(57)【要約】【課題】  病巣選択的に造影するためのリポソーム含有ヨード造影剤に適したヨード化合物を提供する。【解決手段】  ステロイド残基と１ないし４個のアリール基（該アリール基は少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基であり、好ましくはトリヨードアリール基である）とを含むリン酸ジエステル化合物又はその塩。例えば、下記一般式（Ｉ）：【化１】2005068053.tif 000011（式中、Ａｒ1及びＡｒ2はそれぞれ独立に少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基を示し；Ｌ1は３〜４０個の炭素原子を含む三価の連結基を示し；Ｓｔｅ1はステロイド残基を示す）で表されるリン酸ジエステル化合物又はその塩。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ステロイド残基と１ないし４個のアリール基（該アリール基は少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有する）とを含むリン酸ジエステル化合物又はその塩。
【請求項２】
ステロイド残基と１ないし４個のトリヨードアリール基とを含む請求項１に記載のリン酸ジエステル化合物又はその塩。
【請求項３】
下記一般式（Ｉ）：
【化１】
2005068053.tif 000009
（式中、Ａｒ1及びＡｒ2はそれぞれ独立に少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基を示し；Ｌ1は３〜４０個の炭素原子を含む三価の連結基を示し；Ｓｔｅ1はステロイド残基を示す）で表される請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
Ａｒ1及びＡｒ2がそれぞれ独立に少なくとも３個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基である請求項３に記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
下記の一般式（ＩＩ）：
【化２】
2005068053.tif 000010
（式中、Ａｒ3は少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基を示し；Ｌ2は単結合又は１〜２０個の炭素原子を含む２価の連結基を示し；Ｓｔｅ2はステロイド残基を示す）で表される請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
Ａｒ3が少なくとも３個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基である請求項５に記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
請求項１ないし６のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を膜構成成分として含むリポソーム。
【請求項８】
ホスファチジルコリン及びホスファチジルセリンを膜構成成分として含む請求項７に記載のリポソーム。
【請求項９】
請求項７又は８に記載のリポソームを含むＸ線造影剤。
【請求項１０】
血管疾患の造影に用いるための請求項９に記載のＸ線造影剤。
【請求項１１】
泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影に用いる請求項９に記載のＸ線造影剤。
【請求項１２】
マクロファージが局在化する組織又は疾患部位の造影のための請求項９に記載のＸ線造影剤。
【請求項１３】
マクロファージが局在化する組織が肝臓、脾臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、及び腎臓上皮からなる群から選ばれる請求項９に記載のＸ線造影剤。
【請求項１４】
マクロファージが局在化する疾患部位が腫瘍、炎症部位、及び感染部位からなる群から選ばれる請求項９に記載のＸ線造影剤。
【請求項１５】
少なくとも１つのヨード原子が放射性同位体である請求項１ないし６のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を膜構成成分として含むリポソーム。
【請求項１６】
請求項１５に記載のリポソームを含むシンチグラフィー造影剤。
【請求項１７】
泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影に用いる請求項１６に記載のシンチグラフィー造影剤。
【請求項１８】
マクロファージが局在化している組織又は疾患部位の造影に用いるための請求項１６に記載のシンチグラフィー造影剤。
【請求項１９】
対象とする組織が血管、肝臓、脾臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、及び腎臓上皮からなる群から選ばれる請求項１６に記載のシンチグラフィー造影剤。
【請求項２０】
腫瘍、動脈硬化、炎症、及び感染からなる群から選ばれる疾患部位の造影に用いるための請求項１６に記載のシンチグラフィー造影剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヨードアリール基を有するリン酸エステル化合物に関する。この化合物はリポソームの膜構成成分として利用することができ、このリポソームはＸ線造影剤として用いることができる。
【背景技術】
【０００２】
ヨード化合物を用いたＸ線血管造影の分野では、水溶性のヨード造影剤を投与することにより血液の流れを造影し、その流れが滞っている箇所をみつける技術がある。この方法は、ヨード造影剤が血流中にあり、血管内部の血流の変化を検出する方法であるところから、ヨード造影剤が病巣細胞に局在する場合に比べて正常組織との区別がつけにくい。このため、通常この方法では狭窄が５０％以上進んだ病巣しか検出することができず、虚血性疾患の発作が発症する前に病巣を検出することは困難である。
【０００３】
これとは別に、疎水性ヨード造影剤若しくは親水性造影剤を製剤化し、目的とする疾患部位に選択的に集積させる試みが報告されている。例えば、疎水性化合物であるCholesteryl  Iopanoateの油滴分散液を注射することにより、該ヨード化合物が実験動物の動脈硬化部位に集積することが開示されている（非特許文献１参照）。また 、Cholesteryl IopanoateをアセチルＬＤＬに取り込ませて投与することによって該ヨード化合物が実験動物の動脈硬化部位に集積することが開示されている（非特許文献２参照）。
