(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（３）〜（５）で表されるフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体を１種または２種以上含有することを特徴とする抗癌剤。
【化１】
0005161434.tif 000027
（一般式（３）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4は直鎖状又は分岐状のアルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アリール基又はアラルキル基を示す。Ａは直鎖状又は分岐状のアルキル基、フェニル基、水素原子を示す。Ｍ1は金原子を示す。Ｘ1はアニオンを示す。）
【化２】
0005161434.tif 000028
（一般式（４）中のＲ5、Ｒ6は直鎖状又は分岐状のアルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アリール基又はアラルキル基を示す。Ｒ7は、置換基を有する又は無置換のオキサゾリン基、直鎖状又は分岐状の炭素数１〜５のアルキル基、カルボキシル基及びカルボキシエステル基から選ばれる一価の有機基を示す。また、前記オキサゾリン基の置換基は、フェニル基、炭素数１〜６の直鎖状又は分岐状のアルキル基、炭素数１〜６のアルコキシ基及びハロゲン原子から選ばれる基を示す。Ｍ２は金原子を示す。Ｘ２はアニオンを示す。）
【化３】
0005161434.tif 000029
（一般式（５）中のＲ5、Ｒ6及びＲ7は前記と同義。Ｍ3は金原子を示す。Ｘ3はアニオンを示す。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体を含有する抗癌剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
シスプラチンは癌細胞に対して優れた抗癌活性を有することはよく知られ、また、現在、主要な抗癌剤となっている。１，２−ビス（ジフェニルホスフィノ）エタン）を初めとするある種のホスフィン遷移金属錯体はシスプラチンに匹敵するような抗癌作用を有する化合物であることが知られている（例えば、特許文献１〜２参照。）。
【０００３】
例えば、特許文献１及び特許文献２には、下記一般式（６）で表わされるホスフィン遷移金属錯体が提案されている。特許文献１では、Ｒ1〜Ｒ8が同一又は異なる基のフェニル、置換フェニル、４−ピリジル、３−ピリジル、２−ピリジルから選択される基、Ａ1は−（ＣＨ2）n−又はｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、Ｍ1は金、銀、銅、Ｂ1は塩素等のハロゲン原子のホスフィン遷移金属錯体、また、特許文献２では、Ｒ1〜Ｒ8が同一な基のフェニル基、エチル基或いはモノ置換フェニル基、Ａ1は−（ＣＨ2）n−又はｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、Ｍ1は金、銀、銅、Ｂ1は塩素等のハロゲン原子のホスフィン遷移金属錯体、Ｂ1はハロゲン、ＰＦ6、ＮＯ3であるホスフィン遷移金属錯体が提案されている。
【０００４】
【化１】
0005161434.tif 000002
【０００５】
一般に化合物の抗癌活性と抗癌スペクトルは、化学構造に依存し、また、個人によっても、その効果に差があることが知られている。例えば、最高の抗癌剤とされるタキソールに至っても、有効率は３０％程度であり、化学構造が異なる種々の新規な抗癌剤の開発が望まれている。
【特許文献１】特表平１０−５０９９５７号公報
【特許文献２】特開昭６１−１０５９４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明者らは、かかる実情において抗癌作用を有する新規なホスフィン遷移金属錯体について鋭意研究を重ねた結果、特定の構造を有するホスフィン誘導体と金の遷移金属塩とを反応させて得られるホスフィン遷移金属錯体が優れた抗癌性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
即ち、本発明は、優れた抗癌性を有するホスフィン遷移金属錯体を用いた抗癌剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、下記一般式（３）〜（５）で表されるフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体を１種または２種以上含有することを特徴とする抗癌剤である。
【化２１】
0005161434.tif 000003
（一般式（３）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4は直鎖状又は分岐状のアルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アリール基又はアラルキル基を示す。Ａは直鎖状又は分岐状のアルキル基、フェニル基、水素原子を示す。Ｍ1は金原子を示す。Ｘ1はアニオンを示す。）
【化２２】
0005161434.tif 000004
（一般式（４）中のＲ5、Ｒ6は直鎖状又は分岐状のアルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アリール基又はアラルキル基を示す。Ｒ7は、置換基を有する又は無置換のオキサゾリン基、直鎖状又は分岐状の炭素数１〜５のアルキル基、カルボキシル基及びカルボキシエステル基から選ばれる一価の有機基を示す。また、前記オキサゾリン基の置換基は、フェニル基、炭素数１〜６の直鎖状又は分岐状のアルキル基、炭素数１〜６のアルコキシ基及びハロゲン原子から選ばれる基を示す。Ｍ２は金原子を示す。Ｘ２はアニオンを示す。）
【化２３】
0005161434.tif 000005
（一般式（５）中のＲ5、Ｒ6及びＲ7は前記と同義。Ｍ3は金原子を示す。Ｘ3はアニオンを示す。）
【発明の効果】
【００１４】
本発明は、優れた抗癌性を有するホスフィン遷移金属錯体を用いた抗癌剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
以下、本発明をその好ましい実施形態に基づき詳細に説明する。
本発明に係るフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体は、下記一般式（１）又は一般式（２）で表されるホスフィン誘導体と、金の遷移金属塩とを反応させて得られるものである。得られたホスフィン遷移金属錯体は、下記一般式（１）又は下記一般式（２）で表されるホスフィン誘導体を配位子として少なくとも２個以上含有し、金原子を有する。
【００１６】
【化４】
0005161434.tif 000006
【００１７】
【化５】
0005161434.tif 000007
【００１８】
前記一般式（１）の式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4は直鎖状又は分岐状のアルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アリール基又はアラルキル基を示す。前記アルキル基としては、具体的には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉｓｏ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ヘキシル基、ｉｓｏ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基、ｉｓｏ−オクチル基、ｎ−ドデシル基、ｉｓｏ−ドデシル基、ｎ−オクタデシル基、ｉｓｏ−オクタデシル基等の炭素数１〜１８の直鎖状又は分岐状のアルキル基が挙げられ、この中、炭素数１〜５のアルキル基が特に好ましい。前記シクロアルキル基としては、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等が挙げられる。前記アリール基としては、フェニル基、トリル基、キシリル基、ナフチル基等が挙げられる。前記アラルキル基としては、ベンジル基、フェネチル基等が挙げられる。これらの中、式中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4はシクロヘキシル基、フェニル基から選ばれる基が特に好ましい。また、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4はそれぞれが同一の基でも異なる基であってもよいが、Ｒ1とＲ2が同一の基で、Ｒ3とＲ4が同一の基であることが特に好ましい。
