(57)【要約】血液検査の結果に影響を与えることのない血清試料を血漿から迅速に調製できるフィブリノーゲン除去用フィルタ、フィブリノーゲン除去用フィルタデバイス、及び、それらを用いるフィブリノーゲン除去方法を提供する。血漿からフィブリノーゲンを除去するためのフィルタであって、フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーからなり、表面積が０．５ｍ２／ｇ以上であり、空隙率が８５％以下であるフィブリノーゲン除去用フィルタ。
2004065958.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血漿からフィブリノーゲンを除去するためのフィルタであって、フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーからなり、表面積が０．５ｍ２／ｇ以上であり、空隙率が８５％以下であることを特徴とするフィブリノーゲン除去用フィルタ。
【請求項２】
フィルタ１ｇ当たり１ｍｇ以上のフィブリノーゲンを吸着することを特徴とする請求項１に記載のフィブリノーゲン除去用フィルタ。
【請求項３】
フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーは、ポリエステル系樹脂からなるものであることを特徴とする請求項１又は２に記載のフィブリノーゲン除去用フィルタ。
【請求項４】
請求項１、２又は３に記載のフィブリノーゲン除去用フィルタを用いて、血漿からフィブリノーゲンを除去することを特徴とするフィブリノーゲン除去方法。
【請求項５】
血漿からフィブリノーゲンを除去するためのフィルタデバイスであって、筒状の容器にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーが充填されていることを特徴とするフィブリノーゲン除去用フィルタデバイス。
【請求項６】
請求項５に記載のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスの容器内に血漿を注入し、血漿注入側から加圧するか又はろ過血漿出口側から吸引することによって、血漿をフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーを通過させることを特徴とするフィブリノーゲン除去方法。
【請求項７】
請求項５に記載のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスの筒状の容器内に、該筒状の容器の内周壁に液密的に接触し、かつ筒状の容器の長さ方向に移動し得るピストンが備えられており、前記繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーの前記ピストンが配置されている側とは反対側において筒状の容器に血漿吸引口が備えられており、
前記血漿吸引口を血漿に浸した状態でピストンを該血漿吸引口から遠ざかる方向に移動させることにより、筒状の容器内に血漿を吸引し、かつ前記繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーを通過させることを特徴とするフィブリノーゲン除去方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、血清又は血漿に含まれるフィブリノーゲンを除去する方法及びそのための部材に関する。
【背景技術】  臨床検査では病気を診断するために、血液検査が広く用いられている。血液検査の多くは血清検査であり、検査に要する血清は、通常、血液検査容器に採取した血液を、凝固させた後、遠心分離することによって、比重の異なる血餅、即ち、フィブリンと血球成分が混合したゲル様塊状物から分離されたものである。血液検査容器には、血液を凝固させるために凝固促進成分が添加されており、それらは従来吸着性無機物等が用いられていたが、又は、最近ではトロンビン、蛇毒といった酵素が用いられることによって、凝固時間が短縮され、検査結果が得られるまでの時間を短縮することにより、利便性が向上している。
一方、年々増加してきている透析患者の血液は、抗凝固剤が投与されているために凝固時間が異常に長くなり、検体が得られるまでに相当な時間が必要であった。このような課題から抗凝固剤であるヘパリンを中和する成分と凝固促進成分を併用した血液凝固促進剤が開発され、凝固時間の短縮に貢献している（特開昭６２−２４０６１７号公報、特開昭６３−２７５９５３号公報参照）。
しかしながら、これらを用い、血液の流動性がなくなり凝固が完了しているようであっても、遠心分離した後に徐々に血清中にフィブリンが析出してくることがあり、このフィブリンによって、検査装置のノズルがつまったりすることが頻繁に起こっている。
そこで、特開２０００−３０９５３９号公報に記載されているように、親水化された高分子繊維集合体等を用いて、血漿中に含まれるフィブリノーゲンを除去して血清を得る方法が開発されている。
しかしながら、特開２０００−３０９５３９号公報に記載の方法では、血漿中に含まれるアルブミン等の蛋白質も同時に吸着除去してしまうため、この方法により得られた試料は、かかる物質を測定対象とする血液検査に供することができないという問題があった。
【発明の開示】
本発明は、上記現状に鑑み、血液検査の結果に影響を与えることのない血清試料を血漿から迅速に調製できるフィブリノーゲン除去用フィルタ、フィブリノーゲン除去用フィルタデバイス、及び、それらを用いるフィブリノーゲン除去方法を提供することを目的とする。
本発明１は、血漿からフィブリノーゲンを除去するためのフィルタであって、フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーからなり、表面積が０．５ｍ２／ｇ以上であり、空隙率が８５％以下であるフィブリノーゲン除去用フィルタである。
本発明２は、血漿からフィブリノーゲンを除去するためのフィルタデバイスであって、円筒状の容器にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーが充填されているフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスである。
