(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
第２の管状領域と流体連通する第１の管状領域を備え、該第１の管状領域がヒト被験体への挿入用の前端を備え、前記第２の管状領域が流体を収容する手段と流体連通する後端を備え、前記第１の管状領域が前記第２の管状領域の外径よりも小さな外径を有し、前記第１の管状領域の外径が、０．６ｍｍ〜１．２ｍｍであり、前記第１の管状領域が前記第２の管状領域の内径よりも小さな内径を有し、前記第１の管状領域の内径が、約０．２ｍｍ以上であり、前記第１の管状領域及び前記第２の管状領域が、合わせて１５０ｍｍ〜５００ｍｍの長さを有し、前記第１の管状領域の長さが、約３０ｍｍ〜約１００ｍｍである、ヒト経膣卵母細胞回収針であって、使用の際、前記第２の管状領域は、膣を通り抜けるのに適した長さを有し、前記第１の管状領域は、前記第２の管状領域を前記ヒト被験体の組織に穿通させることなく前記卵母細胞に接触するために卵母細胞が位置付けられている組織を穿通するのに適した長さを有する、ヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項２】
前記第１の管状領域の内径が、約０．４ｍｍ以上である、請求項１に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項３】
前記第１の管状領域の内径が、約０．６ｍｍ以上である、請求項２に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項４】
前記第２の管状領域の内径が、約０．９ｍｍ以上である、請求項１ないし３のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項５】
前記第２の管状領域の内径が、約１．１ｍｍ以上である、請求項４に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項６】
前記第２の管状領域の内径が、約１．２ｍｍ以上である、請求項５に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項７】
前記第１の管状領域の外径が、０．８ｍｍ〜１．０ｍｍである、請求項１ないし６のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項８】
前記第１の管状領域の外径が、約０．９ｍｍである、請求項７に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項９】
前記第２の管状領域の外径が、約１．１ｍｍ以上である、請求項１ないし８のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１０】
前記第２の管状領域の外径が、約１．２ｍｍ以上である、請求項９に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１１】
前記第２の管状領域の外径が、約１．４ｍｍ以上である、請求項１０に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１２】
前記第１の管状領域及び前記第２の管状領域が、テーパ領域を介して接続されている、請求項１ないし１１のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１３】
前記第１の管状領域及び前記第２の管状領域が、合わせて２００ｍｍ〜４００ｍｍの長さを有する、請求項１ないし１２のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１４】
前記第１の管状領域の長さが、約４０ｍｍ以上である、請求項１ないし１３のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１５】
前記第１の管状領域の長さが、約６０ｍｍ以下である、請求項１ないし１４のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１６】
前記第１の管状領域が、ステンレス鋼、炭素繊維、硬質プラスチック、セラミック、及びガラスから選択される１つ又は複数の材料から形成される、請求項１ないし１５のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１７】
前記第１の管状領域が、ＡＩＳＩ３０４、ＡＩＳＩ３１６、ＳＩＳ２３４６、及びＳＩＳ２５４３から選択される１つ又は複数のステンレス鋼から形成される、請求項１６に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１８】
前記第２の管状領域が、ステンレス鋼、炭素繊維、硬質プラスチック、セラミック、及びガラスから選択される材料を含む、請求項１ないし１７のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項１９】
前記第２の管状領域が、ＡＩＳＩ３０４、ＡＩＳＩ３１６、ＳＩＳ２３４６、及びＳＩＳ２５４３から選択されるステンレス鋼を含む、請求項１８に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項２０】
前記針が単一の材料片から形成される、請求項１ないし１９のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項２１】
前記ヒト経膣卵母細胞回収針がシングルルーメン針である、請求項１ないし２０のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【請求項２２】
前記ヒト経膣卵母細胞回収針がダブルルーメン針である、請求項１ないし２０のいずれか１項に記載のヒト経膣卵母細胞回収針。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、試料採取針、特に、ヒト被験体からの卵母細胞回収に適した針に関する。本発明は、ヒト被験体から試料、特に卵母細胞を回収する方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
