(57)【要約】【課題】イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸、及びそれらを含むペプチドの苦味、渋味、特異臭をマスキングすることにより、それらを含有する飲食物、医薬品および医薬部外品などの経口摂取または口内利用可能な製品の嗜好性を改善する。【解決手段】  有効成分としてステビア抽出物、特にα−グルコシルステビア抽出物を含むマスキング剤を、イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸、及びそれらを含むペプチドを含有する飲食物、医薬品および医薬部外品などに含有させることにより、嗜好性を改善させることができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ステビア抽出物を有効成分とすることを特徴とする、分岐アミノ酸または分岐アミノ酸を含むペプチドのマスキング剤。
【請求項２】
ステビア抽出物が、α−グルコシルステビア抽出物を主成分とすることを特徴とする、請求項1記載のマスキング剤。
【請求項３】
ステビア抽出物が、α−グルコシルステビア抽出物を主成分とし、該α−グルコシルステビア抽出物のα−グルコシルステビオール配糖体総量に対してα−モノグルコシルステビオサイド、α−ジグルコシルステビオサイド、α−モノグルコシルレバウディオサイドA、α−ジグルコシルレバウディオサイドAの合計量が50%以上(重量比)であり、かつステビア抽出物のβ−グルコシルステビオールに対するα−グルコシル基の平均付加数が１．０〜２．５である、請求項1記載のマスキング剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載のマスキング剤を含有させることを特徴とする、分岐アミノ酸または分岐アミノ酸を含むペプチドが含まれる経口用医薬品。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれかに記載のマスキング剤を含有させることを特徴とする、分岐アミノ酸または分岐アミノ酸を含むペプチドが含まれる食品。
【請求項６】
請求項１〜３のいずれかに記載のマスキング剤を含有させることを特徴とする、分岐アミノ酸または分岐アミノ酸を含むペプチドが含まれる医薬部外品。
【請求項７】
請求項１〜３のいずれかに記載のマスキング剤を含有させることを特徴とする、分岐アミノ酸または分岐アミノ酸を含むペプチドが含まれる化粧品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アミノ酸、イソロイシン、ロイシン及びバリン等の分岐鎖アミノ酸、またそれら分岐鎖アミノ酸を構成成分に含むペプチドを含有する飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品の苦味・渋味・特異臭のマスキング剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
イソロイシン、ロイシン及びバリン等の分岐鎖アミノ酸は、体内で合成できない必須アミノ酸であり、肝硬変などの肝疾患あるいは腎疾患、各種の筋萎縮症のような分岐鎖アミノ酸の代謝の異常を重要な症候とする各種の疾患に対し、顕著な薬効を奏する治療薬として、それらの混合物を主体とした医薬の形で広く使用されている。
【０００３】
また、分岐鎖アミノ酸は食物中タンパク質の約５０％を占めるといわれ、例えば母乳中にはイソロイシン：ロイシン：バリン＝約１：２：１の割合で含まれている。筋肉中タンパク質の約３５％は分岐鎖アミノ酸で構成されており、これらは運動により酸化分解が促進されるため、分岐鎖アミノ酸の運動前後における摂取により筋肉の分解が抑制され、運動によるダメージすなわち疲労が少ないことがわかっている。現在、このような分岐鎖アミノ酸の筋肉活性増強作用が注目され、トップアスリートのみならず健康を気遣う一般消費者の関心も高まっており、医薬品のみならず健康食品や飲料など飲食物への適用が広がっている。
【０００４】
分岐鎖アミノ酸を有効成分とする薬剤の剤型としては、輸液などの液体剤型錠剤、糖衣錠、カプセル、顆粒、粉末などの固体剤型や、溶液(水薬)の液体剤型等がある。これらのうち、顆粒状及び粉末状のものは、そのままで、またはオブラードで包み、あるいは水、温水、牛乳、ジュースなどに溶解または分散あるいは懸濁させて、またはゼリー、スープなどのほかの食品に混ぜて、経口摂取される。液体剤型の薬剤、健康食品や飲料すなわち飲食物においては、他の原材料とともに混合製品化され、摂取される。
【０００５】
しかし、分岐鎖アミノ酸は特有の苦味を呈する。さらには、衛生面から加熱殺菌の重要性は増す傾向にあるが、分岐鎖アミノ酸は加熱殺菌により苦味や特異臭が増大するため、製品の嗜好性を大幅に低下させる。従って、その経口摂取にあたっては苦味のマスキングが必要である。医薬品はもとより、健康食品や飲料においては一般消費者が摂取することからその苦味・特異臭はなおさら問題となる。分岐鎖アミノ酸の筋肉活性増強作用ならびに疲労予防回復効果が発揮されるためには、1回あたりの摂取量は４〜５gといわれ、苦味・特異臭の問題から有効量を摂取するのは容易ではない。
【０００６】
一般に香料等の添加により風味を改良する方法や、ショ糖や異性化糖などの糖類を用いて甘味を付与するとともに異味や異臭をマスキングする方法、調味料を添加する方法も採られている。しかし、香料の添加のみでは不快な風味を十分に改善することは困難で、かつ過剰の添加はかえって製品全体の風味を損なわせる恐れがある。
【０００７】
また、糖類での甘味付けあるいは調味料の添加が苦味等の低減や緩和に有効であることは知られているが、製品の味わいのバランスが損なわれやすく、特に糖類の場合はカロリーが付与されるので、近年の低カロリー志向にそぐわないばかりか、虫歯の誘発等の好ましくない結果を招く。
【０００８】
製品に過剰なカロリーを付加せずに不快な風味を改善するという目的を達するために、アスパルテーム、サッカリン、グリチルリチン酸ジカリウムなどの甘味料の添加による改善が試みられている(例えば特許文献１)。
あるいは、Ｄ−トリプトファンやＤ−スレオニンやアラニンおよび／またはグリシンの併用も試みられている(例えば特許文献２)。
