(57)【要約】【課題】  有用性が認められているハナビラタケについて、子実体形成率および総収穫量の増加を向上させ、より商業栽培に適した栽培方法を提供する。【解決手段】  ハナビラタケを栽培する方法において、ハナビラタケ栽培培地に波頭値が１ｋＶ〜２００ｋＶで波頭長が１μｓ〜１ｍｓである刺激電圧を印加して通電することと、ホウライタケなどの異種キノコの種菌の固形培地もしくはその水溶液または懸濁液を添加することを併用することを特徴とするハナビラタケの人工栽培方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハナビラタケ栽培培地に通電する工程と異種キノコの種菌を添加する工程を含むことを特徴とするハナビラタケの栽培方法。
【請求項２】
通電方法が、刺激電圧の印加である請求項１記載のハナビラタケの栽培方法。
【請求項３】
刺激電圧が、波頭値１ｋＶ〜２００ｋＶの刺激電圧である請求項２記載のハナビラタケの栽培方法。
【請求項４】
刺激電圧が、波頭長1μｓ〜１ｍｓの刺激電圧である請求項３記載のハナビラタケの栽培方法。
【請求項５】
異種キノコの種菌が、菌体の水溶液または懸濁液の形態である請求項１ないし４のいずれかに記載のハナビラタケの栽培方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ハナビラタケ（Sparasiss crispa）の栽培方法に関するものであり、さらに詳しくは栽培過程において異種キノコの種菌の添加と培地への通電をおこなうハナビラタケの栽培方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
現在食用キノコの栽培では、その過程において、低温刺激、菌掻き、注水、覆土などの経験的に得られた発生操作をおこなうことによって、子実体の発生促進や子実体発生時期の制御をしている。この操作をおこなうことによって、効率のよい生産が可能となる。
【０００３】
ところで、現在商業規模で栽培されているキノコは全て白色腐朽菌と呼ばれるリグニン分解能が高いキノコである。一方、褐色腐朽菌と呼ばれるリグニン分解能の低いキノコの場合、商業規模での栽培はおこなわれていなかった。その原因の一つとして発生操作による子実体の発生促進や子実体形成時期の制御が難しいことが考えられる。
【０００４】
褐色腐朽菌に分類されるハナビラタケは、カラマツに生える非常に僅少なキノコであって、歯ごたえが良く、その純白の色合いと葉牡丹の様な形態に特徴を有する食用キノコである。このハナビラタケは、長い間人工培地で子実体を形成させることが出来なかったが、近年比較的短期間で栽培可能な新しい栽培法が確立され（例えば、特許文献１参照）、商業規模での供給が可能となった。このハナビラタケから抽出により得られたβ−グルカンを主成分とする抽出物について医薬品、食品分野での用途が提案されている（例えば、特許文献２、３参照）。
【０００５】
しかし、従来のハナビラタケ栽培では培養時の子実体形成率が極めて低い上に、子実体発生時期がばらつくという問題点があった。この問題は、白色腐朽菌で通常用いられる発生操作をおこなっても解決することが難しかった。この問題を解決する手段として、子実体発生操作として異種キノコの種菌を接種するという手法を用いることによってハナビラタケの子実体形成率が飛躍的に向上することが最近報告されている（特許文献４参照）。
【０００６】
一方、電気刺激を加えることによってキノコの成長が促進されることが報告されている（特許文献５、非特許文献１参照）。例えば、シイタケのほだ木に刺激電圧を印加することによって子実体の全収穫量が３５％増加する（特許文献５）。シイタケ菌床に電気的刺激を印加することによって子実体の全収穫量がおおよそ３０％〜５０％増加する（非特許文献１）。子実体発生操作として栽培培地に通電することによってハナビラタケの子実体形成率が４．５倍となり、全収穫量も約６倍になるなど、栽培効率が飛躍的に向上することが最近報告されている（特許文献６参照）。
【０００７】
しかしながら、栽培培地への通電と異種キノコの種菌の添加をハナビラタケの人工栽培に併用した例は報告されていない。
【特許文献１】特開平１１−５６９０８号公報
【特許文献２】特開２０００−２１７５４３号公報
【特許文献３】特開２００２−１２５４６０号公報
【特許文献４】特開２００２−３６９６２１号公報
【特許文献５】特開平１−２８５１２４号公報
【特許文献６】特願２００３−３４４１８４号
