(57)【要約】      （修正有）【課題】  変形性関節症のような変性関節疾患によって引き起こされた軟骨の損傷の進行を遅らせるために関節面を再表面化し機能的に修復するための生体適合性および生体再吸収性の植え込み式組織移植片を提供する。【解決手段】生体適合性の生物再吸収性の組織修復移植片３０または骨格装置３２がさまざまな軟骨組織の傷の修復に用いるために、特に損傷を受けたまたは疾病の軟骨を再表面化および／または修復するために提供される。修復手順は変性の関節疾患の悪化を遅らせるまたは阻止することを援助し組織の治癒または修復を促進するのを援助する生物学的コンポーネントを含む組織修復移植片を用いて行われる。生体適合性の生物再吸収性の組織修復移植片は骨格と軟骨組織に由来する生存可能な組織の粒子とを含み、組織および骨格が関連付けられるようになる。生きた組織の粒子は組織から移動して骨格に居住できるひとつまたは複数の生存可能な細胞を含んでいる。【選択図】        図１
2005131365.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の疾病のまたは損傷を受けた関節面を再表面化するのに用いられる組織修復移植片であって、
上記組織修復移植片が生体適合性の生物再吸収性の骨格で形成されている、組織修復移植片。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の参照。
該当せず。
【０００２】
連邦政府の資金提供による研究開発の記載。
該当せず。
【０００３】
本発明は、外科装置に関し、より詳しくは、変形性関節症のような変性関節疾患によって引き起こされた軟骨の損傷の進行を遅らせるために関節の関節面を再表面化（resurfacing）し機能的に修復するための生体適合性および生体再吸収性の植込み式組織移植片に関する。
【背景技術】
【０００４】
軟骨、皮膚、筋肉、骨、腱、および靭帯のような軟組織が傷つけられまたは外傷を与えられた組織への損傷は、損傷を修復し治癒を容易にするために外科的な介入を必要とすることが多い。そのような外科的な修復には、公知の医療器具を用いて損傷を受けた組織を縫合または修復すること、他の組織で損傷を受けた組織を増強すること、移植片（implant）またはグラフト（graft）を用いること、またはこれらの技術の任意の組み合わせなどがある。
【０００５】
軟骨の損傷の一般的な例のひとつは、膝関節の半月の損傷である。膝関節には２つの半月、すなわち内側半月および外側半月がある。内側半月および外側半月の各々は、脚の大腿骨および脛骨の間に挟まれた両凹の線維軟骨組織である。膝関節の半月に加えて、半月形の軟骨は肩鎖関節すなわち鎖骨および肩甲骨の肩峰の間の関節、胸鎖関節すなわち鎖骨および胸骨の間の関節、および顎関節すなわち下顎の関節に見られる。半月形の軟骨の主な役割は負荷を支えること、衝撃を吸収すること、および関節を安定化することである。適切に治療されない場合、膝関節での「バケツ柄状断裂」のような半月の損傷が変形性関節症の発症へつながることがある。損傷を受けた半月の軟骨のための現在の通常の治療方法には、損傷を受けた軟骨の除去および／または外科的な修復などがある。
【０００６】
膝関節の組織の損傷の一般的なひとつのタイプには、非血管の弾力的で柔軟な結合性組織である関節の軟骨組織への損傷などがある。軟骨は典型的には関節の「衝撃吸収材」として働くが、あるタイプの軟骨は例えば喉頭、気管、および耳のような管状構造を支持する。大まかに言って、軟骨組織は、コラーゲンを含んだ細胞外基質内に配置された軟骨細胞（chondrocyte）として知られた軟骨の細胞と、構造的な骨格（scaffold）と、空間を満たすプロテオグリカンであるアグレカンとから構成されている。硝子軟骨、線維軟骨、および弾性軟骨を含むいくつかのタイプの軟骨が体で見出される。硝子軟骨は体内では別々の断片として存在していて、またはこのタイプの軟骨は骨の関節端に融合して存在している。硝子軟骨は一般的には体内で関節軟骨、肋軟骨、および一過性軟骨（すなわち、骨化の過程で最終的に骨に変化する軟骨）として存在する。線維軟骨は、腱と骨、骨と骨、および／または硝子軟骨と硝子軟骨の間に典型的に配置された移行細胞である。弾性軟骨は細胞外基質全体に亘って分布している弾性線維を含んでいて、典型的には喉頭蓋、耳、および鼻で見られる。
【０００７】
硝子軟骨の損傷の一般的な例のひとつは、膝関節への外傷性の局所的な関節軟骨欠陥である。膝関節への強い機械的なまたは荷重による衝撃によってさまざまな寸法および形状の軟骨の破片が完全にまたは部分的に剥離または除去されることがある。損傷を受けた関節軟骨は関節の機能をひどく制限し、衰弱させるような痛みを引き起こし、関節の軟骨とその下側の骨とを徐々に破壊する変形性関節症のような長期間の慢性疾患を引き起こすこともある。関節軟骨の損傷は自然治癒せず、発症した場合には外科的な介入を必要とする。現在の治療方法は、洗浄、および剥離した組織の破片の部分的なまたは完全な除去を含む。さらに、外科医は軟骨の欠陥内への出血を引き起こして血栓を形成するために、アブレーション、穴あけ、小さな骨折（microfractures）のようなさまざまな方法を用いることが多い。骨髄からの細胞はある種の痛みを一時的に和らげることができる瘢痕類似組織（scar-like tissue）と呼ばれる線維軟骨を形成すると確信されている。残念なことに、線維軟骨組織は硝子軟骨と同じ機械的な性質を持たず、摩滅の結果として時間の経過と共により速く変質する。患者は典型的には症状の再発を防ぐために外科手術を繰り返さなければならないが、このタイプの外科手術は軟骨の表面がさらに悪化するのを遅らせたり防止したりしない。
【０００８】
さらに最近では、自己由来の軟骨細胞の植込みを含む実験的な方法が行われる頻度が増してきている。その方法では最初の手術手技で関節軟骨の小さな生検が採取され、次に採取された生検が増幅のための細胞培養専用の実験室に移送される。その組織の生検は軟骨細胞を基質から解放する酵素で処理されて、分離された細胞が標準的な組織培養方法を用いて３週から４週の期間に亘って増殖される。細胞の個数が目標数に到達すると、細胞は二番目の手術手技の間に植込まれるために外科医に戻される。この手作業の大きな労働力を要する方法は非常に高価であり、時間がかかる。その臨床データは患者に対する長期の利益を示しているが、膝関節に対する２度の外科手術という外傷的な衝撃と組み合わされた手術のひどく高いコストがこの方法が患者および医者に無理なく受け入れられるのを妨げてきた。
【０００９】
損傷を受けた組織（例えば、軟骨、半月形の軟骨、靭帯、腱、および皮膚）を外科的に治療するためのその他の外科的な方法には、外科的な移植片を用いることなどがある。さまざまな外科的な移植片が知られていて手術手技の利益を得るのを援助するようにそれらの手術手技で用いられてきた。例えば、輸送媒体に載せられた分離された細胞を有する移植片を生み出すさまざまな装置および方法を使用することが知られている。そのような細胞を接種された移植片は、生物分解性の生体適合性の繊維性高分子材料に接種された軟骨細胞からなる軟骨質構造を成長させることによって軟骨を製造および／または修復する管内での（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）方法で用いられる。そのような方法は軟骨細胞が高分子材料に接種される前に、軟骨細胞を軟骨質の組織から最初に分離することをも必要とする。損傷を受けた組織を修復する別の方法は、所望の組織を生み出すのに用いられる幹細胞すなわち先祖細胞を有する移植片を用いる。例えば、脂肪細胞、筋肉、または骨髄内の細胞のような幹細胞すなわち先祖細胞を患者の骨および／または軟骨を再生するために用いることが知られている。幹細胞は患者から取り出されて、軟骨の形成に適した環境に置かれ、それによって脂肪細胞が例えば軟骨細胞のような異なるタイプの細胞を増殖し生み出すように誘導する。
【００１０】
これらの現在の治療方法は局所的な点の欠陥を治療するが、変形性関節症のような変性の関節疾患の悪化に伴って起こる広い表面積に亘る疾病の組織または損傷を受けた組織（例えば軟骨）を治療するようには適合されていない。変形性関節症は関節の軟骨の破損によって起こる長期の変性の関節疾患である。変形性関節症を患う患者では、軟骨が磨り減るにつれて骨が互いに摩擦して、骨に損傷が与えられ、痛みを生じ、関節の動きが制限される。骨棘の形成と共に関節の腫脹および硬化も起こることがあり、それらは冒された関節の柔軟性を減らす。疾病が進行しているまたはかなり重い場合、関節の骨は互いの中に向かって成長し、すなわち、互いに融合して、その結果関節の動きが完全に失われる。
【００１１】
現在のところ、変形性関節症は治癒しない。現在の治療法は疾病の悪化を遅らせること、痛みの管理、および／または関節の動きの改善に焦点を合わせている。痛みを一時的に和らげるための温熱／寒冷療法と共に、コルチコステロイド、グルココルチコステロイド、アスピリン、イブプロフェン、または、アセトアミノフェンが投与されてよい。典型的な治療法には、上記の薬剤の投与に加えて、関節の柔軟性および筋肉の強度を保つための物理的療法および規則的な運動が含まれる。減量によって体重を負担する関節への過剰な圧力が減らされ、同時に副子が関節を支持し圧力または歪みがさらに生ずるのを防止するために用いられる。試みられた全ての治療が失敗した場合には、手術が関節の変形を止め、元に戻し、または停止し、慢性の痛みを和らげるために必要となることがある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
変形性関節症は関節全置換術が薦められるまでにかなり長い進行の期間がある慢性疾患なので、進行を阻止し可能ならば関節の破壊を防止できる早期の外科的なまたは薬剤による介入を提供することが必要とされている。さらに、骨軟骨の移植術および軟骨細胞の移植術を含む現在の外科的な装置および治療方法は不完全な組織の統合、長時間に亘る移植片の製造プロセス、および長期のリハビリテーション期間といった妨げの影響を受けるので、上記の課題を解決できる広い表面積に亘る軟骨の欠陥を修復するための外科的な解決法が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、軟骨および肋軟骨下の骨組織の両方が変形性関節症のような変性に冒された関節顆全体の面積のような広い表面積（例えば約１０ｃｍ2 より広い。）を再表面化する方法に関する。より詳しく言うと、新しい軟骨組織を成長させるための組織作成構造（tissue-engineered construct）で損傷を受けたまたは疾病の軟骨組織を置換えることによって関節の骨の関節面を再表面化するための方法が提供される。本発明によって、組織を治療するために用いられる生体適合性の生物再吸収性の組織移植片、および、そのような移植片の製造および使用方法も提供される。例えば、組織移植片は変形性関節症の発病の結果としての損傷を受けた軟骨組織のような疾病のまたは損傷を受けた組織の修復および／または再生のために用いられる。その移植片は、修復性の間隔保持器として単独で用いられる生体適合性の生物再吸収性の骨格（scaffold）を含んでいて、その骨格は必要に応じて細かく切り刻まれた健康な組織の破片を含んだ懸濁液（suspension）と関連付けられる。生体適合性の組織移植片は、健康な組織の破片を含む懸濁液の上に必要に応じて配置される生物学的薬剤および／または保持要素をも含んでいてよい。組織移植片が関節面の損傷を受けた軟骨組織を修復するためのものである実施の形態では、細かく切り刻まれた健康な組織の破片は軟骨細胞（chondrocyte）を含んだ軟骨の組織または骨髄の破片からなる。
【００１４】
本発明は、細胞の内殖、浸潤、または移動のための修復性の間隔保持器として用いられる生体適合性の生物再吸収性の組織移植片を準備する方法も関する。その組織移植片は、少なくともひとつの生体適合性の生物再吸収性の骨格と細かく切り刻まれた組織のサンプルとを提供する過程と、組織のサンプルを処理して少なくとも１種類の組織の破片を含んだ生存可能な組織の懸濁液を生み出す過程と、組織のサンプルを骨格に付着する過程とを含んでいる。ある実施の形態では、それらの移植片を製造する方法は、組織が付着された骨格を組織のサンプル中の細胞が骨格で生息できるよう十分な期間に亘っておよび十分な条件の下で適切な環境内で培養する過程をさらに含んでいてよい。
【００１５】
