(57)【要約】  【課題】  実際の農産物の生産現場における使用において一定以上の植物生長促進効果を有し、安全性および利便性に優れた植物の生長促進剤および、植物の生長促進方法を提供すること。  【解決手段】  本発明の植物の生長促進剤は、大豆ホエーとバチルス属微生物とを含有する。また、本発明の植物の生長促進方法は、大豆ホエー及びバチルス属微生物を、植物に施用することを特徴とする。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
大豆ホエーとバチルス属微生物とを含有する植物の生長促進剤。
【請求項２】
大豆ホエーが、５０〜８０質量％エタノール水溶液を用いて脱脂大豆から抽出されたものである、請求項１に記載の植物の生長促進剤。
【請求項３】
バチルス属微生物が、バチルス・サブチルスまたはバチルス・プミルスである請求項１又は２に記載の植物の生長促進剤。
【請求項４】
バチルス属微生物が、バチルス・サブチルス ＦＥＲＭ ＢＰ−３４１８株である、請求項１又は２に記載の植物の生長促進剤。
【請求項５】
大豆ホエーとバチルス属微生物との配合割合が、大豆ホエーの乾燥質量１ｇに対して、バチルス属微生物が５×１０５個以上である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の植物の生長促進剤。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の植物の生長促進剤を植物に施用ことを特徴とする、植物の栽培方法。
【請求項７】
大豆ホエー及びバチルス属微生物を、植物に施用することを特徴とする植物の栽培方法。
【請求項８】
大豆ホエーが、５０〜８０質量％エタノール水溶液を用いて脱脂大豆から抽出されたものである、請求項７に記載の植物の栽培方法。
【請求項９】
バチルス属微生物が、バチルス・サブチルスまたはバチルス・プミルスである請求項７又は８に記載の植物の栽培方法。
【請求項１０】
バチルス属微生物が、バチルス・サブチルス ＦＥＲＭ ＢＰ−３４１８株である、請求項７又は８に記載の植物の栽培方法。
【請求項１１】
大豆ホエーとバチルス属微生物とを、大豆ホエーの乾燥質量１ｇに対して、バチルス属微生物が５×１０５個以上となるように施用する、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の植物の栽培方法。
【請求項１２】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の植物の生長促進剤を植物に施用ことを特徴とする、植物の生長促進方法。
【請求項１３】
大豆ホエー及びバチルス属微生物を、植物に施用することを特徴とする植物の生長促進方法。
【請求項１４】
大豆ホエーが、５０〜８０質量％エタノール水溶液を用いて脱脂大豆から抽出されたものである、請求項１３に記載の植物の生長促進方法。
【請求項１５】
バチルス属微生物が、バチルス・サブチルスまたはバチルス・プミルスである請求項１３又は１４に記載の植物の生長促進方法。
【請求項１６】
バチルス属微生物が、バチルス・サブチルス ＦＥＲＭ ＢＰ−３４１８株である、請求項１３又は１４に記載の植物の生長促進方法。
【請求項１７】
大豆ホエーとバチルス属微生物とを、大豆ホエーの乾燥質量１ｇに対して、バチルス属微生物が５×１０５個以上となるように施用する、請求項１３〜１６のいずれか１項に記載の植物の生長促進方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、大豆ホエー及びバチルス（Bacillus）属微生物を用いた植物の生長促進剤および、植物の栽培方法、植物の生長促進方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
植物の生長を促進し、農作物の増収を促進するために、これまでは化学農薬や化学肥料が用いられてきた。しかし、近年においては、それら化学物質を多用することによって環境汚染問題が生ずるとともに、土壌が劣化することにより、農作物の収量の増加にも歯止めがかかってきており、広く社会問題となっている。また、農作物の安全性に対する関心が高まるにつれ、いわゆる無農薬栽培や有機栽培による農作物への需要が増大している。
【０００３】
このような社会的背景の中、植物抽出液、低分子ペプチドまたは微生物を利用して植物の生長を促進する方法や農作物の収量を増加する方法が研究されており、杉・檜等の抽出物、ファイトスルフォカイン、大豆タンパク分解物、バチルス属細菌、根粒菌およびアゾスピリラム（Azospirillum）属菌の利用、根粒菌とアゾスピリラムとの同時利用などが報告されている（例えば、非特許文献１〜３参照）。
しかしながら、非特許文献１〜３に記載された方法においては、一定の効果が期待できるものもあるが、費用が非常にかかるものが多く、実際の農産物の生産現場で利用するには至ってはいない。
