(57)【要約】【課題】  １６員環マクロライド誘導体の抗菌活性を高水準に維持しつつ、血漿中における構造安定性が十分に高く生体内半減期の大幅な延長を可能とする１６員環マクロライド誘導体を提供すること。【解決手段】  下記一般式（１）：【化１】2005298436.tif 000024（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示し、Ｘは＝ＣＨ−ＯＨ又は＝Ｃ＝Ｏで表される基を示す。）で表されることを特徴とする１６員環マクロライド誘導体又はその塩。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）：
【化１】
2005298436.tif 000018
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示し、Ｘは＝ＣＨ−ＯＨ又は＝Ｃ＝Ｏで表される基を示す。）
で表されることを特徴とする１６員環マクロライド誘導体又はその塩。
【請求項２】
下記一般式（２）：
【化２】
2005298436.tif 000019
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表されることを特徴とする請求項１に記載の１６員環マクロライド誘導体又はその塩。
【請求項３】
下記一般式（３）：
【化３】
2005298436.tif 000020
（式中、Ａは保護されていてもよいアルデヒド基を示し、Ｂ１は同一でも異なっていてもよく、それぞれ保護されていてもよい水酸基を示す。）
で表される化合物の９位を還元剤により還元した後、生成された９位の水酸基と、３位の水酸基及び１９位のアルデヒド基が閉環することにより生ずるアセタールとに保護基を導入して下記一般式（４）：
【化４】
2005298436.tif 000021
（式中、Ｂ１は一般式（３）中のＢ１と同義であり、Ｂ２は同一でも異なっていてもよく、それぞれ保護されていてもよい水酸基を示す。）
で表される化合物を得る第１工程と、
前記一般式（４）で表される化合物に塩基を反応させてラクトン環の２位の水素原子を引き抜いた後、メチル化剤を反応させて下記一般式（５）：
【化５】
2005298436.tif 000022
（式中、Ｂ１及びＢ２は一般式（４）中のＢ１及びＢ２とそれぞれ同義であり、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表される化合物を得る第２工程と、
前記一般式（５）で表される化合物中の保護基を除去した後、ラクトン環の９位を酸化して下記一般式（２）：
【化６】
2005298436.tif 000023
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表される１６員環マクロライド誘導体を得る第３工程と、
を含むことを特徴とする１６員環マクロライド誘導体の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はグラム陽性菌に有効な１６員環マクロライド誘導体及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
グラム陽性菌、マイコプラズマ、クラミジア等に有効なマクロライド系抗生物質は、経口投与が可能であり、かつ毒性が低い等の理由により臨床上重要な抗菌剤に分類される。中でも１６員環マクロライド系抗生物質は、耐性誘導されにくいこと、他の薬剤との相互作用が少ないこと、腸管に与える影響が少ないことなどから、多くの誘導体合成研究が行われており、非特許文献１には、ロキタマイシン（ＲＫＭ）が造出されていることが報告されている。
【０００３】
しかしながら、１６員環マクロライド系抗生物質には、一般的に生体内での構造安定性が低く生体内半減期が短いという点で問題があり、例えば非特許文献２においては、１６員環マクロライド系抗生物質であるスピラマイシンは血漿中エステラーゼによりアグリコンが開環されて活性が消失すると報告されている。
【０００４】
また、１６員環マクロライド誘導体に関し、特許文献１には２位にメチル基等の低級アルキル基が置換した２−アルキルタイロシン誘導体が開示されているが、それでもなお生体内における構造安定性が未だ十分なものではなかった。
【０００５】
このように、従来の１６員環マクロライド誘導体はいずれも血漿中における構造安定性が十分に高いものではなく、生体内半減期が十分に延長された１６員環マクロライド誘導体は未だ得られていなかった。
【特許文献１】特開平６−３０６０９４号公報
【非特許文献１】H.Sakakibara,et  al.,“Acyl  Derivatives  of  16-Membered  Macrolides”,The  Journal  of  Antibiotics,1981,Vol.34,No.8,p.1001〜1018
【非特許文献２】A.Inoue,et  al.,“Biosynthesis  and  The  Metabolic  Fate  of  Carbon-14  Labeled  Spiramycin  I”,The  Journal  of  Antibiotics,1983,Vol.36,No.4,p.442〜444
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、上記従来技術の有する課題に鑑みてなされたものであり、抗菌活性を高水準に維持しつつ、血漿中における構造安定性が十分に高く生体内半減期の大幅な延長を可能とする１６員環マクロライド誘導体及びその製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、１６員環マクロライド誘導体の２位に少なくとも一つのメチル基を導入すると共に３位にカルボニル基又は水酸基を残すことにより前記目的が達成されることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明の１６員環マクロライド誘導体又はその塩は、下記一般式（１）：
【０００９】
【化１】
2005298436.tif 000002
【００１０】
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示し、Ｘは＝ＣＨ−ＯＨ又は＝Ｃ＝Ｏで表される基を示す。）
で表されることを特徴とするもの又はその塩である。
【００１１】
本発明の１６員環マクロライド誘導体又はその塩としては、下記一般式（２）：
【００１２】
【化２】
2005298436.tif 000003
【００１３】
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表されるもの又はその塩が好ましい。
