(57)【要約】    【課題】  微量の血液（潜血）を簡便にかつ確実に検出することができるとともに、ヒトや生体への安全性に優れており、ヒトや生体に直接適用することが可能である潜血検出剤及び潜血検出方法を提供する。    【解決手段】  グアヤク脂からなる第１の試薬と、食用油からなる第２の試薬とを含み、使用に際して、グアヤク脂と、食用油と、潜血を含む試料とが接触された状態で発色が生じる潜血検出剤及び該潜血検出剤を用いて潜血を検出する方法。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
グアヤク脂からなる第１の試薬と、食用油からなる第２の試薬とからなり、使用時に第１の試薬、第２の試薬及び試料が接触されることを特徴とする潜血検出剤。
【請求項２】
請求項１に記載の潜血検出剤を用いたことを特徴とする潜血検査装置（パンティーライナーを除く）。
【請求項３】
グアヤク脂からなる第１の試薬と、食用油からなる第２の試薬と、試料とを接触させて、試料中に潜血が存在する場合に発色を生じさせることを特徴とする潜血検出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肉眼では検知することができない微量な血液（潜血）を検出するのに用いられる潜血検出剤に関し、より詳細には、人体や環境に対して安全であり、尿や唾液等の各種の試料に含まれている潜血を精度よく容易に検出することを可能とする潜血検出剤、並びに該潜血検出剤を用いた潜血検査装置及び潜血検出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、疾病の検査・診断あるいは治療効果などを判定するために、尿、糞便、唾液などの各種試料中の血液の有無が検査されている。このような検査において、試料中の血液が肉眼で検知される場合には、特段の工夫は必要ではない。しかしながら、試料中の血液が肉眼で検知され得ない、微量の血液（潜血）の場合には、潜血を検出するための潜血検出剤を用いなければならない。また、このような肉眼で検知され得ない微量の血液（潜血）であっても、重大な疾病の診断等において有益な情報を与えるため、潜血を簡便にかつ高精度に検出することが求められている。
【０００３】
潜血を検出する方法としては、例えば、尿中の潜血の検出には、尿試験紙が広く用いられている。一般的な尿試験紙では、持手となるプラスチックの台紙に、潜血を検出するための試薬が含浸・乾燥されてなる濾紙片が貼り合わされている。上記濾紙片に尿を含浸させることにより、尿中に潜血が存在する場合には試薬が発色し、それによって潜血の有無が検出される。従って、簡便かつ迅速に尿中の潜血を検出することができる。
【０００４】
上記潜血を検出するための試薬としては、発色原体としてのテトラメチルベンチジンやトリジンなどと、発色原体を酸化し発色させるための過酸化水素、クメン、ジメチルジヒドロパーオキシヘキサン、クメンヒドロペルオキシドなどの過酸化物とが用いられている。しかしながら、これらの薬剤は、発癌性を有する危険性が指摘されていたり、人体に対して有害であることが認められている。従って、尿中の潜血検査に際しては、カップなどに一旦蓄積された尿に試験紙を浸漬する方法が用いられている。すなわち、上記薬剤が人体に接触することを回避し得る検査方法が用いられており、さらに、小児が薬剤を舐めたりすることがないように取り扱いに際して注意を払わねばならなかった。
【０００５】
また、唾液中の潜血検査に際しても、カップなどに一旦唾液を蓄積することで、尿の場合と同様に、薬剤が人体に接触することなく唾液中の潜血を検査することができるものの、検査の簡便化を図るために、直接口腔内の唾液に潜血検出剤を接触させ、検査を行うことが求められている。しかしながら、上述した従来の潜血検出剤は、人体に対しての毒性が指摘されているため、このような方法で用いることはできなかった。
【０００６】
さらに、上記潜血検出剤が含まれている試験紙等を廃棄した場合、環境に悪影響を与えるおそれがあった。
【０００７】
