(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジペプチドとして式
【化１】
0005198065.tif 000010
(式中、Xはアラニル、グリシル、アルギニル、セリル、α-アスパルチルまたはα-グルタミルを表し、Yはバリン、ロイシンまたはイソロイシンを表す)で表されるジペプチドを含有する錠剤または顆粒剤であって、ジペプチドとしてYがバリンであるジペプチド、YがロイシンであるジペプチドおよびYがイソロイシンであるジペプチドのそれぞれ１種以上のみを含むことを特徴とする錠剤または顆粒剤。
【請求項２】
Xがアラニル、アルギニルまたはα-グルタミルである請求項１記載の錠剤または顆粒剤。
【請求項３】
さらにバリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる１種以上のアミノ酸を含むことを特徴とする請求項１または２記載の錠剤または顆粒剤。
【請求項４】
組成物中の総ロイシン含量が、総バリン含量または総イソロイシン含量の１〜３倍である請求項１〜３のいずれかに記載の錠剤または顆粒剤。
【請求項５】
ジペプチドとして式
【化２】
0005198065.tif 000011
(式中、Xはアラニル、グリシル、アルギニル、セリル、α-アスパルチルまたはα-グルタミルを表し、Yはバリン、ロイシンまたはイソロイシンを表す)で表されるジペプチドを含有する飲料であって、ジペプチドとしてYがバリンであるジペプチド、YがロイシンであるジペプチドおよびYがイソロイシンであるジペプチドのそれぞれ１種以上のみを含むことを特徴とする飲料。
【請求項６】
Xがアラニル、アルギニルまたはα-グルタミルである請求項５記載の飲料。
【請求項７】
さらにバリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる１種以上のアミノ酸を含むことを特徴とする請求項５または６記載の飲料。
【請求項８】
組成物中の総ロイシン含量が、総バリン含量または総イソロイシン含量の１〜３倍である請求項５〜７のいずれかに記載の飲料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アミノ酸または構成アミノ酸として、バリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1以上を含む経口用の組成物に関する。本明細書中における「アミノ酸」とは、モノマーのアミノ酸を意味し、「構成アミノ酸」とは、蛋白質およびペプチド中のアミノ酸を意味する。
【背景技術】
【０００２】
分岐鎖アミノ酸(BCAA)として知られるバリン、ロイシンおよびイソロイシンは、必須アミノ酸として、長年、栄養食品、輸液用栄養組成物等の成分として使われてきた。また、例えばバリン、ロイシンおよびイソロイシンを有効成分として含む組成物は、例えば筋肉疲労軽減等の生理効果を持つため、スポーツ用栄養補助剤等に広く用いられている。さらに、例えばバリン、ロイシンおよびイソロイシンを有効成分として含む組成物は、肝疾患治療用の医薬品、晩発性運動障害の治療等に用いる医療食等としても知られている。【０００３】
BCAAを経口摂取するための形態としては、飲料、顆粒、錠剤等があるが、BCAAは独特の苦味を有するので、これら飲料、顆粒、錠剤等においては、味に工夫が必要である。また、BCAAを含有する錠剤を製造しようとした場合、圧縮成形機の杵臼へのBCAAの付着、キャッピング、スティッキング等の圧縮成形障害を起こし易く、錠剤の製造が困難であるので、これらの圧縮成形障害を防止する必要があった。【０００４】
一方、C末端がロイシンであるジペプチドを含有する輸液用栄養組成物が特許文献1に記載されており、C末端がロイシンであるジペプチドと、バリンおよびイソロイシンとを含有する輸液用栄養組成物が特許文献2に記載されており、N末端がα-アスパルチルであり、C末端がバリン、ロイシンまたはイソロイシンであるジペプチドを含有する輸液用栄養組成物が特許文献3に記載されている。また、N末端がグリシルであり、C末端がバリン、ロイシンまたはイソロイシンであるジペプチドを含有する液体状の栄養組成物が特許文献4に記載されている。【０００５】
また、C末端がロイシン、イソロイシンまたはバリンであるジペプチドの、微生物を用いた製造法が特許文献5に記載されている。
【特許文献１】特開平2-22232号公報
【特許文献２】特開平3-127737号公報
【特許文献３】特開昭62-151156号公報
【特許文献４】特開昭61-247354号公報
【特許文献５】国際公開第2004/58960号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、栄養、薬理効果等が高く、より味覚に優れた、アミノ酸または構成アミノ酸として、バリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1以上を含む経口用の組成物を提供することにあり、また、溶解性や打錠性が優れている等加工特性の優れた、アミノ酸または構成アミノ酸として、バリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1以上を含む経口用の組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は以下の(1)〜(9)に関する。
(1) 式【０００８】
【化１】
0005198065.tif 000002
