(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）：
【化１】
0005247442.tif 000017
（式中、Ｒ１は水酸基又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基より選ばれる基、
Ｒ２は放射性ハロゲン置換基、
ｍは０〜２の整数である。）で表される化合物またはその塩。
【請求項２】
Ｒ２が、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉからなる群より選択される、請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項３】
Ｒ２が、１８Ｆである、請求項1または２記載の化合物またはその塩。
【請求項４】
下記式（２）：
【化２】
0005247442.tif 000018
（式中、Ｒ3は水酸基又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基より選ばれる基、
Ｒ4は非放射性フッ素置換基、メタンスルホン酸置換基、トリフルオロメタンスルホン酸置換基又は芳香族スルホン酸置換基より選ばれる基、
ｍは０〜２の整数である。）で表される化合物またはその塩。
【請求項５】
下記式（１）：
【化３】
0005247442.tif 000019
（式中、Ｒ１は水酸基又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基より選ばれる基、
Ｒ２は放射性ハロゲン置換基、
ｍは０〜２の整数である。）で表される化合物またはその塩を配合してなる、低毒性アルツハイマー病診断剤。
【請求項６】
Ｒ２が、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉからなる群より選択される、請求項５記載の低毒性アルツハイマー病診断剤。
【請求項７】
Ｒ２が、１８Ｆである、請求項５又は６記載の低毒性アルツハイマー病診断剤。
【請求項８】
請求項１乃至３の何れか１項に記載の式（１）で表される化合物またはその塩と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含んでなる、アミロイド沈着のインビボ撮像用医薬組成物。
【請求項９】
請求項１乃至３の何れか１項に記載の式（１）で表される化合物またはその塩を有効成分として含有する、アミロイド沈着のインビボ撮像用組成物。
【請求項１０】
請求項１乃至３の何れか１項に記載の式（１）で表される化合物またはその塩を有効成分として含有する、PET又はSPECT撮像用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は頭部変性疾患の診断に用いる化合物に関する。より詳しくは、アルツハイマー病を初めとするアミロイドが蓄積する疾患の診断において、病巣部位におけるアミロイドの検出に有用な化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アミロイドと呼ばれる繊維状蛋白質が体内の種々の器官あるいは組織に沈着することにより発症する疾患は、アミロイドーシスと総称されている。アミロイドーシスに共通しているのはアミロイドと呼ばれるβシート構造に富んだ繊維状蛋白質が全身の諸臓器あるいは局所に沈着し、その臓器や組織における機能異常を生じる点である。【０００３】
アミロイドーシスの代表的疾患であるアルツハイマー病（以下、ＡＤという）は、認知症の原因となる疾患として知られている。この病気は、漸次進行性にアミロイドが脳に沈着して死に至る疾患であるため、他のアミロイドーシスと比較しても社会的関心の高い疾患であるといえる。近年、先進各国では社会の高齢化に伴いＡＤ患者数が急激に増加しており、社会的な問題となっている。【０００４】
病理組織学的見地によると、ＡＤは、老人斑（senile plaques）の出現、神経原繊維変化（neurofibrillary tangles）及び広範な神経脱落の３つの脳内病理所見によって特徴付けられる。老人斑はアミロイドを主要構成成分とする構造物であり、その出現は、ＡＤ発症における最初期、すなわち臨床症状が出現する１０年以上前に出現する脳内の病理所見とされる。【０００５】
ＡＤの診断は、ＣＴ及びＭＲＩ等の画像診断を補助的に組み合わせた上で、種々の認知機能評価（例えば、長谷川式スケール、ADAS-JCog、MMSE等）を行うことにより実施されている。しかし、このような認知機能評価に基づく方法は、発症初期における診断感度が低く、さらに、各個人が生来有する認識機能により診断結果が影響を受けやすいという欠点がある。また、確定診断には疾患部の生検が不可欠であるため、患者の存命中にＡＤの確定診断を行うことは、現状では事実上不可能である（非特許文献１）。【０００６】
一方、老人斑を構成するアミロイドはアミロイドβ蛋白質（以下、Ａβという）の凝集体であることが報告されており、さらにＡβの凝集体がβシート構造をとることで神経細胞毒性を示すことが多くの研究より報告されている。これらの知見に基づき、Ａβの脳内への沈着が引き金となり、その下流の現象として神経原繊維変化の形成及び神経脱落が起こるとする、いわゆる「アミロイドカスケード仮説」が提唱されている（非特許文献２）。【０００７】
このような事実に基づき、近年、アミロイドに高い親和性を有する化合物をマーカーとして用い、ＡＤをインビボ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で検出する試みがなされている。
このような脳内アミロイド画像診断用プローブの多くは、アミロイドに対する親和性が高く、かつ脳移行性の高い疎水性の低分子化合物を、種々の放射性核種、例えば１１Ｃ、１８Ｆ及び１２３Ｉ等で標識した化合物である。具体例として、６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］ベンゾチアゾール（以下、ＴＺＤＭという）や６−ヒドロキシ−２−［４’−（Ｎ−メチルアミノ）フェニル］ベンゾチアゾール（以下、６−ＯＨ−ＢＴＡ−１という）を始めとする種々のチオフラビン誘導体（特許文献１、非特許文献３）、（Ｅ）−４−メチルアミノ−４’―ヒドロキシスチルベン（以下、ＳＢ−１３という）や（Ｅ）−４−ジメチルアミノ−４’―ヨードスチルベン（以下、ｍ−Ｉ−ＳＢという）を初めとするスチルベン化合物（特許文献２、非特許文献４，非特許文献５）、６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］ベンゾオキサゾール（以下、ＩＢＯＸという）、６−［２−（フルオロ）エトキシ］−２−［２−（２−ジメチルアミノチアゾール−５−イル）エテニル］ベンゾオキサゾールを初めとするベンゾオキサゾール誘導体（非特許文献６，非特許文献７）、２−（１−｛６−［（２−フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン）マロノニトリル（以下、ＦＤＤＮＰという）を初めとするＤＤＮＰ誘導体（特許文献４、非特許文献８）及び６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（以下、ＩＭＰＹという）を初めとするイミダゾピリジン誘導体（特許文献３、非特許文献９）等を１１Ｃや放射性ハロゲンで標識した化合物が報告されている。さらに、これらの画像診断用プローブの一部については、ヒトイメージング研究が実施され、ＡＤ患者において健常例とは明らかに異なる脳への放射能集積を示すことが報告されている（非特許文献１０、非特許文献１１）。【０００８】
【特許文献１】特表２００４−５０６７２３号公報
【特許文献２】特表２００５−５０４０５５号公報
【特許文献３】特表２００５−５１２９４５号公報
【特許文献４】特表２００２−５２３３８３号公報
【非特許文献１】J. A. Hardy & G. A. Higgins, “Alzheimer’s Disease: The Amyloid Cascade Hypohesis.”, Science, 1992, 256, p.184-185
【非特許文献２】G. McKhann et al., “Clinical diagnosis of Alzheimer’s disease: Report of the NINCDS-ADRDA Work Group under the auspices of Department of Health and Human Services Task Force on Alzheimer’s Disease.”, Neurology, 1984, 34, p.939-944
【非特許文献３】Z.-P. Zhuang et al., “Radioiodinated Styrylbenzenes and Thioflavins as Probes for Amyloid Aggregates.”, J. Med. Chem., 2001, 44, p.1905-1914
【非特許文献４】Masahiro Ono et al., “11C-labeled stilbene derivatives as Aβ-aggregate-specific PET imaging agents for Alzheimer’s disease.”, Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30, p.565-571
【非特許文献５】H. F. Kung et al., “Novel Stilbenes as Probes for amyloid plaques .”, J. American Chemical Society, 2001, 123, p.12740-12741
【非特許文献６】Zhi-Ping Zhuang et al., “IBOX(2-(4’-dimethylaminophenyl)-6- iodobensoxazole): a ligand for imaging amyloid plaques in the brain.”, Nuclear Medicine and Biology, 2001, 28, p.887-894
【非特許文献７】Furumoto Y et al., “[11C]BF-227: A New 11C-Labeled 2-Ethenylbenzoxazole Derivative for Amyloid-β Plaques Imaging.”, European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging, 2005, 32, Sup.1, P759
【非特許文献８】Eric D. Agdeppa et al., “2-Dialkylamino-6-Acylmalononitrile Substituted Naphthalenes (DDNP Analogs): Novel Diagnostic and Therapeutic Tools in Alzheimer’s Disease.”, Molecular Imaging and Biology, 2003, 5, p.404-417
【非特許文献９】Zhi-Ping Zhuang et al., “Structure-Activity Relationship of Imidazo[1,2-a]pyridines as Ligands for Detectingβ-Amyloid Plaques in the Brain.”, J. Med. Chem, 2003, 46, p.237-243
【非特許文献１０】W. E. Klunk et al., “Imaging brain amyloid in Alzheumer’s disease with Pittsburgh Compound-B.”, Ann. Neurol., 2004, 55, p.306-319
【非特許文献１１】Nicolaas P. L. G. Verhoeff et al., “In-Vivo Imaging of Alzheimer Disease β-Amyloid With [11C]SB-13 PET.”, American Journal of Geriatric Psychiatry, 2004, 12, p.584-595
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上記の様に、アミロイドを対象とした画像診断プローブとして、種々の化合物が開示され、臨床応用に向けて検討が進められている。
ＴＺＤＭ、ＩＢＯＸ及びｍ−Ｉ−ＳＢのヨードを［１２５Ｉ］で標識した化合物は、正常マウスを用いた実験の結果、投与後２分点において、いずれも脳内への移行が認められている。しかしこれらの化合物は、正常組織からのクリアランスが十分ではなく、投与後の時間経過に伴い、徐々に脳内に集積する傾向を示している（特表２００５−５１２９４５号公報、Zhi-Ping Zhuang et al.,Nuclear Medicine and Biology, 2001, 28, p.887-894、H. F. Kung et al.,J. Am. Chem. Soc., 2001, 123, p.12740-12741）。正常組織からのクリアランスが十分でないと、アミロイド集積部位において十分なコントラストが得られないといった問題がある。ＳＢ−１３を［１１Ｃ］で標識した化合物については、ラットを用いた実験より正常組織からのクリアランスを有することが示されているが、そのクリアランス速度は十分に速いとはいえない（Masahiro Ono et al., Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30, p.565-571）。【００１０】
一方、ＩＭＰＹを初めとするイミダゾピリジン骨格を有する化合物は、投与後脳内へ移行してアミロイドに集積するといった性質を有すると共に、上述した化合物とは異なり正常組織からのクリアランスが速いといった優れた性質を有することが、［１２５Ｉ］標識化合物を用いた実験の結果明らかとされている。しかし、ＩＭＰＹは、復帰突然変異試験にて陽性を示す化合物であり、この化合物を画像診断プローブとして用いるには、その投与量や投与形態につき十分な注意が必要となる。（国際公開第０３／１０６４３９号パンフレット）