【非特許文献１】大賀祥治  他、日本応用きのこ学会誌  第９巻  ｐ．７〜１２  ２００１年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は有用性が認められているハナビラタケについて、子実体形成率および総収穫量の増加を向上させ、より商業栽培に適した栽培方法を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意検討した結果、発生操作として培地への通電と異種キノコの種菌の接種を併用することによって子実体形成率と収量を高めることが可能であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち本発明は、ハナビラタケを栽培する方法において、ハナビラタケ栽培培地に栽培培地に通電する工程と異種キノコの種菌を添加する工程を含むことを特徴とするハナビラタケの栽培方法を要旨とするものであり、好ましくはその通電が、刺激電圧を印加することにより行なわれる上記方法であり、またその通電する工程が波頭値が1kV〜２００kVである刺激電圧を印加することにより行なわれる上記方法であり、さらにはその通電する工程が、波頭値が１kV〜２００kVで波頭長が１μs〜１msである刺激電圧を印加することにより行なわれる上記方法であり、さらに、前記異種キノコの種菌が、菌体の水溶液または懸濁液の形態で添加されることを特徴とする上記いずれかの方法である。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の栽培方法によれば、ハナビラタケ子実体形成率を高めることが出来、それによりハナビラタケの栽培日数を短縮することが出来るほか、より大きな収量を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明で用いられるハナビラタケは特に菌株を限定するものではなく、どのような菌株でも用いることができる。ハナビラタケの取得方法としては、野生に生育しているものを採取してもよいし、（財）日本きのこ研究所の保存菌株を取り寄せることもできる。さらに生食用として市販されているハナビラタケの小片をできるだけ無菌的に切取り、例えばPDA寒天培地に植菌し培養した後スラントに植継げば、保存用のハナビラタケとすることができる。
【００１３】
本発明の栽培方法は、培地に通電することと異種キノコの種菌を接種すること以外は、栽培ビンによる従来の人工栽培方法により行なうことができる。すなわち、1)栽培ビンに固形培地を作成する。固形培地には接種孔を開けておくことが望ましい。2)種菌を固形培地に接種する。3)接種した培地を通常の条件で培養する。4)培地に通電する、5)異種キノコの種菌を接種する、の操作よりなる。なお、4)と5)については特に順番を限定するものではない。
【００１４】
固形培地はオガクズ培地が好ましい。培地基材としてカラマツのオガクズを使用し、これに小麦粉を１％〜３０％混合する。小麦粉は３％〜２０％が好ましく、５％〜１０％が更に好ましい。培地基材にはコーンコブや広葉樹と針葉樹の混合物などを用いることもできる。これを通常８５０ｃｃのポリプロピレン製栽培ビンに約５２０ｇ充填する。この際、培地中央に接種孔を開けておくと、接種量を多くすることができ培地全体に菌糸が回りやすくなり、また通気がよくなるため好ましい。接種孔を開けることにより結果として収穫までの期間が短縮でき、収量が上がるなどの利点が生じる。接種孔の大きさは断面積がほぼ８０ｍｍ2以上あればよい。固形培地は、高圧殺菌などの方法により殺菌をしておく。
【００１５】
本培地に同様のオガクズ培地で培養したハナビラタケの種菌を接種する。接種量は通常８ｇ〜１８ｇである。種菌を接種した培地の培養条件としては、温度は１５℃〜３０℃、好ましくは１８℃〜２８℃、２０〜２５℃が最も好ましく、湿度は５０％〜８０％、好ましくは５５％〜７５％、６０％〜７０％が最も好ましい。
【００１６】
以上のような方法で培養したハナビラタケ栽培培地に発生操作として通電と異種キノコの種菌の接種をおこなう。通電および異種キノコの種菌の接種は、菌糸が生育し培地全体に蔓延した時点で行なうのが好ましい。また、これらの操作の時期、順序、間隔および回数は特に限定するものではない。
【００１７】
