(57)【要約】【課題】腎臓の放射能蓄積が少なく、かつ尿中への速やかな排泄を可能とする抗体等の放射性金属標識化合物、該標識化合物を有効成分とする画像診断用または治療用の医薬組成物、および画像診断方法乃至は治療方法の提供を目的とする。【解決手段】式１：Ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ｆで表される放射性金属で標識された診断剤及び治療剤を提供する（式中、ＭはＴｃ−９９ｍ、Ｒｅ−１８６又はＲｅ−１８８から選択される放射性金属；Ａはシクロペンタジエニルトリカルボニル基又はシクロペンタジエニルトリカルボニル基から誘導される基；Ｂ及びＣは任意のアミノ酸残基；Ｄはスペーサー１；Ｅはスペーサー２（ただし、ＤとＦが直接結合する場合にはスペーサー２は存在しなくてもよい）；Ｆは抗体、抗体断片等の蛋白質、またはペプチド等の生理活性物質を示す）。【選択図】      図１
2005047821.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ｆ    （式１）
（式１中、
Ｍ：  テクネチウム−９９ｍ（Ｔｃ−９９ｍ）、レニウム−１８６（Ｒｅ−１８６）
またはレニウム−１８８（Ｒｅ−１８８）から選択される放射性金属
Ａ：  シクロペンタジエニルトリカルボニル基またはシクロペンタジエニルトリカルボニル基から誘導される基
Ｂ：  任意のアミノ酸残基
Ｃ：  任意のアミノ酸残基
Ｄ：  スペーサー１
Ｅ：  スペーサー２（ただし、ＤとＦが直接結合し得る場合は、スペーサー２は存在しなくてもよい）
Ｆ：  抗体、抗体断片等の蛋白質、またはペプチド等の生理活性物質
を示す）
で表される放射性金属標識されたシクロペンタジエニルトリカルボニル化合物を有する診断及び治療用薬剤。
【請求項２】
Ｂ−Ｃが、腎臓の酵素により選択的に切断されるアミノ酸配列である請求項１の薬剤。
【請求項３】
Ａのシクロペンタジエニルトリカルボニル基から誘導される基が、カルボニル基を有するシクロペンタジエニルトリカルボニル基である請求項１の薬剤。
【請求項４】
Ｂのアミノ酸残基がグリシン残基である請求項１の薬剤。
【請求項５】
Ｃのアミノ酸残基が、リジン、フェニルアラニンまたはチロシンから選ばれるアミノ酸の残基である請求項１の薬剤。
【請求項６】
Ｂ−Ｃが、グリシル−リシンである請求項１の薬剤。
【請求項７】
Ｄが、アミノ酸残基Ｃと共有結合を形成し、かつスペーサーＥと結合しうる官能基を有するスペーサー、またはＤと結合可能な官能基を有する生理活性物質Ｆと直接結合しうるスペーサーである請求項１の薬剤。
【請求項８】
Ｄがマレオイル基（ｍａｌｅｏｙｌ）またはカルボン酸活性エステルから誘導される基から選択されるスペーサーである請求項７記載の薬剤。
【請求項９】
Ｅが、ＤおよびＦと共有結合する２つの官能基を有するスペーサーである請求項１の薬剤。
【請求項１０】
Ｅがイミノチオールであるか、またはＥがスペーサーとして存在しない、請求項９記載の薬剤。
【請求項１１】
Ｆが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、アルブミン、またはその他の血漿タンパク質、乃至はソマトスタチン、走化性因子、ラミニン、等のペプチドから選択される生理活性物質である請求項１の薬剤。
【請求項１２】
Ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ    （式２）
（式２中、
Ｍ：  テクネチウム−９９ｍ（Ｔｃ−９９ｍ）、レニウム−１８６（Ｒｅ−１８６）またはレニウム−１８８（Ｒｅ−１８８）から選択される放射性金属
Ａ：  シクロペンタジエニルトリカルボニル基またはシクロペンタジエニルトリカルボニル基から誘導される基
Ｂ：  任意のアミノ酸残基
Ｃ：  任意のアミノ酸残基、
Ｄ：  スペーサー１
を示す）
で表される放射性金属標識されたシクロペンタジエニルトリカルボニル化合物。
【請求項１３】
Ａのシクロペンタジエニルトリカルボニル基から誘導される基が、カルボニル基を有するシクロペンタジエニルトリカルボニル基である請求項１２の化合物。
【請求項１４】
Ｂのアミノ酸残基がグリシン残基である請求項１２の化合物。
【請求項１５】
Ｃのアミノ酸残基が、リジン、フェニルアラニンまたはチロシンから選ばれるアミノ酸の残基である請求項１２の化合物。
【請求項１６】
Ｄがマレオイル基（ｍａｌｅｏｙｌ）またはカルボン酸活性エステルから誘導される基から選択されるスペーサーである請求項１２の化合物。
【請求項１７】
請求項１２の式２で表される放射性金属標識されたシクロペンタジエニルトリカルボニル化合物の製法であって、
Ｍ−Ａ−ＣＯＯＲ（Ｍは請求項１２に記載の放射性金属を示し、Ａはシクロペンタジエニルトリカルボニル基を示し、Ｒはアルキル基またはＮ−ヒドロキシスクシンイミジル基を示す）と、Ｈ−Ｂ−Ｃ−Ｄ（Ｂ、Ｃ及びＤは請求項１２に同じくし、Ｈは水素原子を示す）とを反応させて、
Ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ      （式２）
（Ｍ、Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤは請求項１２と同じものを示す。）を得る製法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生体の疾患部位を診断または治療するにあたり、腎臓における放射能滞留低減を可能にする放射性金属標識化合物、該化合物を有効成分とする薬剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体などのタンパク質またはペプチド等の生理活性物質を放射性金属で標識した化合物およびその医薬組成物は、生体内の疾患部位の画像診断用または治療用の放射性医薬品として広く利用されている（例えば、非特許文献１−５参照。）。利用される放射性金属としては、診断用としてはテクネチウム−９９ｍ、インジウム−１１１およびガリウム−６７など、また治療用としてはイットリウム−９０、レニウム−１８６またはレニウム−１８８などが知られている。放射性金属元素を抗体等に標識する場合には、通常、金属キレート剤が用いられる。金属キレート剤としては、ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、ジアミノジチオ化合物、サイクラム、およびＤＯＴＡなどが知られている。これらのキレート剤は抗体等に予め結合しておき、その後放射性金属で標識する場合と、放射性金属キレートを形成後、抗体等に結合して標識する方法がある（例えば、非特許文献６−１０参照。）。
【０００３】
しかしながら、該化合物は、しばしば腎臓に蓄積するため、腎臓における被曝または腎障害を起こすことが知られている（非特許文献１１および１２参照。）。抗体は、ＦａｂやシングルチェインＦｖ等に断片化すると疾患部位等の標的部位への分布が促進されるため、ＦａｂやＦｖが利用されることも少なくない。一方、ＦａｂやＦｖでは腎臓への蓄積が一層顕著であるため、腎臓の被曝および腎障害のおそれが心配され、投与量の調整が必要であった（非特許文献１３−１７参照。）。
【０００４】
標識用の放射性核種には、上記の放射性金属以外に、フッ素−１８、ヨウ素−１２３、およびヨウ素−１３１などの放射性ハロゲン元素も知られている。これらの放射性ハロゲン元素も上述の放射性金属元素と同様に抗体やペプチドに標識して、放射性診断薬あるいは放射性治療薬として広く利用されている。
【０００５】
