(57)【要約】【課題】  損傷した上皮細胞を修復する装置および方法を提供すること。【解決手段】上皮細胞が損傷した患者から採取した血液を、血液から白血球を除去する手段を有する血液処理手段に通過させることを特徴とする損傷上皮の修復方法および装置。【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液から白血球を除去する手段を有する血液処理手段を含むことを特徴とする損傷上皮の修復装置。
【請求項２】
血液から白血球を除去する手段が、繊維、多孔質体、粒子、フィルム、平膜、中空糸、チューブ状物質の中から選ばれる少なくとも1種であることを特徴とする、請求項１記載の修復装置。
【請求項３】
上皮細胞が損傷した患者から血液を採取する手段と、該血液を送液する手段と、血液入口、血液出口、及び血液から白血球を除去する手段を有する血液処理手段と、血液を患者に返血する手段とが、この順序でチューブにより液密に接続されてなる、損傷上皮の修復装置。
【請求項４】
損傷した上皮細胞が腸管上皮細胞であることを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載の修復装置。
【請求項５】
上皮細胞が損傷した患者から採取した血液を、血液から白血球を除去する手段を有する血液処理手段に通過させることを特徴とする損傷上皮の修復方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、人体の腸管等の内壁を構成する上皮細胞において、損傷した上皮細胞を修復することが可能な装置に関する。さらに詳しくは、本発明の装置は、その主要部分として、血液の流出口と流入口を有し、さらに白血球を除去することが可能な手段を有することを特徴とする装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
腸管上皮の更新は生涯にわたり継続され、数日単位で繰り返されているとされる。腸管上皮は消化管管腔内に突出する絨毛とそれに隣接するくぼみである腸陰窩を最小単位として再生、更新がなされていると考えられている。腸陰窩内の底部に存在する腸管上皮幹細胞が自己増殖を繰り返すとともに、腸管上皮を構成する主な４種の細胞（吸収上皮、杯細胞、腸管内分泌細胞、パネート細胞）に分化しうる増殖が活発な腸管上皮前駆細胞を供給する。これらが腸陰窩から絨毛方向に移動するに従い成熟した上皮細胞となり、絨毛先端に達すると死細胞となり管腔内に脱落する。
【０００３】
腸管上皮は元来最も再生能力の高い組織であると認識されることが多いが、一方で重篤な放射線傷害や特定の難治性炎症性腸疾患では粘膜上皮の修復が行い得なくなることが致命的となる。
【０００４】
従って、腸管上皮細胞の由来、特徴づける特異的発現分子や増殖、分化を調節するメカニズムを解明することは、上記疾患の新規治療法の開発にとって重要である。これに関連し、腸管以外の上皮細胞供給機構が存在する可能性が示されているものの（非特許文献１）、その詳細は明らかでない。
【０００５】
一方、近年、体外血液循環治療が種々の疾患を治療する目的で使用されており、例えば患者血液中の白血球を低減させるいわゆる白血球除去療法が、炎症性腸疾患やＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染症の治療として用いられている。（特許文献１、特許文献２）
【特許文献１】欧州特許出願公開第３１９９６１号明細書
【特許文献２】特開２００３−２３５９５９号公報
【非特許文献１】日本消化器病学会雑誌、第100巻、第12号、13頁−18頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の課題は、修復が行えないことが致命的な事態につながる損傷した上皮細胞を修復する装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記の課題を解決するため、上皮細胞の損傷を伴っている患者に体外循環型白血球除去器を適用して白血球除去療法を施行し、患者の上皮細胞の変化を詳細に研究した結果、白血球除去療法を行った後に、上皮細胞が急速に増加していることを見出し、該知見に基づき本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち本発明は、次の発明に関するものである。