本発明は、本発明の生体適合性の生物再吸収性の移植片を用いて組織を治療する方法にも関する。本発明の方法に基づく組織の治療は、生体適合性の生物再吸収性の骨格および細かく切り刻まれた組織のサンプルを提供する過程と、生体適合性の骨格に組織のサンプルを付着する過程と、組織が付着された骨格を治療される組織に対して所望の位置に配置する過程とを含んでいる。ある実施の形態では、組織の修復は、生体適合性の骨格および細かく切り刻まれた組織のサンプルを提供する過程と、組織のサンプルを組織の傷に対して所望の位置に付着する過程と、組織の上に生体適合性の骨格を配置する過程とによって行われる。別の実施の形態では、移植片を製造する方法は、組織が付着された骨格を組織のサンプル中の細胞が骨格で生息できるよう十分な期間に亘っておよび十分な条件の下で適切な環境内で培養する過程をさらに含んでいる。さらに別の実施の形態では、組織を治療する方法は、例えば組織が付着された骨格を所定の位置に固定するなどして骨格を治療される組織に対して所望の位置に固定する過程をさらに含んでいる。
【００１６】
例示的な実施の形態では、移植片は広い軟骨の欠陥を再表面化するために用いられる。特に、移植片は変形性関節症の発病の結果としての膝関節の重い負荷を担う軟骨領域の軟骨の欠陥を治療するのに用いられる。
【００１７】
本発明は添付の例示的な図面と共に以下の詳細な説明からより十分に理解される。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、広い表面積に亘る軟骨の欠陥を修復することができる効果がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
本発明は、変形性関節症のような変性の関節疾患が悪化することによって生ずる関節炎の軟骨を置換する組織作成方法を提供する。その方法は広い表面積の疾病のまたは損傷を受けた軟骨を最適な新しい細胞を提供し植込まれた領域で組織を成長させる形態の移植片で置換える過程を含む。その移植片は移植片が固定される表面の外形または曲率に沿うことができさらに細胞の成長、浸潤、または移動のために十分な機械的な支持を提供する柔軟な骨格を含んでいる。ある実施の形態では、本発明は、軟骨組織が含浸されたまたは移植片に関連する組織が含浸されていない本発明の移植片を含む構造を準備し、輸送し、損傷を受けたまたは疾病の軟骨が除去された肋軟骨下の骨に固定するための手術方法を提供する。
【００２０】
本発明の例示的な実施の形態では、膝関節のような関節の骨の関節面での孤立性の軟骨の病変を有する患者が組織修復手術のための準備をされる。関節切開術によって膝関節が開かれて病変が露出される。関節炎の軟骨組織が関節面の原繊維および裂溝と共に取り除かれる。関節面のデブリドマン（壊死組織切除）が本発明の組織修復移植片を受容するために肋軟骨下の骨の表面を露出するよう十分に深く行われる。必要な場合、肋軟骨下の骨の表面に穴が形成されて、骨の表面に移植片が配置される前に出血が誘発され骨髄細胞の浸潤が行われる。関節面が適正に準備されると、組織修復移植片は準備された関節面に配置されて所定の位置に保持される。
【００２１】
本発明の関節再表面化に用いられる生体適合性の生物再吸収性の組織修復移植片は、生体適合性の生物再吸収性の骨格、および必要に応じて少なくともひとつの細かく切り刻まれた組織の破片を含んだ細かく切り刻まれた組織の懸濁液を含み、細かく切り刻まれた組織の懸濁液は骨格に関連付けられている。本発明の懸濁液中の細かく切り刻まれた組織には、組織の破片から骨格へ移動できる少なくともひとつの生存可能な細胞が含まれている。
【００２２】
骨格は細かく切り刻まれた組織の懸濁液と接触する少なくともひとつの部分を有する。細かく切り刻まれた組織の懸濁液は、骨格の外側面、骨格の内側面、またはそれらを組み合わせた表面に配置されていてよく、または、骨格の全体が細かく切り刻まれた組織の懸濁液と接触していてよい。骨格は、手術室の環境で容易に取り扱えるようにし実質的に亀裂を生ずることなく縫合糸またはその他の固定具を受容し保持することができるよう十分な構造的な完全性および物理的および／または機械的特性を備えた生体適合性の生物移植可能な容易に滅菌できる実質的に任意の材料すなわち輸送媒体を用いて作られていてよい。代わりに、骨格は欠陥部位で所定の位置で固まる注入可能なゲルの形態であってよい。骨格を作るのに用いられる材料および製造方法を選択することによって、十分な強度および物理的特性が骨格で発揮される。好ましくは、骨格は植込みの目標の部位の寸法に合わせて足場を調節できるように曲げやすくもある。いくつかの実施の形態では、骨格は生物再吸収可能なまたは生物吸収可能な材料で作られている。
【００２３】
本発明のある実施の形態では、骨格は生体適合性のポリマーで作られている。さまざまな生体適合性のポリマーが、本発明に基づく生体適合性の組織移植片すなわち骨格装置を作るのに用いられる。生体適合性のポリマーは合成ポリマー、天然ポリマー、またはそれらの組み合わせであってよい。ここで用いられている用語「合成ポリマー」は自然界では見出されないポリマーを意味し、自然界で生ずる生体適合材料から作られていても自然界で見出されないポリマーも合成ポリマーに属する。用語「天然ポリマー」は自然界で生ずるポリマーを意味する。骨格が少なくともひとつの合成ポリマーを含んでいる実施の形態では、適切な生体適合性の合成ポリマーには、脂肪族ポリエステル、ポリアミノ酸、エーテル・エステル共重合体、ポリアルキレンオキサレート、ポリアミド、チロシン誘導ポリカーボネート、ポリイミノカーボーネート、ポリオルトエステル、ポリオキサエステル、ポリアミドエステル、ポリオキサエステル含有アミン基、ポリ無水物、ポリフォスファゼン、およびそれらの混合物からなる集合から選択されたポリマーなどがある。本発明で用いるのに適した合成ポリマーには、コラーゲン、エラスチン、トロンビン、フィブロネクチン、スターチ、デンプン、ポリアミノ酸、ポリフマル酸プロピレン、ゼラチン、ペクチン、フィブリン、酸化セルロース、キチン、キトサン、トロポエラスチン、ヒアルロン酸、リボ核酸、デオキシリボ核酸、ポリペプチド、蛋白、多糖類、ポリヌクレオチド、およびそれらの組み合わせで見出される配列に基づく生合成ポリマーなどもある。
【００２４】
本発明のために、脂肪族ポリエステルには、以下に限定されないが、ラクチド（乳酸、Ｄ−、Ｌ−、およびメソラクチドを含む。）；グリコリド（glycolide：グリコール酸を含む。）；ε−カプロラクトン；ｐ−ジオキサノン（dioxanone：１，４−ジオキサン−２−オン）；トリメチレンカーボネート（１，３−ジオキサン−２−オン）；トリメチレンカーボネートのアルキル誘導体；δ−バレロラクトン；β−ブチロラクトン；γ−ブチロラクトン；ε−デカラクトン；ヒドロキシブチレート；ヒドロキシバレレート；１，４−ジオクセパン（dioxepan）−２−オン（その２量体である１，５，８，１２−テトラオキサシクロテトラデカン−７，１４−オンを含む。）；１，５−ジオクセパン−２−オン；６，６−ジメチル−１，４−ジオキサン−２−オン；２，５−ジケトモルフォリン（diketomorpholine）；ピバロラクトン（pivalolactone）；α，αジエチルプロピオラクトン；エチレンカーボーネート；シュウ酸エチレン；３−メチル−１，４−ジオキサン−２，５−ジオン；３，３−ジエチル−１，４−ジオキサン−２，５−ジオン；６，６−ジメチル−ジオクセパン−２−オン；６，８−ジオクサビシクロオクタン−７−オンのホモポリマーおよびコポリマー（共重合体）、およびそれらのポリマー混合物がある。本発明で用いられる脂肪族ポリマーは、直線状の、枝分かれした、または星型構造のホモポリマーおよびコポリマー（ランダム共重合体、ブロック共重合体、セグメント共重合体（segmented copolymer）、テーパーブロック共重合体（tapered blocks）、グラフト共重合体、トリブロック共重合体（triblok copolymer）など）であってよい。ポリイミノカーボネートは本発明では「生物分解性ポリマーのハンドブック（Handbook of Biodegradable Polymers）」（編集：ドームら（Domb, et al.）、ハードウッド・アカデミック・プレス（Hardwood Academic Press）、第２５１頁から第２７２頁、１９９７年）でケムニッツァー（Kemnitzer）およびコーン（Kohn）によって記載されているポリマーを含むと理解される。エーテルとエステルのコポリマーは本発明では「生体適合材料リサーチ・ジャーナル（Journal of Biomaterial Research）」（第２２巻、第９９３頁から第１００９頁、１９８８年、コーン（Cohn）およびユーンス（Younes）による。）、および「ポリマー・プレプリンツ（Polymer Preprints）」（ポリマー・ケミストリー（Polymer Chemistry）のエー・シー・エス版（ACS Division）、第３０（１）巻、第４９８頁、１９８９年、コーンによる。）に記載されたエーテルとエステルのコポリマー（例えば、ＰＥＯ／ＰＬＡ）が含まれると理解される。ポリアルキレンオキサレートは本発明では米国特許第４，２０８，５１１号、同第４，１４１，０８７号、同第４，１３０，６３９号、同第４，１４０，６７８号、同第４，１０５，０３４号、および同第４，２０５，３９９号に記載されたものが含まれる。ポリフォスファゼン、および、Ｌ−ラクチド、Ｄ，Ｌ−ラクチド、乳酸、グリコリド、グリコール酸、パラ−ジオキサノン、トリメチレンカーボネート、およびカプロラクトンから作られたコ−、テラ−、およびより高次のまたは混合されたモノマーをベースにするコポリマーには、「高分子材料科学百科事典（The Encyclopedia of Polymer Science）」（第１３巻、第３１頁から第４１���、ウィレイ・インターサイエンス（Wiley Intersciences）、ジョン・ウィレイ・アンド・サンズ（John Wiley & Sons）、１９８８年）でオールコック（Allcock）によって、および、「生物分解性ポリマーハンドブック（Handbook of Biodegradable Polymers）」（編集：トームら（Dohm, et al）、ハードウッド・アカデミック・プレス（Hardwood Academic Press）、第１６１頁から第１８２頁（１９９７年））でバンドープら（Vandorpe, et al）によって記載されたものなどがある。ポリ無水物には、ＨＯＯＣ−Ｃ6 Ｈ4 −Ｏ−（ＣＨ2 ）m −Ｏ−Ｃ6 Ｈ4 −ＣＯＯＨ（ここで、ｍは２から８までの整数である。）の形態の二価酸から誘導されたポリ無水物、および、１２個までの炭素の脂肪族アルファ−オメガ二価酸とそれらのポリ無水物のコポリマーが含まれる。アミン基および／またはアミド基を含むポリオキサエステル、ポリオキサアミド、およびポリオキサエステルは、米国特許第５，４６４，９２９号、同第５，５９５，７５１号、同第５，５９７，５７９号、同第５，６０７，６８７号、同第５，６１８，５５２号、同第５，６２０，６９８号、同第５，６４５，８５０号、同第５，６４８，０８８号、同第５，６９８，２１３号、同第５，７００，５８３号、および同第５，８５９，１５０号のいずれかまたは複数に記載されている。ポリオルトエステルは「生物分解性ポリマーのハンドブック（Handbook of Biodegradable Polymers）」（編集：ドームら（Domb, et al.）、ハードウッド・アカデミック・プレス（Hardwood Academic Press）、第９９頁から第１１８頁、１９９７年）でヘラー（Heller）によって記載されたものがある。
【００２５】
本明細書では用語「グリコリド」はポリグリコール酸などを表すことが理解される。さらに、用語「ラクチド」はＬ−ラクチド、Ｄ−ラクチド、それらの混合物、乳酸ポリマー、および乳酸コポリマーなどを表すこと理解される。
【００２６】
弾性コポリマーも本発明ではとりわけ有用である。適切な弾性ポリマーには、２５℃でのヘキサフルオロイソプロパノール（ＨＦＩＰ）中での１デシリットル当り０．１グラムのポリマーの溶液でインヘレント粘度が、約１．２ｄｌ／ｇから約４ｄｌ／ｇまでのものがあり、より好ましくは約１．２ｄｌ／ｇから約２ｄｌ／ｇまでのものがあり、最も好ましくは約１．４ｄｌ／ｇから約２ｄｌ／ｇまでのものがある。さらに、適切なエラストマーは高い伸び率パーセントおよび低い弾性率を示しながら、良好な引張強さおよび良好な回復特性を有する。本発明の好ましい実施の形態では、エラストマーは約２００パーセントより大きい伸び率パーセントを示し、好ましくは約５００パーセントより大きい伸び率パーセントを示す。これらの伸びおよび弾性率の特性に加えて、適切なエラストマーは約３５１８５ｇ／ｃｍ2 （５００ｐｓｉ）より大きい引張強さをも有するべきであり、好ましくは約７０３７０ｇ／ｃｍ2 （１０００ｐｓｉ）より大きい引張強さを有し、約８９３７ｇ／ｃｍ（５０ポンド／インチ）より大きい引裂強さを有するべきであり、好ましくは約１４２９９．２ｇ／ｃｍ（８０ポンド／インチ）より大きい引裂強さを有する。
