(57)【要約】【課題】蛍光粒子の波長に対応した焦点合わせを高精度に短時間にて行う。【解決手段】標本（例えば遺伝情報伝達物）に取りつけられたマーカ用蛍光粒子１１７と同じ波長の透過光源１０９からの透過光によって樹脂製粒子１１８の透過像に焦点合わせを行い、その合焦点位置を基準位置とし、測定時、蛍光の波長の違いに起因して生ずる焦点位置のずれを補正するために、バンドパスフィルタ１０５の切り替えと同期して対物レンズ１０３を移動制御して高品質な蛍光画像の観測分析を行う。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数種類の蛍光粒子を付着した樹脂製粒子を含む試料を保持するプレートを載置して2次元移動するＸＹステージと、前記蛍光粒子を励起する励起光源と、前記樹脂製粒子に照射してその透過像を得るための透過光源と、前記蛍光粒子より発する蛍光波長の選択を行う複数のバンドパスフィルタと、前記バンドパスフィルタを切り替えるためのフィルタ切り替え手段と、前記蛍光粒子より発せられる蛍光を受光し光検出するための撮像素子とを備え、前記樹脂製粒子の透過像の焦点調整に用いる波長は、前記蛍光粒子より発せられる所定の蛍光波長と同じであることを特徴とする蛍光読み取り装置。
【請求項２】
複数種類の蛍光粒子を付着した樹脂製粒子を含む試料を保持するプレートを載置して2次元移動するＸＹステージと、前記蛍光粒子を励起する励起光源と、前記樹脂製粒子に照射してその透過像を得るための透過光源と、前記励起光源の光を収束して前記試料に照射する対物レンズと、前記蛍光粒子より発する蛍光波長の選択を行う複数のバンドパスフィルタと、前記バンドパスフィルタを切り替えるためのフィルタ切り替え手段と、前記蛍光粒子より発せられる蛍光を受光し光検出するための撮像素子とを備え、
前記透過光源は、前記樹脂製粒子に結合する前記試料中に含有される標本を標識するマーカ用蛍光粒子が発する蛍光と同波長を有し、当該波長を用いて前記樹脂製粒子に対し焦点調節をして得られる合焦点位置を基準位置とすることを特徴とする蛍光読み取り装置。
【請求項３】
蛍光波長の相違に起因して生ずる焦点位置の基準位置からのずれをバンドパスフィルタの切り替えと同期して補正する制御を行うことを特徴とする請求項２に記載の蛍光読み取り装置。
【請求項４】
前記蛍光粒子は、所定の粒子径を有するＣｄＳｅであり、前記粒子径に対応した波長の蛍光を発することを特徴とする請求項１或いは請求項２に記載の蛍光読み取り装置。
【請求項５】
前記マーカ用蛍光粒子の粒子径は、前記樹脂製粒子を特定するために使用する粒子径と異なることを特徴とする請求項２に記載の蛍光読み取り装置。
【請求項６】
前記マーカ用蛍光粒子は、試料の光検出する蛍光の最長波長とする粒子径を有するＣｄＳｅであることを特徴とする請求項２に記載の蛍光読み取り装置。
【請求項７】
前記複数種類の蛍光粒子を付着する樹脂製粒子は、磁化された粒子であることを特徴とする請求項１或いは請求項２に記載の蛍光読み取り装置。
【請求項８】
前記撮像素子は、白黒ＣＣＤ素子であることを特徴とする請求項１或いは請求項２に記載の蛍光読み取り装置。
【請求項９】
前記合焦点位置における前記樹脂製粒子の画像を前記撮像素子で撮像し、前記樹脂製粒子の画像位置を記憶し、当該画像位置において、各樹脂製粒子の蛍光波長分析を行うことを特徴とする請求項２に記載の蛍光読み取り装置。
【請求項１０】