他方、比較的安全性が高い潜血検出方法として、グアヤク試験法が知られている（例えば下記の非特許文献１）。食品添加物として用いられているグアヤク脂を発色試薬として用いるグアヤク試験法は、特に法医学の分野で用いられている。しかしながら、上記グアヤク試験法においては、発色のために、グアヤク脂にテレビン油を添加する必要があった。グアヤク脂は食品添加物として使用されており、安全性等において問題はない。しかしながら、発色のために用いられるテレビン油は皮膚刺激性を有する。従って、グアヤク脂とテレビン油との組み合わせを、人体に直接用いることはできなかった。
【非特許文献１】化学大辞典、第３巻、第７頁（共立出版株式会社発行）、縮刷版第３２刷（１９８９年８月１５日発行）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、上述した従来技術の現状に鑑み、試料中の潜血を発色により肉眼で容易に精度よく検出することを可能とし得るだけでなく、ヒトやその他の生物に対しての安全性が高く、さらに、廃棄された場合にも環境に悪影響を与えがたい潜血検出剤、並びに該潜血検出剤を用いた潜血検査装置及び潜血検出方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明に係る潜血検出剤は、グアヤク脂からなる第１の試薬と、食用油からなる第２の試薬とからなり、使用時に第１の試薬、第２の試薬及び試料が接触されることを特徴とし、第１の試薬、第２の試薬及び試料が接触された際に試料中の潜血による発色が生じるものである。
【００１０】
すなわち、本発明に係る潜血検出剤では、発色原体としてグアヤク脂が用いられ、該グアヤク脂を血液の存在下で発色させるための試薬として、安全性に優れた食用油が用いられる。
【００１１】
また、本発明に係る潜血検査装置は、上記潜血検出剤を用いたことを特徴とするものであり、但し、パンティーライナーを除くものである。
【００１２】
さらに、本発明に係る潜血検出方法は、グアヤク脂からなる第１の試薬と、食用油からなる第２の試薬と、試料とを接触させて、試料中に潜血が存在する場合に発色を生じさせることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１３】
本発明に係る潜血検出剤、潜血検査装置及び潜血検出方法では、安全性に優れたグアヤク脂が用いられている。さらに、グアヤク脂を発色させるための薬剤として、同じく安全性に優れた食用油が用いられている。食用油は、テレビン油とは異なり、皮膚刺激性が低く、人体や他の生物に対しての安全性に優れている。従って、本発明に係る潜血検出剤、潜血検査装置及び潜血検出方法は、安全性に優れており、人体や生物に直接適用することもできる。例えば、口腔内の唾液に本発明に係る潜血検出剤あるいは該潜血検出剤を用いた潜血検査装置を直接適用することができる。また、グアヤク脂による発色反応は、血液の存在下で食用油の添加により速やかに起こり、従って、微量な血液である潜血を簡便かつ速やかに、さらに精度よく検出することができる。
【００１４】
よって、本発明によれば、人体や他の生物に対しての安全性に優れ、人体や他の生物に対して直接適用することも可能であり、さらに、検出精度にも優れた潜血検出剤、潜血検査装置及び潜血検出方法を提供することが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
以下、本発明の詳細を説明する。
本発明の潜血検出剤は、グアヤク脂からなる第１の試薬と、食用油からなる第２の試薬とからなる。
【００１６】
（グアヤク脂）
本発明において第１の試薬として用いられるグアヤク脂は、法医学分野のグアヤク試験法において、テレビン油と共に血液の検出に用いられている物質である。また、グアヤク脂は、酸化防止剤として食品添加物にも広く用いられている。グアヤク脂は天然の樹脂であり、例えば、α−グアヤコン酸、β−グアヤコン酸、グアイアレチン酸等を成分として含む。
【００１７】