(式中、Xはアラニル、グリシル、アルギニル、セリル、α-アスパルチルまたはα-グルタミルを表し、Yはバリン、ロイシンまたはイソロイシンを表す)で表されるジペプチドの1種以上を含有することを特徴とする経口用の組成物。
(2) Xがアラニル、アルギニルまたはα-グルタミルである前記(1)記載の組成物。
(3) 組成物が、栄養食品または経口用医薬品である前記(1)または(2)記載の組成物。
(4) 組成物が、錠剤または顆粒剤である前記(3)記載の組成物。
(5) 組成物が、飲料である前記(3)記載の組成物。
(6) Yがバリンであるジペプチド、YがロイシンであるジペプチドおよびYがイソロイシンであるジペプチドのそれぞれ1種以上を含むことを特徴とする前記(1)〜(5)のいずれかに記載の組成物。
(7) さらにバリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1種以上のアミノ酸を含むことを特徴とする前記(6)記載の組成物。
(8) さらにバリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1種以上のアミノ酸を含み、該アミノ酸と前記ジペプチドの構成アミノ酸とを合わせて、バリン、ロイシンおよびイソロイシンを含むことを特徴とする前記(1)〜(5)のいずれかに記載の組成物。
(9) 組成物中の総ロイシン含量が、総バリン含量または総イソロイシン含量の1〜3倍である前記(6)〜(8)のいずれかに記載の組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、栄養、薬理効果等が高く、より味覚に優れた、バリン、ロイシンまたはイソロイシンを含むジペプチドの1種以上を含有する経口用の組成物が提供され、また、バリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1以上を、ジペプチド化することにより、溶解性や打錠性が改善された、バリン、ロイシンまたはイソロイシンを含むジペプチドの1種以上を含有する経口用の組成物が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明の組成物は、式1【００１１】
【化２】
0005198065.tif 000003
(式中、Xはアラニル、グリシル、アルギニル、セリル、α-アスパルチルまたはα-グルタミルを表し、Yはバリン、ロイシンまたはイソロイシンを表す)で表されるジペプチド(以下、ジペプチド(1)とする)の1種以上を含有する。【００１２】
本発明におけるジペプチド(1)に属するジペプチドとしては、アラニルバリン、アラニルロイシン、アラニルイソロイシン、グリシルバリン、グリシルロイシン、グリシルイソロイシン、アルギニルバリン、アルギニルロイシン、アルギニルイソロイシン、セリルバリン、セリルロイシン、セリルイソロイシン、α-アスパルチルバリン、α-アスパルチルロイシン、α-アスパルチルイソロイシン、α-グルタミルバリン、α-グルタミルロイシンおよびα-グルタミルイソロイシンがあげられ、好ましくはアラニルバリン、アラニルロイシン、アラニルイソロイシン、アルギニルバリン、アルギニルロイシン、アルギニルイソロイシン、α-グルタミルバリン、α-グルタミルロイシンおよびα-グルタミルイソロイシンがあげられ、より好ましくはアラニルバリン、アラニルロイシンおよびアラニルイソロイシンがあげられる。本発明の組成物に含有されるジペプチド(1)は、1種または2種以上の組み合わせのいずれであってもよい。【００１３】
また、本発明におけるジペプチド(1)は塩であってもよく、そのような塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、酢酸塩等の有機酸または無機酸との塩、ナトリウム塩、カリウム塩等の塩基との塩等があげられる。本発明におけるジペプチド(1)はいずれも構成アミノ酸として、バリン、ロイシンまたはイソロイシンを含む組成物である。【００１４】
本発明におけるジペプチド(1)はどのような製造方法によって得られたものでもよく、
具体的な製造方法としては、天然物やタンパク質の加水分解等により得られる天然由来物からの抽出精製法、アミノ酸を固相法または液相法によりペプチド結合を形成させる化学合成法、アミノ酸を酵素または微生物を用いて結合させる生化学的合成法等があげられるが、大量に合成する方法としては生化学的合成法である特許文献5記載の方法が適している。【００１５】
本発明の組成物としては、Yがバリンであるジペプチド、YがロイシンであるジペプチドおよびYがイソロイシンであるジペプチドのそれぞれ1種以上を含む組成物であることが好ましい。かかる組成物としては、例えばアラニルロイシン、アラニルイソロイシンおよびアラニルバリンを含有する組成物、グリシルロイシン、グリシルイソロイシンおよびグリシルバリンを含む組成物、アルギニルロイシン、アルギニルイソロイシンおよびアルギニルバリンを含む組成物、セリルロイシン、セリルイソロイシンおよびセリルバリンを含む組成物、α-アスパルチルロイシン、α-アスパルチルイソロイシンおよびα-アスパルチルバリンを含む組成物、α-グルタミルロイシン、α-グルタミルイソロイシンおよびα-グルタミルバリンを含む組成物等があげられ、これらの組成物には、ジペプチド(1)以外に、さらにバリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1以上のアミノ酸を含んでいてもよい。【００１６】
