(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
コラーゲン含有原料またはコラーゲンを過酸化水素存在下で加熱する工程を含むことを特徴とする、着色していないコラーゲンペプチドの製造方法であって、過酸化水素濃度が６〜１０％であり、過酸化水素での処理温度が９０〜１０５℃であり、過酸化水素での処理時間が２〜４時間であり、得られるコラーゲンペプチドの分子量が４０００以下である、方法。
【請求項２】
さらにコラーゲン含有原料またはコラーゲンを蛋白分解酵素で処理することを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項３】
さらにコラーゲン含有原料またはコラーゲンを加熱処理することを特徴とする請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
蛋白分解酵素がパパインまたはプロテアーゼＭである請求項２または３に記載の方法。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法により得られるコラーゲンペプチド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コラーゲンペプチドの新規製造方法、およびそれにより得られるコラーゲンペプチドに関する。
【背景技術】
【０００２】
コラーゲンペプチドはコラーゲンを酵素等で処理して低分子化したものであり、生体において様々な作用をするといわれている。例えば、コラーゲンペプチドは健康食品として美肌効果（非特許文献１等参照）を目的として売り出され、その後、変形性関節症にも効果がある（非特許文献２等参照）ことが証明されて商品価値を高めている。これらの効果は、体内においてプロテオグリカン合成促進効果を有していることに起因するといわれている。また、コラーゲンペプチドは皮膚への浸透もよく、保湿性を有するので化粧品の成分としても用いられている。
【０００３】
このようなコラーゲンペプチドの作用は、コラーゲンを低分子化することによって生じるものである。体内への吸収を考えると、これらの作用は分子量が１００００以下のコラーゲンペプチドのほうが大きいと考えられる。そのため、コラーゲンの低分子化方法についてもいろいろと検討されている。しかしながら、従来から用いられているコラーゲンペプチドの製造方法は、原料からコラーゲンペプチドを煮沸によって抽出する、あるいはコラーゲンを酵素分解する（特許文献１〜３等参照）のが主流である。しかし、これらの方法では、コラーゲンの低分子化に長時間を要する、得られるコラーゲンペプチドの分子量が数万程度と大きい、コラーゲンペプチドが褐変などにより着色してしまう等の問題があった。上述のような作用のあるコラーゲンペプチドは分子量１００００以下のものが多く、このようなコラーゲンペプチドを迅速かつ大量に得ることが必要である。また、着色の問題は、特に化粧品などへの利用においてネックになっている。
【特許文献１】特開２００３−２８４５８６号公報
【特許文献２】特開２００４−５７１９６号公報
【特許文献３】特開２００６−８９号公報
【非特許文献１】菊池数晃、又平芳春：「ヒトの乾燥肌および肌荒れに対する海洋性コラーゲンペプチド含有飲料の有用性」 FRAGRANCE JOURNAL 31, 97-102 (2003)
【非特許文献２】Hashida, M., Miyatake, K., Okamoto, Y., FUJITA, K., MATUMOTO, T., MORIMATSU, F., SAKAMOTO, K, and MINAMI, S. Synergistic effects of D-glucosamine and collagen peptides on healing experimental cartilage injury. Macromol. Biosci., 3: 596-603, 2003
