(57)【要約】【課題】  骨粗鬆症の治療薬として好適な化合物を探索すると共に、公知のウレア誘導体の新たな医薬用途を見出す。【解決手段】  一般式［１］で表される構造を有する化合物またはその塩類は、優れた破骨細胞形成抑制作用を示し、骨粗鬆症の治療剤として有用である。式中、Ａは−（ＮＲ4）−、−（ＣＲ5Ｒ6）−または−Ｏ−を、Ｂはアルキレンまたはアルケニレン基を、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は水素原子、アルキル基、アルケニル基、アダンチルアルキル基などを、Ｒ3はアリ−ル基または不飽和の複素環を、Ｘは酸素原子または硫黄原子をそれぞれ示す。【化１】2005336173.tif 000031【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式［１］で表される化合物またはその塩類を有効成分として含む骨粗鬆症治療剤。
【化１】
2005336173.tif 000026
［式中、Ａは、−（ＮＲ4 ）−、−（ＣＲ5 Ｒ6 ）−または−Ｏ−を示し；Ｂは鎖中に、−Ｏ−、−Ｓ−、−（ＮＲ７ ）−、−ＣＯ−、−Ｎ＝若しくは
【化２】
2005336173.tif 000027
を含有してもよいアルキレン基またはアルケニレン基を示し、該アルキレン基およびアルケニレン基はヒドロキシ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、アリール基、シロキシ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、Ａと結合して飽和の複素環を形成してもよく；Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ4 、Ｒ5 およびＲ6 は同一または異なって水素原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヒドロキシ基、アシル基またはアミノ基を示し、該アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基またはシクロアルケニル基は、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、シクロアルキル基、アダマンチル基、アリール基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、シアノ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく；Ｒ1  とＲ2 、Ｒ2 とＲ4  、Ｒ2とＲ5  およびＲ2とＲ6 は飽和若しくは不飽和の複素環を形成していてもよく；Ｒ3 はアリール基または不飽和の複素環を示し；Ｒ７ は水素原子またはアルキル基を示し；Ｘは＝Ｏまたは＝Ｓを示し；ｎは１〜５の整数を示し；上記された各アミノ基、ヒドロキシ基およびアミノカルボニル基の水素原子はアルキル基、シクロアルキル基、アダマンチル基、アダマンチルアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アシル基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アルキルアミノカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基、アリールアルコキシカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロゲノアルキルオキシカルボニル基、イミダゾリルカルボニル基、ピリジルカルボニル基、飽和若しくは不飽和の複素環、または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されたアルキル基で置換されていてもよい。］
【請求項２】
Ｒ3 がピリジン環である請求項１記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項３】
Ｒ1、Ｒ2 、Ｒ4 、Ｒ5 およびＲ6の少なくとも１つが、アダマンチルアルキル基、アダマンチルオキシアルキル基、アダマンチルアミノアルキル基またはアダマンチルアミノカルボニルアルキル基である請求項１記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項４】
Ｒ1およびＲ2の少なくとも１つが、アダマンチルアルキル基、アダマンチルオキシアルキル基、アダマンチルアミノアルキル基またはアダマンチルアミノカルボニルアルキル基である請求項１記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項５】
Ｒ1およびＲ2 の少なくとも１つが、アダマンチルアルキル基である請求項１記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項６】
Ａが−（ＮＲ4 ）−、−（ＣＲ5  Ｒ6 ）−または−Ｏ−を示し；Ｂが鎖中に、−Ｏ−、−Ｓ−、−（ＮＲ７ ）−、−ＣＯ−、−Ｎ＝若しくは
【化３】
2005336173.tif 000028
を含有してもよいアルキレン基またはアルケニレン基を示し、該アルキレン基はヒドロキシ基、アルコキシ基、アリール基、シロキシ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、Ａと結合して飽和の複素環を形成してもよく；Ｒ1  が水素原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヒドロキシ基またはアミノ基を示し、該アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基またはシクロアルケニル基は、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アルキルアミノカルボニル基、アダマンチル基、アリールオキシカルボニル基、シアノ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、上記された各アミノ基、ヒドロキシ基およびアミノカルボニル基の水素原子はアルキル基、シクロアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基、アリールアルコキシカルボニル基、ハロゲノアルキルオキシカルボニル基、イミダゾリルカルボニル基、不飽和の複素環または不飽和の複素環で置換されたアルキル基で置換されていてもよく；Ｒ 2がアダマンチルアルキル基、アダマンチルオキシアルキル基、アダマンチルアミノアルキル基またはアダマンチルアミノカルボニルアルキル基を示し；Ｒ3が不飽和の複素環を示し；Ｒ4が水素原子、アルキル基、アダマンチルアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アルコキシカルボニルアルキル基、アミノ基、アルキルアミノ基、アシルアミノ基またはアルコキシカルボニルアミノ基を示し；Ｒ5およびＲ6が同一または異なって水素原子、アルキル基、アミノ基またはアルコキシカルボニルアミノ基を示し；Ｒ７が水素原子またはアルキル基を示し；Ｘが＝Ｏまたは＝Ｓを示し；ｎが１〜５の整数を示す請求項１記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項７】
