(57)【要約】【課題】  マダイなどの養殖魚におけるメラニン生成による体色の黒ずみの解消、色揚げのために使用されるアスタキサンチンなどのカロテノイドの使用効率の向上、カロテノイドによる体色鮮明化効果の向上、などに優れ、かつ、生体安全性に優れる養殖魚の体色改善性を提供する。【解消手段】  養殖魚用配合飼料とともに使用される養殖魚の体色改善剤において、前記養殖魚の体色改善剤が、フェルラ酸とγ−オリザノールを必須成分として構成されたことを特徴とする養殖魚の体色改善剤。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
養殖魚用配合飼料とともに使用される養殖魚の体色改善剤において、前記養殖魚の体色改善剤が、フェルラ酸とγ−オリザノールを必須成分として構成されたことを特徴とする養殖魚の体色改善剤。
【請求項２】
フェルラ酸が、γ−オリザノールに対して０．１〜１０倍の配合比率で含有されたものである請求項１に記載の養殖魚の体色改善剤。
【請求項３】
フェルラ酸とγ−オリザノールの配合比率が、１：２である請求項２に記載の養殖魚の体色改善剤。
【請求項４】
フェルラ酸とγ−オリザノールの含有量が、養殖魚用配合飼料の重量を基準にして、フェルラ酸が１〜５０００ｐｐｍ、γ−オリザノールが１〜５０００ｐｐｍ、である請求項１に記載の養殖魚の体色改善剤。
【請求項５】
フェルラ酸が５０ｐｐｍ、γ−オリザノールが１００ｐｐｍ、含有されたものである請求項４に記載の養殖魚の体色改善剤。
【請求項６】
体色改善剤が、フェルラ酸とγ−オリザノールを脱脂米ぬかにより製剤化されたもの、である請求項１に記載の養殖魚の体色改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特にカロテノイド配合またはカロテノイド非配合の養殖魚用配合飼料とともに使用される養殖魚の体色改善剤に関する。
更に詳しくは、本発明は、特にカロテノイド配合またはカロテノイド非配合の養殖魚用配合飼料とともに使用されるフェルラ酸とγ−オリザノールを必須成分として含有して成る養殖魚の体色改善剤、または前記フェルラ酸とγ−オリザノールを脱脂米ぬかにより製剤化して成る養殖魚の体色改善に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、魚類の養殖が盛んになるにつれて、体重や鮮度や肉質だけでなく、体色もまた養殖魚の品質を評価する上で重要な要素になっている。
【０００３】
マダイの体表の色は赤色のカロテノイド（ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ）であるアスタキサンチン（ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ）と黄色のカロテノイドであるツナキサンチン（ｔｕｎａｘａｎｔｈｉｎ）および黒色のメラニン（ｍｅｌａｎｉｎ）などの色素によって発現される。例えば、天然マダイの体側部は鮮やかな赤色を呈し、腹部は白く美しいコントラストをなしている。
【０００４】
一方、養殖マダイは天然マダイに比べて体色が全体に黒ずんでしまうという難点がある。これは天然マダイの生殖場所に比べて養殖マダイは水深の浅い所で飼育されるため、日焼けによって体表にメラニンが生成、沈着することに起因する。
このため、天然マダイに見られる体表の鮮やかな赤色と腹部の白色を養殖魚で発色させるためには、単に赤−黄色系の色素であるカロテノイドを投与するだけでは不十分であり、メラニンの生成を抑えなくては成らない。
【０００５】
従来、前記カロテノイド投与により体色改善を図る技術として、抗酸化性が低いカロテノイドの安定剤としてアスコルビン酸またはその塩を添加するもの（特公昭３７−８５３２）、「甘草」を併用するもの（特開昭６３−１４５３６７）、カロテノイド系色素に脱脂卵黄の加水分解物と水溶性抗酸化剤を配合するもの（特開２０００−１０６８４８）、アスタキサンチンの吸収効率を高めるためにグルタチオンを併用するもの（特開平７−２３１７５５）、などが提案されているが、十分な効果をあげていない。
