(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体を含有することを特徴とする皮膚外用剤。（式中の置換基Ａは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ−ＯＨを示す。）
【化１】
0005236335.tif 000009
【請求項２】
一般式（１）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体を含有することを特徴とする美白剤。（式中の置換基Ａは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ−ＯＨを示す。）
【化２】
0005236335.tif 000010
【請求項３】
一般式（２）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体。
【化３】
0005236335.tif 000011
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、美白効果が顕著に高い皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般に、シミ、ソバカス、日焼けなどに見られる皮膚の色素沈着は、皮膚内に存在するメラニン色素生成細胞がメラニン色素を過剰に生成することが原因とされている。この色素沈着の治療には、ハイドロキノンを外用する処置などが行われてきた。
【０００３】
しかしながら、ハイドロキノンは色素沈着を防止する効果は認められているが、アレルギー性があるため、一般に使用が制約されており、製剤上も不安定であり問題点があった。このように、色素沈着の予防や治療に対して、効果の高い成分や製剤が望まれていた。
【０００４】
一方、本発明の一般式（１）のうち、ＣＨ−ＯＨは公知の物質である（非特許文献１）。しかし、かかる誘導体に美白効果を有することは全く知られていなかった。
【０００５】
【非特許文献１】Ｒ．Ｂ．Ｃｌａｙｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２１８，  ３０５−３２０（１９５６）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明はこのような従来の問題点に鑑み、美白効果に優れ、シミ、ソバカスを予防、治療することができる物質や皮膚外用剤を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、安全性が高く、美白効果に優れた皮膚外用剤を得るべく鋭意研究を重ねた結果、下記の一般式（１）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体が顕著な美白効果を発揮することを見出した。
【０００８】
また、このうち下記の一般式（２）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体が新規物質であることを見出した。
【０００９】
すなわち、本発明は、一般式（１）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体を含有することを特徴とする皮膚外用剤や美白剤を提供するものである。（式中の置換基Ａは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ−ＯＨを示す。）
【００１０】
【化４】
0005236335.tif 000002
【００１１】
また、本発明は、一般式（２）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体を提供するものである。
【化５】
0005236335.tif 000003
【００１２】
本発明は、ラノスタ−８−エン誘導体に美白効果を発見し、これを皮膚外用剤に用いたものである。以上のように、本発明のラノスタ−８−エン誘導体は、メラニン生成を抑制し、優れた美白効果により、シミ、ソバカスを予防、治療する医薬品、医薬部外品、化粧品などの皮膚外用剤の成分として有効である。
【００１３】
次に、本発明の詳細について説明する。
〔１〕一般式（１）の中の置換基Ａについて
置換基Ａは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ−ＯＨを示す。
【００１４】
〔２〕ラノスタ−８−エン誘導体の合成方法
本発明のラノスタ−８−エン誘導体の合成は、ラノステロールまたはその酸化物から種々の公知のジオール化法で製造することができる。例えば、四酸化オスミウム、オスミウム酸カリウム、過マンガン酸カリウムを用いて行う方法や、シャープレス不斉ジオール化法により行う方法がある。
【００１５】
一般式（２）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体は、ラノステロールのケトン部分を公知の方法で酸化反応させたラノステノンを調製し、次いで上記のジオール化法を用いて製造することができる。
【００１６】
本発明の一般式（１）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体は、一種を単独でまたは二種以上を組み合わせて用いることができる。
【００１７】
本発明の皮膚外用剤は、一般式（１）で表される、ラノスタ−８−エン誘導体を配合したものであり、その配合量は、ラノスタ−８−エン誘導体として０．０００１〜２０重量％、好ましくは、０．００１〜５重量％配合することができる。０．０００１％未満の濃度では充分な効果が得られ難く、２０重量％を超える濃度では効果の増強が認められないことがあり不経済である。
【００１８】
本発明の皮膚外用剤には、必要に応じ、通常の化粧品、医薬部外品、医薬品などに使用される成分を適宜配合することができる。例えば、美白剤、保湿剤、油性成分、紫外線吸収剤、防腐剤、酸化防止剤、水、アルコール類、界面活性剤、キレート剤、増粘剤、粉末類、色材、香料などの原料を適宜配合することができる。
【００１９】
本発明の皮膚外用剤は他の公知の美白剤、抗酸化剤と組み合わせることにより、美白効果を高めることができる。例えば、アスコルビン酸、アスコルビン酸誘導体（アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アスコルビン酸リン酸脂肪酸エステルなど）、コウジ酸、コウジ酸誘導体、アルブチン、プラセンタエキス、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸誘導体、茶抽出物、タンニン、甘草抽出物、グラブリジン、メハジキ（益母草）抽出物、アロエ（アロエアンドンゲンシス、キダチアロエ、アロエベラなど）抽出物、フキタンポポ抽出物、マンネンタケ（赤霊芝、黒霊芝など）抽出物、桑白皮抽出物などを配合することができる。
【００２０】
本発明の皮膚外用剤は、化粧水、クリーム、乳液、ゲル剤、軟膏、パック、エアゾール剤、パップ剤、ペースト剤、プラスター剤、洗浄剤、ファンデーション、リップスティック、石鹸、浴用剤などに用いることができるが、これらに限定されることはない。また、本発明の皮膚外用剤は、医薬品、医薬部外品、および化粧品を含むものである。
