(57)【要約】【課題】  小麦粉の原料小麦の品種を正確にかつ簡易迅速に判別する方法を提供すること。【解決手段】  以下の工程を含む小麦粉の原料小麦の品種を判別する方法。  (ａ)  小麦粉からタンパク質を抽出し、タンパク質試料を調製する工程  (ｂ)  得られたタンパク質試料を二次元ゲル電気泳動法によって分離する工程  (ｃ)  ゲル上のタンパク質の分離パターンを可視化する工程  (ｄ)  可視化したタンパク質の分離パターンから小麦粉の原料小麦の品種を判別する工程【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程を含む小麦粉の原料小麦品種の判別方法。
(ａ)  小麦粉からタンパク質を抽出し、タンパク質試料を調製する工程
(ｂ)  得られたタンパク質試料を二次元ゲル電気泳動法によって分離する工程
(ｃ)  ゲル上のタンパク質の分離パターンを可視化する工程
(ｄ)  可視化したタンパク質の分離パターンから小麦粉の原料小麦品種を判別する工程
【請求項２】
二次元ゲル電気泳動法が、一次元目に等電点電気泳動法(IEF)を行い、二次元目にドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（SDS-PAGE）を行うものである、請求項１に記載の判別方法。
【請求項３】
等電点電気泳動法を、ｐＨ範囲が４〜７、５〜８、及び６〜１１の等電点ゲルを１種又は２種以上用いて行うことを特徴とする、請求項２に記載の判別方法。
【請求項４】
原料小麦品種が、1種又は少なくとも２種以上のブレンドである、請求項１から３のいずれかに記載の判別方法。
【請求項５】
タンパク質の分離パターンが、原料小麦品種に特異的又は非特異的である、請求項１から４のいずれかに記載の判別方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、小麦粉の原料小麦の品種を判別する方法に関する。詳しくは、本発明は、小麦粉タンパク質を二次元ゲル電気泳動法によって解析することによって小麦粉の原料小麦の品種を判別する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
小麦粉の原料となる小麦の品種には、国内産では「キタノカオリ」、「ホロシリコムギ」、「ホクシン」、「チホクコムギ」等が、外国産では「ASW（オーストラリア産、ブランド名）」や「CW（カナダ産、ブランド名）」などが知られている。近年、ポスト・ハーベストの問題や国内自給率の向上等の理由から国内産小麦粉を使用してパンや中華麺などの製品を生産しようとする業者が増えると共に、国内産小麦粉を使用した製品に対する消費者の需要が増大している。従って、小麦粉の原料小麦の品種を明らかにする要望が、消費者をはじめとして小麦粉流通業者や食品加工業者などから増加している。
【０００３】
これまでに、米の品種判別についてはDNA解析による方法が報告されている（特許文献１〜３参照）。しかし、小麦の品種判別については小麦品種をグルテニンの遺伝子型にグループ化することは報告されているが、DNA解析による方法を含めてこれまで確立された方法はなく、その判別は事実上不可能であった。
【０００４】
【特許文献１】特許第３０４８１４９号
【特許文献２】特願２０００−２２６８５４号
【特許文献３】特開２００２−３０６１７３号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、本発明の目的は、小麦粉の原料小麦の品種を正確に、かつ簡易迅速に判別する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、小麦粉からタンパク質を質的及び量的に効率よく抽出し、二次元ゲル電気泳動法を用いてタンパク質を分離し、得られたゲル上のタンパク質の分離パターンを解析したところ、小麦品種間でタンパク質の分離パターンが異なることを見出した。さらに、一次元ゲルで用いる等電点ゲルのpH範囲を変えることによって、品種間でのタンパク質の分離パターンの違いを明確化して、相互の比較をすることにより、小麦粉の原料小麦の品種を判別することに成功し、本発明を完成させるに至った。
【０００７】
すなわち、本発明を以下の発明を包含する。
（１）以下の工程を含む小麦粉の原料小麦品種の判別方法。
(ａ) 小麦粉からタンパク質を抽出し、タンパク質試料を調製する工程
(ｂ) 得られたタンパク質試料を二次元ゲル電気泳動法によって分離する工程
(ｃ) ゲル上のタンパク質の分離パターンを可視化する工程
(ｄ) 可視化したタンパク質の分離パターンから小麦粉の原料小麦品種を判別する工程
