(57)【要約】【課題】    本発明は、冷却塔の循環水、冷凍装置の循環冷却水や、温水プールや浴場等の冷温水系、蓄熱水系等に生存している藻類・レジオネラ属菌を防除するための皮膚刺激性の改善された徐放性藻類及びレジオネラ属菌の防除剤、並びにその組成物を提供することを課題とする。【解決手段】  一般式（Ｉ）【化１】
2005089444.tif 000011
（式中、Ｒ１及びＲ２は、水素原子、又はハロゲン原子を示し、それぞれ同一又は異なっていてもよい。）で表されるジチオール化合物を必須成分とする皮膚刺激性の改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤を用いることにより、上記課題を解決できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
2005089444.tif 000009
（式中、Ｒ１及びＲ２は、水素原子、又はハロゲン原子を示し、それぞれ同一又は異なっていてもよい。）で表されるジチオール化合物を必須成分とする皮膚刺激性の改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤。
【請求項２】
徐放化がマイクロカプセル化であることを特徴とする請求項１記載の皮膚刺激性が改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤。
【請求項３】
徐放化がシクロデキストリンによる包接化であることを特徴とする請求項１記載の皮膚刺激性が改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の防除剤が冷却塔循環水用であることを特徴とする皮膚刺激性が改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤。
【請求項５】
一般式（Ｉ）
【化２】
2005089444.tif 000010
（式中、Ｒ１及びＲ２は、水素原子、又はハロゲン原子を示し、それぞれ同一又は異なっていてもよい。）で表されるジチオール化合物を必須成分とする皮膚刺激性の改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤に腐食防止剤、スケール防止剤、消泡剤及び界面活性剤の少なくとも一種を配合することを特徴とする皮膚刺激性の改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤組成物。
【請求項６】
請求項５記載の組成物が冷却塔循環水用であることを特徴とする皮膚刺激性の改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、水系の藻類・レジオネラ属菌の防除剤に関する。更に詳しくは、本発明は、冷却塔の循環水、冷凍装置の循環冷却水や、温水プールや浴場等の冷温水系、蓄熱水系等に生存している藻類・レジオネラ属菌を防除するための皮膚刺激性の改善された徐放性藻類及びレジオネラ属菌の防除剤、並びにその組成物に関する。
【技術背景】
【０００２】  近年、空調設備等の開放循環系冷却水中に生存するレジオネラ属菌によるレジオネラ症問題が多発している。これらの冷却塔が、居室の窓や空調の外気取り入れ口等が近い場合には冷却水のエアロゾルが室内に進入しレジオネラ症の発生原因になる。特に夏場にかけての空調が必要な時期では、冷却塔の水温が高くなり（約１５℃〜３５℃）、塔内で有機物質が濃縮されるため、外部から藻類や微生物などが入り込んで藻類が繁殖したり、微生物や病原菌の増殖に好適な場所となる。また、微生物や藻類によるバイオフィルムやスライム等が配管に付着し熱交換器の熱交換効率の低下や、ろ過機の詰まり等の障害を起こすほか、病原細菌、特にレジオネラ属菌等が増殖して飛散すると、特殊な肺炎、例えば、在郷軍人病やポンティアック熱のような病気の原因となる。このような藻類・微生物による問題の対策として、循環水系等に抗藻・抗菌剤を注入して藻類や微生物・細菌類の増殖を抑制する方法や、装置内を物理的に清掃洗浄し、或いは洗浄剤を用いて化学的に洗浄する方法等が用いられてきた。
【０００３】  抗菌剤を注入して細菌類の増殖を抑制する方法としては、塩素や臭素、二酸化塩素等ハロゲン系の抗菌剤や四級アンモニウム塩類等の界面活性剤、ヒドラジン類やマレイミド類、イソチアゾリン系化合物、ホスホニウム化合物、ニトロアルコール系化合物などの有機化合物が主に用いられている。しかしながら、上記ハロゲン系化合物は設備や配管を腐食させ易いといった問題があり、上記有機化合物では、皮膚刺激性や感作性、発癌性等の毒性の問題や効力が充分でないといった問題あった。また、効力の観点や持続性の問題から多くの薬剤を使用する必要があり環境負荷が大きいといった問題もあった。それらの問題を解決する方法として増殖を抑制するために、抗藻・抗菌剤を継続的に添加したり、一定の時間間隔で添加する必要があった（例えば、特許文献１及び２参照。）。