Ｒ2がアダマンチルアルキル基を示し、Ｒ3 がピリジン環を示す請求項６記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項８】
Ａが−（ＮＲ4  ）−、−（ＣＲ5  Ｒ6 ）−または−Ｏ−を示し；Ｂが鎖中に−Ｓ−若しくは
【化４】
2005336173.tif 000029
を含有してもよいアルキレン基またはアルケニレン基を示し；Ｒ1がアルキル基またはアルケニル基を示し、該アルキル基はハロゲン原子またはアミノ基で置換されていてもよく、さらに該アミノ基はアルキル基、アシル基、アリールアルキルオキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基またはアルコキシカルボニル基で置換されていてもよく；Ｒ2 がアダマンチルアルキル基を示し；Ｒ3がピリジン環を示し；Ｒ4が水素原子を示し；Ｒ5 およびＲ6が水素原子を示し；Ｘが＝Ｏを示し；ｎが１〜５の整数を示す請求項６記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項９】
Ａが、−（ＮＲ4）−、−（ＣＲ5 Ｒ6 ）−または−Ｏ−を示し；Ｂが鎖中に、−Ｏ−、−Ｓ−、−（ＮＲ７ ）−、−Ｎ＝若しくは
【化５】
2005336173.tif 000030
を含有してもよいアルキレン基またはアルケニレン基を示し、該アルキレン基はヒドロキシ基、アルコキシ基、アリール基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、Ａと結合して飽和の複素環を形成してもよく；Ｒ1が水素原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヒドロキシ基またはアミノ基を示し、該アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基またはシクロアルケニル基は、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、シアノ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、上記された各アミノ基、ヒドロキシ基およびアミノカルボニル基の水素原子はアルキル基、シクロアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基、アリールアルコキシカルボニル基、不飽和の複素環または不飽和の複素環で置換されたアルキル基で置換されていてもよく；Ｒ2がアルキル基、アルケニル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基またはアリールアルキル基を示し；Ｒ3がピリジン環を示し；Ｒ4 が水素原子、アルキル基、アダマンチルアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニルアルキル基、アミノ基、アルキルアミノ基、アシルアミノ基またはアルコキシカルボニルアミノ基を示し；Ｒ5 およびＲ6が同一または異なって水素原子またはアルキル基を示し；Ｒ７が水素原子またはアルキル基を示し；Ｘが＝Ｏまたは＝Ｓを示し；ｎが１〜５の整数を示す請求項１記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項１０】
Ａが、−（ＮＲ4  ）−または−（ＣＲ5Ｒ6 ）−を示し；Ｂがアルキレン基またはアルケニレン基を示し；Ｒ1がアルキル基、アルケニル基を示し、該アルキル基はハロゲン原子、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基、イミダゾール基またはピリジン環で置換されていてもよく、さらに該アミノ基はアルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基またはアリールアルコキシカルボニル基で置換されていてもよく；Ｒ2がアルキル基、アルケニル基またはアリールアルキル基を示し；Ｒ3がピリジン環を示し；Ｒ4  が水素原子を示し；Ｒ5およびＲ6が水素原子を示し；Ｘが＝Ｏを示す請求項９記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項１１】
Ｒ1がアルキル基を示し、Ｒ2がアルキル基またはアリールアルキル基を示す請求項１０記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項１２】
Ａが、−（ＮＲ4）−または−（ＣＲ5Ｒ6 ）−を示し；Ｂがアルキレン基またはアルケニレン基を示し；Ｒ1 がアルキル基、アルケニル基またはシクロアルキル基を示し、該アルキル基はハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、ピリジン環またはチオフェン環で置換されていてもよく、さらに上記された各アミノ基、ヒドロキシ基およびアミノカルボニル基の水素原子はアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基、アリールアルコキシカルボニル基で置換されていてもよく；Ｒ2がシクロアルキル基またはシクロアルキルアルキル基を示し；Ｒ3がピリジン環を示し；Ｒ4が水素原子を示し；Ｒ5 およびＲ6が水素原子を示し；Ｘが＝Ｏを示す請求項９記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項１３】
１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−ペンチル−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア、
１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］
−１−（３，３，３−トリフルオロプロピル）ウレア、
１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−（２−ブテニル）−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア、
１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−［２−［Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア、
１−［３−（１−アダマンチル）プロピル］−１−プロピル−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア、
１−ペンチル−１−フェネチル−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア、
１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−３−［２−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］−１−ペンチルウレア、
