(57)【要約】    【解決手段】  本発明の生体関連物質分離用ゲル膜は、２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンから誘導される構成単位を有する重合体を含んでなり、生体関連物質を分離するために用いられることを特徴としている。  また、本発明の生体関連物質の分離方法は、前記の分離用ゲル膜を備えた容器に、生体関連物質を含む試料を導入し、加圧することにより生体関連物質を分離することを特徴としている。    【効果】  本発明によれば、生体関連物質を含む微量の試料、とくにタンパク質を含有する試料であっても、吸着および／または変性させることなく効率的に分離できる。  また、本発明の分離方法によれば、血球成分を破壊、吸着、変性させずに、全血から血球成分と血漿とを簡便に分離することができる。    【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンから誘導される構成単位を有する重合体を含んでなり、生体関連物質を分離するために用いられることを特徴とする生体関連物質分離用ゲル膜。
【請求項２】
前記重合体が、含水ゲル状であることを特徴とする請求項１に記載の生体関連物質分離用ゲル膜。
【請求項３】
支持体の片面または両面に前記重合体層が設けられていることを特徴とする請求項１または２に記載の生体関連物質分離用ゲル膜。
【請求項４】
前記重合体が、少なくとも２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンと架橋剤と重合開始剤とを水存在下で接触させて得られたものであることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の生体関連物質分離用ゲル膜。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の分離用ゲル膜を備えた容器に、生体関連物質を含む試料を導入し、加圧することにより生体関連物質を分離することを特徴とする生体関連物質の分離方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体適合性に優れた重合体を含んでなる生体関連物質分離用ゲル膜およびこれを用いた生体関連物質の分離方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、タンパク質などをはじめとする生体関連物質は、ゲル電気泳動により分子量に応じてバンド状に分画することにより分離され、あるいはメンブランフィルターを用いて圧力をかけて濾過することにより分離されていた。
【０００３】
しかしながら、前者では電気泳動の前処理が煩雑である上、分離に時間がかかり、後者では濾材であるメンブランフィルターに相当量の生体関連物質が吸着してしまうため、分離に要する試料の量が増大し、微量の試料には対応できないという問題があった。さらに、後者の方法では、試料にタンパク質が含まれる場合には、メンブランフィルターとの接触により、濾過されたタンパク質および濾過されずにメンブランフィルター上に残ったタンパク質が変性してしまうという問題もあった。
【０００４】
また、生体関連物質として血液を考えると、全血から血球成分および血漿を分離する場合には、濾材を使用すると、濾材との接触により血球成分が変性あるいは破壊されるため、従来より遠心分離が行われているが、遠心分離機などの装置が必要であることから、より簡便に分離できる手段が望まれていた。
【０００５】
本発明者らは、上記実情に鑑みて鋭意研究した結果、２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（以下、ＭＰＣともいう。）から誘導される構成単位を有する重合体を含むゲル膜を用いれば、生体関連物質を吸着、変性、破壊することなく、簡便な装置で効率的に分離しうることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
なお、ＭＰＣから誘導される構成単位を有する重合体は、生体膜表面の構造に着目して、リン脂質極性基であるホスホリルコリン基を担持させた重合体であり、低タンパク質吸着性、細胞非粘着性あるいは抗血栓性という優れた生体適合性から一連の医療用材料として、ＭＰＣ単独重合体をはじめ、ＭＰＣあるいはその誘導体と各種アルキルメタクリレートなどとの共重合体が既に開発されている（非特許文献１参照、特許文献１〜３参照）。しかしながら、ＭＰＣを架橋させ、３次元網目構造の網目の大きさを調節して分子ふるいとしての特性を付与した生体関連物質分離用ゲル膜については知られていない。
