(57)【要約】      （修正有）【課題】新規のたんぱく質翻訳調節因子及び新規のイニシエーションファクターを提供し、新規のたんぱく質翻訳調節方法を提供する。【解決手段】リボソーム塩基配列の保存領域に相補的な１本鎖ＤＮＡオリゴマーを合成して、細胞内に取込ませ細胞を培養する。１本鎖ＤＮＡオリゴマーがリボソームにおけるたんぱく質合成のたんぱく質翻訳調節因子となり、１本鎖ＤＮＡオリゴマーがリボソームにおけるイニシエーションファクターとなって１本鎖ＤＮＡオリゴマーを使用してたんぱく質翻訳の調節をさせることができる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
たんぱく質翻訳調節因子としてのリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な１本鎖ＤＮＡオリゴマー
【請求項２】
リボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な１本鎖ＤＮＡオリゴマーを用いたたんぱく質翻訳調節方法
【請求項３】
イニシエーションファクターとしてのリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な１本鎖ＤＮＡオリゴマー
【請求項４】
イニシエーションファクターとしてのリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な１本鎖ＤＮＡオリゴマーを用いたたんぱく質翻訳調節方法
【請求項５】
イニシエーションファクターの働きをもったリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な１本鎖ＤＮＡオリゴマー
【請求項６】
イニシエーションファクターの働きをもったリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な１本鎖ＤＮＡオリゴマーを用いたたんぱく質翻訳調節方法
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は細胞のたんぱく質翻訳調節因子及びイニシエーションファクター並びに細胞のたんぱく質翻訳調節方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
たんぱく質翻訳はリボソームの仲介によってメッセンジャーＲＮＡ（以下、「ｍＲＮＡ」とする。）と転移ＲＮＡ（以下、「ｔＲＮＡ」とする。）の相互作用により行われる。ｔＲＮＡに備わったアンチコドンは相補的にｍＲＮＡに結合するがリボソームにも相互的に作用する。リボソームのｔＲＮＡ結合部はＰ  ｓｉｔｅ（ｐｅｐｔｉｄｙｌ  ｔｒｓｎｓｆｅｒａｓｅ  ｃｅｎｔｅｒ）と呼ばれ、高Ｍｇ2+濃度状態ではｍＲＮＡが存在しなくても結合が起こる。Ｐ  ｓｉｔｅは１６ＳリボソームＲＮＡ（以下、「１６ＳｒＲＮＡ」という。）の特定の位置の塩基であろうと考えられている。カリフォルニア大学サンタクルーズのＮｏｌｌｅｒ  ＨＦらのグループはリボソームのｓｍａｌｌ  ｓｕｂｕｎｉｔの一部である１６ＳｒＲＮＡの９６６番、１４０１番のグアニンをメチル化することによってＰ  ｓｉｔｅにおけるｍＲＮＡとｔＲＮＡの結合を阻害することを明らかにした。また、９２６番のグアニンをメチル化すると先程の高Ｍｇ2+濃度状態でのＰ  ｓｉｔｅへのｔＲＮＡ結合を阻害するようになる。これらのリボソームＲＮＡ上の位置は古くから微生物に広く塩基配列が保存された領域、すなわちａｒｃｈａｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ（古細菌）から原核生物に至るまで１６ＳｒＲＮＡに４ヶ所認められ、約２０塩基長のオリゴマーとして存在する。これらの保存領域に挟まれた数百塩基長のＲＮＡ配列は、属あるいは種として分類学上規定される特異的な菌の集団におおむね一致して同じ配列がみられる。このＲＮＡ塩基配列は実際はＤＮＡとしてコードされている。ＤＮＡにコードされたＲＮＡ塩基配列はｒｒｎオペロンと呼ばれ、二つのプロモーターの後ろに１６ＳｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ、２３ＳｒＲＮＡ、５ＳｒＲＮＡ、ｔＲＮＡの順にスペーサー領域を介して連結している。それぞれのｔＲＮＡは二つのｔＲＮＡＧｌｕの組み合わせか、あるいはｔＲＮＡｌｌｅとｔＲＮＡＡｌａの組み合わせで存在し、この２種類のｒｒｎオペロンが数個染色体上に存在する。リボソームＲＮＡの保存領域に関しては重要な機能を担う配列が保存されているとの認識が早くからみられ、リボソームＲＮＡ上の1本鎖ＲＮＡ構造にその機能が託されていると考え、その検索がアミノアシルｔＲＮＡの解析方法に則って行われるようになった。
