(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表される化合物及び／又はその塩を含有する美白用の化粧料。
【化１】
0005140575.tif 000012
（一般式（Ｉ）において、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に炭素数３〜７の第２級又は第３級のアルキル基を表し、Ｒ3は水素原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を表す。）
【請求項２】
前記一般式（Ｉ）で表される化合物が、下記一般式（ＩＩ）で表される化合物であることを特徴とする、請求項１に記載の美白用の化粧料。
【化２】
0005140575.tif 000013
（一般式（ＩＩ）において、  Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に炭素数３〜７の第２級又は第３級のアルキル基を表す。）
【請求項３】
前記一般式（ＩＩ）で表される化合物が、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２’−テノイル）フェノール（化合物（１））であることを特徴とする、請求項２に記載の美白用の化粧料。
【化３】
0005140575.tif 000014
【請求項４】
色素沈着症の予防・改善用であることを特徴とする、請求項１〜３の何れか一項に記載の美白用の化粧料。
【請求項５】
前記一般式（Ｉ）で表される化合物の含有率が、０．０００１〜３質量％であることを特徴とする、請求項１〜４の何れか一項に記載の美白用の化粧料。
【請求項６】
さらに、１，３−ブタンジオール、ジプロピレングリコール、イソプレングリコール、１，２−ペンタンジオール、２，４−ヘキシレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−オクタンジオールから選ばれる少なくとも一種の多価アルコールを含有することを特徴とする、請求項１〜５の何れか一項に記載の美白用の化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、美白用の化粧料に関する。尚、本発明において化粧料とは、日本に於ける医薬部外品に分類される製品に相当するものも包含する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚におけるシミ・ソバカスや日焼け後の色素沈着は、皮膚内に存在する色素細胞（メラノサイト）の活性化によりメラニン生成が著しく亢進した状態である。これらの皮膚色素トラブルを防止または改善する目的の皮膚外用剤として、アスコルビン酸類、過酸化水素、コロイド硫黄、グルタチオン、ハイドロキノン、またはカテコールなどを配合した皮膚外用剤（特に美白剤）が知られている（例えば、非特許文献１を参照）。しかしながら、これらの美白剤は何れも、有効に作用する場合もある一方で作用しない場合があることも知られている。さらにその原因については、詳細に知られていない。【０００３】
さらに、前記美白剤は、安定性や安全性などの面からも問題のある場合があった。すなわち、色素沈着症の予防または改善に関し、アスコルビン酸は、含水化粧料の如き水分を多く含む系においては酸化されやすく不安定なことがあり、皮膚外用剤（美白剤）を変色させる原因となり得る。また、過酸化水素水は保存上の安定性ならびに安全性上の問題があり、グルタチオンやコロイド硫黄は著しい異臭を放つため美白剤の成分として使用することは制約される。更に、ハイドロキノン、カテコールなどは、皮膚刺激性、アレルギー性などの安全性に問題がある場合がある。このような技術背景において、有効に作用し、かつ安定性、安全性を満足する新たな美白素材の開発が望まれている。【０００４】
一方、後記一般式（Ｉ）で表されるチオフェン誘導体が、抗酸化作用、プロスタグランディンの抑制を機序とする抗炎症作用、抗アレルギー作用や抗リウマチ作用を有することは知られている（例えば、特許文献１、特許文献２，特許文献３、特許文献４、非特許文献２、非特許文献３を参照）。【０００５】
しかしながら、このような化合物が、皮膚においてメラニン生成抑制作用を有することは知られておらず、さらに、これらを有効成分として含有する、美白用の化粧料も全く知られていなかった。【０００６】
【特許文献１】特開昭５３−１４１２６５号公報
【特許文献２】特開昭６３−００８３８０号公報
【特許文献３】特開昭６３−５０２２８１号公報
【特許文献４】特表平０６−５０１９１９号公報
【非特許文献１】武田克之ら監修、「化粧品の有用性  評価技術と将来展望」、薬事日報社刊（２００１年）
【非特許文献２】Agents and Action, Vol.12, No.5, p.674-683, (1982)
【非特許文献３】B ioorganic & Medicinal Chemistry, Vol..11, p4207-4216, (2003)
【発明の開示】
【０００７】
本発明は、上記した状況に鑑みてなされたものであり、シミ・ソバカスなどの皮膚色素沈着症の予防・改善に対して優れた効果を発揮する化粧料等を提供することを課題とする。
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、特定のチオフェン誘導体（具体的には一般式（Ｉ）で表される化合物及び／又はその塩）が、色素細胞のメラニン生成に対して強力な抑制効果を有することを見出した。さらに、上記チオフェン誘導体を化粧料等の基材中に配合せしめた場合に、皮膚に対する優れた色素沈着症の予防及び改善効果を発現することを見いだし、本発明を完成させた。即ち、本発明は以下の通りである。
【０００９】
（１）  下記一般式（Ｉ）で表される化合物及び又はその塩を含有する美白用の化粧料。
【化１】
0005140575.tif 000002
【００１０】
（一般式（Ｉ）において、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に炭素数３〜７の第２級又は第３級のアルキル基を表し、Ｒ3は水素原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を表す。）
（２）  前記一般式（Ｉ）で表される化合物が、下記一般式（ＩＩ）で表される化合物であることを特徴とする、（１）に記載の美白用の化粧料。
【００１１】
【化２】
0005140575.tif 000003
【００１２】
