(57)【要約】【課題】  患者に負担の少なく、効果的な血管新生方法及び血管新生剤を提供すること。【解決手段】  上記課題は、低線量の放射線を適用部位に照射することを特徴とする血管新生方法、放射線照射物質を含有してなる血管新生剤などによって達成することができる。本発明においては、例えば、0.6〜6.5Gyの範囲の低線量の放射線を適用することによって安全に患者の血管を新生することができる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
低線量の放射線を適用部位に照射することを特徴とする血管新生方法。
【請求項２】
放射線の照射量が0.6〜6.5Gyである、前記請求項１に記載の血管新生方法。
【請求項３】
放射線の照射量が0.8〜3.5Gyである、前記請求項１に記載の血管新生方法。
【請求項４】
放射線照射装置によって放射線を骨髄、あるいは適用部位に照射する、前記請求項１に記載の血管新生方法。
【請求項５】
放射線放射物質を骨髄、あるいは適用部位に適用することによって放射線を照射する、前記請求項１に記載の血管新生方法。
【請求項６】
低線量の放射線を骨髄、あるいは適用部位に照射することを特徴とする虚血性疾患の治療方法。
【請求項７】
放射線放射物質を含有し、低線量の放射線を照射することができるようにしたことを特徴とする血管新生剤。
【請求項８】
0.6〜6.5Gyの放射線を照射することができる前記請求項７に記載の血管新生剤。
【請求項９】
0.8〜3.5Gyの放射線量を照射することができる前記請求項７に記載の血管新生剤。
【請求項１０】
さらに薬学的に許容できる担体を含有する前記請求項７に記載の血管新生剤。
【請求項１１】
前記放射線放射物質が、ルテチウム−１７７、サマリウム−１５３、セリウム−１３７，１４１または１４３、テルビウム−１６１、ホルミウム−１６６、エルビウム−１６６または１７２、ツリウム−１７２、イッテルビウム−１６９、イットリウム−９０、アクチニウム−２２５、アスタチン−２１１、セリウム−１３７、ジスプロシウム−１６５、エルビウム−１６９、ガドリニウム−１４８，１５９、ホルミウム−１６６、ヨウ素−１２４、チタン−４５、ロジウム−１０５、パラジウム−１０３、レニウム−１８６，１８８、スカンジウム−４７、サマリウム−１５３、ストロンチウム−８９、ツリウム−１７２、バナジウム−４８、イッテルビウム−１６９、イットリウム−９０、銀−１１１またはそれらの組合せよりなる群から選ばれる、前記請求項７〜１０のいずれかに記載の血管新生剤。
【請求項１２】
さらに、Ｇ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＬＩＦ、ＦＧＦ−β、ＦＬＴ３、ＰＩＸＹ３２１、SDF-1、VEGF、PlGF、Angipoietin-1及びこれらの組合せから選択される造血因子、ケモカイン及び／又は血管新生因子を含有する、前記請求項７〜１１のいずれかに記載の血管新生剤。
【請求項１３】
放射線放射物質を含有し、低線量の放射線量を照射することができるようにした虚血性疾患治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血管新生方法及び血管新生剤に関し、より詳しくは、低線量の放射線を骨髄、あるいは適用部位に照射することによって血管を新生する方法及びそのような照射を可能とする血管新生剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、心筋梗塞、狭心症をはじめとする急性冠症候群(虚血性心疾患)、閉塞性動脈硬化症、閉塞性血管性血管炎(バージャー病)などの末梢性血管疾患、さらには脳梗塞、急性血管閉塞症を含めた重度の動脈硬化症をその素因とする、これらの疾患によって虚血性壊死に陥った組織を再生するために、種々の治療方法が試みられている。重度の虚血性心疾患に対する治療方法として、顆粒球コロニー刺激因子(G-CSF)、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)をはじめとする造血因子、血管内皮増殖因子(VEGF)、線維芽細胞増殖因子(bFGF)、肝細胞増殖因子(HGF)をはじめとする血管新生因子を局所あるいは全身投与するによって、こうした組織再生に関わる組織前駆細胞を末梢へと動員せんとする治療法はその一例であり、欧米においてはこれらを発現するウィルスベクターを用いた遺伝子治療も試みられている。