【０００３】
ドイツのマックスブランク研究所のＥｒｄｍａｎｎ  ＶＡらのグループは配列が明らかなオリゴヌクレオチドを合成し、リボソームＲＮＡとの相補的結合能をみてリボソームＲＮＡの1本鎖構造上の位置と配列を決定している。すなわちＥ．ｃｏｌｉとＢ．ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓの５ＳｒＲＮＡ配列の二次構造にみられる１本鎖領域と２本鎖領域が存在することを推定しそれを決定することを行った。彼らはあらかじめ配列のわかっているオリゴマー（３、４塩基）を合成し、常温でハイブリダイズさせ、１本鎖状態を保持している位置と配列を特定している。５ＳｒＲＮＡの約１２０塩基配列の１０番、３０番、６０番、７０番、８５番、９５番の塩基位置に１本鎖領域が認められ、二次構造が提案されている。
【０００４】
その後ブラウン大学のＧｅｒｂｉ  ＳＡ、エジンバラ大学のＣｏｘ  ＲＡのグループでは、真核細胞同士のリボソームＲＮＡの比較あるいは原核細胞との比較を行って機能部位の検索を行つている。真核生物としてＸｅｎｏｐｕｓ  ｌａｅｖｉｓ、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ  ｃｒａｓｓａ、Ｄｒｏｓｏｐhｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ、原核生物としてＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉを用い２８Ｓ、２３Ｓ、１８Ｓ（真核生物）、１６Ｓ（原核生物）を対象にしている。ここでもリボソームＲＮＡの機能領域を明確にするため進化の過程で保存された領域に着目している。制限酵素で５０〜３００塩基毎にマッピングを行いそれについて異種同士から抽出したヌクレオチドをブローブにしてＤＮＡ−ＤＮＡあるいはＤＮＡ−ＲＮＡハイブリダイゼーションを行って異種間で共通の塩基配列すなわち保存された領域を特定する作業を行っている。その結果、（１）各種間に普遍的な保存領域が認められ、（２）その保存領域はリボソームＲＮＡのＤＮＡコード領域内に認められスベーサー領域にはほとんど認められない。（３）１８ＳｒＲＮＡあるいは１６ＳｒＲＮＡの３’末端側の保存領域は生物全般に広く認められ、ｍＲＮＡの結合域Ｓｈｉｎｅ  ａｎｄ  Ｄａｌｇａｒｎｏ  ｂｏｘを強く推定している。（４）１６Ｓ、１８Ｓ内には他にもいくつかの保存域がみつけられている。（５）またｔＲＮＡの結合域とｒＲＮＡのメチル化についての相関についても予想を立てている。
【０００５】
さらにＥ  ｃｏｌｉ（１９７８）、Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｖｕｌｇａｒｉｓ（１９８１）の１６ＳｒＲＮＡ、Ｚｅａ  ｍａｙｓの葉緑体ｒＲＮＡ（１９８０）、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの１８ＳｒＲＮＡ（１９８０）、Ｘｅｎｏｐｕｓ  ｌａｅｖｉｓの１８ＳｒＲＮＡ（１９８１）、ヒトとマウスのミトコンドリア１２ＳｒＲＮＡ（１９８０）、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅミトコンドリア１５ＳｒＲＮＡ（１９８０）の塩基配列がほぼ同時期に発表された。また、Ｅ．ｃｏｌｉの１６ＳｒＲＮＡの二次構造が５ヶ所から提出され細菌に普遍的な二次構造として認められた。これによってペプチド結合を触媒するリボソームの機能が保存配列に存在し、二次構造上に位置が推定されることが確実になってきた。このように１９８０年代初頭になされたリボソームＲＮＡの構造と機能の研究は冒頭に述べたＮｏｌｌｅｒ  ＨＦらの成果に繋がっていくことになった。
【０００６】
