラニンが挙げられ、なかでもトリプトファンまたはフェニルアラニンなどの芳香族の疎水性アミノ酸が好ましい。また、Ｚとしては、リジン、アルギニンまたはヒスチジンなどの塩基性天然アミノ酸も好ましく、なかでもリジンがより好ましい。
また、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ（式中、Ｘ、ＹおよびＺは上記と同意義。）で示される構造からなるペプチド系化合物に、配列番号：１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１または２個以上〔好ましくは数個（２〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合している構造からなるポリペプチドの誘導体（以下、ポリペプチドの誘導体ＩＩＩという。）も、他の好ましい態様として挙げられる。
ポリペプチドの誘導体ＩＩＩにおいて、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ（式中、Ｘ、ＹおよびＺは上記と同意義。）で示される構造からなるポリペプチドの誘導体については、ポリペプチドの誘導体ＩＩについての記載が当てはまる。
ポリペプチドの誘導体ＩＩＩにおいて、式（３）；Ｘ−Ｙ−Ｚ（式中、Ｘ、ＹおよびＺは上記と同意義。）で示される構造からなるポリペプチドの誘導体に結合するアミノ酸配列は、配列番号：１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列において、アミノ末端の５番目から１０番目に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分もしくは前記部分において１または２個以上〔好ましくは数個（２〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列、または配列番号：１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列において、アミノ末端の５番目から１５番目に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分もしくは前記部分において１または２個以上〔好ましくは数個（２〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が好適な例として挙げられる。
また、本発明においては、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ［式中、ＡおよびＤは、天然アミノ酸残基またはその光学異性体であり、
ＢおよびＣは、その一方または両方が、下記式（１）；
2004096260.tif 000024
（式中、Ｒ１およびＲ２は上記と同意義。）
で示される基を表し、
ＢおよびＣの一方のみが式（１）で示されるアミノ酸残基の場合、他方は天然アミノ酸残基またはその光学異性体である。］
で示される構造からなるポリペプチドの誘導体（以下、ポリペプチドの誘導体ＩＶという。）も、好ましく用いることができる。
上記式（５）において、ＢまたはＣが式（１）で示される基の場合、かかる基としては上記ポリペプチドの誘導体Ｉのアミノ末端から２番目または３番目のアミノ酸残基が有する基と同一の基が挙げられる。Ｃのみが式（１）で示される基の場合、Ｂは天然アミノ酸残基またはその光学異性体であればよいが、なかでも小さな側鎖を有するアラニン、セリン、ヒスチジンもしくそれらのＤ−体またはグリシンなどが好適である。Ｂのみが式（１）で示される基の場合、Ｃは天然アミノ酸残基またはその光学異性体であればよいが、なかでも疎水性天然アミノ酸もしくは塩基性天然アミノ酸、またはそれらのＤ−体が好適である。
上記式（５）において、Ａは天然アミノ酸残基またはその光学異性体であればよいが、なかでもグリシンが好適である。
上記式（５）において、Ｄは天然アミノ酸残基またはその光学異性体であればよいが、なかでも疎水性天然アミノ酸もしくは塩基性天然アミノ酸、またはそれらのＤ−体が好適である。
本発明においては、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ（式中、Ａ，Ｂ，ＣおよびＤは上記と同意義。）で示される構造からなるポリペプチドの誘導体に、配列番号：１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列におけるアミノ末端の５番目からカルボキシル末端に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分または前記部分において１または２個以上〔好ましくは数個（２〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が結合している構造からなるポリペプチドの誘導体（以下、ポリペプチドの誘導体Ｖという。）も、他の好ましい態様として挙げられる。