【００２７】
本発明で用いることができる例示的な生体適合性のエラストマーには、以下に限定されないが、ε−カプロラクトンのグリコリドに対するモル比が約３５：６５から約６５：３５までの、より好ましくは４５：５５から３５：６５までのε−カプロラクトンおよびグリコリド（ポリグリコール酸を含む。）の弾性コポリマー；ε−カプロラクトンのラクチドに対するモル比が約３５：６５から約６５：３５までの、より好ましくは４５：５５から３０：７０までの、または約９５：５から約８５：１５までのε−カプロラクトンおよびラクチド（Ｌ−ラクチド、Ｄ−ラクチド、それらの混合物、乳酸ポリマー、および乳酸コポリマーを含む。）の弾性コポリマー；ｐ−ジオキサノンのラクチドに対するモル比が約４０：６０から約６０：４０までのｐ−ジオキサノン（１，４−ジオキサン−２−オン）およびラクチド（Ｌ−ラクチド、Ｄ−ラクチド、それらの混合物、乳酸ポリマー、および乳酸コポリマーを含む。）の弾性コポリマー；ε−カプロラクトンのｐ−ジオキサノンに対するモル比が約３０：７０から約７０：３０までのε−カプロラクトンおよびｐ−ジオキサノンの弾性コポリマー；ｐ−ジオキサノンのトリメチレンカーボネートに対するモル比が約３０：７０から約７０：３０までのｐ−ジオキサノンおよびトリメチレンカーボネートの弾性コポリマー；トリメチレンカーボネートのグリコリドに対するモル比が約３０：７０から約７０：３０までのトリメチレンカーボネートおよびグリコリド（ポリグリコール酸を含む。）の弾性コポリマー；トリメチレンカーボネートのラクチドに対するモル比が約３０：７０から約７０：３０までのトリメチレンカーボネートおよびラクチド（Ｌ−ラクチド、Ｄ−ラクチド、それらの混合物、乳酸ポリマー、および乳酸コポリマーを含む。）の弾性コポリマー；およびそれらの混合物などがある。適切な生体適合性のエラストマーの例が米国特許第５，４６８，２５３号に記載されている。
【００２８】
ある実施の形態では、エラストマーはジオキサン溶液内に形成された３５：６５のε−カプロラクトンおよびグリコリドのコポリマーでポリジオキサノンメッシュを含んでいる。他の実施の形態では、エラストマーは４０：６０のε−カプロラクトンおよびラクチドのコポリマーでポリジオキサノンメッシュを含んでいる。さらに別の実施の形態では、エラストマーは３５：６５のε−カプロラクトンおよびグリコリドのコポリマーと４０：６０のε−カプロラクトンおよびラクチドのコポリマーの５０：５０の混合物である。ポリジオキサノンメッシュは一層の厚みの２次元メッシュまたは多層の厚みの３次元メッシュの形態であってよい。
【００２９】
本発明の骨格は必要な場合には体内の環境で時宜を得た形態で再吸収される生物再吸収性または生物吸収性の材料で作られていてよい。生体内での（ｉｎ  ｖｉｖｏ）の条件の下での吸収時間の違いを本発明の骨格を形成する場合の２つの異なるコポリマーを組み合わせるための基準とすることもできる。例えば、３５：６５のε−カプロラクトンおよびグリコリド（比較的速く吸収されるポリマー）のコポリマーが４０：６０のε−カプロラクトンおよびＬ−ラクチドのコポリマー（比較的ゆっくりと吸収されるポリマー）と混合されて生体適合性の骨格が作られてよい。使用される処理方法に応じて、２つの成分はランダムに連続した連続相であるか、２つの成分の間に十分に一体化された界面が存在する積層体タイプの形態の階層に類似した構造を有していてよい。これらの骨格のミクロ構造は再成長される組織の望ましい解剖学的特徴を再生または修復するように最適化されていてよい。
【００３０】
ある実施の形態では、ポリマーの混合物を用いてある成分からもうひとつの成分へ階層に類似した構造で移行する骨格を形成することが望ましい。この階層に類似した構造を有する骨格は、軟骨（関節の軟骨、半月の軟骨、鼻中隔軟骨、気管軟骨、耳介軟骨、肋軟骨など）、腱、靭帯、神経、食道、皮膚、骨、および血管組織のような自然に発生した組織の構造を修復または再生するために組織作成の用途に用いるのにとりわけ適している。例えは、ε−カプロラクトンおよびグリコリドのコポリマーをε−カプロラクトンおよびラクチドのコポリマーとエラストマーとして混合する（例えばモル比５：９５で）ことによって、柔らかいスポンジ材料からより硬い硬質材料へと、例えば軟骨から骨へ移行するのと同じように移行する骨格が形成される。明らかに、当業者には別のポリマーの混合物が同様の階層の効果をもたらすために、たまは異なる階層（例えば、吸収率の異なる分布、応力応答の分布、または弾性率の異なる分布）をもたらすために用いられてよいことが適切に評価される。例えば、そのような構造上の特徴は、移植片の別の領域（例えば外側部分）より高い濃度の組織の破片が移植片のある領域（例えば内側部分）に存在するように本発明の骨格に関連した細かく切り刻まれた組織の懸濁液に濃度勾配を設けることができる。
【００３１】
本発明の組織修復移植片の生体適合性の骨格は、例えば織物、編物、縦編みの構造（例えばレースに類似した。）、不織布、および編組構造の任意の吸収性または非吸収性のテキスタイルからなる補強材料を含んでいてよい。ある実施の形態では、補強材料はメッシュに類似した構造である。上記の構造のいずれでも、補強材料の機械的な性質は材料の密度または精粗（texture）、材料の編み方または織り方、材料の厚みを変えることによって、または材料に粒子を埋め込むことによって変更することができる。材料の機械的な性質は、繊維が互いに物理的に結合したまたは例えば接着剤またはポリマーのような別の作用剤と物理的に結合した部位をメッシュ内に作ることによっても変更することができる。補強成分を作るために用いられる繊維は、単繊維、紡ぎ糸（yarn）、より糸（thread）、組みひも（braid）、または繊維の束であってよい。これらの繊維は、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリジオキサノン（ＰＤＯ）、トリメチレンカーボネート（ＴＭＣ）、それらのコポリマーまたは混合物のような生物吸収性の材料を含む任意の生体適合性の材料で作られていてよい。それらの繊維は、絹およびコラーゲンをベースとする材料を含む天然のポリマーをベースとする任意の生体適合性の材料から作られていてもよい。これらの繊維は、例えばポリエチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリテトラフルオロエチレン、ポリカーボネート、ポリプロピレン、およびポリビニルアルコールのような非再吸収性の任意の生体適合性の繊維で作られていてもよい。ある実施の形態では、繊維は９５：５のラクチドおよびクリコリドのコポリマーから作られている。
【００３２】
別の実施の形態では、補強材料を形成する繊維は生物吸収性のガラスから作られていてよい。吸収時間を調節するためにさまざまな量の固体粒子が加えられたバイオガラス、シリケート含有燐酸カルシウムガラス、または燐酸カルシウムガラスは、ガラス繊維内に紡がれ補強材料として用いられる材料の例である。加えられる適切な固体粒子の例には、鉄、マグネシウム、ナトリウム、カリウム、およびそれらの組み合わせなどある。
【００３３】
補強材料だけでなく生体適合性の骨格も、組織の内殖が可能なように孔または穿孔を備えた薄くて穿孔を含む弾性シートから形成されていてもよい。そのようなシートはポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、およびポリジオキサノン（ＰＤＯ）の混合物またはコポリマーで作られていてよい。
【００３４】
ある実施の形態では、生体適合性の骨格または補強材料を形成するフィラメントはシース／コア構造の繊維を作るために同時押出し成形されてよい。そのようなフィラメントはひとつまたは複数の異なる生物分解性のポリマーからなるコアを取り囲んだひとつの生物分解性のポリマーからなるシースを含んでいる。より遅く吸収されるコアを取り囲んだ速く吸収されるシースを備えたフィラメントは組織の内殖のために長期の支持が必要な場合に望ましいであろう。
【００３５】
当業者にはひとつまたは複数の補強材料の層が本発明の組織移植片を補強するために用いられることが適切に評価される。さらに、構造および化学的性質が等しいまたは異なる例えばメッシュのような生物分解性のテキスタイルからなる複数の骨格が、より優れた機械的強度の生体適合性の組織移植片を製造するために互いに積み重ねられてよい。
【００３６】
骨格が少なくともひとつの天然ポリマーを含んでいる実施の形態では、天然ポリマーの適正な例として、以下に限定されないが、フィブリンをベースとする材料、コラーゲンをベースとする材料、ヒアルロン酸をベースとする材料、糖たんぱく質をベースとする材料、セルロースをベースとする材料、皮膚、およびそれらの組み合わせなどがある。非限定的な例として、生体適合性の骨格はコラーゲンをベースとする小腸の粘膜下組織から作られている。
【００３７】
本発明の別の実施の形態では、生体適合性の骨格は生体適合性のセラミック材料から作られている。適切な生体適合性のセラミック材料には、例えば、ヒドロキシアパタイト、α−リン酸三カルシウム、β−リン酸三カルシウム、生物活性ガラス、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸カルシウム、外因性のまたは同種異系の骨材料、またはそれらの組み合わせなどがある。本発明で用いるのに適切な生物活性ガラスには、シリケート含有リン酸カルシウムガラス、または吸収時間を調節するためにさまざまな量の固体粒子が加えられたリン酸カルシウムガラスなどがある。生物活性のリン酸カルシウムガラスに組み込まれる適切な化合物には、以下に限定されないが、酸化マグネシウム、酸化ナトリウム、酸化カリウム、およびそれらの組み合わせなどがある。
【００３８】
本発明の組織移植片のさらに別の実施の形態では、骨格は自原性の組織、同種異系の組織、および外因性の組織から得られる。非限定的な例として、皮膚、軟骨、靭帯、腱（tendon）、骨膜、軟骨膜、滑膜、筋膜、腸間膜、腱（sinew）のような組織が生体適合性の骨格を形成するための組織移植片として用いられる。同種異系の組織が用いられるいくつかの実施の形態では、胎児または新生児からの組織が成人の組織に関連するいくつかの免疫原性を避けるために用いられる。
【００３９】
別の実施の形態では。骨格は欠陥部位で所定の位置で固まる注入成形可能なゲルの形態であってよい。ゲルは、アルギン酸塩、架橋アルギン酸塩、ヒアルロン酸、コラーゲンゲル、フィブリングルー、フィブリンクロット、ポリＮ−イソプロピルアクリルアミド、アガロース、キチン、キトサン、セルロース、多糖類、ポリオキシアルキレン、ポリエチレンオキシドおよびポリプロピレンオキシドのコポリマー、ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、多血小板血漿（ＰＲＰ）クロット、乏血小板血漿（ＰＰＰ）クロット、マトリゲル（Ｍａｔｒｉｇｅｌ）、またはそれらの混合物などを含む生物学的または合成ヒドロゲルであってよい。
【００４０】
組織移植片のさらに別の実施の形態では、骨格は開いたセルの構造の複数の小孔を備えた高分子材料の発泡コンポーネントから作られていてよい。小孔の寸法はさまざまな大きさでよいが、好ましくは小孔は組織の内殖が可能な大きさである。より好ましくは、小孔の寸法は約５０μｍから約１０００μｍまでの範囲内にあり、さらにより好ましくは約５０μｍから約５００μｍまでの範囲内にある。高分子材料の発泡コンポーネントには必要な場合には例えば上記のテキスタイルのような補強コンポーネントが含まれていてよい。高分子材料の発泡コンポーネントが補強コンポーネントを含んでいるいくつかの実施の形態では、発泡コンポーネントは発泡コンポーネントの小孔が補強コンポーネントのメッシュに入り込み補強コンポーネントと結合するように補強コンポーネントと一体化されていてよい。
【００４１】
組織移植片の発泡コンポーネントは当業者によく知られたさまざまな方法によって発泡体として形成されてよい。例えば、高分子材料の開始材料が凍結乾燥、超臨界ソルベント発泡（supercritical solvent foaming：すなわち、欧州特許第４６４，１６３号に記載されているような。）、ガス圧入押出し成形（gas injection extrusion）、ガス射出成形（gas injection molding）、または押出し可能な材料（例えば、食塩、砂糖、またはその他の同様な適切な材料）を用いたキャスティングによって発泡体として形成される。
