(57)【要約】水性媒体中で安定に分散しうる多孔質粒子（これは機能物質を吸着していてもよい）と水溶性高分子鎖セグメントをベースとするポリマーとのコンジュゲート、ならびにその使用（例えば、生理活性物質の安定担持または除放）。
2005005548.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
機能物質が吸着されたもしくは非吸着の多孔質粒子およびその粒子表面に固定された水溶性高分子鎖セグメントをベースとするポリマー分子を含んでなるコンジュゲート。
【請求項２】
ポリマー分子が、水溶性高分子鎖としてポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミドおよびポリメタクリルアミドからなる群より選ばれるポリマー由来の鎖を有し、かつ、多孔質粒子表面に該ポリマー分子を固定することのできる共有結合または物理的相互作用を介する結合を形成するための官能基または機能性部分を有する請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
ポリマー分子が、一般式（Ｉ）
Ｒ１−Ｌ１−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｌ２−Ｘ        （Ｉ）
（式中、Ｒ１は水素原子、メチル、保護されていてもよいホルミル、保護されていてもよいアミノ、保護されていてもよいカルボキシ、保護されていてもよいヒドロキシルまたはビニルスルホニル基を表し、
Ｌ１およびＬ２は相互に独立して、原子価結合またはリンカーを表し、
Ｘは多孔質粒子表面に当該ポリマー分子を固定することのできる共有結合または物理的相互作用を介する結合を形成するための官能基または機能性部分を表し、そして
ｎは２〜２０，０００の整数である）
で表される請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項４】
Ｘがメルカプト基、シラノール基、カルボキシル基、アミノ基、またはモノ−もしくはジ−低級アルキル置換アミノ基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、メルカプト基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、シラノール基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、カルボキシル基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、スルホ基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、リン酸基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、およびヒドロキシル基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分からなる群より選ばれる請求項３に記載のコンジュゲート。
【請求項５】
多孔質粒子が平均粒子径１０ｎｍ〜１０ｍｍを有し、かつ、１０μｍ〜１ｎｍ（１０Å）の孔径の細孔を有する有機または無機粒子である請求項１記載のコンジュゲート。
【請求項６】
多孔質粒子が架橋ポリスチレン、アガロース、セファデックス、ポリエチレン焼結連続多孔質体、およびポリプロピレン焼結連続多孔質体からなる群より選ばれる請求項５記載のコンジュゲート。
【請求項７】
多孔質粒子がシリカ、クレイ、ゼオライト、チタニア、アルミナおよびジルコニアからなる群より選ばれる請求項５記載のコンジュゲート。
【請求項８】
多孔質粒子が機能物質を非吸着の状態にある請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項９】
多孔質粒子が機能物質を吸着した状態にある請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項１０】
機能物質が多孔質粒子表面に吸着されており、そして該物質が色素、蛍光・発光体、磁性体、生理活性物質、抗微生物剤、食品添加物、香料もしくは化粧品原料からなる群より選ばれる請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項１１】
機能物質が多孔質粒子表面に吸着されており、そして該物質が生理活性物質である請求項１に記載のコンジュゲートを有効成分として含んでなる生理活性物質を徐放するための組成物。
【請求項１２】
機能物質が多孔質粒子表面に吸着されており、そして該物質が香料である請求項１に記載のコンジュゲートを有効成分として含んでなる香料を徐放するための組成物。
【請求項１３】
機能物質が多孔質粒子表面に吸着されており、そして該物質が抗微生物剤である請求項１に記載のコンジュゲートを有効成分として含んでなる抗微生物剤を徐放するための組成物。
【請求項１４】
