(57)【要約】【課題】人間や哺乳動物の肝臓に対する疾患の予防や治療に有効な作用を備えた肝疾患予防及び治療製剤を提供すること。【解決手段】イソフラボンアグリコンを有効成分として含有することを特徴とする。【選択図】      図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
イソフラボンアグリコンを有効成分として含有することを特徴とする肝疾患予防及び治療製剤。
【請求項２】
原料としての大豆胚芽を麹菌によって発酵させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物を更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンの濃縮物とした生成物を有効成分として含有することを特徴とする肝疾患予防及び治療製剤。
【請求項３】
濃縮されたイソフラボンアグリコンの組成は、少なくとも７０重量％のダイゼインを含有し、かつ、スーパーオキシドジムスターゼ様活性が５００単位／ｇ以上あることを特徴とする請求項２に記載の肝疾患予防及び治療製剤。
【請求項４】
スーパーオキシドジムスターゼ様活性を有する物質を更に含有していることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の肝疾患予防及び治療製剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、人間や哺乳動物の肝臓に対する疾患の予防や治療に好適な肝疾患予防及び治療製剤に関する。
【０００２】
【従来の技術と発明が解決しようとする課題】
一般に、肝臓は「沈黙の臓器」といわれており、気が付かない間に重症の肝疾患に進展することが多い。先進国においては近年食事パターンが変わり、動物性蛋白質や動物性脂肪、糖類など高脂肪高カロリーの過剰摂取にある傾向やビジネスなどのストレスからアルコール摂取量も増えており、脂肪肝になる比率がかなり高くなっている。この脂肪肝は食事やアルコール摂取を控えるなどで改善しなければ慢性肝炎、肝硬変に進展し、ついには肝細胞癌になる可能性がある。また、食事からばかりではなく、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）などのウイルス性肝炎に感染した場合はなおさら肝細胞癌に進展するリスクが高くなる。
【０００３】
しかしながら、脂肪肝や肝炎、肝硬変さらには肝細胞癌（肝臓癌）などの予防及び治療効果のある医薬品や健康食品素材は少なく、食事パターンを変えるとかアルコール摂取を控えるなどしか肝疾患に対する手立てがない状況であった。
【０００４】
田澤ら（田澤賢次ら：栄養−評価と治療、  Ｖｏｌ．１９，  Ｎｏ．１，  ６９−７４，２００２）は動物性蛋白質の摂取が多いと蛋白質の分解産物が腸管内に異常発生し、これらの腐敗毒素たるアミン、硫化水素、フェノール、インドール、アンモニアが腸粘膜から門脈を介して血液中に吸収され肝臓で解毒させるプロセスを経るが、このときに解毒酵素であるチトクロームＰ−４５０が活性酸素を放出するために肝臓の免疫力が障害されることが原因の１つと報告しており、活性酸素消去活性の高い食品に肝疾患の抑制効果があることを指摘している。しかしながら、エストロゲンについては言及していない。
【０００５】
一方、面屋ら（面屋敏宏ら：医学と薬学、  ４１巻、２号、２４７−２４９、１９９９）は肝硬変、肝癌は男性に多く、特に男性肝硬変患者の肝発癌率は女性の約１１倍であることから慢性肝疾患の進展過程において男性ホルモンは促進的役割を女性ホルモンが抑制的役割を果していることを動物試験で強く示唆した。しかしながら、大豆イソフラボンについては言及していない。
【０００６】
本発明はこれらの点に鑑みてなされたものであり、人間や哺乳動物の肝臓に対する疾患の予防や治療に有効な作用を備えた肝疾患予防及び治療製剤を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者は鋭意研究し、本発明者が特許第３０１４１４５号においてすでに提案している生成物であって、「原料となる大豆等の豆類の大豆胚芽を用いて、この大豆胚芽に対して麹菌を用いて製麹処理を施すとともにその生成物に対して加水し、分解処理を施して、イソフラボンアグリコンを多量に含有する生成物やフィチン酸が完全に分解除去された生成物」を生成し、この生成物に対して本発明者等が特開２０００−２８１６７３号公報において提案している生成方法に従って、さらに溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンを濃縮した生成物（アグリマックス（ＡｇｌｙＭａｘ）：ニチモウ株式会社の登録商標、以下「アグリマックス」という）を発明した。この「アグリマックス」にはイソフラボンアグリコン以外の大豆胚芽麹菌発酵産物も含まれているが、活性酸素を消去する作用であるスーパーオキシドジムスターゼ様活性（ＳＯＤ様活性）が非常に高いことが特徴である。すなわち、「アグリマックス」はイソフラボンアグリコンを約７０％に濃縮したもののＳＯＤ様活性は１２，０００単位／ｇであった。デキストリンでイソフラボンアグリコンを３０％に希釈した場合は１，３００単位／ｇであった。
