(57)【要約】【課題】  PPARγ結合能の試験方法に用いることができる蛍光標識化リガンドの提供。【解決手段】  一般式（I）【化１】2005139117.tif 000010［式中、R1：アルキル、ＯＨ、アルコキシ、アルキルチオ、置換可アリール、置換可アリールオキシ、置換可アリールチオ、置換可アリールアルキル、置換可アリールアルキルオキシ、置換可アリールアルキルチオ、置換可アリールオキシアルキル、置換可芳香族ヘテロシクリルオキシ、置換可芳香族ヘテロシクリルチオ、置換可飽和ヘテロシクリル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、置換可アルキルアリールアミノ、置換可アリールアミノ、置換可アリールアルキルアミノ、置換可アリールアルキルオキシカルボニルアミノ；R2：Ｈ、アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ハロゲノ、ニトロ、ジアルキルアミノ、置換可アリール、置換可アリールアルキル、ＯＨ、アルキルカルボニル；R3：置換可アリール、置換可ビフェニル；R4：蛍光基；A1、A2、A3、A4：アルキレン］で表される化合物またはその塩。【選択図】  なし。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（I）
【化１】
2005139117.tif 000009
［式中、R1は、Ｃ1−Ｃ6アルキル基、水酸基、Ｃ1−Ｃ4アルコキシ基、Ｃ1−Ｃ4アルキルチオ基、Ｃ6−Ｃ10アリール基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールオキシ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールチオ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)チオ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)オキシ−(Ｃ1−Ｃ4アルキル)基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル基、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)オキシ基、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)チオ基、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の飽和ヘテロシクリル基、アミノ基、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ基、ジ(Ｃ1−Ｃ4アルキル)アミノ基（当該アルキル基は、同一または異なる）、Ｎ−(Ｃ1−Ｃ4アルキル)−Ｎ−(Ｃ6−Ｃ10アリール)アミノ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールアミノ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)アミノ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、または、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシカルボニルアミノ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）を示し、
R2は、水素原子、Ｃ1−Ｃ6アルキル基、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ基、Ｃ1−Ｃ6アルキルチオ基、ハロゲノ基、ニトロ基、ジ(Ｃ1−Ｃ4アルキル)アミノ基（当該アルキル基は、同一または異なる）、Ｃ6−Ｃ10アリール基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、水酸基、または、Ｃ1−Ｃ5アルキルカルボニル基を示し、
R3は、Ｃ6−Ｃ10アリール基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、または、ビフェニル基（当該ビフェニル基は、置換基群αより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）を示し、
R4は、蛍光基を示し、
A1、A2、A3、およびA4は、独立して、Ｃ1−Ｃ6アルキレン基を示し、
置換基群αは、C1-C6アルキル基、ハロゲノC1-C4アルキル基（当該ハロゲノC1-C4アルキル基は、１乃至７個のハロゲノ基で置換されたC1-C4アルキル基を示す）、水酸基、C1-C5アルキルカルボニルオキシ基、C1-C5アルキルカルボニル基、C1-C4アルコキシ基、ハロゲノC1-C4アルコキシ基（当該ハロゲノC1-C4アルコキシ基は、１乃至７個のハロゲノ基で置換されたC1-C4アルコキシ基を示す）、C1-C4アルキレンジオキシ基、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシ基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、C1-C4アルキルチオ基、C1-C4アルキルスルホニル基、ハロゲノ基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ基、(Ｃ1−Ｃ4アルコキシ)カルボニルアミノ基、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシカルボニルアミノ基、ジ(Ｃ1−Ｃ4アルキル)アミノ基（当該アルキル基は、同一または異なる）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリール基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールオキシ基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールチオ基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールスルホニル基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールスルホニルアミノ基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよく、当該アミノ基の窒素原子は、Ｃ6−Ｃ10アルキル基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)オキシ基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)チオ基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニル基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニルアミノ基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよく、当該アミノ基の窒素原子は、Ｃ6−Ｃ10アルキル基で置換されてもよい）、および、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る��より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の飽和ヘテロシクリル基から成る群を示し、
置換基群βは、C1-C6アルキル基、ハロゲノC1-C4アルキル基（当該ハロゲノC1-C4アルキル基は、１乃至７個のハロゲノ基で置換されたC1-C4アルキル基を示す）、水酸基、C1-C4アルコキシ基、ハロゲノC1-C4アルコキシ基（当該ハロゲノC1-C4アルコキシ基は、１乃至７個のハロゲノ基で置換されたC1-C4アルコキシ基を示す）、C1-C4アルキレンジオキシ基、ヒドロキシ(C1-C4アルキル)基、C1-C5アルキルカルボニル基、ハロゲノ基、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、アミノ基、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ基、ジ(Ｃ1−Ｃ4アルキル)アミノ基（当該アルキル基は、同一または異なる）、アミノ(C1-C4アルキル)基、(C1-C4アルキル)アミノ(C1-C4アルキル)基、[ジ(C1-C4アルキル)アミノ](C1-C4アルキル)基［当該ジ(C1-C4アルキル)アミノ基のアルキル部分は、同一または異なる］、(C1-C4アルコキシ)カルボニルアミノ基、および、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシカルボニルアミノ基から成る群を示す。］で表される化合物またはその塩。
【請求項２】
請求項１に記載の一般式（I）で表される化合物またはその塩を用いたペルオキシソームプロリフェレータ活性化受容体γ（peroxisome proliferator activated receptor γ：PPARγ）結合能を有する化合物を検出する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、適度な強さのPPARγ結合能および蛍光能を併せ持つ化合物もしくはその塩、または、当該化合物もしくはその塩を用いたPPARγ結合能の試験方法（PPARγ結合能を有する化合物を検出する方法）に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペルオキシソームプロリフェレータ活性化受容体γ（peroxisome proliferator activated receptor γ：PPARγ）は核内レセプターファミリーの一員である。PPARγは、血糖低下作用、脂肪細胞分化、脂質代謝等に深く関与する因子であり、PPARγに対して結合活性を有する化合物は、糖尿病、骨粗鬆症、脂質代謝異常に基づく疾患等の治療薬として有望である。化合物のPPARγに対する結合能を試験するための効率的で簡便な方法を見出すことは、PPARγに対して結合能を有する化合物の効率的な創製に有用である。
【０００３】
試験化合物のPPARγに対する結合能を調べる方法としては、放射性ラベル化合物を用いる方法や、蛍光標識化化合物を用いる方法を挙げることができる。このうち、蛍光標識化化合物を用いる方法としては、PPARγリガンドにフルオレセイン等の蛍光分子団を結合させた蛍光標識化リガンドを合成し、それを用いて蛍光偏光度法を行う方法が知られている（例えば、非特許文献１等）。非特許文献１の方法では、用いられる蛍光標識化リガンドのKd値が比較的大きく、大規模なアッセイを行う場合、大量のPPARγタンパク質を必要とすることが予想される。ハイスループットスクリーニング（High Throughput Screening：HTS）等の技術の発達により、短時間に多数の試験化合物の結合能試験を行うことが可能となっていることから、より少ない量のPPARγタンパク質の使用で、より多数の試験化合物の結合能試験を行うことができることが好ましい。そのためには、PPARγに対してより優れた結合活性を有する、すなわち、より小さいKd値を有する蛍光標識化リガンドを開発することが望ましい。
【非特許文献１】DeGrazia, M.J. et.al., Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2003年, 第11巻, p.4325-4332
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明者等は、PPARγに対して優れた結合活性を有する蛍光標識化リガンドについて研究した結果、本発明の一般式（I）で表される化合物またはその塩が、優れたPPARγ結合能および蛍光能を併せ持ち、より少ない量のPPARγタンパク質の使用で、蛍光偏光度法を用いた簡便で網羅的なPPARγ結合能の試験方法（PPARγ結合能を有する化合物を検出する方法）に用いることができることを見出し、本発明を完成させた。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、
（１）一般式（I）
【０００６】
【化２】
2005139117.tif 000002
【０００７】
［式中、R1は、Ｃ1−Ｃ6アルキル基、水酸基、Ｃ1−Ｃ4アルコキシ基、Ｃ1−Ｃ4アルキルチオ基、Ｃ6−Ｃ10アリール基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールオキシ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールチオ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)チオ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)オキシ−(Ｃ1−Ｃ4アルキル)基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル基、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)オキシ基、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)チオ基、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の飽和ヘテロシクリル基、アミノ基、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ基、ジ(Ｃ1−Ｃ4アルキル)アミノ基（当該アルキル基は、同一または異なる）、Ｎ−(Ｃ1−Ｃ4アルキル)−Ｎ−(Ｃ6−Ｃ10アリール)アミノ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールアミノ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)アミノ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、または、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシカルボニルアミノ基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）を示し、
R2は、水素原子、Ｃ1−Ｃ6アルキル基、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ基、Ｃ1−Ｃ6アルキルチオ基、ハロゲノ基、ニトロ基、ジ(Ｃ1−Ｃ4アルキル)アミノ基（当該アルキル基は、同一または異なる）、Ｃ6−Ｃ10アリール基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至５個の置換基で置換されてもよい）、水酸基、または、Ｃ1−Ｃ5アルキルカルボニル基を示し、
R3は、Ｃ6−Ｃ10アリール基（当該アリール基は、置換基群αより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、または、ビフェニル基（当該ビフェニル基は、置換基群αより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）を示し、
R4は、蛍光基を示し、
A1、A2、A3、およびA4は、独立して、Ｃ1−Ｃ6アルキレン基を示し、
置換基群αは、C1-C6アルキル基、ハロゲノC1-C4アルキル基（当該ハロゲノC1-C4アルキル基は、１乃至７個のハロゲノ基で置換されたC1-C4アルキル基を示す）、水酸基、C1-C5アルキルカルボニルオキシ基、C1-C5アルキルカルボニル基、C1-C4アルコキシ基、ハロゲノC1-C4アルコキシ基（当該ハロゲノC1-C4アルコキシ基は、１乃至７個のハロゲノ基で置換されたC1-C4アルコキシ基を示す）、C1-C4アルキレンジオキシ基、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシ基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、C1-C4アルキルチオ基、C1-C4アルキルスルホニル基、ハロゲノ基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ基、(Ｃ1−Ｃ4アルコキシ)カルボニルアミノ基、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシカルボニルアミノ基、ジ(Ｃ1−Ｃ4アルキル)アミノ基（当該アルキル基は、同一または異なる）、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリール基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールオキシ基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールチオ基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールスルホニル基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、Ｃ6−Ｃ10アリールスルホニルアミノ基（当該アリール基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよく、当該アミノ基の窒素原子は、Ｃ6−Ｃ10アルキル基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)オキシ基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)チオ基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニル基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよい）、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニルアミノ基（当該ヘテロシクリル基は、置換基群βより選択される１乃至３個の置換基で置換されてもよく、当該アミノ基の窒素原子は、Ｃ6−Ｃ10アルキル基で置換されてもよい）、および、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る��より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の飽和ヘテロシクリル基から成る群を示し、
