(57)【要約】【課題】  美白効果に優れ、安全性及び安定性の高い皮膚外用剤、および皮膚の細菌性リパーゼに起因する様々な皮膚疾患、例えばニキビ、フケ、皮膚炎等に対して有効な皮膚外用剤を提供する。【解決手段】  コショウ科コショウ属植物ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)の溶媒抽出物を配合する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
コショウ科コショウ属植物ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)の溶媒抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項２】
コショウ科コショウ属植物ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)の溶媒抽出物を有効成分として含有することを特徴とする美白用皮膚外用剤。
【請求項３】
コショウ科コショウ属植物の溶媒抽出物を有効成分として含有することを特徴とするニキビ改善用外用剤。
【請求項４】
コショウ科コショウ属植物がヒッチョウカ(Piper cubeba L.)であることを特徴とする請求項３に記載のニキビ改善用外用剤。
【請求項５】
コショウ科コショウ属植物の溶媒抽出物を有効成分として含有することを特徴とするリパーゼ阻害剤。
【請求項６】
コショウ科コショウ属植物がヒッチョウカ(Piper cubeba L.)であることを特徴とする請求項５に記載のリパーゼ阻害剤。
【請求項７】
コショウ科コショウ属植物の溶媒抽出物の配合量が、剤全量に対して０．０００１〜２０．０質量％であることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
皮膚外用剤に関し、さらに詳しくは本発明は美白作用を有する皮膚外用剤、および皮膚表層の微生物のリパーゼを阻害することにより、このリパーゼに起因するニキビ等の皮膚疾患を予防、防止する皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚のしみ、そばかすなどの色素沈着は、ホルモンの異常や紫外線の刺激がきっかけとなって、表皮色素細胞内でのメラニン色素が形成され、表皮に過剰に沈着することにより発生する。
【０００３】
このメラニン色素は、表皮基底層にあるメラニン細胞（メラノサイト）内のメラニン生成顆粒（メラノソーム）において産生され、生成したメラニンは、表皮細胞に取り込まれ、表皮へ拡散する。このメラノサイト内における生化学反応は、次のようなものと推定されている。
【０００４】
すなわち、必須アミノ酸であるチロシンが酵素チロシナーゼの作用によりドーパを経てドーパキノンになり、これが酵素的又は非酵素的酸化作用により、赤色色素及び無色色素を経て黒色のメラニンへ変化する過程がメラニン色素の生成過程である。
したがって、反応の第一段階であるチロシナーゼの作用を抑制することが、メラニン色素産生の抑制に重要である。
【０００５】
かかるメラニン色素産生の抑制物質については従来より研究されてきており、例えば、Ｌ−アスコルビン酸を大量に投与する方法、グルタチオン等を注射する方法、あるいは、ハイドロキノン、コウジ酸、システインなどを軟膏、クリーム、ローションなどの皮膚外用剤に配合して、局所に塗布するなどの方法がとられている。
【０００６】
一方、人体における細菌性リパーゼには、皮膚表層に常在する微生物（プロピオニバクテリウム アクネス：Propionibacterium acnes 、ピティロスポラム オバール：Pityrosporum ovale、マイクロコッカス属：Micrococcus sp．など）の産生するリパーゼが知られており、これらのリパーゼが、皮脂中に含まれるトリグリセライドを分解し遊離脂肪酸を産生する。この遊離脂肪酸は、皮膚に対して刺激性の炎症反応を引き起こし、ニキビ、皮膚炎、フケなどの要因となると考えられている。
【０００７】
特に、ニキビの原因とされるプロピオニバクテリウム アクネスの菌数と産生する遊離脂肪酸には相関関係があり、遊離脂肪酸が毛包壁に対して、刺激性の炎症反応とそれに伴う過角化、コメドの形成を引き起こすと考えられている（非特許文献１参照）。
【０００８】
これに対し、細菌性のリパーゼを阻害して疾患を抑制または予防する薬剤の開発は未だ途上にあり、2-Pyridylmethyl-2-(P-(2-methylpropyl)-phenyl)propionate （慣用名イブプロフェンピコノール）（非特許文献２参照）、テトラサイクリンおよび金属塩（特許文献１参照）等が報告されているに過ぎない。
【０００９】
【非特許文献１】McGinley,K,J.et.al.,  J.Clin.Microbiol.12:672-675,1980
【非特許文献２】西日皮膚４７．５、p.888〜898、p.899〜908、1985
【特許文献１】特開昭５９−１８６９１９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
従来の美白剤の多くは、安定性、安全性、匂い等の面において問題があり、期待できる効果は弱く、未だ満足のいくものではなかった。また、従来から用いられている細菌性のリパーゼを阻害する薬剤は、他の配合成分との関係からリパーゼ阻害効果を発揮できなかったり、局所適用における安全性、有効性において必ずしも満足し得ないものであった。
【００１１】
そこで、本発明が解決すべき課題は、優れた美白効果を有し、安定性及び安全性の高い皮膚外用剤を提供することであり、リパーゼ阻害活性を有する成分を見出し、これを用いた細菌性リパーゼに起因する皮膚疾患に対して有効な皮膚外用剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の第１は、コショウ科コショウ属植物ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)の溶媒抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤である。
【００１３】
本発明の第２は、コショウ科コショウ属植物ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)の溶媒抽出物を有効成分として含有することを特徴とする美白用皮膚外用剤である。
【００１４】
本発明の第３は、コショウ科コショウ属植物の溶媒抽出物を有効成分として含有することを特徴とするニキビ改善用外用剤である。
【００１５】
本発明の第４は、コショウ科コショウ属植物の溶媒抽出物を有効成分として含有することを特徴とするリパーゼ阻害剤である。
【００１６】
コショウ科コショウ属植物の抽出物にリパーゼ阻害活性および細菌性リパーゼに起因する皮膚疾患に対する作用は知られていなかった。またコショウ科コショウ属植物ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)に優れた美白効果を有することは従来知られていなかった。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、美白効果に優れ、安全性及び安定性の高い皮膚外用剤を提供できる。また本発明によれば、皮膚の細菌性リパーゼに起因する様々な皮膚疾患、例えばニキビ、フケ、皮膚炎等に対して有効な皮膚外用剤が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
