(57)【要約】【課題】減圧における蒸気を用いた、温度感受性マクロレティキュラーポリマーからのポロゲンの除去方法【解決手段】  本発明は、減圧下、ポリマーからポロゲンを蒸気ストリッピングすることを含む、樹脂の改良製造方法に関する。任意にこの方法は、加工助剤を除去するための希釈、およびポロゲンの除去を実施するための低圧蒸気ストリッピングを含む。本発明は、吸着性樹脂、および動物由来生成物を含まない吸着性樹脂を製造する。もう１つの側面において本発明は、この改良方法を用いて製造された樹脂、およびこの製品の製造のために用いられる製造プロセスにおいて、この樹脂を使用して製造された下流生成物を提供する。この下流生成物は、薬品またはその前駆体であり、任意にはセファロスポリンＣおよびインシュリンである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マクロレティキュラー樹脂ビーズの改良された製造方法であって、前記改良が、減圧下で前記樹脂ビーズからポロゲンを蒸気ストリッピングすることを含む方法。
【請求項２】
さらに、前記蒸気ストリッピングに先立って、前記樹脂ビーズを含む母液から加工助剤を除去するために希釈することを含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
さらに、前記減圧を用いて温度を重合温度未満に維持することを含む、請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記加工助剤が、石鹸、塩、および分散剤からなる群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記樹脂が吸着材樹脂である、請求項１記載の方法。
【請求項６】
前記方法が、動物由来生成物の使用を含まない、請求項５記載の方法。
【請求項７】
請求項１記載の改良された方法を用いて製造される樹脂。
【請求項８】
前記生成物を製造するための製造プロセスにおいて、請求項７記載の樹脂を使用して製造される下流生成物。
【請求項９】
薬品またはその前駆体である、請求項８記載の下流生成物。
【請求項１０】
前記薬品またはその前駆体が、セファロスポリンＣおよびインシュリンからなる群から選択される、請求項９記載の下流生成物。
【請求項１１】
樹脂ビーズの改良された製造方法であって、前記改良は、前記加工助剤が、フィルターを詰まらせることなく前記樹脂ビーズから除去されるように、前記母液を希釈剤で連続的に希釈することによって母液から加工助剤を除去することを含む方法。
【請求項１２】
マクロレティキュラー樹脂ビーズの改良された製造方法であって、前記改良は、減圧を用いて、前記樹脂ビーズの変形温度未満で前記樹脂ビーズからポロゲンをストリッピングすることを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、減圧における蒸気を用いた、温度感受性または温度安定性マクロレティキュラー（ｍａｃｒｏｒｅｔｉｃｕｌａｒ）ポリマーからのポロゲン（ｐｏｒｏｇｅｎ）の除去方法およびそのための系に関する。本発明はまた、この改良方法を用いて製造された樹脂、および下流生成物に関し、たとえばこれに限定されないが、様々な医薬加工工程において前記の樹脂を用いて製造された医薬品が挙げられる。
【背景技術】
【０００２】
