(57)【要約】    【課  題】  従来知られているものに比べて、より活性の強い天然物由来の糖質加水分解酵素阻害剤を提供すること。    【解決手段】褐藻類の一種であるアスコフィラム  ノドサム（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｎｏｄｓｕｍ）の抽出物を有効成分とすることを特徴とする糖質加水分解酵素阻害剤。上記糖質加水分解酵素阻害剤は、糖尿病の治療・予防を目的とする有用な健康食品あるいは特定保健用食品として提供できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスコフィラム  ノドサム（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｎｏｄｓｕｍ）の抽出物を有効成分として含有することを特徴とする糖質加水分解酵素阻害剤。
【請求項２】
請求項１記載の抽出物の精製物を有効成分として含有することを特徴とする糖質加水分解酵素阻害剤。
【請求項３】
飲食品である請求項１または２記載の糖質加水分解酵素阻害剤。
【請求項４】
糖尿病の治療・予防を目的とする健康食品または特定保健用食品である請求項３記載の糖質加水分解酵素阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は海藻抽出物、詳しくは褐藻類の一種であるアスコフィラム  ノドサム（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｎｏｄｓｕｍ）の抽出物を有効成分として含有する糖質加水分解酵素阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
肥満および糖尿病等の疾患は、過剰カロリー摂取が主な原因となり、増加の一途をたどっている。糖尿病には、インスリン依存型糖尿病（１型糖尿病）とインスリン非依存型糖尿病（２型糖尿病）の２タイプがあるが、全体の９０％は後者のタイプである。
インスリン非依存型糖尿病における食後高血糖の是正は、経口血糖降下剤、インスリンを用いても困難なことがあり、そのため消化管における糖質の急激な吸収を防ぐ手段として、摂取した糖質の消化に関与する酵素の活性を阻害する物質が用いられる。
【０００３】
糖質加水分解酵素の阻害物質は、糖質加水分解酵素を特異的に阻害し、糖質の加水分解・吸収を遅延することにより、食後の血糖値の急上昇およびそれに続くインスリン値の上昇を抑制することが明らかにされている。
このような糖質加水分解酵素阻害剤として、α−アミラーゼやα−グルコシダーゼを阻害するアカルボース（商品名：グルコバイ；バイエル薬品株式会社）や、α−グルコシダーゼを阻害するボグリボース（商品名：ベイスン；武田薬品工業株式会社）が実際に医薬品として臨床に用いられている。しかしこれらの医薬品は医師の厳密な処方が必要であり、また言うまでもなく食品には利用できない。
【０００４】
糖質加水分解酵素阻害物質およびそれを添加した食品は、前記疾患の病状を改善することから関連する代謝異常の患者に有用であり、更に日常の食生活に取り入れることにより糖尿病の予防にも適している。そのため、安全性が高く摂食可能な天然物として、海藻類（例えば、特許文献１、２、３参照。）、小麦粉（例えば、特許文献４参照。）、グアバ葉（例えば、特許文献５参照。）、クローブ（例えば、特許文献６参照。）、食用きのこ（例えば、特許文献７参照。）、タマリンド種皮（例えば、特許文献８参照。）等由来の糖質加水分解酵素阻害物質が、これまでに提案されている。
従来の天然物由来の糖質加水分解酵素阻害物質は活性が弱く、十分満足できる程のレベルに達していない。
【０００５】
一方、アスコフィラム  ノドサム（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｎｏｄｓｕｍ）は、褐藻類ヒバマタ目、ヒバマタ科に属する海藻であり、主にノルウェーのリアス式海岸の岩礁地帯に生育している。アスコフィラム  ノドサムはアルギン酸を高濃度で含有しているためアルギン酸製造用原料として利用される外、ミネラル、ビタミン類を豊富に含んでいるため、原藻を乾燥し粉末に加工された製品が飼料あるいは肥料・土壌改良剤として広く用いられているものである。