１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−［２−［Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−３−［２−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア、
（Ｚ）−１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−ペンチル−３−［３−（４−ピリジル）−２−プロペニル］ウレア、
（Ｅ）−１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−ペンチル−３−［３−（４−ピリジル）−２−プロペニル］ウレア、
（＋）−１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−３−［２−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］−１−ペンチルウレア、
１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−３−［１−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］−１−ペンチルウレア、
（＋）−１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−［２−［Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−３−［２−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア、
５−（４−ピリジル）吉草酸Ｎ−ペンチル−Ｎ−フェネチルアミド、
５−（４−ピリジル）吉草酸Ｎ−［２−（１−アダマンチル）エチル］−Ｎ−ペンチルアミド、
３−（４−ピリジルメチルチオ）プロピオン酸Ｎ−［２−（１−アダマンチル）エチル］−Ｎ−ペンチルアミド、
２−［２−（４−ピリジル）エチルチオ］酢酸Ｎ−［２−（１−アダマンチル）エチル］−Ｎ−ペンチルアミドおよび
６−（４−ピリジル）カプロン酸Ｎ−［２−（１−アダマンチル）エチル］−Ｎ−ペンチルアミド
からなる群より選択される化合物またはその塩類を有効成分として含む骨粗鬆症治療剤。
【請求項１４】
骨粗鬆症が破骨細胞形成促進を伴なう骨粗鬆症である請求項１〜１３のいずれかに記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項１５】
骨粗鬆症が原発性骨粗鬆症である請求項１４記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項１６】
原発性骨粗鬆症が閉経後骨粗鬆症、老人性骨粗鬆症または妊娠後骨粗鬆症である請求項１５記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項１７】
骨粗鬆症が続発性骨粗鬆症である請求項１４記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項１８】
続発性骨粗鬆症が内分泌疾患に伴なう骨粗鬆症である請求項１７記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項１９】
内分泌疾患に伴なう骨粗鬆症が甲状腺機能亢進症に伴なう骨粗鬆症、クッシング症候群に伴なう骨粗鬆症、副甲状腺機能亢進症に伴なう骨粗鬆症である請求項１８記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項２０】
続発性骨粗鬆症が、薬剤性の骨粗鬆症である請求項１７記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項２１】
薬剤性の骨粗鬆症がステロイド剤の投与に伴なう骨粗鬆症である請求項２０記載の骨粗鬆症治療剤。
【請求項２２】
請求項１記載の一般式［１］で表される化合物またはその塩類を有効成分として含む破骨細胞形成抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ウレア誘導体、酸アミド等（以下、これらをまとめて「ウレア誘導体」と呼ぶ）を有効成分として含む骨粗鬆症の治療剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
骨は骨吸収と骨形成のバランスにより常に再構成（リモデリング）されている。即ち、骨吸収を担う破骨細胞が骨を吸収して生じた骨吸収窩に、骨形成を担う骨芽細胞が新しい骨組織を作ることにより常にリモデリングが行われ、骨吸収と骨形成とのバランスをとることにより骨の恒常性が維持されている。
【０００３】
骨粗鬆症は、骨のリモデリングが何らかの原因で失調し、骨のミネラル分が失われ、骨が脆弱化する疾患である。骨粗鬆症においてリモデリングの失調は、骨吸収の亢進または骨形成の抑制によるものである。
【０００４】
骨吸収の亢進は、破骨細胞形成の亢進または破骨細胞機能の亢進によって生じる。破骨細胞形成を促進する因子は、生体内因子としては、例えばReceptor Activator of NF-κB (RANKL)、インターロイキン-1 (IL-1)、マクロファージコロニー刺激因子 (M-CSF)等が知られている。生体外由来の因子としては、例えばグラム陰性細菌の菌体成分であるリポポリサッカライド (LPS) 等が知られている。
【０００５】
ＲＡＮＫＬは破骨細胞形成を促進し、かつ、破骨細胞機能を亢進することにより骨吸収を促進する。骨芽細胞またはストローマ細胞を介した破骨細胞形成もＲＡＮＫＬを介することが知られており、骨芽細胞やストローマ細胞のＲＡＮＫＬ発現を促進させる因子として、活性型ビタミンD3、副甲状腺ホルモン(PTH)、プロスタグランジンE2 (PGE2)、あるいはインターロイキン1（IL-1）等が知られている（非特許文献１）。
【０００６】
破骨細胞は、単球・マクロファージ系の前駆細胞から適切な刺激により誘導することができる。例えば、骨髄細胞をRANKLおよびM-CSFで刺激することにより形成誘導することができる。また、骨芽細胞やストローマ細胞等の破骨細胞形成を支持する細胞の存在と単球・マクロファージ系の前駆細胞を共存させ、適切な刺激、即ち、活性型ビタミンD3、PGE2、PTH、副甲状腺ホルモン関連ペプチド、ステロイド等の刺激を加えることにより破骨細胞を形成させることができる。
【０００７】
一方、本発明における有効成分であるウレア誘導体は公知化合物であり、その製造方法と共に特許文献１に開示されている。特許文献１には、このウレア誘導体が腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）産生阻害作用を有し、関節リウマチ（ＲＡ）等の自己免疫疾患治療薬として有用であることが記載されている。また、特許文献２にはこれが血管新生抑制薬として有用であることが記載されている。
【非特許文献１】小林泰治他、最新医学  ５８巻、２６３１−２６３９、２００３
【特許文献１】特開２００２−５３５５５号公報