機能物質が多孔質粒子表面に吸着されており、そして該物質が化粧品原料である請求項１に記載のコンジュゲートを有効成分として含んでなる化粧品原料を徐放するための組成物。
【請求項１５】
機能物質を含まない請求項１に記載のコンジュゲートを有効成分として含んでなる水性溶液中に存在する有害物質を吸着除去するための組成物。
【請求項１６】
有害物質がコレステロールまたは中性脂肪であり、該コンジュゲートが生体内に投与されるものである請求項１５記載の組成物。
【請求項１７】
機能物質が多孔質粒子表面に吸着されており、そして該物質が抗微生物剤である請求項１に記載のコンジュゲートを微生物が成長する環境に置くことを含んでなる該環境における微生物の防除方法。
【請求項１８】
機能物質が多孔質粒子表面に吸着されており、そして該物質が化粧品原料である請求項１に記載のコンジュゲートを含む化粧品を、該化粧品原料を必要とする部位の皮膚に施用することを含んでなる化粧方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、医薬、化粧料、診断薬、農業、環境汚染防止、等の分野で使用できる多孔質粒子とポリマー分子のコンジュゲート（または複合体）に関し、さらには該コンジュケートの使用にも関する。
【背景技術】  多孔質粒子、例えばシリカ、クレイなどは、その表面特性を利用して、多種多様な物質の分離用吸着材として、または多種多様な機能物質の安定化等を企図するための担体として使用されてきた。さらに、粒子特性を改良するための改質も行われてきた。例えば、文献１（以下の各文献と共に下記にまとめて示す）には、焼成多孔質ガラス表面にフルオレセインを吸着した物質が、文献２には、エチレングリコールの存在下で二酸化炭素を用いてメタケイ酸塩溶液から沈殿させ、さらにアミノ基を有するシランカプリン剤で修飾したシリカ表面に数種の色素を吸着させた物質が記載されている。
また、文献３には数百ナノメートルのラテックス粒子上に高分子電解質を交互に用いて、より微細なシリカもしくは磁鉄鉱とグルコースオキシダーゼ（ＧＯｘ）の多層を堆積させた磁気バイオ／ナノリアクターが記載されており、かようなリアクターは多層中のＧＯｘ量に比例する酵素活性を示すことも教示されている。文献４には、微細（ｆｉｎｅ）なシリカ粒子表面へのカチオン界面活性剤の吸着を介してステロイド類を組み込んだ粒子が記載されており、また、界面活性剤の濃度によりステロイドの結合性が変動することも示唆されている。文献５には、テトラエチルシリケートの加水分解および重縮合中またはその後、フェニトインを組み込んだシリカ−薬物ハイブリッドである粒子が記載されており、該ハイブリッドからのフェニトインの制御された放出も検討されている。文献６には、メタケイ酸マグネシウム、ＳｉＯ２またはこれらの混合物のフレーク状粒子上に薬物（抗ヒスタミン薬等）を吸着せしめた吸着質が封入された軟質ゼラチンカプセルが記載されており、また、該吸着質は薬物の分散安定性を高めるのに寄与することも記載されている。
また、文献７には、溝を備えた無機マトリックスと該溝中に配置されたフェロモン等の薬剤を含有する粒子が記載されており、さらにこの粒子は薬剤を徐放できることも記載されている。
文献のリスト
文献１：Ｆｕｊｉｉ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｏｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｓ（１９９２），１７（１），１−１４．
文献２：Ｋｒｙｓｚｔａｆｋｉｅｗｉｃｚ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ（２００２），１９９（１−４），３１−３９．
文献３：Ｆａｎｇ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｇｍｕｉｒ（２００２），１８（１６），６３３８−６３４４．
文献４：Ｃｈｅｒｋａｏｕｉ，Ｉ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ（１９９８），１７６（１），１１１−１２０．
文献５：Ｇｏｔｏ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（１９９９），１（２），２０５−２１３．
文献６：Ｌｅｃｈ，Ｓ．ＵＳ  ６０２７７４６  Ａ．
文献７：Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，ＵＳ  ２００３０３１６９４  Ａ１．
【発明の開示】
上記した従来の粒子は例えば文献６に記載されている吸着質（ａｄｓｏｒｂａｔｅ）のように液体中で均質に分散し得るものも提供されているが、水性流体、特に血液等の生物学的流体中では分散安定性に劣るものが多い。
そこで、本発明者らは、機能物質が担持された多孔質粒子の水性流体中での分散安定性を高め、しかも所望により、該多孔質粒子から担持されていた機能物質の水性流体中への制御された放出（または徐放）を可能にするシステムを開発すべく研究してきた。その結果、意外にも特定のポリマーで多孔質粒子表面を修飾すると、該粒子の水性流体中での分散安定性が飛躍的に高まることのみならず、存在する場合には、吸着されていた機能物質が水性流体中へ徐放され、他方、機能物質が存在しない場合には、機能物質（または有害物質）を含有する溶液から該物質を吸着除去できることを見出した。
