(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)：
【化１】
0005127093.tif 000008
（I)
(式中、Ｘ+はＮ+(Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)およびＰ+(Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)から成る群から選択され((Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)は同一であるか、または異なっており、水素およびＣ1-Ｃ9の直鎖または分枝鎖アルキル基、-ＣＨ＝ＮＨ(ＮＨ2)、-ＮＨ2、-ＯＨから成る群から選択されるか、または、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3の２またはそれ以上がそれらが結合している窒素原子と共に、飽和または不飽和の単環または二環式複素環式系を形成する、ただし、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3の少なくとも一つは水素ではない)、
Ｚは、-ＯＣＯＮＨＲ4、-ＮＨＣＯＯＲ4、-ＮＨＣＯＮＨＲ4、-ＮＨＳＯ2Ｒ4、-ＮＨＳＯ2ＮＨＲ4から選択され(-Ｒ4は、Ｃ７−Ｃ２０の飽和の直鎖または分枝鎖アルキル基であるかまたはビニル、アリル、ブチレン、ペンチレンからなる群から選択される直鎖または分枝鎖アルケニル基であり、該アルキルまたはアルケニル基は、Ａ1基で置換されていてもよく、Ａ1はハロゲン原子、アリール、ヘテロアリール、アリールオキシまたはヘテロアリールオキシ基から成る群から選択され、該アリール、ヘテロアリール、アリールオキシまたはヘテロアリールオキシ基は、１またはそれ以上のＣ1-Ｃ20の直鎖または分枝鎖のアルキルまたはアルコキシ基および／またはハロゲン原子で置換されていてもよい)、
Ｙ-は-ＣＯＯ-、ＰＯ3Ｈ-、-ＯＰＯ3Ｈ-、テトラゾールエート-５-イルから成る群から選択される)の化合物、その(Ｒ，Ｓ)ラセミ体混合物、その単一ＲまたはＳエナンチオマー、またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
Ｒ1、Ｒ2およびＲ3がメチルである請求項１記載の化合物。
【請求項３】
窒素と共にＲ1、Ｒ2およびＲ3により形成される複素環式系が、モルホリニウム、キヌクリジニウム、ピリジニウム、キノリニウムおよびピロリジニウムから成る群から選択される請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ1およびＲ2がＨであり、Ｒ3が-ＣＨ＝ＮＨ(ＮＨ2)、-ＮＨ2および-ＯＨから成る群から選択される請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Ｚがウレイド(-ＮＨＣＯＮＨＲ4)またはカルバメート(-ＯＣＯＮＨＲ4)から成る群から選択され、Ｒ4がＣ7-Ｃ20の直鎖または分枝鎖アルキル基である請求項１-４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ4がＣ9-Ｃ18の直鎖または分枝鎖アルキル基である請求項５記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルホスホニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(オクチルオキシカルボニル)-アミノブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルオキシカルボニル)-アミノブチレート、
Ｒ,Ｓ-３-トリメチルアンモニウム-２-(ノニルアミノカルボニル)-オキシ-１-プロパンホスホネート一塩基、
Ｒ,Ｓ-３-ピリジニウム-２-(ノニルアミノカルボニル)-オキシ-１-プロパンホスホン酸クロライド、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ウンデシルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ヘプチルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(デカンスルホニル)アミノブチレート、
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルスルファモイル)アミノブチレート、
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ドデカンスルホニル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ドデカンスルホニル)アミノブチレート、
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ウンデシルスルファモイル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ウンデシルスルファモイル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ドデシルカルバモイル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(１０-フェノキシデシルカルバモイル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(トランス-β-スチレンスルホニル)アミノブチレートから成る群から選択される請求項１記載の化合物。
【請求項８】
請求項１記載の化合物(式中、Ｚは、カルバメート(-ＯＣＯＮＨＲ4)である)の調製法であって、酸Ｙ-基上で保護されていてもよい所望の構造のＸ+-ＣＨ2-ＣＨ(ＯＨ)-ＣＨ2-Ｙ-(式中、Ｘ+およびＹ-は請求項１と同じ意味を有する)の、アルキルイソシアネート (アルキル部分は所望のＲ4アルキル基である)との反応を含む方法。
【請求項９】
請求項１記載の化合物(式中、Ｚは、カルバメート(-ＮＨＣＯＯＲ4)、ウレイド(-ＮＨＣＯＮＨＲ4)、スルホンアミド(-ＮＨＳＯ2Ｒ4)、またはスルファミド(-ＮＨＳＯ2ＮＨＲ4)である)の調製法であって、酸Ｙ-基上で保護されていてもよい所望の構造のＸ+-ＣＨ2-ＣＨ(ＮＨ2)-ＣＨ2-Ｙ-(式中、Ｘ+およびＹ-は請求項１と同じ意味を有する)の、それぞれ、アルキルクロロホルメート、アルキルイソシアネート、アルキルスルホニルクロライド、またはアルキルスルファモイルクロライド(またはＳＯ2Ｃｌ2およびアルキルアミン)(アルキル部分は所望のＲ4アルキル基である)との反応を含む方法。
【請求項１０】
請求項１-７のいずれかに記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１-７のいずれかに記載の化合物の少なくとも一つを医薬上許容されるビヒクルおよび賦形剤と混合して含む医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１-７のいずれかに記載の化合物の少なくとも一つを医薬上許容されるビヒクルおよび賦形剤と混合して含み、他の活性成分を組み合わせて含んでいてもよい医薬組成物。
【請求項１３】
カルニチンパルミトイル-トランスフェラーゼの活性過多に起因する疾患の治療のための請求項１-７のいずれかに記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１４】
該疾患が高血糖症、糖尿病、心障害、虚血およびケトン状態から成る群から選択される請求項１３記載の医薬組成物。
【請求項１５】
該他の活性成分が、糖尿病の治療に適した周知の活性成分である請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項１６】
糖尿病の治療に適した該他の活性成分が、スルホニルウレア、Ｌ-カルニチン、フィブレートおよびペルオキシソーム増殖因子活性化レセプター(ＰＰＡＲ-α)の他のアゴニスト、９-シスレチノイン酸活性化レセプターのアゴニスト、ＨＭＧ-ＣｏＡレダクターゼインヒビター、β-シトステロールインヒビター、コレステロールアシルトランスフェラーゼインヒビター、ビグアニド、コレスチルアミン、アンジオテンシンＩＩアンタゴニスト、メリンアミド、ニコチン酸、フィブリノゲンレセプターアンタゴニスト、アスピリン、α-グルコシダーゼインヒビター、インシュリン分泌促進物質、インシュリンおよびグルカゴン様ペプチド(インクレチン)およびＰＰＡＲ-γのアゴニストから成る群から選択される請求項１５記載の医薬組成物。
【請求項１７】
糖尿病の治療のための、請求項１５-１６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
該他の活性成分が肥満の治療に適した周知の活性成分である請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項１９】
肥満の治療に適した該他の活性成分が、フェンフルラミン、デキスフェンフルラミン、フェンチルアミン、およびβ-３-アドレナリンレセプターアゴニストから成る群から選択される請求項１８記載の医薬組成物。
【請求項２０】
肥満の治療のための請求項１８-１９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
該他の該活性成分が、高トリグリセリド血症の治療に適した周知の活性成分である請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項２２】
他の該活性成分が、高コレステロールレベルの治療およびＨＤＬ血漿レベルの調節に適するものである請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項２３】
高コレステロールレベルの治療および、ＨＤＬ血漿レベルの調節に適した該活性成分が、フィブレートおよび他のＰＰＡＲ-αアゴニスト、コレステロール生合成のインヒビター、ＨＭＧ-ＣｏＡレダクターゼインヒビター、スタチン、コレステロール吸収のインヒビター、アシルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼインヒビター、アニオン交換樹脂、ニコチニルアルコール、ニコチン酸またはその塩、ビタミンＥ、甲状腺ホルモン様物質(thyromimetics)およびＬ-カルニチンから成る群から選択される請求項２２記載の医薬組成物。
【請求項２４】
高コレステロールレベルの処置のための、請求項２２-２３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
高血圧症、肥満、アテローム性動脈硬化症、糖尿病の処置のための請求項２４記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼに対する阻害活性を有する化合物に関する。本発明はまた、これらの化合物活性成分の少なくとも一つを含む医薬組成物および、カルニチンパルミトイル-トランスフェラーゼの活性過多に関連する病状、詳細には、高血糖状態、例えば糖尿病および関連病状の治療および、鬱血性心不全の治療に有用な薬剤の調製における該化合物の使用に関する。
【０００２】
発明の背景
現在のところ、血糖低下治療は、異なる作用機構を有する薬物類の使用に基づいている。
インシュリンとその類似物が、その直接的な血糖低下作用により、最もよく用いられる治療と言える。
他の化合物は、インシュリンの放出を刺激することにより間接的に作用する(スルホニル尿素)。血糖低下薬の特異な目的は、腸管グルコシダーゼの阻害によるグルコースの腸管吸収の低下、またはインシュリン耐性を減じることと言える。
【０００３】
高血糖症は、糖新生のインヒビター、例えばビグアニドを用いて治療される。
いくらかの研究により、糖新生と脂肪酸酸化の間の関連性が強調されている。
カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ(ＣＰＴ)としても知られる膜結合性長鎖アシルカルニチントランスフェラーゼは、器官および亜細胞細胞小器官中に広く見いだされている。この種の酵素の確立された役割は、活性化された長鎖脂肪酸の、ミトコンドリアの膜を通過する輸送である。ここで、ミトコンドリア外膜ＣＰＴ１は、長鎖アシルカルニチンの形成を触媒し、長鎖アシルカルニチンは、特定のキャリアによりミトコンドリアの膜を横切って通過し、そしてミトコンドリア内膜に存在するＣＰＴＩＩにより長鎖アシル補酵素Ａエステルに再変換される。長鎖アシル-ＣｏＡは次いで、アセチル-補酵素Ａに酸化され、重要な糖新生の酵素、ビルビン酸カルボキシラーゼを活性化する。
【０００４】
他の研究により、糖尿病患者において、肝臓で宿命的に酸化されることによりアセチル補酵素Ａ、ＡＴＰおよびＮＡＤＨの増加を引き起こす脂肪酸の血中レベルが高いことが報告されている。これらの化合物を最大限に利用して糖新生が刺激され、これは部分的に、糖尿病患者において上昇したグルコース血中レベルの原因である。ＣＰＴの阻害は、間接的に、肝臓での糖新生の程度を減じ、それゆえ血中のグルコースレベルを減じる。
【０００５】
ＣＰＴインヒビターは、J. Med, Chem., 1995, 38(18), 3448-50および対応するヨーロッパ特許出願ＥＰ０５７４３５５に、血糖低下作用を有する強い誘導体として開示されている。
-ＣＯＲ残基を有するＮ-アシル化アミノカルニチン(式中、Ｒは１〜１９の炭素原子を有する脂肪族の残基である)が、体内でのトランスフェラーゼの役割、詳細にはカルニチンアシルトランスフェラーゼの特異性を調べるために有用であることがＷＯ８５／０４３９６に開示されている。
エメリアミン(emeriamine)およびその類似体が、ＥＰ０１２７０９８およびJ. Med. Chem. 1987, 30, 1458-1463に開示されている。
前に概説した活性の機構にも関わらず、現在のところ、効果的に高血糖症を阻止することができる、ＣＰＴ阻害薬は存在しない。いくらかの製品、例えばテトラデシルグリシド酸またはエトモキシルに関しては、心筋肥大が副作用として証明されている(Life Sci, 1989, 44, 1897-1906)。
現在、臨床で用いられている治療法は、詳細には、望ましくない副作用、例えば重篤な低血糖症、アレルギー現象、浮腫、下痢、腸障害、腎臓毒性などの発症のために、どれも十分満足のいくものではない。
これらに代わる、高血糖症のための有効な治療法を得る必要性が依然として残されている。
【０００６】
発明の概要
今回驚くべきことに、一般式(Ｉ)：
【０００７】
【化２】
0005127093.tif 000002
【０００８】
(式中、
Ｘ+はＮ+(Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)およびＰ+(Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)から成る群から選択され；
(Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)は同一であるか、または異なっており、水素およびＣ1-Ｃ9の直鎖または分枝鎖アルキル基、-ＣＨ＝ＮＨ(ＮＨ2)、-ＮＨ2、-ＯＨから成る群から選択され；または、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3の少なくとも一つが水素原子ではないと言う条件で、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3の２またはそれ以上が窒素原子と共に結合して飽和または不飽和の単環または二環式複素環式系を形成し、
Ｚは、-ＯＲ4、-ＯＣＯＯＲ4、-ＯＣＯＮＨＲ4、-ＯＣＳＮＨＲ4、-ＯＣＳＯＲ4、-ＮＨＲ4、-ＨＮＣＯＲ4、-ＮＨＣＳＲ4、-ＮＨＣＯＯＲ4、-ＮＨＣＳＯＲ4、-ＮＨＣＯＮＨＲ4、-ＮＨＣＳＮＨＲ4、-ＮＨＳＯＲ4、-ＮＨＳＯＮＨＲ4、-ＮＨＳＯ2Ｒ4、-ＮＨＳＯ2ＮＨＲ4、-ＳＲ4
(式中、-Ｒ4はＣ1-Ｃ20の飽和または不飽和の直鎖または分枝鎖アルキル基であり、任意にＡ1基で置換され、Ａ1はハロゲン原子、Ｃ6-Ｃ14アリール、ヘテロアリール、アリールオキシまたはヘテロアリールオキシ基から成る群から選択され、該アリール、ヘテロアリール、アリールオキシまたはヘテロアリールオキシ基は、１またはそれ以上のＣ1-Ｃ20の飽和または不飽和の直鎖または分枝鎖アルキルまたはアルコキシ基および／またはハロゲン原子で任意に置換される)から選択され、
Ｙ-は-ＣＯＯ-、ＰＯ3Ｈ-、-ＯＰＯ3Ｈ-、テトラゾールエート-５-イルから成る群から選択され、
Ｚが-ＮＨＣＯＲ4であるという条件で、Ｘ+はトリメチルアンモニウム、Ｙは-ＣＯＯ-であり、Ｒ4はＣ20アルキルであり、
Ｚが-ＮＨＳＯ2Ｒ4であるという条件で、Ｘ+はトリメチルアンモニウムおよびＹ-は-ＣＯＯ-であり、Ｒ4はトリルではなく、
Ｚが-ＮＨＲ4であるという条件で、Ｘ+はトリメチルアンモニウムでありＹ-は-ＣＯＯ-であり、Ｒ4はＣ1-Ｃ6アルキルではない)の化合物が見出された。
【０００９】
本発明はさらに、薬剤、詳細にはカルニチンパルミトイルカルニチンの活性過多に関連する病状、例えばおよび詳細には、高血糖状態、糖尿病および関連疾患、鬱血性心不全および膨張性心臓病の治療に有用な薬剤の活性成分としての、前記の式(Ｉ)の化合物の使用を含む。
本発明は、活性成分として式(Ｉ)の化合物を、医薬上許容されるビヒクルおよび賦形剤と混合して含む医薬組成物を含む。
本発明は、式(Ｉ)の化合物の調製法も含む。
【００１０】
発明の詳細な説明
本発明の範囲内で、Ｃ1-Ｃ20の直鎖または分枝鎖アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシルおよびエイコシルおよびそれらの可能な異性体、例えばイソプロピル、イソブチル、ｔ-ブチルが示される。
