(57)【要約】【課題】  シアン配糖体とシアンとを含む抗腫瘍性健康食品においてシアン配糖体に対するシアンの相対的濃度を非常に小さくする。【解決手段】  シアン配糖体およびシアンを含む実質的に未発酵の原材料について含有酵素を失活させる工程を行う。前記失活工程を経たβ−グルカンを含有する前記原材料に、該原材料とは異なる他材料由来のβ−グルカナーゼおよびグリコシダーゼを添加する工程と、この原材料を発酵させる工程とをさらに加える。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
シアン配糖体１００重量部に対して１重量部以下のシアンを含むことを特徴とする抗腫瘍性健康食品。
【請求項２】
前記シアン配糖体およびシアンがキノコ由来であることを特徴とする請求項１記載の抗腫瘍性健康食品。
【請求項３】
前記シアン１重量部に対してγ−アミノ酪酸を５０００重量部以上およびエルゴステロールを５０重量部以上含むことを特徴とする請求項１記載の抗腫瘍性健康食品。
【請求項４】
前記シアン配糖体、シアン、γ−アミノ酪酸およびエルゴステロールがキノコ由来であることを特徴とする請求項３記載の抗腫瘍性健康食品。
【請求項５】
前記キノコがカワリハラタケであることを特徴とする請求項２または４記載の抗腫瘍性健康食品。
【請求項６】
前記キノコ由来のシアン配糖体に加えて、キャッサバ、ウメ、アーモンド、りんご、桃および豆のいずれか由来のシアン配糖体を含むことを特徴とする請求項５記載の抗腫瘍性健康食品。
【請求項７】
シアン配糖体、シアン、β−グルカナーゼおよびグリコシダーゼを含む実質的に未発酵の原材料についてβ−グルカナーゼおよびグリコシダーゼを失活させる工程を含むことを特徴とする抗腫瘍性健康食品の製造方法。
【請求項８】
前記失活工程として前記原材料を７５℃以上の温度で加熱処理することを特徴とする請求項７記載の抗腫瘍性健康食品の製造方法。
【請求項９】
前記失活工程を経たグルタミンおよびエルゴステロールを含有する前記原材料に、グルタミン酸デカルボキシラーゼを添加する工程と、この原材料を発酵させる工程とをさらに含むことを特徴とする請求項７記載の抗腫瘍性健康食品の製造方法。
【請求項１０】
前記グルタミン酸デカルボキシラーゼは菌類由来であることを特徴とする請求項９記載の抗腫瘍性健康食品の製造方法。
【請求項１１】
前記グルタミン酸デカルボキシラーゼが酵母、乳酸菌および担子菌類いずれか由来であることを特徴とする請求項１０記載の抗腫瘍性健康食品の製造方法。
【請求項１２】
前記失活工程を経たβ−グルカンを含有する前記原材料に、該原材料とは異なる他材料由来のβ−グルカナーゼおよびグリコシダーゼを添加する工程と、この原材料を発酵させる工程とをさらに含むことを特徴とする請求項７記載の抗腫瘍性健康食品の製造方法。
【請求項１３】
前記原材料がカワリハラタケであることを特徴とする請求項７−１２のいずれかに記載の抗腫瘍性健康食品の製造方法。
【請求項１４】
前記原材料がカワリハラタケであり、かつ前記他材料が植物あるいは菌類であることを特徴とする請求項１２記載の抗腫瘍性健康食品の製造方法。
【請求項１５】
前記β−グルカナーゼは、酵母、乳酸菌、担子菌類および大腸菌のいずれか由来のβ−（１−３）グルカナーゼおよびβ−（１−６）グルカナーゼ、ラミナリナーゼならびにキタラーゼのいずれかであり、前記グリコシダーゼは、バラ科植物、豆類、イモ類、酵母、乳酸菌、担子菌類および大腸菌のいずれか由来のβ−グルコシダーゼ、チオグルコシダーゼ、エムルシンならびにリナマラーゼのいずれかであることを特徴とする請求項１２記載の抗腫瘍性健康食品の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カワリハラタケのようにシアン配糖体およびシアンを含む原材料を用いた抗腫瘍性健康食品およびその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ハラタケ属担子菌であるカワリハラタケ（Ａｇａｒｉｃｕｓ  ｂｌａｚｅｉ  Ｍｕｒｒｉｌｌ）は、ブラジル原産の担子菌類キノコであり、多糖の一種であるβ−グルカンを多く含んでいる。このβ−グルカンは、免疫細胞を活性化させることにより、腫瘍細胞を攻撃させるので、抗腫瘍性があることが報告されている。