【０００４】
また、 Cholesteryl Iopanoateの油滴分散液を注射することによる肝臓や脾臓のX線造影の例（非特許文献３参照）や、diatrizoic acid のエステル体をリポソームに封入し、肝臓や脾臓の選択的造影を行う方法（特許文献１参照）、血管プールやリンパ系をイメージ化するための造影剤（特許文献２及び３参照）が開示されている。しかしながら、これらの製剤方法は、血管疾患を選択的に造影する目的のためには、効率及び選択性ともに十分でなく、Ｘ線照射により血管疾患を画像化した例も報告されていない。
【０００５】
一方、２個の３−アミノ−２，４，６−トリヨードフェニル基を含むアルキルカルボン酸と飽和／不飽和脂肪酸からなるトリグリセリド化合物を、油滴分散（Lipid Emulsion）やTween20分散物として製剤化し、肝臓やBlood-poolの造影を目的として用いる方法が報告されている（例えば、非特許文献４参照）。
【０００６】
また、疎水性、かつ加水分解抵抗性の放射性ヨード造影剤をマイクロエマルジョン製剤化、若しくはアセチルＬＤＬに取り込ませて実験動物に投与して、動脈硬化巣部位を放射性造影する例が開示されている（特許文献４参照）。上述のCholesteryl Iopanoateを用いて動脈硬化巣部位をＸ線造影する例も開示されているが（特許文献５参照）、この化合物は生体内で分解されず、生体臓器、特に肝臓に蓄積することが報告されている（非特許文献５参照）。このような化合物の性質は生体内に長期留まることを示しており、例えば、Ｘ線造影剤のような診断への用途を考えた場合には好ましい性質とはいえない。
【０００７】
化合物の観点からは、２個の３−アミノ−２，４，６−トリヨードフェニル基を含むアルキルカルボン酸からなるジアシル−１，３−グリセリド化合物についての記載がある（特許文献６及び非特許文献６参照）。しかし、合成中間体としての使用以外の用途は示されていない。また、コレステロールと、１個又は２個の３−アミノ−２，４，６−トリヨードフェニル基を含むアルキルカルボン酸をエステル結合を介して縮合した化合物の記載がある（特許文献７及び８）が、生体分解性に関する記述はなされていない。
【特許文献１】米国特許第4567034号
【特許文献２】国際公開WO96/28414
【特許文献３】国際公開WO96/00089
【特許文献４】国際公開WO01/93918
【特許文献５】国際公開WO01/82977
【特許文献６】米国特許第4873075号
【特許文献７】特開2003-12691号公報
【特許文献８】特開2003-12692号公報
【非特許文献１】ファーマシューティカル・リサーチ（Pharmaceutical Research）, 6(12), 1011 (1989)
【非特許文献２】ファーマシューティカル・リサーチ（Pharmaceutical Research）, 16(3), 420 (1999)
【非特許文献３】ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンス（Journal of Pharmaceutical Science）, 72(8), 898 (1983)
【非特許文献４】ラジオロジー（Radiology）, 216(3)
【非特許文献５】ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（ Journal of Medicinal Chemistry）, 25, 1500 (1982)
【非特許文献６】ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（ Journal of Medicinal Chemistry）, 29, 2457 (1986)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の課題は、病巣選択的に造影するためのリポソーム含有ヨード造影剤に適したヨード化合物を提供することである。本発明者等は上記の課題を解決すべく研究を行った結果、ヨードアリール基を有するリン酸エステル化合物がＸ線造影剤としてのリポソームの構成成分として優れた性質を有しており、この化合物を含むリポソームを用いてＸ線造影することにより血管疾患の病巣を選択的に造影できることを見出した。また同時に、この化合物は造影後に肝臓で代謝され、体内に蓄積しない性質を有することも見出した。本発明は上記の知見を基にして完成された。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
すなわち、本発明は、ステロイド残基と１ないし４個のアリール基（該アリール基は少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有する）とを含むリン酸ジエステル化合物又はその塩を提供するものである。この発明の好ましい態様によれば、ステロイド残基と１ないし４個のトリヨードアリール基とを含むリン酸ジエステル化合物又はその塩が提供される。さらに好ましい態様によれば、下記一般式（Ｉ）：
【００１０】
【化１】
2005068053.tif 000002
（式中、Ａｒ1及びＡｒ2はそれぞれ独立に少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基を示し；Ｌ1は３〜４０個の炭素原子を含む三価の連結基を示し；Ｓｔｅ1はステロイド残基を示す）で表されるリン酸ジエステル化合物又はその塩；
下記一般式（ＩＩ）：
【００１１】
【化２】
2005068053.tif 000003
（式中、Ａｒ3は少なくとも１個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基を示し；Ｌ2は単結合又は１〜２０個の炭素原子を含む２価の連結基を示し；Ｓｔｅ2はステロイド残基を示す）で表されるリン酸ジエステル化合物又はその塩が提供される。さらに好ましい態様としては、Ａｒ1及びＡｒ2がそれぞれ独立に少なくとも３個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基である一般式（Ｉ）に記載の化合物又はその塩；Ａｒ3が少なくとも３個のヨウ素原子を置換基として有するアリール基である一般式（ＩＩ）に記載の化合物又はその塩が提供される。
【００１２】
別の観点からは、本発明により、上記の化合物又はその塩を膜構成成分として含むリポソームが提供され、その好ましい態様によれば、ホスファチジルコリン及びホスファチジルセリンを膜構成成分として含む上記リポソームが提供される。
