(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
レモンマートル及びその抽出物のうち少なくとも一方を含むことを特徴とする美白用組成物。
【請求項２】
上記抽出物が、レモンマートルから、水又は親水性溶媒を用いて抽出されたものであることを特徴とする請求項１に記載の美白用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、美白用組成物及びその利用に関するものである。より詳しくは、レモンマートル又はその抽出物を用いた、皮膚へのメラニン沈着の抑制に優れた効果を有する美白用組成物及びその利用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
シミ、ソバカス、日焼け後に生じる皮膚の黒化等の色素沈着は、皮膚内に存在する色素細胞（メラノサイト）の活性化により、メラニン産生が著しく亢進することで生じる。特に中高年齢層の人々では、深刻な肌の悩みの一つになっている。
【０００３】
メラニンは、チロシナーゼの働きによって、チロシンからドーパ、ドーパからドーパキノンに変化して、さらに、５，６−ジヒドロキシインドール等の中間体を経て形成されるものとされている。チロシナーゼとは、メラノサイト中で生合成される酵素である。メラノサイトは、メラニンを形成すると、デンドライトという樹状突起を伸長させて、周りの基底細胞（ケラチノサイト）にメラニンを送り込む。これにより、メラニンはケラチノサイトに貯蔵されるものとされている。
【０００４】
従って、皮膚の色素沈着を予防、改善するためには、メラニン産生過程を阻害したり、既に産生したメラニンを淡色漂白したりすることが考えられる。
【０００５】
このような考えに基づいて、従来から種々の美白成分が提案されてきた。例えば、チロシナーゼ活性を阻害してメラニン産生を抑制するものとして、グルタチオンに代表される硫黄化合物が挙げられる。また、産生したメラニンを淡色漂白するものとしては、過酸化水素、ヒドロキノン、ビタミンＣ等のアスコルビン酸類が利用されてきた。また、ケラチノサイト内のメラニンを減少させる方法として、ビタミンＡ酸等のビタミンＡ類の局所投与が行なわれてきた。
【０００６】
しかし、硫黄化合物は著しい異臭を放つため皮膚を美白する目的で使用することは不適当であった。過酸化水素、ヒドロキノンについては、安定性及び皮膚刺激性等の安全性上問題があるため、一般には使用が制限されていた。ビタミンＣに代表されるアスコルビン酸類は、湿性皮膚外用剤のように、水分を多く含む組成物の成分として配合する場合、酸化されやすく不安定であり、変色、変臭の原因となるという問題も有していた。
【０００７】
このような事情から、安全性等を考慮して、植物からの抽出物等の天然物を美白成分として用いる試みも、多数為されている。特に植物由来の抽出物は、化粧料に配合する場合、イメージもよいというメリットもある。
【０００８】
ところで、上述のメラニン産生過程の阻害、及び産生したメラニンの淡色漂白以外の作用として、メラノサイトのデンドライトの伸長を阻害し、メラニンのケラチノサイトへの輸送を阻害する作用によって美白効果を得ることも検討されている。例えば、キク科ノコギリソウ属の植物のエキスからなるデンドライト伸長抑制剤が提案されている（特許文献１）。
【特許文献１】特開２００４‐２５０３５４号公報（２００４年９月９日公開）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上述したように、これまで様々な美白成分が開発されている。しかしながら、美容分野等において、これらの美白成分のみで十分ということはなく、新たな美白用組成物の開発が強く求められている。
【００１０】
本発明の目的は、新たな美白用組成物及びこれを利用した皮膚外用剤等を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、上記課題を解決するために、鋭意検討を行なった。その結果、レモンマートルは、チロシナーゼ阻害活性を有し、かつ、メラノサイトのデンドライトの伸長阻害効果をも有するという新事実を見出し、本願発明を完成させるに至った。一つの植物で、チロシナーゼ阻害活性及びデンドライトの伸長阻害活性を有するものは、従来報告が無く、全く新たな知見であり、また、レモンマートルは食経験の存在するハーブであり、安全性が高いものでもある。本発明は、かかる新規知見に基づいて完成されたものであり、以下の発明を包含する。
【００１２】
即ち、上記課題を解決するために、本発明に係る美白用組成物は、レモンマートル及びその抽出物のうち少なくとも一方を含むことを特徴としている。
【００１３】
さらに、本発明に係る美白用組成物では、上記抽出物が、レモンマートルから、水又は親水性溶媒を用いて抽出されたものであることがより好ましい。
【００１４】