【０００３】
さらに、組織再生の基礎となる未熟な細胞をより高率に生体に供給するために、最近になって、虚血性心疾患、末梢性血管疾患あるいは脳梗塞の治療法として、骨髄移植（ＢＭＴ）または末梢血幹細胞移植（ＰＢＳＣＴ）、あるいはこれらの細胞を病変部に直接移植する方法などが報告されている。例えば、特表平１１−５０９８４５号公報（特許文献１）には、そのような移植治療の際に放射線を利用する方法が記載されている。具体的には、この公報には、減少した量の放射線を用いる、哺乳動物レシピエントにおけるドナー哺乳動物の造血多分化性細胞の移植方法を提供するもので、(ａ)レシピエントに少なくとも１用量の造血細胞増殖因子を投与し、(ｂ)該レシピエントに低 線量の放射線 を受けさせ、(ｃ)該レシピエントにドナー造血多分化性細胞を移植し、それにより減少した量の放射線を用いて哺乳動物レシピエントにドナー哺乳動物の造血多分性細胞を移植することからなる方法が記載されている。そして、この方法では、０．０１〜０．５Gyの放射線量が適用できると記載されている。
【０００４】
【特許文献１】特表平１１−５０９８４５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上記のように幾らかの動脈硬化を主な素因とする虚血性壊死性疾患の治療方法は知られているが、その有効性、安全性が十分でないか、あるいは、煩雑な手法を用いるために患者に著しい負担を与えるものである。したがって、患者により負担が少なく効果的な虚血性疾患の治療方法または治療剤の開発が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、上記課題を解決するためにマトリックス・メタロプロテイナーゼ−９(MMP-9)正常マウス及びMMP-9欠損マウスを用いて種々の実験を行ない、低線量の放射線を骨髄、あるいは適用部位に照射するのみで血管新生を促進させることができることを見出して、本発明を完成させた。すなわち、本発明は、下記のような血管新生方法、血管新生剤等を提供する。
【０００７】
（１）低線量の放射線を骨髄、あるいは適用部位に照射することを特徴とする血管新生方法。
（２）放射線の照射量が0.6〜6.5 Gyである、前記（１）に記載の血管新生方法。
（３）放射線の照射量が0.8〜3.5 Gyである、前記（１）に記載の血管新生方法。
（４）放射線照射装置によって放射線を骨髄、あるいは適用部位に照射する、前記（１）に記載の血管新生方法。
（５）放射線放射物質を骨髄、あるいは適用部位に適用することによって放射線を照射する、前記（１）に記載の血管新生方法。
（６）低線量の放射線を骨髄、あるいは適用部位に照射することを特徴とする虚血性疾患の治療方法。
【０００８】
（７）放射線放射物質を含有し、低線量の放射線を照射することができるようにしたことを特徴とする血管新生剤。
（８）０．６〜6.5 Gyの放射線を照射することができる前記（７）に記載の血管新生剤。
（９）0.8〜3.5 Gyの放射線量を照射することができる前記（７）に記載の血管新生剤。
（１０）さらに薬学的に許容できる担体を含有する前記（７）に記載の血管新生剤。
（１１）前記放射線放射物質が、ルテチウム−１７７、サマリウム−１５３、セリウム−１３７，１４１または１４３、テルビウム−１６１、ホルミウム−１６６、エルビウム−１６６または１７２、ツリウム−１７２、イッテルビウム−１６９、イットリウム−９０、アクチニウム−２２５、アスタチン−２１１、セリウム−１３７、ジスプロシウム−１６５、エルビウム−１６９、ガドリニウム−１４８，１５９、ホルミウム−１６６、ヨウ素−１２４、チタン−４５、ロジウム−１０５、パラジウム−１０３、レニウム−１８６，１８８、スカンジウム−４７、サマリウム−１５３、ストロンチウム−８９、ツリウム−１７２、バナジウム−４８、イッテルビウム−１６９、イットリウム−９０、銀−１１１またはそれらの組合せよりなる群から選ばれる、前記（７）〜（１０）のいずれかに記載の血管新生剤。
【０００９】
（１２）さらに、Ｇ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＬＩＦ、ＦＧＦ−β、ＦＬＴ３、ＰＩＸＹ３２１、SDF-1(ストローマ細胞由来因子)、VEGF (血管内皮増殖因子)、PlGF (胎盤成長因子)、bFGF(繊維芽細胞増殖因子)、Angipoietin-1及びこれらの組合せから選択される造血因子、ケモカイン及び／又は血管新生因子を含有する、前記（７）〜（１１）のいずれかに記載の血管新生剤。