【０００９】
分岐鎖アミノ酸以外の物質の苦味・渋味・特異臭の緩和あるいは低減に関しても、従来多大な努力がなされている。モノまたはジグリセリドとポリカルボン酸とのエステルの金属塩又はアミノ塩類を含有させることで、苦味、えぐ味、渋味などの不快な味が改善されることが報告されている（例えば特許文献３）
【００１０】
他には、吸着体(シリカゲルや合成吸着樹脂)により苦味物質を除去する方法（例えば特許文献４)、シクロデキストリンなど包接化合物を用いる方法(例えば特許文献５)、ペプチド等の苦味成分を酵素により分解除去する方法(例えば特許文献６)、グリシン及び／またはアラニン添加する方法(例えば特許文献７)、ホエータンパク質などを添加する方法(例えば特許文献８)、ホスファチジン酸等のリン脂質を添加する方法(例えば特許文献９)などである。
【００１１】
【特許文献１】特許第３３６８８９７
【特許文献２】特開平７−１１８１５０
【特許文献３】特開平８−３３２０５１
【特許文献４】特公昭６２−６１５６９、特開昭６０−９１９６９
【特許文献５】特公昭５９−３１６７９、特開平２−２１７７６８
【特許文献６】特開平２−２０７７６８
【特許文献７】特開昭６２−４１２５８
【特許文献８】特許第３２７２４５３
【特許文献９】特許第３４１９９５７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
しかしながら、例えばＤ−トリプトファンなどのアミノ酸やグリチルリチン酸ジカリウムの併用では添加物自身の特異な呈味が製品に影響を及ぼす恐れがあり、またアスパルテーム、サッカリンなどの甘味料を添加した場合も、少量の添加ではマスキング効果が十分みられず、多量に添加するとそれらの異質かつ人工的な甘味質が必ずしも好ましいとは言えないものであった。その他の手法においても、苦味・特異臭の緩和あるいは低減効果は必ずしも十分ではないか、添加物自身が飲食物等に付与する呈味や違和感が問題となっていた。
【００１３】
以上のように、従来、分岐鎖アミノ酸およびそれらのペプチドが苦味・特異臭を有し、それをマスキングする適切な方法が乏しかったために、各種疾患患者への分岐鎖アミノ酸大量投与は容易でなく、また健康意識の高い一般消費者が気軽に摂取でき、かつ効果と良味質を兼ね備えた分岐鎖アミノ酸配合製品はなかった。
【００１４】
本発明の目的は、イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸及びそれらを含むペプチドを含有する飲食物、医薬品および医薬部外品などの経口摂取または口内利用可能な製品に関し、製品の好ましい風味を維持したまま、過度のカロリーを添加せず、その苦味・渋味・特異臭を著しく低減させ、より摂取しやすくする簡便なマスキング方法およびマスキング剤を提供することである。
【発明の効果】
【００１５】
本発明者らは、鋭意検討を行った結果、イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸、及びそれらを含むペプチドから選ばれた少なくとも一種を含有する飲食物、医薬品および医薬部外品などの経口摂取または口内利用可能な製品に対し、ステビア抽出物を添加することにより、製品の好ましい風味が維持されたまま、過度のカロリーが添加されることなしに、香料その他の補助的材料を併用せずとも苦味・渋味・特異臭が著しく低減され、効率的な摂取が可能となることを見出し、本発明の完成に至った。
【００１６】
さらに、特に、ステビア抽出物に糖転移酵素を作用させ糖を転移させた、もしくは糖転移作用後にアミラーゼにて糖鎖を調節したα−グルコシル化ステビア抽出物に、ステビア抽出物よりさらに優れたマスキング効果を見出した。ステビア抽出物並びにα−グルコシル化ステビア抽出物は天然甘味料であり、各種食品の甘味料として広く使用されており安全性も極めて高いものである。以後、ステビア抽出物およびα−グルコシル化ステビア抽出物を総じてステビアと称する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明で使用するステビア抽出物は、ステビオサイド、レバウディオサイドＡなどのステビオール配糖体(ステビア甘味成分)を主成分である。キク科植物ステビアの葉部から抽出されるもので、ステビアに関しては産地や種に限定されることはない。抽出条件としては従来適応されてきたステビア甘味成分を取得する方法で良く、水、熱水、もしくは含水あるいは無水のメタノール、エタノールなどの有機溶媒にて抽出可能である。特には、抽出温度5〜100℃、抽出時間1〜24時間の範囲の条件で行うのが好ましい。また、特開昭51−23300号公報に記載されているように、水あるいは熱水抽出時に、甘味成分の抽出を効果的に行うために、石灰等でｐＨを１０程度に調整することがあるが、これらの補助薬剤の使用については、特に制限はない。
【００１８】
上記方法にて取得したステビア抽出物は、抽出終了後、抽出液から残渣を分離除去したものを用いる。この残渣を分離する方法としては、自然沈降分離あるいは強制ろ過等から適宜選択できるが、効率を優先する場合には、加圧ろ過が好適である。残渣を分離除去した抽出液はこのままでも利用可能であるが、必要に応じて濃縮あるいは乾燥させて用いる。また、この濃縮液を水で希釈あるいは乾燥物を水に再溶解した後、吸着法、例えばイオン交換樹脂を用いて不純物を除去したものや、ハイポーラスポリマー（例えば、アンバーライトＸＡＤ−７ＨＰ、オルガノ（株）製）のカラムに吸着させた後、親水性溶媒で溶出し濃縮したもの、あるいはこれらを乾燥させたものも使用できる。また、ステビア抽出物はステビア甘味料としてとして認可、販売されているものでも利用可能である。
【００１９】
また、ステビア抽出物にα−グルコシル化糖化合物を糖供与体として、α−グルコシル糖転移酵素を用いて糖を転移させたもの、及び付加した糖数をアミラーゼなどにより調節して製造したα−グルコシル化ステビア抽出物を用いることができる。具体的な製法については、特公平５−２２４９８号公報、特公昭５７−１８７７９号公報に記載されている。酵素反応にて製造したα−グルコシル化ステビア抽出物は、デキストリンなどの糖供与体を除去しない未精製のものでも樹脂等によってこれらを精製したものでも利用可能である。また、ステビア甘味料として認可、販売されているものでも利用可能である。
