(57)【要約】      （修正有）【課題】新規フェノール性化合物、この化合物の効率的な製造方法、及びこの化合物の新しい用途の提供。【解決手段】β−アルブチン又はα−アルブチンと、ゲンチジン酸又はプロトカテキュ酸とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ等より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、新規フェノール化合物又はそのカルボン酸塩を製造する工程と；この化合物又はそのカルボン酸塩を分子内でエステル化させる工程とを含む。【選択図】図なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の一般式（１）
【化１】
2005281247.tif 000056
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。）
で表される化合物と、下記一般式（２）
【化２】
2005281247.tif 000057
（式中、２個の−OHは、−COOHが結合している位置に対して２位及び５位又は３位及び４位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、以下の一般式（３）
【化３】
2005281247.tif 000058
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩を製造する方法。
【請求項２】
下記の一般式（１）
【化４】
2005281247.tif 000059
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。）
で表される化合物と、下記一般式（２）
【化５】
2005281247.tif 000060
（式中、２個の−OHは、−COOHが結合している位置に対して２位及び５位又は３位及び４位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、以下の一般式（３）
【化６】
2005281247.tif 000061
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩を製造する工程と、
上記一般式（３）で表される化合物又はそのカルボン酸塩のフェノール性水酸基の１又は２以上を炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸と反応させることによりエステル化し、及び／又はカルボキシル基を炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコールと反応させることによりエステル化する工程と
を含む、下記一般式（４）
【化７】
2005281247.tif 000062
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。但し、R1、R2、R3及びR4が同時に水素原子又はアルカリ金属原子である化合物を除く。）
で表される化合物の製造方法。
【請求項３】
下記の一般式（１）
【化８】
2005281247.tif 000063
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。）
で表される化合物と、下記一般式（２）
【化９】
2005281247.tif 000064
（式中、２個の−OHは、−COOHが結合している位置に対して２位及び５位又は３位及び４位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、以下の一般式（３）
【化１０】
2005281247.tif 000065
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩を製造する工程と；
上記一般式（３）の化合物又はそのカルボン酸塩を分子内でエステル化させる工程と
を含む、下記一般式（５）
【化１１】
2005281247.tif 000066
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。２個の−OHは、カルボニル炭素が結合している位置に対して、２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物の製造方法。
【請求項４】
下記の一般式（１）
【化１２】
2005281247.tif 000067
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。）
で表される化合物と、下記一般式（２）
【化１３】
2005281247.tif 000068
（式中、２個の−OHは、−COOHが結合している位置に対して２位及び５位又は３位及び４位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、以下の一般式（３）
【化１４】
2005281247.tif 000069
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩を製造する工程と；
上記一般式（３）の化合物又はそのカルボン酸塩を分子内でエステル化させて、下記の一般式（５）
【化１５】
2005281247.tif 000070
（式中、２個の−OHはカルボニル炭素が結合している位置に対してに対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物を製造する工程と
上記一般式（５）で表される化合物の２個のフェノール性水酸基のいずれか１以上を炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸と反応させることによりエステル化する工程と
を含む、下記一般式（６）
【化１６】
2005281247.tif 000071
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示す。但し、R2及びR3が同時に水素原子である化合物を除く。）
で表される化合物の製造方法。
【請求項５】
下記の一般式（４）
【化１７】
2005281247.tif 000072
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物。
【請求項６】
下記の一般式（６）
【化１８】
2005281247.tif 000073
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物。
【請求項７】
下記の一般式（４）
【化１９】
2005281247.tif 000074
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物からなるメラニン生成阻害剤。
【請求項８】
下記の一般式（６）
【化２０】
2005281247.tif 000075
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物からなるメラニン生成阻害剤。
【請求項９】
下記の一般式（４）
【化２１】
2005281247.tif 000076
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物からなる抗酸化剤。
【請求項１０】
下記の一般式（６）
【化２２】
2005281247.tif 000077
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物からなる抗酸化剤。
【請求項１１】
下記の一般式（４）
【化２３】
2005281247.tif 000078
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１２】
下記の一般式（６）
【化２４】
2005281247.tif 000079
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１３】
下記の一般式（４）
【化２５】
2005281247.tif 000080
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物と、食品とを含む食品組成物。
【請求項１４】
下記の一般式（６）
【化２６】
2005281247.tif 000081
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、これらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物と、食品とを含む食品組成物。
【請求項１５】
下記の一般式（４）
【化２７】
2005281247.tif 000082
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物と、化粧品基剤とを含む化粧品組成物。
【請求項１６】
下記の一般式（６）
【化２８】
2005281247.tif 000083
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物と、化粧品基剤とを含む化粧品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規フェノール性化合物及びこの化合物の製造方法、並びにメラニン生成阻害剤及び抗酸化剤に関する。
【０００２】
ペルオキシダーゼ（酵素番号EC 1. 11. 1. 7）やラッカーゼ（EC 1. 10. 3. 2）等の酸化酵素は、フェノール性化合物の重合反応を触媒することが知られている。ペルオキシダーゼは、フェノール性化合物を脱水素重合させるとともに、電子受容体である過酸化水素(H2O2)を水に還元する。またラッカーゼは、電子受容体として分子状酸素（O2）を利用する酵素であり、ポリフェノール性化合物の一種であるウルシオールの重合反応である漆の固化に関与することで著名である。フェノール重合物の製造を目的とする合成反応には、西洋ワサビ由来のペルオキシダーゼ（HRP）が汎用される。
