(57)【要約】【課題】本発明は、ケモカイン受容体の機能を特異的に阻害する物質の提供を目的とする。【解決手段】式【化１】2005194193.tif 000073[式中Ｒ1はアルキル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、置換されたシクロアルキル基、トリフルオロブチル基、ペルヒドロナフチル基、 -(CH2)-C(CH3)=CH-Ph で示される基、などの基を示し、Ｚは式【化２】2005194193.tif 000074または式【化３】2005194193.tif 000075（式中Ｒ19はシクロアルキル基またはシクロアルケニル基を示し、Ｒ20は炭素原子数１〜５のアルキル基を示し、Ｙ−は陰イオンを示す。）で示される基を示す。]で示される化合物。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2005194193.tif 000058
｛式中ｍは０〜２の整数を示し、
Ｒ1は
・炭素原子数３〜８個の直鎖状、分岐鎖状の飽和または不飽和のアルキル基、
・炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、
・炭素原子数５〜８のシクロアルケニル基、
・炭素原子数１〜６のアルキル基、炭素原子数３〜８のシクロアルキル基またはフェニル基で置換された炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、
・トリフルオロブチル基、
・ペルヒドロナフチル基、
・-(CH2)-C(CH3)=CH-Ph で示される基、
・シンナミル基
・式
【化２】
2005194193.tif 000059
（式中、ｎ２は０〜３の整数を示し、Ｒ2、Ｒ3はそれぞれ水素原子または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ｒ4はフェニル基、ナフチル基または炭素原子数１〜４の直鎖状、分岐鎖状の飽和もしくは不飽和のアルキル基を示し、Ｘ１は酸素原子、硫黄原子、カルボニル基またはカルボニルオキシ基を示す。）で示される基、
・式
【化３】
2005194193.tif 000060
（式中ｎ３およびｎ４は０〜３の整数を示し、Ｒ5は水素原子、炭素原子数１〜４の直鎖状、分岐鎖状の飽和もしくは不飽和のアルキル基、炭素原子数１〜６のアルコキシ基、フェニル基、ハロゲンで置換されたフェニル基、炭素原子数３〜８のシクロアルキル基またはアリル基を示し、
【化４】
2005194193.tif 000061
は「無置換または炭素原子数１〜３のアルキル基で１〜３個置換された炭素原子数３〜８のシクロアルキル基」、「炭素原子数５〜８のシクロアルケニル基」、「無置換または炭素原子数１〜３のアルコキシ基で置換されたナフチル基」、「アダマンチル基」、「式
【化５】
2005194193.tif 000062
（式中、ｎ５は１または２を示し、Ａ１はメチレン基または -C(CH3)2- で示される基を示し、Ａ２はメチレン基、エチレン基、ビニレン基または -CH(CH3)- で示される基を示す。）で示される基」、「式
【化６】
2005194193.tif 000063
（Ｒ６〜Ｒ10はそれぞれ水素原子、ハロゲン原子、炭素原子数１〜６のアルキル基、炭素原子数１〜５のアルコキシ基、炭素原子数１〜３のアルキルチオ基、トリフルオロメチル基、トリフルオロメチルオキシ基、ベンジル基、フェネチル基、スチリル基、フェノキシ基、ベンジルオキシ基、フェニル基または炭素原子数１〜３のアルコキシカルボニル基を示す。）で示される基」または「式
【化７】
2005194193.tif 000064
（式中、R11とＲ12はそれぞれ水素原子、炭素原子数１〜３のアルキル基またはフェニル基を示し、Ｘ２は窒素原子または =CH- で示される基を示し、Ｘ３は酸素原子、硫黄原子または窒素原子を示す。）で示される基」で示される基、
・式
【化８】
2005194193.tif 000065
[式中、ｎ６は０〜３の整数を示し、Ｘ４は酸素原子または硫黄原子を示し、Ｒ13〜Ｒ15はそれぞれ水素原子、ハロゲン原子、炭素原子数１〜３のアルコキシ基または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ａ３は -(CH2)n7- （式中ｎ７は０〜５の整数を示す。）で示される基、 -CH2-CH=CH-CH2- で示される基または式
【化９】
2005194193.tif 000066
（式中、ｎ８、ｎ９はそれぞれ０または１を示し、Ｒ16は炭素原子数１〜３のアルキル基または -CH2-O-CH2-Ph で示される基を示す。）で示される基を示す。]で示される基、
・式
【化１０】
2005194193.tif 000067
[式中、ｎ１０は０〜２の整数を示し、
【化１１】