以下に本発明を詳述する。
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、血漿からフィブリノーゲンを除去するためのものである。
上記血漿は、通常、抗凝固剤を加えた血液を遠心して血球を沈殿させ、透明な淡黄色である上清を回収することにより得られる。
なお、本発明においては、上記血漿にはフィブリノーゲンが混入している血清も含まれる。
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーからなるものである。
上記フィブリノーゲン吸着性の繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーとしては、フィブリノーゲン吸着性があれば特に限定されず、どのような素材からなるものであっても良い。ただし、本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、血液検査に用いるものであるので、検査に影響するほどの鉄、亜鉛、マグネシウム、アルミニウム等の金属塩、ナトリウムイオン、カリウムイオン、塩化物イオン等を含有するものであってはならない。また、有機物等にあっても同様である。
このようなフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子及び多孔性ポリマーとしては、例えば、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート等のポリエステル系樹脂、ナイロン樹脂、ポリウレタン樹脂、ポリスチレン系樹脂、ポリメタクリル酸メチル等のポリ（メタ）アクリル酸エステルの単独又は共重合樹脂、ポリエチレンと酢酸ビニル又は（メタ）アクリル酸（エステル）等の共重合樹脂等からなるものが挙げられる。これらは単独で用いられてもよく、２種以上が併用されてもよい。中でもポリエステル系樹脂からなるものはフィブリノーゲン吸着性能と、処理後試料の検査値に対する影響のバランスの観点から好適に用いられる。
フィブリノーゲン吸着性の材料は、一般的に他の疎水性蛋白質も吸着しやすい特徴がある。このため、上記フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーは、場合によっては表面特性をコントロールするためにフィルタ表面を親水化処理することが必要となる場合がある。親水化処理剤としては特に限定されず、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等の親水性の合成高分子や天然の水溶性高分子、ポリエーテル変性シリコーン等の高分子界面活性剤等が挙げられる。
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、表面積が０．５ｍ２／ｇ以上であり、空隙率が８５％以下である。
フィルタの表面積が大きいほどフィブリノーゲンの除去効率は向上し、表面積が０．５ｍ２／ｇ未満であると、フィブリノーゲンを除去するためにより多くのフィルタを必要とするため、コストが高くなる。空隙率が８５％を超えると、血漿の回収率が低下する。好ましくは表面積が０．７ｍ２／ｇ以上であり、空隙率が８０％以下である。
なお、フィブリノーゲン除去用フィルタの表面積は、平均繊維径、繊維重量、密度から以下の計算式（１）により求められる。
表面積＝（４×繊維重量）／（素材密度×平均繊維径）…（１）
空隙率は、フィルタ素材の密度、重量、圧縮後の体積から以下の計算式（２）により求められる。
空隙率＝｛１−重量／（素材密度×圧縮後体積）｝×１００…（２）
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、フィルタ１ｇ当たり１ｍｇ以上のフィブリノーゲンを吸着するものであることが好ましい。１ｇ当たりのフィブリノーゲン吸着量が１ｍｇ未満であると、必要なフィブリノーゲン吸着性能を得るためにより多くのフィルタを必要とし、それによって、血漿の回収量が低下することがある。
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタを用いて、血漿からフィブリノーゲンを除去することができる。このような本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタを用いるフィブリノーゲン除去方法もまた、本発明の１つである。
本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスは、血漿からフィブリノーゲンを除去するためのものである。
本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスは、筒状の容器にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーが充填されている構造を有する。上記筒状の容器には、上部と下部に開口部があり、その中にフィブリノーゲン吸着性の繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーが充填され固定されている。
なお、筒状の容器は、好ましくは、円筒状の形状を有するが、角筒状等の他の筒状の形状を有していてもよい。上記フィブリノーゲン吸着性の繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーを固定するために、容器下部の開口部の孔径は小さく絞られていても良く、容器内に固定用のしきり板や補助材等が挿入されていても良い。
上記フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子及び多孔性ポリマーは、本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタに用いられるものと同様のものである。