【非特許文献１】石原ら、Polymer Journal誌、22巻（5）、355〜360頁、1990年
【特許文献１】特許第２８９０３１６号
【特許文献２】特許第２８７０７２７号
【特許文献３】特許第２９４７２９８号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、生体関連物質を吸着および/または変性させることなく、効率的に分離しう
る生体関連物質分離用ゲル膜を提供することを課題としている。さらに本発明は、該生体関連物質分離用ゲル膜を用いて、簡便な装置および操作で生体関連物質を分離できる方法を提供することをも課題としている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明に係る生体関連物質分離用ゲル膜は、２−メタクリロイルオキシエチルホスホリ
ルコリンから誘導される構成単位を有する重合体を含んでなり、生体関連物質を分離するために用いられることを特徴としている。本明細書中、生体関連物質とは、生体（とくにヒトまたはヒト以外の動物）に関連する物質全般を意味し、その由来が純化学的な合成であろうと、生合成（生体由来成分）であろうと、遺伝子組換技術によるものであろうとその別を問わない意味である。
【０００９】
本発明の生体関連物質分離用ゲル膜では、前記重合体は含水ゲル状であることが好ましい。
【００１０】
さらに、本発明の生体関連物質分離用ゲル膜は、具体的には、支持体の片面または両面に前記重合体層が設けられている構成をとることが好ましい。
【００１１】
本発明では、前記重合体は、少なくとも２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンと架橋剤と重合開始剤とを水存在下で接触させて得られたものであることが好ましい。
【００１２】
また、本発明に係る生体関連物質の分離方法は、前記の分離用ゲル膜を備えた容器に、生体関連物質を含む試料を導入し、加圧することにより生体関連物質を分離することを特徴としている。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、生体関連物質を含む微量の試料、とくにタンパク質を含有する試料であっても、該試料を吸着および／または変性させることなく効率的に分離できる。
【００１４】
さらに、本発明の分離用ゲル膜は生体適合性に優れるため、分離操作によってゲル膜を透過した生体関連物質ならびに透過せずにゲル膜上に残存している生体関連物質の双方とも変性することなく、分離された双方の物質をさらなる分析や診断等に用いることができる。
【００１５】
また、本発明の分離方法によれば、高圧で加圧する必要がないため血球成分を破壊することなく、さらに分離用ゲル膜が生体適合性に優れた重合体層を有するため血球成分を吸着および／または変性させずに、全血から血球成分と血漿とを簡便に分離することができる。さらに、本発明の分離方法によれば、透過せずにゲル膜上に残った生体関連物質は結果的に濃縮されることになるため、濃縮手法としても利用できる。また、生体関連物質を含む試料を脱塩、除タンパクして精製することができるため、試料の精製方法としても利用できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、本発明について具体的に説明する。
【００１７】
＜生体関連物質分離用ゲル膜＞
本発明の生体関連物質分離用ゲル膜は、２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンから誘導される構成単位を有する重合体を含んでなり、生体関連物質を分離するために用いられることを特徴としている。
【００１８】
したがって、まず２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンから誘導される構成単位を有する重合体について説明する。
【００１９】
２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣ）は、上述したように生体適合性を示す材料として、既に公知の方法（たとえば、石原ら、Polymer Journal誌、22
巻（5）、355〜360頁、1990年）によって製造することができる。
