(57)【要約】【課題】含イオウ化合物とチオール型ビタミンB1とを結合させる方法において、無臭の含イオウ化合物とビタミンB1とを直接に反応結合させられるようにすること【解決手段】アリイン、イソアリイン、メチインから選択される一又は二以上の含イオウ化合物とチオール型ビタミンB1とを過酸化水素を添加して反応させて結合する【図面】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アリイン、イソアリイン、メチインから選択される一又は二以上の含イオウ化合物とチオール型ビタミンB1とを過酸化水素を添加して反応させる結合方法。
【請求項２】
加熱してアリイナーゼを失活させた生ニンニクから形成したニンニクエキス抽出液とチオール型ビタミンB1とを過酸化水素を添加して反応させる結合方法。
【請求項３】
蒸煮、熱水又はマイクロ波を利用して生ニンニクの加熱処理を行う請求項２に記載の結合方法。
【請求項４】
煮沸水中で少なくとも４０分間生ニンニクを煮沸した後、ニンニクを潰した状態で静置冷却させ、その後濾過濃縮してニンニクエキス抽出液を形成する請求項２又は３に記載の結合方法。
【請求項５】
請求項１乃至４のいずれかに記載の結合方法により製造した健康食品原料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、無臭の含イオウ化合物にチオール型ビタミンB1を反応結合させる方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ニンニクの成分から形成されるアリシンにチオール型ビタミンB1を作用させるとアリチアミンが生成されることが知られており（非特許文献１参照）、この化合物は活性持続型のビタミンB1として盛用されている。
アリシンは、ニンニクを切ったり、すりおろしたり、或いは潰したりする際にその成分であるアリイン、イソアリイン、メチインなどの含イオウ化合物が、同じくニンニク成分であるアリイナーゼによって分解されて形成される極めて不安定な物質である。また、アリシンは、アリルスルフィドやビニルジチインなどの揮発性の有機イオウ化合物を含んでいて特有の臭気を発する物質である。
そのため、アリチアミン自体も、ビタミンB1の脱臭作用によって若干臭気は低減させられるものの、ニンニクの特有の臭気を含んでいる。
【０００３】
従来ビタミン学会などにおいては、水溶性の成分であるアリイン、イソアリイン、メチインにはビタミンB1との結合能がない、とするのが定説であった。
しかし、本発明者らは、ニンニク中のアリイン、イソアリイン、メチインなどの含イオウ化合物が無臭で安定した化合物であることに着目し、水溶性であってもこれらの化合物に対してチオール型ビタミンB1のＳＨ基の部分をＳＳ結合させること、すなわちアリイナーゼ酵素を用いずにニンニクB1の結合化合物であるアリシン−ジアリルジスルフィドを化学的に作り出すことについて鋭意研究した結果、両者を有効に結合させることに成功し、ニンニク由来の特有の臭気を発しない活性持続型ビタミンB1を得ることができた。
【０００４】
ニンニクを加熱処理してアリイナーゼを失活させることによってニンニク特有の臭気の発生を阻止することができる。
特許文献１には、沸騰水２リットルにニンニク１Kgを投入して火を去り、２０分間浸漬した後ニンニクを摩砕し、アスベルギルス・ニゲルより抽出した繊維素分解酵素を使用してニンニクエキスを抽出し、これとビタミンB1とを結合させる方法が開示されている。
しかしながら、この方法では沸騰水２リットル中にニンニク１Ｋｇを投入して火を去り、そのまま２０分間浸漬させた後でニンニクを摩砕する方法を採用しているから、ニンニクはアリイナーゼを失活させる程度には加熱させることは不可能である。したがって、摩砕によってアリシンが生成されてしまうから、形成されたニンニクエキスから特有の臭気が発することになる。また、この方法では、ニンニクエキスの生成に丸一日以上の時間を要し、極めて生産効率の悪いものであった。
【非特許文献１】齋藤洋監修「ニンニクの科学」株式会社朝倉書店発行