最近、放射性ヨウ素を馬尿酸に標識し、更にε−Ｎ−マレオイル−Ｌ−リジン（ＨＭＬ）を介して抗体のＦａｂ断片に結合した化合物が報告された（非特許文献１８および１９参照）。該化合物は、従来の抗体のチロシン残基に放射性ヨウ素を標識した化合物に比べて、腎臓の放射能レベルが低く、かつ速やかな尿中への排泄が示された。この排泄機序は、ラットの実験結果より、腎皮質に存在する刷子縁膜酵素の作用により、化合物中のグリシン−リジン結合が選択的に切断され、代謝物であるヨード馬尿酸が尿中に速やかに排泄されることによることがわかった。
【０００６】
放射性ヨウ素は、診断用および治療用のいずれにも汎用されているが、院内での調製が困難であり緊急時などには使用できない。そこで、放射性金属と配位子の結合した抗体とを必要時に混ぜ合わせることだけで調整可能な放射性金属で安定に標識された抗体の利用が期待されている。しかしながら、放射性金属標識抗体等では、放射性ヨウ素標識抗体で示されたような十分低い腎放射能集積と速やかな尿中排泄を達成した化合物の報告はまだない（非特許文献２０−２４参照。）。
【非特許文献１】
ベール  ティー  エム（Ｂｅｈｒ  ＴＭ）、外８名、「結腸直腸癌における免疫シンチグラフィーのための、テクネチウム−９９ｍで標識された抗−ＣＥＡモノクローナル抗体の完全長のものと断片化したものとの比較（Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｖｅｒｓｕｓ  ｆｒａｇｍｅｎｔｅｄ  ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ−９９ｍ−ｌａｂｅｌｅｄ  ａｎｔｉ−ＣＥＡ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  ｉｍｍｕｎｏｓｃｉｎｔｉｇｒａｐｈｙ  ｉｎ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ）」、Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ、１９９５年、第３６巻、ｐ．４３０−４４１
【非特許文献２】
マロニー  ディー  ジー（Ｍａｌｏｎｅｙ  ＤＧ）、外６名、「再発性Ｂ−細胞リンパ腫患者における、キメラ抗ＣＤ２０モノクローナル抗体（ＩＤＥＣ−Ｄ２Ｂ８）の単剤輸液を増加させて使用したフェーズＩ臨床試験（Ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌ  ｕｓｉｎｇ  ｅｓｃａｌａｔｉｎｇ  ｓｉｎｇｌｅ−ｄｏｓｅ  ｉｎｆｕｓｉｏｎ  ｏｆ  ｃｈｉｍｅｒｉｃ  ａｎｔｉ−ＣＤ２０  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ（ＩＤＥＣ−Ｃ２Ｂ８）  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ  Ｂ−ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）」、Ｂｌｏｏｄ、１９９４年、第８４巻、ｐ．２４５７−２４６６
【非特許文献３】
マロニー  ディー  ジー（Ｍａｌｏｎｅｙ  ＤＧ）、グリロ−ロペス  エイ  ジェー（Ｇｒｉｌｌｏ−Ｌｏｐｅｚ  ＡＪ）、ホワイト  シー  エー（Ｗｈｉｔｅ  ＣＡ）ら、「再発性低度非ホジキンリンパ腫患者に対するＩＤＥＣ−Ｃ２Ｂ８（リツキシマブ）抗−ＣＤ２０モノクローナル抗体治療（ＩＤＥＣ−Ｃ２Ｂ８（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）  ａｎｔｉ−ＣＤ２０  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｒｅｌａｐｓｅｄ  ｌｏｗ−ｇｒａｄｅ  ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）」、Ｂｌｏｏｄ、１９９７年、第９０巻、ｐ．２１８８−２１９５
【非特許文献４】
ワイズマン  ジー  エー（Ｗｉｓｅｍａｎ  ＧＡ）、ライ  ビー（Ｌｅｉｇｈ  Ｂ）、エルウィン  ダブリュ  ディー（Ｅｒｗｉｎ  ＷＤ）ら、「リツキシマブ−難治性非ホジキンリンパ腫のゼバリン放射免疫治療のための放射線量測定結果（Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｄｏｓｉｍｅｔｒｙ  ｒｅｓｕｌｔｓ  ｆｏｒ  Ｚｅｖａｌｉｎ  ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｒｉｔｕｘｉｍａｂ−ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）」、Ｃａｎｃｅｒ、２００２年、第９４巻、ｐ．１３４９−１３５７
【非特許文献５】
ウィトジッヒ  ティー  イー（Ｗｉｔｚｉｇ  ＴＥ）、ゴードン  エル  アイ（Ｇｏｒｄｏｎ  ＬＩ）、カバニラス  エフ（Ｃａｂａｎｉｌｌａｓ  Ｆ）ら、「再発性若しくは難治性の低度甲状腺濾胞腺癌又は変形Ｂ−細胞非ホジキンリンパ腫患者における、イットリウム−９０で標識したイブリツモマブ  チウキセタン放射免疫治療とリツキシマブ免疫治療の無作為制御試験（Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｙｔｔｒｉｕｍ−９０−ｌａｂｅｌｅｄ  ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂ  ｔｉｕｘｅｔａｎ  ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｖｅｒｓｕｓ  ｒｉｔｕｘｉｍａｂ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｒｅｌａｐｓｅｄ  ｏｒ  ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  ｌｏｗ−ｇｒａｄｅ，  ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ，  ｏｒ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ  Ｂ−ｃｅｌｌ  ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ、２００２年、第２０巻、ｐ．２４５３−２４６３
【非特許文献６】
オノ  エム（Ｏｎｏ  Ｍ）、アラノ  ワイ（Ａｒａｎｏ  Ｙ）、ムカイ  ティー（Ｍｕｋａｉ  Ｔ）ら、「テクネチウム−９９ｍで標識されたヒドラジノニコチンアミド誘導化ポリペプチド及びペプチドの血漿蛋白質結合（Ｐｌａｓｍａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｏｆ  （９９ｍ）Ｔｃ−ｌａｂｅｌｅｄ  ｈｙｄｒａｚｉｎｏ  ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｚｅｄ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ）」、Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、２００１年、第２８巻、ｐ．１５５−１６４
【非特許文献７】
オノ  エム（Ｏｎｏ  Ｍ）、外８名、「９９ｍ−Ｔｃで標識されたポリペプチドの生体内での低い蛋白質結合のための９９ｍ−Ｔｃ−ＨＹＮＩＣ−誘導化三元配位子（（９９ｍ）Ｔｃ−ＨＹＮＩＣ−ｄｅｒｉｖａｔｉｚｅｄ  ｔｅｒｎａｒｙ  ｌｉｇａｎｄ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ  ｆｏｒ  （９９ｍ）Ｔｃ−ｌａｂｅｌｅｄ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｗｉｔｈ  ｌｏｗ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｉｎｄｉｎｇ）」、Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、２００１年、第２８巻、ｐ．２１５−２２４