以下、本発明の構成について詳述する。
本発明に用いるコショウ科コショウ属植物としては、ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)が好適である。ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)は、ネパール、インドネシアおよびアフリカに分布するコショウ科コショウ属植物である。
【００１９】
本発明に用いる抽出物は、上記植物のその茎、根、葉、果実、種子等いずれの部位も使用できるが、特に果実が好適であり、これらの部位を抽出溶媒とともに浸漬または加熱還流した後、ろ過し、濃縮して用いられる。本発明に用いられる抽出溶媒は、通常、抽出に用いられる溶媒であれば何でもよく、例えば、エタノール等のアルコール類、含水アルコール、アセトン、酢酸エチルエステル等の有機溶媒を単独あるいは組み合わせて用いることができる。
【００２０】
本発明の皮膚外用剤に配合されるコショウ科コショウ属植物の抽出物の配合量は特に限定はされないが、美白効果、または抗リパーゼ効果を示す濃度として、一般には皮膚外用剤全量に対して、乾燥物として０．０００１〜２０質量％、好ましくは０．００１〜１０質量％、特に好ましくは０．０１〜７質量％配合される。この配合量が０．０００１質量％未満では皮膚外用剤の効果が乏しくなる傾向にあり、逆に、２０質量％を超えて配合しても効果の増加は実質上望めないし、皮膚外用剤への配合も難しくなる傾向にある。
【００２１】
本発明の皮膚外用剤には、上記必須成分に加えて、本発明の効果を損なわない範囲内で、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば、保湿剤、酸化防止剤、油性成分、紫外線吸収剤、乳化剤、界面活性剤、増粘剤、アルコール類、粉末成分、色材、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００２２】
例えば、保湿効果を付与することは、皮膚の乾燥を防ぐ等の目的で有用である。この場合は、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、ヘキシレングリコール、ソルビトール、マルチトール、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、アセチルヒアルロン酸、ムコイチン硫酸、カロニン酸、アテロコラーゲン、コレステリル−１２−ヒドロキシステアレート、乳酸ナトリウム、胆汁酸塩、ｄｌ−ピロリドンカルボン酸塩、短鎖可溶性コラーゲン、ジグリセリン（ＥＯ）ＰＯ付加物、イザヨイバラ抽出物、セイヨウノコギリソウ抽出物、メリロート抽出物等の保湿剤を本発明の皮膚外用剤に配合することができる。
【００２３】
さらに美白効果を付与するために、胎盤抽出液、グルタチオン、ユキノシタ抽出物、アルブチン、コウジ酸、エラグ酸、ルシノール、コラ・デ・カバロ抽出物、ショウガ属植物ルムプヤン抽出物等の美白剤を本発明の皮膚外用剤に配合することができる。
【００２４】
消炎効果を付与するために、グリチルリチン酸誘導体、グリチルレチン酸誘導体、サリチル酸誘導体、ヒノキチオール、酸化亜鉛、アラントイン等の消炎剤を本発明の皮膚外用剤に配合することができる。
【００２５】
また、紫外線による皮膚への悪影響を緩和し、さらに皮膚の老化を抑制する等の目的で、ローヤルゼリー、感光素、コレステロール誘導体、幼牛血液抽出物等の賦活剤、ノニル酸ワレニルアミド、ニコチン酸ベンジルエステル、ニコチン酸β−ブトキシエチルエステル、カプサイシン、ジンゲロン、カンタリスチンキ、イクタモール、カフェイン、タンニン酸、α−ボルネオール、ニコチン酸トコフェノール、イノシトールヘキサニコチネート、シクランデレート、シンナリジン、トラゾリン、アセチルコリン、ベラパミル、セファランチン、γ−オリザノール等の決行促進剤、硫黄、チアントール等の抗脂漏剤等を本発明の皮膚外用剤に配合することができる。
【００２６】
また、多様な目的から、ムクロジ抽出成分、オオバク抽出成分、オウゴン抽出成分、シコン抽出成分、シャクヤク抽出成分、センブリ抽出成分、バーチ抽出成分、セージ抽出成分、ビワ抽出成分、ニンジン抽出成分、アロエ抽出成分、ゼニアオイ抽出成分、アイリス抽出成分、ブドウ抽出成分、ヨクイニン抽出成分、ヘチマ抽出成分、ユリ抽出成分、サフラン抽出成分、センキュウ抽出成分、ショウキョウ抽出成分、オトギリソウ抽出成分、オノニス抽出成分、ローズマリー抽出成分、ニンニク抽出成分、トウガラシ抽出成分、甘草抽出物、チンピ抽出物、トウキ抽出物、マジョラム抽出物、イチヤクソウ抽出物、カリン抽出物、サイコ抽出物、オドリコソウ抽出物、エンメイソウ抽出物や乳清抽出物等を本発明の皮膚外用剤に配合することができる。
【００２７】
さらに各々のビタミンが有する固有の効果を付与するために、ビタミンＡ、β−カロチン、レチノール、酢酸レチノール、プロピオン酸レチノール、パルミチン酸レチノール等のビタミンＡ類、リボフラビン、酪酸リボフラビン、フラビンアデニンヌクレオチド等のビタミンＢ２類、ピリドキシン塩酸塩、ピリドキシンジオクタノエート等のビタミンＢ６類、アスコルビン酸、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アスコルビン酸ジパルミチン酸エステル、アスコルビン酸−２−硫酸ナトリウム、アスコルビン酸リン酸エステル、ＤＬ−α−トコフェノール−アスコルビン酸リン酸ジエステルジカリウムなどのビタミンＣ類、パントテン酸カルシウム、パントテニルアルコール、パントテニルエテルエーテル、アセチルパントテニルエチルエーテル等のパントテン酸類、エルゴカルシフェノール、コレカルシフェノール等のビタミンＤ類、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等のニコチン酸類、α−トコフェロール、酢酸トコフェロール、ニコチン酸−α−トコフェロール、コハク酸−α−トコフェロール等のビタミンＥ類、ビタミンＰ、ビオチン等のビタミン類を本発明の皮膚外用剤に配合することができる。
【００２８】
さらに、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸、リンゴ酸、ヒドロキシエチル三酢酸三ナトリウム等の金属封鎖剤、トラネキサム酸およびその誘導体、アルギニン、リジン、オルニチン、グルタミン、アラニン、ヒスチジン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トレオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、システイン、シスチン、チロシン、プロリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン等のアミノ酸およびその誘導体、トリメチルグリシン、ポリアスパラギン酸等のポリペプチドなどを本発明の皮膚外用剤に配合することができる。
【００２９】
また、本発明の皮膚外用剤は、外皮に適用される化粧料、医薬品、医薬部外品、特に好適には化粧料に広く適用することが可能であり、その剤型も、皮膚に適用できるものであればいずれでもよく、溶液系、可溶化系、乳化系、粉末分散系、水−油二層系、水−油−粉末三層系、軟膏、ゲル、エアゾール等、任意の剤型が適用される。
【００３０】