なお、肉色の改善方法として、即ち畜肉の色を淡くする（畜肉の色を薄くして商品価値を高める）方法として、飼料中にフェルラ酸類を添加する方法が知られているが（特開平６−１５３８１４）、これは後述される本発明とは関係がない。
【０００６】
また、前記メラニンの生成を抑制する方法として、従来、例えば遮光ネットなどで日光を遮る方法が採用されている。しかし、遮光ネットで日覆いをするだけではマダイの体色黒化防止に対して満足な効果は得られない。
そのほか、システイン、γ−オリザノール（特開昭６３−２５８５４１）、プロトアントシアニジン（特開平１０−２２５２２６、特開２００１−２９９２３２）を用いる方法も提案されているが、体色鮮明化に充分な効果をあげているとはいい難い。
さらに、メラニン生成抑制剤であるコウジ酸（特開平３−３０６３７）を添加する方法も提案されているが、近年コウジ酸には発癌性が指摘され、飼料への添加は、安全性の観点からその使用がひかえられている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、マダイなどの養殖魚の体色改善、特に体色の黒化を防止する上で優れた効果を奏し、かつ安全性、経済性に優れる養殖魚の体質改善剤を提供することにある。
【０００８】
本発明者は、前記の目的を達成するために種々の天然物について検討を加えた。その結果、米ぬかに含まれるフェルラ酸とγ−オリザノールを必須成分とした製剤、または、前記フェルラ酸とγ−オリザノールに更に脱脂米ぬかを配合して調製した製剤を、養殖魚用の配合飼料、特にカロテノイド含有の養殖魚用配合飼料に添加して養殖魚に与えた場合、フェルラ酸またはγ−オリザノールの単独使用系に対して顕著に養殖魚のメラニン生成を抑制し、かつ体表へのカロテノイドの蓄積も向上するという刮目すべき知見を見い出した。
本発明は前記知見をベースにして完成されたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明を概説すれば、本発明は、養殖魚用配合飼料とともに使用される養殖魚の体色改善剤において、前記養殖魚の体色改善剤が、フェルラ酸とγ−オリザノールを必須成分として構成されたことを特徴とする養殖魚の体色改善剤に関するものである。
【００１０】
本発明において、前記フェルラ酸とγ−オリザノールを必須成分とする養殖魚の体色改善剤は、所望量の脱脂米ぬかを配合して製剤化したり、あるいは常用されている養殖魚用配合飼料、特に色揚のためにカロテノイドを含有した養殖魚用配合飼料に添加して製剤化したり、その利用形態は特段の制約を受けるものではない。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のフェルラ酸とγ-オリザノールを必須成分とする養殖魚の体色改善剤は、養殖魚用配合飼料とともに使用することにより、養殖魚の体色改善に顕著な効果を奏する。
【００１２】
特に、本発明のフェルラ酸とγ-オリザノールを必須成分とする養殖魚の体色改善剤は、養殖魚においてメラニン生成を顕著に抑制することができ、メラニン生成にもとづく体色の黒ずみという従来からの難点を効果的に解消することができる。
そして、前記したメラニン生成の抑制効果は、フェルラ酸またはγ-オリザノールの単独使用の場合と比較してその使用量が１／１０〜１／２０という極めて少ない使用量のもとで同等もしくはそれ以上の効果を得ることができるため、本発明の体色改善剤は経済性にも優れる。
【００１３】
また、本発明のフェルラ酸とγ-オリザノールを必須成分とする養殖魚の体色改善剤は、特に色揚の目的でアスタキサンチンなどのカロテノイド配合の養殖魚用配合飼料に添加使用される場合、カロテノイドの酸化安定性を増大し、カロテノイドの体内蓄積を助長するため、体色鮮明化効果に優れる。
そして、前記したカロテノイドを介しての体色鮮明化効果は、フェルラ酸またはγ-オリザノールの単独使用の場合と比較して、その使用量が１／１０〜１／２０という極めて少ない使用量のもとで同等もしくはそれ以上の効果を得ることができるため、本発明の体色改善剤は経済性に優れた。
【００１４】