置換基群βは、C1-C6アルキル基、ハロゲノC1-C4アルキル基（当該ハロゲノC1-C4アルキル基は、１乃至７個のハロゲノ基で置換されたC1-C4アルキル基を示す）、水酸基、C1-C4アルコキシ基、ハロゲノC1-C4アルコキシ基（当該ハロゲノC1-C4アルコキシ基は、１乃至７個のハロゲノ基で置換されたC1-C4アルコキシ基を示す）、C1-C4アルキレンジオキシ基、ヒドロキシ(C1-C4アルキル)基、C1-C5アルキルカルボニル基、ハロゲノ基、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、アミノ基、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ基、ジ(Ｃ1−Ｃ4アルキル)アミノ基（当該アルキル基は、同一または異なる）、アミノ(C1-C4アルキル)基、(C1-C4アルキル)アミノ(C1-C4アルキル)基、[ジ(C1-C4アルキル)アミノ](C1-C4アルキル)基［当該ジ(C1-C4アルキル)アミノ基のアルキル部分は、同一または異なる］、(C1-C4アルコキシ)カルボニルアミノ基、および、(Ｃ6−Ｃ10アリール)−(Ｃ1−Ｃ6アルキル)オキシカルボニルアミノ基から成る群を示す。］で表される化合物またはその塩、または、
（２）上記（１）に記載の一般式（I）で表される化合物またはその塩を用いたペルオキシソームプロリフェレータ活性化受容体γ（peroxisome proliferator activated receptor γ：PPARγ）結合能を有する化合物を検出する方法を提供する。
【０００８】
上記一般式（I）で表される化合物またはその塩において、好適な化合物は、式（Ia）
【０００９】
【化３】
2005139117.tif 000003
【００１０】
で表される２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−５−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸、その異性体２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−６−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸、または、それらの混合物であり、より好適な化合物は、式（Ib）
【００１１】
【化４】
2005139117.tif 000004
【００１２】
で表される（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−５−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸、その異性体（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−６−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸、または、それらの混合物である。
上記R1、R2、置換基群αおよび置換基群βにおける「C1−C6アルキル基」は、１乃至６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル基であり、例えば、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基、１−ブチル基、２−ブチル基、２−メチル−１−プロピル基、２−メチル−２−プロピル基、１−ペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチル−２−ブチル基、３−メチル−２−ブチル基、１−ヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基、２−メチル−１−ペンチル基、３−メチル−１−ペンチル基、２−エチル−１−ブチル基、２,２−ジメチル−１−ブチル基、または、２,３−ジメチル−１−ブチル基であり得、好適には、C1-C4アルキル基であり、より好適には、メチル基またはエチル基であり、最も好適には、メチル基である。
【００１３】
上記R1、置換基群αおよび置換基群βにおける「C1-C4アルコキシ基」は、C1-C4アルキル基で置換された水酸基であり、例えば、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基、２−プロポキシ基、１−ブトキシ基、２−ブトキシ基、２−メチル−１−プロポキシ基、または、２−メチル−２−プロポキシ基であり得、好適には、メトキシ基またはエトキシ基であり、より好適には、メトキシ基である。
【００１４】
上記R2における「C1-C6アルコキシ基」は、上記C1-C6アルキル基で置換された水酸基であり、例えば、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基、２−プロポキシ基、１−ブトキシ基、２−ブトキシ基、２−メチル−１−プロポキシ基、２−メチル−２−プロポキシ基、１−ペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、２−メチル−２−ブトキシ基、３−メチル−２−ブトキシ基、１−ヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基、２−メチル−１−ペンチルオキシ基、３−メチル−１−ペンチルオキシ基、２−エチル−１−ブトキシ基、２,２−ジメチル−１−ブトキシ基、または、２,３−ジメチル−１−ブトキシ基であり得、好適には、C1-C4アルコキシ基であり、より好適には、メトキシ基またはエトキシ基であり、最も好適には、メトキシ基である。
【００１５】
上記R1および置換基群αにおける「C1-C4アルキルチオ基」は、C1-C4アルキル基で置換されたメルカプト基であり、例えば、メチルチオ基、エチルチオ基、１−プロピルチオ基、２−プロピルチオ基、１−ブチルチオ基、２−ブチルチオ基、２−メチル−１−プロピルチオ基、または、２−メチル−２−プロピルチオ基であり得、好適には、メチルチオ基またはエチルチオ基であり、より好適には、メチルチオ基である。
【００１６】
上記R2における「C1-C6アルキルチオ基」は、上記C1-C6アルキル基で置換されたメルカプト基であり、例えば、メチルチオ基、エチルチオ基、１−プロピルチオ基、２−プロピルチオ基、１−ブチルチオ基、２−ブチルチオ基、２−メチル−１−プロピルチオ基、２−メチル−２−プロピルチオ基、１−ペンチルチオ基、２−ペンチルチオ基、３−ペンチルチオ基、２−メチル−２−ブチルチオ基、３−メチル−２−ブチルチオ基、１−ヘキシルチオ基、２−ヘキシルチオ基、３−ヘキシルチオ基、２−メチル−１−ペンチルチオ基、３−メチル−１−ペンチルチオ基、２−エチル−１−ブチルチオ基、２,２−ジメチル−１−ブチルチオ基、または、２,３−ジメチル−１−ブチルチオ基であり得、好適には、C1-C4アルキルチオ基であり、より好適には、メチルチオ基またはエチルチオ基であり、最も好適には、メチルチオ基である。
【００１７】
上記R1、R2、R3および置換基群αにおける「C6-C10アリール基」は、６乃至１０個の炭素原子を有する芳香族炭化水素基であり、例えば、フェニル基、インデニル基またはナフチル基であり得、好適には、フェニル基またはナフチル基であり、より好適には、フェニル基である。
【００１８】
上記R1および置換基群αにおける「C6-C10アリールオキシ基」は、上記C6-C10アリール基で置換された水酸基であり、例えば、フェニルオキシ基、インデニルオキシ基またはナフチルオキシ基であり得、好適には、フェニルオキシ基またはナフチルオキシ基であり、より好適には、フェニルオキシ基である。
【００１９】
上記R1および置換基群αにおける「C6-C10アリールチオ基」は、上記C6-C10アリール基で置換されたメルカプト基であり、例えば、フェニルチオ基、インデニルチオ基またはナフチルチオ基であり得、好適には、フェニルチオ基またはナフチルチオ基であり、より好適には、フェニルチオ基である。
【００２０】
上記R1、R2および置換基群αにおける「(C6-C10アリール)−(C1-C6アルキル)基」は、上記C6-C10アリール基で置換された上記C1-C6アルキル基であり、例えば、ベンジル基、１−ナフチルメチル基、２−ナフチルメチル基、インデニルメチル基、１−フェニル−１−エチル基、２−フェニル−１−エチル基、２−(１−ナフチル)−１−エチル基、２−(２−ナフチル)−１−エチル基、１−フェニル−１−プロピル基、２−フェニル−１−プロピル基、３−フェニル−１−プロピル基、３−(１−ナフチル)−１−プロピル基、３−(２−ナフチル)−１−プロピル基、１−フェニル−１−ブチル基、２−フェニル−１−ブチル基、３−フェニル−１−ブチル基、４−フェニル−１−ブチル基、４−(１−ナフチル)−１−ブチル基、４−(２−ナフチル)−１−ブチル基、４−フェニル−１−ペンチル基、５−フェニル−１−ペンチル基、５−フェニル−１−ヘキシル基、または、６−フェニル−１−ヘキシル基であり得、好適には、フェニル−(C1-C4アルキル)基であり、より好適には、ベンジル基、２−フェニル−１−エチル基、３−フェニル−１−プロピル基、または、４−フェニル−１−ブチル基である。
【００２１】
上記R1および置換基群αにおける「(C6-C10アリール)−(C1-C6アルキル)オキシ基」は、上記(C6-C10アリール)−(C1-C6アルキル)基で置換された水酸基であり、例えば、ベンジルオキシ基、１−ナフチルメチルオキシ基、２−ナフチルメチルオキシ基、インデニルメチルオキシ基、１−フェニル−１−エチルオキシ基、２−フェニル−１−エチルオキシ基、２−(１−ナフチル)−１−エチルオキシ基、２−(２−ナフチル)−１−エチルオキシ基、１−フェニル−１−プロピルオキシ基、２−フェニル−１−プロピルオキシ基、３−フェニル−１−プロピルオキシ基、３−(１−ナフチル)−１−プロピルオキシ基、３−(２−ナフチル)−１−プロピルオキシ基、１−フェニル−１−ブチルオキシ基、２−フェニル−１−ブチルオキシ基、３−フェニル−１−ブチルオキシ基、４−フェニル−１−ブチルオキシ基、４−(１−ナフチル)−１−ブチルオキシ基、４−(２−ナフチル)−１−ブチルオキシ基、４−フェニル−１−ペンチルオキシ基、５−フェニル−１−ペンチルオキシ基、５−フェニル−１−ヘキシルオキシ基、または、６−フェニル−１−ヘキシルオキシ基であり得、好適には、フェニル−(C1-C4アルキル)オキシ基であり、より好適には、ベンジルオキシ基、２−フェニル−１−エチルオキシ基、３−フェニル−１−プロピルオキシ基、または、４−フェニル−１−ブチルオキシ基である。
【００２２】
上記R1における「(C6-C10アリール)−(C1-C6アルキル)チオ基」は、上記(C6-C10アリール)−(C1-C6アルキル)基で置換されたメルカプト基であり、例えば、ベンジルチオ基、１−ナフチルメチルチオ基、２−ナフチルメチルチオ基、インデニルメチルチオ基、１−フェニル−１−エチルチオ基、２−フェニル−１−エチルチオ基、２−(１−ナフチル)−１−エチルチオ基、２−(２−ナフチル)−１−エチルチオ基、１−フェニル−１−プロピルチオ基、２−フェニル−１−プロピルチオ基、３−フェニル−１−プロピルチオ基、３−(１−ナフチル)−１−プロピルチオ基、３−(２−ナフチル)−１−プロピルチオ基、１−フェニル−１−ブチルチオ基、２−フェニル−１−ブチルチオ基、３−フェニル−１−ブチルチオ基、４−フェニル−１−ブチルチオ基、４−(１−ナフチル)−１−ブチルチオ基、４−(２−ナフチル)−１−ブチルチオ基、４−フェニル−１−ペンチルチオ基、５−フェニル−１−ペンチルチオ基、５−フェニル−１−ヘキシルチオ基、または、６−フェニル−１−ヘキシルチオ基であり得、好適には、フェニル−(C1-C4アルキル)チオ基であり、より好適には、ベンジルチオ基、２−フェニル−１−エチルチオ基、３−フェニル−１−プロピルチオ基、または、４−フェニル−１−ブチルチオ基である。
【００２３】
上記R1における「(C6-C10アリール)オキシ−(C1-C4アルキル)基」は、上記C6-C10アリールオキシ基で置換されたC1-C4アルキル基であり、例えば、フェニルオキシメチル基、１−ナフチルオキシメチル基、２−ナフチルオキシメチル基、インデニルオキシメチル基、１−フェニルオキシ−１−エチル基、２−フェニルオキシ−１−エチル基、２−(１−ナフチル)オキシ−１−エチル基、２−(２−ナフチル)オキシ−１−エチル基、１−フェニルオキシ−１−プロピル基、２−フェニルオキシ−１−プロピル基、３−フェニルオキシ−１−プロピル基、３−(１−ナフチル)オキシ−１−プロピル基、３−(２−ナフチル)オキシ−１−プロピル基、１−フェニルオキシ−１−ブチル基、２−フェニルオキシ−１−ブチル基、３−フェニルオキシ−１−ブチル基、４−フェニルオキシ−１−ブチル基、４−(１−ナフチル)オキシ−１−ブチル基、または、４−(２−ナフチル)オキシ−１−ブチル基であり得、好適には、フェニルオキシ−(C1-C4アルキル)基であり、より好適には、フェニルオキシメチル基、２−フェニルオキシ−１−エチル基、３−フェニルオキシ−１−プロピル基、または、４−フェニルオキシ−１−ブチル基である。
【００２４】
上記R1および置換基群αにおける「窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル基」は、例えば、フリル基、チエニル基、ピロリル基、アゼピニル基、ピラゾリル基、イミダゾリル基、オキサゾリル基、イソキサゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、１,２,３−オキサジアゾリル基、１,２,３−チアジアゾリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、ピラニル基、ピリジル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、アゼピニル基、アゾシニル基、アゾニニル基、インドリル基、ベンゾフラニル基、ベンゾチエニル基、ベンゾイミダゾリル基、ベンゾイソオキサゾリル基、ベンゾイソキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾイソチアゾリル基、キノリル基、イソキノリルル基、キノキサリニル基またはキナゾリニル基であり得、好適には、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル基であり、より好適には、１個以上の窒素原子を有し、酸素原子または硫黄原子を有してもよい５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル基であり、最も好適には、ピリジル基である。
【００２５】
上記R1および置換基群αにおける「窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)オキシ基」は、上記窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル基で置換された水酸基であり、例えば、フリルオキシ基、チエニルオキシ基、ピロリルオキシ基、アゼピニルオキシ基、ピラゾリルオキシ基、イミダゾリルオキシ基、オキサゾリルオキシ基、イソキサゾリルオキシ基、チアゾリルオキシ基、イソチアゾリルオキシ基、１,２,３−オキサジアゾリルオキシ基、１,２,３−チアジアゾリルオキシ基、トリアゾリルオキシ基、テトラゾリルオキシ基、ピラニルオキシ基、ピリジルオキシ基、ピリダジニルオキシ基、ピリミジニルオキシ基、ピラジニルオキシ基、アゼピニルオキシ基、アゾシニルオキシ基、アゾニニルオキシ基、インドリルオキシ基、ベンゾフラニルオキシ基、ベンゾチエニルオキシ基、ベンゾイミダゾリルオキシ基、ベンゾイソオキサゾリルオキシ基、ベンゾイソキサゾリルオキシ基、ベンゾチアゾリルオキシ基、ベンゾイソチアゾリルオキシ基、キノリルオキシ基、イソキノリルオキシ基、キノキサリニルオキシ基またはキナゾリニルオキシ基であり得、好適には、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル)オキシ基であり、より好適には、１個以上の窒素原子を有し、酸素原子または硫黄原子を有してもよい(５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル)オキシ基であり、最も好適には、ピリジルオキシ基である。
【００２６】
上記R1および置換基群αにおける「窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)チオ基」は、上記窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル基で置換されたメルカプト基であり、例えば、フリルチオ基、チエニルチオ基、ピロリルチオ基、アゼピニルチオ基、ピラゾリルチオ基、イミダゾリルチオ基、オキサゾリルチオ基、イソキサゾリルチオ基、チアゾリルチオ基、イソチアゾリルチオ基、１,２,３−オキサジアゾリルチオ基、１,２,３−チアジアゾリルチオ基、トリアゾリルチオ基、テトラゾリルチオ基、ピラニルチオ基、ピリジルチオ基、ピリダジニルチオ基、ピリミジニルチオ基、ピラジニルチオ基、アゼピニルチオ基、アゾシニルチオ基、アゾニニルチオ基、インドリルチオ基、ベンゾフラニルチオ基、ベンゾチエニルチオ基、ベンゾイミダゾリルチオ基、ベンゾイソオキサゾリルチオ基、ベンゾイソキサゾリルチオ基、ベンゾチアゾリルチオ基、ベンゾイソチアゾリルチオ基、キノリルチオ基、イソキノリルチオ基、キノキサリニルチオ基またはキナゾリニルチオ基であり得、好適には、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル)チオ基であり、より好適には、１個以上の窒素原子を有し、酸素原子または硫黄原子を有してもよい(５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル)チオ基であり、最も好適には、ピリジルチオ基である。