【００２０】
この製造方法の概要を説明すると、まず、三塩化リンの塩化メチレン溶液にエチレングリコールを滴下し２−クロロ−１，３，２−ジオキサホスフォラン（以下ＣＰという）を合成し、得られたＣＰをベンゼンに溶解してこのベンゼン溶液に酸素を添加しながら一晩反応させ２−クロロ−２−オキソ−１，３，２−ジオキサホスフォラン（以下ＣＯＰという）を得る。次に、得られたＣＯＰを、２−ヒドロキシエチルメタクリレート（以下ＨＥＭＡという）のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）溶液とトリエチルアミン（以下、ＴＥＡという）のアセトニトリル溶液との混合溶液中に滴下し、冷却しながら反応させ２−（２−オキソ−１，３，２−ジオキサホスフォロイルオキシエチルメタクリレート（以下ＯＰＥＭＡという）を合成し、得られたＯＰＥＭＡをアセトニトリルに溶解し、このアセトニトリル溶液を冷却してこれにＴＥＡを加えて６０℃で一晩反応させることにより、２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣ）を得るというものである。
【００２１】
本発明に用いられる重合体は、少なくとも、上記のようにして得られたＭＰＣと、架橋剤と重合開始剤とを溶媒存在下、好ましくは水存在下で接触させることにより得ることができる。具体的には、ＭＰＣを単独で、あるいはＭＰＣと他の重合性単量体とを重合させる際に、ＭＰＣと、他の重合性単量体も用いる場合には他の重合性単量体と、架橋剤と重合開始剤とを溶媒存在下で接触させ、１〜３ａｔｍ、２０〜８０℃で、１分〜１０時間ラジカル重合することによって製造できる。
【００２２】
前記溶媒としては、使用する単量体を溶解できるものであればよく、具体的には、水、メタノール、エタノール、プロパノール、ジメチルホルムアミド、ＴＨＦ、これらの混合溶媒などが挙げられるが、これらのうちでは、得られた含水ゲル状の重合体をそのまま、本発明の分離用ゲル膜の重合体層として用いることができる点から水が好ましい。
【００２３】
前記架橋剤としては、ＭＰＣと反応して架橋構造を形成しうるものであれはよく、とくに限定されないが、たとえば、エチレングリコールジメタクリレート、トリエチレングリコールジメタクリレート（以下、ＴＥＧＤＭＡという）、１，３−ジグリセロレートジアクリレートなどのジ（メタ）アクリレート；Ｎ，Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド；
ポリエチレングリコールジアクリレートが挙げられる。
【００２４】
上記架橋剤は、ＭＰＣを単独で用いる場合にはＭＰＣに対して、ＭＰＣ以外の他の単量体を用いる場合には該単量体とＭＰＣとの合計量に対して、通常０．００１モル％〜２０モル％、好ましくは０．０１モル％〜５モル％の量で使用することができる。
【００２５】
上記の範囲内で使用する架橋剤の量を調節することにより、得られる重合体の三次元網目状構造の網目の大きさを調節し、分子ふるいとしての特性を付与することができる。すなわち、架橋剤の量を調節することで、分離対象となる生体関連物質の物理的な大きさ、具体的には分子量に応じて、重合体の網目の大きさを調節し、生体関連物質を分画することが可能である。
【００２６】
得られる重合体の網目の大きさは、分子量が明確な標準溶質を利用してその透過性より求めることができる。この確認結果から重合体の網目の大きさは、平均直径約５ｎｍ〜５μｍの範囲で調節することができると考えられる。
【００２７】
前記重合開始剤としては、公知のラジカル開始剤を用いることができ、とくに限定されないが、具体的には、ペルオキソ二硫酸アンモニウム（以下、ＡＰＳという）、ペルオキソ硫酸アンモニウムなどの過硫酸アンモニウムや、過硫酸カリウム、過酸化ベンゾイル、などの過酸化物及び２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、アゾビスマレノニトリルな
どの脂肪族アゾ化合物を挙げることができる。
【００２８】
上記重合開始剤は、ＭＰＣを単独で用いる場合にはＭＰＣに対して、ＭＰＣ以外の他の単量体を用いる場合には該単量体とＭＰＣとの合計量に対して、通常０．１〜３０モル％、好ましくは０．５〜１０モル％の量で使用することができる。
【００２９】
