(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
１１β，１７α，２１−トリヒドロキシプレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン−２１−エライデート。
【請求項２】
９−フルオロ−１１β，１７，２１−トリヒドロキシ−１６β−メチルプレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン−２１−エライデート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は生物学的活性化合物に関するものであり、薬剤および農薬等の多くの生物学的活性化合物の作用を化学的誘導体化によって改良する方法を提供する。 
【背景技術】
【０００２】
医学界では患者の作用部位への薬剤運搬効果の研究、改良に多大の関心がもたれている。本研究は主として薬剤の腸から血流への吸収に焦点を当てている。但しその他の生物学的障壁を通過する運搬も、多くの疾患、例えば癌、感染症、炎症、ＣＮＳ疾患等の治療に必要な治療効果を得るために重要な役割を演ずることは多い。細胞膜経由輸送は或る治療化合物の最適効果達成を妨害する主原因であることが多い。
【０００３】
最近数十年にわたり、悪性および感染性疾患の治療における薬剤耐性がますます増えており、今や重大な臨床的問題とみなされている。薬剤耐性の発現は多くのメカニズムによって起こるが、微生物および細胞が毒性化合物を有毒レベル以下にまで除去する正常メカニズムがトリガーされることによることが非常に多い。一例は、癌細胞における多剤耐性（ＭＤＲ）の発現である。この場合、ＭＤＲは、細胞が有毒化合物の非常に効率的な流出を実現する細胞膜タンパク質ポンプに関係することがよくある。臨床的立場、すなわち細胞増殖抑制剤で腫瘍を治療する場合には、最も強力なタンパク質ポンプを有する細胞が優先的に生き残り、これらの細胞は増殖して、種々の薬剤による治療に耐性を有する新しい腫瘍になるかも知れない。同様な作用メカニズムは、その他の治療領域、例えば抗マラリヤ剤による治療等で見られる不十分な効果の原因になるかも知れない。
【０００４】
臨床における耐性メカニズムを回避することを試みる幾つかの方法が知られている。例えばベラパミル等のＣａ2+チャンネルブロッカーまたはシクロスポリンのような免疫調節剤との併用が試みられた。しかし顕著な改善はこれまで報告されていない。
【０００５】
文献には、化合物類を脂肪酸と結合させて化学的結合誘導体または物理的混合物のどちらかを形成することによって、治療化合物の治療指数、バイオアベイラビリティー、膜通過性、器官標的化などを改善する幾つかの提案がある。
【０００６】
例えば、欧州特許出願第３９３９２０号は、長鎖（Ｃ16以上）アシル基で誘導体化した抗ウィルス性ヌクレオシドおよびヌクレオシド類似体が親化合物より有効であることを開示している。これら分子の脂肪酸部分は、γ−リノレン酸またはリノール酸等のポリ不飽和脂肪酸から形成されることが記載されている。
【０００７】
米国特許出願第３９２０６３０号は、２、２'−無水−アラシチジンおよびその５'−Ｏ−アシレート類が、抗ウィルス薬として、アラシチジンそのものと同様な全般的生物学的効果および治療効果を有することを教示している。特に化合物２、２'−無水−５'−オレイル−アラシチジンについて記載されている。
【０００８】
欧州特許出願第５６２６５号は、アラビノ−フラノシル−チミン（Ａｒａ Ｔ）と１−１７炭素原子を有する飽和酸とのエステル類を開示している。
【０００９】
ＰＣＴ／ＷＯ９０／００５５５からは、特に燐酸基を介してヌクレオシドのペントース基の５'−位置に結合した脂質誘導体が公知である。この誘導体化の目的は、ヌクレオシド類をより親油性にして、リポソームがそれらを含むことができるようにすることである。リポソームはＨＩＶウィルスを担持することが知られている細胞であるマクロファージおよび単球に優先的に取り込まれる。そこで標的化効果が得られると記載されている。
【００１０】
ヌクレオシド類似体の抗ウィルスおよび抗癌活性は、投与薬剤の細胞内燐酸化に直接関係している。この生化学的変換は通常はウィルスおよび／または細胞内酵素によって行われる。この効果を改善するために、ＷＯ９６／２５４２１は比較的短い鎖（Ｃ14以下）を有する飽和または不飽和脂肪酸によるヌクレオシドの燐脂質誘導体を開示している。
【００１１】
その他のクラスの薬物学的物質の特性を、脂肪酸による誘導体化によって改良する方法も研究されている。
【００１２】
例えばＷＯ９６／２２３０３は、数種のカテゴリーの治療化合物（コルチコステロン、オピオイド、およびオピオイド拮抗薬、抗ウィルス性ヌクレオシド類、シクロスポリン類および関連シクロペプチド類、葉酸拮抗薬、カテコールアミン前駆体およびカテコールアミン類、およびカルボン酸基を含むアルキル化剤）の薬物動態プロフィールおよびデリバリーモードを、トロメタミンまたはエタノールアミン誘導体等のリンカー／スペーサー基を使用して脂肪酸の１ないし３個のアシル誘導体とこれらとを結合することによって変え得ることを教示している。パルミチン酸は好適脂肪酸である。
【００１３】
数種のＮＳＡＩＤｓの親油性プロドラッグはブンドガード（H.Bundgaard）ら（International Journal of Pharmaceutics、４３巻、１０１−１１０ページ、１９８８）およびシャンバグ（V.R.Shanbhag）ら（Journal of Pharmaceutical Sciences、１４９、８１巻、２号、１９９２年２月）から公知である。プロドラッグ的観点に加えて、ＧＩ（胃腸）刺激が減少することが報告されている。ＥＰ−Ａ−０１９５５７０は、ガンマリノレン酸およびジホモ−ガンマ−リノレン酸とＮＳＡＩＤｓとの組み合わせが連続的に摂取した場合のＮＳＡＩＤｓによる副作用を軽減することを示唆している。
【００１４】
米国特許第５,２８４,８７６号は、ＣＮＳ疾患治療において経口プロドラッグとしてドーパミンのドコサヘキサエン酸アミドを使用することを教示している。
【００１５】
皮膚および経口投与どちらでもいわゆる浸透促進剤として用いられる脂肪酸／脂肪酸誘導体を含む物理的混合物がＰＣＴ／ＵＳ９４／０２８８０およびＰＣＴ／ＳＥ９６／００１２２から公知である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
上記のように、これら先行提案の多くは抗ウィルス性ヌクレオシドおよびヌクレオシド類似体の脂肪酸誘導体に関係する。実際、或る種のポリ不飽和脂肪酸がウィルスを攻撃することは以前から知られているから、こうなることは驚くにあたらない。ＥＰ−Ａ−０６４２５２５において、我々自身、ヌクレオシドおよびヌクレオシド誘導体がオレイン酸（cis−９−オクタデセン酸）、エライジン酸（trans−９−オクタデセン酸）、cis−１１−エイコセン酸またはtrans−１１−エイコセン酸と反応して対応する５'−Ｏ−モノエステルを形成することによって上記ヌクレオシドおよびヌクレオシド誘導体の抗ウィルス効果が著しく高まることを教示した。我々は、これら４種類のモノ不飽和、ω−９ Ｃ１８またはＣ２０脂肪酸から得られる好都合な効果が脂肪酸誘導体化によって一般に得られるものより優れていることを示した。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
今や驚くべきことに、本発明により多くの異なる生物学的活性化合物の性質を ω−９ Ｃ１８またはＣ２０モノ不飽和脂肪酸による誘導体化によって好都合に変え得ることを我々は見いだした。こうして本発明は、例えば多くの薬剤および農薬の価値を高めるために広く、かつ簡単に利用できる方法を提供する。
【００１８】
概して本発明は、一面では分子構造中にアルコール、エーテル、フェニル、アミノ、アミド、チオール、カルボン酸およびカルボン酸エステル基から選択される１つ以上の官能基を含む、ヌクレオシドまたはヌクレオシド誘導体以外の生物学的活性化合物の親油性誘導体を提供する。上記親油性誘導体は前記生物学的活性化合物の少なくとも一つの前記官能基が、下記の式であらわされるものから選択される親油性基によって置換された分子構造によって、特徴づけられる：ＲＣＯＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＳ−、ＲＣＨ2Ｏ−、ＲＣＨ2ＮＨ−、−ＣＯＯＣＨ2ＲＮ−ＣＯＮＨＣＨ2Ｒおよび−ＳＣＨ2Ｒ。前記式中、Ｒはｃｉｓ−８−ヘプタデセニル、ｔｒａｎｓ−８−ヘプタデセニル、ｃｉｓ−１０−ノナデセニルおよびｔｒａｎｓ−１０−ノナデセニルから選択される親油性部分である。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は肉芽腫の液体重量を示す。リポソーム投与対照動物の肉芽腫の平均液体含有量は６２.６９ｍｇであった。減少は全投与群に認められた（ナプロキセン１２％、ナプロキセンオレイルエーテル９％、ナプロキセンオレイルエステル１４％およびナプロキセンオレイルアミド２２％）。ナプロキセンオレイルアミドで得られた結果が特に顕著であった。
【図２】図２は肉芽腫組織乾燥重量を示す。リポソーム投与対照動物の肉芽腫の組織乾燥重量は１４.３６ｍｇであった。ナプロキセンは組織乾燥重量に影響を与えないように見えた。残る投与群では減少が認められた（ナプロキセンオレイルエーテル１６％、ナプロキセンオレイルエステル１２％およびナプロキセンオレイルアミド３８％）。ここでもナプロキセンオレイルアミドで得られる減少が最大であった。
【図３】図３はマウスの皮下に２週間埋め込まれたコットン−ラップド軟骨のグリコサミノグリカン含有量を示す。埋め込まれなかった対照軟骨は平均グリコサミノグリカン１１６８ｍｇであった。リポソーム投与対照動物に２週間移植するとグリコサミノグリカンは６０％減少した。ナプロキセンオレイルエーテル投与動物から取り出したインプラントを除き、残る投与群のインプラントはリポソーム投与対照群のそれらより少ないグリコサミノグリカンを含む傾向があった（ナプロキセン１６％、ナプロキセンオレイルエステル１２％およびナプロキセンオレイルアミド１１％）。
【図４】図４はマウスの皮下に２週間埋め込まれたコットン−ラップド軟骨のヒドロキシプロリン含有量を示す。埋め込まれなかった対照軟骨は平均ヒドロキシプロリン含有量３２９ｍｇであった。リポソーム投与対照動物に２週間移植するとヒドロキシプロリンは１９％減少した。ナプロキセンオレイルエーテル投与動物から取り出したインプラントを除き、残る投与群からのインプラントはリポソーム投与対照群のそれらより少ないヒドロキシプロリンを含む傾向があった（ナプロキセン１２％、ナプロキセンオレイルエステル８％、ナプロキセンオレイルアミド３％）。
【図５】誘導体の効果は明らかで、驚くべきものである。図５からわかるように、プレドニゾロンがチモサン刺激−細胞の活性に与える影響は６時間目の化学ルミネッセンスのわずかな減少として認められるだけである。プレドニゾロンエライデートでは、炎症細胞の活性は投与後４８時間にわたって対照に比較して減少する。その効果はプレドニゾロンそのものの効果より明らかに大きく、持続する。
【図６】誘導体類の効果は明らかで驚くべきものである。図６からわかるように、特に好ましい脂肪酸の一つの例として、プレドニゾロン−エライデートの効果は最大であった。その他の脂肪酸誘導体では化学ルミネッセンスはほんのわずかな影響を受けただけである。プレドニゾロン−エライデートでは炎症細胞の活性は投与後４８時間にわたり、対照および残りの脂肪酸誘導体に比較して減少する。
【図７】図７に示すように、腹腔洗浄液中の細胞数は実質的に減少し、この減少は投与後４８時間まで明らかであった。
【図８】細胞を分別すると、腹腔洗浄液中のマクロファージの数に主な影響が出ることがわかった。
【図９】プレドニゾロンではその効果は遥かに少なく、６時間および１２時間目に認められただけである。ベタメタゾンとベタメタゾン−エライデートとの比較でも、腹腔洗浄液中のマクロファージの数の測定で、さほど明らかではないが、同様な効果が認められた。
【図１０】気道反応性。
【図１１】細胞を２×１０5／ｍｌの懸濁液にして、２０μＭの薬剤にさらした。種々の時間に部分を取り、氷冷ＰＢＳですすぎ、その後フローサイトメーターを通過させた。図１１にはドキソルビシンおよびドキソルビシン誘導体の時間の関数としての蓄積が見られる。細胞系ＣＯＲ−Ｌ１２３／Ｐ（ヒト大肺細胞）およびその耐性細胞系ＣＯＲ−Ｌ１２３／Ｒではドキソルビシン誘導体（ドキソルビシン−エライジン−アミドおよびドキソルビシン−オレイル−カルバメート）濃度はほぼ同じであった、一方ドキソルビシン濃度は耐性細胞系では遥かに低かった。
【図１２】細胞を上記のようにダウノルビシン、ダウノルビシン−エライジンアミドおよびダウノルビシン−オレインカルバメートにさらした。薬剤濃度は１０μＭに減らした。耐性および非耐性細胞への取り込みによる蛍光は誘導体に関しては２種類の細胞で多かれ少なかれ同じである。
【図１３】ダウノルビシンそのものではこれらの細胞内への取り込みによる蛍光は２種類の細胞で差があった。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明の好適一実施態様において、治療化合物をｎ−９ Ｃ１８またはＣ２０モノ不飽和脂肪酸で誘導体化することによって、上記治療化合物の生物学的効果は改善される。以下に、下記の群から選択される薬剤類に本発明を適用することに関して詳細に論議する：
