(57)【要約】【課題】紫トウモロコシの水性抽出物の新規用途を提供する。【解決手段】  紫トウモロコシの水性抽出物を抗高血圧組成物の有効成分として用いる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
紫トウモロコシの水性抽出物を有効成分とする抗高血圧組成物。
【請求項２】
食品に添加して用いられる請求項１に記載する抗高血圧組成物。
【請求項３】
高血圧の予防、治療または改善のために用いられる、紫トウモロコシの水性抽出物を含有する健康食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、紫トウモロコシの水性抽出物を有効成分とする、高血圧の予防、治療または改善のために使用される抗高血圧組成物に関する。さらに、本発明は紫トウモロコシの水性抽出物を有効量含む、高血圧の予防または改善のために使用される健康食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
紫トウモロコシ〔イネ科トウモロコシ（Zea mays LINNE)〕は、従来より紫トウモロコシ色素の抽出原料として使用されている。かかる紫トウモロコシ色素は、アントシアニン系色素として広く清涼飲料水、ゼリー、飴などの食品の着色に利用されており、酸性で赤色、中性で暗紫青色、アルカリ性で暗緑色を呈することが知られている。
【０００３】
近年になって、アントシアニン系色素が単に着色料として有用であるだけでなく、着色以外の各種生理活性を有すること、具体的には血中コレステロールの低下作用（非特許文献１）、抗酸化作用（非特許文献２）、抗変異原性（非特許文献３）、及び抗腫瘍活性（非特許文献４）を有することが報告されている。
【非特許文献１】Agric. Biol. Chem., 54(1), 171-175, 1990
【非特許文献２】J.Agric. Food Chem. 50, 6172-6181, 2002
【非特許文献３】Foods & Food Ingredients Journal of Japan (FFI Reports), No.192（別冊）、pp. 77、2001.
【非特許文献４】Cancer Letters 171, 17-25. 2001
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、高血圧を発症する傾向にある者（又は高血圧症傾向にある者）に対して、血圧上昇を抑制することにより高血圧の発症を有意に抑制することのできる抗高血圧組成物を提供することを目的とする。より詳細には、本発明は優れた血圧上昇抑制作用を有し、しかも安全性が高くて健康食品として継続的に服用することのできる抗高血圧組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねていたところ、高血圧を自然に発症するように構築された動物（ラット）（高血圧自然発症ラット）に、紫トウモロコシの水性抽出物を経口投与することによって高血圧症の発生が有意に抑制されること、並びにこれを継続的に投与した場合であっても悪影響なく安全性が極めて高いことを見いだし、紫トウモロコシの水性抽出物が高血圧症の予防並びに改善に、有効に利用できることを確信した。本発明は、かかる知見に基づいて完成されたものである。
【０００６】
すなわち、本願発明は下記の構成を有するものである：
項１：紫トウモロコシの水性抽出物を有効成分とする抗高血圧組成物。
項２：食品に添加して用いられる項１に記載する抗高血圧組成物。
項３：高血圧の予防、治療または改善のために用いられる、紫トウモロコシの水性抽出物を含有する健康食品。
【０００７】
以下、本発明をより詳細に説明する。
【０００８】
本発明の抗高血圧組成物は、紫トウモロコシ〔イネ科トウモロコシ（Zea mays LINNE)〕の水性抽出物を有効成分とするものである。
【０００９】
水性抽出物の原料として用いる紫トウモロコシは、南米の山地で栽培されており、産地ではインカの昔から原住民が食用に供している濃紫色をしたトウモロコシの原種である。日本においては、紫トウモロコシの紫色の種子および芯部から抽出して得られた紫トウモロコシ色素がアントシアニン系色素として、清涼飲料水、ゼリー、飴などの食品の着色に使用されている。
【００１０】
