(57)【要約】【課題】  被験試料中の標的物質を、低濃度から高濃度にわたる広い測定範囲において、簡便な操作で精度よく定量できる測定方法の提供。【解決手段】  被験試料中の標的物質濃度を該標的物質と特異的に結合する検出用物質を用いて測定する方法において、  標的物質または標的物質と同じ特異性をもつ物質からなる特異的物質を、検出用物質を含有した検出溶液に添加した際に吸光度が最大となる基準濃度を求める第一過程と、前記検出溶液と同一種の第二の検出溶液に、前記基準濃度以上の前記特異的物質と、濃度既知の標的物質を含む標準溶液とを添加して、その吸光度を測定する第二過程と、前記検出溶液と同一種の第三の検出溶液に、前記第二過程と同一濃度の特異的物質と、被験試料とを添加して、その吸光度を測定する第三過程とを有することを特徴とする標的物質の測定方法。【選択図】  図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験試料中の標的物質濃度を該標的物質と特異的に結合する検出用物質を用いて測定する方法において、
標的物質または標的物質と同じ特異性をもつ物質からなる特異的物質を、検出用物質を含有した検出溶液に添加した際に吸光度が最大となる基準濃度を求める第一過程と、
前記検出溶液と同一種の第二の検出溶液に、前記基準濃度以上の前記特異的物質と、濃度既知の標的物質を含む標準溶液とを添加して、その吸光度を測定する第二過程と、
前記検出溶液と同一種の第三の検出溶液に、前記第二過程と同一濃度の前記特異的物質と、被験試料とを添加して、その吸光度を測定する第三過程とを有することを特徴とする標的物質の測定方法。
【請求項２】
前記検出用物質は、抗体−抗原反応により、標的物質と特異的に結合するものであることを特徴とする請求項１に記載の標的物質の測定方法。
【請求項３】
前記検出用物質は、検出溶液中で不溶性担体に担持されていることを特徴とする請求項１または２に記載の標的物質の測定方法。
【請求項４】
前記不溶性担体は、ラテックス粒子であることを特徴とする請求項３に記載の標的物質の測定方法。
【請求項５】
前記検出用物質は抗免疫グロブリン抗体であり、前記標的物質は免疫グロブリンであることを特徴とする請求項２ないし４のいずれかに記載の標的物質の測定方法。
【請求項６】
被験試料中の標的物質の測定試薬であって、
標的物質に特異的に結合する検出用物質と、標的物質または標的物質と同じ特異性をもつ物質からなる特異的物質とを含有し、前記特異的物質の濃度は、該特異的物質を前記検出用物質に添加した際に吸光度が最大となる基準濃度以上であることを特徴とする標的物質の測定試薬。
【請求項７】
前記検出用物質は、不溶性担体に担持されていることを特徴とする請求項７に記載の標的物質の測定試薬。
【請求項８】
前記検出用物質は、抗体−抗原反応により標的物質に標的物質と特異的に結合するものであることを特徴とする請求項７または８に記載の標的物質の測定試薬。
【請求項９】
前記検出用物質は抗免疫グロブリン抗体であり、前記標的物質は免疫グロブリンであることを特徴とする請求項８に記載の標的物質の測定試薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、被験試料に含まれる標的物質を、該標的物質に特異的な検出用物質を用いて検出する測定方法および測定試薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
病院や検査センター等において、自動分析装置の発達とともに、用手法で検査されていた免疫血清部門の臨床検査も急速に自動化が進んでいる。このような臨床検査に用いられる測定方法も多種類に渡り、例えばＲＩＡ（ラジオイムノアッセイ）、ＥＩＡ（エンザイムイムノアッセイ）、ＴＩＡ（免疫比濁法）、不溶性担体に抗体等を担持させて、免疫反応に伴う担体の凝集を利用するＬＩＡ（ラテックス凝集法）等の凝集法などが用いられている。これらの方法のうち、ＲＩＡやＥＩＡは測定法に合った専用機種を必要とするのに対して、ＴＩＡやＬＩＡは汎用自動分析装置に適用できることから、これらを用いた免疫血清検査と、生化学検査とを同一ラインで実施する方式が採用されている。
