(57)【要約】【課題】機能性水である電解生成水に着目し、腫瘍の増殖を抑制する作用を有する免疫賦活剤を開発する。【解決手段】腫瘍細胞の増殖を抑制する免疫機能を増強するための免疫賦活剤であって、銀成分を含有する電解生成酸性水および電解生成アルカリ性水を有効成分とする免疫賦活剤。【選択図】    図１５
2005120084.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
同種異系腫瘍細胞の増殖を抑制する免疫機能を増強するための免疫賦活剤であり、銀成分を含有する水を被電解水とする電解にて生成される銀成分含有の弱アルカリ性の電解生成アルカリ性水を有効成分とすることを特徴とする免疫賦活剤。
【請求項２】
請求項１に記載の免疫賦活剤であり、前記電解生成アルカリ性水は、ｐＨ９を基準とし、かつ、銀成分をイオンの形態で１００ ppbを基準として含有するものであることを特徴とする免疫賦活剤。
【請求項３】
請求項１または２に記載の免疫賦活剤であり、前記電解生成アルカリ性水は、酸化還元電位が＋２００ mVを基準とするものであることを特徴とする免疫賦活剤。
【請求項４】
同種異系腫瘍細胞の増殖を抑制する免疫機能を増強するための免疫賦活剤であり、銀成分を含有する水を被電解水とする電解にて生成される銀成分含有の弱酸性の電解生成酸性水を有効成分とすることを特徴とする免疫賦活剤。
【請求項５】
請求項４に記載の免疫賦活剤であり、前記電解生成酸性水は、ｐＨ６を基準とし、かつ、銀成分をイオンの形態で１００ ppbを基準として含有するものであることを特徴とする免疫賦活剤。
【請求項６】
請求項４または５に記載の免疫賦活剤であり、前記電解生成酸性水は、酸化還元電位が４００ mVを基準とするものであることを特徴とする免疫賦活剤。
【請求項７】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の免疫賦活剤を生成する生成方法であり、銀成分を含有する水を被電解水とし、同被電解水を有隔膜電解槽の陰極側電解室にて電解することを特徴とする免疫賦活剤の生成方法。
【請求項８】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の免疫賦活剤を生成する生成方法であり、銀成分を含有する水を被電解水とし、同被電解水を無隔膜電解槽にて電解して、同無隔膜電解槽における陰極側から電解生成水を抽出することを特徴とする免疫賦活剤の生成方法。
【請求項９】
請求項４〜６のいずれか一項に記載の免疫賦活剤を生成する生成方法であり、銀成分を含有する水を被電解水とし、同被電解水を有隔膜電解槽の陽極側電解室にて電解することを特徴とする免疫賦活剤の生成方法。
【請求項１０】
請求項４〜６のいずれか一項に記載の免疫賦活剤を生成する生成方法であり、銀成分を含有する水を被電解水とし、同被電解水を無隔膜電解槽にて電解して、同無隔膜電解槽における陽極側から電解生成水を抽出することを特徴とする免疫賦活剤の生成方法。
【請求項１１】
請求項７〜１０のいずれか一項に記載の免疫賦活剤の生成方法であり、前記被電解水として、水を被電解水とする銀電極を用いる無隔膜電解にて生成される電解生成水を採用することを特徴とする免疫賦活剤の生成方法。
【請求項１２】
請求項７〜１０のいずれか一項に記載の免疫賦活剤の生成方法であり、前記被電解水として、銀粉末を水に溶解して調製される銀水溶液を採用することを特徴とする免疫賦活剤の生成方法。
【請求項１３】
請求項７または９に記載の免疫賦活剤の生成方法を実施するための免疫賦活剤の生成装置であり、当該生成装置は、軟水器および浄水器を有して水道水や天然水等の一般水を軟水処理および浄水処理する処理機構と、銀電極を陽極側電極とし前記処理機構で処理された処理水を被電解水として無隔膜電解する無隔膜電解槽と、同無隔膜電解槽で生成された電解生成水を被電解水として有隔膜電解する有隔膜電解槽を備え、同有隔膜電解槽は、陽極側電解室の下流側および陰極側電解室の下流側に電解生成水を流出させる流出管路を備えることを特徴とする免疫賦活剤の生成装置。
【請求項１４】
請求項８または１０に記載の免疫賦活剤の生成方法を実施するための免疫賦活剤の生成装置であり、当該生成装置は、軟水器および浄水器を有して水道水や天然水等の一般水を軟水処理および浄水処理する処理機構と、銀電極を陽極側電極とし前記処理機構で処理された処理水を被電解水として無隔膜電解する無隔膜電解槽と、同無隔膜電解槽で生成された電解生成水を被電解水として無隔膜電解する無隔膜電解槽を備え、同無隔膜電解槽は、電解室における陽極側の下流側および陰極側の下流側に電解生成水を流出させる流出管路を備えることを特徴とする免疫賦活剤の生成装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、同種異系腫瘍細胞の増殖を抑制する免疫機能を増強するための免疫賦活剤、同免疫賦活剤の生成方法、および、同免疫賦活剤の生成装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌等悪性腫瘍を治療するための腫瘍治療剤としては、多くの種類のものが開発されている。開発されている多くの種類の腫瘍治療剤は、そのほとんどが化学物質を有効成分とする薬剤であって、程度の差はあるものの多くの副作用を伴うという問題を含んでいる。近年、特異な種類の腫瘍治療剤として、ＮａＯＨを含む水を電気分解して得られる電解還元水を有効成分とするものが「癌抑制剤」の名称で提案され（特許文献１を参照）、また、銀イオンを有機または無機イオン交換体からなる担体に担持させてなるものが「生体内フリーラジカル生成剤」の名称で提案されている（特許文献２を参照）。
【０００３】
上記した特許文献１で提案されている癌抑制剤は、有隔膜電解にて生成されるアルカリ性水である電解還元水（電解生成アルカリ性水）に含まれる高濃度の溶存水素が、活性酸素に起因するＤＮＡの損傷を防止または修復する能力を有することに着目して開発されたものである。高濃度の溶存水素を含有する電解還元水は、一般には、電解を助成するＮａＣｌの希薄水溶液を被電解水とする有隔膜電解により、有隔膜電解槽の陰極側電解室にて生成される。
【０００４】
しかしながら、ＮａＣｌの希薄水溶液を被電解水とする有隔膜電解では、有隔膜電解槽の陽極側電解室にて塩素成分を含有する酸化性水（電解生成酸性水）が生成され、その際、次亜塩素酸や塩素ガスが大量に発生し、これらの塩素成分が生成の目的とする電解還元水に溶け込むことになる。塩素成分が大量に溶存する電解還元水は、服用に適さないことは勿論であるが、溶存する塩素成分は、癌細胞に対しては発癌性の方向に作用するとの理由から、塩素成分を大量に溶存していない電解還元水を得るべく、被電解水を、ＮａＣｌ水溶液に替えてＮａＯＨ水溶液を採用することを特定しているものである。
【０００５】
