(57)【要約】【課題】新規なアナフィラキシー型アレルギー症状改善物質を得ることを目的とするとともに、該新規な物質を得る新規な製造方法を提供するものである。【解決手段】ステビアの植物組織から抽出したステビアエキスにイースト菌を加えて発酵させてなり、ステビアの植物組織を粉砕、混合し精製水に入れて加熱、攪拌、冷却、ろ過してろ液を得、このろ液を減圧濃縮してステビアエキスを得て、このステビアエキスにイースト菌を加えて発酵させてなる。【選択図】    図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ステビアの植物組織から抽出したステビアエキスにイースト菌を加えて発酵させ生成されるアナフィラキシー型アレルギー症状改善物質。
【請求項２】
上記ステビアの植物組織がステビアの葉と茎である上記請求項１に記載のアナフィラキシー型アレルギー症状改善物質。
【請求項３】
ステビアの植物組織を粉砕、混合し精製水に入れて加熱、攪拌、冷却、ろ過してろ液を得、このろ液を減圧濃縮してステビアエキスを得て、このステビアエキスにイースト菌を加えて発酵させてなるアナフィラキシー型アレルギー症状改善物質の製造方法。
【請求項４】
ステビアの植物組織がステビアの葉と茎である上記請求項３に記載のアナフィラキシー型アレルギー症状改善物質の製造方法。
【請求項５】
上記減圧濃縮して得られたろ液の濃度が糖度８程度である上記請求項３又は４に記載のアナフィラキシー型アレルギー症状改善物質の製造方法。
【請求項６】
上記発酵期間が１０日以上である上記請求項３〜５の何れかに記載のアナフィラキシー型アレルギー症状改善物質の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、花粉症、蕁麻疹、気管支喘息、アトピー症等の病因とされるアナフィラキシー型アレルギー症状改善物質及びその製造方法に関する。
【０００２】
アナフィラキシーとは、一般に免疫学的機序によって惹起される全身性のアレルギー反応をさす。近年、アレルギー疾患の中でＩｇＥ抗体を介するＩ型すなわちアナフィラキシー型のアレルギー反応により、肥満細胞あるいは好塩基球からヒスタミンやロイコトリエンが全身に遊離されるため、花粉症、蕁麻疹、気管支喘息などを発症すると考えられている。
【０００３】
【従来の技術】
アトピー症皮膚炎等に有効とされる外用皮膚病治療剤として、あるいは胃炎、胃カイヨウ等に有効とされる消化器系疾患治療用内服薬として、ステビア茎部の発酵濃縮液を有効成分とするものが知られている（特公平６−９２３１４号、特公平７−１３０２１号）。
さらに、花粉症等のアレルギー症状に有効とされる抗ヒスタミン作用を有する物質として、ステビアの植物組織の抽出液を発酵させたものが知られている（特開平１０−３３０２７９号）。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
上記ステビアの植物組織を発酵させて得た治療剤、内服薬剤、抗ヒスタミン作用を有する物質は、それぞれその植物組織の発酵に９０日以上の長期の期間が必要である。
本発明は、ステビアの植物組織から抽出したステビアエキスの発酵に要する期間を短縮して、新規なアナフィラキシー型アレルギーの症状を改善させる物質を得ることを目的とするとともに、該新規な物質を得る新規な製造方法を提供することを目的とするものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
そのために本発明アナフィラキシー型アレルギー症状改善物質は、ステビアの植物組織から抽出したステビアエキスにイースト菌を加えて発酵させてなるものである。
そして、上記ステビアの植物組織がステビアの葉と茎である。
【０００６】
また、本発明アナフィラキシー型アレルギー症状改善物質の製造方法は、ステビアの植物組織を粉砕、混合し、これを精製水に入れて加熱、攪拌、冷却、ろ過してろ液を得、このろ液を減圧濃縮してステビアエキスを得て、このステビアエキスにイースト菌を加えて発酵させてなるものである。
【０００７】