【００２７】
上記R1および置換基群αにおける「窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の飽和ヘテロシクリル基」は、例えば、ピロリジニル基、イミダゾリジニル基、ピラゾリジニル基、ピペリジル基、ピペラジニル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、パーヒドロアゼピニル基、パーヒドロアゾシニル基またはパーヒドロアゾニニル基であり得、好適には、ピロリジニル基、ピペリジル基、ピペラジニル基、モルホリニル基またはチオモルホリニル基である。
【００２８】
上記R1、置換基群αおよび置換基群βにおける「C1-C4アルキルアミノ基」は、１個のC1-C4アルキル基で置換されたアミノ基であり、例えば、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基（例えば、１−プロピルアミノ基、２−プロピルアミノ基）、１−ブチルアミノ基、２−ブチルアミノ基、２−メチル−１−プロピルアミノ基または２−メチル−２−プロピルアミノ基であり得、好適には、メチルアミノ基、エチルアミノ基またはプロピルアミノ基であり、より好適には、メチルアミノ基またはエチルアミノ基であり、最も好適には、メチルアミノ基である。
【００２９】
上記R1、R2、置換基群αおよび置換基群βにおける「ジ(C1-C4アルキル)アミノ基」は、同一または異なる２個のC1-C4アルキル基で置換されたアミノ基であり、例えば、ジメチルアミノ基、メチルエチルアミノ基、メチルプロピルアミノ基［例えば、N-(１−プロピル)-N-メチルアミノ基等］、メチルブチルアミノ基［例えば、N-(１−ブチル)-N-メチルアミノ基等］、ジエチルアミノ基、エチルプロピルアミノ基［例えば、N-(１−プロピル)-N-エチルアミノ基等］、ジプロピルアミノ基［例えば、ジ(１−プロピル)アミノ基、ジ(２−プロピル)アミノ基等］、ジ(１−ブチル)アミノ基、ジ(２−ブチル)アミノ基、ジ(２−メチル−１−プロピル)アミノ基またはジ(２−メチル−２−プロピル)アミノ基であり得、好適には、ジメチルアミノ基、メチルエチルアミノ基、メチルプロピルアミノ基、ジエチルアミノ基、エチルプロピルアミノ基、または、ジプロピルアミノ基であり、より好適には、ジメチルアミノ基またはジエチルアミノ基であり、最も好適には、ジメチルアミノ基である。
【００３０】
上記R1における「Ｎ−(C1-C4アルキル)−Ｎ−(C6-C10アリール)アミノ基」は、１個のC1-C4アルキル基および１個の上記C6-C10アリール基で置換されたアミノ基であり、例えば、Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−ナフチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−フェニルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−ナフチルアミノ基、Ｎ−プロピル−Ｎ−フェニルアミノ基、Ｎ−(１−ブチル)−Ｎ−フェニルアミノ基、Ｎ−(１−ブチル)−Ｎ−ナフチルアミノ基、Ｎ−(２−ブチル)−Ｎ−フェニルアミノ基、Ｎ−(２−ブチル)−Ｎ−ナフチルアミノ基、Ｎ−(２−メチル−１−プロピル)−Ｎ−フェニルアミノ基、Ｎ−(２−メチル−１−プロピル)−Ｎ−ナフチルアミノ基、Ｎ−(２−メチル−２−プロピル)−Ｎ−フェニルアミノ基またはＮ−(２−メチル−２−プロピル)−Ｎ−ナフチルアミノ基であり得、好適には、Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−フェニルアミノ基またはＮ−プロピル−Ｎ−フェニルアミノ基であり、より好適には、Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノ基またはＮ−エチル−Ｎ−フェニルアミノ基であり、最も好適には、Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノ基である。
【００３１】
上記R1における「C6-C10アリールアミノ基」は、１個の上記C6-C10アリール基で置換されたアミノ基であり、例えば、フェニルアミノ基、インデニルアミノ基またはナフチルアミノ基であり得、好適には、フェニルアミノ基またはナフチルアミノ基であり、より好適には、フェニルアミノ基である。
【００３２】
上記R1における「(C6-C10アリール)−(C1-C6アルキル)アミノ基」は、１個の上記(C6-C10アリール)−(C1-C6アルキル)基で置換されたアミノ基であり、例えば、ベンジルアミノ基、１−ナフチルメチルアミノ基、２−ナフチルメチルアミノ基、インデニルメチルアミノ基、(１−フェニル−１−エチル)アミノ基、(２−フェニル−１−エチル)アミノ基、[２−(１−ナフチル)−１−エチル]アミノ基、[２−(２−ナフチル)−１−エチル]アミノ基、(１−フェニル−１−プロピル)アミノ基、(２−フェニル−１−プロピル)アミノ基、(３−フェニル−１−プロピル)アミノ基、[３−(１−ナフチル)−１−プロピル]アミノ基、[３−(２−ナフチル)−１−プロピル]アミノ基、(１−フェニル−１−ブチル)アミノ基、(２−フェニル−１−ブチル)アミノ基、(３−フェニル−１−ブチル)アミノ基、(４−フェニル−１−ブチル)アミノ基、[４−(１−ナフチル)−１−ブチル]アミノ基、[４−(２−ナフチル)−１−ブチル]アミノ基、(４−フェニル−１−ペンチル)アミノ基、(５−フェニル−１−ペンチル)アミノ基、(５−フェニル−１−ヘキシル)アミノ基、または、(６−フェニル−１−ヘキシル)アミノ基であり得、好適には、[フェニル−(C1-C4アルキル)]アミノ基であり、より好適には、ベンジルアミノ基、(２−フェニル−１−エチル)アミノ基、(３−フェニル−１−プロピル)アミノ基、または、(４−フェニル−１−ブチル)アミノ基である。
【００３３】
上記R1、置換基群αおよび置換基群βにおける「(C6-C10アリール)−(C1-C6アルキル)オキシカルボニルアミノ基」は、オキシカルボニルアミノ基（−OCONH−）の酸素原子が１個の上記(C6-C10アリール)−(C1-C6アルキル)基で置換された基であり、例えば、ベンジルオキシカルボニルアミノ基、１−ナフチルメチルオキシカルボニルアミノ基、２−ナフチルメチルオキシカルボニルアミノ基、インデニルメチルオキシカルボニルアミノ基、(１−フェニル−１−エチル)オキシカルボニルアミノ基、(２−フェニル−１−エチル)オキシカルボニルアミノ基、[２−(１−ナフチル)−１−エチル]オキシカルボニルアミノ基、[２−(２−ナフチル)−１−エチル]オキシカルボニルアミノ基、(１−フェニル−１−プロピル)オキシカルボニルアミノ基、(２−フェニル−１−プロピル)オキシカルボニルアミノ基、(３−フェニル−１−プロピル)オキシカルボニルアミノ基、[３−(１−ナフチル)−１−プロピル]オキシカルボニルアミノ基、[３−(２−ナフチル)−１−プロピル]オキシカルボニルアミノ基、(１−フェニル−１−ブチル)オキシカルボニルアミノ基、(２−フェニル−１−ブチル)オキシカルボニルアミノ基、(３−フェニル−１−ブチル)オキシカルボニルアミノ基、(４−フェニル−１−ブチル)オキシカルボニルアミノ基、[４−(１−ナフチル)−１−ブチル]アミノ基、[４−(２−ナフチル)−１−ブチル]オキシカルボニルアミノ基、(４−フェニル−１−ペンチル)オキシカルボニルアミノ基、(５−フェニル−１−ペンチル)オキシカルボニルアミノ基、(５−フェニル−１−ヘキシル)オキシカルボニルアミノ基、または、(６−フェニル−１−ヘキシル)オキシカルボニルアミノ基であり得、好適には、[フェニル−(C1-C4アルキル)]アミノ基であり、より好適には、ベンジルオキシカルボニルアミノ基、(２−フェニル−１−エチル)オキシカルボニルアミノ基、(３−フェニル−１−プロピル)オキシカルボニルアミノ基、または、(４−フェニル−１−ブチル)オキシカルボニルアミノ基である。
【００３４】
上記R2、置換基群αおよび置換基群βにおける「ハロゲノ基」は、フルオロ基、クロロ基、ブロモ基、または、ヨード基であり得、好適には、フルオロ基、クロロ基またはブロモ基であり、より好適には、フルオロ基またはクロロ基であり、最も好適には、フルオロ基である。
【００３５】
上記R2、置換基群αおよび置換基群βにおける「C1-C5アルキルカルボニル基」は、水素原子もしくはC1-C4アルキル基で置換されたカルボニル基（-CO-）であり、例えば、ホルミル基、メチルカルボニル基、エチルカルボニル基、１−プロピルカルボニル基、２−プロピルカルボニル基、１−ブチルカルボニル基、２−ブチルカルボニル基、２−メチル−１−プロピルカルボニル基、２−メチル−２−プロピルカルボニル基、１−ペンチルカルボニル基、２−ペンチルカルボニル基、３−ペンチルカルボニル基、２−メチル−２−ブチルカルボニル基、３−メチル−２−ブチルカルボニル基、１−ヘキシルカルボニル基、２−ヘキシルカルボニル基、３−ヘキシルカルボニル基、２−メチル−１−ペンチルカルボニル基、３−メチル−１−ペンチルカルボニル基、２−エチル−１−ブチルカルボニル基、２,２−ジメチル−１−ブチルカルボニル基、または、２,３−ジメチル−１−ブチルカルボニル基であり得、好適には、C1-C3アルキルカルボニル基であり、より好適には、メチルカルボニル基またはエチルカルボニル基であり、最も好適には、メチルカルボニル基である。
【００３６】
上記R4における「蛍光基」は、同一スピン多重度をもつ電子状態間の遷移で発光する性質を有する基（分子団）のことをいい、例えば、ダンシル基、アズレニル基、フルオレセイン基であり得、好適には、フルオレセイン基である。なお、フルオレセイン基は、式（II）
【００３７】
【化５】
2005139117.tif 000005
【００３８】
で表される基を示し、好適には、５−フルオレセイン基（５位に結合手を有する）または６−フルオレセイン基（６位に結合手を有する）であり、より好適には、５−フルオレセイン基である。
【００３９】
上記A1、A2、A3およびA4における「C1-C6アルキレン基」は、１乃至６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキレン基であり、例えば、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、テトラメチレン基、２−メチルトリメチレン基、ペンタメチレン基、２−メチルテトラメチレン基、３−メチルテトラメチレン基、ヘキサメチレン基、２−メチルペンタメチレン基、３−メチルペンタメチレン基、２,３−ジメチルテトラペンタメチレン基、２,４−ジメチルテトラペンタメチレン基または３,３−ジメチルテトラペンタメチレン基であり得、好適には、C1-C4アルキレン基であり、より好適には、メチレン基またはエチレン基であり、最も好適には、メチレン基である。
【００４０】
上記置換基群αおよび置換基群βにおける「ハロゲノC1-C4アルキル基」は、１乃至７個の上記ハロゲノ基で置換されたC1-C4アルキル基であり、例えば、フルオロメチル基、ジフルオロメチル基、ジクロロメチル基、ジブロモメチル基、トリフルオロメチル基、トリクロロメチル基、２−フルオロエチル基、２−ブロモエチル基、２−クロロエチル基、２−ヨードエチル基、２,２−ジフルオロエチル基、２,２,２−トリフルオロエチル基、トリクロロエチル基、ペンタフルオロエチル基、３−フルオロプロピル基、３−クロロプロピル基または４−フルオロブチル基であり得、好適には、トリフルオロメチル基、２,２,２−トリフルオロエチル基またはペンタフルオロエチル基であり、最も好適には、トリフルオロメチル基である。
【００４１】
上記置換基群αにおける「C1-C5アルキルカルボニルオキシ基」は、カルボニルオキシ基（-COO-）の炭素原子が、水素原子もしくはC1-C4アルキル基で置換された基であり、例えば、ホルミルオキシ基、メチルカルボニルオキシ基、エチルカルボニルオキシ基、１−プロピルカルボニルオキシ基、２−プロピルカルボニルオキシ基、１−ブチルカルボニルオキシ基、２−ブチルカルボニルオキシ基、２−メチル−１−プロピルカルボニルオキシ基、２−メチル−２−プロピルカルボニルオキシ基、１−ペンチルカルボニルオキシ基、２−ペンチルカルボニルオキシ基、３−ペンチルカルボニルオキシ基、２−メチル−２−ブチルカルボニルオキシ基、３−メチル−２−ブチルカルボニルオキシ基、１−ヘキシルカルボニルオキシ基、２−ヘキシルカルボニルオキシ基、３−ヘキシルカルボニルオキシ基、２−メチル−１−ペンチルカルボニルオキシ基、３−メチル−１−ペンチルカルボニルオキシ基、２−エチル−１−ブチルカルボニルオキシ基、２,２−ジメチル−１−ブチルカルボニルオキシ基、または、２,３−ジメチル−１−ブチルカルボニルオキシ基であり、好適には、メチルカルボニルオキシ基またはエチルカルボニルオキシ基であり、最も好適には、メチルカルボニルオキシ基である。
【００４２】
上記置換基群αおよび置換基群βにおける「ハロゲノC1-C4アルコキシ基」は、１乃至７個の上記ハロゲノ基で置換されたC1-C4アルキル基であり、例えば、フルオロメトキシ基、ジフルオロメトキシ基、ジクロロメトキシ基、ジブロモメトキシ基、トリフルオロメトキシ基、トリクロロメトキシ基、２−フルオロエトキシ基、２−ブロモエトキシ基、２−クロロエトキシ基、２−ヨードエトキシ基、２,２−ジフルオロエトキシ基、２,２,２−トリフルオロエトキシ基、トリクロロエトキシ基、ペンタフルオロエトキシ基、３−フルオロプロポキシ基、３−クロロプロポキシ基または４−フルオロブトキシ基であり得、好適には、トリフルオロメトキシ基、２,２,２−トリフルオロエトキシ基またはペンタフルオロエトキシ基であり、最も好適には、トリフルオロメトキシ基である。
【００４３】
上記置換基群αおよび置換基群βにおける「C1-C4アルキレンジオキシ基」は、１乃至４個の炭素原子を有するアルキレンジオキシ基であり、例えば、メチレンジオキシ基、エチレン-1,2-ジオキシ基、1-メチルメチレンジオキシ基、プロピレン-1,3-ジオキシ基、1-メチルエチレン-1,2-ジオキシ基、2-メチルエチレン-1,2-ジオキシ基、1-エチルメチレンジオキシ基、ブチレン-1,4-ジオキシ基、1-メチルプロピレン-1,3-ジオキシ基、2-メチルプロピレン-1,3-ジオキシ基、3-メチルプロピレン-1,3-ジオキシ基、1-エチルエチレン-1,2-ジオキシ基、2-エチルエチレン-1,2-ジオキシ基、1,2-ジメチルエチレン-1,2-ジオキシ基、または、1-プロピルメチレンジオキシ基であり得、好適には、C1-C4アルキレンジオキシ基であり、より好適には、メチレンジオキシ基またはエチレン-1,2-ジオキシ基であり、最も好適には、メチレンジオキシ基である。
【００４４】
上記置換基群αにおける「C1-C4アルキルスルホニル基」は、C1-C4アルキル基で置換されたスルホニル基（−SO2−）であり、例えば、メチルスルホニル基、エチルスルホニル基、１−プロピルスルホニル基、２−プロピルスルホニル基、１−ブチルスルホニル基、２−ブチルスルホニル基、２−メチル−１−プロピルスルホニル基、または、２−メチル−２−プロピルスルホニル基であり得、好適には、メチルスルホニル基またはエチルスルホニル基であり、より好適には、メチルスルホニル基である。
【００４５】
上記置換基群αおよび置換基群βにおける「(C1-C4アルコキシ)カルボニルアミノ基」は、カルボニルアミノ基（−CONH−）の炭素原子が上記C1-C4アルコキシ基で置換された基であり、例えば、メトキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基、１−プロポキシカルボニルアミノ基、２−プロポキシカルボニルアミノ基、１−ブトキシカルボニルアミノ基、２−ブトキシカルボニルアミノ基、２−メチル−１−プロポキシカルボニルアミノ基、または、２−メチル−２−プロポキシカルボニルアミノ基であり得、好適には、メトキシカルボニルアミノ基またはエトキシカルボニルアミノ基であり、より好適には、メトキシカルボニルアミノ基である。
【００４６】
上記置換基群αにおける「C6-C10アリールスルホニル基」は、１個の上記C6-C10アリール基で置換されたスルホニル基（−SO2−）であり、例えば、フェニルスルホニル基、インデニルスルホニル基またはナフチルスルホニル基であり得、好適には、フェニルスルホニル基またはナフチルスルホニル基であり、より好適には、フェニルスルホニル基である。
【００４７】
上記置換基群αにおける「C6-C10アリールスルホニルアミノ基」は、スルホニルアミノ基（−SO2NH−）の硫黄原子が１個の上記C6-C10アリール基で置換されたであり、例えば、フェニルスルホニルアミノ基、インデニルスルホニルアミノ基またはナフチルスルホニルアミノ基であり得、好適には、フェニルスルホニルアミノ基またはナフチルスルホニルアミノ基であり、より好適には、フェニルスルホニルアミノ基である。
【００４８】
上記置換基群αにおける「窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニル基」は、上記窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル基で置換されたスルホニル基（−SO2−）であり、例えば、フリルスルホニル基、チエニルスルホニル基、ピロリルスルホニル基、アゼピニルスルホニル基、ピラゾリルスルホニル基、イミダゾリルスルホニル基、オキサゾリルスルホニル基、イソキサゾリルスルホニル基、チアゾリルスルホニル基、イソチアゾリルスルホニル基、１,２,３−オキサジアゾリルスルホニル基、１,２,３−チアジアゾリルスルホニル基、トリアゾリルスルホニル基、テトラゾリルスルホニル基、ピラニルスルホニル基、ピリジルスルホニル基、ピリダジニルスルホニル基、ピリミジニルスルホニル基、ピラジニルスルホニル基、アゼピニルスルホニル基、アゾシニルスルホニル基、アゾニニルスルホニル基、インドリルスルホニル基、ベンゾフラニルスルホニル基、ベンゾチエニルスルホニル基、ベンゾイミダゾリルスルホニル基、ベンゾイソオキサゾリルスルホニル基、ベンゾイソキサゾリルスルホニル基、ベンゾチアゾリルスルホニル基、ベンゾイソチアゾリルスルホニル基、キノリルスルホニル基、イソキノリルスルホニル基、キノキサリニルスルホニル基またはキナゾリニルスルホニル基であり得、好適には、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニル基であり、より好適には、１個以上の窒素原子を有し、酸素原子または硫黄原子を有してもよい(５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニル基であり、最も好適には、ピリジルスルホニル基である。
