(57)【要約】【課題】  蛍光色素を腿色を軽減し、長期間コントラストの良い蛍光観察を可能とする培養顕微装置を提供する。【解決手段】  培養された生体細胞１２９を収容する培養ケース１０３に対し励起光を与えるために落射光ファイバ１２４を介して外部照明部１２３が設けられるとともに、励起光により生体細胞１２９から発生する蛍光を観察する標本観察部１２１と、培養ケース１０３を透過する励起光を導入し励起光を減光させる減光手段１２２とを具備している。【選択図】図１
2005128344.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養された標本を収容する培養ケースと、
前記培養ケース内の標本に励起光を与えるための照明手段と、
前記励起光により前記標本から発生する光を観察する標本観察手段と、
前記培養ケースを透過する前記励起光を導入し、該励起光を減光させる減光手段と
を具備したことを特徴とする培養顕微装置。
【請求項２】
前記培養ケースは、複数個並べて配置され、
前記標本観察手段と前記減光手段は、前記培養ケースを挟んで相対向して配置され、且つ前記培養ケースの並び方向に沿って移動可能にしたことを特徴とする請求項１記載の培養顕微装置。
【請求項３】
前記減光手段は、励起光を吸収する吸光部材が設けられることを特徴とする請求項１または２記載の培養顕微装置。
【請求項４】
前記標本の透過照明観察を行うための照明光源をさらに有し、該照明光源からの光を前記減光手段に代えて、前記培養ケースを挟んで前記標本観察手段と相対向する位置に入射可能にしたことを特徴とする請求項１記載の培養顕微装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物や植物などの生体細胞を長期間観察するため、一定な環境条件下で生かし続けた生体細胞の観察を行なう培養顕微装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
生化学等の分野では生体の機能解析のために、動物や植物の生体細胞を適当な条件下で生かし続け、生体細胞の挙動観察が一般に行われている。
【０００３】
生体細胞の挙動観察には、抗原抗体反応を利用した蛍光色素や、遺伝子導入した蛍光蛋白を用いた蛍光観察が一般に用いられている。このような蛍光観察が用いられるのは、分子レベルでの観察が可能で、分布や分子の挙動観察が可能なためである。ここで、蛍光とは物質に外部から紫外線などのエネルギーを与えると、その物質の原子が基底状態から励起状態に遷移し、その後基底状態に戻るときに特定の光を発する現象である。外部からの紫外線は励起光と一般に呼ばれる。
【０００４】
一方、蛍光色素や蛍光蛋白は励起光を当て続けると、蛍光の強さが段々弱くなったり、または消えてしまう腿色と呼ばれる現象がある。そのため蛍光観察では、できるだけ弱い励起光を用い、且つ観察時以外は試料に励起光を当てななどの配慮が必要とされている。
【０００５】
図７は、特許文献１に開示された培養顕微装置の概略構成を示すもので、培養容器５０１内の試料台５０２に設置した複数の培養ケース５０３に収容される生体試料を培養容器５０１内で培養し、この生体試料をＣＣＤ５０４で撮像して観察するようにしている。この場合、生体試料の蛍光像の観察は、蛍光測定用励起光源５０５からの光を励起光出射ファイバ５０６より出射し、ミラー５０７，５０８で反射し、対物レンズ５０９を経て培養ケース５０３の生体試料に励起光として照射し、生体試料から発せられる蛍光を対物レンズ５０９を介してＣＣＤ５０４で撮像し、一方、生体試料の透過光像の観察は、白色光源５１０からの光を白色光出射ファイバ５１１を介して培養ケース５０３の生体試料に照射し、生体試料を透過した光像を対物レンズ５０９を介してＣＣＤ５０４で撮像するようにしている。