（一般式（ＩＩ）において、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に炭素数３〜７の第２級又は第３級のアルキル基を表す。）
（３）  前記一般式（ＩＩ）で表される化合物が、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２’−テノイル）フェノール（化合物（１））であることを特徴とする、（２）に記載の美白用の化粧料。
【００１３】
【化３】
0005140575.tif 000004
【００１４】
（４）  色素沈着症の予防・改善用であることを特徴とする、（１）〜（３）の何れかに記載の美白用の化粧料。
（５）  前記一般式（Ｉ）で表される化合物の含有率が、０．０００１〜３質量％であることを特徴とする、（１）〜（４）の何れかに記載の美白用の化粧料。
（６）  さらに、１，３−ブタンジオール、ジプロピレングリコール、イソプレングリコール、１，２−ペンタンジオール、２，４−ヘキシレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−オクタンジオールから選ばれる少なくとも一種の多価アルコールを含有することを特徴とする、（１）〜（５）の何れかに記載の美白用の化粧料。
【００１５】
また、本発明は、美白用の化粧料の製造のための前記一般式（Ｉ）で表される化合物及び／又はその塩の使用、及び前記一般式（Ｉ）で表される化合物及び／又はその塩を、美白しようとする皮膚に塗布することを特徴とする方法である。
本発明の上記使用及び方法における一般式（Ｉ）で表される化合物の好ましい態様、好ましい用途、更に好ましく配合される成分は、前記（２）〜（６）と同様である。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】チロシナーゼ、Ｔｒｐ−１、Ｔｒｐ−２タンパク質の発現状況を示すウェスタンブロッティングの図である（図面代用写真）。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
（１）本発明の化粧料の必須構成成分である一般式（Ｉ）で表される化合物
本発明の化粧料の必須構成成分である化合物は、一般式（Ｉ）で表される。一般式（Ｉ）において、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に、炭素数３〜７の第２級又は第３級のアルキル基、すなわちバルキーな置換基を表す。具体的には、Ｒ1及びＲ2としてそれぞれ独立に、イソプロピル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、イソアミル基、ｓｅｃ−アミル基、ｔｅｒｔ−アミル基などが例示できる。これらの中では、ｔｅｒｔ−ブチル基が好ましく、Ｒ1、Ｒ2が共にｔｅｒｔ−ブチル基であるジ−ｔｅｒｔ−ブチル体がより好ましい。【００１８】
一般式（Ｉ）において、Ｒ3は水素原子であっても、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基から選ばれる任意の置換基であってもよい。Ｒ3が置換基である場合、その置換位置は任意である。この中でも、特にＲ3は水素原子であることが好ましい。すなわち、本発明において、一般式（Ｉ）で表される化合物は、一般式（ＩＩ）で表される化合物であることが好ましい。
本発明の化粧料の必須構成成分である化合物は、さらに好ましくは、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２'−テノイル）フェノール、すなわち化合物（１）で表される化合物である。
【００１９】
一般式（Ｉ）で表される化合物はフリー体で本発明の化粧料に使用することもできるが、アルカリなどを用いて塩とし、使用することも可能である。たとえばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、トリエタノールアミン塩、トリエチルアミン塩等の有機アミン塩、リジン塩、アルギニン塩等の塩基性アミノ酸塩等が好ましく例示できる。【００２０】
また、これらの化合物は、任意の方法で製造することができ、例えば下記スキーム１又は２で概略される方法で製造することができるが、これらの方法に限定されない。また当業者は、以下の方法を適宜変更して目的とする化合物を製造することができることを理解する。【００２１】
【化４】
0005140575.tif 000005
【００２２】
スキーム１における反応について簡単に説明する。
３，５−ジ−アルキル−４−ヒドロキシベンゾイックアシッドを塩化チオニルを用いて常法にて処理することにより、３，５−ジ−アルキル−４−ヒドロキシベンゾイックアシッドの酸クロリド体（Ａ）とする。この酸クロリド体（Ａ）を二硫化炭素などの適当な溶媒中で、塩化アルミニウム、四塩化チタンなどのルイス酸で処理する。次いで、チオフェン（Ｂ）を添加して、フリーデルクラフト反応させることで、一般式（Ｉ）の化合物を得ることができる。【００２３】
３，５−ジ−アルキル−４−ヒドロキシベンゾイックアシッド、例えば、シグマ−アルドリッチ社より市販されている３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシベンゾイックアシッドを使用することができる。化合物（Ｂ）としては、Ｒ3が水素原子である無置換体やメチルチオフェン、メトキシチオフェンなどの置換体を使用することができる。ここで、化合物（Ｂ）としてチオフェンを用いた場合には、一般式（ＩＩ）で表される化合物が得られ、さらに、化合物（Ａ）として３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシベンゾイックアシッドの酸クロリド体を用いた場合には、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２’−テノイル）フェノール（化合物（１））が得られる。【００２４】
【化５】
0005140575.tif 000006
【００２５】
スキーム２における反応について簡単に説明する。
チオフェンカルボン酸を塩化チオニルを用いて常法にて処理することにより、チオフェンカルボン酸の酸クロリド体（Ｃ）とする。この酸クロリド体（Ｃ）を二硫化炭素などの適当な溶媒中で、塩化アルミニウム、四塩化チタンなどのルイス酸で処理する。次いで、２，６−ジアルキルフェノール（Ｄ）を添加して、フリーデルクラフト反応させることで一般式（Ｉ）の化合物を得ることができる。