体外受精（ＩＶＦ）は、子がいないことに悩む夫婦を支援するのに一般的な治療介入である。女性被験者の任意の必要なホルモン刺激の後の、ＩＶＦ周期における第１の段階は、卵母細胞の回収すなわち吸引である。ホルモン刺激は、女性内で成熟する卵胞の数の増加につながる。通常の月経周期では、１個又は２個の卵母細胞が生成される。対照的に、上首尾なＩＶＦ周期では、一般的に約５個〜１５個の卵母細胞が成熟する。今日では、ホルモン刺激を全く用いないか又は最小限にしか用いず、その代わりに回収後に卵母細胞を成熟させるか、又は通常は１個又は２個の成熟細胞でＩＶＦ処置には十分であると考えられる自然周期を用いることへの関心が高まっている。
【０００３】
ホルモン刺激の方法とは無関係に、各卵母細胞は卵胞内にある。ＩＶＦ処置中、卵胞は、まだ卵巣内にある間に空にされる。これは通常は経膣的に行われ、これは卵母細胞回収針を用いて膣壁及び卵巣を穿通することを意味する。超音波による卵胞の位置確認後、卵母細胞回収針を用いて各卵胞を刺してこれに入り、続いて、卵母細胞を含有する卵胞液を吸引によって回収する。回収は、陰圧を引き起こすことによって行われる。卵母細胞が吸引のみでは卵胞から放出されない場合、予め温めたフラッシュ溶液を吸引と併用して、卵母細胞を放出し吸引される流体体積を増やすことができる。
【０００４】
ＩＶＦ周期のために卵胞をｉｎ  ｖｉｖｏで空にするのに用いられる卵母細胞回収針は、シングルルーメン又はダブルルーメンを備え得る。ダブルルーメン針は、卵胞から卵母細胞を回収する第１のルーメンと、同時に卵胞に媒体を流し込む第２のルーメンとを有する。これは、フラッシュなしのシングルルーメン針での回収よりも首尾よく卵胞から卵母細胞を放出すると考える人もいる。しかしながら、フラッシュなしでシングルルーメン針を用いる方が一般的である。シングルルーメン針を用いて回収及びフラッシュの両方を行うこともできるが、シングルルーメン針を用いてフラッシュ及び吸引を同時に行うことは不可能である。したがって、フラッシュでシングルルーメン針を用いる場合、卵母細胞が回収される代わりに流し落とされてしまう危険がある。
【０００５】
今日販売されている卵母細胞回収針は、針の全長に沿って均一な外径（ＯＤ）及び内径（ＩＤ）を有する。最も一般的な針は、それぞれ１．６５ｍｍ及び１．４７ｍｍのＯＤに相当する１６ゲージ又は１７ゲージである。これらの針は、例えば、Cook Medical Inc.（Bloomington, IN, USA）、Smiths Medical International（Watford, UK）、及びGynetics Medical Products N.V.（Achel, Belgium）から入手可能である。１８ゲージ（１．２７ｍｍＯＤ）の針が、Smiths Medical Internationalから入手可能である。
【０００６】
卵母細胞回収針の長さは、例えば、用いられる針ガイドのタイプに応じて変わり、針ガイドのタイプはさらに、用いられる超音波トランスデューサのタイプに応じて決まる。通常の針全長は、２００ｍｍ〜４００ｍｍである。
【０００７】
卵母細胞回収針の内径（ＩＤ）すなわち内腔径は、ヒトの場合に約０．１ｍｍ〜０．２ｍｍである卵母細胞の直径よりも大きくなければならない。針のＩＤは、卵母細胞を覆う卵丘細胞塊の移動も可能にするべきである。細い針内で卵母細胞に対して生じる圧力及び
摩擦と同様に、生産及び材料の制限が、ＩＤをどれだけ小さくすることができるかに影響を及ぼす。
【０００８】
回収処置は、主に穿通して空にすべき卵胞の数に応じて、通常は約１０分〜３０分を要する。麻酔及び鎮静を用いなければ、これはかなり難しく、場合によっては女性にとって非常に苦痛な処置である。したがって、処置中に全身麻酔を用いることが国によっては標準である。しかしながら、全身麻酔の使用には医学的危険性が伴い、麻酔医の立ち会いを要件とすることで費用が嵩む。その結果、スカンジナビア諸国等の一部の国は、軽度の鎮静及び／又は局所麻酔下で卵母細胞回収を行う。今日の傾向では、より安価で安全であるため軽度の鎮静及び／又は局所麻酔の使用に向かう診療所が多くなっているが、これは女性にとっての不快感又は疼痛をより大きくする。
【０００９】
針の製造業者は、患者に与える疼痛を小さくするために、より細い卵母細胞回収針を生産することによって処置におけるこの変化に対応してきた。針の太さと被験者が感じる疼痛との間の関係が分かっている（非特許文献１）。この研究では、１６ゲージ及び１８ゲージの２つの針直径の使用を比較した。１６ゲージ針を一方の卵巣で用い、１８ゲージ針を他方の卵巣で用いた。各卵巣で異なる針を用いることで、被験者自身を対照として用いることができた。被験者に対して経度の鎮静を用い、０度〜５度で疼痛を自己評価した。細い針ほどそれに関連して知覚される疼痛が大幅に小さいことが分かった。
【００１０】
疼痛及び疝痛の知覚は、卵母細胞回収処置後の問題でもある。Millerらによる研究（非特許文献２）では、自己評価による疼痛及び疝痛を、卵母細胞回収の３０分後及び２４時間後で記録した。これは、卵母細胞吸引の３０分後及び２４時間後の両方で疼痛及び疝痛があったことを示していた。細い針ほど吸引処置後の疼痛及び疝痛が実際に低減されることを裏付けるデータは現時点ではないが、細い針ほど組織に生じる損傷が少なくなるため、これは期待されるであろう。
【００１１】
上述のように、細い針の方が太い針よりも生じる外傷及び出血が少ない。外傷及び出血は胚の着床に影響を及ぼし得るため、これは有利である。着床は、概して、卵母細胞の回収のわずか２日〜６日後に行われるため、回収プロセス中に外傷が生じた場合、これが適切な着床を妨げる可能性がある。
【００１２】
