(57)【要約】【課題】気管支喘息（例えば、抗原誘発喘息、運動誘発喘息、冷気誘発喘息、アスピリン喘息、有害物質誘発喘息など）の治療および／または予防剤を提供すること。【解決手段】一般式（Ｉ）【化５】2005015354.tif 000019（式中、ｍは０〜４の整数を表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は同一または異なって水素原子、低級アルキルなどを表し、Ｒ５は低級アルコキシなどを表し、Ｒ６は水素原子などを表し、Ｙは４−カルボキシフェニルなどを表す）で表される含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する気管支喘息の治療および／または予防剤を提供する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
2005015354.tif 000017
｛式中、ｍは０〜４の整数を表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は同一または異なって、水素原子、低級アルキル、シクロアルキル、低級アルケニル、シクロアルケニル、アリールまたはアラルキルを表すか、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の中で同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になってスピロ飽和炭素環を形成するか、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の中で隣接する炭素原子上に存在する２つの基が該隣接する２つの炭素原子と一緒になって飽和炭素環を形成するか、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の中で隣接する炭素原子上に存在する２つの基が一緒になって結合を表し（既に存在する結合と一緒になって二重結合を形成する）、Ｒ５は非置換またはハロゲン置換の低級アルコキシを表し、Ｒ６は水素原子またはハロゲンを表し、Ｙは式（ＩＩ）
【化２】
2005015354.tif 000018
［式中、Ｒ７はシアノ、エチニルまたはカルバモイルを表し、Ｒ８は水素原子を表すか、またはＲ７とＲ８が一緒になって結合を表し（既に存在する結合と一緒になって二重結合を形成する）］または４−カルボキシフェニルを表す｝で表される含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する気管支喘息の治療および／または予防剤。
【請求項２】
ｍが０〜２の整数であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が水素原子であるか、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の中で同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になってスピロ飽和炭素環を形成し、Ｒ６が水素原子である請求項１記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
【請求項３】
ｍが１であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が水素原子である請求項１または２記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
【請求項４】
Ｒ５がメトキシである請求項１〜３のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
【請求項５】
Ｙが式（ＩＩ）である請求項１〜４のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
【請求項６】
Ｙが４−カルボキシフェニルである請求項１〜４のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
【請求項７】
Ｒ７がシアノであり、Ｒ８が水素原子である請求項１〜５のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
【請求項８】
気管支喘息が抗原誘発喘息、運動誘発喘息、冷気誘発喘息、アスピリン喘息および有害物質誘発喘息からなる群より選ばれる喘息である請求項１〜７のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
【請求項９】
吸入剤である請求項１〜８のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する気管支喘息（例えば、抗原誘発喘息、運動誘発喘息、冷気誘発喘息、アスピリン喘息、有害物質誘発喘息など）の治療および／または予防剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
