(57)【要約】    【課題】  発色剤や化合物を用いた判定終了確認による種々の問題を解決することができ、液体試料のｐＨが大きく変動したり、長時間経過した場合であっても、判定終了を確実に確認することができ、材料点数の低減及び製造工程の簡略化を果たすことができる、安価な免疫測定具を提供する。    【解決手段】  感作粒子を含む液体試料がクロマトグラフィー用部材２の判定部２ａの上流側から判定部を通って判定終了確認表示部２ｂまで展開されるイムノクロマトグラフを用いた免疫測定具であって、クロマトグラフィー用部材２の判定終了確認表示部２ｂの断面積が、判定終了確認表示部２ｂよりも上流側に位置している部分の断面積よりも小さくされている、免疫測定具１。【選択図】      図１
2005083927.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
感作粒子を含む液体試料がクロマトグラフィー用部材の判定部の上流側から判定部を通って判定終了確認表示部まで展開されるイムノクロマトグラフ法を用いた免疫測定具において、
前記クロマトグラフィー用部材の判定終了確認表示部の断面積が、判定終了確認表示部よりも上流側に位置している部分の断面積よりも小さくされていることを特徴とする、免疫測定具。
【請求項２】
感作粒子を含む液体試料がクロマトグラフィー用部材の判定部の上流側から判定部を通って判定終了確認表示部まで展開されるイムノクロマトグラフ法を用いた免疫測定具において、
前記クロマトグラフィー用部材が前記液体試料を展開し得る多孔性材料からなり、かつ
前記判定終了確認表示部よりも上流側に位置している部分においては前記空孔が前記感作粒子の展開を可能とする大きさとされており、前記判定終了確認表示部における空孔は、前記感作粒子の移動を規制する大きさとされていることを特徴とする、免疫測定具。
【請求項３】
前記クロマトグラフィー用部材に、複数の判定部が設けられている、請求項１または２に記載の免疫測定具。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イムノクロマトグラフ法を用いた免疫測定具に関し、より詳細には、感作粒子を含む液体試料がクロマトグラフィー用部材において展開され、かつ判定部の下流側に、判定終了確認表示部が設けられている免疫測定具に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、尿や血液などの体液中の成分を測定するために、イムノクロマトグラフ法を用いた免疫測定具が種々提案されている。
【０００３】
この種の免疫測定具では、感作粒子を含む液体試料がクロマトグラフィー用部材の上流側から下流側の判定部まで展開される。ここで、感作粒子とは、液体試料中の測定しようとする抗原に対する抗体が、標識用粒子に結合または吸着したものである。そして、判定部より上流側において、感作粒子が、試料中の抗原と反応し、抗原−感作粒子複合体が形成され、該抗原−感作粒子複合体が判定部に向かって移動する。そして、判定部に固定化されている第２の抗体と、抗原−感作粒子複合体とが反応し、抗体−抗原−感作粒子複合体が形成される。このようにして、判定部に固定化されている第２の抗体が結合された複合体である抗体−抗原−感作粒子複合体における標識を検出または測定することにより、試料中の抗原が測定される。
【０００４】
ところで、上記免疫測定具においては、液体試料が確実に判定部まで展開されたか否かを確認することが困難であるという問題があった。そこで、従来、判定部の下流側に、液体試料が確実に判定部まで展開されたことを確認するための判定終了確認表示部が設けられている。
【０００５】
