(57)【要約】【課題】インフルエンザウイルスに対するシアリターゼ阻害活性を有する硫酸化グルコサミンを提供する。【解決手段】ｐ−ニトロフェニル−２−アセトアミド−４−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド及びＸ−２−アセトアミド−３−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｘ：１−ナフチル、２−ナフチル、グリセロ、アリル、パラアセトアミドフェニル）に優れたシアリターゼ阻害活性効果が認められた。【選択図】  図１
2005015451.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）又は（２）のいずれかで表される硫酸化グルコース化合物。
【化１】
2005015451.tif 000008
式中、Ｍは水素原子、アルカリ金属原子、アンモニウム基又は有機アミンを表し、Ｒ１及びＲ２は水素原子、アシル基、シリル基、又は硫酸基を表す。
【化２】
2005015451.tif 000009
式中、Ｍは水素原子、アルカリ金属原子、アンモニウム基又は有機アミンを表し、Ｒ１及びＲ２は水素原子、アシル基、シリル基、又は硫酸基を表し、Ｘは１−ナフチル基、２−ナフチル基、グリセロ基、アリル基、パラアセトアミドフェニル基を表す。
【請求項２】
下記式（３）又は（４）で表される高分子化合物。
【化３】
2005015451.tif 000010
式中、Ｍは水素原子、アルカリ金属原子、アンモニウム基又は有機アミンを表し、Ｒ１及びＲ２は水素原子、アシル基、シリル基、又は硫酸基を表す。Ｘはパラアミノフェニル基を表し、Ａは−ＣＨ−ＣＨ２−を表し、Ｂはグルコース基を有さない繰り返し単位からなる部分を示す。
【化４】
2005015451.tif 000011
式中、Ｍは水素原子、アルカリ金属原子、アンモニウム基又は有機アミンを表し、Ｒ１及びＲ２は水素原子、アシル基、シリル基、又は硫酸基を表す。Ｘは１−ナフチル基、２−ナフチル基、パラアセトアミドフェニル基を表す。Ａは−ＣＨ−ＣＨ２−を表し、Ｂはグルコース基を有さない繰り返し単位からなる部分を示す。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗インフルエンザ薬として有効な硫酸化グルコース化合物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
本研究者らの研究により、硫酸化グルコース化合物、特に硫酸基とアセトアミドを有するグルコース化合物（以下、「硫酸化グルコサミン」ということがある）がシアリターゼ阻害剤として作用し、抗コレラウイルス薬として有効なことが報告されている（非特許文献１）。
この非特許文献において、下記式（５）に示す硫酸化グルコサミン（ｐＮＰ  ６−ｓｕｌｆｏ  ＧｌｃＮＡｃ）のコレラウイルスに対する優れたシアリターゼ阻害活性効果が記載されている。
【化５】
2005015451.tif 000003
本発明に関連する文献として、特許文献１〜８を参照されたい。
【０００３】
【非特許文献１】
第５１回高分子学会年次大会予稿集、２００２、Ｖｏｌ．５１、Ｎｏ．５、９０４
【特許文献１】
特開２００３−２６６４８号公報
【特許文献２】
特開２００２−１２５５５号公報
【特許文献３】
特開２００２−３７７８０号公報
【特許文献４】
特開２００２−３５６４８３号公報
【特許文献５】
特開平１１−３４３２９５号公報
【特許文献６】
特開平１１−３１５１０１号公報
【特許文献７】
特開平１１−３１５０９１号公報
【特許文献８】
特開平１１−３１５０９２号公報
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らはコレラウイルスに対して有効であったｐＮＰ  ６−ｓｕｌｆｏ  ＧｌｃＮＡｃがインフルエンザウイルスにとってもに有効ではないかと考えて鋭意検討を重ねてきた。その結果、当該ｐＮＰ  ６−ｓｕｌｆｏ  ＧｌｃＮＡｃがインフルエンザウイルスに対してシアリターゼ阻害活性を奏するものの、薬理的には充分ではないことがわかった。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者は上記硫酸化グルコサミン（ｐＮＰ  ６−ｓｕｌｆｏ  ＧｌｃＮＡｃ）をベースにして、インフルエンザウイルスに対する優れたシアリターゼ阻害活性を有する誘導体を探索した。
その結果、下記式（１）、（２）に示す硫酸化グルコサミンが優れたインフルエンザウイルスにおけるシアリターゼ阻害活性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【化１】
2005015451.tif 000004
式中、Ｍは水素原子、アルカリ金属原子、アンモニウム基又は有機アミンを表し、Ｒ１及びＲ２は水素原子、アシル基、シリル基、又は硫酸基を表す。
【化２】
2005015451.tif 000005
式中、Ｍは水素原子、アルカリ金属原子、アンモニウム基又は有機アミンを表し、Ｒ１及びＲ２は水素原子、アシル基、シリル基、又は硫酸基を表し、Ｘは１−ナフチル基、２−ナフチル基、グリセロ基、アリル基、パラアセトアミドフェニル基を表す。
【０００６】
上記において、式（２）で表されるの硫酸化グルコサミンは、コレラウイルスに対して有効であったｐＮＰ  ６−ｓｕｌｆｏ  ＧｌｃＮＡｃ（式（５）参照）との対応において、その６位に硫酸基、２位にアセトアミド基がそれぞれ存在する。そして、１位の酸素につながる基（化学式中：Ｘ基）を変化させたものである。