2005194193.tif 000068
は式
【化１２】
2005194193.tif 000069
（式中、ｎ１１は１または２を示し、Ｘ５およびＸ６はそれぞれメチレン基または酸素原子を示す。）で示される基、または
・式
【化１３】
2005194193.tif 000070
（式中、ｎ１２は１〜５の整数を示し、Ｒ17、Ｒ18はそれぞれ水素原子または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ａ４はメチレン基または酸素原子を示す。）]で示される基を示し、
Ｚは式
【化１４】
2005194193.tif 000071
または式
【化１５】
2005194193.tif 000072
（式中Ｒ19は炭素原子数３〜１０のシクロアルキル基または炭素原子数３〜１０のシクロアルケニル基を示し、Ｒ20は炭素原子数１〜５のアルキル基を示し、Ｙ−は陰イオンを示す。）で示される基を示す。｝で表される化合物およびその医薬上許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、白血球遊走因子であるケモカインに対する拮抗作用を有する化合物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
Eotaxinは最も強い好酸球走化性を示すケモカインであり、骨髄から末梢血への好酸球の動員に作用するだけでなく、好酸球脱顆粒・活性酵素産生などのような好酸球の活性化を促進する。また、好酸球の接着分子受容体CD11bの発現や血管内皮細胞の接着分子ICAM-1、VCAM-1の発現を誘導し、好酸球の接着を増強させる。一方、CCR3は好酸球よりクローニングされたG蛋白質共役型受容体であり、好酸球や好塩基球、Th2細胞に発現しており、Eotaxinが高親和性リガンドである。CCR3とEotaxinは、好酸球浸潤を伴うアレルギー性炎症において中心的な役割を果たしているものと考えられる。
【０００３】
気管支喘息は慢性好酸球性剥離性気管支炎として捉えられている。特徴的な好酸球の著明な浸潤以外、気管支喘息の下気道にはTリンパ球、少数ながら好塩基球の浸潤も認められている。好酸球顆粒蛋白には細胞傷害性があり、気道上皮を含む組織の傷害を惹起する。気道に集積するリンパ球は主にTh2細胞であり、Th2細胞はIL-5、IL-4などのサイトカインを産生し、好酸球増多とIgE産生を誘導することによりアレルギー性炎症の誘導、増悪化に関与していると考えられている［Crit Rev Immunol, 17, 325-52 (1997)］。
【０００４】
Eotaxinにより誘導される局所の好酸球浸潤は、IL-5の存在下で著明に増強されることが示されており、IL-5による好酸球のprimingならびにEotaxinによる好酸球遊走が気管支喘息における気道好酸球浸潤の機序である可能性が強く示唆される。また、Th2サイトカインであるIL-4によってEotaxin産生が誘導されることが報告されている。これらから、病変局所において抗原曝露により活性化されたTh2細胞からIL-4、IL-5などのサイトカインが産生され、IL-4はEotaxin産生を介して、IL-5は好酸球のprimingを介して気道好酸球浸潤に寄与している可能性が示唆される［J Immunol, 160, 3569-76 (1998); J Exp Med, 182, 1169-74,(1995); J Allergy Clin Immunol, 102, 65-74 (1998); J Immunol, 160, 60-68 (1998)］。
【０００５】
花粉症患者の鼻ポリープ及び気管支喘息患者の気道ではEotaxinの発現及びEotaxinのmRNA発現が確認されており、その産生細胞として上皮細胞、マクロファージ、Ｔ細胞、好酸球が同定されている。気管支喘息患者の気管支肺胞洗浄液では対照と比べてEotaxinが増加し、肺組織におけるEotaxin陽性細胞数は気道過敏性と有意に相関している。さらに、気管支喘息患者ではEotaxinの発現亢進と並行して、CCR3の発現も亢進している［J Clin Invest, 97, 604-12 (1996); J Immunol, 159, 4593-601 (1997); Biochem Biophys Res Commun, 236, 299-301 (1997); Eur J Immunol, 27, 3507-16 (1997)］。
【０００６】
CCR3は、特にTh2細胞に強く発現していることが知られている。鼻ポリープなどの病変部では、浸潤しているT細胞のほとんどがCCR3を発現し、その細胞が好酸球とco-localizeしている。抗原曝露により好酸球とともにCCR3陽性Th2細胞が病変局所に浸潤し、病態の増悪化につながっていることが示唆されている［Curr
