(57)【要約】  【課題】  本発明は、腫瘍抗原SART3発現細胞を標的とした腫瘍の治療の実現を可能とする。  【解決手段】  本発明は、腫瘍細胞増殖抑制作用を有する抗SART3モノクローナル抗体を特徴し、腫瘍の治療におけるSART3選択の可否の免疫学的検討、該抗体の特異性および抗腫瘍作用を利用した腫瘍の治療を可能とする。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
SART3と特異的に反応し、腫瘍細胞増殖抑制活性を有するモノクローナル抗体。
【請求項２】
受託番号FERM P-19611またはFERM P-19612のハイブリドーマの特性を有するハイブリドーマ細胞系によって産生される請求項１記載のモノクローナル抗体。
【請求項３】
請求項１または２記載のモノクローナル抗体を使用することを特徴とする、SART3を特異的に測定する免疫学的測定法。
【請求項４】
請求項１または２記載のモノクローナル抗体を構成試薬として含む、SART3を特異的に測定するための試薬キット。
【請求項５】
請求項１または２記載のモノクローナル抗体、または該モノクローナル抗体と同様にSART3と特異的に反応し腫瘍細胞増殖抑制活性を有するそのF(ab')2断片、Fab断片またはFv断片を含有する、腫瘍の治療または予防のための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍抗原SART3発現細胞を標的とした腫瘍の治療に関する。詳細には、本発明は、抗SART3モノクローナル抗体、該抗体を用いたSART3の免疫学的測定方法、それらを利用したSART3測定試薬キット、および腫瘍の治療または予防のための該抗体またはそのF(ab')2断片、Fab断片もしくはFv断片を含有する医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
生体には出現した腫瘍細胞を排除する免疫機構が存在する。腫瘍細胞上に存在し、それに対する免疫応答が生じるような抗原は腫瘍抗原と呼ばれる。
腫瘍を破壊する機序においては、腫瘍抗原を特異的に認識する細胞傷害性T細胞がその中心的役割を果たすと考えられている。細胞内で発現する腫瘍抗原タンパク質は細胞内のプロテアソームで分解され、主要組織適合遺伝子複合体（MHC、ヒトにおいてはHLAである）と組み合わされて腫瘍細胞表面に提示される。細胞傷害性T細胞は、自身のT細胞受容体に特異的な腫瘍抗原ペプチドを認識し、腫瘍細胞の細胞膜を破壊する物質やグランザイムを放出することにより腫瘍細胞のDNA切断などを引き起こして、その抗原を発現する細胞を傷害する。
このような腫瘍細胞に対する免疫機構を利用して、腫瘍抗原のエピトープペプチドで生体を免疫し腫瘍細胞の障害を促進することを目的としたワクチン治療が試みられている。  また、腫瘍細胞表面に存在する腫瘍抗原を標的にして、該抗原特異的な抗体に毒物や抗腫瘍薬を結合させ、これらを腫瘍細胞へと選択的に送達するミサイル療法も行われている（非特許文献１３）。
【０００３】
ヒトにおいて知られている腫瘍抗原には、メラノーマをはじめ様々な種類の癌に表出されているMAGE、BAGE、GAGE、メラノーマと正常メラニン細胞に表出されるMART、チロシナーゼなどのメラノソームタンパク質、腫瘍特異的なアミノ酸変異を持つβ-カテニン、CDK4、HER2やp53（変異型）などの癌遺伝子産物、CEAやPSAなどの腫瘍マーカー、HPVまたはEBVなどの癌関連ウイルスタンパク質などが同定されている（非特許文献１４）。
本発明者らは以前、扁平上皮癌細胞から、HLAクラスI拘束性に細胞傷害性Tリンパ球により認識される腫瘍抗原であるSART3を同定した（特許文献１、非特許文献１）。
【０００４】
SART3とは、Saccharomyces cerevisiae Prp24（mRNAスプライシングに関与するsnRNPのリサイクル因子）のヒトオーソログを意味する。イーストツーハイブリッド法による研究の結果、SART3はプレmRNAスプライシング因子（RNPS1：S期に多く見られるRNA結合タンパク質、またはセリンリッチドメインを有するRNA結合タンパク質）と相互作用すること、およびトランスフェクタント内でRNPS1と共存することが示されている（非特許文献２）。SART3とRNPS1が相乗的にキメラミニ遺伝子プレmRNAの近位選択的スプライシングを刺激することから、SART3はRNPS1と複合体を形成して、ｍRNAスプライシングの制御に関与することが示唆された（非特許文献２）。また、U4/U6 snRNPの再集合におけるSART3の機能も報告されている（非特許文献３、４）。SART3はスプライソソームサイクルのリサイクル期に一時的にのみU6およびU4/U6 snRNPと会合するが、このことがプレmRNAスプライシングには必要である。(非特許文献３、４)。このように、プレｍRNAスプライシングにおけるSART3の機能的役割は最近の研究により明らかになってきている。
