(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
カボチャ（Cucurbita  moschata（Cucurbitaceae））の種子の抽出物からなるメイラード反応阻害による黄くすみ抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タンパク質またはアミノ酸と還元糖との縮合反応であるメイラード反応を抑制するメイラード反応阻害剤であり、各種皮膚外用剤又は飲食品へ応用するものである。
【背景技術】
【０００２】
メイラード反応は、アミノ酸、タンパク質等のＮ末端のアミノ基と還元糖が非酵素的に結合し、シッフ塩基を形成し、その後アマドリ転移により安定なアマドリ化合物を形成する。この蛋白質の非酵素的糖化に関する研究は、特に食品科学の分野では古くから行われおり、メイラード反応としてよく知られる現象である。アマドリ化合物は、温度、水分活性、ｐH、保存方法などの環境条件によりさらに化学的に分解を受け、その分解物が重合してAGE（advanced
glycosylation end products）を形成する。AGEは、蛍光を有し、褐色調を呈するため、この反応は褐色反応とよばれる。
【０００３】
生体内の蛋白質においても糖の存在で、生理的にこれらとまったく同様な反応が生じていることが明らかにされるようになった。特に高血糖の持続している糖尿病患者においてはメイラード反応が亢進しており、臨床的にはヘモグロビン糖化度を測定して糖尿病コントロールの指標として広く用いられている。近年では本反応の結果生じる構造や機能の変化が糖尿病のみならず、高血糖を起因とする合併症（糖尿病神経障害、糖尿病網膜症、糖尿病腎症）や種々の病変、老化に深い関わりがあることが判明している。
【０００４】
メイラード反応の機構は、現在次のように理解されている。すなわち、まずタンパク質の遊離アミノ基をグルコース等の還元糖のアルデヒド基が求核反応によって攻撃し、シッフ塩基を形成する。このシッフ塩基は不安定であり、分子内電子転移反応を起こしてアマドリ転移生成物を形成し安定化する。次いで、アマドリ生成物は種々のデオキシオソンを生成し、更にタンパク質のアミノ基と反応を起こして重合体形成をひき起こす。最後に、この重合体形成によりタンパク質の溶解度が低下し、プロテアーゼの作用を受けにくくなり、多くは蛍光を発する褐変物質となるのである。
【０００５】
現在すでに、このメイラード反応を阻害する物質がいくつか知られている。メイラード反応阻害活性を有する成分としては、アミノグアニジン、アミノプロピオニトリル、ペニシラミンなどが良く知られている。その他、尿素やグアニジン（特開昭６２−２４９９０８号）、メチルトリシラノール等のケイ素化合物（特開昭６２−２４９９０９号）、ベンゾフェノン類（特開平４−３６８３２０号）、黄ごんフラボノイド（特開平３−２４０７２５号）について、これらがメイラード反応阻害活性を有することが報告されている。しかし、アミノグアニジンやアミノプロピオニトリルは効果的には強いが、幼年期の動物がアミノプロピオニトリルを含むマメ科植物の花を食することによって、成長時に必要なコラーゲンなどの架橋を抑制し、奇形になる原因と考えられている。また、その他の化合物は、作用が弱く、実用化のために十分満足のゆくものではなかった。
【特許文献１】特開昭６２−２４９９０８号公報
【特許文献２】特開昭６２−２４９９０９号公報
【特許文献３】特開平４−３６８３２０号公報
【特許文献４】特開平３−２４０７２５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
新規で安全性の高いメイラード反応阻害剤、更に皮膚外用剤又は飲食品を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、食用の経験がある植物抽出物の調査を行い、ナツメ（Ziziphus zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））の根、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata (L.) W. Barton（Pyrolaceae））の葉から得られる植物抽出物にペントシジンの生成すなわちメイラード反応を阻害し、肌の硬化、しわ形成、はり・つやの喪失の原因となるコラーゲンの架橋形成や、肌の黄くすみの原因となる着色を抑制し、皮膚老化防止効果や美肌効果において優れた性質を示すことを見い出した。
【０００８】
すなわち、ナツメ（Ziziphus zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））の根、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata (L.) W. Barton（Pyrolaceae））の葉から得られる植物抽出物を利用することにより、皮膚のシワやタルミのような皮膚の形態変化、皮膚のくすみの予防又はその改善が期待できる。つまり、皮膚老化防止作用を持ち、且つ安全な皮膚外用剤又は飲食品を提供することをもって、本発明を完成するに至った。以下に本発明に至る経過を説明する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のナツメ（Ziziphus zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））の根、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata (L.) W. Barton（Pyrolaceae））の葉の抽出物を含有した皮膚外用剤は、安全であり、生体内で生成するメイラード反応を抑えることにより、皮膚に対しては皮膚の硬化、しわ形成、はり喪失や、肌のくすみを抑制して、優れた皮膚老化防止効果、美肌効果を示す。また、ナツメ（Ziziphus zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））を含有した飲食品は、安全であり、生体内で生成するメイラード反応を抑えることにより、高血糖を起因とする合併症（糖尿病神経障害、糖尿病網膜症、糖尿病腎症）や種々の病変や老化を予防することが可能となった。
【発明実施の最良の形態】
【００１０】
本発明で使用する「ナツメの果核（酸棗仁）」は、ナツメ（棗）はクロウメモドキ科ナツメ属の落葉高木で、果実を果物として、乾燥させ（乾しなつめ）、または菓子材料として食用にし、また漢方薬としても用いる。学名はZiziphus zizyphus またはZ. jujuba。英語ではJujubeまたはChinese date（中国のナツメヤシ）という。サネブトナツメまたはその近縁植物の実を乾燥したものは大棗（たいそう）、種子は酸棗仁（さんそうにん）と称する生薬である。（日本薬局方においては、大棗が収録され、ナツメの実とされている。）大棗には強壮作用・鎮静作用が有るとされる。甘味があり、補性作用・降性作用がある。生姜との組み合わせで、副作用の緩和などを目的に多数の漢方方剤に配合されている。酸棗仁には鎮静作用・催眠作用が有るとされる。酸味があり、補性作用・降性作用がある。酸棗仁湯などに配合されている。
