(57)【要約】【課題】  皮膚における線維芽細胞のコラーゲン量を多くするためのコラーゲン合成促進剤を開発する事、および、コラーゲン合成促進剤を配合したシワ改善効果を有する抗老化用化粧料を提供することを課題とした。【解決手段】  γ−オリザノール加水分解物からなるコラーゲン合成促進剤、あるいは、γ−オリザノール加水分解物を有効成分として含有するコラーゲン合成促進剤、あるいは、これらのコラーゲン合成促進剤を配合する抗老化用化粧料。【選択図】「なし」【特許請求の範囲】
【請求項１】
γ−オリザノール加水分解物からなるコラーゲン合成促進剤。
【請求項２】
γ−オリザノール加水分解物を有効成分として含有するコラーゲン合成促進剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のコラーゲン合成促進剤を含有する抗老化用化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、γ−オリザノール加水分解物からなるコラーゲン合成促進剤に関するものであり、更には、このコラーゲン合成促進剤を含有する抗老化用化粧料に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は、常に外界にさらされており、加齢とともにシワ、タルミ、くすみ、色素沈着などが生じる。なかでも、シワやタルミといった形態変化は、真皮マトリックスの９０％以上を占めるコラーゲンによる影響が大きいと考えられている。真皮コラーゲンの量は、加齢と共に減少し、この減少は、若者に比べ約２０％の皮膚の厚さの減少となり、コラーゲンの減少で真皮構造の形成が不完全になるため、皮膚はもろくなる。また、光老化皮膚のコラーゲン量も、通常の皮膚に比べ、著しくコラーゲン量は減少しており、シワ、タルミの大きな形成要因として考えられている。
【０００３】
皮膚の加齢による形態変化を予防する薬剤としてレチノ−ルやレチノイン酸誘導体が、コラーゲン合成を促進するシワ防止化粧品として用いられている。しかし、これらの薬剤は、皮膚刺激性が強く、更には、非常に不安定な物質であり、特殊な製剤化技術を必要とされる。（例えば、特許文献１や特許文献２）他には、ビタミンＣ誘導体が、コラーゲン合成促進効果を持った薬剤として知られているが、経時的な着色や安定性の問題から、処方上の制約があり、使用者の希望を充分に満足させるものにはなり得なかった。
【特許文献１】特開平１５−２９２４２０号公報
【特許文献２】特開平１５−０８１７３７号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明者等は、皮膚における線維芽細胞のコラーゲン量は、若々しい肌を保つ上で重要な意味があると考え、コラーゲン合成促進剤を開発する事、および、コラーゲン合成促進剤を配合したシワ改善効果を有する抗老化用化粧料を提供することを課題とした。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、前記の課題を解決するため、鋭意検討を行った結果、γ−オリザノール加水分解物に、コラーゲン合成促進作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【発明の効果】
【０００６】
本発明の、γ−オリザノール加水分解物からなるコラーゲン合成促進剤、あるいは、γ−オリザノール加水分解物を有効成分として含有するコラーゲン合成促進剤は、皮膚の線維芽細胞においてコラーゲン合成促進効果を有する。これらのコラーゲン合成促進剤は、皮膚における線維芽細胞のコラーゲン量を多くすることができ、結果として、シワの改善効果を示し、抗老化用化粧料の有効成分として使用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明の、γ−オリザノール加水分解物は、γ−オリザノールを加水分解して生成するトリテルペンアルコールを示し、シクロアルタノールやシクロアルテノールやシクロブラノールなどのことであり、市販のγ−オリザノールをケン化分解し、エーテルなどで抽出することで得られる。
【０００８】
本発明のγ−オリザノール加水分解物は、後で証明するように、コラーゲン合成促進機能を有する。したがって、コラーゲン合成促進剤として有用である。
【０００９】
本発明のコラーゲン合成促進剤であるγ−オリザノール加水分解物は、有効成分として含有されコラーゲン合成促進剤として応用される他、皮膚外用剤に配合して、皮膚の線維芽細胞においてコラーゲン合成促進作用を発揮して、コラーゲン合成促進作用によるシワの改善効果等の抗老化作用の機能を持つ、抗老化用皮膚外用剤などに調製することができる。
【００１０】
本発明のγ−オリザノール加水分解物を皮膚外用剤に配合して使用する場合のγ−オリザノール加水分解物の配合量は、皮膚外用剤全量中０．０００１〜１０重量％、好ましくは、０．００１〜２重量％である。
【００１１】
