(57)【要約】【課題】食品として安全に摂取することができる放射線障害抑制剤が望まれていた。【解決手段】本発明によれば、ヒトまたは動物への放射線照射と同時またはその前後に甘蔗由来のエキスを投与することにより、放射線の被曝後に現れる症状を予防または改善することが可能な、放射線障害抑制剤を提供することが可能になる。【選択図】  図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
甘蔗由来のエキスを有効成分とする、放射線障害抑制剤。
【請求項２】
前記甘蔗由来のエキスは、甘蔗汁、甘蔗の溶媒抽出液および甘蔗由来の糖蜜からなる群より選ばれる原料を液体クロマトグラフで分離することにより得られるエキスである、請求項１記載の放射線障害抑制剤。
【請求項３】
前記甘蔗由来のエキスは、多孔質吸着剤を充填したカラムを備える液体クロマトグラフの当該カラムに、甘蔗汁、甘蔗の溶媒抽出液および甘蔗由来の糖蜜からなる群より選ばれる原料を通液し、該多孔質吸着剤に吸着した吸着成分を水、メタノール及びエタノールからなる群より選ばれる少なくとも１つの溶媒で溶出させて得られるエキスである、請求項２記載の放射線障害抑制剤。
【請求項４】
前記多孔質吸着剤は、スチレンジビニルベンゼン共重合体である、請求項３記載の放射線障害抑制剤。
【請求項５】
前記甘蔗由来のエキスは、イオン交換樹脂を充填したカラムを備える液体クロマトグラフの当該カラムに、甘蔗汁、甘蔗の溶媒抽出液及び甘蔗由来の糖蜜からなる群より選ばれる原料を通液して、前記イオン交換樹脂に対する親和力の差に基づき前記原料を分離した画分のうち、波長４２０ｎｍの光を吸収する画分である、請求項１〜２のいずれか一項に記載の放射線障害抑制剤。
【請求項６】
前記イオン交換樹脂は、陽イオン交換樹脂である、請求項５記載の放射線障害抑制剤。
【請求項７】
前記陽イオン交換樹脂は、強酸性陽イオン交換樹脂である、請求項６記載の放射線障害抑制剤。
【請求項８】
前記強酸性陽イオン交換樹脂は、スルホン化ポリスチレン樹脂のナトリウム塩、カリウム塩又はカルシウム塩である、請求項７記載の放射線障害抑制剤。
【請求項９】
前記イオン交換樹脂は、ゲル型のイオン交換樹脂である、請求項５記載の放射線障害抑制剤。
【請求項１０】
前記液体クロマトグラフは、擬似移動床方式クロマトグラフである、請求項５〜９のいずれか一項に記載の放射線障害抑制剤。
【請求項１１】
波長４２０ｎｍの光を吸収する前記画分中の無機塩が、固形分当たり３３％以下である、請求項５〜１０のいずれか一項に記載の放射線障害抑制剤。
【請求項１２】
前記甘蔗由来のエキスは、バガスを、水及び親水性溶媒からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出溶媒で抽出して得られるエキスである、請求項１記載の放射線障害抑制剤。
【請求項１３】
前記抽出溶媒は、エタノールを６０体積％以下、０．１体積％以上含むエタノール−水混合溶媒である、請求項１２記載の放射線障害抑制剤。
【請求項１４】
前記放射線障害が、放射性崩壊によって放出される粒子がつくるビーム、紫外線、Ｘ線、核反応または素粒子の相互転換で放出される粒子線、または宇宙線の１つ以上によって生じる、請求項１〜１３記載の放射線障害抑制剤。
【請求項１５】
白血球が減少した状態、リンパ球が減少した状態、造血障害、易感染状態、出血傾向、免疫反応の抑制状態、生殖細胞の減少、不妊、脱毛、発熱、白内障、放射線宿酔、成長の遅れ、皮膚若しくは粘膜組織の病変化、又は消化器症状のいずれか１つ以上の放射線の被爆後に現れる症状を予防または改善する、請求項１〜１３記載の放射線障害抑制剤。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載の放射線障害抑制剤を含む食品。
【請求項１７】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載の放射線障害抑制剤を含む飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射線障害抑制剤、並びに該放射線障害抑制剤を含む食品及び飼料に関する。
【背景技術】
【０００２】
放射線は、電力源、医療分野、生物の変異の研究などの様々な分野において利用されている。かつてのソ連のチェルノブイリ原子力発電所の事故、茨城県東海村の核燃料加工施設での臨海事故等における大量被爆により、短期的には細胞分裂の旺盛な消化器官系及び／又は造血・免疫系等に放射線障害が誘発され、長期的には甲状腺腫瘍または白血病等の発病の可能性が高まることが知られている。さらに、ガン等の腫瘍性疾病の放射線療法においても、これらの臓器の器質的あるいは機能的障害が副作用として認められている。こうした放射線療法に併発しがちな消化管粘膜病変、免疫抑制または造血機能抑制等の副作用（悪心、嘔吐、低血圧、神経障害、貧血、血小板減少症、白血球減少症またはリンパ球減少症等）を如何に軽減させるかが放射線療法の成否を左右するほど解決すべき重要な課題とされている。放射線障害の予防または治療に有効な物質の探索若しくは作用に関する研究がなされているものの、その制御技術またはその副作用の軽減・改善技術は未だ開発されていないのが現状である。現在、放射線障害防止効果を有する物質としてアミノチオール（aminothiol）誘導体であるAS101、WR-638 (商標：cystaphos)および WR-2721 (商標：gammaphos)等の化合物が販売されている。しかし、AS101、WR-638 および WR-2721 は、前述した悪心、嘔吐、低血圧、神経障害等の副作用誘発が問題視され、その克服が課題とされている。有用な放射線障害防止物質は、細網内皮系細胞を活性化する免疫賦活（アジュバント）作用と関連していることが報告されている(非特許文献１)。
【０００３】
また、放射線障害を軽減するために、以下のような試みも行われている。化学療法又は放射線療法による副作用の改善のために、２−ピラノン誘導体類及びその塩類を有効成分とする血小板増多剤（特許文献１）、脂肪酸を有効成分とする造血幹細胞増殖剤（特許文献２）が報告されている。
【０００４】
より一般的な免疫に関する効果を目的として、免疫応答の調節、ストレスの影響の改善、化学療法又は放射線被照射などによる好ましくない影響を回避する方法として、アンドロステンジオール及びアンドロステントリオールを投与する方法（特許文献３）が報告されている。
【０００５】
また、インターロイキン−１の有する生理活性作用の一部である、特異的抗体産生増強作用及びコンカナバリンＡ共存下における胸腺細胞に対する増殖作用を示す、特定のペプチドを含有する薬剤（特許文献４）が報告されている。
【０００６】
より具体的な放射線障害治療剤としては、１，２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン又はその生理学的許容塩を含有する放射線障害の予防治療剤が報告されている（特許文献５）。この予防治療薬剤の投与によって、６００ＲのＸ線を照射したマウスの処理後生存日数を有意に増加させることが示されている。
【０００７】
同様に、スバガリン系化合物を有効成分とする放射線又は薬物による副作用軽減剤が報告されている（特許文献６）。この薬剤の投与が、８５０ｒａｄ（８．５Ｇｙ）のＸ線を照射したマウスの処理後生存日数を有意に増加させること、及び制癌剤の副作用を減弱させることが示されている。
【０００８】
【特許文献１】特開平５−２１３７５８号公報
【特許文献２】国際公開第９５／３０４１３号パンフレット
【特許文献３】特開２００２−３３２２９３号公報
【特許文献４】特開平０３−１７０４９８号公報
【特許文献５】特開平０１−１３５７１８号公報
【特許文献６】特開平０２−２２３５１６号公報
【非特許文献１】R. Neta, J. J. Oppenheim, R. D. Schreiber, R. Chizzonite, G. D. Ledney and T. J. MacVittie, J. Exp. Med., 173 (5): 1177-1182，1991.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
