(57)【要約】    【課題】  安全で且つ優れたエンドセリン抑制作用を有するエンドセリン抑制剤を提供する。    【解決手段】  カピラリシンを有効成分とするエンドセリン作用抑制剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
カピラリシンを有効成分とするエンドセリン作用抑制剤。
【請求項２】
カピラリシンからなるエンドセリン作用抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内におけるエンドセリンの作用を抑制するエンドセリン作用抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
エンドセリンは強力かつ持続的な血管収縮作用を有する環状ペプチドである。従って、エンドセリンの作用増大は、末梢、腎臓及び脳の血管における持続的な血管収縮等の原因となり、高血圧症、心筋梗塞、脳卒中、急性腎不全、レイノー症候群、アテローム硬化症、喘息、前立腺癌等の種々の疾病を引き起こすと考えられている。
【０００３】
エンドセリンの当該作用は、エンドセリンがそのレセプターに結合することによって惹起されることが明らかにされている。従って、エンドセリンの産生を抑制したり、レセプターへのエンドセリンの結合を阻害する物質は、エンドセリンの作用抑制に繋がり、前記疾患の予防・治療薬となり得る。
【０００４】
一方、カピラリシンは、キク科ヨモギ属のカワラヨモギ（Artemisia capillaris Thunb.）に含まれる成分であり、胆汁分泌促進等があることが知られている（例えば、非特許文献１参照）。しかしながら、カピラリシンにエンドセリンの作用を抑制する効果があることは全く知られていない。
【非特許文献１】「最新和漢薬用植物」刈米達矢  本村雄四郎  著（廣川書店）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、安全で且つ優れたエンドセリン抑制作用を有するエンドセリン抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、種々の植物成分のエンドセリンに対する作用を検討したところ、カピラリシンにエンドセリンの生理作用を抑制する効果があることを見出した。
【０００７】
すなわち本発明は、カピラリシンを有効成分とするエンドセリン作用抑制剤を提供するものである。
【０００８】
また本発明は、カピラリシンからなるエンドセリン作用抑制剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のエンドセリン作用抑制剤は、安全で且つ優れたエンドセリン抑制作用を有する。従って、本発明によれば、血管収縮等のエンドセリンの生理作用に起因する各種疾患の予防又は治療に有効な医薬、化粧料等を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明エンドセリン作用抑制剤におけるカピラリシンは、キク科ヨモギ属のカワラヨモギ（Artemisia capillaris Thunb.）に含まれる精油成分であり、以下の構造を有する。
【００１１】
【化１】
2005139131.tif 000002
【００１２】
カピラリシンは、カワラヨモギから抽出することにより得ることができる。抽出は、例えばカワラヨモギの全草、花蕾、葉をそのまま又は紛砕した後、水不溶性有機溶媒を用いて抽出し、抽出液をアルカリ処理後、水層を中和し、生成した沈殿物を水不溶性有機溶媒で抽出することにより行えばよい。
【００１３】
抽出溶剤には、例えば酢酸ブチル、酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル類が好適に用いられ、これらは単独又は混合して用いてもよい。
【００１４】
抽出過程においては、適宜、濃縮、希釈、濾過等の処理や、カラムクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等の適当な手段を用いて分離精製することができる。クロマトグラフィーの充填剤としては、シリカゲル、アルミナ、セルロース、デキストラン等を用いることができ、展開溶媒としては、水、エタノール、イソプロパノール、メタノール、アセトニトリル、酢酸エチル、アセトン、ヘキサン、クロロホルム、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、酢酸、アンモニア等を単独又は混合して用いることができる。