また、その使用形態も任意であり、例えば化粧水、クリーム、乳液、ローション、パック、軟膏、ムース、石鹸等の他、ファンデーションや口紅等のメーキャップ化粧料、浴用剤等、従来皮膚外用剤に用いるものであればいずれでもよく、剤型は特に問わない。
【００３１】
また、本抽出物の細菌性リパーゼの阻害効果に着目して、本発明皮膚外用剤をリパーゼ阻害剤として用いることができる（本発明のリパーゼ阻害剤）。本発明のリパーゼ阻害剤は、さらに具体的な用途として、代表的にはニキビ改善剤、フケ改善剤、肌荒れ改善用外用剤、皮膚炎改善剤等として用いることができる。
【００３２】
本発明のリパーゼ阻害剤を、ニキビ改善剤として用いる場合にも、コショウ科コショウ属植物の溶媒抽出物に加えて、上記の一般成分を配合することが可能であるが、特に、公知のニキビに対して改善効果を有する成分を配合することにより、一層のニキビ改善効果を発揮させることができる。
【００３３】
具体的には、前述のイブプロフェンピコノール、テトラサイクリン類、イオウ等の薬剤の他、消炎剤、殺菌剤、角栓軟化・溶解剤、皮脂抑制剤等を配合することにより、一層のニキビ改善効果を発揮させることができる。これらの公知のニキビ改善成分の配合量は、具体的な配合成分や製品形態等に応じて適宜変更することが可能である。
【００３４】
本発明リパーゼ阻害剤を、主にフケ改善を目的とした頭皮頭髪用外用剤として用いる場合にも、コショウ科コショウ属植物の溶媒抽出物に加えて、上記の一般成分を配合することが可能であるが、特に、フケに対して改善効果等を有する頭皮頭髪用成分を配合することにより、一層のフケ改善効果等を発揮させることができる。
【００３５】
具体的には、血行促進剤、局所刺激剤、抗脂漏剤、角質溶解剤、殺菌剤、消炎剤、毛包賦活剤、抗男性ホルモン剤等を配合することにより、一層のフケ改善効果を発揮させることができる。これらの公知の頭皮頭髪用成分の配合量は、具体的な配合成分や製品形態等に応じて適宜変更することが可能である。
【００３６】
本発明によるリパーゼ阻害剤を、肌荒れ改善用外用剤として用いる場合にも、コショウ科コショウ属植物の溶媒抽出物に加えて、上記の一般成分を配合することが可能であるが、特に、肌荒れに対して改善効果等を有する成分を配合することにより、一層の消炎効果等を発揮させることができる。
【００３７】
具体的には、グリチルリチン酸、アラントイン、アズレン等の抗炎症剤；トラネキサム酸等のプロテアーゼ阻害剤；アルギニン、オルニチン等のアミノ酸類；グルコース、キシリトール、エリスリトール等の糖類；クエン酸、タンニン酸、酸化亜鉛等の収斂剤；メントール、カンフル等の清涼剤；各種のビタミン類；抗ヒスタミン剤；副腎皮質ステロイド等を配合することが可能である。これらの公知の肌荒れ改善成分の配合量は、具体的な配合成分や製品形態等に応じて適宜変更することが可能である。
【実施例】
【００３８】
次に実施例をあげて本発明を更に具体的に説明するが、本発明の技術的範囲がこれらの実施例によって限定されるものではない。なお、以下の実施例において配合量は質量％である。
【００３９】
まず、実施例に先立ち、本発明に用いる植物抽出物のメラニン生成抑制効果、チロシナーゼ活性抑制効果及び美白効果についての試験方法及び評価方法について説明する。配合量は質量％を表す。
【００４０】
（ヒッチョウカ抽出物の調製）
ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)の原草（果実部分）を室温で１週間メタノールに浸漬し、抽出液を濃縮し、ヒッチョウカ抽出物を得た。この抽出物をＤＭＳＯに１質量％溶かし、この溶液を希釈して濃度を調整し、以下の試験及び実施例に用いた。
【００４１】
１．メラニン生成量の視感判定
＜細胞培養＞
マウス由来のＢ１６メラノーマ培養細胞を使用した。１０％ＦＢＳおよびテオフィリン（0.09mg/ml）を含むイーグルＥＭ培地でＣＯ2インキュベーター（95％空気、5％二酸化炭素）内、３７℃の条件下で培養した。培養２４時間後に試料溶液を終濃度（抽出乾燥物換算濃度）で２Ｘ１０-3〜５Ｘ１０-4質量％になるように添加し、さらに３日間培養を続け、以下の方法でメラニン生成量の視感判定及びチロシナーゼ活性を測定した。
【００４２】
＜視感判定＞
９６ウェルのプレートのフタの上に拡散板を置き、倒立顕微鏡で細胞内のメラニン量を観察し、植物抽出物を添加していない試料(基準)の場合と比較した。その結果を表１に示した。又、比較例として、すでにメラニン生成抑制作用のあることが知られているケイガイ(シソ科オドリコソウ亜科)抽出物についても上記と同様の試験を行った。その結果を併せて表１に示す。
【００４３】
＜判定基準＞
○：基準と比較して白い(基準と比較してメラニン量が少ない)。
△：基準と比較してやや白い(基準と比較してメラニン量がやや少ない)。
×：基準と同程度(基準と比較して同程度のメラニン量)。
【００４４】
２．チロシナーゼ活性の測定
（１）で示した＜細胞培養＞と同様に細胞を培養後、測定時にウェル中の培地を除去し、ＰＢＳ100μlで２回洗う。各ウェルに４５μlの１％トライトンＸ（ローム・アンド・ハース社製商品名、界面活性剤）を含むＰＢＳを加える。1分間プレートを振動させ、よく細胞膜を破壊し、マイクロプレートリーダーで４７５nmの吸光度を測定してこれを０分時の吸光度とした。その後、すばやく５μlの１０mMのＬ‐ＤＯＰＡ溶液を加えて、３７℃のインキュベーターに移し、６０分間反応させた。１分間プレートを振動させ、６０分時の吸光度（475nm）を測定した。植物抽出物を添加していない試料（コントロール）の場合の０分時と６０分時の吸光度差に対する植物抽出物添加試料の前記吸光度差の減少分をチロシナーゼ活性抑制率（％）とした。その結果を表１に示す。
【００４５】
また、比較例として、すでにチロシナーゼ活性抑制作用があることが知られているケイガイのエタノール抽出物についても上記と同様の試験を行った。その結果を併せて表１に示す。なお、表中、−は、コントロールに比べて、危険率５％以内で有意な差が認められなかったことを意味する。
【００４６】
【表１】
2005247732.tif 000002
より、ヒッチョウカ抽出物は、ケイガイ抽出物に比べ、優れたメラニン生成抑制効果及びチロシナーゼ活性抑制効果を有することが分かる。
【００４７】
３．美白効果試験
［試験方法］
夏期の太陽光に４時間（１日２時間で２日間）晒された被験者３０名の上腕内側部皮膚を対象として太陽光に晒された日の５日後より、各試料を朝夕１回ずつ４週間塗布した。パネルを一群６名に分けて５群とし、下記処方のローションを調製し、これを試料として試験を行った。
【００４８】
ローション処方
（アルコール相）                                      質量％
９５％エタノール                                  ２５．０
ポリオキシエチレン（25モル）硬化ヒマシ油エーテル    ２．０
防腐剤・酸化防止剤                                  適量
香料                                                適量
薬剤（表２記載）                              表２記載量
（水相）
グリセリン                                          ２．０
プロピレングリコール                                １．０