１．抗癌剤；
２．抗炎症剤；
−ＮＳＡＩＤｓ
−副腎皮質ステロイド類
３．抗生物質およびその他の抗菌剤；
４．抗寄生虫薬；
５．ＣＮＳ薬；
６．心臓血管薬；
７．抗凝固剤。
【００２１】
しかし本発明は、薬物学的に活性であり、分子構造中にｎ−９ Ｃ１８またはＣ２０モノ不飽和脂肪酸と結合できる官能基を１つ以上含むいかなる化合物にも広く応用できる。例えば、本発明を用いて、鎮痛剤、殺真菌薬、高脂血症薬、制吐剤および診断薬等の医学的化合物の生物学的効果を改善することもできる。
【００２２】
本発明による治療的活性化合物の親油性誘導体は、熟練せる当業者には公知の一般的方法によって、薬物学的に容認される担体および賦形薬と共に処方される。用量の割合は親薬剤のそれと関係する。但し本発明の親油性誘導体が親薬剤の効果を著しく増強する場合にはその用量を通常レベルより減らすことができる。
【００２３】
本発明の好都合な効果は十分確立された薬剤類で証明されたとはいえ、同様な改良はまだ開発途上にあるその他の薬剤類でも示されるかも知れないと考えられる。すなわち、本発明の親油性誘導体で認められた改良特性の仮定的説明は一般的に適用されるものであって、治療的効果の特別のメカニズムに限られるものではない。
【００２４】
本発明による治療的活性化合物の親油性誘導体の幾つかが示す、我々が発見した特に貴重な特性は、それらが薬剤耐性を克服することである。理論によって束縛されるものではないが、本発明の親油性誘導体は何らかの方法で膜タンパク質ポンプと相互作用し、それらの細胞からの活性（毒性）化合物の除去が阻止され、その結果活性化合物の濃度を長期間治療的有効濃度に保つことが可能となる。少なくとも本発明は、本発明による親薬剤およびその親油性誘導体の同時投与によって薬剤耐性効果を克服する可能性にも通じる。親薬剤とその親油性誘導体は容易に投与できるように、同じ製剤中に含まれるのが好適である。但し若干の場合には親薬剤と親油性誘導体とを別々の投与型に含めるのも好ましい。親薬剤の用量に対する親油性誘導体の用量は適切な試験によって決められるが、一般には、重量で１：１から１０００：１までの範囲である。
【００２５】
前にも述べたように、本発明は普通は薬剤だけでなく、生物学的活性を有するいかなる化合物にも適用できる。
【００２６】
生物学的活性化合物の別の経済的重要な群は、農業および園芸に用いられる生成物、例えば殺虫剤、殺真菌薬および除草剤等である。農薬は構造および作用モード共に非常に種々様々である。例えば、幾つかのよく知られた取り込み経路がある；例えば植物は活性化合物を根系から、または直接植物の葉または幹から摂取することができ、一方殺虫剤は、害虫が襲う植物を介して、または直接接触によって取り込まれる。本発明による農薬の親油性誘導体は植物によっても昆虫およびその他の害虫によっても取り込まれやすい特性を有することが判明している。その上、本発明の誘導体類は、薬剤耐性のように問題になりつつある殺虫剤耐性の克服にも役立つ。
【００２７】
本発明によって好都合に誘導体化できる生物学的活性化合物のその他の群は、食物および食品添加物、例えば保存料、香料およびスパイス等を含む。
【００２８】
本発明の親油性誘導体は、親薬剤またはその他の生物学的活性化合物分子を、炭素原子１８または２０の炭素鎖を有するｃｉｓ−またはｔｒａｎｓ−ｎ−９モノ不飽和脂肪酸、脂肪酸アルコールまたは脂肪アミンと、またはこのような脂肪酸、脂肪アルコールまたは脂肪アミンの反応性誘導体、例えば酸塩化物、反応性エステル類、ハロゲン化物などと反応させることによって合成される。ｎ−９とは、脂質部分のＣ末端から数えて９および１０の位置が不飽和であることを示す。このため、使用できる脂肪酸類（およびそれらから誘導されたアルコールおよびアミン類）はｃｉｓ−９−オクタデセン酸（オレイン酸）、ｔｒａｎｓ−９−オクタデセン酸（エライジン酸）、ｃｉｓ−１１−エイコセン酸およびｔｒａｎｓ−１１−エイコセン酸である。
【００２９】
親生物学的活性化合物と脂肪酸、脂肪アルコールまたは脂肪アミン化合物とのカップリング反応は、熟練せる当業者に公知の種々の方法によって達成できる。親分子中に２つ以上の誘導体化可能の官能基が存在する場合、カップリング段階において保護基または改良合成法を用いて必要な選択を行うことができる。一般的に、反応の進行を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）および適した溶媒系を用いて追跡することができる。ＴＬＣによって確認して反応が完了したとき、生成物を有機溶媒で抽出し、クロマトグラフィーおよび／または適切な溶媒系からの再結晶によって精製するのが一般的である。親出発原料にヒドロキシル、アミノ、チオールまたはカルボキシル基が１つより多く存在する場合は、アルキル化またはアシル化化合物の混合物が生成するかも知れない。その後個々のモノ−またはポリ−誘導体化合物は例えばクロマトグラフィーによって分離することができる。
【００３０】
カップリング反応は一段階で行われることが多く、親油性誘導体は普通は良い安定性を有する結晶として回収できる。このことは最終的医薬品を上首尾にガレノス処理するために役立つ。
【００３１】
本発明によって用いられる調製法は以下に示す反応スキーム、並びに本明細書の後部で述べる実施例によって説明される。
【００３２】
ここで本発明を数種類の薬剤についてさらに詳細に説明する。
【００３３】
抗炎症剤
リウマチ性関節炎、骨関節炎、ベクテリエフ症候群、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）、喘息、通風等の重大な疾患の多くは炎症性反応を引き起こす異常免疫応答の結果である。炎症性プロセスは、例えば抗原−抗体相互作用、感染性作用物質、虚血等の多数の刺激によって誘起される一連の事象を含む。肉眼的レベルでは、その反応は紅斑、浮腫、敏感（痛覚過敏）、および疼痛という臨床症状を伴うのが普通である。炎症性疾患は主として３種類の薬、すなわちＮＳＡＩＤｓ（アスピリン様薬剤と呼ぶこともある）、免疫抑制剤（例えばメトトレキセート、シクロホスファミドおよび最近ではシクロスポリン）および副腎皮質ステロイド類（ヒドロコーチゾン、プレドニゾロン、等）で治療される。その治療は主として疾患初期の疼痛および／または強度を抑制する。現在の治療法は高用量および／または長い治療期間によるひどい副作用によって制限されることが多い。
【００３４】
可逆的気道閉塞−喘息−は呼吸疾患の最も一般的なものである。気管支過反応性の程度は普通は副腎皮質ステロイドおよび／または気管支拡張剤の定期的吸入によってコントロールまたは軽減される。大部分の治療法は平均して２−３時間の治療効果をもたらす。大部分の呼吸器エアゾール類では、吸収は経腸または経口投与による吸収とほぼ等しい。抗炎症効果および免疫抑制効果による治療は一時的である。長期治療のためには副作用を抑制した最小量を用いるべきである。
【００３５】
重症喘息発作ではメチルプレドニゾロン琥珀酸ナトリウムを静脈注射し、その後１０日間経口投与する。喘息の急性悪化は経口コルチコステロイドの短期間コースで治療することが多い。気管支喘息を治療する治療法に吸入コルチコステロイドを含めるやり方が最近明らかに増加している。ベクロメタゾン・ジプロピオネート、トランシノロンアセトニドまたはフルニゾリドは経口コルチコステロイドコースの期間を短縮し、或いは完全に経口コルチコステロイドの代わりとなる。これらの薬剤を推奨用量で用いる際にはより少ない副腎機能抑制が認められる。
【００３６】
慢性喘息の局所治療におけるステロイド使用は吸入器によって便利に行われる。これは全身的投与のひどい副作用のリスクを制限する。局所投与後の速やか且つ選択的作用を確実にするためには、気管支の内皮細胞上の受容体への付加および前記受容体との相互作用が必須である。本発明の脂肪酸誘導体は局所投与から得られる利点をより一層改善することができる。気道炎症は致命的喘息発作の顕著な特徴と見なされ、軽度の喘息発作の気管支生検でも同様な変化が見いだされる。重症喘息発作は炎症細胞、主として肺胞マクロファージの気道への多量流入と関係がある。この状態はウィルスによって誘起される気道過剰反応性の外観に非常に似ている。マクロファージは反応性酸素種を放出することができ、それらは肺抵抗を高め、ヒスタミンを遊離させる。一般には炎症細胞、特にマクロファージの抑制を測定するモデルを用いて、可能性のある喘息薬の効果を評価することができる。化学ルミネッセンスを反応性酸素種の放出の尺度として用いることができる。下に示すように、炎症細胞、主にマクロファージのラット腹腔内への流入を本発明の副腎皮質ステロイド誘導体によって減らすことができる。刺激時の炎症細胞の活性も減少し、誘導体投与後、親薬剤投与後よりもより長期間にわたってその減少が認められる。それら誘導体は投与後最低４８時間は有効である。この長時間にわたる活性は喘息治療において非常に好都合である。
【００３７】
天然ホルモン類はin vivoでは非常に速やかに分解することが多いため、注射しない限り治療効果はほとんど得られないことが多い。これらの分子または天然化合物に類似した合成類似体を本発明の脂肪酸と結合することによって薬物動態挙動を変え、治療効果を改善することができる。これは全身投与および局所投与両方に言えることである。
【００３８】
本発明によって誘導体化し得る副腎皮質ステロイド類およびその他の喘息薬の例は次のものを含める：
【００３９】
【化１】
0005232083.tif 000002
【００４０】
【化２】
0005232083.tif 000003
【００４１】
炎症性疾患の治療に最も一般に用いられる薬剤はＮＳＡＩＤｓである。よく使用されるこの群の製品はいろいろあり、主なものはナプロキセン、ジクロフェナック（ボルタレン）、ピロキシカム（フェルデン）およびサリチル酸誘導体である。ＮＳＡＩＤｓは抗炎症性、鎮痛性および解熱剤であるが、それらの主要な臨床的用途は炎症性疾患の治療である。ＮＳＡＩＤｓはこれらの疾患による痛みおよび炎症の症状緩和をもたらすが、ひどい発症中の組織の病的損傷の進行は止めない。今日知られているＮＳＡＩＤｓ製剤のなかで肉芽腫性組織の生成を明らかに軽減するものはない。肉芽腫性液含有量の減少は認められるとはいえ、その効果は肉芽腫性固体物質含有量の同時減少としては反映されない。これら薬剤の主な作用モードはプロスタグランジン生合成の阻止（シクロオキシゲナーゼの阻害）である。各薬剤の分布および薬物動態特性は薬剤活性に重要な影響を有する。これも、同じ化学ファミリーであっても、異なるＮＳＡＩＤｓ薬剤に対しては各患者の応答性に大きなばらつきが起きる理由であると考えられる。例えば、異なるプロピオン酸誘導体に対する耐性に大きいばらつきがあることが報告されている。
【００４２】
ＮＳＡＩＤｓの主な特性はそれらのシクロオキシゲナーゼ阻止能力であり、したがってＰＧＧ2およびＰＧＨ2およびこれらから誘導される全てのエイコサノイド類（ＰＧＩ2、ＴＸＢ2、ＰＧＥ2等）の生合成を阻止する。他方ＮＳＡＩＤｓがリポキシゲナーゼを（少なくとも同程度に）阻止することは知られておらず、そのためロイコトリエン類（ＬＴＢ4およびＬＴＣ4）の合成には影響しない。プロスタグランジンＰＧＩ2およびＰＧＥ2は炎症過程に重要な役割を演ずる。それらは浮腫をおこし、多分血管透過性を高める。ＰＧＩ2は炎症性疾患に関連する痛みの主な要因である。ロイコトリエン類は炎症発作の第二および第三相における重要なメディエータである。そしてＮＳＡＩＤｓはリポキシゲナーゼを治療的に役立つ程度には阻止しないから、それらは炎症性疾患の変性部には影響しない。
【００４３】
ＮＳＡＩＤｓには副作用があり、それらは時には重症になり得る。最も一般的な副作用は胃潰瘍または腸潰瘍の誘発傾向であり、したがって痛み、吐気、胸焼けおよび時には出血および貧血をおこす。これらの効果はプロスタグランジン生合成の阻止と相関するものである。ＰＧＩ2およびＴＸＢ2が存在しないため、血小板は凝集能力を失い、それはそれで出血時間を長引かせる。多くの症例で、ＮＳＡＩＤｓがリウマチ性疾患の進行には好ましい効果を与えないことは明らかであり、状況によっては疾患プロセスを悪化さえすることを示唆する証拠がある。これは軟骨分解の増強による重度の基質喪失としてあらわれる。
【００４４】
その他の副作用、例えば塩および水分の貯留、高カリウム血症および腎血流減少等もプロスタグランジン合成阻害と関連し、治療を不可能にすることがある。若干の患者においてアナフィラキシーショックをおこすこともあるアスピリン過敏症では、アスピリン様薬剤による治療はできない。
【００４５】
親ＮＳＡＩＤｓは、非ステロイド性抗炎症剤として分類され、アルコール、エーテル、フェノール、アミノ（第一、第二または第三）、アミド、チオール、カルボン酸およびカルボキシルエステル基から選択される１つ以上の誘導体化可能基を有するいかなる化合物でもよい。このクラスの現在公知のＮＳＡＩＤｓは下記の化合物を含む：
【００４６】
【化３】
0005232083.tif 000004
【００４７】
【化４】
0005232083.tif 000005
【００４８】
【化５】
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【００４９】