気管支喘息は、気管支平滑筋の異常収縮、気道分泌の亢進による気道狭窄、気管支炎症、気道過敏性、気道リモデリングなどの症状を特徴とし、これらが複合した症状を伴う。気管支喘息の薬物療法としては、気管支平滑筋弛緩作用を有する吸入β受容体刺激剤や抗炎症作用を有する吸入ステロイド剤などの投与が広く用いられている。しかしながら、吸入β受容体刺激剤の投与では効果は著明であるが、長期服用による作用の減弱、および心悸亢進、動悸などを招く可能性があることが報告されている［「呼吸」、１９９９年、１８巻、ｐ．１４７］。また、吸入ステロイド剤も、強力な抗炎症作用を示し、優れた薬剤であるが、口腔咽頭、骨代謝への悪影響、小児での成長障害などの重篤な副作用が報告されている［「アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・アンド・クリティカル・ケアー・メディシン（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．）」、１９９８年、１５７巻、ｐ．Ｓ１］。
【０００３】
アデノシン３’，５’−サイクリンモノフホスフェート（ｃＡＭＰ）は好酸球、好中球、リンパ球、肥満細胞、マクローファージなどの炎症細胞において、炎症反応の制御に重要な役割を果たしている［「アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・アンド・クリティカル・ケアー・メディシン（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．）」、１９９８年、１５７巻、ｐ．３５１］。ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）は、ｃＡＭＰを分解し、その細胞内濃度を調整しており、特にＰＤＥのアイソザイムの１つであるＰＤＥ−ＩＶは、炎症細胞や気管支平滑筋におけるｃＡＭＰ濃度を調整している［「アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・アンド・クリティカル・ケアー・メディシン（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．）」、１９９８年、１５７巻、ｐ．３５１］。炎症細胞ではＰＤＥ−ＩＶを阻害することにより細胞内ｃＡＭＰが上昇し、炎症性サイトカインや活性酸素の産生、接着分子の発現が抑制される［「イムノファーマコロジィー（Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ）」、２０００年、４７巻、ｐ．１２７］。また、気管支平滑筋ではＰＤＥ−ＩＶの阻害により、気管支平滑筋の収縮反応が抑制される［「ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ファーマコロジィー（Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）」、１９９１年、１０４巻、ｐ．４７１］。すなわち、ＰＤＥ−ＩＶを阻害することで、気管支喘息の特徴である炎症反応および気道収縮反応が抑制され、さらには気道分泌の亢進、気道過敏性、気道リモデリングなども抑制され、気管支喘息の治療および／または予防に繋がるものと期待されている。
【０００４】
従来、ＰＤＥ−ＩＶ阻害作用を有する含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩が知られている（特許文献１、２参照）。
一方、アイソザイム選択的なＰＤＥ−ＩＶ阻害剤が、炎症の治療において、また気管支拡張薬として有用であることが知られているが、これまでに知られているＰＤＥ−ＩＶ阻害剤は、例えば、抗鬱作用や催吐作用をも発現すると報告されている［ＣＮＳ  ドラッグ・レビューズ（ＣＮＳ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｖｉｅｗｓ）、２００１年、第７巻、ｐ．３８７；カレント・ファーマシューティカル・デザイン（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ）、２００２年、第８巻、ｐ．１２５５］。ＰＤＥ−ＩＶは、炎症性細胞や気管支平滑筋のみならず、中枢神経系においても分布することが知られていることから［ジーン（Ｇｅｎｅ）、１９９４年、第１４９巻、ｐ．２３７］、これらＰＤＥ−ＩＶ阻害剤の多様な薬理作用は、中枢のまたは末梢のＰＤＥ−ＩＶを阻害することにより、発現したと考えられる。
【０００５】
末梢における疾患の治療を目的とする薬物にとっては、中枢神経系に対する薬理作用は、少なからず副作用に繋がる懸念があり、末梢選択的なＰＤＥ−ＩＶ阻害剤が望まれる。
【０００６】
【特許文献１】
国際公開第９８／２２４５５号パンフレット
【０００７】
【特許文献２】
国際公開第００／１４０８５号パンフレット
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する気管支喘息（例えば、抗原誘発喘息、運動誘発喘息、冷気誘発喘息、アスピリン喘息、有害物質誘発喘息など）の治療および／または予防剤を提供することにある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明は、以下の（１）〜（９）に関する。