図１に示すように、当該Ｘ基を変化させることにより、シアリターゼ阻害活性が最大１０００倍近く変化することがわかった。
【０００７】
Ｘ基としては、１−ナフチル基、２−ナフチル基、グリセロ基、アリル基、パラアセトアミドフェニル基のほか、少なくともその誘導体が同等のシアリターゼ阻害活性を有するものと考えられる。
例えば、ナフチル基においては、その全部又は一部の水素原子を水酸基、スルホンサン基、アミノ基に置換することができる。
グリセロ基においては、その全部又は一部の水素原子をアシル基、シリル基、又は硫酸基に置換することができる。
アリル基においては、炭素数が３〜７のものが好ましく、側鎖を有していてもよい。
【０００８】
式（１）の硫酸化グルコサミンは硫酸基が４位に結合されている。図１からわかるように、硫酸基を４位に結合した式（１）の硫酸化グルコサミンは硫酸基が６位に結合された硫酸化グルコサミンに比べて、著しく高いシアリターゼ阻害活性を示す。
図１において、●で示すデータは市販の抗インフルエンザ薬（ザナミビル：商標名）のシアリターゼ阻害活性を示す。式（１）の硫酸化グルコサミンは当該市販の抗インフルエンザ薬に近い活性を示すことが確認できた。
【０００９】
式（１）において、１位の酸素原子に結合するパラニトロフェニル基は、式（２）のＸ基若しくはその誘導体に置換することが可能である。
【００１０】
上記はグルコースの単糖をベースにしたものであるが、これを多糖体とすることもできる。即ち、式（２）に示される硫酸化グルコサミンに基づく下記式（３）の多糖体がインフルエンザウイルスにおけるシアリターゼ阻害活性を有する。
【化３】
2005015451.tif 000006
式中、Ｍは水素原子、アルカリ金属原子、アンモニウム基又は有機アミンを表し、Ｒ１及びＲ２は水素原子、アシル基、シリル基、又は硫酸基を表す。Ｘはパラアミノフェニル基を表し、Ａは−ＣＨ−ＣＨ２−を表し、Ｂはグルコース基を有さない繰り返し単位からなる部分を示す。
【化４】
2005015451.tif 000007
式中、Ｍは水素原子、アルカリ金属原子、アンモニウム基又は有機アミンを表し、Ｒ１及びＲ２は水素原子、アシル基、シリル基、又は硫酸基を表す。Ｘは１−ナフチル基、２−ナフチル基、パラアセトアミドフェニル基を表す。Ａは−ＣＨ−ＣＨ２−を表し、Ｂはグルコース基を有さない繰り返し単位からなる部分を示す。
式（１）およびその誘導体に基づく多糖体にもインフルエンザウイルスにおけるシアリターゼ阻害活性を有する。例えば、下記式（４）に示される多糖体を例示することができる。
これら多糖体は単糖体から周知の方法で製造することができる。例えば、特許文献６を参照されたい。
【００１１】
【実施例】
次に、この発明の実施例について説明する。
パラニトロフェニル  Ｎ−アセチルーグルコサミニドを出発原料として図２に示される合成工程に従ってパラニトロフェニルＮ−アセチル−６−硫酸化−グルコサミン誘導体を製造した。また、硫酸基の位置を変えた、３−硫酸化−グルコサミン誘導体、４硫酸化グルコサミン誘導体を別途合成した。アグリコン部位を変化させた化合物に対しても同様の操作により６−硫酸化を行いそれぞれの硫酸化体を合成した。合成方法及び１Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータを示す。
【００１２】
ｐ−ニトロフェニル−２−アセトアミド−６−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（２）の合成
ｐ−ニトロフェニル−２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（１．０  ｇ、２９．２  ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０  ｍＬ）に溶解し、４０  ｏＣにおいて、三酸化硫黄トリメチルアミン複合体のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０  ｍＬ）溶液を３０分かけて滴下し、４０ｏＣで２時間磁気攪拌した。次いで、得られた反応混合物にメタノール（２０  ｍＬ）加え１昼夜攪拌した後、減圧下で溶媒を留去した。そして、その残査を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：水）で分離・精製した。得られたシロップをイオン交換樹脂で処理し、ろ過後凍結乾燥することで目的とする化合物（６５７  ｍｇ、５１  ％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ）  δ８．１５  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｈ  ｏｆ  ｐＮＰ  ｇｒｏｕｐ），  ７．１２  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｈ  ｏｆ  ｐＮＰ  ｇｒｏｕｐ），  ５．２８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２  ＝  ８．７  Ｈｚ，  Ｈ−１），  ４．４１  （ｄｄ，  １Ｈ，  ＪＨ−５，  Ｈ−６ｐｒｏＳ  ＝  ２．１  Ｈｚ，  ＪＨ−６ｐｒｏＳ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ  ＝  １１．