(57)【要約】      （修正有）【課題】抗炎症効果及び皮膚刺激緩和効果を有する皮膚外用剤組成物の提供。【解決手段】糖化酵素による解糖過程で得られるブドウ糖含有量３０〜５０％の果糖に異性化した糖誘導体等である混合異性化糖（saccharide isomerate）及び天然漢方成分である銀杏葉抽出物を有効成分として含有することを特徴とする、抗炎症効果及び皮膚刺激緩和効果を有する皮膚外用剤組成物。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
混合異性化糖（saccharide isomerate）及び銀杏葉抽出物を有効成分として含有する皮膚外用剤組成物。
【請求項２】
前記混合異性化糖は、植物由来のブドウ糖であるＤ−グルコースの解糖過程で得られるものであることを特徴とする請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項３】
前記組成物は、組成物の総重量に対して混合異性化糖を０．００１〜２０．０重量％の量で含有することを特徴とする請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項４】
前記組成物は、組成物の総重量に対して銀杏葉抽出物を０．００１〜１０．０重量％の量で含有することを特徴とする請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項５】
前記組成物は、抗炎症用または皮膚刺激緩和用であることを特徴とする請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載の皮膚外用剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖誘導体である混合異性化糖（saccharide isomerate）及び天然漢方成分である銀杏葉抽出物を有効成分として含有することによって、抗炎症効果及び皮膚刺激緩和効果を有する皮膚外用剤組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
接触性皮膚炎は、外部の刺激物質を皮膚に適用する時、皮膚に現れる局所的炎症反応であって、臨床的症状には、かゆみ、ひりひり感、熱感などの刺激感及び紅斑（erythema）、浮腫（edema）などの炎症性刺激反応があり、組織学的には、真皮で浮腫が発見され、表皮と真皮で単核細胞の流入が観察される。また、接触性皮膚炎は、臨床的症状や発現機作によって、刺激性接触性皮膚炎、アレルギー性接触性皮膚炎、感覚性刺激、光毒性皮膚炎に大別できる。
【０００３】
より詳細には、刺激性接触性皮膚炎は、刺激源により刺激された角質形成細胞（keratinocyte）が、多様な生理活性を有するサイトカイン（cytokines）を分泌し、これらが周囲の細胞に作用することによって、炎症メディエーター、サイトカインなどを遊離し、血管拡張と血管透過性の亢進、そして白血球（leukocytes）の移動を誘導して、刺激源の作用部位に紅斑や浮腫などの炎症を起こす非免疫反応である。また、アレルギー性接触性皮膚炎は、免疫反応で化学物質に特異に作用するため、感知するのが難しく、相対的に深刻な臨床的反応を示し、時々は全身的な反応を誘導する。また、感覚性刺激は、紅斑や浮腫などの臨床的症状を示さずに、かゆみ、ひりひり感、熱感などの主観的症状を示す。また、光毒性刺激は、光刺激源分子が光と反応して、一連の生理化学的な反応を起こすことである。その症状は、熱感、かゆみ、紅斑及び浮腫を含む。しかしながら、これらは、明確に区分することが難しく、互いに共通する部分も多い。
【０００４】
ある物質が皮膚に刺激を起こすための共通の過程は、物質が皮膚に浸透して、表皮細胞や真皮細胞と相互作用することによって、兔疫系を活性化させ、その結果、炎症反応が生じることである。
【０００５】
一般に、皮膚に関連する多くの製品は、刺激や炎症を誘発し得る物質を含有していて、生活用品（personal care product）を使用する人々のうち、１０％以上が皮膚に対する副作用を訴えている。１９９０年代米国で消費者を対象にして調べた結果、５０％以上が自分を敏感性皮膚だと思う結果が得られた。しかも、最近、化粧品は、皮膚に実質的な効果を与えることができる機能性化粧品に偏った傾向にあるので、化粧品などの製品の使用による皮膚副作用はますます増加するだろうと考える。