化合物（Ｃ）を得るためには、シグマ−アルドリッチ社より市販されているＲ3が水素原子である２−チオフェンカルボン酸や３−メチル−２−チオフェンカルボン酸、５−メチル−２−チオフェンカルボン酸などを使用することができる。ここで、化合物（Ｃ）として、２−チオフェンカルボン酸の酸クロリドを用いた場合には、一般式（ＩＩ）で表される化合物が得られる。２，６−ジアルキルフェノール（Ｄ）としては、シグマ−アルドリッチ社より市販されている２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェノール、２，６−ジ−イソプロピルフェノールなどを使用することができる。化合物（Ｃ）として２−チオフェンカルボン酸の酸クロリド、化合物（Ｄ）として２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェノールを用いた場合には、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２’−テノイル）フェノール（化合物（１））が得られる。【００２６】
一般式（Ｉ）で表される化合物は、メラニン生成抑制作用に優れる。通常、メラニン生成抑制作用を有する化合物は、チロシナーゼの直接阻害作用やチロシナーゼの分解作用を機序とするものが多い。しかしながら、一般式（Ｉ）で表される化合物は、チロシナーゼの分解作用やチロシナーゼの直接阻害作用によるものとは異なる機序により、メラニン生成を抑制すると考えられる。
【００２７】
（２）本発明の化粧料
本発明の化粧料は、上記一般式（Ｉ）で表される化合物及び／又はその塩を必須成分として含む。本発明の化粧料においては、一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩を一種のみ含んでいても、複数種を組み合わせて含んでいてもよい。【００２８】
本発明の化粧料における一般式（Ｉ）で表される化合物の好ましい含有率は、化粧料の使用目的、皮膚の状態、剤形、塗布される部位によって異なりうるが、０．０００１質量％以上、好ましくは０．００１質量％以上、さらに好ましくは０．０１質量％以上である。一方、上限は３質量％以下、好ましくは１質量％以下、さらに好ましくは０．８質量％以下である。
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物は、強力なメラニン生成抑制作用を有するため、日本における医薬部外品又は他の国におけるこれと類似の商品に用いることもできる。【００２９】
本発明の化粧料は、炎症が生じていない肌状態の部位に使用することが特に好ましい。すなわち、本発明の化粧料は、抗炎症を目的としないことが好ましい。本発明の化粧料は、例えば、一般的にメラニンの生成は亢進しているが、炎症反応などは生じていない、皮膚上のシミやソバカスなどの色素沈着症を予防するために適用したり、色素沈着症を有する部分に適用したりすることが好ましい。【００３０】
本発明の化粧料は、メラニン生成抑制作用を有し、シミ・ソバカスなどの色素沈着症を予防・改善する作用を有しているので、各国の法令の範囲内において「メラニンの生成を抑え、シミ、ソバカスを防ぐ」などの作用・効果の表示をして、消費者にその効果的な使用の形態を知らせることも、本発明の好ましい形態である。【００３１】
本発明の化粧料は、一般式（Ｉ）で表される化合物に加えて、１，３−ブタンジオール、ジプロピレングリコール、イソプレングリコール、１，２−ペンタンジオール、２，４−ヘキシレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−オクタンジオールから選ばれる少なくとも一種の多価アルコールを含有することも好ましい。これらの多価アルコールは、本発明の化粧料の美白効果を増強する作用を有する。
これらの多価アルコールの含有率は、特に制限されないが、好ましくは０．１〜３０質量％、より好ましくは１〜２０質量％、さらに好ましくは５〜１０質量％である。また、一般式（Ｉ）で表される化合物に対して、好ましくは５〜５０質量倍、さらに好ましくは５〜２０質量倍の含有量とすることもよい。【００３２】
また、本発明の化粧料においては、一般式（Ｉ）で表される化合物に加えて、界面活性剤を使用することが好ましい。【００３３】
界面活性剤としては、脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類、イミダゾリン系両性界面活性剤（２−ココイル−２−イミダゾリニウムヒドロキサイド−１−カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類、ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（グリセリルモノステアレート等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノラウレート、ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ＰＯＥモノラウレート、ＰＯＥモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯＥアルキルエーテル類（ＰＯＥセチルエーテル、ＰＯＥ２−オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック（登録商標）類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニック（登録商標）類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類が挙げられる。
本発明の化粧料においては、非イオン性の界面活性剤を含有することが好ましい。これは、一般式（Ｉ）で表される化合物と非イオン性界面活性剤を共に使用することにより、化粧料の美白効果がより向上するからである。
これらの界面活性剤の含有量は、特に制限されないが、好ましくは０．１〜１０質量％、さらに好ましくは０．２〜５質量％である。また、一般式（Ｉ）で表される化合物に対して、好ましくは０．１〜２０質量倍、さらに好ましくは０．２〜２０質量倍の含有量とすることもよい。【００３４】
また、本発明の化粧料は紫外線防御剤を含有していることも好ましい。本願発明の化粧料や医薬部外品に含まれる紫外線防御剤としては、シミなどの悪化因子である紫外線の皮膚への暴露を減じることができれば十分である。このような、紫外線防御剤としては、紫外線散乱効果を有する各種粉体類、紫外線吸収効果を有する化合物が用いられる。【００３５】
