(57)【要約】【課題】溶解度の高い単一結晶形からなるエパルレスタットのＢ型結晶を、効率よく、簡便に製造し得る方法及び本発明の製造方法により得られた単一結晶形のエパルレスタット結晶を含有した医薬組成物を提供すること。【解決手段】エパルレスタットをメタノールに溶解させた後、得られた溶液を冷却して晶析させることを特徴とするエパルレスタット結晶の製造方法、及び該製造方法によりえられるエパルレスタット結晶を含有してなる医薬組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
エパルレスタットをメタノールに溶解させた後、得られた溶液を冷却して晶析させることを特徴とするエパルレスタット結晶の製造方法。
【請求項２】
得られるエパルレスタット結晶が、固体13Ｃ核磁気共鳴スペクトルにおいて、１４６、１４１、１２０及び１７ｐｐｍに特徴的なピークを有する請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
得られるエパルレスタット結晶が、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角度（２θ）が７．４、１１．６、１１．８、１２．６、１３．１、１３．７、１４．４、１４．８、１６．０、１６．１、１７．８、１９．４、１９．７、２１．６、２１．９、２２．８、２３．７、２４．１、２５．４、２６．３、２７．１、２９．２、２９．９、３１．３、３４．０、３４．３及び３７．６°に特徴的なピークを有する請求項１又は２記載の製造方法。
【請求項４】
請求項１〜３いずれか記載の製造方法によりえられるエパルレスタット結晶を含有してなる医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アルドース還元酵素阻害剤等として有用なエパルレスタット結晶の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
エパルレスタットは、式（Ｉ）：
【０００３】
【化１】
2005298424.tif 000002
【０００４】
で表される化合物であり、アルドース還元酵素阻害剤として有用な薬剤として知られている。この化合物は、特許文献１に記載されている方法で合成され、得られた化合物はエタノール又はエタノール−水を用いた再結晶法により結晶化され、エパルレスタット結晶、エパルレスタットのエタノール溶媒和物結晶が得られることが報告されている（特許文献１、非特許文献１、２参照）。
【特許文献１】特公昭６２−５１９５５号公報（第１８欄、３７行〜最下行）
【非特許文献１】J. CHEM. SOC. PERKIN TRANS. 2, 1990, p.1085-1091
【非特許文献２】Tetrahedron Letters, 1989, Vol.30, No.8, p.959-962
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、上記文献には、エパルレスタットの多形結晶体の報告はなく、従ってその多形結晶体を単一な結晶形で製造する方法についても何ら言及されていない。従来公知の製造方法により得られたエパルレスタットを本発明者らが分析した結果、多形結晶体の存在が強く示唆された。そこで、種々の物理化学的分析手法により検討を進めた結果、エパルレスタット結晶に２種の多形が存在していたことを確認した。
第１のエパルレスタット結晶は、固体13Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルにおいて、１６８、１４８、１４６、１４２、１２１、１１８、１８及び１５ｐｐｍに特徴的なピークを有するものであり、本明細書では、かかる固体13ＣＮＭＲスペクトルを有する結晶をＡ型結晶という。さらに、Ａ型結晶は、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角度（２θ）が１２．６、１６．０、１６．４、１７．３、２１．３、２２．０、２２．８、２５．４、２７．６、２９．７、３０．０、３０．２、３３．２、３３．３及び３４．１°に特徴的なピークを有する。
第２のエパルレスタット結晶は、固体13ＣＮＭＲスペクトルにおいて、１４６、１４１、１２０及び１７ｐｐｍに特徴的なピークを有するものであり、本明細書では、かかる固体13ＣＮＭＲスペクトルを有する結晶をＢ型結晶という。さらに、Ｂ型結晶は、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角度（２θ）が７．４、１１．６、１１．８、１２．６、１３．１、１３．７、１４．４、１４．８、１６．０、１６．１、１７．８、１９．４、１９．７、２１．６、２１．９、２２．８、２３．７、２４．１、２５．４、２６．３、２７．１、２９．２、２９．９、３１．３、３４．０、３４．３及び３７．６°に特徴的なピークを有する。