【００１４】
また、本発明の１６員環マクロライド誘導体の製造方法は、下記一般式（３）：
【００１５】
【化３】
2005298436.tif 000004
【００１６】
（式中、Ａは保護されていてもよいアルデヒド基を示し、Ｂ１は同一でも異なっていてもよく、それぞれ保護されていてもよい水酸基を示す。）
で表される化合物の９位を還元剤により還元した後、生成された９位の水酸基と、３位の水酸基及び１９位のアルデヒド基が閉環することにより生ずるアセタールとに保護基を導入して下記一般式（４）：
【００１７】
【化４】
2005298436.tif 000005
【００１８】
（式中、Ｂ１は一般式（３）中のＢ１と同義であり、Ｂ２は同一でも異なっていてもよく、それぞれ保護されていてもよい水酸基を示す。）
で表される化合物を得る第１工程と、
前記一般式（４）で表される化合物に塩基を反応させてラクトン環の２位の水素原子を引き抜いた後、メチル化剤を反応させて下記一般式（５）：
【００１９】
【化５】
2005298436.tif 000006
【００２０】
（式中、Ｂ１及びＢ２は一般式（４）中のＢ１及びＢ２とそれぞれ同義であり、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表される化合物を得る第２工程と、
前記一般式（５）で表される化合物中の保護基を除去した後、ラクトン環の９位を酸化して下記一般式（２）：
【００２１】
【化６】
2005298436.tif 000007
【００２２】
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表される１６員環マクロライド誘導体を得る第３工程と、
を含むことを特徴とする方法である。
【００２３】
なお、本発明の１６員環マクロライド誘導体によれば生体内における活性が高水準に維持されつつ生体内での構造安定性が向上して生体内半減期が大幅に延長される理由は必ずしも定かではないが、本発明者らは以下のように推察する。すなわち、血漿中のエステラーゼによりアグリコンが開環して活性が消失する現象は１４員環マクロライド系抗生物質では報告されておらず、この原因を追求すべく１４員環マクロライド系抗生物質と１６員環マクロライド系抗生物質の化学構造を比較すると、１４員環マクロライド系抗生物質は２位にメチル基が存在するのに対して１６員環マクロライド系抗生物質は２位にメチル基が存在しないことが分かった。そのため、１４員環マクロライド系抗生物質はエステル結合の近傍に存在する２位メチル基の立体障害によって血漿中エステラーゼに対する抵抗性を有しているものと推察した。また、前述の特許文献１では２−アルキルタイロシン誘導体が開示されているが、本化合物は３位水酸基を除去しているために生体内における構造安定性が不十分であると推察した。そこで１６員環マクロライド系抗生物質の２位にメチル基を導入し、且つ、３位に水酸基またはカルボニル基を残すことによって血漿中エステラーゼに対する立体障害が相乗的に作用するようになるため、血漿中エステラーゼに対する抵抗性が驚くべきことに向上したものと推察する。
【発明の効果】
【００２４】
本発明によれば、抗菌活性を高水準に維持しつつ、血漿中における構造安定性が十分に高く生体内半減期の大幅な延長を可能とする１６員環マクロライド誘導体及びその製造方法を提供することが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
以下、本発明をその好適な実施形態に即して詳細に説明する。
【００２６】
先ず、本発明の１６員環マクロライド誘導体又はその塩について説明する。本発明の１６員環マクロライド誘導体又はその塩は、下記一般式（１）：
【００２７】
【化７】
2005298436.tif 000008
【００２８】
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示し、Ｘは＝ＣＨ−ＯＨ又は＝Ｃ＝Ｏで表される基を示す。）
で表されるもの又はその塩である。
【００２９】
前記の一般式（１）で表したように本発明の１６員環マクロライド誘導体は、２位に少なくとも１つのメチル基が結合している。２位に置換基を有さない場合、すなわち、２位が＝ＣＨ２である場合には、血漿中のエステラーゼによりアグリコンが開環して活性が消失する現象が起こる。
【００３０】
また、前記一般式（１）中のＸが＝Ｃ＝Ｏ又は＝ＣＨ−ＯＨであるため、立体障害が向上し、前記２位に置換している少なくとも１つのメチル基との相乗効果により構造安定性が向上する。なお、前記Ｘが＝ＣＨ−ＯＨの場合、水酸基の立体配置はα配置又はβ配置のどちらでもよいが、下記一般式（２）：
【００３１】
【化８】
2005298436.tif 000009
【００３２】
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表されているように、水酸基がα配置したものは、抗菌活性がより高くなることから特に好ましい。
【００３３】
また、本発明の１６員環マクロライド誘導体の塩は、前記一般式（１）で表される１６員環マクロライド誘導体が酸又は塩基と塩を形成したものである。このような塩としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の鉱酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸等の有機酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等の酸性アミノ酸との酸付加塩が挙げられる。
【００３４】
このような１６員環マクロライド誘導体又はその塩の使用形態は特に制限されないが、例えば、常用の増量剤、ｐＨ調節剤、溶解剤等を添加し、常用の製剤技術によって、錠剤、顆粒剤、丸剤、カプセル剤、粉剤、液剤、懸濁剤、注射剤等の製剤とすることができる。また、本発明の１６員環マクロライド誘導体を含有する製剤の投与方法も特に制限されず、経口的又は非経口的に投与することが可能である。
【００３５】
また、本発明の１６員環マクロライド誘導体又はその塩の投与量も特に制限されず、、その投与量は疾病の種類、症状、患者の年齢、体重等により適宜増減することができるが、一般的には、成人の患者に対して２００〜１５００ｍｇ／日程度を数回に分けて投与することが好ましい。
【００３６】
本発明の１６員環マクロライド誘導体又はその塩は、種々の方法により製造することができるが、以下にその代表的な製造法について説明する。
【００３７】
先ず、前記一般式（１）中のＸがカルボニル基（＝Ｃ＝Ｏ）である一般式（６）：
【００３８】
【化９】
2005298436.tif 000010
【００３９】