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
着色が抑制されている、あるいは着色していないコラーゲンペプチドを効率的に短時間で得るための製造方法を提供することが、本発明の課題である。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは上記課題に鑑みて鋭意研究を重ね、コラーゲンを過酸化水素存在下で加熱処理すると低分子化が起こること、得られたコラーゲンペプチドが着色しないこと、さらにはプロテアーゼ処理および加熱処理を行うことによりコラーゲンペプチド製造時間を短縮することができること等を見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００６】
すなわち本発明は：
（１）コラーゲン含有原料またはコラーゲンを過酸化水素存在下で加熱することを特徴とする、着色が抑制された、あるいは着色していないコラーゲンペプチドの製造方法；
（２）さらにコラーゲン含有原料またはコラーゲンを蛋白分解酵素で処理することを特徴とする（１）記載の方法；
（３）さらにコラーゲン含有原料またはコラーゲンを加熱処理することを特徴とする（１）または（２）記載の方法；
（４）蛋白分解酵素がパパインまたはプロテアーゼＭである（２）または（３）に記載の方法；
（５）過酸化水素濃度が６〜１０％であり、過酸化水素での処理温度が９０〜１０５℃であり、過酸化水素での処理時間が２〜４時間であり、得られるコラーゲンペプチドが着色しておらず、分子量が４００００以下である（１）〜（４）のいずれかに記載の方法；
（６）（１）〜（４）のいずれかに記載の方法により得られるコラーゲンペプチド；
（７）（５）記載の方法により得られるコラーゲンペプチド
を提供するものである。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、着色が抑制された、あるいは着色していないコラーゲンペプチド（特に分子量約４００００以下のもの）が効率的に短時間で得られる。したがって、本発明方法により、化粧品、健康食品などに利用価値が高いコラーゲンペプチドが得られる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本明細書の用語「コラーゲンペプチド」とは、加水分解等の方法にてコラーゲンを低分子化して得られるペプチドをいう。コラーゲンペプチドの数平均分子量および重量平均分子量は、ゲル濾過や高速液体クロマトグラフィーなどの当業者に公知の手段および公知の方法を用いて、容易に決定することができる。本明細書において、単に「分子量」という場合には、後ほど説明するようにＨＰＬＣを用いて分析した際の最大ピークのリテンションタイムから求められる分子量を意味する。
【０００９】
本発明は、１の態様において、コラーゲン含有原料またはコラーゲンを過酸化水素存在下で加熱することを特徴とするコラーゲンペプチドの製造方法を提供するものである。本発明において、過酸化水素処理によってコラーゲンを低分子化させると、得られるコラーゲンペプチドの着色が抑制され、後述のごとく、着色していないコラーゲンペプチドを得ることもできる。コラーゲンペプチドの「着色が抑制されている」とは、得られたコラーゲンペプチドの溶液またはコラーゲンペプチド粉末が肉眼で確認した場合に、従来法（例えば、本発明系の比較例１）により得られたコラーゲンペプチドよりも着色が薄いことを意味する。好ましくは、「着色が抑制されている」とは、褐変などによる着色がほとんど認められないことを意味する。着色が抑制されたコラーゲンペプチドは、化粧品、飲食物などに利用価値が高い。
【００１０】