本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスを用いて血漿からフィブリノーゲンを除去するには、まず、本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスの筒状容器内に血漿を注入し、次いで、血漿注入側から加圧するか又はろ過血漿出口側から吸引することによって、血漿をフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーを通過させることによる。
加圧方法として特に限定されず、例えば、図１に示すようなピストンを用いる方法等が挙げられる。吸引方法としては特に限定されず、例えば、図２に示すような内部が減圧された管にデバイスのろ過血漿出口側を挿入する方法が挙げられる。
なお、図１に示すフィルタデバイスでは、円筒状の容器１内にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーからなるフィブリノーゲン吸着材２が収納されている。フィブリノーゲン吸着材２は、好ましくは、本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタで構成されている。また、円筒状の容器１には、円筒状の容器１の内壁に液密的に接触しつつ移動するピストン３が収納される。ピストン３は、ピストンロッド３ａに連結されている。
また、図２に示すフィルタデバイスでは、同様に構成された円筒状の容器１内にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーからなるフィブリノーゲン吸着材２が収納されている。フィブリノーゲン吸着材２は、好ましくは、本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタで構成されている。そして、円筒状の容器１の先端には注射針５が取り付けられている。注射針５が真空採血管４の本体を刺通し、真空採血管４内に至らされる。そのため、円筒状の容器１内に注がれた血漿は、上記フィブリノーゲン吸着材２を通過して真空採血管４内に導かれる。
また、本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスを用いて血漿からフィブリノーゲンを除去する方法の他の例としては、筒状、好ましくは円筒状の容器にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーからなるフィブリノーゲン吸着材が充填されている構造において、筒状容器の内周面に液密的に接触されて移動され得るピストンがさらに備えられており、フィブリノーゲン吸着材の前記ピストンとは反対側において前記筒状の容器に血漿吸引口が設けられており、ピストンを該血漿吸引口から遠ざかるように移動させて血漿を筒状容器内に吸引することにより、血漿が前記繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーを通過し、それによってフィブリノーゲンが除去される。この方法では、採収された血漿中に泡が生じ難い。
上記のように泡が生じ難いフィブリノーゲン除去方法に用いられるフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスの構造例を図３に示す。図３に示す構造では、円筒状部材１内に、フィブリノーゲン吸着材２が収納されている。フィブリノーゲン吸着材２は、繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーからなり、好ましくは、本発明１に従って構成されている。そして、フィブリノーゲン吸着材２の上方にはピストン３が配置されている。ピストン３の外周面は円筒状部材１の内周面に液密的に接触されている。このピストン３は、ピストン３の上方に連結されたピストンロッド３９を操作することにより円筒状部材１内において、円筒状部材１の長さ方向に移動され得る。他方、フィブリノーゲン吸着材２の下方には、すなわちフィブリノーゲン吸着材２のピストン３が配置されている側とは反対側には、血漿吸引口１ａが設けられている。このフィルタデバイスでは、血漿吸引口１ａを血漿に浸した状態で、ピストン３を上方に移動させることにより、すなわち血漿吸引口１ａから遠ざかる方法に移動させることにより、血漿が吸引され、円筒状部材１内に導かれる。この場合に、血漿がフィブリノーゲン吸着材２を通過することにより濾過され、フィブリノーゲンが除去される。
上記のように、本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスを用いて血漿からフィブリノーゲンを除去する方法もまた、本発明の１つである。
【図面の簡単な説明】  図１は、ピストンを用いてフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスを血漿注入側から加圧する方法を示す図である。
図２は、内部が減圧された管を用いてフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスをろ過血漿出口側から吸引する方法を示す図である。
図３は、ピストンが円筒状部材内に配置されており、該円筒状部材内にフィブリノーゲン吸着材が収納されており、吸引により血漿をろ過する方法を説明するための略図的正面図である。
【発明を実施するための最良の形態】  以下に実施例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるものではない。
【実施例１】  平均直径１．８μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ２）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して４ｍＬの体積になるように圧縮した。
【実施例２】  平均直径１．８μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ２）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して３．２ｍＬの体積になるように圧縮した。
