(57)【要約】【課題】光学活性な含フッ素アルコール誘導体を、高収率かつ高鏡像体過剰率で効率的に製造する。【解決手段】下式（１）で表される化合物に、酵母または酵母の処理体を作用させて還元し、下式（２）で表される化合物または下式（３）で表される化合物を選択的に得る。ただし、Ｒ１はアルキル基または１個以上の置換基を有するアルキル基であり、Ｒ２はフルオロアルキル基またはフルオロアルコキシ基であり、ｎは１〜５の整数である。【化１】2005198593.tif 000010【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式（１）で表される化合物に、酵母または酵母の処理体を作用させて還元することを特徴とする下式（２）で表される化合物または下式（３）で表される化合物の製造方法。
ただし、Ｒ１はアルキル基または１個以上の置換基を有するアルキル基であり、Ｒ２はフルオロアルキル基またはフルオロアルコキシ基であり、ｎは１〜５の整数である。
【化１】
2005198593.tif 000009
【請求項２】
酵母がデバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属、オガタエ（Ｏｇａｔａｅａ）属、またはシゾサッカロマイセス（Ｓｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母である請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
Ｒ２がトリフルオロメチル基である請求項１または２に記載の製造方法。
【請求項４】
Ｒ１がメチル基、またはメトキシメチル基である請求項１〜３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項５】
酵母の処理体が、固定化酵母である請求項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬、農薬等の中間体として有用な光学活性な含フッ素アルコール誘導体の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
微生物を作用させることにより、芳香族ケトン誘導体を還元して光学活性なアルコール誘導体を得る方法としては、これまでに以下の方法が提案されている。
（１）ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属、クルイベロマイセス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）属、キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、およびサッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属の酵母を用いて種々の芳香族ケトン誘導体を還元反応し、光学活性なアルコール誘導体を得る方法（非特許文献１参照。）。
（２）チチカビ（Ｇｅｏｔｉｒｉｃｈｕｍ  Ｃａｎｄｉｄｕｍ）のアセトンパウダーを用いて、ベンゼン環上にトリフルオロメチル基が置換したアセトフェノン誘導体を還元し、光学活性なアルコール誘導体を得る方法（非特許文献２参照。）。
（３）乳酸菌由来のアルコールデヒドロゲナーゼを用いて、トリフルオロメチル基で置換されたベンゼン環を有する芳香族ケトン誘導体の還元反応を行い、光学活性なアルコール誘導体を得る方法（特許文献１参照。）。
【０００３】
【特許文献１】国際公開第０３／００４６６６号パンフレット
【非特許文献１】「Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ」、（英国）、１９９９年、第１０巻、３５１５〜３５２０頁
【非特許文献２】「Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、（米国）、１９９８年、第６３巻、８９５７〜８９６４頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかし、（１）の方法で採用する基質は、フッ素原子を含まない芳香族ケトン誘導体であり、本発明におけるフルオロアルキル基、またはフルオロアルコキシ基が置換したベンゼン環を有する芳香族ケトン誘導体を基質とした反応については全く記載がない。本発明者らがデバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属（酵母の分類の見直しによって、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属からデバリオマイセス属へ名称が変更になったが、ピキア属と同一の属。）の酵母を用いて、アセトフェノンの還元反応を実施したところ、得られたアルコール誘導体の鏡像体過剰率は７２％ｅｅと低く、実用上採用できない方法であることが認められた。