【０００４】
また、微生物を用いて植物の生長を促進する方法が提案されている。
例えば、特許文献１には、バチルス属微生物の培養物を、植物の生長促進剤として用いることが開示されている。該特許文献には、該公報に開示された生長促進剤が、植物の生長を促進し、作物の増収が可能になることが開示されている。しかし、該特許文献に開示された微生物は、非常に高価なものであるため、その培養物を二十日大根や小松菜などの大量の生産される実際の農作物の生産現場に使用できるものではない。
【０００５】
また、特許文献２には、特殊なタンパク質分解酵素を産生する新規なバチルス属微生物に、大豆粕と水との混合溶液を用いて、当該溶液中のタンパク質を低分子化して、得られた分解物を水で１０％濃度となるように希釈して、植物の生長肥料として用いることが開示されている。該特許文献には、該公報に開示された肥料が植物の生長肥料として有効であることが開示されている。しかし、該特許文献に開示された方法は、微生物本来の効果を利用しているものではなく、その生長促進作用についても、実施例の比較対照が必ずしも適切でないことから、効果が十分得られるとは言い難い。また、タンパク質低分子化という工程が入ることにより、その優劣が植物の生長効果を左右するため、実際の農産物の生産現場で、一定以上の植物の生長促進効果を維持するのは、非常に困難なものとなっている。
【０００６】
そこで、大量生産を目的とした実際の農産物の生産現場における使用において、一定以上の植物の生長促進効果を担保しつつ、手間が掛からず、安全で、種々の農作物に利用でき、大量かつ安価に利用できる植物の生長促進剤および、植物の生長促進方法が望まれていた。
【０００７】
【特許文献１】特開平１０−２７６５７９
【特許文献２】特開２００２−３６２９８８
【非特許文献１】Moawad, H. et al., Biol. Fertil. Soils, 6,174-177(1988)
【非特許文献２】Singh, C. S. et al., Plant Soil, 53, 387(1979)
【非特許文献３】Bashan, Y. et al., Soil Biol.Biochem, 18, 297-301(1986)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、実際の農産物の生産現場における使用において一定以上の植物生長促進効果を有し、安全性および利便性に優れた植物の生長促進剤および、植物の生長促進方法を提供することを目的とする。さらに、本発明は、低コストで大量供給可能な実用性に優れた植物の生長促進剤および、植物の生長促進方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記目的を達成するために、本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、植物体に対し、大豆ホエーとバチルス属微生物を併せて用いることにより、当該微生物の植物生長促進作用を増強することを見出し、本発明を完成した。また、本発明者らは、上記知見より、これまでに知られていた以上に実用的かつ安価で大量に、植物に対して生長促進作用を発揮しうる生長促進剤および生長促進方法を実現できることを見い出し、本発明を完成した。
【００１０】
すなわち、本発明は、大豆ホエーとバチルス属微生物とを含有する植物の生長促進剤を提供する。
また、本発明は、上記生長促進剤を、植物に施用することを特徴とする植物の栽培方法を提供する。
また、本発明は、大豆ホエー及びバチルス属微生物を、植物に施用することを特徴とする植物の栽培方法を提供する。
また、本発明は、上記生長促進剤を、植物に施用することを特徴とする植物の生長促進方法を提供する。
また、本発明は、大豆ホエー及びバチルス属微生物を、植物に施用することを特徴とする植物の生長促進方法を提供する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明により、バチルス属微生物単独で植物に施用するよりも生長促進効果を有する植物の生長促進剤が提供される。また、本発明により、一定以上の植物に対する生長促進効果を有し、かつ安全性及び利便性を有するとともに、実用性に優れた植物の生長促進剤、植物の栽培方法及び植物の生長促進方法が提供される。更に、本発明により、低コストで大量供給可能な実用性に優れた植物の生長促進剤、及び植物の生長促進方法が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、先ず本発明の植物の生長促進剤について説明する。
本発明の植物の生長促進剤は、大豆ホエーとバチルス属微生物とを含有する。
本発明において用いられる大豆ホエーとは、脱脂大豆からタンパク質を製造する工程で生成するタンパク質画分以外の成分の総称である。