本発明における、通電する工程における通電は、刺激電圧が好ましく、その時の最適な波頭値は１kV〜２００kVであり、１０kV〜２００kVが更に好ましく、１００kV〜２００kVが最も好ましい。波頭値が高い方が好ましいが、装置の作成に費用がかかるなど経済的に不利となる。また、このときの最適な波頭長は１μs〜１msであり、１μs〜１００μsが更に好ましく、１μs〜５０μsが最も好ましい。
【００１８】
通常刺激電圧の印加は、培地中に電極を突き刺しておこなうが、印加の形態についてはこの方法に特に限定しない。
【００１９】
本発明における、異種キノコの種菌を添加する工程で用いられる添加する異種キノコの種菌としては、ナラタケ、ホウライタケ、アミスギダケ、キコブダケおよびカバアナタケが好ましいが、特に種類を限定するものではない。これらの異種キノコを別途固形培地で培養して得られた異種キノコの種菌を、ハナビラタケの培養瓶に添加する。このときの添加量は栽培ビン当たり０．１ｇ〜５ｇが好ましく、０．５ｇ〜３．５ｇが更に好ましく、１．５ｇ〜２．５ｇが最も好ましい。また、異種キノコの種菌は、異種キノコ菌体の水溶液または懸濁液の形態として添加しても良い。このときの水溶液または懸濁液は、液体培養した菌糸体もしくはオガクズ培地で培養した菌糸体を液体に懸濁して調整する。この場合の添加液量としては０．５ｍL〜２５ｍLが好ましく、２ｍL〜１５ｍLが更に好ましく、３ｍL〜８ｍLが最も好ましい。またこの際、常法に従って、菌掻きした後に、異種キノコの種菌を添加してもよい。
【００２０】
以上のような発生操作を行なった後、子実体が栽培ビンの口付近まで生育したものについては、順次栽培ビンのふたを取って、通常の条件、すなわち温度１０℃〜３０℃、好ましくは１５℃〜２８℃、最も好ましくは１７〜２５℃、湿度８０％以上、好ましくは８５％以上、最も好ましくは９０％以上の栽培室に移し、子実体を生育させる。このような栽培により子実体は安定して１４０ｇ以上（栽培ビン1本あたり）収穫できる。
【実施例】
【００２１】
実施例１
ハナビラタケの保存菌株（ユニチカ市販ハナビラタケの断片よりスラント保存）をオガクズ培地に接種して作成した種菌を、栽培用のオガクズ培地に接種した。オガクズ培地の培地基材にはカラマツのオガクズを用い、これに小麦粉を７％混合し、水を加えて水分を６１％に調整した。これを８５０ｃｃのポリプロピレンの栽培ビンに５２０ｇ充填し、直径２０ｍｍの接種孔を市販の穴開け機を用いて栽培ビンの中央に１つ開けた後１１０℃で３時間高圧殺菌した。その後、培地温度が３０℃以下まで下がるのを待って種菌を接種し、これを２３℃、湿度６５％で培養した。接種後５６日経過し、栽培ビンのほぼ全体に菌糸が蔓延したところで発生操作として刺激電圧を印加し、異種キノコの種菌を接種した。このときの刺激電圧の波頭値は約１７０kVであり、波頭長は約１０μsecであった。異種キノコはホウライタケの種菌を２ｇ添加した。発生操作後１０日ほどでハナビラタケ子実体の形成が見られ、その形成率はほぼ１００％であった。子実体形成が見られたものについては、順次栽培ビンのふたを取って、温度１９℃、湿度９０％の栽培室に移し、子実体を生育させた。上限まで生育したと見られる９８日目に収穫した。子実体形成の見られた栽培ビン１６０本につき１本あたりの平均収量は約１５１ｇであり、全収穫量は２４．２ｋｇであった。なお、電気刺激と異種キノコの種菌の接種の順によらずほぼ同じ結果が得られた。
【００２２】
実施例２
実施例１と同様の手順によって栽培し、発生操作として５６日目に刺激電圧を印加し、６３日目に異種キノコの種菌を接種した。５６日目の発生操作後１０日ほどでハナビラタケ子実体の形成が見られ、その形成率はほぼ１００％であった。子実体形成が見られたものについては、順次栽培ビンのふたを取って、温度１９℃、湿度９０％の栽培室に移し、子実体を生育させ、９８日目に収穫した。子実体形成の見られた栽培ビン１６０本につき１本あたりの平均収量は約１４７ｇであり、全収穫量は２３．５ｋｇであった。
【００２３】
実施例３
実施例１と同様の手順によって栽培し、発生操作として５６日目に異種キノコの種菌を接種し、６３日目に刺激電圧を印加した。５６日目の発生操作後１２日ほどでハナビラタケ子実体の形成が見られ、その形成率はほぼ１００％であった。子実体形成が見られたものについては、順次栽培ビンのふたを取って、温度１９℃、湿度９０％の栽培室に移し、子実体を生育させ、９８日目に収穫した。子実体形成の見られた栽培ビン１６０本につき１本あたりの平均収量は約１４２ｇであり、全収穫量は２２．７ｋｇであった。
【００２４】
実施例４