本発明のコラーゲンペプチドの原料となるコラーゲンはいずれの生物に由来するものであってもよく、例えば、ウシ、ウマ、ヒツジなどの陸生動物や鳥類の骨、結合組織、真皮などに由来するものであってもよく、あるいは魚類などの水棲動物の骨、結合組織、ヒレ、ウロコなどに由来するものであってもよい。本発明の好ましいコラーゲンペプチドの原料たるコラーゲンは魚類のウロコに由来するものである。好ましい魚類はタイ、テラピアなどである。
【００１１】
これらのコラーゲン含有原料またはコラーゲンを、直接本発明の方法により過酸化水素存在下で加熱処理してもよいが、コラーゲンペプチドの収量の増加、得られたコラーゲンペプチドの純度の増加、得られたコラーゲンペプチドの風味の向上などの観点から、これらの原料を脱灰してから、そして／あるいは、これらの原料からコラーゲンを抽出してから過酸化水素存在下で加熱処理することが好ましい。例えば、脱灰した魚類のウロコを直接過酸化水素存在下で加熱してもよい。これらの原料からのコラーゲンの抽出は、熱水抽出、高圧抽出などの公知方法により行うことができる。必要な場合には、抽出したコラーゲンを精製してから本発明の方法を適用してもよい。コラーゲンの精製方法としては公知の蛋白精製方法を適用することができ、硫安沈殿、イオン交換クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィーなどが挙げられる。
【００１２】
過酸化水素でのコラーゲン含有原料またはコラーゲンの処理条件は、例えば、コラーゲン含有原料またはコラーゲンの由来、純度、量、必要とされるコラーゲンペプチドの分子量、過酸化水素での処理条件、蛋白分解酵素での処理条件、過酸化水素濃度、処理温度、処理時間などに応じて適宜選択し変更しうる。過酸化水素濃度は通常約２％ないし約２０％であり、好ましくは約６％〜約１２％であり、例えば約６％、約８％、約１０％、約１２％などであってもよい。本明細書において、過酸化水素濃度の％表示は特に断らないかぎり、体積／体積％である。過酸化水素水中でのコラーゲン含有原料またはコラーゲンの処理温度は通常約７０〜約１２０℃であり、例えば約８０〜約１１５℃、好ましくは約９０〜約１０５℃、さらに好ましくは約９５〜約１００℃（１００℃以下だと加圧の必要なし）である。過酸化水素水中でのコラーゲン含有原料またはコラーゲンの処理時間は数十分〜数時間が適当であり、例えば、約３０分、約１時間、約２時間、３約時間、約４時間、約５時間、約６時間などであってよい。かかる過酸化水素処理は滅菌の意味合いもあり、蛋白分解酵素処理後の過酸化水素での処理には蛋白分解酵素の失活（蛋白分解酵素の種類によっては失活しないものもある）と滅菌の両方の意味合いもある。
【００１３】
また本発明は、さらにコラーゲン含有原料またはコラーゲンを蛋白分解酵素で処理することを特徴とするコラーゲンペプチドの製造方法を提供する。コラーゲン含有原料またはコラーゲンを蛋白分解酵素で処理することにより、本発明によりコラーゲンペプチドの製造の所要時間を大幅に短縮することができる（同じ分子量のコラーゲンペプチドを得るのに数分の１の時間で済むこともある）。
【００１４】
蛋白分解酵素での処理において、いずれの蛋白分解酵素であっても使用できるが、コラーゲンペプチドの用途が飲食物や医薬品であることが多いので、有毒な生物由来の蛋白分解酵素は避けた方がよい。また、エンド型の蛋白分解酵素が好ましい。本発明に使用可能な蛋白加水分解酵素の典型例としては、パパイン、ブロメライン、ペプシン、トリプシン、麹菌由来の酵素、納豆菌由来の酵素などが挙げられるが、これらに限らない。蛋白分解酵素は市販もされており、プロテアーゼＭ、プロテアーゼＡ「アマノ」Ｇ、プロチンＳＤ−ＰＣ１０Ｆ、デナチームＡＰ、オリエンターゼＯＮＳなどの商品名で販売されている。好ましい蛋白分解酵素はプロテアーゼＭ、パパインなどである。これらの蛋白分解酵素を１種またはそれ以上を組み合わせて用いることができる。なお、本明細書では、プロテアーゼのほか、プロテイナーゼ、ペプチダーゼに分類される酵素もプロテアーゼに含めるものとする。
【００１５】