一方、細胞タンパク質の段階的界面活性剤分画、およびそれに続く抗SART3ポリクローナル抗体でのウェスタンブロット解析を用いた初期の研究では、SART3タンパク質は正常増殖細胞および癌細胞の両者における細胞質内タンパク質であること、および核画分におけるSART3は癌細胞でしか検出されないことが示唆された。しかしながら、SART3-GFP（グリーンフルオレッセンスプロテイン）の遺伝子移入研究により、異なる結果、すなわちSART3は核のみに局在することが示された（非特許文献２）。このように、癌組織におけるSART3の細胞内局在はいまだ明らかでない。
【０００５】
癌患者のワクチン治療やミサイル療法においてその対象抗原としてSART3を選択するにあたっては、腫瘍細胞上にSART3分子が発現しているか否かは重要である。しかしながらSART3に特異的なモノクローナル抗体が存在しないため、これを測定することは困難であった。またSART3を標的として特異的に腫瘍細胞を傷害するには、抗SART3モノクローナル抗体が不可欠であった。
【０００６】
【特許文献１】国際公開番号 WO 00/12701：新規な腫瘍抗原タンパク質SART-3、およびその腫瘍抗原ペプチド。
【非特許文献１】Yang D, Nakao M, Shichijo S et al.: Identification of a gene coding for a protein possessing shared tumor epitopes capable of inducing HLA-A24-restricted cytotoxic T lymphocytes in cancer patients. Cancer Res.  59:4056-4063, 1999.
【非特許文献２】Harada K, Yamada A, Yang D, Itoh K, Shichijo S:  Binding of a SART3tumor-rejection antigen to a pre-mRNA splicing factor RNPS1: a possibleregulation of splicing by a complex formation. Int. J. Cancer  93: 623-628, 2001.
【非特許文献３】Bell M, Schreiner S, Damianov A, Reddy R, Bindereif A:  p110, a novel human U6 snRNP protein and U4/U6 snRNP recycling factor.  EMBO J.  21:2724-3275, 2002.
【非特許文献４】Rader SD and Guthrie C: A conserved Lsm-interaction motif in Prp24 required for efficient U4/U6 di-snRNP formation.  RNA. 8:1378-1392, 2002.
【非特許文献５】Tanaka S, Tsuda N, Kawano K, Sakamoto M, Nishida T, Hashimoto T, Shichijo S, Kamura T, Itoh K. Expression of tumor-rejection antigens in gynecologic cancers.  Jpn J Cancer Res.  91: 1177-1184, 2000.
【非特許文献６】Kawagoe N, Shintaku I, Yutani S, Etoh H, Matuoka K, Noda S, Itoh K:Expression of the SART3 tumor rejection antigen in renal cell carcinoma.J Urol. 164: 2090-2095, 2000.
【非特許文献７】Murayama K, Kobayashi T, Imaizumi T, Matsunaga K, Kuramoto T, Shigemori M, Shichijo S, Itoh K:  Expression of the SART3 tumor-rejection antigen in brain tumors and induction of cytotoxic T lymphocytes by its peptides.  J Immunother.  2 3: 511-518, 2000.
【非特許文献８】Niiya F, Nishizaka S, Matsunaga K, Koufuji K, Mori M, Katai H, Yamana H, Itoh K:  Expression of SART3 tumor-rejection antigen in gastric cancers.  Jpn J Cancer Res.  91: 337-342, 2000.