【００１３】
また、本発明により、上記のリポソームを含むＸ線造影剤が提供される。この発明の好ましい態様によれば、血管疾患の造影に用いる上記Ｘ線造影剤；泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影に用いる上記Ｘ線造影剤；マクロファージが局在化する組織又は疾患部位の造影に用いる上記のＸ線造影剤；マクロファージが局在化する組織が肝臓、脾臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、及び腎臓上皮からなる群から選ばれる上記のＸ線造影剤が提供される。
【００１４】
さらに、上記Ｘ線造影剤の製造のための上記の化合物又はその塩の使用；Ｘ線造影法であって、上記の化合物を膜構成成分として含むリポソームをヒトを含む哺乳類動物に投与した後にＸ線を照射する工程を含む方法；血管疾患の病巣の造影方法であって、上記の化合物を膜構成成分として含むリポソームをヒトを含む哺乳類動物に投与した後にＸ線を照射する工程を含む方法が本発明により提供される。
【００１５】
また、少なくとも１つのヨード原子が放射性同位体である上記の化合物又はその塩を膜構成成分として含むリポソーム、及び該リポソームを含むシンチグラフィー造影剤が本発明により提供される。この発明の好ましい態様によれば、泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影に用いる上記のシンチグラフィー造影剤；マクロファージが局在化する組織又は疾患部位の造影に用いる上記のシンチグラフィー造影剤；造影対象の組織が血管、肝臓、脾臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、及び腎臓上皮からなる群から選ばれる上記のシンチグラフィー造影剤；腫瘍、動脈硬化巣、炎症部位、及び感染部位からなる群から選ばれる疾患部位の造影に用いる上記のシンチグラフィー造影剤が提供される。
【００１６】
上記シンチグラフィー造影剤の製造のための上記の化合物又はその塩の使用；シンチグラフィー造影法であって、上記の化合物を膜構成成分として含むリポソームをヒトを含む哺乳類動物に投与した後に該リポソームが発生する放射線を検出する工程を含む方法；血管疾患の病巣の造影方法であって、上記の化合物を膜構成成分として含むリポソームをヒトを含む哺乳類動物に投与した後に該リポソームが発生する放射線を検出する工程を含む方法も本発明により提供される。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の化合物は、Ｘ線造影剤のためのリポソームの構成脂質として優れた性質を有しており、この化合物を含むリポソームを用いてＸ線造影することにより血管の病巣を選択的に造影できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本明細書においてＳｔｅ1及びＳｔｅ2が表す「ステロイド残基」とはステロイド化合物（シクロペンタノヒドロフェナントレイン骨格を有する化合物）の残基を意味する。ステロイド残基は、一価の残基であってもよいが、二価以上の残基であってもよい。本明細書においてステロイド残基という場合には、置換又は無置換のステロイド残基のいずれであってもよい。また、ステロイド残基は任意の個数の二重結合を有していてもよい。ステロイド残基は一般に１個以上の不斉炭素を有するが、不斉炭素の配置はそれぞれ独立にＲ又はＳ配置のいずれか、あるいは両者の混合物であってもよい。
【００１９】
上記ステロイド残基を構成するステロイド化合物の例としては、コレステロール、コレスタノール、コール酸、デヒドロコール酸、アンドロステロン、ディジトキシゲニン、ディゴキシゲニン、リトコール酸、スティグマスタノール、テトラヒドロコルチソン、ブファリン、５α −アンドロスタン−３β 、１７β−ジオール、デヒドロエピアンドロステロン、５−アンドロステン−３β、１７β−ジオール、プレグネノロン、５−コレステン−３β、２０α−ジオール、スチグマステロン、β−シトステロール、５−コレステン−３β−オル−７−オン、カンペステロール、２２−ヒドロキシコレステロール、１７α−アセトキシプレグネノロン、ヂオスゲニン、メチルアンドロステンジオール、５−アンドロステン−３β−オル−１７β−カルボン酸、１７α−ヒドロキシプレグネノロン、２１−アセトキシプレグレノロン、１６β−メチル−１６α、１７α−エポキシプレグネノロン、フコステロール、ソラソジン、５−プレグネン−６−メチル−３β、１７−ジオール−２０−オン、６−メチルプレグネノロン、２１−ヒドロキシプレグネノロン、５−プレグネン−３β、２０α−ジオール、１９−ヨードコレステロール、１６α−メチルプレグネノロン、５−アンドロステン−３β、１７β−ジオール−１７−ベンゾエート、５−アンドロステン−３β、１６α−ジオール−１７−オン、３β、１１β、１７α、２１−テトラヒドロプレグ−５−ネン−２０−オン、５−プレグネン−３β、１６α−ジオール−２０−オン、５−コレステン酸−３β−オルメチルエステル、デスモステロール、５−コレステン−３β−オル−２２−オン、プレグ−５−ネン−３β、１７α、２０α−トリオール、１９−ヒドロキシコレステロール、ソラニジン、２５−ヒドロキシコレステロール、７β−ヒドロキシコレステロール、１９−ヒドロキシプレグネノロン、１７α−ヒドロキシ−１６β−メチルプレグネノロン、１６，１７−エポキシ−２１−アセトキシプレグネノロン、５−プレグネン−６、１６α−ジメチル−３β−オル−２０−オン、５−コレステン酸−３β−オル、アンドロスト−５−ネン−３β、１６β、１７β−トリオール、５−コレステン−３β、２２−ジオール、プレグ−５−ネン−３β、１７α、２０β−トリオール、２１−ヒドロキシプレグネノロン−２１−サルフェートカリウム塩、５−プレグネン−３β−オル−２０−オン−１６α−カルボニトリル、１６α、１７α、エポキシプレグネノロン等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。ステロイド残基としては、環構造中に１以上の二重結合を含むステロイド残基か、コレスタナール基が好ましく、なかでもコレステロール基がより好ましい。
【００２０】