【００１９】
前記一般式（１）の式中のＡは直鎖状又は分岐状のアルキル基、フェニル基、水素原子を示す。前記アルキル基としては、具体的には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉｓｏ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ヘキシル基、ｉｓｏ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基、ｉｓｏ−オクチル基、ｎ−ドデシル基、ｉｓｏ−ドデシル基、ｎ−オクタデシル基、ｉｓｏ−オクタデシル基等の炭素数１〜１８の直鎖状又は分岐状のアルキル基が挙げられ、該アルキル基は炭素数１〜５の直鎖状又は分岐状のアルキル基が好ましい。式中のＡはこれらの基の中、メチル基が特に好ましい。
【００２０】
前記一般式（２）の式中のＲ5、Ｒ6は、直鎖状又は分岐状のアルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アリール基又はアラルキル基を示し、前記アルキル基としては、具体的には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉｓｏ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ヘキシル基、ｉｓｏ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基、ｉｓｏ−オクチル基、ｎ−ドデシル基、ｉｓｏ−ドデシル基、ｎ−オクタデシル基、ｉｓｏ−オクタデシル基等の炭素数１〜１８の直鎖状又は分岐状のアルキル基が挙げられ、該アルキル基は炭素数１〜５のアルキル基が特に好ましい。前記アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、イソプロポキシ基、フェノキシ基等が挙げられる。前記シクロアルキル基としては、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等が挙げられる。アリール基としては、フェニル基、トリル基、キシリル基、ナフチル基等が挙げられる。アラルキル基としては、ベンジル基、フェネチル基等が挙げられる。これらの基の中、式中のＲ5、Ｒ6はフェニル基が特に好ましい。また、Ｒ5とＲ6は同一の基でも異なる基であってもよい。
【００２１】
前記一般式（２）の式中のＲ7は一価の有機基である。式中のＲ7は、置換基を有する又は無置換のオキサゾリン基、直鎖状又は分岐状の炭素数１〜５のアルキル基、カルボキシル基、カルボキシエステル基が好ましく、該オキサゾリン基の置換基としては、フェニル基、炭素数１〜６の直鎖状又は分岐状のアルキル基、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子が挙げられる。カルボキシエステル基としては、例えば、一般式；―ＣＯＯＢ4で表され、該式中のＢ4は炭素数１〜８の直鎖状又は分岐状のアルキル基又は下記一般式（２−１）
【００２２】
【化６】
0005161434.tif 000008
【００２３】
（式中、Ｂ5は炭素数１〜５の直鎖状又は分岐状のアルキル基又は水素原子を示す。Ｂ6、Ｂ7は炭素数１〜５の直鎖状又は分岐状のアルキル基、アセチル基又は水素原子を示す。）で表される基を示す。
【００２４】
一方の金の遷移金属塩は、例えば金のハロゲン化物や硝酸塩、過塩素酸塩、四フッ化ホウ素酸塩、六フッ化リン酸塩等を使用することができる。好ましい金の遷移金属塩としては、例えば、塩化金（Ｉ）酸、塩化金（Ｉ）、或いはテトラブチルアンモニウムクロリド・塩化金（Ｉ）等（「第５版  実験化学講座２１」、編者  社団法人日本化学会、発行所  丸善、発行日  平成１６年３月３０日、ｐ３６６〜３８０、Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｃｈｅｍｍ．，１９９７，５０，７７５−７７８頁参照）が好ましく用いられる。
【００２５】
本発明において好ましいフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体は、下記一般式（３）〜（５）で表されるホスフィン遷移金属錯体である。
【００２６】
【化７】
0005161434.tif 000009
【００２７】
（一般式（３）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4は直鎖状又は分岐状のアルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アリール基又はアラルキル基を示す。Ａは直鎖状又は分岐状のアルキル基、フェニル基、水素原子を示す。Ｍ1は金原子を示す。Ｘ1はアニオンを示す。）
【００２８】
【化８】
0005161434.tif 000010
【００２９】
（一般式（４）中のＲ5、Ｒ6は直鎖状又は分岐状のアルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アリール基又はアラルキル基を示す。Ｒ7は、置換基を有する又は無置換のオキサゾリン基、直鎖状又は分岐状の炭素数１〜５のアルキル基、カルボキシル基及びカルボキシエステル基から選ばれる一価の有機基を示す。また、前記オキサゾリン基の置換基は、フェニル基、炭素数１〜６の直鎖状又は分岐状のアルキル基、炭素数１〜６のアルコキシ基及びハロゲン原子から選ばれる基を示す。Ｍ２は金原子を示す。Ｘ２はアニオンを示す。）
【００３０】
【化９】
0005161434.tif 000011
【００３１】
（一般式（５）中のＲ5、Ｒ6及びＲ7は前記と同義。Ｍ3は金原子を示す。Ｘ3はアニオンを示す。）
【００３２】
また、前記一般式（３）〜（５）の式中のＸ1、Ｘ2、Ｘ3はアニオン種を示し、具体的には塩素、ヨウ素、臭素、四フッ化ホウ素、六フッ化リン酸、過塩素酸等が挙がられ、この中、塩素、臭素、ヨウ素のハロゲン原子が特に好ましい。
【００３３】
前記一般式（３）〜（５）のホスフィン遷移金属錯体において、特に好ましい化合物は、前記一般式（３）で表されるホスフィン遷移金属錯体の式中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4がフェニル基又はシクロアルキル基から選ばれる基である化合物、前記一般式（４）で表されるホスフィン遷移金属錯体の式中のＲ7が直鎖状又は分岐状の炭素数１〜５のアルキル基、カルボキシル基、カルボキシエステル基から選ばれる基である化合物及び前記一般式（５）で表されるホスフィン遷移金属錯体の式中のＲ7が置換基を有する又は無置換のオキサゾリン基である化合物である。
【００３４】
また、本発明のフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体は光学活性体であってもよい。
本発明のフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体は、前記一般式（１）又は一般式（２）で表されるホスフィン誘導体と、前述した金の遷移金属塩とを反応させて得られるものであるが、例えば、前記一般式（１）で表されるホスフィン誘導体と、金の遷移金属塩とを反応させることにより、前記一般式（３）で表されるフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体を得ることができ、一方、一般式（２）で表されるホスフィン誘導体と、金の遷移金属塩とを反応させることにより、前記一般式（４）又は一般式（５）で表されるフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体を製造することができる。
【００３５】
例えば、前記一般式（３）で表されるホスフィン誘導体を得るには、前記一般式（１）で表されるホスフィン誘導体と、金の遷移金属塩とを下記条件にて反応させればよい。具体的な反応条件は、該遷移金属塩に対するモル比で１〜５倍モル、好ましくは１．８〜２．２倍モル量の前記一般式（１）で表わされるホスフィン誘導体と該遷移金属塩とを、反応温度が−２０〜６０℃、好ましくは０〜２５℃で、反応時間が０．５〜４８時間、好ましくは１〜３時間で、多くの場合、アセトン、アセトニトリル、メタノール、エタノール、クロロホルム、テトラヒドロフラン等の溶媒中で反応させることにより製造することができる。