【実施例３】  平均直径１．８μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ２）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して２．４ｍＬの体積になるように圧縮した。
【実施例４】  平均直径３．５μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ２）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して４ｍＬの体積になるように圧縮した。
【実施例５】  平均直径３．５μｍのアクリル／ポリエステル製不織布（商品名シャレリアＣ１０４０（旭化成社製）、７０％／３０％、目付４０ｇ／ｍ２）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して２ｍＬの体積になるようにした。
【実施例６】  平均直径３．５μｍのアクリル／レーヨン製不織布（商品名シャレリアＣＲ０４０（旭化成社製）、６５％／３５％、目付４０ｇ／ｍ２）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して２ｍＬの体積になるようにした。
比較例１
平均直径１．８μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ２）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して７ｍＬの体積になるように圧縮した。
比較例２
平均直径６．５μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ２）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して４ｍＬの体積になるように圧縮した。
比較例３
平均直径３．５μｍのポリプロピレン製不織布（商品名エルタスガード（旭化成社製）、目付１７ｇ／ｍ２）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して２ｍＬの体積になるようにした。
実験例１
実施例１〜６及び比較例１〜３で得られたフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスのシリンジ内部の不織布上に、フィブリノーゲン濃度が１００ｍｇ／ｄＬであるヒト血漿を注入し、ピストンで加圧することによってろ過を行った。ろ過後に回収できた血漿の割合及び残存するフィブリノーゲン量をトロンビン時間法に従って求めた。なお、実施例１〜６及び比較例１〜３で得られたフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスのフィルタの表面積は上記の計算式（１）に従って算出し、空隙率は上記の計算式（２）に従って算出した。結果を表１に示した。
2004065958.tif 000003
実験例２
実施例１〜６及び比較例１〜３で用いた不織布をそれぞれ１．０ｇ量り取り、フィブリンノーゲン濃度２３５ｍｇ／ｄＬのヒト血漿に浸漬した後、不織布のみを除去し、残った血漿中のフィブリノーゲン濃度を実験例１と同様の方法にて測定することによってそれぞれ不織布１ｇ当たりの吸着量を求めた。結果を表２に示した。
2004065958.tif 000004
実験１、２の結果より表面積０．５ｍ２／ｇ以上かつ空隙率８５％以下のフィルタを用いた場合、１００ｍｇ／ｍＬの血漿を流通したときにフィブリノーゲンが測定限界以下まで除去されていた。表面積が０．５ｍ２／ｇ未満である場合（比較例２）は、フィブリノーゲンが除去しきれず、また、空隙率８５％以上のとき（比較例１）は血漿の回収率が２０％と非常に低かった。また材質によっては、フィブリノーゲン吸着量が低く、ポリプロピレンを用いた比較例３の場合もフィブリノーゲンを除去しきれなかった。
また、実施例１、４、５で得られたフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスによるフィブリノーゲンの除去処理の検査値への影響は表３に示した通りほとんどなかった。
2004065958.tif 000005
【産業上の利用可能性】  本発明によれば、血漿中に含まれるフィブリノーゲン以外のタンパク質を吸着除去せずにフィブリノーゲンのみを吸着除去できるので、処理後試料を対象とする検査結果に影響が及ばず、ヘパリン投与患者の血清中からたびたびフィブリンが析出してくるという問題を完全に解決できる。
【図１】
2004065958.tif 000006
【図２】
2004065958.tif 000007
【図３】
2004065958.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成17年10月6日(2005.10.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血清又は血漿に含まれるフィブリノーゲンを除去する方法及びそのための部材に関する。
【背景技術】
【０００２】
臨床検査では病気を診断するために、血液検査が広く用いられている。血液検査の多くは血清検査であり、検査に要する血清は、通常、血液検査容器に採取した血液を、凝固させた後、遠心分離することによって、比重の異なる血餅、即ち、フィブリンと血球成分が混合したゲル様塊状物から分離されたものである。血液検査容器には、血液を凝固させるために凝固促進成分が添加されており、それらは従来吸着性無機物等が用いられていたが、又は、最近ではトロンビン、蛇毒といった酵素が用いられることによって、凝固時間が短縮され、検査結果が得られるまでの時間を短縮することにより、利便性が向上している。
【０００３】
一方、年々増加してきている透析患者の血液は、抗凝固剤が投与されているために凝固時間が異常に長くなり、検体が得られるまでに相当な時間が必要であった。このような課題から抗凝固剤であるヘパリンを中和する成分と凝固促進成分を併用した血液凝固促進剤が開発され、凝固時間の短縮に貢献している（特許文献１、特許文献２参照）。
