(57)【要約】【課題】メラニン色素産生自体を直接抑制するのではなく、ＳＯＤ様作用により紫外線照射等で生じたフリーラジカルを消去し、メラニン色素の過剰な生成を抑えることが可能な経口投与用組成物、及び当該経口投与用組成物を含有する美白剤、飲食品を提供する。【解決手段】ローズマリー抽出エキス、セージ抽出エキス、及び夏枯草抽出エキスからなる群から選ばれる１種または２種以上を有効成分とすることを特徴とする経口投与用組成物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ローズマリー抽出エキス、セージ抽出エキス及び夏枯草抽出エキスからなる群から選ばれる１種または２種以上を有効成分として含有することを特徴とする経口投与用組成物。
【請求項２】
請求項１記載の経口投与用組成物を含有する美白剤。
【請求項３】
請求項１記載の経口投与用組成物を含有する飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、経口投与用組成物、及びそれを含有する美白剤、飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
美容上の観点から、シミやソバカスに悩んでいる人が多い。シミやソバカスあるいはクスミやシワといった肌の老化は、紫外線照射、酸化的刺激、ホルモン異常、遺伝的要素などに大きく影響を受けていると言われており、その中でも紫外線照射の影響が最も大きいと考えられている。
【０００３】
皮膚表面上に紫外線を受けると、組織内でフリーラジカル（活性酸素）が発生し、この活性酸素によって、細胞損傷や炎症が惹起されると、炎症系のケミカル・メディエーターを介して、色素沈着を惹起すると言われている。また、紫外線照射に伴い、皮膚スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）活性は低下するが、ＳＯＤを全身投与することによりＳＯＤ活性は低下を免れることが報告されている（例えば、非特許文献１参照。）。また、紫外線照射などの影響により、メラノサイト刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）や副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）など複数のメラノサイト活性化因子の分泌が促進され、色素沈着を誘発することも知られている。
【０００４】
一方、色素沈着は本来、生体防御反応の一つと考えられている。すなわち、皮膚表面細胞上で遺伝情報であるＤＮＡを紫外線照射などから防御するために、表皮細胞に存在する色素細胞（メラノサイト）内のメラノソームと呼ばれるメラニン生成顆粒においてメラニン色素が産生される。このようにして生成したメラニン色素が隣接する細胞に拡散し、表皮細胞のケラチノサイトに蓄積され、皮膚の新陳代謝によりケラチノサイトは通常角質層となり、やがて皮膚から剥がれ落ちると考えられているが、必要以上に過剰にメラニン色素が産生された場合には、表皮内や真皮層に沈着して、その結果、シミやシワとなって残存すると考えられている。そして、上記のメラニン色素は大きく分けて色の濃いユウメラニンと淡色のフェオメラニンの２種類があり、いずれも紫外線の防御に寄与すること、また紫外線照射時にはユウメラニン合成が活性化されることも知られている。
【０００５】
上記のことを鑑みて、従来、シミやシワの生成を防止する物質の探索が行われてきた。その一つの方法として、メラニン色素産生に関与する酵素のチロシナーゼを阻害することでメラニン色素産生自体を抑制する作用を有する物質を用いる方法が挙げられる。また、そのような物質の投与ルートとしては外用の他に経口投与ルートが主に用いられている。
【０００６】