【特許文献２】特開２００３−２２６６８６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
このような骨粗鬆症の治療薬として、好適な化合物を探索すると共に、公知のウレア誘導体の新たな医薬用途を見出すことは意義深い。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
そこで、医薬として有用であることが報告されている下記一般式[1]で示される公知のウレア誘導体（特開２００２−５３５５５）に着目し、骨粗鬆症の治療薬の探索研究を行った。その結果、これらのウレア誘導体が破骨細胞形成に対する抑制作用を有し、骨粗鬆症の治療剤として有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
本発明は、下記一般式［１］で示される化合物またはその塩類（以下特記なき限り「本化合物」とする）を有効成分として含む骨粗鬆症治療剤および破骨細胞形成抑制剤に関するものである。
【化１】
2005336173.tif 000002
【００１１】
［式中、Ａは、−（ＮＲ4 ）−、−（ＣＲ5 Ｒ6 ）−または−Ｏ−を示し；Ｂは鎖中に、−Ｏ−、−Ｓ−、−（ＮＲ７ ）−、−ＣＯ−、−Ｎ＝若しくは
【化２】
2005336173.tif 000003
【００１２】
を含有してもよいアルキレン基またはアルケニレン基を示し、該アルキレン基およびアルケニレン基はヒドロキシ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、アリール基、シロキシ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、Ａと結合して飽和の複素環を形成してもよく；Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ4 、Ｒ5 およびＲ6 は同一または異なって水素原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヒドロキシ基、アシル基またはアミノ基を示し、該アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基またはシクロアルケニル基は、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、シクロアルキル基、アダマンチル基、アリール基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、シアノ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく；Ｒ1 とＲ2 、Ｒ2 とＲ4 、Ｒ 2とＲ5  およびＲ2とＲ6 は飽和若しくは不飽和の複素環を形成していてもよく；Ｒ3 はアリール基または不飽和の複素環を示し；Ｒ７ は水素原子またはアルキル基を示し；Ｘは＝Ｏまたは＝Ｓを示し；ｎは１〜５の整数を示し；上記された各アミノ基、ヒドロキシ基およびアミノカルボニル基の水素原子はアルキル基、シクロアルキル基、アダマンチル基、アダマンチルアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アシル基、アルコキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アルキルアミノカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基、アリールアルコキシカルボニル基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、ハロゲノアルキルオキシカルボニル基、イミダゾリルカルボニル基、ピリジルカルボニル基、飽和若しくは不飽和の複素環、または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されたアルキル基で置換されていてもよい。以下同じ。］
【発明の効果】
【００１３】
本化合物は、優れた破骨細胞形成抑制作用を示し、骨粗鬆症の治療剤として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
一般式［１］で規定された各基について詳しく説明する。
【００１５】
アルキレン基とはメチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基、オクタメチレン基、デカメチレン基、ドデカメチレン基、メチルメチレン基、エチルエチレン基、ジメチルエチレン基、プロピルエチレン基、イソプロピルエチレン基、メチルトリメチレン基等の１〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルキレン基を示す。
【００１６】
アルケニレン基とは、ビニレン基、プロペニレン基、ブテニレン基、ペンテニレン基、ヘキセニレン基、オクテニレン基、ブタンジイリデン基、メチルプロペニレン基等の1個以上の二重結合を有し、２〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルケニレン基を示す。
【００１７】
アルキル基とはメチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、ヘキシル基、オクチル基、デシル基、ドデシル基、イソプロピル基、イソブチル基、イソペンチル基、イソヘキシル基、イソオクチル基、t-ブチル基、３，３−ジメチルブチル基等の１〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルキル基を示す。
【００１８】
アルコキシ基とはメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基、ヘキシルオキシ基、オクチルオキシ基、デシルオキシ基、ドデシルオキシ基、イソプロポキシ基、t-ブトキシ基等の１〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルコキシ基を示す。
【００１９】
アルケニル基とはビニル基、アリル基、３−ブテニル基、５−ヘキセニル基、イソプロペニル基等の２〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルケニル基を示す。
【００２０】
アルキニル基とは、エチニル基、プロピニル基、ブチニル基等の２〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルキニル基を示す。
【００２１】
シクロアルキル基とはシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基、シクロデシル基、シクロドデシル基等の３〜２０個の炭素原子を有するシクロアルキル基を示す。
【００２２】
シクロアルケニル基とはシクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘプテニル基等の５〜２０個の炭素原子を有するシクロアルケニル基を示す。
【００２３】
