(57)【要約】      （修正有）【課題】動物質物質である抽出原料から脂質を抽出する方法において、有機溶媒でない抽出溶媒を採用して有機溶媒と同程度の抽出効果を得らえるようにし、かつ、抽出原料の残渣には有機溶媒が皆無であってその有効利用が図れるようにする。【解決手段】動物質物質である抽出原料から抽出溶媒を使用して脂質を抽出する脂質の抽出方法であり、抽出溶媒として電解生成アルカリ性水を採用して、抽出工程での有機溶媒の使用を回避した。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物質物質である抽出原料から抽出溶媒を使用して脂質を抽出する脂質の抽出方法であり、抽出溶媒として電解生成アルカリ性水を採用することを特徴とする脂質の抽出方法。
【請求項２】
動物質物質である抽出原料から抽出溶媒を使用して脂質を抽出する脂質の抽出方法であり、食塩の希薄水溶液を被電解水とする有隔膜電解にて生成された電解生成アルカリ性水を抽出溶媒として採用し、コレステロールを抽出することを特徴とする脂質の抽出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物質物質である抽出原料から抽出溶媒を使用して脂質を抽出する脂質の抽出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
動物質物質には有用な脂質が多く含まれていることから、動物質物質である抽出原料から抽出溶媒を使用して脂質を抽出する方法が試みられている。例えば、産業廃棄物として処理されているイカ肝臓（ゴロ）等には、液晶の原料としての利用価値の高いコレステロールが多く含まれていることから、当該産業廃棄物を抽出原料とする各種の抽出方法が試みられている。一般に採られている抽出方法としては、抽出溶媒として一般水を採用する煮取方法がある。当該煮取方法では、抽出原料を抽出溶媒である水で煮沸して、抽出原料から脂質を抽出するものである。
【０００３】
当該煮取方法は、抽出原料から脂質を抽出することはできるものの脂質の抽出効率が低く、かつ、抽出工程では水に浸漬している抽出原料を高温に加熱することから、抽出原料が加熱分解し、かつ、分解に起因して異臭を発生するという問題がある。このため、脂質の抽出効率の向上と、抽出原料の加熱分解および分解に起因して異臭を発生を回避すべき抽出方法の開発が要請され、これに対処すべく、（Bligｈ-Dyer法）が開発されている。当該抽出方法（Bligｈ-Dyer法）は、脂質の抽出溶媒として有機溶媒であるクロロホルムとメタノールを合わせて使用するもので、動物質の抽出原料をクロロホルムおよびメタノールの混合液中に長時間浸漬して、抽出原料からコレステロールを含む脂質を抽出する方法である。
【０００４】
当該抽出方法（Bligh-Dyer法）は、基本的には、抽出原料からの脂質の抽出する場合に、有機溶媒を抽出原料の量に応じて使用するものであり、抽出された脂質の後処理には煩雑な処理が要求されるものである。このため、当該抽出方法では、有機溶媒の使用や煩雑な後処理に起因して脂質の抽出コストが高くなり、かつ、脂質の抽出工程（浸漬工程）での安全性を確保する必要がある。また、当該抽出方法では、脂質の抽出処理を行った後の抽出溶媒の後処理にも問題があり、当該抽出溶媒を廃棄することなくこれを回収する必要がある。また、脂質の抽出処理を行った後の抽出原料の残渣の利用や廃棄の問題がある。抽出原料の残渣の利用では、安全性の問題から、家畜の飼料や食品の原料としては利用することができず、また、廃棄するに当たっては、抽出原料の残渣から抽出溶媒を完全に除去してこれを回収しなければならない。従って、当該抽出方法（Blinng-Dyer法）は、未だ実用化されていないのが実状である。
【０００５】