本明細書において、ある官能基について「置換又は無置換」又は「置換基を有していてもよい」という場合には、その官能基が１又は２以上の置換基を有する場合があることを示しているが、特に言及しない場合には、結合する置換基の個数、置換位置、及び種類は特に限定されない。ある官能基が２個以上の置換基を有する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。本明細書において、ある官能基が置換基を有する場合、置換基の例としては、ハロゲン原子（本明細書において「ハロゲン原子」という場合にはフッ素、塩素、臭素、又はヨウ素のいずれでもよい）、アルキル基（本明細書において「アルキル基」という場合には、直鎖状、分岐鎖状、環状、又はそれらの組み合わせのいずれでもよく、環状アルキル基にはビシクロアルキル基などの多環性アルキル基を含む。アルキル部分を含む他の置換基のアルキル部分についても同様である）、アルケニル基（シクロアルケニル基、ビシクロアルケニル基を含む）、アルキニル基、アリール基、ヘテロ環基、シアノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、カルボキシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シリルオキシ基、ヘテロ環オキシ基、アシルオキシ基、カルバモイルオキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基、アリールオキシカルボニルオキシ基、アミノ基（アニリノ基を含む）、アシルアミノ基、アミノカルボニルアミノ基、アルコキシカルボニルアミノ基、アリールオキシカルボニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、アルキル及びアリールスルホニルアミノ基、メルカプト基、アルキルチオ基、アリールチオ基、ヘテロ環チオ基、スルファモイル基、スルホ基、アルキル及びアリールスルフィニル基、アルキル及びアリールスルホニル基、アシル基、アリールオキシカルボニル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、アリール及びヘテロ環アゾ基、イミド基、ホスフィノ基、ホスフィニル基、ホスフィニルオキシ基、ホスフィニルアミノ基、シリル基が挙げられる。
【００２１】
本明細書において、Ａｒ1、Ａｒ2及びＡｒ3はそれぞれ独立に少なくとも１個のヨウ素原子で置換されたアリール基を表す。アリール基の環上に置換するヨウ素原子の個数は１個以上であれば特に限定されないが、３個以上である場合が好ましく、３個の場合が特に好ましい。該アリール基の種類は特に規定されないが、アントラセン基、ナフタレン基、フェニル基、チオフェン基が好ましく、フェニル基が最も好ましい（本明細書中で言及する他のアリール基についても同様である）。 Ａｒ1、Ａｒ2及びＡｒ3が示すアリール基の環上に存在するヨウ素原子の置換位置は特に限定されず、環上の任意の位置に存在することが可能である。該アリール基はヨウ素原子以外の置換基を有していてもよい。該アリール基がヨウ素原子以外の置換基を有する場合にはその置換基の種類、個数、及び置換位置は特に限定されない。アリール基が有する好ましい置換基の例としては、ハロゲン原子、アルキル基、シアノ基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アミノ基、アシルアミノ基、アシル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基が挙げられる。また、アリール基がヨウ素原子以外の置換基を有しない場合も好ましい。
【００２２】
Ａｒ1、Ａｒ2及びＡｒ3がそれぞれトリヨードフェニル基を表す場合、芳香環上における３個のヨウ素原子の置換位置は特に規定されないが、「２，４，６位」、「２，３，５位」、「３，４，５位」置換が好ましく、より好ましくは「２，４，６位」、「２，３，５位」置換であり、なかでも「２，４，６位」置換が最も好ましい。トリヨードフェニル基はさらに置換基を有していてもよい。該トリヨードフェニル基が置換基を有する場合、その好ましい置換基の例としては、 Ａｒ1、Ａｒ2及びＡｒ3が示すアリール基について例示した置換基と同様のものが挙げられる。また、 Ａｒ1、Ａｒ2及びＡｒ3が３個のヨウ素原子以外に置換基を有しない場合も好ましい。
【００２３】
Ｌ1で表される三価の連結基は炭素原子数３〜４０個を含む。該連結基は飽和の基であってもよいが、不飽和結合を含んでいてもよい。また、ヘテロ原子（本明細書においてヘテロ原子という場合には、窒素原子、酸素原子、硫黄原子などの炭素原子以外の任意の原子を意味する）を１個又は２個以上含んでいてもよく、ヘテロ原子を含む官能基を部分構造として含んでいてもよい。２個以上のヘテロ原子を含む場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。連結基中に含まれる不飽和部分又はヘテロ原子を含む官能基としては、例えば、アルケニル基（シクロアルケニル、ビシクロアルケニルを含む）、アルキニル基、アリール基、ヘテロ環基、エステル基（カルボン酸エステル、炭酸エステル、スルホン酸エステル、スルフィン酸エステルを含む）、アミド基（カルボン酸アミド、ウレタン、スルホン酸アミド、スルフィン酸アミドを含む）、エーテル基、チオエーテル基、シリルオキシ基、ヘテロ環オキシ基、アミノ基（アニリノ基を含む）、イミド基、シリル基などがあげられる。上記の官能基はさらに置換基を有していてもよく、これらの官能基はＬ1中に複数個存在してもよい。複数個の存在する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。
【００２４】
Ｌ1で表される三価の連結基の部分構造として、好ましくはアルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロ環基、エステル基、アミド基、エーテル基、ウレタン基、又はアミノ基であり、さらに好ましくは、アルケニル基、エステル基、アミド基、又はエーテル基である。また、Ｌ1で表される三価の連結基が不飽和炭化水素である場合も好ましい。Ｌ1に含まれる炭素原子数は３〜４０が好ましく、より好ましくは３〜３０である。Ｌ1は置換基を有していてもよい。置換基としては、例えば、アルキル基、シアノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、カルボキシル基、アルコキシ基、アミノ基、アシルアミノ基、アシル基、カルバモイル基が好ましい。また、Ｌ1が無置換の場合も好ましい。
【００２５】
Ｌ2は単結合、又は主鎖が１ないし２０個の炭素原子を含む二価の連結基を示す。本明細書において、二価の連結基における「主鎖」とは、連結すべき他の官能基又は原子との結合に関与する連結基中の２個の原子及びそれら２個の原子を最小個数で結ぶ原子群からなる連結基中の原子群を意味している。より具体的には、Ｌ2の主鎖は、リン酸エステルを構成する酸素及びＡｒ3との連結に関与するＬ2中の２個の原子及びそれら２個の原子を最小個数で結ぶＬ2中の原子群からなる。Ｌ2の主鎖が１個の炭素原子を含む二価の連結基を示す場合、リン酸エステルを構成する酸素とＡｒ3とはＬ2中の同一の炭素原子に結合する。
