(57)【要約】【課題】  不純物として膜に含まれるエンドトキシンの溶出を減らし、生体に対する刺激性が軽減された選択透過性分離膜を提供するこことを目的とする。特に、慢性腎不全の治療に用いる高透水性能を有する中空糸型血液浄化器用として好適である選択透過性分離膜を提供する。【解決手段】  選択透過性分離膜において、該膜から溶出してくるエンドトキシンが150EU/m2以下であることを特徴とする選択透過性分離膜である。また、該膜のアルブミンの篩係数が0.01以上0.30以下、内表面近傍における親水性高分子の含量をＡ、膜全体の親水性高分子の含量をＢとしたとき、Ａ、Ｂの関係がＡ≧５質量％、かつＢ／Ａ≦０．４、β2ＭＧのクリアランスが４０mL/min以上であることを特徴とする選択透過性分離膜である。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
選択透過性分離膜から溶出するエンドトキシンが150EU/m2以下であることを特徴とする選択透過性分離膜。
【請求項２】
アルブミンの篩係数が0.01以上0.30以下であることを特徴とする請求項1に記載の選択透過性分離膜。
【請求項３】
選択透過性分離膜を膜面積1.5ｍ2になるようにモジュールに組込み、該モジュールに総タンパク濃度7.0g/dL±0.5gの牛血漿を血液流量200mL/min、透析液流量500mL/min、ろ過速度15mL/minで流したとき、20分後に測定したβ2マイクログロブリンのクリアランスが40mL/min以上である請求項1または2に記載の選択透過性分離膜。
【請求項４】
該膜が主として疎水性高分子と親水性高分子とからなることを特徴とする請求項1〜3いずれかに記載の選択透過性分離膜。
【請求項５】
選択透過性分離膜の血液接触側表面近傍の親水性高分子の含量をＡ、該膜全体の親水性高分子の含量をＢとしたとき、Ａ≧５質量％、Ｂ／Ａ≦０．４の関係を満たすことを特徴とする請求項1〜4いずれかに記載の選択透過性分離膜。
【請求項６】
該疎水性高分子がポリスルホン系高分子であることを特徴とする請求項1〜5いずれかに記載の選択透過性分離膜。
【請求項７】
該親水性高分子がポリビニルピロリドンであることを特徴とする請求項1〜6いずれかに記載の選択透過性分離膜。
【請求項８】
選択透過性分離膜が中空糸膜である請求項1〜7いずれかに記載の選択透過性分離膜。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体の溶質除去や精製を目的とした選択透過性分離膜に関するもので、さらに詳しくは、血液浄化や水中のエンドトキシン除去等に利用される選択透過性分離膜に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、膜分離技術が数多く実用化されており、液体や気体の混合物から目的物を分離したり、不純物を除去するためにさまざまな選択透過性分離膜が利用されている。選択透過性分離膜の素材としては、一般に有機系高分子が汎用されており、例えば、天然高分子としてセルロース、再生セルロース、セルロースジアセテート、セルローストリアセテート等のセルロース誘導体等が用いられ、合成高分子としてはポリシロキサン、ポリアミド、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリオレフィン、ポリアクリロニトリル、ポリメタクリレート等が用いられる。中でもポリスルホン、ポリエーテルスルホンといったポリスルホン系高分子は、工業用分離膜として幅広く利用されているが、その理由は、加熱、放射線、および酸・アルカリ等の化学薬品いずれに対しても優れた耐性を示すためである。また、生体適合性にも優れることから、最近では医療用分離膜の素材としても注目され、需要が増加している。
【０００３】
ところが、ポリスルホン系高分子は撥水性が高く水に濡れにくい素材であるため、所望の膜性能を得る目的で親水性高分子を添加して製膜されることが多い。そのため、膜を使用する際に被処理液中に親水性高分子が溶出したり、あるいはポリスルホン系高分子から微粒子やオリゴマー成分が溶出する問題があった。
【０００４】
これらの欠点を改良する試みは数多く開示されている（例えば、特許文献１〜４参照）。特許文献１では、含水状態で膜に放射線を照射することで親水性高分子を架橋不溶化させ、膜に強固に固定して溶出を改善している。特許文献２では、膜を乾燥状態で熱処理することで、同様に親水性高分子を不溶化し膜に固定している。また、親水性高分子と水不溶性複合体を形成する成分で膜を処理する方法も試みられており、特許文献３では、ポリカルボン酸やポリフェノール等の多価酸を用いた不溶化処理がなされている。
【特許文献１】特開平４−３００６３６号公報
【特許文献２】特開平９−１０３６６４号公報
【特許文献３】特公平８−３２２９７号公報
【０００５】
一方、ポリスルホン系高分子からの微粒子やオリゴマー成分の溶出については、原料の樹脂を再沈殿で精製したり、膜をアルコール系溶剤で洗浄する方法が特許文献４に開示されている。
【特許文献４】特開平５−３２９３４５号公報
【０００６】
しかし、いずれも親水性高分子や微粒子、オリゴマー成分の溶出のみを問題にしており、それ以外の不純物の溶出は考慮されていなかった。ポリスルホン系の膜は、一般に乾湿式紡糸法により製膜されるが、凝固や凝固浴に使用する水の汚染状態によっては製膜過程でいくつかの不純物が混入してくる可能性があった。また、モジュール化した膜に水を充填する場合も同様であった。その中には生体を刺激する生理活性物質も含まれており、とりわけ、糖脂質成分は例えば菌体内毒素やエンドトキシンに代表されるように、微量でも生体に対して多彩、かつ、強力な生理活性物質を有するものがある。これらはポリスルホン系高分子表面に高い親和性を示すため膜に吸着されやすく、洗浄によっては除去されにくい。その一方で、血液のように溶出力の高い溶媒には親和性が高く、溶出して生理活性を発現する可能性があった。このような問題に対しては次のような方法が開示されている（例えば、特許文献５参照）。特許文献５では膜中に存在する生理活性糖脂質含有率を1.3ppb以下でアルブミンの透過率が0.5〜0.001%とする方法が開示されている。しかしながらアルブミンの透過率が0.5%以下では長期透析患者の合併症である透析アミロイド症の原因物質とされるβ2マイクログロブリン（以下、β2MGと略す。）や掻痒感を改善効果があるとされるα１マイクログロブリン付近の分子量（33,000）を有する低分子タンパクの除去が十分に達成されないという問題がある。また、特に敗血症患者ではアルブミンを適正量除去した方が予後に好適であることから十分な性能とはいえなかった。
