(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）クラドリビンとアモルファスシクロデキストリンであるヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとのアモルファス包接化合物と、（ｂ）非包接化合物として前記アモルファスシクロデキストリンと結合したアモルファス遊離クラドリビンと、からなる密接アモルファス混合物である複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体を含み、検出可能な量の遊離結晶性クラドリビンを含まない、固形経口剤形に製剤化された医薬組成物であり、該組成物中のクラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１０〜１：１６である、前記医薬組成物。
【請求項２】
クラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１４である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
クラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１１である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
クラドリビンの３０〜４０重量％が包接化合物（ａ）の形態にあり、クラドリビンの７０〜６０重量％が非包接化合物（ｂ）の形態にある、請求項１〜３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５】
クラドリビン応答性症状の治療に投与される固形経口剤形の医薬組成物を製造するための、（ａ）クラドリビンとアモルファスシクロデキストリンであるヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとのアモルファス包接化合物と、（ｂ）非包接化合物として前記アモルファスシクロデキストリンと結合したアモルファス遊離クラドリビンと、からなる密接アモルファス混合物である複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体の使用であり、ここでクラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１０〜１：１６であり、前記組成物が検出可能な量の遊離結晶性クラドリビンを含まない、前記使用。
【請求項６】
クラドリビン応答性症状が、多発性硬化症、関節リウマチ及び白血病からなる群から選択される、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
クラドリビン応答性症状が多発性硬化症である、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
クラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１４である、請求項５に記載の使用。
【請求項９】
クラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１１である、請求項５に記載の使用。
【請求項１０】
クラドリビンの３０〜４０重量％が包接化合物（ａ）の形態にあり、クラドリビンの７０〜６０重量％が非包接化合物（ｂ）の形態にある、請求項５〜９のいずれかに記載の使用。
【請求項１１】
クラドリビンの経口バイオアベイラビリティーを高める固形経口剤形の医薬組成物を製造するための、（ａ）クラドリビンとアモルファスシクロデキストリンであるヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとのアモルファス包接化合物と、（ｂ）非包接化合物としてアモルファスシクロデキストリンと結合したアモルファス遊離クラドリビンと、からなる密接アモルファス混合物である複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体の使用であり、ここでクラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１０〜１：１６であり、前記組成物が検出可能な量の遊離結晶性クラドリビンを含まない、前記使用。
【請求項１２】
クラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１４である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
クラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１１である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１４】
クラドリビンの３０〜４０重量％が包接化合物（ａ）の形態にあり、クラドリビンの７０〜６０重量％が非包接化合物（ｂ）の形態にある、請求項１１〜１３のいずれかに記載の使用。
【請求項１５】
（ａ）クラドリビンとアモルファスシクロデキストリンであるヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとのアモルファス包接化合物と、（ｂ）非包接化合物として前記アモルファスシクロデキストリンと結合したアモルファス遊離クラドリビンと、からなる密接アモルファス混合物である複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体であり、ここでクラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１０〜１：１６であり、検出可能な量の遊離結晶性クラドリビンを含まない、前記複合体。
【請求項１６】
クラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１４である、請求項１５に記載の複合体。
【請求項１７】
クラドリビン対ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの重量比が１：１１である、請求項１５に記載の複合体。
【請求項１８】
クラドリビンの３０〜４０重量％が包接化合物（ａ）の形態にあり、クラドリビンの７０〜６０重量％が非包接化合物（ｂ）の形態にある、請求項１５〜１７のいずれかに記載の複合体。
【請求項１９】
請求項１５記載の複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体の製造方法であって、
（ｉ）クラドリビンとアモルファスシクロデキストリンであるヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとを水中で４０〜８０℃の温度で合わせ、６〜２４時間その温度を維持し、
（ｉｉ）得られた水性溶液を室温に冷却し、
（ｉｉｉ）冷却した溶液を凍結乾燥させてアモルファス生成物を得る
各工程を含む前記複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体の製造方法。
【請求項２０】
工程（ｉｉ）に続いて濾過工程をさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
工程（ｉ）を４５〜６０℃の温度で行う、請求項１９又は２０に記載の方法。
【請求項２２】
工程（ｉ）を４５〜５０℃の温度で行う、請求項１９〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
工程（ｉ）を攪拌下で行う、請求項２１又は２２に記載の方法。
【請求項２４】
工程（ｉ）を６〜９時間の期間行う、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
工程（ｉｉ）を６〜９時間の期間行う請求項１９〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
工程（ｉｉｉ）が、溶液を−４０〜−８０℃に冷却し、この温度を２〜４時間の期間維持する、最初の凍結段階を含む、請求項１９〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
工程（ｉｉｉ）の最初の凍結段階において、溶液を−４５℃に冷却する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
工程（ｉ）で１２. ００重量部のクラドリビンと１７２. ５０重量部のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとを導入する請求項１９〜２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
工程（ｉ）で１６. ３５重量部のクラドリビンと１７２. ５０重量部のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとを導入する請求項１９〜２７のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
工程（ｉ）で８２５重量部の水を導入する、請求項２８又は２９に記載の方法。
【請求項３１】
凍結乾燥工程（ｉｉｉ）が、
（ａ）複合化溶液を２〜４時間−４０℃〜−８０℃にする最初の凍結段階、
（ｂ）−２５℃で８０〜９０時間の第１乾燥段階、及び
（ｃ）３０℃で１５〜２０時間の第２乾燥段階
を含む、請求項１９〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
凍結乾燥の（ａ）段階を−４５℃で３〜４時間行う、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
凍結乾燥の（ｂ）段階を１００ｍＴｏｒｒの圧力下で行う、請求項３１又は３２に記載の方法。
【請求項３４】
（ｉ）クラドリビンとアモルファスシクロデキストリンであるヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとを水中で４０〜８０℃の温度で合わせ、６〜２４時間その温度を維持し、
（ｉｉ）得られた水性溶液を室温に冷却し、
（ｉｉｉ）冷却した溶液を凍結乾燥させてアモルファス生成物を得、そして
( ｉｖ) アモルファス生成物を固形経口剤形に製剤化する
各工程を含む方法により得ることのできる、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３５】
