(57)【要約】【課題】ウエットワイパー等の除菌・殺菌においてこれまでにない有効性を示す除菌・殺菌剤組成を提供する。【解決手段】二酸化塩素の殺菌作用を助長する賦活剤および二酸化塩素の分解を抑制する活性持続剤を併用する事により除菌・殺菌作用を顕著に高めた。しかもヒト皮膚に影響を与えない新規除菌・殺菌剤組成によってウエットワイパーの殺菌・除菌法を完遂した。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
二酸化塩素を含有する二酸化塩素剤を主成分とする製品及び二酸化塩素を活性化させるための賦活剤或は二酸化塩素の活性を維持するための活性持続剤の併用を特徴とする製品を使用したウエットワイパーの除菌・殺菌法。
【請求項２】
前記二酸化塩素剤は、溶存二酸化塩素ガス水溶液、亜塩素酸及びその塩及び安定化あるいは活性化された二酸化塩素を含有することを特徴とする請求項１に記載するウエットワイパーの除菌・殺菌方法。
【請求項３】
前記賦活剤は無機系塩素殺菌剤として次亜塩素酸及びその塩からなることを特徴とし、請求項１〜３何れかに記載するウエットワイパーの殺菌・除菌法。
【請求項４】
前記活性持続剤はＶＩＩＩ族に属する第２価金属、Ｆｅ２＋及びＣｏ２＋の硫酸塩及び塩酸塩を特徴とし、請求項１〜３何れかに記載するウエットワイパーの殺菌・除菌法。
【請求項５】
前記安定化二酸化塩素は亜塩素酸及びその塩をＮａ２ＣＯ３・３Ｈ２Ｏ２、ＮａＨＣＯ３及びＮａＢＯ３からなる群から選択される安定化剤により安定化された安定化二酸化塩素剤から生成されることを特徴とする請求項１〜４何れかに記載するウエットワイパーの殺菌・除菌法。
【請求項６】
前記活性化二酸化塩素は、前記二酸化塩素剤を有機酸類、鉱物酸類及び過酸化水素及びアルコール類から選択される活性剤により、二酸化塩素の発生を活性化した二酸化塩素剤から発生することを特徴とする請求項１〜５何れかに記載するウエットワイパーの殺菌・除菌法。
【請求項７】
前記二酸化塩素剤における前記二酸化塩素の使用濃度は１．０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍである請求項１〜６の何れかに記載するウエットウエットワイパーの殺菌・除菌法。
【請求項８】
前記賦活剤及び活性持続剤の使用濃度は「請求項７」に記載する二酸化塩素濃度に対して０．０５ｐｐｍ〜１０ｐｐｍで、前記二酸化塩素と同時併用した“三位一体”で有効性を表すことを特徴とする請求項１〜７何れかに記載するウエットワイパーの殺菌・除菌法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】本発明は、二酸化塩素が有する“切れ味”鋭い殺菌能を更に高め、その高まった殺菌能を持続させることにより、より効率的な除菌・殺菌をもたらすものである。
発明者は二酸化塩素剤から二酸化塩素の発生をより活発化させ、二酸化塩素のもつ除菌・殺菌力を更に高めるための賦活剤を創出し、更にこの活性を持続するための活性持続剤を創製し、これら３者を併用使用する事により、より少量の二酸化塩素で著しい除菌・殺菌をもたらす事に成功した。
この新規に組み合わせた殺菌システムにより医療資材や食品基材の消毒・殺菌、更に詳しくは、医薬部外品並びに雑貨品に該当するウエットワイパー類の効率的な消毒・殺菌に関するものである。  猶、本明細書に開示する「除菌」とは「殺菌」、「滅菌」、「消毒」等概念をも包含する。また、ここで言うウエットワイパーとは「ぬれティッシュ」及び「紙おしぼり」「お手拭き」等を含み、紙、布及び合成繊維を素材とし、清拭を目的とする製品の総称であり、主としてヒトの皮膚及び手指の清浄を目的とするものである。
【背景技術】