イオン交換水                                        残余
（製法）
水相、アルコール相を調製後、可溶化する。
【００４９】
［評価方法］
使用後の淡色化効果を下記の判定基準に基づいて判定した。
（判定基準）
◎：被験者のうち著効及び有効の示す割合が８０％以上の場合。
○：被験者のうち著効及び有効の示す割合が５０％〜８０％未満の場合。
△：被験者のうち著効及び有効の示す割合が３０％〜５０％未満の場合。
×：被験者のうち著効及び有効の示す割合が３０％未満の場合。
【００５０】
上記試験法記載の配合組成からなる皮膚外用剤を調製し、表２に記載の薬剤を用いて美白効果を比較した。結果を表２に示す。
【００５１】
【表２】
2005247732.tif 000003
【００５２】
表２より明らかなように、ヒッチョウカ抽出物を配合したローションは、優れた皮膚美白効果を有することが認められた。
【００５３】
４．リパーゼ阻害活性評価試験
（１）リパーゼの調製
Ｐａｂｌｏらの方法（J.Invest.Dermatol.63,213,1974 ）に準じてリパーゼを精製した。すなわち、ブレイン・ハート・インフュージョンブイヨン培地中にヒト皮膚から分離したプロピオニバクテリウム アクネスの１白金耳を接種し、３７℃で７日間嫌気的に培養し、培養液を４℃、３０００rpm で１５分間遠心分離した。次に、−３０℃のもと、遠心分離上清１Ｌ中に、９５％エタノールを１Ｌ添加し、−１０℃で３０分間、スターラーで攪拌したのち、４℃、１０００ｒｐｍで１５分間遠心分離を行い、沈渣を凍結乾燥して、これを粗リパーゼとした。この０．５ｇを、０．１mol/L ＮａＣｌ−０．０２mol/L 酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）３ｍＬに溶解し、セファデックスＧ−１００カラム（φ２．６cm、長さ４５cm）を用いて、０．１mol/L ＮａＣｌ−０．０２mol/L 酢酸緩衝液でゲル濾過し、活性画分４０ｍＬを得て、これをリパーゼ溶液とした。
【００５４】
（２）試験試料の調製
コショウ科コショウ属ヒッチョウカ(Piper cubeba L.)の乾燥した果実５０ｇを、室温で１週間、５倍量のエタノールに浸漬し、抽出液を濃縮乾固した。この固形物をジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、１％ヒッチョウカＤＭＳＯ溶液を作成した。これを用いて以下の実験を行った。
【００５５】
（３）比較試料の調製
リパーゼ阻害効果のある薬剤として現在皮膚外用剤に使用されている(A)2-Pyridylmethyl-2-(P-(2-methylpropyl)-phenyl)propionate（慣用名イブプロフェンピコノール）（西日皮膚47,5 888〜898、898 〜908、1985）、(B)テトラサイクリン（特開昭５９−１８６９１９号公報）を、以下の方法で調製したものを比較試料とした。
【００５６】
(A)2-Pyridylmethyl-2-(P-(2-methylpropyl)-phenyl)propionate
2-Pyridylmethyl-2-(P-(2-methylpropyl)-phenyl)propionate を、酵素溶液中で反応させるときの濃度が、０．１％、０．０１％になるように、ＤＭＳＯに溶解した。
(B)テトラサイクリン
テトラサイクリン塩酸塩（シグマ社製）を、酵素溶液中で反応させるときの濃度が、０．１％、０．０１％になるように、ＤＭＳＯに溶解した。
【００５７】
（４）リパーゼ活性の測定法および阻害率の算出
上記（１）で得られたリパーゼ溶液に、試験試料、比較試料をそれぞれ加えて、３７℃で振盪した後、それぞれ正確に１mLずつ取り分けた（リパーゼ溶液）。他方、オリーブオイル乳液５mLと０．１mol/L リン酸緩衝液（ｐＨ７．０）４mLとを、５０mL容共栓三角フラスコに正確に取りよく混合し、３７℃の恒温水槽を用いて１０分間予熱した。
次いで、ここに上記１mLずつ取り分けたリパーゼ溶液をそれぞれ一か所に集中しないように攪拌しながら加えて良く混合し、酵素反応を行わせた。正確に１０分間経過後、アセトン−エタノール混液２０mLを注ぎ、フェノールフタレイン試薬５滴を加え、０．０５mol/L 水酸化ナトリウム溶液で滴定した。
【００５８】
一方、これとは別に、オリーブ油乳液５mLと０．１mol/L リン酸緩衝液（ｐＨ７．０）４mLとを、５０mL容共栓付き三角フラスコに正確に取り、３７℃で３０分間加温後、アセトン−エタノール混液２０mLをそそぎ、次いで上記１mLずつ取り分けたリパーゼ溶液をそれぞれ加えた。次に、フェノールフタレイン試薬５滴を加え、０．０５mol/L 水酸化ナトリウム溶液で滴定した。これを対照液として酵素反応を行わせた滴定量から差し引き、活性値を算出した。
【００５９】
これと同様に、試験試料もしくは比較試料を加えないリパーゼ溶液の活性値を測定し、この値を、酵素活性値１００（阻害率０％）とする阻害率で表した。この結果を表３に示す。なお、ここで用いたヒッチョウカ抽出物の配合量は、乾燥重量換算である。
【００６０】
【表３】
2005247732.tif 000004
【００６１】
表３から明らかなように、ヒッチョウカ抽出物は、従来からリパーゼ阻害剤として知られているイブプロフェンピコノール、テトラサイクリン塩酸塩に比べ、優れたリパーゼ阻害活性を有することが判明した。
【００６２】
５．ニキビ改善効果
本発明によるニキビ改善用皮膚外用剤の効果を、ニキビに対する改善率から評価した。その結果を表４に示す。
【００６３】
（１）試料
試料としては、表４に示すように、本発明品としてヒッチョウカ(Piper cubeba L.)の全草乾燥物の５０％エタノール抽出物を配合したローションを、比較品として抽出物を除いたローションを用いた。
【００６４】
（２）対象
２２才から３５才までのニキビに悩む男女４０名（１群２０名）。
【００６５】
（３）使用方法および観察日
化粧石鹸を用いて顔面をよく洗浄した後、顔面に各々の皮膚外用剤を１日に２〜３回塗布して、４週間後に患部の観察を行った。
【００６６】
（４）全般改善度
使用前に比較して使用薬剤により症状が改善された（ａ）、不変または悪化した（ｂ）の２段階に分けた。
【００６７】
（５）有効性評価基準
◎：全般改善度で２０名中（ａ）が１５名以上である。
○：全般改善度で２０名中（ａ）が１０〜１４名である。
△：全般改善度で２０名中（ａ）が５〜９名である。
×：全般改善度で２０名中（ａ）が４名以下である。
【００６８】
上記の評価基準に従い本発明品及び比較品の有効性を評価し、その結果を処方と併せて表４に示した。なお、ここで用いられたヒッチョウカ抽出物の配合量は、乾燥重量換算である。
【００６９】
【表４】
2005247732.tif 000005
【００７０】
表４に示すように、ヒッチョウカ抽出物を配合した本発明皮膚外用剤は、優れたニキビ改善効果を有していた。
【００７１】
以下に種々の剤型の本発明皮膚外用剤の処方例を実施例として示す。なお、各実施例の外用剤は、その剤型に応じて常法により製造した。各実施例の本発明皮膚外用剤において、上記の実使用試験を行ったところ、いずれも優れたニキビ改善効果を有していた。なお、各実施例におけるヒッチョウカ抽出物の配合量は、乾燥重量換算である。
【００７２】
実施例１  バニシングクリーム
ステアリン酸                            ６．０  質量％
ソルビタンモノステアリン酸エステル      ２．０