複数種類の蛍光粒子を付着した樹脂製粒子を含む試料を保持するプレートを載置して2次元移動するＸＹステージと、前記蛍光粒子を励起する励起光源と、前記樹脂製粒子に照射してその透過像を得るための透過光源と、前記励起光源の光を収束して前記試料に照射する対物レンズと、前記蛍光粒子より発する蛍光波長の選択を行う複数のバンドパスフィルタと、前記バンドパスフィルタを切り替えて前記蛍光粒子より発せられる所定の波長の蛍光を受光し光検出する蛍光読み取り装置において、
前記透過光源は、前記樹脂製粒子に結合する前記試料中に含有される標本を標識するマーカ用蛍光粒子が発する蛍光と同波長を有し、当該波長を用いて前記樹脂製粒子に対し焦点調節をして得られる合焦点位置を基準位置とし、
前記蛍光粒子より発する蛍光から所望の波長を選択するために前記バンドパスフィルタの切り替えを行った際、選択された波長に依存して生ずる前記基準位置からのずれに応じて前記対物レンズを移動制御することを特徴とする蛍光読み取り装置。
【請求項１１】
複数種類の蛍光粒子を付着した樹脂製粒子を含む試料を保持するプレートを載置して2次元移動するＸＹステージと、前記蛍光粒子を励起する励起光源と、前記励起光源の光を収束して前記試料に照射する対物レンズと、前記蛍光粒子より発する蛍光波長の選択を行う複数のバンドパスフィルタと、前記バンドパスフィルタを切り替えて、前記蛍光粒子より発せられる所定の波長の蛍光を受光し光検出する撮像素子とを備え、
前記樹脂製粒子に結合する前記試料中に含有される標本を標識するマーカ用蛍光粒子が発する蛍光と同波長光を用いて前記樹脂製粒子に対し焦点調節をして得られる合焦点位置を基準位置とし、
前記蛍光粒子より発する蛍光から所望の波長を選択するために前記バンドパスフィルタの切り替えを行った際、選択された波長に依存して生ずる前記基準位置からのずれに応じて前記対物レンズを移動制御することを特徴とする蛍光読み取り装置の合焦点方法。
【請求項１２】
前記試料中の樹脂製粒子の合焦点位置の基準位置を求めるマーカ用蛍光粒子の光源を別個独立に配置することを特徴とする請求項１１に記載の蛍光読み取り装置の合焦点方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、蛍光標識された試料が発する蛍光を読み取る蛍光読み取り装置及び蛍光読み取り装置の合焦点方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来の蛍光読み取り装置においては、図４に示されるように蛍光撮像前に白色、もしくは赤外の透過光源４０８により透過光４１５を試料プレート４０７の下方から蛍光体４１３を含んだ試料４１４に照射する。透過光４１５を照射されることによって生じた蛍光体４１３を含んだ試料４１４の影像は、試料プレート４０７の上方に設置された透過光検出手段４１６により検出される。透過光４１５を照射することにより生じた影像より蛍光体４１３を含んだ試料４１４の焦点合わせを行うと同時に、影像から蛍光体を含んだ試料の位置の検出を行うことが可能となる。焦点位置を合わせた後、光源を透過光源４０８から励起光源４０１へと切り替える。励起フィルタ４０２は、励起光源４０１から発生した光の所定の波長より長い波長域の光を阻止し、所定の波長より短い波長域の光を透過する。励起フィルタ４０２を透過した励起光４０３は、ダイクロイックミラー４０４により反射され対物レンズ４０５に入射される。対物レンズ４０５により収束された励起光４０３は、ＸＹステージ４０６上の試料プレート４０７に照射される。ダイクロイックミラーとは所定の波長より短い波長域の光を反射し、長い波長域の光を透過するものである。励起光４０３により励起された蛍光体４１３は蛍光を発する。蛍光は対物レンズ４０５を介し、ダイクロイックミラー４０４に到達する。蛍光は、励起光４０３より長い波長域であるため、ダイクロイックミラー４０４を透過する。ダイクロイックミラー４０４を透過した蛍光は、透過光検出手段４１６とは別の撮像素子（CCDカメラ）４１０によって蛍光の撮像、光検出される。