Ｃ1-Ｃ20の直鎖または分枝鎖アルケニル基の例は、メチレン、エチリデン、ビニル、アリル、プロパルギル、ブチレン、ペンチレンであり、炭素-炭素二重結合は、任意に他の炭素-炭素不飽和の存在下、許容されるイソメリー(isomery)の範囲内で分枝することも可能なアルキル鎖において、様々な可能な位置に位置することができる。
(Ｃ6-Ｃ14)アリール基の例は、前記の一般的な定義に示すように任意に置換されるフェニル、１-または２-ナフチル、アントリルである。
【００１１】
複素環式基の例は、前記の一般的な定義に示すように任意に置換されるチエニル、キノリル、ピリジル、Ｎ-メチルピペリジニル、５-テトラゾールイルである。
ハロゲン原子としては、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素を意図する。
式(Ｉ)の化合物はまた、分子内塩の形態であり得る。
好ましい化合物の第一のグループには、Ｎ+(Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)がトリメチルアンモニウムである式(Ｉ)の化合物が含まれる。
好ましい化合物の第二のグループには、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3の２またはそれ以上が窒素原子とともに結合して飽和または不飽和の単環または二環の複素環式系、例えば、モルホリニウム、ピリジニウム、ピロリジニウム、キノリニウム、キヌクリジニウムを形成する式(Ｉ)の化合物が含まれる。
好ましい化合物の第三のグループには、Ｒ1およびＲ2が水素であり、Ｒ3が-ＣＨ＝ＮＨ(ＮＨ2)、-ＮＨ2および-ＯＨから成る群から選択される式(Ｉ)の化合物が含まれる。
【００１２】
本発明の異なる態様中、Ｒ4基は好ましくはＣ7-Ｃ20の飽和または不飽和の直鎖または分枝鎖アルキル基である。実際には、アルキル鎖Ｒ4の長さがＣＴＰに対する選択性を著しく増大させることが観察されている。好ましいＲ4基は、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシルおよびエイコシルから成る群から選択される。
Ｚ基の好ましい例は、ウレイド(-ＮＨＣＯＮＨＲ4)およびカルバメート(-ＮＨＣＯＯＲ4、-ＯＣＯＮＨＲ4)基である。
【００１３】
詳細には、Ｘ+、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3が前記の意味を有し、Ｚがウレイド(-ＮＨＣＯＮＨＲ4)またはカルバメート(-ＮＨＣＯＯＲ4、-ＯＣＯＮＨＲ4)であり、Ｒ4がＣ7-Ｃ20、好ましくはＣ9-Ｃ18の飽和または不飽和の、直鎖または分枝鎖アルキル基である式(Ｉ)の化合物が好ましい。
式(Ｉ)の化合物は、Ｚ基に結合する炭素原子上に不斉中心を持つ。本発明の目的に関して、式(Ｉ)の各化合物は、Ｒ、Ｓラセミ体混合物としておよび、分離されたＲ／Ｓ異性体型としての両方で存在することができる。
式(Ｉ)の化合物は、Ｙ-アニオン基を常に含む４級アンモニウムまたはホスホニウム誘導体である。ｐＨにより、式(Ｉ)の各化合物は中性では両性イオン(分子内塩)として、またはＹ-がＹＨ型で存在する化合物として存在することができる。そのような場合、Ｘ+は薬理学上許容される酸で塩化されている。式(Ｉ)は全てのこれらの異なる可能性を包含する。塩基性を有する窒素原子の場合、該塩は無機および有機両方の医薬上許容される酸、例えば塩酸、硫酸、酢酸などとの塩または、カルボキシル基のような酸基の場合、無機および有機両方の医薬上許容される塩基との塩、例えばアルカリおよびアルカリ土類水酸化物、水酸化アンモニウム、アミン、および複素環式塩である。医薬上許容される塩の例は、クロライド、ブロマイド、ヨーダイド、アスパルテート、酸アスパルテート、シトレート、酸シトレート、タートレート、酸タートレート、ホスフェート、酸ホスフェート、フマレート、酸フマレート、グリセロホスフェート、グルコースホスフェート、ラクテート、マレエート、酸マレエート、ムケート、オロテート、オキサレート、酸オキサレート、スルフェート、酸スルフェート、トリクロロアセテート、トリフルオロアセテート、メタンスルホネート、パモエートおよび酸パモエートである。
【００１４】
特に好ましい化合物の第一のグループには、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-キヌクリジニウム-３-(テトラデシルオキシカルボニル)-オキシブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルオキシカルボニル)-オキシ酪酸クロライド、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルホスホニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(オクチルオキシカルボニル)-アミノブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルオキシカルボニル)-アミノブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-オクチルオキシブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-テトラデシルオキシブチレート、
Ｒ,Ｓ-１-グアニジニウム-２-テトラデシルオキシ-３-(テトラゾールエート-５-イル)-プロパン、
Ｒ,Ｓ-１-トリメチルアンモニウム-２-テトラデシルオキシ-３-(テトラゾールエート-５-イル)-プロパン、
Ｒ,Ｓ-３-キヌクリジニウム-２-(テトラデシルオキシカルボニル)-オキシ-１-プロパンホスホネート一塩基、
Ｒ,Ｓ-３-トリメチルアンモニウム-２-(ノニルアミノカルボニル)-オキシ-１-プロパンホスホネート一塩基、
Ｒ,Ｓ-３-ピリジニウム-２-(ノニルアミノカルボニル)-オキシ-１-プロパンホスホン酸クロライド、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ウンデシルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ヘプチルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ,Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルチオカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチレート、
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-テトラデシルアミノブチレート、
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-オクチルアミノブチレート、
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(デカンスルホニル)アミノブチレート、
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルスルファモイル)アミノブチレート、
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ドデカンスルホニル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ドデカンスルホニル)アミノブチレート、
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ウンデシルスルファモイル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ウンデシルスルファモイル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ドデシルカルバモイル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(１０-フェノキシデシルカルバモイル)アミノブチレート、
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(トランス-β-スチレンスルホニル)アミノブチレートが含まれる。
【００１５】
式(Ｉ)の化合物は、当該分野で周知の反応を用いて調製することができる。
Ｚが-ＮＨＲ4である請求項１記載の化合物の調製法は、酸Ｙ-基上で任意に保護された所望の構造のＸ+-ＣＨ2-ＣＨ(ＮＨ2)-ＣＨ2-Ｙ-(式中、Ｘ+およびＹ-は請求項１と同じ意味を有する)の、アルカンカルブアルデヒド(アルカンカルブアルデヒドのアルキル部分は所望のＲ4の１炭素低級の同族体である)との反応および、それに続く還元から成る。
一般に、Ｚがカルボネート(-ＯＣＯＯＲ4)、カルバメート(-ＯＣＯＮＨＲ4、-ＮＨＣＯＯＲ4)、チオカルバメート(-ＯＣＳＮＨＲ4、-ＮＨＣＳＯＲ4)またはチオカルボネート(-ＯＣＳＯＲ4)である式(Ｉ)の化合物は、Ｙ-基上で任意に保護された所望の構造のＸ+-ＣＨ2-ＣＨ(ＯＨ)-ＣＨ2-Ｙ-の化合物(Ｘ+およびＹ-は前に定義したものである)を、それぞれ所望のＲ4アルキル基を含むアルキルクロロホルメート、アルキルイソシアネート、アルキルイソチオシアネート、アルキルチオクロロホルメートと反応させることにより得られる。
Ｚがアミド(-ＮＨＣＯＲ4)、チオアミド(-ＮＨＣＳＲ4)、カルバメート(-ＮＨＣＯＯＲ4、-ＯＣＯＮＨＲ4)、チオカルバメート(-ＮＨＣＳＯＲ4、-ＯＣＳＮＨＲ4)、ウレイド(-ＮＨＣＯＮＨＲ4)、チオウレイド(-ＮＨＣＳＮＨＲ4)、スルフィンアミド(-ＮＨＳＯＲ4)、スルホンアミド(-ＮＨＳＯ2Ｒ4)、スルフィンアモイルアミノ(-ＮＨＳＯＮＨＲ4)およびスルファミド(-ＮＨＳＯ2ＮＨＲ4)である式(Ｉ)の化合物は、Ｙ-基上で任意に保護された所望の構造のＸ+-ＣＨ2-ＣＨ(ＮＨ2)-ＣＨ2-Ｙ-(式中、Ｘ+およびＹ-は前に定義したものである)を、所望のＲ4基を含むアシルクロライド、チオアシルクロライド、アルキルクロロホルメート、アルキルチオクロロホルメート、アルキルイソシアネート、アルキルチオイソシアネート、アルキルスルフィニルクロライド、アルキルスルホニルクロライド、ＳＯＣｌ2およびアルキルアミン、アルキルスルファモイルクロライド(またはＳＯ2Ｃｌ2およびアルキルアミン)とそれぞれ反応させることにより得られる。
【００１６】
Ｚが-ＯＲ4または-ＳＲ4である式(Ｉ)の化合物は、式Ｈａｌ-ＣＨ2-ＣＯ-ＣＨ2-ＣＯＯＲ'のカルボニル化合物(Ｈａｌはハロゲン原子、好ましくは塩素であり、Ｒ'は適当なエステル、例えばそれぞれアルコールおよびチオールＲ4ＯＨまたはＲ4ＳＨ(式中Ｒ4は前に定義するものである)との低級アルキルエステル(エチルまたはｔ-ブチルエステル)の残基である)の、それぞれケタールまたはチオケタールを生じる反応の後、各ケタールまたはチオケタールを各エーテルまたはチオエーテルに変換し、続いてＨａｌ原子を求核置換基、例えばアジド、フサリミド、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ基で置換し、求核基をＸ+基(Ｘ+はＮ+(Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)である)に変換することにより得られ、またはこれとは別に、Ｈａｌ原子を(Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)-置換ホスフィンで置換して、式(Ｉ)(式中、Ｘ+はＰ+(Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3)である)の化合物を得る。
【００１７】
Ｚが-ＮＨＲ4である式(Ｉ)の化合物は、Ｙ-基上で任意に保護された所望の構造のＸ+-ＣＨ2-ＣＨ(ＮＨ2)-ＣＨ2-Ｙ-(Ｘ+およびＹ-は請求項１と同じ意味を有する)のアルカンカルブアルデヒド(アルキル部分はＲ4の１炭素低級の同族体である)との反応およびそれに続く還元により得られる。
各反応物に存在するＲ4は様々であるが、これらの反応物は市場において入手でき、または本分野に関する知識を十分に備えた当該分野の専門家が頼みとし得る文献中の周知の方法に従って調製することができる。
医薬上許容される塩は、文献中に見出される常套法を用いて得られ、さらなる開示を必要としない。
【００１８】
本発明中開示される化合物は、カルニチンパルミトイル-トランスフェラーゼ(ＣＰＴ)の可逆的阻害活性を有する。この活性により、高血糖症、糖尿病およびそれに関連する疾患、例えば、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経障害の治療および予防に有用な薬剤の調製において、それらを活性成分として使用することが許容される。本発明の化合物は、心血管障害、例えば鬱血性心不全の治療および予防のための活性成分としても有用である。式(Ｉ)の化合物は、ケトン状態の予防および治療のための薬剤にも適用できる(ケトン状態は、血液中の高レベルのケトン体により特徴付けられる疾患状態を意図する)。
阻害活性は、パルミトイルカルニチントランスフェラーゼのイソ型Ｉ(ＣＰＴ-Ｉ)に主に生じる。
【００１９】
本発明の更なる目的は、著しい治療効果を生じるような量の、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物を含む医薬組成物に関する。本発明による組成物は慣用的な組成物であり、医薬工業において一般に用いられる方法を用いて得られる。所望の投与経路により、組成物は、経口、非経口、静脈内または経皮経路に適する固体または液体の形態であるべきである。本発明による組成物は、活性成分と共に少なくとも一つの医薬上許容されるビヒクルまたは賦形剤を含む。製剤補助アジュバント、例えば、可溶化剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤が特に有用であり得る。適当な経口医薬組成物の例としては、カプセル、錠剤、顆粒、粉末、シロップ、エリキシルが挙げられる。適当な非経口医薬組成物の例としては、溶液、エマルジョン、懸濁液が挙げられる。適当な経皮医薬組成物の例は、パッチ、皮下インプラントである。
式(Ｉ)の化合物は、他の周知の活性成分と組み合わせて用いることもできる。
活性成分の投与量は、用いられる活性成分の種類、投与経路、治療されるべき病状の程度および患者の一般状態により変化する。投与量および薬量は、臨床の専門家または医者により決定されるべきである。一般に、治療効果は１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重を含む投与量で得ることができる。
本発明による組成物は、血糖低下作用を有する薬剤として有用である。本発明の更なる目的は、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物を、適当な医薬上許容される賦形剤および／またはビヒクルと混合して含む医薬組成物の調製である。
以下の実施例は本発明をさらに説明する。
【００２０】
実施例１
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート(ST 1251)
ノニルイソシアネート
デカノイルクロライド(20 g、104.8 mmol)のアセトン溶液(30ml)をアジ化ナトリウム(9.53 g, 146.6 mmol)水溶液(30 ml)に滴下し、氷浴中で冷却した。アジ化溶液の温度を10〜15℃に保持し、１時間後、溶液を分液漏斗に移し、低い方の相(水相)を除去した。高い方の相を、予め６５℃に温めた100mlのトルエンを含むフラスコに移し、1.5時間後、溶液を乾燥状態まで蒸発させ、13.37 gの粗生成物を得、真空蒸留して8.3 gの純粋な生成物を無色の液体として得た。
収率 47%.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 3.3 (t, 2H), 1.6 (m, 2H), 1.45-1.2 (m, 12H), 0.9 (brt, 3H).
【００２１】
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート
ノニルイソシアネート(15.42 g, 91.12 mmol)をアミノカルニチン分子内塩(7.3 g, 45.56 mmol)の無水DMSO溶液(350 ml)に添加し、溶液を60時間40℃で静置した。生じた混合液をエチルエーテル(2.5 l)を含む３ｌのエルレンマイヤーフラスコに移し、生じた沈殿をデカントすることにより溶媒を分離し、次いでそれをフラスコに移し、再びエチルエーテルで沈殿させた。こうして得た粗生成物を数回、エチルエーテルで洗浄し、シリカゲルクロマトグラフィーカラム上でCHCl3: MeOH 9:1〜CHCl3: MeOH 3:7の勾配を用いて、より高いRfを有する不純物が溶離するまで精製し、次いでＭｅＯＨのみを用いて目的の生成物を溶離した。9.7 gの純粋な生成物を得た。
収率 68%.
M.p.: 145-147℃.
1H-NMR (300 MHz; D2O):
δ: 4.4 (m, 1H), 3.45 (dd, 1H), 3.30 (d, 1H), 3.05 (s, 9H), 2.9 (t, 2H), 2.3 (d, 2H), 1.3 (m, 2H), 1.15 (brs, 12H), 0.8 (brt, 3H).
FAB Mass=330, [(M+H)+].
元素分析；期待された式C17H35N3O3に対応。
K.F.=2.5% 水.
TLC シリカゲル CHCl3: iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH 42:7:28:10.5:10.5;
Rf=0.55.