【０００９】
（１）血液から白血球を除去する手段を有する血液処理手段を含むことを特徴とする損傷上皮の修復装置。
（２）血液から白血球を除去する手段が、繊維、多孔質体、粒子、フィルム、平膜、中空糸、チューブ状物質の中から選ばれる少なくとも1種であることを特徴とする、上記  （１）記載の修復装置。
（３）上皮細胞が損傷した患者から血液を採取する手段と、該血液を送液する手段と、血液入口、血液出口、及び血液から白血球を除去する手段を有する血液処理手段と、血液を患者に返血する手段とが、この順序でチューブにより液密に接続されてなる、損傷上皮の修復装置。
（４）損傷した上皮細胞が腸管上皮細胞であることを特徴とする、上記（１）〜（３）のいずれかに記載の修復装置。
（５）上皮細胞が損傷した患者から採取した血液を、血液から白血球を除去する手段を有する血液処理手段に通過させることを特徴とする損傷上皮の修復方法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、修復が行えないことが致命的な事態につながる損傷した上皮細胞を修復する装置及び方法が提供される。さらに、本発明の装置及び方法を用いることにより様々な上皮細胞の損傷を伴う疾患の治療が可能となることが期待される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１２】
上皮細胞とは身体の内外の遊離面を覆う細胞である。つまり、腸、口腔、食道、気管支、肺、腹膜などの表面を覆う細胞である。例えば、腸の場合は、腸管の表面に存在し、これを覆う一層の細胞群であり、具体的には自己増殖を繰り返す上皮幹細胞、増殖帯の上皮前駆細胞、多くの部分の腸管上皮を構成する主な4種の成熟上皮細胞、即ち、吸収上皮、杯細胞、腸管内分泌細胞、パネート細胞から構成されている。
【００１３】
上皮細胞が損傷した患者とは、腸、口腔、食道、気管支、肺、腹膜などが炎症や潰瘍などにより、上皮の修復が行い得なくなる状態を指す。このような状態は、具体的には潰瘍性大腸炎、クローン病、放射線腸炎、腸管ベーチェット病（単純性潰瘍）、移植片対宿主病（GVHD）腸炎、非特異性小腸潰瘍、口内炎、食道炎、気管支炎、肺炎、腹膜炎などの患者において観察される。
【００１４】
本発明において血液というときには、各種血球成分、さらに血漿、血清などの血液成分及び／又はそれらの混合物も包含される。
本発明において患者から血液を採取する手段とは、具体的には採血針等をいう。
本発明において血液を送液する手段とは具体的にはチューブ内の血液を移動させる手段であり、血液チューブポンプ等をいう。
本発明において血液を患者に返血する手段とは、具体的には血液ポンプ、返血針等からなるものをいう。
【００１５】
本発明において、血液から白血球を除去する手段とは、例えば白血球除去材としての、不織布、織布等の繊維、多孔質体、粒状やビーズ状の粒子、フィルム、平膜、中空糸、チューブ状材料が例示できる。中でも白血球除去できる高い表面積を有することができる点より多孔質体、不織布が好ましく用いられ、最も好ましくは不織布があげられる。
【００１６】
これらの白血球除去材の材質としては、特に限定されないが、セルロース等の天然高分子、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート等のポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン等のポリオレフィン、ポリフッ化ビニリデン、ポリアミド、ポリイミド、ポリウレタン、ポリスルホン、ポリアクリロニトリル等の高分子材料を例示できる。これらの表面は、白血球除去能を向上させるため、あるいは血小板など他の血液成分の付着を防ぐなどのために、さらに表面処理をしてもよい。
【００１７】
白血球除去材が不織布の場合、フィラメントはモノフィラメントでもマルチフィラメントでも構わない。また平均繊維直径０．８μｍ以上４０μｍ未満のものが好ましい。繊維径が大きくなると基材の表面積確保が困難となり、白血球の除去性能が低下するので好ましくない。一方、繊維径が小さくなると除去材の目詰まりが発生しやすくなり好ましくない。
また白血球除去材として、ビーズの形態をとる酢酸セルロース担体も好適例としてあげることができる。