【特許文献１】特開昭６２−２４０６１７号公報
【特許文献２】特開昭６３−２７５９５３号公報
【特許文献３】特開２０００−３０９５３９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、これらを用い、血液の流動性がなくなり凝固が完了しているようであっても、遠心分離した後に徐々に血清中にフィブリンが析出してくることがあり、このフィブリンによって、検査装置のノズルがつまったりすることが頻繁に起こっている。
【０００５】
そこで、特許文献３に記載されているように、親水化された高分子繊維集合体等を用いて、血漿中に含まれるフィブリノーゲンを除去して血清を得る方法が開発されている。
【０００６】
しかしながら、特許文献３に記載の方法では、血漿中に含まれるアルブミン等の蛋白質も同時に吸着除去してしまうため、この方法により得られた試料は、かかる物質を測定対象とする血液検査に供することができないという問題があった。
【０００７】
本発明は、上記現状に鑑み、血液検査の結果に影響を与えることのない血清試料を血漿から迅速に調製できるフィブリノーゲン除去用フィルタ、フィブリノーゲン除去用フィルタデバイス、及び、それらを用いるフィブリノーゲン除去方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明１は、血漿からフィブリノーゲンを除去するためのフィルタであって、フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーからなり、表面積が０．５ｍ2／ｇ以上であり、空隙率が８５％以下であるフィブリノーゲン除去用フィルタである。
【０００９】
本発明２は、血漿からフィブリノーゲンを除去するためのフィルタデバイスであって、円筒状の容器にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーが充填されているフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスである。
【００１０】
以下に本発明を詳述する。
【００１１】
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、血漿からフィブリノーゲンを除去するためのものである。
【００１２】
上記血漿は、通常、抗凝固剤を加えた血液を遠心して血球を沈殿させ、透明な淡黄色である上清を回収することにより得られる。
【００１３】
なお、本発明においては、上記血漿にはフィブリノーゲンが混入している血清も含まれる。
【００１４】
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーからなるものである。
【００１５】
上記フィブリノーゲン吸着性の繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーとしては、フィブリノーゲン吸着性があれば特に限定されず、どのような素材からなるものであっても良い。ただし、本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、血液検査に用いるものであるので、検査に影響するほどの鉄、亜鉛、マグネシウム、アルミニウム等の金属塩、ナトリウムイオン、カリウムイオン、塩化物イオン等を含有するものであってはならない。また、有機物等にあっても同様である。
【００１６】
このようなフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子及び多孔性ポリマーとしては、例えば、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート等のポリエステル系樹脂、ナイロン樹脂、ポリウレタン樹脂、ポリスチレン系樹脂、ポリメタクリル酸メチル等のポリ（メタ）アクリル酸エステルの単独又は共重合樹脂、ポリエチレンと酢酸ビニル又は（メタ）アクリル酸（エステル）等の共重合樹脂等からなるものが挙げられる。これらは単独で用いられてもよく、２種以上が併用されてもよい。中でもポリエステル系樹脂からなるものはフィブリノーゲン吸着性能と、処理後試料の検査値に対する影響のバランスの観点から好適に用いられる。
【００１７】
フィブリノーゲン吸着性の材料は、一般的に他の疎水性蛋白質も吸着しやすい特徴がある。このため、上記フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーは、場合によっては表面特性をコントロールするためにフィルタ表面を親水化処理することが必要となる場合がある。親水化処理剤としては特に限定されず、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等の親水性の合成高分子や天然の水溶性高分子、ポリエーテル変性シリコーン等の高分子界面活性剤等が挙げられる。
【００１８】
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、表面積が０．５ｍ2／ｇ以上であり、空隙率が８５％以下である。
【００１９】
フィルタの表面積が大きいほどフィブリノーゲンの除去効率は向上し、表面積が０．５ｍ2／ｇ未満であると、フィブリノーゲンを除去するためにより多くのフィルタを必要とするため、コストが高くなる。空隙率が８５％を超えると、血漿の回収率が低下する。好ましくは表面積が０．７ｍ2／ｇ以上であり、空隙率が８０％以下である。
【００２０】
なお、フィブリノーゲン除去用フィルタの表面積は、平均繊維径、繊維重量、密度から以下の計算式（１）により求められる。
【００２１】
表面積＝（４×繊維重量）／（素材密度×平均繊維径）…（１）
空隙率は、フィルタ素材の密度、重量、圧縮後の体積から以下の計算式（２）により求められる。
【００２２】
空隙率＝｛１−重量／（素材密度×圧縮後体積）｝×１００…（２）
【００２３】