検査においては、検体溶液（被験試料）における存在量の少ない抗原を感度よく検出する必要に加えて、非常に存在量の多い抗原を検出・定量する必要のある場合がある。例えば、免疫グロブリンはヒト血清成分の中で、正常時でもアルブミンに次ぐ量が存在し、さらにミエローマ血清等の検体では、数万ｍｇ／ｄｌという、正常値の数十倍もの量が存在する。
これに対し、例えばＴＩＡは、低濃度の抗原を検出するには感度が不十分な場合がある。
一方、ＬＩＡはＴＩＡよりも高感度であり、低濃度の抗原に対して好適に用いられる。ＬＩＡでは、通常、被験試料に含まれる抗原の濃度に比例した吸光度の上昇値を用いて検量線を作成している。しかし、検出用の抗体に対して抗原が過剰量となった場合に吸光度が減少する現象（地帯現象）が生じる。したがって、被験試料中の抗原濃度が非常に高い場合、その濃度が誤って判定される可能性がある。
そこで、例えば低濃度における高感度の検出を実現する目的で、抗体等の検出試薬または検体を多量に用いたり、増感剤等の添加物を加えたりする等の対策が行われている（例えば、特許文献１参照。）。
また、高濃度の抗原を含むと予想される検体を希釈して吸光度を測定する方法が用いられている。さらに、地帯現象を抑制する目的で、抗体等を担持した不溶性担体に加えて特定の高分子物質を含有する免疫測定試薬、測定値が所定の基準値以上である被験試料を判定したのち特定濃度の試薬で測定する方法、担体に固定された抗体等と別に抗体を存在させる方法等が提案されている（例えば、特許文献２〜４参照。）。
【特許文献１】特開平９−３０４３８８号公報
【特許文献２】特開平９−３０４３８９号公報
【特許文献３】特開平１０−２３９３１７号公報
【特許文献４】特許第３００５４００号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかしながら、増感剤は、吸光度の上昇を非特異的に促進させるものであり、また検体に含まれるイムノコンプレックス等をも凝集させうることから、誤判定の要因となりやすい。また、検体溶液を希釈する場合、特に検体が多数であると多大な時間と労力が希釈操作に費やされ、また希釈に伴う濃度測定結果の誤差の可能性が発生する。
一方、地帯現象を抑制する工夫を行っても、地帯現象は測定原理に由来するものであって完全に回避することはできず、誤判定の可能性が残る。さらに、検査に際して遭遇するとはいえ低頻度の高濃度な検体に対応するために、検査において取り扱う検体に対して一律に、抗体を多量に用いたり、添加物を加えたりすることは、経済的でなく、また不必要に非特異的な反応を増長して検査精度を低下させる。逆に、高濃度の抗原を含む検体にのみ、上記のような処理を行うことは、特に自動分析機器への適用を妨げる。
このように、被験試料に含まれる抗原等の標的物質を、低濃度から高濃度に渡って簡便かつ精度よく定量することは困難であった。
【０００４】
本発明は前記課題を解決するためになされたもので、被験試料中の標的物質を、低濃度から高濃度にわたる広い測定範囲において、簡便な操作で精度よく定量できる測定方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、地帯現象による吸光度の低下が、さらに添加する抗原量を増やしても依然として持続することに着目し、吸光度減少域（プロゾーン）において検量線を作成することにより、抗原過剰による誤判定の可能性のない方法を見出した。
すなわち、本発明の標的物質の測定方法は、被験試料中の標的物質濃度を該標的物質と特異的に結合する検出用物質を用いて測定する方法において、
標的物質または標的物質と同じ特異性をもつ物質からなる特異的物質を、検出用物質を含有した検出溶液に添加した際に吸光度が最大となる基準濃度を求める第一過程と、
前記検出溶液と同一種の第二の検出溶液に、前記基準濃度以上の前記特異的物質と、濃度既知の標的物質を含む標準溶液とを添加して、その吸光度を測定する第二過程と、
前記検出溶液と同一種の第三の検出溶液に、前記第二過程と同一濃度の前記特異的物質と、被験試料とを添加して、その吸光度を測定する第三過程とを有することを特徴とする。
