(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
酢酸４‐cis‐１‐（４‐アセトキシフェニル）オクタ‐４，７‐ジエニル、イソ酪酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブト‐３‐エニル、２，２‐ジメチルプロピオン酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブト‐３‐エニル、及び安息香酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブト‐３‐エニルから選ばれることを特徴とするキャビコール類縁体化合物。
【請求項２】
下記の構造式（１−３）：
【化１】
0005309591.tif 000016
（式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、炭素数２〜５のアルキルカルボニルオキシ基若しくはフェニルカルボニルオキシ基を表わし、ｎは０又は１を表わし、Ｒ３は、飽和もしくは不飽和の炭素数３〜８のアルキル基、又は水酸基が置換していてもよいフェニル基が置換した飽和もしくは不飽和の炭素数３〜８のアルキル基を表す）で表わされるキャビコール類縁体化合物を含有することを特徴とするＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害剤として用いられる新規なキャビコール類縁体化合物に関する。本発明は、さらに、この化合物の製造方法、及び、キャビコール類縁体化合物を含有するＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌には様々な抗癌剤が用いられており、またリウマチなどの炎症性疾患にはステロイド剤や免疫抑制剤が用いられている。
【０００３】
これらの抗癌剤やステロイド剤、免疫抑制剤は、作用は強力であるが、副作用が非常に強い問題がある。これに対し、生体内で特定のシグナル伝達を遮断する薬剤は、強力な作用が期待できる反面、副作用も少ないので、その重要性が高まっている。
【０００４】
ＭＡＰキナーゼ経路は細胞増殖のみならず紫外線や感染などのストレス応答、あるいは免疫、血管新生、アポトーシスなどの生体機能に深く関わっている。したがってＭＡＰキナーゼの過剰な活性化は発癌、癌の転移や炎症、免疫異常、感染といった病態の発症にも深く関与している。すなわち、ＭＡＰキナーゼシグナルは抗癌薬や抗炎症薬、血管新生阻害剤、癌の転移治療薬など細胞増殖の異常によって引き起こされる疾患の治療薬創製のターゲットとして魅力的なシグナル伝達経路である。そこで、ＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害剤の開発も期待されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、ＭＡＰキナーゼシグナル遮断作用を有し、癌や炎症性疾患あるいは過剰な血管新生に伴う病態および疾患の治療薬として有用な新規な化合物を提供することを課題とする。本発明は、又、この新規な化合物の製造方法を提供することも課題とする。本発明は、さらに、化合物のＭＡＰキナーゼ遮断作用を利用したＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害剤を提供することも課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、下記構造式（Ａ）：
【０００７】
【化１】
0005309591.tif 000002
【０００８】
（式中、Ａｃはアセチル基を表す。）
で表される１’Ｓ‐１’‐アセトキシキャビコールとその類縁体のＭＡＰキナーゼシグナル遮断機構について検討を行うとともに、種々のキャビコール類縁体についてそのＭＡＰキナーゼシグナル遮断作用を検討した結果、特定の種類のキャビコール類縁体が、強力なＭＡＰキナーゼシグナル遮断作用を有することを見出し本発明を完成した。
【０００９】
本発明は、その第一の態様として、下記の構造式（１）：
【００１０】
【化２】
0005309591.tif 000003
（式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、ヒドロキシ基、アシルオキシ基、又はアルコキシカルボニルオキシ基を表し、Ｒ３は、水素、又は飽和もしくは不飽和のアルキル基を表し、ｎは、０又は１を表す。）で表されることを特徴とするキャビコール類縁体化合物を提供する（請求項１）。
【００１１】
これらのキャビコール類縁体化合物は、強力なＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害作用を有し、抗癌剤、抗炎症剤、抗血管新生阻害剤として癌や炎症性疾患などの治療に優れた効果を奏する化合物である。ここで、アルキル基、アシルオキシ基又はアルコキシカルボニルオキシ基としては、炭素数が、１から１０程度のものが好ましく例示される。
