(57)【要約】芳香族基を有するジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物を含有する溶液から、担体と、この担体に担持された多糖誘導体とからなる充填剤を使用する液体クロマトグラフィーにより、光学活性な前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルを分離する。前記多糖誘導体には、多糖の水酸基及びアミノ基の水素原子の一部もしくは全部が、特定のアルキル基を有する芳香族基で一つの水素原子が置換されたカルバモイル基、及び特定のアルキル基を有するベンゾイル基の一種又は二種以上で置換されている多糖誘導体を用いる。本発明によれぱ、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルをより一層明確に分離することができる。
2004094377.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表されるジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物を含有する溶液から、担体と、この担体に担持された多糖誘導体とからなる充填剤を使用する液体クロマトグラフィーにより、光学活性な前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルを分離する方法であって、
前記多糖誘導体は、多糖の水酸基及びアミノ基の水素原子の一部もしくは全部が、下記一般式（２）で表される置換基及び一般式（３）で表される置換基の一種又は二種以上で置換されていることを特徴とする方法。
2004094377.tif 000015
（式中、Ａｒは、置換基及び縮合環の少なくともいずれかを有していても良い、炭素環芳香族基又は複素環芳香族基を表し、Ｒ１は、炭素数が１〜２０の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、フェニル基、又は炭素数が７〜１８のアラルキル基を表す。）
2004094377.tif 000016
（式中、Ｒ２は、炭素数が２〜８の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を表す。）
2004094377.tif 000017
（式中、Ｒ２は、炭素数が２〜８の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を表す。）
【請求項２】
前記多糖誘導体は、セルロース又はアミロースであることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記多糖誘導体の前記アルキル基は、前記一般式（２）又は前記一般式（３）におけるフェニル基の４位の炭素原子に結合していることを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記多糖誘導体の前記アルキル基は、エチル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、又はｓｅｃ−ブチル基であることを特徴とする請求項３記載の方法。
【請求項５】
前記液体クロマトグラフィーは、擬似移動床式クロマトグラフィーであることを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの分離方法に関し、更に詳しくは、高脂血症や動脈硬化等の予防、治療に有用な、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの分離方法に関する。
【背景技術】  光学異性体は、構造式は同一であるが、原子が空間で異なった配置をとっているために互いに鏡像の関係にある。光学異性体を含有する医薬品の場合では、薬効、毒性の点で顕著な差が見られるケースが良く知られている。このため厚生労働省の医薬品製造指針においては、「当該薬物がラセミ体である場合には、それぞれの異性体について吸収、分布、代謝、排泄動態を検討しておくことが望ましい」と記載されている。
また、片方の光学異性体のみを治療薬として用いると投与量が少なくて済み、単位あたりの薬効向上や、副作用の低減を図ることができる。したがって医薬、生化学関連産業等の分野においては、光学純度の高い光学活性体を調製することが極めて重要な課題となっている。
光学異性体が存在する特定のジヒドロキシヘプテン酸エステルは、高脂血症及び動脈硬化症等の予防及び治療に非常に有効であることが知られている。このようなジヒドロキシヘプテン酸エステルの製造方法としては、例えば光学分割用充填剤を用いて光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルを工業的に得る方法が知られている（例えば、国際公開９５／２３１２５号パンフレット及び国際公開０２／３０９０３号パンフレット参照）。
しかし、従来用いられていた光学分割用充填剤における前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルの生産性については、検討の余地が残されており、より一層生産性の優れた光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの製造方法が強く望まれていた。
本発明の課題は、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルをより一層明確に分離することのできる方法を提供する事にある。
【発明の開示】
本発明は、前記課題を解決するための手段として、下記一般式（１）で表されるジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物を含有する溶液から、担体と、この担体に担持された多糖誘導体とからなる充填剤を使用する液体クロマトグラフィーにより、光学活性な前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルを分離する方法であって、
多糖誘導体は、多糖の水酸基及びアミノ基の水素原子の一部もしくは全部が、下記一般式（２）で表される置換基及び一般式（３）で表される置換基の一種又は二種以上で置換されていることを特徴とする方法を提供する。
2004094377.tif 000003
（式中、Ａｒは、置換基及び縮合環の少なくともいずれかを有していても良い、炭素環芳香族基又は複素環芳香族基を表し、Ｒ１は、炭素数が１〜２０の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、フェニル基、又は炭素数が７〜１８のアラルキル基を表す。）
2004094377.tif 000004
（式中、Ｒ２は、炭素数が２〜８の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を表す。）
2004094377.tif 000005
