(57)【要約】    【課題】  遠心分離をした試料の上澄み液と不溶成分との分離を維持するのを容易にする。    【解決手段】  遠沈管２ａの底部に中央部が盛り上がる隆起部４が形成されて底部側方に溝６が形成されている。溝６の上部には遠沈管２ａの内側壁に底部隆起部４を取り囲むように周方向に環状に延び、内側に突出した隆起１０が形成されており、その隆起１０と底部隆起部４によって溝６の上部入口が狭くなっている。遠沈管２ａに試料８を入れ、遠心分離を行うと、不溶成分８ａが底部に移動して溝６内に入る。溝に入った不溶成分８ａは溝の隙間に捕捉され、さらにその溝６の上部入口が狭くなっていることによって不溶成分８ａが上澄み液中に再拡散していくのが一層有効に阻止される。【選択図】      図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
遠心分離機で用いる遠沈管において、
その底部に不溶成分を捕捉する手段を備えていることを特徴とする遠沈管。
【請求項２】
前記手段は、遠沈管の底面に形成され、前記不溶成分が入り込める大きさの溝である請求項１に記載の遠沈管。
【請求項３】
前記手段は遠沈管に入れられ、前記不溶成分が入り込める大きさの間隙を遠沈管底部に形成する粒状物である請求項１に記載の遠沈管。
【請求項４】
前記手段は、遠心分離時に遠沈管底部に移動して停止することができ、溶液を透過し不溶成分を捕捉する大きさの孔をもつフィルタである請求項１に記載の遠沈管。
【請求項５】
前記手段は、遠沈管に入れられ、上部に漏斗状に開いた開口部をもち下部にも開口部をもつとともに上下の開口部がそれらの開口面より小さい断面積の穴で連通した器具である請求項１に記載の遠沈管。
【請求項６】
遠沈管に入れられ、遠心分離時に遠沈管底部に移動して停止することができ、溶液を透過し不溶成分を捕捉する大きさの孔をもつフィルタ。
【請求項７】
遠沈管に入れられ、上部に漏斗状に開いた開口部をもち下部にも開口部をもつとともに上下の開口部がそれらの開口面より小さい断面積の穴で連通した不溶成分捕捉用の器具。
【請求項８】
遠沈管に試料液を入れ、遠心分離機で遠心分離する方法において、
遠沈管の底部に不溶成分を捕捉する手段を遠沈管と一体に形成しておき、又は不溶成分を捕捉する手段を遠沈管に投入した状態で遠心分離を行うことを特徴とする遠心分離方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は生体試料をＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフ）などの分析装置で分析するのに先立ち、試料から不溶成分を除去するための前処理として行う遠心分離方法、遠心分離機で使用する遠沈管、及び遠沈管で不溶成分を捕捉するのに用いる器具に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
薬物の動態測定の分野では、血清や血漿などの生体物質を測定試料とするが、これら生体試料中にはタンパク質が変性したり、繊維質成分などによる不溶成分が生じる。特に、生体試料を冷凍保存したあと、凍結を融解した試料には不溶成分の発生が顕著である。これらの試料をＨＰＬＣなどを使って分離分析する際には、装置内部での目詰まりなどを回避するために不溶成分を除去しなければならない。
【０００３】
これまで、血液や血漿・血清などの試料を不溶成分と分離するために試料を遠沈管に入れ、遠心分離機にかけていた。遠心分離したあと、上澄み液を採取しＨＰＬＣなどで測定することが行われている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかし、遠心分離した不溶成分と上澄み液の比重が似通っているため、遠沈管に衝撃を与えると、遠心分離したにも拘わらず不溶成分と上澄み液が界面で混ざり合い、測定に供しうる最終的な試料の体積が減ってしまう。そのため、遠心分離後の遠沈管を持ち運んだりして取り扱う際には細心の注意を要した。
そこで、本発明は、前処理のための遠心分離をした試料の上澄み液と不溶成分との分離を維持するのが容易な遠心分離方法と、そのために使用する遠沈管を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
遠沈管に試料液を入れ、遠心分離機で遠心分離する方法において、本発明の方法では、遠沈管の底部に不溶成分を捕捉する手段を遠沈管と一体に形成しておき、又は不溶成分を捕捉する手段を遠沈管に投入した状態で遠心分離を行う。
そのために、本発明の遠沈管は、その底部に不溶成分を捕捉する手段を備えている。
【０００６】
そのような遠沈管の一形態は、不溶成分を捕捉する手段として遠沈管の底面に形成され、不溶成分が入り込める大きさの溝を備えたものである。この遠沈管に試料を入れて遠心分離を行うと、遠心分離時に不溶成分が遠沈管底部のその溝に入り込んで捕捉される。
【０００７】
