(57)【要約】【課題】  バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)などに有効な抗菌剤を提供しようとするもの。【解決手段】  この発明の抗菌剤はα―マンゴスチンを有効成分とし、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)に活性を有する。この抗菌剤はα―マンゴスチンを有効成分とするものであるが、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)に対して抗菌作用を発揮するものである。またこの発明の抗菌剤は、α―マンゴスチンを有効成分とし、バンコマイシン感受性腸球菌(ＶＳＥ)に活性を有する。この抗菌剤はα―マンゴスチンを有効成分とするものであるが、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＳＥ)に対して抗菌作用を発揮するものである。またこの発明の抗菌剤は、α―マンゴスチンを有効成分とし、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(ＭＲＳＡ)に活性を有する。この抗菌剤はα―マンゴスチンを有効成分とするものであるが、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(ＭＲＳＡ)に対して抗菌作用を発揮するものである。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
α―マンゴスチンを有効成分とし、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ  )に活性を有することを特徴とする抗菌剤。
【請求項２】
α―マンゴスチンを有効成分とし、バンコマイシン感受性腸球菌(ＶＳＥ)に活性を有することを特徴とする抗菌剤。
【請求項３】
α―マンゴスチンを有効成分とし、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(ＭＲＳＡ)に活性を有することを特徴とする抗菌剤。
【請求項４】
他の抗生物質と併用するようにした請求項１乃至３のいずれかに記載の抗菌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)などに有効な抗菌剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来より、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(ＭＲＳＡ)の院内感染が問題となっている（例えば、非特許文献１参照）。
【０００３】
このＭＲＳＡは、化膿性炎、腸炎など創傷感染、呼吸器感染、消化器感染の原因菌である。現在は多剤耐性ＭＲＳＡが主流となっており、その治療の切り札としてバンコマイシンが用いられている。
【０００４】
しかし、近年バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）の急速な院内感染の広がりが見られるようになってきた。すなわち、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)やバンコマイシン感受性腸球菌(ＶＳＥ)による院内(病院)感染は医療施設における重大な問題である。
【非特許文献１】特定非営利活動法人バイオクリーン・ラボ事務局ホームページ、“ＭＲＳＡおよびＭＲＳＡ院内感染とは？”、[online]、２００３年０７月０３日更新、 [2003/7/16検索]、インターネット＜ＵＲＬ：http://www.d1.dion.ne.jp/~mrsaict/link2.html＞
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
そこでこの発明は、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)などに有効な抗菌剤を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
前記課題を解決するためこの発明では次のような技術的手段を講じている。
(１)  この発明の抗菌剤は、α―マンゴスチンを有効成分とし、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)に活性を有することを特徴とする。
【０００７】
この抗菌剤はα―マンゴスチンを有効成分とするものであるが、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)に対して抗菌作用を発揮するものである。
(２)  この発明の抗菌剤は、α―マンゴスチンを有効成分とし、バンコマイシン感受性腸球菌(ＶＳＥ)に活性を有することを特徴とする。
【０００８】
