(57)【要約】【課題】      コラーゲン合成促進効果を有し、加齢による皮膚の老化を有効に防止し得る皮膚外用剤を提供する。【解決の手段】オウレン及び／又はベルベリン（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ），パルマチン（ｐａｌｍａｔｉｎｅ），コプチジン（ｃｏｐｔｉｓｉｎｅ），ウォレニン（ｗｏｒｅｎｉｎｅ），ジャテオリジン（ｊａｔｅｏｒｒｈｉｚｉｎｅ），マグノフロリン（ｍａｇｎｏｆｌｏｒｉｎｅ），フェルラ酸（ｆｅｒｕｌｉｃ  ａｃｉｄ），クロロゲン酸（ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）より選ばれる１種以上を含む粉末、抽出物又は抽出成分を有効成分として含有させる。本発明の生体コラーゲン合成促進皮膚外用剤は、生体内でのコラーゲン生合成を促進し、加齢変化に伴う組織疲労、機能の低下を改善することが出来る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
キンポウゲ科（Ｒａｎｕｎｃｕｌａｃｅａｅ）オウレン（Ｃｏｐｔｉｓ  ｊａｐｏｎｉｃａ）の粉末、抽出物又は抽出成分を含有することを特徴とする、生体のコラーゲン生成を促進する皮膚外用剤。
【請求項２】
ベルベリン（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ），パルマチン（ｐａｌｍａｔｉｎｅ），コプチジン（ｃｏｐｔｉｓｉｎｅ），ウォレニン（ｗｏｒｅｎｉｎｅ），ジャテオリジン（ｊａｔｅｏｒｒｈｉｚｉｎｅ），マグノフロリン（ｍａｇｎｏｆｌｏｒｉｎｅ），フェルラ酸（ｆｅｒｕｌｉｃ  ａｃｉｄ），クロロゲン酸（ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）より選ばれる１種又は２種以上を含む粉末、抽出物又は抽出成分を含有することを特徴とする、生体のコラーゲン生成を促進する皮膚外用剤。
【請求項３】
オウレンの粉末、抽出物又は抽出成分と、ベルベリン（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ），パルマチン（ｐａｌｍａｔｉｎｅ），コプチジン（ｃｏｐｔｉｓｉｎｅ），ウォレニン（ｗｏｒｅｎｉｎｅ），ジャテオリジン（ｊａｔｅｏｒｒｈｉｚｉｎｅ），マグノフロリン（ｍａｇｎｏｆｌｏｒｉｎｅ），フェルラ酸（ｆｅｒｕｌｉｃ  ａｃｉｄ），クロロゲン酸（ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）より選ばれる１種又は２種以上を含む粉末、抽出物又は抽出成分を含有することを特徴とする、生体のコラーゲン生成を促進する皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、生体内でのコラーゲン合成促進能を高めることにより、皮膚の加齢に伴う変化を防止する皮膚外用剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】  コラーゲンは真皮内の約７０％を占める皮膚の主たる構成成分であり、ほとんどの組織に存在して細胞を保護し、細胞間因子として細胞の結合などの重要な生理的役割を果たしている。生体において重要な役割を持つコラーゲンも加齢による新陳代謝の低下に伴い減少し、老化の進行などの要因となり、改善する対応策が望まれている。皮膚の老化は進行しやすく、老化の兆候も観察されやすい。皮膚老化のシワやタルミは皮膚の弾力性、柔軟性の低下が原因とされ、コラーゲンの減少より引き起こされている。【０００３】  現在までのところ、特許文献１に示すように、経口摂取によるコラーゲン合成促進剤などは多少開発されている。しかしながら、皮膚外用剤においては、特許文献２に示すように、コラゲナーゼを阻害して間接的にコラーゲンの減少を防止する技術等が開示されているものの、顕著にコラーゲン合成を促進し得るものは未だごくわずかである。また、コラーゲンそのものを配合することも可能であるが、高分子であるため、経皮吸収され難いことや安定性などの面から問題がある。
【特許文献１】特開２００３−２７７２８６号公報