【０００５】
（２）の方法では、チチカビの菌体をアセトンで繰り返し洗浄処理して得たアセトンパウダーを用いているため、生菌をそのまま用いる場合とは異なり、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨ等の高価な補酵素が必要である。このため経済的に極めて不利な方法であり、工業的製造方法としては採用できない問題がある。
（３）の方法は、基質によっては収率および鏡像体過剰率が低く、該方法が適用できる基質が限られる問題がある。また、乳酸菌は嫌気性菌であるため、培養時に嫌気性菌に特徴的な強い最終生成物阻害が起こり、菌の増殖速度が著しく抑制される。よって工業的規模で使用可能な量の菌体を得るのが困難である。さらに、生菌から抽出したアルコールデヒドロゲナーゼを用いる場合は、（２）の方法と同様に補酵素を必要とする。よって経済的に極めて不利であり、工業的製造方法としては採用できない問題がある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、上記の問題点を解決するためになされたものであり、高収率かつ高鏡像体過剰率で光学活性な含フッ素アルコール誘導体を製造する方法を提供する。すなわち、本発明は以下の発明を提供する。
【０００７】
＜１＞下式（１）で表される化合物に、酵母または酵母の処理体を作用させて還元することを特徴とする下式（２）で表される化合物または下式（３）で表される化合物の製造方法。
ただし、Ｒ１はアルキル基または１個以上の置換基を有するアルキル基であり、Ｒ２はフルオロアルキル基またはフルオロアルコキシ基であり、ｎは１〜５の整数である。
【０００８】
【化１】
2005198593.tif 000002
【０００９】
＜２＞酵母がデバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属、オガタエ（Ｏｇａｔａｅａ）属、またはシゾサッカロマイセス（Ｓｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母である＜１＞に記載の製造方法。
【００１０】
＜３＞Ｒ２がトリフルオロメチル基である＜１＞または＜２＞に記載の製造方法。
＜４＞Ｒ１がメチル基、またはメトキシメチル基である＜１＞〜＜３＞のいずれかに記載の製造方法。
＜５＞酵母の処理体が、固定化酵母である＜１＞〜＜４＞のいずれかに記載の製造方法。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の製造方法によれば、医薬および農薬の中間体として有用な、光学活性な含フッ素アルコール誘導体を、特別な試薬や装置を必要とせず、簡便な操作によって高収率かつ高鏡像体過剰率で製造できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本明細書においては、式（１）で表される化合物を化合物（１）のようにも記す。他の式で表される化合物についても同様に記す。
【００１３】
本発明におけるＲ１は、アルキル基、または１個以上の置換基を有するアルキル基である。アルキル基としては、炭素数１〜８のアルキル基であるのが好ましく、炭素数１〜６のアルキル基であるのが特に好ましい。該アルキル基は直鎖構造であっても分岐構造であってもよい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ヘキシル基、およびｎ−オクチル基等が挙げられ、メチル基、またはエチル基であるのが好ましい。
【００１４】
１個以上の置換基を有するアルキル基としては、本発明の反応に不活性な置換基が１個以上結合した基である。該置換基としては、塩素原子、臭素原子、水酸基、およびアルコキシ基から選ばれる１種以上の基が好ましい。置換基の数は１個が好ましい。
置換基としてのアルコキシ基は、炭素数１〜８のアルコキシ基であるのが好ましく、炭素数１〜６のアルコキシ基であるのが特に好ましい。該アルコキシ基は直鎖構造であっても、分岐構造であってもよい。アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、およびｎ−オクチルオキシ基等が挙げられ、メトキシ基、またはエトキシ基であるのが好ましい。