前述のように、アミノチオール誘導体であるAS101、WR-638 (商標：cystaphos)、WR-2721 (商標：gammaphos)等の化合物が販売されている。しかし、AS101、WR-638 、WR-2721 は、前述した悪心、嘔吐、低血圧、神経障害等の副作用誘発が問題視され、その克服が課題とされている。
【００１０】
２−ピラノン誘導体及びその塩類（特許文献１）、並びに脂肪酸（特許文献２）に関しては、免疫異常により減少することが知られている特定の血液細胞を増加させる。しかし、他の免疫機能改善効果及びその他の放射線障害に対する影響については確認試験の記載がなく不明である。
【００１１】
放射線障害には前述した免疫機能の異常、消化器官の異常、皮膚炎など様々なものが挙げられる。これらのうちの免疫機能の低下は、様々な別の原因によっても引き起こされる。化学療法、感染症、免疫疾患、ストレスなどは、免疫機能の異常を引き起こす要因であるが、アンドロステンジオール及びアンドロステントリオールの投与により、このような様々な原因による免疫機能の異常が改善される。しかし、特許文献３には放射線障害の影響に対する確認試験の記載がなく、また放射線障害の症状のうち免疫機能の異常以外の症状に対する効果については不明である。
【００１２】
インターロイキン−１様活性を有する特定のペプチドを含有する薬剤（特許文献４）に関しては、特異性抗体産生増強作用およびコンカナバリンＡ共存下における胸腺細胞に対する増殖作用を有するが、これらも免疫機能低下の改善効果の一部であり、この薬剤が免疫機能の異常以外の放射線障害にどのような効果を示すかは不明である。
【００１３】
以上の特許文献１乃至４に示される有効成分は、放射線障害の一部である免疫機能の異常又は免疫機能の異常の一部を改善するものであり、それ故にこれらの有効成分よりも広範囲の免疫機能の改善及び免疫機能の異常以外の放射線障害に関する効果を有する放射線障害抑制剤が望まれていた。
【００１４】
１，２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン及びスバガリン系化合物に関しては、マウスを用いたＸ線照射試験を行い、これらの物質の投与により生存日数又は生存率が有意に増加する。しかし、その被曝量が大きいため、放射線被曝障害の回復に関する確認はなされていない（特許文献５及び６）。
【００１５】
従って、特許文献５乃至６に示される有効成分は、致死的な被曝による放射線障害の延命効果を示すものであり、それ故にガンの放射線治療などによる障害の回復効果を示す放射線障害抑制剤が望まれていた。
【００１６】
以上の物質は、何らかの放射線障害に対する改善効果を有するが、これらは全て薬剤として用いられる特定の化合物であり、食品のように通常摂取されるものではない。従って、食品として安全に摂取することができる放射線障害抑制剤が望まれていた。
【００１７】
そこで、本発明の目的は、上記背景技術の問題点を解決する放射線障害抑制剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明者らは鋭意検討の結果、甘蔗由来のエキスを投与することにより、上記問題点を解決し、放射線障害を抑制することが可能であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１９】
甘蔗由来のエキスは、甘蔗汁、甘蔗の溶媒抽出液及び甘蔗由来の糖蜜からなる群より選ばれる原料を液体クロマトグラフで分離することにより得られるエキスであることが好ましい。特に、甘蔗由来のエキスは以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかであることが好ましい。
【００２０】
（ａ）多孔質吸着剤を充填したカラムを備える液体クロマトグラフの当該カラムに、甘蔗汁、甘蔗溶媒抽出液および甘蔗由来の糖蜜からなる群より選ばれる原料を通液し、該多孔質吸着剤に吸着した吸着成分を水、メタノール、及びエタノールからなる群より選ばれる少なくとも１つの溶媒で溶出させて得られるエキス（以下「エキスａ」という。）。
【００２１】
（ｂ）イオン交換樹脂を充填したカラムを備える液体クロマトグラフ（好ましくは、擬似移動床方式クロマトグラフ）の当該カラムに、甘蔗汁、甘蔗溶媒抽出液及び甘蔗由来の糖蜜からなる群より選ばれる原料を通液して、前記イオン交換樹脂に対する親和力の差に基づき前記原料を分離した画分のうち、波長４２０ｎｍの光を吸収する画分（以下「エキスｂ」という。）。
【００２２】
（ｃ）バガスを、水及び親水性溶媒からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出溶媒で抽出して選ばれるエキス（以下「エキスｃ」という。）。
【００２３】
エキスａ〜ｃは、甘蔗由来のエキスとして放射線照射と併用して投与することができ、放射線照射による障害を特に良好に改善することが可能になる。
【００２４】
本発明はまた、上記放射線障害抑制剤を含む食品及び飼料を提供する。かかる食品又は飼料は、放射線照射と併用して生体に与える（摂取させる）ことが可能であり、これにより放射線障害抑制が可能となる。
【発明の効果】
【００２５】
本発明によれば、ヒトまたは動物への放射線照射と同時またはその前後に甘蔗由来のエキスを投与することにより、放射線被曝による障害を改善することが可能な、放射線障害抑制剤を提供することが可能になる。
【００２６】
本発明の放射線障害抑制剤は植物由来であり、古来よりヒトが食してきた甘蔗または含蜜糖に含まれる成分を含み、食経験があるため安全である。従って、ヒト、ヒトが食用とする家畜もしくは家禽などの産業動物、コンパニオン・アニマル、または希少動物の健康を害することもなく、生体への安全性も高い。このように、本発明の放射線障害抑制剤は、安全性が高い。さらに、スクロースの製造工程における副産物を利用するため低コストである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
（放射線障害抑制剤）
本発明において「放射線」とは、全ての電磁波、および粒子線をいう。具体的には、放射性崩壊によって放出される粒子（光子を含む）がつくるビーム（粒子線）（α線、β線、およびγ線など）、紫外線、Ｘ線、核反応または素粒子の相互転換で放出される粒子線、および宇宙線を含む。
【００２８】
本発明において「放射線障害抑制」とは、放射線の被曝後に現れる症状、例えば、生体における白血球が減少した状態、リンパ球が減少した状態、造血障害、易感染状態、出血傾向、免疫反応の抑制状態、生殖細胞の減少、不妊、脱毛、発熱、白内障、放射線宿酔、成長の遅れ、皮膚若しくは粘膜組織の病変化、又は下痢などの消化器症状等のいずれか１つ以上を予防または改善することをいう。そして、「放射線障害抑制剤」とは、上記放射線障害抑制の効果を奏する剤をいう。
【００２９】
本発明において「生体」とは、ヒトまたはヒト以外の動物の生体を意味する。ここで、「動物」とは、ヒト以外の脊椎動物を意味し、ほ乳類、鳥類、は虫類、両生類、及び魚類を含み、例えば、ウシ、ブタ、ウマ、イヌ、ネコ、サル、ウサギ、カワウソ、フェネック、フェレット、ヤマネ、プレーリードック、パンダ、ゾウ、リス等のほ乳類、オウム、インコ、タンチョウ、トキ等の鳥類、コイ、熱帯魚等の観賞魚、その他の希少動物が挙げられる。
【００３０】
本発明において「甘蔗由来のエキス」とは、甘蔗を原料として得られるエキスをいう。甘蔗由来のエキスは、甘蔗汁、甘蔗の溶媒抽出液及び甘蔗由来の糖蜜からなる群より選ばれる原料を液体クロマトグラフで分離することにより得られるエキスであることが好ましく、上記エキスａ〜ｃのいずれかが特に好ましい。
【００３１】
「甘蔗汁」とは、甘蔗（さとうきび）を圧搾して得られる圧搾汁、甘蔗を水で浸出して得られる浸出汁、又は原料糖製造工程における石灰処理した清浄汁もしくは濃縮汁をいう。
【００３２】
「甘蔗の溶媒抽出液」とは、甘蔗を汎用の有機溶媒で抽出した抽出液を濃縮、乾固後、水に再溶解した抽出液を意味する。直上の有機溶媒としては、例えばメタノール、エタノール等のアルコール類が挙げられ、これらを単独又は組み合わせて使用する。さらに、これらの溶媒と水を組み合わせて使用することもできる。
【００３３】
「甘蔗由来の糖蜜」とは、結晶化工程で得られた砂糖結晶と母液の混合物を遠心分離にかけ、砂糖結晶と分離して得られる振蜜を意味する。例えば、原料製造工場における１番蜜、２番蜜、製糖廃蜜、又は、精製糖製造工程における洗糖蜜、１〜７番蜜、精糖廃蜜等が挙げられる。さらに、これらの糖蜜を原料としてアルコール発酵を行った分離液のように、糖蜜を脱糖処理したものも甘蔗由来の糖蜜に含まれる。