【非特許文献９】Tsuda N, Murayama K, Ishida H, Matsunaga K, Komiya S, Itoh K, Yamada A:  Expression of a newly defined tumor-rejection antigen SART3 in musculoskeletal tumors and induction of HLA class I-restricted cytotoxic T lymphocytes by SART3-derived peptides.  J Orthop Res.  19: 346-351, 2001.
【非特許文献１０】Suefuji Y, Sasatomi T, Shichijo S, Nakagawa S, Deguchi H, Koga T, Kameyama T, Itoh K:    Expression of SART3 antigen and induction of CTLs by SART3-derived peptides in breast cancer patients.  Br J Cancer.  84: 915-919, 2001.
【非特許文献１１】Sasatomi T, Suefuji Y, Matsunaga K, Yamana H, Miyagi Y, Araki Y, Ogata Y, Itoh K, Shirouzu K:  Expression of tumor rejection antigens in colorectal carcinomas.  Cancer.  94: 1636-1641, 2002 .
【非特許文献１２】Shichijo S, Nakao M, Imai Y, Takasu H, Kawamoto M, Niiya F, Yang D, Toh Y, Yamana H, Itoh K:  A gene encoding antigenic peptides of human squamous cell carcinoma recognized by cytotoxic T lymphocytes.  J Exp Med. 187: 277-288, 1998.
【非特許文献１３】G. Payne:  Progress in immunoconjugate cancer therapy.  Cancer Cell 3:207-212, 2003.
【非特許文献１４】Wang, R.F., and Rosenberg, S.A.  Immunol. Rev. 170:85-100, 1999.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
そこで本発明は、SART3特異的モノクローナル抗体の作成、腫瘍抗原SART3の免疫学的測定方法の確立、および該抗体の特異性を利用した腫瘍細胞の傷害を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、SART3発現腫瘍細胞を標的とした腫瘍の治療の実現を可能とする。
【０００９】
即ち、本発明は、
（１）SART3と特異的に反応し、腫瘍細胞増殖抑制活性を有するモノクローナル抗体；
（２）受託番号FERM P-19611またはFERM P-19612のハイブリドーマの特性を有するハイブリドーマ細胞系によって産生される前記（１）記載のモノクローナル抗体；
（３）前記（１）または（２）記載のモノクローナル抗体を使用することを特徴とする、SART3を特異的に測定する免疫学的測定法；
（４）前記（１）または（２）記載のモノクローナル抗体を構成試薬として含む、SART3を特異的に測定するための試薬キット；
（５）（１）または（２）記載のモノクローナル抗体、または該モノクローナル抗体と同様にSART3と特異的に反応し腫瘍細胞増殖抑制活性を有するそのF(ab')2断片、Fab断片またはFv断片を含有する、腫瘍の治療または予防のための医薬組成物；
に関する。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のモノクローナル抗体は、膜貫通ドメイン型SART3またはMHC分子に提示されたSART3ペプチドなどの形で細胞表面に存在する分子を認識し、SART3を発現する細胞をモニタリングできる。さらに、細胞表面上のSART3を認識するか、もしくは何らかの未知の機序で細胞内に取り込まれ細胞内SART3を認識することにより、またはその両者により、腫瘍細胞を傷害する。
これにより本発明は、SART3発現腫瘍細胞を標的とした腫瘍の治療を実現する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
１）SART3