【非特許文献８】
アキザワ  エイチ（Ａｋｉｚａｗａ  Ｈ）、アラノ  ワイ（Ａｒａｎｏ  Ｙ）、ミフネ  エム（Ｍｉｆｕｎｅ  Ｍ）ら、「インジウム−１１１−ＤＴＰＡ−共役ペプチドの腎放射能レベルにおける、インジウム−１１１−ＤＴＰＡ−キレートの重要性（Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｏｆ  （１１１）Ｉｎ−ＤＴＰＡ  ｃｈｅｌａｔｅ  ｉｎ  ｒｅｎａｌ  ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ  ｌｅｖｅｌｓ  ｏｆ  （１１１）Ｉｎ−ＤＴＰＡ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ）」、Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、２００１年、第２８巻、ｐ．４５９−４６８
【非特許文献９】
ムカイ  ティー（Ｍｕｋａｉ  Ｔ）、外８名、「蛋白質の薬物動力学を測定するためのインジウム−１１１に基づく残留レベルのためのモノリアクティブＤＯＴＡ誘導体の合成と評価（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｍｏｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ  ＤＯＴＡ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ  ｆｏｒ  ｉｎｄｉｕｍ−１１１−ｂａｓｅｄ  ｒｅｓｉｄｕａｌｉｚｉｎｇ  ｌａｂｅｌ  ｔｏ  ｅｓｔｉｍａｔｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ）」、Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、２００２年、第５４巻、ｐ．１０７３−１０８１
【非特許文献１０】
アラノ  ワイ（Ａｒａｎｏ  Ｙ）、外８名、「新たに合成したモノリアクティブＤＴＰＡ誘導体を使ったポリペプチドのインジウム−１１１標識のためのキレート剤としてのジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）の再評価（Ｒｅａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｒｉａｍｉｎｅ−ｐｅｎｔａａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ（ＤＴＰＡ）  ａｓ  ａ  ｃｈｅｌａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ  ｆｏｒ  ｉｎｄｉｕｍ−１１１  ｌａｂｅｌｉｎｇ  ｏｆ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｕｓｉｎｇ  ａ  ｎｅｗｌｙ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ  ｍｏｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ  ＤＴＰＡ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ）」、Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ、１９９６年、第３９巻、ｐ．３４５１−３４６０
【非特許文献１１】
オッテ  エー（Ｏｔｔｅ  Ａ）、外７名、「イットリウム−９０  ＤＯＴＡＴＯＣ：初めての臨床試験結果（Ｙｔｔｒｉｕｍ−９０  ＤＯＴＡＴＯＣ：ｆｉｒｓｔ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｒｅｓｕｌｔｓ）」、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ、１９９９年、第２６巻、ｐ．１４３９−１４４７
【非特許文献１２】
シブラ  エム（Ｃｙｂｕｌｌａ  Ｍ）、外３名、「９０Ｙ−ＤＯＴＡＴＯＣで治療した後の末期腎疾患（Ｅｎｄ−ｓｔａｇｅ  ｒｅｎａｌ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｆｔｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ９０Ｙ−ＤＯＴＡＴＯＣ）」、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ、２００１年、第２８巻、ｐ．１５５２−１５５４
【非特許文献１３】
バウム  アール  ピー（Ｂａｕｍ  ＲＰ）、外６名、「Ｂ−細胞リンパ腫の放射免疫検出におけるテクネチウム−９９ｍ標識ＬＬ２モノクローナル抗体フラグメントによる初期臨床結果（Ｉｎｉｔｉａｌ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｒｅｓｕｌｔｓ  ｗｉｔｈ  ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ−９９ｍ−ｌａｂｅｌｅｄ  ＬＬ２  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｒａｇｍｅｎｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂ−ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａｓ）」、Ｃａｎｃｅｒ、１９９４年、第７３巻、ｐ．８９６−８９９
【非特許文献１４】
ブジス  ダブリュ  シー（Ｂｕｊｉｓ  ＷＣ）、外４名、「卵巣癌患者に対するインジウム−１１１標識モノクローナル抗体フラグメントを用いた免疫シンチグラフィーの放射線量測定評価（Ｄｏｓｉｍｅｔｒｉｃ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｓｃｉｎｔｉｇｒａｐｈｙ  ｕｓｉｎｇ  ｉｎｄｉｕｍ−１１１−ｌａｂｅｌｅｄ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ）」、Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ、１９９２年、第３３巻、ｐ．１１１３−１１２０
【非特許文献１５】
デパラティス  エル  アール（ＤｅＰａｌａｔｉｓ  ＬＲ）、外３名、「Ｌｕ−１７７アルファ−［２−（４−アミノフェニル）エチル］−１，４，７，１０−四酢酸−ＣＣ４９  Ｆａｂ放射免疫接合の注射に関連した放射能の腎集積をリジンは低減する（Ｌｙｓｉｎｅ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｒｅｎａｌ  ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ［１７７Ｌｕ］ａｌｐｈａ−［２−（４−ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌ）ｅｔｈｙｌ］−１，４，７，１０−ｔｅｔｒａａｚａ−ｃｙｃｌｏｄｅｃａｎｅ−１，４，７，１０−ｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ−ＣＣ４９  Ｆａｂ  ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）」、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、１９９５年、第５５巻、ｐ．５２８８−５２９５