（式中、Ｒ２は、炭素数が２〜８の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を表す。）
【図面の簡単な説明】  図１は、本発明に用いられる擬似移動床装置の一例の構成の概略を示す図である。
図２は、本発明に用いられる擬似移動床装置の他の例の構成の概略を示す図である。
図３は、実施例１のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。
図４は、実施例２のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。
図５は、実施例３のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。
図６は、実施例４のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。
図７は、実施例５のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。
図８は、比較例１のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。
図９は、比較例２のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルを分離したときのクロマトグラフである。
図１０は、実施例１のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルを分離したときのクロマトグラフである。
図１１は、実施例２のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルを分離したときのクロマトグラフである。
図１２は、実施例３のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルを分離したときのクロマトグラフである。
図１３は、実施例４のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルを分離したときのクロマトグラフである。
図１４は、実施例５のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルを分離したときのクロマトグラフである。
図１５は、比較例１のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルを分離したときのクロマトグラフである。
図１６は、比較例２のカラムを用いて［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルを分離したときのクロマトグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】  本発明では、前記一般式（１）で表されるジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物を含有する溶液から、充填剤を使用する液体クロマトグラフィーにより、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルを分離する。前記充填剤には、担体と、この担体に担持された多糖誘導体とからなる充填剤が用いられる。
前記多糖誘導体は、多糖の水酸基及びアミノ基の水素原子の一部もしくは全部が、前記一般式（２）で表される置換基及び前記一般式（３）で表される置換基の一種又は二種以上で置換されている。
前記多糖誘導体は、例えば炭素数が２〜８の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を有する安息香酸及びその誘導体や前記アルキル基を有するフェニルイソシアナートと多糖の水酸基との間の反応によって、常法に従って合成することができる。
前記安息香酸の誘導体としては、例えば安息香酸の塩化物、安息香酸の酸無水物、安息香酸のエステル等が挙げられる。前記安息香酸、その誘導体、及び前記フェニルイソシアナートは、市販品を用いても良く、また常法に従って合成することができる。
前記多糖誘導体のフェニル基における前記アルキル基の位置は特に限定されないが、フェニル基の４位の炭素原子に前記アルキル基が結合していることが、前記一方の光学異性体の分離効果を高める上で好ましい。また、前記アルキル基の種類は、炭素数が２〜８であれば特に限定されないが、炭素数が２〜４のアルキル基であることが、前記一方の光学異性体の分離効果を高める上で好ましい。
このようなアルキル基としては、例えばエチル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基等が挙げられる。好ましくは、エチル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基である。
前記多糖としては、天然多糖、天然物変性多糖、合成多糖、及びオリゴ糖のいずれを問わず、光学活性であれば特に制限はない。
前記多糖の具体例としては、α−１，４−グルカン（アミロース、デンプン、グリコーゲン）、β−１，４−グルカン（セルロース）、α−１，６−グルカン（デキストラン）、β−１，３−グルカン（カードラン、ジソフィラン等）、α−１，３−グルカン、β−１，２−グルカン（Ｃｒｏｗｎ  Ｇａｌｌ多糖）、α−１，６−マンナン、β−１，４−マンナン、β−１，２−フラクタン（イヌリン）、β−２，６−フラクタン（レバン）、β−１，４−キシラン、β−１，３−キシラン、β−１，４−キトサン、β−１，４−Ｎ−アセチルキトサン（キチン）、α−１，３−１，６−グルカン（ムタン）、プルラン、アガロース、アルギン酸等を挙げることができる。
これらの中では、高純度の多糖を容易に入手できるセルロース、アミロース、β−１，４−キシラン、β−１，４−キトサン、キチン、β−１，４−マンナン、イヌリン、カードラン等が好ましく、特にセルロース、アミロースが好ましい。
前記多糖の数平均重合度（１分子中に含まれるピラノース及びフラノース等の単糖ユニットの個数の平均数）は５以上、好ましくは１０以上である。一方、特に上限はないが、２０００以下であることが、取り扱いの容易さにおいて好ましく、特に好ましくは５００以下である。
前記オリゴ糖の具体例としては、マルトース、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルトヘキサオース、マルトヘプタオース、イソマルトース、エルオース、パラチノース、マルチトール、マルトトリイトール、マルトテトライトール、イソマルチトース、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン等を挙げることができる。
本発明に用いられる多糖誘導体において、前記一般式（２）及び（３）で示される置換基による前記水素原子の置換度は、通常１０〜１００％であり、好ましくは３０〜１００％であり、特に好ましくは８０％〜１００％である。前記置換度が前記範囲にあることが、前記一方の光学異性体の分離効果を高める上で好ましい。