こうして、本発明によれば、機能物質が吸着されたもしくは非吸着の多孔質粒子およびその粒子表面に固定された水溶性高分子鎖セグメントをベースとするポリマー分子を含んでなるコンジュゲートが提供される。
別の態様の本発明としては、機能物質が多孔質粒子表面に吸着されており、該機能物質が生理活性物質、香料、抗微生物剤および化粧品原料からなる群より選ばれる前記コンジュゲートを有効成分として含んでなる該機能物質を徐放するための組成物、また、前記コンジュゲートの該機能物質を徐放する組成物の調製のための使用、さらに前記コンジュゲートを該機能物質の施用が必要とされる部位または場所に施用し、該機能物質の作用を発現させる方法も提供される。
さらに別の態様の本発明として、機能物質を含まない前記コンジュゲートを有効成分として含んでなる、水性溶液または流体中に存在する機能物質、特に有害物質を吸着除去するための組成物、また、前記コンジュゲートを有害物質の除去が望まれる部位または場合に置くことを含んでなる該有害物質の除去方法も提供される。
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明に従うコンジュゲートまたは複合体を構成する多孔質粒子は、後述する機能物質をその界面における何らかの表面エネルギーにより特異的に吸着しうるような孔径の細孔を有する粒子であれば、有機物質もしくは無機物質またはそれらのハイブリドのいずれに由来するものであってもよい。したがって、かような細孔の孔径は限定されるものでないが、一般的に１０μｍ〜１ｎｍ（１０Å）、好ましくは１μｍ〜１ｎｍ、さらに好ましくは０．５μｍ〜１ｎｍである。また、粒子の平均径は、本発明の目的、すなわち表面の修飾により、安定な分散性が達成できるものであればよいが、一般的に５ｎｍ〜１０ｍｍ、好ましくは５ｎｍ〜５０μｍ、より好ましくは５ｎｍ〜３μｍである。
有機物質由来の多孔質粒子の例としては、架橋ポリスチレン、アガロース、セファデックス、ポリエチレン焼結連続多孔質体およびポリプロピレン焼結連続多孔質体が挙げられる。
本発明において好ましく用いられるのは、無機物質由来の多孔質粒子であって、限定されるものでないが、シリカ、クレイ、ゼオライト、チタニア、アルミナおよびジルコニア等である。なお、本発明にいうシリカ（ｓｉｌｉｃａ）は、単に、二酸化ケイ素（ＳｉＯ２）の別称として用いているのでなく、慣用的に二酸化ケイ素に限定されることなく何らかのケイ素分を含み、上記に定義した多孔質粒子をすべて包含する概念で使用している。したがって、上述の文献２〜６に記載されているようにして形成されるシリカ粒子も本発明にいうシリカに包含される。クレイには無機天然物またはそれらの加工物が包含され、おもに粘土鉱物を含み、石英、長石などの粗粒鉱物、水酸化アルミニウム、水酸化鉄、非晶質物質を含んでいてもよい。また、非晶質もしくは結晶質または層構造粘土鉱物から調製される粒子も、本発明にいうクレイに包含される。ゼオライトもまた、天然もしくは合成のいずれであってもよく、通常、分子ふるいや吸着剤として使用できるものが、本発明にいうゼオライトの好ましい例である。その他のチタニア、アルミナおよびジルコニアの語も上記シリカやクレイと同様の広範な概念をもつものとして使用している。
本発明に従うコンジュゲートまたは複合体を構成する水溶性高分子鎖セグメントをベース（または主要部）とするポリマー分子は、該水溶性高分子鎖セグメントの他に、該ポリマー分子が上述した多孔質粒子に固定されうる官能基または機能性部分を有していることが必須である。
かような水溶性高分子鎖セグメントは、本発明の目的、すなわち上述のような多孔質粒子の水性流体中での分散安定性を高めるように作用するものであれば、それらの種類にかかわりなく本発明に包含される。しかし、一般的には、水溶性高分子鎖セグメントとしてポリエチレングリコール（以下、ＰＥＧと略記することもある）、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミドおよびポリメタクリルアミドを好ましいものとして挙げることができる。また、該ポリマー分子が有する前記官能基または機能性部分は、該ポリマー分子を多孔質粒子表面に固定するように働くが、ここにいう「固定する」とは、多孔質粒子表面に結合されたポリマー分子が不動化された状態になることを意味する。ここにいう結合は、該粒子表面に存在しうるもしくは、必要により付加した官能基（例えば、シラノール、ヒドロキシル、メルカプト、アミノ、カルボキシル基等）とポリマー分子中に存在する前記官能基または機能性部分に存在しうる官能基との間での共有結合、または該粒子表面とポリマー分子中に存在する官能基、好ましくは機能性部分との間の物理的相互作用（例えば、静電相互作用、疎水性相互作用、水素結合、ファンデルワールスカ等）による結合であることができる。
