(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
毛髪軸に対して一定方向に偏光した励起レーザーを毛髪に照射し、得られたラマンスペクトルからＣ−Ｃバンド、Ｃ−Ｈバンド、アミドＩバンド及びＮＨバンドよりなる群より選択される少なくとも一つのバンドの信号強度（Ａ）と、ＣＨ３バンド及びＣＨ２バンドからなる群より選択される少なくとも一つのバンドの信号強度（Ｂ）とを得て、（Ａ）と（Ｂ）との信号強度比（Ａ）／（Ｂ）に基づいて毛髪の繊維配向を測定する方法。
【請求項２】
前記信号強度（Ｂ）としてＣＨ３バンドの信号強度を用いる、請求項１記載の方法。
【請求項３】
上記偏光励起レーザーとして毛髪軸に対し、平行に偏光したレーザー及び垂直に偏光したレーザー各々を用いて、各々のスペクトルを得て、それらから得られる各々の（Ａ）／（Ｂ）を比較して毛髪の繊維配向を測定する請求項１又は２記載の方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法によって毛髪の繊維配向を測定し、その毛髪の繊維配向の状態から毛髪のダメージを評価する方法。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法によって毛髪の繊維配向を測定し、その毛髪の繊維配向の状態からくせ毛の程度を評価する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、毛髪繊維配向の測定方法に関する。さらに、毛髪繊維の配向変化から、毛髪のダメージや、くせ毛の程度を評価する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
毛髪はケラチン蛋白質からなる直径４０〜１５０μｍ程度の繊維である。毛髪は最外層にキューティクル、その内側には毛髪の主要部分を占めるコルテックスと呼ばれる組織がある。コルテックス細胞内部は、α−へリックス構造を主体とする結晶性繊維蛋白質の集合体と非晶質の球状蛋白質からなり、全体として複雑な階層構造を形成している。毛髪の繊維配向は、パーマやブリーチなどの化学処理、直毛やくせ毛などの個人差によって変化することが知られている。毛髪に関わる様々な現象の把握や直毛やくせ毛など個人差を評価するために、毛髪内の繊維配向を測定することは重要である。
【０００３】
毛髪内の繊維配向の測定方法としては、Ｘ線小角散乱法が挙げられる（例えば非特許文献１を参照）。この手法では毛束全体での繊維配向が把握できる。更にマイクロビームＸ線小角散乱法を用いると、毛髪一本について、くせの程度を繊維配向の違いとして測定できる。しかしながら、この方法では直径５μｍ以下の局所での構造情報は取得できない。また、測定には大規模な放射光使用施設が必要であるため、簡便に毛髪内の繊維配向を測定する方法とは言い難く、毛髪内局所の繊維配向は簡便に測定できないという欠点があった。
【０００４】
毛髪のダメージや個人差といった特徴を評価する方法としては、毛髪太さやカール半径など毛髪形状の測定（例えば特許文献１を参照。）、ねじり弾性や粘弾性の測定（例えば特許文献２を参照。）などが従来行われてきた。また、有機物を毛髪内に浸透させた後にその浸透速度を観測することによってくせ毛を診断する方法も提案されている（例えば特許文献３を参照。）。
【０００５】
【特許文献１】特開２００２−１１２８３４号公報
【特許文献２】特開平８−１５１１１号公報
【特許文献３】特開平９−１７８７３８号公報