４  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ），  ４．２５  （ｄｄ，  １Ｈ，  ＪＨ−５，  Ｈ−６ｐｒｏＲ  ＝  ５．４  Ｈｚ，  ＪＨ−６ｐｒｏＲ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ  １１．１  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ），  ４．０５  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２  ＝  ８．７  Ｈｚ，  Ｊ２，３  ＝  １０．１  Ｈｚ，  Ｈ−２），  ３．９４  （ｍ，  １Ｈ，  Ｈ−５），  ３．７４  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ２，３，  ＝ １０．１，  Ｊ３，４  ＝  １０．１  Ｈｚ，  Ｈ−３），  ３．６３  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ３，４  ＝ １０．１，  Ｊ４，５  ＝  １０．１  Ｈｚ，  Ｈ−４），  １．８５  （ｓ，  ３Ｈ）．
【００１３】
ｐ−ニトロフェニル−２−アセトアミド−６−ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（３）の合成
ｐ−ニトロフェニル−２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（３００  ｍｇ、０．８７  ｍｍｏｌ）をピリジン（１０  ｍＬ）に溶解し、ジメチルアミノピリジン（１０  ｍｇ）、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロリド（３４０  μＬ、１．３１  ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加え、室温で２４時間磁気攪拌した。反応溶液にメタノール（１０  ｍＬ）を加え１昼夜磁気攪拌した。減圧濃縮後、酢酸エチルで希釈し有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と水で分液洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥し、残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝７：１）で分離精製し、エタノールから再結晶させることで、黄色の結晶（４７０  ｍｇ、９２  ％）を得た。
【００１４】
ｐ−ニトロフェニル−２−アセトアミド−３−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（４）、ｐ−ニトロフェニル−２−アセトアミド−４−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（５）の合成
化合物（３）（１３０  ｍｇ、０．２２  ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４  ｍＬ）に溶解し、５０  ｏＣにおいて、三酸化硫黄トリメチルアミン複合体（１８６  ｍｇ、１．３２  ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０  ｍＬ）溶液を３０分かけて滴下し、５０ｏＣで１２時間磁気攪拌した。次いで、得られた反応混合物にメタノール（１０  ｍＬ）加え１時間攪拌した後、減圧下で溶媒を留去した。残査を、ＴＨＦ（５  ｍＬ）に溶解し、ＴＢＡＦ（１４７μＬ、０．３３  ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加え３時間攪拌した。そして、その残査を減圧下で溶媒を留去した後、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：水）で分離・精製した。得られたシロップをイオン交換樹脂で処理し、ろ過後凍結乾燥することで目的とする化合物（４）（４０  ｍｇ）、（５）（２８ｍｇ）を収率４２  ％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ）  （４）：  δ８．０３  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｈ  ｏｆ  ｐＮＰ  ｇｒｏｕｐ），  ７．０２  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｈ  ｏｆ  ｐＮＰ  ｇｒｏｕｐ），  ５．２８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２  ＝  ８．５  Ｈｚ，  Ｈ−１），  ４．３６  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ２，３，  ＝ １０．５，  Ｊ３，４  ＝  １０．５  Ｈｚ，  Ｈ−３），  ３．９９  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２  ＝  ８．５  Ｈｚ，  Ｊ２，３  ＝  １０．５  Ｈｚ，  Ｈ−２），  ３．８７  （ｄｄ，  １Ｈ，  ＪＨ−５，  Ｈ−６ｐｒｏＳ  ＝  １．５  Ｈｚ，  ＪＨ−６ｐｒｏＳ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ  ＝  １２．０  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ），  ３．６８  （ｄｄ，  １Ｈ，  ＪＨ−５，  Ｈ−６ｐｒｏＲ  ＝  ５．４  Ｈｚ，  ＪＨ−６ｐｒｏＲ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ  １１．１  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ），  ３．６０  （ｍ，  １Ｈ，  Ｈ−５），  ３．６０  （ｍ，  Ｈ−４），  １．８５  （ｓ，  ３Ｈ）．