また、本発明に係る皮膚外用剤は、上記本発明に係る美白用組成物を含むことを特徴としている。
【００１５】
また、本発明に係る飲食用組成物は、上記本発明に係る美白用組成物を含むことを特徴としている。
【発明の効果】
【００１６】
本発明に係る美白用組成物は、以上のように、レモンマートル及びその抽出物のうち少なくとも一方を含む。レモンマートルは、美白用成分を含むことが従来報告されていなかった植物であり、本発明により、全く新しい美白用組成物を提供できるという効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明の一実施形態について説明すると以下の通りである。
【００１８】
＜１：本発明に係る美白用組成物＞
本発明に係る美白用組成物は、レモンマートル及びその抽出物のうち少なくとも一方を含めばよい。レモンマートル及びその抽出物は、チロシナーゼ活性阻害活性及びメラノサイトのデンドライト伸長阻害活性に優れているため、美白効果に優れている。さらに、レモンマートルは、食経験の存在するハーブであることから、本発明に係る美白用組成物は高い安全性を有する。
【００１９】
レモンマートルは、オーストラリア原産のブッシュハーブの１種であり、学名をＢａｃｋｈｏｕｓｉａ  ｃｉｔｒｉｏｄｏｒａという。レモンマートルは、抗バクテリア効果、リラクゼーション効果を有するシトラールを、レモンより多く含んでいることから、石鹸又はデオドラント等として利用できることが知られている。また、レモンマートルの香気成分は油溶性物質であるため、ハーブオイルとしても利用されてきた。しかし、本発明者らは、レモンマートル、特にその抽出物は、優れた美白効果を有するという、これまで全く報告の無かった新たな知見を見出したのである。
【００２０】
レモンマートルの入手方法は特に限定されず、従来公知の方法で栽培してもよいが、例えば、レモンマートルの自然乾燥品等については容易に入手できる。
【００２１】
なお、本明細書において「美白用組成物」とは、メラニン等の色素の、哺乳動物の肌への沈着を改善するために用いる組成物を意味する。例えば、紫外線の照射又は老化等により、メラニン等の色素が沈着して黒ずんだヒト等の哺乳動物の肌を、白くするための組成物も、用語「美白用組成物」の範疇である。本発明に係る美白用組成物は、様々な作用機序によって肌の美白効果を発揮する。つまり、本発明に係る美白用組成物は、チロシナーゼ活性阻害等によるメラニン生成過程の阻害、及びメラノサイトのデンドライト伸長阻害によるメラニン輸送阻害によって、美白効果を発揮するものであるが、本発明に係る美白用組成物による美白の作用機序は、これに限定されない。なお、レモンマートルに含まれるどのような成分が、チロシナーゼ活性を阻害するか、メラノサイトのデンドライト伸長を阻害するかは明らかではない。レモンマートル中のチロシナーゼ阻害活性を有する物質と、メラノサイトのデンドライト伸長阻害活性を有する物質とが同一であるか否かも明らかではないが、後述の実施例で示すように、レモンマートルには、少なくとも、チロシナーゼ阻害活性を有する物質、及び、メラノサイトのデンドライト伸長阻害活性を有する物質が含まれていることが明らかとなった。
【００２２】
本発明に係る美白用組成物に含まれるレモンマートルの形態としては、レモンマートル及びその抽出物のうち少なくとも一方が含まれる限り限定されるものではないが、例えば、レモンマートルの細断物、破砕物、粉砕物、抽出物が挙げられ、これらの濃縮物、乾燥物でもよく、これらを適宜混合してもよい。中でも、本発明に係る美白用組成物は、レモンマートルの抽出物を含むことが好ましい。
【００２３】
レモンマートルの抽出物としては、レモンマートルから抽出したものである限り、特に限定されるものではないが、レモンマートルから、水又は親水性溶媒（以下、「親水性溶媒等」と表記する）を用いて、抽出されたものであることが好ましい。親水性溶媒等を用いて抽出された抽出物は、チロシナーゼ活性阻害活性及びメラノサイトのデンドライト伸長阻害活性が高いため、より美白効果に優れた美白用組成物を提供することができる。上述のように、レモンマートルは、その油溶成分が、主に利用されてきたにも関わらず、本発明者らは、親水性溶媒等で抽出することを試みて、得られた抽出物が、チロシナーゼ活性阻害活性及びメラノサイトのデンドライト伸長阻害活性に優れていることを見出したのである。
【００２４】
上記親水性溶媒等としては、例えば、水、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール等が挙げられる。これらを単独で使用してもよく、２種以上を混合して用いてもよい。中でも水が好ましい。水を用いて得られる抽出物は、チロシナーゼ活性阻害活性及びメラノサイトのデンドライト伸長阻害活性が高い。また、後述のように、本発明に係る美白用組成物を飲食用組成物に包含させるとき、親水性溶媒等として水を用いていれば、安全性の観点からも好ましい。