大豆から大豆油を抽出（搾油）することは、従来より知られており、大豆から大豆油を抽出（搾油）した残渣を、通常、脱脂大豆または大豆粕（かす）と呼んでいる。脱脂大豆は、例えば、大豆をローラーで圧扁し、過剰のヘキサンを用いて油分を抽出した後、減圧条件下で加熱してヘキサンを除去することにより得られる。これらの脱脂大豆は、通常用いられているものを使用することができ、一般的に、水分１０質量％、粗タンパク質４５質量％、脂質１．５質量％、粗繊維及び粗灰分５質量％、可溶無窒素物（炭水化物）３０質量％の組成を成しているが、特に上記組成のものに限定されるものではない。また、脱脂大豆の窒素可溶係数（ＮＳＩ）は一般的に５〜９０であり、本発明においても、これを用いることができる。
【００１３】
これらの脱脂大豆は、さらに適当な抽出工程により抽出が行われ、大豆タンパク質と、その他の部分とに分けられ、別々の用途に使用されている。大豆タンパク質以外の部分が、一般に大豆ホエーと呼ばれている。本発明において用いられる大豆ホエーは、通常のこれらの工程によって得られたものを使用することができ、その組成について、特に限定されるものではない。大豆ホエーの組成としては、例えば、乾燥物中に、タンパク質１０質量％、炭水化物質量％、灰分２９質量％、脂質１質量％のものが挙げられる。
なお、大豆ホエーの乾燥物とは、大豆ホエーを製造する際の通常の乾燥処理を行ったものを意味し、具体的には、自然乾燥、凍結乾燥、スプレードライ等の処理を行ったものをいう。このようにして得られた大豆ホエーの水分含有量は、通常は１０質量％以下になっている。
【００１４】
本発明に用いられる大豆ホエーを得る方法としては、脱脂大豆から酸性水溶液を用いた抽出法や含水アルコール抽出法、水抽出後に酸沈殿する方法などの周知の方法により得られたものを用いることができ、いずれか１つに限定されるものではない。
【００１５】
大豆ホエーを得る方法の一例について説明すると、例えば、大豆ホエーは、次の方法で得ることができる。
まず、大豆の種皮及び胚芽を除去し、圧扁した後に、脱脂して胚芽除去脱脂大豆を得る。次に、これをｐＨ４．３程度に調整した酸性水溶液で抽出操作を行い、固体部分と液体部分とに分け、液体部分を洗浄、乾燥することにより大豆ホエーを得ることができる。また、胚芽除去脱脂大豆を水又はアルカリ水溶液で抽出して得られる大豆タンパク質抽出液のｐＨを４．３付近に調整し、沈殿するタンパク質を分離除去し、得られる液体部分を洗浄、乾燥することで大豆ホエーを得ることができる。
【００１６】
本発明において用いられる大豆ホエーの好ましい製造方法の例としては、アルコール水溶液を利用する方法が挙げられる。大豆ホエーは、脱脂大豆からアルコール水溶液を用いて、公知の方法（浸漬、フラッシング等）により不溶性部分であるタンパク質を沈殿させ、この不溶性部分であるタンパク質を分離除去した後に、液体部分のアルコールを蒸留により分離することにより得ることができる。脱脂大豆に対する抽出工程は、アルコール水溶液不溶性のタンパク質の収率を上げるため、通常、複数回行うことが好ましい。
さらに、得られた大豆ホエーは、自然乾燥、凍結乾燥、スプレードライヤー等で乾燥して、粉末状態とすることができ、これによりバチルス属微生物との混合が容易になり、さらに保存性等の実用性も向上する。
【００１７】
抽出工程において用いられるアルコールとしては、一般にメタノール、エタノール、イソプロパノールが用いられるが、食品製造および取扱い的見地から、エタノールを用いることが好ましい。
また、抽出工程において用いられるアルコールは、水で希釈してアルコール水溶液として用いることが好ましい。アルコール水溶液のアルコール濃度は、一般的に用いられている濃度を使用することでき、好ましくはアルコール濃度が４０〜９０質量％のアルコール水溶液が用いられ、更に好ましくは、アルコール濃度が５０〜８０質量％のアルコール水溶液が用いられる。
本明細書において、「アルコール水溶液」は、「含水アルコール」又は「含水アルコール溶液」と同義であり、これらの用語は一般的に用いられる。例えば、５０〜８０質量％アルコール水溶液は、５０〜８０質量％含水アルコール又は５０〜８０質量％含水アルコール水溶液は同様のものであることを意味する。
アルコール水溶液において、例えば、アルコールとして、エタノールを用いる場合は、エタノール水溶液と表記する。
【００１８】
本発明において用いられるバチルス属微生物としては、植物への生長促進作用を有するバチルス属微生物であれば、特に制限なく利用することができる。バチルス属微生物としては、バチルス・サブチルス（Bacillus subtilis）、バチルス・プミルス（Bacillus pumilus）が好ましく用いられる。
ここで、植物に対する生長促進作用（効果）とは、後記実施例により明らかにされるように、広く植物の生長速度を速め、あるいは、植物の体重量を増加させるすべての作用を含むものであり、植物ホルモン等による特異的な生長促進活性のみを意味するものではない。