【化６】
0005232083.tif 000007
【００５０】
【化７】
0005232083.tif 000008
【００５１】
【化８】
0005232083.tif 000009
【００５２】
【化９】
0005232083.tif 000010
【００５３】
上に示したように、既知ＮＳＡＩＤｓの多くは上に定義した種類の誘導体化可能基を一つより多く含む。これらの場合、これらの官能基の１つ以上が本発明による親油性基によって置換することができ、２つ以上の親油性基がある場合、これらは同じ親油性基でも異なる親油性基でもよい。
【００５４】
本発明の親油性抗炎症剤誘導体は親薬剤と炭素原子１８または２０の鎖長を有するｃｉｓまたはｔｒａｎｓ ｎ−９モノ不飽和脂肪酸、脂肪アルコールまたは脂肪アミンとの反応、またはこのような脂肪酸、脂肪アルコールまたは脂肪アミンの反応性誘導体、例えば酸塩化物、反応性エステル、ハロゲン化物およびメシレート等との反応によって合成される。ｎ−９とは、脂質部分のＣ末端から数えて９および１０位置の間に不飽和があることを示す。例えば使用し得る脂肪酸（およびそれらから誘導されるアルコール類およびアミン類）はｃｉｓ−９−オクタデセン酸（オレイン酸）、ｔｒａｎｓ−９−オクタデセン酸（エライジン酸）、ｃｉｓ−１１−エイコセン酸およびｔｒａｎｓ−１１−エイコセン酸である。
【００５５】
親薬剤と脂肪酸、脂肪アルコールまたは脂肪アミン化合物との間のカップリング反応は熟練せる当業者には公知の種々の方法によって達成できる。親薬剤に２つ以上の誘導化可能の官能基が存在する際には、保護基または改良合成法を用いてカップリング段階に必要な選択性を得ることができる。
【００５６】
一般的に、反応の進行は薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）および適した溶媒系を用いて追跡することができる。ＴＬＣによって確認して反応が完了したときに、生成物を有機溶媒で抽出し、クロマトグラフィーおよび／または適切な溶媒系からの再結晶によって精製するのが一般的である。ＮＳＡＩＤｓ出発原料にヒドロキシル、アミノ、チオールまたはカルボキシル基が１つより多く存在する場合は、アルキル化またはアシル化化合物の混合物が生成するかも知れない。その場合は個々のモノ−またはポリ−誘導体化合物を例えばクロマトグラフィーによって分離することができる。
【００５７】
本発明によって用いられる合成法は下に与えられる反応スキーム並びに本明細書の後部に与えられる実施例によって説明される。
【００５８】
第一の反応スキームはサリチル酸の誘導体化を説明する。 
【００５９】
【化１０】
0005232083.tif 000011
【００６０】
スキーム１
サリチル酸ナトリウムを脂肪アルコールメシレート（Ｒ'−ＯＭＳ）で処理すると、サリチル酸エステル（Ｉ）が生成する。この反応の変法はサリチル酸エステル−２−エーテル（ＩＩ）を与える。ここでエステルおよびエーテル中の炭化水素残基は同じである。この生成物は、サリチル酸エチル（ＩＶ）をアルキル化してエチルサリチレート−２−エーテル（Ｖ）を生成し、その後そのエチルエステルの加水分解によってサリチル酸−２−エーテル（ＩＩＩ）を得るという方法でより好適に得られる。
【００６１】
これらの方法の組み合わせにより、式ＩＩであらわされる、エステル置換基およびエーテル置換基が異なる二付加物の合成が可能となる。
【００６２】
第二の反応スキームはナプロキセンの誘導体化を説明する。
【００６３】
【化１１】
0005232083.tif 000012
【００６４】
スキーム２
ナプロキセンエステル（ＶＩＩ）またはアミド（ＶＩＩＩ）誘導体を、Ｎ，Ｎ '−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）またはＯ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ'−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）のようなカップリング試薬を用いてナプロキセン（ＶＩ）と対応するアルコールまたはアミン（Ｒ'−ＯＨまたはＲ'−ＮＨ2）から合成する。
【００６５】
長鎖エーテル同族体（ＸＩＩ）はナプロキセン（ＶＩ）から、最初に芳香族６−メチルエーテルを脱メチル化して生成物（ＩＸ）を与え、その後プロピオン酸側鎖をエステル化する（Ｘ）方法で合成される。フェノール部分のアルキル化（ＸＩ）およびエチル−エステルの加水分解は生成物（ＸＩＩ）を与えた。これらの方法の組み合わせは、エーテルおよびエステルまたはアミドの炭化水素残基が異なるかまたは同じである二付加物を与えることができる。
【００６６】
第三の反応スキームはピロキシカムの誘導体化を説明する。
【００６７】
【化１２】
0005232083.tif 000013
【００６８】
スキーム３
ピロキシカムエステル（ＸＩＶ）をピロキシカム（ＸＩＩＩ）および対応する脂肪酸塩化物（Ｒ'ＣＯＣ１）から合成する。ピロキシカムのアミド窒素のアシル化が可能であり、少量のＮ−アシル化生成物並びにジアシル化生成物が分離される。主要生成物（ＸＩＶ）の同定は改良ＮＭＲ法によって行われる。
【００６９】
第四の反応スキームはジクロフェナックの誘導体化を説明する。
【００７０】
【化１３】
0005232083.tif 000014
スキーム４
ジクロフェナックエステル（ＸＶＩ）またはアミド（ＶＸＩＩ）はジクロフェナック（ＸＶ）および対応するアルコールまたはアミン（Ｒ−ＯＨまたはＲ−ＮＨ2）から、ＤＣＣまたはＴＢＴＵのようなカップリング試薬を用いて合成される。異性体アミド（ＸＶＩＩＩ）は対応する脂肪酸Ｒ'−ＣＯＯＨとＸＶから、カップリング試薬としてＴＢＴＵを用いて作ることができる。
【００７１】
第五反応スキームは、ベタメタゾン（ＸＩＸ）およびプレドニゾロン（ＸＸ）の誘導体化を説明する。多くのステロイドには第一、第二および第三アルコール機能があり、それら全てをエステルに変換することができる。しかし適度に良い選択性があり、第一アルコールはカップリング試薬としてＤＣＣを用いて、或いは脂肪酸塩化物の直接使用によってエステル化される。
【００７２】
【化１４】
0005232083.tif 000015
【００７３】
スキーム５
本発明のチオ誘導体類は上記反応スキームによって示されるものと類似の方法によって合成される。
【００７４】
本発明による特異的親油性抗炎症剤誘導体の製法はこの後の実施例によって説明され、実施例６および７は中間体化合物の製法を説明する。
【実施例】
【００７５】
実施例１
２−ヒドロキシ安息香酸−（ｃｉｓ−９'−オクタデセニル）エステル
無水Ｎ，Ｎ'−ジメチルホルムアミド４０ｍｌ中水素化ナトリウム（６０％）（０．２１ｇ、５.２５×１０-3ｍｏｌ）の懸濁液に、２−ヒドロキシ安息香酸（サリチル酸）（０.７２６ｇ、５.２５×１０-3ｍｏｌ）を加え、混合物をＮ2 下で８０℃で１時間撹拌した。ｃｉｓ−９−オクタデセノール−メシレート（１ .８２ｇ、５.２５×１０-3ｍｏｌ）を加え、２２時間撹拌し続けた。冷やした反応混合物を濃縮し、残渣を１００ｍｌクロロホルムに溶解した。有機相を水で洗い、炭酸水素ナトリウムおよびブラインで希釈した。乾燥した相を蒸発乾固し、粗生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際溶出系としてヘキサン中５％エーテルを用いた。均質フラクションを蒸発すると表題化合物１.３ｇ（６４％）が得られた。
【００７６】
【化１５】
0005232083.tif 000016
【００７７】
実施例２
２−（ｃｉｓ−９'−オクタデセノキシ）−エチル−ベンゾエート
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４０ｍｌ中水素化ナトリウム（６０％）（０.２０６ｇ、５.１５×１０-3ｍｏｌ）の懸濁液に２−ヒドロキシ−エチル−ベンゾエート（０.８６ｇ、５.１５×１０-3ｍｏｌ）を加え、その混合物をＮ2下で８０℃で１時間撹拌した。ｃｉｓ−９−オクタデセノール−メシレート（１. ７８ｇ、５.１５×１０-3ｍｏｌ）を加え、４０時間撹拌し続けた。冷やした反応混合物を高真空で蒸発し、残留物をクロロホルムおよび水で処理した。乾燥した有機相を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際ヘキサン中５％エーテルで溶出した。均質フラクションを集めると表題化合物１.１１ｇ（５２％）が得られた。
【００７８】
【化１６】
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【００７９】
実施例３
２−（ｃｉｓ−９'−オクタデセノキシ）−安息香酸
エタノール２５ｍｌおよび水５０ｍｌ中２−（ｃｉｓ−９'−オクタデセノキシ）−エチル−ベンゾエート（１.１１ｇ、２.６６×１０-3ｍｏｌ）の懸濁液に水酸化リチウム（２.０ｇ）を加え、反応混合物を９０℃で６時間撹拌した。エタノールを蒸発し、クロロホルム１００ｍｌを加えた。５Ｎ ＨＣｌを注意深く添加してｐＨ７に調節した。有機相を水で洗った。溶媒除去後、生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際溶出系としてクロロホルム中２％メタノールを用いた。表題化合物１.０ｇ（９６％）が得られた。
【００８０】
【化１７】
0005232083.tif 000018
【００８１】
実施例４
１−（ｐ−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチルインドール−３−酢酸−（ｃｉｓ−９'−オクタデセニル）アミド
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６ｍｌ中１−（ｐ−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチルインドール−３−酢酸（インドメタシン）（０.５６ｇ、１.５６×１０-3ｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（０.５１ｇ、１.５６×１０-3ｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチラミン（０．５３ｍｌ、３.１２ ×１０-3ｍｏｌ）を加え、反応混合物をＮ2下で室温で３０分間撹拌した。無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６ｍ１中ｃｉｓ−９−オクタデセニル−アミン（０.４２ｇ、１.５６×１０-3ｍｏｌ）の溶液を加え、撹拌を３時間続けた。溶媒を高真空で蒸発し、残留物をクロロホルムと水とに分割した。乾燥した有機相を濃縮し、生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際クロロホルム中２％エタノールを溶媒系として用いた。均質フラクションを蒸発すると若干のＤＭＦを含む表題化合物が１.０５ｇ得られた。その生成物をエーテルに溶解し、水で洗い、有機相を乾燥し、蒸発すると表題化合物０.８８ｇ（９２％）が得られた。
【００８２】
【化１８】
0005232083.tif 000019
実施例５
Ｓ（＋）−２−（６−メトキシ−２−ナフチル）プロピオン酸−（ｃｉｓ−９' −オクタデセニル）−アミド（ナプロキセンオレイルアミド）
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍｌ中ナプロキセン（１.６５ｇ、７. １５×１０-3ｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（２.３０ｇ、７.１５×１０-3ｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチラミン（２.４５ｍｌ）１４.３×１０-3ｍｏｌ）を加え、反応混合物をＮ2下で室温で３０分間撹拌した。無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２５ｍｌ中１−アミノ−ｃｉｓ−９−オクタデセン（１.９１ｇ、７.１５×１０-3ｍｏｌ）の溶液を加え、３時間撹拌を続けた。溶媒を高真空で蒸発し、残留物をクロロホルムと水との間に分割した。乾燥した有機相を濃縮し、生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際溶出系としてクロロホルム中３％メタノールを用いた。均質フラクションを蒸発すると表題化合物２.７７ｇ（８１％）が得られた。
【００８３】
【化１９】
0005232083.tif 000020
【００８４】
実施例６
Ｓ（＋）−２−（６−ヒドロキシ−２−ナフチル）プロピオン酸
