(57)【要約】【課題】  有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を簡単な培養液体を用いて効率よく培養し、β−Ｄグルカンを高濃度で含有する液体と個体物を得る。【解決手段】  水に、フスマ、大豆、米を混合して作成した培養液体に、鹿角霊芝の菌糸体を接触して多量溶存酸素条件下にて培養した後、該培養液体を加温して培養停止をしたものを固液分離することで、β−Ｄグルカンの高含有液体とβ−Ｄグルカンの高含有固体物を得るようにした。【選択図】        なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養するための培養液体であって、該培養液体は、水に、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として含むものであることを特徴とするキノコ類の培養液体。
【請求項２】
有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養するための培養方法であって、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に、前記キノコ類の菌糸体を接触させ、しかる後、多量溶存酸素条件下にて培養させるようにしたことを特徴とするキノコ類の培養方法。
【請求項３】
請求項１または２において、水溶性蛋白質は、大豆等の豆に含有するものであり、水溶性澱粉は、米、麦に含有するものであることを特徴とするキノコ類の培養液体またはキノコ類の培養方法。
【請求項４】
有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養してβ−Ｄグルカン含有液体を製造する方法であって、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に、前記キノコ類の菌糸体を接触させ、多量溶存酸素条件下にて培養させた後、培養停止処理をし、しかる後、該培養液体を固液分離してβ−Ｄグルカン含有液体を製造するようにしたことを特徴とするβ−Ｄグルカン含有液体の製造方法。
【請求項５】
有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養して得たβ−Ｄグルカン含有液体であって、該β−Ｄグルカン含有液体は、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に、前記キノコ類の菌糸体を接触させ、多量溶存酸素条件下にて培養させたものを培養停止処理をし、固液分離して得たものであることを特徴とするβ−Ｄグルカン含有液体。
【請求項６】
有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養して得たβ−Ｄグルカン含有固体物の製造方法であって、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に、前記キノコ類の菌糸体を接触させ、多量溶存酸素条件下にて培養させた後、培養停止処理をし、しかる後、固液分離することでβ−Ｄグルカン含有固体物を得るようにしたことを特徴とするβ−Ｄグルカン含有固体物の製造方法。
【請求項７】
有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養して得たβ−Ｄグルカン含有固体物であって、該β−Ｄグルカン含有固体物は、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に前記キノコ類の菌糸体を接触させたものを、多量溶存酸素条件下にて培養させ、培養停止処理をしたものを固液分離することで得られる固体物であることを特徴とするβ−Ｄグルカン含有固体物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、霊芝等のサルノコシカケ科のキノコ類の培養液体、キノコ類の培養方法、β−Ｄグルカン含有液体の製造方法、β−Ｄグルカン含有液体、β−Ｄグルカン含有固体物の製造方法、β−Ｄグルカン含有固体物の技術分野に属するものである。
【背景技術】
【０００２】