【特許文献５】特開平１１−３０９３５６号公報
【０００７】
膜中の生理活性糖脂質含有率を1.3ppb以下にすることは好ましい方向であるが、非特許文献１によればエンドトキシンは5〜７EU/ngといわれており、1.3ppbは約7000EU/L相当となる。また、非特許文献１および２から患者の標準体重を60Kgと想定した場合、300EUが体内に流入すると発熱する可能性のあることが示唆され、十分に安全を確保できるとはいえなかった。また、日本透析学会が奨励する透析液中エンドトキシン濃度100EU/L以下を達成するには潜在的に膜が不純物を保有しているという面で十分とはいえなかった。
【非特許文献１】第十三改正日本薬局方  一般試験法  B−62〜63  エンドトキシン試験法
【非特許文献２】和光純薬時報  vol.70  No.64  P17  透析療法とエンドトキシン
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、上記従来技術の問題点を解消し、不純物として膜に含まれるエンドトキシンの溶出を減らし、生体に対する刺激性が軽減された選択透過性分離膜を提供するこことを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、選択透過性分離膜において、該膜から溶出してくるエンドトキシンが100EU/m2以下であることを特徴とする選択透過性分離膜である。また、該膜のアルブミンの篩係数が0.01以上0.30以下であることを特徴とする選択透過性分離膜である。
【発明の効果】
【００１０】
本発明は、生体に対する刺激性があるとされるエンドトキシンの溶出を低減し、また、適正なタンパク除去が可能となり、長期透析患者の合併症や掻痒感を軽減し予後が良好となる中空糸膜の製膜を可能とした。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明の選択透過性分離膜の素材として用いられる疎水性高分子は何ら限定されるものではないが、例えば天然高分子としてセルロース、再生セルロース、セルロースジアセテート、セルローストリアセテート等のセルロース誘導体等が用いられ、合成高分子としてはポリシロキサン、ポリアミド、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリオレフィン、ポリアクリロニトリル、ポリメタクリレート等が用いられる。中でもポリスルホン、ポリエーテルスルホンといったポリスルホン系高分子は、加熱、放射線、および酸・アルカリ等の化学薬品いずれに対しても優れた耐性を示し、また、生体適合性にも優れることから好ましい。ポリスルホン系高分子はスルホン結合を有する樹脂の総称であり特に限定されないが、例を挙げると
【化１】
2005137996.tif 000002
【化２】
2005137996.tif 000003
で示される繰り返し単位をもつポリスルホン高分子やポリエーテルスルホン高分子がポリスルホン系高分子として広く市販されており、入手も容易なため特に好ましい。
【００１２】
本発明に用いられる親水性高分子としては、特に限定されることなく用いられるが、ポリスルホン系高分子と溶液中でミクロな相分離構造を形成するものが好ましく用いられる。ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、カルボキシルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等を挙げる事ができるが、安全性や経済性よりポリビニルピロリドンを用いるのが好ましい実施態様である。また、ここでいうポリビニルピロリドンには酢酸ビニル等のビニル系モノマーとの共重合体を含んでもよく、ポリスルホン系高分子との親和性や膜表面の親水性をコントロールする目的で使用できる。これらの分子量は特に限定しないが、残存して膜に適当な親水性を付与させるのには、重量平均分子量が少なくとも１０万以上のものを用いるのが好ましい。より好ましくは２０万以上、さらに好ましくは３０万以上、よりさらに好ましくは４５万以上である。
【００１３】
近年、透析液の清浄化（エンドトキシン除去）を積極的に行うことにより透析合併症のリスクが低減するなどの臨床効果が示唆されており、透析液作成用の水は限外ろ過、活性炭、逆浸透処理等を行ったものを用いるなど、透析施設のエンドトキシン除去に対する注目度が高まってきている。このような中で、日本透析医学会では透析液中のエンドトキシンレベルの目標として50EU/L以下を推奨している。しかし、透析液や透析液ライン、カプラーを清浄化したとしても血液が直接接触する透析器が菌で汚染されていると、患者血液中へのエンドトキシンの流入を抑えることはできない。血液透析器はγ線やエチレンオキサイドガス、オートクレーブ滅菌などが施され生菌は死滅しているが、菌の死骸やそのフラグメントであるエンドトキシンが生体内に混入すると発熱等の症状を引き起こすことがある。菌体内毒素は先述のように5EU/kgが最小発熱投与量と考えられている（参考文献１参照）。ここで、患者標準体重を60kgとすると300EUが体内に流入すると強い発熱作用を引き起こすことになる。現在、透析現場で使用される透析器の中で最大膜面積のものは2m2（中空糸膜内表面積基準）程度であるのでエンドトキシンの膜からの溶出は、150EU/m2以下とするのが好ましい。ばらつきの管理までを含めると100EU/m2以下にすることがより好ましく、患者のヘマトクリット値の上昇やエリスロポエチン投与量の削減といった臨床効果や治療コストの縮小を得る意味では50EU/m2以下がさらに好ましい。また、最近、エンドトキシンやペプチドグリカンの最小構成単位であるムラミルジペプチドは、ヒト抹消血単核球のサイトカイン産生を誘導することが示唆され、長期透析患者において汚染された透析液からの何らかの刺激が示唆されていることから30 EU/m2以下がさらに好ましい。
【００１４】
生理活性を有する糖脂質（エンドトキシン）には様々な化学種が存在するが、本発明で言うエンドトキシンとは、乾湿式紡糸工程における混入という観点から、主に工程水に存在する微生物由来の菌体内毒素を示すものである。菌体内毒素を容易に検出する手段として、各社よりキット販売されているエンドトキシン測定法を用いた。エンドトキシンはグラム陰性菌の毒素であり、グラム陽性菌等の検出には不向きであるが、これらの測定方法は煩雑で確立されておらず、エンドトキシンが増大すれば、その他菌体由来の不純物も同様に増大するという観点をもとにエンドトキシン測定で代表した。また、テストキットの特性上、反応するフラグメントはすべて検出しているものとみなすことができる。