しかしながら、針が細いほどルーメンも狭くなるため、細い針の使用にはいくつかの欠点もある。例えば、試料、例えば卵母細胞が、細い針のルーメン内で詰まり且つ／又は傷付けられる可能性がある。ヒト卵母細胞のおおよその直径は、０．１ｍｍ〜０．２ｍｍであり、卵丘細胞が卵母細胞を包囲した状態での全体的な細胞塊は、１０ｍｍもの大きさの直径を有し得る（非特許文献１）。したがって、針が細いほど、卵母細胞が針内を進むときに卵母細胞に損傷を与える危険が大きくなる。その結果、用いられる針が細いほど、卵母細胞を傷付ける危険が大きくなることで、ＩＶＦ処置で妊娠に成功する可能性が低くなり得る。
【００１３】
細い針の別の欠点は、所与の陰圧を加える場合に、細い針を通した吸引の方が太い針よりも長時間を要することである。試料（例えば、卵母細胞及び卵胞液）が針内にある時間が長いほど、試料が室温に曝される時間が長くなるため試料の冷却が進む。針ルーメンが細いほど、針壁と試料との間の接触面積も大きくなり、これが試料の冷却をさらに進ませる。試料によっては、例えば卵母細胞は、生理的温度未満の温度に非常に敏感であり、温度が低下すると生存能力を失う。
【００１４】
細い針に必要な長い吸引時間の代案は、加える陰圧を大きくして針を通る卵胞液の移動を加速させることである。しかしながら、これには、高圧を加えることで試料に圧力がか
かるとともに他の物理的損傷を与え得るという欠点がある。加える陰圧が大きすぎることは、卵母細胞の透明帯を傷付ける可能性があるため、卵母細胞吸引中の共通の懸念である。また、加える陰圧は、標準圧力環境での作業時には１ａｔｍ（１０１．３ｋＰａ）を超過することができない。さらに、細い針には、太い針よりも曲がりやすいためユーザがより操作し難いという欠点もある。
【００１５】
現在の卵母細胞回収針を、添付の図１〜図５に関して説明するが、図中では参照しやすいように類似の部品を類似の参照符号で参照している。本発明による針と他の針との比較の結果を提供するデータを、図６〜図１０に示す。
【００１６】
図１は、基底部１５２、子宮筋層１５４、膣１５６、卵管１６０、卵巣１５８、及び卵胞１０４を備える、子宮１５０を示す。卵胞１０４の超音波ガイド付き経膣吸引用の通常の既知の装置１００が、自然な位置で示されている。シングルルーメン卵母細胞回収針１０２が、卵母細胞を含有する卵胞１０４に経膣的に導入されて針ガイド１０６に保持され、針ガイド１０６はさらに、超音波トランスデューサ１０８に保持されている。超音波トランスデューサは、卵胞１０９の超音波視野を生成する。シングルルーメン針の後端は、吸引チューブ１１０に接続され、吸引チューブ１１０はさらに、卵母細胞を含有する卵胞液の採取用の試験管１１２に接続される。真空ポンプ（図示せず）の適用によって、試験管１１２に陰圧が導入される。試験管１１２は、コネクタ（図示せず）を有するシリコーンストッパ１１４で密閉される。
【００１７】
卵母細胞回収針１０２は、シングルルーメン針又はダブルルーメン針であり得る。シングルルーメン針を図２に示す。ダブルルーメン針を図３に示す。陰圧を導入するためにルアーコネクタ及びシリンジをそれぞれが有する他の吸引針構成を、図４及び図５に示す。
【００１８】
図２は、卵母細胞回収針２０２を備える既知のシングルルーメン針装置２００を示す。針２０２の後端は、指先グリップ２２２を備える。針２０２の後端は、吸引チューブ２１０に接続され、吸引チューブ２１０はさらに、シリコーンストッパ２１４を介して試験管２１２に接続される。試験管２１２は、シリコーンストッパ２１４、ルアー接続部２１６、及び真空チューブ２１８を介して、真空ポンプ（図示せず）に接続される。真空チューブ２１８に真空を加えることで、流体が矢印Ａの方向に針２０２に引き込まれ、結果として試験管２１２に引き込まれる。
【００１９】
図３は、既知のダブルルーメン針装置３００を示す。卵母細胞回収針３０２の後端は、指先グリップ３２２を備える。針３０２の後端は、フラッシュチューブ３２４に接続される。フラッシュチューブ３２４の遠位端は、フラッシュ媒体源への接続用のルアー接続部３２５を備える。針３０２の後端は、吸引チューブ３１０にも接続され、吸引チューブ３１０はさらに、卵母細胞を含有する卵胞液の採取用の試験管３１２に接続される。真空ポンプ（図示せず）の適用によって、試験管３１２に陰圧が導入される。試験管３１２は、シリコーンストッパ３１４、ルアー接続部３１６、及び真空チューブ３１８を介して、真空ポンプ（図示せず）に接続される。真空チューブ３１８に真空を加えることで、流体が矢印Ａの方向に針３０２に引き込まれ、結果として試験管３１２に引き込まれる。フラッシュ媒体は、矢印Ｂの方向にフラッシュチューブ３２４を通して針３０２に流し込まれ得る。
【００２０】
図４は、卵母細胞回収針４０２の後端に指先グリップ４２２を備える別の既知のシングルルーメン針装置４００を示す。針４０２の後端は、ルアー接続部（図示せず）を介してシリンジ４２６に接続される。シリンジバレル４３０からシリンジプランジャ４２８を引き抜くことで、針４０２内に陰圧を生じさせ、流体が矢印Ａの方向に針４０２に引き込まれ、結果としてシリンジ４２６に引き込まれる。
【００２１】
図５は、図４の針装置の既知の代替形態を示す。シングルルーメン針装置５００が、後端に指先グリップ５２２があるシングルルーメン卵母細胞回収針５０２を備える。針５０２の後端は、吸引チューブ５２４及びルアー接続部（図示せず）を介してシリンジ５２６に接続される。シリンジバレル５３０からシリンジプランジャ５２８を引き抜くことで、針５０２内に陰圧を生じさせ、流体が矢印Ａの方向に針５０２に引き込まれ、結果としてシリンジ５２６に引き込まれる。
【００２２】
卵母細胞回収針に関する以前の発明は、特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、及び特許文献６に記載のものを含む。特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、及び特許文献５に記載の針は、全て均一な直径で構成されている。したがって、これらは、女性に疼痛及び／又は組織損傷を与えるか、又は卵母細胞に対する圧力及び／又は外傷を引き起こし得る。大きな内径を有する針の使用には、回収される試料、例えば卵母細胞に対して生じる圧力及び／又は外傷を最小限に抑える且つ動作が速いという利点がある。小さな内径を有する針の使用には、回収すなわち吸引時間が長くなるという欠点がある。長い回収時間は、吸引を行う医師にとって不都合であり、試料を回収中の被験者にとって不都合且つ不快であり、回収処置中に試料が冷却される程度及び／又は別の面では試料が圧力又は外傷を受ける程度を大きくする。