【００１８】
本発明の修復装置においては、少なくとも上記血液採取手段、血液送液手段、血液処理手段、血液返血手段から構成され、これらがこの順序で被処理血液を流通させるためのチューブにより液密に接続されている。
【００１９】
また本発明の修復装置には、薬剤、あるいは血液の抗凝固目的で抗凝固剤等を血液に添加する手段を備えていても良い。抗凝固剤を例示すると、抗凝固活性を有する化合物であれば、特に限定されないが、ヘパリン、低分子ヘパリン、メシル酸ナファモスタット、メシル酸ガベキセート、アルガトロバン、クエン酸ナトリウム等が好適例として挙げられ、好ましくはヘパリン或いはメシル酸ナファモスタットが良好に用いられる。
また本発明の装置には、血液の流量や圧力を測定する手段を備えていてもよい。
【００２０】
本発明の装置を用いた血液の処理条件は、対象者、対象者の疾患の状況等によっても異なるが、一般に１回当たり流速２０〜５０ml／分の条件で30分〜２時間血液循環することにより行い得る。もちろん、この条件は例えば採用する白血球除去材の量や吸着特性等をふまえて適宜に設定することができる。
【００２１】
また本発明によれば、損傷した上皮の修復が可能となるので、本発明の装置による処理の前、後、あるいは前後において、損傷上皮の修復を目的として薬剤療法をはじめとする各種治療処置と併用することも可能である。
【００２２】
次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は何らこれに限定されるものではない。
【実施例】
【００２３】
潰瘍性大腸炎の患者８名に対し、以下の条件で白血球除去療法を実施した。
体外循環のシステム構成を図１に示す。
血液処理手段には、セルソーバ（登録商標）EX（旭メディカル株式会社製：血液の出入口を有し、内部にポリエステル不織布を充填した吸着型血液浄化器）を用いた。
図１に示すように、施行方法は、肘窩静脈あるいは大腿静脈から、血液ポンプを用いて循環回路内に血液を取り出し、セルソーバＥＸ内に血液を送り込んだ。処理された血液はそのまま回路内を流れ、脱血側とは逆の肘窩静脈あるいは大腿静脈に返血された。血流は30〜50mL／分で、1回の治療で2L〜3Lの血液を処理した。また、回路内での血液凝固を防ぐためにメシル酸ナファモスタットを回路内に注入した。
【００２４】
損傷上皮細胞の修復効果を以下の方法で確認した。
白血球除去療法施行日の前日および８−11日後（2回目施行後）に大腸内視鏡を行い、内視鏡所見を観察したが症例により大きな差異は認められなかった。しかしながら、直腸の同一部位より、内視鏡下に生検組織を採取し、同一症例に於ける成熟上皮細胞の経時的変化を白血球除去療法前後で追跡したところ、HE染色により同定されるパネート細胞、Alcian Blue染色により同定される杯細胞、Chromogranin A染色により同定される腸管内分泌細胞が急速に増加、改善する症例が5名認められた。この内分泌系腸管成熟上皮細胞が急速に増加した5名では、増加しない3名に比べて、白血球除去療法による治療効果が著明であり、かつ早期に認められた。上皮細胞の急速な増加の観察された５例の症例のうちの2例について、図2及び図３にその結果を示す。図2、３は、同一患者の同一部位におけるパネート細胞、杯細胞、腸管内分泌細胞の染色写真を示すもので、上段が白血球除去療法を施行する前、下段が、それぞれ、白血球除去療法後、8日または１１日における写真である。
【００２５】
以上の結果から明らかなとおり、白血球除去療法を施すことにより上皮細胞の誘導により損傷上皮の修復効果をもたらしている。この誘導された上皮細胞は、これまでの知見より骨髄由来であると考えられる。さらに損傷上皮の修復により、難治性炎症性腸疾患に対する治療効果を発揮していることが考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】本発明の治療装置を用いた体外循環システム図を示す。
【図２】本発明の治療装置による処理前後の損傷上皮細胞の１症例を示す。
【図３】本発明の治療装置による処理前後の損傷上皮細胞の他の症例を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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