【非特許文献１６】
ウルティー  エム  イー（Ｕｌｔｅｅ  ＭＥ）、ブリッジャー  ジー  ジェイ（Ｂｒｉｄｇｅｒ  ＧＪ）、エイブラムス  エム  ジェイ（Ａｂｒａｍｓ  ＭＪ）ら、「テクネチウム−９９ｍ−標識ヒドラジノニコチンアミド−Ｆａｂ’接合による腫瘍イメージング（Ｔｕｍｏｒ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｗｉｔｈ  ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ−９９ｍ−ｌａｂｅｌｅｄ  ｈｙｄｒａｚｉｎｏｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ−Ｆａｂ’  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ）」、Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ、１９９７年、第３８巻、ｐ．１３３−１３８
【非特許文献１７】
ウー  シー（Ｗｕ  Ｃ）、外６名、「Ｇａ−６７−標識  抗−Ｔａｃ  ｄｓＦｖ  フラグメントの生体内分布と異化（Ｂｉｏｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃａｔａｂｏｌｉｓｍ  ｏｆ  Ｇａ−６７−ｌａｂｅｌｅｄ  ａｎｔｉ−Ｔａｃ  ｄｓＦｖ  ｆｒａｇｍｅｎｔ）」、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ、１９９７年、第８巻、ｐ．３６５−３６９
【非特許文献１８】
フジオカ  ワイ（Ｆｕｊｉｏｋａ  Ｙ）、アラノ  ワイ（Ａｒａｎｏ  Ｙ）ら、「３’−ヨードヒプリル  Ｎ（イプシロン）−マレオイル−Ｌ−リシン（ＨＭＬ）接合−Ｆａｂフラグメントの腎臓代謝（Ｒｅｎａｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｏｆ  ３’−ｉｏｄｏｈｉｐｐｕｒｙｌ  Ｎ（ｅｐｓｉｌｏｎ）−ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ（ＨＭＬ）−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  Ｆａｂ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ）」、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ、２００１年、第１２巻、ｐ．１７８−１８５
【非特許文献１９】
アラノ  ワイ（Ａｒａｎｏ  Ｙ）、フジオカ  ワイ（Ｆｕｊｉｏｋａ  Ｙ）、アキザワ  エイチ（Ａｋｉｚａｗａ  Ｈ）ら、「低い腎臓放射能レベルのための放射性標識された抗体フラグメントの化学的設計（Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｌｏｗ  ｒｅｎａｌ  ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ  ｌｅｖｅｌｓ）」、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、１９９９年、第５９巻、ｐ．１２８−１３４
【非特許文献２０】
アキザワ  エイチ（Ａｋｉｚａｗａ  Ｈ）、アラノ  ワイ（Ａｒａｎｏ  Ｙ）、「放射性標識された抗体の代謝可能な結合の介在による薬物動力学の変化  代謝可能なリンカーとモノクローナル抗体の薬物動力学（Ａｌｔｅｒｉｎｇ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｉｎｔｅｒｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｅｔａｂｏｌｉｚａｂｌｅ  ｌｉｎｋａｇｅｓ．  Ｍｅｔａｂｏｌｉｚａｂｌｅ  ｌｉｎｋｅｒｓ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）」、Ｑ  Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ、２００２年、第４６巻、ｐ．２０６−２２３
【非特許文献２１】
アラノ  ワイ（Ａｒａｎｏ  Ｙ）、「ガンマ−イメージングのための診断薬の輸送（Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｇａｍｍａ−ｉｍａｇｉｎｇ）」、Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ、１９９９年、第３７巻、ｐ．１０３−１２０
【非特許文献２２】
リー  エル（Ｌｉ  Ｌ）、外５名、「組換え抗体フラグメントに接合した放射性金属で標識したペプチドの腎臓吸収の低減  Ｃｙｓ−ダイアボディーへのＤＯＴＡ−ペプチドのサイト特異的接合（Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｋｉｄｎｅｙ  ｕｐｔａｋｅ  ｉｎ  ｒａｄｉｏｍｅｔａｌ  ｌａｂｅｌｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｌｉｎｋｅｒｓ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  ｔｏ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｒａｇｍｅｎｔｓ．  Ｓｉｔｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＤＯＴＡ−ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｔｏ  ａ  Ｃｙｓ−ｄｉａｂｏｄｙ）」、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ、２００２年、第１３巻、ｐ．９８５−９９５
【非特許文献２３】
バーベーク  ケー（Ｖｅｒｂｅｋｅ  Ｋ）、外３名、「９９ｍ  Ｔｃ−ＥＣ−Ｆｏｒ−ＭＬＦＫの製造と予備的評価（Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ９９ｍ  Ｔｃ−ＥＣ−Ｆｏｒ−ＭＬＦＫ）」、Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、２００２年、第２９巻、ｐ．５８５−５９２
【非特許文献２４】
キム  エム  ケー（Ｋｉｍ  ＭＫ）、ジェオング  エイチ  ジェー（Ｊｅｏｎｇ  ＨＪ）、カオ  シー  エイチ（Ｋａｏ  ＣＨ）ら、「化学的修飾による９９ｍ  Ｔｃ−標識  抗−Ｔａｃ  モノクローナル抗体Ｆａｂの改良された腎臓クリアランス及び腫瘍ターゲティング（Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｒｅｎａｌ  ｃｌｅａｒａｎｃｅ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ９９ｍ  Ｔｃ−ｌａｂｅｌｅｄ  ａｎｔｉ−Ｔａｃ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｆａｂ  ｂｙ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ）」、Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、２００２年、第２９巻、ｐ．１３９−１４６