【０００６】
したがって、皮膚刺激を緩和するための様々な方法が試みられており、例えば、皮膚刺激を誘発する物質を除去する方法が試みられた。しかし、機能性原料自体が刺激源として作用する場合が多く、また、香料、防腐剤、基剤などの化学物質が５，５００種以上使われているので、それぞれの構成成分によりいろいろな副作用が発生する可能性がある。乳酸（lactic acid）、グリコール酸（glycolic acid）、サリチル酸（salicylic acid）、レチノイド（retinoid）などは、皮膚細胞再生の促進または抗しわ効果のために化粧品に含有されるが、皮膚刺激を誘発する。したがって、使用する原料自体が刺激源として作用する場合が多く、皮膚刺激を誘発する物質を除去する方法の研究は限界がある。
【０００７】
一方、化粧品ではなく医薬品において、刺激緩和及び炎症緩和の目的で用いられている物質には、非ステロイド系として、フルフェナム酸（flufenamicacid）、イブプロフェン（ibuprofen）、ベンジダミン（benzydamine）、インドメタシン（indomethacin）などが挙げられ、ステロイド系として、プレドニゾロン（prednisolone）、デキサメタゾン（dexamethasone）などが挙げられるが、これらの大部分は、皮膚に対する安全性の観点、又は、皮膚用組成物の配合時の安定性の観点から、問題点を有するため、その使用が制限されている（KIM, ChangJong、病態心理学、pp61-69、1988）。それゆえ、人体への副作用が少なく、抗炎症及び刺激緩和効果を有する物質が研究、開発されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本願発明者らは、皮膚外用剤に使われる刺激緩和及び炎症緩和物質の問題点を解決するために、皮膚副作用が少なく、抗炎症効果を有する刺激緩和物質を開発しようと研究した結果、混合異性化糖が抗炎症効果及び皮膚刺激緩和効果に優れていることを見出した。さらに、血行促進効果を示す銀杏葉抽出物も抗炎症効果及び皮膚刺激緩和効果を有し、これらを共に適用すれば、前述の効果がさらに上昇することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明の目的は、糖誘導体である混合異性化糖及び天然漢方成分である銀杏葉抽出物を含有する抗炎症及び皮膚刺激緩和用の皮膚外用剤組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、混合異性化糖及び銀杏葉抽出物を含有する抗炎症及び皮膚刺激緩和用の皮膚外用剤組成物に関する。
【００１１】
本発明で使用する混合異性化糖は、化学的分類において炭水化物（carbohydrate）に属する炭水化物複合体であり、単糖類（saccharide）混合物が触媒化反応により再整列されながら作られた構造物である。この混合異性化糖は、皮膚表面に強力に付着し、乾燥した空気中でも水分を保持する効果、すなわち水磁石のような役目をするものとして知られているもので、皮膚保湿効果に優れた成分である。異性化糖は、自然系において細胞のエネルギー生成反応のための代謝作用のうち、反応の初期段階である解糖過程で見ることができる。反応の基質となるブドウ糖（D-glucose）は、酵素により異性化糖である果糖に転換された後、引き続き次の反応に供される。本発明の混合異性化糖は、植物由来のブドウ糖から製造される。
【００１２】
銀杏葉抽出物は、学名がGinkgo biloba L.(Ginkgoaceae)であり、幼い銀杏葉から由来するもので、伝統東洋薬物データ（Tredimed）には、痰喘（呼吸が困難で、喘息が激しく、せきが出る）、白帯（腰腹痛があり、食欲がなく、下腹が垂れる感じがある）、小便白濁、水瀉（消化が悪くて、水のような下痢をすること）、胸悶（胸が苦しい症状）などの病症治療に効果的であると紹介されており、化粧品では、血行促進により血色を高める効果があると紹介されている。