（１）  一般式（Ｉ）
【００１０】
【化３】
2005015354.tif 000002
【００１１】
｛式中、ｍは０〜４の整数を表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は同一または異なって、水素原子、低級アルキル、シクロアルキル、低級アルケニル、シクロアルケニル、アリールまたはアラルキルを表すか、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の中で同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になってスピロ飽和炭素環を形成するか、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の中で隣接する炭素原子上に存在する２つの基が該隣接する２つの炭素原子と一緒になって飽和炭素環を形成するか、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の中で隣接する炭素原子上に存在する２つの基が一緒になって結合を表し（既に存在する結合と一緒になって二重結合を形成する）、Ｒ５は非置換またはハロゲン置換の低級アルコキシを表し、Ｒ６は水素原子またはハロゲンを表し、Ｙは式（ＩＩ）
【００１２】
【化４】
2005015354.tif 000003
【００１３】
［式中、Ｒ７はシアノ、エチニルまたはカルバモイルを表し、Ｒ８は水素原子を表すか、またはＲ７とＲ８が一緒になって結合を表し（既に存在する結合と一緒になって二重結合を形成する）］または４−カルボキシフェニルを表す｝で表される含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する気管支喘息の治療および／または予防剤。
（２）  ｍが０〜２の整数であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が水素原子であるか、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の中で同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になってスピロ飽和炭素環を形成し、Ｒ６が水素原子である（１）記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
（３）  ｍが１であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が水素原子である（１）または（２）記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
（４）  Ｒ５がメトキシである（１）〜（３）のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
（５）  Ｙが式（ＩＩ）である（１）〜（４）のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
（６）  Ｙが４−カルボキシフェニルである（１）〜（４）のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
（７）  Ｒ７がシアノであり、Ｒ８が水素原子である（１）〜（５）のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
（８）  気管支喘息が抗原誘発喘息、運動誘発喘息、冷気誘発喘息、アスピリン喘息および有害物質誘発喘息からなる群より選ばれる喘息である（１）〜（７）のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
（９）  吸入剤である（１）〜（８）のいずれかに記載の気管支喘息の治療および／または予防剤。
【００１４】
以下、一般式（Ｉ）で表される化合物を化合物（Ｉ）という。
【００１５】
【発明の実施の形態】
一般式（Ｉ）の各基の定義において、低級アルキルおよび低級アルコキシの低級アルキル部分としては、例えば直鎖または分岐状の炭素数１〜８のアルキル、具体的にはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなどがあげられる。
【００１６】
シクロアルキルとしては、例えば炭素数３〜１０のシクロアルキル、具体的にはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシルなどがあげられる。
低級アルケニルとしては、例えば直鎖または分岐状の炭素数２〜８のアルケニル、具体的にはビニル、１−プロペニル、アリル、メタクリル、１−ブテニル、クロチル、ペンテニル、イソプレニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニルなどがあげられる。
【００１７】
シクロアルケニルとしては、例えば炭素数４〜１０のシクロアルケニル、具体的にはシクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル、シクロノネニル、シクロデセニルなどがあげられる。
