(57)【要約】【課題】本発明は、新規血管新生阻害物質を提供することを課題とする。【解決手段】本発明に係る血管新生阻害剤は、下記一般式（Ｉ）【化１】2005120007.tif 000009［式中、Ｒ１は、水素原子又はメチル基を示し、Ｒ２は、水素原子又はアセチル基を示し、ｎは、２又は３である。］で表わされる化合物又はその薬理上許容される塩を有効成分として含有することを特徴としている。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）
【化１】
2005120007.tif 000005
［式中、Ｒ１は、水素原子又はメチル基を示し、Ｒ２は、水素原子又はアセチル基を示し、ｎは、２又は３である。］で表わされる化合物又はその薬理上許容される塩を有効成分として含有する、血管新生阻害剤。
【請求項２】
下記一般式（Ｉ）
【化２】
2005120007.tif 000006
［式中、Ｒ１は、水素原子又はメチル基を示し、Ｒ２は、水素原子又はアセチル基を示し、ｎは、２又は３である。］で表わされる化合物又はその薬理上許容される塩を有効成分として含有する、血管新生を伴う疾患の治療剤又は予防剤。
【請求項３】
前記血管新生を伴う疾患が、血管機能不全、炎症、免疫障害、ベーチェット病、痛風、関節炎、リウマチ、乾癬、糖尿病性網膜症、眼血管由来疾患、骨粗鬆症、ヒッペルリンドー症または腫瘍である、請求項２に記載の治療剤又は予防剤。
【請求項４】
下記一般式（Ｉ）
【化３】
2005120007.tif 000007
［式中、Ｒ１は、水素原子又はメチル基を示し、Ｒ２は、水素原子又はアセチル基を示し、ｎは、２又は３である。］で表わされる化合物を有効成分として含有する、血管新生を阻害するための医薬部外品。
【請求項５】
下記一般式（Ｉ）
【化４】
2005120007.tif 000008
［式中、Ｒ１は、水素原子又はメチル基を示し、Ｒ２は、水素原子又はアセチル基を示し、ｎは、２又は３である。］で表わされる化合物を有効成分として含有する、血管新生を阻害するための食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｌ−カルノシンまたはその誘導体を有効成分として含有する血管新生阻害剤、血管新生を伴う疾患の治療剤又は予防剤、及び血管新生阻害のための医薬部外品又は食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
血管新生は、糖尿病性網膜症、リウマチ、乾癬、ヒッペルリンドー症、腫瘍等の疾患で観察され、病態の進展と密接に関連している事が知られている。（非特許文献１乃至５参照。）
【０００３】
血管新生は、内因性の血管新生促進因子と抑制因子のバランスの基に制御されている。病的状況下では血管新生促進因子が誘導されることにより、血管新生が亢進する。血管新生は以下の４つのステップからなる：1）分泌された血管新生促進因子が、近傍の血管に働きかけ血管内皮細胞を活性化する、2）活性化した血管内皮細胞内の酵素が基底膜を分解する、3）血管内皮細胞の遊走および増殖が生じる、4）血管内皮細胞が血管腔を形成する。これらのステップのうち、1つ又は複数を阻害することにより、血管新生を阻害することができると考えられている。
【０００４】
現在までに、多くの血管新生阻害物質が見出されている。例えば、天然物質として、アンギオスタチン（例えば、非特許文献６参照。）及びエンドスタチン(例えば、非特許文献７参照。)のような内因性の阻害物質、ビタミンＥ(例えば、非特許文献８参照。)、緑茶由来のカテキン類(例えば、非特許文献９参照。)、並びに、葡萄由来のポリフェノール(例えば、非特許文献１０参照。)等が血管新生阻害物質として知られている。
【０００５】
一方、Ｌ−カルノシンは、筋肉、眼、脳等に多量に見出されるジペプチドで、強い抗酸化作用を有する物質であることが知られている（例えば、非特許文献１１参照。）。また、Ｌ−カルノシンが血管形成を促進する旨の報告がある（非特許文献１２）。さらに、Ｌ−カルノシンが、コラーゲン合成促進作用、創傷治癒作用などを示すことは知られていたが（例えば、非特許文献１３乃至１５参照。）、血管新生阻害作用を有することについては知られていなかった。
【０００６】
【非特許文献１】Jozsef Timar et al, "Angiogenesis-Dependent Diseases and Angiogenesis Therapy", PATHOLOGY ONCOLOGY RESEARCH, 2001, Vol.7, No.2, p85-94.