リボソームＲＮＡの保存塩基配列は１６ＳｒＲＮＡ、１８ＳｒＲＮＡの３’末端部にＳｈｉｎｅ  ａｎｄ  Ｄａｌｇａｒｎｏ領域があるが、他にもグアニンがメチル化することによって、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡの結合が阻害される領域として４ヶ所、その他に４ヶ所見出されている。１９８７年の時点で発明者Ｈｏｓｈｉｎａ  Ｓらはかかる機能が明らかになる前にそのうちの２ヶ所を任意に用いることで本来無菌的状態を維持している生体部位に起こる細菌感染症を普遍的に検出し、その病原体を識別する方法を提案した（特許第３１３５９０９号）。１６ＳｒＲＮＡに存在する保存的配列は各々約２０塩基あり、生体内でもこれをプライマーとする複製酵素の伸展反応があるのだろうと推定される。そこでこの共通な塩基配列の中から二つを選んでプライマーとし、いわゆる遺伝子増幅を行えば、原因菌に特異的な配列を検出可能な量だけ得られることになるのである。
【０００７】
さらに、細胞のたんぱく質翻訳調節因子としては明確になっていないグロースファクターやホルモンは転写調節を行っている。グロースファクターは、例えば細胞内のリン酸がたんぱく質の受容体を刺激しその刺激が次々と他のたんぱく質に伝達されるという信号伝達が生じ細胞の分裂が促進される。ホルモンは転写調節遺伝子に直接結合しその結果細胞の分裂が促進されることがある。
【０００８】
次にイニシエーションファクターについて述べる。１６ＳｒＲＮＡや１８ＳｒＲＮＡの塩基配列の中には細菌、真菌、植物、動物など細胞で共通の配列がみられる。特に５３０ループ、９２６倍位、１４０１倍位は塩基配列の共通する領域で二次構造、立体構造も共通した性状を示している。これらの領域は１６ＳｒＲＮＡや１８ＳｒＲＮＡのＰ  ｓｉｔｅ中に存在しておりｍＲＮＡのコドンをｔＲＮＡのアンチコドンが認識するデコーディング機能にかかわる部位である。即ちリボソームのｓｍａｌｌ  ｓｕｂｕｎｉｔ（１６ＳｒＲＮＡ、１８ＳｒＲＮＡとリボソームたんぱく質の複合体）にｍＲＮＡとｔＲＮＡが会合する場所である。
【０００９】
たんぱく質翻訳の開始には、第１段階としてこのＰ  ｓｉｔｅ部位にホルミル化されたメチオニン−ｔＲＮＡ（ｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMet：ＵＡＣ）とｍＲＮＡの転写開始コドン（ＡＵＧ）が相補的に結合したものが定着する。つぎにリボソームのｌａｒｇｅ  ｓｕｂｕｎｉｔ（２３ＳｒＲＮＡ、２８ＳｒＲＮＡとリボソームたんぱく質の複合体）がかぶさっていわゆるリボソーム粒子が形成される。そして、ｓｍａｌｌ  ｓｕｂｕｎｉｔとｌａｒｇｅ  ｓｕｂｕｎｉｔが結合した段階でペプチド鎖伸長反応が始まる。さらにリボソーム、ｔＲＮＡ複合体のｍＲＮＡに対する１コドンの移動（トランスロケーション）が引き続いて起こる。このリボソームのｓｍａｌｌ  ｓｕｂｕｎｉｔ中にある５３０ループ、９２６倍位、１４０１倍位は立体構造でその位置を決めると７０〜１００Åの間に入る。リボソーム上でのたんぱく質翻訳の第１段階ではＰ  ｓｉｔｅにｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetが結合する反応が起こる時、ｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetがＡ  ｓｉｔｅに誤って結合しなく、引き続きｍＲＮＡの開始コドンＡＵＧがｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetのアンチコドンと結合する。この時、ｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetとＰ  ｓｉｔｅの結合の後につぎのｔＲＮＡが会合してこないことがみられる。さらにｌａｒｇｅ  ｓｕｂｕｎｉｔが最後まで会合してこないことなど一連の阻害反応がみられ、この現象を担う因子が存在する。
【００１０】