このような粉体類としては、表面を処理されていても良い、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等が挙げられ、有機粉体類としては、ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等が挙げられ、好ましい。【００３６】
このような紫外線吸収効果を有する化合物としては、一般的には芳香環を有する化合物であれば十分である。例えば、ビタミンＢ1、ビタミンＢ2、ビタミンＢ3、ビタミンＢ6、ビタミンＢ12などのビタミンＢ群類、ビタミンＥ類、ユビキノン類、葉酸類などの芳香環・複素環系ビタミン類などが挙げられる。さらに、紫外線吸収剤として用いられているパラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外線吸収剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、桂皮酸系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、糖系紫外線吸収剤、２−（２’−ヒドロキシ−５’−ｔ−オクチルフェニル）ベンゾトリアゾール、４−メトキシ−４’−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン等が挙げられる。【００３７】
本発明の化粧料は、前記成分以外に、医薬品、化粧品等に一般的に用いられる各種成分、すなわち、油脂、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸、高級アルコール、エステル類、油剤、水性成分、粉末成分、保湿剤、増粘剤、色剤、香料、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐剤、紫外線防御剤、ビタミン類、その他の美白剤、抗炎症剤等を含みうる。【００３８】
油脂またはロウ類としては、具体的には、例えばマカデミアナッツ油、アボガド油、トウモロコシ油、オリーブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワー油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、ミツロウ、キャンデリラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホバロウ等のオイル、ワックス類、流動パラフィン、スクワラン、プリスタン、オゾケライト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類が挙げられ、脂肪酸としては、オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類が挙げられ、高級アルコールとしては、セチルアルコール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、オクチルドデカノール、ミリスチルアルコール、セトステアリルアルコール等が挙げられ、エステル類としては、イソオクタン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプロピル、セバチン酸ジ−２−エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−２−エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ−２−エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット、ダイマーリノール酸ダイマージリノイル、ダイマージリノール酸（フィトステリル／イソステアリル／セチル／ステアリル／ベヘニル）、Ｎ−ラウロイルグルタミン酸（フィトステリル／２−オクチルドデシル）等の合成エステル油類が挙げられ、油剤としては、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ジフェニルポリシロキサン等の鎖状ポリシロキサン、オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサンシロキサン等の環状ポリシロキサン、アミノ変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン、アルキル変性ポリシロキサン、フッ素変性ポリシロキサン等の変性ポリシロキサン等のシリコーン油等が挙げられる。【００３９】
保湿剤としては、ポリエチレングリコール、グリセリン、ジグリセリン、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール等の多価アルコール類、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等が挙げられ、増粘剤としては、グアガム、クインスシード、カラギーナン、ガラクタン、アラビアガム、ペクチン、マンナン、デンプン、キサンタンガム、カードラン、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、グリコーゲン、ヘパラン硫酸、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、トラガントガム、ケラタン硫酸、コンドロイチン、ムコイチン硫酸、ヒドロキシエチルグアガム、カルボキシメチルグアガム、デキストラン、ケラト硫酸、ローカストビーンガム、サクシノグルカン、カロニン酸、キチン、キトサン、カルボキシメチルキチン、寒天、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリエチレングリコール、ベントナイト等が挙げられる。【００４０】
無機顔料としては、表面を処理されていても良い、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタン、酸化亜鉛等が挙げられ、パール剤類としては、表面を処理されていても良い、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等が挙げられ、有機色素類としては、レーキ化されていても良い赤色２０２号、赤色２２８号、赤色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等が挙げられる。【００４１】