【０００２】二酸化塩素の特性として殺菌力が高く、広域の抗菌スペクトルを示し、耐性菌の出現をも認めず、更に抗ウイルス活性も有している。また、類縁殺菌剤である次亜塩素酸ソーダで認められている発癌性物質であるトリハロメタンの生成も認めず、広いｐＨ域で活性を示すと共に、有機物の共存下でも活性を発揮する。更に、ヒト皮膚に対する刺激性も低く、脱臭作用も有する等数多くのメリットを有している。  二酸化塩素は水道水を始め、医療基材の除菌・殺菌剤としても注目され、また、その殺菌力と毒性から次世代の殺菌剤とも言われている。【０００３】しかし、熱に不安定で、爆発性を有し、腐食性からその用途は限定されていたが、アルカリ性等で安定化すると共に、用途に応じてｐＨを調整することにより、その使用方法が拡大された。欧米では広く使用され、ＥＰＡ（環境保護局）やＤＯＡ（アメリカ農務省）で水道水の殺菌剤、食品の消毒剤として承認されている。日本でも水道水の殺菌や食品添加物として限定使用として認可されているが、全般的にその用途は限られている。【０００４】二酸化塩素の除菌・殺菌への応用として食品包装袋への応用（特開２００３−３２７２７７）、自動車エアコンの除菌・消毒（特開２００３−３１０７２７）、生鮮食品の日持ち向上方法（特開２００３−２５０４４４）、食材及び布織機材の洗浄（特開２００３−２３５９４５）等々多岐領域に亘っている。特に医療・衛生管理域として床ずれ防止装置（特開平０８−３０８８８）、使用済み医療器具類の洗浄・滅菌処理方法（特開２００３−２８４７６４）及び手術室の消毒、内視鏡の消毒等も報告されている。【０００５】医療器材の一部に属するウエットワイパー類の除菌・殺菌剤として一般的に塩化ベンザルコニウムや二酸化塩素を使用してウエットワイパー類の衛生性を確保し、消費者のニーズに応える製品の提供に努めている。【０００６】しかし、塩化ベンザルコニウムの抗菌スペクトラムは狭く、緑膿菌・芽胞菌・結核菌・真菌に対して殆ど殺菌活性を示さず、該薬剤の連続使用は耐性菌の出現が確認されており、行攻当局は連続使用を禁止している。【０００７】発明者が店頭のウエットワイパーの微生物調査を実施した結果、塩化ベンザルコニウムを含浸液としたウエットワイパー１７種より４種の製品から１０５ｃｆｕ／ｇの細菌を検出した。
検出菌を同定した結果、Ｐｓｕｅｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（緑膿菌）及びＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｕ  ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓで病原菌や日和見感染菌であった。【０００８】二酸化塩素は前述したように、耐性菌の出現や発癌性のトリハロメタン生成が認められず、殺菌効力も強烈である。しかし、ウエットワイパーの含浸液に二酸化塩素を使用した場合、ウエットワイパーの基材である不織布の特異性にも関係するが、不織布に混在する結合剤やスライムコントロール剤と反応して二酸化塩素が消費され、殺菌力が低下する。そのため該ウエットワイパーを長期保存する事によりカビが発生する事が認められるという欠点が生じる。【０００９】しかし、この欠点をカバーするため高濃度の二酸化塩素を含浸液として使用すれば、特異臭の発生、ウエットワイパー包装袋表面の印字体の剥離・消滅、包装袋の破損が生じ、更にはヒト皮膚に対する影響の危険性をも考えられる。以上の問題を解決するためには低濃度の二酸化塩素で防カビ・防菌に著効を示す新規な殺菌液組成を創出しなければならない。【００１０】一方、実生産では、前述したように、塩化ベンザルコニウムが多用されているが、塩化ベンザルコニウムは抗菌域が狭く、院内感染で死亡事例が認められているセラチアや緑膿菌、芽胞菌、真菌、ウイルスには殆ど殺菌作用を示さず、血液、創傷、痰、尿など取り扱う場面での消毒は困難とされている。特に、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ菌属、中でも高病原性の緑膿菌は塩化ベンザルコニウムを栄養源として増殖するとも言われている。
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】前述のように、多用されている塩化ベンザルコニウムを含浸液とするウエットワイパーの消毒はその製造工程中に混入した上記耐性菌が出荷後の顧客に渡る期間中にも増殖する危険性がある。