【特許文献１】特開２００３−９３０４１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ところが、このように構成した特許文献１のものは、励起光出射ファイバ５０６より出射し対物レンズ５０９を経て培養ケース５０３の生体試料に照射される励起光の多くは、培養ケース５０３を透過し、ファイバ５１１の出射端部を支持する固定アーム５１２の表面で反射することがあり、この反射した励起光が観察対象以外の生体試料を励起して蛍光色素を腿色させてしまうおそれがある。また、仮に、培養ケース５０３を透過した励起光の全てを白色光出射ファイバ５１１で捕獲するようにできたとしても、白色光源５１０のランプ等で反射した光が白色光出射ファイバ５１１を戻り蛍光色素を腿色させてしまうこともある。
【０００７】
本発明は上記事情に鑑みてなされたもので、蛍光色素を腿色を軽減し、長期間コントラストの良い蛍光観察を可能とする培養顕微装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
請求項１記載の発明は、培養された標本を収容する培養ケースと、前記培養ケース内の標本に励起光を与えるための照明手段と、前記励起光により前記標本から発生する光を観察する標本観察手段と、前記培養ケースを透過する前記励起光を導入し、該励起光を減光させる減光手段とを具備したことを特徴としている。
【０００９】
請求項２記載の発明は、請求項１記載の発明において、前記培養ケースは、複数個並べて配置され、前記標本観察手段と前記減光手段は、前記培養ケースを挟んで相対向して配置され、且つ前記培養ケースの並び方向に沿って移動可能にしたことを特徴としている。
【００１０】
請求項３記載の発明は、請求項１または２記載の発明において、前記減光手段は、励起光を吸収する吸光部材が設けられることを特徴としている。
【００１１】
請求項４記載の発明は、請求項１記載の発明において、前記標本の透過照明観察を行うための照明光源をさらに有し、該照明光源からの光を前記減光手段に代えて、前記培養ケースを挟んで前記標本観察手段と相対向する位置に入射可能にしたことを特徴としている。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、培養ケースを透過する、励起に用いられなかった励起光は、減光手段に導かれて減光され、標本側に戻ることがないので、観察対象以外の標本の蛍光色素などの槌色を大幅に軽減することができ、コントラストの良い像を長期間観察することができる。
【００１３】
また、本発明によれば、減光手段に代えて、照明光源からの光を培養ケースを挟んで観察光学手段と相対向する位置に入射させるのみで、標本の透過照明観察を行うこともできる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下、本発明の実施の形態を図面に従い説明する。
【００１５】
（第１の実施の形態）
図１は、本発明が適用される培養顕微装置の概略構成、図２は、同培養顕微装置の要部を拡大した概略構成を示している。図において、１０１は培養顕微装置本体で、この培養顕微装置本体１０１には、培養容器１０２が設けられている。
【００１６】
培養容器１０２には、培養ケース支持棚１０４が複数段（図示例では３段）の設けられている。それぞれの培養ケース支持棚１０４には、複数（図示例では３個）の培養ケース１０３が支持されている。培養ケース支持棚１０４は、図２に示すように培養ケース１０３より少し大きな凹部１０４ａと、凹部１０４ａの底面には培養ケース１０３より少し小さな開口１０４ｂが設けられている。これにより、培養ケース支持棚１０４は、凹部１０４ａを用い培養ケース１０３の位置決めを行うとともに、培養ケース１０３内部の生体細胞１２９を開口１０４ｂを通して観察できるようになっている。