【０００３】
HRPの重合反応は、当初、工場廃液に含まれるフェノール等を不溶性重合物として沈でん除去する目的で研究された（A.M. Klibanov, T.-M. Tu and K.P. Scott, Science, 221, 259(1983)）。近年は、有機溶媒中のフェノール性化合物の重合（T.Oguchi, S.Tawaki, H.Uyama, S.Kobayashi, Macromol. Rapid Commun. 20, 401(1999)）やメタクリル酸含有フェノール(H. Uyama, C Lohavisavapanich, R. Ikeda, S. Kobayashi, Macromolecules, 31, 554 (1998))の重合等の研究に代表されるように、酸化還元特性に優れた機能性フェノール類重合物の合成法として注目されている。
【０００４】
HRPによるフェノール性化合物の重合体の中には生理活性や薬理作用を示すものがある。例えば桂皮酸（trans-フェニルプロピオン酸）のHRPによる重合物は、低毒性で強い抗エイズウィルス活性を示すエイズ治療薬として利用することが提案されている（特許文献１）。またHRPにより製造されたフラボノイドの重合物がグルコシルトランスフェラーゼ阻害活性を示す、う蝕防止物質として利用できることが提案されている（特許文献２）。またHRPにより製造されたグアイアコール重合物が抗菌、抗カビ、抗炎症活性を示す有用物質として利用できることが提案されている（特許文献３）。
【０００５】
しかし、特許文献１〜３に記載の反応で得られる重合物は、重合度に分布のある混合物であり、例えば没食子酸の重合により没食子酸の２量体であるエラグ酸を得る反応のように、HRPで低分子重合物のみを合成する重合反応は知られていない。
【０００６】
さらにHRPは、フェノール性化合物だけでなく、糖とフェノール性化合物がグリコシド結合で結合したフェノール性配糖体の重合も触媒する。
【０００７】
例えばポリヒドロキノンは、酸化還元センサーのメディエーター、抗酸化剤などとして有用であるが、従来の酸化触媒やHRPを用いた合成反応では、ヒドロキノンからベンゾキノンだけが生成し、目的のポリヒドロキノンが得られない。そこでフェノール性配糖体の一種であるβ-アルブチンを、HRPで重合後、生成する重合物（ポリアルブチン）からグルコース残基を酸分解で除去して、ポリヒドロキノンを取得する方法が提唱された(非特許文献１)。しかし、この重合物はβ−アルブチンの重合度が10以上のポリマーで、広い重合度分布を持つ不均一な混合物であり、非特許文献１は、２分子のβ−アルブチンが重合したジアルブチンに例示される低分子の重合物を合成したという報告ではない。
【０００８】
特許文献４によれば、ポリアルブチンもしくはポリアルブチンから糖残基を部分的に酸加水分解で除去した部分分解ポリアルブチンが、皮膚メラニン生成抑制作用を有し、細胞毒性が小さく、さらに安全性が高いため、皮膚外用剤としての利用するできることが提唱されている。部分分解アルブチン中には、一部ジアルブチンも含まれており、ジアルブチンは皮膚浸透性が優れた皮膚外用剤として利用できることが提唱されている。しかし、ジアルブチンはアルブチン重合物中に一部蓄積するものであり、その効率的な製造法は知られていない。
【０００９】
以上で述べた研究事例は、いずれも、単一種類のフェノール性化合物もしくはβ−アルブチン等のいずれか一方のみを、HRP等の酸化酵素により重合させる重合物の製造法、及びそれにより得られる重合物の利用用途に関するものである。
【００１０】
酸化酵素を触媒として２種類のフェノール性化合物の重合物（共重合物）を製造する方法としては、フェノールとアルキル置換フェノール誘導体とをHRPで重合させ、加工性を向上させた共重合物の製造法（特許文献５）、フェノール類とアニリン類とをペルオキシダーゼ又はオキシダーゼで重合させ、フェノール樹脂とアニリン樹脂の諸特性を有し、耐熱性、耐酸化性が優れた共重合物の製造法（特許文献６）等が知られている。
【００１１】
しかし、特許文献５及び６に記載された重合体は、２種類以上のフェノール類が10以上結合した、重合度分布を持つ不均一なポリマー混合物であり、少数分子から構成された低分子共重合物は得られていない。また、特許文献５及び６には、酵素触媒を用いたフェノール性化合物とフェノール性配糖体との共重合物の製造法は、提案されていない。
【特許文献１】特開平03-337796
【特許文献２】特開平06-247959
【特許文献３】特開平09-176075
【特許文献４】特開2003-252746
【特許文献５】特開2001-081185
【特許文献６】特開平07-126377
【非特許文献１】P. Wang, B.D. Martin, S. Parida, D.G. Rethwisch, J.S. Dordick, J. Am. Chem. Soc., 117, 12885 (1995)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、新規フェノール性化合物、この化合物の効率的な製造方法、及びこの化合物の新しい用途を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
上記課題を解決するために本発明者らは研究を重ね、以下の知見を得た。
(i)  ヒドロキノン−β−グリコシド又はヒドロキノン−α−グリコシドと、２，５−ジヒドロキシ安息香酸又は３，４−ジヒドロキシ安息香酸とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、下記の一般式（３）
【００１４】
【化２９】
2005281247.tif 000002
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩が生成し、これを静置することにより、下記の一般式（５）
【化３０】
2005281247.tif 000003
【００１５】
（式中、２個の−OHはカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物が沈殿として生成する。
(ii)    上記一般式（５）の化合物は、pH９程度以上のアルカリ性条件下におくことにより、ラクトン環が開環した上記一般式（３）で表される化合物又はそのカルボン酸塩との平衡状態になる。
(iii)  上記一般式（３）で表される化合物、及び上記一般式（５）で表される化合物は、チロシナーゼ活性を阻害するため、メラニン生成阻害作用を有する。また、抗酸化作用も有する。
【００１６】
本発明は上記知見に基づき完成されたものであり、以下の化合物、その製造方法、メラニン生成阻害剤、抗酸化剤などを提供する。
【００１７】
項１．  下記の一般式（１）
【００１８】
【化３１】
2005281247.tif 000004
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。）
で表される化合物と、下記一般式（２）
【００１９】
【化３２】
2005281247.tif 000005
（式中、２個の−OHは、−COOHが結合している位置に対して２位及び５位又は３位及び４位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、以下の一般式（３）
【００２０】
【化３３】
2005281247.tif 000006
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩を製造する方法。
【００２１】
項２．  下記の一般式（１）
【００２２】
【化３４】
2005281247.tif 000007
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。）
で表される化合物と、下記一般式（２）
【００２３】
【化３５】
2005281247.tif 000008
（式中、２個の−OHは、−COOHが結合している位置に対して２位及び５位又は３位及び４位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、以下の一般式（３）
【００２４】
【化３６】
2005281247.tif 000009
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩を製造する工程と、
上記一般式（３）で表される化合物又はそのカルボン酸塩のフェノール性水酸基の１又は２以上を炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸と反応させることによりエステル化し、及び／又はカルボキシル基を炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコールと反応させることによりエステル化する工程と
を含む、下記一般式（４）
【００２５】
【化３７】
2005281247.tif 000010
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。但し、R1、R2、R3及びR4が同時に水素原子又はアルカリ金属原子である化合物を除く。）
で表される化合物の製造方法。
【００２６】
項３．  下記の一般式（１）
【００２７】
【化３８】
2005281247.tif 000011
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。）
で表される化合物と、下記一般式（２）
【００２８】
【化３９】
2005281247.tif 000012
（式中、２個の−OHは、−COOHが結合している位置に対して２位及び５位又は３位及び４位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、以下の一般式（３）