前記置換度は、例えば、前記反応時における前記安息香酸及びその誘導体や前記フェニルイソシアナートの、前記多糖の前記水酸基及びアミノ基に対する当量によって調整することが可能である。また、前記置換度は、例えば置換基導入の前後における炭素、水素及び窒素等の元素の変化を元素分析により調べることによって求めることができる。
前記多糖誘導体における多糖に対する前記置換基の結合の形態は、特に限定されない。例えば、前記多糖誘導体は、同じ置換基が多糖に結合した多糖誘導体であっても良いし、異なる種類の置換基が多糖に結合した多糖誘導体であっても良い。
また、前記多糖誘導体では、多糖に対する前記置換基の分布は均等であっても良いし、偏りがあっても良い。また、単糖ユニットに結合する前記置換基の個数は、全ての単糖ユニットにおいて同じであっても良いし、異なっていても良い。
また、単糖ユニットに結合する前記置換基の位置は、単糖ユニットにおける特定の水酸基及びアミノ基の位置であっても良いし、特に規則性がなくても良い。
本発明に用いられる担体としては、特に限定されず、カラムに充填される充填剤として通常利用される担体が用いられる。このような担体としては、例えば多孔質の有機担体、多孔質の無機担体、及び多孔質の有機無機ハイブリッド担体等が挙げられる。好ましくは多孔質の無機担体である。
多孔質の有機担体として適当なものには、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、及びポリアクリレート等からなる群から選択される高分子の粒子が挙げられる。
多孔質の無機担体として適当なものには、シリカ、アルミナ、マグネシア、ガラス、カオリン、酸化チタン、ケイ酸塩、及びヒドロキシアパタイト等が挙げられる。
多孔質の有機無機ハイブリッド担体として適当なものには、シリカ、アルミナ、マグネシア、酸化チタン等の分子骨格中にアルキル基、フェニル基、ビニル基、スチリル基等を含有する物質が挙げられる。特に好ましい担体はシリカゲルである。
シリカゲルは、粒径が１００ｎｍ〜１０ｍｍであることが好ましく、１μｍ〜３００μｍであることがより好ましく、１〜７５μｍであることがより一層このましい。シリカゲルの表面の孔の平均孔径は１ｎｍ〜１００μｍであることが好ましく、５ｎｍ〜５００ｎｍであることがより好ましい。シリカゲルは、残存シラノールの影響を排除するために表面処理が施されていることが望ましいが、表面処理が全く施されていなくてもよい。
担体に担持される多糖誘導体の担持量は、充填剤に対して通常１〜８０質量％であり、好ましくは５〜６０質量％であり、特に好ましくは２０〜４０質量％である。担持量が１質量％未満では光学分割を有効に行えないことがあり、また６０質量％を超えても段数の減少による分離効率の低下が起こるため好ましくない。なお、前記担持量は、充填剤の質量と充填剤中の多糖誘導体の質量との割合である。
本発明に用いられる充填剤は、前記多糖誘導体を前記担体に担持させることによって得られる。前記多糖誘導体を担体に担持させる方法は、クロマトグラフィー用の充填剤の調製に通常用いられる方法によって行うことができる。このような方法としては、例えば前記多糖誘導体を前記担体に直接、化学結合する方法、及び多糖誘導体を含有する溶液を担体に塗布してから溶剤を留去する方法等が挙げられる。
前記方法において多糖誘導体の溶解に使用される溶剤は、多糖誘導体を溶解させる事ができるものであれば、通常使用されている有機溶剤のいかなるものでも良い。
さらに、担体と担体上の多糖誘導体との間の化学結合、担体上の多糖誘導体同士の化学結合、担体と多糖誘導体との間に介在する第三成分を利用した化学結合、担体上の多糖誘導体への光照射、γ線等の放射線照射、マイクロ波等の電磁波照射による反応、ラジカル開始剤等によるラジカル発生による反応等によって、更なる化学結合を形成させることで、多糖誘導体の担体上における更なる強固な固定化を図ってもよい。
前記充填剤によって分離される光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルは、前記一般式（１）で表される。
前記一般式（１）におけるＲ１としては、炭素数が１〜２０の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、フェニル基、又はアラルキル基であれば特に限定されない。前記アルキル基は、炭素数が１〜２０であることが好ましく、炭素数が１〜８であることがより好ましく、炭素数が２〜５であることがさらに好ましい。
また、前記アラルキル基の芳香族基は、炭素数が６〜１４であることが好ましく、ヘテロ原子及び縮合環のいずれか一方又は両方を有していても良い。前記アラルキル基のアルキレン基は、炭素数が１〜４であることが好ましく、直鎖状であっても良いし、分枝状であっても良い。
前記一般式（１）におけるＡｒとしては、ヘテロ原子を有していても良い芳香族基であり、縮合多環芳香族基を含む。このようなＡｒとしては、例えばフェニル基、ナフチル基、インデニル基、ピリジル基、キノリル基、インドリル基等が挙げられる。
また、前記Ａｒが有していても良い置換基は、本発明の効果を損なわない範囲であれば特に限定されない。このような前記置換基としては、例えばニトロ基等のヘテロ原子のみからなる置換基やアミノ基、水酸基、アルコキシル基等のヘテロ原子を含む置換基、フッ素や塩素等のハロゲン基、及びこれらの置換基を有していても良いアルキル基やフェニル基等の炭化水素基等が挙げられる。
前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルの具体例としては、下記構造式（４）で表される［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチル、及び下記構造式（５）で表される［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチル等が挙げられる。
2004094377.tif 000006
前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体の混合物は、混合物中の少なくとも一方の光学異性体が前記多糖誘導体で分離される光学異性体を含有するものであれば特に限定されないが、３Ｓ５Ｒ体及び３Ｒ５Ｓ体であることが好ましい。
また、前記混合物は、３Ｓ５Ｒ体と３Ｒ５Ｓ体との混合物のように、鏡像異性体の混合物であっても良いし、３Ｓ５Ｒ体又は３Ｒ５Ｓ体他と３Ｓ５Ｓ体又は３Ｒ５Ｒ体との混合物のように、ジアステレオマーを含有する混合物であっても良いし、またこれらの混合物であっても良い。
本発明においては、前記充填剤を固定相とし、超臨界流体あるいは一般の溶媒、混合溶媒を移動相として、少なくとも前記一般式（１）で表されるジヒドロキシヘプテン酸エステルの光学異性体を含有する混合溶液を前記固定相に供給して、前記移動相によって固定相中において前記光学異性体を移動させるカラムクロマトグラフィーによって、前記光学異性体を分離することができる。本発明では、液体クロマトグラフィーを適用することが、前記光学異性体を分離する上で好ましい。
