(57)【要約】【課題】皮膚のしわやたるみは、紫外線の暴露によって皮膚中や皮膚表面の皮脂中で発生する活性酸素を介した細胞外マトリックス、すなわちコラーゲン・エラスチン等の量的・質的変化が主要な要因の一つであり、コラーゲン・エラスチン等を量的に増加させ、質的に改善することが皮膚の老化に対して有効であることが認識されている。このコラーゲンを量的に増加させることにより、皮膚のシワ改善及びシワ予防することを課題とした。【解決手段】オレアネン型トリテルペン、特にアルジュノール酸、及びアルジュノール酸誘導体により、前記課題が解決できる。【選択図】「なし」【特許請求の範囲】
【請求項１】
オレアネン型トリテルペンを含有することを特徴とする皮膚外用剤、及び化粧料。
【請求項２】
オレアネン型トリテルペンが、アルジュノール酸であることを特徴とする請求項１に記載の皮膚外用剤、及び化粧料。
【請求項３】
オレアネン型トリテルペンが、アルジュノール酸誘導体であることを特徴とする請求項１に記載の皮膚外用剤、及び化粧料。
【請求項４】
オレアネン型トリテルペンが、アルジュノール酸、及びアルジュノール酸誘導体から選択される１種、又は２種以上であることを特徴とする請求項１に記載の皮膚外用剤、及び化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚におけるコラーゲン産生を促進し、シワ改善効果及びシワ予防効果を有する皮膚外用剤、及び化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の老化、すなわち皮膚のしわやたるみは、近年、紫外線の暴露によって皮膚中や皮膚表面の皮脂中で発生する活性酸素を介した細胞外マトリックス、すなわちコラーゲン・エラスチン等の量的・質的変化が主要な要因の一つであることが見出されて、コラーゲン・エラスチン等を量的に増加させ、質的に改善することが皮膚の老化に対して有効であることが認識されるに至っている。
【０００３】
一方、アルジュノール酸（Ａｒｊｕｎｏｌｉｃ  Ａｃｉｄ：２α，３β，２３−ｔｒｉｈｙｄｒｏｘｙｏｌｅａｎ―１２―ｅｎ−ｏｉｃ  ａｃｉｄ）を代表的な例とするオレアネン型トリテルペンは、植物由来の安全性の高い抗酸化剤として利用されている。具体的には、Ｔｅｒｍｉｎａｌｉａ  Ａｒｊｕｎａ、Ｍｉｔｒａｇｙｎａ  Ｃｉｌｉａｔａ、Ｔｒｉｓｔａｎｉａ  Ｃｏｎｆｅｒｔａ、Ｐｓｉｄｉｕｍ  Ｇｕａｉｊａｖａ、Ｃｏｃｈｌｏｓｐｅｒｍｕｍ  Ｔｉｎｃｔｏｒｉｕｍ等の植物由来物質として、主に抗酸化剤に利用されている（非特許文献１）。
【０００４】
しかしながらオレアネン型トリテルペンであるアルジュノール酸をコラーゲン・エラスチン等の産生促進剤・質的改善剤として着目してその効果を研究した報告は見られない。
【非特許文献１】ＡＲＪＵＮＯＬＩＣ  ＡＣＩＤ／サビンサ社（米国）カタログ、２００１年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
安全性の高い、コラーゲンの産生促進剤を見出し、有効なシワ改善剤及びシワ予防剤を提供することを課題とした。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者等はオレアネン型トリテルペン、特にアルジュノール酸がコラーゲン・エラスチン等の産生促進作用・質的改善作用としての効果を見出すべく鋭意研究した結果、きわめて有効なコラーゲン・エラスチン等の産生促進作用・質的改善作用を有することを見出した。
【０００７】
またこれらのオレアネン型トリテルペンは、植物抽出物であり、安全性の高いコラーゲン・エラスチン等の産生促進剤・質的改善剤であることを確認するに至り、本発明を完成した。
すなわち本発明は、以下の構成により達成することが出来る。
（１）オレアネン型トリテルペンを含有することを特徴とする皮膚外用剤、及び化粧料。
（２）オレアネン型トリテルペンが、アルジュノール酸であることを特徴とする（１）に記載の皮膚外用剤、及び化粧料。
（３）オレアネン型トリテルペンが、アルジュノール酸誘導体であることを特徴とする（１）に記載の皮膚外用剤、及び化粧料。
（４）オレアネン型トリテルペンが、アルジュノール酸、及びアルジュノール酸誘導体から選択される１種、又は２種以上であることを特徴とする（１）に記載の皮膚外用剤、及び化粧料。
【０００８】
本明細書において、アルジュノール酸誘導体とは以下に定義される化合物をいう。
すなわち、本明細書においてアルジュノール酸誘導体とは、アルジュノール酸の脂肪酸残基と、炭素数２〜２２の直鎖、分岐、若しくは二重結合を持つアルコールとのエステルであることをいう。
また本明細書においてアルジュノール酸誘導体とは、アルジュノール酸の任意の一以上の水酸基と、炭素数２〜２２の直鎖、分岐、若しくは二重結合を持つ脂肪酸とのエステルであることをいう。
また更に本明細書においてアルジュノール酸誘導体とは、前述のアルジュノール酸の脂肪酸残基とアルコールとのエステルであり、かつ、任意の一以上の水酸基と、炭素数２〜２２の直鎖、分岐、若しくは二重結合を持つ脂肪酸とのエステルをいう。
【発明の効果】
【０００９】
オレアネン型トリテルペン、特にアルジュノール酸はヒト皮膚細胞中で有効にコラーゲン産生を促進し、更にオレアネン型トリテルペン、特にアルジュノール酸を含有する皮膚外用剤及び化粧料は、肌のシワ改善に対する改善効果が顕著であり、ヒト使用試験において有意な抗老化作用を示した。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明で用いるオレアネン型トリテルペンであるアルジュノール酸（Ａｒｊｕｎｏｌｉｃ  Ａｃｉｄ）は、市販のもの（例えばＡｒｊｕｎｏｌｉｃ  Ａｃｉｄ（製造：サビンサ社（米国）、販売：日光ケミカルズ社））をそのまま用いることが出来る。
【００１１】
本発明で用いるオレアネン型トリテルペンであるアルジュノール酸誘導体は、アルジュノール酸の脂肪酸残基と、炭素数２〜２２の直鎖、分岐、若しくは二重結合を持つアルコールとのエステルであっても良い。
また本発明で用いるオレアネン型トリテルペンであるアルジュノール酸誘導体は、アルジュノール酸の任意の一以上の水酸基と、炭素数２〜２２の直鎖、分岐、若しくは二重結合を持つ脂肪酸とのエステルであっても良い。