（５）：  δ  ８．１１  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｈ  ｏｆ  ｐＮＰ  ｇｒｏｕｐ），  ７．０５  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｈ  ｏｆ  ｐＮＰ  ｇｒｏｕｐ），  ５．２０  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２  ＝  ８．５  Ｈｚ，  Ｈ−１），  ４．１８  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ２，３，  ＝ １０．５，  Ｊ３，４  ＝  １０．５  Ｈｚ，  Ｈ−４），  ３．９８  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２  ＝  ８．５  Ｈｚ，  Ｊ２，３  ＝  １０．５  Ｈｚ，  Ｈ−２），  ３．８０  （ｍ，  ２Ｈ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ），  ３．７０  （ｍ，  ２Ｈ，  Ｈ−５，  Ｈ３），  １．８７  （ｓ，  ３Ｈ）．
【００１５】
アリル２−アセトアミド−６−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（６）の合成
アリル２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（２０  ｍｇ、０．７６  ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５  ｍＬ）に溶解し、４０ｏＣにおいて、三酸化硫黄トリメチルアミン複合体（３２０  ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０  ｍＬ）溶液を３０分かけて滴下し、５０  ｏＣで２時間磁気攪拌した。次いで、得られた反応混合物にメタノール（１０  ｍＬ）加え１２時間攪拌した後、減圧下で溶媒を留去した。そして、その残査を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：水）で分離・精製した。得られたシロップをイオン交換樹脂で処理し、ろ過後凍結乾燥することで目的とする化合物（９７  ｍｇ、３２  ％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ）  δ  ５．７６  （ｍ，  １Ｈ，  Ａｌｌｙｌ），  ５．１４  （ｍ，  １Ｈ，  Ａｌｌｙｌ），  ４．４４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ），  ４．２０  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ２．５，  １１．４  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ），  ４．１８  （ｍ，  １Ｈ，  ｍｅｔｙｌｅｎｅ  ｏｆ  Ａｌｌｙｌ  ｇｒｏｕｐ），  ４．０６  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．５，  １１．４  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ），  ４．０１  （ｍ，  １Ｈ，  ｍｅｔｙｌｅｎｅ  ｏｆ  Ａｌｌｙｌ  ｇｒｏｕｐ），  ３．５８  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １０．２  Ｈｚ  Ｈ−２），  ３．５１  （ｍ，  １Ｈ，  Ｈ−５），  ３．７１  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．５，  ９．５  Ｈｚ，  Ｈ−３），  ３．６３  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．５，  ８．５Ｈｚ，  Ｈ−４），  １．８５  （ｓ，  ３Ｈ）
【００１６】
グリセロ２−アセトアミド−６−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（７）の合成