前記混合溶液には、前記混合物を溶解できる混合溶媒等の溶媒が用いられる。このような溶媒の種類や組成は、溶質の種類や濃度に応じて決められる。前記溶媒には、通常液体クロマトグラフィーに用いられる溶媒を用いることができる。
混合溶液に用いられる溶媒は、液体クロマトグラフィー及びこれに準ずる方法における移動相、すなわち溶離液であることが、溶離液の再利用を容易にする上で好ましい。前記混合溶液は、前記カラムクロマトグラフィーによって前記光学異性体に対して分離可能な成分であれば、他の成分を含んでいても良い。
本発明では、通常のカラムクロマトグラフィーによって分離された一方の光学異性体の溶液を採取し、この溶液から溶媒を留去することによって前記光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルを得ることが可能である。
このような前記光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの製造では、試料の供給及び液体の排出の少なくともいずれかが非連続に行われる回分式クロマトグラフィー、あるいは試料の供給及び液体の排出が連続して行われる擬似移動床式クロマトグラフィーを用いて前記光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの分離を行うことが、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルの分取生産性を高める上で好ましい。
特に、前記光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルを製造する場合では、擬似移動床式クロマトグラフィーを用いることがより好ましい。前記擬似移動床式クロマトグラフィーでは、通常この方法で用いられる溶媒を移動相に用いることができる。
前記擬似移動床式クロマトグラフィーは、前記充填剤が充填されている複数のカラムを直列に接続して形成される無端状の管路に溶離液を供給する工程と、前記管路における溶離液の流れ方向において溶離液の供給位置よりも下流側の位置から前記管路を流れる液体の一部を排出する工程（以下「第一の排出工程」とも言う）と、前記管路における溶離液の流れ方向において前記液体の排出位置（以下「第一の排出位置」とも言う）よりも下流側の位置に前記混合溶液を供給する工程と、前記管路における前記混合溶液の供給位置と前記溶離液の供給位置との間の位置から前記管路を流れる液体の一部を排出する工程（以下「第二の排出工程」とも言い、この工程による液体の排出位置を「第二の排出位置」とも言う）と、前記管路における前記混合溶液中の混合成分の位置に前記混合溶液を供給するように、前記溶離液の供給位置、前記第一の排出位置、前記混合溶液の供給位置、及び前記第二の排出位置を、これらの位置の相対的な位置関係を保ったまま液体の流れの下流方向へ移動させる工程と、前記管路から排出される液体に含まれる成分を取り出す工程とを含む。
前記擬似移動床式クロマトグラフィーにおいて、前記管路では、混合溶液中の、充填剤により吸着されやすい成分（以下「エクストラクト成分」とも言う）と、充填剤により吸着されにくい成分（以下「ラフィネート成分」とも言う）とが、充填剤に吸着される。
エクストラクト成分は、前記管路を移動する速度が、ラフィネート成分の移動速度、及び混合溶液の供給位置の移動速度よりも小さいので、混合溶液の供給位置の上流側に分布する。
一方、ラフィネート成分は、前記管路を移動する速度が、エクストラクト成分の移動速度、及び混合溶液の供給位置の移動速度よりも大きいので、混合溶液の供給位置の下流側に分布する。
混合溶液の供給位置より供給される各成分の濃度は、平衡に達するまで経時的に高まり、エクストラクト成分の濃度分布は混合溶液の供給位置付近を頂点に混合溶液の供給位置よりも上流側に分布する。一方、ラフィネート成分の濃度分布は、混合溶液の供給位置付近を頂点に混合溶液の供給位置よりも下流側に分布する。
経時的に広がった各成分の濃度分布の両端が、各排出位置に到達すると、各成分を含む溶液が前記管路よりそれぞれ排出される。各成分の濃度や分布は、前記カラムの大きさ、充填剤の種類、管路に供給する液体の種類、供給速度、管路から排出される各液体の速度、及び前記供給位置及び排出位置の相対的な位置関係及びその移動速度（切り替え速度）等の諸条件により調整される。
なお、前記混合成分は、混合溶液中の前記エクストラクト成分と前記ラフィネート成分とが混在する成分である。また、前記混合成分の位置は、エクストラクト成分とラフィネート成分とが混在している管路中の位置であれば特に限定されないが、エクストラクト成分とラフィネート成分とが等量で混在している位置であることが好ましい。
また、溶離液の供給位置、前記第一の排出位置、前記混合溶液の供給位置、及び前記第二の排出位置の相対的な位置関係は、管路において実質的に等間隔にある位置関係であっても良いし、異なる間隔の位置関係であっても良い。また、これらの位置の移動時期は、管路を流れる液体の成分の分析や、充填剤の種類及び管路中の液体の流速等の諸条件を設定した、コンピュータによるシミュレーション等によって決めることができる。
前記擬似移動床式液体クロマトグラフィーは、例えば、国際公開第９５／２３１２５号パンフレットや特開平９−２０６５０２号公報等に開示されている、通常用いられる擬似移動床（ＳＭＢ）装置を用いて行うことができる。
以下、図面に基づいて本発明における方法を説明する。
図１は、本発明に用いられる擬似移動床装置の一例を示す模式図であり、図２は本発明に用いられる擬似移動床装置の別の例を示す模式図である。図１において、前記管路は１２体のカラムを直列に接続することによって形成されており、図２において、前記管路は８体のカラムを直列に接続することによって形成されている。
それぞれの装置において、図示しないが、カラム同士を接続する全ての管路には、溶離液を供給する管路、混合溶液を供給する管路、及び液体を排出する管路が接続されている。これらの管路からの液体の供給又は液体の排出は、自動弁によって制御されている。
なお、前記カラムの数や大きさは、混合溶液の種類や組成、流量、圧損、装置の大きさ等の要因によって決まるものであり、限定されるものではない。
前記装置を用いる擬似移動床式クロマトグラフィーでは、基本的操作として、次に示す吸着操作、濃縮操作、脱着操作及び溶離液回収操作が連続的に循環して実施される。
（１）  吸着操作
混合溶液中の混合成分が充填剤と接触し、供給される溶離液の流れにより吸着と脱着を繰り返す。充填剤がエクストラクト成分を吸着する度合いは、ラフィネート成分を吸着する度合いよりも大きいため、前記カラム内の移動速度が小さくなる。充填剤がラフィネート成分を吸着する度合いは、エクストラクト成分を吸着する度合いよりも小さいため、カラム内の移動速度が大きくなり、ラフィネート成分の濃度分布は、前記管路においてエクストラクト成分の濃度分布よりも先行する。
（２）  濃縮操作
主としてエクストラクト成分が吸着している充填床に、エクストラクト成分を含んだ溶離液が供給されると、充填剤上に残存しているラフィネート成分が追い出され、エクストラクト成分が濃縮される。