アリールとしては、例えば炭素数６〜１８のアリール、具体的にはフェニル、ナフチル、アントラニルなどがあげられ、アラルキルとしては、例えば炭素数７〜１５のアラルキル、具体的にはベンジル、フェネチル、ベンズヒドリル、ナフチルメチルなどがあげられる。
【００１８】
同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になって形成するスピロ飽和炭素環および隣接する炭素原子上に存在する２つの基が該隣接する２つの炭素原子と一緒になって形成する飽和炭素環としては、例えば炭素数３〜１０の飽和炭素環、具体的にはシクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン、シクロノナン、シクロデカンなどがあげられる。
【００１９】
ハロゲンおよびハロゲン置換の低級アルコキシにおけるハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素の各原子を意味する。
化合物（Ｉ）の薬理学的に許容される塩は、薬理学的に許容される酸付加塩、金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩、アミノ酸付加塩などを包含する。
化合物（Ｉ）の薬理学的に許容される酸付加塩としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩などの有機酸塩があげられ、薬理学的に許容される金属塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩などのアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、亜鉛塩などがあげられ、薬理学的に許容されるアンモニウム塩としては、アンモニウム、テトラメチルアンモニウムなどの塩があげられ、薬理学的に許容される有機アミン付加塩としては、モルホリン、ピペリジンなどの付加塩があげられ、薬理学的に許容されるアミノ酸付加塩としては、グリシン、フェニルアラニン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸などの付加塩があげられる。
【００２０】
次に、化合物（Ｉ）の製造方法について説明する。
化合物（Ｉ）は、国際公開第９８／２２４５５号パンフレットもしくは国際公開第００／１４０８５号パンフレットに記載の方法またはそれらに準じて製造することができる。
化合物（Ｉ）には、互変異性体などの立体異性体が存在し得るが、本発明の気管支喘息の治療および／または予防剤には、これらを含め、全ての可能な異性体およびそれらの混合物を使用することができる。
【００２１】
化合物（Ｉ）の塩を取得したいとき、化合物（Ｉ）が塩の形で得られるときはそのまま精製すればよく、また、遊離の形で得られるときは、化合物（Ｉ）を適当な溶媒に溶解または懸濁し、酸または塩基を加えて単離、精製すればよい。
また、化合物（Ｉ）およびその薬理学的に許容される塩は、水または各種溶媒との付加物の形で存在することもあるが、これらの付加物も本発明の気管支喘息の治療および／または予防剤に使用することができる。
【００２２】
化合物（Ｉ）の具体例を第１表に示す。
【００２３】
【表１】
2005015354.tif 000004
【００２４】
次に、化合物（Ｉ）の薬理作用について試験例により具体的に説明する。
試験例１：中枢移行性試験
９週齢のＳＤ系雄性ラット（日本チャールス・リバー、神奈川）を試験に供した。試験は非絶食下で行い、例数はｎ＝２とした。
化合物２を０．５重量／容量％メチルセルロース水溶液  ４００（メチルセルロース４００ｃＰ、和光純薬工業、大阪）に３ｍｇ／ｍＬの濃度になるよう懸濁させ、１０ｍＬ／ｋｇの用量で直接ラットの胃内に投与した（投与量：３０ｍｇ／ｋｇ）。
【００２５】
投与後０．５、１および２時間の各時点にラット尾静脈を剃刀で切傷後、ヘパリン処理したキャピラリーチューブ（Ｄｒｕｍｍｏｎｄ  ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＣｏ．、Ｂｒｏｏｍａｌｌ、ＰＡ、ＵＳＡ）を用いて約３００μＬの血液を採取した。血液を遠心分離（９，１７０ｘｇ、１０分、４℃）することで血漿を得、得られた血漿サンプルを測定まで−２０℃で冷凍保存した。
【００２６】
最終採血時点での採血終了後、ラット大腿部動静脈を切開し、ヘパリンを少量添加したポリプロピレン製テストチューブに血液を採取してラットを放血死させた後、脳を摘出した。摘出した脳は生理食塩水で洗浄し、分析時まで−８０℃で冷凍保存した。
各時点で得られた血漿サンプル１００μＬにそれぞれ内部標準物質を含むメタノール溶液２００μＬを加えて攪拌し、氷中で２０分間放置後、遠心分離（２０，６００ｘｇ、１０分、４℃）して、上清をＬＣ／ＭＳに注入し、化合物２の血漿中濃度を求めた。その結果、化合物２は、投与後２時間まで、持続的な血漿中濃度推移を示した。
【００２７】