これらを防止するためには、ウエットワイパー基材、製造工程中の薬液貯蔵タンク容器、配管工程、浸漬工程及び包装袋挿入工程及び製造環境等に対して完全な微生物衛生管理を実施しなけれならず、実用面では不可能である。更に、本薬剤を長期間連続使用することにより製造工程中に耐性菌による生体膜（バイオフィルム）が生着する危険性があり、この製造環境下で製造されたウエットワイパーは常時汚染の危険性に曝されている。たとえ、出荷時は規格値に適合した製品であったとしても、顧客に渡る保存期間中に耐性菌の異常増殖が発生する。これらの汚染ウエットワイパーで手指を清拭する事は創傷・炎症の悪化亢進の原因にもなり兼ねない。
【００１２】消毒剤の選択に際しては、消毒の対象物が要求する清浄度、使用時の基本的条件の適合性、抗菌スペクトルの範囲、生体への影響、消毒作用の持続性・吸着性・浸透性、有機物存在下での有効性、消毒対象物への影響、臭気・色素の沈着、耐性菌の出現性、廃棄処理の容易性等々を考慮しなければならない。
【００１３】特に、消毒薬耐性菌の出現が今般重要な問題となっており、「標準感染予防技法」が導入されているにも拘らず、耐性菌、例えば  緑膿菌、セラチア、セパチア等による院内感染・免疫機能の低下した癌患者・老人・術後者・幼若者に死亡例が報告されている。特に、感染の危険性の高い血液、創傷、痰、尿等を取扱う作業環境では手指等の消毒を徹底する必要があるといわれている。
最近では、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン、ポンピドンヨードに対する耐性菌や生体に対する影響について数多く報告されている。
【００１４】前述の諸問題を解決するため、前述した二酸化塩素の特性に視注しウエットワイパーの含浸消毒液として鋭意検討を重ねてきた。
二酸化塩素には強力な酸化・抗菌・消臭活性を有し、細菌に対しては直接微生物と接触して微生物表層あるいは生態系に係る重要な代謝関連酵素および細胞膜組成中のチロシン、メチオニンおよびシスチン残基を特異的に酸化させ、その機能を不活化させる事による、或は二酸化塩素から発生する発生期の酸素により微生物の細胞を破壊する機序が知られている。
また、二酸化塩素は脂肪酸、多糖類、マレイン酸、フマール酸など不飽和脂肪酸と反応せず、従って天然糖類で被覆されている野菜や果実を傷める事はない。
欧米では塩素の代替消毒剤として広く飲料水の殺菌や環境の浄化やＨＡＣＣＰ等食品衛生管理、医療用に使用されていることは前述した。
【００１５】塩素系消毒剤  例えば代表例として次亜塩素酸或はその塩である次亜塩素酸酸ソーダや次亜塩素酸酸カルシュウムはカビ取り剤や洗浄用漂白剤として広く使われている。この次亜塩素酸類の殺菌機序は被対象物自体の「塩素化」による殺菌作用で、分子構造は類似しているが作用機序は異なる。次亜塩素酸類は有機物と容易に結合するためその殺菌活性は容易に失活する。また、その臭気は強烈であり、高濃度含浸殺菌剤としてウエットワイパーの殺菌には不向きである。
【００１６】作用機序の異なる二酸化塩素剤と有機あるいは無機塩素殺菌剤との併用による殺菌相乗効果について鋭意検討を行った。
ここで有機塩素系化合物としてイソシアヌル酸また無機塩素系化合物として次亜塩素酸およびその塩類を挙げることが出来る。
二酸化塩素と塩素系化合物殺菌剤との併用は殺菌剤として既にクイックバスターズ（商品名）として市販されている。更に行攻当局からの２４時間風呂除菌対策として両者併用を薦めている。
しかし、これらは何れも次亜塩素酸塩を主体とし、二酸化塩素を副次的成分とした組成である。
【００１７】本発明は二酸化塩素を主体成分とし、次亜塩素酸塩  例えば次亜塩素酸ソーダを副次的に使用して二酸化塩素の持つ“切れ味”鋭い殺菌作用を次亜塩素酸塩で更に高め、或は賦活しようとしたものである。しかし、次亜塩素酸塩殺菌剤は前述した通り、有機物の存在で容易に失活し、また二酸化塩素も分解する可能性もある。本発明者は長時間併用による相乗効果を維持するため、鋭意検討を続けた。