【特許文献１】特公昭４３−８４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、含イオウ化合物とチオール型ビタミンB1とを結合させる方法において、無臭の含イオウ化合物とビタミンB1とを直接に反応結合させられるようにすることを課題としたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
この技術的課題を解決するための第一の技術的手段は、アリイン、イソアリイン、メチインから選択される一又は二以上の含イオウ化合物とチオール型ビタミンB1とを過酸化水素を添加して反応させて結合することである。
過酸化水素を添加することによって、含イオウ化合物が水溶性であっても、これにビタミンB1のＳＨ基の部分を確実に結合させることができる。
【０００７】
第二の技術的手段は、加熱してアリイナーゼを失活させた生ニンニクからニンニクエキス抽出液を形成し、この抽出液とチオール型ビタミンB1とを過酸化水素を添加して反応させて結合することである。
加熱してアリイナーゼを失活させてしまうと、生ニンニクをすりおろしたり、切断したり或いは潰ししたりしても、ニンニクに含まれている含イオウ化合物からアリシンが生成されることがない。したがって、含イオウ化合物を無臭のまま抽出液内に含ませることができ、上記と同様に、ビタミンB1のＳＨ基の部分を確実に結合させることができる。
【発明の効果】
【０００８】
その結果、ニンニク由来の特有の臭気を発しない活性持続型ビタミンB1を得ることができる利点がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
含イオウ化合物であるアリイン、イソアリイン、メチインはニンニクなどの天然素材から得られるものの他、化学合成されたものをも使用することができる。いずれも無臭の安定した化合物である。
前者の天然素材としては、加熱処理したニンニクの抽出液に含まれているものを利用することができる。後者の合成素材において、アリインは、塩基性下Ｌ−システインと臭化アリルから得られるＳ−アリル−Ｌ−システインを過酸化水素にて酸化し、得られたジアステレオマーをアセトン−水で分別再結晶することによって得られるし、イソアリインもアミノ酸から容易に作り出すことができる。
【００１０】
ニンニクの加熱処理は、蒸煮、熱水又はマイクロ波を利用して行うことができる。
熱水方法による場合には、例えば、煮沸水中で少なくとも４０分間生ニンニクを煮沸した後、ニンニクを潰した状態で静置冷却させ、その後濾過濃縮するとニンニクエキス抽出液が得られるから、簡便に含イオウ化合物を含有するエキスを生成することができる。この場合、ニンニクの潰れ具合が不十分な場合には適宜攪拌などしてこれを十分に潰しておくことが望ましい。
【００１１】
過酸化水素の添加量は、０．０１〜０．０３ml／ビタミンB1６０μｇ程度とするのが望ましい。添加量が少ないとビタミンB1の結合度が低く、多くするとビタミンB1が失活したり分解してしまう可能性がある。なお、、過酸化水素は、ビタミンB1の量、反応温度及び反応時間によってもビタミンB1との結合程度が異なるので、温度及び時間をも勘案して望ましい添加量が選択される。
【実施例１】
【００１２】
この実施例では、熱水を利用してニンニクを加熱処理してニンニクエキスを抽出する方法を使用した。
生ニンニク１００ｇを沸騰水９００ml中に投入し、時々攪拌しながら９０分間煮た。ニンニクは煮崩れしてほとんど原形をとどめていないが、これを冷却しながら攪拌してニンニクをさらに潰して１時間静置し、濾過後エバポレーターで濃縮して１００mlにする。これに９５％エタノール３００mlを加え攪拌した後４℃まで冷却し５時間静置したものを遠心分離機にて４０００rpm
、１０分で分離させた後、上清を取りエバポレーターにてエタノールを除去し、１００mlに調整して加熱抽出ニンニク液（以下単にニンニク液と言う。）を得た。
ニンニク液を試験管に１０mlとりｐＨを７．９０に調整した後、これにあらかじめ作っておいたビタミンB1塩酸基の標準液（０．０１mg／ml）をカセイソーダによってｐＨを７．９０に調整したものを０．０３mg／３ml加え、６０℃で１時間振とうして放置した。次いで３０％過酸化水素０．０１mlを加えて６０℃で１時間振とうして放置してニンニクエキスにビタミンB1を結合させた化合物を形成した（実施例１）。
【実施例２】
【００１３】