【０００６】
従来公知の製造方法により得られた前記のエパルレスタット原体はＡ型結晶又はＡ型とＢ型の混合結晶であった。
【０００７】
医薬品において、多形結晶体が混在していることは、溶解度や安定性等に影響を及ぼす可能性があるため、多形結晶体を含まない所望の単一結晶性を有するエパルレスタットの製造方法が切望されている。そこで、本発明者らは様々な溶媒でエパルレスタットの結晶化を検討した結果、特定の溶媒において単一な各結晶形を効率よく、簡便に製造することに成功した。
【０００８】
本発明の目的は、溶解度の高い単一結晶形からなるエパルレスタットのＢ型結晶を、効率よく、簡便に製造し得る方法を提供することにある。さらに本発明の他の目的は本発明の製造方法により得られた単一結晶形のエパルレスタット結晶を含有した医薬組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の要旨は、
〔１〕  エパルレスタットをメタノールに溶解させた後、得られた溶液を冷却して晶析させることを特徴とするエパルレスタット結晶の製造方法、及び
〔２〕  前記〔１〕記載の製造方法によりえられるエパルレスタット結晶を含有してなる医薬組成物
に関する。
【発明の効果】
【００１０】
本発明により、溶解度の高い単一結晶形からなるエパルレスタットのＢ型結晶を、効率よく、簡便に製造することができる。また、溶解度の高い本発明の製造方法により得られたエパルレスタット結晶を含有した医薬組成物は、生物学的利用率が高く、生体内における吸収も高いという優れた効果を奏することが期待できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
エパルレスタットに多形結晶体が存在することは本発明において見出された全く新規な知見であり、特定の溶媒を用いてエパルレスタット結晶を晶析させることにより、結晶形の異なるエパルレスタット結晶が得られることが分かった。
【００１２】
即ち、Ａ型結晶は、エパルレスタットをエタノールに溶解させた後、得られた溶液を冷却して晶析させることにより、Ｂ型結晶は、エパルレスタットをメタノールに溶解させた後、得られた溶液を冷却して晶析させることにより、それぞれ得られる。
【００１３】
本発明において、晶析に供するエパルレスタットには、固体状、油状等の粗製エパルレスタットやＡ型とＢ型の混合結晶を用いることができ、また、Ａ型結晶を得る場合にはエパルレスタットのＢ型結晶を、Ｂ型結晶を得る場合にはエパルレスタットのＡ型結晶を、それぞれ用いてもよい。
【００１４】
エパルレスタットは、例えば、特公昭６２−５１９５５号公報に記載の方法により、式（II）：
【００１５】
【化２】
2005298424.tif 000003
【００１６】
で示される化合物と一般式(III）：
【００１７】
【化３】
2005298424.tif 000004
【００１８】
で示される化合物との反応により、製造することができる。
【００１９】
結晶の製造にあたりエパルレスタットの使用量は、エタノール又はメタノールに溶解させる際の温度によって異なるため一概には決定できないが、溶解させる温度において、飽和溶液となるまで溶解させることが好ましい。または、エパルレスタットを過飽和になるまで溶解させ、熱濾過等により不溶分を除去し、飽和溶液としてもよい。
【００２０】
Ａ型結晶を製造する場合に、エパルレスタットをエタノールに溶解させる温度は、幾何異性体（Ｚ，Ｚ異性体）の生成を防止する観点から、４０〜７８℃が好ましく、５５〜７５℃がより好ましい。また、溶液を冷却し、結晶を析出させる温度は特に限定されないが、エタノール溶媒和物の生成を防止する観点から、１０〜４０℃が好ましく、１５〜３０℃がより好ましい。
【００２１】
一方、Ｂ型結晶を製造する場合に、エパルレスタットをメタノールに溶解させる温度は、幾何異性体（Ｚ，Ｚ異性体）の生成を防止する観点から、４０〜６４℃が好ましく、５５〜６０℃がより好ましい。また、溶液を冷却し、結晶を析出させる温度は特に限定されないが、結晶多形の混合を防止する観点から、０〜４０℃が好ましく、０〜２５℃がより好ましい。
【００２２】
Ａ型結晶及びＢ型結晶のいずれを製造する場合においても、結晶を析出させる際には、
安定な結晶形に転移させる観点から、温度を一定に保ち、溶液を攪拌することが好ましい。
【００２３】
一般的に、医薬品の場合、溶解度が生体内における吸収及び生物学的利用率に大きな影響を与えることが知られており、難溶性の医薬化合物においては、溶解度を向上させる方法が検討され、多数報告されている。従来、エパルレスタットは難溶性の化合物として知られており、溶解度の改善が望まれているが、驚くべきことに本発明により製造されるエパルレスタットのＢ型結晶は、従来の結晶化法により得られたエパルレスタットのＡ型結晶又はＡ型とＢ型の混合結晶よりも高い溶解度を有する。