【００１７】
ここで、培養ケース１０３は、培養液を添加したシャーレやマイクロウェルプレート等からなるもので、標本としての生体細胞１２９が必要量取り分けられ収納されている。また、培養ケース１０３は、無色透明なガラスまたは底面にガラスを貼り付けた樹脂材料で作られている。
【００１８】
培養容器１０２には、バルブ１３５が接続されている。このバルブ１３５は、培養容器１０２内に二酸化炭素を供給するためのものである。また、培養容器１０２の底面には、温度調整するための温調ヒータ１３７と水を溜めた蒸発皿１３６が配置され、蒸発皿１３６の下部に加湿ヒータ１４０が配置されている。さらに、培養容器１０２内部には、センサ１４１が設けられている。このセンサ１４１は、培養容器１０２内部の二酸化炭素濃度、湿度、温度を検知するためのものである。
【００１９】
バルブ１３５、温調ヒータ１３７、加湿ヒータ１４０およびセンサ１４１には、制御部１３８が接続されている。制御部１３８は、センサ１４１により培養容器１０２内部の二酸化炭素濃度、湿度、温度が検知されると、この検知出力に応じてバルブ１３５を開閉して二酸化炭素を供給したり、加湿ヒータ１４０をＯＮにして蒸発皿１３６から水を蒸発させ水蒸気の供給をしたり、あるいは温調ヒータ１３７をＯＮにして培養容器１０２内部の温度を調整するための熱を供給するなど各種の制御を行なうためのものである。これにより、生体細胞１２９に必要な培養容器１０２内部の環境条件を一定に保ち、生体細胞１２９を培養容器１０２内で長期間生き続けられるようになっている。
【００２０】
一方、培養容器１０２の底面には、一対の第１のガイド１０５と第１の移動ネジ１０６が紙面と垂直方向に平行に配置されている。
【００２１】
第１のガイド１０５は、固定部１０５ａと移動部１０５ｂを有し、固定部１０５ａに対して移動部１０５ｂは直線方向に移動可能になっている。第１の移動ネジ１０６は、ネジ部１０６ａとナット部１０６ｂを有し、ナット部１０６ｂの回転を規制した状態でネジ部１０６ａを回転させることで、ナット部１０６ｂを直動させるようになっている。
【００２２】
第１のガイド１０５の移動部１０５ｂと第１の移動ネジ１０６のナット部１０６ｂには第１の移動部１０７が取付けられている。また、第１の移動ネジ１０６のネジ部１０６ａには、第１の駆動部１０９が取付けられている。第１の駆動部１０９は、制御部１３８の指示により第１の移動ネジ１０６のネジ部１０６ａを回転駆動するもので、ネジ部１０６ａの回転はナット部１０６ｂの直進運動に変換され、第１の移動部１０７を第１のガイド１０５でガイドされる方向（紙面と垂直な方向）に移動可能にしている。
【００２３】
第１の移動部１０７には、培養容器１０２の底面に対し直立した一対のガイド取付面１０７ａ，１０７ｂが相対向して設けられている。ガイド取付面１０７ａには、第２のガイド１１０が設けられ、また、ガイド取付面１０７ｂには、第２の移動ネジ１０８が設けられている。これら第２のガイド１１０と第２の移動ネジ１０８は、第１のガイド１０５と第１の移動ネジ１０６と同じ構成をしたものである。つまり、第２のガイド１１０は、ガイド取付面１０７ａに固定される固定部１１０ａと移動部１１０ｂを有し、固定部１１０ａに対して移動部１１０ｂを直線方向に可能にしている。また、第２の移動ネジ１０８は、ガイド取付面１０７ａに固定されるネジ部１０８ａとナット部１０８ｂを有し、ネジ部１０８ａを回転させることで、ナット部１０８ｂを直動させるようになっている。
【００２４】