【０００４】  特公昭５７−４２６０３号公報では一般式（Ｉ）で表されるジチオール系抗菌剤が、高い抗菌活性を有することが知られており、主に製紙用スライムコントロール剤として一般に用いられているが（例えば、特許文献３参照。）、本化合物も他の有機系化合物と同様皮膚刺激性等の毒性の問題や、アルカリ条件下や還元性物質あるいは求核試薬（硫化物、アミン等）存在下では容易に分解してしまうといった問題があった。これら問題解決のためにＷＯ０２／０８９５７８号公報では、同抗菌剤をマイクロカプセル化する方法が示されている。しかしながら、レジオネラ菌の除去に対して有効であることは知られていなかった（例えば、特許文献４参照。）。
【０００５】  また、ジチオール類は、皮膚刺激性が高く、粉体として取り扱うには粉立ちによる皮膚に接触した場合にはかぶれや水泡を引き起こす等の問題があり、固形製剤としての展開が難しいといった問題があった。また、水溶性も低いため、水処理剤として使用する場合、親水系溶媒に溶解する必要があり、水溶液としての製剤化も難しく開放循環系冷却水中での使用が難しいといった問題もあった。
【０００６】  特開平５−２４７０１１号公報では、シクロデキストリン類と工業用殺菌剤として一般に知られているイソチアゾリン類との包接化合物が紹介されており、皮膚刺激性の軽減がなされることが報告されているが、ジチオール化合物については何ら記載されていない（例えば、特許文献５参照。）。
【特許文献１】  特開平７−２５６２６６号公報
【特許文献２】  特開２００２−２６３６５９号公報
【特許文献３】  特公昭５７−４２６０３号公報
【特許文献４】  国際公開第０２／０８９５７８号パンフレット
【特許文献５】  特開平５−２４７０１１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】  本発明は、冷却塔の循環水、冷凍装置の循環冷却水や、温水プールや浴場等の冷温水系、蓄熱水系等に生存している藻類やレジオネラ属菌等の細菌を防除すること目的にしており、マイクロカプセル化或いは包接化することによりジチオール類の溶出を徐放化することにより、持続性を高めるとともに、皮膚に付着した場合におけるジチオール類の皮膚刺激性等の毒性を低減することにある。更に本発明で用いられるジチオール類が低濃度で有効であることから環境負荷も少ない。また、本発明の防除剤、防除剤組成物は、黴に対しても有効である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】  本発明者は、上記の課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、マイクロカプセル化或いはシクロデキストリンにより包接化したジチオール化合物を用いて水系に生存している藻類及びレジオネラ属菌に対して、優れた防除効果を有することを見いだし、この知見に基づいて本発明を発明するに至った。【０００９】  すなわち、本発明は、
（１）一般式（Ｉ）
【化１】
2005089444.tif 000002
（式中、Ｒ１及びＲ２は、水素原子、又はハロゲン原子を示し、それぞれ同一又は異なっていてもよい。）で表されるジチオール化合物を必須成分とする皮膚刺激性の改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤、
（２）徐放化がマイクロカプセル化であることを特徴とする請求項１記載の皮膚刺激性が改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤、
（３）徐放化がシクロデキストリンによる包接化であることを特徴とする請求項１記載の皮膚刺激性が改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤、
（４）（１）〜（３）のいずれかに記載の防除剤が冷却塔循環水用であることを特徴とする皮膚刺激性が改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤、
（５）一般式（Ｉ）
【化２】
2005089444.tif 000003
（式中、Ｒ１及びＲ２は、水素原子、又はハロゲン原子を示し、それぞれ同一又は異なっていてもよい。）で表されるジチオール化合物を必須成分とする皮膚刺激性の改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤に腐食防止剤、スケール防止剤、消泡剤及び界面活性剤の少なくとも一種を配合することを特徴とする皮膚刺激性の改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤組成物、
（６）（５）記載の組成物が冷却塔循環水用であることを特徴とする皮膚刺激性の改善された徐放化藻類及びレジオネラ属菌防除剤組成物、に関する。
【発明の効果】