（１３）放射線放射物質を含有し、低線量の放射線量を照射することができるようにした虚血性疾患治療剤。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、血管新生が必要な部位あるいは造血組織に低線量の放射線を照射するだけで血管を新生させることができるので、血管新生を必要とする患者の負担を著しく軽減することができる。また、放射線の照射を放射線照射物質を含有する血管新生剤を用いれば、特別な、放射線照射装置を必要としないので、極めて簡便に血管新生の治療を行なうことができるという利点がある。本発明によれば、血管新生を効率良く誘起するので、虚血性壊死性疾患一般すなわち、心筋梗塞、狭心症をはじめとする急性冠症候群(虚血性心疾患)、閉塞性動脈硬化症、閉塞性血管性血管炎(バージャー病)などの末梢性血管疾患、さらには脳梗塞、急性血管閉塞症を含めた重度の動脈硬化症等の治療に有効に用いることができる。
【００１１】
以下、本発明を詳細に説明する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明は、低線量の放射線を適用部位あるいは骨髄に照射するのみで適用部位での血管新生を可能とする。本発明は、これに拘束されるものではないが、次のようなメカニズムを有すると考えられる。すなわち、低線量の放射線（例えば、γ線）を照射すると、主に骨髄ストローマ中に存在するマトリックス・メタロプロテイナーゼ−９(MMP-9)を活性化し、これが可溶性Kit-ligand（ｓＫｉｔＬ）の放出を媒介し、好中球や肥満細胞等の造血細胞増殖、動員を促進させ、さらにこれらの細胞からの血管内皮増殖因子(ＶＥＧＦ)産生を増加させ、結果として骨髄由来血管内皮前駆細胞、あるいはさらに未熟な多能性幹細胞を末梢へと動員することが考えられる。血管内皮前駆細胞は、末梢において新生血管の形成を促進し、虚血性壊死に陥った各種組織の末梢血液循環を回復することによって、組織再生に貢献すると考えられ、近年その存在が確かめられた成人組織多能性幹細胞は、各種組織細胞へと変化しうる豊かな可塑性を有しており、生体各所の組織構成細胞へと分化することにより、それぞれ組織再生、再建へ重大な寄与をなすものと捉えられている。
【００１３】
本発明の第1の態様は、低線量の放射線を適用部位あるいは骨髄に照射することを特徴とする血管新生方法である。本明細書中、「低線量」とは、対象となる患者の組織、臓器などに悪影響を与えない程度の少ない量で、かつ血管の新生に有効な量のことをいう。ここで、「患者」という用語は、ヒト以外に、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ヒツジ、ウシ、ウマ等の非ヒト哺乳動物を含む意味で用いられる。本発明で用いられる放射線の照射量は対象となる患者の種類、体重、体調などによって適宜選択される。本発明の方法において好ましく用いられる放射線の量は、例えば、0.6〜6.5Gy、より好ましくは0.8〜3.5、さらに好ましくは．0.8〜2.2Gyである。本明細書中、「放射線」という用語は、β放射線、γ放射線及びＸ線を含む意味で用いられる。本発明で好ましく用いられる放射線は、γ放射線である。
【００１４】
放射線の照射は、癌の放射線治療などに用いられる汎用の放射線照射装置を用いることができる。そのような汎用の放射線装置としては、リニアック（例えば、エレクタ社製「ＨＬ１５００」等）、ガンマナイフ（例えば、エレクタ社製「レクセルガンマナイフＣ」等）などが知られている。放射線の照射によって治療が必要な部位は、例えば、動脈硬化性病変などによって血流がわるくなった末梢血管の近傍、血流が悪くなった冠動脈の近傍、機械的ダメージによって血管を損傷した部位、重度の凍傷などの虚血部位を含む。放射線の適用に際しては、適用部位以外の組織、臓器などへの影響を最小限に抑えるために、適用部位以外の部位を放射線から遮蔽する放射線遮蔽部材によって保護することが好ましい。なお、放射線の適用は、所望の放射線量を適用できれば、１回でもよいし、複数回に分けて行なってもよい。
【００１５】