【００１５】
膜からのエンドトキシン抽出量を前記した範囲にすることにより、膜自体から溶出するエンドトキシンが人体に対して悪影響を及ぼすことはないと考えられるが、水質管理の不十分な透析施設における透析液や不慮のトラブルにより汚染された透析液が使用された場合に、透析液から血液へのエンドトキシンの流入を抑制する目的で、膜自体にエンドトキシン透過抑制機能を持たせることが好ましい。エンドトキシンは、上述したようにグラム陰性桿菌の細胞壁外膜に存在するリポ多糖であり、その分子量は小さなものでは数千である。
【００１６】
本発明においては、後述するような紡糸条件の適正化により中空糸膜の細孔構造および親水性・疎水性バランスを制御し、透析液側から血液側へのエンドトキシンの透過阻止を図っている。しかし、現在の科学技術においても中空糸膜の細孔径を正確に測定することは困難であり、本発明では、牛血漿アルブミンの篩係数を0.3以下とすることでエンドトキシンの透過阻止能を代替している。より好ましい牛血漿アルブミンの篩係数は0.28以下、さらに好ましくは0.25以下である。牛血漿アルブミンの篩係数は低いほど（細孔径が小さいほど）、エンドトキシンの透過が少なくなるため好ましいが、透析合併症の原因物質と考えられているβ2ＭＧに代表されるような低分子タンパクの除去性を高いレベルで得るためには、牛血漿アルブミンの篩係数は0.01以上が好ましく、より好ましくは0.02以上、さらに好ましくは0.03以上である。
【００１７】
また、エンドトキシンは、先述したように分子量が数千のものから存在するので、中空糸膜の細孔径を制御するだけでは、例えば血液透析膜に使用する場合、β2MG（分子量11,600）に代表されるような低分子タンパク領域の除去とエンドトキシン（分子量数千〜）の透過阻止を両立することは不可能である。この点について発明者らは鋭意検討した結果、膜中の親水性高分子の存在状態を制御することにより、中空糸膜にエンドトキシン吸着能を付与し、細孔径に拠らずエンドトキシン透過阻止が図れることを見出し本発明に到達した。すなわち、エンドトキシンは疎水性材料に吸着しやすい特性を有するため、本願発明の中空糸膜においては、内表面近傍における親水性高分子の含量をＡ、膜全体の親水性高分子の含量をＢとしたとき、Ａ、Ｂの関係がＡ≧５質量％、かつＢ／Ａ≦０．４であることが好ましい。内表面近傍における親水性高分子の含量が５質量％以上であれば、プライミング性や溶質透過性が良くなるだけでなく、血中タンパク等の吸着が抑えられるため血液適合性や性能の経時安定性が良くなる。より好ましくは６質量％以上、さらに好ましくは７質量％以上、よりさらに好ましくは８質量％以上である。内表面近傍における親水性高分子の含量は多い方が前記特性がより向上する意味で好ましいが、多すぎると血液中への親水性高分子の溶出量が増える可能性があるため、２５質量％以下が好ましい。より好ましくは２３質量％以下、さらに好ましくは２１質量％以下、よりさらに好ましくは１９質量％以下である。また、Ｂ／Ａ≦０．４であるとは、中空糸膜の大部分を占める血液非接触部分には親水性高分子含量が少ないことを意味し、すなわち、これらの部分はより疎水性が強いため、エンドトキシンの吸着容量が大きくなり好ましい。また親水性高分子の含量が少ないため、血液側への溶出量を減らすことも可能となる。より好ましいＢ／Ａ比は０．３８以下、さらに好ましくは０．３６以下、よりさらに好ましくは０．３４以下である。しかし、Ｂ／Ａが小さすぎると、膜を透過する血中タンパクが吸着、堆積し、溶質除去性が低下する可能性があるので、０．１５以上が好ましく、０．１８以上がより好ましく、０．２１以上がさらに好ましく、０．２４以上がよりさらに好ましい。
【００１８】
なお、上記した表面近傍層の親水性高分子の含量は、表面赤外分光法（表面ＩＲ）によって測定したもので、数百ｎｍに相当する深度までの範囲に存在する含量の絶対値を評価したものである。また、親水性高分子の中空糸膜全体の親水性高分子の含量は、後述のごとく元素分析法で測定し算出したものである。
【００１９】
従来、長期透析合併症を軽減する目的で、その原因物質と考えられるβ2MGの除去に注目が集まっていたが、さらに、最近になって透析患者の多くが透析時掻痒感を訴え、その原因物質は特定できていないが、β2MGよりもさらに分子量の大きい分子量30,000程度の物質を除去することにより抑制できることが臨床的に経験されている。この意味からも、予後を良好に保つためにより分子量の大きな分子量30,000程度の物質を積極的に除去できる選択透過性分離膜の開発が望まれている。選択透過性分離膜の細孔径を拡大し、かつ有用物質であるアルブミンの漏出量を最小限に抑えるためには膜の細孔分布の幅を狭めることが必要である。しかしながら、膜の細孔分布の幅を小さくするには限界があり、分子量30,000程度の物質を除去できるほどの細孔を形成させると、アルブミン（分子量67,000）の漏出を完全に抑えることは困難である。例えば、特許文献５に記載されているような牛血漿アルブミンの篩係数が0.005以下（透過率0.5％以下）であるような中空糸膜では、細孔径が小さすぎてエンドトキシンの透過は抑制できるが、分子量30,000程度の物質を効率良く除去することは困難と思われる。さらに、敗血症を併発した患者に対して、このような細孔径の小さすぎる中空糸膜を使用した場合、血液中に敗血病巣から流出した原因菌を除去できないため有効な治療効果が期待できない。現在の科学技術においては、膜の細孔径を直接測定することは困難であり、また、分子量30,000程度の血漿タンパク質を容易に入手することが困難なため、本願発明においては、β2MGのクリアランスとアルブミン篩係数との関係によって、膜の有効細孔径を規定した。すなわち、膜面積1.5m2のモジュールで測定したβ2MGの除去性能（β2MGクリアランス）が40mL/min以上あれば掻痒感低減などの臨床効果を発現できることを確認した。
【００２０】