【非特許文献２５】
ウエハラ  ティー（Ｕｅｈａｒａ  Ｔ）、外８名、「シクロペンダジエニルトリカルボニルレニウム（ＣｐＴＲ）の生体内での認識（Ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｄｉｅｎｙｌｔｒｉｃａｒｂｏｎｙｌｒｈｅｎｉｕｍ（ＣｐＴＲ）  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ）」、Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、２００３年、第３０巻、ｐ．３２７−３３４
【非特許文献２６】
スプラダウ  ティー  ダブリュー（Ｓｐｒａｄａｕ  ＴＷ）、外４名、「Ｔｃ−９９ｍシクロペンダジエニルトリカルボニルレニウム標識オクトレオチドの合成と生物学的評価（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｃ−９９ｍ−ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｄｉｅｎｙｌｔｒｉｃａｒｂｏｎｙｌｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ−ｌａｂｅｌｅｄ  ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）」、Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、１９９９年、第２６巻、ｐ．１−７
【非特許文献２７】
ワキサカ  ケー（Ｗａｋｉｓａｋａ  Ｋ）、外８名、「リソソーム蛋白質分解後にｍ−ヨウ化馬尿酸を遊離させる、血漿を安定化する代謝可能な結合としてのＬ−リジンと蛋白質放射性医薬品のための新規な放射性ヨウ素化試薬（Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｒａｄｉｏｉｏｄｉｎａｔｉｏｎ  ｒｅａｇｅｎｔ  ｆｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ｗｉｔｈ  Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ  ａｓ  ａ  ｐｌａｓｍａ−ｓｔａｂｌｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｚａｂｌｅ  ｌｉｎｋａｇｅ  ｔｏ  ｌｉｂｅｒａｔｅ  ｍ−ｉｏｄｏｈｉｐｐｕｒｉｃ  ａｃｉｄ  ａｆｔｅｒ  ｌｙｓｏｓｏｍａｌ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ）」、Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ、１９９７年、第４０巻、ｐ．２６４３−２６５２
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、かかる従来技術の状況に鑑み、腎臓の放射能蓄積が少なく、かつ尿中への速やかな排泄を可能とする抗体等の放射性金属標識化合物、該標識化合物を有効成分とする画像診断用または治療用の医薬組成物、および画像診断方法乃至は治療方法の提供を目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
すなわち、本発明は、下記式１
Ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ｆ          （式１）
（式１中、
Ｍ：  テクネチウム−９９ｍ（Ｔｃ−９９ｍ）、レニウム−１８６（Ｒｅ−１８６）
またはレニウム−１８８（Ｒｅ−１８８）から選択される放射性金属
Ａ：  シクロペンタジエニルトリカルボニル基またはシクロペンタジエニルトリカルボニル基から誘導される基
Ｂ：  任意のアミノ酸残基
Ｃ：  任意のアミノ酸残基
Ｄ：  スペーサー１
Ｅ：  スペーサー２（ただし、ＤとＦが直接結合し得る場合は、スペーサー２は存在しなくてもよい）
Ｆ：  抗体、抗体断片等の蛋白質、またはペプチド等の生理活性物質
を示す）
で表される放射性金属で標識された診断剤及び治療剤に関するものである。
本発明において、診断用薬剤のための放射性金属としてはテクネチウム−９９ｍ、インジウム−１１１およびガリウム−６７など、また治療用としてはイットリウム−９０、レニウム−１８６またはレニウム−１８８等が使用できる。
【０００９】
また、本発明は、
Ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ    （式２）
（式２中、
Ｍ：  テクネチウム−９９ｍ（Ｔｃ−９９ｍ）、レニウム−１８６（Ｒｅ−１８６）
またはレニウム−１８８（Ｒｅ−１８８）から選択される放射性金属
Ａ：  シクロペンタジエニルトリカルボニル基またはカルボニル基を有していてもよいシクロペンタジエニルトリカルボニル基
Ｂ：  任意のアミノ酸残基
Ｃ：  任意のアミノ酸残基、
Ｄ：  スペーサー１
を示す）
で表される放射性金属標識されたシクロペンタジエニルトリカルボニル化合物及びその製法をも提供する。
上記式２で表される放射性金属標識されたシクロペンタジエニルトリカルボニル化合物は、Ｍ−Ａ−ＣＯＯＲ（Ｍは請求項１１に記載の放射性金属を示し、Ａはシクロペンタジエニルトリカルボニル基を示し、Ｒはアルキル基またはＮ−ヒドロキシスクシンイミジル基を示す）と、Ｈ−Ｂ−Ｃ−Ｄ（Ｂ、Ｃ及びＤは、前記同じくし、Ｈは水素原子を示す）とを反応させて製造することができる。ここに、アルキル基とは、炭素数１から６のアルキル基を意味する。
【００１０】
【発明の効果】
本発明により、生体内で腎臓に蓄積されることなく代謝され、生じた放射性代謝物が尿中に速やかに排泄される放射性金属標識化合物を有効成分とする放射性画像診断剤、放射性治療剤の提供が可能になった。
【００１１】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
本発明の特徴は、放射性金属で標識された化合物Ａを、腎臓で選択的に切断されるアミノ酸配列Ｂ−Ｃを介して抗体、抗体断片またはペプチド等の生理活性物質に結合することにより、該化合物が選択的に酵素分解され、かつ代謝産物（Ｍ−Ａ−Ｂ）は腎臓に蓄積することなく、速やかに尿中に排泄されることにある。
アミノ酸配列グリシン−リジンが生体内、殊に腎皮質に存在する刷子縁膜酵素によって切断されることは既に知られていた（非特許文献１８参照。）。実際、放射性ヨウ素を馬尿酸に標識し、更にε−Ｎ−マレオイル−Ｌ−リジン（ＨＭＬ）を介して抗体のＦａｂ断片に結合した化合物は、従来の抗体のチロシン残基に放射性ヨウ素を標識した化合物に比べて、腎臓の放射能レベルが低く、かつ速やかな尿中への排泄を示した。この排泄機序は、ラットの実験結果より、腎皮質に存在する刷子縁膜酵素の作用により、化合物中のグリシン−リジン結合が選択的に切断され、代謝物であるヨード馬尿酸が尿中に速やかに排泄されることによることがわかった。
【００１２】
しかしながら、放射性金属標識された生理活性物質では、これまで効果的な腎臓からの排泄手段が報告されていない（非特許文献２０−２４参照。）。酵素は一般に基質となるべき化合物の化学構造を厳密に識別することが知られている。したがって放射性金属標識体Ａに単にグリシン−リジン配列を結合した場合、グリシン−リジン結合の前後の構造（化学形）を含めた化学構造が、刷子縁膜酵素の基質となりうるか否かを予測することは容易ではない。また、仮に酵素代謝を受けたとしても、代謝物Ａ−Ｂが速やかに尿中に排泄されるように化学構造（化学形）をデザインすることは従来困難であった。