【非特許文献２】Barbara Vega Diaz et al, "Regulation of Vascular Endothelial Growth Factor Expression in Human Keratinocytes by Retinoids", The Journal of Biological Chemistry, January 7, 2000, Vol.275, No.1, pp.642-650.
【非特許文献３】Jeremy Griggs et al, "Inhibition of Proliferative Retinopathy by the Anti-Vascular Agent Combretastatin-A4", American Journal of Pathology, March 2002, Vol.160, No.3, pp.1097-1103.
【非特許文献４】Chris M. Storgard et al, "Decreased angiogenesis and arthritic disease in rabbits treated with an αvβ3 antagonist", The Journal of Clinical Investigation, January 1999, Vol.103, No.1, pp.47-54
【非特許文献５】David J. Gross et al, "The Antiangiogenic Agent Linomide Inhibits the Growth Rate of von Hippel-Lindau Paraganglioma Xenografts to Mice", Clinical Cancer Research, November 1999, Vol.5, pp.3669-3675.
【非特許文献６】Michael S. O'Reilly et al, "Angiostatin: A Novel Angiogenesis Inhibitor That Mediates the Supression of Metastases by a Lewis Lung Carcinoma", Cell, October 21, 1994, Vol.79, pp.315-28.
【非特許文献７】Michael S. O'Reilly et al, "Endostatin: An Endogenous Inhibitor of Angiogenesis and Tumor Growth", Cell, January 24, 1997, Vol.88, pp.277-285.
【非特許文献８】Mokenge P. Malafa et al, "Inhibition of Angiogenesis and Promotion of Melanoma Dormancy by Vitamin E Succinate", 2002, Vol.9, No.10, pp.1023-1032.
【非特許文献９】Francesca Tosetti et al, "'Angioprevention': angiogenesis is a common and key target for cancer chemopreventive agents", The FASEB Journal, January 2002, Vol.16, pp.2-14.
【非特許文献１０】Ebba Brakenhielm et al, "Supression of angiogenesis, tumor growth, and wound healing by reveratrol, a natural compound in red wine and grapes", The FASEB Journal, August2001, Vol.15, pp.1798-1800.
【非特許文献１１】Boldyrev A.A. et al, "The Antioxidative Properties of Carnosine, A Natural Histidine Containing Dipeptide", Biochemistry International, December 1987, Vol.15, pp.1105-13.
【非特許文献１２】Han M Y. Et al, "The Effect on L carnosine of angiogenesis and the mode of action on cultured fibroblast", Korean Biochemical Journal 18(4). 1985(RECD 1986), pp423-428. 1985
【非特許文献１３】M. R. Vizioli et al, "Effects of Carnosine on the Development of Rat Sponge-Induced Granulation Tissue. II. Histoautoradiographic Cbservations on Collagen Biosynthesis", Cellular & Molecular Biology, 1983, Vol.29, No.1, pp.1-9.
【非特許文献１４】Dennis W. et al, "Carnosine, histidine, and wound healing", January 1982, Vol.91, No.1, pp.56-60.
