(57)【要約】      （修正有）【課題】毒性に欠ける一方で免疫刺激活性を示す、新規なリピドＡを提供する。【解決手段】  本発明は、(a)下式（Ｉ）：2005139188.tif 000006[式中、AG1が3-ヒドロキシデカノイル基を示し、AG2が3-ドデカノイルオキシデカノイル基を示し、ここで、Rが水素原子またはPO(OR')2基を示し、R'が水素原子、飽和もしくは不飽和で直鎖状もしくは分枝状のC1-C6アルキル基、又はフェニルもしくはベンジル基を示す]の化合物、及び（b）上記式（Ｉ）中のRがPO(OR)2基を示す場合には、式（Ｉ）の化合物の無機塩、または式（Ｉ）の化合物の第一級、第二級、もしくは第三級アミン塩、または式（Ｉ）の化合物のホスホエタノールアミン塩、から選択される化合物からなることを特徴とする、新規なリピドＡに関する。また、化粧品として許容される媒質中に、前記リピドＡを含む皮膚への局所適用に好適な組成物、並びにその美容のための使用に関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a)下式（Ｉ）：
【化１】
2005139188.tif 000005
[式中、
AG1が3-ヒドロキシデカノイル基を示し、
AG2が3-ドデカノイルオキシデカノイル基を示し、
ここで、Rが水素原子またはPO(OR')2基を示し、R'が水素原子、飽和もしくは不飽和で直鎖状もしくは分枝状のC1-C6アルキル基、又はフェニルもしくはベンジル基を示す]
の化合物、及び
（b）上記式（Ｉ）中のRがPO(OR)2基を示す場合には、式（Ｉ）の化合物の無機塩、または式（Ｉ）の化合物の第一級、第二級、もしくは第三級アミン塩、または式（Ｉ）の化合物のホスホエタノールアミン塩、
（但し、幾つかのR基、R'基が存在する場合、これらは同一または互いに相違するものであることが理解される）
から選択される化合物からなることを特徴とする、リピドＡ。
【請求項２】
前記アミン塩が、モノ-、ジ-、及びトリ-エタノールアミン塩、モノ-、ジ-、及びトリ-イソプロパノールアミン塩、2-アミノ-2-メチル-1-プロパノール、2-アミノ-2-メチル-1,3-プロパンジオール、及びトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンから選択されることを特徴とする、請求項１に記載のリピドＡ。
【請求項３】
前記無機塩が、ナトリウム、マグネシウム、カリウム、亜鉛、またはカルシウムの塩であることを特徴とする、請求項１に記載のリピドＡ。
【請求項４】
化粧品として許容される媒質中に、請求項１乃至３のいずれか一項に記載されるリピドＡを含む皮膚への局所適用に好適な組成物。
【請求項５】
組成物全重量に対して、請求項１に記載のリピドＡを０．０１乃至０．１重量％含むことを特徴とする、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
少なくとも１つの有機または無機のUV-スクリーン剤を更に含むことを特徴とする、請求項４または５に記載の組成物。
【請求項７】
老化の皮膚徴候の予防もしくは処置、及び／またはUV照射の有害な作用からの皮膚の保護のための、請求項１に記載されるリピドＡの、または請求項４乃至６のいずれか一項に記載される組成物の、美容のための使用。
【請求項８】
請求項４乃至６のいずれか一項に記載の組成物を、皮膚に局所適用する工程を含む、皮膚の美容処理方法。
【請求項９】
老化の皮膚徴候の予防もしくは処置、及び／またはUV照射の有害な作用からの皮膚の保護を企図することを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
皮膚の免疫防御の強化を企図する皮膚科用組成物の調製のための、請求項１乃至３のいずれか一項に記載のリピドＡの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、リピドＡタイプの新規な化合物、及びこれを含む組成物、及びその化粧用及び皮膚科用の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は身体の最も重要な器官を構成し、免疫防御システムの主要な有効構成要素と認識されている。３タイプの表皮細胞がこのシステムに加わっており、それらはケラチノサイト、メラノサイト、及びランゲルハンス細胞である。これらの細胞は、皮膚中にのみ見出されるものであるが、免疫反応において、とりわけ抗原発現において、鍵となる役割を果たす。
【０００３】
健康な皮膚は、自由な手段を用いてそれ自身を外的攻撃から防御することができる。しかしながら、免疫システム、特に皮膚の免疫システムは、経時的老化の間に弱まることが知られている。
【０００４】
更に、皮膚は、環境による、及び所定の化学生成物による、絶え間ない攻撃に曝されている。特に、ランゲルハンス細胞は紫外線にとって好ましい標的である。これらの攻撃は免疫防御抑制作用をもたらす。
【０００５】
これは特に、結果として、その蓄積が、それ自体がフリーラジカルを生成し得、且つ真皮に（特にコラーゲンの劣化を促進することにより）及び表皮に（特に上皮の再生を遅延させることにより）有害に作用し得るサイトカインを生成する、「サンバーン細胞」の十分な破壊を低減させる。これらの作用は、皮膚老化の促進に寄与する。