HPLC: SGE-SCX カラム (5 μm, 250x4 mm), T=30℃, 移動相 0.2 M  KH2PO4:CH3CN 85:15, pH そのまま, 流速0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=12.63分。
【００２２】
実施例 2
Ｒ，Ｓ-４-キヌクリジニウム-３-(テトラデシルオキシカルボニル)-オキシブチレート(ST 1265)
t-ブチルＲ，Ｓ-４-キヌクリジニウム-３-ヒドロキシブチレートヨーダイド
キヌクリジン(2.40 g, 21.60 mmol)をt-ブチルＲ，Ｓ-４-ヨード-３-ヒドロキシブチレート(6.18 g, 21.60mmol)のアセトニトリル溶液(60ml)に添加し、溶液を60℃まで20時間、攪拌しながら温めた。溶媒を蒸発させた後、残存物をアセトニトリルに溶解し、エチルエーテルを数回用いて沈殿させ、約13重量%のキヌクリジンヨーダイド(NMRより)の混入されている7.2gの生成物を得た。CH3CN/Et2Oからの結晶化を繰り返した後、4.3 gの純粋な生成物を得た。
収率 50%.
M.p.: 124-127℃.
1H-NMR (300 MHz; D2O):
δ: 4.50 (m, 1H), 3.40 (m, 2H), 2.42 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.88 (m, 6H), 1.34 (m, 9H).
FAB Mass=270, [M+].
元素分析: 期待された式C15H28INO3に対応。
K.F.=0.5% 水.
ｔ-ブチル４-ヨード-３-ヒドロキシブチレートの調製は、J. Pharm. Science 64/7, 1262-1264, 1975に開示されるように行った。
t-ブチル 4-ヨード-3-ヒドロキシブチレートの調製を、J. Pharm. Science 64/7, 1262-1264, 1975.に記載されるように行った。
【００２３】
テトラデシルクロロホルメート
ホスゲン(55.98 mmol)の20%トルエン溶液(29 ml)をテトラデシルアルコール(4 g, 18.66 mmol)に添加し、反応混合液を20時間、攪拌下、室温で静置した。溶媒を蒸発させた後、残存物をヘキサンで処理し、乾燥状態まで(数回)蒸発させて、5.1 gの生成物を無色の液体として得た。
収率 98%.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.30 (t, 2H), 1.72 (m, 2H), 1.30 (m, 22H), 0.85 (brt, 3H).
【００２４】
t-ブチル Ｒ，Ｓ-４-キヌクリジニウム-３-(テトラデシルオキシカルボニル)-オキシブチレートクロライド
ジメチルアミノピリジン(922 mg, 755 mmol)とテトラデシルクロロホルメート(2.09 g, 7.55 mmol)を、t-ブチルＲ，Ｓ-４-キヌクリジニウム-３-ヒドロキシブチレート(2 g, 5.03 mmol)の無水CH2Cl2溶液(20ml)に添加した。溶液を室温に20時間、攪拌下に静置した。この後、溶液をCHCl3で希釈し、NaClで飽和させ,無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。蒸発後に得られた乾燥残存物をエチルエーテルで処理し、溶解しなかった残存物を濾過除去した。溶媒を蒸発させた後、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー(CHCl3: MeOH 9:1)および、MeOHをAmberlyst A-21 樹脂(HCl型に活性化したもの)上で用いた溶離により1.6 gの生成物を塩化物として得た。
収率 58%.
M.p.: 59-60℃.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 5.50 (m, 1H), 4.55 (d, 2H), 3.80 (m, 7H), 2.90 (dd, 1H), 2.75 (dd, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.05 (d, 6H), 1.65 (m, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.25 (m, 22H), 0.85 (brt, 3H).
FAB Mass=510, [M+].
元素分析: 期待された式C30H56ClNO5に対応。
K.F.=1.5% 水.
【００２５】
Ｒ，Ｓ-４-キヌクリジニウム-３-(テトラデシルオキシカルボニル)-オキシブチレート
トリフルオロ酢酸(6 ml)をt-ブチルＲ，Ｓ-４-キヌクリジニウム-３-(テトラデシルオキシカルボニル)-オキシブチレートクロライド(1.05 g, 1.92 mmol)に添加し、溶液を１時間、室温に、攪拌下で静置した。トリフルオロ酢酸の真空蒸発の後、残存物をシクロヘキサンで処理し、乾燥状態まで数回蒸発させ、次いでAmberlyst IRA 402 樹脂 (Cl-型)上に移し、水で溶離した。凍結乾燥により得られた粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(CHCl3: MeOH 8:2)により精製し、480 mgの生成物を分子内塩として得た。
収率 55%.
M.p.: 132-134℃.
1H-NMR (300 MHz; D2O):
δ: 5.35 (m, 1H), 4.05 (m, 2H), 3.40 (m, 8H), 2.55 (dd, 1H), 2.35 (dd, 1H), 2.08 (m, 1H), 1.90 (m, 6H), 1.55 (m, 2H), 1.20 (m, 22H), 0.75 (brt, 3H).
FAB Mass=454, [(M+H)+.
元素分析: 期待された式C26H47NO5に対応。
K.F.=1.5% 水.
TLC シリカゲル CHCl3:MeOH 7:3.
Rf=0.34.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), T=30℃、移動相 0.05 M (NH4)H2PO4:CH3CN 60:40, pH 4.0, 流速0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=6.72 分.
【００２６】
実施例３
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシブチレート(ST 1298)
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシ酪酸ペルクロレートのベンジルエステル
ノニルイソシアネート(7.39 g, 43.36 mmol)を、Ｒ，Ｓ-カルニチンペルクロレートベンジルエステル(7.69 g, 21.86 mmol)のトルエン溶液(100 ml)に添加し、溶液を５日間、攪拌下で還流した。ノニルイソシアネート(1.84 g, 10.86 mmol)をさらに添加し、反応混合液を還流下にさらに５日間置いた。溶媒を真空蒸発させ、残存物をエチルエーテルで洗浄し、続いてクロロホルムで処理し、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相の蒸発から生じたオイルを勾配CHCl3〜CHCl3: MeOH 95:5を用いるフラッシュ-クロマトグラフィーカラムを通して精製した。4.4 gの生成物を濃いオイルの形態で得た。
収率 38.6%.
1H-NMR (200 MHz; CDCl3):
δ: 7.3 (s, 5H), 5.4 (m, 2H), 5.05 (m, 2H), 3.8 (dd, 1H), 3.55 (d, 1H), 3.15 (s, 9H), 3.05 (m, 2H), 2.75 (m, 2H), 1.4 (m, 2H), 1.2 (brs, 12H), 0.8 (brt, 3H).
TLC シリカゲル CHCl3: MeOH 9:1;
Rf=0.29.
【００２７】
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシブチレート
10%のPd/C(0.44 g)をＲ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシ酪酸ペルクロレートのベンジルエステル(4.4 g, 8.44 mmol)のMeOH溶液(115 ml)に添加し、混合液を47psiで4時間水素化した。セライト上で濾過した後、溶液を真空濃縮し、Amberlyst A-21 樹脂を通過させ、MeOHで溶離した。溶媒を蒸発させた後、2.47 gの生成物を得た。
収率 88.7%.
M.p.: 151-153℃.
1H-NMR (300 MHz; D2O):
δ: 5.4 (m, 1H), 3.75 (dd, 1H), 3.5 (d, 1H), 3.15 (s, 9H), 3.05 (t, 2H), 2.55 (dd, 1H), 2.40 (dd, 1H), 1.45 (m, 2H), 1.20 (brs, 12H), 0.8 (brt, 3H).
FAB Mass=331, [(M+H)+].
元素分析: 期待された式C17H34N2O4に対応。
K.F.=1.5% 水.
TLC シリカゲル MeOH.
Rf=0.22.
HPLC: SPHERISORB-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), T=35℃, 移動相 50 mM KH2PO4:CH3CN 40:60, H3PO4を用いてpH 4.0に調整、流速 0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=5.33 分.
【００２８】
実施例 ４
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルオキシカルボニル)-オキシブチレートクロライド(ST 1297)
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシ酪酸クロライドのベンジルエステル
ジメチルアミノピリジン(3.8 g, 31.2 mmol)とノニルクロロホルメート(6.45 g, 31.2 mmol)を、Ｒ，Ｓ-カルニチンペルクロレートベンジルエステル(7.33 g, 20.8 mmol)の無水DMF溶液(50ml)に、0℃で添加した。温度を室温まで上げ、反応混合液を３日間、攪拌下に置いた。CHCl3を添加し、溶液を1Nの過塩素酸で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、乾燥状態まで蒸発させて、6.02 gの粗生成物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー(CHCl3: MeOH 85:15)により精製した。3.52 gの濃いオイルを得、これを続いてMeOH中に溶解し、Amberlyst A-21樹脂(HCl型に活性化したもの)を通してMeOHで溶離した。溶媒を真空蒸発させた後、3.1 gの油状生成物を得た。
収率 32.4%.
1H-NMR (200 MHz; CDCl3):
δ: 7.3 (s, 5H), 5.45 (m, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.4 (d, 1H), 4.1 (t, 2H), 3.8 (dd, 1H), 3.4 (s, 9H), 2.9 (m, 2H), 1.55 (m, 2H), 1.2 (brs, 12H), 0.8 (brt, 3H).
必要な変更を加えて、ノニルクロロホルメートの調製を、テトラデシルクロロホルメートに関して実施例２に開示するように行った。
【００２９】
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルオキシカルボニル)-オキシ酪酸クロライド
10%のPd/C(110 mg)をベンジルＲ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルオキシカルボニル)-オキシ酪酸クロライド(1.1 g, 2.4 mmol)のMeOH溶液(10 ml)に添加し、混合液を47 psiで２時間水素化した。セライト上で濾過した後、溶液を真空乾燥させ、883 mgの生成物を得(収率 100%)、これを沈殿によりCH3CN/Et2Oからさらに精製し、600 gの生成物を得た。
収率: 68%.
M.p.: 150℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; D2O):
δ: 5.4 (m, 1H), 4.1 (m, 2H), 3.75 (dd, 1H), 3.55 (d, 1H), 3.1 (s, 9H), 2.7 (m, 2H), 1.5 (m, 2H), 1.20 (brs, 12H), 0.7 (brt, 3H).
FAB Mass=332, [M+].
元素分析: 期待された式C17H34ClNO5に対応。
K.F.=1.7% 水.
TLC シリカゲル CHCl3:MeOH 1:1;
Rf=0.10.
HPLC: SPHERISORB-C1 カラム (5μm, 250x4.6 mm), T=30℃, 移動相 50 mM (NH4)H2PO4:CH3CN 60:40, H3PO4でpH 3.0に調整, 流速0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=5.67 分.
【００３０】
実施例 5
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルホスホニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシブチレート(ST 1300)
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルホスホニウム-３-ヒドロキシ酪酸ヨーダイドのエチルエステル
1MのトリメチルホスフィンのTHF溶液(93 ml)をエチルＲ，Ｓ-４-ヨード-３-ヒドロキシブチレート(20 g, 77.5 mmol)に添加し、反応混合液を室温に５日間攪拌下に静置した。エチルエーテルを添加し、生じた沈殿をデカンテーションにより分離した。沈殿をEt2Oで粉砕し、真空下で乾燥させ、18.5 gの生成物を得た。
収率 71.3%.
M.p.: 105-107℃.
1H-NMR (200 MHz; CDCl3):
δ: 4.6 (m, 1H), 4.15 (q, 2H), 3.1 (m, 1H), 2.75 (m, 3H), 2.2 (d, 9H), 1.3 (t, 3H).
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルホスホニウム-３-ヒドロキシ酪酸のエチルエステルを、Tetrahedron 1990, 4277-4282に記載されるように、Ｒ，Ｓ-３-ヒドロキシ-４-ブチロラクトンを出発物質として用いて調製した。
【００３１】
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルホスホニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシ酪酸ヨーダイドのエチルエステル
ノニルイソシアネート(4.04 g, 23.86 mmol)をＲ，Ｓ-４-トリメチルホスホニウム-３-ヒドロキシ酪酸ヨーダイドのエチルエステル(4 g, 11.97 mmol)の無水DMF溶液(80 ml)に添加し、溶液を７日間、110℃、攪拌下に静置した。CHCl3を添加し(300 ml)、溶液を水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させた。溶媒の蒸発後、得られた残存物をアセトニトリルで処理し、生じた固体を濾過除去し、濾液をCHCl3: MeOH 8:2を用いるシリカゲルフラッシュ-クロマトグラフィーにより精製し、2.07 ｇの濃いオイルの形態の生成物を得た。
収率 34.3%.
1H-NMR (200 MHz; CDCl3):
δ: 5.4 (m, 2H), 4.15 (q, 2H), 3.15 (m, 4H), 2.8 (d, 2H), 2.2 (d, 9H), 1.5 (m, 2H), 1.2 (brs, 12H), 0.8 (brt, 3H).
【００３２】
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルホスホニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシブチレート
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルホスホニウム-３-(ノニルカルバモイル)-オキシ酪酸ヨーダイドのエチルエステル(2.07 g, 4.11 mmol)を1NのHCl(200 ml)に溶解し、溶液を70℃まで３時間温めた。溶媒を真空蒸発させた後、得られた残存物をMeOHで処理し、Amberlyst A-21 樹脂を通過させ、MeOHで溶離した。粗生成物を得、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、MeOHで溶離して700 mgの生成物を得た。
収率: 49%.
M.p.: 123-127℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; D2O):
δ: 5.3 (m, 1H), 3.1 (m, 2H), 2.80-2.45 (m, 4H), 1.85 (d, 9H), 1.4 (m, 2H), 1.2 (brs, 12H), 0.8 (brt, 3H).
FAB Mass=348, [(M+H)+].
元素分析: 期待された式C17H34NO4Pに対応。
K.F.=3.4% 水.
TLC シリカゲル MeOH;
Rf=0.18.
HPLC: SPHERISORB-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), T=25℃, 移動相 50 mM KH2PO4:CH3CN 40:60, H3PO4でpH 4.0 に調整, 流速0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=5.18 分.
以下の実施例６および７を、図１によりさらに説明する。
【００３３】
実施例６
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(オクチルオキシカルボニル)-アミノブチレートクロライド (ST 1253) (2a, 図１)
ステップA
3 g (0.012 mmol)のアミノカルニチンイソブチルエステルを20 mlの無水CH2Cl2に溶解した。2.48 ml(0.1078 mol)のトリエチルアミンと、(アルコールをホスゲンのトルエン溶液と反応させることにより予め調製した)3.6 g(0.0178 mol)のオクチルクロロホルメートを溶液に添加した。反応混合液を4.5 時間、室温に静置した。次いで溶媒を蒸発させ、生じた固体をエチル酢酸中に溶解し、濾過した。溶媒を乾燥状態まで真空蒸発させ、生じた固体をシリカゲル上で精製し、100%のCHCl3で溶離し、次いでCHCl3:MeOH 95:5および90:10で溶離した。生成物を50%収率で得た。
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/酢酸10.5)/アセトン 7:3;
Rf=0.8.
HPLC: SPHERISORB-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), 移動相 50 mM (NH4)H2PO4:CH3CN 60:40, pH 4.0, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=8.6 分.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.56-4.46 (m, 1H), 4.12-4.02 (m, 2H), 3.94-3.88 (m, 2H), 3.66-3.5 (s, 9H), 3.4 (s, 9H), 2.74-2.66 (m, 2H), 2-1.86 (m, 1H), 1.68-1.56 (t, 2H), 1.4-1.2 (m, 12H), 0.97-0.7 (d, 6H), 0.6-0.3 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C20H41N2O4Clに対応。
【００３４】
ステップB
ステップＡで得られたエステルを、Amberlyst IRA 402 樹脂 (OH- 活性型)上で加水分解し、水で溶離した。水を乾燥状態まで蒸発させ、生じた固体をアセトンで粉砕し、続いて濾過した。白色固体を得た。
収率 94%.