【００４２】
ある実施の形態では、本発明の作成された組織修復移植片の発泡コンポーネントは、凍結乾燥のようなポリマーと溶媒の相を分離する方法によって作られてよい。しかし、多くの場合には、ポリマー溶液は以下の４つの方法、すなわち（ａ）熱的に誘導された（thermally induced）ゲル化／結晶化、（ｂ）非溶剤によって誘導された（non-solvent induced）溶媒およびポリマーの相の分離、（ｃ）化学的に誘導された（chemically induced）相の分離、および（ｄ）熱的に誘導されたせん点分解（thermally induced spinodal decomposition）のうちのいずれかひとつによって２つの相に分離される。ポリマー溶液は調節されながら２つの別個の相または２つの連続した相（two bicontinuous phases）に分離される。その後溶媒の相を除去することによって、塊状ポリマーより低い密度でマイクロメートル範囲内の小孔を備えた多孔質構造が通常残される。「相の分離によるマイクロセル発泡体（Microcellular Foams Via Phase Separation）」（ジェイ・バック・サイエンス・テクノロジー、エイ・ティー、ヤング、第４（３）巻、１９８６年５月／６月（J. Vac. Sci.Technol., A. T. Young, Vol. 4(3), May/Jun 1986））が参照される。
【００４３】
これらの発泡体を準備するのに含まれる過程は、凍結乾燥されるべきポリマー用の正しい溶媒を選択する過程と、均質な溶液を準備する過程とを含む。次に、ポリマー溶液が凍結および真空乾燥サイクルにさらされる。凍結過程はポリマー溶液を相に分離し、真空乾燥過程は溶媒を昇華および／または乾燥によって取り除いて多孔質ポリマー構造すなわち相互に結合された開いたセルの多孔質発泡体を残す。
【００４４】
発泡コンポーネントを準備するために用いられる適切な溶媒には、以下に限定されないが、蟻酸、蟻酸エチル、酢酸、ヘキサフルオロイソプロパノール（ＨＦＩＰ）、環状エーテル（例えば、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチレンフルオリド（ＤＭＦ）、およびポリジオキサノン（ＰＤＯ））、アセトン、Ｃ２からＣ５までのアルコールのアセテート（例えば、エチルアセテートおよびｔ−ブチルアセテート）、グリメ（glyme：例えば、モノグリメ、エチルグリメ、ジグリメ、エチルジグリメ、トリグリメ、ブチルジグリメ、およびテトラグリメ）、メチルエチルケトン、ジプロピレングリコールメチルエーテル、ラクトン（例えば、γ−バレロラクトン、δ−バレロラクトン、β−ブチロラクトン、γ−ブチロラクトン）、１，４−ジオキサン、１，３−ジオキソラン、１，３−ジオキソラン−２−オン（エチレンカーボネート）、ジメチルカーボネート、ベンゼン、トルエン、ベンジルアルコール、ｐ−キシレン、ナフタレン、テトラヒドロフラン、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルホルムアミド、クロロホルム、１，２−ジクロロメタン、モルホリン、ジメチルスルホキシド、ヘキサフルオロアセトン三二水和物（ＨＦＡＳ）、アニソール、およびそれらの混合物などがある。これらの溶媒のうちで、好ましい溶媒は１，４−ジオキサンである。溶媒中のポリマーの均質な溶液が標準的な方法を用いて準備される。
【００４５】
利用可能な受容されるポリマーの濃度または溶媒の量は各システムに応じて変わる。大まかに言うと、溶液中のポリマーの量は、各溶媒中でのポリマーの溶解度および発泡体に望まれる最終的な性質のような要因に応じて約０．５重量％から約９０重量％までの範囲内にあり、好ましくは約０．５重量％から約３０重量％までの範囲内にある。
【００４６】
ある実施の形態では、ポリマー溶媒システム内に固体が加えられて結果的に形成される発泡体の表面の構成が変更されてよい。加えられた固体の粒子が溶液内で沈殿して底面に達するので、加えられた固体の成分を含み発泡した高分子材料を含まない領域が形成される。代わりに、加えられた固体が結果的に形成される組織移植片の望まれる領域（すなわち、上部、側部、または底部）でより集中されて、それらの全ての領域で成分が変更されてもよい。例えば、選択された位置で固体を集中させることは、磁性材料で作られた成形型内に配置された溶液に金属の固体を加える（または金属で作られた成形型内に配置された溶液に磁性材料の固体を加える）ことによって行われる。
【００４７】
さまざまなタイプの固体をポリマー溶媒システムに加えることができる。好ましくは、固体はポリマーにも溶媒にも反応しないタイプのものである。大まかに言って、加えられる固体は約１．０ｍｍより小さい平均の直径を有し、好ましくは、約５０μｍから約５００μｍまでの範囲内の平均の直径を有する。好ましくは、固体は粒子およびポリマー溶媒の混合物の全体の体積の約１体積％から約５０体積％までの範囲内の体積％（全体の体積は１００体積％に等しい。）を構成するような量で存在する。
【００４８】
例示的な固体には、以下に限定されないが、脱塩された骨の粒子、リン酸カルシウムの粒子、バイオガラスの粒子、硫酸カルシウム、炭酸カルシウム、骨修復のための粒子、小孔を形成するための溶脱可能な固体および補強材料として働くまたは吸収されて小孔を形成するように働く溶媒システム中で溶けない生物吸収性のポリマーの粒子、および生物非吸収性の材料などがある。
【００４９】
適切な溶脱可能な固体には、塩（例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、酒石酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、およびそれらの類似物）、生体適合性の単糖類および２糖類（例えば、グルコース、フルクトース、デキストロース、マルトース、ラクトース、およびスクロース）、多糖類（例えば、スターチ、アルギン酸塩、およびキトサン）、水溶性たんぱく質（例えば、ゼラチン、およびアガロース）のような非毒性の溶脱可能な材料がある。溶脱可能な材料は、溶脱可能な材料を含んだ発泡体を、粒子が粒子の実質的に全てが溶脱されしかし発泡体は溶けないまたは有害に変形されない十分な時間に亘って溶かされる溶媒中に浸すことによって除去される。好ましい抽出溶媒は水であり、より好ましくは蒸留脱イオン水である。そのようなプロセスは米国特許第５，５１４，３７８号に記載されている。好ましくは発泡体は発泡体が急速に吸収されることが望まれない限り、溶脱プロセスが終了した後に低温および／または真空のもとで乾燥されて、発泡体の加水分解が最小にされる。
【００５０】
適切な生物非吸収性の材料には、ステンレス鋼、コバルトクロム、チタン、およびチタン合金のような生体適合性の金属、生物不活性のセラミック粒子（例えば、アルミナ、ジルコニア、および硫酸カルシウムの粒子）などがある。さらに、生物非吸収性の材料には、ポリエチレン、ポリ酢酸ビニル、ポリメチルメタクリレート、ポリプロピレン、ポリエチレンテレフタレート、シリコーン、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール、ポリウレタン、ポリビニルアルコール、天然ポリマー（例えば、セルロース粒子、キチン、ケラチン）のようなポリマー、および弗素化ポリマーおよびコポリマー（例えば、ポリ弗化ビニリデン、ポリテトラフルオロエチレン、およびヘキサフルオロプロピレン）などがある。
【００５１】
皮膚移植片を放射線不透過性にする固体（例えば、硫酸バリウム）を加えることもできる。加えられる固体には、緩衝剤、補強材料、または多孔性調節剤として働く固体だけでなく組織の再生または内殖を促進する固体もある。
【００５２】
上述したように、本発明の多孔質の補強された組織移植片の装置は成形型および本発明の補強要素からなる成形型構成に適切なポリマーを注入、流し込み、または配置することによって作られる。成形型構成は適切な浴槽内でまたは冷却された棚に置かれて冷却され、それによって補強された骨格が提供される。生物学的コンポーネントが凍結乾燥過程の前または後に加えられてよい。発泡コンポーネントを形成する間にポリマー溶媒システムの凍結速度を調節することが重要であると確信されている。凍結過程の間に生み出された小孔の形態学的なタイプは溶液の熱力学、凍結速度、ポリマーが冷却される温度、溶液の濃度、均質なまたは異質の核生成が生ずるかどうかなどの要因との相関を有する。当業者は過度な実験を行わずにそれらのパラメーター（要因）を最適化することができる。
【００５３】
必要とされる大まかな過程には、ポリマー発泡体および補強コンポーネントが作られる適切な材料を選択する過程が含まれている。メッシュの補強材料が用いられる場合、適切なメッシュの密度が選択されなければならない。さらに、補強材料は成形型内で適切な向きに配置されなければならず、ポリマー溶液は適切な速度で加えられなければならず、好ましくは気泡の形成を回避するために適切な角度に傾けられた成形型に加えられ、ポリマー溶液は凍結乾燥されなければならない。
【００５４】
メッシュの補強材料を用いる実施の形態では、補強材料のメッシュは所定の密度を有していなければならない。すなわち、メッシュの補強材料の開孔は構造（発泡体および補強材料）が縫合可能またはその他の方法で固定可能となるように十分小さくなければならないが、発泡材料および発泡材料の開いたセルおよびセルの壁がメッシュの開孔を通ったときに発泡体と補強材料のメッシュとの間の適切な結合を妨げるほどに小さくてはならない。適切に結合されないと、積層された構造の一体性が、その構造を脆くて取り扱いが難しいものにしていることによって損なわれる。メッシュの密度が構造の機械的な強度を決めるので、メッシュの密度は組織の修復のための望ましい用途に応じて変えられる。さらに、メッシュに用いられる織布のタイプは、例えば構造の弾性、剛性、破裂強さ、縫合保持強度、および極限引張強さのような補強材料の機械的性質ばかりでなく、構造の機械的な強度の方向性をも決める。非限定的な例として、本発明の発泡体をベースとする生体適合性の骨格のメッシュの補強材料は、ある方向で硬く別の方向で弾力的であるように作られ、または代わりに、メッシュの補強材料は等方性に作られてよい。
【００５５】
補強された発泡体を凍結乾燥する間、望ましい一体性および機械的な性質を備えた移植片を製造するためにいくつかのパラメータおよび手順が重要である。好ましくは、補強材料は成形型内に配置されたときに実質的に平坦である。適正な程度の平坦さを確保するために、補強材料（例えば、メッシュ）は成形型内に配置される前に熱加圧によって平坦に加圧される。さらに、補強材料が等方性でない場合、その異方性を構造に方向性を表示することによって記すことが望まれる。これは、織布の補強材料内に染められた標記または染められた糸のようなひとつまたは複数の標識を埋め込むことによって実行できる。標識の方向または姿勢は外科医に物理的な性質が優れている移植片の向きを示すことになる。
【００５６】
上記のように、ポリマー溶液が凍結乾燥の前に成形型に加えられる方法は、適切な機械的な一体性を備えた組織移植片を生み出すのに貢献する。メッシュの補強材料が用いられ、その補強材料が２つの薄い（例えば、０．７５ｍｍ）間隙調整板（シム）の間に配置される場合、補強材料は成形型内の望まれる深さで実質的に平坦な姿勢で位置決めされなければならない。ポリマー溶液は気泡が発泡コンポーネントの層の間から逃れることができるような方法で注がれなければならない。好ましくは、成形型は望ましい角度に傾けられ、ポリマー溶液は泡の形成を妨げるのに最適な調整された速度で注がれる。当業者は複数の変数によって傾斜角度および注入速度が制御されることを適切に評価する。大まかに言うと、成形型は気泡の形成を回避するために約１度より大きい角度だけ傾けられなければならない。さらに、注入速度は全ての気泡が成形型に捕獲されるのではなく成形型から逃れることができるよう十分に遅くなければならない。
【００５７】
メッシュ材料が補強材料として用いられる場合、メッシュの開孔の密度は望まれる機械的性質を備えた組織移植片が結果的に形成されるための重要な要因である。低い密度、または開いたニットの（編まれた）メッシュ材料が好ましい。ある好ましい材料は、商標ＶＩＣＲＹＬ（アメリカ合衆国ニュージャージー州サマヴィルのエチコン・インコーポレーテッド）で市販されている９０：１０のグリコリドおよびラクチドのコポリマーである。ある例示的な低密度の開いたニットのメッシュはアメリカ合衆国ニュージャージー州サマヴィルのエチコン・インコーポレーテッドから販売されているニットのＶＩＣＲＹＬ  ＶＫＭ−Ｍ（Knitted VICRYL VKM-M）である。別の好ましい材料はポリジオキサノンまたは９５：５のラクチドおよびグリコリドのコポリマーである。