医薬品加工において様々なマクロレティキュラー樹脂が用いられている。これらのマクロレティキュラー樹脂は、薬品加工用途におけるこれらの樹脂の使用に先立つ製造の工程で、樹脂からポロゲンが除去されている。マクロレティキュラーポリマーからポロゲンを除去する現行方法は、重合の完了後に水性反応混合物中のポリマーの蒸留を実施し、次いで溶媒で洗浄するか、または溶媒で脱水ポリマーを洗浄することを伴う。現行方法は、いくつかの欠点を有する。１つの重大な欠点は、樹脂を洗浄してポロゲンを含まないものにするためには、多量の溶媒、例えばメタノールを用いることに関わっている。このことは、溶媒の購入、次いでこの溶媒のその後の処分および／または再生のために、樹脂製造プロセスに重大なコストをもたらす。他の欠点としては、反応器におけるポロゲンの蒸留（＜５％まで）；メタノール洗浄による残留ポロゲンの除去（＜６００ｐｐｍまで）；ポロゲンの除去のためのメタノールの大規模な使用（廃棄物＝３．５ｋｇメタノール／ｋｇ樹脂）；制限されたポロゲン回収／リサイクル（ポロゲン廃棄物＝０．２５ｋｇポロゲン廃棄物／ｋｇ樹脂）；および最終生成物中に望ましくない動物ウイルスまたはその他の微生物を導入する可能性がある動物由来成分（ゼラチン）の使用が挙げられる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
ポロゲン除去のために蒸気ストリッピングを使用するというこれまでの試みは、大気圧またはそれ以上で飽和または過熱（ｓｕｐｅｒｈｅａｔｅｄ）蒸気のいずれかが用いられたことによって主として失敗であった。その結果、蒸気の温度は、ポリマーが軟化するかまたは変形する温度を超え、その結果として、表面が損傷して多孔性を失った物質が生じていた。これらの損傷表面および多孔性の喪失によって、これらの樹脂は意図された目的には適さないものになるか、および／または結果として非常に低下した性能特性となっていた。本発明は、所望のポリマーの軟化点、または樹脂の重合温度以下の操作条件を用いることによって、これらの課題を解消する。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、マクロレティキュラー樹脂ビーズの改良された製造方法を提供する。この改良には、減圧下での樹脂ビーズからのポロゲンの蒸気ストリッピング、および任意に、蒸気ストリッピング操作に先立って樹脂ビーズを含む母液からの加工助剤の除去のための希釈（逐次または連続的のいずれか）が含まれる。本発明を用いて除去される様々な加工助剤としては、例えば石鹸、塩、および分散剤が挙げられる。この方法は、減圧を用いて温度を重合温度以下に維持することを含む。
【０００５】
さらに、本明細書に記載された樹脂を使用して製造された下流生成物も提供されると理解される。下流生成物としては例えば、薬品およびその前駆体が挙げられる。薬品の例としては、ラクタム抗生物質（セファロスポリンＣがその一例である）；抗高血糖症薬（インシュリンがその一例である）；アミノグリコシド（バンコマイシンがその一例である）；およびビタミンＢ１２およびその誘導体が挙げられる。ポロゲンおよびその他の物質の効果的な除去によって、残留メタノールまたはその他の溶媒を含まないよりクリーンな樹脂が残される。残留メタノールまたはその他の溶媒は、下流生成物の加工を妨げることがあり、または樹脂の使用に先立って薬品製造業者によって追加の洗浄工程が実施されることを必要とする。
【０００６】
ポリマー性吸着材樹脂はまた、発酵ブロスストリームの捕獲／放出および精製プロセスにも用いられる。このプロセスは、細胞収集工程、続いての限外濾過を含むことができる。次いでこのストリームは、ポリマー性吸着材樹脂によって精製または清澄化される。発酵ブロスは清澄化された後、ターゲット分子を捕獲するために、樹脂の固定床または樹脂の模擬移動床のいずれかにおいてポリマー性吸着材樹脂を通過する。次いでこの吸着性の例えばターゲット分子は、水性緩衝液、有機溶媒、またはこれらの組合わせのいずれかを用いて、吸着性樹脂から選択的に溶離される。ターゲット分子は典型的に、６０〜７０％の出発純度から＞８５〜９９％の目標純度まで精製される。このポリマー性吸着材樹脂は、発酵ブロスをベースとしない薬品ストリームのさらなる精製に用いられる場合もある。このような場合、半合成抗生物質は例えば、上記プロトコルを用いて精製される。