ポリペプチドの誘導体Ｖにおいて、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ（式中、Ａ，Ｂ，ＣおよびＤは上記と同意義。）で示される構造からなるポリペプチドの誘導体については、ポリペプチドの誘導体ＩＶについての記載が当てはまる。
ポリペプチドの誘導体Ｖにおいて、式（５）；Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ（式中、Ａ，Ｂ，ＣおよびＤは上記と同意義。）で示される構造からなるポリペプチドの誘導体に結合するアミノ酸配列は、配列番号：１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列において、アミノ末端の５番目から１０番目に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分もしくは前記部分において１または２個以上〔好ましくは数個（２〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列、または配列番号：１〜２２に記載のアミノ酸配列からなる群から選択されるひとつのアミノ酸配列において、アミノ末端の５番目から１５番目に至るまでのアミノ酸配列に相当する部分もしくは前記部分において１または２個以上〔好ましくは数個（２〜５個）〕のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加したアミノ酸配列が好適な例として挙げられる。
以上述べたグレリンまたはポリペプチドの誘導体Ｉ〜Ｖにおいて、カルボキシル末端に更に塩基性アミノ酸を結合させてもよい。ここで、塩基性アミノ酸としては、上述したリジン、アルギニンまたはヒスチジンなどの塩基性天然アミノ酸、もしくはそれらのＤ−体、またはそれらのＤ−もしくはＬ−Ｎ−メチルアミノ酸などが挙げられる。
また、以上述べたグレリンまたはポリペプチドの誘導体Ｉ〜Ｖにおいて、カルボキシル末端のカルボキシル基が、塩、エステルまたはアミドを形成していてもよい。カルボキシル基が塩を形成する場合、その塩は薬学的に許容される塩が好ましい。薬学的に許容される塩としては、例えば無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などが挙げられる。無機塩基との塩の好適な例としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩；ならびにアルミニウム塩、アンモニウム塩などが挙げられる。有機塩基との塩の好適な例としては、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンなどとの塩が挙げられる。無機酸との塩の好適な例としては、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などとの塩が挙げられる。有機酸との塩の好適な例としては、例えばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマール酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などとの塩が挙げられる。塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えばアルギニン、リジン、オルニチンなどとの塩が挙げられ、酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えばアスパラギン酸、グルタミン酸などとの塩が挙げられる。これらの塩の中でも、酢酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩が最も好ましい。
カルボキシル末端のカルボキシル基がエステルを形成している場合、かかるエステルとしては、式；ＣＯＯＲ８（式中、Ｒ８は、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ６−１４アリール基、Ｃ７−１６アラルキル基を示す。）で示されるエステルが挙げられる。
カルボキシル末端のカルボキシル基がアミドを形成している場合、かかるアミドとしては、式；−ＣＯＮ（Ｒ９）（Ｒ１０）（Ｒ９またはＲ１０は、同一または異なって、水素、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ６−１４アリール基、Ｃ７−１６アラルキル基を示す。）で示されるアミドが挙げられる。とりわけ−ＣＯＮＨ２が好ましい。
カルボキシル末端のカルボキシル基がエステルまたはアミドを形成している場合、エステルまたはアミドにさらにアミノ基またはグアニジド基などの塩基性基が結合していてもよい。
本発明において使用できるポリペプチドの誘導体の具体例としては、例えばヒト由来のグレリン〔配列番号１および２で示されるアミノ配列の３位セリン残基が酢酸、酪酸、吉草酸、オクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