十分撹拌した無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中水素化ナトリウム（６０％）（１２.９ｇ、０.３３６ｍｏｌ）懸濁液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３００ｍｌ中エタンチオール（２４.３ｍｌ、０.３２８ｍｏｌ）溶液を滴下した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１５０ｍｌ中ナプロキセン（１５ｇ、０.０６５ｍｏｌ）溶液をゆっくり加え、反応混合物を１５０℃で３時間加熱した。澄明溶液を冷却し、３.５Ｎ ＨＣｌでｐＨを調節した（２−３）。溶媒を高真空で蒸発し、残留物をエーテル１５０ｍｌと水９０ｍｌとの混合物で処理した。固体沈殿物を濾去し、濾液を濃縮した。残留物をクロロホルム９０ｍｌと水９０ｍｌとの混合物で処理し、冷蔵庫に２４時間保存した。白色沈殿物を濾去し、洗い、乾燥すると、表題化合物１０.１ｇ（７２％）が得られた。
【００８５】
【化２０】
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【００８６】
実施例７
Ｓ（＋）−２−（６−ヒドロキシ−２−ナフチル）プロピオン酸−エチルエステル
無水エタノール１２００ｍｌ中Ｓ（＋）−２−（６−ヒドロキシ−２−ナフチル）プロピオン酸（５.０ｇ、２３×１０-3ｍｏｌ）溶液にｐ−トルエン−スルホン酸（０.２ｇ）を加え、反応混合物を２４時間還流加熱した。冷やした混合物を固体ＮａＨＣＯ3部分と共に撹拌した。その溶液を濾過し、溶媒を蒸発した。残留物をクロロホルムに溶解し、水で洗った。有機相を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムでクロロホルム中２％メタノールで溶出した。均質フラクションは表題化合物４.８ｇ（８０％）を与えた。
【００８７】
【化２１】
0005232083.tif 000022
【００８８】
実施例８
Ｓ（＋）−２−（６−［ｃｉｓ−９'−オクタデセノキシ］−２−ナフチル）−プロピオン酸−エチルエステル
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３５０ｍｌ中水素化ナトリウム（６０％）（０.４７ｇ、１１.８×１０-3ｍｏｌ）懸濁液にＳ（＋）−２−（６−ヒドロキシ−２−ナフチル）プロピオン酸−エチルエステルを加え、反応混合物をＮ2下で室温で２時間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｍｌ中ｃｉｓ−９−オクタデセノール−メシレート（３.９１ｇ、１０.７×１０-3ｍｏｌ）溶液を加え、撹拌を４８時間続けた。溶媒を高真空で蒸発し、残留物をクロロホルムと水で処理した。乾燥した有機相を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際クロロホルムで溶出した。均質フラクションは表題化合物２.９３ｇ（５６％）を与えた。
【００８９】
【化２２】
0005232083.tif 000023
【００９０】
実施例９
Ｓ（＋）−２−（６−［ｃｉｓ−９'−オクタデセノキシ］−２−ナフチル）−プロピオン酸（ナプロキセンオレイルエーテル）
テトラヒドロフラン１１５ｍｌおよび１Ｍ ＮａＯＨ２５ｍｌ中Ｓ（＋）−２−（６−［ｃｉｓ−９'−オクタデセノキシ］−２−ナフチル）−プロピオン酸−エチルエステル（３.７９ｇ、７.６７×１０-3ｍｏｌ）溶液を室温で１０日間撹拌した。１Ｍ ＨＣｌ１７ｍｌを加え、溶媒を蒸発した。残留物をクロロホルムおよび水に取り、１Ｍ ＨＣｌでｐＨを１に調節した。有機相を水で洗い、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮すると表題化合物３.２５ｇ（９４％）が得られた。
【００９１】
【化２３】
0005232083.tif 000024
【００９２】
実施例１０
４−Ｏ−（ｔｒａｎｓ−９'−オクタデセノイル）−２−メチル−Ｎ（２−ピリジル）−２Ｈ−１，２−ベンゾチアジン−３−カルボキサミド−１，１−ジオキシド
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２５ｍｌ中４−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ［２−ピリジル］−２Ｈ，１，２−ベンゾチアジン−３−カルボキサミド−１，１−ジオキシド（ピロキシカム）溶液に、ジクロロメタン２０ｍｌ中ｔｒａｎｓ−９−オクタデセノイルクロリド（２.２ｇ、７.５３×１０-3ｍｏｌ）溶液２ｍｌを加え、反応混合物をＮ2下で室温で撹拌した。残りの酸塩化物溶液を２ｍｌづつ２時間間隔で加えた。合計８０時間の反応時間後、溶媒を高真空で蒸発した。残留物をエーテル２００ｍｌに溶解し、水と少量のＮａＨＣＯ3（水溶液）で洗った。乾燥した（ＭｇＳＯ4）有機相を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際エチルアセテート／ヘキサン（４０：６０）で溶出した。均質フラクションを集め、蒸発すると、固体物質３.５６ｇが得られ、それをペンタン／エーテル中で還流した。冷やした混合物を一晩４℃に保った。固体物質を濾去し、ペンタンで洗い、乾燥すると表題化合物３.５ｇ（７８％）が得られた。
【００９３】
【化２４】
0005232083.tif 000025
【００９４】
実施例１１
［２−（２，６−ジクロロフェニル）アミノ］ベンゼン酢酸）−（ｃｉｓ−９' −オクタデセニル）−エステル
ジクロロメタン１５ｍｌおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３ｍｌ中（２−［２、６−ジクロロフェニル］）−アミノ］ベンゼン酢酸ナトリウム（ジクロフェナック）（０.４８ｇ、１.６×１０-3ｍｏｌ）溶液に、酢酸（０.０９ｍｌ、１.６×１０-3ｍｏｌ）、ｃｉｓ−９−オクタデシン−１−０１（０.４２ｇ、１．６×１０-3ｍｏｌ）、４−ジメチルーアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（５０ｍｇ）およびＤＣＣ（０.３４ｇ、１．７×１０-3ｍｏｌ）を加え、反応混合物を０ ℃で６時間、室温で４８時間撹拌した。白色沈殿を濾去し、ジクロロメタンで洗った。有機相を水で洗い、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮し、シリカゲルカラムで精製した。その際エチルアセテート／ヘキサン（４０：６０）で溶出した。均質フラクションは表題化合物０.４５ｇ（５３％）を無色液体として与えた。
【００９５】
【化２５】
0005232083.tif 000026
【００９６】
実施例１２
４−Ｏ−（ｃｉｓ−１１'−エイコサノイル）−２−メチル−Ｎ（２−ピリジル）−２Ｈ−１，２−ベンゾチアジン−３−カルボキサミド−１，１−ジオキシド
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３ｍｌ中４−ヒドロキシ−２−メチル−Ｎ［２−ピリジル］−２Ｈ−１，２−ベンゾチアジン−３−カルボキサミド−１，１−ジオキシド（ピロキシカム）（０.３ｇ、０.９９０×１０-3ｍｏｌ）溶液にジクロロメタン２.５ｍｌ中ｃｉｓ−１１−エイコサノイルクロリド（０.２９ｇ、０.９０×１０-3ｍｏｌ）溶液１.５ｍｌを加えた。残りの酸塩化物溶液を２時間後に加えた。合計８０時間の反応時間後に溶媒を高真空で蒸発した。残留物をエーテル４０ｍｌに溶解し、水および少量のＮａＨＣＯ3（水溶液）で洗った。乾燥した有機相を濃縮し、粗生成物をシリカゲルガラムで精製した。その際エチルアセテート／ヘキサン（４０：６０）で溶出した。均質フラクションを集め、蒸発すると表題化合物０.４２ｇ（７５％）が得られた。
【００９７】
【化２６】
0005232083.tif 000027
【００９８】
実施例１３
Ｓ（＋）−２−（６−メトキシ−２−ナフチル）プロピオン酸−ｃｉｓ−９'−オクタデセニル−エステル
ジクロロメタン１０ｍｌ中Ｓ（＋）−２−（６−メトキシ−２−ナフチル）プロピオン酸（ナプロキセン）（０.１５ｇ、０.６５ｍｍｏｌ）溶液に、ｃｉｓ−９−オクタデセノール（０．１８ｇ、０.６７ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（０.１３ｇ、０.６７ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（２０ｍｇ）を加え、反応混合物をＮ2下、室温で３時間撹拌した。生成した白色沈殿を濾去し、ジクロロメタンで洗った。 溶媒を蒸発し、生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際溶出液としてジクロロメタンを用いた。均質フラクションは表題化合物０.２５ｇ（８０％）を与えた。
【００９９】
【化２７】
0005232083.tif 000028
【０１００】
実施例１４
１１β，１７α，２１−トリヒドロキシプレグナ−１，４−ジエン−３、２０−ジオン−２１−エライデート
無水ジオキサン２００ｍｌおよびピリジン６.５ｍｌ中１１β、１７α、２１−トリヒドロキシプレグナ−１、４−ジエン−３、２０−ジオン（プレドニゾロン）溶液に、エライジン酸塩化物（８.０ｇ、２６.６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０℃で３時間撹拌した。少量のメタノールを加え、溶媒を高真空で蒸発した。残留物をエーテルと水とに分配した。有機相を酒石酸（水溶液）、ＮａＨＣＯ3（水溶液）および水で洗った。乾燥した有機相を濃縮し、生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際溶出系としてヘプタン／エチルアセテート／メタノール（６４：３２：４）を用いた。均質フラクションを蒸発すると表題化合物９.１８ｇ（９０％）が得られた。
【０１０１】
【化２８】
0005232083.tif 000029
【０１０２】
実施例１５
９−フルオロ−１１β，１７，２１−トリヒドロキシ−１６β−メチルプレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン−２１−エライデート
無水ジオキサン４０ｍｌおよびピリジン１ｍｌ中９−フルオロ−１１β，１７，２１−トリヒドロキシ−１６β−メチルプレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン（ベタメタゾン）（０.９ｇ、２.３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、エライジン酸塩化物（１.１３ｇ、３.０３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を周囲温度で４８時間撹拌した。少量のメタノールを加え、溶媒を高真空で蒸発した。残留物をエーテルと水とに分配した。有機相を酒石酸（水溶液）、ＮａＨＣＯ3（水溶液）および水で洗った。乾燥した有機相を濃縮し、生成物をシリカゲルカラムで精製した。その際溶出系としてヘプタン／エチルアセテート／メタノール（６４：３２：４）を用いた。不純フラクションを再精製し、均質フラクションを蒸発すると表題化合物１.０２ｇ（６５％）が得られた。
【０１０３】
【化２９】
0005232083.tif 000030
【０１０４】
ＮＳＡＩＤｓおよびその他の抗炎症剤が一般に処方される状態を治療する場合、本発明の親油性誘導体を経腸的または非経口的に全身投与することができる。
【０１０５】
好適形で経腸投与する場合、本発明の化合物はソフトまたはハードゼラチンカプセル、錠剤、顆粒、粒または粉末、糖衣錠、シロップ、懸濁液または溶液として処方することができる。
【０１０６】
非経口的投与の場合、本発明の化合物を注射または注入溶液、懸濁液または乳濁液として調製するのが適切である。
【０１０７】
本発明の医薬組成物は一般的方法によって調製される。例えばそれら製剤は不活性または薬力学的活性な添加物を含むことができる。錠剤または顆粒等は一般的な結合剤、増量剤、担体物質または希釈剤を含むことができる。液体製剤は例えば滅菌溶液の形で存在する。
【０１０８】
カプセルは活性成分以外に増量剤または濃化剤を含むことができる。さらに香味改良添加物並びに、保存料、安定剤、保水剤および乳化剤等の普通用いられる物質、浸透圧を変える塩類、緩衝剤およびその他の添加物等も含んでよい。
【０１０９】
所望ならば、本発明の化合物の薬剤は抗酸化剤、例えばトコフェロール、Ｎ−メチル−トコフェラミン、ブチル化ヒドロキシアニソール、アスコルビン酸またはブチル化ヒドロキシトルエン等を含むことができる。
【０１１０】
本発明による化合物の用量は治療すべき疾患の性質およびその進行段階によって、使用法および使用経路並びに患者の要求によって変化する。一般に全身投与する際の成人１日量は約０.１−１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、好適には０.５−３０ｍｇ／ｋｇ／日である。
【０１１１】
本発明はさらに、炎症性、疼痛誘発および／または発熱状態の治療法において、そのような治療を必要とするヒト患者に本発明の少なくとも１種類の化合物を投与することを含む治療法に関係する。
【０１１２】
現在好まれる本発明の抗炎症薬親油性誘導体は、親薬剤がナプロキセンであるものである。特に、我々はナプロキセンオレイルエーテル、ナプロキセンオレイルエステルおよびナプロキセンオレイルアミドがナプロキセンそのものよりも改善された抗炎症効果を示すことを見いだした。動物in vivoモデルにおいて、これらの誘導体は肉芽腫液体含有量に関して、炎症の第一相に対して改善された効果を示した。さらに驚くべき効果は、特にナプロキセンオレイルアミド投与で肉芽腫組織乾燥重量が減少したことである。これは、既知ＮＳＡＩＤｓによる治療では得られなかった組織損傷の減少を意味する。この効果の大きさは、治療量のステロイドによってのみ期待できるものであった。ＮＳＡＩＤｓの重症副作用である軟骨分解の減少も認められた。