外用の美白剤としては、具体的には、メラニン色素産生自体を抑制するハイドロキノン誘導体（特許文献１参照）、チロシナーゼ阻害による美白効果を期待したエラグ酸（例えば、非特許文献２参照）、コウジ酸（特許文献２、３参照）、アルブチン（特許文献４参照）などが既に提案されている。また、経口投与としては、チロシナーゼを阻害しメラニン色素生成を抑制するバラの抽出エキス又はキクの抽出エキス（特許文献５参照）や、バラ科ピラカンタ属植物の溶媒抽出物（特許文献６参照）などが既に提案されており、これらの成分は沈着してしまったメラニン色素を退色させるのに有効であることが示されている。
【０００７】
しかし、一般的に皮膚は薬剤を透過し難く、皮膚の状態の他に、薬剤の化学構造や性状および使用した基剤により、薬剤の吸収性は大きく影響されることが知られているばかりか、衣服等と擦れるなどにより薬剤が除去されやすく、皮膚に吸収されるまでそのままの状態を保たねばならなかったり、外気との接触等により、経皮吸収性が変化してしまうと
いう問題があった。
【０００８】
一方、経口投与の場合には、上記のような吸収性等に係わる問題は少ないものの、チロシナーゼ阻害剤の場合にはメラニン色素の産生を必要以上に抑制してしまい、その結果として、生体に必要な紫外線防御能が減弱してしまうという問題があった。
【０００９】
そこで最近では、チロシナーゼを阻害することなく、すなわち、メラニン合成に直接影響することなく、紫外線等で活性化したメラノサイト活性のみを抑制する経口美白剤（特許文献７参照）が提案されている。
【００１０】
【特許文献１】特開昭６３−２４６３１１号公報
【特許文献２】特公昭３２−８１００号公報
【特許文献３】特開平１−２７５５２４号公報
【特許文献４】特開昭６３−８３１４号公報
【特許文献５】特開２００１−４８８０１号公報
【特許文献６】特開２００１−１３９４８２号公報
【特許文献７】特開２００２−２２０３３３号公報
【非特許文献１】Yoshiki Miyachi：J. Invest, Dermatol., 89, 111（1987）
【非特許文献２】立花新一ら、Fragrance J,9,37(1997)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、チロシナーゼを阻害することによってメラニン色素産生自体を直接抑制するのではなく、ＳＯＤ様作用により紫外線照射等で生じたフリーラジカルを消去し、メラニン色素の過剰な生成を抑えること、すなわち色素沈着あるいはシミやソバカスの増悪化を予防することが可能な経口投与用組成物、及び当該経口投与用組成物を含有する美白剤、飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは上記目的を達成すべく、鋭意研究した結果、ローズマリー抽出エキス、セージ抽出エキス、及び夏枯草抽出エキスからなる群から選ばれる１種又は２種以上を経口投与することにより、メラノサイトでのメラニンの生成を直接抑制することなく、すなわち必要以上にメラニンの生成を抑制することなく、ＳＯＤ様作用により紫外線照射などにより生じたフリーラジカルを消去することによって過剰なメラニン生成を抑制し、その結果として、優れた美白作用を示すことを見出し、本発明を完成させた。
【００１３】
すなわち、本発明は、ローズマリー抽出エキス、セージ抽出エキス、及び夏枯草抽出エキスからなる群から選ばれる１種または２種以上を有効成分として含有することを特徴とする経口投与用組成物に関する。
【００１４】
また、上記経口投与用組成物を含有する美白剤、飲食品に関する。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、メラノサイトでのメラニンの生成を直接抑制することなく、紫外線照射等により生じたフリーラジカルを、ＳＯＤ様作用により消去することで、優れた美白効果を得ることができる。従って、本発明は、必要以上にメラニン生成を抑えることないため、身体に対する負荷が少なく、さらに、ストレス等内因的に生じる酸化ストレス等に対しても優れた美白効果を得ることができる。このことは、最近のオゾン層の破壊により、増加傾向にある紫外線による害を直接防御することができ、さらに、必要以上にメラニンの生成を抑えないため、本来の皮膚の防御機構を保持することができるということである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００１７】