また、本発明の標的物質の測定試薬は、被験試料中の標的物質の測定試薬であって、
標的物質に特異的に結合する検出用物質と、標的物質または標的物質と同じ特異性をもつ物質からなる特異的物質とを含有し、前記特異的物質の濃度は、該特異的物質を前記検出用物質に添加した際に吸光度が最大となる基準濃度以上であることを特徴とする。
【発明の効果】
【０００６】
本発明の測定方法によれば、被験試料中の標的物質を、低濃度から高濃度にわたる広い測定範囲において、簡便な操作で精度よく定量することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明の標的物質の測定方法は、被験試料中の標的物質濃度を該標的物質と特異的に結合する検出用物質を用いて測定するものである。
本発明の測定方法に用いられる被験試料としては、性状が液体であればよく、例えば、血液、血清、体液、尿や、固体の検体を分散した液の上清等が挙げられる。
【０００８】
本発明において、測定される標的物質としては、特に制限はないが、各種疾病やアレルギー等の原因物質、病原菌、生理活性物質、それらの抗体等が挙げられる。具体的には、免疫グロブリン（例えば、ヒト及び動物免疫グロブリン、変性免疫グロブリン）、各種ウイルス抗原（例えば、肝炎ウイルス関連抗原、風疹ＨＡ抗原等）、種々の細菌、真菌、毒素等の微生物抗原（例えば、トキソプラズマ、梅毒トレポネーマ等）、各種血漿タンパク成分（例えば、α−フェトプロテイン、Ｃ反応性タンパク（ＣＲＰ）、アルブミン、補体成分等）、各種ホルモン（例えば、エストロゲン、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、（ＨＣＧ）等）、抗体（例えば、抗ＣＥＡ（carcinoembryonic antigen）抗体、抗反応性タンパク抗体、抗フィブリノーゲン抗体、抗γ−グロブリン抗体等）、ホルモン受容体（例えば、甲状腺刺激ホルモンリセプター、ＨＣＧリセプター等）、酵素（例えば、アルカリフォスファターゼ、コリンエステラーゼ等）、基質（例えば、コレステロール、尿酸等）、ヘモグロビン誘導体、糖誘導体（例えば糖化合物、糖タンパク質等）が挙げられる。
【０００９】
本発明の測定方法に用いられる検出用物質は、標的物質と特異的に結合するものであればよい。このような検出用物質としては、例えば、抗原−抗体反応、酵素−基質反応又はリガンド−受容体反応等によって標的物質と結合する物質が挙げられる。これらの中でも、標的物質と抗原−抗体反応によって結合する物質を用いると、標的物質である抗原または抗体と結合する抗体または抗原が、多種にわたって入手可能であることにより、多種の標的物質を測定できる。
【００１０】
まず、標的物質または標的物質と同じ特異性をもつ物質からなる特異的物質を、検出用物質を含有した検出溶液に添加した際に吸光度が最大となる基準濃度を求める第一過程を行う。
本発明において前記特異的物質に用いられる、標的物質と同じ特異性をもつ物質とは、前記検出用物質上の、前記標的物質と結合する部位に対して特異的に結合する物質をいう。
上記の吸光度が最大となる基準濃度を求める際に、特異的物質を用いることができるが、特に、標的物質と同一のものが好ましい。
なお、前記基準濃度は、検出用物質と標的物質との親和性、検出用物質の濃度等から、前もって計算により推定しておくこともできる。
【００１１】
前記検出溶液において、検出用物質は溶液中に分散させて用いてもよいし、不溶性担体に担持させて用いてもよいが、不溶性担体に担持させて用いることが好ましい。このことにより、標的物質濃度の変化量に対する吸光度の変化率がより高くなるため、感度の高い検出を行うことができる。