例えば、下記の特許文献１には、判定部の下流側に判定終了確認表示部が設けられており、該判定終了確認表示部において、クロマトグラフィー用部材にベンゾパープリン４Ｂや混合レッドなどの直接染料からなる指示薬を定着させてなる免疫測定具が開示されている。特許文献１に記載の免疫測定具では、液体試料が判定終了確認表示部に展開されてきた場合、直接染料が液体試料のｐＨ値、すなわち６．０〜９．０のｐＨ値に応じて赤色に呈色する。この赤色により、液体試料が判定終了確認表示部まで展開されてきたことが確認される。
【０００６】
他方、下記の特許文献２には、判定部の下流側に設けられた判定終了確認表示部において、エオシンＢなどの指示薬を酸含有アルコール溶液に溶解し、クロマトグラフィー用部材に吸収させ、乾燥させてなる免疫測定具が開示されている。ここでは、免疫測定具にブロッキング材を塗布したとしても、指示薬が酸性側の色調でクロマトグラフィー用部材に固定されているため、酸性側の色調が保持され、一定時間経過しても変色が生じ難いとされている。
【０００７】
他方、下記の特許文献３には、クロマトグラフィー用部材の判定終了確認表示部に水により発色する発色剤を存在させた免疫測定具が開示されている。ここでは、血液のｐＨが７．２〜７．４、尿のｐＨが４．６〜８．０であるため、ｐＨ４．６〜８．０で発色する発色剤を用いることが好適であるとされている。
【０００８】
下記の特許文献４には、クロマトグラフィー用部材の判定終了確認表示部に水性インクを滲ませてなる免疫測定具が開示されている。例えば、赤色インキなどの水で滲み易い水性インキを用いることにより、液体試料が展開してきた場合に該水性インキの滲みにより
判定終了を確認することができるとされている。
【０００９】
さらに、下記の特許文献５には、ビオチン又はビオチン誘導体及び糖リガンド又は糖リガンド誘導体から得られる化合物Ａと、化合物Ａと特異的に結合する化合物であって、アビジン又は坑ビオチン抗体及び糖結合性蛋白質から得られる化合物Ｂとのうち一方の化合物を判定部の下流の対照領域に固定しておき、かつ液体試料中に含有される標識用粒子に上記化合物Ａ及び化合物Ｂのうち他方の化合物を結合させてなる免疫測定具が開示されている。ここでは、標識用粒子に結合されている化合物Ａ又はＢと、判定終了確認表示部である対照領域に固定されている化合物Ｂ又は化合物Ａとの反応により、判定終了確認表示部である対照領域に標識用粒子を固定することにより、判定終了の確認を行なうことができるとされている。
【特許文献１】特許第２９４２０８７号公報
【特許文献２】特開２００１−２２１７９８号公報
【特許文献３】特開平６−２８９０２４号公報
【特許文献４】特開平７−３５７５１号公報
【特許文献５】特開平１１−１１８８０１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
特許文献１〜４に記載の免疫測定具では、種々の発色剤を判定終了確認に用いているが、これらの発色剤は、液体試料のｐＨが変動した場合、発色しないおそれがあり、判定終了を確実に確認することができないおそれがあった。
【００１１】
また、場合によっては、時間の経過とともに、液体試料により発色剤自体が判定終了確認表示部から流れてしまうおそれがあった。
【００１２】
さらに、免疫測定具が劣化した場合や、性状が特種な検体では、感作粒子が十分に展開せず、液体試料の水分のみが展開することがある。このような場合、特許文献１〜４に記載の種々の発色剤を用いた免疫測定具では、水分のみによっても発色し、誤った判定結果が得られるおそれがあった。
【００１３】
また、特許文献１〜５に記載の各先行技術では、クロマトグラフィー用部材の判定終了確認表示部において、発色剤や前述した特種な化合物を固定しなければならず、従って、材料点数が増加し製造コストが高くつくという問題もあった。特に、特許文献５に記載の免疫測定具では、判定終了を確認するために、標識用粒子においても化合物Ａ又は化合物Ｂの一方を固定する必要があり、さらにコストが高くつかざるを得なかった。
【００１４】
また、特許文献１〜５に記載の各先行技術では、指示薬や化合物などをクロマトグラフィー用部材に塗布するために、煩雑な塗布工程及び乾燥工程が必要であり、製造工程が煩雑であった。
