(57)【要約】【課題】  新規なＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法及びＤ−キロ−イノシトールの製造方法を提供する。【解決手段】  そばを含んだ原料を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物を固液分離し、分離された液体成分を脱イオン処理することとした。【選択図】        なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
そばを含んだ原料を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物を固液分離し、分離された液体成分を脱イオン処理することを特徴とするＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法。
【請求項２】
そばを含んだ原料を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物を固液分離し、分離された液体成分を脱イオン処理し、その後、イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うことにより、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製するようにしたことを特徴とするＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法。
【請求項３】
そばを含んだ原料を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物を加水分解処理した後に、脱イオン処理するようにしたことを特徴とする請求項１又は２に記載のＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法。
【請求項４】
上記脱イオン処理として、イオン交換樹脂による脱イオン処理を行うようにしたことを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法。
【請求項５】
上記脱イオン処理として、高温で陽イオン交換樹脂による脱イオン処理を行い、その後陰イオン交換樹脂による脱イオン処理を行うようにしたことを特徴とする請求項１又は２に記載のＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法。
【請求項６】
上記脱イオン処理として、電気透析による脱イオン処理を行うようにしたことを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法。
【請求項７】
上記副産物がそば焼酎蒸留かすであることを特徴とする、請求項１〜請求項６のいずれかに記載のＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法。
【請求項８】
請求項１〜７に記載のいずれかの分取方法によって得られたＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を、陰イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うことにより、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物を得るようにしたことを特徴とするＤ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法。
【請求項９】
請求項１〜７に記載のいずれかの分取方法によって得られたＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製することにより、高純度のＤ−キロ−イノシトールを得ることを特徴とするＤ−キロ−イノシトールの製造方法。
【請求項１０】
イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うことによって、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製するようにしたことを特徴とする請求項９に記載のＤ−キロ−イノシトールの製造方法。
【請求項１１】
上記イオン交換樹脂を用いたクロマト分離が、陽イオン交換樹脂を用いたクロマト分離の後に、陰イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うようにしたクロマト分離であることを特徴とする請求項１０に記載のＤ−キロ−イノシトールの製造方法。
【請求項１２】