【非特許文献１５】永井  甲子四郎ら、「カルノシン、β−アラニンの抗腫瘍作用」、日本生理誌、１９８６年、４８巻、７４１−７４７頁。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、新規血管新生阻害物質を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本件発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を行った結果、Ｌ−カルノシン誘導体が血管新生阻害作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち本発明は、以下を含む。
（１）  下記一般式（Ｉ）
【化５】
2005120007.tif 000002
［式中、Ｒ１は、水素原子又はメチル基を示し、Ｒ２は、水素原子又はアセチル基を示し、ｎは、２又は３である。］で表わされる化合物（以下、「Ｌ−カルノシン誘導体」という。）又はその薬理上許容される塩を有効成分として含有する、血管新生阻害剤、及び、血管新生を伴う疾患の治療剤又は予防剤、
【０００９】
（２）  血管新生を伴う疾患が、血管機能不全、炎症、免疫障害、ベーチェット病、痛風、関節炎、リウマチ、乾癬、糖尿病性網膜症、眼血管由来疾患、骨粗鬆症、ヒッペルリンドー症または腫瘍である、（１）に記載の治療剤又は予防剤、並びに、
【００１０】
（３）  Ｌ−カルノシン誘導体またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する、血管新生を阻害するための医薬部外品及び食品に関する。
【００１１】
上記において、「血管新生を伴う疾患」とは、血管新生により引き起こされる疾患、血管新生により悪化が促進される疾患、または血管新生による不健康状態のことを意味する。このような疾患としては、例えば、糖尿病性網膜症、リウマチ、乾癬、血管機能不全、炎症、免疫障害、ベーチェット病、痛風、関節炎、眼血管由来疾患（例えば、後水晶体繊維増殖症、黄斑変性、角膜移植拒絶、血管新生緑内障）、骨粗鬆症、ヒッペルリンドー症、腫瘍（充実性腫瘍、腫瘍転移、良性腫瘍（例えば血管種、聴神経鞘腫、神経繊維腫、トラコーマおよび化膿性肉芽腫））などを挙げることができる。前記腫瘍のうちでは、腫瘍転移（転移性腫瘍）が挙げられる。前記リウマチのうちでは、慢性関節リウマチが挙げられる。
【００１２】
「食品」は、経口摂取するものであれば特に限定はなく、いわゆる健康食品等の一般食品、並びに、病者用食品、高齢者用食品及び特定保健用食品（いわゆる、機能性食品）等の特定用途食品を含む。
【００１３】
本発明のＬ−カルノシン誘導体は、カルボキシル基及びアミン基を有するため、酸及び塩基と反応して塩にすることができる。
【００１４】
酸との塩としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩などの無機酸の塩、酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩などのカルボン酸の塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩などのスルホン酸の塩またはグルタミン酸塩、アスパラギン酸塩などのアミノ酸の塩を挙げることができる。
【００１５】
塩基との塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩又はカルシウム塩のようなアルカリ金属又はアルカリ土類金属の塩；トリエチルアミン塩、トリメチルアミン塩のような有機塩基の塩を挙げることができる。
【００１６】
また、本発明で用いる式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩は、大気中に放置しておくことにより、水分を吸収し、吸着水が付いたり、水和物となったりする場合があり、そのような水和物も本発明に包含される。
【００１７】
さらに、本発明で用いる式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩は、他のある種の溶媒を吸収し、溶媒和物となる場合があるが、そのような溶媒和物も本発明に包含される。
【００１８】
本発明の化合物として好適には、以下の化合物が挙げられる。
（１）Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２が水素原子であり、ｎが２である化合物。（以下、「Ｌ−カルノシン」という。）
（２）Ｒ１がメチル基であり、Ｒ２が水素原子であり、ｎが２である化合物。（以下、「Ｌ−アンセリン」という。）
（３）Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２が水素原子であり、ｎが３である化合物。（以下、「ホモカルノシン」という。）
（４）Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２がアセチル基であり、ｎが２である化合物。（以下、「Ｎ−アセチル−Ｌ−カルノシン」という。）