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表される１６員環マクロライド誘導体の代表的な製法は、下記反応式（i）：
【００４０】
【化１０】
2005298436.tif 000011
【００４１】
（式中、Ａは保護されていてもよいアルデヒド基を示し、Ｂは保護されていてもよい水酸基を示し、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表される製法である（以下、「第一の製法」という）。
【００４２】
すなわち、第一の製法は反応式（i）中において一般式（７）で表される１６員環マクロライド誘導体の２位を不活性溶剤中でメチル化した後、そのメチル化後の１６員環マクロライド誘導体から保護基を除去することにより製造する方法である。
【００４３】
不活性有機溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ヘキサン、ヘキサメチルホスホラミド（ＨＭＰＡ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルプロピレンウレア（ＤＭＰＵ）、クロロホルム、ジクロロメタン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ベンゼン、トルエン又はその混合溶媒等が挙げられる。
【００４４】
また、前記一般式（７）中のＡで表される「保護されていてもよいアルデヒド基」としては、アルデヒド基、或いはアセタール、チオアセタール、ケタール、チオケタール等の保護されているアルデヒド基が挙げられる。このような保護されているアルデヒド基としては、具体的にはジメチルアセタール、ジメチルケタール、ジエチルアセタール、ジエチルケタール、ジエチルチオアセタール、ジエチルチオケタール、エチレンアセタール、エチレンチオケタール、プロピレンアセタール、プロピレンケタール、或いはこれらに更にメチル基等の置換基が結合したもの等が挙げられる。
【００４５】
また、前記一般式（７）中のＢで表される「保護されていてもよい水酸基」としては、水酸基、或いは下記保護基により保護されている水酸基が挙げられる。このような保護基としては、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、トリ（イソプロピル）シリル基、トリ（ｔｅｒｔ−ブチル）シリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジエチルシリル基、セキシルジメチルシリル基等のシリル系の保護基、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基等のアルカノイル系の保護基、２−テトラヒドロフラニル基、２−テトラヒドロピラニル基等の保護基が挙げられる。
【００４６】
また、ラクトン環の２位のメチル化の方法としては、エステルに隣接するα位をアルキル化する一般的な方法を用いることができ、特に制限されるものではないが、具体的には、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドや水素化ナトリウム等の塩基と反応させた後にメチル化剤を導入する方法や、シリルエノレート、チタンエノレート等を用いてエノレートを形成させた後に２位アルキル化を行う方法等を挙げることができる。なお、メチル化の反応を通じて、不活性有機溶媒中、室温又は冷却した温度条件下（好ましくは、−７８〜０℃）で反応をさせることが好ましい。前記温度条件を超える高温となると、マクロライド化合物が分解する傾向にある。
【００４７】
また、保護基を除去する方法としては、通常用いられる方法を用いることができ、特に制限されないが、具体的には、アンモニア等の塩基、塩酸、硫酸等の無機酸で処理する方法や、トリフルオロ酢酸、ジフルオロ酢酸等の有機酸で処理する方法等が挙げられる。また、保護基がシリル系保護基である場合は、テトラブチルアンモニウムフルオリド、塩酸、酢酸等で処理する方法が挙げられる。なお、保護基の除去に際しては、２０〜６０℃の温度条件下、１〜７２時間攪拌して反応させることが好ましい。
【００４８】
次に、前記一般式（１）中のＸが＝ＣＨ−ＯＨである一般式（８)：
【００４９】
【化１１】
2005298436.tif 000012
【００５０】
（式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表される１６員環マクロライド誘導体の製造方法のうち代表的な例を説明する。このような１６員環マクロライド誘導体の代表的な製造方法は、下記反応式（ii）：
【００５１】
【化１２】
2005298436.tif 000013
【００５２】
（式中、Ａは保護されていてもよいアルデヒド基を示し、Ｂは保護されていてもよい水酸基を示し、Ｒは水素原子又はメチル基を示す。）
で表される製造方法である（以下、第二の製法という）。
【００５３】
すなわち、第二の製法は、反応式（ii）において一般式（９）で表される化合物の３位及び９位のカルボニル基（オキソ基）を還元して水酸基とした後、酸化剤を用いて９位を再酸化し、その後に保護基を除去することにより前記一般式（８）で表される１６員環マクロライド誘導体を製造する方法である。
【００５４】
酸化する方法としては、ピリジニウムクロロクロメート、ピリジニウムジクロメート等のクロム化合物、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬、Ｊｏｎｅｓ試薬等の酸化剤を用いる方法の他、Ｓｗｅｒｎ酸化、Ｃｏｒｅｙ−Ｋｉｍ酸化等の方法を用いることもできる。
【００５５】
また、反応溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、アセトニトリル等が用いられる。また、前記一般式（９）中のＡで表される「保護されていてもよいアルデヒド基」及び前記一般式（９）中のＢで表される「保護されていてもよい水酸基」は、前記第一の製法で説明したものと同様である。
【００５６】
また、カルボニル基を還元する方法としては、一般的な方法を用いることができ、特に制限されないが、具体的には、塩化セリウム等のランタノイド化合物や、塩化カルシウム、塩化マグネシウム等の存在下、アルコール中において水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤を添加して還元する方法が挙げられる。なお、還元に際しての反応条件としては、用いる還元剤によって適宜選択されるが、一般的には−２０〜２５℃の温度条件下、０．５〜２時間反応させることが好ましい。
【００５７】