ＦＤＤＮＰについても、復帰突然変異試験にて陽性を示すことが、報告されている。（国際公開第０３／１０６４３９号パンフレット）【００１１】
アミロイドを標的とした画像診断プローブとしては、アミロイドへの親和性を有し、正常組織からのクリアランスが十分に速いといったＩＭＰＹの優れた性能を維持しつつ、変異原性等の毒性がおさえられた化合物を用いることが好ましいが、現在のところそのような性能を備えた化合物は開示されていない。【００１２】
本発明は上記事情に鑑みてなされたものであり、アミロイドへの親和性を有し、正常組織からのクリアランスが十分に速く、かつ、変異原性等の毒性がおさえられた化合物を得ることを目的とした。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
発明者はイミダゾピリジン−フェニル骨格を有する化合物であって、そのフェニル基の炭素に酸素を結合させた化合物を用いることにより、上記条件を充たし得る化合物群が得られることを見出し、本発明を完成した。【００１４】
すなわち、本発明は、下記式（１）：【００１５】
【化４】
0005247442.tif 000002
で表される化合物及びその塩、並びに前記式（１）で表される化合物又はその塩を配合してなる低毒性アルツハイマー病診断剤である。【００１６】
式（１）中、Ｒ１は水素、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、炭素数１〜４のアルキル置換基又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基より任意の基を選択することができる。Ｒ１は、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基であることが好ましく、水酸基、メチル置換基、又はメトキシ置換基であることがより好ましい。
Ｒ２は、任意の放射性ハロゲン置換基を用いることができ、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉより選択されるハロゲンを用いることが好ましく、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ又は１２５Ｉより選択されるハロゲンを用いることがより好ましく、１８Ｆであることが特に好ましい。
また、ｍは０〜２の整数である。【００１７】
また、本発明の他の側面によれば、前記式（１）で表される化合物またはその塩と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含んでなる、アミロイド沈着のインビボ撮像用医薬組成物が提供される。
本発明のさらに他の側面によれば、医薬用途に使用される、前記式（１）で表される化合物またはその塩が提供される。
本発明のさらに他の側面によれば、アミロイド沈着のインビボ撮像用途に使用される前記式（１）で表される化合物またはその塩が提供される。
本発明のさらに他の側面によれば、(a)前記式（１）で表される化合物またはその塩の検出可能な量を投与するステップと、
(b)前記化合物またはその塩の患者のアミロイド沈着への結合を検出するステップと、
を含んでなる、患者のアミロイド沈着をインビボで検出する方法が提供される。
本発明の好ましい実施形態によれば、前記ステップ(b)は、PET又はSPECT撮像により行われる。【００１８】
また、本発明の別の一側面によると、下記式（２）：【００１９】
【化５】
0005247442.tif 000003
【００２０】
で表される化合物並びにその塩が提供される。【００２１】
式（２）中、Ｒ３は水素、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、炭素数１〜４のアルキル置換基又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基より任意の基を選択することができる。Ｒ３は、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基であることが好ましく、水酸基、メチル置換基、又はメトキシ置換基であることがより好ましい。【００２２】
Ｒ４は非放射性ハロゲン置換基、メタンスルホン酸置換基、トリフルオロメタンスルホン酸置換基又は芳香族スルホン酸置換基より選ばれる基を用いることができる。
非放射性ハロゲン置換基としては、放射性フッ素を用いた求核置換反応における標的となりうるハロゲンを用いることができ、好ましくはヨウ素又は臭素を用いることができる。
また、ｍは０〜２の整数である。
【発明の効果】
【００２３】
本発明により、アミロイドへの親和性を有し、正常組織からのクリアランスが十分に速く、かつ、変異原性等の毒性がおさえられた化合物及び低毒性アルツハイマー病診断剤を得ることが可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２４】
以下、６−メトキシ−２−［４’−（３”−パラトルエンスルホニルオキシプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを例にとり、本発明の一つの実施形態に係る、放射性ハロゲン標識化合物の前駆体化合物の合成方法を説明する。【００２５】
まず、２−ブロモ−３−ヒドロキシピリジンをナトリウムメトキシドの存在下、ヨウ化メチルと反応させ、２−ブロモ−３−メトキシピリジンを合成する。次に、濃硫酸−濃硝酸の混酸によるニトロ化を行い、２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジンへと変換した後、パラジウム炭素によるブロモ基の還元的脱離とニトロ基の還元を行って、２−アミノ−５−メトキシピリジンを合成する（図１、工程１〜３）。これら一連の反応において、反応条件は定法、例えば文献（Joseph G. Lombardino, Journal of Medicinal Chemistry, 1981, 24, p. 39-42）記載の方法に従って設定することができる．【００２６】
また別途、４’−ヒドロキシアセトフェノンと臭化第二銅とを反応させ、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノンを合成する（図１、工程４）。このときの反応条件は定法、例えば文献（King, L. Carroll and Ostrum, G. Kenneth, Journal of Organic Chemistry, 1964, 29(12), p.3459-3461）記載の方法に従って行うことができる。【００２７】
次に、上記で合成した２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノンと２−アミノ−５−メトキシピリジンとを反応させ、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成する（図１、工程５）。この工程は、下記の要領にて行うことができる。【００２８】
まず、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノンと２−アミノ−５−メトキシピリジンをアセトニトリル等の不活性溶媒に溶解し、還流温度にて２〜６時間反応させると、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの臭化水素塩が生成し、白色沈殿を生じる。このときの不活性溶媒としては、アセトニトリルの他、メタノールやアセトンといった、同様の反応にて通常用いられる溶媒を用いることができる。また、反応温度は還流することができる温度であればよく、例えばアセトニトリルを溶媒とした場合は９０℃とすることができる。なお、用いる溶媒の量は、反応に十分な量であればよいが、多過ぎると反応物の沈殿を得ることができないため、注意が必要である。例えば、１０ｍｍｏｌ相当の２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノンを用いて反応させる場合は、４０〜５０ｍＬ位の溶媒を用いればよい。【００２９】
次に、反応液をろ過して沈殿物をろ別後、この白色沈殿をメタノール／水混液（１：１）に懸濁し、これに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を懸濁させた沈殿物に対して大過剰となるように加えると、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンが遊離して沈殿が生じる。この新たに生じた沈殿をろ取することによって、本工程の目的物である２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを結晶として得ることができる。水／メタノール混液の量は、反応させるために十分な量であれば特に限定する必要はないが、多すぎると結晶の析出の妨げとなるため注意が必要である。例えば、１０ｍｍｏｌ相当の２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノンを用いた場合であれば、４０〜１００ｍＬ程度の水／メタノール混液を用いればよい。また、炭酸水素ナトリウムの量は、反応基質である前記沈殿物に対して大過剰であれば特に限定する必要はなく、例えば、前記条件にて反応させる場合であれば、２５ｍＬ程度の飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を反応液に添加すればよい。【００３０】
次いで、合成した２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンと１，３−プロパンジオールモノパラトルエンスルホネートを、テトラヒドロフランとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混液に溶解し、これにトリフェニルホスフィンとジイソプロピルアゾジカルボキシレートを加えて光延反応を行うことで、目的物である６−メトキシ−２−［４’−（３”−パラトルエンスルホニルオキシプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得ることができる（図１、工程７）。副原料である１，３−プロパンジオールモノパラトルエンスルホネートは、例えば文献（Abderrahim Bouzide and Gilles Sauve, Organic Letters, 2002, 4(14), p.2329-2332.）記載の方法に従って容易に合成することができ（図１、工程６）、その使用量は反応基質に対して過剰量であれば良く、典型的には反応基質である２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンに対してモル比にして２．２倍程度用いればよい。トリフェニルホスフィンとジイソプロピルアゾジカルボキシレートの量については、一般的な光延反応の条件に従えばよく、典型的には副原料である１，３−プロパンジオールモノパラトルエンスルホネートと同モル程度用いればよい。【００３１】
なお、６位がヒドロキシ置換基である化合物は、前記工程５で得られた２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンに三臭化ほう素などを作用させて脱メチル化反応を行った後、６位水酸基をテトラヒドロピラニル基などで保護してから、前記工程７の反応を行い、最後に６位の保護基を脱保護することによって得ることができる。また、６位の炭素に結合する置換基がメチル置換基やエトキシ置換基である化合物は、前記工程４における２−アミノ−５−メトキシピリジンの代わりに、それぞれ２−アミノ−５−メチルピリジン及び２−アミノ−５−エトキシピリジンを用いればよく、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン環における置換基の位置の異なる化合物、例えば８位の炭素にメチル置換基やメトキシ置換基が結合した化合物は、工程４における２−アミノ−５−メトキシピリジンの代わりに、それぞれ２−アミノ−３−メチルピリジン及び２−アミノ−３−メトキシピリジンを用いればよい。【００３２】
次に、２−［４’−（３”−［１８Ｆ］フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを例にとり、本発明に係る放射性ハロゲン標識化合物の製造方法について説明する。【００３３】
２−［４’−（３”−［１８Ｆ］フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの製造においては、まず、相間移動触媒と［１８Ｆ］フッ化物イオンとカリウムイオンとを含む混合物を得る。［１８Ｆ］フッ化物イオンは公知の方法にて得ることができ、例えば、Ｈ２１８Ｏ濃縮水をターゲットとしてプロトン照射を行うといった方法により、得ることができる。このとき、［１８Ｆ］フッ化物イオンはターゲットとしたＨ２１８Ｏ濃縮水中に存在している。この［１８Ｆ］フッ化物イオンを含むＨ２１８Ｏ濃縮水を陰イオン交換カラムに通液して該カラムに放射性フッ素を吸着捕集し、Ｈ２１８Ｏ濃縮水と分離する。その後、該カラムに炭酸カリウム溶液を流して［１８Ｆ］フッ化物イオンを溶出させ、相間移動触媒を加えて乾固させることにより、相間移動触媒と［１８Ｆ］フッ化物イオンとカリウムイオンとを含有する混合物を得ることができる。【００３４】
ここで、相間移動触媒は、［１８Ｆ］フッ化物イオンとの間で包摂体を形成する性質を有する種々の化合物を用いることができる。具体的には、放射性フッ素標識有機化合物の製造に用いられている種々の化合物を用いることができ、１８−クラウン−６−エーテル及びその他の種々のアミノポリエーテルを用いることができる。最も好ましい態様としては、クリプトフィックス２２２（商品名、メルク社製）を用いることができる。【００３５】