紫トウモロコシの水性抽出物の調製方法は、特に限定されない。好ましくは、抽出溶媒として、例えば塩酸、硫酸若しくはリン酸等の無機酸、またはクエン酸やリンゴ酸等の有機酸を用いてｐＨ約１〜４の範囲に調整したものを用い、かかる酸性条件下で４〜１２時間程度、例えば一晩、紫トウモロコシを低温、加温または煮沸条件下で浸漬する方法を挙げることができる。この際、抽出に用いる紫トウモロコシは、好ましくは紫トウモロコシの紫色の種子および芯部であり、そのまま（生）または適当な大きさに切断もしくは破砕したものであってもよいし、これを乾燥処理したもの（そのままの形状、若しくは粗末、細切物）であってもよい。浸漬によって得られた抽出物は、そのまま用いてもよいが、必要に応じて濾過、共沈または遠心分離によって固形物を除去した後、そのまま若しくは濃縮することもでき、さらに精製処理に供することもできる。
【００１１】
なお、本発明でいう「紫トウモロコシの水性抽出物」には、上記抽出処理から直接得られる水性抽出物のほか、抽出処理後さらに精製処理を施すことによって得られる処理物の全てが含まれる。
【００１２】
上記抽出溶媒としては、特に制限されないが、水、低級アルコール、またはこれらの混合物を挙げることができる。低級アルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノール及びイソプロピルアルコール、ブタノール等の炭素数１〜４の低級アルコールを例示することができる。低級アルコールとして好ましくはエタノールである。抽出溶媒として好ましくは水、または含水アルコール（特に、含水エタノール）であり、より好ましくは水である。なお、水溶性溶媒として含水アルコールを用いる場合、それに含まれるアルコール量は０容量％より多く８０容量％以下であることが好ましい。
【００１３】
なお、抽出方法としては、一般に用いられる方法を採用することができ、前述する浸漬法（静置）の他；低温、加温または煮沸条件下で攪拌しながら抽出を行う方法；またはパーコレーション法等を用いることもできる。
【００１４】
斯くして得られる紫トウモロコシの水性抽出物（以下、抽出処理から直接得られる水性抽出物を「紫トウモロコシの抽出物処理物」ともいう）は、精製処理として、さらに吸着処理に供することができる。
【００１５】
ここで吸着処理は、常法に従って行うことができ、例えば活性炭、シリカゲルまたは多孔質セラミックなどによる吸着処理；スチレン系のデュオライト S-861（商標Duolite, U.S.A.ダイヤモンド・シャムロック社製、以下同じ）、デュオライト S-862、デュオライト S-863又はデュオライト S-866；芳香族系のセパビーズ SP70（商標、三菱化学（株）製、以下同じ）、セパビーズ SP700、セパビーズ SP825；ダイヤイオン HP10（商標、三菱化学（株）製、以下同じ）、ダイヤイオン HP20、ダイヤイオン HP21、ダイヤイオン HP40、及びダイヤイオン HP50；あるいはアンバーライト XAD-4（商標、オルガノ製、以下同じ）、アンバーライト XAD-7、 アンバーライト XAD-2000などの合成吸着樹脂を用いた吸着処理を挙げることができる。次いで、樹脂担体に吸着担持された本発明の有効成分である水性抽出物は、例えば含水アルコールなどの適当な溶媒で当該樹脂担体を洗浄することによって、回収することができる。ここで含水アルコールとしては、通常１０〜６０容量％、好ましくは２５〜４５容量％のエタノールを含有するものを好適に例示することができる。
【００１６】
かくして得られる紫トウモロコシ水性抽出物の吸着処理液は、再度吸着処理に付されるか、またはイオン交換処理、膜分離処理、抽出処理又はｐＨ調整処理（酸処理）等の各種の処理に供される。これらの処理は１種以上を組み合わせて行ってもよいし、また同一の処理を同一もしくは異なる条件で繰り返し行うことにより実施することもできる。
【００１７】
吸着処理としては、前述する処理を挙げることができる。
【００１８】
イオン交換処理は、特に制限されず慣用の樹脂を用いて常法に従って陽イオン交換処理または陰イオン交換処理を行うことができる。例えば陽イオン交換樹脂としては、制限されないがダイヤイオン SK 1B（商標、三菱化学（株）製、以下同じ）、ダイヤイオン SK 102 、ダイヤイオン SK 116、ダイヤイオン PK 208、ダイヤイオン WK10、ダイヤイオン WK20などが、また陰イオン交換樹脂としては、制限されないがダイヤイオン SA 10A（商標、三菱化学（株）製、以下同じ）、ダイヤイオン SA 12A、ダイヤイオン SA 20A、ダイヤイオン PA 306、ダイヤイオン WA 10、ダイヤイオン WA 20などが例示される。