【発明の効果】
【００２１】
本発明のラノスタ−８−エン誘導体は、優れたメラニン生成抑制効果を示すとともに、これらを含有する皮膚外用剤は、優れた美白効果を示した。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる化合物の製造例、処方例および実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。処方例に示す配合量は重量％を示す。また、以下に示すＭＳとは質量分析、ＥＩとは電子衝撃法、１Ｈ−ＮＭＲとは水素核の核磁気共鳴分析を示す。
【実施例１】
【００２３】
製造例１  ラノスタ−８−エン誘導体（化合物１）の合成
【化６】
0005236335.tif 000004
【００２４】
ラノステロール１．０ｇをアセトン１５０ｍＬと水２０ｍＬの混液に溶解し、Ｎ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド２．３ｇ、四酸化オスミウム０．１ｇを加え、室温で２４時間反応させた。反応後、溶媒を除去し、酢酸エチルと水で抽出し、酢酸エチル層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過したのち、ろ液を濃縮した。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーでヘキサン：酢酸エチル＝１：１の溶出溶媒を用いて精製し、化合物１を０．８５ｇ得た。
ＭＳ（ＥＩ、ｍ／ｚ）  ４６０（Ｍ＋）、４４５（Ｍ−ＣＨ３）＋、４２７、４０９など
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δ）  ３．１０〜３．２３（２Ｈ、ｍ）、２．０６（５Ｈ、ｍ）、０．９〜１．９（１９Ｈ、ｍ）、０．７５（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ）、０．８０（３Ｈ、ｓ）、０．９１（３Ｈ、ｓ）、０．９５（３Ｈ、ｄ）、０．９８（３Ｈ、ｓ）、１．０１（３Ｈ、ｓ）、１．１２（３Ｈ、ｓ）、１．１６（３Ｈ、ｓ）
【００２５】
製造例２  ラノスタ−８−エン誘導体（化合物２）の合成
【化７】
0005236335.tif 000005
【００２６】
ラノステロール１．０ｇをアセトン１００ｍＬに溶解し、氷冷下、ジョーンズ試薬１．５ｍＬを加え、１時間反応させた。反応後、溶媒を除去し、酢酸エチルと水で抽出し、酢酸エチル層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過したのち、ろ液を濃縮した。これに製造例１と同様にジオール化を行い、シリカゲルカラムクロマトグラフィーでヘキサン：酢酸エチル＝２：１の溶出溶媒を用いて精製し、化合物２を０．５１ｇ得た。
ＭＳ（ＥＩ、ｍ／ｚ）  ４５８（Ｍ＋）、４４３（Ｍ−ＣＨ３）＋、４２５、４０７など
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δ）  ３．１４〜３．２３（１Ｈ、ｍ）、２．４７〜２．７１（２Ｈ、ｍ）、２．０６（５Ｈ、ｍ）、０．８８〜２．０４（１９Ｈ、ｍ）、０．７５（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ）、０．８０（３Ｈ、ｓ）、０．９１（３Ｈ、ｓ）、０．９５（３Ｈ、ｄ）、０．９８（３Ｈ、ｓ）、１．０１（３Ｈ、ｓ）、１．１２（３Ｈ、ｓ）、１．１６（３Ｈ、ｓ）
【実施例２】
【００２７】
処方例１  化粧水
［処方］                                                      配合量
１．化合物１                                                ０．００１部
２．１，３−ブチレングリコール                              ８．０部
３．グリセリン                                              ２．０部
４．キサンタンガム                                          ０．０２部
５．クエン酸                                                ０．０１部
６．クエン酸ナトリウム                                      ０．１部
７．エタノール                                              ５．０部
８．パラオキシ安息香酸メチル                                ０．１部
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）          ０．１部
１０．香料                                                    適量
１１．精製水にて全量を１００とする。
［製造方法］成分１〜６、１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合しろ過して製品とする。
【００２８】
処方例２  クリーム
［処方］                                                      配合量
１．化合物１                                                １．０部
２．スクワラン                                              ５．５部
３．オリーブ油                                              ３．０部
４．ステアリン酸                                            ２．０部
５．ミツロウ                                                ２．０部
６．ミリスチン酸オクチルドデシル                            ３．５部
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）        ３．０部
８．ベヘニルアルコール                                      １．５部
９．モノステアリン酸グリセリン                              ２．５部
１０．１，３−ブチレングリコール                              ８．５部
１１．パラオキシ安息香酸メチル                                ０．２部
１２．パラオキシ安息香酸エチル                                ０．０５部
１３．香料                                                    ０．１部
１４．精製水にて全量を１００とする。