【００１２】
前記の構造式（１）で表される化合物は、以下に示す方法により製造することができる。本発明は、この製造方法も提供するものである。
【００１３】
すなわち、４‐ヒドロキシベンズアルデヒドを、グリニャール試薬又は有機リチウム試薬等と反応させた後、水酸基をアシル化、アルコキシカルボニル化する方法により製造することができる。請求項２は、この態様に該当し、４‐ヒドロキシベンズアルデヒドを、下記の構造式（２）：
【００１４】
【化３】
0005309591.tif 000004
【００１５】
（式中Ｍは、ＭｇＸ又はＬｉを表し、ｎは０又は１を表し、ＸはＣｌ、Ｂｒ又はＩを表し、Ｒ３’は、飽和もしくは不飽和のアルキル基を表す。）で表されるグリニャール試薬又は有機リチウム試薬と反応させた後、水酸基のアシル化又はアルコキシカルボニル化を行うことを特徴とする下記の構造式（１−１）：
【００１６】
【化４】
0005309591.tif 000005
【００１７】
（式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、水酸基、アシルオキシ基、又はアルコキシカルボニルオキシ基を表し、ｎは０又は１を表し、Ｒ３は、水素、飽和もしくは不飽和のアルキル基を表す。）で表されるキャビコール類縁体化合物の製造方法、を提供するものである。
【００１８】
この製造方法においては、先ず、４‐ヒドロキシベンズアルデヒドと、構造式（２）のグリニャール試薬又は有機リチウムを、以下に示すように反応をさせて、下記の構造式（３）で表されるジオール化合物を得る。この反応は、通常のグリニャール反応や有機リチウムとの反応と同様な条件で行うことができ、例えば、金属ナトリウム等で完全に脱水（乾燥）されたエーテル類、例えばエチルエーテルやテトラヒドロフラン中で行われる。
【００１９】
【化５】
0005309591.tif 000006
【００２０】
そしてこのようにして得られたジオール化合物のフェノール性水酸基を、以下に示す反応でアシル化又はアルコキシカルボニル化することにより、構造式（４）で示されるアルコール化合物を得る。アシル化又はアルコキシカルボニル化は、通常のフェノール性水酸基のアシル化反応又はアルコキシカルボニル化反応と同様の条件で行うことができる。例えば、アシル化反応は無水酢酸や酸ハライド等を使用して行われる。又、アルコキシカルボニル化反応は、アルキル炭酸ハライド等を使用して行うことができる。
【００２１】
【化６】
0005309591.tif 000007
【００２２】
そしてこのようにして得られたアルコール化合物のアルコール性水酸基を、以下に示す反応でアシル化又はアルコキシカルボニル化することにより、構造式（１）で示され、Ｒ３が、水素、飽和もしくは不飽和のアルキル基であるキャビコール類縁体化合物を得る。このアシル化又はアルコキシカルボニル化も、通常のアルコール性水酸基のアシル化反応又はアルコキシカルボニル化反応と同様の条件で行うことができ、例えば、アシル化反応は無水酢酸や酸ハライド等を使用して行われる。又、アルコキシカルボニル化反応は、アルキル炭酸ハライド等を使用して行うことができる。
【００２３】
【化７】
0005309591.tif 000008
【００２４】
構造式（１）の化合物のうち、ｎが０であって、Ｒ３がフェニル基、ｐ‐アシルオキシフェニル基又はｐ‐アルコキシカルボニルオキシフェニル基のもの、すなわち下記の構造式（１−２）：
【００２５】
【化８】
0005309591.tif 000009
（式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、アシルオキシ基又はアルコキシカルボニルオキシ基を表し、Ｒ４は、水素、アシルオキシ基又はアルコキシカルボニルオキシ基を表す。）で表されるキャビコール類縁体化合物は、４‐ヒドロキシベンゾフェノン又は４，４’‐ジヒドロキシベンゾフェノンのフェノール性水酸基を保護基で保護した後、カルボニル基を還元し、その後、前記保護基を取り除いてジオール化合物又はトリオール化合物を得、このジオール化合物又はトリオール化合物に、アシル化又はアルコキシカルボニル化を行う方法により得ることができる。
【００２６】
４‐ヒドロキシベンゾフェノン又は４，４’‐ジヒドロキシベンゾフェノンのフェノール性水酸基の適切な保護基としてはシリル基が例示される。
【００２７】
例えば、当該保護基としてtert‐ブチルジメチルシリル基を用いた場合は、以下に示すシリル化反応が行われ、４‐ヒドロキシベンゾフェノンからは、下記構造式（５）の化合物であってＲ４がＨで表されるモノシリル体が、４，４’‐ジヒドロキシベンゾフェノンからはＲ４がtert‐ブチルジメチルシリルオキシ基で表されるジシリル体が得られる。このシリル化反応は、通常の水酸基のシリル化反応と同様の条件で行うことができる。