上記製造方法において、ステビアの植物組織がステビアの葉と茎である。
また、上記ろ液の減圧濃度は糖度８程度である。
さらに、上記発酵期間が１０日以上である。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明のアナフィラキシー型アレルギーの症状を改善させる物質は、その原料を南米のステビア・レバウディアナ・ベルトニ（Ｓｔｅｖｉａ  ｒｅｂａｕｄｉａｎａ  Ｂｅｒｔｏｎｉ）とする。
【０００９】
先ず、ステビアの地上部、地面からおよそ１５ｃｍ程から上部の葉と茎を用い、これを乾燥させて乾燥させた葉部、茎部を双方とも１０ミクロンメートル以下に粉砕する。
粉砕したステビアの葉部と茎部を３：１０の割合で混合し、ステビア混合物を得て、このステビア混合物１０ｋｇを精製水１２０リットルに入れ、常温より加熱して、しばしば穏やかに撹拌しながら数時間抽出を続ける。
その後常温まで冷却し、その後１４０メッシュの大きさでろ過を行ないろ液を得る。
このろ液を取り出し、これをさらに８０℃ほどの温度で１時間ほど加熱撹拌を行なう。
上記ろ液を加熱撹拌後、糖度８度ほど（固形物濃度およそ８ｗ／ｖ％）まで減圧濃縮を行なう。
濃縮された溶液をさらにほぼ０．４５マイクロメートル以下の大きさにてろ過する。得られたろ液をステビアエキスとし、これを原料とする。
【００１０】
上記工程で得たステビアエキス１リットルにつき、およそ２．０ｇの乾燥イースト菌を加え、常温にて穏やかに撹拌し、他の微生物の侵入を認めない条件下にて、発酵を行なう。乾燥イースト菌はサッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）類を用いる。
この発酵期間は１０日間以上とするが、望ましくは１０日〜１４日間とする。
１０日程発酵させた液を０．４５マイクロメーター以下の大きさにてろ過を行ない，完全に溶液状態とする。以上の方法で精製された液体が抗ヒスタミン作用を有する。
【００１１】
このようにして得た本発明物質によってモルモット摘出回腸標本における、抗ヒスタミン作用に関し薬理学的実験を行った。実験では、上記製法にて得られた液体を試験液（ステビア試験液という）とし、この試験液を凍結乾燥処理し、得られた固形物（ステビア固形物という）を、ロックリンガー液（Ｌｏｃｋ−Ｒｉｎｇｅｒ液）に溶解して用いた。
実験には雄性モルモット（Ｈａｒｔｌｅｙ系、３００￣３５０ｇ）２０匹を用いた。
モルモットより回腸を摘出しマグヌス法によりヒスタミンによって誘発される等尺性収縮を測定した。収縮は張力トランスジューサー（ＢＧ−１０，Ｋｕｌｉｔｅ      Ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ、Ｕ．Ｓ．Ａ）を介し直流増幅器（ＡＭ  ２０、Ｕｎｉｐｕｌｓｅ）にて記録した。ステビア固形物（１０−６  、１０−５、１０−４、１０−３ｇ／ｍｌ）をあらかじめモルモット摘出回腸に適用し、ヒスタミン１０−６  Ｍ（ｈｉｓｔａｍｉｎｅ１０−６  Ｍ）による収縮反応を検討した。抗ヒスタミン薬であるジフェインヒドラミンを対照薬として比較検討した。栄養液はロックリンガー液（ｍＭ）（Ｌｏｃｋ−Ｒｉｎｇｅｒ液（ｍＭ））を用い、組成はＮａＣｌ  １５４、ＫＣｌ  ５．６、ＣａＣｌ２  ２．２、ＭｇＣｌ２  ２．１、ＮａＨＣＯ３  ５．９、Ｇｌｕｃｏｓｅ  ２．８（ｐＨ  ７．４）であった。栄養液は９５％Ｏ２と５％ＣＯ２の混合ガスを通気した。実験は室温（２３〜２４℃）で行なった。使用した薬物は、ステビア試験液、ヒスタミン（ワコ）（ｈｉｓｔａｍｉｎｅ（Ｗａｋｏ））、ジフェインヒドラミン（ワコ）（ｄｉｐｈｅｎｈｙｄｒａｍｉｎｅ（Ｗａｋｏ））であった。ステビア固形物はロックリンガー液（Ｌｏｃｋ−Ｒｉｎｇｅｒ液）に溶解させマグヌス管に直接適用した。得られた成績はダネット（Ｄｕｎｎｅｔｔ’ｓ）のマルチプル  コンパリソン  テスト（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｔｅｓｔ）により危険率５％をもって有意差ありとした。
【００１２】
