(57)【要約】【課題】食品などの幅広い分野での使用を可能にし、長期間保存してもホスファチジルセリンの均質で安定な分散状態を保持し、さらに、飲食品に添加する際に必要とされる耐酸性、耐塩性、耐熱性に優れたホスファチジルセリン含有水性組成物を提供する。【解決手段】ホスファチジルセリン（Ａ）を、水系溶媒に分散させるための界面活性剤が、下記のＢ１、Ｂ２，およびＢ３の３成分を必須とし、かつ、Ｂ１／Ｂ２／Ｂ３の重量比０．１〜５０／０．１〜５０／０．１〜５０であることを特徴とする界面活性剤。Ｂ１；炭素数１２〜１８の脂肪酸と平均重合度５〜１０のポリグリセリンのモノエステルＢ２；炭素数１２〜１８の脂肪酸とショ糖のエステルＢ３；レシチン  ホスファチジルセリン０．００５重量％〜２５重量％と前記の界面活性剤０．２重量％〜５０重量％を含有するホスファチジルセリン含有水性組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホスファチジルセリン（Ａ）を、水系溶媒に分散させるための界面活性剤が、下記のＢ１、Ｂ２，およびＢ３の３成分を必須とし、かつＢ１／Ｂ２／Ｂ３の重量比０．１〜５０／０．１〜５０／０．１〜５０であることを特徴とする界面活性剤。
Ｂ１；炭素数１２〜１８の脂肪酸と平均重合度５〜１０のポリグリセリンとのモノエステル
Ｂ２；炭素数１２〜１８の脂肪酸とショ糖のエステル
Ｂ３；レシチン
【請求項２】
ホスファチジルセリン（Ａ）０．００５重量％〜２５重量％と、請求項１記載の界面活性剤０．２重量％〜５０重量％を含有するホスファチジルセリン含有水性組成物。
【請求項３】
｛ホスファチジルセリン（Ａ）／界面活性剤｝の重量比［前記のＡ／（Ｂ１＋Ｂ２＋Ｂ３）］が１／１０〜１／１の配合比であり、かつ、界面活性剤のＢ１／Ｂ２／Ｂ３の重量比が、２〜１５／２〜１５／０．５〜１０ある請求項２記載のホスファチジルセリン含有水性組成物。
【請求項４】
ホスファチジルセリンの平均粒径が２００ｎｍ以下である請求項２または３に記載のホスファチジルセリン含有水性組成物。
【請求項５】
安定剤（Ｃ成分）の１種または２種以上をさらに含有する請求項２〜４のいずれか１項に記載のホスファチジルセリン含有水性組成物。
【請求項６】
請求項２〜５のいずれか１項に記載のホスファチジルセリン含有水性組成物を用いることを特徴とする飲食品。
【請求項７】
請求項２〜５のいずれか１項に記載のホスファチジルセリン含有水性組成物を用いることを特徴とする医薬部外品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホスファチジルセリンを水性溶媒に分散させるための界面活性剤、その活性剤を用いたホスファチジルセリン含有水性組成物およびこの水性組成物を用いる飲食品および医薬部外品に関する。さらに詳しくは、長期間保存してもホスファチジルセリンが、均質な分散状態を保持しうる上、飲食品や医薬部外品等に添加する際に必要とされる、耐熱性、耐酸性、耐塩性などに優れた、ホスファチジルセリン含有水性組成物およびこの水性組成物を用いる飲食品および医薬部外品に関する。  
【背景技術】
【０００２】
ホスファチジルセリンは、リン脂質の一種であり、植物や動物に存在している物質である。近年、ホスファチジルセリンには、脳内グルコースの上昇作用や記憶障害の回復（J．Nutr．Sci．Vitaminol．,42,Sakai M．et al, 1996年）（非特許文献１）などの脳機能改善効果があることがわかり、生理活性物質として注目され始め、盛んにその製造方法や用途が検討されている。
しかしながら、ホスファチジルセリンは油および水に対する溶解性が極めて低いことなどから、水に均一に分散して安定な液状品として利用することは困難であった。そのため、医薬品や食品では、油へ懸濁させるか、あるいは粉末、顆粒の形で供されてきたが、医薬品や食品への添加、利用する際の作業性の悪さなどが問題となり、改善が求められていた。ホスファチジルセリンを含有する分散液については、次の技術が開示されている。
特開平５−１３９９５７号公報（特許文献１）では、レシチンを用いてホスファチジルセリンを含有する、脂肪乳剤が開示されている。この脂肪乳剤は、液の安定性が十分でない、耐熱性や耐塩性等がないなどの問題がある。
【０００３】
特開平６−２９３６１５号公報（特許文献２）には、粒径１００〜３０００オングストローム（１０ｎｍ〜３００ｎｍ）の非イオン性ポリオキシエチレン系活性剤を用いたＯ／Ｗ／Ｏ型混合脂質膜小胞が開示されている。しかし、得られるホスファチジルセリン可溶化液は、保存安定性がよいものの、この技術では、耐塩性や、耐加熱安定性等の性能が必ずしも十分ではないなどの問題がある。
特開平１１−２０９３０７号公報（特許文献３）には、セリン、非イオン性ポリオキシエチレン−ポリプロピレン系活性剤を含有する処方が開示されている。しかし、この技術では、耐塩性や、耐加熱安定性等の性能が必ずしも十分ではないなどの問題がある。
特開２００１−４８７４３号公報（特許文献４）には、リゾリン脂質とショ糖脂肪酸エステルを含有する分散液が開示されている。しかし、この技術では、液の耐熱性、耐酸性、耐塩性に劣る等の問題がある。