【００３４】
エキスｃは、バガスを原料として製造される。「バガス」とは、典型的には原糖製造工程における製糖過程で排出されるバガスをいう。原糖工場における製糖過程で排出されるバガスには、最終圧搾機を出た最終バガスだけではなく、第１圧搾機を含む以降の圧搾機に食い込まれた細裂甘蔗をも含む。好適なバガスは、原糖工場において圧搾工程により糖汁を圧搾した後に排出されるバガスである。当該バガスは、甘蔗の種類、収穫時期等により、その含まれる水分、糖分及びそれらの組成比が異なるが、本発明においては、これらのバガスを任意に用い得る。さらに、本発明では、原料のバガスとして、原糖工場と同様に、例えば黒糖製造工場において排出される甘蔗圧搾後に残るバガス、又は実験室レベルの小規模な実施により甘蔗から糖液を圧搾した後のバガスも用い得る。
【００３５】
以下、エキスａ〜ｃについてそれぞれ詳述する。
【００３６】
エキスａは、上述の通り、多孔質吸着剤を充填したカラムを備える液体クロマトグラフの当該カラムに、甘蔗汁、甘蔗溶媒抽出液及び甘蔗由来の糖蜜からなる群より選ばれる原料を通液し、該多孔質吸着剤に吸着した吸着成分を水、メタノール及びエタノールからなる群より選ばれる少なくとも１つの溶媒で抽出させて得られるエキスである。
【００３７】
上記原料は、そのまま又は水で任意の濃度に調製して、多孔質吸着剤を充填したカラムに通液することができる。なお異物除去のために、カラムで処理する前に、甘蔗汁、甘蔗の溶媒抽出液または甘蔗由来の糖蜜をろ過することが望ましい。ろ過の手法は特に限定されず、食品工業で広く使用されているスクリーンろ過、ケイソウ土ろ過、精密ろ過、限外ろ過等の手段を好ましく使用できる。
【００３８】
多孔質吸着剤としては、合成多孔質吸着剤が好ましい。好適な合成多孔質吸着剤は、有機系樹脂からなるものである。有機系樹脂としては、例えば、芳香族系樹脂、アクリル酸メタクリル樹脂、アクリロニトリル脂肪族系樹脂等が使用できる。有機系樹脂の中では、芳香族系樹脂が好ましい。
【００３９】
芳香族系樹脂の多孔質吸着剤として、例えば、スチレン−ジビニルベンゼン系樹脂からなる多孔質吸着剤が挙げられる。また、芳香族系樹脂としては、疎水性置換基を有する芳香族系樹脂、無置換基型の芳香族系樹脂、無置換基型に特殊処理をした芳香族系樹脂等の多孔質性樹脂が挙げられるが、無置換基型に特殊処理を施した芳香族系樹脂が好ましい。
【００４０】
多孔質吸着剤で市販のものとしては、ダイヤイオン（商標）ＨＰ−１０、ＨＰ−２０、ＨＰ−２１、ＨＰ−３０、ＨＰ−４０、ＨＰ−５０（以上、無置換基型の芳香族系樹脂、いずれも商品名、三菱化学株式会社製）；ＳＰ−８２５、ＳＰ−８００、ＳＰ−８５０、ＳＰ−８７５、ＳＰ−７０、ＳＰ−７００（以上、無置換基型に特殊処理を施した芳香族系樹脂、いずれも商品名、三菱化学株式会社）；ＳＰ−９００（芳香族系樹脂、商品名、三菱化学株式会社製）；アンバーライト（商標）ＸＡＤ−２、ＸＡＤ−４、ＸＡＤ−１６、ＸＡＤ−２０００（以上、芳香族系樹脂、いずれも商品名、株式会社オルガノ製）；ダイヤイオン（商標）ＳＰ−２０５、ＳＰ−２０６、ＳＰ−２０７（以上、疎水性置換基を有する芳香族系樹脂、いずれも商品名、三菱化学株式会社製）；ＨＰ−２ＭＧ、ＥＸ−００２１（以上、疎水性置換基を有する芳香族系樹脂、いずれも商品名、三菱化学株式会社製）；アンバーライト（商標）ＸＡＤ−７、ＸＡＤ−８（以上、アクリル酸エステル樹脂、いずれも商品名、株式会社オルガノ製）；ダイヤイオン（商標）ＨＰ１ＭＧ、ＨＰ２ＭＧ（以上、アクリル酸メタクリル樹脂、いずれも商品名、三菱化学株式会社製）；セファデックス（商標）ＬＨ２０、ＬＨ６０（以上、架橋デキストランの誘導体、いずれも商品名、ファルマシア  バイオテク株式会社製）等が挙げられる。中でも、ＳＰ−８５０が特に好ましい。
【００４１】
カラムに充填する多孔質吸着剤の量は、カラムの大きさ、溶媒の種類、固定担体の種類などによって適宜決定できるが、上記原料の固形分に対して、０．０１〜５倍湿潤体積量が好ましい。
【００４２】
上記原料をカラムに通すことにより、原料中の本発明の効果を有する成分は固定担体に吸着され、スクロース、グルコース、フラクトースおよび無機塩類の大部分がそのまま流出する。
【００４３】
多孔質吸着剤に吸着された成分は、溶媒（溶出溶媒）により溶出させることができる。エキスａを効率よく溶出するには、その前に残留するスクロース、グルコース、フラクトース及び無機塩類を水洗により充分に洗い流すことが好ましい。これにより吸着した吸着成分（すなわち本願発明の有効成分）をより効率よく回収することができる。
【００４４】
溶出溶媒は、水、メタノール、エタノール及びこれらの混合物から選ばれる。溶出溶媒は、水とアルコールの混合溶媒、特にエタノール−水混合溶媒が好ましく、さらに室温において効率よく目的の効果を有する成分を溶出できるため、５０／５０〜６０／４０（体積／体積）エタノール−水混合溶媒が好ましい。そして、カラム温度を上げることにより、エタノール−水混合溶媒のエタノール混合比を減らすことができ、エキスａを効率的に溶出することができる。この場合、カラム内は常圧にすることも加圧にすることもできる。
溶出速度は、カラムの大きさ、溶媒の種類、多孔質吸着剤の種類等によって適宜変更が可能であるが、ＳＶ＝０．１〜１０ｈｒ-1が好ましい。なお、ＳＶ（Space Velocity、空間速度）は、１時間当たり樹脂容量の何倍量の液体を通液するかという単位である。
【００４５】
エキスｂは、上述の通り、イオン交換樹脂を充填したカラムを備える液体クロマトグラフの当該カラムに、甘蔗汁、甘蔗溶媒抽出液及び甘蔗由来の糖蜜からなる群より選ばれる原料を通液して得られる画分であって、前記画分は、前記イオン交換樹脂に対する親和力の差に基づき前記材料を分離した画分のうち、波長４２０ｎｍの光を吸収する画分である。
【００４６】
イオン交換樹脂は、イオン交換のタイプに基づいて、陽イオン交換樹脂と陰イオン交換樹脂とに分類される。本発明では、陽イオン交換樹脂を用いることが好ましく、強酸性陽イオン交換樹脂を用いることがより好ましい。特に好ましいのは、ナトリウムイオン型、カリウムイオン型またはカルシウムイオン型の強酸性陽イオン交換樹脂である。強酸性陽イオン交換樹脂としては、スルホン化ポリスチレン樹脂のナトリウム塩、カリウム塩又はカルシウム塩が好ましい。
【００４７】
イオン交換樹脂は、樹脂の形態に基づいて、ゲル型樹脂と、ポーラス型、マイクロポーラス型またはハイポーラス型等の多孔性樹脂とに分類される。本発明では、ゲル型のイオン交換樹脂を用いることが好ましい。強酸性型のナトリウムイオン型、カリウムイオン型またはカルシウムイオン型であるゲル型の陽イオン交換樹脂を用いることがより好ましい。
【００４８】
市販のイオン交換樹脂としては、ダイヤイオン（商標）ＳＫ１Ｂ、ＳＫ１０４、ＳＫ１１０、ＳＫ１１２、ＳＫ１１６（以上、三菱化学株式会社製）、ＵＢＫ５３０、ＵＢＫ５５０（以上、三菱化学株式会社製）、アンバーライト（商標）アンバーライトＩＲ１２０ＢＮ、ＩＲ１２４、ＸＴ１００６、ＩＲ１１８アンバーリスト３１、クロマトグラフ用アンバーライトＣＧ１２０、ＣＧ６０００（以上、オルガノ株式会社製）、ダウエックス（商標）ＨＣＲ−Ｓ、ＨＣＲ−Ｗ２、ＨＧＲ−Ｗ２、モノスフィアー６５０Ｃ、マラソンＣ６００、５０Ｗ×２、５０Ｗ×４、５０Ｗ×８（以上、ダウ・ケミカル日本株式会社製）、ムロマック５０ＷＸ（室町化学工業株式会社製）、ピュロライト（商標）Ｃ−１００Ｅ、Ｃ−１００、Ｃ−１００×１０、Ｃ−１２０Ｅ、ＰＣＲ４３３、ＰＣＲ５６３Ｋ、ＰＣＲ８２２、ＰＣＲ８３３、ＰＣＲ８６６、ＰＣＲ８８３、ＰＣＲ８９２、ＰＣＲ９４５（以上、エイエムビー・アイオネクス株式会社製）等が挙げられる。中でもＵＢＫ５３０、ＵＢＫ５５０等のＵＢＫシリーズが特に好ましい。
【００４９】
イオン交換樹脂の量は、カラムの大きさ、固定担体の種類などによって適宜決定できるが、原料の固形分に対して２〜１０，０００倍湿潤体積量が好ましく、５〜５００倍湿潤体積量がより好ましい。
【００５０】