【００１５】
本発明の目的は、上述した従来技術の欠点を解消し、発色剤や化合物を用いた判定終了確認による種々の問題を解決することができ、液体試料のｐＨが大きく変動したり、長時間経過した場合であっても、判定終了を確実に確認することができるとともに、免疫測定具を構成する材料の点数を低減することができ、かつ簡便な工程で製造することができる安価な免疫測定具を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本願の第１の発明は、感作粒子を含む液体試料がクロマトグラフィー用部材の判定部の上流側から判定部を通って判定終了確認表示部まで展開されるイムノクロマトグラフ法を
用いた免疫測定具において、前記クロマトグラフィー用部材の判定終了確認表示部の断面積が、判定終了確認表示部よりも上流側に位置している部分の断面積よりも小さくされていることを特徴とする。
【００１７】
本願の第２の発明は、感作粒子を含む液体試料がクロマトグラフィー用部材の判定部の上流側から判定部を通って判定終了確認表示部まで展開されるイムノクロマトグラフ法を用いた免疫測定具において、前記クロマトグラフィー用部材が前記液体試料を展開し得る多孔性材料からなり、かつ前記判定終了確認表示部よりも上流側に位置している部分においては前記空孔が前記感作粒子の展開を可能とする大きさとされており、前記判定終了確認表示部における空孔は、前記感作粒子の移動を規制する大きさとされていることを特徴とする。
【００１８】
本発明（第１，第２の発明）の免疫測定具では、複数の判定部が設けられる。
【発明の効果】
【００１９】
第１の発明に係る免疫測定具では、クロマトグラフィー用部材の判定終了確認表示部の断面積が、感作粒子を判定終了確認表示部に拘束し得るように、判定終了確認表示部よりも上流側に位置している部分の断面積よりも小さくされている。すなわち、判定終了確認表示部より上流側では、感作粒子を含む液体試料を感作粒子が移動し得るように展開され、判定終了確認表示部では、断面積が小さくされており、それによって感作粒子が判定終了確認表示部に捕捉される。従って、判定終了確認表示部まで感作粒子が展開されてきたことを判定終了確認表示部における感作粒子の存在により確実に確認することができる。
【００２０】
第２の発明に係る免疫測定具では、クロマトグラフィー用部材が液体試料を展開し得る多孔性材料により構成されており、かつ判定終了確認表示部よもりも上流側においては感作粒子が移動される大きさの空孔を有するように構成されており、判定終了確認表示部においては感作粒子が捕捉される大きさの空孔を有するように構成されている。従って、液体試料の感作粒子が、判定終了確認表示部まで確実に展開されてきた場合、判定終了確認表示部において該感作粒子が捕捉される。よって、第２の発明においても、判定終了確認表示部におけ感作粒子の存在により、判定終了を確実に把握することができる。
【００２１】
上記のように本発明（第１，第２の発明）によれば、判定終了確認表示部の物理的な構成により、感作粒子が判定終了確認表示部に捕捉されるため、指示薬や発色剤を用いることなく確実に判定終了を確認することができる。従って、液体試料のｐＨが大きく変動した場合であっても、確実に判定の終了を確認することができるとともに、時間の経過とともに発色剤などが判定終了確認表示部から流れることによる誤判定も生じ難い。また、液体試料中の水分のみが展開してきた場合においても、偽陰性の判定が行なわれることがない。
【００２２】
さらに、判定終了の確認に指示薬や発色剤を用いないため、材料点数を低減することができるとともに、製造工程の簡略化を図ることができる。従って、判定終了の確認を確実に行い得、かつ安価な免疫測定具を提供することが可能となる。
【００２３】