したがって、特に飲食品等の分野で必要とされる、耐酸性、耐塩性、耐熱性がともに優れ、安定な分散状態を保つホスファチジルセリン含有水性組成物として十分に満足できるものがなく、そのような安定なホスファチジルセリン含有水性組成物が求められているのが現状であった。
また、医薬部外品等に配合する際に、耐酸性、耐塩性、耐熱性がともに優れ、安定な分散状態を保つホスファチジルセリン含有水性組成物として十分満足できるものがなく、求められているのが現状であった。
【０００４】
【非特許文献１】J．Nutr．Sci．Vitaminol．,42,Sakai M．et al1996年、（第４７〜５４頁）
【特許文献１】特開平５−１３９９５７号公報（第２〜４頁）
【特許文献２】特開平６−２９３６１５号公報（第２〜５頁）
【特許文献３】特開平１１−２０９３０７号公報（第３〜６頁）
【特許文献４】特開２００１−４８７４３号公報（第２〜４頁）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、上記のような水難溶性ホスファチジルセリンを水性組成物とすることで食品、医薬部外品などの幅広い分野での使用を可能にし、長期間保存してもホスファチジルセリンの析出、沈殿または浮上を生じることなく、均質で安定な分散状態を保持し、さらに、飲食品に添加する際に必要とされる耐酸性、耐塩性、耐熱性に優れ、該組成物を配合した飲食品、医薬部外品においても、ホスファチジルセリンが析出、沈澱、浮上したりすることがなく、安定性に優れたホスファチジルセリン含有水性組成物、およびこの水性組成物を含有する飲食品、医薬部外品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題解決のため鋭意研究した結果、特定の３種の界面活性剤を用いると、耐酸性、耐塩性、耐熱性に優れ、均一安定な、ホスファチジルセリンの分散液が得れることの知見を得て、本発明を完成するに至った。即ち本発明は次の〔１〕〜〔６〕である。
〔１〕  ホスファチジルセリン（Ａ）を、水系溶媒に分散させるための界面活性剤が、下記のＢ１、Ｂ２，およびＢ３の３成分を必須とし、かつＢ１／Ｂ２／Ｂ３の重量比０．１〜５０／０．１〜５０／０．１〜５０であることを特徴とする界面活性剤。
Ｂ１；炭素数１２〜１８の脂肪酸と平均重合度５〜１０のポリグリセリンとのモノエステル
Ｂ２；炭素数１２〜１８の脂肪酸とショ糖のエステル
Ｂ３；レシチン
〔２〕  ホスファチジルセリン（Ａ）０．００５重量％〜２５重量％と、前記〔１〕記載の界面活性剤０．２重量％〜５０重量％を含有するホスファチジルセリン含有水性組成物。
〔３〕｛ホスファチジルセリン（Ａ）／界面活性剤｝重量比が１／１０〜１／１であり、かつ、界面活性剤Ｂ１／Ｂ２／Ｂ３の活性剤重量比が、２〜１５／２〜１５／０．５〜１０ある〔２〕記載のホスファチジルセリン含有水性組成物。
〔４〕ホスファチジルセリンの平均粒径が２００ｎｍ以下である前記〔２〕または〔３〕に記載のホスファチジルセリン含有水性組成物。
〔５〕  安定剤（Ｃ）をさらに含有する前記の〔２〕〜〔４〕のいずれかに記載のホスファチジルセリン含有水性組成物。
【０００７】
〔６〕  前記の〔２〕〜〔５〕のいずれかに記載のホスファチジルセリン含有水性組成物を含んでなることを特徴とする飲食品。
〔７〕  前記の〔２〕〜〔５〕のいずれかに記載のホスファチジルセリン含有水性組成物を含んでなることを特徴とする医薬部外品。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、ホスファチジルセリンが長期間保存しても均質で安定な分散状態を保つことができるホスファチジルセリン含有水性組成物が提供される。また、本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物は、耐酸性、耐塩性、耐熱性にも優れ、食品および食品添加物に使用される酸および塩を配合しても安定性を保つことができ、６０〜１００℃で殺菌処理または必要に応じて１００〜１５０℃の高温殺菌または滅菌処理することができ、この際の加熱に対しても安定であり、また、長期間保存しても均一な状態を保つことができる。
このホスファチジルセリン含有水性組成物は、そのまま食品として摂取でき、さらに各種飲食品の製造に際して配合することによりホスファチジルセリンを含有する飲食品を得ることができる。
またさらに、本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物は、医薬部外品にも配合することができ、塩や酸と併用したり、熱処理したりする場合にも安定性を有することから有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明の界面活性剤組成物は、ホスファチジルセリン（Ａ）を、水系溶媒に分散するための界面活性剤が、下記のＢ１、Ｂ２，およびＢ３の３成分を必須とし、かつＢ１／Ｂ２／Ｂ３の重量比０．１〜５０／０．１〜５０／０．１〜５０であることを特徴とする。