この抗菌剤はα―マンゴスチンを有効成分とするものであるが、バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＳＥ)に対して抗菌作用を発揮するものである。
(３)  この発明の抗菌剤は、α―マンゴスチンを有効成分とし、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(ＭＲＳＡ)に活性を有することを特徴とする。
【０００９】
この抗菌剤はα―マンゴスチンを有効成分とするものであるが、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(ＭＲＳＡ)に対して抗菌作用を発揮するものである。
(４)  他の抗生物質と併用するようにしたこととしてもよい。
【００１０】
このように構成すると、より抗菌作用を発揮することができる。前記他の抗生物質として、アンピシリン(ＡＢＰＣ)、ゲンタマイシン(ＧＭ)、ミノサイクリン(ＭＩＮＯ)、ホスホマイシン(ＦＯＭ)、及び塩酸バンコマイシン(ＶＣＭ)などを例示することができる。
【００１１】
α―マンゴスチンとＧＭとの間にはＶＲＥに対する抗菌効果の相乗作用が、α―マンゴスチンとＡＢＰＣ、ＭＩＮＯ、ＦＯＭ、及びＶＣＭとの間にはＶＲＥに対する部分的な相乗作用が認められた。
【００１２】
ＶＳＥに対しては、α―マンゴスチンとＶＣＭとの間に抗菌活性の相乗作用が認められ、α―マンゴスチンとＡＢＰＣ、ＧＭ、ＭＩＮＯ、及びＦＯＭとの間に部分的な相乗作用が認められた。
【００１３】
α―マンゴスチンとＶＣＭとの間にはＭＲＳＡに対する抗菌効果の相乗作用が、α―マンゴスチンとＡＢＰＣ、ＧＭ、ＭＩＮＯ、及びＦＯＭとの間にはＭＲＳＡに対する抗菌効果の部分的な相乗作用が認められた。
【００１４】
α―マンゴスチンとＧＭとの間にはＭＳＳＡに対する抗菌効果の相乗作用が、α―マンゴスチンとＡＢＰＣ、ＭＩＮＯ、ＦＯＭ、及びＶＣＭとの間にはＭＳＳＡに対する抗菌効果の部分的な相乗作用が認められた。
【００１５】
すなわち、α―マンゴスチンと抗生物質との併用は院内感染予防に非常に効果があるものと考えられる。
【発明の効果】
【００１６】
この発明は上述のような構成であり、次の効果を有する。
【００１７】
バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)などに有効な抗菌剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
以下、この発明の実施の形態を具体的に説明する。
【００１９】
東南アジア、スリランカ等で自生するマンゴスチンから分離して得たα―マンゴスチンやβ―マンゴスチンなどの抗ＶＲＥ活性や抗ＶＳＥ活性、抗ＭＲＳＡ活性などを検討するとともに、汎用抗生物質との間での抗菌活性の相乗作用の有無について検討した。
(１)供試試料
α―マンゴスチン及び同時に得られるβ―マンゴスチン、並びに汎用抗生物質〔アンピシリン(ＡＢＰＣ)、ゲンタマイシン(ＧＭ)、ミノサイクリン(ＭＩＮＯ)、ホスホマイシン(ＦＯＭ)、及び塩酸バンコマイシン(ＶＣＭ)〕を試験に供した。ここで、前記α―マンゴスチンは〔化１〕の化学構造を、β―マンゴスチンは〔化２〕の化学構造を有するものである。
【００２０】
【化１】
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【００２１】
【化２】
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【００２２】
(２)供試菌株
表１に示す５株のＶＲＥ及び９株のＭＲＳＡを試験に供した。
【００２３】
【表１】
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【００２４】
(３)ＭＩＣ値の測定
ＳＣＤ培地(日本製薬株式会社製)をＶＲＥ及びＶＳＥの前培地用に使用した。また、ミューラーヒントン(ＭＨ)寒天培地(Ｄｉｆｃｏ製)を最小発育阻止濃度(ＭＩＣ)値の測定用に使用した。
【００２５】
α―マンゴスチン、β―マンゴスチン、汎用抗生物質のＶＲＥ、ＶＳＥ及びＭＲＳＡに対するＭＩＣ値を、日本化学療法学会の標準法であるミクロプランター(佐久間製作所製)を使用する寒天平板希釈法(五島ら、Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，２９，７６−７９，１９８１)に従い測定した。
【００２６】
その結果、表２に示すようにα―マンゴスチンの５株のＶＲＥに対するＭＩＣ値は３．１３μｇ/ｍＬ又は６．２５μｇ/ｍＬ、３株のＶＳＥに対するＭＩＣ値は６．２５μｇ/ｍＬ又は３．１３μｇ/ｍＬであり、比較対照に使用したβ―マンゴスチンやＧＭよりも優れた値を示した。
【００２７】
また表３に示すようにα―マンゴスチンのＭＲＳＡに対するＭＩＣ値は６．２５μｇ/ｍＬ又は１２．５μｇ/ｍＬであり、比較対照に使用したβ―マンゴスチンよりも優れた値を示した。
【００２８】
【表２】