そのような遠沈管の他の形態は、既存の遠沈管に不溶成分を捕捉する手段を入れて使用するものである。そのような不溶成分捕捉手段は、不溶成分が入り込める大きさの間隙を遠沈管底部に形成する粒状物、遠心分離時に遠沈管底部に移動して停止することができ溶液を透過し不溶成分を濾過する大きさの孔をもつフィルタ、又は上部に漏斗状に開いた開口部をもち下部にも開口部をもつとともに上下の開口部がそれらの開口面より小さい断面積の穴で連通した器具の他、遠沈管内で不溶成分を捕捉できる機能をもつように設計された適当な器具である。
【０００８】
このように既存の遠沈管に不溶成分捕捉手段を入れたものは、遠沈管の外形は既存のものそのものであるので、遠沈管形状に起因するオートサンプラの誤動作を回避することができる。
【０００９】
既存の遠沈管に不溶成分捕捉手段を入れた遠沈管の一形態は、不溶成分を捕捉する手段として不溶成分が入り込める大きさの間隙を遠沈管底部に形成する粒状物を備えたものである。その遠沈管では、試料を入れて遠心分離を行うと、遠心分離時に試料中の不溶成分が粒状物の間隙に入り込んで捕捉される。
【００１０】
既存の遠沈管に不溶成分捕捉手段を入れた遠沈管の他の形態は、不溶成分を捕捉する手段として、遠心分離時に遠沈管底部に移動して停止することができ、溶液を透過し不溶成分を濾過する大きさの孔をもつフィルタを備えたものである。遠沈管に試料を入れその上からフィルタを入れて遠心分離を行うと、遠心分離時に試料中の不溶成分が遠心分離されて遠沈管底部に移動するとともに、フィルタも遠沈管底部に移動して試料中の不溶成分がフィルタと遠沈管底部の間に捕捉される。
【００１１】
既存の遠沈管に不溶成分捕捉手段を入れた遠沈管のさらに他の形態は、不溶成分を捕捉する手段として、上部に漏斗状に開いた開口部をもち下部にも開口部をもつとともに上下の開口部がそれらの開口面より小さい断面積の穴で連通した不溶成分捕捉用の器具を備えたものである。この器具を遠沈管に入れ、その上から試料を入れて遠心分離を行うと、遠心分離時に試料中の不溶成分がその器具の連通穴を通って下部の開口部に移動して捕捉される。
【００１２】
このようにして、本発明によれば、遠心分離終了後、試料中の不溶成分は遠沈管底部にたまって捕捉され、浮き上がりにくくなり、持ち運び時に注意を必要としなくなる。
【発明の効果】
【００１３】
以上のように、本発明では遠沈管の底部に不溶成分を捕捉する手段を遠沈管と一体に形成しておき、又は不溶成分を捕捉する手段を遠沈管に投入した状態で遠心分離を行うようにしたので、不溶成分と遠心分離された上澄み液との再拡散による混合が起きにくくなるので、遠心分離後も細心の注意を払わずに遠沈管を取り扱うことができるようになる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
図１は遠沈管の底部に溝を設けた第１の実施例を表わしたものであり、（Ａ）はその概略断面図、（Ｂ）はその遠沈管に血液などの試料を入れ、遠心分離を行った後の状態を示した断面図である。
【００１５】
遠沈管２は上部が開口し、底をもつ円筒状で、ガラス又はプラスチック製である。その底部には中央部が盛り上がる隆起部４が形成されていることにより、底部側方に溝６が形成されている。図示は省略されているが、上部開口部の外側面には遠心分離機に装着するためのつば部が設けられている。
【００１６】
この遠沈管２に血液などの試料８を入れ、遠心分離を行うと、（Ｂ）に示されるように、不溶成分８ａが底部に移動して溝６内に入る。溝に入った不溶成分８ａは溝の隙間に捕捉されることにより、試料の上澄み液に再拡散していきにくくなる。
【００１７】
図２は図１の実施例を改良したものである。遠沈管２ａの底部には図１と同様に中央部に隆起部４が形成されていることにより、側方に溝６が形成されている。この実施例では溝６の上部には遠沈管の内側壁に底部隆起部４を取り囲むように周方向に環状に延び、内側に突出した隆起１０が形成されている。その隆起１０と底部隆起部４によって溝６の上部入口が狭くなっている。
１２は遠沈管上部開口部の外側面に設けられ、この遠沈管２ａを遠心分離機に装着するためのつば部である。
【００１８】
図２の遠沈管に試料８を入れて遠心分離を行うと、その不溶成分８ａは溝６内に入るが、その溝６の上部入口が狭くなっていることによって不溶成分８ａが上澄み液中に再拡散していくのが一層有効に阻止される。
【００１９】
図３は図２の遠沈管をさらに改良した実施例である。図２の遠沈管と比較すると、底部中央部の隆起部４にも遠沈管内側に突出する隆起１４がさらに形成されている点で異なる。隆起１４は隆起１０に対向するように環状に延びて形成されている。
【００２０】
この実施例の遠沈管では、隆起１０と１４が対向する方向に設けられていることにより、溝６の上部入口がさらに狭められ、内部に捕捉された試料の不溶成分８ａが上澄み液に再拡散するのがよりいっそう有効に阻止される。
【００２１】
図１〜図３の実施例では、遠沈管の底部に溝を設けることにより不溶成分がその溝中に残留し、遠心分離された上澄み液との再拡散による混合が起きにくくなる。
また、図１〜図３の実施例では、遠心分離後に上澄み液を試料として分析に供した後、溝６に入り込んだ不溶成分８ａを洗浄するのが容易ではなくなるので、遠沈管を使い捨て式にするのが好ましい。