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタは、フィルタ１ｇ当たり１ｍｇ以上のフィブリノーゲンを吸着するものであることが好ましい。１ｇ当たりのフィブリノーゲン吸着量が１ｍｇ未満であると、必要なフィブリノーゲン吸着性能を得るためにより多くのフィルタを必要とし、それによって、血漿の回収量が低下することがある。
【００２４】
本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタを用いて、血漿からフィブリノーゲンを除去することができる。このような本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタを用いるフィブリノーゲン除去方法もまた、本発明の１つである。
【００２５】
本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスは、血漿からフィブリノーゲンを除去するためのものである。
【００２６】
本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスは、筒状の容器にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーが充填されている構造を有する。上記筒状の容器には、上部と下部に開口部があり、その中にフィブリノーゲン吸着性の繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーが充填され固定されている。
【００２７】
なお、筒状の容器は、好ましくは、円筒状の形状を有するが、角筒状等の他の筒状の形状を有していてもよい。上記フィブリノーゲン吸着性の繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーを固定するために、容器下部の開口部の孔径は小さく絞られていても良く、容器内に固定用のしきり板や補助材等が挿入されていても良い。
【００２８】
上記フィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子及び多孔性ポリマーは、本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタに用いられるものと同様のものである。
【００２９】
本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスを用いて血漿からフィブリノーゲンを除去するには、まず、本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスの筒状容器内に血漿を注入し、次いで、血漿注入側から加圧するか又はろ過血漿出口側から吸引することによって、血漿をフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子又は多孔性ポリマーを通過させることによる。
【００３０】
加圧方法として特に限定されず、例えば、図１に示すようなピストンを用いる方法等が挙げられる。吸引方法としては特に限定されず、例えば、図２に示すような内部が減圧された管にデバイスのろ過血漿出口側を挿入する方法が挙げられる。
【００３１】
なお、図１に示すフィルタデバイスでは、円筒状の容器１内にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーからなるフィブリノーゲン吸着材２が収納されている。フィブリノーゲン吸着材２は、好ましくは、本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタで構成されている。また、円筒状の容器１には、円筒状の容器１の内壁に液密的に接触しつつ移動するピストン３が収納される。ピストン３は、ピストンロッド３ａに連結されている。
【００３２】
また、図２に示すフィルタデバイスでは、同様に構成された円筒状の容器１内にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーからなるフィブリノーゲン吸着材２が収納されている。フィブリノーゲン吸着材２は、好ましくは、本発明１のフィブリノーゲン除去用フィルタで構成されている。そして、円筒状の容器１の先端には注射針５が取り付けられている。注射針５が真空採血管４の本体を刺通し、真空採血管４内に至らされる。そのため、円筒状の容器１内に注がれた血漿は、上記フィブリノーゲン吸着材２を通過して真空採血管４内に導かれる。
【００３３】
また、本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスを用いて血漿からフィブリノーゲンを除去する方法の他の例としては、筒状、好ましくは円筒状の容器にフィブリノーゲン吸着性を有する繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーからなるフィブリノーゲン吸着材が充填されている構造において、筒状容器の内周面に液密的に接触されて移動され得るピストンがさらに備えられており、フィブリノーゲン吸着材の前記ピストンとは反対側において前記筒状の容器に血漿吸引口が設けられており、ピストンを該血漿吸引口から遠ざかるように移動させて血漿を筒状容器内に吸引することにより、血漿が前記繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーを通過し、それによってフィブリノーゲンが除去される。この方法では、採収された血漿中に泡が生じ難い。
【００３４】