Biol, 7, 836-43 (1997)］。
【０００７】
アレルギー性結膜炎の中でも重症なアトピー性角結膜炎や春季カタルでは、結膜の著明な増殖性変化による慢性的な炎症のみならず、角膜においてもしばしば上皮障害を伴う。アレルギー性結膜炎の眼瞼結膜や涙液には多数の好酸球が浸潤しており、浸潤好酸球数と重傷度との間には相関が認められている。好酸球の眼局所への浸潤には接着分子やサイトカイン、さらにケモカインの関与が考えられている。アトピー性角結膜炎や春季カタルの患者の涙液中には好酸球遊走性ケモカインであるEotaxinが検出され、Eotaxin濃度は涙液中の好酸球数と相関することが示されている［J Allergy Clin Immunol, 103, 1220-1221 (1995)］。一方、好酸球顆粒蛋白質は角膜上皮細胞への細胞障害性を有することから、角膜上皮障害の発症は、浸潤してきた好酸球などの炎症細胞による組織障害が重要な役割を担っていると考えられている。さらに、結膜及び角膜の実質細胞が、アレルギー性サイトカインであるIL-4の刺激により多量のEotaxinを産生することが報告されている［Int Arch Allergy Immunol, 121, 144-150 (2000)］。
【０００８】
従って、CCR3へのEotaxinの結合を特異的に阻害する物質は、好酸球の遊走、接着増強及び活性化を抑制し、気管支喘息やアレルギー性結膜炎をはじめとするアレルギー性疾患に対する治療又は予防のための医薬品として有用であると考えられる。
【０００９】
ケモカイン受容体の機能を阻害する物質としてはＷＯ９８／０４５５４号明細書などに記載されているが、本発明の化合物は知られていない。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、ケモカイン受容体の機能を特異的に阻害する物質の提供を目的とする。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、課題を解決するために種々検討した結果、ある種の化合物がケモカイン受容体の機能を特異的に阻害することを見出し本発明を完成した。
【００１２】
すなわち本発明は、式
【００１３】
【化１６】
2005194193.tif 000002
【００１４】
｛式中ｍは０〜２の整数を示し、
Ｒ1は
・炭素原子数３〜８個の直鎖状、分岐鎖状の飽和または不飽和のアルキル基、
・炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、
・炭素原子数５〜８のシクロアルケニル基、
・炭素原子数１〜６のアルキル基、炭素原子数３〜８のシクロアルキル基またはフェニル基で置換された炭素原子数５〜８のシクロアルキル基、
・トリフルオロブチル基、
・ペルヒドロナフチル基、
・-(CH2)-C(CH3)=CH-Ph で示される基、
・シンナミル基
・式
【００１５】
【化１７】
2005194193.tif 000003
【００１６】
（式中、ｎ２は０〜３の整数を示し、Ｒ2、Ｒ3はそれぞれ水素原子または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ｒ4はフェニル基、ナフチル基または炭素原子数１〜４の直鎖状、分岐鎖状の飽和もしくは不飽和のアルキル基を示し、Ｘ１は酸素原子、硫黄原子、カルボニル基またはカルボニルオキシ基を示す。）で示される基、
・式
【００１７】
【化１８】
2005194193.tif 000004
【００１８】
（式中ｎ３およびｎ４は０〜３の整数を示し、Ｒ5は水素原子、炭素原子数１〜４の直鎖状、分岐鎖状の飽和もしくは不飽和のアルキル基、炭素原子数１〜６のアルコキシ基、フェニル基、ハロゲンで置換されたフェニル基、炭素原子数３〜８のシクロアルキル基またはアリル基を示し、
【００１９】
【化１９】
2005194193.tif 000005
【００２０】
は「無置換または炭素原子数１〜３のアルキル基で１〜３個置換された炭素原子数３〜８のシクロアルキル基」、「炭素原子数５〜８のシクロアルケニル基」、「無置換または炭素原子数１〜３のアルコキシ基で置換されたナフチル基」、「アダマンチル基」、「式
【００２１】
【化２０】
2005194193.tif 000006
【００２２】
（式中、ｎ５は１または２を示し、Ａ１はメチレン基または -C(CH3)2- で示される基を示し、Ａ２はメチレン基、エチレン基、ビニレン基または -CH(CH3)- で示される基を示す。）で示される基」、「式
【００２３】
【化２１】
2005194193.tif 000007
【００２４】
（Ｒ６〜Ｒ10はそれぞれ水素原子、ハロゲン原子、炭素原子数１〜６のアルキル基、炭素原子数１〜５のアルコキシ基、炭素原子数１〜３のアルキルチオ基、トリフルオロメチル基、トリフルオロメチルオキシ基、ベンジル基、フェネチル基、スチリル基、フェノキシ基、ベンジルオキシ基、フェニル基または炭素原子数１〜３のアルコキシカルボニル基を示す。）で示される基」または「式