【０００６】
この場合の免疫刺激作用は、免疫機能、とりわけ表皮の免疫機能を、皮膚の自然防御を強化することによって再構築し、よって特に老化の皮膚徴候に対抗することまたはこれを予防することを可能にする。
【０００７】
免疫刺激特性に恵まれた細菌抽出物が、従来技術において既知である。さらに、これらの細菌の外膜中に固定されたリポポリサッカライド（以下LPSと表示）が、これらの特性の部分的な原因であることが既知である。
【０００８】
LPSは、３つの区画に分かれた層状構造を有し、8000乃至54000ダルトンの分子量を有する複合化学分子であり、これらは細胞の外側から内側へ向かって、
・O抗原（ポリマーであり、所定の株に特異的であり、それぞれ連続する５乃至７の糖、一般的にはアミノ糖を含む１乃至１０のユニットからなる）、
・コア（一つの細菌属から別の細菌属に高度に転化し、且つグラム陰性細菌に特異的な分子、KDO（2-ケト-3-デオキシオクトン酸）によってリピドＡに結合した多糖である）、
・細菌の外膜中にLPSを固定するリピドＡ、
である。
【０００９】
リピドＡは、３位と３’位とに位置するそのヒドロキシル基と２位と２’位とに位置するそのアミノ基との縮合を経て、多少によらず不飽和であり且つ水酸化され、それ自体がその水酸基上で別の脂肪酸とエステル化されていても良い脂肪酸を担持するグルコサミンの二量体である。リン脂質性である細胞の外膜中におけるリピドＡの固定を可能にするのはこれらの脂肪酸である。更に、これらの（C12-C18としての）性質及びグルコサミン上のその位置が、リピドＡの、よってLPSの生物学的活性を決定する。
【００１０】
しかしながら、生物学的に活性なLPSの探求は、これら分子の内毒性の問題によって手詰まりとなっている。実際、ほとんどのLPSが、いったん細胞膜から開放されるとCD14レセプターに結合することができ、またこれらを活性化することができ、然るにとりわけ敗血症性ショックを起こしうるTNFの放出を引き起こしうるリピドＡを有する。
【特許文献１】米国特許6482807
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
従って、どのような構造因子がこれらLPSのためのCD14レセプターのアゴニスト又はアンタゴニスト特性に影響しうるのかを決定するために、研究が行われてきた。こうして、円筒形状であり、且つ／またはその脂肪酸がグルコサミン骨格上に対称に並んだLPSは、円錐形状であり、且つ／または非対称のLPSとは違って、むしろCD14のアンタゴニストであることが判明している。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
出願人が毒性を欠く一方で免疫刺激特性に恵まれた新規なリピドＡを発見したのは、このような状況においてである。このリピドＡは、米国特許6482807（図4a）に記載の通りNeisseria meningitidisのLPS中に存在するものと（炭素原子二つ以内では）非常に類似した構造を有するが、その特性は示さない。
【００１３】
本発明によるリピドＡは、Vitreoscilla filiformisの株から最初に単離された。
【００１４】
細菌株Vistreoscilla filiformisは、化粧品に導入されるバイオマスの製造のために出願人によって現在使用されている。このバイオマスの調製方法には、酸化無菌培地中で、無機塩及び糖の存在下で細菌を培養する工程；細菌を含む培地を除去し、その後遠心分離してバイオマスを得、これを瓶に入れた後殺菌する工程を含む。殺菌により生じる細胞の破裂は、本質的に細胞膜及び凝固したタンパク質を含み、更にLPSの重量の約70%を含むスラリーへの、並びに細胞質を含み、更にLPSの重量の約30%を含む上澄み液への、バイオマスのデカンテーションを引き起こす。全細菌は、（乾燥重量として）約10%のＬＰＳを含む。
【００１５】
Vistreoscilla filiformisの様々な抽出物は、免疫刺激特性及び無毒性に恵まれており、出願人によって、化粧用または製薬用の使用、特に老化の皮膚徴候の処理における使用が開示されている。
【００１６】
このように、欧州特許出願出願0765667は、バイオマスの遠心分離及び得られる上澄み液の透析によって得られる、リボソームが豊富な細菌フラクションを使用している。欧州特許出願0876813は、これらの細菌のための培地から得られる免疫刺激フラクションを更に開示している。最後に、国際特許出願94/02158は、免疫刺激剤としての、細菌包膜のまたは前記包膜から得られるフラクション、特にLPSのフラクションの使用を開示している。
【００１７】
しかしながら、上記従来技術におけるフラクションは、その構造が今日まで明らかにされたことのない遊離のリピドＡを、実際には検出不能な非常に少量含むのみであり、ほとんどのリピドＡは、それ自体がほとんどの従来技術の抽出物中に比較的少量で存在するLPSの形態で存在している。
【００１８】
さらにまた、従来技術の細菌フラクションの免疫刺激作用が、LPSの存在に関連していたかどうかは明確でなかった。実際、LPSは、別の免疫抗原、特に細胞質（上澄み液）中に存在する細胞膜又はリボソーム中に含まれるムレインと共に、少量存在するのみである。更に、これらのフラクションの回収に使用される熱処理（121℃にて４０分間）がLPSを変性させ、これを不活性にしたとも考え得る。特に、従来技術の細菌フラクションの免疫刺激作用が、これらの含むLPSによって、LPSが細胞膜から分離され、然るにCD14レセプターに対して潜在的に活性となった後に、毒性の危険性無く保持されうることは予期され得なかった。