【非特許文献１】Journal  of  Structural  Biology，(2006)，155(3)，p.438-444.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明では、毛髪切片を作成することなく、毛髪内の局所（例えば、直径５μｍ以下の局所）における繊維配向を簡便に定量的に測定しうる方法を提供することを目的とする。また、その測定結果に基づいて毛髪の個人差やダメージを評価する方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、ラマン分光法によって毛髪のラマンスペクトルを測定することで、毛髪の繊維配向がいくつかのラマンバンドに反映され、そのピーク強度の変化から繊維配向を簡便に定量的に測定し評価することが可能であることを見出した。本発明は、このような知見に基づきなされるに至ったものである。
【０００８】
本発明は、偏光励起レーザーを毛髪に照射し、得られたラマンスペクトルからＣ−Ｃバンド、Ｃ−Ｈバンド、アミドＩバンド及びＮＨバンドよりなる群より選択される少なくとも一つのバンドの信号強度（Ａ）と、ＣＨ３バンド及びＣＨ２バンドからなる群より選択される少なくとも一つのバンドの信号強度（Ｂ）とを得て、（Ａ）と（Ｂ）との信号強度比（Ａ）／（Ｂ）に基づいて毛髪の繊維配向を測定する方法に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、毛髪切片を作成することなく、例えば直径５μｍ以下の毛髪内の局所における繊維配向を簡便に定量的に測定することが可能になる。また、測定結果に基づいてダメージ毛や個人差（くせ毛・直毛など）を簡便に評価することが可能である。
【００１０】
また、本発明によれば、毛髪を断片したり有機物を浸透させる等の加工処理を必要とせず、簡便な方法で、微細な範囲における毛髪の繊維配向を測定することが可能である。また、毛髪繊維配向の測定によって、毛髪のダメージや、くせ毛・直毛などの個人差も容易に評価することが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明について以下に説明する。
本発明では、偏光励起レーザーを毛髪に照射し、ラマン分光計を用いて毛髪内の局所におけるラマンスペクトルを測定する。ここで、「局所」とは、レーザービームが照射されたときの焦点部分となる毛髪の一部分をいい、レーザービームの照射面積（ビーム径）、及び共焦点ラマン分光器の共焦点光学系のピンホールによって定まる範囲をいう。
【００１２】
ラマン分光測定においては、一般的な方法を使用することができ、特に、共焦点顕微ラマン法による測定が好ましい。また、本発明に用いられる偏光励起レーザーとしては、ラマン分光測定において一般的に用いられるレーザー光源を使用することができる。
【００１３】
本発明におけるラマン分光測定は、１本又は複数の測定対象の毛髪に対して、偏光している励起レーザー光を照射することによって行う。該レーザー光としては、毛髪軸に対して一定方向に偏光した励起レーザーを用いて行うことが、得られたラマンスペクトルの、上述した各バンド情報から毛髪繊維配向の情報を精度良く得ることが容易となるので好ましい。ここで、毛髪軸とは、測定部位における毛髪の成長方向（図１（ｂ）を参照。）を指す。
【００１４】
「毛髪軸に対して一定方向に偏光した」とは、（１）毛髪軸と平行な方向に偏光した場合、（２）毛髪を置く試料台面と同一面内でかつ毛髪軸と垂直な方向に偏光した場合、（３）（１）と（２）とをベクトル的に合成したときに得られる一方向に偏光した場合、又は（４）毛髪を置く試料台面内にない一方向へ偏光した場合のいずれかを意味する。このうち、（１）又は（２）の方向に偏光したレーザーを使用することが、毛髪の繊維配向の情報をより精度良く得られるので好ましい。この場合、（１）と（２）各々のレーザー光を同一の毛髪に対して別々に照射して対応する２つのラマンスペクトルを得て、両スペクトルから得られた、後述する（Ａ）／（Ｂ）を比較して毛髪繊維配向情報を得る方法や、複数の毛髪に対して、（１）のレーザー光を照射して、対応するラマンスペクトルを得て、各スペクトルから得られた後述する（Ａ）／（Ｂ）を比較して毛髪繊維配向情報を測定することが好ましい。