【００３６】
一方、前記一般式（４）又は一般式（５）で表されるホスフィン遷移金属錯体を得るには、例えば前記一般式（２）で表されるホスフィン誘導体と、金の遷移金属塩との反応において、前記一般式（２）の式中のＲ7の基の種類に応じて選択的に所望のホスフィン遷移金属錯体を製造することができる。例えば、前記一般式（４）で表されるホスフィン遷移金属錯体の好ましい化合物を得るには、一般式（２）の式中のＲ7が前述した直鎖状又は分岐状の炭素数１〜５のアルキル基、カルボキシル基、カルボキシエステル基から選択される基を有するホスフィン誘導体を使用すればよい。具体的な反応条件は、該遷移金属塩に対するモル比で１〜５倍モル、好ましくは１．５〜２．２倍モル量の前記一般式（２）で表わされるホスフィン誘導体と該遷移金属塩とを、反応温度が−２０〜６０℃、好ましくは０〜２５℃で、反応時間が０．５〜４８時間、好ましくは１〜３時間で、多くの場合、アセトン、アセトニトリル、メタノール、エタノール、クロロホルム、テトラヒドロフラン等の溶媒中で反応させることにより製造することができる。
【００３７】
一方、前記一般式（５）で表されるホスフィン遷移金属錯体の好ましい化合物を得るには、一般式（２）の式中のＲ7が前述した置換基を有する又は無置換のオキサゾリン基を有するホスフィン誘導体を使用すればよい。具体的な反応条件は、該遷移金属塩に対するモル比で０．４〜３倍モル、好ましくは０．６〜１．５倍モル量の前記一般式（２）で表わされるホスフィン誘導体と該遷移金属塩とを、反応温度が−２０〜６０℃、好ましくは０〜２５℃で、反応時間が０．５〜４８時間、好ましくは１〜３時間で、多くの場合、アセトン、アセトニトリル、メタノール、エタノール、クロロホルム、テトラヒドロフラン等の溶媒中で反応させることにより製造することができる。
【００３８】
なお、これらの反応終了後、必要により常法の精製を行って製品としてもよい。
また、本発明のフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体は、一般式（３）〜（５）の式中のＸ1、Ｘ2又はＸ3がハロゲン原子のものを合成し、次いで所望の無機酸、有機酸又はそれらのアルカリ金属塩を溶媒中で反応させることにより、式中のＸ1、Ｘ2、Ｘ3を他のアニオンに誘導することができる（特開平１０−１４７５９０号公報、特開平１０−１１４７８２号公報、特開昭６１−１０５９４号公報参照）。
【００３９】
なお、本発明で使用する原料の前記一般式（１）のホスフィン誘導体は、公知の化合物であり、例えば、下記反応スキーム（１）に従って化合物（７）又は化合物（９）と、ホスフィン化合物（８）とを反応させることにより前記一般式（１）に相当するホスフィン誘導体を製造することができる（例えば、特開平７−１７９４８６号公報、特開平６−４１１７１号公報参照。）。また、市販のものを用いてもよい。
【００４０】
【化１０】
0005161434.tif 000012
【００４１】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4及びＡは前記と同義。）。
一方、本発明で使用する原料の前記一般式（２）のホスフィン誘導体も公知の化合物であり、例えば下記反応スキーム（２）又は下記反応スキーム（３）に従って前記一般式（２）に相当するホスフィン誘導体（化合物（２ａ）〜（２ｈ））を製造することができる（例えば、有機合成化学協会誌、Ｖｏｌ．６１，Ｎｏ．３，２００３，ｐ２１１−２２５、特開平２−６２８８６号公報、特開平９−５９２９０号公報、特開平１０−４５７８７号公報等参照。）。また、例えば特開２０００−２５６３８４号公報に記載されているように１，１−ビス（ジアルキルホスフィノ）フェロセン化合物等のボラン錯体を得た後、次に脱ボラン化しても容易に前記一般式（２）に相当するホスフィン誘導体を製造することができる。
【００４２】
【化１１】
0005161434.tif 000013
【００４３】
（式中、Ｒ5、Ｒ6は前記と同義。Ｒ及びＲ’は適宜選択される一価の有機基又は水素原子を示す。）
【００４４】
【化１２】
0005161434.tif 000014
【００４５】
（式中、Ｒ5、Ｒ6は前記と同義。Ｒ、Ｒ’は適宜選択される一価の有機基又は水素原子を示す。アスタリスは不斉炭素中心を示す。）
本発明のホスフィン遷移金属錯体は、後述するように優れた抗癌作用を有し、抗癌剤として利用することができる。
【００４６】
すなわち、本発明の抗癌剤は、前記フェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体を１種または２種以上含有してなるものである。
本発明の抗癌剤が適用される癌の種類は特に限定されるものではなく、例えば、悪性黒色腫、悪性リンパ腫、消化器癌、肺癌、食道癌、胃癌、大腸癌、直腸癌、結腸癌、尿管腫瘍、胆嚢癌、胆管癌、胆道癌、乳癌、肝臓癌、膵臓癌、睾丸腫瘍、上顎癌、舌癌、口唇癌、口腔癌、咽頭癌、喉頭癌、卵巣癌、子宮癌、前立腺癌、甲状腺癌、脳腫瘍、カポジ肉腫、血管腫、白血病、真性多血症、神経芽腫、網膜芽腫、骨髄腫、膀胱腫、肉腫、骨肉腫、筋肉腫、皮膚癌、基底細胞癌、皮膚付属器癌、皮膚転移癌、皮膚黒色腫などが挙げられ、さらに悪性腫瘍ばかりでなく良性腫瘍にも適用することができる。また、本発明の抗癌剤は、癌転移を抑制するために使用することもでき、特に、術後の癌転移抑制剤としても有用である。
【００４７】
本発明の抗癌剤は、種々の形態でヒトまたは動物に投与することができ、経口投与でもよいし、静脈内、筋肉内、皮下または皮内等への注射、直腸内投与、経粘膜投与等の非経口投与でもよい。経口投与に適する製剤形態としては、例えば、錠剤、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤などを挙げることができ、非経口投与に適する医薬組成物としては、例えば、注射剤、点滴剤、点鼻剤、噴霧剤、吸入剤、坐剤、または軟膏、クリーム、粉状塗布剤、液状塗布剤、貼付剤等の経皮吸収剤等を挙げることができる。さらに、埋め込み用ペレットや公知の技術により持続性製剤としてもよい。
【００４８】
上述したうち、好ましい投与形態や製剤形態等は、患者の年齢、性別、体質、症状、処置時期等に応じて、医師によって適宜選択される。
本剤を錠剤、丸剤、散剤、粉剤、顆粒剤等の固形製剤とする場合には、前記ホスフィン遷移金属錯体を、常法に従って適当な添加剤、例えば、乳糖、ショ糖、Ｄ−マンニトール、トウモロコシデンプン、合成もしくは天然ガム、結晶セルロース等の賦形剤、デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アラビアゴム、ゼラチン、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボシキメチルセルーロースカルシウム、カルボシキメチルセルーロースナトリウム、デンプン、コーンスターチ、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム等の滑沢剤、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム等の充填剤または希釈剤等と適宜混合して製造することができる。錠剤等は、必要に応じて、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、白糖、ポリエチレングリコール、酸化チタン等のコーティング剤を用いて、糖衣、ゼラチン、腸溶被覆、フイルムコーティング等を施しても良い。
【００４９】