摘出した脳を秤量後、脳重量と等量（１ｍＬ／ｇ脳）の精製水を添加し、ホモジナイザー［約１０００ｒｐｍで約３分間（５〜６回）粉砕、ホモジナイザー攪拌装置（１６−８０、池本理化学工業、東京）］を用いて氷冷下でホモジナイズした。さらに、内部標準物質を含む脳重量の２倍量（２ｍＬ／ｇ脳）のメタノール溶液を添加して再度氷冷下ホモジナイズし、脳のホモジネート液とした。得られた脳のホモジネート液を氷中で２０分間放置後、その４００μＬをマイクロチューブに分注し遠心分離（２０，６００ｘｇ、１０分、４℃）して、上清をＬＣ／ＭＳに注入し、化合物２の脳中濃度を求めた。
【００２８】
投与後２時間時点での化合物２の脳中濃度は１８９ｎｇ／ｍＬ（平均値、ｎ＝２）、血漿中濃度は６７９０ｍｇ／ｍＬ（平均値、ｎ＝２）であった。これより化合物２の脳中濃度／血漿中濃度の比は０．０２８１（２．８％）と算出された。脳の血管容積が脳の全組織量の約２％を占めることを考慮すれば、化合物２の脳内移行量は、無視できるレベルにあると考えられる（杉山  雄一  編集、ファーマコキネティクス研究の方法と技術  −前臨床から臨床第１相へ−、１９９３年、ｐ．２２７、日本薬物動態学会）。
試験例２：抗原抗体反応により誘発される肺胞内への好酸球浸潤および好中球浸潤に対する抑制作用
（１）抗原暴露前に化合物２で処置した場合（好酸球浸潤および好中球浸潤に対する化合物２による予防効果）
６週齢のＢＮラット（雄性；日本チャールスリバー、神奈川）を試験に用いた。少なくとも１週間の検疫・馴化の後、体重増加が順調、かつ外見上に異常が認められない個体を用い、７週齢で試験を開始した。動物は室温１９〜２５℃、湿度３０〜７０％、一日１２時間照明（午前７時〜午後７時）の飼育環境条件下で飼育した。
【００２９】
７週齢雄性ＢＮラットに、卵白アルブミン（ＯＶＡ；Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）１ｍｇおよび水酸化アルミニウム（和光純薬工業、大阪）１００ｍｇを含む生理食塩水溶液１ｍＬを腹腔内投与し、さらに２日後に同様に腹腔内投与することによりラットを感作した。１回目の感作後１４日目に、感作したラットを噴霧用プラスチックケージに入れ、超音波ネブライザー（ＮＥ−Ｕ１２、オムロン、東京）を用いて１重量／容量％のＯＶＡ生理食塩水溶液を２５分間噴霧することにより反応を惹起した。化合物２は、ミキサーおよびソニケーターを用いて０．５重量／容量％メチルセルロース４００（ＭＣ）水溶液に懸濁し、２ｍｇ／ｍＬおよび０．６ｍｇ／ｍＬの濃度の溶液として調製し（化合物２懸濁液）、ＯＶＡ生理食塩水溶液の噴霧１時間前にそれぞれを５ｍＬ／ｋｇ経口投与した（化合物２投与群）。また、溶媒投与群として、化合物２懸濁液の代わりに０．５重量／容量％ＭＣ水溶液を５ｍＬ／ｋｇ経口投与した群を設けた。一方、非抗原投与群として、ＯＶＡ生理食塩水溶液の代わりに生理食塩水溶液のみを同様に噴霧し、溶媒投与群と同様に０．５重量／容量％ＭＣ水溶液を５ｍＬ／ｋｇ経口投与した群を設けた。ＯＶＡ生理食塩水溶液または生理食塩水溶液噴霧２４時間後に気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）を行った。すなわち、ラットをペントバルビタール・ナトリウム（ｐｅｎｔｂａｒｂｉｔａｌ  ｓｏｄｉｕｍ；ネンブタール注射液、ダイナボット、大阪）５０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与することにより麻酔した後、気管カニューレを介して０．０１重量／容量％のエチレンジアミン四酢酸−２ナトリウム塩（ＥＤＴＡ−２Ｎａ）を含むハンクス液（Ｈａｎｋｓｂｌａｎｃｅｄ  ｓａｌｔ  ｓｏｌｕｔｉｏｎａ（ＨＢＳＳ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ニューヨーク、ＵＳＡ）を４ｍＬ注入し、約１５秒後に回収した。この操作を計２回繰り返して、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）とした。ＢＡＬＦを遠心（毎分９５０回転（２００ｘ  ｇ）、１０分間、４℃）した後、取得した細胞を上記のハンクス液（０．５ｍＬ）に懸濁した。ＢＡＬＦ中の総白血球数を自動血球カウンター（Ｃｅｌｌｔａｃα  ＭＥＫ−６１５８、日本光電、東京）を用いて計数した。また、サイトスピンＩＩＩ（Ｃｙｔｏｓｐｉｎ  ＩＩＩ；Ｓｈａｎｄｏｎ，Ｏｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ，ＵＳＡ）を用いて塗抹標本を作製し、ライト染色を行い、光学顕微鏡にて細胞３００個を観察し、この中の好酸球数および好中球数を計数した。
【００３０】
ＢＡＬＦ中の好酸球数および好中球数は次の計算式で求めた。
【００３１】
【数１】
2005015354.tif 000005
【００３２】
【数２】
2005015354.tif 000006
【００３３】
化合物２による肺胞内への好酸球浸潤の抑制率（％）および好中球浸潤の抑制率（％）は次の計算式から算出した。
好酸球浸潤抑制率
【００３４】
【数３】
2005015354.tif 000007
【００３５】
好中球浸潤抑制率
【００３６】
【数４】
2005015354.tif 000008