Ｂ１；炭素数１２〜１８の脂肪酸と平均重合度５〜１０のポリグリセリンとのモノエステル
Ｂ２；炭素数１２〜１８の脂肪酸とショ糖のエステル
Ｂ３；レシチン下記のＢ１、Ｂ２，およびＢ３の３成分を用いることを特徴とする。
本発明で用いられるホスファチジルセリンは、グリセリンの１−、および２−位の位置に脂肪酸由来のアシル基を有し、３−位にホスホリルセリン基を有する化合物であり、動物由来、植物由来あるいは微生物由来などの起源に限定されるものではなく、また天然より得られるもの、酵素によりアシル基や塩基部分を交換させたもの、さらに水素添加させたもの、化学合成により得られたものなどが挙げられる。ここで構成脂肪酸としては、炭素数１２〜２０の飽和または不飽和の脂肪酸が好ましく挙げられる。
天然品としては、例えば卵黄、牛脳等の動物由来のもの、大豆、菜種または亜麻仁等の植物由来のものなどが挙げられる。好ましくは、ホスファチジルコリンを原料とし酵素で塩基交換したホスファチジルセリンが、工業的にも、入手性からもより好ましく挙げられる。
使用するホスファチジルセリンの純度は、特に限定されないが、純度の高いものが好ましい。ホスファチジルセリンの純度は、好ましくは、１０〜８０重量％、入手性から２０〜７０重量％がさらに好ましい。
なおまた、ホスファチジルセリンの合成方法としては、次の公知の方法が挙げられる。例えば、精製水に大豆由来のホスファチジルコリン（ホスファチジルコリン純度７０％）、セリン（食品添加物グレード）を加えて混合し懸濁させた後、さらに基質変換触媒として、ホスホリパーゼＤを加えて、４５〜５０℃の温度１５時間程度反応を行う。反応終了後、塩析して、凍結乾燥して、ホスファチジルセリンを得る。このホスファチジルセリン生成物中のホスファチジルセリン含量は、５０重量％程度である。
【００１０】
本発明に用いるＢ１成分は、炭素数１２〜１８の脂肪酸と平均重合度５〜１０のポリグリセリンとのモノエステルである。重合度が５〜１０のポリグリセリンとしては、ペンタグリセリン（５）、ヘキサグリセリン（６）、デカグリセリン（１０）等が挙げられる。炭素数１２〜１８の脂肪酸としては、ラウリン酸（Ｃ１２）、ミリスチン酸（Ｃ１４）、パルミチン酸（Ｃ１６）、ステアリン酸（Ｃ１８）、オレイン酸（Ｃ１８：１）等が挙げられる。
前記の炭素数１２〜１８の脂肪酸と重合度５〜１０のポリグリセリンとのモノエステルは、１種単独でまたは２種以上のものを混合して使用できる。
本発明に用いるＢ１成分の炭素数１２〜１８の脂肪酸と平均重合度５〜１０のポリグリセリンとのモノエステルのなかでも、好ましくは、デカグリセリンモノミリスチン酸エステル（モノミリスチン酸デカグリセリンという場合もある。以下同様）、ペンタグリセリンモノオレイン酸エステル、デカグリセリンモノオレイン酸エステル等が挙げられる。
【００１１】
また、本発明に用いるＢ２成分の炭素数１２〜１８の脂肪酸とショ糖のエステルとしては、ショ糖と炭素数が１２〜１８の脂肪酸（Ｃ１２〜Ｃ１８）とのエステルであり、具体的には例えば、ショ糖モノラウリン酸（Ｃ１２）エステル、ショ糖モノミリスチン酸（Ｃ１４）エステル、ショ糖モノパルミチン酸（Ｃ１６）エステル、ショ糖モノステアリン酸（Ｃ１８）エステル、ショ糖モノオレイン酸（Ｃ１８：１）エステル等が挙げられる。
前記の炭素数１２〜１８の脂肪酸とショ糖のエステルは、１種単独で、または２種以上のものを混合して使用できる。本発明に用いる炭素数１２〜１８の脂肪酸とショ糖のエステルのなかでも、好ましくは、ショ糖ラウリン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル等が挙げられる。
【００１２】
また、本発明に用いるＢ３成分のレシチンは、例えば、大豆レシチン、卵黄レシチン、酵素分解レシチンが挙げられる。これらのレシチンは、１種単独で、または２種以上配合して使用できる。
【００１３】
本発明で用いる成分Ｂ１／Ｂ２／Ｂ３の界面活性剤の重量比は、０．１〜５０／０．１〜５０／０．１〜５０であり、さらに、２〜１５／２〜１５／０．５〜１０が好ましい。この比率の範囲であると、ホスファチジルセリンの分散液を調整する際に、安定した分散液となる。この範囲外であると、耐塩性や耐加熱安定性が悪くなるので好ましくない。
【００１４】
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物は、ホスファチジルセリン（Ａ）０．００５重量％〜２５重量％と、前記の界面活性剤（Ｂ１＋Ｂ２＋Ｂ３）０．２重量％〜５０重量％を含有する。
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物において、ホスファチジルセリンは、水性組成物中に対して０．００５〜２５重量％、好ましくは０．０５〜１５重量％、より好ましくは０．５〜７．５重量％となるように配合するのが好ましい。
ホスファチジルセリンの配合量が  ０．００５重量％より少ないと、ホスファチジルセリンの生理活性の機能を発揮することが難しく、２５重量％より
多い場合には、ホスファチジルセリン含有水性組成物の液の粘性が高くなり、乳化安定性が劣るので、好ましくない。