より具体的には、例えば、本発明に係る植物の生長促進剤を施用してから、ある栽培時点における植物の生長速度を速め、その栽培時点において植物の大きさや体重量増加や、本発明に係る植物の生長促進剤を施用した場合、施用しない場合と比して、植物が一定の大きさになるまでにかかる時間が短いことなどをいう。
【００１９】
本発明に利用できるバチルス属微生物の代表的かつ最も好ましい例として、バチルス・サブチルス（Bacillus subtilis） ＦＥＲＭ ＢＰ−３４１８株を挙げることができる。バチルス・サブチルス（Bacillus subtilis） ＦＥＲＭ ＢＰ−３４１８株は、１９９１年５月２１日付で通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所（旧：微生物工業技術研究所）に微工研条寄第３４１８号（ＦＥＲＭＢＰ−３４１８）として、ブタペスト条約に基づき国際寄託されている（特許第3040234号参照）。また、バチルス・サブチルス（Bacillus subtilis） ＦＥＲＭ ＢＰ−３４１８株としては、市販されているものを用いることができ、このような市販品としては、「バクトクリアーＦＭ」（株式会社エー・エイチ・シー製）が挙げられる。
【００２０】
本発明に用いられるバチルス属微生物は、培養したものを用いるが、培養は、通常用いられるバチルス属微生物の増殖法に準じて、固体培養あるいは液体培養により行うことができる。このうち、培養後の処理の容易さの観点から液体培養により行なうことが好ましい。なお、培養に使用する培地成分や培養条件などは、公知の方法を参酌して、最終的な剤型等を考慮して適宜設定することができる。
【００２１】
また、バチルス属の菌は、ある条件下で、栄養型細胞に比べて種々の物理的および化学的感作に対する強い抵抗力を持つ芽胞を形成することが知られている（尾崎学、坂崎利一編、「家畜微生物学」、三訂版、第１９〜２１頁、１９８７年）。本発明においては、用いるバチルス属微生物としては、栄養細胞の状態にあるものであっても、芽胞の状態にあるものであってもよく、または、それらの混在した状態にあるものを用いることもできる。ただし、保存による製剤中の菌数の減少を回避するためには、芽胞の状態にあるものを多く用いることがより好ましい。また、栄養細胞数に対する芽胞数の比をより多くするためには、培養時間を通常より長くしたり、回収した培養液あるいは洗浄により得た菌体を７０〜８０℃の温度にて熱処理する方法が一般的に用いられており、本発明でも同様の方法で芽胞の状態にある菌体を多く含む培養物を得ることが可能である。
【００２２】
本発明において用いられるバチルス属微生物としては、バチルス属微生物の菌体はもとより、その培養上清、または、これらの両方を意味するものである。培養上清とは、培養の結果として得られる全体から菌体を除いた部分であり、菌の代謝産物を含むものである。
【００２３】
培養により得られる培養物（本発明において、バチルス属微生物の菌体もしくは培養上清、またはそれら両方を含む。）は、そのまま、あるいは、菌体と培養上清とを分離した上で、本発明の生長促進剤の構成成分として使用できる。例えば、液体培養により得られる培養液は、バチルス属微生物の菌体および培養上清の双方を含有する培養物としてそのまま使用してもよく、また、例えば遠心分離と水や生理食塩水等による洗浄の繰り返し、もしくはろ過等の手段により分離するなどして、菌体のみ、あるいは、培養上清のみを、本発明の植物の生長促進剤の構成成分として使用することができる。さらに、バチルス属微生物の培養物は、自然乾燥、凍結乾燥、スプレードライヤー等の使用により、乾燥粉末状態とすることができる。
【００２４】
本発明の植物の生長促進剤に含有される、大豆ホエーとバチルス属微生物との割合は、特に限定されるものではない。この植物の生長促進剤中の大豆ホエーとバチルス属微生物との比は、例えば、大豆ホエーの乾燥質量１ｇに対してバチルス属微生物が５×１０５個以上であることが好ましく、更に好ましくは５×１０７個以上であり、更に好ましくは１×１０９個以上であり、最も好ましくは５×１０９個以上である。
なお、大豆ホエーの乾燥質量とは、大豆ホエーを製造する際の通常の乾燥処理、例えば、自然乾燥、凍結乾燥、スプレードライ等の処理によって乾燥したものの質量を意味し、通常は、水分含有量が１０質量％以下になっているものの質量を意味する。
【００２５】
バチルス属微生物の菌体数は、一般的な方法で測定することができる。このような方法としては、例えば、希釈平板法が挙げられる。
希釈平板法について説明する。希釈平板法とは、測定対象となる菌体が含まれたサンプルを、一定量秤量し、測定に適当であると思われる希釈倍率が異なるサンプルを約６〜７検体作製する。その検体の一定量を、滅菌シャーレ内の培地上に、均一になるように塗り広げる。そのシャーレを適当な温度のインキュベーター内で、１〜２日間静置し、希釈倍率が異なったサンプルを塗ったシャーレの中で、１００個程度のコロニーが発生しているシャーレのコロニー数をカウントして、希釈率をかけて、当初のサンプル中の菌体数を算出する方法である。
