(57)【要約】【課題】  酸素透過性が低く、薬物放出製に優れ、従来のゼラチンハードカプセル製造工程を利用して製造することができるハードカプセルを提供すること。【解決手段】  （ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種、および（ｂ）ゲル化剤、を含有するハードカプセル。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種、および
（ｂ）ゲル化剤、
を含有するハードカプセル。
【請求項２】
前記α−１，４−グルカンが酵素合成α−１，４−グルカンである、請求項１に記載のハードカプセル。
【請求項３】
前記α−１，４−グルカンの修飾物の修飾が、エステル化、エーテル化および架橋からなる群より選択される化学修飾である、請求項１に記載のハードカプセル。
【請求項４】
前記ゲル化剤が多糖類またはゼラチンである、請求項１に記載のハードカプセル。
【請求項５】
さらにゲル化補助剤を含有し、該ゲル化補助剤が、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、アンモニウムイオン、ナトリウムイオン、リチウムイオンからなる群より選択される１種または２種以上のイオンを含む、請求項１に記載のハードカプセル。
【請求項６】
前記（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種を６０〜９９．９重量％、（ｂ）ゲル化剤を０．１〜４０重量％含有する、請求項１に記載のハードカプセル。
【請求項７】
さらにゲル化補助剤を０．０１〜３重量％含有し、各成分の合計が１００重量％を超えない量で含まれる、請求項６に記載のハードカプセル。
【請求項８】
加熱された、（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種および（ｂ）ゲル化剤を含む溶液に、モールドピンを浸漬する工程、
浸漬したモールドピンを加熱溶液から取り出す工程、
モールドピンに付着した溶液を冷却して硬化させる工程、および
得られた硬化物をモールドピンから取り外す工程、
を包含する、ハードカプセルの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、α−１，４−グルカンからなるハードカプセルおよびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
医薬品の投与形態のなかで、ハードカプセルは薬剤の安定化、味や臭いのマスキング、服用の容易さ等の利点を持ち、幅広く用いられている。近年ではそれらの特長を生かして、健康食品用途にも使用されている。
【０００３】
従来から、ハードカプセルの基剤としてゼラチンが広く用いられている。これはゼラチン溶液が高温では溶液状態であるのに対し、低温にするとゲル化する性質を利用したものである。このようなカプセルは、ゼラチンを含む基剤溶液にピンを浸漬して引き上げ、皮膜をゲル化させ、これを乾燥後剥がしとり、必要に応じた裁断等の処理をすることによって、製造することができる（浸漬法）。
【０００４】
しかしながらゼラチンを基剤としたハードカプセルは、水分が可塑剤として作用するため、皮膜中の水分が１０％以下になると割れが生じ、逆に高湿条件では軟化するという不具合がある。またカプセル内容物にアルデヒド基や還元糖を含む場合、ゼラチンと反応がおこりカプセルが不溶化することが知られている。それに加えて近年、牛海綿状脳症（ＢＳＥ）の問題が発生し、動物由来原料の使用を控える動きが広がりつつある。
【０００５】
一方、カプセルに封入される内容物が酸化されやすい物質である場合は、カプセルの皮膜が酸素非透過性であることが求められる。一般に、酸素バリア性高分子は、酸素透過係数が０．０６×１０−１０（ｃｍ３・ｃｍ／ｃｍ２・ｓ・ｃｍＨｇ）以下のものとされている。ゼラチンの酸素透過係数はそれより低いが、カプセルに封入される内容物によっては、さらに酸素透過性の低い膜が必要とされる場合もある。
【０００６】
こうした欠点を解消するために、ハードカプセルについてこれまでにも様々な改良がなされてきた。特開平３−８０９３０号公報（特許文献１）では、可塑剤としてポリエチレングリコールを配合し、柔軟性を改善したゼラチンハードカプセルについて記載されている。