【発明の効果】
【０００７】
本発明のさらなる意外な発見は、上記の方法におけるポロゲンの除去後、ポリマーが乾燥していて、自由に流れる（ｆｒｅｅ−ｆｌｏｗｉｎｇ）ものであるということである。このことは、乾燥ポリマーを次いでさらに空気篩い分け（ａｉｒ  ｓｉｆｔ）して所望の粒子サイズ範囲にすることができるという点で乾燥ポリマーを得る利点がある、という点で有益である。上記発明の使用によって、湿潤した自由に流れないポリマーを乾燥し、次いで乾燥ポリマーに対してほかの加工工程を実施するという、時間のかかるエネルギー集約的な加工工程が排除される。本発明の単分散樹脂はまた、さらなる製造上の利点を提供し、たとえば様々な用途に用いられる場合の圧力降下の減少が挙げられる。
【０００８】
本明細書に記載されている手順の使用は、廃水処理プラントにおける流出物の生物処理を使用する必要性を予め回避する。この結果、毎年数十万ドルの範囲のかなり大きなコストの節約を生じる。従来のプロセスは、１製造バッチあたり数千キログラムの廃棄物ＭｅＯＨまたはその他のポロゲン溶媒を排出する。次いでこれらの物質は、コストのかかる処分を必要とする。本発明の使用の結果、廃水処理プラントに対して１バッチあたりゼロ（「０」）ｋｇの廃棄物ＭｅＯＨまたはその他のポロゲン溶媒を生じる。この結果は、環境に優しいプロセスである。
【０００９】
ポリマーからのポロゲンの蒸気ストリッピングに先立って、ポリマービーズは、ビーズスラリーを底部スクリーンが取付けられたストリップカラムに移し替え、一方で希釈水を移送管に同時に添加することによって、反応スラリーから分離される。このインライン希釈工程は、反応スラリーを効果的に希釈し、溶液粘度を低下させて、液体をスラリーから排出するのをより容易にする。
【００１０】
本発明は、希釈水を反応スラリーにバッチごとに添加する現行方法とは異なり、ポリマーを表面に浮上させることができ、次いで希釈された反応母液をビーズのレベルまで排出する。現行技術の課題は、液体をビーズから排出することができる所望の液体ビーズ界面を得るには、ビーズは典型的に１２時間を要するので、非常に時間がかかるということである。ここでさらに、本発明の使用の結果、この母液希釈工程にかかる２４時間以上のサイクル時間から、わずか約５時間のサイクル時間へのサイクル時間減少が生じる。蒸気ストリッピングの使用の結果、蒸留および溶媒洗浄にかかる３０時間から、わずか約５時間へのサイクル時間減少が生じ、同様に樹脂製造プロセスからのアセトンおよび／またはメタノール洗浄（「溶媒洗浄」）の必要性を減少させるか、または排除する。この結果、迅速で環境に優しいプロセスが生じ、これはエネルギー消費を有意に減少させ、同様に危険な廃棄物の量も有意に減少させる。
【００１１】
他の課題の結果として、母液があらゆる種類の加工も行なわずにフィルターに直接送られる場合、フィルターの目詰まりを生じる。本発明のさらに他の態様において、樹脂ビーズの改良製造方法は、母液を希釈剤で連続的に希釈することによって、母液から加工助剤を除去することを含み、これによって加工助剤は、フィルターを詰まらせることなく樹脂ビーズから除去される。
【００１２】