よって、本発明における微生物の数単位（個）は、ｃｆｕ単位（コロニー形成単位）を意味する。
【００２６】
本発明の植物の生長促進剤に含まれる大豆ホエーの含有量としては、上記の植物の生長促進剤中の大豆ホエーとバチルス属微生物との比が満たされる範囲であれば、特に限定されない。
【００２７】
本発明の植物の生長促進剤における大豆ホエー及びバチルス属微生物の存在状態は、水溶液状態、乾燥粉末状態、及び乾燥固形状態のいずれでもよい。いずれの存在状態であっても、その効果に変わりがないが、保存性等を考慮すると実用上は乾燥粉末状態であることが好ましい。
本発明の植物の生長促進剤は、固形状のものを用いることができ、例えば粉末状のものであってもよい。粉末状のものは、例えば水に溶解して用いる場合に溶解度を高めることが容易となるので好ましい。また、粉末状のものは、土壌に散布する場合にも均等に散布できるので好ましい。また、固体状とは、少なくとも液状や半液状ではないことを意味する。これらの固体状の形状は特に制限されるものではなく、例えば、ブロック状、顆粒状等が挙げられる。
なお、粉末状とは、見た目が粉末様のものを意味するものとし、水分含有量は問わない。
【００２８】
本発明の植物の生長促進剤は、後述する植物の栽培方法及び植物の生長促進方法において用いることができる。本発明の生長促進剤が粉末状である場合は、水に溶解又は懸濁して用いてもよく、又は、そのままの状態で散布等してもよい。また、固形状のものを用いる場合は、例えば錠剤の形態に形成して用いることができ、固形状の場合も、そのままの状態で用いることもできるが、例えば水に溶解又は懸濁して用いることもできる。
【００２９】
本発明の植物の生長促進剤が適応される植物としては、例えばチンゲンサイ、コマツナ、ハクサイ等のアブラナ科植物、トマト、ナス等のナス科植物、キュウリ、メロン等のウリ科植物、ホウレンソウ等のアカザ科植物、レタス、シュンギク等のキク科植物、シバ、イネ等のイネ科植物等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３０】
本発明の植物の生長促進剤は、施肥をした植物体に対して用いたとき、生長促進作用を発揮し、その効果は、単独施肥時に比べ、より生長を促進させるという作用を有するものである。さらに詳しくは、施肥をした植物体に対して本発明の生長促進剤を用いたときの生長促進作用とは、施用してから、ある栽培時点における植物の生長速度を速め、その栽培時点において植物植物の大きさや体重量増加等を示す作用のことを意味する。
本発明における、施肥をした植物に対し大豆ホエーとバチルス属微生物とを併せて与えることにより、単独施肥時に比べ、より生長を促進させるという効果は、大豆ホエーとバチルス属微生物のみの使用で、施肥にかわる効果を発揮するものではない。植物に肥料を施すことによって、これらの効果が発揮されるものである。従って、施肥せずに、本発明の植物の生長促進剤のみを、植物に与えた場合も、上記効果を奏するものではない。
【００３１】
次に、本発明の植物の栽培方法及び植物の生長促進方法について説明する。
本発明の植物の栽培方法及び植物の生長促進方法（以下、植物の生長促進方法という場合には、植物の栽培方法をも含むものとする）は、大豆ホエー及びバチルス属微生物を、植物に施用することを特徴とする。
本発明の植物の生長促進方法は、大豆ホエー及びバチルス属微生物を、植物に施用することを特徴とする。本発明の植物の生長促進方法において用いられる大豆ホエー及びバチルス属微生物としては、上述した本発明の植物の生長促進剤に含有されるものを用いることができる。
本発明の植物の生長促進方法においては、大豆ホエーの乾燥質量１ｇに対して、バチルス属微生物が５×１０５個以上となるように施用することが好ましく、更に好ましくは５×１０７個以上であり、更に好ましくは１×１０９個以上であり、最も好ましくは５×１０９個以上である。大豆ホエーの乾燥質量１ｇに対して、バチルス属微生物が５×１０５個以上となるように施用することにより、植物の生長促進効果が十分に発揮される。
【００３２】
本発明の植物の生長促進方法において、大豆ホエー及びバチルス属微生物の植物への施用量は、上述した、大豆ホエーとバチルス属微生物との比が満たされる範囲であれば、特に限定されない。
【００３３】
なお、本発明の植物の生長促進方法において、大豆ホエー及びバチルス属微生物を植物へ施用する方法としては、特に制限はないが、例えば、植物の栽培土壌に混和する方法、栽培土壌の表面に散布する方法、栽培土壌に潅注する方法、栽培用水に混和する方法、種子にコートする方法、茎や根など植物体に注入する方法、塊茎の切断面に塗布する方法、人工培地に添加する方法、植物体に散布する方法等が挙げられる。