【００４９】
上記置換基群αにおける「窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニルアミノ基」は、スルホニルアミノ基（−SO2NH−）の硫黄原子が上記窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する５乃至１０員の芳香族ヘテロシクリル基で置換された基であり、例えば、フリルスルホニルアミノ基、チエニルスルホニルアミノ基、ピロリルスルホニルアミノ基、アゼピニルスルホニルアミノ基、ピラゾリルスルホニルアミノ基、イミダゾリルスルホニルアミノ基、オキサゾリルスルホニルアミノ基、イソキサゾリルスルホニルアミノ基、チアゾリルスルホニルアミノ基、イソチアゾリルスルホニルアミノ基、１,２,３−オキサジアゾリルスルホニルアミノ基、１,２,３−チアジアゾリルスルホニルアミノ基、トリアゾリルスルホニルアミノ基、テトラゾリルスルホニルアミノ基、ピラニルスルホニルアミノ基、ピリジルスルホニルアミノ基、ピリダジニルスルホニルアミノ基、ピリミジニルスルホニルアミノ基、ピラジニルスルホニルアミノ基、アゼピニルスルホニルアミノ基、アゾシニルスルホニルアミノ基、アゾニニルスルホニルアミノ基、インドリルスルホニルアミノ基、ベンゾフラニルスルホニルアミノ基、ベンゾチエニルスルホニルアミノ基、ベンゾイミダゾリルスルホニルアミノ基、ベンゾイソオキサゾリルスルホニルアミノ基、ベンゾイソキサゾリルスルホニルアミノ基、ベンゾチアゾリルスルホニルアミノ基、ベンゾイソチアゾリルスルホニルアミノ基、キノリルスルホニルアミノ基、イソキノリルスルホニルアミノ基、キノキサリニルスルホニルアミノ基またはキナゾリニルスルホニルアミノ基であり得、好適には、窒素原子、酸素原子もしくは硫黄原子から成る群より選択される１乃至４個のヘテロ原子を含有する(５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニルアミノ基であり、より好適には、１個以上の窒素原子を有し、酸素原子または硫黄原子を有してもよい(５乃至７員の芳香族ヘテロシクリル)スルホニルアミノ基であり、最も好適には、ピリジルスルホニルアミノ基である。
【００５０】
上記置換基群βにおける「ヒドロキシ(C1-C4アルキル)基」は、１乃至４個の水酸基で置換されたC1-C4アルキル基であり、例えば、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基（例えば、１−ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシエチル基）、ジヒドロキシエチル基（例えば、１,２−ジヒドロキシエチル基等）、ヒドロキシプロピル基（例えば、１−ヒドロキシ−１−プロピル基、２−ヒドロキシ−１−プロピル基、３−ヒドロキシ−１−プロピル基、１−ヒドロキシ−２−プロピル基等）、ジヒドロキシプロピル基（例えば、２,３−ジヒドロキシ−１−プロピル基等）、ヒドロキシブチル基（例えば、１−ヒドロキシ−１−ブチル基、２−ヒドロキシ−１−ブチル基、３−ヒドロキシ−１−ブチル基、４−ヒドロキシ−１−ブチル基、１−ヒドロキシ−２−ブチル基、３−ヒドロキシ−２−ブチル基、４−ヒドロキシ−２−ブチル基等）、３−ヒドロキシ−２−メチル−１−プロピル基、１−ヒドロキシ−２−メチル−２−プロピル基またはジヒドロキシブチル基（例えば、２,３−ジヒドロキシ−１−ブチル基、２,４−ジヒドロキシ−１−ブチル基、３,４−ジヒドロキシ−１−ブチル基等）であり得、好適には、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基、ジヒドロキシエチル基、ヒドロキシプロピル基、ジヒドロキシプロピル基、ヒドロキシブチル基、または、ジヒドロキシブチル基であり、より好適には、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基（特に、２−ヒドロキシエチル基）またはヒドロキシプロピル基（特に、３−ヒドロキシプロピル基）である。
【００５１】
上記置換基群βにおける「アミノ(C1-C4アルキル)基」は、１乃至４個のアミノ基で置換されたC1-C4アルキル基であり、例えば、アミノメチル基、アミノエチル基（例えば、１−アミノエチル基、２−アミノエチル基）、ジアミノエチル基（例えば、１,２−ジアミノエチル基等）、アミノプロピル基（例えば、１−アミノ−１−プロピル基、２−アミノ−１−プロピル基、３−アミノ−１−プロピル基、１−アミノ−２−プロピル基等）、ジアミノプロピル基（例えば、２,３−ジアミノ−１−プロピル基等）、アミノブチル基（例えば、１−アミノ−１−ブチル基、２−アミノ−１−ブチル基、３−アミノ−１−ブチル基、４−アミノ−１−ブチル基、１−アミノ−２−ブチル基、３−アミノ−２−ブチル基、４−アミノ−２−ブチル基等）、３−アミノ−２−メチル−１−プロピル基、１−アミノ−２−メチル−２−プロピル基またはジアミノブチル基（例えば、２,３−ジアミノ−１−ブチル基、２,４−ジアミノ−１−ブチル基、３,４−ジアミノ−１−ブチル基等）であり得、好適には、アミノメチル基、アミノエチル基またはアミノプロピル基であり、より好適には、アミノメチル基またはアミノエチル基（特に、２−アミノエチル基）である。
【００５２】
上記置換基群βにおける「(C1-C4アルキル)アミノ(C1-C4アルキル)基」は、１乃至４個のC1-C4アルキルアミノ基で置換されたC1-C4アルキル基であり、例えば、メチルアミノメチル基、エチルアミノメチル基、プロピルアミノメチル基［例えば、（１−プロピルアミノ）メチル基、（２−プロピルアミノ）メチル基］、ブチルアミノメチル基［例えば、（１−ブチルアミノ）メチル基等］、メチルアミノエチル基［例えば、１−（メチルアミノ）エチル基、２−（メチルアミノ）エチル基］、エチルアミノエチル基［例えば、２−（エチルアミノ）エチル基等］、プロピルアミノエチル基［例えば、２−（１−プロピルアミノ）エチル基等］、ブチルアミノエチル基［例えば、２−（１−ブチルアミノ）エチル基等］、１,２−ジ（メチルアミノ）エチル基、メチルアミノプロピル基［例えば、１−メチルアミノ−１−プロピル基、２−メチルアミノ−１−プロピル基、３−メチルアミノ−１−プロピル基、１−メチルアミノ−２−プロピル基等］、エチルアミノプロピル基［例えば、３−エチルアミノ−１−プロピル基等］、プロピルアミノプロピル基［例えば、３−（１−プロピルアミノ）−１−プロピル基等］、２,３−ジ（メチルアミノ）−１−プロピル基、ブチルアミノプロピル基［例えば、３−（１−ブチルアミノ）−１−プロピル基等］、１−メチルアミノ−１−ブチル基、２−メチルアミノ−１−ブチル基、３−メチルアミノ−１−ブチル基、４−メチルアミノ−１−ブチル基、４−エチルアミノ−１−ブチル基、１−メチルアミノ−２−ブチル基、３−メチルアミノ−２−ブチル基、４−メチルアミノ−２−ブチル基、３−メチルアミノ−２−メチル−１−プロピル基、１−メチルアミノ−２−メチル−２−プロピル基、２,３−ジ（メチルアミノ）−１−ブチル基、２,４−ジ（メチルアミノ）−１−ブチル基または３,４−ジ（メチルアミノ）−１−ブチル基であり得、好適には、メチルアミノメチル基、エチルアミノメチル基、プロピルアミノメチル基、メチルアミノエチル基、エチルアミノエチル基、プロピルアミノエチル基、メチルアミノプロピル基、エチルアミノプロピル基、または、プロピルアミノプロピル基であり、より好適には、メチルアミノメチル基またはメチルアミノエチル基［特に、２−（メチルアミノ）エチル基］である。
【００５３】
上記置換基群βにおける「[ジ(C1-C4アルキル)アミノ](C1-C4アルキル)基」は、１乃至４個の上記ジ(C1-C4アルキル)アミノ基（当該アルキル基は、同一または異なる）で置換されたC1-C4アルキル基であり、例えば、（ジメチルアミノ）メチル基、（Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアミノ）メチル基、（メチルプロピルアミノ）メチル基［例えば、［Ｎ−メチル−Ｎ−（１−プロピル）アミノ］メチル基、［Ｎ−メチル−Ｎ−（２−プロピル）アミノ］メチル基］、［Ｎ−メチル−Ｎ−（１−ブチル）アミノ］メチル基、（ジエチルアミノ）メチル基、（エチルプロピルアミノ）メチル基［例えば、［Ｎ−エチル−Ｎ−（１−プロピル）アミノ］メチル基、［Ｎ−エチル−Ｎ−（２−プロピル）アミノ］メチル基］、（ジプロピルアミノ）メチル基［例えば、［ジ（１−プロピル）アミノ］メチル基、［ジ（２−プロピル）アミノ］メチル基］、［ジ（１−ブチル）アミノ］メチル基、（ジメチルアミノ）エチル基［例えば、１−（ジメチルアミノ）エチル基、２−（ジメチルアミノ）エチル基］、２−（Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアミノ）エチル基、２−［Ｎ−メチル−Ｎ−（１−プロピル）アミノ］エチル基、２−［Ｎ−メチル−Ｎ−（１−ブチル）アミノ］エチル基、（ジエチルアミノ）エチル基［例えば、１−（ジエチルアミノ）エチル基、２−（ジエチルアミノ）エチル基］、２−［Ｎ−エチル−Ｎ−（１−プロピル）アミノ］エチル基、（ジプロピルアミノ）エチル基［例えば、２−［ジ（１−プロピルアミノ）］エチル基等］、２−［ジ（１−ブチル）アミノ］エチル基、１,２−ジ（ジメチルアミノ）エチル基、（ジメチルアミノ）プロピル基（例えば、１−ジメチルアミノ−１−プロピル基、２−ジメチルアミノ−１−プロピル基、３−ジメチルアミノ−１−プロピル基、１−ジメチルアミノ−２−プロピル基、２−ジメチルアミノ−２−プロピル基等）、（ジエチルアミノ）プロピル基（例えば、３−ジエチルアミノ−１−プロピル基等）、（ジプロピルアミノ）プロピル基［例えば、３−［ジ（１−プロピル）アミノ］−１−プロピル基等］、３−［ジ（１−ブチル）アミノ］−１−プロピル基、２,３−ジ（ジメチルアミノ）−１−プロピル基、１−ジメチルアミノ−１−ブチル基、２−ジメチルアミノ−１−ブチル基、３−ジメチルアミノ−１−ブチル基、４−ジメチルアミノ−１−ブチル基、４−ジエチルアミノ−１−ブチル基、１−ジメチルアミノ−２−ブチル基、３−ジメチルアミノ−２−ブチル基、４−ジメチルアミノ−２−ブチル基、３−ジメチルアミノ−２−メチル−１−プロピル基、１−ジメチルアミノ−２−メチル−２−プロピル基、２,３−ジ（ジメチルアミノ）−１−ブチル基、２,４−ジ（ジメチルアミノ）−１−ブチル基または３,４−ジ（ジメチルアミノ）−１−ブチル基であり得、好適には、（ジメチルアミノ）メチル基、（ジエチルアミノ）メチル基、（ジプロピルアミノ）メチル基、（ジメチルアミノ）エチル基、（ジエチルアミノ）エチル基、（ジプロピルアミノ）エチル基、（ジメチルアミノ）プロピル基、（ジエチルアミノ）プロピル基、または、（ジプロピルアミノ）プロピル基であり、より好適には、（ジメチルアミノ）メチル基または（ジメチルアミノ）エチル基［特に、２−（ジメ���ルアミノ）エチル基］である。
【００５４】
本発明の化合物（I）は、カルボキシル基を有するので、塩基と処理することにより塩にすることができ、そのような塩も本発明に包含される。そのような塩は、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩等の金属塩；アンモニウム塩；または、ｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機アミン塩であり得る。
【００５５】
また、本発明の化合物（I）が、塩基性基を有する場合、酸と処理することにより塩にすることができ、そのような塩も本発明に包含される。そのような塩は、例えば、弗化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、沃化水素酸塩のようなハロゲン原子化水素酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、燐酸塩、メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩のような低級アルカンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩のようなアリ−ルスルホン酸塩、酢酸塩、りんご酸塩、フマ−ル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、蓚酸塩、マレイン酸塩のような有機酸塩、または、グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩であり得る。
【００５６】
本発明の化合物（I）には、光学異性体および／または幾何異性体が存在することがあるが、その各々あるいはそれらの混合物も本発明に包含される。
【００５７】
本発明の化合物（I）またはその塩を用いた試験化合物のPPARγ結合能試験は、例えば、DeGrazia, M.J. et.al., Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2003年, 第11巻, p.4325-4332に記載された方法またはそれに準じた方法に従い、行うことができる。本発明の化合物（I）またはその塩は、優れたPPARγ結合能および蛍光能を併せ持つことから、当該化合物を蛍光偏光度法に用いることにより、より少ない量のPPARγタンパク質の使用で、簡便でより網羅的にPPARγ結合能を有する化合物を検出することができる。
本発明の化合物(I)は、以下のA法乃至C法によって製造することができる。
【００５８】
【化６】
2005139117.tif 000006
【００５９】
【化７】
2005139117.tif 000007
【００６０】
【化８】
2005139117.tif 000008
【００６１】
上記式において、R1、R2、R3、R4、A1、A2、A3およびA4は、前述のものと同意義を示し、Raは、C1−C6アルキル基を示し、Protは、アミノ基の保護基を示し、X1は、脱離基を示し、X2は、クロロ基、ブロモ基、ヨード基またはトリフルオロメタンスルホニルオキシ基を示す。
【００６２】
上記Protにおけるアミノ基の保護基は、反応の際にアミノ基を保護し得るものであれば特に限定はなく、そのような基は、加水素分解、加水分解、電気分解および光分解のような化学反応により除去し得る保護基であり、Green, T. H., Wuts, P. G. M., Protective Groups in Organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.等に記載の保護基であり得る。そのような基は、例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、ペンタノイル、ピバロイル、バレリル、イソバレリル、オクタノイル、ラウロイル、パルミトイル、ステアロイルのようなアルキルカルボニル基；クロロアセチル、ジクロロアセチル、トリクロロアセチル、トリフルオロアセチルのようなハロゲノ低級アルキルカルボニル基；メトキシアセチルのような低級アルコキシ低級アルキルカルボニル基；(E)-2-メチル-2-ブテノイルのような不飽和アルキルカルボニル基等の脂肪族アシル基；ベンゾイル、α-ナフトイル、β-ナフトイルのようなアリ−ルカルボニル基；2-ブロモベンゾイル、4-クロロベンゾイルのようなハロゲノアリ−ルカルボニル基；2,4,6-トリメチルベンゾイル、4-トルオイルのような低級アルキル化アリ−ルカルボニル基；4-アニソイルのような低級アルコキシ化アリ−ルカルボニル基；4-ニトロベンゾイル、2-ニトロベンゾイルのようなニトロ化アリ−ルカルボニル基；2-（メトキシカルボニル）ベンゾイルのような低級アルコキシカルボニル化アリ−ルカルボニル基；4-フェニルベンゾイルのようなアリ−ル化アリ−ルカルボニル基等の芳香族アシル基；メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、t-ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニルのような低級アルコキシカルボニル基；２,２,２-トリクロロエトキシカルボニル、2-トリメチルシリルエトキシカルボニルのようなハロゲノまたはトリ低級アルキルシリル基で置換された低級アルコキシカルボニル基等のアルコキシカルボニル基；ビニルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、2-ブテニルオキシカルボニルのようなアルケニルオキシカルボニル基；ベンジルオキシカルボニル、4-メチルベンジルオキシカルボニル、4-メトキシベンジルオキシカルボニル、4-クロロベンジルオキシカルボニルのような、低級アルキル、低級アルコキシもしくはハロゲノ基で置換されてもよいベンジルオキシカルボニル基；ベンジリデンのようなシッフ塩基を形成する置換メチレン基；または、ベンジル、4-メチルベンジル、4-メトキシベンジル、4-クロロベンジルのような、低級アルキル、低級アルコキシもしくはハロゲノ基で置換されてもよいベンジル基であり得、好適には、低級アルコキシカルボニル基または低級アルキル、低級アルコキシもしくはハロゲノ基で置換されてもよいベンジルオキシカルボニル基であり、より好適には、ｔ−ブトキシカルボニル基またはベンジルオキシカルボニル基である。
【００６３】
上記X1における脱離基は、求核試薬と反応して脱離する基であれば特に限定はなく、例えば、水酸基；クロロ、ブロモ、ヨードのようなハロゲノ基；メタンスルホニルオキシ、エタンスルホニルオキシのような低級アルキルスルホニルオキシ基；トリフルオロメタンスルホニルオキシのようなハロゲノ低級アルキルスルホニルオキシ基；ベンゼンスルホニルオキシのようなアリールスルホニルオキシ基；ｐ−トルエンスルホニルオキシのような低級アルキル化アリールスルホニルオキシ基；パラクロロベンゼンスルホニルオキシのようなハロゲノアリールスルホニルオキシ基、または、スクシンイミジル基、フタルイミジル基にような置換されてもよいイミジル基であり得、好適には、ハロゲノ基または置換されてもよいイミジル基であり、より好適には、置換されてもよいイミジル基である。