【００１１】
本発明に使用する「Ｍａｌｖａ  ｎｕｔｓ」とは、ＭＡＣＪＯＮＧとも呼ばれ、東南アジアで果実は食用とされる。コレステロールを抑え、ダイエットなどの作用があるとされる。
【００１２】
本発明に使用する「カボチャ」とは、ウリ科カボチャ属 Cucurbita に属する植物の総称であり、果実を食用とする。種子（パンプキンシード）も食品として市販されている。また、種子から取った食用油（パンプキンシードオイル）もある。
【００１３】
本発明に使用する「トチュウ」とは、中国原産のトチュウ科の落葉樹である。樹皮は医薬品として扱われる。葉は煎じて健康茶、杜仲茶として飲用される。杜仲茶は、グッタペルカという成分を含み、血圧の降下や肝機能の機能向上に効果があると言われている。また、薬性が穏かで補養強壮薬として用いられていて、応用される領域は広く、内科と産婦人科で見られる心臓、腎臓、生殖機能の衰退の症状には、いずれも良好な治療効果があるといわれる。更に、高血圧、高コレステリン血症、動脈硬化、脳神経衰弱などの心臓と脳中枢神経の疾病に有効であるといわれる。
【００１４】
本発明に使用する「サラシア」とは、インド、スリランカから東南アジアにかけて分布するニシキギ科のつる性植物で、現地では古くから薬用や食べ物として利用されており、インド伝承医学「アーユル・ヴェーダ」では、糖尿病や肥満の予防や治療に使われていた。
【００１５】
本発明に使用する「オオウメガサソウ」とは、北アメリカのケベック州からジョウジア州とヨーロッパ、日本では茨城県以北の太平洋側、北海道に分布し、アメリカインディアンの間に広く愛用され膀胱結石の薬用に供されている。
【００１６】
なお、ナツメ（Ziziphus
zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））の根、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata (L.) W. Barton（Pyrolaceae））の葉から得られる植物抽出物は、抽出溶媒としては、水やエタノールなどの各種極性有機溶媒及びそれらの混液を用いることができる。抽出物の精製は、様々な方法が用いられるが、活性炭、スチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤（ＨＰ−２０：三菱化成社製）やオクタデシルシラン処理シリカ（Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ  ＯＤＳ：富士シリシア化学製）により吸着させ、適当な溶媒で溶出する方法が簡便でかつ実用的である。
【００１７】
本発明のメイラード反応阻害剤は、常法に従い、必須成分であるナツメ（Ziziphus zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））の根、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata (L.) W. Barton（Pyrolaceae））の葉から得られる植物抽出物を通常の製剤用基剤に配合して調製することができる。
【００１８】
本発明のメイラード反応阻害剤及びそれを含有する皮膚外用剤又は飲食品におけるナツメ（Ziziphus zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））の根、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata (L.) W. Barton（Pyrolaceae））の葉から得られる植物抽出物の含有量は、乾燥固形分として好ましくは０．０００１〜１０重量％（以下、特に記載のあるもの以外は重量％を単に％で示す）、より好ましくは０．０１〜５％である。抽出液を使用する場合は、溶質である乾燥固形分の含有量が上記範囲内であれば、その抽出液濃度等は何ら限定されるものではない。
【００１９】
尚、本発明において、前記ナツメ（Ziziphus
zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））の根、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata (L.) W. Barton（Pyrolaceae））の葉から得られる植物抽出物を配合する皮膚外用剤の製剤化に際して、使用の態様に応じて選択することができ、例えば、精製水、低級アルコール、多価アルコール、高級アルコール、油脂、ロウ、シリコン類、粉体、界面活性剤、水溶性高分子、植物エキス、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、防腐剤、香料、酸化防止剤等を用いることができる。同様に、飲食品の製剤化に際して、通常使用される充填剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤などの稀釈剤または賦形剤を用いることができる。このように、本発明の効果を損なわない範囲内で、医薬部外品、化粧品、飲食品などの製剤に使用される成分や添加剤を併用して製造することができ、製剤中への含有量は、特に規定しない。
【００２０】
又、本発明のメイラード反応阻害剤、更に皮膚外用剤又は飲食品の剤型は任意であり、アンプル状、カプセル状、粉末状、顆粒状、丸剤、錠剤状、固形状、液状、ゲル状、気泡状、乳液状、クリーム状、軟膏状、シート状などの医薬部外品、化粧品又は飲食品に配合して用いることができる。
【００２１】
具体的には、例えば、皮膚外用剤として、化粧水、乳液、クリーム、軟膏、ローション、オイル、パックなどの基礎化粧料、洗顔料や皮膚洗浄料、ファンデーション、白粉、おしろい、口紅、頬紅、アイシャドウ、アイライナー、マスカラ、眉墨、まつ毛などのメークアップ化粧料などである。一般的な飲食品としては、サプリメント、ドリンク、シリアル、粉末飲料、ゼリー、ビスケット、飴、ガムなどへの使用も可能である。
【実施例】
【００２２】
以下に参考例、試験例及び実施例を挙げ、本発明について更に説明する。なお、これらは本発明を何ら限定するものではない。
【００２３】
「製造例１」
ナツメの果核（酸棗仁）、MACJONGの果実（Malva nuts）、カボチャの種子、トチュウの葉、サラシアの根、オオウメガサソウの葉を乾燥させる。この乾燥物１０重量部に水または５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液１５０重量部を加え、水の場合は６０℃で３時間、５０％エタノールの場合は室温で時々攪拌しながら３日間抽出し、濾過して、溶媒を留去し、抽出物を得た。これらを試料として試験例１の方法により、メイラード反応阻害能を測定した。水抽出物の結果を表1に５０％エタノール抽出物の結果を表２に示した。
【００２４】
「試験方法及び評価方法」
ａ）試料本発明の製造例１で得られた抽出液を用い、試験に供した。尚、ブランクとして５０％エタノール溶液、陽性対照として２０mMのアミノグアニジンを同様の条件で調製し、試験に用いた。