本発明の植物の生長促進方法を実施する際の、大豆ホエー及びバチルス属微生物を含有する噴霧液又は栽培土壌等における微生物の総量又は微生物濃度を規定することはできない。
本発明の植物の成長促進方法における生長促進効果は、植物に対して一定以上の微生物量が作用しないと発揮し得ないが、これは、投与方法、対象植物、投与回数、投与濃度、土壌の量等の多様な要素を考慮し、当業者が適宜調製することができ、一概に規定することは困難である。
例えば、二十日大根や小松菜の栽培に対して、栽培土壌への散布又は葉面へ散布して用いる場合には、後述する実施例において明らかなように、微生物量が２．５×１０４個／ｍｌ水溶液を１０ｍｌ用い、これを週1回投与し、これを4回続けることにより効果を発揮することがわかる。
施用する場合、大豆ホエー、バチルス属微生物は、粉末状であっても、固形物であってもよく、固形物としては、錠剤の形態のものも含まれる。また、粉末状、固形物のものを水に溶解、又は懸濁して用いることもできる。
【００３４】
なお、本発明の植物の生長促進方法においては、大豆ホエー及びバチルス属微生物を、同時に植物に施用してもよく、又はいずれかを施用した後、一定時間経過後に他方を施用してもよい。同時に施用せず、一定時間経過した後に他方を施用させる場合には、何れを先に施用してもよく、大豆ホエー又はバチルス属微生物のいずれかを施用した後に、一定時間経過後に他方を施用すればよい。なお、一定時間とは、４８時間以内に施用することをいう。４８時間を超えて施用した場合、植物の生長促進効果が減少する場合がある。
【００３５】
一定時間経過してから施用する方法としては、例えば、大豆ホエーを土壌と混ぜ、先に蒔いておき、適当な時期に、バチルス属微生物やその培養液を噴霧する方法などである。施用時に手間がかかるが、大豆ホエーとバチルス属微生物との混合物を作らなくても、本発明の効果を発揮しうるので、有効な場合がある。
本発明の植物の生長促進方法においては、大豆ホエーとバチルス属微生物とを同時に施用することが好ましい。同時に施用することによって、植物の生長促進効果を最大限に発揮することができる。大豆ホエーとバチルス属微生物とを同時に施用する場合には、上述した本発明の植物生長促進剤を用いることができる。
【００３６】
本発明の植物の生長促進方法は、大豆ホエー及びバチルス属微生物を植物に対して施用した時、植物の生長促進作用を発揮し、その効果は、単独施肥時に比べ、より生長を促進させるという作用を有するものである。さらに詳しくは、植物に、大豆ホエー及びバチルス属微生物を施用した際の生長促進作用とは、施用してから、ある栽培時点における植物の生長速度を速め、その栽培時点において植物植物の大きさや体重量増加などをいう。本発明の植物の生長促進方法における、施肥をした植物に対し大豆ホエーとバチルス属微生物とを併せて与えることにより、単独施肥時に比べ、より生長を促進させるという効果は、大豆ホエーとバチルス属微生物のみの使用で、施肥にかわる効果を発揮するものではない。植物に肥料を施すことによって、これらの効果が発揮されるものである。従って、施肥しない場合には、上記効果を奏するものではない。
【００３７】
本発明の植物の生長促進方法を適用する際に用いられる肥料としては、通常、有機質肥料、化成肥料等が使用されるが、それ以外にも、いわゆる土壌改良材や堆肥等、肥料成分を含むものは全て用いることができ、いずれか１つに限定されるものではない。
【実施例】
【００３８】
以下、本発明を実施例により更に詳細に説明する。なお、本発明の範囲は、かかる実施例に限定されないことはいうまでもない。なお、以下の実施例において、部および％は、特に断りのない限り質量部又は質量％を表す。
【００３９】
バチルス・サブチルス（Bacillus subtilis）BP-3418株、ＩＦＯ−3009株、ＩＦＯ−3013株、及びバチルス・プミルス（Bacillus pumilus）ＩＦＯ―3813株は、以下の説明において、BP-3418株、ＩＦＯ−3009株、ＩＦＯ−3013株及び、ＩＦＯ―3813株という。
BP-3418株は、市販品である「バクトクリアーＦＭ」（株式会社エー・エイチ・シー製）を、その他の菌株は、株式会社エー・エイチ・シー附属総合研究所内で作製したものを用いた。なお、上記菌株は粉末状であり、それらの水分含有量は１〜３％であった。
微生物の数単位は、以下において、ｃｆｕ単位を示す。ｃｆｕは、コロニー形成単位を意味し、希釈平板法によりカウントした値である。
【００４０】
実施例１
脱脂大豆の製造は、以下のように行った。
丸大豆１．５ｋｇをローラーで圧扁し、過剰のｎ−ヘキサン１０Ｌを用いて油分を抽出した。次いで、減圧条件下で５０〜６０℃に加熱してｎ−ヘキサンを除去し、脱脂大豆（ＮＳＩ：約８０）を約１ｋｇ得た。
