(57)【要約】【課題】ＥＰＯ投与のためにより良好な投与経路、およびＥＰＯ投与のための有効用量および投薬レジメンを決定するための手段の提供。  【解決手段】（項目１）  患者における所望される薬力学的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るための方法であって、以下の工程：  （ａ）１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程；（ｂ）薬物速度論的／薬力学的モデルを使用して、該１以上のＥＰＯ投薬レジメンの薬力学的プロフィールを決定する工程；および（ｃ）該薬力学的プロフィールに基づいて、該所望される薬力学的応答を与える該１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程、を包含する、方法。  【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
薬力学的プロフィールに基づいて所望の薬力学的応答を提供するＥＰＯ投薬レジメンを選択するための手段を提供するシステムであって、該ＥＰＯ投薬レジメンは、少なくとも４日間にわたって、血清ＥＰＯレベルを、少なくともほぼ血清ＥＰＯ閾値レベルで維持する、システム。
【請求項２】
前記血清ＥＰＯ閾値レベルが、赤血球の生成を増加させるのに十分なＥＰＯの量である、請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
前記血清ＥＰＯ閾値レベルが、少なくとも１週間にわたって維持される、請求項１に記載のシステム。
【請求項４】
前記血清ＥＰＯ閾値レベルが、少なくとも２週間にわたって維持される、請求項１に記載のシステム。
【請求項５】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、ＥＰＯを１週間に１回投与する工程を包含する、請求項１に記載のシステム。
【請求項６】
前記１週間に１回のＥＰＯ投薬レジメンが、３００ＩＵ／ｋｇ〜２４００ＩＵ／ｋｇの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項５に記載のシステム。
【請求項７】
前記１週間に１回のＥＰＯ投薬レジメンが、２０，０００ＩＵ〜１２０，０００ＩＵの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項５に記載のシステム。
【請求項８】
前記１週間に１回のＥＰＯ投薬レジメンが、１，０００ＩＵ／ｋｇ〜４０，０００ＩＵ／ｋｇの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項５に記載のシステム。
【請求項９】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、ＥＰＯ用量を２週間毎に１回投与する工程を包含する、請求項１に記載のシステム。
【請求項１０】
前記２週間毎に１回のＥＰＯ投薬レジメンが、９００ＩＵ／ｋｇ〜１２００ＩＵ／ｋｇの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項９に記載のシステム。
【請求項１１】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、ＥＰＯを１０日に１回投与する工程を包含する、請求項１に記載のシステム。
【請求項１２】
前記１０日に１回のＥＰＯ投薬レジメンが、９００ＩＵ／ｋｇの用量のＥＰＯを投与する工程を包含する、請求項１１に記載のシステム。
【請求項１３】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、ＥＰＲＥＸ[Ｉ］（登録商標）、ＥＲＹＰＯ（登録商標）、ＰＲＯＣＲＩＴ（登録商標）およびＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）からなる群より選択されるＥＰＯを投与する工程を包含する、請求項１に記載のシステム。
【請求項１４】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、新規赤血球生成刺激タンパク質（ＮＥＳＰ）、ヒトエリスロポエチンアナログ、ヒト血清アルブミン融合タンパク質、エリスロポエチンωおよびエリスロポエチン変異体からなる群より選択されるＥＰＯを投与する工程を包含する、請求項１に記載のシステム。
【請求項１５】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、ＥＰＯの生物学的活性を有するタンパク質を投与する工程を包含する、請求項１に記載のシステム。
【請求項１６】
前記ＥＰＯの生物学的活性を有するタンパク質が、エリスロポエチンアナログ、エリスロポエチンアイソフォーム、エリスロポエチン模倣物、エリスロポエチンフラグメント、ハイブリッドエリスロポエチンタンパク質、エリスロポエチンレセプターアゴニストおよび腎性エリスロポエチンからなる群より選択される、請求項１５に記載のシステム。
【請求項１７】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、天然に存在するＥＰＯ、組換えＥＰＯ、合成ＥＰＯ、トランスジェニックＥＰＯ、およびＥＰＯを生成するための遺伝子活性化法からなる群に由来するＥＰＯを投与する工程を包含する、請求項１に記載のシステム。
【請求項１８】
前記患者が、貧血を有する、請求項１に記載のシステム。
【請求項１９】
前記貧血が、ＥＰＯ濃度に関連する貧血を含む、請求項１８に記載のシステム。
【請求項２０】
前記貧血が、末期腎性貧血、腎不全に関連した貧血および透析に関連する貧血からなる群より選択される、請求項１９に記載のシステム。
【請求項２１】
前記貧血が、癌化学療法に関連した貧血を含む、請求項１８に記載のシステム。
【請求項２２】
前記貧血が、ＡＩＤＳ薬物療法に関連した貧血を含む、請求項１８に記載のシステム。
【請求項２３】
前記貧血が、薬物に関連した貧血を含む、請求項１８に記載のシステム。
【請求項２４】
前記薬物が、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群から選択される、請求項２３に記載のシステム。
【請求項２５】
前記薬物がジドブジンである、請求項２３に記載のシステム。
【請求項２６】
前記患者が輸血を受けている、請求項１に記載のシステム。
【請求項２７】
前記患者が、骨髄移植を受けている、請求項１に記載のシステム。
【請求項２８】
前記患者が、慢性関節リウマチを有する、請求項１に記載のシステム。
【請求項２９】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、静脈内投与、皮下投与および非経口投与からなる群より選択される経路を介してＥＰＯを投与する工程を包含する、請求項１に記載のシステム。
【請求項３０】
前記ＥＰＯが、改変されたグリコシル化パターンを有するＥＰＯである、請求項１に記載のシステム。
【請求項３１】
前記改変されたグリコシル化パターンが、高グリコシル化を含む、請求項３０に記載のシステム。
【請求項３２】
前記改変されたグリコシル化パターンが、脱グリコシル化を含む、請求項３０に記載のシステム。
【請求項３３】
ＥＰＯ投薬レジメンに従って患者に投与するための、ＥＰＯを含むキットであって、ここで、第１用量のＥＰＯの投与は、少なくとも４日間にわたって血清ＥＰＯ閾値レベルを維持し、そして第２用量のＥＰＯが、該第１用量のＥＰＯから生じる赤血球生成と同時に該患者に投与される、キット。
【請求項３４】
前記第２用量のＥＰＯが、前記第１用量の６日後と１４日後との間に前記患者に投与される、請求項３３に記載のキット。
【請求項３５】
前記第２用量のＥＰＯが、前記第１用量の６日後と１０日後との間に前記患者に投与される、請求項３３に記載のキット。
【請求項３６】
前記第２用量のＥＰＯが、前記第１用量の７日後に前記患者に投与される、請求項３３に記載のキット。
【請求項３７】
前記ＥＰＯが、ＥＰＲＥＸ（登録商標）、ＥＲＹＰＯ（登録商標）、ＰＲＯＣＲＩＴ（登録商標）およびＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）からなる群より選択されるＥＰＯである、請求項３３に記載のキット。
【請求項３８】
前記ＥＰＯが、新規赤血球生成刺激タンパク質（ＮＥＳＰ）、ヒトエリスロポエチンアナログ、ヒト血清アルブミン融合タンパク質、エリスロポエチンωおよびエリスロポエチン変異体からなる群より選択されるＥＰＯである、請求項３３に記載のキット。
【請求項３９】
前記ＥＰＯが、ＥＰＯの生物学的活性を有するタンパク質である、請求項３３に記載のキット。
【請求項４０】
前記ＥＰＯの生物学的活性を有するタンパク質が、エリスロポエチンアナログ、エリスロポエチンアイソフォーム、エリスロポエチン模倣物、エリスロポエチンフラグメント、ハイブリッドエリスロポエチンタンパク質、エリスロポエチンレセプターアゴニストおよび腎性エリスロポエチンからなる群より選択される、請求項３９に記載のキット。
【請求項４１】
前記ＥＰＯが、天然に存在するＥＰＯ、組換えＥＰＯ、合成ＥＰＯ、トランスジェニックＥＰＯ、およびＥＰＯを生成するための遺伝子活性化法からなる群に由来するＥＰＯである、請求項３３に記載のキット。
【請求項４２】
前記ＥＰＯの第１用量および第２用量が、３００ＩＵ／ｋｇ〜２４００ＩＵ／ｋｇの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項３３に記載のキット。
【請求項４３】
前記ＥＰＯの第１用量および第２用量が、２０，０００ＩＵ〜１２０，０００ＩＵの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項３３に記載のキット。
【請求項４４】
前記ＥＰＯの第１用量および第２用量が、１，０００ＩＵ／ｋｇ〜４０，０００ＩＵ／ｋｇの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項３３に記載のキット。
【請求項４５】
前記ＥＰＯが、改変されたグリコシル化パターンを有するＥＰＯである、請求項３３に記載のキット。
【請求項４６】
前記改変されたグリコシル化パターンが、高グリコシル化を含む、請求項３３に記載のキット。
【請求項４７】
前記改変されたグリコシル化パターンが、脱グリコシル化を含む、請求項３３に記載のキット。
【請求項４８】
前記患者が、貧血を有する、請求項３３に記載のキット。
【請求項４９】
前記貧血が、ＥＰＯ濃度に関連する貧血を含む、請求項４８に記載のキット。
【請求項５０】
前記貧血が、末期腎性貧血に関連した貧血、腎不全に関連した貧血および透析に関連する貧血からなる群より選択される、請求項４９に記載のキット。
【請求項５１】
前記貧血が、癌化学療法に関連した貧血を含む、請求項４８に記載のキット。
【請求項５２】
前記貧血が、ＡＩＤＳ薬物療法に関連した貧血を含む、請求項４８に記載のキット。
【請求項５３】
前記貧血が、薬物に関連した貧血を含む、請求項４８に記載のキット。
【請求項５４】
前記薬物が、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群から選択される、請求項５３に記載のキット。
【請求項５５】
前記薬物がジドブジンである、請求項５３に記載のキット。
【請求項５６】
前記患者が輸血を受けている、請求項３３に記載のキット。
【請求項５７】
前記患者が、骨髄移植を受けている、請求項３３に記載のキット。
【請求項５８】
前記患者が、慢性関節リウマチを有する、請求項３３に記載のキット。
【請求項５９】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、静脈内投与、皮下投与および非経口投与からなる群より選択される経路を介してＥＰＯを投与する工程を包含する、請求項３３に記載のキット。
【請求項６０】
患者について、第１用量のＥＰＯおよび第２用量のＥＰＯを含むＥＰＯ投薬レジメンを選択するための手段を提供するシステムであって、ここで、該第１用量のＥＰＯの投与は、少なくとも４日間にわたって該患者における血清ＥＰＯ閾値レベルを維持し、そして該第２用量のＥＰＯが、該第１用量のＥＰＯから生じる赤血球生成と同時である、システム。
【請求項６１】
前記第２用量のＥＰＯが、前記第１用量の６日後と１４日後との間に前記患者に投与される、請求項６０に記載のシステム。
【請求項６２】
前記第２用量のＥＰＯが、前記第１用量の６日後と１０日後との間に前記患者に投与される、請求項６０に記載のシステム。
【請求項６３】
前記第２用量のＥＰＯが、前記第１用量の７日後に前記患者に投与される、請求項６０に記載のシステム。
【請求項６４】
前記ＥＰＯが、ＥＰＲＥＸ（登録商標）、ＥＲＹＰＯ[V］（登録商標）、ＰＲＯＣＲＩＴ（登録商標）およびＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）からなる群より選択されるＥＰＯである、請求項６０に記載のシステム。
【請求項６５】
前記ＥＰＯが、新規赤血球生成刺激タンパク質（ＮＥＳＰ）、ヒトエリスロポエチンアナログ、ヒト血清アルブミン融合タンパク質、エリスロポエチンωおよびエリスロポエチン変異体からなる群より選択されるＥＰＯである、請求項６０に記載のシステム。
【請求項６６】
前記ＥＰＯが、ＥＰＯの生物学的活性を有するタンパク質である、請求項６０に記載のシステム。
【請求項６７】
前記ＥＰＯの生物学的活性を有するタンパク質が、エリスロポエチンアナログ、エリスロポエチンアイソフォーム、エリスロポエチン模倣物、エリスロポエチンフラグメント、ハイブリッドエリスロポエチンタンパク質、エリスロポエチンレセプターアゴニストおよび腎性エリスロポエチンからなる群より選択される、請求項６６に記載のシステム。
【請求項６８】
前記ＥＰＯが、天然に存在するＥＰＯ、組換えＥＰＯ、合成ＥＰＯ、トランスジェニックＥＰＯ、およびＥＰＯを生成するための遺伝子活性化法からなる群に由来するＥＰＯである、請求項６０に記載のシステム。
【請求項６９】
前記ＥＰＯの第１用量および第２用量が、３００ＩＵ／ｋｇ〜２４００ＩＵ／ｋｇの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項６０に記載のシステム。
【請求項７０】
前記ＥＰＯの第１用量および第２用量が、２０，０００ＩＵ〜１２０，０００ＩＵの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項６０に記載のシステム。
【請求項７１】
前記ＥＰＯの第１用量および第２用量が、１，０００ＩＵ／ｋｇ〜４０，０００ＩＵ／ｋｇの範囲のＥＰＯ用量を投与する工程を包含する、請求項６０に記載のシステム。
【請求項７２】
前記ＥＰＯが、改変されたグリコシル化パターンを有するＥＰＯである、請求項６０に記載のシステム。
【請求項７３】
前記改変されたグリコシル化パターンが、高グリコシル化を含む、請求項６０に記載のシステム。
【請求項７４】
前記改変されたグリコシル化パターンが、脱グリコシル化を含む、請求項６０に記載のシステム。
【請求項７５】
前記患者が、貧血を有する、請求項６０に記載のシステム。
【請求項７６】
前記貧血が、ＥＰＯ濃度に関連する貧血を含む、請求項７５に記載のシステム。
【請求項７７】
前記貧血が、末期腎性貧血に関連した貧血、腎不全に関連した貧血および透析に関連する貧血からなる群より選択される、請求項７６に記載のシステム。
【請求項７８】
前記貧血が、癌化学療法に関連した貧血を含む、請求項７５に記載のシステム。
【請求項７９】
前記貧血が、ＡＩＤＳ薬物療法に関連した貧血を含む、請求項７５に記載のシステム。
【請求項８０】
前記貧血が、薬物に関連した貧血を含む、請求項７５に記載のシステム。
【請求項８１】
前記薬物が、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群から選択される、請求項８０に記載のシステム。
【請求項８２】
前記薬物がジドブジンである、請求項８０に記載のシステム。
【請求項８３】
前記患者が輸血を受けている、請求項６０に記載のシステム。
【請求項８４】
前記患者が、骨髄移植を受けている、請求項６０に記載のシステム。
【請求項８５】
前記患者が、慢性関節リウマチを有する、請求項６０に記載のシステム。
【請求項８６】
前記ＥＰＯ投薬レジメンが、静脈内投与、皮下投与および非経口投与からなる群より選択される経路を介してＥＰＯを投与する工程を包含する、請求項６０に記載のシステム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願に対する相互参照）
本願は、米国特許仮出願第６０／１３３，４１８号（１９９９年５月１１日出願）（その内容は、本明細書中に参考として援用される）に対する優先権を主張する。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、所望の薬力学的応答／薬物速度論的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るためのシステムおよび方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
エリスロポエチン（ＥＰＯ）は、定常状態の間の赤血球産生の調節および出血後の赤血球集団の回復を促進することを担う、主要な因子である。ＥＰＯは、分子量が３０ＫＤａの糖タンパク質ホルモンであり、そしてひどくグリコシル化されており、それにより、インビボでの迅速な分解からそのＥＰＯ分子が保護されるように作用する。ヒトにおける血清ＥＰＯ濃度は、通常では６〜３２Ｕ／ｌ（ｌ）の範囲であり、そしてＥＰＯの半減期（ｔ1/2）は、血漿体積に近い分布体積で、２〜１３時間の範囲であると報告されている。大きなシアロ糖タンパク質について予期されるように、ＥＰＯの１０％未満が、尿中に排出される（例えば、Ｌａｐｐｉｎら、１９９６、Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ  Ｈａｅｍ．１８：１３７〜１４５を参照のこと）。
【０００４】
成体生物におけるＥＰＯ合成のための主要部位は、腎臓である；肝臓および骨髄もまた関与しているが、そのデータは結論に至らないままである。増加したＥＰＯ合成のための主要な刺激は、組織低酸素であり、これは、その組織における酸素利用可能性の減少から生じる。低酸素は、大量の血液の損失、放射線または高い高度への曝露による赤血球の破壊から生じ得る。さらに、種々の形態の貧血が、低酸素を生じる。なぜなら、赤血球は身体における酸素輸送を担うからである。正常な状態において、ＥＰＯのレベルの増加が、新規な赤血球の産生を刺激し、それにより酸素レベルを上昇させかつ低酸素状態を低減または排除する。
【０００５】
ＥＰＯの主要な機能は、他の増殖因子と相乗作用して、骨髄における赤血球前駆体の増殖および分化を刺激して、血液中の網状赤血球増加およびＰＢＣ数の増加を生じる（赤血球生成として公知であるプロセス）ことである（図１）。赤血球生成の間に、赤血球系列に沿う細胞分化が、ヒトにおいて２週間の期間にわたって生じる。最も早い前駆体は、ＢＦＵ−Ｅ（赤血球バースト形成単位）であり、これは小さくかつ顕著な組織学的特徴を有さない。ＢＦＵ−Ｅの後の段階は、ＣＦＵ−Ｅ（赤血球コロニー形成単位）であり、これは、ＢＦＵ−Ｅより大きく、そしてヘモグロビン産生が開始する段階のすぐ前である。ヘモグロビン産生を開始する細胞は、未成熟赤血球であり、これは、ヘモグロビンを産生し始めるだけでなく、その核が最終的に成熟赤芽細胞になるように濃縮し始める。その成熟赤芽細胞は未成熟赤血球より小さく、そしてきつくつまった核を有し、その核が、その細胞が網状赤血球になるときに放出される。網状赤血球がこのような名前であるのは、これらの細胞がポリリボソームの網状ネットワークを含むからであり、そしてこの網状赤血球がそのポリリボソームを失うとき、それは成熟赤血球（ＲＢＣ）になる。
【０００６】
最近まで、ＥＰＯの入手可能性は非常に限定されていた。このタンパク質はヒト尿中に存在するが、排出レベルが低すぎて、これは治療用途のためのＥＰＯの実用的な供給源にならない。ＥＰＯをコードする遺伝子の同定、クローニング、発現およびＥＰＯ精製の技術（例えば、米国特許第４，７０３，００８号、同第５，３８９，５４１号、同第５，４４１，８６８号、同第５，６１４，１８４号、同第５，６８８，６７９号、同第５，８８８，７７４号、同第５，８８８，７７２号および同第５，８５６，２９８号に記載されるような技術）により、治療適用のためにＥＰＯが容易に入手可能になった。組換えＥＰＯプラスミドを含む哺乳動物細胞の増殖を支持した細胞培地からの組換えＥＰＯ（ｒＨｕＥＰＯ）の精製の記載は、例えば、米国特許第４，６６７，０１６号に含まれる。この組換えＥＰＯは、ヒト尿エリスロポエチンのアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を有し、そしてこの２つは、化学的試験、および物理学的試験および免疫学的試験において区別不可能である。組換えプラスミド上にＥＰＯ遺伝子を含む哺乳動物細胞宿主からの生物学的に活性な組換えＥＰＯの発現および回収により、治療適用に適切な量のＥＰＯが入手可能になった。さらに、その遺伝子配列の知識およびより多量の精製タンパク質の入手可能性により、このタンパク質の作用様式のより良い理解がもたらされた。
【０００７】
タンパク質の生物学的活性は、その構造に依存する。特に、タンパク質の一次構造（すなわち、そのアミノ酸配列）は、合成の間および後のポリペプチドによる二次（例えば、α−へリックスまたはβ−プリーツシート）構造および三次（全体の３次元折り畳み）構造の形成を可能にする情報を提供する。さらに、タンパク質の生物学的活性はその構造により支配されるだけでなく、そのタンパク質が翻訳された後に生じた修飾によっても支配される。実際、多くの細胞表面タンパク質および分泌タンパク質が、１つ以上のオリゴサッカリド群により修飾される。グリコシル化として公知であるこの修飾は、タンパク質の物理学的特性に劇的に影響し得、そしてタンパク質の安定性、分泌、および細胞内局在化において重要であり得る。適切なグリコシル化が、生物学的活性に必須であり得る。
【０００８】
ヒトＥＰＯのアミノ酸配列１〜１６５を有するヒト尿由来ＥＰＯおよび組換えＥＰＯ（哺乳動物細胞中で発現）の両方が、３つのＮ結合オリゴサッカリド鎖および１つのＯ結合オリゴサッカリド鎖を含み、これらの鎖は、合わせてその糖タンパク質の総分子量の約４０％を含む。このオリゴサッカリド鎖は、末端シアリン酸残基により修飾されていることが示されている。すべてのシアリン酸残基を除去するためのグリコシル化ＥＰＯの酵素処理は、インビボ活性の損失を生じるが、そのインビトロ活性には影響しない（Ｌｏｗｙら、１９６０、Ｎａｔｕｒｅ
１８５：１０２；Ｇｏｌｄｗａｓｓｅｒら、１９７４、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２４９：４２０２）。この挙動は、肝性アシアロ糖タンパク質結合タンパク質との相互作用の際の循環からのアシアロ糖タンパク質の迅速なクリアランスにより説明されている（Ｍｏｒｒｅｌら、１９６８、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２４３：１５５；Ｂｒｉｇｇｓら、１９７４、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２２７：１３８５；およびＡｓｈｗｅｌｌら、１９７８  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．５０：２８７）。従って、ＥＰＯは、肝性結合タンパク質による結合を回避するようにシアリル化されている場合にのみ、インビボでの生物学的活性を保有する。
【０００９】
ヘモグロビンレベルに対して欠損した（または効率の悪い）ＥＰＯ産生は、特定の形態の貧血と関係がある。これらとしては、腎不全および末期腎疾患の貧血、慢性障害（慢性感染および慢性関節リウマチ）の貧血、自己免疫疾患の貧血、後天性免疫不全（ＡＩＤＳ）の貧血、および悪性疾患の貧血が挙げられる。これらの状態の多くは、ＥＰＯ活性のインヒビターであることが示されている因子の産生と関係がある。他の貧血は、明らかにＥＰＯ非依存性であり、これらとしては、再生不良性貧血、鉄欠乏性貧血、サラセミア、巨赤芽球性貧血、赤芽球ろう、および脊髄異形成症候群が挙げられる。
【００１０】
ヒト血清中のＥＰＯレベルの測定は、臨床学的重要性を有する。患者の血清中のＥＰＯレベルの決定は、ＥＰＯレベルの増加または減少と関連する貧血および赤血球増加を、ＥＰＯレベルの増加または減少と関連しないものと区別する際に有用であり得る。さらに、不適切に低い血清ＥＰＯレベルを示すことは、貧血患者が外因性ＥＰＯでの処置から恩恵を受け得ると結論付けるための前提条件である。
【００１１】
臨床試験において、エポエチンαが、正常な患者および種々の貧血状態の患者において評価されている。エポエチンαは、正常なヒトボランティアにおいて、活発な血液学的応答を誘導するが、ただしそれは、十分な鉄供給がヘモグロビン合成の増加を支持するように利用可能である場合である。試験の大多数は、腎不全と関連する貧血の処置における安全性および有効性を調査している。さらに、エポエチンαは、他の患者群における貧血（プラチナに基づく癌化学療法と関連する貧血、ＡＩＤＳの患者におけるジドブジン療法と関連する貧血、および他の薬物（例えば、シスプラチン）と関連する貧血を含む）を改めるために使用され得る。また、エポエチンαの投与は、他の多くの可能な治療適用を有し；エポエチンα投与は、手術を受ける予定の患者における自己血液供与の能力を増加させ、そして未処置の自己ドナーにおいてしばしば観察されるヘモクリットの減少を和らげ；エポエチンα投与は、同種異系（自己ではない）骨髄移植の後の赤血球回復を増加させ；そしてエポエチンαの投与は、慢性関節リウマチを患っている個体における生活の質を改善することが示されている。
【００１２】
ＥＰＯの代替適用は、運動選手のヘマトクリットの増加を引き起こすことにより、運動選手のパフォーマンスを増強することのためである。このヘマトクリット増強は、肺から運動中の骨格筋へ輸送される酸素の能力を増加する。生物工学によるＥＰＯの合成以来、運動選手へのＥＰＯの注入（血液ドーピングとしても公知）は、一般的にスポーツ（特に、サイクリング）においてポピュラーになっている（Ｓｃｈｅｅｎ，ＡＪ．、１９９８、Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．Ｌｉｅｇｅ  ５３（８）：４９９〜５０２）。
【００１３】
現在、患者に投与される標準的ＥＰＯ投薬レジメンと関連する多数の不利益が存在する。特定の適応（例えば、癌）において、被検体は、１５０  ＩＵ／ＥＰＯのｋｇで１週間あたり３回処置される。従って、現在認証されている投薬スケジュールをより便利な投薬スケジュールおよびレジメンに変化させることが、重要な目的のままである。より頻度が少ない投与が、使用者の受け入れおよび利便性を改善することが予期される。さらに、この標準的投与レジメンは、その患者の生理学的応答を最大にしないかもしれず；そして標準的投与レジメンは、最も費用効率がよいわけでないかもしれない。
【００１４】
さらに、ＥＰＯ投与の経路と関連する多数の不利益が存在し；規則正しい静脈内投与は患者にとって不便であり；静脈内投与は、特定の状態に罹患した個体（例えば、血管へのアクセスが限定される継続通院腹膜透析患者および非透析患者）には実際的でなく；静脈内投与を介するｒＨｕＥＰＯの迅速な用量送達は、より長時間の間ｒＨｕＥＰＯのより低いバイオアベイラビリティを生じ、そして所望する程度にＲＢＣの産生を刺激するために有効ではないかもしれない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
従って、上記に詳説した理由すべてのために、ＥＰＯ投与のためにより良好な投与経路、およびＥＰＯ投与のための有効用量および投薬レジメンを決定するための手段が、必要である。
【００１６】
従って、本発明の１つの局面は、ｒＨｕＥＰＯに対する応答を特徴付けそして予測するための薬物速度論的／薬力学的（ＰＫ／ＰＤ）モデルを開発し、それにより患者にとって最も効率が良く、費用効果があり、かつ／または便利な処置レジメンを同定することである。本発明の特定の実施形態において、週に１回または２週間ごとに１回のＥＰＯ投与が意図される。本発明の別の局面は、２つ以上の投与レジメンの投与の後にそのＥＰＯ投与レジメン間の許容性および安全性のパラメーターとともに臨床的結果を比較するために、ＥＰＯの薬物速度論的および薬力学的プロフィールを評価するための方法論を提供する。関連するビジネス方法およびコンピューターシステムもまた、意図される。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
（発明の要旨）
本発明の特定の実施形態は、所望の薬力学的応答に最適化されたＥＰＯ投薬レジメンを得るための方法を含み得、この方法は、１つ以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程、次いで１つ以上のＥＰＯ投薬レジメンの薬力学的プロフィールを決定するためにＰＫ／ＰＤモデルを使用する工程、そして最後に、そのＥＰＯプロフィールに基づく所望の薬力学的（ＰＤ）応答を達成するための投与についてそのＥＰＯ投薬レジメンのうちの１つを選択する工程を包含し得る。さらなる実施形態において、そのＰＤ応答は、網状赤血球数、ＲＢＣ数、およびヘモグロビンレベルからなる群のうちの１つ以上を含み得る。
【００１８】
本発明の代替的実施形態はまた、所望の薬力学的応答について最適化されたＥＰＯ投薬レジメンを得るための方法であり得、この方法は、１つ以上の所望の薬力学的応答をまず選択する工程、次いで、その所望の応答を提供するＥＰＯ投薬レジメンを決定するためにＰＫ／ＰＤモデルを使用する工程、そして最後に、所望の薬力学的応答を達成するために投与についてそのＥＰＯ投薬レジメンのうちの１つを選択する工程を包含し得る。さらなる実施形態において、そのＰＤ応答は、網状赤血球数、ＲＢＣ数、およびヘモグロビンレベルからなる群のうちの１つ以上を含み得る。
【００１９】
本発明のさらなる好ましい実施形態は、所望の薬力学的応答について最適化された投薬レジメンを得るために使用され得る、コンピュータープログラムを包含し得る。さらなる実施形態において、そのコンピューターコードは、ＥＰＯについてのＰＫ／ＰＤモデルを記載し、そしてユーザーが１つ以上の薬力学的応答を選択することを可能にする。次いで、そのコンピューターコードは、所望の薬力学的応答を提供するＥＰＯ投薬レジメンを決定するためにそのＰＫ／ＰＤモデルを使用する。そのＥＰＯ投薬レジメンは、毎週または２週間ごとに１回、体重、用量に基づいて投与され得る。好ましくは、その毎週のＥＰＯ投与は、４０，０００  ＩＵ／ｋｇの用量でＥＰＯを投与することを包含し得、そして２週間ごとに１回のＥＰＯ投与レジメンは、約８０，０００〜約１２０，０００  ＩＵ／ｋｇの用量でのＥＰＯの投与を包含し得る。さらなる実施形態において、そのＰＤ応答は、網状赤血球数、ＲＢＣ数、およびヘモグロビンレベルからなる群のうちの１つ以上を含み得る。
【００２０】
本発明の代替的な好ましい実施形態は、所望の薬力学的応答について最適化された投薬レジメンを得るためのコンピュータープログラムを包含し得る。さらなる実施形態において、そのコンピュータープログラムは、コンピューターコードを含む。そのコンピューターコードは、ユーザーが１つ以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択することを可能にし得る。次いで、このコンピューターコードは、選択されたＥＰＯ投薬レジメンに基づいて薬力学的応答を決定するためにＰＫ／ＰＤモデルを使用する。
【００２１】
本発明の好ましい実施形態は、所望の薬物速度論的応答について最適化されたＥＰＯ投薬レジメンを決定するためのコンピュータープログラムを含み得、このプログラムは、１つ以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程、そのＥＰＯ投薬レジメンの薬物速度論的応答を決定するためにＰＫ／ＰＤモデルを使用する工程、次いで薬物速度論的プロフィールに基いて（特定の実施形態においては、１つ以上のＥＰＯ化合物またはＥＰＯ様化合物に基づいて）所望のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程を包含する。さらなる実施形態において、その薬物速度論的応答は、血清ＥＰＯレベル、バイオアベイラビリティ、およびＥＰＯ閾値レベルを含み得る。
【００２２】
本発明のさらなる実施形態は、所望の薬物速度論的応答について最適化されたＥＰＯ投薬レジメンを得るための方法を包含し得、この方法は、まず１つ以上の所望の薬物速度論的応答を選択する工程、次いでＰＫ／ＰＤモデルを使用して、所望の薬物速度論的応答の１つ以上を提供するＥＰＯ投薬レジメンを決定する工程、そして最後に、その所望の薬物速度論的応答を提供するＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程を包含する。
【００２３】
本発明のさらなる実施形態は、所望の薬物速度論的応答について最適化されたＥＰＯ投薬レジメンを得るためのコンピュータープログラムを含み得、そのプログラムは、ＥＰＯについてのＰＫ／ＰＤモデルを記載するコンピューターコードを含む。さらなる実施形態において、そのコンピューターコードは、ユーザーが１つ以上の薬物速度論的応答を選択するのを可能にし得、次いでＰＫ／ＰＤモデルを使用して、所望の薬物速度論的応答を提供する１つ以上のＥＰＯ投薬レジメンを決定する。
【００２４】
本発明の代替的な好ましい実施形態は、所望の薬物速度論的応答について最適化された投薬レジメンを得るためのコンピュータープログラムを含み得る。さらなる実施形態において、そのコンピュータープログラムは、コンピューターコードを含む。そのコンピューターコードは、ユーザーが１つ以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択するのを可能にし得る。次いでそのコンピューターコードは、ＰＫ／ＰＤモデルを使用して、選択されたＥＰＯ投薬レジメンに基づいて薬物速度論的応答を決定する。１つ以上のＥＰＯ化合物またはＥＰＯ様化合物が、使用について意図され得る。
【００２５】
本発明の別の好ましい実施形態は、種々の方法を包含し、この方法は、患者への第１用量のＥＰＯ、続いて第２用量のＥＰＯを含むＥＰＯ投与レジメンを消費者に提供する、ビジネス方法を含む。この第２用量のＥＰＯは、好ましくは、第１用量後に、第１用量のＥＰＯから生じるＰＤプロフィールと同時の時点で、患者に投与される。このＰＤプロフィールは、時間に対しての産生された前駆体細胞の数、時間に対しての網状赤血球濃度、時間に対しての産生されたＲＢＣ数、および時間に対してのヘモグロビン濃度を含み得る。最も好ましくは、このＰＤプロフィールは、このレジメンについての網状赤血球プロフィールである。第２用量のＥＰＯは、好ましくは、その網状赤血球プロフィールと同時発生するように（すなわち、網状赤血球産生がピークであるときに）投与される。この第２用量のＥＰＯは、循環における未熟赤血球が成熟ＲＢＣへと成熟するのを促進する。
【００２６】
本発明のさらなる実施形態は、患者への第１用量のＥＰＯ、続いて第２用量のＥＰＯを含むＥＰＯ投与レジメンを患者に提供するビジネス方法を包含する。この第２用量のＥＰＯは、第１用量後に、患者の網状赤血球プロフィールと同時の時点で、患者に投与される。この第２用量は、第１ＥＰＯ用量後の６〜１０日以内に投与され得る。好ましくは、第２のＥＰＯは、第１のＥＰＯ用量の７日後に投与される。
【００２７】
本発明のビジネス方法は、本発明の方法論の商業的使用および他の使用に関する。１つの局面において、このビジネスモデルは、消費者（すなわち、患者、医療実施者、医療サービス提供者、および薬剤配給業者および薬剤製造業者）に、本発明により提供されるＥＰＯ投与レジメンと提供する状況における、本発明の方法論の市場調査、販売、またはライセンス供与を含む。これらは、週に１回および２週に１回のＥＰＯ投与レジメンを包含する。
【００２８】
本発明の別の好ましい実施形態は、患者における皮下（ＳＣ）ＥＰＯ投与についての薬物速度論的モデルを作製するための方法を提供する。この方法は、患者から薬物速度論的データを得る工程、その患者から収集したＰＫデータに基づいて方程式を選択する工程、そしてその方程式にＰＫデータを当てはめる工程を包含し得る。さらに、このＰＫデータを得る工程は、収集したＰＫデータからの血清ＥＰＯ濃度値を正規化すること、およびその正規化したデータに基づいて血清ＥＰＯ濃度−時間プロフィールを作成することを包含し得る。さらなる実施形態において、複数の時点での投与前血清ＥＰＯ濃度値を平均することにより、このＰＫデータからベースラインＥＰＯ濃度値をまず得ること；次いでＳＣ  ＥＰＯ投与後に血清ＥＰＯ濃度値を得ること；次いで、血清ＥＰＯ濃度値から投与前ＥＰＯ濃度値を差引くことによって正規化された血清ＥＰＯ濃度値を得ること；最後に、各時点での平均正規化血清ＥＰＯ濃度値を算出することによって、このＰＫデータが正規化され得る。
【００２９】
本発明のさらなる実施形態において、そのＰＫ方程式は、Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ−Ｍｅｎｔｅｎ式を選択することを包含し得る。そのＰＫデータは、例えば、ＡＤＡＰＴ  ＩＩソフトウェアを使用してＰＫ方程式に当てはめられ得、そしてパラメーターの推定値が、最尤法および拡張された（ｅｘｔｅｎｄｅｄ）最小二乗法による最小二乗を利用することによって、得られ得る。さらなる実施形態において、そのパラメーターは、Ｖｍａｘ、Ｋｍ、Ｖｄ、Ｅｒ、τ（低用量）およびτ（高用量）からなる群より選択され得る。