【００２５】
【化２２】
2005194193.tif 000008
【００２６】
（式中、R11とＲ12はそれぞれ水素原子、炭素原子数１〜３のアルキル基またはフェニル基を示し、Ｘ２は窒素原子または =CH- で示される基を示し、Ｘ３は酸素原子、硫黄原子または窒素原子を示す。）で示される基」で示される基、
・式
【００２７】
【化２３】
2005194193.tif 000009
【００２８】
[式中、ｎ６は０〜３の整数を示し、Ｘ４は酸素原子または硫黄原子を示し、Ｒ13〜Ｒ15はそれぞれ水素原子、ハロゲン原子、炭素原子数１〜３のアルコキシ基または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ａ３は -(CH2)n7- （式中ｎ７は０〜５の整数を示す。）で示される基、 -CH2-CH=CH-CH2- で示される基または式
【００２９】
【化２４】
2005194193.tif 000010
【００３０】
（式中、ｎ８、ｎ９はそれぞれ０または１を示し、Ｒ16は炭素原子数１〜３のアルキル基または -CH2-O-CH2-Ph で示される基を示す。）で示される基を示す。]で示される基、
・式
【００３１】
【化２５】
2005194193.tif 000011
【００３２】
[式中、ｎ１０は０〜２の整数を示し、
【００３３】
【化２６】
2005194193.tif 000012
【００３４】
は式
【００３５】
【化２７】
2005194193.tif 000013
【００３６】
（式中、ｎ１１は１または２を示し、Ｘ５およびＸ６はそれぞれメチレン基または酸素原子を示す。）で示される基、または
・式
【００３７】
【化２８】
2005194193.tif 000014
【００３８】
（式中、ｎ１２は１〜５の整数を示し、Ｒ17、Ｒ18はそれぞれ水素原子または炭素原子数１〜３のアルキル基を示し、Ａ４はメチレン基または酸素原子を示す。）]で示される基を示し、
Ｚは式
【００３９】
【化２９】
2005194193.tif 000015
【００４０】
または式
【００４１】
【化３０】
2005194193.tif 000016
【００４２】
（式中Ｒ19は炭素原子数３〜１０のシクロアルキル基または炭素原子数３〜１０のシクロアルケニル基を示し、Ｒ20は炭素原子数１〜５のアルキル基を示し、Ｙ−は陰イオンを示す。）で示される基を示す。｝で表される化合物およびその医薬上許容される塩である。
【００４３】
【発明の実施の形態】
本発明において、直鎖状、分岐鎖状の飽和または不飽和のアルキル基とは、たとえばメチル基、エチル基、n-プロピル基、イソプロピル基、n-ブチル基、イソブチル基、tert-ブチル基、n-ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、tert-ペンチル基、n-ヘキシル基、n-ヘプチル基、n-オクチル基、ビニル基、アリル基、イソプロペニル基、ブテニル基、イソブチレニル基、イソプレニル基、アセチレニル基などの炭化水素基である。
【００４４】
本発明においてシクロアルキル基とは、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基などの環状飽和炭化水素基である。
【００４５】
本発明においてシクロアルケニル基とは、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘキサジエニル基などの環状不飽和炭化水素基である。
【００４６】
本発明においてアルコキシ基とはメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基、イソプロポキシ基、イソブトキシ基、sec-ブトキシ基、tert-ブトキシ基、ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、アリルオキシ基などの基である。
【００４７】
本発明の化合物は、例えば以下に示す方法によって合成することができる。すなわち、下記式（ａ）
【００４８】
【化３１】
2005194193.tif 000017
【００４９】
で表される化合物と下記式（ｂ）
Ｒ19-ＣＨＯ   （ｂ）
（式中、Ｒ19は前記と同義）で表される化合物を還元剤の存在下、還元的アルキル化反応を行い、下記式（ｃ）
【００５０】
【化３２】
2005194193.tif 000018
【００５１】
（式中、Ｒ19は前記と同義）で表される化合物を得、更に、鉱酸、有機酸処理などの通常用いられる方法により加水分解することにより、下記式（ｄ）
【００５２】
【化３３】
2005194193.tif 000019