【０００８】
肝疾患の原因である欧米型の食事パターンが由来の毒素が原因で解毒酵素であるチトクロームＰ−４５０が働き、活性酸素を出すことで肝臓はダメージを受けるが、このダメージを「アグリマックス」が発揮する高いＳＯＤ様活性で抑制することができるし、さらにＳＯＤ様活性の高いシベリヤ霊芝（チャーガ）エキス末、カテキン、アップルペクチンなどを混合し、ＳＯＤ様活性を高めることも可能である。
【０００９】
Ｚｈｏｕ  Ｙａｊｕｎら（Ｚｈｏｕ  Ｙａｊｕｎら：医学と薬学、４５巻、１号、７２−７５、  ２００１）はウイルス性慢性肝疾患の女性罹患率が男性に比べて低いという臨床疫学的事実は肝線維化進展における女性ホルモンの抑制的関与を示唆している。小池（小池和彦：医学のあゆみ、Ｖｏｌ．２０４、Ｎｏ．１０、７６２−７６６、２００３）は慢性Ｃ型肝炎における肝発癌メカニズムについてはマウスで炎症や線維化なしに肝癌が発生している点に注目している。すなわち、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）はＴＮＦ−α（腫瘍壊死因子）やＩＬ−１βなどの細胞遺伝子発現や核内レセプターＲＸＲ−αとの相互作用や転写因子ＡＰ−１の活性化に関与しているが、一方、活性酸素（ＲＯＳ：ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｏｘｙｇｅｎ  ｓｐｅｃｉｅｓ  ）の産生増加が肝炎という炎症なしにコア蛋白によって惹起されているとしており、肝発癌発生には活性酸素が協同的に働いているとしている。したがって、Ｃ型肝炎では肝臓において活性酸素を消去（スカベンジ）させることが肝発癌予防のポイントといえる。
【００１０】
「アグリマックス」のイソフラボンはアグリコン型イソフラボンであり、吸収性の面でグリコシド型イソフラボンに比べて優れている。すなわち、グリコシド型イソフラボンは摂取後、腸内細菌の酵素でアグリコン型に分解された後に始めて吸収されるためである。また、「アグリマックス」は脂肪細胞の分解に優れているイソフラボンであるから、肝臓がダメージを受けて脂肪肝になることを脂肪細胞分解の観点からも抑制的に働くことが示唆できる。また、イソフラボンアグリコン以外のＳＯＤ様活性の高い成分が含有されているので、前述した面屋らの報告のように、エストロゲンが肝臓癌発生率を抑制する働きがあるのであればイソフラボンアグリコンはエストロゲンレセプターを結合し、エストロゲン様作用を有するからエストロゲンとしての効果が期待できるばかりでなく、抗酸化作用による肝癌発生の予防に関しては他のイソフラボン製剤に比べて優れている（表１参照）。しかも、エストロゲンはその補充療法では副作用が強く、ＱＯＬ（生活の質）の面で問題であるが、「アグリマックス」ではそのような副作用はまったくない。男性ホルモンであるテストステロンに対してはアンドロゲンレセプターへの結合に対して拮抗的に働くので、テストステロンの働きを抑制する可能性が高い。テストステロンの分泌を抑制するために去勢することもＱＯＬの面において問題であるので、「アグリマックス」の摂取が望ましい。
【００１１】
【表１】
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【００１２】
以上のことから「アグリマックス」は肝疾患に対して肝発癌への進展を抑制する働きを有する副作用のない有効な製剤であることを確認して本発明を完成させたものである。
【００１３】
このようにしてなされた本発明の肝疾患予防及び治療製剤は、イソフラボンアグリコンを有効成分として含有することを特徴とする。このようにして形成されている本発明の肝疾患予防及び治療製剤は、有効成分のイソフラボンアグリコンが人間や哺乳動物の肝臓に対する疾患の予防や治療に有効な作用を発揮することができる。
【００１４】
また、本発明の肝疾患予防及び治療製剤は、原料としての大豆胚芽を麹菌によって発酵させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物を更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンの濃縮物とした生成物を有効成分として含有することを特徴とする。このようにして形成されている本発明の肝疾患予防及び治療製剤は、「アグリマックス」を有効成分としているために、より確実に人間や哺乳動物の肝臓に対する疾患の予防や治療に有効な作用を発揮することができる。