次に、標識前駆体である６−メトキシ−２−［４’−（３”−パラトルエンスルホニルオキシプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのジメチルホルムアミド溶液を調製し、上記で調製した相間移動触媒と［１８Ｆ］フッ化物イオンとカリウムイオンとを含有する混合物に加え、反応条件を与えて求核置換反応を行うことにより、２−［４’−（３”−［１８Ｆ］フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンが合成される。反応条件としては、２−［１８Ｆ］フルオロ−２−デオキシ−Ｄ−グルコースを初めとする他の放射性フッ素標識化合物における条件に準じて設定することができる。例えば、前記反応溶液を９０〜１３０℃程度の条件で５〜１０分間反応させるといった条件を用いることができる。【００３６】
他の放射性ハロゲン標識化合物の合成は、標識前駆体及び用いる放射性ハロゲンを適宜選択し、それぞれ公知の方法に準じた反応条件を与えることによって行うことができる。例えば、２−［４’−（３”−［１２３Ｉ］ヨードプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成は、標識前駆体として２−［４’−（３”−クロロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを用い、アセトンまたはメタノール溶媒中、Ｎａ［１２３Ｉ］と複分解反応させることによって得ることができる。【００３７】
本発明に係る診断剤は、他の一般に知られている放射性診断剤と同様、本発明に係る放射性ハロゲン標識化合物を所望により適当なｐＨに調整された水又は生理食塩水、あるいはリンゲル液等に配合させた液として調製することができる。この場合における本化合物の濃度は、配合された本化合物の安定性が得られる濃度以下とする必要がある。本化合物の投与量は、投与された薬剤の分布を画像化するために十分な濃度であれば特に限定する必要はない。例えば、ヨウ素−１２３標識化合物及びフッ素−１８標識化合物の場合は、体重６０ｋｇの成人一人当り５０〜６００ＭＢｑ程度、静脈投与又は局所投与して使用することができる。投与された薬剤の分布は、公知の方法にて画像化することができ、例えばヨウ素−１２３標識化合物の場合はＳＰＥＣＴ装置、フッ素−１８標識化合物の場合はＰＥＴ装置を用いて画像化することができる。
【実施例】
【００３８】
以下、実施例、参考例及び比較例を記載して本発明をさらに詳しく説明するが、本発明の内容はこれらに限定されるものではない。
なお、下記実施例において、各化合物の名称を、表１のように定義した。【００３９】
【表１】
0005247442.tif 000004
【００４０】
（参考例１）２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性フッ素化体）の合成【００４１】
本発明に係る化合物のアミロイドへの親和性、脂溶性並びに変異原性を調べるための試料として、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの非放射性フッ素化体の合成を行った。【００４２】
２−ブロモ−３−ヒドロキシピリジン１００．０ｇ（０．５７５ｍｏｌ相当）をジメチルスルホキシド３１０ｍＬに溶解し、これに１ｍｏｌ／Ｌナトリウムメトキシド−メタノール溶液５７５ｍＬ（０．５７５ｍｏｌ相当）を加えた後、反応液を９０℃に加温しメタノールを留去した。反応液を１０℃以下まで冷却後、ヨウ化メチル９３．９ｇ（０．６６２ｍｏｌ相当）を加え、室温で２０．５時間攪拌した。反応終了後、反応液を氷水に注ぎクロロホルムで２回抽出した。合わせたクロロホルム層は１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムで洗浄したのち、飽和食塩水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去して、２−ブロモ−３−メトキシピリジン６５．４ｇ（０．３４８ｍｏｌ相当）を得た（図２、工程１）。【００４３】
濃硫酸２６２ｍＬを−２℃まで冷却し、これに９０％硝酸２６２ｍＬを注意深く加えた後、２−ブロモ−３−メトキシピリジン６５．３ｇ（０．３４７ｍｍｏｌ相当）を注意深く加えた。反応混合物を氷浴下１０分攪拌後、室温で３０分攪拌し、さらに５５℃まで昇温して１．５時間攪拌した。反応液を室温まで冷却後、少量ずつ氷中に注いで沈殿物を生成させ、この沈殿物をろ取して水で洗浄した。これを五酸化二リンの存在下、減圧下乾燥を行い、２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン５５．７ｇ（０．２３９ｍｏｌ相当）を得た（図２、工程２）。【００４４】
２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン５５．６ｇ（０．２３９ｍｏｌ相当）をエタノール１７００ｍＬに溶解し、アルゴン気流下１０％パラジウム炭素（５０％ｗｅｔ）３７．３ｇを添加後、ヒドラジン１水和物２８３ｍＬを滴下した。反応混合物を７０分間加熱還流後、反応液を室温まで冷却してパラジウム炭素をろ過し、さらにろ過物をエタノールで洗浄して洗浄液をろ液と合わせた。この液を減圧濃縮後、水１３００ｍＬと濃アンモニア水１３０ｍＬを加え、クロロホルムで８回抽出した。合わせたクロロホルム層は、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮し、得られた粗生成物を減圧蒸留して、２−アミノ−５−メトキシピリジン２６．２ｇ（０．２１１ｍｏｌ相当）を得た（図２、工程３）。【００４５】
臭化第二銅２８．１７ｇ（１２６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシアセトフェノン８．１８ｇ（６０．０ｍｍｏｌ相当）を酢酸エチル５０ｍＬ−クロロホルム５０ｍＬ混液に溶解した液を加え、加熱還流した。５時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製し、さらに酢酸エチル−石油エーテルから再結晶を行い、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン７．２５ｇ（３３．７ｍｍｏｌ相当）を得た。（図２、工程４）。【００４６】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン２．１５ｇ（１０．０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−メトキシピリジン１．２５ｇ（１０．０ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル５０ｍＬに溶解し、９０℃の油浴にて３．５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水４０ｍＬ−メタノール４０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約２０ｍＬ加え、超音波洗浄器を用いて５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１．９６ｇ（８．１６ｍｍｏｌ相当）を得た（図２、工程５）。【００４７】
十分に乾燥させ水分を取り除いた２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２４２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ相当）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶解し、これに炭酸カリウム４１８ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ相当）を加えた。これに１−ブロモ−３−フルオロプロパン１４０μＬ（１．５ｍｍｏｌ相当）を加え、室温下１８時間攪拌した。反応終了後、反応液を水に注ぎクロロホルムで３回抽出した。合わせたクロロホルム層は水と飽和食塩水で１回ずつ洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過、濃縮した。得られた粗生成物をリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製し、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（以下、化合物１とする）１８９ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ相当）を得た（図２、工程６）。【００４８】
得られた化合物のＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００４９】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ 7.83-7.79 ( m, 2H ), 7.64-7.63 ( s, 1H ), 7.56-7.54 ( m, 1H ), 7.48-7.45 ( m, 1H ), 6.95-6.92 ( m, 2H ), 6.93-6.90 ( m, 1H ), 4.65 ( dt, 2JHF = 47.0 Hz, J = 6.0 Hz, 2H ), 4.11 ( t, J = 6.0 Hz, 2H ), 3.75 ( s, 3H ), 2.17 ( dquint, 3JHF = 25.9 Hz, J = 6.0 Hz, 2H )。【００５０】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ 158.48, 149.06, 145.42, 142.64, 126.93, 126.80, 119.39, 117.22, 114.58, 108.31, 107.39, 80.66 ( d, 1JCF = 164.6 Hz ), 63.46 ( d, 3JCF = 5.8 Hz ), 56.02, 30.33 ( d, 2JCF = 20.2 Hz )。【００５１】
１９Ｆ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：４７０ＭＨｚ）：δ -221.94 ( tt, 2JHF = 47.0 Hz, 3JHF = 25.9 Hz )。【００５２】
（参考例２）２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−ヒドロキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性フッ素化体）の合成【００５３】
本発明に係る化合物のアミロイドへの親和性、脂溶性並びに変異原性を調べるための試料として、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−ヒドロキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの非放射性フッ素化体の合成を行った。【００５４】
２−ブロモ−３−ヒドロキシピリジン３１．１１ｇ（１７８．８８ｍｍｏｌ相当）をジメチルスルホキシド９５．８ｍＬに溶解し、これに１ｍｏｌ／Ｌナトリウムメトキシド−メタノール溶液８９．９ｍＬ（８９．９ｍｍｏｌ相当）を加えた後、反応液を９０℃に加温しメタノールを留去した。反応液を５℃以下まで冷却後、ヨウ化メチル２９．２ｇ（２０５．６２ｍｍｏｌ相当）を加え、室温で１７時間攪拌した。反応終了後、反応液を氷水に注ぎクロロホルムで２回抽出した。合わせたクロロホルム層は１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムで洗浄したのち、飽和食塩水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去して、２−ブロモ−３−メトキシピリジン２０．７４ｇ（１１０．３１ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程１）。【００５５】
濃硫酸８３ｍＬを−５℃まで冷却し、これに９０％硝酸８３ｍＬを注意深く加えた後、２−ブロモ−３−メトキシピリジン２０．６９ｇ（１１０．０４ｍｍｏｌ相当）を注意深く加えた。反応混合物を氷浴下５分攪拌後、室温で１０分攪拌し、さらに５５℃まで昇温して１時間攪拌した。反応液を室温まで冷却後、少量ずつ氷中に注いで沈殿物を生成させ、この沈殿物をろ取して水で洗浄した。これを五酸化二リンの存在下で減圧乾燥させ、２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン１７．４１ｇ（７４．７１ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程２）。【００５６】
２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン１７．３６ｇ（７４．５０ｍｍｏｌ相当）をエタノール５２０ｍＬに溶解し、アルゴン気流下１０％パラジウム炭素（５０％ｗｅｔ）１１．６３ｇを添加後、ヒドラジン１水和物８８．４ｍＬを滴下した。この混合物を４５分間加熱還流後、室温まで冷却してパラジウム炭素をろ過し、さらにろ過物をエタノールで洗浄して洗浄液をろ液と合わせた。この液を減圧濃縮後、水４０２ｍＬと濃アンモニア水３８ｍLを加え、クロロホルムで８回抽出した。合わせたクロロホルム層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、次いで減圧蒸留して、２−アミノ−５−メトキシピリジン８．１４ｇ（６５．５７ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程３）。【００５７】
４’−ベンゾイルオキシアセトフェノン１３．５０ｇ（５９．６６ｍｍｏｌ相当）をメタノール１１００ｍＬに溶解し、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムトリブロミド３４．５２ｇ（７１．５９ｍｍｏｌ相当）を加え、室温で終夜攪拌した。溶媒を減圧下留去後、残渣を酢酸エチルに溶解し、これを水で２回洗浄したのち、飽和食塩水で洗浄した。酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／塩化メチレン＝１／１）で精製して、４’−ベンゾイルオキシ−２−ブロモアセトフェノン１３．３８ｇ（４３．８４ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程４）。【００５８】