また、本発明の組成物としては、ジペプチド(1)以外に、さらにバリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1以上のアミノ酸を含んで、該アミノ酸とジペプチド(1)の構成アミノ酸と合わせて、バリン、ロイシンおよびイソロイシンを含む組成物であることも好ましい。かかる組成物としては、アラニルロイシン、イソロイシンおよびバリンを含む組成物、アラニルロイシン、アラニルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、アラニルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、イソロイシンおよびアラニルバリンを含む組成物、グリシルロイシン、イソロイシンおよびバリンを含む組成物、グリシルロイシン、グリシルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、グリシルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、イソロイシンおよびグリシルバリンを含む組成物、アルギニルロイシン、イソロイシンおよびバリンを含む組成物、アルギニルロイシン、アルギニルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、アルギニルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、イソロイシンおよびアルギニルバリンを含む組成物、セリルロイシン、イソロイシンおよびバリンを含む組成物、セリルロイシン、セリルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、セリルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、イソロイシンおよびセリルバリンを含む組成物、α-アスパルチルロイシン、イソロイシンおよびバリンを含む組成物、α-アスパルチルロイシン、α-アスパルチルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、α-アスパルチルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、イソロイシンおよびα-アスパルチルバリンを含む組成物、α-グルタミルロイシン、イソロイシンおよびバリンを含む組成物、α-グルタミルロイシン、α-グルタミルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、α-グルタミルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、イソロイシンおよびα-グルタミルバリンを含む組成物等があげられ、より好ましくはロイシン、アラニルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、グリシルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、アルギニルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、セリルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、α-アスパルチルイソロイシンおよびバリンを含む組成物、ロイシン、α-グルタミルイソロイシンおよびバリンを含む組成物があげられる。【００１７】
また、本発明の組成物は必要により他のアミノ酸を含んでいてもよい。他のアミノ酸としては、例えば脂肪族アミノ酸(具体的には、グリシン、アラニン等)、ヒドロキシアミノ酸(具体的には、セリン、トレオニン等)、酸性アミノ酸(具体的には、アスパラギン酸、
グルタミン酸等)、酸性アミノ酸アミド(具体的には、アスパラギン、グルタミン等)、塩基性アミノ酸(具体的には、リジン、ヒドロキシリジン、アルギニン、オルニチン等)、含硫アミノ酸(具体的には、システイン、シスチン、メチオニン等)、芳香族アミノ酸(具体的には、フェニルアラニン、チロシン、チロニン等)、複素環式アミノ酸(具体的には、トリプトファン、ヒスチジン等)、イミノ酸(具体的には、プロリン、4-ヒドロキシプロリン等)等があげられる。【００１８】
また、本発明の組成物では、総ロイシン含量が、総バリン含量または総イソロイシン含量の1〜3倍であることが好ましく、好ましくは1.5〜2.5倍、とりわけ好ましくは1.6〜2倍である。ここで、総ロイシン含有量とは、組成物中のアラニルロイシン、グリシルロイシン、アルギニルロイシン、セリルロイシン、α-アスパルチルロイシンおよびα-グルタミルロイシンから選ばれる1以上のジペプチドの構成アミノ酸のロイシンに相当する含量と、必要により含まれているロイシンの含量との合計のことであり、総イソロイシン含有量は、組成物中のアラニルイソロイシン、グリシルイソロイシン、アルギニルイソロイシン、セリルイソロイシン、α-アスパルチルイソロイシンおよびα-グルタミルイソロイシンから選ばれる1以上のジペプチドの構成アミノ酸のイソロイシンに相当する含量と、必要により含まれているイソロイシンの含量との合計のことであり、総バリン含有量は、組成物中のアラニルバリン、グリシルバリン、アルギニルバリン、セリルバリン、α-アスパルチルバリンおよびα-グルタミルバリンから選ばれる1以上のジペプチドの構成アミノ酸のバリンに相当する含量と、必要により含まれているバリンの含量との合計のことである。【００１９】