【００１９】
また本発明でいう膜分離法とは、膜による濾過方法を広く意味するものであり、例えばメンブレンフィルター（MF）膜、限外濾過（UF）膜、逆浸透膜および電気透析膜などの機能性高分子膜を用いた濾過処理を挙げることができる。また膜分離法としてはこれらの膜を利用した限外濾過法や逆浸透膜法などのほか、イオン選別膜による濃度勾配を利用した透析法、隔膜としてイオン交換膜を使用し電圧を印加する電気透析法などが知られている。工業的には逆浸透膜法による膜分離法が好ましい。かかる膜分離法に用いられる膜材料としては、天然、合成、半合成の別を問わず、例えばセルロース、セルロース・ジ-アセテート若しくはトリ-アセテート、ポリアミド、ポリスルホン、ポリスチレン、ポリイミド、ポリアクリロニトリルなどを挙げることができる。
【００２０】
本発明の膜分離法には、分画分子量が例えば104〜106の範囲にある膜を用いて高分子化合物を分離除去する処理方法と分画分子量が約2000〜4000程度、好ましくは3000程度の膜を用いて低分子化合物を分離除去する処理方法が含まれる。前者の方法として具体的にはＮTU-3150膜, NTU-3250膜, NTU-3550膜, NTU-3800 UF膜（以上、日東電工製）；Cefilt-UF（日本ガイシ製）；AHP-2013膜, AHP-3013膜, AHP-1010膜（以上、旭化成製）；等を利用した限外濾過（UF）膜処理を挙げることができ、また後者の方法として具体的にはNTR-7250膜, NTR-7410膜, NTR-7430膜, NTR-7450膜（以上、日東電工製）、AIP-3013膜, ACP-3013膜, ACP-2013膜, AIP-2013膜, AIO-1010膜（以上、旭化成製）などの膜を利用した逆浸透膜（ナノフィルトレーション膜、分画分子量3000程度）処理を挙げることができる。これらは１種単独で行ってもまた２種を組み合わせて実施してもよい。
【００２１】
本発明において抽出処理とは、特に制限はされないが、炭酸ガス、エチレン、プロパン等を紫トウモロコシ色素抽出液の吸着処理液に臨界点以上の温度、圧力下の密閉系装置内で接触させる方法を挙げることができる。
【００２２】
またｐＨ調整処理（酸処理）は、紫トウモロコシ水性抽出物の吸着処理液若しくは上記の各種処理が施された処理液をｐＨ１〜４に調整し、酸性条件下に曝されることによって実施できる。好ましくはｐＨ１.５〜２の条件下に曝される酸処理である。酸処理は、具体的には上記処理液に酸を添加配合することによって簡便に行うことができる。かかる酸としては、食品添加物として通常使用される酸であれば特に制限されず、かかる中から任意に選択使用することができる。例えばクエン酸、酢酸、リンゴ酸、乳酸等の有機酸または硫酸、塩酸、リン酸、硝酸等の無機酸等を例示することができる。好ましくは食品添加物として通常使用される無機酸を用いた酸処理である。
【００２３】
かかる酸処理を行う温度条件は特に制限されず、通常５〜100℃の範囲から適宜選択使用することができる。例えば20〜100℃や40〜100℃の範囲を例示することができる。酸処理時間も特に制限されず、通常１〜300分の範囲から適宜選択することができる。一般に高温下での処理であればより短い処理時間で十分であり、よって例えば40〜100℃での処理の場合は５〜60分の範囲から処理時間を採択することができる。なおこの時、処理液は撹拌してもしなくても特に制限されない。
【００２４】
好ましい処理方法は、特に制限されないが、紫トウモロコシ抽出処理物に対し吸着処理を行い、脱吸着処理液後に、膜分離処理を行う方法である。また、必要に応じて上記脱吸着処理後に更にイオン交換処理（好ましくは陰イオン交換樹脂処理）を行うこともできる。なお、ここで膜分離処理は、好ましくは逆浸透膜処理または限外濾過膜処理であり、より好ましくは逆浸透膜処理である。また、当該膜分離処理は、分画分子量が2000〜4000、好ましくは3000付近である膜を用いて行うことが好ましい。
【００２５】