【００１８】その結果、ＶＩＩＩ族元素鉄族の２価イオン  詳しくは第一鉄或は第一コバルトに活性保持作用があることを認め、これらを活性持続剤として検討を重ねた。
【００１９】以上記述したとおり、二酸化塩素を主薬として有機或は無機塩素系化合物殺菌剤からなる賦活剤を賦活剤ＭＫと称し、この賦活剤ＭＫは次亜塩素酸或はその塩類であり、活性持続剤は第ＶＩＩＩ族元素鉄族２価イオンからなる。この活性持続剤を活性持続剤ＳＸと称し、この活性持続剤ＳＸは硫酸第一鉄或は塩化第一鉄からなる。本発明した新規組成薬剤は二酸化塩素、賦活剤ＭＫ及び活性持続剤ＳＸを“三位一体”の組み合わせで使用することを特徴とする新規殺菌組成である。
【００２０】“三位一体”の組み合わせで使用する事により想像もし得なかった驚愕的な殺菌活性が得られた。ウエットワイパーの殺菌消毒液量は常用時の５〜５０分の１量で同一の効果がることを認めた。
これにより、二酸化塩素剤の最大の欠点であった二酸化塩素臭やウエットワイパー包装袋表面の印字の剥離・消滅、包装袋の破損問題が解消された。
【００２１】一般に、ウエットワイパーの基材である不織布の主原料素材は、紙、コットン、合成繊維等々があり、それぞれ結合剤やスライムコントロール剤で処理され、従ってこれら基材には上記薬剤が残留する。ヒトへの安全性を考慮して上記薬剤を無毒化ないしは中和する必要がある。二酸化塩素には上記薬剤を中和作用をも合わせ持っていることを知った。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】本願明細書に記載する二酸化塩素剤とは二酸化塩素を含有するものをいい、例えば亜塩素酸ナトリウム、亜塩素酸カリウム等の亜塩素酸塩に塩酸、硫酸等の無機酸を加えることにより発生させることが出来る。【００２３】また、上記二酸化塩素は亜塩素酸塩を安定化剤により安定化させた安定化二酸化塩素剤から発生させても良い。
ここで、安定化剤とはＮａ２ＣＯ３，３Ｈ２Ｏ２、ＮａＨＣＯ３、ＮａＢＯ３等を挙げることができる。このような安定化二酸化塩素剤は助川化学（株）より提供されている。【００２４】更に、上記二酸化塩素は上記二酸化塩素剤を有機酸類、過酸化水素及びアルコール類から選択される活性化剤により二酸化塩素の発生を活性化した二酸化塩素から発生させてもよい。  ここで、上記有機酸類とは、  例えば  クエン酸等を代表例として挙げることが出来る。また、上記鉱物酸類としては、例えば硫酸を代表例として挙げることができる。また、上記アルコール類としては、例えばエタノールを代表例として挙げることが出来る。
このような活性化された活性化二酸化塩素も、また助川化学（株）より提供されている。【００２５】上記賦活剤ＭＫは有機系塩素殺菌剤として  例えばイソシアヌル酸無機系塩素殺菌剤として  例えば次亜塩素酸或はその塩類、代表例として次亜塩素酸ソーダ、次亜塩素酸カルシウムを挙げることが出来る。次亜塩素酸及びその塩類は次亜塩素酸発生用装置より食塩水電気分解で得られる次亜塩素酸イオン等の機能水をも含む。【００２６】上記活性持続剤ＳＸは、ＶＩＩＩ族元素鉄族の２価イオン  例えば塩酸第一鉄、硫酸第一鉄或は硫酸第一コバルト或は塩酸第一コバルトの何れからなる水溶液あるいは上記化合物を混合しても良い。【００２７】本発明による含浸液濃度はウエットワイパー基材不織布（１２．３ｘ２７．４ｃｍ）例えば不織布  ４５ＨＢＷにおいて二酸化塩素の好ましい濃度は３０ｐｐｍ〜３００ｐｐｍで、より好ましくは５０ｐｐｍ〜１００ｐｐｍである。本不織布で二酸化塩素濃度が下限値より低い場合は、不織布に含まれる結合剤やスライムコントロール剤により消費されるため、殺菌力が低下するため好ましくない。
二酸化塩素５０ｐｐｍ〜１００ｐｐｍ含浸液に対して好ましい賦活剤ＭＫの濃度は０．１ｐｐｍ〜２．０ｐｐｍ、好ましくは０．２５ｐｐｍ〜１．５ｐｐｍ、更に好ましくは０．５ｐｐｍ〜１．０ｐｐｍである。