本出願人は、食品素材から有用成分を抽出する方法については長期にわって研究しており、鰹節からの旨味成分やだし成分、昆布からの旨味成分やだし成分、浸漬大豆からの豆乳、コーヒ豆からの飲料用成分を抽出するための抽出溶媒として、特定された電解生成水を採用する抽出方法を確立して提案している（特許文献１を参照）。
【０００６】
当該抽出方法は、抽出溶媒として水を使用しても、その抽出温度や抽出時間を調整すれば十分に抽出することができる成分を抽出の対象としているものである。具体的には、抽出原料としては、上記したように、鰹節、昆布、大豆、コーヒ豆等の食品素材を抽出原料としている。従って、当該抽出方法は、動物質物質である抽出原料から脂質を抽出することを意図としているものではない。
【特許文献１】特開２０００−４１６１５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明者は、近年、機能性水として注目されている電解生成水に着目して、電解生成水を抽出溶媒として使用して、水では抽出条件を如何に制御しても十分には抽出し得ない、動物質物質に含まれている脂質を抽出する試みを行い、特定の電解生成水を抽出溶媒とする脂質の抽出では、抽出溶媒としてクロロホルム、メタノール、ヘキサン等の有機溶媒を使用した場合と少なくとも同程度の抽出効果を得ることができることを知得した。
【０００８】
従って、本発明の目的は、特定の電解生成水を抽出溶媒として、有機溶媒を使用した場合と少なくとも同程度の抽出効果を有する脂質の抽出方法を提供すること、および、これにより、抽出溶媒として有機溶媒を採用した場合に発生する上記た種々の問題を回避することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、動物質物質である抽出原料から抽出溶媒を使用して脂質を抽出する脂質の抽出方法に関する。本発明に係る抽出方法では、抽出溶媒として、電解生成アルカリ性水を採用することを特徴とするものである。
【００１０】
また、本発明に係る抽出方法は、動物質物質である抽出原料から抽出溶媒を使用して脂質を抽出する脂質の抽出方法であって、食塩の希薄水溶液を被電解水とする有隔膜電解にて生成された電解生成アルカリ性水を抽出溶媒として採用して、脂質中の有効成分であるコレステロールを抽出することを特徴とするものでもある。
【発明の効果】
【００１１】
本発明に係る脂質の抽出方法によれば、抽出溶媒として有機溶媒ではない電解生成アルカリ性水を採用しているにもかかわらず、抽出溶媒として有機溶媒を採用した場合と同等の抽出効果を得ることができる。特に、脂質中のコレステロールについては、抽出溶媒が有機溶媒である場合よりも電解生成アルカリ性水である場合の方が、高い抽出効果が得られている。
【００１２】
電解生成アルカリ性水が、有機溶媒とは少なくとの同等の抽出機能を発揮するメカニズムの解明は未だなされてはいないが、電解生成アルカリ性水が高い抽出機能を有することは、本発明の「実施例」の項を参照すれば明白である。従って、本発明に係る脂質の抽出方法は、動物質物質である抽出原料から脂質を抽出する方法としては、極めて有効な抽出方法であって、コスト的にも有利な抽出方法ということができる。
【００１３】
本発明に係る抽出方法では、かかる作用効果に加えて、抽出溶媒として有機溶媒でない電解生成アルカリ性水を採用しているから、抽出媒体として有機溶媒を使用することに起因する種々の問題の発生を回避することができる。有機溶媒の使用に起因する問題としては、脂質の抽出工程では、抽出原料に応じて使用される有機溶媒の回収、抽出工程で発生する有機溶媒のガス等に起因する環境汚染、身体に対する影響等の問題がある。しかしながら、抽出溶媒として電解生成アルカリ性水を採用する本発明に係る抽出方法ではこれらの問題は発生せず、本発明に係る抽出方法は安全でかつ容易に実施でき、また、これらの問題の解決に要するコストが不要であって、経済的にも有利な抽出方法ということができる。
【００１４】