【００２５】
レモンマートルの抽出方法は、従来公知の連続式、バッチ式等の方法を使用すればよく、限定されるものではない。抽出条件も特に限定されず、任意の時間、冷浸または温浸することで抽出してもよい。例えば、レモンマートル及び／又はその乾燥物を、室温にて数分〜７日間、好ましくは1時間〜３日間、溶媒に浸漬してもよい。また、レモンマートル及び／又はその乾燥物を、溶媒と共に３〜１２時間、好ましくは１〜７時間加熱してもよく、加熱還流してもよい。このように、レモンマートルからの抽出は加熱抽出により行なうことが好ましい。加熱抽出によれば、得られる抽出物のチロシナーゼ活性阻害活性及びメラノサイトのデンドライト伸長阻害活性がさらに向上する。また、加熱抽出によれば、より迅速かつ簡便に、チロシナーゼ活性阻害活性及びメラノサイトのデンドライト伸長阻害活性を有する抽出物を得ることができる。また、亜臨界条件で抽出を行なえば、抽出効率がさらに向上する。
【００２６】
抽出を行なった後は、濾過等によって抽出残渣を取り除く等の処理を行なってもよい。また、得られた抽出物を、さらに減圧濾過又は限外濾過等で濃縮してもよい。また、溶媒を完全に除去して乾固したり凍結乾燥したりしてもよい。このような濃縮物、又は、乾固したり凍結乾燥したりして得られた物質も、本明細書でいう「抽出物」の範疇である。
【００２７】
なお、抽出に用いるレモンマートルには、抽出処理の前に、乾燥、細断、粉砕等の処理を施してもよい。
【００２８】
また、本発明に係る美白用組成物は、レモンマートルの抽出物中に含まれる香気成分によりリラクゼーション効果を奏するものであってもよい。また、レモンマートル及び／又はその抽出物は、上述のようにチロシナーゼ活性阻害活性及びメラノサイトのデンドライト伸長阻害活性に優れている。つまり、レモンマートル及びその抽出物のうち少なくとも一方を含む組成物は、皮膚にメラニンが沈着することを抑制するための、メラニン沈着抑制組成物でもあり得る。
【００２９】
本発明に係る美白用組成物に含まれる、レモンマートル及びその抽出物の含有量は、特に限定されるものではないが、美白用組成物の全量を１００重量％として、０．０００１重量％以上２０重量％以下の範囲とすることが好ましく、さらに好ましくは、０．００１重量％以上５重量％以下である。この範囲であれば、より優れた美白効果を得ることができ、かつ、美白用組成物に含有させた、レモンマートル及びその抽出物の量に見合うだけの十分な効果を得ることができる。
【００３０】
また、本発明に係る美白用組成物に含まれる、レモンマートル及びその抽出物以外の成分は、特に限定されないが、例えば、美白用の化粧料に一般に用いられている油性成分、界面活性剤、紫外線吸収剤、低級アルコール、防腐剤、殺菌剤、色剤、粉末、香料、水溶性高分子、緩衝剤、従来公知の美白成分等の成分を、本発明の効果を損なわない範囲で適宜配合できる。
【００３１】
＜２：本発明に係る皮膚外用剤＞
本発明に係る皮膚外用剤は、本発明に係る美白用組成物を含めばよい。
【００３２】
本発明に係る皮膚外用剤は、優れた美白効果を有し、かつ安全性の高い本発明に係る美白組成物を含んでいるため、皮膚における色素沈着の発生及び進行を予防、改善することができ、皮膚を美白化する効果に優れている。例えば、本発明に皮膚外用剤は、その実施形態として、シミ、ソバカス等の予防及び／又は治療に有効な美白用皮膚外用剤の形態も取り得る。
【００３３】
本発明に係る皮膚外用剤における美白組成物の含有量は、特に限定されるものではないが、皮膚外用剤の全量を１００重量％として、レモンマートル及びその抽出物の総量が、レモンマートルの乾燥固形分で０．０００１重量％以上２０重量％以下の範囲となるように含まれることが好ましく、０．００１重量％以上５重量％以下であることがより好ましい。この範囲であれば、皮膚における色素沈着を予防、改善する、優れた効果を得ることができ、かつ、美白用組成物に含有させた、レモンマートル及びその抽出物の量に見合うだけの十分な効果を得ることができる。
【００３４】
本発明に係る皮膚外用剤の剤形は、特に限定されるものではなく、例えば、クリーム、乳液、オイル、ローション、軟膏、パック、水性ゲル、オイルゲル等が挙げられる。中でも、クリーム、乳液、オイル等は、経皮吸収に優れているため好ましい。また、医薬部外品としてのローション、乳液、クリーム、パック剤、石鹸等の薬用化粧品、及び医薬品としてのローション、乳液、クリーム、軟膏等の皮膚外用剤も、本発明に係る皮膚外用剤の範疇である。これらの皮膚外用剤の製造方法としては、特に限定されず、その剤形に応じて、従来公知の皮膚外用剤と同様の方法で製造して、本発明に係る美白用組成物を配合してもよい。また、本発明に係る美白用組成物を、従来公知の浴用剤に配合することで、浴用組成物としてもよい。
【００３５】
