(57)【要約】【課題】表皮細胞の分化過程を促進することにより乾燥肌、しわ、肌荒れ、アトピー性皮膚炎の改善及び予防する、製剤中での安定性、使用性の優れた化粧料を提供する。【解決手段】クロラッパタケの子実体、クロラッパタケの菌糸体培養物、クロラッパタケの子実体抽出物又はこれらの混合物を含有する化粧料。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロラッパタケの子実体、クロラッパタケの菌糸体培養物、クロラッパタケの子実体抽出物又はこれらの混合物を含有する化粧料。
【請求項２】
クロラッパタケの子実体、クロラッパタケの菌糸体培養物、クロラッパタケの子実体抽出物又はこれらの混合物を、組成物総量を基準として固形分換算で、０．０００００１〜２０質量％含有する請求項１記載の化粧料。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化粧料に関し、より詳細には、敏感肌、乾燥肌、しわ、肌荒れ、アトピー性皮膚炎などの改善及び予防効果に優れた化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の最外層に存在する角層は外界からの環境因子（紫外線、乾燥等）に対する防御壁として重要である。角層はブロックにたとえられる角質細胞とモルタルにたとえられる細胞間脂質によって構成されている。そして、角層は通常の水分移動の容易な細胞間マトリクスとは異なり、水分を通しにくい脂質ラメラ構造を有している。さらに、角層の物理的強度を維持するために角質細胞の細胞膜は不溶性角化膜という角層特異的な蛋白質群の架橋構造物に置き換わり、細胞内ケラチンもそれらとともに架橋され、物理的強度を維持している。
【０００３】
インボルクリンは角化不溶性膜の最外層に位置する構成蛋白質であり（非特許文献１参照）、他の角化不溶性膜の蛋白質、ロリクリン等と架橋されるだけでなく、細胞間脂質であるセラミドと共有結合をし、細胞間脂質ラメラ構造の形成にも非常に重要であると記載されている（非特許文献２参照）。また、インボルクリンは表皮細胞の分化過程で特異的に細胞膜の近傍に、角化不溶性膜形成の前段階に産生され（非特許文献３参照）、表皮細胞分化マーカーと考えられている。
【０００４】
また、過増殖を伴った荒れ肌、アトピー性皮膚炎等ではこの角層の物理的強度が異常となり、表皮細胞の不溶性角化膜形成不全が認められている（非特許文献４参照）。また、皺形成部分においても表皮細胞の分化不全が認められている（非特許文献５参照）。従って、表皮細胞の分化は角層の防御機能の獲得と密接な関係があり、非常に重要な過程である。
【０００５】
【非特許文献１】Steinert，PM.et al J Biol Chem 1995 Jul 28;270(30):17702-11
【非特許文献２】Nemes, Z.,Proc Natl Acad Sci U S A 1999 Jul 20;96(15):8402-7
【非特許文献３】Steinert，PM.et al J Biol Chem 1997 Jan 17;272(3):2021-30
【非特許文献４】Hirao,T. et alExp Dermatol 2001 Feb;10(1):35-44
【非特許文献５】Kobayashi, H., J Dermatol Sci 2001 Aug;27 Suppl 1:S19-25
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、これまで上述した角層の物理的強度の異常は外用による油剤、保湿剤によって改善されてきたが、インボルクリンの産生を促進して表皮分化を制御し、安全性、使用性の優れた化粧料はこれまで報告されていない。
【０００７】
従って、本発明の目的は、表皮細胞の分化過程を促進することにより乾燥肌、しわ、肌荒れ、アトピー性皮膚炎の改善及び予防する、製剤中での安定性、使用性の優れた化粧料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記の目的を達成すべく鋭意研究した結果、アンズタケ属クロラッパタケの子実体、その菌糸体培養物、その子実体抽出物又はこれらの混合物が、高い安全性と優れたインボルクリン産生促進作用を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００９】
すなわち、本発明は、クロラッパタケの子実体、クロラッパタケの菌糸体培養物、クロラッパタケの子実体抽出物又はこれらの混合物を含有する化粧料に関する。
【００１０】
また、その含有量は、組成物総量を基準として固形分換算で、０．０００００１〜２０質量％であることが好ましい。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、角層直下の顆粒層に存在する表皮細胞に働きかけ、角化不溶性膜の構成蛋白であるインボルクリンを産生促進し、表皮細胞の分化を促進することで、敏感肌、乾燥肌、しわ、肌荒れ、アトピー性皮膚炎の改善および予防が期待される、製剤中での安定性、使用性に優れた化粧料を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明において用いられるクロラッパタケ（Craterellus cornucopioides ( L.: Fr.) Pers.）は、アンズタケ属の食用キノコであって、広く市場に流通しているものである。