【０００３】
以上のような蛍光撮像前の焦点合わせするための透過光として、励起光源に用いる励起レーザ光より波長の長い赤外レーザ光を使用することが特許文献１に記載されている。
【特許文献１】特開平９−２４３９２１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、上記従来の構成では、蛍光体を含んだ試料への焦点位置合わせの際に使用する透過光の波長と観察したい蛍光体の蛍光波長が異なるために、蛍光体を含んだ試料の合焦点位置で蛍光体が発する微弱な蛍光を検出する事が難しく、高品質な画像を得ることが難しいという課題を有していた。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記従来の課題を解決するために、本発明の蛍光読み取り装置は、複数種類の蛍光粒子を付着した樹脂製粒子を含む試料を保持するプレートを載置して2次元移動するＸＹステージと、前記蛍光粒子を励起する励起光源と、前記樹脂製粒子に照射してその透過像を得るための透過光源と、前記蛍光粒子より発する蛍光波長の選択を行う複数のバンドパスフィルタと、前記バンドパスフィルタを切り替えるためのフィルタ切り替え手段と、前記蛍光粒子より発せられる蛍光を受光し光検出するための撮像素子とを備え、前記樹脂製粒子の透過像の焦点調整に用いる波長は、前記蛍光粒子より発せられる所定の蛍光波長と同じであることを特徴としたものである。
【０００６】
また、本発明の蛍光読み取り装置は、複数種類の蛍光粒子を付着した樹脂製粒子を含む試料を保持するプレートを載置して2次元移動するＸＹステージと、前記蛍光粒子を励起する励起光源と、前記樹脂製粒子に照射してその透過像を得るための透過光源と、前記励起光源の光を収束して前記試料に照射する対物レンズと、前記蛍光粒子より発する蛍光波長の選択を行う複数のバンドパスフィルタと、前記バンドパスフィルタを切り替えるためのフィルタ切り替え手段と、前記蛍光粒子より発せられる蛍光を受光し光検出するための撮像素子とを備え、
前記透過光源は、前記樹脂製粒子に結合する前記試料中に含有される標本を標識するマーカ用蛍光粒子が発する蛍光と同波長を有し、当該波長を用いて前記樹脂製粒子に対し焦点調節をして得られる合焦点位置を基準位置とすることを特徴としたものである。
【０００７】
また、本発明の蛍光読み取り装置は、複数種類の蛍光粒子を付着した樹脂製粒子を含む試料を保持するプレートを載置して2次元移動するＸＹステージと、前記蛍光粒子を励起する励起光源と、前記樹脂製粒子に照射してその透過像を得るための透過光源と、前記励起光源の光を収束して前記試料に照射する対物レンズと、前記蛍光粒子より発する蛍光波長の選択を行う複数のバンドパスフィルタと、前記バンドパスフィルタを切り替えて前記蛍光粒子より発せられる所定の波長の蛍光を受光し光検出する蛍光読み取り装置において、
前記透過光源は、前記樹脂製粒子に結合する前記試料中に含有される標本を標識するマーカ用蛍光粒子が発する蛍光と同波長を有し、当該波長を用いて前記樹脂製粒子に対し焦点調節をして得られる合焦点位置を基準位置とし、
前記蛍光粒子より発する蛍光から所望の波長を選択するために前記バンドパスフィルタの切り替えを行った際、選択された波長に依存して生ずる前記基準位置からのずれに応じて前記対物レンズを移動制御することを特徴としたものである。