（３）  脱着操作
エクストラクト成分の濃縮時よりも多くの量の溶離液が充填床に供給されると、それまで充填剤に吸着されていたエクストラクト成分が充填剤上から脱離し、カラム内のエクストラクト成分の移動速度が濃縮操作時のそれよりも大きくなる。
（４）  溶離液回収操作
ラフィネート成分を吸着している充填剤に、ラフィネート成分の吸着時よりも溶離液の供給量が減少すると、管路を移動しているラフィネート成分の移動が抑制される。溶離液の供給量が減少するポイントよりも下流側の充填剤は、溶離液中の成分を吸着し、このような成分を含有しない溶離液が前記ポイントよりも下流側の管路に供給される。
図１において、１〜１２は充填剤の入った室（吸着室、カラム）であり、相互に直列に連結されている。１３は溶離液供給ライン、１４はエクストラクト抜き出しライン、１５は光学異性体含有液供給ライン、１６はラフィネート抜き出しライン、１７はリサイクルライン、１８はポンプを示す。
図１で示した吸着室１〜１２と各ライン１３〜１６の配置の状態では、吸着室１〜３で脱着操作、吸着室４〜６で濃縮操作、吸着室７〜９で吸着操作、吸着室１０〜１２で溶離液回収操作がそれぞれ行われている。このような擬似移動床では、一定時間間隔ごとにバルブ操作により各供給液及び抜き出しラインを、管路における液体の流れ方向に吸着室１室分だけそれぞれ移動させる。
従って、次の吸着室の配置状態では、吸着室２〜４で脱着操作、吸着室５〜７で濃縮操作、吸着室８〜１０で吸着操作、吸着室１１〜１で溶離液回収操作がそれぞれ行われるようになる。このような操作を順次行うことによって、光学異性体の混合物の分離処理が連続的に効率よく達成される。
図１において、エクストラクト抜き出しライン１４から採取されたエクストラクト溶液は、第一流下型薄膜蒸発器、第二流下型薄膜蒸発器、強制型薄膜蒸発器に順次供給することによって濃縮される。蒸発器からの蒸気は、例えば回収槽に収容し、蒸発装置によって組成を調整すると、溶離液として再利用することが可能となる。
前述した蒸発器によって濃縮された濃縮液は貯留槽に送られ、再結晶や蒸留等の操作を行うと、前記濃縮液から目的の光学活性体が得られる。
なお、ラフィネート抜き出しライン１６から採取されたラフィネート溶液は、ラセミ化槽を介して混合溶液と混合されて、前記クロマトグラフィーによる分離に再度供しても良い。
なお、図１の擬似移動床装置は、エクストラクト成分を製造目的物とする装置であるが、前述した蒸発器や蒸発装置等の機器をラフィネート抜き出しライン１６の下流側に接続すると、ラフィネート成分を製造目的物とする装置を構成することが可能である。
また、図１の擬似移動床装置は、エクストラクト抜き出しライン１４及びラフィネート抜き出しライン１６の両方に、前記蒸発器や蒸発装置等の機器をそれぞれ設けると、エクストラクト成分及びラフィネート成分の両方を製造目的物とする装置を構成することが可能である。
また、図２に示した吸着室１〜８と各ライン１３〜１６の配置の状態では、吸着室１で溶離液回収操作、吸着室２〜５で吸着操作、吸着室６〜７で濃縮操作、吸着室８で脱着操作がそれぞれ行われている。このような擬似移動床では、一定時間間隔ごとにバルブ操作により各供給液及び抜き出しラインを、管路における液体の流れ方向に吸着室１室分だけそれぞれ移動させる。
従って、次の吸着室の配置状態では、吸着室２で脱着操作、吸着室３〜６で濃縮操作、吸着室７〜８で吸着操作、吸着室１で溶離液回収操作がそれぞれ行われるようになる。このような操作を順次行うことによって、光学異性体の混合物の分離処理が連続的に効率よく達成される。
本発明の方法により、ジヒドロキシヘプテン酸エステルの少なくとも一方の光学異性体が効率よく分離することができ、大きな分取生産性をもって光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルを得ることが可能となる。得られる光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルは、医薬品の有効成分として用いることができる。
また、前記ジヒドロキシヘプテン酸エステルは、医薬品等として有用な下記一般式（６）で表される化合物のいずれかの光学異性体や、下記一般式（７）で表されるメバロノラクトン系化合物のいずれかの光学異性体を、酸化反応や脱水縮合反応等の公知の反応によって製造する際の中間体として用いることができる。
2004094377.tif 000007
（式中、Ａｒは、置換基及び縮合環の少なくともいずれかを有していても良い、炭素環芳香族基又は複素環芳香族基を表し、Ｒ１は、炭素数が１〜２０の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、フェニル基、又は炭素数が７〜１８のアラルキル基を表す。）
2004094377.tif 000008
（式中、Ａｒは、置換基及び縮合環の少なくともいずれかを有していても良い、炭素環芳香族基又は複素環芳香族基を表す。）
【実施例】  以下、本発明を実施例によって詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
＜合成例１  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの作製＞
（１）  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸ナトリウム塩の抽出
下記構造式（８）で示される［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸ナトリウム塩を、ＮＯＶＡＲＴＩＳ製の医薬品Ｌｅｓｃｏｌ（同社の登録商標）からクロロホルム加熱還流にて抽出した。得られた試料を１Ｈ−ＮＭＲ、ＣＯＳＹ、１３Ｃ−ＮＭＲ、ＨＭＱＣ、及びＩＲによって測定し、得られたスペクトルから抽出物を特定した。１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ、及びＩＲで検出されたピークを以下に示す。
2004094377.tif 000009
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．３０（ｍ，１Ｈ，Ｈ２１），１．５３（ｍ，１Ｈ，Ｈ２１），１．５５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ，Ｈ１６，Ｈ１７），１．８９（ｍ，１Ｈ，Ｈ２３），２．０９（ｍ，１Ｈ，Ｈ２３），３．７３（ｍ，１Ｈ，Ｈ２２），４．２３（ｍ，１Ｈ，Ｈ２０），４．８８（ｍ，１Ｈ，Ｈ１５），５．７０（ｄｄ，Ｊ１＝１６．０Ｈｚ，Ｊ２＝５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ１９），６．５９（ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ１８），７．０−７．６（ｍ，８Ｈ，Ｈ２−Ｈ５，Ｈ１０，Ｈ１１，Ｈ１３，Ｈ１４）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２１．５（Ｃ１６，Ｃ１７），４３．７（Ｃ２３），４４．５（Ｃ２４），４７．２（Ｃ１０），６５．９（Ｃ２２），６９．０（Ｃ２０），１１２．１（Ｃ２），１１５．４（Ｃ１１，Ｃ１３），１１６．９（Ｃ１８），１１８．７（Ｃ５），１１９．６（Ｃ４），１２１．６（Ｃ３），１４１．８（Ｃ１９），１５９．８（Ｃ１２），１６１．７（Ｃ８）（なお、１１３．０，１２７．７，１３４．３，及び１３４．８は四級炭素のＣ１，Ｃ６，Ｃ７，Ｃ９）