【０１１３】
これらの所見、例えば肉芽腫乾燥重量の減少によってわかる直接的改善効果、および軟骨分解の減少等の組み合わせはナプロキセン誘導体の治療指数を有意に改善する。これらの誘導体で治療した動物は、親化合物で治療した動物よりもかなり小さい侵襲性を示した。これは、これら誘導体の消化器副作用の誘発力がより小さいことを強く示唆する。
【０１１４】
理論によって束縛されるものではないが、この高まった抗炎症効果は、これら誘導体の親油性性質のために細胞による取り込みが増加するためであり、またはナプロキセンの活性とは全く異なる活性によるものであると考えることができる。ナプロキセンに付加した脂肪酸末端は反応性酸素種（ＲＯＳ）の掃去剤（これは多くのメカニズムによって抗炎症性であり得る）として作用するらしい。例えば、組織損傷はＲＯＳ感受性プロテアーゼーインヒビターの保護によって阻止されるし、タンパク質に対する酸化的損傷によって生成する内因性抗原類の形成は防止され、ヒアルロン酸を解重合から保護することによって血管由来因子の生成を阻止する。
【０１１５】
移植軟骨では、ナプロキセン様のその他のＮＳＡＩＤｓはプロテオグリカンおよびコラーゲン喪失を増加する傾向がある。それに対して、本発明のナプロキセン誘導体は軟骨からのプロテオグリカンまたはコラーゲンの喪失を高める傾向を示さない。シクロオキシゲナーゼ阻害は軟骨に対するＮＳＡＩＤｓの有害作用の原因であると考えられ、ナプロキセン誘導体はナプロキセンと共にこの酵素を阻止し得ることから、ナプロキセン誘導体のより大きいサイズおよび親油性特性が軟骨基質からナプロキセン誘導体を排除することが示唆される。
【０１１６】
これらナプロキセン誘導体の高められた抗炎症効果を明らかにする実験をここに詳細に述べる。
【０１１７】
生物学的効果
使用した肉芽腫誘起性軟骨分解のin vivoモデルは、滅菌コットンに包んだラット大腿骨頭軟骨をマウスの背中の皮下に埋め込んだものである。そのコットンは明白なＴ細胞が関係した肉芽腫性反応を誘発し、それは移植軟骨からの基質化合物の喪失に通ずる。可能性のある薬剤の抗関節炎効果を試験する手段として、このモデルは幾つかの明白な長所を有する。このモデルは軟骨基質の喪失を確認するための定量的生化学的終点を有する慢性糜爛性疾患を含む。抗炎症性活性はコットン肉芽腫の湿潤および乾燥重量から判断でき、軟骨保護効果は移植軟骨のグリコサミノグリカンおよびヒドロキシプロリン含有量（それぞれプロテオグリカンおよびコラーゲンを示す）から測定できる。肉芽腫は分離しており、必要に応じて摘出し、種々のメディエータまたは酵素を評価することができる。
【０１１８】
雌ＴＯマウス（２１±４ｇ）群（ｎ＝１０）においてコットンで包んだラット大腿骨頭軟骨を皮下に移植した。２週間目にインプラントを除去した。コットンは肉芽腫様反応を誘発し、同時にプロテオグリカンを移植軟骨から遊離させた。等モル量のナプロキセン（３０ｍｇ／ｋｇ）およびナプロキセン誘導体（６０ｍｇ／ｋｇ）を毎日経口投与し、肉芽腫発生に対する影響および軟骨プロテオグリカン含有量に与える影響を評価した。それら化合物はリポソームとして処方され、空のリポソームを賦形薬コントロールとして用いた。
【０１１９】
１５ｍｇ／ｍｌリポソーム組成物は次のように調製した：グリセロール／滅菌水緩衝液中で脂質誘導体（ＤＭＳＯ中）とレシチン（エタノール中）を１：１（ｗ／ｗ）で混合し、その後透析して溶媒類を除去する。誘導体化しないＮＳＡＩＤｓ化合物の７.５ｍｇ／ｍｌリポソーム組成物は、グリセロール／滅菌水中で空のリポソームに上記化合物を加えることによって調製した。
【０１２０】
結果をマン−ホィットニーを用いるＩＮＳＴＡＴで分析した。ｐ値はタイ（ties）を補正した。ｐ＜０.０５を有意とした。
【０１２１】
試験した化合物
ナプロキセン（ＶＩ）、ナプロキセンオレイルエーテル（XII）、ナプロキセンオレイルエステル（VII）およびナプロキセンオレイルアミド（VIII）。化合物XII、VIIおよびVIIIのＲ'はｃｉｓ−ＣＨ2（ＣＨ2）7ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ2）7 ＣＨ3である。
【０１２２】
このモデルでナプロキセンで得られたこれらの結果は、文献に報告されたナプロキセンおよびその他のＮＳＡＩＤｓを用いた同様な研究から判明した結果に匹敵する。
【０１２３】
薬剤投与を対照と比較した場合、肉芽腫の液体含有量は減少した、そしてその減少はナプロキセンオレイルアミドの場合には有意であることが判明した。組織乾燥重量はナプロキセンによって影響を受けないように見えたが、親油性有意は減少をおこすように見え、それはここでもナプロキセンオレイルアミドの場合に有意であった。これらの顕著な所見は、ナプロキセン誘導体がナプロキセンそのものに比し、軟骨分解を減らすことを強く示唆する。これは実際に確認された。なぜならばナプロキセンがリポソーム対照および親油性誘導体に比較して移植軟骨からのプロテオグリカン喪失を増加することがわかったからである。同じ所見はヒドロキシプロリン含有量として評価した軟骨分解にも反映された。但しナプロキセン投与動物からのインプラントは比較的少ないコラーゲンをもつ傾向があったが、投与群の間に統計的有意差はなかった。
【０１２４】
その上、ナプロキセン投与動物は侵襲的挙動を示し、その結果１０インプラントのうち４インプラントを失った。リポソーム投与群またはナプロキセン誘導体投与群では同様な侵襲的挙動の結果としてインプラントが失われることはなかった。これはナプロキセン誘導体が親ＮＳＡＩＤｓよりもよく耐えられたことを示唆する。
【０１２５】
上記の実験は、本発明によって誘導体化することによりナプロキセンの生物学的特性がかなり改善されることを示すものである。
【０１２６】
プレドニゾロンおよびベタメタゾンおよびそれらの誘導体のラット腹腔内単球／ マクロファージに与える影響
雄ラットの腹腔内に０時に１０ｍｇ／ｍｌ試験化合物を４ｍｌ、または賦形薬のみを注射した。投与後６、１２、２５、４８および７２時間目に腹腔を生理的食塩液４０ｍｌで洗浄し、分離した細胞を洗い、数え、分別した。それらの細胞をオプソニン結合−チモサン（zymosan）、Ｎ−ホルミル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニン（ｆＭＬＰ）またはホルボール−１２−ミリステート１３−アセテート（ＰＭＡ）で刺激し、細胞の活性を化学ルミネッセンス生成によって１時間にわたり測定した。
【０１２７】
誘導体の効果は明らかで、驚くべきものである。図５からわかるように、プレドニゾロンがチモサン刺激−細胞の活性に与える影響は６時間目の化学ルミネッセンスのわずかな減少として認められるだけである。プレドニゾロンエライデートでは、炎症細胞の活性は投与後４８時間にわたって対照に比較して減少する。その効果はプレドニゾロンそのものの効果より明らかに大きく、持続する。
【０１２８】
選択したプレドニゾロン誘導体の効果をさらに研究するために別の実験系列を行った。この実験ではプレドニゾロンの７種類の脂肪酸エステルの抗炎症効果を比較した。
【０１２９】
雄ラットに試験化合物１０ｍｇ／ｍｌの或る用量、または賦形薬のみを０時に腹腔内注射した。投与後４８時間に腹腔を洗浄し、分離した細胞を洗い、数え、分別した。細胞をその後オプソニン結合−チモサン、Ｎ−ホルミル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニン（ｆＭＬＰ）またはホルボール１２−ミリステート１３−アセテート（ＰＭＡ）で刺激し、細胞活性を化学ルミネッセンス生成によって１時間にわたり測定した。
【０１３０】
誘導体類の効果は明らかで驚くべきものである。図６からわかるように、特に好ましい脂肪酸の一つの例として、プレドニゾロン−エライデートの効果は最大であった。その他の脂肪酸誘導体では化学ルミネッセンスはほんのわずかな影響を受けただけである。プレドニゾロン−エライデートでは炎症細胞の活性は投与後４８時間にわたり、対照および残りの脂肪酸誘導体に比較して減少する。
【０１３１】
図７に示すように、腹腔洗浄液中の細胞数は実質的に減少し、この減少は投与後４８時間まで明らかであった。
【０１３２】
細胞を分別すると、腹腔洗浄液中のマクロファージの数に主な影響が出ることがわかった。これは図８に示される。プレドニゾロンではその効果は遥かに少なく、６時間および１２時間目に認められただけである。ベタメタゾンとベタメタゾン−エライデートとの比較でも、腹腔洗浄液中のマクロファージの数の測定で、さほど明らかではないが、同様な効果が認められた（図９）。
【０１３３】
プレドニゾロン−エライジン酸エステルの直接的抗喘息効果を研究するために、試験化合物を気道過剰反応モデルで評価した。
【０１３４】
ラットの内毒素誘起性気道変化に与えるプレドニゾロンエライジン酸の影響
急性炎症性気道変化のラットモデルにおいて、動物をエアゾール化内毒素（ＬＰＳ）にさらす。これは９０分以内に気管および気管支に広汎性好中性炎症をおこし、同時に気管支肺胞液中の好中球数の増加および喘息の重要な特徴である気道反応性上昇をおこす。１０匹の雄Ｆ３４４ラットをチェンバー内で３０分間１００μｇ／ｍｌ ＬＰＳにさらした。エアゾールにさらす１２時間前と４時間前に動物にプレドニゾロンまたはプレドニゾロン誘導体、３ｍｇ／ｋｇを点滴注入した。エアゾール被曝終了後９０分に、５−ヒドロキシトリプタミンに対する気道反応性の測定および気道炎症の評価のために動物の準備を行った。肺抵抗の最低５０％増加が認められるまで、５ＨＴを５分ごとに静脈注射に加えた。そして肺抵抗を５０％増加するのに必要な５ＨＴ量、ＰＣ50ＲL、を計算した。プレドニゾロンも誘導体も気管支肺胞液中の炎症細胞数に影響を与えなかった。気道反応性は図１０に示すように、プレドニゾロン−エライジン酸エステルによって驚くべく高程度の影響を受けた。これは喘息治療において非常に重要であるかも知れない。
【０１３５】
抗癌剤
効果的な癌化学療法治療は若干の重大な障害のために制限される。そのうちの幾つかは完全にまたは一部克服できるかも知れない。作用を確実により特異的にするあらゆる薬剤の変形は、患者にとって直接的利益となる。最も重要な要求は、問題の腫瘍が提供される治療に対して感受性を有することである。これは治療薬の種類および作用メカニズムに大きく依存し、実際の治療を開始する前の生検／分離−腫瘍細胞のin vitro実験で評価することができる。腫瘍を数種の薬剤に感受性にし得る方法も知られている。
【０１３６】
化学療法薬剤はそれらの性質として細胞に毒性を有する。悪性腫瘍細胞がその薬剤に比較的敏感である限り、好ましい状況となる。もしもその薬剤が腫瘍組織／腫瘍細胞に蓄積する傾向があれば、治療ポテンシャルはさらに改善される。治療指数をさらに改善するためには器官標的化が重要な要因である。一次腫瘍、特に初期、または別の腫瘍型から転移した一次腫瘍は、肝臓、脾臓、肺、脳等の選ばれた組織に限られることが非常に多い。薬剤の性質、その処方、または投与法がその薬剤を選択した組織に向かわせるならば、非常に選択的な腫瘍根絶が達成されるかも知れない。
【０１３７】
本発明の好適抗癌性誘導体は以下に述べる試験で証明されるように、改善された治療指数を有する。
【０１３８】
親抗癌化合物は、悪性腫瘍の治療に有用な特性を有する群に分類でき、アルコール、エーテル、フェニル、アミノ、アミド、チオール、カルボン酸およびカルボン酸エステル基から選択される１つ以上の誘導化可能基を有する化合物ならばいかなる化合物でもよい。本発明によって誘導体化できる現在使用できる抗癌剤の若干の例は次のものを含む：
【０１３９】
【化３０】
0005232083.tif 000031
【０１４０】
【化３１】
0005232083.tif 000032
【０１４１】
【化３２】
0005232083.tif 000033
【０１４２】
【化３３】
0005232083.tif 000034
【０１４３】
【化３４】
0005232083.tif 000035
【０１４４】
上記のように、公知の抗癌剤の多くは上に定義した種類の誘導化可能基を１つより多く含む。これらの場合、これら官能基の１つ以上を本発明による親油性基によって置換することができる。そして２つ以上の親油性基が存在する場合、これらは同じ基でも異なる基でもよい。
【０１４５】
本発明の親油性抗癌性誘導体は既述の一般的製法によって合成することができる。
【０１４６】
例えば、以下の反応スキームはドキソルビシン（XXI）およびダウノルビシン（XXII）からのアミド類およびカルバメート類の形成を説明する。親化合物（類）のアミノ基を、脂肪酸（ＲＣＯＯＨ）または脂肪アルコール（Ｒ'ＯＨ）から作られるアシル−チアゾリジン−２−チオンまたはアルキルオキシ−カルボニル−チアゾリジン−２−チオン試薬と反応させて、アミドまたはカルバメートに選択的に誘導することができる。
【０１４７】
【化３５】
0005232083.tif 000036
【０１４８】
スキーム６