【００１３】
本発明の化合物は、放射性金属キレート部分に、シクロペンタジエニルトリカルボニル基（Ａ）を用い、このシクロペンタジエニル金属（Ｍ−Ａ）にグリシルリシンで代表されるアミノ酸配列Ｂ−Ｃおよびマレオイル基に代表されるスペーサー１（Ｄ）を結合し、さらに抗体等の生理活性物質（Ｆ）をこのＢ−Ｃ−Ｄを介して結合し標識したものである。また、本発明の化合物は、スペーサー１（Ｄ）にさらにスペーサー２（Ｅ）を結合させた、Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅを介して抗体等の生理活性物質（Ｆ）を結合し標識することもできる。シクロペンタジエニルトリカルボニル金属は、金属を容易にかつ安定に保持する錯体構造であり、近年、放射性金属標識に有用な化合物として広く用いられている。本発明者等は、グリシル基を誘導したシクロペンタジエニルトリカルボニル金属は、その構造の馬尿酸との類似性により、生体が馬尿酸と認識して排泄を促進することを認めた（非特許文献２５参照。）。そこで、グリシル基を誘導したシクロペンタジエニルトリカルボニル金属をリジンおよびスペーサーを介して生理活性物質たる抗体に結合した化合物を各種合成し、生体に投与を試みた。その結果、生体における腎臓の刷子縁膜酵素によって選択的に切断されるＢ−Ｃ結合を包含する式１の化学構造Ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ｆを見出すことに成功した。殊に、グリシルリシンで代表されるアミノ酸配列Ｂ−Ｃ誘導化シクロペンタジエニルトリカルボニル金属は、シクロペンタジエニルトリカルボニル金属の結合存在下であっても刷子縁膜酵素の基質となり、リジンとグリシン間の選択的切断を受けることが示された。更に、Ｂ−Ｃ間が切断して生じる代謝物であるＭ−Ａ−Ｂは、腎臓に蓄積することなく速やかに尿中に排泄されることがわかった。
【００１４】
Ｍ−Ａは、放射性金属で標識されたシクロペンタジエニルトリカルボニル金属である。放射性金属Ｍは、診断用としては、テクネチウム−９９ｍ（９９ｍＴｃ）、インジウム−１１１（１１１Ｉｎ）およびガリウム−６７（６７Ｇａ）など、また治療用としてはイットリウム−９０（９０Ｙ）、レニウム−１８６（１８６Ｒｅ）またはレニウム−１８８（１８８Ｒｅ）等があげられる。また、Ａには、カルボニル基等の結合基を導入することもできる。
【００１５】
ＢおよびＣは、それぞれ任意のアミノ酸残基を示す。Ｂのアミノ酸残基としては、例えばグリシン残基が挙げられ、Ｃのアミノ酸残基としては、例えばリジン、フェニルアラニン、またはチロシンから選択されるアミノ酸残基が挙げられる。このうち、好ましいＢ−Ｃの組み合わせは、グリシン−リジンである。
【００１６】
Ｄはマレオイル基またはカルボン酸活性エステルから誘導される基から選択されるスペーサー１であり、アミノ酸残基Ｃの側鎖アミノ基と共有結合を形成するとともに、Ｅまたは直接Ｆと共有結合を形成する官能基を有する化合物である。カルボン酸活性エステルとしては、例えば、ヒドロキシスクシンイミド、テトラフルオロフェノールが挙げられる。Ｄのスペーサー１としては、マレオイル基が好ましい。
【００１７】
Ｅは、２−イミノチオランから誘導されるイミノチオールに代表されるスペーサー２であり、予め抗体等の生理活性物質をＥで誘導化することにより、Ｄと共有結合を形成する。生理活性物質がＤと直接に結合しうる官能基を有するときは、Ｅは必須ではない。
【００１８】
Ｆは、抗体（Ｍａｂ）、抗体断片Ｆ（ａｂ）’２、等の蛋白質、またはペプチド等からなる生理活性物質である。
【００１９】
具体的には、次のような化合物が、本発明の式１で表される化合物の好ましい様態として例示できる。
シクロペンタジエニルトリカルボニルレニウム（１８６Ｒｅ）−グリシン−リジン−ε−Ｎ−マレオイル−２−イミノチオラン−Ｍａｂ
シクロペンタジエニルトリカルボニルレニウム（１８８Ｒｅ）−グリシン−リジン−ε−Ｎ−マレオイル−２−イミノチオラン−Ｍａｂ
シクロペンタジエニルトリカルボニルテクネチウム（９９ｍＴｃ）−グリシン−リジン−ε−Ｎ−マレオイル−２−イミノチオラン−Ｍａｂ
シクロペンタジエニルトリカルボニルレニウム（１８６Ｒｅ）−グリシン−リジン−ε−Ｎ−マレオイル−２−イミノチオラン−Ｆａｂ’
シクロペンタジエニルトリカルボニルレニウム（１８６Ｒｅ）−グリシン−リジン−ε−Ｎ−マレオイル−２−イミノチオラン−ペプチド
【００２０】
以下に、本発明の化合物の合成例を、スキーム１及び２を参照しながら説明する。
【００２１】
2005047821.tif 000003
2005047821.tif 000004
【００２２】
上記スキーム１及びスキーム２は、本願化合物であるＭ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ｆ（式１）の合成ルートの一例を示している。スキーム１には、式１のＭ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ部分の合成ルートが、スキーム２には、Ｅ−Ｆ部分の合成ルート及びＭ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ部分とＥ−Ｆ部分を結合して、本願化合物であるＭ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ｆ（式１）を合成するルートが示されている。
【００２３】
スキーム１のＮα−（ｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−ｇｌｙｃｉｎｅ（１）は、本願化合物である式１のＢの部分に対応するグリシンのアミノ基に保護基としてｔ−ブトキシカルボニル基（ｔ−Ｂｏｃ）が結合したものである。この化合物（１）とＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を反応させて、Ｎ−Ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ−Ｎα−（ｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−ｇｌｙｃｉｎｅ（２）を得ることができる。
Ｎε−Ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ・ＨＣｌ（３）は、式１のＤ−Ｃ部分に対応する化合物であり、リジン（Ｃ）の末端のアミノ基とマレオイル基（Ｄ）とが結合した化合物である。
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）により、上記化合物（２）と（３）を結合させ、Ｎα−（ｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−ｇｌｙｃｙｌ−Ｎε−ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ（４）を得ることができる。次に、この化合物（４）をアニソールに溶かし、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を加えてグリシンの保護基であるｔ−Ｂｏｃをはずして、Ｇｌｙｃｙｌ−Ｎε−Ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ・ＴＦＡ（５）を得る。この化合物（５）は、本願化合物である式１のＤ−Ｃ−Ｂ部分に対応する化合物であり、ここに、Ｄはマレオイル基、Ｃはリジン残基、Ｂはグリシンである。