M.p.= 170℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.4 (m, 1H), 4.05 (t, 2H), 3.5 (d, 2H), 3.2 (s, 9H), 2.4 (d, 2H), 1.6 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 12H), 0.95-0.85 (t, 3H).
FAB Mass=454, [(M+H)+.
元素分析: 期待された式 C16H32N2O4に対応。
K.F.=1.74 % 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/酢酸10.5)
Rf=0.65.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), 移動相 0.05M (NH4)H2PO4:CH3CN 60:40, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=9.0 分.
【００３５】
実施例７
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルオキシカルボニル)-アミノブチレート (ST 1285) (2b, 図１)
ステップ A
生成物を、ノニルクロロホルメートを用いて、実施例６の ステップ Aに開示するように調製した。
収率: 50%.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5)/アセトン 7:3
Rf=0.71.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), 移動相 50 mM (NH4)H2PO4:CH3CN 60:40, pH 4.0, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=10.417 分.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.54-4.44 (m, 1H), 4.1-4.02 (m, 2H), 3.96-3.86 (m, 2H), 3.6-3.5 (m, 2H), 3.2 (s, 9H), 2.72-2.66 (m, 2H), 2-1.86 (m, 1H), 1.66-1.56 (m, 2H), 1.38-1.26 (m, 14H), 0.96-0.94 (d, 6H), 0.92-0.86 (t, 3H).
【００３６】
ステップ B
生成物を、実施例６のステップ Bに開示するように調製した。
収率 80%.
M.p.= 160℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.5-4.35 (m, 1H), 4.1-4.0 (t, 2H), 3.55-3.45 (d, 2H), 3.2 (s, 9H), 2.45-2.35 (d, 2H), 1.7-1.5 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 14H), 0.9-0.8 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C17H34N2O4に対応。
K.F.=1.3 % 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5);
Rf=0.62.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), 移動相 0.05M (NH4)H2PO4:CH3CN 60:40, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=7.56 分.
以下の実施例８-９を、図２によりさらに説明する。
【００３７】
実施例８
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-オクチルオキシブチレート (ST 1207) (6a, 図２)
ステップ A
39 g (0.3 mol)のオクチルアルコールを25 mlのトルエンに溶解し、14.5 ml (0.107 mol)のエチルクロロアセテートと8 mlのチオニルクロライドをそこへ15℃で添加した。添加終了後、反応混合液を４時間、室温で静置した。エチル酢酸を次いで添加し、溶液を３回、1NのNaOHで洗浄し、続いて水で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで処理し、濾過し、乾燥状態まで真空蒸発させた。生成物をヘキサンのみ〜ヘキサン/エチルエーテル 95:5までの勾配を用いて溶離するシリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製した。生成物を80%収率で得た。
TLC シリカゲル ヘキサン/エチルエーテル 85:15;
Rf=0.75.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.2-4.09 (q, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.4-3.5 (dd, 2H), 2.85 (s, 2H), 1.60-1.58 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 10H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C22H33ClO4に対応。
【００３８】
ステップ B
先のステップAで得た生成物26.8 g (0.066 mol)と13.5 mlのトリエチルシランの混合液に、9 mlのBF3.Et2Oを0℃で滴下した。添加終了後、反応混合液を４時間還流した。冷却後、エーテルを添加し、溶液を２回、1NのNaOHで、次いで水で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムにて乾燥させ、濾過し、乾燥状態まで真空蒸発させた。オイルを得、これをヘキサンのみ〜ヘキサン/エチルエーテル 95:5までの勾配を用いて溶離するシリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製した。生成物を70% 収率で得た。
TLC シリカゲルヘキサン/エチルエーテル 90:10;
Rf=0.47.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.2-4.09 (dd, 2H), 4.0-3.85 (m, 1H), 3.62-3.40 (m, 4H), 2.70-2.50 (dd, 2H), 1.55-1.50 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 10H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析:期待された式C14H27ClO3に対応。
【００３９】
ステップ C
5.2 g (0.08 mol)のNaN3と触媒量のテトラブチルアンモニウムブロマイドを、先のステップＢで得られた11.4 g (0.041 mol)の生成物の溶液に添加した。反応混合液を60℃で３日間置いた。溶液を乾燥状態まで真空蒸発させた。濃暗色の溶液を得、これをヘキサンのみ〜ヘキサン/エチルエーテル 95:5までの勾配を用いて溶離するシリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製した。生成物を83%収率で得た。.
TLC シリカゲル ヘキサン/エチルエーテル 95:5;
Rf=0.23.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.2-4.09 (dd, 2H), 4.0-3.80 (m, 1H), 3.60-3.40 (dd, 2H), 3.40-3.20 (dd, 2H), 2.70-2.40 (dd, 2H), 1.60-1.40 (m, 2H), 1.4-1.1 (m, 10H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C14H27N3O3に対応。
【００４０】
ステップ D
先のステップＣで得た生成物(15.39 g, 0.054 mol)を31 mlの酢酸に溶解し、生じた溶液を、10%のPd/Cを60 psiで 7 時間用いて触媒的水素化に供した。反応の進行を出発生成物がなくなるまでTLC(ヘキサン/エチルエーテル 95:5)で調査した。その後、ホルムアルデヒドを添加し(4.6 ml, 0.167 mol)、続いて10%のPd/Cを添加し、混合液を30 psiにて２日間水素化した。触媒を濾過除去し、混合液を真空乾燥させた。淡黄色の液体を得、これをメチレンクロライドで処理し、1NのNaOH、次いで水、次いでNaCl飽和溶液で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、乾燥状態まで真空蒸発させた。濃いオイルを得た。生成物を98% 収率で得た。.
TLC シリカゲル AcOEt/MeOH/NH3 90:10:3;
Rf=0.42.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.2-4.09 (dd, 2H), 3.85-3.80 (m, 1H), 3.60-3.40 (dd, 2H), 2.65-2.40 (dd, 2H), 2.40-2.20 (dd, 2H), 2.20 (s, 6H), 1.60-1.40 (m, 2H), 1.4-1.1 (m, 10H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C16H36NO3に対応。
【００４１】
ステップE
先のステップＤで得た生成物(15.21 g, 0.053 mol)を98 mlのTHFに溶解し、8 mlのメチルヨーダイドをそこへ添加した。反応を一晩、室温で進行させた。混合液を乾燥状態まで真空蒸発させた。濃いオイルを得た。生成物を98%収率で得た。
TLC シリカゲル AcOEt/MeOH/NH3 90:10:3;
Rf=0.10.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.45-4.3 (m, 1H), 4.2-4.09 (dd, 2H), 3.75-3.30 (m, 2H), 3.5 (s, 9H), 2.75-2.60 (dd, 2H), 1.60-1.45 (m, 2H), 1.30-1.15 (m, 10H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C16H39INO3に対応。
【００４２】
ステップ F
先のステップＥで得た生成物を、Amberlyst IRA 402 樹脂 (OH- 活性型)上で水素化し、水で溶離した。乾燥状態まで水を蒸発させた。生じた固体をイソプロピルアルコールで３回処理した。白色固体を得た。
収率=93%
M.p.= 106℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; MeOD):
δ: 4.30-4.15 (m, 1H), 3.70-3.60 (dd, 1H), 3.50-3.40 (m, 2H), 3.20 (s, 9H), 2.75-2.65 (dd, 1H), 2.20-2.10 (dd, 1H), 1.60-1.50 (m, 2H), 1.40-1.20 (m, 10H), 0.9-0.8 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C15H31NO3に対応。
K.F.=5.7 % 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5);
Rf=0.7.
HPLC: SGE-SAX カラム (5μm, 250x4 mm), 移動相 0.025M (NH4)H2PO4:CH3CN 30:70, 検出器: RI, UV 205 nm, 流速=0.75 ml/分, RT=5.85 分.
MS-FAB+グリセロールマトリックス=274.
【００４３】
実施例９
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-テトラデシルオキシブチレート (ST 1228) (6b, 図２)
ステップA
生成物を、テトラデシルアルコールを用いる実施例８のステップＡのように調製した。生成物を73%収率で得た。
TLC シリカゲル ヘキサン/エチルエーテル 95:5;
Rf=0.63.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.2-4.09 (q, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.4-3.5 (dd, 2H), 2.85 (s, 2H), 1.60-1.58 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C34H67ClO4に対応。
【００４４】
ステップ B
生成物を実施例８のステップ Bのように調製した。図２に示す生成物 2bを、72%収率で得た。.
TLC シリカゲル ヘキサン/エチルエーテル 95:5;
Rf=0.4.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.2-4.09 (dd, 2H), 4.0-3.85 (m, 1H), 3.62-3.40 (m, 4H), 2.70-2.50 (dd, 2H), 1.55-1.50 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C20H39O3に対応。
【００４５】
ステップ C
生成物を実施例８のステップCのように調製した。生成物を79%収率で得た。.
TLC シリカゲル ヘキサン/エチルエーテル 90:10;
Rf=0.36.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.2-4.09 (dd, 2H), 4.0-3.80 (m, 1H), 3.60-3.40 (dd, 2H), 3.40-3.20 (dd, 2H), 2.70-2.40 (dd, 2H), 1.60-1.40 (m, 2H), 1.4-1.1 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C20H39N3O3に対応。
【００４６】
ステップ D
実施例８のステップDのように生成物を調製した。生成物を98%収率で得た。
TLC シリカゲル AcOEt/MeOH/NH3 90:10:3;
Rf=0.72.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.2-4.09 (dd, 2H), 3.85-3.80 (m, 1H), 3.60-3.40 (dd, 2H), 2.65-2.42 (dd, 2H), 2.38-2.20 (dd, 2H), 2.18 (s, 6H), 1.60-1.40 (m, 2H), 1.4-1.1 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C22H45NO3に対応。
【００４７】
ステップ E
実施例８のステップ Eのように生成物を調製した。生成物を99%収率で得た。
TLC シリカゲル AcOEt/MeOH/NH3 90:10:3;
Rf=0.15.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.45-4.3 (m, 1H), 4.2-4.09 (dd, 2H), 3.75-3.30 (m, 2H), 3.5 (s, 9H), 2.75-2.60 (dd, 2H), 1.60-1.45 (m, 2H), 1.30-1.15 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C23H48INO3に対応。
【００４８】
ステップ F
実施例８のステップ Fのように生成物を調製した。生成物を99%収率で得た。
M.p.= 106℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; DMSO-D6):
δ: 4.10-4.0 (m, 1H), 3.60-3.20 (m, 4H), 3.05 (s, 9H), 2.40-2.30 (dd, 1H), 1.80-1.70 (dd, 1H), 1.50-1.40 (m, 2H), 1.30-1.15 (m, 22H), 0.9-0.8 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C21H43NO3に対応。
K.F.=6.4 % 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5);
Rf=0.6.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), 移動相 0.05M (NH4)H2PO4:CH3CN 40:60, 検出器: RI, UV 205 nm, 流速=0.75 ml/分, RT=4.38 分.
MS-FAB+グリセロールマトリックス=358.3
以下の実施例１０-１１を、図３bによりさらに説明する。
【００４９】
実施例１０
Ｒ，Ｓ-１-グアニジニウム-２-テトラデシルオキシ-３-(テトラゾールエート-５-イル)プロパン (ST 1263) (10, 図３b)
ステップ A
実施例９のステップ Cで調製した6.65 g (0.0179 mol)の中間体を10 mlのメタノールに溶解し、10mlの4NのNaOHを溶液に添加した。反応液を１６時間、室温に静置した。20 mlの6NのHClを溶液に添加し、エチル酢酸で抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過および真空濃縮した。生成物を白色固体として95.6% 収率で得た。.
TLC シリカゲル ヘキサン/エチルエーテル 1:1;
Rf=0.5.
M.p.=42-45℃.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 3.9-3.8 (m, 1H), 3.56-3.48 (m, 2H), 3.42-3.26 (dd, 2H), 2.68-2.5 (m, 2H), 1.6-1.5 (m, 2H), 1.4-1.2 (s, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C18H35N3O3に対応。
【００５０】
ステップ B
0℃にて、4.96 mlのTEAを、ステップ Aで得られた化合物2.79 g(8.19 mmol)、アミノプロピオニトリル(0.58 g, 8.2 mmol)およびDEPC(ジエチルホスホシアニデート)(1.71ml)を含む無水DMF溶液(4.2 ml)に滴下した。反応液を１時間、室温に静置した。溶媒を蒸発させ、残存物をエチル酢酸に溶解し、水、次いで飽和NaCl溶液で２回洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過および真空濃縮した。生成物を得、ヘキサン: エチルエーテル (7:3/1:1/3:7)を用いてシリカゲルカラムを通して精製した。
収率: 71%.
TLC シリカゲル エチルエーテル 100%;
Rf=0.42.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 6.6-6.4 (m, 1H), 3.9-3.8 (m, 1H), 3.60-3.4 (m, 5H), 3.3-3.2 (dt, 1H), 2.7-2.6 (t, 2H), 2.6-2.4 (dd, 2H), 1.6-1.5 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C21H39N5O2に対応。
【００５１】
ステップ C
2.99 g(0.0114 mol)のトリフェニルホスフィンと0.2 mlの水を、2.99 g (7.62 mmol)のステップ Bで得られた化合物を含む溶液に添加した。反応液を一晩室温に静置した。溶媒を蒸発させ、生成物を得、エチル酢酸100%、次いでエチル酢酸:メタノール:アンモニア 7:3:0.3を用いてシリカゲルカラムを通して精製した。
収率: 65%.
TLC シリカゲル エチル 酢酸:メタノール:アンモニア 7:3:0.3;
Rf=0.26.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 3.78-3.7 (m, 1H), 3.58-3.48 (m, 4H), 2.8-2.7 (dd, 2H), 2.7-2.6 (m, 2H), 2.5-2.3 (dd, 2H), 1.6-1.5 (m, 2H), 1.4-1.3 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C21H41N3O2に対応。
【００５２】
ステップ D
ステップ Cで得られた1.69 g(4.6 mmol)の化合物を、1.2 g (5.2 mmol)の(BOC)2Oおよび、9.2 mlの1N NaOHで30 分間、室温で処理した。反応混合液をエチル酢酸中に注ぎ、４回1N HClで洗浄し、次いで水および飽和NaCl溶液で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、乾燥状態までおよび真空濃縮した。生成物を白色固体として得た。
収率: 100%.
TLC シリカゲル エチルエーテル 100%;
Rf=0.26.
M.p.=83-84℃.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 7.2-7.0 (m, 1H), 4.9-4.8 (m, 1H), 3.8-3.6 (m, 1H), 3.5-3.4 (dt, 4H), 3.2-3.0 (m, 2H), 2.6 (t, 2H), 2.4 (d, 2H), 1.5 (m, 2H), 1.4 (s, 9H), 1.4-1.2 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C26H49N3O4に対応。
【００５３】
ステップ E
ステップ Dで得られた生成物(1.19 g, 2.56 mmol)を12 mlの無水THF中にアルゴン雰囲気下で溶解し、次いで 3.062gのトリフェニルホスフィン、1.54 mlのトリエチルシリルアジドおよび4.9 mlのDEAD (ジエチルアゾジカルボキシレート)を出発生成物がなくなるまで0℃にて３日以内に滴下した。混合液を次いで硝酸セリウムアンモニウム水溶液で処理し、CH2Cl2で希釈した。反応液を２時間静置し、有機相を飽和NaCl溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空乾燥させた。残存物をヘキサン/エチル酢酸(9:1/8:2/7:3)を用いてシリカゲルカラムを通して精製した。生成物を66% 収率で得た。.