本発明のフェルラ酸とγ-オリザノールを必須成分とする養殖魚の体色改善剤は、前記したメラニンの生成抑制効果、体色鮮明化効果のほかに、飼育成績（生育効果、飼料効率）や過酸化ストレスに対して優れた効果を発揮し、更にはカロテノイド添加の養殖魚用配合飼料からエクストルーダペレット（ＥＰ）を製造するときにカロテノイドの酸化安定性を高め、従ってカロテノイドの残存率を高めるなど、諸々の優れた作用効果を発現する。
【００１５】
前記したことからわかるように、本発明のフェルラ酸とγ-オリザノールを必須成分とする養殖魚の体色改善剤は、フェルラ酸とγ-オリザノールを併用することにより、体色改善などに相乗的な作用効果を発現させることができる、かつ両成分は米ぬかをはじめ多くの食物に含まれ、ヒトが常に摂取していて安全性が高いため、極めて有効なものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、本発明の技術的構成及び実施態様について詳しく説明する。
【００１７】
本発明の養殖魚の体色改善剤において、その第１の必須成分であるフェルラ酸は下記の化１に示されるものであり、また第２の必須成分であるγ−オリザノールは下記の化２で示されるものである。
下記の化２で示されるγ−オリザノールにおいて、Ｒは、ステロール、トリテルペンアルコール、高級アルコールの残基を示す。より具体的には、Ｒは、β−シトステロール（Ｃ２９Ｈ５０Ｏ）、ステイグマステロール（Ｃ２９Ｈ５２Ｏ）、カンペステロール（Ｃ２８Ｈ４８Ｏ）などのステロールの残基、Ｃ３０Ｈ５０ＯまたはＣ３１Ｈ５２Ｏの組成をもつトリテルペンアルコールの残基を示す。
【００１８】
【化１】
2005176799.tif 000002
【００１９】
【化２】
2005176799.tif 000003
【００２０】
前記フェルラ酸とγ−オリザノールは米ぬかをはじめ多くの食物に含まれ、かつ、ヒトが常に摂取しているものであるから、その安全性は確立されている。
前記フェルラ酸は、正確にいうと天然にはその形態で存在するのではなく、γ−オリザノールを加水分解して調製されるものである。
前記γ−オリザノールは、例えば米ぬかを有機溶媒で抽出処理して得た抽出物、抽出濃縮物（抽出エキス）を利用すればよい。また、フェルラ酸は前記γ−オリザノールを加水分解処理して調製したものを利用すればよい。
米ぬかは、後述するように養殖魚用の配合飼料の一成分として良く使用される成分であるが、前記したことからわかるように、米ぬかを養殖魚に与えただけでは、本発明のフェルラ酸とγ−オリザノールとから成る体色改善剤を与えたことにはならない。別言すれば、米ぬかの投与という行為は、本発明とは全く関係のないことである。
【００２１】
本発明の養殖魚の体色改善剤において、フェルラ酸とγ−オリザノールの配合割合及び配合量は、適宜に設定すればよい。
両者の配合比率は、投与効果、経済性などの観点から、一般的にはフェルラ酸をγ−オリザノールに対して０．１〜１０倍の重量比率で配合すればよい。一般的にいって、フェルラ酸の配合量はγ−オリザノールより少ない方が好ましい。
本発明において、後述する実施例で実証されるように、フェルラ酸とγ−オリザノールの配合比率が１：２のとき、優れた相乗的な体色改善効果（メラニンの抑制効果、カロテノイドの蓄積効果など）が発現される。
両者の具体的な配合量は、適用される養殖魚用の配合飼料の重量を基準にして、例えば養殖魚用混合飼料の重量を基準にして、フェルラ酸  １〜５０００ｐｐｍ、γ−オリザノール  １〜５０００ｐｐｍ、好ましくはフェルラ酸  １０〜１００ｐｐｍ、γ−オリザノール  ５０〜５００ｐｐｍ、の範囲に設定すればよい。
【００２２】
本発明において、前記フェルラ酸およびγ−オリザノールから成る体色改善剤は、カロテノイド配合または無配合の養殖魚用配合飼料に直接、添加して使用することができる。
また、前記フェルラ酸およびγ−オリザノールの両成分を養殖魚用配合飼料へ添加配合する作業を円滑にするために、予めフェルラ酸とγ−オリザノールを一定の配合比率で混合したものを脱脂米ぬかで１０倍〜１００倍に希釈して製剤化したものを直接、使用したり、あるいは前記製剤化したものを養殖魚用配合飼料に１〜５％程度添加して使用してもよい。なお、脱脂米ぬかは、この種の養殖魚用配合飼料の典型的な配合成分の１つである。