【００３０】
本発明のさらなる実施形態は、ＳＣ  ＥＰＯ投与後のＥＰＯのバイオアベイラビリティを算出するための方法を提供する。この方法は、ＰＫデータを得る工程、用量に対する血清ＥＰＯ濃度曲線下面積（ＡＵＣ）を算出する工程；ＡＵＣを用量に対して正規化する工程；そして最後に、ＰＫデータの線形回帰を実施することにより方程式を誘導する工程を包含し得る。
【００３１】
本発明の別の好ましい実施形態は、ＳＣ  ＥＰＯ投与後の薬力学的（ＰＤ）モデルを作製するための方法を提供する。この方法は、血清ＥＰＯ濃度を正規化する工程、ＰＤデータを得る工程、ＰＤモデルを選択する工程、そのＰＤモデルに基づいて方程式を得る工程、およびそのＰＤデータをそのＰＤ方程式に当てはめる工程を包含し得る。さらなる実施形態において、血清ＥＰＯ濃度を正規化する工程は、各用量群について複数の時点の投与前血清ＥＰＯ濃度値を平均することによって、各用量群についてのベースライン血清ＥＰＯ濃度（Ｃbs）を得ること、次いでＰＫモデルにより推測される血清ＥＰＯ濃度にＣbsを加算することによりＣbsを調節することを包含し、ここでこの調節されたＣbsがＰＤ分析のための強制関数（ｆｏｒｃｉｎｇ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ）として使用され得る。
【００３２】
さらなる実施形態において、そのＰＫデータは、平均の投与前前駆体細胞数、網状赤血球数およびＲＢＣ数、ならびにヘモグロビン濃度を決定すること、次いで、ＥＰＯ用量に従う平均網状赤血球対時間プロフィール、平均ＥＢＣ対時間プロフィール、および平均ヘモグロビン対時間プロフィールを得ることによって、得られ得る。
【００３３】
さらなる実施形態において、そのＰＤモデルは、細胞の損失および産生モデルを包含し得る。そのＰＤデータは、例えば、ＡＤＡＰＴ  ＩＩソフトウェアを使用することによりモデル方程式に当てはめられ得、後、最尤法および拡張された最小二乗モデルによる最小二乗を使用することによって推定パラメーターおよび固定パラメーターの両方が得られ得る。さらに、その推定パラメーターは、Ｋｓ、ＳＣ50およびＴＰを含み得、同時に固定パラメーターは、ＲL、ＲＢＣL、Ｈｂおよび閾値を含み得る。
【００３４】
本発明のさらに好ましい実施形態は、種々の用量のＳＣ  ＥＰＯ後の患者におけるＰＤ応答を予測するための方法を提供し得る。さらに、この方法は、用量および投薬レジメンを選択する工程；次いで、ＰＫ／ＰＤモデルを介してその特定の用量および投薬レジメンに基づいてＰＤ応答を決定する工程を包含し得る。さらなる実施形態において、そのＰＤ応答は、網状赤血球数、ＲＢＣ数、およびヘモグロビンレベルからなる群のうちの１つ以上を含み得る。
【００３５】
本発明は、ヘモグロビンレベルに対して欠損したかまたは能率の悪いＥＰＯ産生を有し得る患者の要求に取り組み得、この要求は、特定の形態の貧血に関連し得る。これらとしては、末期腎性貧血または腎不全関連貧血、プラチナに基づく癌化学療法に関連する貧血、ＡＩＤＳ薬物療法に関連する貧血（薬物は、シスプラチンおよびジドブジンを含み得る）が挙げられ得るが、これらに限定されない。また、患者は、手術前に自己輸血を受けているか、同種異系骨髄移植から回復中であるか、慢性関節リウマチを患っているか、あるいはＲＢＣ数および／もしくはヘモグロビンの増加を必要とするかまたは所望する運動選手などであり得る。
【００３６】
本発明のＰＫ／ＰＤモデルは、多くの潜在的治療適用を有する。例えば、医師は、このＰＫ／ＰＤモデリングシステムを使用して、ＲＢＣ数および／もしくはヘモグロビンの増加が必要な患者に投与するために最適化ＥＰＯ投薬レジメンを決定し得る。詳細には、その医師は、所望の薬力学的結果に基づいてＥＰＯ投薬レジメンを決定すること、または特定のＥＰＯ投薬レジメンに基づいて薬力学的応答を決定することのいずれかの選択肢を有する。
【００３７】
（項目１）  患者における所望される薬力学的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るための方法であって、以下の工程：
（ａ）１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程；
（ｂ）薬物速度論的／薬力学的モデルを使用して、該１以上のＥＰＯ投薬レジメンの薬力学的プロフィールを決定する工程；および
（ｃ）該薬力学的プロフィールに基づいて、該所望される薬力学的応答を与える該１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程、
を包含する、方法。
（項目２）  患者における所望される薬力学的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るための方法であって、以下の工程：
（ａ）１以上の所望される薬力学的応答を選択する工程；
（ｂ）薬物速度論的／薬力学的モデルを使用して、該１以上の所望される薬力学的応答を与えるＥＰＯ投薬レジメンを決定する工程；および
（ｃ）該所望される薬力学的応答を与える１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程、
を包含する、方法。
（項目３）  患者における皮下ＥＰＯ投与に対する薬力学的応答を予測するための方法であって、以下の工程：
（ａ）ＥＰＯの用量および投薬レジメンを選択する工程；および
（ｂ）該用量および投薬レジメンに基づいて、該薬力学的応答を決定する工程、
を包含する、方法。
（項目４）  前記薬力学的応答が、網状赤血球数における変化、ＲＢＣ数における変化、およびヘモグロビンレベルにおける変化からなる群から選択される、請求項１、２、および３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５）  患者における所望される薬力学的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンであって、該最適化ＥＰＯ投薬レジメンが、以下の工程：
（ａ）１以上の所望される薬力学的応答を選択する工程；
（ｂ）薬物速度論的／薬力学的モデルを使用して、該１以上の所望される薬力学的応答を与えるＥＰＯ投薬レジメンを決定する工程；および
（ｃ）該所望される薬力学的応答を与える該１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程、
を包含する方法によって得られる、最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目６）  前記薬力学的応答が、網状赤血球数における変化、ＲＢＣ数における変化、およびヘモグロビンレベルにおける変化からなる群から選択される、請求項５に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目７）  患者における所望される薬物速度論的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るための方法であって、以下の工程：
（ａ）１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程；
（ｂ）薬物速度論的／薬力学的モデルを使用して、該１以上のＥＰＯ投薬レジメンの薬物速度論的プロフィールを決定する工程；および
（ｃ）該薬物速度論的プロフィールに基づいて、該所望される薬物速度論的応答を与える該１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程、
を包含する、方法。
（項目８）  患者における所望される薬物速度論的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るための方法であって、以下の工程：
（ａ）１以上の所望される薬物速度論的応答を選択する工程；
（ｂ）薬物速度論的／薬力学的モデルを使用して、該１以上の所望される薬物速度論的応答を与えるＥＰＯ投薬レジメンを決定する工程；および
（ｃ）該所望される薬物速度論的応答を与える１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程、
を包含する、方法。
（項目９）  前記薬物速度論的応答が、血清ＥＰＯレベルにおける変化、バイオアベイラビリティにおける変化、および閾値レベルにおける変化からなる群から選択される、請求項７または８に記載の方法。
（項目１０）  患者における所望される薬力学的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンであって、該最適化ＥＰＯ投薬レジメンが、以下の工程：
（ａ）１以上のＥＰＯ投薬レジメンを選択する工程；
（ｂ）薬物速度論的／薬力学的モデルを使用して、該１以上のＥＰＯレジメンの薬力学的プロフィールを決定する工程；および
（ｃ）所望される薬力学的応答を与える該ＥＰＯ投薬レジメンを、該薬力学的プロフィールに基づいて選択する工程、
を包含する方法によって得られる、最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１１）  前記患者が貧血に罹患している、請求項５または１０に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１２）  前記患者が貧血に罹患している、請求項１、２、３、７、および８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）  前記貧血が、ＥＰＯ濃度に関連した貧血を含む、請求項１２に記載の方法。
（項目１４）  前記貧血が、末期腎性貧血または腎不全に関連した貧血を含む、請求項１２に記載の方法。
（項目１５）  前記貧血が、癌化学療法に関連した貧血を含む、請求項１２に記載の方法。
（項目１６）  前記貧血が、ＡＩＤＳ薬物療法に関連した貧血を含む、請求項１２に記載の方法。
（項目１７）  前記貧血が、薬物に関連した貧血を含む、請求項１２に記載の方法。
（項目１８）  前記薬物が、シスプラチンおよびジドブジンからなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
（項目１９）  前記患者が、手術の前に、自己輸血を受けている、請求項１、２、３、７、および８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）  前記患者が、同種異系骨髄移植から回復中である、請求項１、２、３、７、および８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）  前記患者が、慢性関節リウマチを患っている、請求項１、２、３、７、および８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）  前記投薬レジメンが、皮下投薬レジメンである、請求項１、２、３、７、および８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）  薬物速度論的／薬力学的モデルを使用して、患者についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを選択するためのシステムであって、以下：
（ａ）該薬物速度論的／薬力学的モデルによって実行される工程を決定する、プログラム命令のセットに従って制御される、プロセッサー；
（ｂ）該プロセッサーに連結されたメモリであって、該メモリは、該プログラム命令のセットおよび該薬物速度論的／薬力学的モデルによって使用されるパラメーターを格納する、メモリ；ならびに
（ｃ）該プロセッサーに連結されたユーザーインターフェイスであって、該ユーザーインターフェイスは、ユーザーが、該薬物速度論的／薬力学的モデルによって使用されるパラメーターを入力することを可能にする、ユーザーインターフェイス、
を備える、システム。
（項目２４）  前記薬力学的応答が、網状赤血球数における変化、ＲＢＣ数における変化、およびヘモグロビンレベルにおける変化からなる群から選択される、請求項２３に記載のシステム。
（項目２５）  前記患者が貧血に罹患している、請求項２３に記載のシステム。
（項目２６）  前記貧血が、ＥＰＯ濃度に関連した貧血を含む、請求項２５に記載のシステム。
（項目２７）  前記貧血が、末期腎性貧血または腎不全に関連した貧血を含む、請求項２５に記載のシステム。
（項目２８）  前記貧血が、癌化学療法に関連した貧血を含む、請求項２５に記載のシステム。
（項目２９）  前記貧血が、ＡＩＤＳ薬物療法に関連した貧血を含む、請求項２５に記載のシステム。
（項目３０）  前記貧血が、薬物に関連した貧血を含む、請求項２５に記載のシステム。
（項目３１）  前記薬物が、シスプラチンおよびジドブジンからなる群から選択される、請求項３０に記載のシステム。
（項目３２）  前記患者が、手術の前に、自己輸血を受けている、請求項２３に記載のシステム。
（項目３３）  前記患者が、同種異系骨髄移植から回復中である、請求項２３に記載のシステム。
（項目３４）  前記患者が、慢性関節リウマチを患っている、請求項２３に記載のシステム。
（項目３５）  前記投薬レジメンが、皮下投薬レジメンである、請求項２３に記載のシステム。
（項目３６）  患者における所望される薬力学的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るためのコンピューター読み出し可能媒体であって、以下：
ＥＰＯについての薬物速度論的／薬力学的モデルを記載するコンピューターコードであって、該コードは、１以上の所望される薬力学的応答の選択、および該１以上の所望される薬力学的応答を与える１以上のＥＰＯ投薬レジメンを決定するための該薬物速度論的／薬力学的モデルの使用を提供する、コンピューターコード
を格納する、コンピューター読み出し可能媒体。
（項目３７）  患者における所望される薬力学的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るためのコンピューター読み出し可能媒体であって、以下：
ＥＰＯについての薬物速度論的／薬力学的モデルを記載するコンピューターコードであって、該コードは、１以上のＥＰＯ投薬レジメンの選択、および１以上のｒＨｕＥＰＯ投薬レジメンに対する薬力学的応答を決定するための該薬物速度論的／薬力学的モデルの使用をユーザーに提供する、コンピューターコード
を格納する、コンピューター読み出し可能媒体。
（項目３８）  前記薬力学的応答が、網状赤血球数における変化、ＲＢＣ数における変化、およびヘモグロビンレベルにおける変化からなる群から選択される、請求項３６または３７に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目３９）  患者における所望される薬物速度論的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るためのコンピューター読み出し可能媒体であって、以下：
ＥＰＯについての薬物速度論的／薬力学的モデルを記載するコンピューターコードであって、該コードは、１以上の所望される薬物速度論的応答の選択、および該１以上の所望される薬物速度論的応答を与える１以上のＥＰＯ投薬レジメンを決定するための該薬物速度論的／薬力学的モデルの使用を提供する、コンピューターコード
を格納する、コンピューター読み出し可能媒体。
（項目４０）  患者における所望される薬物速度論的応答についての最適化ＥＰＯ投薬レジメンを得るためのコンピューター読み出し可能媒体であって、以下：
ＥＰＯについての薬物速度論的／薬力学的モデルを記載するコンピューターコードであって、該コードは、１以上のＥＰＯ投薬レジメンの選択、および該１以上のＥＰＯ投薬レジメンに対する薬物速度論的応答を決定するための該薬物速度論的／薬力学的モデルの使用をユーザーに提供する、コンピューターコード
を格納する、コンピューター読み出し可能媒体。
（項目４１）  前記薬物速度論的応答が、血清ＥＰＯレベルにおける変化、バイオアベイラビリティにおける変化、および閾値レベルにおける変化からなる群から選択される、請求項３９または４０に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目４２）  前記患者が貧血に罹患している、請求項３６、３７、３９、および４０のいずれか一項に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目４３）  前記貧血が、ＥＰＯ濃度に関連した貧血を含む、請求項４２に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目４４）  前記貧血が、末期腎性貧血または腎不全に関連した貧血を含む、請求項４２に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目４５）  前記貧血が、癌化学療法に関連した貧血を含む、請求項４２に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目４６）  前記貧血が、ＡＩＤＳ薬物療法に関連した貧血を含む、請求項４２に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目４７）  前記貧血が、薬物に関連した貧血を含む、請求項４２に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目４８）  前記薬物が、シスプラチンおよびジドブジンからなる群から選択される、請求項４７に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目４９）  前記患者が、手術の前に、自己輸血を受けている、請求項３６、３７、３９、および４０のいずれか一項に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目５０）  前記患者が、同種異系骨髄移植から回復中である、請求項３６、３７、３９、および４０のいずれか一項に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目５１）  前記患者が、慢性関節リウマチを患っている、請求項３６、３７、３９、および４０のいずれか一項に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目５２）  前記投薬レジメンが、皮下投薬レジメンである、請求項３６、３７、３９、および４０のいずれか一項に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目５３）  患者における皮下ＥＰＯ投与のための薬物速度論的モデルを作成するための方法であって、以下の工程：
（ａ）患者から薬物速度論的データを得る工程；
（ｂ）該データに基づいて方程式を選択する工程；および
（ｃ）該方程式に該薬物速度論的データを当てはめる工程；
を包含する、方法。
（項目５４）  前記薬物速度論的データを得る工程が、以下：
（ａ）該薬物速度論的データからの血清ＥＰＯ濃度値を正規化する工程；および
（ｂ）該正規化データに基づいて、血清ＥＰＯ対時間プロフィールを作成する工程、
を包含する、請求項５３に記載の方法。
（項目５５）  前記正規化する工程が、以下：
（ａ）複数の時点での投与前血清ＥＰＯ濃度値を平均化することによって、前記薬物速度論的データからのベースライン血清ＥＰＯ濃度値を得る工程；
（ｂ）皮下ＥＰＯ投与後に、血清ＥＰＯ濃度値を得る工程；
（ｃ）血清ＥＰＯ濃度値から投与前ＥＰＯ濃度値を減算することによって、正規化血清ＥＰＯ濃度値を得る工程；および
（ｄ）各時点で、正規化血清ＥＰＯ濃度値の平均を算出する工程、
を包含する、請求項５４に記載の方法。
（項目５６）  前記方程式が、ミカエリス−メンテン式を含む、請求項５３に記載の方法。
（項目５７）  前記当てはめる工程が、最尤法および拡張された最小二乗モデルによる最小二乗を利用して、薬物速度論的パラメーターの推定値を得る工程を包含する、請求項５３に記載の方法。
（項目５８）  前記パラメーターが、Ｖｍａｘ、Ｋｍ、Ｖｄ、Ｋａ、Ｆｒ、τ（低用量）およびτ（高用量）からなる群から選択される、請求項５７に記載の方法。
（項目５９）  前記当てはめる工程が、ＡＤＡＰＴ  ＩＩソフトウェアを利用する工程を包含する、請求項５７に記載の方法。
（項目６０）  患者における皮下ＥＰＯ投与のための薬力学的モデルを作成するための方法であって、以下の工程：
（ａ）血清ＥＰＯ濃度を正規化する工程；
（ｂ）薬力学的データを得る工程；
（ｃ）薬力学的モデルを選択する工程；
（ｄ）該モデルに基づいて、方程式を得る工程；および
（ｅ）該方程式に薬力学的データを当てはめる工程；
を包含する、方法。
（項目６１）  前記正規化する工程が、以下：
（ａ）各用量群について、複数の時点で投与前血清ＥＰＯ濃度値を平均化することによって、各用量群についてのベースライン血清ＥＰＯ濃度（Ｃbs）を得る工程；および
（ｂ）薬物速度論的モデルによって推定される血清ＥＰＯ濃度にＣbsを加算することによってＣbsを調整する工程であって、ここで該調整されたＣbsは、薬力学的分析のための強制関数として使用され得る、工程；
を包含する、請求項６０に記載の方法。
（項目６２）  前記薬力学的データを得る工程が、以下：
（ａ）投与前前駆細胞数の平均を決定する工程；
（ｂ）投与前網状赤血球数の平均を決定する工程；
（ｃ）投与前ＲＢＣ数の平均を決定する工程；
（ｄ）投与前ヘモグロビン濃度の平均を決定する工程；
（ｅ）ＥＰＯ用量に従って、網状赤血球の平均対時間プロフィールを得る工程；
（ｆ）ＥＰＯ用量に従って、ＲＢＣの平均対時間プロフィールを得る工程；および
（ｇ）ＥＰＯ用量に従って、ヘモグロビンの平均対時間プロフィールを得る工程、
を包含する、請求項６０に記載の方法。
（項目６３）  前記薬力学的モデルが、細胞産生モデルおよび細胞損失モデルを含む、請求項６０に記載の方法。
（項目６４）  前記当てはめる工程が、最尤法および拡張された最小二乗モデルによる最小二乗を利用して、パラメーターを得る工程を包含する、請求項６０に記載の方法。
（項目６５）  前記パラメーターが、推定パラメーターおよび固定パラメーターを含む、請求項６４に記載の方法。
（項目６６）  前記推定パラメーターが、Ｋｓ、ＳＣ50、およびＴＰを含む、請求項６５に記載の方法。
（項目６７）  前記固定パラメーターが、ＲL、ＲＢＣL、Ｈｂ、および閾値を含む、請求項６５に記載の方法。
（項目６８）  前記当てはめる工程が、ＡＤＡＰＴ  ＩＩソフトウェアを使用する工程を包含する、請求項６４に記載の方法。
（項目６９）  皮下投与後のＥＰＯのバイオアベイラビリティを算出するための方法であって、以下の工程：
（ａ）薬物速度論的データを得る工程；
（ｂ）ＡＵＣを算出する工程；
（ｃ）用量に対してＡＵＣを正規化する工程；および
（ｄ）該薬物速度論的データの線形回帰を実施することによって、該ＥＰＯのバイオアベイラビリティを提示する方程式を導き出す工程；
を包含する、方法。
（項目７０）  ＥＰＯを含む薬学的組成物であって、ここで該組成物は、以下の工程：
毎週１回の規準で、該組成物を投与する工程
を包含する方法によって患者に投与される、薬学的組成物。
（項目７１）  前記投与する工程が、用量４０，０００ＩＵの前記ＥＰＯを投与する工程を包含する、請求項７０に記載の薬学的組成物。
（項目７２）  ＥＰＯを含む薬学的組成物であって、ここで該組成物は、以下の工程：
２週間毎に１回の規準で、該組成物を投与する工程
を包含する方法によって患者に投与される、薬学的組成物。
（項目７３）  前記投与する工程が、８０，０００ＩＵ／ｋｇ、１００，０００ＩＵ／ｋｇ、および１２０，０００ＩＵ／ｋｇからなる群から選択される用量の前記ＥＰＯを投与する工程を包含する、請求項７２に記載の薬学的組成物。
（項目７４）  患者における未熟赤血球からの成熟赤血球の産生を増強するための、ＥＰＯを含む薬学的組成物であって、ここで該組成物は、以下の工程：
該患者に該組成物を投与する工程であって、その結果、該未熟赤血球が誘導されて成熟赤血球になる、工程、
を包含する方法によって投与される、薬学的組成物。
（項目７５）  患者における赤血球の増強したレベルを維持するためのキットであって、該キットは、第１用量のＥＰＯおよび第２用量のＥＰＯを備え、ここで該第２用量のＥＰＯは、該第１用量後に、該第１用量のＥＰＯから生じる網状赤血球の産生と同時の時点で、該患者に投与される、
キット。
（項目７６）  前記第２用量のＥＰＯが、前記第１用量の６日後と１２日後との間に前記患者に投与される、請求項７５に記載のキット。
（項目７７）  前記第２用量のＥＰＯが、前記第１用量の６日後と１０日後との間に前記患者に投与される、請求項７５に記載のキット。
（項目７８）  前記第２用量のＥＰＯが、前記第１用量の７日後に前記患者に投与される、請求項７５に記載のキット。
（項目７９）  ビジネス方法であって、以下の工程：
患者への第１用量のＥＰＯに次いで第２用量のＥＰＯである、ＥＰＯ投与レジメンを、消費者に提供する工程であって、ここで、該第２用量のＥＰＯは、該第１用量後に、該第１用量のＥＰＯから生じる網状赤血球の産生と同時の時点で、該患者に投与される、工程、
を包含する、方法。
（項目８０）  前記ＥＰＯ投与レジメンが、有効量のＥＰＯを１週間に１回投与する工程を包含する、請求項７９に記載の方法。
（項目８１）  前記有効量のＥＰＯが、４０，０００ＩＵ／ｋｇを含む、請求項８０に記載の方法。
（項目８２）  前記ＥＰＯ投与レジメンが、有効量のＥＰＯを２週間毎に１回投与する工程を包含する、請求項７９に記載の方法。
（項目８３）  前記有効量のＥＰＯが、８０，０００ＩＵ／ｋｇ、１００，０００ＩＵ／ｋｇ、および１２０，０００ＩＵ／ｋｇからなる群から選択される、請求項８２に記載の方法。
（項目８４）  前記ＥＰＯ投与レジメンが、有効量のＥＰＯを４週間毎に１回投与する工程を包含する、請求項７９に記載の方法。
（項目８５）  前記消費者が、患者または保健提供者である、請求項７９に記載の方法。
（項目８６）  ビジネス方法であって、以下の工程：
ユーザーまたは患者に、ＥＰＯ投与レジメンを提供する工程、
を包含する、方法。
（項目８７）  前記投与レジメンが、毎週１回である、請求項８６に記載の方法。
（項目８８）  前記投与レジメンが、２週間毎に１回である、請求項８６に記載の方法。
（項目８９）  前記投与レジメンが、４週間毎に１回である、請求項８６に記載の方法。
（項目９０）  さらに以下の工程：
ユーザーまたは患者に、ＥＰＯ投与レジメンを提供する前記工程に関連して、ＥＰＯを提供する工程、
を包含する、請求項８６に記載の方法。
（項目９１）  前記提供する工程が、販売する工程を包含する、請求項８６または９０に記載の方法。
（項目９２）  前記提供する工程が、コンピューターシステムの使用を通して実施される、請求項８６または９０に記載の方法。
（項目９３）  ＥＰＯを含む薬学的組成物であって、ここで該組成物は、以下の工程：
４週間毎に１回の規準で、該組成物を投与する工程
を包含する方法によって患者に投与される、薬学的組成物。
（項目９４）  前記ＥＰＯが、組換えエリスロポエチン、組換えヒトエリスロポエチン、エリスロポエチンα、高グリコシル化エリスロポエチン、高グリコシル化ヒトエリスロポエチン、改変されたグリコシル化エリスロポエチン、エリスロポエチン融合タンパク質、ヒトエリスロポエチン融合タンパク質、エリスロポエチンω、エリスロポエチンレセプターアゴニスト、腎性エリスロポエチン、尿エリスロポエチン、およびＰＥＧ結合体化エリスロポエチンアナログからなる群から選択される、請求項１、２、３、７、８、５３、６０、６９、７９、および８６のいずれか一項に記載の方法。
（項目９５）  前記ＥＰＯが、組換えエリスロポエチン、組換えヒトエリスロポエチン、エリスロポエチンα、高グリコシル化エリスロポエチン、高グリコシル化ヒトエリスロポエチン、改変されたグリコシル化エリスロポエチン、エリスロポエチン融合タンパク質、ヒトエリスロポエチン融合タンパク質、エリスロポエチンω、エリスロポエチンレセプターアゴニスト、腎性エリスロポエチン、尿エリスロポエチン、およびＰＥＧ結合体化エリスロポエチンアナログからなる群から選択される、請求項２３に記載のシステム。
（項目９６）  前記ＥＰＯが、組換えエリスロポエチン、組換えヒトエリスロポエチン、エリスロポエチンα、高グリコシル化エリスロポエチン、高グリコシル化ヒトエリスロポエチン、改変されたグリコシル化エリスロポエチン、エリスロポエチン融合タンパク質、ヒトエリスロポエチン融合タンパク質、エリスロポエチンω、エリスロポエチンレセプターアゴニスト、腎性エリスロポエチン、尿エリスロポエチン、およびＰＥＧ結合体化エリスロポエチンアナログからなる群から選択される、請求項３６、３７、３９、および４０のいずれか一項に記載のコンピューター読み出し可能媒体。
（項目９７）  前記貧血が、ＥＰＯ濃度に関連した貧血を含む、請求項１１に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目９８）  前記貧血が、末期腎性貧血または腎不全に関連した貧血を含む、請求項１１に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目９９）  前記貧血が、癌化学療法に関連した貧血を含む、請求項１１に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１００）  前記貧血が、ＡＩＤＳ薬物療法に関連した貧血を含む、請求項１１に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１０１）  前記貧血が、薬物に関連した貧血を含む、請求項１１に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１０２）  前記薬物が、シスプラチンおよびジドブジンからなる群から選択される、請求項１０１に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１０３）  前記患者が、手術の前に、自己輸血を受けている、請求項５または１０に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１０４）  前記患者が、同種異系骨髄移植から回復中である、請求項５または１０に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１０５）  前記患者が、慢性関節リウマチを患っている、請求項５または１０に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１０６）  前記投薬レジメンが、皮下投薬レジメンである、請求項５または１０に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１０７）  前記ＥＰＯが、組換えエリスロポエチン、組換えヒトエリスロポエチン、エリスロポエチンα、高グリコシル化エリスロポエチン、高グリコシル化ヒトエリスロポエチン、改変されたグリコシル化エリスロポエチン、エリスロポエチン融合タンパク質、ヒトエリスロポエチン融合タンパク質、エリスロポエチンω、エリスロポエチンレセプターアゴニスト、腎性エリスロポエチン、尿エリスロポエチン、およびＰＥＧ結合体化エリスロポエチンアナログからなる群から選択される、請求項５または１０に記載の最適化ＥＰＯ投薬レジメン。
（項目１０８）  前記ＥＰＯが、組換えエリスロポエチン、組換えヒトエリスロポエチン、エリスロポエチンα、高グリコシル化エリスロポエチン、高グリコシル化ヒトエリスロポエチン、改変されたグリコシル化エリスロポエチン、エリスロポエチン融合タンパク質、ヒトエリスロポエチン融合タンパク質、エリスロポエチンω、エリスロポエチンレセプターアゴニスト、腎性エリスロポエチン、尿エリスロポエチン、およびＰＥＧ結合体化エリスロポエチンアナログからなる群から選択される、請求項７０、７２、７４、および９３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目１０９）  前記ＥＰＯが、組換えエリスロポエチン、組換えヒトエリスロポエチン、エリスロポエチンα、高グリコシル化エリスロポエチン、高グリコシル化ヒトエリスロポエチン、改変されたグリコシル化エリスロポエチン、エリスロポエチン融合タンパク質、ヒトエリスロポエチン融合タンパク質、エリスロポエチンω、エリスロポエチンレセプターアゴニスト、腎性エリスロポエチン、尿エリスロポエチン、およびＰＥＧ結合体化エリスロポエチンアナログからなる群から選択される、請求項７５に記載のキット。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３８】
（発明の詳細な説明）
本発明が、変化し得るような本明細書中に記載の特定の方法論、プロトコールおよび試薬などに限定されないことが理解される。本明細書中で使用される術語が、特定の実施形態のみを記載する目的のために使用され、そして本発明の範囲を限定することを意図しないこともまた理解されるべきである。本明細書中および添付の特許請求の範囲において使用されるように、単数形の「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が特に明確に示さない限り、複数の言及を含むことに注意しなければならない。
【００３９】
特別の定めのない限り、本明細書中で使用されるすべての専門用語および科学用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般に理解される意味と同じ意味を有する。好ましい方法、デバイスおよび材料が記載されるが、本明細書中に記載されるこれらと類似または等しい任意の方法および材料が、本発明の実施または試験において使用され得る。本明細書中で引用されるすべての参考文献は、本明細書中でその全体において参考として援用される。
【００４０】
（定義）
ａ．ｍ．    午前の、朝
ＡＵＣ    濃度対時間曲線下の領域
ＡＵＣ(0-168)    時間０〜１６８時間までの血清におけるエポエチンα濃度のＡＵＣ
ＡＵＣ（ＲＥＴＩ）    ベースラインからの％網状赤血球変化のＡＵＣ
ＡＵＣ（ＨＥＭＯ）    ベースラインからのヘモグロビン変化のＡＵＣ
ＡＵＣ（ＲＢＣ）    ベースラインからの総赤血球数変化のＡＵＣ
ＢＵＮ    血中尿素窒素
℃    摂氏度
Ｃmax    最大濃度
Ｃmin    時間０〜１６８時間までの投与前の谷（ｔｒｏｕｇｈ）の濃度のＡＵＣ
ＣＬ／Ｆ    クリアランス／バイオアベイラビリティ
ｃｍ    センチメートル
ＣＲＦ    症例報告フォーム
ＣＶ％    変動係数、相対的標準偏差
ｄ    日
Ｄ    用量（量）
ｄＬ    デシリットル
ｇ    グラム
ｈ    時間
Ｈｂ    ヘモグロビン
Ｈｃｔ    ヘマトクリット
ＨＩＶ    ヒト免疫不全ウイルス
ＩＲＢ    施設内（ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ）審査委員会
Ｉ    負のフィードバック機構
ＩＶ    静脈内
ｋｇ    キログラム
Ｌ    リットル
ＬＤＨ    乳酸デヒドロゲナーゼ
ＬＯＱ    定量限界
ｕｇ    マイクログラム（μｇも同様）
ｍｇ    ミリグラム
ｍｉｎ    分
ｍＬ    ミリリットル
Ｎ／Ａ    適用不可／利用不可
ｎｇ    ナノグラム
ｎｍ    ナノメートル
ＮＭＲ    核磁気共鳴
Ｎｏ．    番号
ＮＳ    統計学的に有意でない
ＯＴＣ  店頭販売薬
ｑ．ｗ．    １週間あたり１回
ＱＣ    品質管理
ｒ    相関係数
ｒ2    決定係数
ＲＢＣ    赤血球
ＲＥＦ    参照
ＲＥＴＩ    網状赤血球
ＲＩＡ    ラジオイムノアッセイ
ｒＨｕＥＰＯ    組換えヒトエリスロポエチン
ＲＷＪＰＲＩ    Ｒ．Ｗ．ジョンソン製薬研究所
ＳＣ    皮下
ＳＤ    標準偏差
ＳＥ    標準誤差
ＳＥＭ    平均の標準誤差
ＳＧＯＴ    血清グルタミン酸−オキザロ酢酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）
ＳＧＰＴ    血清グルタミン酸−ピルビン酸トランスアミナーゼ（ＡＬＴ）
ｔmax    最大濃度の時間
ｔ．ｉ．ｗ．    １週間に３回
ＴＩＢＣ    全鉄結合能力
ｔ1/2    除去半減期
ＷＢＣ    白血球
ＷＨＯＡＲＴ    世界保健機関有害反応専門用語。
【００４１】