【０００３】
このカワリハラタケを原料とした健康食品として、乾燥品、乾燥粉末品がある。また、これらの他、摂取しやすい形態として、抽出エキス、抽出エキスから得られる粉末品、かかる粉末を用いた錠剤品などがある。
【０００４】
主たる有効成分として認識されていたβ−グルカンは、カワリハラタケの子実体を発酵させることにより分子量が小さくなり、分子量が小さくなることで免疫細胞活性化に有効となる。したがって、カワリハラタケを採取してから１日程乾燥させてから、原材料を乾燥したり、或いは、原材料から食品構成成分を抽出したりしていた。
【０００５】
シイタケ、ヒラタケ、そしてカワリハラタケなどの担子菌類には、エルゴステロールが多く含まれており、エルゴステロール酸化誘導体にはガン細胞増殖阻止効果、エルゴステロールには血管新生抑制効果があることは知られている（特許文献１）。
【０００６】
また、担子菌類特にハラタケ属はγ−アミノ酪酸を含んでいることが知られ、その生産量を増大する製造方法については既に報告されている（特許文献２）。γ−アミノ酪酸の有用性を利用してγ−アミノ酪酸含有健康食品が市販されている。
【０００７】
さらに、シアン配糖体については、カワリハラタケにシアン配糖体が含まれることについては報告されていないが、乳酸発酵物にそれを含む杏仁種子粉を添加することで免疫賦活効果と抗酸化効果を期待している報告がある（特許文献３）。
【特許文献１】特開２００２−３０８７７７号公報
【特許文献２】特開２００２−２４７９６６号公報
【特許文献３】特開２００３−３８１２２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明者は前記抗腫瘍性健康食品の成分およびその作用について鋭意検討した結果、β−グルカンよりも食品に含まれるシアン配糖体が抗腫瘍性の中心的な役割を果たしていることを見出した。すなわち、シアン配糖体が体内で腫瘍部分に達したときに、この部分に存在するβグルコシターゼによってシアン配糖体がシアンに変化し、変化したシアンが腫瘍細胞（癌細胞など）を攻撃し、腫瘍細胞を死滅させる。
【０００９】
しかしながら、前記従来の健康食品の製造方法においては、原材料が原初的に含有する微量シアンに加えて、原材料に含まれる酵素のグリコシダーゼが原材料の発酵過程で多くのシアン配糖体をシアンに変化させ（２０〜５０％程度）、このシアンが腫瘍細胞ではなく健全な細胞を攻撃してしまう恐れがあった。さらに、体内でシアンに変化すべきシアン配糖体が減少することによって抗腫瘍性も低下する可能性があった。ちなみに、シアンは人体にとって有害であるが、シアン配糖体そのものの有害性はない。
【００１０】
したがって、本発明の目的は、シアン配糖体とシアンとを含む抗腫瘍性健康食品においてシアン配糖体に対するシアンの相対的濃度を非常に小さくすることである。
【００１１】
また、本発明者は鋭意検討した結果、β−グルカンの濃度が高いことのみでなく、カワリハラタケなどに含まれるγ−アミノ酪酸とエルゴステロールの濃度が高い場合に、抗腫瘍性をより高めることができることを見出した。すなわち、γ−アミノ酪酸が免疫細胞を賦活化させ、エルゴステロールが腫瘍全体の栄養血管の新生を抑えて腫瘍細胞周辺のシアン濃度と免疫細胞の量を多くし腫瘍を治癒し得る。
【００１２】
したがって、本発明の別の目的は、前記健康食品においてシアン配糖体に対するシアンの相対的濃度を非常に小さくすると同時に、特にグルタミンから生成されるγ−アミノ酪酸を高濃度にすることである。
【００１３】
シアン配糖体の分析については、配糖体をアガリクスのグリコシダーゼで分解し、酸性下で処理して、ＨＣＮとしてピリジンピラゾン吸光光度法（ＪＩＳ−Ｋ０１０２）で測定することが最良であるが、アガリクスの酵素の標準品が無いことから、製品のシアン配糖体の測定は、既にアガリクスの酵素により遊離したシアンを測定しその値をシアン配糖体濃度の指標とすることも出来る。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