本発明に用いられるローズマリー抽出エキスは、Rosmarinus officinalis（ローズマリー、マンネンロウ）の葉から抽出されたエキスを意味する。
【００１８】
セージ抽出エキスは、Salvia officinalis（セージ、サルビア）の葉から抽出されたエキスを意味する。
【００１９】
夏枯草抽出エキスは、Prunella vulgarisの花穂から抽出されたエキスを意味する。
【００２０】
上記抽出エキスは、通常、原料生薬を極性または非極性溶媒を用いて常法によって抽出して得られる抽出液、濃縮液、希釈物及び乾燥物を意味する。
【００２１】
抽出方法としては、加熱抽出（煎出）、加温抽出（温浸）、低温抽出（冷浸）、パーコレーション法などが挙げられる。
【００２２】
抽出溶媒は、水のほかにエタノール、酢酸エチル、ヘキサン、アセトン、エーテル、１−プロパノ−ルなどの有機溶媒が挙げられ、それらを単独で用いるか、または２種類以上を適宜混合して使用することができる。
【００２３】
本発明の経口投与用組成物において、ローズマリー抽出エキス、セージ抽出エキス、及び夏枯草抽出エキスからなる群から選ばれる１種または２種以上の混合物の成人一人当たりの１日摂取量は、固形分換算で０．００５ｇ〜２０ｇ、好ましくは０．０５〜５ｇである。当該範囲内であれば、効果的に美白効果を得ることができる。また、これらを通常、成人１日当たり１〜３回に分けて経口投与することが好ましい。
【００２４】
本発明の経口投与用組成物は、必須成分である上記化合物の他に通常の医薬品及び飲食品において使用されるアスコルビン酸、コウジ酸、アルブチン、胎盤抽出物、ビタミンＥ、システイン、グルタチオン等の公知の美白剤、ビタミンＢ類、ビタミンＤ、アミノ酸、ペプチド、蛋白質等を配合することができる。
【００２５】
本発明の経口投与用組成物の剤型は、特に制限されるものではなく、固形剤、半固形剤、液剤等とすることができる。具体的には錠剤、細粒剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、チュアブル剤、発泡剤、ドライシロップ剤、ゼリー剤、ゼリードロップ剤、液剤等の剤型が挙げられる。
【００２６】
また、本発明の経口投与用組成物は、健康食品、栄養補助食品、医薬部外品、医薬品等の用途に好適に用いることができる。
【００２７】
本発明の経口投与用組成物を美白剤、飲食品として用いる場合、ローズマリー抽出エキス、セージ抽出エキス、及び夏枯草抽出エキスからなる群から選ばれる１種または２種以上を混合したものをそのままの形で使用することもできるが、その他の成分として、通常の食品添加物及び医薬品添加物を使用することができる。例えば結晶セルロース、ショ糖脂肪酸エステル、白糖等の賦形剤を加え、例えば乾式顆粒打錠法あるいは湿式顆粒打錠法により造粒して製造することができる。また、上記経口投与用組成物をデキストリン等の賦型剤、香料、色素等と共にペレット、顆粒、錠剤、又はゼラチン等で被覆してカプセル剤とすることもできる。
【００２８】
さらに、通常、液状の食品及び医薬品に使用される乳化剤、分散助剤、界面活性剤、甘味料、酸味料、糖アルコール、フレーバー、芳香物質等賦形剤を加えて溶解し、液体の状態として製造することもできる。
【００２９】
例えば、美白剤としては、上記のように本発明の経口投与用組成物を製剤化したものを使用することができる。
【００３０】
また、飲食品としては、経口投与用組成物をそのまま、あるいは粉末、液状、ゲル状あるいは固形状の食品の形態に加工することによって使用することができる。具体的には、粉末スープ、ケーキミックス等の粉末食品、ジュース、清涼飲料、茶、スープ等の飲料、ゼリー、プリン、ヨーグルト等のゲル状又は半固形状食品、パン、クッキー、飴、ガム等の固形食品、又はアイスクリーム等の冷菓等が挙げられる。
【００３１】