ＥＰＯとは、本明細書中に規定される場合に、造血幹細胞からの赤血球の末端分化を特異的に刺激し、そしてヘモグロビンの産生を刺激する、任意の分子をいう。例えば、本発明の範囲を制限しないが、ＥＰＯ分子としては、有機もしくは無機の小分子、合成もしくは天然のアミノ酸ペプチド、組換えもしくは天然の発現系から精製したタンパク質、または合成もしくは天然の核酸配列、あるいは上記のものの任意の化学的誘導体が挙げられ得る。エリスロポエチンの特定の例としては、エポエチンα（ＥＰＲＥＸ（登録商標）、ＥＲＹＰＯ（登録商標））、新規な赤血球生成刺激タンパク質（ＮＥＳＰ）（欧州特許出願第ＥＰ６４０６１９号に記載される、組換えヒトエリスロポエチン（エポエチン）の高グリコシル化アナログ）、ヒトエリスロポエチンアナログ（国際特許出願公開ＷＯ９９６６０５４に記載されるヒト血清アルブミン融合タンパク質、国際特許出願公開ＷＯ９９３８８９０に記載されるエリスロポエチン変異体、米国特許第５，６８８，６７９号に記載される、ヒトエリスロポエチン遺伝子のＡｐａ  Ｉ制限フラグメントから産生され得るエリスロポエチンω、国際特許出願公開ＷＯ９９１１７８１に記載される改変されたグリコシル化ヒトエリスロポエチン、ＷＯ９８０５３６３または米国特許第５，６４３，５７５号に記載されるＰＥＧ結合体化エリスロポエチンアナログ）が挙げられる。内因性ヒトエリスロポエチンの発現のために改変された細胞株の特定の例は、国際特許出願公開ＷＯ９９０５２６８および同ＷＯ９４１２６５０に記載される。ＥＰＯの好ましい形態は、精製された組換えＥＰＯである。例えば、精製された組換えＥＰＯは、ＥＰＲＥＸ（登録商標）、ＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）、またはＥＲＹＰＯ（登録商標）の商品名で供給される。具体的には、エポエチンα（ＥＰＲＥＸ（登録商標）、ＥＲＹＰＯ（登録商標））は、注射用の滅菌された無色透明の水溶液であり、これは予め充填された、４，０００ＩＵまたは１０，０００ＩＵのいずれかのエポエチンα（組換えヒトエリスロポエチン）、および０．４ｍｌ（４，０００ＩＵ注射器）または１．０ｍｌ（１０，０００ＩＵ注射器）のリン酸緩衝液中の２．５ｍｇ／ｍｌのヒト血清アルブミンを含む、単回使用注射器中に提供される。
【００４２】
ＥＰＯはまた、ヒトエリスロポエチンの生物学的活性を有するタンパク質、ならびに以下のものの生物学的活性にかかわらず、そしてさらに、天然に存在するもの、組換え、合成、トランスジェニック、および遺伝子活性化法（例えば、ＥＰＯ様タンパク質）が挙げられるがこれらに限定されない以下のものの方法または合成または製造にかかわらず、エリスロポエチンアナログ、エリスロポエチンアイソフォーム、エリスロポエチン模倣物、エリスロポエチンフラグメント、ハイブリッドエリスロポエチンタンパク質、エリスロポエチンレセプターアゴニスト、腎性エリスロポエチン、上記のもののオリゴマーおよびマルチマー、上記のもののホモログ、および上記のもののムテインを含む。このようなＥＰＯおよび生成方法論は、例えば、米国特許第５，７１６，６４４号、同第５，６７４，５３４号、同第５，９１６，５９７号、同第６，０４８，５２４号、同第５，９９４，１２７号、同第５，９５５，４２２号、同第５，８５６，２９８号、同第５，７５６，３４９号、同第５，６２１，０８０号、同第５，５４７，９３３号、および同第５，４４１，８６８号に記載される。
【００４３】
ＳＣ  ＥＰＯ投与とは、本明細書中において規定される場合に、所望の投薬量のＥＰＯの、投薬用の送達デバイスを介しての送達をいう。投薬用の送達デバイスは、処置されるべき個体の表皮を貫通し得、そして所望の投薬量のＥＰＯの、この個体の組織への導入を生じる。本発明の送達デバイスとしては、任意の伝統的な皮下針注射器、空気動力型無針注射器、ジェット注射器、またはガス加圧型無針注射器（例えば、米国特許第５，７３０，７２３号、同第５，８９１，０８６号、同第５，９５７，８８６号、および同第５，８５１，１９８号を参照のこと）が挙げられ得るが、これらに限定されない。
【００４４】
閾値レベルとは、本明細書中において規定される場合に、このレベルより高く維持される血清ＥＰＯ濃度が、未熟（ｙｏｕｎｇ）ＲＢＣの成熟ＲＢＣへの分化を促進する、血清ＥＰＯ濃度をいう。逆に、閾値レベルより低く維持された血清ＥＰＯ濃度は、網状赤血球のＲＢＣへの成熟をもたらさない。
【００４５】
患者とは、本明細書中において記載される場合に、疾患状態、処置レジメン、または所望に起因して、ヘマトクリット、ＲＢＣ数、または酸素容量の増加を必要とする個体を含む。
【００４６】
下部構造ドメインとは、本明細書中において記載される場合に、システムのユーザーに対して非常に透過性であるシステムの操作局面を含む。下部構造ドメイン項目の例としては、同時処理、トランザクション補助、データ構造補助、およびセキュリティーサービスなどを使用するサービスが挙げられる。
【００４７】
ビジネスドメインとは、本明細書中において記載する場合に、そのシステムにより実行される実際のビジネスのモデルおよび方法に関する、このシステムの実際の機能を考慮する全ての操作および理論を含む。例えば、ビジネスモデルがＥＰＯ投与レジメンを提供し、そして投薬量のＥＰＯを販売する場合には、ビジネスドメイン理論は、このビジネスの実行の全ての局面を含む。これには、ＥＰＯの製造、購入および販売、顧客のチェックおよび顧客のための信頼の確立などが挙げられる。ビジネスドメインは下部構造に関する活動のための補助を含まないことに注目することが、重要である。
【００４８】
本発明の好ましい実施形態は、ＥＰＯが１週間に１回約４０，０００ＩＵ／ｋｇ、連続した２週間にわたって投与される、投与レジメンを記載する。最初の用量のＥＰＯは、ＲＢＣ前駆細胞からの網状赤血球の産生を容易にする。第二の用量のＥＰＯは、患者の網状赤血球の薬力学的プロフィールと一致するために、投与される。第二の用量のＥＰＯは、最初の用量に続いて６〜１０日間投与され、そして好ましくは、網状赤血球濃度が最初のＥＰＯ用量に続いてピークに達した時点で、投与される。
【００４９】
本発明のこの局面は、ＥＰＯによる赤血球系前駆細胞の増殖、および血液循環における網状赤血球の放出の刺激に関する。単回用量の投与の後に、網状赤血球は、６〜１２日の範囲の時点でピークに達し、そして１５日までの時点で、投与前のレベルに戻った。網状赤血球段階における細胞の寿命は、血液循環において約１〜２日間である。従って、当業者は、未熟赤血球が、投薬後約７〜１４日で、血液循環に現れることを予測する。ＥＰＯ治療の開始後７日目〜１４日目の間に未熟赤血球が成熟赤血球に成熟するために、ＥＰＯが必要とされることが、仮定される。成熟赤血球は、健常な被験体において、１２０日の平均寿命を有する。成熟赤血球の寿命は、慢性貧血または他の疾患状態の患者において、より短くあり得る。
【００５０】
本発明の別の好ましい実施形態は、ＥＰＯが２以上のサイクルを含む投薬サイクルで投与される投与レジメンを含み、ここで、ＥＰＯは、連続する２週間にわたって１週間に１回投与される。投薬サイクルの間の時間の長さは、好ましくは、ＲＢＣの寿命に一致する。ＲＢＣの寿命は、代表的に１２０日間であるが、この時間は、疾患状態または処置レジメンに起因して、変動し得る。従って、好ましくは、ＥＰＯの引き続くサイクルは、好ましくは、先の投与に続いて６０〜１２０日間投与される。
【００５１】
本発明の好ましい実施形態は、静脈内（ＩＶ）および皮下（ＳＣ）の投与に続く、健常なボランティアにおける血清ＥＰＯ濃度についての薬物速度論的モデル、ならびに血液中の網状赤血球、ＲＢＣ数およびＨｂ濃度の変化を引き起こすＳＣ  ＥＰＯの薬力学的モデルを記載する。さらに、特定の実施例は、本発明のＰＫ／ＰＤモデルの利用に従う。これらとしては、以下が挙げられる：ｒＨｕＥＰＯの種々の投薬レジメンについてのヘモグロビン応答の予測される差異の決定；ｒＨｕＥＰＯを用いる維持治療に対する予測された応答に対する、被験体の体重の効果の評価；および癌患者が健常なボランティアと同程度にｒＨｕＥＰＯ処置に対して応答するか否かの評価。
【００５２】
（薬物速度論的モデルおよび分析）
モデル化およびＳＣ  ｒＨｕＥＰＯ薬物速度論を記載するデータを、Ｒｏｂｅｒｔ  Ｗｏｏｄ  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＲＷＪＰＲＩ）により実施する臨床試験から得た。これは、健常なボランティアにおける、２つの匹敵するオープンラベルの（ｏｐｅｎ  ｌａｂｅｌｅｄ）無作為化された平行なプラシーボ制御された試験からなり、ここで、ｒＨｕＥＰＯを、８つの単回ＳＣ用量のＥＰＲＥＸ（登録商標）：３００、４５０、６００、９００、１２００、１３５０、１８００、２４００ＩＵ／ｋｇとして、ならびに複数投薬レジメン：４週間にわたって１週間に３回１５０ＩＵ／ｋｇおよび４週間にわたって１週間に１回６００ＩＵ／ｋｇとして、投与した。各処置群は、５の被験体を有した。
【００５３】
ｒＨｕＥＰＯ投与後に測定したｒＨｕＥＰＯ濃度を、ベースライン値に対して補正した。なぜなら、使用したラジオイムノアッセイは、内因性のＥＰＯとｒＨｕＥＰＯとの間を区別し得ないからである。各被験体に対するベースラインＥＰＯ濃度を、投与前の値を平均することにより、決定した（１０分、２０分および３０分）。この値を各時点における投薬後の値から減算して、補正した血清ｒＨｕＥＰＯ濃度を得た。全ての被験体について補正した濃度の平均を、データ分析のために使用した。アッセイ検出の限度（７．８ＩＵ／ｌ）より低い測定値を、いずれもデータ点として使用しなかった。静脈内のデータもまた、ベースラインＥＰＯレベルについて補正した。
【００５４】
文献から得られるＩＶデータの予備分析から、１区画モデルで十分であることが見出された。ｒＨｕＥＰＯの処分は、主としてクリアランスの用量依存性減少に起因して、非線形であることが報告されている（例えば、Ｍａｃｄｏｕｇａｌｌら、１９９１、Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．２０：９９−１１３を参照のこと）。従って、Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ−Ｍｅｎｔｅｎ関数を使用して、ｒＨｕＥＰＯ処分を記載した。ｒＨｕＥＰＯ濃度についてのＩＶデータ（ＣEPO＝Ａｐ／Ｖｄ）対時間を、以下の方程式に当てはめた：
【００５５】
【数１】
2005247858.tif 000002
【００５６】
ここで、Ａｐは、身体内のｒＨｕＥＰＯの量であり、Ｖｍａｘは、プロセスの容量であり、Ｋｍは、アフィニティー定数、すなわち除去速度がＶｍａｘの半分に達する血漿ｒＨｕＥＰＯ濃度であり、そしてＶｄは、分布の容量である。
【００５７】
種々の用量に関するＩＶ濃度−時間プロフィールを、図２に示す。非線形分布を有する１区画モデルを使用して、ｒＨｕＥＰＯの速度論を記載した。注目すべきことに、２区画モデルは、早い時点ではＩＶデータをより良好に当てはめ得る；それにもかかわらず、全体のデータ当てはめにおいて、より大きな複雑性を生成する。その結果、１区画モデルは受容可能な当てはめを与え、そして目的に適うので、これを選択した。また、ｒＨｕＥＰＯは３０ＫＤａのタンパク質であるので、これは静脈内区画に制限されることが予測され得、従って１区画モデルの選択が正当化される。
【００５８】
当てはめにより得られるパラメーターを、図３に列挙する。得られたＶｄ（０．０５５８Ｌ／ｋｇ）およびＶｍａｘ／Ｋｍ（すなわち、低用量におけるＣＬ：０．００６６Ｌ／時間／ｋｇ）は、報告された文献の推定の範囲内である（例えば、Ｍａｃｒｏｄｏｕｇａｌｌら、前出およびＬａｐｐｉｎら、１９９６、Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ  Ｈａｅｍ．１８：１３７−１４５８を参照のこと）。大きなＫｍの値は、ＥＰＯ処分がほんの穏やかに非線形であることを示し、そして用量依存性除去は、高用量においてのみ重要となる。ラットにおける試験は、骨髄および脾臓におけるレセプターへのｒＨｕＥＰＯの結合が、可飽和のｒＨｕＥＰＯの除去に寄与することを示唆した（例えば、Ｋａｔｏら、１９９７、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２８３：５２０−２７を参照のこと）。
【００５９】
ＳＣ  ＥＰＯの薬物速度論は、大部分の薬物（吸収されるものの８７％）の迅速な零次投入、引き続く少ない部分の薬物（吸収されるものの１３％）の遅い一次吸収を有する、二重吸収モデルにより、最良に特徴付けられることが見出された。バイオアベイラビリティは、用量（４６〜１００％の範囲）とともに増加し、速度論の非線形性に実質的に寄与することが見出された。このモデル（図４）に関する微分方程式を、以下に示す：
【００６０】
【数２】
2005247858.tif 000003
【００６１】
ｒＨｕＥＰＯは、ＩＶ投与の際に、１００％バイオアベイラブルであるようであった。ＳＣ投薬の後のバイオアベイラビリティを、パラメーターＦにより表す。従って、一次プロセスに関するｒＨｕＥＰＯの量は、Ｆ×Ｆｒ×用量により与えられ、一方で零次プロセスにより吸収されたものは、Ｆ×（１−Ｆｒ）×用量で与えられる。
【００６２】
全ての当てはめを、ＡＤＡＰＴ  ＩＩソフトウェアを使用して実行した（例えば、Ａｒｇｅｎｉｏら、１９９８、ＡＤＡＰＴ  ＩＩ  Ｕｓｅｒ’ｓ  Ｇｕｉｄｅ、Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、Ｌｏｓ  Ａｎｇｅｌｅｓを参照のこと）が、任意の適切なソフトウェアもまた、使用し得る。パラメーターの推定は、最尤法による最小二乗当てはめを使用して実施し、そして使用した拡張最小二乗分散モデルは、以下により与えられる：
【００６３】
【数３】
2005247858.tif 000004
【００６４】
８つの単回ＳＣ用量および５つのＩＶ用量レベルの同時の当てはめを実行した。最初の当てはめの間に、Ｖｍａｘ、Ｋｍ、Ｖｄ、ｋａ、Ｆｒおよび分散パラメーターを、用量にわたって一定に維持し、一方でτおよびＦを、用量とともに変動させた。結果は、τが単一の値として１３５０ＩＵ／ｋｇの用量まで固定され得るのに対し、最後の２つの用量については、高い方のτ値が最適であることを示した。バイオアベイラビリティＦは、試験した用量の範囲において、用量とともに比例的に増加し、そして以下のように一次方程式により記載されることが見出された（ｒ2＝０．９７１３）：
Ｆ＝０．３８８４＋０．０００２４９５２×用量      （３）
線形回帰のために、４５０ＩＵ／ｋｇの用量についてのＦ値を、アウトライアーであることがわかった場合には、排除した。最終当てはめを、この関数を使用して実施し、Ｆ値を用量にわたって設定し、そしてτを、最後の２つの用量を除いて（これらに関してはτを６０時間に設定した）すべての用量に対して、４４時間に固定した。これにより、全てのデータを、単一のセットのＶｍａｘ、Ｋｍ、Ｖｄ、ｋａ、Ｆｒ、および分散パラメーターについてのパラメーターを使用して記載することが可能となった。６００ＩＵ／ｋｇ／週の複数投薬量データを、Ｆを６０％に設定した場合（これが最適な当てはめを与えたので）と同じパラメーターを使用してシミュレートした。１５０ＩＵ／ｋｇｔ．ｉ．ｗ．レジメンについては、Ｆを２５％に固定した。さらに、この低い用量については、Ｖｄを増加させ（０．１１９３ｌ／ｋｇ）、そしてτを１８時間に設定することが、必要であった。
【００６５】
図５Ａおよび５Ｂは、異なる単回ＳＣ用量に対する平均ｒＨｕＥＰＯ濃度−時間プロフィールを示す。ＳＣデータの目視評価は、フリップフロップ速度論を明らかに示す。なぜなら、終末傾斜がＩＶ単一指数減退（ｍｏｎｏｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌ  ｄｅｃｌｉｎｅ）と比較してずっと平坦であるからである。従って、一次吸収速度定数を割り当てて、終末相を捕捉した。このデータはまた、ｒＨｕＥＰＯ濃度が１日以内でピークのＣｍａｘに迅速に達することを示し、これによって、同様により速い吸収プロセスが存在しなければならないことを示す。この迅速な上向き曲線（ｕｐｃｕｒｖｅ）は、零次投入プロセスにより、説明された。全ての用量にわたる終末傾斜は平行であることが見出され、このことは、単一の一次吸収速度ｋａが全ての用量に関して、この相を説明し得ることを示す。遅い一次吸収プロセスに関する用量の画分は、ほんの１３．１％であった。従って、バイオアベイラブルな用量の大部分は、零次成分により、２〜３日以内で迅速に吸収される。一次吸収速度ｋａは、皮下部位からのｒＨｕＥＰＯのゆっくりとした連続的な放出を説明する。類似の二重吸収速度モデルを使用して、ＳＣ投薬に続く別の高分子であるＩＬ−１０の吸収速度論を特徴付けた（例えば、Ｒａｄｗａｎｓｋｉら、１９９８、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１５：１８９５−１９０２を参照のこと）。
【００６６】
図６は、異なる単回ＳＣ用量についてのＡＵＣ対用量のプロットを提供する。増加する用量に伴うＡＵＣの比例的より大きな増加は、ＣＬまたはバイオアベイラビリティのいずれかあるいは両方が、用量とともに変化していることを示す。ｒＨｕＥＰＯの排除は、非常に穏やかに非線形であるのみであることが、見出された。他方で、Ｆは、用量とともに線形に増加することが見出され（図７）、そしてＳＣ用量に付随するＡＵＣの非比例的な増加の原因となる主要な因子であることがわかった。最後の２つの最も高い用量において、減少したＣＬもまた、非線形性に寄与した。図８は、逆重畳により得られる全ての用量、および個々の用量からのデータを提唱されるモデルに当てはめることにより得られる全ての用量についての、Ｆ値を列挙する。両方の方法を使用して得られた推定は非常に類似しており、従って、本発明の薬物速度論的モデルが、Ｆの値を変化させることに起因する非線形性を十分に説明し得ることを示す。
【００６７】
ＳＣ  ｒＨｕＥＰＯの不完全な非線形性のバイオアベイラビリティの原因は、公知ではない。例えば、タンパク質ＩＬ−１０は、ＳＣ投薬の際にほんの４２％のバイオアベイラビリティを示し、損失は、タンパク質分解酵素の効果に起因するようである（例えば、同上を参照のこと）。次に、これらの酵素は、より高い濃度のペプチドまたはタンパク質基質において、可飽和であり得る。二重吸収プロセスは、ＳＣ投薬の後の高分子のアクセスの制御におけるリンパの役割に起因し得る。迅速な初期の吸収相は、大部分の用量の、局所血管への漏出により引き起こされ得るが、後期の相は、リンパ系を介して遅く入ることに関連し得る。
【００６８】
１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および６００ＩＵ／ｋｇ／週の複数回用量レジメンについてのｒＨｕＥＰＯ濃度対時間のシミュレーションを、図９に示す。本発明の薬物速度論的モデルは、大部分のパラメーターを単回用量の当てはめから得た値に固定して、複数回用量データを正確に記載する。１５０ＩＵ／ｋｇのより低い複数回用量レジメンについては、Ｖｄを増加させなければならなかった。このことは、バイオアベイラブルな量が非常に低い場合の分布に関与する非線形性に起因し得る。Ｖｄの同じ変化もまた、１０ＩＵ／ｋｇ  ＩＶ用量のより良好な当てはめを容易にし得、ここで、最大濃度は同じ範囲である。
【００６９】
（薬力学的モデルおよび分析）
血液中の網状赤血球の薬力学、ＲＢＣ数、およびＨｂレベルを記載するデータを、ＲＷＪＰＲＩにより実施する臨床試験から得た。これは、健常なボランティアにおける、２つの匹敵するオープンラベルの無作為化された平行なプラシーボ制御された試験からなり、ここで、ｒＨｕＥＰＯを、８つの単回ＳＣ用量のＥＰＲＥＸ（登録商標）：３００、４５０、６００、９００、１２００、１３５０、１８００、２４００ＩＵ／ｋｇとして、ならびに複数投薬レジメン：４週間にわたって１週間に３回１５０ＩＵ／ｋｇおよび４週間にわたって１週間に１回６００ＩＵ／ｋｇにおいて、投与した。各処置群は、５の被験体を有した。測定した薬力学的終点は、網状赤血球の数、血液中のＲＢＣ、およびヘモグロビン計数であった。
【００７０】
薬力学的データを、細胞の産生および損失のモデルを使用して記載した。このモデルは、ｒＨｕＥＰＯ投与後の時間とともに、細胞数の変化を記載する。このモデルによれば、赤血球生成のプロセスに関与する全ての細胞が、零次の様式（ｋ０）で産生されることが仮定される：これらの細胞は、これらの細胞が死ぬかまたは他の細胞に転換される終了時における一定の期間、生存する。その結果として、細胞は、これらの細胞の除去がその細胞の寿命に等しい期間により遅延されることを除いて、これらの細胞が生じる速度と正確に等しい速度で損失される。任意の単一のセットの細胞の寿命が、時間に関して一定であり、そしてその型の各細胞に関して同じであることが、仮定される。
【００７１】
図１０は、本発明のＰＤモデルの概略図を提供する。各前駆体細胞（ＴＰ）、網状赤血球（ＲL）、および赤血球（ＲＢＣL）の寿命が示される。区画は、血液中の赤血球の前駆体細胞（Ｐ）、網状赤血球（Ｒ）、赤血球（ＲＢＣ）、およびヘモグロビン（Ｈｂ）のプールを反映する。投与されたｒＨｕＥＰＯによる赤血球生成の刺激（Ｃｐ（ｔ））は、骨髄中の前駆細胞の産物に対して作用するＨｉｌｌ関数（Ｓ（ｔ））により与えられる。
【００７２】
このモデルに関する微分方程式は、以下の通りである：
【００７３】
【数４】
2005247858.tif 000005
【００７４】
Ｓmaxとは、ｒＨｕＥＰＯによる網状赤血球産生の最大の可能な刺激であり、そしてＳＣ50とは、最大の刺激の半分を引き起こし得るｒＨｕＥＰＯの血漿中濃度である。パラメーターＫｓは、Ｋｓ＝ｋ０×Ｓmaxとして定義され、そしてｒＨｕＥＰＯによる刺激の際の細胞の最大の可能な産生速度を表す。
【００７５】
ＳＣ50をまた、網状赤血球からのＲＢＣの形成のための閾値ｒＨｕＥＰＯ濃度として使用した。ｒＨｕＥＰＯ濃度がこの限界より低く低下する場合には、網状赤血球は赤血球に転換しないことを仮定した。このプロセスのために、モデル方程式（６）についての刺激関数を、以下のように調節した：
Ｃｐ（ｔ）≦ＳＣ50の場合には、Ｃｐ（ｔ−ＴＰ−ＲL＝０）（１１）であり、そしてＣｐ（ｔ−ＲＢＣL）≦ＳＣ50の場合には、Ｃｐ（ｔ−ＴＰ−ＲL−ＲＢＣL）＝０（１２）である。
ベースライン条件（定常状態レベル）を、以下のように定義する：
【００７６】
【数５】
2005247858.tif 000006
【００７７】
その結果、初期条件自体が、定常状態レベルを規定する。
Ｐｓｓ＝Ｐ（０）、Ｒｓｓ＝Ｒ（０）およびＲＢＣｓｓ＝ＲＢＣ（０）（１４）前駆体定常状態条件は、明白な形態で以下のように定義され得る：
Ｐｓｓ＝ｋｉｎ×ＴＰ  （１５）
前駆体区画についてのベースライン条件は未知であるので、１４×１０10細胞／Ｌ／ｈｒの値を、上記方程式および文献が推定するＫin（１９）を使用して、割り当てた。
【００７８】
ヘモグロビンレベルの変化を、比例因子Ｈｂcellを単に使用することにより、モデル化した。この因子は、１細胞（網状赤血球またはＲＢＣ）あたりのヘモグロビン含有量を表す。
Ｈｂ（ｔ）＝Ｈｂcell×細胞数（ｔ）  （１６）。
【００７９】
図１に示されるように、赤血球生成は、カスケードの事象に関与する。モデルにおける前駆体区画は、網状赤血球に最終的に変換されるこのプロセスに関与する骨髄中の全ての細胞を示す。従って、時間ＴＰは、ｒＨｕＥＰＯにより刺激された最も初期の前駆細胞が、分化プロセスのカスケードを経て、最終的に網状赤血球に変換されるために必要とされる平均時間の長さとして役立つ。言い換えると、これは、網状赤血球がｒＨｕＥＰＯにより開始されるために観察される時間の遅れを説明する。一旦、網状赤血球が形成されると、これは、ＲL（この時点で、これはＲＢＣに変換される）に等しい時間存在する。網状赤血球が消失する主な様式は、閾値未満の条件を除く、赤血球への変換によってであると推定される。このモデルは、細胞の無作為な破壊（例えば、出血）を説明しない。従って、全てのこれらの細胞の産生および除去の速度は、１つの０次速度定数ｋ０によって示され得る。一旦、ＲＢＣが産生されると、次いで、これは、ＲＢＣL日の期間生存し、このＲＢＣL日の後に、これは、血液から消失する。
【００８０】
網状赤血球のＲＢＣへの形質転換は、７２時間にわたって、部分的に骨髄中で、および部分的に血液中で起こる（例えば、Ｊｕｓｋｏ，１９９４．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．５６：４０６〜１９を参照のこと）。網状赤血球は、骨髄中で、および漏出によって形成され、それらは、循環中に進み、そこでこれらの未成熟細胞は、赤血球に形質転換される前に２４〜４８時間発達する（例えば、Ｇｕｙｔｏｎ．１９９６．Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ
Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａを参照のこと）。ｒＨｕＥＰＯは、骨髄からの網状赤血球の未成熟な放出を刺激することが公知であることから、これらの新規に生まれた細胞は、ｒＨｕＥＰＯ刺激下で、血液中において、７２時間のそれらの全寿命を費やすと、推定された。結果的に、網状赤血球の寿命（ＲL）は、７２時間に固定された。ＲＢＣ寿命（ＲＢＣL）は、１２０日に固定され、そして細胞あたりのＨｂ含量は、文献での値に基づいて２９．５ｐｇ／細胞に固定された（例えば、Ｊｕｓｋｏ（前出）およびＧｕｙｔｏｎ（前出）を参照のこと）。網状赤血球およびＲＢＣの両方が、血液の全Ｈｂ含量に貢献すると推定される。
【００８１】
さらに、新規細胞産生（速度Ｋｓ）および損失モデルが、ＳＣ50およびＫｓの推定値を得るために使用された。網状赤血球および赤血球は、３日（７２時間）および１２０日（２８８０時間）の寿命を有すると推定された。血液中の網状赤血球の出現における時間の遅れは、前駆細胞を提示する前駆体区画の導入によって評価された。Ｋｓ値０．３７０９×１０10細胞／Ｌ／時間が、得られ、およそ２のＳmaxを生じた。これは、赤血球生成の適度な最大刺激を反映する。得られたＳＣ50値は、２３ＩＵ／Ｌであり、これは、低血清ｒＨｕＥＰＯ濃度が、刺激を維持するに十分であったことを示す。ｒＨｕＥＰＯのＳＣ50に等しいと推定される閾値濃度は、血液中の網状赤血球の赤血球への変換に必須であることが見出された。９００ＩＵ／ｋｇまでのｒＨｕＥＰＯの単回用量は、ＲＢＣ産生時間の間、この閾値を超えて、ｒＨｕＥＰＯレベルを維持し得た。これは、４回のより低い単回ＳＣ用量の投与後に、網状赤血球産生における刺激にもかかわらず、ＲＢＣ数が増加せずに、結果的に、短時間で、非常にわずかなＨｂの変化のみを生じることを説明する。また、閾値の概念は、Ｈｂレベルの有意な改善を引き起こした、ｒＨｕＥＰＯ複数回投薬レジメンに対するＨｂレベルのより良好な応答性を説明する。この研究の対応する性質は、異なるｒＨｕＥＰＯ用量への応答における変動性を生じたが、１セットのパラメーターは、特定の範囲の用量およびレジメンへの応答性の合理的な特徴付けを提供した。
【００８２】
図１１は、全ての単回ＳＣ用量についての平均網状赤血球数対時間プロフィールを示す。網状赤血球数は、第１のサンプリング点で、前用量レベルに比較してすぐにわずかに増加する。このレベルは、３〜４日間持続され、その後、それらは、ピークがおよそ２００〜３００時間に達するまで定常的に上昇し始める。次いで、数は、２５時間のみかけの半減期で迅速に低下し始め、２２日（５２８時間）でベースラインレベルに達する。
【００８３】
データおよびモデル当てはめは、図１２Ａおよび１２Ｂに示される。データに薬力学的方程式を当てはめることによって得られたパラメーター推定値は、図１３に示される。４．４５１×１０10細胞／日（５Ｌの血液容量を推定）に変換されるＫｓ０．３７０９×１０10細胞／Ｌ／時間が得られた。全てのＲＢＣのうち１％が、毎日破壊され、そして健常なヒトの網状赤血球によって置換され、２〜３×１０11細胞／日の赤血球産生速度（ｋ０）を生じることが公知である。従って、推定されたＳmaxは、１．５〜２．２であり、これは、ｒＨｕＥＰＯが、網状赤血球の０次産生速度において最大２．５〜３．２倍の増加（血液において遅くかつ制限された上昇を説明する、比較的に適度な程度の刺激）を生じ得ることを示す。
【００８４】
得られた２２．５８ＩＵ／ＬのＳＣ50は、最大の半分の刺激を引き起こすために必要とされる血清ｒＨｕＥＰＯ濃度を反映する。ｒＨｕＥＰＯ血清濃度が、このレベルを超えて維持される限り、細胞数は、ベースラインを超えるままのはずである。通常の赤血球性前駆細胞（起源にかかわらず）は、細胞表面上に１０００未満のＥＰＯレセプターを発現する。このレセプターへのＥＰＯの結合は、最終的には、骨髄における赤血球性前駆体の分化および増殖の刺激を導くシグナル伝達事象を引き起こす（例えば、Ｌａｐｐｉｎ（前出）を参照のこと）。さらに、ＥＰＯは、骨髄からの網状赤血球の放出を促進し、これにより、血清の網状赤血球および赤血球数の増加を引き起こす（同書）。０時点あとに観察される網状赤血球のレベルにおけるわずかな増加は、これらの初期時のモデルにより説明されない、骨髄からの未成熟網状赤血球の初期放出に起因して引き起こされ得る。
【００８５】
得られた２２．５８ＩＵ／Ｌの低いＳＣ50値は、赤血球生成細胞上に少数のレセプター部位が存在し、これは、容易に飽和され、その結果、迅速な送達での高用量により、生体利用可能なｒＨｕＥＰＯのかなりの消費が導かれ得るという事実を反映する。用量の増加またはより遅い送達は、ｒＨｕＥＰＯレベルが、長時間にわたってＳＣ50を超えて維持されることを容易にし、そして網状赤血球産生の刺激の程度および持続時間において増加が存在する。この概念は、２つの最近の臨床研究の結果を説明する。この結果は、ＳＣ  ｒＨｕＥＰＯが、赤血球の産生を刺激するためにＩＶ投薬よりも効果的であることを示す。低いバイオアベイラビリティにもかかわらず、ＳＣ投薬による延長した吸収は、ＲＢＣ産生のより効果的な刺激を生じる（Ｋａｕｆｍａｎｎら，１９９８．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３９：５７８〜８３およびＢｅｓａｒａｂら，１９９２．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．２：１４０５〜１２を参照のこと）。
【００８６】
図１２Ａおよび１２Ｂは、いくつかの用量レベルについての薬力学的データがかなり変動し、この変動は、漸増用量による刺激の程度が一貫していないことによって反映されることを示す。例えば、６００および１２００ＩＵ／ｋｇ用量は、９００および１３５０ＩＵ／ｋｇ用量と比較して、わずかに多い数の細胞を産生する。しかし、ベースラインへの復帰のパターンは、用量にわたって同様のようである。任意の場合、本発明のモデルは、応答傾向を捕捉し、データの変動性の性質、および１つの単一のセットのパラメーターが全ての用量からの薬力学的データを適切に記載しているという事実を考慮する。ＫｓおよびＳＣ50が各群について変動することを可能にすることによって、各用量レベルからより当てはめたデータを得ることが、可能である。これは、合理的である。なぜなら、これらは、対応する用量群であるが、パラメーターは、一般化の目的のために平均化されなければならないからである。
【００８７】
図１４は、Ｈｂ応答対８回の単回ＳＣ用量および刺激後の時間を示す。Ｈｂレベルにおいて、あったとしても、非常にわずかな変化が存在し、そしてこれは、ｒＨｕＥＰＯ濃度が、７日で閾値限界近くに落ち込み、それによってＲＢＣへの新規に形成された網状赤血球の変換を妨げるという事実によって説明され得る。従って、Ｈｂレベルにおけるわずかな上昇は、９００ＩＵ／ｋｇまでの用量に対して、網状赤血球数の増加によって単に引き起こされ、その後に、ＲＢＣが適度に増加して、一貫してより高いＨｂレベルに貢献もする。この閾値の概念は、Ｆｌａｈａｒｔｙら（前出）に報告されるように、健常ボランティアにおける１０００ＩＵ／ｋｇまでの単回の静脈内用量の後に、ヘマトクリットまたはヘモグロビン応答において有意に増加しない、網状赤血球応答における用量依存性増加を説明し得る。
【００８８】
図１５および１６は、ｒＨｕＥＰＯの複数回ＳＣ投薬後の、網状赤血球、ＲＢＣおよびＨｂ数の変化について示すモデルを示す。両方の投薬レジメンについての薬力学的応答が、把握される。ｒＨｕＥＰＯ濃度は、ほとんどの時間、閾値を超えて維持され、これにより、網状赤血球に、ＲＢＣに変換される機会を与える。これは、単回用量に対する複数回用量後のＨｂレベルにおける定常的な増加として反映される。異なる単回ＳＣ用量の適合および複数回のＳＣ用量の刺激は、数回のより低い用量の投与によってＳＣ50を超えてｒＨｕＥＰＯ濃度を維持することが、単回ショットとして同じ総用量を与えることとは逆に、Ｔｉｂレベルにおける連続的な増加を可能にする傾向があることを示す。後者の場合、この濃度は、すぐにＳＣ50未満に落ち込み、網状赤血球応答の減少、およびより重要なことには、非効率的なＨｂ応答を引き起こす。
【００８９】
結論として、本発明のＰＫ／ＰＤモデルは、ｒＨｕＥＰＯの制御における用量、投薬レジメン、および投与経路の重要性を実証し、そして種々の条件について最適なｒＨｕＥＰＯ用量および再投与時間の設計のための価値のあるツールとして使用され得る。さらに、本発明は、ＥＰＯ処置の投薬量およびスケジュールを仕立てるためにコンピュータベースのシステムを提供し、その結果、患者は、例えば、ヘモグロビンおよび網状赤血球の産生の増加に関してか、または患者の必要性に適切な投薬レジメン（例えば、１週間に１回もしくは２週間毎に１回）を提供するように、最適な利益を受ける。
【００９０】
（ビジネス方法）
本発明の特定の実施形態において、ＥＰＯの投与レジメンの提供および投薬されるＥＰＯの販売に関するビジネス方法が、実施され得る。特定の実施形態において、この方法は、本発明のコンピュータシステムを通して実施され得る。例えば、ユーザー（例えば、医師または薬剤師のような健常な実施者）が、コンピュータ末端を通して、およびインターネットまたは他の手段により、本発明のシステムにアクセスし得る。ユーザーとコンピュータシステムとの間の接続は、好ましくは、保障されている。
【００９１】
実際には、ユーザーは、例えば、患者に関する情報（例えば、患者の疾患状態、ヘマトクリット、ヘモグロビン濃度、ならびに患者の網状赤血球および／またはＲＢＣ数に関する他の因子（例えば、所望のまたは最適な網状赤血球もしくはＲＢＣ数））に関する情報を入力し得る。次いで、コンピュータシステムは、常駐するコンピュータープログラムの使用により、患者に対する１以上の適切なＥＰＯ投与レジメンを提供し得る。コンピュータープログラムはまた、ユーザーのインターフェースにより、異なるＥＰＯまたはＥＰＯ様薬物についての価格および費用の比較を、これらのＥＰＯまたはＥＰＯ様薬物についての適切な投与レジメンと組み合わせてか、またはこれとは別々に、提供し得る。
【００９２】
本発明の好ましい実施形態に従うコンピュータシステムは、例えば、機能が高められたＩＢＭ  ＡＳ／４００中距離コンピュータシステムであり得る。しかし、当業者は、コンピュータシステムが、多くのユーザーのコンピュータ装置または１人のユーザーデバイス（例えば、個人用コンピュータもしくはワークステーション）と組み合わされるか否かにかかわらず、本発明の方法および装置が、任意のコンピュータシステムに同等に適用されることを理解する。コンピュータシステムは、適切に、プロセッサー、メインメモリ、メモリコントローラ、補助的なメモリインターフェース、および末端インターフェース（これらは全て、システムバスを通じて相互接続される）を備える。種々の改変、付加または欠失（例えば、キャッシュメモリまたは他の周辺デバイスの付加）が、本発明の範囲内でコンピュータシステムになされ得ることに留意すること。
【００９３】
このプロセッサーは、コンピュータシステムの計算および制御機能を実行し、そして適切な中央処理装置（ＣＰＵ）を備える。このプロセッサーは、単一の集積回路（例えば、マイクロプロセッサー）を備え得るか、またはプロセッサーの機能を達成するように協同して働く任意の適切な数の集積回路デバイスおよび／もしくは回路基板を備え得る。このプロセッサーは、その記憶メモリ内で、本発明のＰＫ／ＰＤモデリングコンピュータープログラムを適切に実施する。
【００９４】
好ましい実施形態において、補助的なメモリインターフェースは、コンピュータシステムが補助的なメモリデバイス（例えば、磁気ディスク（例えば、ハードディスクもしくはフロッピー（登録商標）ディスク）または光学的メモリデバイス（例えば、ＣＤ−ＲＯＭ））からの情報を格納し、そして読み出すことを可能にする。１つの適切なメモリデバイスは、直接アクセスメモリ装置（ＤＡＳＤ）である。ＤＡＳＤは、フロッピー（登録商標）ディスクからプログラムおよびデータを読み出し得るフロッピー（登録商標）ディスクドライブであり得る。本発明は、十分に機能化されたコンピュータシステムの状況において記載されている（そしてこの記載は続く）が、当業者は、本発明の機構が種々の形式のプロブラム製品として配布され得ること、および実際にこの配布を実施するために、特定の型の信号保持媒体にかかわらず、本発明が同等に適用されることを理解することに留意することが重要である。信号保持媒体の例としては、記録型媒体（例えば、フロッピー（登録商標)ディスクおよびＣＤ  ＲＯＭＳ）、ならびに送信型媒体（例えば、デジタルおよびアナログのデータリンク）（無線データリンクを含む）が挙げられる。
【００９５】
本発明のコンピュータシステムはまた、別々のプロセッサーの使用を通じる、メモリコントローラを備え得る。これは、メインメモリからの、および／または補助的な格納インターフェースからメインプロセッサーに要求された情報を移動させることを担う。説明の目的のために、メモリコントローラが別々の実体として記載されるが、当業者は、実際、メモリコントローラにより提供される機能部分が、実際には、メインプロセッサー、メインメモリ、および／または補助的な格納インターフェースに付随する回路に存在し得ることを理解する。
【００９６】
さらに、本発明のコンピュータシステムは、システム管理者およびコンピュータプログラマーが、通常、プログラム可能なワークステーションを通じてコンピュータシステムと通信することが可能である末端インターフェースを備え得る。本発明が、複数のプロセッサーおよび複数のシステムバスを有するコンピュータシステムに等しく適用されることが理解されるべきである。同様に、好ましい実施形態のシステムバスは、代表的なハードワイヤード分岐バスであるが、コンピュータ関連環境における双方向通信を支持する任意の接続手段が、使用され得る。