ラット由来のグレリン〔配列番号３および４で示されるアミノ配列の３位セリン残基が酢酸、酪酸、吉草酸、オクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
マウス由来のグレリン〔配列番号５で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
ブタ由来のグレリン〔配列番号６および７で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
ウシ由来のグレリン〔配列番号８で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
ヒツジ由来のグレリン〔配列番号９で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
イヌ由来のグレリン〔配列番号１０で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
ウナギ由来のグレリン〔配列番号１１で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
ニジマス由来のグレリン〔配列番号１２および１３で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
ニワトリ由来のグレリン〔配列番号１４，１５および１６で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
カエル由来のグレリン〔配列番号１７および１８で示されるアミノ配列の３位トレオニン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
テラピア由来のグレリン〔配列番号１９で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；
ナマズ由来のグレリン〔配列番号２０および２１で示されるアミノ配列の３位セリン残基がオクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕；または
ウマ由来のグレリン〔配列番号２２で示されるアミノ配列の３位セリン残基が酪酸、オクタン酸またはデカン酸でアシル化されたポリペプチドの誘導体。〕
が好ましく挙げられ、ヒト、ラット、マウス、ブタ、ウシ、ヒツジ、イヌまたはウマ由来のグレリンがより好ましく、ヒト由来のグレリンが特に好ましい。
また、
2004096260.tif 000025
2004096260.tif 000026
2004096260.tif 000027
2004096260.tif 000028
などが好ましく用いられる。
本発明に係る上記グレリンまたはポリペプチドの誘導体は公知の方法により得ることができる。例えば、天然の原料から単離する方法、組換えＤＮＡ技術を用いる方法、化学的に合成する方法、組換えＤＮＡ技術と化学的合成を組み合わせる方法などが挙げられる。天然の原料から単離する方法としては、例えば消化管のグレリン産生細胞を培養してグレリンを単離精製する方法が挙げられる。組換えＤＮＡ技術を用いる方法としては、グレリン遺伝子を含有するベクターにより、消化管細胞などに代表されるペプチド中の少なくともひとつのアミノ酸残基の側鎖を修飾することができる宿主細胞を形質転換し、得られた形質転換細胞を培養して培養物から目的のポリペプチドの誘導体を採取する方法などが挙げられる。化学的に合成する方法としては、当該技術分野で常用されている固相合成法または液相合成法などが挙げられる。組換えＤＮＡ技術と化学的合成を組み合わせる方法としては、グレリンの一部を化学合成法により製造し、残りを遺伝子操作法により製造して、両者を縮合する方法などが挙げられる。より具体的に、本発明に係るポリペプチドの誘導体の製造方法としては、ＷＯ０１／０７４７５号公報および特願２００３−１０６５３３号公報に記載の方法が挙げられる。
細胞内カルシウムイオン濃度の測定は公知の方法が利用できるが、望ましくは、カルシウムイオン濃度変化によるＦｌｕｏ−４  ＡＭ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅ社）の蛍光強度の変化を利用したＦＬＩＰＲ（Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ社）またはＦＬＥＸ  ｓｔａｔｉｏｎＴＭ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ社）を用いるのがよい。
ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏでＧＨ分泌誘導活性を確認するためには、公知の方法を利用することができる。例えばｉｎ  ｖｉｔｒｏでは、ＧＨを分泌してＧＨＳ−Ｒの発現も確認されている脳下垂体細胞に被検物質を添加して、細胞培養液中に分泌されるＧＨを、抗ＧＨ抗体を用いたラジオイムノアッセイによって測定するという方法が挙げられる。また上記ラジオイムノアッセイ法において、抗ＧＨ抗体の代わりに他のホルモンに対する抗体を用いれば、該ホルモンの分泌量も測定できる。ｉｎ  ｖｉｖｏでのＧＨ分泌誘導活性を確認するためには、被検物質を動物（例えば、ラット）の末梢静脈に注射した後の血清中のＧＨ濃度を測定すればよい。
本発明の肝障害の予防または治療剤は、上記ポリペプチドの誘導体、またはそれらの薬理学的に許容される塩を含む。前記薬理学的に許容される塩としては上述の例と同一の塩を例示できる。本発明の肝障害の予防または治療剤は、ポリペプチドの誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩を含んでいればよいが、通常はこれら有効成分と自体公知の薬理学的に許容しうる担体とを混合して用いる。前記有効成分と所望により薬理学的に許容しうる担体とからなる医薬組成物は、例えば、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤もしくはカプセル剤などの固形剤；注射剤もしくはシロップ剤などの液状製剤；坐剤、点眼剤、点鼻剤、トローチ剤、外用液剤、エアゾール剤などの外用剤など公知の形態をとり得る。本発明の肝障害の予防または治療剤は、注射剤、点鼻剤、エアゾール剤などの形態を有することが好ましい。注射剤としては、本発明の有効成分と所望により薬理学的に許容しうる担体を含む凍結乾燥製剤を用時に溶媒に溶解する形態を有していてもよい。
薬学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤；液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤などとして配合される。また必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤などの製剤添加物を用いることもできる。
賦形剤の好適な例としては、例えば乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸、デキストランおよびその誘導体などが挙げられる。滑沢剤の好適な例としては、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカなどが挙げられる。結合剤の好適な例としては、例えば結晶セルロース、白糖、Ｄ−マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、デキストランおよびその誘導体などが挙げられる。崩壊剤の好適な例としては、例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウムなどが挙げられる。顆粒剤及び錠剤には、適当なコーティング剤（ゼラチン、白糖、アラビアゴム、カルナバロウ等）、腸溶性コーティング剤（例えば酢酸フタル酸セルロース、メタアクリル酸コポリマー、ヒドロキシプロピルセルロースフタレート、カルボキシメチルエチルセルロース等）などで剤皮を施してもよい。カプセル剤は、通常のカプセル剤の他、腸溶性コーティングカプセル剤、胃内抵抗性カプセル剤、放出制御カプセル剤とすることもできる。腸溶性カプセル剤とする場合、腸溶性コーティング剤でコーティングした本発明の肝障害の予防治療剤に上記の適当な賦形剤を添加したものを通常のカプセルに充填する。あるいは、腸溶性コーティング剤でコーティングしたカプセル、若しくは腸溶性高分子を基剤として成形したカプセルに本発明の肝障害の予防治療剤を充填することができる。
溶剤の好適な例としては、例えば注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油などが挙げられる。溶解補助剤の好適な例としては、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。懸濁化剤の好適な例としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリンなどの界面活性剤；例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの親水性高分子などが挙げられる。等張化剤の好適な例としては、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトールなどが挙げられる。緩衝剤の好適な例としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩などの緩衝液などが挙げられる。無痛化剤の好適な例としては、例えばベンジルアルコールなどが挙げられる。防腐剤の好適な例としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸などが挙げられる。抗酸化剤の好適な例としては、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸などが挙げられる。
本発明にかかる薬剤が坐剤の剤形を有する場合は、親油性基剤、水溶性基剤または乳剤性基剤に、本発明の有効成分、および所望により、例えば、局所麻酔薬、抗ヒスタミン剤、局所収斂剤、サルファ剤、抗生物質、瘡傷治療薬、界面活性剤、ビタミン類、生薬エキス、胆汁酸類、防腐剤、賦形剤、吸収促進剤またはアミノ酸などを含有することにより本発明にかかる薬剤を製造することができる。
本発明にかかる薬剤が外用液剤の剤形を有する場合、薬学的に許容される担体としては、例えば、緩衝剤、安定化剤、防腐剤、ｐＨ調製剤、溶剤、溶解補助剤、着香剤、ゲル化剤、矯味剤または清涼化剤などなどが挙げられる。前記溶剤としては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、エタノール、イソプロパノール、ブチレングリコール、水、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、ブドウ糖、イプシロンアミノカプロン酸、グリシン、グルタミン酸塩、ヒアルロン酸ナトリウム、ポリエチレングリコール類、カルボキシビニルポリマー類やセタノール、ステアリルアルコールなどの高級アルコール類、中鎖脂肪酸エステル類やミリスチン酸イソプロピルなどの脂肪酸エステル類、ステアリン酸などの高級脂肪酸、スクワラン、流動パラフィン、白色ワセリンまたは精製ラノリンなどを挙げることができる。
前記外用液剤を通常噴射剤と共に用いることによりエアゾール剤を製造することができる。噴射剤としては通常エアゾールに用いられるジメチルエーテル、液化石油ガス、Ｎ２ガス、亜酸化窒素ガス、ＣＯ２ガス、代替フロンガスなどを挙げることができる。噴射剤を用いないで圧縮空気を用いることもできる。また、これらの混合物を用いてもよい。
本発明のポリペプチドの誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩は毒性が低く、ヒトまたはヒト以外の哺乳動物（例、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、サルなど）に対して用いることができる。投与量は、患者の症状、栄養状態、年齢、体重または併用薬剤などにより異なるので一概にはいえないが、成人に非経口投与、好ましくは静脈内、皮下または筋肉内注射を行う場合、１日約０．００１〜１００ｍｇであり、好ましくは約０．０１〜１０ｍｇであり、より好ましくは約０．１〜１０ｍｇである。この量を１日１回乃至数回投与するのが望ましい。本発明の薬剤は患者の静脈内、皮下、筋肉内に投与することが好ましく、在宅治療の場合には経口投与、経鼻投与、経肺投与、坐剤投与が望ましい。投与期間としては、約４〜２４週間が好ましく、より好ましくは約４〜１２週間が好ましい。
本発明の肝障害の予防または治療剤は、特に、肝炎、肝硬変または肝不全に有効である。肝炎としては、ウィルス性肝炎、アルコール性肝炎、薬物性肝炎または自己免疫性肝炎などが挙げられる。
本発明の肝障害の予防または治療剤は、ポリペプチドの誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩が有する肝細胞増殖促進作用を利用して、肝臓手術後の肝再生・肝機能回復促進剤として用いることもできる。肝臓手術として、具体的には、例えば肝切除術などが挙げられる。
【実施例】  以下に実施例を示し、本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれに限定されないことはいうまでもない。
【実施例１】  ジメチルニトロソアミン（ＤＭＮ）誘発肝線維症／肝硬変モデルを用いたグレリン投与実験（生存率の評価）
ＤＭＮにより誘発される肝線維症／肝硬変モデルラットを作製し、ラットグレリンを皮下注射して肝臓障害に対する効果を調べた。なお、本実施例の経時的な流れを第１図に示した。
（１）ＤＭＮ誘発肝線維症／肝硬変モデルの作製
ＤＭＮ（和光純薬株式会社製）を生理食塩液（株式会社大塚製薬工場製、日局生理食塩液）で１％の濃度（ｖ／ｖ）に希釈したものを用時調製して、ＤＭＮが１ｍＬ／ｋｇとなるように雄性ラット（４週齢）に対し腹腔内投与した。投与は１日１回、１週間に３日間連続して６週間反復投与し、初回投与日をｄａｙ１とした。
（２）投与液の作製
ラットグレリン（株式会社ペプチド研究所より購入）を、その濃度が１ｍｇ／ｍＬとなるように溶媒である５重量％マンニトールに加えて溶解した後、１回当たりの必要量毎に分注し、使用するまで約−８０℃で凍結保存した。用時融解し、３０および３μｇ／ｍＬの濃度となるように生理食塩水で希釈して投与液とした。
（３）グレリン投与
（１）で得られたＤＭＮ処置ラットに対し、（２）で調整したグレリン３μｇ／ｍＬを含む投与液またはグレリン３０μｇ／ｍＬを含む投与液をそれぞれ１ｍＬ／ｋｇ背部皮下に投与した。また、対照群として、（１）で得られたＤＭＮ処置ラットに対し、グレリンを含まない生理食塩水を１ｍＬ／ｋｇ背部皮下に投与した。前記投与は、ＤＭＮ初回投与日（ｄａｙ１）から１日１回ずつ毎日、８週間にわたって行った。