この生成物および反応混合物に応じて、バッチごとの希釈工程を数回繰返すことができ、その後残留スラリーが溶媒洗浄に備えてフィルター中の脱水を可能にするのに十分な程度希釈される。インライン希釈の使用は、プロセス時間を有意に減少させ、生産性を改良した。例えば従来のプロセスは、次の工程を含む。すなわち、重合→浮上分離→濾過→乾燥→篩い分け→再水和である。インライン希釈工程を用いることによって、浮上分離工程が排除され、総工程数を６工程から５工程に減らす。すなわち、重合→濾過→乾燥→篩い分け→再水和である。溶媒洗浄（「例えばアセトン」）の排除、および蒸気ストリッピングによる乾燥は、６工程を次の４工程の１つまたはそれ以上の組合わせに減少させる。すなわち、重合→蒸気ストリッピング→篩い分け→再水和である。本発明のさらなる利点には、生成物品質の改良、加工能力の改良、および例えば吸着材樹脂収率の改良が含まれる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明は、１つの態様において蒸気を用いて減圧下に実施される。本発明の１つの態様において、この加工工程は温度が１００℃未満に維持される。これは、温度が１００℃またはそれ以上である場合に発生する樹脂ビーズへの損傷を防ぐ。防がれる損傷としては、制御されていない残留モノマーの後重合、および軟化、および／または樹脂ビーズの吸着特性を妨げるビーズ表面への損傷が挙げられる。本発明を使用して解消される他の課題としては、蒸気適用後の細孔潰れ、ならびにビーズが重合によって接合してビーズ塊または望ましくない単一の大きいビーズを形成するビーズとビーズとの凝集の排除または実質的な減少が挙げられる。細孔潰れおよびビーズの凝集のどちらも、低い性能特性を有する樹脂生成物を生じる。
【００１４】
減圧は、与えられたポリマーの重合温度よりも高くない操作温度を得るように調節され、これは従来方法によって経験的に決定される。例えば圧力は、６０℃の温度を維持するために約１５０ｍｍ水銀絶対圧（ｍｅｒｃｕｒｙ  ａｂｓｏｌｕｔｅ）とすることができる。さらなる例として、圧力は、８０℃の温度を維持するために約３５０ｍｍ水銀絶対圧とすることができる。当業者であれば与えられたポリマーの重合温度よりも高くない所望の温度を得るために圧力を調節することができ、かつ所望の範囲は経験的に得られるが、例えば５０〜９０℃の範囲内とすることもできると考えられる。細孔潰れおよび／またはビーズの凝集が発生しないように、他の変数も操作することができると考えられる。
【実施例１】
【００１５】
名目６５０ミクロンの調和平均サイズの球形マクロレティキュラージビニルベンゼン／エチルビニルベンゼンコポリマーを、溶液重合において、トルエンをポロゲンとしてかつゼラチンを分散剤として用いて粒子サイズの制御をして調製した。水相は、ＤＩ水（９７．４％）、ゼラチン２５０Ａ３０（０．３％）、ホウ酸（０．３％）、Ｐａｄｍａｃ  Ａ（１．２％）、塩化カルシウム（０．７％）、および水酸化ナトリウム（０．１％）から構成された。有機相は、８０％ジビニルベンゼン（２９．９％）、Ｔｒｉｇｏｎｏｘ  ２１Ｓ触媒（０．３％）、およびトルエン（６９．８％）ポロゲンから構成された。水相対有機相の比は１．３であった。混合物を窒素雰囲気中で７０℃に加熱し、１２時間保持した。重合後、混合物を大気圧で加熱し、１２時間８８℃に維持して、トルエンの大部分をトルエン／水共沸物として除去した。蒸留後にコポリマー中に残留したトルエンは、コポリマー乾燥重量ベースで３％であった。
【００１６】
コポリマーおよび母液を、母液を排出することができる８０℃のジャケット付きフィルター底部容器に移し替えた。この容器の圧力を、３８０ｍｍ水銀絶対圧に減圧した。２３１１ｍｍ水銀絶対圧にある飽和蒸気を、この容器の頂部に導入した。蒸気を１時間あたり１床体積で８時間供給した。この容器から出る蒸気ストリームを凝縮し、収集した。有機相がこの凝縮物中に観察された。
【００１７】
比較例として、コポリマーサンプルを蒸留後に採取し、水、メタノール、次いで再び水で順次洗浄した。
【００１８】