本発明に係る皮膚外用剤に含まれる本発明に係る美白用組成物以外の成分としては、特に限定されるものではなく、従来公知の皮膚外用剤に配合される成分を含んでいてもよい。例えば、水、炭化水素類、エステル類、油脂類、高級アルコール類、高級脂肪酸類、界面活性剤、多価アルコール類、低級アルコール類、防腐剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、増粘剤、保湿剤、粉末成分、抗炎症剤、ｐＨ調整剤、金属封鎖剤、糖類、香料、色剤、各種薬効成分、レモンマートル及びその抽出物以外の美白成分等を、含んでいてもよい。これらは、本発明に係る皮膚外用剤の用途等に応じて適宜配合すればよい。以下に、これらの成分の具体例を挙げるが、これに限定されるものではない。また、本発明に係る皮膚外用剤は、以下に例示する成分を、単独で含んでいてもよく、２種以上を混合して含んでいてもよい。
【００３６】
上記炭化水素類としては、流動パラフィン、ワセリン、スクワラン、セレシンワックス、パラフィンワックス等を例示できる。
【００３７】
上記エステル類としては、ミリスチン酸イソプロピル（ＩＰＭ）、合成ゲイロウ、ホホバ油、カルナウバワックス等を例示できる。
【００３８】
上記油脂類としては、牛脂、鯨油、アザラシ油、メンハーデン油、ハリバ肝油、タラ肝油、タラ、マグロ、カメ獣脂、馬の蹄、羊の蹄、ミンク、カワウソ、マーモット油等の動物油脂類、オリーブ油、ツバキ油、マカデミアナッツ油、オリーブ油、ラノリン、ヒマシ油、グレープシード油、カカオ油、ヤシ油、木ロウ、ホホバ油、ベニバナ油、ココナッツ油、ヘーゼルナッツ油、ブドウ種子油、アボカド油、大豆油等の植物油脂類、シリコンオイル等の合成油脂類等を例示できる。
【００３９】
上記高級アルコール類としては、セタノール、ステアリルアルコール、カプリルアルコール、ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、コレステロール、フィトステロール、ヘキシルデカノール、オクチルドデカノール、ベヘニルアルコール等を例示できる。
【００４０】
上記高級脂肪酸類としては、ステアリン酸、オレイン酸、カプリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ベヘニン酸、ラノリン脂肪酸、リノール酸、リノレン酸、ラウリン酸、イソステアリン酸等を例示できる。
【００４１】
上記界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、アルキルスルホコハク酸エステル等のアニオン界面活性剤、４級アルキルアミン塩等のカチオン界面活性剤、ポリオキシエチレンセチルエーテル、モノステアリン酸ポリエチレングリコール、モノステアリン酸グリセリン、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウリン酸エステル、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、脂肪酸モノグリセライド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビンタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンステアリルエーテル、ポリオキシエチレンオレイルエーテル、ポリオキシエチレン高級アルコールエーテル、ポリオキシアルキルアリルエーテル、ポリオキシエチレンジスチレン化フェニルエーテル、ポリオキシエチレン誘導体、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレート、ソルビンタンセスキオレエート、ソルビンタンモノライレート、ポリオキシエチレンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、１−ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ポリエチレングリコールモノラウレート、ポリエチレングリコールモノオレート、ポリオキシチエレンヒマシ油、ポリオキシエチレンラノリン等のノニオン界面活性剤、アルキルベタイン、グリシン型、アルキルアミノベタイン、イミダゾリン型、Ｌ−アルギニン型、Ｌ‐リジン型等の両性界面活性剤、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ポリオキシエチレンステアリン酸アミド等の非イオン性界面活性剤等を例示できる。
【００４２】
上記多価アルコール類としては、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等を例示できる。
【００４３】
上記低級アルコール類としては、エタノール、プロパノール等を例示できる。
【００４４】
上記防腐剤としては、パラベン類、グルコン酸クロルヘキシジン、カンフル、パラオキシ安息香酸メチル、安息香酸塩、サリチル酸、フェノキシエタノール等を例示できる。
