(57)【要約】【課題】インスリン様作用、抗酸化作用及び降圧作用を有し、安全に摂取することができ、且つ安価に製造できるものである機能性食品及び医薬、並びにそれらを簡便に製造することができる製造方法を提供する。【解決手段】ペプチドＴｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ及びこれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含むローヤルゼリー（ＲＪ）タンパク質分解物を含む機能性食品及び医薬；並びにＲＪ中のタンパク質を、酵素により分解する工程を含む機能性食品の製造方法。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ペプチドＴｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ及びこれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含むローヤルゼリータンパク質分解物を含むことを特徴とする機能性食品。
【請求項２】
ローヤルゼリー水溶液からタンパク質を除いた上清をさらに含む、請求項１記載の機能性食品。
【請求項３】
ローヤルゼリー中のタンパク質を、酵素により分解する工程を含むことを特徴とする、請求項１又は２記載の機能性食品の製造方法。
【請求項４】
ローヤルゼリー中のタンパク質を酵素により分解する工程を、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）由来のプロテアーゼ、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｌｉｓ）由来のプロテアーゼ、バチルス・ステアロセルモルフィス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）由来のプロテアーゼ、及びこれらの混合物からなる群より選択される酵素を用いて行うことを特徴とする、請求項３記載の製造方法。
【請求項５】
前記酵素が、アピシンを分解しうる酵素であることを特徴とする請求項３又は４記載の製造方法。
【請求項６】
ローヤルゼリー水溶液をのタンパク質を沈殿させ、タンパク質沈殿物及び上清に分ける工程と、
沈殿させた前記タンパク質を酵素により分解し、酵素分解物を得る工程と、
前記酵素分解物と前記上清とを合わせる工程とを含む、請求項３の機能性食品の製造方法。
【請求項７】
ペプチドＴｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ及びこれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含むローヤルゼリータンパク質分解物を含むことを特徴とする、インスリン様作用、アンジオテンシン変換酵素阻害作用、抗酸化作用又はこれらの組み合わせの作用を有する医薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、医薬、機能性食品及びその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ローヤルゼリー（以下ＲＪと略す）は、一般に滋養強壮剤として、又は発育促進、老化防止、若返りなどの機能を有する食品として摂取されている。ＲＪ中に含まれる生理活性物質としては、１０−ヒドロキシデセン酸等がこれまでに知られている（特許文献１参照）。また、化粧品添加物の分野において、ＲＪの有機溶媒抽出物は抗酸化作用を有することが知られており（特許文献２参照）、さらに抗酸化作用を向上させるためにＲＪ中のタンパク質を熱分解することも知られている（特許文献３参照）。しかしながら、これらの作用をより簡便な方法でさらによく向上させる手段が求められている。
【０００３】
ところで、近年、抗酸化作用を有する物質が、生体内等において血圧降下、活性酸素消去、過酸化物生成抑制、コレステロール上昇抑制及び脂肪代謝促進等の様々な好ましい効果を発現することが明らかになってきており、そのような作用を有する物質を医薬として、また食品に添加するなどして摂取することが好ましいことが知られている。また、生活習慣病の一つとして多く発生する高血圧を、有効に制御するニーズが近年特に大きくなっている。さらに、血糖値の低下等のため、生体内でインスリン様作用を発揮する物質についてのニーズがある。そして、これらの効果を安全に得ることができ、且つ安価に製造することができる医薬及び機能性食品が求められている。
【０００４】
【特許文献１】
特開平９−０６７２５２号公報
【特許文献２】
特開２００２−１７３４１３号公報
【特許文献３】
特開２００１−１１２７１５号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、インスリン様作用、抗酸化作用及び降圧作用を有し、安全に摂取することができ、且つ安価に製造できるものである機能性食品及び医薬を提供することにある。