エキスｂを得る場合においては、原料を上記カラムに通し、次に水を溶離液として用いてカラムクロマトグラフィー処理をすることが好ましい。得られた多数の画分のうち、波長４２０ｎｍの光を吸収する画分を分取することにより、エキスｂを得ることができる。なお、以下この方法をイオンクロマト分離ということがある。
【００５１】
通液条件は、原料の組成及び固定担体の種類等によって適宜決定する。用いる液体クロマトグラフが単塔式回分分離法に基づくものである場合は、溶離液として脱気処理した水を用い、流速はＳＶ＝０．３〜１．０ｈｒ-1、サンプルの供給量は液量として樹脂の１〜２０％、温度は４０〜７０℃が好ましい。
【００５２】
この分離法により得た画分のそれぞれについて、波長４２０ｎｍでの吸収を測定すると共に、電気伝導度（塩分量の尺度）、又はスクロース、グルコース及びフラクトースの濃度を分析することが好ましい。各画分の前記値を時系列的にグラフに表すと、通常、波長４２０ｎｍでの吸光度のピーク、電気伝導度のピーク、スクロース及び還元糖のピークがこの順に現れる。
【００５３】
下記に述べる製造例２の条件でエキスｂを得る場合、波長４２０ｎｍでの吸光度のピーク、電気伝導度のピーク、スクロース及び還元糖のピークが、図１に示すように現れる。従って、図１の画分３〜１４に相当する画分を、波長４２０ｎｍの光を吸収する画分として分取することが好ましく、画分３〜８に相当する画分を分取することが有効成分濃度を高める上でさらに好ましい。また、スクロースが溶出しきった後の画分１８〜３０に相当する画分は、該画分をそのまま用いて測定した波長４２０ｎｍでの吸光度は低いものの、これらを合わせて濃縮したサンプルは、後述する製造例２のサンプル８と同様に、その吸光度が高い。つまり、画分１８〜３０に相当する画分は濃度が低くても、固形分当たりの有効成分の純度が比較的高い。従って非スクロース画分全体（画分１〜９と画分１８〜３０とを合わせたものに相当する）は、画分３〜８に相当する画分のみより有効成分の濃度は低いが、同様に本発明でいう甘蔗由来のエキスとして使用することができる。なお、４２０ｎｍの光は、スクロース、グルコース及びフルクトースなどの糖類に吸収されない。従って、これらの糖類は、本発明の放射線障害抑制効果を奏する物質ではない。また、波長４２０ｎｍの光を吸収する画分の塩分（すなわち無機塩）を、放射線障害抑制効果を奏する物質を濃縮するために更に膜処理等に付して低減または除去してもよい。この場合、該画分の塩分は、固形分当たり３３％以下になるように低減することが好ましく、更に好ましくは２０％以下、特に好ましくは１０％以下になるように低減する。なお、膜処理による場合、技術的な観点から塩分を１％未満にすることは困難であるが、ゲルろ過クロマトグラフによる場合、塩分を０．０１％にまでもしくはそれ以下に低減することが可能である。
【００５４】
エキスｂを得るときに用いる液体クロマトグラフは、擬似移動床式連続分離法に基づく擬似移動床方式クロマトグラフであることが好ましい。擬似移動床方式クロマトグラフでは、原料供給量、溶離液通液量、各画分抜き出し流量は、原料の組成、固定担体の種類、樹脂量に合わせて適宜設定することができる。
【００５５】
原糖工場において２番蜜を原料として擬似移動床式連続分離法により得られるエキスｂの組成は、原料の種類及びイオン交換樹脂の分離能により変化する。しかし、その組成は、一般には、固形分当たりのスクロースが１０％以下、非糖分が９０％以上、見掛純糖率が１０％以下である。ここで、見掛純糖率は、ブリックス（Ｂｘ．）度（ブリックス度計で測定した固形百分率）に対する糖度（糖度計で測定した純スクロース規定量に対する直接旋光度）の百分率である。
【００５６】
一方、単塔式回分分離法により得られるエキスｂは、２番蜜を原料として得られた画分の場合、一般に、固形分（凍結乾燥固形分）当たりのポリフェノール量が約５％（カテキン換算）、電気伝導度灰分（すなわち塩分）は約４４．７％、糖度は約５％である。
【００５７】
エキスｃは、上述の通りバガスを水及び親水性溶媒からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出溶媒で抽出して得られるエキスである。
【００５８】
エキスｃを得るために、バガスを水単独を使用して抽出してもよいが、水と親水性溶媒とを組み合わせて使用する場合、親水性溶媒としては、例えばメタノール、エタノール等の低級アルコール類、アセトン等のケトン類等が挙げられる。好ましくは、エタノールが使用される。水と親水性溶媒とを組み合わせて使用する場合、エタノールを６０体積％以下、０．１％以上含むエタノール−水混合溶媒、すなわちエタノール／水が体積比で６０／４０以下、０．１／９９．９以上のエタノール−水混合溶媒を用いることが好ましい。抽出溶媒は、より好ましくはエタノールを５０体積％以下、１体積％以上含むエタノール−水混合溶媒である。
【００５９】
抽出温度は、目的とする成分を効率よく抽出するために、５０〜１００℃であることが好ましい。抽出時間は、バガスの原料、種類、状態等に依存するが、通常１〜３時間である。抽出方法としては、例えばバガスと抽出溶媒をともに容器に入れて抽出する方法、抽出溶媒を循環させて抽出する方法、連続式に抽出する方法、例えば、デスメット式抽出機、ルルギ式抽出機によるもの等が挙げられる。
【００６０】
バガスの抽出液は、一般的に糖含量が多い（１０〜８０％）。従って、バガスの抽出液を上記と同様のカラムクロマトグラフィー処理に更に付すこと、又はバガスの抽出液を酵母で発酵させることにより糖を部分的に又は完全に除去してもよい。このカラムクロマトグラフィー処理または酵母の発酵により得られた画分、若しくはバガスの抽出液を集め、慣用の手段（減圧下での溶媒除去、凍結乾燥など）により濃縮することによって、甘蔗由来のエキスを得ることができる。
【００６１】
上述のエキスａ〜ｃに代表される甘蔗由来のエキスは、天然物由来である。それ故に、甘蔗由来のエキスの成分又は組成は、原料となる甘蔗、甘蔗の産地、気温又はエキスの製造方法などにより若干異なる。例えば、下記の製造例１で得られる甘蔗由来のエキスの分析値の一例は、以下の通りである。
【００６２】
すなわち、固形分は３７．４重量％、ブリックス（Ｂｘ．）は４０．６、糖含量は固形分当たり９．８％（内訳；スクロース６．８％、グルコース１．４％、フラクトース１．６％）、ポリフェノール含量は固形分当たり５．０％である。ここで、固形分は常圧加熱乾燥法により、ブリックスはブリックス計によって測定されるものである。糖含量（スクロース、グルコース及びフラクトース含量）は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析により求めたものを、それぞれ各サンプルの固形分重量に対する比（％）として示した。そして、ポリフェノール含量は、カテキン水溶液を標準溶液として検量線を作成し、フェノール試薬で反応させて波長７６５nmの吸光度を測定するフォリン−チオカルト法により測定し、カテキン換算の値として示したものである。
【００６３】
甘蔗由来のエキスは、液状でも粉末状でもよい。液状の甘蔗由来のエキスとしては、後述する製造例１の甘蔗由来のエキスを挙げることができる。一方、粉末状の甘蔗由来のエキスは、上記液状物を用いて、スプレードライ法、凍結乾燥法、流動層造粒法、または賦形剤を用いた粉末化法等により製造することができる。なお、甘蔗由来のエキスは固形分２０％以上に濃縮することが、腐敗防止の観点から好ましく、液状の場合は特に冷蔵保存することが好ましい。
【００６４】
（甘蔗由来のエキスの放射線障害抑制効果）
甘蔗由来のエキスの放射線障害防止物質としての有用性を明らかにするために、Ｘ線の全身照射により誘発したニワトリの放射線障害病態モデルの作出を試みた。次に、甘蔗由来のエキスを投与することにより、Ｘ線誘発放射線障害ニワトリの小腸粘膜構造の形態学的変化の推移および免疫応答能の推移の面から検索し、その小腸粘膜病変及び免疫抑制に対する甘蔗由来のエキスの病態軽減・改善効果を評価した。その結果、甘蔗由来のエキスは、Ｘ線の全身照射により誘発する放射線障害または免疫抑制の病態を軽減・改善する効果を有することが判明した。従って、本解析モデルは未だ明らかにされていない放射線障害防止物質や免疫抑制改善剤のスクリーニング又は開発に有用であり、また日常の食生活に常用される天然素材の甘蔗由来のエキスの経口投与により放射線障害及び免疫抑制が軽減・改善するとの知見は安全性の高い畜産物の生産及び公衆衛生の向上に寄与するばかりでなく、イヌ又はネコ等のコンパニオン・アニマルへの医療、またはヒトの医療分野で強く要請されている無痛療法への応用の可能性を示唆するものと考えられる。