【００１９】
従って、出願人が、Vistreoscilla filiformisのLPS中に存在するリピドＡを同定し、これが毒性に欠ける一方で免疫刺激活性を示すことを明らかにしたことは、驚くべきである。この発見によって、出願人は、製薬分野とは異なり、完全な耐性を示す活性化合物が求められる化粧品分野におけるその使用を、予見することができた。
【００２０】
したがって、本発明の目的は、
(a)下式（Ｉ）：
【化１】
2005139188.tif 000002
[式中、
AG1が3-ヒドロキシデカノイル基を示し、
AG2が3-ドデカノイルオキシデカノイル基を示し、
ここで、Rが水素原子またはPO(OR')2基を示し、R'が水素原子、飽和もしくは不飽和で直鎖状もしくは分枝状のC1-C6アルキル基、又はフェニルもしくはベンジル基を示す]
の化合物、及び
（b）上記式（Ｉ）中のRがPO(OR)2基を示す場合には、式（Ｉ）の化合物の無機塩、または式（Ｉ）の化合物の第一級、第二級、もしくは第三級アミン塩、または式（Ｉ）の化合物のホスホエタノールアミン塩、
（但し、幾つかのR基、R'基が存在する場合、これらは同一または互いに相違するものであることが理解される）
から選択される化合物からなることを特徴とする、
新規なリピドＡである。
【００２１】
前記式（Ｉ）の化合物のアミン塩は、モノ-、ジ-、及びトリ-エタノールアミン塩、モノ-、ジ-、及びトリ-イソプロパノールアミン塩、2-アミノ-2-メチル-1-プロパノール、2-アミノ-2-メチル-1,3-プロパンジオール、及びトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンから選択してよい。
【００２２】
前記無機塩は、とりわけナトリウム、マグネシウム、カリウム、亜鉛、またはカルシウムの塩であってよい。
本発明の主題はまた、化粧品として許容される媒質中にこうしたリピドＡを含む皮膚への局所適用に好適な組成物である。
【００２３】
化粧品として許容されるとの表現は、本発明の目的のためには、組成物の使用者を躊躇させうるかゆみ、ひりひりする痛み、または赤斑を引き起こさず、且つ快適な外観、匂い、及び感触を有する、不活性媒質を意味するものと理解される。
【００２４】
本発明の主題はまた、以上に定義されるリピドＡ、または上述の組成物の、老化の皮膚徴候の予防もしくは処置、び／またはUV照射の有害な作用からの皮膚の保護のための、特に美容のための使用である。
【００２５】
その主題はまた、皮膚への上述の組成物の局所適用を含む、皮膚の美容処理方法である。この方法は、とりわけ老化の皮膚徴候の予防もしくは処置、及び／またはUV照射の有害な作用からの皮膚の保護を企図する。
【００２６】
その主題はまた、皮膚の免疫防御の強化を企図する皮膚科用組成物の調製のための、以上に定義されるリピドＡの使用である。
【００２７】
本発明によるリピドＡは、添付の図に示され、後の実施例１に詳細に記載される方法に従って、化学合成によって調製可能である。
【００２８】
変形として、これは非子実性（non-fruiting）の、非光合成糸状細菌の培地から得てもよい。
【００２９】
この変形方法においては、Beggiatoales目の細菌、例えばArch. Microbiol. (1984) 137, 139-144に記載された定義に従う、Beggiatoa albaの様々な株などのBeggiatoa属の培地を使用することができる。Vitreoscilla、Flexithrix、またはLeucothrix属の細菌の培地を使用することもまた可能である。これらの細菌は、水もしくは海の中、あるいは温泉の中に見出される。
【００３０】
使用可能な細菌の中では、特に以下のものを挙げることができる。
・Vitreoscilla beggiatoides (ATCC 43181)
・Vitreoscilla stercoraria (ATCC 15218)
・Vitreoscilla beggiatoides (ATCC 43181)
・Beggiatoa alba (ATCC 33555)
・Flexithrix dorothaea (ATCC 23163)
・Leucothrix mucor (ATCC 43181)。
【００３１】
これらの細菌は、国際特許出願94/02158に記載のように既知の方法に従って培養して良く、様々な方法で、例えば濾過または遠心分離によって分離及び単離することのできるバイオマスを得る。その後リポ多糖フラクションを、例えばいわゆるWestphal法(Westphal, O. and Jann, K. (1965), in R. L. Whistler(ed.) Methods in Carbohydrate Chemistry Vol. 5, Academic Press, New York, pp. 83-91)に従ってこのバイオマスから抽出する。この方法は、フェノール−水混合物を用いる抽出、これに続きフェノールを除去するための透析を含む。高濃度のLPSを含む細菌フラクションがこうして得られる。本発明によるリピドＡは、例えば、Morrison, D. C. and Leive, L. (1975) J. Biol. Chem. 250, 2911-2919またはTakayama, K. et al. (1981) Cancer Research 41, 2654-2657に記載された方法の一つに従って、このフラクションから得てもよい。