【００５８】
メッシュ材料の密度または「開き具合」はコンピュータにインターフェースで接続されたデジタル・フォトカメラを用いて評価することができる。ある評価では、メッシュの密度はＩＢＭの３００ＰＬコンピュータにインターフェースで接続されたソニーのデジタル・フォトカメラＤＫＣ−５００と共にニコンのＳＭＺ−Ｕズームレンズを用いて求められた。２０倍に拡大された各メッシュの部分のデジタル画像がメッシュの密度を求めるためにＩｍａｇｅ−Ｐｒｏ  Ｐｌｕｓ  ４．０ソフトウェアを用いて操作された。一旦デジタル画像がソフトウェアに取り込まれると、デジタル画像はメッシュ内の空のスペースの面積が画像の全体の面積から減算されるように閾値によって処理された。メッシュの密度は残りのデジタル画像の百分率であるとみなされた。最も望ましい機械的な性質を備えた移植片は約１２％から約８０％までの範囲内のメッシュの密度を備えた、より好ましくは約４５％から約８０％までの範囲内のメッシュの密度を備えた移植片であることが見出された。
【００５９】
ある実施の形態では、軟骨の修復のための好ましい骨格はメッシュで補強された発泡体である。より好ましくは、発泡体はポリジオキサノン（ＰＤＯ）を含むメッシュで補強されていて、発泡体の組成は３５：６５のε−カプロラクトンおよびグリコリドのコポリマーである。関節の軟骨に対しては、細胞および骨の内殖を可能にするための好ましい構造は開いた孔の構造を有し細胞の移動を可能にするよう十分な寸法の構造である。適切な孔の寸法は、平均の直径が約５０μｍから約１０００μｍまでの範囲内にあり、より好ましくは約５０μｍから約５００μｍまでの範囲内にある。メッシュの層は約１μｍから約１０００μｍまでの範囲内の厚みを有する。好ましくは、発泡体は約３００μｍから約２ｍｍまでの範囲内の厚みを有し、より好ましくは約５００μｍから約１．５ｍｍまでの範囲内の厚みを有する。好ましくは、メッシュの層は約１２％から約８０％までの範囲内のメッシュの密度を有し、より好ましくは約４５％から約８０％までの範囲内のメッシュの密度を有する。
【００６０】
別の実施の形態では、軟骨の修復のための好ましい骨格は不織布構造である。より好ましくは、不織布構造の組成には、ＰＡＮＡＣＲＹＬ、９５：５のラクチドおよびグリコリドのコポリマー、ＶＩＣＲＹＬ、９０：１０のグリコリドおよびラクチドのコポリマー、または、商標ＥＴＨＩＳＯＲＢ（ベルギー国のジョンソン・アンド・ジョンソン・インターナショナル）で市販されているポリジオキサノンおよびＶＩＣＲＹＬの混合物がある。関節の軟骨に対しては、組織および骨の内殖を可能にするための好ましい構造は開いた孔の構造を有し細胞の移動を可能にするよう十分な寸法の構造である。不織布の骨格の適切な孔の寸法は、平均の直径が約５０μｍから約１０００μｍまでの範囲内にあり、より好ましくは約１００μｍから約５００μｍまでの範囲内にある。不織布の骨格は約３００μｍから約２ｍｍまでの範囲内の厚みを有し、より好ましくは約５００μｍから約１．５ｍｍまでの範囲内の厚みを有する。
【００６１】
ある実施の形態では、半月の修復のための好ましい骨格はメッシュで補強された発泡体である。より好ましくは、発泡体はポリジオキサノン（ＰＤＯ）を含むメッシュで補強されていて、発泡体の組成は３５：６５のε−カプロラクトンおよびグリコリドのコポリマーである。細胞および骨の内殖を可能にするための好ましい構造は開いた孔の構造を有し細胞の移動を可能にするよう十分な寸法の構造である。適切な孔の寸法は、平均の直径が約５０μｍから約１０００μｍまでの範囲内にあり、より好ましくは約５０μｍから約５００μｍまでの範囲内にある。メッシュの層は約１μｍから約１０００μｍまでの範囲内の厚みを有する。好ましくは、発泡体は約３００μｍから約２ｍｍまでの範囲内の厚みを有し、より好ましくは約５００μｍから約１．５ｍｍまでの範囲内の厚みを有する。この実施の形態では、好ましい使用方法は、細かく切り刻まれた軟骨をこの骨格材料で取り囲むことである。好ましくは、メッシュの層は約１２％から約８０％までの範囲内のメッシュの密度を有し、より好ましくは約４５％から約８０％までの範囲内のメッシュの密度を有する。
【００６２】
当業者には本発明の生体適合性の骨格を形成するための適切な材料はいくつかの要因に応じて選択されることが適切に評価される。これらの要因には、生体内での（ｉｎ  ｖｉｖｏ）機械的な性能；細胞の吸着、増殖、移動、および分化に関する材料に対する細胞の反応；生体適合性；および必要な場合には、生物吸収性（または生物分解）の動力学などがある。その他の関連性のある要因には、化学的組成、成分の空間的な分布、ポリマーの分子量、および結晶性の程度などがある。
【００６３】
生体適合性の骨格に加えて、本発明の組織修復移植片は骨格の少なくとも一部と関連した生存可能な組織の少なくともひとつのサンプルをも含んでいる。用語「生存可能な」は本明細書ではひとつまたは複数の生存可能な細胞を含んだ組織のサンプルを意味している。実質的に任意のタイプの組織が本発明の組織修復移植片を構成するのに用いることができる。好ましくは、使用される組織は、軟骨組織、半月組織、靭帯組織、腱組織、皮膚組織、骨組織、筋肉組織、骨膜組織、心膜組織、滑液膜組織、神経組織、脂肪組織、腎臓組織、骨髄、肝臓組織、膀胱組織、膵臓組織、脾臓組織、椎間円板組織、胎児性組織、歯周組織、血管組織、血液、およびそれらの組み合わせから選択される。軟骨の修復に有用なある実施の形態では、組織は骨組織を含まず、軟骨細胞（chondrocytes）を含有する線維軟骨、半月組織、靭帯組織、および腱組織からなる集合から選択される。組織移植片を構成するのに用いられる組織は自原性の組織、同種異系の組織、または、異種の組織であってよい。例えば、健康な軟骨組織、骨髄組織、または吸引液（aspirates）が顆状関節の表面を修復するための組織修復移植片に適切に用いられる。
【００６４】
半月の修復に有用なある実施の形態では、組織修復移植片で用いられる組織は、半月組織、軟骨組織、皮膚、滑液膜組織、骨膜組織、心膜組織、脂肪組織、骨髄、血液、腱組織、靭帯組織、およびそれらの組み合わせからなる集合から選択できる。組織は例えば生検またはその他の外科的な除去のようなさまざまな通常の方法のいずれを用いて獲得されてもよい。好ましくは、組織のサンプルは無菌状態で獲得される。生きた組織のサンプルが獲得されると、そのサンプルは次に滅菌状態で処理されて少なくともひとつの細かく切り刻まれたすなわち細かく分割された組織の粒子を含んだ懸濁液が作られる。組織の各破片の粒子サイズはさまざまでよく、例えば組織の寸法は約０．１ｍｍ3 から約３ｍｍ3 までの範囲内にあってよく、約０．５ｍｍ3 から約１ｍｍ3 までの範囲内にあってよく、約１ｍｍ3 から約２ｍｍ3 までの範囲内にあってよく、約２ｍｍ3 から約３ｍｍ3 までの範囲内にあってよく、しかし好ましくは組織の粒子は１ｍｍ3 より小さい。
【００６５】
好ましくは、細かく切り刻まれた組織は組織の破片から骨格に移動できる少なくともひとつの生存可能な細胞を有する。より好ましくは、組織は植込み後に組織の破片から移動して骨格で居住を開始できる有効な量の細胞を含んでいる。必要に応じたある実施の形態では、細かく切り刻まれた組織の破片は細胞を取り囲む細胞外の基質から細胞が外に移動するのを容易にするために基質消化酵素と接触させられてよい。その酵素は細胞外の基質から骨格材料へ細胞が移動する速度を加速するのに用いられる。本発明に用いられる適切な基質消化酵素には、以下に限定されないが、コラゲナーゼ、メタロプロティナーゼ、コンドロイチナーゼ、トリプシン、エラスターゼ、ヒアルロニダーゼ、ペプチダーゼ、サーモリシン（thermolysin）、およびプロテアーゼなどがある。
【００６６】
ある実施の形態では、細かく切り刻まれた組織の粒子は組織の粒子が生理的緩衝液に関連付けられた懸濁液として形成される。適切な生理的緩衝液には、以下に限定されないが、食塩水、リン酸緩衝液、ハンクス平衡塩、トリス緩衝食塩水、ヘペス緩衝食塩水、およびそれらの組み合わせなどがある。さらに、組織は当業者に知られた任意の標準的な細胞培地で漿液が存在する状態でまたは存在しない状態で細かく切り刻まれてよい。細かく切り刻まれた組織の懸濁液を骨格または組織の損傷された部位に付着する前に、細かく切り刻まれた組織の懸濁液は濾過され濃縮されて、少量の生理的緩衝液のみが懸濁液中に残留するようにして組織の粒子が乾燥するのを防止すると同時に細かく切り刻まれた組織の粒子が直接骨格または組織の損傷された部位に付着されるようにする。好ましくは、細かく切り刻まれた組織の粒子は約１ｍｇ／ｃｍ2 から約１００ｍｇ／ｃｍ2 までの範囲内の濃度で付着され、より好ましくは約１ｍｇ／ｃｍ2 から約２０ｍｇ／ｃｍ2 までの範囲内の濃度で付着される。
【００６７】
細かく切り刻まれた生きた組織の懸濁液は、組織が骨格と関連付けられるように生きた組織の懸濁液を生体適合性の骨格に付着することによって本発明に基づく組織修復移植片を作るために用いることができる。好ましくは、組織は骨格の少なくとも一部と関連付けられている。組織修復移植片は目標の部位に直ちに植込まれてよく、または代わりに、その構造（組織修復移植片）は組織のサンプルの生存力を保持するのに有効な条件の下で所定の期間に亘って滅菌状態で培養されてもよい。構造（組織修復移植片）が培養される実施の形態では、培養条件はさまざまであってよく、しかし好ましくは移植片は１時間から６週間までの範囲内の期間に亘って、より好ましくは約１週間から約６週間までの範囲内の期間に亘って、約２０℃から約４０℃までの範囲内の温度で、約５％から約１０％までの範囲内の二酸化炭素（ＣＯ2 ）を含む湿度の高い、例えば湿度１００％の大気中で培養される。
【００６８】
キットが本発明の組織修復移植片を準備するのを援助するために用いることができる。本発明に基づけば、キットはひとつまたは複数の生体適合性の骨格を収容する滅菌コンテナと、患者から生きた組織のサンプルを収集するための採取ツールと、組織のサンプルの生存力を保持するためのまたはひとつ複数の試薬とを含んでいる。組織のサンプルの生存力を保持するための適切な試薬には、例えば食塩水、リン酸緩衝液、ハンクス平衡塩、標準細胞培地、ダルベッコ変更イーグル培地（Dulbecco's modified Eagle's medium）、アスコルビン酸、ＨＥＰＥＳ、非必須アミノ酸、Ｌ−プロリン、ウシ胎仔血清、自己由来血清、およびそれらの組み合わせなどがある。キットは、組織を細かく切り刻まれた組織の粒子に分割するための処理ツールをも含んでいてよく、または代わりに採取ツールが組織のサンプルを収集してサンプルを細かく分割された組織の粒子に処理するように適合されていてもよい。キットは必要な場合には骨格を滅菌コンテナから植え込むために患者へ運ぶための輸送器具をも含んでいてよい。
【００６９】
生物学的コンポーネントが、必要な場合には本発明の組織修復移植片内に組み込まれていてよい。好ましくは、生物学的コンポーネントは上述された骨格の中に組み込まれているか骨格にコーティングされている。生物学的コンポーネントが骨格にコーティングされている実施の形態では、生物学的コンポーネントは好ましくは骨格の少なくとも一部と関連付けられている。非限定的な例として、生体適合性の骨格は細かく切り刻まれた組織の破片の懸濁液を骨格に繋留するための接着剤を含んでいる。好ましくは、接着剤にはアンカー剤、橋かけ剤（例えば化学的または物理的な）、およびそれらの組み合わせなどがある。
【００７０】
適切なアンカー剤には、以下に限定されないが、ヒアルロン酸、フィブリングルー、フィブリンクロット、コラーゲンゲル、アルギン酸塩ゲル、ゼラチン−レゾルシン−ホルマリン接着剤、イガイをベースとする接着剤、ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ）をベースとする接着剤、キトサン、トランスグルタミナーゼ、ポリアミノ酸をベースとする接着剤、セルロースをベースとする接着剤、多糖類をベースとする接着剤、合成アクリレートをベースとする接着剤、多血小板血漿（ＰＲＰ）、乏血小板血漿（ＰＰＰ）、ＰＲＰのクロット、ＰＰＰのクロット、マトリゲル（Matrigel）、モノステアロイル・グリセロール・コスクシネート（ＭＧＳＡ）、モノステアロイル・グリセロール・コスクシネートおよびポリエチレングリコール（ＭＧＳＡ／ＰＥＧ）のコポリマー、ラミニン、エラスチン、プロテオグリカン、およびそれらの組み合わせなどがある。