（４）結果
第２図に生理食塩水投与群、グレリン３μｇ／ｋｇ投与群および３０μｇ／ｋｇ投与群の生存曲線を示した。生理食塩水投与群は、処理を開始後４０日目に死亡例が出始め、５６日目には半数が死亡した。これに対して、グレリン３μｇ／ｋｇ投与群のラットでは５６日目に７５％が生存し、グレリン３０μｇ／ｋｇ投与群では全例が生存した。以上の結果より、グレリンはＤＭＮによる肝線維症・肝硬変モデルにおいて、死亡率を劇的に低下させる効果が認められた。
【実施例２】  ＤＭＮ誘発肝線維症／肝硬変モデルを用いたグレリン投与実験（各種パラメータの評価）
投与日数を８週間から３５日にした以外は実施例１と同一の方法で実験を行い、臓器重量、血液学および血清生化学の観点からラットグレリンの肝臓障害に対する効果を評価した。なお、ＤＭＮ処置しない群（正常ラット）をコントロール群として置いた。
（１）臓器重量
第１表に、ＤＭＮ誘発肝線維症ラットに対する生理食塩水またはグレリンの皮下注射前後の臓器重量、および腹水出現頻度を、正常ラットのデータとともに示した。なお、表中のΔ臓器重量（ｇ）は次式；
Δ臓器重量（ｇ）＝投与３５日目の臓器重量（ｇ）−投与前の臓器重量（ｇ）
により算出し、表中の数値はその平均値±Ｓ．Ｅ．を示す。
正常ラットに比べて生理食塩水およびグレリン３μｇ／ｋｇ投与群の肝臓重量は低下したのに対し、グレリン３０μｇ／ｋｇ投与群では肝臓重量低下が抑えられる傾向があった。脾臓重量は正常ラットに比べて生理食塩水およびグレリン３μｇ／ｋｇ投与群では約２倍強に増加したが、グレリン３０μｇ／ｋｇ投与群ではやや増加が抑制された。生理食塩水投与群では腹水出現が半数弱観察されたが、グレリン３０μｇ／ｋｇ投与群では出現しなかった。
2004096260.tif 000029
（２）血液学
第２表に、ＤＭＮ誘発肝線維症ラットに対する生理食塩水またはグレリンの皮下注射前後の血液学データを、正常ラットのデータとともに示した。
正常ラットと比べて、生理食塩水投与群ではＤＭＮ処理により白血球数が増加する傾向を示し、赤血球数が減少し、血小板数が減少する傾向が認められた。しかし、グレリン３０μｇ／ｋｇ投与により、血小板数が回復した。また、他の血球数も正常レベルに回復する傾向を示した。
2004096260.tif 000030
（３）血清生化学
第３表に、ＤＭＮ誘発肝線維症ラットに対する生理食塩水またはグレリンの皮下注射前後の凝固線溶系データを、正常ラットのデータとともに示した。
正常ラットに比べて、生理食塩水投与群では血清中フィブリノーゲンが減少し、ヘパプラスチン時間が延長する傾向が認められた。しかし、グレリン投与によりフィブリノーゲンが回復して正常化に向かい、ヘパプラスチン時間も正常化する傾向が観察された。
2004096260.tif 000031
【実施例３】  グレリン１週間反復投与によるラット肝細胞増殖促進作用
Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラットにグレリン１０μｇ／ｋｇを１日２回、７日間反復静脈内投与し、投与終了翌日に肝臓を摘出・固定した。細胞増殖期に発現するペプチドとしてｋｉ−６７タンパクを免疫染色した。
グレリンによる肝細胞増殖作用を定量的に評価するため、生理食塩水投与群１例およびグレリン投与群１例の肝臓切片の８箇所を任意に選び、画面内のおよそ２００個の肝細胞のうちのｋｉ−６７陽性細胞数を顕微鏡下に計測した。
第３図に示したように、光学顕微鏡下にｋｉ−６７陽性細胞をカウントし、生理食塩水投与群と比較したところ、グレリン投与群において、増殖期細胞が生理食塩水投与群に比べておよそ２〜１０倍増加していた。
また、下記表に示したように、生理食塩水投与群では、ｋｉ−６７陽性細胞数は観察した肝細胞２２８±２７個のうちの２．５±１．２個であり、率にして１．０７±０．４０％であった。これに対して、グレリン投与群では、肝細胞２３１±２７個のうちの２０．９±６．１個（ｐ＜０．０００１）がｋｉ−６７陽性であり、率にして９．２８±３．２６％であった。
2004096260.tif 000032
【実施例４】  肝切除術後の肝重量
Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラットを麻酔下に肝臓を７０％切除し、４０％制限摂餌下にグレリンの３０μｇ／ｋｇまたは生理食塩水を１日２回、３日間、皮下注射した。４日後に肝臓を摘出し、肝重量を測定した。
４０％制限摂餌下のラットにおいて、肝臓切除後に生理食塩水を皮下注射した群に比べて、グレリンを皮下注射した群では肝臓重量が増加した（第５表）。
2004096260.tif 000033
肝炎、肝硬変や肝癌で肝切除手術後などの肝障害時の病態では、消化器症状がみられ栄養状態が悪化していることが多く、食事摂食が不十分で回復が不十分なことが多い〔内科学書３、山村、吉利監修、中山書店、ｐ．１０９５〜１２５０（１９８７）〕。制限摂餌下の検討では、このような悪条件でのグレリンの回復効果を検討したものである。