一般式（Ｉ）で表される化合物以外の美白成分または美白剤としては、例えば、パンテテイン−Ｓ−スルホン酸、イソフェルラ酸、アスコルビン酸−グルコシド、アスコルビン酸リン酸エステル塩、４−ｎ−ブチルレゾルシノールなどの４−（炭素数４〜１０の）アルキルレゾルシノール類、アルブチン、コウジ酸、リノール酸、リノール酸メチル、トラネキサム酸、トラネキサム酸メチルアミド等が挙げられる。【００４２】
また、本発明の化粧料は、低級アルコール類（エタノール、イソプロパノール等）、または前記のビタミン類以外にも、ビタミンＡ又はその誘導体、ビタミンＤ類、パントテン酸、パンテチン、コエンザイムＱ10等を含みうる。
【００４３】
本発明の化粧料の剤型は任意であり、通常この種の化粧料又は医薬部外品に用いられる剤型であれば制限なく使用できるが、本願発明の美白用の化粧料や美白用の医薬部外品は、一般式（Ｉ）で表される化合物が、皮膚内に浸透し、美白作用、メラニン生成抑制作用を示すことから、皮膚に長時間滞留させるのに適した形態、例えば化粧水、乳液、軟膏、クリーム、ローションであることが望ましい。また、パック料も、閉塞による効果が期待されるので好ましい形態である。【００４４】
本発明の化粧料は、一般式（Ｉ）で表される化合物を含むこと以外は、通常の化粧料の製造と同様にして製造することができる。【００４５】
以下に実施例及び試験例を参照して、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明がこれらの実施例及び試験例によって限定を受けないことは言うまでもない。
【実施例】
【００４６】
＜製造例＞
２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（２’−テノイル）フェノール（化合物（１））の合成
３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシベンゾイックアシッド２３．２ｇに塩化チオニル６０ｇを加え、室温にて１時間撹拌した後、過剰の塩化チオニルを減圧下で留去した。これに二硫化炭素３００ｍｌを加えて溶解し、さらに塩化アルミニウム１３．５ｇを添加した。４０℃で、３０分間撹拌した後に、チオフェン８８．２ｇを添加した。次いで、反応液を１０％塩酸中に注ぎ込み、ジクロロメタンにて抽出し、無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、濃縮し、シリカゲルカラムにて分画精製し、化合物（１）を得た。【００４７】
＜実施例１＞
下記に示す処方に従って水中油クリームを作製した。すなわち、（Ａ）の各成分を混合し、８０℃に加熱した。一方、（Ｂ）の各成分を混合し８０℃に加熱した。（Ａ）の混合物に、（Ｂ）の混合物を加えて撹拌して乳化させ、その後３５℃にまで冷却して、クリーム１を得た。
（Ａ）ＰＯＥ（３０）セチルエーテル                   ２．０  質量％
グリセリンモノステアレート                   １０．０  質量％
流動パラフィン                               １０．０  質量％
ワセリン                                       ４．０  質量％
セタノール                                     ５．０  質量％
γ−トコフェロール                             ０．０５質量％
ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）           ０．０１質量％
ブチルパラベン                                 ０．１  質量％
化合物（１）                                   ０．７  質量％
（Ｂ）１，３−ブタンジオール                       １０．０  質量％
精製水                                       ５８．１４質量％【００４８】
＜実施例２＞
下記に示す処方に従って水中油クリームを作製した。すなわち、（Ａ）の各成分を混合し、８０℃に加熱した。一方、（Ｂ）の各成分を混合し８０℃に加熱した。（Ａ）の混合物に、（Ｂ）の混合物を加えて撹拌して乳化させ、その後３５℃にまで冷却して、クリーム２を得た。
（Ａ）ＰＯＥ（３０）セチルエーテル                    ２．０  質量％
グリセリンモノステアレート                    １０．０  質量％
流動パラフィン                                １０．０  質量％
ワセリン                                        ４．０  質量％
セタノール                                      ５．０  質量％
γ−トコフェロール                              ０．０５質量％
ＢＨＴ                                          ０．０１質量％
ブチルパラベン                                  ０．１  質量％
化合物（１）                                    ０．０５質量％
（Ｂ）１，３−ブタンジオール                        １０．０  質量％
精製水                                        ５８．７９質量％【００４９】
＜実施例３＞
下記に示す処方に従って乳液を作製した。すなわち、（Ａ）の各成分を混合し、７０℃に加熱した。一方、（Ｂ）の各成分を混合し７０℃に加熱した。（Ｂ）の混合物に、（Ａ）の混合物を加えて予備乳化を行い、さらにホモミキサーで均一に乳化し、乳化後かき混ぜながら３０℃にまで冷却して、乳液を得た。
（Ａ）合成ゲイロウ                                     ２．５  質量％
セタノール                                       １．０  質量％
スクワラン                                       ４．０  質量％
ステアリン酸                                     １．０  質量％
ＰＯＥ（２５）モノステアレート                   ２．２  質量％