（２）二次元ゲル電気泳動法が、一次元目に等電点電気泳動法(IEF)を行い、二次元目にドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（SDS-PAGE）を行うものである、（１）に記載の判別方法。
（３）等電点電気泳動法を、ｐＨ範囲が４〜７、５〜８、又は６〜１１の等電点ゲルを１種又は２種以上用いて行うことを特徴とする、（２）に記載の判別方法。
（４）原料小麦品種が、1種又は少なくとも２種以上のブレンドである、（１）から（３）のいずれかに記載の判別方法。
方法。
（５）タンパク質の分離パターンが、原料小麦品種に特異的又は非特異的である、（１）から（４）のいずれかに記載の判別方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の方法によれば、小麦粉の原料小麦の品種を正確に、かつ簡易迅速に判別することができる。本発明の方法によれば、約１６００個のタンパク質を分離することができ、国内産小麦品種と外国産小麦品種の判別、単一品種とブレンド品の両方の判別が可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明は、以下の工程を含む小麦粉の原料小麦品種の判別方法である。
(ａ) 小麦粉からタンパク質を抽出し、タンパク質試料を調製する工程
(ｂ) 得られたタンパク質試料を二次元ゲル電気泳動法によって分離する工程
(ｃ) ゲル上のタンパク質の分離パターンを可視化する工程
(ｄ) 可視化したタンパク質の分離パターンから小麦粉の原料小麦品種を判別する工程
【００１０】
本発明の方法によって判別できる小麦粉の原料国内産小麦品種、または外国産小麦粉の原料ブランド小麦については特に限定は無く、例えば「キタノカオリ」、「ホロシリコムギ」、「ホクシン」、「チホクコムギ」、「ハルユタカ」、「勝系３３号」などの国内産小麦品種；「CW（1CW、2CW、3CW）（カナダ産、ブランド名）」、「PH（オーストラリア産、ブランド名）」、「HRW(アメリカ産、ブランド名)」などの外国産ブランド小麦が含まれる。
また、上記の原料小麦品種は、１種であってもよく、少なくとも２種以上のブレンドであってもよい。ブレンドとしては、例えば「キタノカオリ」と「ホロシリコムギ」のブレンド、「ホクシン」と「勝系３３号」のブレンド、「ホクシン」とカナダ産「１ＣＷ」のブレンド等が挙げられる。
【００１１】
以下、各工程について詳細に説明する。
まず、工程（ａ）では、小麦粉からのタンパク質を抽出し、タンパク質試料を調製する。小麦粉は、前処理は必要なくそのまま用いてもよいが、抽出効率を高める上で均一に粉砕されていることが好ましい。
小麦粉からのタンパク質を抽出は、例えば10％(W/V)のトリクロロ酢酸を含むアセトン溶液に小麦粉を加え、沈殿するタンパク質を遠心分離により回収することにより行うことができる。続いて、得られたタンパク質沈澱をタンパク質変性剤（尿素など）、非イオン界面活性剤（Triton X-100, Nonidet P-40など）または両イオン性界面活性剤(CHAPSなど)を含む溶解用緩衝液に溶かしてタンパク質試料とする。
【００１２】
次に、工程（ｂ）では、工程（ａ）で得られたタンパク質試料のタンパク質を二次元電気ゲル泳動法によって分離する。
二次元ゲル電気泳動法の一次元目は、等電点電気泳動法(IEF) によってタンパク質をそれぞれの等電点の違いによって分離する。二次元ゲル電気泳動法の二次元目は、ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（SDS-PAGE)によって、一次元目の等電点で分けられたタンパク質をさらに分子量の違いによって分離する。
【００１３】
本発明においてはタンパク質の分離能を上げるために、一次元目の等電点電気泳動を、ｐＨ範囲が４〜７、５〜８、又は６〜１１の等電点ゲルを１種又は２種以上用いて行う。上記ｐＨ範囲の等電点ゲルを１種用いた場合は、それぞれ酸性、中性及び塩基性領域に分布するタンパク質の分離パターンに基づく情報を別々に得ることができる。また、等電点ゲルを２種以上用いた場合には、１種を用いた場合に得られる上記情報だけでは判別できない小麦品種の判別をも可能にし、複数の情報を組み合わせることによってより正確な判別をする上でより好ましい。
【００１４】
さらに、使用する等電点ゲルの種類に応じて、検出に適した分離パターン（スポットの数、大きさ、濃度）が得られるように、添加するタンパク質量を調整することが好ましい。例えば、ｐＨ範囲が４〜７、５〜８の等電点ゲルの場合は、ゲル１本当たり６０〜１２０μｇ、好ましくは８０μｇのタンパク質を添加し、またｐＨ範囲が６〜１１の等電点ゲルの場合は、ゲル１本当たり２０〜５０μｇ、好ましくは３０μｇのタンパク質を添加すればよい。タンパク質量が上記範囲より少ないと、銀染色法による検出限界以下となって染色されないタンパクが存在する可能性があり、またタンパク質量が上記範囲より多いと、タンパク質同士が互いに重なってしまう可能性が出るため好ましくない。