１，２イソプロピリデングリセロ２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（２４４  ｍｇ、０．７３  ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０  ｍＬ）に溶解し、４０  ｏＣにおいて、三酸化硫黄トリメチルアミン複合体（３０３  ｍｇ、２．１９  ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０  ｍＬ）溶液を３０分かけて滴下し、４０  ｏＣで２時間磁気攪拌した。次いで、得られた反応混合物にメタノール（８  ｍＬ）加え１２時間攪拌した後、減圧下で溶媒を留去した。そして、その残査を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：水）で分離・精製した。得られた、シロップをＴＦＡ：水：メタノール＝１：１２：１２の溶液（５  ｍＬ）に溶解させ室温で１時間攪拌した。残査を濃縮後、イオン交換樹脂で処理し、ろ過後凍結乾燥することで目的とする化合物（８０  ｍｇ、４６  ％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ）  δ  ４．４０  （ｄｘ２，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ  Ｈ−１），  ４．１９  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ２．０，  １１．４  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ），  ４．０８  （ｄｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．５，  １１．４  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ），  ３．７０  （ｍ，  ４Ｈ），  ３．３０−３．５８  （ｍ，  １４Ｈ），  １．８５  （ｓ，  ６Ｈ）
【００１７】
１−ナフチル−２−アセトアミド−６−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（８）の合成
１−ナフチル−２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（１２３  ｍｇ、０．３５  ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４  ｍＬ）に溶解し、５０ｏＣにおいて、三酸化硫黄トリメチルアミン複合体（２４６  ｍｇ、１．７７  ｎｎｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８  ｍＬ）溶液を３０分かけて滴下し、５０  ｏＣで３時間磁気攪拌した。次いで、得られた反応混合物にメタノール（５  ｍＬ）加え１２時間攪拌した後、減圧下で溶媒を留去した。そして、その残査を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：水）で分離・精製した。得られたシロップをイオン交換樹脂で処理し、ろ過後凍結乾燥することで目的とする化合物（６０  ｍｇ、３４  ％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ，  ３０  ｏＣ）    δ  ８．０８  （ｍ，  １Ｈ，  Ｈ−８  ｏｆ  ｎａｐｈｔｈｙｌ），  ７．９３  （ｍ，  １Ｈ，  Ｈ−５  ｏｆ  ｎａｐｈｔｈｙｌ），  ７．６５  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  Ｈ−４  ｏｆ  ｎａｐｈｔｈｙｌ），  ７．５８  （ｍ，  ２Ｈ，  Ｈ−６，  Ｈ−７  ｏｆ  ｎａｐｈｔｈｙｌ）  ７．４９  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ８．０  Ｈｚ，  Ｈ−３  ｏｆ  ｎａｐｈｔｈｙｌ）  ７．２６  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝０．７  ７．７  Ｈｚ，  Ｈ−２  ｏｆ  ｎａｐｈｔｈｙｌ），  ５．２７  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  Ｈ−１），  ４．４４  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ２．０，  １１．５  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ），  ４．２７  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．５，  １１．５  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ），  ４．２０  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．０，  １０．５  Ｈｚ，  Ｈ−２），  ３．９６  （ｍ，  １Ｈ，  Ｈ−５），  ３．７０  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  １０．０，  １０．０  Ｈｚ，  Ｈ−３），  ３．６５  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．０，  ９．５  Ｈｚ，  Ｈ−４），  １．９３  （ｓ，  ３Ｈ，  ａｃｅｔａｍｉｄｅ）
【００１８】