【００１５】
この濃縮されたイソフラボンアグリコンの組成としては、少なくとも７０重量％のダイゼインを含有し、かつ、スーパーオキシドジムスターゼ様活性が５００単位／ｇ以上あるようにするとよい。このようにして形成されている本発明の肝疾患予防及び治療製剤は、更に確実に人間や哺乳動物の肝臓に対する疾患の予防や治療に有効な作用を発揮することができる
また、本発明の肝疾患予防及び治療製剤としては、更にスーパーオキシドジムスターゼ様活性を有する物質、例えばシベリア霊芝、アップルペクチン等を含有していることを特徴とする。このようにして形成されている本発明の肝疾患予防及び治療製剤は、アグリコン等からなる有効成分による作用効果と、ＳＯＤ様活性を備えた物質による作用効果とが相乗的に作用するために、より一層確実に人間や哺乳動物の肝臓に対する疾患の予防や治療に有効な作用を発揮することができる。
【００１６】
従って、本発明の肝疾患予防及び治療製剤は、人間や哺乳動物の肝臓に対する疾患の予防や治療に有効な作用を発揮することにより、人間や哺乳動物の肝臓疾患の予防および治療を良好に行なうことができる。
【００１７】
【発明の実施形態】
以下、本発明の実施形態を説明する。
【００１８】
本実施形態においては、本発明者が特許第３０１４１４５号において既に提案している生成物であって、「原料となる大豆等の豆類に対して麹菌を用いて製麹処理を施すとともにその生成物に対して加水分解処理を施して、イソフラボンアグリコンを多量に含有する生成物やフイチン酸が完全に分解除去された生成物」において、原料として大豆胚芽を用い、本発明者等が提案している特開２０００−２８１６７３号公報に示す生成方法に従って、更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンが例えば３０重量％以上の濃縮物とした生成物とする。
【００１９】
図１は前記特許第３０１４１４５号において提案している生成物であって、豆類の１種である大豆胚芽のイソフラボン化合物の配糖体を分解して、アグリコンを多量に含むイソフラボン化合物を生成した生成物の製造方法の１実施形態および同時に大豆粕中のフィチン酸を除去した生成物の製造方法の１実施形態を示す工程図である。
【００２０】
まず、アグリコンを多量に含むイソフラボン化合物を生成した生成物を製造する場合について説明する。
【００２１】
図１の工程に沿って説明すると、先ず大豆胚芽を蒸煮する。この蒸煮を施すことにより、麹菌の増殖が容易となる。また、この大豆胚芽の蒸煮は製造目的等に応じてバッチ式や連続式で行うと良い。
【００２２】
そして、この蒸煮が終了した大豆胚芽を一旦冷却して、大豆胚芽中の水分量を麹菌が増殖可能な量（例えば、３７重量％）とさせる。
【００２３】
このようにして水分量を整えられた大豆胚芽に対して、本発明方法が以下のようにして行なわれる。
【００２４】
即ち、蒸煮が終了した大豆胚芽を殺菌し、冷却した後、大豆胚芽と麹菌との配合割合を、例えば大豆胚芽を４００ｋｇに対して麹菌胞子を  ８×１０７    個／ｇに調整した種麹（精白米にて調整）を２００ｇを混合した。更に、製麹のスタート時には３２℃に冷却した後、品温が４０℃になるまで通風しないで４０℃になった時点で通風しながら、温度上昇を抑えた。スタートから約１７時間後の最初の撹拌（盛工程）を行った。大豆胚芽の熱を冷まし、撹拌後品温が３５℃前後になるように通風しながら、温度をコントロールをした。次いで約８時間後に２回目の撹拌（仲工程）を行い、熱を冷ました。再び品温を通風で３５℃前後にコントロールし、更に約１６時間後に３回目の撹拌（仕舞工程）を前回同様に行った。その後は品温が約３８℃になるように通風しながら、温度コントロールし、スタートから４８時間後に製麹を終了させた。製麹終了後、水分含量が５０％になるように撹拌しながら、水分調整を行い、品温が約５０℃になるように加温後、４８時間以上麹菌の酵素で大豆胚芽中のイソフラボン化合物の大部分がアグリコン体になるまで加水分解した。表１の通り本発明による処理により大豆胚芽のイソフラボン化合物はアグリコン体のダイゼインが主体となるように多量に得られた。
【００２５】
この製麹に用いる麹菌としては、古くからの日本独特の発酵食品やテンペに用いられている麹菌であり、食品として安全なアスペルギルス・ウサミ、アスペルギルス・カワチ、アスペルギルス・アワモリ、アスペルギルス・サイトイ、アスペルギルス・オリゼー、アスペルギルス・ニガー等アスペルギルス属およびリゾープス属等からなる麹菌を用いるとよい。
【００２６】
この発酵時間については、使用する麹菌の種類に応じて、少なくとも２４時間以上であり、大豆粕中のイソフラボン化合物の配糖体を十分に分解させるに十分な発酵時間とするとよい。
【００２７】