【００１３】
本発明による皮膚外用剤組成物は、組成物の総重量に対して、有効成分として混合異性化糖０．００１〜２０．０重量％を含有し、銀杏葉抽出物０．００１〜１０．０を重量％含有することを特徴とする。
【００１４】
本発明による皮膚外用剤組成物は、その剤型において特に限定されるものではなく、例えば、柔軟化粧水、栄養化粧水、マッサージクリーム、栄養クリーム、パック、ジェルまたは皮膚粘着タイプ化粧料の剤型を有する化粧料組成物であってもよく、また、ローション、軟膏、ゲル、クリーム、パッチまたは噴霧剤のような経皮投与型の剤型であってもよい。
【発明の効果】
【００１５】
本発明による抗炎症及び刺激緩和用の皮膚外用剤組成物は、混合異性化糖及び銀杏葉抽出物を有効成分として含有することによって、抗しわなどに効果を有する機能性成分による皮膚刺激を緩和し、炎症を誘発させる物質に対して炎症緩和効果を示すため、皮膚安全性が非常に高い敏感肌用皮膚外用剤として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、試験例により本発明を詳細に説明する。しかしながら、本発明はこれらの例に限定されるものではない。
【００１７】
以下の試験例では、混合異性化糖として、Pentapharm社製（スイス、商品名；Pentavitin HM）を使用し、銀杏葉抽出物として、太平洋社製（韓国、商品名；銀杏葉抽出物）を使用した。
【００１８】
上記混合異性化糖は、澱粉を酸または液化酵素で液化した後、糖化酵素と反応させて調製した糖化液を濾過、脱色、イオン精製し、さらにこの精製されたブドウ糖液を固定化した異性化酵素（glucose isomerase）層に通液して、ブドウ糖含量３０〜５０％の果糖に異性化したものである。
【００１９】
また、上記銀杏抽出物は、銀杏葉を細かく砕いて粉末にしたもの５０ｇを水、エタノール混合液５００ｍｌに室温で７日間浸漬して抽出し、濾過した後、その濾液を減圧濃縮して濃縮物（６．７ｇ）を得、食用エタノールで５０％（Ｗ／Ｗ）濃度に調整した銀杏抽出液である。
【００２０】
［試験例１］抗炎症試験１
抗炎症効果は、プロスタグランディンの生成抑制効果で評価した。前記抽出物を利用したマクロファージを対象にして効果を測定した。
【００２１】
まず、マウスの腹腔から取ったマクロファージに、最終濃度が５００μＭとなるようにアスピリンを添加し、細胞に残存するシクロオキシゲナーゼ（cyclooxygenase；ＣＯＸ）活性を非可逆的に阻害した。その後、前記懸濁液を、９６ウェルの細胞培養プレート（96 well plate）の各ウェルに１００μｌずつ滴下し、５％ＣＯ２と３７℃の条件下、培養器で２時間培養し、マクロファージを容器表面に付着させた。付着したマクロファージを、ＰＢＳで３回洗浄した後、これを抽出物の効果試験に使用した。
【００２２】
前記マクロファージ５ｘ１０４ｃｅｌｌ／ｍｌに、ＬＰＳを１％（ｗ／ｖ）で含有するＲＰＭＩ培地を添加して、１２時間培養することにより、プロスタグランディンの生成を誘発し、抽出物１００μｌで処理した際に遊離されるプロスタグランディンを、酵素免疫分析法（ＥＬＩＳＡ）を用いて定量した。この時、抽出物のプロスタグランディンの生成抑制活性は、ＬＰＳで処理した群と、処理しない群において各々生成されたプロスタグランディンの差異を１００％に設定し、ＬＰＳと試料の両方で処理したときのプロスタグランディンの減少量（百分率）として求め、対照群と比較し、効果判定した。その結果を下表１に示した。
【表１】
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【００２３】
実験結果、アスピリンで処理した対照群に比べて、混合異性化糖によるプロスタグランディンの生成抑制効果が非常に高いことが分かった。また、銀杏葉抽出物によるプロスタグランディンの生成抑制効果も高く、その効果は使用含量が増加するにつれて増加することが分かった。
【００２４】
［試験例２］抗炎症試験２
本実験は、ＳＤマウスを利用したカラギーナン足浮腫（Carrageenan foot edema）法を使用した。混合異性化糖及び銀杏葉抽出物のそれぞれの試料４０ｍｇ／ｋｇを腹腔内に投与した後、１時間後、０．１％のカラギーナン溶液０．５ｍｌを実験動物の後足の裏に注入して、炎症を誘発した。カラギーナン注入直後と、注入後４時間後、マウスの足嵩の変化を測定して、下記数式により％抑制率を算出し、その結果を下表２に示した。