【００６４】
以下A法乃至C法の各工程について述べる。
（A法）
（A−1工程）
A−1工程は、化合物（V）を製造する工程であり、
（A−1a工程）：化合物（III）を酸で処理してｔ−ブトキシカルボニル基を除去する反応、および、
（A−1b−1工程）：X1が水酸基である場合に、縮合剤の存在下で行なわれるA−1a工程で得られる化合物と化合物（IV）の縮合反応、または、
（A−1b−2工程）：X1が水酸基以外である場合に、縮合剤の非存在下で行なわれるA−1a工程で得られる化合物と化合物（IV）の縮合反応、とから成る。
【００６５】
化合物（III）は、国際公開第９９／１８０６６号パンフレットに記載された方法（例えば、参考例３６等）またはそれに準じた方法により容易に製造することができ、化合物（IV）は、公知であるかまたは公知の化合物から容易に得ることができる。
（A−1a工程）
使用される酸は、通常酸として使用されるもので、反応を阻害しないものであれば特に限定はなく、トリフルオロ酢酸のような有機酸、または、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸のような無機酸であり得、好適には、トリフルオロ酢酸または塩酸である。
【００６６】
使用される溶媒は、例えば、メチレンクロリド、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン、クロロベンゼン、ジクロロベンゼンのようなハロゲン化炭化水素類；蟻酸エチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル、炭酸ジエチルのようなエステル類；ジエチルエ−テル、ジイソプロピルエ−テル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエ−テル類；メタノ−ル、エタノ−ル、ｎ−プロパノ−ル、イソプロパノ−ル、ｎ−ブタノ−ル、イソブタノ−ル、ｔ−ブタノ−ル、イソアミルアルコ−ル、ジエチレングリコール、グリセリン、オクタノール、シクロヘキサノール、メチルセロソルブのようなアルコ−ル類；ホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ−メチルピロリジノン、ヘキサメチルホスホロトリアミドのようなアミド類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類であり得、好適には、メチレンクロリドまたはテトラヒドロフランである。
【００６７】
反応温度は、原料化合物、溶媒、試薬によって異なるが、通常、−２０乃至１００℃であり、好適には、０乃至６０℃である。
【００６８】
反応時間は、原料化合物、溶媒、試薬、反応温度によって異なるが、通常、１０分間乃至２４時間であり、好適には、３０分間乃至６時間である。
【００６９】
本工程の目的化合物は、精製することなく次の反応に使用することができる。
（A−1b−1工程）
使用される縮合剤は、
（１）ジエチルホスホリルシアニド、ジフェニルホスホリルアジドのような燐酸エステル類と下記塩基の組合せ；
（２）１,３−ジシクロヘキシルカルボジイミド、１,３−ジイソプロピルカルボジイミド、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド類；上記カルボジイミド類と下記塩基の組合せ；上記カルボジイミド類とＮ−ヒドロキシスクシンイミド、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２,３−ジカルボキシイミドのようなＮ−ヒドロキシ類の組合せ；
（３）２,２’−ジピリジル  ジスルフィド、２,２’−ジベンゾチアゾリル  ジスルフィドのようなジスルフィド類とトリフェニルホスフィン、トリブチルホスフィンのようなホスフィン類の組合せ；
（４）Ｎ,Ｎ’−ジスクシンイミジル  カ−ボネート、ジエチルピロカーボネート、ジ−２−ピリジル  カーボネート、Ｓ,Ｓ’−ビス（１−フェニル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ジチオカーボネートのようなカーボネート類；
（５）Ｎ,Ｎ’−ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフォニッククロリドのようなホスフォニッククロリド類；
（６）Ｎ,Ｎ’−ジスクシンイミジルオキザレート、Ｎ,Ｎ’−ジフタルイミジルオキザレート、Ｎ,Ｎ’−ビス（５−ノルボルネン−２,３−ジカルボキシイミジル）オキザレート、１,１’−ビス（ベンゾトリアゾリル）オキザレート、１,１’−ビス（６−クロロベンゾトリアゾリル）オキザレート、１,１’−ビス（６−トリフルオロメチルベンゾトリアゾリル）オキザレートのようなオキザレート類；
（７）上記ホスフィン類と、アゾジカルボン酸ジエチルのようなアゾジカルボン酸エステル類、もしくは、１,１’−（アゾジカルボニル）ジピペリジンのようなアゾジカルボキシアミド類、の組合せ；上記ホスフィン類と下記塩基の組合せ；
（８）Ｎ−エチル−５−フェニルイソオキサゾリウム−３’−スルホネートのようなＮ−低級アルキル−５−アリールイソオキサゾリウム−３’−スルホネート類；
（９）ジ−２−ピリジル  ジセレニドのようなジヘテロアリールジセレニド類；
（１０）ｐ−ニトロベンゼンスルホニルトリアゾリドのようなアリールスルホニルトリアゾリド類；
（１１）２−クロロ−１−メチルピリジニウム  ヨージド、２−ブロモ−１−エチルピリジニウム  クロリドのような２−ハロゲノ−１−低級アルキルピリジニウム  ハライド類；
（１２）１,１’−オキザリルジイミダゾ−ル、Ｎ,Ｎ’−カルボニルジイミダゾ−ルのようなイミダゾール類；
（１３）３−エチル−２−クロロ−ベンゾチアゾリウム  フルオロボレートのような３−低級アルキル−２−ハロゲノ−ベンゾチアゾリウム  フルオロボレート類；
（１４）３−メチル−ベンゾチアゾール−２−セロンのような３−低級アルキル−ベンゾチアゾール−２−セロン類；
（１５）フェニルジクロロホスフェート、ポリホスフェートエステルのようなホスフェート類；
（１６）クロロスルホニル  イソシアネートのようなハロゲノスルホニルイソシアネート類；
（１７）トリメチルシリルクロリド、トリエチルシリルクロリドのようなハロゲノシラン類；
（１８）メタンスルホニルクロリドのような低級アルカンスルホニルハライドと下記塩基の組合せ；または、
（１９）Ｎ,Ｎ,Ｎ’,Ｎ’−テトラメチルクロロホルマミジウムクロリドのようなＮ,Ｎ,Ｎ’,Ｎ’−テトラ低級アルキルハロゲノホルマミジウムクロリド類であり得、好適には、燐酸エステル類と下記塩基の組合せまたはカルボジイミド類であり、より好適には、燐酸エステル類（特に、シアノリン酸ジエチル）である。
【００７０】
使用される塩基は、例えば、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムのようなアルカリ金属炭酸塩；炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのようなアルカリ金属炭酸水素塩；または、Ｎ−メチルモルホリン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ−メチルピペリジン、ピリジン、４−ピロリジノピリジン、ピコリン、４−（Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン、２,６−ジ（tert−ブチル）−４−メチルピリジン、キノリン、Ｎ,Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ,Ｎ−ジエチルアニリンのような有機塩基類であり得、好適には、有機塩基類であり、より好適には、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、または、ピリジンである。
【００７１】
使用される溶媒は、反応を阻害せず、原料化合物をある程度溶解するものであれば特に限定はなく、例えば、ヘキサン、ヘプタンのような脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレンのような芳香族炭化水素類；メチレンクロリド、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン、クロロベンゼン、ジクロロベンゼンのようなハロゲン化炭化水素類；蟻酸エチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル、炭酸ジエチルのようなエステル類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；アセトニトリル、イソブチロニトリルのようなニトリル類；または、ホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ−メチルピロリジノン、ヘキサメチルホスホロトリアミドのようなアミド類であり得、好適には、塩化メチレンまたはテトラヒドロフランである。
【００７２】
本工程においては、必要に応じて緩衝液を用いることができる。そのような緩衝液は、通常有機合成反応に用いられるものであれば特に制限はなく、例えば、pH６乃至pH８緩衝液であり得、好適には、pH７リン酸緩衝液である。
【００７３】
反応温度は、原料化合物、溶媒、試薬により異なるが、通常、−２０乃至１２０℃であり、好適には、０乃至１２０℃である。
【００７４】
反応時間は、原料化合物、溶媒、試薬、反応温度により異なるが、通常、３０分間乃至２日間であり、好適には、１乃至１２時間である。
【００７５】
反応終了後、本工程の目的化合物は、常法に従って反応混合物から単離される。例えば、必要に応じて、反応混合物を中和し、不溶物が存在するときは、不溶物を濾去し、反応混合物に水および酢酸エチルのような水と混和しない溶媒を加えて、目的化合物を抽出した後、有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウム等の乾燥剤を用いて乾燥させた後、溶媒を留去することによって目的化合物が得られる。得られる目的化合物は、必要に応じ、常法、例えば、再結晶またはシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、更に精製することができる。
（A−1b−2工程）
使用される塩基は、例えば、炭酸リチウム、酸ナトリウム、炭酸カリウムのようなアルカリ金属炭酸塩；炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのようなアルカリ金属炭酸水素塩；または、Ｎ−メチルモルホリン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ−メチルピペリジン、ピリジン、４−ピロリジノピリジン、ピコリン、４−（Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン、２,６−ジ（ｔ−ブチル）−４−メチルピリジン、キノリン、Ｎ,Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ,Ｎ−ジエチルアニリンのような有機塩基類であり得、好適には、有機塩基類であり、より好適には、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、または、ピリジンである。
【００７６】
使用される溶媒は、反応を阻害せず、原料化合物をある程度溶解するものであれば特に限定はなく、例えば、ベンゼン、トルエン、キシレンのような芳香族炭化水素類；メチレンクロリド、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン、クロロベンゼン、ジクロロベンゼンのようなハロゲン化炭化水素類；蟻酸エチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル、炭酸ジエチルのようなエステル類；ジエチルエ−テル、ジイソプロピルエ−テル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエ−テル類；アセトニトリル、イソブチロニトリルのようなニトリル類；ホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ−メチルピロリジノン、ヘキサメチルホスホロトリアミドのようなアミド類；または、Ｎ−メチルモルホリン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ−メチルピペリジン、ピリジン、４−ピロリジノピリジン、ピコリン、４−（Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン、２,６−ジ（ｔ−ブチル）−４−メチルピリジン、キノリン、Ｎ,Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ,Ｎ−ジエチルアニリンのような有機塩基類であり得、好適には、ハロゲン化炭化水素類または有機塩基類であり、より好適には、メチレンクロリドまたはピリジンである。
【００７７】
反応温度は、原料化合物、溶媒、試薬により異なるが、通常、−２０乃至１２０℃であり、好適には、０℃乃至１２０℃である。
【００７８】
反応時間は、原料化合物、溶媒、試薬、反応温度により異なるが、通常、３０分間乃至２日間で、好適には、１乃至１２時間である。
【００７９】
反応終了後、本工程の目的化合物は、常法に従って反応混合物から単離される。例えば、必要に応じて、反応混合物を中和し、不溶物が存在するときは、不溶物を濾去し、反応混合物に水および酢酸エチルのような水と混和しない溶媒を加えて、目的化合物を抽出した後、有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウム等の乾燥剤を用いて乾燥させた後、溶媒を留去することによって目的化合物が得られる。得られる目的化合物は、必要に応じ、常法、例えば、再結晶またはシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、更に精製することができる。
（A−2工程）
A−2工程は、化合物（VII）を製造する工程であり、
（A−2a工程）：A-1工程で得られる化合物（V）のProt基を除去する反応、および、
（A−2b−1工程）：X1が水酸基である場合に、縮合剤の存在下で行なわれるA−2a工程で得られる化合物と化合物（VI）の縮合反応、または、
（A−2b−2工程）：X1が水酸基以外である場合に、縮合剤の非存在下で行なわれるA−2a工程で得られる化合物と化合物（VI）の縮合反応、とから成る。
【００８０】
化合物（VI）は、公知であるかまたは公知の化合物から容易に得ることができる。
【００８１】
アミノ基の保護基Protの除去反応は、その保護基の種類によって異なるが、有機化学の分野で周知の方法により、以下の様に行われる（例えば、Green, T. H., Wuts, P. G. M., Protective Groups in Organic Synthesis. Third Edition, 1999年, John Wiley & Sons, Inc.）。
【００８２】
Protが、脂肪族アシル基、芳香族アシル基、アルコキシカルボニル基、アルケニルオキシカルボニル基、または、シッフ塩基を形成する置換メチレン基である場合、それらは、含水溶媒中、酸または塩基で処理することにより、除去され得る。
【００８３】
使用される酸は、通常酸として使用されるもので、反応を阻害しないものであれば特に限定はなく、好適には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸のような無機酸である。
【００８４】
使用される塩基は、化合物の他の基に影響を与えないものであれば特に限定はなく、好適には、ナトリウムメトキシドのような金属アルコキシド、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムのようなアルカリ金属炭酸塩、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのようなアルカリ金属水酸化物、または、アンモニア水、濃アンモニア−メタノ−ルのようなアンモニア類である。
【００８５】
使用される溶媒は、通常、加水分解反応に使用されるものであれば特に限定はなく、好適には、水、または、メタノ−ル、エタノ−ル、ｎ−プロパノ−ルのようなアルコ−ル類、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエ−テル類等の有機溶媒および水の混合溶媒である。
【００８６】
反応温度および反応時間は、原料化合物、溶媒、および、使用される酸もしくは塩基により異なるが、好適には、反応温度は、０乃至１５０℃であり、反応時間は、１乃至１０時間である。
【００８７】
Protが、低級アルキル、低級アルコキシもしくはハロゲノ基で置換されてもよいベンジルオキシカルボニル基、または、低級アルキル、低級アルコキシもしくはハロゲノ基で置換されてもよいベンジル基である場合、それらは、溶媒中、還元試薬での処理、好適には、触媒存在下、室温での加水素分解、または、酸化試薬での処理により、除去され得る。
【００８８】
加水素分解反応において使用される溶媒は、反応を阻害しないものであれば特に限定はなく、好適には、メタノ−ル、エタノ−ル、イソプロパノ−ルのようなアルコ−ル類、ジエチルエ−テル、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエ−テル類、トルエン、ベンゼン、キシレンのような芳香族炭化水素類、ヘキサン、シクロヘキサンのような脂肪族炭化水素類、酢酸エチル、酢酸プロピルのようなエステル類、酢酸のような脂肪族カルボン酸類、または、これらの有機溶媒および水の混合溶媒である。
【００８９】
加水素分解反応において使用される触媒は、通常、加水素分解反応に使用されるものであれば特に限定はなく、好適には、パラジウム−炭素、水酸化パラジウム−炭素、ラネ−ニッケル、酸化白金、白金黒、ロジウム−酸化アルミニウム、トリフェニルホスフィン−塩化ロジウム、または、パラジウム−硫酸バリウムである。