【００２６】
Ｌ2が示す二価の連結基は飽和の基であってもよいが、１個又は２個以上の不飽和結合を含んでいてもよい。また、主鎖中にヘテロ原子を１個又は２個以上含んでいてもよい。２個以上のヘテロ原子を含む場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。主鎖中のヘテロ原子の個数については特に規定されないが２０個以下であることが好ましく、より好ましくは１０個以下である。主鎖中のヘテロ原子の位置は特に限定されない。
【００２７】
Ｌ2が示す二価の連結基はヘテロ原子を含む官能基を主鎖の部分構造として含んでいてもよい。Ｌ2が示す二価の連結基の主鎖の部分構造である不飽和部分又はヘテロ原子を含む官能基としては、例えば、アルケニル基、アルキニル基、エステル基（カルボン酸エステル、炭酸エステル、スルホン酸エステル、スルフィン酸エステルを含む）、アミド基（カルボン酸アミド、ウレタン、スルホン酸アミド、スルフィン酸アミドを含む）、エーテル基、チオエーテル基、ジスルフィド基、アミノ基、又はイミド基などがあげられる。上記の官能基はさらに置換基を有していてもよい。これらの官能基はＬ2の主鎖中に複数個存在してもよく、存在位置も特に限定されない。Ｌ2の主鎖中に上記の官能基が複数個存在する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。
【００２８】
Ｌ2で表される二価の連結基の部分構造として、好ましくはアルケニル基、エステル基、アミド基、エーテル基、チオエーテル基、ジスルフィド基又はアミノ基を挙げることができ、さらに好ましくはアルケニル基、エステル基、アミド基、又はエーテル基を挙げることができる。また、主鎖中及び／又は主鎖の部分構造である官能基中にヘテロ原子を含まない場合も好ましい。ヘテロ原子を含む場合、該へテロ原子は酸素原子、窒素原子又は硫黄原子が好ましく、酸素原子又は窒素原子がもっとも好ましい。Ｌ2に含まれる炭素原子の個数は１５個以下が好ましい。Ｌ2の主鎖上にはさらに１個又は２個以上の置換基が存在していてもよい。２個以上の置換基が存在する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。Ｌ2の主鎖上に置換基が存在する場合、置換基の種類、個数、及び置換位置は特に限定されないが、置換基としては、例えば、ハロゲン原子、アルキル基、水酸基、又はオキソ基などが好ましい。また、Ｌ2の主鎖上に置換基が存在しない場合も好ましい。
【００２９】
本発明の化合物は１以上の不斉中心を有する場合があるが、この場合、不斉中心に基づく光学活性体又はジアステレオ異性体などの立体異性体が存在する。純粋な形態の任意の立体異性体、任意の立体異性体の混合物、ラセミ体などは、いずれも本発明の範囲に包含される。また、本発明の化合物はオレフィン性の二重結合を有する場合があるが、その配置はＥ又はＺのいずれであってもよく、両者の混合物として存在していてもよい。本発明の化合物は互変異性体として存在する場合もあるが、任意の互変異性体、又はそれらの混合物は本発明の範囲に包含される。さらに、本発明の化合物は塩を形成する場合があり、遊離形態の化合物又は塩の形態の化合物が水和物又は溶媒和物を形成する場合もあるが、このような場合も本発明の範囲に包含される。塩の種類は特に限定されず、酸付加塩又は塩基付加塩のいずれであってもよい。
【００３０】
以下に本発明の化合物の好ましい例を示すが、本発明の化合物はこれらの例に限定されることはない。
【００３１】
【化３】
2005068053.tif 000004
【００３２】
【化４】
2005068053.tif 000005
以下に本発明の化合物の一般的な合成法について説明するが、本発明の化合物の合成法はこれらに限定されるものではない。本発明の化合物において用いられるヨードアリール基、とりわけトリヨードフェニル基に関する合成原料としては、通常市販されているものを使用してもよく、あるいは用途に応じて適宜合成してもよい。市販品としては、例えば2,4,6-トリヨードフェノールや安息香酸誘導体（例えば、3-amino-2,4,6-triiodobenzoic acid, acetrizoic acid, iopipamide, diatrizoic acid, histodenz, 5-amino-2,4,6-triiodoisophthalic acid, 2,3,5-triiodobenzoic acid, tetraiodo-2-sulfobenzoic acid）、ヨードパン酸（iopanoic acid）、iophenoxic acidなどを用いることができる。合成により入手する場合には、例えばRichard C. Larock著、Comprehensive organic transformations（VCH）に記載の方法により、芳香環上にヨード原子を導入し、原料として用いることができる。
【００３３】
上記のトリヨードフェニル誘導体は、通常、部分構造として水酸基やアミノ基、チオール基、カルボキシル基等の官能基を含有するため、これらの官能基と、カルボン酸、ハロゲン水酸基等を有するアルキルアルコールとを、エーテル連結／エステル連結／アミノ連結／アミド連結などを介して縮合してトリヨードフェニル基を有するアルコールとし、本発明の化合物の合成中間体として用いることもできる。これらの工程では、必要な場合には保護基を用いることもできるが、この場合の保護基とは、例えば、T. W. Green & P. G. M. Wuts著、Protecting groups in organic synthesis（John Wiley & Sons, Inc.）に記載のものを用いることができる。カルボン酸を有するアルコールとしては、例えば、10-ヒドロキシデカン酸、12-ヒドロキシドデカン酸、16-ヒドロキシヘキサデカン酸が挙げられ、ハロゲン化アルコール化合物としては、例えば、6-ブロモ-1-ヘキサノール、8-ブロモ-1-オクタノール、9-ブロモ-1-ノナノール、10-ブロモ-1-デカノール、11-ブロモ-1-ウンデカノール、12-ブロモ-1-ドデカノールが挙げられるが、これらは単なる例示であり、これらに限定されるものではない。
【００３４】