この現象のそれぞれを役割分担してたんぱく質翻訳を開始し、たんぱく質翻訳が順調に正確に進むための働きをしている因子をイニシエーションファクター（Ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ、ＩＦ）という。イニシエーションファクターには原核生物ではＩＦ１、ＩＦ２、ＩＦ３の３種類があり、このうちＩＦ２はＧＴＰを脱リン酸化するＧＴＰａｓｅである。また、ＩＦ２はたんぱく質翻訳の第１段階で働きｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetがｍＲＮＡのＡＵＧに結合する際に関与する。真核生物ではイニシエーションファクターとしてｅＩＦ２がＩＦ２と同様の働きをしている。ＩＦ１はリボソームｓｍａｌｌ  ｓｕｂｕｎｉｔに最初に結合してｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetがＰ  ｓｉｔｅに結合するための空間を提供し、ＩＦ３はｌａｒｇｅ  ｓｕｂｕｎｉｔが結合するのを防ぐ「くさび」の役をしていると考えられるが、ＩＦ１とＩＦ３はまだ本体が明らかになっていない。
【特許文献１】特許第３１３５９０９号公報
【非特許文献１】Sadayori Hoshina, Marius Ueffing, and I. Bernard Weinstein．Growth factor-induced DNA synthesis in cells that overproduce protein kinase C．Journal of Cellular Physiology,145: 262-268,1990.
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
新規のたんぱく質翻訳調節因子及び新規のイニシエーションファクター並びに新規のたんぱく質翻訳調節方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
リボソームＲＮＡに存在する保存的配列を合成した１本鎖ＤＮＡオリゴマーを細胞内に取込ませると増殖性細胞がさらに増殖することが見出された。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、例えば、細胞を用いて有用たんぱく質を多量に生産できる。再生医療で組織細胞を増殖させる場合に上皮細胞増殖因子（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ）と本発明であるオリゴマーＤＮＡを加えると細胞が良く増殖し、必要な臓器再生技術を早期に得られる。あるいは免疫細胞に本発明であるオリゴマーＤＮＡを与えれば、免疫細胞のたんばく質合成能力を制御でき、免疫機能をコントロールでき、免疫能を賦活できる。あるいは、がん細胞に本発明であるオリゴマーＤＮＡを与えると、がん細胞のたんばく質合成能力を制御でき、がん細胞を殺せる可能性がある。細菌に本発明であるオリゴマーＤＮＡを与えれば抗生物質のように使える可能性がある。細菌の１６ＳリボソームＲＮＡだけに存在し、ヒトや植物の１８ＳリボソームＲＮＡに無いオリゴマー配列が認められているので、識別して使うことができる。さらに、イニシエーションファクターとして使用することにより、より効果的に細胞のたんぱく質合成能力を制御できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
図１はＥ．ｃｏｌｉの１６ＳｒＲＮＡの塩基配列図である。表１に示すようにＥ．ｃｏｌｉのリボソームの保存領域のうち１６ＳＲＲＵ１（５’ＣＡＧＣＡＧＣＣＧＣＧＧＴＡＡＴＡＣ３’（配列番号１））と人の１８ＳｒＲＮＡとラットの１８ＳｒＲＮＡとの一致率は１００％であり、Ｅ．ｃｏｌｉのリボソームの保存領域のうち１６ＳＲＲＵ５（ＧＣＡＣＡＣＡＣＣＧＣＣＣＧＴ（配列番号３））と人の１８ＳｒＲＮＡとの一致率が９３％、ラットの１８ＳｒＲＮＡとの一致率が１００％であり、Ｅ．ｃｏｌｉリボソームの保存領域のうち１６ＳＲＲＵ２（ＣＣＧＴＣＡＡＴＴＣＣＴＴＴＧＡＧＴＴＴ（配列番号３））と人の１８ＳｒＲＮＡとラットの１８ＳｒＲＮＡとの一致率が９５％であるようにＥ．ｃｏｌｉや高等の哺乳類の間で進化の進み具合に差があるにも関わらず共通の遺伝子配列を持つものがある。
【表１】
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【００１５】
リボソーム塩基配列の保存領域はたんぱく質合成機能を行う場の領域とされ、リボソーム立体構造では１本鎖で存在することが徐々に明らかになってきた。ラット繊維芽細胞Ｒａｔ６の１８ＳｒＲＮＡ塩基配列に相補的なＤＮＡ塩基配列を３つ合成した。３つのＤＮＡオリゴマーは、ＳＲＲ１１（５’ＣＡＧＣＡＧＣＣＧＣＧＧＴＡＡＴＡＣ３’（配列番号１））、ＳＲＲ２２（ＣＣＧＴＣＡＡＴＴＣＣＴＴＴＧＡＧＴＴＴ（配列番号２））、ＳＲＲ５３（ＧＣＡＣＡＣＡＣＣＧＣＣＣＧＴ（配列番号３））である。