今日、霊芝等のサルノコシカケ科のキノコ類は、β−Ｄグルカンを有効成分として多量に含んでいることが知られている。そしてこのβ−Ｄグルカンは、免疫力を高め、癌の予防や治療、糖尿病患者の血糖値の降下、さらにはＣ型肝炎の治療に高い効果があると言われており、そこでこれらキノコ類からβ−Ｄグルカンを抽出し、これを飲用し、あるいは服用すること等が提案される。このようなβ−Ｄグルカンの抽出方法として、キノコ類を熱含水アルコールで含水アルコール可溶成分を抽出した後、その抽出残渣に熱水を加えて水可溶成分を抽出するようにしたもの（特許文献１）、キノコ類を冷水、熱水で抽出した後、熱水中にて酵素処理して抽出するようにしたもの（特許文献２）、超音波粉砕処理したキノコ類を、プロテアーゼ等の酵素を用いて酵素処理した後、有効成分を抽出するようにしたもの（特許文献３）がある。
【特許文献１】特開平９−５６３６２号公報
【特許文献２】特開２００１−３２７２６３号公報
【特許文献３】特開２００２−２６２８２０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
ところが、前記特許文献１のものは総抽出率としても１０％未満と低く、効率の良い抽出ができないという問題がある。また特許文献２、３のものは、酵素処理をしなければならないため抽出操作が面倒であるばかりでなく、得られる培養液体、キノコ類の培養方法、β−Ｄグルカン含有液体の製造方法、β−Ｄグルカンの収率についても、前記特許文献１のものよりは高いが、総量としては低いなどの問題が残されており、ここに本発明の解決すべき課題がある。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、上記の如き実情に鑑みこれらの課題を解決することを目的として創作されたものであって、請求項１の発明は、有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養するための培養液体であって、該培養液体は、水に、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として含むものであることを特徴とするキノコ類の培養液体である。
請求項２の発明は、有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養するための培養方法であって、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に、前記キノコ類の菌糸体を接触させ、しかる後、多量溶存酸素条件下にて培養させるようにしたことを特徴とするキノコ類の培養方法である。
請求項３の発明は、請求項１または２において、水溶性蛋白質は、大豆等の豆に含有するものであり、水溶性澱粉は、米、麦に含有するものであることを特徴とするキノコ類の培養液体またはキノコ類の培養方法である。
請求項４の発明は、有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養してβ−Ｄグルカン含有液体を製造する方法であって、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に、前記キノコ類の菌糸体を接触させ、多量溶存酸素条件下にて培養させた後、培養停止処理をし、しかる後、該培養液体を固液分離してβ−Ｄグルカン含有液体を製造するようにしたことを特徴とするβ−Ｄグルカン含有液体の製造方法である。
請求項５の発明は、有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養して得たβ−Ｄグルカン含有液体であって、該β−Ｄグルカン含有液体は、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に、前記キノコ類の菌糸体を接触させ、多量溶存酸素条件下にて培養させたものを培養停止処理をし、固液分離して得たものであることを特徴とするβ−Ｄグルカン含有液体である。
請求項６の発明は、有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養して得たβ−Ｄグルカン含有固体物の製造方法であって、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に、前記キノコ類の菌糸体を接触させ、多量溶存酸素条件下にて培養させた後、培養停止処理をし、しかる後、固液分離することでβ−Ｄグルカン含有固体物を得るようにしたことを特徴とするβ−Ｄグルカン含有固体物の製造方法である。
請求項７の発明は、有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養して得たβ−Ｄグルカン含有固体物であって、該β−Ｄグルカン含有固体物は、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として水に含む培養液体に前記キノコ類の菌糸体を接触させたものを、多量溶存酸素条件下にて培養させ、培養停止処理をしたものを固液分離することで得られる固体物であることを特徴とするβ−Ｄグルカン含有固体物である。