不溶性担体としては、有機高分子粒子、無機物質粒子、ラテックス粒子、細胞膜片、血球、微生物等が挙げられる。これらの中でも、工業的に一定の品質性能のものを大量生産できることから、ラテックス粒子が好ましい。ラテックス粒子の材料としては、粒径を比較的一定に、また、工業的に一定の品質、性能のものを大量生産することができるものであれば、特に制限はなく、例えばスチレン、塩化ビニル、アクリロニトリル、酢酸ビニル、アクリル酸エステル、メタクリル酸エステル等のビニル系モノマーの単一重合体や共重合体；スチレン−ブタジエン共重合体、メチルメタクリレート−ブタジエン共重合体等のブタジエン系共重合体等が挙げられる。これらのうち、抗体等の物質の吸着性に優れており、かつ、生物学的活性を長期間保持できる等の観点から、ポリスチレン系のポリマー粒子がさらに好ましい。ラテックス粒子の粒径は、０．０１〜１０μｍが好ましく、０．０３〜１μｍが特に好ましい。
【００１２】
不溶性担体に検出用物質を担持させる場合、その方法としては、物理的に吸着させる方法、化学的に結合させる方法等を用いることができる。物理的に吸着させる場合には、不溶性担体と検出用物質を単に混合すればよい。また、化学的に結合させる場合には、不溶性担体もしくは検出用物質の表面に存在する官能基を利用して、または適当な官能基を有するスペーサを介して結合させることができる。前記スペーサとしては、カルボジイミド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル等が挙げられる。
【００１３】
前記検出用物質として抗体を用いる場合、その抗体の由来は限定されず、例えば、ウサギ抗体、ラット抗体、マウス抗体、ヤギ抗体などいかなる動物種の血清由来のものも使用でき、またモノクローナル抗体でもポリクローナル抗体でもよいし、抗体であってもＦ（ａｂ’）２等の抗体フラグメントであってもよいが、コストの面で、ヤギ血清から精製した抗体が好ましい。抗体の精製方法および純度も特に制限されず、例えば、硫安塩析等によって精製された抗体を用いることができる。前記検出用物質として抗体を用い、かつ前記不溶性担体に担持させて用いる場合、その抗体は、不溶性担体の凝集を妨げないものであればよい。
さらに、抗体として抗免疫グロブリン抗体を用いれば、標的物質として免疫グロブリンを検出することができる。
【００１４】
吸光度を測定する方法としては、例えば免疫比濁法、免疫比ろう法等が挙げられ、免疫比濁法が好ましく用いられる。
【００１５】
ついで、前記検出溶液と同一種の第二の検出溶液に、前記基準濃度以上の前記特異的物質と、濃度既知の標的物質を含む標準溶液とを添加して、その吸光度を測定する第二過程を行う。
このとき、前記特異的物質を添加した後に標準溶液を添加してもよいし、特異的物質と、標準溶液とを同時に添加してもよい。
ここで、前記検出溶液と同一種の検出溶液とは、第一過程において用いた検出溶液と、組成、濃度、温度、ｐＨ等の条件が全て同一であるものを示す。
【００１６】
前記特異的物質を添加した後に標準溶液を添加する場合は、標準溶液を添加してから一定時間経過後に、吸光度を測定する。特異的物質と、標準溶液とを同時に添加する場合は、これらを添加してから一定時間経過後に、吸光度を測定する。なお、吸光度の測定条件は、前記第一過程と同様とする。
この吸光度と標準溶液における標的物質の濃度に対して吸光度をプロットすることにより、検量線を作成することができる。ここで、標準溶液の濃度が高くなると吸光度が低下する検量線が得られる。
なお、検出溶液に添加する特異的物質の濃度を、前記基準濃度以上のうちいずれの濃度に設定するかを選択することで、微少濃度から高濃度に渡る濃度範囲の標的物質を、より正確に定量することができる。例えば、微少濃度の標的物質を測定する場合は、添加する特異的物質の濃度を基準濃度より大きくすることにより、標的物質の濃度の微小な違いに対してより吸光度の差が大きい検量線を得ることができる。高濃度の標的物質を測定する場合は、基準濃度以上かつ基準濃度付近とすればよく、この場合、用いる検出用物質も少なくてすむので、さらに経済的である。
【００１７】
さらに、前記検出溶液と同一種の第三の検出溶液に、前記第二過程と同一濃度の前記特異的物質と、被験試料とを添加して、その吸光度を測定する第三過程を行う。すなわち、前記第一過程、第二過程において用いた検出溶液と同一種の検出溶液を別に調製し、この検出溶液に、第二過程と同一濃度の前記特異的物質と、被験試料とを添加する。添加してから、前記第二過程における吸光度の測定と同一の時間経過後に、吸光度を測定する。なお、吸光度の測定条件は、前記第一過程および第二過程と同様とする。