【０００７】
特表２００３−５０５５６５号公報（特許文献２）には、基剤としてプルランを使用し、ゲル化剤およびゲル化補助剤を配合したハードカプセルおよび製造方法について記載されている。プルランの皮膜はゼラチンと比較して酸素の透過性が低いという利点がある。しかしこの被膜は、張力を加えた時の伸びが小さいため、潰れや割れが生じやすい。加えて吸湿性が高いために、高湿度の環境で保管すると、カプセル間の、あるいはカプセルと包装材との癒着が生じ、また服用時のべたつきの原因となる。
【０００８】
特開平３−２７９３２５号公報（特許文献３）には、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等の水溶性セルロース誘導体を基剤として使用し、ゲル化剤およびゲル化補助剤を配合したハードカプセルおよびその製造方法について記載されている。しかし、水溶性セルロース誘導体を基剤としたカプセルは酸素の透過性が高く、酸化の影響を受け易い薬剤を内容物とするカプセルにおける使用は困難である。またセルロース誘導体は植物由来原料ではあるが、化学的な修飾を施して得られたものである。さらにヒドロキシプロピルメチルセルロースを基材としたカプセルは薬物放出性が劣るという欠点もある。
【０００９】
また、澱粉を基剤としたハードカプセルも開発されている（田久保典人、生命とくすり  １０、（６）６（１９９４年）、非特許文献１）。しかしこれは射出成形法で製造されるものであって、従来のゼラチンハードカプセルの製造装置をそのまま使用することはできないという欠点がある。
【００１０】
国際公開第０２／１０２３５５号パンフレット（特許文献４）には、ポリ（１，４−α−Ｄ−グルカン）と澱粉とからなるハードカプセルが記載されている。しかしこのハードカプセルは、澱粉を好ましくは５０〜９５重量％、最も好ましくは７０〜９０重量％となる量で含む、澱粉を主成分とするハードカプセルであって、本願発明によるα−１，４−グルカンを主成分とするハードカプセルとは異なるものである。
【００１１】
国際公開第０２／０６５０７号パンフレット（特許文献５）には、酵素合成アミロースから得られる生分解性物品が記載されており、この生分解性物品の１種としてカプセルが記載されている。この文献には、滴下法によるいわゆるシームレスカプセルの製造方法が記載されているが、一方、ハードカプセルについての具体的な記載はなく、またハードカプセルの製造方法についても記載されていない。
【特許文献１】特開平３−８０９３０号公報
【特許文献２】特表２００３−５０５５６５号公報
【特許文献３】特開平３−２７９３２５号公報
【特許文献４】国際公開第０２／１０２３５５号パンフレット
【特許文献５】国際公開第０２／０６５０７号パンフレット
【非特許文献１】田久保典人、生命とくすり  １０、（６）６（１９９４年）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、上記問題点の解決を意図するものであり、その目的とするところは、酸素透過性が低く、薬物放出製に優れ、従来のゼラチンハードカプセル製造工程を利用して製造することができるハードカプセルを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種、および（ｂ）ゲル化剤、を含有するハードカプセルを提供するものであり、そのことにより上記目的が達成される。
【００１４】
このα−１，４−グルカンが、酵素合成α−１，４−グルカンであるのが好ましい。また、α−１，４−グルカンの修飾物の修飾は、好ましくはエステル化、エーテル化および架橋からなる群より選択される化学修飾である。
【００１５】
ハードカプセルが、（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種を６０〜９９．９重量％、および（ｂ）ゲル化剤を０．１〜４０重量％含有するのが好ましい。また、ハードカプセルがゲル化補助剤を０．０１〜３重量％含有するのが好ましい。
【００１６】
また本発明は、上記ハードカプセルの製造方法も提供する。
【発明の効果】
【００１７】