本発明の化合物は任意の長さのアルキル鎖を有するが、適当な合成原料が存在しない場合には、適宜合成的に調製することができる。その合成法は、例えば、Wittig反応やBarbier-Wieland分解、Arndt-Eistert合成、アセチリドをを用いる方法（例えば、Tetrahedron Lett. 35, 9501 (1994)に記載の方法に準拠）、クロロ蟻酸エステルを用いる方法（例えば、Synthesis 427 (1986)に記載）、マロン酸ジエチルを用いる方法（例えば、Arch. Pharm. (Weinheim) 328, 271 (1995)に記載）等が挙げられる。また、これらの方法で得られた化合物のカルボン酸／カルボン酸エステル構造を還元して水酸基に変換することも有効である。しかし、これらの方法は単なる例示であり、これらに限定されるものではない。
【００３５】
これらのトリヨードフェニル基を有するアルコールを原料化合物として用い、適当な塩基（例えば水酸化ナトリウム、炭酸カリウム、水素化ナトリウム、ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、テトラゾールなど）を用いて、適当なリン酸エステル前駆体（例えばオキシ塩化リン、ジクロロリン酸メチル、メチルジクロロフォスファイト、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルメチルフォスフォンアミディッククロリド、2-シアノエチルＮ，Ｎ−ジイソプロピルクロロフォスフォアミダイトなど）と反応して誘導することにより、本発明の化合物を合成することができるが、これに限定されるものではない。
【００３６】
本発明の化合物又はその塩はリポソームの膜構成成分として用いることができる。本発明の化合物又はその塩を用いてリポソームを調整する場合、本発明の化合物又はその塩の使用量は、膜構成成分の全質量に対して１０から９０質量％程度、好ましくは１０から８０質量％、さらに好ましくは２０から８０質量％である。本発明の化合物は膜構成成分として１種類を用いてもよいが、２種類以上を組み合わせて用いてもよい。
【００３７】
リポソームの他の膜構成成分としては、リポソームの製造に通常用いられている脂質化合物をいずれも用いることが可能である。例えば、Biochim. Biophys. Acta 150(4), 44 (1982)、Adv. In Lipid. Res. 16(1), 1 (1978)、RESEARCH IN LIPOSOMES (P. Machy, L. Leserman著、John Libbey EUROTEXT社)、「リポソーム」（野島、砂本、井上編、南江堂）等に記載されている。脂質化合物としてはリン脂質が好ましく、特に好ましいのはホスファチジルコリン（PC）類である。ホスファチジルコリン類の好ましい例としては、eggPC、ジミリストイルPC（DMPC）、ジパルミトイルPC（DPPC）、ジステアロイルPC（DSPC）、ジオレイルPC（DOPC）等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３８】
本発明の好ましい態様では、リポソームの膜構成成分として、ホスファチジルコリンとホスファチジルセリン（PS）を組合せて用いることができる。ホスファチジルセリンとしては、ホスファチジルコリンの好ましい例として挙げたリン脂質と同様の脂質部位を有する化合物が挙げられる。ホスファチジルコリンとホスファチジルセリンを組合せて用いる場合、PCとPSの好ましい使用モル比はPC：PS＝９０：１０から１０：９０の間であり、さらに好ましくは、３０：７０から７０：３０の間である。
【００３９】
本発明のリポソームの別の好ましい態様によると、膜構成成分として、ホスファチジルコリンとホスファチジルセリンを含み、さらにリン酸ジアルキルエステルを含むリポソームが挙げられる。リン酸ジアルキルエステルのジアルキルエステルを構成する２個のアルキル基は同一であることが好ましく、それぞれのアルキル基の炭素数は６以上であり、１０以上が好ましく、１２以上がさらに好ましい。好ましいリン酸ジアルキルエステルの例としては、ジラウリルフォスフェート、ジミリスチルフォスフェート、ジセチルフォスフェート等が挙げられるが、これに限定されることはない。この態様において、ホスファチジルコリン及びホスファチジルセリンの合計質量に対するリン酸ジアルキルエステルの好ましい使用量は１から５０質量％までであり、好ましくは１から３０質量％であり、さらに好ましくは１から２０質量％である。
【００４０】
ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、リン酸ジアルキルエステ及び本発明の化合物を膜構成成分として含むリポソームにおいて、上記成分の好ましい質量比はPC：PS：リン酸ジアルキルエステル：本発明の化合物が５〜４０質量％：５〜４０質量％：１〜１０質量％：１５〜８０質量％の間で選択することができる。
【００４１】
本発明のリポソームの構成成分は上記４者に限定されず、他の成分を加えることができる。その例としては、コレステロール、コレステロールエステル、スフィンゴエミリン、FEBS Lett. 223, 42 (1987); Proc. Natl. Acad. Sci., USA 85, 6949 (1988)等に記載のモノシアルガングリオキシドGM1誘導体、Chem. Lett. 2145 (1989); Biochim. Biophys. Acta 1148, 77 (1992)等に記載のグルクロン酸誘導体、Biochim. Biophys. Acta 1029, 91 (1990); FEBS Lett. 268, 235 (1990)等に記載のポリエチレングリコール誘導体が挙げられるが、これに限られるものではない。
【００４２】
本発明のリポソームは、当業者が利用可能ないかなる方法で製造してもよい。製造法の例としては、先に挙げたリポソームの総説成書類の他、Ann. Rev. Biophys. Bioeng. 9, 467 (1980)、"Liposomes" (M. J. Ostro編、MARCELL DEKKER、INC.)等に記載されている。具体例としては、超音波処理法、エタノール注入法、フレンチプレス法、エーテル注入法、コール酸法、カルシウム融合法、凍結融解法、逆相蒸発法等が挙げられるが、これに限られるものではない。本発明のリポソームのサイズは、上記の方法で作成できるサイズのいずれであっても構わないが、通常は平均が400nm以下であり、200nm以下が好ましい。リポソームの構造は特に限定されず、ユニラメラ又はマルチラメラなどのいずれの形態でもよい。また、リポソームの内部に適宜の薬物や他の造影剤の１種又は２種以上を配合することも可能である。
【００４３】
