(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
微小流路が形成された基板と、前記微小流路上で前記基板と接して前記基板上に傾斜して載置されたカバープレートと、前記基板と前記カバープレートの最大隙間付近に液体を滴下する滴下手段とを備えた微小化学分析システムを用いて、前記基板と前記カバープレートの間に試料を配置し、前記滴下手段から溶媒を滴下し前記試料を前記溶媒に溶解させるとともに、試料成分を溶解した溶液を毛細管現象により前記微小経路に選択的に導き、前記微小経路上で前記試料成分を分離することを特徴とする試料成分の分離方法。
【請求項２】
前記カバープレートは、前記基板上に載置されたスペーサ上に載置されたことを特徴とする請求項１記載の試料成分の分離方法。
【請求項３】
前記滴下手段は、重力により液体を間欠的に滴下するように構成された点滴針と、この点滴針に供給される液体を貯留する液溜め部とを備えたことを特徴とする請求項１又は２記載の試料成分の分離方法。
【請求項４】
前記微小流路の少なくとも一部がカバー部材により覆われ、このカバー部材の端部において前記基板と前記カバープレートが接していることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項記載の試料成分の分離方法。
【請求項５】
前記基板と前記カバープレートの最大隙間付近に滴下された液体が、毛細管現象により前記微小経路に導入されるように構成されたことを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項記載の試料成分の分離方法。
【請求項６】
前記請求項１〜５のいずれかに記載の試料成分の分離方法を用いて前記微小経路上で分離された試料成分を、マイクロプローブを使用して分析することを特徴とする試料成分の分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、微小流路が形成された基板上で試料成分の分離、分析等を行うための微小化学分析システムを用いた試料成分の分離、分析方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、試料成分の分離、分析等を行うためのシステムとして、μ−ＴＡＳ（Total Analysis System）又はラボオンチップなどと呼ばれている微小化学分析システムの開発が盛んである（非特許文献１）。このシステムは、基板上に形成された微小流路に液体試料を流し込み、基板上で試料成分の分離、抽出を行い、又は試料成分の反応、合成を行い、さらには、分離後や反応後の試料成分の分析を行うことができるように構成されている。
【０００３】
そして、この微小化学分析システムは、ごく微量の試料を用いて効率的に分離、分析等を行うことができるという特徴を有し、あらゆる分野において、試料成分の分離、分析等の効率を大幅に向上させることができるものと期待されている。
【非特許文献１】マイクロ・ナノ熱流体ハンドブック編集委員会編「マイクロ・ナノ熱流体ハンドブック」エヌ・ティー・エス ２００６年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ところで、この微小化学分析システムには、液体試料を微小流路に導くためのマイクロポンプが必須である。そして、このマイクロポンプの開発も盛んに行われている。しかし、このマイクロポンプは外部動力式であり、システムの構成がやや大掛かりになってしまうという問題があった。
【０００５】
そこで、本発明は、外部動力式のマイクロポンプを用いることなく液体試料を微小流路に導くことのできる微小化学分析システムを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
以上のような実状に鑑み、鋭意検討の結果、基板上に形成された微小流路の上に、カバープレートを基板に対してわずかに傾斜をつけて配置し、基板とカバープレート間の最大隙間付近に液体を滴下すると、毛細管現象によって液体が微小流路に導かれることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００７】
すなわち、本発明の試料成分の分離方法は、微小流路が形成された基板と、前記微小流路上で前記基板と接して前記基板上に傾斜して載置されたカバープレートと、前記基板と前記カバープレートの最大隙間付近に液体を滴下する滴下手段とを備えた微小化学分析システムを用いて、前記基板と前記カバープレートの間に試料を配置し、前記滴下手段から溶媒を滴下し前記試料を前記溶媒に溶解させるとともに、試料成分を溶解した溶液を毛細管現象により前記微小経路に選択的に導き、前記微小経路上で前記試料成分を分離することを特徴とする。