工程（ｉ）又は（ｉｉ）に続いて濾過工程をさらに含む、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記方法の工程（ｉ）を４５〜６０℃の温度で行う、請求項３４又は３５に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記方法の工程（ｉ）を４５〜５０℃の温度で行う、請求項３４〜３６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項３８】
前記方法の工程（ｉ）を攪拌下で行う、請求項３６又は３７に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記方法の工程（ｉ）を６〜９時間の期間行う、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記方法の工程（ｉｉ）を６〜９時間の期間行う、請求項３４〜３７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項４１】
工程（ｉｉｉ）が、溶液を−４０〜−８０℃に冷却し、この温度を２〜４時間の期間維持する、最初の凍結段階を含む、請求項３４〜４０のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項４２】
工程（ｉｉｉ）の最初の凍結段階において、溶液を−４５℃に冷却する、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記方法の工程（ｉ）で１２. ００重量部のクラドリビンと１７２. ５０重量部のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとを導入する、請求項３４〜４２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記方法の工程（ｉ）で１６. ３５重量部のクラドリビンと１７２. ５０重量部のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとを導入する、請求項３４〜４２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記方法の工程（ｉ）で８２５重量部の水を導入する、請求項４３又は４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記方法の工程（ｉｉｉ）が、
（ａ）複合化溶液を２〜４時間−４０℃〜−８０℃にする最初の凍結段階、
（ｂ）−２５℃で８０〜９０時間の第１乾燥段階、及び
（ｃ）３０℃で１５〜２０時間の第２乾燥段階
を含む請求項３４〜４５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項４７】
凍結乾燥の（ａ）段階を−４５℃で３〜４時間行う、請求項４６に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
凍結乾燥の（ｂ）段階を１００ｍＴｏｒｒの圧力下で行う、請求項４６又は４７に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記方法の製剤化段階（ｉｖ）が複合体とステアリン酸マグネシウムとをブレンドし、錠剤に打錠する、請求項３４〜４８のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５０】
ステアリン酸マグネシウムをソルビトール粉末とプレミックスしてから複合体とブレンドする、請求項４９に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、固形経口剤形に製剤化された複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体を含む組成物、及びクラドリビンの経口バイオアベイラビリティーを高めるための方法に関する。
【０００２】
発明の背景
クラドリビンは、酸に不安定な薬物であるが、下記：
【０００３】
【化１】
0005256611.tif 000002
【０００４】
の化学構造を有する。
クラドリビンは、２−クロロ−２‘−デオキシアデノシン又は２−ＣｄＡとしても知られている。クラドリビンは、白色、非含水結晶性粉末として存在し、個々の結晶及び結晶凝集体から構成されている。
【０００５】
クラドリビンは、リンパ増殖症候群に治療用途のある代謝拮抗剤である。クラドリビンは、Ｌ１２１０のような実験的白血病の処置や、ヘアリーセル白血病及びリンパ性白血病並びにヴァルデンストレームマクログロブリン血症のために臨床的に治療するために使用されてきた。クラドリビンは、免疫抑制剤として、そして関節リュウマチ、炎症性大腸炎（例えば、クーロン症、潰瘍性大腸炎）及び多発性硬化症を含む種々の自己免疫症状の治療のためのモダリティーとしても使用されてきた(例えば、J. Liliemark, Clin. Pharmacokinet, 32 (2): 120-131, 1997を参照)。クラドリビンは、例えば、リンパ腫、ランゲルハンス細胞組織球、紅斑性狼瘡、慢性斑状乾癬、セザリー症候群、ビング−ニール症候群、再発神経膠腫、及び固形腫瘍における実験的又は臨床的のいずれかでも研究されてきた。
【０００６】
薬物の非経口デリバリーに対して、経口デリバリーは、種々の理由のために、しばしば、好適である。まず第一に、患者の薬剤服用遵守であり、あるいは経費のため又は療法考慮のためである。患者の薬剤服用遵守は、経口剤形が何回ものヘルスケア提供者の訪問、又は活性薬物に関連する注射もしくは時間のかかる点滴の不快さを軽減する。ヘルスケアに対する経費の上昇時、非経口投与経費に対する経口投与に関連する減少した経費は重要性が増す。非経口投与の経費は、ヘルスケア提供者状況においてヘルスケア専門家が投与する必要があるために一層高く、それはこのような投与に関連するすべての参加者の経費も含む。さらに、一定の場合には、持続した時間に亘ってクラドリビンをゆっくりと放出させる必要性のような療法の考慮を、経口又は経粘膜デリバリーによってのみ実際的に合致することがある。
【０００７】
しかし、今日まで、クラドリビンの経口デリバリーが、低いバイオアベイラビリティー (例えば、J. Liliemark 等, J. Clin. Oncol., 10 (10) : 1514-1518,1992を参照)、及び次善患者間差異(suboptimal interpatient variation) (例えば、J. Liliemark, Clin. Pharmacokinet, 32 (2): 120-131,1997を参照)により悩まされてきた。A. Tarasuik 等、 reporting poor absorption and pH dependent lability (Arch. Immunol. et Therapie Exper. , 42: 13-15,1994)も参照。
【０００８】
シクロデキストリン類は、サイクリックα−（１→４）結合Ｄ−グルコピラノース単位から構成されるサイクリックオリゴサッカライドである。６〜８単位をもつシクロデキストリンは、それぞれ、α−、β−及びγ−シクロデキストリンと命名されている。単位の数は、円錐型キャビティーのサイズを決定し、シクロデキストリンと薬物がその中に含まれ安定な複合体の形成とを特徴付ける。α−、β−及びγ−シクロデキストリンの多くの誘導体が知られており、１個以上のヒドロキシル基がエーテル基又はその他のラジカルのいずれかと置換される。したがって、これらの化合物は公知の複合化剤であり、以前から薬学分野で使用され、水不溶性薬物と包接化合物を形成し、こうしてこれらの薬物を水性媒体に可溶化させる。
【０００９】
最近、Schultz等は、米国特許第６，１９４，３９５号(B1)に、クラドリビンをシクロデキストリンと複合化させ、可溶化させたことを記載する。このSchultz等の特許は、特に皮下及び筋肉内注射のための、以前から記載されていたクラドリビンの水性製剤の固有の問題に主に向けられている。Schultz等は、クラドリビンが、シクロデキストリンと製剤化されるとき水性媒体中で顕著により溶けやすくなるばかりでなく、シクロデキストリンと合わせると、酸触媒加水分解に対してより安定になることを見出した。この後の方の知見は、固形経口剤形の製剤に特定の利点を有することを教示し、ここで、この化合物は胃内容物の酸性ｐＨで通常加水分解を受ける。Schultz等は、固形経口剤形と関連する実際的な作用について何も記載していない。事実、彼等は、溶融押出プロセスである、固形剤形の一方法を記載するのみであり、ここでは、クラドリビンとシクロデキストリンとが、その他の任意の添加剤と混合され、次いで、溶融が起こるまで加熱される。さらに、当該特許に列挙される１ｍｇ〜１５ｍｇのクラドリビン及び１００ｍｇ〜５００ｍｇのシクロデキストリンの広範囲の投与量が、固形経口剤形中の一定量のクラドリビンと存在されるべき特定量のシクロデキストリンに対して重要でなく示唆する。事実、これらの投与範囲は、混合物として適切であり得るが複合形成体に対しては適切でない多くの組合せを含む。例えば、１ｍｇのクラドリビン対５００ｍｇのシクロデキストリンの比はシクロデキストリンを多く含み過ぎ、その結果、薬物は複合体を容易に去ることはなく、その療法作用を達成しないだろう。他方、１５ｍｇのクラドリビン及び１００ｍｇのみのシクロデキストリンは、その量のクラドリビンを複合体を形成するのに充分でない。
【００１０】
Schultz等の特許は、クラドリビンとシクロデキストリンとを合わせ／複合化することによる経口剤形中のクラドリビンの安定性を改良することを示唆するが、そのような手段による薬物の経口バイオアベイラビリティーを改良することを示唆していない。事実、この特許は、クラドリビンとシクロデキストリンとの固形経口剤形からのクラドリビンのバイオアベイラビリティーを高めるか最大限にする方法、又は、そうするように具体的に設計した組成物を記載も示唆もしていない。
【００１１】
多くの研究者達が、種々の濃度の選択したシクロデキストリンを含む水中の特定の薬物の溶解性を、例えば、Schults等の特許で報告されているように、シクロデキストリンの濃度を上げることにより選択した温度とｐＨレベルでの薬物の溶解性を向上させることを証明するために検討をした。複合体形成の特質を解明するため（例えば、シクロデキストリン及び薬物が１：１複合体又は１：２複合体を形成するかどうか、例えば、シクロデキストリンとランカシディン群抗体との包接化合物に関する、ハラダ等の米国特許第4,497,803号、及びシクロデキストリンと(2'-ベンジルオキシカルボニル)フェニルトランス-4-グアニジノメチルシクロヘキサンカルボキシレートの酸付加塩との複合体に関する、シノダ等の米国特許第4,478,995号を参照）に種々の研究者により相溶解度研究も行われてきた。