【００２３】
特許文献１は、採卵と連係する内部卵巣周囲ブロッキング（internal periovarial blocking）用の麻酔針を開示している。
【００２４】
特許文献２は、ハンドル、ハンドルから延びる採取針、及び採取される卵子の損傷を防止するために採取針を選択された温度に維持する加熱機構を備える、採卵装置を開示している。この発明は、卵母細胞吸引中の温度問題を解決するかもしれないが、均一な直径の針を開示しており、したがって上述のように小さなＩＤを有する針又は大きなＯＤを有する針の欠点を有する。
【００２５】
特許文献３及び特許文献７はいずれも、側部開口部を有する吸引針構造を開示している。特許文献３及び特許文献７の両方が、上述のように小さなＩＤを有する針又は大きなＯＤを有する針の欠点を有する均等なサイズの針を開示している。
【００２６】
特許文献５は、卵胞から卵子及び卵胞液を回収する採卵装置を開示している。この装置は、針に対して吸引を生じさせることで試料が針に引き込まれる手段に接続される針を備える。
【００２７】
特許文献６は、小径の第２の領域に接続される大径の第１の領域を有する針を備えるシリンジを開示している。この針は、粘性の高い液体の回収ではなく患者の尿道、食道、及び血管等の導管への送出に用いられる。卵母細胞等の試料の採取に針を用いることは示唆されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２８】
【特許文献１】国際公開第２００５／０２５４３４号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２００５／０１４３６１９号明細書
【特許文献３】米国特許第５，８４３，０２３号明細書
【特許文献４】米国特許出願第１０／２３３，４３１号明細書
【特許文献５】米国特許第６，４６１，３０２号明細書
【特許文献６】米国特許第６，９２９，６２３号明細書
【特許文献７】米国特許第５，９７９，３３９号明細書
【非特許文献】
【００２９】
【非特許文献１】アジズ（Aziz）ら、1993年、ヒューマン・リプロダクション（Human Reproduction）第8巻、第7号、p.1098-1100
【非特許文献２】ミラー（Miller）ら、2004年、ファーティリティ・アンド・ステリリティ（Fertility and Sterility）第81巻、第1号、p.191-193
【発明の概要】
【００３０】
本発明は、細い針の利点を保持しながら太い針に関連する欠点を減らす且つ／又はなくす、試料採取針を提供する。したがって、本発明は、被験体からの生体試料、特に、組織へのアクセス及び穿通ができるようになるには体腔を通り抜ける必要がある場所等のアクセスし難い位置に位置付けられている試料の回収に適した針を提供する。例えば、生体試料は、卵母細胞であり得る。生体試料は、粘稠液であり得るか又は粘稠液中に存在し得る。針での卵母細胞の回収では、卵巣及び卵胞を穿通できるようになるには針が膣を通り抜けなければならない。試料採取針は、外科用又は医療用の針であり得る。
【００３１】
したがって、本発明の第１の態様は、第２の（後）管状領域と流体連通する第１の（前）管状領域を備え、第１の管状領域が被験体の組織を穿通する前端を備え、第２の管状領域が流体を受容する手段と流体連通する後端を備え、第１の管状領域が第２の管状領域の外径及び内径よりも小さな外径及び内径を有し、第１の管状領域が第２の管状領域の内径よりも小さな内径を有する、試料採取針を提供する。
【００３２】
本発明による試料採取針の利点は、比較的細い第１の管状領域のみが試料回収中の組織を侵襲する一方で、比較的太い第２の管状領域は組織を侵襲しないことである。
【００３３】
第１の管状領域及び第２の管状領域は、第１の管状領域及び第２の管状領域両方のルーメンを通って延びる共通の中心軸に沿って配置され得る。代替的に、第１の管状領域及び第２の管状領域は、互いに対して偏心的に配置され得る。すなわち、針は、第１の管状領域及び第２の管状領域両方のルーメンを通って延びる中心軸の周りで非対称である。
【００３４】
第１の管状領域は、テーパ領域を介して第２の管状領域に接続され得る。テーパ領域は、第１の管状領域と第２の管状領域との間で直径を徐々に変化させ得る。テーパ領域は、緩急いずれであってもよい。代替的に、テーパ領域がなくてもよく、第１の管状領域と第２の管状領域との間の接続部が実質的に直角であってもよい。
【００３５】
第１の管状領域自体がテーパ状であってもよい。好ましくは、テーパは、比較的狭い前端から、第１の管状領域を第２の管状領域に接続するより広い領域までである。
【００３６】
好ましくは、流体を回収する手段は、生体試料を収容するのに適している。流体を回収する手段は、密閉可能であることが好ましい。好ましくは、流体を回収する手段は無菌である。流体を回収する手段は、試験管を含む任意の適当な容器であり得る。
【００３７】
ヒト卵母細胞回収処置の場合、第１の管状領域の外径は、好ましくは０．６ｍｍ〜１．２ｍｍ、より好ましくは０．８ｍｍ〜１．０ｍｍ、最も好ましくは約０．９ｍｍである。
【００３８】
ヒト卵母細胞回収処置の場合、第２の管状領域の外径は、好ましくは１．１ｍｍ以上、より好ましくは１．２ｍｍ以上、最も好ましくは１．４ｍｍ以上である。
【００３９】
ヒト卵母細胞回収処置の場合、第１の管状領域の内径は、好ましくは約０．２ｍｍ以上、より好ましくは約０．４ｍｍ以上、最も好ましくは約０．６ｍｍ以上である。卵母細胞
回収針の第１の管状領域の内径は、常に卵母細胞回収中の特定の種の卵母細胞の直径と少なくとも同程度に大きくあるべきである。試料が卵母細胞ではない場合、内径は、回収される試料の損傷を受けやすい部分の直径と少なくとも同程度に大きくあるべきである。
【００４０】
ヒト卵母細胞回収処置の場合、第２の管状領域の内径は、好ましくは約０．９ｍｍ以上、より好ましくは約１．１ｍｍ以上、最も好ましくは約１．２ｍｍ以上である。