（５）Ｒ１がメチル基であり、Ｒ２がアセチル基であり、ｎが２である化合物。（以下、「Ｎ−アセチル−Ｌ−アンセリン」という。）
（６）Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２がアセチル基であり、ｎが３である化合物。（以下、「Ｎ−アセチル−ホモカルノシン」という。）
（７）Ｒ１がメチル基であり、Ｒ２がアセチル基であり、ｎが３である化合物。  
【００１９】
上記（１）〜（７）のうちでは、より好ましくは（１）、（２）、（３）の化合物が挙げられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
本発明のＬ−カルノシン及びＬ−アンセリンは、商業的に入手することができる（たとえば、和光純薬株式会社カタログ32版（2002年）、134頁及び386頁参照。）。また、ホモカルノシンも、商業的に入手することができる（たとえば、sigma-aldorich社、H4885、L-homocarnosine）。
【００２１】
前記化合物のうち、Ｒ１がメチル基であり、Ｒ２が水素原子であり、ｎが３である化合物は、Ｎ−アセチル−Ｌ−ホモカルノシンのイミダゾール基のＮＨ位をメチル化することにより入手できる。
このＮ−アセチル−Ｌ−ホモカルノシンは、Ｌ−ホモカルノシン（Ｌ−homocarnosine, gamma-aminobutyryl-L-histidine、たとえば、sigma-aldrich社、H4885から商業的に入手できる。）を後述する方法によりアセチル化すれば得ることができる。
【００２２】
前記イミダゾール基のＮＨ位のメチル化反応は、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などの溶媒中、ヨウ化メチルなどのハロゲン化メチルを、炭酸カリウム、重曹などの塩基の存在下に前記化合物と反応させることにより行うことができる。反応は、通常−１０℃〜室温（２５℃）で、通常１乃至２４時間で実施することができる。
【００２３】
一般式（Ｉ）で表わされる化合物のうち、Ｒ２がアセチル基である化合物は、以下の方法により製造することができる。なお、下記反応式中、Ｒ1は水素原子またはメチル基であり、Ｒ2はアセチル基（ＣＨ3ＣＯ−）であり、ｎは２または３である。
【化６】
2005120007.tif 000003
【００２４】
上記工程は、溶媒中、塩基性条件下で、Ｌ−カルノシン、Ｌ−アンセリン又はＬ−ホモカルノシンに、アセチル化剤を作用させることにより、達成することができる。
【００２５】
ここで、使用される溶媒としては、ペプチドが溶解できる水が最もよいが，反応を阻害せず、出発物質をある程度以上溶解するものであれば特に限定はなく、例えば、水と混合できる溶媒があけられる。たとえばアセトン；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド類；ホルムアミド、Ｎ，Ｎ-ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ-ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）などのアミド類等を挙げることができる。
【００２６】
使用される塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの水酸化アルカリ金属が挙げられる。
【００２７】
使用されるアセチル化剤としては、アセチルハライド（ＣＨ３Ｃ（Ｏ）Ｘ）又は無水酢酸を挙げることができる。Ｘはハロゲン原子であり、たとえば塩素原子、臭素原子などが挙げられる。このうち好ましくは、アセチルクロライドが挙げられる。
【００２８】
前記アミノ基（−ＮＨ2）のアセチル化においては、（１）ラセミ化反応をできるだけ防ぐこと、（２）イミダゾール基のＮがメチル化していないＬ−カルノシンやＬ−ホモカルノシンのアセチル化反応では、イミダゾール基のＮＨ位に、更にアセチル化が起こらないような条件を選び、不要な副生成物の生成を押さえることが好ましい。
【００２９】
このため、反応温度は、ラセミ化反応および付加的アセチル化反応を抑制するため、通常室温（２５℃）以下で、好適には５乃至１０℃付近である。また反応液のpHは、好ましくは塩基性で、ｐＨ１２〜１３の範囲にあることが望ましい。
反応時間は、通常１乃至２４時間であり、好適には３０乃至３時間である。
【００３０】
反応終了後、本反応の目的化合物はペプチド合成関連の当業者周知の方法により、反応混合物から単離できる。たとえば、イオン交換カラムクロマトグラプィーなどで精製できる。  
【００３１】
このようなＬ−カルノシン、Ｌ−アンセリン、Ｌ−ホモカルノシンなどのアセチル化反応は、たとえば、公知の方法（特開昭５８−１２４７５０号公報）にしたがって実施することができる。
【００３２】