【００１５】
１個以上の置換基を有するアルキル基としては、モノクロロメチル基、モノブロモメチル基、ヒドロキシメチル基、メトキシメチル基、エトキシメチル基、およびメトキシエチル基等が挙げられ、メトキシメチル基、ヒドロキシメチル基、またはモノクロロメチル基が好ましい。
Ｒ１としては、メチル基、エチル基、メトキシメチル基、ヒドロキシメチル基、またはモノクロロメチル基が好ましい。
【００１６】
本発明におけるＲ２はフルオロアルキル基、またはフルオロアルコキシ基である。フルオロアルキル基とは、アルキル基中の炭素原子に結合した水素原子の１個以上がフッ素原子で置換された基であり、水素原子の全部がフッ素原子で置換されたペルフルオロアルキル基が好ましい。フルオロアルキル基の炭素数は１〜８が好ましく、特に１〜６が好ましい。フルオロアルキル基は直鎖構造であっても、分岐構造であってもよい。フルオロアルキル基としては、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、−ＣＨ２ＣＨＦ２、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−（ＣＦ２）３Ｆ、−ＣＦ（ＣＦ３）２、および−Ｃ４Ｆ９（たとえば、−（ＣＦ２）４Ｆ、−ＣＦ２ＣＦ（ＣＦ３）２、−Ｃ（ＣＦ３）３）等が挙げられ、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−（ＣＦ２）３Ｆ、−ＣＦ（ＣＦ３）２が好ましく、特に−ＣＦ３が好ましい。
【００１７】
フルオロアルコキシ基とは、アルコキシ基中の炭素原子に結合した水素原子の１個以上がフッ素原子で置換された基である。フルオロアルコキシ基中のフッ素原子の割合は４０質量％以上が好ましく、アルコキシ基中の水素原子の全部がフッ素原子で置換されてなるペルフルオロアルコキシ基が特に好ましい。フルオロアルコキシ基の炭素数は１〜８が好ましく、特に１〜６が好ましい。フルオロアルコキシ基は直鎖構造であっても、分岐構造であってもよい。フルオロアルコキシ基としては、−ＯＣＨ２Ｆ、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨ２ＣＨＦ２、−ＯＣＨ２ＣＦ３、−ＯＣＦ２ＣＦ３、−Ｏ（ＣＦ２）３Ｆ、−ＯＣＦ（ＣＦ３）２、および−ＯＣ４Ｆ９（たとえば、−Ｏ（ＣＦ２）４Ｆ、−ＯＣＦ２ＣＦ（ＣＦ３）２、−ＯＣ（ＣＦ３）３）等が挙げられ、−ＯＣＦ３が好ましい。
Ｒ２としては、−ＣＦ３、または−ＯＣＦ３が好ましい。
【００１８】
本発明におけるｎは１〜５の整数であり、還元反応によって得られる含フッ素光学活性アルコール誘導体の有用性から、１または２であるのが好ましい。すなわち、化合物（１）、化合物（２）、および化合物（３）のベンゼン環部位に置換するＲ２の数は１〜５個であり、１個または２個が好ましい。Ｒ２の置換位置は特に制限されない。たとえば、Ｒ２がモノ置換する場合には、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１基に対してメタ位またはパラ位に置換するのが好ましく、Ｒ２がジ置換する場合には、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１基に対して３,５位、２,５位、または２,４位に置換するのが好ましい。
【００１９】
化合物（１）としては、下記化合物等が挙げられ、化合物（２）および化合物（３）としては、化合物（１）の−Ｃ（Ｏ）Ｒ１基部分を、それぞれ対応する絶対配置を有する−ＣＨ（ＯＨ）Ｒ１基に置き換えた化合物等が挙げられる。
【００２０】
【化２】
2005198593.tif 000003
【００２１】
本発明における化合物（１）は、公知の化合物であるか、または公知の化合物に公知の手法を適用することによって得ることができる。また、Ｒ１中に不斉炭素原子が存在する場合の該不斉炭素原子の絶対配置はＲであってもＳであってもよい。本発明の還元反応では、Ｒ１の絶対配置は保持される。化合物（１）としては、還元反応によって得られる含フッ素光学活性アルコール誘導体の有用性から、下記化合物が好ましい。
【００２２】
【化３】
2005198593.tif 000004
【００２３】