【００３２】
本発明による組成物は、所望の効果を得るために十分な量、好ましくは組成物全重量に対して0.01乃至0.1重量％の、この化合物を含む。
【００３３】
本発明による組成物は、局所適用に従来利用されているあらゆる製剤（galenic）形態、とりわけ水性ゲルまたは水性もしくは水−アルコール性溶液の形態で提供して良い。これはまた、脂肪相もしくは油性相の添加に際し、ローションもしくはセラムタイプの分散物の形態、乳剤タイプの液体もしくは半液体の濃度を有するエマルションであって、水性相中に脂肪相を分散させること（O/W）またはその逆（W/O）によって得られるものの形態、またはクリームもしくはゲルタイプの滑らかな半固体もしくは固体の濃度を有する懸濁物もしくはエマルションの形態、あるいは多相エマルション（W/O/WまたはO/W/O）の形態、ミクロエマルションの形態、イオン性及び／または非イオン性タイプの小胞分散物、またはワックス／水性相分散物の形態で提供されうる。
【００３４】
本発明の好ましい実施態様によれば、該組成物はエマルションの形態で提供される。
【００３５】
本発明に使用される組成物は、多少の程度によらず流動性であって良く、白色もしくは有色のクリーム、軟膏、乳剤、ローション、セラム、ペースト、もしくはフォームの外観を有して良い。これは任意に、固体形態で、例えばディッシュ中にまたはスティック形態で成型されて、目の周囲に適用されても良い。
【００３６】
該組成物がエマルションの形態である場合、該エマルションの油性相の割合は、例えば組成物全重量に対して5乃至80重量％、好ましくは5乃至50重量％の範囲であって良い。エマルションの形態の組成物中に使用されるオイル、乳化剤、及び共乳化剤は、化粧品または皮膚科の分野に従来使用されるものから選択される。乳化剤及び共乳化剤は、一般的に、組成物全重量に対して0.3乃至30重量％、好ましくは0.5乃至20重量％の割合で該組成物中に存在する。該エマルションは、更に脂質小胞を含んで良い。
【００３７】
本発明において使用可能な脂肪物質として、オイル類、とりわけ鉱物オイル（流動パラフィン）、植物由来のオイル（アボカドオイル、大豆油）、動物由来のオイル（ラノリン）、合成オイル（ペルヒドロスクアレン）、シリコーンオイル（シクロメチコーン）、およびフッ化オイル（ペルフルオロポリエーテル）を挙げて良い。脂肪物質としては、脂肪アルコール、例えばセチルアルコール、脂肪酸、ワックス、及びゴム、とりわけシリコーンゴムを使用することもまた可能である。
【００３８】
本発明において使用される乳化剤及び共乳化剤としては、例えばポリエチレングリコールの脂肪酸エステル、例えばPEG-100ステアレート、PEG-50ステアレート、及びPEG-40ステアレート；ポリオールの脂肪酸エステル、例えばグリセリルステアレート、ソルビタントリステアレート、及び例えばTween（登録商標）20またはTween（登録商標）60の商標名で市販のオキシエチレン化ソルビタンステアレート；及びこれらの混合物を挙げて良い。
【００３９】
本発明による組成物は、化粧品及び皮膚科の分野における従来のアジュバント、例えば親水性もしくは親油性ゲル化剤、活性剤、スクリーン剤、保存料、溶媒、香料、充填剤、顔料、脱臭剤、及び着色物質を更に含んで良い。これらの様々なアジュバントの量は、懸かる分野において従来使用されている通りであり、例えば組成物全重量に対して0.01乃至20重量％である。これらアジュバントは、その性質によって、脂肪相または水性相に導入して良い。これらアジュバント及びその濃度は、本発明による有利な特性を損なうことのないようなものであるべきである。
【００４０】
親水性ゲル化剤としては、とりわけカルボキシビニルポリマー（カーボマー）、アクリルコポリマー、例えばアクリレート/アルキルアクリレートコポリマー、ポリアクリルアミド、多糖類、天然ゴム及び粘土を挙げることができ、親油性ゲル化剤としては、変性粘土、例えばベントン、脂肪酸の金属塩、及び疎水性シリカを挙げることができる。
【００４１】
活性剤としては、本発明による組成物は、とりわけ、表皮剥離剤もしくは保湿剤；脱色剤；抗糖化剤；NO-シンターゼインヒビター、真皮もしくは表皮巨大分子の合成を刺激する且つ/またはこれらの変質を予防する剤；線維芽細胞または角質細胞の増殖を刺激する及び/または角質細胞の分化を刺激する剤；引き締め剤；抗汚染及び/または抗フリーラジカル剤；及び筋弛緩または皮膚弛緩剤から選択される、少なくとも１つの化合物を含んで良い。
【００４２】
