(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表されるベンゾフロキサン誘導体と、下記一般式（２）で表されるβ−ジケトン誘導体を、固体状の担体に吸着させ、次いで、固相状態においてマイクロ波照射加熱して脱水環化させることを特徴とする、キノキサリン誘導体の合成方法。
【化１】
0005190873.tif 000018
（１）
〔式中、Ｒ1は水素、又はＣ1〜4のアルキル基であり、
Ｒ2及びＲ3はそれぞれハロゲン原子であり、
Ｒ4は水素、又はＣ1〜4のアルキル基である。〕
【化２】
0005190873.tif 000019
（２）
〔式中、Ｒ5はＣ1〜4のアルキル基、メトキシ基、又はアリール基であり、
Ｒ6は
【化３】
0005190873.tif 000020
である。〕
【請求項２】
前記キノキサリン誘導体が下記一般式（３）で表されるキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体である、請求項１記載のキノキサリン誘導体の合成方法。
【化４】
0005190873.tif 000021
（３）
〔式中、Ｒ1は水素、又はＣ1〜4のアルキル基であり、
Ｒ2及びＲ3はそれぞれハロゲン原子であり、
Ｒ4は水素、又はＣ1〜4のアルキル基であり、
Ｒ5はＣ1〜4のアルキル基、メトキシ基、又はアリール基であり、
Ｒ6は
【化５】
0005190873.tif 000022
である。〕
【請求項３】
前記キノキサリン誘導体が下記一般式（４）で表されるキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体である、請求項１記載のキノキサリン誘導体の合成方法。
【化６】
0005190873.tif 000023
（４）
〔式中、Ｒ1は水素であり、
Ｒ2及びＲ3はそれぞれハロゲン原子であり、
Ｒ4は水素であり、
Ｒ5はＣ1〜4のアルキル基、又はアリール基であり、
Ｒ6は
【化７】
0005190873.tif 000024
である。〕
【請求項４】
前記固体状の担体は、シリカゲル、アルミナ、又はモレキュラシーブである、請求項１〜３のいずれかに記載のキノキサリン誘導体の合成方法。
【請求項５】
下記一般式（４）で表される、キノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体。
【化８】
0005190873.tif 000025
（４）
〔式中、Ｒ1は水素であり、
Ｒ2及びＲ3はそれぞれハロゲン原子であり、
Ｒ4は水素であり、
Ｒ5はＣ1〜4のアルキル基、又はアリール基であり、
Ｒ6は
【化９】
0005190873.tif 000026
である。〕
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マイクロ波照射加熱によるキノキサリン誘導体の合成方法、及び新規キノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体に関わり、より詳細には、毒性、腐食性、浸透性が低く安全性に優れ、かつ反応時間が短縮され、収率が大幅に改善され経済性に優れたキノキサリン誘導体の合成方法、及び新規キノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
キノキサリン誘導体は抗菌性（非特許文献１）や低酸素細胞毒性（非特許文献２）を持つことが知られている。
また、キノキサリン1，４−ジオキサイド誘導体が、低酸素状態の細胞に選択的に毒性を発現することが報告されている（非特許文献３）。キノキサリン1，４−ジオキサイド誘導体は、低酸素状態において生体内還元を受けて反応性(細胞に障害性）の高いラジカル性化合物へと変換され、その生じたラジカルが低酸素状態において特に強い細胞毒性を発揮する。多くの癌は固形の癌であり、その固形の癌組織は、異常な細胞増殖により毛細血管が破壊され他の組織から孤立してしまうことや、血管の新生が細胞増殖に追いつかないため、十分に酸素や栄養分が届かず低酸素状態になっている。よって、本キノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体は十分に酸素が供給されている正常組織にはあまり障害を生じずに特異的に病巣のみに障害を与えることが期待できる。