ＩＲ（ＫＢｒ  ｄｉｓｋ）：３０００〜２８５０（ｗ，Ｃ−Ｈ伸縮），１５８０（ｓ，Ｃ＝Ｏ伸縮），１５００（ｍ，置換芳香族），１３４５（ｍ），１２２０（ｓ），１１５５（ｍ），１１０５（ｗ），９７０（ｗ），８３５（ｍ，ｐ置換芳香族），７４０（ｍ，置換芳香族）
（２）  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸ナトリウム塩のメチルエステル化
上記（１）で得た［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸ナトリウム塩を、ジメチルホルムアミド溶液中で、炭酸リチウムを触媒として過剰のヨウ化メチルと反応させ、得られた油性成分をジエチルエーテルにより抽出した。得られた試料を１Ｈ−ＮＭＲ、ＭＳ、及びＩＲで測定し、得られたスペクトルから抽出物を特定した。１Ｈ−ＮＭＲ及びＩＲで検出されたピークを以下に示す。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．４１（ｍ，１Ｈ），１．５９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ），２．３０（ｄｄ，Ｊ１＝１４．８Ｈｚ，Ｊ２＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），２．４４（ｄｄ，Ｊ１＝１４．８Ｈｚ，Ｊ２＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），３．５８（ｓ，３Ｈ），３．８７（ｍ，１Ｈ），４．２４（ｍ，１Ｈ），４．５０（ｍ，１Ｈ），４．９０（ｍ，１Ｈ），５．７０（ｄｄ，Ｊ１＝１６．１Ｈｚ，Ｊ２＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），６．６９（ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，１Ｈ），７．０−７．６（ｍ，８Ｈ）
ＩＲ（ＫＢｒ  ｄｉｓｋ）：３０５０〜２８５０（ｗ，Ｃ−Ｈ伸縮），１７２０（ｓ，Ｃ＝Ｏ伸縮），１５４５（ｍ），１５００（ｍ，置換芳香族），１３４５（ｍ），１２２０（ｓ），１１５５（ｍ），１１００（ｗ），９７０（ｗ），８３５（ｍ，ｐ置換芳香族），７４０（ｍ，置換芳香族）
＜合成例２  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルの作製＞
（１）  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸ナトリウム塩の抽出
合成例１の（１）と同じ手法により得た。
（２）  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸ナトリウム塩のエチルエステル化
ヨウ化メチルをヨウ化エチルに代えて、合成例１の（２）と同じ手法により得た。得られた試料を１Ｈ−ＮＭＲ、ＭＳ、及びＩＲによって測定し、得られたスペクトルから抽出物を特定した。１Ｈ−ＮＭＲ及びＩＲで検出されたピークを以下に示す。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．１６（ｔ，Ｊ１＝７．１Ｈｚ，Ｊ２＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．５８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ），２．２９（ｄｄ，Ｊ１＝１４．８Ｈｚ，Ｊ２＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），２．４２（ｄｄ，Ｊ１＝１４．８Ｈｚ，Ｊ２＝４．５Ｈｚ，１Ｈ），３．４（ｍ，１Ｈ），３．８７（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），４．２３（ｍ，１Ｈ），４．７６（ｍ，１Ｈ），４．９０（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），５．７２（ｄｄ，Ｊ１＝１６．１Ｈｚ，Ｊ２＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），６．６２（ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，１Ｈ），７．０−７．７（ｍ，８Ｈ）
ＩＲ（ＫＢｒ  ｄｉｓｋ）：３０５０〜２８５０（ｗ，Ｃ−Ｈ伸縮），１７２０（ｓ，Ｃ＝Ｏ伸縮），１５５０（ｍ），１５０５（ｍ，置換芳香族），１３４５（ｍ），１２２０（ｓ），１１５５（ｍ），１１００（ｗ），９７０（ｗ），８３５（ｍ，ｐ置換芳香族），７４０（ｍ，置換芳香族）
【実施例１】（１）  セルロース  トリス（４−イソプロピルフェニルカルバメート）の合成
セルロース５０ｇを乾燥ピリジンに分散させ、これに４−イソプロピルフェニルイソシアナート３１０ｇ（セルロース中の水酸基に対して２．０当量）を加えて２４時間加熱還流した。反応物をメタノールに注ぎ、生じた白色固体を濾別し、減圧乾燥してセルロース  トリス（４−イソプロピルフェニルカルバメート）を得た。得られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表１に示す。
（２）  光学異性体分離用充填剤の作製
（１）で得られたセルロース  トリス（４−イソプロピルフェニルカルバメート）をアセトンに溶解させ、得られたアセトン溶液を粒径２０μｍのシリカゲルへ均一に振りかけた後、溶剤を留去させることにより、セルロース  トリス（４−イソプロピルフェニルカルバメート）が担持された充填剤を得た。
（３）  光学異性体分離用カラムの作製
（２）で作製した充填剤を、長さ２５ｃｍ、内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、光学異性体分離用カラムを作製した。
（４）  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離
前記（３）で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルについて液体クロマトグラフィーにより光学分割を行った。この光学分割における保持係数及び分離係数を表２に、クロマトグラフを図３に示す。