【００２０】
さらに、α−グルコシル化ステビア抽出物の中でも、α−グルコシルステビオール配糖体総量に対して、α−モノグルコシルステビオサイド、α−ジグルコシルステビオサイド、α−モノグルコシルレバウディオサイドＡ、α−ジグルコシルレバウディオサイドＡの合計量が５０％以上(重量比)であり、かつステビア抽出物のβ−グルコシルステビオールに対するα−グルコシル基の平均付加数が１．０〜２．５であるものは、ステビア抽出物と同様に飲食物等の苦味・渋味・特異臭を低減させる効果を有するとともに、それ自身の甘味質がシャープで切れがよく、かつ雑味や異臭を呈さないことから、本目的を達成するのに最良である。当該α−グルコシル化ステビア抽出物は、詳しくは、特公平５−２２４９８に記載の方法にて製造できる。
【００２１】
α−グルコシル化ステビア抽出物の製造に用いられるα−グルコシル糖転移酵素としては例えば、バチルス・マセランス（Bacillus maceranns）、バチラス・メガテリウム（Bacillus megaterium)、バチラス・ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermophilus）などのバチルス属起源のサイクロデキストリングルコシルトランスフェラーゼが上げられる。α−１，４グルコシダーゼにはα−アミラーゼ、β−アミラーゼ、グルコアミラーゼが用いられるが、α−モノグルコシルステビオサイド、α−ジグルコシルステビオサイド、α−モノグルコシルレバウディオサイドA、α−ジグルコシルレバウディオサイドＡの含有量を上げるにはグルコアミラーゼを用いるのが好ましい。サイクロデキストリングルコシルトランスフェラーゼとα−１，４グルコシダーゼによる酵素反応は、ｐＨ３〜８、反応温度は３０〜８０℃で行うが、サイクロデキストリングルコシルトランスフェラーゼによる糖転移反応はｐＨ５〜７、温度５０〜７０℃が好ましく、α−１，４グルコシダーゼによる糖鎖分解反応はｐＨ４〜７、温度４０〜７０℃が好ましい。酵素量は反応時間に応じて適度に添加すれば良い。
【００２２】
本発明で使用するステビア抽出物は、ステビオサイド、レバウディオサイドAなどのステビオール配糖体(ステビア甘味成分)が主成分である。キク科植物ステビアの葉部から抽出されるもので、ステビアに関しては産地や種に限定されることはない。抽出条件としては従来適応されてきたステビア甘味成分を取得する方法で良く、水、熱水、もしくは含水あるいは無水のメタノール、エタノールなどの有機溶媒にて抽出可能である。特には、抽出温度5〜100℃、抽出時間1〜24時間の範囲の条件で行うのが好ましい。また、特開昭51−23300号公報に記載されているように、水あるいは熱水抽出時に、甘味成分の抽出を効果的に行うために、石灰等でｐＨを１０程度に調整することがあるが、これらの補助薬剤の使用については、特に制限はない。
【００２３】
上記方法にて取得したステビア抽出物は、抽出終了後、抽出液から残渣を分離除去したものを用いる。この残渣を分離する方法としては、自然沈降分離あるいは強制ろ過等から適宜選択できるが、効率を優先する場合には、加圧ろ過が好適である。残渣を分離除去した抽出液はこのままでも利用可能であるが、必要に応じて濃縮あるいは乾燥させて用いる。また、この濃縮液を水で希釈あるいは乾燥物を水に再溶解した後、吸着法、例えばイオン交換樹脂を用いて不純物を除去したものや、ハイポーラスポリマー（例えば、アンバーライトＸＡＤ−７ＨＰ、オルガノ（株）製）のカラムに吸着させた後、親水性溶媒で溶出し濃縮したもの、あるいはこれらを乾燥させたものも使用できる。また、ステビア抽出物はステビア甘味料としてとして認可、販売されているものでも利用可能である。
【００２４】
また、ステビア抽出物に澱粉、デキストリンなどを糖供与体として、α−グルコシル糖転移酵素を用いて糖を転移させたもの、及び付加した糖数をアミラーゼなどにより調節して製造したα−グルコシル化ステビア抽出物を用いることができる。具体的な製法については、特公平５−２２４９８号公報、特公昭５７−１８７７９号公報に記載されている。酵素反応にて製造したα−グルコシル化ステビア抽出物は、デキストリンなどの糖供与体を除去しない未精製のものでも樹脂等によってこれらを精製したものでも利用可能である。また、ステビア甘味料として認可、販売されているものでも利用可能である。
【００２５】
さらに、α−グルコシル化ステビア抽出物の中でも、α−グルコシルステビオール配糖体総量に対して、α−モノグルコシルステビオサイド、α−ジグルコシルステビオサイド、α−モノグルコシルレバウディオサイドA、α−ジグルコシルレバウディオサイドAの合計量が50%以上(重量比)であり、かつステビア抽出物のβ−グルコシルステビオールに対するα−グルコシル基の平均付加数が１．０〜２．５であるものがステビア抽出物と同様に、飲食物等の苦味・渋味・特異臭を低減させる効果を有するとともに、それ自身の甘味質がシャープで切れがよく、かつ雑味や異臭を呈さないことから、本目的を達成するのに最良である。
【００２６】
α−グルコシルステビオール配糖体総量に対して、α−モノグルコシルステビオサイド、α−ジグルコシルステビオサイド、α−モノグルコシルレバウディオサイドA、α−ジグルコシルレバウディオサイドAの合計量が５０％以上(重量比)であり、かつステビア抽出物のβ−グルコシルステビオールに対するα−グルコシル基の平均付加数が１．０〜２．５であるα−グルコシル化ステビア抽出物は、例えば以下に記載の方法にて製造できる。
【００２７】