また本発明で用いるオレアネン型トリテルペンであるアルジュノール酸誘導体は、前記のアルコールとのエステルであり、かつ、任意の一以上の水酸基と、前記の脂肪酸とのエステルであっても良い。
また更に、本発明で用いるオレアネン型トリテルペンであるアルジュノール酸、及びアルジュノール酸誘導体はこれらの混合物であってもかまわない。
【００１２】
本発明で用いるアルジュノール酸、及びアルジュノール酸誘導体は０．００１重量％〜５重量％で有効に機能を発揮させることができ、更に好ましくは０．０１重量％〜２重量％の範囲が望ましい。
【００１３】
本発明で利用される皮膚老化防止剤、皮膚外用剤、あるいは化粧料の形態は特に制限されることは無く、クリーム、乳液、ローション、メイクアップ化粧料（ファンデーション等）等に用いることができるが、用途としては皮膚老化防止化粧料、あるいは紫外線防止化粧料に有効に用いることができる。
【００１４】
本発明の皮膚外用剤には、上記必須成分のほか本発明の効果を損なわない範囲で化粧品、医薬部外品などの皮膚外用剤に配合される成分として動植物油由来の硬化油、天然由来のロウ、炭化水素系の油相成分、動植物由来の油相成分、シリコーン系の油相成分、フッ素系の油相成分、高級アルコール、増粘剤、紫外線吸収剤、粉体、顔料、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、多価アルコール、糖、高分子化合物、トコトリエノール類以外の生理活性成分、経皮吸収促進剤、溶媒、酸化防止剤、香料、防腐剤等を配合することができる。
（正常ヒト真皮線維芽細胞によるコラーゲン産生促進効果の評価）
先ず、アルジュノール酸による正常ヒト真皮線維芽細胞のコラーゲン産生促進効果を示す。
アルジュノール酸としては、市販のものをそのまま用いた。
【００１５】
アルジュノール酸は培地で各濃度に希釈し、下記の方法により試験を行った。
（細胞培養法）
正常ヒト真皮線維芽細胞は、２．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で９６穴マイクロプレートに播種した。２４時間１％牛胎児血清（ＦＢＳ）含有ダルベッコ変法イーグルＭＥＮ培地（ＤＭＥＭ）にて培養後、アルジュノール酸を含有する０．５％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭに交換した。４８時間培養後培養上清を採取し、Ｉ型コラーゲンをＩ型コラーゲン定量法を用いて定量した。同時にＢＣＡ法を用いて細胞のタンパク量を定量した。Ｉ型コラーゲン産生促進作用を示す化合物のポジティブコントロールには２００μＭアスコルビン酸リン酸マグネシウムを用いた。
（Ｉ型コラーゲン定量法）
培養上清をＳＵＭＩＬＯＮ  Ｈタイプ  マルチウェルプレートに添加し、一晩４℃に放置することによりウェル底面にコーティングした。１％牛血清アルブミン（ＢＳＡ）溶液を用いてブロッキング処理後、定法に従いＥＬＩＳＡを行った。一次抗体には４０００倍希釈した抗ヒトＩ型コラーゲン抗体（ウサギ）、二次抗体には１００倍希釈したヒストファイン（ｓｉｍｐｌｅ  ｓｔａｉｎ  ＰＯ（ウサギ））を用いた。０．３ｍｇ／ｍｌ  ２，２’−Ａｚｉｎｏｂｉｓ（３−ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｔｈｉａｚｏｌｉｎｅ−６−ｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）ｄｉａｍｍｏｎｉｕｍ  ｓａｌｔ溶液にて発色後、４０５ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダーにて測定した。コラーゲン量は、同じプレートで作成した検量線から算出した。単位タンパク量あたりのコラーゲン量を算出し、これをコラーゲン産生量とした。
（コラーゲン産生効果の評価）
測定は、アルジュノール酸の一点の濃度につき三回の測定を行い、得られたデータの有意差検定は、スチューデント（Ｓｔｕｄｅｎｔ）のｔ−検定によった。ｐ（ｔ−ｔｅｓｔ）はスチューデント（Ｓｔｕｄｅｎｔ）ｔ−検定を表し、＊＊はｐ<０．０１を、＊はｐ<０．０５を表す。
評価結果を表１に示す。
【００１６】
【表１】
2005089311.tif 000002
表１から明らかなように、アルジュノール酸は有意にコラーゲン産生促進効果を有することが示され、オレアネン型トリテルペンのコラーゲン産生促進効果が分かる。
【実施例】
【００１７】
以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明の技術的範囲がこれらに限定されるものではない。なお配合量は重量％で現す。
【００１８】
アルジュノール酸を実際の化粧品処方に適用した場合のシワ改善効果を示す。
（シワ改善効果）
アルジュノール酸の、シワ改善効果を、実施例１〜４、比較例１の保湿アイクリームの処方を用いて示す。
実施例１〜４、比較例１：保湿アイクリーム
（処方）
油相                                                          重量％
ポリオキシエチレン（２０）ポリオキシプロピレン（４）
セチルエーテル      １．０
ポリオキシエチレン（５０）硬化ヒマシ油                      １．０
自己乳化型モノステアリン酸グリセリル                        １．０
ステアリン酸                                                ３．０
ベヘニルアルコール                                          ３．０
ミツロウ                                                    ３．０
スクワラン                                                １３．０
２−エチルヘキサン酸セチル                                  ７．０