本剤を注射剤、点眼剤、点鼻剤、吸入剤、噴霧剤、ローション剤、シロップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の液状製剤とする場合には、前記ホスフィン遷移金属錯体を、精製水、リン酸緩衝液等の適当な緩衝液、生理的食塩水、リンゲル溶液、ロック溶液等の生理的塩類溶液、カカオバター、ゴマ油、オリーブ油等の植物油、鉱油、高級アルコール、高級脂肪酸、エタノール等の有機溶媒等に溶解して、必要に応じてコレステロール等の乳化剤、アラビアゴム等の懸濁剤、分散助剤、浸潤剤、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油系、ポリエチレングリコール系等の界面活性剤、リン酸ナトリウム等の溶解補助剤、糖、糖アルコール、アルブミン等の安定化剤、パラベン等の保存剤、塩化ナトリウム、ブドウ糖、グリセリン等の等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、吸着防止剤、保湿剤、酸化防止剤、着色剤、甘味料、フレーバー、芳香物質等を適宜添加することにより、滅菌された水溶液、非水溶液、懸濁液、リポソームまたはエマルジョン等として調整できる。この際、注射剤は、生理学的なｐＨ、好ましくは６〜８の範囲内のｐＨを有することが好ましい。
【００５０】
本剤を、ローション剤、クリーム剤、軟膏等の半固形製剤とするには、前記ホスフィン遷移金属錯体を脂肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン、パラフィン、蝋、硬膏剤、樹脂、プラスチック、グリコール類、高級アルコール、グリセリン、水、乳化剤、懸濁化剤等と適宜混和することにより製造することができる。
【００５１】
本発明の抗癌剤に含まれる前記ホスフィン遷移金属錯体の含有量は、投与形態、重篤度や目的とする投与量などによって様々であるが、一般的には、製剤の全重量に対して０．００１〜８０重量％、好ましくは０．１〜５０重量％である。
【００５２】
本発明の抗癌剤の投与量は、例えば患者の年齢、性別、体重、症状、および投与経路などの条件に応じて適宜医者が決定するものであるが、一般的には、成人一日あたりの有効成分の量として１μｇ／ｋｇから１，０００ｍｇ／ｋｇ程度の範囲であり、好ましくは１０μｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇ程度の範囲である。上記投与量の薬剤は一日一回に投与してもよいし、数回（例えば、２〜４回程度）に分けて投与してもよい。なお、前記有効成分の量とは、抗癌剤中の本発明のホスフィン遷移金属錯体の含有量を基準にした量を示す。
【００５３】
本発明の抗癌剤は、既知の化学療法、外科的治療法、放射線療法、温熱療法や免疫療法などと組み合わせて用いてもよい。
【実施例】
【００５４】
以下、本発明を実施例により詳細の説明するが本発明はこれらに限定されるものではない。
［実施例１］
＜ビス（（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）フェロセニル）エチルジシクロヘキシルホスフィン）金（Ｉ）クロリド＞
窒素ガスで置換した２５ｍｌ二口フラスコに、（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）フェロセニル）エチルジシクロヘキシルホスフィン［ストレムケミカル社（Ｓｔｒｅｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．）製］０．１０ｇ（０．１７ｍｍｏｌ）と、脱気したクロロホルム溶液３ｍｌを入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．０４ｇ（０．０９ｍｍｏｌ）を加え室温で６時間撹拌した。得られた溶液を水で洗浄し有機層を乾固した。得られた褐色固体を減圧下乾燥後ビス（（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）フェロセニル）エチルジシクロヘキシルホスフィン）金（Ｉ）クロリド０．１１ｇを得た（収率８９％）。
【００５５】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＦＡＢ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ１４０９．（Ｍ+−Ｃｌ-）
【００５６】
［実施例２］
＜ビス（（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（ジフェニルホスフィノ）フェロセニル）エチルジシクロヘキシルホスフィン）金（Ｉ）クロリド＞
窒素ガスで置換した２５ｍｌ二口フラスコに、（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（ジフェニルホスフィノ）フェロセニル）エチルジシクロヘキシルホスフィン（ストレムケミカル社製）０．１３ｇ（０．２２ｍｍｏｌ）と、脱気したクロロホルム溶液３ｍｌを入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．０７ｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を加え室温で４時間撹拌した。得られた溶液を水で洗浄し有機層を乾固した。得られた褐色固体を減圧下乾燥後ビス（（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（ジフェニルホスフィノ）フェロセニル）エチルジシクロヘキシルホスフィン）金（Ｉ）クロリド０．１５ｇを得た（収率９８％）。
【００５７】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＦＡＢ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ１３８５．（Ｍ+−Ｃｌ-）
【００５８】
［実施例３］
＜ビス（（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）フェロセニル）エチルジフェニルホスフィン）金（Ｉ）クロリド＞
窒素ガスで置換した２５ｍｌ二口フラスコに、（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）フェロセニル）エチルジフェニルホスフィン（ストレムケミカル社製）０．１０ｇ（０．１７ｍｍｏｌ）と、脱気したクロロホルム溶液３ｍｌを入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．０６ｇ（０．１２ｍｍｏｌ）を加え室温で２４時間撹拌した。得られた溶液を水で洗浄し有機層を乾固した。得られた褐色固体を減圧下乾燥後ビス（（Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）フェロセニル）エチルジフェニルホスフィン）金（Ｉ）クロリド０．１０ｇを得た（収率８３％）。
【００５９】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＦＡＢ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ１３８５．（Ｍ+−Ｃｌ-）
【００６０】
［実施例４］
＜ビス（（Ｓ）−１−（（Ｒ）−２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）フェロセニル）エチルジフェニルホスフィン）金（Ｉ）クロリド＞
窒素ガスで置換した２５ｍｌ二口フラスコに、（Ｓ）−１−（（Ｒ）−２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）フェロセニル）エチルジフェニルホスフィン（ストレムケミカル社）０．０９ｇ（０．１５ｍｍｏｌ）と、脱気したクロロホルム溶液２ｍｌを入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．０５ｇ（０．０８ｍｍｏｌ）を加え室温で２４時間撹拌した。得られた溶液を水で洗浄し有機層を乾固した。得られた褐色固体を減圧下乾燥後ビス（（Ｓ）−１−（（Ｒ）−２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）フェロセニル）エチルジフェニルホスフィン）金（Ｉ）クロリド０．０９ｇを得た（収率８４％）。
【００６１】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＦＡＢ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ１３８５．（Ｍ+−Ｃｌ-）
また、実施例１〜４で得られた化合物について簡単に表１にまとめた。
【００６２】
【表１】
0005161434.tif 000015
【００６３】
合成例１
＜１，１−フェロセンジカルボン酸（化合物（２３））の調製＞
【００６４】