活性持続剤ＳＸは二酸化塩素５０ｐｐｍ〜１００ｐｐｍ含浸液に対して好ましい濃度は０．１ｐｐｍ〜２．０ｐｐｍで、好ましくは０．２５ｐｐｍ〜１．５ｐｐｍで、更に好ましくは０．５ｐｐｍ〜１．０ｐｐｍである。
活性持続剤ＳＸを２０ｐｐｍ以上で使用すると次亜塩素酸或はその塩化合物を分解するため、高濃度での使用は好ましくない。【００２８】上記二酸化塩素に賦活剤ＭＫ、活性維持剤ＳＸを併用する組み合わせ使用は従来から汎用されている次亜塩素酸よりも低濃度、短時間の処理で微生物に対して１０〜１００倍の除菌効果を示し、更には、広いｐＨ域、広い抗菌スペクト域を示すと共に、生体に対する副作用も認められない。【００２９】ウエットワイパーに対する除菌・殺菌試験法は未だ確立されておらず、微生物の汚染状況の把握は勿論のこと、ウエットワイパーに対する含浸消毒薬剤の有効性の評価判定法もなく、ただ直感的観察に頼ったきらいがある。
本発明者は鋭意基礎検討を重ね、初めてウエットワイパーの微生物汚染を数値で評価できるシステムに成功した。即ち、“ウエットワイパー微生物学”の道を拓くものと言える。
【実験例１】
【００３０】〈ウエットワイパーの調製〉
不織布原反（Ｊ−ｓｏｆｔ社製４５ＨＢＷ）を１２．３ｘ２７．４ｃｍに裁断し、それに含浸薬液を５．０ｍｌ／シートの割合で添加（０．０１５ｍｌ／ｃｍ２相当）、次いで含浸液が均一になるよう無菌的にローラーで漬み込ませて後、包装袋に無菌的に挿入した。このウエットワイパーに後述する被検カビ３株の混合胞子懸濁液を注射針で接種し（チャレンジ）、密封する。３０℃で一定期間放置後、ポテトデキストロース液体培地（ＰＤＢ）（常用の２倍濃度）１．０ｍｌを注入し、更に３０℃で３日〜５日間培養する。生育したコロニー及び胞子形成コローを分別して測定する。
各実験群５枚とし検出菌数を平均して生育カビ検出指数を算出する。
【００３１】〈評価方法〉
検出した生育菌数を下記のとおり求めた。
Ｎ＝（ｎ／ｄ０＋ｍ／ｄ１ｘＦ）
Ｎ    ；  生育カビ検出指数
ｎ    ；  検出コロニー数
ｄ０  ；  コロニー検出日
ｍ    ；  胞子形成コロニー数
ｄ１  ；  胞子形成コロニー検出日
Ｆ    ；  係数    １０
【００３２】〈接種菌胞子懸濁液の調整〉
チャレンジ試験用の被検株としてＴｒｉｃｈｏｄｅｍａ  ｖｉｒｉｄａｅ，Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｌａｄｏｓｐｏｒｏｉｄｅｓ及びＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇａｒ  ＩＦＯ６３４１をＰＤＡ斜面培地で３日〜５日、３０℃で培養する。斜面培地より常法とおりガラスビーズで胞子を採集後、無菌水に懸濁する。この懸濁液を粗ろ過後３菌液を混合した。（菌数１．４ｘ１０４ｃｆｕ／ｍｌ．）
【実験例２】
【００３３】〈店頭ウエットワイパーより微生物の検出及び同定〉
含浸殺菌剤と塩化ベンザルコニウムを含む紙おしぼりを常法とおり、０．１％レシチン（和光純薬）及び０．７％ポリソルベート（花王株式会社）を含む標準寒天培地（日水製薬）に貼付し、３０℃で３〜５日間培養した。菌の生育が認められた検体より分離した菌体を数回純粋分離を繰返した。この分離菌株を検鏡観察、グラム染色、生化学的知見をもとに同定キットＮ−１８（日水製薬）で同定を行った。この結果、分離菌株ＮＷＰ−１２はＰｓｕｅｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｓｐｐ（緑膿菌）及びＮＷＰ−１８株はＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｓｐｐと同定した。
【００３４】〈実施例１〜３、比較例１〜４〉
被検カビ３株に対する最小致死濃度の測定結果を表１に示す。
実験方法は「防菌防黴」に記載する方法に準拠した。表１の脚欄に示すように二酸化塩素の最小致死濃度は助川化学（株）より市販している賦活剤ＭＥの存在で１２５ｐｐｍであった。賦活剤として有機系塩素殺菌剤であるイソシアヌル酸  無機系塩素殺菌剤として  次亜塩素酸の塩化合物である次亜塩素酸ソーダ、次亜塩素酸カルシウムそれぞれの最小致死濃度は１２５ｐｐｍ、１２５ｐｐｍ及び２５０ｐｐｍであった。一方賦活剤ＭＥが存在しない場合、二酸化塩素  ＞５００ｐｐｍ、イソシアヌル酸２５０ｐｐｍ、１２５ｐｐｍ及び２５０ｐｐｍであった。