【００７１】
適切な橋かけ剤には、例えばジビニルスルホン（ＤＶＳ）、ポリエチレングリコール・ジビニルスルホン（ＶＳ−ＰＥＧ−ＶＳ）、ヒドロキシエチルメタクリレート・ジビニルスルホン（ＨＥＭＡ−ＤＩＳ−ＨＥＭＡ）、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、アルデヒド、イソシアネート、ハロゲン化アルキルおよびハロゲン化アリール、イミドエステル、Ｎ−置換マレイミド、アシル化化合物、カルボジイミド、塩化ヒドロキシ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、光（例えば、青色光、および紫外線光）、ｐＨ（水素イオン濃度）、温度およびそれらの組み合わせなどがある。
【００７２】
本発明で用いられる生物学的コンポーネントは、損傷の部位に配置されたときに影響を受けた組織の治癒および／または再生を促進するさまざまな作用因子から選択されてもよい。治癒を実際に促進するまたははかどらせる化合物または薬剤であるだけでなく、作用因子には、汚染を防止する化合物または薬剤（例えば、抗菌物質、および抗生物質）、炎症を減らす化合物または薬剤（例えば、抗炎症剤）、酸化再生セルロース（例えば、エチコン・インコーポレイテッドから販売されているＩＮＴＥＲＣＥＥＤおよびＳｕｒｇｉｃｅｌ：登録商標）およびヒアルロン酸のような癒着の形成を防止するまたは最小にする化合物、および、免疫システムを抑制する化合物または薬剤（例えば、免疫抑制薬）などもある。
【００７３】
例として、本発明の移植片内に配置される別のタイプの作用因子には、異種または自己由来の成長因子、蛋白（マトリックス蛋白を含む。）、ペプチド、抗体、酵素、血小板、糖蛋白、ホルモン、サイトカイン、グリコサミノグリカン、核酸、鎮痛薬、ウイルス、ウイルス粒子、およびセルタイプ（cell types）などがある。同じまたは異なる機能性のひとつまたは複数の作用因子が移植片に組み込まれてよいことが理解される。
【００７４】
適切な作用因子の例には、傷ついたまたは損傷を受けた組織の治癒および／または再生を促進することが知られている多数の異種または自己由来の成長因子などがある。これらの成長因子は生体適合性の骨格に直接組み込まれていてよく、または代わりに生体適合性の骨格は例えば血小板のような成長因子の供給源を含んでいてよい。例示的な成長因子には、以下に限定されないが、ＴＧＦ−β、骨形態形成蛋白、軟骨由来形態形成蛋白、線維芽細胞成長因子、血小板由来成長因子、血管内皮細胞由来成長因子（ＶＥＧＦ）、上皮成長因子、インスリン様成長因子、肝細胞成長因子、およびそれらの破片などがある。適切な作用因子には、上記の薬剤の作用薬（アゴニスト）、および拮抗薬（アンタゴニスト）もある。成長因子には上記の成長因子の組み合わせもある。さらに、成長因子は血液の血小板によって供給される自己由来の成長因子であってもよい。その場合には、血小板からの成長因子はさまざまな成長因子の確定されないカクテルとなる。血小板は通常血液中に見出され、止血および傷の治癒の役割を果たす。血餅が形成される間、血小板は活性化されて、ＰＤＧＦ、ＴＧＦ−β、ＶＥＧＦ、およびＩＧＦのような成長因子を放出する。血小板は遠心分離法のような方法を用いて血液から分離できる。多血小板血漿（ＰＲＰ）が活性化因子と組み合わされると、血小板の血餅（クロット）が形成される。活性化因子には、以下に限定されないが、トロンビン、アデノシン２リン酸（ＡＤＰ）、コラーゲン、エピネフリン、アラキドン酸、リストセチン、カルシウム、およびそれらの組み合わせなどがある。
【００７５】
本発明の移植片中に存在する蛋白には、分離された形態で移植片中に存在する蛋白だけでなく移植片中に収容された例えば血小板のような細胞またはその他の生物学的供給源から分泌された蛋白もある。分離された形態の蛋白は典型的には約５５％以上の純度であり、すなわちその他の細胞蛋白、分子、残屑（debris）などから分離されている。より好ましくは、分離された蛋白は少なくとも６５％の純度であり、最も好ましくは少なくとも約７５％から約９５％の純度である。上記の記載にもかかわらず、当業者は約５５％未満の純度の蛋白も本発明の範囲内に含まれることを適切に評価する。本明細書では、用語「蛋白」は、糖蛋白、リポ蛋白、プロテオグリカン、ペプチド、およびそれらの破片を含む。作用因子として有用な蛋白の例として、以下に限定されないが、プレイオトロフィン（pleiotrophin）、エンドセリン、テネイシン、フィブロネクチン、フィブリノーゲン、ビトロネクチン、Ｖ−ＣＡＭ、Ｉ−ＣＡＭ、Ｎ−ＣＡＭ、セレクチン、カドヘリン、インテグリン、ラミニン、アクチン、ミオシン、コラーゲン、細糸、中間フィラメント、抗体、エラスチン、フィブリリン、およびそれらの破片などがある。
【００７６】
グリコサミノグリカンは細胞接着の役割を果たす大きく帯電した多糖類であり、本発明に基づく作用因子として働く。作用因子として有用なグリコサミノグリカンの例として、以下に限定されないが、硫酸ヘパリン、ヘパリン、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、ヒアルロナン（ヒアルロン酸としても知られている。）、およびそれらの組み合わせなどがある。
【００７７】
本発明の生体適合性の骨格は、骨格に組み込まれた細胞をも有していてよい。本発明に基づく作用因子として働くことができる適切な細胞のタイプは、以下に限定されないが、骨細胞、骨芽細胞、破骨細胞、線維芽細胞、幹細胞、多能性細胞、軟骨細胞の先祖、軟骨細胞、内皮細胞、マクロファージ、白血球、脂肪細胞、単球、血漿細胞、マスト細胞、臍帯細胞、間質細胞、間葉幹細胞、上皮細胞、筋芽細胞、腱細胞（tenocytes）、靭帯の線維芽細胞、ニューロン、および骨髄細胞などがある。細胞は典型的には同種のリガンド（例えば、刺激物質）に反応するレセプタ分子をその表面に有する。刺激物質はその同種のレセプタに接触するとそのレセプタを所有する細胞に特定の生物学的行動を起こさせるリガンドである。例えば、刺激物質（またはリガンド）に反応して細胞は有意のレベルのＣａ2+のような第２のメッセンジャーを生み出し、そのメッセンジャーが次に（本明細書中の例と一致した）プロテインキナーゼＣのような蛋白のリン酸化のような細胞プロセスへの二次の効果を及ぼす。ある場合には、細胞が固有の刺激物質によって刺激されると、その細胞は通常は蛋白の形態の細胞のメッセンジャー（糖蛋白、プロテオグリカン、およびリポ蛋白を含む。）を分泌する。この細胞のメッセンジャーは抗体（例えば、血漿細胞から分泌された。）、ホルモン（例えば、パラクリン、オートクライン、または外分泌のホルモン）、サイトカイン、または、それらの天然または合成の破片であってよい。
【００７８】
本発明の組織移植片は、核酸、ウイルス、またはウイルス粒子が少なくともひとつの目標の遺伝子生成物をエンコードする目標の遺伝子を特定の細胞または細胞タイプへ運ぶ遺伝子治療法に用いることもできる。したがって、生物学的作用因子は核酸（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、またはオリゴヌクレオチド）、ウイルス、ウイルス粒子、非ウイルス性ベクターであってよい。ウイルスおよびウイルス粒子はＤＮＡまたはＲＮＡウイルスであってよく、またはＤＮＡまたはＲＮＡウイルスに由来していてよい。目標の遺伝子生成物は好ましくは蛋白、ポリペプチド、インターフェレンス・リボ核酸（interference ribonucleic acids：ｉＲＮＡ）、およびそれらの組み合わせからなる集合から選択される。
【００７９】
用いることができる核酸および／またはウイルスの薬剤（すなわち、ウイルスまたはウイルス粒子）が組織修復移植片の生体適合性の骨格に組み込まれると、その移植片は次にあるタイプの生物学的反応を顕すために特定の部位に移植できる。核酸またはウイルスの薬剤は次に細胞によって吸収され、核酸またはウイルスがエンコードした任意の蛋白が細胞によって局部的に産生される。ある実施の形態では、核酸またはウイルスの薬剤は細かく切り刻まれた組織の懸濁液の組織の破片中の細胞によって吸収され、または別の実施の形態では、核酸またはウイルスの薬剤は傷ついた組織の部位を取り囲む組織中の細胞によって吸収される。当業者には産生された蛋白が上記のタイプの蛋白であり、または組織が傷または損傷を治癒する、感染と闘う、または炎症反応を低減する能力を増強するのを容易にする類似の蛋白であってよいことを認識する。核酸は組織の修復プロセスまたはその他の正常な生物学的プロセスに負の作用を及ぼすかもしれない望ましくない遺伝子の生成物の発現を遮断するのにも用いられる。ＤＮＡ、ＲＮＡ、およびウイルスの薬剤は遺伝子発現ノックアウトとしても知られている発現遮断機能などを行うためにも用いられることが多い。
【００８０】
当業者は生物学的コンポーネントのアイデンティティー（種類）が医療技術の原理および用いることができる治療器具に基づいて外科医によって決められることが適切に理解される。
【００８１】
組織修復移植片の生物学的コンポーネントまたは作用因子は、骨格を作る前にまたは骨格を作った後に骨格に組み込まれてよく、または、移植片を手術によって配置する前にまたは配置した後に骨格に組み込まれてよい。
【００８２】
手術によって配置する前に、生体適合性の骨格は生体適合性のコンポーネントを含む適切な容器内に配置されていてよい。適切な条件の下で適切な期間が経過すると、骨格には生物学的コンポーネントが含浸されることになる。代わりに、生物学的コンポーネントは例えば適切なゲージの注射器を用いて骨格に生物学的薬剤を注入することによって骨格内に組み込まれてもよい。生物学的コンポーネントを骨格に混合し、圧縮し、拡散させ、遠心力を加えて配置するなどの骨格に適切な生物学的コンポーネントを充填するための当業者に知られたその他の方法が用いられてもよい。代わりに、生物学的コンポーネントは骨格に注入する前にゲル様のキャリアと混合されてもよい。ゲル様のキャリアは、アルギン酸塩、架橋アルギン酸塩、ヒアルロン酸、コラーゲンゲル、フィブリングルー、フィブリンクロット、ポリＮ−イソプロピルアクリルアミン、ポリオキシアルキレン、アガロース、キチン、キトサン、セルロース、多糖類、ポリオキシアルキレン、ポリエチリンオキシドおよびポリプロピレンオキシドのコポリマー、ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、乏血小板血漿（ＰＰＰ）のクロット、ラミニン、可溶性基底膜、およびそれらの組み合わせなどの生物学的または合成ヒドロゲルであってよい。
【００８３】
手術によって配置された後に、生体適合性の骨格が生物学的コンポーネントを含んでいない移植片には生物学的薬剤が導入され、または、骨格が少なくともひとつの生物学的コンポーネントを含んでいる移植片にはその生物学的コンポーネントが補足的な量だけ追加されてよい。生物学的コンポーネントを手術によって配置された移植片に組み込む方法のひとつは、適切なゲージの注射器を用いて注入するものである。
【００８４】
生体適合性の骨格に含まれる生物学的コンポーネントの量は、骨格の寸法、骨格が作られている材料、骨各の多孔度、生物学的コンポーネントのアイデンティティー（種類）、組織修復移植片の意図される目的などを含むさまざまな要因に応じて変えられてよい。当業者は、組織の治癒を容易にするおよび／または促進するために所定の用途で生体適合性の骨格に含まれる生物学的コンポーネントの適切な量を容易に決めることができる。生物学的コンポーネントの量はもちろん生物学的コンポーネントのアイデンティティーおよび所定の用途に応じて変えることができる。
【００８５】
別の実施の形態では、組織修復移植片は組織が付着された骨格の上に配置される追加の保持要素を含んでいてよい。好ましくは、この実施の形態では、組織の懸濁液の少なくとも一部が、組織の懸濁液が生体適合性の骨格と保持要素との間に挟まれるように骨格の外側面の少なくとも一部に関連付けられている。保持要素は実質的に任意の生体適合性の材料で形成されていてよく、ある実施の形態では、保持要素は、同種異系の組織、自原性の組織、および異種の組織から得られたグラフト、上述された生体適合性の骨格から選択された追加の生体適合性の骨格、およびそれらの組み合わせなどを含む組織グラフトを用いて形成されてよい。別の実施の形態では、保持要素は多孔性のメッシュ、例えば編物、織布、不織布、または組織の内殖を可能にする孔または穿孔を有する薄い有孔エラストマーシートのような多孔性のメッシュに類似した材料であってよい。薄い有孔エラストマーシートは、好ましくは、コラーゲン、絹、または、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、およびポリジオキサノン（ＰＤＯ）の混合物またはコポリマーで作られている。使用される保持要素のタイプは望まれる組織修復に応じて変えられてよい。非限定的な例として、半月を修復するためのある実施の形態では、保持要素はメッシュで補強された発泡体である。別の実施の形態では、保持要素はメッシュ構造であってよい。それらの保持要素は生体適合性の骨格の上に配置されてよく、または代わりに保持要素は例えば縫合またはステープリングなどによって保持要素として働くように移植片に固定されてよい。当業者には、例えば保持要素に開口を設けるなど、保持要素をさらに処理することが医療科学の原理および使用可能な治療器具に基づいて外科医によって決定されてよい。