これらのコポリマーサンプルは、メタノール抽出／水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）を用いたガスクロマトグラフ（ＧＣ）（「ＧＣ−ＦＩＤ」）によって、残留トルエンについて分析した。この技術は、コポリマーとメタノールとの混合、メタノールの採取、およびメタノールのＧＣ中への注入から構成された。得られたピークの面積を、標準的トルエン溶液を用いて得られたものと比較した。さらにはこれらのコポリマーサンプルを秤量し、次いで１０５℃で一晩乾燥し、再び秤量して、乾燥した時の重量損失を決定した。上記に基づいて、１乾燥グラムコポリマーあたり２００ｐｐｍ未満のトルエンが、両方のサンプル中に存在すると決定された。
【００１９】
動的セファロスポリンＣテストは、テストコポリマーの充填カラムを通して固定速度で既知の濃度のセファロスポリンＣをポンプ移送し、流出液へのＵＶ応答を経時的に検出することによって行なう。１％漏出における時間および対応能力は、ビーズ内拡散の課題（例えば表面スキンの存在またはマクロレティキュラー構造の潰れまたは損傷）に関連した課題を検出するのに有用である。これらの課題は、プローブ分子がポリマー構造中に拡散するのに長時間かかる場合、単に総容量を見るだけでは見逃す可能性がある。
【００２０】
テストコポリマー５０ｃｃを、ジャケット付きの２．５４ｃｍの直径ガラスカラム中に、プランジャーと共に用い、フリーボードおよび混合を最小限にした。ｐＨ２．８、５℃の１０，０００ｐｐｍセファロスポリンＣ溶液を、１床体積／時でこのカラムに供給した。流出液を連続的に分析して、１％破過点を１００ｐｐｍセファロスポリンＣが検出される時点として規定した。次いで１％動的容量を、１％破過点が観察されるまでにテストコポリマーの容積へ供給されたセファロスポリンの総重量として規定した。
【００２１】
残留ポロゲンが減圧蒸気ストリッピングを用いて除去されたコポリマーを、動的セファロスポリンＣ取り込みについてテストし、４４ｇ／リットルの１％破過容量を有することが見出された。比較によって、残留ポロゲンがメタノール洗浄を用いて除去されたコポリマーを、動的セファロスポリンＣ取り込みについてテストし、４４ｇ／リットルの１％破過容量を有することが見出された。
【実施例２】
【００２２】
名目６５０ミクロンの調和平均サイズの球形マクロレティキュラージビニルベンゼン／エチルビニルベンゼンコポリマーを、溶液重合において、トルエンをポロゲンとしてかつゼラチンを分散剤として用いて粒子サイズの制御をして実施例１のように調製した。重合後にコポリマー中に残留するトルエンは、コポリマー乾燥重量ベースで４５％であった。
【００２３】
コポリマーおよび母液を、母液を排出することができる８０℃ジャケット付きフィルター底部容器に移し替えた。この容器の圧力を、３８０ｍｍ水銀絶対圧に減圧した。２３１１ｍｍ水銀絶対圧の飽和蒸気を、この容器の頂部に導入した。蒸気を１時間あたり１床体積で５時間供給した。この容器から出る蒸気ストリームを凝縮し、収集した。有機相がこの凝縮物中に観察された。
【００２４】
比較例として、コポリマーサンプルを重合後に採取し、水、メタノール、次いで再び水で順次洗浄した。これらのコポリマーサンプルは、メタノール抽出／水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）でのガスクロマトグラフ（ＧＣ）（「ＧＣ−ＦＩＤ」）によって、残留トルエンについて分析した。１乾燥グラムコポリマーあたり２００ｐｐｍ未満のトルエンが、両方のサンプル中に存在した。
【００２５】
ポロゲンが減圧蒸気ストリッピングを用いて除去されたコポリマーを、動的セファロスポリンＣ取り込みについてテストし、６８ｇ／リットルの１％破過容量を有することが見出された。比較によって、ポロゲンがメタノール洗浄を用いて除去されたコポリマーを、動的セファロスポリンＣ取り込みについてテストし、４０ｇ／リットルの１％破過容量を有することが見出された。
【実施例３】