上記のように泡が生じ難いフィブリノーゲン除去方法に用いられるフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスの構造例を図３に示す。図３に示す構造では、円筒状部材１内に、フィブリノーゲン吸着材２が収納されている。フィブリノーゲン吸着材２は、繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーからなり、好ましくは、本発明１に従って構成されている。そして、フィブリノーゲン吸着材２の上方にはピストン３が配置されている。ピストン３の外周面は円筒状部材１の内周面に液密的に接触されている。このピストン３は、ピストン３の上方に連結されたピストンロッド３９を操作することにより円筒状部材１内において、円筒状部材１の長さ方向に移動され得る。他方、フィブリノーゲン吸着材２の下方には、すなわちフィブリノーゲン吸着材２のピストン３が配置されている側とは反対側には、血漿吸引口１ａが設けられている。このフィルタデバイスでは、血漿吸引口１ａを血漿に浸した状態で、ピストン３を上方に移動させることにより、すなわち血漿吸引口１ａから遠ざかる方法に移動させることにより、血漿が吸引され、円筒状部材１内に導かれる。この場合に、血漿がフィブリノーゲン吸着材２を通過することにより濾過され、フィブリノーゲンが除去される。
【００３５】
上記のように、本発明２のフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスを用いて血漿からフィブリノーゲンを除去する方法もまた、本発明の１つである。
【発明の効果】
【００３６】
本発明によれば、血漿中に含まれるフィブリノーゲン以外のタンパク質を吸着除去せずにフィブリノーゲンのみを吸着除去できるので、処理後試料を対象とする検査結果に影響が及ばず、ヘパリン投与患者の血清中からたびたびフィブリンが析出してくるという問題を完全に解決できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３７】
以下に実施例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるものではない。
【００３８】
実施例１
平均直径１．８μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ2）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して４ｍＬの体積になるように圧縮した。
【００３９】
実施例２
平均直径１．８μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ2）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して３．２ｍＬの体積になるように圧縮した。
【００４０】
実施例３
平均直径１．８μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ2）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して２．４ｍＬの体積になるように圧縮した。
【００４１】
実施例４
平均直径３．５μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ2）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して４ｍＬの体積になるように圧縮した。
【００４２】
実施例５
平均直径３．５μｍのアクリル／ポリエステル製不織布（商品名シャレリアＣ１０４０（旭化成社製）、７０％／３０％、目付４０ｇ／ｍ2）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して２ｍＬの体積になるようにした。
【００４３】
実施例６
平均直径３．５μｍのアクリル／レーヨン製不織布（商品名シャレリアＣＲ０４０（旭化成社製）、６５％／３５％、目付４０ｇ／ｍ2）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して２ｍＬの体積になるようにした。
【００４４】
比較例１
平均直径１．８μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ2）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して７ｍＬの体積になるように圧縮した。
【００４５】
比較例２
平均直径６．５μｍのポリエチレンテレフタレート製不織布（目付４０ｇ／ｍ2）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して４ｍＬの体積になるように圧縮した。
【００４６】
比較例３
平均直径３．５μｍのポリプロピレン製不織布（商品名エルタスガード（旭化成社製）、目付１７ｇ／ｍ2）を直径１５ｍｍに打ち抜いたものを複数枚重ね、１．０ｇ量り取った。これをＪＭＳ社製１０ｍＬシリンジに充填し、加圧して２ｍＬの体積になるようにした。
【００４７】
実験例１
実施例１〜６及び比較例１〜３で得られたフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスのシリンジ内部の不織布上に、フィブリノーゲン濃度が１００ｍｇ／ｄＬであるヒト血漿を注入し、ピストンで加圧することによってろ過を行った。ろ過後に回収できた血漿の割合及び残存するフィブリノーゲン量をトロンビン時間法に従って求めた。なお、実施例１〜６及び比較例１〜３で得られたフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスのフィルタの表面積は上記の計算式（１）に従って算出し、空隙率は上記の計算式（２）に従って算出した。結果を表１に示した。
【００４８】
【表１】
2004065958.tif 000009
【００４９】
実験例２
実施例１〜６及び比較例１〜３で用いた不織布をそれぞれ１．０ｇ量り取り、フィブリンノーゲン濃度２３５ｍｇ／ｄＬのヒト血漿に浸漬した後、不織布のみを除去し、残った血漿中のフィブリノーゲン濃度を実験例１と同様の方法にて測定することによってそれぞれ不織布１ｇ当たりの吸着量を求めた。結果を表２に示した。
【００５０】
【表２】
2004065958.tif 000010
【００５１】
実験１、２の結果より表面積０．５ｍ2／ｇ以上かつ空隙率８５％以下のフィルタを用いた場合、１００ｍｇ／ｍＬの血漿を流通したときにフィブリノーゲンが測定限界以下まで除去されていた。表面積が０．５ｍ2／ｇ未満である場合（比較例２）は、フィブリノーゲンが除去しきれず、また、空隙率８５％以上のとき（比較例１）は血漿の回収率が２０％と非常に低かった。また材質によっては、フィブリノーゲン吸着量が低く、ポリプロピレンを用いた比較例３の場合もフィブリノーゲンを除去しきれなかった。