【００１５】
本発明の方法では、ラマン分光測定により得られたラマンスペクトルのうち、Ｃ−Ｃバンド、Ｃ−Ｈバンド、アミドＩバンド及びＮＨバンドよりなる群より選択される少なくとも一つのバンドの信号強度（Ａ）と、ＣＨ３バンド及びＣＨ２バンドからなる群より選択される少なくとも一つのバンドの信号強度（Ｂ）とを得る。
【００１６】
ここで、Ｃ−Ｃバンドは９３６ｃｍ−１付近、Ｃ−Ｈバンドは１３１４ｃｍ−１付近、アミドＩバンドは１６６６ｃｍ−１付近、ＮＨバンドは３２９０ｃｍ−１付近、ＣＨ３バンドは２９３０ｃｍ−１付近、ＣＨ２バンドは１４５２ｃｍ−１付近で観測されるものである。なお、ＮＨ伸縮振動領域はＯＨ伸縮振動が重なって観測される領域であるが、ピーク強度の増強に水がかかわっていないと仮定できるとき、３２９０ｃｍ−１付近のピークをＮＨ伸縮振動のピークとする。
また、（Ｂ）群のピークは、（Ａ）群のピークを正規化する目的で使用されるため、そのピークが大きく、かつ、毛髪繊維配向以外の影響を受けにくいものが好ましく選択される。このような観点から、（Ｂ）群のうちＣＨ３バンドの信号強度を用いることが好ましい。
【００１７】
ピーク（Ａ）とピーク（Ｂ）とのピーク強度比（Ａ）／（Ｂ）を算出して、（Ａ）のピーク強度を（Ｂ）のピーク強度により正規化する。ピーク強度（信号強度）とは各ピーク波長におけるそれぞれのベースラインからピークまでの高さであるが、各ピーク強度を、それぞれのピーク面積に置き換えて算出することもできる。ピーク（Ｂ）の信号強度で正規化したピーク（Ａ）の信号強度を対比することにより、毛髪内の局所におけるα−ヘリックス構造の配向状態を知ることができる。
【００１８】
一般に、毛髪の繊維構造は、ケラチンのα−へリックス構造が主体となっていることが知られている。そして、α−へリックスに由来するＣ−Ｃ伸縮、アミドＩ（Ｃ＝Ｏ伸縮）、ＮＨ伸縮の振動方向は、α−へリックス構造軸に対して平行であることが知られており、α−へリックス構造軸は毛髪軸に沿った方向であることが知られている。したがって、毛髪軸に対して平行な偏光を与えた場合にＣ−Ｃ伸縮、アミドＩ、ＮＨ伸縮のバンドを測定し、その散乱光強度を観測することによって、毛髪中のα−へリックス構造の配向情報を得ることが可能となる。
また、一般に、機械力により毛髪を２０％以上延伸すると、繊維の伸長過程で、α−へリックス構造がほぐれβ−シート構造の生成が生じることが知られている（Biophysical  Journal，Vol.87，p.640-647，(2007)を参照。）。ほぐれて生成したβ−シートに由来するアミドＩ（Ｃ＝Ｏ伸縮）、ＮＨ伸縮のバンドは、毛髪軸に対して垂直方向であることが知られている。したがって、毛髪軸に対して垂直な偏光を与えた場合に、アミドＩ、ＮＨ伸縮のバンドを測定し、その散乱光強度を観測することによって、毛髪中のβ−へリックス構造の配向情報を得ることが可能となる。
【００１９】
前記の（Ａ）／（Ｂ）を比較して毛髪繊維配向情報を得る手法により、毛髪内の局所（例えば、直径５μｍ以下の局所）における繊維配向を測定することができる。特に、本発明によれば、毛髪切片を作成することなく簡便に定量的に繊維配向を測定することができる。
【００２０】
本発明の方法により毛髪の繊維配向を測定した後、その毛髪の繊維配向の状態から、くせ毛の程度を評価したり、毛髪のダメージを評価したりすることができる。すなわち、直毛やくせ毛などの毛髪の個体差を評価することができる。また、毛髪の過収縮（パーマ処理）、毛髪の伸長（ストレートパーマ処理）等の化学処理による毛髪の繊維配向の状態から毛髪のダメージを評価することができる。