SART3は、KE4細胞（食道癌セルライン）由来のcDNAライブラリーより単離した。該ライブラリーの組換えプラスミドとHLA-A2402（HLA-A24の一種）cDNAの組換えプラスミドをVA-13細胞（繊維芽セルライン）にダブルトランスフェクトし、そのトランスフェクタントがKE4CTL(KE4細胞に対するCTL、FERM BP-5954）を活性化するか否かをIFN-γ産生を指標として検討することで、スクリーニングを行った（国際公開番号 WO 00/12701）。クローニングされた遺伝子がコードするSART3のアミノ酸配列を配列番号：１に示す。
【００１２】
２）モノクローナル抗体
モノクローナル抗体は、抗原特異的な抗体産生細胞をクローニングすることにより得られる。本方法は当業界において周知である。一般的には、抗原タンパク質で適当な動物を免疫し、その免疫動物から回収した抗体産生細胞をマウス由来ミエローマセルラインと融合してハイブリドーマを作製する。HAT培地で選択した後、産生抗体の抗原特異性をELISA法により検討することでハイブリドーマをスクリーニングする。
抗体のFc部分に対する非特異的結合を回避するため、モノクローナル抗体はF（ab'）2断片、Fab断片またはFv断片として用いることができる。抗体の断片化の方法は当業界で周知であり、例えば、F（ab'）2断片はタンパク質分解酵素であるパパインを、Fab断片は同じくペプシンを処置することにより作製できる。
【００１３】
３）免疫学的測定方法
免疫学的測定方法により、ある患者に対しSART3を対象抗原とした腫瘍の治療が選択可能であるかを検討する。
例えば、癌患者より採取した組織標本に、酵素標識した本発明の抗SART3モノクローナル抗体を反応させるか、または該抗体を一次抗体として反応させ、さらに一次抗体特異的な標識二次抗体を反応させる。形成された抗原・抗体複合体の存在をその標識を利用して検出し、SART3発現の有無を測定する。
または患者の末梢血より採取した細胞を本発明の抗SART3モノクローナル抗体と反応させる。該抗体を予めFITC等で蛍光標識しておくか、あるいは蛍光標識した該抗体に特異的な二次抗体を反応させて、フローサイトメトリーを使用してSART3発現細胞を検出する。
【００１４】
４）キット
上記の免疫学的測定方法の原理を利用して、SART3の発現を簡便に検査できるキットが開発できる。例えばこのようなキットは、本発明の抗SART3モノクローナル抗体、該モノクローナル抗体特異的なペルオキシダーゼ結合二次抗体、および発色基質を含み、SART3発現を視覚化して測定する。
【００１５】
５）医薬組成物
本発明の医薬組成物は、本発明のモノクローナル抗体またはそのF(ab')2断片、Fab断片もしくはFv断片とともに製薬的に許容された担体、アジュバント、および／または添加剤を含む。本発明のモノクローナル抗体またはF(ab')2断片、Fab断片もしくはFv断片に、抗腫瘍作用を有する薬剤または放射性物質を結合させて使用することもできる。該組成物は、様々な慣用的方法で、例えば注射剤または点滴剤として投与できる。
【実施例】
【００１６】
以下に本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に制限されるものではない。
【００１７】
実施例１
抗SART3ハイブリドーマおよびモノクローナル抗体の作成
8週齢メスBALB/cマウス(Charles River Japan, Yokohama, Japan)を、SART3-グルタチオン-S-トランスフェラーゼ融合タンパク質（非特許文献１）で免疫し、マウスの脾臓細胞をマウスミエローマセルラインNS-1と融合した。HAT培地選択の後、SART3-GST（グルタチオン-S-トランスフェラーゼ）融合タンパク質およびGSTに対する抗体産生をELISA法で検討して、ハイブリドーマクローンを選別した。最終的に、限界希釈によりSART3特異的クローンを得て、このクローンをSART3-1-157-29-18と命名した。クローンSART3-1-157-29-18は、茨城県つくば市東１丁目１番３号に住所を有する産業技術総合研究所生命工学工業技術研究所に寄託番号FERM P-19612（寄託日：平成１５年１２月１６日）として寄託されている。クローンSART3-1-157-29-18は、SART3-GSTには反応するがGSTには反応しないIgG1抗体を産生した。
【００１８】
実施例２
ウェスタンブロット解析による抗SART3モノクローナル抗体の特異性の検討
クローンSART3-1-157-29-18から産生される抗SART3モノクローナル抗体（モノクローナル抗体Ｂ)の特異性を調べるため、ウェスタンブロット解析を行った。