本発明において、複数の判定部が設けられている場合には、複数の判定部が設けられている領域の下流に判定終了確認表示部が設けられ、それによって本発明に従って複数の判定を行なうことができ、しかも判定終了を確実に確認し得る免疫測定具を提供することがてきる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２４】
以下、本発明の免疫測定具の具体的な実施形態を説明することにより、本発明をより詳
細に説明する。
【００２５】
図１（ａ）は、本発明に係る免疫測定具の第１の実施形態を示す平面図であり、（ｂ）はその側面図である。この免疫測定具１は、クロマトグラフィー用部材２を有しており、クロマトグラフィー用部材２の上流側に採液部３を有する。また、採液部３とクロマトグラフィー用部材２との間の領域において、標識用粒子に抗体が結合あるいは吸着された感作粒子が存在する感作粒子配置部４が配置されている。
【００２６】
クロマトグラフィー用部材２は、液体試料を展開し得る多孔性のクロマトグラフィー用材料により構成される。このようなクロマトグラフィー用材料としては、濾紙クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等に用いられる適宜のクロマトグラフィー用シートを用いることができる。より具体的には、クロマトグラフィー用部材２を構成する材料としては、各種合成繊維、天然繊維もしくは再生繊維をシート状に加工したものを挙げることができる。また、市販のメンブランシートを裁断することによりクロマトグラフィー用部材２を構成してもよい。
【００２７】
クロマトグラフィー用部材２には判定部２ａが位置しており、判定部２ａの下流側に判定終了確認表示部２ｂが位置している。第１の実施形態では判定終了確認表示部２ｂの幅方向寸法が判定終了確認表示部２ｂよりも上流側の部分に比べて小さくされており、それによって判定終了確認表示部２ｂの断面積が判定終了確認表示部２ｂよりも上流側の部分の断面積よりも小さくされている。
【００２８】
また、採液部３は、従来からイムノクロマトグラフ法に適用されている吸収パッドからなる。吸収パッドは、液体試料を速やかに吸収し得る適宜の材料、例えば、より大きな空孔を有する多孔性材料や繊維材料により構成され得る。なお、採液部３は必ずしも必要ではなく、液体試料を感作粒子配置部４に直接供給できる場合には、採液部３は不要であり、その場合、感作粒子配置部４が採液部を兼ねることになる。
【００２９】
免疫測定具１を使用するに際しては、採液部３において液体試料が供給される。すなわち、免疫測定具１の採液部３を液体試料に浸漬することにより、あるいは液体試料を採液部３に付着させることにより、液体試料が採液部３に供給される。液体試料は、毛管現象により、採液部３から下流側すなわち、感作粒子配置部４を経てクロマトグラフィー用部材２に向かって移動する。この場合、先ず、液体試料中の抗原が、感作粒子配置部４に存在する感作粒子と結合し、抗原−感作粒子複合体が形成される。そして、抗原−感作粒子複合体がクロマトグラフィー用部材２の判定部２ａに至ると、判定部２ａに固定化されている抗体と、抗原−感作粒子複合体とが反応し、抗体−抗原−感作粒子複合体が形成される。従って、判定部２ａにおいて、抗原の存在を確認することができる。ここで、液体試料を感作粒子配置部４に直接供給する場合は、上記工程から採液部３を省略し、その他は同様に行えばよい。
【００３０】
また、感作粒子配置部４において、感作粒子は液体試料中に、測定成分である抗原に対応した量よりも過剰に含まれるため、抗原と反応しなかった残りの感作粒子は判定部２ａからさらに下流側に移動し、判定終了確認表示部２ｂに至る。ところが、判定終了確認表示部２ｂの断面積が、感作粒子が捕捉されるように小さくされている。すなわち、感作粒子の移動が、断面積が小さくなった図１の矢印Ａで示す部分で蓄積されることになる。このようにして、捕捉された感作粒子の存在により、感作粒子含有液体試料が確実に判定部２ａまで展開されたことを確認することができる。なお、感作粒子は、標識用粒子に抗体を結合あるいは吸着させたものであるので、標識用粒子の標識により、感作粒子の存在を確認することができる。