上記イオン交換樹脂を用いたクロマト分離が、陰イオン交換樹脂を用いたクロマト分離の後に、陽イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うようにしたクロマト分離であることを特徴とする請求項１０に記載のＤ−キロ−イノシトールの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法及びＤ−キロ−イノシトールの製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
そばの成分として、ファゴピリトールというものが含まれていることが知られているが、同時にＤ−キロ−イノシトールという糖尿病に効果のある成分が含まれていることも知られている（例えば、非特許文献１参照）。Ｄ−キロ−イノシトールは近年、インシュリン非依存性糖尿病の治療薬として公知であり（例えば、特許文献１参照）、また、多嚢胞性卵巣症候群の治療薬としても知られている（例えば、非特許文献２参照）。
【０００３】
また、そばに含有されるファゴピリトールについては、調製法が特許文献に知られている。このような特許文献に、ファゴピリトールの機能について調査した記載はないが、その用途は、Ｄ−キロ−イノシトールと同様、糖尿病の治療や予防及び多嚢胞性卵巣症候群の治療や予防に関すると記載されている（例えば、特許文献２、特許文献３参照）。
【０００４】
これらの特許文献２、３によれば、そば粉からファゴピリトールの製造ができるとの記載がある。ファゴピリトールには数種の異性体があり、そば粉から製造されるファゴビリトールは数種の異性体の組成物である。その組成物の中にＤ−キロ−イノシトールが副成分として含まれることもあるとの記載がある。また、ファゴピリトールを強酸、例えば４モル濃度の塩酸で加水分解する方法及び酵素により加水分解する方法によりＤ−キロ−イノシトールが生成する事例が上記特許文献２、３に記載されている。
【０００５】
しかし、そば粉を原料として、ファゴピリトールの調製法である特許文献２、３に記載の方法に基づいて、Ｄ−キロ−イノシトールを製造した場合、工程数が多くまた原料が高価であるため、Ｄ−キロ−イノシトールの製造に多大なコストがかかってしまう。
【０００６】
近年、糖尿病患者及び糖尿病予備軍と呼ばれる人が増加しており、安全かつ手軽に飲食用に供することのできる糖尿病に対して予防を含む効果のある健康食品が常に求められている。また、少子化が進む中、不妊に悩む女性も多く不妊の一因である多嚢胞性卵巣症候群に対して予防を含む効果のある健康食品に関しても多くの関心が持たれている。
【特許文献１】国際公開第９０／１０４３９号パンフレット
【特許文献２】国際公開第９８／５００４９号パンフレット
【特許文献３】国際公開第０１／８９５３２号パンフレット
【非特許文献１】「ジャーナル・オブ・アグリカルチュラル・アンド・フード・ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  ａｎｄ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）」，（米国），２０００年，第４８巻，ｐ．２８４３−２８４７
【非特許文献２】「ザ・ニュー・イングランド・ジャーナル・オブ・メディシン（Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇ１ａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）」，（米国），１９９９年，第３４０巻，ｐ．１３１４−１３２０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
このような中、安価にＤ−キロ−イノシトール又はそれを主成分とする組成物の製造方法が要望されている。本発明はこのような要望に応えてなされたものであり、新規なＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法及びＤ−キロ−イノシトールの製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、前記した課題を達成するために特に、低コストで得られる原料の探索をするとともに、このような原料からの低コストのＤ−キロ−イノシトール製造法について種々検討を重ねた。その結果、そばを含んだ原料を使用する飲用アルコール又は工業用アルコールを製造する際に生ずる副産物よりＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を得ることができることを知見するにいたった。
【０００９】
このＤ−キロ−イノシトールとミオ−イノシトールを主成分とする組成物は、このままで前述のとおりの糖尿病薬あるいはその予防的な補助成分などとして利用できる。
さらには、このＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物から、低コストでＤ−キロ−イノシトールを分離精製する方法に想到した。このことにより、前述の糖尿病薬あるいはその予防的な補助成分としての効果を発揮することができる。
このように、本発明により、そばを含んだ原料を使用する飲用アルコール又は工業用アルコール製造の際に生ずる副産物より、Ｄ−キロ−イノシトールの単独、あるいはこれとミオ−イノシトールを主成分とする組成物を安価に得る方法が提供される。