本発明の血管新生方法は、動脈硬化などにより足の血管の流れが悪くなる閉塞性動脈硬化症、閉塞性血管性血管炎(バージャー病)等を含めた末梢性血管疾患、冠動脈の血液の流れが悪くなる虚血性心疾患、さらには脳梗塞、急性血管閉塞症を含めた重度の動脈硬化症などの虚血性疾患、骨髄異形成症候群、再生不良性貧血などの治療に有効に用いることができる。
【００１６】
次に、本発明の第２の態様は、放射線放射物質を含有し、低線量の放射線を照射することができるようにしたことを特徴とする血管新生剤に関する。本発明の血管新生剤は、上記した治療方法において、低線量の放射線を患部に照射するために用いられる。
【００１７】
本発明の血管新生剤に用いられる放射線放射物質は、特にこれらに限定されないが、例えば、ルテチウム−１７７、サマリウム−１５３、セリウム−１３７，１４１または１４３、テルビウム−１６１、ホルミウム−１６６、エルビウム−１６６または１７２、ツリウム−１７２、イッテルビウム−１６９、イットリウム−９０、アクチニウム−２２５、アスタチン−２１１、セリウム−１３７、ジスプロシウム−１６５、エルビウム−１６９、ガドリニウム−１４８，１５９、ホルミウム−１６６、ヨウ素−１２４、チタン−４５、ロジウム−１０５、パラジウム−１０３、レニウム−１８６，１８８、スカンジウム−４７、サマリウム−１５３、ストロンチウム−８９、ツリウム−１７２、バナジウム−４８、イッテルビウム−１６９、イットリウム−９０、銀−１１１、またはそれらの組合せを含む。
【００１８】
本発明の血管新生剤においては、好ましくは0.6〜6.5Gy、より好ましくは0.8〜3.5、さらに好ましくは0.8〜2.2Gyの放射線を照射できるように放射線照射物質を含有させる。本発明の血管新生剤の処方は、放射性物質の種類及び対象とする照射量、照射野を決定すれば、当業者であれば公知の手法も用いて容易に調製することができる（例えば、Eric J. Hall; Radiobiology for the Radiologist, 4th Edition, J.B. Lippincott Company PA、F. M. Khan; The Physics of Radiation Therapy Second Edition, Lippincott Williams & Wilkins MDなどの文献参照）。
【００１９】
本発明の血管新生剤は、血管新生を促進するために、血管新生因子産生細胞を動員する造血因子を含有することができる。本明細書中、「造血因子」という用語は、造血に関与する物質を広く意味するもので、例えば、造血前駆細胞の増殖および分化を調節するサイトカインを含む。本発明で用いることができる造血因子は、例えば、Ｇ−ＣＳＦ(顆粒球コロニー刺激因子)、ＳＣＦ(幹細胞 因子)、ＧＭ−ＣＳＦ(顆粒球マクロファージコロニー刺激因子)、ＩＬ−１、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＬＩＦ(白血病抑制因子)、ＦＬＴ３、ＰＩＸＹ３２１、さらに広い意味では血管新生因子の範疇に属するb-ＦＧＦ(線維芽細胞増殖因子)、VEGF (血管内皮増殖因子)、PlGF (胎盤成長因子)、ケモカインSDF-1(ストローマ細胞由来因子)及びこれらの組合せを含む。これらの増殖因子は市販されているか、あるいは公知文献によって調製可能である。また、本発明の血管新生剤は、ＭＭＰ−９を含有することもできる。
【００２０】
本発明の血管新生剤は、放射線放射物質は単独で、あるいはこれに医薬上許容される担体を加えて製剤化することができる。本発明の血管新生剤は、骨髄あるいは適用部位に非経口で直接局所投与できる形態で使用するのが好ましく、例えば、筋肉注射および皮下注射に適する。非経口投与の場合、本発明の放射線放射物質を、プロピレングリコール水溶液、ゴマ油などの適当な溶媒に溶解し、必要に応じて適宜緩衝剤、液体希釈剤などを加えることができる。一般に本発明の放射線放射物質は、上記のような形態で、例えば、製剤中、約５重量％から７０重量％の濃度範囲で含有される。造血因子及び／又はＭＭＰ−９が添加される場合は、例えば、約０．１〜２００μｇ／ｋｇ／日の投与量となるように処方する。
【００２１】
本発明の血管新生剤は、1日に１回または数回に分けて投与することができる。いずれにしても、本発明の血管新生剤は、所望の低線量を適用できるように、放射線照射物質の含有量及び投与量を考慮して処方され、投与される。
【００２２】