本発明で用いる式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩は、優れた血管新生阻害活性が確認され、これにより、血管新生を伴う疾患の治療および予防、たとえば、糖尿病性網膜症、リウマチ、乾癬、血管機能不全、炎症、免疫障害、ベーチェット病、痛風、関節炎、眼血管由来疾患（例えば、後水晶体繊維増殖症、黄斑変性、角膜移植拒絶、血管新生緑内障）、骨粗鬆症、ヒッペルリンドー症、腫瘍（たとえば、充実性腫瘍、腫瘍転移、良性腫瘍（例えば血管種、聴神経鞘腫、神経繊維腫、トラコーマおよび化膿性肉芽腫））などを挙げることができる。前記充実性腫瘍、腫瘍転移、良性腫瘍のうちでは、特に、腫瘍転移の抑制（すなわち、腫瘍の抗転移作用）に有効である。前記リウマチのうちでは慢性関節リウマチに有効である。
【００３３】
また、血管新生阻害などを有する既存の食品や健康食品に、前記化合物又はその薬理上許容される塩を添加することで、血管新生阻害などの効果を著しく高めることもできる。
【００３４】
前記式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩を、血管新生阻害剤又は血管新生に伴う疾患の治療剤若しくは予防剤として使用する場合、その投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤もしくはシロップ剤等による経口投与、又は注射剤、座剤もしくは点眼剤等による非経口投与を挙げることができる。これらの製剤は、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤などの添加剤を用いて周知の方法で製造される。
【００３５】
例えば、賦形剤としては、例えば、デンプン、バレイショデンプン、トウモロコシデンプン等のデンプン、乳糖、結晶セルロース、リン酸水素カルシウム等を挙げることができる。
【００３６】
滑沢剤（コーティング剤）としては、例えば、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、セラック、タルク、カルナウバロウ、パラフィン等を挙げることができる。
【００３７】
結合剤としては、例えばポリビニルピロリドン、マクロゴール及び前記賦形剤と同様の化合物を挙げることができる。
【００３８】
崩壊剤としては、例えば前記賦形剤と同様の化合物及びクロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドンのような化学修飾されたデンプン・セルロース類を挙げることができる。
【００３９】
安定剤としては、例えばメチルパラベン、プロピルパラベンのようなパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコールのようなアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノール、クレゾールのようなフェエノール類；チメロサール；デヒドロ酢酸；及びソルビン酸を挙げることができる。
【００４０】
矯味矯臭剤としては、例えば通常使用される、甘味料、酸味料、香料等を挙げることができる。
【００４１】
また、液剤を製造するための溶媒としては、エタノール、フェノール、クロロクレゾール、精製水、蒸留水等を使用することができる。
【００４２】
界面活性剤又は乳化剤としては、例えば、ポリソルベート８０、ステアリン酸ポリオキシル４０、ラウロマクロゴール等を挙げることができる。
【００４３】
前記式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩を、血管新生阻害剤又は血管新生に伴う疾患の治療剤若しくは予防剤として使用する場合、本発明の化合物又はその薬理学的に許容される塩の使用量は症状、年齢、投与方法等によって異なるが、例えば経口投与の場合には、患者（温血動物、特に人間）に対して１日あたり、下限として０．０１ｍｇ（好ましくは０.１ｍｇ）、上限として、２０００ｍｇ（好ましくは５００ｍｇ、より好ましくは１００ｍｇ）を１回又は数回に分けて、症状に応じて投与することが望ましい。静脈内投与の場合には、成人に対して１日当たり、下限として０．００１ｍｇ（好ましくは０．０１ｍｇ）、上限として、５００ｍｇ（好ましくは５０ｍｇ）を１回又は数回に分けて、症状に応じて投与することが望ましい。
【００４４】
前記式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩を、医薬部外品として使用する場合、その種類、形状は、特に限定はないが、例えば、菓子類（例えば、飴、ガム、クッキー等）、飲料として使用することができる。
【００４５】
前記式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩を、医薬部外品として使用する場合、その添加量は、その種類、形状等により異なるが、例えば、１乃至９０質量％であり、好ましくは、１乃至２０％である。
【００４６】