更にまた、前記フェルラ酸とγ−オリザノールとから成る配合製剤、または前記フェルラ酸とγ−オリザノールと脱脂米ぬかとから成る配合製剤を、ドライペレット、モイストペレットをはじめ自家製の飼料など、いずれの形態のカロテノイド配合または無配合の養殖魚用配合飼料に添加して使用してもよい。
【００２３】
本発明の養殖魚の体色改善剤において、前記フェルラ酸、γ−オリザノールおよび脱脂米ぬかから調製した製剤において、各成分の配合割合は、前記した適用する養殖魚用配合飼料の重量を基準としたフェルラ酸とγ−オリザノールの配合量を念頭に入れて適宜に設定すればよい。例えば、フェルラ酸  ０．０１〜１０％、γ−オリザノール  ０．０１〜１０％、脱脂米ぬか  ８０〜９９．８％の範囲、好ましくはフェルラ酸  ０．５％〜１．０％、γ−オリザノール  １〜２％、脱脂米ぬか  ９７〜９９％の範囲で設定すればよい。
【００２４】
本発明の養殖魚の体色改善剤は、養殖魚用配合飼料とともに用いられ、養殖魚のメラニン生成を効果的に抑制し、体色の改善（特にメラニンによる黒化の防止）に寄与する。
また、本発明の養殖魚の体色改善剤は、カロテノイド配合の養殖魚用配合飼料とともに用いられ、前記カロテノイドの安定化（耐酸化性）と体内蓄積を通じて体色の改善（特にカロテノイドによる色揚の増進）に寄与する。
本発明において、本発明の養殖魚の体色改善剤の投与期間は、特に制限されないが、美しい体色を発現させるためにはカロテノイド含有の養殖魚用配合飼料とともに３ヶ月以上の連続投与が好ましい。
【００２５】
本発明の養殖魚の体色改善剤は、カロテノイド配合または無配合の養殖魚用配合飼料とともに用いられるものであり、この種の養殖魚用配合飼料としては、公知のマダイ、ブリ、ヒラメ、サケなどの海産魚；マス、アマゴ、ヤマメ、アユなどの淡水魚；エビ、カニなどの甲殻類；キンギョ、ニシキゴイなどの観賞魚、などに対する養殖魚用配合飼料を使用すればよい。
本発明において、本発明の養殖魚の体色改善剤が適用される養殖魚用配合飼料は、前記したように甲殻類などへの配合飼料を含むようにその適用範囲は広義に解釈すべきである。
【００２６】
前記した養殖魚用配合飼料について、以下、具体的に説明する。
(1).海産魚マダイ、ブリ育成用の配合飼料：
一般的な組成は、動物性飼料（魚粉）５０〜６５％、穀類（小麦粉など）〜１５％、植物性油かす類（大豆脂粕）〜１０％、そうこう類（米ぬか、ふすま）〜５％、その他（動物油脂、ビール酵母、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムなど）〜１０％である。このものの成分組成は、粗蛋白質４５〜５５％、粗脂肪１０〜１６％以上、粗糖質１５〜２０％、粗灰分〜１１％、である。
【００２７】
例えば、キリンフィード株式会社製のマダイ育成用配合飼料(マダイＥＰ４．５）の一般的な組成は、動物性飼料６０％、穀類１５％、植物性油かす類１０％、そうこう類（米ぬか、ふすま）５％、その他（動物油脂、ビール酵母、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムなど）１０％である。また、このものの成分組成は、粗蛋白質４８％、粗脂肪１２％、粗繊維１．８％、粗灰分１５％、カルシウム１．８％、リン１．４％である。
前記したマダイ、ブリなどの海産魚用配合飼料としては、前記キリンフィード株式会社のほかに、株式会社ヒガシマル、日清飼料株式会社、オリエンタル酵母株式会社、日本配合飼料株式会社、日本農産工業株式会社、丸紅飼料株式会社などのメーカーがほぼ同じ組成の配合飼料を提供している。
【００２８】
(2).淡水魚アユ育成用の配合飼料：
アユ育成用の配合飼料として、日本農産工業株式会社は、一般的な組成が、動物性飼料（魚粉）５５％、穀類（小麦粉）２１％、そうこう類（米ぬか、ふすま）１０％、植物性油粕類（大豆油粕）７％、その他（飼料用酵母、アルファルファミール、小麦胚芽、食塩）６％のものを提供している。このものの成分組成は、粗蛋白質４５．０％、粗脂肪３．０％以上、粗繊維４．０％以下、粗灰分１５．０％である。
前記アユ育成用配合飼料として、前記日本農産工業株式会社のほかに、オリエンタル酵母株式会社、日本配合飼料株式会社、丸紅飼料株式会社などのメーカーがほぼ同じ組成の配合飼料を提供している。