本発明における使用に好ましい活性剤の例は、（N-2-ヒドロキシエチルピペラジン-N-2-エタン）スルホン酸（HEPES）；2-オキソチアゾリジン-4-カルボン酸（プロシステイン）；α-及びβ-ヒドロキシ酸、とりわけ5-(n-オクタノイル)-サリチル酸；セラミド；サポゲニン及び植物抽出物、とりわけヤマイモの抽出物、これを含むもの；レスベラトロル；アスコルビン酸及びその誘導体；レチノイド及びカロテノイド、とりわけレチノール、レチニルエステル及びリコペン；シュードジペプチド、例えば｛2-[アセチル-(3-トリフルオロメチルフェニル)アミノ] -3-メチルブチリルアミン｝酢酸；大豆抽出物、とりわけ大豆タンパク質加水分解物またはイソフラボン豊富な大豆抽出物；トコフェロール及びそのエステル；及びこれらの混合物である。
【００４３】
本発明に使用可能なスクリーン剤としては、有機または無機の光保護剤、UVA及び/またはUVB中で活性であって、脂溶性、水溶性、もしくは化粧品溶媒中に不溶性の剤を挙げてよい。
【００４４】
有機光保護剤は、とりわけアントラニレート；桂皮酸誘導体；ジベンゾイルメタン誘導体；サリチル酸誘導体、カンファ誘導体；トリアジン誘導体、例えば米国特許出願4367390、欧州特許出願863145、欧州特許出願517104、欧州特許出願570838、欧州特許出願796851、欧州特許出願775698、欧州特許出願878469、欧州特許出願933376、欧州特許出願507691、欧州特許出願507692、欧州特許出願790243、及び欧州特許出願944624に記載されたもの；ベンゾフェノン誘導体；β,β-ジフェニルアクリレート誘導体；ベンゾトリアゾール誘導体；ベンザルマロネート誘導体；ベンズイミダゾール誘導体；イミダゾリン；ビス-ベンゾアゾリル誘導体、例えば欧州特許669323及び米国特許2463264に記載されたもの；ｐ-アミノ安息香酸（PABA）誘導体；メチレンビス（ヒドロキシフェニルベンゾトリアゾール）誘導体、例えば米国特許出願5237071、同5166355、英国特許出願2303549、独国特許出願19726184、及び欧州特許出願893119に記載されたもの；スクリーン性ポリマー、及びスクリーン性シリコーン、例えば国際特許出願93/04665に記載されたもの；α-アルキルスチレンから誘導される二量体、例えば独国特許出願19855649に記載のもの；4,4-ジアリールブタジエン、例えば欧州特許出願0967200、独国特許出願19746654、独国特許出願19755649、欧州特許出願1008586、欧州特許出願1133980、及び欧州特許出願133981に記載されたもの、及びこれらの混合物から選択される。
【００４５】
UV-A及びUV-B中で活性な光保護剤の例としては、INCI名で以下に示すものを挙げることができる。
・ パラ-アミノ安息香酸誘導体、以下を含む：PABA、エチルPABA、エチルジヒドロキシプロピルPABA、エチルヘキシルジメチルPABA、とりわけISP社により”ESCALOL 507”の名で市販のもの、グリセリルPABA、PEG-25 PABA、BASF社により”UVINUL P25”の名で市販のもの、
・ サリチル酸誘導体、以下を含む：HAARMANN and REIMER社により”NEOHELIOPAN OS”の名で市販のホモサレート(homosalate)、ジプロピレングリコールサリチレート、とりわけSCHER社により”DIPSAL”の名で市販のもの、TEAサリチレート、とりわけHAARMANN and REIMER社により”NEO HELIOPAN TS”の名で市販のもの、
・ ジベンゾイルメタン誘導体、以下を含む：ブチルメトキシジベンゾイルメタン、とりわけHOFFMANN LA ROCHE社により”PARSOL 1789”の商品名で市販のもの、イソプロピルジベンゾイルメタン、
・ 桂皮酸誘導体、以下を含む：エチルヘキシルメトキシシンナメート、とりわけHOFFMANN LA ROCHE社により”PARSOL MCX”の商品名で市販のもの、イソプロピルメトキシシンナメート、イソアミルメトキシシンナメート、とりわけHAARMANN and REIMER社により” NEO HELIOPAN E 1000”の商品名で市販のもの、シノキセート(Cinoxate)、DEAメトキシシンナメート、ジイソプロピルメチルシンナメート、グリセリルエチルヘキサノエートジメトキシシンナメート、
・ β,β’-ジフェニルアクリレート誘導体、以下を含む：オクトクリレン、BASF社によって”UVINUL N539”の商品名で市販のもの、エトクリレン、とりわけBASF社によって”UVINUL N35”の商品名で市販のもの、
・ ベンゾフェノン誘導体、以下を含む：ベンゾフェノン-1、とりわけBASF社によって”UVINUL 400”の商品名で市販のもの、ベンゾフェノン-2、とりわけBASF社によって”UVINUL D50”の商品名で市販のもの、ベンゾフェノン-3またはオキシベンゾン、とりわけBASF社によって”UVINUL M40”の商品名で市販のもの、ベンゾフェノン-4、とりわけBASF社によって”UVINUL MS40”の商品名で市販のもの、ベンゾフェノン-5、ベンゾフェノン-6、とりわけNORQUAY社によって”HELISORB 11”の商品名で市販のもの、ベンゾフェノン-8、とりわけAMERICAN CYANAMID社によって”SPECTRA-SORB UV-24”の商品名で市販のもの、ベンゾフェノン-9、とりわけBASF社によって”UVINUL DS-49”の商品名で市販のもの、ベンゾフェノン-12、及びn-ヘキシル=2-(4-ジエチルアミノ-2-ヒドロキシベンゾイル)ベンゾエート、