本発明の皮膚外用剤は、外用剤基剤に通常用いられる油脂類、エステル油類、炭化水素油類、ロウ類、低級アルコール類、高級アルコール類、多価アルコール類、脂肪酸類、界面活性剤、水溶性高分子類、香料、水等を適宜配合することができ、更に他の老化防止剤、保湿剤、育毛剤、発毛剤、経皮吸収促進剤、紫外線吸収剤、細胞賦活剤、抗炎症剤、美白剤、防腐防カビ剤などを配合することが出来る。
【実施例１】
【００１２】
以下、本発明の内容を実施例により更に説明する。
（実施例１）
【００１３】
線維芽細胞によるコラーゲン合成能の評価
線維芽細胞は５％子牛血清（ＦＢＳ）含有ＤＭＥＭを用いて９６穴マイクロプレートにほぼコンフルエントになるように播種し、播種２４時間後に所定の濃度の試料を含有した０．５％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭと交換した。陽性コントロールとして５０?Ｍアスコルビン酸リン酸マグネシウムを用いた。４８時間、試料含有培地で培養したのち、培地を回収してＥＬＩＳＡに供した。細胞は０．１％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００溶液にて溶解したのち、Ｌｏｗｒｙ法を用いてタンパク量を定量した。コラーゲンのＥＬＩＳＡは直接法で実施した。すなわち、培地および検量線用コラーゲンをＳＵＭＩＬＯＮ  ＭＵＬＴＩ  ＷＥＬＬ  ＰＬＡＴＥ  Ｈ  Ｔｙｐｅ  Ｐｌａｔｅ  （住友ベークライト）に入れ、４℃にて一昼夜コーティングしたのち、１％牛血清アルブミン（ＢＳＡ）溶液を用いて３７℃にて１時間ブロッキングした。一次抗体として、Ａｎｔｉ−Ｈｕｍａｎ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ  Ｔｙｐｅ  Ｉ  ａｎｔｉｂｏｄｙ（Ｒａｂｂｉｔ）を用い、０．３％ＢＳＡ溶液で希釈した一次抗体を３７℃にて１時間反応させた。二次抗体として、ヒストファインＰＯ（Ｒａｂｂｉｔ）を用い、０．３％ＢＳＡ溶液で１００倍希釈した二次抗体を３７℃にて１時間反応させた。Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅの発色試薬として２，２'−Ａｚｉｎｏｂｉｓ（３−ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｔｈｉａｚｏｌｉｎｅ−６−ｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）ｄｉａｍｍｏｕｎｉｕｍ  ｓａｌｔ  （ＡＢＴＳ）を用い、０．３ｍｇ／ｍｌのリン酸−クエン酸バッファー（０．１Ｍ，  ｐＨ４．０）  溶液を加え、２０分間反応させ、マイクロプレートリーダーにて４０５ｎｍの吸光度を測定した。
【００１４】
培地中のコラーゲン含有量は、同じプレートで測定した検量線から算出した。
Ｌｏｗｒｙ法によって測定した全細胞のタンパク量で、ＥＬＩＳＡを用いて測定した培地中のコラーゲン含有量を除することによって、細胞の単位タンパク量あたりのコラーゲン産生量を算出した。
【００１５】
コラーゲン産生量（ｎｇ／ｍｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ）＝培地中のコラーゲン含有量（ｎｇ／ｗｅｌｌ）÷全タンパク量（ｍｇ／ｗｅｌｌ）
【００１６】
コラーゲン合成能は、試料を添加せずに培養した細胞（コントロール）のコラーゲン産生量を１００として、各濃度の試料で培養した時のコラーゲン産生量の割合（％）であらわした。
【００１７】
（試験結果）
評価結果を表１に示した。表１の結果より、γ‐オリザノ−ル加水分解物は、未添加の場合と比べて、明らかにコラーゲン合成能が増大した。
【００１８】
このことから、γ−オリザノール加水分解物は、有効成分として含有されコラーゲン合成促進剤として応用される他、皮膚外用剤に配合して、皮膚の線維芽細胞においてコラーゲン合成促進作用を発揮して、コラーゲン合成促進作用によるシワの改善効果等の抗老化作用の機能を持つ、抗老化用皮膚外用剤として有用であることが分かる。
【００１９】
【表１】
2005263677.tif 000002
【００２０】
以下に、本発明のコラーゲン合成促進剤を配合した皮膚外用剤の応用例を示す。配合量は重量％である。
【００２１】
処方例１  アイゲル
（Ａ）
γ−オリザノール加水分解物                      ０．２％
精製水素添加大豆リン脂質                        １．０％
精製オリーブスクワラン                        １０．０％
テトラエチルヘキサン酸ペンタエリスリチル        ６．０％
プロピルパラベン                                ０．２％
（Ｂ）
アクリレーツ／アクリル酸アルキル（Ｃ１０−３０）
クロスポリマー２％水溶液                  １５．０％
キサンタンガム２％水溶液                      １０．０％