実施例１〜３に示すようにイソシアヌル酸、次亜塩素酸ソーダ、次亜塩素酸カルシウム１ｐｐｍの併用で賦活剤ＭＥの有無に係らず二酸化塩素の最小致死濃度は、それぞれ７．８ｐｐｍ、３．９ｐｐｍ、１５．６ｐｐｍと相乗効果を示した。実施例１示す値は比較例１のそれと比較して１００倍以上の殺菌活性能を示した。
【表１】
2005211644.tif 000002
【００３５】
【００３４】で得られた有効性を更に確認に確認するため二酸化塩素の初発濃度５００ｐｐｍにして次亜塩素酸ソーダ１．０ｐｐｍの存在下における金属塩の影響をカビ３株に対する最小致死濃度を常法通り求めた。この結果が示すように、ＦｅＳＯ４、ＣｏＳＯ４に促進効果が認められた。一方、Ｆｅ３（ＳＯ４）２にはその効果は認められなかった。
2005211644.tif 000003
2005211644.tif 000004
【００３６】
【００３５】で記述した金属塩  特に有効性が認められたＦｅＳＯ４の作用機序について検討した。二酸化塩素の初発濃度５００ｐｐｍにして次亜塩素酸ソーダ１．０ｐｐｍの存在下でＦｅＳＯ４の有無による殺菌活性の持続性を最小致死濃度で検討した。
【表３】
2005211644.tif 000005
2005211644.tif 000006
以上の結果より、新しく賦活剤として次亜塩素酸ソーダを賦活剤ＭＫ、及び活性続剤ＦｅＳＯ４を活性続剤ＳＸと命名する。
【比較例１０、１１】
【００３７】不織布４５ＨＢＷを基材とするウエットワイパーで塩化ベンザルコニウム（比較例１０）及びクロルヘキシジン含浸液（比較例１１）による接種標準カビの生育抑制試験を上記薬剤の濃度を変えて検討した。
【図１】
図１に示すようにカビの生育はこれら薬剤の濃度が高くなるに従い逆に接種カビの生育が認められ、上記薬剤の生育抑制活性は弱いことが示唆された。
【実施例１３】
【００３８】賦活剤について検討した結果を次に示す。【００３４】で記載した同一方法で不織布４５ＨＢＷを基材とするウエットワイパーを二酸化塩素、賦活剤ＭＫ及び活性持続剤ＳＸからなる殺菌含浸液として、接種標準カビ（１．３ｘ１０３ｃｆｕ／ｍｌ  懸濁液）のチャレンジによる生育抑制試験を上記含浸薬剤の濃度を変えて検討した。この際、二酸化塩素、賦活剤ＭＫ及び活性持続剤ＳＸの濃度は図２に表示するとおりである。本図が示すように、二酸化塩素濃度が２５ｐｐｍで最高の生育菌検出指数を示し、その際、生育菌検出指数は賦活剤ＭＫ及び活性持続剤ＳＸの添加濃度に依存して減少する。二酸化塩素５０ｐｐｍ、賦活剤ＭＫ１ｐｐｍ及び活性持続剤ＳＸ１ｐｐｍからなる含浸薬剤で生育菌検出指数は０．５と急減し、二酸化塩素１００ｐｐｍ、賦活剤ＭＫ１ｐｐｍ及び活性持続剤ＳＸ１ｐｐｍからなる含浸薬剤では生育菌検出指数は０となり、完全に殺菌している事が認められた。
【図２】
【実施例１３〜１７】
【００３９】含浸殺菌液（二酸化塩素１００ｐｐｍ、賦活剤ＭＫ１ｐｐｍ及び活性持続剤ＳＸ１ｐｐｍ）の量を前記不織布シート（１２．３ｘ２７．４ｃｍ）当り１．０ｍｌ（０．００３ｍｌ／ｃｍ２相当  実施例１３）、２．５ｍｌ（０．００６ｍｌ／ｃｍ２相当  実施例１４）、５．０ｍｌ（０．０１５ｍｌ／ｃｍ２相当  実施例１５）、７．５ｍｌ（０．０１８ｍｌ／ｃｍ２相当  実施例１６）及び１０ｍｌ（０．０３ｍｌ／ｃｍ２相当  実施例１７）浸し、前記同様の方法で標準接種カビ（１．３ｘ１０３ｃｆｕ／ｍｌ）を接種チャレンジした結果、図３に示すように生育菌検出指数は含浸液量に依存して抑制され、含浸殺菌液５．０ｍｌ／シート（０．０１５ｍｌ／ｃｍ２相当  実施例１５）以上の濃度で完全に抑制された。
【図３】
【実験例３】
【００４０】不織布４５ＨＢＷには抗菌活性を示すスライムコントロールあるいは結合剤が残存しており、これによりヒト皮膚に何らかの影響与える危険性が考えられ、従ってこれを中和或は完全除去する必要がある。