【０００８】
また、本発明の蛍光読み取り装置の合焦点方法複数種類の蛍光粒子を付着した樹脂製粒子を含む試料を保持するプレートを載置して2次元移動するＸＹステージと、前記蛍光粒子を励起する励起光源と、前記励起光源の光を収束して前記試料に照射する対物レンズと、前記蛍光粒子より発する蛍光波長の選択を行う複数のバンドパスフィルタと、前記バンドパスフィルタを切り替えて、前記蛍光粒子より発せられる所定の波長の蛍光を受光し光検出する撮像素子とを備え、
前記樹脂製粒子に結合する前記試料中に含有される標本を標識するマーカ用蛍光粒子が発する蛍光と同波長光を用いて前記樹脂製粒子に対し焦点調節をして得られる合焦点位置を基準位置とし、
前記蛍光粒子より発する蛍光から所望の波長を選択するために前記バンドパスフィルタの切り替えを行った際、選択された波長に依存して生ずる前記基準位置からのずれに応じて前記対物レンズを移動制御することを特徴としたものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、樹脂製粒子の蛍光分析を行う前に、マーカ用蛍光粒子が発する蛍光と同じ波長の透過光を使用して樹脂製粒子に対して焦点合わせを行うため、高精度な焦点位置が得られる。また、蛍光測定時に、蛍光波長選択手段のバンドパスフィルタを切り替えることで測定対象となる蛍光の波長が変化した場合、微小なずれが生じるが、バンドパスフィルタの切り替えと連動して対物レンズを移動することで焦点位置を補正することにより、高精度な蛍光画像を取得することが出来る。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下に、本発明の蛍光読み取り装置の実施の形態を図面とともに詳細に説明する。
【実施例１】
【００１１】
図１は、本発明による実施例１における蛍光読み取り装置の概略図を示すものである。
【００１２】
図１において、励起光１１２をダイクロイックミラー１０２、対物レンズ１０３を介して試料プレート１１４上に照射する。ダイクロイックミラー１０２は、励起光源１０１からの励起光１１２を反射するとともに、試料プレート１１４上の試料から発せられる蛍光１１５を透過させる特性を有する。
【００１３】
励起光１１２により励起されて試料プレート１１４に載置された試料から発せられる蛍光１１５を光検出器であるＣＣＤカメラ１０８で受光して、受光した蛍光１１５の電気信号を画像処理制御回路１１０にて画像処理を行い、モニタ１１１に表示する。
【００１４】
画像処理制御回路１１０は、更に、樹脂製粒子１１８に焦点を合わすための対物レンズ１０３の移動の制御、所望の波長のみを透過さすためのバンドパスフィルタ１０５の切り替え制御、Ｘ−Ｙステージ１０４を所定の位置へ移動する制御なども行っている。
【００１５】
以上のように構成された蛍光読み取り装置について、以下にその測定動作について説明する。なお、試料としては、生体試料、例えば遺伝情報伝達物などである。
【００１６】
樹脂製粒子１１８に焦点を合わすために、試料プレート１１４の上部に設置された透過光源１０９により試料中の含有遺伝情報伝達物１１６に取りつけられたマーカ用蛍光粒子１１７が励起されて発する蛍光と同一波長の光を照射する。実施例においては、６６０ｎｍの波長の発光ダイオード（以下、ＬＥＤと省略する。）を使用している。透過光１１３の照射によって投影される樹脂製粒子１１８の影のコントラストに対してその像が明確に見えることができるように焦点合わせを行う。これは、樹脂製粒子１１８は、透過光源１０９からの透過光１１３を照射され、対物レンズ１０３、バンドパスフィルタ１０５を介して、ＣＣＤカメラ１０８にてその透過像が観測される。その際に、マーカ用蛍光粒子１１７が励起されて発する蛍光と同一波長（実施例では、６６０ｎｍ）を使用し、バンドパスフィルタ１０５を通じて焦点動作をするので、以後の蛍光測定時の焦点変動が少なく、また、光の通過ルートが同じとなるので、高精度に焦点調節ができる。