【化１３】
0005161434.tif 000016
【００６５】
窒素雰囲気下、１０００ｍｌ四つ口フラスコ中で、ＴＭＥＤＡ（テトラメチルエチレンジアミン）５３ｍｌ（３３３．２５ｍｍｏｌ）、ｎ−ＢｕＬｉ−ヘキサン３１０ｍｌ（５３７．７５ｍｍｏｌ）溶液を混合し、乾燥エーテル４００ｍｌに溶かしたフェロセン２０．０１ｇ（１０７．５５ｍｍｏｌ、化合物（２１））をキャヌレーションにより注入し、その後室温で１９時間攪拌した。乾燥エーテルにドライアイスを入れ、−７８℃に保った溶液に前記フェロセンを含む溶液を添加し十分に混合後、３時間放置した。次に反応液に水及び塩酸を加えてｐＨ２に調製した。生じた沈殿を回収後、水、エーテルで洗浄、次にデシケータ中で一晩乾燥して赤褐色の固体として１，１’−フェロセンジカルボン酸（化合物（２３））２７．３０ｇ（収率９３％）を得た。
【００６６】
＜１，１’−フェロセンジカルボン酸クロライド（化合物（１７））の調製＞
【００６７】
【化１４】
0005161434.tif 000017
【００６８】
窒素雰囲気下、５００ｍｌ四つ口フラスコ中で前記で調製した１，１’−フェロセンジカルボン酸（化合物（２３））２７．９２ｇ（２８．０９ｍｍｏｌ）を入れ、塩化メチレン１１５ｍｌとピリジン０．１２ｍｌを入れ、次にオキサリルクロリド１６．８３ｍｌ（１７５．８６ｍｍｏｌ）を１時間かけて滴下し、１６時間還流させた。溶媒を留去し、窒素雰囲気下、ヘキサンと塩化エチレン（１：１）の混合溶媒を用いて、赤色の固体の１，１’−フェロセンジカルボン酸クロライド（化合物（１７））６．２９ｇ（収率７０％）を抽出した。
【００６９】
［実施例５］
＜１，１−ビス［（Ｓ）−Ｎ−（１−置換―２−ヒドロキシエチル）アミド］フェロセン（化合物（１９））の調製＞
【００７０】
【化１５】
0005161434.tif 000018
【００７１】
窒素雰囲気下、１００ｍｌ二口フラスコ中で、前記一般式（１８）の式中のＲがイソプロピル基のアミノアルコール化合物２．０９ｇ（２０．２８ｍｍｏｌ）をトリエチルアミン５．２ｍｌ（３６．８７ｍｍｏｌ）、塩化メチレン６５ｍｌで溶かした溶液をＡ液とした。合成例１で調製した１，１’−フェロセンジカルボン酸クロライド２．８７ｇ（９．２２ｍｍｏｌ）を塩化メチレン１１５ｍｌに溶かした溶液をＢ液とした。
【００７２】
前記Ａ液にＢ液をゆつくり２時間かけて滴下し、更に２４時間攪拌下に反応を行った。反応終了後、水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去して褐色の固体として前記一般式（１９）の式中のＲがイソプロピル基である１，１−ビス［（Ｓ）−Ｎ−（１−置換―２−ヒドロキシエチル）アミド］フェロセン３．８０ｇ（収率９３％）を得た。
【００７３】
（同定データ）
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００Ｍ）：６．３４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ，ＮＨ），４．７６（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．５０（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．４７（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．３８（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），３．９３（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ），３．８８（ｄｄ，Ｊ＝３．０，１１．６Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ），３．７５（ｄｄ，Ｊ＝６．０，１１．６Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ），１．９６（ｍ，２Ｈ，Ｍｅ2ＣＨ），１．０２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ3，１．００（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ3）
【００７４】
＜１，１’−ビス［（Ｓ）−４−置換オキサゾリン−２−イル］フェロセン（化合物（２０））の調製＞
【００７５】
【化１６】
0005161434.tif 000019
【００７６】
窒素雰囲気下、５００ｍｌナス型フラスコ中で前記で調製した一般式（１９）の式中のＲがイソプロピル基である１，１−ビス［（Ｓ）−Ｎ−（１−置換―２−ヒドロキシエチル）アミド］フェロセン３．８０ｇ（８．５５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン４３ｍｌとトリエチルアミン８．３４ｍｌ（４４．４６ｍｍｏｌ）で溶かし、メタンスルホニルクロリド１．７８ｍｌ（２２．２３ｍｍｏｌ）と塩化メチレン５．５ｍｌの混合溶媒を冷却しながらゆっくり滴下し１６時間攪拌下に反応を行った。次いで水、氷水、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去し、次にシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し、褐色固体として一般式（２０）の式中のＲがイソプロピル基である１，１’−ビス［（Ｓ）−４−置換オキサゾリン−２−イル］フェロセン２．９６ｇ（収率８５％）を得た。
【００７７】
（同定データ）
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００Ｍ）：４．７７（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．７４（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．３５（ｂｒｓ，４Ｈ，ＦｃＨ），４．３１（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１０．１Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ），４．０６（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ），３．９８（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ），１．８６（ｍ，２Ｈ，Ｍｅ2ＣＨ），１．０２（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ3），０．９４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ3）
【００７８】
＜１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−置換オキサゾリン−２−イル］フェロセン（化合物（２ｄ）の調製＞
【００７９】
【化１７】
0005161434.tif 000020
【００８０】
アルゴン雰囲気下、１００ｍｌナス型フラスコ中に前記で調製した一般式（２０）の式中のＲがイソプロピル基である１，１’−ビス［（Ｓ）−４−置換オキサゾリン−２−イル］フェロセン２．８１ｇ（６．８７ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ４５ｍｌに完全に溶解した。さらにＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（ＴＭＥＤＡ）３．０２ｍｌ（１９．２８ｍｍｏｌ）を加えた。アセトン−ドライアイス浴につけて−７８℃に保った状態でｓｅｃ−ＢｕＬｉ−ヘキサン溶液１５．５１ｍｌ（１９．２８ｍｍｏｌ）をゆっくり注入し、４時間攪拌を行った。続いて、アセトン−ドライアイス浴を氷浴に取り換え、１５分放置した後、ジフェニルホスフィンクロライド３．０２ｍｌ（１９．２８ｍｍｏｌ）を入れ、一晩攪拌した後、溶液を留去した。次にアルゴン雰囲気下でシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し、褐色の固体として前記一般式（２ｄ）の式中のＲがイソプロピル基である１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−置換オキサゾリン−２−イル］フェロセン１．５０ｇ（収率２７％）を得た。