本発明においては、酵母または酵母の処理体を、化合物（１）に作用させることによって還元し、光学活性な化合物（２）、または光学活性な化合物（３）を得る。ここで光学活性であるとは、生成物の鏡像体過剰率が、８５％ｅｅ以上であることをいい、９０％ｅｅ以上であるのが好ましい。
【００２４】
酵母としては、公知または周知の酵母を用いることができる。該酵母としては、デバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属、オガタエ（Ｏｇａｔａｅａ）属、シゾサッカロマイセス（Ｓｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、およびキャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属に属する酵母等が挙げられ、デバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属、オガタエ（Ｏｇａｔａｅａ）属、またはシゾサッカロマイセス（Ｓｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母を用いるのが好ましい。
【００２５】
デバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母としては、エチェリシ（Ｅｔｃｈｅｌｌｓｉｉ）種、アルタガベイチア（Ａｒｔａｇａｖｅｙｔｉａｅ）種、カルソニ（Ｃａｒｓｏｎｉｉ）種、ネパレンシス（Ｎｅｐａｌｅｎｓｉｓ）種、ディスポラス（Ｄｉｓｐｏｒｕｓ）種、プレトリエンシス（Ｐｒｅｔｏｒｉｅｎｓｉｓ）種、グロボーサ（Ｇｌｏｂｏｓａ）種、ファリノーザ（Ｆａｒｉｎｏｓａ）種、およびジャポニカス（Ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）種の酵母等が挙げられ、エチェリシ（Ｅｔｃｈｅｌｌｓｉｉ）種が好ましい。
オガタエ（Ｏｇａｔａｅａ）属に属する酵母としては、ミニュータ（Ｍｉｎｕｔａ）種、グルコザエマ（Ｇｌｕｃｏｚｙｍａ）種、ヘンリシ（Ｈｅｎｒｉｃｉｉ）種、コダマエ（Ｋａｄａｍａｅ）種、フィロデンドリ（Ｐｈｉｌｏｄｅｎｄｒｉ）種、ピニ（Ｐｉｎｉ）種、ポリモルファ（Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ）種、およびウィカーハミ（Ｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｉ）種の酵母等が挙げられ、ミニュータ（Ｍｉｎｕｔａ）種が好ましい。
【００２６】
シゾサッカロマイセス（Ｓｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母としては、ポンベ（Ｐｏｍｂｅ）種、ジャポニカス（Ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）種、およびオクトスポラス（Ｏｃｔｏｓｐｏｒｕｓ）種の酵母等が挙げられ、ポンベ（Ｐｏｍｂｅ）種が好ましい。
キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属に属する酵母としては、ユーティリス（Ｕｔｉｌｉｓ）種、アルビカンス（Ａｌｂｉｃａｎｓ）種、アトランティカ（Ａｔｌａｎｔｉｃａ）種、およびシルバティカ（Ｓｉｌｖａｔｉｃａ）種の酵母等が挙げられる。
【００２７】
なお、これら酵母の分類は、クルツマン（Ｃ．Ｐ．Ｋｕｒｔｚｍａｎ）らによる、「Ｔｈｅ  Ｙｅａｓｔｓ，ａ  Ｔａｘｏｎｏｉｃ  Ｓｔｕｄｙ，４ｔｈ  ｒｅｖｉｓｅｄ  ａｎｄ  ｅｎｌａｒｇｅｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ」、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ（１９９７）に従って決定されたものである。
【００２８】
これらの酵母としては、自然界に分布する酵母を用いることができる。また、酵母を化学薬品へ曝露する、光照射する、または放射線照射する等によって人為的に変異を起こして還元活性を増強した酵母であってもよく、または遺伝子組み換えによって、還元反応に関与する遺伝子を挿入して還元活性を増強した酵母等であってもよい。さらに、これらの酵母は培養液を含んだまま還元反応に用いてもよく、遠心分離等の方法により培養液と分離して用いてもよい。
