(57)【要約】【課題】  有効菌を用いて、ジャガイモのそうか病の発生を効果的に抑制するそうか病抑制剤とその抑制方法を提供する。【解決手段】  バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株を１００ｍｌのＢＴ液体  培地（肉エキス１０ｇ，ポリペプトン１０ｇ，ＮａＣｌ２ｇ，蒸留水１０００ｍｌｐＨ７．６）に入れて振とう培養し、その２４時間培養物を７９２ｍｌのＢＴ培地中に移して本培養する。土，減菌ナプラ，バーミキュライト，油かす，ピートモス，炭酸カルシウムを混合した高圧減菌した土壌を作製してワグネネルポットに入れて希釈液肥を散布したものに、上記の本培養物を根圏土壌とともに加えて撹拌した。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を有効菌とする、ジャガイモそうか病抑制剤。
【請求項２】
粉粒体状担体にバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を含有させた粉粒体状の請求項１記載のジャガイモそうか病抑制剤。
【請求項３】
バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を液体培地で培養した液体状の請求項１記載のジャガイモそうか病抑制剤。
【請求項４】
バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を固体培地で培養した固形状の請求項１記載のジャガイモそうか病抑制剤。
【請求項５】
肥料に請求項１〜４のジャガイモそうか病抑制剤を添加してそうか病を抑制できる、ジャガイモ肥料。
【請求項６】
農薬に請求項１〜４のジャガイモそうか病抑制剤を添加してそうか病を抑制できる、ジャガイモ用農薬。
【請求項７】
土に請求項１〜４いずれかのそうか病抑制剤を接種して、ジャガイモのそうか病の発生を抑える、ジャガイモ栽培土。
【請求項８】
請求項１〜４いずれかのそうか病抑制剤を、畑に散布又はすきこんでジャガイモのそうか病の発生を抑える、ジャガイモのそうか病抑制方法。
【請求項９】
ジャガイモの種芋を請求項１〜４いずれかのそうか病抑制剤に接触させて種芋表面にバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を付着させてから畑に植えつけて、ジャガイモのそうか病の発生を抑える、ジャガイモのそうか病抑制方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジャガイモの収穫に大きな影響を与えるそうか病の発生を、バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）菌を用いて抑制する技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
ジャガイモのそうか病は、ジャガイモの表面・内部で繁殖して褐色の病巣を作り、表面に褐色の病斑を生起させる。このそうか病に冒されたジャガイモは商品価値を失うもので、ジャガイモの収穫に大きく影響を与えるものである。
【０００３】
従来、植物及び果実における真菌感染または細菌感染による病害を抑制する方法として、抗菌活性を有するバチルス・チューリンジェンシス株ＡＱ５２（ＮＲＲＬ寄託番号Ｂ２１６１９）の菌の培養物を用いる方法が、特表２００１−５２４８０６号公報で知られている。
【０００４】
このバチルス・チューリンジェンシス株は、他の細菌株との組み合わせによって、トマト植物の焼き枯れ病の抑制、ビートアワヨトウ幼虫の生育阻害を示す。しかしながらジャガイモのそうか病に有効であるとまで知られていない。
又、このジャガイモのそうか病を効果的に抑止する細菌は知られていなかった。
【特許文献１】特表２００１−５２４８０６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明が解決しようとする課題は、従来の問題を解消し、ジャガイモのそうか病を有効に抑止しうる細菌を用いたジャガイモそうか病抑制剤及びそうか病抑制方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
かかる課題を解決した本発明の構成は、
１）  バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を有効菌とする、ジャガイモそうか病抑制剤
２）  粉粒体状担体にバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を含有させた粉粒体状の前記１）記載のジャガイモそうか病抑制剤
３）  バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を液体培地で培養した液体状の前記１）記載のジャガイモそうか病抑制剤
４）  バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を固体培地で培養した固形状の前記１）記載のジャガイモそうか病抑制剤
５）  肥料に前記１）〜４）のジャガイモそうか病抑制剤を添加してそうか病を抑制できる、ジャガイモ肥料
６）  農薬に前記１）〜４）のジャガイモそうか病抑制剤を添加してそうか病を抑制できる、ジャガイモ用農薬
７）  土に前記１）〜４）いずれかのそうか病抑制剤を接種して、ジャガイモのそうか病の発生を抑える、ジャガイモ栽培土
８）  前記１）〜４）いずれかのそうか病抑制剤を、畑に散布又はすきこんでジャガイモのそうか病の発生を抑える、ジャガイモのそうか病抑制方法