【００３１】
上記判定終了確認表示部２ｂの断面積は、液体試料中に含有されている感作粒子が判定終了確認表示部２ｂに至った際に捕捉され得る断面積とされればよい。すなわち、感作粒子の濃度が判定終了確認表示部２ｂに至った場合に著しく高くなり、捕捉され得る程度の断面積とされればよい。このような断面積の大きさは、使用される液体試料中の感作粒子の大きさや濃度によってもことなるため、一義的には定め得ない。
【００３２】
もっとも、通常、判定終了確認表示部２ｂの断面積は、判定終了確認表示部２ｂよりも上流側の断面積の３０〜８０％程度の割合とすることが好ましい。
【００３３】
図２は、本発明の第２の実施形態に係る免疫測定具を示す平面図である。免疫測定具５では、クロマトグラフィー用部材２の一部を切り欠くことにより、判定終了確認表示部２ｂが設けられている。すなわち、第１の実施形態では、判定終了確認表示部２ｂの幅方向寸法が判定終了確認表示部２ｂよりも下流側の全長に渡り小さくなるようにされていたが、図２に示すように判定終了確認表示部２ｂにおいて、クロマトグラフィー用部材２の両側縁に開いた切り欠き２ｃ，２ｄを設けることにより判定終了確認表示部２ｂを構成してもよい。この場合においても判定終了確認表示部２ｂの断面積が、感作粒子を捕捉し得るようにクロマトグラフィー用部材２の上流側部分の断面積よりも小さくされている。従って、第１の実施形態の場合と同様に、第２の実施形態の場合においても、展開されてきた感作粒子が判定終了確認表示部２ｂで捕捉されるため感作粒子が判定部２ａまで確実に展開されてきたことを確認することができる。
【００３４】
また、第２の実施形態においては、判定終了確認表示部２ｂよりも下流側の断面積を小さくしていないので、判定終了確認表示部２ｂよりも下流側の部分の吸水性を損なうことがなく、すなわち、液体試料を上流側から下流側へとより速やかに展開させることができる。
【００３５】
図３は、本発明の第３の実施形態に係る免疫測定具を説明するための側面図である。免疫測定具６では、第１の実施形態の場合と同様に上流側から採液部３、感作粒子配置部４及びクロマトグラフィー用部材２が設けられており、クロマトグラフィー用部材２には判定部２ａ及び判定終了確認表示部２ｂが設けられている。異なるところは、判定終了確認表示部２ｂの厚みが判定終了確認表示部２ｂよりも上流側の部分よりも薄くされていることにある。
【００３６】
第３の実施形態では、判定終了確認表示部２ｂの断面積はその厚みを薄くすることにより、判定終了確認表示部２ｂよりも上流側の部分よりも小さくされている。
【００３７】
従って、第３の実施形態においても、展開してきた感作粒子が捕捉されるように、判定終了確認表示部２ｂの断面積が小さくされているため、判定終了確認表示部２ｂに展開してきて、判定終了確認表示部２ｂに捕捉された感作粒子の存在により、判定の終了を確認することができる。
【００３８】
第１〜第３の実施形態から明らかなように、第１の発明において、判定終了確認表示部の断面積を、感作粒子が捕捉されるようにする具体的な構成は、感作粒子が捕捉され得る限り特に限定されるものではなく、様々な形状とすることができる。
【００３９】
また、第３の実施形態の免疫測定具６は、本願の第２の発明の実施形態にもなり得る。
【００４０】
すなわち、クロマトグラフィー用部材２は、先に記載したように、感作粒子含有液体試料を展開し得る多孔性材料で構成されている。そして、この多孔性材料からなるクロマトグラフィー用部材２を、判定終了確認表示部２ｂが設けられている部分においてローラー
などを用いて押圧することにより、図３に示した判定終了確認表示部２ｂを構成することができる。この場合には、判定終了確認表示部２ｂにおいては、押圧により空孔の大きさが小さくなる。従って、この押圧の程度を制御することによりすなわち、感作粒子が移動し得ない大きさの空孔となるように押圧することにより、感作粒子を判定終了確認表示部２ｂの開始部分に捕捉することができる。