本発明者らは、後述する試験例で示すように、上記の方法により得られる本発明の紫トウモロコシ水性抽出物を、高血圧自然発症ラットに経口投与した場合に、本発明の目的である抗高血圧作用（血圧上昇抑制作用）を有効に発揮することを認めた。さらに、当該紫トウモロコシ水性抽出物は、継続的に経口投与しても上記ラットに悪影響を与えることなく、極めて安全なものであることが確認された。このため本発明の紫トウモロコシ水性抽出物は、高血圧を発症する傾向のある（または高血圧症傾向の）ヒト等の被験者に対して、血圧上昇抑制剤、高血圧発症予防剤、または高血圧症改善剤として、またはかかる効果を備える健康食品として有効に利用できるものと思われる。
【００２６】
従って、本発明によれば、紫トウモロコシ水性抽出物を有効成分とする抗高血圧組成物を提供することができる。
【００２７】
かかる紫トウモロコシ水性抽出物は、水、アルコール（例えば、エタノール）、その他の溶媒に溶解若しくは分散した溶液状態（乳剤状、液剤状、シロップ状など）、若しくは公知の方法により調製・成形した固体状態（散剤状、粉状、顆粒状、錠剤状、丸剤状など）の、経口的に服用または摂取される各種の製剤（食品組成物[例えば、サプリメント]、医薬品組成物または医薬部外品組成物）とすることができる。
【００２８】
当該製剤は、上記紫トウモロコシ水性抽出物に加えて、その製品形態に応じて、食品衛生上または薬学的に許容される担体や添加剤が配合されていてもよい。例えば、固体状態の製剤を調製する場合の賦形剤としては、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、コーンスターチ、ゼラチン、澱粉、デキストリン、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、合成ならびに天然のケイ酸アルミニウム、酸化マグネシウム、乾燥水酸化アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、重炭酸ナトリウム、乾燥酵母が例示される。また、溶液状態の製剤を調製する場合の賦形剤としては、水、グリセリン、プロピレングリコール、単シロップ、エタノール、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール等が例示される。また、これらの製剤は、所望によりクエン酸、リン酸、リンゴ酸又はその塩類などの安定化剤；スクラロース、アセスルファムカリウムなどの高甘味度甘味料やショ糖、果糖などの甘味剤；アルコール類、グリセリンなどの防腐剤；粘滑剤、希釈剤、緩衝剤、着香剤及び着色剤のような通常の添加剤と混合されていてもよく、常法又はその他の適切な方法で、散剤、錠剤、乳剤、カプセル剤、顆粒剤、チュアブル、液剤、シロップ剤等の経口投与用形態に製造することができる。
【００２９】
また、上記の紫トウモロコシ水性抽出物は、高血圧を発症する傾向のある（または高血圧症傾向の）ヒトを含む被験者を対象として、血圧上昇を抑制したり、高血圧症の発症を予防したり、または高血圧症を改善することを目的として用いられる健康食品の有効成分としても有用である。
【００３０】
ここで健康食品とは、通常の食品より積極的な意味での保健、健康維持・増進等の目的をもった食品をいう。本発明の紫トウモロコシ水性抽出物は、一般の食品に添加することにより（言い換えれば、原材料の一つとして使用することにより）、高血圧症の予防、治療もしくは改善を目的とした健康食品の調製に用いることができる。
【００３１】
例えば、食品としては、特に制限されないが、(1)乳飲料、乳酸菌飲料、果汁入り清涼飲料、清涼飲料、炭酸飲料、果汁飲料、野菜飲料、野菜・果実飲料、アルコール飲料、粉末飲料、コーヒー飲料、紅茶飲料、茶飲料などの飲料；(2)カスタードプリン、ミルクプリン、スフレプリン、果汁入りプリン等のプリン類、ゼリー、ババロア及びヨーグルト等のデザート類；(3)アイスクリーム、アイスミルク、ラクトアイス、ミルクアイスクリーム、果汁入りアイスクリーム及びソフトクリーム、アイスキャンディー、シャーベット、氷菓等の冷菓類；(4)チューインガムや風船ガム等のガム類（板ガム、糖衣状粒ガム）；(5)マーブルチョコレート等のコーティングチョコレートの他、イチゴチョコレート、ブルーベリーチョコレート及びメロンチョコレート等の風味を付加したチョコレート等のチョコレート類；（6)ハードキャンディー（ボンボン、バターボール、マーブル等を含む）、ソフトキャンディー（キャラメル、ヌガー、グミキャンディー、マシュマロ等を含む）、ドロップ、タフィ等の飴類；(7)ハードビスケット、クッキー、おかき、煎餅等の焼き菓子類；（以上、(2)〜(7)を総合して菓子という）；赤ワイン等の果実酒、リキュール、チュウハイ、炭酸アルコール飲料等のアルコール類を挙げることができる。