TLC シリカゲル ヘキサン/AcOEt 1:1;
Rf=0.34.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.95-4.8 (m, 1H), 4.7-4.5 (m, 2H), 3.9-3.8 (m, 1H), 3.50-3.40 (m, 1H), 3.40-3.31 (m, 1H), 3.3-3.2 (m, 1H), 3.22-3.0 (dd, 2H), 3.10-3.0 (m, 3H), 1.45-1.35 (m, 1H), 1.2 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C25H48N6O3に対応。
【００５４】
ステップ F
ステップ Eで得られた生成物(0.969 g, 1.97 mmol)を13.09 mlの無水THFに溶解し、次いで 13.1 mlの3N HClを添加した。反応混合液を２時間、50℃、攪拌下に静置した。反応混合液を真空乾燥させ、残存物をCH2Cl2で処理し、1N NaOH溶液で処理した。有機相を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空乾燥させた。生成物を92%収率で得た。.
TLC シリカゲル AcOEt/MeOH/NH3 9:1:0.3
Rf=0.31.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.78-4.58 (m, 2H), 3.8-3.7 (m, 1H), 3.5-3.4 (m, 1H), 3.30-3.24 (m, 1H), 3.24-3.18 (m, 4H), 3.05-3.0 (dd, 2H), 3.0-2.6 (dd, 2H), 1.4 (m, 2H), 1.2 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C21H40N6Oに対応。
【００５５】
ステップ G
ステップ Fで得られた生成物(2.78 g, 7.1 mmol)を20 mlの無水MeOHに溶解し、次いで、(周知の方法で調製した)2.34 gのイミノメタンスルホン酸を３日以内に添加した。得られた懸濁液を真空乾燥させ、次いで1N NaOHで処理し、攪拌下に30分間置いた。固体を濾過し、水、次いでアセトンで洗浄した。標題生成物を45%収率で得た。.
TLC シリカゲル AcOEt/MeOH/NH3 7:3:0.3;
Rf=0.22.
M.p.=240℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 3.90-3.75 (m, 1H), 3.6-3.4 (m, 2H), 3.40-3.20 (m, 2H), 3.20-3.10 (dd, 1H), 2.95-2.85 (dd, 1H), 1.4 (m, 2H), 1.2 (s, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C19H39N7Oに対応。
HPLC: Spherisorb-C1 (5μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05 M KH2PO4:CH3CN 35:65, pH=3, 流速 0.75 ml/分, 検出器: UV 205 nm, RT=5.51 分.
MS-FAB+グリセロールマトリックス=382.
【００５６】
実施例１１
Ｒ，Ｓ-１-トリメチルアンモニウム-２-テトラデシルオキシ-３-(テトラゾールエート-５-イル)プロパン (ST 1287) (9, 図３b)
ステップ A-F
化合物を、実施例１０のステップ A-Fのように調製した。
ステップ H
実施例１０のステップ Fで調製した2.79 g(7.14 mmol)の化合物を18 mlの水に懸濁し、1.47 mlのHCOOHと1.57 mlのH2COをそこへ添加した。反応混合液を一晩還流し、次いで冷却し、メチレンクロライドを添加した。pHを0.5 N NaOHを用いて９に調製した。混合液を３回、メチレンクロライドで抽出した。有機相を0.5 N NaOH、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過および真空濃縮した。生成物を固体として100% 収率で得た。.
TLC シリカゲル AcOEt/MeOH/NH3 9:1:0.3;
Rf=0.58.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.7-4.5 (m, 1H), 3.8-3.7 (m, 1H), 3.5-3.4 (m, 1H), 3.30-3.20 (m, 2H), 3.10 (m, 3H), 2.45-2.35 (m, 2H), 2.30 (s, 6H), 1.4-1.3 (m, 2H), 1.2-1.0 (m, 22H), 0.90-0.80 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C23H44N6Oに対応。
【００５７】
ステップ I
ステップ Hで得られた化合物2.99 g (7.14 mmol)をTHFに溶解し、2.5 mlのCH3Iをそこへ添加した。反応液を３時間、室温に静置した。溶媒を蒸発させ、固体残存物を熱エーテルで洗浄し、一晩攪拌下に置き、次いで濾過した。生成物を得た。
収率: 100%.
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH 42:7:28:10.5:10.5;
Rf=0.73.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.90-4.80 (m, 2H), 4.70-4.55 (m, 1H), 4.40-4.25 (m, 1H), 3.80-3.60 (m, 2H), 3.60-3.40 (m, 3H), 3.30 (s, 9H), 3.30-3.10 (m, 2H), 1.60-1.40 (m, 2H), 1.3-1.1 (m, 22H), 0.9-0.8 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C24H47IN6Oに対応。
MS-FAB+グリセロールマトリックス=436.
【００５８】
ステップ L
ステップ Iで得られた生成物(2.99 g, 5.33 mmol)をMeOHに溶解し、次いで、MEOHで調整したOH-型のIRA 402 樹脂に通した。標題生成物を固体として得、続いてAcOEtで粉砕した。.
収率=88%.
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH (42:7:28:10.5:10.5)/アセトン 8:2;
Rf=0.73.
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH 42:7:28:10.5:10.5;
Rf=0.73.
M.p.= 180℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 4.30-4.20 (m, 1H), 3.90-3.70 (m, 2H), 3.60-3.55 (m, 1H), 3.50-3.30 (m, 4H), 3.25 (m, 1H), 3.0-2.9 (m, 1H), 1.60-1.40 (m, 2H), 1.3-1.1 (m, 22H), 0.9-0.8 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C21H43N5Oに対応。
MS-FAB+グリセロールマトリックス=382.
K.F.=1% 水
HPLC: Spherisorb-C1 (5μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05 M KH2PO4:CH3CN 35:65, pH=3, 流速0.75 ml/分, 検出器: UV 205 nm, RT=5.18 分.
以下の実施例１２-１４を、図４によりさらに説明する。
【００５９】
実施例１２
Ｒ，Ｓ-３-キヌクリジニウム-２-(テトラデシルオキシカルボニル)-オキシ-１-プロパンホスホネート一塩基(ST 1260)
ステップ A
無水環境において、-70℃で、1.6 M BuLiのヘキサン溶液(14 ml, 0.022 mol)をジベンジルホスファイト(5.8 g, 0.022 mmol)のTHF溶液に滴下した。１５分後、5 mlのTHFに溶解した1.8 ml(0.022 mol)のエピブロムヒドリンを添加した。添加後、エーテル化したBF3 (3.6 ml, 0.022 mol)を非常にゆっくりと滴下した。反応液をさらに３時間、-70℃に置いた。飽和アンモニウムクロライド溶液を添加し、次いで温度を室温まで上げた。この溶液を数回、AcOEtで抽出し、集めた有機相を飽和NaHCO3で処理し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過および真空濃縮した。オイルを得、シリカゲルクロマトグラフィー(AcOEt/ヘキサン 1:1)上での精製後、1.1 gの未反応のジベンジルホスファイトと5.3 ｇの目的の生成物を得た。
収率=60%.
TLC シリカゲル AcOEt/ヘキサン 7:3;
Rf=0.54.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 7.4-7.2 (m, 10H), 5.1-4.9 (m, 4H), 4.2-4.0 (m, 1H), 3.5-3.3 (dd, 2H), 2.2-2.0 (m, 2H).
元素分析: 期待された式C17H20BrO4Pに対応。
MS-FAB+グリセロールマトリックス=399, 400, 401, 402.
【００６０】
ステップ B
2 g (5 mmol)のステップ Aで得られた化合物を10%濃度に溶解し、溶液を0℃に冷却した。1.4 mlのTEA (10 mmol)と0.62 gの(5 mmol)のDMAP (ジメチルアミノピリジン)をそこへ添加した。その後すぐ、5.2 mmolのテトラデシルクロロホルメートを添加し、温度を室温まで上げた。反応の進行をTLC上で調査し、出発化合物がなくなるまで続けた。さらにクロロホルムを添加し、反応混合液を1N HClと水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、溶媒を蒸発させ、オイルを得、これをヘキサン/AcOEt 7:3を溶離剤として用いるフラッシュクロマトグラフィーを通して精製した。生成物を得た。
収率: 75%.
TLC シリカゲル ヘキサン/AcOEt 7:3;
Rf=0.31.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 7.4-7.2 (m, 10H), 5.1-4.9 (m, 5H), 4.1-3.9 (m, 2H), 3.6-3.4 (dd, 2H), 2.4-2.2 (m, 2H), 1.6-1.4 (m, 2H), 1.3-1.1 (m, 22H), 0.9-0.7 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C32H48BrO6Pに対応。
【００６１】
ステップ D
ステップ Bで得られた生成物(6.39 g, 10 mmol)を12 mlのDMFに溶解し、次いで、触媒量(基質に対して1%重量)のTBAI(テトラブチルアンモニウムヨーダイド)と共にキヌクリジン(2.2 g, 20 mmol)を添加した。反応は、出発生成物がなくなるまで50℃の温度で行った。反応の終わりに混合液を高吸引下で濃縮し、生成物を含む半固体を得た。後者をCHCl3/MeOH 8:3を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーを通して精製した。生成物を得た。
収率=15%.
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH (42:7:28:10.5:10.5)/アセトン 8:2;
Rf=0.8.
1H-NMR (300 MHz; MeOD):
δ: 7.4-7.1 (m, 50H), 5.3-5.1 (m, 1H), 4.9-4.8 (d, 2H), 4.1-4.0 (m, 2H), 3.8-3.4 (m, 2H), 3.4-3.2 (m, 6H), 2.2-1.7 (m, 9H), 1.6-1.4 (m, 2H), 1.3-1.1 (m, 22H), 0.9-0.7 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C32H54NO6Pに対応。
MS-FAB+グリセロール マトリックス=580.
【００６２】
ステップ E
ステップ Dで得られた生成物をMeOHに溶解し、次いで10%のPd/C(基質に対して5%重量)を添加し、分散物を室温にて１８時間、水素化した(60 psi)。その後、分散物を、セライトを通して濾過し、乾燥状態まで濃縮させた。標題生成物をさらに精製することなく得た。収率=99%.
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH (42:7:28:10.5:10.5)/アセトン 8:2;
Rf=0.57.
1H-NMR (300 MHz; D2O):
δ: 5.5-5.3 (m, 1H), 4.2-4.1 (m, 2H), 4.0-3.4 (m, 8H), 2.2-1.7 (m, 9H), 1.60-1.40 (m, 2H), 1.3-1.1 (m, 22H), 0.9-0.7 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C25H48NO6Pに対応。
MS-FAB+グリセロール マトリックス=490.
K.F.=7% 水
HPLC: Spherisorb-C1 (5μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.075 M KH2PO4:CH3CN 60:40, 流速0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=16.53 分.
【００６３】
実施例１３
Ｒ，Ｓ-３-トリメチルアンモニウム-２-(ノニルアミノカルボニル)-オキシ-１-プロパンホスホネート一塩基 (ST 1286)
ステップ A
生成物を、実施例１２のステップ Aに開示するように調製した。
【００６４】
ステップ C
先のステップで得られた生成物(4 g, 10 mmol)をCH2Cl2(10% 溶液)に溶解し、エーテル化したBF3(1.6 ml)とノニルイソシアネート(3.38 g, 20 mmol)を室温で添加した。30分後、反応を開始させ、まずさらにCH2Cl2を添加し、次いで有機相を1N NaOHで数回洗浄した。生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン/AcOEt 7:3)上で精製した。
収率=85%.
TLC シリカゲル AcOEt/ヘキサン 6:4;
Rf=0.28.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 7.4-7.2 (m, 10H), 5.1-4.9 (m, 5H), 4.6-4.2 (m, 1H), 3.7-3.5 (dd, 2H), 3.2-3.0 (m, 2H), 2.4-2.2 (m, 2H), 1.5-1.3 (m, 2H), 1.3-1.1 (m ,12H), 0.9-0.7 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C27H40BrNO5Pに対応。
【００６５】
ステップ F
先のステップで得られた化合物(5.68 g, 10 mmol)を、触媒量(基質に対して1% w/w)のTBAI(テトラブチルアンモニウムヨーダイド)と共にDMF(11 ml)に溶解した。この溶液を気体のトリメチルアミンで飽和させた。反応は、50℃で、出発化合物がなくなるまで行った。反応終了後、溶液を高吸引濃縮し、生成物を含む半固体を得た。後者を単離し、CH2Cl2のみ〜CH2Cl2:MeOH 1.1までの勾配を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーを通して精製した。生成物を得た。
収率: 25%.
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH (42:7:28:10.5:10.5)/アセトン 8:2;
Rf=0.73.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 7.5-7.2 (m, 5H), 5.5-5.4 (m, 1H), 4.9-4.8 (m, 4H), 4.0-3.6 (m, 2H), 3.2-3.1 (s, 9H), 2.2-2.1 (s, 9H), 2.0-1.8 (m, 2H), 1.5-1.4 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 12H), 0.9-0.7 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C27H42N2O5Pに対応。
MS-FAB+グリセロールマトリックス=457.
【００６６】
ステップ G
ステップ Fで得られた生成物をMeOHに溶解し、次いで10%のPd/C(基質に対して5%重量)を添加した。分散物を室温で１８時間、水素化した(60 psi)。終了後、分散物をセライトを通して濾過し、乾燥状態まで濃縮した。標題生成物をさらに精製することなく得た。
収率=99%.
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH (42:7:28:10.5:10.5)/アセトン 8:2;
Rf=0.31.
1H-NMR (300 MHz; D2O):
δ: 5.6-5.5 (m, 1H), 4.1-3.5 (m, 2H), 3.2-3.1 (s, 9H), 3.1-3.0 (m, 2H), 2.2-1.7 (m, 2H), 1.5-1.4 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 12H), 0.9-0.7 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C15H35N2O5Pに対応。
MS-FAB+グリセロール マトリックス=367.
K.F.=3% 水.
HPLC: Spherisorb-C1 (5μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05 M (NH4)H2PO4:CH3CN 35:65, 流速 0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=7.31 分.
【００６７】
実施例１４
Ｒ，Ｓ-３-ピリジニウム-２-(ノニルアミノカルボニル)-オキシ-１-プロパンホスフィン酸クロライド (ST 1268)
ステップ A
生成物を、実施例１２のステップ Aに開示するように調製した。
【００６８】
ステップ C
生成物を、実施例 13のステップ Cに開示するように調製した。
【００６９】
ステップ H
先のステップで得られた化合物(5.68 g, 10 mmol)を無水ピリジン(50% 溶液)に、触媒量(基質に対して1% w/w)のTBAI(テトラブチルアンモニウヨーダイド)と共に溶解した。反応は、50℃で、出発化合物がなくなるまで行った。反応終了後、溶液を高吸引濃縮し、生成物を含む半固体を得、CH2Cl2のみ〜CH2Cl2:MeOH 9:〜1:1の勾配を用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーを通して単離および精製した。
収率: 20%.