【００９０】
本反応は、通常、常圧乃至10000hPaの水素雰囲気下で行われる。
【００９１】
反応温度および反応時間は、原料化合物、溶媒、および、使用される触媒により異なるが、通常、反応温度は、０乃至１００℃であり、反応時間は、５分間乃至２４時間である。
【００９２】
酸化試薬を用いる除去反応において使用される溶媒は、反応を阻害しないものであれば特に限定はなく、好適には、含水有機溶媒である。このような有機溶媒は、好適には、アセトンのようなケトン類、メチレンクロリド、クロロホルム、四塩化炭素のようなハロゲン化炭化水素類、アセトニトリルのようなニトリル類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエーテル類、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ヘキサメチルホスホロトリアミドのようなアミド類、または、ジメチルスルホキシドのようなスルホキシド類であり得る。
【００９３】
使用される酸化試薬は、通常、酸化反応に使用されるものであれば特に限定はなく、好適には、過硫酸カリウム、過硫酸ナトリウム、セリウムアンモニウムナイトレート（ＣＡＮ）、または、２,３−ジクロロ−５,６−ジシアノ−ｐ−ベンゾキノン（ＤＤＱ）である。
【００９４】
反応温度および反応時間は、原料化合物、溶媒、および、使用される酸化試薬等により異なるが、通常、反応温度は、０乃至１５０℃であり、反応時間は、１０分間乃至２４時間である。
【００９５】
Protが、アリルオキシカルボニル、２−ブテニルオキシカルボニルのような２−アルケニルオキシカルボニル基である場合、それらは、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムまたはニッケルテトラカルボニルの存在下、ピロリジン、ピペリジン等を使用して、除去され得る。
【００９６】
反応終了後、本工程の目的化合物は、常法に従って反応混合物から単離される。例えば、必要に応じて、反応混合物を中和し、不溶物が存在するときは、不溶物を濾去し、反応混合物に水および酢酸エチルのような水と混和しない溶媒を加えて、目的化合物を抽出した後、有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウム等の乾燥剤を用いて乾燥させた後、溶媒を留去することによって目的化合物が得られる。得られた目的化合物は、必要に応じ、常法、例えば、再結晶またはシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、更に精製することができる。また、本工程の目的化合物は、精製することなく次の反応に使用することもできる。
（A−2b−1工程）および（A−2b−2工程）
A−2b−1工程およびA−2b−2工程は、それぞれ上記A−1b−1工程およびA−1b−2工程と同様の方法に従って行われる。
（A−3工程）
A−3工程は、塩基存在下、A−2工程で得られる化合物（VII）の加水分解反応を行い、化合物（I）を製造する工程である。
【００９７】
使用される塩基は、化合物の他の基に影響を与えないものであれば特に限定はなく、好適には、ナトリウムメトキシドのような金属アルコキシド、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムのようなアルカリ金属炭酸塩、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのようなアルカリ金属水酸化物、または、アンモニア水、濃アンモニア−メタノ−ルのようなアンモニア類である。
【００９８】
使用される溶媒は、通常、加水分解反応に使用されるものであれば特に限定はなく、好適には、メタノ−ル、エタノ−ル、ｎ−プロパノ−ルのようなアルコ−ル類、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエ−テル類、および、これらアルコ−ル類とエ−テル類の混合溶媒から選択される有機溶媒と水の混合溶媒、または、水であり、より好適には、メタノ−ル、エタノ−ル、テトラヒドロフラン、および、これらの混合溶媒から選択される有機溶媒と水の混合溶媒である。
【００９９】
反応温度および反応時間は、原料化合物、溶媒、および、使用される塩基により異なるが、好適には、反応温度は、０乃至１５０℃であり、反応時間は、１乃至１０時間である。
【０１００】
反応終了後、本工程の目的化合物は、常法に従って反応混合物から単離される。例えば、必要に応じて、反応混合物を中和し、不溶物が存在するときは、不溶物を濾去し、反応混合物に水および酢酸エチルのような水と混和しない溶媒を加えて、目的化合物を抽出した後、有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウム等の乾燥剤を用いて乾燥させた後、溶媒を留去することによって目的化合物が得られる。得られた目的化合物は、必要に応じ、常法、例えば、再結晶またはシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、更に精製することができる。
（B法）
（B−1工程）
B−1工程は、公知であるかまたは公知の化合物から容易に得られる、化合物（VIII）および化合物（IX）を、触媒および塩基の存在下、反応させて、式（IV）においてR3がビフェニル基であり、X1が水酸基であり、Protがｔ−ブトキシカルボニル基である化合物（IVa）を製造する工程である。
【０１０１】
使用される触媒は、０価または２価パラジウムを含有し、有機合成に使用され得るものであれば特に限定はなく、例えば、金属パラジウム、パラジウム−炭素、水酸化パラジウム、塩化パラジウム(II)、酢酸パラジウム(II)、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム−クロロホルム、アリルパラジウムクロリド、［１,２−ビス（ジフェニルホスフィノ）エタン］パラジウム  ジクロリド、ビス（トリ−Ｏ−トリルホスフィン）パラジウム  ジクロリド、ビス（トリフェニルホスフィノ）パラジウム  ジクロリド、テトラキス（トリフェニルホスフィノ）パラジウム、または、ジクロロ［１,１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウムであり得る。必要に応じ、反応溶液中に、上記触媒と共に有効な触媒を形成する配位子が存在してもよく、その配位子は、例えば、１,１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン、ビス（２−ジフェニルホスフィノフェニル）エーテル、２,２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１,１’−ビナフトール、１,３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン、１,４−ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン、トリ−Ｏ−トリルホスフィン、２−ジフェニルホスフィノ−２’−メトキシ−１,１’−ビナフチル、または、２,２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１,１’−ビナフチルであり得る。触媒は、好適には、酢酸パラジウム(II)、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム−クロロホルム、酢酸パラジウム(II)とビス（２−ジフェニルホスフィノフェニル）エーテルの組み合わせ、または、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム−クロロホルムと１,１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンの組み合わせであり、より好適には、酢酸パラジウム(II)とビス（２−ジフェニルホスフィノフェニル）エーテルの組み合わせ、または、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム−クロロホルムと１,１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンの組み合わせである。
【０１０２】
使用される塩基は、例えば、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウムのようなアルカリ金属炭酸塩；炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのようなアルカリ金属炭酸水素塩；水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのようなアルカリ金属水酸化物；水酸化カルシウム、水酸化バリウムのようなアルカリ土類金属水酸化物；水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウムのようなアルカリ金属水素化物；リチウムアミド、ナトリウムアミド、カリウムアミドのようなアルカリ金属アミド；リチウムメトキシド、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリウムｔ−ブトキシド、カリウムｔ−ブトキシドのようなアルカリ金属アルコキシド；またはトリエチルアミン、トリブチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−エチルモルホリン、ピリジン、ピコリン、４−（Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン、キノリン、Ｎ,Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ,Ｎ−ジエチルアニリン、１,５−ジアザビシクロ［４,３,０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１,４−ジアザビシクロ［２,２,２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）、１,８−ジアザビシクロ［５,４,０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）のような有機アミンであり得、好適には、アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属炭酸水素塩、アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物であり、より好適には、アルカリ金属炭酸水素塩（特に、炭酸水素ナトリウム）である。
【０１０３】
使用される溶媒は、反応を阻害せず、出発原料をある程度溶解するものであれば特に限定はなく、例えば、蟻酸エチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル、炭酸ジエチルのようなエステル類；ジエチルエ−テル、ジイソプロピルエ−テル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエ−テル類；メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、ｔ−ブタノール、イソアミルアルコール、ジエチレングリコール、グリセリン、オクタノール、シクロヘキサノール、メチルセロソルブのようなアルコール類；アセトニトリル、イソブチロニトリルのようなニトリル類；ホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ−メチルピロリジノン、ヘキサメチルホスホロトリアミドのようなアミド類；酢酸；水；または、これらの混合溶媒であり得、好適には、アルコール類、酢酸、水、または、これらの混合溶媒である。
【０１０４】
反応温度は、溶媒、出発原料、試薬等により異なるが、通常、０乃至１５０℃であり、好適には、６０乃至１２０℃である。
【０１０５】
反応時間は、溶媒、出発原料、試薬、反応温度等により異なるが、通常、１乃至４８時間であり、好適には、３乃至１０時間である。
【０１０６】
反応終了後、本工程の目的化合物は、常法に従って反応混合物から単離される。例えば、反応混合物を中和して濃縮し、反応混合物に水および酢酸エチルのような水と混和しない溶媒を加えて、目的化合物を抽出した後、有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウム等の乾燥剤を用いて乾燥させた後、溶媒を留去することによって目的化合物が得られる。得られた目的化合物は、必要に応じ、常法、例えば、再結晶、再沈殿またはシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、更に精製することができる。
（B−2工程）
B−2工程は、B−1工程で得られる化合物（IVa）と、公知であるかまたは公知の化合物から容易に得られる化合物（III）を反応させて、式（V）においてR3がビフェニル基であり、Protがｔ−ブトキシカルボニル基である化合物（Va）を製造する工程である。
【０１０７】
B−2工程は、A−1工程と同様の方法に従って行われる。
（B−3工程）
B−3工程は、B−2工程で得られる化合物（Va）と、公知であるかまたは公知の化合物から容易に得られる化合物（VI）を反応させて、式（VII）においてR3がビフェニル基である化合物（VIIa）を製造する工程である。
【０１０８】
B−3工程は、A−2工程と同様の方法に従って行われる。
（B−4工程）
B−4工程は、塩基存在下、B−3工程で得られる化合物（VIIa）の加水分解反応を行い、式（I）においてR3がビフェニル基である化合物（Ic）を製造する工程である。
【０１０９】
B−4工程は、A−3工程と同様の方法に従って行われる。
（C法）
C法は、光学活性なA−I工程の原料化合物（IIIa）を製造する方法である。
（C−1工程）
C−1工程は、塩基存在下、化合物（X）の加水分解反応を行い、化合物（XI）を製造する工程である。化合物（X）は、国際公開第９９／１８０６６号パンフレットに記載された方法［例えば、参考例３６（ａ）等］またはそれに準じた方法により容易に製造することができる。
【０１１０】
C−1工程は、A−3工程と同様の方法に従って行われる。
（C−2工程）
C−2工程は、C−1工程で得られる化合物（XI）の光学分割を行い、光学活性な化合物（XII）を製造する工程である。
【０１１１】
光学分割の方法は、通常有機化学の分野で用いられる方法であれば特に限定はなく、例えば、ジアステレオマー塩を形成して分割する方法、優先晶析法、光学分割カラムを用いるカラムクロマトグラフィ−法等であり得、好適には、ジアステレオマー塩を形成して分割する方法である。
【０１１２】
ジアステレオマー塩を形成して分割する方法は、通常、化合物（XI）のカルボキシル基と塩を形成し得る光学活性な塩基を用いて行なわれる。溶媒中、化合物（XI）の一方の光学異性体について光学活性な塩基とのジアステレオマー塩を形成させ、生成したジアステレオマー塩を溶媒から濾取し、必要に応じて、光学純度を上げるために再結晶を行い、酸を用いてカルボン酸に戻すことにより、化合物（XI）の一方の光学異性体を得ることができる。用いる塩基の立体配置［Ｒ体もしくはＳ体、（＋）体もしくは（−）体、または、ｄ体もしくはｌ体］に応じて、得られる光学活性な化合物（XI）の立体配置［Ｒ体もしくはＳ体、（＋）体もしくは（−）体、または、ｄ体もしくはｌ体］が決定される。
【０１１３】
上記方法に用いられる光学活性な塩基は、通常、ジアステレオマー塩を形成して分割する方法に用いられるものであれば特に限定はなく、例えば、（Ｒ）−ノルエフェドリン、（Ｓ）−ノルエフェドリン、［（＋）−ノルエフェドリン、（−）−ノルエフェドリン］、（Ｒ）−ブルシン、（Ｓ）−ブルシン、（Ｒ）−ストリキニーネ、（Ｓ）−ストリキニーネ、（Ｒ）−キニン、（Ｓ）−キニン、（Ｒ）−シンコニジン、（Ｓ）−シンコニジン、（Ｒ）−酒石酸、（Ｓ）−酒石酸、（Ｒ）−フェネチルアミン、または、（Ｓ）−フェネチルアミンであり得、好適には、（Ｒ）−ノルエフェドリンまたは（Ｓ）−ノルエフェドリン［（＋）−ノルエフェドリンまたは（−）−ノルエフェドリン］である。（−）−ノルエフェドリンを用いることにより、（Ｓ）体の化合物（XII）を得ることができる。
【０１１４】
使用される溶媒は、反応を阻害せず、出発原料をある程度溶解するものであれば特に限定はなく、例えば、ベンゼン、トルエン、キシレンのような芳香族炭化水素類；メチレンクロリド、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン、クロロベンゼン、ジクロロベンゼンのようなハロゲン化炭化水素類；蟻酸エチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル、炭酸ジエチルのようなエステル類；アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、シクロヘキサノンのようなケトン類；ジエチルエ−テル、ジイソプロピルエ−テル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジメチルエーテルのようなエ−テル類；アセトニトリル、イソブチロニトリルのようなニトリル類；メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、２−メチル−１−プロパノール、２−メチル−２−プロパノールのようなアルコール類；ホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ−メチルピロリジノン、ヘキサメチルホスホロトリアミドのようなアミド類；または、これらの混合溶媒であり得、好適には、ニトリル類、アルコール類、または、これらの混合溶媒であり、より好適には、アルコール類（特に、エタノール）である。
【０１１５】
反応温度は、溶媒、出発原料、試薬等により異なるが、通常、２０乃至１５０℃であり、好適には、４０乃至１２０℃である。
【０１１６】
反応時間は、溶媒、出発原料、試薬、反応温度等により異なるが、通常、１０分間乃至４時間であり、好適には、３０分間乃至２時間である。
【０１１７】