引き続いて、第二過程で作成した検量線上で、第三過程で得た吸光度と同一の値を示す点に対応する標的物質の濃度を参照することにより、被験試料に含まれる標的物質の濃度を求めることができる。
【００１８】
本発明の標的物質の測定試薬は、標的物質に特異的に結合する検出用物質と、標的物質または標的物質と同じ特異性をもつ物質からなる特異的物質とを含有し、前記特異的物質の濃度は、該特異的物質を検出用物質を含有した検出溶液に添加した際に吸光度が最大となる基準濃度以上であることを特徴とする。
このような測定試薬に、濃度既知の標的物質を含む標準溶液を添加して一定時間経過後の吸光度を測定することにより検量線を作成し、別に、同一種の測定試薬に被験試料を添加して同一の時間経過後の吸光度を測定することにより、検量線を用いて被験試料における標的物質濃度を求めることができる。
【００１９】
本発明の測定方法では、検出溶液に、特異的物質を前記基準濃度以上で添加することにより、微少量から多量に渡る標的物質を、簡便かつ正確に定量することができる。高濃度の標的物質に対しても希釈操作を必要としないので、多数の試料を一括して取り扱いやすい。例えば生体由来の被験試料の個体差、正常・異常、標的物質の種類によらず、簡便な機構で自動分析を行えるので、コストダウン、分析に要する時間の短縮を実現できる。
さらに、前記検出溶液において、検出用物質を不溶性担体に担持させて用いると、さらに感度よく標的物質を検出することができ、検出用物質の使用量を低減できる。
また、検出用物質として抗免疫グロブリン抗体を用いると、標的物質として免疫グロブリン（イムノグロブリン）を検出することができ、特に、従来は希釈せずに定量することが困難であったイムノグロブリンＧ（ＩｇＧ）、イムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）、イムノグロブリンＭ（ＩｇＭ）等の、正常検体に多量に存在する免疫グロブリンについても、希釈することなく正確に定量を行うことができる。
【００２０】
本発明の測定方法は、病院や検査センター等において、汎用自動分析装置を用いた自動分析に好適に用いることができる。ここで、例えば、Ｃ３、Ｃ４等を含む補体成分などの、正常検体に多量に存在する標的物質についても、希釈することなく正確に定量を行うことができる。
【実施例】
【００２１】
［実施例１］
（１）検出溶液および特異的物質溶液の調製
検出溶液として、抗ヒトＩｇＧヤギポリクローナル抗体からなる検出用物質を、物理吸着でラテックス粒子からなる不溶性担体に担持させたラテックス試液（抗ＩｇＧ抗体担持ラテックス試液）を調製した。
抗ヒトＩｇＧヤギポリクローナル抗体（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏｒｐ．製：以下、「抗ＩｇＧ抗体」という）からなる検出用物質を２．０ｍｇ／ｍｌの濃度で５０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ７．２）に溶解した液１０．０ｍｌに、平均粒径が１１０ｎｍのポリスチレン粒子（藤倉化成（株）製：固形分１質量％）１０．０ｍｌを添加し、４℃で６０分間撹拌した。次いで、この液にウシ血清アルブミン（以下、「ＢＳＡ」という）を１質量％含有する５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．２：以下、「ＰＢＳ」という）を添加し、４℃で６０分間撹拌した後、２００００×ｇで６０分間遠心分離して洗浄した。洗浄操作は３回行った。得られた沈殿物にＢＳＡを０．１質量％含有するＰＢＳ１０ｍｌを添加し、ポリスチレン粒子を懸濁した後、超音波破砕機にて分散処理を行い、固形分０．１％（Ｗ／Ｖ）の抗ＩｇＧ抗体担持ラテックス試液を得た。