【００２９】
【化４０】
2005281247.tif 000013
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩を製造する工程と；
上記一般式（３）の化合物又はそのカルボン酸塩を分子内でエステル化させる工程と
を含む、下記一般式（５）
【００３０】
【化４１】
2005281247.tif 000014
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。２個の−OHは、カルボニル炭素が結合している位置に対して、２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物の製造方法。
【００３１】
項４．  下記の一般式（１）
【００３２】
【化４２】
2005281247.tif 000015
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。）
で表される化合物と、下記一般式（２）
【００３３】
【化４３】
2005281247.tif 000016
（式中、２個の−OHは、−COOHが結合している位置に対して２位及び５位又は３位及び４位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、以下の一般式（３）
【００３４】
【化４４】
2005281247.tif 000017
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩を製造する工程と；
上記一般式（３）の化合物又はそのカルボン酸塩を分子内でエステル化させて、下記の一般式（５）
【化４５】
2005281247.tif 000018
【００３５】
（式中、２個の−OHはカルボニル炭素が結合している位置に対してに対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物を製造する工程と
上記一般式（５）で表される化合物の２個のフェノール性水酸基のいずれか１以上を炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸と反応させることによりエステル化する工程と
を含む、下記一般式（６）
【００３６】
【化４６】
2005281247.tif 000019
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示す。但し、R2及びR3が同時に水素原子である化合物を除く。）
で表される化合物の製造方法。
【００３７】
項５．  下記の一般式（４）
【００３８】
【化４７】
2005281247.tif 000020
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物。
【００３９】
項６．  下記の一般式（６）
【００４０】
【化４８】
2005281247.tif 000021
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物。
【００４１】
項７．  下記の一般式（４）
【００４２】
【化４９】
2005281247.tif 000022
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物からなるメラニン生成阻害剤。
【００４３】
項８．  下記の一般式（６）
【００４４】
【化５０】
2005281247.tif 000023
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物からなるメラニン生成阻害剤。
【００４５】
項９．  下記の一般式（４）
【００４６】
【化５１】
2005281247.tif 000024
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物からなる抗酸化剤。
【００４７】
項１０．  下記の一般式（６）
【００４８】
【化５２】
2005281247.tif 000025
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物からなる抗酸化剤。
【００４９】
項１１．  下記の一般式（４）
【００５０】
【化５３】
2005281247.tif 000026
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【００５１】
項１２．  下記の一般式（６）
【００５２】
【化５４】
2005281247.tif 000027
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【００５３】
項１３．  下記の一般式（４）
【００５４】
【化５５】
2005281247.tif 000028
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物と、食品とを含む食品組成物。
【００５５】
項１４．  下記の一般式（６）
【００５６】
【化５６】
2005281247.tif 000029
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、これらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物と、食品とを含む食品組成物。
【００５７】
項１５．  下記の一般式（４）
【００５８】
【化５７】
2005281247.tif 000030
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物と、化粧品基剤とを含む化粧品組成物。
【００５９】
項１６．  下記の一般式（６）
【００６０】
【化５８】
2005281247.tif 000031
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物と、化粧品基剤とを含む化粧品組成物。
【発明の効果】
【００６１】
本発明によれば、フェノール性化合物とフェノール性配糖体とが１分子づつ結合した化合物が提供された。この化合物は、メラニン生成阻害作用や抗酸化作用を有することから、医薬品、化粧品、食品の有効成分や添加剤などとして好適に使用できる。
【００６２】
また、本発明の化合物は、配糖体であることから、水溶性が高い、皮膚への刺激が少ない、細胞毒性が低い、高い安定性を有するなどの利点を有する。このことからも医薬、化粧品、食品の成分として有用性が高い。
【００６３】
本発明によれば、特定のフェノール性化合物と特定のフェノール性配糖体とを、酸化酵素の存在下で反応させることにより、高分子重合体が生成することなく、これら特定の化合物が１分子づつ結合した低分子化合物が得られる。この化合物は前述したような有用性を有する。
【００６４】
従来のフェノール性化合物とフェノール性配糖体との共重合体は、種々の分子量を有する高分子重合体の集合物であるのに対して、本発明方法により得られる重合体は、特定のフェノール性化合物と特定のフェノール性配糖体とが１分子づつ結合した低分子化合物である。このような低分子化合物は、医薬品や食品として摂取する場合に吸収性がよく、また外用剤や化粧品として使用する場合に高い浸透性を示す。また、製造管理や、分析、生理作用の解析等が容易であるという利点もある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００６５】
以下、本発明を詳細に説明する。先ず、製造方法について説明し、それにより得られる本発明の化合物とその用途について説明する。
（Ｉ）新規フェノール性化合物の製造方法
本発明のフェノール性化合物の製造方法は、下記の一般式（１）
【００６６】
【化５９】
2005281247.tif 000032
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。）
で表される化合物と、下記一般式（２）
【００６７】
【化６０】
2005281247.tif 000033
（式中、２個の−OHは、−COOHが結合している位置に対して２位及び５位又は３位及び４位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩とを、ペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素の存在下で、反応させることにより、以下の一般式（３）
【００６８】
【化６１】
2005281247.tif 000034
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOHは２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、一般式（２）の化合物又はそのカルボン酸塩に由来する２個の−OHは−COOHが結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。）
で表される化合物又はそのカルボン酸塩を製造する方法である。
一般式（１）で表される化合物
上記一般式（１）で表される化合物において、ヒドロキノンと糖のヘミアセタール性水酸基との結合はβ−グリコシド結合であってもよく、α−グリコシド結合であってもよい。β−グリコシド結合の場合、後述する一般式（５）又は（６）の化合物の溶解度が比較的低くなり、沈殿として回収し易くなる。また、α−グリコシド結合の場合は、一般式（５）又は（６）の化合物の溶解度が比較的高くなり、高濃度の溶液を容易に調製できるようになる。
【００６９】