また、カビ接種試験（チャレンジ試験）に影響を与える可能性があるので、この不織布を二酸化塩素で前処理してチャレンジしたカビの生着試験を次記のとおり実施した。
不織布４５ＭＢＷ（１２．３ｘ２７．４ｃｍ）を二酸化塩素１０ｐｐｍ、２５ｐｐｍ、５０ｐｐｍ及び１００ｐｐｍで２時間、室温で浸漬処理を行い、脱水後２０時間室温で風乾し、更に４５℃で３時間乾燥して残留する二酸化塩素を完全に除去した。得られた前処理不織布を前述した方法で標準カビ懸濁液を接種チャレンジを行った。図４に示すように、二酸化塩素の前処理濃度に比例してカビの生着が認められた。換言すれば、不織布にはカビの生着を抑制する物質が存在し、この化合物が二酸化塩素と反応して抑制物質が中和され、そのため
【００３５】や
【００３６】に示したように塩化ベンザルコニウムやクロルヘキシジンの高濃度の浸漬で不織布に含まれている抗菌薬剤と反応し、抗菌活性が低下しそのためカビが生着したものと思われる。即ち、塩化ベンザルコニウムやクロルヘキシジンには抗カビ活性が弱いことを示唆している。  同様に、二酸化塩素２５ｐｐｍで不織布中の抗菌薬剤を中和し、従ってそれ以上の濃度で抗カビ活性が発現されるようになった。
【図４】
【００４１】〈比較例１２〜１７、実施例１８〜１９〉
ウエットワイパーより分離した汚染細菌ＮＷＰ−１２及びＮＷＰ−１８に対して参考例として二酸化塩素、実施例として二酸化塩素・賦活剤ＭＫ・活性持続剤ＳＸの３液混合液及び比較例として塩化ベンザルコニウム及びクロルヘキシジンの最小致死濃度を図５の脚欄に記載する条件で求めた。
この結果、ＮＷＰ−１２（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｓｐｐと同定）に対して二酸化塩素：６３ｐｐｍ（比較例１２）、二酸化塩素、賦活剤ＭＫ、活性持続剤の３液混合液：＜１ｐｐｍ（実施例１８）、塩化ベンザルコウム：＞５００ｐｐｍ（比較例１３）、クロルヘキシジン：２ｐｐｍ（比較例１４）であった。一方ＮＷＰ−１８（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｓｐｐと同定）に対する最小致死濃度は二酸化塩素：２５０ｐｐｍ（比較例１５）、二酸化塩素、賦活剤ＭＫ、活性持続剤の３液混合液：＜１ｐｐｍ（実施例１９）、塩化ベンザルコニウム：＞５００ｐｐｍ（比較例１６）、クロルヘキシジン：６３ｐｐｍ（比較例１７）であった。ＮＷＰ−１２（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｓｐｐ）及びＮＷＰ−１８（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｓｐｐ）に対する塩化ベンザルコニウムの最小致死濃度は＞５００ｐｐｍ（比較例５）で、耐性であることを再確認した。
しかし両菌株の二酸化塩素、賦活剤ＭＫ、活性持続剤ＳＸの３液剤からなる新規殺菌混合液に対する最小致死量は＜１ｐｐｍ（実施例１８）で著い感受性を示す。
【表４】
2005211644.tif 000007
【実施例２０】
【００４２】ウエットワイパーより分離した汚染菌ＮＷＰ−１２（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｓｐｐ）及びＮＷＰ−１８（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｓｐｐ）を二酸化塩素で前処理した不織布４５ＨＢＷの厚手布及び薄手布を【００３６】で記載する方法で接種し、二酸化塩素１００ｐｐｍ、賦活剤ＭＫ１ｐｐｍ、活性持続剤ＳＸ１ｐｐｍからなる含浸液５ｍｌ／シートの割合で浸し、３０℃、２０時間放置後各検体より菌の回収を行った。菌の回収はストマッカーで抽出し、比較例として塩化ベンザルコニウム検体からの菌の検出は培地中に０．１％レシチン、０．７％ポリソルベート８０を含む標準寒天培地を用い、一方二酸化塩素を含む検体からの菌の検出は標準寒天培地に１ｍＭ    Ｎａ２Ｓ２Ｏ３を加えて菌の生育に影響がないように行った。この結果、二酸化塩素を含む含浸液では厚手布、薄手布に係らず、耐性菌汚染不織布からは菌の回収は認められず、完全に殺菌されていた。一方、塩化ベンザルコニウムを含む含浸液では接種耐性汚染菌は殆ど殺菌されなかった。
