(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物（但し、フェルラ酸及びジヒドロキシ安息香酸を除く）を有効成分とする抗酸化剤。
【請求項２】
焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物（但し、フェルラ酸及びジヒドロキシ安息香酸を除く）を有効成分とする酸化ストレス改善剤。
【請求項３】
焼酎蒸留残渣の主原料が麦類又は芋類である請求項１記載の抗酸化剤又は請求項２記載の酸化ストレス改善剤。
【請求項４】
疎水性有機溶媒がヘキサンである請求項１記載の抗酸化剤、請求項２記載の酸化ストレス改善剤、又は請求項３記載の抗酸化剤若しくは酸化ストレス改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、活性酸素を抑制する抗酸化剤及び酸化ストレス改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代人は、生活習慣（食習慣、運動習慣、休養、喫煙や飲酒等）が乱れることが多く、この生活習慣の乱れは、インスリン非依存性糖尿病（成人型糖尿病）、肥満、高脂血症（家族性を除く）、高尿酸血症、循環器疾患（先天性を除く）、大腸癌（家族性を除く）、高血圧症、肺扁平上皮癌、慢性気管支炎、肺気腫、アルコール性肝障害又は歯周病等を発症・進行させると考えられており、これら疾患群を生活習慣病と総称している。
このような疾患群のうち、がん、心疾患、脳血管疾患は、日本人の３大死因であり、病死全体の６０％を占めている。そして、これら高血圧、動脈硬化、糖尿病、癌といった生活習慣病を含む様々な病態を引き起こす一因として、体内で産生される活性酸素が深く関与しているといわれている（非特許文献１）。
【０００３】
当該活性酸素は、適当であれば生体調節、抗菌活性、抗ウィルス活性等の生体の恒常性維持に利用される一方で、ストレス、紫外線等によって産生が過剰になると、核酸分解、タンパク質変性、脂質過酸化等を引き起こして細胞にダメージを与え、様々な病態の誘引の一因となってしまう。過剰な活性酸素産生を抑制することは、食品や医薬品の分野では活性酸素過剰産生によって誘発又は助長される症状及び疾患、例えば生活習慣病の予防、改善や治療につながると考えられ、このため活性酸素の産生を抑制する物質に関する研究開発が進められている。
【０００４】
ところで、酒は、水とアルコールを主成分とする飲料であるが、健康に有用な成分も含まれていることから、百薬の長とされ、適度な飲酒は健康によいとされている。特に、焼酎は、蒸留工程を有しているためアセトアルデヒド等不純物が少なく健康によいとされ、消費者の健康志向と嗜好の変化も相俟って焼酎の需要が拡大している。
これら日本酒や焼酎は、麹菌を利用して原料（主原料）を醸造発酵させた一次もろみや二次もろみから採取して得られるものであるが、このとき日本酒や焼酎を採取する醸造工程で、日本酒残渣（酒絞り粕ともいう）や焼酎蒸留残渣（焼酎蒸留廃液ともいう）と呼ばれる副生成物が生じる。これら残渣は、家畜の飼料として用いられることもあるが、殆どが有効利用されずに廃棄されているのが現状である。従って、その有効利用が求められている。
【０００５】
斯かる、状況の下、アルコール存在下で焼酎残液を米麹熟成した物の血液上昇抑制作用や抗酸化作用（特許文献１）、泡盛の蒸留粕の低級アルコール抽出物の抗酸化作用（特許文献２）、大麦焼酎残留残液を合成吸着剤に吸着後アルカリ又はエタノール抽出した物の抗酸化作用（特許文献３）、酒粕又は米焼酎残渣の水又はエタノール抽出物の活性酸素除去作用（特許文献４）等が報告されている。
しかしながら、焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物の抗酸化作用があることは知られていない。
【特許文献１】特開２００６−１９７８９７号公報
【特許文献２】特開２００３−５２３５１号公報
【特許文献３】特開２００４−２３８４５３号公報
【特許文献４】特開平５−３１０５９０号公報
【非特許文献１】板倉  弘重、Eiyo-Hyouka To Tiryo. Vol. 19, No. 3, 293-298, 2002
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、体内に過剰に産生される活性酸素を抑制する抗酸化剤又は酸化ストレス改善剤を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、活性酸素抑制作用を有する物質の探索を行ったところ、意外にも焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物が優れた活性酸素抑制作用を示し、抗酸化効果を発揮する医薬品、食品等として有効であることを見出した。
【０００８】
すなわち、本発明は以下に係る発明を提供するものである。
（１）焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物を有効成分とする抗酸化剤。
（２）焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物を有効成分とする酸化ストレス改善剤。