糖は、単糖若しくはオリゴ糖又はこれらの糖の誘導体であればよく、公知の糖を制限なく使用できる。このような公知の単糖としては、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、タロース、アロース、アルトロース、フラクトース、ソルボース、ラムノース、フコースのような６単糖；リボース、アラビノース、キシロース、リキソースのような５単糖；マルトース、ラクトース、セロビオース、イソマルトース、ゲンチオビオース、ガラクトビオース、マンノビオースのような２糖類；上述した単糖類が複数個グリコシド結合したマルトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、セロオリゴ糖、ゲンチオオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、マンノオリゴ糖のようなオリゴ糖などが挙げられる。また糖誘導体としては、上記の糖において、水酸基がカルボキシル基、アセチル基、アセチルアミノ基、アミノ基、メチル基などで置換されていたり、リン酸基、硫酸基などが導入されているものが挙げられる。
【００７０】
中でも、単糖又はその誘導体が好ましく、６単糖又はその誘導体が好ましく、グルコース又はその誘導体がより好ましい。
【００７１】
ヒドロキノンにグルコースがβ―グルコシド結合したβ―アルブチン及びヒドロキノンにグルコースがα―グルコシド結合したα―アルブチンは試薬として市販、又は工業的に製造された商品が販売されており、これらをそのまま使用することができる。またこれらの化合物は、常法に従い、例えばアセチルブロモグルコースもしくはアセチルクロログルコースをアルカリ性アセトン中で、ヒドロキノンと反応させ、脱アセチル化すれば、化学的に合成することができる。さらにこれらの化合物は、ヒドロキノンを受容体として酵素の糖転移反応を利用した合成法により得ることができる。例えばα―アルブチンは、特殊なα―アミラーゼ[T.Nishimura, T.Kometani, H.Haku, Y.Terada, and S.Okada, J.Ferment. Bioeng., 78, 37(1994).]、シクロデキストリン合成酵素[S. Mori, M.Goto, H.Tsuji, T. Mase, A. Matsuura, T.Oya, and S.Kitahata, J. Appl. Glycosci., 44, 23 (1997).] 、スクロースホスホリラーゼ[S.Kitao, and H. Sekine, Biosci. Biotechnol. Biochem., 58, 38 (1994).]、α―グルコシダーゼ[J.Kurosu, T. Sato, K. Yoshida, T. Tsugane, S. Shimura, K.Kirimura, K. Kino, and S.Usami, J.Biosci.Bioeng., 93, 328 (2002).]などによる合成例が知られている。またヒドロキノンβ―フラクトフラノシド（H.Nakano, K.Hamayasu, K. Nakagawa, A.Tabata, K.Fujita, K.Hara, M.Murakami, and S.Kitahata, J.Appl.Glycosci., 49,115(2002).）、ヒドロキノン  β―キシロシド（J. Sulistyo, Y.Kamiyama, H.Ito, and T. Yasui, Biosci. Biotechnol. Biochem., 58, 1311 (1994).）なども酵素を触媒とした合成法で合成可能である。さらにβ―アルブチンのグルコース残基にグルコース、マルトースなどのマルトオリゴ糖が結合した化合物は、β―アルブチンを受容体、デンプンを供与体としてシクロデキストリン合成酵素の触媒作用で合成されることが知られている[K. Sugimoto, T.Nishimura, K.Nomura, K.Sugimoto, and T.Kuriki, Chem.Pharm. Bull., 51, 798 (2003).]。
一般式（２）で表される化合物
一般式（２）で表される化合物には、下記の化学式（７）
【００７２】
【化６２】
2005281247.tif 000035
で表される２，５−ジヒドロキシ安息香酸（ゲンチジン酸）又はそのカルボン酸塩及び下記化学式（８）
【００７３】
【化６３】
2005281247.tif 000036
で表される３，４−ジヒドロキシ安息香酸（プロトカテキュ酸）又はそのカルボン酸塩が含まれる。ゲンチジン酸及びプロトカテキュ酸は市販されている。
【００７４】
このように、一般式（２）で表される化合物のカルボキシル基は、ナトリウム、カリウムのようなアルカリ金属等の塩になっていてもよい。酸化酵素の種類などにもよるが、一般にこのような塩を用いる方が反応が進行し易いため、好ましい。これらの塩は、一般式（２）の化合物を水酸化ナトリウムや水酸化カリウム等で中性〜弱酸性まで中和することにより得られる。また、試薬として市販されている一般式（２）の化合物のナトリウム塩などは、そのまま反応に使用できる。
【００７５】
特に、目的とする重合物の収率が高く、また反応速度が高い点で、２，５−ジヒドロキシ安息香酸（ゲンチジン酸）が好ましい。
酸化酵素
酸化酵素は、ペルオキシダーゼ（EC1.11.1.7）、ラッカーゼ(EC1.10.3.2)、ジフェノールオキシダーゼ、モノフェノールオキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、及びアスコルビン酸オキシダーゼからなる群より選ばれる少なくとも１種の酸化酵素を用いる。
【００７６】
ラッカーゼは、ポリフェノールオキシダーゼ、ウルシオールオキシダーゼなどとも称されており、複数の水酸基を有するフェノール類を酸化する。
【００７７】
ジフェノールオキシダーゼ(EC 1. 10. 3. 1)は、カテコールのように２個の水酸基を有するフェノール類を酸化する機能を有する酸化酵素であり、カテコールオキシダーゼ、o−ジフェノラーゼ、チロシナーゼ、カテコラーゼとも称される。
【００７８】
モノフェノールオキシダーゼ(EC 1. 14. 18. 1)は、１個の水酸基を有するフェノール性化合物を酸化する機能を有する酸化酵素であり、モノフェノールモノオキシゲナーゼ、フェノラーゼ、チロシナーゼ、クレゾラーゼとも称される。
【００７９】
また、ジフェノールオキシダーゼ及びモノフェノールオキシダーゼは、ラッカーゼと同様に銅を含有する酵素であるが、カテコール類にのみ作用する酵素であり、後者は1,2-ベンゼンジオールが存在するときにのみカテコール類に作用する酵素である。
【００８０】
ペルオキシダーゼとしては、例えば、西洋ワサビ由来のペルオキシダーゼ（R.H.Kenten, P.J.G.Mann, Biochem. J., 57, 347 (1954)；L.M.Shannon, E.Kay, J.Y.Lew, J.Biol.Chem., 241, 2166(1966).）、タバコ由来のペルオキシダーゼ(S.S.Kim, S.H. Wender, E.C.Smith, Phytochemistry, 19, 165 (1980).)、ダイズ由来のペルオキシダーゼ(K.G.Paul, in "The Enzymes" 2nd. Ed. Vol.8, 227-274 (1963).)、糸状菌の一種であるArthromyces ramosus由来のペルオキシダーゼ (アルスロミセス  ラモサス；Y. Shinmen, J. Asami, T. Adachi, S. Shimizu, H. Yamada, Agric.Biol. Chem., 50, 247 (1986).)  などを使用できる。西洋ワサビ由来のペルオキシダーゼは、例えば東洋紡績社による市販品を使用でき、ダイズ由来のペルオキシダーゼ、アルスロミセス ラモサス由来のペルオキシダーゼは、例えばシグマ社製の実験試薬を購入できる。
【００８１】
ラッカーゼとしては、例えばウルシ由来のラッカーゼ（Rhus vernificera, ルス  ベルニフィセラ、T. Nakamura, Biochim. Biophys. Acta, 205, 44 (1958).  ）、Trametes（トラメテス）、Aspergillus（アスペルギルス）、 Polyporus（ポリポラス）、Picnoporus coccineus (ピクノポラス  コシネウス、和名；ヒイロタケ)、Coriolus versicolor (コリオラス  ベルシカラー、和名；カワラタケ)のような菌類由来のラッカーゼ（村尾澤夫、山本英子、松村瑛子、田中彰、新隆志、薬誌、105, 91(1985)）を使用できる。
【００８２】
ビリルビンオキシダーゼ(EC1.3.3.5)は、マルチ銅タンパク質の一種で、主としてビリルビンに作用する酵素であり、例えばPenicillium（ペニシリウム）属、 Myrothecium（ミロセシウム）属のような真菌由来の酵素を使用できる。ミロセシウム属真菌由来のビリルビンオキシダーゼは、例えば天野エンザイム社から市販されている。
【００８３】
アスコルビン酸オキシダーゼ(EC1.3.3.5)は、マルチ銅タンパク質の一種で、主としてL-アスコルビン酸に作用する酵素であり、例えばキュウリ、カボチャなどの植物や微生物由来の酵素を使用できる。
【００８４】
酸化酵素としては、目的重合物の収率が高く、また市販酵素を容易に入手できる点で西洋ワサビ、ダイズ、アルスロミセスのようなペルオキシダーゼ、又はウルシ、トラメテスのようなラッカーゼなどが好ましく、中でも安価な市販酵素の入手が容易な点で、西洋ワサビのペルオキシダーゼやトラメテスのラッカーゼがより好ましい。
【００８５】
これらの酵素は、酵素反応の障害にならない限り、必ずしも高純度の酵素である必要はなく、粗酵素であってもよい。さらに、イオン交換樹脂、セラミックス等に吸着させたり、格子やマイクロカプセルにより酵素を包括したりすることにより固定化させた酵素も使用できる。
酸化反応