【特許文献１】特開平５−２８４９３７号公報
【特許文献２】特開２０００−３４２２２４号公報
【特許文献３】特開２００２−２１２０９５号公報
【特許文献４】特開昭５７−１４０７２７号公報
【特許文献５】特開平７−５９５３９号公報
【特許文献６】特開平１２−０７２６８２号公報
【特許文献７】特開２０００−０６３２８１号公報
【特許文献８】特開平９−２９１０３９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、より活性の強い天然物由来の糖質加水分解酵素阻害剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、褐藻類の一種であるアスコフィラム  ノドサム（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｎｏｄｓｕｍ）の抽出物が強力なα−アミラーゼ阻害作用を有することを見出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、
（１）  アスコフィラム  ノドサム（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｎｏｄｓｕｍ）の抽出物を有効成分として含有することを特徴とする糖質加水分解酵素阻害剤、
（２）  上記（１）記載の抽出物の精製物を有効成分として含有することを特徴とする糖質加水分解酵素阻害剤、
（３）  飲食品である上記（１）または（２）記載の糖質加水分解酵素阻害剤、および
（４）  糖尿病の治療・予防を目的とする健康食品または特定保健用食品である上記（３）記載の糖質加水分解酵素阻害剤、
に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明で得られるアスコフィラム  ノドサムからの抽出物は、強いα−アミラーゼ阻害作用を有し、さらにα−グルコシダーゼ阻害作用も有するので、前記抽出物を含有する糖質加水分解酵素阻害剤は、従来知られている海藻由来の糖質加水分解酵素阻害物質に比べても、より効果的に糖尿病の治療・予防を行うことができる。
本発明の糖質加水分解酵素阻害剤は、糖尿病を治療・予防できることから、関連する代謝異常の患者に有用であり、飲食品、特に健康食品または特定保健用食品として日常の食生活に取り入れることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明において、アスコフィラム  ノドサム（以下アスコフィラムと略す。）は、そのいずれの組織、部位も用いることができるが、好ましくは葉茎部である。アスコフィラムからの抽出に際し、海から収穫された全藻または葉茎部をそのまま、あるいはそれらを裁断、細断または磨細したもの、またそれらを乾燥したもの、さらに全藻または葉茎部を乾燥後に裁断、細断または粉砕したものを用いることができ、好ましくは生のものを乾燥し、粉砕されたものである。乾燥は、自体公知の方法、例えば風乾、天日乾燥、凍結乾燥などいずれの方法であってもよい。
【００１０】
抽出溶剤としては、水または有機溶剤、またはそれらの混合液が用いられる。有機溶剤としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール等の炭素数１〜４の低級アルコール、ジメチルケトン、メチルエチルケトン、アセトンおよびメチルイソブチルケトン等のケトン類等の極性有機溶剤、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸ブチル、あるいはジエチルエーテル等の非極性有機溶剤が挙げられ、さらにこれら極性有機溶剤と非極性有機溶剤を適宜組み合わせることもできる。