【００２４】
次に、スキーム１の［１８６Ｒｅ］Ｔｒｉｃａｒｂｏｎｙｌ（ｃａｒｂｏｘｙｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｄｉｅｎｙｌ）ｒｈｅｎｉｕｍ（ＣｐＴＲ−ＣＯＯＨ）（６）とＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を反応させて、Ｎ−Ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ  ｔｒｉｃａｒｂｏｎｙｌ（ｃａｒｂｏｘｙｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｄｉｅｎｙｌ）ｒｈｅｎｉｕｍ（［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＳｕ）（７）を得ることができる。化合物（７）は、本願化合物である式１のＭ−Ａ部分に対応する化合物であり、ここに、Ｍはレニウム、Ａは−ＣＯＯＳｕ基（Ｓｕはスクシンイミジル基）を有するシクロペンタジエニル基を表す。
この化合物［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＳｕ（７）を、上記化合物Ｇｌｙｃｙｌ−Ｎε−Ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ・ＴＦＡ（５）と反応させて、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＯＨ（８）を得ることができる。この化合物（８）は、本願化合物である式１のＤ−Ｃ−Ｂ−Ａ−Ｍ部分に対応する化合物である。
【００２５】
スキーム２のＦａｂ−ＮＨ２は、本願化合物である式１のＦ部分に相当する化合物である。このＦａｂ−ＮＨ２を式１のＥ部分に相当する２−イミノチオラン（２−ＩＴ）と反応させ、Ｆａｂ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＳＨを得ることができる。すなわち、Ｆａｂ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＳＨは、式１のＦ−Ｅ部分に相当する化合物である。
最後に、式１のＦ−Ｅ部分に相当するＦａｂ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＳＨと、式１のＤ−Ｃ−Ｂ−Ａ−Ｍ部分に対応する化合物［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＯＨ（８）を反応させ、Ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ｆ（式１）で表される本願化合物を得ることができる。
【００２６】
スキーム２では、Ｆ−Ｅ部分を合成し、スキーム１で合成したＤ−Ｃ−Ｂ−Ａ−Ｍ部分と結合させて本願の式１の化合物を得るルートを例示したが、ＤがＦと結合し得る官能基を有するときには、スキーム１で合成したＤ−Ｃ−Ｂ−Ａ−Ｍ部分と直接Ｆ部分を結合させることも可能である。この場合は、式１でＥが存在しない化合物、Ｍ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｆが本願化合物として得られることになる。
【００２７】
本発明の化合物を有効成分とする放射性診断剤または放射性治療薬等の医薬組成物は、本願化合物が含有する生理活性物質の性質に基づき、腫瘍、炎症、感染症、心循環器疾患、脳・中枢系疾患等の各種疾患および臓器・組織の画像診断、あるいは治療に用いられる。本化合物は、腎臓に蓄積することなく速やかに体外に排泄されるので、腹部のバックグラウンドとなる放射能が少ないため、画像診断においては腹部の病巣部位の検出・診断が容易となる。また、放射性治療の場合には、腎臓への被曝を低減できる。また、被曝の低減が可能な分、投与量を増加させ、標的臓器へ放射能を大量に集め、治療効果を高めることも可能になる。
【００２８】
本発明の化合物を、放射性診断剤または放射性治療剤として供する場合は、上述した方法によって調製される放射性金属標識物を更にＨＰＬＣ法により精製し不純物および未反応物を取り除いた後に使用しても良い。
【００２９】
本発明の化合物は、薬学的に許容される添加物と混合することにより、水溶性の放射性診断剤または放射性治療剤に調製することができる。かかる添加物としては、薬学的に許容されるアスコルビン酸、ｐ−アミノ安息香酸等の安定化剤、水性緩衝液等のｐＨ調節剤、Ｄ−マンニトール等の賦形剤、および放射化学的純度を改良するのに役立つクエン酸、酒石酸、マロン酸、グルコン酸ナトリウム、グルコヘプトン酸ナトリウム、等があげられる。またこれらの添加物を加えた凍結乾燥品、凍結溶液の形態でも提供が可能である。
【００３０】
本発明の化合物を含有してなる放射性診断剤および放射性治療剤は、静脈内投与等の非経口投与、あるいは経口投与により投与でき、その投与量は患者の年齢、体重、適当な放射線イメージング装置、および対象疾患の状態などの諸条件を考慮し、イメージングおよび治療が可能と考えられる放射能および投与量が決定される。
ヒトを対象とする場合、Ｔｃ−９９ｍ標識体を用いた診断剤の投与量は、Ｔｃ−９９ｍの放射能量として３７ＭＢｑ〜１１１ＭＢｑである。Ｒｅ−１８６またはＲｅ−１８８標識体を用いた治療剤の場合は、放射能量として３７ＭＢｑ〜１８５００ＭＢｑの範囲であり、好ましくは３７０ＭＢｑ〜７４００ＭＢｑである。
【００３１】
【実施例１】
以下に説明するすべての実施例では、日本原子力研究所より供給された１８６ＲｅＯ４−溶液を０．０１Ｎ  ＮａＯＨにて中和して用いた。Ｎａ［１２５Ｉ］ＩはＩＣＮ  ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ，  Ｉｎｃより購入した。逆相ＨＰＬＣは、Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＡＲ−３００（４．６  ｘ  １５０ｍｍ，  Ｎａｃａｌａｉ  Ｔｅｓｑｕｅ）を用い、０．１％トリフルオロ酢酸（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ（ＴＦＡ））を含有する水（Ａ）と０．１％  ＴＦＡを含有するアセトニトリル（Ｂ）をＡ：Ｂ  ＝  ８０：２０からＡ：Ｂ  ＝  ２０：８０へ３０分間で変換するｇｒａｄｉｅｎｔ法（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ  １）により、流速１．０ｍＬ／ｍｉｎで溶出した。分子篩ＨＰＬＣは５  Ｄｉｏｌ−３００（７．５  ｘ  ６００ｍｍ，  Ｎａｃａｌａｉ  Ｔｅｓｑｕｅ）を用い、溶出溶媒として０．１Ｍリン酸緩衝液  ｐＨ  ６．８（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ  ２）により溶出した。溶出液はフラクションコレクター（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｎｃｅｓ，  ＲｅｄｉＦｒａｃ）により０．５分間隔で分取後、Ａｕｔｏ  ｗｅｌｌ  γｓｙｓｔｅｍ（ＡＲＣ−３８０Ｍ，  Ａｌｏｋａ）で放射能を測定した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、シリカゲルプレート（Ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ６０Ｆ２５４，  Ｍｅｒｋ）を使用し、クロロホルム（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ  ３）又は生理食塩水（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ  ４）を展開溶媒とした。