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH (42:7:28:10.5:10.5)/アセトン 8:2;
Rf=0.73.
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 9.4-9.3 (d, 2H), 8.2-8.1 (t, 1H), 7.9-7.8 (t, 2H), 7.3-7.1 (m, 5H), 5.3-5.1 (m, 3H), 4.9-4.8 (m, 2H), 3.0-2.9 (m, 2H), 2.2-1.6 (m, 2H), 1.4-1.2 (m, 2H), 1.3-1.1 (m, 12H), 0.9-0.7 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C24H38N2O5Pに対応。
MS-FAB+グリセロールマトリックス=477.
【００７０】
ステップ I
ステップ Hで得られた生成物(4.76 g, 10 mmol)を100 mlのCH2Cl2に溶解し、生じた溶液に20 mmolのTMSI(トリメチルシリルヨーダイド)を添加した。30分後、反応が終了した。0.5 mlの水を混合液に添加し、これを乾燥状態まで濃縮させた。最終生成物を、水/メタノール 9:1 〜メタノール100%勾配を用いるRP-18シリカゲルクロマトグラフィーにより精製および単離した。固体を水に溶解し、IRA 402 樹脂 (Cl- 活性型)を通過させた。. ST 1268 を得た。
収率=80%.
M.p.=202-204℃.
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH (42:7:28:10.5:10.5)/アセトン 8:2;
Rf=0.48.
1H-NMR (300 MHz; D2O):
δ: 9.4-9.3 (d, 2H), 8.2-8.1 (t, 1H), 7.9-7.8 (t, 2H), 5.5-5.4 (m, 1H), 5.2-4.8 (m, 2H), 3.0-2.9 (m, 2H), 2.2-2.0 (m, 2H), 1.4-1.1 (m, 14H), 0.9-0.7 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C18H32N2ClO5Pに対応。
MS-FAB+グリセロールマトリックス=387.
K.F.=6% 水.
HPLC: Spherisorb-C1 (5μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.050 M KH2PO4:CH3CN 35:65, 流速 0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=5.61 分.
【００７１】
実施例１５
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチレート (ST 1326)
粗生成物を、エチルエーテルを用いた沈殿により反応混合液から得、直接エチルエーテルで洗浄し、シリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製する以外は実施例１に開示するように、テトラデシルイソシアネートおよびＲ-アミノカルニチン分子内塩から出発して、生成物を調製した。
収率 57%.
M.p.: 160-162℃.
[α]20D= -21.1° (c=0.5, MeOH).
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.52 (m, 1H), 3.60 (dd, 1H), 3.48 (d, 1H), 3.20 (s, 9H), 3.10 (t, 2H), 2.40 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.28 (brs, 22H), 0.8 (brt, 3H).
ESI Mass=400, [(M+H)+.
元素分析: 期待された式 C22H45N3O3に対応。
K.F.=2.5% 水.
TLC シリカゲル CHCl3: iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH 42:7:28:10.5:10.5;
Rf=0.50.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), T=30℃, 移動相 0.05 M (NH4)H2PO4:CH3CN 75:25, pH=4.9 (そのまま), 流速 0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=13.63 分.
【００７２】
実施例１６
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ウンデシルカルバモイル)-アミノブチレート (ST 1327)
生成物を、実施例１に開示するように、ウンデシルイソシアネートおよびＲ-アミノカルニチン分子内塩から出発し、シリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製し、さらにアセトニトリルからの沈殿により精製して調製した。
収率 50%.
M.p.: 149-150.2℃.
[α]20D= -21.16° (c=1, MeOH).
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.52 (m, 1H), 3.60 (dd, 1H), 3.48 (d, 1H), 3.20 (s, 9H), 3.10 (t, 2H), 2.40 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.28 (brs, 16H), 0.8 (brt, 3H).
ESI Mass=358, [(M+H)+;
元素分析: 期待された式 C19H39N3O3に対応。
K.F.=2.3% 水.
TLC シリカゲル CHCl3: iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH 42:7:28:10.5:10.5.
Rf=0.50.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), T=30℃, 移動相 0.05 M (NH4)H2PO4:CH3CN 80:20, pH=4.9 (そのまま), flow 0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=17.37 分.
【００７３】
実施例１７
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ヘプチルカルバモイル)-アミノブチレート (ST 1328)
生成物を、実施例１に開示するように、ヘプチルイソシアネートおよびＲ-アミノカルニチン分子内塩から出発し、シリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製し、さらにアセトニトリルからの沈殿により精製して調製した。.
収率 47%.
M.p.: 149-150℃.
[α]20D= -34.0° (c=0.97, MeOH).
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.52 (m, 1H), 3.60 (dd, 1H), 3.48 (d, 1H), 3.20 (s, 9H), 3.10 (t, 2H), 2.40 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.30 (brs, 8H), 0.8 (brt, 3H).
ESI Mass=302, [(M+H)+;
元素分析: 期待された式C15H31N3O3に対応。
K.F.=6.17% 水
TLC シリカゲル CHCl3:iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH 42:7:28:10.5:10.5.
Rf=0.50.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μ, 250x4 mm), T=30℃, 移動相 0.05 M (NH4)H2PO4:CH3CN 85:15, pH=6 (H3PO4), 流速 0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=7.16 分.
【００７４】
実施例１８
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルチオカルバモイル)-アミノブチレート (ST 1329)
生成物を、実施例１に開示されるように、ノニルイソチオシアネートおよびＲ，Ｓ-アミノカルニチン分子内塩から出発して調製した。クロマトグラフィーは、8:2〜2:8のCHCl3/MeOH勾配を用いて行った。
収率 53%
M.p.: 104-107℃
1H-NMR (200 MHz; CD3OD):
δ: 5.45 (brm, 1H), 3.75 (dd, 1H), 3.55 (d, 1H), 3.45 (brm, (2H), 3.22 (s, 9H), 2.48 (m, 2H), 1.55 (m, 2H), 1.30 (brs, 12H), 0.90 (brt, 3H).
ESI Mass=346, [(M+H)+;
元素分析: 期待された式C17H35N3O2Sに対応。
K.F.=2.6% 水;
TLC シリカゲル CHCl3: iPrOH:MeOH:H2O:CH3COOH 42:7:28:10.5:10.5.
Rf=0.74;
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), T=30℃, 移動相 0.05 M (NH4)H2PO4:CH3CN 85:15, pH=6.0 (H3PO4), 流速 0.75 ml/分, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=8.87 分.
【００７５】
実施例１９
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート (ST 1283)
生成物を、実施例１に開示するように、ノニルイソシアネートおよびＲ-アミノカルニチン分子内塩から出発して調製した。
M.p.: 146-147℃
[α]20D= -13.4° (c=0.5, H2O).
元素分析: 期待された式 C17H35N3O3に対応。
K.F.=2.8% 水.
残りの物理化学的データは、ラセミ体のST1251のデータ(実施例１)と一致した。
【００７６】
実施例２０
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルカルバモイル)-アミノブチレート (ST 1338)
生成物を実施例１に開示するように、ノニルイソシアネートおよびＳ-アミノカルニチン分子内塩から出発して調製した。
M.p.: 146-147℃
[α]20D= +16.7° (c=0.43, H2O).
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.52 (m, 1H), 3.60 (dd, 1H), 3.45 (d, 1H), 3.18 (s, 9H), 3.10 (t, 2H), 2.40 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.28 (brs, 12H), 0.90 (brt, 3H).
ESI Mass=330, [(M+H)+;
元素分析: 期待された式 C17H35N3O3に対応。
K.F.=1.8% 水.
残りの物理化学的データは、ラセミ体のST1251のデータ(実施例１)と一致した。
【００７７】
実施例２１
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチレート (ST 1340)
粗生成物をエチルエーテルを用いた沈殿により反応混合物から得、直接エチルエーテルで洗浄し、シリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製する以外は実施例１に開示するように、生成物をテトラデシルイソシアネートおよびＳ-アミノカルニチン分子内塩から出発して調製した。
収率= 57%;
M.p.: 166-167℃
[α]20D= +20.7° (c=0.5, MeOH).
元素分析: 期待された式 C22H45N3O3に対応。
K.F.=1.7% 水.
残りの物理化学的データは、ラセミ体のST1326のデータ(実施例1５)と一致した。
【００７８】
実施例２２
イソブチルＲ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-テトラデシルアミノ-アミノブチレート (ST 1252)
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-テトラデシルアミノ-アミノブチレートイソブチルエステルアセテート
ラセミ体のアミノカルニチンのイソブチルエステル(5 g, 0.0198 mol)およびテトラデカナール(4.6 g, 0.0217 mol)を250 mlのメタノールに溶解した。氷酢酸(1.13 ml, 0.198 mol)と 1 gの10% Pd/Cを添加した。混合液を30 psiで一晩水素化した。セライト上で濾過した後、溶液を真空濃縮した。淡黄色オイルを得、これをまずAcOEt、次いで AcOEt/MeOH 9:1で溶離するシリカゲルカラムを通して精製した。4ｇの生成物を得た。
収率= 47%;
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5)/メチル酢酸 7:3
Rf=0.74.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 3.92-3.90 (d, 2H), 3.64-3.58 (m, 1H), 3.50-3.30 (m, 2H), 2.80-2.50 (m, 4H), 2.0-1.9 (m, 1H), 2.6-2.4 (m, 2H), 1.3 (s, 22H), 0.98-0.82 (m, 9H).
【００７９】
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-テトラデシルアミノ-アミノブチレート
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-テトラデシルアミノ-アミノ酪酸のイソブチルエステル、酢酸塩(3.3 g)を、Amberlyst IRA 402 樹脂 (OH- 活性型)上で水素化し、水で溶離した。減圧下で乾燥状態まで水を蒸発させ、生じた白色固体をメタノールで洗浄し、濾過および真空乾燥させた。1.95gの生成物を得た。
収率 70%
M.p.= 160℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.4 (m, 1H), 3.40-3.35 (m, 3H), 3.2 (s, 9H), 2.80-2.72 (m, 1H), 2.56-2.42 (m, 2H), 2.27-2.16 (m, 1H), 1.55-1.40 (m, 2H), 1.3 (s, 22H), 0.92-0.85 (t, 3H).
元素分析: 期待された式C21H44N2O2に対応。
K.F.=1.93 % 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5)
Rf=0.5.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), 移動相 0.05M (NH4)H2PO4:CH3CN 60:40, pH=4, 流速=0.75 ml/分; 検出器: RI, UV 205 nm, RT=30.017 分.
【００８０】
実施例２３
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-オクチルアミノブチレート (ST 1254)
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-オクチルアミノ-アミノブチレートイソブチルエステルアセテート
ラセミ体のアミノカルニチンクロライドのイソブチルエステル(5 g, 0.0198 mol)とオクタンアルデヒド(2.79 g, 0.0217 mol)を250 mlのメタノールに溶解した。氷酢酸(1.13 ml, 0.198 mol)と1 gの10%のPd/Cを添加した。混合液を30 psiで一晩水素化した。セライト上で濾過した後、溶液を真空濃縮した。8.5 gの生成物を得、続いて、まずAcOEt、次いでAcOEt/MeOH (9:1; 8.5:1.5)で溶離するシリカゲルカラムを通して精製した。3gの生成物を得た。
収率= 40%;
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/酢酸 10.5)
Rf=0.54.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 3.92-3.90 (d, 2H), 3.64-3.58 (m, 1H), 3.50-3.30 (m, 2H), 2.80-2.50 (m, 4H), 2.0-1.9 (m, 1H), 2.6-2.4 (m, 2H), 1.3 (s, 10H), 0.98-0.82 (m, 9H).
【００８１】
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-オクチルアミノブチレート
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-テトラデシルアミノ-アミノ酪酸のイソブチルエステル、酢酸塩、(2.8 g, 0.00719)を、Amberlyst IRA 402 樹脂 (OH-活性型)上で水素化し、水で溶離した。乾燥状態まで減圧下で水を蒸発させ、生じた白色固体をメタノールで洗浄し、濾過および真空乾燥させた。1.8 gの生成物を得た。
収率 70%
M.p.= 140℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 3.42-3.30 (m, 3H), 3.2 (s, 9H), 2.85-2.70 (m, 1H), 2.60-2.40 (m, 2H), 2.30-2.20 (m, 1H), 1.55-1.40 (m, 2H), 1.3 (s, 10H), 0.92-0.85 (t, 3H).
元素分析: 期待させる式C15H32N2O2に対応。
K.F.=2.8 % 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5)
Rf=0.32.
HPLC: SGE-SCX カラム (5μm, 250x4 mm), 移動相 0.05M (NH4)H2PO4:CH3CN 40:60, pH=4, 流速=0.75 ml/分; 検出器: RI, UV 205 nm, RT=43.20 分.
【００８２】
実施例２４
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(デカンスルホニル)アミノブチレート (ST 1364)
アミノカルニチンイソブチルエステルクロライドヒドロクロライド
アミノカルニチンのイソブチルエステル分子内塩(3 g, 18.72 mmol)をイソブタノール(120 ml)に溶解し、氷浴で冷却した。気体のHClを、完全に飽和し、混合物を浄化するまで溶液に通気した。溶液を一晩還流した(浴温130℃)。溶媒を真空蒸発させ、残存物をEt2Oで粉砕した。 5.1 gの白色固体を得た。
収率= 95%;
1H-NMR (200 MHz; D2O):
δ: 4.3 (m, 1H), 4.0 (d, 2H), 3.8 (d, 2H), 3.2 (s, 9H), 3.1 (m, 2H), 2.0 (m, 1H), 0.9 (d, 6H).
元素分析: 期待された式 C11H26Cl2N2O2に対応。
K.F.=1 % 水.
【００８３】
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(デカンスルホニル)-アミノブチレート
無水ジクロロメタン(5 ml)中のＲ，Ｓ-アミノカルニチンクロライドのイソブチルエステル、塩酸塩(1 g, 3.46 mmol)を、0℃で3 mlの無水ジクロロメタンに懸濁したトリエチルアミン(2.65 ml, 19mmol)およびデカンスルホニルクロライド(2.1 g, 8.65 mmol)と共に添加した。混合液を攪拌下で３日間、室温に置いた。溶媒を乾燥状態まで蒸発させ、残存物をエチル酢酸で処理し、トリエチルアミンヒドロクロライドの白色沈殿を溶液から真空-濾過により分離した。エチル酢酸溶液を真空乾燥させ、2.8 gの黄色オイルを得た。イソブチルエステルを水素化するために71 mlの1N NaOHを添加し、懸濁液を攪拌下、一晩、室温に放置した。懸濁液を蒸発および真空乾燥させ、固体の残存物をオイル-真空下で完全に乾燥させ、メタノールで処理し、メタノールを溶離剤として用いるシリカゲルクロマトグラフィーカラムを通して精製した。555 mgの生成物を得た。
収率 44%
M.p.= 158℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.3 (m, 1H), 3.45 (m, 2H), 3.25 (s, 9H), 3.15 (m, 2H), 2.45 (d, 2H), 1.8 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.4 (brs, 12H), 0.9 (brt, 3H).
元素分析: 期待されたC17H36N2O4Sに対応。
Mass ESI = 365 [(M+H)+], 387[(M+Na)+]
K.F.=3% 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピルアルコール 7/水 10.5/酢酸10.5)
Rf=0.62.