【００１０】  本発明の水系における藻類・レジオネラ属菌の防除方法によれば、ジチオール系抗菌剤を主成分として含有するマイクロカプセル或いはシクロデキストリン包接化物を添加することにより、冷凍装置の循環冷却水や、２４時間風呂の循環温水などの冷温水系、蓄熱水系等に生存しているレジオネラ属菌を防除し、その増殖を防止することができる。また、金属加工油用や製紙工業用、塗料用、繊維油剤用、木材処理用等の腐敗菌等に対する工業防除剤としても有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】  本発明に用いられるジチオール系化合物は、スライムコントロール剤として優れた作用を有する化合物として知られ、製紙産業で抄紙工程時に使用されている。【００１２】  一般式（Ｉ）で表されるジチオール系化合物としては、４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オン、４−フェニル−５−クロロ−１，２−ジチオール−３−オン、１，２−ジチオール−３−オンが挙げられ、これらは混合物として用いてもよい。なかでも、４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オンが好ましい。
一般式（Ｉ）で表されるジチオール系化合物のマイクロカプセル中或いは包接化物中の含量は特に制限されるものではなく、添加量としては、レジオネラ属菌が生存している水系に対して、ジチオール化合物の濃度として０．１〜１０００００ｍｇ／Ｌの範囲にあるのが好ましく、１〜１００ｍｇ／Ｌが更に好ましい。【００１３】  本発明において、他の抗菌剤を使用してもよい。併用される抗菌剤としては、四級アンモニウム塩類等の界面活性剤系殺菌剤、ヒドラジン類やマレイミド類、イソチアゾリン系化合物、ホスホニウム化合物、ブロモニトロ系化合物、ピリチオン系化合物等が挙げられ、具体的には、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ，Ｎ−ジｎ−デシルアンモニウムクロリド、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ，Ｎ−ジｎ−オクチルアンモニウムクロリド、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−オクチル−Ｎ−デシルアンモニウムクロリド、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−イソノニル−Ｎ−デシルアンモニウムクロリド、Ｎ−ヘキサデシル−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド、Ｎ−ヘキサデシル−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムブロミド、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−オクタデシル−Ｎ−（３−（トリメトキシリル）プロピル）アンモニウムクロリド、ヒドラジン、水和ヒドラジン、ソルビタン酸ヒドラジン、マレイミド、Ｎ−メチルマレイミド、Ｎ−エチルマレイミド、シトラコン酸イミド、Ｎ−メチルシトラコン酸イミド、Ｎ−エチルシトラコン酸イミド、２，３−ジメチルマレイン酸イミド、Ｎ−メチル−２，３−ジメチルマレイン酸イミド、Ｎ−エチル−２，３−ジメチルマレイン酸イミド、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）マレイミド、Ｎ−シクロヘキシルマレイミド、Ｎ−４−ヒドロキシシクロヘキシルマレイミド、Ｎ−フェニルマレイミド、Ｎ−ｐ−ヒドロキシフェニルマレイミド、Ｎ−ｐ−ヒドロキシベンジルマレイミド、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン、２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン、５−クロロ−２−ｎ−オクチルイソチアゾリン−３−オン、１，２−ベンゾイソチアゾリン−３−オン、テトラキス（ヒドロキシメチル）ホスホニウム硫酸塩、テトラキス（ヒドロキシメチル）ホスホニウムリン酸塩、テトラキス（ヒドロキシメチル）ホスホニウム硝酸塩、テトラキス（ヒドロキシメチル）ホスホニウム塩酸塩、テトラキス（ヒドロキシメチル）ホスホニウム臭酸塩、テトラキス（ヒドロキシメチル）ホスホニウムフッ酸塩、２−ブロモ−２−ニトロプロパン−１，３−ジオール、２，２−ジブロモ−２−ニトロプロパン−１−エタノール、２，２−ジブロモ−３−ニトロプロピオンアミド、ビス（２−ピリジンチオール−１−オキシド）銅塩、ビス（２−ピリジンチオール−１−オキシド）亜鉛塩、ビス（２−ピリジンチオール−１−オキシド）鉄塩、２−ピリジルチオ−１−オキシドナトリウム、ピリチオンジスルフィド、グルタルアルデヒド、過酸化水素、１−ブロモ−３−クロロ−５，５−ジメチルヒダントイン、メチレンビスチオシアネート、次亜塩素酸ナトリウム、１，５−ペンタンジアール、３−（３，４−ジクロロフェニル）−１，１−ジホスホン酸、２，３，３−トリヨードアリルアルコール、中でも２，２−ジブロモ−３−ニトロプロピオンアミド、２−ブロモ���２−ニトロプロパン−１，３−ジオール、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン、２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オンが好ましい。