４’−ベンゾイルオキシ−２−ブロモアセトフェノン１３．３３ｇ（４３．６８ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−メトキシピリジン５．６７ｇ（４５．６７ｍｍｏｌ相当）をエタノール４８１ｍＬに溶解し、２時間加熱還流した。反応液を冷却後、炭酸水素ナトリウム６．６４ｇ（７９．０９ｍｍｏｌ相当）を加え、反応混合物をさらに４時間加熱還流した。反応終了後溶媒を減圧濃縮し、残渣をクロロホルムに溶解した後、水で洗浄した。クロロホルム層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後に溶媒を留去し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／酢酸エチル＝２０／１）で精製して、２−（４’−ベンゾイルオキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１０．２０ｇ（３０．８７ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程５）。【００５９】
十分に乾燥させ水分を取り除いた２−（４’−ベンゾイルオキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４．９０ｇ（１４．８３ｍｍｏｌ相当）をクロロホルム２４５ｍＬに溶解し、−１５℃まで冷却した。これに三臭化ホウ素１２．６２ｍＬ（１３３．４８ｍｍｏｌ相当）をジクロロメタン１３４ｍＬに溶解した液を滴下し、室温に昇温後１７時間攪拌した。反応終了後、反応液を氷冷してメタノール６６８ｍＬを加え、さらに室温にて３時間攪拌したのち、反応混合物を減圧濃縮した。得られた粗生成物にクロロホルム２９０ｍＬとメタノール２９ｍＬを加えてリパルプ後、沈殿物をろ別した。ろ別した沈殿物をクロロホルムで洗浄した後、減圧下乾燥を行い、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヒドロキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３．００ｇ（１３．２８ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程６）。【００６０】
２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヒドロキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２．９８ｇ（１３．１７ｍｍｏｌ相当）をジメチルホルムアミド１１４ｍＬに溶解したのち、炭酸カリウム２．１９ｇ（１５．８ｍｍｏｌ相当）を加え、４℃に冷却した。これにメトキシメチルクロリド１．５９ｍＬ（２１．０８ｍｍｏｌ相当）をジメチルホルムアミド４．８ｍＬに溶解した液を滴下し、反応液を室温まで昇温後、２１時間攪拌した。反応終了後、反応液を濃縮したのち、これにクロロホルム５７ｍＬとメタノール５７ｍＬを加えてリパルプし、ろ過を行って沈殿物とろ液とに分けた。沈殿物をクロロホルム−メタノール混液（１：１）１１４ｍＬで洗浄し、前記ろ液を合わせて減圧濃縮した。得られた粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝１０／１→５／１）で精製し、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−４−メトキシメチル−６−メトキシメトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジニウムクロリド２．０３ｇ（５．７８ｍｍｏｌ）を得た（図３、工程７）。【００６１】
２−（４’−ヒドロキシフェニル）−４−メトキシメチル−６−メトキシメトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジニウムクロリド２．０１ｇ（５．７３ｍｍｏｌ相当）をジメチルホルムアミド８３．６ｍＬに溶解し、炭酸カリウム３．１７ｇ（２２．９２ｍｍｏｌ相当）と１−ブロモ−３−フルオロプロパン１．６２ｇ（１１．４６ｍｍｏｌ相当）を加え、室温にて終夜攪拌した。反応終了後、反応液を水に注ぎ塩化ナトリウムを加え塩析しながらクロロホルムで２回抽出した。合わせたクロロホルム層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥して濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝１０／１→５／１）で精製して、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−４−メトキシメチル−６−メトキシメトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジニウムクロリド１．９５ｇ（４．５７ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程８）。【００６２】
２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−４−メトキシメチル−６−メトキシメトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジニウムクロリド１．９３ｇ（４．５３ｍｍｏｌ相当）をメタノール２９ｍＬに溶解し、濃塩酸０．９５ｍＬを加えて、２時間加熱還流した。反応液を冷却後、水中に注ぎ塩化ナトリウムを加え塩析しながらクロロホルムで２回抽出した。合わせたクロロホルム層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝１０／１→５／１）で精製して、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシメトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１．２２ｇ（３．６８ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程９）。【００６３】
２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシメトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１．１８ｇ（３．５７ｍｍｏｌ相当）をイソプロピルアルコール２９ｍＬに溶解し、濃塩酸０．５９ｍＬを加えて２３時間加熱還流した。反応液を冷却後、水中に注ぎ塩化ナトリウムを加え塩析しながらクロロホルムで２回抽出した。合わせたクロロホルム層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝１０／１）で精製して、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−ヒドロキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（以下、化合物２とする）４８１ｍｇ（１．６８ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程１０）。【００６４】
得られた化合物のＮＭＲ測定結果（内部標準物質：ジメチルスルホキシド）は、以下の通りであった。【００６５】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＧＳＸ−２７０（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重ジメチルスルホキシド、共鳴周波数：２７０ＭＨｚ）：δ 8.52 ( s, 2H ), 8.30-8.25 ( m, 1H ), 7.85-7.79 ( m, 1H ), 7.67-7.62 ( m, 1H ), 7.22-7.16 ( m, 2H ), 5.64 ( s, 1H ), 4.62 ( dt, 2JHF = 47.0 Hz, J = 5.9 Hz, 2H ), 4.17 ( t, J = 5.9 Hz, 2H ), 2.14 ( dquint, 3JHF = 26.2 Hz, J = 5.9 Hz, 2H )。【００６６】
（参考例３）２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性フッ素化体）の合成【００６７】
本発明に係る化合物のアミロイドへの親和性、脂溶性並びに変異原性を調べるための試料として、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの非放射性フッ素化体の合成を行った。【００６８】
臭化第二銅２８．１７ｇ（１２６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシアセトフェノン８．１８ｇ（６０．０ｍｍｏｌ相当）を酢酸エチル５０ｍＬ−クロロホルム５０ｍＬ混液に溶解させた液を加え、加熱還流した。５時間後、反応混合物を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製し、さらに酢酸エチル−石油エーテルから再結晶を行い、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン７．２５ｇ（３３．７ｍｍｏｌ相当）を得た。（図４、工程１）。【００６９】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン６４９ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノピリジン２８５ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ相当）とをアセトニトリル２０ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて１時間加熱還流した。反応液を室温まで冷却した後、炭酸水素ナトリウム２５４ｍｇ（５．４ｍｍｏｌ相当）を加え、さらに１００℃の油浴で１時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、得られた沈殿物をアセトニトリルと水で洗浄した。これを減圧下乾燥させて、２−（４’−ヒドロキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４０５ｍｇ（１．９ｍｍｏｌ相当）を得た（図４、工程２）。【００７０】
十分に乾燥させ水分を取り除いた２−（４’−ヒドロキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３９８ｍｇ（１．８９ｍｍｏｌ相当）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１５ｍＬに溶解し、これに炭酸カリウム７８８ｍｇ（５．７ｍｍｏｌ相当）を加えた。これに１−ブロモ−３−フルオロプロパン２６０μＬ（２．８ｍｍｏｌ相当）を加え、室温下２０．５時間攪拌した。反応終了後、反応液を水に注ぎクロロホルムで３回抽出した。合わせたクロロホルム層は水と飽和食塩水で洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過、濃縮した。得られた粗生成物をリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製し、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（以下、化合物３とする）２６４ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ相当）を得た（図４、工程３）。【００７１】
ＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００７２】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ 8.09 ( dt, J = 6.9, 1.2 Hz, 1H ), 7.90-7.86 ( m, 2H ), 7.76 ( d, J = 0.7 Hz, 1H ), 7.62-7.59 ( m, 1H ), 7.14 ( ddd, J = 9.1, 6.7, 1.2 Hz, 1H ), 6.99-6.95 ( m, 2H ), 6.75 ( dt, J = 6.7, 1.2 Hz, 1H ), 4.67 ( dt, 2JHF = 47.0 Hz, J = 6.0 Hz, 2H ), 4.14 ( t, J = 6.0 Hz, 2H ), 2.19 ( dquint., 3JHF = 25.9 Hz, J = 6.0 Hz, 2H )。【００７３】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ158.74, 145.68, 145.61, 127.29, 126.67, 125.42, 124.41, 117.29, 114.69, 112.21, 107.21, 80.73 ( d, 1JCF = 164.6 Hz ), 63.53 ( d, 3JCF = 5.3 Hz ), 30.42 ( d, 2JCF = 20.2 Hz )。【００７４】
１９Ｆ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：４７０MHｚ）：δ-222.04 ( dd, 2JHF = 47.0 Hz, 3JHF = 25.9 Hz ).【００７５】
（参考例４）２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性フッ素化体）の合成【００７６】
本発明に係る化合物のｌｏｇＰＨＰＬＣの算出に用いる計算式を作成する目的で、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの非放射性フッ素化体の合成を行った。【００７７】