従来、キノキサリン誘導体は、トリエチルアミン等の塩基性触媒存在下でベンゾフロキサンにβ‐ジケトン化合物を付加させた後、脱水環化させるBeirut反応により合成されている。例えば、２−ベンゾイル−６，７−ジクロロ−３−フェニルキノキサリン１，４−ジオキサイドのBeirut反応による合成においては、反応時間が２４時間であり収率が３６％であると報告されている（非特許文献４、５）。
【非特許文献１】薬学雑誌116巻6号491-496
【非特許文献２】Oncology Reports 8, 679-684 (2001)
【非特許文献３】J.Med.Chem. 1995, 38, 1786-1792
【非特許文献４】Heterocycles vol4, No6 1077-1082(1976)
【非特許文献５】Journal of Organic Chemistry vol31, 4067-4068(1966)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかし、Beirut反応は、one pot反応で簡便な合成法であるが、オイルバス等による加熱法による塩基触媒を利用した液相反応であるため、以下のような改善すべき点がある。
まず、加熱時に引火性溶媒を使用するため、安全性が低い。すなわち、使用している塩基性触媒は皮膚に接触すると腐食性を持つものが多く、また、トリエチルアミン等、常温で液体の物資が多く、皮膚に対する浸透性が大きい。固体の塩基触媒使用の場合でも、反応時は系が液相反応であるため、皮膚に付着した場合、浸透性が大きく、安全性が低い。
また、Beirut反応は塩基性条件下で行われるため、塩基不安定な官能基を有する誘導体の合成は困難であり、目的物の収率を十分確保することができない場合が多い。
また、Beirut反応の反応時間は、時間単位又は日単位の比較的長時間を要していた。また、オイルバス等による加熱法は、熱伝導や対流によって反応熱が反応物質に伝わり、反応が進行するものであり、エネルギー消費が多く、経済性の向上が望まれていた。
また、触媒塩基の再生は、蒸留等の操作が煩雑であり、また、廃棄の場合も中和処理等の操作が煩雑である。【０００４】
そこで、本発明は、毒性、腐食性、浸透性が低く安全性に優れ、かつ反応時間が短縮され、収率が大幅に改善され経済性に優れたキノキサリン誘導体の合成方法を提供することを目的とする。【０００５】
また、本発明は、新規のキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、鋭意研究の結果、ベンゾフロキサン誘導体と、β−ジケトン誘導体を、固体状の担体に吸着させ、次いで、固相状態においてマイクロ波照射加熱して脱水環化させることを特徴とする、優れたキノキサリン誘導体の合成方法及び新規キノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体を見出し、本発明を完成するに至った。【０００７】
すなわち、本発明は、〔１〕ベンゾフロキサン誘導体と、β−ジケトン誘導体を、固体状の担体に吸着させ、次いで、固相状態においてマイクロ波照射加熱して脱水環化させることを特徴とする、キノキサリン誘導体の合成方法；〔２〕上記一般式（１）で表されるベンゾフロキサン誘導体と、上記一般式（２）で表されるβ−ジケトン誘導体を、固体状の担体に吸着させ、次いで、固相状態においてマイクロ波照射加熱して脱水環化させることを特徴とする、キノキサリン誘導体の合成方法；〔３〕前記キノキサリン誘導体が上記一般式（３）で表されるキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体である、前記（２）記載のキノキサリン誘導体の合成方法；〔４〕前記キノキサリン誘導体が上記一般式（４）で表されるキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体である、前記（２）記載のキノキサリン誘導体の合成方法；〔５〕前記固体状の担体は、シリカゲル、アルミナ、又はモレキュラシーブである、前記（１）〜（４）のいずれかに記載のキノキサリン誘導体の合成方法；〔６〕上記一般式（４）で表される、キノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体；を提供する。【０００８】
本発明のキノキサリン誘導体の合成方法における反応工程は次のとおりである。【０００９】