【実施例】
【００２１】
以下、本発明を実施例に基づき更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２２】
以下の装置を用いて試験を行った。
＜装置構成＞
ラマン分光器：ナノファインダー３０（東京インスツルメンツ社製、商品名）
励起波長：６３２．８ｎｍ
ピークパワー：８ｍＷ
対物レンズ：４０倍（ＮＡ＝０．９）
【００２３】
実施例１
（未処理毛の測定）
実験におけるレーザーの向き、偏光方向、試料の向きなどの位置関係、及び実験装置の概略図を図１に示す。図１（ａ）は実験装置の概略図を示し、図１（ｂ）は、実験の座標系を示す。測定対象の毛髪は、毛髪軸（測定部位における毛髪の長軸方向）が試料台面上で常に一定方向になるように配置しその方向をＸ軸とした。また、試料台面と同一面内で、かつ毛髪と垂直な方向をＹ軸、試料台面内になく、かつ毛髪と垂直な方向をＺ軸方向とした。レーザー光源１０から照射された入射光は、入射光の偏光の精度を高めるために、グランテーラープリズム１１を透過させた後、２分の１波長板１２を用いて偏光面を９０度回転させて偏光方向の切り替えを行い、試料台１３上に配置した測定対象（毛髪）に対して照射した。測定対象の毛髪試料は、張力はあたえずそのままの形状を維持したまま、上から針金などで荷重を加え、試料台面上に置いた。散乱光は、散乱光の偏光成分を取り出すために、ラマン分光器の付属品であるグランテーラープリズム１４を検出器側に付け、プリズムを９０度回転させて偏光を選択し、ＣＣＤ１５により検出した。なお、測定対象はすべて日本人男性の白髪で行った。測定の際には、毛髪表面から約１０μｍ奥のコルテックス部分について測定を行った。
【００２４】
未処理の毛髪を、毛髪軸がステージ上で常に一定方向になるように置き（Ｘ軸方向）、試料下方（Ｚ軸方向）から励起レーザーを照射した。このとき、毛髪軸と平行な方向に偏光したレーザー、または、毛髪を置く試料台面と同一面内でかつ毛髪軸と垂直な方向に偏光したレーザーを用いて２種類のラマンスペクトルの測定を行った。それぞれ、励起レーザーと同じ向きの散乱光を検出し、毛髪軸に対して平行な励起レーザーを用いた場合の測定を、Ｚ（ＸＸ）Ｚ、毛髪軸に対して垂直な励起レーザーを用いた場合の測定をＺ（ＹＹ）Ｚと表記する。それぞれの測定結果を図２に示す。
【００２５】
図２から明らかなように、α−へリックス由来のＣ−Ｃ伸縮振動（９３６ｃｍ−１）、α−へリックス由来Ｃ−Ｈ変角振動（１３１４ｃｍ−１）、アミドＩ（１６６６ｃｍ−１）及びＮＨ伸縮振動（３２９０ｃｍ−１）のピークが、Ｚ（ＹＹ）ＺよりもＺ（ＸＸ）Ｚで強く観測された。ＮＨ伸縮振動の領域はＯＨ伸縮振動とＮＨ伸縮振動が重なって観測されるが、ピーク強度の増強には主にＮＨ伸縮振動が寄与している。
【００２６】
図２に示した各ラマンスペクトルにおいて、Ｃ−Ｃバンド、Ｃ−Ｈバンド、アミドＩバンドのピーク強度をそれぞれ２９３０ｃｍ−１付近のＣＨ３のピーク強度で除することで正規化し、ＣＨ３バンドのピーク強度を１００としたときのピーク強度を表１及び図３に示す。図３中、それぞれ左側のピーク強度がＺ（ＸＸ）Ｚの測定結果を表し、右側のピーク強度がＺ（ＹＹ）Ｚの測定結果を表す。
【００２７】
【表１】
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【００２８】
表１及び図３から明らかなように、それぞれのバンドにおけるピーク面積はＺ（ＹＹ）Ｚの測定結果よりもＺ（ＸＸ）Ｚの測定結果の方が大きかった。毛髪軸に平行な繊維配向の信号は、Ｚ（ＹＹ）よりもＺ（ＸＸ）Ｚで強く得られた。したがって、本発明の方法により毛髪内の繊維の配向を測定できることが分かった。