・ ベンジリデンカンファ誘導体、以下を含む：3-ベンジリデンカンファ、4-メチルベンジリデンカンファ、とりわけMERCK社により”EUSOLEX 6300”の名で市販のもの、ベンジリデンカンファスルホン酸、カンファベンズアルコニウムメソスルフェート、テレフタリリデンジカンファスルホン酸、ポリアクリルアミドメチルベンジリデンカンファ、
・ ベンズイミダゾール誘導体、以下を含む：フェニルベンズイミダゾールスルホン酸、とりわけMERCK社により”EUSOLEX 232”の商品名で市販のもの、二ナトリウムフェニルジベンズイミダゾールテトラスルホネート、とりわけHAARMANN and REIMER社により” NEO HELIOPAN AP”の商品名で市販のもの、
・トリアジン誘導体、以下を含む：アニソトリアジン、とりわけCIBA SPECIALTY CHEMICALS社により"TINOSORB S"の商品名で市販のもの、エチルヘキシルトリアゾン、とりわけBASF社によって”UVINUL T150”の商品名で市販のもの、ジエチルヘキシルブタミドトリアゾン、とりわけSIGMA 3V社により"UVASORB HEB"の商品名で市販のもの、及び2,4,6-トリス（ジイソブチル-4'-アミノベンザルマロネート)-s-トリアジン、
・ベンゾトリアゾール誘導体、以下を含む：ドロメトリゾールトリシロキサン、RHODIA CHIMIE社により"SILATRIZOLE"の名で市販のもの、メチレンビスベンゾトリアゾリルテトラメチルブチルフェノール、とりわけFAIRMOUNT CHEMICAL社により"MIXXIM BB/100"の商品名の固体形態で、またはCIBA SPECIALTY CHEMICALS社により"TINOSORB M"の商品名の水性分散物中の微小化形態で市販のもの、
・アントラニリン誘導体（HAARMANN and REIMER社により” NEO HELIOPAN MA”の商品名で市販のメンチルアントラニレートを含む）、
・イミダゾリン誘導体（エチルヘキシルジメトキシベンジリデンジオキソイミダゾリンプロピオネートを含む）。
【００４６】
ベンザルマロネート誘導体（HOFFMANN LA ROCHE社により”PARSOL SLX”の商品名で市販のベンザルマロネート基を含むポリオルガノシロキサンを含む）及び4,4-ジアリールブタジエン誘導体（1,1-ジカルボキシ（2,2'-ジメチルプロピル）-4,4-ジフェニルブタジエンを含む）を挙げても良い。
【００４７】
特にもっとも好ましい有機光保護剤は、以下の化合物から選択される：エチルヘキシルサリチレート、エチルヘキシルメトキシシンナメート、オクトクリレン、フェニルベンズイミダゾールスルホン酸、ベンズフェノン-3、ベンズフェノン-4、ベンズフェノン-5、4-メチルベンジリデンカンファ、テレフタリリデンジカンファスルホン酸、二ナトリウムフェニルジベンズイミダゾールテトラ-スルホネート、2,4,6-トリス（ジイソブチル=4'-アミノベンザルマロネート）-s-トリアジン、アニソトリアジン、エチルヘキシルトリアゾン、ジエチルヘキシルブタミドトリアゾン、メチレンビスベンゾトリアゾリルテトラメチルブチルフェノール、ドロメトリゾールトリシロキサン、1,1-ジカルボキシ（2,2'-ジメチルプロピル）-4,4-ジフェニルブタジエン、及びこれらの混合物。
【００４８】
無機光保護剤は、金属酸化物の、被覆有りもしくはなしの、顔料あるいはまたナノ顔料（主要平均粒径：一般的に5nm乃至100nm、好ましくは10nm乃至50nm）、例えば全てそれ自体良く知られたUV光保護剤である、酸化チタン（無定形またはルチル及び／もしくはアナタース形の結晶形）、酸化鉄、酸化亜鉛、酸化ジルコニウム、または酸化セリウムのナノ顔料から選択される。従来の被覆剤は、更に、アルミナ及び／またはアルミニウムステアレートである。こうした金属酸化物の被覆もしくは未被覆のナノ顔料は、欧州特許出願518772及び同518773に記載されている。
【００４９】
スクリーン剤は、本発明の組成物中に、一般的に組成物全重量に対して0.1乃至20重量％、好ましくは0.2乃至15重量％の範囲の割合で存在する。
【００５０】
本発明を、以下の非限定的実施例によって、ここに詳説する。これらの実施例においては、量は重量％で示される。組成物の成分は、CTFA命名法に従って示される。
【実施例】
【００５１】
（実施例１：リピドＡの調製）
ａ）Ａの合成：
CH2Cl2(15ml)中の3-ドデカノイルオキシデカノイル（1.54mmol）及び市販のグルコサミンを含む溶液Ａ’（1.4mmol）を、EDC.Mel（2.10mmol）で処理し、室温にて一晩撹拌する。その後反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製する。
【００５２】
先出する化合物（15.2mmol）を3-ヒドロキシデカノイル(16.7mmol)及びCH2Cl2(95ml)中の4-ピロリジノピリジン（1.7mmol）で溶解させる。EDC.Mel（16.7mmol）を加え、媒質を室温にて一晩撹拌する。その後反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製する。
【００５３】