本発明により、（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種、および（ｂ）ゲル化剤を含むハードカプセルを製造することができる。このハードカプセルは動物由来の原料であるゼラチンを使用せずに製造することができるため、より安全性に優れるものである。さらに、このハードカプセルは、安定性、薬物放出性に優れ、そして酸素透過性が低いという利点を有する。加えて、このハードカプセルは、当分野で普及している、浸漬法によるゼラチンハードカプセル製造用装置をそのまま使用して製造することができるため、製造が容易である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
用語の定義
用語「分散度Ｍｗ／Ｍｎ」とは、重量平均分子量Ｍｗに対する数平均分子量Ｍｎの比（すなわち、Ｍｗ÷Ｍｎ）である。高分子化合物は、タンパク質のような特別の場合を除き、その由来が天然または非天然のいずれであるかに関わらず、その分子量は単一ではなく、ある程度の幅を持っている。そのため、高分子化合物の分子量の分散程度を示すために、高分子化学の分野では通常、分散度Ｍｗ／Ｍｎが用いられている。この分散度は、高分子化合物の分子量分布の幅広さの指標である。分子量が完全に単一な高分子化合物であればＭｗ／Ｍｎは１であり、分子量分布が広がるにつれてＭｗ／Ｍｎは１よりも大きな値になる。本明細書中で「分子量」という用語は、特に断りのない限り重量平均分子量（Ｍｗ）を指す。
【００１９】
用語「ハードカプセル」とは、本明細書中で用いられる場合、キャップ部とボディ部を別々に成形し、内容物を充填した後にはめ込まれる、カプセル被膜を指す。本明細書中の「ハードカプセル」の概念には、２枚のフィルムの間に内容物を充填して接着するソフトカプセルや、内容物を皮膜溶液とともに凝固液に滴下するシームレスカプセル、基剤の析出やエマルジョン化等によって内部に有効成分を取り込むマイクロカプセルは含まれない。
【００２０】
用語「α−１，４−グルカン」とは、本明細書中で用いられる場合、Ｄ−グルコースを構成単位とする糖であって、α−１，４−グルコシド結合のみによって連結された糖単位を少なくとも２糖単位以上有する糖をいう。α−１，４−グルカンは、直鎖状の分子である。α−１，４−グルカンは、直鎖状グルカンとも呼ばれる。１分子のα−１，４−グルカンに含まれる糖単位の数を、重合度という。本明細書中で「重合度」という用語は、特に断りのない限り重量平均重合度を指す。α−１，４−グルカンの場合、重量平均重合度は、重量平均分子量を１６２で割ることによって算出される。
【００２１】
ハードカプセル
本発明のハードカプセルは、（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種、および（ｂ）ゲル化剤、を含む。本発明のハードカプセルはさらに、ゲル化補助剤を含んでもよい。
【００２２】
本発明のハードカプセルに含まれるα−１，４−グルカンは、グルコースが直鎖状に結合した構造のポリマーである。これは、当該分野で公知の方法で、天然澱粉から、あるいは酵素的な手法等で作製され得る。
【００２３】
天然澱粉からα−１，４−グルカンを得る方法としては、たとえば天然澱粉中に存在するアミロペクチンのα−１，６−グルコシド結合のみに、枝切り酵素として既知のイソアミラ−ゼやプルラナ−ゼを選択的に作用させ、アミロペクチンを分解することにより、アミロ−スを得る方法（いわゆる澱粉酵素分解法）がある。別の例として、澱粉糊液からアミロ−ス／ブタノ−ル複合体を沈殿させて分離する方法がある。
【００２４】
また公知の酵素合成法を用いて、α−１，４−グルカンを調製することもできる。酵素合成法の例としては、スクロースを基質として、アミロスクラーゼ（ａｍｙｌｏｓｕｃｒａｓｅ、ＥＣ  ２．４．１．４）を作用させる方法がある。
【００２５】
酵素合成法の別の例は、グルカンホスホリラーゼ（α−ｇｌｕｃａｎ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ、ＥＣ  ２．４．１．１；通常、ホスホリラーゼという）を用いる方法が挙げられる。ホスホリラーゼは、加リン酸分解反応を触媒する酵素である。
【００２６】
本発明では、酵素合成α−１，４−グルカンを用いるのが好ましく、グルカンホスホリラーゼを用いて酵素合成されたα−１，４−グルカンを用いるのが特に好ましい。グルカンホスホリラーゼを用いて酵素合成された酵素合成α−１，４−グルカンは次のような特徴を有する：