また、９位を再酸化する方法としては、前記酸化剤により酸化する方法が挙げられる。また酸化に際しての反応条件としては、用いる酸化剤によって適宜選択されるが、一般的には−２０〜２５℃の温度条件下、０．５〜２時間反応させることが好ましい。
【００５８】
次に、本発明の１６員環マクロライド誘導体の製造方法、すなわち、前記一般式（２）で表される１６員環マクロライド誘導体の製造方法を説明する（以下、「第三の製法」という。）。このような本発明の１６員環マクロライド誘導体の製造方法は、反応式（iii）：
【００５９】
【化１３】
2005298436.tif 000014
【００６０】
（式中、Ａは保護されていてもよいアルデヒド基を示し、Ｂ１及びＢ２はそれぞれ保護されていてもよい水酸基を示し、Ｒはメチル基又は水素原子を示す。）
で表される方法である。
【００６１】
先ず、第１工程として、反応式（iii）において一般式（３）で表される化合物の９位のカルボニル基を還元剤により還元した後、生成された９位の水酸基と、３位の水酸基及び１９位のアルデヒド基が閉環することにより生ずるアセタールとに保護基を導入して一般式（４）で表される化合物を得る。
【００６２】
反応式（iii）中のＡで表される「保護されていてもよいアルデヒド基」及び、Ｂ１、Ｂ２で表される「保護されていてもよい水酸基」としては、前記第一の製法において説明したものと同様である。
【００６３】
また、カルボニル基を還元剤により還元する方法としては、前記第二の製法において説明した方法と同様である。また、還元剤の配合量としては、一般式（３）で表されている化合物の１モルに対して還元剤の配合量が、３〜６モルとなることが好ましい。なお、還元剤を導入することで得られた化合物を精製して得られる中間体を、以下「中間体ａ」という。
【００６４】
また、保護基を導入する方法としては、特に制限されないが、例えば前記第一の製法において説明した保護基を含有する化合物（保護剤）を、中間体ａを不活性有機溶媒に溶解させた溶液に添加して保護基を導入する方法が挙げられる。具体的には、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド等の化合物を保護剤として添加し、攪拌して反応させることにより、保護基を導入する方法が好ましい。このような保護剤の配合量としては、中間体ａの１モルに対して保護剤の配合量が、２〜４モルとなることが好ましい。また、保護基の導入に際しての反応条件としては、用いる保護剤によって適宜選択されるが、一般的にはＤＭＦ等の不活性有機溶媒中、２０〜６０℃の温度条件下、１２〜２４時間反応させて保護基を導入することが好ましい。
【００６５】
また、一般式（４）で表される化合物を精製する方法としては一般的な方法を用いることができ、特に制限されないが、具体的には、反応液から化合物を抽出した後、無水硫酸マグネシウムを用いて乾燥させて濃縮して得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製する方法等が挙げられる。
【００６６】
次に、第２工程として、前記一般式（４）で表される化合物に不活性有機溶媒中塩基を反応させてラクトン環の２位の水素原子を引き抜いた後、メチル化剤を反応させて前記一般式（５）で表される化合物を得る。
【００６７】
このような不活性有機溶媒としては、第一の製法で説明したものと同様である。また、塩基としては、水素の引き抜きに用いることができるものであればよく、特に制限されないが、ブチルリチウム、ＬＤＡ（リチウムジイソプロピルアミド）のような塩基を好適に用いることができる。また、メチル化剤としては、ヨウ化メチル等の一般的なものが挙げられる。
【００６８】
また、２位の水素原子を引き抜く反応としては、窒素気流下、室温又は冷却した温度条件下（好ましくは−７８〜０℃）で、不活性有機溶媒に塩基を配合した溶液に前記一般式（４）で表されている化合物を添加して、２位の水素原子を引き抜く反応が挙げられる。なお、反応時間としては、用いる塩基によって適宜選択されるが、一般的に、塩基の導入後５〜３０分間反応を行わせることが好ましい。また、塩基の配合量としては、一般式（４）で表されている化合物の１モルに対して塩基の配合量が、３〜６モルとなることが好ましい。なお、ここで得られた化合物を精製して得られる中間体を、以下「中間体ｂ」という。
【００６９】
また、メチル化剤を反応させる方法としては、一般的な方法を用いることができ、具体的には、窒素気流下、室温又は冷却した温度条件下（好ましくは−７８〜０℃）で、不活性有機溶媒中の中間体ｂに、ヨウ化メチル等のメチル化剤を添加して攪拌し、反応させる方法が挙げられる。このような反応に際しては、メチル化剤を添加した後、０．５〜２時間攪拌して反応させることが好ましい。また、メチル化剤の配合量としては、中間体ｂの１モルに対してメチル化剤の配合量が、３〜６モルとなることが好ましい。
【００７０】
このようにしてメチル化した後の化合物を第１の工程で説明した精製方法と同様の方法を用いて精製し、一般式（５）で表されている化合物を得ることができる。
【００７１】
次に、第３工程として、前記一般式（５）で表される化合物中の保護基を除去した後、ラクトン環の９位を酸化して下記一般式（２）で表される１６員環マクロライド誘導体を得る。
【００７２】
保護基を除去する方法としては、前記の第一の製法において説明した方法と同様である。なお、保護基を除去して得られた化合物を精製して得られる中間体を、以下「中間体ｃ」という。
【００７３】
９位を酸化する方法としては、得られた中間体ｃを反応溶媒中に溶解して反応溶液を得た後、得られた反応溶液に酸化剤を導入することで酸化反応せしめる方法が挙げられる。酸化に際しての反応条件としては、０〜２０℃の温度条件下、酸化剤を添加して０．５〜２時間攪拌して反応させることが好ましい。また、酸化剤の配合量としては、中間体ｃの１モルに対して酸化剤の配合量が、１〜２モルとなることが好ましい。なお、反応溶媒及び酸化剤としては、前記第二の製法で説明したものと同様である。
【００７４】
また、酸化剤を用いて中間体ｃの９位を酸化した後、この反応液から化合物を抽出し、これを精製することで目的の化合物である前記一般式（２）で表される１６員環マクロライド誘導体を得ることができる。
【００７５】
前記一般式（２）で表される１６員環マクロライド誘導体を精製する方法としては、特に制限されるものではないが、クロロホルムとメタノールとの混合溶媒（好ましい配合比（容量基準）は、９：１〜２：１）からなる展開溶媒を用いるｐＴＬＣによる精製が好ましい。
【実施例】
【００７６】
以下、実施例及び比較例に基づいて本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００７７】