前記特性を有する選択透過性分離膜を得るための好ましい実施様態の一例として、中空糸膜型選択透過性分離膜について以下に例示する。紡糸原液として、疎水性高分子にポリスルホン(PS)またはポリエーテルスルホン(PES)、親水性高分子にポリビニルピロリドン（PVP）を用いた場合について詳細に説明する。製膜原液はPSまたはPES、PVPおよびそれらの共通溶剤からなる。溶剤はＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド（DMAc）、ジメチルスルホキシド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（NMP）が挙げられるが、これらを単独あるいは任意の割合で混合して使用するのが好ましい。安価であり、溶剤自体の安全性が高い点でDMAc、NMPがより好ましい。また、ミクロ相分離を誘発させる目的で、添加剤として少量の水や塩類を加えても構わない。塩類としては、臭化リチウム等の無機塩を使用するのが好ましい。さらに、中空状に製膜するためには、適切な粘度が必要であるが、そのために好ましい組成は、ポリスルホン系高分子が15〜40質量％、PVPが0〜30質量％であり、残りが溶剤および/または添加剤である。
【００２１】
上記得られた紡糸原液と内部凝固液を２重管紡糸ノズルより吐出し、エアギャップ部を通過させ、凝固浴に導いて中空糸膜を得る際、紡糸原液組成、内部凝固液とエアギャップ部長さ・雰囲気、外部凝固液条件は膜の透過性能を制御するための主要なアイテムである。本発明の透過性能を得るための詳細な手段は後述するが、本発明に至るには３つのポイントからなる。すなわち、
1)工程での菌（エンドトキシン）の混入を抑制する。
2)アルブミンの篩係数を調節する。
3)β2ＭＧのクリアランスを調節する。
【００２２】
本発明の中空糸膜を得るための第1のポイントは、製膜工程中での菌体およびエンドトキシンのコンタミを防ぐために、使用する水の汚染を阻止するのが好ましい。菌体およびエンドトキシンのコンタミを抑制する手段として、具体的には製膜作業をクラス100,000のクリーンルーム内で実施することが好ましい。また、製膜に使用する例えば洗浄機、乾燥機、カセ捲き機、ポリエチレンフィルム等、中空糸膜に接触する装置、部材は使用都度、殺菌力の強い、70〜90wt%のエタノール水溶液を用いて殺菌消毒するのが好ましい。作業者はUV殺菌を施した手袋を着用して製膜作業を行うのも好ましい態様である。製膜工程で使用する水はすべて逆浸透（RO）膜システムを透過させ、後述するエンドトキシン測定におけるエンドトキシン量が検出感度以下のRO水を使用するのが好ましい。また、菌に汚染された液滴の飛沫が床面から製膜装置や部材に付着することを防止するために、製膜工程機器類はすべて床から50cm以上の高さを保って設置することも好ましい態様である。乾燥に用いるエアーはクリーンルームと同様にHEPAフィルターを通して浄化したものを用いる。以上のように徹底した製膜工程中での菌体およびエンドトキシンのコンタミ阻止により目的とする中空糸膜を得ることが可能となる。
【００２３】
また、菌体はその起源により生育最適条件は異なるが、通常は３７℃付近、湿度の高い状態での生育が顕著である。そのため、中空糸膜製造後よりモジュール組立て・滅菌処理までの乾燥した膜の保存条件としては、それらの条件を回避することが好ましい実施様態である。例えば、室温（２５℃）で相対湿度が５０Rh％以下で保存することが好ましく、作業性の面から２５〜５０Rh％がさらに好ましい実施様態である。また、低温下に保存することも好ましい実施様態であり、２０℃以下で保存することが好ましい。冷凍保存では一部残存した水の体積膨張による膜構造の破壊が懸念されることと、設備面でコストを要することから０℃を超える範囲が好ましい実施様態である。管理が容易なことから５℃〜１５℃がより好ましい実施様態である。また、好気性菌の抑制として保存系内の酸素濃度を低減することも好ましい実施様態である。特に一部の嫌気性菌は窒素を繁殖要因としている場合が多いので、保存系内をアルゴン置換することがより好ましい実施様態である。さらに上記を組み合わせ、保存系内をアルゴン雰囲気とし、低温保存することが制菌効果が著しく期待できる点で好適な実施様態である。
【００２４】
本発明の選択透過性分離膜を得るための第2のポイントは、アルブミンの篩い係数を0.01〜0.3とするために血液接触側の細孔径、細孔分布、親水性高分子含有量を最適化するのが好ましい。血液接触側の細孔径、細孔分布をコントロールする手段としては、紡糸原液組成、ノズル温度、内部凝固液組成の組合せによるのが好ましい。具体的には、紡糸原液組成は疎水性高分子／親水性高分子／溶媒／非溶媒＝10〜30／0〜15／25〜85／0〜10が好ましい。
【００２５】
紡糸原液中の疎水性高分子含量が少なすぎると、選択透過性分離膜の細孔径をアルブミンの透過を抑制できる程度に小さく抑えることが難しいことがある。逆に、疎水性高分子含量が多すぎると空隙率を高めることが困難となり、β2MGのクリアランスが不足することがある。また、紡糸原液中の親水性高分子の含量が少なすぎるとエンドトキシン透過を抑制する効果は大きくなるが、選択透過性分離膜の疎水性が強すぎるため血中タンパク質の吸着量が増え、所期のアルブミン篩い係数やβ2MGクリアランスを得ることが困難となる可能性がある。逆に、親水性高分子含量が多すぎると中空糸膜の強伸度が低下するとか、エンドトキシンが透過しやすくなるなどの問題が発生する可能性がある。したがって、紡糸原液中の疎水性高分子／親水性高分子／溶媒／非溶媒＝12〜28／1〜14／28〜82／0〜9がより好ましく、14〜26／2〜13／30〜80／0〜8がさらに好ましく、15〜25／3〜12／32〜78／0〜8がよりさらに好ましい。また、紡糸原液中の親水性高分子と疎水性高分子の比率は５５質量％以下が好ましく、５０質量％以下がより好ましく、４５質量％以下がさらに好ましく、４０質量％以下がよりさらに好ましく、３５質量％以下が特に好ましい。該比率が多すぎると中空糸膜中の親水性高分子の含量が多くなるため、血液透析時等に溶出しやすくなるとか、透析液側から血液側へエンドトキシンが透過しやすくなるなどの問題が生じることがある。逆に、該比率が少なすぎると、中空糸膜の内表面近傍の親水性高分子の含量が少なくなるため、血液適合性や透析性能が低下することがある。したがって、該比率は５質量％以上が好ましく、７質量％以上がより好ましく、９質量％以上がさらに好ましく、１１質量％以上がよりさらに好ましい。
【００２６】
ノズル温度は30〜80℃が好ましい。ノズル温度が低すぎると、紡糸原液の粘度が高くなるため吐出安定性が低下するとか、外気温との差が小さくなるためノズル温度を安定化させるのが難しくなるなどの問題が起こることがある。逆に、ノズル温度が高すぎると紡糸原液の粘度が低くなるため曳糸性が低下し紡糸安定性、ひいては中空糸膜長さ方向の性能安定性が低下する可能性がある。したがって、ノズル温度は35〜75℃がより好ましく、40〜70℃がさらに好ましい。