以下に試験例を挙げて本発明を詳細に説明する。尚、試験に用いたローズマリー抽出エキス、セージ抽出エキス、夏枯草抽出エキスは、下記実施例において記載された方法により得られたものを使用した。
【００３２】
[試験例１]〔ＳＯＤ様活性、及びチロシナーゼ阻害作用試験〕
（１）ＳＯＤ様活性作用の測定方法
ＳＯＤ様活性の測定方法は、例えば、Ukedaら（H.Ukeda：Anal. Biochem.,251,206-209(1997)）による還元型ホルマザンが水可溶性であるテトラゾリウム塩ＸＴＴ（3'-[1-[(phenylamino)-carboxyl]-3,4-tetrazolium]-bis(4-methoxy-6-nitro)benzenesulfonic acid
hydrate）を用いて測定した。これは、従来、ＮＢＴ法が抱えていたキサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）との直接的相互作用などの問題点を完全に改善した新しいＳＯＤ活性測定法である。
２．５ｍＬの緩衝液（５０ｍＭ）が入った試験管に３ｍＭキサンチン、３ｍＭ  ＥＤＴＡ、１ｍＭ  ＸＴＴ、及び試料溶液をそれぞれ０．１ｍＬ加え、直ちにトリガーとして５７ｍＵ／ｍＬ  ＸＯＤを０．１ｍＬ加えた。２５℃で２０分間反応させた後、４７０ｎｍにおける吸光度を測定した。緩衝液としては、炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ１０．２）を用いた。試料を添加したもの（xantine（＋））の吸光度とともに、キサンチンを添加しないもの（xantine(−)）の吸光度を測定した。
尚、これは、成分が直接ＸＴＴを還元しＯ2−によらず還元型ホルマザンを生成しないことを確認し、真のＯ2−消去による還元型ホルマザン生成の抑制量を測定するために設定した。さらに、成分の色に基づく４７０ｎｍの吸光度を知るためにＸＴＴを添加しない系（ＸＴＴ(−)）を設けた。
阻害率は試料を添加しないときの吸光度をコントロールとして、以下の式で求めた。
阻害率（％）＝
｛コントロール−（xantine（＋））−（xantine(−)）｝／コントロール×１００
【００３３】
（２）チロシナーゼ阻害作用の測定方法
チロシナーゼ阻害作用の測定方法は、Ｌ−ドーパを基質としてチロシナーゼ反応より生成したドーパクロムを比色法により測定した。酵素溶液はtyrosinase  from  mushroom，6050unit/mg（sigma社製）を０．０４ｍｇ／ｍLに、基質溶液はL−Dopa（和光社製）を２ｍMに、それぞれ０．１ｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を用いて調製した。分光光度計キュベット（１ｃｍ）に、基質溶液１ｍＬ、試料溶液１ｍＬ及びリン酸緩衝液１ｍＬを加え、攪拌後３分間３７℃でプレインキュベートし、酵素溶液０．１ｍＬを加えてすばやく攪拌した後、ゼロ点補正をし、反応グラフを描き、反応初速度（ΔＡ／ｍｉｎ）を求めた。
【００３４】
（３）試験結果
上記試験の結果を、表１に記載する。表１の結果から、明らかなように試験試料にはＳＯＤ様活性が認めら、チロシナーゼ阻害作用は殆ど認められなかった。尚、同試験において検討した参考例の試料については、チロシナーゼ阻害活性はビタミンＣで顕著な阻害作用が確認されたが、ＳＯＤ様活性はビタミンＣ自身の還元作用により測定不能であり、また、ビタミンＥでは活性が非常に弱い結果となった。
【表１】
2005112817.tif 000002
【００３５】
[試験例２] 〔紫外線照射後のメラノサイト活性化抑制試験〕
（１）試験方法