【００１５】
続いて工程（ｃ）では、上記（ｂ）の操作後、二次元目の平面ゲル上にスポット状に分離されたタンパク質を検出できるよう可視化する。可視化の手段は、銀染色法、蛍光染色法、クマーシー・ブリリアント・ブルー染色法（CBB）のいずれであってもよいが、感度の点から銀染色法が好ましい。
【００１６】
最後に、可視化したタンパク質の分離パターンから小麦粉の原料小麦品種を判別する。ここで、「タンパク質の分離パターン」とは、タンパク質のスポットの位置、数、大きさ、濃さ、それらの組み合わせをいい、これらを総合的に判断することによって、小麦品種の判別を行うことができる。また、タンパク質のスポットは、個々の小麦品種に特異的であっても非特異的であってもよい。
【実施例】
【００１７】
以下、実施例によって本発明を更に具体的に説明するが、これらの実施例は本発明を何ら限定するものでない。
【００１８】
(実施例１)  酸性領域のタンパク質解析による国内産小麦の品種判別
(1)小麦粉試料からタンパク質の抽出
小麦粉試料として国内産小麦粉である「キタノカオリ」、「ホロシリコムギ」、「ホクシン」、「勝系３３号」を用いた。
上記の各小麦粉試料60mgに10%(W/V)トリクロロ酢酸（TCA）を含むアセトン溶液を加え、攪拌し、タンパク質を沈澱化し、その後、その溶液を−30℃で２時間放置した。次に、その沈澱溶液を遠心分離して上澄みを捨て、沈澱に−30℃に冷やしたアセトン１mＬを加え、均一になるまで攪拌した。その後、タンパク質沈澱を含んだアセトン溶液をさらに−30℃で２時間放置した。上記操作を再度繰り返した後に、タンパク質を含んだアセトン溶液を−30℃で１晩放置した。翌日、タンパク質を含んだアセトン溶液を遠心分離して上澄みを捨て、沈澱に−30℃に冷やしたアセトンを再度１mL加え、さらに−30℃で２時間放置した。続いて、タンパク質を含んだアセトン溶液を遠心分離し、上澄みを捨て、タンパク質沈澱を得た。タンパク質沈澱をアスピレーターにより脱気して、沈澱に含まれるアセトンを除去し、乾燥させた。アセトン沈澱を溶解緩衝液（8 M尿素、4％CHAPS, 40 mM Tris, 5% 2−メルカプトエタノール）に溶かし、タンパク質試料とした。タンパク質量は島津製作所製分光光度計UV2100を用いて、バイオラッド社製のタンパク質アッセイキットにより595nmの吸光度によって測定した。
【００１９】
(2)タンパク質の二次元ゲル電気泳動法  
(1)で調製したタンパク質試料を二次元ゲル電気泳動法に供した。一次元目の泳動はアマシャムバイオサイエンス社製のアイピージーフォー装置（IPGphor）、二次元目の電気泳動はアマシャムバイオサイエンス社製のマルチフォー装置（Multiphor）を用いた。タンパク質試料をｐＨ範囲が４〜７の等電点ゲル（Immobiline DryStrip:アマシャムバイオサイエンス社製）にアプライし、一本のゲル当たり50マイクロアンペアの定電流で13時間通電し、タンパク質を等電点に従って分離した。
二次元目のSDS-PAGEは、アクリルアミド濃度が12〜14％の濃度勾配のあるゲル（ExcelGel SDS XL Gradient 12-14：アマシャムバイオサイエンス社製）上に等電点電気泳動を終了した等電点ゲルをアプライし、ゲル一枚当たり35ミリアンペアで４〜６時間通電した。
【００２０】
(3)タンパク質の可視化
二次元目の電気泳動終了後に、ゲルをアマシャムバイオサイエンス社製の銀染色キット（Silver Staining Kit, Protein）を用いて銀染色し、タンパク質スポットを可視化した。ゲル上のタンパク質スポットを画像解析装置（ImageMaster 2D Elite：アマシャムバイオサイエンス社製）を用いてタンパク質に番号を付け、品種間でのタンパク質の違い（多型）を調査した。
小麦品種別の二次元ゲル電気泳動によるタンパク質の分離パターンを図１(図１ａ：「キタノカオリ」、図１ｂ：「ホロシリコムギ」、図１ｃ：「ホクシン」、図１ｄ：「勝系３３号」）に、またタンパク質スポットの多型検出の結果を表１に示す。
【００２１】
【表１】
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【００２２】