【００６５】
甘蔗由来のエキスの放射線障害抑制効果は、後述の実施例に示すように、具体的には以下の３つの実験系で評価された。
まず、予備試験として、種々の線量のＸ線を全身照射した3週齢の近交系ニワトリ（遺伝子型、H.B15）を30日間観察し、50％致死線量（LD50）を算出した。
（1）高い線量（1300R及び1700R）のＸ線をニワトリに全身照射する前後に甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間そ嚢内に投与した。その後、ニワトリの生存率及び生存日数の面から甘蔗由来のエキスの効果を評価した。
（2）LD50の920Rの線量を照射する前に、甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間そ嚢内に投与したニワトリの空腸病変を、組織病理学的に検討し、甘蔗由来のエキス投与が体重及び消化管粘膜の病変の軽減・改善に及ぼす効果を検索した。
（3）種々の線量（600〜1800R）のＸ線を全身照射する前後に、甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間そ嚢内に投与したニワトリにおける抗体産生及び遅延型過敏反応の推移を解析することにより、甘蔗由来のエキス投与が免疫機能の軽減・改善に及ぼす効果を評価した。
【００６６】
実施例の結果は、以下のように要約される。まず、3週齢ニワトリ（遺伝子型、H.B15）におけるＸ線の全身照射によるLD50は、920Rであった。（１）920R以上の高線量のＸ線を照射されたニワトリにおいては、体重の減少、消化管における粘膜の縮小および固有層内出血、クリプト数の低下及び免疫応答の低下が誘発された。しかし、Ｘ線の全身照射前後に甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間そ嚢内に投与することにより、Ｘ線照射に併発する上記の消化管の病態が軽減・改善された。（２）600Rの低線量のＸ線を照射されたニワトリにおいては、体重の減少及び消化管病変は認められなかった。しかし、免疫応答の低下は誘発された。この線量の全身照射前後に甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間そ嚢内に投与することにより、Ｘ線照射に併発する上記の免疫抑制が軽減・改善された。
【００６７】
上記のように、放射線の全身照射による障害は、被爆線量及び照射条件により異なっていた。920R以上の高線量のＸ線を一度に全身照射されたニワトリにおいては、照射条件により斃死率の値は異なるが、７日間内斃死率が低線量照射されたニワトリに比べて高かった。これらのニワトリでは免疫機能の低下に加えて、体重の減少及び消化管粘膜病変も認められた。Ｘ線（400〜600R/羽/日）を３日間、連日分割照射したニワトリにおいては、体重の減少及び／又は免疫機能の低下は認められたが、斃死例は観察されなかった。低線量のＸ線600Rを全身照射されたニワトリにおいては、体重の減少も認められず、免疫抑制のみが観察された。従って、920R以上の高線量のＸ線を照射されたニワトリにおける斃死は、消化管障害及び／又は免疫機能の低下などに起因するものと考えられる。Ｘ線の全身照射前後に甘蔗由来のエキスをそ嚢内に投与されたニワトリにおいては、生存率の上昇がみられた。この甘蔗由来のエキス投与による生存率及び生存時間の増加は、放射線の全身照射に併発する消化管粘膜病変または免疫抑制等の病態の軽減・改善との関連がみられた。
【００６８】
高線量の放射線照射による消化管粘膜の縮小または固有層クリプトルーメンの拡張等の病変は、放射線に高感受性の分裂旺盛な上皮細胞、またはgoblet (chalice) 細胞等の前駆細胞の障害（壊死またはアポトーシス）により誘発されることが報告されている。これらの前駆細胞の分化・成熟の障害に起因するこうした消化管病変、特にクリプト数の低下又はルーメンの拡張等はペプシン等の消化酵素等の外分泌機能障害を誘発するとともに、腸管バリアーの損傷に伴い腸内に内在する細菌叢の不均一化又は細菌の体内侵入により斃死を誘発する。放射線の全身照射前後に甘蔗由来のエキスをそ嚢内に投与されたニワトリでは、生存率及び生存時間の増加、消化管粘膜の縮小、並びに固有層クリプト数の改善がみられた。このことから、その作用機序は不明であるが、甘蔗由来のエキスは放射線照射に併発する消化管粘膜障害を保護する作用を有するものと考えられる。
【００６９】
低線量のＸ線600Rを全身照射されたニワトリにおける免疫抑制も、全身照射前後の甘蔗由来のエキスの投与により、免疫機能の軽減・改善がみられた。このことから、甘蔗由来のエキスは、放射線照射に併発する免疫機能障害を軽減する作用を有するものと考えられる。甘蔗由来のエキスがシクロホスファミド等の免疫抑制剤で障害されたリンパ組織の再構築修復作用及び免疫増強活性等の作用をもつことを考慮すると、この放射線障害としての免疫抑制に対する改善効果は甘蔗由来のエキスの多彩な生物学的作用によるものと考えられる。一般に、放射線照射も造血・免疫系の細胞分裂の旺盛な細胞を障害するが、免疫抑制剤と異なり、免疫系細胞の非選択的障害による免疫抑制を誘発することが知られている。この放射線障害としての免疫抑制に対する甘蔗由来のエキスの改善効果に関する作用機序は不明であり、今後の検討課題であるが、その効果は抗体産生および細胞性免疫の応答の低下等の免疫抑制全般に対してみられた。
【００７０】
このように高線量の放射線の全身照射で誘発した放射線障害としての消化管障害または免疫抑制の病態が甘蔗由来のエキスの経口投与により軽減した成績は、消化管及び造血・免疫系の病態解析モデルを提供するとともに、薬物の有効性及びスクリーニング等に関する研究に重要な知見を提供するものと考えられる。また、外科手術後の術後管理、ガンの化学、及び放射線療法又は移植療法等に随伴する免疫抑制等未だ確立していない副作用軽減療法を開発する上でも重要な知見を提供するものと考えられる。しかも放射線障害としての消化管障害や免疫抑制の病態が甘蔗由来のエキスの経口投与により軽減したことから、昨今、開発要請の高い無痛療法にも寄与する可能性が示唆される。また、家畜生産の分野においては、感染又はストレス等に起因する非特異的免疫抑制は産業動物の生産性阻害の大きな要因であり、天然素材の甘蔗由来のエキスの実用化は「食」の安全性の確保及び低コスト生産技術の向上に寄与するものと考えられる。さらに、砂糖は古来、日常の食生活に供され、その抽出物である甘蔗由来のエキスは免疫増強機能を有することから、生活習慣病及び公衆衛生の向上に寄与するものと期待される。
【００７１】
（放射線抑制剤の形態）
本発明の放射線障害抑制剤は、上述した甘蔗由来のエキスを有効成分として含む。放射線障害抑制剤の全重量を基準とした甘蔗由来のエキスの重量の比率は、０．５〜１００重量％であることが好ましく、１０〜１００重量％であることがより好ましい。
【００７２】
本発明の放射線障害抑制剤は、甘蔗由来のエキス以外に賦形剤などを含んでもよい。賦形剤として、動物用の場合、コーンスターチ、及び小麦デンプン等の各種デンプン、デキストリン、各種グルテン、小麦粉、ふすま、各種米糠、大豆かす、及び黄粉などの大豆類、グルコース又は乳糖などの糖類、植物・動物油等の油脂類、魚粉類、酵母類、ケイ素化合物類、各種リン酸塩、ケイソウ土又はベントナイトなどの鉱物類、飼料及び飼料添加物の製剤を製造する上で使用できる賦形剤が挙げられる。また、ヒト用の場合、乳糖、デンプン及びマルトース等の糖類、その他ヒト用の製剤を製造する上で使用できる賦形剤が挙げられる。これらのうち、コーンスターチ、デキストリン及び脱脂米糠は、製剤用担体として用いることができ、これらと甘蔗由来のエキスを混合することで、放射線障害抑制剤を、例えば、粉末状、顆粒状、錠剤状の固形製剤とすることができる。
【００７３】
（放射線障害抑制剤の機能及び放射線障害抑制方法）
本発明の放射線障害抑制剤は、ヒトまたは動物に投与（例えば、経口投与）することにより、放射線障害抑制効果を示し、放射線障害を改善する。また、放射線治療を受ける場合など、あらかじめ放射線被曝することが明らかな場合には、被曝の前、被曝と同時に、あるいは被曝の直後に本発明の放射線障害抑制剤を投与することにより、放射線被曝に起因する障害を抑制することができる。