【００８６】
さらに別の実施の形態では、静電気的に紡いだ（electrostatically spun）織物のバリアが増殖および組織の癒着に対するバリアとして働くように移植片に加えられて、手術後の癒着の可能性を低減している。織物のバリアは好ましくは移植片に加えられる高密度の繊維質の織物の形態である。好ましくは、繊維質の織物は生体適合性の骨格の上面および／または底面に融合されている直径の小さい繊維からなる。これによって、多孔性、透過性、劣化速度、機械的性質のような構造のいくつかの表面の性質が調節できる。
【００８７】
当業者には、繊維質の織物は、繊維質の層が凍結乾燥された発泡体および不織面に積層される静電紡糸プロセス（electostatic spinning process）によって製造されることが適切に評価される。この静電紡糸プロセスはさまざまな繊維材料を用いて行われてよい。例示的な繊維材料には、脂肪族ポリエステルなどがある。発泡コンポーネントを形成するポリマー溶液を準備するのに有用な上述された溶媒などを含むさまざまな溶媒も用いられてよい。
【００８８】
繊維質の層の組成、厚み、多孔性は望まれる機械的および生物学的特性を得るように調節されてよい。例えば、繊維質の層の生物吸収速度は下側の生体適合性の骨格に比べてより長いまたはより短い生物吸収特性となるように選択されてよい。さらに、繊維質の層は機械的な力が構造（骨格および繊維質の層の組み立て体）の繊維質の層の側に加えられてもよいように、組み立て体により大きな構造上の一体性を提供してよい。ある実施の形態では、繊維質の層は縫合、ステープル、またはさまざまな固定器具を用いて組み立て体を所定の位置に保持できるものでよい。大まかに言って、繊維質の層は約１μｍから約１０００μｍまでの範囲内の厚みを有する。
【００８９】
本発明の組織修復移植片は患者の疾病のまたは損傷を受けた関節面を再表面化するために用いることができ、その組織修復移植片は疾病の軟骨組織が除去されて準備された関節面の実質的に全体の表面を覆うように構成されている。
【００９０】
本発明のある実施の形態では、組織修復移植片は靭帯、腱、神経、皮膚、軟骨、または半月の傷などの組織の傷を治療するために用いられる。組織の傷の修復には、当業者に知られたさまざまな方法のいずれかによって生きた組織のサンプルを得る過程と、生きた組織のサンプルを組織を例えば切断するなどで滅菌状態の下で処理して少なくともひとつの細かく切り刻まれた細かく分割された組織の粒子を作る過程と、生体適合性の骨格に組織のサンプルを付着させて組織のサンプルを骨格に関連付けて組織修復移植片を形成する過程と、組織修復移植片を組織の傷に対して望まれる位置に配置する過程とが含まれている。組織の傷の修復には、骨格を組織の傷の部位に配置する過程と、次に細かい組織の粒子を骨格に付着する過程とがさらに含まれていてよい。骨格に関連付けられた組織の粒子中の細胞は骨格に移動して増殖を始め植え込みの部位を取り囲む組織と一体化して、組織の傷を修復する。組織の傷を修復するこの方法は、別の必要に応じた過程をさらに含んでよい。組織修復移植片を組織の傷に対して望まれる位置に配置する過程の前に骨格および関連付けられた組織の粒子は組織の粒子中の細胞が組織から移動して骨格に定住できるようにするのに有効な期間に亘っておよび条件の下で培養されてよい。本発明のある例示的な実施の形態では、組織修復移植片は患者の疾病のまたは損傷を受けた関節面を再表面化するために用いられ、その組織修復移植片は関節面の実質的に全ての表面を覆うように構成されている。関節面の再表面化に関しては、本発明の方法は約１０ｃｍ2 から約２０ｃｍ2 までの範囲内の表面積を有する欠損軟骨のような比較的大きい表面積の欠損軟骨の再表面化および／または修復に用いるのにとりわけ適している。
【００９１】
本発明で用いられる組織移植片は適切な採取器具を用いてドナー（自原性の、同種異系の、または異種の）から得られる。組織のサンプルは組織が収集されるときに細かく切り刻まれ、小さな粒子に分割されてよく、または代わりに、組織のサンプルは採取されて体から収集された後に細かく切り刻まれてよい。組織のサンプルが採取された後に細かく切り刻まれるいくつかの実施の形態では、組織のサンプルは計量され次にリン酸緩衝食塩水で３回洗浄されてよい。約３００ｍｇから約５００ｍｇまでの組織が次にごく少量の例えば約１ｍｌの例えばリン酸緩衝食塩水または例えばＨａｍｓ  Ｆ１２中の０．２％のコラーゲナーゼのような基質溶解酵素のような生理的緩衝液と共に細かく切り刻まれる。組織を細かく切り刻むことによって組織は約１ｍｍ3 の粒子または小片に分割される。組織はさまざまな方法で細かく切り刻まれてよい。ある実施の形態では、組織は２つの滅菌されたメスを用いて平行な向きで細かく切り刻まれ、別の実施の形態では組織は組織を所望の寸法の粒子に自動的に分割するプロセッサ器具によって細かく切り刻まれる。ある実施の形態では、細かく切り刻まれた組織は生理的溶液から分離されて例えばふるい分け、沈殿、または遠心分離のような当業者に知られたさまざまな方法のいずれかを用いて濃縮されてよい。細かく切り刻まれた組織が濾過されて濃縮される実施の形態では、細かく切り刻まれた組織の懸濁液は好ましくは組織が乾燥するのを防止するために懸濁液中に少量の液体を保持している。別の実施の形態では、細かく切り刻まれた組織の懸濁液は濃縮されず、細かく切り刻まれた組織は高濃度の組織の懸濁液または例えばヒドロゲル、フィブリングルー、またはコラーゲンのような別のキャリアによって組織修復の部位に直接運ばれてよい。この実施の形態では、細かく切り刻まれた組織の懸濁液は組織の破片を所定の位置に保持するために上述された生体適合性の骨格のいずれかによって覆われてよい。
【００９２】
細かく切り刻まれた組織は次に骨格全体を覆うように細胞散布器（cell spreader）を用いて骨格に分布されてよい。半月および軟骨の修復ための好ましい実施の形態では、細かく切り刻まれた組織は骨格全体を覆うようにダルベッコ変更イーグル培地（ＤＭＥＭ）中に予浸された４ｃｍ×５ｃｍの骨格に散布される。必要な場合には、組織の粒子は例えばフィブリングルー、または多血小板血漿のような上述された接着剤のいずれかを用いて骨格に接着されてよい。フィブリングルーまたは多血小板血漿を用いる実施の形態では、数μｌのトロンビンがフィブリングルーまたは多血小板血漿を骨格に散布する前に骨格に配置されて定着されてよい。組織の粒子および任意の追加の薬剤が骨格に付着されると、組織修復移植片は直ちに植え込まれ、または代わりに組織修復移植片は組織の粒子中の細胞が組織の粒子から骨格へ移動できるようにするのに十分な期間に亘って十分な条件のもとで管内で（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）培養されてよい。組織修復移植片が植え込まれる前に培養されるある実施の形態では、組織修復移植片は好ましくは例えば２０％のウシ胎仔血清（ＦＣＳ）、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．１ｍＭの非必須アミノ酸、２０ｍｇ／ｍｌのＬ−プロリン、５０ｍｇ／ｍｌのアスコルビン酸、１００ｍｇ／ｍｌのペニシリン、１００ｍｇ／ｍｌのストレプトマイシン、および０．２５ｍｌ／ｍｌのアンホテリシンＢを補足されたＤＭＥＭ−ハイ・グルコースのような軟骨細胞（chondrocyte）増殖培地中で約１週から約３週までに亘って管内で（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）培養される。
【００９３】
本発明に基づく組織移植片を用いる組織の傷を修復する方法は組織の傷を修復するための外科手術の間に行われてよい。代わりに、細かく切り刻まれた細かく分割された組織の粒子を作るために組織のサンプルを処理する過程、組織の粒子を骨格に付着させて組織修復移植片を形成する過程、および／または、植え込みの前に組織修復移植片を培養する過程が、移植片を傷の部位に対して手術によって配置する前に別の滅菌された位置で実行されてよい。
【００９４】
損傷を受けた組織を修復するのに用いられる移植片は治療される組織の所望の位置または病変の外形および大きさに整合するような寸法および形状にされる。移植片には切断、折りたたみ、丸める、またはその他の操作などを含むさまざまな方法によって必要な外形にするために寸法および形状が与えられる。上述されたように、生物学的コンポーネントは、骨格の製造中または製造後に、または移植片を患者の体に植え込む前または植え込んだ後に、骨格に加えられてよい。追加の量の生物学的コンポーネントが移植片が植え込まれた後に加えられてもよい。冒された解剖学的構造上の部位が（低侵襲手術、直視下手術、または小開口手術（mini-open surgical technique）などによって）アクセスされると、移植片は裂傷または病変内のような組織の傷に対する所望の位置に固定できる。移植片が所望の位置または病変に配置されると、移植片は機械的に動的な環境内で移植片を保持できるようにする適切な方法によって固定されてよい。ある側面では、移植片は化学的なおよび／または機械的な締結方法で固定されてよい。適切な化学的な締結具には、フィブリングルー、フィブリンクロット、およびその他の公知の生物学的に適合性のある接着剤のようなグルーおよび／または接着剤などがある。適切な機械的な締結具には、縫合糸、ステープル、組織鋲（tissue tacks）、縫合アンカー（suture anchors）、針（darts）、ねじ（screws）、ピン、および矢（arrows）などがある。ひとつまたは複数の化学的および／または機械的な締結具の組み合わせが用いられてよいことが理解される。代わりに、化学的および／または機械的な締結具が用いられなくてもよい。代わりに、移植片は治療される組織の適切な部位に締まり嵌めによって配置されてもよい。
【００９５】
ある使用例では、組織修復移植片は関節の再表面化手術の間に間接面の損傷を受けたまたは疾病の軟骨組織を修復または交換するために用いられ、またはスタンドアロンの装置として用いられる。修復の場合には、骨関節の関節面の損傷を受けたまたは疾病の軟骨組織は原線維性の傷および裂傷と共に手術中に除去される。関節面はデブリドマン（壊死組織切除）され組織修復移植片を受容する肋軟骨下骨表面を露出するように準備される。移植片を配置する前に、肋軟骨下骨表面は微小骨折の形成または穿孔などによる骨髄刺激方法によって処理されて肋軟骨下骨表面が掻爬される。骨髄刺激方法によって、骨髄細胞が組織修復プロセスへ寄与できるようになる。移植片は関節に機械的な支持を与えると同時に新たな軟骨が移植片内で成長できるようにもし、結局移植片を自然の（本来の）軟骨組織と同様の機械的性質を備えた新たな組織で置き換えるようにする。移植片は適正な関節の働きを確立するために初期に必要な機械的な支持を提供し、さらに組織の再生のためのガイドとしても働く。スタンドアロンの装置としての別の使用例では、疾病の軟骨組織が関節面から除去され、細かく切り刻まれた軟骨組織を備えた組織修復移植片が損傷を受けた軟骨の機能に取って代わるように働く。細かく切り刻まれた軟骨組織は新たな軟骨組織を成長させるための組織の供給源として働く。
【００９６】
本発明の移植片は治療薬のための輸送器具としても用いることができ、ここで治療薬は細胞、細胞の基質、および固有の成長因子の組み合わせを含む細かく切り刻まれた組織からなる。移植片の骨格部分はホルモンおよび蛋白が周囲の環境に放出されるようにすることができる。
【００９７】