その結果、ヒスタミンの収縮反応の及ぼすステビアの影響を観た。
ヒスタミン１０−６Ｍ（Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ１０−６Ｍ）をモルモット摘出回腸標本に適用すると収縮が誘発される。ヒスタミン（Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ）は２回適用して定常状態になったことを確認してコントロールとした。図１は５例のヒスタミン（ｈｉｓｔａｍｉｎｅ）収縮反応に及ぼすステビア固形物の影響を検討したものである。ヒスタミン（Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ）の収縮反応はステビア固形物１０−６ｇ／ｍｌはその収縮反応に対して影響を及ぼさなかった。ステビア固形物１０−５、１０−４、１０−３ｇ／ｍｌではヒスタミン（ｈｉｓｔａｍｉｎｅ）による収縮反応をそれぞれコントロールの９３％、７８％、５５％に減少させた（図１，２）。ステビア固形物１０−３ｇ／ｍｌは有意な抑制を示した。これらステビア固形物による反応はステビア固形物を洗浄することにより回復したことから可逆性であった。
【００１３】
上記本発明物質をクリーム状（ステビアクリームと云う）とエキス状（ステビアエキスと云う）にして、このステビアクリーム及びステビアエキスの皮膚安全試験として、皮膚貼付試験をした。
この試験は、富山県富山市杉谷２６３０番地の富山医科薬科大学医学部皮膚科学教室（医学博士、諸橋正昭教授）にて豊田雅彦講師が試験責任者となって行われた。
この試験は、健常人１８名（男性１２名、女性６名、年齢２１〜４３歳、平均年齢３２．５歳）を対象に行われた。その方法は、ステビアクリーム及びステビアエキスを両者ともａｓ  ｉｓにてフィンチャンバーを用いて上腕内側あるいは背部に貼付し、４８時間後および７２時間後に貼付試験の評価を行った。評価判定はＩＣＤＲＧ基準の評価法にのっとって行った。
結果は、ステビアクリーム及びステビアエキスの貼付試験を施行した１８名全例において、貼付後４８時間後及び７２時間後ともいずれの物質も陽性反応（一時刺激、接触皮膚炎）を示さなかった。
【００１４】
【発明の効果】
本発明は、ステビア抽出エキスをイースト菌にて発酵させて生成された液体が、抗ヒスタミン作用を有することを初めて明らかにした。この作用はステビア固形物１０−５  ｇ／ｍｌ以上の濃度より観察され可逆的であった。ステビア固形物の抗ヒスタミン作用はヒスタミンＨ１（ｈｉｓｔａｍｉｎｅＨ１）受容体の遮断作用と結論した。この作用機序はステビア固形物がヒスタミンのＨ１受容体に結合し、ヒスタミンの発現作用を抑制すると考えられる。ステビア抽出エキスをイースト菌にて発酵させて生成された液体（ステビア試験液）の中に抗ヒスタミン作用を示す化合物が含まれていることが示された。本発明物質がアナフィラキシー型アレルギーである、花粉症、蕁麻疹、気管支喘息あるいはアトピーなどの疾患に対する症状の軽減に有効であることが示された。
さらに本発明方法では、ステビアエキスにイースト菌を加えて発酵させることにより、比較的短期間でアナフィラキシー型アレルギーの症状を改善させる物質を得ることができた。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明物質の製造工程を示すフローチャート。
【図２】モルモット摘出回腸標本においてヒスタミン（１０−６Ｍ）により誘発される収縮反応に及ぼすステビアの影響を示す図。それぞれの値は５例の平均値±標準誤差を示す。ステビアエキスは低い濃度から１０−３ｇ／ｍｌまでの範囲で適用した。
【図３】モルモット摘出回腸標本においてヒスタミン（１０−６Ｍ）により誘発される収縮反応に及ぼすステビア１０−５Ｍ、１０−４Ｍ、１０−３ｇ／ｍｌの影響を示す図。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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