［製造方法］成分１〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１０〜１２、１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加え、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１３を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００２９】
比較例１  従来のクリーム
処方例２において、化合物１をスクワランに置き換えたものを従来のクリームとした。
【００３０】
処方例３  乳液
［処方］                                                      配合量
１．化合物１                                                ０．０５部
２．化合物２                                                ０．０５部
３．スクワラン                                              ５．０部
４．オリーブ油                                              ５．０部
５．ホホバ油                                                ５．０部
６．セタノール                                              １．５部
７．モノステアリン酸グリセリン                              ２．０部
８．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）        ３．０部
９．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート
（２０Ｅ．Ｏ．）                                        ２．０部
１０．プロピレングリコール                                    １．０部
１１．グリセリン                                              ２．０部
１２．パラオキシ安息香酸メチル                                ０．２部
１３．香料                                                    ０．１部
１４．精製水にて全量を１００とする。
［製造方法］成分１〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１０〜１２、１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１３を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００３１】
処方例４  ゲル剤
［処方］                                                      配合量
１．化合物１                                                ０．０５部
２．化合物２                                                ０．０５部
３．エタノール                                              ５．０部
４．パラオキシ安息香酸メチル                                ０．１部
５．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）          ０．１部
６．香料                                                    適量
７．１，３−ブチレングリコール                              ５．０部
８．グリセリン                                              ５．０部
９．キサンタンガム                                          ０．１部
１０．カルボキシビニルポリマー                                ０．２部
１１．水酸化カリウム                                          ０．２部
１２．精製水にて全量を１００とする。
［製造方法］成分１〜６と、成分７〜１２をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合しろ過して製品とする。
【００３２】
処方例５  軟膏
［処方］                                                      配合量
１．化合物１                                                ５．０部
２．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）        ２．０部
３．モノステアリン酸グリセリン                            １０．０部
４．流動パラフィン                                          ５．０部
５．セタノール                                              ６．０部
６．パラオキシ安息香酸メチル                                ０．１部
７．プロピレングリコール                                  １０．０部
８．精製水にて全量を１００とする。
［製造方法］成分１〜５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分６〜８に加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００３３】
処方例６  パック
［処方］                                                      配合量
１．化合物１                                                １．０部
２．化合物２                                                １．０部
３．ポリビニルアルコール                                  １２．０部
４．エタノール                                              ５．０部
５．１，３−ブチレングリコール                              ８．０部
６．パラオキシ安息香酸メチル                                ０．２部
７．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．）          ０．５部