アリール基とはフェニル基、ナフチル基等の芳香族炭化水素環を示し、それらは１個以上の置換基を有してもよく、置換基としては、例えばアルキル基、シクロアルキル基、カルボキシ基、アミノ基、ヒドロキシ基、アミノアルキル基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基、シアノ基、ハロゲン原子、アルキルオキシ基などが挙げられる。
【００２４】
シロキシ基とは、トリアルキルシリルオキシ基、ジアルキル（アリール）シリルオキシ基、アルキル（ジアリール）オキシ基、トリアリールシリルオキシ基などの珪素含有有機基を示す。
【００２５】
ハロゲン原子とはフッ素、塩素、臭素、ヨウ素を示す。
【００２６】
複素環とは、例えば窒素原子、酸素原子、硫黄原子を１〜４個を含む５〜２０員環の飽和若しくは不飽和の単環式複素環または２環式複素環を示し、これらの複素環は、１個以上の置換基を有してもよく、その置換基としては、例えばアルキル基、シクロアルキル基、カルボキシ基、アミノ基、ヒドロキシ基、アミノアルキル基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基、シアノ基、ハロゲン原子、アルキルオキシ基、アリール基、アリールアルキル基、飽和若しくは不飽和の複素環などが挙げられる。また上記の複素環が環内に窒素原子または硫黄原子を有するとき、それらの原子が酸化され、Ｎ−オキシド、Ｓ−オキシドなどの形になっていてもよい。
【００２７】
飽和の複素環の具体例としては、窒素原子を環内に有するピロリジン、ピペリジン、ホモピペリジン、ピペラジン、窒素原子と酸素原子を環内に有するモルホリン、窒素原子と硫黄原子を環内に有するチオモルホリンなどの単環式複素環が挙げられ、それらはベンゼン環等と縮合してテトラヒドロキノリン、テトラヒドロイソキノリンなどの２環式複素環を形成してもよい。
【００２８】
不飽和の複素環の具体例としては、窒素原子を環内に有するピロール、ピリジン、ピラゾール、イミダゾール、ピラジン、ピリダジン、ピリミジンなどの単環式複素環またはインドール、キノリン、イソキノリン、ベンズイミダゾール、ナフチリジン、ピロロピリジン、イミダゾピリジンなどの２環式複素環、酸素原子を環内に有するフランなどの単環式複素環またはベンゾフランなどの２環式複素環、硫黄原子を環内に有するチオフェンなどの単環式複素環またはベンゾチオフェンなどの２環式複素環、窒素原子と酸素原子若しくは硫黄原子を環内に有するオキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾールなどの単環式複素環またはベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、チエノピリジン、オキサゾロピリジン、チアゾロピリジン、フロピリジンなどの２環式複素環などが挙げられる。さらに、上記の不飽和複素環は部分的に飽和結合を含む形であってもよい。
【００２９】
本発明における塩類とは医薬として許容される塩であれば特に制限はなく、塩酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩、酢酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸等の有機酸との塩、また、ナトリウム、カリウム、カルシウム等のアルカリ金属またはアルカリ土類金属との塩などが挙げられる。また、本化合物の第四級アンモニウム塩も本発明における塩類に包含される。さらに、本化合物に幾何異性体または光学異性体が存在する場合には、それらの異性体も本発明の範囲に含まれる。なお、本化合物は水和物および溶媒和物の形態をとっていてもよい。
【００３０】
本化合物の好ましい例としては、下記（１）〜（３）のものが挙げられる。
【００３１】
（１）一般式［１］で規定された各基が以下の基から選択され、またはそれらの組み合わせからなる化合物またはその塩類
１） Ｒ3 ：ピリジン環。
【００３２】
２）Ｒ1  、Ｒ2 、Ｒ4  、Ｒ5  およびＲ6 のうちの少なくとも１つ：アダマンチルアルキル基、アダマンチルオキシアルキル基、アダマンチルアミノアルキル基またはアダマンチルアミノカルボニルアルキル基。
【００３３】
３）Ｒ1 およびＲ2 のうちの少なくとも１つ：アダマンチルアルキル基、アダマンチルオキシアルキル基、アダマンチルアミノアルキル基またはアダマンチルアミノカルボニルアルキル基。
【００３４】
４）Ｒ1 およびＲ2  のうちの少なくとも１つ：アダマンチルアルキル基。
【００３５】
（２）一般式［１］で規定された各基が以下の基からなる化合物またはその塩類
Ａ：−（ＮＲ4 ）−、−（ＣＲ5  Ｒ6 ）−または−Ｏ−；
Ｂ：鎖中に、−Ｏ−、−Ｓ−、−（ＮＲ７ ）−、−ＣＯ−、−Ｎ＝若しくは
【化３】
2005336173.tif 000004
【００３６】
を含有してもよいアルキレン基またはアルケニレン基であって、該アルキレン基はヒドロキシ基、アルコキシ基、アリール基、シロキシ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、Ａと結合して飽和の複素環を形成してもよい、
Ｒ1 ：水素原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヒドロキシ基またはアミノ基であって、該アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基またはシクロアルケニル基は、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アルキルアミノカルボニル基、アダマンチル基、アリールオキシカルボニル基、シアノ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、Ｒ1  中の各アミノ基、ヒドロキシ基およびアミノカルボニル基の水素原子はアルキル基、シクロアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基、アリールアルコキシカルボニル基、ハロゲノアルキルオキシカルボニル基、イミダゾリルカルボニル基、不飽和の複素環または不飽和の複素環で置換されたアルキル基で置換されていてもよい、
Ｒ2 ：アダマンチルアルキル基、アダマンチルオキシアルキル基、アダマンチルアミノアルキル基またはアダマンチルアミノカルボニルアルキル基、
Ｒ3 ：不飽和の複素環、
Ｒ4 ：水素原子、アルキル基、アダマンチルアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アルコキシカルボニルアルキル基、アミノ基、アルキルアミノ基、アシルアミノ基またはアルコキシカルボニルアミノ基、
Ｒ5 およびＲ6 ：同一または異なって水素原子、アルキル基、アミノ基またはアルコキシカルボニルアミノ基、
Ｒ７ ：水素原子またはアルキル基、
Ｘ：＝Ｏまたは＝Ｓ、
ｎ：１〜５の整数。
【００３７】
これらのうち、Ｒ2 がアダマンチルアルキル基であって、Ｒ3 がピリジン環であるものがより好ましい。
【００３８】
さらに、一般式［１］で規定された各基が以下の基からなる化合物またはその塩類が特に好ましい。
【００３９】
Ａ：−（ＮＲ4  ）−、−（ＣＲ5  Ｒ6 ）−または−Ｏ−；
Ｂ：鎖中に−Ｓ−若しくは
【化４】
2005336173.tif 000005
【００４０】
を含有してもよいアルキレン基またはアルケニレン基、