臭化第二銅２８．１７ｇ（１２６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシアセトフェノン８．１８ｇ（６０．０ｍｍｏｌ相当）の酢酸エチル５０ｍＬ−クロロホルム５０ｍＬ混液を加え、加熱還流した。５時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製し、さらに酢酸エチル−石油エーテルから再結晶を行い、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン７．２５ｇ（３３．７ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程１）。【００７８】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン４４１ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ヨードピリジン４４９ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル１５ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水１０ｍＬ−メタノール１０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約１０ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン５２６ｍｇ（１．５６ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程２）。【００７９】
十分に乾燥させ水分を取り除いた２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン６７３ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ相当）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２５ｍＬに溶解し、これに炭酸カリウム８３１ｍｇ（６．０ｍｍｏｌ相当）を加えた。これに１−ブロモ−３−フルオロプロパン２７５μＬ（３．０ｍｍｏｌ相当）を加え、室温下２４時間攪拌した。反応終了後、反応液を水に注ぎクロロホルムで３回抽出した。合わせたクロロホルム層は水と飽和食塩水で洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム）で精製し、さらにリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製して、２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３４９ｍｇ（０．８８１ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程３）。【００８０】
得られた２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００８１】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.37-8.35 ( m, 1H ), 7.88-7.84 ( m, 2H ), 7.72 ( s, 1H ), 7.42-7.39 ( m, 1H ), 7.32 ( dd, J = 9.4, 1.6 Hz, 1H ), 6.99-6.96 ( m, 2H ), 4.67 ( dt, 2JHF = 47.0 Hz, J = 6.0 Hz, 2H ), 4.15 ( t, J = 6.0 Hz, 2H ), 2.20 ( dquint, 3JHF = 25.9 Hz, J = 6.0 Hz, 2H )。【００８２】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ159.01, 146.23, 144.16, 132.36, 130.28, 127.42, 126.05, 118.31, 114.77, 106.90, 80.72 ( d, 1JCF = 164.6 Hz ), 74.80, 63.57 ( d, 3JCF = 5.3 Hz ), 30.42 ( d, 2JCF = 20.2 Hz )。【００８３】
１９Ｆ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：４７０MHｚ）：δ-222.09 ( dd, 2JHF = 47.0 Hz, 3JHF = 25.9 Hz )。【００８４】
（参考例５）２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００８５】
本発明に係る化合物のｌｏｇＰＨＰＬＣの算出に用いる計算式を作成する目的で、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの非放射性フッ素化体の合成を行った。【００８６】
臭化第二銅２８．１７ｇ（１２６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシアセトフェノン８．１８ｇ（６０．０ｍｍｏｌ相当）の酢酸エチル５０ｍＬ−クロロホルム５０ｍＬ混液を加え、加熱還流した。５時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製し、さらに酢酸エチル−石油エーテルから再結晶を行い、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン７．２５ｇ（３３．７ｍｍｏｌ相当）を得た（図６、工程１）。【００８７】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン４４１ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ヨードピリジン４４９ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル１５ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水１０ｍＬ−メタノール１０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約１０ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン５２６ｍｇ（１．５６ｍｍｏｌ相当）を得た（図６、工程２）。【００８８】
得られた２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：ジメチルスルホキシド）は、以下の通りであった。【００８９】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重ジメチルスルホキシド、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.86-8.84 ( m, 1H ), 8.14 ( s, 1H ), 7.78-7.74 ( m, 2H ), 7.40-7.35 ( m, 2H ), 6.86-6.82 ( m, 2H )。【００９０】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重ジメチルスルホキシド、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ158.08, 145.87, 143.87, 132.48, 131.72, 127.67, 124.99, 118.14, 116.14, 108.02, 75.85。【００９１】
（参考例６）［１２５Ｉ］−２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ） フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００９２】
ＬｏｇＰＨＰＬＣの算出に用いる計算式を作成する目的で、下記の工程に従い、［１２５Ｉ］−２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成した。【００９３】
臭化第二銅２８．１７ｇ（１２６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシアセトフェノン８．１８ｇ（６０．０ｍｍｏｌ相当）を酢酸エチル５０ｍＬ−クロロホルム５０ｍＬ混液に溶解させた液を加え、加熱還流した。５時間後、反応混合物を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製し、さらに酢酸エチル−石油エーテルから再結晶を行い、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン７．２５ｇ（３３．７ｍｍｏｌ相当）を得た（図７、工程１）。【００９４】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン２．１５ｇ（１０．０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ブロモピリジン１．７４ｇ（１０．０ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル５０ｍＬに溶解し、１０５℃の油浴にて６時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水２０ｍＬ−メタノール２０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約２５ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、６−ブロモ−２−（４’−ヒドロキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２．４１ｇ（８．３２ｍｍｏｌ相当）を得た（図７、工程２）。【００９５】
十分に乾燥させ水分を取り除いた６−ブロモ−２−（４’−ヒドロキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２９０ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ相当）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶解し、これに炭酸カリウム４１３ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ相当）を加えた。これに１−ブロモ−３−フルオロプロパン１３８μＬ（１．５ｍｍｏｌ相当）を加え、室温下２０．５時間攪拌した。反応終了後、反応液を水に注ぎクロロホルムで３回抽出した。合わせたクロロホルム層は飽和食塩水で洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過、濃縮した。得られた粗生成物をリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製し、６−ブロモ−２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３０２ｍｇ（０．８６６ｍｍｏｌ相当）を得た（図７、工程３）。【００９６】
６−ブロモ−２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン８５ｍｇ（０．２４ｍｍｏｌ相当）をジオキサン１０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン２ｍＬを加えた後、これにビストリブチルスズ１８５μＬ（０．３６ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム２０ｍｇ（触媒量）を添加した。反応混合物を９０℃で２４時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をプレパラーティブＴＬＣ（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝６／４）にて精製した。さらに得られた粗生成物をリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製し、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４２ｍｇ（７４．２μｍｏｌ相当）を得た（図７、工程４）。【００９７】
得られた６−トリブチルスタニル−２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００９８】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.01-7.93 ( m, 1H ), 7.91-7.87 ( m, 2H ), 7.75-7.74 ( m, 1H ), 7.63-7.58 ( m, 1H ), 7.20-7.11 ( m, 1H ), 7.00-6.95 ( m, 2H ), 4.67 ( dt, JHF = 47.0 Hz, J = 6.0 Hz, 2H ), 4.15 ( t, J = 6.0 Hz, 2H ), 2.20 ( dquint, JHF = 26.1 Hz, J = 6.0 Hz, 2H ), 1.64-1.47 ( m, 6H ), 1.39-1.31 ( m, 6H ), 1.19-1.04 ( m, 6H ), 0.91 ( t, J = 7.2 Hz, 9H )【００９９】
６−トリブチルスタニル−２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）１００μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ５０μＬ、３７〜３７０ＭＢｑの［１２５Ｉ］ヨウ化ナトリウム１０〜１００μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素２０μＬを添加した。当該混合液を室温にて１０分間静置した後、下記の条件のＨＰＬＣに付して［１２５Ｉ］−２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した（図７，工程５）。【０１００】