これらの殺菌・抗菌剤は単一または混合してジチオール系化合物と併用して用いることができ、その配合量は、ジチオール系化合物の配合量を超えないことが好ましい。【００１４】  併用可能な殺菌・抗菌剤はマイクロカプセル化或いは包接化されたジチオール化合物と併用することもできる。また、塩素や臭素、二酸化塩素等ハロゲン系の抗菌剤もマイクロカプセル化或いはシクロデキストリンで包接化されジチオール化合物の抗菌能を阻害しない範囲で併用することもできる。【００１５】  マイクロカプセル化で使用する壁剤を形成する高分子化合物はポリアミド樹脂、飽和・不飽和のポリエステル樹脂、エポキシ樹脂、ウレタン樹脂、シリコン樹脂、メラミン樹脂、ゼラチン、尿素樹脂、フェノール樹脂等の高分子化合物、或いはこれらの混合物からなる高分子等いずれでもよく、特に限定されるものではない。なかでもメラミン樹脂、ウレタン樹脂、ポリアミド樹脂が好ましく、特にメラミン樹脂が好ましい。【００１６】  マイクロカプセル化の方法については例えば次に示す方法によってできる。すなわち、本発明のジチオール化合物を芯物質としてマイクロカプセルを調製するには、例えば、ゼラチン等の水溶性ポリマーで芯物質を包括し、その濃厚相を分離・硬化するように壁膜を形成させるコアセルペーション法、分散状態の芯物質にモノマーを植え付け、これと連続相を形成する溶液の水溶性モノマーとを、それらの界面で重合反応させ、芯物質を含有した壁膜を形成させる界面重縮合法。また、芯物質に重合触媒を吸着させ外部側から初期重縮合物を包囲させるように反応させ壁膜を形成させるインサイチュ重合法等と称される公知のマイクロカプセル化法等いずれでもよく、特に限定されるものではない。【００１７】  本発明におけるシクロデキストリンによる包接化防除剤とは、一般式（Ｉ）で表されるジチオール化合物をシクロデキストリン類、すなわち、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、メチル−α−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、メチル−γ−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−α−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン等のシクロデキストリンで包接化されたものをいう。【００１８】  包接化の方法については例えば次に示す方法によってできるが、特に限定されるものではない。【００１９】＜飽和水溶液法＞
シクロデキストリンの飽和水溶液にジチオール化合物をそのまま、或いは少量の適当な溶媒に溶解して添加し、０．５時間乃至数時間激しく混合撹拌すると、本発明の包接化物が固体となって析出する。これを濾取後乾燥すると、本発明の包接化物が粉末として得られる。【００２０】＜混練法＞
シクロデキストリンに０．３〜３倍量の水を加え混練し、スラリーとしておく。そこにジチオール化合物をそのまま、或いは少量の適当な溶媒に溶解して添加し、０．５時間乃至数時間混練すると、本発明の包接化物が得られる。【００２１】  本発明の包接化物は、防除活性成分であるジチオール化合物がそのままでは溶出してこないので、付着しても皮膚刺激性が弱くなるので粉末状の防除剤として使用してよく、また粉末を顆粒状又は錠剤等の固形状に加工して使用してもよい。【００２２】  本発明組成物における腐食防止剤としては、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、１，２，３−ベンゾトリアゾール、アルキルベンゾトリアゾール等が挙げられる。【００２３】  スケール防止剤としては、スチレンスルホン酸ソーダ、スルホン酸基含有重合体、１，４−ナフトキノン、１，２−ナフトキノン、ベンゾキノン、ホスホン酸塩、オルトリン酸塩、ポリリン酸塩等が挙げられる。【００２４】  消泡剤としては、ジメチルシリコーンオイル、アルキルアラルキル変性シリコーンオイル、フロロシリコーンオイル、グリセリン脂肪酸エステル、レシチン等が挙げられる。【００２５】  界面活性剤としては、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキルエーテル硫酸塩等の陰イオン界面活性剤、脂肪族４級アンモニウム塩、塩化ベンザコニウム塩、ピリジニウム塩等の陽イオン界面活性剤、カルボキシベタイン、アミノカルボン酸塩、イミダゾリウムベタイン等の両性界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、等の非イオン界面活性剤が挙げられる。