次に記すスキーム７も２つの抗癌性アルキル化剤クロラムブシル（XXIII）およびメルファラン（XXIV）の誘導体化を説明するものである。一官能価クロラムブシルは多数の方法によってエステル化され、またはアミドに変換できる。しかし二官能価メルファランは自己縮合または環形成反応等の多くの副反応を受けることがある。未保護メルファランにおいては、ＤＣＣまたはＴＢＴＵ等のカップリング試薬の使用の有用性は限られているが、アミン官能基はアシル−チアゾリジン−２−チオン試薬によって、対応するアミドに都合よく変換できる。
【０１４９】
【化３６】
0005232083.tif 000037
【０１５０】
スキーム７
本発明による特異的抗癌性誘導体の製法は以下の実施例によって説明される。実施例１８および２１は中間体の製法に関係する。
【０１５１】
実施例１６
クロラムブシル−オレイル エステル
ジクロロメタン７０ｍｌ中４−［ｐ−［ビス（２−クロルエチル）アミノ］−フェニル］酪酸（クロラムブシル）（０.９６６ｇ、３.１８ｍｍｏｌ）およびオレイルアルコール（０１８９３ｇ、３.３３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＣ（０.７２ｇ、３.５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチル−アミノ−ピリジン（ＤＭＡＰ）（２５ｍｇ）を加え、反応混合物を周囲温度で１２時間撹拌した。固体沈殿を濾去し、残留物をＣＨ2Ｃｌ2５０ｍｌに溶解し、水で洗った。有機相にエーテル２５ｍｌを加え、固体沈殿を濾去した。濾液を蒸発し、残留物をシリカゲルカラムで精製した。この際ＣＨ2Ｃｌ2を溶出液として用いた。均質フラクションを蒸発すると表題化合物１.０ｇ（５５％）が得られた。
【０１５２】
【化３７】
0005232083.tif 000038
【０１５３】
実施例１７
エライジン酸メルファランアミド
ＤＭＦ２４ｍｌ、水４ｍｌおよびトリエチルアミン４ｍｌ中、Ｌ−３−［ｐ−［ビス（２−クロルエチル）アミノ］−フェニル］アラニン（メルファラン）（０.６０３ｇ、１.９８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ１２ｍｌ中３−チアゾリジン−２−チオン−エライジルアミド（０.６１７ｇ、１.６１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を暗所で室温で１.５時間撹拌した。溶媒を高真空で蒸発し、残留物をクロロホルム１００ｍｌに溶解し、ｐＨ５.５の水で洗った。有機相をＡｇＮＯ3（水溶液）、水（ｐＨ５.５）および飽和ＮａＣｌ（水溶液）で洗った。その有機相を蒸発すると表題化合物０.８４ｇ（７５％）が得られた。
【０１５４】
【化３８】
0005232083.tif 000039
【０１５５】
実施例１８
３−エライドイル−１，３−チアゾリジン−２−チオン
ジクロロメタン（２０ｍｌ）中エライジル酸（２.０ｇ）７.１ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（８６ｍｇ、０.７ｍｍｏｌ）、１，３−チアゾリジン−２−チオン（１. ０ｇ、８.４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１.７ｇ、８.２ｍｍｏｌ）の混合物をＮ2 下で０℃で１時間撹拌し、その後周囲温度でさらに５時間撹拌した。追加のＤＣＣ（４１ｍｇ、０.２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を同温度で２時間撹拌した。処理後フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2；四塩化炭素−クロロホルム１：０、１：１、０：１）を行うと、表題化合物２.５６ｇ（９４％）が黄色ワックス様固体として得られた。
【０１５６】
【化３９】
0005232083.tif 000040
【０１５７】
実施例１９
エライジン酸ダウノルビシンアミド
塩酸ダウノルビシン（２５０ｍｇ、０.４４ｍｍｏｌ）および３−エライドイル−１，３−チアゾリジン−２−チオン（実施例１８、４００ｍｇ、１.０４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍｌ）と、炭酸ナトリウム（０.１２Ｍ ＮａＨＣＯ3、０.８Ｍ Ｎａ2ＣＯ3）で緩衝したブライン（４Ｍ ＮａＣｌ ２０ｍｌ）との間に分配した。混合物を暗所でＮ2下で周囲温度で４時間激しく撹拌した。相を分離し、水相をエーテルで抽出した（３×１０ｍｌ）。合一した有機相を硝酸ナトリウム水溶液で洗った（３×１０ｍｌ ２Ｍ）。存在する１、３−チアゾリジン−２−チオンを除去するために、ピリジン（１.０ｍｌ）を加え、エーテル相を、硝酸銀（０.２Ｍ）を含む硝酸ナトリウム（２Ｍ）水溶液（２×３ｍｌ）と共に激しく振とうした。各処理後、混合物をセライトを通して濾過し、エーテル（２０ｍｌ）ですすいだ。エーテル相を硝酸ナトリウム水溶液（５ｍｌ ２Ｍ）およびブライン（５ｍｌ）で洗い、最後に乾燥した（ＭｇＳＯ4）。粗生成物をピリジン（０.２％ｗ／ｗ）で予備調製したシリカゲルカラムで精製した。溶出液としてクロロホルム中０.２％ピリジンおよび０.６％メタノールを用いた。表題化合物３３２ｍｇ（９５％）が暗赤色粉末として得られた。
【０１５８】
【化４０】
0005232083.tif 000041
【０１５９】
実施例２０
エライジン酸ドキソルビシンアミド
塩酸ドキソルビシン（４００ｍｇ、０.６９ｍｍｏｌ）を上記のように、ＴＨＦ（３５ｍｌ）および緩衝ブライン（３５ｍｌ）中、３−エライドイル−１，３−チアゾリジン−２−チオン（実施例１８、４００ｍｇ、１.０４ｍｍｏｌ）で周囲温度で１０分間処理した。反応を完了するために追加のアミド化試薬（実施例１８：１００ｍｇ、０.２６ｍｍｏｌ）が必要であった。６時間後、相を分離し、水相をＴＨＦで抽出した。合一した有機相をブラインで洗い、乾燥した（ＭｇＳＯ4）。実施例１９に記載したフラッシュクロマトグラフィーによって精製すると表題化合物４４０ｍｇ（７９％）が暗赤色結晶として得られた（ｍｐ．１１５−１１６℃）。
【０１６０】
【化４１】
0005232083.tif 000042
【０１６１】
実施例２１
３−（ｃｉｓ−９−オクタデセン−１−オキシカルボニル）−１，３−チアゾリジン−２−チオン
上記化合物は実質的に、エチル同族体のためのチェン（Chen）およびヤング（ Yang）の方法によって合成した。Ｎ2下で０℃に保持したクロロホルム（乾燥、エタノール−フリー；１５ｍｌ）中２−チオキソ−３−チアゾリジンカルボニルクロリド2（１.６ｇ、８.６ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（１.３ｍｌ、９.３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、オレイルアルコール（ｃｉｓ−９−オクタデセン−１−オール；２．８ｇ、１０.４ｍｍｏｌ）を１０分間以内に加えた。その混合物を同温度で８０分間撹拌し、氷水（５ｍｌ）を加えた。塩酸（０.５ｍｌ １Ｍ）を滴下して水相のｐＨを６に調節した。標準的に処理し、その後フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2：ヘキサン−クロロホルム１：１、１：２、１：３、０：１）を行うと、黄色油１.７８ｇ（５０％）が得られた。
【０１６２】
【化４２】
0005232083.tif 000043
【０１６３】
実施例２２
ダウノルビシン オレイル カルバメート、［Ｎ−（ｃｉｓ−９−オクタデセン−１−オキシカルボニル）ダウノルビシン］
塩酸ダウノルビシン（２５０ｍｇ、０.４４ｍｍｏｌ）を３−（ｃｉｓ−９−オクタデセン−１−オキシカルボニル）−１，３−チアゾリジン−２−チオン（実施例２１、５５０ｍｇ、１.３３ｍｍｏｌ）と共に実施例１９においてアミド同族体について記載したように２７時間処理した。実施例２０に記載したようにＴＨＦで抽出した後得られた粗生成物をエーテル（４０ｍｌ）に溶解した。存在する１，３−チアゾリジン−２−チオンを請求項１９の方法によって除去した。粗生成物をピリジン（０.２％ｗ／ｗ）で予備調製したシリカゲルガラムで精製した。その際ベンゼン中０.２％ピリジンおよび０−１０%メタノールで溶出した。表題化合物３２１ｍｇ（８７％）が暗赤色粉末として得られた。
【０１６４】
【化４３】
0005232083.tif 000044
【０１６５】
実施例２３
ドキソルビシン オレイル カルバメート、［Ｎ−（ｃｉｓ−９−オクタデセン−１−オキシカルボニル）ドキソルビシン］
塩酸ドキソルビシン（２５０ｍｇ、０.４３ｍｍｏｌ）を３−（ｃｉｓ−９−オクタデセン−１−オキシカルボニル）−１，３−チアゾリジン−２−チオン（実施例２１：７００ｍｇ、１.６９ｍｍｏｌ）と共に実施例１９においてアミド同族体について記載したように６９時間処理した。ＴＨＦを減圧下で除去し、生成した懸濁液を水（２０ｍｌ）とピリジン−クロロホルム１：４（２５ｍｌ）に分配した。未溶解の物質を、有機相に加えたピリジン（１５ｍｌ合一）で処理した。揮発物は減圧下で蒸発によって除去した。残留残渣（１.１ｇ）を硝酸銀水溶液（０.６ｍｌ １Ｍ）を含む酢酸エチルで２０−３０℃で２０分間超音波処理した。生成した懸濁液をセライトを通して濾過し、酢酸エチル（２０ｍｌ合一）ですすいだ。超音波処理サイクルをさらに硝酸銀（０.４ｍｌ １Ｍ）で繰り返した。合一した有機相をブライン（５ｍｌ）で洗い、乾燥した（ＭｇＳＯ4）。回転蒸発器で酢酸エチルを蒸発することによって得た粗生成物（０.６１ｇ）を実施例２２に記載のようにしてフラッシュクロマトグラフィーによって精製すると、表題化合物２０８ｍｇ（５８％）が暗赤色ガラスとして得られる。
【０１６６】
【化４４】
0005232083.tif 000045
【０１６７】
実施例２４
タキソール−２'−エライデート
タキソール（２５ｍｇ、０.０２９ｍｍｏｌ）を先ず最初に、ピリジン（３×１ｍｌ）への溶解および減圧下における蒸発を繰り返すことによって乾燥した。それからピリジン（１ｍｌ）に溶解すると、澄明な無色溶液が得られ、それにＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ'−エチルカルボジイミド塩酸（９ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２ｍｇ、０.０２ｍｍｏｌ）、エライジン酸（１０ｍｇ、０.０３５ｍｍｏｌ）および無水ＭｇＳＯ4（３ｍｇ）を混合物として加えた。反応物をＮ2下で室温で４８時間撹拌した。ピリジンを減圧下で蒸発して除去し、残留物をＤＣＭ（２５ｍｌ）に溶解した。有機相をその後乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下で蒸発すると白色固体が得られる。それをフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2；ジエチルエーテルヘキサン１：１ないし１：０勾配溶出）によって精製すると表題化合物が白色固体（２５ｍｇ、７７％）として得られた。
【０１６８】
【化４５】
0005232083.tif 000046
【０１６９】
ネズミ皮下ＡＤＪ／ＰＣ６形質細胞腫およびそのシスプラチン抵抗サブラインにおけるメルファラン−エライジンアミドおよびクロラムブシル−オレイルエステルのin vivo抗腫瘍効果
不飽和度の異なるクロラムブシルおよびクロラムブシル−脂肪酸結合物のヒトリンパ腫および正常ヒト末梢血リンパ球の細胞毒性がアネル（A.Anel）らのBioc hemical Pharmacology、４０巻、６号、１１９３−１２００ページ、１９９０、に記載されている。クロラムブシル−アラキドン酸およびクロラムブシル−ドコサヘキサエン酸のリンパ腫細胞に対する毒性はクロラムブシルまたは遊離脂肪酸の個々の毒性ポテンシャルと等しいかまたはより高い。これに対し、オレイン酸およびエライジン酸を例とする本発明の脂肪酸誘導体は親薬剤のみに比し遥かに毒性が小さい。これは下記の実験によって示される。
【０１７０】
ネズミ充実性ＡＤＪ／ＰＣ６形質細胞腫および、シスプラチンおよびその他のアルキル化剤に対する耐性があるということから選択されたそのサブラインを体重２０−２５ｇのＢＡＬＢ／Ｃ雌マウスに１ｍｍ3腫瘍断片として皮下に移植した。メルファランまたはメルファランエライジンアミド、またはクロラムブシルまたはクロラムブシル−オレイルエステルを腫瘍移植後２０日目に腹腔内に単回投与した。腫瘍を３０日目に切除し、対照および治療群の重量を比較した。活性はＥＤ90として測定した抗腫瘍効果と比較した薬剤毒性測定値、ＬＤ50（ｍｇ／ｋｇ）、に基づいて決められた。ＥＤ90は、対照と比較して腫瘍質量を９０％減少させるのに必要な量（ｍｇ／ｋｇ）である。
【０１７１】
表１からわかるように、メルファラン−エライジンアミドおよびクロラムブシルオレイルエステルどちらのＬＤ50（ｍｇ／ｋｇ）も、それぞれメルファランおよびクロラムブシルのそれらと比較して遥かに多量であった。これは毒性の減少を意味する。
【０１７２】
【表１】
0005232083.tif 000047
【０１７３】