ＨＰＬＣ条件：
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（商品名、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製、サイズ：４．６×１５０ｍｍ）
移動相：０．１％トリフルオロ酢酸／０．１％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル＝８０／２０→０／１００（１７分）
流速：１．０  ｍＬ／分
検出器：紫外可視吸光光度計（検出波長：２８２ｎｍ）及び放射線検出器    （ｒａｙｔｅｓｔ社 ＳＴＥＦＦＩ型）【０１０１】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液をＳｅｐ−Ｐａｋ Ｃ１８カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ１８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１３０ｍｇ）に通液し、［１２５Ｉ］−２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、エタノール１ｍＬを通液して［１２５Ｉ］−２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において３７．５ＭＢｑであった。また、下記の条件によるＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９６．５％であった。【０１０２】
ＴＬＣ分析条件：
ＴＬＣプレート：ＲＰ−１８Ｆ２５４（製品名、メルク社製）
展開相：メタノール／水＝２０／１
検出器：バイオイメージングアナライザー，ＢＡＳ−２５００（形式：ＢＡＳ−２５００、富士写真フィルム株式会社製）【０１０３】
（参考例７）［１２５Ｉ］−２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１０４】
ＬｏｇＰＨＰＬＣの算出に用いる計算式を作成する目的で、下記の工程に従い、    ［１２５Ｉ］−２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成した。【０１０５】
臭化第二銅２８．１７ｇ（１２６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシアセトフェノン８．１８ｇ（６０．０ｍｍｏｌ相当）を酢酸エチル５０ｍＬ−クロロホルム５０ｍＬ混液に溶解させた液を加え、加熱還流した。５時間後、反応混合物を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製し、さらに酢酸エチル−石油エーテルから再結晶を行い、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン７．２５ｇ（３３．７ｍｍｏｌ相当）を得た（図８、工程１）。【０１０６】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン２．１５ｇ（１０．０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ブロモピリジン１．７４ｇ（１０．０ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル５０ｍＬに溶解し、１０５℃の油浴にて６時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水２０ｍＬ−メタノール２０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約２５ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、６−ブロモ−２−（４’−ヒドロキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２．４１ｇ（８．３２ｍｍｏｌ相当）を得た（図８、工程２）。【０１０７】
６−ブロモ−２−（４’−ヒドロキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１３８ｍｇ（０．４７６ｍｍｏｌ相当）をジオキサン２０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン２ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ３６０μＬ（０．７１３ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム２０ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で２２時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をプレパラーティブＴＬＣ（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／４）にて精製した。さらに得られた粗生成物をリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製し、６−トリブチルスタニル−２−（４’−ヒドロキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４７ｍｇ（９４．９μｍｏｌ相当）を得た（図８、工程３）。【０１０８】
６−トリブチルスタニル−２−（４’−ヒドロキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）５３μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ５０μＬ、１３６ＭＢｑの［１２５Ｉ］ヨウ化ナトリウム（容量として、４０μＬ）、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、参考例６と同様の条件のＨＰＬＣに付して［１２５Ｉ］−２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した（図８，工程４）。【０１０９】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標、ウォターズ・インヴェストメンツ・リミテッド）Ｌｉｇｈｔ Ｃ１８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量：１３０ｍｇ）に通液し、［１２５Ｉ］−２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、エタノール１ｍＬを通液して［１２５Ｉ］−２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において３７．５ＭＢｑであった。また、上記参考例６と同様の条件によるTLC分析にて測定したところ、その放射化学的純度は９６．５％であった。【０１１０】
（参考例８）［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹの合成【０１１１】
ＬｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ及び脳集積性に関する検討における比較例に用いるため、下記の工程に従い、［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを合成した。【０１１２】
文献（Zhi-Ping Zhuang et al., J. Med. Chem, 2003, 46, p.237-243）記載の方法に従い、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成し、メタノールに溶解した（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）。当該溶液５３μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  １００μＬ、１９０〜２４０ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム２０〜５０μＬ、１ｍｍｏｌ／Ｌ ヨウ化ナトリウム溶液 １０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、参考例４と同様の条件のＨＰＬＣに付して［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹ画分を分取した。【０１１３】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ(登録商標)Ｌｉｇｈｔ Ｃ１８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量：１３０ｍｇ）に通液し、［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、エタノール１ｍＬを通液して［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において４７〜５６ＭＢｑであった。また、参考例４と同様の条件にてＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９８．０％であった。【０１１４】
（実施例１）６−メトキシ−２−［４’−（３”−パラトルエンスルホニルオキシプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１１５】
２−ブロモ−３−ヒドロキシピリジン１００．０ｇ（０．５７５ｍｏｌ相当）をジメチルスルホキシド３１０ｍＬに溶解し、これに１ｍｏｌ／Ｌナトリウムメトキシド−メタノール溶液５７５ｍＬ（０．５７５ｍｏｌ相当）を加えた後、反応液を９０℃に加温しメタノールを留去した。反応液を１０℃以下まで冷却後、ヨウ化メチル９３．９ｇ（０．６６２ｍｏｌ相当）を加え、室温で２０．５時間攪拌した。反応終了後、反応液を氷水に注ぎクロロホルムで２回抽出した。合わせたクロロホルム層を１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムで洗浄したのち、飽和食塩水で２回洗浄した。これを無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去することにより、２−ブロモ−３−メトキシピリジン６５．４ｇ（０．３４８ｍｏｌ）を得た（図１、工程１）。【０１１６】
濃硫酸２６２ｍＬを−２℃まで冷却し、これに９０％硝酸２６２ｍＬを注意深く加えた後、２−ブロモ−３−メトキシピリジン６５．３ｇ（０．３４７ｍｍｏｌ相当）を注意深く加えた。得られた混合物を氷浴下１０分攪拌後、室温で３０分攪拌し、さらに５５℃まで昇温して１．５時間攪拌した。反応液を冷却後、徐々に氷中に注いで沈殿物を生成させ、これをろ取し水で洗浄した。得られた沈殿物につき五酸化二リンの存在下で減圧乾燥を行い、２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン５５．７ｇ（０．２３９ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程２）。【０１１７】
２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン５５．６ｇ（０．２３９ｍｏｌ相当）をエタノール１７００ｍＬに溶解し、アルゴン気流下１０％パラジウム炭素（５０％ｗｅｔ）３７．３ｇを添加後、ヒドラジン１水和物２８３ｍＬを滴下した。反応混合物を７０分間加熱還流後、反応液を室温まで冷却してパラジウム炭素をろ過し、さらにろ過物をエタノールで洗浄して洗浄液をろ液と合わせた。この液を減圧濃縮後、水１３００ｍＬと濃アンモニア水１３０ｍLを加え、クロロホルムで８回抽出した。合わせたクロロホルム層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物を減圧蒸留して、２−アミノ−５−メトキシピリジン２６．２ｇ（０．２１１ｍｏｌ相当）を得た（図１、工程３）。【０１１８】
臭化第二銅２８．１７ｇ（１２６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシアセトフェノン８．１８ｇ（６０．０ｍｍｏｌ相当）を酢酸エチル５０ｍＬ−クロロホルム５０ｍＬ混液に溶解した液を加え、加熱還流した。５時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製し、さらに酢酸エチル−石油エーテルから再結晶を行い、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン７．２５ｇ（３３．７ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程４）。【０１１９】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン２．１５ｇ（１０．０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−メトキシピリジン１．２５ｇ（１０．０ｍｍｏｌ相当）とをアセトニトリル５０ｍＬに溶解し、９０℃の油浴にて３．５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別した。ろ別した沈殿物をアセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させて粗結晶を得た。得られた粗結晶を、水４０ｍＬ−メタノール４０ｍＬ混液に懸濁させ、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約２０ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１．９６ｇ（８．１６ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程５）。【０１２０】