【００３２】
中でも、継続的に服用するという観点から、パン、キャンディ、錠菓等の菓子類、その他の固形製品、清涼飲料、栄養飲料などの液体製品、ゼリーのような半固形製品を好適に例示することができる。
【００３３】
本発明の紫トウモロコシ水性抽出物の用量は、体重60kgの成人に一日当たり、例えば、400〜4000mgの範囲で用いることが好ましい。
【００３４】
しかしながら、用量は、紫トウモロコシ水性抽出物を服用する人の健康状態、投与方法及び他の剤との組み合わせなどの種々の因子により変動し得る。なお、本発明の抗高血圧組成物または健康食品中に含まれる紫トウモロコシ水性抽出物の割合は、これらの組成物（食品組成物、医薬品組成物、医薬部外品組成物を含む）の一日当たりの投与量または摂取量から、上記用量に基づいて、適宜設定調整することができる。
【００３５】
本発明にかかる紫トウモロコシ水性抽出物は、元来より食経験のある紫トウモロコシの種子に多く含まれており、かつ食品添加物として使用されていることから、高血圧症の予防、治療もしくは改善を目的とした医薬品、医薬部外品または食品の有効成分として安全かつ有効に使用できるとともに、経済的に製造できるという特長を有する。
【発明の効果】
【００３６】
本発明の紫トウモロコシの水性抽出物を有効成分とする組成物によれば、紫トウモロコシの水性抽出物の作用に基づいて、高血圧症を発症する傾向にある者または高血圧症傾向にある者に対して、血圧上昇を抑制する効果、高血圧症の発症を抑制する効果、または高血圧症を改善する効果を発揮することができる。ゆえに、本発明の組成物は、抗高血圧組成物として、医薬品、医薬部外品または健康食品として有効に利用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３７】
以下に、本発明の構成ならびに効果をより明確にするために、調製例、試験例及び実施例を記載する。但し本発明は、これらの実施例等に何ら影響されるものではない。
【調製例１】
【００３８】
水100 Lと硫酸450 gの混合液（pH 2.3）に紫トウモロコシ乾燥物（芯と種子）10 kgを投入し、室温下に一夜浸漬放置した（抽出処理）。抽出処理後、60メッシュ金網にて固液分離した液に、濾過助剤（昭和化学工業製ラヂオライト700）を2％の割合で配合して濾過し、紫トウモロコシ粗抽出液（紫トウモロコシの抽出処理物）約100 Lを得た。この粗抽出液を、吸着樹脂（スチレンビニルベンゼン共重合体：ダイヤイオンHP20、三菱化学（株）製）10 LにSV=1、温度20℃の条件で通液し、樹脂を水 30L（SV=1）で洗浄した。さらに、樹脂に、30 v/v% エタノール／0.2 wt/v% クエン酸水溶液15 Lを通液し（SV=1、温度20℃）、脱離液を回収した。得られた脱離液を40℃以下、減圧下で濃縮して、紫トウモロコシ抽出液を得た。
【００３９】
この紫トウモロコシ抽出液を、次いで、吸着樹脂セパビーズSP207（三菱化学（株）製）10 LにSV=1、温度20℃の条件下で通液し、樹脂を水 30 L（SV=1）、次いで15 v/v% エタノール／0.2 wt/v% クエン酸水溶液 10 L（SV=1）で洗浄した。さらに、樹脂に25 v/v% エタノール／0.2 wt/v% クエン酸水溶液 20 Lを通液し（SV=1、温度20℃）、脱離液を回収した。この脱離液を40℃以下、減圧下で濃縮した後、噴霧乾燥し、粉末状の暗赤色の紫トウモロコシ抽出物70ｇを得た。なお、この粉末中には、シアニジン 3-グルコシドが18.5 %含まれていた。
【試験例１】
【００４０】
紫トウモロコシ抽出物の血圧に対する影響
紫トウモロコシ抽出物を６週齢の高血圧自然発症ラットに１日２回、５週間反復経口投与し、血圧上昇に対する抑制作用を、主に収縮期血圧の変動を指標に検討した。なお、これと並行して、比較試験（陽性対照）として、抗高血圧作用を有するカルシウム拮抗薬であるジルチアゼムを投与することによる血圧上昇抑制作用を観察した（成田寛、長尾拓、稲益正徳、岩崎仁、守田隆志：SHRの血圧上昇およびこれに伴う心肥大と血管肥厚に対するDiltiazemの影響、日本薬理学雑誌86(3)：165-174、1985）。
【００４１】
１．試験動物及び飼育条件