本発明に基づく組織移植片を用いる組織の傷を修復する方法は組織の傷を修復するための外科手術の間に実施することができる。図１は孤立性の軟骨の病変である（そして前十字靭帯（ＡＣＬ）の裂傷または半月の損傷はない）と診断された患者の疾病のまたは損傷を受けた関節面を再表面化する例示的な方法を示している。図示されているように、患者は通常の手術技術を用いて通常の形態で組織修復手術の準備をされている。組織の修復は本発明の組織修復移植片を用いて傷ついた組織の部位で行われる。図示されたこの例では、組織の傷の部位は患者の膝関節の楕円関節面１０である。図示された採取器具２０のような適切な器具を用いて、組織のサンプルが組織修復移植片３０を形成するために患者（または別のドナー）から採取される。好ましくは、組織は健康な軟骨の組織からなる。組織のサンプルは細かく切り刻まれてまたは分割されて約０．１ｍｍ3 から約３ｍｍ3 までの範囲内の粒子寸法の少なくともひとつの組織の粒子にされる。組織は２つの滅菌されたメスを平行な向きに用いるなどの通常の細かく切り刻む方法を用いて細かく切り刻まれてよい。約３００ｍｇから約５００ｍｇまでの範囲内の組織が修復部位の組織の傷の大きさに応じて約１ｍｇの生理的緩衝液と共に細かく切り刻まれる。細かく切り刻まれた組織は濾過され濃縮されて細かく切り刻まれた組織の粒子が生理的緩衝液から分離される。細かく切り刻まれた組織は例えばふるい分け、沈殿、または遠心分離のようなさまざまな通常の方法のいずれかを用いて濃縮される。細かく切り刻まれた組織の粒子は次に図１に示されているように細胞散布器または組織分配器４０を用いて散布される。４ｃｍ×５ｃｍの生体適合性の骨格３２が保持リング２２内のような組織分配器４０内に保持されて、ダルベッコ変更イーグル培地（ＤＭＥＭ）に浸される。多血小板血漿（ＰＲＰ）のような接着剤５０が生体適合性の骨格および細かく切り刻まれた組織の粒子に加えられる。
【００９８】
組織修復移植片を受容するために関節面１２を準備するために、関節面１２は軟骨下骨面１４を露出するように壊死組織切除されてよい。必要な場合には、ひとつまたは複数の孔が出血を誘導し骨髄細胞の浸潤を起こすために露出された軟骨下骨面１４に形成されてよい。次に組織修復移植片３０は直ちにまたは管内で（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）培養された後に組織の傷の部位に植え込まれる。好ましくは、準備された面積に配置された組織修復移植片３２の寸法は欠損および／または準備された面積の寸法および形状にほぼ一致する。図１に示されているように、細かく切り刻まれた組織の層を備えた移植片３２の側面は準備された軟骨下骨面１４の下に沿って配置されなければならない。必要な場合には、移植片は次にひとつまたは複数の締結因子を用いて所定の位置に固定される。適切な締結因子には、締結具（fasteners）、ステープル、組織鋲（tissue tacks）、縫合糸、接着剤、およびそれらの組み合わせなどがある。例えば、生体適合性の生物吸収性のステープル６０が図１に例示されているように組織が加えられた移植片３０を準備された軟骨下骨面１４に固定するのに用いられてよい。固定された移植片はメスを用いてその周縁部を一回りして切り取られてよい。さらに、フィブリングルーのような密閉剤が移植片をエッジを一回りして密閉するために用いられてよい。最終的な傷の閉鎖が通常の手術技術を用いて通常の形態で行われる。
【００９９】
以下の実施例は本発明の原理および実施を例示したものである。本発明の範囲および真髄に含まれるさまざまな別の実施の形態が当業者には明らかであろう。
【実施例】
【０１００】
実施例１．
この試験の主要な目的は膝関節のような大きい荷重を担う関節顆の領域の広い軟骨の欠損を再表面化するための移植片の保持力を検査することである。
【０１０１】
Ａ．軟骨の欠損の生成
欠損が８頭のヤギの大腿骨内側顆（ＭＦＣ）の荷重を担う外形に生成された。ＭＦＣはランダムに割り当てられた後膝の内側を関節切開することによってアクセスされた。軟骨の厚み全体（ＩＣＲＳグレード３）がメスおよび掻爬術を用いて除去された。軟骨は肋軟骨下の最高到達点（tidemark）のレベルまで手作業で取り除かれたが、確かに骨が目視されるようには露出されないようにされた。この試験では２０ｍｍ×２０ｍｍの正方形および７ｍｍの円形の２つの寸法の欠損が検査された。ヤギ一頭当たりひとつの後膝についてひとつの欠損が生成された。
【０１０２】
Ｂ．移植片の準備
この移植片の保持力の試験では、移植片は適切な寸法の予め湿らされた骨格にフィブリングルーを加えることによって準備された。使用された骨格の組成は不織布構造の９５：５のラクチドおよびグリコリドのコポリマーであり、その骨格は骨格へのまたは骨格からの細胞の内殖、浸潤、または移動に好ましい構造的な環境を提供する。細胞、組織の破片、および生物活性はこの試験の目的のために移植片に加えられなかった。フィブリングルーが移植片を肋軟骨下の骨面に接着するのを容易にするために加えられた。
【０１０３】
Ｃ．移植片の再表面化および付加
欠損よりわずかに大きい寸法の移植片が欠損を覆って配置されてステープルを用いて肋軟骨下骨に固定された。大きい欠損（２０ｍｍ×２０ｍｍ）に対しては５個から６個のステープルが用いられ、小さい（７ｍｍ）の欠損に対しては１個のみのステープルが用いられた。最後に周縁エッジの余分な骨格材料が外科はさみで切り取られて移植片の表面と隣接する本来の軟骨との間が円滑に接続され移行することが確実となるようにされた。
【０１０４】
Ｄ．術後のリハビリテーション
繊維ガラスのギプス／シュレーダー−トーマス副子がリハビリテーションの手順に応じて２週から４週に亘って治療された動物の各々に手術後に用いられた。繊維ガラスのギプス／シュレーダー−トーマス副子は各ヤギについて毎日検査されて手術された四肢に直接負荷が加わっていないことが確かめられた。これらのヤギに用いられたリハビリテーション手順は手術後に２週に亘る固定を必要とした。これらのヤギは安楽死の前に固定手段無しで更に２週に亘って歩行した。
【０１０５】
Ｅ．結果のまとめ
大まかな分析および組織学的な分析の両方が７ｍｍの円形の欠損への移植片の保持がＭＦＣ領域にでさえも完璧であることを示した。ステープルおよび骨格の繊維が損なわれていない兆候が全てのケースについて観察された。
【０１０６】
当業者は上述された実施の形態に基づいて本発明の別の特徴および利点を適切に評価するだろう。従って、本発明は特許請求の範囲に記載された以外は、特定して例示され記載されたものに限定されるべきではない。本明細書で引用された全ての刊行物および参照文献はそれらの全体が明らかに本明細書で参照文献として引用される。
【０１０７】
この発明の具体的な実施態様は以下の通りである。
（１）骨格が、合成ポリマー、天然ポリマー、注入成形可能なゲル、セラミック材料、自原性の組織、同種異系の組織、異種の組織、およびそれらの組み合わせからなる集合から選択された、請求項１記載の組織修復移植片。
（２）骨格に関連付けられた少なくともひとつの生物学的コンポーネントをさらに含む、請求項１記載の組織修復移植片。
（３）生物学的なコンポーネントが、少なくともひとつの組織の破片を含み、上記組織の破片が上記組織の破片から移動して骨格に居住するのに有効な量の生存可能な細胞を有する、上記実施態様（２）記載の組織修復移植片。
（４）少なくともひとつの組織の破片が複数の細胞を含み、手術部位に植え込まれたときに上記複数の細胞の少なくとも一部が骨格に関連付けられた上記組織の破片から移動して、植え込みの部位で増殖しての周囲の組織と一体化することができる、上記実施態様（３）記載の組織修復移植片。
（５）少なくともひとつの組織の破片が複数の細胞を含み、手術部位に植え込まれる前に上記複数の細胞の少なくとも一部が骨格に関連付けられた上記組織の破片から移動して、上記骨格で増殖して居住することができる、上記実施態様（３）記載の組織修復移植片。
【０１０８】
（６）少なくともひとつの組織の破片が、自原性の組織、同種異系の組織、異種の組織、およびそれらの組み合わせを含む、上記実施態様（３）記載の組織修復移植片。
（７）少なくともひとつの組織の破片が、軟骨、半月、腱、靭帯、およびそれらの組み合わせからなる集合から選択された骨を含まない組織タイプを含む、上記実施態様（３）記載の組織修復移植片。
（８）生物学的コンポーネントが、抗生物質、抗菌物質、抗炎症剤、成長因子、ホルモン、サイトカイン、蛋白、グリコサミノグリカン、免疫抑制剤、核酸、鎮痛剤、細胞タイプ、ウイルス、ウイルス粒子、およびそれらの組み合わせからなる集合から選択された、上記実施態様（２）記載の組織修復移植片。
（９）細胞タイプが、骨細胞、線維芽細胞、幹細胞、多能性細胞、軟骨細胞の祖先、軟骨細胞、骨細胞、破骨細胞、骨芽細胞、内皮細胞、マクロファージ、脂肪細胞、単球、血漿細胞、マスト細胞、臍帯細胞、白血球細胞、間質細胞、間葉幹細胞、上皮細胞、筋芽細胞、腱細胞、靭帯の線維芽細胞、および骨髄細胞からなる集合から選択された、上記実施態様（８）記載の組織修復移植片。
（１０）生体適合性の組織修復移植片が上記組織移植片に加えられた少なくともひとつの別の生物学的コンポーネントをさらに含む、上記実施態様（２）記載の組織修復移植片。
【０１０９】
（１１）別の生物学的コンポーネントが、成長因子、基質蛋白、ペプチド、抗体、酵素、サイトカイン、ウイルス、核酸、ペプチド、分離された細胞、血小板、またはそれらの組み合わせからなる、上記実施態様（１０）記載の組織修復移植片。
（１２）少なくともひとつの別の生物学的コンポーネントが血小板からなり、
上記血小板が、アルギン酸塩、架橋アルギン酸塩、ヒアルロン酸、コラーゲンゲル、フィブリングルー、フィブリンクロット、ポリＮ−イソプロピルアクリルアミド、アガロース、キチン、キトサン、セルロース、多糖類、ポリオキシアルキレン、ポリエチレンオキシドおよびポリプロピレンオキシドのコポリマー、ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、乏血小板血漿（ＰＰＰ）のクロット、ラミニン、可溶性基底膜、およびそれらの組み合わせからなる集合から選択された生物学的または合成ヒドロゲルに由来する、上記実施態様（１０）記載の組織修復移植片。
（１３）生物学的コンポーネントが血小板の活性化因子をさらに含む、上記実施態様（１１）記載の組織修復移植片。
（１４）血小板の活性化因子が、トロンビン、アデノシン２リン酸（ＡＤＰ）、コラーゲン、エピネフリン、アラキドン酸、リストセチン、およびそれらの組み合わせからなる集合から選択された、上記実施態様（１３）記載の組織修復移植片。
（１５）生体適合性の骨格が、組織の破片の懸濁液を上記生体適合性の骨格に係留するための接着剤をさらに含む、上記実施態様（２）記載の組織修復移植片。
（１６）接着剤が、ヒアルロン酸、フィブリングルー、フィブリンクロット、コラーゲンゲル、ゼラチン・レゾルシン・ホルマリン接着剤、イガイをベースにする接着剤、ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ）をベースにする接着剤、キトサン、トランスグルタミナーゼ、ポリアミノ酸をベースにする接着剤、セルロースをベースにする接着剤、合成アクリレートをベースにする接着剤、多血小板血漿（ＰＲＰ）、マトリゲル、モノステアロイル・グリセロール・コスクシネート（ＭＧＳＡ）、モノステアロイル・グリセロール・コスクシネートおよびポリエチレングリコール（ＭＧＳＡ／ＰＥＧ）のコポリマー、ラミニン、エラスチン、プロテオグリカン、およびそれらの組み合わせからなる集合から選択されたアンカー剤からなる、上記実施態様（１５）記載の組織修復移植片。
（１７）接着剤が、ジビニルスルホン（ＤＶＳ）、ポリエチレングリコール・ジビニルスルホン（ＶＳ−ＰＥＧ−ＶＳ）、ヒドロキシエチルメタクリレートジビニルスルホン（ＨＥＭＡ−ＤＩＳ−ＨＥＭＡ）、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、アルデヒド、イソシアネート、ハロゲン化アルキルおよびハロゲン化アリール、イミドエステル、Ｎ置換マレイミド、アシル化化合物、カルボジイミド、塩化ヒドロキシ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、光、水素イオン濃度、温度、およびそれらの組み合わせからなる集合から選択された化学的な橋かけ剤からなる、上記実施態様（１５）記載の組織修復移植片。
【図面の簡単な説明】
【０１１０】
【図１】本発明の組織修復移植片を準備し取り付ける方法を示す模式図である。
【符号の説明】
【０１１１】
１０  楕円関節面
１２  関節面
１４  軟骨下骨面
２０  採取器具
２２  保持リング
３０  組織修復移植片
３２  骨格
４０  組織分配器
５０  接着剤
【図１】
2005131365.tif 000003
【外国語明細書】
2005131365000001.pdf