【化１０】
0005190873.tif 000002
【発明の効果】
【００１０】
本発明のキノキサリン誘導体の合成方法は、触媒として塩基を使用せず、固体状の担体を用いるため、毒性、腐食性、浸透性が低く安全性に優れ、かつ反応時間が短縮され、収率が大幅に改善され経済性に優れたキノキサリン誘導体の合成方法が提供され、さらには、新規のキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明のキノキサリン誘導体の合成方法は、ベンゾフロキサン誘導体と、β−ジケトン誘導体を、固体状の担体に吸着させ、次いで、固相状態においてマイクロ波照射加熱して脱水環化させることを特徴とする。【００１２】
本発明では、固相状態においてマイクロ波照射加熱により脱水環化させるため、電気双極子を持っている有機化合物が振動するマイクロ波によって作られる強い電界の中で分子振動し、分子間に摩擦熱が発生して熱に変化し、分子レベルの昇温が急速に起こり、反応が進行する。このように、オイルバス等の熱伝導や対流による加熱法に比べ，マイクロ波照射加熱は熱伝導や対流によって反応熱が反応物質に伝わる方法ではなく、マイクロ波照射によって分子を直接加熱する方法であるため、分子レベルの加熱が起こり、従来法に比べ、エネルギーのロスがなく、経済的である。【００１３】
また、塩基触媒を使用したBeirut反応（従来法）では反応時間が２４時間かかるのに対して、本発明では反応時間が数分程度で済み、反応時間が従来法の１/60から1/720であり非常に経済的である。【００１４】
また、従来法の収率が３６％であるのに対して、本発明では新規物質の収率が３６〜９０％であり、既知物質の収率では約２．５倍に著しく向上する。
また、本発明では、加熱反応時が固相であり、引火性溶媒を使用した液相反応と比べ、引火することがなく安全性が高い。【００１５】
本発明のキノキサリン誘導体の合成方法において、好ましくは、下記一般式（１）で表されるベンゾフロキサン誘導体と、下記一般式（２）で表されるβ−ジケトン誘導体を、固体状の担体に吸着させ、次いで、固相状態においてマイクロ波照射加熱して脱水環化させる。【００１６】
【化１１】
0005190873.tif 000003
(1)
〔式中、
Ｒ１は水素、又はＣ1〜4のアルキル基であり、
Ｒ２及びＲ３はそれぞれ水素、Ｃ1〜4のアルキル基、又はハロゲン原子であり、
Ｒ４は水素、又はＣ1〜4のアルキル基である。〕【００１７】
【化１２】
0005190873.tif 000004
(2)
〔式中、
Ｒ５はＣ1〜4のアルキル基、メトキシ基、又はアリール基であり、
Ｒ６はＣ1〜4のアルキル基、メトキシ基、エトキシ基、アリール基、又は下記のいずれか
【化１３】
0005190873.tif 000005
である。〕【００１８】
本発明のキノキサリン誘導体の合成方法においては、前記キノキサリン誘導体が下記一般式（３）で表されるキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体であることが好ましい。【００１９】
【化１４】
0005190873.tif 000006
(3)
〔式中、
Ｒ１は水素、又はＣ1〜4のアルキル基であり、
Ｒ２及びＲ３はそれぞれ水素、Ｃ1〜4のアルキル基、又はハロゲン原子であり、
Ｒ４は水素、又はＣ1〜4のアルキル基であり、
Ｒ５はＣ1〜4のアルキル基、メトキシ基、又はアリール基であり、
Ｒ６はＣ1〜4のアルキル基、メトキシ基、エトキシ基、アリール基、又は下記のいずれか
【化１５】
0005190873.tif 000007
である。〕【００２０】
上記一般式（１）及び（３）において、Ｒ１は好ましくは水素、メチル基、又はエチル基であり、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ好ましくは水素、メチル基、エチル基、又は塩素原子であり、Ｒ４は好ましくは水素、メチル基、又はエチル基である。【００２１】
上記一般式（１）及び（３）において、特に好ましくは、Ｒ１及びＲ４が共に水素であると高収率が得られ、また、Ｒ２及びＲ３同士が同じ基であると、高収率が得られる。Ｒ２及びＲ３のどちらかが水素であると、反応機構から二つのキノキサリン誘導体が得られるが二つを合わせた収率は高い。【００２２】