【００２９】
本発明において、色揚げなどの目的で前記養殖魚用配合飼料に配合されるカロテノイド（ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ）は、動植物界に広く分布している黄色ないし赤色の脂溶性色素で、多数の共役二重結合を含む脂肪族または脂環式のポリエン類である。
なお、天然には６００種あまりの化合物が存在するといわれている。
【００３０】
前記カロテノイド（ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ）のうち典型的に使用されるものは、アスタキサンチン（ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ）〔分子式Ｃ４０Ｈ５２Ｏ４〕である。
アスタキサンチン（ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ）は、赤色を呈するカロテノイドの一種であり、微生物、植物、動物に分布する。マダイ、キンギョの体表の色、サケの筋肉の赤色、エビやカニの甲羅の色などはアスタキサンチンによるものである。
アスタキサンチンの生理作用としては、魚類では保護色、婚姻色、紫外線防御作用、卵質向上作用、抗酸化作用が知られている。また、近年、強力な活性酵素消去作用を持つことが判り、哺乳動物で発ガン予防効果、ガン細胞増殖抑制効果、免疫増強効果なども判り注目されている。
【００３１】
本発明において、前記養殖魚用配合飼料に添加配合するアスタキサンチン源としては、酵母（Ｐｈａｆｆｉａ  ｒｈｏｄｏｚｉｍａ）、緑藻（Ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｌｕｖｉａｌｉｓ）、オキアミやアミエビなどの甲殻類、の抽出物がある。その他、合成品（ロッシュ社製、商品名カロフィールピンク）もある。なお、後者はマダイ、サケ、マス用の配合飼料として限定して使用されている。
【００３２】
本発明において、カロテノイドとしては、前記したアスタキサンチンのほかに、β−カロチン（Ｃ４０Ｈ５６）、ルテイン（Ｃ４０Ｈ５６Ｏ２ ）、ゼアキサンチン（Ｃ４０Ｈ５６Ｏ２ ）、カプサンチン（Ｃ４０Ｈ５６Ｏ３ ）などを例示することができる。
前記カロテノイドの養殖魚用配合飼料への添加量は、養殖魚の種類、養殖の期間、養殖魚の出荷時期などにより変動するが、例えば１ｐｐｍ〜１００ｐｐｍを添加すればよい。
【実施例１】
【００３３】
以下、実施例により更に詳しく説明する。なお、いうまでもないことであるが、本発明は実施例のみに限定されるものではない。
【００３４】
(1).試験飼料調整法：
魚粉６０％、穀類１５％、植物性油かす類１０％、そうこう類（米ぬか、ふすま）５％、その他（動物油脂、ビール酵母、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム）１０％から成る配合飼料「マダイ育成用配合飼料マダイＥＰ４５」（キリンフィード社製）の２００ｋｇに対してアスタキサンチンを６０ｐｐｍ添加するとともに、下記の表１に示すごとくフェルラ酸またはγ−オリザノールの所定量を添加して試験飼料を調整した（コントロール区は無添加）。
【００３５】
【表１】
2005176799.tif 000004
【００３６】
(2).飼育条件：
平均体重２８０ｇ前後のマダイを一群３０尾ずつ２×２×２．５ｍの網生簀に収容して６試験区を設け、海面で飼育試験を９８日間行った。なお、全ての試験区には日覆ネットを施した。各試験区には所定の試験飼料を１日２回、１週間に６日給餌した。
【００３７】
１．飼育成績について：
飼育９８日目に各試験区から１０尾を取り上げ、フェノキシエタノールで麻酔した直後に体重を測定して飼育成績（生育効果、飼料効率）を求めた。飼育成績を下記の表２に示す。
【００３８】
【表２】
2005176799.tif 000005
【００３９】