また、上記した特許文献２で提案されている生体内フリーラジカル生成剤は、フリーラジカルである・ＯＨが癌細胞を破壊する作用を有することに着目して開発されたものである。この点に着目すれば、・ＯＨの発生が継続してなされる剤が極めて有利であり、当該生体内フリーラジカル生成剤は、銀イオンが水をラジカル分解して・ＯＨを生成することを前提とし、銀イオンを担持するイオン交換体が・ＯＨを長時間継続して発生することを理由に、銀イオンを担持するイオン交換体を生体内フリーラジカル生成剤として特定しているものである。
【特許文献１】特開２００１−１３７８５２号公報
【特許文献２】ＷＯ９５／１４４８４号再公表特許公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明者等は、近年、特殊な機能を有するものとして注目されている電解生成水について鋭意研究した結果、銀成分を含有する電解生成アルカリ性水および電解生成酸性水は、癌細胞を直接攻撃する機能を有することはないものの、特定の腫瘍に対する免疫機能を増強する作用を有するとの知見を得た。本発明は、かかる知見に基づいてなされたもので、その目的とするところは、特定された成分を含有する電解生成水を有効成分とする免疫賦活剤、同免疫賦活剤の生成方法、および、同免疫賦活剤の生成装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、同種異系腫瘍細胞の増殖を抑制する免疫機能を増強するための免疫賦活剤であり、本発明に係る免疫賦活剤の第１は、銀成分を含有する水を被電解水とする電解にて生成される銀成分含有の弱アルカリ性の電解生成アルカリ性水を有効成分とすることを特徴とするものである。当該免疫賦活剤においては、前記電解生成アルカリ性水は、ｐＨ９を基準とし、かつ、銀成分をイオンの形態で１００ ppbを基準として含有していることが好ましい。また、当該免疫賦活剤においては、前記電解生成アルカリ性水は、酸化還元電位が＋２００ mVを基準とするものであることが好ましい。
【０００８】
また、本発明に係る免疫賦活剤の第２は、銀成分を含有する水を被電解水とする電解にて生成される銀成分含有の弱酸性の電解生成酸性水を有効成分とすることを特徴とするものである。当該免疫賦活剤においては、前記電解生成酸性水は、ｐＨ６を基準とし、かつ、銀成分をイオンの形態で１００ ppbを基準として含有していることが好ましい。また、当該免疫賦活剤においては、前記電解生成酸性水は、酸化還元電位が４００ mVを基準とするものであることが好ましい。
【０００９】
本発明に係る免疫賦活剤の生成方法は、本発明に係るこれらの免疫賦活剤を生成するための生成方法である。本発明に係る生成方法の第１は、本発明に係る第１の免疫賦活剤を生成する生成方法であって、銀成分を含有する水を被電解水とし、同被電解水を有隔膜電解槽の陰極側電解室に電解するか、または、同被電解水を無隔膜電解槽にて電解して、陰極側の電解生成水を抽出することを特徴とするものである。
【００１０】
また、本発明に係る生成方法の第２は、本発明に係る第２の免疫賦活剤を生成する生成方法であって、銀成分を含有する水を被電解水とし、同被電解水を有隔膜電解槽の陽極側電解室に電解するか、または、同被電解水を無隔膜電解槽にて電解して、陽極側の電解生成水を抽出することを特徴とするものである。
【００１１】
本発明に係るこれらの生成方法においては、前記被電解水として、水を被電解水とする銀電極を用いる無隔膜電解にて生成される電解生成水を採用することができ、また、銀粉末を水に溶解して調製される銀水溶液を採用することができる。
【００１２】
本発明に係る免疫賦活剤の生成装置は、本発明に係るこれらの該免疫賦活剤の生成方法を実施するための生成装置であり、当該生成装置の第１は、軟水器および浄水器を有して水道水や天然水等の一般水を軟水処理および浄水処理する処理機構と、銀電極を陽極側電極とし前記処理機構で処理された処理水を被電解水として無隔膜電解する無隔膜電解槽と、同無隔膜電解槽で生成された電解生成水を被電解水として有隔膜電解する有隔膜電解槽を備えることを特徴とするものである。
【００１３】
また、当該生成装置の第２は、軟水器および浄水器を有して水道水や天然水等の一般水を軟水処理および浄水処理する処理機構と、銀電極を陽極側電極とし前記処理機構で処理された処理水を被電解水として無隔膜電解する無隔膜電解槽と、同無隔膜電解槽で生成された電解生成水を被電解水として無隔膜電解する無隔膜電解槽を備え、同無隔膜電解槽は、電解室における陽極側の下流側および陰極側の下流側に電解生成水を流出させる流出管路を備えることを特徴とするものである。
【発明の効果】
【００１４】
本発明に係る各免疫賦活剤は、癌細胞等腫瘍を直接攻撃する作用がなくて抗癌剤としての機能を有するものではないが、マウス腫瘍であるSarcoma180（Ｓ−１８０）に対する腫瘍増殖抑制作用を有すること、同じくマウス腫瘍であるＭｅｔｈ−Ａに対する腫瘍増殖抑制作用を有していないことを確認している。この効果（抗腫瘍作用）は、Ｓ−１８０が抗原性の高い同種異系腫瘍であり、Ｍｅｔｈ−Ａが同系腫瘍であることから、免疫系を介していることが予測される。さらに、この結果に基づいて、脾臓リンパ球の活性化反応を検討した結果、natural killer活性を示す細胞表面マーカーＣＤ２３３の発現割合や細胞障害性、Ｔ細胞活性を示すＣＤ３ｅ発現の割合が、腫瘍抑制群で顕著に増加していることを確認している。これらの結果は、本発明で特定している銀成分を含有する電解生成アルカリ性水および電解生成酸性水の投与によって、腫瘍抑制群では、細胞性免疫機能が亢進し、抗腫瘍作用を発揮していることを示唆している。
【００１５】
以上の結果から、本発明で特定している銀成分を含有する電解生成アルカリ性水および電解生成酸性水は、その作用機序については未だ特定し得ないが、同種異系腫瘍細胞に対して抗腫瘍免疫力を高める剤、換言すれば、免疫機能を増強するための免疫賦活剤であるものと認められる。
【００１６】
本発明に係る第１の免疫賦活剤は、電解生成アルカリ性水のｐＨについては、ｐＨ９を基準としてｐＨ８．０〜１０．０の範囲にあることが好ましく、酸化還元電位については、＋２００ mVを基準として＋４００ mV〜−８００ mVの範囲にあることが好ましく、かつ、銀成分については、銀イオン換算濃度で１００ ppbを基準として３０ ppb〜２００ ppbの範囲にあることが好ましい。
【００１７】
また、本発明に係る第２の免疫賦活剤は、電解生成酸性水のｐＨについては、ｐＨ６を基準としてｐＨ５．０〜７．０の範囲にあることが好ましく、酸化還元電位については、＋４００ mVを基準として＋２００ mV〜＋８００ mVの範囲にあることが好ましく、かつ、銀成分については、銀イオン換算濃度で１００ ppbを基準として３０ ppb〜２００ ppbの範囲にあることが好ましい。
【００１８】
本発明に係る各免疫賦活剤は、銀成分を含有する水を被電解水とし、同被電解水を有隔膜電解槽の各電解室に電解することにより生成することができる。当該生成方法では、有隔膜電解槽の陰極側電解室にて第１の免疫賦活剤（電解生成アルカリ性水）が生成され、かつ、有隔膜電解槽の陽極側電解室にて第２の免疫賦活剤（電解生成酸性水）が生成される。
【００１９】