【００８１】
（同定データ）
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００Ｍ）：
７．３０（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１６．２Ｈｚ，８Ｈ，ＡｒＨ），７．２２（ｍ，８Ｈ，ＰｈＨ），７．１６（ｍ，４Ｈ，ＰｈＨ），５．０５（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．５５（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．２８（ｄｄ，Ｊ＝８．２，９．７Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ），３．８７（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ），３．６５（ｔ，ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ），３．４８（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），１．６７（ｍ，２Ｈ，Ｍｅ2ＣＨ），０．８２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ3），０．６２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ3）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，８０％Ｈ3ＰＯ4，４００Ｍ）；
１６３．９４，１６３．９，１３８．９，１３８．８，１３７．５，１３７．３，１３４．６（２Ｃ），１３４．２（２Ｃ），１３２．５（２Ｃ），１３２．３（２Ｃ），１２８．９（２Ｃ），１２８．２（２Ｃ），１２８．１（２Ｃ），１２８．０５（２Ｃ），１２８．０（２Ｃ），１２７．９（２Ｃ），８０．３，８０．０，７７．５，７７．３，７５．９，７５．１，７５．０１，７４．９８，７２．０（２Ｃ），６９．５，３１．８，１８．７，１７．３（２Ｃ）
31ＰＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，８５％Ｈ3ＰＯ4，４００Ｍ）；−１６．８１
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ-1）；
３０５１．３，１９５６．４，１５８５．８，１４７４．０，１４３４．９，１３５４．３，１２６９．２，１０６１．９，１０３０．７，８７６．７，８２９．７，６３５．７
ＨＲＭＳ；
ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ46Ｈ46ＦｅＮ2Ｏ2Ｐ2  ７７７．２３８４，ｆｏｕｎｄ：７７７．２４１０
ｍ．ｐ．：７５−７５℃
［α］ 20D＝−１３６．６（ｃ＝０．８０，ＣＨＣｌ3）
【００８２】
＜ビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−イソプロピル−２−イル］フェロセン）二金（Ｉ）ジクロリドの合成＞
窒素ガスで置換した１００ｍｌ二口フラスコに前記で調製した前記一般式（２ｄ）の式中のＲがイソプロピル基である１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−イソプロピル−２−イル］フェロセン０．７８（１．０ｍｍｏｌ）の脱気したＴＨＦ溶液を入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．５１ｇ（１．０ｍｍｏｌ）を加え室温で２４時間撹拌した。得られた溶液を乾固し酢酸エチルに溶解した。この溶液を水で洗浄し有機層を乾固した。得られた褐色固体を減圧下乾燥後ビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−イソプロピル−２−イル］フェロセン）二金（Ｉ）ジクロリド０．８９ｇを得た（収率８８％）。
【００８３】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ１９８２．（Ｍ+−Ｃｌ-）
【００８４】
［実施例６］
＜ビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブチル−２−イル］フェロセン）二金（Ｉ）ジクロリドの合成＞
実施例５において一般式（１８）の式中のＲがｔｅｒｔ−ブチル基のアミノアルコール化合物を用いた以外は実施例５と同様な条件下で反応を行ってビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−ｔｅｒｔ−ブチル−２−イル］フェロセン）二金（Ｉ）ジクロリド１．０４ｇを得た（収率９９％）。
【００８５】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ２０３８．（Ｍ+−Ｃｌ-）
【００８６】
［実施例７］
＜ビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−イソブチル−２−イル］フェロセン）二金（Ｉ）ジクロリドの合成＞
実施例５において一般式（１８）の式中のＲがイソブチル基のアミノアルコール化合物を用いた以外は実施例５と同様な条件下で反応を行ってビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−イソブチル−２−イル］フェロセン）二金（Ｉ）ジクロリド０．９２ｇを得た（収率８９％）。
【００８７】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ２０３８．（Ｍ+−Ｃｌ-）
【００８８】
［実施例８］
＜ビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−ｓｅｃ−ブチル−２−イル］フェロセン）二金（Ｉ）ジクロリドの合成＞
実施例５において一般式（１８）の式中のＲがｓｅｃ−ブチル基のアミノアルコール化合物を用いた以外は実施例５と同様な条件下で反応を行ってビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−ｓｅｃ−ブチル−２−イル］フェロセン）二金（Ｉ）ジクロリド０．８１ｇを得た（収率８９％）。
【００８９】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ２０３８．（Ｍ+−Ｃｌ-）
【００９０】
［実施例９］
＜１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−２−イソプロピル−２−アセチルアミノエチルエステル］フェロセン（化合物（２ｆ−１））の合成＞
【００９１】
【化１８】
0005161434.tif 000021
【００９２】
窒素雰囲気下、１００ｍｌナス型フラスコ中で実施例５と同様にして調製した一般式（２ｄ−１）の１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−４−置換オキサゾリン−２−イル］フェロセン１．５５ｇ（２．０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ４０ｍｌに完全に溶解し、無水硫酸ナトリウム１８．８０ｇ（１３２．３８ｍｍｏｌ）を入れ、攪拌しながら水２．０ｍｌ（１１１．１１ｍｍｏｌ）を入れた。次に氷浴で冷却し、トリフルオロ酢酸３．８ｍｌ（５０．０ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下し、窒素雰囲気下に一晩攪拌した。次に濾過して無水硫酸ナトリウムを除去した後。溶媒を留去し、塩化メチレン３０ｍｌに溶解し、ピリジン７．２ｍｌを加えた。更に氷冷しながら無水酢酸１２ｍｌ（７６．０ｍｍｏｌ）を加え、窒素雰囲気下で一晩攪拌した。次にＨＣｌ、水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し、赤褐色の固体として１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−２−イソプロピル−２−アセチルアミノエチルエステル］フェロセン（化合物（２ｆ−１））１．３２ｇを得た（収率７３．７％）