表２に示すごとくフェルラ酸とγ−オリザノールを投与した試験区では、コントロール区に比べ体重増加が認められ、かつ飼料効率も上昇している。特にフェルラ酸５０ｐｐｍとγ−オリザノール１００ｐｐｍを混合して投与した２区では、フェルラ酸とγ−オリザノールをそれぞれ単独でかつ多量（１０００ｐｐｍ）投与したいずれの試験区(４区、６区)よりも優れた飼料効率の上昇が見られる。
【００４０】
２．体色鮮明化効果について：
前記飼育成績の測定に供したマダイにおいて、頭部、側部、および腹部の体色を色彩色差計（クロマメータＣＲ−３００、ミノルタ社製）で測定した。結果を下記の表３に示す。
【００４１】
【表３】
2005176799.tif 000006
【００４２】
表３に示すごとく頭部、側部及び腹部のいずれの部位においてもフェルラ酸およびγ−オリザノール投与区（２〜６区）ではコントロール区（１区）に比べ明るさを示すＬ値が上昇している。このことは、メラニン生成がフェルラ酸およびγ−オリザノールを投与することにより抑制されたことを示している。
さらに、フェルラ酸５０ｐｐｍとγ−オリザノール１００ｐｐｍを混合して投与した２区では、フェルラ酸を単独で１０００ｐｐｍ投与した４区およびγ−オリザノールを単独で１０００ｐｐｍ投与した６区よりも高いＬ値を示している。このことは、フェルラ酸とγ−オリザノールを１：２の比率で混合して投与する場合、その投与量がフェルラ酸またはγ−オリザノールの単独投与量の１／１０から１／２０で同等、若しくはそれを上回る体色鮮明化効果があることを示している。すなわち、フェルラ酸とγ−オリザノールを併用したとき、相乗的にマダイのメラニン生成を抑制する効果があることを示している。
【００４３】
一方、赤さを示すａ値についても表３に示すごとくフェルラ酸およびγ−オリザノール投与区（２〜６区）がコントロール区（１区）に比べ高い傾向を示すことが認められる。このことは、フェルラ酸およびγ−オリザノールがアスタキサンチンの蓄積にも有効に働いたことを示している。
さらに、ａ値においてもフェルラ酸５０ｐｐｍとγ−オリザノール１００ｐｐｍを混合して投与した２区では、フェルラ酸を単独で１０００ｐｐｍ投与した４区およびγ−オリザノールを単独で１０００ｐｐｍ投与した６区よりも高い値を示している。すなわち、フェルラ酸とγ−オリザノールを併用したとき、相乗的にマダイのカロテノイド蓄積を向上する効果があることを示している。
【００４４】
３．表皮中のカロテノイド含量について：
表皮中のカロテノイド含量（ｍｇ／固体）について調べた結果を、下記の表４に示す。
表４に示されるように、フェルラ酸およびγ−オリザノール投与区（２〜６区）がコントロール区（１区）に比べ高いことが認められる。特にフェルラ酸とγ−オリザノールの併用区である２区において、高い値を示している。
これらの結果からフェルラ酸およびγ−オリザノールを投与することにより天然魚に近い赤と白のコントラストの鮮やかなマダイを養殖することができること、またフェルラ酸およびγ−オリザノールを１：２の比率で混合使用する場合、両成分の使用量をそれぞれの単独使用量の１／１０〜１／２０という極めて少ない使用量でその効果を増強させることができること、がわかる。
【００４５】
【表４】
2005176799.tif 000007
【００４６】
４．過酸化脂質生成抑制効果について：
各試験区（１〜６）から５尾をとりあげ、それぞれの血漿を採取し過酸化脂質についてチオバルビツール酸法で求めた。なお、この過酸化脂質（過酸化物）の生成は、飼育中の魚の過酸化ストレスに関係しているものであり、過酸化物量が少ないということは、過酸化ストレスが軽減され、飼育効率、体色改善剤の有効利用、などに良い結果が得られるということができる。
結果を下記の表５に示す。表５は、各試験区の魚の血漿中に含まれる過酸化物量をマロンジアルデヒド（ＭＤＡ）含量で示したものである。
コントロール区（１区）に比べてフェルラ酸およびγ-オリザノール投与区（２〜６区）ではマロンジアルデヒド（ＭＤＡ）が減少している。さらにフェルラ酸５０ｐｐｍとγ−オリザノール１００ｐｐｍを混合して投与した２区のＭＤＡ含量は、他の単独投与区と比較して最も低下している。特に、１０００ｐｐｍという多量を単独投与した４区及び６区と比較しても更に低いＭＤＡ含量を示している。