HPLC: Spherisorb-C1 カラム (5 μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05M K2H2PO4:CH3CN 35:65, pH そのまま, 流速=0.73 ml/分; 温度 = 30℃, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=7.0 分.
【００８４】
実施例２５
Ｒ，Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ノニルスルファモイル)アミノブチレート(ST 1362)
Ｒ，Ｓ-アミノカルニチンクロライドイソブチルエステル、塩酸塩(2 g, 6.9mmol)の無水ジクロロメタン溶液(40 ml)を、トリエチルアミン(3.8 ml, 27.6 mmol)と共に添加、ジクロロメタン中のSO2Cl2 (10 mlの最終溶液の1.7 ml)を0℃で滴下した。混合液を攪拌下、３日間、室温に放置し、トリエチルアミン(1.9 ml, 13.8 mmol)およびノニルアミン(2.5 ml, 13.8 mmol)を添加し、反応混合液を攪拌下、一晩、室温に放置した。溶媒を真空蒸発させ、残存物をエチル酢酸(100 ml)で処理し、トリエチルアミンヒドロクロライドの沈殿を、溶液から真空-濾過により分離した。エチル酢酸溶液を真空乾燥させ、4.8 g の黄色オイルを得、これに105 mlの1N NaOHを添加し、イソブチルエステルを加水分解した。混合液を攪拌下に一晩、室温で放置し、真空乾燥させた。残存物を完全にオイル-真空下で乾燥させた。黄色の半固体をクロロホルムから結晶化させた。1.26 g の生成物を得た。
収率 50%
M.p.= 152℃ dec.
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.1 (m, 1H), 3.48 (d, 2H), 3.25 (s, 9H), 2.95 (m, 2H), 2.5 (t, 2H), 1.55 (t, 2H), 1.45 (brs, 12H), 0.9 (brt, 3H).
元素分析: 期待された式 C16H35N3O4Sに対応。
Mass ESI = 366 [(M+H)+], 388[(M+Na)+]
K.F.=5.8% 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピル アルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5)
Rf=0.34.
HPLC: Spherisorb-C1 カラム (5 μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05M KH2PO4:CH3CN 35:65, pH そのまま, flow=0.75 ml/分; 温度 = 30℃, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=6.68 分.
【００８５】
実施例２６
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ドデカンスルホニル)アミノブチレート (ST 1391)
生成物を、実施例２４に開示するように、Ｓ-アミノカルニチンクロライドのイソブチルエステル、塩酸塩およびドデカンスルホニルクロライドから出発して調製し、600 mgの生成物を得た。.
収率 44%
M.p.= 156℃ dec.
[α]D20 = +6° (c= 0.245%, H2O)
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.3 (m, 1H), 3.45 (m, 2H), 3.25 (s, 9H), 3.15 (m, 2H), 2.45 (d, 2H), 1.8 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.4 (brs, 16H), 0.9 (brt, 3H).
元素分析: 期待された式 C19H40N2O4Sに対応。
K.F.=8.6% 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピル アルコール 7/水 10.5/酢酸 10.5)
Rf=0.65.
HPLC: Spherisorb-C1 カラム (5μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05M KH2PO4:CH3CN 40:60, pH そのまま, flow=0.75 ml/分; 温度 = 30℃, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=8.5 分.
【００８６】
実施例２７
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ドデカンスルホニル)アミノブチレート (ST 1420)
生成物を実施例２４に開示されるように、Ｒ-アミノカルニチンクロライドのイソブチルエステル、塩酸塩およびドデカンスルホニルクロライドから出発して調製し、450 mgの生成物を得た。.
収率 34%
M.p.= 158℃ dec.
[α]D20 = -7° (c= 0.265%, H2O)
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.3 (m, 1H), 3.45 (m, 2H), 3.28 (s, 9H), 3.15 (m, 2H), 2.45 (d, 2H), 1.8 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.3 (brs, 16H), 0.9 (brt, 3H).
元素分析: 期待された式 C19H40N2O4Sに対応。
K.F.=6.9% 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピル アルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5)
Rf=0.66.
HPLC: Spherisorb-C1 カラム (5 μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05M KH2PO4:CH3CN 40:60, pH そのまま, 流速=0.75 ml/分; 温度 = 30℃, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=8.11 分.
【００８７】
実施例２８
Ｓ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ウンデシルスルファモイル)アミノブチレート (ST 1427)
粗生成物を、勾配CHCl3: MeOH 9:1〜1:9を用いるシリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製する以外は実施例２５に開示するように、Ｓ-アミノカルニチンクロライドのイソブチルエステル、塩酸塩およびウンデシルアミンから出発して生成物を調製した。生成物をさらにシリカゲルクロマトグラフィーカラム上でMeOHを用いて精製した。0.7 g の純粋な生成物を得た。
収率 38%
M.p.= 153℃ dec.
[α]D20 = +4° (c= 0.25%, H2O, pH = 2)
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.1 (m, 1H), 3.48 (d, 2H), 3.25 (s, 9H), 2.95 (m, 2H), 2.5 (m, 2H), 1.55 (brt, 2H), 1.45 (brs, 16H), 0.9 (brt, 3H).
元素分析: 期待された式 C18H39N3O4Sに対応。
K.F.=2.9% 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピル アルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5)
Rf=0.68.
HPLC: Spherisorb-C1 カラム (5 μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05M KH2PO4:CH3CN 60:40, pH そのまま, 流速=0.7 ml/分; 温度 = 30℃, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=8.384 分.
【００８８】
実施例２９
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ウンデシルスルファモイル)アミノブチレート (ST 1428)
粗生成物を、勾配CHCl3: MeOH 9:1〜1:9を用いてシリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製する以外は実施例２５に開示されるように、Ｓ-アミノカルニチンクロライドのイソブチルエステル、塩酸塩およびウンデシルアミンから出発して生成物を調製した。生成物をMeOHを用いてシリカゲルクロマトグラフィーカラム上でさらに精製した。0.5 g の生成物を得た。
収率 32%
M.p.= 158℃ dec.
[α]D20 = -4° (c= 0.25%, H2O, pH = 2)
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.1 (m, 1H), 3.48 (d, 2H), 3.25 (s, 9H), 2.95 (m, 2H), 2.5 (m, 2H), 1.55 (brm, 2H), 1.45 (brs, 16H), 0.9 (brt, 3H).
元素分析: 期待された式 C18H39N3O4Sに対応。
K.F.=4.77% 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピル アルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5)
Rf=0.68.
HPLC: Spherisorb-C1 カラム (5 μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05M KH2PO4:CH3CN 60:40, pH そのまま, 流速=0.7 ml/分; 温度 = 30℃, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=8.379 分.
【００８９】
実施例３０
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(ドデシルカルバモイル)アミノブチレート (ST 1375)
生成物を実施例１に開示されるように、Ｒ-アミノカルニチン分子内塩およびドデシルイソシアネートから出発して調製した。ジエチルエーテルで洗浄した後得られた粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーカラム上で精製し、4.8 gの生成物を得た。.
収率 55%
M.p.= 147℃ dec.
[α]D20 = -24.6° (c= 0.48%, MeOH)
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 4.51 (m, 1H), 3.60 (dd, 1H), 3.45 (dd, 1H), 3.2 (s, 9H), 3.1 (t, 2H), 2.4 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.3 (brs, 18H), 0.9 (t, 3H).
元素分析: 期待された式 C20H41N3O3に対応。
K.F.=5.4% 水.
TLC シリカゲル (CHCl3 42/MeOH 28/イソプロピル アルコール 7/水 10.5/ 酢酸 10.5)
Rf=0.6.
HPLC: Spherisorb-C1 カラム (5 μm, 250x4.6 mm), 移動相 0.05M KH2PO4:CH3CN 65:35, pH =5.6, 流速=0.75 ml/分; 温度 = 30℃, 検出器: RI, UV 205 nm, RT=8.5 分.
【００９０】
実施例３１
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(１０-フェノキシデシルカルバモイル)アミノブチレート (ST 1449)
１０-フェノキシデシルイソシアネート
１１-フェノキシウンデカノイルクロライド(31.1 g, 104.8 mmol)のアセトン溶液(30 ml)を、アジ化ナトリウム(9.53 g, 146.6 mmol)水溶液(30 ml)に滴下し、氷浴中で冷却し、溶液の温度を10〜15℃に保った。１時間後、溶液を分液漏斗に移し、低い方の相(水相)を除去した。高い方の相を予め65℃に温めた、100 ml のトルエンを含むフラスコに移した。1.5 時間後、溶液を乾燥状態まで蒸発させ、13.37 gの粗生成物を得、これは、次なる反応に用いることができた。
1H-NMR (300 MHz; CDCl3):
δ: 7.2 (m, 2H), 6.9 (m, 3H), 3.9 (t, 2H), 3.6 (t, 2H), 1.4 (m, 2H), 1.3 (m, 10H).
【００９１】
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(１０-フェノキシデシルカルバモイル)-アミノブチレート
1１０-フェノキシデシルイソシアネート(25.0 g, 91.12 mmol)をアミノカルニチン分子内塩(7.3 g, 45.56 mmol)の無水DMSO溶液(350 ml)に添加し、溶液を６０時間、40℃に静置した。生じた混合液をエチルエーテル(2.5 l)を含む3lのエルレンマイヤーフラスコに移し、生じた沈殿のデカンテーションにより溶媒を分離し、次いでこれを少量のクロロホルムで処理し、フラスコに移し、再びエチルエーテルで沈殿させた。そうして得られた粗生成物を数回エチルエーテルで洗浄し、CHCl3: MeOH 9:1 〜CHCl3: MeOH 3:7勾配を用いて、より高いRfを有する不純物が溶離するまで用いてシリカゲル クロマトグラフィーカラム上で精製し、次いでMeOHのみを用いて目的の生成物を溶離した。13.5 gの純粋な生成物を得た。
収率 68%
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 7.2 (m, 2H), 6.9 (m, 3H), 4.5 (m, 1H), 3.9 (t, 2H), 3.6 (dd, 1H), 3.4 (dd, 1H), 3.2 (s, 9H), 3.1 (t, 2H), 2.4 (m, 2H), 1.8 (m, 2H), 1.6 (m, 2H), 1.4 (m, 2H), 1.3 (m, 10H).
FAB Mass=436, [(M+H)+;
元素分析: 期待された式 C24H41N3O4に対応。
K.F.=2.3% 水.
【００９２】
実施例３２
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(トランス-β-スチレンスルホニル)-アミノブチレート (ST 1448)
Ｒ-アミノカルニチンイソブチルエステルクロライド塩酸塩
Ｒ-アミノカルニチン分子内塩(3 g, 18.72 mmol)をイソブタノール (120 ml)に溶解し、氷浴で冷却した。気体のHClを、完全に飽和し、混合物を浄化するまで溶液に通気した。溶液を一晩還流した(浴温130℃)。溶媒を真空蒸発させ、残存物をEt2Oで粉砕した。5.1 gの白色固体を得た。
収率= 95%;
1H-NMR (200 MHz; D2O):
δ: 4.3 (m, 1H), 4.0 (d, 2H), 3.8 (d, 2H), 3.2 (s, 9H), 3.1 (m, 2H), 2.0 (m, 1H), 0.9 (d, 6H).
元素分析: 期待された式 C11H26Cl2N2O2に対応。
K.F. = 1% 水.
【００９３】
Ｒ-４-トリメチルアンモニウム-３-(トランス-β-スチレンスルホニル)-アミノブチレート
Ｒ-アミノカルニチンクロライドイソブチルエステル、塩酸塩(1 g, 3.46 mmol)の無水ジクロロメタン溶液(5 ml)を、3 mlの無水ジクロロメタンに懸濁したトリエチルアミン(2.65 ml, 19mmol)およびトランス-β-スチレンスルホニルクロライド(1.753 g, 8.65 mmol)と共に0℃で添加した。混合液を攪拌下３日間、室温に置いた。溶媒を乾燥状態まで蒸発させ、残存物をエチル酢酸(100 ml)で処理し、トリエチルアミンヒドロクロライドの白色沈殿を真空濾過により溶液から分離した。エチル酢酸溶液を真空乾燥させ、次いで71 mlの1N NaOHを添加してイソブチルエステルを加水分解し、懸濁液を攪拌下、一晩、室温に放置した。懸濁液を蒸発および真空乾燥させ、固体の残存物をオイル-真空下で完全に乾燥させ、メタノールで処理し、メタノールを溶離剤として用いるシリカゲルクロマトグラフィーカラムにより精製した, 565 mgの生成物を得た。
収率 50%
1H-NMR (300 MHz; CD3OD):
δ: 7.8 (d, 1H), 7.5 (m, 5H), 7.3 (d, 1H), 4.3 (m, 1H), 3.4 (m, 2H), 3.2 (s, 9H), 2.4 (d, 2H).