【００９７】
本発明のコンピュータシステムのメインメモリは、ＥＰＯ投与のＰＫ／ＰＤモデリングおよびオペレーティングシステムに関する１以上のコンピュータープログラムを適切に備える。メモリ中のコンピュータープログラムは、その最も広い意味において使用され、そしてコンピュータープログラムの任意かつ全ての形式（ソースコード、中間（ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ）コード、機械コード、およびコンピュータープログラムの任意の他の例を含む）を含む。本明細書中で使用される場合、用語「メモリ」は、システムの仮想メモリスペースにおける任意の格納位置をいう。コンピュータープログラムおよびオペレーティングシステムの一部が、実行するためにメインプロセッサーについての指示キャッシュ（ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ  ｃｈａｃｈｅ）にロードされ得、一方、他のファイルが磁気または光学ディスク格納デバイスに十分に格納され得ることが理解されるべきである。さらに、メインメモリが、別個のメモリ位置を備え得ることが理解されるべきである。
【００９８】
本発明の他の対象物、特徴および利点が、以下の特定の実施例から明白になる。特定の実施例は、本発明の特定の実施形態を示すが、例示のみによって提供される。従って、本発明はまた、この詳述された記載から当業者に明白になり得る本発明の精神および範囲内での、種々の変化および改変を含む。
【００９９】
（実施例１：ＥＰＯについてのヒト薬物速度論およびバイオアベイラビリティ）
本発明の以下の実施例は、４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンを支持するＰＫ／ＰＤの概要を提供する。このデータは、文献およびＲＷＪＰＲＩ，Ｒａｒｉｔａｎ，ＮＪにより実施される４つの臨床研究の両方から誘導される。３つの研究を、Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇ  ＢＢ−ＩＮＤ−２３１８の下で行い、そして１つの研究を、ＵＫで行なった。この研究の簡潔な概説を、図１７に示す。
【０１００】
この技術の概要に含まれる臨床薬物速度論的研究を、図１８Ａ〜１８Ｄに記載し、そしてこれらの研究からの薬物速度論的データを、図１９に要約する。血清中のＥＰＯ濃度の決定のために使用される分析方法を、後におよび図２０に要約する。
【０１０１】
臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３（図１７）は、４０，０００ＩＵの一週間に１回の投与レジメンを支持するデータを提供する。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０（図１７）は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３と同様の設計を有する。
【０１０２】
臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０において、ヘモグロビンレベルを変動させる無作為化の問題が存在し、そして多くの被験体が、開始時に鉄欠乏性であった。研究部位での無作為化における誤差は、各処置群において、雄性および雌性の等しくない分布を生じ、そして平均ベースラインヘモグロビン値における不釣合いに寄与した。血液学的値の総説は、スクリーニング評価とベースライン評価との間に、多数の被験体についてのヘモグロビンにおける実質的な変動を示した。さらなる調査は、装置の較正に関する実験室の非一貫性を示した。本研究の陽性の知見を適切に確認するために、反復研究を実施することを決定した。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０の反復であった。
【０１０３】
臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８（図１７）およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９（図１７）は、異なる単回用量および複数回用量後の、ＥＰＯの用量比例を調査するため、ならびに予備的薬物速度論的および薬力学的情報を得るために、行なわれた２つのパイロット研究である。
【０１０４】
（インビボ研究のための一般的分析方法）
（要約）
生体分析方法を開発し、そしてＲＷＪＰＲＩ，Ｒａｒｉｔａｎ，ＮＪにより実施されるＥＰＯについての臨床プログラムを支持するように検証した。ヒト血清中のＥＰＯ濃度を決定するために使用された独特な方法は、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）（ＲＷＪＰＲＩ研究Ｎｏｓ  ＤＭ９２００１およびＤＭ９６０２３）であった。この研究は、ＰＰＤ開発（ＰＰＤ），Ｒｉｃｈｍｏｎｄ  ＶＡ，ｔｈｅ  Ｃｏｎｔｒａｃｔ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）（これは、支持的な臨床研究（ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０）の分析を行なう）に首尾よく移された。このＲＩＡ方法は、中心的な研究（ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３）の分析のために、ＰＰＤにて酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）により十分に相互検証された。ＲＩＡとＥＬＩＳＡとの間の適合性を試験するために、１セットの１６個のプールしたヒト被験体サンプルを、ＲＷＪＰＲＩによって調製し、そしてＥＬＩＳＡおよびＲＩＡの両方においてＰＰＤで分析した。ＥＬＩＳＡは、感度を損なうことなく、試薬の接触性、分析時間および検量線の範囲の延長において改善を提供した。
【０１０５】
（アッセイ型）
ラジオイムノアッセイを、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９（ＲＷＪＰＲＩで行なわれた）およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０（ＰＰＤで行なわれた）を支持するように、ＥＰＯの定量のために使用した。ＥＬＩＳＡを、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３（ＰＰＤで行われた）におけるＥＰＯの定量のために使用した。
【０１０６】
ＲＩＡ方法は、ＥＰＯの定量的決定のために、Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ＤＳＬ），Ｗｅｂｓｔｅｒ，ＴＸによって最初に開発され、そして結果を、ＲＷＪＰＲＩ方法で得られた結果と比較した。市販のＲＩＡは、１次抗体としてヒト尿ＥＰＯに対するウサギポリクローナル抗血清、およびトレーサーとしてヒト尿125Ｉ−ＥＰＯを使用する二重抗体の競合方法である。この手順は、ラジオイムノアッセイの基本原理に従い、それによって、固定数の抗体結合部位について、放射性抗原と非放射性抗原との間で競合する。抗体に結合した125Ｉ−標識ＥＰＯの量は、血清中に存在するＥＰＯの濃度と反比例する。遊離抗原および結合抗原の分離は、容易であり、そして促進された二重抗体ポリエチレングリコールシステムを使用することによって迅速に達成される。ＤＳＬキットの主要な内部（ｉｎ−ｈｏｕｓｅ）改変は、標準物およびスパイクした品質管理コントロールにおける尿中ＥＰＯの組換えヒトＥＰＯへの置換である。このアッセイに使用される標準的な濃度は、７．８、１５．６、３１．３、６２．５、１００、および１２５ｍＵ／ｍＬであった。この正確な方法を、ＰＰＤに移し、そしてＰＰＤによって検証した。
【０１０７】
ＰＰＤの免疫化学部は、ヒト血清中のＥＰＯ濃度の決定のためにＥＬＩＳＡを検証した。このＥＬＩＳＡは、血漿または血清中のＥＰＯ濃度の定量的決定のために、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮによって開発された直接的な二重抗体サンドイッチアッセイである。ｒＨｕＥＰＯに特異的なモノクローナル（マウス）抗体で予めコーティングされたマイクロタイターウェルを使用して、ＥＰＯを捕捉する。結合したＥＰＯを、抗ＥＰＯポリクローナル（ウサギ）抗体および西洋ワサビペルオキシダーゼ（結合体）で標識する。光学的シグナルを、テトラメチルベンジジン／緩衝化水素過酸化物（基質）の添加によって生成する。発生した色の量は、サンプルまたは標準物中のＥＰＯ濃度に正比例する。Ｒ＆Ｄキットの主要な内部改変は、標準物およびスパイクした品質管理サンプル中の内部組換えヒトＥＰＯの使用であった。このアッセイに使用される標準濃度は、７．８、１５．６、３１．３、５０、６２．５、１００、１２５および２５０ｍＵ／ｍＬであった。
【０１０８】
（検量線の範囲）
臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０に使用されるＲＩＡは、０．１ｍＬサンプルのアリコートを使用して、７．８〜１２５ｍＵ／ｍＬの検量線範囲を有した。ＲＷＪＰＲＩでの検量線の精度は、５．８％以下であり、そしてＰＰＤでは、１０．８％以下であった。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３からの臨床サンプルをアッセイするために使用されるＥＬＩＳＡは、０．１ｍｌサンプルのアリコートを使用して、７．８〜２５０ｍＵ／ｍＬの濃度範囲を、５．３％以下の精度で実証した。
【０１０９】
（定量のより低い限界）
定量のより低い限界（ＬＬＯＱ）（正確かつ精密に定量され得る最低の測定可能な標準濃度）は、ＲＩＡおよびＥＬＩＳＡの両方において７．８ｍＵ／ｍＬであった。
【０１１０】
（品質管理）
両方の方法についての品質管理サンプル（ＱＣ）を、この研究において予期された濃度を反映させるために、ブランク血清において調製した。ＲＷＪＰＲＩでＲＩＡの検証の間にアッセイされたＱＣ濃度は、３５、６０、１００、３００、１０００および２０００ｍＵ／ｍＬであった。ＰＰＤでＲＩＡの検証の間にアッセイされたＱＣ濃度は、１００、５００、２０００および５０００ｍＵ／ｍＬであった。ＥＬＩＳＡについてのＱＣ濃度は、７．８、２０、１００、５００、２０００および５０００ｍＵ／ｍＬであった。ヒト血清における少なくとも３つのレベルのＱＣを、毎日のサンプル分析の間に、研究サンプルによりアッセイした。
【０１１１】
前の臨床研究からの１セットの１６個のプールしたヒト血清サンプルを、ＲＷＪＰＲＩによって調製し、そしてＲＩＡおよびＥＬＩＳＡの両方においてアッセイされるべき盲目サンプルを、ＰＰＤに輸送した。両方の方法により得られた値間で算定された差異相対パーセント（ＲＰＤ）を、（ＱＣの最低レベルに対して）１５．８％またはそれよりも良好であると決定した。
【０１１２】
希釈直線性もまた、実証した。なぜなら、いくつかのサンプルの予期された濃度は、検量線の最高濃度を超えたからである。ＲＷＪＰＲＩでのＲＩＡの検証の間に、希釈時の直線性が、ＱＣサンプルの一連の１：３０〜１：２５６倍の希釈物を使用して確立された。ＰＰＤにて、希釈直線性が、ＱＣサンプルにおける１：２０〜１：２００倍の希釈物、および最高のＥＰＯ濃度を有する１人の被験体からのインビボサンプルにおける１：２０〜１：１００倍の希釈物によるＲＩＡ検証の間に実証された。ＥＬＩＳＡ検証の間に、希釈直線性が、５０００ｍＵ／ｍＬ  ＱＣの１：５０倍の希釈物、１：１００倍の希釈物および１：２００倍の希釈物を使用して、確立された。
【０１１３】
（回収）
このアッセイを、サンプルを抽出することなく行なった。従って、回収の評価は、必要とされなかった。
【０１１４】
（正確さおよび精度）
ＲＩＡにおいて、アッセイ内正確さ（測定濃度と標的濃度との間の差異パーセント）は、ＲＷＪＰＲＩでは１０２．７〜１２７％であり、そしてＰＰＤでは９５．５〜１００．３％の範囲であった。アッセイ間正確さは、ＲＷＪＰＲＩで８１．７〜１０９．８％、そしてＰＰＤで１００〜１０５．６％の範囲であった。ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、アッセイ内正確さは、８７．９〜１０９．９％の範囲であり、そしてアッセイ間正確さは、８３．６〜１１６％の範囲であった。
【０１１５】
ＲＩＡにおいて、アッセイ内精度（変動の係数パーセント）は、ＲＷＪＰＲＩで８．２％以下、そしてＰＰＤで５．３％以下であった。アッセイ間精度は、ＲＷＪＰＲＩで１５．１％以下、そしてＰＰＤで７．２％以下であった。ＥＬＩＳＡにおいて、アッセイ内精度は、１０％以下であり、そしてアッセイ間精度は、１２．９％以下であった。
【０１１６】
（安定性）
ヒト血清中のＥＰＯの安定性を、−２０℃で２０ヶ月、室温で２ヶ月および４回の凍結／融解サイクルの間について実証した。
【０１１７】
（データ分析および受容能の基準）
検証された４つのパラメーターのロジスティック曲線を使用して、両方のアッセイにおける標準的な曲線から、ＥＰＯの未知の血清サンプル濃度を決定した。ＲＷＪＰＲＩで行なわれたＲＩＡからのデータを、Ｍａｃｒｏｍｅｄｉｃソフトウェア（ＩＣＮ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．Ｃｏｓｔａ  Ｍｅｓａ，ＣＡ）を使用して減算した。ＰＰＤで行なわれたＲＩＡおよびＥＬＩＳＡからのデータを、ＰＰＤ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｏｒａｃｌｅ  ７．３知的財産ＲＩＣＯＲＡデータベースを使用して減算した。ＲＩＡアッセイは、ＱＣが名目の２０％以内であり、そして二連の１分あたりのカウントが、６％以下であった場合に、受け入れられ得る。ＥＬＩＳＡアッセイは、ＱＣが正確さおよび精度の両方に関して２０％以内であった場合に、受け入れられ得る。
【０１１８】
（個々の研究の要約）
（パイロット予備的研究、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９）
臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８および臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９は、ＳＣ投与後のＥＰＯの用量比率を研究するために設計された２つのパイロット予備研究であった。研究設計における類似性のために、２つの研究からのデータをプールして、薬物速度論的および薬力学的分析についての用量範囲を最大化する。
【０１１９】
臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８の目的は、単回の４５０−、９００−、１３５０−、または１８００−ＩＵ／ｋｇのＥＰＯ皮下投与後の薬物速度論的および薬力学的プロフィールを決定すること、ならびにこれらのプロフィールを代表的な１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．×４週間投与レジメンのプロフィールと比較することであった。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９の目的は、単回の３００−、６００−、１２００−、または２４００−ＩＵ／ｋｇのＥＰＯのＳＣ用量後のＥＰＯのＰＫプロフィールおよびＰＤプロフィールを決定すること、およびこれらのプロフィールを６００−ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．×４週間投与レジメンのプロフィールと比較することであった。各研究にはプラシーボグループが存在した。
【０１２０】
これら２つの研究において使用されたＥＰＯ処方物は、４０，０００ＩＵ／ｍＬであった。防腐剤を含まないリン酸緩衝化溶液は、２．５ｍｇ／ｍＬヒト血清アルブミン、５．８４ｍｇ／ｍＬ塩化ナトリウム、１．１６４ｍｇ／ｍＬリン酸ナトリウム一塩基二水和物、および２．２２５ｍｇ／ｍＬリン酸ナトリウム二塩基二水和物を含む（処方物番号ＦＤ−２２５１２−０００−Ｊ−４５；製品ロット番号５Ｃ９０３Ｊ；製造年月、１９９５年３月）。これらの２つの研究において使用したプラシーボ処方物は、２．５ｍｇ／ｍＬヒト血清アルブミン、５．８４ｍｇ／ｍＬ塩化ナトリウム、１．１６４ｍｇ／ｍＬリン酸ナトリウム一塩基二水和物、および２．２２５ｍｇ／ｍＬリン酸ナトリウム二塩基二水和物を含む、防腐剤を含まないリン酸緩衝化溶液であった（処方物番号ＦＤ−２２５１２−０００−ＡＢＸ−４５；製品ロット番号５Ｃ９０２Ｊ；製造年月、１９９５年３月）。
【０１２１】
両方の研究は、標識可能（ｏｐｅｎ−ｌａｂｅｌ）であり、無作為化され、プラシーボコントロールを有し、並行のグループであり、単一中心の研究である。３２の健常な被験体が臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８に登録され、そして３０の被験体がこの研究を完了し、そしてＰＫ／ＰＤ分析に含まれた。３０の被験体が臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９に登録され、そしてこの研究を完了した。これらの２つの研究における被験体の人口学的なデータは、図２１に列挙される。
【０１２２】
頻繁な連続的な血液サンプルを、６００−ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．投与レジメンについては第１週と第４週の間、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンについては第４週の間に、血清ＥＰＯ決定のために収集した。血清ＥＰＯ決定のために、週に１回、投与前の血液サンプルもまた、収集した。単回用量グループについて、血清ＥＰＯ決定のための一連の血液サンプルを、４週間の研究期間にわたって取った。血液サンプルをまた、４週間の研究期間の間、血液中の網状赤血球パーセント（ＲＥＴＩ％）、全赤血球（ＲＢＣ）、およびヘモグロビン（ＨＥＭＯ）の決定のために収集した。
【０１２３】
血清ＥＰＯについてのサンプル分析を、ＲＷＪＰＲＩ、Ｒａｒｉｔａｎ，ＮＪ．において実行した。血清中のＥＰＯ濃度の決定のために、ＤＳＬによって製造され、そしてＲＷＪＰＲＩで改変されたＲＩＡキット手順を使用した。この方法およびその確認は、第４節に記載されている。薬物速度論的パラメーターおよび薬力学的パラメーターは、説明的な統計学によって要約される。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９において被験体についての平均ＥＰＯ濃度−時間プロフィールが、それぞれ、図２２および２３において示される。
【０１２４】
単回投与後の血清ＥＰＯ濃度は、１５日目までに内因性のＥＰＯレベルまで低下するが、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンは、処置期間全体を通じて、投与前内因性ＥＰＯレベルより上の血清ＥＰＯ濃度を維持することができた（図２２）。被験体のこのグループについての平均投与前内因性ＥＰＯ濃度は、１４±４ｍＩＵ／ｍＬであり、第４の投薬週の間の第１の投薬、第２の投薬、および第３の投薬の前の平均の谷（ｔｒｏｕｇｈ）の濃度（ベースラインＥＰＯについて補正される）は、それぞれ、１９±９、４８±１８、および５２±２５ｍＩＵ／ｍＬであった。最後の投薬週における第１の投薬、第２の投薬、および第３の投薬後にＣmaxとして投薬される間の血清ＥＰＯの蓄積が存在し、それぞれ、１２８〜１６３、１４１〜２１４、および１５２〜３３４ｍＩＵ／ｍＬの範囲であった。週あたり６００−ＩＵ／ｋｇを１回の投与レジメンは、血清ＥＰＯレベルを投与前の内因性ＥＰＯレベルより上に（投薬週において５〜６日間まで）維持した（図２３）。これらの被験体における平均投与前内因性ＥＰＯレベルは、１３±３ｍＩＵ／ｍＬであり、そして平均定常状態の谷のＥＰＯ濃度（ベースラインＥＰＯについて補正される）は、１１±５ｍＩＵ／ｍＬであった。この投与レジメンは、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンよりも高いＣmaxに達したが、投与前の谷の濃度は、内因性ＥＰＯレベルに近かった。６００−ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．レジメンについてのＣmax値はは第１週と第４週の間、それぞれ、１２０３〜２１４８および９２０〜１４８９ｍＩＵ／ｍＬの範囲であった。平均±ＳＤの薬物速度論的パラメーターおよび薬力学的パラメーターの値は、図２４において列挙される。
【０１２５】
平均Ｃmaxおよび用量の間の直線関係（相関係数＝０．９８２）が存在した（図２５）。このことは、注入部位からのＥＰＯの吸収速度が用量には依存していないことを示す。一方、ＡＵＣと用量との間の関係は曲線状であり、その結果、用量の増加とともにクリアランス（ＣＬ／Ｆ）が減少した。
【０１２６】
４週目の研究期間中の平均網状赤血球パーセント−時間プロフィールを図２７に示す。血液中の網状赤血球パーセントは、単回用量と複数回用量の両方について、薬物投与後約１０日目にその最大値に達した。単回投与後の血液中の網状赤血球パーセントは、１５日目までに投与前のベースラインの値に低下したが、２回の複数回投与レジメン（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および６００ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．）後の血液中における網状赤血球パーセントは、３０日目まで、投与前のベースラインよりも上を良好に維持した。この観察は、予測できないものではない。なぜなら、網状赤血球の段階における細胞の正常の寿命は、骨髄中では約３．５日間であり、そして血液循環中では１〜２日間であるからである（Ｈｉｌｌｍａｎ、前出）。ＥＰＯは、骨髄、コロニー形成単位赤血球（ＣＦＵ−Ｅ）、およびバースト形成単位赤血球（ＢＦＵ−Ｅ）におけるその標的赤血球前駆細胞上の特異的細胞表面レセプターに結合することによって、その生物学的効果を発揮する（Ｄｅｓｓｕｐｒｉｓら、１９８４、Ｂｒ．Ｊ，Ｈａｅｍａｔｏｌ．５６：２９５−３０６およびＷｕら、１９９５、Ｃｅｌｌ、８３：５９−６７）。これらの赤血球前駆体細胞は、最終的に、網状赤血球に成熟し、次いで、これは血液循環中に放出される。これらの２つの研究からのデータは、単回投与のＥＰＯによる刺激から生成した網状赤血球は、血液循環中に約７〜１０日間見られることを示す。血液循環中で１〜２日間の寿命を有するので、単回用量による刺激から生成される網状赤血球は、１５日目までに血液循環中から消失することが予想される。従って、網状赤血球の連続生成は、血清中のＥＰＯが連続的に（例えば、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後）または断続的に（例えば、６００−ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．投与レジメン後）、内因性ＥＰＯ濃度より上に維持されることを必要とする。
【０１２７】
単回用量データについて、ＥＰＯの平均ＡＵＣ［ＡＵＣ（０〜２９日目）］が増加するにつれて、平均ＡＵＣの網状赤血球パーセント（ＡＵＣ［ＵＮＣＯＲＲ
ＲＥＴＩ］）の増加についての傾向が存在した（血清ＥＰＯ濃度は、投与前ＥＰＯレベルについて補正され、そしてＡＵＣ値は、４週間の期間にわたって算出された）。類似のＡＵＣ（０〜２９日目）の値の単回用量データと比較して、複数回用量データが、より高い平均ＡＵＣ（ＵＮＣＯＲＲ  ＲＥＴＩ）の値を有する。従って、このデータは、ＥＰＯの複数回用量が、単回用量よりも網状赤血球の生成を刺激する際により有効であることを示唆する。
【０１２８】
ＥＰＯが、網状赤血球の生成においてＡＵＣに関連して増加することに関わらず、単回用量投与後にはヘモグロビンレベルの明白な増加は存在しなかった。単回投薬後のヘモグロビンレベルの増加の欠如の理由は、この時点では知られていない。一方、両方の複数回用量レジメンは、定常的なヘモグロビンレベルの上昇を送達し得、そしてベースラインからのヘモグロビンの変化のパターンは、２つの複数回用量レジメンと同様であった（図２８）。
【０１２９】
結論として、この研究からの結果は、ＥＰＯに対する薬理学的応答は、用量および投与レジメンの関数であることを示す。ＳＣ投与後のＥＰＯの吸収速度は、用量には依存していなかった。ＥＰＯのクリアランスは、用量依存的であり、増加する用量とともに減少した。単回用量についてのＡＵＣ（０〜２９日目）との応答の増加する傾向（ＡＵＣ［ＵＮＣＯＲＲ  ＲＥＴＩ］）が存在した。連続した薬理学的応答（連続的な網状赤血球の生成およびヘモグロビンの保持された上昇）は、ＥＰＯ血清濃度が連続的に（例えば、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後）または断続的に（例えば、６００−ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．投与レジメン後）、内因性ＥＰＯ濃度より上に維持されることを必要とする。
【０１３０】
（臨床研究Ｅｐｏ−ＰＨＩ−３７０）
本研究の第１の目的は、１５０  ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．または４０，０００  ＩＵｑ．ｗ．の投与後、ＥＰＯの薬物速度論的プロフィールを評価すること、および２つの投与レジメンが、臨床的な効力の尺度としてヘモグロビンを使用して、同様の臨床的結果を送達することを実証することであった。第２の目的は、１５０  ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．または４０，０００  ＩＵｑ．ｗ．の投与後、ＥＰＯの薬力学的プロフィールを評価すること、および２つのＥＰＯ投与レジメン間の耐性パラメーターおよび安全性パラメーターを比較することであった。
【０１３１】
本研究において使用されるＥＰＯを、単回使用バイアル中の、滅菌した、無色の、防腐剤を含まない、クエン酸緩衝化溶液として処方した。ＥＰＯ  １０，０００  ＩＵ／ｍＬ（処方物番号ＦＤ−２２５１２−０００  Ｃ−４５、ロット番号Ｄ０００１２３）を、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．腕において使用し、そしてＥＰＯ  ４０，０００ＩＵ／ｍＬ（処方物番号ＦＤ−２２５１２−０００
ＡＣ−４５、ロット番号Ｄ０００１７５）を使用して、４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．腕において使用した。
【０１３２】
これは、４９の健常な被験体（４９人が登録され、そして安全性について分析され；４６人が研究を完了しそしてＰＫ／ＰＤについて分析された）において行われた、単一中心の、標識可能な、並行した設計の、無作為化された研究であった。被験体は、２つの処置グループに無作為化され、そして４週間にわたって、標準的な癌レジメン（１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｓ．ｃ．ｔ．ｉ．ｗ．）または毎週固定された用量レジメン（４０，０００−ＩＵ  ｓ．ｃ．ｑ．ｗ．）のいずれかとしてＥＰＯを受容した。血液サンプルを、ＥＰＯ血清濃度の決定のために、投与前、１日目、８日目、１５日目、および４週間目の間に引き出した。血液サンプルをまた、網状赤血球パーセント、ヘモグロビン、および全赤血球数の決定のために、ベースラインで（１日目）および４週間の研究期間の間にわたる特定の時点で引き出した。
【０１３３】
ＰＫ／ＰＤについて分析した４６の被験体のうち、２４の被験体（雄性９人および雌性１５人）を、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．腕に登録し、そして２２の被験体（雄性１４人および雌性８人）を、４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．腕に登録した。人口学的データおよびこれらの被験体のベースラインヘモグロビンを、図２９に列挙する。
【０１３４】
血清ＥＰＯについてのサンプル分析を、ＰＰＤ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＶＡにおいて実行した。ＤＳＬによって製造され、そしてＲＷＪＰＲＩで改変されたＲＩＡキット手順を、血清中のＥＰＯ濃度の決定のために使用した。
【０１３５】
本研究のサンプルサイズは、統計学的な考慮に基づいたものではなかった。要約的な統計学は、処置グループおよび日数によって、薬力学的なパラメーターについて提供され：平均、標準偏差、メジアン、範囲、および標準誤差を算出した。１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．後のＥＰＯのＰＤプロフィールを比較するために、二元配置に適切な分散モデルの分析をデータに当てはめた。これは、目的のＰＤパラメーター（網状赤血球パーセント、ヘモグロビン、および全赤血球数のｌｏｇ変換したＡＵＣ））の１つを伴い、これは、従属変数および処理、性別、および固定された効果としての処置による性別と同様である。処置による性別の相互作用の効果は３つすべてのパラメーターについて有意ではないことが見出され、相互作用の期間を有さないモデルの減少はデータに適合された。そして処置および性別の効果を、残存するエラーの用語を使用して５％レベルで試験した。４００００ＩＵ／週〜１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．までの手段の比率、および雌性から雄性への手段の比率を、ＡＮＯＶＡモデルから得られた幾何学的最小二乗法手段を使用して見積もった。
【０１３６】
研究期間の第４週の間の１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．グループおよび４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．グループについての平均血清ＥＰＯ濃度−時間プロフィール（投与前内因性ＥＰＯレベルについて補正していない）を、図３０に示す。
【０１３７】
１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンの第４週の間、ＥＰＯピーク血清濃度（ベースラインＥＰＯについて補正している）は、７８〜４４７ｍＩＵ／ｍＬの範囲（平均Ｃmax＝１９１±１００ｍＩＵ／ｍＬ）であり、谷の濃度は７．３〜８８ｍＩＵ／ｍＬ（平均谷濃度（Ｃmin＝３９±１８ｍＩＵ／ｍＬ））であった。４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンの第４週の間において、血清ＥＰＯピーク濃度（ベースラインＥＰＯについて補正している）は、１９７〜１９９２ｍＩＬ／ｍＬの範囲（平均Ｃmax＝７８５±４２７ｍＩＵ／ｍＬ）であり、そして９〜２４時間の範囲の時点（平均ｔmax＝１８±５時間）で達成され、次いで、２９日目の投薬週の終わりには、多重指数関数的に谷のレベル（分析方法の定量限界（７．８ｍＩＵ／ｍＬ）より下の値から４４  ＩＵ／ｍＬ（２９日目の平均谷濃度＝１９±１０  ｍＩＵ／ｍＬ）までの範囲）にまで低下する。４週の研究期間にわたる平均Ｃminは、１３±９ｍＩＵ／ｍＬであった。２つの投与レジメンの終末相は、それぞれ、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．の投薬レジメンについて、３１．８±１３．４時間（Ｎ＝１３）および３９．３±７．１時間（Ｎ＝３）の平均半減期で、並行しているようであった。
【０１３８】
平均（ＳＤ）（％ＣＶ）薬物速度論的パラメーターの値を、図３１に列挙する。
【０１３９】
１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投薬レジメン後に得られたバイオアベイラビリティに対する４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投薬レジメンのバイオアベイラビリティを、以下の式を使用して算出した：
【０１４０】
【数６】
2005247858.tif 000007
【０１４１】
平均体重を、研究を完了した被験体からのデータを使用して算出した。
【０１４２】
１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投薬レジメン後のバイオアベイラビリティに対する４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投薬レジメン後のＥＰＯのバイオアベイラビリティは、１７６％であった。
【０１４３】
網状赤血球パーセントおよびヘモグロビン濃度についての、ベースラインからの平均変化対研究日数の直線プロットを、図３２および３３にそれぞれ示す。平均薬力学的パラメーター値（ベースライン値について補正している）を、図３４に示す。２つの投薬レジメンの動的な応答は、４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投薬レジメンについての血清ＥＰＯ  ＡＵＣが、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投薬レジメンについてのそれよりも大きかったという事実にも関わらず同様であった。２つの投与レジメン間で、ヘモグロビンのＡＵＣおよび赤血球のＡＵＣにおいて統計学的に有意な鎖は存在しなかったが、４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメン後の網状赤血球パーセントのＡＵＣは、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後のそれよりも統計学的に大きかった（ｐ＜０．０５）。雄性の被験体と雌性の被験体の間で、網状赤血球パーセントのＡＵＣ、ヘモグロビンのＡＵＣ、および赤血球のＡＵＣ中で統計学的に有意な差は存在しなかった。
【０１４４】
１ヶ月の研究期間にわたるヘモグロビンおよび全赤血球の変化の時間プロフィールは、血清中のＥＰＯの曝露の違い（すなわち、ＡＵＣ［０−１６８］）に関わらず、そして４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．レジメンについて網状赤血球の生成がより高いこと（曲線の下の領域によって測定されるように）に関わらず、２つの投与レジメン間で同様であった。ヘモグロビンのＡＵＣおよび１ヶ月の研究期間にわたる全赤血球のＡＵＣは、２つの投与レジメンについて同様であった。この研究において、雄性の被験体および雌性の被験体についての薬力学的応答において差は存在しなかった。
【０１４５】
本研究のデータは、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後および４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメン後のヘモグロビン応答が同様であること、および２つの投与レジメンが交換可能に使用され得ることを示唆するが、無作為化の問題、研究への参加の際のヘモグロビンレベルの変動が存在し、そして多くの被験体は、開始時に鉄が不足している（トランスフェリン飽和値によって示されるように）。研究の部位での無作為化の失敗は、各処置グループ中での雄性および雌性の不均衡な分布を生じ、そして平均ベースラインヘモグロビン値の不均衡に寄与する。本研究のポジティブな知見を適切に確証するために、反復研究を行うことが決定された（臨床研究ＥＰＯ−３７３）。
【０１４６】
（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３）
本研究の第１の目的は、１５０  ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．または４０，０００  ＩＵｑ．ｗ．の投与後、ＥＰＯのＰＫプロフィールを評価すること、および２つの投与レジメンが、類似の臨床的な結果を送達することを実証することであった。第２の目的は、１５０  ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．または４０，０００  ＩＵｑ．ｗ．の投与後、ＥＰＯのＰＤプロフィールを評価すること、および２つのＥＰＯ投与レジメン間の耐性パラメーターおよび安全パラメーターを比較することであった。
【０１４７】
本研究において使用されるＥＰＯは、単回使用バイアル中の、滅菌した、無色の、防腐剤を含まない、リン酸緩衝化溶液として処方された。ＥＰＯ１０，０００ＩＵ／ｍＬ（処方物番号ＦＤ−２２５１２−０００  Ｔ−４５、ロット番号９９ＫＳ０７７）を、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．腕において使用し、そしてＥＰＯ  ４０，０００ＩＵ／ｍＬ（処方物番号ＦＤ−２２５１２−０００  ＡＡ−４５、ロット番号９９ＫＳ０９１）を使用して、４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．腕において使用した。
【０１４８】