【００１２】
Schultz等は、クラドリビン−シクロデキストリン複合体がクラドリビンの水溶解性及び酸安定性を改良することを教示するが、当業界は、複合体が固形経口剤形で投与されるときバイオアベイラビリティー及び患者間変動に関して複合化の利点をいかに最大化し又は高めるかを示唆していない。
【００１３】
発明の概要
アモルファスシクロデキストリンをクラドリビンと合わせて、固形経口剤形に配合できる特に利点のある生成物を形成できることが、今、見出された。この生成物は複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体(complex cladribine-cyclodextrin complex)であり、それを含有する固形経口剤形はその薬物の経口バイオアベイラビリティーを改良し及び／又はより低い患者間及び／又は患者内変動を達成する。
【００１４】
本発明は、（ａ）クラドリビン及びアモルファスシクロデキストリンのアモルファス包接化合物と、（ｂ）非包接化合物としてアモルファスシクロデキストリンと結合したアモルファス遊離クラドリビンと、の密接アモルファス混合物である複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体、並びに固形経口剤形に製剤化された、前記複合体を含む医薬組成物を提供する。従って、シクロデキストリン自体はアモルファスであり、クラドリビンとの包接化合物はアモルファスであり（そして、好ましくはクラドリビンで飽和され）、非包接化合物を形成する遊離クラドリビンはアモルファスである。
【００１５】
本発明は、（ａ）クラドリビン及びアモルファスシクロデキストリンのアモルファス包接化合物と、（ｂ）非包接化合物としてアモルファスシクロデキストリンと結合したアモルファス遊離クラドリビンと、の密接アモルファス混合物である複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体を含み、固形経口剤形に製剤化された医薬組成物を投与の必要な対象に経口投与することを含む、クラドリビンの経口バイオアベイラビリティーを高める方法を提供する。
【００１６】
本発明は、さらに、本発明の組成物を哺乳類に投与することによる哺乳類のクラドリビン投与に対する応答性症状の治療方法を提供する。クラドリビン−応答性症状を治療しクラドリビンの経口バイオアベイラビリティーを高めるために投与するための本発明の医薬組成物の製造におけるクラドリビンの使用も提供される。
【００１７】
さらに、本発明は、
（ｉ）クラドリビンとシクロデキストリンとを水中で約４０〜約８０℃の温度で合わせ、約６〜約２４時間その温度を維持し、
（ｉｉ）得られた水性溶液を室温に冷却し、
（ｉｉｉ）冷却した溶液を凍結乾燥させてアモルファス生成物を得る
各工程を含む複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体の製造方法を提供する。
【００１８】
さらに別の態様では、本発明は、
（ｉ）クラドリビンとシクロデキストリンとを水中で約４０〜約８０℃の温度で合わせ、約６〜約２４時間その温度を維持し、
（ｉｉ）得られた水性溶液を室温に冷却し、
（ｉｉｉ）冷却した溶液を凍結乾燥させてアモルファス生成物を得、そして
(ｉｖ)アモルファス生成物を固形経口剤形に製剤化する
各工程を含む方法により得ることのできる医薬組成物を提供する。
【００１９】
図面の簡単な記述
下記の詳細な記述及び添付の図面を参照することにより、本発明のより完全な理解及びその多くの付随的な利点が容易に理解されよう。単一の図面は相溶解度研究の結果を表すグラフである。ここで、種々モル濃度のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰβＣＤ）が、種々のクラドリビンモル濃度に対してプロットされている。（●）は下記の実施例２で特定された条件下での複合体について得られたデーター点を表す。
【００２０】
発明の詳細な記述
本明細書及び請求の範囲を通して下記の定義と一般的記載が適用できる。
本明細書中で言及される特許、公開された出願、及び科学文献は当業者の知識を確立し、各々が具体的且つ個々に参照として含めると指摘したと同様に全体として参照として本明細書に含める。本明細書で引用した文献と本明細書の具体的教示との間に矛盾が生じた場合、本明細書の教示の利益となるように解決される。同様に、当業界で理解されている語句の定義と本明細書で具体的に教示した語句の定義とが矛盾した場合、本明細書の教示の利益となるように解決される。
【００２１】
本明細書で使用する「包接化合物」という用語は、クラドリビンと選択したシクロデキストリンとの複合体を意味し、クラドリビン分子の疎水性部分（窒素含有環系）がシクロデキストリン分子の疎水性キャビティー中に挿入されている。これはしばしば単に薬物のシクロデキストリン複合体と称される。
【００２２】
「非包接化合物」という用語は、包接化合物ではない複合体を意味し、クラドリビンの疎水性部分がシクロデキストリンキャビティー中に挿入されるのではなく、非包接化合物は、「遊離」クラドリビン（すなわち、包接化合物中のクラドリビンでない）上のヒドロキシルとアミノ基とのシクロデキストリントーラスの外部上のヒドロキシル（例えば、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの場合、グルコース環上のヒドロキシプロピル基及びヒドロキシル基）に対する主に水素結合により形成される。これは、包接化合物よりもよりゆるく結合を保っている。
【００２３】
請求項の移行句又は本体で使用されているような、「含む(comprise(s))」及び「含む(comprising)と言う用語は拡張可能な意味として解釈される。すなわち、これらの用語は、句「少なくとも有する(having at least)」又は「少なくとも含有する(including at least)」と同義的に解釈される。方法・プロセスに使用される場合、「含む(comprising)」という用語は、その方法が少なくとも記載した工程を含むが、追加の工程を含むことができる。組成物に使用される場合、「含む(comprising)」という用語は、その組成物が少なくとも記載した特徴物又は成分を含有するが、追加の特徴物又は成分も含有することができる。
【００２４】
「本質的に・・からなる(consists essentially)」又は「本質的に・・からなる(consisting essentially)」という用語は、部分的に閉鎖的な意味、すなわち、それらは方法又は組成物の本質的な特質を実質的に変化させる工程又は特徴物もしくは成分の包含を許さない。例えば、本明細書中で記載した組成物の所望の特性に有意な影響を与え得る工程又は特徴物もしくは成分の包含を許さない。すなわち、方法又は組成物は、特定の工程又は物質及び本発明の基本的もしくは新規な特質に実質的に影響しないものに制限される。本明細書中で基本的又は新規な特徴物は複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体であり、（ａ）クラドリビン及びアモルファスシクロデキストリンのアモルファス包接化合物と、（ｂ）非包接化合物としてアモルファスシクロデキストリンと関連付けられたアモルファス遊離クラドリビンと、の密接アモルファス混合物である。これが、固形経口剤形に製剤化され、改良したバイオアベイラビリティー及び／又はより低い患者間変動及び／又は患者内変動を与えるようになる。本発明の本質は出発シクロデキストリンのアモルファス特性、及びクラドリビンにより発揮される水溶解度のレベル（室温で約５ｍｇ／ｍｌ）、及びその結果として水素結合のその能力の組合せであり、以降に述べる特定の条件下でこの組合せを利用でき、クラドリビンの経口バイオアベイラビリティーを最適化するのに独特で良く適した特別のアモルファス混合物を与える。
【００２５】
「からなる(consist of)」及び「からなる(consist)」という用語は閉鎖的な用語で、記載した工程又は特徴物もしくは成分のみを含む。
本明細書中で使用される、「a」、「an」及び「the」は、その内容を明確に指示しない限り、それらが言及する用語の複数形も特に包含する。
【００２６】
本明細書中で「約(about)」という用語は、おおよそ(approximately)、くらいの(in the region of)、概略(roughly)、または大体(around)を意味するのに使用される。数値範囲に関して「約」という用語を使用するとき、記載した数値の上下の境界を延長することによりその範囲を修正する。本明細書では「約」又は「おおよそ」という用語は、記載した値の上下２０％まで変動の数値を修正するのに使用される。
【００２７】
本明細書で使用する「アモルファス」という用語は非結晶性固体を意味する。本明細書中でシクロデキストリン自身に包含されるシクロデキストリンは、それらが各々多くの個々の異性体から構成されるのでアモルファスであり、クラドリビンとのそれらの複合体もアモルファスである。さらに、複合化の条件を選択でき（以下に述べるように高温や延長させた複合化時間）、その結果、過飽和クラドリビン溶液が形成される。冷却すると、複合体とシクロデキストリンとのアモルファス特質のため、いくらか過剰の遊離クラドリビンが沈殿せず、むしろ（好ましくは飽和した）アモルファスクラドリビン−シクロデキストリン包接化合物と密接混合状態でアモルファス内にトラップされる。この過剰クラドリビンは、水素結合によりシクロデキストリンとゆるく保持した結合を形成、すなわち、非包接化合物を形成する。これは、次いで、生成物中のクラドリビンの量を増加させ、この追加のクラドリビンは、それがアモルファスであるため、そしてそれがアモルファス包接化合物との密接混合状態であるため、胃酸による分解からいくらか保護されることが期待される（包接化合物の形態であるクラドリビンと同程度の保護はされないが）。
【００２８】
「飽和」という用語は、アモルファスシクロデキストリン中のクラドリビンの複合体に関連して使用されるとき、複合体はクラドリビンで飽和されていることを意味する。すなわち、複合体は、使用される複合化の条件下で与えられた量のシクロデキストリンと（包接及び非包接化合物の双方により）複合化できる最大限の量のクラドリビンを含む。より詳細には以下に記載するように、相溶解度の検討を使用して、この情報を与えることができる。（複合化の条件も以下に詳細に記載する。）  あるいは、飽和複合体は、選択したシクロデキストリンの水溶液に、それ以上クラドリビンが溶液中に入らなくなるまでクラドリビンを単に加え、究極的には過剰のクラドリビン（もし存在するなら）を（濾過又は遠心分離により）除去し、溶液を凍結乾燥させて乾燥飽和複合体を得ることにより経験的に達成できる。