【００３７】
結果を第２表に示す。
【００３８】
【表２】
2005015354.tif 000009
【００３９】
（２）抗原暴露後に化合物２で処置した場合（好酸球浸潤および好中球浸潤に対する化合物２による治療効果）
上記（１）と同様にして、７週齢雄性ＢＮラットに、卵白アルブミン（ＯＶＡ；Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）１ｍｇおよび水酸化アルミニウム（和光純薬工業、大阪）１００ｍｇを含む生理食塩水溶液１ｍＬを腹腔内に投与し、さらに２日後に同様に腹腔内投与することによりラットを感作した。１回目の感作後１４日目に、感作したラットを噴霧用プラスチックケージに入れ、超音波ネブライザー（ＮＥ−Ｕ１２、オムロン、東京）を用いて１重量／容量％のＯＶＡ生理食塩水溶液を２５分間噴霧することにより反応を惹起した。また、非抗原投与群として、ＯＶＡ生理食塩水溶液の代わりに生理食塩水溶液のみを同様に噴霧した群を設けた。化合物２は、ミキサーおよびソニケーターを用いて０．５重量／容量％メチルセルロース４００（ＭＣ）水溶液に懸濁し、２ｍｇ／ｍＬの濃度の溶液として調製し（化合物２懸濁液）、ＯＶＡ生理食塩水溶液の噴霧６時間後に５ｍＬ／ｋｇ経口投与した（化合物２投与群）。また、溶媒投与群として、化合物２の代わりに０．５重量／容量％ＭＣ水溶液を５ｍＬ／ｋｇ経口投与した群を設けた。さらに、非抗原投与群にも同様に０．５重量／容量％ＭＣ水溶液を５ｍＬ／ｋｇ経口投与した。ＯＶＡ生理食塩水溶液または生理食塩水溶液噴霧２４時間後に気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）を行った。すなわち、ラットをペントバルビタール・ナトリウム（ｐｅｎｔｂａｒｂｉｔａｌ  ｓｏｄｉｕｍ；ネンブタール注射液、ダイナボット、大阪）５０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与することにより麻酔した後、気管カニューレを介して０．０１重量／容量％のエチレンジアミン四酢酸−２ナトリウム塩（ＥＤＴＡ−２Ｎａ）を含むハンクス液（Ｈａｎｋｓ  ｂｌａｎｃｅｄ  ｓａｌｔ  ｓｏｌｕｔｉｏｎａ（ＨＢＳＳ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ニューヨーク、ＵＳＡ）を４ｍＬ注入し、約１５秒後に回収した。この操作を計２回繰り返して、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）とした。ＢＡＬＦを遠心（毎分９５０回転（２００ｘ  ｇ）、１０分間、４℃）した後、取得した細胞を上記のハンクス液（０．５ｍＬ）に懸濁した。得られたＢＡＬＦ中の好酸球数および好中球数を上記（１）と同様に計数し、化合物２による肺胞内への好酸球浸潤の抑制率（％）および好中球浸潤の抑制率（％）を上記（１）と同様に算出した。結果を第３表に示す。
【００４０】
【表３】
2005015354.tif 000010
【００４１】
以上より、抗原の暴露前であっても暴露後であっても、化合物２の投与により、抗原により惹起される肺胞内への好酸球の浸潤および好中球の浸潤が抑制できることが示された。
試験例３：抗原抗体反応により誘発される気道収縮に対する抑制作用
６週齢のＢＮラット（雄性；日本チャールスリバー、神奈川）を試験に用いた。少なくとも１週間の検疫・馴化の後、体重増加が順調、かつ外見上に異常が認められない個体を用い、７週齢で試験を開始した。動物は室温１９〜２５℃、湿度３０〜７０％、一日１２時間照明（午前７時〜午後７時）の飼育環境条件下で飼育した。
【００４２】
７週齢雄性ＢＮラットに、卵白アルブミン（ＯＶＡ；Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）１ｍｇおよび水酸化アルミニウム（和光純薬工業、大阪）１００ｍｇを含む生理食塩水溶液１ｍＬを腹腔内投与し、さらに翌日および２日後に同様に腹腔内投与することによりラットを感作した。
初回の感作後１４日目〜１６日目に、ペントバルビタール・ナトリウム（ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ  ｓｏｄｉｕｍ；ネンブタール注射液、ダイナボット、大阪）８０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与することによりラットを麻酔し、頸部を切開して気管および頸静脈を露出後、臭化パンクロニウム（ｐａｎｃｒｏｎｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ；Ｓｉｇｍａ、ＭＯ、ＵＳＡ）の０．２ｍｇ／ｍＬ生理食塩水溶液を１ｍＬ静脈内投与した。自発呼吸停止後、直ちに気管カニューレを装着して、人工呼吸器（ＴＹＰＥ７０２５、Ｕｇｏ  Ｂａｓｉｌｅ、Ｖａｒｅｓｅ、Ｉｔａｌｙ）による定流量呼吸（７０回／分、１ｍＬ／体重１００ｇ）を施した。気道抵抗の指標として、気道内圧（ｃｍＨ２Ｏ）を人工呼吸の回路から分岐して接続した差圧トランスデューサー（ＴＰ−６０３Ｔ、日本光電、東京）により測定した。気道内圧は、プリアンプ（呼吸用アンプ：ＡＲ−６０１Ｇ、日本光電）を介してレコーダー（ＷＴ−６８７Ｇ、日本光電）に記録した。化合物２は０．５重量／容量％メチルセルロース４００（ＭＣ）水溶液に２ｍｇ／ｍＬおよび０．６ｍｇ／ｍＬの濃度になるように懸濁させ、気道内圧が安定した後、それぞれ５ｍＬ／ｋｇ経口投与した。化合物２投与１時間後に抗原であるＯＶＡの１０ｍｇ／ｍＬ生理食塩水溶液を１ｍＬ／ｋｇ頸静脈内投与し、気道内圧の変化を５分間観察した（化合物２投与群）。同様に、化合物２の代わりに０．５重量／容量％ＭＣ水溶液を５ｍＬ／ｋｇ投与した群を設けた（抗原投与群）。