試験には、高血圧自然発症ラットとして薬効薬理試験に一般的に用いられている雄性SHR/N Crjラット（SPF、日本チャールス・リバー株式会社）を使用した。動物は４週齢（体重56〜76 g）のものを入手し、５日間の検疫期間およびその後３〜４日間の馴化期間を設け、その間に異常のみられなかった動物を試験に用いた。投与開始時の体重範囲は96〜120gであった。
【００４２】
動物は温度20〜26℃（実測値：温度20〜23℃）、湿度40〜70％（実測値：湿度43〜65％）、明暗各12時間（照明：午前6時〜午後6時）、換気回数12回／時（フィルターにより除菌した新鮮空気）に維持された動物飼育室で飼育した。また、血圧測定は防音室内で実施した。
【００４３】
動物は、ステンレス製五連ケージ（W:755×D：210×H：170mm）を用いて個別飼育した。飼料は製造後５ヵ月以内の固型飼料（CRF-1、オリエンタル酵母工業株式会社）を、飲料水は水道水を、それぞれ自由に摂取させた。
【００４４】
試験に際して、被験動物を対照群（注射用水投与）、紫トウモロコシ抽出物投与群、及びジルチアゼム投与群（陽性対照群）の３群（各群、10匹ずつ）に群分けした。なお、群分けはコンピュータを用いて、体重および収縮期血圧を層別に分けた後、無作為抽出法により各群の平均体重および平均収縮期血圧ならびにそれらの分散がほぼ等しくなるように投与開始日に行った。
【００４５】
２．試験方法
（１）投与検体及びその投与方法
紫トウモロコシ抽出物として、上記調製例に記載する方法で調製したものを使用した。また陽性対照物質であるジルチアゼムとして、ジルチアゼム塩酸塩（和光純薬工業（株）製）を用いた。なお、これらの検体は、必要量を秤量後、所定濃度になるように注射用水（（株）大塚製薬工場製）に用時溶解して用いた。対照群には、この注射用水（（株）大塚製薬工場製）を投与液として用いた。
【００４６】
投与回数は、１日午前と午後の２回とし、各投与量は、投与直前に測定する体重を基準として、紫トウモロコシ抽出物は１回あたり28.35mg/kg/回（１日投与量、56.7 mg/kg/day）、ジルチアゼムは吉田ら(吉田益美ら：生薬製剤メンテックの薬効薬理試験−SHRでの血圧上昇に対する作用−、薬理と治療19(9)：3651-3656、1991)および成田ら(成田寛ら：SHRの血圧上昇およびこれに伴う心肥大と血管肥厚に対するDiltiazemの影響、日本薬理学雑誌86(3)：165-174、1985)の報告を参考に血圧上昇抑制作用が認められている60mg/kg/回（１日投与量、120mg/kg/day）とした。また。投与は経口投与とし、ラット用経口ゾンデを取り付けたポリプロピレン製ディスポーザブル注射筒を用いて強制経口投与を行った。投与は、群分け日を初日（１日）として、８日、１５日、２２日、２９日及び３６日の午前と午後に各一回行った。
【００４７】
（２）一般状態観察と体重測定
各群（対照群、紫トウモロコシ抽出物投与群、ジルチアゼム投与群）のそれぞれの被験動物（各群10匹ずつ）について、投与1日（群分け日）、8、15、22、29および36日の午前の投与前に一般的な状態を観察するとともに体重を測定した。
【００４８】
（３）血圧及び心拍数の測定
各群（対照群、紫トウモロコシ抽出物投与群、ジルチアゼム投与群）のそれぞれの被験動物（各群10匹ずつ）について、投与開始前、及び投与開始から8、15、22、29および36日めに血圧測定を行った。なお、投与期間中の血圧測定は、午前の投与後約1時間から午後の投与前までに実施した。血圧は、尾動静脈圧を非観血式自動血圧測定装置（BP-98A、株式会社ソフトロン）を用いて、無麻酔下でtail caff法にて収縮期血圧、平均血圧、拡張期血圧および心拍数を測定した。測定は３回実施し、その平均値を各個体の測定値とした。なお、血圧測定前には、動物の体温を上げるため、動物を保温箱（設定温度：38℃）に５分程入れた。
【００４９】
３．試験結果
（１）一般状態および体重
各群（対照群、紫トウモロコシ抽出物投与群、ジルチアゼム投与群）の体重推移を図１に示す。図から分かるように、投与期間中、いずれの投与群にも特記すべき一般状態の変化並びに体重の変化は認められず、順調な体重推移を示した。
【００５０】
（２）血圧および心拍数
2.1.  収縮期血圧