なお、本発明において、「グアヤク脂」は、天然の樹脂であるグアヤク脂に含まれる上記各成分をも包含する表現として用いられている。すなわち、本発明でいうグアヤク脂としては、天然の樹脂であるグアヤク脂の他、これに含まれる各成分であるα−グアヤコン酸、β−グアヤコン酸、グアイアレチン酸等が挙げられ、これらは単独で用いられてもよく、複数種用いられてもよい。また、本発明において用いられるグアヤク脂は特に限定されるものではないが、食品添加物規格合格品が、人体や他の生物への安全性が高く、好適に用いられる。
【００１８】
上記グアヤク脂が第１の試薬として用いられる際の具体的な形態は特に限定されないが、例えば、一般的な尿試験紙と同様の形態で用いることができる。すなわち、持手となる合成樹脂からなる台紙に貼り付けられた濾紙片などの基材にグアヤク脂を含浸もしくは塗布させ、乾燥させて用いることができる。
【００１９】
濾紙等の基材にグアヤク脂を含浸もしくは塗布させるに際しては、グアヤク脂を溶媒に溶解または懸濁し、得られた液を基材に含浸もしくは塗布させればよい。
【００２０】
上記溶媒は特に限定されず、グアヤク脂を溶解または懸濁させることができ、乾燥時に容易に除去し得る適宜の液体が用いられる。残留時の人体や他の生物への安全性を考慮すると、上記溶媒としてはエチルアルコールなどが好適に用いられる。
【００２１】
グアヤク脂を上記のように基材に含浸もしくは塗布し、乾燥させて用いる場合、グアヤク脂は、乾燥後における付着量が基材の単位面積あたり１〜５００μｇ／ｃｍ2、より好ましくは５〜２００μｇ／ｃｍ2となるように用いられることが望ましい。グアヤク脂の付着されている量が上記範囲より少ないと、得られる潜血検出剤の発色強度が不十分となることがあり、多すぎると、試料が親水性の場合に、試料が基材になじまずにはじかれ、発色までに時間を要することがある。
【００２２】
また、グアヤク脂は、発色を妨害しない、例えば水などの懸濁液または溶解液の状態のままで用いられてもよい。
【００２３】
なお、グアヤク脂は、単独で放置された状態では発色せず、また、後述の食用油と混合されただけでも発色せず、食用油の存在下において、赤血球、特にヘモグロビンと共存された場合に、グアヤク脂は青色に発色し、潜血を可視化する。
【００２４】
（食用油）
本発明において第２の試薬として用いられる食用油は特に限定されないが、例えば、オリーブオイル、ごま油、サフラワー油、綿実油、オレンジ油、大豆油、アボガド油、杏仁油、ヘーゼルナッツ油、アーモンド油、マカデミアンナッツ油、ココナッツ油、グレープシード油、米油、椿油、サザンカ油、ホホバ油、ローズヒップ油、トウモロコシ油、ヒマワリ油、菜種油、ハッカ油等が挙げられ、特に、オリーブオイル、ごま油、サフラワー油、綿実油、オレンジ油、大豆油等の食用として用いられている安全性の高い適宜の油を好適に用いることができる。
【００２５】
なお、本発明において、「食用油」は、食用油に含まれ、血液と共存することによりグアヤク脂を発色させる成分、例えば脂肪酸や脂肪酸エステル類をも包含する表現として用いられている。すなわち、本発明でいう食用油としては、食用油そのものの他、これに含まれる各成分である脂肪酸、脂肪酸エステル類等が挙げられ、これらは単独で用いられてもよく、複数種用いられてもよい。
【００２６】
上記脂肪酸としては、食用油に含まれる成分であれば特に限定されるものではなく、例えば、ミリスチン酸、リノール酸、パルミチン酸等が挙げられ、これらは単独で用いられても複数種用いられてもよい。
上記脂肪酸エステル類としては、食用油に含まれる成分であれば特に限定されるものではなく、脂肪酸と、多価アルコールを含むアルコール類とのエステルが例示される。このような脂肪酸エステル類としては、例えば、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ブチル、リノール酸エチル、パルミチン酸イソプロピル等の人体にとって安全な脂肪酸エステルが好ましい。これらの脂肪酸エステル類は、単独で用いられてもよく、複数種用いられてもよい。
【００２７】
また、上記食用油は、そのまま用いられてもよく、あるいは必要によって溶媒に溶解または懸濁されて用いられてもよい。食用油を基材などに付着させる際は、溶媒に溶解または懸濁させた食用油を基材などの必要な部分に含浸もしくは塗布してもよく、さらに、必要に応じて、溶媒を乾燥させてもよい。