ポリオキシエチレン（２０モル）
ソルビタンモノステアリン酸エステル    １．５
アルブチン                              ７．０
亜硫酸水素ナトリウム                    ０．０３
プロピレングルコール                  １０．０
ヒッチョウカエタノール抽出物            ０．０００１
防腐剤・酸化防止剤                      適量
香料                                    適量
イオン交換水                            残余
【００７３】
（製法）
イオン交換水にヒッチョウカ抽出物とアルブチン及びプロピレングリコールを加え加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よくかきまぜながら、３０℃まで冷却する。
【００７４】
実施例２  中性クリーム
ステアリルアルコール                                  ７．０  質量％
ステアリン酸                                          ２．０
水添ラノリン                                          ２．０
４−ｔ−ブチル−４’−ｔ−メトキシジベンゾイルメタン  ３．５
スクワラン                                            ５．０
２−オクチルドデシリアルコール                        ６．０
ポリオキシエチレン（25モル）セチルアルコールエーテル  ３．０
グリセリンモノステアリン酸エステル                    ２．０
胎盤抽出物                                            ０．１
プロピレングリコール                                  ５．０
ヒッチョウカエタノール抽出物                        １０．０
香料                                                  適量
防腐剤・酸化防止剤                                    適量
イオン交換水                                          残余
【００７５】
（製法）
イオン交換水にヒッチョウカ抽出物、胎盤抽出物及びプロピレングリコールを加え加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よくかきまぜながら、３０℃まで冷却する。
【００７６】
実施例３  コールドクリーム
固型パラフィン                                        ５．０  質量％
蜜ロウ                                              １０．０
ワセリン                                            １５．０
流動パラフィン                                      ４１．０
グリセリンモノステアリン酸エステル                    ２．０
ポリオキシエチレン（２０モル）
ソルビタンモノラウリン酸エステル              ２．０
コウジ酸                                              ２．０
４−ｔ−ブチル−４’−ｔ−メトキシジベンゾイルメタン  ３．５
石鹸粉末                                              ０．１
硼砂                                                  ０．２
ヒッチョウカ１，３−ブチレングリコール抽出物          ０．１
イオン交換水                                          残余
香料                                                  適量
防腐剤・酸化防止剤                                    適量
【００７７】
（製法）
イオン交換水にヒッチョウカ抽出物、コウジ酸、石鹸粉末および硼砂を加え加熱溶解して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相をかきまぜながら徐々に加え反応を行う。反応終了後ホモミキサーで均一に乳化し、乳化後よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。
【００７８】
実施例４  乳液
ポリオキシエチレン（２０モル）ポリオキシ
プロピレン（２モル）セチルアルコール      １．０  質量％
オクチルーｐーメトキシシンナメート                ３．５
シリコーンＫＦ９６（２０ｃｓ）（信越化学工業）  ２０．０
流動パラフィン（中粘度）                          ３．０
プロピレングリコール                              ５．０
アルブチン                                        ２．０
亜硫酸水素ナトリウム                              ０．０３
グリセリン                                        ２．０
エタノール                                      １５．０
カルボキシビニルポリマー                          ０．３
ヒドロキシプロピルセルロース                      ０．１
ＫＯＨ                                            適量
防腐剤                                            適量
ヒッチョウカ１，３−ブチレングリコール抽出物    ２０．０
イオン交換水                                      残余
【００７９】
（製法）
イオン交換水とエタノールにヒッチョウカ抽出物の含水アルコール抽出物及びアルブチンを加温溶解し、更にプロピレングリコール以下の水溶性成分を溶解して、７０℃に保つ（水相）。他の油性成分を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え、予備乳化を行い、ホモミキサーで均一乳化し、乳化後、よくかきまぜながら、３０℃まで冷却する。
【００８０】
実施例５  乳液
ポリオキシエチレン（２０モル）ポリオキシ
プロピレン（２モル）セチルアルコール      １．０  質量％
シリコーンＫＦ９６（２０ｃｓ）（信越化学工業）    ２．０
流動パラフィン（中粘度）                          ３．０
プロピレングリコール                              ５．０
アスコルビン酸グルコシド                          ５．０
オクチル−ｐ−メトキシシンナメート                ３．５