【００１７】
次に光源を透過光源１０９から励起光源１０１に切り替える。実施例においては、樹脂製粒子（Ｑｕａｎｔｕｍ  ｂｅａｄ、以後ＱＢと略す。）１１８は、球状の樹脂製粒子を使用している。
【００１８】
励起光源１０１は半導体レーザ、又はＬＥＤによる所定波長のみを発するものを使用することで、所定より長い波長域の光を阻止するためのフィルタを必要としない。
【００１９】
励起光源１０１より発生した励起光１１２は、ダイクロイックミラー１０２により反射され、対物レンズ１０３により収束され、ＸＹステージ１０４上の試料プレート１１４に照射される。励起光１１２が照射され励起された前記試料プレート１１４内の樹脂製粒子１１８に付着した複数種類の蛍光粒子は蛍光１１５を発する。ダイクロイックミラー１０２を反射した励起光１１２より長い複数の波長を有する蛍光１１５は対物レンズ１０３を通り、ダイクロイックミラー１０２を透過する。蛍光１１５は、バンドパスフィルタ１０５により所定の波長のみ透過した後、結像レンズ１０７によって結像しCCDカメラ１０８により撮像され、光検出される。フィルタ切り替え手段１０６によりバンドパスフィルタ１０５を順次切り替えることで単一の白黒CCDカメラ１０８により複数の波長を撮像し、光検出を行うことが出来る。撮像された画像は画像処理制御回路１１０を介し、画像信号としてモニタ１１１にて表示される。
【００２０】
図２は、本発明に使用する蛍光粒子（Ｑｕａｎｔｕｍ  ｄｏｔ、以後ＱＤと略す）を説明するための概略図である。図２において、ＱＤ２０１、ＱＤ２０２、ＱＤ２０３は、それぞれ直径の異なるＣｄＳｅ（セレン化カドミウム）の粒子状の結晶で、直径約２ｎｍから約１０ｎｍの大きさのものを使用する。そして、励起光２０４がＱＤに照射されると、その粒子径に応じた波長２０５、２０６、２０７の光を蛍光する。以後、説明の簡略化のため、異なる３種類の粒子径を有するＱＤを使用する測定について述べる。
【００２１】
図３は、上記の３種類のＱＤが所定の比率で付着されたＱＢを説明するための概略図である。図３において、ＱＢ３０１、ＱＢ３０２は、磁化することができる樹脂製の球状粒子であり、直径の異なる３種類のＱＤ３０３、ＱＤ３０４、ＱＤ３０５をその外面に付着している。ＱＢの大きさは、約１０ミクロンで、ＱＤに比べ、はるかに大きい粒子である。
【００２２】
ＱＢ３０１、ＱＢ３０２は３種類のＱＤ３０３、ＱＤ３０４、ＱＤ３０５が所定の比率で付着しているので、ＱＢ３０１、ＱＢ３０２に励起光を照射すると、ＱＢ３０１、ＱＢ３０２は、３種類のＱＤの付着された比率に応じた特定の蛍光を発する。そして、その発せられる蛍光を複数のバンドパスフィルタを用いて蛍光の波長分析をする事により、ＱＢ３０１、ＱＢ３０２を特定することができる。ＱＢの一例として説明すると、ＱＢ３０１は、ＱＤ３０３：ＱＤ３０４：ＱＤ３０５＝３：１：０の比率で各ＱＤを付着させ、ＱＢ３０２には、ＱＤ３０３：ＱＤ３０４：ＱＤ３０５＝１：１：１の比率で各ＱＤを付着させる。ＱＢを励起すると、付着されたＱＤの比率に応じた蛍光を発し、その蛍光を波長分析することによりＱＢを特定できる。もちろん、使用するＱＤの種類、ＱＤの混合比率を変えることによって、より多種類のＱＢを作ることができる。