本発明のリポソームを造影剤として用いる場合には、好ましくは非経口的に投与することができ、より好ましくは静脈内投与することができる。例えば、注射剤や点滴剤などの形態の製剤を凍結乾燥形態の粉末状組成物として提供し、用事に水又は他の適当な媒体（例えば生理食塩水、ブドウ等輸液、緩衝液など）に溶解ないし再懸濁して用いることができる。本発明のリポソームを造影剤として用いる場合、投与量はリポソームのヨード含有量が従来のヨード造影剤のヨード含有量と同程度になるように適宜決定することが可能である。
【００４４】
いかなる特定の理論に拘泥するわけではないが、動脈硬化、若しくはPTCA後の再狭窄等の血管疾患においては、血管の中膜を形成する血管平滑筋細胞が異常増殖を起こすと同時に内膜に遊走し、血流路を狭くすることが知られている。正常の血管平滑筋細胞が異常増殖を始めるトリガーはまだ完全に明らかにされていないが、マクロファージの内膜への遊走と泡沫化が重要な要因であることが知られており、その後に血管平滑筋細胞がフェノタイプ変換（収縮型から合成型）をおこすことが報告されている。
【００４５】
本発明のリポソームを用いると、泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋に対して疎水性ヨード化合物を選択的に取り込ませることができる。その結果、病巣と非疾患部位とをコントラストをつけて造影することが可能である。従って、本発明の造影剤は、特に血管疾患のＸ線造影に好適に使用でき、例えば、動脈硬化巣やPTCA後の再狭窄等の造影を行うことができる。
【００４６】
また、例えばJ. Biol. Chem., 265, 5226 (1990)に記載されているように、リン脂質よりなるリポソーム、特にPCとPSから形成されるリポソームが、スカベンジャーレセプターを介してマクロファージに集積しやすいことが知られている。従って本発明のリポソームを使用することにより、本発明のヨード化合物をマクロファージが局在化している組織又は疾患部位に集積させることができる。本発明のリポソームを用いると、公知技術であるサスペンジョン又はオイルエマルジョンを用いる場合に比べて、より多くのヨード化合物をマクロファージに集積させることが可能である。
【００４７】
マクロファージの局在化が認められ、本発明の方法で好適に造影可能な組織としては、例えば、血管、肝臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、腎臓上皮を挙げることができる。また、ある種の疾患においては、疾患部位にはマクロファージが集積していることが知られている。こうした疾患としては、腫瘍、動脈硬化、炎症、感染等を挙げることができる。従って、本発明のリポソームを用いることにより、これらの疾患部位を特定することができる。特に、アテローム性動脈硬化病変の初期過程において、スカベンジャーレセプターを介して変性LDLを大量に取り込んだ泡沫化マクロファージが集積していることが知られており（Am. J. Pathol., 103, 181(1981)、Annu. Rev. Biochem., 52, 223(1983)）、このマクロファージに本発明のリポソームを集積化させてＸ線造影をすることにより、他の手段では困難な動脈硬化初期病変の位置を特定することが可能である。
【００４８】
本発明のリポソームを用いた造影方法は特に限定されない。例えば、通常のＸ線造影剤を用いた造影方法と同様にしてＸ線を照射することにより造影を行うことができる。また、ヨードの放射線同位体を含む本発明の化合物を用いてリポソームを形成し、該リポソームをシンチグラフィー用造影剤として用いることにより、核医学的方法による造影を行うことも可能である。ヨードの放射性同位体は特に限定されないが、好ましい例としては122Ｉ、123Ｉ、125Ｉ及び131Ｉを挙げられ、特に好ましい例としては123Ｉ及び125Ｉをあげることができる。放射性ラベル化合物の合成は対応する非ラベル化合物を合成した後に、Appl. Radiat. Isot., 37(8), 907 (1986)等に記載されている既知の方法で実施することができる。疎水性化合物がトリヨードベンゼン誘導体である場合、同一ベンゼン環上の３個のヨード原子のうち少なくとも１個が放射線同位体化されていることが好ましい。好ましくは２個以上が放射線同位体化されていることであり、最も好ましいのは３個が同一の放射線同位体でラベル化されていることである。
【実施例】
【００４９】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されることはない。なお、下記の実施例中の化合物番号は上記に示した化合物例の番号に対応している。また、実施例中の化合物の構造はNMRスペクトルにより確認した。
【００５０】
例１
10-ブロモ-1-デカノール25.1gと2,4,6-トリヨードフェノール45.0g、炭酸カリウム15.0gをジメチルホルムアミド500mLに加え、室温で２日攪拌した。反応物を500mLの水に注ぎ、生じた沈殿を濾別した。水、メタノールで順次洗浄した後、乾燥して10-（2,4,6-トリヨードフェノキシ）-1-デカノールを55.2g（収率92%）で得た。
11-ブロモ-1-ウンデカノールより、10-（2,4,6-トリヨードフェノキシ）-1-デカノールと同様の手法で11-（2,4,6-トリヨードフェノキシ）-1-ウンデカノールを得た。
ヨードパン酸10.1gと1,6-ジヒドロキシヘキサン11.1gをジクロロメタン100mLに溶かし、ジメチルアミノピリジン0.21gとエチル−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩3.45gを加えて室温で１日撹拌した。水を加えてジクロロメタンで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水無水硫酸マグネシウムで乾燥し、除媒した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、1,6-ジヒドロキシヘキサンのモノヨードパン酸エステルを9.61g（収率81％）得た。
11-（2,4,6-トリヨードフェノキシ）アンデカン酸を用い、J. Med. Chem., 29(12), 2457 (1986)に記載の方法に準拠して1,3-ジアシルグリセロール誘導体を得た。
【００５１】