上記反応によりジアステレオマー塩を得た後、必要に応じて、上記溶媒（好適には、上記塩形成に用いたものと同一の溶媒）から再結晶し、得られた塩に水および酢酸エチルのような水と混和しない溶媒を加えて、酸（好適には、塩酸）により酸性とし、目的化合物を抽出した後、有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウム等の乾燥剤を用いて乾燥させた後、溶媒を留去することによって目的化合物が得られる。得られた目的化合物は、必要に応じ、常法、例えば、再結晶、再沈殿またはシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、更に精製することができる。
（C−3工程）
C−3工程は、酸存在下、C−2工程で得られた化合物（XII）を式Ra-OHを有するアルコール化合物と反応させ、化合物（XIII）を製造する工程である。
【０１１８】
使用される酸は、通常酸として使用されるもので、反応を阻害しないものであれば特に限定はなく、トリフルオロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸のような有機酸、または、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸のような無機酸であり得、好適には、塩酸または硫酸である。使用される酸は、触媒量用いることで反応を進行させることができる。
【０１１９】
使用される溶媒は、反応を阻害せず、出発原料をある程度溶解するものであれば特に限定はなく、例えば、ベンゼン、トルエン、キシレンのような芳香族炭化水素類；メチレンクロリド、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン、クロロベンゼン、ジクロロベンゼンのようなハロゲン化炭化水素類；蟻酸エチル、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル、炭酸ジエチルのようなエステル類；アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、シクロヘキサノンのようなケトン類；アセトニトリル、イソブチロニトリルのようなニトリル類；メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、２−メチル−１−プロパノール、２−メチル−２−プロパノールのようなアルコール類であり得、好適には、アルコール類である。なお、試薬として用いる式Ra-OHを有するアルコール化合物と同一のアルコール類を溶媒として用いることが好ましい。
【０１２０】
反応終了後、本工程の目的化合物は、常法に従って反応混合物から単離される。例えば、反応混合物を中和して濃縮し、反応混合物に水および酢酸エチルのような水と混和しない溶媒を加えて、目的化合物を抽出した後、有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウム等の乾燥剤を用いて乾燥させた後、溶媒を留去することによって目的化合物が得られる。得られた目的化合物は、必要に応じ、常法、例えば、再結晶、再沈殿またはシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、更に精製することができる。
（C−4工程）
C−4工程は、C−2工程で得られた化合物（XIII）から化合物（IIIa）を製造する工程である。
【０１２１】
C−4工程は、国際公開第９９／１８０６６号パンフレットの参考例３６（ｂ）および３６（ｃ）に記載された方法またはそれに準じた方法に従って行なわれる。
【発明の効果】
【０１２２】
本発明の一般式（I）で表される化合物またはその塩は、優れたPPARγ結合能および蛍光能を併せ持ち、より少ない量のPPARγタンパク質の使用で、蛍光偏光度法を用いた簡便でより網羅的なPPARγ結合能の試験方法（PPARγ結合能を有する化合物を検出する方法）に用いることができ、有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１２３】
以下、実施例および試験例を示し、本発明を更に詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
【実施例】
【０１２４】
（実施例１）
（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−５−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸、および、（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−６−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸の混合物［上記式（Ib）を有する化合物およびその異性体の混合物］
（ａ）３−（４−ベンジルオキシフェニル）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸
国際公開第９９／１８０６６号パンフレットの参考例３６（ａ）に記載された方法で得られる３−（４−ベンジルオキシフェニル）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸  エチル（３９４mg, ０.９１mmol）のエタノール（１０ml）溶液に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（３.５ml）を加え、室温にて１６時間攪拌した。続いて反応溶液を減圧下にて濃縮して得られる残渣を１Ｎ塩酸で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下にて濃縮した。得られた固体にジイソプロピルエーテルおよびヘキサンの混合溶媒を加え濾取して、無色結晶の目的化合物（３４０mg, 収率：９２%）を得た。
mp １２４−１２５℃.
1H-NMR ［400MHz，CDCl3，内部標準：テトラメチルシラン（TMS）］： δ (ppm) １.２６（９H, s）, ３.１９（２H, d, J=６.０ Hz）, ４.７５（１H, t, J=６.０ Hz）, ５.０１（２H, s）, ６.７５（２H, d, J=９.０ Hz）, ６.８７（２H, d, J=８.５ Hz）, ７.１９（２H, d, J=８.５ Hz）, ７.２４（２H, d, J=９.０ Hz）, ７.２８−７.４０（５H, m）.
FAB-MS (m/z):４２７ [(M+Na)+].
IR （KBr） cm−１ ２９６３, １７１８, １５１２, １２４８, １２３２。
（ｂ）（Ｓ）−３−（４−ベンジルオキシフェニル）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸
実施例１（ａ）で得られる３−（４−ベンジルオキシフェニル）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸（１２７g, ３１３mmol）のエタノール（３００ml）溶液に、（−）−ノルエフェドリン（２３.７g, １５７mmol）を加え、１時間加熱還流した。室温に戻した後、析出した結晶を濾取してエタノールで洗浄した。エタノールを用いて３回再結晶を行い、目的化合物の（−）−ノルエフェドリン塩を得た。光学異性体過剰率は、キラルパックOJ−R［溶出溶媒：CH３CN/リン酸−トリエチルアミンのバッファー溶液（pH２.２）＝７/３］を用いたHPLC分析により、＞９９％eeであった。
【０１２５】
得られた目的化合物の（−）−ノルエフェドリン塩に１Ｎ塩酸を酸性になるまで加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、減圧下にて濃縮した。得られた固体にジイソプロピルエーテルを加え濾取して、無色結晶の目的化合物（４０.５g, 収率：３２%）を得た。
mp １１８−１１９℃。
（ｃ）（Ｓ）−３−（４−ベンジルオキシフェニル）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸  エチル
実施例１（ｂ）で得られる（Ｓ）−３−（４−ベンジルオキシフェニル）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸（４０.５g, １００mmol）および濃硫酸（２.０ml）のエタノール（３６０ml）溶液を室温で１６時間撹拌した。溶媒を減圧下にて留去し、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下にて濃縮し、無色シロップ状の目的化合物（４２.８g, 収率：９９%）を得た。
（ｄ）（Ｓ）−３−[４−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノエトキシ）フェニル]−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸  エチル
実施例１（ｃ）で得られる（Ｓ）−３−（４−ベンジルオキシフェニル）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸エチルを用いて、国際公開第９９／１８０６６号パンフレットの参考例３６（ｂ）および３６（ｃ）に記載された方法と同様の方法に従い、目的化合物を得た。
（ｅ）４’−[２−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル]ビフェニル−４−カルボン酸
市販の４−カルボキシルフェニルホウ酸（１６６mg）および２−（４−ブロモフェニル）エチルカルバミン酸  ｔ−ブチル（J.Med.Chem., 2000年，第43巻, p.4354-4358）をトルエン（３ml）、エタノール（３ml）および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３ml）の混合溶媒に加え、窒素雰囲気下、加熱還流した。反応溶液にテトラキストリフェニルフォスフィンパラジウム（１１５mg）を加え１００℃で４時間攪拌した。続いてテトラキストリフェニルフォスフィンパラジウム（１００mg）を追加し、さらに１００℃で４時間攪拌した。反応液に酢酸エチルおよび飽和硫酸水素カリウム水溶液を加え、酢酸エチル層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下にて濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ジクロロメタン/メタノール＝２０/１乃至１０/１）にて精製した後、ジイソプロピルエーテルを用いて結晶化して、濾取し、無色結晶の目的化合物（７０mg）を得た。
mp ２２８−２３０℃.
1H-NMR ［500MHz，CDCl3，内部標準：テトラメチルシラン（TMS）］： δ (ppm) 1.28-1.62 (9H, m), 2.75-2.95 (2H, m), 3.32-3.50 (2H, m), 7.16-8.23 (8H, m).
FAB-MS (m/z): 342 [(M+H)+]。
（ｆ）（Ｓ）−３−[４−[２−[４’−[２−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸  エチル
実施例１（ｄ）で得られる（Ｓ）−３−[４−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノエトキシ）フェニル]−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸  エチル（１７８mg）、実施例１（ｅ）で得られる４’−[２−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−エチル]ビフェニル−４−カルボン酸（１００mg）、シアノリン酸ジエチル（５６μl）およびトリエチルアミン（１５３μl）を用いて、国際公開第９９／１８０６６号パンフレットの実施例７３に記載された方法に準じた方法に従い、無色油状の目的化合物（１９９mg）を得た。
1H-NMR ［400MHz，CDCl3，内部標準：テトラメチルシラン（TMS）］： δ (ppm) 1.21 (3H, t, J=7.0 Hz), 1.26 (9H, s), 1.44 (9H, s), 2.83-2.87 (2H, m), 3.16-3.18 (2H, m), 3.39-3.44 (2H, m), 3.87-3.90 (2H, m), 4.13-4.21 (4H, m), 4.57-4.58 (1H, m), 4.68-4.71 (1H, m), 6.61-6.65 (1H, m), 6.75 (2H, d, J=9.0 Hz), 6.86 (2H, d,J=8.5 Hz), 7.22-7.30 (6H, m), 7.54 (2H, d, J=8.0 Hz), 7.64 (2H, d, J=8.0 Hz), 7.84 (2H, d, J=8.0Hz)。
（ｇ）（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−５−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸  エチル、および、（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−６−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸  エチルの混合物
実施例１（ｆ）で得られる（Ｓ）−３−[４−[２−[４’−[２−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸  エチル（９１mg）に、室温で４Ｎ塩化水素−ジオキサン溶液（１ml）を加え、１時間攪拌した。反応溶液を減圧下にて濃縮後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去した。
【０１２６】
得られた油状の粗製の（Ｓ）−３−[４−[２−[４’−（２−アミノエチル）−ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）プロピオン酸  エチル（７８mg）をジメチルアセトアミド（１ml）に溶解し、トリエチルアミン（５４μl）および６−（フルオレセイン−５−カルボキサミド）ヘキサン酸  Ｎ−スクシンイミジルエステル［一部６−（フルオレセイン−６−カルボキサミド）ヘキサン酸  Ｎ−スクシンイミジルエステルを含む］（５０mg）を室温にて加え、４０℃で２４時間、次いで６０℃で１６時間攪拌した。反応液に酢酸エチルおよび水を加え、有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下にて濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ジクロロメタン/メタノール＝９/１乃至６/１）にて精製し、橙色粉末の目的化合物（８６mg）を得た。
mp １４６−１４９℃.
1H-NMR ［400MHz，CDCl3，内部標準：テトラメチルシラン（TMS）］： δ (ppm) 1.11 (3H, t, J=7.0 Hz), 1.16-1.59 (6H, m), 1.21 (9H, s), 1.89-2.09 (2H, m), 2.69-2.76 (2H, m), 3.09 (2H, d, J=6.5 Hz), 3.17-3.33 (4H, m), 3.62-3.63 (2H, m), 4.04-4.10 (4H, m), 4.89 (1H, t, J=6.5 Hz), 6.52-6.58 (4H, m), 6.68-6.69 (2H, m), 6.75 (2H, d, J=8.5 Hz), 6.90 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.20-8.46 (16H, m), 8.64-8.82 (2H, m).
FAB-MS (m/z): 1080 [(M+H)+]。
（ｈ）（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−５−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸、および、（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−６−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸の混合物［上記式（Ib）を有する化合物およびその異性体の混合物］
実施例１（ｇ）で得られる（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−５−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸  エチル、および、（Ｓ）−２−（４−ｔ−ブチルフェノキシ）−３−[４−[２−[４’−[２−[６−フルオレセイン−６−カルボキサミドヘキサノイルアミノ]エチル]ビフェニル−４−カルボニルアミノ]エトキシ]フェニル]プロピオン酸  エチルの混合物（８０mg）をエタノール（０．８ml）およびテトラヒドロフラン（０．８ml）の混合溶媒に溶解し、０℃において１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１５０μl）を加え、０℃で５時間、続いて室温で１６時間、さらに４０℃で２４時間攪拌した。反応液に１Ｎ塩酸（１５０μl）を加え有機溶媒を留去して、得られた残渣に水を加え、析出した固体を濾取して、橙色粉末の目的化合物（５９mg）を得た。
mp ２０２−２０４℃.
1H-NMR ［400MHz，CDCl3，内部標準：テトラメチルシラン（TMS）］： δ (ppm) 1.10-1.56 (6H, m), 1.20 (9H, s), 1.99-2.09 (2H, m), 2.69-2.76 (2H, m), 2.98-3.38 (6H, m), 3.59-3.62 (2H, m), 4.05-4.10 (2H, m), 4.66-4.67 (1H, m), 6.52-6.57 (4H, m), 6.70-6.73 (4H, m), 6.86-6.89 (2H, m), 7.20-7.22 (4H, m), 7.27-8.46 (12H, m), 8.64-8.81 (2H, m).