上記一般式（２）及び（３）において、Ｒ５は好ましくはメチル基、メトキシ基、又はフェニル基であり、Ｒ６は好ましくはメチル基、メトキシ基、エトキシ基、又はフェニル基である。【００２３】
あるいは、本発明のキノキサリン誘導体の合成方法において、前記キノキサリン誘導体は下記一般式（４）で表されるキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体であることが好ましい。【００２４】
【化１６】
0005190873.tif 000008
(4)
〔式中、
Ｒ１は水素であり、
Ｒ２及びＲ３はそれぞれ水素、ハロゲン原子、又はメトキシ基であり、
Ｒ４は水素であり、
Ｒ５はＣ1〜4のアルキル基、又はアリール基であり、
Ｒ６はＣ1〜4のアルキル基、アリール基、又は
【化１７】
0005190873.tif 000009
である。〕【００２５】
本発明のキノキサリン誘導体の合成方法において、前記固体状の担体は、シリカゲル、アルミナ、又はモレキュラシーブであることが好ましい。より好ましくは、シリカゲルが用いられる。シリカゲルは弱い固体酸であり、低毒性であり、皮膚に対する腐食性がなく、浸透性もほとんどない。また、本発明のキノキサリン誘導体の合成方法においては、シリカゲル等の脱水作用を利用するため、反応終了後、シリカゲル等を加熱し、乾燥させれば再生が容易であり経済的である。【００２６】
特に好ましい担体としては、分離精製用に市販されているカラムクロマトグラフィー用シリカゲルが用いられる。分離精製用に市販されているカラムクロマトグラフィー用シリカゲルを用いた場合、反応生成したキノキサリンを吸着しているシリカゲルをカラムクロマトグラフィーにより精製すれば足りるので、反応後の精製操作は容易である。【００２７】
あるいは、本発明は、上記一般式（４）で表されるキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体を提供するものである。【００２８】
上記一般式（４）において、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ好ましくは水素、フルオロ基、クロロ基、又はメトキシ基であり、Ｒ５は好ましくはメチル、又はフェニル基であり、Ｒ６は好ましくはメチル基、フェニル基、又は
【化１８】
0005190873.tif 000010
である。
【実施例】
【００２９】
以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。当業者は、以下に示す実施例のみならず様々な変更を加えて実施することが可能であり、かかる変更も本特許請求の範囲に包含される。【００３０】
（実施例１）
２−ベンゾイル−６，７−ジクロロ−３−フェニルキノキサリン１，４−ジオキサイドの合成
５，６−ジクロロベンゾフロキサン（41mg, 0.2mmol）及びジベンゾイルメタン（47.1mg, 1.05eq）をジクロロメタン8mLに溶かし、シリカゲル（wakogel C-200）を6g加え、エバポレートして溶媒をとばし、シリカゲル上に吸着させた。その後、真空ポンプで完全に溶媒を除き、マイクロ波（７００Ｗ）を２分間照射した。酢酸エチルで反応性生物を抽出し、溶媒を留去後、カラムクロマトグラフィーで分離精製し(CHCl-3 : MeOH = 98:2)、減圧乾燥した。これにより、73.2mgの結晶が得られ、収率は８９％であった。【００３１】
（実施例２）
２−ベンゾイル−６，７−ジフルオロ−３−フェニルキノキサリン１，４−ジオキサイドの合成
５，６−ジフルオロベンゾフロキサン（34.4mg, 0.2mmol）及びジベンゾイルメタン（47.1mg, 1.05eq）をジクロロメタン8mLに溶かし、シリカゲル（wakogel C-200）を6g加え、エバポレートして溶媒をとばし、シリカゲル上に吸着させた。その後、真空ポンプで完全に溶媒を除き、マイクロ波（７００Ｗ）を２分間照射した。酢酸エチルで反応性生物を抽出し、溶媒を留去後、カラムクロマトグラフィーで分離精製し(n-hexane : EtOAc = 3:2)、減圧乾燥した。これにより、68.4mgの結晶が得られ、収率は９０％であった。【００３２】
このようにして合成された化合物をＮＭＲ等で解析し、化学構造を確認した。その結果を以下に示す。【００３３】
【化１９】
0005190873.tif 000011