当該有隔膜電解では、被電解水を有隔膜電解槽の陰極側電解室および陽極側電解室の同時に供給して、これらの各電解室にて第１，第２の免疫賦活剤を同期的に生成することができる。また、被電解水を有隔膜電解槽の一方の電解室に供給し、他方の電解室には単なる水を供給することにより、第１，第２の免疫賦活剤を選択的に生成することができる。これらの場合、被電解水として、水を被電解水とする銀電極を用いる無隔膜電解にて生成される電解生成水を採用することができ、また、銀粉末を水に溶解して調製される銀水溶液を採用することができる。
【００２０】
当該有隔膜電解において、被電解水として、水を被電解水とする銀電極を用いる無隔膜電解にて生成される電解生成水を採用する方式を採る場合には、下記の生成装置、すなわち、軟水器および浄水器を有して水道水や天然水等の一般水を軟水処理および浄水処理する処理機構と、銀電極を陽極側電極とし前記処理機構で処理された処理水を被電解水として無隔膜電解する無隔膜電解槽と、同無隔膜電解槽で生成された電解生成水を被電解水として有隔膜電解する有隔膜電解槽を備える生成装置によって容易に実施することができる。この場合、免疫賦活剤のｐＨ、酸化還元電位、銀成分の含有量等については、採用する被電解水の特性や、各電解時の電解電流値等の電解条件を適宜制御することにより、所望の値に設定することができる。
【００２１】
当該生成装置においては、無隔膜電解槽を有隔膜電解槽の上流側に配設して、無隔膜電解槽で生成される銀含有の電解生成水を被電解水としているが、無隔膜電解槽を有隔膜電解槽の下流側に配設して、有隔膜電解槽にて生成される電解生成水を無隔膜電解槽に対する被電解水とした場合にも、銀成分含有の電解生成水を生成することができる。しかしながら、当該電解方式にて生成された銀成分含有の電解生成水においては、抗腫瘍作用があることを確認することはできなかった。
【００２２】
また、本発明に係る各免疫賦活剤は、銀成分を含有する水を被電解水とし、同被電解水を無隔膜電解槽の電解室にて電解することにより生成することができる。当該生成方法では、無隔膜電解槽の陰極側にて第１の免疫賦活剤（電解生成アルカリ性水）が生成され、かつ、無隔膜電解槽の陽極側にて第２の免疫賦活剤（電解生成酸性水）が生成される。このため、当該無隔膜電解では、無隔膜電解槽で生成される電解生成水を陰極側から抽出することにより第１の免疫賦活剤が得られ、かつ、無隔膜電解槽で生成される電解生成水を陽極側から抽出することにより第２の免疫賦活剤が得られる。
【００２３】
当該無隔膜電解は、電解室における陰極側および陽極側の下流側にそれぞれ抽出管路を備える無隔膜電解槽を使用することにより、容易に実施することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２４】
本発明は免疫賦活剤、その生成方法および生成装置に関するものである。本発明に係る免疫賦活剤は、同種異系腫瘍細胞の増殖を抑制する免疫機能を増強するための免疫賦活剤であり、その第１の免疫賦活剤は、銀成分を含有する電解生成アルカリ性水を有効成分とするものである。当該免疫賦活剤は、具体的には、電解生成アルカリ性水のｐＨがｐＨ８．０〜１０．０の範囲にあり、酸化還元電位が＋４００ mV〜−８００ mVの範囲にあり、かつ、銀成分が銀イオン換算で３０ ppb〜２００ ppbの範囲にあるものである。
【００２５】
また、本発明に係る第２の免疫賦活剤は、銀成分を含有する電解生成酸性水を有効成分とするものである。当該免疫賦活剤は、具体的には、電解生成酸性のｐＨがｐＨ５．０〜７．０の範囲にあり、酸化還元電位が＋２００ mV〜＋８００ mVの範囲にあり、かつ、銀成分が銀イオン換算で３０ ppb〜２００ ppbの範囲にあるものである。
【００２６】
これらの各免疫賦活剤は、癌等腫瘍細胞を直接攻撃する作用がなく、抗癌剤としての機能を有するものではない。しかしながら、マウス腫瘍であるSarcoma180（Ｓ−１８０）に対する腫瘍増殖抑制作用を有すること、同じくマウス腫瘍であるＭｅｔｈ−Ａに対する腫瘍増殖抑制作用を有していないことを確認している。この結果（抗腫瘍作用）は、マウス腫瘍であるSarcoma180（Ｓ−１８０）が抗原性の高い同種異系腫瘍であり、同じくマウス腫瘍であるＭｅｔｈ−Ａが同系腫瘍であることから、免疫系を介していることを示唆している。
【００２７】
また、この結果に基づいて、脾臓リンパ球の活性化反応を検討した結果、（natural killer）活性を示す細胞表面マーカーＣＤ２３３の発現割合や細胞障害性Ｔ細胞活性を示すＣＤ３ｅ発現Ｔリンパ球の割合は腫瘍抑制群で顕著に増加していることを確認している。これらの結果は、本発明で特定している銀成分を含有する電解生成アルカリ性水や電解生成酸性水の投与によって、腫瘍抑制群では、細胞性免疫機能が亢進し、抗腫瘍作用を発揮していることを示唆している。
【００２８】
以上の結果から、本発明で特定している銀成分を含有する電解生成アルカリ性水や電解生成酸性水は、その作用機序については未だ特定し得ないが、抗原性が高く、獲得免疫能の高い同種異系腫瘍に対して抗腫瘍免疫力を高める剤、換言すれば、免疫機能を増強する免疫賦活剤であるものと認められる。当該免疫機能を増強する免疫賦活作用は、含有する銀成分の量が多いほど大きいことを確認している。一実験の範囲（銀成分の含有量０〜１５０ppbの範囲）においては、銀成分の含有量が１５０ ppbの場合が最大の免疫賦活作用を示すことを確認している。
【００２９】
当該免疫賦活剤は、水道水や天然水等の一般水を軟水処理および浄水処理してなる処理水を被電解水とする無隔膜電解と、同無隔膜電解にて生成された電解生成水を被電解水とする有隔膜電解または無隔膜電解の電解処理によって容易に生成することができる。また、当該免疫賦活剤の有隔膜電解槽を使用する生成方法は、図１に示す免疫賦活剤の生成装置によって実施することができる。図１は、当該免疫賦活剤生成装置の一実施形態の全体構成を概略的に示すもので、水処理機構１０、無隔膜電解槽２０、および、有隔膜電解槽３０を備えている。
【００３０】
当該免疫賦活剤生成装置を構成する水処理機構１０は、軟水器１１、浄水器１２、および貯留槽１３を備えている。軟水器１１は、陽イオン交換樹脂を内蔵し、浄水器１２は高精度の濾過機能を有するフィルタを内蔵している。軟水器１１は、給水管路１１ａを介して水源である水道水の供給源に連結し、給水管路１１ｂを介して浄水器１２に連結している。また、浄水器１２は、給水管路１２ａを介して貯留槽１３に連結している。貯留槽１３は、給水管路１３ａを介して、無隔膜電解槽２０の電解室Ｒに連結している。また、貯留槽１３は、還流管路１３ｂ、オーバフロー管路１３ｃ、および、図示しない水位検知センサーを備えている。オーバフロー管路1３ｃは排水管路１３ｄに連結し、かつ、給水管路１３ａの途中は、排水弁１３ｅを介して排水管路１３ｄに連結している。また、給水管路１３ａの途中には、給水ポンプ１４が介装されている。
【００３１】