【０００６】
本発明の別の目的は、インスリン様作用、抗酸化作用及び降圧作用を有し、且つ安全な機能性食品を簡便に製造することができる機能性食品の製造方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明によれば、ペプチドＴｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ及びこれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含むＲＪタンパク質分解物を含むことを特徴とする機能性食品が提供される。
【０００８】
また、本発明によれば、ＲＪ中のタンパク質を、酵素により分解する工程を含むことを特徴とする、前記機能性食品の製造方法が提供される。
【０００９】
さらに、本発明によれば、ＲＪ中のタンパク質を酵素により分解する工程を、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）由来のプロテアーゼ、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｌｉｓ）由来のプロテアーゼ、バチルス・ステアロセルモルフィス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）由来のプロテアーゼ、及びこれらの混合物からなる群より選択される酵素を用いて行うことを特徴とする、前記機能性食品の製造方法が提供される。
【００１０】
さらに、本発明によれば、ペプチドＴｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ及びこれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含むＲＪタンパク質分解物を含むことを特徴とする、インスリン様作用、アンジオテンシン変換酵素阻害作用、抗酸化作用又はこれらの組み合わせの作用を有する医薬が提供される。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本発明の機能性食品は、特定のＲＪタンパク質分解物を含む。
【００１２】
前記ＲＪとしては、セイヨウミツバチが産生するもの等の通常のＲＪを挙げることができ、生ＲＪ又は乾燥ＲＪを用いることができる。生ＲＪとしては、水分６３〜６８％、粗タンパク質１１〜１４．５％、１０−ヒドロキシデセン酸１．６％以上のものを挙げることができ、乾燥ＲＪとしては、水分量５％以下、粗タンパク質３０〜４１％、１０−ヒドロキシデセン酸３．８５％以上のものを挙げることができる。
【００１３】
前記ＲＪタンパク質分解物は、ペプチドＴｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ及びこれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含む。
【００１４】
本発明の機能性食品は、ＲＪからタンパク質を除いた上清をさらに含むことができる。このような上清は、具体的には後述する製造方法により得ることができる。
【００１５】
本発明の機能性食品中の、上記ＲＪタンパク質分解物の含有割合は、分解物の乾物として０．０１〜３０質量％とすることができる。また、本発明の機能性食品中の前記上清の含有割合は、上清の乾物として、０．０１〜３０質量％とすることができる。
【００１６】
本発明の機能性食品の形態は、特に限定はされないが、例として、錠剤、散剤、顆粒剤、調味料、食用油、菓子類、パン類、麺、パスタ類等の固形食品、スープ状及びゼリー状の食品、大豆発酵豆乳等の豆乳、スポーツ飲料等の飲料等の形態とすることができる。また、ペットフード、飼料、餌料等の、ヒト以外の動物の摂取に適した形態とすることもできる。
【００１７】
本発明の機能性食品は、ヒトのみならず、哺乳類等のヒト以外の動物にも適用することができる。
【００１８】
本発明の機能性食品の製造方法は、ＲＪ中のタンパク質を、酵素により分解する工程を含む。
【００１９】
酵素による分解の工程は、生、冷凍物、乾燥物等の形態のＲＪを、そのまま酵素反応に供することにより行なうこともできるが、好ましくはＲＪから分離して得たタンパク質を酵素反応に供することにより行なうことができる。
【００２０】
ＲＪからのタンパク質の分離は、ＲＪを水溶液とし、エタノール沈殿等の方法によりその中のタンパク質を沈殿させ、沈殿を回収することにより行なうことができる。前記エタノール沈殿は、具体的には例えば、ＲＪを水に５〜２０質量％の割合で溶解して水溶液とし、ｐＨを６．５〜７．５に調整し、これにエタノールを適宜添加しタンパク質を沈殿させることにより行なうことができる。エタノールの添加割合は、添加後の溶液全体に対するエタノール量として、５０〜８０質量％の割合で添加することができる。
【００２１】
