(57)【要約】【課題】測定装置など外部環境に起因するバックグラウンド蛍光値を低減したマイクロチップ用基板を提供すること。  【解決手段】表面に検出目的となる物質を捕獲し、その検出目的となる物質を蛍光又は発光により検出することに用いられるマイクロチップ用基板であって、検出目的となる物質を捕獲する表面を含む透明層、及び該透明層の下に光不透過層を有することを特徴とするマイクロチップ用基板であり、好ましくは光不透過層が黒色であり、光不透過層が透明層の裏面に形成されているマイクロチップ用基板。【特許請求の範囲】
【請求項１】
表面に検出目的となる物質を捕獲し、その検出目的となる物質を蛍光又は発光により検出することに用いられるマイクロチップ用基板であって、検出目的となる物質を捕獲する表面を含む透明層、及び該透明層の下に光不透過層を有することを特徴とするマイクロチップ用基板。
【請求項２】
光不透過層が黒色である請求項１記載のマイクロチップ用基板。
【請求項３】
光不透過層が透明層の裏面に形成されている請求項１又は２記載のマイクロチップ用基板。
【請求項４】
光不透過層が、透明層に光不透過性のインクを塗布することにより形成されるものである請求項１〜３いずれか記載のマイクロチップ用基板。
【請求項５】
光不透過層が、光不透過性のフィルム又は光不透過性の基板を透明層に重ね合せることにより形成されるものである請求項１〜３いずれか記載のマイクロチップ用基板。
【請求項６】
光不透過層に顔料を含む請求項１〜５いずれか記載のマイクロチップ用基板。
【請求項７】
透明層の材質がプラスチックまたはガラスである請求項１〜６いずれか記載のマイクロチップ用基板。
【請求項８】
透明層の材質が環状ポリオレフィンである請求項１〜７いずれか記載のマイクロチップ用基板。
【請求項９】
検出目的となる物質が生体由来物又は生体由来物と親和性を有する物質である請求項１〜８いずれか記載のマイクロチップ用基板。
【請求項１０】
生体由来物が、核酸、ペプチド、蛋白、糖鎖、脂質の何れか又はこれらの複合物である請求項９記載のマイクロチップ用基板。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、核酸、ペプチド、蛋白、糖鎖、脂質、その他の生体由来物又は生体由来物と親和性を有する物質などを固相基板表面に配置・固定したデバイスであるマイクロチップ用基板に関する。
【背景技術】
【０００２】
マイクロチップ上の物質を検出する手段として蛍光物質を用いる場合、マイクロチップ基板のバックグラウンド蛍光量が重要となる。ここでバックグラウンド蛍光とは、検出目的である蛍光物質以外の部位から発生する蛍光による信号をさす。具体的には、マイクロチップ基板自体の発する蛍光、測定装置など外部環境に起因する干渉光等が挙げられる。マイクロチップ基板自体の発する蛍光に関しては、チップ基板の材料として無蛍光性又は低蛍光性の物質を用いることで解決可能である。しかしながら、基板に蛍光を発しないものを用いても測定装置など外部環境からの影響によるバックグラウンド蛍光を解消することはできなかった。
【０００３】
マイクロチップの一つに、基板上にＤＮＡ（オリゴヌクレオチドを含む）を固定したＤＮＡチップがある。ＤＮＡチップを用いた各種解析には、スキャナーと呼ばれる測定機器を用いることが多い。現在主に利用されているスキャナーでは、ＤＮＡチップの試料点着面に対して直接励起光を照射し、蛍光物質から発せられた蛍光を受光器にて検出するという方法が用いられている。この際、励起光の一部は基板を透過してスキャナーの冶具などに達し、その反射光の影響でチップのバックグラウンド蛍光量が大きくなることがある。
【０００４】