（１）分子量分布が狭い（Ｍｗ／Ｍｎが１．１以下）；
（２）製造条件を適切に制御することによって任意の重合度（約６０〜約３７０００）を有するものが得られる；
（３）完全に直鎖であり、天然澱粉から分画したアミロースに認められるわずかな分岐構造をも含まない；
（４）天然澱粉と同様にグルコース残基のみで構成されており、α−１，４−グルカンも、その分解中間体も、そして最終分解物に至るまで生体に対して毒性がない；
（５）酸素透過性が低い；
（６）皮膜中の水分が変動しても、強度等の物性が変化しにくい；
（７）必要に応じて澱粉と同様の化学修飾が可能である。
【００２７】
グルカンホスホリラーゼを用いて酵素合成された酵素合成α−１，４−グルカンは、上記のような特徴を持つため、ハードカプセルの基剤として使用した場合に、次のような利点が得られる：
（ａ）服用後に安全に分解、代謝される；
（ｂ）分子量あるいは化学修飾の置換度の制御により薬物放出時間のコントロールが可能である；
（ｃ）酸化の影響を受けやすい内容物（封入物）を保護する；
（ｄ）外部の湿度変化の影響を受けにくく、また吸湿性薬物を安定に保護する。
【００２８】
上記のα−１，４−グルカンに修飾を施したものを用いることもできる。このような修飾の例としては、エステル化、エーテル化および架橋が挙げられる。
【００２９】
エステル化は、例えば、α−１，４−グルカンを各種溶媒中でまたは無溶媒で、エステル化試薬（例えば、酸無水物、有機酸、酸塩化物、ケテンまたは他のエステル化試薬）と反応させることによって行われ得る。このようなエステル化によって、例えば、酢酸エステル、プロピオン酸エステルなどのアシル化エステル修飾物が得られる。
【００３０】
エーテル化は、例えば、α−１，４−グルカンを、アルカリ存在下でエーテル化剤（例えば、ハロゲン化アルキル、硫酸ジアルキルなど）と反応させることによって行われ得る。このようなエーテル化によって、例えば、カルボキシメチルエーテル、ヒドロキシプロピルエーテル、ヒドロキシメチルエーテル、メチルエーテル、エチルエーテルの修飾物が得られる。
【００３１】
架橋は、例えば、α−１，４−グルカンを、架橋剤（ホルマリン、エピクロロヒドリン、グルタルアルデヒド、各種ジグリシジルエーテル、各種エステルなど）と反応させることによって行われ得る。
【００３２】
α−１，４−グルカンは、修飾を施していないものまたは修飾を施したものをそれぞれ単独で用いてもよく、またはそれらを併用して用いてもよい。また、２種以上のα−１，４−グルカン修飾物を併用してもよい。
【００３３】
本発明のハードカプセルには、ゲル化剤が含まれる。ゲル化剤の例としては、多糖類、例えば、カラギーナン、ジェランガム、ローカストビーンガム、ペクチン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、トラガント、寒天、キサンタン、アラビアゴム、グアガム、タマリンドガム等、およびゼラチンが挙げられる。これらを単独で、あるいは組み合わせて用いることができる。ゲル化剤として上記の多糖類を使用することにより、動物由来原料を含まないハードカプセルを製造することができるため、好ましい。
【００３４】
本発明のハードカプセルは、必要に応じてゲル化補助剤を含んでいても良い。ゲル化補助剤の例としては、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、アンモニウムイオン、ナトリウムイオン、リチウムイオン等を含む物質が挙げられる。これらのイオンを含む物質を単独で使用してもよく、また２種以上を併用してもよい。本発明のハードカプセルに、このようなゲル化補助剤を含めることによって、ハードカプセル製造時のゲル化能力を高めることができる。
【００３５】