【００２３】
さらに、ＱＢ３０１、ＱＢ３０２には、例えば遺伝情報伝達物のような特定の生体試料と結合可能な腕３０９及び３１０が多数取りつけられている。
【００２４】
前記のＱＤ及びＱＢを用いて生体試料を検出する手法の一例として、遺伝情報伝達物ｍＲＮＡを検出する方法について、具体的に説明を行う。なお、これ以降説明の簡略化のため、ＱＢ３０１をＱＢ−Ｘ３０１、ＱＢ３０２をＱＢ−Ｙ３０２、ｍＲＮＡ３０７をｍＲＮＡ−Ｘ３０７、ｍＲＮＡ３０８をｍＲＮＡ−Ｙ３０８とする。
【００２５】
まず、生体試料中に含有される遺伝情報伝達物ｍＲＮＡにマーカ用蛍光体として波長６６０ｎｍの蛍光を発する粒子径約１０ｎｍのＱＤ３０６を付着させる。さらに、遺伝情報伝達物ｍＲＮＡ中の特定のｍＲＮＡ−Ｘ３０７と結合可能な腕３０９を取りつけたＱＢ−Ｘ３０１、ｍＲＮＡ−Ｙ３０８と結合可能な腕３１０を取りつけたＱＢ−Ｙ３０２を、上記ｍＲＮＡを含有する生体試料中に入れる。すると、ＱＢ−Ｘ３０１はｍＲＮＡ−Ｘ３０７と腕を介して結合し、ＱＢ−Ｙ３０２はｍＲＮＡ−Ｙ３０８と腕を介して結合する。その後、磁石を用いて磁力によりＱＢを吸着し不要な試料を洗い流す。これによりＱＢ−Ｘ３０１、ＱＢ−Ｙ３０２及びＱＢと結合したマーカ用蛍光体のＱＤを付着したｍＲＮＡ−Ｘ３０７        、ｍＲＮＡ−Ｙ３０８が残り、その他の不要な生体試料は除去される。こうして、残った生体試料を試料プレートに注入し、本発明の蛍光読み取り装置にて検出を行う。
【００２６】
まず、検出動作に先立って行うＱＢ１１８に対する焦点合わせを、図１を用いて説明する。
【００２７】
図１において、試料プレート１１４の上方に設置された赤色LEDなどによる透過光源１０９より赤色マーカ用蛍光粒子１１７が蛍光するのと同じ波長を含む赤色光を照射する。赤色光を照射し透過光１１３により投影される赤色マーカ用蛍光体１１７にて標識された遺伝情報伝達物１１６を付着したＱＢ１１８の像をＣＣＤカメラ１０８により取得する。ＱＢ１１８に焦点を合わせて鮮明な透視像となるよう対物レンズ１０３を画像処理制御装置１１０の制御下で移動する。このときの合焦点動作は、マーカ用蛍光体１１７の発する赤色と同じ波長を使用して焦点位置を求めるものであり、得られた焦点位置を基準位置１１９として画像制御装置内に記憶しておく。ここでは、透過光によるＱＢ１１８の透過像を透過光源１０９を用いて取得するので明るく高精度に焦点を合わすことができる。即ち、蛍光粒子が発光した像を観測していないので、鮮明な像が得られる。そして、続いて行う蛍光の測定分析の際に使用する励起光の照射時の焦点位置の基準値として用いる。また、この合焦点位置での試料プレート１１４中のそれぞれのＱＢ１１８の位置を画像処理制御装置での画像データの画像領域における画像位置として記憶し、以後の蛍光の測定分析の際に各ＱＢ１１８を特定する。
【００２８】
次に励起光源１０１に光源を切り替えて蛍光観察を行う手順について説明する。励起光源１０１に切り替え、まずＱＢ１１８にマーカ用蛍光体の付着したｍＲＮＡ１１６の有無を検出する為、中心波長６６０ｎｍのバンドパスフィルタ１０５を用いて蛍光観察を行う。実施例においては、発光波長が６６０ｎｍの赤色ＬＥＤによる透過光源１０９を用いて焦点合わせを行っているので、同波長の蛍光を有する赤色マーカ用蛍光体１１７の蛍光画像を高精度で撮像出来る。ＱＤに用いるＣｄＳｅ粒子の蛍光効率が高く、励起レーザ光による退色も少ないので、明るい蛍光画像が得られる。
【００２９】