【００２９】
「実質的に含まない(substantially free)」におけるような、表現「実質的に(substantially)」は、正確な計算値の２０％以内、好ましくは１０％いない、最も好ましくは５％以内を意味する。
【００３０】
「患者間変動」という用語は薬物が投与される患者中の変動を指す。「患者内変動」という用語は、異なる時間に投与したときに、一人の患者により経験される変動を指す。
本明細書中で使用されるとき、変わりやすいものの数値範囲の記載は、発明がその範囲内の値のいずれかに等しい変動をもって実施され得ることを伝えることを意図する。したがって、本質的に離散している変わりやすいものについて、この変わりやすいものは、範囲の末端を含んで数値範囲の整数のいずれかに等しくあることができる。同様に、本質的に連続的である変わりやすいものについて、この変わりやすいものは、範囲の末端を含んで数値範囲の本当の値のいずれかに等しくあることができる。一例として、０と２との間値として記載される変わりやすいものは、本質的に離散している変わりやすいものについて０、１又は２であることができ、本質的に連続的である変わりやすいものについて０．１、０．０１、０．００１又は他の本当の値のいずれかであることができる。
【００３１】
明細書及び請求の範囲において、単数形は、特に明記しない限り、複数のものを含む。本明細書中で使用されるとき、特記しない限り、語「又は(or)」は、「包含的(inclusive)」である意味の「及び／又は(and/or)」並びに「排他的(exclusive)」でない意味の「二者択一(either/or)」に使用される。
【００３２】
本明細書中で使用される技術及び科学用語は、特に定義しない限り、本発明に関連する業界の熟達者により一般的に理解される意味を有する。本明細書中で当業者に知られている種々の方法や物質に言及する。薬学の一般的な原理を記載する標準的な参考著作物にはGoodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th Ed. , McGrawHill Companies Inc., New York (2001)等がある。
【００３３】
以下に本発明の特定の実施態様に詳細な言及がなされる。発明がこれらの特定の実施態様に関連させて記載するが、このような特定の実施態様に本発明を限定することを意図していないことが了解されよう。それどころか、請求の範囲により定義される通りの発明の精神及び範囲内に含まれ得る代替物、修正物、及び均等物を含むことを意図する。下記の記述で、多くの特定の詳細を本発明の完全な理解のために記載される。本発明はこれらの詳細の幾らか又はすべてなしで実施できる。その他の例では、周知の方法作用は詳細には記載しない、本発明を不必要に不明瞭にしないためである。
【００３４】
所望の薬物動態学特性を達成するのに有用な本発明の組成物、並びに医薬組成物の製造方法及び使用方法が提供される。クラドリビンが最も高い熱力学状態にある、シクロデキストリンとクラドリビンとの溶液が、当該溶液が吸収される胃粘膜に与えられるとき、改良したクラドリビン吸収と関連し、このような組成物がこれによりより高いバイオアベイラビリティー及び／又はより低い患者間変動を反映すると言う発見から生じる。
【００３５】
本発明をそのように限定することを望まないで、次のように仮定する。溶出時（例えば、体液のような流体と接触することにより）、本発明の乾燥組成物は局所的に飽和クラドリビン溶液を形成し、当該溶液中でクラドリビンは最も高い熱力学的活性(highest thermodynamic activity: HTA)の状態にあり、このようにして良好な吸収をもたらす。クラドリビンは、相当に低い、（しかし、そんなに重要ではないが）固有の水可溶性を示す。それは、事実、いくらか水溶性である。飽和水溶液中の包接及び非包接化合物の解離から形成される遊離クラドリビンは胃粘膜により吸収されることによりより安定な活性レベルを求める。
【００３６】
前述の観点から、最適な医薬組成物を製造するために、固形経口剤形において、これらの剤形が、粘膜において体液と固形剤形とが接触するときに局所的に飽和されたクラドリビン溶液（クラドリビンはそのＨＴＡ状態にある）を放出するように製剤化すべきであることが明白である。インビボでこのような局所的に飽和された溶液を与えるために、クラドリビン対アモルファスシクロデキストリンの最適比率をまず確認することが重要であり、本明細書ではこの比率をＨＴＡ比率と称するが、固形剤形に使用されるべきである。
【００３７】
ＨＴＡ比率は経験的に決定され、一定量のアモルファスシクロデキストリンと複合化できるクラドリビンの可及的に多い量に相当する、アモルファスシクロデキストリンに対するクラドリビンの比率として確認される。ＨＴＡ比率は、異なる濃度のアモルファスシクロデキストリン溶液を用いて溶解され得るクラドリビンの飽和濃度を決定する相溶解度検討のような経験的方法を使用して決定できる。それ故、この方法は、飽和クラドリビン−シクロデキストリン複合体が形成される濃度を確定する。相溶解度グラフ上のある点により表されるモル比が、どれくらい多くのモルのアモルファスシクロデキストリンが、与えられた条件で、複合体中の薬物を維持するのに必要な最小量かを示し、これを次いで重量比に換算できることに注意すべきである。例えば、相溶解度ダイアグラムが与えられたシクロデキストリンの９モルが飽和複合体中のクラドリビンを維持するのに必要であることを示す場合、クラドリビンのモル数にその分子量をかけ、選択したシクロデキストリンのモル数にその分子量をかけ、適切な最適化された重量比として生成物の比率に到達できる。相溶解度は、さらに、形成されたクラドリビン−シクロデキストリン包接化合物の特質についての情報も与える。例えば、包接化合物が１：１複合体（１分子のシクロデキストリンと複合化される１分子の薬物）又は１：２複合体（２分子のシクロデキストリンと複合化される１分子の薬物）である。
【００３８】
本発明では、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰβＣＤ）もしくはヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリンのような選択したアモルファスシクロデキストリン、又はクラドリビンのいずれかを、他の過剰量を加えて種々の溶解性データ点（種々の飽和クラドリビン−シクロデキストリン複合体を示す）を確定し、得られた線を引く固定変動値として使用することにより開始できる。典型的には、クラドリビンを、複合体形成を促進すると経験的に見出されている条件下で既知濃度のアモルファスシクロデキストリンを含有する水溶液に加える。通例、例えば、約４５℃〜約６０℃で有意な期間、例えば、少なくとも６〜９時間加熱して複合化を行う。さらに良好な結果が約８０℃までの温度で２４時間までの期間加熱することにより得られると思われる。次いで、過剰の析出したクラドリビンを除去し、クラドリビン濃度を続いて測定する。この濃度は与えられた濃度のアモルファスシクロデキストリンに対して可溶化されたクラドリビンの量を表す。数データ点が得られるまで、このプロセスを異なる既知の濃度のシクロデキストリンについて繰り返す。各データ点は、既知の濃度の選択したアモルファスシクロデキストリンに溶解するクラドリビンの飽和濃度を表す。次いで、これらのデータ点をプロットし、使用した種々のシクロデキストリン濃度に対するクラドリビンの濃度を示す。このグラフは、与えられた一連の複合化条件下の溶液を形成するのに使用されたシクロデキストリンの特定の濃度に対するクラドリビンの量を決定するのに使用できる相溶解度ダイアグラムである。クラドリビンの水性溶解度は室温で約５ｍｇ／ｍｌであり、上昇させた温度でより高いと思われることが了解される。結果として、データー点は、選択した条件下で水性ＨＰβＣＤ又はその他のアモルファスシクロデキストリン中に溶解するクラドリビンの量に相当する。後に凍結乾燥されると、溶液は、（ａ）クラドリビン及びアモルファスシクロデキストリンのアモルファス包接化合物と、（ｂ）非包接化合物としてアモルファスシクロデキストリンと結合したアモルファス遊離クラドリビンと、の密接アモルファス混合物である複合体クラドリビン−シクロデキストリンをもたらす。複合化の間に平衡条件に達すると、アモルファスクラドリビン−シクロデキストリン複合体はクラドリビンで飽和され得る。
【００３９】
当業者は、クラドリビンとアモルファスシクロデキストリンとの飽和複合体が形成される濃度（そしてかくて同様にＨＴＡ比率）が種々の代わりの方法により確定できることを了解するであろう。したがって、これらの濃度を確定するのに適切な当分野で公知のいずれの方法も本発明の範囲内である。
【００４０】
所望の薬学的特性（改良したバイオアベイラビリティー及び／又は伝統的なアプローチと比較した変動計数）が、クラドリビン及びシクロデキストリンの包接化合物と非包接化合物との混合物と関連することが見出された。
【００４１】
本質的にアモルファスなシクロデキストリン、例えば、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、ランダムにメチル化されたシクロデキストリン等と、いくらか水に溶ける化合物であるクラドリビン（その遊離ヒドロキシルとアミノ基を介して水素結合できる）とを使用して、クラドリビンはこれらのシクロデキストリンの溶液中で改良した溶解性を与える。改良した水溶解性ばかりでなく、実際の包接複合化物質から離れて、シクロデキストリンとクラドリビンとの水素結合関係もある。
【００４２】
当業者は、各与えられた出発濃度比についての相溶解度ダイアグラムが、変動（反応物の濃度、温度及び時間）が最終生成物中のより高い又はより低い割合のいずれかのタイプの関係を良好にする包接化合物と非包接化合物との関係を促進することを変更し得ることを基準に当業者の研究の出発点を表すと了解するであろう。クラドリビン対シクロデキストリンの比率から出発して、複合体形成に向けて平衡を促進すると経験的に見出されている温度及び／又は希釈が、次いで、本発明に従う種々の割合のクラドリビンとシクロデキストリンとの包接化合物及び非包接化合物の混合物の形成を促進すると分析される。
【００４３】