【００１５】
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物に用いるポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ１）、ショ糖脂肪酸エステル（Ｂ２）、レシチン（Ｂ３）の界面活性剤の合計量は、通常０．２〜５０重量％、好ましくは１〜４０重量％、より好ましくは５〜２５重量％である。ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、レシチンの合計量が５０重量％を超えると、ホスファチジルセリン含有水性組成物を飲食物へ添加した際、界面活性剤特有の味が飲食品の味へ影響し、好ましくない。
【００１６】
好ましくは、Ｂ１成分がデカグリセリンモノミリスチン酸エステル、ペンタグリセリンモノオレイン酸エステル、デカグリセリンモノオレイン酸エステルで、Ｂ２成分がショ糖ラウリン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル等で、Ｂ３成分がレシチンの組み合わせが挙げられる。
【００１７】
ホスファチジルセリン含有水性組成物中に使用する｛ホスファチジルセリン（Ａ）と界面活性剤｝の重量比［Ａ／（Ｂ１＋Ｂ２＋Ｂ３）］は、１／１０〜１／１の配合比であるのが好ましい。［Ａ／（Ｂ１＋Ｂ２＋Ｂ３）］の重量比が、１／１０より少ないと、最終製品の味が悪くなる可能性が高く、１／１より多いと分散液の経時安定性が悪くなるので好ましくない。
【００１８】
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物には、水（Ｄ成分とする）の他に、さらに安定剤（Ｃ成分とする）として、ガム質や糖アルコール、糖類などを用いてもが挙げられる。具体的には例えば、アラビアガム、キサンタンガム、トラガントガム、グアガム、ジェランガム、ローカストビーンガム等のガム質類；グリセリン等の多価アルコール類；マルチトール、還元水あめ、ラクチトール、パラチニット、ソルビトール、マンニトール、ブドウ糖果糖液糖、乳糖等の単糖類や二糖類；デキストリン等の多糖類；などが挙げられる。これらの安定剤は、１種単独で、あるいは２種以上混合して使用することができる。
より好ましくは、グリセリン、還元水あめが挙げられる。
Ｃ成分の安定剤の添加量としては、０．０１重量％〜８０重量％、好ましくは、１〜６０重量％、さらに好ましくは、１０〜５０重量％である。
本発明では、水性組成物とは、通常水を分散媒とするが、水分が少なくても水溶性の安定剤が多い場合には、ホスファチジルセリンが均一に安定して分散する液となり、その分散液を水等で希釈した場合には、水性分散液となりうるので、このような場合も含めて水性組成物という。
【００１９】
本発明で使用する水は、飲食品、医薬部外品等に使用できる水であれば特に制限はなく、例えば、イオン交換水、蒸留水等の精製水、水道水、天然水、アルカリイオン水等が挙げられる。また、これは水のみであっても、その他に食品添加物を加えた水であってもよい。食品添加物としては、界面活性剤、安定剤、調味料、酸および塩などが挙げられる。
水の添加量としては、０．０１重量％〜９９．２重量％、好ましくは、１重量％〜８０重量％、さらに好ましくは、１０重量％〜６０重量％である。
【００２０】
したがって、本発明では、水単独若しくは、前記の安定剤と水の混合物が分散媒であり、前記の安定剤と水の合計として添加量は、０．０１重量％〜９９．２重量％でよい。
【００２１】
本発明では、上記の３種の界面活性剤に加え、本発明の効果を損なわない範囲において、目的や用途によりその他の成分や界面活性剤を混合して使用しても構わない。
【００２２】
次に製造方法について記載する。
下記の工程Ｉ、II、IIIおよびVIを順次行い、水性組成物中のホスファチジルセリンの平均粒子径が２００ｎｍ以下となるようにすることを特徴とするホスファチジルセリン含有水性組成物の製造方法が挙げられる。
工程Ｉ；Ｂ１成分と、Ｂ２成分と、Ｂ３成分と、Ｄ成分の水とを、はかり取り、加熱溶解する。
前記の工程Ｉの場合は、配合物の液温度が６０〜８５℃になるように攪拌し、加熱溶解することが好ましい。
工程II；次いで、工程Ｉで得られた混合液に、Ａ成分のホスファチジルセリンを添加する。
工程III；前記の工程IIで得られた分散液を均質機による均質化圧力４９ＭＰａ（５００ｋｇ／ｃｍ2）以上の高せん断力を与える。
【００２３】
前記の工程Ｉ、IIに引き続いて、さらに下記の工程IVを行い、粒子径２００ｎｍ以下のホスファチジルセリン含有水性組成物を得るホスファチジルセリン含有水性組成物の製造方法が挙げられる。
工程IV；前記の工程IIの後、ホモジナイザーによる攪拌羽根の周速が７５０ｍ/分以上の高せん断力を与える。
前記の工程Ｉ、IIおよびIVを行い、さらに引き続いて工程IIIを行い粒子径２００ｎｍ以下のホスファチジルセリン含有水性組成物を得るホスファチジルセリン含有水性組成物の製造方法が挙げられる。
さらに安定剤を配合する場合には、Ａ成分のホスファチジルセリンを添加する前に配合することが望ましい。