上記溶媒は特に限定されず、食用油を溶解または懸濁させることができ、さらに、溶媒を乾燥させる場合は、乾燥時に容易に除去し得る適宜の液体を用いることができる。このような液体としては、残留時の人体への安全性を考慮すると、エチルアルコールや酢酸エチルが好適に用いられる。
【００２８】
また、上記食用油を基材に付着する際には、食用油が基材の単位面積あたり０．１〜８０ｍｇ／ｃｍ2、より好ましくは、０．２〜６０ｍｇ／ｃｍ2の範囲で付着されることが望ましい。食用油の付着量が上記範囲より少ないと、得られる潜血検出剤の発色強度が不十分となることがあり、多すぎると、試料が親水性の場合、試料がはじかれ、反応までに長時間を要することがある。
【００２９】
上記グアヤク脂と食用油とは、使用時にグアヤク脂、食用油及び試料が接触されるようになされていれば、その形態及び構造は特に限定されない。即ち、  使用時に、試料中の血液成分が、グアヤク脂及び食用油と接触することにより、グアヤク脂が発色し、潜血を顕在化させ得る限り、試料、グアヤク脂及び食用油を接触させる形態及び構造については特に限定されない。
【００３０】
例えば、濾紙などの基材を用いる形態の場合、上記グアヤク脂と食用油とは、混合されて基材に付着されていてもよいが、唾液等の試料と接触した時に相互が混合する位置に別々に設けられていてもよい。また、使用時に、基材に付着されたグアヤク脂部分に食用油を塗布などにより添加してもよい。好ましくは、使用時に、試料とグアヤク脂とを接触させた後に、食用油を添加することが望ましい。それによってグアヤク脂による発色をより効果的に発現させ得る。もっとも、上記のように、予めグアヤク脂と食用油とを混合しておき、しかる後試料と接触させてもよい。
【００３１】
また、本発明においては、グアヤク脂と食用油との混合割合は特に限定されず、広い範囲で両者を用いたとしても、潜血を発色させ、潜血を目視により確認することができる。もっとも、十分な発色強度を得るには、グアヤク脂と食用油との合計に対し、グアヤク脂の割合を５０重量％以下とすることが望ましい。
【００３２】
また、本発明においては、本発明の目的を阻害しない範囲で、界面活性剤などの他の添加剤を用いてもよい。
【００３３】
（検出方法）
本発明に係る潜血検出方法では、上記グアヤク脂からなる第１の試薬と、食用油からなる第２の試薬とを用いて潜血が検出される。この場合、上述したように、グアヤク脂及び食用油を予め混合しておき、試料に接触させてもよく、あるいはグアヤク脂を試料と接触させた後、食用油を添加することにより、潜血を可視化してもよい。
【００３４】
また、上述したように、濾紙などの基材にグアヤク脂及び食用油を同じ部分に付着させておいてもよく、使用時に試料とグアヤク脂及び食用油が混合し得る限り、グアヤク脂と食用油とを基材の別の部分に配置してもよい。さらに、濾紙などの基材にグアヤク脂のみを含浸もしくは塗布し、必要に応じて乾燥させておき、試料をグアヤク脂に接触させた後、食用油をさらに接触させてもよい。
【００３５】
いずれの場合においても、グアヤク脂と、血液中の赤血球、特にヘモグロビンとの反応により、さらに食用油との接触により、発色が生じ、潜血が可視化され、目視により潜血の有無を容易にかつ確実に検出することができる。
【００３６】
（潜血検査装置）
本発明に係る潜血検査装置は、パンティーライナーを除くものであり、上記のような第１の試薬であるグアヤク脂と、第２の試薬である食用油とが濾紙等の基材に付着されている構成を有する。この場合、基材は、濾紙に限らず、第１，第２の試薬を、付着させ得る適宜の部材により構成され得る。また、第１の試薬であるグアヤク脂と第２の試薬である食用油とは同一の基材の同一部分に付着されていてもよいが、使用時に接触し得る限り、同一の基材の別々の部分に付着されていてもよく、或いは別々の基材に付着されていてもよい。さらに、上記基材は、第１の試薬であるグアヤク脂のみを付着させたものであってもよく、その場合には第２の試薬である食用油を使用に際して添加すればよい。
さらに、本発明に係る潜血検査装置を構成するに際しては、本発明の目的を阻害しない範囲で、接着剤や他の着色剤を用いてもよく、また基材として不織布や合成樹脂フィルムなどの適宜の部材を適宜用いることができる。