【００２６】
名目７５ミクロンの調和平均サイズの球形マクロレティキュラージビニルベンゼン／エチルビニルベンゼンコポリマーを、溶液重合において、ｏ−キシレンおよびメチルイソブチルカルビノール（「ＭＩＢＣ」）をポロゲンとしてかつセルロースを分散剤として用いて粒子サイズの制御をして調製した。水相は、ＤＩ水（９８．９％）、メチルヒドロキシセルロース（０．５％）、ホウ酸（０．４％）、ナトリウムラウリルスルフェート（０．０１％）、および水酸化ナトリウム（０．２％）から構成された。有機相は、８０％ジビニルベンゼン（３５．４％）、過酸化ベンゾイル触媒（０．７％）、ならびにｏ−キシレン（２９．０％）およびメチルイソブチルカルビノール（３４．９％）ポロゲンから構成された。水相の有機相に対する比は１．３であった。混合物を窒素雰囲気中で８０℃に加熱し、１２時間保持した。１２時間後、混合物を１００℃に加熱し、５時間保持した。
【００２７】
典型的に０．０２５％のメチルヒドロキシセルロースの濃度はその後、（この液体を、フィルターを通して容易に排出させるため）コポリマーおよび母液をより大きい容器に移し替え、この混合物を水で希釈、混合し、攪拌を停止し、コポリマーを浮上させ、この容器の底部から液体の一部分を排出し、目標のメチルヒドロキシセルロース濃度が達成されるまでこの操作を繰返すことによって得られる。しかしながら優れた代替方法として、この実施例においてコポリマーおよび母液を、８０℃ジャケット付きフィルター底部容器に移し替え、これはコポリマー／母液スラリーをポンプ移送し、その管を通して水も同様にポンプ移送して、希釈（０．０２５％メチルヒドロキシセルロース）を達成し、そして混合することによって行われた。これによって、希釈された母液を排出させた。
【００２８】
この容器の圧力を３８０ｍｍ水銀絶対圧に減圧した。２３１１ｍｍ水銀絶対圧にある飽和蒸気を、この容器の頂部に導入した。蒸気を、１時間あたり１床体積で５時間供給した。取り出されたコポリマーは、乾燥し、自由に流れるものであった。この物質についてこのことは有利であるが、というのも比較対照のアセトン洗浄物質が、典型的に水でリンスされ、次いでサイズ分類するために乾燥されるからである。
【００２９】
コポリマーサンプルを、ジクロロメタン抽出（「ＤＣＭ」）／水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）でのガスクロマトグラフ（ＧＣ）（「ＧＣ−ＦＩＤ」）によって、残留ｏ−キシレンおよびＭＩＢＣについて分析した。この技術は、コポリマーとＤＣＭとの混合、ＤＣＭの採取、およびＤＣＭのＧＣ中への注入から構成された。得られたピークの面積を、標準溶液を用いて得られたものと比較した。さらにはこのコポリマーサンプルを秤量し、次いで１０５℃で一晩乾燥し、再び秤量して、乾燥した時の重量損失を決定した。１乾燥グラム樹脂あたり０．５％未満のｏ−キシレンおよび０．１ｐｐｍ未満のＭＩＢＣが存在した。
【００３０】
動的インシュリン容量テストは、テストポリマーの充填カラムを通して固定速度で既知の濃度のインシュリンをポンプ移送し、流出液についてのＵＶ応答（２８０ｎｍ）を経時的に検出することによって行なった。１％漏出における時間および対応インシュリン容量は、ビーズ内拡散の課題（例えば表面スキンの存在またはマクロレティキュラー構造の潰れまたは損傷）に関連した課題を検出するのに有用である。これらの課題は、プローブ分子がポリマー構造中に拡散するのに長時間かかる場合、単に総インシュリン容量を見るだけでは見逃す可能性がある。テストの詳細は次の通りであった。
【００３１】
テストに用いられる試薬
・Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水または同等物
・トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｔ−６５０８）または同等物
・ウシインシュリン（Ｓｉｇｍａ  ＃Ｉ  ５５００）
・０．８〜１．８の間の不均整を有し、および非残留プローブ分子を有し、Ｍグレード樹脂については＞２，５００プレート／メートルの効率を有するテストカラム（Ｃグレード樹脂については＞１，０００プレート／メートル、およびＳグレード樹脂については＞５，０００プレート／メートル）
【００３２】
用いられる装置
・Ｖａｒｉａｎ  ＰｒｏＳｔａｒ（商標）２１０溶媒送達モジュール（または商品として同等のポンプ）
・Ｓｐｅｃｔｒａｆｌｏｗ（商標）７８３吸光度検出器（または商品として同等のもの）
・データ取得および分析のためのＡｇｉｌｅｎｔ  Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ（商標）インターフェースおよびソフトウエア（または商品として同等のもの）
・Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｌｉｇｕｉｄ  Ｆｌｏｗｍｅｔｅｒ  Ｏｐｔｉｆｌｏｗ（商標）１０００（Ｂｏｄｍａｎ  Ｈ１０００）または同等のもの
【００３３】
典型的な前端吸着曲線およびサンプル計算は、次のように実施した。水／ＴＦＡ溶液を、テフロン（登録商標）蓋の付いている１／２ガロンアンバーガラス容器において、１．０ｃｃまたは１つの１ｃｃアンプルのＴＦＡを、１リットルのＭｉｌｌｉ−Ｑ（商標）水（メスシリンダーを用いて）中に混合することによって調製した。インシュリン溶液は、秤量紙上でインシュリン１．２５グラムを秤量し、１リットルビンに移し替えて調製した。２５０ｇの水／ＴＦＡ溶液を添加し、その中に溶解させた。分光光度計を２９１ｎｍに設定し、５．０ｍｇ／ｃｃの溶液のＵＶ吸光度を測定し、記録した。ＩＮＦ＝ＡＵ、２９１ｎｍで５．０ｍｇ／ｃｃ。ＩＮＦ値としてのこの値を用いて、総容量を計算した。
【００３４】
前端テストを次のように実施した。ポンプ移送／テスト系における第一貯留タンクを、水／ＴＦＡ溶液で満たした。第二貯留タンクをインシュリン溶液で満たした。調製されたテストカラムをポンプに取付けた。テストカラムを、２ｃｃ／分で２０ｃｃの水／ＴＦＡ溶液でリンスした。ポンプを止め、ポンプ供給を、インシュリン溶液に切り替えた。フローを２ｃｃ／分に設定した。このフローを開始させる前に、水／ＴＦＡ溶液を送込みラインからテストカラムに移動させ、これをインシュリン溶液と置き換えた。Ｓｐｅｃｔｒａｆｌｏｗ（商標）７８３検出器を、２９１ｎｍでカラム流出液をモニターするように設定し、検出器をゼロにした。ポンプおよびＣｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ（商標）データ取得システムを同時に設定した。テスト溶液２００ｃｃを、テストカラム上に通過させて２００ｃｃ容積測定フラスコに入れた。２００ｃｃの収集時間は、９８．５〜１０１．５分であった。このカラムを取外し、この系を洗浄した。動的容量または１％漏出容量は、次のように決定した。すなわち、ＵＶプロフィール上のｍＡＵ０およびｍＡＵｍａｘを、次のように決定した。ｍＡＵ０を決定し、これは、分析の開始と、有意な振れが発生する直前との間として規定された、このプロフィールのべースラインの３点平均であった。ｍＡＵｍａｘは、シグナルの変化が１％未満であるこのプロフィールのプラトーであった。１％漏出までの時間（ｔ１％）は、検出器の応答が１％レベルに達した時間として規定された。これは、式：［（ｍＡＵｍａｘ−ｍＡＵ０）×０．０１］＋ｍＡＵ０によって計算される。次いで動的容量を、［ｔ１％×５（ｍｇ／ｃｃ）×２（ｃｃ／分）］／（カラム中の樹脂ｃｃ）によって計算した。
【００３５】