前記式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩を、食品として使用する場合、食品の種類、形状は、特に限定はないが、例えば、米類、豆類、麦類、小麦粉・澱粉等の粉類、野菜等の農産食品類；乳、卵、はちみつ等の畜産食品類；魚類、貝類、貝藻類等の水産食品類；野菜加工品、果実加工品（例えば、果実飲料、缶詰、ジャム、乾燥果実等。）、菓子類（例えば、チョコレート、クッキー、ビスケット、キャンディー、ケーキ、錠菓等）、パン類、麺類、豆製品等の農産加工食品；肉製品（例えば、ソーセージ、缶詰ハム、ベーコン類等。）、酪農製品（例えば、バター、チーズ、アイスクリーム、乳酸菌製品等。）、加工卵製品等の畜産加工食品；加工魚介類、加工海草類等の水産加工食品；及び、調味料（例えば、砂糖、みそ、醤油、食酢、ソース、ドレッシング等。）、食用油、飲料（例えば、清涼飲料水等。）調理食品（例えば、冷凍食品、乾燥食品、インスタント食品、レトルト食品等。）等の食品として使用することができる。
【００４７】
前記式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩の食品への添加量は、食品の種類等によって異なるが、例えば、チョコレート、クッキー、錠菓、清涼飲料、パン、ドレッシング等として使用する場合、０．０１乃至１０質量％で添加することができ、好ましくは、０．１乃至５質量％である。
【００４８】
前記式（Ｉ）で表される化合物又はその薬理上許容される塩を、食品として使用する場合、本発明の化合物の使用量は、食品の種類等によって異なるが、例えば、１日あたり、下限として０．０１ｍｇ（好ましくは０.１ｍｇ）、上限として、２０００ｍｇ（好ましくは５００ｍｇ、より好ましくは１００ｍｇ）を１回又は数回に分けて、摂取することが望ましい。
【００４９】
また、本発明の医薬部外品又は食品は、使用目的に合わせて、固体、液体、ゾル、ゲル、粉末又は顆粒の形態で使用することができる。
【００５０】
本発明の医薬部外品又は食品は、当業者に周知の方法により製造することができる。例えば、本発明の加工食品は、本発明の化合物を原料と共に添加し、加熱調理することにより製造することができる。
【実施例】
【００５１】
以下、実施例、試験例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
（実施例１）
血管新生阻害作用試験
本試験は、Biochemical and Biophysical Research Communications, 289, 220-224、2001記載の鶏卵漿尿膜法に準じて、Ｌ−カルノシン（和光純薬株式会社製）による血管新生阻害作用を試験した。
【００５２】
３日令の受精鶏卵から無菌的に卵白を約２ｍｌ抜き取り、卵の気室側の殻を破り直径２ｃｍの穴を開け、ステンレス製のキャップを被せ３７℃で孵卵させた。２４時間後に０．９％のＮａＣｌ／１％メチルセルロースで一定濃度に溶解した被験化合物（Ｌ−カルノシン）１０μｌを、漿尿膜（直径２ｍｍ）上に置いたシリコンリングの中に落とし入れ、再度キャップを被せ、更に４８時間孵卵させた。６日令に成長した漿尿膜内に脂肪乳剤を加え血管を観察しやすくした後、漿尿膜に新生された血管の発達状態を観察し、血管新生阻害の程度を判定した。
【００５３】
判定は鶏卵漿尿膜上の無血管領域が直径３ｍｍ以上のものを阻害活性陽性とし、（陽性を示した卵数／処理した卵数）×１００（％）を、血管新生阻害率として算定した。結果を表１（血管新生阻害率）に示す。
【００５４】
（実施例２）
血管新生阻害作用試験
被験化合物としてＬ−アンセリン（和光純薬株式会社製）を用い、実施例１と同様にして血管新生阻害作用を試験し、血管新生阻害率を算定した。結果を表１に示す。
【００５５】
（実施例３）
血管新生阻害作用試験
被験化合物としてＬ−ホモカルノシン（sigma-aldrich社、H4885）を用い、実施例１と同様にして血管新生阻害作用を試験し、血管新生阻害率を算定した。結果を表１に示す。
【００５６】
【表１】
2005120007.tif 000004
(表１中、注１で示す「−」は実施していないことを示す。)
【００５７】
この結果から、Ｌ−カルノシン、Ｌ−アンセリン、Ｌ−ホモカルノシンはいずれも用量依存的に血管新生を阻害する事が確認された。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明で用いる前記化合物又はその薬理上許容される塩は、優れた血管新生阻害活性を有し、血管新生を伴う疾患の治療および予防、たとえば、糖尿病性網膜症、リウマチ（たとえば慢性関節リウマチ）、乾癬、血管機能不全、炎症、免疫障害、ベーチェット病、痛風、関節炎、眼血管由来疾患（例えば、後水晶体繊維増殖症、黄斑変性、角膜移植拒絶、血管新生緑内障）、骨粗鬆症、ヒッペルリンドー症、腫瘍（たとえば、充実性腫瘍、腫瘍転移、良性腫瘍（例えば血管種、聴神経鞘腫、神経繊維腫、トラコーマおよび化膿性肉芽腫））などの治療および予防に有効である。また、血管新生阻害のための医薬部外品、食品にも用いることができる。