バックグラウンド蛍光量が大きくなった場合、ＤＮＡチップから得られるデータの再現性又は信頼性に支障をきたすおそれがある。従来用いられているＤＮＡチップ用基板としては、ガラスを材料としているものが多いが、ガラスのように透明性の高い基板では励起光が透過しやすいために特にその影響が大きくなってしまう。このため、低蛍光であり、かつ、スキャナーの治具などの反射光によるバックグラウンド蛍光量を低減可能な基板が求められていた。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、低蛍光で、かつ、スキャナーの治具などの反射光によるバックグラウンド蛍光量を低減可能なマイクロチップ基板を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、
（１）表面に検出目的となる物質を捕獲し、その検出目的となる物質を蛍光又は発光により検出することに用いられるマイクロチップ用基板であって、検出目的となる物質を捕獲する表面を含む透明層、及び該透明層の下に光不透過層を有することを特徴とするマイクロチップ用基板、
（２）光不透過層が黒色である（１）記載のマイクロチップ用基板、
（３）光不透過層が透明層の裏面に形成されている（１）又は（２）記載のマイクロチップ用基板、
（４）光不透過層が、透明層に光不透過性のインクを塗布することにより形成されるものである（１）〜（３）いずれか記載のマイクロチップ用基板、
（５）光不透過層が、光不透過性のフィルム又は光不透過性の基板を透明層に重ね合せることにより形成されるものである（１）〜（３）いずれか記載のマイクロチップ用基板、
（６）光不透過層に顔料を含む（１）〜（５）いずれか記載のマイクロチップ用基板、
（７）透明層の材質がプラスチックまたはガラスである（１）〜（６）いずれか記載のマイクロチップ用基板、
（８）透明層の材質が環状ポリオレフィンである（１）〜（７）いずれか記載のマイクロチップ用基板、
（９）検出目的となる物質が生体由来物又は生体由来物と親和性を有する物質である請求項（１）〜（８）いずれか記載のマイクロチップ用基板、
（１０）生体由来物が、核酸、ペプチド、蛋白、糖鎖、脂質の何れか又はこれらの複合物である（９）記載のマイクロチップ用基板、
である。
【発明の効果】
【０００７】
本発明のマイクロチップ用基板は、従来の基板に対して、大幅に蛍光バックグラウンド蛍光量が低減されているという利点がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
測定装置等、外部環境からの影響の低減には、基板に光不透過層を導入することが有効である。すなわち、光不透過層を導入することにより、基板を透過して測定装置冶具等に達する励起光が低減する。その結果、測定装置冶具等からの反射光も激減し、外部環境由来のバックグラウンド蛍光量を低減できる。
【０００９】
本発明に使用する光不透過層は、光を透過させず、また、光を反射させにくいものが好ましい。
光不透過層は、製造効率の観点から、透明層からなる透明基板に光不透過性のインクを塗布すること、光不透過性のフィルム又は光不透過性の基板を透明基板に重ね合せることにより形成することが好ましい。
【００１０】
光不透過性のインクとしては、比較的蛍光を発しにくい材料である顔料を含むことがより好ましい。
【００１１】
顔料としては黒色のものが好ましく、着色性、耐熱性、耐ブリード性、耐薬品性の点からカーボンブラックがより好ましい。
【００１２】
本発明に使用する透明な層の材質としては、ガラス基板、プラスチックなどを用いることができるが、いずれの材質についても、無蛍光性又は低蛍光性である必要がある。
【００１３】
透明な層の材質となるプラスチックとしては、熱可塑性樹脂、熱硬化性樹脂を用いることができるが、熱可塑性樹脂の方が製造効率の観点から好ましい。低蛍光性の熱可塑性樹脂として、例えばポリエチレン、ポリプロピレン等の直鎖状ポリオレフィン、環状ポリオレフィン、含フッ素樹脂等を用いることが好ましく、耐熱性、耐薬品性、低蛍光性、成形性に特に優れる環状ポリオレフィンを用いることがより好ましい。ここで環状ポリオレフィンとは、環状オレフィン構造を有する重合体単独または環状オレフィンとα―オレフィンとの共重合体を水素添加した飽和重合体をさす。