【発明の効果】
【０００５】
請求項１、２の発明とすることにより、β−Ｄグルカンを有効成分として含有するキノコ類の培養溶液が入手しやすい簡単なものでできることになる。
請求項３の発明とすることにより、キノコ類の培養液体を、入手しやすくしかも飼料程度しかに有効利用がなされていないフスマ、ヌカやそば殻、さらには豆、米、麦に含有する有効成分を用いて製造することができ、特に米においては古米の利用ができるという利点がある。
請求項４、５の発明とすることにより、β−Ｄグルカンを高濃度に含有する液体を高収率で簡単に製造することができる。
請求項６、７の発明とすることにより、β−Ｄグルカンを高濃度で含有する固体物を簡単に製造することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
次ぎに、本発明を実施するための最良の形態について説明する。本発明は、フスマ、ヌカやそば殻、大豆等の豆、古米を含む米や廃棄澱粉を培地の栄養成分として有効に利用し、キノコ類の培養液体、キノコ類の培養方法、β−Ｄグルカン含有液体の製造方法、β−Ｄグルカン含有液体、β−Ｄグルカン含有固体物の製造方法、β−Ｄグルカン含有固体物に関するものである。
【０００７】
前記キノコ類の培養液体は、有効成分としてβ−Ｄグルカンを含む鹿角霊芝等のキノコ類の菌糸体を培養するための培養液体であって、該培養液体は、水に、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つに含まれる水溶性物質と、水溶性蛋白質と、水溶性澱粉とを主原料として含むものである。フスマは、小麦から小麦粉を製造する際に発生するものであり、またヌカは、玄米を白米にする際に発生するものであり、さらにまたそば殻はそば粉を製造する際に発生するものであり、これらに含有する水溶性物質がキノコ類を培養する際の微量栄養源（微量栄養元素）として機能するものと考えられる。フスマ、ヌカやそば殻は、食品廃棄物として生成されたものを用いることもできるが、水溶性澱粉として小麦自体、玄米、そばの実事態を用いた場合、これらにはフスマ、ヌカやそば殻が含有することになり、よってフスマ、ヌカやそば殻の添加を省略し、あるいは低減することもできる。フスマ、ヌカやそば殻は各単独で使用しても良く、また混合して使用しても良い。一方、水溶性蛋白質としては大豆等の豆類が代表例としてあげられ、また水溶性澱粉としては麦、米が代表例としてあげられるが、米としては古米であっても良く、さらには廃棄澱粉であっても良い。
【０００８】
前記キノコ類の培養液体（液体培地）は、水に、フスマ、ヌカ、そば殻の少なくとも一つ、豆等の水溶性蛋白質物質、米等の水溶性澱粉を添加することで製造できるが、これら添加物はミキサー等で微粉砕したものが好ましい。培養液体は、水１０００重量部に対し、フスマ、ヌカやそば殻を２０〜８０重量部、豆を１０〜２０重量部、米を１５〜３５重量部の割合で混合することで好適に作成することができるが、これら数値に限定されるものではない。
【０００９】
キノコ類の培養は、前記製造した培養液体に菌種を接触させた後、培養することになるが、菌種としては冷凍菌種を解凍し、回復させたものを採用することができる。培養液体と菌種との接触比率は任意であるが、培養液体／菌種＝１０／１〜３０／１の容量比となるようにすることが好ましい。培養は常温、多量溶存酸素条件（好気性条件）下で行うことが好ましく、培養液体に空気を供給する等して多量溶存酸素条件にする。
培養は、静置培養でも良いが、接触当初に撹拌をしてよく分散し混合させた後、静置培養するようにすることが好ましい。このような培養条件として、２５℃、１２０ｒｐｍ（回転／分）の条件下で４日間、撹拌培養し、その後、７日間静置培養することが例示されるが、この培養条件についても任意である。また、前記多量溶存酸素条件とするには、例えば、滅菌空気を、培養液１Ｌに対して撹拌培養期間中には１Ｌ／分、静置培養期間中には０．５Ｌ／分というような条件で行うことができる。
【００１０】
前記培養した後、培養液体を精製することでβ−Ｄグルカン含有液体、β−Ｄグルカン含有固体物を得ることになるが、特に安定したβ−Ｄグルカン含有液体を得るため、培養液体を加熱して培養停止を行う必要がある。培養液体の精製は例えば、培養液体をミキサーで微粉砕した後、加熱して培養停止処理をし、しかる後、遠心分離機や濾過等の固液分離手段によって分離することで、β−Ｄグルカンを高含有する透明度のある液体と固体物とを得ることができる。