なお、前記液体クロマトグラフィーは、測定装置としてＪＡＳＣＯ社製ＵＶ−９７０を用い、下記の分析条件で行った。なお、検出されたピークの成分の旋光性を旋光検出器  ＰＤＲ−Ｃｈｉｒａｌ社製Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｐｏｌａｒｉｍｅｔｅｒによって測定することにより、検出されたピークが光学異性体であることを確認することができる。また、前記保持係数（ｋ’）は下記式（１）及び（２）から算出し、前記分離係数（α）は下記式（３）から算出した。
＜分析条件＞
移動相：ヘキサン／２−プロパノール＝８０／２０（ｖ／ｖ）
流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ
カラム温度：２５℃
検出波長：２５４ｎｍ
ｋ１’＝（ｖ１−ｖ０）／ｖ０
（ただし、ｖ１は、各光学異性体のより早く溶出する溶質成分の保持容量（保持時間）を示し、ｖ０はトリ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼンの溶出容量（溶出時間）であるデッドボリューム（デッドタイム）を示す。）
ｋ２’＝（ｖ２−ｖ０）／ｖ０
（ただし、ｖ２は、各光学異性体のより遅く溶出する溶質成分の保持容量（保持時間）を示し、ｖ０はトリ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼンの溶出容量（溶出時間）であるデッドボリューム（デッドタイム）を示す。）
α＝ｋ２’／ｋ１’
（ただし、ｖ１及びｖ２は、各光学異性体の溶質成分の保持容量（保持時間）を示し、ｖ０はトリ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼンの溶出容量（溶出時間）であるデッドボリューム（デッドタイム）を示す。）
【実施例２】（１）  セルロース  トリス（４−ｎ−ブチルフェニルカルバメート）の合成
４−イソプロピルフェニルイソシアナートの代わりに４−ｎ−ブチルフェニルイソシアナートを使用した他は、実施例１の（１）と同じ手法により合成し、セルロース  トリス（４−ｎ−ブチルフェニルカルバメート）を得た。得られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表１に示す。
（２）  光学異性体分離用充填剤の作製
（１）で得られたセルロース  トリス（４−ｎ−ブチルフェニルカルバメート）を使用した以外は、実施例１の（２）と同じ手法により光学異性体分離用充填剤を作製した。
（３）  光学異性体分離用カラムの作製
（２）で得られた光学異性体分離用充填剤を使用した以外は、実施例１の（３）と同じ手法により光学異性体分離用カラムを作製した。
（４）  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離
（３）で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルについて、実施例１と同様に液体クロマトグラフィーにより光学分割を行った。この光学分割における保持係数及び分離係数を表２に、クロマトグラフを図４に示す。
【実施例３】（１）  セルロース  トリス（４−エチルフェニルカルバメート）の合成
４−イソプロピルフェニルイソシアナートの代わりに４−エチルフェニルイソシアナートを使用した他は、実施例１の（１）と同じ手法により合成し、セルロース  トリス（４−エチルフェニルカルバメート）を得た。得られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表１に示す。
（２）  光学異性体分離用充填剤の作製
（１）で得られたセルロース  トリス（４−エチルフェニルカルバメート）を使用した以外は、実施例１の（２）と同じ手法により光学異性体分離用充填剤を作製した。
（３）  光学異性体分離用カラムの作製
（２）で得られた光学異性体分離用充填剤を使用した以外は、実施例１の（３）と同じ手法により光学異性体分離用カラムを作製した。
（４）  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離
（３）で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルについて、実施例１と同様に液体クロマトグラフィーにより光学分割を行った。この光学分割における保持係数及び分離係数を表２に、クロマトグラフを図５に示す。
【実施例４】（１）  セルロース  トリス（４−ｓｅｃ−ブチルフェニルカルバメート）の合成
４−イソプロピルフェニルイソシアナートの代わりに４−ｓｅｃ−ブチルフェニルイソシアナートを使用した他は、実施例１の（１）と同じ手法により合成し、セルロース  トリス（４−ｓｅｃ−ブチルフェニルカルバメート）を得た。得られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表１に示す。
（２）  光学異性体分離用充填剤の作製
（１）で得られたセルロース  トリス（４−ｓｅｃ−ブチルフェニルカルバメート）を使用した以外は、実施例１の（２）と同じ手法により光学異性体分離用充填剤を作製した。
（３）  光学異性体分離用カラムの作製
（２）で得られた光学異性体分離用充填剤を使用した以外は、実施例１の（３）と同じ手法により作製した。
（４）  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離
（３）で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルについて、実施例１と同様に液体クロマトグラフィーにより光学分割を行った。この光学分割における保持係数及び分離係数を表２に、クロマトグラフを図６に示す。
【実施例５】（１）  セルロース  トリス（４−イソブチルフェニルカルバメート）の合成
４−イソプロピルフェニルイソシアナートの代わりに４−イソブチルフェニルイソシアナートを使用した他は、実施例１の（１）と同じ手法により合成し、セルロース  トリス（４−イソブチルフェニルカルバメート）を得た。得られた生成物の炭素、水素、及び窒素元素の元素分析の結果を表１に示す。
（２）  光学異性体分離用充填剤の作製
（１）で得られたセルロース  トリス（４−イソブチルフェニルカルバメート）を使用した以外は、実施例１の（２）と同じ手法により光学異性体分離用充填剤を作製した。
（３）  光学異性体分離用カラムの作製
（２）で得られた光学異性体分離用充填剤を使用した以外は、実施例１の（３）と同じ手法により作製した。
（４）  ［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの光学異性体の分離
（３）で得られた光学異性体分離用カラムを用い、合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルについて、実施例１と同様に液体クロマトグラフィーにより光学分割を行った。この光学分割における保持係数及び分離係数を表２に、クロマトグラフを図７に示す。