ＤＢＡ／２ＮＣｒｊマウス（雄性、６週齢）６匹を１群として用いた。体重を測定し、表２に示す被験物質を０．５％カルメロースナトリウム溶液に溶解させて用いた。８群のＤＢＡ／２ＮＣｒｊマウスに試験試料、比較試料及び対照試料をゾンデで直接胃の中に投与した。その後、投与１時間後に医療用紫外線照射装置デルマレー（クリニカル・サプライ社製）を用いて、中波長紫外線を５分間０．０９Ｊ／ｃｍ２照射した。被検試料投与と照射を１日１回、９日間行った。次に１０日目にＤＢＡ／２ＮＣｒｊマウスの両耳を採取し、外側の皮膚が上になるように置き、左右の耳から１箇所ずつ、６ｍｍのトレパンで皮膚を採取した。その後、外側の皮膚を採取し、定法に従ってメラニン色素を産生しているメラノサイトの指標であるド−パ陽性メラノサイトの染色を行い、顕微鏡下でメラノサイト数を数え、１ｍｍ2当たりのメラノサイト数を計測し、抑制率を求めた。なお、１群のＤＢＡ／２ＮＣｒｊマウスは中波長紫外線を照射せず、同様に実験を行った（以下、非照射群という）。
抑制率（％）＝
｛（対照群−非照射群）−（各試料群−非照射群）｝／（対照群−非照射群）×１００
【表２】
2005112817.tif 000003
【００３６】
（２）検定方法
結果の判定は、本発明の試験試料投与群及び対照試料投与群のそれぞれのドーパ陽性メ
ラノサイト数を比較して行った。また、有意差検定はダネット（ｄｕｎｎｅｔｔ）検定を用いた。尚、試料投与量は、２０ｍｇ／ｋｇとした。
【００３７】
（３）試験結果
上記試験結果を、表３に記載する。表３の結果から明らかなように、いずれの試料も有意なドーパ陽性メラノサイト抑制作用が確認され、経口投与による色素沈着防止効果が認められた。一方、比較試料のビタミンＣについては、同条件での紫外線照射によるドーパ陽性メラノサイトの増加に対して有意な抑制効果は確認できなかった。
【表３】
2005112817.tif 000004
【００３８】
以上の結果より、ローズマリー抽出エキス、セージ抽出エキス、夏枯草抽出エキスには、メラニン合成に直接影響することなく、紫外線照射等で生成したフリーラジカルにより活性化したメラノサイト活性のみを抑制するという特性があることが確認された。
【実施例】
【００３９】
以下に、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明する。また、本実施例で用いた各種抽出エキスは、以下の製造方法により得られたものを使用した。
【００４０】
〔製造例〕
（１）ローズマリー抽出エキス
ローズマリー葉１００ｇを刻み、水１Ｌを加えて沸騰水浴で加熱攪拌し、ろ過後、ろ液をエバポレーターで減圧濃縮し、濃縮液を凍結乾燥した。
【００４１】
（２）セージ抽出エキス
セージ葉１００ｇを刻み、水１Ｌを加えて沸騰水浴で加熱攪拌し、ろ過後、ろ液をエバポレーターで減圧濃縮し、濃縮液を凍結乾燥した。
【００４２】
（３）夏枯草抽出エキス
夏枯草１００ｇを刻み、水１Ｌを加えて沸騰水浴で加熱攪拌し、ろ過後、ろ液をエバポレーターで減圧濃縮し、濃縮液を凍結乾燥した。
【００４３】
実施例１（錠剤）
（処方）
ローズマリー抽出エキス                ３３重量部
乳糖                                  ６１重量部
合成ケイ酸アルミニウム                  ５重量部
ステアリン酸マグネシウム                １重量部
【００４４】
（製造方法）
上記の各成分を混合し、その混合物を打錠機で１錠３００ｍｇに打錠して１錠中にローズマリー抽出エキスを１００ｍｇ含む錠剤を得る。
【００４５】
実施例２（錠剤）
（処方）
ローズマリー抽出エキス            １６．７重量部
セージ抽出エキス                  １６．７重量部
乳糖                                  ６１重量部
合成ケイ酸アルミニウム                  ５重量部
ステアリン酸マグネシウム                １重量部
【００４６】
（製造方法）
上記の各成分を混合し、その混合物を打錠機で１錠３００ｍｇに打錠して１錠中にローズマリー抽出エキス及セージ抽出エキスを各５０ｍｇ含む錠剤を得る。
【００４７】
実施例３（飲料）
（処方）
分量（１００ｍＬ中）
夏枯草抽出エキス                        ２００ｍｇ
エリスリトール                        ２０００ｍｇ
スクラロース                              ２０ｍｇ