【００２２】
図４は第２の実施例を表わしたものである。この実施例は、（Ａ）に示されるように、上部が開口し、底部に底をもつ円筒状遠沈管２０に、不溶成分を捕捉する手段として粒状物２２を入れたものである。粒状物２２はガラスビーズなどであり、試料として処理される血液などよりも比重が大きい材質からなり、試料の不溶成分を隙間に捕捉できるように適当な隙間を形成する大きさ、例えば１〜２ｍｍの直径をもつものが好ましい。図示は省略されているが、上部開口部の外側面には遠心分離機に装着するためのつば部が設けられている。
【００２３】
（Ｂ）に示されるように、粒状物２２を入れた遠沈管に試料８を入れ、遠心分離を行うと、その不溶成分８ａは粒状物２２の隙間に捕捉される。
この実施例でも、同じように粒状物の間隙に不溶成分が残留し、上澄み液との再拡散による混合がおきにくくなる。
【００２４】
図５は第３の実施例を表わしたものである。（Ａ）に示されるように、上部に開口をもち、底部に底をもつ通常の遠沈管２０に、フィルタ２４を入れたものである。フィルタ２４は溶液を透過し、不溶成分を濾過する大きさの孔をもったものである。ここでも図示は省略されているが、遠沈管２０には上部開口部の外側面には遠心分離機に装着するためのつば部が設けられている。
【００２５】
フィルタ２４は、（Ｃ）に示されるように、その外形寸法が遠沈管２０の内径に対応して内径の壁面を摺動できる大きさであり、円筒状の側壁２６の底面にフィルタ２４が取りつけられたものである。このように側壁２６を有することにより、フィルタ２４が傾くことなしに遠沈管２０の内面に沿って底部方向に移動することができる。フィルタ２４と側壁２６の材質は、遠心分離後にフィルタ２４が浮き上らないように、処理される試料の血液などと比重と等しいか、それよりも大きいものを選択する。
【００２６】
フィルタ２４は遠沈管２０に試料８を入れた後に、その上部に投入する。遠心分離により、（Ｂ）に示されるように試料の不溶成分８ａが底部に移動するとともにフィルタ２４も底部に移動し、その際上澄み液はフィルタ２４を透過するが、不溶成分８ａは透過せずに捕捉されるので、不溶成分８ａは遠沈管の底部とフィルタ２４の間に保持される。
【００２７】
図６は第４の実施例を表わしたものである。（Ａ）に示されるように、上部に開口をもち、底部に底をもつ通常の遠沈管２０に、不溶成分捕捉用器具３０を入れたものである。不溶成分捕捉用器具３０は、上部に漏斗状に開いた開口部３２をもち下部にも開口部３４をもつとともに、上下の開口部３２，３４がそれらの開口面より小さい断面積の穴３６で連通している。ここでも図示は省略されているが、遠沈管２０には上部開口部の外側面には遠心分離機に装着するためのつば部が設けられている。
【００２８】
不溶成分捕捉用器具３０を遠沈管２０に入れ、その上から試料８を入れて遠心分離を行うと、遠心分離時に試料８中の不溶成分８が連通穴３６を通って下部の開口部３４に移動して捕捉される。
【００２９】
この不溶成分捕捉用器具３０は上部の開口部３２が漏斗状に開いた形状をしており、かつ連通穴３６の断面積が小さいので、回収できずに無駄になる上澄み液の割合が少なくてすみ、貴重な試料をより有効に使用できるようになる。
【産業上の利用可能性】
【００３０】
本発明の遠心分離方法及びそれに使用する機器は、生体試料その他の試料を分析などの試料として供するための前処理として利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】第１の実施例を表わしたものであり、（Ａ）はその概略垂直断面図、（Ｂ）は遠心分離を行った後の状態を示した概略垂直断面図である。
【図２】同実施例を改良した遠沈管を示す垂直断面図である。
【図３】同実施例をさらに改良した遠沈管を示す垂直断面図である。
【図４】第２の実施例を表わしたものであり、（Ａ）はその概略垂直断面図、（Ｂ）は遠心分離を行った後の状態を示した垂直断面図である。
【図５】第３の実施例を表わしたものであり、（Ａ）はその概略垂直断面図、（Ｂ）は遠心分離を行った後の状態を示した概略垂直断面図、（Ｃ）はフイルタ部分を示す垂直断面図である。
【図６】第４の実施例を表わしたものであり、（Ａ）はそこで用いる器具の概略垂直断面図、（Ｂ）は遠心分離を行った後の状態を示した概略垂直断面図である。
【符号の説明】
【００３２】
２，２Ａ，２ｂ，２０，      遠沈管
４      隆起部
６      溝
８      試料
８ａ      試料の不溶成分
１０，１４      隆起
２２      粒状物
２４      フィルタ
３０      不溶成分捕捉用器具
３２，３４      開口部
３６      連通穴
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
2005147964.tif 000006
【図５】
2005147964.tif 000007
【図６】
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