本発明のハードカプセルは、（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種を下限６０重量％上限９９．９重量％の量で含む。上記下限は８０重量％であるのが好ましく、９０重量％であるのがより好ましい。上記上限は９９．８重量％であるのが好ましく、９９．６重量％であるのがより好ましい。（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種、がハードカプセル中に上記範囲で含まれる場合は、カプセルの強度、安定性、薬物放出性に優れるからである。また本発明のハードカプセルは、ゲル化剤を下限０．１重量％上限４０重量％の量で含む。上記下限は０．２重量％であるのが好ましく、０．３重量％であるのがより好ましい。上記上限は１５重量％であるのが好ましく、５重量％であるのがより好ましい。ゲル化剤の量が上記範囲から外れる場合は、ハードカプセルの製造が困難となる恐れがある。本発明のハードカプセルにさらにゲル化補助剤が含まれる場合は、下限０．０１重量％上限３重量％の量で含む。この上限は１重量％であるのが好ましい。なお、これら各成分（α−１，４−グルカン、その修飾物、ゲル化剤およびゲル化補助剤）は、各成分の合計が１００重量％を超えない量で含まれることを条件とする。
【００３６】
本発明のハードカプセルは柔軟化剤を含んでいても良い。柔軟化剤の例としては、グリセリン、モノアセチン、ジアセチン、トリアセチン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、デンプン、デキストリン、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル等が挙げられる。このような柔軟化剤を含めることによって、得られるハードカプセルの皮膜物性を改良することができる。
【００３７】
本発明のハードカプセルは、界面活性剤などの滑沢剤を含んでいても良い。滑沢剤の例としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、モノステアリン酸ソルビタン、レシチン、カルナウバロウ、セラック等が挙げられる。このような滑沢剤を用いることによって、内容物充填時のカプセルの開閉を容易にしたり、服用時のべたつきを改善することができる。
【００３８】
本発明のハードカプセルには、その内側面および／または外側面にコーティングを施していても良い。コーティング剤の例としては、ゼイン、デキストリン、プルラン、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース、酢酸フタル酸セルロース、アミノアルキルメタアクリレート コポリマーＥ、メタアクリル酸コポリマーＬ、メタアクリル酸 コポリマーＬＤ、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、ポリビニルアルコール、セラック、ポリエチレングリコール等が挙げられる。このようなコーティングを施すことにより、腸溶性などの放出機能を付与したり、ガスバリア性、投与性などを改善したりすることができる。
【００３９】
本発明のハードカプセルは、識別性や遮光性の賦与を目的として、着色剤や顔料を含んでいても良い。着色剤および顔料の例としては、黄色三二酸化鉄、三二酸化鉄、食用赤色２号アルミニウムレーキ、食用赤色３号、食用赤色１０２号、食用赤色１０４号、食用赤色１０５号、食用赤色１０６号、食用黄色４号、食用黄色５号、食用緑色３号、食用青色１号、食用青色２号、銅クロロフィンナトリウム、銅クロロフィン、酸化チタン等が挙げられる。
【００４０】
ハードカプセルの製造方法
本発明のハードカプセルを製造する方法としては、押出し成形、射出成形、キャスティング又は浸漬法などの方法により、通常使用される製造装置で製造することができる。特にα−１，４−グルカンとゲル化剤とが含まれる本発明のハードカプセルは、ゼラチンハードカプセルの製造に一般的に使用される装置をそのまま使用して製造することができるという利点を有する。
【００４１】
本発明のハードカプセルは、好ましくは、ゼラチンハードカプセルの製造において通常用いられる浸漬法によって製造される。この浸漬法は、
・加熱された、α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種およびゲル化剤を含む溶液に、モールドピンを浸漬する工程、
・浸漬したモールドピンを加熱溶液から取り出す工程、
・モールドピンに付着した溶液を冷却して硬化させる工程、および
・得られた硬化物をモールドピンから取り外す工程、
を包含する。図１に、浸漬法によるハードカプセルの製造の概略工程図を示す。
【００４２】