２−ナフチル−２−アセトアミド−６−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（９）の合成
２−ナフチル−２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（１２３  ｍｇ、０．３５  ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４  ｍＬ）に溶解し、５０  ｏＣにおいて、三酸化硫黄トリメチルアミン複合体（２４６  ｍｇ、１．７７  ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８  ｍＬ）溶液を３０分かけて滴下し、５０  ｏＣで３時間磁気攪拌した。次いで、得られた反応混合物にメタノール（５  ｍＬ）加え１２時間攪拌した後、減圧下で溶媒を留去した。そして、その残査を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：水）で分離・精製した。得られたシロップをイオン交換樹脂で処理し、ろ過後凍結乾燥することで目的とする化合物（７２  ｍｇ、４５  ％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ，  ｒｔ）  δ  ７．６４  （ｍ，  ３Ｈ，  ｎａｐｈｔｈｙｌ），  ７．３４  （ｍ，  １Ｈ，  ｎａｐｈｔｈｙｌ），  ７．２７  （ｍ，  ２Ｈ，  ｎａｐｈｔｈｙｌ），  ７．０３  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ２．４，  ９．０  Ｈｚ，  ｎａｐｈｔｈｙｌ）  ５．１２  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．７  Ｈｚ，  Ｈ−１），  ４．２３  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ２．１，  １１．５  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ），  ４．０７  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．７，  １１．４  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ），  ３．８９  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ９．９  Ｈｚ，  Ｈ−２），  ３．６７  （ｍ，  １Ｈ，  Ｈ−５），  ３．５６  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．６，  ９．６  Ｈｚ，  Ｈ−３），  ３．４４  （ｔ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．０，  ９．０  Ｈｚ，  Ｈ−４），  １．８７  （ｓ，  ３Ｈ，  ａｃｅｔａｍｉｄｅ）
【００１９】
ｐ−アセトアミドフェニル−２−アセトアミド−６−スルホ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（１０）の合成
（２）（５０ｍｇ、０．１１  ｍｍｏｌ）を水（２  ｍＬ）に溶解し、１０  ％水酸化パラジウム炭素（１０  ｍｇ）を加えた後、水素雰囲気下で２時間激しく磁気攪拌した。得られた反応混合物をセライトろ過し、そのろ液を減圧濃縮した。残査を水（２  ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（４６  ｍｇ、０．３３  ｍｍｏｌ）を加えた後、０  ｏＣに冷却した。更に、無水酢酸（３２  μＬ、０．３３  ｍｍｏｌ）を滴下し、０  ｏＣで３時間、磁気攪拌した。得られた反応混合物を減圧濃縮し、その残査を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：水）で分離・精製した。得られたシロップをイオン交換樹脂で処理し、ろ過後、凍結乾燥することで目的とする化合物（３）（４１  ｍｇ、８０  ％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ，  ３０  ｏＣ）  δ  ７．３３  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  Ｈｍｅｔｈａ  ｏｆ  ｐｈｅｎｙｌ  ｇｒｏｕｐ），  ７．０６  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  Ｈｏｒｔｈｏ  ｏｆ  ｐｈｅｎｙｌ  ｇｒｏｕｐ），  ５．１２  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  Ｈ−１），  ４．３７  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ２．０，  １１．５  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ），  ４．２３  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ５．５，  １１．５  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ），  ３．９７  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ８．０，  １０．５  Ｈｚ，  Ｈ−２），  ３．８４  （ｍ，  １Ｈ，  Ｈ−５），  ３．６５  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  １０．０，  １０．０  Ｈｚ，  Ｈ−３），  ３．６１  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ  ＝  ９．０，  ９．５  Ｈｚ，  Ｈ−４），  ２．１３，  ２．０２  （ｓ  ｘ  ２，  ６Ｈ，  ａｃｅｔａｍｉｄｏ  ｇｒｏｕｐｓ）