【０００８】
また、前記カバープレートは、前記基板上に載置されたスペーサ上に載置されたことを特徴とする。
【０００９】
また、前記滴下手段は、重力により液体を間欠的に滴下するように構成された点滴針と、この点滴針に供給される液体を貯留する液溜め部とを備えたことを特徴とする。
【００１０】
また、前記微小流路の少なくとも一部がカバー部材により覆われ、このカバー部材の端部において前記基板と前記カバープレートが接していることを特徴とする
また、前記基板と前記カバープレートの最大隙間付近に滴下された液体が、毛細管現象により前記微小経路に導入されるように構成されたことを特徴とする。
【００１１】
本発明の試料成分の分析方法は、本発明の試料成分の分離方法を用いて前記微小経路上で分離された試料成分を、マイクロプローブを使用して分析することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の微小化学分析システムを用いた試料成分の分離、分析方法によれば、外部動力式のマイクロポンプを用いることなく、基板とカバープレートの間の毛細管現象を利用することで、液体試料を微小流路に導くことができる。したがって、システムの構成をコンパクトにすることができる。
【００１３】
また、試料成分の分離、分析を簡便に行うことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１５】
本発明の微小化学分析システムの一実施例の概略を示す図１において、１は基板であり、微小流路としての流路溝２が形成されている。基板１は、流路溝２が形成された面が平坦になっており、例えば、ガラス、シリコンウエハー、ＺｎＳｅ、ステンレスなどの金属から形成されている。なお、この基板１の大きさは、一辺が１ｃｍ〜１０ｃｍ程度のものが取り扱いの上からも適している。また、後述するように、分離した試料成分をそのままマイクロプローブを使用して分析する場合には、そのマイクロプローブに対して擾乱となるシグナルが出ない材料からなる基板１を用いるのが好ましい。例えば、赤外分光とラマン分光を併用する場合には、シリコンウエハーに金などの金属を蒸着又はスパッタしたものが好適に用いられる。
【００１６】
基板１上には、流路溝２上で基板１と接してカバープレート３が傾斜して載置されている。そして、基板１とカバープレート３の最大隙間は１ｍｍ以下、好ましくは０．１〜０．８ｍｍの範囲に調整されており、基板１とカバープレート３の最大隙間付近に滴下された液体が、毛細管現象により流路溝２に導入されるように構成されている。基板１上には小粒状のスペーサ４が載置されており、スペーサ４上にカバープレート３が載置されている。なお、スペーサ４がカバープレート３の中心から少しずれた位置に接しており、これによりカバープレート３が傾斜している。
【００１７】
カバープレート３は、基板１に面する側、すなわち、液体が接する面が平坦なものであれば特定のものに限定されないが、透明で基板１上の液体の様子や、後述する試料、試料溶液の挙動が観察できるものが望ましい。例えば、光学顕微鏡観察に用いられるカバーグラスが好適に用いられる。また、カバープレート３には加工が施されていても構わない。例えば、カバープレート３の種類やコーティングを変化させてやることで、基板１上の液体の移動速度を変化させることができる。
【００１８】
基板１とカバープレート３の最大隙間付近、すなわち、カバープレート３の基板１と接した端部とは反対側の端部付近には、点滴針５の先端が位置している。また、点滴針５の基端には、点滴針５に供給される液体を貯留する液溜め部６が接続している。そして、これら点滴針５と液溜め部６により、基板１上に液体を滴下するための滴下手段が構成されている。なお、この滴下手段は、重力により液体を間欠的に滴下するように構成されている。また、点滴針５の先端は、基板１とカバープレート３の間に確実に液体を導くために、基板１とカバープレート３の最大隙間から水平方向に０．１〜１ｍｍ離れ、かつ、基板１の上面から垂直方向に０．３〜１．１ｍｍ離れた位置に配置されている。
【００１９】