【００２４】
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物の製造方法は、前記の各種成分を所定量はかりとり、混合できればよく、特に、液温４０℃以上で攪拌、混合する。更に水性組成物の安定性を高めるために、高圧ホモジナイザー［商品名：マイクロフルイダイザー  みづほ工業（株）製、アルティマイザー  （株）スギノマシン製］などの均質化処理機を使用して４９ＭＰａ（５００Ｋｇ／ｃｍ2）以上、より好ましくは１００ＭＰａ以上、さらに好ましくは１５０ＭＰａ以上の高せん断力を与える方法、また例えばホモミキサー［商品名；ＴＫホモミキサー  特殊機化工業（株）製、クレアミックス  エム・テクニック（株）製］で攪拌羽根の周速が７５０ｍ/分以上の高せん断力を与える方法等の均質化処理を行うことにより、均一な液状のホスファチジルセリン含有水性組成物を得ることができる。
【００２５】
また、均質化処理は前記の均質化処理機以外にも、ナノマイザー、超音波乳化機等の均質化処理機やアジホモミキサー、ウルトラミキサーなどのホモミキサーを用いることができる。
ホスファチジルセリン含有水性組成物をより安定化させるために、この均質化処理を２回以上行ってもよい。
このようにして得られるホスファチジルセリン含有水性組成物は、ホスファチジルセリンの平均粒径が２００ｎｍ以下となり、安定化する。平均粒径が１００ｎｍ以下では、透明性を帯びてくるようになり、さらに安定化するので好ましい。
分散方法としては、自然乳化法、転相乳化法、液晶乳化法、ゲル乳化法、およびＤ相乳化法およびＰＩＴ乳化法なども利用できる。また、これらの方法と前記均質化処理などの機械式乳化法を組み合わせて行ってもよい。
【００２６】
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物は、そのまま摂取する、あるいは主に、茶系飲料、発酵乳飲料、スポーツ飲料、炭酸飲料、栄養飲料などの飲料や、パン、めん、菓子類、乳肉製品、調味料などの食品にホスファチジルセリンを添加するための配合原料として使用することができる。その用途としては、特に制限はなく、あらゆる種類の飲食品に適用することができる。
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物を添加する食品としては、例えば、パン、ビスケット、キャンディー、ゼリーなどのパン・菓子類や、ヨーグルト、ハムなどの乳肉加工食品や、味噌、ソース、タレ、ドレッシングなどの調味料や、豆腐、麺類などの加工食品や、マーガリン、ファットスプレッド、ショートニングなどの油脂加工食品や、粉末飲料、粉末スープなどの粉末食品などが挙げられる。さらにその形状が、カプセル状、タブレット状、粉末状、顆粒状などにした健康食品や特定保健用食品などを挙げることができる。
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物を添加する飲料としては、食塩、鉄分などの塩類やミネラル分、酸味料、甘味料、アルコール、ビタミン、フレーバーおよび果汁の中から少なくとも１種を含む飲料、例えば、茶系飲料、スポーツ飲料、果汁飲料、発酵乳飲料、アルコール飲料、ビタミン・ミネラル飲料などが挙げられる。さらに、加工乳、豆乳、体質改善のための飲料、生理効果を期待できる天然素材をホスファチジルセリンと組み合わせた飲料などを挙げることができる。
これらの使用時、ホスファチジルセリン含有水性組成物の配合量は、特に限定されないが、例えば製品中、０．０１〜１０重量％が望ましい。
前記のホスファチジルセリン含有水性組成物は、対象としては特に限定されないが、例えば、人、牛、豚、羊等の家畜、犬、猫、ウサギ、ねずみ等の小動物等を対象としてホスファチジルセリン含有水性組成物を経口投与することができる。
ホスファチジルセリンの摂取量としては、成人で１００ｍｇ／日〜３００ｍｇ／日程度である。
【００２７】
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物は、ドリンク剤などの医薬部外品にホスファチジルセリンを添加するための配合原料として使用することができる。その用途としては、特に制限はなく、例えば、栄養ドリンク剤、リップクリーム、軟膏、カプセル状、タブレット状、粉末状、顆粒状等の医薬部外品が挙げられる。
【００２８】
本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物は、食品分野に使用できる界面活性剤を使用しているので安全性に優れ、化粧水などの化粧料にホスファチジルセリンを添加するための配合原料として使用することもできる。その用途としては、特に制限はなく、皮膚や毛髪に直接使用される化粧料および浴用化粧料等あらゆる種類の化粧料に適用することができる。例えば、化粧水、ボディーローション、ヘアリキッド、ヘアトニック、育毛剤、浴用剤等である。本発明のホスファチジルセリン含有水性組成物は、保湿性、皮膚の保護、油性成分の分散性向上等にも利用できる。
【実施例】
【００２９】
次に、実施例に基づいて本発明をさらに詳細に説明する。