【００２８】
【化９】
0005309591.tif 000010
（式中、ＴＢＳはtert‐ブチルジメチルシリル基を表す。以下においても同様である。）
【００２９】
水酸基のシリル化後、水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ４）等の還元剤を使用して、４‐ヒドロキシベンゾフェノン又は４，４’‐ジヒドロキシベンゾフェノンのカルボニル基を還元し、その後ＴＢＳ等の保護基が取り除かれる（脱保護）。例えば脱ＴＢＳ反応には、フッ化テトラブチルアンモニウム等が用いられる。保護基がＴＢＳの場合、この還元反応及び脱保護基反応は以下の式で示され、４‐ヒドロキシベンゾフェノンからは、下記構造式（６）で表されＲ４がＨであるジオール体が、４，４’‐ジヒドロキシベンゾフェノンからはＲ４がＯＨであるトリオール体が得られる。この還元反応及び脱保護基反応とも、通常のカルボニル基の還元や脱保護基反応と同様の条件で行うことができる。
【００３０】
【化１０】
0005309591.tif 000011
【００３１】
そしてこのようにして得られたジオール化合物あるいはトリオール化合物を、以下に示す反応でアシル化、もしくはアルコキシカルボニル化することにより、構造式（７）で示されるアルコール化合物を得る。アシル化若しくはアルコキシカルボニル化も通常のフェノール性水酸基のアシル化反応と同様の条件で行うことができ、例えば、アシル化反応は無水酢酸や酸ハライド等を使用して行われ、又、アルコキシカルボニル化反応は、アルキル炭酸ハライド等を使用して行うことができる。
【００３２】
【化１１】
0005309591.tif 000012
【００３３】
そしてこのようにして得られたアルコール化合物を、以下に示す反応でアシル化、若しくはアルコキシカルボニル化することにより、構造式（１）で示されるキャビコール類縁体化合物を得る。アシル化若しくはアルコキシカルボニル化も通常のアルコール性水酸基のアシル化反応と同様の条件で行うことができ、例えば、アシル化反応は無水酢酸や酸ハライド等を使用して行われ、又、アルコキシカルボニル化反応は、アルキル炭酸ハライド等を使用して行うことができる。
【００３４】
【化１２】
0005309591.tif 000013
【００３５】
下記の構造式（１−３）：
【００３６】
【化１３】
0005309591.tif 000014
【００３７】
（式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ、水酸基、アシルオキシ基、又はアルコキシカルボニルオキシ基を表し、ｎは０又は１を表し、Ｒ３は、水素、飽和もしくは不飽和のアルキル基、フェニル基、ｐ‐アシルオキシフェニル基、又はｐ‐アルコキシカルボニルオキシフェニル基を表す。）で表されるキャビコール類縁体化合物は、優れたＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害作用を有し、抗癌剤、抗炎症剤、抗血管新生阻害剤として、癌や炎症性疾患治療に好適に用いられる。本発明は、この構造式（１−３）で表されるキャビコール類縁体化合物を含有することを特徴とするＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害剤も提供するものである（請求項３）。
【００３８】
構造式（１−３）で表されるキャビコール類縁体化合物には、前記の構造式（１）で表される化合物も含まれるが、これらは、前記の方法により製造することができる。又、構造式（１−３）で表されるキャビコール類縁体化合物の中で、前記の構造式（１）で表されるもの以外の化合物は、特開２００７−２３０９４９号に記載の方法等により製造することができる。
【００３９】
又、構造式（１−３）で表されるキャビコール類縁体化合物は、例えば、注射等により投与することにより、ＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害作用を示し、抗癌剤、抗炎症剤、抗血管新生阻害剤として使用することができる。
【発明の効果】
【００４０】
本発明のキャビコール類縁体化合物、すなわち前記の構造式（１）で表される化合物は、優れたＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害作用を有する。この本発明のキャビコール類縁体化合物は、本発明の製造方法により容易に得ることができる。
【００４１】
又、構造式（１−３）で表されるキャビコール類縁体化合物を含有することを特徴とする本発明のＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害剤は、抗癌剤、抗炎症剤、抗血管新生阻害剤として、癌や炎症性疾患治療に好適に用いられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４２】