また、流路溝２の両端を除く部分は、カバー部材７により覆われている。カバー部材７の一方の端部において、基板１とカバープレート３が接している。また、カバー部材７の一方の端部には、カバープレート３が接している。これにより、基板１とカバープレート３の間にある液体が毛細管現象により流路溝２に移動し、さらに、流路溝２中の液体が、毛細管現象によりカバープレート３側の流路溝２の端部から、その反対側の端部へ向けて移動するようになっている。なお、流路溝２の端部がカバー部材７で覆われていないのは、液体の移動を妨げないようにするためである。
【００２０】
つぎに、この微小化学分析システムを用いた試料成分の分離方法及び分析方法について説明する。
【００２１】
まず、基板１とカバープレート３の間に試料Ｓを配置する。なお、試料Ｓを配置することによって基板１とカバープレート３の隙間を調整できるときは、スペーサ４を省略してもよい。また、後述の操作により試料Ｓの成分を流路溝２に導くために、試料Ｓは図１に示すように流路溝２の端部付近に配置するか、流路溝２中に配置するのが好ましい。試料Ｓを基板１とカバープレート３の最大隙間付近に配置すると、後述の溶媒の滴下の操作を行ったときにマランゴニ効果によって試料Ｓからの溶出成分が流路溝２と反対の向きに逆流してしまい、好ましくないからである。
【００２２】
そして、点滴針５から溶媒を滴下する。この溶媒は、分析する試料に応じて選択したものを用いるのが好ましい。溶媒を滴下すると、基板１上に落ちた溶媒の液滴は、基板１とカバープレート３の隙間から毛細管現象によって吸い込まれて行く。吸い込まれた溶媒はカバープレート３の下に留まる。滴下する液滴の数を順次増やしていき、基板１とカバープレート３の間が溶媒でほぼ満たされた状態になると、溶媒は毛細管現象によって流路溝２に移動するとともに、カバープレート３の周縁部及び流路溝２の隙間のある端部で生じる気化によって減少する。このとき、基板１とカバープレート３の間が溶媒でほぼ満たされた状態に保つように、溶媒の滴下量を調節する。
【００２３】
溶媒に溶解した試料Ｓからの溶出成分は、流路溝２に向かって選択的に流れて行く。これは、カバープレート３の周縁部における溶媒の気化量よりも、毛細管現象及び流路溝２の隙間のある端部で生じる気化による流路溝２への溶媒の移動量の方が大きいからである。
【００２４】
細長い流路溝２中を移動するにしたがって、試料Ｓの溶出成分は、クロマト効果により流路溝２中で流路溝２の長さ方向に分離する。流路溝２に溶媒が満ちたところで、点滴針５からの滴下を終了する。このまま放置して溶媒を蒸発させると、流路溝２の異なった部分に試料Ｓの異なった成分が分布した状態となる。
【００２５】
カバープレート３を取り外した後、基板１上の流路溝２に析出した試料Ｓの成分を、そのままマイクロプローブを用いて分析する。このマイクロプローブとしては、顕微赤外分光分析、ラマン分光、蛍光Ｘ線分析、Ｘ線マイクロアナライザー分析、光電子分光分析、オージェ電子分光などをもちいることができ、或いは飛行時間型質量分析装置を用いることができる。これにより、試料Ｓの成分の組成や化学構造などを解析することが可能である。
【００２６】
以上のように、本実施例の微小化学分析システムは、微小流路としての流路溝２が形成された基板１と、前記流路溝２上で前記基板１と接して前記基板１上に傾斜して載置されたカバープレート３と、前記基板１と前記カバープレート３の最大隙間付近に液体を滴下する滴下手段としての点滴針５とを備えている。したがって、外部動力式のマイクロポンプを用いることなく、基板１とカバープレート３の間の毛細管現象を利用することで、液体試料を流路溝２に導くことができる。したがって、液体を流路溝２に導入するための基板１面上の面内送液を動力を使わず行うことができ、システムの構成をコンパクトにすることができる。
【００２７】
また、前記カバープレート３は、前記基板１上に載置されたスペーサ４上に載置されており、基板１とカバープレート３の隙間を簡便に調整することができる。
【００２８】
また、前記滴下手段は、重力により液体を間欠的に滴下するように構成された点滴針５と、この点滴針５に供給される液体を貯留する液溜め部６とを備えており、簡便に液体を基板１上に供給することができる。
【００２９】
また、前記流路溝２の少なくとも一部がカバー部材７により覆われ、このカバー部材７の端部において前記基板１と前記カバープレート３が接しており、確実に液体を流路溝２に導くことができる。
【００３０】
また、前記基板１と前記カバープレート３の最大隙間付近に滴下された液体が、毛細管現象により前記流路溝２に導入されるように構成されており、システムを簡単な構成とすることができる。
【００３１】