コレステロール1.0gとトリエチルアミン0.81gをジクロロメタン10mLに溶かし、さらにＮ，Ｎ−ジイソプロピルメチルフォスフォンアミディッククロリド0.55mLを加えて撹拌した。冷やした飽和炭酸水素ナトリウムを加え、ジクロロメタンで２回抽出した後、得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、除媒して粗結晶を1.65g得た。この粗結晶0.55gをジクロロメタン15mLに溶かし、10-（2,4,6-トリヨードフェノキシ）-1-デカノール0.41gとテトラゾール81mgを加えて室温で１日撹拌した。反応溶液に31％過酸化水素1mLを加えて５分間さらに撹拌した。反応液に飽和食塩水を加えて、クロロホルムで２回抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、除媒した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してリン酸トリエステル体を0.60g（収率85％）得た。
【００５２】
上記リン酸トリエステル体を0.60gをメチルエチルケトン20mLに溶かし、ヨウ化ナトリウム0.43gを加えて３時間加熱還流した。放冷後、生じた結晶を濾別し、メチルエチルケトンで洗浄した。１規定塩酸を加えて、クロロホルムで２回抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去して化合物６−５を0.40g（収率68％）得た。
化合物６−５：
1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ:  8.05 (2H, s)  5.43-5.28 (1H, m)  4.18-3.88 (5H, m)  2.40-0.60 (m)
それぞれ対応するアルコール化合物より、化合物６−５と同様の手法で下記化合物を得た。
化合物３−５：
1H-NMR (300MHz, CDCl3)  δ:  8.05 (4H, s)  5.40-5.36 (1H, m)  4.73-4.55 (1H, m)  4.34-4.10 (5H, m)  3.93 (4H, t)  2.50-0.60 (m)
化合物４−５：
1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ:  8.05 (4H, s)  5.40-5.35 (1H, m)  5.25-5.15 (1H, m)  4.35 (1H, dd)  4.20-4.08 (4H, m)  3.93 (4H, t)  3.73-3.61 (4H, m)  2.49-2.40 (2H, m)  2.32 (4H, t)  2.04-0.60 (m)
化合物６−６：
1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ:  8.05 (2H, s)  5.41-5.37 (1H, m)  4.22-4.07 (1H, m)  4.02 (2H, q)  3.93 (2H, t)  2.55-0.60 (m)
化合物７−３：
1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ:  8.05 (1H, s)  5.41-5.37 (1H, m)  4.20-3.97 (5H, m)  3.39 (1H, dd)  3.26 (1H, dd)  2.80-2.69 (1H, m)  2.46-2.40 (2H, bd)  2.05-0.60 (m)。
【００５３】
試験例１：血管平滑筋細胞におけるヨード原子の取り込み量
下記に示した割合でジ・パルミトイル ＰＣ（フナコシ社製、No.1201-41-0225）、ジ・パルミトイル ＰＳ（フナコシ社製、No.1201-42-0237）をJ. Med. Chem., 25(12), 1500 (1982)記載の方法で、本発明のヨード化合物とナス型フラスコ内でクロロホルムに溶解して均一溶液とした後、溶媒を減圧で留去してフラスコ底面に薄膜を形成した。この薄膜を真空で乾燥後、0.9%生理食塩水（光製薬社製、No512）を適当量加え、超音波照射（Branson社製、No.3542プローブ型発振器、0.1mW）を氷冷下５分実施することにより、均一なリポソーム分散液を得た。得られた分散液の粒径をWBCアナライザー（日本光電社製、A-1042）で測定した結果、粒子径は40から65nmであった。この方法により調製した下記リポソーム製剤を日本国特許、特願２００１−０１８５７３記載の血管平滑筋細胞とマクロファージとの混合培養系に添加し、３７℃５％ＣＯ2で２４時間培養した後、血管平滑筋細胞に取り込まれたヨード化合物を定量した。このように本発明の化合物は効率よく血管平滑筋細胞に取り込ませることができ、Ｘ線造影剤のためのリポソームの構成脂質として優れた性質を有することが明らかである。
【００５４】
【表１】
2005068053.tif 000006
【００５５】
【化５】
2005068053.tif 000007
試験例２： Ｓ９の作製及び分解試験
ＳＤラット雄６週齢（日本チャールスリバー社製）を購入し１週間馴化した。１週間馴化後、体重を測定し、断頭放血した。肝臓を摘出し、冷却した0.15M KClで３回洗浄した。洗浄後、肝臓の湿重量を測定し、その重量の３倍の冷却した0.15M KClを加え、ホモジナイザーに移した。氷冷中でホモジネイトし、その後、ホモジネイトを9000gで１０分間冷却遠心した。この上清をＳ９と呼び、−８０℃以下で保存した。
【００５６】
保存してあるＳ９を、流水中で溶解した。溶解したＳ９ 0.1mlに、0.4M MgCl2 0.02ml、1.65M KCl 0.02ml、0.2M Naりん酸緩衝液（pH 7.4） 0.5mlを加え、グルコース６りん酸（オリエンタル酵母社製）、NADPH（オリエンタル酵母社製）、NADH（オリエンタル酵母社製）を4μMになる様に添加し蒸留水を加え、全量を１mlとした（これをＳ９Mixと呼ぶ）。Ｓ９Mix 1mlに被験物質を５μg/mlになる様添加し、３７℃で往復振盪した。Ｓ９Mix中の被験物質量（未変化体）を経時でHPLCを用い測定した。なお、被験物質はＤＭＳＯ（和光純薬社製）にて予め溶解した。結果には、S9Mixに添加直後の未変化体量を１００とし、30分後の未変化体量をその百分率に直して表記した。既知である比較化合物１〜３がＳ９分解試験において分解が全く認められないのに対し、本発明の化合物は効率的に分解されることが明らかであり、Ｘ線造影剤のためのリポソームの構成脂質として優れた性質を有することが明らかである。
化合物３−５：20％  化合物４−５：43％  化合物６−６：80％  化合物７−３：38％
比較化合物１：100％  比較化合物２：100％  比較化合物３：100％
【００５７】
【化６】
2005068053.tif 000008