【００２７】
内部凝固液には水と溶剤の混合液を用いるのが好ましく、その内部凝固液濃度は20〜60質量％が好ましい。内部凝固液濃度は低い方が中空糸膜内面側の細孔径が小さくなるが、アルブミン篩い係数を0.01以上に高めることやβ2MGクリアランスを高めることが難しくなることがある。逆に、内部凝固液濃度が高すぎると緻密層の細孔径が大きくなりアルブミン篩い係数を0.3以下に抑えることやエンドトキシンの透過を抑制することが難しくなることがある。したがって、内部凝固液濃度は25〜55質量％がより好ましく、30〜50質量％がさらに好ましい。
【００２８】
本発明の中空糸膜を得るための第３のポイントは、β2MGのクリアランスを４０mL／min（1.5m2）以上とするために、先述したアルブミン篩い係数をコントロールするための手段に加えてエアギャップ条件、ノズル径、外部凝固液条件を適正化するのが好ましい。具体的には、エアギャップ部は外気と遮蔽する部材で囲むのが好ましい。また、エアギャップ長さは100〜1000mmが好ましい。ノズルは紡糸原液吐出孔の内径が150〜400μmである二重円管状ノズルを用いるのが好ましい。外部凝固液濃度は0〜50質量％が好ましい。外部凝固液温度は20〜80℃が好ましい。
【００２９】
エアギャップ部を外気と遮蔽する部材で囲むことにより、エアギャップ内部は紡糸原液からの溶媒蒸気と外部凝固液からの溶媒および水の蒸気で満たされる。すなわち、エアギャップ内部の溶媒および水蒸気量をコントロールすることにより、中空糸膜外表面の細孔径および開孔率、親水性高分子含量をコントロールすることができる。また、エアギャップ長さが短いと中空糸膜外表面の開孔径が小さくなるためエンドトキシンの逆流入は減少するが、β2MGクリアランスを向上するのが難しくなることがある。逆に、エアギャップ長さが長いと外表面孔径が拡大するためβ2MGクリアランスは向上するが、空隙率が高くなりすぎ中空糸膜強度が不足する可能性がある。したがって、エアギャップ長さは150〜900mmがより好ましく、200〜800mmがさらに好ましく、250〜750mmがよりさらに好ましい。
【００３０】
本発明においては、内部凝固液として紡糸原液に対して凝固性の液体を用いることを特徴としている。このような紡糸原液に対して凝固性を有する液体を用いる場合、中空糸膜の内径はノズルの紡糸原液吐出孔の内径により決定される。紡糸原液と内部凝固液はノズルより同時に吐出されるため、紡糸原液はノズルより吐出された直後より凝固が開始される。このとき、紡糸原液に過度の緊張、延伸がかかると凝固した部分の細孔に変形または亀裂が生じることがある。細孔に変形や亀裂が生じると細孔分布が拡大し、ひいてはシャープな分画特性を得ることが困難となる。また同様の理由で、紡糸原液が完全に凝固および相分離を完了した後に実質的に延伸をかけないのが好ましい。実質的に延伸をかけないとは、中空糸膜が紡糸工程中を走行中に弛みが発生しない程度のテンション以上に引っ張らないことをいう。一般的な血液浄化用中空糸膜の内径は150〜250μm程度であり、二重円管状ノズルの紡糸原液吐出孔の内径はより好ましくは160〜350μm、さらに好ましくは170〜300μm、よりさらに好ましくは180〜250μmである。
【００３１】
外部凝固液濃度が高すぎると、エアギャップ部を通過して外部凝固液に浸漬された中空糸膜の外表面側の相分離が成長し開孔径および開孔率が高くなりすぎることがある。すなわち、中空糸膜の強度が低下したり、エンドトキシンの逆流入が増大する課題につながることがある。逆に、外部凝固液濃度が低すぎると、相分離よりも凝固が支配的となり支持層から外表面にかけての細孔径が小さくなりすぎることがある。この場合、透析液側から血液側に向けてのエンドトキシンの逆流入は減少するが、膜断面方向のβ2MGの透過抵抗が大きくなるためクリアランスが向上しない可能性がある。したがって、外部凝固液濃度は3〜40質量％がより好ましく、5〜35質量％がさらに好ましく、7〜30質量％がよりさらに好ましい。
また、外部凝固液温度が高すぎると、エアギャップ内部の溶媒蒸気、水蒸気がミスト状になり、それが紡糸原液に付着したところと付着しなかったところで凝固および相分離の状態が変わるため、外表面孔径や孔構造に斑を生じることがある。すなわち、細孔径に斑を生じることとなり、シャープな分画特性を得ることができなくなる可能性がある。逆に、外部凝固液温度が低すぎると、外表面側の溶媒交換が遅くなるため相分離が成長せず、外表面側の開孔径および開孔率が小さくなることがある。すなわち、β2MGクリアランスを向上するのが難しくなる可能性がある。したがって、外部凝固液温度は30〜80℃がより好ましく、40〜75℃がさらに好ましく、50〜75℃がよりさらに好ましい。
【００３２】
製膜後の中空糸膜は、湿潤状態のまま綛に巻き取った後、３，０００〜２０，０００本の束にする。ついで、得られた中空糸膜束を洗浄し、過剰の溶媒、親水性高分子を除去するのが好ましい。中空糸膜束の洗浄方法として、本発明では、室温〜５０℃、１０〜４０vol％のエタノールまたはイソプロパノール水溶液に中空糸膜束を浸漬して処理するのが好ましい。具体的には、中空糸膜束を過剰のエタノールまたはイソプロパノール水溶液に浸漬し室温〜５０℃で１５〜６０分処理した後、中空糸膜束を取り出し遠心脱液を行う。この操作を前記アルコール水溶液を更新しながら３、４回繰り返して洗浄・脱液処理を行う。処理温度が低すぎる場合には、洗浄回数を増やす等が必要になりコストアップに繋がることがある。また、処理温度が高すぎると親水性高分子の分解が加速し、洗浄しても親水性高分子の溶出量が低下しないことがある。上記洗浄を行うことにより、中空糸膜中の菌体およびエンドトキシンを除去することができるだけでなく、中空糸膜全体の親水性高分子の含量の適正化を行い、エンドトキシン透過抑制や親水性高分子の溶出量を減ずることが可能となる。
【００３３】
アルブミン篩係数は中空糸膜の細孔径の指標であり、β2MGクリアランスは細孔数、曲路率の指標と置き換えることができる。ここで、膜の溶質透過特性は、膜の細孔径、細孔数、細孔曲路率の関数である。すなわち、細孔径はアルブミン（ストークス半径３５Å）が透過しない程度まで大きくし、かつ膜の空隙率を大きくし（細孔数を増やし）、膜厚を薄くすることによりβ2MG（ストークス半径１６Å）の透過性を向上することが可能である。前記製膜条件を取ることにより中空糸膜の空隙率は５０％以上とすることが可能である。空隙率は高い方が溶質除去の面より好ましいが、高すぎると膜強度を保てなくなることがあるので、８５％以下が好ましい。より好ましい空隙率は５５〜８５％、さらに好ましくは６０〜８５％である。また膜厚は１０〜５０μｍが好ましい。膜厚は前記理由により薄いほうが好ましいが、薄すぎると膜強度を保てなくなることがあるので、より好ましくは１５μm以上、さらに好ましくは２０μm以上、よりさらに好ましくは２５μm以上である。膜厚が厚すぎると膜中エンドトキシンや過剰の親水性高分子の洗浄除去性が低下することがあるので、より好ましくは４５μm以下、さらに好ましくは４０μm以下、よりさらに好ましくは３５μm以下である。