【００４１】
使用の際、針の前端が被験体の組織を穿通する一方で、後端は被験体の組織を穿通しない。使用の際、針の前端は、患者等の被験体の膣壁、卵巣、及び卵胞の１つ又は複数を穿通し得る。本発明の試料採取針の利点は、比較的小さな外径を有する針の前領域が、前領域の外径が大きな針よりも小さな疼痛及び／又は小さな外傷及び／又は小さな組織損傷を被験体に与え得ることである。後領域が前領域よりも大きな内径を有することの利点は、等しい陰圧下で後領域内での材料の流れをより速くすることができるため、動作が速くなり、回収される試料、例えば卵母細胞に与える圧力がより小さくなり得ることである。したがって、第２の管状領域の内径が大きいことは、これが良好な輸送管としての役割を果たすことを意味する。
【００４２】
第１の管状領域は、回収対象の試料の部位に到達するために穿通されなければならない解剖学的距離と少なくとも同程度に長いことが好ましい。試料の部位は組織であり得る。例えば、卵母細胞回収の場合、第１の管状領域は、膣壁を通って卵巣内の卵胞に到達するのに十分なほど長いことが好ましい。ヒト被験者で用いるためには、第１の管状領域は、少なくとも３０ｍｍの長さ、より好ましくは少なくとも４０ｍｍの長さである。第１の管状領域は、３０ｍｍ〜８０ｍｍの長さ、例えば、３０ｍｍ、３５ｍｍ、４０ｍｍ、４５ｍｍ、５０ｍｍ、５５ｍｍ、６０ｍｍ、６５ｍｍ、７０ｍｍ、７５ｍｍ、又は８０ｍｍの長さであり得る。針の第１の管状領域は、試料の部位に到達するのに必要なよりも長くすることができるが、第１の管状領域の長さが増すにつれて、第２の管状領域のより大きな直径に関連する利点が減る。針の細い部分が長いほど、卵母細胞が針内で費やす時間が長くなり、処置中の卵母細胞の冷却がより進み、より大きな摩擦及び場合によっては圧力が卵母細胞に対して生じる。
【００４３】
針の第１の管状領域及び第２の管状領域の全長は、試料に到達するのに十分なほど長くなければならない。卵母細胞回収針の場合、必要とされる全長は、女性被験者の解剖学的サイズ及び構造に応じて決まる。すなわち、第２の（後）管状領域は、膣を通り抜けるのに十分なほど長くなければならない。第１の（前）管状領域は、試料が位置付けられている部位、例えば組織、例えば卵巣、特に卵巣の卵胞を穿通して試料に接触しつつも、第２の（後）管状領域をその部位、例えば組織に穿通させることがないようにするのに十分なほど長くなければならない。試料への接触が、その部位からの試料の回収を可能にする。ヒト被験者の場合、第１の管状領域及び第２の管状領域を合わせた長さが１５０ｍｍ〜５００ｍｍであることが好ましい。例えば、第１の管状領域及び第２の管状領域を合わせた長さは、２００ｍｍ〜４００ｍｍ、例えば３００ｍｍであり得る。
【００４４】
第１の管状領域の長さが、第２の管状領域を試料、例えば組織に穿通させることなく試料に接触するのに十分なほど長いことが特に好ましい。好ましくは、試料が不必要な圧力を受けないことを確実にするために、第１の管状領域は長すぎない。ヒト卵母細胞回収針の場合、第１の管状領域は、好ましくは約３０ｍｍ以上、より好ましくは約４０ｍｍ以上で、且つ好ましくは１００ｍｍ以下、より好ましくは８０ｍｍ以下、最も好ましくは６０ｍｍ以下とするべきである。
【００４５】
第２の管状領域の長さは、被験体の解剖学的構造に応じて決まり、すなわち試料に到達するのに十分なほど長く、また、針を安定させる且つ／又は試料を可視化するのに必要な機器に応じて決まる。試料採取針の適切な寸法は、回収対象の試料及び試料回収対象の被験体に応じて変わる。したがって、試料及び被験体が、第１の管状領域及び第２の管状領域の内径及び外径に適した寸法を決める。被験体は、ヒトである。解剖学の知識を用いれば、当業者は試料採取針に適した寸法を選択することができる。
【００４６】
好ましくは、針の構成は、試料回収時間が許容吸引時間を維持するのに十分なほど短いような構成であり、許容吸引時間とは、実用的な目的で、標準針、例えば、１．４ｍｍの均一な外径、１．０ｍｍの均一な内径、及び３５５ｍｍの長さを有する針を用いる場合に要する吸引時間に相当する吸引時間を意味する。試料の吸引時間は、加える陰圧、吸引される試料の粘度、及び吸引される試料の体積に応じて決まる。相当する吸引時間は、標準針での吸引時間と同じくらいの短さの吸引時間、標準針での吸引時間よりも短いか又は最大３０％長い吸引時間、好ましくは標準針での吸引時間よりも２０％以下しか長くない吸引時間である。標準針は、例えば、１．０ｍｍの均一な内径及び１．４ｍｍの均一な外径を有し、例えば３５５ｍｍの長さを有する針である。許容可能な短さの吸引時間は、回収の際の試料の冷却を最小限に抑え、医師が立ち会う時間を最短にし、回収中に被験体が不快を感じる時間を最短にし、且つ回収される試料への損傷及び／又は外傷を最小にする吸引時間である。吸引時間は、２分未満、例えば１分未満であり得る。回収される試料は、３ｍｌ〜８ｍｌ、例えば４ｍｌ〜５ｍｌの体積を有し得る。最大１気圧（すなわち、０ｋＰａ〜１０１．３ｋＰａ）の陰圧が、針の後端に加えられ得る。
【００４７】
試料採取針は、ステンレス鋼、炭素繊維、硬質プラスチック、セラミック、及びガラスから選択される１つ又は複数の材料から形成され得る。特に好ましい材料としては、ＡＩＳＩ３０４、ＡＩＳＩ３１６、ＳＩＳ２３４６、及びＳＩＳ２５４３から選択されるステンレス鋼が挙げられる。最も好ましい材料は、ＡＩＳＩ３０４ステンレス鋼である。第１の管状領域及び第２の管状領域は、同じ材料からできていても異なる材料からできていてもよい。
【００４８】
好ましくは、針は鋭い先端を備える。先端は、超音波下で可視性を高めるようになっていてもよい。先端はエコー源性であってもよい。例えば、針の先端の外面には、１つ又は複数の溝が設けられ得る。
【００４９】
試料採取針は、単一の材料片から形成されてもよく、又は単一の管を形成するように互いに接合される２つ以上の材料片から形成されてもよい。
【００５０】