グリセリンモノステアレート                       ０．５  質量％
γ−トコフェロール                               ０．０５質量％
ＢＨＴ                                           ０．０１質量％
ブチルパラベン                                   ０．１  質量％
化合物（１）                                     １．０  質量％
（Ｂ）１，３−ブタンジオール                           ３．０  質量％
プロピレングリコール                             ７．０  質量％
キサンタンガム                                   ０．１  質量％
カルボキシビニルポリマー                         ０．２  質量％
水酸化カリウム                                   ０．２  質量％
精製水                                         ７７．１４質量％【００５０】
＜実施例４＞
下記に示す処方に従って化粧水を作製した。（Ａ）の各成分を混合し、室温下で溶解させた。一方（Ｂ）の各成分を室温下で混合し、溶解させた。（Ｂ）の混合物に、（Ａ）の混合物を加えて可溶化させて、ローションを得た。
（Ａ）ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノラウレート            １．５  質量％
ＰＯＥ（２０）モノラウリレート                    ０．５  質量％
エタノール                                      １０．０  質量％
γ−トコフェロール                                ０．０２質量％
化合物（１）                                      ０．０１質量％
（Ｂ）グリセリン                                        ５．０  質量％
プロピレングリコール                              ４．０  質量％
イソフェルラ酸ナトリウム                          ０．０５質量％
クエン酸                                          ０．１５質量％
クエン酸ナトリウム                                ０．１  質量％
精製水                                          ７８．６７質量％【００５１】
＜実施例５＞
下記に示す処方に従ってパックを作製した。（Ａ）の各成分を室温にて分散溶解させ、これに（Ｂ）の混合物を加えて均一に溶解させて、パックを得た。
（Ａ）ポリビニルアルコール                            １５．０  質量％
精製水                                          ４０．０  質量％
（Ｂ）ビザボロール                                      ０．５  質量％
γ−トコフェロール                                ０．０２質量％
エタノール                                        ４．０  質量％
化合物（１）                                      ２．０  質量％
ＰＯＥ（８）・ＰＯＰ（５５）共重合体               ３．０  質量％
精製水                                          ３５．４８質量％【００５２】
＜試験例１＞  化合物１のメラニン生成抑制試験
メラニン合成過程において特異的に細胞に取り込まれるチオウラシル（試験では14Ｃラベルしたチオウラシルを使用）を用いて、化合物（１）のメラニン生成抑制作用を評価した。２４ウェルのプレートを使用し、その内の１５ウェルにメラノサイト培養用完全培地（倉敷紡績株式会社製）を２ｍｌずつ入れ、各ウェルにそれぞれ１．５×１０4個／ｃｍ2の濃度でヒト正常メラノサイト（倉敷紡績株式会社製）を播種した。５％二酸化炭素雰囲気下、３７℃で２４時間培養を行った。その後、全てのウェルについて、以下の条件で培地交換した。即ち３ウェルは新しいメラノサイト培養用完全培地（コントロール）、３ウェルずつ合計９ウェルには１．０×１０-3ｍＭ、２．０×１０-3ｍＭ、４．０×１０-3ｍＭ濃度で化合物（１）を含むメラノサイト培養用完全培地、さらに別の３ウェルはチロシナーゼ阻害剤として知られるフェニルチオウレア０．１ｍＭ濃度で含むメラノサイト培養用完全培地であった。更に、これらの１５ウェルに14Ｃ−チオウラシル（14Ｃラベルしたチオウラシル）を０．２５×１０-6Ｃｉ（キュリー）添加した。そして上記培養条件と同様の条件で更に３日間培養した。培養終了後、各ウェルから培養液を除去し、ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）で洗浄後、トリプシン及びＥＤＴＡ含有培地を使用して、ウェル底面より細胞を剥離して、細胞懸濁液とし、遠心分離にて細胞を回収した。細胞数は血球計算板を用いてカウントした。その後、各ウェルから回収した細胞における14Ｃ−チオウラシル量を液体シンチレーションカウンターにて測定した。コントロールのウェルから回収した細胞の放射線量に対する、被検物質を含む培地で培養した細胞の放射線量の百分率をそれぞれ求め、メラニン量（％）とした。すなわち、各細胞内に取り込まれた放射線量性が小さい程、メラニン量が小さく、メラニン抑制力価が大きいとすることができる。結果を表１に示す。【００５３】
【表１】
0005140575.tif 000007
【００５４】
表１の結果より、本発明の化粧料に含有される化合物（１）は、濃度依存的なメラニン生成抑制作用を示した。なお、フェニルチオウレア０．１ｍＭと化合物（１）４．０×１０-3ｍＭは、同等のメラニン生成抑制力価を示した。これより、化合物（１）は、ポジティブコントロールであるフェニルチオウレアに比して、２０倍以上強いメラニン生成抑制力価を有することが分かる。なお、フェニルチオウレアは毒性の面で実用には向かないが、現在実際に使用されているメラニン生成抑制剤よりも、非常にメラニン生成抑制作用が強い物質として、通常この様な実験ではポジティブコントロールとして使用される。ここで、組成物における化合物（１）の濃度４×１０-3ｍＭは、約０．０００１質量％に相当する。【００５５】