ｂ）ペントシジン（ｐｅｎｔｏｓｉｄｉｎｅ）の生成抑制作用の測定試料溶液１０μLに５０mM Ｒｉｂｏｓｅ、５０ｍＭ Ｌｙｓｉｎｅ、５０ｍＭ Ａｒｇｉｎｉｎｅ、１００ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4(ｐＨ7.4)、Ｈ2Ｏを各１００μＬ加え、６０℃、24時間ヒートブロック上でインキュベートし、反応終了後、反応溶液１００μＬにＨ２Ｏ ４００μＬを加え、高速液体クロマトグラフィーにてＰｅｎｔｏｓｉｄｉｎｅ生成量を測定した。
＜高速液体クロマトグラフィー測定条件＞
溶媒は、アセトニトリル：ＴＦＡ：Ｈ２Ｏ＝３：０.１：９６.９を使用。流速は１ｍＬ/ｍｉｎ、カラム温度は室温、励起波長を３３５ｎｍとし測定波長を３８０ｎｍとする。インジェクション量は１０μＬで行う。尚、ペントシジン(ｐｅｎｔｏｓｉｄｉｎｅ)標品は、Monnieの方法に基づいて調整し、各種機器スペクトルデータにより確認した。それを用いて高速液体クロマトグラム上のピークがペントシジン（ｐｅｎｔｏｓｉｄｉｎｅ）であることを確認した。
【００２５】
【表１】
0005313436.tif 000002
【００２６】
表１の結果から明らかなように、ナツメ（Ziziphus zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））の根、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata (L.) W. Barton（Pyrolaceae））の葉の抽出物は、メイラード反応の公知の阻害剤であるアミノグアニジンと比較して著しく高いメイラード反応によるペントシジン生成抑制効果が認められた。
【００２７】
以下に本発明の皮膚外用剤または飲食品の処方例を挙げる。
【００２８】
〔化粧水〕
（成分名）                                                （質量％）
ナツメ果核（酸棗仁）水抽出物                                ５．０
グリセリン                                                  ５．０
ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（２０Ｅ．０）    １．５
エタノール                                                  ８．０
クエン酸トリエチル                                          ２．０
防腐剤・酸化防止剤                                          適量 
精製水                                                      残部
【００２９】
〔化粧用クリーム〕
（成分名）                                              （質量％）
トチュウ葉５０％エタノール抽出物                            ０．５
ミツロウ                                                    ２．０
ステアリルアルコール                                        ５．０
ステアリン酸                                                ８．０
スクワラン                                                １０．０
自己乳化型グリセリルモノステアレート                        ３．０
ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．０）              １．０
グリセリン                                                  ５．０
水酸化カリウム                                              ０．３
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００３０】
〔乳液〕
（成分名）                                                （質量％）
カボチャ種子水抽出物                                        ０．０１
スクワラン                                                  ８．０
ワセリン                                                    ２．０
ミツロウ                                                    ０．５
ソルビタンセスキオレエート                                  ０．８
ポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０Ｅ．０）            １．２
カルボキシビニルポリマー                                    ０．２
グリセリン                                                  １．５
水酸化カリウム                                              ０．１
エタノール                                                  ７．０
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００３１】
〔パック剤〕
（成分名）                                                （質量％）
サラシア根水抽出物                                          ０．００１
酢酸ビニル樹脂エマルジョン                                １５．０
ポリビニルアルコール                                      １０．０
ホホバ油                                                    ３．０
グリセリン                                                  ５．０
酸化チタン                                                  ８．０
カオリン                                                    ７．０
エタノール                                                  ５．０
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００３２】
〔軟膏〕
（成分名）                                                （質量％）