図１及び表１に示すように、小麦品種によって酸性領域で分離されるタンパク質のスポットに違いが見られた。「キタノカオリ」、「ホロシリコムギ」、及び「勝系３３号」では、それぞれ特異的なタンパク質が見いだされた。すなわち「キタノカオリ」ではNo.A2、A9が、「ホロシリコムギ」ではNo. A１、A4、A6が、そして「勝系３３号」ではNo. A5のタンパク質がそれぞれの小麦品種に特異的であった。一方、「ホクシン」ではそのような特異的タンパク質は見いだされなかった。しかし「ホクシン」では、多型を示すタンパク質の組み合わせ、すなわちタンパク質No. A3、A7、及びA8の組み合わせが特異的であり、小麦品種を識別できた。これらの結果から、それら特異的タンパク質の存在や多型を示すタンパク質の組み合わせによって、小麦品種を識別できることが明らかになった。
【００２３】
(実施例２)  中性領域のタンパク質解析による国内産小麦の品種判別
実施例１と同様にして調製したタンパク質試料について、ｐＨ範囲が５〜８の等電点ゲル（ReadyStrip IPG Strip:バイオラッド社製）を用いて一次元目の等電点電気泳動を行う以外は、実施例１と同様にして二次元ゲル電気泳動を行い、タンパク質スポットを可視化し、解析を行った。
小麦品種別の二次元ゲル電気泳動によるタンパク質の分離パターンを図２(図２ａ：「キタノカオリ」、図２ｂ：「ホロシリコムギ」、図２ｃ：「ホクシン」、図２ｄ：「勝系３３号」）に、またタンパク質スポットの多型検出の結果を表２に示す。
【００２４】
【表２】
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【００２５】
図２及び表２に示すように、小麦品種によって中性領域で分離されるタンパク質のスポットに違いが見られた。「キタノカオリ」において、特異的タンパク質がNo. N2、N5、N6、N7、N12に見いだされた。また、「ホロシリコムギ」では特異的タンパク質はNo.N1に、「勝系３３号」ではNo. N4、N13に見いだされ、それら特異的タンパク質によってそれら小麦品種を識別できた。
【００２６】
一方、「ホクシン」では特異的タンパク質は見いだされなかったが、多型を示すタンパク質の組み合わせ、すなわちタンパク質No.N3、N8、N9、及びN10の組み合わせを示し、この組み合わせを示すのはホクシンのみであることから他の小麦品種と識別することができた。これらの結果から、それら特異的タンパク質の存在や多型を示すタンパク質の組み合わせによって、小麦品種を識別できることが明らかになった。
【００２７】
（実施例３）  塩基性領域のタンパク質解析による国内産小麦の品種判別
実施例１と同様にして調製したタンパク質試料について、等電点が６〜１１の等電点ゲル（Immobiline DryStrip、アマシャムバイオサイエンス社製）を用いて一次元目の等電点電気泳動を行う以外は、実施例１と同様にして二次元ゲル電気泳動を行い、タンパク質スポットを可視化し、解析を行った。
小麦品種別の二次元ゲル電気泳動によるタンパク質の分離パターンを図３(図３ａ：「キタノカオリ」、図３ｂ：「ホロシリコムギ」、図３ｃ：「ホクシン」、図３ｄ：「勝系３３号」）に、またタンパク質スポットの多型検出の結果を表３に示す。
【００２８】
【表３】
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【００２９】
図３及び表３に示すように、小麦品種によって塩基性領域で分離されるタンパク質のスポットに違いが見られた。「キタノカオリ」、「ホロシリコムギ」、「ホクシン」及び「勝系３３号」において特異的タンパク質が見いだされた。すなわち「キタノカオリ」ではNo.B1、「ホロシリコムギ」ではNo.B19、「ホクシン」ではNo.B10、「勝系３３号」ではNo. B3、B5、B6、B17、B20、B25がそれぞれの小麦品種に特異的であった。したがって、それら特異的タンパク質を用いることによって、「キタノカオリ」、「ホロシリコムギ」そして「勝系３３号」を識別できることが明らかになった。
【００３０】
（実施例４）外国産小麦粉のブランド名判別
小麦粉試料として外国産小麦粉であるカナダ産のブランド小麦粉「1CW」を用いた。実施例１と同様にして調製したタンパク質試料について、pH範囲が４〜７、５〜８、及び６〜１１の等電点ゲルを用いて一次元目の等電点電気泳動を行い、続いて実施例１と同様にして二次元ゲル電気泳動を行い、タンパク質スポットを可視化し、解析を行った。
「1CW」の二次元ゲル電気泳動によるタンパク質の分離パターンを図４（図４ａ：酸性領域、pH 範囲4〜７、図４ｂ：中性領域、pH 範囲５〜８、図４ｃ：塩基性領域、pH 範囲６〜１１）に、また、タンパク質のスポットの多型検出の結果を表４に示す。
【００３１】
【表４】
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【００３２】
図４及び表４に示すように、中性領域と塩基性領域のタンパク質で、「キタノカオリ」、「ホロシリコムギ」、「ホクシン」、「勝系３３号」に比較して、「1CW」にのみ存在するタンパク質(N11、B4)が見いだされた。従って、それらタンパク質を用いて「1CW」を判別できることが明らかになった。