当該水処理機構１０は、水道水を軟水器１１および浄水器１２で処理してなる処理水を貯留槽１３内に設定された所定量貯留させる機能、換言すれば被電解水を生成する機能、および、貯留槽１３に貯留されている処理水を被電解水として、無隔膜電解槽２０の電解室Ｒに供給する機能の両機能を備えている。当該水処理機構１０においては、貯留槽１３に貯留されている処理水を、給水ポンプ１４を駆動させることにより、被電解水として、無隔膜電解槽２０の電解室Ｒに供給する。
【００３２】
無隔膜電解槽２０は、円筒状の槽本体２１内に陽極電極２２と陰極電極２３を配設して構成されている。陽極電極２２は銀製の棒体であって、槽本体２１の中央部に位置し、陰極電極２３はＳＵＳ３０４らなる円筒体であって、陽極電極２２を中心としてその外周側に位置している。これにより、槽本体２１内が電解室Ｒに形成されている。槽本体２１の下方側には、貯留槽１３が有する給水管路１３ａが連結されている。また、槽本体２１は、電解室Ｒに連通する流出管路２１ａを備えている。流出管路２１ａは、その分岐管路にて、後述する有隔膜電解槽３０の各電解室Ｒ1，Ｒ2に連結されている。
【００３３】
当該無隔膜電解槽２０においては、制御機構４０が有する電源から、陽極電極２２と陰極電極２３間に印加電圧が付与されて電解運転が開始される。電解運転では、給水ポンプ１４の駆動により、貯留槽１３に貯留されている処理水を被電解水として、電解室Ｒ内に供給される。被電解水は、電解室Ｒ内で設定された所定の電解電流によって電解を受けて電解生成水となる。当該電解生成水は、流出管路２１ａを経て、後述する有隔膜電解槽３０の各電解室に供給される。電解電流値は、図示しない電流計にて検出されて制御機構４０が有するマイクロコンピュータに入力され、設定された電解電流値に制御される。これにより、電解運転時には、陽極電極２２と陰極電極２３間の電解電流値は、設定された所定の範囲に維持される。当該無隔膜電解槽２０では、電解電流値は０〜３０ mAの範囲で制御可能である。
【００３４】
有隔膜電解槽３０は、方形の箱状を呈する槽本体３１内を、イオン透過可能な隔膜３２で区画してなるもので、各区画室には電極３３ａ，３３ｂがそれぞれ配設されて、一対の電解室Ｒ1，Ｒ2に形成されている。各電極３３ａ，３３ｂは、Ｔｉ板の表面をＰｔ鍍金してなる同一のものであり、隔膜３２を挟んで互いに対向して位置している。槽本体３１の下方側には、無隔膜電解槽２０が有する流出管路２１ａの分岐管路が連結されていて、無隔膜電解槽２０にて生成された電解生成水を被電解水として、各電解室Ｒ1，Ｒ2に供給し得るようになっている。また、槽本体３１は、各電解室Ｒ1，Ｒ2に連通する一対の流出管路３１ａ，３１ｂを備え、両流出管路３１ａ，３１ｂの途中には、切替バルブ３４が介装されている。
【００３５】
当該有隔膜電解槽３０においては、制御機構４０が有する電源から、各電極３３ａ，３３ｂに電圧が印加されて電解運転が開始されるが、電解運転は、無隔膜電解槽２０の電解運転に連動して行われる。当該有隔膜電解槽３０の電解運転の途中では、各電極３３ａ，３３ｂに印加する電圧の極性が所定時間毎に正負反転するよう制御され、かつ、この極性の反転に伴い切替バルブ３４が切替動作して、両流出管路３１ａ，３１ｂの両電解室Ｒ1，Ｒ2に対する連結状態を切替えるように構成されている。各電極３３ａ，３３ｂにおける極性の反転および切替バルブ３４の切替動作は、制御機構４０が有するマイクロコンピュータによって制御されるとともに、両電極３３ａ，３３ｂ間の電解電流値は、図示しない電流計にて検出されてマイクロコンピュータにて設定された電解電流値に制御される。これにより、電解運転時には、両電極３３ａ，３３ｂ間の電解電流値は、設定された所定の範囲に維持される。当該有隔膜電解槽３０では、電解電流値は０〜３ Aの範囲で制御可能である。
【００３６】
このように、当該有隔膜電解槽３０においては、各電極３３ａ，３３ｂに対する極性を定期的に反転させて各電解室Ｒ1，Ｒ2の陽極側および陰極側を定期的に反転させる構成を採っている。この意図は、電解運転時、陽極側電解室で生成される電解生成酸性水の雰囲気において発生し易いスケールの付着に対処するものであって、仮に、陽極側電解室でスケールが発生して付着する場合でも、当該陽極側電解室を陰極側電解室に反転させて、電解生成アルカリ性水の雰囲気にすることによって、当該スケールを流出除去させるものである。
【００３７】
従って、当該有隔膜電解槽３０にあっては、電解運転時、各電解室Ｒ1，Ｒ2を定期的に陽極側および陰極側に反転して、一方の電解室Ｒ1においては、陽極側電解室である場合には電解生成酸性水が生成されるとともに陰極側電解室である場合には電解生成アルカリ性水が生成され、かつ、他方の電解室Ｒ2においては、陰極側電解室である場合には電解生成アルカリ性水が生成されるとともに陽極側電解室である場合には電解生成酸性水が生成される。これらの場合、各電解室Ｒ1，Ｒ2の陽極側および陰極側の反転に応じて切替バルブ３４が切替動作して、流出管路３１ａ，３１ｂは各電解室Ｒ1，Ｒ2の反転側に連結して、流出管路３１ａ，３１ｂの一方は電解生成酸性水の専用の流出管路として確保され、かつ、流出管路３１ａ，３１ｂの他方は電解生成アルカリ性水の専用の流出管路として確保される。当該有隔膜電解槽３０の陰極側電解室で生成される電解生成アルカリ性水（銀成分含有）が本発明に係る第１の免疫賦活剤に該当し、かつ、陽極側電解室で生成される電解生成酸性水が本発明に係る第２の免疫賦活剤に該当する。
【００３８】
当該免疫賦活剤生成装置においては、水処理装置１０は、任意に運転されて、貯留槽１３には常時所定量の処理水が貯留されていて、無隔膜電解槽２０および有隔膜電解槽３０による同期的な電解運転時には、供給ポンプ１４の駆動により、貯留槽１３内の処理水が被電解水として無隔膜電解槽２０の電解室Ｒに供給される。なお、貯留槽１３内の処理水が設定されている量まで減量した場合には、図示しない水位検知センサーがこれを検知して、制御機構４０のマイクロコンピュータに検出信号を出力する。マイクロコンピュータは、当該検出信号に基づき給水バルブ１１ｃを開放して、処理水を貯留槽１３内の貯留量が所定量になるまで補給を継続する。
【００３９】
無隔膜電解槽２０および有隔膜電解槽３０による同期的な電解運転においては、無隔膜電解槽２０の陽極電極２２および陰極電極２３間には３０ mA以下の所定値の電解電流が印加され、かつ、有隔膜電解槽３０の両電極３３ａ，３３ｂ間には３A以下の所定値の電解電流が印加される。無隔膜電解槽２０による無隔膜電解においては、電解室Ｒに供給された被電解水である処理水の電解では、陽極電極２２側から銀イオンが溶出し、銀イオンまたはその他の形態の銀成分を含有する電解生成水、すなわち、銀成分を含有する略中性の電解生成水が生成される。生成された当該電解生成水は、被電解水として、有隔膜電解槽３０の両電解室Ｒ1，Ｒ2に供給される。
【００４０】
有隔膜電解槽３０による有隔膜電解においては、一方の電解室Ｒ1が陽極側電解室である場合には電解生成酸性水が生成されるとともに、陰陽極側電解室である場合には電解生成アルカリ性水が生成され、また、他方の電解室Ｒ2が陰極側電解室である場合には電解生成アルカリ性水が生成されるとともに、陽極側電解室である場合には電解生成酸性水が生成される。当該有隔膜電解により生成された電解生成酸性水は、例えば専用の流出管路である流出管路３１ａを通して所定の場所に流出され、電解生成アルカリ性水は、例えば専用の流出管路である流出管路３１ｂを通して所定の場所に流出される。