【００４５】
上記紫外線吸収剤としては、パラアミノ安息香酸誘導体、ベンゾフェノン誘導体、アントラニル酸系紫外線吸収剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、ケイ皮酸系紫外線吸収剤、糖系紫外線吸収剤等を例示できる。なお、紫外線吸収剤の代わりに、又は共に、酸化亜鉛等の紫外線分散剤を包含させてもよい。
【００４６】
上記酸化防止剤としては、ビタミンＥ、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）等を例示できる。
【００４７】
上記増粘剤としては、アラビアゴム、カルボキシビニルポリマー、キサンタンガム、ポリビニルアルコール、無水ケイ酸、キサンタンガム等の水溶性多糖類、ヒドロキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等の水溶性セルロース類、プルラン、ポリアクリル酸ナトリウム等の水溶性高分子等を例示できる。
【００４８】
上記保湿剤としては、ポリエチレングリコール等の多価アルコール類、グルコース、ソルビトール、デキストリン、トレハロース、乳糖等の糖類及びその誘導体、グルタミン酸ナトリウム、ケラチン誘導体、コラーゲン誘導体、トリメチルグリシン等のアミノ酸類及びその誘導体、カルボキシビニルポリマー、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム等の水溶性高分子、海藻エキス、酵母エキス、保湿作用を有する各種植物エキス、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸オクチルドデシル、オレイン酸コレステリル等のエステル類、ポリアクリル酸ナトリウム、結晶性セルロース、各種植物精油及びこれらの混合物が挙げられる。また、上述の植物油脂類、脂肪酸類、高級アルコール類も保湿剤として使用できる。
【００４９】
上記粉末成分としては、酸化チタン、シリカゲル、タルク、アクリル酸−メタクリル酸共重合体等を例示できる。
【００５０】
上記抗炎症剤としては、グリチルリチン酸ジカリウム、トラネキサム酸及びその誘導体、３‐サクシニルオキシグリチルレチン酸第二ナトリウム等を例示できる。
【００５１】
上記ｐＨ調整剤としては、クエン酸塩、酢酸塩等を、金属封鎖剤としてエデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等を、糖類としてグルコース、フルクトース、マンノース、ショ糖、トレハロース、硫酸化トレハロース等を例示できる。
【００５２】
上記香料としては、バニリン、オレンジフレーバー、レモンフレーバー、ミルクフレーバーゲラニオール、リナロール等を例示できる。
【００５３】
上記色剤としては、水溶性のタール系色素、水不溶性のタール系色素、クチナシ系色素、ベニバナ系色素、ウコン系色素、パプリカ色素、アナトー色素、コチニール色素等の天然色素、酸性、塩基性色素、ベンガラ等を例示できる。
【００５４】
上記薬効成分としては、本発明に係る皮膚外用剤の使用目的に応じた薬効成分、例えば、ヒアルロン酸、胎盤抽出物、甘草抽出物、朝鮮人参エキス、ビタミン類、ステロール配糖体等を挙げることができる。
【００５５】
また、レモンマートル及びその抽出物以外の美白成分として、例えば、ビタミンＣ及びその誘導体、アルブチン及びその誘導体、ルシノール及びその誘導体、ハイドロキノン及びその誘導体、ハイドロキノン配糖体、トラネキサム酸及びその誘導体、サリチル酸及びその誘導体、コウジ酸、エラグ酸、乳酸メンチル、レゾルシン及びその誘導体、メントール誘導体、リポ酸、漢方薬及びその抽出物、食品素材及びその抽出物等を含んでいてもよい。
【００５６】
これまでに例示した成分の他にも、本発明に係る皮膚外用剤は、カフェイン、タンニン、ベラパミル、グラブリジン、グリチルリチン酸及びその誘導体又はその塩、４‐（１，１‐ジメチルエチル）‐４’‐メトキシ−ジベンゾイルメタン、水酸化カリウム等を、任意に配合してもよい。また、本発明に係る皮膚外用剤は、ワックス（例えば、マイクロクリスタリンワックス、ラノリン蝋、カンデリラ蝋、鯨蝋、カカオ脂、シリコンワックス、オレエート、ミリステート、リノレエート、ステアレート、パラフィン、蜜蝋、カルナウバ蝋、地蝋、カンデリラ蝋、微晶蝋等）を含んでいてもよい。
【００５７】
また、本発明に係る皮膚外用剤は、美白用組成物以外の、従来公知の化粧用組成物に慣用的に使用される添加物を、必要に応じて含み得る。使用され得る添加物としては、例えば、コラーゲン、ヒアルロン酸、エラスチン、ムコ多糖ビタミンＡおよびその誘導体、ビタミンＢ２、パントテン酸及びその誘導体、ナイアシン、ビオチン等が挙げられる。また、本発明に係る皮膚外用剤の剤形を軟膏にするとき、従来公知の軟膏に本発明に係る美白用組成物を配合すればよい。従来公知の軟膏としては、マクロゴール４０００、マクロゴール４００等を例示できる。