【００４１】
すなわち、判定終了確認表示部２ｂよりも上流側では、感作粒子が展開し得る大きさの空孔が設けられており、他方、判定終了確認表示部２ｂでは、空孔の大きさは感作粒子が移動し得ない大きさとされている。従って、判定終了確認表示部２ｂにおいて感作粒子が移動し得ないため、判定終了確認表示部２ｂに感作粒子が捕捉される。よって、感作粒子の存在により、感作粒子が少なくとも判定部まで展開されてきたことを確実に把握することができる。
【００４２】
また、通常、判定終了確認表示部の空孔の大きさは、判定終了確認表示部よりも上流側の空孔の大きさの３０〜８０％程度の面積割合とすることが好ましい。
【００４３】
図４は、本発明の第４の実施形態に係る免疫測定具を説明するための側面図である。免疫測定具７では、採液部３及び感作粒子配置部４と、クロマトグラフィー用部材として空孔の大きさの異なる多孔性シート８，９とが積層されている。多孔性シート８は、クロマトグラフィー用部材２と同様の材料で構成されている。多孔性シート８には、判定部８ａが位置している。また、判定部８ａにおいては、第２の抗体が固定化されている。そして、多孔性シート８の下流側に多孔性シート９が積層されている。多孔性シート９は、多孔性材料からなるが、その空孔は、感作粒子を移動させない大きさとされている。他方、多孔性シート８においては、感作粒子が展開し得る大きさの空孔が設けられている。従って、本実施形態では、多孔性シート９の開始端が、判定終了確認表示部８ｂを構成する。
【００４４】
このように、判定終了確認表示部を構成する相対的に小さな空孔を有する部分は、判定部が形成されたクロマトグラフィー用部材に積層された別部材に構成されてもよい。
【００４５】
なお、本願の第２の発明においても、本願の第１の発明と同様に、採液部３は必ずしも必要ではない。
【００４６】
図５及び図６は、本発明に係る免疫測定具の具体的な構造の一例を示す分解斜視図及び外観を示す斜視図である。
【００４７】
本発明に係る免疫測定具は、図１〜図４に示したように感作粒子配置部及びクロマトグラフィー用部材と必要に応じて採液部のみとで構成されてもよい。もっとも、図５及び図６に示すように、判定操作を簡便に行なうためには、ハウジングにクロマトグラフィー用部材２などを収納した構造とすることが好ましい。
【００４８】
図５に示す免疫測定具１１では、ハウジング１２内に第１の実施形態の免疫測定具１が取り付けられている。ハウジング１２は、第１のハウジング材１２ａと、第２ハウジング材１２ｂとを有する。第１のハウジング材１２ａと、第２のハウジング材１２ｂとの間に、免疫測定具１が狭持される。第１のハウジング材１２ａには、免疫測定具１の判定部２ａに対応した位置に判定窓１２ｃが設けられている。この判定窓１２ｃから免疫測定具１の判定部２ａの着色状態を目視により観察することができる。
【００４９】
また、第１のハウジング材１２ａには、判定終了確認窓１２ｄが設けられている。判定終了確認表示窓１２ｄは、免疫測定具１の判定終了確認表示部２ｂに対応した位置に設けられている。従って、判定終了確認表示窓１２ｄから、感作粒子の存在を確認することに
より、判定が終了したがどうかを確実に把握することができる。
【００５０】
なお、判定表示窓１２ｃ及び判定終了確認表示窓１２ｄは、いずれも透孔により構成されてもよく、またガラスなどの透明性材料により閉成されていてもよい。
【００５１】
上記免疫測定具１の上流側には、吸収パッドからなる採液部３が固定されている。また、判定終了確認表示部のさらに下流側にも吸収パッドからなる液吸収部３ａが形成されているのが好ましい。吸収パッドは、液体試料を速やかに吸収し得る適宜の材料例えば、より大きな空孔を有する多孔性材料や繊維状部材により構成され得る。なお、採液部３及び液吸収部３ａは必ずしも必要ではない。
【００５２】