従ってｍＲＮＡ１１６が付着したＱＢ１１８と、そうでないＱＢの識別が精度よく行える。また、検出したマーカ用蛍光体の付着したＱＢ１１８の位置を画像処理装置１１０に記憶しておく。
【００３０】
その後、バンドパスフィルタ１０５を順次切り替えを行いながら蛍光観察を行いＱＢ１１８の蛍光の波長強度分析をする事により画像処理装置１１０に記憶した位置のＱＢ１１８の種類を特定する。ＱＢ１１８が特定されることにより観察されたマーカ用蛍光体の付着したｍＲＮＡ１１６を特定することが出来る。また、蛍光観察時にＱＢ１１８から複数波長の蛍光１１５が発せられるが、各蛍光波長に依存して焦点位置が異なるので前もって、それぞれの所定の波長に対する基準位置からのずれを測定しておき、バンドパスフィルタ１０５を切り替えるとともに、その切り替えと同期して対物レンズ１０３を画像処理制御装置１１０により移動制御して、波長ごとに基準位置１１９からのずれを補正して正確な焦点合わせを行い、高精度の蛍光画像を撮像する。即ち、複数の蛍光の焦点位置を自動的に補正することで焦点時間の短縮を可能とすることが出来る。
【００３１】
マーカ用蛍光体１１７には、蛍光粒子として使用しているＣｄＳｅ粒子の中でその粒子径が約１０ｎｍと最も大きく、赤色の蛍光を発するＱＤを採用している。いずれの粒子径のＱＤを用いてもよいが、他の蛍光波長の検出分析に対する影響を少なくするため、使用しているＱＤの中で、最小粒子径または、最大粒子径のものを使用するのが望ましい。本実施例では、最大粒子径のＱＤを使用したが、もちろん、最小粒子径のＱＤを用いても、蛍光波長の検出分析に対する影響を少なくして精度よく行うことができる。
【産業上の利用可能性】
【００３２】
本発明にかかる蛍光読み取り装置は、複数波長の蛍光測定時、精度良く焦点合わせが出来るという特徴を有し、従来の蛍光読み取り装置よりも明るい高品質な蛍光画像の取得が可能である。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】本発明の実施例１における蛍光読み取り装置の概略図
【図２】本発明の実施例１における蛍光粒子（ＱＤ）の蛍光を説明する概略図
【図３】本発明の実施例１による樹脂製粒子（ＱＢ）の概略図
【図４】従来の蛍光読み取り装置の概略図
【符号の説明】
【００３４】
１０１、４０１  励起光源
１０２、４０４  ダイクロイックミラー
１０３、４０５  対物レンズ
１０４、４０６  ＸＹステージ
１０５  バンドパスフィルタ
１０６  フィルタ切り替え手段
１０７、４０６  結像レンズ
１０８、４１０  ＣＣＤカメラ
１０９、４０８  透過光源
１１０、４１１  画像処理制御手段
１１１、４１２  モニタ
１１２  励起光
１１３、４１５  透過光
１１４、４０７  試料プレート
１１５  蛍光
１１６  生体試料（ｍＲＮＡ）
１１７  マーカ用蛍光体
１１８  樹脂製粒子（ＱＢ）
１１９  基準焦点位置
２０１、２０２、２０３、３０３、３０４、３０５  蛍光粒子（ＱＤ）
２０４  励起光
２０５、２０５、２０７  蛍光
３０１  ＱＢ（ＱＢ−Ｘ）
３０２  ＱＢ（ＱＢ−Ｙ）
３０６  マーカ用蛍光粒子
３０７  遺伝情報伝達物（ｍＲＮＡ−Ｘ）
３０６  遺伝情報伝達物（ｍＲＮＡ−Ｙ）
３０９、３１０  ＱＢと遺伝情報伝達物を接合する腕
４０２  励起フィルタ
４０３  励起光
４１３  蛍光体
４１４  生体試料
４１６  透過光検出手段
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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