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【００２９】
【表３】
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【００３０】
(４)汎用抗生物質との間での相乗作用の検討
α―マンゴスチンと汎用抗生物質との間でのｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける抗菌効果の相乗作用の有無をＤｉｄｒｙらの方法に従い、表３に示すＦＩＣ  ｉｎｄｅｘの計算法(Ｃｈｅｃｋｅｒｂｏａｒｄ法)に沿ってＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ(Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｉｎｈａｂｉｔｏｒｙ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ)を算出することにより求めた。
【００３１】
【表４】
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【００３２】
その結果、図１に示すように、α―マンゴスチンとＧＭとの間にはＶＲＥに対する抗菌効果の相乗作用が、α―マンゴスチンとＡＢＰＣ、ＭＩＮＯ、ＦＯＭ、及びＶＣＭとの間にはＶＲＥに対する部分的な相乗作用が認められた。
【００３３】
ＶＳＥに対しては、α―マンゴスチンとＶＣＭとの間に抗菌活性の相乗作用が認められ、α―マンゴスチンとＡＢＰＣ、ＧＭ、ＭＩＮＯ、及びＦＯＭとの間に部分的な相乗作用が認められた。
【００３４】
α―マンゴスチンとＶＣＭとの間にはＭＲＳＡに対する抗菌効果の相乗作用が、α―マンゴスチンとＡＢＰＣ、ＧＭ、ＭＩＮＯ、及びＦＯＭとの間にはＭＲＳＡに対する抗菌効果の部分的な相乗作用が認められた。
【００３５】
α―マンゴスチンとＧＭとの間にはＭＳＳＡに対する抗菌効果の相乗作用が、α―マンゴスチンとＡＢＰＣ、ＭＩＮＯ、ＦＯＭ、及びＶＣＭとの間にはＭＳＳＡに対する抗菌効果の部分的な相乗作用が認められた。
【００３６】
以上より、α―マンゴスチンと抗生物質との併用は院内感染予防に非常に効果があるものと考えられる。
【実施例】
【００３７】
次に、この発明の構成をより具体的に説明する。
(１)α―マンゴスチン、β―マンゴスチンの分離及び精製
Ｇａｒｃｉｎｉａ  ｍａｎｇｏｓｔａｎａ  Ｌ．(マンゴスチン)の樹皮、茎を乾燥させたのち細断し、ｎ−ヘキサン、塩化メチレン、メタノールで抽出した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー(Ｆｌｕｋａ  ６０７４，粒径：０．０６３〜０．２ｍｍ)を通過(溶媒：ｎ−ヘキサン、塩化メチレン、メタノール)させたのち、ｎ−ヘキサン抽出液層より２つの主要化合物であるα―マンゴスチン及びβ―マンゴスチン（黄色針状結晶)を得た。
【００３８】
これら２つの化合物の構造は、標準品及びそれぞれのスペクトルデータ(Ｍａｈａｂｕｓａｋａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，５０，４７４−４７８  １９８７；Ｐｒａｖｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０，３６１−３６２，１９９１)をもとに確認した。
(２)供試菌
ＶＲＥ：５株のバンコマイシン耐性腸球菌(Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ  ＡＴＣＣ  ５１２９９、Ｅ．ｆａｅｃａｌｉｓ  ＡＴＣＣ  ５１５７５、Ｅ．ｆａｅｃｉｕｍ  ＡＴＣＣ  ５１５５９、Ｅ．ｆａｅｃｉｕｍ  ＫＩＨＣ−２３７、及びＥ．ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ  ＫＩＨＣ−２４１)を使用した(表１参照)。なお、ＡＴＣＣ株は米国Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）より購入した。また、ＫＩＨＣ株(２株)は神戸市保険環境研究所から譲渡された株である。
【００３９】
ＶＳＥ：３株のバンコマイシン感受性腸球菌(Ｅ．ｆａｅｃａｌｉｓ  ＩＦＯ  １２９６５、Ｅ．ｆａｅｃｉｕｍ  ＩＦＯ  ３５３５、及びＥ．ｆａｅｃａｌｉｓ  ＡＴＣＣ  ８４５９)を使用した(表１参照)。
(３)汎用抗生物質
汎用抗生物質であるアンピシリン、ゲンタマイシン、ミノサイクリン、ホスホマイシン、及び塩酸バンコマイシンを相乗作用の有無の検討に使用した。
(４)α―マンゴスチンと汎用抗生物質との相乗作用
一定濃度のα―マンゴスチン溶液(５０％ジエチルスルホキサイド溶液)及び汎用抗生物質溶液を滅菌精製水で適宜２段階希釈した。各希釈液１ｍＬづつ(単独試料の場合は１ｍＬ)をそれぞれの滅菌プラスチックシャーレに適宜加えた。滅菌したＭＨ寒天培地８ｍＬ(α―マンゴスチン溶液又は各汎用抗生物質溶液単独の場合は９ｍＬ)を加え、よく振り混ぜた。冷後、α―マンゴスチン、汎用抗生物質、及びα―マンゴスチンと汎用抗生物質との混合溶液のＭＩＣ値をそれぞれ測定した。