肝硬変や肝癌における肝臓切除術後、あるいは肝臓移植や肝臓再生医療において、グレリンは肝細胞再生を促し、障害の予防や早期治癒に有用であることが示された。
【実施例６】  臓器血流量
麻酔下のＷｉｓｔａｒ系雄性ラットに、グレリン３０μｇ／ｋｇまたは生理食塩水を皮下注射し、直ちにマイクロスフィア（直径１５．５μｍ、Ｔｒｉｒｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．）１５０万個を静脈内投与して１分後に臓器を摘出して臓器中マイクロスフィア量を測定し、時間あたりの臓器血流量を測定した〔Ｓｈａｒｏｎ  Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，７８，ｐ．４２８−４３４（１９８８）；Ｋａｗａｉ  Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ．Ｒｅｓ．，２５，ｐ．４４１−４４６（２００２）〕。
生理食塩水投与群（コントロール）に比べて、グレリン投与群では肝臓、脾臓、胃における臓器血流量が増加し（ｐ＜０．０５）、空腸では増加傾向を示した（第６表）。
2004096260.tif 000034
肝硬変などの障害時には、肝血流量が低下し、脾臓重量が増加することが分かっており、肝機能悪化や血小板低下などの障害につながることが示唆されている〔内科学書３、山村、吉利監修、中山書店、ｐ．１０９５−１２５０（１９８７）〕。
グレリン投与によるこれら臓器の血流量増加作用から、肝障害時に見られる臓器傷害抑制にグレリンが有用であることが示された。すなわち、肝硬変では増殖した結合組織や再生結節のために、肝静脈枝の狭窄ならびに閉塞が生じ、門脈圧亢進や肝うっ血が惹起され、肝リンパの漏出を生じ、腹水の発生因子となることが知られている〔内科学書３、山村、吉利監修、中山書店、ｐ．１０９５〜１２５０（１９８７）〕。肝血流量を増加させることができるグレリンは、これらの症状に基づいて発生する危険性のある、静脈瘤や脾腫などの病態を予防、治療できる薬剤として期待できる。
【実施例７】  肝細胞増殖マーカー（ＰＣＮＡ）およびＨＧＦの発現量
ＤＭＮ誘発肝線維症ラットに対する生理食塩水およびグレリン皮下注射後の肝臓中のＰＣＮＡｍＲＮＡおよびＨＧＦｍＲＮＡ発現量をｒｅａｌ  ｔｉｍｅＲＴ−ＰＣＲ法で測定した。ＰＣＮＡｍＲＮＡおよびＨＧＦｍＲＮＡの発現量を第７表に示した。
2004096260.tif 000035
ＤＭＮ誘発肝線維症ラットへのグレリン投与群では、生理食塩水投与群に比べてＨＧＦｍＲＮＡ発現が増加（ｐ＜０．０５）し、ＰＣＮＡｍＲＮＡ発現が増加する傾向が認められた。これらの結果は、肝線維症などの病態において、グレリンはＨＧＦ発現増加作用を介して肝細胞再生あるいは新生に働いて、肝機能を維持することに有用であることを示している。
また、これらの結果は、ＧＨＳ−Ｒを介して細胞内カルシウム濃度を上昇させる活性を有する、例えばヒトなどのグレリンを含む本発明に使用されるポリペプチドの誘導体であれば、上記実施例と同様肝硬変等の肝疾患に基づく肝機能障害および肝切除後の肝再生・肝機能回復に対して有用であることを示すものである。
産業の利用可能性
本発明において、有効成分であるポリペプチドの誘導体は、肝炎、肝硬変、肝不全などの肝疾患で生じている肝機能障害を防ぐことができ、これら疾患の治療や進行を防ぐことに有用である。
また、本発明において、有効成分であるポリペプチドの誘導体は、肝細胞増殖促進作用を有し、肝臓手術、特に肝切除術後の肝再生・肝機能回復促進剤としても有用である。
さらに、ラットなどを用いた動物実験よりポリペプチドの誘導体は副作用をほとんど示さないため、ヒトをはじめとするホ乳類に安全に投与できるという利点もある。
【配列表】
2004096260.tif 000036
2004096260.tif 000037
2004096260.tif 000038
2004096260.tif 000039
2004096260.tif 000040
2004096260.tif 000041
2004096260.tif 000042
2004096260.tif 000043
2004096260.tif 000044
2004096260.tif 000045
2004096260.tif 000046
2004096260.tif 000047
【図１】
2004096260.tif 000062
【図２】
2004096260.tif 000063
【図３】
2004096260.tif 000064
【国際調査報告】
2004096260.tif 000065
2004096260.tif 000066
2004096260.tif 000067
2004096260.tif 000068
2004096260.tif 000069
2004096260.tif 000070
2004096260.tif 000071
2004096260.tif 000072