酸化反応は、溶媒として通常水を用いればよいが、酵素反応を阻害しない限り、全溶媒に対して、例えば70容量％以下、好ましくは50容量％以下の範囲で、水溶性有機溶媒を含んでいてもよい。水溶性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、イソプロパノールのような低級アルコール；アセトン；ジオキサン；アセトニトリルなどが挙げられる。
【００８６】
反応時の一般式（１）で表されるフェノール性配糖体及び一般式（２）で表されるフェノール性化合物又はそのカルボン酸塩の濃度は、特に限定されないが、通常1〜200mM程度、好ましくは20〜150mM程度とすればよい。フェノール性配糖体とフェノール性化合物との濃度比は、重合物の生成量に大きく影響する。一般式（１）のフェノール性配糖体：一般式（２）のフェノール性化合物又はそのカルボン酸塩のモル比が１：０．２５〜１：４程度、好ましくは１：０．５〜１：２程度の範囲が目的重合物を得るのに好適である。上記モル比は１：２であるのが最も好ましい。いずれかの基質のみが圧倒的に高濃度で存在する反応系では、目的の低分子共重合物ではなく、高分子ポリマーが主に蓄積する。
【００８７】
酵素の使用量は、一般式（１）のフェノール性配糖体１ｇ当たり、通常10から100000単位程度とすればよい。
【００８８】
反応液のpHは、使用する酵素の至適pHに応じて当業者であれば適宜設定できるが、例えばHRPを用いる場合は通常pH5〜9程度、好ましくは6.5〜7.5程度とすればよい。Trametesのラッカーゼを使用する場合は、通常pH4〜9.5程度、好ましくは4.5〜5.5程度とすればよい。
【００８９】
反応温度は、使用する酸化酵素の至適温度を考慮して適宜定めることができるが、通常10〜70℃程度、好ましくは15〜40℃程度の範囲で、酵素の至適温度や基質の安定性などを考慮して適宜設定すればよい。室温で使用しても、通常は、十分生成物を得ることができる。反応時間は、使用する酵素量、温度等にも依存するが、通常0.1〜48時間程度とすればよい。
【００９０】
ペルオキシダーゼを用いる場合、一般式（１）で表されるフェノール性配糖体及び一般式（２）で表されるフェノール性化合物又はそのカルボン酸塩を含む溶液に、通常0.5〜30重量％程度の濃度の過酸化水素水を少量づつ滴下することが好ましい。過酸化水素の使用量は、一般式（１）のフェノール性配糖体１モルに対して、0.1〜５モル程度の範囲で使用するのが好ましい。
【００９１】
その他、過酸化水素を発生させることができるグルコースオキシダーゼのような酵素とその基質とを反応液に共存させることによっても、重合反応を進行させることができる。
【００９２】
その他の酵素、例えばラッカーゼを用いる場合は、過酸化水素の添加は必要ではない。反応液が少容量である場合は、空気中の酸素の自動的な拡散により反応は進行するが、好ましくはスターラー等で反応液を撹拌したり、空気または酸素を含む気体を反応液に吹き込むことにより、十分な反応速度を得ることができる。
酸化生成物
上記の酸化反応により、反応液中に、上記一般式（３）で表される化合物又はそのカルボン酸塩が生成する。反応液から、分子篩いクロマトグラフィー等を用いてこの化合物を単離することができる。
エステル化処理
また、反応液を３０〜６０℃程度の温度下で、１〜２４時間程度処理することにより、上記一般式（３）で表される化合物又はそのカルボン酸塩が、分子内の水酸基とカルボキシル基とがラクトン環を形成して、下記の一般式（５）
【００９３】
【化６４】
2005281247.tif 000037
（式中、Glyの結合様式、並びにR2及びR3は、上記と同じ。）
が沈殿として生成する。この処理は、静置により行ってもよく、撹拌しながら行ってもよい。
【００９４】
本発明方法に用いる原料（基質）及び重合物の分析は、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（TLC）、オクタデシルシリル（ODS）基やC30基を有する担体を充填したカラムを装着した高速液体クロマトグラフィー（HPLC）、GPCモードのHPLCなどの公知の手段で行うことができる。
修飾工程
上記一般式（３）で表される化合物又はそのカルボン酸塩は、そのフェノール性水酸基の１又は２以上を炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸と反応させることによりエステル化し、及び／又はカルボキシル基を炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコールと反応させることによりエステル化することができる。これにより、下記一般式（４）
【００９５】
【化６５】
2005281247.tif 000038
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基又はこれらの単糖のオリゴ糖残基を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の環の炭素−炭素結合の位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2、R3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は、水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。但し、R1、R2、R3、R4が全て水素原子又はアルカリ金属原子である化合物を除く。）
で表される化合物が得られる。
【００９６】
上記のフェノール性水酸基のエステル化、及びカルボキシル基のエステル化は常法に従い行うことができる。例えば、上記一般式（３）の化合物又はそのカルボン酸塩を、塩酸や硫酸などの無機酸の存在下で、炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸と反応させることにより、フェノール性水酸基をエステル化できる。また例えば、上記一般式（３）の化合物又はそのカルボン酸塩を、硫酸や塩酸などの無機酸もしくはNaOHやKOHなどの塩基の存在下で、炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコールと反応させることにより、カルボキシル基をエステル化できる。また選択的にエステル化を望む場合は、反応に関与させない水酸基を予めベンジル基等で保護した後、直接、脱水縮合させる、あるいは反応させる部位の水酸基を予め無水酢酸等でアセチル化する、あるいはカルボキシル基をメタノール等の低級アルコールでエステル化し、その後、エステル交換反応させることにより、選択的なエステルの形成が可能である。
【００９７】
また、上記一般式（５）で表される化合物は、２個のフェノール性水酸基のいずれか１以上を、炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸でエステル化することにより、下記一般式（６）
【００９８】
【化６６】
2005281247.tif 000039
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示す。但し、R1及びR2が全て水素原子である化合物を除く。）
で表される化合物を得ることができる。
【００９９】
エステル化方法は前述した通りである。
（ＩＩ）フェノール性化合物
本発明の第１のフェノール性化合物は、下記の一般式（４）
【０１００】
【化６７】
2005281247.tif 000040
（式中、Glyは、６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−COOR4は２個のベンゼン環の間の炭素−炭素結合の位置に対して２位又は６位に結合しており、−OR2及び−OR3は−COOR4が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物である。
【０１０１】
一般式（４）の化合物には、下記構造式（９）
【０１０２】
【化６８】
2005281247.tif 000041
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基を示す。−O−Glyはβ−グリコシド結合である。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物、下記構造式（１０）
【０１０３】
【化６９】
2005281247.tif 000042
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基を示す。−O−Glyはβ−グリコシド結合である。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物、及び下記構造式（１１）
【０１０４】
【化７０】
2005281247.tif 000043
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基を示す。−O−Glyはβ−グリコシド結合である。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物、下記構造式（１２）
【０１０５】
【化７１】
2005281247.tif 000044
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−O−Glyはα−グリコシド結合である。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物、下記構造式（１３）
【０１０６】
【化７２】
2005281247.tif 000045
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−O−Glyはα−グリコシド結合である。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物、及び下記構造式（１４）
【０１０７】
【化７３】
2005281247.tif 000046