SART1-GST（非特許文献12）およびSART3-GSTの精製タンパク質、SART3-mycトランスフェクタント（非特許文献1）、親293T細胞（SV40-形質転換胎児由来腎臓セルライン）、SW620（大腸腺癌セルライン）、およびNS-8（胃癌セルライン）細胞の可溶化液をSDS-PAGEにより分離し、さらにHybond-PVDFメンブラン(Amersham)にブロットした。乳タンパク質(Block Ace, Yukijirushi, Tokyo, Japan)、でブロッキングした後、メンブランを10μg/mlの抗SART3または抗myc抗体と4時間インキュベートし、さらに適したホースラディッシュペルオキシダーゼ結合二次抗体とインキュベートした。タンパク質バンドはECL検出キット(Amersham)を用いて検出した。
ポリクローナル抗SART3ウサギ抗体と同様、本発明の抗SART3モノクローナル抗体ＢはSART3-GSTの140kDaバンドを検出したが、無関係なSART1-GSTの130kDaバンドは検出しなかった（図1A）。このモノクローナル抗体Ｂは、細菌で産生されたGST融合タンパク質だけでなく、293T細胞において発現したmyc標識SART3タンパク質（図1A）、またはSW620大腸癌セルラインで発現した天然SART3（図1B）もまた検出できた。本発明者らは、SART3タンパク質が、正常増殖細胞、癌組織、およびNS-8を除く腫瘍セルラインにおいて広範に発現していることを以前に示している（非特許文献１、５−１１）。NS-8細胞でSART3タンパク質が検出されないことは、本発明の抗SART3モノクローナル抗体Ｂまたはポリクローナル抗体のいずれを用いても確認できた。
【００１９】
実施例３
免疫組織学的染色によるSART3の発現
組織標本におけるSART3の発現を、本発明の抗SART3モノクローナル抗体Ｂを用いて免疫組織学的に解析した。
口腔扁平上皮細胞癌組織のホルマリン固定パラフィン切片を脱ロウし、その後95℃で40分間5％尿素中でインキュベートすることにより抗原性を取り戻した。内因性ペルオキシダーゼ活性を不活化した後、1：400希釈の抗SART3モノクローナル抗体Ｂの腹水を室温で15分間反応させた。この切片をさらにビオチン結合抗マウスIgG F(ab')2と10分間、続いてストレプトアビジン結合ペルオキシダーゼと10分間インキュベートした。AEC(3-アミノ-9-エチルカルバゾール)を1％過酸化水素とともに色素原としてアプライし、その切片をヘマトキシリンで対比染色した。
代表的染色は図2に示される。SART3は癌細胞および正常細胞の両者の核内で染色されたが、癌細胞は近隣の肥厚細胞または正常上皮細胞より高いレベルのSART3を発現した。アイソタイプ適合モノクローナル抗体(KOLT-2、抗CD28)により組織標本が染色されなかったことから、本発明のモノクローナル抗体ＢがSART3を特異的に染色することが確認できた（図2C)。界面活性剤分画研究（非特許文献１、５−１１）と、SART3-GFP遺伝子移入研究（非特許文献２）または本明細書に示される免疫組織学的解析との間の矛盾は、分画研究の条件下で核SART3タンパク質が細胞質画分へ漏出したことによる可能性がある。本明細書に示されるSART3の核局在性は、核内でのプレmRNAスプライシングにおけるSART3の機能的役割に一致する。
【００２０】
実施例５
KE4細胞におけるSART3発現のフローサイトメトリー解析
KE4細胞（食道癌セルライン）におけるSART3の発現は、mRNAレベルおよびタンパク質レベルで報告されている（非特許文献１）。従って本発明の抗SART3モノクローナル抗体Ｂを用いて、腫瘍細胞におけるSART3の発現をさらにフローサイトメトリーにより解析した。
細胞（1 x 106）を、精製抗SART3モノクローナル抗体ＢとFITC結合抗マウスIgG(Dako, Kyoto, Japan)、またはビオチン結合抗SART3とPerCP-アビジン (BD Pharmingen, Mountainview, CA)の組み合わせで間接的に染色した。 KOLT2 (抗CD28) をアイソタイプ適合コントロール抗体として使用した。染色細胞はFACScan フローサイトメーター (BD)で解析した。
無傷およびパラホルムアルデヒド透過処理KE4細胞の代表的なSART3染色ヒストグラムは図3Aに示される。SART3はKE4細胞の細胞表面には発現しておらず、透過処理細胞でのみ検出可能であった。アイソタイプ適合モノクローナル抗体（KOLT-2）による染色により、本発明のモノクローナル抗体Ｂが細胞内のSART3を特異的に染色することが確かめられた（図3A）。
【００２１】
実施例６
SART3の異所性発現