【００５８】
本発明に係る皮膚外用剤の用途は、特に限定されず、皮膚の色素沈着の予防及び／又は改善の用途で利用でき、例えば、医薬品、医薬部外品又は化粧料等が挙げられる。より好適な用途として化粧料が挙げられる。
【００５９】
＜３．本発明に係る飲食用組成物＞
本発明に係る飲食用組成物は、本発明に係る美白用組成物を含んでいればよい。本発明に係る飲食用組成物によれば、レモンマートル及び／又はその抽出物を、口から摂取することで、体内から美白効果を得ることができる。
【００６０】
本発明に係る飲食用組成物における美白組成物の含有量は、特に限定されるものではないが、飲食用組成物の全量を１００重量％として、レモンマートル及びその抽出物の総量が、レモンマートルの乾燥固形分で０．０００１重量％以上２０重量％以下の範囲となるように含まれることが好ましく、０．００１重量％以上５重量％以下であることがより好ましい。この範囲であれば、皮膚における色素沈着を予防、改善する、優れた効果を得ることができ、かつ、美白用組成物に含有させた、レモンマートル及びその抽出物の量に見合うだけの十分な効果を得ることができる。
【００６１】
本発明に係る飲食用組成物の提供形態としては、特に限定されないが、食品、飲料又は飼料等を例示でき、より具体的には、穀物加工品（小麦粉加工品、デンプン類加工品、プレミックス加工品、麺類等）、油脂加工品（可塑性油脂、てんぷら油、マヨネーズ類等）、大豆加工品（豆腐類、味噌等）、食肉加工品（ハム、ベーコン等）、水産製品、乳製品（原料乳、クリーム、ヨーグルト、バター、チーズ等）、野菜・果実加工品（ペースト類、ジャム類等）、菓子類（チョコレート、ビスケット類等）、アルコール飲料（日本酒、ワイン、ウイスキー、焼酎、ビール等）、飲料（お茶、コーヒー等の清涼飲料、ドリンク剤等）、調味料、半乾燥又は濃縮食品、乾燥食品、冷凍食品、固形食品、液体食品（スープ等）等を例示できる。また、タブレット状、顆粒状、カプセル状等の錠剤等の、経口的に摂取可能な形状物も、本発明に係る飲食用組成物の範疇である。
【００６２】
本発明に係る飲食用組成物の製造方法としては、その提供形態に応じて、従来公知の飲食用組成物と同様の方法で製造して、本発明に係る美白用組成物を配合してもよい。
【００６３】
本発明に係る飲食用組成物に含まれる、本発明に係る美白用組成物以外の成分としては、
また、レモンマートル及び／又はその抽出物を、サプリメント等の錠剤、お茶、食品等の従来公知の飲食用組成物に含まれる成分に配合することで、本発明に係る美白用組成物を、飲食用の組成物としてもよい。このような成分としては、従来公知の飲料又は食品の成分である限り限定されず、ブドウ糖等の糖類、界面活性剤、増粘剤、防腐剤、香料、着色剤、ビタミン又はクエン酸等の栄養剤等を添加してもよい。
【００６４】
以下に実施例を示し、本発明の実施の形態についてさらに詳しく説明する。もちろん、本発明は以下の実施例に限定されるものではなく、細部については様々な態様が可能であることはいうまでもない。さらに、本発明は上述した実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、それぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本明細書中に記載された特許文献全てが、本明細書中において参考として援用される。
【実施例】
【００６５】
＜実施例１：レモンマートルの抽出物の生成＞
レモンマートルの葉の乾燥物３ｇを細切したものを、４０ｍｌの水に加えて、７０℃で１時間加熱することで抽出を行なった。次に、室温まで冷却した後、不溶物を濾過で除去した。その後、減圧濃縮して、次に、凍結乾燥して、抽出物を得た。
【００６６】
＜実施例２：メラニン生成抑制効果の確認＞
レモンマートルの抽出物のメラニン生成抑制（黒色化抑制ともいう）効果について、マウスメラノーマ細胞の細胞ペレットを用いて確認した。
【００６７】
まず、２×１０４個のＢ１６メラノーマ細胞を、１０％（ｖ／ｖ）牛胎児血清を含むイーグル最少栄養培地３ｍｌを入れた直径３５ｍｍのシャーレに播種し、５％（ｖ／ｖ）炭酸ガスに調整した炭酸ガスインキュベータを用いて、３７℃、約２４時間培養した。
【００６８】
次に、このシャーレに純水、又はレモンマートルの抽出物を終濃度で０．０８％（ｗ／ｖ）、０．１５％（ｗ／ｖ）となるように純水に溶解した溶液を添加した。次に、純水又は当該溶液を添加する前と同じ条件で、さらに５日間培養した。
【００６９】
次に、トリプシン処理を行なった後、遠心操作により１．５ｍｌ用チューブ（エッペンドルフ社製）に細胞を回収して、その白色化度を目視で評価した。評価の結果については、白色化大を＋＋、白色化中を＋、やや白色化を＋−、白色化しなかったものを−と判定した。併せて、細胞塊体積の変化を目視で判定して、細胞毒性の指標とした。結果を表１に示す。