実施例１と同様の手順によって栽培し、発生操作として４９日目に刺激電圧を印加し、５６日目に異種キノコの種菌を接種し、６３日目に再び刺激電圧を印加した。５６日目の発生操作後９日ほどでハナビラタケ子実体の形成が見られ、その形成率はほぼ１００％であった。子実体形成が見られたものについては、順次栽培ビンのふたを取って、温度１９℃、湿度９０％の栽培室に移し、子実体を生育させ、９８日目に収穫した。子実体形成の見られた栽培ビン１６０本につき１本あたりの平均収量は約１６０ｇであり、全収穫量は２５．６ｋｇであった。
【００２５】
表１は実施例１から４の実施内容をまとめたものである。各手法によって効果に多少の差が見られている。
【００２６】
【表１】
2005137263.tif 000002
実施例５
ホウライタケの種菌に代えて液体培養したホウライタケの菌糸体懸濁液5mLを添加した以外は実施例１の方法と同様にして栽培をおこなったところ、発生操作後１０日ほどでハナビラタケ子実体の形成が見られ、その形成率はほぼ１００％であった。子実体形成の見られた栽培ビン１６０本につき１本あたりの平均収量は約１５３ｇであり、全収穫量は２４．５ｋｇであった。なお、電気刺激と異種キノコの種菌の接種の順によらずほぼ同じ結果が得られた。
【００２７】
実施例６
（財）日本きのこ研究所より入手したハナビラタケの保存菌株NS421、NS422、NS423、NS424、NS425、TMC504、TMC572の７株について実施例１と同様の手順によって接種し、栽培したところ、全てにおいて子実体の形成が見られた。表２に菌株ごとの結果を示す。
【００２８】
【表２】
2005137263.tif 000003
比較例１
刺激電圧を印加して栽培培地に通電操作と異種キノコの種菌の接種を行なうことをしなかった以外は実施例１と全く同様の操作により接種を行い培養した。
【００２９】
５６日経過時点で１５％程度子実体の形成がみられた。ただし、形成の時期にはかなりのばらつきが見られた。子実体形成が見られたものについては、順次栽培ビンのふたを取って、温度１９℃、湿度９０％の栽培室に移し、子実体を生育させた。収穫は、キノコが上限まで生育したと見られる１０５日目におこなった。最終的な子実体形成率は２０％程度であり、子実体形成の見られた栽培ビン３２本につき１本あたりの平均収量は約９０ｇであった。全収穫量は２．９０ｋｇであった。
【００３０】
比較例２
比較例１と同じ培養を行い、１５％程度子実体の形成がみられた５６日経過時点で、子実体形成が見られたものと見られなかったもの全てについて培地表面を掻き取り、異種キノコの種菌を接種した。異種キノコは、同様のオガクズ培地でホウライタケを培養して作成した種菌２ｇを用いた。
【００３１】
接種後２週ほどでハナビラタケの子実体の形成が見られ、その形成率は９０％程度であった。子実体形成が見られたものについては、順次栽培ビンのふたを取って、温度１９℃、湿度９０％の栽培室に移し、子実体を生育させた。収穫は、キノコが上限まで生育したと見られる１０５日目におこなった。子実体形成の見られた栽培ビン１４４本につき１本あたりの平均収量は約１３０ｇであり、全収穫量は１８．５ｋｇであった。
【００３２】
比較例３
比較例１と同じ培養を行い、接種後５６日経過し、栽培ビンのほぼ全体に菌糸が蔓延したところで刺激電圧を印加した。印加電圧は約170kVであった。印加後１０日ほどでハナビラタケ子実体の形成が見られ、その形成率は９０％程度であった。子実体形成が見られたものについては、順次栽培ビンのふたを取って、温度１９℃、湿度９０％の栽培室に移し、子実体を生育させた。子実体形成の見られた栽培ビン１４４本につき１本あたりの平均収量は約１３０ｇであり、全収穫量は１８．７ｋｇであった。
【００３３】
表３は、実施例１と比較例１，２、３において顕著に差が見られた内容をまとめたものである。電気刺激と異種キノコの種菌添加の併用によって、それぞれを単独で実施するよりもさらに子実体形成率と平均収量が増加していることがわかる。
【００３４】
【表３】
2005137263.tif 000004
このように、栽培培地への通電と異種キノコの種菌の接種を併用することによって、子実体形成時期の短縮と同調ができるほか、子実体形成率と収量が上がるなどハナビラタケの栽培効率を大幅に上げることができる。特に子実体形成率と収量については各発生操作を単独で用いた場合よりさらに高くすることが出来る。これらより商業規模での栽培において大きくコストダウンを図ることが可能となる。