従って、例えば、より希釈したシクロデキストリンを（すなわち、溶解性プロット分析に使用される容量よりもより多い水容量）用いて出発することにより、論理的により多くのクラドリビンを複合体形成からクラドリビンのより多くを封鎖する溶液中に収容し得る。蒸発時、溶解したクラドリビンのいくらかが、非包接化合物の仕方でシクロデキストリンと結合する傾向にある。最初の希釈を変更させることにより、包接化合物又は非包接化合物形成の方向に向けて平衡にシフトし得る。同様に、複合化温度を上昇させることにより、クラドリビンの水溶解性を増し、一方で包接化合物の安定性を減少させ、従って、非包接化合物を促進させる。こうして、複合化温度を変更させることにより、包接化合物又は非包接化合物形成の方向に向けて平衡にシフトし得る。最終的に、複合化温度を変更させて、本発明のクラドリビンとシクロデキストリンとの包接化合物及び非包接化合物の混合物の形成を良好にできる。
【００４４】
以降に例示するように、追加のクラドリビンを溶液中に入れることにより（上述したように、シクロデキストリンの希釈溶液をより高い温度及びより長い複合化時間を使用して）、固体アモルファス混合物中のクラドリビンを可及的に多くすることができる。溶液が冷却されると、これらのシクロデキストリンの大きいアモルファス特質が、シクロデキストリンとの包接複合化を形成する量を超えるクラドリビンの過剰量の結晶かをできなくする。凍結乾燥時クラドリビン−シクロデキストリン包接化合物（これはアモルファス）と複合化されていないシクロデキストリン（及び複合化されたシクロデキストリンも）と水素結合によりゆるく結合したアモルファス遊離クラドリビン（すなわち、非包接化合物）とのアモルファス混合物を得る。
【００４５】
実施例に示すように、これは、凍結乾燥前に、温度を高めること（例えば、約５０℃〜８０℃）及び長い時間（２４時間まで）にわたって攪拌することにより、可溶化を最大限にすることによりなされ得る。得られる重量／重量比は、約１：１４及び１：１１であった。これらの例示した条件下で見かけ上の最適重量／重量比はこれらのうちより高い方、すなわち約１：１４のクラドリビン：シクロデキストリンである。複合化媒体に大過剰のクラドリビンを加えると、クラドリビンのうちの幾らかの結晶化が起こり、生成物中に幾らかの結晶性クラドリビンをもたらし、この望ましくない過剰のクラドリビンは溶液状でなく、アモルファスシクロデキストリンに水素結合せず、重量比を低くする。したがって、包接化合物を形成してわずか溶液中に溶解し得る量のみにする量を超える過剰のクラドリビンの量を注意深くコントロールすることが望ましい。アモルファス包接化合物及びアモルファス遊離クラドリビンの所望のアモルファス混合物を「複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体」と称することができ、これは包接化合物及び非包接／水素結合化合物の双方を含む。包接化合物は選択したアモルファスシクロデキストリンの疎水性キャビティー中に挿入されたクラドリビン−シクロデキストリンの複合体であり、一方、非包接／水素結合複合体はシクロデキストリンにアモルファス遊離クラドリビンがゆるく水素結合した複合体である。生成物が以下に例示する通りに得られるとき（１７％ＨＰβＣＤ溶液、４５〜５０℃複合化温度で約９時間）、約３分の２（６０〜７０％）のクラドリビンが非包接化合物中に存在し、残りの３分の１（３０〜４０％）が包接化合物中に存在すると見積もられる。使用するシクロデキストリンのパーセンテージを増加させることにより、及び／又は温度をうまく管理することにより、より高割合のアモルファス混合物が包接化合物の形態である生成物を容易に得ることができる。代表的なアモルファスシクロデキストリン（ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰβＣＤ））の場合には、例示した条件について、約１：１０〜約１：１６のクラドリビン：シクロデキストリン重量比が適切である。この比率は、同一条件下で、ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリンについて同一であると予期される。得られる物質は水性媒体中のクラドリビンの急速な溶解により特徴づけられる。
【００４６】
凍結乾燥（lyopholization  としても知られている）は、基本的な３段階から構成される。すなわち、最初の凍結段階、次いで一次乾燥段階そして最後に二次乾燥段階である。下記の実施例２は、そこに記載されているバッチで行った凍結乾燥の詳細を与える。この手順は、Xiaolin (Charlie) Tang及びMichael J. PikalによるPharmaceutical Research, Vol. 21, No. 2, February 2004,191-200（全体を参照として本明細書に含める）により記載された原理に従うことによりさらに最適化できる。
【００４７】
上述の方法は、例えば、α−、β−又はγ−シクロデキストリン、２，６−ジメチル−β−シクロデキストリン等のような相対的に低い水溶解性の元来結晶性のシクロデキストリンよりもむしろアモルファスシクロデキストリンを要求する。これらの水溶解性の低いシクロデキストリンは、包接化合物を形成する量を超えるクラドリビンの結晶をもたらし、それ故、所望のアモルファス混合物を与えないからである。さらに、クラドリビンが高い疎水性／親油性であったとき、上述の方法は有用でない。このような状況では、薬物は本来水溶性／水素結合能力を有さず、本発明で得られる独特の混合物を与えることができないからである。しかし、事実上は、クラドリビンは室温で５ｍｇ／ｍｌの水溶解性を示し、したがって、有意量の薬物は室温よりも高い温度で特に水相中で溶けうる。さらに、例えば、ＨＰβＣＤの場合、クラドリビンの幾らかは、クラドリビンのジオキシアデノシン部分に見出される２個のヒドロキシ官能基を介してシクロデキストリン中の２−ヒドロキシプロピル及び遊離グルコース−ＯＨに水素結合することにより結合され得る。
【００４８】
本発明の範囲内のシクロデキストリンは、天然シクロデキストリンα−、β−若しくはγ−シクロデキストリンのアモルファス誘導体であり、１種以上のヒドロキシ基が、例えば、アルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、アルキルカルボニル、カルボキシアルコキシアルキル、アルキルカルボニルオキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル又はヒドロキシ−(モノもしくはポリアルコキシ)アルキル基により置換され、しかも各アルキルもしくはアルキレン部分が好ましくは６個までの炭素原子を含有する。単に実体として慣用的に称されるが、アモルファスシクロデキストリンは実際は多くの異なる実体の混合物である。置換基が基本シクロデキストリン構造の種々のヒドロキシル上に配置できるからである。これは、順に、これらのシクロデキストリンのアモルファス特質をもたらす。さらに、これらのシクロデキストリンは、例えば、１〜１４，好ましくは、４〜７の置換度を変動させて得ることができ、置換度は、シクロデキストリン分子上のおおよその平均置換基数、例えば、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン分子の場合に、おおよそヒドロキシプロピル基の数であり、すべてのこのような変動は本発明の範囲内である。本発明で使用できる置換アモルファスシクロデキストリンには、例えば、米国特許第３，４５９，７３１号に記載されているようなポリエーテル等がある。置換シクロデキストリンの別の例にはエーテル等があり、１種以上のシクロデキストリンヒドロキシ基の水素が、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ−Ｃ１−６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−６アルキルもしくはＣ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル基又はその混合エーテルにより置換される。特に、このような置換シクロデキストリンはエーテル類であり、１種以上のシクロデキストリンヒドロキシ基の水素がＣ１−３アルキル、ヒドロキシ−Ｃ２−４アルキルもしくはカルボキシ−Ｃ１−２アルキルにより、またはより特定的にはメチル、エチル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ヒドロキシブチル、カルボキシメチルもしくはカルボキシエチルにより置換される。「Ｃ１−６アルキル」という用語は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖及び分枝鎖飽和炭化水素基、例えば、メチル、エチル、１-メチルエチル、１，１−ジメチルエチル、プロピル、２−メチルプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル等を含むことを意味する。ここで意図されるその他のシクロデキストリンにはグルコシル−β−シクロデキストリン及びマルトシル−β−シクロデキストリン等がある。本発明で特に実用性のあるものは、ランダムにメチル化されたβ−シクロデキストリン、及びヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリンのようなポリエーテル類、並びにスルホブチルエーテル類、特にβ−シクロデキストリンスルホブチルエーテル等である。単純シクロデキストリンに加え、分枝したシクロデキストリン類やシクロデキストリンポリマー類も使用できる。その他のシクロデキストリン類は、例えば、Chemical and Pharmaceutical Bulletin 28: 1552-1558 (1980); YakugyoJiho No. 6452 (28 March 1983); Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 19: 344-362 (1980); U. S. Patent. Nos. 3,459, 731 及び4,535, 152;欧州特許第 EP 0 149 197A 及びEP 0 197 571A; PCT 国際特許公開No. W090/12035; 並びに英国特許公報GB 2,189, 245に記載されている。
【００４９】