【００７４】
放射線障害抑制剤の投与量は、甘蔗由来のエキスの精製度、形態、対象とする動物の種類、健康状態、成長の度合い等により適宜決定し得る。特に投与の形態、例えば集中投与又は長期投与のいずれかであるかは、投与量を決定する上で重要な要因である。例えば、放射線障害抑制剤として、集中投与では、下記の製造例１に記載の甘蔗由来のエキスを、単糖類および少糖類を除く固形分として体重１ｋｇ当たり１日に50〜3,000ｍｇ摂取させることが好ましく、特に好ましくは、100〜2,000ｍｇを１〜20日間摂取させる。また、同製造例１に記載の甘蔗由来のエキスを日常的に長期投与する場合、単糖類および少糖類を除く固形分として体重１ｋｇ当たり１日に1〜100ｍｇ摂取させることが好ましく、特に好ましくは、1〜50ｍｇを数週間から数ヶ月間摂取させる。
【００７５】
（放射線障害抑制剤を含む食品及び飼料）
本発明は、上述した放射線障害抑制剤を含む食品ならびに飼料をまた提供する。食品または飼料の形状は、固形または液体のいずれであってもよい。
【００７６】
「食品」としては、菓子類、清涼飲料、機能性調味料、健康食品等が挙げられる。
【００７７】
「飼料」としては、ドッグフード、キャットフード等のコンパニオン・アニマル用飼料、家畜用飼料、養殖魚介類用飼料等が挙げられる。「飼料」には、動物が栄養目的で経口的に摂取するもの全てが含まれる。具体的には、養分含量の面から分類すると、粗飼料、濃厚飼料、無機物飼料、特殊飼料の全てを包含し、また公的規格の面から分類すると、配合飼料、混合飼料、単体飼料の全てを包含する。また、給餌方法の面から分類すると、直接給餌する飼料、他の飼料と混合して給餌する飼料、または飲料水に添加し栄養分を補給するための飼料の全てを包含する。
【００７８】
食品または飼料に含まれる放射線障害抑制剤の重量は、食品又は飼料の種類及び摂取方法に依存する。しかし、放射線障害抑制効果を有効に発揮させる観点から、本発明の食品又は飼料は、単糖類および少糖類を除く固形分として0.001重量％以上となるような量の甘蔗由来のエキスを含むことが好ましい。または、集中的に摂取する場合、本発明の食品又は飼料は、単糖類および少糖類を除く固形分として食品又は飼料の１日摂取量にして好ましくは50〜3,000ｍｇ／ｋｇ（体重）、より好ましくは100〜2,000ｍｇ／ｋｇ（体重）の甘蔗由来のエキスを含む。日常的に長期摂取する場合、本発明の食品又は飼料は、単糖類および少糖類を除く固形分として食品又は飼料の１日摂取量にして好ましくは1〜50ｍｇ／ｋｇ（体重）の甘蔗由来のエキスを含む。
以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に解説する。
【００７９】
［実施例］
以下の実施例で使用する甘蔗由来のエキスは、特に記載がない場合、下記の製造例１により調製されたエキスである。また、甘蔗由来のエキスは、図または表中において、SCE（Sugar Cane Extractの略）と表現することがある。甘蔗由来のエキスの投与量に関する記載、例えば「500 mg/kg/日」または「500 mg/kg体重/日」は、１日に体重1 kg当り500 mgを投与したこと意味する。また、Ｘ線の全身照射は、日立メデイコ社製のＸ線照射装置（MBR-1520R）を使用した。Ｘ線量（Ｘと略記）は、レントゲン（R）単位で表示した。例えば「600R」は、ニワトリに対して600Rの線量のＸ線が各実施例に記載された所定の条件で照射されたという意味である。
【００８０】
［製造例１］
原糖工場において、陽イオン交換樹脂を充填した分離塔を用いた擬似移動床式連続分離法を使用し、イオン交換カラムクロマト分離を行った。原料として、結晶缶にて２回スクロース結晶を回収し、遠心分離により結晶を除いた振蜜である２番蜜（ブリックス（Ｂｘ．）は約８５である）を使用した。
【００８１】
２番蜜をブリックス約５０に希釈した。この希釈した２番蜜に、消石灰および炭酸ソーダを添加して不純物を凝集させ、引き続きケイソウ土ろ過を行った。得られたろ液の分析値は、ブリックス４７．３、糖度（Ｐｏｌ．）２３．６、純糖率（Ｐｕｒｉｔｙ）４９．９、還元糖分２．５％であった。このろ液を原料として使用し、擬似移動床式連続分離法によるイオン交換クロマトグラフィーを行った。
【００８２】
なお、原料の調製からイオン交換カラムクロマト分離までの工程は連続的に行われるため、各工程の液の固形分濃度及び組成は時間とともに若干変動する。従って、以下の濃度及び組成は定常運転における測定値を示した。
【００８３】
陽イオン交換樹脂としてＵＢＫ５３０（三菱化学株式会社）を用いた。該樹脂を充填した分離塔は８分割されており、１塔当たりの樹脂量は６．５ｍ3である。原料液と溶離液（水）の供給、およびスクロース画分と非スクロース画分の抜き出し位置を一定時間毎に切り替えることにより、連続的に供給、抜き出しを行った。定常時の規定値は、供給流量３ｍ3／時間、溶離水流量１３．５ｍ3／時間、非スクロース画分抜き出し流量１２．１３ｍ3／時間、スクロース画分抜き出し流量４．３７ｍ3／時間、切り替え時間２６７秒であった。このクロマトグラフィー処理により、スクロース画分と非スクロース画分が分離された。これらはそれぞれ、後述する単塔式回分分離法（製造例２）における図１の画分１０〜１７、および画分１〜９と画分１８〜３０とを合わせたものに相当する。
【００８４】
スクロース画分は、スクロースが固形分当たり約８７％（ＨＰＬＣ分析による）であり、またブリックスは約３５である。この画分は清浄汁に混合して製糖本工程に戻され、再びスクロースが回収される。
【００８５】
得られた非スクロース画分の分析値は、スクロースが固形分当たり約０．３％（ＨＰＬＣ分析による）、ブリックスは約８であった。該非スクロース画分を濃縮缶により濃縮し、ブリックス４０．０、糖度（Ｐｏｌ．）２．３、純糖率（Ｐｕｒｉｔｙ）５．８、還元糖分５．４％とした。この非スクロース画分を、後の試験に用いるため、１晩凍結乾燥処理に付した（以下、「製造例１の甘蔗由来のエキス」という場合がある）。
【００８６】
得られた凍結乾燥粉末０．２５ｇは、０．５ｍＭリン酸バッファ（ｐＨ７．５）を用いて１００ｍｌになるように希釈し、波長４２０ｎｍでの吸光度を測定した。その吸光度は、１．１１であった。
【００８７】
［製造例２］
原糖工場で得られた２番蜜処理液を原料として、単塔式回分分離法によるイオン交換カラムクロマトグラフィー処理を行った。原料は、２番蜜処理液を使用した。
【００８８】
前記２番蜜処理液は、２番蜜を希釈後、引き続き炭酸ソーダによる清浄処理、ケイソウ土ろ過を行ったものである。この原料の分析値は、ブリックス４７．４、糖度（Ｐｏｌ．）２３．２、純糖率（Ｐｕｒｉｔｙ）４８．９、還元糖分３．２％であった。
【００８９】
単塔式回分分離法として、ＦＰＬＣシステム（ファルマシア株式会社製）を用い、分画分離を行った。
【００９０】
ゲル型の強酸性陽イオン交換樹脂ＵＫＢ５３０、ナトリウムイオン型（商標、三菱化学株式会社）５００ｍｌをカラムに充填した。カラムは内径２６ｍｍ、高さ１，０００ｍｍで、フローアダプター付きである。通液は、溶離液として脱気した蒸留水を用い、流速ＳＶ＝０．５ｈｒ-1（４．１７ｍｌ／分）、温度６０℃で行った。
【００９１】
約２５ｍｌの原料をカラムに供与した。分画条件は、原料供与３０分後から溶出液の回収を開始し、試験管１本当たり３．６分間（約１５ｍｌ／本）回収し、全部で３０本回収した。
【００９２】
得られた３０画分についての波長４２０ｎｍの吸光度、電気伝導度、および糖濃度を測定した。その結果を図１に示す。吸光度測定のために、０．５ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ７．５）２ｍｌに各画分０．１ｍｌを加えて試料とした。電気伝導度測定のために、各画分を蒸留水で０．５％に希釈して試料とした。糖濃度は、ＨＰＬＣにより測定された。
【００９３】