【００１３】
本発明の化粧料には、クロラッパタケの子実体、クロラッパタケの菌糸体培養物、クロラッパタケの子実体抽出物又はこれらの混合物を用いることができる。これらのうち、化粧料への配合時の取り扱いの点から、好ましくはクロラッパタケの子実体抽出物、菌糸体培養物が、更に好ましくはクロラッパタケの子実体抽出物が挙げられる。
【００１４】
上述のクロラッパタケの子実体を配合するには、該子実体を好ましくは、通常の乾燥手段、例えば減圧乾燥、噴霧乾燥又は凍結乾燥等により乾燥後、０．０１〜１ｍｍの径に破砕した子実体を、所望の化粧料に混合する方法などにより配合することができる。
【００１５】
上述のクロラッパタケの子実体の抽出物を製造する方法としては、例えばクロラッパタケの子実体の減圧乾燥、噴霧乾燥又は凍結乾燥等による乾燥物や新鮮物に対し、重量比で５〜３０倍の抽出溶剤を加え、通常１５〜５０℃で２４時間〜１週間浸漬して抽出液を得る方法などが挙げられる。また、抽出液をろ過又は遠心分離して不溶物を除去し、次いで通常の濃縮手段、例えば減圧濃縮等して濃縮抽出物として得ることもできる。更に、これら抽出物を上述の乾燥手段により乾燥末として得る方法等が挙げられる。
【００１６】
上述の抽出物を製造する際に用いる抽出溶剤としては、例えば、水や、メタノール、エタノール、１，３−ブチレングリコール等の水溶性有機溶剤、又はこれらの混合溶剤が挙げられる。更に酢酸エチル等の極性有機溶媒によって再抽出してもよい。または、クロロフォルム等の非極性溶媒処理によって疎水性物質を除いたあと上記の方法で濃縮することもできる。
【００１７】
上述のクロラッパタケの菌糸体培養物を製造する方法としては、例えばグルコース、ペプトン、酵母抽出物等を含み、必要に応じてリン、マンガン、マグネシウム、カルシウム、鉄等のミネラル成分や穀類等を含む通常の液体培地又は固体培地等にて培養した後、培養物を例えば、分配、吸着、分子ふるい、遠心分離、イオン交換、各種カラムクロマトグラフィー等を使用した公知の精製法により精製する方法等により得ることができる。この際培養条件は、培地の種類等に応じて、常法に従い適宜選択することができるが、好ましくはｐＨ４〜９、温度１５〜３５℃で、３〜６０日間培養するのが望ましく、光は特には
必要としない。また培地へ植菌する際のクロラッパタケの菌糸体の生菌体量は、１〜１００ｍｇであるのが好ましい。
【００１８】
本発明の化粧料へのクロラッパタケの子実体、クロラッパタケの菌糸体培養物、クロラッパタケの子実体抽出物又はこれらの混合物の含有量は、化粧料の剤形、形態、又はクロラッパタケの子実体、菌糸体培養物、又は子実体抽出物の選択によって、適宜変更されるが、インボルクリン産生促進作用を有するに十分で、しかも色や臭いが出にくいことから、好ましくは組成物総量を基準として乾燥固形分換算で、０．０００００１〜２０質量％（以下、％と記す）であり、更に好ましくは０．０００００１〜１０％である。
【００１９】
特に、クロラッパタケの子実体抽出物を用いた場合の含有量は、組成物総量を基準として乾燥固形分換算で、０．０００００１〜１０％とするのが好ましく、特に好ましくは０．００００２５〜５％である。
【００２０】
本発明の化粧料の剤形としては、特に限定されないが、クリーム、乳液、化粧水、美容液、パック等の基礎化粧料、口紅、ファンデーション等のメールアップ化粧料、洗顔料等の洗浄料、シャンプー、リンス、育毛剤等の毛髪化粧料、入浴料、医薬部外品、及び医薬品などに応用が可能である。また、その形態は、特に限定されないが、溶液系、可溶化系、乳化系、粉末分散系、水−油二層系、水−油−粉末三層系、軟膏、ゲル、エアゾール等、任意の形態とすることができる。
【００２１】
本発明の化粧料には、本発明の効果を損なわない範囲において、既知の着色顔料、防腐剤、油剤、アルコール、界面活性剤、増粘剤、薬効成分等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００２２】