また、上記と同様の方法により、ビタミンB1塩酸基の標準液の添加量を０．０６mg／６mlとした、ニンニクエキスにビタミンB1を結合させた化合物を形成した（実施例２）。
いずれの化合物も、ニンニク特有の臭気をほとんど発することはなかった。
【実施例３】
【００１４】
人工合成により作ったアリイン（Ｓ−アリルシスティンスルホキシド）７mgを量り、７mlの純水で溶解して試験管に２ml注ぎ入れた後、これにｐＨを７．９０に調整したビタミンB1塩酸基の標準液０．０６mg／６mlを加えて６０℃で１時間放置した。次いで３０％過酸化水素０．０１mlを加えて６０℃で１時間振とうして放置して人工合成アリインにビタミンB1を結合させた化合物を形成した（実施例３）。
【実施例４】
【００１５】
また、人工合成により作ったイソアリイン（Ｓ−アリルシスティン）を原料として、上記と同様の方法により、人工合成イソアリインにビタミンB1を結合させた化合物を形成した（実施例４）。
これらの化合物も、ニンニク特有の臭気はなかった。
【００１６】
上記の実施例１〜４によって得られた化合物におけるビタミンB1の結合能を、パラアミノアセトフェノン法によって検量線Ａ％を求め表−１に示した。
検量線Ａ％を求めるに際しては、過酸化水素を添加する前の化合物の状態において求めたＡ％をａ欄に、過酸化水素添加後の化合物について求めたＡ％をｂ欄に、さらにｂ欄の検量試料にＬ−システイン１０mg／mlを０．５ml添加したものについて求めたＡ％をｃ欄に示した。
他方、検量線を比較するための試料として、ビタミンB1塩酸基の標準液（０．０１mg／ml）を用いてビタミンB1２０、３０、４０、６０μｇの標準液を作り、それぞれ比較試料＜イ−２＞＜イ−３＞＜イ−４＞＜イ−６＞とした。
各比較試料についてそのまま求めた検量線Ａ％を表−１のａ欄に示した。また、比較試料＜イ−３＞＜イ−６＞については、これに３０％過酸化水素０．０１mlを加えて６０℃で１時間放置したものについて求めたＡ％をｂ欄に、さらにｂ欄の検量試料にＬ−システイン１０mg／mlを０．５ml添加したものについて求めたＡ％をｃ欄に示している。
なお、ｃ欄は、システインの還元作用によって結合後解離したビタミンB1を示すものである。
【００１７】
上記の各試料について株式会社島津製作所の分光光度計２０Ａを使用したパラアミノアセトフェノン法による検量線を作成した結果は表−１の通りである。なお、検量線Ａ％については、３回検量した数値の平均を示した。
（表−１）
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【００１８】
試料＜イ−６＞の検量結果から明らかなように、ニンニク液を加えずに単独で作用させた場合とシステインを加えて還元させた場合とで数値に変動はないから、ビタミンB1同志が結合することがないことを示している。
実施例におけるｃ欄ではｂ欄に比べて多量にビタミンB1が検量されているが、これは、これらの化合物と結合していたビタミンB1が結合状態での不顕化作用によって測定されなかったものの、システインの還元作用によって解離して測定されたことを示している。
したがって、アリイン、イソアリイン、メチイン等の含イオウ化合物に過酸化水素を添加してビタミンB1を作用させることによって、これらの化合物にビタミンB1が確実に結合していることを確認することができる。
【００１９】
次に、上記実施例におけるニンニク液１００mlにビタミンB1塩酸基の標準液０．０６mg／６mlを結合させる際に、過酸化水素の添加量及び反応温度変化させるとビタミンB1の検出量及び不顕化率がどのように変化するかを調べた結果、表−２の結果となった。
（表−２）
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【００２０】
表−２から明らかなように、過酸化水素の添加量は、ビタミンB1の、反応温度によってバラツキが見られるが、ビタミンB1の検出量及び不顕化率を勘案すると、ビタミンB1６０μｇについては、反応温度を６０℃において過酸化水素を０．０１〜０．０３ml添加するのが最も好ましい結果を示している。
【産業上の利用可能性】
【００２１】
なお、請求項１乃至４に記載した反応結合方法により製造した含イオウ化合物にビタミンB1を結合させたものは、薬剤として利用する他、健康食品原料として利用することができる。