【００１５】
斯くして得られたカピラリシンは、後記実施例に示すように、エンドセリンの作用を抑制する効果を有することからエンドセリン作用抑制剤となり得る。すなわち、カピラリシンを有効成分とするエンドセリン作用抑制剤は、エンドセリン作用抑制効果を発揮する医薬品、医薬部外品又は化粧料として、カピラリシンからなるエンドセリン作用抑制剤は、種々の成分を配合することにより、同様の医薬品、医薬部外品又は化粧料等として用いることができ、エンドセリンの生理作用に起因する疾患、例えば高血圧症、虚血性心疾患、急性腎不全、レイノー症候群、アテローム硬化症、喘息等の疾病の予防、治療等に利用できる。
【００１６】
斯かる医薬品、医薬部外品又は化粧料は、外用、内用のいずれの方法でも投与することができるが、外用投与、特に皮膚外用剤の製剤形態とすることが好ましい。その剤型は、目的に応じて任意に選択でき、クリーム状、軟膏状、乳液状、ローション状、溶液状、ゲル状、パック状、パウダー状、スティック状等にできる。斯かる製剤は、本発明の効果を損なわない範囲で、化粧料、医薬部外品、医薬品等に一般に用いられる精製水、エタノール、油性物質、保湿剤、増粘剤、防腐剤、乳化剤、薬効成分、粉体、紫外線吸収剤、色素、香料、乳化安定剤、ｐＨ調整剤等を配合し、常法に従って製造できる。
【００１７】
本発明のカピラリシンを有効成分とするエンドセリン作用抑制剤におけるカピラリシンの含有量は、通常全組成の１×１０-5〜１×１０-3重量％、好ましくは５×１０-5〜１×１０-3重量％、より好ましくは１×１０-4〜１×１０-3重量％、特に、２．５×１０-4〜５×１０-4重量％であるのが好ましい。
【００１８】
本発明エンドセリン作用抑制剤の使用量（投与量）は、患者の体重、年齢、性別、疾患の程度等により適宜決定されるが、カピラリシンとして、経口投与の場合は成人１日当たり４〜４０ｍｇ、外用投与の場合は１日当たり１〜１０ｍｇを一回又は数回に分けて投与することができる。
【実施例】
【００１９】
試験例  エンドセリン作用抑制効果の評価
メラノサイトには、エンドセリンレセプターが存在し、エンドセリンがメラノサイトの活性化に関与することが報告されている（The Journal of Biological Chemistry Vol. 266, No. 27, 18352-18357, 1991）。従って、エンドセリンレセプターを有する細胞としてメラノサイトを用い、当該細胞の増殖能をもって、カピラリシンのエンドセリン作用抑制効果を評価した。
（１）材料及び方法
９６穴プレートにヒト培養メラノサイトを２．５×１０4cells/well（1 well＝135μl）の細胞密度で播種した。培地はサプルメント添加Ｍｅｄｉｕｍ １５４(Cascade Biologics Corporation)を用いた。培養24時間後、培地をＭｅｄｉｕｍ １５４(PMA -)に置換し、終濃度が１．２５μＭから５μＭとなるようにカピラリシン（「カピラリシン標準品」（和光純薬工業））を添加した。さらに、終濃度１０ｎＭとなるようにエンドセリン−１（ＥＴ−１；Sigma Corporation）を加えた。なお、ポジティブコントロールとしてカピラリシンは加えず、エンドセリン−１のみを終濃度１０ｎＭとなるように加えた群、及びネガティブコントロールとしてカピラリシン、エンドセリン−１共に加えない群を設定した。いずれのウェルも最終的な培地の量は２００μＬとした。
２０時間後、Ｍｅｄｉｕｍ １５４(PMA -)で調製した１０μci/mL 3Ｈ−チミジン  ２０μＬを各ウェルに加えた。４時間培養後、細胞内への3Ｈ−チミジンの取り込みを常法に従い、ｃｅｌｌ  ｍａｔｒｉｘ ９６、液体シンチレーションカウンターを用いて測定した。
【００２０】
（２）結果
カピラリシンの１．２５μＭ添加で、エンドセリン−１によるメラノサイトのＤＮＡ合成促進の抑制が認められた（図１）。なお、メラノサイトにおいて、カピラリシンは濃度１００μＭまで、アロマーブルー染色により細胞毒性がないことを確認した。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】エンドセリンのメラノサイト増殖作用に対する抑制効果を示す図である。
【図１】
2005139131.tif 000003