(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
形態的に幼体と成体との区別があるコンブ目の未成熟体を円形状、多角形状又は櫛状にくり抜いた組織片となし、該組織片に付着している夾雑物と該組織片の切断面から出る粘液とを除去した後、該組織片を清浄な海水で洗浄することを特徴とする海藻類の未成熟体を成熟させる方法。
【請求項２】
前記未成熟体の組織片を、ろ過又は滅菌した培養水中で清浄な状態に保持することを特徴とする請求項１に記載の海藻類の未成熟体を成熟させる方法。
【請求項３】
１２時間以上の連続した暗期を含む光周期である短日条件を培養のための光条件としたことを特徴とする請求項１又は２に記載の海藻類の未成熟体を成熟させる方法。
【請求項４】
前記培養水の温度は０〜３０℃の範囲であることを特徴とする請求項２に記載の海藻類の未成熟体を成熟させる方法。
【請求項５】
前記培養水は、海洋深層水、表層海水、該海洋深層水若しくは表層海水を基とした栄養塩補強海水又は人工海水であることを特徴とする請求項２又は４に記載の海藻類の未成熟体を成熟させる方法。
【請求項６】
前記海藻類は、前記海藻類の未成熟体の組織片を成熟させてなるものであることを特徴とする請求項２〜５のいずれかに記載の海藻類の未成熟体を成熟させる方法。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載の海藻類の未成熟体を成熟させる方法により得られた海藻類。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、海藻類の未成熟体を成熟させる方法及びその方法により得られた海藻類に関するものであり、例えば、育種、増養殖用種苗生産、研究、教育等の分野において利用されるものである。
【０００２】
本発明において「未成熟体」とは、天然海域において成熟しない発芽から成体となる前の葉体をいうものとする。
【０００３】
本発明において「コンブ目」とは、コンブ科とチガイソ科とツルモ科とニセツルモ科とよりなるコンブ目植物をいうものとする。この「コンブ目植物」なる語は、「新日本海藻誌」（吉田忠生著、出版元：内田老鶴圃）に記載されている。なお、コンブ科にはアラメ、カジメ、サガラメ等が含まれ、チガイソ科にはワカメ、チガイソ等が含まれる。
【背景技術】
【０００４】
海藻類においても特にアラメ、カジメ、ワカメ、コンブに代表される褐藻類のコンブ目は、食品としての利用に加えて、沿岸域に海中林を形成し、魚介類等の産卵・生育場や幼稚魚等の育成場となり、漁業及び環境面からも重要である。また海藻類は、食品、医薬品ないし化粧品への添加物となるアルギン酸の原藻であると共に、近年では生理活性物質であるフコイダンの原藻となるなど多様な産業に使用されている。
【０００５】
コンブ目の成熟誘導方法は、成体の一部を切り出し、適当な栄養塩補強海水中で培養することにより成熟させる方法である。
【０００６】
特開２００４-１３５５６２号公報は、コンブ目の幼体を切断し、海洋深層水を掛け流した水槽中で培養することにより成熟を誘導する培養方法（以下「従来の培養方法」という。）を開示している。
【特許文献１】特開２００４-１３５５６２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかるに、ほとんどのコンブ属植物は、幼体・成体共に単葉の形態を有し、幼体と成体との明確な区別がなく、天然海域では１０数ｃｍ程度の幼体でも成熟することがある。また、種苗生産には、天然海域で成熟した胞子体を採取して母藻としており、成体の生育状況・成熟状況や採取時の天候等により採苗は不安定である。
【０００８】
コンブ目未成熟体の成熟を誘導する上記従来の培養方法は、培養海水が海洋深層水の掛け流しに限定されているため、専ら海洋深層水を豊富に使用することができる場所においてのみ適用することができるに過ぎない。
【０００９】
また、止水で培養する場合、胞子体片の緑変・腐敗を防ぐため、切断後に清浄な状態を保つ必要があり、その際に水温、光周期条件等の培養条件も成熟に影響を及ぼす。
【００１０】
以上の如き状況に鑑み、本発明は、海藻類の未成熟体の成熟を誘導するため、光周期、水温、培地等の培養条件を設定することにより、迅速かつ安定した海藻類の未成熟体を成熟させる方法及びその方法により得られた海藻類を提供しようとしてなされたものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記課題を解決するために、本発明は、下記の如き海藻類の未成熟体を成熟させる方法及びその方法により得られた海藻類を提供するものである。
【００１２】
（１）形態的に幼体と成体との区別があるコンブ目の未成熟体を円形状、多角形状又は櫛状にくり抜いた組織片となし、該組織片に付着している夾雑物と該組織片の切断面から出る粘液とを除去した後、該組織片を清浄な海水で洗浄することを特徴とする海藻類の未成熟体を成熟させる方法（請求項１）。
【００１３】
（２）前記未成熟体の組織片を、ろ過又は滅菌した培養水中で清浄な状態に保持する（請求項２）。
【００１４】
（３）１２時間以上の連続した暗期を含む光周期である短日条件を培養のための光条件とする（請求項３）。
【００１５】
（４）前記培養水の温度は０〜３０℃の範囲である（請求項４）。
【００１６】