この蛋白質の加水分解については、使用する麹菌の種類に応じて、大豆胚芽中のイソフラボン化合物の配糖体を十分に低減させるに十分な加水分解時間ならびに加水分解温度とするとよい。
【００２８】
このようにすれば、発酵の初期において有機酸を生成して大豆胚芽中の雑菌の増殖を抑制し、２次汚染の心配がなくなり、大豆胚芽を原料とした生成物を大量生産することができる。また、低水分としなくともイソフラボン化合物の配糖体を十分に低減させる処理を施すことができる。
【００２９】
続いて、本実施形態においては加水分解によって得られた生成物を、特開２０００−２８１６７３号公報に示す方法に従って、（１）親水性有機溶媒を用いて溶媒抽出し、（２）抽出して得た親水性有機溶液に疎水性有機溶媒を用いて液液分離し、（３）液液分離して得た親水性有機溶液に疎水性有機溶媒を用いて液液分離し、そして（４）必要に応じて、液液分離して得た疎水性有機溶液を濃縮乾燥することにより、表２のようなイソフラボンアグリコンが３０重量％以上の濃縮物を得た。この場合のイソフラボンアグリコンとしては、ダイゼインが約７０重量％含有されている。更に、スーパーオキシドジムスターゼ様活性を５００単位／ｇ以上含有している。
【００３０】
【表２】
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【００３１】
【実施例】
次に、本発明のイソフラボンアグリコンを含有する肝疾患予防及び治療製剤による肝疾患予防及び治療作用を説明する。
【００３２】
本実施例においては、肝疾患予防及び治療度合いを測定し易い雌に対して実験を行った。
【００３３】
実施例１
雌性の６週齢Ｃ５７ＢＬ／６マウスを３群（各８匹）に分け、その内２群を卵巣摘出し、１群を偽手術を施した。すわわち、▲１▼Ｓｈａｍ（偽手術）群、▲２▼ＯＸＶ（卵巣摘出）コントロール群、▲３▼ＯＸＶ（卵巣摘出）「アグリマックス」群（０．６％ＡｇｌｙＭａｘ  添加した餌投与）の３群で２週間予備飼育を行った後、高カロリー高脂肪餌を投与し、８週間飼育し、８週間後に肝臓中のトリグセライド量を比較した。下表３は高カロリー高脂肪餌の成分組成である。表４はその結果の肝臓中のトリグセライド量（ｍｇ／ｇ肝臓）を示す。
【００３４】
【表３】
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【００３５】
【表４】
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【００３６】
この雌性マウス試験で分かったことは、卵巣摘出することによりエストロゲンの分泌低下させたマウスに高カロリー高脂肪餌を投与すると脂肪肝になるが、「アグリマックス」をその餌に添加することでエストロゲンが分泌低下したマウスが脂肪肝になることを抑制できることが証明された。この結果から「アグリマックス」はエストロゲンと同じように肝臓機能の低下を抑制できることが示唆された。
【００３７】
実施例２
Ｂ型肝炎の４７才の女性に「アグリマックス」入り健康食品（製品名：ファイトロゲンはシベリヤ霊芝エキス末も含有）をイソフラボンアグリコンとして１日６０ｍｇになるように摂取した。摂取前と摂取１ヶ月後の血清トランスアミナーゼ（ＧＯＴ、ＧＰＴ）を調べた。その結果は下表５の通りとなった。
【００３８】
【表５】
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【００３９】
この女性は摂取する前はグリチルリチン製剤（医薬品：グリチロン錠）を処方されていた。血清トランスアミナーゼ（ＧＯＴ、ＧＰＴ）には変化が見られなかったばかりでなく、副作用として頭痛がひどかった。
【００４０】
「アグリマックス」入り健康食品（製品名：ファイトロゲン）を摂取後は頭痛もなくなり、体調も良くなった。
【００４１】
このことは「アグリマックス」が副作用もなっく、肝炎に対して予防効果があることが示唆できる結果といえた。
【００４２】
なお、本発明は前記実施の形態並びに実施例に限定されるものではなく、必要に応じて変更することができる。本発明の肝疾患予防及び治療製剤は前記実施例のように経口投与の他に点滴によって体内に吸収させるようにしてもよい。
【００４３】
【発明の効果】
このように本発明の肝疾患予防及び治療製剤は構成され作用するものであるから、人間や哺乳動物の肝臓に対する疾患の予防や治療に有効な作用を備えた肝疾患予防及び治療を良好に行なわせることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】大豆胚芽中のイソフラボン化合物のうち薬理作用の高いアグリコンを生成する製造方法の１実施形態を示す工程図
【図１】
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