上記のように得られるアセトニドを、酢酸／水（4/1）混合物中に溶解させ、60℃にて１時間加熱する。その後媒質を濃縮し、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して中間体Ａを得る。
【００５４】
ｂ）Ｂの合成
Ｂ’は、Ａの合成に用いたのと同様のプロトコル（上記参照）を応用することによって、市販製品Ｂ”から得られる。
【００５５】
CH2Cl2(25ml)中のTCBOC-Cl(13.2mmol)を、CH2Cl2(125ml)中にＢ’（12mmol）及びピリジン（25mmol）を含む０℃の溶液に、１５分間に亘って滴下する。その後該混合物を、3.5時間かけて穏やかに室温に昇温させる。4-ピロリジノピリジン(6.0mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（60mmol）及びジフェニルクロロホスホネート（18mmol）を次々に加える。該混合物を室温にて５時間に亘り撹拌する。その後反応物をCH2Cl2で希釈し、冷温HCl水溶液（7.5%）で洗い、その後飽和NaHCO3水溶液で洗い、その後乾燥させて濃縮する。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製する。
【００５６】
ZnCl2（エーテル中1.0M、2.41mmol）を０℃にて、CH2Cl2(60ml)中のジクロロメチルメチルエーテル（24.2mmol）及び上述の通り得られる化合物(4.84mmol)に加える。該混合物を穏やかに室温に昇温させ、その後室温で一晩撹拌する。その後反応媒質をEtOAｃで希釈し、飽和NaHCO3水溶液で洗い、その後乾燥させて濃縮する。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｂを得る。
【００５７】
ｃ）Ｃの合成
1,2-ジクロロエタン（18.5mmol）中にＢ（1.85mmol）及びＡ（1.54mmol）を含む溶液を、４Åのモレキュラーシーブ（1g）を用いて１時間に亘り撹拌し、その後AgOTf（5.55mmol）を一度に加えて処理する。４時間に亘り室温で暗所にて撹拌した後、更なるAgOTf（1.85mmol）を加えて反応物を一晩撹拌する。その後、クリーム状の混合物をセライトで濾過し、濃縮する。シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーでの精製により、化合物Ｃ’を得ることができる。
【００５８】
AcOH(4.5ml)/THF(40ml)混合物中にＣ’を含む溶液を、室温でPtO2（0.45g）の存在下、70psigの圧力下にて、18時間に亘り加水分解する。該溶液を、CHCl3/MeOH(2/1)で希釈し、その後短時間超音波をかける。その後触媒を濾過し、CHCl3／MeOH(2/1)混合物で洗う。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製する。
【００５９】
CH2Cl2(25ml)中の先出する生成物（12mmol）を、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（60mol）及びPOCl3（18mmol）の存在下、室温にて５時間に亘り撹拌する。その後該反応物を濃縮する。その後反応媒質をCH2Cl2で希釈し、飽和NaHCO3水溶液で洗い、その後乾燥させて濃縮する。残渣を酢酸（100ml）に溶解させ、亜鉛粉（0.9ml）と共に60℃に加熱する。反応物を冷却し、セライトで濾過し、その後濃縮する。シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーでの精製により、化合物Ｃを得ることができる。
【００６０】
（実施例２：免疫刺激効果の証明）
免疫刺激効果を、LPSを豊富に含み、ここでリピドＡが本発明によるものである、Vitreoscilla filiformisフラクションで評価した。
【００６１】
ａ）LPSの抽出
Vitreoscilla filiformisの株（ATCC 15551）を、国際特許出願94/02158に記載された技術に従って培養した。培養は、26℃にて、少なくとも48時間、600nmにて、1.5以上の光学密度に相当する適当な細胞濃度が得られるまで行った。該株を、48時間毎に新たな媒質中にて、2%V/Vで、安定な培養が得られるまで継代培養した。その後、200mlの新たな媒質を仕込んだ１リットルのコニカルフラスコに、4mlの上記培養菌を接種した。
【００６２】
コニカルフラスコ中、26℃での培養は、100回転／分で振盪した培養テーブル上で行った。こうして得られたベースストックを、101発酵槽用の接種材料として使用した。26℃、ｐＨ7、100回転／分、及びｐＯ２≧15%にて、増殖が起こった。
【００６３】
増殖の48時間後、バイオマスを作業容量600リットルの発酵槽中に移し、同様の条件下で培養した。
下記表の培地を用いた。
【００６４】
【表１】
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【００６５】
121℃にて20分間に亘り滅菌する前に、1Nの水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムの添加によって、ｐＨを7.15に調整した。
蒸留水１リットル当たりのHeller微量元素の組成は、下表に示すとおりであった。