また、本発明に係る抽出方法は、脂質を抽出した後の抽出原料の残渣の処分についても、抽出溶媒として有機溶媒を使用する場合に比較して有利である。本発明に係る抽出方法を実施して残った抽出原料の残渣は、有害な有機溶媒を含有しないとともに、有機溶媒に起因する破壊も少なくて安全性に問題がなく、低脂肪で低コレステロールの食材原料や家畜に飼料として有効に活用ができる利点がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明者は、電解生成水について鋭意研究した結果、電解生成水のうちの電解生成アルカリ性水は、動物質物質に含まれる脂質の酸化を抑制す機能を有すること、動物質物質中のアルカリプロテアーゼの活性を阻害する機能を有すること、高いｐＨにもかかわらずタンパク質を高分子のまま可溶化させる機能を有すること、魚組織から水溶性固形物を抽出する機能を有すること等の知見を得て、抽出溶媒として電解生成アルカリ性水を採用し、電解生成アルカリ性水を使用して物質物質である抽出原料から脂質を抽出する抽出方法を実施した。
【００１６】
本発明に係る抽出方法の実施では、動物質物質としてマイカを採用するとともに、抽出溶媒として下記に示す電解生成アルカリ性水を採用し、下記の「実施例」の項でに示す詳細な条件の下で、脂質の抽出実験を行った。採用した電解生成アルカリ性水は、食塩の希薄水溶液（０．１重量％）を被電解水とする有隔膜電解にて陰極側電解室で生成された電解生成アルカリ性水であって、ｐＨが１０〜１２の範囲にある酸化還元電位が極めて低いものである。
【００１７】
得られた実験結果からは、抽出溶媒として電解生成アルカリ性水を採用した場合には、有機溶媒を使用した場合に匹敵する脂質の抽出効果が確認され、かつ、抽出した脂質には、有機溶媒を使用して抽出した脂質よりも多くのコレステロールが含まれていることが確認された。また、本発明に係る抽出方法で抽出された脂質から精製したコレステロールの純度は、極めて高いことが確認された。純度の高いコレステロールは、液晶の原料として利用価値の高いものである。
【００１８】
以上の結果を総合すると、動物質物質から脂質を抽出方法では、電解生成アルカリ性水を抽出溶媒とする本発明に係る抽出方法によれば、抽出効率の高い脂質の抽出を、低コストでかつ安全に実施することができる。また、本発明に係る抽出方法により抽出された脂質から精製したコレステロールは、純度が高くて産業的な利用の高いものである。さらにまた、本発明に係る抽出方法により脂質を抽出した後の抽出原料の残渣は、有機溶媒を含まない安全なものであり、低脂肪、低コレステロールの食材原料や家畜等の飼料として有効利用することができる。
【実施例】
【００１９】
本実施例では、電解生成アルカリ性水を抽出溶媒とする本発明に係る抽出方法を実施する実験（実施例）と、有機溶媒を抽出溶媒とする上記した（Blinng-Dyer法）に係る抽出方法を実施する実験（比較例）を行った。各実験では、動物質である抽出原料としてマイカを採用した。マイカは、市販の冷凍物を加熱し解凍したもので、解凍したマイカから筋肉および肝臓を採取して抽出原料とした。
【００２０】
また、実施例の実験（以下実施例実験と称す）では、抽出溶媒として電解生成アルカリ性水を採用した。当該電解生成アルカリ性水は、有隔膜電解槽を有する電解水生成装置（SUPER OXSEED LABO：葵エンジニアリング株式会社製）を使用して、０．１重量％の希薄食塩水を被電解水とした。有隔膜電解では、被電解水４０００ｍＬを電解電圧９〜１１Ｖ、電解電流１００ｍＡの電解条件で１０分間電解するこによって、有隔膜電解槽の陰極側電解室にて電解生成アルカリ性水を生成させた。当該電解生成アルカリ生成水は、ｐＨが１１で、酸化還元電位が−８００ｍＶの特性を有する。また、比較例の実験（比較例実験と称す）では、抽出溶媒として、クロロホルム（特級）−メタノール（特級）を組合わせた有機溶媒を採用した。
【００２１】