【図５】
【００４３】〈実施例２１〜２６、比較例１８〜２３〉
【００３７】で既述した方法で、表３に表示する不織布６種を二酸化塩素１００ｐｐｍで前処理し、乾燥を繰返して完全に残留する二酸化塩素を除去した後、二酸化塩素１００ｐｐｍ、賦活剤ＭＫ  １ｐｐｍ、活性持続剤ＳＸ１ｐｐｍからなる含浸液（実施例２１〜２６）あるいは塩化ベンザルコニウム５００ｐｐｍ（比較例１８〜２３）からなる含浸液を含むウエットワイパーを作成し、次いで被検カビ３株及び塩化ベンザルコニウム耐性菌２株を接種した。この検体を３０℃、３０日間保存し、カビ、接種耐性菌、臭気、着色について観察した。
その際、カビはＰＤＡ培地貼付法、接種耐性菌はＳＤＡ培地貼付法で求めた。この結果、表３に示すように、二酸化塩素１００ｐｐｍ、賦活剤ＭＫ１ｐｐｍ、活性持続剤ＳＸ  １ｐｐｍからなる含浸液実験群（実施例２１〜２６）ではカビ、接種耐性菌は全く検出されず、更に臭気、着色も何ら変化は認められなかった。しかし、塩化ベンザルコニウム含浸実験群（比較例１８〜２３）では保存１０日目からカビの生着が認められ、また接種耐性菌の生着も認められた。
【表５】
2005211644.tif 000008
【実施例２７〜３２、対照例１、２】
【００４４】二酸化塩素４００ｐｐｍ、賦活剤ＭＫ（０．２、２．０、２０ｐｐｍ）、活性持続剤ＳＸ（０．２、２．０、２０ｐｐｍ）からなる含浸液のヒト皮膚に対する刺激試験を単回貼付（実施例２７〜２９）その際の対照として水を用いた（対照例１）及び週１回の累積貼付試験（実施例３０〜３２）及びその対照として水を用いて（対照例２）実施した。評価方法は日皮学会標準法に準拠した。
この結果を表４に示す。二酸化塩素４００ｐｐｍ、賦活剤ＭＫ２０ｐｐｍ、活性持続剤ＳＸ２０ｐｐｍからなる含浸液の１週間累積貼付（実施例３２）でも、ヒトの年齢差に係らず、全く変化は認められず、この含浸液が安全なものであることを確認した。
【表６】
2005211644.tif 000009
2005211644.tif 000010
【発明の効果】
【００４５】以上説明したように、本発明の二酸化塩素、賦活剤ＭＫ及び活性持続剤ＳＸを“三位一体”とした含浸液は不織布に残留する結合剤やスライムコントロール剤を中和すると共に、カビ、細菌に対して強烈な殺菌作用を発揮する。塩化ベンザルコニウムを含浸液として使用した場合、度々認められる病原菌耐性菌に対しても完全に除菌・殺菌することも認めた。更に、本発明の含浸液組成はこれまでの欠点であった二酸化塩素の高濃度使用による臭気、包装袋表面の印字の消失・剥離問題も改善され、またヒト皮膚に対する影響も認められず安全であると確認した。本発明含浸液はこれまでにない優れた殺菌剤組成であることを確認した。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の比較対照である塩化ベンザルコニウム及びクロルヘキシジンの含浸液での接種カビの生育指数を比較例として開示。
【図２】含浸液として二酸化塩素、賦活剤ＭＫ及び活性持続剤ＳＸ併用による接種カビの殺菌効力を示した。
【図３】新規殺菌組成液の含浸液量による殺菌効力の影響を示した。
【図４】二酸化塩素によるウエットワイパー素材中の抗菌薬剤の中和効果を実験例として示した。
【図５】ウエットワイパーより分離した塩化ベンザルコニウム耐性菌で汚染させたウエットワイパーを新規殺菌組成剤による除菌・殺菌効果を示した。
【図１】
2005211644.tif 000011
【図２】
2005211644.tif 000012
【図３】
2005211644.tif 000013
【図４】
2005211644.tif 000014
【図５】
2005211644.tif 000015