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−O−Glyはα−グリコシド結合である。R1、R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示し、R4は水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜８の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪族アルコール残基を示す。）
で表される化合物が含まれる。
【０１０８】
特に、目的とする重合物の合成収率が高い点で、一般式（９）の化合物及び一般式（１２）の化合物が好ましい。
【０１０９】
また、R1、R2及びR3は、化合物のメラニン生成阻害作用及び抗酸化作用が高い点、及び水溶性が高いために水溶性の医薬組成物、食品組成物、化粧品組成物などの成分として使用しやすい点で水素原子又は炭素数１〜４の脂肪酸残基であることが好ましく、水素原子であることがより好ましい。また、R4は、化合物の水溶性が高い点で、水素原子、アルカリ金属原子又は炭素数１〜３の脂肪族アルコール残基であることが好ましく、水素原子又はアルカリ金属原子であることがより好ましい。最も好ましいのは、R1、R2、R3及びR4の全てが水素原子又はアルカリ金属原子である化合物である。
【０１１０】
また本発明の第２のフェノール性化合物は、下記の一般式（６）
【０１１１】
【化７４】
2005281247.tif 000047
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−OR2及び−OR3はカルボニル炭素が結合している位置に対して２位及び５位、３位及び４位、又は４位及び５位に結合している。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を表す。）
で表される化合物である。
【０１１２】
一般式（６）の化合物には、下記構造式（１５）
【０１１３】
【化７５】
2005281247.tif 000048
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−O−Glyはβ−グリコシド結合である。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示す。）
で表される化合物、下記構造式（１６）
【０１１４】
【化７６】
2005281247.tif 000049
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−O−Glyはβ−グリコシド結合である。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示す。）
で表される化合物、及び下記構造式（１７）
【０１１５】
【化７７】
2005281247.tif 000050
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−O−Glyはβ−グリコシド結合である。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示す。）
で表される化合物、下記構造式（１８）
【０１１６】
【化７８】
2005281247.tif 000051
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−O−Glyはα−グリコシド結合である。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示す。）
で表される化合物、下記構造式（１９）
【０１１７】
【化７９】
2005281247.tif 000052
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−O−Glyはα−グリコシド結合である。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示す。）
で表される化合物、及び下記構造式（２０）
【０１１８】
【化８０】
2005281247.tif 000053
（式中、Glyは６単糖残基若しくは５単糖残基、又はこれらの単糖からなるオリゴ糖残基、又はこれらの糖残基の誘導体を示す。−O−Glyはα−グリコシド結合である。R2及びR3は、同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜２２の直鎖又は分岐鎖を有する飽和又は不飽和脂肪酸残基を示す。）
で表される化合物が含まれる。
【０１１９】
特に、目的とする重合物の合成収率が高い点で、一般式（１５）の化合物及び一般式（１８）の化合物が好ましい。
【０１２０】
また、R2及びR3は、メラニン生成阻害作用及び抗酸化作用が高い点、及び水溶性が高いために水溶性の医薬組成物、食品組成物、化粧品組成物などの成分として使用しやすい点で、水素原子又は炭素数１〜４の脂肪酸残基であることが好ましく、水素原子であることがより好ましい。最も好ましいのは、R2及びR3の全てが水素原子である化合物である。
【０１２１】
一般式（６）の化合物は、pH９程度以上の溶媒に溶解することにより、ラクトン環が開環して、一部が一般式（４）においてR1及びR4が共に水素原子である化合物になる。上記液性の反応液中には、一般式（６）の化合物と、一般式（４）においてR1及びR4が共に水素原子である化合物とが平衡状態で含まれる。従って、本発明において、一般式（６）で表される化合物には、一般式（４）においてR1及びR4が共に水素原子である化合物が含まれる。
（ＩＩＩ）メラニン生成阻害剤
上記一般式（４）で表される化合物及び上記一般式（６）で表される化合物は、チロシナーゼによるDOPAからドーパクロムの生成を抑制する。ドーパクロムや、これから生成する5,6-ジヒドロキシインドール、5,6-ジヒドロキシインドール-2-カルボン酸のようなモノマーが重合することによりメラニンが生合成される。このことから、上記一般式（４）で表される化合物及び上記一般式（６）で表される化合物は、メラニン生成阻害剤として有用である。
【０１２２】
従って、本発明の第１のメラニン生成阻害剤は、上記一般式（４）で表される化合物からなる。また本発明の第２のメラニン生成阻害剤は、上記一般式（６）で表される化合物からなる。一般式（４）の化合物の中の好ましいもの、及び一般式（６）の化合物の中の好ましいものは前述した通りである。
（ＩＶ）抗酸化剤
上記一般式（４）で表される化合物及び上記一般式（６）で表される化合物は、安定なラジカルであるDPPH（１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）を分解する。ラジカルは物質の酸化の引き金となることから、ラジカルを消去する上記一般式（４）で表される化合物及び上記一般式（６）で表される化合物は抗酸化剤として有用である。
【０１２３】
従って、本発明の第１の抗酸化剤は、上記一般式（４）で表される化合物からなる。また本発明の第２の抗酸化剤は、上記一般式（６）で表される化合物からなる。一般式（４）の化合物の中の好ましいもの、及び一般式（６）の化合物の中の好ましいものは前述した通りである。
（Ｖ）医薬組成物
上記一般式（４）の化合物及び上記一般式（６）の化合物（以下、項目Ｖにおいて、「本発明のフェノール性化合物」と称する）は、薬学的に許容される賦形剤、結合剤、崩壊剤、潤沢剤、付湿剤などの担体と配合して、医薬組成物として使用できる。
【０１２４】
本発明において、「医薬組成物」には、薬事法に規定される医薬品として用いられるもの及び医薬外品として用いられるものの双方が含まれる。
【０１２５】
この医薬組成物は、特に、メラニン生成阻害用の医薬組成物として、又は抗酸化用の医薬組成物として好適に使用できる。
【０１２６】
賦形剤としては、公知のものを広く使用でき、例えば、乳糖、ショ糖、ブドウ糖等の各種の糖類；バレイショデンプン、コムギデンプン、トウモロコシデンプン等の各種デンプン類、；結晶セルロース等の各種セルロース類；無水リン酸水素カルシウム、炭酸カルシウム等の各種無機塩類等が挙げられる。
【０１２７】
結合剤としては、公知のものを広く使用でき、例えば、結晶セルロース、プルラン、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、マクロゴール等が挙げられる。
【０１２８】
崩壊剤としては、公知のものを広く使用でき、例えば、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、デンプン、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。
【０１２９】
潤沢剤としては、公知のものを広く使用でき、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、硬化油などが挙げられる。
【０１３０】
付湿剤としては、公知のものを広く使用でき、例えば、ココナッツ油、オリーブ油、ゴマ油、落花生油、大豆リン脂質、グリセリン、ソルビトール等が挙げられる。
【０１３１】
この組成物は、例えば錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤、トローチ剤等の経口投与剤；注射剤、点滴剤、外用剤（経皮パッチ、鼻腔内スプレー剤など）、座剤等の非経口投与剤などの各種の公知の製剤形態にすることができる。
【０１３２】
医薬組成物中の本発明のフェノール性化合物の含有量は、投与対象の年齢、性別、症状、製剤の形態、投与経路、期待される効果などにより異なり一概に定めることはできないが、１日投与量が体重１ｋｇ当たり0.01〜500ｍｇ程度となる量含まれていることが好ましい。例えば、１日３回投与する製剤であれば、１剤中にはこの３分の１量が含まれていればよい。
【０１３３】