蛋白分解酵素での処理は、過酸化水素での処理の前、後、あるいは過酸化水素での処理中または同時に行うことができる。過酸化水素による蛋白分解酵素の酸化による失活を考慮すると、コラーゲン含有原料またはコラーゲンを過酸化水素存在下で加熱する前に、コラーゲン含有原料またはコラーゲンを蛋白分解酵素で処理することが好ましい。ただし、プロテアーゼＭ、プロテアーゼＡ「アマノ」Ｇ、プロテアーゼＳ「アマノ」Ｇなどのプロテアーゼは酸化剤の影響を受けないかあるいは受けにくいので、過酸化水素での処理の前、あるいは過酸化水素での処理中または処理後に、これらの蛋白分解酵素を用いてコラーゲン含有原料またはコラーゲンを処理することができる。これらの蛋白分解酵素での処理条件は、蛋白分解酵素の使用条件（例えば、温度、ｐＨ、反応時間、酵素量など）、コラーゲン含有原料またはコラーゲンの由来、純度、量、必要とされるコラーゲンペプチドの分子量、過酸化水素での処理条件、蛋白分解酵素での処理条件などに応じて適宜選択し、変更することができる。パパインを蛋白分解酵素として用いる場合、例えば、常温〜約７０℃（最適温度は約６０℃）にて、例えば、約３０分〜約２時間作用させることができる。また、プロテアーゼＭを蛋白分解酵素として用いる場合、例えば、約３０℃〜約５５℃にて（最適温度は約６０℃）、例えば、約３０分〜約２時間作用させることができる。
【００１６】
上記の蛋白分解酵素および／または過酸化水素の作用を促進するために、部分的にコラーゲンの構造を破壊することも好ましい。かかる部分的破壊は酸処理、アルカリ処理、加熱処理などにより行うことができるが、加熱処理によるのが好ましい。したがって、本発明は、さらにコラーゲン含有原料またはコラーゲンを加熱処理することを特徴とするコラーゲンペプチドの製造方法に関する。
【００１７】
本発明におけるコラーゲン含有原料またはコラーゲンの加熱処理は、過酸化水素での処理の前、後、あるいは過酸化水素での処理中または同時に行うことができる。また、本発明におけるコラーゲン含有原料またはコラーゲンの加熱処理は、蛋白分解酵素での処理の前、後、あるいは蛋白分解酵素での処理中または同時に行うことができる。好ましくは、蛋白分解酵素での処理の前に加熱処理を行うことによって、適度に変性され、蛋白分解酵素の作用を受けやすくなったコラーゲン含有原料またはコラーゲンを得ることができる。
【００１８】
本発明におけるコラーゲン含有原料またはコラーゲンの加熱処理は、水、塩の水溶液、緩衝液、希酸水溶液、希アルカリ水溶液などの水性溶媒にコラーゲン含有原料またはコラーゲンを懸濁または溶解させ、約１００℃前後にて、通常は約７０〜約１２０℃で加熱処理を数分〜数時間行うことができる。例えば、コラーゲン含有原料またはコラーゲンを水に懸濁または溶解させて加熱処理を行う場合、通常には、約９０℃〜１２０℃、好ましくは約９５℃〜約１０５℃、さらに好ましくは約９５〜約１００℃（１００℃以下だと加圧の必要なし）で数分〜数時間、好ましくは約２０分〜約６０分、例えば９５℃で３０分の加熱処理を行うことにより、コラーゲンの構造を部分的に破壊することができる。加熱処理のｐＨは特に限定されないが、中性付近が好ましい。これらの条件は、コラーゲン含有原料またはコラーゲンの由来、純度、量、必要とされるコラーゲンペプチドの分子量、過酸化水素での処理条件、蛋白分解酵素での処理条件などに応じて適宜選択し、変更することができる。
【００１９】
本発明の方法において得られるコラーゲンペプチドの分子量は、本発明の方法における様々なパラメータを適宜選択・変更することにより調節することができる。コラーゲンペプチドの分子量を調節するために、例えば、過酸化水素濃度、過酸化水素での処理温度、処理時間などを適宜選択してもよく、蛋白分解酵素の種類や量、反応条件を適宜選択してもよく、その前の加熱工程の温度、時間を適宜選択してもよい。例えば、本発明によるコラーゲンペプチドの製造法を用いれば、例えば、分子量約１００００あるいは数千の着色していないコラーゲンペプチドを、数時間以内で得ることも可能である。