ステビア抽出物（ステビア葉部から常法により水またはアルコールを用いて抽出し非甘味成分を抽出除去したものであり、市販の通常抽出品及び調整品も含む）をメタノール等の親水性有機溶媒と水との混合溶媒を用いて晶析し原料中のレバウディオサイドＡの含有量を９０％以上に調製した。上記の方法により得られた原料に、サイクリデキストリングルコシルトランスフェラーゼを用いてグルコースを付加させ、さらにα−１，４グルコシダーゼより糖付加したグルコースを加水分解することにより、α−グルコシルステビオール配糖体総量に対しα−グルコシルレバウディオサイドＡの含有量が９０％以上（重量比）でかつα−グルコシルステビオール配糖体総量に対しα−モノグルコシルレバウディオサイドＡ、α−ジグルコシルレバウディオサイドＡの合計量が５０％以上（重量比）もしくは９０％以上であるであるα−グルコシル化ステビア抽出物を得た。なお、純度１００％のレバウディオサイドＡを原料として用いる事により、α−グルコシルステビオール配糖体総量に対しα−グルコシルレバウディオサイドＡの含有量が１００％（重量比）でかつα−グルコシルステビオール配糖体総量に対しα−モノグルコシルレバウディオサイドＡ、α−ジグルコシルレバウディオサイドＡの合計量が１００％（重量比）のα−グルコシル化ステビア抽出物を得る事が出来る。
【００２８】
サイクロデキストリングルコシルトランスフェラーゼはバチルス・マセランス（Bacillus maceranns）、バチラス・メガテリウム（Bacillus megaterium)、バチラス・ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermophilus）などのバチルス属起源のものが上げられる。α−１，４グルコシダーゼにはα−アミラーゼ、β−アミラーゼ、グルコアミラーゼが用いられるが、α−モノグルコシルレバウディオサイドＡ、α-ジグルコシルレバウディオサイドＡの含有量を上げるにはグルコアミラーゼを用いるのが好ましい。サイクロデキストリングルコシルトランスフェラーゼとα−１,４グルコシダーゼによる酵素反応は、ｐＨ３〜８、反応温度は３０〜８０℃で行うが、サイクロデキストリングルコシルトランスフェラーゼによる糖転移反応はｐＨ５〜７、温度５０〜７０℃が好ましく、α−１，４グルコシダーゼによる糖鎖分解反応はｐＨ４〜７、温度４０〜７０℃が好ましい。酵素量は反応時間に応じて適度に添加すれば良い。
【００２９】
本発明におけるステビアの飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品への添加量は、そのマスキング効果を示す濃度であれば特に限定されないが、一般に体積当たり、ステビオール骨格として１ｐｐｍ以上であれば充分な効果を得ることが可能である。また、ステビアの添加量に特に上限はないが、経済性、添加効果及び本来の風味に与える影響を考慮すると、１％以下が好ましい。従って、本発明のステビアがその効果を充分に発揮するためには、飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品に対して、ステビオール骨格として１ｐｐｍ〜１％添加することが好ましい。さらに望ましくは３ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍ添加することが好ましい。
【００３０】
なお、ステビアを飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品に対して５０ｐｐｍ以上添加すると、甘味が同時に付与されるが、ステビアにより付与された甘味は自然で違和感がないので、製品に対して悪影響を及ぼすものではない。従ってステビアは苦味・特異臭のマスキング剤と甘味料の両機能を兼ね備えるものである。
【００３１】
本発明にて使用されるイソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸及びその原料は一般的に発酵法で製造されているものを粉砕したものか、あるいは水に溶解できる状態のものであればその限りではない。また、ペプチド類も既存のタンパク質の加水分解物から分離精製したもの、化学合成法により合成したものなどが使用できる。これらの分岐鎖アミノ酸の、飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品中に占める割合は、特に定めるものではない。３種を併用する場合は、その摂取量のバランスは、ヒトの必須アミノ酸必要量バランスを考慮すると、重量比としてイソロイシン：ロイシン：バリン＝１．０：１．３〜２．０：１．０〜１．５が目安となるが、これに限定されない。
【００３２】
ここでいう飲食物は粉末、固形状、半固形状、液状いずれの形状をとるものであってかまわない。また医薬品および医薬部外品などの経口摂取または口内利用可能な製品は、粉末などの固形製剤、シロップ等の液状製剤、化粧水、マウスウォッシュ、歯磨き等、経口摂取や顔面・口腔などに用いられるものであれば特に限定されることはない。
これらは、イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸及びそれらを含むペプチドのいずれか一種以上とステビアを含有することを必須とするが、副材料として、一般的な食品や医薬品原料、無機酸、甘味料、香料などの添加物が添加されていてもかまわない。
【００３３】
本発明にて併用できる無機酸としては例えば、炭酸、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、ホウ酸等があげられるが、特に、炭酸、塩酸、リン酸等が好ましい。また、有機酸としては例えば、クエン酸、無水クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、アスコルビン酸、酢酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、マロン酸、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、他のアミノ酸塩等があげられるが、特に、クエン酸、無水クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、アスコルビン酸、酢酸等が好ましい。
【００３４】
本発明にて併用できる甘味料としては、例えばショ糖、果糖、異性化糖、グルコース、マルトース、パラチノース、トレハロース、フラクトオリゴ糖などの糖類・オリゴ糖類、マンニトール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール等の糖アルコール類、アスパルテーム、サッカリン、サッカリンナトリウム、アセスルファムＫ、スクラロースなどの合成甘味料、グリチルリチン酸、グリチルリチン酸モノアンモニウム、グリチルリチン酸二ナトリウム、グリチルリチン酸三ナトリウム、ソーマチンなどの天然高甘味度甘味料等である。