【００５３】
（式中、Ｒ19は前記と同義）で表される化合物もしくはそれらの塩とした後、下記式（ｅ）
【００５４】
【化３４】
2005194193.tif 000020
【００５５】
（式中、ｍは前記と同義）で表される化合物もしくはそれらの塩を用いてアミド結合を形成する通常の方法により縮合し、下記式（ｆ）
【００５６】
【化３５】
2005194193.tif 000021
【００５７】
（式中、ｍ、Ｒ19は前記と同義）で表される化合物を得、下記式（ｇ）
Ｒ1-ＯＨ  （ｇ）
（式中、Ｒ1は前記と同義）で表される化合物と光延反応によりエーテル結合を形成することによって、下記式（ｈ）
【００５８】
【化３６】
2005194193.tif 000022
【００５９】
（式中、ｍ、Ｒ1，Ｒ19は前記と同義）で表される本発明化合物を合成することができる。
また、上記式（ｈ）で示される本発明の化合物は、上記式（ｆ）で表される化合物もしくはそれらの塩と、下記式（ｉ）
Ｒ1-Ｌ  （ｉ）
（式中、Ｒ1は前記と同義であり、Ｌは脱離基を表す。ここで脱離基とは、例えば塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子、メタンスルホニルオキシ基、ｐ−トルエンスルホニルオキシ基等のアルキルスルホニルオキシ基、アリールスルホニルオキシ基等が挙げられる）で表される化合物を塩基存在下反応させることによって合成することもできる。
【００６０】
更に、上記式（ｈ）で表される化合物と下記式（ｊ）
Ｒ20-Y  （ｊ）
（式中、Ｒ20およびYは前記と同義である）で表される化合物を反応させることによって下記式（ｋ）
【００６１】
【化３７】
2005194193.tif 000023
【００６２】
（式中、ｍ、Ｒ1，Ｒ19、Ｒ20は前記と同義）で表される本発明化合物を合成することができる。この際、ピペリジンの１位と４位にcis,transの異性体が生じるが、便宜上、低極性の化合物をcis体、高極性の化合物をtrans体と命名する。
【００６３】
本発明の化合物は、その置換の態様によって、光学異性体、ジアステレオ異性体、幾何異性体等の立体異性体が存在することがあるが、本発明の化合物はこれら全ての立体異性体及びそれらの混合物をも包含する。
【００６４】
上記反応で塩基を用いる場合の塩基としては例えば炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、ジムシルナトリウム、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、tert−ブチルカリウム等のアルカリ金属塩類、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピロリジン、ピペリジン等のアミン類、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム等を用いることができ、鉱酸とは例えば塩酸、臭化水素酸、よう化水素酸、硝酸、硫酸等であり、有機酸とは例えば、酢酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等であり、還元剤とは例えば水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトシウム、水素化リチウムアルミニウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム等である。反応溶媒としては、水、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、tert−ブチルアルコール等のアルコール類、ジオキサン、テトラヒドロフラン等エーテル類、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ピリジン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトン、酢酸等の反応に不活性な溶媒を用いることができる。
【００６５】
本発明の化合物は常用の増量剤、ｐＨ調節剤、溶解剤などを添加し、常用の製剤技術によって錠剤、顆粒剤、丸剤、カプセル剤、粉剤、液剤、懸濁剤、注射剤、点眼剤などに調整し、経口、注射、点眼などの経路で投与することができる。
【００６６】
本発明の化合物を、ケモカイン受容体作用阻害剤として用いる場合の投与量は、体重、年齢、性別などにより異なるが、通常成人の患者に対して１日あたり１〜１０００ｍｇを１回〜数回に分けて投与することができる。
【００６７】
【発明の効果】
本発明の化合物は、好酸球浸潤において重要な働きを担っているＣＣＲ３等のケモカイン受容体に対して高い親和性を有し、ＣＣＲ３等のケモカイン受容体の作用を阻害することにより、ヒト及び動物におけるＣＣＲ３等のケモカインの受容体が関わる疾患、例えば気管支喘息やアレルギー性結膜炎をはじめとするアレルギー性疾患に対する治療又は予防のために使用することができる。