FAB-MS (m/z): 1052 [(M+H)+]。
（試験例１）PPARγ結合能試験
（１）ヒトPPARγの調製
ポリメラーゼ連鎖反応（polymerase chain reaction：以下、「PCR」という）法により、ヒスチジン（以下、「His」という）タグ融合ヒトPPARγ［pQE30（QIAGEN社）に由来する］のリガンド・バインディング・ドメイン（ligand binding domain：以下、「LBD」という）の融合タンパク質（以下、「His-PPARγ-LBD」という）をコードした組換え発現ベクターを取得し、そのベクターで形質転換された大腸菌を培養し、その培養物よりHis-PPARγ-LBDを回収した。
【０１２７】
まず、ヒトPPARγをコードする配列（アミノ酸207-476）の両末端に制限酵素Sal IおよびBamH Iの認識配列を付加し、Hisタグ融合タンパク質発現ベクターpQE30（QIAGEN社）に組み込むために、下記ヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドを合成した。
【０１２８】
5’-TGGGATCCGAGTCCGCTGACCTCCGGGCCCTGG-3’：γ１（配列表の配列番号：１）
5’-ACAAGCTTCTAGTACAAGTCCTTGT-3’：γ２（配列表の配列番号：２）
次いで、ヒトcDNAライブラリー（Clontech社、カタログ番号：K-1420-1）を鋳型とし、かつ、上記γ１およびγ２をプライマーとして９９℃にて２分間からなる保温を行った後、９９℃にて３０秒間、次いで５５℃にて３０秒間、次いで７２℃にて１分間からなる保温サイクルを３０回繰り返すことによりＰＣＲを行った。増幅されたポリヌクレオチド断片をpUC118ベクター（TAKARA社）へサブクローニングし、常法により挿入部分のヌクレオチド配列を決定した。次いで、得られた組換えベクターを制限酵素Sal IおよびBamH Iで処理した後、挿入部分を回収してpQE30へサブクローニングし、組替え発現ベクターを構築した。
【０１２９】
次いで、アミノ末端のアミノ酸配列をX線結晶構造解析の報告（R. T. Nolte et al, Nature, 1998年，第395巻， 第10号, p.137-143）のあるものと同じ配列にするため、下記ヌクレオチド配列を有するオリゴヌクレオチドを合成した。
【０１３０】
5’-CACCATCACGGACCCGAGTCCGCTGACCTC-3’：γ３（配列表の配列番号：３）
次いで、先に得られた組換え発現ベクターを鋳型とし、かつ、上記γ３をプライマーとして９５℃にて３０秒間からなる保温を行った後、９５℃にて３０秒間、次いで５５℃にて１分間、次いで６８℃にて６分間からなる保温サイクルを１２回繰り返すことによるＰＣＲを行った。増幅されたポリヌクレオチド断片につき、常法により挿入部分のヌクレオチド配列を決定した。以上の操作により組換え発現ベクターpQE30-PPARγを得た。PPARγの遺伝子配列は、配列表の配列番号４に示す通りである。
【０１３１】
次いで、得られた組換え発現ベクターpQE30-PPARγで、電気穿孔法により大腸菌株SG13009株（QIAGEN社）を形質転換した。この形質転換株を、１００μg/ml濃度のアンピシリンおよび２５μg/ml濃度のカナマイシンを含むL-broth培地［LB BROTH BASE （Invitrogen社）２０ｇを１lの水に溶解したもの］５mlに接種し、３７℃にて４時間振とう培養を行った。次いで、１００μg/ml濃度のアンピシリンおよび２５μg/ml濃度のカナマイシンを含むL-broth培地１００mlに２．０％（容積／容積）接種し、３７℃にて１２時間振とう培養を行なった。次いで、１００μg/ml濃度のアンピシリンおよび２５μg/ml濃度のカナマイシンを含むL-broth培地１lに１０％（容積／容積）接種し、３７℃にて４時間振とう培養を行なった。次いで０．１mMイソプロピル-β-D-チオガラクトシドを添加し、３０℃にて６時間振とう培養を行なった。
【０１３２】
培養終了後、４０００×g、３０分間の遠心分離で沈殿画分を回収し、２５mlの懸濁バッファー（組成は以下に示した）に懸濁し、懸濁液を超音波処理した。１４０００×g、３０分間の遠心分離を行い上清を回収し、ニッケル硫酸を付加したHiTrap Chelating HPカラム(Amersham Bioscience社)に添加した。ニッケルカラムAバッファー（組成は以下に示した）およびニッケルカラムBバッファー（組成は以下に示した）によるグラジエント溶出法により、His-hPPARγ-LBDを含む溶出画分を回収し、透析バッファー（組成は以下に示した）により透析を行った。次いで、透析を行ったHiTrap Chelating HPカラム溶出画分をHiTrap SP HPカラム（Amersham Bioscience社）に添加し、イオン交換カラムAバッファー（組成は以下に示した）およびイオン交換カラムBバッファー（組成は以下に示した）によるグラジエント溶出法により、His-hPPAR-LBDを含む溶出画分を回収した。次いで、ゲル濾過バッファー（組成は以下に示した）で平衡化したHiLoad Superdex75（Amersham Bioscience社）にHiTrap SP HPカラム溶出画分を添加し、ゲル濾過バッファーにより溶出し、融合タンパク質His-PPARγ-LBDを回収した。
【０１３３】
１０乃至２０％ポリアクリルアミド・ドデシル硫酸ナトリウム・ゲル電気泳動を行なった結果、得られた融合タンパク質の還元条件下における分子量は約３２０００であった。
懸濁バッファー：
Tris-HCl (pH8.0)                50mM
NaCl                           200mM
イミダゾール                    10mM
Complete EDTA-free (Roche社)
(プロテアーゼインヒビター)      1錠/50ml
ニッケルカラムAバッファー：
Tris-HCl (pH8.0)                50mM
NaCl                           200mM
ニッケルカラムBバッファー
Tris-HCl (pH8.0)                50mM
NaCl                           200mM
イミダゾール                   500mM
透析バッファー：
HEPES (pH7.5)                   50mM
(±)-ジチオトレイトール(DTT)     5mM
エチレンジアミン四酢酸(EDTA)     1mM
イオン交換カラムAバッファー
HEPES (pH7.5)                   20mM
(±)-ジチオトレイトール(DTT)     5mM
エチレンジアミン四酢酸(EDTA)     1mM
イオン交換カラムBバッファー：
HEPES (pH7.5)                   20mM
NaCl                             1M
(±)-ジチオトレイトール(DTT)     5mM
エチレンジアミン四酢酸(EDTA)     1mM
ゲル濾過バッファー：
Tris-HCl (pH8.0)                25mM
NaCl                           200mM
(±)-ジチオトレイトール(DTT)     5mM
エチレンジアミン四酢酸(EDTA)     1.5mM
（２）蛍光偏光を利用したPPARγ結合能試験（Kd値の算出）
PPARγ結合能試験用のバッファー（以下「溶液１」という）として、以下の組成のバッファーを調製した。
溶液１（pH 7.0）：
HEPES                                                  10mM
EDTA 3Na                                                0.1mM
(±)-ジチオトレイトール（DTT）                         10mM
γ-GLOBULINS 16% Solution Bovine（SIGMA CHEMICAL CO.）  1mg/ml
溶液１に実施例１で得られる化合物（１．０nM）を加え、溶液２とした。３８４穴平底黒プレート３７１０（Corning Incorporated）に溶液２を３６μl添加した。そこに段階希釈したHis-PPARγを４μlずつ添加した。このとき、ブランクとして溶液１（３６μl）に５０％(v/v)グリセリン（和光純薬株式会社）/Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline（インビトロジェン株式会社）４μlを添加したものを調製し、コントロールとして溶液２（３６μl）に５０％(v/v)グリセリン（和光純薬株式会社）/Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline（インビトロジェン株式会社）４μlを添加したものを調製した。室温にて一晩静置後、蛍光偏光度測定装置Analyst（LjL社）を用いて、ブランクを指定し、以下の条件で蛍光偏光度を測定した。
Kinetic read cycle:                      1  of  1
Read start delay time:                   0  s
Time delay between kinetic reads:        <n/a>
Barcode:                                 <n/a>
Microplate format:                       Corning 384 Square Opaque PS
Shake time:                              0  s
Temperature:                             Room temperature
Serial number:                           AN0223
Read sequence:                           row
Mode sequence:                           well
Detection mode:                          FPS
Light sensor:                            HC-120
Excitation side:                         Top
Emission side:                           Top
Lamp:                                    Continuous
Readings per well:                       3
Time between readings:                   100  ms
Integration time:                        100000  us
Attenuator mode:                         out
Motion settling time:                    150  ms
Z Height:                                2  mm  Numeric
Excitation filter:                       1  Fluorescein  485  nm
Emission filter:                         1  Fluorescein  530  nm
Beamsplitter:                            Top  Fluorescein  505  nm
Excitation polarizer filter:             s
Emission polarizer filter:               s
Detector counting:                       SmartRead
Flash lamp voltage:                      <n/a>
Delay after flash:                       <n/a>
Sensitivity setting:                     4
A/D converter gain:                      x1
Integrating gain:                        x1
Detection mode:                          FPP
Light sensor:                            HC-120
Excitation side:                         Top
Emission side:                           Top
Lamp:                                    Continuous
Readings per well:                       3
Time between readings:                   100  ms
Integration time:                        100000  us
Attenuator mode:                         out
Motion settling time:                    150  ms
Z Height:                                2  mm  Numeric
Excitation filter:                       1  Fluorescein  485  nm
Emission filter:                         1  Fluorescein  530  nm
Beamsplitter:                            Top  Fluorescein  505  nm
Excitation polarizer filter:             s
Emission polarizer filter:               p
Detector counting:                       SmartRead
Flash lamp voltage:                      <n/a>
Delay after flash:                       <n/a>
Sensitivity setting:                     4
A/D converter gain:                      x1
Integrating gain:                        x1
（PPARγ存在下の蛍光偏光度−コントロールの蛍光偏光度）（ΔmP）を縦軸に、His-PPARγ-LBDタンパク質濃度の対数（logM）を横軸にとり、得られたデータをプロットした（図１）。データ解析ソフトPrism（GraphPad Software, Inc.）を用いてSigmoidal dose-response (variable slope)の式により解析を行い、EC50値を求めた。２回以上測定を行なって求められたEC50値の平均値を取り、Kd値とした。実施例１の化合物のHis-PPARγに対するKd値は、638±152pMであった（図１）。
【０１３４】
上記非特許文献１に記載された化合物のKd値は、61±14nMであることから、実施例１の化合物のPPARγに対する結合活性は、当該化合物に比較して約100倍優れている。したがって、下記PPARγ結合能試験において、実施例１の化合物を使用した場合に必要なタンパク質（PPARγ）の量は、非特許文献１に記載された化合物を使用した場合の約1/100の量になると概算される。
（３）蛍光偏光を利用したPPARγ結合能試験（Ki値の算出）
実施例１の化合物を用いて、試験化合物のPPARγ結合能試験を行った。
【０１３５】
以下の組成でバッファー（溶液３）を調製した。
溶液３：
HEPES                                                  10mM
EDTA 3Na                                                0.1mM
(±)-ジチオトレイトール（DTT）                         10mM
γ-GLOBULINS 16% Solution Bovine（SIGMA CHEMICAL CO.）  1mg/ml
His-hPPARγ                                            10.3nM
実施例１の化合物                                        1.0nM
試験化合物はDMSOで１mMまたは２５μMに調製した後、DMSOで１mMまたは２５μMから１／３ずつ９段階希釈を行った。
【０１３６】
溶液３を３８４穴平底黒プレート３７１０（Corning Incorporated）に３８μlずつ添加し、そこに、各濃度の試験化合物をそれぞれ２μlずつ添加した。このとき、試験化合物の代わりにDMSO（２μl）を添加したものをネガティブコントロールとした。さらに、ポジティブコントロールとして溶液２（３８μl）にDMSO（２μl）を添加した。ブランクとして、溶液１（３８μl）にDMSO（２μl）を添加した。室温にて一晩静置後、ブランクを指定して、蛍光偏光度測定装置Analyst（LjL社）を用いて、試験例１（２）と同様の条件で蛍光偏光度を測定した。
【０１３７】
試験化合物のPPARγ結合能は、まず以下の式により求められる阻害率で表した。
【０１３８】
阻害率（％）＝100−［（X−A）/（B−A）］×100
X：試験化合物添加時の蛍光偏光度（mP）
A：ポジティブコントロールの蛍光偏光度（mP）
B：ネガティブコントロールの蛍光偏光度（mP）
横軸に試験化合物の濃度の対数（logM）を、縦軸に上記阻害率（％）をとり、得られたデータをプロットした（図２）。データ解析ソフトPrism（GraphPad Software, Inc.）を用いてSigmoidal dose-response （variable slope）の式により解析を行った。試験例１（２）のKd値を用いて、試験化合物のKi値を計算した（図２）。
【０１３９】
ロシグリタゾン  マレイン酸塩（rosiglitazone maleate；米国特許第５００２９５２号明細書に記載された(±)-5-[4-[2-(methyl-2-pyridylamino)ethoxy]benzyl]-2,4-thiazolidinedione maleate）は、128±64nMのKi値を示し、（Ｓ）−３−[４−[２−（ビフェニル−４−カルボニルアミノ）エトキシ]フェニル]−２−［４−（ｔ−ブチル）フェノキシ］］プロピオン酸（国際公開第９９／１８０６６号パンフレットの例示化合物番号１３８−３の化合物の光学活性体；国際公開第９９／１８０６６号パンフレットの実施例１０４に記載された方法と同様の方法に従い合成することができる；図２において、化合物Ａという）は、779±14pMのKi値を示した。
【産業上の利用可能性】
【０１４０】
本発明の一般式（I）で表される化合物またはその塩は、優れたPPARγ結合能および蛍光能を併せ持ち、より少ない量のPPARγタンパク質の使用で、蛍光偏光度法を用いた簡便でより網羅的なPPARγ結合能の試験方法（PPARγ結合能を有する化合物を検出する方法）に用いることができ、有用である。
【図面の簡単な説明】
【０１４１】
【図１】実施例１の化合物のPPARγ結合能を示す。
【図２】実施例１の化合物を用いたPPARγ結合能試験結果を示す。
【配列表フリーテキスト】
【０１４２】
配列番号１：ヒトPPARγをコードしたポリヌクレオチドを増幅するためのセンス・プライマー。
【０１４３】
配列番号２：ヒトPPARγをコードしたポリヌクレオチドを増幅するためのアンチセンス・プライマー。
【０１４４】
配列番号３：アミノ末端のアミノ酸配列をX線結晶構造解析の報告のあるものと同じ配列にするためのセンス・プライマー。
【図１】
2005139117.tif 000011
【図２】
2005139117.tif 000012
【配列表】
2005139117000001.app