【００１０】
すなわち、上記目的を達成するために、本発明は、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法であって、そばを含んだ原料を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物を固液分離し、分離された液体成分を脱イオン処理することを特徴とする。
【００１１】
本発明に係るＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法は、別の形態で、そばを含んだ原料を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物を固液分離し、分離された液体成分を脱イオン処理し、その後、イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うことにより、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製するようにしたことを特徴とする。
上記いずれの分取方法でも、そばを含んだ原料を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物を加水分解処理した後に、脱イオン処理することが一般的である。
【００１２】
上記脱イオン処理としては、イオン交換樹脂による脱イオン処理を行うことができる。また、上記脱イオン処理として、高温で陽イオン交換樹脂による脱イオン処理を行い、その後陰イオン交換樹脂による脱イオン処理を行うようにすることもできる。これによって、加水分解処理を行う必要がある場合であっても、これを省略することができる。
さらに、上記脱イオン処理として、電気透析による脱イオン処理を行うこともできる。
上記副産物としては、そば焼酎蒸留かすを用いることができる。
【００１３】
また、本発明は別の側面で、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法であって、該分取方法は、上記分取方法によって得られたＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を、陰イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うことにより、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物を得るようにしたことを特徴とする。
【００１４】
またさらに、本発明はさらに別の側面で、Ｄ−キロ−イノシトールの製造方法であって、該方法は、上記分取方法によって得られたＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製することにより、高純度のＤ−キロ−イノシトールを得ることを特徴とする。
この製造方法では、イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うことによって、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製することができる。また、係るイオン交換樹脂を用いたクロマト分離として、陽イオン交換樹脂を用いたクロマト分離の後に、陰イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うようにすることができる。また、係るイオン交換樹脂を用いたクロマト分離として、陰イオン交換樹脂を用いたクロマト分離の後に、陽イオン交換樹脂を用いたクロマト分離を行うようにすることができる。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、そばを含んだ原料を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物、すなわち安価なそば焼酎蒸留かすを原料としたＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法及びＤ−キロ−イノシトールの製造方法が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下に、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法及びＤ−キロ−イノシトールの製造方法をその実施の形態について、さらに詳細に説明する。
【００１７】
イノシトールには、本発明に係る２種類の異性体を含め９種類の異性休が存在する。ここで、本明細書中、２種類の異性体であるＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを区別せずに総称する際には、イノシトールと記載することがある。また、これらの異性体を区別する際には、それぞれをＤ−キロ−イノシトール又はミオ−イノシトールと記載する。