グリセリン                                        ２．０
エタノール                                      １５．０
カルボキシビニルポリマー                          ０．３
ヒドロキシプロピルセルロース                      ０．１
ＫＯＨ                                            適量
防腐剤                                            適量
ヒッチョウカエタノール抽出物                      ７．０
イオン交換水                                      残余
【００８１】
（製法）
イオン交換水とエタノールにヒッチョウカ抽出物を加温溶解し、更にプロピレングリコール以下の水溶性成分を溶解して、７０℃に保つ（水相）。他の油性成分を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え、予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化し、乳化後、よくかきまぜながら、３０℃まで冷却する。
【００８２】
実施例６  乳液
ポリオキシエチレン（２０モル）ポリオキシ
プロピレン（２モル）セチルアルコール      １．０  質量％
シリコーンＫＦ９６（２０ｃｓ）（信越化学工業）    ２．０
流動パラフィン（中粘度）                          ３．０
プロピレングリコール                              ５．０
グリセリン                                        ２．０
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン  ３．５
エタノール                                      １５．０
カルボキシビニルポリマー                          ０．３
ヒドロキシプロピルセルロース                      ０．１
ＫＯＨ                                            適量
防腐剤                                            適量
胎盤抽出物                                        ５．０
ヒッチョウカメタノール抽出物                      ０．００１
イオン交換水                                      残余
【００８３】
（製法）
イオン交換水とエタノールにヒッチョウカ抽出物および胎盤抽出物を加温溶解し、更にプロピレングリコール以下の水溶性成分を溶解して、７０℃に保つ（水相）。他の油性成分を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え、予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化し、乳化後、よくかきまぜながら、３０℃まで冷却する。
【００８４】
実施例７  乳液
ポリオキシエチレン（２０モル）ポリオキシ
プロピレン（２モル）セチルアルコール      １．０  質量％
シリコーンＫＦ９６（２０ｃｓ）（信越化学工業）    ２．０
流動パラフィン（中粘度）                          ３．０
プロピレングリコール                              ５．０
グリセリン                                        ２．０
エタノール                                      １５．０
カルボキシビニルポリマー                          ０．３
ヒドロキシプロピルセルロース                      ０．１
ＫＯＨ                                            適量
防腐剤                                            適量
コウジ酸                                          ３．０
ヒッチョウカアセトン抽出物                        ３．０
イオン交換水                                      残余
【００８５】
（製法）
イオン交換水とヒッチョウカ抽出物およびコウジ酸を加温溶解し、更にプロピレングリコール以下の水溶性成分を溶解して、７０℃に保つ（水相）。他の油性成分を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え、予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化し、乳化後、よくかきまぜながら、３０℃まで冷却する。
【００８６】
実施例８  乳液
ステアリン酸                                          １．５  質量％
セチルアルコール                                      ０．５
蜜ロウ                                                ２．０
ポリオキシエチレン（２０モル）モノオレイン酸エステル  １．０
グリセリンモノステアリン酸エステル                    １．０
エタノール                                          １０．０
アルブチン                                          ２０．０
亜硫酸水素ナトリウム                                  ０．０３
プロピレングリコール                                  ５．０
ヒッチョウカ水抽出物                                  ０．５
イオン交換水                                          残余
香料                                                  適量
防腐剤・酸化防止剤                                    適量
【００８７】
（製法）
イオン交換水にヒッチョウカ抽出物、アルブチン及びプロピレングリコールを加え加熱溶解して７０℃に保つ（水相）。エタノールに香料を加えて溶解する（アルコール相）。他の油性成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備乳化を行いホモミキサーで均一に乳化する。これをかきまぜながらアルコール相を加える。その後かきまぜながら３０℃まで冷却する。
【００８８】
実施例９  乳液
マイクロクリスタリンワックス                        １．０  質量％
蜜ロウ                                              ２．０