【００７０】
【表１】
0005283873.tif 000002
【００７１】
表１に示すように、レモンマートルの抽出物は、黒色化を強く抑制することが示され、かつ細胞塊体積の変化が認められなかった。このことから、レモンマートルの抽出物は、低毒性で高い美白効果を示すことが明らかとなった。
＜実施例３：メラニン生成抑制効果の確認＞
次にヒトメラノサイト（クラボウ社製）を用いてメラニン生成抑制の確認試験を行なった。
【００７２】
まず、ヒト正常メラノサイト（クラボウ社製）を、Ｍｅｄｉｕｍ２５４培地（ＨＭＧＳを添加したヒトメラノサイト培地、クラボウ社製）で増幅した。増幅したヒト正常メラノサイトを、９６穴プレートに１穴当たり１０４個となるように加えて、５％（ｖ／ｖ）炭酸ガスに調整した炭酸ガスインキュベータで、３７℃、約２４時間培養した。次に、このシャーレに純水、又は抽出物を終濃度で０．０８、０．１５％（ｗ／ｖ）となるよう純水に溶解した溶液を添加した。そして、純水又は当該溶液を添加する前と同じ条件でさらに５日間培養した後、細胞を回収した。
【００７３】
次に、回収した細胞に、５０μｌの細胞懸濁溶液（ＴｒｉｔｏｎＸ−１００ ０．１％（ｖ／ｖ）を含むＰＢＳ緩衝液）を添加して、十分に懸濁させた後、４℃で１時間静置した。その後、５０μｌの１０ｍＭ Ｌ−ＤＯＰＡ（ナカライ社製）を添加して、３７℃で１時間インキュベートした。
【００７４】
その後、プレートリーダー（マルチスキャンプラスＭＫＩＩ、日本フロウラボラトリー社製）で４９５ｎｍの吸光度を測定して、メラニン生成量を測定した（レモンマートルの抽出物を添加しなかった場合の値を１００として、相対値で表した）。結果を表２に示す。
【００７５】
【表２】
0005283873.tif 000003
【００７６】
表２に示すように、レモンマートルの抽出物は、低濃度でもメラニン生成を抑制することが示された。
【００７７】
＜実施例４：抽出条件とチロシナーゼ阻害活性との関係＞
本実施例では、実施例１で得た抽出物の他に、抽出の温度条件を１００℃にして得られた抽出物、抽出の溶媒として、水の代わりに、５０％エタノール溶液、１００％エタノール溶液、１００％メタノール溶液又はクロロホルムを用いて得られた抽出物のチロシナーゼ阻害活性を確認した。
【００７８】
まず、上記温度条件及び溶媒の種類以外は、実施例１に記載の方法と同じ方法で、レモンマートルの抽出物を得た。
【００７９】
次に、実施例３で用いた細胞懸濁液１ｍｌにヒトメラノサイトを１×１０１０個含むように懸濁させた。この懸濁させた液体１００μｌに、チロシナーゼの基質として１０ｍＭ Ｌ−ＤＯＰＡとを溶解した溶液に、各抽出物を０．１５％（ｗ／ｖ）になるように添加して、３７℃で１時間静置した。なお、コントロールとして、抽出物を添加しない場合についても同様の操作を行なった。
【００８０】
次に、各溶液を、プレートリーダー（日本フロウラボラトリー社製、品名；マルチスキャンプラスＭＫＩＩ）で４９５ｎｍの吸光度を測定して、コントロールの吸光度を１００としたときの各試料の吸光度を算出した。つまり、コントロールにおけるチロシナーゼ活性を１００％として、各溶液のチロシナーゼ活性を算出して、コントロールと各溶液とのチロシナーゼ活性の差を、チロシナーゼの阻害活性として評価したものである。結果を図１に示す。図１は、チロシナーゼ阻害活性を測定した結果を示す図である。図１において横軸は抽出に用いた溶媒の種類を示し、縦軸はコントロールを１００とした場合における、チロシナーゼ活性の相対値を示す。
【００８１】
図１に示すように、７０℃の水で抽出した抽出物が、最も高いチロシナーゼ阻害活性を示した。
【００８２】
＜実施例５：抽出物の濃度とチロシナーゼ阻害活性との関係＞
実施例１に記載の方法と同じ方法で得た抽出物を、０％（ｗ／ｖ）、０．０８％（ｗ／ｖ）、０．１５％（ｗ／ｖ）、０．３０％（ｗ／ｖ）、０．６０％（ｗ／ｖ）、１．２０％（ｗ／ｖ）になるように添加した（それぞれサンプル１〜６とする）以外は、実施例４に記載した方法と同じ方法でチロシナーゼ阻害活性を測定した。なお、コントロールとして、抽出物を添加しない場合についても同様の操作を行なった。
【００８３】
チロシナーゼ阻害活性については、実施例４と同様に、コントロールにおけるチロシナーゼ活性を１００％として、各溶液のチロシナーゼ活性を測定することで、コントロールと各溶液とのチロシナーゼ活性の差を、チロシナーゼ阻害活性として評価した。結果を図２及び表３に示す。図２は、チロシナーゼ阻害活性を測定した結果を示す図である。図２において横軸はサンプルの番号を示す。この番号は、表３に示す番号と対応している。また、縦軸はコントロールを１００とした場合における、チロシナーゼ活性の相対値を示す。
【００８４】
【表３】
0005283873.tif 000004
【００８５】