本実施例の試料成分の分離方法は、本実施例の微小化学分析システムを用いて、前記基板１と前記カバープレート３の間に試料Ｓを配置し、前記滴下手段としての点滴針５から溶媒を滴下し前記試料Ｓを前記溶媒に溶解させるとともに、試料成分を溶解した溶液を毛細管現象により前記流路溝２に選択的に導き、前記流路溝２上で前記試料成分を分離するものであり、試料成分の分離を簡便に行うことができる。
【００３２】
本実施例の試料成分の分析方法は、本実施例の試料成分の分離方法を用いて前記流路溝２上で分離された試料成分を、マイクロプローブを使用して分析するものであり、試料成分の分析を簡便に行うことができる。
【００３３】
以上、本発明の一実施例について説明したが、本発明は上記実施例に限定されるものでなく、種々の変形実施が可能である。
【００３４】
例えば、上記のように基板１とカバープレート３の隙間に試料を配置し溶媒を導入する代わりに、予め試料Ｓ中の可溶成分を溶媒抽出して調製した試料溶液を基板１とカバープレート３の隙間に導入してもよい。
【００３５】
この場合、前記点滴針５から試料成分を溶解した溶液を滴下し、前記溶液を毛細管現象により前記流路溝２に選択的に導き、前記流路溝２上で前記試料成分を分離することになるが、上記実施例と同様に試料成分を分離することができる。このようにすることによって、不溶成分の割合が多い試料であっても、効率よく試料成分の分離を行うことができる。
【００３６】
また、本発明の微小化学分析システムは、上記の試料成分の分離、分析に限らず、試料成分の反応、合成などにも用いることができる。したがって、基板上の流路溝は上記実施例で示したものに限られず、例えば、流路溝を複数形成してもよく、枝分かれした形状としてもよい。
【００３７】
以下、より具体的に本発明の微小化学分析システム及びこれを用いた試料成分の分離、分析方法について説明する。
【実施例１】
【００３８】
健康補助食品として市販されているカプセル状の「ブルーベリーエキス」を割ると、中から粘度の高い液状物が出てきた。その様子を図２に示す。この液状物を試料とし、図１に示す構成の装置を用いて、分離操作を行った。なお、基板１には、表面に幅１ｍｍ、深さ０．３ｍｍの流路溝２を形成し、その上にクロミウム膜をスパッタにより形成したものを用いた。
【００３９】
基板１の流路溝２の端部から３ｍｍ程度離れた位置に試料Ｓを直径０．５ｍｍ程度の大きさに取り分け、放置して固めた。その様子を図３に示す。そして、さらに基板１上にスペーサ４を置き、その上にカバープレート３を載置した。そして、点滴針５から溶媒としてエタノールを滴下した。
【００４０】
このとき、試料Ｓから溶出した成分が移動する様子を図４に示す。なお、図４中、左上が溶媒を基板１とカバープレート３の間に充填した初期状態で、その後の経過を左上から右上、さらに左下から右下の順に示している。時間の経過とともに、溶出した試料成分が流路溝２の端部に吸い込まれて様子が確認できる。
【００４１】
そして、点滴針５からの滴下を終了し、このまま放置して溶媒を蒸発させた。このとき、流路溝２には、赤色に着色した部分と、黄色に着色した部分が分離していた。カバープレート３を取り外した後、基板１上の流路溝２に析出した試料Ｓの成分を、そのままマイクロプローブを用いて分析した。
【００４２】
図５に、流路溝２に残った赤色に着色した部分をラマン分光分析した結果を示す。赤色に着色した部分は、アントシアニン成分であることが確認された。
【００４３】
また、図６には、黄色に着色した部分をラマン分光分析した結果を示す。黄色に着色した部分は、カロテノイドであることが確認された。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】本発明の微小化学分析システムの一実施例を示す概略図である。
【図２】実施例１において用いた試料の写真である。
【図３】実施例１における基板上に固化させた試料の写真である。
【図４】実施例１における試料の溶出の様子を示す写真である。
【図５】実施例１における赤色に着色した部分のラマン散乱スペクトルのチャートである。
【図６】実施例１における黄色に着色した部分のラマン散乱スペクトルのチャートである。
【符号の説明】
【００４５】
１  基板
２  流路溝（微小流路）
３  カバープレート
４  スペーサ
５  点滴針（滴下手段）
６  液溜め部
７  カバー部材
【図５】
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【図６】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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