以上のごときポリマー分子について、説明を簡潔にするために水溶性高分子鎖セグメントとして好ましい態様の一つであるＰＥＧ由来のセグメントを有するポリマーを例に主として挙げ以下に説明するが、他のポリマー分子もこれらの説明に基づいて理解できるであろう。ＰＥＧ由来のセグメントを有するポリマー（またはポリマー分子）は、下記の一般式（Ｉ）によって表すことができる。
Ｒ１−Ｌ１−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｌ２−Ｘ        （Ｉ）
上式中、Ｒ１は水素原子、メチル、保護されていてもよいホルミル、保護されていてもよいアミノ、保護されていてもよいカルボキシ、保護されていてもよいヒドロキシルまたはビニルスルホニル基を表し、
Ｌ１およびＬ２は相互に独立して、原子価結合またはリンカーを表し、
Ｘは多孔質粒子表面に当該ポリマー分子を固定することのできる共有結合または物理的相互作用を介する結合を形成するための官能基または機能性部分を表し、そして
ｎは２〜２０，０００の整数である。
Ｌ１がリンカーである場合の代表的なものとしては、限定されるものでないが、−（ＣＨ２）ｐ−Ｏ−、−（ＣＨ２）ｑ−ＣＯＯ−または−（ＣＨ２）ｒ−Ｓ−で表される連結基であることができ、ここでｐ、ｑおよびｒはそれぞれ独立して０〜８の整数である。これらのリンカーは記載した方向性で上記の式（Ｉ）のＬ１部分に組み込まれる構造を有する。一方、Ｌ２がリンカーである場合の代表的なものとしては、限定される
2005005548.tif 000003
で表される連結基であることができ、ここで、ｋおよびｌは１〜６の整数である。これらのリンカーは記載した方向性で上記の式（Ｉ）のＬ２部分に組み込まれる構造を有する。
Ｘが官能基である場合の基としては、シラノール、メルカプト、カルボキシルおよびアミノ基を挙げることができる。このような基は、多孔質粒子表面に、例えば、シラノール基またはヒドロキシル基が存在する場合にはＸのシラノールと縮合してシロキサン結合（−ＳｉＯ−）を形成し、またはＸのカルボキシル基と縮合してエステル結合（−ＯＣＯ−）を形成することにより、ポリマー分子を多孔質粒子表面に固定することができる。他方、Ｘは、モノ−もしくはジ−低級アルキル置換アミノ基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、メルカプト基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、シラノール基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、カルボキシル基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、スルホ基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、リン酸基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分、およびヒドロキシル基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分であることができる。なお、上記または下記において本明細書でいう、低級アルキルは、炭素原子数１〜６個（Ｃ１−Ｃ６）の直鎖または分岐したアルキルであり、具体的なものとしてはメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ．−プロピル、ブチル、ｓｅｃ．−ブチル、ヘキシル等を挙げることができる。
Ｘの好ましい態様であるモノ−もしくはジ−低級アルキル置換アミノ基を側鎖に有するオリゴまたはポリマー主鎖部分は、下記の一般式（ＩＩ）で表されるものが代表例である。
2005005548.tif 000004
上式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、相互に独立して水素原子、低級アルキル基であることができ、さらにＲ３は−（ＣＨ２）ｘ−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（ａｌｋ）２、ここでｘは０〜６の整数であり、ａｌｋは同一もしくは異なる低級アルキル基を表し、
Ｌ３は、式
2005005548.tif 000005
または−ＣＯＮＲ６（ＣＨ２）ｚ−で表される基であり、ｚは０〜１０の整数であり、Ｒ６は酸素原子、イオウ原子、窒素原子で中断されていてもよい低級アルキル基を表し、ｍは１〜２，０００の整数を表す。
これらのポリマーは、Ｙ．Ｎａｇａｓａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｒａｐｉｄ  Ｃｏｍｍｕｎ．１９９７，１８，９７２に記載の方法またはそれらの方法に準じて製造することができ、また、Ｒ３が−（ＣＨ２）ｘ−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）
2005005548.tif 000006