本発明の組成物に使用するためにシクロデキストリンを記載し、及び／又はシクロデキストリンの製造、精製及び分析の指針を与える参考文献には次の  Cyclodextrin Technology by Jozsef Szejtli, Kluwer Academic Publishers (1988) Cyclodextrins in Pharmaceuticals の章; Cyclodextrin Chemistry by M. L. Bender 等, Springer-Verlag, Berlin (1978) ; Advances in Carbohydrate Chemistry, Vol. 12, Ed. by M. L. Wolfrom, Academic Press, New York "The Schardinger Dextrins" の章 by Dexter French, pp. 189-260; Cyclodextrins and their Inclusion Complexes by J. Szejtli, Akademiai Kiado, Budapest, Hungary (1982); I. Tabushi, Acc. Chem. Pfesearch, 1982, 15, pp. 66-72; W. Sanger, Angewandte Chemie, 92, p. 343-361 (1981); A. P. Croft 等, Tetrahedron, 39, pp. 1417-1474 (1983); Irie et aL, Pharmaceutical Research, 5, pp. 713-716 (1988); Pitha et. al., Int. J. Pharm. 29, 73 (1986); U. S. Patent Nos. 4,659,696 及び4, 383, 992; 独国特許第DE 3,118, 218 及び DE-3,317, 064; 並びに欧州特許第EP 0 094 157A等がある。β−及びγ−シクロデキストリンのヒドロキシアルキル化誘導体を記載する特許にはPithaの米国特許第4,596, 795号及び第4,727, 064号、Mullerの米国特許第4,764, 604号及び第4,870, 060号並びにMuller等の米国特許第6,407, 079号等がある。
【００５０】
クラドリビンと複合化するのに特に興味のあるアモルファスシクロデキストリンにはβ−及びγ−シクロデキストリンのヒドロキシアルキル（例、ヒドロキシエチル又はヒドロキシプロピル）誘導体、β−又はγ−シクロデキストリンのカルボキシアルキル（例、カルボキシメチルまたはカルボキシエチル）誘導体、β−シクロデキストリンスルホブチルエーテル、並びにランダムにメチル化されたβ−シクロデキストリン等がある。２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰβＣＤ）、２−ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン（ＨＰγＣＤ）、ランダムにメチル化されたβ−シクロデキストリン、β−シクロデキストリンスルホブチルエーテル、カルボキシメチル−β−シクロデキストリン（ＣＭβＣＤ）及びカルボキシメチル−γ−シクロデキストリン（ＣＭγＣＤ）が特に興味があり、さらにヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン及びヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリンが特に興味がある。
【００５１】
本発明で使用するためのアモルファス遊離クラドリビン及びアモルファス、好ましくは、飽和されたクラドリビン−シクロデキストリン包接化合物のアモルファス混合物は、本明細書中で記載し且つ例示したように、液体環境中で複合体形成を促進する条件下で調製できる。得られた液体調製物を、続いて、経口又は経粘膜剤形として投与するのに適した乾燥形態に変換できる。
【００５２】
当業者は、本明細書中で記載するように組成物を調製するのに当分野の様々なアプローチが利用できることを了解するであろう。本明細書中で例示されている一つの利用できる方法は、アモルファスシクロデキストリン水溶液中でクラドリビンを混合し、溶解しないクラドリビン（例えば、濾過又は遠心分離により）を分離し、そして飽和溶液を凍結乾燥(lyophilizing or freeze-drying)して固形アモルファス混合物を形成する工程を含む。
【００５３】
本発明の医薬組成物は、場合により、１種以上の賦形剤又はその他の薬学的に不活性な成分を含むことができる。しかし、本発明の一つの利点は、本明細書で記載した通りのクラドリビン薬物形態を錠剤やパッチ剤のような特定の形態に成形し製造するのに必要な最小量の賦形剤で調製できる。賦形剤は、クラドリビン、シクロデキストリン又は複合体形成に影響を与えないものから選択できる。
【００５４】
剤形は、場合により、周知の薬学的に許容できるキャリヤー、稀釈剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、スカベンジャー、芳香剤着色剤、及び賦形剤のいずれかを用いて薬学的に許容できるビヒクル中に配合される（Handbook of Pharmaceutical Excipients, Marcel Dekker Inc., New York and Basel (1998); Lachman 等編、The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, 3rd Ed., (1986); Lieberman 等編、Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Dekker Inc., New York and Basel (1989);並びにThe Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3d Ed. , American Pharmaceutical Association and Pharmaceutical Press, 2000を参照) ;さらにRermington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Gennaro, Mack Publishing Co., Easton, PA (1990) and Remington : The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott, Williams &amp; Wilkins, (1995)も参照)。一回用の固形経口は、少量（例えば、約１重量％）の適切な結合剤又はステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤と圧縮した、上述したアモルファス遊離クラドリビン及び（好ましくは飽和された）アモルファスクラドリビン−シクロデキストリン複合体のアモルファス混合物（すなわち、クラドリビン−シクロデキストリン複合体）からなる。
【００５５】
一定の場合では、経口吸収は、ミクロ環境の修正によるような、種々の賦形剤および溶解性を増すもしくは浸透性を増強する添加剤の添加によりさらに促進させることができる。
【００５６】
本明細書中で記載する方法及び医薬組成物はクラドリビンで治療する必要のある患者の治療に新規な治療方法を提供する。本明細書中で示したように、本発明は経口のクラドリビンに伝統的に関連したバイオアベイラビリティーの低いことの課題に向けられている。
【００５７】
本発明の組成物は、いずれのクラドリビン−応答性疾病の治療でも療法として実際的に適している。クラドリビンに応答性の数種の病状は文献に十分解説されている（下に掲載）。いずれかの目標病状に対して、有効量の最適化されたクラドリビン−シクロデキストリン複合体（すなわち、上述した最適化されたアモルファス飽和クラドリビン−アモルファスシクロデキストリン複合体とモルファス遊離クラドリビンとのアモルファス混合物）が使用される（例えば、多発性硬化症、関節リウマチ、又は白血病の治療に有効な量）。
【００５８】
「治療に有効な量」又は「有効量」という用語は、求める治療結果を達成するのに有効な投与量で治療することを意味する。文献に記載されている治療に有効な投与量には、ヘアリーセル白血病について(0.09 mg/kg/day for 7 days)、多発性硬化症について(約0.04〜約1.0 mg/kg/day (米国特許第5,506, 214号参照) )のようなものがあり、その他の疾病について、米国特許第5,106, 837 号(自己溶血性貧血)、第 5,310, 732号 (炎症性大腸炎)、第 5,401, 724号 (関節リウマチ)、第 5,424, 296号(悪性星細胞腫)、第 5,510, 336号 (組織球増殖症)、第 5,401, 724号 (慢性骨髄性白血病) 及び第6,239, 118号 (アテローム性動脈硬化症)を参照されたい。
【００５９】
さらに、種々の投与量及び投与処方が、多発性硬化症の治療に使用するための文献に報告されている。例えば、Romine等、Proceedings of the Association of American Physicians, Vol. 111, No. 1,35-44 (1999)、Selby等、The Canadian Journal of Neurological Sciences, 25,295-299 (1998)、Tortorella等、Current Opinion in Investigational Drugs, 2 (12), 1751-1756 (2001)、Rice等Neurology, 54,1145-1155 (2000)、及びKarlsson等、British Journal of Haematology, 116,538-548 (2002)（これらを全体として参照として本明細書に含める）等を参照されたい。
【００６０】
さらに、治療に有効な投与量は文献に教示されている投与経路が考慮されなければならない。本発明は経口投与後のクラドリビンのバイオアベイラビリティーを最適化するが、経口剤形から最適バイオアベイラビリティーでさえ静脈投与後に得られるバイオアベイラビリティーを達成することを、特に初期時点では期待されないことが理解される。従って、適切な投与量を達成するために、静脈投与に固形経口剤形を組み入れることが示唆される投与量を増加することがしばしば好ましい。現時点で、多発性硬化症の治療に対して、本固形剤形中の本発明の複合体クラドリビン−シクロデキストリン複合体中の１０ｍｇのクラドリビンが最初の１ヶ月の５〜７日の期間の間１日当り１回投与し、２ヶ月目の５〜７日の別の期間に繰り返し、続いて、１０ヶ月治療しないということが想定される。あるいは、患者は、６ヶ月の全期間１ヶ月当り５〜７日の期間の間１日当り１０ｍｇ投与量を投与され、続いて、１８ヶ月治療しない。さらなる投与情報については、米国仮特許出願番号 [IVAX0021-P-USA/Attorney Docket No. 033935-011]、及び米国仮特許出願番号 [IVAX0022-P-USA/Attorney Docket No. 033935-012]、双方とも発明の名称は"Cladribine Regimen for Treating Multiple Sclerosis"であり、２００４年３月２５日に出願され、両出願とも参照として本明細書に全体を含める。