次に用いた試験方法、評価方法を示す。
１．保存安定性試験１；
実施例および比較例で得たホスファチジルセリン含有水性組成物を試料として用い、１００ｍｌサンプルビンに入れ、調製直後、および４０℃での３０日静置保存後の外観状態を目視により次の評価基準で評価した。○は状態良好、△は状態がやや悪い、×は状態が悪く、析出・浮遊・沈殿が発生、−は未測定をそれぞれ表す。
２．耐熱性試験
精製水にホスファチジルセリン含有水溶組成物を１％添加し、常温でのホスファチジルセリン含有水性組成物の水溶液の外観状態を目視により評価した。さらに、この水溶液の耐熱性を確認するため、この水溶液を湯煎にかけ液温が８５℃に達温した時点より３０分間加熱処理を行った。これらの水溶液を室温にて放冷した後、外観状態を目視により評価し、ホスファチジルセリン含有水性組成物の水溶液の耐熱性を確認した。○は状態良好、△は状態がやや悪い、×は状態が悪く、析出・浮遊・沈殿が発生、−は未測定をそれぞれ表す。
３．水性組成物の平均粒径の測定
水性組成物の平均粒径の測定には、サブミクロン粒子分析装置［ＣＯＵＬＴＥＲ  Ｎ４ＳＤ型  ベックマン・コールター（株）製］を用いた。
【００３０】
４．１  耐酸・耐熱試験
クエン酸にてｐＨを３に調整した精製水にホスファチジルセリン含有水性組成物を１％添加し、常温での外観状態を目視により評価し、ホスファチジルセリン含有水性組成物の耐酸性を確認した。さらに、この酸性条件での耐熱性を確認するため、この水性組成物含有酸性水溶液を湯煎にかけ液温が８５℃に達温した時点より３０分間加熱処理を行った。これらの水性組成物含有酸性水溶液を室温にて放冷した後、外観状態を目視により評価し、ホスファチジルセリン含有水性組成物の耐酸・耐熱性を確認した。○はほとんど均一状態で良好、△は状態がやや悪い、×は状態が悪く、析出・浮遊・沈殿が発生、−は未測定をそれぞれ表す。
４．２  耐酸保存安定性試験
前記の耐酸・耐熱試験を行った試験溶液の４０℃静置保存試験を実施し、３０日静置保存後の外観状態を目視により評価した。○はほとんど均一状態で良好、△は状態がやや悪い、×は状態が悪く、析出・浮遊・沈殿が発生、−は未測定をそれぞれ表す。
５．１  耐塩性・耐熱性試験
同様に、食塩を５％含有する精製水にホスファチジルセリン含有水性組成物を１％添加し、常温での外観状態を目視により評価し、ホスファチジルセリン含有水性組成物の耐塩性を確認した。さらに、この高塩濃度条件での耐熱性を確認するため、この水性組成物含有食塩水を湯煎にかけ、液温が８５℃に達温した時点より３０分間加熱処理を行った。これらの水性組成物含有食塩水の外観状態を目視により評価し、ホスファチジルセリン含有水性組成物の耐塩・耐熱性を確認した。○はほとんど均一状態で良好、△は状態がやや悪い、×は状態が悪く、析出・浮遊・沈殿が発生、−は未測定をそれぞれ表す。
５．２  耐塩保存安定性試験
前記の耐酸・耐熱試験を行った試験溶液の４０℃静置保存試験を実施し、３０日静置保存後の外観状態を目視により評価した。○はほとんど均一状態で良好、△は状態がやや悪い、×は状態が悪く、析出・浮遊・沈殿が発生、−は未測定をそれぞれ表す。
【００３１】
６．＜ＰＳ含量の測定方法＞
ホスファチジルセリン含量は、高速液体クロマトグラフィーで測定した。
条件は次の通り。
機種；高速液体クロマトグラフィー（（株）日立製作所  モデルＤ７０００）、
固定相；シリカゲルカラム（直経４．６ｍｍ×長さ２５０ｍｍ）
移動相；アセトニトリル：メタノール：リン酸＝７８０：５０：９の混合溶媒、
検出；紫外線波長２０２ｎｍ、
あらかじめ測定した検量線から算定する。
【００３２】
＜ホスファチジルセリン試作品の合成＞
特開２００２−２１８９９１号公報記載の方法に準じて、精製水に大豆由来のホスファチジルコリン（ホスファチジルコリン純度７０％）、セリン（食品添加物グレード）塩化カルシウム、グリセリン脂肪酸モノエステルを加えて混合し懸濁させた後、さらに基質変換触媒として、ストレプトマイセス属のホスフォリパーゼＤ（旭化成工業（株）品）を加えて、４５〜５０℃の温度１５時間反応を行った。反応終了後、塩析し、凍結乾燥して、ホスファチジルセリンを得た。このホスファチジルセリン生成物中のホスファチジルセリン含有量は、高速液体クロマトグラフィーで測定したところ５０重量％であった。  
【００３３】
実施例１
２０００ｍＬ容ステンレス製ビーカーに、ショ糖パルミチン酸エステル［商品名：サンソフトＳＥ−１６Ｐ  太陽化学（株）製］４０ｇ（４重量％）とグリセリン［食添グリセリングレード］３５０ｇ（３５重量％）、水５００ｇ（５０重量％）の順に入れ、スリーワンモーターでかき混ぜながら８０℃に加温した。モノオレイン酸ペンタグリセリン［商品名：サンソフトＡ−１７１Ｅ  太陽化学（株）製］４０ｇ（４重量％）、酵素分解大豆レシチン［商品名：サンレシチンＷ−１  太陽化学（株）製］２０ｇ（２重量％）を添加し、十分溶解させた後、前記のホスファチジルセリン試作品［ホスファチジルセリン含有量５０重量％］５０ｇ（５重量％）を添加し、ホスファチジルセリンを分散した。次いで高圧ホモジナイザー１４７ＭＰａ（１５００ｋｇ／ ｃｍ2）の圧力で均質化処理を行い、平均粒径が１４４ｎｍのホスファチジルセリン分散液約９００ｇを得た（収率９０％）。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／４）  なお、表中には、配合組成は重量％で示した。