また、特異的物質としてヒトＩｇＧ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏｒｐ．製：以下、「ＩｇＧ」という）を用い、特異的物質の溶液（特異的物質溶液）を調製した。グリシン５０ｍＭ、食塩７０ｍＭを純水に溶解し、ｐＨ７．２に調整して、この溶液に、ＩｇＧ濃度１０ｍｇ／ｄｌ、１５ｍｇ／ｄｌ、２０ｍｇ／ｄｌ、２５ｍｇ／ｄｌ、５０ｍｇ／ｄｌ、７５ｍｇ／ｄｌ、２００ｍｇ／ｄｌ、５００ｍｇ／ｄｌとなるようにヒトＩｇＧを混合し、特異的物質溶液を得た。
（２）基準濃度の決定
まず、上記（１）で調製した各ＩｇＧ濃度の特異的物質溶液を、上記（１）と同様の方法で調製したそれぞれ別の検出溶液に添加し、添加時から５分後の吸光度を測定した。以下、吸光度の測定は、自動汎用測定機日立７０２０形（日立製作所（株）製）を使用して、測定波長８００ｎｍ、測定温度３７℃で行った。結果を図１に示す。なお、図１は、横軸を対数目盛りとした片対数グラフである。
その結果、ＩｇＧ濃度が２５ｍｇ／ｄｌの場合に、他の濃度の場合と比べて吸光度が最大となった。すなわち、ＩｇＧについての基準濃度は２５ｍｇ／ｄｌであった。
【００２２】
（３）検量線の作成
ついで、上記（１）と同様の方法で調製したＩｇＧ濃度２５ｍｇ／ｄｌの特異的物質溶液３００μｌと、標準溶液として、標的物質として濃度既知のＩｇＧを含む血清３μｌとを混合した。
なお、標準溶液は、ＩｇＧ濃度既知の血清を希釈することにより、ＩｇＧ濃度１０ｍｇ／ｄｌ、２５ｍｇ／ｄｌ、１００ｍｇ／ｄｌ、５００ｍｇ／ｄｌ、１０００ｍｇ／ｄｌ、２０００ｍｇ／ｄｌ、５０００ｍｇ／ｄｌ、８０００ｍｇ／ｄｌとなるように調製した。
この混合液に、上記（１）の方法で別に調製した検出溶液１００μｌを添加し、添加時から５分後の吸光度を測定した。標準溶液のＩｇＧ濃度に対して吸光度をプロットし、ＩｇＧ測定用の検量線を作成した。結果を図２に示す。図２は、横軸を対数目盛りとした片対数グラフである。
【００２３】
（４）被験試料の測定
その後、上記（１）と同様の方法で調製したＩｇＧ濃度２５ｍｇ／ｄｌの特異的物質溶液３００μｌと、被験試料として、ＩｇＧ濃度が１０００ｍｇ／ｄｌであるヒト血清３μｌとを混合した。
この混合液に、上記（１）の方法で別に調製した検出溶液１００μｌを添加し、添加時から５分後の吸光度を測定した。得られた吸光度と上記（３）で作成した検量線を用いて、被験試料中のＩｇＧ濃度を求めた。その結果、検量線から求めた被験試料中のＩｇＧ濃度の値は１０１２ｍｇ／ｄｌとなり、用いた被験試料のＩｇＧ濃度と一致した。
【００２４】
［比較例１］
実施例１における（１）検出溶液および特異的物質溶液の調製で、ＩｇＧを添加しなかったこと以外は、実施例１と同様に測定を行った。結果を図３に示す。図３は、横軸を対数目盛りとした片対数グラフである。
【００２５】
図２から明らかなように、ラテックス試液に基準濃度のＩｇＧを添加した実施例１では、標準溶液のＩｇＧ濃度が低濃度から高濃度にいたるまで、ＩｇＧ濃度と吸光度が一義的に対応する検量線を得ることができ、濃度未知試料について測定した吸光度からＩｇＧ濃度を誤判定する可能性を除くことができた。このことにより、被験試料において、希釈を行わずにＩｇＧ濃度を正確に求めることができた。
ラテックス試液にＩｇＧからなる特異的物質を含有させなかった比較例１では、標準溶液中のＩｇＧ濃度が高濃度に渡るときに、吸光度の同一の値に対して、２つ以上のＩｇＧ濃度が対応する場合があり、すなわちＩｇＧ濃度と吸光度が一義的に対応する検量線を得ることができなかった。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】実施例１において、特異的物質としてＩｇＧを検出溶液に添加したときの、特異的物質の濃度に対する吸光度を示す図である。
【図２】実施例１における、標準溶液のＩｇＧ濃度に対する吸光度を示す図である。
【図３】比較例１における、標準溶液のＩｇＧ濃度に対する吸光度を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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