【００６１】
さらに、当業者は、本発明で投与されるクラドリビンの治療に有効な量を、別の活性成分と、本発明に従ってクラドリビンを精密に調和させることにより及び／又は投与することにより増減させることができることを了解するであろう。従って、本発明は、一定の哺乳類に特定の特殊緊急事態に合わせて投与／治療する方法を提供する。治療に有効な量は、例えば、相対的に低い量で始め、段階を追って、有利な効果の評価を同時に行いながら増量することにより、経験的に容易に決定できる。
【００６２】
前節で記載したように、本発明のクラドリビンの投与は、クラドリビン−応答性症状を治療するために１種以上の追加の活性成分の投与により達成できる。追加の活性成分は、各追加の活性成分及び治療しようとする症状に適した投与経路及び投与量及び頻度により投与されうる。例えば、多発性硬化症の治療において、その他の有用な薬物には、ヒト体内で見出される天然プロテインと同一の、インターフェロンベーター(RebifR, BetaseronR/BetaferonR, AvonexR); アミノ酸グルタミン酸、リシン、アラニン及びチロシンのランダム鎖（ポリマー）の、ガラティラメルアセテート (GopaxoneR)、モノクローナル抗体の、natalizumab (AntegrenR)、ヒト化抗-CD52モノクローナル抗体である、alemtuzumab (Campath-11HR)、ニューロン中のカリウムチャンネルをブロックする薬物である、4- アミノピリジン(4-AP及びFampridineとしても知られている)、並びに筋肉のコントロールを改善し、筋肉剛性を減少させしかも多発性硬化症の疲労症状を軽減するのに使用される抗−ウイルス剤の、アマンタジン［この目的のためにはペモリン(CylertR) 及びL-カルニチン(漢方製品)も有用であり得る］等がある。ヘアリーセル白血病の治療では、追加の活性成分は、インターフェロンアルファ、ペントスタチン、フルダラビン、リツキシマブ（抗−CD20モノクローナル抗体）及び抗−CD22組換えイムノトキシンBL22等を含むことができ、その他の追加の活性成分がその他の白血病において適切であり得る。関節リウマチの治療においては、選択され得るその他の多くの活性成分がある。これらにはNSAIDS (非ステロイド性抗炎症薬)があり、これらには次の三種がある。すなわち、アスピリンのようなサリチル酸エステル、イブプロフェンやインドメタシンのような伝統的NSAIDS、並びにセレコキシブ(CelebrexR)、ロフェコキシブ(VioxxR)、メロキシカム(MobicR)、バルデコキシブ(BextraR)、ルミラコキシブ(PrexigeR) 及びエトリコキシブ(ArcoxiaR)のようなCOX-2 インヒビターである。本発明と関連付けて使用できる関節リウマチを治療するのに有用なその他の薬物には、DMARDS、グルココルチコイド、生物学的応答調節物質(Biological response modifier) 及び非-NSAID 鎮痛薬等がある。DMARDSはメトトレキサート、プラケニル、レフルノミド(AravaR)、スルファサラジン、金、ペニシラミド、シクロスポリン及びアザチオピリン等の抗リウマチ薬(disease-modifying anti-rheumatic drugs)である。グルココルチコイドはデキサメサゾン、プレドニゾロン、トリアムシノロン及び多くのその他のもの等がある。生物学的応答調節物質（これは免疫系の疾病闘争能力を復活させる）には、etanercept (EnrelR)、腫瘍壊死因子阻害剤(tumor necrosis factor inhibitor)、infliximab (RemicadeR)（これも、抗-TNF薬）、anakinra(KineretR)、選択的IL-1 ブロッカー、及びHumiraR（別の抗-TNF 薬であるヒトモノクローナル抗体）等がある。非-NSAID 鎮痛薬にはアセトアミノフェン並びにヒドロコドン、オキシコドン及びプロポキシフェンのような麻薬性鎮痛薬等がある。一般的に言って、クラドリビンのメカニズムと異なるメカニズムにより作用するような薬物は、本明細書で記載するクラドリビンと併用療法に特に有用である。経口又は経粘膜経路の投与によって効果的であり、しかも単回投与剤形の本発明のクラドリビン複合体と適合性のあるような薬物を本発明の投与剤に配合できる。そ���でなければ、もちろん、量、頻度及びそれらに適した投与経路を介して別々に投与すべきである。
【００６３】
本明細書中で使用される「治療する」という用語は、本発明に従って個体の症状を治療しない場合と比較して、本発明の化合物を投与する個体の症状を減少させ、防止し、その進展を遅らせ、コントロールし、軽減し及び／又は逆転させることを意味する。専門家は、本明細書に記載した複合体、組成物、剤形及び方法が、熟達した専門家（医者又は獣医）により続く療法を決定するために継続した臨床評価と共に使用されるべきということを了解するであろう。このような評価は、特定の治療用量を増加させるか、減少させるか又は継続するか、及び／又は投与の様式を変更させるかを評価する助けになり、情報の提供となる。
【００６４】
本発明の方法は、本発明の方法の利点を経験し得るいずれかの対象／患者に使用することが意図されている。従って、本発明では、「対象」並びに「患者」という用語は、ヒト並びに非−ヒト対象、特に家畜を含む。
【００６５】
当業者に公知の適切な物質及び／又は方法のいずれも本発明を実施するのに利用できる。しかし、好適な物質及び方法は記載される。特記しない限り、下記の記述及び実施例で言及される物質、試薬等は市場から入手できる。
【実施例】
【００６６】
下記の実施例は一定の本発明の好適な実施態様をさらに例証することを目的とするものであり、事実上限定するものではない。当業者は、ここで記載する特定の物質及び方法に対する多くの均等物を、日常的な経験を超えないものを使用して認識するか、又は確かめることができるであろう。
【００６７】
（実施例１）
相溶解度研究
下記のようにして相溶解度研究を行った。種々の濃度のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰβＣＤ）のシクロデキストリン溶液に過剰のクラドリビンを加え、下記の実施例２に記載するようにして複合体を形成した。過剰の未溶解のクラドリビンを濾過により除去した。複合化溶液中のクラドリビンの量を測定してデーター点を得る。このプロセスを異なる既知の濃度のＨＰβＣＤを用いて、数データー点が得られるまで繰り返す。次いで、これらのデーター点を図形的にプロットする。各データー点は、特定の濃度のシクロデキストリンを用いて水中に溶解できるクラドリビンの最大量を表す。データー点によりもたらされる線上の点は生成物の比を表す。当業界の熟達者は、過剰のシクロデキストリンが既知濃度のクラドリビン溶液に加えられる場合に、同じ結果が生じ得ることを了解するであろう。
【００６８】
得られたシクロデキストリンに対するクラドリビンのモル濃度をプロットし、グラフとして与える。図に代表的な相溶解度ダイアグラムを示す。クラドリビン−ＨＰβＣＤについてのプロットした線は、試験した条件についてのクラドリビン可溶化を表す。すなわち、シクロデキストリン濃度に対するクラドリビンの濃度の比を表す。各プロット線の上側領域は、過剰の不溶性クラドリビンが存在する場合の条件を表す。各プロット線の下側領域は、シクロデキストリンが過剰である場合の条件を表す。
【００６９】
図に示されているクラドリビン−ＨＰβＣＤのプロットはおおよそ直線であり、これは１：１複合体であることを表し、薬物の１モルが１モルのシクロデキストリンと複合化されている。図は、複合体中にクラドリビンを維持するのに追加のシクロデキストリンが必要であることも示す。例えば、選択した条件下で溶解して０．０４９モルのクラドリビンを維持するのに約０．１４モルのＨＰβＣＤが必要であり、これは、究極的に、アモルファス、好ましくは、飽和したクラドリビン−ＨＰβＣＤ包接化合物及び（非包接化合物としての）アモルファス遊離クラドリビンのアモルファス混合物を与える。下記の実施例２の条件下で、生成物中の有意部分のクラドリビンは包接化合物中ではなく、むしろ非包接化合物として水素結合によりそれと密接混合体中にゆるく保たれているアモルファス形態であることが予期できる。
【００７０】
（実施例２）
ヒトトライアルのためのクラドリビン−シクロデキストリン複合体の製造
下記の方法によりクラドリビンをＨＰβＣＤと複合化させる。
【００７１】
８２５ｍｌの蒸留水中に、１７２．５ｇのヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを溶解させ（おおよそ１７％溶液を形成）、次いで、クラドリビンを加え、得られた混合物を約４５〜約５０℃に約９時間攪拌する。室温でさらに６〜９時間攪拌を続ける。未溶解のクラドリビンを濾過により除き、得られた溶液を室温に冷却する。アモルファスクラドリビン−シクロデキストリン複合体及びアモルファス遊離クラドリビンのアモルファス混合物を形成するために、クラドリビン−シクロデキストリン水溶液を凍結乾燥により乾燥させ、それから固形経口剤形に組み入れる。凍結乾燥手順は複合化溶液を約２〜４時間、好ましくは約３〜４時間の間に約−４０℃〜約−８０℃（例えば、約−４５℃の温度）の温度に急速にする凍結段階、次いで、約−２５℃でおおよそ８０〜９０時間、典型的には低圧力下での一次乾燥段階、それから、約３０℃で約１５〜２０時間の二次乾燥段階を含む。
【００７２】
前記一般的方法により製造した生成物を、最終生成物のクラドリビン対シクロデキストリンの重量比を見出すためにＨＰＬＣ（Hypersil ODS 3ミクロンカラム及びアセトニトリル系移動相、264nmでのUV検出を利用）により分析できる。最終生成物製剤を当業界公知の方法によりさらに特徴化できる。これらの方法には、例えば、外観検査、ＨＰＬＣによる全体不純物含量の確認、Karl Fischer滴定器を使用する水分の確認、標準方法による崩壊態様の決定（例えば、USP<711> Apparatus II装置及び264nmでのUV検出を使用するような）、含量の均一性検査及び活性成分のＨＰＬＣによる定量等がある。
【００７３】
２バッチのクラドリビン／シクロデキストリン製品（ＦＤ０４及びＦＤ０５）を下記のような前述の一般的方法により製造した。