【００２４】
従って、本発明ではさらに、本発明により製造されたエパルレスタットのＢ型結晶を含有した医薬組成物を提供する。前記の如く、溶解度の高い単一の結晶形からなるエパルレスタットのＢ型結晶を含有した本発明の医薬組成物は、生体内における吸収及び生物学的利用率が高いという優れた効果を奏することが期待される。
【００２５】
本発明の医薬組成物の形状は、錠剤、散剤、顆粒剤、坐剤、注射剤、点眼剤、液剤、カプセル剤、丸剤、懸濁剤、貼付剤、シロップ剤等のいずれであってもよく、医薬品に通常用いられる担体、賦形剤、希釈剤、崩壊剤、安定剤、保存剤、緩衝剤、乳化剤、芳香剤、着色剤、甘味剤等の添加剤を適宜含有してもよい。
【００２６】
医薬組成物は、本発明により製造されたエパルレスタットのＢ型結晶が用いられる以外は、その形状等に応じて、通常と同様に製造することができ、エパルレスタットのＢ型結晶の添加時期や添加方法についても特に限定されない。従って、医薬組成物中のエパルレスタット結晶の含有量も、その形状、目的等に応じて適宜選択することができる。
【実施例】
【００２７】
以下、実施例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例等によりなんら限定されるものではない。
【００２８】
参考例１〔Ａ型結晶の製造〕
エパルレスタット２１４ｍｇに、エタノール１５ｍｌを添加し、加熱還流下、攪拌しながら、エパルレスタットを溶解させた。その後、内温を徐々に表１に示す晶析温度に下げ、同温度を維持しながらさらに１５時間攪拌した。攪拌後、析出した結晶を吸引濾取し、減圧乾燥して、表１に示す収率で、エパルレスタットのオレンジ結晶を得た。なお、本明細書において、晶析温度とは、結晶が析出を開始した温度ではなく、晶析中一定に保持した温度をいう。得られた結晶の固体13ＣＮＭＲスペクトル及び粉末Ｘ線回折パターンを図１〜３に示す。なお、図２の粉末Ｘ線回折パターンについては、ピークの詳細を表２に示す。これらの結果から、得られた結晶はいずれもＡ型結晶であることが分かる。
【００２９】
実施例１〔Ｂ型結晶の製造〕
エパルレスタット２１４ｍｇに、メタノール１５ｍｌを添加し、加熱還流下、攪拌しながら、エパルレスタットを溶解させた。その後、内温を徐々に表１に示す晶析温度に下げ、同温度を維持しながらさらに１５時間攪拌した。攪拌後、析出した結晶を吸引濾取し、減圧乾燥して、表１に示す収率で、エパルレスタットの黄色結晶を得た。得られた結晶の固体13ＣＮＭＲスペクトル及び粉末Ｘ線回折パターンを図４〜７に示す。なお、図５の粉末Ｘ線回折パターンについては、ピークの詳細を表３に示す。これらの結果から、得られた結晶はいずれもＢ型結晶であることが分かる。
【００３０】
なお、固体13ＣＮＭＲスペクトル及び粉末Ｘ線回折パターンの測定方法は以下の通りである。
【００３１】
〔固体13ＣＮＭＲスペクトル〕
各結晶形の固体ＮＭＲスペクトルを、プローブにMASVTN500SBを装備したBruker ADVANCE500 装置を用いて、１２５．７６ＭＨｚで操作して記録する。Kel-Fキャップを備えた４ｍｍの酸化ジルコニウムＭＡＳローターに固体を充填し、そのローターを約８ｋＨｚで回転させる。
傾斜的にパルスをかけるramp64法を用いて、Hartmann-Hahn条件下交差分極を行い（ＣＰ接触時間１．７５ミリ秒、繰り返し時間４秒）、ＴＯＳＳ法によりスピニングサイドバンドを除いた13Ｃ  ＭＡＳスペクトルを獲得する。なお、プロトンチャネルのデカップリングはＴＰＰＭ法を用いる。標準物質であるグリシン（アルドリッチ社製、Lot.No. 11923LA）のカルボキシレートシグナルを１７６．０３ｐｐｍに設定し、外部基準として化学シフトを測定する。
【００３２】
〔粉末Ｘ線回折パターン〕
粉末Ｘ線回折分析装置（RINT2000；リガク製）を用いて測定する。システムには、Ｃｕ  Ｋ−ＡＬＰＨＡ１の放出を提供するために４０ｋＶ及び４０ｍＡに維持した銅Ｘ線源と検出器を使用する。
発散スリット０．５°、散乱スリット０．５°及び０．１５ｍｍ幅の受光スリットを使用してビームを制御する。０．０２°／ポイントの段階走査で、５秒／ポイントの計算時間を用いて５°から４０°の２θのデータを収集する。
【００３３】
【表１】
2005298424.tif 000005
【００３４】
【表２】
2005298424.tif 000006
【００３５】
【表３】
2005298424.tif 000007
【００３６】
試験例〔溶解度試験〕
１．検量線の作成