【００４１】
当該電解生成アルカリ性水は、所定量の銀成分を含有する電解生成アルカリ性水であって、本発明に係る第１の免疫賦活剤に該当する。当該電解生成酸性性水は、所定量の銀成分を含有する電解生成酸性水であって、本発明に係る第２の免疫賦活剤に該当する。
【００４２】
当該生成装置においては、免疫賦活剤が含有する銀成分の量を、無隔膜電解の電解運転条件によって制御することができる。例えば、電解電流値や電解時間を制御することによって、銀イオンとしての濃度を０〜２００ ppbの範囲において、任意の濃度に設定することができる。また、免疫賦活剤のｐＨ等の特性については、有隔膜電解の電解運転条件によって制御することができる。例えば、電解電流値や電解時間を制御することによって、電解生成アルカリ性水のｐＨを７．０〜１１．０の範囲において任意の値に、また、電解生成酸性水のｐＨを３．０〜７．０の範囲において任意の値にそれぞれ設定することができる。
【００４３】
なお、当該生成装置においては、無隔膜電解槽２０からの流出管路２１ａを有隔膜電解槽３０の電解室Ｒ1，Ｒ2に選択的に連通するように構成して、無隔膜電解槽２０にて生成される電解生成水を、電解室Ｒ1，Ｒ2の選択された一方の電解室に供給するとともに、非選択の他方の電解室には単なる水を供給するように電解運転することもできる。当該電解運転によれば、選択された一方の電解室にて免疫賦活剤を生成することができる。例えば、選択された電解室が陰極側電解室である場合には、電解生成アルカリ性水である第１の免疫賦活剤が生成され、また、選択された電解室が陽極側電解室である場合には、電解生成酸性水である第２の免疫賦活剤が生成される。
【実施例１】
【００４４】
本実施例では、当該免疫賦活剤の生成装置で生成された電解生成アルカリ性水であって、銀成分の濃度を異にする電解生成アルカリ性水（供試薬）について、その腫瘍細胞の増殖阻害作用、移植腫瘍に対する抗腫瘍作用を確認するため、下記に示す２つの実験 (in vitro)を行った。
（１）実験１：各種腫瘍細胞に対する作用
本実験では、供試料として、社団法人北里研究所の研究室で継代維持・保存してきた各種マウスおよびヒト癌細胞を採用した。また、供試薬としては、当該免疫賦活剤の生成装置で毎回生成した４種の電解生成アルカリ性水（供試薬１〜４）を採用した。供試薬１はｐＨ９．３で銀成分の濃度５０ ppbの電解生成アルカリ性水、供試薬２はｐＨ９．３で銀成分の濃度２５ ppbの電解生成アルカリ性水、供試薬３はｐＨ９．３で銀成分の濃度１２．５ ppbの電解生成アルカリ性水、供試薬４はｐＨ９．３で銀成分の濃度６．２５ ppbの電解生成アルカリ性水である。
【００４５】
供試料中、マウスメラノーマ細胞株（Ｂ１６／ＢＬ６），サルコーマ細胞株（Ｓ−１８０），マウスリンパ腫細胞株（Ｐ３８８），ファイブロサルコーマ細胞株（Ｌ９２９），ヒト神経芽腫細胞株（ＮＢ−１），ヒト子宮頸癌株（ＨｅＬａ），ヒト腺維芽細胞株（ＷＩ−３８細胞）については、１０％胎児ウシ血清（Fetal Bovine Serum；ＦＢＳ）を含むMinimum Eagle's Ｍedium（ＭＥＭ）培地で継代維持した。これらの細胞を３〜５×１０4  cell/mLに調製し、その０．１ mLを９６穴培養プレートに播取した。これらに、目的量の供試薬を添加し、さらに、トータル０．２ mLとなるようにＭＥＭ培地を加え、５％のＣＯ2存在下、３７℃で７２時間培養した。細胞生存率は、ＭＴＴ法（Carmichaei,J.,et al.Cancer Res.vol.47,p936〜942,1987）による比色定量により測定した。
【００４６】
供試料中、マウスサルコーマ細胞株（Ｍｅｔｈ−Ａ），マウス肺癌株（ＬＣＣ），ヒト胃癌株（ＫＡＴＯ−III），ヒト骨髄性白血病細胞株（ＨＬ−６０），ヒト組織球性リンパ腫細胞株（Ｕ−９３７），ヒト前立腺癌株（ＬＮＣａＰ），マウスリンパ腫細胞株（Ｌ５１７８Ｙ−ＭＬ），ヒトリンパ芽球性白血病細胞株（Jurkat）については、１０％ＦＢＳ含有の（ＲＰＭＩ−１６４０）培地で継代維持した。これらの細胞を５×１０4 cell/mLに調製し、その０．１ mLを９６穴培養プレートに播取した。これらに、目的量の供試薬を添加し、さらに、トータル０．２ mLとなるように（ＲＰＭＩ−１６４０）培地を加え、５％のＣＯ2存在下、３７℃で７２時間培養した。細胞生存率は、ＭＴＴ法による比色定量により測定した。
【００４７】
供試料中、マウス骨髄芽球様白血病細胞株（Ｍ１），ヒト肝癌株（Ｈｅｐ Ｇ２），ヒト口腔類上皮癌株（ＫＢ細胞）については、１０％ＦＢＳ含有のＤＭＥＭ（Dulbeccs Modijed EM）培地で継代維持した。これらの細胞を５×１０4 cell/mLに調製し、その０．１ mLを９６穴培養プレートに播取した。これらに、目的量の供試薬を添加し、さらに、トータル０．２ mLとなるようにＤＭＥＭ培地を加え、５％のＣＯ2存在下、３７℃で７２時間培養した。細胞生存率は、ＭＴＴ法による比色定量により測定した。当該実験結果を、表１（マウス樹立癌細胞の細胞生存率）、および、表２（ヒト樹立癌細胞の細胞生存率）に示す。
【００４８】
【表１】
2005120084.tif 000003
【００４９】
【表２】
2005120084.tif 000004
【００５０】
（２）実験２：マウスに対する抗腫瘍作用
本実験では、供試動物として、５週齢雌性ｄｄＹ系マウス（日本ＳＬＣより購入）、５週齢雌性ＢＡＬＢ／ｃ系マウス（日本ＳＬＣより購入）を採用した。ｄｄＹ系マウスには、その腹側皮内に１×１０6個のＳ−１８０細胞を移植し、ＢＡＬＢ／ｃ系マウスには、その腹側皮内にＭｅｔｈ−Ａ細胞を移植して、移植日をday０として、day０からday１５（移植日から１５日）までの間、供試薬をマウスに自由経口摂取による投与を行った。この間、定期的に腫瘍の大きさ（長径および短径）を外部から測定するとともに、体重を測定した。また、day１５にマウスを放血致死させ、腫瘍を摘出してその重量を測定した。
【００５１】
当該実験においては、供試薬として、銀成分が７０ ppb濃度でｐＨ９．２の電解生成アルカリ性水を採用した。また、当該実験では、コントロール群として供試薬に替えて蒸留水を採用し、比較群として供試薬に替えてクレスチン（ＰＳＫ，陽性対照：三共株式会社製）を採用した。また、動物群については、マウスを購入後１週間の予備飼育ののち実験に供した。飼育は、マウスをポリカーボネート製のケージ（３２×２３１×１３ cm）に５匹入れ、室温２３±０．５℃、湿度５５±５％の環境下で行い、照明は午前８時〜午後８時の１２時間照射とし、水、餌は自由に摂取し得る状態とした。
【００５２】