【００６６】
【表２】
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【００６７】
0.2g/lのポリメチルシロキサンタイプの起泡防止剤（Silbione 97350 RP）をこの培地に加えた。温度を26℃乃至30℃に調節した。最適なのは29℃である。
【００６８】
完全な増殖サイクルは、48時間を要した。
曝気は、20%溶解酸素の最少量を得るために質量流量計により制御した。
増殖の最後に、実質的に残留グルコースは皆無であった。
バイオマスを遠心分離によって分離させた。
【００６９】
これは、４℃に冷却した工業型の遠心分離器で行われ、これにより8000×ｇに等しい遠心力を得ることが可能となり、２分間稼働させた。
こうして回収した培地は、後日の使用のために冷凍によって貯蔵可能であった。
凍結生成物を４℃にて解凍し、その後該細胞を１もしくは２リットルのパッケージに入れて、20乃至40分間に亘り121℃のオートクレーブに入れた。
【００７０】
420mlのオートクレーブ生成物を、100000gで４℃にて、１時間半に亘り遠心分離する。ペレットを回収し、その後150mlの可溶化バッファ中に再懸濁させる。100℃にて１時間に亘り加熱した後、遠心分離を100000gで４℃にて30分間に亘って実行する。100mlの上澄み液を除去し、ここに60mgのタンパク分解酵素Ｋ（0.6mg/ml）を加える。６０℃で１時間に亘り加熱した後、エタノール中、200mlの塩化マグネシウム溶液を加え、得られる組成物を、−２０℃に一晩維持する。エタノールによる二度の沈殿を、その後−２０℃にて行う。蒸留水中に再懸濁させた後、得られる生成物を水に対して透析し、その後凍結乾燥させる。
【００７１】
ｂ）ランゲルハンス細胞の表面での、分子の発現
酵素処理によって得られる正常なヒトのランゲルハンス細胞を、ポジティブコントロールとして使用される上記工程（ａ）で得られる生成物100μg/mlまたは100μg/mlのE.coli LPSと共に、１８時間に亘ってインキュベートする。
実験を３回繰り返す。
【００７２】
HLA-DR分子の発現を、蛍光の平均強度の比率の形で表す。３回の実験についてのその平均は、試験した生成物について1.28であり、参照LPSについて測定したもの（1.19）と著しい差異はない。
【００７３】
更に、電子顕微鏡で評価され、膜の100μm毎の金粒子の数で表される、B7-2分子の発現は、細胞が試験した生成物とインキュベートされた場合には、参照LPSとの場合（88.5±8.3）よりも格段に高い（162.4±13.7）。
【００７４】
最後に、膜の100μm2毎の食菌されたビーズの数として表される、ランゲルハンス細胞によるラテックスビーズの食菌作用能力は、試験した生成物の存在下では著しく増大しており（54.1±11.4）、参照LPSの存在下で得られるもの（34.7±6.9）よりも高い。
【００７５】
（結論）
試験した生成物は、ランゲルハンス細胞の表面でＴ細胞との接触に関与した主要分子の発現の増大を誘発するが、これは免疫反応の開始に必要である。更に、食作用は、細菌もしくはウィルス性病原剤に対する身体の防御の提供における、ランゲルハンス細胞の機能活性の第一段階の一つであり、試験したLPSによるその刺激は、このLPSのリピドＡの特性である、ランゲルハンス細胞による病原剤排除の増大した活性を示唆する。
【００７６】
（実施例３：化粧品組成物）
O/Wエマルションを、以下の成分から調整する。重量による割合は以下の通りである。
グリセリルステアレート                              ２．０％
ポリソルベート６０                                  ２．０％
ステアリン酸                                        １．５％
水酸化ナトリウム                                    ０．７％
カーボマー                                          ０．４％
サンフラワーオイル                                 １５．０％
プロピレングリコール                                ３．０％
保存料                                              ０．５％
リピドＡ*                                            ０．１％
水                                            １００％とする残量
*：実施例１に記載のように得られる。
【００７７】
この組成物は、当業者により定法によって調製して良い。その調製方法は、好ましくは水酸化ナトリウム水溶液中にリピドＡを溶解させる工程を含む。
【図面の簡単な説明】
【００７８】
【図１】図１は、本発明のリピドＡの調製方法の図示である。
【図１】
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【外国語明細書】
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