なお、本発明の血管新生剤の投与方法は、上記のような態様に特に限定されることはなく、例えば、ＷＯ９９／０５１２９９号公報に記載されているようなインプラント（例えば、ステント）の形態で低線量の放射線を血管新生の必要な部位に適用することができる。
この場合は、ワイヤ、チューブ又はメッシュなどの形状のステントに放射線放射物質を公知の手法で担持させるか、あるいは、そのステントを形成する素材中に放射線放射物質を含有させることによってステントの形態の血管新生剤を構成することができる。放射線放射物質を素材中に含有させる方法としては、例えば、放射線放射物質を適当量、チタン、ニッケル、ニッケル／チタン合金のようなステント形成材料中に混合することによって達成することができる。また、ステントの材料として生分解性ポリマーを用い、これに放射線放射物質を混合してステントとした場合は、体内に埋め込んでから所定時間経過すればそのステントが生体内で分解するので好ましい。このようなステントを作製する場合は、放射線放射物質の半減期などを考慮する必要がある。
【実施例】
【００２３】
以下、実施例に基づいて本発明を説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２４】
実施例１：  低線量の放射線照射による血管新生
低線量の放射線（２ Gy）を後肢虚血マウスモデルに照射して血管新生が促進されるか否か調べた。本実験においては、CD1マウスと少なくとも10回戻し交配させた後の、週齢(７−１０週)、性別を一致させたマトリックスメタロプロテイナーゼ-9(MMP-9)野生型マウスとMMP-9欠損(129Sv)マウスを用いた。
これらのマウスの後肢に虚血部位を設けるために、大腿部の血管を結紮する処理(Hind limb; HL)を行なった。具体的には、清潔環境下において右大腿部を切開し、筋肉、血管を露出させ、右大腿動脈及び静脈を近位端と遠位端の二カ所で結紮し、筋膜、皮膚を縫合した。
このようにして大腿部に虚血性部位を設けた野生型及びMMP-9欠損マウスをグループ分けし、それぞれのグループ（６匹以上）に、２Ｇｙの放射線を1回照射し、その後経時的に血管新生について観察した。なお、必要に応じて、放射線を照射しないグループ及び結紮処理をしないグループをコントロールとして用いた。
【００２５】
（組織病理学的検査）
MMP-9正常マウス及びMMP-9欠損マウスについて、大腿動静脈の結紮処理後、側副血管の成長について調べた。結果を第１図ａ−ｎに示す。図１ａ−ｄは虚血肢からの腓腹筋筋肉組織断片をＨ＆Ｅで染色したもの；図１ｅはＨ＆Ｅ染色筋肉断片の壊死組織の部分を定量した結果；図１ｆ−ｉは筋肉組織をｖＷＦで免疫組織化学法によって染色したもの；図１ｊは結紮処理と放射線照射の7日後の筋肉断片におけるｖＷＦ陽性血管を定量した結果；図１ｋ−ｎは筋肉断片を血管内皮細胞の表面マーカーＣＤ３１（緑色蛍光）及び平滑筋細胞に特異的な平滑筋アクチン（ＳＭＡ：赤色蛍光）で染色した結果を示す。なお、図１に示される組織学的断片は、放射線照射及びコントロールの後肢虚血グループにおいて、後肢虚血を生じさせてから１４日後に採取した虚血肢の腓腹筋筋肉からの組織断片である。
これらの結果を検討するに、ＨＬ誘起筋肉組織におけるｖＷＦ陽性毛細血管の数は、MMP-9欠損マウスと比較して野生型において多かった（図１j）。また、放射線照射は、MMP-9正常マウスの毛細血管の数を増加させたが、MMP-9欠損マウスの毛細血管の数を有意に増加させなかった（図１a-d, f-i）。平滑筋細胞を覆う血管の数は、MMP-9欠損マススと比較して野生型において多かった(図１k-n)。以上の結果から、血管新生にMMP-9が関与していること、低線量の放射線照射によって適用部位において血管新生が促進されたことが明らかとなった。
【００２６】
（サーモグラフィー及びレーザードップラーによる血流変化の測定）
まず、血管形成が促進されているか否かをサーモグラフィーによって測定した。側副部のサーモグラフ測定は市販の装置（Lisca PIM II camera） を用いて行なった。得られた結果を図１ｏ−sに示す。図１ｏ−ｒは結紮処理10日後の血流の指標として平均体温をサーモグラフィーで測定した結果；図１ｓは結紮処理10日後の平均体温を数量化したグラフである。これらの結果から、低線量の放射線の照射により、虚血肢における末梢循環血流が増加したことが分かる。