【特許文献２】特開２００１−３１６２２１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】  本発明の目的は、コラーゲン合成能を高めることの出来るコラーゲン合成促進皮膚外用剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】  本発明においては、オウレンの粉末もしくは抽出物等及び／又はベルベリン（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ），パルマチン（ｐａｌｍａｔｉｎｅ），コプチジン（ｃｏｐｔｉｓｉｎｅ），ウォレニン（ｗｏｒｅｎｉｎｅ），ジャテオリジン（ｊａｔｅｏｒｒｈｉｚｉｎｅ），マグノフロリン（ｍａｇｎｏｆｌｏｒｉｎｅ），フェルラ酸（ｆｅｒｕｌｉｃ  ａｃｉｄ），クロロゲン酸（ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）より選択した１種以上を含む粉末もしくは抽出物等を皮膚外用剤基剤に含有させることにより、上記課題を解決した。以下に、本発明に関して詳細に説明する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】  本発明のコラーゲン合成促進皮膚外用剤は、上記したようにオウレンの粉末、抽出物もしくは抽出成分及び／又はベルベリン（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ），パルマチン（ｐａｌｍａｔｉｎｅ），コプチジン（ｃｏｐｔｉｓｉｎｅ），ウォレニン（ｗｏｒｅｎｉｎｅ），ジャテオリジン（ｊａｔｅｏｒｒｈｉｚｉｎｅ），マグノフロリン（ｍａｇｎｏｆｌｏｒｉｎｅ），フェルラ酸（ｆｅｒｕｌｉｃ  ａｃｉｄ），クロロゲン酸（ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）から選択した１種以上を含む粉末、抽出物又は抽出成分を含有して成る。オウレンに関しては、特に根茎の使用が好ましい。また、ベルベリン等は、これらを含有する植物から抽出したものであることが好ましい。ベルベリン等を含有する植物としては、オウレン，ミカン科（Ｒｕｔａｅｃｅａｅ）オウバク（Ｐｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｉ  Ｃｏｒｔｅｘ），ケシ科（Ｐａｐａｖｅｒａｃｅａｅ）エンゴサク（Ｃｏｒｙｄａｌｉｓ  Ｔｕｂｅｒ），キンポウゲ科（Ｒａｎｕｎｃｕｌａｃｅａｅ）ショウマ（Ｃｉｍｉｃｉｆｕｇａｅ  Ｒｈｉｚｏｍａ）等が挙げられる。抽出物より濃縮、精製したものを用いることもできる。【０００７】  上記植物の粉末化や抽出は常法によって行えばよい。抽出は、例えば上記植物を乾燥して刻み、または粉末状にして抽出溶媒を加え、冷浸または加熱することによって行うことが出来る。抽出溶媒としては、水、エタノール、１，３−ブタンジオール、イソプロパノール等の１種又は２種以上の混合溶媒を使用することが出来る。【０００８】  なお、本発明における抽出物とは、抽出液、該抽出液の希釈液もしくは濃縮液、該抽出物を乾燥して得られる乾燥物、または抽出エキスのいずれをも意味するものとする。上記抽出物の粗精製および精製は常法によって行えばよく、例えばＭＣＩゲル（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）等の吸着剤による吸着および溶出、クロマトグラフィー等を適当に組み合わせて実施することが出来る。【０００９】  以上のようにして得られる上記植物の１種又は２種以上の粉末、抽出物、該抽出物の粗精製物、精製物及び成分は、後述する実施例から明らかなように、コラーゲン合成促進作用を有するため、コラーゲン合成促進皮膚外用剤の有効成分として使用することが出来る。本発明のコラーゲン合成促進皮膚外用剤は、生薬由来のものを有効成分としているため、安全性が高いと考えられる。【００１０】  本発明のコラーゲン合成促進皮膚外用剤は、医薬部外品や化粧品として提供して問題ない。配合量は外用剤中の有効濃度や外用剤の安定性等を考慮して１０重量％程度以下が適当である。外用剤の形態としては、ローション、乳剤、クリーム、軟膏等、種々の形態をとる事が出来る。また、化粧水、美容液、乳液等のコラーゲン合成促進皮膚化粧料としても提供することができる。【００１１】  以下、実施例により本発明を更に具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。なお「％」は特に断らない限り重量％を意味する。
【実施例】