【００３５】
また、本発明において、着香目的に各種香料を併用することもできる。例えば、レモンフレーバー、オレンジフレーバー、グレープフレーバー、グレープフルーツフレーバー、チョコレートフレーバー、ＤＬ−メントール、バニラエッセンス等があげられる。
本発明に示す、ステビアと、イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸及びそれらを含むペプチドから選ばれた一種以上を含有する飲食物、医薬品および医薬部外品などの経口摂取または口内利用可能な製品は、撹拌翼を有する溶解槽、高圧ホモジナイザー、混練機など、飲食物、医薬品、医薬部外品の製造時に通常使用される機器を使用して問題なく製造できる。また、飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品に通常使用できるいかなる製造用剤および原材料を添加してもかまわない。
【実施例】
【００３６】
以下に具体的な実施例を示すが、本発明はこれに限定されるものではない。なお、アミノ酸、ペプチド類試薬レベルの製品を和光純薬（株）から購入した。
苦味・特異臭低減効果、および甘味質の判定基準を以下に示す。試験は、１０人のパネラーで行い、その平均から算出した。
【００３７】
【表１】
2005336078.tif 000002
【００３８】
【表２】
2005336078.tif 000003
【００３９】
［実施例１］
表１に示す分岐鎖アミノ酸水溶液に対して、ステビア抽出物として「ステビアフィンＨ： 日本製紙ケミカル（株）製」、α−グルコシル化ステビア抽出物として「ＳＫスイートＦＺ： 日本製紙ケミカル（株）製、α−グルコシル基平均付加数１．５）」を添加した溶液を調製した。これらについて、苦味、特異臭の２点について官能試験を行い評価した。表２の結果から明らかなように、本発明品では苦味低減効果、特異臭低減効果が確認された。また、その甘味質は自然で良好なものであった。
【００４０】
【表３】
2005336078.tif 000004
【００４１】
【表４】
2005336078.tif 000005
【００４２】
［比較例１］
ショ糖、アスパルテームを使用する他は、実施例１と同様の操作により溶液を要請し、同様に官能試験を行い評価した。
表３に明らかなように、ショ糖では甘味質が不自然でない代わりに、苦味や特異臭の低減効果はあまり認められなかった。アスパルテームにおいては、苦味低減効果が認められた代わりに、人工的な呈味による甘味質の不良化が見受けられた。
【００４３】
【表５】
2005336078.tif 000006
【００４４】
［実施例２］
分岐鎖アミノ酸水溶液（ロイシン、イソロイシン、バリン）の０．５％水溶液及び分岐鎖アミノ酸を含むペプチド（アラニルロイシン、アラニルイソロイシン、アラニルバリン）の０．２％水溶液に対して、前述のステビア抽出物（ステビアフィンＨ、ＳＫスイートＦＺ）及び、ショ糖、アスパルテームを添加（２００ｐｐｍ）した溶液を調製した。これらについて、苦味について官能試験を行い評価した。表４の結果から明らかなように、本発明品では苦味低減効果が確認された。
【００４５】
【表６】
2005336078.tif 000007
【手続補正書】
【提出日】平成16年6月28日(2004.6.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ステビア抽出物を有効成分とすることを特徴とする、分岐鎖アミノ酸または分岐鎖アミノ酸を含むペプチドのマスキング剤。
【請求項２】
ステビア抽出物が、α−グルコシル化ステビア抽出物を主成分とすることを特徴とする、請求項1記載のマスキング剤。
【請求項３】
ステビア抽出物が、α−グルコシル化ステビア抽出物を主成分とし、該α−グルコシル化ステビア抽出物のα−グルコシルステビオール配糖体総量に対してα−モノグルコシルステビオサイド、α−ジグルコシルステビオサイド、α−モノグルコシルレバウディオサイドA、α−ジグルコシルレバウディオサイドAの合計量が50%以上(重量比)であり、かつステビア抽出物のβ−グルコシルステビオールに対するα−グルコシル基の平均付加数が１．０〜２．５である、請求項1記載のマスキング剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載のマスキング剤を含有させることを特徴とする、分岐鎖アミノ酸または分岐鎖アミノ酸を含むペプチドが含まれる経口用医薬品。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれかに記載のマスキング剤を含有させることを特徴とする、分岐鎖アミノ酸または分岐鎖アミノ酸を含むペプチドが含まれる食品。
【請求項６】
請求項１〜３のいずれかに記載のマスキング剤を含有させることを特徴とする、分岐鎖アミノ酸または分岐鎖アミノ酸を含むペプチドが含まれる医薬部外品。
【請求項７】
請求項１〜３のいずれかに記載のマスキング剤を含有させることを特徴とする、分岐鎖アミノ酸または分岐鎖アミノ酸を含むペプチドが含まれる化粧品。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アミノ酸、イソロイシン、ロイシン及びバリン等の分岐鎖アミノ酸、またそれら分岐鎖アミノ酸を構成成分に含むペプチドを含有する飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品の苦味・渋味・特異臭のマスキング剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
イソロイシン、ロイシン及びバリン等の分岐鎖アミノ酸は、体内で合成できない必須アミノ酸であり、肝硬変などの肝疾患あるいは腎疾患、各種の筋萎縮症のような分岐鎖アミノ酸の代謝の異常を重要な症候とする各種の疾患に対し、顕著な薬効を奏する治療薬として、それらの混合物を主体とした医薬の形で広く使用されている。
【０００３】
