(57)【要約】【課題】本発明の目的は、骨密度低下において原因となる骨吸収を優位に抑制する作用を、副作用の少ない生薬より見いだし、長期間服用可能な安全かつ有効性の高い骨吸収抑制剤ならびに骨粗鬆症の予防及び治療剤の提供を目的とする。【解決手段】センレンシ、ゴカヒ、クレンピ、ヒハツ、ニクズク、リュウガンニク、ガイハク、レンニク、ヒシノミ、トウヒ、サンシュユ、グンバイナズナ、ソウズク、ビャクズク、ダイフウシ、シンギョウ、ゴウカンヒ、バンランコン、リュウタン及びチョウジから選択される少なくとも一つの生薬を有効成分とする骨吸収抑制剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
センレンシ、ゴカヒ、クレンピ、ヒハツ、ニクズク、リュウガンニク、ガイハク、レンニク、ヒシノミ、トウヒ、サンシュユ、グンバイナズナ、ソウズク、ビャクズク、ダイフウシ、シンギョウ、ゴウカンヒ、バンランコン、リュウタン及びチョウジから選択される少なくとも一つの生薬を配合する骨吸収抑制剤。
【請求項２】
センレンシ、ゴカヒ、クレンピ、ヒハツ、ニクズク、リュウガンニク、ガイハク、レンニク、ヒシノミ、トウヒ、サンシュユ及びグンバイナズナから選択される少なくとも一つの生薬を配合する骨吸収抑制剤。
【請求項３】
センレンシ、ゴカヒ、クレンピ、ヒハツ及びニクズクから選択される少なくとも一つの生薬を配合する骨吸収抑制剤。
【請求項４】
センレンシ及びクレンピから選択される少なくとも一つの生薬を配合する骨吸収抑制剤。
【請求項５】
センレンシ、ゴカヒ、クレンピ、ヒハツ、ニクズク、リュウガンニク、ガイハク、レンニク、ヒシノミ、トウヒ、サンシュユ、グンバイナズナ、ソウズク、ビャクズク、ダイフウシ、シンギョウ、ゴウカンヒ、バンランコン、リュウタン及びチョウジから選択される少なくとも一つの生薬を配合することを特徴とする骨粗鬆症の予防及び治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、老化に伴う骨密度及び骨強度の低下による易骨折性を改善する目的で摂取する骨吸収抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
我が国は世界でも有数の長寿国となり、平均寿命は８０歳に達する。急速な医療の進歩は寿命を延ばすことに成功したが、一方で、骨粗鬆症の症状とされる骨折や骨の変形により大幅に活動を制約されたり、痛みにより苦痛を強いられたりする高齢者が急増している。また、性別や年齢に関係のない、近年の健康またはダイエット志向をうけた食事制限等によるCa摂取不足が原因となる骨密度の低下も、加齢に伴う骨粗鬆症の発症と同様に深刻な問題である。
【０００３】
現代社会において、高齢者及び現代人のQOL（QUALITY OF LIFE）に重大な影響を及ぼす骨密度低下の予防を目的とした医薬品、特定保健食品、食品の開発は非常に重要な課題となっている。
【０００４】
加齢により男女ともに骨量は減少するが、女性では閉経後の骨量減少が大きく、かつ急激である。７０歳代においてその骨量は、最大骨量に比し、約３０％も減少する（非特許文献１）。閉経後の骨粗鬆症の主因はエストロゲン欠乏であり、その病態は、骨代謝回転が亢進し、骨形成と骨吸収はともに促進されるが骨吸収が骨形成を上回ることで骨量が減少する。従って、骨密度低下抑制剤とも言い換えられる骨吸収抑制剤は、骨粗鬆症による骨折のリスクを軽減するために極めて有用である。
【０００５】
これまで、骨粗鬆症の治療法としては、エストロジェン剤、ビタミンD剤、カルシトニン剤、ビスホスホネート製剤の投与などが試みられているが、エストロジェン剤は乳ガンや子宮ガンの血栓症の発症リスクの増加、ビタミンＤ剤はビタミンＤ受容体に遺伝子多型がみられ有効性が左右される。カルシトニン剤は注射薬であり、ビスホスホネート製剤は消化器障害の副作用発現率が高いといった問題点がある。これらは長期服用に適さず、骨折リスクの予防という観点からは十分なものとはいえない。長期服用を考慮した植物においては、補骨脂にその有効性が見いだされていることは知られている（特許文献１）。