【００２０】
本発明は、さらなる態様において、着色していないコラーゲンペプチドの製造方法を提供する。本明細書において「着色していない」とは、得られたコラーゲンペプチドの溶液またはコラーゲンペプチド粉末が肉眼で確認した場合に、褐変などによる着色が認められないことを意味する。着色していないコラーゲンペプチドは、化粧品、飲食物などに利用価値が非常に高い。
【００２１】
本発明において着色していないコラーゲンペプチドを得るためには、過酸化水素存在下での加熱工程における条件、すなわち過酸化水素濃度、過酸化水素処理時間および過酸化水素処理温度を選択する必要がある。過酸化水素での処理時間が長すぎると低分子化が進みすぎ、また実用的でない。過酸化水素での処理時間が短すぎると低分子化が不十分である。過酸化水素濃度が高いほどコラーゲンの低分子化が早くなるが、あまり濃度が高すぎても実用的でなく、除去も難しくなる。また過酸化水素濃度が低すぎると低分子化に時間がかかりすぎ、着色が抑制されにくくなる。例えば、約３０分〜６時間の過酸化水素処理で着色していないコラーゲンペプチドを得るには、過酸化水素濃度を約２〜約２０％とすることができ、好ましくは約５〜約１５％、より好ましくは約６〜約１０％とすることができる。過酸化水素での処理温度が高すぎると低分子化が進みすぎて分子量制御が困難となり、着色の心配もある。処理温度が低すぎると低分子化が不十分となり、処理時間も長くかかり、実用的でない。例えば、上記過酸化水素濃度および処理時間で着色していないコラーゲンペプチドを得るには、過酸化水素での処理温度を約８０〜約１１５℃とすることができ、好ましくは約９０〜約１０５℃、さらに好ましくは約９５〜約１００℃（１００℃以下だと加圧の必要なし）とすることができる。例えば、過酸化水素濃度約６〜約１０％、過酸化水素での処理温度約９０〜約１０５℃、過酸化水素での処理時間約２〜約４時間で、分子量約４００００以下の着色していないコラーゲンペプチドが得られる（実施例４参照）。
【００２２】
本発明により得られたコラーゲンペプチドは溶液状態、粉末状態など、用途に応じた形態にすることができる。本発明により得られたコラーゲンペプチドから過酸化水素を除去する必要がある場合には、凍結乾燥やスプレードライなどの方法によりコラーゲンペプチドを乾燥させることにより、これを行うことができる。
【００２３】
本発明の方法はバッチ方式で行うこともでき、あるいは連続プロセスにて行うこともできる。連続プロセスは、例えば、低分子化反応で得られたコラーゲンペプチドを一定の分子量カットオフ値を有する膜で分離する工程を含んでいてもよい。本発明の方法は単純な方法であるため、スケールアップが容易で、所望の分子量の、しかも用途によっては着色していないコラーゲンペプチドを大量生産するのに適している。
【００２４】
以下に実施例を示して本発明をさらに詳細かつ具体的に説明するが、実施例は本発明を限定するものではない。
【００２５】
本発明の方法において得られるコラーゲンペプチドの分子量は、本発明の方法における様々なパラメータを適宜選択・変更することにより調節することができる。コラーゲンペプチドの分子量を調節するために、例えば、過酸化水素濃度、過酸化水素での処理温度、処理時間などを適宜選択してもよく、蛋白分解酵素の種類や量、反応条件を適宜選択してもよく、その前の加熱工程の温度、時間を適宜選択してもよい。
【００２６】
本発明により得られたコラーゲンペプチドは溶液状態、粉末状態など、用途に応じた形態にすることができる。本発明により得られたコラーゲンペプチドから過酸化水素を除去する必要がある場合には、凍結乾燥やスプレードライなどの方法によりコラーゲンペプチドを乾燥させることにより、これを行うことができる。
【００２７】