第２のガイド１１０の移動部１１０ｂと第２の移動ネジ１０８のナット部１０８ｂには第２の移動部１１１が取付けられている。また、第２の移動ネジ１０８のネジ部１０８ａには、第２の駆動部１３９が取付けられている。第２の駆動部１３９は、制御部１３８の指示により第２の移動ネジ１０８のネジ部１０８ａを回転駆動するもので、ネジ部１０８ａの回転はナット部１０８ｂの直進運動に変換され、第２の移動部１１１を第２のガイド１１０でガイドされる方向（図示上下方向）に移動可能にしている。
【００２５】
第２の移動部１１１は、矩形状の枠体からなるもので、ガイド取付面１０７ａ、１０７ｂに沿った胴部１１１ａ、１１１ｂと培養ケース支持棚１０４と平行なガイド支持部１１１ｃ、１１１ｄを有している。
【００２６】
ガイド支持部１１１ｃには、第３のガイド１１３と第３の移動ネジ１１４が設けられ、ガイド支持部１１１ｄには、第４のガイド１１５と第４の移動ネジ１１６が設けられている。第３のガイド１１３と第４のガイド１１５は、第１のガイド１０５と同じ構成をしたものである。また、第３の移動ネジ１１４と第４の移動ネジ１１６も第１の移動ネジ１０６と同じ構成をしたものである。ここで、第３の移動ネジ１１４は、ガイド支持部１１１ｃに固定されるネジ部１１４ａとナット部１１４ｂを有し、ネジ部１１４ａを回転させることで、ナット部１１４ｂを直動させるようになっている。第４の移動ネジ１１６もガイド支持部１１１ｄに固定されるネジ部１１６ａとナット部１１６ｂを有し、ネジ部１１６ａを回転させることで、ナット部１１６ｂを直動させるようになっている。
【００２７】
第３の移動ネジ１１４のナット部１１４ｂには、標本観察手段としての標本観察部１２１が取り付けられている。また、第３の移動ネジ１１４のネジ部１１４ａには、第３の駆動部１１７が取付けられている。第３の駆動部１１７は、制御部１３８の指示により第３の移動ネジ１１４のネジ部１１４ａを回転駆動するもので、ネジ部１１４ａの回転はナット部１１４ｂの直進運動に変換され、標本観察部１２１を第３のガイド１１３により培養ケース支持棚１０４に沿った方向（図示左右方向）に移動可能にしている。
【００２８】
第４の移動ネジ１１６のナット部１１６ｂには、減光手段１２２が取り付けられている。また、第４の移動ネジ１１６のネジ部１１６ａには、第４の駆動部１１８が取付けられている。第４の駆動部１１８は、制御部１３８の指示により第４の移動ネジ１１６のネジ部１１６ａを回転駆動するもので、ネジ部１１６ａの回転はナット部１１６ｂの直進運動に変換され、減光手段１２２を第４のガイド１１５により培養ケース支持棚１０４に沿った方向（図示左右方向）に移動可能にしている。
【００２９】
この場合、制御部１３８は、第３の駆動部１１７による第３の移動ネジ１１４と、第４の駆動部１１８による第４の移動ネジ１１６を同時に駆動し、標本観察部１２１と減光手段１２２を培養ケース１０３を挟んで相対向させ、標本観察部１２１の光軸Ｘと減光手段１２２の光軸Ｙが一致するように制御するようにしている。
【００３０】
標本観察部１２１には、照明手段として落射光ファイバ１２４を介して外部照明部１２３が接続されている。外部照明部１２３は、水銀ランプ、キセノンランプまたはレーザ光源等を備えたものである。
【００３１】
標本観察部１２１は、培養ケース１０３内の生体細胞１２９を観察する観察光学系として第１のレンズ１３４、励起フィルタ１２５、対物レンズ１３１、ダイクロイックミラー１２７、吸収フィルタ１２６、結像レンズ１４４を有し、また、撮像手段としてＣＣＤなどの撮像素子１２８を有している。ここで、励起フィルタ１２５は、蛍光色素の励起に必要な波長のみ透過する特性を備えたものである。ダイクロイックミラー１２７は、波長の短い励起光を反射し、波長の長い蛍光を透過するような特性を有している。また、吸収フィルタ１２６は、蛍光色素の発する蛍光を選択的に透過するような特性を有している。