実施例実験は、図１に示す実験手順に基づいて行い、また、比較例実験は図２に示す実験手順に基づいて行った。これらの実験は、脂質の抽出工程、脂質の分離工程、および、脂質の濃縮工程からなり、本発明が適用対象とする抽出方法は、脂質の抽出工程に該当する。
【００２２】
（１）実施例実験（図１を参照）：購入した冷凍のマイカを室温にて解凍して、マイカ肝臓１００ｇを秤量し、これをフードプロセッサーで粉砕した後、これをホモジナイザーカップに移して抽出工程に付した。
【００２３】
抽出工程では、粉砕された抽出原料を収容したホモジナイザーカップに、抽出溶媒である電解生成アルカリ性水を１５０ｍＬ加えて、ホモジナイザーを使用して３０００ｒｐｍで３０分間撹拌する撹拌処理を行った。ホモジナイザーカップに電解生成アルカリ性水を加えて撹拌する撹拌処理を３回行った後、得られたホモジネートを４℃の暗所で静置して、抽出原料中の脂質を抽出した。
【００２４】
抽出工程に続く分離工程は、脂質を含有する抽出液と抽出原料の残渣を分離する工程である。分離工程では、抽出工程で生成された浸漬液（ホモジネート）中の抽出原料の残渣を分離した。次いで、残渣を分離して生成された濾液を分液ロートに移して、ヘキサン８００ｍＬを加えて１分間撹拌した後、ヘキサン層を三角フラスコに採取した。この場合、分液ロート内に生じたエマルジョンについては遠心分離にかけ、エマルジョンが完全に分離したことを確認した後、残存するヘキサン層を先に三角フラスコに採取したものと合わせ、これに無水硫酸ナトリウムを加えて、４℃の暗所で脱水した。脱水後、濾紙を用いて濾過した。
【００２５】
分離工程に続く濃縮工程では、分離工程で生成された濾液をナスフラスコに採取し、濾液をロータリーエバポレーターにて濃縮した。濃縮された濾液を秤量済み（１００ｍＬ）ナスフラスコに採取し、これをロータリーエバポレーターにてさらに濃縮した後、窒素気流下で脱溶剤して放冷却して秤量し、総脂質収率（％）を算出した。
【００２６】
（２）比較例実験（図２を参照）：購入した冷凍のマイカを室温で解凍して、マイカ肝臓１００ｇを秤量し、これをフードプロセッサーで粉砕した後、これをホモジナイザーカップに移して抽出工程に付した。
【００２７】
抽出工程では、粉砕された抽出原料を収容したホモジナイザーカップに、抽出溶媒であるクロロホルム１００ｍＬと、抽出溶媒であるメタノール２００ｍＬとをこの順に加え、ホモジナイザーを使用して３０００ｒｐｍで３０分間撹拌する撹拌処理を行った。これに、抽出溶媒であるクロロホルムを１００ｍＬ加えて、さらに３０００ｒｐｍで１０分間撹拌する撹拌処理し、これに、高純水を任意の量だけ加えて、さらに３０００ｒｐｍで１０分間撹拌する撹拌処理した。得られたホモジナイネートについては、４℃の暗所で４８時間静置して、抽出原料中の脂質を抽出した。
【００２８】
抽出工程に続く分離工程は、脂質を含有する抽出液と抽出原料の残渣を分離する工程である。分離工程では、抽出工程で生成された浸漬液（ホモジネート）を濾紙を用いて吸引濾過し、少量のクロロホルムで残渣を戻した後、これをホモジナイザーカップに移し、これにクロロホルムを１００ｍＬを加えて、３０００ｒｐｍで１５分間撹拌処理を行った。これをさらに吸引濾過して、濾液を分液ロートに移して震とうした後、静置して溶液を分離した。溶液が十分に分離した後、クロロホルム層を三角フラスコに採取し、これに無水硫酸ナトリウムを加えて４℃の暗所で脱水した。脱水後、濾紙を用いて濾過した。
【００２９】
分離工程に続く濃縮工程では、分離工程で生成された濾液をナスフラスコに採取し、濾液をロータリーエバポレーターにて濃縮した。濃縮された濾液を秤量済み（１００ｍＬ）ナスフラスコに移し換え、これをロータリーエバポレーターにてさらに濃縮した後、窒素気流下で脱溶剤して放冷却して秤量し、総脂質収率（％）を算出した。
【００３０】