定期的に行う腫瘍の大きさ（長径および短径）および体重の測定は、癌の増殖度合いを確認するもので、腫瘍の大きさ（長径および短径）の測定にはノギスを使用して、腫瘍の大きさ（腫瘍推定重量）を、長径（mm）×短径（mm）2／２の式で算出した。なお、統計処理はunpaired ｔ検定で行った。また、供試薬の投与終了後の腫瘍の大きさについては、摘出した腫瘍の重量を直接測定することによって行った。これらの結果については、Ｓ−１８０細胞に対する結果を、表３（移植Ｓ−１８０の増殖抑制効果：推定重量および実重量）、図２のグラフ（移植Ｓ−１８０の増殖の経時的変化：推定重量）、図３のグラフ（移植Ｓ−１８０の増殖の実重量）に示す。また、Ｍｅｔｈ−Ａに対する結果を、表４（移植の増殖抑制効果：推定重量および実重量）、図４のグラフ（移植Ｍｅｔｈ−Ａの増殖の経時的変化：推定重量）、図５のグラフ（移植Ｍｅｔｈ−Ａの増殖の実重量）に示す。
【００５３】
【表３】
2005120084.tif 000005
【００５４】
【表４】
2005120084.tif 000006
【００５５】
（３）考察
マウスおよびヒトの各種樹立癌細胞株の細胞増殖に対する銀成分含有の電解生成アルカリ性水の作用について検討した結果では、増殖抑制に対して感受性の高いＰ３８８マウスリンパ腫株において、培地ｐＨが変化する限界濃度の５０％（供試薬添加）においても１０％程度の増殖抑制しか認められなかった。他の細胞株に対しても、増殖抑制効果は認められなかった。従って、当該結果は、細胞に対する銀成分含有の電解生成アルカリ性水には、直接的な細胞膜障害ＤＮＡ／ＲＮＡの切断、転写阻害、選択的情報伝達阻害作用等はないことが示唆される。
【００５６】
マウスに移植した腫瘍細胞の抗腫瘍に対する銀成分含有の電解生成アルカリ性水の作用について検討した結果では、皮内に移植したＳ−１８０細胞の増殖は陽性対照のクレスチン（ＰＳＫ）投与の場合と同程度の有意（Ｐ＞０．０５）に抑制される結果を得ており、皮内に移植したＭｅｔｈ−Ａ細胞の増殖は抑制されない結果を得ている。Ｓ−１８０は抗原性が高い同種異系の癌であるのに対して、Ｍｅｔｈ−Ａは抗原性が低い同系な癌である。ＰＳＫは、免疫賦活作用を有する制癌剤であって、Ｍｅｔｈ−Ａには増殖抑制作用が低いと言われている。また、銀成分含有の電解生成アルカリ性水の増殖抑制作用がＰＳＫのパターンに類似することから、銀成分含有の電解生成アルカリ性水の増殖抑制作用は、免疫系を介した作用であることが示唆される。
【実施例２】
【００５７】
本実施例では、当該免疫賦活剤の生成装置で生成された電解生成アルカリ性水で、銀成分の濃度を異にする電解生成アルカリ性水（供試薬）について、マウス移植腫瘍（Ｓ−１８０，Ｍｅｔｈ−Ａ）に対する抗腫瘍作用を確認するため、下記に示す２つの実験 (in vivo)を行った。本実施例では、腫瘍として、社団法人北里研究所の研究室で継代維持・保存してきたＳ−１８０腫瘍，Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍を採用した。また、供試薬としては、当該免疫賦活剤の生成装置で生成した銀成分の濃度を異にする電解生成アルカリ性水（供試薬１〜４）を採用し、コントロールとして蒸留水を、陽性対照としてクレスチンＰＳＫ（陽性対照：三共株式会社製）を採用した。供試薬１は銀イオン濃度０ ppbでｐＨ９．５の電解生成アルカリ性水（Ａｇ０試薬という）、供試薬２は銀イオン濃度４０ ppbでｐＨ９．５の電解生成アルカリ性水（Ａｇ４０試薬という）、供試薬３は銀イオン濃度７０ ppbでｐＨ９．５の電解生成アルカリ性水（Ａｇ７０試薬という）、供試薬４は銀イオン濃度１５０ ppbでｐＨ９．５の電解生成アルカリ性水（Ａｇ１５０試薬という）である。各供試薬は、連日生成したものである。なお、供試験用マウスは、各投与試薬毎に６匹を一群とした。
（１）実験１：Ｓ−１８０に対する作用
マウスとしては、５週齢雌性ｄｄＹマウス（日本ＳＬＣより購入）を採用し、ｄｄＹ系マウスの腹側皮内に０．５×１０6個のＳ−１８０細胞を移植し、移植日をday０として、day０からday２４（移植日から２４日）までの間を基準とし、供試薬、蒸留水およびＰＳＫについてはマウスに自由な経口摂取による自由経口投与を行い、ＰＳＫについては経口ゾンデによる強制経口投与を行った。経口投与では、day０からday２４までの間（同日投与群）の外に、移植日の１週間前からday２４までの間（前投与群）、および、移植日の1週間後からday２４までの間（後投与群）の投与を行った。
【００５８】
これらの投与の間、定期的に腫瘍の大きさ（長径および短径）を外部から測定するとともに、体重を測定した。また、day２４にマウスを放血致死させ、腫瘍を摘出してその重量を測定した。なお、実験に供したマウスは、購入後１週間の予備飼育の後のものであり、飼育は、マウスをポリカーボネート製のケージ（３２×２３１×１３ cm）に６匹入れ、室温２３±０．５℃、湿度５５±５％の環境下で行い、照明は午前８時〜午後８時の１２時間照射とし、水、餌は自由に摂取し得る状態とした。
【００５９】
定期的に行う腫瘍の大きさ（長径および短径）および体重の測定は、腫瘍の増殖度合いを確認するもので、腫瘍の大きさ（長径および短径）の測定にはノギスを使用して、腫瘍の大きさ（腫瘍推定重量）を、長径（mm）×短径（mm）2 ／２の式で算出した。なお、統計処理は、unpaired ｔ検定で行った。また、供試薬等の投与終了後の腫瘍の大きさについては、摘出した腫瘍の重量を直接測定することによって行った。これらの結果については、表５（移植Ｓ−１８０の増殖効果：推定重量，実重量）、図６〜図９のグラフ（移植Ｓ−１８０腫瘍の増殖の経時的変化：推定重量）に示す。
【００６０】
【表５】
2005120084.tif 000007
【００６１】
（２）実験２：Ｍｅｔｈ−Ａに対する作用
マウスとしては、５週齢雌性ＭＡＬＢ／ｃ系マウス（日本ＳＬＣより購入）を採用して、ＢＡＬＢ／ｃマウスの腹側皮内にＭｅｔｈ−Ａ腫瘍を移植し、移植日をday０として、day０からday２４（移植日から２４日）までの間を基準として、供試薬、蒸留水、およびＰＳＫについてはマウスに自由な経口摂取による自由経口投与を行い、ＰＳＫについては経口ゾンデによる強制経口投与を行った。経口投与では、day０からday２４までの間（同日投与群）の外に、移植日の１週間前からday２４までの間（前投与群）、および、移植日の１週間後からday２４までの間（後投与群）の投与を行った。
【００６２】
これらの投与の間、定期的に腫瘍の大きさ（長径および短径）を外部から測定するとともに、体重を測定した。また、day２４にマウスを放血致死させ、腫瘍を摘出してその重量を測定した。なお、実験に供したマウスは、購入後１週間の予備飼育の後のものであり、ｄｄＹ系マウスと同一条件で飼育したものである。
【００６３】
定期的に行う腫瘍の大きさ（長径および短径）および体重の測定は、腫瘍の増殖度合いを確認するもので、腫瘍の大きさ（長径および短径）の測定にはノギスを使用して、腫瘍の大きさ（腫瘍推定重量）を、長径（mm）×短径（mm）2／２の式で算出した。なお、統計処理は、unpaired ｔ検定で行った。また、供試薬の投与終了後の腫瘍の大きさについては、摘出した腫瘍の重量を直接測定することによって行った。これらの結果については、図１０〜図１３のグラフ（移植Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍の増殖の経時的変化：推定重量）に示す。