９）  ジャガイモの種芋を前記１）〜４）いずれかのそうか病抑制剤に接触させて種芋表面にバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を付着させてから畑に植えつけて、ジャガイモのそうか病の発生を抑える、ジャガイモのそうか病抑制方法
にある。
本発明の粉粒状坦体としては、炭酸カルシウム，ゼオライト，バーミキュライト，カニガラ，エビガラ等の甲殻類の粉末等を材料とするものが一般的に使用される。製品は、この坦体にバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を添加混合して製作する。
又本発明の固形培地としては液体培地に寒天を加えて固化した培地を成分としたものが使用されるが、米ぬか・ふすま類・焼酎かす等の食品廃棄物を有効に使用できる。これらを坦体に添加してバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を含有させたものが使用される。
尚、本明細書中の菌の英文表記の下線は菌のイタリックス表記であることを示す。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）を有効菌（その培養物）とすることで、ジャガイモそうか病を、効果的に抑制できた。又その施用方法として、土壌又は栽培土にバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）のジャガイモそうか病抑制剤を散布すること又はすき込むことでそうか病が発生しにくい畑、土壌にでき、又本発明のそうか病抑制剤に接触させたジャガイモの種芋は植え付けられるとそうか病の発生がきわめて少なくできる、という効果がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明のバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）は、有害病原源菌を抑止する他の細菌（抗菌性微生物）とともに、混合培養して、これを畑又は土壌に散布することが好ましい。又は種芋にこの培養物を接触させることでもかなりのそうか病の抑止を得ることができる。
ジャガイモそうか病抑制剤の最も好ましい使用方法は種芋をその抑制剤に直接つける方法かあるいは、種芋を播種する前に土壌に直接散布する方法が好ましい。
【実施例１】
【０００９】
本発明に使用するバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）の性状について説明する。
１．性態学的性状
＊グラム染色  陽性
＊通性好気性
＊運動性  陽性
＊桿菌（連鎖有り）
＊胞子形成（楕円径：芽胞位置  偏在）
＊胞子の横に円形のＰａｒａｓｐｏｒａｌ  ｃｒｙｓｔａｌを作る
【００１０】
【表１】
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【００１１】
生化学的性状テストの結果は表２の通りである。
【００１２】
【表２】
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【００１３】
本発明に使用するバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）の特性は表３の通りである。
【００１４】
【表３】
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【００１５】
本発明に使用するバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）の寄託の情報
寄託所：独立行政法人産業技術総合研究所  特殊生物寄託センター
受託番号：ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３
分類学上の位置：Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ
識別のための表示：Ａ３２４
【００１６】
（そうか病抑制比較試験）
以下、本発明のバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株（受諾番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１９７１３）のジャガイモそうか病の効果を確かめるため確認試験（圃場試験）行った。試験は１／５０００ａ及び１／２０００ａのワグネネルポットを用いて行った下記表４と図１に試験条件を示す。
表６よりＡ３２４区は全く発病が見られず、Ａ３２４株がジャガイモそうか病に抗菌活性をもっていることが確認できた。
【００１７】
【表４】
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【００１８】
以下、試験の手順を詳しく説明する。
１．８月２５日
堆肥・土壌等量培地（下記）１ＬにＭａｌｔｏｓｅ−Ｂｅｎｎｅｔｔ’ｓ液体培地（下記）でジャガイモそうか病の病源菌であるストレプトマイセス・スキャビーズ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｃａｂｉｅｓ）ＮＢＲＣ１３７６７株を試験管で２８℃１２１ｍｉｎ-1７日間振とう培養した培養液を１０ｍｌ加え撹拌し２８℃のインキュベーターで培養した。
【００１９】
【表５】
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【００２０】
２．８月３０日
土１５ｋｇに減菌ナプラ１Ｌ、バーミキュライト２Ｌ、油かす１Ｌ、ピートモス２Ｌ、炭酸カルシウム１０ｇを混合し、高圧蒸気減菌を行い、圃場試験用の土壌を作製した。
【００２１】
３．９月３日
ジャガイモの種芋（品種：出島）を水道水にて洗浄し室内にて乾燥させた。