クエン酸                                ２８０ｍｇ
リンゴ酸                                ２００ｍｇ
安息香酸ナトリウム                        ４０ｍｇ
パラオキシ安息香酸ブチル                ３．０ｍｇ
パラオキシ安息香酸エチル                ７．０ｍｇ
アセロラフレーバー                      １００μＬ
────────────────────────────
精製水を加え全量                        １００ｍＬ
【００４８】
（製造方法）上記処方の１００倍量を秤量し、各成分を精製水約６Ｌに加熱溶解し、精製水で１０Ｌ付近まで加え、冷却し、５０℃付近でアセロラフレーバーを加え、更に精製水を加えて１０Ｌとし、１００ｍＬ容量のガラス瓶に充填した。
【００４９】
実施例４
（処方）              ｍｇ/６錠
ゼリー状の中心錠
寒天末                                  ７２．３ｍｇ
白糖                                １０１７．６ｍｇ
水飴                                １９７４．６ｍｇ
ローズマリー抽出エキス                １２０．０ｍｇ
精製水                              １３１５．５ｍｇ
――――――――――――――――――――――――――――
素錠合計                            ４５００．０ｍｇ
糖衣層
（プレミックス）
精製白糖                            ２４００．０ｍｇ
アスコルビン酸                        ３００．０ｍｇ
（バインダー）
精製白糖                              ３２１．０ｍｇ
アラビアゴム                            ２９．４ｍｇ
精製水                                １５９．６ｍｇ
――――――――――――――――――――――――――――
糖衣合計                            ３２１０．０ｍｇ
【００５０】
（製造方法）
ゼリー状の素錠は、加熱した精製水に寒天末を加え溶解した後、精製白糖及び水飴を加えて溶かし、この混合液にローズマリー抽出エキスを添加してゼリー素地を調製する。このゼリー素地を１個当たり０．５〜１．５ｇの素地が充填できるスターチモールドに注入し、成型、乾燥後、固化物を取り出し、スターチ粉を取り除いてゼリー状の素錠とする。
【００５１】
次に、アスコルビン酸を、精製白糖と均一に混合したプレミックス及び、精製白糖とアラビアゴムを精製水に溶解したバインダーを調製する。
【００５２】
糖衣パンにゼリー状の素錠を入れ、これを回転させながら、温風を送って予め素錠をあたためた後、素錠の全表面が濡れる程度のバインダーを加えて均一にし、すばやくプレミックスを加えて均一にコーティングし、適度に乾燥させる。次いで、バインダーを加え、さらにプレミックス粉末糖衣物を加えてコーティングを行う。このコーティング操作を所定回数繰り返し、ゼリー状ドロップ剤が得られる。
【産業上の利用可能性】
【００５３】
本発明に係るローズマリー抽出エキス、セージ抽出エキス、及び夏枯草抽出エキスからなる群から選ばれる１種または２種以上を有効成分として含有する経口投与用組成物は、経口投与により優れた美白作用を奏する。また、本発明の経口投与用組成物は、メラニン色素産生自体を直接抑制するのではなく、紫外線照射等で生じたフリーラジカルを消去し、メラニン色素の過剰な生成を抑えるものであることが明らかである。従って、肌の紫外線防御機能を損なうことなく、美容上の問題となる過剰なメラニンの生成を抑えるので、内服で手軽に美容が得られる美白剤、あるいは飲食品として好適に用いることができる。