１，３−プロパンジオール１．４５ｍＬ（２０．０ｍｍｏｌ相当）を塩化メチレン２００ｍＬに溶解し、氷浴下これに酸化銀６．９６ｇ（３０．０ｍｍｏｌ相当）、ヨウ化カリウム６６６ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ相当）及びパラトルエンスルホニルクロリド４．２１ｇ（２２．０ｍｍｏｌ相当）を加え、室温にて３時間攪拌した。反応混合物から不溶分をろ過し、さらに不溶分を酢酸エチルで洗浄した。ろ液と洗液をあわせて濃縮し、得られた粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝３／２→１／１）で精製して、１，３−プロパンジオールモノパラトルエンスルホネート２．４７ｇ（１０．７ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程６）。【０１２１】
１，３−プロパンジオールモノパラトルエンスルホネート５５４ｍｇ（２．４０ｍｍｏｌ相当）のテトラヒドロフラン１０ｍＬ溶液に、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２６０ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ相当）とトリフェニルホスフィン６３６ｍｇ（２．４２ｍｍｏｌ相当）を加え、さらにＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｍＬを加えて内容物を完溶させた。反応混合物にジイソプロピルアゾジカルボキシレート０．４８ｍＬ（２．４２ｍｍｏｌ相当）を加え、室温下２３時間攪拌した後、反応液を濃縮した。得られた粗生成物をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／酢酸エチル＝１９／１）で精製し、さらにリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製した後、再度フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝３５／６５）で精製して、２−［４’−（３”−パラトルエンスルホニルオキシプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２２０ｍｇ（０．４８７ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程７）。【０１２２】
得られた化合物のＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【０１２３】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ7.81-7.77 ( m, 2H ), 7.76-7.72 ( m, 2H ), 7.71-7.70 ( m, 1H ), 7.64-7.62 ( m, 1H ), 7.49-7.46 ( m, 2H ), 7.24-7.21 ( m, 2H ), 6.95-6.92 ( m, 1H ), 6.81-6.77 ( m, 2H ), 4.25 ( t, J = 6.0 Hz, 2H ), 3.95 ( t, J = 6.0 Hz, 2H ), 3.80 ( s, 3H ), 2.34 ( s, 3H ), 2.11 ( quint., J = 6.0 Hz, 2H )。【０１２４】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ158.16, 149.11, 145.41, 144.77, 142.71, 132.64, 129.75, 127.71, 126.93, 126.85, 119.45, 117.28, 114.47, 108.35, 107.49, 66.99, 62.97, 56.11, 28.77, 21.52.【０１２５】
（実施例２）２−［４’−（３”−［１８Ｆ］フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１２６】
［１８Ｆ］フッ化物イオン含有Ｈ２１８Ｏ（放射能量５０８７ＭＢｑ、合成開始時補正値）を、Ｓｅｐ−Ｐａｋ  Ｌｉｇｈｔ  ＱＭＡ（商品名、日本ウォーターズ株式会社製）に通液し、［１８Ｆ］フッ化物イオンを吸着捕集した。次いで、該カラムに炭酸カリウム水溶液（６６．７ｍｍｏｌ／Ｌ、０．３ｍＬ）及びクリプトフィックス２２２（商品名、メルク社製）２０ｍｇ（５３．１μｍｏｌ相当）のアセトニトリル１．５ｍＬ溶液を通液して、［１８Ｆ］フッ化物イオンを溶出した。【０１２７】
これをヘリウムガスの通気下、１００℃に加熱して水を蒸発させた後、アセトニトリル（０．３ｍＬ×２）を加えて共沸させ、乾固させた。ここに上記実施例１にて合成した２−［４’−（３”−パラトルエンスルホニルオキシプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン５ｍｇのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１．０ｍＬ溶液を加え、１３０℃で１０分間加熱した。反応液を３０℃まで冷却したのち、反応液にジエチルエーテル３．０ｍＬを加え、Ｓｅｐ−Ｐａｋ  Ｐｌｕｓ  Ｓｉｌｉｃａ（商品名，日本ウォーターズ社製）に通液した。さらにＳｅｐ−Ｐａｋ  Ｐｌｕｓ  Ｓｉｌｉｃａに、ジエチルエーテル３．５ｍＬとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド０．５ｍＬの混液を２回通液した。通液後のジエチルエーテル溶液を、ヘリウムガスの通気下６０℃に加温して濃縮し、濃縮液にアセトニトリル／水／トリエチルアミン＝５５０：４５０：１の混合液２ｍＬを加え希釈した。【０１２８】
得られた溶液をＨＰＬＣ（カラム：ＳＵＭＩＰＡＸ  ＯＤＳ  ＪＰ−０６（２０ｍｍｉ．ｄ．×２５０ｍｍ、住化分析センター製）、溶離液：アセトニトリル／水／トリエチルアミン＝５００／５００／１、流量：７．５ｍＬ／ｍｉｎ）を用いて精製を行った。目的物を含む溶離液のフラクションに水５０ｍＬを加えて希釈した後、この液をＳｅｐ−Ｐａｋ  Ｐｌｕｓ  Ｃ１８（商品名、日本ウォーターズ社製）に通液し、目的物を吸着捕集した。次いで該カラムに水２０ｍＬを通液して洗浄した後、エタノール２ｍＬを通液して溶出し、２−［４’−（３”−［１８Ｆ］フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのエタノール溶液を得た。得られた放射能量は１７９５ＭＢｑ（合成開始後９４分）であり、下記条件にてＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９０．４％であった。【０１２９】
ＴＬＣ分析条件：
ＴＬＣプレート：Ｓｉｌｉｃａ  Ｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４（製品名、メルク社製）
展開相：クロロホルム／メタノール／トリエチルアミン＝５０／１／２
検出器：Ｒｉｔａ  Ｓｔａｒ（製品名、ｒａｙｔｅｓｔ社製）【０１３０】
（実施例３〜５、比較例１〜５）アミロイド親和性の測定
本発明化合物のアミロイド親和性を、以下のｉｎ ｖｉｔｒｏ結合試験により評価した。【０１３１】
（１）Ａβ１−４０（ペプチド研究所）（以下、Ａβ１−４０という）をリン酸緩衝液（ｐＨ ７．４）で溶解して３７℃で６２〜７２時間振盪させ、１ｍｇ／ｍＬの凝集Ａβ懸濁液（以下、本実施例にてアミロイド懸濁液という）を得た。【０１３２】
（２）上記アミロイド懸濁液につき、文献（Naiki, H.ら、Laboratory Investigation.74、p.374-383(1996)）記載の方法に従い、チオフラビンT（Ｆｌｕｋａ社製）を用いた蛍光光度測定による定性実験を行い、（１）で得た凝集化Ａβがアミロイドであることを確認した（測定条件：励起波長４４６ｎｍ，蛍光波長４９０ｎｍ）。【０１３３】
（３）文献（Wang, Y.ら、 J. Labelled Compounds Radiopharmaceut.44、 S239(2001)）記載の方法に従い、２−（４’−アミノフェニル）ベンゾチアゾールを標識前駆体として［１２５Ｉ］２−（３’−ヨード−４’−アミノフェニル）ベンゾチアゾール（以下、［１２５Ｉ］３’−Ｉ−ＢＴＡ−０）を調製し、エタノールに溶解した。コンゴーレッド、チオフラビンＴ及び６−メチル−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］ベンゾチアゾール（以下、６−Ｍｅ−ＢＴＡ−２）は、市販の試薬をそのまま秤量して用いた。【０１３４】
（４）２−（３’−ヨード−４’−アミノフェニル）ベンゾチアゾール（以下、３’−Ｉ−ＢＴＡ−０）及びＩＭＰＹを、それぞれ文献（Wang, Y.ら、 J. Labelled Compounds Radiopharmaceut.44、S239(2001)）及び文献（Zhuang, Z.P.ら、J.Med. Chem.46,237(2003)）記載の方法に従って合成した。【０１３５】
（５）［１２５Ｉ］３’−Ｉ−ＢＴＡ−０、各評価化合物及びアミロイドの最終濃度が表２記載の濃度となるように０．１％牛血清アルブミン含有リン酸緩衝液（ｐＨ ７．４）に溶解した試料を調製し、９６穴マイクロプレートの各ウェル（容量約０．３ｍＬ）に充填した。【０１３６】
【表２】
0005247442.tif 000005
【０１３７】
（６）試料溶液を充填したマイクロプレートを、２２℃で３時間、一定速度（４００回転／分）で振盪した後、各試料溶液をグラスファイバーフィルター（商品名：ＭｕｌｔｉｓｃｒｅｅｎＴＭ−ＦＣ、ミリポア社製）にて濾過することにより、アミロイドに結合した［１２５Ｉ］３’−Ｉ−ＢＴＡ−０と結合していない［１２５Ｉ］３’−Ｉ−ＢＴＡ−０とを分離した。【０１３８】
（７）各試料溶液の濾過に用いたグラスファイバーフィルターを、０．１％牛血清アルブミン含有リン酸緩衝液（ｐＨ ７．４）で洗浄（０．５ｍＬ×５回）し、グラスファイバーフィルターの放射能をオートウェル・ガンマシステム  （Ａｌｏｋａ社製、形式：ＡＲＣ−３０１Ｂ）で測定し、各試料溶液の放射能量として阻害率の計算に用いた（以下、各評価化合物濃度が０の試料における放射能量をＡ、評価化合物濃度が０．００１ｎｍｏｌ／Ｌ以上の試料における放射能量をＢとする）。【０１３９】
（８）別に、６−Ｍｅ−ＢＴＡ−２を１５μｍｏｌ／Ｌ、［１２５Ｉ］３’−Ｉ−ＢＴＡ−０を４００ｐｍｏｌ／Ｌ、Ａβ１−４０を１μｍｏｌ／Ｌ配合させた液を調製し、上記（６）及び（７）と同様の操作を行って放射能量を測定した。求めた放射能量をバックグランド放射能量とし、阻害率の計算に用いた（以下、ＢＧとする）。【０１４０】
（９）上記（７）及び（８）にて測定した放射能量を用い、下記式（１）：【０１４１】
【数１】
0005247442.tif 000006
【０１４２】
より阻害率を求めた。得られた阻害率をプロビット変換した値を評価化合物の濃度の対数に対してプロットしたグラフを作成し、最小二乗法にて近似直線を作成した。この直線を用い、放射能量が各評価化合物無添加試料における値の半分となるような各評価化合物濃度を求め、各化合物の５０％阻害濃度（以下、ＩＣ５０％値という）とした。この値を指標として用い、各評価化合物のアミロイド（凝集化Ａβ１−４０）親和性を評価した。【０１４３】
各評価化合物におけるＩＣ５０％値を表３に示す。化合物１〜３は、何れも１００未満のＩＣ５０％値を示し、コンゴーレッド及びチオフラビンTよりも高いアミロイド（凝集化Ａβ１−４０）親和性を有していた。この結果より、化合物１〜３は、良好なアミロイド（凝集化Ａβ１−４０）親和性を有する化合物であることが示された。特に、化合物１においては、３’−Ｉ−ＢＴＡ−０及び６−Ｍｅ−ＢＴＡ−２よりも高くＩＭＰＹと同等のアミロイド（凝集化Ａβ１−４０）親和性を有していた。【０１４４】
【表３】
0005247442.tif 000007
【０１４５】
（実施例６、比較例６）オクタノール抽出法を用いた分配係数の測定【０１４６】
化合物の血液脳関門（以下、ＢＢＢという）透過性の指標として一般に知られているオクタノール抽出法を用いた分配係数（以下、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌという）を測定した。【０１４７】
オクタノール２ｍＬに化合物４（実施例５）を含む溶液１０μＬ及び１０ｍｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）２ｍＬを添加し、３０秒間攪拌した。この混合液を低速遠心機（日立工機株式会社製、形式：CENTRIFUGE CT4D）で遠心分離（２０００ 回転／分×６０分間）した後、オクタノール層及び水層を各１ｍＬ分取し、それぞれの放射能をオートウェル・ガンマシステム（Ａｌｏｋａ社製、形式：ＡＲＣ−３０１Ｂ）にて計測した。得られた放射能を用い、式（２）よりｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値を算出した。【０１４８】
【数２】
0005247442.tif 000008
【０１４９】
結果を表４に示す。ＢＢＢを透過可能な化合物においては、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値は１〜３の間の値の値であることが知られている（Douglas D. Dischino et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030-1038）。化合物４のｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌの値は１．８であり、比較例のＩＭＰＹ同様にＢＢＢ透過性を有することが示唆された。【０１５０】