次に本発明を実施するためのより具体的な形態を、実施例により説明する。なお、実施例は、本発明の範囲を限定するものではなく、本発明の趣旨を損なわない限り、他の形態へ変更することができる。
【００４３】
合成例１
４‐ヒドロキシベンズアルデヒドより、４‐（ヒドロキシフェニルメチル）フェニルメタノール（4-(hydroxyphenylmethyl)phenylmethanol）の合成
【００４４】
４‐ヒドロキシベンズアルデヒド（６．１ｇ、５０ｍｍｏｌ）と乾燥テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）の混合物に、アルゴン雰囲気下、フェニルリチウムの約１９％ジブチルエーテル溶液（５０ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）を、−７８℃にて３０分かけて滴下し１０分撹拌する。飽和塩化アンモニア水溶液を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）にて抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、乾燥後、溶媒留去する。得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４０：１）にて精製し、４‐（ヒドロキシフェニルメチル）フェニルメタノール（１５．５ｇ、９９％）を得た。
【００４５】
得られた化合物は無色結晶であり、融点、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より得られた化合物は、４‐（ヒドロキシフェニルメチル）フェニルメタノールであると確認された。
【００４６】
ｍｐ：  １６３〜１６５℃
ＩＲ（ＫＢｒ）：  ３４０２ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）  δ： 5.69 (1H, s), 6.74 (2H, d, J = 8.6 Hz), 7.16 (2H, d, J = 8.6 Hz), 7.20-7.36 (5H, m)
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）  δ： 76.6 (d), 116.0 (d), 127.5 (d), 128.0 (d), 129.1 (d x 2), 136.8 (s), 146.0 (s), 157.6 (s)
ＥＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２００［Ｍ］＋
【００４７】
合成例２
４‐（メトキシカルボニルオキシフェニルメチル）フェニルメチルカーボネート（4-(methoxycarbonyloxyphenylmethyl)phenyl methyl carbonate）の合成
合成例１で得られた４‐（ヒドロキシフェニルメチル）フェニルメタノール（８００ｍｇ、４ｍｍｏｌ）と乾燥ピリジン（２ｍＬ）の混合物に、メチル炭酸クロリド（０．７７ｍＬ、１０．０ｍｍｏｌ）を０℃にて加える。３０分撹拌し、水を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）にて抽出した。抽出液を１０％塩酸、飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄し、溶媒留去し、得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３０：１）で精製し４‐（メトキシカルボニルオキシフェニルメチル）フェニルメチルカーボネート（１．０９ｍｇ、８６％）を得た。
【００４８】
得られた化合物は無色油状物質であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物は４‐（メトキシカルボニルオキシフェニルメチル）フェニルメチルカーボネートであると確認された。
【００４９】
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  １７３２ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 3.79 (3H, s), 3.89 (3H, s), 6.70, (1H, s), 7.15 (2H, d, J = 8.9 Hz), 7.28.10-7.39 (7H, m).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 54.8 (q), 55.2 (q), 79.9 (q), 121.0 (d), 126.8 (d),128.10 (d), 128.14 (d), 128.4 (d), 137.4 (s), 139.2 (s), 150.7 (s), 153.9 (s), 154.9 (s).