【００９３】
（同定データ）
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００Ｍ）：
７．２９（ｍ，８Ｈ，ＰｈＨ），７．２２（ｍ，８Ｈ，ＰｈＨ），７．１２（ｍ，４Ｈ，ＰｈＨ），６．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ，ＮＨ），５．０６（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．６６（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．４１（ｄｄ，Ｊ＝２．６，１１．５Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ），４．１３（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ），３．９５（ｄｄ，Ｊ＝７．２，１１．５Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ），３．４５（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），２．０８（ｍ，２Ｈ，Ｍｅ2ＣＨ），１．８８（ｓ，６Ｈ，ＣＯＣＨ3），１．０７（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ3），１．０２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ．６Ｈ，ＣＨ3）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１００Ｍ）；
１７０．４，１７０．３，１３８．６，１３８．４，１３６．６，１３６．５，１３５．０，１３４．８，１３２．２，１３２．０，１３０．０，１２８．７，１２８．６，１２８．５，６６．０，５３．４，２９．６，２３．４，２０．０，１９．９
31ＰＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，８５％Ｈ3ＰＯ4，４００Ｍ）：
−１７．３７０
【００９４】
＜ビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−２−イソプロピル−２−アセチルアミノエチルエステル］フェロセン）金（Ｉ）クロリドの合成＞
窒素ガスで置換した２５ｍｌ二口フラスコに前記で調製した１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−２−イソプロピル−２−アセチルアミノエチルエステル］フェロセン（化合物（２ｆ−１））０．９０ｇ（１．０ｍｍｏｌ）を脱気したＴＨＦ溶液を入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．３１ｇ（０．６ｍｍｏｌ）を加え室温で２時間撹拌した。得られた溶液にジエチルエーテルを加え析出した固体をろ過した。得られた褐色固体を減圧下乾燥後ビス（１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−２−イソプロピル−２−アセチルアミノエチルエステル］フェロセン）金（Ｉ）クロリド０．９６ｇを得た（収率９６％）。
【００９５】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ１９９０．（Ｍ+−Ｃｌ-）
【００９６】
［実施例１０］
＜（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（メトキシカルボニル）フェロセン（化合物（２ｈ−２））の調製＞
【００９７】
【化１９】
0005161434.tif 000022
【００９８】
窒素雰囲気下、５００ｍｌナス型フラスコ中で実施例９と同様に調製した１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−２−イソプロピル−２−アセチルアミノエチルエステル］フェロセン（化合物（２ｆ−１））５．０ｇ（５．５８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ５０ｍｌに完全に溶解した。窒素雰囲気中で１７０ｍ１のメタノールに金属ナトリウム５．１０ｇ（２２１．７４ｍｍｏｌ）を加えて調製したナトリウムメトキシドを注入し、２４時間攪拌した。酢酸―メタノール溶液で中和した後、水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し、オレンジ色の固体として（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（メトキシカルボニル）フェロセン（化合物（２ｈ−２））２．６１ｇを得た（収率６９．８％）。
【００９９】
（同定データ）
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００Ｍ）；
７．３１−７．１４（ｍ，２０Ｈ，ＰｈＨ），５．０９（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．６０（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），３．７４（ｓ，６Ｈ，ＣＨ３），３．４９（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１００Ｍ）；
１７０．３，１３９．０，１３８．８，１３７．７，１３７．６，１３５．０，１３４．８，１３２．６，１３２．６，１３２．４，１２９．５，１２８．５，１２８．５，５２．０
【０１００】
＜ビス（（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（メトキシカルボニル）フェロセン）金（Ｉ）クロリドの合成＞
窒素ガスで置換した２５ｍｌ二口フラスコに前記で調製した（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（メトキシカルボニル）フェロセン（化合物（２ｈ−２））０．８０ｇ（１．２ｍｍｏｌ）を脱気したＴＨＦに入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．３７ｇ（０．７ｍｍｏｌ）を加え室温で２時間撹拌した。得られた溶液を乾固し酢酸エチルに溶解した。この溶液を水で洗浄し有機層を乾固した。得られた褐色固体を減圧下乾燥後ビス（（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（メトキシカルボニル）フェロセン）金（Ｉ）クロリド０．７８ｇを得た（収率８３％）。
【０１０１】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ１５３７．（Ｍ+−Ｃｌ-）
【０１０２】
［実施例１１］
＜（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（エトキシカルボニル）フェロセン（化合物（２ｈ−３））の調製＞
【０１０３】
【化２０】
0005161434.tif 000023
【０１０４】
窒素雰囲気下、２００ｍｌナス型フラスコ中で実施例９と同様に調製した１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）−２，２−ビス−［（Ｓ）−２−イソプロピル−２−アセチルアミノエチルエステル］フェロセン（化合物（２ｆ−１））５．５０ｇ（６．１３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ５０ｍｌで完全に溶解した。窒素雰囲気中で１７０ｍ１のエタノールに金属ナトリウム６．０ｇ（２６０．８７ｍｍｏｌ）を加えて調製したナトリウムエトキシドを注入し、４８時間攪拌した。酢酸―メタノール溶液で中和した後、水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し、オレンジ色の固体として（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（エトキシカルボニル）フェロセン（化合物（２ｈ−３））２．６０ｇを得た（収率６０．７％）。