【０００６】
このような観点から、高齢化社会における骨折リスクの低減及び骨粗鬆症の予防及び治療さらには現代社会におけるQOLの維持において、有用な安全かつ有効性のある骨吸収抑制剤が求められている。
【０００７】
【非特許文献１】水口  弘司，外１名、閉経後骨粗鬆症−その定義と概念−、医学のあゆみ、医歯薬出版、1993年、165、p.504-507
【特許文献１】特開平6-133733号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、骨密度低下において原因となる骨吸収を優位に抑制する作用を、副作用の少ない生薬より見いだし、長期間服用可能な安全かつ有効性の高い骨吸収抑制剤ならびに骨粗鬆症の予防及び治療剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、前記課題を解決するために鋭意検討した結果、センレンシを初めとする数種の生薬が、有効な骨吸収抑制作用を有することを見いだし、本発明を完成した。
【００１０】
すなわち本発明の１つの態様は、センレンシ、ゴカヒ、クレンピ、ヒハツ、ニクズク、リュウガンニク、ガイハク、レンニク、ヒシノミ、トウヒ、サンシュユ、グンバイナズナ、ソウズク、ビャクズク、ダイフウシ、シンギョウ、ゴウカンヒ、バンランコン、リュウタン及びチョウジから選択される少なくとも一つの生薬を有効成分とする骨吸収抑制剤である。
【００１１】
好ましくはセンレンシ、ゴカヒ、クレンピ、ヒハツ、ニクズク、リュウガンニク、ガイハク、レンニク、ヒシノミ、トウヒ、サンシュユ及びグンバイナズナから少なくとも一つ、更に好ましくはセンレンシ、ゴカヒ、クレンピ、ヒハツ及びニクズクから、最も好ましくはセンレンシ及びクレンピから少なくとも一つ選択される。
【００１２】
本発明の別の態様は、センレンシ、ゴカヒ、クレンピ、ヒハツ、ニクズク、リュウガンニク、ガイハク、レンニク、ヒシノミ、トウヒ、サンシュユ、グンバイナズナ、ソウズク、ビャクズク、ダイフウシ、シンギョウ、ゴウカンヒ、バンランコン、リュウタン及びチョウジから選択される少なくとも一つの生薬を配合することを特徴とする骨粗鬆症の予防及び治療剤である。
【００１３】
特にセンレンシ、クレンピは10μg/mlでも50%以上と強力な骨吸収抑制作用を示した。
【発明の効果】
【００１４】
本発明により、本発明の係る生薬を用いることで、骨粗鬆症に代表される骨密度低下の原因となる骨吸収を優位に抑制することができた。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明において前記した各種生薬は、エキスや生薬末などの所望の形態のものであってもよい。ここでいうエキスとは生薬から水、極性溶媒（アルコール類など）で抽出した抽出物であり、流エキス、乾燥エキス、チンキを含む。また生薬末とは生薬粉砕物、エキス等よりえられる粉末体や顆粒体などを含む。例えば生薬エキスは、各生薬細切後、５０％エタノールを用いて加熱抽出し、減圧下でエタノールを留去することにより得ることが出来る。
【００１６】
本発明における、各生薬の有効投与量は、健康成人１日当たりの原生薬換算量で、100mg〜50gであり、好ましくは１g〜１０ｇ、より好ましくは1g〜5gである。
【００１７】
本発明の有効成分である各種生薬は、そのままあるいは必要に応じて他の公知の添加剤、例えば賦形剤、崩壊剤、結合剤、懸濁化剤、溶解補助剤、緩衝剤、水溶性基剤、乳化剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、ｐＨ調整剤、清涼化剤、消泡剤、粘稠剤、コーティング剤、着色剤、界面活性剤、可塑剤、香料などを用いて、一般的な製剤化方法により、液剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、ドライシロップ剤などの経口製剤とすることができる。
【実施例】
【００１８】
以下、本発明の骨吸収抑制剤を実施例により更に詳しく説明する。
実施例１
（生薬エキスの調整法）