総容量は次のように測定し、カラムテストからの収集流出液の分光光度計上の吸光度を測定して次の式によって示される：総容量は、［（１−ＥＦＦ／ＩＮＦ）×１０００］／（カラム中の樹脂ｃｃ）によって示される。サンプルの動的容量の計算は、次のとおりである：ｍＡＵ０＝４５．７；ｍＡＵｍａｘ＝５０６．２；１％漏出における検出器応答［（５０６．２−４５．７）×０．０１］＋４５．７＝５０．３；１％応答が発生した時間＝３３．８分（曲線から読取られた）；動的容量＝［３３．８×５（ｍｇ／ｃｃ）×２（ｃｃ／分）］／カラム中の４．８ｃｃ樹脂＝７０ｍｇ／ｃｃ。サンプル総容量測定は、次のように行なわれた：ＩＮＦ＝０．５７ＡＵ、（５．０ｍｇ／ｃｃ、２９１ｎｍ）ＥＦＦ＝０．２７５ＡＵ（２９１ｎｍ）ＩＮＦ；総容量＝［（１−０．２７５／０．５７）×１０００］／（カラム中の４．８ｃｃ樹脂）＝１０８ｍｇ／ｃｃ。実施例コポリマーの動的容量は、７３ｍｇ／ｃｃであった。比較によって、上記のように調製されたが、水で逐次希釈され、アセトンおよび水で洗浄されたサンプルは、６８ｍｇ／ｃｃの動的容量を有することが分かった。
【００３６】
本発明は、溶媒の使用を排除し、さらにこの生成物の特性を保持または改良する。次の表は、実施例１および２におけるこれらの物質の細孔サイズ分布を示している。減圧蒸気ストリッピングの使用は、細孔潰れを生じず、望ましい直径の細孔容積の増加を生じて細孔サイズ分布を改良した。
【００３７】
【表１】
2005146249.tif 000002
【００３８】
蒸気ストリッピング試験が実施されたセファロスポリン（Ｃｅｐｈ）Ｃの結果である。これらの結果を下記に示す。
【００３９】
【表２】
2005146249.tif 000003
【００４０】
表２は、最初に蒸留してポロゲンの大部分を除去し次いでメタノールで洗浄されてポロゲンの残りを除去した典型的な生成物に対して、減圧蒸気ストリッピングされた物質のセファロスポリンＣについての優れた動的容量について記載している。この表はまた、減圧蒸気ストリッピングのみがなされたコポリマーの予想外のより高いセファロスポリンＣ容量も示している。
【００４１】
これらのサンプルの総多孔度を、窒素多孔度測定法によって決定した。これらの結果を下に示す。
【００４２】
【表３】
2005146249.tif 000004
【００４３】
表３は、減圧蒸気ストリッピングの使用が、コポリマーの細孔構造に悪影響を与えず、減圧蒸気ストリッピングの使用が単独でコポリマーの細孔構造を有利に変更して、より良好な性能特性を生じたという結果を記載している。
【００４４】
インライン希釈および減圧蒸気ストリッピング試験についてのインシュリンの結果を下に示す。
【００４５】
【表４】
2005146249.tif 000005
【００４６】
表４は、バッチごとの希釈よりも優れた、インライン希釈の使用に係るインシュリンについての動的容量、およびバッチごとの希釈およびアセトン洗浄よりも優れた、インライン希釈および減圧蒸気ストリッピングの両方の使用に係るインシュリンについての動的容量について記載している。
【００４７】
本発明の他の態様において、この樹脂は吸着材樹脂であり、任意に、動物由来生成物の使用を含まず、例えばゼラチンを含まずに製造される。ゼラチンを含まないという事実によって、微生物汚染物質の潜在的リスクを排除し、最終薬品へと進行し、優れた性能特性を有すると同時に、一方で動物由来病原体のリスクを生じない、高度に望ましい生成物を生じる。当業者であれば、本明細書に記載された実施態様は、本発明の中心的精神および範囲から逸脱することなく、修正および変更することができることを理解するであろう。
【外国語明細書】
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