【００１６】
ラット線維芽細胞Ｒａｔ６を９６ウエル培養シャーレで上皮細胞増殖因子（以下、「ＥＧＦ」という。）加ＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  Ｍｅｄｉｕｍ）を入れて２週間培養した。その後たんぱく質合成機能領域のＤＮＡオリゴマーＳＲＲ１１とＳＲＲ２２の１０ｎｇ／ｍＬを上記ＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）添加ＤＭＥＭに加えてさらに培養を３週間続けた。ＥＧＦを加えたがＤＮＡを加えていないＲａｔ６細胞を（あ）ケース、ＥＧＦを加えＤＮＡを加えたものを（い）ケースとする。これらの条件培地に馴化したＲａｔ６細胞を一般に使われる１０％子牛血清（ＣＳ）とＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）を加えていない培地（以下、「Ａケース」という。）、一般に使われる１０％子牛血清（ＣＳ）を加えＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）を加えていない培地（以下、「Ｂケース」という。）、ＤＮＡオリゴマーを除いたＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）を加えた培地（以下、「Ｃケース」という。）に戻して培養を１週間から３週間行った。培地交換はその間３から４日ごとに適宜行った。その結果を表２に示す。
【表２】
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【００１７】
（あ）ケースで培養したＲａｔ６細胞をＡケースの培地に置き換えると１１個のコロニーを形成した。Ｂケースに置き換えた場合ではコロニー数は６１個に増加した。Ｃケースで培養を行うとコロニー数は１７０個であった。一方、（い）ケースで培養を行ったＲａｔ６細胞はＢケースに置き換えた場合コロニー数は７７個であった。Ｃケースではコロニー数は８３２個であった。
（あ）ケースで培養をし続けた場合に比べ、それにオリゴマーＤＮＡを添加して培養を続けた（い）ケースのＲａｔ６細胞では、Ｂケースの標準培地に戻したものではコロニー数はわずかに増加したが、Ｃケースに戻した場合ではコロニー数が強く増加した。また、ＳＲＲ１１の代わりにＳＲＲ５３を加えて同様の実験を試みたところ細胞増殖能が認められた。
【００１８】
以下参考に詳細な実験経過を記載する。第１日（１１月９日）Ｒａｔ６細胞を約２週間ＥＧＦで培養する。第１３日（１１月２２日）Ｒａｔ６細胞をＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）のみとＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）とオリゴＤＮＡ（ＳＲＲ１１＋ＳＲＲ２２）（１０ｎｇ／ｍＬ）を添加した条件培地に交換。Ｒａｔ６細胞は正常発育。第１８日（１１月２７日）ＥＧＦ（２０ｎｇ／ｍＬ）を増量。第２２日（１２月１日）ＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）に減量。Ｒａｔ６細胞の発育は正常を維持している。第２６日（１２月５日）ＥＧＦ＋オリゴＤＮＡ（ＳＲＲ１１＋ＳＲＲ２２）を添加した培地でのＲａｔ６細胞の発育が増殖性に変換し、コロニー形成が見られる。ＥＧＦのみを添加した培地でのＲａｔ６細胞の発育が増殖性に変換し、コロニー形成が見られる。また、ＳＲＲ２２＋ＳＲＲ５３（ＧＣＡＣＡＣＡＣＣＧＣＣＣＧＴ）を添加した系でもＲａｔ６細胞の発育が増殖性を示した。特にＳＲＲ１１＋ＳＲＲ２２を添加した場合の細胞増殖能が最も強力であった。第２６日（１２月５日）９６ウェルプレートにそれらのコロニーを選び、細胞を１×１０５ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌづつ軟寒天培地に植え継ぐ。Ａ：上層を０．３％寒天にＥＧＦのみ添加、Ｂ：上層を０．３％寒天にＥＧＦとオリゴＤＮＡ（ＳＲＲ１１、ＳＲＲ２２）を添加、下層はすべて０．５％寒天で何も添加せず。第３３日（１２月１２日）９６ウェルプレートにそれらのコロニーを選び、細胞を８×１０３／ｗｅｌｌづつ接種。条件培地は１０％ＣＳとＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）をそれぞれ添加した培地に戻した。第３９日（１２月１８日）増殖性細胞に一般に見られるフォーカス形成とコロニー形成が見られた。第５４日（１月２日）結果観察した。