【００２６】  本発明の防除剤組成物の対象水系への適用方法としては、例えば、防除剤組成物を直接水系に添加、投入、混合等させることにより、また、固定床、濾過器等にあらかじめ防除剤組成物を塗布乃至は浸透させる等の方法が挙げられる。【００２７】  本発明防除剤は、冷凍装置の循環冷却水や、２４時間風呂の循環温水等の冷温水系、蓄熱水系等に生存しているレジオネラ属菌等の細菌類を防除し、その発生、その増殖を防止することができる。【００２８】  一般式（Ｉ）で表されるジチオール化合物のマイクロカプセル化或いは包接化防除剤中の含量は、本発明の目的を達成ために必要な含量であればよく、特に制限されるものではない。
また、ジチオール化合物の添加濃度としては、レジオネラ属菌や藻類が生存している水系に対して、ジチオール化合物の濃度が０．１〜１００，０００ｍｇ／Ｌの範囲にあるのが好ましく、１〜１００ｍｇ／Ｌが更に好ましい。
【実施例】
【００２９】  以下に、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。【００３０】合成例１
アジピン酸ジブチル１６０グラムに４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オン４０グラムを溶解しＡ液を調製する。２％ゼラチン水溶液３００グラム中にＡ液を加えて乳化し、Ｏ／Ｗエマルジョンを調製する。得られたＯ／Ｗエマルジョンを１０％炭酸ナトリウム水溶液でｐＨ８〜９にし、メラミンホルムアルデヒド８０グラムを添加する。次にクエン酸でｐＨを５．５に調整し、７０℃で２時間撹拌し、メラミン膜を有する平均粒径２ミクロンのジチオール内包マイクロカプセル化製剤（ＹＦ−１２）を得た。【００３１】実施例１
（１）検体の調製
３００ｍＬ三角フラスコ６個に純水２００ｍＬを入れ、オートクレーブ滅菌を行う。ＹＦ−１２を１０．３１ｇ取り、純水で１００ｍＬにメスアップする（４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オンとして１０，０００ｍｇ／Ｌ）。これを検体調製液とする。滅菌済みの三角フラスコに２０μＬ、１００μＬ、２００μＬ、４００μＬ、６００μＬの検体調製液を添加し、滅菌したＮａＯＨ若しくはＨＣＬ水溶液を調製し、ｐＨを６．５〜７．５の範囲に合わせる。ブランクを含めて被験物質の濃度は０、１、５、１０、２０、３０ｍｇ／Ｌとなる。【００３２】（２）菌懸濁液の調製
あらかじめＢＣＹＥ培地にレジオネラ属菌を適当量接種し、試験当日に新鮮培養菌となるように培養する。培地より白金耳を用いて菌をかきとり、滅菌水に懸濁させる。およそ１０７個／ｍＬとなるように懸濁させた後、各々の三角フラスコに２ｍＬずつ加える。菌を添加した時点で試験開始とする。【００３３】（３）菌数の測定
試験開始から０、６、１２、２４、４８時間経過後、試験液を取り、１、１０、１００、１，０００、１０，０００倍希釈系列を作り、希釈液を０．１ｍＬ取り、ＷＹＯ培地に塗抹する。その後、乾燥を避けるためにビニル袋に詰め、倒置して３７℃で１週間培養する。培養終了後、コロニーを計測し、濃度変化とともに変化するレジオネラ生菌数、時間経過とともに変化するレジオネラ生菌数を測定した。これらの結果を表１に示す。【００３４】実施例２
（１）検体の調製
３００ｍＬ三角フラスコ６個に純水２００ｍＬを入れ、オートクレーブ滅菌を行う。ＹＦ−１２を１０．３１ｇ取り、純水で１００ｍＬにメスアップする（４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オンとして１０，０００ｍｇ／Ｌ）。これを検体調製液とする。滅菌済みの三角フラスコに２０μＬ、５０μＬ、１００μＬの検体調製液を添加し、滅菌したＮａＯＨ若しくはＨＣＬ水溶液を調製し、ｐＨを６．５〜７．５の範囲に合わせる。ブランクを含めて被験物質の濃度は０、０．１、０．２５、０．５ｍｇ／Ｌとなる。
（２）菌懸濁液の調製
あらかじめＢＣＹＥ培地にレジオネラ属菌を適当量接種し、試験当日に新鮮培養菌となるように培養する。培地より白金耳を用いて菌をかきとり、滅菌水に懸濁させる。およそ１０７個／ｍＬとなるように懸濁させた後、各々の三角フラスコに２ｍＬずつ加える。菌を添加した時点で試験開始とする。試験開始２４時間後、薬剤の効果の持続性を確認する意味で、再度同様に菌を添加した。
（３）菌数の測定
試験開始から０、６、１２、２４、３０、３６、４８時間経過後、試験液を取り、１、１０、１００、１，０００、１０，０００倍希釈系列を作り、希釈液を０．１ｍＬ取り、ＷＹＯ培地に塗抹する。その後、乾燥を避けるためにビニル袋に詰め、倒置して３７℃で１週間培養する。培養終了後、コロニーを計測し、濃度変化とともに変化するレジオネラ生菌数、時間経過とともに変化するレジオネラ生菌数を測定した。これらの結果を表２に示す。【００３５】比較例１