収縮期血圧の測定結果を図２に示す。図から分かるように、対照群（−○−）の収縮期血圧の平均値は、投与開始前に121mmHgを示したが、その後、加齢とともに上昇し、投与36日には206mmHgを示した。紫トウモロコシ抽出物投与群（−□−）では、投与８日より対照群と比較して有意な低値がみられ、その上昇を有意に抑制した。また、陽性対照物質のジルチアゼム投与群（−△−）でも同様にその上昇を抑制した。ジルチアゼムの抑制効果は紫トウモロコシ抽出物と比べて若干強く、投与22日にはトウモロコシ抽出物投与群と比較して有意な低値が認められた。
【００５１】
2.2.      平均血圧および拡張期血圧
平均血圧の測定結果を図３に、拡張期血圧の測定結果を図４に示す。図３から分かるように、対照群（−○−）の平均血圧の平均値は、投与開始前に97mmHgを示したが、その後、加齢とともに上昇し、投与36日には171mmHgを示した。紫トウモロコシ抽出物投与群（−□−）では、投与８日より対照群と比較して有意な低値がみられ、その上昇を有意に抑制した。また、陽性対照物質のジルチアゼム投与群（−△−）でも同様にその上昇を抑制した。ジルチアゼムの抑制効果は紫トウモロコシ抽出物と比べて若干強く、投与８日には紫トウモロコシ色素投与群と比較して有意な低値が認められた。
【００５２】
図４から分かるように、対照群（−○−）の拡張期血圧の平均値は、投与開始前に85mmHgを示したが、その後、加齢とともに上昇し、投与36日には153mmHgを示した。紫トウモロコシ抽出物投与群（−□−）では、投与8〜29日に対照群と比較して有意な低値がみられ、その上昇を有意に抑制した。また、陽性対照物質のジルチアゼム投与群（−△−）でも同様にその上昇を抑制した。
【００５３】
2.3 心拍数の推移
心拍数の測定結果を図５に示す。対照群（−○−）の心拍数の平均値は、投与開始前に456beat/minを示したが、その後、加齢とともに減少し、投与36日には394beat/minを示した。紫トウモロコシ抽出物投与群（−□−）およびジルチアゼム投与群（−△−）については、対照群とほぼ同様な推移を示し、対照群に比較して有意な変化はみられなかった。
【００５４】
４．考察
今回、陽性対照物質として使用したジルチアゼムは、抗高血圧作用を有するカルシウム拮抗薬である。成田ら(成田寛ら：SHRの血圧上昇およびこれに伴う心肥大と血管肥厚に対するDiltiazemの影響、日本薬理学雑誌86(3)：165-174、1985)は、高血圧自然発症ラット（SHRラット）にジルチアゼムを生後４週から12週間にわたって投与した結果、SHRラットの血圧上昇を有意に抑制したが、心拍数は対照群と差を認めなかった事を報告している。本試験においてもジルチアゼムは抗高血圧作用を示したものの心拍数には影響を与えず、上記報告と同様の結果が得られた。
【００５５】
そして、本発明で用いた紫トウモロコシ抽出物は、若干作用は緩和であるものの、ジルチアゼムと同様に、収縮期血圧、平均血圧および拡張期血圧の各血圧に対してその上昇をいずれも抑制する作用を示した。さらに、紫トウモロコシ抽出物の投与によって、心拍数や体重等に対する悪影響は一切認められなかった。
【００５６】
これらの結果から、紫トウモロコシ抽出物は、高血圧を発症する傾向にある被験者または高血圧症傾向にある被験者に対して血圧上昇抑制作用を示すことが明らかになった。紫トウモロコシ抽出物の抗高血圧作用は、抗高血圧剤（医薬品）であるジルチアゼムと比べると穏やかであったこと、並びに身体に悪影響がないことから、食品として継続的に摂取することによって高血圧症の予防に適していると考えられる。
【実施例１】
【００５７】
食品組成物（１）
調製例１で調製した暗赤色の粉末（紫トウモロコシ抽出物）を抗高血圧剤として用いて、グレープ果汁20％入り飲料を調製した。具体的には下記の処方に従って材料を混合し、ろ過した後、250mlのビンに充填して、80℃で10分間殺菌してグレープ果汁20％入り飲料を調製した。
【００５８】
スクラロース                     0.0136 (kg)
5倍濃縮グレープ透明果汁          4.0
クエン酸（結晶）                 0.25
紫トウモロコシ抽出物             0.20
グレープフレーバー               0.10
フルーツフレーバー               0.10
清  水                           適量        
合  計                         100.00  kg。