本発明の試料採取針は、図１〜図５に関して説明されるもの等の、超音波トランスデューサ、真空ポンプ、吸引チューブ、フラッシュチューブ、採取管、採取管用のストッパ、真空ポンプ、シリンジ、針ガイド、指先グリップ、及びチューブを採取管、真空ポンプ、及びシリンジの１つ又は複数に接続するコネクタのうち、１つ又は複数に嵌着又は嵌合され得る。管材はＴｅｆｌｏｎ（登録商標）を含み得る。さらに、本発明の試料採取針は、図１〜図５に関して説明されるもの等の、シングルルーメン又はダブルルーメン針装置で用いられ得る。例えば、この装置は、図１〜図５に関して説明される構成部品の１つ又は複数を備え得る。
【００５１】
本発明の第２の態様は、被験体から試料を採取する方法であって、上述のように、本発明による試料採取針を被験体に挿入すること、及び被験体から試料を引き抜くことを含む、被験体から試料を採取する方法を提供する。好ましくは、試料は卵母細胞である。被験体はヒトである。
【００５２】
好ましくは、試料採取針の第１の（前）管状領域のみが被験体の組織を穿通する。すなわち、好ましくは、試料採取針の第２の（後）管状領域は被験体の組織を穿通しない。これには、針の狭い部分すなわち第１の管状領域のみが被験体の組織を穿通することで、被験体が受ける疼痛、不快感、及び外傷を最小にし得るという利点がある。例えば、ヒト卵母細胞回収処置中には、第１の管状領域の約３０ｍｍ又は約４０ｍｍが被験体に挿入され得る。
【００５３】
本発明の第３の態様は、被験体から試料を採取する方法における、上述のような試料採取針の使用を提供する。被験体は、ヒトである。試料は、試料を含有する部位、例えば組織に針が侵襲的に入る場所から少し離れて位置し得る。試料は卵母細胞であり得る。
【００５４】
本発明による針及び方法を、単に一例として、さらなる図面の図６〜図１５を参照して説明する。
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１】子宮と、卵巣からの卵胞の超音波ガイド付き経膣吸引用の装置との概略縦断面図である（従来技術）。
【図２】図１に示す装置との併用に適したシングルルーメン針の概略縦断面図である（従来技術）。
【図３】図１に示す装置との併用に適したダブルルーメン針の縦断面図である（従来技術）。
【図４】卵巣からの卵胞の経膣吸引に適した、シリンジに接続されているシングルルーメン針の縦断面図である（従来技術）。
【図５】卵巣からの卵胞の経膣吸引に適した、チューブを介してシリンジに接続されているシングルルーメン針の縦断面図である（従来技術）。
【図６】本発明によるシングルルーメン試料採取針の縦断面図である。
【図７】テーパ領域が第１の管状領域と第２の管状領域とを接続している、本発明によるシングルルーメン針の縦断面図である。
【図８】第１の管状領域及び第２の管状領域が偏心的に配置されている、本発明によるシングルルーメン針の縦断面図である。
【図９】テーパ領域が第１の管状領域と第２の管状領域とを接続し、第１の管状領域及び第２の管状領域が偏心的に配置されている、本発明によるシングルルーメン針の縦断面図である。
【図１０】テーパ状の第１の管状領域を有する、本発明によるシングルルーメン針の縦断面図である。
【図１１】表１に寸法を示す針（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、及び（ｄ）を通した、ｉｎ  ｖｉｖｏ注射に適した水の２０ｍｌ試料に関する室温での吸引時間の差を示す棒グラフである。
【図１２】表１に寸法を示す針（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、及び（ｄ）を通した、ヒアルロン酸ナトリウム溶液（０．２ｇ．ｌ-1）の１０ｍｌ試料に関する室温での吸引時間の差を示す棒グラフである。
【図１３】表１に寸法を示す針（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、及び（ｄ）を通した、ヒアルロン酸ナトリウム溶液（０．４ｇ．ｌ-1）の１０ｍｌ試料に関する室温での吸引時間の差を示す棒グラフである。
【図１４】表１に寸法を示す針（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、及び（ｄ）を通して吸引した場合の、ｉｎ  ｖｉｖｏ注射に適した水の試料の温度の低下を示す棒グラフである。
【図１５】表１に寸法を示す針（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、及び（ｄ）を通して吸引した場合の、ｉｎ  ｖｉｖｏ注射に適した水の試料の温度の低下を示す棒グラフである。図１５に示す試料の温度パラメータは、図１４に示す試料の温度パラメータと異なる。
【発明を実施するための形態】
【００５６】
図１１〜図１５の生データは、別表に提供されている。
【００５７】
図６は、本発明によるシングルルーメン試料採取針６３２を示す。針は、第２の（後）管状領域６３６と流体連通する第１の（前）管状領域６３４を備え、第１の管状領域６３４は、被験体への挿入用の鋭い先である前端６３８を備え、第２の管状領域６３６は、流体収容チャンバ（図示せず）と流体連通する後端６４０を備える。針６３２の後端６４０に真空を加えることで、流体を矢印Ａの方向に引く。針の全長（Ｚ）は、約３５０ｍｍである。針６３２の第２の管状領域６３６は、３１０ｍｍの長さ（Ｘ）、１．４ｍｍのＯＤ、及び１．２ｍｍの内径を有する。針６３２の第１の管状領域６３４は、４０ｍｍの長さ（Ｙ）、０．９ｍｍの外径、及び０．６ｍｍの内径を有する。
【００５８】
第１の管状領域及び第２の管状領域の異なる配置が可能である。いくつかの例を図７〜図１０に示す。
【００５９】
図７の試料採取針７３２では、第１の（前）管状領域７３４及び第２の（後）管状領域７３６が、テーパ領域７３５を介して接続される。
【００６０】
図８の試料採取針８３２では、第１の（前）管状領域８３４及び第２の（後）管状領域８３６が、互いに対して偏心している。
【００６１】
図９の試料採取針９３２では、第１の（前）管状領域９３４及び第２の（後）管状領域９３６が、互いに対して偏心している。第１の（前）管状領域９３４及び第２の（後）管状領域９３６が、テーパ領域９３５を介して接続される。