これらの抽出溶剤の内、好ましくは極性有機溶剤および極性有機溶剤と水の混合液、より好ましくはメタノール、エタノールまたはアセトン、またはそれらと水の混合液であり、特に好ましくは、メタノール、エタノールまたはアセトンとの水の混合液である。極性有機溶剤と水の混合液の混合割合は、極性有機溶剤により異なるが、通常極性有機溶剤／水が５／９５〜１００／０（ｖ／ｖ）の範囲内である。例えば、抽出溶剤としてメタノール−水混合液またはエタノール−水混合液を用いる場合、その割合としては５／９５〜１００／０（ｖ／ｖ）が挙げられ、好ましくは３０／７０〜７０／３０（ｖ／ｖ）である。またアセトン−水混合液を用いる場合、その割合としては５／９５〜１００／０（ｖ／ｖ）が挙げられ、好ましくは３０／７０〜８０／２０（ｖ／ｖ）である。これらの割合は、抽出効率、抽出物量および抽出物の酵素阻害活性等を考慮して決められるのが好ましい。
【００１１】
本発明において、抽出物を得るための抽出方法に制限はなく、浸漬による抽出、加熱抽出、連続抽出あるいは超臨界抽出等、自体公知の方法を用いることができる。アスコフィラムと抽出溶剤との比率は、特に制限されないが、アスコフィラム乾燥物／溶剤比が１／１００〜１／２（ｗ／ｖ）が好ましい範囲であり、１／１０〜１／５（ｗ／ｖ）がより好ましい範囲である。具体的には、抽出は、例えばアスコフィラムを乾燥し、粉砕した抽出原料１００ｇに対して抽出溶剤約２００ｍＬ〜１０Ｌ、好ましくは５００ｍＬ〜１Ｌを用い、静置または緩やかに撹拌しながら行われる。抽出温度は室温から常圧下での溶剤の沸点以下の範囲とするのが作業上便利であり、また抽出時間は抽出温度等によって異なるが、数分から７日間の範囲であり、約３０分〜２４時間とするのが好ましい。
【００１２】
抽出操作終了後、ろ過あるいは遠心分離等自体公知の方法で固形物（抽残）が除かれ、抽出液が得られる。抽出液は自体公知の方法で濃縮され、黒〜褐色油状またはペースト状に濃縮された抽出物が得られる。また、抽出液または濃縮された抽出物は、例えば温熱乾燥、凍結乾燥等自体公知の方法で乾燥することにより、固形の抽出物とすることもできる。
抽出液、濃縮物、または濃縮物を水および／または有機溶剤に溶解した溶液は、例えば限外ろ過、吸着樹脂処理、分子クロマトグラフィー、分配クロマトグラフィーあるいは液−液抽出等の方法により精製されてもよい。精製された抽出物は、精製物として本発明に用いることができる。
【００１３】
本発明に係る抽出物は強いα−アミラーゼ阻害作用を有し、さらにα−Ｄ−グルコシダーゼ阻害作用を有することから糖質加水分解酵素阻害剤として有用である。
なお、上記糖質加水分解酵素としては、加水分解によって糖のみを生じる単純糖質を加水分解する酵素と、糖以外の物質をも生ずる複合糖質を加水分解する酵素に分けられるが、本発明における糖質加水分解酵素とは、糖のみから成るＯ−グリコシル化合物を加水分解する酵素をいう。このような糖質加水分解酵素として、例えばα−アミラーゼ、α−Ｄ−グルコシダーゼ、β−Ｄ−グルコシダーゼ、スクラーゼ、マルターゼ、イソマルターゼ、ラクターゼ、トレハラーゼ等が挙げられる。
【００１４】
本発明の糖質加水分解酵素阻害剤は、上記抽出物または精製物をそのまま、あるいは抽出物または精製物に製薬学的に許容される添加物、あるいは食品素材、食品原料、さらに必要に応じて食品添加物等を適宜混合し、自体公知の方法で液剤、散剤、顆粒剤、錠剤、マイクロカプセル、ソフトカプセルあるいはハードカプセル等の製剤として製造されることができる。また、飲食品として、固形食品、クリーム状またはジャム状の半流動食品、ゲル状食品、飲料等あらゆる食品形態にすることが可能である。このような飲食品としては、例えば、清涼飲料、コーヒー、紅茶、乳飲料、乳酸菌飲料、ドロップ、キャンディー、チューインガム、チョコレート、グミ、ヨーグルト、アイスクリーム、プリン、水羊羹、ゼリー菓子、クッキー等が挙げられる。これら各種製剤および飲食品は、糖尿病の治療・予防を目的とする健康食品または特定保健用食品として有用である。
【００１５】