メルファラン−エライジン酸アミドでは感受性−およびシスプラチン耐性腫瘍どちらでもＥＤ90に達したが、メルファランはシスプラチン耐性腫瘍では全く活性を示さなかった。メルファラン−エライジン酸アミドのＥＤ90は６０ｍｇ／ｋｇであった。
【０１７４】
多剤耐性を有する、または有しない細胞内へのドキソルビシンおよびドキソルビシン誘導体の細胞内蓄積
腫瘍細胞は長期間化学療法後、抗癌剤に耐性を示すことがある。薬剤耐性の一つの形は、多剤耐性（ＭＤＲ）である。その場合細胞はビンカアルカロイド類、アントラサイクリン類、アクチノマイシンＤおよびコルヒチン等の種々の薬に交差耐性を示す。ＭＤＲ表現型はＰ−糖タンパク質と呼ばれる特殊の群の膜通過性糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）の過剰発現と関係している。Ｐ−ｇｐはエネルギー依存性薬剤排出ポンプとして機能するように見える。Ｐ−糖タンパク質は抗癌剤を細胞外に活発に排出することによって抗癌剤の細胞内濃度をその有効濃度より下に下げることができる。カルシウムチャンネル−ブロッカーであるベラパミルは、抗腫瘍薬の細胞内濃度を高めることによってＭＤＲを元に戻すことができる。ジヒドロピリジンおよびピリジン同族体、カルモジュリン阻止物質、合成イソプレノイド類、向リソソーム剤、ビスベンジルイソキノリン−アルカロイド、キニジン、キナクリン、リドカイン、フェノキサジン、アミオダロンおよびシクロスポリンＡは、細胞に同時投与した際、またはin vivoに同時投与される際にＭＤＲを変化させる薬のその他の例である。まだ実験的レベルであるが、癌治療においては耐性変更剤の使用が一般的になりつつある。
【０１７５】
これらの高度に生体内活性である化合物はそれら自体問題がないわけではない。軽度ないし重度の生命を脅かす副作用が認められるため、in vitroで認められる非常に有望な結果を臨床的に得ることは不可能である。
【０１７６】
これらの作用物質の大部分はカチオン性且つ親油性である。親油性は耐性モジュレータにとって好ましい特徴である。リポソーム封入ドキソルビシンについてその多剤耐性克服効果を試験した。細胞内薬剤濃度はドキソルビシンのリポソームを用いると２倍になった（Cancer chemotherapy and Pharumacology、１９９１、２８巻：２５９−２６５ページ）。リポソームのみでもＭＤＲに影響するかも知れない（リポソームによって誘起される多剤耐性細胞内への薬剤の蓄積の増加、Cancer Research、５２巻、３２４１−３２４５、１９９２）、（カルジオリピン、ホスファチジルイノシトール、ジオレイルホスファチジン酸のリポソーム）。
【０１７７】
細胞を２×１０5／ｍｌの懸濁液にして、２０μＭの薬剤にさらした。種々の時間に部分を取り、氷冷ＰＢＳですすぎ、その後フローサイトメーターを通過させた。図１１にはドキソルビシンおよびドキソルビシン誘導体の時間の関数としての蓄積が見られる。細胞系ＣＯＲ−Ｌ１２３／Ｐ（ヒト大肺細胞）およびその耐性細胞系ＣＯＲ−Ｌ１２３／Ｒではドキソルビシン誘導体（ドキソルビシン−エライジン−アミドおよびドキソルビシン−オレイル−カルバメート）濃度はほぼ同じであった、一方ドキソルビシン濃度は耐性細胞系では遥かに低かった。
【０１７８】
多剤耐性を有するまたは有しない細胞内へのダウノルビシンおよびダウノルビシ ン誘導体の細胞内蓄積
細胞を上記のようにダウノルビシン、ダウノルビシン−エライジンアミドおよびダウノルビシン−オレインカルバメートにさらした。薬剤濃度は１０μＭに減らした。耐性および非耐性細胞への取り込みによる蛍光は誘導体に関しては２種類の細胞で多かれ少なかれ同じであり（図１２）、ダウノルビシンそのものではこれらの細胞内への取り込みによる蛍光は２種類の細胞で差があった（図１３）。
【０１７９】
ドキソルビシン−エライジン酸アミドの同時投与によるドキソルビシンに対する 細胞の感受性増加
ＭＴＴアッセイを用いて化合物の毒性を調べた。アッセイ前の６日間、細胞を化合物にさらした。使用した細胞系はＰｇＰを過剰発現するＨ６９／ＬＸ４、ヒト小肺細胞系であった。その細胞系はドキソルビシン−エライジン酸アミドのみに高度に耐性であり、ドキソルビシン−エライジン酸アミドのＩＣ50値は＞５０μＭである。しかし驚くべきことに、ドキソルビシン−エライジン−アミドを５μＭ濃度でドキソルビシンと同時に投与すると、上記細胞系のドキソルビシン感受性はＩＣ50＝０.４μＭからＩＣ50＝０.０８μＭに高まる。２０μＭドキソルビシン−エライジン−アミドの添加はドキソルビシン感受性をＩＣ50０.０４＝μＭに高める。表２の結果は、この誘導体が細胞の耐性メカニズムと相互作用し、ドキソルビシンそのものの効果を強め、そして感受性細胞系のレベルにまで回復することができることを示す。
【０１８０】
【表２】
0005232083.tif 000048
【０１８１】
上記図１１−１３に示したように、アントラサイクリン類ドキソルビシンおよびダウノルビシンの脂肪酸誘導体はドキソ耐性細胞系のＭＤＲメカニズムに対して調節作用を有する。耐性細胞系に親薬剤と同時投与する際、親薬剤に対する感受性が再び感受性細胞系と同じ桁になる。このＭＤＲモジュレータに対するこのアプローチは好都合である。なぜならば同時投与した薬剤はまさに活性化合物の誘導体であり、それはin vivoで加水分解されて活性薬剤と無毒性脂肪酸残基を遊離するからである。
【０１８２】
抗菌剤
この治療分野には非常に種々様々の薬剤が含まれる。
【０１８３】
抗菌剤の最も重要な群は多分ペニシリンであるが、薬剤耐性がますます深刻になるにつれ、細菌感染症を治療するための代替治療薬に焦点が当てられてきた。他の作用メカニズムを有する他の薬剤で治療されるとはいえ、マイコバクテリウムおよび原虫によって起きる疾患の治療においても、細菌感染症の克服に重要である因子類の幾つか、例えば細胞内取り込み、組織分布、耐性メカニズムの回避等は同様に重要である。
【０１８４】
この分野で使用される全ての薬剤は標的感染症に対して非常に良い〜中程度の効果を有する。この領域では通常の新薬開発の他に、より良い経口バイオアベイラビリティを有する誘導体、すなわち純粋プロドラッグ類の開発に焦点が当てられており、この研究は薬剤耐性問題にはほとんど影響をもたない。
【０１８５】
抗生物質の臨床的効果はその抗菌活性で決まるだけでなく、その薬物学的および薬物動態的特性によっても決まる。プロドラッグは抗生物質の安定性および溶解度を高めるために、そして親化合物の経口吸収、組織浸透性および作用持続時間を改良するために用いられている。経口投与後の血清中濃度の上昇は抗生物質の組織濃度の改善につながる。
【０１８６】
ペニシリンおよびその他の関連β−ラクタム抗生物質領域では、単純アルキルエステル類は安定過ぎてプロドラッグとして使用できないとしばしば言われている。好適プロドラッグは１ないし３個のメチレンリンカーまたはメトキシカルボニル アルキルエステルを有するdoubleエステルである。これらの側鎖改変は経口バイオアベイラビリティの改良を容易にし、これらの誘導体は生体内で十分に不安定で、血流中の内因性または微生物由来酵素による加水分解性代謝によって活性薬剤を遊離する。これらのペニシリン−プロドラッグは薬剤耐性状態にほとんど影響を与えない。ペニシリンおよび密接に関係する同族体に対して活性な、最も優勢で、合理的によく特徴づけられた耐性メカニズムは、細菌が獲得した、加水分解酵素β−ラクタマーゼを産生する能力である。その酵素は細胞内−および細胞外両方で見いだされる。それはその薬が実際の細菌に到達する前にすでに血流中で破壊され得ることを意味する。その他の種類の薬剤耐性は純粋な排除メカニズムによる。このメカニズムによって薬剤は細菌またはその他の微生物に入ることを阻止される。本発明の脂質誘導体は血流中ではさほど容易には加水分解されず、そのため血流中でその薬剤誘導体はよりよく循環することができる。特に、新規脂質誘導体の高い細胞内輸送および付加的効果が排除メカニズムを克服し、活性薬剤が細胞／細菌のその他のコンパートメントにおいて放出され、そこではそれは加水分解酵素には無関係にその作用をあらわすことができると考えられる。
【０１８７】
本発明によって誘導体化できる抗生物質およびその他の抗菌剤の若干の例は以下の化合物を含む：
【０１８８】
【化４６】
0005232083.tif 000049
【０１８９】
【化４７】
0005232083.tif 000050
【０１９０】
【化４８】
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【０１９１】
上に図示したように、抗菌剤は誘導化可能基を１つより多く含むことができる。これらの場合にはこれら官能基の１つ以上が本発明によって親油性基で置換でき、２つ以上の親油性基がある場合は同じ親油性基でも異なる親油性基でもよい。
【０１９２】
本発明の親油性抗菌化合物は既述のように同じ一般的方法によって合成できる。しかし、数種のペニシリン誘導体の選択的および効率的誘導体化は、例えば親薬剤に複数の官能基（−ＯＨ2−ＮＨ−および−ＮＨ2）が存在する等、種々の要因により、βラクタム環の開裂、化合物のその他の再構成または分解によって複雑になるかも知れない。そのため保護基および種々の試薬系を使用して、スキーム８のアンピシリン（ＸＸＶ）で示されるように、選択的誘導体化を容易にすることができる。
【０１９３】
第一アミノ基はアシル−チアゾリジン−２−チオンによって選択的に脂肪酸アンピシリンアミド（ＸＸＶＩ）に変換できる。同じアミノ官能基はベンザルデヒドでシッフ塩基（ＸＸＶＩＩ）として保護される。そのカルボン酸をセシウム塩に変形し、さらに脂肪臭化物（ＲＢｒ）と反応させる。軽度酸性加水分解によりアミノ基が再形成され、アンピシリン−脂肪酸エステル（ＸＸＶＩＩＩ）が生成する。
【０１９４】
【化４９】
0005232083.tif 000052
【０１９５】
スキーム８
三官能価抗結核薬パラ−アミノ−サリチル酸、ＰＡＳ（ＸＸＩＸ）、の選択的誘導体化がスキーム９に示される。ＰＡＳそのものは多くの反応条件下では不安定で、自己縮合および二付加物形成が起こり得る。カルボン酸をそのセシウム塩に変形することができ、さらにメシレートとの反応によって対応するエステルに変形できる。脂肪酸塩化物は主としてアミノ基と反応し、対応するアミドを与える。フェノール基に対する反応から生ずる生成物は微塩基性加水分解により除去することができる。
【０１９６】
【化５０】
0005232083.tif 000053
【０１９７】
スキーム９
本発明による特異的抗菌化合物の製法を以下に示す。
【０１９８】
実施例２５
パラ−アミノ−サリチル酸エライジルエステル
無水ＤＭＦ５０ｍｌ中パラ−アミノ−サリチル酸（ＰＡＳ）（０.４７ｇ、３. １ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０.９８ｇ、３.０ｍｍｏｌ）の懸濁液にエライジルメシレート（１．０ｇ、２.９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を周囲温度で６０時間、３５℃で４８時間撹拌した。反応混合物をエーテルと水で抽出し、有機相をＮａＨＣＯ3（水溶液）および水で洗った。溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラムで精製した。溶出系としてヘプタン／ＣＨ2Ｃｌ2／ＡｃＯＨ／ＭｅＯＨ（８５：１５：２：２）を用いた。生成物含有フラクションを蒸発すると表題化合物０.６ｇ（５１％）が得られた。
【０１９９】
【化５１】
0005232083.tif 000054
【０２００】
実施例２６
４−（エライドアミド）−サリチル酸
無水ＴＨＦ１００ｍｌ中ＰＡＳ（２.６ｇ、１７ｍｍｏｌ）の溶液にＴＨＦ２０ｍｌ中エライジン酸塩化物（５.１１ｇ、１７ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で滴下した。反応混合物を周囲温度で２４時間撹拌した。さらにエライジン酸塩化物（１.０ｇ）を加えた。溶媒を高真空で蒸発し、残留物をエーテルと水との間に分配した。有機相を酒石酸（水溶液）および水で洗った。溶媒を留去し、残留物を水５ｍｌを加えたメタノール１００ｍｌに溶解した。固体沈殿を濾去し、エタノールから再結晶すると粗材料３.９ｇが得られた。この材料１.５ｇを、１Ｍ ＮａＯＨ １１ｍｌ加えたエタノール１００ｍｌに溶解した。混合物を周囲温度で２時間撹拌し、０.５Ｍ酒石酸（水溶液）３０ｍｌで酸性にした。固体沈殿を水で洗い、エーテルに溶解し、有機相を酒石酸（水溶液）で洗った。溶媒を留去し、残留物を無水クロロホルム×２から蒸発すると表題化合物１.３ｇ（８７％）が得られた。
【０２０１】
【化５２】
0005232083.tif 000055
【０２０２】
実施例２７
エライジン酸クロラムフェニコールエステル
無水ＤＭＦ１０ｍｌおよびピリジン２ｍｌ中Ｄ−ｔｈｒｅｏ−２、２'−ジクロロ−Ｎ−［β−ヒドロキシ−α−（ヒドロキシメチル）］−ｐ−ニトロフェネチルアセタミド（０.２０ｇ、０.６２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ３ｍｌ中エライジル酸塩化物（０.１９ｇ、０.６２ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。反応混合物を周囲温度で１２時間撹拌した。溶媒を高真空で蒸発し、残留物を酢酸エチルと水との間に分配した。有機相を濃縮し、粗生成物をシリカケルカラムで、溶出系として酢酸エチル／ヘキサン（１：１）を用いて精製した。均質フラクションを蒸発すると表題化合物０.１４ｇ（３９％）が得られた。