（３）抽出したイカ肝臓総脂質画分からの脂質不ケン化物の調製：実施例実験および比較例実験で得たイカ肝臓の総脂質画分に１０倍量の１ＮのＫＯＨ−エタノール溶液を加え、これを１時間加熱還流を行い、冷却した後、これにＫＯＨ−エタノール溶液の３倍量の蒸留水を加え分液ロートに移した。分液ロートに移した総脂質画分については、ＫＯＨ−エタノール溶液の２倍量のエーテルで２回抽出を行った。次いで、エーテル層を水洗した後、エーテル溶液を無水硫酸ナトリウムで脱水し、エーテル溶液をガラス濾過器で濾紙を用いて濾過し、これをナスフラスコに移し、ロータリーエバポレータで濃縮した。濃縮したエーテル溶液については、秤量済み（１００ｍＬ）のナスフラスコに移してロータリーエバポレータで濃縮した後、窒素気流下で溶媒を完全に除去して放冷し、重量を測定した。
【００３１】
（４）脂質不ケン化物からのコレステロールの分離、精製：脂質不ケン化物を１０ｍＬの温メタノールに溶解し、放冷した後、結晶の析出を確認して、５℃で２４時間冷却した。結晶物については、秤量したガラス濾過器を用いて濾過し、濾液（母液）と結晶物をそれぞれ秤量済み（１００ｍＬ）のナスフラスコに分離し回収した。結晶および母液をロータリーエバポレータで濃縮した後、窒素気流下で溶媒を完全に除去して、コレステロールを精製した。放冷後、コレステロールの重量を測定した。
【００３２】
（５）ＴＬＣによるコレステロールの純度分析：コレステロールの純度分析には、薄層板クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を用いた。ＴＬＣの分析には、展開溶媒として、ヘキサン：ジエチルエーテル(Et2O)：酢酸(AcOH)＝４０：６０：１（ｖｏｌ比）に調製した展開溶媒を使用し、薄層板（シリカゲル０．２５ｍｍ）については、１１０℃で６０分活性化した。ＴＬＣの分析では、１００ｍｇを秤量した結晶および母液を、クロロホルムで２％溶液に希釈した後、その１μＬを薄層板にスポットして展開した。展開後の薄層板に５０％硫酸を噴霧し、加熱炭化させ、コレステロールの微紅色を確認した。ＴＬＣ分析の結果は、板上に現れたスポットで判定した。
【００３３】
（６）結果：実施例実験および比較例実験の結果を、抽出された脂質の収率、その構成成分を分離、精製した際の収率については表１に示し、ＴＬＣを用いたコレステロール純度の分析結果については、図３に示す。
【００３４】
【表１】
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【００３５】
表１に示す結果を参照すると、実施例実験および比較例実験では共に、同程度の脂質収率が得られていることが確認される。また、抽出した脂質の成分をコレステロール含有率に注目して分離、精製した結果では、比較例実験で抽出された脂質からは１３％の不ケン化物が分離され、そのうちの１６％がコレステロールとして精製された。これに対して、実施例実験で抽出された脂質からは７％の不ケン化物が分離され、そのうちの７３％がコレステロールとして精製された。なお、この場合に分離された脂肪酸画分は、両実験共に同程度の収率であった。
【００３６】
以上の結果から、実施例実験および比較例実験（抽出方法）では、同程度の脂質抽出効果が得られること、抽出された脂質に含まれるコレステロールについては比較例実験に比較して実施例実験のほうが多いことが確認される。
【００３７】
また、図３に示す結果を参照すると、実施例実験および比較例実験で得られたコレステロールの純度は、同程度の高い純度であることが確認された。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】本発明の実施例実験に係る抽出方法の実験手順を示す手順図である。
【図２】本発明に対する比較例実験に係る抽出方法の実験手順を示す手順図である。
【図３】脂質不ケン化物のＴＬＣ分析に結果を示す各成分の展開図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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