＜試験例２＞  本発明の化粧料の使用テスト１
次に、上記の結果を踏まえ、本発明の化粧料の皮膚色素沈着症の予防・改善に対する効果を調べた。実施例１及び実施例２で製造したクリーム１及び２について、使用テストを行い、紫外線の照射に対するメラニン生成抑制作用を調べた。また、比較例として、実施例１において化合物（１）を精製水に置き換えることにより調製したクリーム（対照品）を用いた。
【００５６】
１０名の被験者の前腕内側部に１．５ｃｍ×１．５ｃｍの部位を３ヶ所設定し、３ヶ所の内の１部位には、実施例１で製造したクリーム１（化合物（１）０．７％含有）を、１部位に実施例２で製造したクリーム２（化合物（１）０．０５％含有）を、残りの１部位には比較例である対照品のクリームを、１週間、１日３回塗布した。１週間後に、３ヶ所の設定部位以外を遮光し、設定部位に紫外線を３日間連続で照射した。照射紫外線のエネルギー量は、予め測定してあった、被験者の１．０  ＭＥＤ（Minimum  Erythema  Dose：最小紅斑惹起エネルギー量）相当量であった（合計３．０ＭＥＤ相当量）。クリームの塗布は、紫外線の照射３日間も含めて、さらに１日３回を２１日間連続して行った。初回の紫外線照射の７日後及び２１日後に、紫外線を照射した部位について、専門評価者３名により、以下に示す基準に則り、色素沈着の状態を評価した。評価結果について、設定部位毎に、専門評価者による評価点の平均を算出した。結果を表２に示す。【００５７】
色素沈着状態の評価点
評価点：標語
０  ：変化無し
０．５：境界不明瞭な弱度の黒化
１．０：境界明瞭な黒化
１．５：境界明瞭な中等度の黒化
２．０：境界明瞭な強度の黒化
＊各評価点の中間点も採用する。【００５８】
【表２】
0005140575.tif 000008
【００５９】
表２に示すように、紫外線照射７日後においては、対照品とクリーム２（化合物（１）０．０５％含有）、クリーム１（化合物（１）０．７％含有）との間において、評価点に明瞭な差は認められず、有意な差（Paired-T-test）も認められなかった。すなわち、紫外線を照射した部位は同様な色素沈着を生じていると考えられる。しかし、２１日後においては、対照品とクリーム２、クリーム１との間において、有意な差（それぞれ、Ｐ＜０．０５）が認められた。クリーム２とクリーム１との間では、有意な差は認められなかったが、クリーム１の方がより評価点が小さかったことから、色素沈着を抑制する作用に優れると考えられる。【００６０】
また、初回の紫外線照射の７日後および２１日後に、３ヶ所の設定部位及びその隣接部位（遮光されていた部位）の皮膚の明度（Ｌ値）を色彩色差計（コニカミノルタ色彩色差計ＣＲ３００）にて測定した。測定結果について、１０名の被験者の設定部位ごとに、Ｌ値の平均値を算出した。さらに、２１日後の設定部位（紫外線照射部位）と紫外線非照射隣接部位とのＬ値の差（ΔＬ値：隣接部位のＬ値−紫外線照射部位のＬ値）を算出した。結果を表３に示す。【００６１】
【表３】
0005140575.tif 000009
【００６２】
表３に示すように、紫外線照射７日後には、クリーム１（化合物（１）０．７％含有）塗布部位、クリーム２（化合物（１）０．０５％含有）塗布部位、対照品塗布部位ともに、紫外線非照射部位よりもＬ値（明度）が下がっていた。すなわち、紫外線照射による色素沈着で、皮膚の明度が低下していることが判る。さらに、各塗布部位について、２１日後の非照射部位とのＬ値（明度）の差を算出したΔＬ値を比較すると、クリーム１、クリーム２塗布部位において、対照品塗布部位と比べて、非照射部位との差を示すΔＬ値が小さく、より明度が回復していた。すなわち、クリーム１、クリーム２は、色素沈着を改善する作用を有することが分かる。クリーム１、クリーム２塗布部位ともに、対照品塗布部位に対して、Paired-T-testの結果、Ｐ＜０．０５であり、有意な差が認められた。【００６３】
＜試験例３＞  本発明の化粧料の使用テスト２
実施例１の処方において、１，３−ブタンジオールを１，２−ペンタンジオールに置換したクリーム３、グリセリンに置換したクリーム４、水に置換したクリーム５を作製した。実施例１で製造したクリーム１とクリーム３、クリーム４、クリーム５について、被験者の上腕内側部に１．５×１．５ｃｍの４部位を設定し、試験例２とほぼ同様の方法で紫外線照射及び試料の塗布を実施し、７日後と２１日後に色彩色差計による明度（Ｌ値）の測定を実施し、さらに非照射部位との差も算出した。結果を表４に示す。【００６４】
【表４】
0005140575.tif 000010
【００６５】
表４に示すように、色彩色差計による評価において、紫外線照射７日後には、クリーム１、クリーム３、クリーム４、クリーム５塗布部位ともに、紫外線非照射部位よりもＬ値（明度）が下がっていた。すなわち、紫外線照射による色素沈着で、皮膚の明度が低下していることが判る。さらに、各塗布部位について、２１日後の非照射部位とのＬ値（明度）の差を算出したΔＬ値を比較すると、１，３−ブタンジオールを含有するクリーム１と１，２−ペンタンジオールを含有するクリーム３塗布部位においては、これらを水に置換したクリーム５塗布部位と比べてΔＬ値が小さく、明度の回復が促進していることが判る。また、１，３−ブタンジオールをグリセリンに置換したクリーム４においては、クリーム１やクリーム３に比して、明度の回復促進効果が多少低かった。すなわち、１，３−ブタンジオールや１，２−ペンタンジオールのような２価の多価アルコールを含有するクリーム１、クリーム３は、色素沈着を予防・改善する作用に優れていると考えられる。
【００６６】
なお、本発明のクリーム１〜５の何れも、塗布部位に好ましくない反応は観察されず、本発明品の化粧料又は医薬部外品は、安全性の高いことも併せて確認された。【００６７】
＜試験例４＞  正常ヒトメラノサイトチロシナーゼ活性の阻害試験
メラノサイト培養用培地（Medium 254、倉敷紡績株式会社）にて培養したヒト正常メラノサイト（倉敷紡績株式会社）をセルスクレーパーにて回収し、これをPreteoExtractTM Subcellular Proteome Extraction Kit（カルビオケム社）を用いて抽出したタンパク溶液を粗チロシナーゼタンパク溶液とした。このチロシナーゼタンパク溶液のドーパ酸化活性を測定することにより、化合物（１）のチロシナーゼ活性の阻害作用を評価した。