【００１９】
実験ではＤＮＡオリゴマーＳＲＲ２２を加えた場合にコロニー数が最も増加したことから、ＳＲＲ２２の塩基配列の位置がたんぱく質翻訳の主たる場を提供していると考えられる。リボソームＲＮＡの１本鎖領域で塩基配列が進化の過程で保存された部位に（ＳＲＲ２２にはＴが多く見られる）ｍＲＮＡのポリＡテールが結合する。そこで１本鎖ＤＮＡオリゴマーＳＲＲ２２をＤＮＡ合成して細胞に与えると、フリーのｍＲＮＡが結合しそれがリボソームＲＮＡのＳＲＲ２２部位に結合しやすくなる。ｍＲＮＡとｒＲＮＡの結合する速度を加速して触媒反応を行うと推測される。１本鎖ＤＮＡが化学物質としてたんぱく質合成やリボソームの働きについて触媒のように寄与していると推測される。本発明では１本鎖ＤＮＡオリゴマーによるたんぱく質翻訳調節因子を提供する。また、本発明では細胞に本発明である１本鎖ＤＮＡオリゴマーを細胞内に取込ませ細胞を培養したんぱく質翻訳調節する方法を提供する。
【００２０】
さらに、イニシエーションファクターとしてのリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な一本鎖ＤＮＡオリゴマーについて述べる。イニシエーションファクターは、たんぱく質合成において、Ｐ  ｓｉｔｅにｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetが結合する反応が起こる時、ｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetがＡ  ｓｉｔｅに誤って結合しなく、引き続きｍＲＮＡの開始コドンＡＵＧがｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetのアンチコドンと結合するなどたんぱく質翻訳の開始、たんぱく質翻訳が順調に正確に進むための働きをしている。そして、本発明によるリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な一本鎖ＤＮＡオリゴマーはイニシエーションファクターとして作用しｆＭｅｔ−ｔＲＮＡiMetをＰ  ｓｉｔｅに誘引する働きなどたんぱく質翻訳の開始、たんぱく質翻訳が順調に正確に進むための働をするため急激なたんぱく質合成を促し、その結果急激な細胞の増殖に至ったと考えられる。本発明ではイニシエーションファクターとしてのリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な一本鎖ＤＮＡオリゴマーを提供する。
【００２１】
最後に、イニシエーションファクターの働きをもったリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な一本鎖ＤＮＡオリゴマーについて述べる。リボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な一本鎖ＤＮＡオリゴマーには細胞を急激に増殖させる働きがあるがイニシエーションファクターそのものではない可能性が科学上ある。しかし、イニシエーションファクターと同様ないしイニシエーションファクターに匹敵する働きを有することから、本発明では、イニシエーションファクターの働きをもったリボソームＲＮＡ塩基配列に相補的な一本鎖ＤＮＡオリゴマーを提供する。
【産業上の利用可能性】
【００２２】
新たに細胞内でたんぱく質を多量に生産させることができ医学的実験や治験に貢献し、さらには細胞を増殖させたり増殖を制限させるなどすることで、がん細胞のたんぱく質合成能力を制御できる可能性があるなど新規の医薬品の開発に繋がる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】Ｅ．ｃｏｌｉの１６ＳｒＲＮＡの塩基配列図
【符号の説明】
【００２４】
１    ＳＲＲ１
２    ＳＲＲ２
３    ＳＲＲ５
【図１】
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【配列表】
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