これは、３６の健常な被験体（３６人が登録され、そして安全について分析され；３４人が研究を完了しそしてＰＫ／ＰＤについて分析された）において行われた、単一中心の、標識可能な、並行した設計の、無作為化された研究であった。被験体は、２つの処置グループに無作為化され、そして４週間にわたって、標準的な癌レジメン（１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｓ．ｃ．ｔ．ｉ．ｗ．）または毎週固定された用量レジメン（４０，０００  ＩＵ  ｑ．ｗ．）のいずれかとしてＥＰＯを受容した。血液サンプルを、血清ＥＰＯ濃度の決定のために、投与前、１日目、８日目、１５日目、および４週間目の間に引き出した。血液サンプルをまた、網状赤血球パーセント、ヘモグロビン、および全赤血球数の決定のために、ベースラインで（１日目）および４週間の研究期間の間にわたる特定の時点で引き出した。
【０１４９】
ＰＫ／ＰＤについて分析した３４の被験体のうち、１７の被験体（雄性９人および雌性８人）を、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．腕に登録し、そして１７の被験体（雄性１４人および雌性８人）を、４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．腕に登録した。人口学的データおよびこれらの被験体のベースラインヘモグロビンを、図３５に列挙する。
【０１５０】
Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（Ｒ＆Ｄ）、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮによって製造され、ＲＷＪＰＲＩにおいて改変され、そしてもともとのＲＩＡを用いて、ＰＰＤ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＶＡにおいて相互に確証されたＥＬＩＳＡキットを、血清中のＥＰＯ濃度の決定のために使用した。
【０１５１】
本研究のサンプルサイズは、統計学的な考慮に基づいたものではなかった。要約的な統計学は、薬力学的パラメーターについてのグループおよび日数の処理によって提供され：平均、標準偏差、メジアン、範囲、および標準誤差を算出した。１５０  ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および４０，０００  ＩＵ  ｓ．ｃ．ｑ．ｗ．後のＥＰＯの薬力学的プロフィールを比較するために、二元配置に適切な分散モデルの分析をデータに当てはめた。これは、目的の薬力学的パラメーター（網状赤血球パーセント、ヘモグロビン、および全赤血球数のｌｏｇ変換したＡＵＣ））の１つを伴い、これは、従属変数および処理、性別、および固定された効果としての処置による性別と同様である。処置による性別の相互作用の効果は３つすべてのパラメーターについて有意ではないことが見出され、相互作用の期間を有さないモデルの減少はデータに適合された。そして処置および性別の効果は、残存するエラーの用語を使用して５％レベルで試験された。４００００  ＩＵ／週〜１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．までの手段の比率、および雌性から雄性への手段の比率を、ＡＮＯＶＡモデルから得られた幾何学的最小二乗法を使用して見積もった。
【０１５２】
研究期間の第４週の間の１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．グループおよび４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．グループについての平均血清ＥＰＯ濃度−時間プロフィール（投与前内因性ＥＰＯレベルについて補正していない）を、図３６に示す。
【０１５３】
１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンの第４週の間、血清中のＥＰＯ濃度（ベースラインＥＰＯについて補正している）は、７５〜２８４ｍＩＵ／ｍＬピーク濃度の範囲（平均Ｃmax＝１４３±５４ｍＩＵ／ｍＬ）であり、谷のレベルの値は、分析方法の定量限界（７．８ｍＩＵ／ｍＬ）より下の値から４０
ＩＵ／ｍＬまでの範囲であった（平均谷濃度（Ｃmin＝１８±９ｍＩＵ／ｍＬ））。４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンの第４週の間において、血清ＥＰＯ濃度（ベースラインＥＰＯについて補正している）は、１〜２４時間の範囲の時点（平均ｔmax＝１６±８時間）でピーク濃度（平均Ｃmax＝８６１±４４５ｍＩＵ／ｍＬ）に達し、次いで、２９日目の投与週の終わりには、多重指数関数的に谷のレベルの値は、分析方法の定量限界（７．８ｍＩＵ／ｍＬ）より下の値から５．９ｍＩＵ／ｍＬ（２９日目の平均谷濃度＝２．０±１．５ｍＩＵ／ｍＬ）までの範囲）にまで低下する。第４週の研究期間の間の４０，０００  ＩＵ
ｑ．ｗ．の平均Ｃminは、３．８±４．３ｍＩＵ／ｍＬであった。２つの投与レジメンの終末相は、それぞれ、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．の投薬量レジメンについて、１９．４±８．１時間（Ｎ＝９）および１５．０±６．１時間（Ｎ＝９）の平均半減期値で、並行しているようであった。
【０１５４】
平均（ＳＤ）（％ＣＶ）薬物速度論的パラメーターの値を、図３７に列挙する。
【０１５５】
１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後に得られたバイオアベイラビリティに対する４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンのバイオアベイラビリティを、以下の式を使用して算出した：
【０１５６】
【数７】
2005247858.tif 000008
【０１５７】
平均体重を、研究を完了した被験体からのデータを使用して算出した。
【０１５８】
１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後のＥＰＯのバイオアベイラビリティに対する４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメン後のＥＰＯのバイオアベイラビリティは、２３９％であった。
【０１５９】
網状赤血球パーセント、ヘモグロビン濃度、および全赤血球数についての、ベースラインからの平均変化対研究日数の直線プロットを、図３８、３９、および４０にそれぞれ示す。
【０１６０】
平均薬力学的パラメーター値（ベースライン値について補正している）を、図４１に示す。２つの投与レジメンの動的な応答は、４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンについての血清ＥＰＯ  ＡＵＣが、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンについてのそれよりも大きかったという事実にも関わらず同様であった。２つの投与レジメン間で、網状赤血球パーセントのＡＵＣ、ヘモグロビンのＡＵＣおよび赤血球のＡＵＣにおいて統計学的に有意な差は存在しなかった。雄性の被験体と雌性の被験体の間で、網状赤血球パーセントのＡＵＣ中で統計学的に有意な差は存在しなかった（ｐ＞０．０５）。しかし、ヘモグロビンのＡＵＣおよび赤血球のＡＵＣは、雄性の被験体におけるよりも、雌性の被験体で統計学的により大きかった（それぞれ、ｐ＝０．０３８および０．０４２）。これらの差は、臨床的に有意ではなかった。
【０１６１】
１ヶ月の研究期間にわたる網状赤血球パーセント、ヘモグロビン、および全赤血球の変化の時間プロフィールは、血清中のＥＰＯの曝露の違い（ＡＵＣ［０−１６８］による）に関わらず、２つの投与レジメン間で同様であった。さらに、１ヶ月の研究期間にわたる網状赤血球パーセントのＡＵＣ、ヘモグロビンのＡＵＣ、および全赤血球のＡＵＣには、２つの投与レジメンについて、統計学的に有意な差がなかった。この研究において、雄性の被験体および雌性の被験体についての薬力学的応答の違いは存在しなかった。本研究のデータは、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後および４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメン後のヘモグロビン応答が同様であり、それによって２つの投与レジメンが交換可能に使用され得ることの根拠を示す。
【０１６２】
結論として、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後および４０，０００−ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメン後の血清中のＥＰＯの全体の曝露における予測される差が存在した。ヘモグロビン応答は同様であり、それによって、２つの投与レジメンが交換可能に使用され得ることの根拠を示す。従って、本研究は、週に１回のＥＰＯ投与レジメンが使用され得ることを示す。このレジメンは、一般に使用される投与レジメンに付随する欠点を克服する。好ましい実施形態において、４０，０００  ＩＵ用量は、これらの臨床研究に基づいて意図される。本発明はまた、２週間おきに１回の投与レジメン（例えば、８０，０００〜１２０，０００  ＩＵで）を意図する。特定の実施形態において、ＥＰＯの２週間おきに１回の用量が使用され得る。
【０１６３】
（結果）
（ＩＶ投与後の薬物速度論）
健常なボランティアまたは損なわれた腎機能を有する患者におけるＩＶ投与後、ｒ−ＨｕＥＰＯが、血漿の容積に匹敵する容積で分配され、そして血漿濃縮物は、４〜１１．２時間の範囲の平均半減期値で崩壊（ｄｅｃａｙ）する。これは、反復投与後には短くなることが報告されている（Ｍａｃｄｏｕｇａｌｌら、１９９１、Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．、２０：９９−１１３）。健常な被験体において５０〜１０００  ＩＵ／ｋｇの単回の静脈内投薬後にＣmaxおよびＡＵＣ値の用量に比例する増加が存在した（Ｆｌａｈａｒｔｙら、１９９０、Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．、４７：５５７−６４）。そして、クリアランス（ＣＬ）は、健常な被験体における１０−、１００−、および５００−ＩＵ／ｋｇ用量の単回のボーラスの静脈内投与後に、用量には依存していないことが報告された（それぞれ、５．８９±１．５３、７．０２±１．１４、および６．８８±１．１９ｍＬ／ｈ／ｋｇの平均値）（Ｖｅｎｇ−Ｐｅｎｄｅｒｓｅｎら、１９９５、Ｊ．Ｐｈａｒｍａ．Ｓｃｉ．８４（６）：７６０−７６７）。しかし、クリアランスはまた、単回静脈内１０−ＩＵ／ｋｇ投薬後には、健常な被験体における１００および５００  ＩＵ／ｋｇの単回の静脈内投薬後（それぞれ、ＣＬ＝７．９および６．２ｍＬ／ｈ／ｋｇ）よりも高い（１３．１ｍＬ／ｈ／ｋｇ）ことが報告された（Ｗｉｄｎｅｓｓら、１９９６、Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．８０（１）：１４０−１４８）。
【０１６４】
（ＳＣ投与後の薬物速度論）
臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０、およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３からのＳＣ投与後の薬物速度論的パラメーターの要約を、図４２に示す。
【０１６５】
単回または週に１回のＳＣ投与後、血清ＥＰＯ濃度は、９〜３６時間の範囲の時間（ｔmax）において最大値に達した。平均ｔmaxは、異なる単回用量で同様であり、１５．６±５．８〜２８．８±７．８時間の範囲であった。平均Ｃmaxと用量との間には直線関係が存在した（相関係数＝０．９８２）。このことは、注入部位からのＥＰＯの吸収速度が用量に依存していないことを示す。一方、ＡＵＣと用量との間の関係は、曲線関係であり、その結果、クリアランス（ＣＬ／Ｆ）は、用量の増加とともに減少する（Ｃｈｅｕｎｇら、１９９８、Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．，６４：４１２−４２３）。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０からのデータは、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンが、４０，０００−ＩＵｑ．ｗ．の毎週の投与レジメンよりも高いＣＬ／Ｆ値を有したことを示す。そして、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９におけるデータは、１５０−ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンが、６００−ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．投与レジメンよりも高いＣＬ／Ｆ値を有したことを示す。
【０１６６】
図４２に示すように、ＥＰＯは、ＩＶ投与後よりもＳＣ投与後により遅い速度で低下する。半減期値は、３００〜２４００ＩＵ／ｋｇの単回ＳＣ用量後、１５．９〜２２１時間の範囲であり、そして、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメン後の平均半減期値は、それぞれ、１９．４±８．１および１５．０±６．１時間であった。半減期値は、この用量範囲研究において用量独立であった。ＩＶ投与と比較してＳＣ投与後に観察されたより長い半減期値は、おそらく、皮下組織からの吸収半減期の反映である。
【０１６７】
単回用量投与後の血清ＥＰＯ濃度は、１５日目まで（低用量に関してより早い）に内因性ＥＰＯレベルまで低下したが、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンは、処置期間を通して投与前（ｐｒｅｄｏｓｅ）の内因性ＥＰＯレベルより上の血清ＥＰＯ濃度を維持することができた（Ｃｈｅｕｎｇ、前出）。６００ＩＵ／ｋｇ／ｍＬおよび４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．の毎週の投与レジメンは、投薬週の５〜６日目まで、投与前の内因性ＥＰＯレベルより上の血清ＥＰＯレベルを維持した（Ｃｈｅｕｎｇ、前出）。これらの毎週の投与レジメンは、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンよりもより高いＣmaxを達成したが、投与前の最低値濃度は、内因性ＥＰＯレベルと近かった。
【０１６８】
（ＳＣ投与後のＥＰＯの薬力学）
ＥＰＯの単回（３００〜２４００ＩＵ／ｋｇ）または複数回（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．、６００ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．または４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．）ＳＣ投与後、パーセント網状赤血球は、３〜４日目までに増加し始めた。単回用量投与後のパーセント網状赤血球は、６〜１２日目にその最大値に達したが（Ｃｈｅｕｎｇ、前出）、一方、複数回用量レジメンのパーセント網状赤血球は、８日目から２９日目の最後の血液サンプル点までの範囲の時にピーク値に達した（Ｃｈｅｕｎｇ、前出）。全ての複数回用量レジメンは、緩やかに刺激されたが、パーセント網状赤血球における増加（約２〜７％）を維持した。この増加は、２２日目〜２９日目まで投与前のベースライン値より上に維持されたが、単回用量投与後のパーセント網状赤血球は、１５日目〜２２日目までにベースライン値に減少した（Ｃｈｅｕｎｇ、前出）。
【０１６９】
パーセント網状赤血球の（ベースラインからの）平均ＡＵＣ変化［ＡＵＣ（ＲＥＴＩ）］とＥＰＯの平均ＡＵＣ（投与前の内因性ＥＰＯレベルに対して補正）［ＡＵＣ（０日〜２９日）］との間の関係は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９のデータに関して図４３に、そして臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３のデータに関して図４４に示す。ベースラインからのパーセント網状赤血球におけるＡＵＣ値の両方の変化およびＥＰＯは、４週間に渡って算出した。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９におけるＡＵＣ（ＲＥＴＩ）値は、網状赤血球のサンプル回収時間が異なる場合、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３におけるＡＵＣ（ＲＥＴＩ）値と比較され得ない。サンプリングスケジュールは、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９においてより少なく、そしてＡＵＣ（ＲＥＴＩ）値は、過小評価されかもしれない。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９からのデータは、単回用量データに関して、ＥＰＯの平均ＡＵＣ（０日〜２９日）が増加する場合、平均ＡＵＣ（ＲＥＴＩ）において増加傾向があることを示した。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３からのデータに基づく複数回用量レジメンに関して、ＥＰＯの平均ＡＵＣ（０日〜２９日）が増加する場合、平均ＡＵＣ（ＲＥＴＩ）の増加傾向がまた存在した。
【０１７０】
１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．レジメンに対する１ヶ月での総ＥＰＯ投与は、１８００ＩＵ／ｋｇであり、そして６００ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．レジメンに対しては、約２４００ＩＵ／ｋｇであった。１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．レジメンは、１８００ＩＵ／ｋｇ単回用量レジメンよりもはるかに小さい平均ＥＰＯ
ＡＵＣ（０日〜２９日）値を有したが、これは、より小さい平均ＡＵＣ（ＲＥＴＩ）値を有した。同様に、６００ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．レジメンは、２４００ＩＵ／ｋｇ単回用量レジメンよりもはるかに小さいＥＰＯ  ＡＵＣ（０日〜２９日）を有したが、これはまた、より小さい平均ＡＵＧ（ＲＥＴＩ）値を有した。従って、複数回投与後のＥＰＯ（単位ＡＵＧ曝露当たり）は、網状赤血球産生において、単回用量後よりもより効率的である。
【０１７１】
網状赤血球の産生におけるＥＰＯ  ＡＵＣ関連増加にもかかわらず、単回用量投与後、ヘモグロビンに明らかな増加は存在しなかった。一方、複数回用量レジメンは、ヘモグロビンの安定な増加を送達し得、そしてヘモグロビンの増加パターンは、中心的な臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３（図４５）および補助的臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０（図４６）に示されるように、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．と４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンとの間で類似し、試験的な臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９に示されるように、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．と６００ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．レジメンとの間で類似していた。単回投薬後のヘモグロビン応答の欠損は、現時点で知られていない。これに対して２つの可能な説明が存在する：単回用量後の網状赤血球における増加（２４００ＩＵ／ｋｇ単回用量後のパーセント網状赤血球の最大増加は、６．６％）は、ヘモグロビンにおける任意の実質的な増加を誘導するに十分長く維持されないのかもしれない；そして未熟赤血球の生存が血液循環中のＥＰＯの連続した存在に依存することが仮定される（Ａｌｆｒｅｙら、１９９７、Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ、３４９：１３８９−１３９０）。単回用量投与後、網状赤血球は６〜１２日の範囲の時にピークとなり、そして１５日目までの時に投与前のレベルに戻った。網状赤血球段階の細胞の寿命は、血液循環中で約１〜２日である（Ｈｉｌｌｍａｎら、１９６７、Ｓｅｍ  Ｈａｅｍａｔｏｌ．，４（４）：３２７−３３６）。
【０１７２】
従って、未熟赤血球が、血液循環中に投薬後約７〜１４日で現れることが期待される。それまでに、単回用量投与後のＥＰＯ濃度は、内因性レベルであり、これは、赤血球生存を維持するために十分なＥＰＯが血液循環中に存在しないことに起因して、未熟赤血球の死を引き起こし得る。一方、ＥＰＯ濃度は、ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後連続してか、または毎週の投与レジメン後断続的に、内因性レベルより上に維持され、したがって未熟赤血球の生存が維持され、研究期間の間ヘモグロビンの連続した増加が誘導された。
【０１７３】
従って、多数の薬理学的に産生される未熟赤血球の生存を維持するためには、血清ＥＰＯ濃度が内因性レベルよりも上でなければならない。
【０１７４】
（結論）
結論として、健康な被験体におけるこれら４つの１相研究からのデータは、ヒトにおけるＥＰＯの薬物速度論および薬力学が、ＳＣ投与後、非線形であることを示す。これらの研究からのデータはまた、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンが、週当たり４０，０００ＩＵの投与レジメンと同様のヘモグロビン応答を送達し、これによって２つの投与レジメンが交換可能に使用され得ることが保証されることを、明らかに示す。従って、ＥＰＯは、２回の断続的な週に対して約４０，０００ＩＵ／ｋｇで１週間に１回投与される。最初のＥＰＯ投薬は、ＲＢＣ前駆細胞からの網状赤血球の産生を容易にする。第２のＥＰＯ投薬は、患者の網状赤血球薬力学プロフィールと合うように投与される。第２のＥＰＯ投薬は、最初の投薬後６〜１０日で投与され、そして好ましくは最初のＥＰＯ投薬後、網状赤血球濃度のピーク時に投与される。
【０１７５】
（実施例２：１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与後のＥＰＯ  ＰＫ／ＰＤプロフィールの評価）
癌のような特定の徴候において、被験体は、１５０ＩＵ／ｋｇエポエチンαｔ．ｉ．ｗ．で処置される。従って、現在承認された投薬スケジュールをより簡便な投薬スケジュールおよびレジメン（すなわち、１週間当たり１回または２週間毎に１回）に変化させることは重要な目標のままである。より少ない頻度の投与は、利用者の承認および利便性を改善する。
【０１７６】
エポエチンαの複数回投与レジメンの薬物速度論的および薬力学的特性は、前の実施例で定義した（ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９）。このデータは、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および６００ＩＵ／ｋｇ／週の投与レジメンが類似した薬力学応答（例えば、ヘモグロビンの増加）を有することを示唆する。従って、エポエチンαは、潜在的に、毎週ｋｇ用量当たり投与され得る。６００ＩＵ／ｋｇは、７０ｋｇのヒトに対して４２，０００ＩＵに等しいので、本研究は、１週当たり４０，０００ＩＵの固定された投与レジメンが、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．の承認された投与レジメンに匹敵する薬力学的応答を送達することを示すように実施された。
【０１７７】
本研究の第１の目標は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．または４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与後のエポエチンαの薬物速度論的プロフィールを評価すること、そして２つの投与レジメンが類似した臨床結果を送達することを示すことであった。
【０１７８】
第２の目標は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．または４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与後のエポエチンαの薬力学プロフィールを評価すること、そして２つのエポエチンα投与レジメン間の寛容および安全性パラメーターを比較することであった。
【０１７９】
３６人の健康な成人ボランティア（１８人の男性および１８人の女性）を、この開放標識、平行設計、無作為化、単回中心の研究に登録した。被験体は、１８歳と４５歳との間の年齢であり、女性に関しては包括的に１２．０と１４．０ｇ／ｄＬとの間のヘモグロビンレベル、そして男性に関しては包括的に１３．０と１４．０ｇ／ｄＬとの間のヘモグロビンレベルを有した。被験体を、封入および除外の判断基準に基づいて研究資格に対してスクリーニングし、そして２つの処置群の内の１つの無作為化した。群１は、４週間、１５０ＩＵ／ｋｇのＳＣ  ＥＰＯ、ｔ．ｉ．ｗ．の標準的な癌レジメンを受けた。群２は、４週間、４０，０００ＩＵエポエチンα  ｓ．ｃ．ｑ．ｗ．の毎週の固定された用量レジメンを受けた。
【０１８０】
被験体は、研究の間毎日、経口の鉄補充（２カプセルのＦｅｒｒｏ−Ｇｒａｄ（登録商標）（各々が１０５ｍｇの鉄元素を含む））を受けた。
【０１８１】
血液サンプルを、血清エリスロポエチン濃度、完全血球算定（ＣＢＣ）（パーセント網状赤血球を含む）、ヘモグロビン濃度およびヘマトクリット値の測定に関する研究の間、ベースラインおよび特定の時点で採取した。安全性評価は、処置で出現した有害事象、臨床実験室試験における変化（血液学および化学）、生命徴候測定および身体的検査結果の、発生数ならびに型に基づいた。さらに、血清の鉄、算出されたトランスフェリン飽和およびフェリチン濃度を、研究の間モニターした。
【０１８２】
安全性は、処置で出現した有害事象の発生数および重篤度、ならびに身体的検査の発見、生命徴候測定および臨床実験室パラメーターにおける事前の試験からの変化に基づいた。
【０１８３】
プロトコールは、全ての被験体が開示された後に修正した。修正は、封入および除外の判断基準、共同治療、実験室パラメーター、尿検査、生命徴候測定および４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群に対する投与レジメンを明確にした。
【０１８４】
１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．群に無作為化された３人の被験体および４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群中の１人の被験体は、封入／除外判断基準に特定化される制限（１４．０ｇ／ｄＬ）をわずかに超えたヘモグロビン侵入判断基準を有したが、本研究からは除外した。１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．群中の被験体２０１２、２０１５および２０１６は、１４．１ｇ／ｄＬのスクリーニングヘモグロビンを有し；４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群における被験体２０１８は、１４．２ｇ／ｄＬのスクリーニングヘモグロビンを有した。４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群の４人の被験体は、除外判断基準に特定化される４５ｎｇ／ｍＬの制限より下のスクリーニングフェリチン値を有し：被験体１００６は、４０ｎｇ／ｍＬのスクリーニング値を有し、被験体１０１０は、４３ｎｇ／ｍＬのスクリーニング値を有し、そして被験体１０１５および２０１１は、４４ｎｇ／ｍＬのスクリーニング値を有した。各処置群における１つの被験体（１５０ＩＵ／ｋｇ群の被験体２０１５および４０，０００ＩＵ群の被験体２０１４）は、１９％のスクリーニングトランスフェリン飽和値を有し、≧２０％の封入判断基準よりわずかに下であった。最大値より０．１ｋｇ上の体重の被験体２００２（４０，０００ＩＵ）は、彼の体重に対するプロトコールの封入判断基準によって許容した。さらに、被験体２０１６（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）は、エポエチンα治療の開始４日前に漢方の睡眠錠剤を摂っていた。
【０１８５】
（研究薬剤の情報）
エポエチンαは、滅菌、無色、保存料なし、リン酸緩衝化溶液、単回使用バイアルで供給されるように処方された。市販の製品を本研究で使用し、商業的にラベルされていた。エポエチンα  １０，０００ＩＵ／ｍＬ溶液は、処方番号ＦＤ２２５１２−０００−Ｔ−４５、ロット番号９９ＫＳ０７７であり、そしてエポエチンα４０，０００ＩＵ／ｍＬ溶液は、処方番号ＦＤ２２５１２−０００−ＡＡ−４５、ロット番号９９ＫＳ０９１であった。
【０１８６】
（投薬量および投与）
被験体は、１日目の研究薬物の投与の少なくとも１２時間前に本発明者らの施設に入場した。被験体を、１日目の投与前少なくとも１０時間閉じ込め；水は自由に利用可能であった。被験体を無作為に割り当て、２つの研究薬物のうちの１つを以下のように受けた：
【０１８７】
【表１】
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【０１８８】
用量群１に関して、７０ｋｇ被験体に対する注射の体積は、約１．０ｍＬであった。
用量群２に関して、注射の体積は、ちょうど１ｍＬであった。
【０１８９】
処置相の間の任意の時に、任意の被験体に対するヘモグロビンが１８．０ｇ／ｄＬに等しいかまたはこれを超える場合、第１の知見を確認するために第２のサンプルを採取した。確認された場合、静脈切開を実施してヘモグロビンレベルを減少させた；最初は、１単位の血液を除去した。ヘモグロビンを再びもう一度測定し、被験体を安定化させた。ヘモグロビンレベルがまだ１８．０ｇ／ｄＬまたはそれより大きい場合、１単位の血液に対して別の０．５単位の血液を除去し、そしてヘモグロビンを測定した。任意の静脈切開された被験体は、エポエチンα治療が中止され、そして必要な完了評価および手順をうけた。
【０１９０】
エポエチンαの１０，０００ＩＵ／ｍＬ処方物を群１に使用し（標準的な癌レジメン）、そしてエポエチンαの４０，０００ＩＵ／ｍＬ処方物を群２に使用した（毎週固定された用量レジメン）。
【０１９１】
（共存治療）
研究薬剤の１回目の投与前の最初の２週間およびその後の研究の全期間に対して、薬物（処方箋調剤、一般用医薬品（ＯＴＣ）、漢方または「天然物」）を摂取しないように被験体に指導した。頭痛または流感のような徴候の場合は、パラセタモールを投与し得た。任意の薬物投与が必要になった場合、適切な症例報告形式（ＣＲＦ）および情報源の文書に報告した。
【０１９２】
被験体は、研究の間毎日、経口の鉄補充（２カプセルのＦｅｒｒｏ−Ｇｒａｄ（登録商標）（各々が１０５ｍｇの鉄元素を含む））を受けた。
【０１９３】
（研究の評価）
（時間および事象スケジュール）
研究を３つの相に分けた：スクリーニング、処置、および完了／早期停止。被験体を、スクリーニング期間の間、それらの適格に関して評価した（手順は２週間の研究薬剤の投与の間に実施した）。被験体は、無作為に２つの処置群のうちの１つに割り当てられ、次いで処置相に進められた。被験体は、１日目の研究薬剤の前に少なくとも１２時間、診療室に拘束され、そして全ての試験が実施されるまで、投薬後少なくとも２４時間拘束されたままであった。被験体は、１日目の投与の前少なくとも１０時間閉じ込められたが、水は自由に受けた。処置相は、研究薬剤の投与からなる（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．群に対しては、１、３、５、８、１０、１２、１５、１７、１９、２２、２４および２６日目の投薬、４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群に対しては１、８、１５および２２日目の投薬）。２２日目に、第２の拘束期をエポエチンαの投与と共に開始し、そして投薬後少なくとも１４４時間続けた。薬物速度論的、薬力学的および安全性パラメーターの評価は、全ての被験体に対して２８日の処置相の間、周期的間隔で実施した。研究の完了評価および手順は、２９日目または研究からの早期停止時に実施した。
【０１９４】
（薬物速度論的評価）
（サンプル収集および操作）
静脈血管サンプル（各々２．５ｍＬ）を、血清エリスロポエチン濃度の測定のために１５０ＩＵ／ｋｇエポエチンαｔ．ｉ．ｗ．群（群１）から、以下の時点で直接的静脈穿刺によって吸引管に収集した：
１日目：研究薬物の最初の投薬の３０、２０および１０分前。
【０１９５】
８および１５日目：投薬の直前。
【０１９６】
２２および２４日目：投薬の直前ならびに投薬後０．５、３、６、９、１２、１５、１８、２４、３０、および３６時間。
【０１９７】
２６日目：投薬の直前ならびに投薬後０．５、３、６、９、１２、１５、１８、２４、３６、４８、および７２時間。
【０１９８】
以下の時点における、４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群（群２）由来の血清エリストポエチン濃度の測定のための血液サンプル：
１日目：研究薬物の最初の投薬の３０、２０および１０分前。
【０１９９】
８および１５日目：投薬の直前。
【０２００】
２２〜２８日目：投薬の直前ならびに２２日目のエポエチンα投与後０．５、３、６、９、１２、１５、１８、２４、３０、３６、４８、４８．５、５１、５４、５７、６０、６３、６６、７２、７８、８４、９６、９６．５、９９、１０２、１０５、１０８、１１１、１１４、１２０、１２６、１３２、１４４、および１６８時間。
【０２０１】
サンプルを約２０分間室温で凝血させ、次いで、冷却遠心機中、１０分間、１２００ｒｐｍで遠心した。血清を、予め標識したポリプロピレンバイアルに分配した。サンプルを−２０Ｃで凍結し、そして分析までこの温度で凍結保存した。
【０２０２】
（分析手順）
血清エポエチンαに関するサンプル分析を、ＰＰＤ開発（Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、ＶＡ）で実施した。酵素結合イムノソルベント検定法（ＥＬＩＳＡ）キット手順（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，（Ｒ＆Ｄ），Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮによって製造され、そしてＲＷＪＰＲＩで改変）を、血清中のエリスロポエチン濃度の測定のために使用した。市販のＥＬＩＳＡは、直接的で二重抗体のサンドイッチアッセイである。ｒＨｕＥＰＯに対して特異的であるマウスモノクローナル抗体を用いて予めコートされたマイクロタイターウェルを使用して、ＥＰＯを捕獲した。結合したＥＰＯを、抗ＥＰＯポリクローナル（ウサギ）抗体および西洋ワサビペルオキシダーゼを用いて標識する。視覚のシグナルは、基質の添加によって産生される。Ｒ＆Ｄキットの主要な企業内改変は、標準物質およびスパイク質のコントロールサンプル中の企業内組換えヒトエリスロポエチンの使用である。
【０２０３】
アッセイで使用される標準物質濃度は、７．８、１５．６、３１．３、５０、６２．５、１００、１２５および２５０ｍＩＵ／ｍＬであった。感度（受容可能な精度を提供する最も低い標準物質として定義される）は、７．８ｍＩＵ／ｍＬであり、そしてアッセイの範囲は、品質管理希釈を介して５，０００ｍＩＵ／ｍＬまで延長された。
【０２０４】
（薬物速度論的パラメーター）
エリスロポエチンの血清濃度を測定した。薬物速度論的パラメーターのＣmax、ｔmax、Ｃmin、ＡＵＣ(0-168)、ＣＬ／Ｆ、およびｔ1/2を、モデル独立法によって測定した。
【０２０５】
（薬力学的分析）
薬力学パラメーターは、パーセント網状赤血球、赤血球、およびヘモグロビンにおけるベースラインからの変化の測定、ならびに血清エリスロポエチン濃度に対するこれらの関係を含んだ。
【０２０６】
（安全性評価）
（有害事象）
処置で出現する有害事象を、臨床調査の間に観察される任意の有害または意図されない事象として定義し、これは、発症において新規であるかまたは重篤度もしくは頻度において悪化されたものであり、医療介入（さらなる診断手順または研究治療の改変を含む）を必要とする病理学的知見を含む。
【０２０７】
各被験体を、可能な有害事象に対して、第１の投薬を用いて開始する研究を通して観察した。有害事象報告は、被験体の自発的な報告によって同定した。本研究者らは、被験体のＣＲＦの任意の処置で出現する有害事象を、本研究の薬剤に対する関連にかかわらず記録した。有害事象は、発症の日、重篤度（顕著、中程度または穏和）、研究薬剤に対する関連（非常にありそうである、おそらく、可能性がある、疑わしい、または関連なし）、研究治療に関してとられた行為（なし、用量を減少させた、薬剤を一次的に停止した、または薬剤を永久に停止した）、およびその事象が重篤であるか否かに従って、特徴付けた。共存治療および結果に対する情報をまた、記録した。
