(57)【要約】【課題】  極めて精度が高く、相関係数の高い検量線を作成することができるので、従来よりも正確なシリコーンの分析方法及び医薬品等の薬品中の微量のシリコーンの分析方法を提供すること。【解決手段】  試料を熱分解し、得られる熱分解生成物をガスクロマト法により分離し、次いで質量分析法により該試料中のシリコーン量を分析する方法であって、前記熱分解をヒアルロン酸の存在下に行うことを特徴とするシリコーンの分析方法を構成とする。【選択図】      図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料を熱分解し、得られる熱分解生成物をガスクロマト法により分離し、次いで質量分析法により該試料中のシリコーン量を分析する方法であって、前記熱分解をヒアルロン酸の存在下に行うことを特徴とするシリコーンの分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、熱分解ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）及び質量分析法（ＭＳ）を適用したシリコーンの分析方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
種々の薬品、特に液状の薬品において、その包装容器のシール剤であるシリコーンが混入してしまい品質低下を生じることが知られているが、特に前記薬品が医薬用途に適用される場合には大きな問題となる。これらの問題発生を防止するために、種々の薬品中での微量のシリコーンを定量的に分析することが産業上強く要望されている。
【０００３】
このため、従来から、熱分解ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）と質量分析法（ＭＳ）とを組み合わせたシリコーンの定量分析方法が検討されてきた。この方法では、試料を熱分解してシリコーンの熱分解生成物であるヘキサメチルシクロトリシロキサン及びオクタメチルシクロテトラシロキサンを発生させ、これらをＧＣ法で分離し、次いでＭＳ法で定量する分析方法で、所定濃度のシリコーンを有機溶媒に溶解した試料を用いて予め作成された検量線と対比することで試料中のシリコーンを定量する分析方法である。
【非特許文献１】伊藤邦夫編、シリコーンハンドブック、ｐ．768、日刊工業新聞社  １９９０年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、従来の方法においては、ばらつきが大きく精度の高い検量線を作成することができず、実質的に有効な定量分析を行うことが困難であるという課題があった。
これは、本発明者の検討結果によれば、現象的にシリコーンの熱分解現象の再現性が乏しく、単に熱分解条件を変更することのみでは改良されえないものであった。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、上記従来技術の状況に鑑み、鋭意検討したところ、シリコーンの熱分解をヒアルロン酸の存在下で行うと、シリコーンの熱分解が極めて再現性が高く行われること、その結果として、精度の極めて高い検量線を作成することができ、試料中のシリコーンを定量分析できることを見出し本発明に至ったものである。
【０００６】
即ち、本発明は、試料を熱分解し、得られる熱分解生成物をガスクロマト法により分離し、次いで質量分析法により該試料中のシリコーン量を分析する方法であって、前記熱分解をヒアルロン酸の存在下に行うことを特徴とするシリコーンの分析方法である。
【発明の効果】
【０００７】
本発明は、試料を熱分解し、得られる熱分解生成物をガスクロマト法により分離し、次いで質量分析法により当該試料中のシリコーン量を分析する際に、熱分解をヒアルロン酸の存在下で行うことにより、極めて精度が高く、相関係数の高い検量線を作成することができるので、従来よりも正確なシリコーンの定量分析が可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明においては、ヒアルロン酸の存在下でシリコーンを熱分解するので、安定してシリコーンの熱分解生成物が得られ、高精度の検量線が容易に得ることができる。
【０００９】
本発明に用いられるヒアルロン酸の分子量については、特に制限されるものではないが、好ましくは１５０万〜２６０万である。
【００１０】
また、本発明に用いられるヒアルロン酸の量については、好ましくは試料２〜３ｍｇに対して、ヒアルロン酸５０〜４００μｇ含有させる。
【実施例】
【００１１】
以下、実施例をもって本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されない。
【００１２】