【００４３】
気道収縮は、抗原静脈内投与後５分間の気道内圧変化の曲線下面積（ＡＵＣ０−５分）で表した。化合物２による気道収縮反応の抑制率（％）は、次式より算出した。
【００４４】
【数５】
2005015354.tif 000011
【００４５】
結果を第４表に示す。
【００４６】
【表４】
2005015354.tif 000012
【００４７】
上記の試験により、化合物２の投与により、抗原により惹起される気道収縮反応が抑制されることが示された。
上記試験の結果は、化合物（Ｉ）を投与することにより気管支喘息に伴う肺胞内への炎症性細胞（好酸球、好中球）の浸潤、および気道収縮反応を抑制できることを示唆している。一方、気管支喘息は好酸球性の気道炎症を特徴とした疾患であり［クリニカル・エクスペリメンタル・アラージー（Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ａｌｌ．）、２００２年、３２巻、ｐ．１６２］、肺組織およびＢＡＬＦへの著明な好酸球浸潤が認められることが知られている。また、アスピリンなどの非ステロイド抗炎症剤、ディーゼル排気などの有害物質、抗原、運動、冷気などが、喘息における炎症などの症状を誘発または増悪させる因子であると考えられている［グローバル・イニシアチブ・フォー・アズマ（Ｇｌｏｂａｌ  Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ  ｆｏｒ  Ａｓｔｈｍａ  （ＧＩＮＡ））著、ＧＩＮＡガイドライン（Ｇｌｏｂａｌ  Ｓｔｒａｔｅｇｙ  ｆｏｒ  Ａｓｔｍａ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）、２００２年、ｐ．３９］。
【００４８】
以上のことから、化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩は、気管支喘息（例えば、抗原誘発喘息、運動誘発喘息、冷気誘発喘息、アスピリン喘息、有害物質誘発喘息など）の治療および／または予防剤として有用であると考えられた。
化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩は、そのまま単独で投与することも可能であるが、通常各種の医薬製剤として提供するのが望ましい。また、それら医薬製剤は、動物および人に使用されるものである。
【００４９】
本発明に係わる医薬製剤は、活性成分として化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩を単独で、あるいは任意の他の治療のための有効成分との混合物として含有することができる。また、それら医薬製剤は、活性成分を薬理学的に許容される一種もしくはそれ以上の担体と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の方法により製造される。
【００５０】
投与経路としては、治療に際し最も効果的なものを使用するのが望ましく、経口または、例えば静脈内、気管内、経皮などの非経口をあげることができる。
投与形態としては、例えば錠剤、注射剤、吸入剤、外用剤などがあげられる。徐放的な適応もまた利用できる。
経口投与に適当な、例えば錠剤などは、乳糖、マンニットなどの賦形剤、澱粉などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、ヒドロキシプロピルセルロースなどの結合剤、脂肪酸エステルなどの界面活性剤、グリセリンなどの可塑剤、安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類などの防腐剤などを用いて製造できる。
【００５１】
非経口投与に適当な、例えば注射剤は、好ましくは受容者の血液と等張である活性化合物を含む滅菌水性剤からなり、例えば、塩溶液、ブドウ糖溶液または塩水とブドウ糖溶液の混合物からなる担体などを用いて注射用の溶液を調製する。
吸入剤は、活性成分を粉末または液状にして、吸入噴霧剤または担体中に配合し、例えば、定量噴霧式吸入器、ドライパウダー吸入器などの吸入容器に充填することにより製造される。吸入噴射剤としては、従来公知のものを広く使用することができ、例えばフロン−１１、フロン−１２、フロン−２１、フロン−２２、フロン−１１３、フロン−１１４、フロン−１２３、フロン−１４２ｃ、フロン−１３４ａ、フロン−２２７、フロン−Ｃ３１８、１，１，１，２−テトラフルオロエタンなどのフロン系ガス、ＨＦＡ−２２７、ＨＦＡ−１３４ａなどの代替フロンガス、プロパン、イソブタン、ｎ−ブタンなどの炭化水素系ガス、ジエチルエーテル、窒素ガス、炭酸ガスなどがあげられる。担体としては、従来公知のものを広く使用でき、例えば糖類、糖アルコール類、アミノ酸類などがあげられ、乳糖、Ｄ−マンニトールなどが好ましい。