上記製剤および飲食品の製造に用いられる添加物、食品素材、食品原料あるいは食品添加物としては、例えば賦形剤（乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、デンプン、結晶セルロース等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム、蔗糖脂肪酸エステル等）、崩壊剤（デンプン、カルメロースナトリウム、炭酸カルシウム等）、結合剤（デンプン糊液、ヒドロキシプロピルセルロース液、アラビアゴム液等）、乳化剤・溶解補助剤（アラビアゴム、ポリソルベート８０、ポピドン等）、甘味料（白糖、果糖、単シロップ、ハチミツ等）、着色料（食用タール色素、酸化鉄等）、保存料（パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸プロピル、ソルビン酸等）、増粘剤（ヒドロキシエチルセルロース、ポリエチレングリコール、アルギン酸ナトリウム等）、酸化防止剤（亜硫酸水素ナトリウム、エデト酸ナトリウム、アスコルビン酸等）、安定化剤（チオ硫酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等）、酸味料（レモン果汁等）、調味料（グルタミン酸ナトリウム等）、香料（ハッカ、ストロベリー香料等）等を使用することができる。
【００１６】
上記各種製剤および飲食品に対する該糖質加水分解酵素阻害剤の添加量としては、抽出物に含まれる活性成分の含有量により異なり一様ではないが、抽出物（固形分換算）として、例えば約０．０００１〜５０質量％、好ましくは約０．００１〜２０質量％、より好ましくは約０．０１〜１０質量％である。
【００１７】
これら各種製剤および飲食品を経口的に摂取する場合、本発明抽出物の一日あたりの用量は、固形物に換算して、体重１ｋｇに対して、約０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは約０．１〜５００ｍｇ、さらに好ましくは約１〜３００ｍｇの範囲である。この用量を、１回または数回に分けて摂取すると良い。但し、実際の用量は、目的や摂取者の状況（性別、年齢、体重、ＢＭＩ等）を考慮して決められるべきである。
【００１８】
以下に本発明において好ましい実施例について述べるが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００１９】
アスコフィラム乾燥粉末約５０．０ｇを精密に量り、表１の割合のエタノール−水混合液５００ｍＬを加え、緩やかに撹拌しながら室温で１時間抽出した。抽出液を遠心管に移し、遠心分離により上澄み液と沈殿に分け、沈殿にはエタノール−水混合液５００ｍＬを加え、１回目と同様にして１時間抽出した。抽出液を１回目と同様にして上澄み液と沈殿に分け、１回目と２回目の上澄み液を合わせて吸引ろ過し、ろ液として計約１Ｌの抽出液を得た。この抽出液を、ロータリーエバポレーターを用いて減圧下、約６０℃で濃縮し、次に濃縮物を凍結乾燥して黒褐色粉末状の抽出物１〜６を得た。各収量を表１に示す。
【表１】
2005170837.tif 000002
【実施例２】
【００２０】
実施例１で得た抽出物のα−アミラーゼ、マルターゼ及びシュクラーゼ阻害活性を測定した。
１）α−アミラーゼ阻害活性の測定
実施例１で得た抽出物を段階希釈して５、１０、１５、２０、２５ｐｐｍに調製した試料溶液各々１ｍＬと、４質量％デンプン溶液（０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解した。）１ｍＬをよく混合し、３７℃で５分間加温した。次にα−アミラーゼ（シグマ社製）溶液０．０２ｍＬ（４．２５ｕｎｉｔｓ／０．０２ｍＬ）を加えてよく混合し、３７℃で６０分間反応後、沸騰湯浴で１０分間保ち反応を停止して反応液を得た。対照区１は、予め沸騰湯浴で１０分間保ち失活させたα−アミラーゼ溶液を加えて行い、対照区２は、試料溶液の代わりに水を加えて行った。
試料区と対照区１は反応液を４０倍に希釈し、対照区２は反応液を４倍に希釈し、得られた各希釈液０．８ｍＬに、０．０１Ｎヨウ素溶液（０．０２Ｎヨウ素溶液（和光純薬工業製）を蒸留水で２倍希釈した。）０．８ｍＬと蒸留水４ｍＬを加えてよく攪拌して試験溶液とした。次に、蒸留水を対照とし、液層の長さ１ｃｍで波長６６０ｎｍにおける試験溶液の吸光度を測定した。
別に、１ｍＬ中にデンプン５０〜８００μｇを含む標準液０．８ｍＬずつを用いて、上記同様に発色させた液による吸光度値から、検量線を作成した。試験溶液の吸光度と検量線から、反応液の残存デンプン量を求め、次式により阻害率を算出した。
分解率（％）＝（Ｂ’−Ｓ’）／Ｂ’×１００
Ｓ’：試料区反応液の残存デンプン量（μｇ／ｍＬ）