精製水                                        １４．４％
（Ｃ）
ヒアルロン酸ナトリウム１％水溶液                １．０％
１，３−ブチレングリコール                      ７．０％
メチルパラベン                                  ０．２％
精製水                                        ３０．０％
（Ｄ）
アルギニン                                      ０．２％
精製水                                          ４．８％
調整法
Ａ、Ｂ、Ｃをそれぞれ８０℃に加熱し、均一に溶解した。ＣにＢを加え混合した後に、Ａを添加した。撹拌しながら冷却し、５０℃でＤを添加し、３５℃で調製を終了した。
【００２２】
処方例２  アイクリーム１
（Ａ）
γ−オリザノール加水分解物                      ２．０％
精製水素添加大豆リン脂質                        ０．５％
ミリスチン酸デカグリセリル                      ３．０％
セラキルアルコール                              ２．０％
パルミチン酸セチル                              ４．０％
精製オリーブスクワラン                        １０．０％
トリエ２−エチルヘキサン酸グリセリル            ８．０％
セタノール                                      ６．０％
プロピルパラベン                                ０．２％
（Ｂ）
グリセリン                                      ３．０％
キサンタンガム２％水溶液                      １０．０％
メチルパラベン                                  ０．２％
精製水                                        ５１．１％
調整法
Ａ、Ｂをそれぞれ８０℃に加熱し、均一に溶解した。ホモミキサーでＡを撹拌しながら混合しＢを添加して乳化後、パドル撹拌しながら冷却し、３５℃で調製を終了した。
【００２３】
処方例３  アイクリーム２
（Ａ）
γ−オリザノール加水分解物                        ０．１％
ステアリン酸グリセリル                            ５．０％
ＰＯＥ（２５）セチルエーテル                      １．５％
トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル          ７．０％
セタノール                                        ５．０％
プロピルパラベン                                  ０．２％
（Ｂ）
１，３−ブチレングリコール                        １．５％
メチルパラベン                                    ０．２％
精製水                                          ５９．３％
（Ｃ）
キサンタンガム２％水溶液                        １０．０％
エデト酸ニナトリウム                              ０．２％
精製水                                          １０．０％
調整法
Ａ、Ｂをそれぞれ８０℃に加熱し、均一に溶解した。ＡにＢを添加して乳化した後、撹拌冷却しながら５０℃でＣを添加し、３５℃で調製を終了した。
【００２４】
処方例４  化粧水
（Ａ）
γ−オリザノール加水分解物                        ０．２％
ＰＯＥ（４０）硬化ヒマシ油                        １．５％
１，３−ブチレングリコール                        ５．０％
ジプロピレングリコール                            ５．０％
メチルパラベン                                    ０．２％
（Ｂ）
カミツレエキス                                    ０．２％
ヒアルロン酸ナトリウム１％水溶液                  ５．０％
精製水                                          ８２．９％
調整法
Ａを７０℃で加温し均一にした。Ｂは室温で均一混合した。Ａを撹拌しながら室温下にてＢを少しずつ加え、可溶化した。