実施例１
本発明を実施するに先立ち、使用するヒアルロン酸中にシリコーンが含まれていないことを確認した。
添加するヒアルロン酸として、分子量１５０万〜２６０万程度のヒアルロン酸粉末を準備した。
前記粉末５０〜４００μｇを熱分解容器に入れ、後述の熱分解装置にセットした。
熱分解炉は、フロンティア・ラボ社製のダブルショットパイロライザイー（機種名：Ｐｙ−２０２０Ｄ）を用いた。熱分解炉の温度（熱分解温度）は７００℃として、熱分解生成物（ガス）を発生させた。
熱分解生成物の分離に用いたガスクロマトグラフにはＡｇｉｌｅｎｔ社製の６８９０を用いた。
キャリアーガスとして、ヘリウムを使用し、分離カラムにはＪ＆Ｗ社製のＤＢ１−ＨＴ（３０ｍ）を使用した。カラム温度は常に１００℃とし、また注入口温度は２５０℃とした。
質量分析計は、日本電子社製の二重収束型質量分析計であるＤＸ−３０３を使用した。測定方法として特定の質量数（ｍ／ｚ）だけを観測する選択イオンモニタリング（ＳＩＭ）法を用いた。観測する質量数は２０７及び２８１である。これらはそれぞれ、ヘキサメチルシクロトリシロキサン及びオクタメチルシクロテトラシロキサンに由来する質量数である。
質量数２０７及び２８１のクロマトグラム上にヘキサメチルシクロトリシロキサン及びオクタメチルシクロテトラシロキサンが現れないことを確認した。尚、シリコーンが存在する場合、その熱分解生成物であるヘキサメチルシクロトリシロキサンは１分４０秒付近に、オクタメチルシクロテトラシロキサンは２分１０秒付近に観測されるが、本実験においては前記時間経過してもピークは認められなかった。
【００１３】
次に、シリコーン標準液を作製し、検量線を作成した。
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）を溶剤とした５０ｐｐｍシリコーン標準液を作製した。この標準溶液を熱分解容器に添加し、数分放置しＴＨＦを揮発させた後、これに前記シリコーンが含まれていないヒアルロン酸粉末を１００μｇ添加した。標準溶液の熱分解容器への添加量は１μｌ、２μｌ及び４μｌとした。各添加量を変えた標準溶液について３回測定を行い、得られるクロマトグラムよりそのピーク面積を算出し、検量線を作成した。ヒアルロン酸粉末を添加することで、ピーク面積のばらつきは抑えることができ、かつ相関係数の高い検量線を作成できた。
検量線はヘキサメチルシクロトリシロキサン及びオクタメチルシクロテトラシロキサン各々について作成した（図１、図２参照）。
各添加量を変えた標準溶液を測定したときのクロマトグラムより得られるピーク面積の変動係数は３〜２５％程度であった。
【００１４】
最後に、実試料を用いて測定を行った。
実試料としては、表面にシリコーンが０．２ｍｇ塗布された注射器用として用いられるゴム栓を用いた。このゴム栓をヘキサンで抽出し、得られた抽出液を濃縮し、この液を１０μｌ熱分解容器に添加後、測定を行った。得られたクロマトグラムよりピーク面積を算出し、作成した検量線を用いて定量を行い、測定を５回行った。その結果、シリコーン量は、０．１９ｍｇ、０．２０ｍｇ、０．１３ｍｇ、０．１２ｍｇ及び０．１７ｍｇであり、５回の平均値０．１６ｍｇであった。
尚、定量は２つの検量線にて、各々定量しその平均値を定量値とした。
【００１５】
比較例１
実施例１において、ヒアルロン酸を添加しないこと以外は、同じ操作を行った。
検量線はヘキサメチルシクロトリシロキサン及びオクタメチルシクロテトラシロキサン各々について作成した（図３、図４参照）。
その結果、各濃度におけるピーク面積の変動係数は５０〜１５０％であり、ヒアルロン酸存在下における変動係数より高く、精度が悪いことが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００１６】
本発明は、微量のシリコーンを高い精度で分析することができるので、医薬品等の薬品中の微量のシリコーン分析が可能であり、医薬品等の品質管理に適用できる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】ヒアルロン酸を添加した時のヘキサメチルシクロトリシロキサンの検量線である（実施例１）。
【図２】ヒアルロン酸を添加した時のヘキサメチルシクロテトラシロキサンの検量線である（実施例１）。
【図３】ヒアルロン酸を添加しなかった時のヘキサメチルシクロトリシロキサンの検量線である（比較例１）。
【図４】ヒアルロン酸を添加しなかった時のヘキサメチルシクロテトラシロキサンの検量線である（比較例１）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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