【００１８】
１）そば焼酎蒸留かすの液体成分の分離
本発明は、例えばそばを含んだ原料として、そば米を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物を原料とするものである。現在、そばを原料にしたアルコールの製造は、ほとんどがそば焼酎の製造であるため、そば焼酎を製造する際に副産物として生産されるそば焼酎蒸留かすを出発原料として用いるのが好ましい。
【００１９】
原料として用いられるそばは、一般に食用に供されているものはすべて使用できる。通常、そばの種類として、普通種、ダッタン種、宿根種が知られており、それぞれ、甘そば（通常の日本そば）の原料、苦そば（ダッタンそば）の原料、漢方薬の原料及び葉を食用として利用されている。本発明に使用できる種類としては、普通種、ダッタン種が挙げられる。また、これらの種類のそばの品種についても限定しないが、普通種としては、キタワセソバ、キタユキ、牡丹そば等を挙げることができる。
【００２０】
そばを含んだ原料を使用してアルコールを製造する際に生ずる副産物例えばそば焼酎蒸留かすは、通常、固液混合状態である。したがって、本発明では、このような原料を固液分離する。固液の分離方法は、ろ過、遠心分離等の方法によればよい。固液を分離したそば焼酎蒸留かすのうち、液体分をＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールの製造の原料として使用する。
【００２１】
２）そば焼酎蒸留かすの液体成分からのＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを含む中性成分を主成分とする組成物の製造
上記液体成分からのＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを含む中性成分を主成分とする組成物を分取する方法を次に説明する。
（１）方法１：加水分解処理を行わずに脱イオン処理のみの方法
そば焼酎蒸留かすの液体成分を、陽イオン交換樹脂及び陰イオン交換樹脂を通して精製することによりイオン性の不純物を除くことができ、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを含む中性成分を主成分とする組成物を得ることができる。
【００２２】
例えば、得られた液体成分を、陽イオン交換樹脂を充填したカラムに通過させる。続いて、このカラムにイオン交換水を通過させて洗浄する。この通過液及び洗浄液を、陰イオン交換樹脂を充填したカラムに通過させる。続いてこのカラムにイオン交換水を通過させて洗浄する。得られた通過液及び水洗浄液を、エバポレーターを用いて減圧下で濃縮する、といった一連の処理操作で、陽イオン交換樹脂及び陰イオン交換樹脂を通した精製（分取）を行うことができる。
【００２３】
なお、カラム処理操作は、室温で行うことができる。また、陽イオン交換樹脂及び陰イオン交換樹脂による脱イオン処理は、上記とは逆に陰イオン交換樹脂による脱イオン処理を行った後に、陽イオン交換樹脂による脱イオン処理を行うようにすることもできる。
以上のような一連の操作によって、高機能の組成物として、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを含む中性成分を主成分とする組成物が得られることに、本発明者らは想到した。
【００２４】
使用するイオン交換樹脂は、陽イオン交換樹脂としては、強酸性陽イオン交換樹脂デュオライト（登録商標）Ｃ−２０、陰イオン交換樹脂としては、強塩基性陰イオン交換樹脂デュオライト（登録商標）Ａ１１６をそれぞれ例示することができる。
【００２５】
（２）方法２：酸による加水分解処理後に脱イオン処理を行う方法
そば焼酎蒸留かすの液体成分から効率良くＤ−キロ−イノシトールを生産するために液体成分中のファゴピリトール等のＤ−キロ−イノシトール誘導体の加水分解を行う。これは、ファゴピリトール等のＤ−キロ−イノシトール誘導体を加水分解することによってＤ−キロ−イノシトールの含有量を増加させるためである。
原料のそば焼酎蒸留かすの状態にもよるが、酸を加え加水分解する際には、加える酸の濃度は０．０３規定から１規定、温度は、８０から１２０℃、加水分解時間は３０分から６時間程度が好適である。加える酸は、塩酸、硫酸等の強酸が好ましい。加える酸の量、温度及び反応時間は、予備試験を行い決めることが望ましい。一般的に加水分解時間は、酸性度及び反応温度が低い場合は長くし、酸性度及び反応温度が高い場合は短くすることが好ましい。
【００２６】
加水分解した溶液を、上記した方法１のように陽イオン交換樹脂及び陰イオン交換樹脂を通して精製することにより、イオン性の不純物を除くことができ、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを含む中性成分を主成分とする組成物を得ることができる。
ここで使用できる陽イオン交換樹脂及び陰イオン交換樹脂としては、上記方法１に関する説明で、例示したものを挙げることができる。