2004094377.tif 000010
＜比較例１＞
セルロース  トリス（４−メチルフェニルカルバメート）がシリカゲルに担持されている充填剤であるダイセル化学工業（株）製光学異性体分離用充填剤ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ  ＯＧ（ダイセル化学工業社の登録商標、粒径２０μｍ）を、長さ２５ｃｍ、内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、光学異性体分離用カラムを作製した。
得られた前記光学異性体分離用カラムを用い、合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルについて、実施例１と同様に液体クロマトグラフィーにより光学分割を行った。この光学分割における保持係数及び分離係数を表２に、クロマトグラフを図８に示す。
＜比較例２＞
セルロース  トリス（４−クロロフェニルカルバメート）がシリカゲルに担持されている充填剤であるダイセル化学工業（株）製光学異性体分離用充填剤ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ  ＯＦ（ダイセル化学工業社の登録商標、粒径２０μｍ）を、長さ２５ｃｍ、内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、光学異性体分離用カラムを作製した。
得られた前記光学異性体分離用カラムを用い、合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルについて、実施例１と同様に液体クロマトグラフィーにより光学分割を行った。この光学分割における保持係数及び分離係数を表２に、クロマトグラフを図９に示す。
2004094377.tif 000011
【実施例６〜１０】
合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルに代えて、合成例２で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルの光学異性体の分離を、実施例１〜実施例５と同様に行った。これらの光学分割における保持係数及び分離係数を表３に、クロマトグラフを図１０〜図１４にそれぞれ示す。
＜比較例３及び４＞
合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルに代えて、合成例２で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルの光学異性体の分離を、比較例１及び比較例２と同様に行った。これらの光学分割における保持係数及び分離係数を表３に、クロマトグラフを図１５及び図１６にそれぞれ示す。
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【実施例１１】  実施例１の（２）で得られた光学異性体分離用充填剤を内径１．０ｃｍ、長さ１０ｃｍのステンレス製カラム８本にスラリー充填法で充填し、小型擬似移動床式装置に取り付け、合成例１で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの分取を行った。小型擬似移動床式装置の操作条件、及び得られたラフィネート成分の生産性を表４に示す。
また、前記小型擬似移動床式装置による［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの分取条件を以下に示す。
＜分取条件＞
移動相：ヘキサン／２−プロパノール＝８０／２０（ｖ／ｖ）
カラム温度：４０℃
検出波長：２５４ｎｍ
混合溶液の濃度：５ｇ／Ｌ（溶媒は移動相と同じ）
【実施例１２〜実施例１５】
実施例２〜実施例５の（２）で得られた光学異性体分離用充填剤のそれぞれを使用した以外は、実施例１１と同様に、小型擬似移動床式装置による［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの分取を行った。小型擬似移動床式装置の操作条件、及び得られたラフィネート成分の生産性を表４に示す。
＜比較例５＞
比較例２で用意した光学異性体分離用充填剤を使用した以外は、実施例１１と同様に、小型擬似移動床式装置による［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸メチルの分取を行った。小型擬似移動床式装置の操作条件、及び得られたラフィネート成分の生産性を表４に示す。
なお、比較例１で用意した光学異性体分離用充填剤は、単カラムによる前記液体クロマトグラフィーにおいて分離が不十分であったため、前記光学異性体分離用充填剤については、前記小型擬似移動床式装置への適用を実施しなかった。
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【実施例１６】  実施例１の（２）で得られた光学異性体分離用充填剤を実施例１１と同様に充填した小型擬似移動床式装置を用いて、合成例２で作製した［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルの分取を行った。小型擬似移動床式装置の操作条件及び得られたラフィネート成分の生産性を表５に示す。
【実施例１７〜実施例２０】
実施例２〜実施例５の（２）で得られた光学異性体分離用充填剤のそれぞれを、実施例１２〜実施例１５と同様に充填した小型擬似移動床式装置をそれぞれ用いて、［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルの分取を行った。小型擬似移動床式装置の操作条件及び得られたラフィネート成分の生産性を表５に示す。
＜比較例６＞
比較例２で用意した光学異性体分離用充填剤を実施例１６と同様に充填した小型擬似移動床式装置を用いて、［Ｒ＊，Ｓ＊−（Ｅ）］−（±）−［３−（４−フルオロフェニル）−１−（１−メチルエチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルの分取を行った。小型擬似移動床式装置の操作条件及び得られたラフィネート成分の生産性を表５に示す。
なお、比較例１で用意した光学異性体分離用充填剤は、単カラムによる前記液体クロマトグラフィーにおいて分離が不十分であったため、前記光学異性体分離用充填剤については、前記小型擬似移動床式装置への適用を実施しなかった。
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【産業上の利用可能性】  本発明により、光学活性なジヒドロキシヘプテン酸エステルをより一層明確に分離することができ、また、より一層大きな分取生産性をもって製造することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【国際調査報告】
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