次いで、上述のようにして得られた脱脂大豆１ｋｇを、６０％エタノール水溶液６Lに混合し、６０℃の温度で１時間撹拌抽出を行い、遠心分離により固液分離を行い、エタノール抽出液と固形分とに分離した。この固形分に６０％エタノール水溶液６Lを加え、同じ抽出操作を繰り返して、得られたエタノール抽出液を、先の抽出液を合わせて約１１Lのエタノール抽出液を得た。得られたエタノール抽出液を減圧濃縮してエタノールを除去し、大豆ホエー１．２Lを得た。得られた大豆ホエーをスプレードライにかけ、粉末大豆ホエー２２０ｇを得た。得られた大豆ホエーの水分含有量は４〜６％であった。
【００４１】
実施例２
乳糖粉末０．５ｇ中に、BP-3418株を約２．5×１０5、２．5×１０7、２．5×１０9、２．5×１０11個含有させ、それぞれを、実施例１で得られた大豆ホエー０．５ｇと混合し、植物の生長促進剤を得た。得られた植物の生長促進剤を、それぞれ製剤Ａ１〜Ａ４とした。製剤Ａ１〜Ａ４中に含まれるBP-3418株の個数（大豆ホエー１ｇあたり）は、それぞれ5×１０5、5×１０7、5×１０9、5×１０11個である。また、乳糖粉末１ｇ中に、BP-3418株を約２．5×１０5、２．5×１０7、２．5×１０9、２．5×１０11個含有する製剤を調整し、それぞれを製剤Ｂ１〜Ｂ４とした。
【００４２】
ミックスピート及び赤玉土を等量混合したものに菜種粕肥料（商品名：「発酵油粕」（成分組成は、Ｎ：Ｐ：Ｋ＝３：７：４），日清オイリオ社製）を、その容量が、ミックスピート及び赤玉土の合計容量の4％となるように含有させて調製した用土を４号ポットに入れたものを１８個用意し、二十日大根の種を各鉢に２０粒づつ撒いた。それぞれのポットに、製剤Ａ１〜Ａ４及び製剤Ｂ１〜Ｂ４を、それぞれ１ｇを精製水１０ｍｌに溶解した溶液を、２ポットづつ毎週１回、用土上面に撒いた（計１６ポット）。残りの２ポットは水のみを撒き、コントロールとした。二十日大根を４週間生育させた後（すなわち、製剤を４回散布させた）、各区の二十日大根１株あたりの平均生重量（根も含める）を求めた。結果を表1に示す。
【００４３】
【表１】
2005281195.tif 000002
【００４４】
表１から明らかなように、バチルス属微生物のみを施用した場合は、コントロールよりも二十日大根の生長を促進する効果があることがわかる。
また、大豆ホエーとバチルス属微生物とを含有する植物の生長促進剤を施用した場合は、バチルス属微生物の施用量が大豆ホエー１ｇに対して５×１０５〜５×１０１１個となる範囲において、バチルス属微生物のみを施用した場合によりも、二十日大根の生長を促進する効果が向上していることがわかる。
また、上記結果から、本発明の植物の生長促進剤は、土壌の表面に散布することにより、植物の生長を促進する効果があることがわかる。
【００４５】
実施例３
二十日大根に代え、小松菜を用いて実施例２と同様に試験を行った。結果を表２に示す。
【００４６】
【表２】
2005281195.tif 000003
【００４７】
表２から明らかなように、バチルス属微生物のみを施用した場合は、コントロールよりも小松菜の生長を促進する効果があることがわかる。
また、大豆ホエーとバチルス属微生物とを含有する植物の生長促進剤を施用した場合は、バチルス属微生物の施用量が大豆ホエー１ｇに対して５×１０５〜５×１０１１個となる範囲において、バチルス属微生物のみを施用した場合よりも、小松菜の生長を促進する効果が向上していることがわかる。
【００４８】
実施例４
種々のバチルス属微生物（BP-3418株、ＩＦＯ−3009株、ＩＦＯ−3013株および、ＩＦＯ−3813株）と大豆ホエーとの混合物について植物の生長促進効果を検討した。
乳糖粉末０．５ｇ中に、BP−3418株、IFO−3009株、ＩＦＯ−3013株、 IFO−3813株を約２．5×１０7個含有させ、それぞれを、実施例１で得られた大豆ホエー０．５ｇと混合し、植物の生長促進剤を得た。得られた植物の生長促進剤を、それぞれ製剤Ａ２、Ｃ、Ｄ及びＥとした。それぞれの製剤中に含まれるバチルス属微生物の個数（大豆ホエー１ｇあたり）は5×１０7である。また、乳糖粉末１ｇ中に、BP−3418株、IFO−3009株、ＩＦＯ−3013株、 IFO−3813株を約２．5×１０7個含有する製剤を調整し、それぞれを製剤Ｂ２、Ｆ、Ｇ及びＨとした。
得られた製剤について、実施例１と同様に試験を行った。結果を表３に示す。
【００４９】
【表３】
2005281195.tif 000004
【００５０】
表３から明らかなように、バチルス属微生物のみを施用した場合は、コントロールに比べ、わずかに二十日大根の生長を促進する効果が認められた。また、大豆ホエーとバチルス属微生物とを施用した場合は、使用した４種のバチルス属微生物のいずれにおいても、バチルス属微生物のみを施用した場合よりも、二十日大根の生長を促進する効果が向上していることがわかる。
【００５１】
実施例５
大豆ホエー抽出時のアルコール濃度を代え、得られた大豆ホエーによる植物の生長促進効果を調べた。