また、分岐鎖アミノ酸は食物中タンパク質の約５０％を占めるといわれ、例えば母乳中にはイソロイシン：ロイシン：バリン＝約１：２：１の割合で含まれている。筋肉中タンパク質の約３５％は分岐鎖アミノ酸で構成されており、これらは運動により酸化分解が促進されるため、分岐鎖アミノ酸の運動前後における摂取により筋肉の分解が抑制され、運動によるダメージすなわち疲労が少ないことがわかっている。現在、このような分岐鎖アミノ酸の筋肉活性増強作用が注目され、トップアスリートのみならず健康を気遣う一般消費者の関心も高まっており、医薬品のみならず健康食品や飲料など飲食物への適用が広がっている。
【０００４】
分岐鎖アミノ酸を有効成分とする薬剤の剤型としては、輸液などの液体剤型錠剤、糖衣錠、カプセル、顆粒、粉末などの固体剤型や、溶液(水薬)の液体剤型等がある。これらのうち、顆粒状及び粉末状のものは、そのままで、またはオブラードで包み、あるいは水、温水、牛乳、ジュースなどに溶解または分散あるいは懸濁させて、またはゼリー、スープなどのほかの食品に混ぜて、経口摂取される。液体剤型の薬剤、健康食品や飲料すなわち飲食物においては、他の原材料とともに混合製品化され、摂取される。
【０００５】
しかし、分岐鎖アミノ酸は特有の苦味を呈する。さらには、衛生面から加熱殺菌の重要性は増す傾向にあるが、分岐鎖アミノ酸は加熱殺菌により苦味や特異臭が増大するため、製品の嗜好性を大幅に低下させる。従って、その経口摂取にあたっては苦味のマスキングが必要である。医薬品はもとより、健康食品や飲料においては一般消費者が摂取することからその苦味・特異臭はなおさら問題となる。分岐鎖アミノ酸の筋肉活性増強作用ならびに疲労予防回復効果が発揮されるためには、1回あたりの摂取量は４〜５gといわれ、苦味・特異臭の問題から有効量を摂取するのは容易ではない。
【０００６】
一般に香料等の添加により風味を改良する方法や、ショ糖や異性化糖などの糖類を用いて甘味を付与するとともに異味や異臭をマスキングする方法、調味料を添加する方法も採られている。しかし、香料の添加のみでは不快な風味を十分に改善することは困難で、かつ過剰の添加はかえって製品全体の風味を損なわせる恐れがある。
【０００７】
また、糖類での甘味付けあるいは調味料の添加が苦味等の低減や緩和に有効であることは知られているが、製品の味わいのバランスが損なわれやすく、特に糖類の場合はカロリーが付与されるので、近年の低カロリー志向にそぐわないばかりか、虫歯の誘発等の好ましくない結果を招く。
【０００８】
さらに、製品に過剰なカロリーを付加せずに不快な風味を改善するという目的を達するために、アスパルテーム、サッカリン、グリチルリチン酸ジカリウムなどの甘味料の添加による改善が試みられている(例えば特許文献１)。
【０００９】
あるいは、Ｄ−トリプトファンやＤ−スレオニンやアラニンおよび／またはグリシンの併用も試みられている(例えば特許文献２)。
【００１０】
分岐鎖アミノ酸以外の物質の苦味・渋味・特異臭の緩和あるいは低減に関しても、従来多大な努力がなされている。モノまたはジグリセリドとポリカルボン酸とのエステルの金属塩又はアミノ塩類を含有させることで、苦味、えぐ味、渋味などの不快な味が改善されることが報告されている（例えば特許文献３）
【００１１】
他には、吸着体(シリカゲルや合成吸着樹脂)により苦味物質を除去する方法（例えば特許文献４)、シクロデキストリンなど包接化合物を用いる方法(例えば特許文献５)、ペプチド等の苦味成分を酵素により分解除去する方法(例えば特許文献６)、グリシン及び／またはアラニン添加する方法(例えば特許文献)、ホエータンパク質などを添加する方法(例えば特許文献８)、ホスファチジン酸等のリン脂質を添加する方法(例えば特許文献９)などである。
【００１２】
【特許文献１】特許第３３６８８９７
【特許文献２】特開平７−１１８１５０
【特許文献３】特開平８−３３２０５１
【特許文献４】特公昭６２−６１５６９、特開昭６０−９１９６９
【特許文献５】特公昭５９−３１６７９、特開平２−２１７７６８
【特許文献６】特開平２−２０７７６８
【特許文献７】特開昭６２−４１２５８
【特許文献８】特許第３２７２４５３
【特許文献９】特許第３４１９９５７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
しかしながら、例えばＤ−トリプトファンなどのアミノ酸やグリチルリチン酸ジカリウムの併用では添加物自身の特異な呈味が製品に影響を及ぼす恐れがあり、またアスパルテーム、サッカリンなどの甘味料を添加した場合も、少量の添加ではマスキング効果が十分みられず、多量に添加するとそれらの異質かつ人工的な甘味質が必ずしも好ましいとは言えないものであった。その他の手法においても、苦味・特異臭の緩和あるいは低減効果は必ずしも十分ではないか、添加物自身が飲食物等に付与する呈味や違和感が問題となっていた。
【００１４】
以上のように、従来、分岐鎖アミノ酸およびそれらのペプチドが苦味・特異臭を有し、それをマスキングする適切な方法が乏しかったために、各種疾患患者への分岐鎖アミノ酸多量投与は容易でなく、また健康意識の高い一般消費者が気軽に摂取でき、かつ効果と良味質を兼ね備えた分岐鎖アミノ酸配合製品はなかった。
【００１５】
本発明の目的は、イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸、またはそれらを含むペプチドを含有する飲食物、医薬品および医薬部外品などの経口摂取または口内利用可能な製品に関し、製品の好ましい風味を維持したまま、過度のカロリーを添加せず、その苦味・渋味・特異臭を著しく低減させ、より摂取しやすくする簡便なマスキング方法およびマスキング剤を提供することである。
【発明の効果】
【００１６】
本発明者らは、鋭意検討を行った結果、イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸、及びそれらを含むペプチドから選ばれた少なくとも一種を含有する飲食物、医薬品および医薬部外品などの経口摂取または口内利用可能な製品に対し、ステビア抽出物を添加することにより、製品の好ましい風味が維持されたまま、過度のカロリーが添加されることなしに、香料その他の補助的材料を併用せずとも苦味・渋味・特異臭が著しく低減され、効率的な摂取が可能となることを見出し、本発明の完成に至った。