ホホバ油                                                    ５．０
ポリエチレングリコール１５００                              ５．０
メチルポリシロキサン                                        ０．２
防腐剤                                                      適量
アルジュノール酸                                            表２に記載の量
水相
アルゲコロイド２重量％水溶液                              １０．０
精製水                                                      残部
（調製方法）
油相成分、水相成分ともに８０℃で加温溶解し、油相成分を水相成分に攪拌しながら、徐々に加えて乳化する。撹拌しながら冷却して組成物を得た。
【００１９】
（シワ改善効果の評価方法）
年齢３０〜５０歳の健常な女性１０名を被験者とし、実施例１〜７、及び比較例１の化粧料を目元の皮膚に毎日、３月間使用した後の、肌のシワ対する改善効果について調べた。
【００２０】
（シワ改善効果の判定基準）
著効：肌のシワが著しく改善された。
有効：肌のシワがかなり改善された。
やや有効：肌のシワが若干改善された感じがする。
効果なし：肌のシワの改善効果は全く見られない。
【００２１】
（シワ改善効果の評価基準）
◎：被験者の著効、有効、やや有効を示す割合が８０％以上。
○：被験者の著効、有効、やや有効の示す割合が５０％以上８０％未満。
△：被験者の著効、有効、やや有効の示す割合が３０％以上５０％未満。
×：被験者の著効、有効、やや有効の示す割合が３０％未満。
【００２２】
【表２】
2005089311.tif 000003
表２に示されるように、アルジュノール酸を含有する実施例１〜４の保湿アイクリームは、肌のシワに対する改善効果が顕著であり、アルジュノール酸、すなわちオレアネン型トリテルペンのコラーゲン産生促進効果に対する有効性が分かる。
【００２３】
以下に、さらに、本発明の化粧品の処方例を示す。
（実施例５）
【００２４】
サンスクリーンクリーム
（処方）
Ａ相                                                          重量％
縮合リシノール酸ヘキサグリセリル                            １．０
親油処理微粒子酸化チタン                                    ５．０
ピバリン酸２−オクチルドデシル                              ８．０
トリ（カプリル酸カプリン酸）グリセリル                      ３．０
メチルフェニルポリシロキサン                                ７．０
デカメチルシクロペンタシロキサン                            ２．０
Ｂ相
アルジュノール酸                                            ０．５
セタノール                                                  ２．０
ベヘニルアルコール                                          １．０
ペンタステアリン酸デカグリセリル                            ０．４
ステアロイル乳酸ナトリウム                                  ０．１
パラメトキシケイ皮酸２−エチルヘキシル                      ６．０
４−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メトキシジベンゾイルメタン        ２．０
Ｃ相
モノイソステアリン酸デカグリセリル                          ３．０
キサンタンガム                                              ０．３
精製水                                                      残部
（調製方法）
予めＡ相成分を８０℃に加温してホモミキサーで６，０００回転／分の条件で１０分撹拌する。続いて８０℃に加温したＢ相成分を、Ａ相成分に加えて均一としてＡ・Ｂ混合成分を得る。Ｃに撹拌しながら徐々に加え、乳化し、８０℃を維持しながらホモミキサーで５，０００回転／分で７分間撹拌する。パドル撹拌しながら冷却し、３５℃〜３０℃で撹拌を止め、放置する。
（実施例６）
【００２５】
乳液
（処方）
Ａ相                                                          重量％
アルジュノール酸                                            ０．５
モノステアリン酸ポリオキシエチレン（５）グリセリル          １．０
親油型モノステアリン酸グリセリル                            １．０
ワセリン                                                    ４．０
スクワラン                                                １０．０
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリトリトール              ３．０
２−エチルヘキサン酸セチル                                  ３．０
ホホバ油                                                    １．０
ベヘニルアルコール                                          ０．４