黄色針状結晶、mp. 249~251 ℃ (CHCl3/hexane); IR (KBr) cm-1 : n 1685, 1503, 1341; 1H-NMR (CDCl3) : d 7.35-7.47 (m, 7H, H-3’, 5’, 2”, 3”, 4”, 5”, 6”), 7.61 (tt, 1H, J  = 1.4, 7.6 Hz, H-4’), 7.77 (dd, 2H, J = 1.4, 8.3 Hz, H-2’, 6’), 8.43 (dd, 1H, J = 7.2, 9.3 Hz, H-5), 8.53 (dd, 1H, J = 7.2, 9.6 Hz, H-8); 13C-NMR (CDCl3) : d108.7 (d, J = 23.1 Hz, CH), 109.3 (d, J = 23.1Hz, CH), 126.4 (C), 128.8 (2 x CH), 129.0 (2 x CH), 129.2 (2 x CH), 129.9 (2 x CH), 130.9 (CH), 134.6 (C), 134.7 (C), 135.0 (CH), 135.8 (C), 140.0 (C), 141.1 (C), 153.0 (dd, 15.9, 57.8 Hz, C), 154.8 (dd, 15.9, 57.8 Hz, C), 185.3 (C); HRMS (EI) m/z: 378.0816. Calcd. For C21H12N2O3F2: M, 378.0816.【００３４】
（実施例３）
２−ベンゾイル−６，７−ジメトキシ−３−フェニルキノキサリン１，４−ジオキサイドの合成
５，６−ジメトキシベンゾフロキサン（39.2mg, 0.2mmol）及びジベンゾイルメタン（47.1mg, 1.05eq）をジクロロメタン8mLに溶かし、シリカゲル（wakogel C-200）を6g加え、エバポレートして溶媒をとばし、シリカゲル上に吸着させた。その後、真空ポンプで完全に溶媒を除き、マイクロ波（７００Ｗ）を２分間照射した。酢酸エチルで反応性生物を抽出し、溶媒を留去後、カラムクロマトグラフィーで分離精製し(CHCl-3 : MeOH = 98:2)、減圧乾燥した。これにより、49.8mgの結晶が得られ、収率は６２％であった。【００３５】
このようにして合成された化合物をＮＭＲ等で解析し、化学構造を確認した。その結果を以下に示す。【００３６】
【化２０】
0005190873.tif 000012
黄色針状結晶、mp. 286 ℃ dec. (CHCl3/hexane);  IR (KBr) cm-1 : n 1673, 1612, 1502, 1333; 1H-NMR (CDCl3) : d4.10 (s, 3H, OCH3), 4.13 (s, 3H, OCH3), 7.34-7.40 (m, 3H, H-3”, 4”, 5”), 7.43-7.46 (m, 4H, H-3’, 5’, 2”, 6”), 7.59 (dt, 1H, J = 1.4, 7.6 Hz, H-4’ ), 7.77-7.79 (dd,  2H, J = 1.4, 7.6 Hz, H-2’, 6’ ), 7. 91 (s, 1H, H-5), 8.01 (s, 1H, H-8);  13C-NMR (CDCl3) : d 57.0 (CH3), 57.1 (CH3), 98.8 (CH), 99.3 (CH), 127.2 (C), 128.6 (2 x CH), 129.0 (2 x CH), 129.1 (2 x CH), 130.1(2 x CH), 130.4 (CH), 133.3 (C), 134.4 (C), 134.5 (CH), 135.1 (C), 137.9 (C), 139.2 (C), 154.5 (C), 154.9 (C), 186.0 (C); HRMS (EI) m/z : 402.1212. Calcd. For C23H18N2O5: M, 402.1215.【００３７】
（実施例４）
２−アセチル−６，７−ジフルオロ−３−メチルキノキサリン１，４−ジオキサイドの合成
５，６−ジフルオロベンゾフロキサン（34.4mg, 0.2mmol）及びアセチルアセトン（21.0mg, 1.05eq）をジクロロメタン8mLに溶かし、シリカゲル（wakogel C-200）を6g加え、エバポレートして溶媒をとばし、シリカゲル上に吸着させた。その後、真空ポンプで完全に溶媒を除き、マイクロ波（７００Ｗ）を２分間照射した。酢酸エチルで反応性生物を抽出し、溶媒を留去後、カラムクロマトグラフィーで分離精製し(n-hexane : EtOAc = 1:1)、減圧乾燥した。これにより、39.1mgの結晶が得られ、収率は７７％であった。【００３８】