例えば、タール系色素、酸化鉄等の着色顔料、パラベン、フェノキシエタノール等の防腐剤、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、環状シリコン等のシリコン油、パラフィン、ワセリン等の炭化水素類、オリーブスクワラン、米スクワラン、米胚芽油、ホホバ油、ヒマシ油、紅花油、オリーブ油、マカデミアナッツ油、ヒマワリ油等の植物油、ミツロウ、モクロウ、カルナバロウ等のロウ類、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸セチル、イソステアリン酸イソステアリル、ミリスチン酸イソプロピル等のエステル油、エタノール等の低級アルコール類、セタノール、ベヘニルアルコール、ステアリルアルコール、長鎖分岐脂肪族アルコール等の高級アルコール類、コレステロール、フィトステロール、分岐脂肪酸コレステロールエステル、マカデミアナッツ脂肪酸フィトステリルエステル等のステロール類及び誘導体、硬化油等の加工油類、ステアリン酸、ミリスチン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、イソ型長鎖脂肪酸、アンテイソ型長鎖脂肪酸等の高級脂肪酸、リモネン、水素添加ビサボロール等のテルペン類、トリカプリル・カプリン酸グリセリル、２−エチルヘキサン酸グリセリル、トリイソ型長鎖脂肪酸グリセリル、トリパルミチン酸グリセリル等のトリグリセリド、セチル硫酸ナトリウム、Ｎ−ステアロイル−Ｌ−グルタミン酸塩等の陰イオン界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン多価アルコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、多価アルコール脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、変性シリコン、蔗糖エステル等の非イオン界面活性剤、テトラアルキルアンモニウム塩等の陽イオン界面活性剤、ベタイン型、スルホベタイン型、スルホアミノ酸型等の両性界面活性剤、レシチン、リゾフォスファチジルコリン、セラミド、セレブロシド等の天然系界面活性剤、酸化チタン、酸化亜鉛等の顔料、ジブチルヒドロキシトルエン等の抗酸化剤、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、硫酸ナトリウム、硝酸カリウム、硫酸ナトリウム、メタ珪酸ナトリウム、塩化カルシウム等の無機塩類、クエン酸ナトリウム、酢酸カリウム、琥珀酸ナトリウム、アスパラギン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、ジクロロ酢酸、メバロン酸、グリチルリチン酸等の有機酸及びその塩、塩酸エタ
ノールアミン、硝酸アンモニウム、塩酸アルギニン、ジイソプロピルアミン塩、尿素、デカルボキシカルノシン等の有機アミン類及びその塩、エデト酸等のキレート剤、キサンタンガム、カルボキシビニルポリマー、カラギーナン、ペクチン、アルキル変性カルボキシビニルポリマー、寒天等の増粘剤、水酸化カリウム、ジイソプロパノールアミン、トリエタノールアミン等の中和剤、ヒアルロン酸、コラーゲン、コンドロイチン硫酸等の生体高分子、グルコサミン、Ｎ−アセチルグルコサミン及びそのオリゴマー、クリタケ等の培養生成物、クリタケ、クロカワ、カミツレ、アロエ、モモ、カロット、スギナ、クワ、桃の葉、セージ、ビワ葉、キュウカンバー、セイヨウキズタ、ハイビスカス、ウコン、ローズマリー、ピーカンナッツ、甘草、火棘、椿種子、茶の実、モッキン、アセンヤク、チョウジ、セイヨウサンザシ等の植物抽出物、胎盤抽出物、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルフォン酸塩等の紫外線吸収剤、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール、マルビトール、ジグリセリン、ラフィノース等の多価アルコール、セリン、スレオニン、γ−アミノ酪酸、β−ヒドロキシ−γ−アミノ酪酸等のアミノ酸、Ｎ−メチル−Ｌ−セリン、ザルコシン等のアミノ酸誘導体、アスコルビン酸、ナイアシン、ビオチン、トコフェロール等のビタミン類及びアスコルビン酸硫酸エステル塩、アスコルビン酸燐酸エステル塩、ニコチン酸トコフェロール等のビタミン誘導体等を本発明の目的を達成する範囲内で適宜配合することができる。
【実施例】
【００２３】
以下、試験例、処方例により詳細に説明する。
【００２４】
製造例１(クロラッパタケ子実体の５０％エタノール抽出物の製造方法)
クロラッパタケの子実体乾燥物１００ｇをミルにて粉砕し、５０％エタノール５００ｍＬにて１週間抽出を行った。これを濾紙に通し、更に濾過孔径０．２２μｍの膜（ミリポア社製）で濾過してクロラッパタケ子実体の５０％エタノール抽出物得た。
【００２５】
製造例２（クロラッパタケ子実体のエタノール抽出物の製造方法）
製造例１で用いた５０％エタノール５００ｍＬをエタノール５００ｍＬに変更した以外は、製造例１と同様の製法にてクロラッパタケ子実体のエタノール抽出物得た。
【００２６】
［試験例］