合成例１〜２［中間体１：２β−メチル−３−デヒドロ−２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−２０−ジエチルアセタール（下記一般式（１０）中、Ａがジエチルアセタール基、Ｂがアセトキシル基、Ｒが水素原子、２位のメチル基がβ配置で表される化合物）、及び中間体２：２，２−ジメチル−３−デヒドロ−２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−２０−ジエチルアセタール（下記一般式（１０）中、Ａがジエチルアセタール基、Ｂがアセトキシル基、Ｒがメチル基で表される化合物）の合成］
一般式（１０）：
【００７８】
【化１４】
2005298436.tif 000015
【００７９】
出発物質である２，３−デヒドロ−２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−２０−ジエチルアセタールは公知の化合物（Lawrence  C.Creemer,et  al.,“3-Keto  16-Membered  Macrolides  Derived  from  Tylosin”,The  Journal  of  Antibiotics，2002,Vol.55,No.４，p427〜436）である。本化合物１．５４ｇをテトラヒドロフラン７５ｍｌに溶解後、氷冷下、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド２１０．９ｍｇ、ヨウ化メチル０．２ｍｌを添加して２時間撹拌した。反応液に水７５ｍｌを添加し、これを酢酸エチル１５０ｍｌで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、２β−メチル−３−デヒドロ−２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−２０−ジエチルアセタールを５９５．３ｍｇ、２，２−ジメチル−３−デヒドロ−２’，４’，４’’−トリアセチルデスマイコシン−２０−ジエチルアセタールを３１９．９ｍｇそれぞれ得た。なお、中間体１及び中間体２は以下のような物性を示した。
【００８０】
中間体１の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  ＋４．６°（ｃ１．０５，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ５０Ｈ８１ＮＯ１８（３）マススペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ９８４［Ｍ＋Ｈ］＋（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ３)：δ（ｐｐｍ）０．８９（１７−Ｈ），１．１１（２１−Ｈ），１．３１（２−Ｍｅ）１．８０（２２−Ｈ），１．９４（ＯＡｃ），２．０３（ＯＡｃ），２．０８（ＯＡｃ），２．３０（３′−ＮＭｅ２），３．４０（２″−ＯＭｅ），３．４９（３″−ＯＭｅ），３．５５（２−Ｈ），５．７９（１３−Ｈ），６．０８（１０−Ｈ），７．０６（１１−Ｈ）。
【００８１】
中間体２の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  −３１．１°（ｃ１．０３，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ５１Ｈ８３ＮＯ１８（３）マススペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ９９８［Ｍ＋Ｈ］＋（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）０．９２（１７−Ｈ），０．９７（１８−Ｈ），１．１３（２１−Ｈ），１．３３（２−Ｍｅ２），１．８１（２２−Ｈ），１．９５（ＯＡｃ），２．０５（ＯＡｃ），２．１１（ＯＡｃ），２．３４（３’−ＮＭｅ２〉，３．４２（２”−ＯＭｅ），３．５１（３”−ＯＭｅ）,５．９４（１３−Ｈ），６．０８（Ｈ−１０），７．１８（１１−Ｈ）。
【００８２】
実施例１［化合物１：２−メチル−３−デヒドロデスマイコシン（一般式（１）中のＲが水素原子、Ｘが＝Ｃ＝Ｏで表される化合物）の製造］
前記のようにして得た中間体１の２２０．８ｍｇをメタノール２５ｍｌに溶解し、これに２８％アンモニア水０．１ｍｌを添加して室温で７２時間撹拌した。反応液を濃縮後、得られた残査をアセトニトリル４ｍｌに溶解し、これに１Ｎ塩酸を１ｍｌ添加して室温で１時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を添加して中和した後、酢酸エチル５０ｍｌで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去して２−メチル−３−デヒドロデスマイコシンを１６１．２ｍｇ得た。本化合物はケト体、エノール体の平衡状態で存在する。このような化合物１は以下のような物性を示した。
【００８３】
化合物１の物性：（１）分子式：Ｃ４０Ｈ６５ＮＯ１４（２）マススペクトル（ＨＲＴＯＦ−ＭＳ）：ｍ／ｚ７８２．４３４３［Ｍ−Ｈ]−（理論値：７８２．４３２７（Ｃ４０Ｈ６５ＮＯ１４として計算））。（４）１Ｈ  ＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）１２．３（ｅｎｏｌ−ＯＨ）。
【００８４】
実施例２［化合物２：２，２−ジメチル−３−デヒドロデスマイコシン（前記一般式（１）のＲがメチル基、Ｘが＝Ｃ＝Ｏで表される化合物）の製造］
前記の中間体２の２６２．７ｍｇを化合物１の製法における手法と同様の手法で脱保護し、２，２−ジメチル−３−デヒドロデスマイコシン（化合物２）を９６．５ｍｇ得た。このような化合物２は以下のような物性を示した。
【００８５】
化合物２の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  ＋１４．３°（ｃ１．０４，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ４１Ｈ６７ＮＯ１４（３）マススペクトル（ＨＲＴＯＦ−ＭＳ）：ｍ／ｚ７９６．４４９６[Ｍ−Ｈ]−（理論値：７９６．４４８３（Ｃ４１Ｈ６６ＮＯ１４として計算））（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）０．９０（１７−Ｈ），１．０７（１８−Ｈ），１．１２（２１−Ｈ），１．２９（２−Ｍｅ），１．３２（２−Ｍｅ)，１．８１（２２−Ｈ），２．４９（３’−ＮＭｅ２），３．４４（２”−ＯＭｅ），３．５８（３”−ＯＭｅ），６．０３（１３−Ｈ），６．１１（１０−Ｈ），７．１９（１１−Ｈ），９．８２（２０−Ｈ）。
【００８６】