Ｂ’：対照区１反応液の残存デンプン量（μｇ／ｍＬ）
阻害率（％）＝（Ｃ−Ｓ）／Ｃ×１００
Ｓ：試料区の分解率（％）
Ｃ：対照区２の分解率（％）
【００２１】
２）マルターゼ阻害活性の測定
〔粗酵素溶液の調製〕
ラット腸管アセトン粉末（シグマ社製）に１８倍量（質量）の０．１Ｍマレイン酸緩衝液（ｐＨ６．０）を加えて氷冷しながらホモジナイズし、遠心分離（約０℃、３０００ｒｐｍ、１０分間）により得た上澄み液を０．１Ｍマレイン酸緩衝液（ｐＨ６．０）で１０倍（容量）希釈し、粗酵素溶液とした。
〔阻害活性の測定〕
実施例１で得た抽出物を段階希釈して０．０５、０．１、０．２、０．４質量％に調製した試料溶液各々０．２ｍＬと、２質量％マルトース溶液（０．１Ｍマレイン酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解する。）０．２ｍＬをよく混合し、３７℃で５分間加温した。次に粗酵素溶液０．２ｍＬを加えてよく混合し、３７℃で６０分間反応後、沸騰湯浴で１０分間保ち反応を停止した。反応液を室温まで放冷後遠心分離（約２０℃、３，０００ｒｐｍ、１０分間）し、上澄み液を得た。対照区１は、予め沸騰湯浴で１０分間保ち失活させた粗酵素溶液を加えて行い、対照区２は、試料溶液の代わりに水を加えて行った。
試料区、対照区１および対照区２の上澄み液のグルコース量は、グルコースオキシダーゼ法による測定キット（グルコースＣＩＩ−テストワコー；和光純薬工業製）を用いて測定し、次式により阻害率を算出した。
阻害率（％）＝  （Ｃ−（Ｓ−Ｂ））／Ｃ×１００
Ｓ：試料区上澄み液のグルコース量（ｍｇ／１００ｍＬ）
Ｃ：対照区２上澄み液のグルコース量（ｍｇ／１００ｍＬ）
Ｂ：対照区１上澄み液のグルコース量（ｍｇ／１００ｍＬ）
【００２２】
３）シュクラーゼ阻害活性の測定
〔粗酵素溶液の調製〕
ラット腸管アセトン粉末（シグマ社製）に１８倍量の０．１Ｍマレイン酸緩衝液（ｐＨ６．０）を加えて氷冷しながらホモジナイズし、遠心分離（約０℃、３０００ｒｐｍ、１０分間）により得た上澄み液を粗酵素溶液とした。
〔阻害活性の測定〕
実施例１で得た抽出物を段階希釈して０．０５、０．１、０．２、０．４質量％に調製した試料溶液各々０．２ｍＬと、２質量％シュクロース溶液（０．１Ｍマレイン酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解する。）０．２ｍＬをよく混合し、３７℃で５分間加温した。次に粗酵素溶液０．２ｍＬを加えてよく混合し、３７℃で６０分間反応後、沸騰湯浴で１０分間保ち反応を停止した。反応液を室温まで放冷後遠心分離（約２０℃、３，０００ｒｐｍ、１０分間）し、上澄み液を得た。対照区１は、予め沸騰湯浴で１０分間保ち失活させた粗酵素溶液を加えて行い、対照区２は、試料溶液の代わりに水を加えて行った。
試料区、対照区１および対照区２の上澄み液のグルコース量は、グルコースオキシダーゼ法による測定キット（グルコースＣＩＩ−テストワコー；和光純薬工業製）を用いて測定し、次式により阻害率を算出した。
阻害率（％）＝  （Ｃ−（Ｓ−Ｂ））／Ｃ×１００
Ｓ：試料区上澄み液のグルコース量（ｍｇ／１００ｍＬ）
Ｃ：対照区２上澄み液のグルコース量（ｍｇ／１００ｍＬ）
Ｂ：対照区１上澄み液のグルコース量（ｍｇ／１００ｍＬ）
【００２３】
阻害活性は、各酵素活性を５０％阻害するときの濃度（ＩＣ５０）で示した。抽出物のα−アミラーゼ阻害活性、マルターゼ阻害活性およびシュクラーゼ阻害活性の結果を、表２に示す。
【表２】
2005170837.tif 000003
表２から、前記実施例１で得た抽出物３〜６はα−アミラーゼ阻害活性およびα−Ｄ−グルコシダーゼ阻害活性を有し、特にα−アミラーゼ阻害活性の強いことが分かる。
【実施例３】
【００２４】
各種海藻の乾燥粉末約５０．０ｇを精密に量り、エタノール−水〔３０：７０（ｖ／ｖ）〕混合液５００ｍＬを加え、緩やかに撹拌しながら室温で１時間抽出した。抽出液を遠心管に移し、遠心分離により上澄み液と沈殿に分け、沈殿にはエタノール−水〔３０：７０（ｖ／ｖ）〕混合液５００ｍＬを加え、１回目と同様にして１時間抽出した。抽出液を１回目と同様にして上澄み液と沈殿に分け、１回目と２回目の上澄み液を合わせて吸引ろ過し、ろ液として計約１Ｌの抽出液を得た。この抽出液を、ロータリーエバポレーターを用いて減圧下、約６０℃で濃縮し、次に濃縮物を凍結乾燥して粉末状の抽出物（抽出物７、比較例１〜８）を得た。