このようにして合成された化合物をＮＭＲ等で解析し、化学構造を確認した。その結果を以下に示す。【００３９】
【化２１】
0005190873.tif 000013
黄色針状結晶、mp. 199~200 ℃ (CHCl3/hexane); IR (KBr) cm-1: n 1713, 1517, 1332;  1H-NMR (CDCl3) : d 2.53 (s, 3H, CH3), 2.73 (s, 3H, COCH3), 8,35-8.38 (dd, 1H, J = 7.2, 9.3 Hz, H-5), 8.43-8.45 (dd, 1H, J = 7.2, 9.3 Hz, H-8); 13C-NMR (CDCl3) : d 13.8 (CH3), 29.8 (CH3), 108.4 (d, J = 23.1 Hz, CH), 108.6 (d, J = 23.1 Hz, CH), 133.8 (d, J = 8.7 Hz, C), 135.0 (d, J = 8.7 Hz, C), 139.7 (C), 140.0 (C), 152.5 (dd, J = 15.9, 98.3 Hz, C), 154.5 (dd, 15.9, 98.3 Hz, C), 193.6 (C);  HRMS (EI) m/z: 254.0502. Calcd. For C11H8N2O3F2: M, 254.0503.【００４０】
（実施例５）
２−アセチル−６，７−ジメトキシ−３−メチルキノキサリン１，４−ジオキサイドの合成
５，６−ジメトキシベンゾフロキサン（39.2mg, 0.2mmol）及びアセチルアセトン（21.0mg, 1.05eq）をジクロロメタン8mLに溶かし、シリカゲル（wakogel C-200）を6g加え、エバポレートして溶媒をとばし、シリカゲル上に吸着させた。その後、真空ポンプで完全に溶媒を除き、マイクロ波（７００Ｗ）を２分間照射した。酢酸エチルで反応性生物を抽出し、溶媒を留去後、カラムクロマトグラフィーで分離精製し(n-hexane : EtOAc = 1:1)、減圧乾燥した。これにより、33.5mgの結晶が得られ、収率は６０％であった。【００４１】
このようにして合成された化合物をＮＭＲ等で解析し、化学構造を確認した。その結果を以下に示す。【００４２】
【化２２】
0005190873.tif 000014
黄色針状結晶、mp. 254 ℃ (CHCl3/hexane); IR (KBr) cm-1 : n1717, 1609, 1498, 1329 ;
1H-NMR (CDCl3) : d 2.54 (s, 3H, CH3), 2.74 (s, 3H, COCH3), 4.09 (s, 3H, OCH3), 4.11 (s, 3H, OCH3), 7.83 (s, 1H, H-5), 7.92 (s, 1H, H-8); 13C-NMR (CDCl3) : d 13.7 (CH3), 30.1 (CH3), 56.9 (CH3), 57.0 (CH3), 98.3 (CH), 98.7 (CH), 132.4 (C), 133.9 (C), 137.6 (C), 138.4 (C), 154.0 (C), 154.8 (C), 194.4 (C); HRMS (EI) m/z: 278.0902. Calcd. For C13H14N2O5: M, 278.0902.【００４３】
（実施例６）
６，７−ジクロロ−３−メチル−２−（４’−ニトロベンゾイル）−キノキサリン１，４−ジオキサイドの合成
５，６−ジクロロベンゾフロキサン（41mg, 0.2mmol）及び４−ニトロベンゾイルアセトン（43.5mg, 1.05eq）をジクロロメタン8mLに溶かし、シリカゲル（wakogel C-200）を6g加え、エバポレートして溶媒をとばし、シリカゲル上に吸着させた。その後、真空ポンプで完全に溶媒を除き、マイクロ波（７００Ｗ）を２分間照射した。酢酸エチルで反応性生物を抽出し、溶媒を留去後、カラムクロマトグラフィーで分離精製し(n-hexane : EtOAc = 3:2)、減圧乾燥した。これにより、46mgの結晶が得られ、収率は５８％であった。【００４４】