本発明者らは、4つのさらなる固形癌セルライン（肺癌１、前立腺癌１および胃癌２）および15の白血病セルライン（骨髄系4、T細胞系4、およびB細胞系７）について、実施例５に記載されるようにSART3発現を検討した。試験した癌細胞および白血病細胞はいくつかのBセルラインを除いて、いずれもそれらの細胞表面にSART3を発現していなかった（表1に要約）。四つのB細胞系セルライン（C1R-A2402、Raji、NALM-6、およびBALL-1）は細胞表面にSART3を発現していた（図3Bおよび表1）。このSART3の異所性発現は、健常ボランテイアの末梢血リンパ球またはCD20ゲートB細胞の細胞表面では検出されなかった。SART3の細胞表面発現とこれらのB細胞の成熟段階との間には関連性がないので、B系白血病細胞上に異所性に発現するSART3は、B系細胞上の分化抗原であるよりもむしろ腫瘍関連抗原であることを裏付けるものと言える。
表１  SART3の細胞表面発現のまとめ
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【００２２】
実施例７
抗SART3モノクローナル抗体による腫瘍細胞増殖抑制
腫瘍細胞増殖に対する抗SART3モノクローナル抗体の効果を検討した。
実施例１と同様にして抗SART3モノクローナル抗体（モノクローナル抗体Ａ）を産生する別のクローンSART3-1-134-1-17-6を作製した。クローンSART3-1-134-1-17-6は、茨城県つくば市東１丁目１番３号に住所を有する産業技術総合研究所生命工学工業技術研究所に寄託番号FERM P-19611（寄託日：平成１５年１２月１６日）として寄託されている。
モノクローナル抗体Ａは、モノクローナル抗体Ｂと同様にC1R/A2402およびNALM-6上に発現するSART3を認識した。またKE4細胞内のSART3にも結合した（図４）。
腫瘍細胞の増殖はCell counting Kit 8（Dojin化学、熊本）を使用して測定した。
KE4、C1R、C1R/A2402、PC93およびPC93A2402（PC93のHLAトランスフェクタント）を、各々5×103細胞／ウェルで96穴平底プレートにまき、抗SART3モノクローナル抗体の腹水0.062〜0.25％存在下培養した。２日後、Cell counting Kit 8試薬10μlを加え、１〜２時間培養し、上清の吸光度をメーカーのプロトコールに従い測定した。
モノクローナル抗体Aは、KE4細胞の増殖を抑制した。またモノクローナル抗体ＡおよびＢは、C1R、C1R/A2402、PC93およびPC93A2402の増殖を抑制した： 
表２  抗SART3モノクローナル抗体による腫瘍細胞増殖抑制効果
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mAb：モノクローナル抗体。
本結果より、本発明のモノクローナル抗体は細胞表面上のSART3を認識するか、もしくは何らかの未知の機序で細胞内に取り込まれ細胞内SART3を認識することにより、またはその両者により、腫瘍細胞を傷害することが示唆される。
【産業上の利用可能性】
【００２３】
本発明は、腫瘍抗原SART3の発現の免疫学的測定、および抗腫瘍効果を有する抗SART3モノクローナル抗体による腫瘍細胞の傷害を可能とすることから、新規な抗腫瘍剤としての応用が期待できる。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】抗SART3モノクローナル抗体Ｂのウェスタンブロット解析：(A) SART1-GST、SART3-GST、SART3-mycトランスフェクタントおよび親293T細胞の可溶化液、または(B) SART3-mycトランスフェクタント、SW620 (大腸癌)、およびNS-8 (胃癌)の可溶化液をSDS-PAGEで分離し、さらにメンブランにブロットした。タンパク質バンドを示された抗体で検出した。
【図２】抗SART3モノクローナル抗体Ｂによる口腔扁平上皮細胞癌の免疫組織線染色：元の倍率はA: X100、B: X400である。
【図３】抗SART3モノクローナル抗体Ｂのフローサイトメトリー解析：A:無傷またはパラホルムアルデヒド透過処理KE4細胞を染色した。B: 表面SART3陽性Bセルラインの染色ヒストグラム。C:健常ドナー末梢血リンパ球およびCD20ゲートB細胞の染色ヒストグラム。
【図４】抗SART3モノクローナル抗体Ａのフローサイトメトリー解析:モノクローナル抗体Ａよる、無傷またはパラホルムアルデヒド透過処理KE4細胞、およびSART3陽性Bセルラインの染色ヒストグラム。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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