で表されるポリマーは、特願２００３−０４９０００の明細書の記載に従って製造できる。なお、特定の製造例を反応スキームで示すと、次のように製造されるイニファターを用い、さらにジアルキルアミノスチレン等を重合させる方法が挙げられる。
スキームＩ：
2005005548.tif 000007
スキームＩＩ：
2005005548.tif 000008
（上式中、Ａは、低級アルキルオキシ、保護されていてもよいホルミル、保護されていてもよいヒドロキシ、等であることができる。）
さらに、Ｒ１または上記Ａの定義における保護されていてもホルミルとは、式
2005005548.tif 000009
で表され、ＲａおよびＲｂは、相互に独立して、低級アルキルを表すか、一緒になってメチル置換エチレンを表すか、あるいはＲａ−ＯおよびＲｂ−Ｏが一緒になってＯ＝を表す（この場合にホルミルＯＣＨ−となる）。また、保護されていてもよいアミノ、保護されていてもよいカルボキシ、保護されていてもよいヒドロキシルは、例えばペプチド合成等の技術分野で周知の保護基により保護されているか、または未保護の状態にある基を意味する。さらに、保護されたアミノ基にはマレイミドが包含され、ヒドロキシルの保護基にはｐ−トルエンスルホニル基も包含される。
上記の「共有結合または物理的相互作用を介する結合を形成するための官能基または機能性部分」にいう各種官能基を有するポリマーは、例えば、上記のスキームＩ：における“Ａ”として、保護された形態にあるメルカプト基（例えば、トリアルキルシリルスルフィド）等を、保護された形態にあるシラノール基（例えば、トリアルコキシシリル）を選び、スキームＩに記載に従う最初の工程を実施し、必要により、それぞれの保護基を脱離することによって得ることができる（例えば、特開平１１−３２２９１７号公報および特開２００３−１４９２４５号公報参照）。同様にその他の官能基を有するポリマーも、それぞれ対する保護された形態にある官能基を“Ａ”として選び、上記のスキームＩに準じて得ることができる。
他方、側鎖にモノ−もしくはジ−低級アルキル基以外の官能基を有するオリゴまたはポリマー主鎖部分をもつポリマーは、例えば、上記のＹ．Ｎａｇａｓａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，で用いるジアルキルアミノエチル（メタ）アクリロイルに代え、所望の官能基（保護されていてもよい）を有する（メタ）アクリル酸エステルまたはアミドを用いて第二のブロックを形成する重合反応を行うか、または上記のイニファターを用い、さらに所望の官能基（保護されていてもよい）を有する（メタ）アクリル酸エステルまたはアミドを用いて第二のブロックを形成することによって得ることができる。
このようなポリマー分子中に例えば、上記の式（ＩＩ）で表される部分を有するポリマーは、例えば、多孔質粒子がシリカ、クレイ、ゼオライト等である場合は、水性流体中で該粒子表面に物理的に結合でき、しかもイオン強度の変化等では該表面から遊離しないで固定された状態が保持できる。さらに、例えば、上記の式（ＩＩ）におけるＲ４およびＲ５を、それぞれメチルにするかエチルにするかによりポリマー分子を温度感受性にすることもできる（例、Ｌ３が−ＣＯＯ（ＣＨ２）２−であり、Ｒ４およびＲ５がエチル基である場合には４０℃付近でポリマー分子を水に対して不溶化せしめることもできる。）。また、さらにＲ４およびＲ５を選ぶことにより、ポリマーの親−疎水性バランスやアミノ基のｐＫａを制御することにより、水性流体中でのポリマー分子の分散性を制御することもできる。このような制御は、例えば、本発明に従うコンジュゲートの多孔質粒子に機能物質が吸着されている場合に、該物質をコンジュゲートから水性流体中へ放出する挙動を制御するのに利用できる。本明細書で用いる場合の水性流体とは、水それ自体を初め、生物学的流体（例えば、血液、尿）、緩衝剤、等張剤、さらには水混和性の有機溶媒（例えば、メタノール、エタノール、アセトン、アセトコトリル、ジメチルホルムアミド等）を含む水溶液を包含する概念である。
多孔質粒子に吸着させうる機能物質は、いずれも限定されるものでないが、次のものを挙げることができる。
（ａ）  色素としては、アゾ系色素、キノン系色素、トリアリールメタン系色素、シアニン系色素、アクロシアニン系色素、インジゴ系色素が挙げられ、それぞれのクラスには、いずれも当業者に周知の色素が包含される。
（ｂ）  蛍光・発光体としては、ピレン、アントラセン、ＦＩＴＣ、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、ＣＹ−３、ＣＹ−５、ＣｄＳ量子ドット、ＣｄＳｅ／ＺｎＳ量子ドット等が挙げられる。
（ｃ）  生理活性物質としては、アクチビンＡ（ヒト型）、ＡＬＣＡＭ（ヒト型）、ＡＮＧ（アンジオゲニン）（ヒト型）、ＢＤＮＦ（ヒト型）、ＢＭＦ−２（ヒト型）カドヘリン、Ｃａｓｐａｓｅ−１（ヒト型）、ＣＤ１４、ＣＤ４０、チトクロームＣ、ＥＧＦ（ヒト型）、Ｆａｓリガンド、各クラスのインターロイキン、各クラスのインターフェロン、等を挙げることができる。