【００６２】
図１０の試料採取針１０３２では、第１の（前）管状領域１０３４が第２の（後）管状領域１０３６に接続され、第１の（前）管状領域は、被験体への挿入用の鋭い先を提供する前端１０３８から、第１の（前）管状領域１０３４が第２の（後）管状領域１０３６につながる領域１０３５まで、テーパ状になっている。
【００６３】
図６〜図１０の試料採取針は、図１〜図５に関して説明されるもの等の、超音波トランスデューサ、真空ポンプ、吸引チューブ、フラッシュチューブ、採取管、採取管用のストッパ、真空ポンプ、シリンジ、針ガイド、指先グリップ、及びチューブを採取管、真空ポンプ、及びシリンジの１つ又は複数に接続するコネクタのうち、１つ又は複数を含む、従来の試料回収装置に接続され得る。図６〜図１０の試料採取針は、回収中及び／又は回収後の試料の温度低下を減らすために加熱機構も備え得る。
【００６４】
被験体からの卵母細胞の回収等、被験体から試料を回収する方法は、被験体への図６による試料採取針６３２の挿入を含む。針の後端６４０は、採取容器を介して真空に接続される。針の前端６３８は、被験体から回収すべき試料の部位に挿入される（例えば、卵母細胞回収の場合、部位は卵胞である）。試料採取針６３２の第１の管状領域６３４の一部のみ又は全部が、試料の部位を穿通する。第２の管状領域６３６は、試料の部位、例えば被験体の組織を穿通しない。従来の真空装置を用いて、試料採取針６３２の後端６４０に
真空が加えられ、これにより、試料が矢印Ａの方向で針に入る。試料は、試料採取針６３２の後端６４０を通って採取容器（図示せず）に引き込まれる。
【００６５】
図７〜図１０による試料採取針は、本明細書に記載されるような被験体から試料を回収する方法でも用いられ得る。
【００６６】
本発明による針についての分析
本発明による針を、実験状況下及び臨床状況下で分析した。
【００６７】
実験室分析
（ａ）細い針、（ｂ）本発明による針、（ｃ）標準針、及び（ｄ）調整済み標準針を用いて、吸引時間及び回収される試料の温度変化を分析した。針の直径は、表１に示す。
【００６８】
【表１】
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【００６９】
粘度の異なる試料の吸引時間に対する針寸法の影響を調査した。用いる試料は、ｉｎ  ｖｉｖｏ注射に適した水（「注射用水」（「ＷＦＩ」））、ヒアルロン酸ナトリウム溶液（０．２ｇ．ｌ-1）、及びヒアルロン酸ナトリウム溶液（０．４ｇ．ｌ-1）とした。ヒアルロン酸ナトリウム溶液は、ＷＦＩ中にヒアルロン酸ナトリウムを溶解することによって調整した。
【００７０】
真空ポンプ（Rocket of London、２４０Ｖ、３０Ｗ、５０Ｈｚ）を−１０２ｍｍＨｇ（−１３．６ｋＰａ）に調整して、較正済みの圧力計で各試験前に確かめた。針を、４００ｍｍチューブ（ＩＤ１．３５ｍｍ）で真空ポンプに接続し、且つ１．３５ｍｍのＩＤを有する１８０ｃｍの長さのＰＶＣチューブ片を用いて５０ｍｌ試験管に接続した。全ての試験で試験管と床との間で一定の距離を保つために、試験管（針に接続されている）を卓上の加熱ブロック内に入れた。加熱ブロックを所望の温度に調整するか、又はオフにした。試験全体を通して、針を垂直に保持した。室温で試料を保持している容器に針を挿入したときにタイマを開始させた。
【００７１】
ＷＦＩの吸引時間に対する針寸法の影響の試験の場合、２０ｍｌの試料が試験管に移ったときにタイマを停止させ、無作為な順序で各針に関して試験を５回繰り返した。各タイプ３本の針を用いた。試料の温度は２０±２℃に保った。
【００７２】
ヒアルロン酸ナトリウム溶液の吸引時間に対する針寸法の影響の試験の場合、１０ｍｌの試料が試験管に移ったときにタイマを停止させた。無作為な順序で各針に関して試験を５回繰り返した。各タイプ２本の針を用いた。試料の温度は２１±１℃に保った。
【００７３】
図１１及び表２に示すように、本発明の針（針ｂ）を用いて吸引したＷＦＩの試料の吸引時間は、細い針（針ａ）を用いた吸引時間よりもはるかに短い。標準針（針ｃ）は、本発明による針（針ｂ）の４３秒と比較して２０ｍｌＷＦＩの吸引時間が３５秒だったため、わずかに優れていた。調整済みの針（針ｄ）は、針全体を通して最大（１．２ｍｍ）の内径を有するため、予想通りに吸引時間が最速であった（２０ｍｌを２４秒で吸引した）。
【００７４】
【表２】
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【００７５】
ヒアルロン酸ナトリウム溶液は、ＷＦＩよりも粘度が高い。高濃度のヒアルロン酸ナトリウム溶液の方が、低濃度のヒアルロン酸ナトリウム溶液よりも粘度が高い。図１２及び図１３に示すように、本発明の針（針ｂ）を用いた０．２ｇ．ｌ-1ヒアルロン酸ナトリウム溶液及び０．４ｇ．ｌ-1ヒアルロン酸ナトリウム溶液の両方の吸引時間は、細い針（針ａ）を用いた吸引時間よりもはるかに短い（表３及び表４）。吸引時間の最も顕著な差は、細い針（針ａ）と他の針（針ｂ、ｃ、及びｄ）との間にあった。高濃度のヒアルロン酸ナトリウム溶液（すなわち、粘度のより高い溶液）では、本発明の針（針ｂ）の吸引時間と標準針（針ｄ）の吸引時間との間に有意な差はなかった。本発明による針（針ｂ）と比較した場合、針ａ、ｃ、及びｄを用いてヒアルロン酸ナトリウム溶液（０．２ｇ．ｌ-1）を吸引するのに要する時間の間には有意な差があった（スチューデントｔ検定（別表））。とはいえ、本発明の針（針ｂ）と標準針（針ｃ）との間の差は、４０秒から４２秒への増加を伴うだけであるため、０．２ｇ．ｌ-1ヒアルロン酸ナトリウム溶液を吸引する場合は実質的な意義はない。通常の臨床試料サイズは、卵母細胞吸引の場合、約３ｍｌ〜８ｍｌ、より一般的には約３ｍｌ〜５ｍｌである。この実験における吸引は１０ｍｌで行ったが、これは、卵母細胞吸引の臨床例であるこの体積の半分の吸引が、この実験的状況下で約１秒の時間差しかもたらさないことを意味する。
【００７６】
【表３】
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【００７７】
【表４】