これら抽出物のα−アミラーゼ阻害活性を、前記実施例２に準じて測定した。試料溶液の濃度は１０μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬ、１０００μｇ／ｍＬの３点とした。結果は表３に阻害率（％）で示す。
【表３】
2005170837.tif 000004
表３から、アスコフィラムの抽出物は他の海藻類に比べて強いα−アミラーゼ阻害活性を有し、しかも低濃度でもその活性が発現することが分かる。
【実施例４】
【００２５】
ラット糖負荷試験
前記実施例１で得た抽出物１、抽出物３および抽出物４を試料として、ラットを用いた糖負荷試験を行った。一晩絶食した９週齢のＷｉｓｔａｒ系ラットを対照群、試料投与群それぞれ５匹ずつ用いた。ラットの尾静脈からヘパリン入り採血管に約０．５ｍＬ採血した。採血後、対照群にはデンプン１ｇ／体重ｋｇを、試料投与群にはデンプンとして１ｇ／体重ｋｇ、試料として１ｇ／体重ｋｇになるよう混合・調製したものを、それぞれ胃ゾンデを用いて経口投与した。投与後、３０、６０及び１２０分後に約０．５ｍＬ採血した。採血した血は遠心分離で血漿画分を分画して、分析に供するまで−４０℃で保存した。
血漿グルコース量は、グルコースオキシダーゼ法による測定キット（グルコースＣＩＩ−テストワコー；和光純薬工業製）を用いて測定した。血漿グルコース量の経時変化を表４に示す。
【表４】
2005170837.tif 000005
本発明の抽出物は、デンプン投与後３０分で対照群と比較して、有意に血漿中のグルコース量の上昇を抑制することが分かる。
【実施例５】
【００２６】
アスコフィラム乾燥粉末約８００ｇに、エタノール−水〔５０：５０（ｖ／ｖ）〕混合液８Ｌを加え、緩やかに撹拌しながら室温で１時間抽出した。抽出液を遠心管に移し、遠心分離により上澄み液と沈殿に分け、沈殿にはエタノール−水混合液８Ｌを加え、１回目と同様にして１時間抽出した。抽出液を１回目と同様にして上澄み液と沈殿に分け、１回目と２回目の上澄み液を合わせて吸引ろ過し、ろ液として計約１６Ｌの抽出液を得た。この抽出液を、分画分子量１万の限外ろ過膜（製品名：ＦＢ０２−ＶＣ−ＦＵＳＯ１８１；ダイセンメンブレンシステムズ社）を用いて限外ろ過し、濃縮液量が５Ｌになった時点で水５Ｌを加えてろ過を続け、濃縮液量が再び５Ｌになった時点で限外ろ過を終了した。濃縮液を、ロータリーエバポレーターを用いて減圧下、約６０℃で濃縮し、次に濃縮物を凍結乾燥して黒褐色粉末状の抽出物（抽出物８）約７３ｇを得た。
【実験例６】
【００２７】
乳糖５０質量部、コーンスターチ３８質量部、レモン香料１質量部及び庶糖脂肪酸エステル１質量部に、上記実施例５の抽出物８を１０質量部加えて混合後、打錠機を用いて打錠し、サプリメントを作製した。
【実験例７】
【００２８】
表５に示す配合の飲料溶液を約６５℃で１０分間加熱処理し、室温まで冷却した後滅菌容器に無菌的に充填し、りんご果汁飲料を作製した。
【表５】
2005170837.tif 000006
【実験例８】
【００２９】
以下の手順でコーヒーゼリーを作製した。
（１）粉ゼラチン１５ｇを約４５ｍＬの水に入れ、ふやかしておく。
（２）鍋に水６００ｍＬ、インスタントコーヒー３ｇ、グラニュー糖８０ｇを入れ煮立たせる。グラニュー糖が溶けたら火を止め、実施例５の抽出物８約７ｇと（１）を加えてよく溶かす。
（３）荒熱を取ってブランデー約１０ｍＬを加え、冷ましてトロミが付けば内側を湿らせたゼリー型に流し込み、冷やして固める。
【産業上の利用可能性】
【００３０】
本発明で得られるアスコフィラム  ノドサムからの抽出物は、強い糖質加水分解酵素阻害作用を有するので、アスコフィラム  ノドサムからの抽出物を含有する糖質加水分解酵素阻害剤は、従来知られている海藻由来の糖質加水分解酵素阻害物質に比べても、より効果的な糖尿病の治療・予防効果を得ることができる。また上記抽出物を含有する飲食品は糖尿秒の治療・予防用の健康食品または特定保健用食品として有用である。