【０１０５】
（同定データ）
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００Ｍ）；
７．３１−７．１２（ｍ，２０Ｈ，ＰｈＨ），５．０８（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．６７（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），４．３３−４．１１（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２），３．４６（ｂｒｓ，２Ｈ，ＦｃＨ），１．２０（ｔ，６Ｈ，ＣＨ3）
13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１００Ｍ）：
１７０．０，１３９．０，１３８．９０，１３７．７，１３７．５，１３５．０，１３４．７，１３２．６，１３２．４，１２９．５，１２８．５，１２８．４，６０．９，１４．５
31ＰＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，８５％Ｈ3ＰＯ4，４００Ｍ）：
−１７．６０７
【０１０６】
＜ビス（（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（エトキシカルボニル）フェロセン）金（Ｉ）クロリドの合成＞
窒素ガスで置換した２５ｍｌ二口フラスコに前記で調製した（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（エトキシカルボニル）フェロセン（化合物（２ｈ−３））０．８４ｇ（１．２ｍｍｏｌ）を脱気したクロロホルム溶液に入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．３７ｇ（０．６ｍｍｏｌ）を加え室温で３時間撹拌した。得られた溶液を乾固し酢酸エチルに溶解した。この溶液を水で洗浄し有機層を乾固した。得られた褐色固体を減圧下乾燥後ビス（（−）−（Ｓ）−（Ｓ）−１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−２，２’−ビス（エトキシカルボニル）フェロセン）金（Ｉ）クロリド０．９６ｇを得た（収率９８％）。
【０１０７】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＥＳＩ，ＰＯＳ）ｍ／ｚ１５９３．（Ｍ+−Ｃｌ-）
実施例５〜１１で得られたホスフィン遷移金属錯体について、その構造式を表２及び表３にまとめた。
【０１０８】
【表２】
0005161434.tif 000024
【０１０９】
【表３】
0005161434.tif 000025
【０１１０】
＜抗癌性の評価＞
実施例１〜８で得られたフェロセン骨格を有するホスフィン金錯体の腫瘍細胞に対する活性評価を下記のように実施した。また、比較対象としてシスプラチン（比較例１）についても同様な試験を実施した。
【０１１１】
癌細胞としてＨＬ−６０（ヒト急性骨髄性白血病細胞）を使用し、１０％ウシ胎児血清および１％抗生物質、抗真菌剤を補足したＲｏｓｅｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ培地（ＲＰＭＩ１６４０）中で、５％二酸化炭素雰囲気下、湿潤インキュベーター中、３７℃で培養した。
【０１１２】
細胞はＰＢＳで洗浄し、細胞数を算定後、同じ培地を用いて１×１０6細胞／ｍｌ懸濁液を調製した。滅菌９６ウエルのマイクロプレートに前記の懸濁液を５００００細胞／ウエルの密度となるように加えた。
【０１１３】
次に水もしくはジメチルスルホキシドに完全に溶解させた実施例１〜８で調製したホスフィン金錯体溶液またはシスプラチン溶液（比較例１）を加え、引き続き２４時間インキュベータ中で培養した。
【０１１４】
その後、生存細胞数をＭｏｓｍａｎｎ（Ｔ．Ｍｏｓｍａｎｎ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄ（１９８３））６５，５５−６３）変法により評価した。即ち、テトラゾリウム塩（３，［４，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌｅ−２−ｙｌ］−２，５−ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ，ＭＴＴ）溶液を加え、さらに３時間、同条件で培養した。細胞内のミトコンドリアの酵素活性により生成したホルマザン結晶を０．０４ｍｏｌ／ＨＣｌ／イオソプロピルアルコールで溶解し、マイクロプレートリーダー（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  ５５０）を用い、５９５ｎｍの吸光度を測定した。バックグランドを排除するために６３０ｎｍの吸光度を測定し、実測値から差し引いた。これを生存細胞数として評価し、５０％細胞発育抑制濃度（ＩＣ50）を算出した。なお、ＩＣ50値の算出に当たっては、同様に実施した少なくとも３回以上の実験値の平均値を採用した。この結果を表４に示す。
【０１１５】
【表４】
0005161434.tif 000026
【０１１６】
表４の結果から明らかなように、本発明のフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体はシスプラチンよりも優れた抗癌作用を有することがわかった。
【０１１７】
［実施例１２］
散剤の製造
実施例１〜１１と同様にして得られたホスフィン金錯体のそれぞれについて、試料５０ｇ、乳糖４００ｇおよびトウモロコシデンプン５０ｇをブレンダーで混合して散剤を得た。
【０１１８】
［実施例１３］
顆粒剤の製造
実施例１〜１１と同様にして得られたホスフィン金錯体のそれぞれについて、試料５０ｇ、乳糖２５０ｇおよび低置換度ヒドロキシプロピルセルロース５０ｇを混合した後、１０％ヒドロキシプロピルセルロース水溶液１５０ｇを加えて混練した。これを押出し造粒機を用いて造粒、乾燥して顆粒剤を得た。
【０１１９】
［実施例１４］
錠剤の製造
実施例１〜１１と同様にして得られたホスフィン金錯体のそれぞれについて、試料５０ｇ、乳糖２５０ｇ、トウモロコシデンプン１２０ｇ、結晶セルロース７５ｇおよびステアリン酸マグネシウム５ｇをブレンダーで混合した後、錠剤機で打錠して錠剤を得た。
【０１２０】
［実施例１５］
カプセル剤の製造
実施例１〜１１と同様にして得られたホスフィン金錯体のそれぞれについて、試料２５ｇ、乳糖３００ｇ、トウモロコシデンプン１７０ｇおよびステアリン酸マグネシウム５ｇをＶ型混合機を用いて混合した後、３号カプセルに１８０ｍｇずつ充填してカプセル剤を得た。
【０１２１】
［実施例１６］
注射剤の製造
実施例１〜１１と同様にして得られたホスフィン金錯体のそれぞれについて、試料１００ｍｇおよびグルコース１００ｍｇを精製水２ｍｌに溶解した後濾過し、濾液を２ｍｌアンプルに分注、封入した後滅菌して注射剤を得た。
【０１２２】
［実施例１７］
ローション剤の製造
実施例１〜１１と同様にして得られたホスフィン金錯体のそれぞれについて、試料１ｇ、エタノール３ｇ、ヒドロキシエチルセルロース０．２ｇおよびパラオキシ安息香酸メチル０．１ｇを精製水１００ｍｌに混合溶解してローション剤を得た。
【０１２３】
［実施例１８］
軟膏剤の製造
実施例１〜１１と同様にして得られたホスフィン金錯体のそれぞれについて、試料２ｇ、流動パラフィン６ｇ、ミツロウ２ｇ、自己乳化型モノステアリン酸グリセリド３ｇおよび白色ワセリン５ｇを加温して溶解、分散させ、軟膏剤を得た。
【０１２４】
［実施例１９］
クリーム剤の製造
実施例１〜１１と同様にして得られたホスフィン金錯体のそれぞれについて、試料２ｇを、モノステアリン酸グリセリド２ｇ、ステアリルアルコール４ｇ、オクチルドデカノール２ｇおよびモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン５ｇに加温しながら分散させ、これにパラオキシ安息香酸メチル０．１ｇ、グリセリン５ｇ及び精製水６０ｇを加温して溶解させたものを加え、高速攪拌により乳化、冷却し、クリーム剤を得た。
【産業上の利用可能性】
【０１２５】
本発明のフェロセン骨格を有するホスフィン遷移金属錯体は抗癌作用を有し、抗癌剤として利用することができる。