(57)【要約】  【課題】  非染色の角層細胞の形状の鑑別法であって、従来の染色による形状の鑑別法や非染色の形状鑑別法では知ることの出来なかった角層細胞の特性値を検知する手段を提供する。  【解決手段】  皮膚の角層細胞の形状を鑑別或いは計測するための方法であって、１）粘着剤を塗工した透明な担体を皮膚に圧着して剥離し、皮膚より角層細胞を採取し、２）粘着剤を塗工していない面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、３）粘着剤を塗工している面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、４）２）と３）の観察乃至は計測結果の差異を指標とし、角層細胞を鑑別する。  【選択図】  なし 【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚の角層細胞の形状を鑑別或いは計測するための方法であって、１）粘着剤を塗工した透明な担体を皮膚に圧着して剥離し、皮膚より角層細胞を採取し、２）粘着剤を塗工していない面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、３）粘着剤を塗工している面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、４）２）と３）の観察乃至は計測結果の差異を指標とすることを特徴とする、角層細胞の鑑別方法。
【請求項２】
前記拡大手段が、拡大ビデオによって作られる画像であることを特徴とする、請求項１に記載の角層細胞の鑑別方法。
【請求項３】
観察している対象が、角層細胞に於ける、真皮側との接着面の凹凸構造であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の角層細胞の鑑別方法。
【請求項４】
拡大ビデオによって作られる画像が、取り込まれた拡大画像を二値化したものであることを特徴とする、請求項２又は３に記載の角層細胞の鑑別方法。
【請求項５】
皮膚状態を鑑別するためのものであることを特徴とする、請求項１〜５何れか１項に記載の角層細胞の鑑別方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肌の状態を鑑別するのに有用な角層細胞の鑑別方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
角層細胞の形状は、肌状態を反映し、又、角層細胞の形状そのものが肌状態に反映されるため、肌状態を知る為の意義深い情報である。この様な肌状態と関わりの深い角層細胞の形状としては、例えば、角層細胞の面積、角層細胞の体積、角層細胞がきれいな六角形か否かと言った、形の規則性などが挙げられる。（例えば、特許文献１、特許文献２、特許文献３を参照）この様な角層細胞の形状を鑑別するためには、角層細胞を皮膚より採取し、これをゲンチアナバイオレットやブリリアントグリーンなどの染色剤で染色し、角層細胞１個、１個の形状を識別できるようにすることが必要であった。（例えば、特許文献４、特許文献５を参照）この為、角層細胞の採取より、角層細胞の形状の鑑別が終了するまでに１〜２日を要していた。斯くのごとく時間を要することは、化粧料の選択などの行為においては、購入しに来たときに適切な化粧料が選択できないことになり、ビジネスチャンスの喪失を招くものであった。この様な状況を踏まえて、非染色条件で角層細胞の形状を、拡大ビデオを用いて、高光度の光を当てることにより鑑別する技術が開発された（例えば、特許文献６を参照）が、この方法での形状の鑑別結果と、従来の染色による鑑別結果とでは、取り分け規則性の鑑別において、隔たりが存した。この原因としては、角層細胞の形状に未だ知られていない、肌特性と関連したファクターが存在するものと考えられ、その正体を見極めることが望まれていた。
【０００３】
他方、皮膚の角層細胞の形状を鑑別或いは計測するための方法であって、１）粘着剤を塗工した透明な担体を皮膚に圧着して剥離し、皮膚より角層細胞を採取し、２）粘着剤を塗工していない面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、３）粘着剤を塗工している面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、４）２）と３）の観察乃至は計測結果の差異を指標とする鑑別方法は全く知られていない。
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−１３１３８号公報
【特許文献２】特開２００３−３８４４９号公報
【特許文献３】特開平０９−３８０４５号公報
【特許文献４】特開平０６−４６０１号公報
【特許文献５】特開平１１−３０９１１８号公報
【特許文献６】特開平０９−１３１３２３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、この様な状況下為されたものであり、非染色の角層細胞の形状の鑑別法であって、従来の染色による形状の鑑別法や非染色の形状鑑別法では知ることの出来なかった角層細胞の特性値を検知する手段を提供すること課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