ラノリン                                            ２．０
流動パラフィン                                    ２０．０
スクワラン                                        １０．０
ソルビタンセスキオレイン酸エステル                  ４．０
ポリオキシエチレン（２０モル）
ソルビタンモノオレイン酸エステル            １．０
アルブチン                                          ５．０
亜硫酸水素ナトリウム                                ０．０３
トラネキサム酸                                      ５．０
プロピレングリコール                                ７．０
ヒッチョウカ酢酸エチル抽出物                        ０．１
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン    ３．５
イオン交換水                                        残余
香料                                                適量
防腐剤・酸化防止剤                                  適量
【００８９】
（製法）
イオン交換水にヒッチョウカ抽出物、アルブチン、トラネキサム酸及びプロピレングリコールを加え加熱して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱溶解して７０℃に保つ（油相）。油相をかきまぜながら、この油相に水相を徐々に加え、ホモミキサーで均一に乳化する。乳化後よくかきまぜながら３０℃まで冷却する。
【００９０】
実施例１０  ゼリー
９５％エタノール                                      １０．０  質量％
ジプロピレングリコール                                １５．０
ポリオキシエチレン（15モル）オレイルアルコールエーテル  ２．０
アルブチン                                              ０．５
亜硫酸水素ナトリウム                                    ０．０３
アスコルビン酸ジステアレ−ト                            ０．５
カルボキシビニルポリマー（商品名：カーボポール９４１）  １．０
苛性カリ                                                ０．１５
Ｌ−アルギニン                                          ０．１
ヒッチョウカメタノール抽出物                            ２．０
香料                                                    適量
防腐剤                                                  適量
イオン交換水                                            残余
【００９１】
（製法）
イオン交換水にヒッチョウカ抽出物、アルブチン及びカーボポール９４１を均一に溶解し、一方９５％エタノールにジプロピレングリコール、ポリオキシエチレン（１５モル）オレイルアルコールエーテル、その他の成分を溶解し、水相に添加する。ついで苛性カリ、Ｌ−アルギニンで中和させ増粘する。
【００９２】
実施例１１  ピールオフ型パック
（アルコール相）
９５％エタノール                                      １０．０  質量％
ポリオキシエチレン（15モル）オレイルアルコールエーテル  ２．０
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン        ３．５
防腐剤                                                  適量
香料                                                    適量
（水相）
ヒッチョウカエタノール抽出物                            ３．０
アルブチン                                              １．０
亜硫酸水素ナトリウム                                    ０．０３
ポリビニルアルコール                                  １２．０
グリセリン                                              ３．０
ポリエチレングリコール１５００                          １．０
イオン交換水                                            残余
【００９３】
（製法）
８０℃にて水相を調製し、５０℃に冷却する。ついで室温で調製したアルコール相を添加後均一に混合し、放冷する。
【００９４】
実施例１２  粉末入りパック
（アルコール相）
９５％エタノール                              ２．０  質量％
防腐剤                                        適量
香料                                          適量
色剤                                          適量
アスコルビン酸ジオレ−ト                      １．０
（水相）
ヒッチョウカエタノール抽出物                  ７．０
アルブチン                                    １．０
プロピレングリコール                          ７．０
亜鉛華                                      ２５．０
カオリン                                    ２０．０
イオン交換水                                  残余
【００９５】
（製法）
室温にて水相を均一に調製する。ついで室温にて調製したアルコール相を添加し均一に混合する。
【００９６】
実施例１３  吸水軟膏
ワセリン                                          ４０．０  質量％
ステアリルアルコール                              １８．０
モクロウ                                          ２０．０
ポリオキシエチレン（10モル）モノオレイン酸エステル  ０．２５
グリセリンモノステアリン酸エステル                  ０．２５
胎盤抽出物                                          １．０