【００３２】
そして、外部照明部１２３からの照明光を落射光ファイバ１２４を介して標本観察部１２１に導入すると、落射光ファイバ１２４から出射された光は、第１のレンズ１３４を介して対物レンズ１３１の後側焦点面に収束する光となり、励起フィルタ１２５で選択され、ダイクロイックミラー１２７で反射し、対物レンズ１３１の後側焦点面に収束する。また、対物レンズ１３１の後側焦点面に収束した光は対物レンズ１３１により平行光となり照明範囲内を均一に照明し、培養ケース１０３内の生体細胞１２９の蛍光色素を励起する励起光１４２として照射される。励起光１４２により励起された蛍光色素は、励起光１４２より波長の長い蛍光１４３となり、対物レンズ１３１で平行光となり、ダイクロイックミラー１２７、吸収フィルタ１２６を透過し、結像レンズ１４４を介して撮像素子１２８の撮像面に投影され撮像される。
【００３３】
ところで、照明範囲の中での生体細胞１２９は点在し、且つ生体細胞１２９内で観察対象の部位は更に限定され少なくなる。つまり、照明範囲内の大部分の励起光１４２は培養ケース１０３を透過して減光手段１２２側に達する。
【００３４】
減光手段１２２は、培養ケース１０３を透過してくる励起光を減光する手段として、封止ガラス１３２、反射部材１２２ａおよび吸光部材１２２ｂを有している。この場合、封止ガラス１３２は、培養ケース１０３を透過してきた励起光１４２が表面で反射し、この反射光を生体細胞１２９側に戻らなくするため、標本観察部１２１の光軸Ｘに対して傾けて装着されている。反射部材１２２ａは、光軸Ｙに対して法線が４５度になるように配置されていて、封止ガラス１３２を透過する励起光１４２を光軸Ｙに対し直角方向に反射するようにしている。吸光部材１２２ｂは、反射部材１２２ａの反射光路に配置されている。この吸光部材１２２ｂには、例えば植毛紙１３３が取付けられており、励起光を吸収するようにしている。
【００３５】
このような構成において、第１の移動部１０７を第１の移動ネジ１０６により第１のガイド１０５に沿って前後方向に移動させ、第２の移動部１１１を第２の移動ネジ１０８により第２のガイド１１０に沿って上下方向に移動させることで、各培養ケース支持棚１０４に対する標本観察部１２１と減光手段１２２の高さ位置を設定し、さらに、第３の移動ネジ１１４と第４の移動ネジ１１６をそれぞれ駆動し、標本観察部１２１と減光手段１２２を培養ケース支持棚１０４に沿って移動させることにより、培養ケース支持棚１０４上の培養ケース１０３の生体細胞１２９上に標本観察部１２１と減光手段１２２を位置決めする。この場合、標本観察部１２１と減光手段１２２は、培養ケース１０３の生体細胞１２９を挟んで標本観察部１２１の光軸Ｘと減光手段１２２の光軸Ｙが一致する状態に設定する。
【００３６】
この状態で、外部照明部１２３からの照明光を落射光ファイバ１２４を介して標本観察部１２１に導入すると、落射光ファイバ１２４から出射した光は、第１のレンズ１３４を介して対物レンズ１３１の後側焦点面に収束する光となり、励起フィルタ１２５で選択され、ダイクロイックミラー１２７で反射し、対物レンズ１３１の後側焦点面に収束する。対物レンズ１３１の後側焦点面に収束した光は、対物レンズ１３１により平行光となり照明範囲内を均一に照明し、培養ケース１０３内の生体細胞１２９の蛍光色素を励起する励起光１４２として照射する。励起光１４２により励起された蛍光色素は、励起光１４２より波長の長い蛍光１４３となり、対物レンズ１３１で平行光となり、ダイクロイックミラー１２７、吸収フィルタ１２６を透過し、結像レンズ１４４を介して撮像素子１２８の撮像面に投影され撮像される。
【００３７】