【００３７】
（実施例及び比較例）
次に、本発明の非限定的な実施例を説明することにより、本発明を明らかにする。
【００３８】
原材料
（ａ）グアヤク脂…関東化学社製、試薬規格のグアヤク脂
（ｂ）食用油…食用油として、下記の種々の食用油を用意した。
【００３９】
オリーブオイル（発売：阪神局方、規格：日本薬局方）
ごま油（発売：和光純薬、規格：食品用）
サフラワー油（発売：和光純薬、規格：食品用）
綿実油（発売：和光純薬、規格：食品用）
オレンジ油（発売：和光純薬、規格：和光1級）
大豆油（発売：和光純薬、規格：和光1級）
ミリスチン酸イソプロピル（発売：日光ケミカルズ、規格：薬添規）
ミリスチン酸ブチル（発売：日光ケミカルズ、規格：粧配規）
リノール酸エチル（発売：日光ケミカルズ、規格：粧配規）
パルミチン酸イソプロピル（発売：日光ケミカルズ、規格：粧原基）
ミリスチン酸ブチル(発売：日光ケミカルズ、規格：粧配規)
【００４０】
（ｃ）テレビン油…和光純薬社製、規格：試薬
（ｄ）界面活性剤…モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０Ｅ．０．）、（発売：日光ケミカルズ、規格：粧原基）
（ｅ）基材…濾紙
（ｆ）非水溶性接着剤…アクリル系接着剤（積水化学工業社製、粘着剤成分：アクリル酸２−エチルヘキシル・ビニルピロリドン共重合体）
（ｇ）水溶性接着剤…ポリビニルアルコール系接着剤（ヤマト社製、商品名：アラビック）
なお、上記薬添規、粧配規及び粧原基の略号の意味は以下の通りである。
薬添規：医薬品添加物規格、粧配規：化粧品種別配合成分規格、粧原基：化粧品原料基準
【００４１】
（実施例１〜１１）
上記濾紙に、０．０５ｗ／ｖ％濃度のグアヤク脂のエタノール溶液を、グアヤク脂の乾燥重量として約３０μｇ／ｃｍ2となるように滴下により含浸させ、室温で乾燥させた。このようにして、グアヤク濾紙を得た。
このグアヤク濾紙に、生理食塩水でヒト血液を薄めた血液−生理食塩水溶液（血液の濃度は１μＬ／ｍＬ：肉眼では血液の有無を判別できない濃度）を一滴滴下し、下記の表１に示す各食用油を一滴滴下した後、５分後に発色を肉眼により観察した。結果を下記の表１に示す。
【００４２】
【表１】
2005134366.tif 000002
【００４３】
なお、表１における発色強度の評価の意味は以下の通りである。
◎：明らかな青，○：青，△：薄い青，×：発色なし
また、実施例１１におけるオリーブオイルとミリスチン酸イソプロピルの混合比は重量比率である。
【００４４】
表１から明らかなように、実施例１〜１１のいずれにおいても、肉眼で潜血による発色を十分に確認することができた。
【００４５】
（実施例１２〜２２）
上記実施例１で用意したグアヤク濾紙に、下記の表２に示す各食用油の酢酸エチル溶液（濃度は２０ｗ／ｖ％）を、食用油の乾燥重量として約２ｍｇ／ｃｍ2となるように滴下により含浸させ、室温で乾燥させ、潜血検査装置を得た。
次に、得られた潜血検査装置に、実施例１と同様の血液−生理食塩水溶液を一滴滴下し、５分後に発色を肉眼により観察した。結果を下記の表２に示す。
【００４６】
【表２】
2005134366.tif 000003
【００４７】
なお、表２における発色強度の評価の意味は、表１と同様である。
【００４８】
表２から明らかなように、実施例１２〜２２においても、実施例１〜１１の場合と同様に、肉眼により潜血の有無を十分に確認することが可能であった。
【００４９】
（潜血試験紙としての性能評価）
疑似検体として、ヒトの唾液またはヒトの尿でヒト血液を薄めた溶液（血液の濃度は１μＬ／ｍＬ）を用い、この擬似検体に、上記実施例１２、１８及び２２の潜血検査装置を３秒間浸漬し、５分後に発色を肉眼により観察した。結果を下記の表３に示す。
【００５０】
【表３】
2005134366.tif 000004
【００５１】
表３から明らかなように、実施例１２、１８及び２２の潜血検査装置のいずれにおいても、擬似検体中の潜血による発色を目視により確認することができた。