前記目的を達成するため本発明の抗腫瘍性健康食品の製造方法は、シアン配糖体およびシアンを含む実質的に未発酵の原材料について含有酵素を失活させる工程を含むことを特徴とする。
【００１５】
かかる構成によれば、カワリハラタケのようにシアン配糖体およびシアンを含む原材料を用い、該原材料を実質的に未発酵の状態で、シアン配糖体をシアンに変化させる酵素であるβ−グルコシダーゼを失活させることで、シアン配糖体に対するシアンの相対的濃度を極めて低濃度とすることができる。したがって、体内の腫瘍部位でシアンに変化するシアン配糖体を多量に含み且つ毒性のシアンをほとんど含まない安全で有効な抗腫瘍性健康食品を得ることができる。
【００１６】
シアン配糖体に対する相対的なシアン濃度としては、シアン配糖体１００重量部に対してシアン１重量部以下とすることができる。かかる健康食品は、シアン配糖体に対するシアンの相対的濃度が非常に低いので健康食品摂取者に対してシアンの毒性による悪影響を与えなくすることができる。
【００１７】
なお、シアンの定量分析はＨＣＮとしてピリジンピラゾン吸光光度法（ＪＩＳ  ＫＯ１０２）で測定することができる。また、シアン配糖体の定量分析は、酵素の失活処理をしていない材料からその一部を分離して、発酵などにより該材料のグリコシダーゼでシアン配糖体を分解し、酸性下で処理してシアンに変化させる。これを前述のピリジンピラゾン吸光光度法で遊離したシアンの濃度を測定し、材料の発酵していない残りの部分のシアン濃度を引けば材料のシアン配糖体の濃度を知ることが出来き、材料の重量にその濃度を乗じて量が計算できる。
【００１８】
ここで、前記シアン配糖体およびシアンおよびグリコシダーゼを含む原材料として、バラ科植物果実、担子菌類キノコ、豆類、イモ類などがある。原材料としてキノコを用いる場合、担子菌類が好ましい。担子菌類の中でもハラタケ属が更に好ましい。また、キノコの中でもカワリハラタケが好ましい理由は、β−グルカンのうちβ−（１−３）（１−６）グルカンを多く含んでおり、シアン配糖体が多く、更にエルゴステロールを多く含んでいることがあげられる。
【００１９】
前記失活工程を原材料が実質的に未発酵の状態で行うには、原材料の農産物を採取した後、なるだけ短時間のうちに処理すれば良い。実質的に未発酵の状態とは、自己の持つ酵素で分解（自己消化）が殆ど進んでいないことをいう。カワリハラタケの場合は、湿度と温度が高いと採取後数時間で変色と共に自己消化により形が崩れ異臭を放つので、形が崩れず異臭を放たない状態である。
【００２０】
前記失活工程としては、原材料を７５℃以上の温度で加熱処理する工程がある。加熱処理方法として、水熱処理や遠赤外線乾燥、熱風乾燥などがある。
【００２１】
グリコシダーゼが失活したかどうかの確認は、原材料の一部をとり湿度９０％以上、温度２５℃から４５℃で３時間以上経過させたもののシアン濃度が上昇していないことを調べることで可能である。
【００２２】
また、原材料にキノコを用いる場合、キャサバ、ウメ、アーモンド、りんご、桃および豆のいずれか由来のシアン配糖体を含有させるようにすることが望ましい。
【００２３】
例えば、キャッサバ、豆からのシアン配糖体はリナマラーゼという酵素で分解され遊離シアンを産生する。容易にリナマラーゼは入手できるため、積極的に標的となる癌細胞周辺へ送り込み、キャッサバからのシアン配糖体の分解をコントロールして治療する方法に活用できる。カワリハラタケなどのキノコ由来のシアン配糖体は緩慢に分解し、一方キャッサバからのシアン配糖体は送り込んだ酵素で比較的早く分解しシアンを遊離するため、効果が相乗的に働きがん細胞を攻撃することが出来るという特徴がある。そのためキャッサバのシアン配糖体を添加することは有効である。ウメ、リンゴ、桃およびアーモンドのシアン配糖体はエムルシンという酵素で分解されるが、前記キャサバ、豆と同様に有効である。
【００２４】