この様な状況に鑑みて、本発明者らは、非染色の角層細胞の形状の鑑別法であって、従来の染色による形状の鑑別法による結果と隔たりのない結果を提供する、角層細胞の形状の鑑別方法を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、皮膚の角層細胞の形状を鑑別或いは計測するための方法であって、１）粘着剤を塗工した透明な担体を皮膚に圧着して剥離し、皮膚より角層細胞を採取し、２）粘着剤を塗工していない面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、３）粘着剤を塗工している面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、４）２）と３）の観察乃至は計測結果の差異を指標とすることにより、この様な鑑別が為しうることを見出し、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は以下に示す技術に関するものである。
（１）皮膚の角層細胞の形状を鑑別或いは計測するための方法であって、１）粘着剤を塗工した透明な担体を皮膚に圧着して剥離し、皮膚より角層細胞を採取し、２）粘着剤を塗工していない面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、３）粘着剤を塗工している面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、４）２）と３）の観察乃至は計測結果の差異を指標とすることを特徴とする、角層細胞の鑑別方法。
（２）前記拡大手段が、拡大ビデオによって作られる画像であることを特徴とする、請求項１に記載の角層細胞の鑑別方法。
（３）観察している対象が、角層細胞に於ける、真皮側との接着面の凹凸構造であることを特徴とする、（１）又は（２）に記載の角層細胞の鑑別方法。
（４）拡大ビデオによって作られる画像が、取り込まれた拡大画像を二値化したものであることを特徴とする、（２）又は（３）に記載の角層細胞の鑑別方法。
（５）皮膚状態を鑑別するためのものであることを特徴とする、（１）〜（５）何れか１項に記載の角層細胞の鑑別方法。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、非染色の角層細胞の形状の鑑別法であって、従来の染色による形状の鑑別法や非染色の形状鑑別法では知ることの出来なかった角層細胞の特性値を検知する手段を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の角層細胞の鑑別法は、皮膚の角層細胞の形状を鑑別或いは計測するための方法であって、１）粘着剤を塗工した透明な担体を皮膚に圧着して剥離し、皮膚より角層細胞を採取し、２）粘着剤を塗工していない面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、３）粘着剤を塗工している面より、拡大手段を用いて角層細胞を染色することなく観察乃至は計測し、４）２）と３）の観察乃至は計測結果の差異を指標とすることを特徴とする。
【０００９】
本発明の角層細胞の鑑別法に用いる、角層細胞を採取するための粘着剤を塗工した担体において、粘着剤としては、架橋していても良い酢酸ビニル、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルエーテルなどの重合体乃至は共重合体等の水親和性の高分子化合物を使用することが出来る。中でも、架橋構造を有するポリ酢酸ビニル、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ビニルピロリドン・酢酸ビニル共重合体、或いは、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリアクリル酸及び／又はその塩並びにポリメタクリル酸及び／又はその塩から選択されるものがより好ましく例示できる。これらは唯一種でも用いることができるし、二種以上を組み合わせて用いることもできる。特に好ましいものは、架橋構造を有するポリ酢酸ビニル、ポリビニルピロリドン、ビニルピロリドン・酢酸ビニル共重合体などが特に好ましい。又、担体としてはポリエチレンテレフタレートの様なポリエステル、ポリ塩化ビニル、ナイロン、アクリル樹脂などの薄膜、シート、板乃至はディスクが好ましく例示できる。ディスクとは厚さ０．１〜１ｍｍの薄板を意味し、形態維持性と変形性とを有するので、本発明の支持体としては特に好ましい。担体である、支持体上に水溶性の固着剤を塗工する方法であるが、これは常法に従って行えば良く、例えば、水性担体で支持体を湿らせ、これに水溶性の固着剤の粉末を噴霧する方法、水溶性の固着剤の水溶液を噴霧乾燥させる方法或いは水溶性の固着剤の水溶液をドクターブレードなどで塗工し乾燥させる方法、シリコーンなどで処理した剥離紙上に、前記高分子を延展し、これに支持体を貼付して、高分子を支持体上に転写する方法等が好ましく例示できる。かかる塗工に際して、支持体上を予め界面活性剤などで処理し、塗工厚をより均一化することもできる。この様な界面活性剤としては、エーテル系の界面活性剤が好ましく、具体的にはトリトンＸ−１００が好ましく例示できる。又、本発明においては、この様な形態であって、既に市販されている粘着テープなどを購入して、使用することも出来る。