（ｄ）  香料としては、シス−３−ヘキセノールおよびその各種エステル、３，６−ノナジエノール、ジャスミンおよびその類似物、デルターデカラクトン等のラクトン類、２−ｎ−ヘキシルシクロペンタノン、プレニルアセテート等を挙げることができる。また、抗体、酵素、核酸、ペプチド核酸も上記の生理活性物質に包含される。
（ｅ）  磁性体としては、フェリコロイド（Ｆｅ２Ｏ３）を挙げることができる。
（ｆ）  食品添加物としては、ウド抽出物、アオイ花抽出物、アズキ全草抽出物、エリソルビン酸、γ−オリザノールを挙げることができる。
（ｇ）  化粧品原料としては、アスコルビン酸およびその誘導体、アセチルパントテニルエーテル、アセロラエキス、アセンヤクエキス、アビエチン酸エステル、アラントイン、アルブチン、イチョウエキス、ウイキョウエキス、カミツレエキス、甘草エキス、コウジ酸、トコフェロールおよびその誘導体、サリチル酸、ヨクイニンエキス等を挙げることができる。
（ｈ）  抗微生物剤には、当該技術分野で周知の抗ウイル剤および抗バクテリア剤、抗菌・カビ剤、抗腫瘍剤、抗生物質が包含される。これらには、例えば、限定されるものでないが、アジスロマイシン、エリスロマイシン、ジョサマイシン、スピラマイシン、タイロシン等のマクロライド系抗生物質、オキシテトラサイクリン、オーレオマイシン、クロルテトラサイクリン、テトラサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン等のテトラサイクリン系抗生物質、アルベカシン、カナマイシン、ゲンタマイシン、ストレプトマイシン、スペクチノマイシン、ネオマイシン、トブラマイシン等のアミノグリコシド系抗生物質、アボパルシン、テイコプラニン、バンコマイシン等のグリコペプチド系抗生物質、アンピシリン、オキサシリン、スルバクタム、セファロスポリン、セファトリアゾン、タゾバクタム、ナフシリン、ピペラシリン、ペニシリン、メチシリン等のβ−ラクタム系抗生物質、クロロマイセチン等クロラムフェニコール系抗生物質、バージニアマイシン、プリスチナマイシン等のストレプトグラミン系抗生物質、リンコマイシン、ダプトマイシン等のその他の抗生物質、スルファメトキサゾール、スルホンアミド等のサルファ剤、キノロン、ナリジクス酸等のキノロン系抗菌剤、エンロフロキサシン、オフロキサシン、サラフロキサシン、シプロ、トロパン、バイトリル等のニューキノロン系抗菌剤、等を挙げることができる。
このような、機能物質は、多孔質粒子とポリマー分子とのコンジュゲートを形成する前に多孔質粒子に吸着させておくか、またはコンジュゲートを形成している間もしくはコンジュゲートが形成された後に多孔質粒子に吸着させることもできる。したがって、機能物質を含まないコンジュゲートは水性流体中に存在しうる機能物質、特に有害物質（例えば、コレステロール、中性脂肪等）を当該流体から吸着除去するのに使用できる。
多孔質粒子とポリマー分子のコンジュゲートは、必要により機能物質の共存下で、ポリマーおよび存在する場合には機能物質を溶解しうる溶媒、例えば、水、テトラヒドロフラン、低級アルカノール、ジクロロメタン、超臨界二酸化炭素、芳香族炭化水素中で、溶媒が液体状態を維持しうる温度において、多孔質粒子とポリマー分子がコンジュゲートを形成するのに十分な時間接触させればよい。通常、ポリマー分子は、重量基準で多孔質粒子の１／１００〜１０，０００倍量、好ましくは１／１０〜１０００倍量、さらに好ましくは１〜２００倍量使用するのがよい。
多孔質粒子に吸着担持させうる機能物質は、それぞれの組み合わせの種類が異なることによって変動するが、多孔質粒子の重量を基準に、０．００００１重量％〜２００重量％、好ましくは０．１重量％〜３０重量％より好ましくは０．１重量％〜１０重量％である。
こうして、機能物質を多孔質粒子に吸着した多孔質粒子とポリマー分子とのコンジュゲートは、特に、機能物質が蛍光・発光体および色素の一部以外であるときは、水性流体中に置いたとき、場合により温度変化、ｐＨ変化、水混和性有機溶媒の添加等により多孔質粒子から機能物質を制御された様式で脱着し、水性溶体中へ放出することができる。
したがって、例えば、機能物質が抗微生物剤、特に、抗菌剤であるときは、パルプ工業、アルミ延伸工業、食品加工業または水性潤滑油などの水を大量に利用する産業用水または廃水に本発明に従うコンジュゲートを施用することにより、長期間の殺菌を行うことができる。また、機能物質が生理活性物質であるときは、コンジュゲートを生体の所望の部位に投与ないし埋植し、その場で生理活性物質を徐放させて、各種疾患の治療または予防を行うこともできる。また、機能物質が香料であるときは、コンジュゲートを水性流体中に置くことにより香料を徐放することができ、これは室内の芳香化または芳香性化粧料に使用できるであろう。さらに、化粧品原料が、例えば、安定性に欠けるかもしくは皮膚に悪影響を及ぼす場合等には、そのような化粧品原料の安定化もしくは安全使用に、本発明に従コンジュゲートは資することができる。
【図面の簡単な説明】  図１は、本発明による多孔質粒子の分散安定化の概念図である。