【００５２】
また、実施例１、４、５で得られたフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスによるフィブリノーゲンの除去処理の検査値への影響は表３に示した通りほとんどなかった。
【００５３】
【表３】
2004065958.tif 000011
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】図１は、ピストンを用いてフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスを血漿注入側から加圧する方法を示す図である。
【図２】図２は、内部が減圧された管を用いてフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスをろ過血漿出口側から吸引する方法を示す図である。
【図３】図３は、ピストンが円筒状部材内に配置されており、該円筒状部材内にフィブリノーゲン吸着材が収納されており、吸引により血漿をろ過する方法を説明するための略図的正面図である。
【手続補正書】
【提出日】平成17年10月6日(2005.10.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
上記のように泡が生じ難いフィブリノーゲン除去方法に用いられるフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスの構造例を図３に示す。図３に示す構造では、円筒状部材１内に、フィブリノーゲン吸着材２が収納されている。フィブリノーゲン吸着材２は、繊維集合体、微粒子または多孔性ポリマーからなり、好ましくは、本発明１に従って構成されている。そして、フィブリノーゲン吸着材２の上方にはピストン３が配置されている。ピストン３の外周面は円筒状部材１の内周面に液密的に接触されている。このピストン３は、ピストン３の上方に連結されたピストンロッド３ａを操作することにより円筒状部材１内において、円筒状部材１の長さ方向に移動され得る。他方、フィブリノーゲン吸着材２の下方には、すなわちフィブリノーゲン吸着材２のピストン３が配置されている側とは反対側には、血漿吸引口１ａが設けられている。このフィルタデバイスでは、血漿吸引口１ａを血漿に浸した状態で、ピストン３を上方に移動させることにより、すなわち血漿吸引口１ａから遠ざかる方法に移動させることにより、血漿が吸引され、円筒状部材１内に導かれる。この場合に、血漿がフィブリノーゲン吸着材２を通過することにより濾過され、フィブリノーゲンが除去される。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】削除
【補正の内容】
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】削除
【補正の内容】
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】削除
【補正の内容】
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
実験例１
実施例１〜４及び比較例１，２で得られたフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスのシリンジ内部の不織布上に、フィブリノーゲン濃度が１００ｍｇ／ｄＬであるヒト血漿を注入し、ピストンで加圧することによってろ過を行った。ろ過後に回収できた血漿の割合及び残存するフィブリノーゲン量をトロンビン時間法に従って求めた。なお、実施例１〜４及び比較例１，２で得られたフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスのフィルタの表面積は上記の計算式（１）に従って算出し、空隙率は上記の計算式（２）に従って算出した。結果を表１に示した。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
【表１】
2004065958.tif 000012
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
実験例２
実施例１〜４及び比較例１，２で用いた不織布をそれぞれ１．０ｇ量り取り、フィブリンノーゲン濃度２３５ｍｇ／ｄＬのヒト血漿に浸漬した後、不織布のみを除去し、残った血漿中のフィブリノーゲン濃度を実験例１と同様の方法にて測定することによってそれぞれ不織布１ｇ当たりの吸着量を求めた。結果を表２に示した。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
【表２】
2004065958.tif 000013
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
実験１、２の結果より表面積０．５ｍ2／ｇ以上かつ空隙率８５％以下のフィルタを用いた場合、１００ｍｇ／ｍＬの血漿を流通したときにフィブリノーゲンが測定限界以下まで除去されていた。表面積が０．５ｍ2／ｇ未満である場合（比較例２）は、フィブリノーゲンが除去しきれず、また、空隙率８５％以上のとき（比較例１）は血漿の回収率が２０％と非常に低かった。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５２】
また、実施例１、４で得られたフィブリノーゲン除去用フィルタデバイスによるフィブリノーゲンの除去処理の検査値への影響は表３に示した通りほとんどなかった。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５３】
【表３】
2004065958.tif 000014
【国際調査報告】
2004065958.tif 000015
2004065958.tif 000016