合成例３［中間体３：２β−メチル−３−エピ−９−ヒドロ−２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−２０−ジエチルアセタール（下記一般式（１１）中、Ａがジエチルアセタール基、Ｂがアセトキシル基、２位のメチル基がβ配置で表される化合物）の合成］
一般式（１１）：
【００８７】
【化１５】
2005298436.tif 000016
【００８８】
前記のようにして製造された中間体１の２６１．４ｍｇをメタノール６ｍｌに溶解後、塩化セリウム７水和物１４８．４ｍｇを添加して室温で３０分撹拌した後、氷冷下、水素化ホウ素ナトリウム０．４ｇを添加して１５分撹拌した。反応液に水５０ｍｌを添加し、これを酢酸エチル５０ｍｌで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、２β−メチル−３−エピ−９−ヒドロ−２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−２０−ジエチルアセタールを９８．７ｍｇ得た。
【００８９】
中間体３の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  ＋７．０°（ｃ１．１４，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ５０Ｈ８５ＮＯ１８（３）マススペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ９８８［Ｍ＋Ｈ］＋（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）０．７２（１８−Ｈ），０．８８（１７−Ｈ），０．９７（２１−Ｈ），１．３６（２−Ｍｅ），１．７０（２２−Ｈ），１．９６（ＯＡｃ），２．０１（ＯＡｃ），２．０８（ＯＡｃ），２．３０（３’−ＮＭｅ２），２．６５（２−Ｈ），３．４４（２″−ＯＭｅ），３．４９（３″−ＯＭｅ），４．１１（９−Ｈ），５．３６（１３−Ｈ），５．６７（１０−Ｈ），６．３２（１１−Ｈ）。
【００９０】
実施例３［化合物３：２β−メチル−３−エピ−デスマイコシン（前記一般式（１）中のＲが水素原子、Ｘが＝Ｃ−ＯＨ（水酸基はβ配置）、２位のメチル基がβ配置で表される化合物）の製造］
中間体３の９８．７ｍｇをジクロロメタン６ｍｌに溶解し、これに氷冷下、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬５０ｍｇを添加して１．５時間撹拌した。反応液に０．２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を１０ｍｌ添加し、これを酢酸エチル２０ｍｌで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた残査を実施例２と同様の手法で脱保護して２β−メチル−３−エピ−デスマイコシンを６８．７ｍｇ得た。
【００９１】
化合物３の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  −９．２°（ｃ０．９５，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ４０Ｈ６７ＮＯ１４（３）マススペクトル（ＨＲＴＯＦ−ＭＳ）：ｍ／ｚ７８４．４４９５ [Ｍ−Ｈ］−（理論値：７８４．４４８３（Ｃ４０Ｈ６６ＮＯ１４として計算））（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）０．７８（１７−Ｈ），０．８４（１８−Ｈ），１．１３（２１−Ｈ），１．３１（２−Ｍｅ），１．７３（２２−Ｈ），２．４４（３’−ＮＭｅ２），２．５６（２−Ｈ），３．４１（２”−ＯＭｅ），３．５４（３”−ＯＭｅ），５．８５（１３−Ｈ），６．１６（１０−Ｈ），７．０２（１１−Ｈ），９．６７（２０−Ｈ）。
【００９２】
合成例４［中間体４：９−ヒドロ−９，２０−ジ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−３，２０−アセタール（前記一般式（４）中、Ｂ１がアセトキシル基、Ｂ２がＯ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基で表される化合物）の合成］
出発物質の２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−２０−ジエチルアセタール（前記一般式（３）において、Ａがジエチルアセタール基、Ｂ１がアセトキシル基で表される化合物）は公知の化合物である（Lawrence  C.Creemer,et  al.,“3-Keto  16-Membered  Macrolides  Derived  from  Tylosin”,The  Journal  of  Antibiotics，2002,Vol.55,No.４，p427〜436）。本化合物５０．１ｇをメタノール１Ｌに溶解し、これに塩化セリウム７水和物２８．８ｇを添加して室温で３０分撹拌した。その後、氷冷下で水素化ホウ素ナトリウム９．７ｇを３０分かけて添加し、添加終了より室温で１０分撹拌した。反応液に１Ｍのリン酸水素二ナトリウム５００ｍｌを添加し、これを５００ｍｌの酢酸エチルで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して９−ヒドロ−２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−２０−ジエチルアセタールを２２．４ｇ得た。次いで本化合物２２．２ｇを３００ｍｌのアセトニトリルに溶解し、これに１Ｎ塩酸水溶液７５ｍｌを添加し、室温で１時間撹拌した。反応液を１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、これを酢酸エチル３００ｍｌで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた残査をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２５０ｍｌに溶解した。これにｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド１０．９ｇ、イミダゾール９．８ｇを添加し、４５℃で１８時間撹拌した。反応液に水２５０ｍｌを加え、これをトルエン５００ｍｌで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して９−ヒドロ−９，２０−ジ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−２’，４’，４’’−トリ−Ｏ−アセチルデスマイコシン−３，２０−アセタールを３．９８ｇ得た。