（３）焼酎二次もろみ又はその焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物を含有する酸化ストレス改善用食品。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の抗酸化剤は、体内の過剰な活性酸素を抑制することができる。斯かる点から、高血圧、動脈硬化、糖尿病、高脂血症、癌等の生活習慣病の予防、治療及び／又は改善に用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
焼酎は、一般的に、米麹（又は麦麹）に水と酵母を加えて発酵させたもろみ（一次もろみ）を作り、これに蒸した主原料（蒸した米、大麦、サツマ芋、蕎麦、砂糖キビ等）と水とを仕込み、発酵醸成させ、二次もろみとし、次いで、二次もろみを蒸留して、製造される。
本発明に用いられる焼酎蒸留残渣は、醸造工程において二次もろみを蒸留した際に蒸留されず残った副産物であり、焼酎蒸留廃液ともいわれる。
また、本発明においては、焼酎蒸留残渣としては、焼酎蒸留残渣から液体を絞った固形分（焼酎絞り粕ともいう）、その絞り取った液体も包含される。
【００１１】
焼酎製造における主原料は、穀類又は芋類等でんぷんを含む食物であればよく、例えば、米、大麦、小麦、サツマ芋、蕎麦、砂糖キビ、胡麻、ジャガイモ、山芋、サトイモ、にんじん、豆類、栗、しそ等が挙げられ、２種以上組み合わせてもよい。好ましくは芋類及び／又は麦類である。
【００１２】
本発明の焼酎蒸留残渣の抽出物は、前記焼酎蒸留残渣を、常温又は加温下にて疎水性有機溶媒で抽出することにより得られる。
【００１３】
当該抽出方法は、液々分液、固液分液、浸漬、煎出、浸出、還流抽出、超音波抽出、マイクロ波抽出等の公知の方法であればいずれでもよい。
また、抽出の際、焼酎蒸留残渣は、適宜、液体（原液、濃縮液、希釈液等）、ペースト状半固体、濃縮乾固物、乾燥粉体等の状態に調製してもよい。
【００１４】
当該疎水性有機溶媒としては、例えばクロロホルム、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、石油エーテル、ベンゼン、シクロヘキサン、ｎ−ヘキサン等が挙げられ、２種以上組み合わせてもよく、好ましくはｎ−ヘキサンである。
【００１５】
当該抽出溶媒の使用量は、溶媒の種類によっても異なるが、好ましくは焼酎蒸留残渣１質量部（乾燥質量）に対して、１／５〜１０質量部、好ましくは１／２〜５質量部、より好ましくは１〜３質量部である。
【００１６】
また、抽出温度は、０〜４０℃、好ましくは１０〜３０℃、より好ましくは１５〜２５℃である。抽出期間は、１／１０時間〜１日間、好ましくは１／２時間〜５時間である。
【００１７】
得られた抽出物は、抽出液、その希釈液、濃縮液又は乾燥物等の状態に適宜調製してもよい。
また、得られた疎水性有機溶媒抽出物は、適宜公知の分離・精製技術、例えば液々分液、固液分液、濾過膜、活性炭、吸着樹脂、イオン交換樹脂等の方法によって不活性な不純物を除去し、更に精製してもよい。
【００１８】
後記実施例に示すように、焼酎蒸留残渣のヘキサン抽出物は、白血球における優れた活性酸素抑制作用が認められたことから、焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物は抗酸化剤又は酸化ストレス改善剤（以下、抗酸化剤等とする）として使用することができ、抗酸化剤等の製造のために使用することができる。すなわち、本発明の抗酸化剤等は、生体内において活性酸素によって引き起こされる高血圧、動脈硬化、糖尿病及び癌等の生活習慣病を予防、改善又は治療する効果を発揮する、医薬部外品、医薬品、食品等として使用することができる。
「酸化ストレス」とは、生体の活性酸素産生系と消去系のバランスが崩れ、過剰な活性酸素が産生されるようになった、生体にとって好ましくない状態をいう。これより、「酸化ストレスを改善する」というのは、このバランスを正常に戻すことをいう。体内で過剰に産生されるようになった活性酸素は、タンパク質酸化、脂質酸化、核酸分解等の原因となり、細胞にダメージを与え、機能不全を引き起こし、病態の進行に影響する。現在、活性酸素の過剰産生によって誘発又は助長される疾患としては、例えば、循環器疾患、脳神経系疾患、消化器系疾患、腎疾患、呼吸器系疾患、代謝・内分泌疾患、アレルギー疾患、眼疾患、老化・老人性疾患等が挙げられる。
ここで、食品としては、一般飲食品の他、抗酸化、生活習慣病の予防・改善等をコンセプトとする飲食品、機能性食品、病者用食品及び特定保健用食品が挙げられる。また、これらの食品は、ベッドレスト者、高血圧、動脈硬化、糖尿病及び癌等の生活習慣病予備軍（生活習慣病に至っていないがその状態に近い（境界領域期）の集団）に対して有用である。
【００１９】
本発明の抗酸化剤等を医薬品として使用する場合の形態として、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等の経口投与又は注射剤、座剤、吸入剤、経皮吸収剤、外用剤等による非経口投与が挙げられる。またこのような種々の剤形の各製剤を調製するには、本発明の焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物を単独で、又は他の薬学的に許容される賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、矯味剤、矯臭剤、香料、被覆剤、担体、希釈剤、着色剤等を適宜組み合わせて用いることができる。本発明の上記製剤における抗酸化剤等の総配合量は、乾燥物として通常、全組成の０．０００１〜２０質量％、特に０．０００２〜５質量％が好ましい。