次に、レーザードップラー環流イメージ（ＬＤＰＩ）分析装置 (Moor Instruments, Devon, United Kingdom)を用いて、処置後3週間、血流を測定した。図１ｔ-ｗに、結紮処理14日後の結紮肢における血液の環流をレーザードップラーによって分析した結果を示す。デジタルカラーイメージでは、白が最大の環流を、黄色が中程度の環流を、そして青が最少の環流を示す。また、図１ｘは、放射線照射されたMMP-9正常マウスの非結紮肢において血液の流動（blood flux）が回復したことを示すグラフである。これらの結果から、低線量（２Ｇｙ）の放射線照射で虚血肢において血流が改善されたことが明らかとなった。
なお、野生型マウスへ放射線を同線量照射した場合は、非照射コントロールと比較して、平均体温を上昇させ（図１o,p）、血流を改善させたことが確認された（図１t,u）。一方、MMP-9欠損マウスへ放射線照射した場合は、平均体温も、血流についても充分な改善が認められなかった（図１q,r,v,w）。
以上の実験結果から、本発明の低線量放射線照射によって血管新生が促進されることがより明確となった。
【００２７】
参考例
上記の実験結果によって低線量の放射線照射によって血管の新生が促進されることが明らかとなった。参考のため、本件発明に関連する実験データを添付する。
図２は、一定量の非致死量放射線照射後に生じる血管内皮前駆細胞、造血前駆細胞の骨髄内再生及び末梢血中への動員がMMP-9依存であることと、それが血管新生因子の増加と一致していることを示す一連のグラフである。この実験においては、MMP-9正常及び欠損マウスにday 0で６．５Ｇｙの放射線を１回照射した。図２ａに末梢血液中の白血球数（WBC）の数；図２ｂに骨髄細胞数の経時的変化；図２ｃ、dに骨髄中の造血前駆細胞(コロニー形成細胞) （CFU-C）、血管内皮前駆細胞(コロニー形成細胞)（CFU-EC）数の経時的変化、図２e、fに末梢血液中に認められたCFU-C、CFU-EC数の経時的変化；そして図２ｇ−ｉはMMP-9正常及び欠損マウスの血漿中のケモカインSDF-1、血管新生因子VEGF及びP1GFレベルについてＥＬＩＳＡ法によって測定した結果を示す。
【００２８】
図３は、MMP-9正常及び欠損マウスに低線量（２Ｇｙ）の放射線を1回照射した場合にもMMP-9の活性化、血管新生因子産生の増大を媒介として生じた血管再生の基礎となる血管内皮前駆細胞の末梢血中への動員を示す一連のグラフである。図３ａは放射線照射後０〜２８日の間でのＷＢＣの回復；図３ｂは２Ｇｙ照射後に採取した骨髄細胞を無血清培地で一晩培養した後のMMP-9活性の変化（上清をザイモグラフィーによって活性化MMP-9をアッセイした）；図３ｃは低線量放射線照射マウスにおける血漿中のKit-ligandレベルの変化；図３ｄは末梢血中のCFU-C についてのアッセイ結果；図３Ｅは末梢血中のCFU-ECについてのアッセイ結果；図３ｆは血漿中のVEGF の変化；図ｇ−ｈは大腿血管結紮処理後に２Ｇｙの放射線を照射した場合あるいは照射しなかった場合の経時的変化(図３g：CFU-C；図３h：CFU-EC；  図３i：血漿VEGF ）を示す。
【産業上の利用可能性】
【００２９】
本発明によれば、血管新生を効率良く誘起するので、虚血性壊死性疾患一般すなわち、心筋梗塞、狭心症をはじめとする急性冠症候群(虚血性心疾患)、閉塞性動脈硬化症、閉塞性血管性血管炎(バージャー病)などの末梢性血管疾患、さらには脳梗塞、急性血管閉塞症を含めた重度の動脈硬化症等虚血性疾患等の治療に有効に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】図１は、低線量放射線照射によって血管新生が起こることを示す一連の図である。
【図２】図２は、非致死量放射線照射による骨髄中の各種前駆細胞の再生及び末梢血中への動員がMMP-9依存であることと、それがケモカイン、血管新生因子の増加と一致していることを示す一連のグラフである。
【図３】図３は、MMP-9正常及び欠損マウスに低線量（２Ｇｙ）の放射線を1回照射した後のMMP-9の活性化、血管新生因子、サイトカインによって媒介される未熟な各種前駆細胞の末梢血中への動員を示す一連のグラフである。
【図１】
2005336102.tif 000002
【図２】
2005336102.tif 000003
【図３】
2005336102.tif 000004