なお、上記評価において、血液が添加されていないヒトの唾液及び血液が添加されていないヒトの尿を検体とした場合には、実施例１２、１８及び２２の潜血検査装置のいずれにおいても発色は認められなかった。
【００５２】
（実施例２３〜３３）
下記の表４に示すように、各種食用油の酢酸エチル溶液（濃度は２０ｗ／ｖ％）を食用油の乾燥重量として約２ｍｇ／ｃｍ2となるように濾紙に滴下により含浸させ、室温で乾燥させ、食用油濾紙を得た。
この食用油濾紙に、実施例１で用意したグアヤク濾紙をポリビニルアルコール系接着剤を用いて貼り合わせ、実施例２３〜３３の潜血検査装置を得た。
この潜血検査装置を、擬似検体に２〜３秒間浸漬し、５分後に発色を肉眼により観察した。尚、擬似検体としては、ヒト血液をヒトの唾液またはヒトの尿で薄めた溶液を使用した（血液の濃度は１μＬ／ｍＬ）。結果を下記の表４に示す。
【００５３】
【表４】
2005134366.tif 000005
【００５４】
なお、表４における発色強度の評価の意味は、表１と同様である。
【００５５】
表４から明らかなように、実施例２３〜３３のいずれにおいても、潜血を目視により容易に確認することができた。
なお、血液が添加されていないヒトの唾液及び血液が添加されていないヒトの尿についても、実施例２３〜３３の潜血検査装置を用いて検査を行ったところ、いずれも発色は認められなかった。
【００５６】
（実施例３４〜３６）
下記の表５に示す各食用油を用いて構成された食用油濾紙（食用油の付着量は約２ｍｇ／ｃｍ2）及び実施例１で用意したグアヤク濾紙をそれぞれ一辺が５ｍｍの正方形に切り取り、厚さ２００μｍ×長さ６０ｍｍ×幅５ｍｍのポリエチレン板の端部から、上記食用油濾紙及びグアヤク濾紙の順に並べ、アクリル系接着剤を用いて接着し、潜血検査装置を得た。なお、食用油濾紙とグアヤク濾紙とは、それぞれが接触するように並べて両者を配置した。
この潜血検査装置を、擬似検体に２〜３秒間浸漬し、１分後及び５分後に発色を肉眼により観察した。擬似検体としては、実施例２３と同様に、ヒト血液をヒトの唾液またはヒトの尿で薄めたものを使用した（血液の濃度は１μＬ／ｍＬ）。結果を下記の表５に示す。
【００５７】
【表５】
2005134366.tif 000006
【００５８】
（実施例３７〜３９）
実施例３４〜３６で用いた食用油濾紙及びグアヤク濾紙のそれぞれに、さらにモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンエタノール溶液（濃度は１０ｗ／ｖ％）を、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンの乾燥重量として約１ｍｇ／ｃｍ2となるように滴下により含浸させ、室温で乾燥させ、潜血検査装置を得た。
この潜血検査装置を、擬似検体に２〜３秒間浸漬し、１分後及び５分後に発色を肉眼により観察した。擬似検体としては、実施例２３と同様に、ヒト血液をヒトの唾液またはヒトの尿で薄めたものを使用した（血液の濃度は１μＬ／ｍＬ）。結果を下記の表６に示す。
【００５９】
【表６】
2005134366.tif 000007
【００６０】
（実施例４０〜４７）
グアヤク脂及びオリーブオイルの量を下記の表７に示すように変更したことを除いては、実施例２３と同様にして実施例４０〜４７の潜血検査装置を得た。
この潜血検査装置について、実施例２３と同様に、擬似検体に対する発色を評価した。結果を下記の表７に示す。
【００６１】
【表７】
2005134366.tif 000008
【００６２】
なお、表７における発色強度の評価の意味は、表１と同様である。また、発色時間は、色の変化が安定するまでの時間を示す。
【００６３】
表７から明らかなように、実施例４０〜４７のいずれにおいても潜血を目視により確認することができたが、血液の生理食塩水溶液は親水性であるため、グアヤク脂または食用油の使用量が多い場合には、発色に時間を要することがわかる。
【００６４】
（安全性の評価）
剃毛したウサギの背部に、１ｃｍ×１ｃｍに打ち抜いた実施例１３〜３９の潜血検査装置を適用し、上からガーゼで覆い、絆創膏で固定した。適用２４時間後に除去し、３０分後に刺激性としての赤みを観察した。表８に評価基準を示す。なお、実施例２３〜３３については，食用油面をウサギ皮膚に接するように適用した。その結果、実施例１３〜３９の全てにおいて、刺激性評価のスコアは０であった。なお、刺激性はｎ＝４の平均値で求めた。