【００２２】
４．９月１０日
（１） １／５０００ａワグネネルポットに前記２．で作製した減菌土壌３ｋｇを詰めた。
（２） バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株を１００ｍｌの三角フラスコにＢＴ液体培地（下記）８ｍｌ入れたものに１白金耳植菌し２８℃１２１ｍｉｎ-1で振とう培養を開始した。
ＢＴ液体培地
肉エキス  １０ｇ
ポリペプトン  １０ｇ
ＮａＣｌ  ２ｇ
蒸留水  １０００ｍｌ
ｐＨ７．６
【００２３】
５．９月１１日
（１） ４−（２）で前培養しているバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株の２４時間培養物を２０００ｍｌの撹拌三角フラスコに調製してある７９２ｍｌのＢＴ液体培地中に全量移し８００ｍｌのスケールで２８℃１５０ｒｐｍの本培養開始を開始した。
（２） １／２０００ａワグネネルポットに前記２．で作製した減菌土壌７．５ｋｇを詰めた。
（３） ４−（１）で作製した１／５０００ａワグネネルポットに５００ｍｌ、５−（２）で作製した１／２０００ａワグネネルポットに１Ｌの「くみあい苦土有機入り尿素複合液肥０４６」の１０００倍希釈溶液を散布した。
（４） ５−（３）で作製した１／５０００ａワグネネルポットに１０ｇ（５試験区）、１／２０００ａワグネネルポットに２５ｇ（１試験区）の病源菌のストレプトマイセス・スキャビーズ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｃａｂｉｅｓ）ＮＢＲＣ１３７６７株を２８℃１７日間培養した堆肥・土壌等量培地を根圏に投入し撹拌した。
（５） ５−（４）の病害区として５−（４）と同じものを作製した。
（６） ５−（４）の対照区として、５−（３）で作製したワグネネルポットに病源菌のストレプトマイセス・スキャビーズ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｃａｂｉｅｓ）ＮＢＲＣ１３７６７株を培養していない堆肥・土壌等量培地を１／５０００ａワグネネルポットに１０ｇ（５試験区）、１／２０００ａワグネネルポットに２５ｇ（１試験区）根圏に投入し撹拌した。
【００２４】
６．９月１２日
（１） ７０％ＥｔＯＨに３で洗浄した種芋を３分浸した後、乾燥させ殺菌した。
（２） ５−（４）で作製した１／５０００ａワグネネルポットに、５−（１）でバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株の２４時間本培養したものを、１００ｍｌ根圏土壌に加え撹拌した。（５試験区）
（３） ６−（２）の対照区と病害区として５−（５）、５−（６）で作製した１／５０００ａワグネネルポットに減菌したＢＴ液体培地のみ（無菌）を１００ｍｌずつ根圏に加え撹拌した。（１／５０００ａワグネネルポットの対照区及び病害区は、各５試験区ずつ。）
（４） ５−（４）で作製した１／２０００ａワグネネルポットに、６−（１）で殺菌した種芋をバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株２４時間培養物に３０分浸し種芋を投入した（播種）。（１試験区）。
（５） ６−（４）の対照区と病害区として５−（５）、５−（６）で作製した１／２０００ａワグネネルポットに、減菌したＢＴ液体培地のみ（無菌）に、６−（１）で殺菌した種芋を３０分浸しそれぞれ種芋１個を投入した（播種）。（対照区及び病害区は、各１試験区ずつ。）
【００２５】
７．９月１３日
６−（２）、６−（３）で作製した１／５０００ａワグネネルポットに６−（１）で殺菌した種芋それぞれ１個を投入した（播種）。
【００２６】
８．９月３０日
多数出ているジャガイモの芽を摘み取り３本仕立てにした。（芽かき）
【００２７】
９．１０月２日  １０月２４日
土寄せ
【００２８】
１０．１２月２６日
各試験区よりジャガイモの収穫、病斑判定記録
【００２９】
１１．１２月２９日
１０で収穫したジャガイモを水道水で洗浄し、再度、病斑の判定と記録を行った。
【００３０】
以上の結果、収穫したジャガイモのそうか病の病斑の有無と程度を判定したら下記の表５の結果となった。
【００３１】
【表６】
2005289878.tif 000008
【００３２】
この表６から分かるように、本発明のバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株は発病した鉢がなく、ジャガイモが健全に生育していて、バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）Ａ３２４株がジャガイモそうか菌の発病を抑制していることが分かった。他のバチルス・チューリンジェンシスの他菌株では病斑・腐れが認められ、充分なそうか病の抑制とはなっていなかった。
【００３３】
尚、栽培期間中の散水は控え目に行ない、やや土壌が湿っている状態〜乾燥している状態に調節した。
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明のジャガイモそうか病抑制剤は、ジャガイモのそうか病の抑制の他に、他の多くの抗菌性ＢＴ菌や抗菌性微生物を添加して使うことにより、他の植物病害の抗菌剤として使用できる。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】実施例１に使用した０区・１区・９区のワグネネルポットの使用状態を示す説明図である。
【符号の説明】
【００３６】
１  １／５０００ａワグネネルポット
２  １／２０００ａワグネネルポット
【図１】
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