本発明の方法はバッチ方式で行うこともでき、あるいは連続プロセスにて行うこともできる。連続プロセスは、例えば、低分子化反応で得られたコラーゲンペプチドを一定の分子量カットオフ値を有する膜で分離する工程を含んでいてもよい。本発明の方法は単純な方法であるため、スケールアップが容易で、所望の分子量の、着色が抑制された、あるいは着色していないコラーゲンペプチドを大量生産するのに適している。
【００２８】
以下に比較例および実施例を示して本発明をさらに詳細かつ具体的に説明するが、実施例は本発明を限定するものではない。
【００２９】
なお、下記実施例および比較例におけるコラーゲンおよびコラーゲンペプチドの分子量は、Superdex peptideを用いたゲルろ過クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）におけるピークトップのリテンションタイムを基に算出した。プルランを分子量スタンダードとして使用した。ＨＰＬＣ条件は、移動相：２０ｍＭ  ＣＨ３ＣＯＯＮａ＋２００ｍＭ  ＮａＣｌ（ｐＨ５．０）、流速：１．０ｍｌ／分、検出：２１０ｎｍで行った。
【実施例１】
【００３０】
過酸化水素存在下での加熱処理によるコラーゲンの低分子化について検討した。濃塩酸にて脱灰したテラピアのウロコ（２ｇ）を２０ｍｌの１０％過酸化水素水中で煮沸した。１０分間煮沸した場合のコラーゲンペプチドの分子量は７００００、１時間煮沸した場合のコラーゲンペプチドの分子量は５００００であった。
【００３１】
この実験において、過酸化水素存在下で加熱することによりコラーゲンペプチドの低分子化が起こることが初めて見出された。しかも、過酸化水素存在下で加熱しても（２時間煮沸しても）溶液に着色が見られなかった。過酸化水素非存在下では２時間の煮沸により溶液が黄色に変色した（図１）。
【００３２】
次に、ウロコ（２ｇ）を２０ｍｌの１０％過酸化水素中、９５℃で処理することとし、加熱時間を延長して実験を行った。加熱はオートクレーブ装置を９５℃に設定して行った。加熱１時間後〜８時間後に経時的にサンプリングし、分子量を測定した。結果を図２および図３に示す。対照系では分子量がほとんど低下していないのに対し、１０％過酸化水素添加系ではコラーゲンペプチドの分子量の低下が見られ、８時間で分子量７０００となった。対照系では加熱時間とともに溶液が褐変したのに対し、過酸化水素処理した実験系では全く褐変は認められなかった。残存ウロコを目視で確認したところ、過酸化水素添加により抽出率も上昇したことがわかった。
【実施例２】
【００３３】
上記実施例ではコラーゲンペプチドの低分子化に比較的長時間を要したので、プロテアーゼ処理の併用を試みた。濃塩酸にて脱灰したテラピアのウロコ（１ｇ）を１０ｇの水に添加し、９５℃で３０分加熱処理を行った。次に、パパイン（アサヒフードアンドヘルスケア製）１５３ｍｇ（タンパク質を２８ｍｇ含む）を添加し、６０℃で１時間処理した。パパインで１時間処理した後、１０％になるように過酸化水素を添加し、９５℃で４時間加熱した。遠心分離にて上清を得て、これを凍結乾燥したところ、分子量４８０で白色の低分子化コラーゲンペプチド０．９ｇを得た。
【実施例３】
【００３４】
実施例２のパパイン１５３ｍｇをプロテアーゼＭ（天野エンザイム製）１００ｍｇ（タンパク質を２８ｍｇ含む）に変えた以外は実施例２と同じ条件で実験を行った。その結果、分子量７０００で白色の低分子化コラーゲンペプチド０．８７ｇを得た。
【実施例４】
【００３５】
実施例１の実験系において、過酸化水素での処理条件およびコラーゲンペプチドの着色について検討した。先ず、１０％過酸化水素の存在下において、処理温度とコラーゲンの低分子化および着色の度合いについて調べた。結果を図４および表１に示す。過酸化水素処理温度については、１１５℃までは温度が高いほど低分子化に要する時間は短縮された。目視による処理溶液の着色の度合いは以下のとおりであった（処理時間４時間で観察）。９０℃から１０５℃の範囲では着色が全く認められず、１１０℃以上でもわずかに黄色〜褐色を呈した程度であった。過酸化水素を添加しない場合はすべての試験温度において明らかな黄色〜褐色を呈した。