さらに前記重合開始剤に加えて必要に応じて重合促進剤を使用してもよい。重合促進剤としては、たとえば、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（以下、ＴＭＥＤＡという）、ジメチルｐ-トルイジン、ｐ−ニトロジメチルアニリン、ｐ−メトキシ
ジメチルアニリンが挙げられる。
【００３０】
ＭＰＣ以外の他の重合性単量体としては、具体的には、エチルメタクリレート、プロピルメタクリレート、ｉｓｏ−プロピルメタクリレート、ｎ−ブチルメタクリレート、ｓｅｃ−ブチルメタクリレート、ｔｅｒｔ−ブチルメタクリレート、ペンチルメタクリレート、ヘキシルメタクリレート、へプチルメタクリレート、オクチルメタクリレート、トリデシルメタクリレート、ステアリルメタクリレートなどの炭素原子数１〜１８のアルキル基を有するアルキルメタクリレート；
２−エトキシエチルメタクリレート、２−エトキシプロピルメタクリレート、２−フェノキシエチルメタクリレート、２−ブトキシエチルメタクリレート、などの炭素原子数１〜６のアルキル基を有するアルコキシアルキルメタクリレート；ポリエチレングリコールモノメタクリレート、２−ヒドロキシエチルメタクリレート、アクリルアミド、Ｎ−ビニルピロリドン、アクリル酸、メタクリル酸、アクリルアミド-２-メチルプロパレスルホン酸が挙げられる。
【００３１】
なお、重合体の合成の際にＭＰＣに加えて上記の重合性単量体を用いる場合、すなわち、得られる重合体が、ＭＰＣから誘導される構成単位と他の重合性単量体から誘導される構成単位とからなる共重合体である場合には、ＭＰＣから誘導される構成単位と前記重合性単量体から誘導される構成単位とのモル比（ＭＰＣ：他の重合性単量体）は、通常９９：１〜３０：７０、好ましくは９９：１〜５０：５０である。
【００３２】
該モル比は、得られた共重合体をＥＳＣＡ（Ｘ線光電子分光計）で測定し、リン原子と炭素原子の分析値より、ＭＰＣから誘導される構成単位の含有量を求めることにより決定することができる。
【００３３】
上記のように溶媒存在下で上記単量体と架橋剤と重合開始剤とを接触させることにより重合反応を進行させて得られた重合体はゲル状を呈する。さらに該重合体を溶媒中に１〜２４時間浸漬し、洗浄することにより、未反応の単量体、架橋剤、重合開始剤を除去し精製することが好ましい。
【００３４】
前記重合体は、液体窒素などを用いて一旦凍結乾燥してもよく、上記溶媒として水を用いた場合にはそのまま用いてもよいが、本発明のゲル膜を形成する際には水で膨潤された含水ゲル状であることが好ましい。
【００３５】
前記重合体が含水ゲル状であると、前記重合体層を有する本発明のゲル膜では、試料がゲル中に存在する水の部分を拡散あるいは通過経路として透過するため、試料を過剰に吸収保持することなく、さらに試料がゲル膜を透過する際にゲル膜に含まれる水によって希釈されるため、微量の試料であっても希釈せずに対応できるため好ましい。
【００３６】
上記重合体は膨潤平衡に達した状態で使用されることが好ましいが、その含水率は乾燥時の重量に対して通常１００〜３０００重量％である。該含水率は、下式のように重合体
を凍結乾燥した重量Ｗ１と、膨潤平衡に達した含水ゲル状の重合体の重量Ｗ２とを測定し、Ｗ２をＷ１で除した百分率により求めることができる。
【００３７】
含水率（重量％）＝１００×Ｗ２/Ｗ１
本発明の生体関連物質分離用ゲル膜は、上記のような重合体を含んでなるが、ゲル膜に物理的な強度を付与する点からは、支持体の片面または両面に前記重合体層が設けられている構成をとることが好ましい。
【００３８】
本発明に用いられる支持体としては、前記含水ゲル状の重合体の形態を保持することができ、さらに該重合体の生体適合性、透過性を阻害しないものであることが望ましい。具体的には、セルロースジアセテート、セルローストリアセテートなどの酢酸セルロース、ポリ三弗化エチレン、ポリアミド、ポリスルホン、ポリテトラフルオロエチレン、多孔性シリカゲル、多孔性アルミナなどの材料が挙げられる。支持体の厚さは、前記ＭＰＣ重合体の生体適合性を阻害しないようにする点からはできる限り薄い方がよいが物理的強度との兼ね合いから膜厚は通常１０〜５００μｍ、好ましくは５０〜３００μｍである。
【００３９】
該支持体上に重合体層を設けるには、（１）重合により形成されるポリマー鎖の絡み合いによる物理的固定化、（２）支持体表面の水酸基とＭＰＣポリマー中に存在するエステル基とのエステル交換反応による支持体への化学反応による固定化のいずれかの手法によることが好ましい。
【００４０】