また製剤とする場合の、組成物中の本発明フェノール性化合物の含有比率としては、例えば0.1〜10重量％程度の比率を挙げることができる。
【０１３４】
また、本発明のフェノール性化合物は、医薬組成物の他成分の酸化防止のために、医薬組成物中に含まれていてもよい。この場合の本発明のフェノール性化合物の含有量は、0.1〜10重量％程度とすればよい。
（ＶＩ）化粧品組成物
上記一般式（４）及び上記一般式（６）の化合物（以下、項目ＶＩにおいて、「本発明のフェノール性化合物」と称する。）は、慣用されている化粧品基剤と配合して、化粧品組成物にすることができる。この組成物は、特に、メラニン生成阻害用の化粧品組成物又は抗酸化用の化粧品組成物として好適に用いることができる。
【０１３５】
化粧品の形態としては、各種の形態を目的に応じて選択でき、具体的には、石鹸、洗顔料、化粧水、乳液、ファンデーション、口紅、リップクリーム、クレンジングクリーム、マッサージクリーム、パック、ハンドクリーム、ハンドパウダー、ボディシャンプー、ボディローション、ボディクリーム、浴用化粧品等が挙げられる。上記化粧品は、各形態に応じた常法に従って調製することができる。本発明の化粧品組成物における化粧品基剤は、これらの化粧品に通常含まれているものを使用できる。
【０１３６】
本発明の化粧品組成物には、必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲で化粧品に通常用いられる成分、例えば保湿剤、香料、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤等の成分も配合することができる。
【０１３７】
本発明の化粧品組成物中のフェノール性化合物の含有量は、化合物の種類、化粧品の形態等に応じて適宜設定することができ、例えば、0.0001〜20重量％程度、好ましくは0.01〜５重量％程度とする事ができる。上記化粧品は、フェノール性化合物の種類、化粧品の形態、日焼けの程度等に応じて、適量を、１日１回、又は２〜４回に分けて肌に適用する事ができる。
【０１３８】
また、本発明のフェノール性化合物は、化粧品組成物の他成分の酸化防止のために、化粧品組成物中に含まれていてもよい。この場合の本発明のフェノール性化合物の含有量は、0.0001〜10重量％程度、好ましくは0.01〜５重量％とすればよい。
（ＶＩＩ）食品組成物
上記一般式（４）で表される化合物及び上記一般式（６）で表される化合物（以下、項目ＶＩＩにおいて、「本発明のフェノール性化合物」と称する。）は、食品に添加して食品組成物とすることができる。この食品組成物は、特に、メラニン生成抑制用の食品組成物又は抗酸化用の食品組成物として好適に使用できる。
【０１３９】
食品の種類は特に限定されず、例えば、飲料（炭酸飲料、清涼飲料、乳飲料、アルコール飲料、果汁飲料、茶類、栄養飲料、スープ等）、粉末飲料（粉末ジュース、粉末スープ、ふりかけ等）、菓子類（ガム、キャンディー、クッキー、せんべい、ビスケット、ゼリー等）、パン、麺類、シリアル、調味料（ソース、ドレッシング等）、冷凍食品のような総菜類等を例示できる。
【０１４０】
本発明の食品組成物は、特定保健用食品、栄養補助食品、病者用食品等として使用できる。本発明の食品組成物には、必要に応じて、一般的に許容されている食品添加物を添加してもよい。
【０１４１】
食品組成物中のフェノール性化合物の含有量は、対象の症状、年齢、性別、期待される効果などにより異なるが、１日摂取量が0.01〜100mg程度となる量含まれていることが好ましい。また食品組成物中のフェノール性化合物の含有比率は、食品の種類によっても異なるが、固形食品の場合、0.001〜１重量％程度が好ましく挙げられ、液体食品の場合、１〜10mg／100ml(重量/容量)％程度が好ましく挙げられる。
【０１４２】
また、本発明のフェノール性化合物は、食品組成物の酸化防止のために、食品組成物中に含まれていてもよい。この場合の本発明のフェノール性化合物の含有量は、0.01〜１重量％程度とすればよい。
実施例
以下、実施例及び試験例を示して、本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例１】
【０１４３】
フェノール化合物とフェノール性配糖体の混合系にHRPを作用させた場合の低分子共重合物の生成
一般式（１）で表されるフェノール性配糖体と各種フェノール化合物とを含む反応系で、HRP（東洋紡績社製）により共重合物が生成するか否かをTLCで分析した。
【０１４４】
一般式（１）で表されるフェノール性配糖体としては、β−アルブチン（ナカライテクス社製）、及びα−アルブチン（江崎グリコ社製）を用いた。
【０１４５】
また、フェノール化合物としては後掲の表１に記載した化合物を用いた。これらのフェノール化合物は、ナカライテスク社又はシグマ−アルドリッチ社から購入した。
【０１４６】
反応液中の各フェノール性配糖体及びフェノール化合物の終濃度は0.1Mとした。反応液のpHをほぼ中性にするため、必要に応じて2.0 M水酸化ナトリウム溶液で中和した後、基質濃度が0.1Mとなるよう0.1Mリン酸緩衝液(pH 7.0)を加えた。
【０１４７】
反応液中のHRP濃度は25 μg/mlとし、H2O2は終濃度が30 mMとなるように、2.4 M H2O2水溶液を、約5分間隔で数回に分けて添加した。
【０１４８】
室温で２時間反応後、TLCで生成物を分析した。TLCは、プレートにシリカゲル60F254(メルク社)、展開溶媒に酢酸エチル：酢酸：水(体積比3 : 1 : 1)を用い、展開後、硫酸発色によりスポットを検出した。
【０１４９】
結果を表１に示す。表１中には、フェノール性配糖体とフェノール化合物とが１分子づつ結合した目的共重合物と考えられるスポットの強度を−（生成しなかった）、＋（少し生成した）、＋＋（中程度に生成した）、＋＋＋（大量に生成した）の４段階で表示した。
【０１５０】
【表１】
2005281247.tif 000054
表１から明らかなように、フェノール化合物として、２，５−ジヒドロキシ安息香酸（ゲンチジン酸）及び２，５−ジヒドロキシ安息香酸メチルエステル（ゲンチジン酸メチル）、又は３，４−ジヒドロキシ安息香酸（プロトカテク酸）を用いた場合にのみ、フェノール性配糖体とフェノール化合物とが１分子づつ結合した目的共重合物が合成され、他の異性体、構造類縁体は有効な基質とはなり得なかった。ゲンチジン酸メチルは、ゲンチジン酸よりやや少量の生成物を与えた。
【実施例２】
【０１５１】
フェノール化合物とフェノール性配糖体の混合系にラッカーゼを作用させた場合の低分子共重合物の生成
実施例１と同様の反応系において、Trametes由来のラッカーゼ（ラッカーゼダイワ、大和化成社製）を25 μg/ml添加し、スターラーで撹拌（約300rpm）しながら、室温で12時間反応を行った。その他の条件は実施例１と同様にした。さらに、実施例１と同様の条件でTLC分析を行った。結果を以下の表２に示す。
【０１５２】
【表２】
2005281247.tif 000055
表２から明らかなように、ラッカーゼを用いた場合にも、HRPと全く同様、フェノール化合物としてゲンチジン酸、ゲンチジン酸メチル、又はプロトカテク酸を用いた場合にのみ、フェノール性配糖体とフェノール化合物とが１分子づつ結合した目的共重合物が合成された。ただし生成物量はHRPよりもやや少なかった。
【実施例３】
【０１５３】
ゲンチジン酸とβ−アルブチンとの濃度比が重合生成物に与える影響の検討
フェノール性配糖体としてβ−アルブチン（ナカライテスク社製）、フェノール化合物として２，５−ジヒドロキシ安息香酸（ゲンチジン酸ナトリウム）（シグマ社製）を用い、各基質の濃度を0〜0.2Mの範囲で変化させることにより、ゲンチジン酸とβ−アルブチンとの比率を変化させた。
【０１５４】
生成物についてTLCを行った結果を図１に示す。図１のプレートにおいて、下方がサンプルをスポットした側である。レーン１及び２はマーカーをアプライした結果を示しており、Arbはβ−アルブチンを示し、Glcはグルコースを示し、Glc2はマルトースを示し、Glc3はマルトトリオースを示す。ゲンチジン酸ナトリウムはGAで表される展開溶媒のフロントの位置に展開される。レーン４〜８が、被験サンプルであり、その組成比は薄層板の下方に示されている。
【０１５５】
図１から明らかなように、β-アルブチン単独では、分子量の非常に大きなスポットが原点付近に検出されており、ポリマーが生成していることが分かる。これに対して、β-アルブチン：ゲンチジン酸のモル比が１ : ２〜２ : １の範囲では、ポリマーが生成することなく、Glcに近い展開移動度を有する共重合物のスポットが検出された。この共重合物は、β−アルブチンとゲンチジン酸とを１分子づつ含むものと考えられる。中でも、β-アルブチン：ゲンチジン酸のモル比が１ : ２の場合に、最も高収率で目的の共重合物が得られたことも分かる。
【実施例４】
【０１５６】
酸化酵素間の比較
β−アルブチン872mg（3.2mmol）にゲンチジン酸ナトリウム1129mg（6.4mmol）を加え、脱イオン水42.47mlで溶解した。次に、この溶液に、50mMリン酸buffer（pH7.0）で10mg/mlに溶解した西洋ワサビペルオキシダーゼ（以下HRPと略記、東洋紡績社製）1mlを加えた。さらに、40℃の恒温槽に入れ、10分おきに6％過酸化水素水（2.358M）427μlを計10〜12回加えた。
【０１５７】
Arthromyces ramosus由来のペルオキシダーゼ（ARP、シグマ社製）、及び大豆由来のペルオキシダーゼ（SBP、シグマ社製）についても同じ操作を行った。
【０１５８】
反応後の反応液を薄層クロマトグラフィーで展開した。展開溶媒としては酢酸エチル：酢酸：水＝３：１：１を用い、硫酸発色により検出した。結果を図２に示す。図２の(A)はHRPの結果を示し、(B)はARPの結果を示し、(C)はSBPの結果を示す。各展開図の右欄に記載したＸは、アルブチンとゲンチジン酸ナトリウムとの１：１共重合物を示す。
【０１５９】