Ｒ1 ：アルキル基またはアルケニル基であって、該アルキル基はハロゲン原子またはアミノ基で置換されていてもよく、さらに該アミノ基はアルキル基、アシル基、アリールアルキルオキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基またはアルコキシカルボニル基で置換されていてもよい、
Ｒ2 ：アダマンチルアルキル基、
Ｒ3 ：ピリジン環、
Ｒ4 ：水素原子、
Ｒ5 および Ｒ6  ：水素原子、
Ｘ：＝Ｏ、
ｎ：１〜５の整数。
【００４１】
（３）一般式［１］で規定された各基が以下の基からなる化合物またはその塩類
Ａ：−（ＮＲ 4）−、−（ＣＲ5 Ｒ6 ）−または−Ｏ−；
Ｂ：鎖中に、−Ｏ−、−Ｓ−、−（ＮＲ７ ）−、−Ｎ＝若しくは
【化５】
2005336173.tif 000006
【００４２】
を含有してもよいアルキレン基またはアルケニレン基であって、該アルキレン基はヒドロキシ基、アルコキシ基、アリール基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、Ａと結合して飽和の複素環を形成してもよい、
Ｒ1 ：水素原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヒドロキシ基またはアミノ基であって、該アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基またはシクロアルケニル基は、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、シアノ基または飽和若しくは不飽和の複素環で置換されていてもよく、Ｒ1 の各アミノ基、ヒドロキシ基およびアミノカルボニル基の水素原子はアルキル基、シクロアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基、アリールアルコキシカルボニル基、不飽和の複素環または不飽和の複素環で置換されたアルキル基で置換されていてもよい、
Ｒ2 ：アルキル基、アルケニル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基またはアリールアルキル基、
Ｒ3 ：ピリジン環、
Ｒ4 ：水素原子、アルキル基、アダマンチルアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニルアルキル基、アミノ基、アルキルアミノ基、アシルアミノ基またはアルコキシカルボニルアミノ基、
Ｒ5 およびＲ6 ：同一または異なって水素原子またはアルキル基、
Ｒ７ ：水素原子またはアルキル基、
Ｘ：＝Ｏまたは＝Ｓ、
ｎ：１〜５の整数。
【００４３】
これらのうち、一般式［１］で規定された各基が以下の基からなる化合物またはその塩類がより好ましい。
【００４４】
Ａ：−（ＮＲ4  ）−または−（ＣＲ5Ｒ6 ）−、
Ｂ：アルキレン基またはアルケニレン基、
Ｒ1 ：アルキル基、アルケニル基であって、該アルキル基はハロゲン原子、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基、イミダゾール基またはピリジン環で置換されていてもよく、さらに該アミノ基はアルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基またはアリールアルコキシカルボニル基で置換されていてもよい、
Ｒ2 ：アルキル基、アルケニル基またはアリールアルキル基、
Ｒ3 ：ピリジン環、
Ｒ4 ：水素原子、
Ｒ5およびＲ6：水素原子、
Ｘ：＝Ｏ。
【００４５】
さらに、これらのうち、Ｒ1 が炭素数３以上のアルキル基であって、Ｒ2 がアルキル基またはアリールアルキル基である化合物またはその塩類が特に好ましい。
【００４６】
また、一般式［１］で規定された各基が以下の基からなる化合物またはその塩類がより好ましい。
【００４７】
Ａ：：−（ＮＲ4  ）−または−（ＣＲ5Ｒ6 ）−、
Ｂ：アルキレン基またはアルケニレン基、
Ｒ1 ：アルキル基、アルケニル基またはシクロアルキル基であって、該アルキル基はハロゲン原子、ヒドロキシ基、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アミノカルボニル基、ピリジン環またはチオフェン環で置換されていてもよく、さらにＲ1 中の各アミノ基、ヒドロキシ基およびアミノカルボニル基の水素原子はアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基、アリールアルコキシカルボニル基で置換されていてもよい、
Ｒ2 ：シクロアルキル基、フェニルアルキル基またはシクロアルキルアルキル基、
Ｒ3 ：ピリジン環、
Ｒ4 ：水素原子、
Ｒ5  およびＲ6  ：水素原子、
Ｘ：＝Ｏ。
【００４８】
本化合物の最も好ましい具体例として、下記化合物およびその塩類が挙げられる。
【００４９】
○１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−ペンチル−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア（化合物１）
【化６】
2005336173.tif 000007
【００５０】
○１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］−１−（３，３，３−トリフルオロプロピル）ウレア（化合物２）
【化７】
2005336173.tif 000008
【００５１】
○１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−（２−ブテニル）−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア（化合物３）
【化８】
2005336173.tif 000009
【００５２】
○１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−［２−［Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア（化合物４）
【化９】
2005336173.tif 000010
【００５３】
○１−［３−（１−アダマンチル）プロピル］−１−プロピル−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア（化合物５）
【化１０】
2005336173.tif 000011
【００５４】
○１−ペンチル−１−フェネチル−３−［３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア（化合物６）
【化１１】
2005336173.tif 000012
【００５５】
○１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−３−［２−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］−１−ペンチルウレア（化合物７）
【化１２】
2005336173.tif 000013
【００５６】