ヒト正常表皮細胞（Ｅｐｉｄｅｒｃｅｌｌ／新生児包皮、クラボウ社製）を２４穴プレートに１×１０４／ウェルの濃度で播種し、ＭＣＤＢ１５３ＨＡＡ（和光純薬工業社製）をベースとし、ハイドロコーチゾン（０．５μｍｏｌ／Ｌ）、エタノールアミン（０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）、ホスホエタノールアミン（０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）、インシュリン（５μｇ／ｍＬ）、ＥＧＦ（上皮細胞成長因子：１０ｎｇ／ｍＬ）、およびＢＰＥ（牛脳下垂体抽出液（クラボウ社製）:４μＬ／ｍＬ）を添加した培地により培養した。４日間培養後、上記よりＢＰＥを抜き、５０％エタノールで抽出したクロラッパタケ抽出物（製造例１）を２．５×１０−６％（試験例１）、２．５×１０−５％（試験例２）、２．５×１０−４％（試験例３）加えた培地に交換して１日間培養した。培養後、ＰＢＳでウェルを２回洗浄した後、インボクリン  ELISA ASSAY （Biomedical Technologies社製 カタログＮｏ．BT-650）を使用してインボルクリン量を定量した（ｎ＝４）。結果を表１に記載する。
また、クロラッパタケ抽出物を含有しない試料を比較例１とした。
【００２７】
［表１］
クロラッパ抽出物  インボルクリン量    Ｓ．Ｅ．        Ｐ
（×１０−６％）    （ｎｇ／ｍＬ）
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
比較例１      −            ０．２２        ０．０１１    −
試験例１      ２．５        ０．２２        ０．００５    ０．９９<
試験例２    ２５            ０．２４        ０．００７    ０．１６
試験例３  ２５０            ０．２５        ０．００６    ０．０１
【００２８】
表１から、クロラッパタケ抽出物はヒト正常表皮細胞のインボルクリンの産生を促進し、分化を促進することが明らかである。
【００２９】
以下、本発明の処方例を示す。
処方例１〜３（スキンクリーム）
下記の組成でそれぞれを配合し、スキンクリームを調製した。
（１）組成                            処方例１    処方例２    処方例３
（Ａ）
ステアリン酸                            １          １          −
イソステアリン酸                        −          −          １
モノステアリン酸グリセリン              ２          ２          ２
ベヘニルアルコール                      ２          ２          ２
サラシミツロウ                          １          １          −
ミリスチン酸セチル                      １          １          １
セスキオレイン酸ソルビタン              １          １          １
Ｎ−ステアロイルフィトスフィンゴシン    ０．１      ０．１      ０．１
水素添加レシチン                        ０．１      ０．１      ０．１
植物スクワラン                          ５          ５          ５
ミリスチン酸オクチルドデシル            ５          ５          ５
（Ｂ）
クロラッパタケ抽出物
(５０％エタノール抽出物)                ０．００１  ０．０１    ０．1
１，３−ブチレングリコール              ５        １０          ５
濃グリセリン                            ５          ５          ５
パラオキシ安息香酸メチル                ０．２      ０．２      ０．２
Ｎ−アセチルグルコサミンオリゴマー      ０．１      ０．１      ０．１
アスコルビン酸燐酸エステルＮａ塩        ０．２      ０．２      ０．２
γ−アミノ酪酸                          ０．１      ０．１      ０．１
Ｎ−ステアロイルグルタミン酸Ｎａ        ０．２      ０．２      ０．２
アルキル変性カルボキシビニルポリマー    ０．０５    ０．０５    ０．００５
ニコチン酸アミド                        ０．１      ０．１      ０．１
ザルコシン                              ０．１      ０．１      ０．１
香料                                    ０．０２    ０．０２    ０．０２
精製水                                  残  量      残  量      残  量
合計                                    １００      １００      １００
（２）調製法