ポリエチレングリコール１５００                              ２．０
ポリエーテル変性シリコーン                                  ０．４
ステアリン酸カリウム                                        ０．４
Ｂ相
グリセリン                                                  ５．０
ジプロピレングリコール                                      ４．０
マルチトール（７５％水溶液）                                １．０
Ｌ−アルギニン（１％水溶液）                                １．５
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                  ０．１
防腐剤                                                      適量
精製水                                                      残部
Ｃ相
カルボキシビニルポリマー                                    ０．１
精製水                                                    １０．０
（調製方法）
実施例１〜４、比較例１と同様の方法で調製した。
（実施例７）
【００２６】
エモリエントクリーム
（処方）
油相                                                          重量％
アルジュノール酸                                            ０．３
α−トコフェロール                                          ０．３
水素添加大豆リン脂質（１）                                  １．０
ポリオキシエチレン４０モノステアリン酸                      ２．０
自己乳化型モノステアリン酸グリセリル                        ５．０
ステアリン酸                                                ２．０
セタノール                                                  ２．０
スクワラン                                                １２．０
マカデミアナッツ油                                          ４．０
メチルポリシロキサン（３００ｃＳｔ）                        ０．２
防腐剤                                                      適量
水相
１，３−ブチレングリコール                                  ７．０
精製水                                                      残部
（調製方法）
実施例１〜４、比較例１と同様の方法で調製した。
（実施例８）
【００２７】
油中水型保湿クリーム
（処方）
油相                                                          重量％
アルジュノール酸                                            ０．５
モノイソステアリン酸ジグリセリル                            ２．５
縮合リシノール酸ヘキサグリセリル                            １．５
スクワラン                                                  ５．０
メチルフェニルポリシロキサン                                ５．０
酢酸トコフェロール                                          ０．１
防腐剤                                                      適量
水相
アルギン酸ナトリウム                                        ０．１
グリセリン                                                １０．０
１，３−ブチレングリコール                                  ５．０
硫酸マグネシウム                                            ０．１
精製水                                                      残部
（調製方法）
油相成分、水相成分ともに８０℃で加温溶解し、水相成分を油相成分に攪拌しながら、徐々に加えて乳化する。撹拌しながら冷却して組成物を得た。
【００２８】
（肌のはり、たるみに対する改善効果の評価方法）
実施例１〜４、比較例１と同様の方法で評価した。
【００２９】
これらの結果を表３に示す。
【００３０】
【表３】
2005089311.tif 000004
表３に示されるように、アルジュノール酸を含有する実施例５〜８の化粧品処方は、肌のシワ改善に対する改善効果が顕著であり、アルジュノール酸、すなわちオレアネン型トリテルペンのコラーゲン産生促進効果に対する有効性が分かる。
【産業上の利用可能性】
【００３１】
本発明は、オレアネン型トリテルペン、特にアルジュノール酸が皮膚におけるコラーゲン産生を促進することから、シワ改善効果及びシワ予防効果のみならず、細胞賦活作用を有することが期待される。更に細胞賦活作用により、皮膚のターンオーバーが促進され、美白作用を発揮することも期待できる。