【００５２】
外用剤としては、特に限定されるものではないが、例えば基剤に活性成分を溶解または混合分散しクリーム状、ペースト状、ゼリー状、ゲル状、乳液状、液状などの形状になされたもの（軟膏剤、ローション剤など）、基剤に活性成分および経皮吸収促進剤を溶解または混合分散させたものを例えばポリエチレンなどの支持体上に展延したもの（パップ剤、テープ剤など）などがあげられる。上記基剤としては、薬理学的に許容しうるものであればいずれでもよく、軟膏剤、リニメント剤、ローションなどの基剤として従来公知のものを用いることができ、例えば、アルギン酸ナトリウム；ゼラチン、コーンスターチ、トラガントガム、メチルセルロース、キサンタンガム、デキストリン、ポリビニルアルコールなどのポリマー；オリーブ油、ラノリンなどの油脂類；白色ワセリン；パラフィン；ステアリン酸などの高級脂肪酸；セチルアルコールなどの高級アルコール；ポリエチレングリコール；水などがあげられる。上記経皮吸収促進剤としては、薬理学的に許容しうるものであればいずれでもよく、例えばエタノール、ジエチレングリコールなどのアルコール類；ドデシルピロリドンなどの極性溶剤；尿素；ラウリル酸エチル；エイゾン；オリーブ油などがあげられる。さらに必要に応じて、カオリン、ベントナイト、酸化亜鉛、酸化チタンなどの無機充填剤；粘度調節剤；老化防止剤；ｐＨ調節剤；グリセリン、プロピレングリコールなどの保湿剤などを添加してもよい。
【００５３】
また、これら非経口剤においても、経口剤で例示した賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、界面活性剤、可塑剤、防腐剤などから選択される１種もしくはそれ以上の補助成分を添加することもできる。
化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩の投与量および投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度などにより異なるが、通常経口の場合、成人一人当り０．０１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは０．０５〜５０ｍｇを一日１回ないし数回投与する。静脈内投与などの非経口投与の場合、成人一人当り０．００１〜１００ｍｇ  、好ましくは０．０１〜５０ｍｇを一日１回ないし数回投与する。気管内投与（吸入剤）の場合、成人一人当たり、０．００１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは０．０１〜１００ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ〜２０ｍｇを一日１回ないし数回投与する。しかしながら、これら投与量および投与回数に関しては、前述の種々の条件により変動する。
【００５４】
以下に、本発明の態様を実施例で説明する。
【００５５】
【実施例】
実施例１：錠剤（化合物１）
常法により、次の組成からなる錠剤を調製する。化合物１  ４０ｇ、乳糖２８６．８ｇおよび馬鈴薯澱粉６０ｇを混合し、これにヒドロキシプロピルセルロースの１０％水溶液１２０ｇを加える。この混合物を常法により練合し、造粒して乾燥させた後、整粒し打錠用顆粒とする。これにステアリン酸マグネシウム１．２ｇを加えて混合し、径８ｍｍの杵をもった打錠機（菊水社製ＲＴ−１５型）で打錠を行って、錠剤（１錠あたり活性成分２０ｍｇを含有する）を得る。
2005015354.tif 000013
実施例２：錠剤（化合物２）
化合物２  ４０ｇを用い、実施例１と同様にして、標記錠剤（１錠あたり活性成分２０ｍｇを含有する）を得る。
2005015354.tif 000014
実施例３：注射剤（化合物３）
常法により、次の組成からなる注射剤を調製する。化合物３  １ｇおよびＤ−マンニトール５ｇを注射用蒸留水に添加して混合し、さらに塩酸水溶液および水酸化ナトリウム水溶液を添加してｐＨを６に調整した後、注射用蒸留水で全量を１０００ｍＬとする。得られた混合液をガラスバイアルに２ｍＬずつ無菌的に充填して、注射剤（１バイアルあたり活性成分２ｍｇを含有する）を得る。
2005015354.tif 000015
実施例４：ドライパウダー吸入剤（化合物４）
ジェットミル（Ａ−０ＪＥＴ；セイシン企業）を用いて、化合物４  １０ｇを空気圧５ｋｇ／ｃｍ２で１．５ｇ／分間の送り速度で粉砕する。得られる化合物４の粉砕物と乳糖（Ｐｈａｒｍａｔｏｓｅ３２５Ｍ；ＤＭＶ社製）とを重量比１：５で混合し、ドライパウダー製剤を得る。
2005015354.tif 000016
【００５６】
【発明の効果】
本発明により、含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する気管支喘息（例えば、抗原誘発喘息、運動誘発喘息、冷気誘発喘息、アスピリン喘息、有害物質誘発喘息など）の治療および／または予防剤が提供される。