【００２９】
実施例２
（くせ毛および直毛の測定）
くせ毛のくせの内外を２箇所ずつ計４部位（図４（ｂ）におけるＡ点〜Ｄ点）について、毛髪軸（測定部位における長軸方向）が、常に試料面台に対して一定方向（Ｘ軸方向）になるように置き（図４（ｃ）及び（ｄ））、実施例１と同様にして、毛髪軸と平行な方向に偏光したレーザーを用い、励起レーザーと同じ向きの散乱光を検出する測定（Ｚ（ＸＸ）Ｚ）を行った。また、同様にして、直毛の任意の４部位についてＺ（ＸＸ）Ｚの測定を行った。くせ毛のスペクトルの測定結果を図４（ａ）に示す。
得られたくせ毛及び直毛のラマンスペクトルにおいて、アミドＩバンド（１６６６ｃｍ−１）のピーク強度をそれぞれ２９３０ｃｍ−１付近のＣＨ３のピーク強度で除することで正規化し、ＣＨ３バンドのピーク強度を１００としたときのピーク強度を表２及び図５に示す。
【００３０】
【表２】
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【００３１】
表２及び図５から明らかなように、直毛では毛髪のどの部位においてもほぼ同じスペクトルが得られ、ピーク強度比もほぼ一定であり、繊維配向が一定であることがわかった。一方、くせ毛では部位によりスペクトル形状が異なり、ピーク強度比もばらつきがあり、繊維配向が一定でないことがわかった。
したがって、本発明の方法により、毛髪の個体差（直毛・くせ毛）や、毛髪の局所における繊維配向状態の部位差を評価できることが分かった。
【００３２】
実施例３
（過収縮毛の測定）
市販のブリーチ剤、パーマ剤を用いて無限浴で、ブリーチ処理を５回、パーマ処理を１回行った毛髪試料に対し、実施例１と同様に、毛髪軸と平行な方向に偏光したレーザー及び毛髪軸と垂直な方向に偏光したレーザー各々を用いて２種類のラマンスペクトルの測定を行った。それぞれ、励起レーザーと同じ向きの散乱光を検出し、毛髪軸に対して平行な励起レーザーを用いた場合の測定を、Ｚ（ＸＸ）Ｚ、毛髪軸に対して垂直な励起レーザーを用いた場合の測定を（Ｚ（ＹＹ）Ｚ）と表記する。それぞれの測定結果を図６に示す。また、図６中、実施例１で測定した未処理毛の測定結果をあわせて示す。
【００３３】
また、図６に示した各ラマンスペクトルにおいて、Ｃ−Ｃバンド（９３６ｃｍ−１）、Ｃ−Ｈバンド（１３１４ｃｍ−１）及びアミドＩバンド（１６６６ｃｍ−１）のピーク強度をそれぞれ２９３０ｃｍ−１付近のＣＨ３のピーク強度で除することで正規化し、ＣＨ３バンドのピーク強度を１００としたときのピーク強度を表３及び図７に示す。表３及び図７中、実施例１で測定した未処理毛の測定結果をあわせて示す。
また、過収縮毛および未処理毛のそれぞれの表面について、光学顕微鏡（倍率４０倍）を用いて観察した。それぞれの光学顕微鏡写真（光顕像）を図８（ａ）及び（ｂ）に示す。図８（ａ）は未処理毛の表面の光学顕微鏡写真であり、図８（ｂ）は過収縮毛の表面の光学顕微鏡写真である。
【００３４】
【表３】
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【００３５】
表３及び図７のＺ（ＸＸ）Ｚの結果から明らかなように、未処理毛では過収縮毛に対して、毛髪のα−へリックスに由来するＣ−Ｃバンド、Ｃ−Ｈバンド及びアミドＩバンドの各ピーク強度が減少した。一このことから、過収縮毛では、毛髪が縮んだことによってα−へリックスの毛髪軸に対する傾きが大きくなったと考えられる。また、図８から明らかなように、未処理毛では毛髪表面にキューティクルが観察されたが（図８（ａ））、過収縮毛では毛髪表面にキューティクルが観察できず、コルテックスがむき出しになっていることがわかった（図８（ｂ））。