このように、いずれの実施例においても皮膚刺激は認められず、ヒトへの直接の使用に問題ないと判断された。
【００６５】
【表８】
2005134366.tif 000009
【００６６】
（安定性評価）
実施例１〜１１で用意したグアヤク濾紙、並びに、実施例１２〜２２、実施例２３〜３３、実施例３４〜３６及び実施例３７〜３９で得られた各潜血検査装置を、それぞれ別々にガラス瓶に入れ、閉栓し、密封した。５０℃で約１ヶ月間保存した後に、グアヤク濾紙及び潜血検査装置を取り出し、上述した疑似検体にグアヤク濾紙及び潜血検査装置を３秒間浸漬し、５分後の発色を評価した。そして、上記と同様にガラス瓶に密封された状態で４℃で１ヶ月保存された後のグアヤク濾紙及び潜血検査装置による発色強度と比較した。結果を下記の表９に示す。
なお、上記の安定性評価において、実施例１〜１１で用意したグアヤク濾紙を評価する際には、擬似検体に浸漬した後、すぐに実施例１〜１１で用いた各食用油を一滴滴下した。
【００６７】
表９における発色強度の評価の意味は以下の通りである。
◎：４℃保存品と発色に差がなかった。
○：４℃保存品よりも発色は弱いが判定は可能であった。
×：発色が弱いか、或いは発色せず、判定不可能であった。
【００６８】
【表９】
2005134366.tif 000010
【００６９】
表９から明らかなように、実施例１２〜２２では発色強度の低下が若干認めらたものの、実施例１〜１１のグアヤク濾紙及び実施例１２〜３９の潜血検出装置は、５０℃という過酷な温度に保存した場合であっても、潜血の判定が可能であることがわかった。
【００７０】
（実用性評価）
コップに採取した唾液を検体とし、市販の尿潜血試験紙（テルモ社製、商品名：ウリエース）で評価したところ、予め唾液潜血が認められた被験者２名の口腔内に、実施例２３及び実施例３７の潜血検査装置を直接適用し、潜血の検出及び刺激性等の不快感の有無を評価した。
その結果、いずれも青い発色反応により潜血を肉眼により確認することができた。また、不快感の訴えはなかった。
【００７１】
同様に、予め市販の尿潜血試験紙による唾液潜血が認められなかった被験者２名について、同様にして評価したところ、発色は認められず、また不快感の訴えもなかった。
【００７２】
上記のように、口腔内に直接適用された場合であっても、実施例の潜血検査装置では、ヒトに負担を与えることなく、潜血を検出し得ることがわかる。
【００７３】
なお、市販の尿潜血試験紙については、発癌性が疑われている試薬が用いられていることが明らかであるため、被験者を保護するために、上記口腔内への直接適用による試験は行わなかった。
【００７４】
（比較例１）
実施例１と同様にしてグアヤク濾紙を用意した。このグアヤク濾紙に、実施例１と同様の血液−生理食塩水溶液（血液の濃度は１μＬ／ｍＬ）を一滴滴下し、５分後に発色を肉眼により観察した。その結果、発色は認められなかった。
【００７５】
（比較例２〜４）
オリーブオイルの代わりにテレビン油を用いたことを除いては、実施例２３、３４及び３７と同様にして潜血検査装置を用意し、それぞれ比較例２〜４とした。
比較例２〜４の各潜血検査装置に、実施例１と同様の血液−生理食塩水溶液（血液の濃度は１μＬ／ｍＬ）を一滴滴下し、５分後に発色を肉眼により観察した。
さらに、実施例と同様にして安全性の評価を行った。評価にあたっては、テレビン油面をウサギの皮膚に接するように適用した。刺激性評価のスコアはｎ＝４の平均値であり、上述した安全性の評価と同様にして行った結果である。結果を下記の表１０に示す。
【００７６】
【表１０】
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【００７７】
表１０における発色強度の評価の意味は、表１と同様である。
【００７８】
表１０から明らかなように、テレビン油を用いた比較例２〜４では、発色は認められたものの、皮膚刺激性が認められ、ヒトへの直接適用は問題であることがわかる。