各ピークの分析を行うため、波長４２０ｎｍの吸光ピーク部分を４つに、またスクロースのピーク部分を３つに、スクロースのピーク以降を１つにまとめた。すなわち、画分３および４を合わせてサンプル１に、画分５および６を合わせてサンプル２に、画分７および８を合わせてサンプル３に、画分９および１０を合わせてサンプル４に、画分１１および１２を合わせてサンプル５に、画分１３および１４を合わせてサンプル６に、画分１５および１６を合わせてサンプル７に、画分１７〜３０を合わせてサンプル８とした（図１参照）。画分１および２では溶出される成分が殆どないため、廃棄した。サンプル１〜８を１晩凍結乾燥して、粉末とした。
【００９４】
吸光度は、得られた凍結乾燥粉末０．２５ｇを０．５ｍＭリン酸バッファー（pH７．５）に溶解して１００ｍｌとし、波長４２０ｎｍで測定した。また、凍結乾燥固形分の分配率、電気伝導度灰分（塩分）、スクロース(Suc)、グルコース(Glu)およびフラクトース(Fru)含量、ポリフェノール量を測定した。
【００９５】
伝導度灰分は、電気伝導度と既知の硫酸灰分との関係の検量線から、係数を求め算出した。また、スクロース、グルコースおよびフラクトース含量は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析により求めたものを、それぞれ各サンプルの固形分重量に対する比（％）として示した。ポリフェノール含量は、カテキン水溶液を標準溶液として検量線を引き、フェノール試薬で反応させて波長７６５ｎｍの吸光度を測定するフォリン−チオカルト法により測定し、カテキン換算の値として示した。凍結乾燥固形分の分配比率は、全サンプルの固形分重量の合計に対する各サンプルの固形分重量の比（％）である。
【００９６】
各サンプルの分析結果を表１に示す。
【００９７】
【表１】
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【００９８】
サンプル８の吸光度は0.86であり、比較的高い吸光度を示した。しかし、サンプル８は固形分の回収率が低いため、この画分だけを本発明の効果を有する画分として回収することは効率が悪い。
【００９９】
糖分含量から、サンプル１〜３および８が非スクロース分画分に相当し、サンプル４〜７がスクロース分画分に相当することがわかる。
［予備試験］
【０１００】
「種々の線量のＸ線を全身照射したニワトリの生存率」
３週齢の近交系ニワトリ（遺伝子型、H.B15）60羽を6群（10羽／１群）に分け、Ｘ線照射装置（MBR-1520R、Hitachi Medical Corporation、Tokyo）を用いて、６種類のＸ線量（700〜1200R、100R刻み）を各群のニワトリに、0.5mm Alと0.2mm Cuのフィルター、150kVと15mA、100R／分、及びニワトリと照射源との距離52cmの条件で照射した。その後、ニワトリを30日間観察し、その生存率の平均を算出した。その結果を図２に示す。
【０１０１】
図２にみられるように、800R以下の線量を照射したニワトリはすべて生存し、1100R以上の線量を照射したニワトリはすべて死亡した。ニワトリの生存率は、線量依存的に低下する傾向がみられた。LD50（生存率50％）を誘発する線量は、グラフから推定して920Rであった。
【実施例１】
【０１０２】
「甘蔗由来のエキスの経口投与（そ嚢内投与）が、X線照射されたニワトリの生存率又は生存日数に及ぼす影響」
甘蔗由来のエキスの効果を、生存率、生存時間の推移及び放射線照射障害による死亡の防御率の面から検討した。
【０１０３】
1300R（0.3mm Alと0.5mm Cuのフィルター、125kVと10mA、50R／分、及びニワトリと照射源との距離52cm）の照射条件下で、３週齢の近交系ニワトリ（遺伝子型、H.B15）にＸ線を全身照射した。1300Rの線量の全身照射の前または後に、甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間、そ嚢内にそれぞれ投与した（SCE+1300R群、1300R+SCE群とそれぞれ略記）。対照群として、各線量の放射線照射後に甘蔗由来のエキスの代わりに、同量の生理食塩水を3日間、そ嚢内に投与したニワトリを1300R群（対照群）として実験に供した。1300Rの照射試験では、１群７羽のニワトリで10日間観察を行った。その結果を図３に示す。
【０１０４】
図３にみられるように、1300R群（対照群）では、照射後4日以内の死亡率が約60%であり、その平均生存時間は130.3時間であった。しかし、SCE+1300R群及び1300R+SCE群の死亡率は、いずれも約30%に低下した。さらに、それらの平均生存時間は共に185.1時間と生存時間の延長が認められた。
【０１０５】
線量1300Rを1700Rに変更し、1700R（0.3mm Alと0.5mm Cuのフィルター、125kVと10mA、100R／分、及びニワトリと照射源との距離52cm）の線量の全身照射の前または後に、甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間、そ嚢内にそれぞれ投与した（SCE+1700R群、1700R+SCE群とそれぞれ略記）。対照群として、各線量の放射線照射後に甘蔗由来のエキスの代わりに、同量の生理食塩水を3日間、そ嚢内に投与したニワトリを1700R群（対照群）として実験に供した。1700Rの照射試験では、１群10羽で72時間の観察を行った。その結果を図４に示す。
【０１０６】
図４にみられるように、1700R群（対照群）では、照射後24時間内にすべてのニワトリが死亡し、その平均生存時間は14.4時間であった。しかし、SCE+1700R群及び1700R+SCE群の平均生存時間は、それぞれ38.4及び19.2時間であった。従って、高い照射線量では、甘蔗由来のエキスを照射前に投与した方が、生存率がさらに高くなり、放射線障害を防御する効果が高くなった。
【０１０７】
図３、図４に示された結果から明らかなように、甘蔗由来のエキスを照射の前又は後にニワトリに投与することによって、生存時間の延長及び生存率の上昇が認められた。
【実施例２】
【０１０８】
「甘蔗由来のエキスの経口投与（そ嚢内投与）が、Ｘ線全身照射ニワトリの小腸粘膜病変の軽減・改善に及ぼす影響」
【０１０９】
ニワトリの空腸病変を病理組織学的に検討し、甘蔗由来のエキス投与が消化管粘膜の病変の軽減・改善に及ぼす効果を検索した。3週齢の近交系ニワトリ（遺伝子型、H.B15）を以下の４群に分けた。すなわち、LD50の920Rの線量のＸ線を予備試験と同様の照射条件下で全身照射した群（１群16羽、920R群と略記）、照射する前に甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間、そ嚢内に投与した群（１群16羽、SCE+920R群と略記）、甘蔗由来のエキスを3日間、そ嚢内に投与し照射しなかった群（１群10羽、SCE群）、および無処置ニワトリの対照群（１群10羽、対照群）である。空腸について、常法に準じてホルマリン固定ヘマトキシリン−エオジン染色及びコンカナバリンA-FITC染色標本を各群についてそれぞれ作製し、病理組織学的及び免疫組織化学的に検索した。
【０１１０】
その結果、920R群では10日間の観察期間に半数のニワトリが死亡した。しかし、SCE+920R群の生存率は、68.8%（11/16羽）であった。甘蔗由来のエキスによる防御効率（SCE+920R群の生存率から920R群の生存率を引いた値）は、18.8%であった。従って、甘蔗由来のエキスは、Ｘ線による斃死を防御する活性を有することが判明した。
【０１１１】
次に、照射後６日間の空腸を病理組織学的に検索した。その結果を以下の表に示す。
【０１１２】
【表２】
2005075750.tif 000004
【０１１３】
表２にみられるように、920R群の切片当りのクリプト（陰窩）数は対照群に比して有意に低下し、生存したニワトリにおけるその数は時間経過に伴い回復し、6日目にはほぼ対照群の範囲を示した。これに対して、SCE+920R群の照射直後の空腸クリプト数は、対照群に比して有意に低かったが920R群と比べて有意に高く、かつSCE+920R群の照射直後のクリプト数の回復は、920R群に比して早かった。
【０１１４】