【００２７】
また、近年、陽イオン交換樹脂及び陰イオン交換樹脂用いて精製するのとほぼ同等の精製を行える電気透析装置が用いられており、本発明でもイオン性の不純物を除くための処理として電気透析装置を用いることもできる。この電気透析装置としては、マイクロアシライザーＳ３（旭化成ケミカルズ株式会社製）を挙げることができる。
【００２８】
（３）方法３：酸による以外の加水分解処理及び脱イオン処理
また、上記の酸加水分解方法に代わり、陽イオン交換樹脂処理の際に高温でイオン交換樹脂処理を行うことにより、酸による加水分解処理の工程を省くことが可能である。これは、高温の陽イオン交換樹脂で脱塩されると共に加水分解反応が起こるためである。
この高温での陽イオン交換樹脂処理の場合、反応温度は８０〜９０℃、流速はＳＶ＝０．５〜０．１が好適である。
なお、ここでＳＶ（space velocity）は、空間速度を表し、イオン交換樹脂の充填してあるカラムを１時間に通過する液量（ｍｌ）とカラムに充填してあるイオン交換樹脂の量（ｍｌ）の比（倍量）である。
【００２９】
この方法の場合には、高温で陽イオン交換樹脂処理を行った後、陰イオン交換樹脂で精製することにより、イオン性の不純物を除くことができる。こうしてＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを含む中性成分を主成分とする組成物を得ることができる。使用できる陰イオン交換樹脂としては、上記方法１に関する説明で例示したものを挙げることができる。
【００３０】
３）クロマト分離によるＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製するようにした、係る組成物の分取方法、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法（Ｄ−キロ−イノシトールの分離精製方法）及びＤ−キロ−イノシトールの製造方法（Ｄ−キロ−イノシトールの分離精製方法について説明する。
上記の２）（１）〜（３）で説明した方法１〜方法３でイオン性の不純物を除去した、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを含む中性成分を主成分とする組成物は、クロマトグラフィー分離を行うことにより、精製することができる。これによって、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを組成物として、又はＤ−キロ−イノシトール若しくはミオ−イノシトールをそれぞれ単独に精製することが可能である。このことを以下に説明する。
【００３１】
（１）Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製するようにした、係る組成物の分取方法
上記の２）（１）〜（３）で説明した方法１〜方法３で得た溶液から、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを精製するには、糖分離に使用される陽イオン交換樹脂を用いたクロマト分離が好適である。このクロマト分離によって、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを同じ画分として精製することができる。この工程で、前工程で得た溶液中に含まれていたＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトール以外の糖（グリセロールなど）を分離することができる。
【００３２】
ここで用いられる陽イオン交換樹脂は、金属塩タイプであることが望ましく、金属塩として例えば、カルシウムイオン、鉛イオン、亜鉛イオン、ナトリウムイオンなどが好適である。このような金属塩タイプの陽イオン交換樹脂は、例えば、強酸性陽イオン交換樹脂デュオライト（登録商標）Ｃ−２０を活性化し、この活性化した樹脂（Ｈ+型）に、使用したい金属イオンを吸着させることにより作成することができる。
これらの陽イオン交換樹脂を用いてクロマト分離を行うことにより、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製することができる。
【００３３】
さらには、上記で得た組成物中のＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールの純度が低いとき、すなわち糖類（例えば、グリセロールなど）の除去が不十分なときは、該組成物を濃縮結晶化又はエタノールなどの溶媒を加える方法による再結晶法により、さらにＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールの純度を上げることができる。
【００３４】
（２）Ｄ−キロ−イノシトールの分離精製方法（その１）