元素分析: 期待された式 C15H22N2O4Sに対応。
ESI Mass = 327 [(M+H)+]
【００９４】
薬理学的活性
CPT阻害活性の測定
Kerner, J. & Bieber, L.L. (1990) Biochemistry 29: 4326-34に開示される方法をほぼそのまま用いて、通常通り給餌したフィッシャーラットの肝臓または心臓から得た新鮮なミトコンドリア調製物におけるCPTの阻害を評価した。ミトコンドリアを肝臓または心臓から単離し、75 mMのスクロースバッファー、1 mM EGTA、 pH 7.5中に懸濁した。50μMの[14C] パルミトイル-CoA (比放射能 10,000 DPM/mole)および10 mMのL-カルニチンを含む100 μlのミトコンドリア懸濁液を37℃で、被験生成物の数量濃度(0-3 mM)の存在下でインキュベートした。反応時間: 1分。
表１は、測定されたIC50を示す。
本発明の化合物は、EP 0 574 355に開示される実施例１の参考化合物SDZ-CPI-975の阻害活性よりも高い阻害活性を有する。
【００９５】
【表１】
表１
ラットの肝臓のミトコンドリアにおけるCPT1阻害曲線のIC50
0005127093.tif 000003
【００９６】
オレエート誘導β-ヒドロキシブチレート生成の測定
β-ヒドロキシブチレートの生成は、CPTの活性の指標である。実際には、ミトコンドリアのβ酸化の最終産物であるケトン体の生成が、CPTの活性に関連している。
Venerandoら(Am. J. Physiol. 266:C455-C461, 1994)による方法に従って得たミトコンドリア調製物を用いた。肝細胞を37℃で、pH 7.4のKRB重炭酸塩バッファー、6 mM グルコース、1% BSA中、O2/CO2 95/雰囲気中、 2.5x106 細胞/mlでインキュベートした。異なる濃度の試験化合物を用いた４０分間のインキュベーションの後、一回目のサンプルセットを採取し(Ｔ0分)、オレエートを添加した(ＫＲＢ+ＢＳＡ1.4％中１mMの終濃度)。２０分後、２回目の回収を行った(Ｔ20分)。
表２は結果を示す。データは、２回行われた３つの異なる実験の平均である。
本発明の化合物は、EP 0 574 355に開示される実施例１の参考化合物SDZ-CPI-975の阻害活性よりも高いβ-ヒドロキシブチレート阻害活性を有する。
【００９７】
【表２】
表２
ラットの肝細胞におけるβ-ヒドロキシブチレート生成についてののＣＰＴ１阻害曲線のＩＣ50
0005127093.tif 000004
【００９８】
ＣＰＴインヒビターで処置した断食ラットの血清中のグルコースおよびβ-ヒドロキシブチレート
通常通り給餌したフィッシャーラットを２４時間断食させ、その後試験化合物で処置した。処置の１時間後、動物を屠殺し、グルコースおよびβ-ヒドロキシブチレートの血清濃度を測定した。
表３は結果を示す。化合物ＳＴ１３２６は、１４．５ｍｇ／２ｍｌ／ｋｇを投与し、他の試験化合物に関しては、投与量は、ＳＴ１３２６の投与量と同量にした。
【００９９】
【表３】
0005127093.tif 000005
【０１００】
ＣＰＴインヒビターで処置した糖尿病の動物におけるグルコースとインシュリンのレベル
５週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊオスのラットを、Ｃｈ．Ｒｉｖｅｒより得た。標準条件(２２±２℃；５５±１５％湿度；１５-２０／時間の空気の入れ替え；１２時間の明暗サイクル、７００−１９００ルクスを用いる)にて、４ＲＦ２１フィードストック(Mucedola)を用いる通常の食餌を与えて順化させた１０日後、(８．３０ａ．ｍ．から４．３０ｐｍまで断食させて)血糖を吸収後状態にコントロールした。尾の末端を切断して血液を回収した。自動分析装置Cobas Mira Sを用い、グルコースGDHキット(Roche)を用いて、血液の酸性上清(ＨＣＬＯ４０．３７５Ｎ)中のグルコースを分析した。
動物を各２６匹のマウスの２グループに分け、高脂肪および低脂肪の食餌をそれぞれ与えた。
食餌開始から２ヶ月後、血糖を出発法に従い試験した。食餌開始から約３ヶ月後、血糖を出発法に従い試験し、血漿のインシュリンレベルも(尾の末端切除からの血液回収にて)［125I］ラットインシュリンキット(Amersham)を用いて測定した。
【０１０１】
低脂肪餌を給餌した１０匹のマウスの１グループと高脂肪餌を給餌した２つの１０匹のマウスのグループを選択した。高脂肪食餌を与えた２グループの一方には、ST 1327を脱イオン水中、45 mg/Kgの投与量で(経口で、１日２回, 8.30 a.m.と5.30 p.m.に)投与した。投与体積は10 ml/Kgであった。２つの残りのグループは、ビヒクルのみで処置した。高脂肪または低脂肪の食餌は、治療期間中、ずっと継続した。
処置の２０日後に、血糖と血漿インシュリンを測定した。処置の４３日後、最終処置後８時間の、(8.30 a.m.-4.30 p.m.断食させた)吸収後状態時に動物を断頭により屠殺した。血液を回収し、血清を遠心分離により分離し、- 80℃で保存した。肝臓、心臓および骨格筋(上肢)をさらに抽出し、ドライアイス−アセトン中で凍らせ、- 80℃で保存した。
高脂肪の食餌は、低脂肪の食餌に関して、体重、血糖およびインシュリンの増加を測定した。
ST 1327を用いた処置の２０日後、グルコースとインシュリンのレベルは懸著に低下した。
表４は結果を示す。
【０１０２】
表４
【表４】
0005127093.tif 000006
ステューデンツｔテスト、*および**は、高脂肪食餌に対してｐ＜０．００１およびｐ＜０．０１をそれぞれ示す。()は事例数を示す。
これらの結果は、本発明による化合物が断食条件において血糖症をコントロールするのに有効であることを示す。これは、肝臓での糖新生が断食期間(すなわち、夜間休息)中に起こる糖尿病の治療において重要な側面である。
【０１０３】
心筋虚血への、CPTインヒビターの効果
本発明の化合物は、虚血、詳細には心筋の虚血の治療にも有効である。
この目的ために、Charles-Riverにより提供された、体重が２００-２２５ｇのオスのウィスターラットを、23°+/- 1℃の一定温度、50+/- 10%の相対湿度、１２時間の明-暗サイクルに置き、4RF21のペレット(Mucedola)、水道水を無制限に与えた。
動物を、ナトリウムペントバルビタールを70 mg/Kg i.p.の投与量で用いて麻酔した。心臓をすぐに取り出し、冷クレブス-ヘンセライト(Krebs-Henseleit)溶液に入れ、大動脈へカニューレ挿入を行い、次いでLangendorff法に従い37℃で100 cmの水圧を用いて潅流した。
【０１０４】
還流媒質(Krebs-Henseleit)はpH 7.4で、128 mM NaCl, 4.7 mM KCl, 1 mM MgCl2, 0.4 mM Na2HPO4, 20.2 mM NaHCO3, 1.3 mM CaCl2, 5 mM グルコースから成る。媒質は、常にカルボゲン(carbogen) ( 95% O2, 5% CO2)で酸素処理した。
「順化」期間の１０分後、心臓を再循環装置(recirculant apparatus)中で２０分間、アルブミンと錯体を形成したパルミテート(０．６ｍM)(フラクションV、脂肪酸を含まない)を含む同じ媒質と共に、本発明によるCPTインヒビターを用いて、または用いずに潅流した。例として、ST 1364を１および５μMの濃度で用いた。その期間の後、潅流静水圧を１００ｃｍから２０ｃｍへと３０分間低下させることにより虚血を誘導した。出発圧力条件(１００ｃｍ)に再度設定して再潅流を開始した。心臓は２０分間コントロールし、インヒビターは再潅流期の間も存在させた。
ラクテートデヒドロゲナーゼ(ＬＤＨ)の放出を、通常の酸素処理条件における流出液、虚血期間の３０分で回収した媒質、および、再潅流中１．５、１０、１５および２０分で回収した媒質について測定した。
【０１０５】
５μＭの投与量のＳＴ１３６４の存在下で、流出物中のＬＤＨの放出は明らかに減少し、再潅流期間中の結果は有意に低下している(図１)。この結果は、処置されたものがコントロールに比べ、再潅流による細胞の損傷が少ないことを示唆する。
統計学的分析は、ステューデントの非対データのための「ｔ」テストにより行った。
各グループの事例数は、６である(ｎ＝６)。
以下の表５は結果を示す。
【０１０６】
表５
【表５】
0005127093.tif 000007
【０１０７】
統計学的分析は、ステューデントの非対データのための「ｔ」テストにより行った。*ｐ＜０．０５対コントロール；**ｐ＜０．０１対コントロール。
各グループの事例数は、６である(ｎ＝６)。
５μＭの投与量のＳＴ１３６４の存在下で、流出物中のＬＤＨの放出は明らかに減少し、再潅流期間中の結果は有意に低下している(図１)。この結果は、処置されたものがコントロールに比べ、再潅流による細胞の損傷が少ないことを示唆する。
【０１０８】
他の側面において本発明は、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物の、目的の疾患の治療に適した他の活性成分の少なくとも一つとの組み合わせを提供する。
糖尿病の治療または予防において、本発明は、任意に適当な周知の活性成分、例えばスルホニルウレア、Ｌ-カルニチン、フィブレートおよび、ペルオキシソーム増殖因子活性化レセプター(ＰＰＡＲ-α)の他のアゴニスト、９-シスレチノイン酸活性化レセプターのアゴニスト、例えばＰＸＲ、詳細には、α-、β-およびγ-イソ型、ＨＭＧ-ＣｏＡレダクターゼインヒビター、β-シトステロールインヒビター、コレステロールアシルトランスフェラーゼインヒビター、ビグアニド、コレスチルアミン、アンジオテンシンＩＩアンタゴニスト、メリンアミド、ニコチン酸、フィブリノゲンレセプターアンタゴニスト、アスピリン、α-グルコシダーゼインヒビター、インシュリン分泌促進物質、インシュリンおよびグルカゴン様ペプチド(インクレチン)およびＰＰＡＲ-γのアゴニスト(チアゾリジンジオンその他)と組み合わせた式(Ｉ)の化合物を提供する。
肥満の治療または予防において、本発明は、適当な周知の活性成分、例えばフェンフルラミン、デクスフェンフルラミン、フェンチラミン、αβ-３-アドレナリンレセプターアゴニストと任意に組み合わせた式(Ｉ)の化合物を提供する。
高トリグリセリド血症の治療または予防において、本発明は、適当な周知の活性成分と任意に組み合わせた式(Ｉ)の化合物を提供する。
【０１０９】
本発明による化合物はまた、高いコレステロールレベルの治療または予防および、ＨＤＬの血漿レベルを変更することにも有用であり、従ってこれらの改変された血漿レベルに関連する疾患の治療または予防において利益をもたらす。関連する疾患の例としては、高血圧症、肥満、アテローム性動脈硬化症、糖尿病および関連疾患が挙げられる。本発明の化合物の少なくとも一つを含む薬剤は、前記疾患の治療または予防に有効なその他の活性成分の少なくとも一つを組み合わせて含んでもよい。他の活性成分の例としては、フィブレート、例えばクロフィブレート、ベザフィブレートおよびジェムフィブロジルおよび、他のＰＰＡＲ-αアゴニスト；コレステロール生合成のインヒビター、例えばＨＭＧ-ＣｏＡレダクターゼインヒビター、例えばスタチン、すなわちロバスタチン、シンバスタチンおよびプラバスタチン；コレステロール吸収のインヒビター、例えばβ-シトステロールおよび(アシルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ)インヒビター、例えばメリナミド；アニオン交換樹脂、例えばコレスチルアミン、コレスチポールまたは架橋デキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体；ニコチニルアルコール、ニコチン酸またはその塩；ビタミンＥ；チロミメティクスおよびＬ-カルニチンが挙げられる。
【０１１０】
本発明の化合物は、治療的有効量の少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物を医薬上許容されるビヒクルおよび／または賦形剤と混合して含む医薬組成物の形で経口投与することができる。経口医薬組成物の例としては、舌下投与を含む硬質または軟質カプセル、錠剤、アンプル、サシェ、エリキシル、懸濁剤、シロップなどが挙げられる。これとは別に、本発明による活性成分は、治療食に直接組み込まれてもよい。そのような治療的に有用な組成物中の活性化合物の量は、効果的な投与量が得られるようなものである。活性化合物は、鼻腔内に、例えば液体ドロップまたはスプレーとして投与することもできる。
錠剤、ピル、カプセルなどは、結合剤、例えばトラガカントゴム、アカシア、コーンスターチまたはゼラチン；賦形剤、例えばジカルシウムホスフェート；崩壊剤、例えばコーンスターチ、ポテトスターチ、アルギン酸；潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム；および甘味剤、例えばスクロース、ラクトースまたはサッカリンを含んでもよい。投与単位製剤がカプセルである場合、それは、前記のタイプの物質に加えて脂肪オイルのような液体キャリアを含んでもよい。
様々な他の物質が、コーティングとしてまたは、投与単位の物理的形態を変えるために存在してもよい。例えば、錠剤はセラック、砂糖またはその両方でコーティングしてもよい。シロップまたはエリキシルは活性成分に加えて、甘味剤としてスクロース、保存料としてメチルおよびプロピルパラベン、色素および、チェリー風味またはオレンジ風味のような風味剤を含んでもよい。
【０１１１】
これらの活性成分は非経口で投与してもよい。これらの活性化合物の溶液または懸濁液は、パイロジェンフリーの水中に調製することができる。
注入使用に適した医薬製剤には、無菌水溶液または分散液および、無菌注射溶液または分散液の即席調製のための分散物および無菌粉末が含まれる。
所望される場合あるいは必要と思われる場合、医薬組成物は制御放出製剤であってもよい。これらの製剤を調製するための様々な技術は公知である。
医薬組成物に関しては、「レミントンの医薬化学ハンドブック(Remington's Pharmaceutical Sciences Handbook)、Mack Pub. N. Y. USA」が一般的に参照される。
【０１１２】
用いられる活性成分の有効投与量は、用いられる特定の化合物、投与様式、治療される症状および治療される症状の重篤度により変化しう得る。
組成物は、以下に列挙するものと同じ一般的方法で作成し、投与する。本発明の化合物は、所望の治療目的により、単独でまたは、１またはそれ以上の追加的活性剤と組み合わせて効果的に使用することができる。組み合わせ治療には、式Ｉの化合物と１またはそれ以上の追加的活性剤を含む単一医薬投与製剤の投与ならびに、式Ｉの化合物と各活性剤のそれぞれ別々の医薬投与製剤における投与が含まれる。例えば式Ｉの化合物とＨＭＧ-ＣｏＡレダクターゼインヒビターは、錠剤またはカプセルのような単一経口投与組成物にて患者に一緒に、または各薬剤を別々の経口投与製剤にて投与することができる。別々の投与製剤を用いる場合、式Ｉの化合物および１またはそれ以上の追加的活性剤を実質的に同じ時間に、すなわち同時に、または続けて投与することができ、組み合わせ治療は全てのこれらの方法を含むと理解される。
【０１１３】
アテローム性動脈硬化症の組み合わせ治療または予防の例は、式Ｉの化合物が１またはそれ以上の次の活性剤を組み合わせて投与するものである。抗高脂血症剤；血漿ＨＤＬ-上昇剤；抗高コレステロール剤、例えばコレステロール生合成インヒビター、例えばＨＭＧ-ＣｏＡレダクターゼインヒビター、ＨＭＧ-ＣｏＡシンターゼインヒビター、スクアレンエポキシダーゼインヒビターまたは、スクアレンシンセターゼインヒビター(スクアレンシンターゼインヒビターとしても知られる)；アシル-補酵素Ａ；コレステロールアシルトランスフェラーゼ(ＡＣＡＴ)インヒビター、例えばメリンアミド；プロブコール；ニコチン酸およびその塩およびナイアシンアミド；コレステロール吸収インヒビター、例えばβ-シトステロール；胆汁酸金属イオン封鎖剤アニオン交換樹脂、例えばコレスチルアミン、コレスチポールまたは架橋デキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体；ＬＤＬ(低密度リポタンパク質)レセプター誘導物質；フィブレート、例えばクロフィブレート、ベザフィブレート、フェノフィブレートおよびジェムフィブロジルおよび他のＰＰＡＲ-αアゴニスト、Ｌ-カルニチン；ビタミンＢ6および医薬上許容されるそれらの塩；ビタミンＢ12；抗酸化ビタミン、例えばビタミンＣおよびＥおよびβカロテン；β-ブロッカー；アンジオテンシンＩＩアンタゴニスト；アンジオテンシン変換酵素インヒビター；および血小板凝集インヒビター、例えばフィブリノゲンレセプターアンタゴニスト(すなわちグリコプロテインＩＩｂ／ＩＩＩａフィブリノゲンレセプターアンタゴニスト)およびアスピリン。式Ｉの化合物は、１以上の追加的活性剤と組み合わせて投与することができる。
【０１１４】
組み合わせ治療のもう一つの例は、肥満または肥満に関連する疾患の治療に見ることができ、式Ｉの化合物は例えば、フェンフルラミン、デキスフェンフルラミン、フェンチルアミンおよびβ-３アドレナリンレセプターアゴニストおよびＬ-カルニチンと組み合わせて効果的に用いることができる。
組み合わせ治療のもう一つの例は、糖尿病および関連疾患の治療に見ることができ、式Ｉの化合物は、例えばスルホニルウレア、ビグアニド、α-グルコシダーゼインヒビター、他のインシュリン分泌促進物質、インシュリンおよびグルカゴン様ペプチド(インクレチン)およびＰＰＡＲ-γのアゴニスト(チアゾリジンジオンその他)ならびにアテローム性動脈硬化症の治療に関する前記の活性剤と組み合わせて効果的に用いることができる。
【図１】
0005127093.tif 000009
【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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