各生薬を細切後、10倍量の50%エタノールを用いて沸騰加熱、抽出し、自然濾過後、エバポレーターを用いて、40℃減圧下でエタノールを留去し、各エキスを製造した。
試験例１
（骨吸収抑制率の測定）
骨吸収抑制率は破骨細胞を用いる以下の測定方法で行った。
（１）破骨細胞の調整
破骨細胞の調整はUdagawa等の方法(Udagawa N.et al:Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87,7260-7264(1990)）に準じて行った。すなわち、新生仔マウスの頭蓋骨より調整した初代培養骨芽細胞とマウス骨髄細胞を共培養し、単球・マクロファージ系前駆細胞より破骨細胞を分化誘導する方法である。
【００１９】
1)初代培養骨芽細胞の調整
新生仔マウス（ddY系1〜2日齢）より頭蓋骨（頭頂骨と前頭骨）を無菌的に摘出し、PBS中で周囲の軟組織を除去後、骨小片に細断した。骨小片を12mlの酵素溶液（0.1% collagenase：細胞分散用，Wako Pure Chem.Co. Osaka Japan）、0.05%  trypsin(Gibco BRL,Paisley,Scotland UK)中で、37℃、10分間インキュベ−トし、上清を酵素消化液とした。得られた酵素消化液を遠心分離（2000rpm×10min）し、沈渣に10% Fatal Calf Serum(FCS:Moregate,Australia)を含有するα-minimal essential medium(α-MEM:Sigma Chem.Co.,St.Louis,MO USA)を加え細胞懸濁液（分画１）とした。酵素消化した骨小片は新しい酵素溶液（12ml）に移し、同様な酵素消化操作を８回繰り返し、細胞懸濁液（分画２〜８）を得た。分画５から分画８の細胞懸濁液を37℃、5%CO2条件下で細胞がコンフルエントになるまで培養後、初代培養骨芽細胞として実験に用いた。
【００２０】
2)破骨細胞の分化誘導
コラーゲンゲル（Cellmatrix type-A,Nitta Gelatin Inc.,Osaka Japan）で表面を覆った培養皿（100mm dish）上に、1)で得られた初代培養骨芽細胞（１×106 cell/dish）を播種した。３時間培養後、マウス（ddY系５週齢）下肢の長幹骨より調整した骨髄細胞懸濁液（１×106 cell/dish）を更に播き、破骨細胞誘導因子であるPGE2(Sigma Chem.Co)とcalcitriol(Wako Pure Chem.Co)を加え８日間培養した。
【００２１】
（２）破骨細胞を用いた骨吸収抑制率の測定
（１）による調整で得られた破骨細胞を0.2% collagenase溶液で消化後、    α-MEM中に懸濁し、象牙スライス（直径10mm，厚さ100μ）上に巻播した。３時間培養後、象牙スライスに非接着性の細胞を除去した。その後、100μg/mlの各生薬エキスを含むα-MEM（生薬エキス100mg/ml のDMSO溶液の10μlを10mlのα-MEMで希釈した。）500μlを、象牙スライスを含む24穴プレートに添加し３日間培養した。培養終了後、象牙スライスを0.01NnaOH溶液に浸し、超音波処理し、表面に接着した細胞を剥離した。象牙スライスは水洗後、0.1%トルイジンブルー溶液で吸収窩を染色し、表面の吸収窩の数を顕微鏡下（×40）でカウントし、骨吸収能とした。象牙スライス上の吸収窩は３人の実験者が計測し、その平均値を吸収窩数とした。骨吸収抑制率は、対照溶媒のDMSO添加群の吸収窩数を100として百分率で表した。
（結果）
表１に本発明に係る生薬を、骨吸収抑制率の強い順に示す。表２には特に抑制率の高かったクレンピ及びセンレンシの抑制率を示す。
【００２２】
【表１】
2005281221.tif 000002
【００２３】
【表２】
2005281221.tif 000003
【産業上の利用可能性】
【００２４】
本発明により、長期間服用可能な安全かつ有効性の高い骨吸収抑制剤の提供が可能となり、骨粗鬆症を代表とする、骨密度及び骨強度の低下による病状の予防及び治療に有用な医薬品などに利用可能である。