（５）前記培養水は、海洋深層水、表層海水、該海洋深層水若しくは表層海水を基とした栄養塩補強海水又は人工海水である（請求項５）。
【００１７】
（６）前記海藻類は、前記海藻類の未成熟体の組織片を成熟させてなるものである（請求項６）。換言すれば、この海藻類は、海藻類の未成熟体の組織片を前記方法により成熟させてなる海藻類について、さらに、その海藻類の未成熟体の組織片を前記方法により成熟させてなるものである。いわば、海藻類の子世代、孫世代について本発明を適用するのである。
【００１８】
（７）前記いずれかの海藻類の未成熟体を成熟させる方法により得られた海藻類（請求項７）。すなわち、該方法により得られた生活史各世代の海藻類又はその各々の細胞又は組織を有する海藻類。
【００１９】
なお、海洋深層水は水深２００ｍ以深の海水をいい、表層海水は水深２００ｍ以浅の海水をいうものとする。
【発明の効果】
【００２０】
本発明の方法によれば、海藻類の未成熟体を成熟させることができるため、世代交代を人為的に早めることが可能であり、本発明の方法は育種技術の開発に応用することができる。また、本発明によれば、海藻増殖・養殖等の種苗生産において、室内培養で得た未成熟体や天然採集した未成熟体からも採苗ができるため、安定した種苗生産が可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
以下、海藻類の未成熟体の一部を培養水中で清浄な状態に保持することにより海藻類の未成熟体を成熟させる方法の一例をコンブ目について説明する。
【００２２】
コンブ目の幼体の一部をくり抜くことにより、胞子体片を作製し、その切断面から出る粘液と表面の夾雑物とをペーパータオル等で除去した後、該胞子体片を滅菌海水で数回洗浄する。
【００２３】
該胞子体片を滅菌海水中又は滅菌海水を基とした栄養塩補強海水中で培養することにより成熟を誘導する。その間、随時、該胞子体片の変色又は海水の白濁がないことを確認する。因みに、滅菌海水とは加熱、濾過等により滅菌してなる海水であり、栄養塩補強海水とは窒素、リン、金属類等の栄養成分を加えてなる海水である。
【００２４】
培養中、胞子体片の変色又は海水・栄養塩補強海水の白濁があったときは、直ちに培養容器と海水を交換すると共に、胞子体片の表面ないし断面の夾雑物ないし汚損物の除去を行う。培養する際の光条件は明期が短い条件が好ましく、水温は生長可能な温度帯で培養する。この培養の結果、胞子体片の表面が隆起し、濃い褐色を呈した遊走子嚢斑（子嚢斑）が形成される。遊走子嚢斑から遊走子を得て、これを培養することにより配偶体を得ることができる。また、この配偶体を成熟させることにより胞子体を得て、さらにこの胞子体（未成熟体）を本発明の成熟誘導方法により成熟させることにより生活環を複数回完結させることが可能となる。
【実施例】
【００２５】
成体と幼体との区別が容易なカジメについて、未成熟体を下記の如く成熟させた。
【００２６】
天然海域で２００４年１１月２日に採取したカジメから遊走子を放出させ、保存しておいた配偶体を材料として用いた。この配偶体を２００５年１２月１２日から成熟させ、１５日後の１２月２７日に胞子体を確認した。
【００２７】
この胞子体を２リットル容のガラスフラスコ、８０μE ｍ-２ s-１、明暗周期１２時間：１２時間、１８℃、Provasoliの栄養塩補強海水中で培養し、葉長約１ｃｍの胞子体を得た。この胞子体を室内に設置した３０リットル及び１００リットル容の円形水槽、天然光下、水深３９７ｍから取水した水温１８℃の駿河湾深層水中で培養した。２００６年６月２日に葉長１０〜１５ｃｍの胞子体を得た。
【００２８】
これらの胞子体１１個体から各１枚、基部から５ｃｍの部分をくり抜き、ろ過滅菌海水中でエアレーションした。胞子体片から分泌された粘液をペーパータオルで拭き取り、さらにろ過滅菌海水中でエアレーション後、再び粘液を拭き取った。
【００２９】
この作業を粘液が出なくなるまで行った後、５０μE ｍ-２ s-１、明暗周期８時間：１６時間、２０℃、ろ過滅菌海水中もしくは１/４〜１/１０倍に希釈したProvasoliの栄養塩補強海水で培養した。２００６年７月５日に１１枚中５枚が成熟し、７月１３日には遊走子を採取した。これを７月１３日から８月２４日まで、鉄無添加Provasoliの栄養塩補強海水５０ｍlを満たした円形のプラスチックシャーレで、光量６０μE ｍ-２ s-１、明暗周期１２時間：１２時間、水温２０℃で培養し、配偶体とした。
【００３０】
その後、培養海水を１/４濃度のProvasoliの栄養塩補強海水に交換し、配偶体の成熟を誘導して胞子体を９月１日に確認した。その後、９月１５日から１０月２６日にProvasoliの栄養塩補強海水３００ｍlを満たしたガラスフラスコに移し、週に一度の頻度で水換えをしながら培養を続け、葉長約１ｃｍの胞子体を得た。
【００３１】
これらの胞子体を２００６年１０月２６日から２００７年１月２９日まで、室内に設置した３０リットル及び１００リットル容の円形水槽、天然光下、水温１６〜１８℃、水深３９７もしくは６８７ｍから取水した駿河湾深層水中で培養し、葉長１０〜１５ｃｍの胞子体を得た。これを上記と同様の成熟誘導方法で成熟させた。なお、この際に培養条件を変更し、水温１５℃、培養海水にはろ過滅菌海水を用いた。これにより３月１６日に成熟が確認され、３月２３日に遊走子を採取した。その後、配偶体に分化した状態で培養を継続している。