８．クエン酸                                                ０．１部
９．クエン酸ナトリウム                                      ０．３部
１０．香料                                                    適量
１１．精製水にて全量を１００とする。
［製造方法］成分１〜１１を均一に溶解し製品とする。
【００３４】
処方例７  ファンデーション
［処方］                                                      配合量
１．化合物２                                                ０．２部
２．ステアリン酸                                            ２．４部
３．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート
（２０Ｅ．Ｏ．）                                        １．０部
４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）        ２．０部
５．セタノール                                              １．０部
６．精製ラノリン                                            ２．０部
７．流動パラフィン                                          ３．０部
８．ミリスチン酸イソプロピル                                ６．５部
９．パラオキシ安息香酸ブチル                                ０．１部
１０．カルボキシメチルセルロースナトリウム                    ０．１部
１１．ベントナイト                                            ０．５部
１２．プロピレングリコール                                    ４．０部
１３．トリエタノールアミン                                    １．１部
１４．パラオキシ安息香酸メチル                                ０．２部
１５．二酸化チタン                                            ８．０部
１６．タルク                                                  ４．０部
１７．ベンガラ                                                １．０部
１８．黄酸化鉄                                                ２．０部
１９．香料                                                    適量
２０．精製水にて全量を１００とする。
［製造方法］成分１〜９を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分２０に成分１０をよく膨潤させ、続いて、成分１１〜１４を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１５〜１８を加え、ホモミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この水相に油相をかき混ぜながら加え、冷却し、４５℃で成分１９を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００３５】
処方例８  浴用剤
［処方］                                                      配合量
１．化合物１                                                ０．００５部
２．炭酸水素ナトリウム                                    ５０．０部
３．黄色２０２号                                            適量
４．香料                                                    適量
５．硫酸ナトリウムにて全量を１００とする。
［製造方法］成分１〜５を均一に混合し製品とする。
【実施例３】
【００３６】
実験例１  Ｂ１６マウスメラノーマを用いたメラニン生成抑制試験
対数増殖期にあるＢ１６マウスメラノーマをφ６０ｍｍ  ｄｉｓｈに３×１０４個の細胞を播種し、被験物質を含むＥａｇｌｅｓ’ＭＥＭ（１０％ＦＣＳを含む）を加え、３７℃、５％ＣＯ２条件下にて培養した。培養５日後に細胞をｄｉｓｈから剥離し、細胞を超音波破砕した後、４Ｎ−ＮａＯＨを加え６０℃で２時間の処理を行い、分光光度計でＯＤ４７５ｎｍを測定した。尚、超音波処理後の細胞破砕液をＬｏｗｒｙの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９５１、１９３、２６５−２７５）でタンパク定量し、タンパク量当りのメラニン量を比較することによって、メラニン生成抑制効果の指標とした。被験物質としては、化合物１および２、比較化合物としてメラニン生成抑制効果が知られている、アルブチンを供した。
【００３７】
その結果、表１に示したように、化合物１および２は優れたメラニン生成抑制効果を示した。
【００３８】
【表１】
0005236335.tif 000006
【００３９】
実験例２  臨床例
日焼け炎症後色素沈着した患者４名に対し、処方例２に示したクリームを１日２回患部に塗布し、２カ月間観察した。同時に比較例１の従来のクリームについても同様にして試験した。効果の判定は、−：変わらない、＋：うすくなった、＋＋：ほとんど消えた、＋＋＋：完全に消えた  の４段階とした。また、皮膚所見では、試験による悪化、炎症などの異常を観察した。
【００４０】
その結果、表２に示したように、処方例２のクリームにおいて、４例中３例に効果が認められた。これに対し、表３に示したように、比較例１の従来のクリームには効果が認められなかった。また、いずれのクリームにも皮膚の異常は認められなかった。
【００４１】
【表２】
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【００４２】
【表３】
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【００４３】
その他の処方例についても同様に使用試験を行ったところ、優れた美白効果を示した。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明のラノスタ−８−エン誘導体は、優れたメラニン生成抑制効果を示し、これらを含有する皮膚外用剤は、優れた美白効果を示した。これらは、化粧品、医薬部外品、医薬品等に応用可能である。