【０２０８】
重篤な有害事象は、致命的であるかもしくはすぐに生命を脅かす事象、入院患者の入院が必要であるかもしくは延長させる事象、持続性もしくは有意な障害または不適性を引き起こす事象、あるいは先天性異常、出生時欠損または過剰用量であるかとして定義した。本研究者らは、全ての重篤な有害事象を迅速にＲＷＩＰＲＩに報告するように指示した。本研究者らは、２９日目の最後の評価後３５日目までの重篤な有害事象に関する情報を収集した。安全性データをまた、潜在的に重篤な有害事象に対して再調査し；これらは、必要な医療介入に対して十分に重篤であるかまたは警告を与えるものとみなした。
【０２０９】
（臨床実験室試験）
臨床実験室試験に関するサンプル分析は、Ｈａｖｅｎｆｅｒｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂｅｒｋｓ、ＵＫで実施した。ヘモグロビン、ヘマトクリット、パーセント網状赤血球、赤血球（ＲＢＣ）、平均血球体積（ＭＣＶ）、平均血球ヘモグロビン（ＭＣＨ）、平均血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）、および血小板を含む血液サンプルを、スクリーニングの間、ならびに１、３、５、８、１０、１２、１５、１７、１９、２２、２４、２６、および２９日目に、可能であれば午前８時と午前１０との間で採取した。スクリーニングＣＢＣはまた、総赤血球数および総白血球数を異なって含んだ。
【０２１０】
血清化学サンプルを、スクリーニングおよび終了（２９日）に採取し；パラメーターとしては、グルコース、カルシウム、ナトリウム、カリウム、塩素、リン、血液尿素窒素（ＢＵＮ）、総ビリルビン、クレアチニン、総タンパク質、コレステロール、アルブミン、尿酸、アルカリホスファターゼ、血清グルタミン酸−オキザロ酢酸トランスアミナーゼ（ＳＧＯＴ；アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、血清グルタミン酸−ピルビン酸トランスアミナーゼ（ＳＧＰＴ；アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、および乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）が挙げられた。
【０２１１】
鉄パラメーター（血清鉄、総鉄結合容量（ＴＩＢＣ）、およびフェリチンレベル）に対する血液サンプルを、スクリーニングの間ならびに８、１５、２２および２９日目に採取した。トランスフェリン飽和は、鉄／総鉄結合容量として算出した。
【０２１２】
尿試験は、計量棒を介して実施した。血液または白血球エステラーゼが陽性（１＋またはより大きい）そして／またはタンパク質もしくはニトレートが微量もしくはそれより多い場合、尿の被験物を、顕微鏡実験のために中央実験室に送った。
【０２１３】
（他の安全性観察）
（生命徴候）
現在の（ｓｉｔｔｉｎｇ）血圧、パルス速度および口腔温度の生命徴候測定を、スクリーニングの訪問時、１、８、１５および２２日目の研究薬剤投与前、ならびに２９日目（終了）時に記録した。呼吸数および体重測定をスクリーニングおよび終了時に実施し；伸長測定は、スクリーニングの訪問時のみに得た。
【０２１４】
（理学的検査）
理学的検査をスクリーニングの訪問時および２９日目に実施した。
【０２１５】
（データ品質保証）
研究場所を選択する前に、本研究者、研究場所の職員および設備が、臨床ＲＷＪＰＲＩ職員によって評価された。インフォームドコンセントのプロトコールおよび記載を再調査し、そして研究の開始前に本研究者らの倫理委員会（ＥＣ）によって承認された。症例報告形式は、周期的な現場でのモニター訪問の間にＲＷＪＰＲＩ職員によって精度および完全性に対して再調査された。
【０２１６】
データにおける矛盾は、本研究者または指定された人によって解決された。このデータをＲＷＪＰＲＩデータベースに入力し、そして適切なコンピューター編集プログラムをこのデータベースの精度を証明するために実行した。
【０２１７】
（統計方法）
本研究のサンプルサイズは、統計的考慮に基づかなかった。従って、分析は記述的であり；統計的試験が薬物速度論的パラメーターに対して実施されていない。平均値、標準偏差、中央値、および範囲を含む要約の統計を、血液学、血清化学および生命徴候測定に関して処置群によって分けた。
【０２１８】
主要な目的（すなわち、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．または４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．の投与後のエポエチンαの薬物速度論的プロフィールを評価すること、そしてヘモグロビンを臨床効果の測定として用いて２つの投与レジメンが類似の臨床結果を送達することを示すこと）は、研究薬剤投与後に得られた薬物速度論的パラメーターの記述的な比較によって焦点をあてられる。
【０２１９】
（薬物速度論）
以下の薬物速度論的パラメーターを、モデル独立方法によって、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ  ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．１（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｃｏｎｓｕｌｔｉｎｇ，Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ａｐｅｘ，ＮＣ）を用いて算出した：
ピーク血清濃度（Ｃmax）：１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンおよび４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンの４週目の投与期間の間に観察された最大血清濃度。
【０２２０】
Ｃmaxに対する時間（ｔmax）：Ｃmaxが生じた時間。エポエチンαｔ．ｉ．ｗ．処置群についてはＴmaxを報告しなかった。なぜなら、Ｃmaxは、投与４週目の間に３つの用量のいずれか１つで無作為に生じたからである。
【０２２１】
平均投与前量谷（ｍｅａｎ  ｐｒｅｄｏｓｅ  ｔｒｏｕｇｈ）濃度（Ｃmin）：１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．レジメンについてのＣminを、２２日目、２４日目および２６日目の投与前谷濃度、ならびに２６日目の最後の用量の７２時間後の投与前谷濃度を平均することによって評価した。４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．レジメンについてのＣminを、８日目、１５日目、２２日目の投与前濃度および２２日目の最後の用量の１６８時間後の投与前濃度を平均することによって評価した。
【０２２２】
エポエチンα４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．および１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．についての、時間０から、投与最終週の間の最後の血液サンプリング時間までの血清濃度−時間曲線下面積ＡＵＣ(0-168)：線形台形法則を用いて算出した。
【０２２３】
ＳＣ投与後のクリアランス（ＣＬ／Ｆ）：用量（ｋｇあたり）をＡＵＣ(0-168)によって除算することによって算出した。
【０２２４】
最終除去半減期（ｔ1/2）：０．６９３／除去速度定数から算出した。除去速度定数を、対数線形濃度−時間プロットの最終線形領域における連続したデータ点の線形回帰によって評価した。３つのデータ点のうちの最小のものを回帰において用いた。０．９７５未満の相関係数（ｒ）（またはｒ2＜０．９５）を有する回帰についてはｔ1/2値を報告しなかった。
【０２２５】
薬物速度論的パラメーターの平均、標準偏差および変動係数を、各処置について算出した。
【０２２６】
薬物速度論的パラメーターを、投与前内因性エリスロポエチンレベルについて補正された血清エリスロポエチン濃度を用いて算出した。投与後血清濃度値を、各々の値から、投与の３０分前、２０分前および１０分前に収集したサンプルから決定した平均ベースラインエリスロポエチン濃度を引くことによって投与前ベースラインエリスロポエチン濃度について補正した。投与前血清エリスロポエチン濃度がアッセイの定量限界未満であった場合、この濃度を平均値の算出には含めなかった。被験体の投与前サンプルの３つ全ての濃度の値がアッセイの定量限界未満であった場合、アッセイの定量限界である７．８ｍＩＵ／ｍＬを、その被験体についての平均ベースラインエリスロポエチン濃度として割り当てた。実際の血液採血時間（最初の投与時点に対する時間）を、薬物速度論的パラメーターの算出において用いた。
【０２２７】
１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後に得られたバイオアベイラビリティと比較した４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンのバイオアベイラビリティを、以下の式を用いて算出した：
【０２２８】
【数８】
2005247858.tif 000010
【０２２９】
*研究を完了した４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群における被験体の平均体重。
【０２３０】
（薬力学）
平均、標準偏差、メジアン、分布範囲および標準誤差を含むまとめの統計を、網状赤血球パーセントおよびヘモグロビン濃度について、処置群および日によって提供した。算出は、研究を完了した被験体に基づいた。ベースライン、１日目、３日目、５日目、５日目、８日目、１０日目、１２日目、１５日目、１７日目、１９日目、２２日目、２４日目、２６日目および２９日目をまとめた；「ウインドー処理」を行って、被験体が指定日に収集されたデータを有さない場合は、まとめに実験室試験結果を含めた。ベースラインからの変化を、処置群および日によってまとめた。研究日に対するベースライン値からの平均変化の線形プロットを、網状赤血球、ヘモグロビンおよびフェリチンについて作成した。
【０２３１】
（薬物速度論／薬力学）
プロトコールにおいて述べた通りの公称時間（ｎｏｍｉｎａｌ  ｔｉｍｅ）（１日目の初回用量に対する日数）を、薬力学的パラメーターの算出において用いた。以下の薬力学的パラメーターを、モデル独立方法によって、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ  ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．１（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｃｏｎｓｕｌｔｉｎｇ，Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ａｐｅｘ，ＮＣ）を用いて算出した：
時間０から、投与開始後６７２時間（２９日目）までの網状赤血球パーセントの血清濃度−時間曲線下面積［ＡＵＣ（ＲＥＴＩ）］を、線形台形法則を用いて算出した。ＡＵＣ（ＲＥＴＩ）を、投与前網状赤血球パーセント値について補正した網状赤血球パーセント値を用いて評価した。投与前−１０分および−３０分の測定値の平均を、投与前網状赤血球パーセント値として用いた。負の値を有する、補正した網状赤血球パーセントデータについては、０の値をＡＵＣ（ＲＥＴＩ）の評価に用いた。
【０２３２】
時間０から、投与開始後６７２時間（２９日目）までのヘモグロビンの血清濃度−時間曲線下面積［ＡＵＣ（ＨＥＭＯ）］を、線形台形法則を用いて算出した。ＡＵＣ（ＨＥＭＯ）を、投与前ヘモグロビン値について補正したヘモグロビン値を用いて評価した。投与前−１０分および−３０分の測定値の平均を、投与前ヘモグロビンとして用いた。負の値を有する、補正したヘモグロビンデータについては、０の値をＡＵＣ（ＨＥＭＯ）の評価に用いた。
【０２３３】
時間０から、投与開始後６７２時間（２９日目）までの赤血球総数（ＲＢＣ）の血清濃度−時間曲線下面積［ＡＵＣ（ＲＢＣ）］を、線形台形法則を用いて算出した。ＡＵＣ（ＲＢＣ）を、投与前ＲＢＣ値について補正したＲＢＣ値を用いて評価した。投与前−１０分および−３０分の測定値の平均を、投与前ＲＢＣとして用いた。負の値を有する、補正したＲＢＣデータについては、０の値をＡＵＣ（ＲＢＣ）の評価に用いた。
【０２３４】
ＡＵＣ（ＲＥＴＩ）、ＡＵＣ（ＨＥＭＯ）およびＡＵＣ（ＲＢＣ）の、４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．の１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．に対する比を決定した。
【０２３５】
（安全性）
安全性評価は、被験体によって報告された有害な事象の種類および発生率、ならびに身体検査、臨床実験データおよび生命徴候における変化に基づいた。処置出現有害事象を、体系（ｂｏｄｙ  ｓｙｓｔｅｍ）、好ましい用語および含まれる用語によって分類した。有害な事象を、Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  Ａｄｖｅｒｓｅ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ  Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ（ＷＨＯＡＲＴ）辞書に従ってコード化した。ここでは、含まれる用語は、発明者らの用語法に最も密接に関連した説明であり、好ましい用語は、密接に関連した含まれる用語の群であり、そして体系は、関連する好ましい用語を含む広範なカテゴリーである。処置出現有害事象を、体系および好ましい用語によってまとめ、そして個々の被験体データリストとして提示した。
【０２３６】
臨床実験データおよび生命徴候をまとめ、そして個々の被験体データリストとして提示した。
【０２３７】
（データ格納）
本研究からのプロトコール、報告および生データを、Ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ＲＷＪＰＲＩに格納する。データは、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  Ｓｔｕｄｙ  ＤＭ００００９について保持されるプロジェクトノートに見出され得る。
【０２３８】
（研究継続期間）
両方の群についての投与および血清サンプル収集を、２０００年２月２１日から２０００年３月２９日までの期間の間に行った。エリスロポエチン血清アッセイの確認を、２０００年１月２１日および２０００年２月３日に行った。血清サンプルを、２０００年３月２４日から２０００年４月４日の期間の間に分析した。
【０２３９】
（結果）
（人口統計学的特徴およびベースライン特徴）
３６の健常な成人（１群あたり１８被験体）を本研究に参加させ、そして２つの処置群のうちの一方に無作為に割り当てた。全体として、大多数の被験体（８９％）が白人であり、平均年齢は２６．５歳（１８歳〜４１歳の範囲）であった。４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群における被験体の平均体重は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．群（６６．８ｋｇ）と比較してわずかに重く（７０．３ｋｇ）、残りのベースラインおよび人口統計学的特徴は、この２つの群の間で非常に類似していた。
【０２４０】
本研究を完了した３４被験体の人口統計学的特徴およびベースライン特徴を、図４７に提示する。研究集団全体からの顕著な差異はなかった。
【０２４１】
（研究完了／中止情報）
被験体は、被験体が研究の全継続期間（２９日間）参加した場合、研究を完了したとみなされた。さらに、被験体は、研究薬物の全ての必要とされる用量を摂らなければならず、被験体は、血液サンプリング手順に従わなければならず、そして被験体は２９日目の評価および手順を経なければならない。効力集団は、研究を完了した、全ての必要な用量を受けている被験体を含んでいた。効力集団を、薬物速度論的データ分析および薬力学的データ分析に用いた。
【０２４２】
両方の群における９４％の被験体が研究を完了した。エポエチンα１５０ＩＵ／ｋｇ群における１人の被験体（１０１４）は、有害な事象（持続した頭痛）に起因して研究１５日目に中止し、そしてエポエチンα４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群における１人の被験体（１００６）は、１０日目に中止した（被験体の選択）。これらの被験体は、効力集団に含まれなかった。
【０２４３】
（分析結果）
（薬物速度論的結果）
図４８は、研究期間の４週間目の間の１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．群および４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．群についての平均血清エポエチンα濃度−時間プロフィール（投与前内因性エリスロポエチンレベルについて補正していない）を図示する。投与前内因性エリスロポエチンレベルについて補正した平均血清エリスロポエチン濃度−時間プロフィールを図４９に示す。
【０２４４】
１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．レジメン群および４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．レジメン群における被験体についての平均（ＳＤ）投与前内因性エリスロポエチンα濃度はそれぞれ、８（０．４）ｍＩＵ／ｍＬおよび９（２）ｍＩＵ／ｍＬであった。１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンの４週間目の間、血清中のエリスロポエチン濃度（ベースラインエリスロポエチンについて補正した）は、７５〜２８４ｍＩＵ／ｍＬのピーク濃度［平均（ＳＤ）Ｃmax＝１４３（５４）ｍＩＵ／ｍＬ］から、分析方法の定量限界（７．８ｍＩＵ／ｍＬ）未満の値〜４０ＩＵ／ｍＬの範囲の谷レベル値［平均（ＳＤ）谷濃度（Ｃmin）＝１８（９）ｍＩＵ／ｍＬ］の範囲であった。４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンの４週目の間、血清エリスロポエチン濃度（ベースラインエリスロポエチンについて補正した）は、１〜２４時間の範囲の時間［メジアンｔmax＝１５（分布範囲１〜２４）時間］でピーク濃度［平均（ＳＤ）Ｃmax＝８６１（４４５）ｍＩＵ／ｍＬ］に到達し、次いで、投与週間の最後に２９日目に分析法の定量限界（７．８ｍＩＵ／ｍＬ）未満の値から５．９ｍＩＵ／ｍＬまでの範囲の谷レベル値［２９日目の平均（ＳＤ）谷濃度＝２．０（１．５）ｍＩＵ／ｍＬ］まで多指数関数的に（ｍｕｌｔｉ−ｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌｌｙ）減少した。４週間の研究期間の間の４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．の平均（ＳＤ）Ｃminは、３．８（４．３）ｍＩＵ／ｍＬであった。２つの投与レジメンの末期は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンおよび４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンについて平均（ＳＤ）半減期がそれぞれ、１９．４（８．１）時間（ｎ＝９）および１５．０（６．１）時間（ｎ＝９）であって、並行であるようであった。
【０２４５】
平均（ＳＤ）［％ＣＶ］薬物速度論的パラメーターの値を、図５０に提示する。１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後のエポエチンαのバイオアベイラビリティに対する４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメン後のエポエチンαのバイオアベイラビリティは、２３９％であった。
【０２４６】
（薬力学的結果）
網状赤血球パーセント、ヘモグロビン濃度および赤血球値におけるベースラインからの平均値変化を、処置グループおよび研究日によって、それぞれ、図５１、５３および５５に要約する。薬力学的結果についてのベースラインからの平均値変化は、本研究を完了した被験体についてのみ表す。
【０２４７】
網状赤血球パーセント、ヘモグロビン濃度および赤血球値についての対研究日のベースラインからの平均値変化の直線プロットを、それぞれ、図５２、５４および５６に表す。
【０２４８】
（網状赤血球パーセント）
両グループにおいて、網状赤血球における平均値変化は、１０日目まで上昇し、そして２９日目まで徐々に低下した（図５１および図５２）
（ヘモグロビン）
ベースラインの平均ヘモグロビンは、２つの投薬グループにおいて等価であり、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．グループにおいて１３．４ｇ／ｄＬ、および４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．グループにおいて１３．５ｇ／ｄＬであった。両処置グループにおいて、ヘモグロビン値についてのベースラインからの平均値変化は、２６日まで上昇した（図５３および図５４）。４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．グループについてのヘモグロビンにおけるベースラインからの平均変化は、エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．グループにおける変化を反映した。全体で、両グループは、２９日目まででベースラインから３．１ｇ／ｄＬの上昇を示した。
【０２４９】
（赤血球）
赤血球値におけるベースラインからの平均値変化を、図５５および図５６に例示する。両処置グループにおいて、赤血球値についてのベースラインからの平均変化は、２４日目まで上昇した。４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．グループについての赤血球値におけるベースラインからの平均値変化は、エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．グループにおける変化を反映した。全体で、両グループは、２９日目まででベースラインから１．０×１０12／Ｌの上昇を示した。
【０２５０】
（薬物速度論的／薬力学的結果）
平均薬力学的パラメーター値（ベースライン値に対して補正した）を、図５７に示す。２つの投与レジメンのこれらの力学的応答は、類似したが、４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメンについての血清エリスロポエチンＡＵＣは、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンについての血清エリスロポエチンＡＵＣより大きかった。この２つの投与レジメン間の網状赤血球％のＡＵＣ、ヘモグロビン濃度のＡＵＣおよび赤血球のＡＵＣにおいて、統計的に有意な差異（ｐ＞０．０５）は存在しなかった。雄性および雌性の被験体間の間の網状赤血球％のＡＵＣにおいて、統計的に有意な差異（ｐ＞０．０５）は存在しなかった。しかし、ヘモグロビンのＡＵＣおよび赤血球のＡＵＣは、雌性よりも雄性において統計的により大きかった（それぞれ、ｐ＝０．０３８および０．０４２）。これらの差異は、臨床的に有意ではなかった。
【０２５１】
（安全性の結果）
（曝露の程度）
本研究に参加している３４人（９４％）の被験体が、全用量の研究薬物（エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．［１２用量］またはエポエチンα  ４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．［４用量］）を受けた。エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．グループに無作為化された１人の被験体（１０１４）は、６用量の研究薬物を受けた後、有害事象（持続性の頭痛）に起因して本研究を中止した。４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．グループにおいて、１人の被験体（１００６）は、２用量の研究薬物を受けた後、中止することを選択した。
【０２５２】
１人の例外を除き、全ての被験体は、プロトコールに従い、毎日経口的に鉄分補給を受け；被験体２００８（４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．）は、本研究の１９日目に経口鉄分補給を中断した。１人の例外を除き、全ての女性は、研究前に行われた産児制限の方法を継続し（プロトコールに従って）；被験体１０１０（エポエチンα  ４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．）は、研究開始の１７日前に経口産児制限を中断した。
【０２５３】
（有害事象）
全ての処置−緊急有害事象を、図５８に要約する。全体で、エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．を投与された１８人の被験体のうち１３人（７２％）が、有害事象を有し、対して、エポエチンα  ４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．を投与された１８人の被験体のうち１２人（６７％）が、有害事象を有した。処置−緊急有害事象の大半は、その重篤性は穏やかであり、この２つのグループ間でわずかな質的差異を有した。
【０２５４】
最も頻繁に報告された有害事象は、疼痛（２２％  １５０ＩＵ／ｋｇ、２８％
４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．）、頭痛（２８％  両グループ）、および紅斑性の発疹であった。エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．を受けた１８人の被験体のうち５人（２８％）が、前腕のカニューレ部位に紅斑性の発疹を示し、対して、エポエチンα  ４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．を受けた１８人の被験体のうち２人（１１％）が、前腕のカニューレ部位に紅斑性の発疹を示した。全ての事象を、エポエチンα治療に無関係な研究者によって評価した。
【０２５５】
（全有害事象の要約）
（死、他の重篤な有害事象、および他の有意な有害事象）
本研究の過程において、死および重篤な有害事象は存在しなかった。エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．を投与した１人の被験体（１０１４）は、本研究の１５日目に有害事象（持続性の頭痛）に起因して本研究を中止した。この頭痛は、その研究者によって、ほぼおそらくエポチロンα投与に関連するものとして評価された。
【０２５６】
被験体２００７（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．、２８歳の白人男性）は、２６日目で１８．０ｇ／ｄＬのヘモグロビンレベルを有した。その日以降のヘモグロビン再評価によって、１７．６ｇ／ｄＬのレベルを示した。２９日目では、この被験体のヘモグロビンレベルは、１８．２ｇ／ｄＬであった；３１日目の再評価によって、１８．４ｇ／ｄＬのヘモグロビンレベルが示された。次いで、このプロトコールに指定されるように、この被験体を静脈切開し；４５０ｍＬの血液を取り出した。この被験体は、２９日目に本研究を完了し、そしてヘモグロビンレベルを、安全性について引き続いてモニターし；３２日目および３９日目での評価によって、それぞれ、１７．７ｇ／ｄＬおよび１６．９ｇ／ｄＬのヘモグロビンレベルが示された。
【０２５７】
有害事象の処置のために本研究の間に使用された併用薬剤としては、以下を含んだ：パラセタモール（頭痛（被験体１０１４、２００４［１５０ＩＵ／ｋｇ］および１０１１、２００８［４０，０００ＩＵ］）、歯痛（被験体２００４［１５０ＩＵ／ｋｇ］）、頸痛（被験体２０１０［１５０ＩＵ／ｋｇ］）、生理痛（被験体１０１３［１５０ＩＵ／ｋｇ］）、胃腸性流感（被験体１０１１［４０，０００ＩＵ］）、風邪（被験体１０１３［１５０ＩＵ／ｋｇ］）、カニューレ部位の痛み（被験体１００８［１５０ＩＵ／ｋｇ］）のため）；ならびに正常生理食塩水およびクロラムフェニコール（眼部炎症（被験体２００４［１５０ＩＵ／ｋｇ］）のため）。
【０２５８】
（臨床実験評価）
（経時的実験値）
鉄、フェリチン、トランスフェリン飽和におけるベースラインからの平均変化を、図５９に要約する。いずれかの処置が、臨床的に有意な異常性を生じたことを示す、鉄値またはトランスフェリン飽和において一貫したパターンは存在しなかった。
【０２５９】
グループ間で類似したフェリチン変化に反映させた、これらのパターンは、ヘモグロビンの産生のための鉄貯蔵の予期された使用を反映する（図６０）。両グループにおける変動する血清鉄レベルは、臨床的に有意とみなされなかった。
【０２６０】
図６０に例示するように、フェリチン値におけるベースラインからの平均値変化は、８日目まで低下し、２９日目まで低い値を維持し、これは、この期間を通した持続的な赤血球生成を示す。フェリチン値のベースラインからの平均値変化において、２つのグループ間に顕著な差異は存在しなかった。
【０２６１】
（個々の被験体の変化）
本研究の過程の間、有害事象として記録された個々の被験体の変化は存在しなかった。
【０２６２】
（他の安全性の観察）
（生命徴候）
個々の被験体データに対する、研究日での生命徴候測定におけるベースラインからの平均値変化の要約を、図６１に示す。いずれの処置グループについての平均の生命徴候測定における臨床的に有意な変化、およびグループ間の有意な差異は存在しなかった。
【０２６３】
エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．を投与された２人の被験体は、１４０ｍｍＨｇの上限以上の収縮期血圧を示し；これらの事象は、研究者によって臨床的に有意であるとみなされず、そして有害事象としても記録しなかった。
【０２６４】
（身体的所見）
身体的試験においてベースラインからの臨床的に有意な変化は存在しなかった。
【０２６５】
（安全性の結論）
１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．または４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与されたエポエチンαは、安全であり、かつ本研究の健常な被験体によく寛容された。いずれの処置グループにおいても、臨床的に重要な処置−緊急有害事象は存在しなかった。処置−緊急有害事象の大半は、重篤性において穏やかであり、この２つのグループ間でわずかな質的差異を有した。本研究中に死亡した被験体はなく、重篤な有害事象は報告されなかった。エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．を投与された１人の被験体を、高いヘモグロビンレベルに起因して、本研究の３１日目に静脈切開した。この被験体におけるヘモグロビンレベルの引き続くモニタリングでは、ヘモグロビンレベルのさらなる上昇は示されなかった。エポエチンα  １５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．を受けた１人の被験体は、有害事象（持続性の頭痛）に起因して本研究を中止した。いずれのグループについても、臨床実験試験値、平均生命徴候測定、または身体的試験において注記される臨床的に有意な変化は存在せず；２つのグループ間のこれらの結果における明らかな差異も存在しなかった。
【０２６６】
（要約および考察）
エポエチンα  ４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．の投与後、Ｃmax値は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンの値の６倍、ＡＵＣ(0〜168)値は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメンの値の３倍であった。１５０ＩＵ／ｋｇ
ｔ．ｉ．ｗ．投与レジメン後のクリアランスは、４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．投与レジメン後のクリアランスよりも高かった。１ヶ月の研究期間にわたる網状赤血球パーセント、ヘモグロビンおよび全赤血球における変化の時間プロフィールは、この２つの投与レジメン間で類似したが、血清中のエポエチンαの曝露において［ＡＵＣ(0〜168)の点において］差異が存在した。さらに、この２つの投与レジメン間の１ヶ月の研究期間にわたる網状赤血球パーセント、ヘモグロビンおよび全赤血球のＡＵＣにおいて統計的に有意な差異（ｐ＞０．０５）は存在しなかった。雄性および雌性の被験体間の間のヘモグロビンのＡＵＣおよび赤血球のＡＵＣの差異は、統計的に有意であるが、これらの差異は、臨床的に有意ではなかった。本研究のデータは、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．の投与レジメン後のヘモグロビン応答が類似したことを明らかに示す
１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．および４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．の投与レジメン後の血清中のエポエチンαの全曝露において、予測された差異が存在した。ヘモグロビン応答は類似し、これは、この２つの投与レジメンが、交換可能に使用され得ることを示唆する。
【０２６７】
（実施例３：ＥＰＲＥＸ（登録商標）およびＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）の投与の後のＰＫ／ＰＤパラメーターの比較）
図６２はｒＨｕＥｐｏの赤血球生成刺激効果についてのモデルの略図である。このモデルを、８倍用量のＥＰＲＥＸ（登録商標）の投与後ｒＨｕＥｐｏ応答についての速度論的および動力学的なパラメーター、ならびに単回用量のＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）の投与の後の速度論的パラメーターを予測するために使用した。
【０２６８】
（薬物速度論）
４週間投与した６００ＩＵ／ｋｇ／週のＥＰＲＥＸ（登録商標）の薬物速度論を８倍用量の同時当てはめから得たパラメーターを用いてシミュレートした。τおよびＦｒ値のみを予測した。ＩＮＴ−５７癌の１５０ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗのレジメンのために、Ｆ、τおよびＶｄ値を以前の研究からの前予測に基づいて、図６３に示されるように固定した（ＥＰＯ−３５８／３５９）。単回用量のＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）（２４００ＩＵ／ｋｇ）の薬物速度論を予測し、これらのパラメーターを１８００ＩＵ／ｋｇ／月の複数回用量レジメンをシミュレートするために使用した。速度論的パラメーター同一セットを雄、雌の両方のプロフィールを特徴づけるために使用した。なぜなら、予備操作では、性に基づいた予測パラメーターで有意を示さなかったからである。
【０２６９】
（薬力学）
速度論を固定し、動力学的応答の推進のための強制関数（ｆｏｒｃｉｎｇ  ｆａｎｃｔｉｏｎ）として使用した。薬剤投与前の値を網状赤血球のベースラインレベルとして固定し、４８時間の値および９６時間の値の平均値をＲＢＣのベースラインとして固定した。ＥＰＲＥＸ（登録商標）の単回用量予測から得られる、寿命のパラメーターをさらなる複数回用量での当てはめのために固定化した。複数回用量６００ＩＵ／ｋｇ／週の手術レジメンの後の網状赤血球応答について、ＳｍａｘおよびＳＣ50を予測した。図６４で報告されたように、応答中の変化を考慮すると、これらのパラメーターは評価できるほど変化していない。これは新しいボランティアのセットで行った単回用量研究とは異なったＩ相研究であるという事実をこの差異は単純に反映し得る。さらにこれらのセットのパラメーターは、図６５および図６６に示されているシミュレーションに基づいて、１５０ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗの癌レジメンもうまく特徴づけるようである。雄および雌の網状赤血球データは別々に分析した。なぜなら雄被験体のデータから予想されたＳｍａｘおよびＳＣ５０は、雌の応答を十分に記述しなかったからである。差異が評価可能であるかどうかは判断するのが難しいが、図６８に示されるように、雌とは別に予想した場合に、これらのパラメーターは異なっていた。これらのパラメーターは、性に基づいたいくつかのわずかな薬力学的差異を反映し得る。なぜなら、すべてのデータはより低い変動を有すると予想され得る単一の研究より得られたからである。