このようにして合成された化合物をＮＭＲ等で解析し、化学構造を確認した。その結果を以下に示す。【００４５】
【化２３】
0005190873.tif 000015
黄色針状結晶、mp. 215-217 oC (CHCl3/hexane); IR (KBr) cm-1: n 3427, 1692, 1325; 1H-NMR (CDCl3): d 2.51 (s, 3H, 3-CH3), 8.04 (d, 2H, J = 8.9 Hz, H3’, 5’), 8.36 (d, 2H, J = 8.9 Hz, H2’, 6’), 8.63 (s, 1H, H5), 8.80 (s, 1H, H8); 13C-NMR (CDCl3): d 14.2 (CH3), 121.6 (CH), 121.9 (CH), 124.6 (2 x CH), 130.0 (2 x CH), 135.4 (C), 136.8 (C), 138.0 (C), 138.2 (C), 138.5 (C), 139.2 (C), 140.8 (C), 151.4 (C), 185.0 (C); HRMS (EI) m/z: 392.9913 (M+). Calcd. for C16H9N3O5Cl2: M, 392.9919.【００４６】
（実施例７）
６，７−ジフルオロ−３−メチル−２−（４’−ニトロベンゾイル）−キノキサリン１，４−ジオキサイドの合成
５，６−ジフルオロベンゾフロキサン（34.4mg, 0.2mmol）及び４−ニトロベンゾイルアセトン（43.5mg, 1.05eq）をジクロロメタン8mLに溶かし、シリカゲル（wakogel C-200）を6g加え、エバポレートして溶媒をとばし、シリカゲル上に吸着させた。その後、真空ポンプで完全に溶媒を除き、マイクロ波（７００Ｗ）を２分間照射した。酢酸エチルで反応性生物を抽出し、溶媒を留去後、カラムクロマトグラフィーで分離精製し(n-hexane : EtOAc = 3:2)、減圧乾燥した。これにより、26.3mgの結晶が得られ、収率は３６％であった。【００４７】
このようにして合成された化合物をＮＭＲ等で解析し、化学構造を確認した。その結果を以下に示す。【００４８】
【化２４】
0005190873.tif 000016
黄色針状結晶、mp. 232-233 oC (CHCl3/hexane); IR (KBr) cm-1: n 3065, 1703, 1528, 1333; 1H-NMR (DMSO-d6) : d 2.52 (s, 3H, 3-CH3), 8.05 (dt, 2H, J = 2.1, 8.9 Hz, H3’, 5’), 8.33 (dd, 1H, J = 7.2, 9.3 Hz, H5), 8.38 (dt, 2H, J = 2.1, 8.9 Hz, H2’, 6’), 8.51 (dd, 1H, J = 7.2, 9.6 Hz, H8); HRMS (EI) m/z: 361.0509 (M+). Calcd. for C16H11N3O5F2: M, 362.0510.【００４９】
（HepG2細胞に対する低酸素選択的細胞毒性試験）
低酸素条件下での細胞毒性増強効果について、ヒト肝癌細胞であるHepG2細胞を用いて試験を行った。通常の酸素状態（noroxia）ならびに低酸素状態（hypoxia）において、表１に示す各キノキサリン１，４−ジオキシド誘導体（上記一般式（３）においてＲ１〜Ｒ６が表１のものである化合物１〜８）20 μＭを6時間暴露し、7日間培養後、コロニーの形成率について比較した。なお、表１中「Ph-NO2」はベンゾイル基のパラ位にニトロ基が導入された基を意味する。【００５０】
【表１】
0005190873.tif 000017
【００５１】
表１に示すように、キノキサリン骨格の6及び7位に電子求引性置換基、特に塩素原子を持つ化合物において低酸素選択性が得られた。また、キノキサリン骨格の２位のベンゾイル基パラ位にニトロ基を導入した化合物において低酸素細胞に対して著しく活性が向上した。
【産業上の利用可能性】
【００５２】
本発明のキノキサリン誘導体の合成方法は、触媒として塩基を使用せず、固体状の担体を用いるため、毒性、腐食性、浸透性が低く安全性に優れ、かつ反応時間が短縮され、収率が大幅に改善され経済性に優れたキノキサリン誘導体の合成方法が提供され、さらには、新規のキノキサリン１，４−ジオキサイド誘導体が提供される。