本発明の組成物は、いかなる形態でも構わないが、好ましくは食品または医薬品であることが好ましい。食品とは例えばサプリメント、清涼飲料、栄養補助食品、栄養機能性食品、特定保険食品等の健康食品、患者への食事療法を目的として提供される医療食等を示し、医薬品とは医療用医薬品、一般用医薬品、医薬部外品等を示す。
本発明の組成物は、例えば医薬品における輸液、注射剤等にも適応しえるが、経口で用いられる栄養食品または経口用医薬品であることが好ましい。栄養食品とは、前記食品のうちの例えばバリン、ロイシン、イソロイシン等の栄養成分の補給を目的とするものを示し、経口用医薬品とは前記医薬品のうち例えばバリン、ロイシン、イソロイシン等の薬効成分の経口摂取を目的とするものを示す。経口で用いることのできる形態としては、錠剤、顆粒剤、飲料等があげられる。【００２０】
本発明において、錠剤とは普通錠、コーテイング錠、徐放錠、口腔内速崩壊錠、バッカル錠、チュアブル錠等を示し、顆粒剤としては、通常の顆粒剤、細粒剤、丸剤、散剤等を示す。なお、顆粒剤としては使用時に水等の溶液に溶解させてヒトに提供することを目的とした形態(例えば、ドライシロップ等)のものも含まれる。
本発明において、飲料とは、前記の清涼飲料水のみならず他の商品分類に属するものであっても飲料形態を示すもの全てを示し、医薬品における飲料とは液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を示し、医療食における飲料とは栄養食品と同義のものを示す。【００２１】
本発明において、錠剤または顆粒剤は、例えばジペプチド(1)に必要により前記アミノ酸を加えこれらを主活性成分とし、それ以外に、通常の栄養食品または医薬品において用いられる通常の賦形剤、崩壊剤等を含有してもよい。また、更に結合剤、滑沢剤、その他の添加成分等を所望により含有させることもできる。錠剤または顆粒剤中で前記主活性成分が占める割合は、好ましくは約15〜95質量%、より好ましくは約30〜90質量%、さらに好ましくは約60〜80質量%である。【００２２】
賦形剤としては、例えば糖類(単糖類、二糖類、多糖類)、糖アルコール等があげられ、好ましくは、単糖類、二糖類、糖アルコールがあげられる。錠剤または顆粒剤中で賦形剤が占める割合は、好ましくは約15〜90質量%、より好ましくは約15〜60質量%、さらに好ましくは約20〜40質量%である。
単糖類または二糖類としては、例えば、乳糖、ショ糖、マルトース、トレハロース等があげられる。糖アルコールとしては、例えばマンニトール、還元麦芽糖水飴、マルチトール、マルトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール、エリスリトール等があげられる。単糖類、二糖類または糖アルコールは、アミノ酸の種類や配合比、含有量等によって任意に1種または2種以上の組み合わせから選択することができる。【００２３】
また、賦形剤としての多糖類として、好ましくはβ-シクロデキストリン、結晶セルロース等があげられ、特に口腔速崩壊錠剤の形態において、β-シクロデキストリンが好ましい。【００２４】
崩壊剤としては、例えば、コーンスターチ、バレイショデンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クロスポビドン、クロスカルメロースナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム等があげられ、好ましくはカルボキシメチルセルロースカルシウムまたはデンプングリコール酸ナトリウムがあげられる。錠剤または顆粒剤中で崩壊剤が占める割合は、好ましくは0.5〜20質量%、より好ましくは0.5〜5質量%、さらに好ましくは0.5〜2質量%である。【００２５】
結合剤としては、例えばメチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、プルラン、アクリル酸系高分子、ポリビニルアルコール、ゼラチン、寒天、アラビアゴム、アラビアゴム末、部分α化デンプン、マクロゴール等があげられる。錠剤または顆粒剤中で結合剤が占める割合は、好ましくは0.5〜5質量%、より好ましくは0.5〜3質量%、さらに好ましくは0.5〜2質量%である。【００２６】
滑沢剤としては、例えば、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、フマル酸ステアリルナトリウム、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム、軽質無水ケイ酸、含水二酸化ケイ素、ショ糖脂肪酸エステル等があげられる。錠剤または顆粒剤中で滑沢剤が占める割合は、好ましくは0.05〜10質量%、より好ましくは0.1〜5質量%、さらに好ましくは0.1〜3質量%である。【００２７】
その他の添加成分としては、ベータカロチン、食用黄色5号、食用赤色2号、食用青色2号等の食用色素、食用レーキ色素、ベンガラナイアシン等の着色剤、ビタミンE、アスコルビン酸、ビタミンB類、ビタミンA、ビタミンDまたはこれらの誘導体等のビタミン類、カルシウム、マグネシウム、ナトリウム等のミネラル類、アスパルテーム、グルコース、フルクトース、スクラロース、ステビア、サッカロース、サッカリンナトリウム、ソーマチン、アセスルファムカリウム等の甘味料、二酸化ケイ素、ケイ酸カルシウム、合成ケイ酸アルミニウム、タルク、リン酸水素カルシウム等の固化防止剤、重曹等の発泡剤、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸等の酸味料、レモンフレーバー、レモンライムフレーバー、オレンジフレーバー、グレープフルーツフレーバー、メントール等の香料等が挙げられ、これらの中から1種又は2種以上を所望により使用することができる。錠剤または顆粒剤中でその他の添加成分が占める割合は、好ましくは0.01〜5質量%、より好ましくは0.1〜3質量%、さらに好ましくは0.1〜1質量%である。【００２８】