【表４】
0005247442.tif 000009
【０１５１】
（実施例７〜９、比較例７）ＨＰＬＣを用いた分配係数の測定【０１５２】
ＨＰＬＣによる分配係数（以下、ｌｏｇＰＨＰＬＣという）を下記の方法により測定した。このｌｏｇＰＨＰＬＣは、化合物のＢＢＢ透過性の指標として一般に知られているｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌと、ｐＨ ７．２〜７．４において同等の値を有することが知られている数値である(Franco Lombardo et al., J.Med.Chem., (2000), 43, p.2922-2927)。【０１５３】
まず、表５記載の各評価化合物を、濃度１ｍｇ／ｍＬとなるように１０％ジメチルスルホキシド含有メタノールに溶解し、試料溶液を調製した。この試料溶液１μＬにつき、下記の条件によるＨＰＬＣ分析を行い、溶媒の溶出時間（ｔ0）及び化合物の溶出時間（ｔR）を求めた。【０１５４】
【表５】
0005247442.tif 000010
【０１５５】
ＨＰＬＣ条件：
カラム：Ｐｒｏｄｉｇｙ ＯＤＳ（３）（製品名、ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製、サイズ：４．６×２５０ ｍｍ）
移動相：５０ｍＭトリエチルアミンリン酸（ｐＨ ７．２）／アセトニトリル＝４０／６０混液
流速：０．７ｍＬ／分
検出器：紫外可視吸光光度計（検出波長：２８２ｎｍ）【０１５６】
得られたｔ０及びｔRを用い、計算式（３）より各評価化合物のリテンションファクター（以下、Ｋ’ＨＰＬＣ値という）を求めた。【０１５７】
【数３】
0005247442.tif 000011
【０１５８】
別に、上記参考例６にて合成した［１２５Ｉ］−２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン溶液（放射能濃度３７ＭＢｑ／ｍＬ）及び、上記参考例７にて合成した［１２５Ｉ］−２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン溶液（放射能濃度３７ＭＢｑ／ｍＬ）を、別々に用意したオクタノール２ｍＬに１０μＬずつ添加し、さらにそれぞれの溶液に１０ｍｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）２ｍＬを加えた。各液を３０秒間攪拌した後、２０００回転／分の条件にて６０分間遠心分離を行った。オクタノール相及び水相それぞれ１ｍＬにつき、放射能をオートウェル・ガンマシステム（Ａｌｏｋａ社製、形式：ＡＲＣ−３０１Ｂ）にて計測した。得られた放射能より、上記の式（２）を用いてｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値を算出した。【０１５９】
さらに、上記参考例４にて合成した２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン溶液及び上記参考例５にて合成した２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン溶液のそれぞれについて上記と同様のＨＰＬＣ分析を行い、Ｋ’ＨＰＬＣ値を求めた。【０１６０】
２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン及び２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンにおけるlog１０Ｋ’ＨＰＬＣに対して［１２５Ｉ］ー２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン及び［１２５Ｉ］ー２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンにおけるｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値をプロットしたグラフを作成し、直線の傾きとy切片を見積もった。この値を用い、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値とｌｏｇＰＨＰＬＣ値とがｐＨ ７．２〜７．４において等しいと仮定して、下記式（４）を求めた。【０１６１】
【数４】
0005247442.tif 000012
【０１６２】
各評価化合物について求めたＫ’ＨＰＬＣを用い、上記計算式（４）に従って、各評価化合物におけるｌｏｇＰＨＰＬＣ値を求めた。【０１６３】
結果を表６に示す。この表に示すように、ｌｏｇＰＨＰＬＣ値は、化合物１〜３のいずれにおいても、１〜３の間の値を示していた。上述したように、ＢＢＢを透過可能な化合物においては、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値は１〜３の間の値であることが知られている(Douglas D. Dischino et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030-1038)。また、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌとｌｏｇＰＨＰＬＣとはｐＨ ７．２〜７．４において同等の値を有することが知られている (Franco Lombardo et al., J.Med.Chem., (2000), 43, p.2922-2927)。以上の結果より、化合物１〜３は、ＢＢＢを透過する性質を有するものであることが示唆された。【０１６４】
【表６】
0005247442.tif 000013
【０１６５】
（実施例１０、比較例８）脳内移行性及びクリアランスの測定【０１６６】
化合物４を用い、雄性のＷｉｓｔａｒ系ラット（７週齢）における脳への放射能集積の経時的変化を測定した。【０１６７】
化合物４を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液、及び上記参考例８にて調製した［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹ（比較例７）を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度１５〜３１ＭＢｑ／ｍＬ）各０．０５ｍＬを、チオペンタール麻酔下で尾静脈より上記ラットに投与した。投与後２分、５分、３０分、６０分に腹部大動脈より脱血した上で脳を採取し、脳の放射能をオートウェル・ガンマシステム（形式：ＡＲＣ−３０１Ｂ、Ａｌｏｋａ社製）を用いて計測し（以下、本実施例にてＡとする）、さらに脳の質量を測定した。また、投与液を１０００倍希釈した溶液０．０５ｍＬについての放射能量を同様に測定した（以下、本実施例にてＢとする）。これらの測定結果を用い、下記式（５）より、各解剖時間点における、脳への単位重量当たりの放射能分布率（％ＩＤ／ｇ）を算出した。なお、各時間点において３匹の動物を用いて実験を行った。【０１６８】
【数５】
0005247442.tif 000014
【０１６９】
結果を表７に示す。表７に示すように、化合物４は、投与後２分点において、１２３Ｉ−ＩＭＰＹと同等以上の集積が認められ、その後６０分にかけて速やかに消失する傾向を示していた。この結果より、化合物４は１２３Ｉ−ＩＭＰＹと同様、高い脳移行性及び速やかな脳からのクリアランスを有することが示唆された。【０１７０】
【表７】
0005247442.tif 000015
【０１７１】
（実施例１１）脳内アミロイドの描出の確認【０１７２】
本発明に係る化合物が脳内アミロイドを描出し得るかを評価するため、下記の実験を行った。【０１７３】
（１）Ａβ１−４２（和光純薬工業）をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で溶解して３７℃で７２時間振盪させ、１ｍｇ／ｍＬの凝集Ａβ懸濁液（以下、本実施例にてアミロイド懸濁液という）を得た。【０１７４】
（２）雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（７週齢）の片側扁桃核へ上記アミロイド懸濁液を２．５μＬ（２５μｇ相当）注入し、対照として、反対側の扁桃核にリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）を２．５μＬ注入した。アミロイド懸濁液及びリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）注入３日後のラットを、検体とした。【０１７５】
（３）化合物４を１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解し、試料溶液とした（放射能濃度８４ＭＢｑ／ｍＬ）。この溶液を、上記ラットに尾静脈より投与した（投与量：０．５ｍＬ、投与した放射能：４２ＭＢｑ相当）。【０１７６】
（４）投与３０分後に脳を摘出して、ミクロトーム（形式：ＣＭ３０５０Ｓ、ＬＥＩＣＡ社製）を用いて厚さ１０μｍの脳切片を作製した。当該脳切片をイメージングプレート上で１．５時間露光させた後、バイオイメージングアナライザー（形式：ＢＡＳ−２５００、富士写真フィルム株式会社製）を用いて画像解析を行った。【０１７７】
（５）バイオイメージングアナライザーを用いた上記画像解析の終了後、チオフラビンＴによる病理染色を行って蛍光顕微鏡（株式会社ニコン製、形式：ＴＥ２０００−Ｕ型、励起波長：４００〜４４０ｎｍ、検出波長：４７０ｎｍ）を用いたイメージングを行い、当該切片上にアミロイドが沈着していることを確認した（図９ｂ）。【０１７８】
アミロイド脳内注入ラットの脳切片におけるオートラジオグラム及びチオフラビンＴ染色のイメージを図９に示す。この図に示すように、アミロイド懸濁液を注入した側の扁桃核において、明らかな放射能集積性を有すると共に、その他の部位における非特異的な集積が少ない良好な画像が得られていた。また、放射能集積部位におけるチオフラビンＴ染色の結果より、集積の認められた部位においてアミロイドが存在していることが確認された。一方、リン酸緩衝生理食塩液を注入した側の扁桃核においては、他の部位と比較した有意な放射能集積は確認されなかった。
この結果より、化合物４は、脳内アミロイドに集積する性能を有し、脳内アミロイドの描出能を有することが示唆された。【０１７９】
（実施例１２〜１４）復帰突然変異試験【０１８０】
化合物１、化合物２及び化合物３の遺伝子突然変異誘発性を調べるため、ネズミチフス菌（Salmonella typhimurium）のＴＡ９８及びＴＡ１００を用いる復帰突然変異試験（以下、Ａｍｅｓ試験という）を行った。【０１８１】
試験はＳ９ｍｉｘ無添加とＳ９ｍｉｘ添加の場合について実施した。陰性対象はジメチルスルホキシドを用い、陽性対象はＳ９ｍｉｘ無添加の場合は２−（２−フリル）−３−（５−ニトロ−２−フリル）アクリルアミドを用い、Ｓ９ｍｉｘ添加の場合は２−アミノアントラセンを用いた。【０１８２】
試験用プレートへの各試料の添加量は、化合物１については１２５０μg／プレートを最高用量として、７用量（公比４）で実施とし，化合物２及び化合物３については５０００μg／プレートを最高用量として、７用量（公比３）で実施とした。被験物質と試験菌株（ＴＡ９８又はＴＡ１００）、あるいは被験物質とＳ９ｍｉｘと試験菌株とを混合後，軟寒天を用いて試験用プレート上の培地へ重層し、３７℃で４８時間培養した。判定は、培養後のプレートにおける復帰突然変異コロニー数をカウントすることにより行い、復帰突然変異コロニー数が陰性対照の２倍以上の値を示し、更に濃度に依存して増加した場合を陽性とした。【０１８３】
結果を表８に示す。化合物１、化合物２及び化合物３の処理群における復帰変異コロニー数は、いずれの菌株ともＳ９ｍｉｘ添加の有無にかかわらず、陰性対照の２倍未満であった。一方、陽性対照物質処理群は、明らかな復帰変異コロニー数の増加を示していた。以上の結果より、化合物１、化合物２及び化合物３はＡｍｅｓ陰性と判定され、遺伝子突然変異誘発性は無いものと判断された。【０１８４】
【表８】
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【産業上の利用可能性】
【０１８５】
本発明に係る化合物は、診断薬分野において利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１８６】
【図１】６−メトキシ−２−［４’−（３”−パラトルエンスルホニルオキシプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図２】２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性フッ素化体）の合成スキーム。
【図３】２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］−６−ヒドロキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性フッ素化体）の合成スキーム。
【図４】２−［４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性フッ素化体）の合成スキーム。
【図５】２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図６】２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図７】［１２５Ｉ］−２−（４’−（３”−フルオロプロポキシ）フェニル−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図８】［１２５Ｉ］−２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図９】（ａ）化合物４投与３０分後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示。）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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