【数１】
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【表２】
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【００２５】
［試験例３］局所抗炎症効能
テトラデカノイルホルボールアセテート（Tetradecanoylphorbol acetate；ＴＰＡ）２μｇを２０μｌアセトンに溶解し、ＩＣＲマウスの耳に塗布して、浮腫を誘発した。浮腫を誘発した直後、１５分後、６時間後にそれぞれの試料を塗布した。最初のＴＰＡ塗布後、２４時間後に、マウスの耳の一定部分をパンチで打ち抜き、耳の重さを測定した。また、浮腫の部位に寄り集まった好中球(neutrophils)の数の指標として、ミエロペルオキシダーゼ（myeloperoxidase）活性を測定することによって、各試料の抗炎症効能を評価し、その結果を下表３に示した。
【表３】
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【００２６】
前記表２及び表３から明らかなように、混合異性化糖及び銀杏葉抽出物で処理した群は、対照群として使用したアスピリン処理群に比べて優れた効果を示した。特に、混合異性化糖による抗炎症効果は非常に優れた結果を示し、特に混合異性化糖及び銀杏葉抽出物を共に適用する場合に、非常に優れた抗炎症効能が得られた。
【００２７】
［試験例４］刺激緩和試験
女性と男性１５人（Ｍ３、Ｆ１２）を対象にして、直径１．３ｃｍ程度の円形に、試験物質２０μｌをスパチュラ（spatula）を用いて５０回塗布した。初めの２回は、試験物質塗布後、内部にろ過紙のないヒルトップチャンバー（hill top chamber）を載せた後、絆創膏で固定して、閉鎖条件を作った。ヒルトップチャンバーによるチャンバーにおいて、３回から８回までは、試験物質塗布後、ろ過紙を載せ、絆創膏を用いて固定した。２３時間毎に塗布し、塗布除去後、１時間後にＣＴＦＡガイドライン（１９８１年）のterminologyに基づいて検査をした。週末には塗布しなかった。塗布終了後、４日目には、delayed type反応を調べるために、追加検査を行い、結果に反映させた。データは、最後の検査結果を用いて、Levene’testで等分散性を確認した後、ＡＮＯＶＡ（Ｄｕｎｃａｎ）により事後検定（ｐ＜０．０５）を行い比較した。判定は、下表４を基準に行った。試験物質は、細胞再生の促進または抗しわ効果のために化粧品に含有される機能性原料の1つである乳酸を選択して、試験を行い、また、混合異性化糖及び銀杏葉抽出物による刺激緩和効果があるかどうかを把握するために、乳酸と混合して製造した。
【表４】
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【００２８】
試験物質は、下表５の処方で調製した。
【表５】
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【００２９】
日付別の刺激数値データは、下表６に示す通りである。図１は、各試料別に刺激指数値を合計した結果を示すグラフである。
【表６】
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【００３０】
本試験の結果から、乳酸による皮膚に対する刺激反応が非常に高いのに対して、混合異性化糖及び銀杏葉抽出物により乳酸による皮膚刺激が非常に低いことが分かった。また、前記データから、刺激緩和効果を示す混合異性化糖及び銀杏葉抽出物を共に適用した時、皮膚刺激緩和効果がさらに高まることが分かった。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】乳酸及び刺激緩和原料に対するヒト累積刺激試験結果を示すグラフである。
【図１】
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