錠剤の製造方法としては、直接打錠法、間接打錠法のどちらでもよい。直接打錠法の場合はジペプチド(1)に必要により前記のアミノ酸、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、その他の添加成分等を加えた打錠剤用組成物を、そのまま従来公知の方法で打錠すればよく、間接打錠法による場合は以下のように製造すればよい。
【００２９】
ジペプチド(1)に必要により前記のアミノ酸、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、その他の添加成分等を加えた組成物を攪拌造粒機、高速攪拌造粒機、流動層造粒機、押出造粒機、攪拌流動層造粒機等の造粒機、好ましくは流動層造粒機に投入し、水または必要により0.5〜5質量%、好ましくは1〜4質量%、より好ましくは1.5〜3.5質量%の賦形剤もしくは結合剤、好ましくはメチルセルロース、マンニトール、エリスリトール、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、プルラン等の1種以上を含有した水(結合水)を噴霧して、常法により造粒を行う。ここで用いられる水は、食品衛生法または薬事法上許容される水、例えば精製水等であることが好ましい。【００３０】
得られた打錠用顆粒を適当な方法により圧縮成形して錠剤を製造するが、圧縮成形方法は、特に限定されることなく、従来公知の方法を用いることができる。例えば、打錠用顆粒に、所望により前記のアミノ酸、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、その他の添加成分等を加え、混合し、圧縮成形する通例の方法や、あらかじめ滑沢剤を杵表面および臼壁に塗布してから、打錠用顆粒に、所望により滑沢剤以外の前記のアミノ酸、賦形剤、崩壊剤、結合剤等を加え、混合し、圧縮成形する方法等があげられる。【００３１】
ここで、直接打錠法および間接打錠法における、前記のアミノ酸、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、その他の添加成分等は、それぞれ独立した粉体または液体の形態であってもよいし、予めこれらを組み合わせて、公知の湿式造粒または乾式造粒方法等を用いて造粒した顆粒状の形態であってもよい。前記のアミノ酸、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、その他の添加成分等を造粒する方法としては、例えば前記の各種添加成分に、食品衛生法または薬事法上許容される水、例えば精製水等を加えて造粒する方法または水等を噴霧して造粒する方法等があげられ、好ましくは前記打錠用顆粒の製造において用いられる造粒方法があげられる。【００３２】
本発明における錠剤の硬度は、好ましくは50〜120N、より好ましくは60〜110N、さらに好ましくは65〜100N、最適には70〜90Nである。また、チュアブル剤として用いる場合は、一般錠剤より柔らかいものが好ましい。なお、硬度は、錠剤の直径方向について、KHT-20N硬度測定器(藤原製作所)等を用いて測定する。【００３３】
顆粒の製造方法としては、例えば前記打錠用顆粒の製造方法と同様にして製造し、各工程において必要により粉砕および/または篩い分けすることにより所望の粒径にすることで製造することができる。【００３４】
なお、本願の組成物中に必要により前記のアミノ酸を含有させる場合には、各アミノ酸は粉砕して用いるのが好ましい。使用される前記のアミノ酸の粒子径は、顕微鏡法または篩い分け法で測定するときの体積平均粒子径で0.5〜400μmであるのが好ましく、5〜200μmであるのがより好ましい。【００３５】
本発明において、飲料は、ジペプチド(1)に必要により前記のアミノ酸を加えこれらを主活性成分とし、それ以外に、炭酸水、ビタミン類(前記と同義)、酸味料(前記と同義)、甘味料(前記と同義)、香料(前記と同義)、ミネラル類(前記と同義)、単糖類または二糖類(前記と同義)、糖アルコール(前記と同義)等の副原料が含まれていてもよく、より好ましくは、炭酸水、クエン酸、アスコルビン酸、ショ糖、スクラロース、アスパルテーム、ソーマチン、トレハロース、エリスリトール、カルシウム、マグネシウム、ナトリウム等が含まれていてもよい。飲料中で前記主活性成分が占める割合は、全固形分の質量に対して、好ましくは約15〜95質量%、より好ましくは約30〜90質量%、さらに好ましくは約60〜80質量%であり、飲料の水等の溶媒の質量に対して、好ましくは約0.5〜30質量%、より好ましくは約3〜20質量%、さらに好ましくは約10〜15質量%である。【００３６】
飲料の製造方法としては、ジペプチド(1)と必要により前記のアミノ酸、前記の副原料等にジペプチド(1)が所望の濃度になるように水を加え、必要によりpH調整剤で飲料中のpHを調整する。また、必要であれば例えば120℃で30秒〜30分ほど高温加熱等して殺菌してもよい。この場合は、殺菌後再度水を加えて最終的にジペプチド(1)が必要量になるように調製してもよい。【００３７】