ＹＦ−１２の代わりに、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン１０重量％と２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン４重量％を含む水溶液（ローム・アンド・ハース社製、商品名：ＫＡＴＨＯＮ  ＷＴ）を用い、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オンと２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オンの濃度の合計が０、１、５、１０、２０、３０ｍｇ／Ｌとした以外は、実施例１と同じ操作を行った。これらの結果を表１に示す。【００３６】比較例２
ＹＦ−１２の代わりに、２−ブロモ−２−ニトロプロパン−１，３−ジオール（長瀬化成株式会社製、商品名：ブロノポール）を用いた以外は、実施例１と同じ操作を行った。これらの結果を表１に示す。【００３７】比較例３
ＹＦ−１２の代わりに、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン１０重量％と２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン４重量％を含む水溶液（ローム・アンド・ハース社製、商品名：ＫＡＴＨＯＮ  ＷＴ）を用い、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オンと２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オンの濃度の合計が０、０．１、０．２５、０．５ｍｇ／Ｌとした以外は、実施例２と同じ操作を行った。これらの結果を表２に示す。【００３８】
【表１】
2005089444.tif 000004
【００３９】
【表２】
2005089444.tif 000005
【００４０】  表１の結果から、実施例１、比較例１，２に示される各薬剤の添加濃度１ｍｇ／Ｌの場合の生菌数（個／ｍＬ）を比較すると、ＹＦ−１２を用いた実施例１では６時間後で４．５×１０３個／ｍＬ台、１２時間後で＜１０個／ｍＬ台、２４時間後で＜１０個／ｍＬ台、４８時間後で＜１０個／ｍＬ台であるのに対して、公知の殺菌剤を用いた比較例１、２では１０４〜１０５個／ｍＬ台である。また、表２において更に低い添加濃度０．５の場合、ＹＦ−１２は菌を再接種した４８時間後で＜１０個／ｍＬ台であるのに対して、公知の殺菌剤である比較例３を用いた場合４８時間後で８×１０３個／ｍＬ台であることから、ジチオール化合物を主成分として含有するマイクロカプセル化抗菌剤は、レジオネラ菌に対して公知の殺菌剤よりも低濃度で優れた防除力を有することが分かる。
更に表２において殺菌剤の持続性を確認する為２４時間後に菌を再接種してもＹＦ−１２は除菌力を有しており、一度殺菌した後でも薬剤の効果が持続していることが分かる。【００４１】合成例２
シクロデキストリン包接化物の製造「包接化合物１」：β−シクロデキストリン（日本食品化工株式会社からセルデックスＢ−１００の商標名で販売されている。）３０ｇに水を加え、乳鉢内でスラリー状になるまで混練する。この中に４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オン（株式会社エーピーアイコーポレーション社製マイクロバン８６原体）５ｇを添加し、引き続き混練する。２０分程すると次第に粘度は増加していくが、ある一定の粘度に落ち着いたところで混錬を止め、乾燥・粉砕すると、目的の包接化物の粉末を得る。【００４２】  この粉末の赤外線吸収スペクトルを測定すると、β−シクロデキストリンには存在せずジチオール化合物に特有の吸収帯が高波数側にシフトしていることにより包接化合物であることを確認した。
ジチオール化合物→包接化されたジチオール化合物：１５１６〜１５２１ｃｍ−１→１５２６〜１５３１ｃｍ−１、１６２６〜１６３１ｃｍ−１→１６８０〜１６８５ｃｍ−１。【００４３】合成例３
シクロデキストリン包接化物の製造「包接化合物１」：２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（日本食品化工株式会社からセルデックスＨＰ−β−ＣＤの商標名で販売されている。）３０ｇに水を加え、乳鉢内でスラリー状になるまで混練する。この中に４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オン（株式会社エーピーアイコーポレーション社製マイクロバン８６原体）４ｇを添加し、引き続き混練する。２０分程すると次第に粘度は増加していくが、ある一定の粘度に落ち着いたところで混錬を止め、乾燥・粉砕すると、目的の包接化物の粉末を得る。【００４４】  合成例２と同様に、この粉末についても赤外線吸収スペクトルにおけるジチオール化合物の特異的吸収帯の高波数側へのシフトにより、包接化合物であることを確認した。【００４５】実施例３