【００３３】
（実施例５）ブレンド小麦粉の品種判別
小麦粉試料としては、国内産小麦の「キタノカオリ」と「ホロシリコムギ」、及び「ホクシン」と「勝系３３号」をそれぞれブレンドした小麦粉、また国内産小麦の「ホクシン」と外国（カナダ）産小麦「１ＣＷ」をそれぞれブレンドした小麦粉を用いた。それぞれの小麦粉を１：１で混合したものから実施例１と同様にしてタンパク質を調製し、pH範囲が４〜７、５〜８、及び６〜１１の等電点ゲルを用いて一次元目の等電点電気泳動を行い、続いて実施例１と同様にして二次元ゲル電気泳動を行い、タンパク質スポット可視化し、解析を行った。
【００３４】
ブレンド小麦粉タンパク質の二次元ゲル電気泳動によるタンパク質の分離パターンを図５（図５ａ：「キタノカオリ」と「ホロシリコムギ」のブレンド（pH 範囲4〜７）、図５ｂ：「キタノカオリ」と「ホロシリコムギ」のブレンド（pH 範囲５〜８）、図５ｃ： 「ホクシン」と「勝系３３号」のブレンド（pH 範囲６〜１１）、図５ｄ： 「ホクシン」と「１ＣＷ」のブレンド（pH 範囲６〜１１））に、また、タンパク質のスポットの多型検出の結果を表５に示す。
【００３５】
【表５】
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【００３６】
「キタノカオリ」と「ホロシリコムギ」をブレンドした場合、酸性領域では「キタノカオリ」に特異的なタンパク質であるNo.A2、A9と 「ホロシリコムギ」に特異的なタンパク質であるNo.A1、A4、A6とが同時に見いだされた（図５ａ、表５ａ）。また中性領域では「キタノカオリ」に特異的なタンパク質であるNo.N5、N6、N7、N12と「ホロシリコムギ」に特異的なタンパク質であるNo.N1が同時に見いだされた（図５ｂ、表５ｂ）。従って、「キタノカオリ」と「ホロシリコムギ」をブレンドした小麦粉であることを判別できることが明らかとなった。
【００３７】
また、「ホクシン」と「勝系３３号」をそれぞれブレンドした場合は、塩基性領域では「ホクシン」に特異的なタンパク質であるNo.B10と「勝系３３号」に特異的であるタンパク質No.B3、B6、B17、B20、B25が同時に見いだされた（図５ｃ、表５ｃ）。したがって「ホクシン」と「勝系３３号」をブレンドした小麦粉であることを判別できることが明らかとなった。
【００３８】
さらに、国内産の「ホクシン」とカナダ産の「１ＣＷ」をブレンドした場合は、塩基性領域では「ホクシン」に特異的なタンパク質であるNo.B10と「１ＣＷ」に特異的であるNo．B4が同時に見出された（図５ｄ、表５ｄ）。したがって「ホクシン」と「１ＣＷ」をブレンドした小麦粉であることを判別できることが明らかとなった。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】図１ａは、小麦粉（「キタノカオリ」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (酸性領域、pH 範囲4〜７)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図１ｂは、小麦粉（「ホロシリコムギ」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (酸性領域、pH 範囲4〜７)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図１ｃは、小麦粉（「ホクシン」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (酸性領域、pH 範囲4〜７)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図１ｄは、小麦粉（「勝系３３号」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (酸性領域、pH 範囲4〜７)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。
【００４０】