エパルレスタット（Ａ型とＢ型の混合結晶）１０ｍｇを精密に量り取り、後述のＨＰＬＣ測定条件に記載の移動相に溶解させ、１００μｇ／ｍｌの溶液を得た。得られた溶液をそれぞれ、化合物の濃度が５、１０、５０、１００μｇ／ｍｌになるように移動相で希釈し、調製した。これにより下記のＨＰＬＣ測定条件にしたがって標準の検量線を作成した。
【００３７】
２．１  崩壊試験法第２液
エパルレスタットＡ型結晶、Ｂ型結晶及びＡ型とＢ型の混合結晶をそれぞれ乳鉢ですりつぶした後、２０ｍｇを精密に量り取り、５０ｍｌ容の褐色ナスフラスコに移した。日本薬局方に従って調製した崩壊試験法の第２液２５ｍＬを添加し、２０℃で６０分間攪拌した。攪拌後、この懸濁液を濾過し、濾液を１０倍に希釈した溶液を試料として、下記の測定条件で高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）のピーク面積を測定した。濃度は、ピーク面積及び先に作成した検量線を用いて算出した。結果を表４に示す。
【００３８】
２．２  リン酸二水素カリウム緩衝液（ｐＨ８．０）
エパルレスタットＡ型結晶、Ｂ型結晶及びＡ型とＢ型の混合結晶をそれぞれ乳鉢ですりつぶした後、２０ｍｇを精密に量り取り、５０ｍｌ容の褐色ナスフラスコに移した。日本薬局方に従って調製したリン酸二水素カリウム緩衝液（ｐＨ８．０）２５ｍＬを添加し、２０℃で６０分間攪拌した。攪拌後、この懸濁液を濾過し、濾液を１０倍に希釈した溶液を試料として、下記の測定条件でＨＰＬＣのピーク面積を測定した。濃度は、ピーク面積及び先に作成した検量線を用いて算出した。結果を表４に示す。
【００３９】
２．３  水（ＨＰＬＣ用超純水）
エパルレスタットＡ型結晶、Ｂ型結晶及びＡ型とＢ型の混合結晶をそれぞれ乳鉢ですりつぶした後、２０ｍｇを精密に量り取り、５０ｍｌ容の褐色ナスフラスコに移した。水（ＨＰＬＣ用超純水）２５ｍＬを添加し、２０℃で６０分間攪拌した。攪拌後、この懸濁液を濾過し、濾液を１０倍に希釈した溶液を試料として、下記の測定条件でＨＰＬＣのピーク面積を測定した。濃度は、ピーク面積及び先に作成した検量線を用いて算出した。結果を表４に示す。
【００４０】
〔ＨＰＬＣ測定条件〕
検出波長：  294 ｎｍ
カラム  ：  Quicksorb ５μ（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ）
カラム温度：  ３５℃付近
移動相  ：  0.05mol/l リン酸二水素カリウム／アセトニトリル混液（１３：７）
流量    ：  １．０ｍｌ／ｍｉｎ
注入量  ：  １０μｌ
【００４１】
【表４】
2005298424.tif 000008
【００４２】
以上の結果より、エパルレスタットを特定の溶媒を用いて結晶化することにより、所望の単一結晶形からなるエパルレスタット結晶を簡便に得ることができ、また単一の結晶形からなるエパルレスタット結晶は混合結晶に比べて、またＢ型結晶はＡ型結晶に比べて、それぞれ高い溶解度を示していることが分かる。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明により得られるエパルレスタット結晶は、アルドース還元酵素阻害剤として、慢性糖尿病の合併症の予防及び治療等に好適に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】図１は、参考例１において、４０℃で析出させて得られた結晶の固体13ＣＮＭＲスペクトルである。
【図２】図２は、参考例１において、４０℃で析出させて得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。
【図３】図３は、参考例１において、室温で析出させて得られた結晶の固体13ＣＮＭＲスペクトルである。
【図４】図４は、実施例１において、４０℃で析出させて得られた結晶の固体13ＣＮＭＲスペクトルである。
【図５】図５は、実施例１において、４０℃で析出させて得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。
【図６】図６は、実施例１において、室温で析出させて得られた結晶の固体13ＣＮＭＲスペクトルである。
【図７】図７は、実施例１において、１０℃で析出させて得られた結晶の固体13ＣＮＭＲスペクトルである。
【図１】
2005298424.tif 000009
【図２】
2005298424.tif 000010
【図３】
2005298424.tif 000011
【図４】
2005298424.tif 000012
【図５】
2005298424.tif 000013
【図６】
2005298424.tif 000014
【図７】
2005298424.tif 000015