【０２７０】
予想されたＥＰＲＥＸ（登録商標）パラメーターを、単回用量および２倍用量の両方のＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）のレジメンについての応答を刺激するために使用した。ＥＰＲＥＸ（登録商標）の予測からのそれぞれの性について予想されたパラメーターに従って、本発明のモデルを用いたシミュレーションは雄および雌について別々に行なった。さらに、ＲＢＣ応答は網状赤血球データを用いて生じたパラメーターに基づいてシミュレートした。赤血球応答はＥＰＲＥＸ（登録商標）およびＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）の両方のすべての場合で十分に特徴付けられるようである。
【０２７１】
図６６および６７に示されるシミュレーションに基づいて、同じセットの動力学的パラメーターは、両方の処方物に対する応答を十分に記述し得ると理解され得る。よって、ＥＰＲＥＸ（登録商標）およびＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）は、薬力学上等価であるようであると結論づけられ得る。２つの処方物の間の応答の差異は、変化した速度論によって完全に説明され得ることを、本発明のモデルは予測する。実際に、本発明のモデルは、ＥＰＯおよびＥＰＯ様化合物の新しい形態およびバージョンのＰＫ／ＰＤ特徴を、最も有益な処置レジメンを用いて患者に与えるために現在利用可能なＰＫ／ＰＤ特徴と比較するために使用され得る。
【０２７２】
（実施例４：ｒＨｕＥＰＯの異なった投与レジメンの比較）
ｒＨｕＥＰＯの慢性的投与のための基本投薬レジメンは、１５０ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗおよび６００ＩＵ／ｋｇ／週である。患者の治療がより頻度の少ない投与を含んでいる場合には、費用の節約、および利便性の増加があり得る。従って、ｒＨｕＥＰＯの種々の投薬レジメンに対するヘモグロビン反応の差異を、最も効率的な処置レジメンを提供する、ｒＨｕＥＰＯに対する反応を特徴化し、かつ予想するための本発明のモデルを用いて調べた。
【０２７３】
本発明の二重の吸収薬物速度論的モデルと一緒に、産生／損失薬力学的モデルを使用した。健康なボランティアのｒＨｕＥＰＯ動力学の当てはめから得られたパラメーターを、種々の投薬レジメンのシミュレーションに使用した（図３および図１３）。４０ＩＵ／ＬのベースラインＥＰＯ濃度を全ての場合のシミュレーションのために固定した。ＡＤＡＰＴ  ＩＩプログラムを全てのシミュレーションに使用した。
【０２７４】
図６８は、ｒＨｕＥＰＯのいくつかの異なる用量および投与レジメンのについての、シミュレートした時間に対するヘモグロビン応答のプロフィールを示している。全てのレジメンは、約１２６日（３０２４時間）で定常状態に達するまで、Ｈｂ濃度の継続的な上昇を生み出す。６００ＩＵ／ｋｇ／週の用量はＨｂレベルの最大限の増加を生み出すようである。この用量およびレジメンは、大半の期間にｒＨｕＥＰＯの濃度を２３ＩＵ／Ｌの閾値より高く維持しさせ得、最終的に、より高い定常状態のレベルのＨｂを生成する、細胞数の継続的な増加を引き起こす。２週間ごとに与えられる１２００ＩＵ／ｋｇの同一総容量は、かなり低い応答を生じさせる。なぜなら、網状赤血球の多くが赤血球に変換される前に、ｒＨｕＥＰＯの濃度が閾値未満に下がってしまうからである。さらに、次回のｒＨｕＥＰＯの投与はまた、毎週の投与で起こるような、閾値より高い濃度に上昇させるに十分直ぐには与えられていない。
【０２７５】
同様の議論が、２週間ごとの投与での４５０ＩＵ／ｋｇ／週の９００ＩＵ／ｋｇに対する比較においてなされ得る。送達された総用量の点から、１５０ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗの投与が４５０ＩＵ／ｋｇ／週の投与レジメンに等しいが、１週間に３回の投与の後、動力学的プロフィールはわずかに良いＨｂ応答を生じた。予測されたように、９００ＩＵ／ｋｇ／１０日の投与スケジュールは、１２００ＩＵ／ｋｇ／２週間（４８％増加）よりも良い定常状態の応答プロフィール（５６％増加）を生じたが、６００ＩＵ／ｋｇ／週（７１％増加）レジメンよりも低かった。
【０２７６】
処置をかなり長時間続ける場合、達成した真の定常状態応答は種々の投薬およびレジメンによって異なるようである。しかし、定常状態応答におけるのこれらの差異は、わずかなＨｂレベルの上昇（例えば、１ユニットの増加）のみを引き起こす短期間の処置レジメンでのようには明らかではないが、他のレジメンと比較して、一貫して高いＨｂ応答を引き起こす、６００ＩＵ／ｋｇ／週の処置を除く。本発明のモデルを用いたシミュレーションは、再投与の時間が減少するにつれて、Ｈｂのより大きく、かつより安定した増加が、同じ総用量で達成され得ることを示している。頻繁な投与は閾値より高いｒＨｕＥＰＯ濃度の維持を助け、網状赤血球からのＲＢＣの形成を容易にする。網状赤血球の寿命よりも４０倍長い寿命を有する赤血球は、はるかに長時間血液中で維持され、Ｈｂレベルの安定した増加という結果を生じる。また、より頻繁な投与で見られる応答の変化もまた、選択される用量に依存するように思われる。１週間おきのレジメンを毎週投与のスケジュールに変化させると、４５０ＩＵ／ｋｇ用量よりも６００ＩＵ／ｋｇ用量に影響を与える。定常状態の点では良好な応答が達成されるが、１週間に３回の投与は、同じ総用量の毎週の投与よりも好適ではあり得ない。なぜなら、応答に改善があるという程度は、より頻繁な投与の不便性に比べて、それほど大きくないからである。よって、試験される投薬レジメンについて、毎週１回の６００ＩＵ／ｋｇ／ＥＰＯ用量は、所望のＰＫ／ＰＤ応答を与えることが示されている。
【０２７７】
実際に、本発明のモデルは、例えば、１日に１回よりも少なく、１週間に１回より少なく、２週間に１回より少なく、３週間に１回より少なく、または４週間に１回より少ない、任意の所望の投与レジメンを提供し得る。このレジメンは、使用されるＥＰＯおよび所望されるＰＫ／ＰＤ応答に依存する。従って、本発明のモデルは、いかなる特定のＥＰＯ型を用いる使用にも、いかなる特定の投薬レジメン型を用いる使用にも制限されず、そして任意の型のＥＰＯを用いて改変され得、そして使用され得る。
【０２７８】
（実施例５：患者体重に関連したｒＨｕＥＰＯの４０，０００ＩＵ／週投与の効果）
反復ｒＨｕＥＰＯ投与の必要性は、体重に基づいた投与を、不便かつ時間浪費的なものにする。この実践から被験体の体重とは無関係の規定量の投与への変換は、ｒＨｕＥＰＯの臨床使用を容易にする。よって、体重変化に伴う、予測されるＲＢＣおよびヘモグロビン応答プロフィールの変化の程度を明らかにするための試みにおいて、本発明のモデルを用いて、シミュレーションを行なった。投与様式のこの変化が、理論的な見通しから正当であるかどうかに関しての洞察を与えるために、これらのシミュレーションを使用することを意図した。
【０２７９】
本発明の二重の吸収薬物速度論的モデルと一緒に、産生／損失薬力学的モデルを使用した。健康なボランティアのｒＨｕＥＰＯ動力学の当てはめから得られたパラメーター（図３および図１３）を種々の投薬レジメンのシミュレーションに使用した。４０ＩＵ／ＬのベースラインＥＰＯ濃度を全ての場合のシミュレーションのために固定した。ＡＤＡＰＴ  ＩＩプログラムを全てのシミュレーションに使用した。
【０２８０】
ｒＨｕＥＰＯの維持療法に対して予想される応答に対する被験体体重の効果を図６９に示した。図６９は、５０、７０および９０ｋｇの体重の患者に対して４００００ＩＵ／週の総量を付与することと比較して、２４週間（４０３２時間）にわたる６００ＩＵ／ｋｇ／週のレジメンについての時間プロフィールに対する、シミュレートしたＲＢＣおよびヘモグロビン応答を示している。ＲＢＣおよびＨｂの両方は、ｒＨｕＥＰＯの投与期間にわたって継続した増加を示している。４００００ＩＵ／週の用量は６００ＩＵ／ｋｇ／週の投与レジメンに類似し、大半の患者が７０ｋｇの体重を有することを想定する。
【０２８１】
体重の変化は、分配の量（Ｖｄ）に影響する。ｒＨｕＥＰＯは０．０５５８Ｌ／ｋｇのＶｄを有し、これは血漿の体積に非常に近い。体重が増加するにつれて、Ｖｄ（Ｌ）は増加して、達成されるｒＨｕＥＰＯの最大濃度をより低くさせる。
【０２８２】
体重の変化はまた、クリアランスパラメーターＶｍａｘ（ＩＵ／時間／ｋｇ）に影響を与える。体重の増加とともにＶｍａｘ（ＩＵ／時間）の増加があり、ｒＨｕＥＰＯのクリアランス（Ｖｍａｘ／（Ｋｍ＋ＣEPO））の増加へと導く。ＶｍａｘおよびＶｄの両方が同じ程度影響されるので、排出速度定数（すなわち、より低い濃度でのｋ）は変わらないままである。いずれの場合でも、体重の差異は有意な程度には速度論に影響を与えないようである。なぜなら、ＳＣ投与の後、終末の勾配は吸収速度論によって事実上制御され、かつＳＣ50は非常に低く、終末の勾配が主に応答の程度を制御するからである。
【０２８３】
シミュレーションは、定常状態のレベルのＲＢＣの数およびＨｂの数が体重に基づいてわずかに異なっていることを示している。しかし、定常状態に達する時間もまた長く、よって、例えば４週間などの早い時期でのＨｂ応答はあまり異ならない（６００ＩＵ／ｋｇ／週の投与について１６．３５ｇ／ｄｌに対して、５０、７０および９０ｋｇの被験体について１６．４６、１６．３３および１６．１９ｇ／ｄｌ）。
【０２８４】
そのため、本発明のモデルに由来するデータは、５０〜９０ｋｇの範囲にわたる体重の差異が、実質的にｒＨｕＥＰＯの速度論および動力学に寄与しないことを示している。そのため体重に基づいた投与は、最適でも不可避でもあり得ず、そして体重に基づいた投与から、体重とは無関係の４０，０００ＩＵ／週の基本レジメンへの変更は、合理的かつ便利である。４０，０００および６５０ＩＵの用量は絶対的なことを意味するのではなく、患者に対して投与され得、そして同じまたは同様の効果を提供し得る一定範囲の用量値を企図する。実際、「約」４０，０００または６５０ＩＵは同じまたは同様の効果を患者に与える一定範囲の値を企図し、特定の実施形態では、ＩＵ値の＋／−１〜２０％の範囲を企図する。
【０２８５】
（実施例６：癌患者のｒＨｕＥＰＯ速度論の評価）
化学療法を受ける癌患者はしばしば、貧血性である。不適切な内因性のＥＰＯ生産は、これらの患者の貧血状態の原因となる因子の１つであると考えられ、そして、１５０ＩＵ／ｋｇの用量での１週間に３回（ｔ．ｉ．ｗ）のｒＨｕＥＰＯの投与は貧血を治療する際に有益であると証明されている。このレジメンは、適切な反応を付与し、そして最も一般的に使用されているが、頻繁に必要である投薬は不便であり、そして最高のものとはなり得ない。従って、現在の１週間に３回のレジメンのヘモグロビンレベルと同等の増加を生じ得るために、１週間に１度付与され得る、最適な用量のｒＨｕＥＰＯを求めた。正常な被験体から得たデータを用いる本発明のＰＫ／ＰＤモデルを使用して、癌患者における反応を量的に比較し、もしあれば、速度論の差異の可能性のある原因を説明した。本研究はまた、本発明のモデルを有効にする機会を提供し、その結果、将来の予想される目的のためにそれらが、確実に使用され得る。
【０２８６】
癌患者のデータは、ＲＷＪＰＲＩより得た。これは、固形腫瘍を有し、かつプラチナ含有化学療法（シスプラチンまたはカルボプラチン）を受けている、１５０人の貧血癌患者で実施された、オープン標識で、無作為の、制御された、並行群の、多施設の研究であった。３００、４５０、６００、９００ＩＵ／ｋｇの週ごとのＳＣ用量および週に３回の１５０ＩＵ／ｋｇのＳＣ用量を含む異なった用量レベルのＰＲＯＣＲＩＴ（登録商標）（エポエチンα（Ｅｐｏｅｔｉｎ  ａｌｆａ），Ａｍｇｅｎ）を、１２週間で５群の被験体（１群につき２５人の患者）に投与した。コントロールの群は、処置を受けなかった。患者は、１８歳以上、前研究でＨｂが１０ｇ／ｄｌ以下、正確な網状赤血球数は３％以下、血小板は２５，０００細胞／ｍｍ3以上、クレアチニン２．０ｍｇ／ｍｌ以下、陰性便潜血、溶血反応の証拠なし、ならびに通常の血清フォレートレベルおよびビタミンＢ12レベルが必要とされた。また、確率化の１か月前に輸血を必要とせず、かつ鉄の欠損していない非験体のみをこの研究に含めた。ヘモグロビン数を、主な薬力学的終点として計測した。
【０２８７】
正常なボランティアの速度論および動力学的なデータの当てはめから得られるパラメーターを使用して、ｒＨｕＥＰＯの種々の用量およびレジメンを癌患者に投与した後、応答をシミュレートした。本発明の二重吸収速度論モデルとともに、産生／損失の薬力学的モデルを使用した。４０ＩＵ／ＬのベースラインのＥＰＯ濃度とともに健康なボランティアのｒＨｕＥＰＯ動力学の当てはめから得たパラメーターを（図３および図１３）、種々の用量レジメンのシミュレーションの始点として使用し、そして応答で変化する種々のパラメーターの効果を調査した。ＡＤＡＰＴ  ＩＩプログラムを、全てのシミュレーションのために使用した。
【０２８８】
図７０Ａ〜７０Ｅは、ヘモグロビンデータおよびｒＨｕＥＰＯの種々の用量およびレジメンを付与された貧血癌患者の網状赤血球、ＲＢＣおよびＨｂの応答のシミュレーションを示す。図に見られるように、患者は、継続的なＨｂ濃度の増加とともに、一般的には、治療法に対して良好に応答しているようである。３００ＩＵ／ｋｇの用量レジメンに関連した非常にわずかな応答のみがある。週１回の用量の増加で、応答の程度に増加が見られるようである。しかし、最も高い用量の９００ＩＵ／ｋｇ／週は、６００ＩＵ／ｋｇ／週の用量よりもかなり高いＨｂレベルの上昇を生成することはない。データは、１週間１回の６００ＩＵ／ｋｇのレジメンが、１週間に３回の１５０ＩＵ／ｋｇのレジメンよりもわずかによい応答を生じることを示している。健康な被験体からのパラメーターを用いるシミュレーションはまた、実際に癌患者で観察された応答と比較してより高い応答を予測することがこの図より判断でき得る。健康な被験体と比較した、癌患者のｒＨｕＥＰＯの速度論および／または動力学の差異は、これらの変化した応答プロフィールの原因を説明し得る。従ってこれらの差異を説明するための薬力学的モデルの選択パラメーターを変更してシミュレーションを行なった。
【０２８９】
骨髄の赤血球の形成不全、ＲＢＣの生存の減少、および網状赤血球の減少が、慢性疾患の貧血の可能性のある原因のいくつかであることが報告されている（例えば、Ａｂｅｌｓ，１９９２．Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１９：２９−３５を参照のこと）。抗癌薬療法はまた、これらの患者の貧血の主な原因の１つであると考えられている（例えば、Ｍａｔｓｕｍｏｔｏら、１９９０．Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．７５：４６３−６８を参照のこと）。Ｋｓ値の３分の１の減少は、低下した本質的な細胞の産生速度および／または低下したＳmaxを示し、シミュレーションで見られるような減少した応答を説明し得る。癌患者は、ベースラインＥＰＯ濃度を有しており、このベースラインＥＰＯ濃度は正常より高いが、貧血の程度にとっては不適切に低い（例えば、Ｃａｓｅら、１９９３．Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．８５：８０１−８０６およびＭｉｌｌｅｒら、１９９０．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２２：１６８９−９９を参照のこと）。ベースラインＥＰＯ濃度は、癌に関連した貧血の重篤度および型ならびに化学療法に依存して、４０Ｕ／Ｌより低い範囲から５００Ｕ／Ｌより高い範囲まで変化することが報告されている（例えば、Ｌｕｄｗｉｇら、１９９４．Ｂｌｏｏｄ
８４：１０５６−６３、Ｃａｓｅら、前出、Ａｂｅｌｓ、前出、およびＭｉｌｌｅｒら、前出を参照のこと）。５００ＩＵ／ｌより大きいベースラインＥＰＯレベルは、ｒＨｕＥＰＯ療法に対する非応答性を示すと報告されている（例えば、Ｌｕｄｗｉｇら、前出を参照のこと）。
【０２９０】
このモデルのベースラインＥＰＯ濃度を、７０Ｕ／Ｌに増加させると、ＥＰＯに対するシステムの感受性の減少を表し、応答−時間プロフィールを下げ、そしてこのデータにより良好な適合性を付与した。投薬は毎週行なわれたので、濃度はほとんどの網状赤血球を赤血球に変換するのを可能にする域値を優に上回ったままだった。従って、域値の変化は、この曲線を変化させることにおいて有意に助けとはならなかった。このことは、網状赤血球−ＲＢＣの変換プロセスはこれらの患者ではあまり影響を受け得ないことを示唆する。正常の状態では、赤血球は２８８０時間生存し、そして産生／損失モデルによると、真の定常状態は、新しい赤血球の産生の開始の後の１寿命で達成される。ＲＢＣの寿命のいかなる減少も、これらの患者で、より早い時期に達し、かつより低くあるべきこの定常状態の原因である。この研究で、正常の状態での真の定常状態の達成を可能にするのに十分に長く投薬が行なわれていないので、この可能性は実証されなかった。以前に述べられたように、癌患者の減少した応答の別の可能な原因は、ｒＨｕＥＰＯの薬物速度論の差異であり得る。健康なボランティアでは、ｒＨｕＥＰＯは、ＳＣ投与の後フリップフロップ速度論を受け、これにより濃度を長期間ベースラインの上に存在させ、新しい細胞の産生の継続した刺激を可能にする。リンパ管を経由したゆっくりとした１次流入は、この現象に寄与すると仮定され、そして、疾患の状態および化学療法に起因して、リンパ管の生理学的機能の任意の変化は、低い応答を導く、ゆっくりとした送達を減少し得る。
【０２９１】
１週間に３回の１５０ＩＵ／ｋｇと比較して、週に１回の６００ＩＵ／ｋｇのレジメンは、高い総用量を必要とするが、癌患者でのより良いＨｂ応答を生じ、そしてｒＨｕＥＰＯの維持療法にとって、より便利な投薬計画である。従って、本発明のモデルによると、現在のレジメンから６００ＩＵ／ｋｇ／週への変化は好ましくあり得る。開発されたＰＫ／ＰＤモデルは、癌などのような疾患状態に起因する応答の差異を説明し得、そしてｒＨｕＥＰＯの薬物速度論の変化を伴うかまたは伴わない、より低いＫｓ値および／またはより高いベースラインＥＰＯレベルは、これらの患者に見られる鈍い応答の原因であり得るとシミュレーションは予測する。
【０２９２】
上記の詳細な説明および特定の実施例を参照して、当業者は、本発明のＰＫ／ＰＤモデルシステムが、種々の状況で使用され得ることを理解する。例えば、血清ＥＰＯ濃度のような、患者における所望の薬物速度論応答を達成するために、実施者は、ＥＰＯ用量レジメンを調節したいと望み得る。実施者は、この結果を達成するために本発明のシステムを使用し得る。あるいは、実施者は、ヘモグロビンレベルの特定の増加のような、患者における特定の薬力学的応答を望み得る。実施者は、どのＥＰＯ用量レジメンが所望の結果を達し得るかを決定するために本発明のシステムを使用し得る。別の面では、実施者はどの型の薬物速度論および薬力学的な結果が、特定のＥＰＯ用量レジメンより生じるかを決定することを望み得る。また、実施者は、この決定をするために本発明のＰＫ／ＰＤモデルを使用し得る。
【０２９３】
（実施例７：１か月の投与レジメン期間中のイヌのＥＰＯの免疫原性）
本研究は、免疫抑制されたビーグル犬のおよび非免疫抑制のビーグル犬のＥＰＯ処方物の免疫原性を評価するために設計した。ＥＰＯ処方物の薬力学および薬物速度論プロフィールを調査した。
【０２９４】
（規制の遵守）
Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ（ＧＬＰ）：本研究は、非臨床研究室研究の米国食品薬品局のＧＬＰ規制（２１ＣＦＲ、第５８部）に厳しく従って行なわれなかったが、プロトコールおよび適用可能なオーリード基本操作手順（Ｏｒｅａｄ  ｓｔａｎｄａｒｄ  ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）に従って行った。
【０２９５】
動物の世話および使用：動物の研究は、ＮＲＣ「Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ
Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ」（１９９６年改定）およびＵＳＤＡ「Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｗｅｌｆａｒｅ  Ａｃｔ」（１９９６年８月２４日発行、Ｌ．８９−５４４およびその後に続く改定版）に従って行なわれた。オーリードＭｅｔ／ＰＫは、ＡＡＡＬＡＣの公認の施設である。
【０２９６】
（同定および入手先）
処方物：
ＥＰＲＥＸ（登録商標）、１つの２０００ＩＵ／ｍＬおよび１つの１０，０００ＩＵ／ｍＬ
コントロールとして生理食塩水
貯蔵
研究で使用しない場合、ＥＰＯ処方物は、光から保護して、冷蔵庫で貯蔵した（約４℃）。未使用の処方物は、次の用量に従ってＲＷＪＰＲＩに返却するか、または、破棄した。
【０２９７】
（研究動物）
種類：                        イヌ
系統：                        ビーグル
性別：                        雄
入手先：                      Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ、Ｉｎｃ．
Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄｉａｎａ
４６２９９
投薬時の年齢：                ８〜９か月
最初の投薬の時の標的体重：    ９〜１２ｋｇ
同定法：                      動物供給者によってなされる入れ墨
研究個体数：                  １８（Ｎ＝３匹／群）。
【０２９８】
（飼育）
イヌはイヌ保持室の犬小屋の中で処置群によって収容された群であり、そして順応され薬剤投与の前に操作およびサンプル回収を行なった。検疫は、投与の少なくとも５日前であった。検疫期間の最後に研究員によって全ての動物の健康を確認した。研究／回収期間の間、健康条件に起因して必要でなければ、イヌは群飼育に維持した。犬小屋は動物の数およびプロトコールの数で標識した。
【０２９９】
（環境条件）
動物部屋を、５０±１５％の相対湿度および１２時間の明期／暗期サイクルで２３±３℃に維持した。１時間当り少なくとも１０回の換気を行なった。
【０３００】
（食事および水）
イヌに、研究の際、Ｐｕｒｉｎａ  Ｃｅｒｔｉｆｉｅｄ  Ｃａｎｉｎｅ  Ｄｉｅｔ（登録商標）＃５００７および水を適宜に付与した。食料分析の結果（売主によって提供された分析の証明書）および水分析の結果（溶解した固形物、微生物含量、選択要素、重金属、および塩素処理した炭化水素）を生データファイルに維持した。研究の結果に干渉するのに十分なレベルで、汚染は食事または水に存在しないと理にかなって予期された。
【０３０１】
（用量および種の正当化）
用量を以前の研究で評価された処方から得られた既存のデータに基づいて選択した。本研究を、ＥＰＯ処方物の免疫原性および２つの用量レジメンのＰＫ／ＰＤプロフィールを評価するために、免疫抑制および非免疫抑制のビーグル犬で行なった。使用したイヌの数は、科学的に有効な結果を提供するために必要な最小限の数であった。許容できるインビトロモデルは入手できなかった。薬物速度論、薬力学、および毒物学の研究の実施のために、目的の繁殖されたビーグル犬を慣用的に使用し、制限要求を満たした。
【０３０２】
（研究設計）
（要約）
ビーグル犬（Ｎ＝３匹／群、６群）をランダムに処置群に割り当てた。２日目に、３群のイヌに単一経口用量のシクロスポリン（２５ｍｇ／ｋｇ）を投与した。その後、３群のイヌに維持量のシクロスポリン（１０ｍｇ／ｋｇ）を毎日受容させた。ＥＰＲＥＸ（登録商標）およびビヒクルを用いる２つの用量レジメンを、免疫抑制および非免疫抑制のイヌで試験した。全ての処方物およびビヒクルを皮下に（ｓｃ）毎日または毎週のいずれかに投与した。４週間以上にわたり、指定した回数、血液サンプルを回収した。注射部位を毎日観察し、そして体重を１週間ごとに測った。最後の回収の後、イヌを安楽死させるかまたは別の研究施設に寄付した。
【０３０３】
（処方物用量投与の調製および試験）
（１日目）
試験処方物を、１日目に最初にイヌに投与した（下の表を参照のこと）。全ての処方は、次の表に特記した容量で投与した。
【０３０４】
用量は、適切なゲージ針に適合したシリンジ内に調製した。ＳＣ用量を、投与部位に投与した。投与部位を刈り、その後投与し、そして、消せないインクでマークした。
【０３０５】
【表２】
2005247858.tif 000011
【０３０６】
1：２０００ＩＵ  ＥＰＯ／ｍＬを含むＥＰＲＥＸ（登録商標）処方物に基づく。
2：１０，０００ＩＵ  ＥＰＯ／ｍＬを含むＥＰＲＥＸ（登録商標）処方物に基づく。
ＮＡは適用せずを示す。
【０３０７】
（観察、サンプル回収、およびプロセシング）
イヌおよび注射部位を毎日監察した。いかなる異常な外観も行動も記述し、そして評価した。体重は週に１回記録した。
【０３０８】
指定された最初の時点で（以下を参照のこと）、約２ｍＬの血液を頸静脈を経てヘパリン化したＶａｃｕｔａｉｎｅｒｓ（登録商標）（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）に回収した。頸静脈不全の場合は、血液を橈側皮静脈を経て回収し、そして記述した。シクロスポリン投与の前に得た最初の血液回収を血漿を採取するために使用した。血液は氷上に置き、遠心分離し（１５００×ｇ、１０分間、約４℃）、そして血漿を回収した。血漿を輸送のために−２０℃で凍結した。
【０３０９】
２回目の血液の回収で、ＥＤＴＡを含むＶａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）を使用して回収した約２ｍＬの血液を朝に獲得し、そして氷上に置いた。２回目の回収は、全血として約４℃で貯蔵し、そして網状赤血球、ヘモグロビン、および総赤血球細胞の計測に使用した。
【０３１０】
（最初の血液回収時点）
群１および２（毎日ＥＰＲＥＸ（登録商標））：１日目および２８日目の前用量、１，３，８，１２、１６および２４時間目、および３，７，１４，２１、および２４日目の前用量。
【０３１１】
群３〜６（週に１回ＥＰＲＥＸ（登録商標）または生理食塩水）：１日目および２２日目の前用量、１，３，８，１２，２４，４８，７２、および９６時間目、および７日目および１４日目の前用量。
【０３１２】
（２回目の血液回収時点）
全ての群：１，３，７，１０，１４，１７，２１，２４および２８日目の前用量。
【０３１３】
研究の間必要なので、さらなる血清サンプルを回収し、腎臓および肝臓の機能を評価した。最後のサンプル回収の２４時間以内に、イヌをバルビツレート安楽死溶液の静脈内過量で安楽死させるか、または別の研究機関に寄付した。
【０３１４】
（サンプル分析）
回収した全血（ＥＤＴＡ中）を網状赤血球、ヘモグロビン、および総赤血球細胞について分析した。
【０３１５】
（結果）
本研究の結果を、図７１および７２に示す。本研究の結果は、免疫抑制または非免疫抑制のイヌの５０ＩＵ／ｋｇ／日および６００ＩＵ／ｋｇ／週の用量レジメンの後、４週間の研究期間にわたる動的反応（ヘモグロビンおよび赤血球細胞の上昇パターン）が類似していることを示す。
【０３１６】
（実施例８：オスカニクイザルにおける３倍用量のＩＶおよび６倍用量のＳＣ投与の後の組換えヒトＥＰＯのＰＫ／ＰＤモデリング）
（目的）
本研究の目的は、オスカニクイザルでのｒＨｕＥｐｏ（ＥＰＲＥＸ（登録商標））の３倍単一用量のＩＶ投与および６倍単一用量のＳＣ投与の後の血中の増加した網状赤血球、赤血球およびヘモグロビンの数の点から、ｒＨｕＥｐｏの薬物速度論（ＰＫ）および薬力学（ＰＤ）プロフィールを特徴付けるために、本発明のＰＫ／ＰＤモデルを利用することであった。
【０３１７】
（方法）
データを、ＲＷＪＰＲＩ（Ｓｂｉ  Ｓｔｕｄｙ  番号０８７６−４９および０８７５−４９およびＲＷＪＰＲＩ  Ｓｔｕｄｙ  番号ＤＭ９９１４６およびＤＭ９９１２４、１９９９年１２月）によって行なわれた２つの研究より得た。１つの研究は、１２匹のオスカニクイザルで行なわれた並行した群研究であった（Ｓｂｉ  Ｓｔｕｄｙ  番号０８７６−４９およびＲＷＪＰＲＩ  Ｓｔｕｄｙ  番号ＤＭ９９１４６、１９９９年１２月）。サルを、４群に分け、１つの群がコントロールであり、他の３つの群には、静脈に５００，２０００、および４０００ＩＵ／ｋｇのＥＰＲＥＸ（登録商標）を注射した。血液サンプルを前用量に汲み上げ、そして４８時間までｒＨｕＥｐｏの濃度を測定した。他の研究を並行した群研究で、１群ごとに３匹の７群に分けた２１匹のオスカニクイザルで行なった（Ｓｂｉ  Ｓｔｕｄｙ  番号０８７５−４９およびＲＷＪＰＲＩ  Ｓｔｕｄｙ  番号ＤＭ９９１２４、１９９９年１２月）。コントロール群は、皮下に滅菌生理食塩水を受容し、残りの６群は、４００，１０００，２４００，５０００，２００００および４００００ＩＵ／ｋｇのＥＰＲＥＸ（登録商標）を皮下に投与された。動物を、群を超えて均一な体重の分配を有するように割り当てた。血液サンプルを前用量に汲み上げ、そして２８日まで投与した後、ｒＨｕＥｐｏの濃度ならびに網状細胞、赤血球およびヘモグロビン計測のために種々の回数汲み上げた。平均データをこの分析に使用した。
【０３１８】
（モデル：ＰＫ／ＰＤモデルの概略図は図７３に記載される）
薬物速度論：２−区画モデルを、ＩＶ投与のときの速度論プロフィールの多指数関数を説明するために選択した。非区画分析は、速度論の非一次性を示し、ミカエリス−メンテンの処置関数を用いてモデル化された。用量の画分の急速な零次の流入を有する二重吸収速度論に続いて、残りのゆっくりとした一次の流入を、ＳＣ投与の際にｒＨｕＥｐｏの吸収を特徴付けるために使用した。６回の単一ＳＣ用量および３回の単一ＩＶ用量を、全てのデータを特徴付けるための共通セットのパラメーターを獲得するために同時にこのモデルに当てはめた。
【０３１９】
静脈内の速度論のモデリングに使用される微分方程式は以下である：
【０３２０】
【数９】
2005247858.tif 000012
【０３２１】
ＳＣデータは以下の方程式でモデル化した。
【０３２２】
【数１０】
2005247858.tif 000013
【０３２３】
Ａｐは血漿中の薬物量を示し、一方、Ａｔは末梢区画（すなわち、組織）中の薬物を示す。微分定数（ｍｉｃｒｏｃｏｎｓｔａｎｔ）ｋ１２およびｋ２１は、中心区画（血漿）と末梢区画との間の輸送の１次速度である。ＶｍａｘおよびＫｍはミカエリス−メンテンの定数であり、このプロセス１および１／２のＶｍａｘに到達する濃度の容量を示す。Ｆｒは、吸収ｋ１の１次経路に関連する用量の割合である。零次の流入（ｋｏ）についての期間（ｔａｕ１）を、これらのデータおよび初期の操作に基づいて１０時間に固定した。吸収の単一１次速度ｋａは、別のｋａが推定された最も低い用量（４００ＩＵ／ｋｇ）を除いて、全ての用量を記載し得る。バイオアベイラビリティＦは、用量によって変化するようであり、そして最も低い２つの用量についてを推定し、残りの用量について１００％に固定した。
【０３２４】
異なる寿命を有する２つの前駆体細胞区画でのカテナリー加齢薬力学モデル（図７３）を、ＥＰＲＥＸ（登録商標）の薬力学のモデリングのために使用した。産生の刺激を、両方の前駆体区画の産生速度で起こると想定した。ｋ０は細胞の零次の産生速度を示し、一方、ＴRおよびＴRBCは網状赤血球および赤血球の寿命を表す。
【０３２５】
ベースラインのｒＨｕＥｐｏ濃度を、０であると想定し、よって、ベースラインの網状赤血球レベルを、ｋ０  ＴRによって与えた。推定目的のために使用した微分方程式は以下のとおりである：
【０３２６】
【数１１】
2005247858.tif 000014
【０３２７】
この刺激関数をＨｉｌｌ式によって与える場合、ガンマを１に固定する。
【０３２８】
【数１２】
2005247858.tif 000015
【０３２９】
６用量レベルのＥＰＲＥＸ（登録商標）の投与後の網状赤血球数を、上記の方程式に当てはめて、全ての用量にわたるデータを特徴付ける１セットの動力学的パラメーターを得た。薬物速度論的モデルについてのパラメーターを固定し、動力学の強制（ｆｏｒｃｉｎｇ）関数として使用した。投与前の網状赤血球数を定常状態のベースライン値に固定した。
【０３３０】
網状赤血球の当てはめから得られた動力学的パラメーターを、全ての用量についてのＲＢＣ数およびヘモグロビンレベルをシュミレートするために使用した。４８時間のＲＢＣ数値をベースラインとして使用し、一方、各グループの投与前のヘモグロビン数の投与前の総細胞数（ＲＢＣ＋網状赤血球）に対する比から、細胞当りのヘモグロビン含有量を、各グループに対して固定した。
【０３３１】
シミュレーション目的に使用した微分方程式は以下のとおりである：
【０３３２】
【数１３】
2005247858.tif 000016
【０３３３】
（結果）
図７４は、３単回の静脈内用量および６単回ＳＣ用量のＥＰＲＥＸ（登録商標）の投与後の、ｒＨｕＥｐｏ濃度−時間プロフィールに対する当てはめを示す。獲得したパラメーターを図７５に列挙する。最も低い用量の終局は、わずかに予想を越えていたが、非直線の配置を有したこの２区画薬物速度論的モデルは、この多相ＩＶ速度論プロフィールを適切に表現し得た。配置における非直線性が穏やかであり、高い用量のみで突出することを示す、高いＫｍ値が推定された。Ｖｄ配置の中心の体積は５７ｍｌ／ｋｇと推定され、これは、血液の体積に近い。ＳＣ投与について、バイオアベイラビリティは用量と共に実質的に増加し、最も低い用量で２６．８％および次に高い同量で７３％のバイオアベイラビリティを示した。最も低い用量は他の用量と比較して、わずかに異なったｋａ値を有する。パラメーター推定より生物が利用可能な用量の大部分の割合はゆっくりとした１次経路に従うことが推測され得る。流入の零次の経路は速いようであり、生物が利用可能な用量の小さい割合（３５．５％）を占める。
【０３３４】
網状赤血球の当てはめを図７６ａ、７６ｂ、および７７に示し、これらは、推定された薬力学パラメーターを列挙する。２番目の前駆体区画のＴＰ２によって説明される時間差は小さかった（約１５時間）。推定された赤血球の寿命はほぼ６日であった。産生速度の最大の可能な増加を表すＳｍａｘは、３．１３３であり、これに対して、８４２．５ＩＵ／Ｌの高いＳＣ50値が推定された。図７８ａおよび７８ｂはＲＢＣ数についてのシミュレーションを示し、図７９ａおよび７９ｂはヘモグロビン応答についてのシミュレーションである。
【０３３５】
図８０は健康なヒトにおけるＥＰＲＥＸ（登録商標）の投与後に得られた薬力学パラメーターを示す。薬物速度論モデルは、ＩＶ濃度−時間プロフィールに基づいて、２−区画から１−区画モデルへと単純化した。この薬力学モデルを内因性のＥＰＯレベルによる細胞の生成の制御によって延長し、体の自然なフィードバック機構を説明する別の要素もまた含まれた（図８１）。これは、ＰＩ区画によって代表される初期細胞の生成速度を低下することによって、それら自身の生成のフィードバック阻害を網状赤血球が起こすことを想定することによって行なわれた。この阻害が効力を有するにはＴＰ０時間かかることが想定される。阻害はＨｉｌｌ関数を用いてモデル化した。サルとヒトとの間の薬力学パラメーター推定の比較は、区画寿命パラメーターがそれらの種間で非常に似ていることを示している。ＳｍａｘおよびＳＣ５０値は種間で異なるようだが、これは、ヒトにおける網状赤血球に対するｒＨｕＥｐｏの効果についてのモデル中のカウンター調節およびベースラインＥｐｏ濃度の複雑性の増加に起因し得る。
【０３３６】
（考察）
薬物速度論：ＩＶ投薬の際に、速度論は、２指数関数（ｂｉｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌ）的減少に従い、非線形傾向の２区画モデルを用いて表された。ｒＨｕＥｐｏの主な作用部位は骨髄であり、骨髄は大いに灌流した組織であり、従って、本モデルの末梢区画はｒＨｕＥｐｏのいくらかの非特異的結合のみを示し得る。最も低い用量の最終局面は過剰評価された。これは、後半の時点での濃度測定が入手できなかったこと、または、おそらくこの用量の範囲での異なった薬物速度論的行動に起因し得る。ヒトに似て、推定Ｖｄはサルの血液体積に非常に近く、速度論は、高いＫｍ値によって示されたように、ゆるやかに非直線的であった。
【０３３７】
ＳＣ投与の後、ｒＨｕＥｐｏのピーク濃度は１日以内に達成され、ｒＨｕＥｐｏはＩＶ投与の後の時間と比較して、はるかに長い時間循環中に残った。これは最終局面を支配するｋａが、フリップフロップ現象の発生に起因する。これらのデータパターンは、多局面吸収モデルを使用して受けいれられる程度に表現された。最も高いＳＣ用量の最初の濃度はわずかに過剰評価された。しかし、単独のセットのパラメーターが全ての用量レベルを記載するのに使用された事実を考慮すると、このことは受け入れられるべきである。本発明者らの二重吸収薬物速度論的モデルは、ＳＣ部位からの薬物の異なった吸収経路を説明するのに使用され得る。用量の一部の急速な零次流入は、皮下部位の血管を経由して血液に直接入ることによって説明され得る。これに対して、用量の別の画分は、リンパ管に入り、リンパから血液へのゆっくりとした１次吸収プロセスを経験すると想定される。これはまた、１次吸収の開始の１０時間の時間差を説明する。バイオアベイラビリティは用量とともに増加し、２４００ＩＵ／ｋｇおよびそれ以上の用量で１００％であった。この同じ二重吸収モデルはヒトのＳＣ速度論をうまく特徴づけ、用量とともに増加するバイオアベイラビリティという似通った傾向を示した。しかし、サルとは異なって、用量の主要な画分が、ヒトにおいて零次経路を経由して吸収されることをこのモデルは予測した。