図２は、シリカ粒子とＰＥＧ／ＰＡＭＡブロック共重合体とのコンジュゲートのイオン強度の変動に対する分散安定性を示すグラフである。■プロットはシリカ粒子のみの結果を示し、●はコンジュゲートの水溶液の透過率を示す。
図３は、クレイ粒子とＰＥＧ／ＰＡＭＡブロック共重合体とのコンジュゲートへのピレン分子の吸着特性を示すグラフである。
図４は、クレイ粒子とＰＥＧ／ＰＡＭＡブロック共重合体とのコンジュゲートへのＣｄＳｅ／ＺｎＳ型半導体ナノ粒子の吸着挙動を示すグラフである。
図５は、クレイ粒子とＰＥＧ／ＰＡＭＡブロック共重合体とのコンジュゲートにヒドロキノンを吸着させた場合のＬ−ドーパを用いて抗酸化挙動について調べた結果を示すグラフである。■ブロットはヒドロキノンのみを、●はクレイ粒子に吸着させたヒドロキノンを、▲は、ヒドロキノンのみを３時間インキュベートしたときを、▼はクレイ粒子に吸着させたヒドロキノンを３時間インキュベートしたときの結果を表す。
図６は、クレイ粒子とＰＥＧ／ＰＡＳＴブロック共重合体とのコンジュゲートの分散安定性を示すグラフである。
図７は、クレイ粒子に吸着させたピレンの放出挙動を示すグラフである。
図８は、クレイ粒子とＰＥＧ／ＰＡＭＡブロック共重合体とのコンジュゲートに対するウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）の吸着挙動を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】  以下、本発明について具体例を挙げてさらに説明するが、これは本発明の理解を容易にするために提供するものである。
実施例１：シリカ粒子コンジュゲートの製造方法
この実施例で使用するポリマー（ＰＥＧ／ＰＡＭＡと略記する下記式で表されるポリマー）
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上述のＹ．Ｎａｇａｓａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｒａｐｉｄ  Ｃｏｍｍｕｎ．１９９７，１８，９２７に記載の方法に従って得られた。ＰＥＧ  Ｍｎ＝４，０００ｇ／ｍｏｌ、ＰＡＭＡ（ポリメタクリル酸（２−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチル））Ｍｎ＝２，０００）を分散安定剤として用い、シリカ粒子を修飾した。
フィルターを通したコロイダルシリカ溶液（日産化学工業株式会社、スノーテックスＳ（コロイダルシリカ）粒径１７ｎｍ）１５０μＬ（シリカ粒子４１．５ｍｇ含有）に９．８５ｍｌのリン酸バッファー（ｐＨ＝７．４）を加え、全量を１０ｍｌとして、３０分間超音波をあてたものに、ＰＥＧ／ＡＭＡのブロックポリマー（４０００／２０００）を２００ｍｇをリン酸バッファー１０ｍｌに溶解させたものを加え、Ｕｖ−ｖｉｓスペクトルにより、その透過率の変化を調べた結果、ほぼ完全に透明であった。
このようにして調製したコンジュゲートの安定性をイオン強度を変化させて評価した。その結果を図２に示す。ブロックポリマーを加えない系ではイオン強度を増加させると容易に凝集沈殿し、白濁するのに対し、ブロックポリマー混合系では極めて高い塩強度でも全く透明を保っていることがわかる。
動的光散乱（ＤＬＳ）測定によって測定した粒径は７０ｎｍであった。
実施例２：クレイ粒子とＰＥＧ／ＰＡＭＡとのコンジュゲートの製造方法
実施例１のシリカをクレイ粒子（Ｌａｐｏｒｔｅ  Ｉｎｄｕｔｒｉｅｓ  ＬＴＤ、Ｌａｐｏｎｉｔｅ  ＸＬＧ−（Ｆ）、５ｍｇ）に代えた以外は実施例１の方法を繰り返して、コンジュゲートを調製した。このようにして調製したコンジュゲートの安定性をイオン強度を変化させて評価した。ＰＥＧ／ＰＡＭＡ複合化粒子ではシリカと同様極めて安定分散の粒子が調製された。ＤＬＳ測定によって測定した粒径は１４０ｎｍであった。
実施例３：シリカとＰＥＧ／ＰＡＭＡコンジュゲートに対するグルセオフルビン（ＧＦ）の担持
この実施例では、実施例１で調製したコンジュゲートに抗真菌剤としてグルセオフルビンを担持させた。グルセオフルビン（ＧＦ）５ｍｇをアセトンに溶かし、シリカ粒子（４０ｍｇ）のリン酸緩衝液中に加え、シリカ粒子にＧＦを取り込ませた。その後、ＰＥＧ／ＰＡＭＡの２００ｍｇを加え、撹拌してコンジュゲートを調製した。蛍光による測定結果、３％のＧＦがコンジュゲートに取り込まれていることが確認された。
実施例４：クレイ粒子とＰＥＧ／ＰＡＭＡとのコンジュゲートに対するピレンの担持
リン酸バッファー（１０ｍＭ，ｐＨ７．４；Ｎａ２ＨＰＯ４．１２Ｈ２Ｏ，２．８６５ｇ／ｌ；ＮａＨ２ＰＯ４．２Ｈ２Ｏ，０．３１２ｇ／ｌ）１０ｍＬ中にクレイ粒子１００ｍｇ及びＰＥＧ／ＰＡＭＡ２００ｍｇのリン酸緩衝溶液にピレンのアセトン溶液（１ｍｇ〜８ｍｇ／１ｍＬ）を加え、１時間室温遮光下で撹拌した。調製した溶液を透析により未吸着ピレンを除き、蛍光測定した。図３から見られるように、蛍光強度が徐々に増加し、６％を越えたところでエキシマーの吸収が増加することから細孔内に濃縮されていることがわかる。こうしてクレイに対する蛍光体の安定担持が達成された。