純水２００ｍＬを入れた３００ｍＬ容器を６本オートクレーブ滅菌した後、「包接化合物１」が最終濃度０、１、５、１０、２０、３０ｍｇ／Ｌとなるよう添加する。新鮮培養されたレジオネラ属菌を取り、約１０７個／ｍＬになるように純水に調整し、各容器に１０ｍＬ加え、最終的に約１０５個／ｍＬとなるようにする。時々混合し、０、６、１２、２４、４８時間後、液を取り、数段階の１０倍希釈系列を作成し、ＷＹＯα培地に播種し、３７℃で１週間培養後、出現したコロニーを計測し、濃度変化と共に変化するレジオネラ生菌数または時間経過と共に変化するレジオネラ生菌数を見た。これらの結果を
【表３】
2005089444.tif 000006
に示す。【００４６】比較例４
「包接化合物１」の代わりに、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン１０重量％と２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン４重量％を含む水溶液［ローム・アンド・ハース社、ＫＡＴＨＯＮ  ＷＴ］を用い、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オンと２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オンの濃度の合計が０、１、５、１０、２０、３０ｍｇ／Ｌとした以外は、実施例３と同じ操作を行った。これらの結果を表３に示す。【００４７】比較例５
「包接化合物１」の代わりに、２−ブロモ−２−ニトロプロパン−１，３−ジオール［一般名：ブロノポール］を用いた以外は、実施例３と同じ操作を行った。これらの結果を表３に示す。【００４８】
【表３】
【００４９】  表３に見られるように、各薬剤の添加濃度１ｍｇ／Ｌの場合の生菌数を比較すると、「包接化合物１」を用いた実施例３では６時間後で４．５×１０３個／ｍＬ台、１２時間後で＜１０２個／ｍＬ台であり、２４時間後で＜１０２個／ｍＬ台であり、４８時間後で＜１０２個／ｍＬ台と、公知の殺菌剤を用いた比較例１、２では、１０５個／ｍＬ台であることから、ジチオール系抗菌剤を主成分として含有するマイクロカプセルは、レジオネラ菌に対して公知の殺菌剤よりも優れた防除力を有することが分かる。
【００５０】実施例４
（１）検体の調製
３００ｍＬ三角フラスコ６個に純水２００ｍＬを入れ、オートクレーブ滅菌を行う。化合物２を３７９ｍｇ取り、純水で１００ｍＬにメスアップする。これを検体調製液とする。滅菌済みの三角フラスコに２０μＬ、１００μＬ、２００μＬ、４００μＬ、６００μＬの検体調製液を添加し、滅菌したＮａＯＨ若しくはＨＣＬ水溶液を調製し、ｐＨを７．０の範囲に合わせる。ブランクを含めて被験物質の濃度は０、１、５、１０、２０、３０ｍｇ／Ｌとなる。
（２）菌懸濁液の調製
あらかじめＢＣＹＥ培地にレジオネラ属菌を適当量接種し、試験当日に新鮮培養菌となるように培養する。培地より白金耳を用いて菌をかきとり、滅菌水に懸濁させる。およそ１０７個／ｍＬとなるように懸濁させた後、各々の三角フラスコに２ｍＬずつ加える。菌を添加した時点で試験開始とする。
（３）菌数の測定
試験開始から０、６、１２、２４、４８時間経過後、試験液を取り、１、１０、１００、１，０００、１０，０００倍希釈系列を作り、希釈液を０．１ｍＬ取り、ＷＹＯ培地に塗抹する。その後乾燥を避けるためにビニル袋に詰め、倒置して３７℃で１週間培養する。培養終了後、コロニーを計測し、濃度変化とともに変化するレジオネラ生菌数、時間経過とともに変化するレジオネラ生菌数を測定した。これらの結果を表４に示す。
【００５１】実施例５
ｐＨを８に変えた以外は、実施例４と同じ操作を行った。これらの結果を表４に示す。
【００５２】比較例６
包接化合物２の代わりに、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン１０重量％と２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オン４重量％を含む水溶液（ローム・アンド・ハース社製、商品名：ＫＡＴＨＯＮ  ＷＴ）を用い、５−クロロ−２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オンと２−メチル−４−イソチアゾリン−３−オンの濃度の合計が０、１、５、１０、２０、３０ｍｇ／Ｌとした以外は、実施例４と同じ操作を行った。これらの結果を表４に示す。
【００５３】比較例７
包接化合物２の代わりに、２−ブロモ−２−ニトロプロパン−１，３−ジオール（長瀬化成株式会社製、商品名：ブロノポール）を用いた以外は、実施例４と同じ操作を行った。これらの結果を表４に示す。
【００５４】参考例１
包接化合物２の代わりに、４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オン（包接化していないもの）を用いて実施例４と同じ操作で評価しようとしたところ、沈殿が生じ、時間経過とともに変化するレジオネラ生菌数を測定できなかった。