【実施例】
【００３４】
以下、本発明の有効性を実施例を挙げて説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお、以下の実施例における物性の評価方法は以下の通りである。
【００３５】
１、膜面積の計算
透析器の膜面積は中空糸の内径基準として求める。
A＝n×π×d×L
ここで、nは透析器内の中空糸本数、πは円周率、dは中空糸の内径（m）、Lは透析器内の中空糸の有効長（m）である。
【００３６】
２、エンドトキシン濃度の測定
（サンプル調製）
サンプルの調製はすべてクリーンルーム内で実施した。
１）中空糸膜束の場合
アルコールにより予め殺菌消毒されたポリエチレンフィルムに所定の膜面積となるような中空糸膜束を装填したものを使用した。
２）モジュール形状の場合
アルコールにより予め殺菌消毒されたパイプカッターで両端を切除し、中空糸膜束を取り出す。この中空糸膜束をアルコールにより予め殺菌消毒されたポリエチレンフィルムに所定の膜面積となるような中空糸膜束を装填したものを使用した。
（サンプルの調製）
サンプル調製に使用する器具類はすべて121℃×20分のオートクレーブ殺菌を実施した後、使用した。サンプル抽出液には日本薬局方注射用水・大塚蒸留水を使用した。中空糸膜束の膜面積1m2（内径基準）あたり500mLの注射用水を広口の1L三角フラスコに用意し、25℃に調温し、UV殺菌灯により殺菌された手袋でポリエチレンフィルムを持ち、中空糸膜束には一切触れないように注射用水中に中空糸膜を投入する。このままの状態で30分おきに軽く、攪拌し、25℃で２時間抽出した。
（サンプルの測定）
このようにして得られた抽出液の上澄み液を用いてエンドトキシン濃度を測定した。エンドトキシン濃度はリムルスESIIテストワコー（和光純薬工業社製）を用い、取扱説明書の方法に従って検量線を作成し、分析を行った。
【００３７】
３、牛血漿アルブミンの篩係数の測定
中空糸膜束の場合はモジュールケースに装填後、両端をウレタン樹脂により封止し、切削により両端を開口し中空糸膜モジュールの形態としたのちに測定を実施した。サンプルはγ線滅菌されていてもされていなくともどちらでもよい。
（１％牛血漿アルブミン溶液の調製）
Ａ液；純水3Lに対してNa2HPO4・12H2Oを53.72gとNaClを26.30g溶解する。
Ｂ液；純水3Lに対してKH2PO4を20.42gとNaClを26.30g溶解する。
Ａ液にＢ液を添加し、pH=7.5±0.1にあわせる。
このリン酸緩衝液3Lに牛血漿アルブミン（和光純薬社製）30gを溶解させる。溶解後、再度1N-NaOHを用いてpH＝7.5±0.1に調製する。
（モジュールの準備）
モジュールの透析液側流路に純水500mL/minで5分間通液し、ついで血液側流路に200mL/minで5分間通液した。ついでモジュールの透析液側流路に先のリン酸緩衝液500mL/minで5分間通液し、ついで血液側流路に200mL/minで5分間通液した。その後血液側から透析液側にろ過をかけながら3分間通液した。
（測定）
測定液回路を血液側に接続し、透析液側のプライミング液（リン酸緩衝液）を廃棄する。37℃の恒温槽中に置き、透析液側を封止し、血液側を200mL/minで1分間流し、血液側に残っていたプライミング液を除去する。ついで透析液入り口部に回路を接続し、血液側200mL/min、透析液入り口部につないだ濾過回路の流量を30mL/minに設定し、血液側透過液、濾液ともに試験液に戻す循環系で試験を実施する。循環開始から15分後の試験液、血液側透過液、濾液をそれぞれ採取した。この採取したサンプルを純水で10倍希釈し（濾液は希釈なしが好ましい）280nmの波長で分光器により吸光度を測定した。アルブミンの篩係数はそれぞれの吸光度より
SCalb＝2×Cf／（Cb＋Co）
で算出した（ここでCfは濾液の吸光度、Cbは試験液の吸光度、Coは血液側透過液の吸光度を表し、希釈した場合にはそれぞれの希釈倍率を乗じるものとする）。
【００３８】
（β2ＭＧのクリアランス測定）
β2ＭＧクリアランス測定用に内径基準で膜面積1.5m2の中空糸膜モジュール（透析器）を準備する。総タンパク質濃度7.0±0.5g/dLに調製、37℃に保温したACD添加牛血漿を血液側流量200mL/min.で流し、市販透析液を500mL/min.、濾過流量15mL/min.で流す。透析器出口血漿は濾過流量分のACD添加生理食塩水とともに、元の血漿の入ったビーカーに戻すリサイクル回路とする。牛血漿にはヒトβ2MGを0.05〜0.1mg/Lの濃度になるように添加する。透析開始から5min.間隔で20min.間、血液入口、出口、透析液出口中のβ2MG濃度を測定する。クリアランスは以下の式で計算する。
クリアランス(β2MG)＝200×［（200×CBi）−(185×CBo)]／（200×CBi）
ここで、CBi；血液入口部濃度、CBo；血液出口部濃度。また、以下の式で計算される%MBEが±50%を超える場合はデータとして採用しない。
%MBE＝100×（MB−MD）／MD
ここでMB；（200×CBi）−(185×CBo)、MD；515×CDoである。
【００３９】
（内表面近傍の親水性高分子含量の測定）
親水性高分子としてＰＶＰを用いた場合の測定法を例示する。測定は赤外線吸収法分析で行った。上記した親水性高分子の内、外表面の最表層における存在割合と同様の方法で準備した測定サンプルを使用し、表面近傍の測定はＡＴＲ法、膜全体の測定は透過法で行った。ＡＴＲ法は、内部反射エレメントとしてダイヤモンド４５°を使用した方法により赤外吸収スペクトルを測定した。測定にはＳＰＥＣＴＲＡ  ＴＥＣＨ社製ＩＲμｓ／ＳＩＲＭを使用した。赤外吸収スペクトルにおける１６７５ｃｍ-1付近のＰＶＰのＣ＝Ｏに由来するピークの吸収強度Ａｐと１５８０ｃｍ-1付近のポリスルホン系高分子に由来するピークの吸収強度Ａｓの比Ａｐ／Ａｓを求めた。ＡＴＲ法においては吸収強度が測定波数に依存しているため、補正値としてポリスルホン系高分子のピーク位置υｓおよびＰＶＰのピーク位置υｐ（波数）の比υｐ／υｓを実測値にかけた。次の式で血液接触面の近傍層のＰＶＰの存在割合を算出した。