一方、培養ケース１０３を透過する励起に用いられなかった励起光１４２は、減光手段１２２に達し、封止ガラス１３２に入射する。この場合、封止ガラス１３２は、標本観察部１２１の光軸Ｘに対して傾けて設けられているため、封止ガラス１３２表面での僅かな反射が生体細胞１２９の観察部位に戻り、照明むらを生じることがない。そして、封止ガラス１３２を透過した励起光１４２は、反射部材１２２ａで反射し、吸光部材１２２ｂに到達し、植毛紙１３３により吸収される。
【００３８】
従って、このようにすれば、培養ケース１０３を透過する、励起に用いられなかった励起光１４２は、減光手段１２２に導かれて減光され、生体細胞１２９側に戻ることがないので、観察対象以外の生体細胞１２９の蛍光色素の槌色を大幅に軽減することができ、コントラストの良い蛍光像を長期間観察することができる。
【００３９】
また、減光手段１２２に用いられる植毛紙１３３は封止ガラス１３２により減光手段１２２内部に密閉されているため、培養容器１０２の内部を汚染することも防止できる。
【００４０】
（第２の実施の形態）
次に、本発明の第２の実施の形態を説明する。
【００４１】
この場合、本発明が適用される培養顕微装置については、図１で述べたと同様なので、ここでは、同図を援用するものとする。
【００４２】
図３は、本発明の培養顕微装置の要部の概略構成を示すもので、図２と同一部分には、同符号を付している。
【００４３】
この場合、減光手段２０１は、第２レンズ２０２、ピンホール２０３、散乱部２０４を有している。ピンホール２０３は、第２レンズ２０２により収束した励起光１４２の径より大きく設定されている。散乱部２０４は、入射した励起光１４２の吸収と散乱を行うもので、内部に反射率の低い塗装がされている。
【００４４】
このような構成において、培養ケース１０３を透過した励起光１４２は、第２レンズ２０２によりピンホール２０３に収束される。そして、ピンホール２０３を通過した光を散乱部２０４に入射させる。散乱部２０４は、内部に施された反射率の低い塗装により、入射した励起光１４２の吸収と散乱を行う。
【００４５】
これにより励起光１４２は、散乱部２０４内部で吸収と散乱を繰返すことで、減光が進みエネルギーが軽減される。この場合、散乱光がピンホール２０３に何回か繰返して達することで、光の一部が生体細胞１２９に戻ることがあっても、生体細胞１２９へのダメージを充分に軽減することができる。
【００４６】
この場合も、散乱部２０４に、上述した植毛紙１３３、ピンホール２０３に、詳述したは封止ガラス１３２をそれぞれ設けるようにすれば、生体細胞１２９の汚染を抑えたうえで、さらに減光の程度を上げることが可能である。
【００４７】
（第３の実施の形態）
次に、本発明の第３の実施の形態を説明する。
【００４８】
この場合、本発明が適用される培養顕微装置については、図１で述べたと同様なので、ここでは、同図を援用するものとする。
【００４９】
図４、図５は、本発明の培養顕微装置の要部の概略構成を示すもので、図２と同一部分には、同符号を付している。
【００５０】
この場合、減光手段３０１は、第３レンズ３０２、透過ファイバ３０３を有し、さらに培養顕微装置本体１０１に取り付けられた外設置部３０４を有している。第３レンズ３０２は、生体細胞１２９を透過した励起光１４２を透過ファイバ３０３端に収束するためのものである。透過ファイバ３０３は、第３レンズ３０２を介して導入された励起光１４２を外設置部３０４まで伝送するものである。
【００５１】
外設置部３０４は、図５に示すように、透過ファイバ３０３端の光軸Ｖ上にレンズ３０２ａおよび照明光源３０５が配置されている。また、透過ファイバ３０３端の光軸Ｖと直交する光軸Ｗ上には、減光部３０６が配置されている。また、これら光軸Ｖと光軸Ｗの交点Ｚには反射ミラー３０７が配置されている。反射ミラー３０７は、それぞれの光軸Ｖ、Ｗに対して４５°の角度をなす位置に配置され、且つ光軸Ｗ方向に移動可能になっている。