酵母の培養には、酵母の生育に必要な有機体の炭素源、窒素源および無機塩類を配合した培地または培養液を用いうる。必要に応じ、ビタミン類を培地にまたは培養液に添加することもできる。培養条件は酵母の種類により適宜変更され、通常の場合、培地または培養液のｐＨは４〜９、培養温度は＋２０〜＋５０℃、培養日数は１〜７日間であるのが好ましい。また、培養は好気的条件下に実施するのが好ましい。
【００２９】
還元反応においては、酵母の処理体を用いることもできる。本発明における酵母の処理体としては、遠心分離等の方法を適用することによって培養液を分離した酵母に、（ａ）超音波処理、（ｂ）有機溶媒による洗浄処理、（ｃ）乾燥処理、または（ｄ）不活性担体への固定化処理から選ばれるいずれかの処理を施した酵母をいう。酵母の処理体としては、高価な補酵素が不要であること、還元反応に用いた後に回収再利用できること、および処理体が安価に調製できることから、（ｄ）の不活性担体に固定化を行って得た固定化酵母が好ましい。
【００３０】
（ｄ）における不活性担体としては、セライト、多孔性グラスビーズ、セルロースおよびその誘導体、キチンおよびその誘導体、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸カルシウム、κ−カラギーナン、シリカゲル、アルミナ、セラミックス、ポリスチレンおよびその誘導体、ポリウレタン、ポリアクリルアミド、ナイロン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール誘導体、ポリプロピレングリコール誘導体、またはポリブタジエン誘導体が好ましく、特に、多孔性グラスビーズ、キチンおよびその誘導体、アルギン酸ナトリウム、またはアルギン酸カルシウムが好ましい。
【００３１】
本発明の方法においては、高価な補酵素を必要としない方法であり、操作性が良好であることから、酵母、または不活性担体に固定化された固定化酵母を用いるのが好ましい。
【００３２】
酵母の量は、酵母の種類、および化合物（１）に対する還元活性により適宜変更される。通常、反応速度の観点から、化合物（１）の量に対して２×１０−４〜４０００質量％が好ましく、特に、２×１０−３〜２００質量％が好ましい。
【００３３】
本発明の製造方法には、必要に応じて溶媒を用いてもよい。溶媒としては、水系溶媒および有機溶媒が好ましく、該溶媒はそれぞれを単独で用いても、または２種以上の混合溶媒として用いてもよい。２種以上の混合溶媒として用いる場合は、水系溶媒と有機溶媒との混合溶媒であるのが好ましい。溶媒量は、化合物（１）に対して０．０１〜５０倍容量が好ましく、特に０．１〜３０倍容量が好ましい。
水系溶媒としては、水または緩衝液が挙げられる。緩衝液としては、一般的に用いられている緩衝液から適宜選択されうる。たとえば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液、ＴＲＩＳ緩衝液、酢酸緩衝液、またはＭＥＳ緩衝液等が挙げられる。
【００３４】
有機溶媒としては、一般的に用いられている有機溶媒から適宜選択されうる。たとえば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノ-ル、ブタノール、イソブタノール、ｔ−ブチルアルコール等のアルコール系溶媒；ペンタン、ヘキサン、ヘプタン等の脂肪族炭化水素系溶媒；ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素系溶媒；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔ−ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル系溶媒；アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン等のケトン系溶媒；およびアセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルスルホキシド等の溶媒を適宜用いることができる。これらの有機溶媒は単独で用いても、または２種以上の混合溶媒として用いてもよい。
【００３５】
本発明の製造方法においては、酵母および酵母の処理体の還元活性を高めることができるので、反応液に炭素源を添加するのが好ましい。炭素源としては糖が好ましく用いられる。糖としては、グルコース、フルクトース、またはガラクトース等の単糖類、もしくはマルトース、ラクトース、またはスクロース等の二糖類等が挙げられる。炭素源の量は、反応液の容量に対して０．１〜３０％（ｗ／ｖ）が好ましい。