○１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−［２−［Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−３−［２−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア（化合物８）
【化１３】
2005336173.tif 000014
【００５７】
○（Ｚ）−１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−ペンチル−３−［３−（４−ピリジル）−２−プロペニル］ウレア（化合物９）
【化１４】
2005336173.tif 000015
【００５８】
○（Ｅ）−１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−ペンチル−３−［３−（４−ピリジル）−２−プロペニル］ウレア（化合物１０）
【化１５】
2005336173.tif 000016
【００５９】
○（＋）−１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−３−［２−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］−１−ペンチルウレア（化合物１１）
【化１６】
2005336173.tif 000017
【００６０】
○１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−３−［１−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］−１−ペンチルウレア（化合物１２）
【化１７】
2005336173.tif 000018
【００６１】
○（＋）−１−［２−（１−アダマンチル）エチル］−１−［２−［Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−３−［２−メチル−３−（４−ピリジル）プロピル］ウレア（化合物１３）
【化１８】
2005336173.tif 000019
【００６２】
○５−（４−ピリジル）吉草酸Ｎ−ペンチル−Ｎ−フェネチルアミド（化合物１４）
【化１９】
2005336173.tif 000020
【００６３】
○５−（４−ピリジル）吉草酸Ｎ−［２−（１−アダマンチル）エチル］−Ｎ−ペンチルアミド（化合物１５）
【化２０】
2005336173.tif 000021
【００６４】
○３−（４−ピリジルメチルチオ）プロピオン酸Ｎ−［２−（１−アダマンチル）エチル］−Ｎ−ペンチルアミド（化合物１６）
【化２１】
2005336173.tif 000022
【００６５】
○２−［２−（４−ピリジル）エチルチオ］酢酸Ｎ−［２−（１−アダマンチル）エチル］−Ｎ−ペンチルアミド（化合物１７）
【化２２】
2005336173.tif 000023
【００６６】
○６−（４−ピリジル）カプロン酸Ｎ−［２−（１−アダマンチル）エチル］−Ｎ−ペンチルアミド（化合物１８）
【化２３】
2005336173.tif 000024
【００６７】
本化合物の製造は、例えば特開２００２−５３５５５記載の方法によって製造できる。
【００６８】
本化合物の有用性を調べるべく、骨髄細胞からの破骨細胞形成に関する薬理試験を実施した。破骨細胞は、後述するように、骨粗鬆症における骨吸収亢進において中心的な役割を担う細胞である。破骨細胞の誘導には、骨髄細胞をRANKLおよびM-CSFで刺激する実験系が繁用される。この実験系を用いて本化合物が破骨細胞形成を抑制するか否かを検討した。詳細については後述の薬理試験の項で示すが、本化合物が骨髄細胞からのＭ−ＣＳＦおよびＲＡＮＫＬ刺激による破骨細胞形成を抑制することを見出した。このことから、本化合物は、骨粗鬆症の治療剤、好ましくは、破骨細胞形成亢進を伴なう骨粗鬆症治療剤として有用であることが見出された。
【００６９】
本化合物は、より好ましくは、RANKL, M-CSF, IL-1, PGE2, LPSによる破骨細胞形成亢進を伴なう骨粗鬆症の治療に有効である。
【００７０】
本化合物は、さらに好ましくは、RANKLまたはM-CSFによる破骨細胞形成亢進を伴なう骨粗鬆症の治療に有効である。
【００７１】
本化合物は、最も好ましくは、RANKLおよびM-CSFによる破骨細胞形成亢進を伴なう骨粗鬆症の治療に有効である。
【００７２】
骨粗鬆症の病態を大別すると、原発性骨粗鬆症と続発性（二次性）骨粗鬆症に二分される。原発性骨粗鬆症には、閉経後骨粗鬆症、老人性骨粗鬆症、妊娠後骨粗鬆症等が挙げられ、続発性骨粗鬆症には内分泌疾患に伴なう骨粗鬆症（甲状腺機能亢進症に伴なう骨粗鬆症、クッシング症候群に伴なう骨粗鬆症、副甲状腺機能亢進症に伴なう骨粗鬆症等）、薬剤性の骨粗鬆症（ステロイド剤の投与による骨粗鬆症等）が挙げられる(池田恭治、最新医学  ５８巻、２６５８−２６６３、２００３)。
【００７３】
閉経後骨粗鬆症における骨吸収亢進は、月経の終了（閉経）によるエストロゲン欠乏により、ＩＬ−１やＰＧＥ２等のメディエーターを介して骨芽細胞や骨髄ストローマ細胞等からのＲＡＮＫＬ産生が亢進し、破骨細胞形成および骨吸収が亢進することが示されている(池田恭治、最新医学  ５８巻、２６５８−２６６３、２００３)。老人性骨粗鬆症の骨吸収亢進の機序は、従来老化に伴なう骨形成の低下であると考えられていたが、近年、骨形成の低下およびカルシウム利用能の低下によるカルシウム不足が原因となり、反動的に血中カルシウム濃度を増加させるＰＴＨの血中濃度が上昇し、ＰＴＨによるＲＡＮＫＬの産生亢進を介して破骨細胞形成および骨吸収が亢進することが示されている(池田恭治、最新医学  ５８巻、２６５８−２６６３、２００３)。
【００７４】
内分泌疾患に伴なう骨粗鬆症としては、例えば甲状腺機能亢進症に伴なう骨粗鬆症が挙げられる。甲状腺機能亢進症では、甲状腺機能の亢進により甲状腺ホルモンの産生が増加し、その結果骨芽細胞からのＲＡＮＫＬ産生亢進を介して破骨細胞形成および骨吸収を亢進することが示されている（越山裕行、最新医学  ５８巻、２６７１−２６７９、２００３）。内因性ステロイドであるグルココルチコイドの産生が増加する内分泌疾患であるクッシング症候群に伴なう骨粗鬆症は、過剰量のステロイドが骨芽細胞抑制作用を介して骨形成を抑制すると同時に、ＰＴＨ分泌を亢進し、その結果骨芽細胞や骨髄ストローマ細胞からのＲＡＮＫＬ発現亢進を介した破骨細胞形成および骨吸収が促進される。その他、副甲状腺機能亢進症においても、ＲＡＮＫＬ産生の亢進を介した破骨細胞形成および骨吸収の亢進が示されている（越山裕行、最新医学  ５８巻、２６７１−２６７９、２００３）。
【００７５】
薬剤性の骨粗鬆症としては、例えばステロイド剤の投与による骨粗鬆症がその代表である。ステロイド剤を長期連続投与された患者に多く見られる。その機序は、クッシング症候群における骨吸収と同様に、過剰なステロイドによるＲＡＮＫＬ産生亢進を介した破骨細胞形成・骨吸収の亢進である（鈴木  静他、最新医学  ５８巻、２６６４−２６７０、２００３）。
【００７６】
本化合物は、これら破骨細胞形成亢進を介した骨粗鬆症の治療剤として有用である。
【００７７】