図２及び表３に示すように、抽出物の濃度を０．１５％（ｗ／ｖ）とした場合、チロシナーゼ活性は１０％、即ち、チロシナーゼ阻害活性は９０％という高い値となった。なお、抽出物の濃度を０．３０％（ｗ／ｖ）、０．６０％（ｗ／ｖ）、１．２０％（ｗ／ｖ）とした場合においても、極めて高いチロシナーゼ阻害活性を示したが、抽出物自体の色による影響も受けた。抽出物自体の色の影響を受けない測定方法を用いれば、より高いチロシナーゼ阻害活性が示される可能性もある。
【００８６】
＜実施例６：デンドライトの伸長阻害活性の確認＞
本実施例では、ヒトメラノサイトの形態変化、具体的には、デンドライトの伸長阻害活性について確認した。
【００８７】
まず、ヒト正常メラノサイト（クラボウ社製）を、Ｍｅｄｉｕｍ２５４培地（ＨＭＧＳを添加したヒトメラノサイト培地、クラボウ社製）で増幅した。増幅したヒト正常メラノサイトを、４８穴プレートに１穴当たり３×１０３個となるように加えて、５％（ｖ／ｖ）炭酸ガスに調整した炭酸ガスインキュベータで、３７℃、約２４時間培養した。
【００８８】
次に、このシャーレに、純水、又はレモンマートルの抽出物を終濃度で０．０８％（ｗ／ｖ）、０．１５％（ｗ／ｖ）となるように純水に溶解した溶液を添加した。そして、純水又は当該溶液を添加する前と同じ条件でさらに２日間培養した後、デンドライトの様子を目視で観察した。伸長阻害活性が大きいものを＋＋、中程度のものを＋、なしのものを−として評価した。結果を表４に示す。
【００８９】
【表４】
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【００９０】
レモンマートルの抽出物添加群ではいずれもデンドライトの伸長が抑制された。
【００９１】
＜実施例７：美白クリームの製造＞
まず、以下のＡ〜Ｅの材料を調製した。
Ａ：実施例１の方法で得たレモンマートル抽出物 １．００ｇ及び精製水 ５．００ｇの混合物
Ｂ：３‐サクシニルオキシグリチルレチン酸第二ナトリウム ０．０５ｇ
Ｃ：スクワラン １０．００ｇ、ミリスチン酸オクチルドデシル ８．００ｇ、マイクロクリスタリンワックス ４．００ｇ、ベヘニルアルコール ３．００ｇ、親油型モノステアリン酸グリセリン ２．５０ｇ及びモノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．） ２．５０ｇの混合物
Ｄ：１，３‐ブチレングリコール １０．００ｇ、パラオキシ安息香酸メチル ０．１０ｇ及び精製水 ５４．００ｇの混合物
Ｅ：香料 ０．３０ｇ。
【００９２】
次に、８０〜８５℃に加熱したＤにＢを加えて、これに８０〜８５℃で加熱溶解したＣをホモミキサーで攪拌しながら加えて、均一に乳化した。これを室温で徐々に約５０℃に冷却した後、Ａを懸濁させてもの及び混合物Ｅを加えた。さらに攪拌を続けながら室温まで冷却することで、美白クリームを得た。
【００９３】
＜実施例８：化粧水の製造＞
まず、以下のＦ〜Ｉの材料を調製した。
Ｆ：酸化亜鉛 １．３０ｇ、無水ケイ酸 １．１０ｇ、タルク ２．００ｇ、ベンガラ ０．０１ｇ及びポリオキシエチレンステアリン酸アミド（４Ｅ．Ｏ．） ０．０５ｇの混合物
Ｇ：実施例１の方法で得たレモンマートル抽出物０．６０ｇ、 エタノール ５．００ｇ、及び精製水 ５．００ｇの混合物
Ｈ： 濃グリセリン ３．００ｇ 、カンフル ０．１０ｇ 、パラオキシ安息香酸メチル ０．０５ｇ及び香料 ０．０５ｇの混合物
Ｉ：精製水 ８１．７４ｇ。
【００９４】
次に、Ｉのうち約６０ｇをＦに加え、ホモミキサーで均一に分散させて粉体分散液を作製した。これにＧの溶液及びＨを加え、さらにＩの残部を加えた。次に、ホモミキサーで均一に分散させてカーマインローションを得た。
【００９５】
＜実施例９：美白軟膏の製造＞
まず、以下のＪ及びＫの混合物を調製した。
Ｊ：マクロゴール４０００ ４７．５０ｇ及びマクロゴール４００ ４７．５０ｇの混合物
Ｋ：実施例１の方法で得たレモンマートル抽出物０．５０ｇを精製水 ４．５０ｇに溶解した溶液。
【００９６】
次に、Ｊを水浴上で６５℃に加温して溶解し、均一に混合してマクロゴール軟膏基剤を製造した。これに、Ｋを練合して、美白軟膏を製造した。
【産業上の利用可能性】
【００９７】
本発明に係る美白用組成物によれば、皮膚の色素沈着を予防、改善することができ、かつ安全性が高いので、化粧品産業等において好適に利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００９８】
【図１】本発明の実施例において、レモンマートルの抽出物のチロシナーゼ阻害活性を測定した結果を示す図である。
【図２】本発明の実施例において、レモンマートルの抽出物のチロシナーゼ阻害活性を測定した結果を示す図である。
【図１】
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【図２】
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