上記の工程は、必要に応じて、モールドピンに付着した溶液を硬化させる前にモールドピンを上下方向に１８０度回転させる工程を含んでもよい。また、得られた硬化物をモールドピンから取り外す前に、硬化物を乾燥させてもよい。さらに、浸漬させる溶液にゲル化補助剤を加えて、ゲル化を促進させてもよい。
【００４３】
ハードカプセルの製造に使用される溶液は、α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種を５〜５０重量％、好ましくは１０〜２０重量％、ゲル化剤を０．０５〜５重量％、好ましくは０．１〜１．０重量％の範囲で含む。さらにゲル化補助剤を用いる場合は、ゲル化補助剤を０．０１〜０．２重量％、好ましくは０．０５〜０．１重量％の範囲で含む。α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種が５重量％より少ない場合は、十分な厚みを有するハードカプセルが得られないおそれがある。一方、５０重量％を超える場合は、溶液の粘度が高くなり、浸漬法による、均一な厚みを有するハードカプセルの製造が困難となるおそれがある。ゲル化剤が０．０５重量％より少ない場合は、モールドピンに付着した溶液の十分なゲル化が得られないおそれがある。一方、５重量％を超える場合は、溶液の粘度が高くなり、浸漬法によって均一な厚みを有するハードカプセルを製造することが困難となるおそれがある。ゲル化補助剤が０．２重量％を超える場合は、溶液の粘度が不均一となる恐れがある。
【００４４】
この溶液の媒体として水を用いる。使用することができる水として、例えば水道水、イオン交換水、蒸留水、精製水が挙げられる。
【００４５】
モールドピンを浸漬する溶液の温度は、α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種、およびゲル化剤が良好に溶解する温度であればよい。この温度は好ましくは４０〜７０℃、より好ましくは４５〜５５℃である。上記範囲の温度は、均一な厚みを有するハードカプセルの製造に適しているからである。また、モールドピンに付着した溶液の冷却時間および冷却温度は、浸漬法による公知のハードカプセルの製造において通常用いられる条件を用いればよい。
【００４６】
本発明のハードカプセルには、粉末、顆粒、錠剤、液状、半固形状の内容物を充填することができる。また必要に応じてキャップ部とボディ部の接合部分にシールを施して、内容物の漏れ防止や安定性の改善を図ることができる。
【００４７】
本発明のハードカプセルに充填し得る内容物として、医薬品、農薬および肥料、食品および食品添加物、香料、染料、洗剤等が挙げられる。
【実施例】
【００４８】
以下、実施例及び試験例によって本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されることはない。
【００４９】
試験例において、馬鈴薯塊茎由来の精製グルカンホスホリラーゼの調製方法、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ由来スクロースホスホリラーゼの調製方法、α−１，４−グルカンの収率（％）の計算方法、重量平均分子量（Ｍｗ）及び数平均分子量（Ｍｎ）の測定方法は、特開２００２−３４５４５８号の記載により公知である方法に従った。具体的に、合成したグルカンの分子量は次のように測定した。まず、合成したグルカンを１Ｎ水酸化ナトリウムで完全に溶解し、適切な量の塩酸で中和した後、グルカン約３００μｇ分を、示差屈折計と多角度光散乱検出器を併用したゲル濾過クロマトグラフィーに供することにより重量平均分子量を求めた。詳しくは、カラムとしてＳｈｏｄｅｘ ＳＢ８０６Ｍ−ＨＱ（昭和電工製）を用い、検出器としては多角度光散乱検出器（ＤＡＷＮ−ＤＳＰ、Ｗｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）および示差屈折計（Ｓｈｏｄｅｘ ＲＩ−７１、昭和電工製）をこの順序で連結して用いた。カラムを４０℃に保ち、溶離液としては０．１Ｍ硝酸ナトリウム溶液を流速１ｍＬ／分で用いた。得られたシグナルを、データ解析ソフトウェア（商品名ＡＳＴＲＡ、Ｗｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）を用いて収集し、同ソフトを用いて解析することにより、重量平均分子量、数平均分子量を求めた。