【００３４】
比較例１
モノオレイン酸ペンタグリセリン、ショ糖パルミチン酸エステルおよび酵素分解大豆レシチンの合計１００ｇをモノオレイン酸ペンタグリセリン１００ｇ（１０重量％）とした以外は、実施例１と全く同じ操作を行い、平均粒径が３１４ｎｍのホスファチジルセリン分散液約９００ｇを得た。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／４）
【００３５】
比較例２
実施例１におけるモノオレイン酸ペンタグリセリン、ショ糖パルミチン酸エステルおよび酵素分解大豆レシチンの合計１００ｇをショ糖パルミチン酸エステル１００ｇ（１０重量％）とした以外は、実施例１と同様に操作を行い、平均粒径が１１３ｎｍのゲル状のホスファチジルセリン分散液約９００ｇを得た。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／４）
【００３６】
比較例３
モノオレイン酸ペンタグリセリン、ショ糖パルミチン酸エステルおよび酵素分解大豆レシチンの合計１００ｇを酵素分解大豆レシチン１００ｇ（１０重量％）とした以外は、実施例１と同様の操作を行い、平均粒径が２２６ｎｍのホスファチジルセリン分散液約９００ｇを得た。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／４）
結果を表１に示す。
なお、表中には、ホスファチジルセリン（ＰＳと略す、５０％含有量）の製品の量と純度換算した量で示す。
【００３７】
【表１】
2005263668.tif 000002
【００３８】
以上の結果から、比較例１は耐熱試験溶液、耐塩・耐熱試験溶液、耐酸・耐熱試験溶液およびホスファチジルセリン分散液自体の４０℃３０日間静置保存における安定性において劣っている。比較例２はゲル状組成物で水への分散性が劣っており、また、耐塩・耐熱試験溶液および耐酸・耐熱試験溶液の４０℃３０日間静置保存における安定性が共に劣っている。比較例３は耐熱試験溶液、耐塩・耐熱試験溶液、耐酸・耐熱試験溶液およびホスファチジルセリン分散液自体の安定性が劣っている。それに対して、実施例１は、ホスファチジルセリン分散液自体の４０℃３０日間静置保存における安定性に優れ、耐熱、耐塩、耐酸性が共に優れ、それぞれの試験溶液の４０℃３０日間静置保存後も安定であることがわかる。
【００３９】
実施例２
２０００ｍＬ容ステンレス製ビーカーに、ショ糖ラウリン酸エステル［商品名：リョートーシュガーエステルＬ−１６９５  三菱化学フーズ（株）製］４０ｇ（４重量％）とグリセリン５００ｇ（５０重量％）、水３５０ｇ（３５重量％）の順に入れ、かき混ぜながら８０℃に加温した。モノミリスチン酸デカグリセリン［商品名：リョートーポリグリエステルＭ−１０Ｄ  三菱化学フーズ（株）製］４０ｇ（４重量％）、大豆レシチン［商品名：サンレシチンＬ−８  太陽化学（株）製］２０ｇ（２重量％）を添加し、十分溶解させた後、前記のホスファチジルセリン試作品［ホスファチジルセリン含有量５０重量％］５０ｇ（５重量％）を添加し、ホスファチジルセリンを分散した。次いで高圧ホモジナイザー１６２ＭＰａ（１６５０ｋｇ／ ｃｍ2）の圧力で均質化処理を行い、平均粒径が９１ｎｍのホスファチジルセリン分散液約９００ｇを得た。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／４）
【００４０】
比較例４
ショ糖ラウリン酸エステルおよび大豆レシチンの合計６０ｇをショ糖ラウリン酸エステル６０ｇ（６重量％）とした以外は、実施例１と同様の操作を行い、平均粒径が２１０ｎｍのホスファチジルセリン分散液約９００ｇを得た。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／４）
【００４１】
比較例５
ショ糖ラウリン酸エステルおよび大豆レシチンの合計６０ｇを大豆レシチン６０ｇ（６重量％）とした以外は、実施例１と同様の操作を行い、平均粒径が４３７ｎｍのホスファチジルセリン分散液約９００ｇを得た。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／４）
【００４２】
比較例６
ショ糖ラウリン酸エステルおよびモノミリスチン酸デカグリセリンの合計８０ｇをショ糖ラウリン酸エステル８０ｇ（８重量％）とした以外は、実施例１と同様な操作を行い、平均粒径が８１ｎｍのホスファチジルセリン分散液を得た。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／４）
結果を表２に示す。なお、表中には、ホスファチジルセリン（ＰＳと略す、５０％含有量）の製品の量と含有量から換算した量で示す。
【００４３】
【表２】
2005263668.tif 000003