【００２０】
本発明の抗酸化剤等を飲品として使用する場合の形態として、例えば、パン類、ケーキ類、麺類、米飯類、スープ類、菓子類（各種スナック類、焼菓子、揚菓子、チョコレート、ガム、飴等）、ゼリー類、冷凍食品、乳製品、飲料等の他、トリグリセリド及びジグリセリドからなる脂肪油、大豆、菜種油等の食用油、バターやマーガリン等の脂肪等の油脂を配合した油脂組成物、例えばショートニング類、ピーナッツバター類等の加工油脂食品、マーガリン類、スプレッド類等の油中水滴型食品、アイスクリーム類、ドレッシング類、トッピング類、マヨネーズ類等の水中油滴型等、の各種食品の他、上述した経口投与製剤と同様の形態（錠剤、カプセル製剤、シロップ等）が挙げられる。また、本発明の抗酸化剤等をペットフードとして使用してもよい。
種々の形態の食品を調製するには、本発明の焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物を単独で、又は他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油脂、乳化剤、防腐剤、香料、安定化剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせて用いることができる。当該食品又はペットフード等にする場合、本発明の当該抽出物の含有量は、全組成の０．０００１〜２０質量％、特に０．０００２〜５質量％が好ましい。
【００２１】
本発明の焼酎蒸留残渣の疎水性有機溶媒抽出物の投与量（有効摂取量）は、一日当り６０〜６００００ｍｇ／６０ｋｇ体重とするのが好ましく、特に６００〜６０００ｍｇ／６０ｋｇ体重とするのが好ましい。
【実施例】
【００２２】
実施例１  （サツマ）芋焼酎蒸留残渣からの試料調製
（サツマ）芋焼酎の焼酎蒸留残渣（雲海酒造社）100gを凍結乾燥し得られた乾燥物（５．３g）にヘキサン100 mLを加えて室温で、１時間、攪拌し、濾過した。得られた濾液（ヘキサン相）を濃縮乾固する事によってヘキサン抽出物（0.9 ｍｇ）を得た。
上記と同様に芋焼酎の焼酎蒸留残渣の凍結乾燥物から、それぞれ水、50％エタノール、100％エタノールを用いて、それぞれ水抽出物（556.7 mg）、50％エタノール抽出物（667.0 mg）、100％エタノール抽出物（475.5 mg）を得た。
【００２３】
実施例２  （大）麦焼酎蒸留残渣からの試料調製
（大）麦焼酎の焼酎蒸留残渣（雲海酒造社）100gを凍結乾燥し、得られた乾燥物（１３．７g）にヘキサン100mLを加えて室温で、１時間、攪拌し、濾過した。得られた濾液（ヘキサン相）を濃縮乾固する事によってヘキサン抽出物（0.1 mg）を得た。
上記と同様に麦焼酎の焼酎蒸留残渣の凍結乾燥物（１３．７g）に、それぞれ水、50％水−エタノール又は100％エタノールを用いて、それぞれ水抽出物（5563.7 mg）、50％エタノール抽出物（5764.9 mg）、100％エタノール抽出物（3010.9 mg）を得た。
【００２４】
実施例３  芋焼酎蒸留残渣抽出物及び麦焼酎蒸留残渣抽出物の活性酸素抑制効果
動物は、SDラット（10〜16週齢、雄）を使用した。フォーレン(アボットジャパン)麻酔下で、頚動脈採血を行った。この血液サンプルを、血球分離用試薬 (SIGMA) に重層して遠心分離した後、白血球画分を回収した。回収した白血球に上記ヘキサン抽出物(10μg/mL)PBS溶液を加え、室温で1時間反応させた後、蛍光試薬10μM 5, 6-CM-H2DCFDA（Invitrogen）を室温で20分、10％(v/v)固定試薬（BECKMAN COULTER）を室温で20分添加し、細胞内の活性酸素をFlow cytometry（Becton Dickinson）にて測定した。抽出物無添加のものをコントロールとした。
【００２５】
図１に示すように、コントロールを１００％としたとき、芋焼酎蒸留残渣の、水抽出物、５０％エタノール抽出物、１００％エタノール抽出物は活性酸素を抑制しなかったが、ヘキサン抽出物は２３．３％有意に抑制した。当該ヘキサン抽出物は、活性酸素を有意に抑制した。
【００２６】
図１に示すように、コントロールを１００％としたとき、麦焼酎蒸留残渣の水抽出物、５０％エタノール抽出物、１００％エタノール抽出物は抑制しなかったが、ヘキサン抽出物は５７．６％有意に抑制した。
【００２７】
芋焼酎蒸留残渣のヘキサン抽出物及び麦焼酎蒸留残渣のヘキサン抽出物は、水、水エタノール混液抽出物及びエタノール溶媒抽出物よりも、活性酸素を有意に抑制した。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】芋及び麦の焼酎蒸留残渣の各抽出物（水、５０％エタノール水、エタノール、ｎ−ヘキサン）における活性酸素抑制効果を示す（コントロール：抽出物無添加）。
【図１】
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