【００４０】
以上の測定結果をもとに、ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値をＤｉｄｒｙらの方法により算出し(表４参照)、α―マンゴスチンと汎用抗生物質との間の相乗作用の有無を下記のＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値の範囲で評価した。
【００４１】
ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ≦０．５：相乗作用
０．５＜ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ＜１．０：部分的な相乗作用
１．０≦ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ：不関(相加作用)
ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ≧２．０：拮抗作用
(５)α―マンゴスチンと汎用抗生物質との相乗効果の有無
〔ア〕図１に示すように、α―マンゴスチンとゲンタマイシンとの間でＶＲＥに対する抗菌活性の相乗作用が認められた。平均ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値(及び標準偏差)は、０．４５１±０．０６９であった。
【００４２】
また、α―マンゴスチンとアンピシリン、ゲンタマイシン、ミノサイクリン、ホスホマイシン、及び塩酸バンコマイシンとの間にＶＲＥに対する部分的な相乗作用が認められた。平均ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値(及び標準偏差)は０．６０６±０．３２８、０．９６９±０．２１７、０．８２６±０．２８６、及び０．５０８±０．２７１であった。
【００４３】
〔イ〕一方、ＶＳＥに対しては、α―マンゴスチンと塩酸バンコマイシンとの間に抗菌活性の相乗作用が認められた。平均ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値(及び標準偏差)は０．３７８±０．１１３であった。また、α―マンゴスチンとアンピシリン、ゲンタマイシン、ミノサイクリン、及びホスホマイシンとの間に部分的な相乗作用が認められた。平均ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値(及び標準偏差)は０．８３６±０．２８４、０．５００±０．１０８、０．７５０±０．０００、及び０．７９２±０．１９１であった。
【００４４】
〔ウ〕α―マンゴスチンとＶＣＭとの間にはＭＲＳＡに対する抗菌効果の相乗作用があった。平均ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値(及び標準偏差)は０．４４１±０．１３１であった。また、α―マンゴスチンとアンピシリン、ゲンタマイシン、ミノサイクリン、及びホスホマイシンとの間にはＭＲＳＡに対する抗菌効果の部分的な相乗作用が認められた。平均ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値(及び標準偏差)は順にそれぞれ０．７７９±０．３４３、０．６６７±０．３５９、０．５８６±０．３０３、及び０．５０４±０．１４９であった。
【００４５】
〔エ〕α―マンゴスチンとゲンタマイシンとの間にはＭＳＳＡに対する抗菌効果の相乗作用があった。平均ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値(及び標準偏差)は０．４２８±０．２０９であった。また、α―マンゴスチンとアンピシリン、ミノサイクリン、ホスホマイシン、及び塩酸バンコマイシンとの間にはＭＳＳＡに対する抗菌効果の部分的な相乗作用が認められた。平均ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘ値(及び標準偏差)は順にそれぞれ０．６３５±０．３２５、０．７５０±０．０００、０．６２５±０．２１７、及び０．６２５±０．０００であった。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
バンコマイシン耐性腸球菌(ＶＲＥ)やバンコマイシン感受性腸球菌(ＶＳＥ)による院内(病院)感染の防止のために医療施設において好適に適用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】α―マンゴスチンと汎用抗生物質との相乗作用を説明する図
【図１】
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