ヒッチョウカエタノール抽出物                      １０．０
イオン交換水                                        残余
【００９７】
（製法）
イオン交換水にヒッチョウカ抽出物、胎盤抽出物を加え、７０℃に保つ（水相）。他の成分を７０℃にて混合溶解する（油相）。上記水相に油相を添加し、ホモミキサーで均一に乳化後、冷却する。
【００９８】
実施例１４  ローション
（１）リジンベタイン                          １．０  質量％
（２）ヒッチョウカエタノール抽出物            ０．２
（３）グリチルリチン酸ジカリウム              ０．０５
（４）グリセリン                              ４．０
（５）１，３−ブチレングリコール              ４．０
（６）エタノール                              ７．０
（７）ポリオキシエチレンオレイルアルコール    ０．５
（８）メチルパラベン                          ０．０５
（９）クエン酸                                ０．０１
（10）クエン酸ソーダ                          ０．１
（11）香料                                    ０．０５
（12）精製水                                  残余
【００９９】
実施例１５  クリーム
（１）セトステアリルアルコール                ３．５  質量％
（２）スクワラン                            ４０．０
（３）ミツロウ                                ３．０
（４）還元ラノリン                            ５．０
（５）ヒッチョウカブタノール抽出物            ０．９
（６）エチルパラベン                          ０．３
（７）ポリオキシエチレン(20)
ソルビタンモノパルミチン酸エステル      ２．０
（８）ステアリン酸モノグリセリド              ２．０
（９）香料                                    ０．０３
（10）トラネキサム酸ヘキシルアミド            ３．０
（11）リン酸ピリドキサール                    ０．１
（12）オルニチンベタイン                      ０．０５
（13）１，３−ブチレングリコール              ５．０
（14）グリセリン                              ５．０
（15）精製水                                  残余
【０１００】
実施例１６  乳液
（１）トラネキサム酸塩酸塩                          ２．０  質量％
（２）ヒッチョウカ１，３−ＢＧ抽出物                １．０
（３）アラニンベタイン                              ０．１
（４）アラントイン                                  ０．０５
（５）ステアリン酸                                  １．５
（６）セチルアルコール                              ０．５
（７）ミツロウ                                      ２．０
（８）ポリオキシエチレン(10)モノオレイン酸エステル  １．０
（９）グリセリンモノステアリン酸エステル            １．０
（10）プロピレングリコール                          ５．０
（11）エタノール                                    ３．０
（12）エチルパラベン                                ０．３
（13）香料                                          ０．０３
（14）精製水                                        残余
【０１０１】
実施例１７  軟膏
（１）トラネキサム酸ｎ−ヘキシルエステル塩酸塩      ３．０  質量％
（２）グリチルリチン酸ピリドキシン                  １．０
（３）γ−ブチロベタイン                            ０．１
（４）ヒッチョウカ熱水抽出物                        １．５
（５）ステアリルアルコール                        １８．０
（６）モクロウ                                    ２０．０
（７）ポリオキシエチレン(10)モノオレイン酸エステル  ０．２５
（８）グリセリンモノステアリン酸エステル            ０．２５
（９）ワセリン                                    ４０．０
（10）精製水                                        残余
【０１０２】
実施例１８  パック
（１）トラネキサム酸グアニジド                ５．０  質量％
（２）トリパルミチン酸ビリドキシン            １．５
（３）フェニルアラニルベタイン                ０．１
（４）ポリビニルアルコール                  １５．０
（５）ヒッチョウカアセトン抽出物              ２．０
（６）ポリエチレングリコール                  ３．０
（７）プロピレングリコール                    ７．０
（８）エタノール                            １０．０
（９）メチルパラベン                          ０．０５
（10）香料                                    ０．０５
（11）精製水                                  残余
【０１０３】
実施例１９  固形白粉
（１）タルク                              ８２．４  質量％
（２）ステアリン酸                          １．５
（３）ラノリン                              ５．０
（４）スクワラン                            ５．０
（５）ヒッチョウカエタノール抽出物          ０．３
（６）ソルビタンセスキオレイン酸エステル    ２．０
（７）トリエタノールアミン                  １．０
（８）トラネキサム酸メチルアミド            １．０
（９）ジカプリル酸ピリドキシン              ０．１
（10）グルタミン酸ベタイン                  ０．１
（11）顔料                                  適量
（12）香料                                  適量