表面近傍層での親水性高分子の存在割合（質量％）＝Ｃａｖ×Ａｐ／Ａｓ×υｐ／υｓ
ただし、Ｃａｖは後述の元素分析法で求めたＰＶＰ含有率である。
【００４０】
（中空糸膜全体での親水性高分子含有率の測定）
親水性高分子としてＰＶＰを用いた場合の測定法を例示する。サンプルを、真空乾燥器を用いて、８０℃で４８時間乾燥させ、その１０ｍｇをＣＨＮコーダー（ヤナコ分析工業社製、ＭＴ−６型）で分析し、窒素含有量からＰＶＰの質量割合を下記式で計算し求めた。
ＰＶＰの質量割合（質量％）=窒素含有量（質量％）×１１１／１４
【００４１】
（エンドトキシン阻止性能の測定）
エンドトキシン除去性能は以下のように測定した。中空糸膜を所定本数充填したモジュールを準備した。モジュールの中空糸外側にFeed液入口を１箇所、モジュールの中空糸内側に濾液出口を一箇所設け、測定前に予め純水でプライミングし、モジュール内の空気を除去した後37℃で保温した。Feed側に、37℃の純水を、膜面積1.5m2あたり500mL/minの割合で送液し、全量ろ過した。回路やケースに付着したエンドトキシンによる測定誤差を無くすため、５時間ろ過を続けた。エンドトキシン濃度を１万〜１０万ＥＵ／Ｌになるように純水に溶解したエンドトキシン水溶液を、中空糸膜面積1.5m2あたり、500mL/minの濾過速度で、10Lろ過させた時の濾液中のエンドトキシン濃度を測定した。エンドトキシン濃度は、リムルステストワコー（和光純薬）を使用して測定した。ろ液中エンドトキシン濃度が検出感度以下を合格とした。
【００４２】
（実施例１）
ポリエーテルスルホン(住化ケムテックス社製、スミカエクセル５２００Ｐ)１８．５質量％、ポリビニルピロリドン（BASF社製コリドンK−90）３．０質量％、ジメチルアセトアミド(DMAc)７４．５質量％、RO水４．０質量％を均一に溶解した。疎水性高分子に対する親水性高分子の比率は１６質量％であった。得られた紡糸原液を内部凝固液として４０質量％DMAc水溶液とともに、６５℃に加温したチューブインオリフィスノズルから吐出し、紡糸管により外気と遮断された５００mmの乾式部を通過後、７５℃、２０質量％のDMAc水溶液中で凝固させ、湿潤状態のまま綛に捲き上げた。該中空糸膜約10,000本の束の周りに中空糸束側表面が７０vol％エタノール水溶液により殺菌消毒されたポリエチレン製のフィルムを巻きつけた後、27cmの長さに切断した。得られた中空糸膜束を４０℃×３０vol％のイソプロパノール（IPA）水溶液に３０分間浸漬した。この操作を液を交換し２回行いエンドトキシンと過剰の親水性高分子を洗浄除去した。洗浄後の中空糸膜束をＲＯ水で軽くすすぎIPAを除去した後、通風乾燥機に入れ、４５℃で１２時間かけて乾燥させた。なお、原料投入以外の製膜工程は全てクラス100,000の規格に該当するクリーンルーム内で行い、機器はすべて床上１５０cmに設置し、水は生菌およびエンドトキシンが検出感度以下のＲＯ水を使用した。乾燥機内に流入する空気には直前にHEPAフィルターを設置して清浄化を実施した。使用機器はすべて使用前に７０vol％エタノール水溶液で殺菌消毒して使用した。作業者はUV殺菌を実施した手袋を着用して作業を実施した。得られた中空糸膜束は、市販のアルミラミネート袋（エチレンオキサイドガス（ＥＯＧ）滅菌済み）に入れ、袋内をアルゴン置換したのち封止し、７℃の冷蔵庫内で3ヶ月保管した。
【００４３】
保管後の中空糸膜を用いてエンドトキシン濃度、内表面近傍および全体の親水性高分子含量、空隙率、膜厚を測定した。結果を表１に示す。
【００４４】
また、保管後の中空糸膜束をモジュールに組み上げ、牛血漿アルブミンの篩係数、β2MGのクリアランス、エンドトキシン透過を測定した。結果を表１に示す。
【００４５】
（比較例１）
外部凝固液槽の高さを床上３０cm、中空糸膜束の洗浄なし、フィルム・機器の殺菌消毒なし、水をイオン交換水にした以外は実施例１と同様の方法で乾燥中空糸膜束を得た。得られた中空糸膜束は、市販のアルミラミネート袋に入れ、７℃の冷蔵庫内で3ヶ月間保管した。
【００４６】
保管後の中空糸膜を用いてエンドトキシン濃度、内表面近傍および全体の親水性高分子含量、空隙率、膜厚を測定したところ、エンドトキシン濃度が２５０EU/m2と高い値を示した。これは製膜において、生菌およびエンドトキシンレベルの高い水を使用したことに加えて、乾燥前の洗浄を行わなかったため、多量のエンドトキシンが膜中に残存したものと思われる。その他の結果を表１に示す。
【００４７】
また、保管後の中空糸膜束をモジュールに組み上げ、牛血漿アルブミンの篩係数、β2MGのクリアランスを測定した。膜中のエンドトキシンレベルが高い以外は特に大きな問題はなかった。結果を表１に示す。
【００４８】
（実施例２）
ポリスルホン(アモコ社製、Ｐ−３５００)１７．５質量％、ポリビニルピロリドン（BASF社製コリドンK−60）９．０質量％、ジメチルアセトアミド(DMAc)７２．５質量％、RO水１．０質量％を均一に溶解した。疎水性高分子に対する親水性高分子の比率は５０質量％であった。得られた紡糸原液を内部凝固液として３５質量％DMAc水溶液とともに、５５℃に加温したチューブインオリフィスノズルから吐出し、紡糸管により外気と遮断された６５０mmの乾式部を通過後、５０℃、１０質量％のDMAc水溶液中で凝固させ、湿潤状態のまま綛に捲き上げた。該中空糸膜約10,000本の束の周りに中空糸束側表面が７０vol％エタノール水溶液により殺菌消毒されたポリエチレン製のフィルムを巻きつけた後、27cmの長さに切断した。得られた中空糸膜束を３０℃×３０vol％のエタノール水溶液に３０分間浸漬した。この操作を液を交換し３回行いエンドトキシンと過剰の親水性高分子を洗浄除去した。洗浄後の中空糸膜束をＲＯ水で軽くすすぎエタノールをＲＯ水に置換した後、通風乾燥機に入れ、４０℃で１６時間かけて乾燥した。なお、原料投入以外の製膜工程は全てクラス100,000の規格に該当するクリーンルーム内で行い、機器はすべて床上１５０cmに設置し、水は生菌およびエンドトキシンが検出感度以下のＲＯ水を使用した。乾燥機内に流入する空気には直前にHEPAフィルターを設置して清浄化を実施した。使用機器はすべて使用前に７０vol％エタノール水溶液で殺菌消毒して使用した。作業者はUV殺菌を実施した手袋を着用して作業を実施した。得られた中空糸膜束は、市販のポリエチレン袋（EOG滅菌済み）に入れ、袋内をアルゴン置換した後７℃の冷蔵庫内で3ヶ月間保管した。
【００４９】