【００６８】
【実施例】
以下、実施例および試験例により本発明をさらに詳細に説明する。
実施例１
化合物８１，化合物８１'の合成
【００６９】
【化３８】
2005194193.tif 000024
【００７０】
（１）ピペリジン４−イル−カルバミックアシッド tert-ブチルエステル（6.00g）のテトラヒドロフラン（以下ＴＨＦと略す）（120ml）溶液にシクロオクト−１−エンカルバアルデヒド（4.97g）と酢酸（1.72ml）を加え、さらにトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（8.25g）を氷冷下加え、室温で２時間攪拌した。溶媒を留去後、エーテルで希釈し、2mol/l水酸化ナトリウム水溶液、食塩水で順次洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。
【００７１】
得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで酢酸エチルとヘキサンの混合溶媒を用いて精製し、（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−カルバミックアシッド tert-ブチルエステル（3.86g）を得た。
【００７２】
（２）（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−カルバミックアシッド tert-ブチルエステル（3.86g）の塩化メチレン（15ml）溶液にトリフルオロ酢酸（15ml）を氷冷下加え、室温で２時間攪拌した。溶媒を留去後、クロロホルムで希釈し、2mol/l水酸化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去し、未精製の１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イルアミン（2.66g）を得た。
【００７３】
（３）１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イルアミン（2.66g）と２−ヒドロキシフェニル酢酸（2.18g）と１−ヒドロキシベンゾトリアゾール１水和物（2.75g）のジメチルホルムアミド（30ml）溶液に塩酸１−エチル−３−（３−ジメチル）カルボジイミド（3.44g）を加え、80℃で３時間攪拌した。溶媒を留去後、酢酸エチルで希釈し、食塩水で３回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。得られた残渣をＮＨ型のシリカゲル（富士シリシア化学株式会社製 Chromatorex）カラムクロマトグラフィーでメタノールとクロロホルムの混合溶媒を用いて精製し、Ｎ−（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−２−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド（3.88g）を得た。
【００７４】
（４）フェネチルアルコール（183mg）とトリフェニルホスフィン（393mg）と40％ジエチルアゾジカルボキシレート トルエン溶液（653mg）のＴＨＦ（20ml）溶液にＮ−（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−２−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド（357mg）を氷冷下加え、室温で３時間攪拌した。さらに、フェネチルアルコール（183mg）とトリフェニルホスフィン（393mg）と40％ジエチルアゾジカルボキシレート トルエン溶液（653mg）のＴＨＦ（10ml）溶液を加え、室温で２時間攪拌した。
【００７５】
溶媒を留去後、酢酸エチルで希釈し、2mol/l水酸化ナトリウム水溶液、食塩水で順次洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。得られた残渣をＳＣＸ（VARIAN社製固相抽出用充填剤 BondesilＳＣＸ）に吸着させ、メタノールとクロロホルムの混合溶媒で洗浄した後、7mol/lアンモニアのメタノール溶液とクロロホルムの混合溶媒で溶出させた。溶媒を留去し、残渣をＮＨ型のシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで酢酸エチルとヘキサンの混合溶媒を用いて精製し、Ｎ−（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−２−（２−フェネチルオキシフェニル）アセトアミド（402ｍg）を得た。