（Ａ）成分及び（Ｂ）成分を各々８０℃に加熱溶解した後混合して、攪拌しつつ冷却し、３０℃まで冷却して、スキンクリームを調製した。
【００３０】
処方例４〜６（ローション）
下記の組成でそれぞれを配合し、ローションを調製した。
（１）組成                            処方例４    処方例５    処方例６
アラメ抽出物
（５０％エタノール抽出物）            ０．１      １          ５
１，３−ブチレングリコール            ５          −          ５
ジプロピレングリコール                −          ５          ５
ラフィノース                          １          １          １
エタノール                            −          −          １
フェノキシエタノール                  ０．２      ０．２      ０．２
ペクチン                              −          −          ０．０５
キサンタンガム                        −          −          ０．１
クエン酸ナトリウム                    ０．０５    ０．０５    ０．０５
クロラッパタケ抽出物
（エタノール抽出物）                  ０．１      ０．１      ０．１
ジイソプロピルアミンジクロロ酢酸      ０．２      ０．２      ０．２
γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸        ０．２      ０．２      ０．２
ヒアルロン酸ナトリウム                ０．００１  ０．００１  ０．００１
グリチルリチン酸ジカリウム            ０．２      ０．２      ０．２
クリタケ抽出物（エタノール抽出物）    ０．０５    ０．０５    ０．０５
デカルボキシカルノシン塩酸塩          ０．０５    ０．０５    ０．０５
香料                                  ０．０２    ０．０２    ０．０２
精製水                                残  量      残  量      残  量
合計                                  １００      １００      １００
（２）調製法
各成分をそれぞれ混合溶解し、攪拌して、ローションを調製した。
【００３１】
処方例７〜９（ジェル）
下記の組成でそれぞれを配合しジェルを調製した。
（１）組成                          処方例７    処方例８    処方例９
（Ａ）
デカメチルシクロペンタシロキサン    １０        １０        １０
イソステアリン酸イソステアリル        １          −          −
オリーブ油                            −          １          −
マカデミアナッツ油                    −          −          １
ユーカリ油                            ０．１      −          ０．１
ヘキシルデカノール                    １          ０．１      −
ＰＯＥ硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）    ２          ２          ２
球状シリコン粉体（注１）              １          １          ５
（Ｂ）
クロラッパタケ抽出物
（５０％エタノール抽出物）            ０．００１  ０．０１    ０．１
１，３−ブチレングリコール            ５        １０          ５
ソルビトール液                        ３          ３          ３
ポリエチレングリコール４０００        １          １          １
カルボキシビニルポリマー              ０．２      ０．２      ０．２
糖セラミド（注２）                    ０．１      ０．１      ０．１
パラオキシ安息香酸メチル              ０．２      ０．２      ０．２
メバロノラクトン                      ０．５      ０．５      ０．５
エデト酸二ナトリウム                  ０．０２    ０．０２    ０．０２