本発明の組成物は、体内においてバリン、ロイシンまたはイソロイシンに分解されるので、バリン、ロイシンまたはイソロイシンの有する筋肉疲労の軽減、運動能力向上もしくは体脂肪率軽減のための筋肉の構築、集中力向上、肝疾患の治療、晩発性運動障害の治療、免疫機能の向上等の目的に用いることができる。また、本発明の組成物を経口で摂取または投与した場合、バリン、ロイシンまたはイソロイシンよりも味覚に優れ、または吸収性が好ましく、または栄養、薬理効果等が高くなる。摂取または投与量は、その目的、ヒト等の性別、体重、年齢等により一概には言えないが、組成物中のジペプチド(1)の構成アミノ酸のバリン、ロイシンおよびイソロイシンに相当する含量と、必要により含まれているバリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1以上のアミノ酸の含量の総量として、好ましくは0.1〜20g/日、より好ましくは約1〜10g/日、さらに好ましくは約2〜7g/日である。【００３８】
以下、実施例、参考例および試験例により本発明を具体的に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。【００３９】
参考例1
特許文献1に記載された方法により採取されたC末端Hisタグ付加型ジペプチド合成酵素400mg、ATP2Na33.1g、塩化マグネシウム12.3g、L-アラニン2.7g、およびL-ロイシン3.93gを100mmol/LTrisHCl緩衝液(pH8)1Lに添加し、37℃で16時間反応を行った。約3.5gのアラニルロイシンを得た。【００４０】
参考例2
特許文献1に記載された方法により採取されたC末端Hisタグ付加型ジペプチド合成酵素400mg、ATP2Na33.1g、塩化マグネシウム12.3g、L-アラニン2.7g、およびL-イソロイシン3.93gを100mmol/LTrisHCl緩衝液(pH8)1Lに添加し、37℃で16時間反応を行った。約3.5gのアラニルイソロイシンを得た。【００４１】
参考例3
特許文献1に記載された方法により採取されたC末端Hisタグ付加型ジペプチド合成酵素400mg、ATP2Na33.1g、塩化マグネシウム12.3g、L-アラニン2.7g、およびL-バリン3.5gを100mmol/LTrisHCl緩衝液(pH8)1Lに添加し、37℃で16時間反応を行った。約3.1gのアラニルバリンを得た。【００４２】
試験例1
日本SLC社から購入したWistar系白色ラット(雄、150±20g)を一定条件下(温度:24±2℃、湿度:60±5%、明暗周期:12時間)で3日間以上順応させた後、ネンブタール(大日本製薬)による麻酔下で開腹し採血した。採取した血液は、エチレンジアミン四酢酸(ナカライテスク)およびクエン酸ナトリウム(キシダ化学)を添加した後、遠心分離し、血漿を得た。【００４３】
アラニルバリン(協和発酵工業)、アラニルロイシン(協和発酵工業)もしくはアラニルイソロイシン(協和発酵工業)を水に溶かして10mmol/L溶液を調製した。調製したジペプチド溶液を10μL取り、血漿4μLもしくは水4μLと混合し、37℃で2時間インキュベートした。インキュベートした混合溶液をTLCプレート(メルク社製)にアプライし、ブタノール(キシダ化学):酢酸(キシダ化学):水＝2:1:1の溶液で展開した後に、1%ニンヒドリン溶液を噴霧し、80℃で5分間インキュベートした。なお、1%ニンヒドリン溶液はニンヒドリン(和光純薬)をエタノール(キシダ化学)に溶かして調製した。結果を第1表に示した。
アラニルバリン、アラニルロイシンもしくはアラニルイソロイシンを水と混合した場合にはスポットが一つしかなかったのに対し、アラニルバリン、アラニルロイシンもしくはアラニルイソロイシンをラット血漿と混合した場合にはさらにアミノ酸のスポットもあり、アラニルバリン、アラニルロイシンもしくはアラニルイソロイシンは血漿中で速やかにアミノ酸に分解することが分かった。【００４４】
【表１】
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【００４５】
試験例2
アラニルバリン(協和発酵工業)、アラニルロイシン(協和発酵工業)、アラニルイソロイシン(協和発酵工業)、バリン(協和発酵工業)、ロイシン(協和発酵工業)もしくはイソロイシン(協和発酵工業)を用いて、男性3名、女性3名からなるパネラーで味覚官能性の評価を実施した。結果を第2表に示した。パネラーには被験物質の種類をブラインドとした。6名中6名がバリン、ロイシンおよびイソロイシンを「苦い」と述べ、アラニルバリン、アラニルロイシンおよびアラニルイソロイシンを「苦くない」と述べた。【００４６】
【表２】
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【００４７】
試験例3
アラニルバリン(協和発酵工業)、バリン(協和発酵工業)、アラニルイソロイシン(協和発酵工業)およびイソロイシン(協和発酵工業)を、それぞれ200mmol/Lの濃度で水に溶かし、アラニルロイシン(協和発酵工業)、ロイシン(協和発酵工業)をそれぞれ133mmol/Lの濃度で水に溶かした。アラニルバリン(協和発酵工業)とバリン(協和発酵工業)、アラニルイソロイシン(協和発酵工業)とイソロイシン(協和発酵工業)、およびアラニルロイシン(協和発酵工業)とロイシン(協和発酵工業)のそれぞれについて、男性3名、女性3名からなるパネラーで、2液を比較する味覚官能性の評価を実施した。パネラーには被験物質の種類をブラインドとした。
結果、6名中6名がバリン、ロイシンおよびイソロイシンに対し、それぞれアラニルバリン、アラニルロイシンおよびアラニルイソロイシンを「苦くない」と述べた。
【実施例１】