これらのうち、支持体表面への重合体層の固定化と、重合体を製造するための重合とを同時に行うことができ、効率的である点からは（１）の物理的固定化手法がより好ましい。
【００４１】
この場合、上述したようにＭＰＣなどの単量体と架橋剤と重合開始剤とを接触させ、重合反応を進行させて重合体を得るより前のいずれかの段階で、支持体をこれらの反応混合物と接触させ、この状態で重合反応を進行させることにより、支持体の片面または両面に前記重合体層を形成させることができる。
【００４２】
支持体を反応混合物と接触させる方法としては、ディップコート、スピンコート、刷毛を用いた塗布などの公知の方法が挙げられる。このように支持体と反応混合物とを接触させることにより、支持体の外表面（支持体の片面または両面）のみならず、支持体を構成する材料の表面にも該反応混合物が付着した状態で、重合反応を進行させることができるため、重合体層を支持体表面に設けるとともに、支持体内部の材料表面にも重合体をコーティングすることができる。
【００４３】
これによって、生体関連物質が、支持体表面に設けられた重合体層を透過した後、支持体内部を透過する際にも、支持体を構成する材料との接触による変性を抑制することができる。
【００４４】
このようにして、支持体表面に設けられる重合体層の厚さは、支持体の片面あたり、膨潤平衡に達した含水ゲルの状態で通常１０ｎｍ〜１０μｍであればよく、好ましくは１０ｎｍ〜１μｍである。
【００４５】
得られた分離用ゲル膜は、単層で用いることもできるが、使用する架橋剤の量を変えることにより網目の大きさを変えた複数のゲル膜を積層して用いることもできる。その場合、網目の大きさが上から下に向って小さくなるようにゲル膜を積層することが望ましい。
【００４６】
本発明において、分離の対象となる前記生体関連物質は、既に定義したとおりであるが
、具体的には、タンパク質、多糖類、核酸、血液（血清、血漿、血球、抗体を含む）、細胞などが挙げられる。
【００４７】
これらの生体関連物質は、従来の分離方法では、分離に手間や時間がかかったり、残分が変性したり、特別な装置が必要であったりといった問題があったが、本発明の分離用ゲル膜を用いれば、生体適合性に優れる材料からなる含水ゲル状の重合体層を有するため、該分離用ゲル膜を透過したものは言うまでもなく透過しなかった残分までも変性させることなく回収でき、分析などの二次的な目的に使用することができる。さらに、後述するように分離自体も簡便な手法により行うことができるため、より効率的に行うことができる。
【００４８】
＜前記ゲル膜を用いた生体関連物質の分離方法＞
本発明に係る生体関連物質の分離方法は、前記の分離用ゲル膜を備えた容器に、生体関連物質を含む試料を導入し、加圧することにより生体関連物質を分離することを特徴としている。
【００４９】
この場合、容器の材質は、導入する試料を吸着および/または変性させたり、試料中に
成分が溶出したりするおそれのない材料であればよく、公知の材料を用いることができるが、具体的には、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、アクリル樹脂、シリコン樹脂、ポリ塩化ビニル、ガラスなどが好ましく挙げられる。
【００５０】
容器の形状は、前記分離用ゲル膜を備えることができ、分離後の試料を、ゲル膜を透過したものとしないものと別々に回収できる構造を有し、加圧することができればよく、とくに限定されないが、たとえば、図１および２に示したように、ゲル膜を挟んで、上下に独立のセルが形成されており、各セルを単独で開閉できる手段を有し、かつ上部セルの蓋に加圧用の孔が設けられている構造の容器などが挙げられる。容器の大きさおよび分離用ゲル膜の大きさは、使用する試料の量に応じて適宜決定することができる。
【００５１】
このような容器に、生体関連物質を含む試料を導入し、シリンジなどの簡便な手段で上部の孔から気体を導入し加圧することによって、生体関連物質を容易に分離することができる。なお、シリンジによる加圧は、手動で行える程度で充分であり、通常１〜５ａｔｍ程度である。
【００５２】
このように、本発明の分離方法によれば、高圧で加圧する必要がないため血球成分を破壊することなく、さらに分離用ゲル膜が生体適合性に優れた重合体層を有するため血球成分を吸着および／または変性させずに、全血から血球成分と血漿とを簡便に分離することができる。さらに、本発明の分離方法によれば、透過せずにゲル膜上に残った生体関連物質を結果的に濃縮することになるため、濃縮手法としても利用できる。また、生体関連物質を含む試料を脱塩、除タンパクして精製することができるため、試料の精製方法としても利用できる。