【図２】図２ａは、小麦粉（「キタノカオリ」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (中性領域、pH 範囲５〜８)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図２ｂは、小麦粉（「ホロシリコムギ」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (中性領域、pH 範囲５〜８)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図２ｃは、小麦粉（「ホクシン」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (中性領域、pH 範囲５〜８)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図２ｄは、小麦粉（「勝系３３号」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE(中性領域、pH 範囲５〜８)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。
【００４１】
【図３】図３ａは、小麦粉（「キタノカオリ」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (塩基性領域、pH 範囲６〜１１)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図３ｂは、小麦粉（「ホロシリコムギ」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (塩基性領域、pH 範囲６〜１１)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図３ｃは、小麦粉（「ホクシン」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (塩基性領域、pH 範囲６〜１１)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図３ｄは、小麦粉（「勝系３３号」）から抽出したタンパク質を2D-PAGE(塩基性領域、pH 範囲６〜１１)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。
【００４２】
【図４】図４ａは、外国産小麦粉（ブランド名「1CW」, カナダ産）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (酸性領域、pH 範囲４〜７)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図４ｂは、外国産小麦粉（ブランド名「1CW」, カナダ産）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (中性領域、pH 範囲５〜８)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。  図４ｃは、外国産小麦粉（ブランド名「1CW」, カナダ産）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (塩基性領域、pH 範囲６〜１１)で分離した画像の一部である（二重丸：タンパク質が存在する、一重丸：タンパク質が存在しない、矢印：品種特異的タンパク質）。
【００４３】
【図５】図５ａは、ブレンドした小麦粉（「キタノカオリ」と「ホロシリコムギ」のブレンド）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (酸性領域、pH 範囲４〜７)で分離した画像の一部である（一重丸：「キタノカオリ」に特異的なタンパク質、二重丸：「ホロシリコムギ」に特異的なタンパク質）。  図５ｂは、ブレンドした小麦粉（「キタノカオリ」と「ホロシリコムギ」のブレンド）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (中性領域、pH 範囲５〜８)で分離した画像の一部である（一重丸：「キタノカオリ」に特異的なタンパク質、二重丸：「ホロシリコムギ」に特異的なタンパク質）。  図５ｃは、ブレンドした小麦粉（「ホクシン」と「勝系３３号」のブレンド）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (塩基性領域、pH 範囲６〜１１)で分離した画像の一部である（一重丸：「ホクシン」に特異的なタンパク質、二重丸：「勝系３３号」に特異的なタンパク質）。  図５ｄは、ブレンドした小麦粉（「ホクシン」と「１ＣＷ」のブレンド）から抽出したタンパク質を2D-PAGE (塩基性領域、pH 範囲６〜１１)で分離した画像の一部である（一重丸：「ホクシン」に特異的なタンパク質、二重丸：「1ＣＷ」に特異的なタンパク質）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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