また、陰イオン交換樹脂を用いることにより、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを分離することが可能である。陰イオン交換樹脂は、強塩基性の樹脂で水酸基タイプ（ＯＨ-型）のものが好ましい。例えば、強塩基性陰イオン交換樹脂アンバーライト（登録商標）ＣＧ−４００を挙げることができる。
【００３５】
上記の２）（１）〜（３）で説明した方法１〜方法３で得たＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを含む中性成分を主成分とする組成物について陽イオン交換樹脂を用いたクロマト分離３）（１）の工程を行わず、直接陰イオン交換樹脂（ＯＨ-型）によるクロマト分離を行うことにより、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物を分取することができる。
【００３６】
金属塩型陽イオン交換樹脂を用いたクロマト分離により得られたＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物(上記３)（１）で説明した工程で得られたＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物）を、陰イオン交換樹脂を用いたクロマト分離で精製すれば、高純度のＤ−キロ−イノシトールを簡単に得ることができる。
【００３７】
（３）Ｄ−キロ−イノシトールの分離精製方法（その２）
また、Ｄ−キロ−イノシトールとミオ−イノシトールの水等に対する溶解度に差があることは公知であるので、その差を利用した分別結晶を行うことにより、上記３）（１）で説明した工程で得たＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールの組成物から、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノトールの成分比の異なる組成物を得ることもできる。
【００３８】
例えば、エタノールを用いた分別結晶化法を行い、結晶化した部分としてＤ−キロ−イノシトールとミオ−イノシトールを約１対４の割合で含む組成物と、溶液部分としてＤ−キロ−イノシトールとミオ−イノシトールを約４対１の割合で含む組成物を同時に得ることができる。
【００３９】
以下に本発明に係るＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の分取方法及びＤ−キロ−イノシトールの製造方法の実施例を示してより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
まず、本発明では、工業的に生産されているそば焼酎の副産物として出るそば焼酎蒸留かすを使用することが好適であるが、入手できない場合を想定し、そば焼酎蒸留かすの製造について、参考例として記載する。
【００４０】
参考例１
そば焼配蒸留かすの製造
そば米（外皮を取り除いたそばの実）９００ｇ（約６合）をイオン交換水２リットルに入れ、室温で２時間放置した。ざるで水を切った後、炊飯器に入れ炊く。炊飯の際の水の量は同量の白米を炊飯する場合よりやや多め（１割程度多め）とした。炊き上がったそば米を冷まし、煮沸滅菌した１０リットル・ホウロウ容器に入れ、市販米麹２枚（４００ｇ）をばらしてよく混ぜ合わせる。その後、酵母菌及び滅菌したイオン交換水２リットルを加え、室温で２週間発酵させた。発酵期間中は、雑菌が入らないように気を付けながら毎日２回よく攪拌を行った。
次に、発酵液を容器ごと加熱し、アルコールを蒸発させながら約１／２程度まで煮詰めることにより、そば焼酎蒸留かすを得た。
【００４１】
参考例２
イノシトール異性体及びその他糖類の分析方法
以下の実施例で得られた組成物等のサンプルは、高速液体クロマトグラファー（ＨＰＬＣ）で分析した。
高速液体クロマトグラフィーの分析条件は以下の通りである。
カラム：Ｗａｋｏｓｉｌ  ５ＮＨ２（４．６×２５０ｍｍ）
カラム温度：４０℃
検出器：ＲＩ  ＤＥＴＥＣＴＥＲ  ＲＩ−１５３０（日本分光株式会社）
注入量：２０μ１
溶媒：アセトニトリル−水＝４：１
流量：２ｍｌ／ｍｉｎ
【実施例１】
【００４２】
そば焼酎蒸留かすからのイノシトール組成物の製造１
この実施例１は、上記１）を経て、上記２）（２）の方法２を経て、上記３）（１）のＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製するようにした、係る組成物の分取方法を実施した実施例である。
【００４３】
参考例１で製造したそば焼酎蒸留かすを遠心し、上清５００ｍｌを１０倍に濃縮し、硫酸を０．１規定になるように加え、１００℃で３時間加熱した。得られた溶液を強酸性陽イオン交換樹脂デュオライト（登録商標）Ｃ−２０（Ｈ+型）２５０ｍｌを充填したカラムに通過させた。続いて、このカラムに７５０mlのイオン交換水を通過させて洗浄した。この通過液及び洗浄液を、強塩基性陰イオン交換樹脂デュオラィト（登録商標）Ａ１１６（ＯＨ-型）３００ｍｌを充填したカラムに通過させた。
【００４４】
続いてこのカラムに９００mlのイオン交換水を通過させて洗浄した。カラム処理操作は、室温で行った。得られた通過液及び水洗浄液を、エバポレーターを用いて減圧下で２５mlまで濃縮した。