【００３６】
さらに反応液には、反応が速やかに進行するため、水素イオン供与体を添加するのが好ましい。水素イオン供与体としてはアルカノール、シクロアルカノール等のアルコール化合物が好ましい。該アルコール化合物の炭素数は１〜８であるのが好ましく、特に１〜６であるのが好ましい。また、アルコール化合物は直鎖構造、分岐構造、または環構造のいずれであってもよい。アルコール化合物としてはメタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、ｔ−ブタノール、シクロペンタノール、シクロヘキサノール等が挙げられ、エタノールが好ましい。水素イオン供与体の量は、反応液の容量に対して０．１〜１０％（ｗ／ｖ）が好ましい。
【００３７】
本発明の還元反応を行う場合、以下に示すいずれかの方法によって行うのが好ましい。
（方法１）溶媒に炭素源、水素イオン供与体、および化合物（１）を添加した後に、酵母または酵母の処理体を添加し、振とうまたは撹拌することにより反応させる方法。
（方法２）溶媒に炭素源、水素イオン供与体、および酵母または酵母の処理体を添加した後に、化合物（１）を添加し、振とうまたは撹拌することにより反応させる方法。
（方法１）において、酵母または酵母の処理体を反応系に添加する際、および（方法２）において、化合物（１）を反応系に添加する際は、反応系に一括添加しても、連続的に添加してもよい。
【００３８】
ここで、「連続的に添加する」とは、反応初期に、酵母もしくは酵母の処理物、または化合物（１）の全量を一括で添加する「一括添加」に対する概念であり、反応を開始させた後に、酵母もしくは酵母の処理体、または化合物（１）を反応系中に添加する操作を１度以上行うことをいう。連続添加は、反応開始後に任意の量の酵母もしくは酵母の処理体、または化合物（１）を反応系中に２度以上導入する操作、反応を開始させた後に一定時間にわたって酵母もしくは酵母の処理体、または化合物（１）を導入しつづける操作等により行われるのが好ましい。前記操作は、反応中、１度行っても２度以上行ってもよい。
（方法１）において、酵母または酵母の処理体を反応系中に添加する方法としては、酵母または酵母の処理体をそのまま、または溶媒に分散させて添加する方法が挙げられる。（方法２）において、化合物（１）を反応系に添加する方法としては、化合物（１）をそのまま、または化合物（１）を溶媒に溶解させた溶液を添加する方法が挙げられる。
【００３９】
本発明の還元反応は、通常は反応温度、反応液のｐＨ等の反応条件を制御しながら行う。反応条件は、還元反応の進行状況、および副生成物の生成の状況等を考慮し、適宜決定されうる。溶媒を使用する場合の反応温度は、通常は０〜＋９０℃が好ましく、特に０〜＋６０℃が好ましく、反応速度を大きくできることから、＋２０〜＋４５℃がとりわけ好ましい。また、反応液のｐＨは、反応速度の観点から、１〜１０が好ましく、特に３〜９が好ましい。
反応時間は、酵母の還元活性が維持され、反応が進行する時間であれば、特に制限されない。通常、工業的な製造を考慮すると、反応時間は１時間〜１０日間が好ましく、特に１〜９６時間が好ましい。
【００４０】
本発明の製造方法によれば、酵母または酵母の処理体は化合物（１）のカルボニル基部分を還元し、−ＣＨ（ＯＨ）−構造に変換する。該還元反応は立体選択的に進行するため、化合物（２）、または化合物（３）が選択的に生成する。また、酵母の種類、化合物（１）の構造、および反応溶媒、反応温度、および反応液のｐＨ等の反応条件を適宜選択することにより、化合物（２）および化合物（３）のいずれかを立体選択的に合成できる。
【００４１】
還元反応によって生成した化合物（２）または化合物（３）は、後処理を行うのが好ましい。後処理としては、遠心分離、またはろ過等の操作によって反応液から不溶性物質を除去した後に、抽出、分液、または洗浄等の操作を行うのが好ましい。たとえば、前記還元反応によって得た反応粗液を遠心分離して不溶性物質を除去した後に、抽出溶媒としての非水溶性有機溶媒（たとえば、ヘキサン、トルエン、酢酸エチル、ｔ−ブチルメチルエーテル、塩化メチレン、クロロホルム、およびジエチルエーテル等）を添加して、つぎに撹拌し、分液して非水溶性有機溶媒層を分離する抽出操作が挙げられる。非水溶性有機溶媒による抽出操作は、２回以上繰返してもよい。
化合物（２）または化合物（３）は、後処理を行った後、さらに精製してもよい。精製方法としては、結晶化、蒸留、昇華、およびカラム精製等の方法が挙げられる。精製方法は１つのみ行っても、２つ以上を組合わせて行ってもよい。