【００１０】
前記粘着剤を塗工した透明な担体を用いて、皮膚より角層細胞を採取する方法は、既に一般的に行われている方法に準じて行えば良く、粘着面を皮膚に一様に負荷がかかるように圧着し、暫しの間加圧状態を保ち、しかる後に端よりゆっくり剥離させればよい。
【００１１】
かくして得られた、標本は拡大手段を用いて観察に付される。拡大手段としては、反射光によりその表面を観察できるものが好ましく、例えば、走査型の顕微鏡、拡大ビデオスコープなどが好適に例示できる。かかる観察は、画像に変換して行うことが好ましく、走査型の顕微鏡であれば、顕微鏡像をデジタルカメラなどで撮影し、画像情報とし、画像処理ソフトで処理して用いることが好ましく、拡大ビデオスコープでは、光源と画像取込部が一体化したアタッチメントで、画像取込口の周囲に光源が存し光線の方向が互いにほぼ平行になるように統制されたアタッチメントを介して角層細胞表面の画像を取り込むことが好ましい。又、この様な観察を行うに際しては、既に市販の装置が存し、これを利用することが出来る。好ましい市販の機器としては、株式会社モリッテクスから販売されている「アイ−スコープ（ｉ−ｓｃｏｐｅ）ＵＳＢ」が例示できる。この機器は、カメラを装着した撮影ヘッド（アタッチメント）を有し、その先端開口から画像を取り込むようになっており、プラスチック製のケーシングの内側に、円環状に配列された光源（発光ダイオード）が、カメラを囲んだ状態で内蔵されている。又、別にこのカメラを静置するためのカメラ台（測定台）が存し、ここに前記角層細胞標本を固定するようになっている。この様な観察において、本発明の角層細胞の鑑別方法では、角層細胞を、支持体において粘着剤を塗工した面からと、塗工して無い面から指示体越しにと、二方向から観察乃至は計測する。これは、角層細胞の空気接触面側と生体接触面側との形状の差異を検知するためである。かかる際は標本を１対１で精密に比較観察し、検知することも出来るが、より簡便には、同じ部位の角層細胞の標本を、支持体において粘着剤を塗工した面からと、塗工して無い面から指示体越しにと、二方向から観察乃至は計測し、観察、計測結果を画像として取込、どちらかの画像を左右反転させ、観察結果を画像上で重ね合わせることが可能な状態に調整し、しかる後に、画像上での引き算により、この二種の画像の差異を差異画像として明確にすることが、好ましく例示できる。この様な画像処理は、例えば「フォトショップ」（ＡＤＯＢＥ社製）等の市販の画像処理ソフトを用いて行うことが出来る。更に、この差異画像を二値化して印象を強めることも、差異画像を、色を変えて元の画像に貼り付けることも、取り込んだ画像を二値化した後、一方を左右反転し、引き算することも何れの方法に於いても、この差異を画像として検知することが出来る。
【００１２】
この様に処理して得られた画像は、角層細胞の生体接着側に存する、凹凸構造を反映したもので、角層細胞の辺縁部から離れたところに、この構造が明確に現れるときには、重なりに不全な部分が存し、皮膚バリア機能、保水機能に支障を来している可能性が高いと言われている。従って、この部分の形態を観察することにより、角層細胞の接着形態等が鑑別でき、皮膚バリア機能、保水機能の鑑別も更に確度の高いものとすることが出来る。
【実施例】
【００１３】
以下に、実施例を挙げて、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明が、かかる実施例にのみ限定されないことは言うまでもない。
【００１４】
＜実施例１＞
パネラーの頬部より、粘着テープを用いてストリッピングにより、角層細胞を採取し、株式会社モリテックスの「アイ−スコープＵＳＢ」を用いて、標本の粘着剤を塗工している面と、塗工していない面とをそれぞれ観察し、同一部位を贋造に取り込んだ。投稿誌得ている面の画像については、左右を一致させるためフォトショップ（登録商標：ＡＤＯＢＥ社のプログラムソフト名）を用いて、画像の左右反転を行った。塗工して無い面から観察画像を図１に、塗工面からの観察画像の左右反転画像を図２に示す。これらの図を再びフォトショップを用いて引き算して図３の画像を得た。この画像の色を赤に変換し、元の非塗工側からの画像に貼り付けると図４に示す画像になる。角層細胞の生体接着面に存する凹凸構造が確認できることが判る。
【産業上の利用可能性】
【００１５】
本発明は、更に、的確な皮膚状態の鑑別に応用できる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】実施例１の粘着剤非塗工面からの角層細胞の写真である。（図面代用写真）
【図２】実施例１の粘着剤塗工面からの角層細胞の写真である。（図面代用写真）
【図３】図１と図２の画像の差分の画像を示す写真である。（図面代用写真）
【図４】図３を色を変えて、図２に貼り付けた画像である。（図面代用写真）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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