【００９３】
中間体４の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  −８．４°（ｃ１．０４，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ５７Ｈ１０１ＮＯ１７Ｓｉ２（３）マススペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ１１２８［Ｍ＋Ｈ］＋（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）０．８７（Ｓｉ（ＣＨ３）２Ｃ（ＣＨ３）３），０．８８（Ｓｉ（ＣＨ３）２Ｃ（ＣＨ３）３），０．９８（２１−Ｈ），１．７３（２２−Ｈ），１．９７（ＯＡｃ），２．０４（ＯＡｃ），２．０９（ＯＡｃ），２．３３（３’−ＮＭｅ２），３．４６（２”−ＯＭｅ），３．５０（３”−ＯＭｅ），３．８１（９−Ｈ），５．３６（１３−Ｈ），５．９０（１０−Ｈ），６．１８（１１−Ｈ）。
【００９４】
合成例５［中間体５：９−ヒドロ−９，２０−ジ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−２’，４’，４’’−トリス−Ｏ−トリエチルシリルデスマイコシン−３，２０−アセタール（前記一般式（４）中、Ｂ１がＯ−トリエチルシリル基、Ｂ２がＯ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基で表される化合物）の合成］
中間体４の３．８８ｇをメタノール２５０ｍｌに溶解し、これに２８％アンモニア水２ｍｌを添加して室温で７２時間撹拌した。反応液を濃縮後、得られた残査をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６０ｍｌに溶解し、これにトリエチルシリルクロリド３．５ｍｌ、イミダゾール２．８ｇを添加して室温で１８時間撹拌した。反応液に水６０ｍｌを添加し、これを酢酸エチル１２０ｍｌで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して９−ヒドロ−９，２０−ジ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−２’，４’，４’’−トリス−Ｏ−トリエチルシリルデスマイコシン−３，２０−アセタールを３．３７得た。
【００９５】
中間体５の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  −１７．５°（ｃ１．００，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ６９Ｈ１３７ＮＯ１４Ｓｉ５（３）マススペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ１３４５［Ｍ＋Ｈ］＋（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）０．８７（Ｓｉ（ＣＨ３）２Ｃ（ＣＨ３）３），１．１８（２１−Ｈ），１．７５（２２−Ｈ），２．４２（３’−ＮＭｅ２），３．４７（２”−ＯＭｅ），３．５８（３”−ＯＭｅ），５．４４（１３−Ｈ），５．８４（１０−Ｈ），６．１４（１１−Ｈ）。
【００９６】
合成例６〜７［中間体６：２β−メチル−９−ヒドロ−９，２０−ジ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−２’，４’，４’’−トリス−Ｏ−トリエチルシリルデスマイコシン−３，２０−アセタール（前記一般式（５）中、Ｂ１がＯ−トリエチルシリル基、Ｂ２がＯ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基、Ｒが水素原子、２位のメチル基がβ配置で表される化合物）及び中間体７：２α−メチル−９−ヒドロ−９，２０−ジ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−２’，４’，４’’−トリス−Ｏ−トリエチルシリルデスマイコシン−３，２０−アセタール（前記一般式（５）においてＢ１がＯ−トリエチルシリル基、Ｂ２がＯ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基、Ｒが水素原子、２位のメチル基がα配置で表される化合物）の合成］
窒素気流下、ジイソプロピルエチルアミン０．３５ｍｌ、テトラヒドロフラン２ｍｌ、Ｎ，Ｎ’−ジメチルプロピニルウレア２ｍｌの混液を−７８℃に冷却し、これに中間体５（６７５．１ｍｇ）のテトラヒドロフラン溶液２ｍｌを添加した。５分後にヨウ化メチル０．１６ｍｌを添加してさらに３０分撹拌した後、反応液に水２００ｍｌを添加し、これを酢酸エチル２００ｍｌで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、２β−メチル−９−ヒドロ−９，２０−ジ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−２’，４’，４’’−トリス−Ｏ−トリエチルシリルデスマイコシン−３，２０−アセタールを３４０．１ｍｇ、２α−メチル−９−ヒドロ−９，２０−ジ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−２’，４’，４’’−トリス−Ｏ−トリエチルシリルデスマイコシン−３，２０−アセタールを３９．２ｍｇ得た。
【００９７】
中間体６の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  −２．１°（ｃ０．８４，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ７０Ｈ１３９ＮＯ１４Ｓｉ５（３）マススペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ１３５９［Ｍ＋Ｈ］＋（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）１．２６（２−Ｍｅ），１．６９（２２−Ｈ），２．４１（３’−ＮＭｅ２），２．５２（２−Ｈ），３．４７（２”−ＯＭｅ），３．５８（３”−ＯＭｅ），５．４２（１３−Ｈ），５．７１（１０−Ｈ），５．９４（１１−Ｈ）。
【００９８】