オオウメガサソウ葉５０%エタノール抽出物                    ０．０００１
酢酸トコフェロール                                          ０．５
パラジメチルアミノ安息香酸オクチル                          ４．０
ブチルメトキシベンゾイルメタン                              ４．０
ステアリルアルコール                                      １８．０
モクロウ                                                  ２０．０
グリセリンモノステアリン酸エステル                          ０．３
ワセリン                                                  ３３．０
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００３３】
〔錠剤〕
（成分名）                                                （質量％）
ナツメ果核（酸棗仁）５０％エタノール抽出物                  １．０
ショ糖脂肪酸エステル                                        ２．０
デンプン                                                  １５．０
シェラック                                                  １．２
乳糖                                                      １０．０
結晶セルロース                                              残部
【００３４】
〔ドリンク〕
（成分名）                                                （質量％）
MACJONG果実水抽出物    
１０．０
乳酸カルシウム                                              ２．０
塩化マグネシウム                                            ０．１
ビタミンミックス                                            ０．１
酸味料・香料                                                適量
果糖ブドウ糖液糖                                            適量
保存剤                                                      適量
水                                                          残部
【００３５】
〔ゼリー〕
（成分名）                                                （質量％）
トチュウ葉水抽出物                                          ２．０
ゲル化剤                                                    ３．５
砂糖                                                      ５０．０
果汁                                                        ２．０
香料                                                        適量
酸味料・甘味料                                              適量
水                                                          残部
【００３６】
〔キャンディー〕
（成分名）                                                （質量％）
サラシア根水抽出物                                          １．０
砂糖                                                      ３５．０
果汁                                                        ２．０
酸味料                                                      ０．５
香料                                                        ０．５
水飴                                                        残部
【００３７】
〔ガム〕
（成分名）                                                （質量％）
ナツメ果核（酸棗仁）５０％エタノール抽出物                  ３．０
軟化材                                                      ４．０
色素                                                        ３．０
香料                                                        ３．０
ガムベース                                                  残部
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明のナツメ（Ziziphus
zizyphus（Rhamnaceae））の果核（酸棗仁）、MACJONG（Sterculia lychnophora）の果実（Malva nuts）、カボチャ（Cucurbita moschata（Cucurbitaceae））の種子、トチュウ（Eucommia
ulmoildes（Eucommiaceae））の葉、サラシア（Salacia oblonga（Celastraceae））の根、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata (L.) W. Barton（Pyrolaceae））の葉の抽出物は、皮膚に対しては皮膚の硬化、しわ形成、はり喪失や、肌のくすみを抑制して、優れた皮膚老化防止効果、美肌効果を示す。
また、生体内で生成するメイラード反応を抑えることにより、高血糖を起因とする合併症（糖尿病神経障害、糖尿病網膜症、糖尿病腎症）や種々の病変や老化を予防することができるため、老化予防を目的とする皮膚外用剤及び飲食品に広く応用が期待できる。