したがって、本発明の方法により、化学処理などのダメージによる毛髪内繊維の配向変化を測定できることが分かった。
【００３６】
実施例４
（伸長毛の測定）
伸長毛のモデルとして、市販のパーマ剤を用いて無限浴でパーマ１剤を塗布して軟化した髪を１．４倍に伸長させた後、パーマ２剤を塗布して毛髪試料を作製した。作製した毛髪試料に対し、実施例１と同様にしてＺ（ＸＸ）ＺとＺ（ＹＹ）Ｚの２種類の偏光ラマンスペクトルを測定した。結果を図９に示す。図９中、実施例１で測定した未処理毛の測定結果をあわせて示す。
【００３７】
また、図６に示した各ラマンスペクトルにおいて、Ｃ−Ｃバンド（９３６ｃｍ−１）、Ｃ−Ｈバンド（１３１４ｃｍ−１）及びアミドＩバンド（１６６６ｃｍ−１）のピーク強度をそれぞれ２９３０ｃｍ−１付近のＣＨ３のピーク強度で除することで正規化し、ＣＨ３バンドのピーク強度を１００としたときのピーク強度を表４及び図１０に示す。表４及び図１０中、実施例１で測定した未処理毛の測定結果をあわせて示す。
【００３８】
【表４】
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【００３９】
表４及び図１０の、Ｚ（ＸＸ）Ｚの結果から明らかなように、伸長毛では、実施例３における過収縮毛と同様に、未処理毛に対して毛髪のα−へリックスに由来するＣ−Ｃバンド、Ｃ−Ｈバンド及びアミドＩバンドの各ピーク強度が減少した。一方、表４及び図１０の、Ｚ（ＹＹ）Ｚの結果から明らかなように、アミドＩバンドのピーク強度は、実施例３における過収縮毛では未処理毛とほぼ同じ値を示したのに対し、伸長毛では未処理毛に対して増加していた。この増加は、未処理毛に対して、伸長毛でβ−シート構造が増加したことを示すと考えられる。
以上のことより、Ｚ（ＸＸ）Ｚにおけるα−へリックスに由来するピーク強度の低下は、繊維配向の傾きの変化ではなく、繊維自体がα−へリックスからβ−シートに変化して配向したことを意味すると考えられる。
したがって、本発明の方法により、伸長の処理を施すストレートパーマ等の化学処理による毛髪内繊維の配向変化を測定できることが分かった。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】図１（ａ）は実験装置の概略図を示し、図１（ｂ）は実験の座標系を示す。
【図２】図２は、未処理毛のＺ（ＸＸ）Ｚ及びＺ（ＹＹ）Ｚで測定したラマンスペクトルを示す。
【図３】図３は、未処理毛におけるＺ（ＸＸ）Ｚ及びＺ（ＹＹ）ＺのＣ−Ｃバンド、Ｃ−Ｈバンド、アミドＩバンドのピーク強度の測定結果を示す。
【図４】図４（ａ）は、くせ毛のＺ（ＸＸ）Ｚで測定したラマンスペクトルを示す。図４（ｂ）は、くせ毛の測定点を示す。図４（ｃ）及び（ｄ）は、試料面台上の毛髪軸の配置方向を示す。
【図５】図５は、くせ毛におけるＺ（ＸＸ）ＺのアミドＩバンドのピーク強度の測定結果を示す。
【図６】図６は、過収縮毛および未処理毛のＺ（ＸＸ）Ｚ及びＺ（ＹＹ）Ｚで測定したラマンスペクトルを示す。
【図７】図７は、過収縮毛および未処理毛におけるＺ（ＸＸ）Ｚ及びＺ（ＹＹ）ＺのＣ−Ｃバンド、Ｃ−Ｈバンド、アミドＩバンドのピーク強度の測定結果を示す。
【図８】図８（ａ）は未処理毛の表面の光学顕微鏡写真であり、図８（ｂ）は過収縮毛の表面の光学顕微鏡写真である。
【図９】図９は、伸長毛および未処理毛のＺ（ＸＸ）Ｚ及びＺ（ＹＹ）Ｚで測定したラマンスペクトルを示す。
【図１０】図１０は、伸長毛および未処理毛におけるＺ（ＸＸ）Ｚ及びＺ（ＹＹ）ＺのＣ−Ｃバンド、Ｃ−Ｈバンド、アミドＩバンドのピーク強度の測定結果を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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