【００５５】
【表４】
2005089444.tif 000007
【００５６】  表４の結果から、実施例、比較例に示される各薬剤の添加濃度１ｍｇ／Ｌの場合の生菌数（個／ｍＬ）を比較すると、包接化合物２を用いた実施例４では３時間後で＜１０個／ｍＬ未満となったのに対して、公知の殺菌剤を用いた比較例６、７では１０３〜１０６個／ｍＬ台であることから、ジチオール化合物を包接化した防除剤は、レジオネラ菌に対して公知の殺菌剤よりも低濃度で速効性が認められ、持続性に優れた除菌力を有することが分かる。更に実施例５の結果からｐＨ８といったアルカリ条件下でも低濃度で速効性が認められ、持続性に優れた防除力を有することが分かる。
【００５７】実施例６
淡水藻類（藍藻類；Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ  ｌａｅｔｅｖｉｒｅｎｓ）１０５個／ｍＬを含むＤｅｔｍｅｒ培地に、一定量の包接化合物２を溶解し、培地中の４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オンの濃度が１ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、３０ｐｐｍである試料を調製し、２０℃で２４時間連続して照明し振とう培養した。１週間後に目視にて判定した。結果を表５に示した。
【００５８】実施例７
淡水藻類（緑藻類；Ｇｒａｅｓｉｅｌｌａ  ｅｍｅｒｓｏｎｉｉ、旧Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ  ｐｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ）１０５／ｍｌを含むＭＩＮ培地に、一定量の化合物２を溶解し、培地中の４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オンの濃度が１ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、３０ｐｐｍである試料を調製し、２３℃で２４時間連続して照明し振とう培養した。１週間後に目視にて判定した。結果を表５に示した。
【００５９】実施例８
淡水藻類（珪藻類；Ｎｉｔｚｓｃｈｉａ  ｃｌｏｓｔｅｒｉｕｍ）１０５個／ｍＬを含むＭＩＮ培地に、一定量の包接化合物２を溶解し、培地中の４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オンの濃度が１ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、３０ｐｐｍである試料を調製し、２２℃で２４時間連続して照明し振とう培養した。１週間後に目視にて判定した。結果を表５に示した。
【００６０】
【表５】
2005089444.tif 000008
【００６１】  表中の数字は色調を表し、４が最も濃く、１は微かに色を帯び、０は全く変化がないことを示している。
【００６２】実施例９
水溶性試験
包接化合物１、包接化合物２及び４，５−ジクロロ−１，２−ジチオール−３−オン（ＲＹＨ−８６）の室温での水への溶解性は、それぞれ、約８ｇ／Ｌ、約１９ｇ／Ｌ、約０．０５ｇ／Ｌであったことから、シクロデキストリン包接防除剤は、原体ＲＹＨ−８６を１０数％含有することから、１０倍以上水へ可溶化できることが明らかになり、水溶性の製剤として加工も可能なことが示された。
【００６３】実施例１０
マイクロカプセル化藻類及びレジオネラ属菌防除剤組成物の例
マイクロカプセル化製剤（ＹＦ−１２）      ９５重量％
ジエタノールアミン（腐食防止剤）            ３重量％
ジメチルシリコーンオイル〈消泡剤〉          ２重量％
冷却塔循環水にマイクロカプセル化製剤のみを添加した場合には、使用中泡立ちがあったがジメチルシリコーンオイルを配合した本組成物では泡立ちは認められなかった。
【００６４】実施例１１
包接化藻類及びレジオネラ属菌防除剤組成物の例
包接化合物１                              ９６重量％
ベンゾトリアゾール（腐食防止剤）            ２重量％
アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム        ２重量％
包接化合物のみを水へ溶解する場合に比較し、均一な溶解物が得られた。
【産業上の利用可能性】
【００６５】  本発明の防除剤及びその組成物によれば、ジチオール類の皮膚刺激性等の毒性を低減するとともに、冷却塔の循環水、冷凍装置の循環冷却水や、温水プールや浴場等の冷温水系、蓄熱水系等に生存している藻類やレジオネラ属菌等の細菌を防除することができる。また、マイクロカプセル化或いは包接化することによりジチオール類の溶出を徐放化することにより効力の持続性を高め、更にジチオール類は低濃度で有効であることから環境負荷も少ない。本発明の防除剤、防除剤組成物は、黴に対しても有効である。