保管後の中空糸膜を用いてエンドトキシン濃度、内表面近傍および全体の親水性高分子含量、空隙率、膜厚を測定した。結果を表１に示す。
【００５０】
また、保管後の中空糸膜束をモジュールに組み上げ、牛血漿アルブミンの篩係数、β2MGのクリアランス、エンドトキシン透過を測定した。結果を表１に示す。
【００５１】
（比較例２）
内部凝固液濃度を６５質量％、外部凝固液槽の高さを３０cm、中空糸膜束の洗浄なし、水はイオン交換水を使用した以外は、実施例２と同様の方法で製膜を行い乾燥中空糸膜束を得た。得られた中空糸膜束は、市販のポリエチレン袋（ＥＯＧ滅菌済み）に入れ、7℃の冷蔵庫内で3ヶ月間保管した。
【００５２】
保管後の中空糸膜を用いてエンドトキシン濃度、内表面近傍および全体の親水性高分子含量、空隙率、膜厚を測定したところ、エンドトキシン濃度が２９０EU/m2と高い値を示した。これは製膜において、生菌およびエンドトキシンレベルの高い水を使用したことに加えて、乾燥前の洗浄を行わなかったため、多量のエンドトキシンが膜中に残存したものと思われる。その他の結果を表１に示す。
【００５３】
また、保管後の中空糸膜束をモジュールに組み上げ、牛血漿アルブミンの篩係数、β2ＭＧクリアランス、エンドトキシン透過を測定した。β2ＭＧクリアランスは高いが、アルブミン篩係数も０．３７と高い値を示した。また、エンドトキシンの透過が観察された。内部凝固液濃度を高めたため、中空糸膜内表面だけでなく、全体的に細孔径が大きくなりすぎたものと思われる。また、膜中親水性高分子含量が高いためエンドトキシンが透過しやすくなったものと思われる。その他の結果を表１に示す。
【００５４】
（実施例３）
ポリエーテルスルホン(住化ケムテックス社製スミカエクセル4800Ｐ)１８．０質量％、ポリビニルピロリドン（BASF社製コリドンK−90）６．０質量％、ジメチルアセトアミド(DMAc)７３．０質量％、RO水３．０質量％を均一に溶解した。疎水性高分子に対する親水性高分子の比率は３３質量％であった。得られた紡糸原液を内部凝固液として３０質量％DMAc水溶液とともに、５０℃に加温したチューブインオリフィスノズルから吐出し、紡糸管により外気と遮断された４００mmの乾式部を通過後、４５℃、２０質量％のDMAc水溶液中で凝固させ、湿潤状態のまま綛に捲き上げた。該中空糸膜約10,000本の束の周りに中空糸束側表面が７０vol％エタノール水溶液により殺菌消毒されたポリエチレン製のフィルムを巻きつけた後、27cmの長さに切断した。得られた中空糸膜束を４０℃×４０vol％のエタノール水溶液に３０分間浸漬した。この操作を液を交換し２回行いエンドトキシンと過剰の親水性高分子を洗浄除去した。洗浄後の中空糸膜束をＲＯ水で軽くすすぎエタノールをＲＯ水に置換した後、通風乾燥機に入れ、６０℃で９時間かけて乾燥した。なお、原料投入以外の製膜工程は全てクラス100,000の規格に該当するクリーンルーム内で行い、機器はすべて床上１５０cmに設置し、水は生菌およびエンドトキシンが検出感度以下のRO水を使用した。乾燥機内に流入する空気には直前にHEPAフィルターを設置して清浄化を実施した。使用機器はすべて使用前に７０vol％エタノール水溶液で殺菌消毒して使用した。作業者はUV殺菌を実施した手袋を着用して作業を実施した。得られた中空糸膜束は、市販のポリエチレン袋（EOG滅菌済み）に入れ、袋内をアルゴン置換した後、37℃の倉庫内で1ヶ月間保管した。
【００５５】
保管後の中空糸膜を用いてエンドトキシン濃度、内表面近傍および全体の親水性高分子含量、空隙率、膜厚を測定した。結果を表１に示す。
【００５６】
また、得られた中空糸膜束をモジュールに組み上げ、牛血漿アルブミンの篩係数、β2MGのクリアランスを測定した。結果を表１に示す。
【００５７】
（比較例３）
ポリスルホン(アモコ社製Ｐ−3500)２０．０質量％、ポリビニルピロリドン（BASF社製コリドンK−90）１．０質量％、ジメチルアセトアミド(DMAc)７６．０質量％、RO水３．０質量％を均一に溶解した。疎水性高分子に対する親水性高分子の比率は０．５質量％であった。得られた紡糸原液を内部凝固液としてＲＯ水とともに、５０℃に加温したチューブインオリフィスノズルから吐出し、紡糸管により外気と遮断された４００mmの乾式部を通過後、４５℃、２０質量％のDMAc水溶液中で凝固させ、湿潤状態のまま綛に捲き上げた。該中空糸膜約10,000本の束の周りに中空糸束側表面が７０vol％エタノール水溶液により殺菌消毒されたポリエチレン製のフィルムを巻きつけた後、27cmの長さに切断した。得られた中空糸膜束を４０℃×４０vol％のエタノール水溶液に３０分間浸漬した。この操作を液を交換し２回行いエンドトキシンと過剰の親水性高分子を洗浄除去した。洗浄後の中空糸膜束をＲＯ水で軽くすすぎエタノールをＲＯ水に置換した後、通風乾燥機に入れ、６０℃で９時間かけて乾燥した。なお、製膜工程は全てクリーンルーム外で行い、機器はすべて床上１５０cmに設置し、水はイオン交換水を使用した。乾燥機内に流入する空気はHEPAフィルターで処理しないものを使用した。使用機器はすべて使用前に７０vol％エタノール水溶液で殺菌消毒して使用した。作業者はUV殺菌を実施した手袋を着用して作業を実施した。得られた中空糸膜束は、市販のポリエチレン袋（EOG滅菌済み）に入れ、37℃の倉庫内で1ヶ月間保管した。
【００５８】
得られた中空糸膜を用いてエンドトキシン濃度、内表面近傍および全体の親水性高分子含量、空隙率、膜厚を測定したところ、エンドトキシン濃度が１３０EU/m2と高い値を示した。これは製膜において、中空糸膜の製造をクリーンルーム外で行ったことと乾燥に用いる空気を除菌処理しなかったため、乾燥中に菌が付着し、保存中に増殖したものと思われる。その他の結果を表１に示す。
【００５９】
また、得られた中空糸膜束をモジュールに組み上げ、牛血漿アルブミンの篩係数、β2MGのクリアランスを測定した。アルブミン篩係数は０．００３と小さい値を示し、β2MGのクリアランスも２２mL/min（1.5m2）と低値であった。これは、内部凝固液濃度を低くしたため中空糸膜内表面の細孔径が小さくなりすぎたため溶質の透過抵抗が大きくなり、アルブミン篩係数とβ2MGの値が小さくなったものと思われる。その他の結果を表１に示す。
【００６０】
【表１】
2005137996.tif 000004
【産業上の利用可能性】
【００６１】
本発明の選択透過性分離膜は、不純物として膜に含まれるエンドトキシンの溶出を減らし、生体に対する刺激性が軽減された選択透過性分離膜を提供することができる。従って、産業界に寄与することが大である。