水酸化カリウム                        ０．０５    ０．０５    ０．０５
香料                                  ０．０２    ０．０２    ０．０２
精製水                                残  量      残  量      残  量
合計                                  １００      １００      １００
注１：東芝シリコーン社製  トスパール  １４５Ａ
注２：紀文フードケミカル社製  バイオセラミド
（２）調製法
（Ａ）成分及び（Ｂ）成分を各々６０℃に加熱溶解した後混合して、攪拌しつつ冷却し、３０℃まで冷却して、クリームを調製した。
【００３２】
処方例１０〜１２（親油クリーム）
下記の組成でそれぞれを配合し、親油クリームを調製した。
（１）組成                      処方例１０    処方例１１    処方例１２
（Ａ）
共変性シリコン（注３）              ２            ２            ２
ＰＯＥ変性シリコン分散液（注４）    −            ２            −
スクワラン                          −            −          １０
デカメチルシクロペンタシロキサン  １５          ２０          １０
メチルポリシロキサン                ５            ２            ３
長鎖分岐脂肪酸コレステリル（注５）  −            −            ３
シリコンエラストマー分散液（注６）  ５            ２            −
（Ｂ）
クロラッパタケ抽出物
（５０％エタノール抽出物）          ０．００１    ０．１        １
塩化ナトリウム                      １            １            １
ジプロピレングリコール              ５            ５            ５
濃グリセリン                        ５            ５            ５
ラフィノース                        １            １            １
パラオキシ安息香酸メチル            ０．３        ０．３        ０．３
甘草抽出物（エタノール抽出物）      ０．１        ０．１        ０．１
Ｎ−メチル−Ｌ−セリン              ０．５        ０．５        ０．５
香料                                ０．０２      ０．０２      ０．０２
精製水                              残  量        残  量        残  量
合計                                １００        １００        １００
注３：ゴールドシュミット社製  ABIL  EM90
注４：東レダウコーニングシリコーン社製  シリコンBY22-008
注５：日本精化社製  YOFCO  CLE-NH
注６：東レダウコーニングシリコーン社製  トレフィル
（２）調製法
（Ａ）成分及び（Ｂ）成分を各々６０℃に加熱溶解した後混合して、攪拌しつつ冷却し、３０℃まで冷却して、親油クリームを調製した。
【００３３】
処方例１３〜１４（入浴剤）
下記の組成でそれぞれを配合し、入浴剤を調製した。
（１）組成                    処方例１３  処方例１４
硫酸ナトリウム                  ８５        ８５
香料および界面活性剤            適量        適量
有機色素                        適量        適量
クロラッパタケ抽出物
（５０％エタノール抽出抽出物）    １          ３
メタケイ酸ナトリウム              １          １
炭酸水素ナトリウム              残量        残量
合      計                １００      １００
（２）調製法
各成分を混合し、入浴剤を調製した。尚、この入浴剤は使用時に約３０００倍に希釈される。
【００３４】
以上の処方例１〜１４において４０℃２ヶ月経過後においても何ら変質は生じなかった。また、本発明の化粧料は１ヶ月間の適応試験において、いずれも荒れ肌の改善効果が認められ、使用性（滑らかさ、しっとり感、ハリ、ツヤ）においても優れた効果を示し、安全性も良好なものであった。
【００３５】
尚、上記実施例中で用いた香料は、下記香料処方のものである。
【００３６】
【表１】
2005089389.tif 000002