【０２０３】
【化５３】
0005232083.tif 000056
【０２０４】
実施例２８
オキサシリン−オレイル エステル
水７６ｍｌ中（５−メチル−３−フェニル−４−イソキサゾリル）ペニシリン（オキサシリン）ナトリウム塩（１.０ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の溶液に、０.２ＭＨＣｌ（水溶液）１３.１ｍｌを加え、その混合物を蒸発した。残留物をメタノール５０ｍｌおよび水５ｍｌに溶解した。Ｃｓ2ＣＯ3の２０％溶液（水溶液）をｐＨ７になるまで加えた。混合物を蒸発乾固した。
ＤＭＦ５０ｍｌ中残留物の溶液にオレイルブロミド（０.７８ｇ、２.４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を周囲温度で７２時間撹拌した。溶媒を高真空中で蒸発し、残留物を水およびクロロホルムで抽出した。有機相を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムで、溶媒系として酢酸エチル／ヘキサン（４０：６０）を用いて精製した。均質フラクションを蒸発すると表題化合物０.６９ｇ（４５％）が得られた。
【０２０５】
【化５４】
0005232083.tif 000057
【０２０６】
実施例２９
エライジン酸アンピシリンアミド
アセトニトリル１０ｍｌ中Ｄ−（−）−（α−アミノベンジル）ペニシリン（アンピシリン）（０.１０ｇ、０.２９ｍｍｏｌ）の溶液に、３−チアゾリジン−２−チオン−エライジルアミドおよびＤＢＵ（０.０４３ｍｌ、０.２９ｍｍｏｌ）溶液を加え、二相反応混合物を周囲温度で７２時間激しく撹拌した。溶媒を留去し、残留物を酢酸エチルと飽和塩化ナトリウム（水溶液）との間に分配した。粗生成物を分離し、メタノールに再溶解した。混合物を蒸発乾固すると、表題化合物０.１ｇ（５５％）が得られた。
【０２０７】
【化５５】
0005232083.tif 000058
【０２０８】
実施例３０
アンピシリン−オレイルエステル
ＤＭＦ３０ｍｌ中アンピシリン（１.２１ｇ、３.５ｍｍｏｌ）および炭酸水素カリウム（０.３５ｇ、３.５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ベンザルデヒド（０.９２ｇ、８.７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃で４時間撹拌した。炭酸水素カリウム（０.３５ｇ、３.５ｍｍｏｌ）およびオレイルブロミド（１.２１ｇ、３. ７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で２時間、周囲温度で１２時間撹拌を続けた。溶媒を高真空で蒸発し、残留物を酢酸エチルおよび冷水（０℃）で抽出した。有機相を蒸発すると黄色シロップ２.４６ｇが得られた。
粗生成物をアセトニトリルに溶解し、１Ｍ ＨＣｌ（水溶液）をｐＨ＝２になるまで加えた。水３０ｍｌを加え、アセトニトリルを留去した。生成物を酢酸エチルおよびジクロロメタンで抽出した。合一した有機相を蒸発し、粗生成物をシリカゲルカラムで溶媒系として酢酸エチル中１％トリエチルアミンを用いて精製した。均質フラクションを蒸発すると表題化合物０.８ｇ（３８％）が得られた。
【０２０９】
【化５６】
0005232083.tif 000059
【０２１０】
抗寄生虫薬
寄生虫感染はヒト医学および獣医学における重大問題である。寄生虫は通常、食物／水を介して、または昆虫が刺すことによってホストに侵入する。寄生虫は腸管（上皮細胞層）または血流に見いだされる、この場合赤血球または、その他の、肺または脳等の標的器官が感染するかも知れない。寄生虫はホストの細胞間および細胞内両方に見いだされる。原虫について言うと、寄生虫の生活環には数段階あることがよくあり、全ての段階が治療されるわけではない。
【０２１１】
ヒトにおける最も主要な寄生虫感染症はマラリアであり、一方動物、特に鳥（家禽）では腸感染、コクシジューム症が主な問題である。未治療状態では糞便は胞子を含み、それは動物または新たな人々の再感染に導く（他の種属とのクロスオーバーも）。
【０２１２】
活性薬剤を寄生虫そのものに効率的に運搬し、または例えばマラリアおよびコクシジューム症では、寄生虫感染細胞内に運搬することが重要である。
【０２１３】
本発明の親油性抗寄生虫誘導体は既述の一般的製法によって合成できる。
【０２１４】
例えば、反応スキーム１０は抗マラリア薬ヒドロキシ−クロロキン（ＸＸＸ）のアシル化を示す。反応は第一ＯＨ基に完全に選択的である。
【０２１５】
【化５７】
0005232083.tif 000060
【０２１６】
スキーム１０
生物学的効果
選択されたヒドロキシクロロキノン誘導体の高められた抗マラリア効果を示す実験を次に示す。
【０２１７】
ヒドロキシクロロキノン−エライジン酸エステルのマウス−マラリアに与える効果
ＮＫ６５系薬剤感受性P.bergheiの４日間試験をスイス アルビノ雌マウスで行った。ヒドロキシクロロキノン−エライデート０.０６３、０.２５、１.０および４ｍｇ／ｋｇおよびヒドロキシクロロキノン０.０９４、０.３９５、１.５および６ｍｇ／ｋｇを３匹づつのマウス群に４日間腹腔内投与した。寄生虫接種物１０7感染細胞を０日目に静脈内投与し、その日のうちに薬剤を投与した。動物にその後３日間投与し、５日目に尾血液フィルムを作り、寄生虫血を検査した。モル−ベースで、この４日間試験においてエライジン酸誘導体はエライジン酸そのものよりも２.５−３倍効果が高かった。これらの知見はヒトにおけるマラリア治療に非常に重要である。
【０２１８】
【表３】
0005232083.tif 000061
【０２１９】
ヒドロキシクロロキノン硫酸またはヒドロキシクロロキノンエライデートでマウス血液中のP.bergheiマラリア寄生虫を５０％、９０％および９９％減少させる有効量がこの表に示される。
【０２２０】
本発明によって誘導体化できる抗寄生虫薬の例は下記を含む：
【０２２１】
【化５８】
0005232083.tif 000062
【０２２２】
マラリアは最も広くはびこっている寄生虫病であり、推定マラリア発生率は臨床症例が年間２００万−５００万台である。抗マラリア薬に対する獲得耐性は大きな問題となりつつある。
【０２２３】
ヒトは、普通、感染した雌アノフェレス蚊に刺されると、注入された（胞子虫の）種虫に感染する。その寄生虫は速やかに循環を出て、肝実質細胞に入り、そこで増殖し、組織shizontsに発達する。薬剤が肝臓内の形質胞体状の組織に作用するならば、それら薬剤は原因予防に用いられる。本発明の脂質誘導体は肝組織に親和性を有するから、これらの化合物はマラリア病の組織型により有効であり、P.vivaxおよびP.ovaleの肝臓型を根絶するかも知れない。これらの型は生き残り、後に増殖し、最初の感染の数カ月ないし数年後に赤血球感染を再発させる。
【０２２４】
P.falciparumはヒトマラリアの症例の８５％以上を占める。P.falciparumの耐性種は薬剤を十分に高い濃度まで蓄積しない。Ｃａ2チャンネルブロッカーはクロロキンのような薬に対する感受性を一部回復する。多数の化学的に関係ない薬に対する交差耐性は、悪性腫瘍に見られる多剤耐性と同様である。
【０２２５】
脂肪酸はそれら自体が抗マラリア効果を有するらしい（クルグリアク（Krugli ak）ら、実験寄生虫学８１巻、９７−１０５ページ、１９９５）。オレイン酸、エライジン酸、リノレイン酸のような脂肪酸がPlasmodium vinckei petteriまたはPlasmodium yoelii nigeriensisに感染したマウスにおける寄生虫血の発生を阻止した。
【０２２６】
しかし、ヒトにおいて同様な効果を得るのに必要な細胞内濃度は、非現実的多量の脂肪酸の摂取を必要とする。
【０２２７】
ここでも本発明の実施態様に基づき、抗マラリア薬誘導体が驚くほど効率的に高濃度で細胞内寄生虫に運搬され、薬剤耐性メカニズムを克服することさえできる。
【０２２８】
本発明の抗マラリア誘導体の製法を示す実施例を以下に記す：
【０２２９】
実施例３１
７−クロロ−４−［４−［エチル（２−エライドイルオキシエチル）アミノ］１−メチルブチルアミノ］−キノリン
ジクロロメタン３０ｍｌ中７−クロロ−４−［４−［エチル（２−ヒドロキシエチル）アミノ］１−メチルブチルアミノ］キノリン（ヒドロキシクロロキン）（３.１７ｇ、９.４ｍｍｏｌ）の溶液に、エライジン酸塩化物（２.８２ｇ、９. ４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を周囲温度で４８時間撹拌した。少量のメタノールを加え、溶媒を高真空で蒸発した。残留物をシリカゲルカラムで反復精製した（第一行程：クロロホルム／メタノール９：１、第二行程：クロロホルム／メタノール９５：５）。均質フラクションを蒸発すると表題化合物１.１８ｇ（２１％）が得られる。
【０２３０】
【化５９】
0005232083.tif 000063
【０２３１】
本発明によって誘導体化できるその他の領域内の薬の例をさらに幾つか挙げる。
【０２３２】
中枢神経系薬
【０２３３】
【化６０】
0005232083.tif 000064
【０２３４】
心臓血管薬
【０２３５】
【化６１】
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【０２３６】
下記の一般的反応スキームは、本発明によるワルファリンおよびセロケンの誘導体の製法を示す。
【０２３７】
スキーム１１は抗凝固剤ワルファリン（ＸＸＸＩ）のアシル化を示す。
【０２３８】
【化６２】
0005232083.tif 000066
【０２３９】
スキーム１１
セロケン（ＸＸＸＩＩ）のヒドロキシ基の選択的アシル化はアミノ官能基の存在によって複雑になる。アミノ官能基をＢＯＣ誘導体として好適に保護し、脂肪酸塩化物の使用によってＯＨ基を変形する。これらの反応はスキーム１２に示される。
【０２４０】
【化６３】
0005232083.tif 000067
【０２４１】
スキーム１２
反応スキーム１１の特殊な実施例を次に示す。
【０２４２】
実施例３２
３−（α−アセトニルベンジル）−４−エライドイルオキシクマリン
無水ジオキサン１２０ｍｌおよびピリジン２５ｍｌ中３−（α−アセトニルベンジル）−４−ヒドロキシクマリン（ワルファリン）（３.７０ｇ、１２ｍｍｏｌ）の溶液にエライジン酸塩化物（３.６０ｇ、１２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を周囲温度で４時間撹拌した。溶媒を高真空で蒸発した。残留物をエーテルと水との間に分配した。有機相を酒石酸（水溶液）、ＮａＨＣＯ3および水で洗った。乾燥した有機相を濃縮し、生成物をシリカゲルカラムで、溶出系としてヘプタン／酢酸エチル（６：１）を用いて精製した。不純なフラクションを再精製し、均質フラクションを蒸発すると表題化合物が淡黄色油として５．１ｇ（７０％）得られる。
【０２４３】
【化６４】
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【０２４４】
上述のように、本発明はヒトまたは動物医学に有用な化合物だけでなく、あらゆる種類の生物学的活性化合物に一般的に適用できる。特に、アルコール、エーテル、フェニル、アミノ、アミド、チオール、カルボン酸およびカルボン酸エステル基から選択される１つ以上の官能基を有する農薬を本発明によって誘導体化できる。このような農薬および園芸用化学薬品の例は次のものを含む：
【０２４５】
【化６５】
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【０２４６】
【化６６】
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【０２４７】
【化６７】
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【０２４８】
【化６８】
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【０２４９】
【化６９】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
0005232083.tif 000077
【図５】
0005232083.tif 000078
【図６】
0005232083.tif 000079
【図７】
0005232083.tif 000080
【図８】
0005232083.tif 000081
【図９】
0005232083.tif 000082
【図１０】
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【図１１】
0005232083.tif 000084
【図１２】
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【図１３】
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