基質となる０．１％ドーパ溶液は、Ｌ−β−（３，４−ジヒドロキシフェニル）アラニン（Ｌ−ＤＯＰＡ）を１０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．８）にて０．１（ｗ／ｖ）％となるように溶解し、調製した。９６ウェルプレートに１〜５μｇ／８０μＬに調製した粗チロシナーゼタンパク溶液を８０μＬずつ添加し、そこにＤＭＳＯにて１０μＭ、１００μＭ、１０００μＭとした化合物（１）の溶液を各々３ウェルに２０μＬずつ添加した。また、ポジティブコントロールとして、チロシナーゼ活性阻害剤として知られるフェニルチオウレアを同様にＤＭＳＯにて１０μＭ、１００μＭ、１０００μＭ溶液とし、各々３ウェルに２０μＬずつ添加した。また、コントロールとしてＤＭＳＯを各３ウェルに２０μＬずつ添加した。各被験溶液の入ったウェルに０．１％ドーパ溶液を１００μＬずつ添加し、直ちにプレートリーダーにて４５０ｎｍの吸光度を測定し、これを０分値とした。９６ウェルプレートは、そのままプレートリーダー中で３７℃にて１０分間インキュベートした後、再度４５０ｎｍ吸光度を測定し、これを１０分値とした。各ウェルにおける１０分値から０分値を差し引いた値を０→１０分吸光度変化値とし、コントロールの０→１０分吸光度変化値平均を１００％として各濃度の被験物質にて処理した際のドーパ酸化活性を測定した。結果を表５に示す。【００６８】
【表５】
0005140575.tif 000011
【００６９】
化合物（１）を添加した場合は、添加濃度の高低に関わらず、コントロールと同等のドーパ酸化活性を示した。すなわち、化合物（１）は、正常ヒトメラノサイトから抽出したチロシナーゼ活性を阻害しないことが明らかとなった。なお、１００μＭの添加濃度は、試験例１で示された培養細胞系でメラニン生成を８０％以上抑制した濃度の２５倍である。一方、フェニルチオウレアは、添加濃度を高くすればするほど、ドーパ酸化活性が低下したことから、チロシナーゼ活性を阻害する作用があることが判った。このことから、化合物（１）は、通常のメラニン生成抑制剤とは異なり、チロシナーゼに対する直接阻害とは全く別のメカニズムでメラニン生成を阻害していることが判る。このようなメカニズムとしては、チロシナーゼ及びＴｒｐ−１、Ｔｒｐ−２等のチロシナーゼ関連蛋白質の発現の阻害、細胞内での代謝生成物等による間接的なチロシナーゼ活性の阻害、生成されたメラニンの輸送の阻害などが考えられる。【００７０】
＜試験例５＞  チロシナーゼ及びチロシナーゼ関連蛋白（Ｔｒｐ−１、Ｔｒｐ−２）の発現測定
ヒト正常メラノサイト（倉敷紡績株式会社）の細胞懸濁液を７×１０4個／ｍＬメラノサイト培養用培地（Medium 254、倉敷紡績株式会社）となるように調製し、これをφ１０ｃｍ培養シャーレに１０ｍＬ播種し、ＣＯ2インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ2）にて培養した。翌日、培地を除去し、そこに２μＭ又は５μＭの化合物（１）を含有させたメラノサイト培養用培地、またはメラノサイト培養用培地（コントロール）を１０ｍＬずつ添加した後、ＣＯ2インキュベーターにて７２時間培養した。７２時間培養後、培地を除去し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）にて洗浄した後、セルスクレーパーにて細胞を回収した。この細胞ペレットにタンパク抽出液（０．１％ＮＰ−４０、０．０１％ＳＤＳ、１０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．８）、protease inhibitor）を添加し、細胞を懸濁した後、４℃にて１時間振とうした。これを４℃にて１５，０００rpm、１０分間遠心分離し、上清を回収してこれを粗タンパク抽出液とした。
粗タンパク抽出液５μｇを常法に従いＳＤＳ−ポリアクリルアミド電気泳動し、泳動タンパクをＰＶＤＦフィルターに転写した後、このフィルターを３％スキムミルク含有ＴＰＢＳ（０．１％（ｗ/ｖ）ｔｗｅｅｎ−２０含有ＰＢＳ）に１時間（室温）浸漬した。フィルターをＴＰＢＳにて洗浄後、チロシナーゼまたはチロシナーゼ関連タンパクを認識する１次抗体含有ＴＰＢＳにて１時間（室温）反応させた。使用抗体および希釈率は以下の通りである。
チロシナーゼ；抗チロシナーゼ（Ｈ−１０９）ポリクローナル抗体（ウサギ）、
（サンタクルズ社製、ＳＣ−１５３４１）、１／４００希釈
Ｔｒｐ−１；抗Ｔｒｐ−１（Ｈ−９０）ポリクローナル抗体（ウサギ）、
（サンタクルズ社製、ＳＣ−２５５４３）、１／４００希釈
Ｔｒｐ−２；抗Ｔｒｐ−２（Ｄ−１８）ポリクローナル抗体（ヤギ）、
（サンタクルズ社製、ＳＣ−１０４５１）、１／２５０【００７１】
フィルターをＴＰＢＳにて洗浄後、２次抗体含有ＴＰＢＳにて１時間（室温）反応させた。使用抗体および希釈率は以下の通りである。
チロシナーゼ及びＴｒｐ−１；ECL Anti-rabbit IgG, Horseradish peroxidase-linked species-specific whole antibody（ロバ）、アマシャムバイオサイエンス社製、ＮＡ９３４）、１／１５，０００希釈
Ｔｒｐ−２；Anti- goat IgG, Horseradish peroxidase-conjugated antibody（ロバ）、（サンタクルズ社製、ＳＣ−２０３３）、１／７，５００希釈
フィルターをＴＰＢＳにて洗浄後、ECL Plus western blotting detection systemを用いて各タンパクを検出した。検出には冷却ＣＣＤカメラ搭載化学発行検出装置（ＡＴＴＯ社製）を用いた。結果を図１に示す。【００７２】
化合物（１）は、＜試験例１＞でメラニン生成抑制効果が確認された濃度以上である５μＭにおいてもチロシナーゼ及びチロシナーゼ関連タンパク（Ｔｒｐ−１、Ｔｒｐ−２）の発現量に影響を与えなかった。これにより、メラニン生成抑制作用が新規メカニズムによるものであることが更に裏付けられた。
【産業上の利用の可能性】
【００７３】
本発明により、シミ・ソバカスなどの皮膚色素沈着症の予防、改善に対して優れた効果を発揮する美白用の化粧料が提供される。また、本発明の化粧料は、安全に使用することができる。
本発明は、美白用の化粧料又は美白用の医薬部外品に応用できる。
【図１】
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