本化合物の投与は非経口でも経口でも行うことができる。投与剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、注射剤、貼付剤等が挙げらる。本化合物の製剤化方法は特開２００２−５３５５５、特開２００３−２２６６８６に記載されているが、これらの方法に限らず、汎用されている技術を用いて製剤を得ることができる。例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の経口剤は、乳糖、結晶セルロース、デンプン、植物油等の増量剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換ヒドロキシプロピルメチルセルロース等の崩壊剤、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴール、シリコン樹脂等のコーティング剤、ゼラチン皮膜等の皮膜剤などを必要に応じて加えて、調製することができる。
【００７８】
本化合物の投与量は患者の症状、年令、剤型等によって適宜選択できるが、経口剤であれば通常１日当り０．１〜５０００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇを１回または数回に分けて投与すればよい。
【００７９】
以下に本化合物の製剤例および本化合物を用いた薬理試験の結果を例示するが、これらの例は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【００８０】
製剤例
本化合物の経口剤および注射剤としての一般的な製剤例を以下に示す。
【００８１】
１）    処方１
錠剤（１００ｍｇ中）
本化合物                                         １ ｍｇ
乳糖                                         ６６．４ｍｇ
トウモロコシデンプン                           ２０ ｍｇ
カルボキシメチルセルロース カルシウム             ６ ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース                     ４ ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                       ０．６ｍｇ
上記処方の錠剤に、コーティング剤（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴール、シリコン樹脂等通常のコーティング剤）２ｍｇを用いてコーティングを施し、目的とするコーティング錠を得る（以下の処方の錠剤も同じ）。また、本化合物および添加物の量を適宜変更することにより、所望の錠剤を得ることができる。
【００８２】
２）    処方２
カプセル剤（１５０ｍｇ中）
本化合物                                          ５ ｍｇ
乳糖                                           １４５ ｍｇ
本化合物および乳糖の混合比を適宜変更することにより、所望のカプセル剤を得ることができる。
【００８３】
３）    処方３
注射剤（１０ｍｌ中）
本化合物                                 １０〜１００ ｍｇ
塩化ナトリウム                                   ９０ ｍｇ
水酸化ナトリウム                                     適量
塩酸                                                 適量
滅菌精製水                                           適量
本化合物および添加物の混合比を適宜変更することにより、所望の注射剤を得ることができる。
【００８４】
薬理試験
骨髄には破骨細胞の前駆細胞が含まれており、骨髄細胞にＭ−ＣＳＦおよびＲＡＮＫＬを作用させると破骨細胞に分化することが知られている。また、酒石酸耐性酸ホスファターゼ（ＴＲＡＰ）活性は破骨細胞形成の指標として汎用されている。破骨細胞形成の評価系として汎用される系(例えばYamada T et al.: Blood 101;2227-2234, 2003)である、初代培養マウス骨髄細胞をＲＡＮＫＬおよびＭ−ＣＳＦで刺激した際の破骨細胞形成に対する本化合物の作用を検討した。
【００８５】
(被験化合物含有液の調製) 
上述した化合物１〜１８をそれぞれDMSOに溶解し、得られた濃度5mMの溶液を培養液中の最終濃度が1μＭとなるように培地にて希釈して被験化合物含有液を調製した。
【００８６】
(使用した培地および培養条件)
細胞の培養には、ウシ胎児血清  （１０％）、ペニシリンＧ（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）を含むαＭＥＭ培地を用いた。培養条件は、５％ＣＯ２，３７℃とした。
【００８７】
（骨髄細胞の培養）
ｄｄＹマウス（雄性、5週齢）５匹の後肢大腿骨および頚骨を採取し、骨髄腔内をαＭＥＭで洗浄することにより骨髄細胞を得た。骨髄細胞を１×１０６個／ｍｌとなるように培地で懸濁し、１２穴培養プレート上に５×１０４個ずつ播種した。Ｍ−ＣＳＦおよびＲＡＮＫＬをそれぞれ最終濃度１０ｎｇ／ｍｌ，１００ｎｇ／ｍｌとなるように添加し、さらに被験化合物含有液（化合物の最終濃度１ｎｇ／ｍｌ）を添加した。１週間後に以下の方法でＴＲＡＰ染色を行い破骨細胞分化誘導能を検討した。なお、コントロール群には被験化合物を添加せず、正常対照群にはＭ−ＣＳＦ，ＲＡＮＫＬ，被験化合物のいずれも添加しなかった。
【００８８】
（TRAP染色）
TRAP染色はUdagawaらの方法(Endocrinology 125:1805-1813, 1989)に準じて行った。TRAP染色液はNaphtol AS-MX phosphoric Acid (5 mg), Fast Red Violet LB salt (25 mg) をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド  0.5 mlに溶解し、50 mM酒石酸ナトリウム・0.1 M酢酸ナトリウム緩衝液 (pH 5.0) を50 ml加えて調製した。培養した細胞から培地を取り除き、10 %ホルマリン含有PBSで細胞を固定した後、適量のTRAP染色液を加えて室温で10 〜 15分染色した。洗浄、乾燥した後、TRAP陽性細胞数を顕微鏡下で任意の２視野計数し、その平均をTRAP陽性細胞数とした。
【００８９】
（結果評価）
コントロールに対する破骨細胞形成抑制率は以下の式で計算した。
【００９０】
破骨細胞形成抑制率（％）＝｛１−（薬剤添加群のＴＲＡＰ陽性細胞数）／（コントロール群のＴＲＡＰ陽性細胞数）｝× １００
これらの結果を表1に示す。
【表１】
2005336173.tif 000025
【００９１】
表１から明らかなように、いずれの被験化合物も破骨細胞形成を抑制した。なお、正常対照群にはＴＲＡＰ陽性細胞は全く生じなかった。
【００９２】
薬理試験の結果から、本化合物は優れた破骨細胞形成抑制作用を示し、骨粗鬆症治療薬として有用であることが認められる。