その後、カルシウムイオン型陽イオン交換樹脂デュオライト（登録商標）Ｃ−２０（Ｈ+型）８００mlを充填したカラム及びイオン交換水を用いてクロマトグラフィーを行い、分画を行った。画分は１０mlずつの画分とした。得られた画分を高速液体クロマトグラフィーで分析し、イノシトールを多く含む画分のみを回収した。さらに同じカルシウムイオン型陽イオン交換樹脂を用いたクロマトグラフィー操作を繰り返した。これらの操作により、イノシトールを多く含む画分を得ることができた。その結果、Ｄ−キロ−イノシトールとミオ−イノシトールをほぼ同量含み、イノシトール純度約９０％のイノシトール組成物約０．４ｇを得た。
【実施例２】
【００４５】
そば焼酎蒸留かすからのイノシトール組成物の製造２
この実施例２は、上記実施例１で得た組成物にさらに、上記３）（１）で説明した再結晶法を実施した実施例である。
実施例１で得たイノシトール組成物にイオン交換水１mlを加え、エタノールを少しずつ、合計４ml加えることにより、結晶としてイノシトール純度９５％以上のイノシトール組成物約０．３ｇを得た。
【実施例３】
【００４６】
そば焼酎蒸留かすからのＤ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物の製造
この実施例３は、実施例２で得た組成物に対し、さらに上記３）（２）で説明したＤ−キロ−イノシトールの分離精製方法（その１）を実施した実施例である。
実施例２で得た組成物を強塩基性陰イオン交換樹脂アンバーライト（登録商標）ＣＧ−４００（ＯＨ−型）１００mlを充填したカラムを用いてクロマトグラフィーを行い、分画を行った。画分は２mlずつの画分とした。各画分をＨＰＬＣ分析し、Ｄ−キロ−イノシトールを５０％以上含む画分を回収し、Ｄ−キロ−イノシトールを主成分とする組成物を約０．１５ｇ得た。
【実施例４】
【００４７】
そば焼酎蒸留かすからのＤ−キロ−イノシトールの製造１
この実施例４は、実施例２で得た組成物に対し、さらに上記３）（２）で説明したＤ−キロ−イノシトールの分離精製方法（その１）を、Ｄ−キロ−イノシトールが高純度となるように実施した実施例である。
【００４８】
実施例２で得た組成物を強塩基性陰イオン交換樹脂アンバーライト（登録商標）ＣＧ−４００（ＯＨ-型）１００mlを充填したカラムを用いてクロマトグラフィーを行い、分画を行った。画分は２mlずつの画分とした。各画分をＨＰＬＣ分析し、Ｄ−キローイノシトールを９９％以上含む画分を回収し、９９％以上の純度のＤ−キロ−イノシトールを約０．１ｇ得た。
【実施例５】
【００４９】
そば焼酎蒸留かすからのイノシトール組成物の製造３
この実施例５は、上記２）の（３）で説明した方法３を実施し、上記３）（１）のＤ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールを主成分とする組成物を精製するようにした、係る組成物の分取方法を実施した実施例である。
【００５０】
参考例１で製造したそば焼酎蒸留かす５００mlを１０倍に濃縮し、強酸性陽イオン交換樹脂デュオライト（登録商標）Ｃ−２０（Ｈ+型）２５０ｍ１を充填し、カラム温度を８０℃に保持し、通液速度を１００ml／ｈｒ（ＳＶ＝０．４）として通過させた。続いて、このカラムに７５０mlのイオン交換水を通過させて洗浄した。この通過液及び洗浄液を、強塩基性陰イオン交換樹脂デュオライト（登録商標）Ａ１１６（ＯＨ-型）３００mlを充填したカラムに通過させた。続いて、このカラムに９００mlのイオン交換水を通過させて洗浄した。陰イオン交換樹脂処理操作は、室温で行った。得られた通過液及び水洗浄液中を、エバポレーターを用いて減圧下で２５mlまで濃縮した。
【００５１】
その後、カルシウムイオン型陽イオン交換樹脂デュオライト（登録商標）Ｃ−２０（Ｈ+型）８００mlを充填したカラムを用いてクロマトグラフィーを行い、分画を行った。得られた画分を高速液体クロマトグラフィーで分析し、イノシトールを多く含む画分のみを回収した。さらに、同じカルシウムイオン型陽イオン交換樹脂を用いたクロマトグラフィー操作を繰り返した。これらの操作により、イノシトールを多く含む画分を得ることができた。その結果、Ｄ−キロ−イノシトール及びミオ−イノシトールをほぼ同量含む、イノシトール純度約９０％のイノシトール組成物約０．４ｇを得た。
【実施例６】
【００５２】
そば焼酎蒸留かすからのＤ−キロ−イノシトールの製造２
この実施例６は、実施例５で得た組成物に対し、さらに上記３）（２）で説明したＤ−キロ−イノシトールの分離精製方法（その１）を実施した実施例である。
実施例５で得た組成物を強塩基性陰イオン交換樹脂アンバーライト（登録商標）ＣＧ−４００（ＯＨ-型）１００mlを充填したカラムを用いてクロマトグラフィーを行い、分画を行った。画分は２mlずつの画分とした。各画分をＨＰＬＣ分析し、Ｄ−キロ−イノシトールを９９％以上含む画分を回収し、９９％純度以上のＤ−キロ−イノシトールを約０．１ｇ得た。