中間体７の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  −６３．６°（ｃ０．６８，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ７０Ｈ１３９ＮＯ１４Ｓｉ５（３）マススペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）：ｍ／ｚ１３５９［Ｍ＋Ｈ］＋（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）１．８１（２２−Ｈ），２．４２（３’−ＮＭｅ２），２．４６（２−Ｈ），３．４６（２”−ＯＭｅ），３．５８（３”−ＯＭｅ），３．８２（３−Ｈ），５．４６（１３−Ｈ），５．９８（１０−Ｈ），６．２９（１１−Ｈ）。
【００９９】
実施例４：［化合物４：２β−メチルデスマイコシン（前記一般式（２）中、Ｒが水素原子、２位のメチル基がβ配置で表される化合物）の製造］
中間体６の１０７．３ｍｇをアセトニトリル５ｍｌに溶解し、これに水５ｍｌを添加した。これにジフルオロ酢酸５０μｌを添加して４５℃で７２時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して中和し、これを酢酸エチル５０ｍｌで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮した。得られた残査をジクロロメタン３ｍｌに溶解し、これに氷冷下、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬２５ｍｇを添加して１．５時間撹拌した。反応液に０．２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を１０ｍｌ添加し、これを酢酸エチル２０ｍｌで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後濃縮し、得られた残査をクロロホルム−メタノール４：１を展開溶媒とするｐＴＬＣにより精製し、２β−メチルデスマイコシンを２５．９ｍｇ得た。
【０１００】
化合物４の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  −２１．３°（ｃ１．１５，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ４０Ｈ６７ＮＯ１４（３）マススペクトル（ＨＲＴＯＦ−ＭＳ）：ｍ／z７８４．４４７７［Ｍ−Ｈ］−（理論値：７８４．４４８３（Ｃ４０Ｈ６６ＮＯ１４として計算）（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ（ｐｐｍ）０．８６（１７−Ｈ），０．９５（１８−Ｈ），１．１３（２１−Ｈ），１．２１（２−Ｍｅ），１．７２（２２−Ｈ），２．２８（２−Ｈ），２．５１（３’-ＮＭｅ２），３．４１（２”−ＯＭｅ），３．５４（３”−ＯＭｅ），５．８２（１３−Ｈ），６．１５（１０−Ｈ），７．１１（１１−Ｈ），９．６３（２０−Ｈ）。
【０１０１】
実施例５［化合物５：２α−メチルデスマイコシン（前記一般式（２）中、Ｒが水素原子、２位のメチル基がα配置で表される化合物）の製造］
中間体７の５３．５ｍｇを実施例４と同様に処理し、２α−メチルデスマイコシンを１８．９ｍｇ得た。
【０１０２】
化合物５の物性：（１）比旋光度：［α］Ｄ  ＋３．８°（ｃ０．４３，ＣＨＣｌ３）（２）分子式：Ｃ４０Ｈ６７ＮＯ１４（３）マススペクトル（ＨＲＴＯＦ−ＭＳ）：ｍ／ｚ７８６．４６５９［Ｍ＋Ｈ］＋（理論値：７８６．４６４０（Ｃ４０Ｈ６８ＮＯ１４として計算）（４）１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ａｃｅｔｏｎｅ―ｄ６）：δ（ｐｐｍ）０．９４（１７−Ｈ），０．９９（２−Ｍｅ），１．０１（１８−Ｈ），１．８８（２２−Ｈ），２．４８（２−Ｈ），２．４８（２’−ＮＭｅ２），３．４５（２”−ＯＭｅ），３．５２（３”−ＯＭｅ），５．８８（１３−Ｈ），６．４０（１０−Ｈ），７．２３（１１−Ｈ），９．６９（２０−Ｈ）。
【０１０３】
（実施例で得られた化合物の評価）
＜試験例１＞
実施例１〜５において得られた化合物１〜５並びにデスマイコシン及びロキタマイシンについて、ＮＣＣＬＳ標準法に準じた微量液体希釈法により試験菌に対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を測定した。測定用培地は、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅでは２％馬溶血液加Ｃａｔｉｏｎ−ａｄｊｕｓｔｅｄ  Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎｂｒｏｔｈ（２％ＬＨＢ加ＣＡＭＨＢ）を使用し、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅではＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｔｅｓｔ  ｍｅｄｉｕｍ（ＨＴＭ）を使用した。最終接種菌数を１０４ＣＦＵ／ｗｅｌｌとし、３５℃で２０〜２４時間好気培養した。各プレートの薬剤不含有培地における菌の発育を対照に、菌の発育の認められない最小の薬剤濃度をもってＭＩＣとした。その結果を表１に示す。なお、表中の数値の単位は（μｇ／ｍｌ）である。
【０１０４】
【表１】
2005298436.tif 000017
【０１０５】
このように化合物１〜５は臨床上重要なグラム陽性菌に対して抗菌力を有し、化合物４はデスマイコシンと同等の抗菌力を有していた。また、化合物５はマクロライド耐性菌に対して特に強い抗菌力を示した。
【０１０６】
＜試験例２＞
化合物４について、以下のようにして血漿中エステラーゼに対する抵抗性について評価した。すなわち、化合物４をラットの血漿中に３７℃で１時間インキュベートした後、ラクトン開環体の存在比を未変化体との存在比として評価した。比較物質としてデスマイコシンを使用した。なお、開環体存在比は、以下の式によって計算した。
開環体存在比（％）＝（ラクトン開環体量／未変化体残存量）×１００
結果は、デスマイコシンの開環体存在比が１６．６％であり、化合物４の開環体存在比は１％以下であった。このように化合物４はラット血漿中１時間で安定に存在したことから、２位のメチル基と３位の水酸基により相乗的に血漿中エステラーゼに対する抵抗性を獲得しことが確認された。
【産業上の利用可能性】
【０１０７】
以上説明したように、本発明によれば、抗菌活性を高水準に維持しつつ、血漿中における構造安定性が十分に高く生体内半減期の大幅な延長を可能とする１６員環マクロライド誘導体及びその製造方法を提供することが可能となる。
【０１０８】
したがって、本発明の１６員環マクロライド誘導体は、抗菌活性を十分に発揮しつつ生体内半減期が延長されるため、抗菌剤として、特に抗生物質等として有用である。