（３）考察
Ｓ−１８０腫瘍の増殖抑制効果について：蒸留水群（コントロール群）では、Ｓ−１８０腫瘍は経時的に増加しており、ＰＳＫ前投与群およびＡｇ０試薬同日投与群では、Ｓ−１８０腫瘍の経時的増加が若干抑制される傾向にある（図６参照）。Ａｇ４０試薬前投与群およびＡｇ４０試薬同日投与群では、移植１０日後から、有意な腫瘍増殖抑制が認められる（図７参照）。Ａｇ７０試薬投与群では、Ａｇ７０試薬前投与群およびＡｇ７０試薬後投与群共に、移植１７日後から、有意な腫瘍増殖抑制が認めらた（図８参照）。但し、Ａｇ７０試薬同日投与群では、腫瘍増殖が抑制されたものと抑制されないものとがあったため、平均値が上昇して、unpaired ｔ検定においては有意差は認められなかった。Ａｇ１５０試薬投与群では、Ａｇ１５０試薬前投与群、Ａｇ１５０試薬同日投与群、およびＡｇ１５０試薬後投与群共に、移植１０日後から、有意な腫瘍増殖抑制が認めらた（図９参照）。
【００６４】
表５には、以上の試薬投与の終了後におけるＳ−１８０腫瘍の推定重量および実重量を示している。この結果は、上記したＳ−１８０腫瘍増殖抑制に対する各試薬の抑制効果を裏付けている。
【００６５】
なお、Ｓ−１８０腫瘍を移植したマウスにおける飲水量と体重変化について観察したところ、Ａｇ０試薬、Ａｇ４０試薬、Ａｇ７０試薬、Ａｇ１５０試薬間で有意差はないが、蒸留水に比較して多量に飲水していることを確認している。また、Ａｇ０試薬、Ａｇ４０試薬、Ａｇ７０試薬、Ａｇ１５０試薬、蒸留水の投与のいずれのマウスにおいても体重は増加しており、体毒性によるマウスの体重減少は認められなかった。
【００６６】
Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍の増殖抑制効果について：蒸留水群（コントロール群）およびＰＳＫの各投与群ではＭｅｔｈ−Ａ腫瘍は経時的に増加しており、これらの間には有意差は認められない。また、Ａｇ０試薬、Ａｇ４０試薬、Ａｇ７０試薬、Ａｇ１５０試薬の各投与群でも、Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍は同様に経時的に増加しており、これらの間には有意差は認められない（図１０〜図１３参照）。
【実施例３】
【００６７】
本実施例では、当該免疫賦活剤の生成装置で生成された銀成分の濃度を異にする電解生成アルカリ性水、蒸留水（コントロール）、およびＰＳＫ（陽性対照）のＴリンパ球に対する作用を確認する実験を行った。
【００６８】
本実験では、各試薬を投与した（day２４）マウスから摘出した脾臓をスライドグラスで潰して、細胞懸濁液を調製し、これを（Lympholite-M）に重層し、２０℃の下、２０００ rpmで２０分間遠心分離して、Ｔ細胞群を得た。得られたＴ細胞をＭＥＭ培地に懸濁し、1×１０6細胞／mL／wellに調製し、抗原として（Ｓ−１８０）膜画分を５０μL加え、５％ＣＯ2存在下３７℃で２４時間培養した。培養終了後、ＦＩＴＣ標識ＣＤ３ｅ抗体、ＰＥ標識ＣＤ２３３抗体を反応させ、洗浄後、ＦＡＣＳ（flow cytometory）にてリンパ球の活性化を測定した。また、細胞障害性を示すＣＤ３ｅ抗原の発現とＮＫ（natural killer）活性を示すＣＤ２３３抗原の発現について、実施例２の結果から、各試薬の投与群中の腫瘍増殖および抑制の典型的な例を示す個体を抽出し、脾臓Ｔリンパ球のＣＤ発現を、ＦＡＣＳで解析した。得られた結果を、表６（リンパ球に対する活性化作用）、および、得られたＦＡＣＳの解析結果を図１４に示す。
【００６９】
【表６】
2005120084.tif 000008
【００７０】
図１４において、ＵＲゾーンは活性化ナチュラルキラー細胞と活性化障害性Ｔ細胞（ＣＤ２３３(＋)，ＣＤ３ｅ(＋)）を示し、ＵＬゾーンは活性化ナチュラルキラー細胞（ＣＤ２３３(＋)）を示し、ＬＲゾーンは活性化障害性Ｔ細胞（ＣＤ３ｅ(＋)）を示し、ＬＬゾーンは不活性化リンパ球を示している。得られたＦＡＣＳの解析結果からは、腫瘍増殖抑制が認められなかったコントロール群およびＡｇ０試薬投与群では、いずれも、ＣＤ３ｅ(−)およびＣＤ２３３(−)の不活性化Ｔリンパ球が６５〜７５％を占めている。また、腫瘍増殖抑制を示したクレスチン（ＰＳＫ：陽性対照）投与群およびＡｇ１５０試薬投与群では、ＣＤ２３３(＋)とＣＤ３ｅ(＋)の活性化Ｔリンパ球の割合は１３〜２３％であり、非抑制群に比較して約３倍上昇している。
【００７１】
この結果は、Ａｇ１５０試薬投与によって、細胞性免疫が賦活性化していることを示している。また、この結果は、ナチュラルキラー活性を示すＣＤ２３３(＋)、細胞障害性Ｔ細胞活性を示すＣＤ３ｅ(＋)のＴリンパ球の割合も増加していることを示していることから、Ａｇ４０〜Ａｇ１５０試薬（銀成分含有の電解生成アルカリ性水）によって、細胞性免疫機能が亢進し、抗腫瘍作用を発揮していることを示唆している。
【実施例４】
【００７２】
本実施例では、無隔膜電解（銀電極）−有隔膜電解…本発明に係る生成装置…にて生成した銀成分の濃度を異にする電解生成アルカリ性水（Ａ群供試薬）および電解生成酸性水（Ｂ群供試薬）、有隔膜電解−無隔膜電解（銀電極）にて生成した銀成分の濃度を異にする電解生成アルカリ性水（Ｃ群供試薬）、無隔膜電解（銀電極）にて生成した電解生成水（Ｄ群供試薬）、銀粉末を水に添加して十分に撹拌して調製した銀水溶液（Ｅ群供試薬）について、マウス移植腫瘍（Ｓ−１８０）に対する抗腫瘍作用を確認するための実験 (in vivo)を行った。
（１）実験
本実験では、供試動物として、５週齢雌性ｄｄＹ系マウス（日本ＳＬＣより購入）を採用した。ｄｄＹ系マウスには、その腹側皮内に１×１０6個のＳ−１８０細胞を移植し、移植日をday０として、day０からday１４（移植日から１４日）までの間、供試薬をマウスに自由経口摂取による投与を行った。この間、定期的に腫瘍の大きさ（長径および短径）を外部から測定するとともに、体重を測定した。また、day１４にマウスを放血致死させ、腫瘍を摘出してその重量を測定した。
【００７３】
本実験においては、供試薬として、下記の表７に示す各供試薬Ａ群（Ａ1，Ａ2）、供試薬Ｂ群（Ｂ1，Ｂ2，Ｂ3）、供試薬Ｃ群（Ｃ1，Ｃ2）、供試薬Ｄ群（Ｄ1，Ｄ2）、および、供試薬Ｅ群（Ｅ1，Ｅ2）を採用した。また、本実験では、コントロール群として供試薬に替えて蒸留水を採用した。動物群については、マウスを購入後１週間の予備飼育ののち実験に供した。飼育は、マウスをポリカーボネート製のケージ（３２×２３１×１３ cm）に５匹入れ、室温２３±０．５℃、湿度５５±５％の環境下で行い、照明は午前８時〜午後８時の１２時間照射とし、水、餌は自由に摂取し得る状態とした。
【００７４】
【表７】
2005120084.tif 000009
【００７５】
（２）結果