また、ハウジング１２から上記採液部３は突出している。この突出している採液部３を覆うように、キャップ１４がハウジング１２に取り付けられる。このようにして、図６に示す免疫測定具１１は、容易に携帯し得る小型の免疫測定具として構成されている。
【００５３】
なお、ハウジング１２及びキャップ１４は、適宜の合成樹脂材料で構成され得る。また、免疫測定具１１では、第１の実施形態の免疫測定具１が収納されていたが、第２〜第４の各免疫測定具が代わりに収納されていてもよい。
【００５４】
本発明は、上述したように、免疫測定具における判定終了確認表示部の構成に特徴を有するものであり、その他の構成は特に限定されるものではない。
【００５５】
本発明における免疫測定具において供給される液体試料についても特に限定されず、尿、血液、便懸濁液あるいは血清などの血液成分などの様々な体液を挙げることができる。あるいは、体液を希釈した液体なども液体試料として用いることができる。
【００５６】
また、液体試料中に含まれている測定対象物質についても特に限定されず、ヘモグロビン、糖ＬＨ、ＳＦＨ（卵胞刺激ホルモン）、ＴＳＨ（甲状腺刺激ホルモン）、様々な蛋白質などを挙げることができる。
【００５７】
また、本発明で使用される感作粒子は、標識用粒子に抗体を結合あるいは吸着させたものであるが、標識用粒子としては、特に限定されず、金コロイドまたは合成樹脂ラテックスなどを挙げることができる。合成樹脂ラテックスとしては、ポリスチレン、スチレン−（メタ）アクリル酸共重合体などの様々な合成樹脂からなるラテックスを挙げることができる。
【００５８】
もっとも、標識用粒子の大きさは、免疫測定具における判定終了確認表示部よりも上流側において展開される大きさであることが必要である。具体的には、合成樹脂ラテックスとしては、通常、好ましくは１００〜４００ｎｍ程度、より好ましくは２００〜４００ｎｍ程度の粒径（直径）を有するものが用いられる。
【００５９】
また、上記標識用粒子に固定化される抗体については、測定対象物質である抗原に応じて選択すればよい。
【００６０】
さらに、測定対象物質は抗体であってもよく、その場合には、標識用粒子に、対応した抗原あるいは２次抗体を固定化すればよい。
【００６１】
また、判定部に固定化される第２の抗体についても、測定対象物質である抗原に応じた抗体を選択すればよく、測定対象物質が抗体である場合には、該抗体に応じた抗原あるいは２次抗体を選択すればよい。
【００６２】
次に、具体的な実施例について説明する。
【００６３】
（実施例１）
標識用粒子として、平均粒径３００ｎｍの青色ポリスチレンラテックス（積水化学社製）を用意した。このラテックス粒子を固形分濃度で０．０５重量％となるように水で希釈し、ラテックス希釈液を得た。
【００６４】
クロマトグラフィー用部材として、ニトロセルロースメンブレン（ミリポア社製、品名ＳＲＨＦ、厚み２００μｍ）をＢＳＡでブロッキングし、しかる後、幅５ｍｍ×長さ５ｃｍに裁断した。このようにして、長さ５ｃｍ×幅５ｍｍ×厚み２００μｍのクロマトグラフィー用部材を用意した。
【００６５】
幅５ｍｍ×長さ１ｃｍのベンリーゼ不織布（旭化成社製）を別途用意し、これに上記ラテックス希釈液を０．０５ｍＬ添加し、乾燥させ、コンジュゲートパッドを得た。このコンジュゲートパッドを、上記クロマトグラフィー用部材の上流側端部から上流側に５ｍｍの長さ部分が突出し、かつ長さ５ｍｍの領域でクロマトグラフィー用部材に重なる位置に固定し、採液部を兼ねた感作粒子配置部（標識用粒子配置部）を形成した。また、上記クロマトグラフィー用部材の上流側端部から長さ方向４ｃｍの部分を、幅１ｍｍのローラーを用いて押圧し、厚み１００μｍの判定終了確認表示部を形成した。このようにして得た長さ５．５ｃｍの免疫測定具では、長さ１ｃｍのコンジュゲートパッドの領域が採液部を兼ねた感作粒子配置部（標識用粒子配置部）を構成し、クロマトグラフィー用部材の上流側端部から４ｃｍ〜４．１ｃｍの部分が判定終了確認表示部を構成しており、クロマトグラフィー用部材の判定終了確認表示部よりも上流側に判定部が形成される。