図５は、Ｘ線照射６時間後の空腸の上皮組織の状態を示す、顕微鏡写真である。Ａ１、Ｂ１、およびＣ１は倍率１００倍、Ａ２、Ｂ２、およびＣ２は倍率４００倍の写真である。Ａ１およびＡ２は、対照群の空腸上皮組織であり、正常な組織像を示している。Ｂ１およびＢ２は、920R群の空腸上皮組織であり、Ｂ１において粘膜上皮の縮小が認められ、倍率の高いＢ２においては矢印で示す剥離した細胞塊がクリプト中に認められた。また、矢じり部分には、出血像が認められた。一方、Ｃ１（SCE+920R群）では、Ｂ１（920R群）ほど粘膜上皮が縮小しておらず、Ｃ２（SCE+920R群）においてもＢ２（920R群）のような出血は確認されなかった。図６もＸ線照射６時間後の空腸上皮組織の状態を示す顕微鏡写真であり、特に粘膜固有層内の出血に注目した病変を示している。Ｄ１およびＥ１は倍率１００倍の写真であり、Ｄ２およびＥ２は倍率４００倍の写真である。Ｄ１およびＤ２（920R群）では、粘膜固有層内の出血部分が多く認められる。Ｅ１およびＥ２（SCE+920R群）では出血像が認められるが、その大きさは920R群よりも小さく、また数も少なかった。したがって、これらの組織病理学的検査所見から、甘蔗由来のエキスは、高線量のＸ線照射による小腸病変を軽減する効果を有することが示唆される。
【実施例３】
【０１１５】
「甘蔗由来のエキスの経口投与（そ嚢内投与）が、種々の線量のＸ線を全身照射したニワトリの免疫応答に及ぼす影響」
（実施例３−１）
抗体産生及び遅延型過敏反応の推移を解析することにより、甘蔗由来のエキス投与が免疫機能の軽減・改善に及ぼす効果を評価した。表３に示すように、３週齢の近交系ニワトリ（遺伝子型、H.B15）を、1群7羽の計11群に分けた。すなわち、対照群、SCE群、600Ｒ群、SCE+600R群、600R + SCE群、1200R群、SCE+1200R群、1500R群、SCE+1500R群、1800R群、SCE+1800R群である。
【０１１６】
11群のうち3群は、600RのＸ線を、0.5mm Alと0.2mm Cuのフィルター、150kVと15mA、50R／分、及びニワトリと照射源との距離52cmの条件下で１回全身照射したニワトリ（600Ｒ群と略記）、照射する前又は後に甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を３日間、そ嚢内に投与したニワトリ（SCE+600Ｒ群、600Ｒ+SCE群とそれぞれ略記）とした。
【０１１７】
別の3群に、種々の線量のＸ線（400 R、500 R、および600R /羽/日）を３日間連日、0.5mm Alと0.2mm Cuのフィルター、125kVと10mA、50R／分、及びニワトリと照射源との距離45cmの条件下で全身照射を行った（1200R群、1500R群、及び1800R群とそれぞれ略記）。同様にさらに別の３群に、種々の線量のＸ線（400R、500 R、および600R /羽/日）を３日間連日、同様の照射条件下で全身照射し、照射する前に甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間、そ嚢内に投与した（SCE+1200Ｒ群、SCE＋1500Ｒ群、及びSCE＋1800Ｒ群とそれぞれ略記）。
【０１１８】
さらに11群のうちの残りの2群には、Ｘ線を照射しなかった。そのうちの１群は、甘蔗由来のエキス（500 mg/kg体重/日）を3日間そ嚢内に投与し（SCE群と略記）、他の１群は、無処置ニワトリの対照群とした。
【０１１９】
各群のニワトリの4週齢時に、ヒツジ赤血球（SRBC; 5×108 細胞数）とブルセラ・アボルタス（Brucella abortus）（BA; 1×109 菌体数）の混合抗原（0.1 ml）を静脈内にそれぞれ接種した。抗原接種後7日目（５週齢時）に採取した血清中の両抗原に対する凝集力価を常法にてそれぞれ測定した（一次応答）。さらに、同じ個体で5週齢時に、上記混合抗原（0.1 ml）を静脈内にそれぞれ接種した。抗原接種後7日目（６週齢時）に採取した血清中の両抗原に対する凝集力価を常法にてそれぞれ測定した（二次応答）。一次応答及び二次応答の抗体価とは、血清の2倍段階希釈における50％凝集を示す最大希釈の逆数のLog2 であり、各値を表３−１及び表３−２にす。また、2-ME抵抗性抗体価とは、0.2 M  メルカプトエタノール(2-ME)で血清を処理した後、同様に2倍希釈凝集力価測定法で得られる力価であって、IgMが不活化され実質的にIgGの活性を示す力価であり、各値を表３−１及び表３−２に示す。さらに、抗体産生応答数の成績を、以下の表３−１、表３−２に示す。
【０１２０】
【表３−１】
2005075750.tif 000005
【０１２１】
【表３−２】
2005075750.tif 000006
【０１２２】
SCE群における両抗原に対する凝集素力価及び2-ME抵抗性抗体価は、対照群に比して、ともに高い傾向が認められた。Ｘ線の全身照射を受けた600R群、1200R群、1500R群及び1800R群の抗体価及び2-ME抵抗性抗体価は、対照群に比してともに低く、Ｘ線の照射量依存性に低下する傾向が認められた。また、Ｘ線の全身照射の前又は後に甘蔗由来のエキスを投与したニワトリの抗体応答（SCE+600R群、600R+SCE群、SCE+1200R群、SCE+1500R群、SCE+1800R群）を600R群、1200R群、1500R群及び1800R群の各群とそれぞれ比較したところ、エキスを投与した各群の抗体価は高い傾向を示した。
【０１２３】
従って、甘蔗由来のエキスはＸ線の全身照射によって誘発される抗体産生能の抑制を軽減・改善する作用を有することが示唆された。
【０１２４】
（実施例３−２）
ヒトγグロブリン（human γ globulin: HγG）に対する遅延型過敏応答は、抗原の攻撃接種後、24、48及び72時間のニワトリの肉垂の厚さをノギスでそれぞれ計測し、左右の差を算出することにより評価した。上記した対照群、SCE群、600R群、SCE+600R群及び600R+SCE群の5群のニワトリには、5週齢時にHγG （400 μg/ml ）と完全フロインドアジュバント（Freunds complete adjuvant）の懸濁液（1 ml）を胸部筋肉内接種により感作し、その2週後に0.1 mlのHγG（40 μg）を左側の肉垂の皮内に攻撃接種した。対照として、生理食塩水を右側の肉垂に同様に接種した。HγGに対する遅延型過敏反応に及ぼす影響を図７に示す。
【０１２５】
肉垂の腫脹は、Ｘ線の全身照射を受けた600R群では、対照群に比して有意に低かった。一方、甘蔗由来のエキスを投与したSCE+600R群及び600R+SCE群のいずれにおいても、肉垂の腫脹は、600R群よりも有意に高く、遅延型過敏反応の回復傾向が認められた。
【産業上の利用可能性】
【０１２６】
本発明の放射線障害抑制剤は、天然物であるにもかかわらず、放射線障害抑制効果が高く、しかも少量でその効果を発揮する。また、本発明の放射線障害抑制剤は、食品又は飼料として安全に摂取することができる。従って、本発明は、産業上の利用可能性を有する。
【図面の簡単な説明】
【０１２７】
【図１】イオン交換樹脂を充填したカラムを用いた単塔式回分分離法による２番蜜分画サンプルの分析値
【図２】種々のX線照射量がニワトリの生存率に及ぼす影響
【図３】甘蔗由来のエキスの経口投与がX線（1300R）照射ニワトリの生存率に及ぼす影響
【図４】甘蔗由来のエキスの経口投与がX線（1700R）照射ニワトリの生存率に及ぼす影響
【図５】X線照射６時間後の空腸の組織病理学的検索（HE染色）
【図６】X線照射６時間後の空腸の組織病理学的検索（HE染色）
【図７】甘蔗由来のエキスの経口投与またはX線照射がニワトリの遅延型過敏反応の及ぼす影響
【符号の説明】
【０１２８】
A1    対照群(100倍率)
A2    対照群(400倍率)
B1    920 R 群(100倍率)
B2    920 R 群(400倍率)
C1    SCE+920 R 群(100倍率)
C2    SCE +920 R 群(400倍率)
D1    920 R群群(100倍率)
D2    920 R群群(400倍率)
E1    SCE +920 R 群(100倍率)
E2    SCE +920 R 群(400倍率)
【図１】
2005075750.tif 000007
【図２】
2005075750.tif 000008
【図３】
2005075750.tif 000009
【図４】
2005075750.tif 000010
【図７】
2005075750.tif 000011
【図５】
2005075750.tif 000012
【図６】
2005075750.tif 000013