【００４２】
本発明の方法により得られる化合物（２）および化合物（３）は、医薬または農薬等の中間体として有用な光学活性な化合物である。
本発明の好ましい態様としては、たとえば以下に示す製造方法が挙げられる。すなわち、化合物（１ａ）に対して、デバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属の酵母、または該酵母の処理体を作用させることにより、化合物（３ａ）を高収率かつ高鏡像体過剰率で得る方法が挙げられる。もしくは化合物（１ａ）に対して、シゾサッカロマイセス（Ｓｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、またはオガタエ（Ｏｇａｔａｅａ）属の酵母、または該酵母の処理体を作用させることにより、化合物（２ａ）を高収率かつ高鏡像体過剰率で得る方法が挙げられる。
【００４３】
【化４】
2005198593.tif 000005
【実施例】
【００４４】
以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの例によって限定されない。以下において、ガスクロマトグラフィーをＧＣと記し、高速液体クロマトグラフィーをＨＰＬＣと記す。リットルはＬとも記す。
化合物（１）および化合物（４）の変換率は、ＨＰＬＣを用いて測定した。カラムは、Ｍｉｇｈｔｙｓｉｌ／ＲＰ１８ＧＰ、１５０ｍｍ×４．５ｍｍ、充填剤粒径５μｍ（関東化学社製）を用い、検出波長は２１０ｎｍとした。移動相は、０．１％（Ｖ／Ｖ）トリフルオロ酢酸／Ｈ２Ｏ：ＣＨ３ＣＮ＝４０：６０（Ｖ／Ｖ）を用い、流量は１ｍＬ／分とした。
【００４５】
還元反応によって得られた光学活性アルコール誘導体の絶対配置、および鏡像体過剰率は旋光度測定の結果、およびＧＣによる分析結果から求めた。ＧＣカラムは、Ｌｉｐｏｄｅｘ  Ｅ、５０ｍ×０．２５ｍｍ（Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ社製）を用いた。
また、光学活性アルコール誘導体の回収率は、原料回収を考慮した値である。
【００４６】
以下における「湿菌体質量」は、酵母を含む培養液を、日立ハイテクノロジーズ社製遠心分離機（ｈｉｍａｃ  ＣＦ１６ＲＸ）を用い、４℃において、３３００×ｇの遠心加速度で５分間遠心分離して、培養液を分離した後の酵母の質量をいう。なお、「ｇ」は重力加速度を示す。
【００４７】
［例１］化合物（１ａ）の還元反応の例（その１）
【００４８】
【化５】
2005198593.tif 000006
【００４９】
イオン交換水（１Ｌ）に対し、グルコース（１０ｇ）、ペプトン（３ｇ）、モルトエキス（３ｇ）、および酵母エキス（３ｇ）を溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨを６．０に調整した。これを５００ｍＬ容坂口フラスコに１００ｍＬずつ分注し、１２１℃にて２０分間高圧蒸気滅菌を行って液体培地を調製した。この液体培地に、デバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属エチェリシ（Ｅｔｃｈｅｌｌｓｉｉ）種（ＮＢＲＣ  １９８７）の酵母の１白金耳分ずつを加え、２４℃にて７２時間振とう培養した。培養終了後、遠心分離によって酵母を液体培地から分離した。
【００５０】
リン酸緩衝液（１００ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ＝７．０、１４ｍＬ）に、グルコース（０．３５ｇ）、エタノール（０．２１ｍＬ）、および化合物（１ａ）（１４ｍｇ）を添加し、温度を３０℃に保ちながら前記の方法で得た酵母（湿菌体質量で２．８ｇ）を添加した。２２時間振とう培養した後に反応液を採取し、ＨＰＬＣ分析したところ、化合物（１ａ）の変換率は９９％以上であった。生成物を単離後、旋光度測定の結果、および1ＨＮＭＲスペクトルおよびＧＣスペクトル解析の結果に基づき、Ｒ体である化合物（３ａ）の生成を確認した。生成物の鏡像体過剰率は９１％ｅｅであり、化合物（３ａ）の回収率は９０％以上であった。
【００５１】
［例２］化合物（１ａ）の還元反応の例（その２）
【００５２】
【化６】
2005198593.tif 000007
【００５３】