【００７６】
（５）Ｎ−（１−シクロオクト−１−エニル−メチル−ピペリジン−４−イル）−２−（２−フェネチルオキシフェニル）アセトアミド（2.15g）にヨウ化メチル（20ml）を加え、室温で一晩攪拌した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーでメタノールとクロロホルムの混合溶媒を用いて精製し、Rf値の高い低極性の化合物（cis体）を含むフラクションの溶媒を留去し、標題化合物（表中の化合物８１）（2.25g）を得た。また、Rf値の低い高極性の化合物（trans体）を含むフラクションの溶媒を留去し、標題化合物（表中の化合物８１'）（0.38g）を得た。
化合物８１  1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-D) d ppm 1.35-1.72 (m, 8 H) 1.78-1.94 (m, 2 H) 2.11-2.41 (m, 6 H) 3.11 (t, J=6.84 Hz, 2 H) 3.27 (s, 3 H) 3.41-3.67 (m, 4 H) 3.57 (s, 2 H) 4.02 (m, 1 H) 4.05 (s, 2 H) 4.20 (t, J=6.84 Hz, 2 H) 6.09 (t, J=8.00 Hz, 1 H) 6.81-7.02 (m, 3 H) 7.14-7.38 (m,
7 H)
化合物８１'  1H NMR (200 MHz, CHLOROFORM-D) d ppm 1.38-1.80 (m, 8 H) 1.80-2.05 (m, 2 H) 2.10-2.42 (m, 6 H) 3.04 (s, 3 H) 3.13 (t, J=6.9 Hz, 2 H) 3.35-3.58 (m, 2 H) 3.70 (s, 2 H) 3.92-4.32(m, 3 H) 4.21 (t, J=6.9 Hz, 2 H) 4.27 (s, 2 H) 6.15 (t, J=8.1 Hz, 1 H) 6.80-6.96 (m, 2 H) 7.12-7.41 (m, 8 H)
【００７７】
実施例
対応する原料を用いて実施例１と同様の操作を行い、以下の表に示した化合物を得た。表ではcis体の化合物のデーターを示した。
【００７８】
【表１】
2005194193.tif 000025
【００７９】
【表２】
2005194193.tif 000026
【００８０】
【表３】
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【００８１】
【表４】
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【００８２】
【表５】
2005194193.tif 000029
【００８３】
【表６】
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【００８４】
【表７】
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【００８５】
【表８】
2005194193.tif 000032
【００８６】
【表９】
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【００８７】
【表１０】
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【００８８】
【表１１】
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【００８９】
【表１２】
2005194193.tif 000036
【００９０】
【表１３】
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【００９１】
【表１４】
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【００９２】
【表１５】
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【００９３】
【表１６】
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【００９４】
【表１７】
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【００９５】
【表１８】
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【００９６】
【表１９】
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【００９７】
【表２０】