【００４８】
アラニルBCAA含有チュアブル錠
アラニルバリン8g(協和発酵工業)、アラニルロイシン15g(協和発酵工業)、アラニルイソロイシン7.5g(協和発酵工業)とマルチトール70g(東和化成、食品用50mesh)の混合物を、プルラン(プルランPF-20、林原)の5%水溶液8mLで、流動層造粒機(FL-MINI型、フロイント産業)を用いて造粒した。得られた顆粒(約80g)にステアリン酸マグネシウムム0.8g(三栄源FFI)を加えて得られた混合物をポリエチレン袋内で十分に混合した後、直径8mm、240mgの錠剤を、単発式打錠圧縮成形機(菊水竪型成形機6B-2M、菊水製作所)を用いて製造した。
得られた錠剤は、苦味の抵抗なく食べられた。
【実施例２】
【００４９】
アラニルイソロイシン含有チュアブル錠(グレープフルーツ風味)
マルチトール(東和化成、食品用50mesh)67gとアラニルイソロイシン25g(国産化学)の混合物を、プルラン(プルランPF-20、林原)の5%水溶液7mLで、流動層造粒機(FL-MINI型、フロイント産業)を用いて造粒した。得られた造粒物92gにクエン酸(磐田化学)3g、アスパルテーム(味の素)1g、グレープフルーツフレーバー(SFグレープフルーツJP、三栄源FFI)3g、二酸化ケイ素(カープレックス、塩野義)1gを混合後、直径8mm、240mgの錠剤を、単発式打錠圧縮成形機(菊水竪型成形機6B-2M、菊水製作所)を用いて製造した。【００５０】
比較例1  イソロイシン含有チュアブル錠(グレープフルーツ風味)
マルチトール(東和化成、食品用50mesh)67gとイソロイシン16g(協和発酵工業)とアラニン9g(協和発酵工業)の混合物を、プルラン(プルランPF-20、林原)の5%水溶液7mLで、流動層造粒機(FL-MINI型、フロイント産業)を用いて造粒した。得られた造粒物92gにクエン酸(磐田化学)3g、アスパルテーム(味の素)1g、グレープフルーツフレーバー(SFグレープフルーツJP、三栄源FFI)3g、二酸化ケイ素(カープレックス、塩野義)1gを混合後、直径8mm、240mgの錠剤を、単発式打錠圧縮成形機(菊水竪型成形機6B-2M、菊水製作所)を用いて製造した。【００５１】
試験例4
実施例2で製造した錠剤(錠剤A)と比較例1で製造した錠剤(錠剤B)を用いて、男性3名、女性3名からなるパネラーで官能評価を実施した。3点識別法において、6名中6名が錠剤AとBを識別し、5名が錠剤Aを好ましいとした。Bが好ましくない理由として5名とも「苦味」をあげた。
【実施例３】
【００５２】
アラニルBCAA含有口腔内速崩壊錠
アラニルバリン(国産化学)、アラニルロイシン(国産化学)、アラニルイソロイシン(国産化学)とβ-シクロデキストリン(セルデックスB-100、日本食品加工社製)および乳糖(SUPER-TAB、旭化成社製)やクエン酸(協和ハイフーズ)、リン酸水素カルシウム(太平化学産業)、オレンジフレーバー(長谷川香料)およびスクラロース(三栄源FFI)を第3表に示す配合で混合し、ポリエチレン袋内で十分に混合した後、滑沢剤としてショ糖脂肪酸エステル(DKエステルF20W、第一工業製薬)を杵、臼に塗布し、単発打錠機(竪型成型機6B-2M、菊水製作所)を用いて直径15mm、750mgの錠剤を製造した。錠剤硬度が5kgfとなるように打錠圧を調整した。なお、錠剤強度はKHT-20N硬度測定器(藤原製作所)を用いて計測した。
該錠剤は口腔内で1分以内に崩壊し、苦味は感じられなかった。【００５３】
【表３】
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【実施例４】
【００５４】
アラニルロイシン含有飲料
液温90℃の水100mLにアラニルロイシンを20g(国産化学)、エリスリトール3g(日研化学)、クエン酸0.5g(協和ハイフーズ)、スクラロース(サンスイートSA-8020、三栄源FFI)0.01gを攪拌溶解し、クエン酸でpHを3.3に調整した後、オレンジフレーバー(三栄源FFI)0.1gを添加し飲料を製造した。90℃で15分加熱して放置した。清澄な飲料が得られた。本飲料は100ml中、ロイシン13g相当のアラニルロイシンを含有する。  【００５５】
比較例2  ロイシン含有飲料
液温90℃の水100mLにロイシン3g(協和発酵工業)、エリスリトール3g(日研化学)、クエン酸0.5g(協和ハイフーズ)、スクラロース(サンスイートSA-8020、三栄源FFI)0.01gを添加し、攪拌したが、不溶の浮遊物および沈殿が見られ清澄な飲料は製造できなかった。クエン酸でpHを3.3に調整しても不溶物が見られ清澄な飲料は製造できなかった。
【実施例５】
【００５６】
アラニルBCAA含有清涼飲料用粉末(ビタミンミネラルなし)
アラニルバリン(国産化学)、アラニルロイシン(国産化学)、アラニルイソロイシン(国産化学)とショ糖(グラニュー糖、野村株式会社)およびクエン酸(協和ハイフーズ)、トレハロース(林原商事)、スクラロース(サンスイートSA-8020、三栄源FFI)、レモンフレーバー(パウダードレモン8318、武蔵野香料化学)およびアスコルビン酸(華北薬品)を第4表(実施例5)に示す配合でビニール袋内で混合し、清涼飲料用粉末を製造した。該粉末15gを50mLの水に溶かすと清澄な飲料が得られた。該飲料50mL中にはバリン、ロイシン、イソロイシン換算で各々1.5、3、1.5g含まれる。【００５７】
【表４】
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【００５８】
比較例3  BCAA含有清涼飲料用粉末(ビタミンミネラルなし)