【００１４】
前者の例としては、例えばノルボルネン、ジシクロペンタジエン、テトラシクロドデセンに代表されるノルボルネン系モノマー、および、これらのアルキル置換体を開環重合して得られる重合体を水素添加して製造される飽和重合体である。
【００１５】
後者の共重合体はエチレンやプロピレン、イソプロピル、１−ブテン、３−メチル−１−ブテン、１−ペンテン、３−メチル−１−ペンテン、１−ヘキセン、１−オクテン等のα―オレフィンと環状オレフィン系モノマーのランダム共重合体を水素添加することにより製造される飽和重合体である。共重合体では、エチレンとの共重合体が最も好ましい。
これら樹脂は単独で用いてもよく、２種類またはそれ以上の共重合体あるいは混合物であってもよい。また、樹脂成分以外に繊維状、球状その他の形状を有する無機物あるいは有機物充填材、または各種添加剤成分を含んでもよい。
【実施例】
【００１６】
以下、本発明を実施例により説明する。
検出目的となる物質を捕獲する表面を含む透明な層の下に光不透過層を有するマイクロチップ用基板を作製し、測定装置など外部環境に起因するバックグラウンド蛍光量の低減の効果を評価した。光不透過層の作製方法は、透明な層の下に光不透過性のフィルム又は基板を重ね合わせる、あるいは光不透過性のインクを塗布させることにより行なった。
【００１７】
基板のバックグラウンド蛍光量は、ＤＮＡチップスキャナー（ＳｃａｎＡｒｒａｙ  ４０００、Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＣｈｉｐ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製）を用いて測定した。バックグラウンド蛍光量検出には、最も一般的に用いられている、Ｃｙ３（励起光波長５４３ｎｍ、検出波長５７０ｎｍ）と、Ｃｙ５（励起光波長６３３ｎｍ、検出波長６６０ｎｍ）を用いた。
【００１８】
測定に用いた基板の形状は、板状であり、２枚の基板についてバックグラウンド蛍光量を測定し平均値を算出した。表１に示した値は基板２枚の平均値である。
【００１９】
《実施例１》
カーボンブラックを１重量パーセント配合した環状ポリオレフィン樹脂で作成した基板（厚み１ｍｍ）を、更に透明な低蛍光性ガラス基板（厚み１ｍｍ）の裏面に貼り合わせた基板を作成した。
【００２０】
《実施例２》
カーボンブラックを１重量パーセント配合した環状ポリオレフィン樹脂で作成した基板（厚み１ｍｍ）を、更に透明な低蛍光性環状ポリオレフィン基板（厚み１ｍｍ）の裏面に貼り合わせた基板を作成した。
【００２１】
《実施例３》
カーボンブラックを含むインクをシルクスクリーン印刷によって透明な低蛍光性ガラス基板（厚み１ｍｍ）の裏面に塗布した基板を作成した。
【００２２】
《実施例４》
カーボンブラックを含むインクを、シルクスクリーン印刷によって透明な低蛍光性環状ポリオレフィン基板（厚み１ｍｍ）の裏面に塗布した基板を作成した。
【００２３】
《比較例１》
透明な低蛍光性ガラス基板単体（厚み１ｍｍ）を前記実施例と同様の方法で測定した。
【００２４】
《比較例２》
透明な低蛍光性環状ポリオレフィン基板単体（厚み１ｍｍ）を前記実施例と同様の方法で測定した。
【００２５】
【表１】
2005189050.tif 000002
【産業上の利用可能性】
【００２６】
本発明により、透明な層の下に光不透過層を有するマイクロチップ用基板を作製することにより、測定時にバックグラウンド蛍光量を低減できた。本発明のマイクロチップ用基板は、遺伝子解析等に有効に利用することのできる高い検出限界、良好な再現性を有するＤＮＡチップの作製を可能にする。