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【００９８】
【表２１】
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【００９９】
【表２２】
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【０１００】
【表２３】
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【０１０１】
【表２４】
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【０１０２】
【表２５】
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【０１０３】
【表２６】
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【０１０４】
【表２７】
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【０１０５】
【表２８】
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【０１０６】
【表２９】
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【０１０７】
【表３０】
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【０１０８】
【表３１】
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【０１０９】
【表３２】
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【０１１０】
【表３３】
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【０１１１】
試験例１
CCR3受容体結合阻害試験
モノ・ポリ分離液（大日本製薬製）にヒト末梢血を重層し、1500rpm、20分間、室温で遠心し、多核球層を得た。この多核球層をPBS(−)で希釈し、1200rpm、5分間遠心し、沈殿した細胞を滅菌水で懸濁して溶血した。滅菌水と同量の1.8% NaCl水溶液を添加して、1200rpm、5分間遠心し、沈殿した細胞を一度PBS(−)で洗浄した。氷冷したPBS(−)／2mM EDTA／0.5% BSAに懸濁し、CD16マイクロビーズ（第一化学社製）を添加して、6〜12℃で30分間インキュベートした後、MACSカラム（第一化学製）に流して、通過した細胞液を回収し、好酸球を得た。
【０１１２】
ヒト末梢血から分離した好酸球、0.1nM [125I] human Eotaxin（2000Ci/mmol、Amersham Biosciences 製）及び被験化合物を0.1mlの50mM HEPES／5mM MgCl2／1mM CaCl2／0.5% BSA（pH 7.2）に懸濁し、37℃、90分間インキュベートした後、予め0.5%ポリエチレンイミン（pH 7.2）に浸しておいたグラスフィルターGF/Cにて濾過を行い、1.5mlのPBS(−)／0.5M NaCl／0.05% BSAにて洗浄した後、グラスフィルター上の放射活性を測定した。CCR3に対する結合親和性は、さまざまな濃度の化合物による[125I] human Eotaxinの50%結合阻害濃度（IC50値）を算出した。
【０１１３】
その結果、本発明の化合物は優れた効果があることがわかった。
【０１１４】
試験例２
ラット好酸球遊走試験
Brown Norway Ratの腹腔にウマ血清を1ml投与し、48時間後に腹腔内をHBSSで洗浄して細胞を回収した。65% Percoll（Amersham Biosciences 製）、50% Percoll、回収した腹腔内細胞の順に重層し、2500rpm、10分間遠心し、多核球層を得た。この多核球層を一度HBSSで洗浄した後、RPMI1640／1% FCSで懸濁してラット好酸球とした。
96穴ケモタキシスチャンバー（ポアアイズ5μm、家田貿易 製）の下室にヒトEotaxin（100nM）及び被験化合物を30μlのRPMI1640／1% FCSに調製し、フィルターをのせ、上室に50μlのRPMI1640／1% FCSに懸濁したラット好酸球を添加した。37℃、2時間インキュベートした後、フィルターを取り除き、下室に移動した細胞数を測定した。
【０１１５】
ラット好酸球の遊走に対する被験化合物の作用は、ヒトEotaxin（100nM）に被験化合物を添加することによって下室への遊走の抑制率（%）を算出した。
【０１１６】
その結果、本発明の化合物は優れた効果があることがわかった。