【００５２】
反射ミラー３０７には、第５のガイド３１０と第５の移動ネジ３１１が設けられている。第５のガイド３１０は、外設置部３０４側に固定される固定部３１０ａと移動部３１０ｂを有し、固定部３１０ａに対して移動部３１０ｂを直線方向に可能にしている。また、第５の移動ネジ３１１は、外設置部３０４側に回動可能に固定されるネジ部３１１ａとナット部３１１ｂを有し、ネジ部３１１ａを回転させることで、ナット部３１１ｂを直動させるようになっている。
【００５３】
第５のガイド３１０の移動部３１０ｂと第５の移動ネジ３１１のナット部３１１ｂには、反射ミラー３０７が取付けられている。また、第５の移動ネジ３１１のネジ部３１１ａには、第５の駆動部３１２が取付けられている。第５の駆動部３１２は、制御部１３８の指示により第５の移動ネジ３１１のネジ部３１１ａを回転駆動するもので、ネジ部３１１ａの回転はナット部３１１ｂの直進運動に変換され、反射ミラー３０７を第５のガイド３１０でガイドされる方向（光軸Ｗ方向）に移動可能にしている。
【００５４】
反射ミラー３０７の移動走行路上には、位置センサ３０８ａ、３０８ｂが配置されている。位置センサ３０８ａは、光軸Ｖと光軸Ｗの交点Ｚに反射ミラー３０７が位置する状態を検知するもので、また、位置センサ３０８ｂは、光軸Ｗ上で、反射ミラー３０７が透過ファイバ３０３より出射する励起光を妨げない退避位置にある状態を検出するものである。これにより、位置センサ３０８ａ、３０８ｂの検知出力を利用して制御部１３８により反射ミラー３０７の位置制御が可能となり、透過ファイバ３０３との光学的な接続先を減光部３０６と照明光源３０５とに切換できるようにしている。
【００５５】
このような構成によると、反射ミラー３０７が交点Ｚに位置している場合は、透過ファイバ３０３を出射した励起光１４２は、レンズ３０２ａにより平行光となり反射ミラー３０７で反射されて、減光部３０６に到達する。この場合も減光部３０６に上述した植毛紙１３３を設けるようにすれば、励起光１４２は、植毛紙３１３で吸収され減光される。
【００５６】
一方、反射ミラー３０７が、光軸Ｗ上で、透過ファイバ３０３より出射する励起光を妨げない退避位置に移動させた状態では、透過ファイバ３０３と照明光源３０５が光学的に接続されるため、照明光源３０５の光を透過ファイバ３０３を介して生体細胞１２９側に導くことが可能となる。
【００５７】
このようにして、反射ミラー３０７の位置を切換えることで、落射照明時は培養ケース１０３を透過した励起光１４２を減光部３０６側に導いて減光させ、生体細胞１２９の腿色を防止することができ、一方、透過照明時には照明光源３０５からの光により生体細胞１２９を照明すれば、生体細胞１２９の透過像を観察することが可能となる
（第４の実施の形態）
次に、本発明の第４の実施の形態を説明する。
【００５８】
この場合、本発明が適用される培養顕微装置については、図１で述べたと同様なので、ここでは、同図を援用するものとする。
【００５９】
図６は、本発明の培養顕微装置の要部の概略構成を示すもので、図３と同一部分には、同符号を付している。
【００６０】
この場合、減光手段２０１には、さらに透過ファイバ４０１、第４レンズ４０２が設けられ、透過ファイバ４０１は、外部に設けた照明光源４０３に接続されている。
【００６１】
このような構成によれば、標本観察部１２１の光軸Ｘに減光手段２０１の光軸Ｙを一致させておけば、培養ケース１０３を透過した励起光１４２は、減光手段２０１に導入されて減光される。
【００６２】