本実験において、定期的に行う腫瘍の大きさ（長径および短径）および体重の測定は、癌の増殖度合いを確認するもので、腫瘍の大きさ（長径および短径）の測定にはノギスを使用して、腫瘍の大きさ（腫瘍推定重量）を、長径（mm）×短径（mm）2／２の式で算出した。なお、統計処理はunpaired ｔ検定で行った。また、供試薬の投与終了後の腫瘍の大きさについては、摘出した腫瘍の重量を直接測定することによって行った。これらの結果を、供試薬Ａ群については表８に、供試薬Ｂ群については表９に、供試薬Ｃ群については表１０に、供試薬Ｄ群については表１１に、供試薬Ｅ群については表１２にそれぞれ示す。
【００７６】
【表８】
2005120084.tif 000010
【００７７】
【表９】
2005120084.tif 000011
【００７８】
【表１０】
2005120084.tif 000012
【００７９】
【表１１】
2005120084.tif 000013
【００８０】
【表１２】
2005120084.tif 000014
【００８１】
また、これらの各表に示す結果を基にして、各測定日毎にまとめた結果（グラフ）を図１５（７日目）、図１６（１０日目）、図１７（１４日目）にそれぞれ示す。さらにまた、これらの各表に示す結果を基にして、供試薬の生成方法の相違による結果（グラフ）を図１８に、供試薬の投与時期の相違による結果（グラフ）を図１９に、供試薬の銀イオン濃度の相違による結果（グラフ）を図２０にそれぞれ示す。
（３）考察
本実験の結果を参照すると、供試薬の生成方法の相違に関しては、無隔膜電解（銀電極）−有隔膜電解法にて生成した銀成分含有の電解生成生成酸性水（供試薬Ａ群）および電解生成アルカリ性水（供試薬Ｂ群）には高い増殖抑制作用が認められる。但し、銀成分含有の電解生成アルカリ性水であっても、有隔膜電解−無隔膜電解（銀電極）にて生成した電解生成アルカリ性水（供試薬Ｃ群）には増殖抑制作用が認められない。また、無隔膜電解（銀電極）にて生成した銀含有の電解生成水（供試薬Ｄ群）、および、銀粉末を水に添加して調製した銀水溶液（供試薬Ｅ群）には、増殖抑制作用は認められない。
【００８２】
供試薬の投与時期の相違に関しては、前投与および同時投与共に増殖抑制作用を有するが、同時投与の場合の方において増殖抑制作用がより高い傾向があることが認められる。また、供試薬の銀イオン濃度の相違に関しては、銀成分が銀イオン濃度で１００ ppbであれば高い増殖抑制作用が認められ、銀成分が銀イオン濃度で５００ ppbであっても、増殖抑制作用に差異が認められない。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】本発明に係る免疫賦活剤生成装置の全体構造を概略的に示す概略構成図である。
【図２】移植Ｓ−１８０腫瘍の増殖の経時的変化（推定重量）を示すグラフである。
【図３】移植Ｓ−１８０腫瘍の増殖（実重量）を示すグラフである。
【図４】移植Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍の増殖の経時的変化（推定重量）を示すグラフである。
【図５】移植Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍の増殖（実重量）を示すグラフである。
【図６】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する各試薬（蒸留水、ＰＳＫ、Ａｇ０試薬）の増殖抑制効果を経時的に示すグラフである。
【図７】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する各試薬（蒸留水、Ａｇ４０試薬）の増殖抑制効果を経時的に示すグラフである。
【図８】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する各試薬（蒸留水、Ａｇ７０試薬）の増殖抑制効果を経時的に示すグラフである。
【図９】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する各試薬（蒸留水、Ａｇ１５０試薬）の増殖抑制効果を経時的に示すグラフである。
【図１０】移植Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍に対する各試薬（蒸留水、ＰＳＫ、Ａｇ０試薬）の増殖抑制効果を経時的に示すグラフである。
【図１１】移植Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍に対する各試薬（蒸留水、Ａｇ４０試薬）の増殖抑制効果を経時的に示すグラフである。
【図１２】移植Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍に対する各試薬（蒸留水、Ａｇ７０試薬）の増殖抑制効果を経時的に示すグラフである。
【図１３】移植Ｍｅｔｈ−Ａ腫瘍に対する各試薬（蒸留水、Ａｇ１５０試薬）の増殖抑制効果を経時的に示すグラフである。
【図１４】各試薬を投与した各群のＦＡＣＳ（flow cytometory）による解析結果を示す解析図である。
【図１５】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する各試薬（７日目）の増殖抑制効果を示すグラフである。
【図１６】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する各試薬（１０日目）の増殖抑制効果を示すグラフである。
【図１７】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する各試薬（１４日目）の増殖抑制効果を示すグラフである。
【図１８】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する生成方法を異にする各試薬の増殖抑制効果を示すグラフである。
【図１９】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する投与時期を異にする各試薬の増殖抑制効果を示すグラフである。
【図２０】移植Ｓ−１８０腫瘍に対する銀成分濃度を異にする各試薬の増殖抑制効果を示すグラフである。
【符号の説明】
【００８４】
１０…水処理機構、１１…軟水器、１１ａ…給水管路、１１ｂ…給水管路、１１ｃ…給水バルブ、１２…浄水器、１２ａ…給水管路、１３…貯留槽、１３ａ…給水管路、１３ｂ…還流管路、１３ｃ…オーバフロー管路、１３ｄ…排水管路、１３ｅ…排水弁、１４…給水ポンプ、２０…無隔膜電解槽、２１…槽本体、２１ａ…流出管路、２２…陽極電極、２３…陰極電極、３０…有隔膜電解槽、３１…槽本体、３１ａ，３１ｂ…流出管路、３２…隔膜、３３ａ，３３ｂ…電極、３４…切替バルブ、４０…制御機構、Ｒ，Ｒ1，Ｒ2…電解室。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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