【００５０】
アセチル化α−１，４−グルカンの置換度は、「澱粉・関連糖質実験法」（中村ら、１９８６年、学会出版センター）の記載に従い、以下の方法で測定した。試料１ｇを３００ｍｌの三角フラスコに精秤し、７５％のエタノール５０ｍｌを加え分散した。これに０．５Ｎの水酸化ナトリウム水溶液を４０ｍｌ加え、密栓して４８時間室温で振盪した。過剰のアルカリを０．５Ｎの塩酸で滴定し、ブランクとの差から置換度（DS）を求めた。置換度（DS）は無水グルコース残基あたりの平均置換水酸基数である。
【００５１】
酸素透過性試験は日本工業規格ＪＩＳ Ｋ７１２６“プラスチックフィルム及びシートの気体透過度試験方法”に基づいた差圧法により以下の方法で行った。装置は、試験片に酸素を透過させるための透過セル、透過した酸素による圧力変化を検知する圧力検出器、透過セルに酸素を供給するための試験気体供給器、真空ポンプなどから構成される。圧力検出器は佐藤真空株式会社製ＮＥＷパルミル真空計ＰＶＤ−９５００−Ｌ２１を用いて１Ｐａの精度で測定した。透過面の直径３０ｍｍ、試験片はデシケーター内でシリカゲルを用いて４８時間以上乾燥したものを用いた。試験条件は室温２０℃、試験温度２５℃で行った。試験方法は、試験片によって隔てられた一方（低圧側）を真空に保ち、もう一方（高圧側）に酸素を約1気圧導入し、低圧側の圧力を記録し透過曲線を得た。透過曲線の定常状態の傾きから単位時間における低圧側の圧力変化を求め、気体透過度及び気体透過係数を算出した。なお、試験片の厚さは３箇所測定した平均値を用いた。
【００５２】
ハードカプセルの圧縮試験は以下の方法で行った。レオメーター（FUDOH RT−２００２D・D）の試料台上に、局方乳糖２００M(五協産業)を充填したハードカプセルを横向きに置き、直径２０ｍｍの円盤状アダプターとの間に挟んだ。試料台を６０ｍｍ／ｍｉｎの速さで３ｍｍ上昇させて圧縮し、再び降下させた。これを５回繰り返したのち、カプセルの割れやへこみの状況を観察した。サンプルは相対湿度が６０％で１週間保存したものと、真空下で乾燥させたものを用いた。同じサンプルにつき５錠のカプセルを試験した。
【００５３】
ハードカプセルの溶出試験は日本薬局方に基づき、３７℃の蒸留水中でおこなった。内容物には、アセトアミノフェンと乳糖を１：５の重量比で混合したものを用いた。
【００５４】
製造例１：α−１，４−グルカンの合成
１５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）、１０６ｍＭスクロース、及びマルトオリゴ糖混合物（テトラップＨ、林原製）５．４ｍｇ／リットルを含有する反応液(１リットル)に、馬鈴薯塊茎由来の精製グルカンホスホリラーゼ（１単位／ｍｌ）と、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ由来スクロースホスホリラーゼ（１単位／ｍｌ）を加えて３７℃で１６時間保温し、反応終了後、生成したα−１，４−グルカンの収率（％）、重量平均分子量（Ｍｗ）および分子量分布（Ｍｗ／Ｍｎ）を決定した。その結果、重量平均分子量が１２５０ｋDa、分子量分布（Ｍｗ／Ｍｎ）が１．０３のα−１，４−グルカンを得た。
【００５５】
製造例２：アセチル化α−１，４−グルカンの合成
ジメチルスルホキシド８０ｇに、試験例１で得られたα−１，４−グルカンの濃度が５重量％となるように溶解し、炭酸ナトリウム２ｇを添加後、酢酸ビニル８ｇを加えて、４０℃において６０分反応させた。反応後、エタノールを添加して生成物を析出させ、ろ過後、数回水で洗浄し、精製した。得られたアセチル化α−１，４−グルカンの置換度は０．４４であった。
【００５６】
実施例１
液温７０℃の蒸留水９０ｇに、κ−カラギーナン０．２ｇ、塩化カリウム０．０８ｇおよび製造例１のα−１，４−グルカン１０ｇを、攪拌しながら溶解させた。この溶液の温度を５０℃に保ち、直径７．０ｍｍ、または６．７ｍｍを有する、先端が半球状であるステンレス円柱ピンを浸漬させ、引き上げた。これを上下方向に１８０度反転させ、２０℃で凝固させ、次いで乾燥してハードカプセルを得た。
【００５７】
実施例２
製造例１のα−１，４−グルカン１０ｇの代わりに製造例２のアセチル化α−１，４−グルカン１０ｇを用いる他は実施例１と同様にして、ハードカプセルを得た。