また、各レーンは過酸化水素を添加する度に採取したサンプルであり、右方のサンプルほど過酸化水素の添加量が多く、その分反応時間も長いことを示す。過酸化水素の添加に従ってアルブチン及びゲンチジン酸ナトリウムが減少した。それに伴って、１：１共重合物が生成したことが分かる。３種類の酵素による反応を比較した結果、ほぼ同様にＸが蓄積していた。
【実施例５】
【０１６０】
ゲルろ過による目的共重合物の単離
実施例４のHRPを用いた反応後の反応液をBio-Gel P-2ゲルろ過カラムに通した。条件は742cm3（半径1.5cm、長さ105cm）のカラムで、濃縮した反応液3mlを添加し10％エタノールで溶出した。溶出は流速10ml/hで行い、2.5mlずつ分画した。
各フラクションを薄層クロマトグラフィーで展開した結果を図３に示す。目的とする１：１共重合物Xと不純物Yとが分離された。
アルブチン872mgに対してＸは277mg、Ｙは24mg回収することができた。これらの物質を凍結乾燥すると褐色〜黒色の粉末として得ることができた。
【実施例６】
【０１６１】
ラクトン環の形成
実施例５で得られた、β−アルブチンとゲンチジン酸との１：１共重合物Xの1重量％濃度の水溶液10mlを６日間室温下で静置し、生じた沈殿（重量にして1/3程度）を12000rpmの遠心分離により回収した。沈殿物は褐色であった。
【０１６２】
また、実施例４のHRPを用いた反応液そのものを陽イオン交換樹脂（ダイヤイオン PK-216H）に通して酸性にし、再び室温で6日間静置した。アルブチンに対して重量で7%程度の黄色の沈殿が生じたため、12000rpmで遠心分離することによりにより回収した。
【０１６３】
これらの2つの沈殿は脱イオン水には溶解しにくいため、ジメチルスルホキシド（DMSO）に溶かし、TLCで確認したところ同一であった。以後、この沈殿物を生成物Pと呼ぶ。
【０１６４】
また、次のようにしても生成物Pを得ることができた。アルブチン872mg（3.2mmol）にゲンチジン酸ナトリウム1129mg（6.4mmol）を加え、脱イオン水42.47mlで溶解した。次に、この溶液に、50mMリン酸緩衝液（pH7.0）で10mg/mlに溶解したHRP1mlを加えた。さらに、40℃の恒温槽に入れ、6％過酸化水素水（2.358M）427μl加えた。
【０１６５】
反応液を2〜3日室温で放置した後、アルブチンに対して重量で15%の黄色の沈殿物を得た。NMR等により生成物Pであると確認された。
【実施例７】
【０１６６】
生成物PのMALDI−TOF/MS分析
生成物Pを脱イオン水に懸濁し、CHCA（α−シアノヒドロキシ桂皮酸）飽和溶液（アセトニトリル：水＝９：１）50μlに対して5μl混合し、1μlを測定ホルダーに滴下後風乾した。これをMALDI−TOF/MS（ABI社製VoyagerTM）で分析した。測定はPositiveモードで行った。結果を図４に示す。図４に示されるように、[M+H]+=407のピークが得られた。このことから、生成物Pの分子量は406と推定された。
【実施例８】
【０１６７】
生成物Pの1H-及び、13Ｃ-核磁気共鳴スペクトル
JNM-AL300FT NMR SYSTEM（日本電子）を用いて、生成物Pについて、13C-NMR及び、1H-NMRスペクトルを測定した。試料はDMSO-d6に溶解し、DSSを標準として、化学シフト（(）値は、ppmで表した。また、DEPT法、H-H COSY、C-H COSY、NOEも測定した。
13C-NMRの結果を図５に示す。13C-NMRではβ-グルコシル基（δ62.0（6位）、71.0（4位）、74.8（2位）、78.3（5位）、78.6（3位）、102.7ppm（1位））の存在が示され、アグリコンについてはδ＝166.8（13'位）、156.3（10'位）、155.6（1'位）、149.0(12'位)、145.9（3'位）、127.8（8'位）、120.5（4'位）、120.3（7'位）、119.0（6'位）、118.9（9'位）、118.8（5'位）、117.1（2'位）、107.1（11'位）の存在が示された。
1H-NMRの結果を図６に示す。1H-NMRに関してもβ-グルコシル基（δ3.60〜5.41ppm）とアグリコンが１対１で結合しており、カップリングのパターンから9及び10位の水素（δ7.06（doublet）及び7.46（doublet））、2位（δ7.40（doublet））、3位（δ7.26（doublet doublet））、5位（δ8.85（doublet））と推定され、アグリコンのヒドロキシル基は2つでδ＝11.19及び10.54ppmとすると推定構造と整合性がとれる。
これらの結果から、生成物Pは図７のような構造をもつ新規な配糖体であると結論付けされた。
【実施例９】
【０１６８】
紫外可視吸収スペクトル
生成物Pの紫外可視吸収スペクトルの測定には、UV/VIS Spectrophotometer V-530 JASCO（日本分光）を用いた。溶媒には脱イオン水、DMSOを用い、190〜800nmのスペクトルを測定した。
【０１６９】
生成物Pは粉末状態で黄色〜褐色を呈し、水に難溶であったがDMSOやDMFにはよく溶解した。これらの溶媒に溶かすと褐色を呈した。水には難溶であったが、50μg/ml程度では比較的溶解した状態であったため、可視紫外吸収スペクトルを測定することができた。結果を図７に示す。372.5nm、234.5nm、213.0nmに吸収極大が認められた。
【０１７０】
また、生成物Pの50μg/mlのDMSO溶液について可視紫外吸収スペクトルを測定した結果を図８に示す。376.5nmに強いピークを認め、紫外部（272.5、279.5nm）にも吸収が認められた。
【実施例１０】
【０１７１】
チロシナーゼ阻害作用
0.1Mリン酸緩衝液にそれぞれ0,6,12, 24, 60mMに溶解したアルブチン水溶液1ml、80U/mlマッシュルーム由来のチロシナーゼ1ml、5mM  DOPA1mlをそれぞれ加え、475nmにおける吸光度を5分後に測定した。
上記の操作において、アルブチン水溶液に代えて、生成物Pを１N水酸化ナトリウムで溶解後、１N塩酸で中和したものを使用した他は上記と同様の操作を行った。生成物Pの濃度は、0,6,12,24mMとした。
上記の操作において、アルブチン水溶液に代えて、ゲンチジン酸ナトリウム塩の水溶液を使用した他は上記と同様の操作を行った。ゲンチジン酸ナトリウム塩の濃度は上記のアルブチンの場合と同様とした。
結果を図１０に示す。図１０のグラフの縦軸の475nmにおける吸光度は、DOPAの酸化生成物であるドーパクロムの吸収極大であり、475nmにおける吸光度が低くなることは、チロシナーゼによるDOPAの酸化反応を阻害していることを示す。
【０１７２】
図１０から、生成物Pは濃度依存的にチロシナーゼ活性を阻害していることが分かる。これに対してアルブチン及びゲンチジン酸はチロシナーゼ阻害作用が弱かった。このことから、生成物Pはメラニン生成を抑制し、美白剤としての有用性があることが分かる。
【実施例１１】
【０１７３】
生成物Pの抗酸化作用
安定なラジカルであるDPPH（1，1-ジフェニル-２-ピクリルヒドラジル）を0.02重量%となるようにエタノールに溶解し、等量の0.05〜１.0mMの試料溶液を添加後、室温で20分放置した。その後、分光光度計によってDPPH の吸収極大である540nmの吸光度を測定した。
【０１７４】
試料溶液としては、生成物P、ゲンチジン酸ナトリウム、アルブチン、及び既存の抗酸化剤であるアスコルビン酸のそれぞれの水溶液を用いた。生成物Pは１N水酸化ナトリウムで溶解後、１N塩酸で中和したものを使用した。各試料の濃度は、0,0.05,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1mMとした。
【０１７５】
結果を図１１に示す。図１１から明らかなように、DPPHラジカルの半分を消去できる濃度を算出したところ、アスコルビン酸が93μM、ゲンチジン酸ナトリウムが50μM、アルブチンが800μMであったのに対して、生成物Pは143μMであった。生成物Pはアスコルビン酸やゲンチジン酸には及ばないものの、これに近いラジカル消去活性を有し、抗酸化物質として使用できることが分かる。
【図面の簡単な説明】
【０１７６】
【図１】反応液に含まれるフェノール性配糖体とフェノール性化合物との比率が生成物に与える影響を示す図である。
【図２】酸化酵素としてHRP（Ａ）、ARP（Ｂ）及びSBP（Ｃ）を用いた場合の反応生成物の薄層クロマトグラフィーの結果を示す図である。
【図３】実施例４において、HRPを用いて酸化反応を行うことにより得られた反応液をゲルろ過クロマトグラフィーにかけることにより、目的物が単離されたことを示す図である。
【図４】実施例４において、HRPを用いて酸化反応を行うことにより得られた生成物PのMALDI-TOF/MSの結果を示す図である。
【図５】実施例４において、HRPを用いて酸化反応を行うことにより得られた生成物Pの13C-NMRの結果を示す図である。
【図６】実施例４において、HRPを用いて酸化反応を行うことにより得られた生成物Pの1H-NMRの結果を示す図である。
【図７】生成物Pの推定構造を示す図である。
【図８】生成物Pの水溶液の紫外可視吸収スペクトルを示す図である。
【図９】生成物PのDMSO溶液の紫外可視吸収スペクトルを示す図である。
【図１０】生成物Pのチロシナーゼ活性阻害作用を、アルブチンおよびゲンチジン酸のそれと比較した図である。
【図１１】生成物Pのチロシナーゼ抗酸化作用を、アルブチン、ゲンチジン酸及びアスコルビン酸のそれと比較した図である。
【図１】
2005281247.tif 000084
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
2005281247.tif 000092
【図１０】
2005281247.tif 000093
【図１１】
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