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３１６［Ｍ］＋
ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３１６．０９４３（Ｃ１７Ｈ１６Ｏ５，理論値：３１６．０９４７）
【００５０】
実施例１
フェニルリチウムの代わりに、３‐cis‐ヘプタ‐３，６‐ジエニルマグネシウムブロマイドを用いた以外は合成例１と同様に、又、メチル炭酸クロリドの変わりに無水酢酸を用いた以外は合成例２と同様にして、酢酸４‐cis‐１‐（４‐アセトキシフェニル）オクタ‐４，７‐ジエニルを得た。
【００５１】
得られた化合物は無色油状物質であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物は酢酸４‐cis‐１‐（４‐アセトキシフェニル）オクタ‐４，７‐ジエニルであると確認された。
【００５２】
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  1740, 1360ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 1.79-2.22 (4H, m), 2.08 (3H, s), 2.30 (3H, s), 4.64 (2H, t, J = 6.4 Hz), 4.81-5.04 (2H, m), 5.45 (1H, m), 5.85 (2H, m), 7.06 (2H, d, J = 8.6 Hz), 7.34 (2H, d, J = 8.6 Hz).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 21.2 (q), 21.3 (q), 29.7 (t), 31.2 (t), 35.4 (t), 74.9 (d), 114.9 (t), 121.7 (d), 127.4 (d), 127.8 (d), 126.8 (d), 128.6 (d), 136.7 (t), 138.1, (s), 150.1 (s), 169.1 (s), 170.2 (s).
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３０２［Ｍ］＋
ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３０２．１５０９（Ｃ18Ｈ22Ｏ4，理論値：３０２．１５１８）
【００５３】
実施例２
フェニルリチウムの代わりに、アリルマグネシウムブロマイドを用いた以外は合成例１と同様に、又、メチル炭酸クロリドの変わりに無水酢酸、イソ酪酸クロリドを順次用いた以外は合成例２と同様にして、イソ酪酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブト‐３‐エニルを得た。
【００５４】
得られた化合物は無色油状物質であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物はイソ酪酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブト‐３‐エニルであると確認された。
【００５５】
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  1765, 1735ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 1.16 (3H, t, J = 7.6, 7.6 Hz), 2.34 (2H, q, J = 7.6, 7.6, 7.6 Hz), 2.35-2.70 (2H, m), 5.03-5.10 (2H, m), 5.66 (1H, ddt, J = 13.8, 10.3, 6.8, 6.8 Hz), 5.80 (1H, dd, J = 7.6, 5.9 Hz), 7.06 (2H, J = 8.4 Hz), 7.34 (2H, d, J = 8.4 Hz).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 9.1 (q), 21.1 (q), 27.7 (t), 40.7 (t), 74.2 (d), 118.1 (t), 121.5 (d), 127.7 (d), 133.7 (d), 137.8 (s), 150.2 (s), 169.4 (s), 173.5 (s).
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２７６［Ｍ］＋
ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２７６．１３５２（Ｃ16Ｈ20Ｏ4，理論値：２７６．１３６２）
【００５６】
実施例３
フェニルリチウムの代わりに、アリルマグネシウムブロマイドを用いた以外は合成例１と同様に、又、メチル炭酸クロリドの変わりに無水酢酸、ピバリン酸クロリドを順次用いた以外は合成例２と同様にして、２，２‐ジメチルプロピオン酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブト‐３‐エニルを得た。
【００５７】
得られた化合物は無色油状物質であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物は２，２‐ジメチルプロピオン酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブト‐３‐エニルであると確認された。
【００５８】
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  1766, 1732ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 1.20 (9H, s), 2.29 (3H, s), 2.42-2.68 (2H, m), 5.67 (1H, ddt, J = 17.0, 10.3, 6.8, 6.8 Hz), 5.78 (1H, dd, J = 7.6, 5.6 Hz), 7.05 (2H, d, J = 8.6 Hz), 7.32 (2H, d, J = 8.6 Hz).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 21.1 (q), 27.0 (q), 41.1 (s), 74.0 (d), 118.1 (t), 121.5 (d), 127.3 (d), 133.2 (d), 138.1 (d), 141.1 (s), 150.1 (s), 166.5 (s), 169.4 (s).