実施例５：クレイ粒子とＰＥＧ／ＰＡＭＡとのコンジュゲートに対する半導体蛍光粒子の担持
クロロホルム１０ｍＬ中にクレイ１０ｍｇ、ＣｄＳｅ量子ドット０．１３ｍｌ（２０・ｍｏｌ／ｍｌ）、ＰＥＧ／ＰＡＭＡ２００ｍｇ（５０００／２０００）を加え、２時間よく撹拌し、クロロホルムを留去させた。ここにリン酸バッファー１０ｍＬを加え、蛍光測定を行った。クレイに担持させたＣｄＳｅ−粒子それ自体はリン酸バッファー中で殆ど発光しないものの、ＰＥＧ／ＰＡＭＡで安定化したＣｄＳｅ−クレイは強い発光を示した（図４参照）。コンジュゲートへのＣｄＳｅ／ＺｎＳ型半導体ナノ粒子の吸着の様子（ａ）、クレイ粒子にＣｄＳｅ／ＺｎＳ型半導体ナノ粒子を吸着させると発光強度は極端に低下する（ｂ）のに対し、コンジュゲートでは極めて強い発光挙動が見られる。
実施例６：クレイ粒子とＰＥＧ／ＰＡＭＡとのコンジュゲートに対するヒドロキノンの担持
実施例４のピレンのかわりにヒドロキノンを用いた以外は全く同様の方法でヒドロキノンの担持を行った。図５に示すようにヒドロキノン及びクレイ粒子担持ヒドロキノンのＬ−ＤＯＰＡ抗酸化性を調べたところ、良好な結果を得た。特にヒドロキノンでは３時間リン酸緩衝液中でインキュベートした後にＬ−ＤＯＰＡを加えたところ全く抗酸化性を失っていたのに対し、クレイ粒子担持ヒドロキノンでは活性が残存しており、クレイ粒子に担持された物質の安定化が達成され、薬物徐放担体として優れていることが確認された。
実施例７：ＰＥＧ／ポリ（４−ジメチルアミノメチルスチレン）（ＰＥＧ／ＰＡＳＴｓ略記する。）ブロック共重合体による多孔質粒子の安定化
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ＰＥＧ／ＰＡＳＴは、上記スキームＩＩで得られた最終化合物をイニファターとして用い、４−ジメチルアミノエチルメチルスチレンをアニオンリビング重合させることによって得た。こうして得たＰＥＧ／ＰＡＳＴをＰＥＧ／ＰＡＭＡの代わりに用いたこと以外、実施例２の操作を繰り返してクレイ粒子とのコンジュゲートを得た。
図６からみられるとおり、ＰＥＧ／ＰＡＳＴの添加量を増やすと透明性が増し、コンジュゲートの分散安定化性が高まることが確認された。
実施例８：ピレンの放出実験
１００ｍｌナスフラスコにクレイ６ｍｇ、アセトン６ｍｌ、アセトン溶解させたピレン０．３ｍｇ（１９．８・１）（５ｗｔ％）を加えた。次にクレイにピレンを取り込ませるため、２ｈ撹拌を行い、エバポレートし、アセトンを除去した。その後、０．４μｍのシリンジフィルターをかけ、クレイ粒子と未反応のピレンを除いた。その次に、サンプルを透析膜に入れ、２Ｌの密封できる容器に入れた。そして、この溶液を１ｍＬ取り出し、蛍光測定し、その強度変化を観察し、あらかじめ用意した検量線データと比較することによりリリース量を算出した。最終を図７に示す。また、フィルターの中に入ったピレン−クレイ溶液の蛍光強度を測ることにより、クレイに配位したピレンの状態も測定することにした。なお反応はすべて遮光下で行った。
透析膜の外に出てきたピレンのリリース量から２日後までは、クレイに取り込まれたピレンがほとんど放出されていないことが分かる。その後、３日目あたりからピレンが放出されてきている様子が分かる。その後リリースさせてから２０日後あたりまでピレンが大きくリリースされている様子が分かる。その後のリリース挙動は、非常に緩やかになっていく様子がわかる。その後、３０日付近では、ほとんどピレンは、リリースされていないことが確認される。
実施例９：タンパク非特異吸着抑制評価
３０ｍｌサンプル官にシリカ粒子６６０μｌ、とＰＢＳ１０ｍＬ（０．１５Ｍ）とを加え３０時間超音波処理を行った。その後ＰＥＧ／ＰＡＭＡを０から２００ｍｇ加えサンプル調整を行ったのち、超遠心分離（７００００ｒｐｍ，３１２０００×ｇ，３０分）を３回行いクレイと未反応のＰＥＧ／ＰＡＭＡを除いた。その後、溶液が０．１ｍｇ／ｍｌとなるように蛍光でラベル化されたタンパクであるＦＩＴＣ−ＢＳＡをリン酸緩衝溶液で溶解させたものを加え、１時間振とうを行い、超遠心分離（７００００ｒｐｍ，３１２０００×ｇ，３０分）をかけることにより、その上澄み液の蛍光測定を行い（ｅｘ＝４９３ｎｍ）、タンパク吸着量を認めた。
図８にシリカに吸着したタンパク量を上澄み及びシリカ粒子上からはがしとったタンパク量を定量することによって求めたデータを示す。ポリマーが無いかあるいは少ない場合には大量のタンパク質が粒子に吸着しているのに対し、ポリマー添加量を増やすと非特異的吸着が効果的に抑制されることがわかる。
【産業上の利用可能性】  本発明は、各種機能物質を担持し、安定に水性流体中に分散できめコンジュゲートを提供する。機能物質の機能によって利用不能産業が拡大しうるが、例えば、機能物質が生理活性物質である場合は、医薬製造業で本発明を利用できる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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