【００４４】
以上の結果から、比較例４は耐熱性試験溶液およびホスファチジルセリン分散液自体の保存安定性が劣っており、耐塩・耐熱試験溶液、耐酸・耐熱試験溶液の保存安定性が若干劣っていた。比較例５は耐熱試験溶液の保存安定性が若干劣っており、耐塩・耐熱試験溶液、耐酸・耐熱試験溶液およびホスファチジルセリン分散液自体の保存安定性が共に劣っていた。比較例６は耐熱性試験、耐塩・耐熱性および耐酸・耐熱試験溶液の保存安定性が劣っている。それに対して、実施例２は、ホスファチジルセリン分散液自体の保存安定性が優れており、さらに耐熱、耐塩、耐酸性が共に優れ、それぞれの試験溶液の４０℃３０日間静置保存後も安定であることがわかる。
【００４５】
実施例３
２０００ｍＬ容ステンレス製ビーカーに、ショ糖ミリスチン酸エステル［商品名：リョートーシュガーエステルＭ−１６９５  三菱化学フーズ（株）製］４０ｇ（４重量％）、還元水飴［商品名：アマミール  東和化成工業（株）製］３２０ｇ（３２重量％）、水５００ｇ（５０重量％）の順に入れ、かき混ぜながら８０℃に加温した。モノオレイン酸デカグリセリン［商品名：ＳＹグリスターＭＯ−７５０  阪本薬品工業（株）製］６０ｇ（６重量％）、大豆レシチン［商品名：ＳＬＰ−ＰＣ５５  ツルーレシチン工業（株）製］３０ｇ（３重量％）を添加し、十分溶解させた後、ホスファチジルセリン［ホスファチジルセリン含有量５０重量％］５０ｇ（５重量％）を添加し、ホスファチジルセリンを分散した。次いで高圧ホモジナイザーで１４７ＭＰａ（１５００ｋｇ／ ｃｍ2）の圧力で均質化する工程を２回行い、平均粒径が１１６ｎｍの均一なホスファチジルセリン分散液約９００ｇを得た。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／５．２）
【００４６】
実施例４
実施例３の還元水飴３２０ｇおよび水５００ｇを水８２０ｇ（８２重量％）とした以外は、実施例３と同様な操作を行い、平均粒径が１１８ｎｍの均一なホスファチジルセリン分散液約９００ｇを得た。（ホスファチジルセリン／界面活性剤＝１／５．２）
結果を表３に示す。なお、表中には、ホスファチジルセリン（ＰＳと略す、５０重量％含有量）の試作品の量と純度換算した量で示す。
【００４７】
【表３】
2005263668.tif 000004
【００４８】
以上の結果から、実施例３は、ホスファチジルセリン分散液自体の保存安定性が優れており、また耐熱、耐塩、耐酸性が共に優れ、４０℃３０日間静置保存後も安定であり、また、実施例４は、ホスファチジルセリン分散液、耐塩・耐熱試験溶液、耐酸・耐熱試験溶液の４０℃３０日間静置保存において、安定性で実施例３より若干劣っていたが安定であった。
【００４９】
実施例５
実施例２のホスファチジルセリン分散液を用いて、第４表の組成で飲料を調製し、１００ｍＬ容ビンに充填し密封した。この飲料を８５℃で３０分間加熱殺菌し、飲料を調製した。このようにして得られた飲料は分散状態が安定であった。さらにこの飲料を４０℃の恒温槽に３０日間静置保存した後、分散安定性を評価したところ、ホスファチジルセリンの析出は全く認められず、分散状態は安定であった。
【００５０】
比較例７
第４表の配合材料中、実施例２のホスファチジルセリン分散液の代わりに比較例４のホスファチジルセリン分散液を用いた以外は実施例５と同様にして飲料を調製した。このようにして得られた飲料は、分散状態が不安定であった。この飲料を４０℃の恒温槽に３０日間静置保存した後、分散安定性を評価したところ、ホスファチジルセリンの析出が認められ、分散状態は不安定であった。
結果を表４に示す。
【００５１】
【表４】
2005263668.tif 000005
【００５２】
以上の結果から、実際の飲料に配合した本発明の実施例２の分散液を用いた処方は、耐酸性、耐熱性等に優れているのに対して、比較例４の分散液を用いた処方が耐酸性、耐熱性等に劣っていることがわかる。
【００５３】
実施例６
実施例２のホスファチジルセリン分散液を用いて、第５表の組成で化粧水を調製し、１００ｍＬ容ビンに充填し密封した。この化粧水を９５℃で１５分間加熱殺菌し、化粧水を調製した。このようにして得られた化粧水は、状態が透明性を帯びて安定であった。さらにこの化粧水を４０℃の恒温槽に３０日間静置保存した後、安定性を評価したところ、ホスファチジルセリンの析出は全く認められず、安定であった。
【００５４】
比較例８
第５表の配合材料中、実施例２のホスファチジルセリン分散液の代わりに比較例４のホスファチジルセリン分散液を用いた以外は実施例６と同様にして化粧水を調製した。このようにして得られた化粧水の状態は透明性がほとんどなく不安定であった。また、この化粧水を４０℃の恒温槽に３０日間静置保存した後、安定性を評価したところ、ホスファチジルセリンの析出が認められた。
結果を表５に示す。
【００５５】
【表５】
2005263668.tif 000006
【００５６】
以上の結果から、実際の化粧水に配合した本発明の実施例２の分散液を用いた処方は、耐熱性等に優れているのに対して、比較例４の分散液を用いた処方が耐熱性等に劣っていることがわかる。