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２９０［Ｍ］＋
ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２９０．１５０２（Ｃ17Ｈ22Ｏ4，理論値：２９０．１５１８）
【００５９】
実施例４
フェニルリチウムの代わりに、アリルマグネシウムブロマイドを用いた以外は合成例１と同様に、又、メチル炭酸クロリドの変わりに無水酢酸、安息香酸クロリドを順次用いた以外は合成例２と同様にして、安息香酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブト‐３‐エニルを得た。
【００６０】
得られた化合物は無色油状物質であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物は安息香酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブト‐３‐エニルであると確認された。
【００６１】
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  1767, 1716ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 12.33 (3H, s), 2.62-2.85 (2H, m), 5.05-5.16 (2H, m), 5.77 (1H, ddt, J = 17.0, 10.3, 6.8, 6.8 Hz), 6.05 (1H, dd, J = 7.6, 5.9 Hz), 7.08 (2H, d, J = 11.1 Hz), 7.35 (7H, m), 8.05 (2H, d, J = 8.6 Hz).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 21.1 (q), 40.9 (t), 75.1 (d), 118.4 (t), 121.5 (d), 127.6 (d), 128.9 (d), 129.6 (d), 130.2 (s), 132.9 (d), 133.0 (d), 137.7 (d), 150.3 (s), 165.6 (s), 169.3 (s).
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３１１［Ｍ＋Ｈ］＋
ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３１１．１２４６（Ｃ19Ｈ19Ｏ4，理論値：３１１．１２８３）
【００６２】
実施例５
フェニルリチウムの代わりに、ｎ‐プロピルマグネシウムブロマイドを用いた以外は合成例１と同様に、又、メチル炭酸クロリドの変わりに無水酢酸を用いた以外は合成例２と同様にして、酢酸１‐（４‐アセトキシフェニル）ブチルを得た。
【００６３】
実施例６
フェニルリチウムの代わりに、エチルマグネシウムブロマイドを用いた以外は合成例１と同様に、又、メチル炭酸クロリドの変わりにプロピオン酸クロリドを用いた以外は合成例２と同様にして、プロピオン酸１‐（４‐プロピオニルオキシフェニル）プロピルを得た。
【００６４】
実施例７
フェニルリチウムの代わりに、ビニルマグネシウムブロマイドを用いた以外は合成例１と同様に、又、メチル炭酸クロリドの変わりに無水酢酸を用いた以外は合成例２と同様にして、酢酸１‐（４‐アセトキシフェニル）アリルを得た。
【００６５】
実施例８
フェニルリチウムの代わりに、３，４‐ビス（ベンジルオキシ）フェニルビニルマグネシウムブロマイドを用いた以外は合成例１と同様に、又、メチル炭酸クロリドの変わりに無水酢酸を用いた以外は合成例２と同様にして、さらに、Ｐｄ‐Ｃ触媒存在下、エタノール中、水素雰囲気下でベンジル基を脱保護することにより、酢酸１‐（４‐アセトキシフェニル）‐３‐（３，４‐ジハイドロキシフェニル）アリルを得た。
【００６６】
合成例３
特開２００７−２３０９４９号の実施例２の方法で、４‐（メトキシカルボニルオキシフェニルメチル）フェニルメチルカーボネートを得た。
【００６７】
合成例４
特開２００７−２３０９４９号の実施例３の方法で、酢酸ビス‐（４‐アセトキシフェニル）メチルを得た。
【００６８】
合成例５
特開２００７−２３０９４９号の実施例４の方法で、酢酸１‐（４‐アセトキシフェニル）‐２‐フェニルエチルを得た。
【００６９】
合成例６
無水酢酸の代わりに塩化プロピオニルを、メチル炭酸クロリドの代わりに塩化プロピオニルを用いた以外は、特開２００７−２３０９４９号の実施例１と同様な方法によりプロピオン酸フェニル‐（４‐プロピオニルオキシフェニル）メチルを得た。
【００７０】
得られた化合物は無色油状物質であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物はプロピオン酸フェニル‐（４‐プロピオニルオキシフェニル）メチルであると確認された。