前記固液分離されたβ−Ｄグルカンの高含有液体は高収率で得られ、これを乾燥することで、β−Ｄグルカンのエキス粉末を得ることができる。後述する実験例においても明らかなように、β−Ｄグルカンを高含有する液体の培養液体の容量に対する収率は９５％にも及び、しかもこの液体には６０ｍｇ／１００ｍｌの割合でβ−Ｄグルカンを含有していることが確認され、本発明が如何に高効率でβ−Ｄグルカンを高含有する液体を精製できるかがわかる。この液体は、このままでも充分に飲料用として用いられるが、さらに微小浮遊物をフィルターで濾過する等して精製することで、より透明度の高いβ−Ｄグルカン高含有液体を得ることができる。
また、前記固液分離された固体物は殆どが菌糸体であり、乾燥後の収率は後述する実験例では０．４％程度であった。この固体物は、このままでも３０％のβ−Ｄグルカンを含有するが、さらにセルラーゼ等のβ−グルカンへの分解酵素を作用させることで、６０％ものβ−Ｄグルカンを含有するエキス粉末とすることができる。
【００１１】
［実験例］
次に、実験例について具体的に記載するが、本発明は本実験例に限定されるものでないことは勿論である。また、β−Ｄグルカンの分析は、財団法人「日本食品分析センター」が提供するグルカンの酵素分析方法であって、沈澱したグルカンを濃硫酸でブドウ糖に変換し、該変換したブドウ糖の量からグルカンを換算する方法を採用した。
【００１２】
＜冷凍菌種の作成と回復＞
６０ｍｇ／Ｌ（ミリグラム／リットル）のクロラルフェニコールを含有する寒天培地のシャーレの斜面にペニシリンを塗布したものに、鹿角霊芝の子実体から分離した白い種菌糸を接種して菌種を作成した後、冷凍保存した。菌種の回復には、使用の３日前から２５℃の恒温条件下におくことで菌糸の活性を回復することができる。上記冷凍菌種は、３ヵ月半のあいだ子実体まで栽培することができるものであった。栽培した子実体は、前記分離した子実体と同じであることが別途確認実験により確認できた。
【００１３】
＜液体培地の作成＞
液体培地は、水１０００重量部に、フスマを５０重量部、大豆を１５重量部、米を２５重量部の微粉際したものを添加することで作成し、撹拌下、室温にて１日養生した。
【００１４】
＜培養＞
前記冷凍菌種を解凍させ、２５℃の恒温条件下に３日間静置して回復させたものを、前記作成した培養液体に回復菌種を接種するが、その接種割合は液体培地／菌種＝２０／１の容量比となるようにした。接種後、培養することになるが、培養条件としては、２５℃、１２０ｒｐｍ（回転／分）の条件下で４日間、撹拌培養し、その後、７日間静置培養した。また、前記培養液体を多量溶存酸素条件とするため、滅菌空気を、培養液１Ｌに対して撹拌培養期間中には１Ｌ／分、静置培養期間中には０．５Ｌ／分供給した。
【００１５】
＜培養液の精製＞
前記培養した培養液をミキサーで微粉砕した後、９０℃で３０分間加熱して培養停止処理をし、これを遠心分離機を用いて固液分離した。分離液体は、透明性があり、９５％の高収率で得られた。また分離固体は、乾燥後の収量として０．４％であった。
【００１６】
分離液体は、６０ｍｇ／１００ｍｌの割合でβ−Ｄグルカンを含有した高含有液体であった。このものをさらに生成するため、メッシュが０．２μｍ（マイクロメートル）のメンブランフィルターを用いて精製（濾過）することで、さらに透明性の高いβ−Ｄグルカン高含有液体が得られた。このものは、そのまま飲用することができた。
【００１７】
一方、分離固体は、β−Ｄグルカンを３０％含有する菌糸体であり、これの４０ｇをよく粉砕してから、０．１ｍｏｌ／Ｌの塩酸水溶液１Ｌに入れ、７０℃で１時間加熱した後、固液分離した。得られた個体を中性になるまで水洗した後、セルラーゼを重量比で０．０２％の割合となるよう添加し、４５℃で８時間反応させた。しかる後、セルラーゼの活性を除去するため１００℃で３０分間加熱し、乾燥させることで、含有率６０％のβ−Ｄグルカンの固体物（エキス粉末）を得た。
【００１８】
また、前記分離固体を粉砕機を用いて平均粒径が３０μｍ、２０μｍ、１０μｍの粒子粉末にしたところ、これら粉末中に含まれるβ−Ｄグルカンの含有量は３０％、３４％、５２％であった。このことから、分離固体を粉砕して用いる場合に、１０μｍ以下の微細粒子とすることが、菌糸体中に含有するβ−Ｄグルカンを有効成分として有効に機能させるため好ましいといえる。