バリン(協和発酵工業)、ロイシン(協和発酵工業)、イソロイシン(協和発酵工業)と、ショ糖(グラニュー糖、野村株式会社)およびクエン酸(協和ハイフーズ)、トレハロース(林原商事)、スクラロース(サンスイートSA-8020、三栄源FFI)、レモンフレーバー(パウダードレモン8318、武蔵野香料化学)およびアスコルビン酸(華北薬品)を第4表(比較例3)に示す配合でビニール袋内でビニール袋内で混合し、粉末清涼飲料を製造した。本粉末15gを50mLの水に溶かすと溶解せず、飲用に適さなかった。【００５９】
すなわち、本発明の組成物は、溶解性が優れていることが明らかとなった。
【実施例６】
【００６０】
アラニルBCAA含有清涼飲料用粉末(ビタミンミネラル入り)
実施例5で得た清涼飲料用粉末に、乳酸カルシウム(磐田化学)および酸化マグネシウム(協和発酵)、リボフラビン(DSMニュートリション)、ニコチン酸アミド(DSMニュートリション)、パントテン酸カルシウム(三栄源FFI)、ビタミンA(ドライビタミンA、三栄源FFI)、ピリドキシン塩酸塩(三栄源FFI)、チアミン塩酸塩(三栄源FFI)、ビタミンD3(ドライビタミンD3、ナガセ生化学)、ビタミンB12(0.1%ビタミンB12、DSMニュートリション)および葉酸(DSMニュートリション)を第5表の配合で各材料を混合し、粉末清涼飲料を製造した。本粉末15gを50mLの水に溶解し、飲料を製造できた。本飲料は好適に服用することが可能であった。【００６１】
【表５】
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【実施例７】
【００６２】
グリシルBCAA含有チュアブル錠
グリシルバリン(国産化学)80mg、グリシルロイシン(国産化学)150mg、グリシルイソロイシン(国産化学)75mgと、マルチトール2g(東和化成、食品用50mesh)の混合物にステアリン酸マグネシウムム3mg(三栄源FFI)を加えて得られた混合物をポリエチレン袋内で十分に混合した後、直径8mm、240mgの錠剤を、単発式打錠圧縮成形機(菊水竪型成形機6B-2M、菊水製作所)を用いて製造する。
【実施例８】
【００６３】
アルギニルBCAA含有チュアブル錠
アルギニルバリン(国産化学、酢酸塩)80mg、アルギニルロイシン(国産化学、酢酸塩)150mg、アルギニルイソロイシン(国産化学、酢酸塩)75mgと、マルチトール2g(東和化成、食品用50mesh)の混合物にステアリン酸マグネシウム3mg(三栄源FFI)を加えて得られた混合物をポリエチレン袋内で十分に混合した後、直径8mm、240mgの錠剤を、単発式打錠圧縮成形機(菊水竪型成形機6B-2M、菊水製作所)を用いて製造する。
【実施例９】
【００６４】
α-グルタミルBCAA含有チュアブル錠
α-グルタミルバリン(国産化学)80mg、α-グルタミルロイシン(SENN  CHEMICAL)150mg、イソロイシン(協和発酵工業製)35mgと、マルチトール2g(東和化成、食品用50mesh)の混合物にステアリン酸マグネシウムム3mg(三栄源FFI)を加えて得られた混合物をポリエチレン袋内で十分に混合した後、直径8mm、240mgの錠剤を、単発式打錠圧縮成形機(菊水竪型成形機6B-2M、菊水製作所)を用いて製造する。
【実施例１０】
【００６５】
アラニルBCAA含有普通錠
アラニルバリン(国産化学)、アラニルロイシン(国産化学)、アラニルイソロイシン(国産化学)および還元麦芽糖水あめ(マビット50M、林原商事)、ステアリン酸マグネシウム(三栄源FFI)を第6表の配合比率で混合し、ポリエチレン袋内で十分混合した。混合した粉末を、単発打錠機(竪型成型機6B-2M、菊水製作所)を用いて直接圧縮成型し、直径8mm、240mgの錠剤を製造した。打錠圧を1.7tに設定した。錠剤強度はKHT-20N硬度測定器(藤原製作所)を用いて計測した。打錠障害は認められなかった。錠剤硬度12.7kgの錠剤を製造できた。【００６６】
【表６】
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【００６７】
比較例4  BCAA含有普通錠
バリン(協和発酵工業)、ロイシン(協和発酵工業)、イソロイシン(協和発酵工業)および還元麦芽糖水あめ(商品名:マビット50M、林原商事)、ステアリン酸マグネシウム(三栄源FFI)を第6表の配合比率で混合し、ポリエチレン袋内で十分混合した。本混合物中のバリン、ロイシン、イソロイシン含量は実施例1と等しくなるように設定した。混合した粉末を、単発打錠機(竪型成型機6B-2M、菊水製作所)を用いて直接圧縮成型し、直径8mm、240mgの錠剤を製造した。打錠圧を1.7tに設定した。錠剤強度はKHT-20N硬度測定器(藤原製作所)を用いて計測した。打錠工程において、キャッピング傾向が観察された。打錠硬度は平均5.5kgであり、手で粉砕可能なほどもろいものも認められた。【００６８】
すなわち、本発明の組成物は、打錠性等の加工特性の優れた組成物であることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００６９】
本発明によれば、栄養、薬理効果等が高く、より味覚に優れた、バリン、ロイシンまたはイソロイシンを含むジペプチドの1種以上を含有する経口用の組成物が提供され、また、バリン、ロイシンおよびイソロイシンから選ばれる1以上を、ジペプチド化することにより、溶解性や打錠性が改善された、バリン、ロイシンまたはイソロイシンを含むジペプチドの1種以上を含有する経口用の組成物が提供される。