実施例１で得られた脱脂大豆１ｋｇを、４０、５０、６０、７０、８０及び９０％エタノール水溶液６Lに混合し、６０℃の温度で１時間撹拌抽出を行い、遠心分離により固液分離を行い、エタノール抽出液と固形分とに分離した。この固形分に４０、５０、６０、７０、８０及び９０％エタノール水溶液６Lを加え、同じ抽出操作を繰り返して、得られたエタノール抽出液を、先の抽出液を合わせて約１１Lのエタノール抽出液を得た。得られたエタノール抽出液を減圧濃縮してエタノールを除去し、大豆ホエー１．２Lを得た。得られた大豆ホエーをスプレードライにかけ、粉末大豆ホエー１８１ｇ、２０１ｇ、２２５ｇ、２１４ｇ、１９５ｇ及び１６１ｇを得た。
【００５２】
乳糖粉末０．５ｇ中に、BP−3418株を約２．5×１０7個含有させ、それぞれを、上述のようにして得られた大豆ホエー０．５ｇと混合し、植物の生長促進剤を得た。得られた植物の生長促進剤を、それぞれ製剤Ｉ、Ｊ、Ｋ、Ｌ、Ｍ及びＮとした。それぞれの製剤中に含まれるBP−3418株（大豆ホエー１ｇあたり）は5×１０7個である。
得られた製剤について、実施例１と同様に試験を行った。結果を表４に示す。
【００５３】
【表４】
2005281195.tif 000005
【００５４】
表４に示すように、すべてのアルコール濃度においても、得られた大豆ホエーとバチルス属微生物とを植物に施用すると生長促進効果が認められたが、特に５０〜８０％エタノール溶液で抽出した場合が、その効果が顕著であった。
【００５５】
実施例６
用土上面への製剤の散布を、葉面に霧吹きでスプレーする方法に代えた以外は実施例１と同様にして試験を行った。結果を表５に示す。
【００５６】
【表５】
2005281195.tif 000006
【００５７】
表５から明らかなように、バチルス属微生物のみを施用した場合は、コントロールよりも植物の生長を促進する効果があることがわかる。
また、大豆ホエーとバチルス属微生物とを葉面に噴霧することにより施用した場合は、バチルス属微生物の施用量が大豆ホエー１ｇに対して５×１０５〜５×１０１１個となる範囲において、バチルス属微生物のみを施用した場合よりも、二十日大根の生長を促進する効果が向上していることがわかる
この結果から、本発明の植物の生長促進剤は葉面に噴霧することによっても植物の生長促進効果を示すことがわかった。
【００５８】
実施例７
二十日大根に代え、小松菜を用いた以外は実施例６と同様にして試験を行った。結果を表６に示す。
【００５９】
【表６】
2005281195.tif 000007
【００６０】
表６から明らかなように、バチルス属微生物のみを施用した場合は、コントロールよりも植物の成長を促進する効果があることがわかる。
また、大豆ホエーとバチルス属微生物とを葉面に噴霧することにより施用した場合は、バチルス属微生物の施用量が大豆ホエー１ｇに対して５×１０５〜５×１０１１個となる範囲において、バチルス属微生物のみを施用した場合に比べ、小松菜の生長を促進する効果があることがわかる。
【００６１】
実施例８
乳糖粉末０．５ｇ中に、BP−3418株を約５×１０１０個含有させ、それを、実施例１で得られた大豆ホエー０．５ｇと混合し、植物の生長促進剤を得た。この植物の生長促進剤中に含まれるBP−3418株（大豆ホエー１ｇあたり）は１×１０１１個である。次いで、この植物の生長促進剤を、精製水を用いて希釈し、赤土、バーミキュライトおよびベントナイトをそれぞれ１０：１０：１の割合で混合したものに、均質に散布し、それらを撹はん造粒した後、温風を当てて乾燥し、ＢＰ−3418株濃度  約１×１０８個／無機粒剤１ｇである無機粒剤を得た。これを製剤Ｏとする。また、乳糖粉末１ｇ中に、BP-3418株を約１×１０８個／無機粒剤１ｇとなる無機粒剤を得た。これを製剤Ｐとする。
【００６２】
５０ｍ２の圃場（土の比重；０．５）に市販の化学肥料２０ｋｇを均質に施用した後、そのうち１／３（約１６．７ｍ２）には2．５ｋｇの製剤Ｏを散布し（ホエー区）、他の１／３には２．５ｋｇの製剤Ｐを散布し（乳糖区）、他の１／３は１．２５ｋｇの赤土と１．２５ｋｇのバーミキュライトを散布（対照区）して、全ての区を深さ約１０ｃｍでぞれぞれ耕したのち、ホウレンソウ種子をそれぞれの区に６５ｍｌずつ均一に播種した。
よって、ホエー区および、乳糖区のＢＰ−3418株濃度は、約３×１０５個／土壌１ｇとなる。
【００６３】
４カ月経過後に、それぞれの区より抽出した面積１ｍ２×３箇所（計３ｍ２）について、ホウレンソウの株ごとの最長葉長及び展開葉数を計測し、平均値を求めた。また、同箇所の面積１ｍ２あたりのホウレンソウ地上部の総重量を計量し、平均収量を求めた。結果を表７に示す。
【００６４】
【表７】
2005281195.tif 000008
【００６５】
表７から明らかなように、乳糖を用いた試験区においては、対象区よりもわずかに生長促進効果が認められた。また、ホエー区においては、乳糖を単独で用いた場合よりも生長促進効果は大きかった。
この結果から、本発明の植物の生長促進剤は、土壌に混和することにより、植物の生長を促進する効果があることがわかる。