【００５８】
比較例１
実施例１のα−１，４−グルカン１０ｇの代わりに、プルラン（林原製、ＰＩ−２０）１０ｇを用いる他は実施例１と同様にして、ハードカプセルを得た。
【００５９】
比較例２
液温７０℃の蒸留水９０ｇに、ゼラチン１０ｇを、攪拌しながら溶解させた。この溶液の温度を５０℃に保ち、直径７．０ｍｍ、または６．７ｍｍを有する、先端が半球状であるステンレス円柱ピンを浸漬させ、引き上げた。これを上下方向に１８０度反転させ、２０℃で凝固させ、次いで乾燥してハードカプセルを得た。
【００６０】
比較例３
液温５０℃の蒸留水９０ｇに、κ−カラギーナン０．２ｇ、塩化カリウム０．０８ｇおよびヒドロキシプロピルセルロース（信越化学社製、ＨＰＭＣ２９１０）１０ｇを、攪拌しながら溶解させた。この溶液の温度を５０℃に保ち、直径７．０ｍｍ、または６．７ｍｍを有する、先端が半球状であるステンレス円柱ピンを浸漬させ、引き上げた。これを上下方向に１８０度反転させ、２０℃で凝固させ、次いで乾燥してハードカプセルを得た。
【００６１】
試験１：フィルム作製および酸素透過性試験
上記実施例１および比較例１〜３で得られた各溶液を、ステンレス板状に流延し、３０℃に保った乾燥機で乾燥させて、厚さ約３０μｍのフィルムを得た。こうして得られた４種類のフィルムについて酸素透過性試験を行なった。結果を表１に示す。
【００６２】
【表１】
2005194218.tif 000002
【００６３】
表１に示されるとおり、α−１，４−グルカンからなるフィルムは、ハードカプセルに多用されているゼラチンあるいはヒドロキシプロピルメチルセルロースのフィルムと比較して、その酸素透過性は数十から数千分の一であり、優れた酸素バリア性を有する。
【００６４】
試験２：ハードカプセル圧縮試験
実施例１、２および比較例１〜３で得られたハードカプセルの圧縮試験を行った。結果を表２に示す。
【００６５】
【表２】
2005194218.tif 000003
【００６６】
表２に示されるとおり、実施例１および２のサンプルは、相対湿度６０％での保存および真空乾燥のいずれにおいてもひび割れが生じなかった。それに対し、ゼラチンを基剤とした比較例２のサンプルは、相対湿度６０％での保存ではひび割れは生じなかったものの、真空で乾燥させたものは割れて内容物が漏洩した。またプルランを基剤とした比較例１のサンプルは、相対湿度６０％での保存および真空乾燥の何れにおいても潰れてしまい、その後元の形状に復元しなかった。
【００６７】
試験３：溶出試験
実施例１、２および比較例１で得られたハードカプセルの溶出試験を行った。結果を図２に示す。図２によれば、実施例１のα−１，４−グルカンおよび実施例２のアセチル化α−１，４−グルカンを基剤としたハードカプセルは、２０分以内にほぼすべての薬物を溶出した。溶出挙動は比較例１のゼラチンから得られたカプセルと同等であり、実施例のカプセルは良好な薬物放出性を有するものであることが確認できた。
【産業上の利用可能性】
【００６８】
本発明により、（ａ）α−１，４−グルカンおよびその修飾物の少なくとも１種、および（ｂ）ゲル化剤、を含むハードカプセルを製造することができる。このハードカプセルは動物由来の原料であるゼラチンを使用せずに製造することができるため、より安全性に優れるものである。さらに、このハードカプセルは、安定性、薬物放出性に優れ、そして酸素透過性が低いという利点を有する。加えて、このハードカプセルは、当分野で普及している、浸漬法によるゼラチンハードカプセル製造用装置をそのまま使用して製造することができるため、製造が容易である。安全性、安定性、薬物放出性に優れ、そして酸素透過性が低い、このハードカプセルは、種々の内容物を封入させることができるため、医薬品、農薬および肥料、食品および食品添加物、香料、染料、洗剤など、多様な用途に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
【図１】浸漬法によるハードカプセルの製造の概略工程図である。
【図２】実施例および比較例で得られたハードカプセルの溶出試験の結果を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
2005194218.tif 000005