【００１７】
さらに、特に、ステビア抽出物に糖転移酵素を作用させ糖を転移させた、もしくは糖転移作用後にアミラーゼにて糖鎖を調節したα−グルコシル化ステビア抽出物に、ステビア抽出物よりさらに優れたマスキング効果を見出した。ステビア抽出物並びにα−グルコシル化ステビア抽出物は天然甘味料であり、各種食品の甘味料として広く使用されており安全性も極めて高いものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本発明で使用するステビア抽出物は、ステビオサイド、レバウディオサイドAなどのステビオール配糖体(ステビア甘味成分)が主成分である。キク科植物ステビアの葉部から抽出されるもので、ステビアに関しては産地や種に限定されることはない。抽出条件としては従来適応されてきたステビア甘味成分を取得する方法で良く、水、熱水、もしくは含水あるいは無水のメタノール、エタノールなどの有機溶媒にて抽出可能である。特には、抽出温度５〜１００℃、抽出時間１〜２４時間の範囲の条件で行うのが好ましい。また、特開昭５１−２３３００号公報に記載されているように、水あるいは熱水抽出時に、甘味成分の抽出を効果的に行うために、石灰等でｐＨを１０程度に調整することがあるが、これらの補助薬剤の使用については、特に制限はない。
【００１９】
上記方法にて取得したステビア抽出物は、抽出終了後、抽出液から残渣を分離除去したものを用いる。この残渣を分離する方法としては、自然沈降分離あるいは強制ろ過等から適宜選択できるが、効率を優先する場合には、加圧ろ過が好適である。残渣を分離除去した抽出液はこのままでも利用可能であるが、必要に応じて濃縮あるいは乾燥させて用いる。また、この濃縮液を水で希釈あるいは乾燥物を水に再溶解した後、吸着法、例えばイオン交換樹脂を用いて不純物を除去したものや、ハイポーラスポリマー（例えば、アンバーライトＸＡＤ−７ＨＰ、オルガノ（株）製）のカラムに吸着させた後、親水性溶媒で溶出し濃縮したもの、あるいはこれらを乾燥させたものも使用できる。また、ステビア抽出物はステビア甘味料としてとして認可、販売されているものでも利用可能である。
【００２０】
また、ステビア抽出物に澱粉、デキストリン等を糖供与体として、α−グルコシル糖転移酵素を用いて糖を転移させたもの、及び付加した糖数をアミラーゼなどにより調節して製造したα−グルコシル化ステビア抽出物を用いることができる。具体的な製法については、特公平５−２２４９８号公報、特公昭５７−１８７７９号公報に記載されている。酵素反応にて製造したα−グルコシル化ステビア抽出物は、デキストリンなどの糖供与体を除去しない未精製のものでも樹脂等によってこれらを精製したものでも利用可能である。また、ステビア甘味料として認可、販売されているものでも利用可能である。
【００２１】
さらに、α−グルコシル化ステビア抽出物の中でも、α−グルコシルステビオール配糖体総量に対して、α−モノグルコシルステビオサイド、α−ジグルコシルステビオサイド、α−モノグルコシルレバウディオサイドＡ、α−ジグルコシルレバウディオサイドＡの合計量が50%以上(重量比)であり、かつステビア抽出物のβ−グルコシルステビオールに対するα−グルコシル基の平均付加数が１．０〜２．５であるものがステビア抽出物と同様に、飲食物等の苦味・渋味・特異臭を低減させる効果を有するとともに、それ自身の甘味質がシャープで切れがよく、かつ雑味や異臭を呈さないことから、本目的を達成するのに最良である。当該α−グルコシル化ステビア抽出物は、詳しくは、特公平５−２２４９８に記載の方法にて製造できる。
【００２２】
α−グルコシル化ステビア抽出物に用いられるサイクロデキストリングルコシルトランスフェラーゼはバチルス・マセランス（Bacillus maceranns）、バチラス・メガテリウム（Bacillus megaterium)、バチラス・ステアロサーモフィラス（Bacillus stearothermophilus）などのバチルス属起源のものが上げられる。α−１，４グルコシダーゼにはα−アミラーゼ、β−アミラーゼ、グルコアミラーゼが用いられるが、α−モノグルコシルレバウディオサイドＡ、α-ジグルコシルレバウディオサイドＡの含有量を上げるにはグルコアミラーゼを用いるのが好ましい。サイクロデキストリングルコシルトランスフェラーゼとα−１,４グルコシダーゼによる酵素反応は、ｐＨ３〜８、反応温度は３０〜８０℃で行うが、サイクロデキストリングルコシルトランスフェラーゼによる糖転移反応はｐＨ５〜７、温度５０〜７０℃が好ましく、α−１，４グルコシダーゼによる糖鎖分解反応はｐＨ４〜７、温度４０〜７０℃が好ましい。酵素量は反応時間に応じて適度に添加すれば良い。
【００２３】
本発明におけるステビア抽出物の飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品への添加量は、そのマスキング効果を示す濃度であれば特に限定されないが、一般に体積当たり、ステビオール骨格として１ｐｐｍ以上であれば充分な効果を得ることが可能である。また、ステビア抽出物の添加量に特に上限はないが、経済性、添加効果及び本来の風味に与える影響を考慮すると、１％以下が好ましい。従って、本発明のステビア抽出物がその効果を充分に発揮するためには、飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品に対して、ステビオール骨格として１ｐｐｍ〜１％添加することが好ましい。さらに望ましくは３ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍ添加することが好ましい。
【００２４】
なお、ステビア抽出物を飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品に対して５０ｐｐｍ以上添加すると、甘味が同時に付与されるが、ステビア抽出物により付与された甘味は自然で違和感がないので、製品に対して悪影響を及ぼすものではない。従ってステビア抽出物は苦味・特異臭のマスキング剤と甘味料の両機能を兼ね備えるものである。
【００２５】