【００６６】
（比較例１）
ローラーによる加圧部分を設けなかったことを除いては実施例１と同様にして、免疫測定具を作製した。
【００６７】
（実施例２）
標識用粒子として、平均粒径５０ｎｍの金コロイド（ブリティッシュバイオセル社製）を用意した。この標識用粒子を固形分濃度で０．０８重量％となるよう水で希釈し、金コロイド希釈液を得た。この金コロイド希釈液をラテックス希釈液に代えて用いたことを除いては、実施例１と同様にして免疫測定具を作製した。
【００６８】
（比較例２）
クロマトグラフィー用部材にローラーによる圧力を加えなかったことを除いては、実施例２と同様にして免疫測定具を作製した。
【００６９】
（実施例３）
標識用粒子として平均粒径３００ｎｍの青色ポリスチレンラテックス（積水化学社製）を用意した。
【００７０】
このラテックスにＨＢｓ抗体を吸着量が３０μｇ／ｍｇとなるように室温で固定化し、ＢＳＡでブロッキング操作を施した。遠心分離で過剰な抗体を除去し、ラテックスの固形分濃度が０．０５重量％となるように１重量％ＢＳＡ含有リン酸緩衝液で希釈した。このようにして得られた希釈液を、実施例１で用いたコンジュゲートパッドに０．０５ｍＬ添加し、乾燥させ、実施例１で用いたのと同様のクロマトグラフィー用部材に固定した。実施例３の免疫測定具では、上流側端部のコンジュゲートパッドの領域に採液部を兼ねた感作粒子配置部が配置されており、クロマトグラフィー用部材の上流側端部から長さ方向３
ｃｍの部分に幅１ｍｍの判定部を設け、該判定部にＨＢｓ抗体を固定化した。液体試料中にＨＢｓ抗原が存在した場合には、サンドイッチ反応により、判定部において標識用粒子の青色が検出される。
（実施例及び比較例の評価）
実施例１，２及び比較例１，２では、液体試料として水を採液部から供給した。その結果、下記の表１に示すように比較例１，２では、判定終了確認表示部において標識用粒子による着色を確認することができなかった。これに対して、実施例１，２では、標識用粒子が判定終了確認表示部で捕捉されるため、標識用粒子の着色が５分後及び３分後に確認された。すなわち、５分後及び３分後には、標識用粒子が少なくとも判定部まで展開されてきたことが確認された。また、実施例３では、ＨＢｓ抗原含有液体試料を供給したところ、判定部において標識用粒子の青色の着色によりＨＢｓ抗原の存在が検出されるとともに、５分後に判定終了確認表示部において標識用粒子の青色による着色が確認された。従って、液体試料が確実に判定部に展開されてきたことを５分後に確認することができた。
【００７１】
【表１】
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【図面の簡単な説明】
【００７２】
【図１】（ａ），（ｂ）は本発明の第１の実施形態に係る免疫測定具を示す平面図及び側面図。
【図２】本発明の第２の実施形態に係る免疫測定具を示す平面図。
【図３】本発明の第３の実施形態に係る免疫測定具を示す側面図。
【図４】本発明の第４の実施形態に係る免疫測定具を示す側面図。
【図５】図１に示した免疫測定具を用いて構成される免疫測定具の分解斜視図。
【図６】図５に示した免疫測定具の外観を示す斜視図。
【符号の説明】
【００７３】
１…免疫測定具
２…クロマトグラフィー用部材
２ａ…判定部
２ｂ…判定終了確認表示部
２ｃ，２ｄ…切り欠き
３…採液部
３ａ…液吸収部
４…感作粒子配置部
５…免疫測定具
６…免疫測定具
７…免疫測定具
８，９…多孔性シート
８ａ…判定部
１１…免疫測定具
１２…ハウジング
１２ａ，１２ｂ…第１，第２のハウジング材
１２ｃ…判定窓
１２ｄ…判定終了確認表示窓
１４…キャップ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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