これらの結果は、フェルラ酸およびγ−オリザノールの投与によって魚の過酸化ストレスが軽減されたことを示している。さらに、フェルラ酸およびγ−オリザノールを１：２の比率で混合使用する場合、両成分の使用量をそれぞれの単独使用量の１／１０〜１／２０という極めて少ない使用量でその効果を増強させることが出来ること、がわかる。
【００４７】
【表５】
2005176799.tif 000008
【００４８】
養殖魚は天然魚に比べ水深の浅い所で過密に養殖されているため、種々のストレスに曝されている。特に、太陽光紫外線や飼料の酸化に基づく過酸化物（例えばカロテノイド配合の飼料において、酸化安定性に劣るカロテノイドの酸化分解により生成する過酸化物）などによって引き起こされる過酸化ストレスは、魚類の体色の黒化、カロテノイドの蓄積の低下のみならず成長障害、肉質の低下や種々の疾病の原因になっている。
前記したように本発明によりフェルラ酸およびγ−オリザノールの投与により過酸化ストレスが軽減されることは、メラニン生成を抑制しさらにアスタキサンチンの蓄積を向上する効果のみならず、成長促進や飼料効率の増加にも寄与するものであり、これらの点は前記した諸データにより裏付けられている。そして、本発明においては、これらの効果はフェルラ酸とγ−オリザノールを１：２の比率で混合使用する場合、それぞれを単独でかつ多量使用の場合と比較して、極めて少ない使用量でこれら効果を増強することができる。
【００４９】
前記したように、本発明のフェルラ酸およびγ−オリザノールを必須成分として含有する養殖魚の体色改善剤は、フェルラ酸とγ−オリザノールの配量比率が約１：２（５０ｐｐｍ：１００ｐｐｍ）のときに、優れた相乗的な体色改善効果（メラニンの生成抑制、カロテノイドの蓄積効果、過酸化物の生成抑制効果など）を発現するという特異性をもっている。
本発明者は、前記した特異性の発言メカニズムについて、次のように推論している。
1)．フェルラ酸とγ−オリザノールの両者を親水性、脂溶性（親油性）の観点からみると、相対的にはフェルラ酸は親水性に優れ、γ−オリザノールは脂溶性に優れている。
2)．前記化１（フェルラ酸）と化２（γ−オリザノール）からみて、活性酸素の生成抑制やメラニンの抑制効果を発現する部分は、両者がフェルラ酸部分を共有していることからこの部位である。
ところで、γ−オリザノールの置換基であるＲはステロイドなど高い分子量のものであり、フェルラ酸部分とＲ基の分子量比は、ほぼ１：２ということができる。
3)．アスタキサンチンなどのカロテノイドは脂溶性であるため、脂溶性の抗酸化剤が有効である。一方、メラニンの生成抑制はある程度の水溶性のものが好ましいと考えられる。
また、活性酸素種に対しては水溶性と脂溶性の抗酸化剤が有効であると考えられる。
4)．このため、親水性のフェルラ酸と脂溶性（親水性）のγ−オリザノールを含有する体色改善剤、特に両者を１：２の配合比率で含有する体色改善剤は、他のケースよりも優れた相乗的な体色改善効果を発現する。
【００５０】
次に、本発明の他の効果（メリット）として、飼料調製時のメリットについて試験データに基づいて説明する。
【００５１】
５．エクストルーダーペレット（ＥＰ）調製時のアスタキサンチンの分解防止効果について：
当業界において、養殖魚配合飼料として取扱い性などの観点から、ペレットタイプのものが市販されている。前記ペレットタイプの飼料は、押出成形機により製造されたエクストルーダペット（ＥＰ）のものが広く使用されている。
下記の表６に、カロテノイドとしてアスタキサンチンを配合した配合飼料のＥＰ成形時におけるアスタキサンチンの残存率を示す。
表６に示されるように、フェルラ酸およびγ-オリザノール投与区（２〜６区）ではコントロール区（１区）に比べアスタキサンチンの残存率が向上している。更にフェルラ酸５０ｐｐｍとγ−オリザノール１００ｐｐｍを混合して投与した２区の残存率が最も向上していた。このことは、フェルラ酸またはγ-オリザノールを単独でかつ多量に投与する場合（４区、６区）と比較して、両成分を極めて少量混合して投与することにより、相乗的にアスタキサンチンの分解を防止することが出来ることを示している。
【００５２】
【表６】
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