酵母をデバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属エチェリシ（Ｅｔｃｈｅｌｌｓｉｉ）種（ＮＢＲＣ  １９８７）から、シゾサッカロマイセス（Ｓｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属ポンベ（Ｐｏｍｂｅ）種（ＡＴＣＣ  ３８３９９）に変更する以外は例１と同様に反応を行った。化合物（１ａ）の変換率は９９％であった。生成物を単離し、旋光度測定の結果、および1ＨＮＭＲスペクトルおよびＧＣスペクトル解析の結果に基づき、Ｓ体である化合物（２ａ）の生成を確認した。生成物の鏡像体過剰率は９２％ｅｅであり、化合物（２ａ）の回収率は９０％以上であった。
【００５４】
［例３］化合物（１ａ）の還元反応の例（その３）
酵母をデバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属エチェリシ（Ｅｔｃｈｅｌｌｓｉｉ）種（ＮＢＲＣ  １９８７）から、オガタエ（Ｏｇａｔａｅａ）属ミニュータ（Ｍｉｎｕｔａ）種（ＮＢＲＣ  ０９７５）に変更する以外は例１と同様に反応を行った。化合物（１ａ）の変換率は１００％であった。生成物を単離し、旋光度測定の結果、および1ＨＮＭＲスペクトルおよびＧＣスペクトル解析の結果に基づき、Ｓ体である化合物（２ａ）の生成を確認した。生成物の鏡像体過剰率は９６％ｅｅであった。化合物（２ａ）の回収率は９０％以上であった。
【００５５】
［例４］化合物（１ａ）の還元反応の例（その４）
酵母をデバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属エチェリシ（Ｅｔｃｈｅｌｌｓｉｉ）種（ＮＢＲＣ  １９８７）から、キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属ユーティリス（Ｕｔｉｌｉｓ）種（ＮＢＲＣ  ０３９６）に変更する以外は例１と同様に反応を行った。化合物（１ａ）の変換率は２０％であった。
【００５６】
［例５］固定化酵母を用いた化合物（１ａ）の還元反応の例（その１）
デバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属エチェリシ（Ｅｔｃｈｅｌｌｓｉｉ）種（ＮＢＲＣ  １９８７）（湿菌体質量で１０ｇ）をイオン交換水（１４０ｍＬ）に懸濁した。氷冷下（約４℃）でアルギン酸ナトリウムを酵母の懸濁液中に除々に添加し、アルギン酸ナトリウムの最終濃度が２％（Ｗ／Ｖ）になるように調製した。充分にアルギン酸ナトリウムが膨潤した後に、チュービングポンプを用いて、氷冷下で、０．５ｍｏｌ／Ｌの塩化カルシウム溶液中に撹拌しながら滴下することにより、球形のゲルを形成させた。全量滴下した後に３０分間撹拌し、濾過した後にイオン交換水で洗浄して、固定化酵母を調製した。
【００５７】
リン酸緩衝液（１００ｍｍｏｌ／Ｌ  、ｐＨ＝７．０、５０ｍＬ）に、グルコース（１．２ｇ）、エタノール（０．７ｍＬ）を添加し、温度を３０℃に保ち、化合物（１ａ）（５０ｍｇ）を添加し、さらに調製した固定化酵母を全量添加した。２２時間振とう培養後に反応液を採取しＨＰＬＣ分析したところ、変換率は９９％以上であった。生成物を単離し、旋光度測定の結果、および1ＨＮＭＲスペクトルおよびＧＣスペクトル解析の結果に基づき、Ｒ体である化合物（３ａ）であることを確認した。生成物の鏡像体過剰率は９２％ｅｅであり、化合物（３ａ）の回収率は９０％以上であった。
【００５８】
［比較例］アセトフェノンの還元反応の例
【００５９】
【化７】
2005198593.tif 000008
【００６０】
化合物（１ａ）（１４ｍｇ）を化合物（４）（６．６ｍｇ）に変更する以外は例１と同様に反応を行った。化合物（４）の変換率は８１％であった。生成物を単離し、1ＨＮＭＲスペクトルおよびＧＣスペクトル解析の結果、化合物（４）の−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３基部分が−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３基に変換され、かつ光学活性である化合物の生成を確認した。生成物の鏡像体過剰率は７２％ｅｅであった。
【産業上の利用可能性】
【００６１】
本発明は、医薬および農薬の中間体として有用な、光学活性な含フッ素アルコール誘導体を、高収率かつ高鏡像体過剰率で製造する方法を提供する。本発明の方法は、特別な試薬や反応装置を用いることなしに実施でき、絶対配置の異なる含フッ素アルコール誘導体を作り分けることができる方法であることから、工業的に有用な方法である。