【００１２】  本発明の実施例として、コラーゲン合成促進皮膚クリームの処方を表１に示す。表１中、（１）〜（５）を混合後加熱溶解して７５℃とし、これに混合、加熱溶解し７５℃とした（６）〜（９）及び（１２）を添加して乳化し、攪拌冷却後５０℃にて（１０）及び（１１）を添加、混合する。表１中（１０）のオウレン抽出分画液は、オウレン５００ｇを５Ｌの５０％エタノールにて室温で１週間抽出し、ＭＣＩゲルにて分画して調製した。また、表１中（１０）の替わりにエタノールを配合したものを比較例とした。
【表１】
2005281284.tif 000002
【００１３】  本発明の実施例について、コラーゲン合成能上昇試験をヒト正常新生児皮膚繊維芽細胞を用いた評価により検討した。まず、次の（１）０．５容量％牛胎仔血清（ＦＢＳ）含有ダルベッコ修正基礎培地（ＤＭＥＭ）、（２）コーティング緩衝液、（３）洗浄緩衝液、（４）発色液を調製する。
（１）０．５容量％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ：ＤＭＥＭ（Ｓｉｇｍａ社製）に、終濃度０．５容量％ＦＢＳを添加して調製する。
（２）コーティング緩衝液：炭酸ナトリウム  ０．８ｇ、炭酸水素ナトリウム  １．５ｇ、アジ化ナトリウム  ０．１ｇ／精製水５００ｍｌを調製する。
（３）洗浄緩衝液：０．０５容量％Ｔｗｅｅｎ２０／リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ（−））溶液。
（４）発色液：０．１Ｍリン酸水素一ナトリウム（ｐＨ４．０）水溶液。【００１４】  正常ヒト新生児皮膚繊維芽細胞株（ＮＨＤＦ）を０．５容量％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭにて２×１０４個／ｍｌに調製し、９６穴プレートに１００μｌずつ播種して、５％炭酸ガス、飽和水蒸気下、３７℃で培養した。【００１５】  ２４時間後、培養液を吸引除去し、植物抽出物５０％エタノール水溶液を最高濃度２ｍｇ／ｍｌ（終濃度）で０．５容量％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭに添加して培養をし、５％炭酸ガス、飽和水蒸気下、３７℃で培養した。【００１６】  ４８時間後、０．５容量％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ：コーティング緩衝液＝１：３になるよう調製し、そこに、培養上清を添加し、混和後、酵素免疫測定（ＥＬＩＳＡ）用９６穴プレートに１００μｌずつ添加する。また、同様に検量線用にコラーゲン溶液を調製し、プレートに１００μｌずつ添加する。３７℃で２時間反応させ、洗浄緩衝液で３回洗浄を行い、アルブミンでブロッキングする。その後、３７℃で１時間反応させ、洗浄緩衝液で３回洗浄し、１次抗体を１００μｌ添加し、３７℃で１時間反応させ、また、洗浄緩衝液で３回洗浄する。その後、２次抗体を同様に反応させ、洗浄後、発色試薬で発色させ、マイクロプレートリーダー４０５ｎｍで測定した。【００１７】  コラーゲンの検量線より培養上清中のコラーゲン量を算出し、蛋白量で除して、コラーゲン生成量として求めた。結果を表２に示す。以下に示すようにオウレン抽出分画液濃度依存的にコラーゲン生成量が顕著に増えた。
【表２】
2005281284.tif 000003
【００１８】  続いて本発明の実施例及び比較例について使用試験を行った。コラーゲン合成が促進されると、肌に弾力が戻り、シワが出来にくくなることが推察されるため、以下の試験を行った。日常戸外で作業するパネラー１５名を１群とし、各群にそれぞれ実施例及び比較例をブラインドにて顔面及び手に使用させ、シワ及び皮膚弾性の変化を観察し、評価した。使用期間は１月から１２月の１年間とした。シワについては「減少」、「変化なし」、「微小なシワが増加」、「明確なシワが増加」の４段階、皮膚弾性については「上昇」、「変化なし」、「やや低下」、「低下」の４段階で評価し、各評価を得たパネラー数を表３に示した。以下に示すようにエタノール配合の比較例と比べ、オウレン抽出分画液を含有する実施例の使用により、シワが減少し、皮膚弾性が顕著に上昇した。
【表３】
2005281284.tif 000004
【発明の効果】
【００１９】  以上詳述したように、本発明に係るコラーゲン合成促進皮膚外用剤は、皮膚内でのコラーゲン生合成を促進し、加齢変化に伴うシワ、タルミなどの老化防止に効果を発揮させることが出来る。また、生薬由来のものを有効成分としているため、副作用が比較的少なく、安全性にも優れた皮膚外用剤である。