ＲＪを水溶液としてタンパクを分離した後の上清は、タンパク質を分解してタンパク質分解物を得た後に、ＲＪタンパク質分解物と合わせて、機能性食品の成分の一部とすることができる。このように、上清をさらに含むことにより、ＲＪタンパク質分解物の有効成分と、エタノール可溶画分等の上清中の有効成分とを両方有効に摂取しうる機能性食品とすることができる。
【００２２】
酵素反応に用いる酵素としては、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）由来のプロテアーゼ、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｌｉｓ）由来のプロテアーゼ、バチルス・ステアロセルモルフィス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）由来のプロテアーゼ、及びこれらの混合物からなる群より選択される酵素を用いることができる。より具体的には例えば、天野エンザイム株式会社等より市販されるプロテアーゼＡ、プロテアーゼＮ、プロテアーゼＳ又はプロテアーゼＭ等を用いることができる。また、酵素反応に用いる酵素としては、特に、アピシン及び／又は分子量５５，０００の糖タンパク質を分解しうる酵素であることが好ましい。
【００２３】
酵素反応の反応条件は、用いる酵素が基質と反応する際の至適ｐＨ及び温度に応じて適宜選択できるが、例えば、水溶液中で、基質／酵素の質量比を１００〜５００とし、反応時間１〜２０時間で行なうことができる。反応温度は具体的には例えば５０〜６０℃とすることができるが、前記プロテアーゼＮ、プロテアーゼＳ等のように至適温度の高い酵素を用いる場合は、これよりも高い温度で反応を行なうことができる。
【００２４】
前記酵素反応により得られた、タンパク質の分解物を含む反応物は、必要に応じて、酵素を失活させる工程及びろ過する工程に供し、さらに必要に応じてｐＨを調整したり、さらには賦形剤等の添加剤及び／又は他の食品材料に配合する等して、本発明の機能性食品とすることができる。
【００２５】
酵素を失活させる工程は、酵素反応終了後の懸濁液を、６０〜１００℃程度の温度で５〜２０分間程度加熱することにより行うことができる。また、ろ過する工程は、例えば限外ろ過等により、分子量２０００以下の分子をろ取することにより行うことができる。ｐＨを調節する工程は、具体的には例えばクエン酸水溶液を添加する等して行なうことができる。
【００２６】
本発明の医薬は、前記ＲＪタンパク質分解物を含む。
【００２７】
本発明の医薬の形態は、特に限定されないが、例として、錠剤、散剤、顆粒剤、液剤、カプセル、シロップ等の形態とすることができる。
【００２８】
本発明の医薬の製造方法は、特に限定されないが、例えば前記の方法等により得られたＲＪタンパク質分解物をそのまま、又は必要に応じて、前記ＲＪタンパク質分解物を前記の方法等により酵素を失活させる工程及びろ過する工程に供したもの、又はこれらにさらに賦形剤等の製剤のための材料を加え、製剤としたもの等を、本発明の医薬とすることができる。
【００２９】
本発明の医薬は、ヒトのみならず、哺乳類等のヒト以外の動物をも投与対象とすることができる。
【００３０】
本発明の医薬の投与方法は、例として、経口投与が挙げられる。経口投与する場合は、前記した製剤の形態等で投与することができる。
【００３１】
本発明の機能性食品又は医薬の投与量は、患者の年齢、性別、体格、様態等に応じて適宜選択でき、例えば、ペプチドの合計量として、通常１日あたり３００〜１５００ｍｇ／ヒト５０ｋｇで使用することができる。
【００３２】
本発明の機能性食品及び医薬は、インスリン様作用と、抗酸化作用と、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害作用とを有する。インスリン様作用により、ヒト等が摂食した際に、血糖値を低下させることが期待できる。抗酸化作用は、本発明の機能性食品をさらに他の食品に添加した場合、その食品中及び生体内の両方において、抗酸化作用の発現が期待できる。また、ＡＣＥ阻害作用により、高血圧症を有するヒト等が摂食した際に、降圧作用を発現することが期待できる。
【００３３】
【発明の効果】
本発明の機能性食品及び医薬は、インスリン様作用、抗酸化作用及び降圧作用を有し、安全に摂取することができ、且つ安価に製造できるものである。
【００３４】
また、本発明の機能性食品の製造方法では、インスリン様作用、抗酸化作用及び降圧作用を有し、且つ安全な機能性食品を簡便に製造することができる。
【００３５】
【実施例】
以下、本発明を、実施例及び比較例を参照してより詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されない。
【００３６】
【実施例１〜４】
生ＲＪを水に１０質量％の割合で溶解し、ｐＨを６．５〜７．５の間に調整した。これに、エタノールを、最終濃度が５０〜８０質量％となる範囲の割合で、ＲＪ中のタンパク質が沈殿するまで適宜添加した。これを、遠心分離及びろ過により、上清と沈殿タンパク質とに分けた。上清は保存し、一方沈殿タンパク質は水に１０ｗ／ｖ％の割合で懸濁させた。