また、減光手段２０１を移動し、第４レンズ４０２と透過ファイバ４０１側の光軸Ｔを標本観察部１２１の光軸Ｘに一致させれば、照明光源４０３から生体細胞１２９を照明し、透過観察象を得ることが可能となる。
【００６３】
このようにすれば、第３の実施の形態で述べた反射ミラー３０７の位置を切替えるための手段を特別に設けることなく、励起光１４２の減光と生体細胞１２９の透過照明観察を行なうことが可能となる。
【００６４】
なお、本発明は、上記実施の形態に限定されるものでなく、実施段階では、その要旨を変更しない範囲で種々変形することが可能である。
【００６５】
さらに、上記実施の形態には、種々の段階の発明が含まれており、開示されている複数の構成要件における適宜な組み合わせにより種々の発明が抽出できる。例えば、実施の形態に示されている全構成要件から幾つかの構成要件が削除されても、発明が解決しようとする課題の欄で述べた課題を解決でき、発明の効果の欄で述べられている効果が得られる場合には、この構成要件が削除された構成が発明として抽出できる。
【図面の簡単な説明】
【００６６】
【図１】本発明の第１の実施の形態の概略構成を示す図。
【図２】第１の実施の形態の要部の概略構成を示す図。
【図３】本発明の第２の実施の形態の要部の概略構成を示す図。
【図４】本発明の第３の実施の形態の要部の概略構成を示す図。
【図５】第３の実施の形態に用いられる外設置部の概略構成を示す図。
【図６】本発明の第４の実施の形態の要部の概略構成を示す図。
【図７】従来の培養顕微装置の概略構成を示す図。
【符号の説明】
【００６７】
１０１…培養顕微装置本体、１０２…培養容器
１０３…培養ケース、１０４…培養ケース支持棚
１０４ａ…凹部、１０４ｂ…開口
１０５…第１のガイド、１０５ａ…固定部、１０５ｂ…移動部
１０６…第１の移動ネジ、１０６ａ…ネジ部、１０６ｂ…ナット部
１０７…第１の移動部、１０７ａ．１０７ｂ…ガイド取付面
１０８…第２の移動ネジ、１０８ａ…ネジ部、１０８ｂ…ナット部
１０９…第１の駆動部、１１０…第２のガイド、１１０ａ…固定部、１１０ｂ…移動部
１１１…第２の移動部、
１１１ａ．１１１ｂ…胴部、１１１ｃ．１１１ｄ…ガイド支持部
１１３…第３のガイド、１１４…第３の移動ネジ、１１４ａ…ネジ部
１１４ｂ…ナット部、１１５…第４のガイド、１１６…第４の移動ネジ
１１６ａ…ネジ部、１１６ｂ…ナット部、１１７…第３の駆動部
１１８…第４の駆動部、１２１…標本観察部、１２２…減光手段
１２２ａ…反射部材、１２２ｂ…吸光部材、１２３…外部照明部
１２４…落射光ファイバ、１２５…励起フィルタ
１２６…吸収フィルタ、１２７…ダイクロイックミラー
１２８…撮像素子、１２９…生体細胞、１３１…対物レンズ
１３２…封止ガラス、１３３…植毛紙、１３４…第１のレンズ
１３５…バルブ、１３６…蒸発皿、１３７…温調ヒータ
１３８…制御部、１３９…第２の駆動部、１４０…加湿ヒータ
１４１…センサ、１４２…励起光、１４３…蛍光
１４４…結像レンズ、２０１…減光手段、２０２…レンズ
２０３…ピンホール、２０４…散乱部、３０１…減光手段
３０２…レンズ、３０２ａ…レンズ、３０３…透過ファイバ
３０４…外設置部、３０５…照明光源、３０６…減光部
３０７…反射ミラー、３０８ａ．３０８ｂ…位置センサ
３１０…第５のガイド、３１０ａ…固定部、３１０ｂ…移動部
３１１…第５の移動ネジ、３１１ａ…ネジ部、３１１ｂ…ナット部
３１２…第５の駆動部、３１３…植毛紙、４０１…透過ファイバ
４０２…レンズ、４０３…照明光源
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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