【００２０】
ｐ−ニトロフェニル−６−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシド（１１）の合成
ｐ−ニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド（２００  ｍｇ、１．９９  ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８  ｍＬ）に溶解し、４０  ｏＣにおいて、三酸化硫黄トリメチルアミン複合体（５５４  ｍｇ、３．９９  ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８  ｍＬ）溶液を３０分かけて滴下し、５０  ｏＣで３時間磁気攪拌した。次いで、得られた反応混合物にメタノール（５  ｍＬ）加え１２時間攪拌した後、減圧下で溶媒を留去した。そして、その残査を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：水）で分離・精製した。得られたシロップをイオン交換樹脂で処理し、ろ過後凍結乾燥することで目的とする化合物（１１０  ｍｇ、４１  ％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  Ｄ２Ｏ）  δ  ７．９８  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｈ  ｏｆ  ｐＮＰ  ｇｒｏｕｐ），  ６．９９  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｈ  ｏｆ  ｐＮＰ  ｇｒｏｕｐ），  ５．０４  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ１，２  ＝  ８．０  Ｈｚ，  Ｈ−１），  ４．３０  （ｄｄ，  １Ｈ，  ＪＨ−５，  Ｈ−６ｐｒｏＳ  ＝  ２．０  Ｈｚ，  ＪＨ−６ｐｒｏＳ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ  ＝  １１．０  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ），  ４．１０  （ｄｄ，  １Ｈ，  ＪＨ−５，  Ｈ−６ｐｒｏＲ  ＝  ５．５  Ｈｚ，  ＪＨ−６ｐｒｏＲ，  Ｈ−６ｐｒｏＳ  １１．０  Ｈｚ，  Ｈ−６ｐｒｏＲ），  ３．７７  （ｍ，  １Ｈ，  Ｈ−５），  ３．４９  （ｍ，  ２Ｈ，  Ｈ−２，  Ｈ−３），  ３．４１  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ３，４  ＝ １０．１，  Ｊ４，５  ＝  １０．１  Ｈｚ，  Ｈ−４）．
【００２１】
インフルエンザウィルスシアリダーゼ阻害活性測定
エッペンドルフチューブに酢酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．０、１００  ｍＭ  酢酸ナトリウム）に溶解させた基質  （４−メチルウンベリフェリルシアル酸、４  ｍＭ、５μＬ）、それぞれの濃度に調製した阻害剤（５μＬ）を加えたものに、インフルエンザウィルス（Ａ／Ｍｅｍｐｈｉｓ／１／７１（Ｈ３Ｎ２））を酢酸ナトリウムバッファーに溶解させた溶液  （１０  μｇ／ｍＬ（タンパク量），５  μＬ）を加え３７    ｏＣで３０分インキュベートした。炭酸ナトリウムバッファー（ｐＨ１１．５、１  ｍＬ）を加え、反応を止めて、反応溶液のλｅｘ＝３６５  ｎｍ，  λｅｍ＝４５０  ｎｍにおける蛍光強度を測定し阻害活性を算出した。それぞれのサンプルに対して２重測定で行った。
結果は、横軸に阻害剤の濃度、縦軸に阻害活性をプロットした図１として示してある。
【００２２】
図１の結果より、この発明の硫酸化グルコサミンはインフルエンザウイルスのシアリターゼ阻害活性を有することが確認できる。従って、この発明の硫酸化グルコサミンは抗インフルエンザウイルス薬としての薬理効果を有するものである。
特に、硫酸基を４位に結合したも硫酸化グルコサミンに優れたシアリターゼ阻害活性が確認できた。
【００２３】
この発明は、上記発明の実施の形態及び実施例の説明に何ら限定されるものではない。特許請求の範囲の記載を逸脱せず、当業者が容易に想到できる範囲で種々の変形態様もこの発明に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１はこの発明の実施例の硫酸化グルコサミンのインフルエンザウイルスシアリダーゼ阻害活性を示すグラフ図である。
【図２】図２はこの発明の実施例の硫酸化グルコサミンの製造方法およびその構造を示す。
【図１】
2005015451.tif 000012
【図２】
2005015451.tif 000013