【００３７】
この懸濁液に２０％ＮａＯＨ及び３０％ＮａＣＯ３を添加して、下記各酵素の至適ｐＨに懸濁液ｐＨを調整した後、プロテアーゼＡ（至適ｐＨ６〜８，至適温度５０℃）（実施例１）、プロテアーゼＮ（至適ｐＨ６〜８，至適温度５５℃）（実施例２）、プロテアーゼＳ（至適ｐＨ７〜９，至適温度７０℃）（実施例３）又はプロテアーゼＭ（至適ｐＨ３〜６，至適温度５０℃）（実施例４）（いずれも天野エンザイム株式会社製）を、基質に対する質量比で１／１００の割合で添加し、各酵素の至適ｐＨ及び至適温度で酵素反応を行なった。酵素反応開始後１、２、３、４又は２０時間後に、１０％クエン酸を添加してｐＨを５〜６に調整し、８０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、遠心分離及び膜ろ過により不純物及び不溶成分を除去し、ＲＪタンパク質酵素分解物の反応物溶液を得た。これらについて、抗酸化活性及びＡＣＥ阻害活性を、下記の方法に従い測定した。結果を図１及び図２にそれぞれ示す。
【００３８】
（ロダン鉄法による抗酸化活性の測定）
リノール酸１．３ｍｌにエタノール１００ｍｌを加え、リノール酸を完全に溶解した後、５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍｌを加え、攪拌し、これをリノ−ル酸溶液とした。この溶液２０ｍｌを５０ｍｌ容褐色サンプル瓶に採り、実施例１〜４それぞれの酵素反応開始後１、２、３、４又は２０時間後のＲＪタンパク質分解物の水懸濁液から得た反応物溶液２００μｌ及び蒸留水４．８ｍｌを加え、全量を２５ｍｌとして、これを抗酸化試験に供する試料液とした。
次に、２０ｍｌ容試験管に７５％エタノールを４．７ｍｌ、試料液０．１ｍｌ及び３０％ＮＨ４ＳＣＮ溶液０．１ｍｌを採り攪拌した。これに０．０２Ｍ  ＦｅＣｌ２溶液（０．０２Ｍ  ＦｅＣｌ２／３．５％ＨＣＬ）０．１ｍｌを添加し、再度攪拌した。その後、３０分間放置し、５００ｎｍで吸光度を計測することにより、リノール酸の酸化度を評価し、抗酸化活性を測定した。
【００３９】
（ＡＣＥ阻害活性の測定）
実施例１〜４それぞれの酵素反応開始後１、２、３、４又は２０時間後のＲＪタンパク質分解物の水懸濁液から得た反応物溶液をＡＣＥ阻害活性測定の試料として用い、Ｈ．Ｓ．Ｃｈｅｕｎｇらの方法（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．  ２０，  １６３７（１９７１））に従って測定した。
【００４０】
【実施例５】
（脂肪分解阻害能の測定）
（１）実施例２と同様に、ＲＪタンパク質分解物を含む反応物溶液を得た。但し酵素反応時間は３時間とした。得られた反応物溶液を凍結乾燥処理にて乾燥物とし、さらに牛血清アルブミンを含まないＫＲＢ（Ｋｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ  ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解し、様々なＲＪタンパク質分解物濃度を有する検体溶液を得た。
（２）Ｗｉｓｔｅｒ系雄性ラットの副睾丸脂肪組織から、Ｒｏｄｂｅｌｌの方法（Ｒｏｄｂｅｌｌ，  Ｍ．：Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２３９，３７５（１９６４））で脂肪細胞を調製し、２．５％アルブミンを含むＫＲＢ（Ｋｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ  ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）緩衝液（ｐＨ７．４）中に１０６個／ｍｌの細胞が含まれる脂肪細胞懸濁液を得た。
（３）牛血清アルブミン２．５％を含むＫＲＢ（Ｋｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ  ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）緩衝液（ｐＨ７．４）２００μｌに、上記（１）で得た検体溶液２５μｌ、エピネフリン５μｇ／ｍｌ溶液２５μｌ（最終濃度０．４２μｇ／ｍｌ）及び上記（２）で得た脂肪細胞懸濁液５０μｌを加え、５％ＣＯ２下で３７℃で１時間インキュベートし、遊離する脂肪酸を、ＮＥＦＡ−テスト（商品名、和光純薬株式会社製）を用いてＤｕｎｃｏｍｂｅの変法（Ｊ．Ｂｏｂｅｒｇ，  Ｌ．Ａ．  Ｃａｒｌｓｏｎ，：  Ｃｌｉｎ．ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  １０，  ４２０（１９６４））により定量した。一方、検体溶液の代わりに水を加えた他は上記と同様に操作して対照とした。各検体について測定した遊離脂肪酸量の、対照の遊離脂肪酸量に対する割合を、脂肪分解率として求めた。結果を図３に示す。
【００４１】
【実施例６】
（脂肪合成促進能の測定）