【０３３８】
薬力学：網状赤血球数は４８時間以内に増加し始め、約１０日でピークに達し、その後落ち始め、２０日までにベースラインレベルに戻った。本発明者らのカテナリー−エイジングモデルはデータをうまく特徴付けているようである。図７８ａ，７８ｂ，７９ａおよび７９ｂのシミュレーションは網状赤血球の動力学が、ＲＢＣ数およびヘモグロビン数の変化を予想するために簡単に使用され得る。
【０３３９】
エリスロポエチンの作用の正確なモードはまだ十分に理解されていない。ｒＨｕＥｐｏの主要の作用は初期の前駆細胞の増殖の刺激であると考えられた。しかし、エリスロポエチンは分化した赤芽球にも作用するという実験動物に関する研究からの証拠がある（Ｋｒａｎｔｚら、Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ  ａｎｄ
ｔｈｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｅｓｉｓ，１９７０，Ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃｈｉｃａｇｏ  Ｐｒｅｓｓ）。この思考学派は、ｒＨｕＥｐｏに初期の２４時間に網状赤血球応答を生じるために成熟した赤芽球で作用し、正赤芽球への付加効果に起因する大赤血球症が続くという提案を導く。この理論に基づいて、本発明者らは、２つの前駆体細胞集団で発生するｒＨｕＥｐｏの刺激を用いて機械論のカテナリー−エイジングモデルを開発し、そのモデルは、赤芽球および初期の前駆細胞を示し得る。
【０３４０】
赤芽球は、平均的に成熟すると２〜５回細胞分裂を経験するか、または種によって１１〜４８時間のターンオーバー期間を経験することが公知である（同上、Ａｐｌｅｎら、１９５９、Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，７７：７５３，Ｏｓｇｏｏｄ，Ｅ．，１９５４，Ｂｌｏｏｄ，９：１１４１，およびＦｌｉｅｄｎｅｒら、１９５９、Ａｃｔａ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．，２２：６５）。本発明者らのモデルは、新規に生成された網状赤血球は実際に血行に放出される前に、１５時間の時間差があることを予想しており、これは赤芽球の成熟時間を反映する。
【０３４１】
予測された網状赤血球の寿命は６日である。ヒトでは、網状赤血球の段階での細胞の正常な寿命は、骨髄で約３．５日、血中で１〜２日である（Ｈｉｌｌｍａｎら、１９６７、Ｓｅｍ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．，４（４）：３２７）。しかし、重症な貧血の動物モデルでは、骨髄網状赤血球プールが、循環へとシフトされていることが示されている（同上、およびＢｅｓｓｉｓら、１９７３、Ｌｉｖｉｎｇ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｖｅｒｌａｇ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ−Ｂｅｒｌｉｎ）。これらの置きかえられた骨髄網状赤血球は赤芽球を生成するのに通常の網状赤血球よりも３日長くかかる。よって、本発明者らは、本発明者らのモデルによって予測される網状赤血球の平均寿命は、骨髄および血中の成熟期間の合計を反映していると予測し得る。
【０３４２】
論文で、ヒトでは、赤芽球前駆体が骨髄中で網状赤血球を形成するのに平均５日かかると報告されている（Ｋｒａｎｔｚら、前出）。この時間はＰ１およびＰ２区画中で細胞が費やす時間の合計を実際に反映し、それは８５時間であると予測される。
【０３４３】
結論として、ｒＨｕＥｐｏ速度論および動力学は種（サルおよびヒト）を超えてかなり類似しているようであり、本発明のモデルはｒＨｕＥｐｏ効果の速度論および動力学を十分に概算し得、細胞のエイジング時間のパラメーターの現実的な予測を付与する。
【０３４４】
記載された本発明の実施例およびシステムの種々の改変および変化は、本発明の範囲および精神から反れることなく当業者にとって明らかである。本発明は特定の好ましい実施形態と関連して記載されたが、請求された発明はそのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことが理解されるべきである。確かに、当業者にとって自明である本発明を実施するための記載された型の種々の改変は、先の特許請求の範囲内であることが意図される。
【図面の簡単な説明】
【０３４５】
【図１】図１は、赤血球生成のプロセスである。
【図２】図２は、５つの示される用量レベルの静脈投与後の、血清ｒＨｕＥＰＯ濃度対時間プロフィールである。１５０  ＩＵ／Ｋｇ用量および３００  ＩＵ／ｋｇ用量についてのデータは、６人の健常被検体からの平均データであり、一方、他の用量は、１人の被検体のデータである。円は、ベースラインＥＰＯ濃度について補正したデータであり、一方、実線は、上記の方程式１、２および３にそのデータを当てはめることから得られる。
【図３】図３は、静脈内および皮下ＥＰＯ用量についての薬物速度論的パラメーターである。
【図４】図４は、血漿ｒＨｕＥＰＯ（ＣEPO）対時間プロフィールの分析に使用される本発明の薬物速度論的モデルの模式図である。使用される記号は、上記の発明の詳細な説明の定義の節にて規定されている。
【図５Ａ】図５Ａは、３００  ＩＵ／ｋｇ用量、４５０  ＩＵ／ｋｇ用量、６００  ＩＵ／ｋｇ用量、および９００  ＩＵ／ｋｇ用量の皮下投与後の、血清ｒＨｕＥＰＯ濃度対時間プロフィールである。各用量についてのデータ点は、５人の健常被検体の平均値である。そのデータは、ベースラインＥＰＯ濃度について補正され、一方、そのデータを方程式１、２および３に当てはめることから、実線が得られる。
【図５Ｂ】図５Ｂは、１２００  ＩＵ／ｋｇ用量、１３５０  ＩＵ／ｋｇ用量、１８００  ＩＵ／ｋｇ用量、および２４００  ＩＵ／ｋｇ用量の皮下投与後の、血清ｒＨｕＥＰＯ濃度対時間プロフィールである。各用量についてのデータ点は、５人の健常被検体の平均値である。そのデータは、ベースラインＥＰＯ濃度について補正され、一方、そのデータを方程式１、２および３に当てはめることから、実線が得られる。
【図６】図６は、図４Ａおよび４Ｂに示される８つの用量レベルの皮下投与後の、用量に対する血清ｒＨｕＥＰＯ濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）である。このＡＵＣは、Ｓｐｌｉｎｅ法により算出された。
【図７】図７は、８つの示される用量レベルの皮下投与後の用量に対するｒＨｕＥＰＯのバイオアベイラビリティ（Ｆ）である。このＦ値は、本文中に説明されるようなモデルに薬物速度論的データをまず当てはめることにより得られた。線形回帰によって、ｒ2＝０．９７１３、傾き＝０．０００２４９５２、および切片＝０．３８８４が得られた。
【図８】図８は、皮下ｒＨｕＥＰＯ投与についてのバイオアベイラビリティ値である。
【図９】図９は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．（上）および６００ＩＵ／ｋｇ／週（下）の複数の投与レジメンの間の、血清ｒＨｕＥＰＯ濃度対時間のプロフィールである。黒丸は平均データを示し、一方、線はモデル予測値である。
【図１０】図１０は、網状赤血球濃度、ＲＢＣ濃度およびヘモグロビン濃度の分析に使用される薬力学モデルの概略図である。符号は、以下の本発明の詳細な説明の定義の節で定義される。
【図１１】図１１は、８つの示された皮下ｒＨｕＥＰＯ用量レベルについての、平均網状赤血球数対時間のプロフィールである。
【図１２Ａ】図１２Ａは、３００ＩＵ／ｋｇ、４５０ＩＵ／ｋｇ、６００ＩＵ／ｋｇおよび９００ＩＵ／ｋｇ用量の皮下投与後の、網状赤血球数対時間のプロフィールである。各々の用量についてのデータは、５の健康な被験体からの平均値である。符号は、実験データを示し、一方、黒線は、データを以下の方程式４、５、６および７に当てはめることによって得られた。
【図１２Ｂ】図１２Ｂは、１２００ＩＵ／ｋｇ、１３５０ＩＵ／ｋｇ、１８００ＩＵ／ｋｇおよび２４００ＩＵ／ｋｇ用量の皮下投与後の、網状赤血球数対時間のプロフィールである。各々の用量についてのデータは、５の健康な被験体からの平均値である。符号は、実験データを示し、一方、黒線は、データを方程式４、５、６および７に当てはめることによって得られた。
【図１３】図１３は、皮下ＥＰＯ効果についての見積もられた薬力学パラメーターおよび決定された薬力学パラメーターである。
【図１４】図１４は、８つの示されたｒＨｕＥＰＯの用量レベルの単回皮下投与後の、ヘモグロビン濃度対時間のプロフィールである。黒丸は平均データであり、一方、黒線はモデル予測である。
【図１５】図１５は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．  ｒＨｕＥＰＯの複数回皮下投与後の、網状赤血球応答、ＲＢＣ応答およびヘモグロビン応答である。黒丸は測定データを示し、そして、黒線はモデル予測である。
【図１６】図１６は、６００ＩＵ／ｋｇ週ｒＨｕＥＰＯの複数回皮下投与後の、網状赤血球応答、ＲＢＣ応答およびヘモグロビン応答である。黒丸は測定データを示し、そして、黒線はモデル予測である。
【図１７】図１７は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における被験体についての、薬物速度論的データおよび薬力学的データに寄与する、エポエチンα（Ｅｐｏｅｔｉｎ  Ａｌｆａ）の臨床薬物速度論的研究の概要である。
【図１８Ａ】図１８Ａは、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３についての生物薬剤学的研究の概要である。
【図１８Ｂ】図１８Ｂは、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０についての生物薬剤学的研究の概要である。
【図１８Ｃ−１】図１８Ｃは、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８についての生物薬剤学的研究の概要である。
【図１８Ｃ−２】（図１８Ｃの続き）。
【図１８Ｄ−１】図１８Ｄは、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９についての生物薬剤学的研究の概要である。
【図１８Ｄ−２】（図１８Ｄの続き）。
【図１９−１】図１９は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３についての薬物速度論的データの概要である。
【図１９−２】（図１９の続き）。
【図２０】図２０は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３についての分析方法の概要である。
【図２１】図２１は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９に登録された被験体についての、平均±ＳＤ人口統計およびベースラインパラメーターである。
【図２２】図２２は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８における被験体についての、平均血清エポエチンα濃度−時間プロフィール（ベースラインＥＰＯについては訂正せず）である。
【図２３】図２３は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９における被験体についての、平均血清エポエチンα濃度−時間プロフィール（ベースラインＥＰＯについては訂正せず）である。
【図２４−１】図２４は、平均±ＳＤ（％ＣＶ）薬物速度論的パラメーター（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９）である。
【図２４−２】（図２４の続き）。
【図２５】図２５は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９において、単回または複数回のＳＣ用量レジメンを受ける被験体についての、平均±ＳＤ  Ｃｍａｘと用量との間の関係である。
【図２６】図２６は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９において、単回または複数回のＳＣ用量レジメンを受ける被験体についての、平均±ＳＤ  ＣＬ／Ｆと用量との間の関係である。
【図２７】図２７は、４週間の研究期間についての平均パーセント網状赤血球−時間のプロフィールである（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９）。
【図２８】図２８は、４週間の１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．（Ｎ＝５）および６００ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ（Ｎ＝５）のエポエチンα後のベースラインプロフィールからのヘモグロビンにおける平均±ＳＣ変化である（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９）。
【図２９】図２９は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０における被験体の人口統計データである。
【図３０】図３０は、４回目の投薬週の間に、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．（Ｎ＝２４）または４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ（Ｎ＝２２）を受けた後の健康な被験体におけるエポエチンαの平均血清濃度−時間のプロフィール（ベースラインＥＰＯについては訂正せず）である（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０）。
【図３１】図３１は、平均±ＳＤ（％ＣＶ）の薬物速度論的パラメーターである（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０）。
【図３２】図３２は、パーセント網状赤血球におけるベースラインからの平均変化のプロフィールである。
【図３３】図３３は、ヘモグロビン（ｇ／ｄｌ）におけるベースラインからの平均変化のプロフィールである。
【図３４】図３４は、ベースライン値について訂正された平均±ＳＤ（％ＣＶ）の薬力学的パラメーターである（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０）。
【図３５】図３５は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における被験体の平均±ＳＤの人口統計データである。
【図３６】図３６は、４回目の投薬週の間に、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．（Ｎ＝１７）または４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ（Ｎ＝１７）を受けた後の健康な被験体におけるエポエチンαの平均血清濃度−時間のプロフィール（ベースラインＥＰＯについては訂正せず）である（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３）。
【図３７】図３７は、ベースライン値について訂正された平均±ＳＤ（％ＣＶ）の薬物速度論的パラメーターである（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３）。
【図３８】図３８は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における被験体についての、パーセント網状赤血球におけるベースラインからの平均変化のプロフィールである。
【図３９】図３９は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における被験体についての、ヘモグロビン（ｇ／ｄｌ）におけるベースラインからの平均変化のプロフィールである。
【図４０】図４０は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における被験体についての、ベースラインの総赤血球（×１０12／ｌ）からの平均変化のプロフィールである。
【図４１】図４１は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における被験体についてのベースライン値について訂正された、平均±ＳＤ（％ＣＶ）薬力学的パラメーターである。
【図４２−１】図４２は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９、ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における被験体についてのベースライン値について訂正された、平均±ＳＤ（％ＣＶ）薬物速度論的パラメーターである。
【図４２−２】（図４２の続き）。
【図４３】図４３は、エポエチンα（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３５８およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３５９）のＡＵＣ（０〜２９日）の機能としてのパーセント網状赤血球における平均ＡＵＣ変化である。
【図４４】図４４は、エポエチンα（臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０およびＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３）のＡＵＣ（０〜２９日）の機能としてのパーセント網状赤血球における平均ＡＵＣ変化である。
【図４５】図４５は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における被験体についてのヘモグロビン（ｇ／ｄｌ）におけるベースラインからの平均変化のプロフィールである。
【図４６】図４６は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７０における被験体についてのヘモグロビン（ｇ／ｄｌ）におけるベースラインからの平均変化のプロフィールである。
【図４７】図４７は、ＥＰＯ研究（ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３）を完了した３４人の被験体の人口統計およびベースライン特徴である。１８人の被験体は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．のＥＰＯ投与レジメンを投与された群１の一部であり、そして１８人の被験体は、４０，０００ｑ．ｗでＥＰＯを投与された群２の一部分であった。人口統計特徴は、性別、年齢（歳）、体重（ｋｇ）、身長（ｃｍ）および人種を含む。
【図４８】図４８は、三角で示された群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）および丸で示された群２（４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ）における被験体についての投与前内因性エリスロポエチン濃度について訂正されない血清エポエチンα濃度である。
【図４９】図４９は、三角で示された群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）および丸で示された群２（４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ）における被験体についての投与前内因性エリスロポエチン濃度について訂正されない血清エポエチンα濃度である。
【図５０】図５０は、群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）および群２（４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ）における個々の被験体についてのデータを含む、平均（ＳＤ）［％ＣＶ］薬物速度論的パラメーター値である。
【図５１】図５１は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３についての投薬群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）および群２（４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ）におけるすべての被験体に対する効力集団についての研究日毎のパーセント網状赤血球におけるベースラインからの平均（ＳＤ）変化の概要である。
【図５２】図５２は、すべての被験体に対する効力集団についての研究日毎のパーセント網状赤血球におけるベースラインからの平均（ＳＤ）変化の概要である。白丸は、群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）を示し、そして黒丸は、群２（４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ）を示す。得られたパラメーターを、図５１に列挙する。
【図５３】図５３は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３についての群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）および群２（４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ）におけるすべての被験体に対する効力集団についての研究日毎のヘモグロビン（ｇ／ｄＬ）におけるベースラインからの平均（ＳＤ）変化の概要である。
【図５４】図５４は、すべての被験体に対する効力集団についての研究日毎のパーセントヘモグロビン（ｇ／ｄＬ）におけるベースラインからの平均（ＳＤ）変化の概要である。白丸は、群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）を示し、そして黒丸は、群２（４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ）を示す。得られたパラメーターを、図５３に列挙する。
【図５５】図５５は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３におけるすべての被験体に対する効力集団についての研究日毎の赤血球（×１０12／Ｌ）におけるベースラインからの平均（ＳＤ）変化の概要である。
【図５６】図５６は、すべての被験体に対する効力集団についての研究日毎の赤血球（×１０12／Ｌ）におけるベースラインからの平均（ＳＤ）変化の概要である。白丸は、群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）を示し、そして黒丸は、群２（４０，０００ＩＵ  ｑ／ｗ）を示す。得られたパラメーターを、図５５に列挙する。
【図５７】図５７は、ベースライン値について訂正された平均の薬力学的パラメーター値である。％ＣＶは、パーセント変動係数である。注解は以下の通りである：a１ヶ月の研究期間に渡り、そして投与前ベースライン値について訂正された、％網状赤血球のＡＵＣ；b１ヶ月の研究期間に渡り、そして投与前ベースライン値について訂正された、ヘモグロビンのＡＵＣ；c１ヶ月の研究期間に渡り、そして投与前ベースライン値について訂正された、赤血球のＡＵＣ；dすべての被験体についての、４０，０００ＩＵ  ｑ．ｗ．〜１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．の平均パラメーター値の比；e両方の処置群におけるすべての雌性被験体を含む；f両方の処置群におけるすべての雄性被験体を含む；g雄性および雌性の被験体の間で統計学的に異なる（ｐ＜０．０５）。
【図５８】図５８は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における個々の被験体についての好ましい期間による、処置によって発生する有害事象である。
【図５９】図５９は、両方の処置群および研究日毎の、鉄、フェリチン、トランスフェリン飽和、および他の血清化学パラメーターにおけるベースラインからの平均変化である。臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３において、群１は、１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．ＥＰＯを投与され、そして群２は、４０，０００ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ．を投与された。
【図６０】図６０は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３についての両方の処置群および研究日毎の、鉄、フェリチン（ｎｇ／ｍＬ）におけるベースラインからの平均変化のプロフィールである。群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）は、白丸で示され、そして群２（４０，０００ＩＵ／ｋｇ  ｑ．ｗ）は黒丸で示される。フェリチンについて得られたパラメーターを、図５９に列挙する。
【図６１】図６１は、臨床研究ＥＰＯ−ＰＨＩ−３７３における群１（１５０ＩＵ／ｋｇ  ｔ．ｉ．ｗ．）における個体についての生命徴候測定におけるベースラインからの平均変化の概要である。
【図６２】図６２は、ｒＨｕＥＰＯの赤血球生成刺激効果についてのモデルの概略図である。
【図６３】図６３は、ＥＰＲＥＸ（登録商標）およびＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）のｒＨｕＥＰＯ投薬後の薬物速度論的パラメーターである。
【図６４】図６４は、ｒＨｕＥＰＯ投薬後の薬力学的パラメーターである。雄および雌についての網状赤血球データを別々に分析した。これらのパラメーターは、性に基づいたいくつかのわずかな薬力学的差を反映し得る。
【図６５】図６５は、４週間の６００ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗ．ＥＰＲＥＸ（登録商標）の投与後の薬力学的パラメーターのプロフィールである。平均ｒＨｕＥＰＯ濃度−時間、網状赤血球濃度−時間およびＲＢＣ濃度−時間プロフィールを示す。雄性被験体を黒丸で示し、一方、雌性被験体を白丸で示す。
【図６６】図６６は、１ヶ月の１５０ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗ．ＥＰＲＥＸ（登録商標）の投与後の薬力学的パラメーターのプロフィールである。平均ｒＨｕＥＰＯ濃度−時間、網状赤血球濃度−時間およびＲＢＣ濃度−時間プロフィールを示す。雄性被験体を黒丸で示し、一方、雌性被験体を白丸で示す。
【図６７】図６７は、２４００ＩＵ／ｋｇ／月の単回用量でのＰＲＯＬＥＡＳＥ（登録商標）の投与後の薬力学的パラメーターのプロフィールである。平均ｒＨｕＥＰＯ濃度−時間、網状赤血球濃度−時間およびＲＢＣ濃度−時間プロフィールを示す。雄性被験体を黒丸で示し、一方、雌性被験体を白丸で示す。
【図６８】図６８は、ｒＨｕＥＰＯの異なる用量／レジメンの投与後のヘモグロビンレベルのシミュレーションである。
【図６９】図６９は、体重５０ｋｇ、７０ｋｇおよび９０ｋｇの被験体に、４０，０００ＩＵ／週のｒＨｕＥＰＯの総用量の投与と比較して、２４週間の６００ＩＵ／ｋｇ／週のＥＰＯ用量レジメンについての、ヘモグロビンおよびＲＢＣの応答対時間のプロフィールのシミュレーションである。
【図７０Ａ】図７０Ａは、１２週間の１５０ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗ．のＥＰＯ用量レジメンについての癌患者における、網状赤血球、ＲＢＣおよびヘモグロビン応答対時間のプロフィールのシミュレーションである。
【図７０Ｂ】図７０Ｂは、１２週間の３００ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗ．のＥＰＯ用量レジメンについての癌患者における、網状赤血球、ＲＢＣおよびヘモグロビン応答対時間のプロフィールのシミュレーションである。
【図７０Ｃ】図７０Ｃは、１２週間の４５０ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗ．のＥＰＯ用量レジメンについての癌患者における、網状赤血球、ＲＢＣおよびヘモグロビン応答対時間のプロフィールのシミュレーションである。
【図７０Ｄ】図７０Ｄは、１２週間の６００ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗ．のＥＰＯ用量レジメンについての癌患者における、網状赤血球、ＲＢＣおよびヘモグロビン応答対時間のプロフィールのシミュレーションである。
【図７０Ｅ】図７０Ｅは、１２週間の９００ＩＵ／ｋｇ／ｔ．ｉ．ｗ．のＥＰＯ用量レジメンについての癌患者における、網状赤血球、ＲＢＣおよびヘモグロビン応答対時間のプロフィールのシミュレーションである。
【図７１】図７１は、免疫抑制された（ＩＳ）イヌおよび免疫抑制されないイヌについての日毎の平均ヘモグロビン時間−濃度プロフィールである。黒丸は、５０ＩＵ／ｋｇ／日ＩＳイヌで投与されたＥＰＯを示し、黒四角は、非ＩＳイヌについて５０ＩＵ／ｋｇ／日ｔ．ｉ．ｗ．で投与されたＥＰＯを示し、白三角は、ＩＳイヌについて６００ＩＵ／ｋｇ／週で投与されたＥＰＯを示し、黒三角は、非ＩＳイヌについての６００ＩＵ／ｋｇ／週で投与されたＥＰＯを示し、黒菱形は、ＩＳイヌについての生理食塩水コントロールを示し、そして黒八角形は、非ＩＳイヌについての生理食塩水コントロールを示す。
【図７２】図７２は、免疫抑制されたイヌおよび免疫抑制されないイヌについての日毎の平均赤血球時間−濃度プロフィールである。黒丸は、５０ＩＵ／ｋｇ／日ＩＳイヌで投与されたＥＰＯを示し、黒四角は、非ＩＳイヌについて５０ＩＵ／ｋｇ／日ｔ．ｉ．ｗ．で投与されたＥＰＯを示し、白三角は、ＩＳイヌについて６００ＩＵ／ｋｇ／週で投与されたＥＰＯを示し、黒三角は、非ＩＳイヌについての６００ＩＵ／ｋｇ／週で投与されたＥＰＯを示し、黒菱形は、ＩＳイヌについての生理食塩水コントロールを示し、そして黒八角形は、非ＩＳイヌについての生理食塩水コントロールを示す。
【図７３】図７３は、サルにおけるｒＨｕＥＰＯについてのＰＫ／ＰＤモデルである。
【図７４】図７４は、ＥＰＲＥＸ（登録商標）の３度の単回静脈内用量および６度の単回皮下用量の投与後のｒＨｕＥｐｏ濃度−時間プロフィールについてのフィッティングである。得られたパラメーターを、図７５に列挙する。
【図７５】図７５は、サルにおけるＰＫパラメーターである。
【図７６Ａ】図７６Ａは、４００ＩＵ／ｋｇ、１０００ＩＵ／ｋｇおよび２４００ＩＵ／ｋｇの投与レジメンについての平均網状赤血球濃度−時間プロフィールである。
【図７６Ｂ】図７６Ｂは、５０００ＩＵ／ｋｇ、２０，０００ＩＵ／ｋｇおよび４０，０００ＩＵ／ｋｇの投与レジメンについての平均網状赤血球濃度−時間プロフィールである。
【図７７】図７７は、サルにおけるＰＤパラメーターである。
【図７８Ａ】図７８Ａは、４００ＩＵ／ｋｇ、１０００ＩＵ／ｋｇおよび２４００ＩＵ／ｋｇの投与レジメンについての平均ＲＢＣ濃度−時間プロフィールである。
【図７８Ｂ】図７８Ｂは、５，０００ＩＵ／ｋｇ、２０，０００ＩＵ／ｋｇおよび４０，０００ＩＵ／ｋｇの投与レジメンについての平均ＲＢＣ濃度−時間プロフィールである。
【図７９Ａ】図７９Ａは、４００ＩＵ／ｋｇ、１０００ＩＵ／ｋｇおよび２４００ＩＵ／ｋｇの投与レジメンについての平均ヘモグロビン濃度−時間プロフィールである。
【図７９Ｂ】図７９Ｂは、５，０００ＩＵ／ｋｇ、２０，０００ＩＵ／ｋｇおよび４０，０００ＩＵ／ｋｇの投与レジメンについての平均ヘモグロビン濃度−時間プロフィールである。
【図８０】図８０は、ヒトにおけるＰＤパラメーターである。
【図８１】図８１は、ヒトにおけるｒＨｕＥＰＯについてのＰＫ／ＰＤモデルである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１８Ｃ−１】
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【図１８Ｃ−２】
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【図１８Ｄ−１】
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【図１８Ｄ−２】
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【図１９−１】
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【図１９−２】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４−１】
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【図２４−２】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２−１】
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【図４２−２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【図６１】
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【図６２】
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【図６３】
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【図６４】
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【図６５】
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【図６６】
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【図６７】
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【図６８】
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【図６９】
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【図７０Ａ】
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【図７０Ｂ】
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【図７０Ｃ】
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【図７０Ｄ】
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【図７０Ｅ】
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【図７１】
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【図７２】
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【図７３】
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【図７４】
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【図７５】
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【図７６Ａ】
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【図７６Ｂ】
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【図７７】
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【図７８Ａ】
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【図７８Ｂ】
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【図７９Ａ】
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【図７９Ｂ】
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【図８０】
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【図８１】
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