原材料から食品を得る方法としては、乾燥したものを最終製品とすることや、乾燥したものを粉砕加工し凍結乾燥あるいは抽出したものにデキストリン等の賦形剤を加えて加工することで抽出物の乾燥物、該乾燥物からさらに粉末を得ることができ、これらを健康食品として用いることができる。さらに、前記粉末を結晶セルロース等と組み合わせることで錠剤を得ることができる。
【００２５】
次に、前記本発明の別の目的、すなわちシアン配糖体に対するシアンの相対的濃度を非常に小さくすると同時に、特にグルタミンから生成されるγ−アミノ酪酸を高濃度にするため、本発明は前記製造方法において、前記失活工程を経た前記原材料に、グルタミン酸デカルボキシラーゼを添加する工程と、この原材料を発酵させる工程とをさらに含むことを特徴とする。
【００２６】
グルタミンをγ−アミノ酪酸に変化させる酵素であるグルタミン酸デカルボキシラーゼが前記失活工程で失活している。そのため、有効成分であるγ−アミノ酸の濃度が小さい状態である。そこで、グルタミン酸デカルボキシラーゼを添加して発酵させることで、γ−アミノ酸の濃度を大きくすることができる。これにより、シアン１重量部に対してγ−アミノ酸酪酸を５０００重量部以上の濃度とすることができる。なお、このγ−アミノ酸と有効に協働するエルゴステロールの濃度はシアン１重量部に対して５０重量部以上であることが望ましい。
【００２７】
シアン１重量部に対してγ−アミノ酪酸が５０００重量部未満の濃度である場合、シアン濃度が高く有害あるいはγ−アミノ酪酸が少ないため免疫機能の増強が望めないことになる。
【００２８】
シアン１重量部に対してエルゴステロールが５０重量部未満の濃度である場合、シアン濃度が高く有害あるいはエルゴステロールが少なく腫瘍の新生栄養血管抑制が十分働かない。
【００２９】
本発明において、カワリハラタケのγ−アミノ酪酸の定量分析はアミノ酸自動分析法（食品衛生検査指針）に準拠して行う。またエルゴステロールの定量分析は高速液体クロマトグラフ法（同）に準拠して行う。
【００３０】
なお、発酵工程は、原材料の酵素を失活させた後に別原料からの酵素ないし酵素そのものを添加し、殺菌された清潔な容器にて、湿度９０％以上あるいは水溶液中、温度２５℃から４５℃で３時間以上１６８時間以内で処理することである。
【００３１】
また、本発明製造方法は別観点から、すなわち、β−グルカンの有効性を確保するという観点から、前記製造方法において該原材料とは異なる他材料由来のβ−グルカナーゼないし／およびグリコシダーゼを添加する工程と、この原材料を発酵させる工程とをさらに含むことを特徴とする。
【００３２】
β−グルカンを低分子化する酵素であるβ−グルカナーゼが前記失活工程で失活している。そのため、β−グルカンの多くが非常に大きな分子量で存在し（分子量２００万以上）、β−グルカンが有効に作用しがたい状態である。そこで、他材料由来の酵素β−グルカナーゼないし／およびβ−グルカナーゼを含む他材料抽出物を添加して発酵させることで、β−グルカンを低分子化する。このとき、他材料由来のβ−グルカナーゼと他材料由来抽出物に含まれるβ−グルコシダーゼは原材料のシアン配糖体をシアンに変化させる酵素とはならないことを見出した。したがって、他材料由来のβ−グルカナーゼとβ−グルコシダーゼは発酵によって、β−グルカンの低分子化を促進する一方、シアンを増やすことはない。これにより、β−グルカンの分子量を１００万以下として、β−グルカンが免疫活性を促進させるようにできる。
【００３３】
前記他材料由来のグリコシダーゼ、β−グルコシダーゼとしては、原材料がカワリハラタケである場合に、他材料由来のβ−グルカナーゼおよびグリコシダーゼが植物あるいは菌由来のβ−グルカナーゼおよびグリコシダーゼであることが好ましく、さらに、前記β−グルカナーゼは、酵母、乳酸菌、担子菌類および大腸菌のいずれか由来のβ−（１−３）グルカナーゼおよびβ−（１−６）グルカナーゼ、ラミナリナーゼならびにキタラーゼのいずれかであり、前記グリコシダーゼは、バラ科植物、豆類、イモ類、酵母、乳酸菌、担子菌類および大腸菌のいずれか由来のβ−グルコシダーゼ、チオグルコシダーゼ、エムルシンならびにリナマラーゼのいずれかであることが好ましい。