実施例５の（２）と同様にして得た脂肪細胞懸濁液４０μｌを２．５％牛血清アルブミンと３ｍＭ１４Ｃ−グルコース（０．２５μＣｉ）を含むＫｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ緩衝液（ｐＨ７．４）１６０μｌに加え、さらに１０ｎＭインスリン２５μｌ（最終濃度１ｎＭ）を加え、５％ＣＯ２下で３７℃、２０分間インキュベートした。次に、実施例５の（１）と同様にして得た様々なＲＪタンパク質分解物濃度を有する検体溶液２５μｌを加え、５％ＣＯ２下３７℃で１時間インキュベートし、イソプロピルアルコール２．４ｍｌ、ヘプタン０．６ｍｌ及び水０．２５ｍｌを加え反応を停止させた。遠心分離後上清を取り、液体シンチレーターでトリグリセライド−１４Ｃによる放射線量（ｃｐｍ）を測定した。結果を図４に示す。
また、対照として、検体溶液の代わりに１０ｎＭインスリンを用いた他は上記と同様に操作し、放射線量を測定した。結果を併せて図４に示す。
【００４２】
【実施例７】
実施例２と同様に、ＲＪタンパク質分解物の水懸濁液を得た。但し酵素反応時間は３時間とした。得られた懸濁液を遠心分離し、試料溶液を得た。この試料溶液を、下記の条件に従い、ゲルクロマトグラフィー法により分離した。
【００４３】
（分離条件）
カラム：Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−２５（アマシャム・バイオサイエンス社製）、１．６×７５ｃｍ
溶出液：５０ｍＭ酢酸
流量：２０ｍｌ／時間
【００４４】
各フラクションにおける２８０ｎｍにおける吸光度を測定した。また、各フラクションの相対的な抗酸化活性、ＡＣＥ阻害活性及び脂肪合成促進能を、上記と同様に測定した。結果を図５に示す。
【００４５】
図５中に示されるＮｏ．２８〜３５のピークのフラクションを分取し、これをさらに、下記の条件に従いＨＰＬＣにより分離した。
【００４６】
（分離条件）
カラム：ＴＳＫ−ｇｅｌ  ＯＤＳ−１２０Ｔ（東ソー株式会社製）
カラム温度：３５℃
溶出液：０．１％  ＴＦＡ  アセトニトリル０％（０分）から５０％（６０分）の直線濃度勾配
流量：１．０ｍｌ／分
検出：２３０ｎｍにおける吸光度
【００４７】
分離結果を図６に示す。また、各フラクションの相対的な抗酸化活性を、上記と同様に測定した。結果を図６に併せて示す。図６中に示すピークＦ１〜Ｆ５を含むフラクションをそれぞれ分取し、さらに、濃度勾配を図７中に図示するように適宜変更した以外は上記と同一の条件のＨＰＬＣで分離した。分離した各フラクションの相対抗酸化活性を測定した。結果を図７に示す。
【００４８】
図７に示す、吸光度に対して抗酸化活性が高かったピークＰ１〜Ｐ５を分取し、含まれるペプチドの配列を決定したところ、Ｐ１〜Ｐ５のピークはそれぞれ、ペプチドＴｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ、Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓを含んでいることが分かった。また、得られたピークＰ１〜Ｐ５を試料として、実施例１〜４と同様にＡＣＥ阻害率を測定した。さらに、ピークＰ１〜Ｐ５を検体溶液として、実施例５と同様にＡＣＥ阻害率及び脂肪合成促進能を測定した。結果を表１に示す。
【００４９】
【表１】
2005006533.tif 000002
【００５０】
【処方例１】
実施例２と同様に、ＲＪ水溶液をエタノール沈殿に供して上清と沈殿タンパク質とに分けた。沈殿タンパク質を３時間の酵素反応に供し、ＲＪタンパク質分解物を得た。上記上清を乾燥させたもの及びタンパク質分解物を乾燥させたものを等量（質量比）で混合した混合物と、乳糖−デンプン−プルランからなる賦形剤とを６：４〜８：２（質量比）の割合で配合し、カプセルに充填し、機能性食品を得た。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例１〜４における抗酸化活性の測定結果を示すグラフである。
【図２】実施例１〜４におけるＡＣＥ阻害活性の測定結果を示すグラフである。
【図３】実施例５における脂肪分解阻害能の測定結果を示すグラフである。
【図４】実施例６における脂肪合成促進能の測定結果を示すグラフである。
【図５】実施例７におけるゲルクロマトグラフィーによるＲＪタンパク質分解物の分離結果を示すグラフである。
【図６】実施例７における第１段階のＨＰＬＣによる分離結果を示すグラフである。
【図７】実施例７における第２段階のＨＰＬＣによる分離結果を示すグラフである。
【図１】
2005006533.tif 000003
【図２】
2005006533.tif 000004
【図３】
2005006533.tif 000005
【図４】
2005006533.tif 000006
【図５】
2005006533.tif 000007
【図６】
2005006533.tif 000008
【図７】
2005006533.tif 000009