【表１】
0005263870.tif 000002
Ｘは着色が全く検知できなかったこと、一重丸はわずかに黄色〜褐色を呈したこと、二重丸は明らかに黄色〜褐色を呈したことを示す。
【００３６】
次に、過酸化水素濃度について検討した。処理温度は９５℃および１２１℃とした。結果を図５（９５℃）および図６（１２１℃）に示す。９５℃、１２１℃で過酸化水素の濃度を１０％まで変えて加熱処理を行った。その結果、９５℃処理の場合、６％以上過酸化水素を添加することにより、２時間で低分子化反応が進行した。一方、１２１℃処理の場合は過酸化水素濃度を上げるにつれ、低分子化速度は速くなった。ただし、過酸化水素無添加の場合は分子量４００００以下にはならなかった。
【実施例５】
【００３７】
過酸化水素存在下でのプロテアーゼ処理を行う実験系でコラーゲンペプチドを得た。濃塩酸にて脱灰したテラピアのウロコ（１ｇ）を１０ｍｌの１０％過酸化水素水に添加し、これにプロテアーゼＭ（天野エンザイム製）１００ｍｇを添加し、３０℃で３時間撹拌した。その後、９５℃にセットしたオートクレーブ装置にて１〜４時間加熱した。１０％過酸化水素およびプロテアーゼＭ添加系では、９５℃で２時間加熱するとコラーゲンペプチドの分子量が４１００にまで低下した。プロテアーゼＭを添加しなかった系では、２時間の加熱で分子量は約４００００であった。過酸化水素処理した実験系では溶液の褐変は全く認められなかった。
【００３８】
比較例１
従来法によるコラーゲンペプチドの製造
テラピアのウロコ４ｇを濃塩酸にて脱灰し、２ｇの脱灰ウロコを得て、２０ｍｌの水に添加し、３時間煮沸した。煮沸後のコラーゲンの分子量は６７０００であった。煮沸後の上清にプロテアーゼ（パパイン、２０ｍｇ）を添加し、６０℃で１．５時間反応させた後、１０分間煮沸してプロテアーゼを失活させてから乾燥させ、分子量２０００のコラーゲンペプチドを得た。上記従来法によれば最終産物に明らかな褐変が見られた。また、煮沸時間が長いことも従来法の欠点と考えられた。
【産業上の利用可能性】
【００３９】
本発明によれば、短時間でコラーゲンペプチドが大量に得られ、しかも着色が抑制された、あるいは着色していないコラーゲンペプチドを得ることができる。したがって、本発明は化粧品、飲食物（特に健康食品）などの分野において利用可能である。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】図１は、コラーゲンを過酸化水素存在下（左）および非存在下（右）で煮沸処理した場合のコラーゲンペプチド溶液の着色の有無を示す図である。
【図２】図２は、過酸化水素（１０％）存在下での加熱処理および過酸化水素不存在下での加熱処理によるコラーゲンペプチドの経時的低分子化を示すアクリルアミドゲル電気泳動のパターンを示す図である。左の２ｈ〜８ｈのセットは過酸化水素（１０％）存在下での２時間〜８時間の低分子化、右の１ｈ〜８ｈのセットは過酸化水素不存在下での１時間〜８時間の低分子化の結果を示す。ｍａｒｋｅｒは分子量マーカーである。
【図３】図３は、過酸化水素存在下での加熱処理によるコラーゲンペプチドの経時的低分子化（分子量変化）を示す図である。
【図４】過酸化水素処理の温度とコラーゲンペプチドの低分子化の関連を示す図である。
【図５】９５℃で処理した場合の過酸化水素濃度とコラーゲンペプチドの低分子化の関係を示す図である。
【図６】１２１℃で処理した場合の過酸化水素濃度とコラーゲンペプチドの低分子化の関係を示す図である。
【図１】
0005263870.tif 000003
【図２】
0005263870.tif 000004
【図３】
0005263870.tif 000005
【図４】
0005263870.tif 000006
【図５】
0005263870.tif 000007
【図６】
0005263870.tif 000008