【００５３】
以下、実施例に基づいて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００５４】
＜分離用ゲル膜１（Ｔ１００）の合成＞
ＭＰＣの２．５ｍｏｌ/ｌ水溶液１ｍｌに、ＴＥＧＤＭＡを０．２モル％となるように
添加し、この中にＡＰＳの０．２２ｍｏｌ/ｌ水溶液を０．０６ｍｌ加え、室温下で３０
分間攪拌し、完全に混合させた。その混合液に支持体(ＦＵＪＩ  ＦＩＬＭ製アセチルセ
ルロース膜；ポアサイズ５μｍ、膜厚１００μｍ)をディップコートし、室温下で重合促
進剤としてＴＭＥＤＡを０．０６ｍｌ加え２０秒間スピンコートしながらゲル化させ、支持体両面に含水ゲル状の重合体層を設けた。
【００５５】
このゲル状の重合体層を設けた支持体を、純水に１日間浸漬して、膨潤させ、未反応物を除去した。
【００５６】
このようにして、ポアサイズ５μｍ、膜厚１００μｍの酢酸セルロース膜の両面に膜厚８μｍの含水ゲル状の重合体層を設けた分離用ゲル膜１（Ｔ１００）を得た。
【００５７】
＜生体関連物質の分離能評価＞
生体関連物質含有試料のモデルとして、ブルーデキストラン（分子量２００万）とサフラニン（分子量３５０）の混合液を使用して、上記で得られた分離用ゲル膜１（Ｔ１００）の分離能を評価した。
【００５８】
分離の様子を図１に示す。
【００５９】
図１に示した容器は、ポリスチレン製であり、ゲル膜を挟んで上下に独立のセルが形成されており、各セルを単独で開閉できる手段を有し、かつ上部セルの蓋に加圧用の孔が設けられている。この容器の上部セルに試料を入れ、シリンジを用いて加圧用の孔より容器内に空気を導入し加圧したところ、図１のようにサフラニンは分離用ゲル膜１を透過して下部セルに移動したがブルーデキストランは透過せず、両者を分離することができた。
【００６０】
なお、下部セルにサフラニンのみが透過したことは、波長５９０ｎｍの吸光度を分光光度計（紫外可視光スペクトル測定装置Ｖ−５３０；製造元  日本分光）を用いて測定し確認した。
【実施例２】
【００６１】
＜分離用ゲル膜２（Ｐ３００）の合成＞
ＭＰＣの２．５ｍｏｌ/ｌ水溶液１ｍｌに、ポリエチレングリコールジアクリレート（
分子量２５８）を０．１２モル％となるように添加し、この中にＡＰＳの０．２２ｍｏｌ/ｌ水溶液を０．０６ｍｌ加え、室温下で３０分間攪拌し、完全に混合させた。その混合
液に支持体(ＦＵＪＩ  ＦＩＬＭ製アセチルセルロース膜；ポアサイズ５μｍ、膜厚１０
０μｍ)をディップコートし、室温下で重合促進剤としてＴＭＥＤＡを０．０６ｍｌ加え
２０秒間スピンコートしながらゲル化させ、支持体両面に含水ゲル状の重合体層を設けた。
【００６２】
このゲル状の重合体層を設けた支持体を、純水に１日間浸漬して、膨潤させ、未反応物を除去した。
【００６３】
このようにして、ポアサイズ５μｍ、膜厚１００μｍの酢酸セルロース膜の両面に膜厚８μｍの含水ゲル状の重合体層を設けた分離用ゲル膜２（Ｐ３００）を得た。
【００６４】
＜生体関連物質の分離能評価＞
生体関連物質含有試料として、ヒト全血を使用して、上記で得られた分離用ゲル膜２（Ｐ３００）の分離能を評価した。
【００６５】
分離の様子を図２に示す。
【００６６】
図２に示した容器は、図１に示したものと同様であり、この容器の上部セルに試料を入れ、シリンジを用いて加圧用の孔より容器内に空気を導入し加圧したところ、図２のよう
に血漿は分離用ゲル膜２を透過して下部セルに移動したが血球成分は透過せず、両者を分離することができた。
【００６７】
なお、下部セルに血漿のみが透過したことは、得られた血漿を波長２８０ｎｍの吸光度を分光光度計（紫外可視光スペクトル測定装置Ｖ−５３０；製造元  日本分光）を用いて測定することによって確認した。
【００６８】
また、透過せずに分離用ゲル膜２上に残った血球成分を走査型電子顕微鏡（ＴＯＰＣＯＮ  ＳＭ−２００）で確認したところ、赤血球などの変形・破裂や血小板の凝集などは見られなかった。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
【図１】図１は、実施例１の分離能評価の様子を示す写真である。
【図２】図２は、実施例２の分離能評価の様子を示す写真である。
【図１】
2005147838.tif 000002
【図２】
2005147838.tif 000003