【００７１】
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  1740ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 1.17 (3H, t, J = 7.6 Hz), 1.25, (3H, t, J = 7.6 Hz), 2.44 (2H, q, J = 7.6 Hz), 2.57 (2H, t, J = 7.6 Hz), 6.89, (1H, s), 7.45 (2H, d, J = 8.6 Hz), 7.26-7.35 (7H, m).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 8.9 (q), 27.6 (t), 27.7 (t), 75.9 (d), 121.5 (d), 126.9 (d), 127.8 (d), 128.2 (d), 128.4 (d), 137.7 (s), 140.0 (d), 150.2 (s), 172.7 (s), 173.1 (s).
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３１３［Ｍ＋Ｈ］＋
ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３１２．１３６０（Ｃ19Ｈ20Ｏ4，理論値：３１２．１３６２）
【００７２】
合成例７
メチル炭酸クロリドの代わりにイソ酪酸クロリドを用いた以外は、特開２００７−２３０９４９号の実施例１と同様な方法により、イソ酪酸（４‐アセトキシフェニル）フェニルメチルを得た。
【００７３】
得られた化合物は無色油状物質であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物はイソ酪酸（４‐アセトキシフェニル）フェニルメチルであると確認された。
【００７４】
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  1759, 1736ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 1.20 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.28, (3H, d, J = 6.8 Hz), 2.65 (1H, spt., J = 7.0 Hz), 2.77 (1H, spt., J = 6.8 Hz), 6.87, (1H, s), 7.04 (2H, d, J = 8.6 Hz), 7.22-7.35 (7H, m).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 18.8 (q), 34.0 (d), 34.1 (d), 75.8 (d), 121.4 (d), 126.8 (d), 127.9 (d), 128.1 (d), 128.4 (d), 137.7 (s), 140.1 (d), 150.3 (s), 172.7 (s), 175.3 (s), 175.7, (s).
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３４０［Ｍ＋Ｈ］＋
ＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３４０．１６８７（Ｃ21Ｈ24Ｏ4，理論値：３４０．１６７５）
【００７５】
合成例８
メチル炭酸クロリドの代わりにピバルクロリドを用いた以外は、特開２００７−２３０９４９号の実施例１と同様な方法により、２，２‐ジメチルプロピオン酸（４‐アセトキシフェニル）フェニルメチルを得た。
【００７６】
得られた化合物は無色油状物質であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物は２，２‐ジメチルプロピオン酸（４‐アセトキシフェニル）フェニルメチルであると確認された。
【００７７】
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  1732 1768ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 1.24 (9H, s), 2.25 (3H, s), 6.83 (1H, s), 7.05 (2H, d, J = 8.6 Hz), 7.23-7.35 (7H, m).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 20.9 (q), 27.0 (q), 38.8 (s), 75.9 (d), 121.5 (d), 126.8 (d), 127.8 (d),128.0, (d), 128.4 (d), 150.1 (s), 169.2(s), 177.1 (s).
ＥＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３２６［Ｍ］＋
ＨＲ−ＥＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３２６．１５３０（Ｃ20Ｈ22Ｏ4，理論値：３２６．１５１８）
【００７８】
合成例９
無水酢酸の代わりにメチル炭酸クロリドを用いた以外は、特開２００７−２３０９４９号の実施例３と同様な方法により、ビス‐（４‐メトキシカルボニルオキシフェニルメチル）メチルカーボネートを得た。
【００７９】
得られた化合物は無色結晶であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物はビス‐（４‐メトキシカルボニルオキシフェニルメチル）メチルカーボネートであると確認された。
【００８０】
ｍｐ：  84-86  ℃
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  1743, 1720ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 3.15 (3H, s), 3.29 (6H, s), 6.88 (1H, s), 7.06 (4H, d, J = 8.4Hz), 7.33 (4H, d, J = 8.4 Hz).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 41.1 (q), 41.2 (q), 75.6 (d), 121.6 (d), 128.3 (d), 137.4 (s), 150.3 (s), 169.3 (s), 170 (s).
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３９１［Ｍ＋Ｈ］＋
ＨＲ−ＦＳＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：３９１．１０２５（Ｃ19Ｈ19Ｏ9，理論値：３９１．１０２９）
【００８１】
合成例１０
メチル炭酸クロリドの代わりに塩化プロピオニルを用いた以外は、特開２００７−２３０９４９号の実施例１と同様な方法により、プロピオン酸（４‐アセトキシフェニル）フェニルメチルを得た。
【００８２】
得られた化合物は無色油状物質であり、赤外スペクトル、ＮＭＲ測定等の結果は以下に示すとおりであった。この結果より、得られた化合物はプロピオン酸（４‐アセトキシフェニル）フェニルメチルであると確認された。
【００８３】
ＩＲ（ｎｅａｔ）：  2982, 1740ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 1.17 (3H, t, J = 7.6 Hz), 2.28 (3H, s), 2.44 (2H, q, J = 7.6 Hz), 6.89 (1H, s), 7.05 (2H, d, J = 8.7 Hz), 7.24-7.35 (7H, m).
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： 9.0, 21.1, 27.8, 76.0, 121.6, 127.0, 128.0, 128.3, 128.5, 137.9, 140.0, 150.2, 169.3, 173.3.
ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２９８［Ｍ＋Ｈ］＋
ＨＲ−ＦＳＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：２９８．１２０５（Ｃ18Ｈ18Ｏ4，理論値：２９８．１１８３）
【００８４】
実施例９  ＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害作用の検討
モデル細胞である分裂酵母カルシニューリン遺伝子ノックアウト細胞（h+ leu1 ura4-D18 ppb1::ura4+）を用い、塩化マグネシウム含有培地での生育を判定することでＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害の指標とし、ＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害作用を検討した。
【００８５】
分裂酵母カルシニューリン遺伝子ノックアウト細胞（h+ leu1 ura4-D18 ppb1::ura4+）を対数増殖期まで培養後（ＹＰＤ液体培地）、０．１１ＭのＭｇＣｌ２を添加したＹＰＤ寒天培地に、カルシニューリン遺伝子ノックアウト細胞を、２．０×１０５ｃｅｌｌｓ／ｐｌａｔｅずつ播種した。ｐｌａｔｅに円形のろ紙（直径３ｍｍ）を置き、ろ紙上にＤＭＳＯに溶解させた試験化合物を５μＬ（２０ｎｍｏｌ）ずつ添加した。対照として、化合物を含まないＤＭＳＯ溶液もろ紙上に添加し、ｐｌａｔｅを３０℃で培養した。
【００８６】
３日間培養した後、細胞増殖の程度を判定した。表１にその結果を示す。ろ紙の周囲に細胞増殖が顕著に認められた場合＋＋、軽度に細胞増殖が認められた場合＋、わずかに細胞増殖が認められた場合±と判定した。化合物を含まないＤＭＳＯのみを添加した場合にはろ紙周囲の細胞増殖は認められない（判定−）。
【００８７】
表１に示す結果より明らかなように、構造式（１−３）で表される化合物を加えた場合は、カルシニューリンノックアウト細胞増殖括性が示され、ＭＡＰキナーゼシグナル伝達阻害作用があることが示された。
【００８８】
【表１】
0005309591.tif 000015