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【００７８】
吸引する試料の温度に対する針寸法の影響を試験するために、水浴を３７±０．５℃の試料回収温度に加熱し、加熱ブロックを２５±０．５℃又は３７±０．５℃の試料送出温度に加熱した。温度を標準化するために、２０ｍｌの水を収容した５０ｍｌ試験管を加熱ブロックに入れた。較正済みの温度計（Ｖｉ  Ｎｏ０１７−６９）で各試験前に温度を確かめた。温水（３７±０．５℃）が入っている水浴に針を入れるのと同時に、タイマを開始させた。２０ｍｌの温水を試験管に吸引したら、タイマを停止させ、針を水から取り出し、針を取り出した２０秒後に試験管内の水の温度を測定した。吸引前後の温度の差を確定した。
【００７９】
無作為な順序で各針に関して試験を５回繰り返した。各試験後に、針を室温の水でフラッシュした。各試験が確実に室温のファルコン管で開始されるよう、実験用の試験管として４本の５０ｍｌファルコン管を用いた。各タイプ２本の針を用いた。図１４は、３７℃の回収温度から吸引して２５℃でインキュベートした試験管に送出した場合のＷＦＩの２０ｍｌ試料の温度の低下が、本発明による針（針ｂ）で吸引した場合と標準針（針ｃ）で吸引した場合とで異ならなかったことを示す。針ｂ及びｃの両方に関して、標準針（針ｃ）が本発明の針（針ｂ）よりも速い吸引時間で吸引するにもかかわらず、試料の温度の低下は両方の針で（回収時点と送出時点との間で）２．６℃であった。細い針（針ａ）は、吸引時間が長いため予想通りに最大の温度損失を生じた。細い針（針ａ）及び調整済み標準針（針ｄ）と比較して、本発明の針（針ｂ）での３７℃の回収温度から吸引して２５℃の回収温度へ送出した場合のＷＦＩの試料の温度低下には、有意な差があった（スチューデントｔ検定）。本発明の針（針ｂ）で吸引される試料の温度低下と標準針（針ｃ）で吸引される試料の温度低下との間では、有意な差がなかった。
【００８０】
図１５は、３７℃の回収温度から吸引して３７℃でインキュベートした試験管に送出した場合のＷＦＩの２０ｍｌ試料の温度の低下が、回収温度が３７℃で試験管を２５℃でインキュベートした場合の温度の低下よりも小さかったことを示す。これらのデータは、本発明の針（針ｂ）を用いて回収した試料が細い針（針ａ）を用いて回収した試料よりも小さな温度低下を示したことを示す。本発明の針（針ｂ）及び標準針（針ａ）で回収した試料は、標準針（針ａ）の方が速く吸引するにもかかわらず同じ温度低下を示すように見える。
【００８１】
データは、細い針（ＯＤ：０．８ｍｍ、ＩＤ：０．６ｍｍ）と比較して、本発明の針で回収した試料の方が速い吸引時間を有し且つ小さな温度低下を示すことを示す。外径の小さな針に関連する疼痛がより低いレベルであることと組み合わせて、本発明の針は、臨床用途に有益である。卵母細胞は、実際にはＷＦＩよりも高い粘度の液体中で回収されるため、本発明による針を用いた卵母細胞の回収は、標準針を用いた回収と同じか又はほぼ同じくらい短い吸引時間を示す可能性が高い。
【００８２】
膣は体温（３７℃）である。したがって、膣を経由した試料採取針の使用は、回収される試料を膣の通過中に３７℃でインキュベートすることになるため、温度損失を減らすことになる。
【００８３】
臨床分析
本発明による試料採取針（表１の針ｂ）を、標準針（表１の針ｃ）と臨床的に比較した。これらの針を用いて、女性被験者から卵母細胞を回収した。
【００８４】
スウェーデンの２つのＩＶＦ診療所がこの臨床試験に参加した。評価に参加した患者全員に対して、２つの異なる種類の吸引針を用いた。婦人科医が、子宮の異なる側で交互に針を用いた。本発明による針（針ｂ）を標準針（針ｃ）と比較した。針の外観が異なるため、婦人科医についての盲検化は不可能であった。調査対象集団は、調査期間中に診療所で治療を受ける厳選された数の患者から構成した。腹部手術既往のある患者及び子宮内膜症であることが分かっている患者は除外した。吸引プロセス及び麻酔法は、臨床標準手順に従って行い、両群で同じとした。
【００８５】
針が卵母細胞の品質に影響を及ぼさないことを確実にするために、以下のデータも収集した：採取した成熟卵母細胞の数、正常受精（２ＰＮ）した卵母細胞の数、及び初期胚の発生。
【００８６】
本発明の針は、容易な取り扱いを反映するパラメータについて、標準針と同じくらい有効であるか又は少なくとも同じくらい有効であると報告された。
【００８７】
診療所の１つのみが、各針で回収した卵母細胞の胚発生を分析した。分析の結果は、表５に示されており、上述のプロトコルに従って回収した卵母細胞を有する１０人の患者を含む。本発明の針（針ｂ）で吸引した卵母細胞に関する受精率及び２日目までの胚発生は、対照針（針ｃ）で吸引した卵母細胞と比較して正常であった。
【００８８】
【表５】
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【００８９】
この調査は、本発明による針（針ｂ）での卵母細胞の吸引すなわち回収が、標準針（針ｃ）での卵母細胞の吸引と比較して受精又は胚発生の成功に悪影響を及ぼさないことを示唆している。
【００９０】
【表６】
0005342554.tif 000007
【００９１】
【表７】
0005342554.tif 000008
【００９２】
【表８】
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【００９３】
【表９】
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【００９４】
【表１０】
0005342554.tif 000011
【００９５】
【表１１】
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【図１】
0005342554.tif 000013
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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