【００３４】
前記β−グルカンのうち、β−（１−３）（１−６）グルカンの分析は、α−アミラーゼ処理、プロテアーゼ処理、アミログルコシダーゼ処理、セルラーゼ処理、更にエタノールでの沈殿物を硫酸加水分解でグルコースまで分解しグルコースオキシダーゼ法によりグルコースを定量することでβ−（１−３）（１−６）グルカン量を知ることが出来る。
【発明の効果】
【００３５】
本発明によれば、シアン配糖体とシアンとを含む抗腫瘍性健康食品においてシアン配糖体に対するシアンの相対的濃度を非常に小さくすることが可能である。また、シアン配糖体に対するシアンの相対的濃度を非常に小さくすると同時に、特にグルタミンから生成されるγ−アミノ酪酸を高濃度にすることである。また、シアン配糖体に対するシアンの相対的濃度を非常に小さくすると同時に、β−グルカンの分子量を小さくすることができる。
【実施例】
【００３６】
以下、本発明の実施例を説明する。
【００３７】
（実施例１）
カワリハラタケ子実体採取後急速に１２０℃の熱風で乾燥させ、その乾燥子実体１００ｋｇを粉砕加工させる。その後、湿度９５％温度３５℃とし大腸菌由来のβ−グルカナーゼおよびβ−グルコシダーゼおよびチオグルコシダーゼおよびエムルシンおよびリナマラーゼの混合液5リットルを加えて４８時間の発酵を行い、その後熱風乾燥機で乾燥し原料粉末を作成する。この原料粉末を打錠機にてタブレットを作成しあるいは粉末をそのままあるいは賦形剤を添加して健康食品とする。
【００３８】
（シアン配糖体重量部１８０：γ−アミノ酪酸重量部１００００：エルゴステロール重量部１００：シアン重量部１）
（実施例２）
採取後直ぐに強制冷風乾燥したカワリハラタケ子実体５０ｋｇと同じく乾燥メシマコブ子実体５０ｋｇを熱水抽出し２００ｋｇに減量濃縮後、乳酸菌由来のβ−グルカナーゼおよびβ−グルコシダーゼ混合液２リットルを加えて、３５℃４８時間で発酵させる。その後７５℃１時間加熱し、さらにキャッサバ由来のシアン配糖体を含むデキストリンを加えて瞬間過熱滅菌機にて滅菌し乾燥させタブレットないし粉末の健康食品とする。
【００３９】
（シアン配糖体重量部１００：γ−アミノ酪酸重量部８０００：エルゴステロール重量部５０：シアン重量部１）
（実施例３）
採取後直ぐにカワリハラタケ子実体１００ｋｇを９５℃で熱水抽出し酵素を失活させたのち２００ｋｇに濃縮減量し、シイタケの失活していないβ−グルカナーゼおよびβ−グルコシダーゼを含む抽出物１０リットルを加え、さらにβ−グルカナーゼおよびβ−グルコシダーゼおよびグルタミン酸デカルボキシラーゼを含む酵母および乳酸菌抽出物を加えて、温度３５℃で４８時間発酵させ、その後７５℃１時間加熱し、さらにキャッサバ由来のデキストリンを加え加熱乾燥し原料粉末とする。発酵によりγ−アミノ酪酸とβ−グルカンの増量を図り、カワリハラタケのシアン配糖体が自己の酵素で分解されず遊離シアン量を少なくした粉末を元に、タブレットおよび顆粒の健康食品とする。
【００４０】
（シアン配糖体重量部２００：β−グルカン重量部５００００：γ−アミノ酪酸重量部２００００：エルゴステロール重量部２００：シアン重量部１）
（比較例１）
カワリハラタケ子実体を加熱せずに乳酸菌を加えて４８時間発酵させ、凍結乾燥後に粉砕加工して健康食品とした。カワリハラタケの酵素が失活せず遊離シアンが増加したことで当健康食品を過剰摂取した場合にはシアンの急性毒性の危険が増加することとなった。
【００４１】
（シアン配糖体重量部５：β−グルカン重量部５００００：γ−アミノ酪酸重量部２００００：エルゴステロール重量部２００：シアン重量部１）
（比較例２）
カワリハラタケ子実体を採取後加熱せずに３５℃で４８時間発酵させ、その後天日で２日かけて乾燥させ、粉砕加工し健康食品とした。カワリハラタケの酵素が失活せず遊離シアンが増加し、日光を十分当てたためエルゴステロールが減少し、シアンによる急性毒性の危険とエルゴステロールの効果を得られない結果となった。
【００４２】
（シアン配糖体重量部５：β−グルカン重量部２００００：γ−アミノ酪酸重量部１００００：エルゴステロール重量部５：シアン重量部１）