精製水（８２５ｍｌ）を、１−リットルガラス容器を水浴中に浸すことにより４８℃（４５℃〜５０℃の目標範囲）に予備加熱した。加熱した精製水を攪拌して制御した中心渦を達成した。２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（１７２．５０ｇ）を秤量して、４０分間かけて加熱した水にゆっくりと加えた。得られた溶液をさらに１０分間攪拌してシクロデキストリンを完全に溶解させた。クラドリビン（ＦＤ０４について１２．００ｇ及びＦＤ０５について１８．７５ｇ）を秤量し、攪拌中のシクロデキストリン溶液に加えると、曇ってから澄明になった。得られた澄明溶液を４８℃に維持し、９時間攪拌を続けた。さらに７時間攪拌を続けながら、溶液を室温に冷却した。
【００７４】
ＦＤ０５の製造の際の大量のクラドリビンの使用は本方法を最適化する試みの一部であったが、その場合のクラドリビンの最初の量は多すぎ、バッチＦＤ０５の冷却段階の終点で沈殿が観察されることが見出された。溶液を濾過して沈殿を取り除いた。得られた生成物の分析により、ＦＤ０５の場合、１６．３５ｇのクラドリビンがシクロデキストリン複合体中に組み入れられたことが明らかとなった（分析値＝８７．２％）。バッチＦＤ０４について濾過が必要でなく、ＦＤ０４の製造に使用した量はより適切で、ＦＤ０５の方法はより少量のクラドリビンで始める（１８．７５ｇではなくて１６．３５ｇ）ことにより最適化でき、したがって濾過工程を回避できることを示している。
【００７５】
室温に冷却後、そして、ＦＤ０５の場合、濾過後、これらの溶液を１００ｍｌ凍結乾燥バイアル（１バイアル当り２０ｍｌ）中に充填し、充填済みバイアルを部分的に栓をした。凍結乾燥は下記に示すような−４５℃で約２００分の凍結、１００ｍＴｏｒｒ圧力下−２５℃で約５，２００分の一次乾燥相、及び３０℃で約１，０８０分の二次乾燥相を含んだ。
【００７６】
【表１】
0005256611.tif 000003
【００７７】
前述した方法により製造したクラドリビン／シクロデキストリンのＦＤ０４及びＦＤ０５バッチをＨＰＬＣ（Hypersil ODS 3ミクロンカラム及びアセトニトリル系移動相、264nmでのUV検出を利用）により分析し、経験的に下記の特性を有することが見出された。
【００７８】
【表２】
0005256611.tif 000004
【００７９】
ＤＳＣサーモグラム及びＸ線回折法により得られた生成物を分析し、凍結乾燥物中の存在し得る遊離クラドリビンを決定した。重要なことに、試料は２１０℃〜２３０℃の領域（結晶クラドリビンの溶融に関連）に転移はなかった。双方の場合共、２１０℃〜２３０℃の領域で顕著な熱活性が記録されず、凍結乾燥の終点で得られた複合体は、分析方法の感度（最高３％ｗ／ｗ）を考慮して、有意な量の遊離結晶クラドリビンがないことを示唆している。この結論は、複合体ＦＤ０４及びＦＤ０５双方についてＸ線回折追跡から結晶性クラドリビンのピークがないことにより支持されている。
【００８０】
両製品は、アモルファスクラドリビン−ＨＰβＣＤ包接化合物及び非包接化合物としてシクロデキストリンに水素結合したアモルファス遊離クラドリビンのアモルファス混合物である。得られたクラドリビン：ＨＰβＣＤ重量比は約１：１４及び１：１１であった。
【００８１】
一般的に言って、本発明の範囲内のアモルファス混合物のクラドリビン：ＨＰβＣＤ重量比は約１：１０〜１：１６である。
（実施例３）
経口錠剤の製造
臨床研究に使用するため、実施例２に記載したアモルファス混合物ＦＤ０４及びＦＤ０５のバッチを使用して錠剤を製造した。
【００８２】
バッチＮＯ  １２０はクラドリビン−ＨＰβＣＤ複合体混合物ＦＤ０５を使用してバッチサイズ３，０００錠を製造し、バッチＮＯ  １２６はクラドリビン−ＨＰβＣＤ複合体混合物ＦＤ０４を使用してバッチサイズ８００錠を製造した。これらの２バッチのマスター処方を表ＩＩＩに示す。臨床研究のため、バッチＮＯ  １２０は３．０ｍｇ錠であり、バッチＮＯ  １２６は１０ｍｇ錠である。
【００８３】
【表３】
0005256611.tif 000005
【００８４】
下記の表はバッチＮＯ  １２０錠剤及びバッチＮＯ  １２６錠剤の製造方法を記載する。
【００８５】
【表４】
0005256611.tif 000006
【００８６】
バッチＮＯ  １２０  ３．０ｍｇ錠及びバッチＮＯ  １２６  １０．０ｍｇ錠の双方は、一方が平らな縁取り、他方が浅い凸状の丸い錠剤である。バッチＮＯ  １２０  ３．０ｍｇ錠の平均重量は１００ｍｇ、厚さは２．７ｍｍ、脆弱度は０．２％、硬度は４Ｋｐであり、崩壊時間は３分だった。バッチＮＯ  １２６  １０．０ｍｇ錠の平均重量は１９８ｍｇ、厚さは４．２ｍｍ、脆弱度は１％、硬度は２．８Ｋｐであり、崩壊時間は５分４２秒だった。
【００８７】
バッチＮＯ  １２０  ３．０ｍｇ錠及びバッチＮＯ  １２６  １０．０ｍｇ錠を、以下の実施例５で概要を述べる臨床研究に使用した。
（実施例４）
臨床研究：相対的バイオアベイラビリティー
この研究は、３種の経口クラドリビン製剤、すなわち、（１）本発明のシクロデキストリン系製剤（錠剤１：複合体ＦＤ０５、すなわち、上述のバッチＮＯ  １２０錠剤）、（２）粘膜接着性製剤（錠剤２：３．０ｍｇのクラドリビン、１０ｍｇのCarbopol 71G NF、２２．２ｍｇのリン酸二カルシウム、６４．３ｍｇのラクトース及び０．５ｍｇのステアリン酸マグネシウム、バッチＮＯ  １２１）、並びに（３）硬ゲルカプセル（３．０ｍｇのクラドリビン、５．０ｍｇのCarbopol 974P、９１．３ｍｇのAvicel PH101、１００ｍｇのAvicel PH102、０．２ｍｇのコロイダル二酸化珪素及び０．５ｍｇのステアリン酸マグネシウム、バッチＮＯ  ＲＤ０３０３０）の相対的バイオアベイラビリティーを、ＭＳ（多発性硬化症）を罹患する患者における１固定皮下クラドリビン（標準製剤）投与と比較して評価することである。
【００８８】
この研究は、ＭＳを罹患する１２患者を使用する、２中心、非盲検、無作為、４方向クロスオーバー１回投与研究だった。患者は、無作為に３種の固定経口投与（３．０ｍｇ）及び固定皮下３．０ｍｇ投与を受けた。これらの４回の処置日を、少なくとも５日間の薬物が無くなる間隔により離して行った。各処置期間で、血漿中クラドリビンの評価のため２４時間にわたって血液試料を採取した。
【００８９】
クラドリビンの血漿濃度をＨＰＬＳ／ＭＳ／ＭＳ法により測定した。この方法を使用して、濃度対ピーク面積比の関係が、クラドリビンついて１００ｐｇ／ｍｌ〜５０，０００ｐｇ／ｍｌの範囲内で直線であることを見出した。定量の限界は１００ｐｇ／ｍｌだった。１６実験について試料の分析を行った。較正曲線の調整により排除される較正は必要なく、各品質管理試料の精度はＧＬＰ要求に合致した。
【００９０】
５７６臨床血漿試料を分析し、クラドリビンの濃度値を決定した。結果は満たされ、下記の表（表Ｖ及びＶＩ）に要約した。これらの表中、次の定義が適用される。Ｔｍａｘは血漿中の最大濃度に達するまでの時間、Ｔ１／２は血漿中のクラドリビンの半減期、ＣＭＡＸは血漿中のクラドリビンの最大濃度、ＡＵＣｉｎｆはゼロから無限大に外挿される測定データについての曲線下の面積であり、ＡＵＣｔは測定したデータ（ゼロから最後の点まで）の曲線下の面積であり、Ｇｅｏｍ  Ｍｅａｎは幾何的平均であり、ＣＶは変動の係数（相対標準偏差）であり、ＬＬは下限であり、ＵＬは上限である。
【００９１】
【表５】
0005256611.tif 000007
【００９２】
【表６】
0005256611.tif 000008
【００９３】
（実施例５）
臨床研究：用量反応及び絶対バイオアベイラビリティー
本研究の目的は、２種の固定経口用量における経口与後のクラドリビンの全身アベイラビリティーを、ＭＳ（多発性硬化症）を罹患する患者における１固定皮下クラドリビン（標準製剤）投与と比較して評価すること、及びこの集団におけるクラドリビンの安全性及び耐性を評価することである。
【００９４】
この研究は、ＭＳを罹患する２６患者を使用する、３中心、非盲検、無作為、３方向クロスオーバー１回投与研究だった。患者は、無作為に２種の固定経口用量（３．０ｍｇ及び１０．０ｍｇ）及び固定皮下３．０ｍｇ用量（１時間注入としての投与）を受けた。これらの３回の処置日を、少なくとも５日間の薬物が無くなる間隔により離して行った。各処置期間で、血漿中クラドリビンの評価のため２４時間にわたって血液試料を採取した。
【００９５】
クラドリビンの血漿濃度をＨＰＬＳ／ＭＳ／ＭＳ法により測定した。この方法を使用して、濃度対ピーク面積比の関係が、クラドリビンついて１００ｐｇ／ｍｌ〜５０，０００ｐｇ／ｍｌの範囲内で直線であることを見出した。定量の限界は１００ｐｇ／ｍｌだった。１６実験について試料の分析を行った。１実験（装置の欠陥のため拒否しなければならなかった）以外の他のすべての実験は許容できた。較正曲線の調整により排除される較正は必要なく、各品質管理試料の精度はＧＬＰ要求に合致した。
【００９６】
８５８臨床血漿試料を分析し、クラドリビンの濃度値を決定した。結果は満たされ、下記の表（表ＶＩＩ〜Ｘ）に要約した。これらの表中、次の定義が適用される。Ｔｍａｘは血漿中の最大濃度に達するまでの時間、Ｔ１／２は血漿中のクラドリビンの半減期、Ｃｍａｘは血漿中のクラドリビンの最大濃度、ＡＵＣｉｎｆはゼロから無限大に外挿される測定データについての曲線下の面積であり、ＡＵＣｔは測定したデータ（ゼロから最後の点まで）の曲線下の面積であり、Ｇｅｏｍ  Ｍｅａｎは幾何的平均であり、ＣＶは変動の係数（相対標準偏差）であり、ＬＬは下限であり、ＵＬは上限であり、σ２は平均変動であり、σＢ２は対象間の平均変動であり、σＷ２は対象内の平均変動であり、ＣＶＴは変動の総係数であり、そしてＣＶＷは対象内の変動の係数である。
【００９７】
【表７】
0005256611.tif 000009
【００９８】
【表８】
0005256611.tif 000010
【００９９】
【表９】
0005256611.tif 000011
【０１００】
【表１０】
0005256611.tif 000012
【０１０１】
前述は本発明の原理のみを例証として考慮される。さらに、多くの修正や変更が当業者に容易になされ得るので、示し記載した、正確な構成及び作用に本発明を限定することを望まない。従って、すべての適切な修正及び均等物を回復でき、特許請求の範囲内に入る。
【図面の簡単な説明】
【０１０２】
【図１】相溶解度研究の結果を表すグラフである。ここで、種々モル濃度のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰβＣＤ）が、種々のクラドリビンモル濃度に対してプロットされている。（●）は下記の実施例２で特定された条件下での複合体について得られたデーター点を表す。
【図１】
0005256611.tif 000013