【実施例２】
【００５９】
食品組成物（２）
調製例１で調製した暗赤色の粉末（紫トウモロコシ抽出物）を抗高血圧剤として用いて、ノンシュガーキャンディを調製した。具体的には下記の処方に従って材料を混合し、加熱溶解した後、成型してノンシュガーキャンディを調製した。
【００６０】
還元パラチノース                60.00  (kg)
還元澱粉糖化物                  59.33
スクラロース                     0.03
クエン酸（無水）                 1.50
クエン酸三ナトリウム             0.07
紫トウモロコシ抽出物            10.00
グレープフレーバー               0.20
清  水                          30.00       
煮詰めて、収量約               100.00 。
【実施例３】
【００６１】
食品組成物（３）
調製例１で調製した暗赤色の粉末（紫トウモロコシ抽出物）を抗高血圧剤として用いて、ドリンクゼリーを調製した。具体的には下記の処方に従って材料を混合し、加熱溶解した後、容器に充填して、85℃30分間殺菌してドリンクゼリーを調製した。
【００６２】
砂糖                             5.00
果糖ぶどう糖液糖                15.00
5倍濃縮ホワイトグレープ果汁      4.00
ゲル化剤（増粘多糖類）           0.20
ゲル化剤（ジェランガム）         0.15
クエン酸三ナトリウム             0.10
乳酸カルシウム                   0.10
クエン酸（無水）                 0.18
紫トウモロコシ抽出物             0.33
グレープフレーバー               0.30
清  水                           適量        
合  計                         100.00  kg。
【実施例４】
【００６３】
食品組成物（４）
調製例１で調製した暗赤色の粉末（紫トウモロコシ抽出物）を抗高血圧剤として用いて、下記の処方で材料を混合し、打錠機により錠剤を調製した。
【００６４】
ソルビトール                     79.75  (kg)
ショ糖脂肪酸エステル              0.15
香料                              0.1
紫トウモロコシ抽出物             20.0       
合  計                          100.0  kg。
【図面の簡単な説明】
【００６５】
【図１】各群〔対照群（−○−）、紫トウモロコシ抽出物投与群（−□−）、及びジルチアゼム投与群（陽性対照群）（−△−）〕について、各検体投与による体重増加の推移を経時的に示す図である（試験例１）。
【図２】試験例１において、各群〔対照群（−○−）、紫トウモロコシ抽出物投与群（−□−）、及びジルチアゼム投与群（陽性対照群）（−△−）〕について、各検体投与後に測定した収縮期血圧の結果を示す図である。図中、＊は対照群との有意差がP<0.05、＊＊は対照群との有意差がP<0.01、＃は紫トウモロコシ抽出物投与群との有意差がP<0.05であることを示す（図３〜５においても同じ）。
【図３】試験例１において、各群〔対照群（−○−）、紫トウモロコシ抽出物投与群（−□−）、及びジルチアゼム投与群（陽性対照群）（−△−）〕について、各検体投与後に測定した血圧の平均値を示す図である。
【図４】試験例１において、各群〔対照群（−○−）、紫トウモロコシ抽出物投与群（−□−）、及びジルチアゼム投与群（陽性対照群）（−△−）〕について、各検体投与後に測定した拡張期血圧の結果を示す図である。
【図５】試験例１において、各群〔対照群（−○−）、紫トウモロコシ抽出物投与群（−□−）、及びジルチアゼム投与群（陽性対照群）（−△−）〕について、各検体投与後に測定した心拍数を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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