本発明にて使用されるイソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸及びその原料は一般的に発酵法で製造されているものを粉砕したものか、あるいは水に溶解できる状態のものであればその限りではない。また、ペプチド類も既存のタンパク質の加水分解物から分離精製したもの、化学合成法により合成したものなどがしようできる。これらの分岐鎖アミノ酸の、飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品などの経口摂取または口内利用可能な製品中に占める割合は、特に定めるものではない。３種を併用する場合は、その摂取量のバランスは、ヒトの必須アミノ酸必要量バランスを考慮すると、重量比としてイソロイシン：ロイシン：バリン＝１．０：１．３〜２．０：１．０〜１．５が目安となるが、これに限定されない。
【００２６】
ここでいう飲食物は粉末、固形状、半固形状、液状いずれの形状をとるものであってかまわない。また医薬品および医薬部外品などの経口摂取または口内利用可能な製品は、粉末などの固形製剤、シロップ等の液状製剤、化粧水、マウスウォッシュ、歯磨き等、経口摂取や顔面・口腔などに用いられるものであれば特に限定されることはない。
【００２７】
これらは、イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸及びそれらを含むペプチドのいずれか一種以上とステビア抽出物を含有することを必須とするが、副材料として、一般的な食品や医薬品原料、無機酸、甘味料、香料などの添加物が添加されていてもかまわない。
【００２８】
本発明にて併用できる無機酸としては例えば、炭酸、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、ホウ酸等があげられるが、特に、炭酸、塩酸、リン酸等が好ましい。また、有機酸としては例えば、クエン酸、無水クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、アスコルビン酸、酢酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、マロン酸、Ｌ−グルタミン酸塩酸塩、他のアミノ酸塩等があげられるが、特に、クエン酸、無水クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、アスコルビン酸、酢酸等が好ましい。
【００２９】
本発明にて併用できる甘味料としては、ショ糖、果糖、異性化糖、グルコース、マルトース、パラチノース、トレハロース、フラクトオリゴ糖などの糖類・オリゴ糖類、マンニトール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール等の糖アルコール類、アスパルテーム、サッカリン、サッカリンナトリウム、アセスルファムＫ、スクラロースなどの合成甘味料、グリチルリチン酸、グリチルリチン酸モノアンモニウム、グリチルリチン酸二ナトリウム、グリチルリチン酸三ナトリウム、ソーマチンなどの天然高甘味度甘味料等である。
【００３０】
また、本発明において、着香目的に各種香料を併用することもできる。例えば、レモンフレーバー、オレンジフレーバー、グレープフレーバー、グレープフルーツフレーバー、チョコレートフレーバー、ＤＬ−メントール、バニラエッセンス等があげられる。
【００３１】
本発明に示す、ステビア抽出物と、イソロイシン、ロイシン、バリン等の分岐鎖アミノ酸及びそれらを含むペプチドから選ばれた一種以上を含有する飲食物、医薬品および医薬部外品などの経口摂取または口内利用可能な製品は、撹拌翼を有する溶解槽、高圧ホモジナイザー、混練機など、飲食物、医薬品、医薬部外品の製造時に通常使用される機器を使用して問題なく製造できる。また、飲食物、医薬品、医薬部外品、化粧品に通常使用できるいかなる製造用剤および原材料を添加してもかまわない。
【実施例】
【００３２】
以下に具体的な実施例を示すが、本発明はこれに限定されるものではない。なお、アミノ酸、ペプチド類試薬レベルの製品を和光純薬工業（株）から購入した。
苦味・特異臭低減効果、および甘味質の判定基準を以下に示す。試験は、１０人のパネラーで行い、その平均から算出した。
【００３３】
苦味・特異臭判定基準
2005336078.tif 000008
【００３４】
甘味質判定基準
2005336078.tif 000009
【００３５】
［実施例１］
表１に示す分岐鎖アミノ酸水溶液に対して、ステビア抽出物として「ステビアフィンＨ： 日本製紙ケミカル（株）製」、α−グルコシル化ステビア抽出物として「ＳＫスイートＦＺ： 日本製紙ケミカル（株）製、α−グルコシル基平均付加数１．５）」を添加した溶液を調製した。これらについて、苦味、特異臭の２点について官能試験を行い評価した。
【００３６】
表２の結果から明らかなように、本発明品では苦味低減効果、特異臭低減効果が確認された。また、その甘味質は自然で良好なものであった。
2005336078.tif 000010
【００３７】
2005336078.tif 000011
【００３８】
［比較例１］
ショ糖、アスパルテームを使用する他は、実施例１と同様の操作により溶液を要請し、同様に官能試験を行い評価した。
表３に明らかなように、ショ糖では甘味質が不自然でない代わりに、苦味や特異臭の低減効果はあまり認められなかった。アスパルテームにおいては、苦味低減効果が認められた代わりに、人工的な呈味による甘味質の不良化が見受けられた。
2005336078.tif 000012
【００３９】
［実施例２］
分岐鎖アミノ酸水溶液（ロイシン、イソロイシン、バリン）の０．５％水溶液、分岐鎖アミノ酸を含むペプチド（アラニルロイシン、アラニルイソロイシン、アラニルロイシンアラニルロイシン）の０．２％水溶液に対して、前述のステビア抽出物（ステビアフィンＨ、ＳＫスイートＦＺ）及び、ショ糖、アスパルテームを添加（２００ｐｐｍ）した溶液を調製した。これらについて、苦味について官能試験を行い評価した。
【００４０】
表４の結果から明らかなように、本発明品では苦味低減効果が確認された。
2005336078.tif 000013