ＳｅｐＰａｋ  ｐｌｕｓ（Ｃ１８  ｓｈｏｒｔ  ｂｏｄｙ；３６０ｍｇ／ｃａｒｔｒｉｄｇｅ，  Ｗａｔｅｒｓ）はエタノール６ｍＬを流した後、Ｈ２Ｏ  ６ｍＬを流して前処理した後に使用した。サンプルを添加後Ｈ２Ｏ  ５ｍＬ、次いでエタノール２〜３ｍＬで溶出した。最初の１００μＬは廃棄した。トリカルボニル（シクロペンタジエニルカーボネート）レニウム（Ｔｒｉｃａｒｂｏｎｙｌ（ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｄｉｅｎｙｌｃａｒｂｏｎａｔｅ）ｒｈｅｎｉｕｍ（［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＨ））、及びトリカルボニル［（シクロペンタジエニルカルボニルアミノ）アセテート］レニウム（Ｔｒｉｃａｒｂｏｎｙｌ［（ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｄｉｅｎｙｌｃａｒｂｏｎｙｌ  ａｍｉｎｏ）ａｃｅｔａｔｅ］ｒｈｅｎｉｕｍ（ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ））は、以前本願発明者らが報告した方法に基づき合成した（非特許文献２５および２６参照。）。その他の試薬は、全て特級のものをそのまま使用した。
【００３２】
ＣｐＴＲ−ＣＯＯＨ（６）の合成：
（１）［１８６Ｒｅ］Ｔｒｉｃａｒｂｏｎｙｌ（ｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｄｉｅｎｙｌ）ｒｈｅｎｉｕｍ（ＣｐＴＲ−ＣＯＯＭｅ）の合成
本化合物は以前本発明者らが報告した方法（非特許文献２５参照）を少し変更して合成した。
ポータブルリアクター（０．８×８．５  ｃｍ；耐圧ガラス工業）に１，１’−ビス（メトキシカルボニル）フェロセン（１２ｍｇ，  ４０μｍｏｌ）、ヘキサカルボニルクロム（１９ｍｇ，  ８６．３μｍｏｌ）、塩化スズ（ＩＩ）無水物（３７ｍｇ，  １９５．１μｍｏｌ）を加えた。［１８６Ｒｅ］ＲｅＯ４−水溶液は、真空下で溶媒を留去させた後、乾燥メタノール（５００μＬ）に抽出し、前記ポータブルリアクターに加えた。容器を密閉後、撹拌しながら２００℃の油浴中で６０分反応させた。氷上で１０分以上冷却し室温に戻した後、反応溶媒を減圧下で留去した。残渣をクロロホルムに溶かし、クロロホルムを溶出溶媒とするシリカゲルクロマトグラフィーで精製することにより、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＭｅを得た。放射化学的収率（６３％）、放射化学的純度（９５％以上）はそれぞれＴＬＣ（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ  ３）により求めた。
【００３３】
（２）［１８６Ｒｅ］Ｔｒｉｃａｒｂｏｎｙｌ（ｃａｒｂｏｘｙｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｄｉｅｎｙｌ）ｒｈｅｎｉｕｍ（ＣｐＴＲ−ＣＯＯＨ）（６）の合成
次いで、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＭｅをジオキサン（２００μＬ）に溶かし、２Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（６００μＬ）を加えた。室温で１０分間撹拌した後、ｃｏｎｃ．  ＨＣｌで反応液を酸性にして、活性化したＳｅｐＰａｋカラムを用いて精製し、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＨ（６）を得た。放射化学的収率（９５．２％）、放射化学的純度（９５％以上）はそれぞれＴＬＣ（ｓｏｌｖｅｎｔ
ｓｙｓｔｅｍ  ３）により求めた。
【００３４】
【実施例２】
Ｎα−（ｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−ｇｌｙｃｙｌ−Ｎε−ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ（４）の合成：
（１）Ｎ−Ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ−Ｎα−（ｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−ｇｌｙｃｉｎｅ（２）の合成
Ｎα−（ｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−ｇｌｙｃｉｎｅ（１）（０．８ｇ，４．５７ｍｍｏｌ）とＮ−ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ（ＮＨＳ，  ０．５５ｇ，  ４．７８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ，２０ｍＬ）に溶かして氷冷し、０℃で１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ，  １．０３ｇ，  ５．０４ｍｍｏｌ）を加え、０〜５℃で４時間、その後室温で１６時間撹拌した。析出した沈殿物をろ過し、ろ液を減圧下で留去した。
イソプロピルアルコールから再結晶し、白色結晶の上記化合物（２）を１．０３ｇ（収率８３．６％）得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  １．４４（９Ｈ，  ｓ，  Ｂｏｃ），  ２．８０（４Ｈ，  ｄ，  ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ），  ４．２０（２Ｈ，  ｄ，  ＣＨ２）
ＦＡＢ−ＭＳ：理論値（Ｃ１１Ｈ１７Ｎ２Ｏ６  （Ｍ＋Ｈ）＋）：ｍ／ｚ  ２７３、測定値：２７３
【００３５】
（２）Ｎα−（ｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−ｇｌｙｃｙｌ−Ｎε−ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ（４）の合成
Ｗａｋｉｓａｋａらの方法（非特許文献２７参照）に従って合成したＮε−Ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ・ＨＣｌ（３）（２００ｍｇ，  ０．７６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶かし、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ，  １３２．９μＬ，  ０．７８ｍｍｏｌ）を加えた。ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶かした化合物（２）（１７２．７ｍｇ，  ０．６３ｍｍｏｌ）を滴下し、常温で一晩撹拌した。反応液を減圧留去した後、残渣を酢酸エチルに溶かし、ｐＨ  ５〜６に希釈した硫酸で３回洗浄した。無水硫酸カルシウムで乾燥し、ろ過したろ液を減圧下で留去して、無色油状の上記化合物（４）を１５５．７ｍｇ（収率６４．０％）得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  １．３０−１．９１（６Ｈ，  ｍ，  （ＣＨ２）３），  １．４１（９Ｈ，  ｓ，  Ｂｏｃ），  ４．５２（１Ｈ，  ｓ，  ＣＨ），  ５．６０（１Ｈ，  ｓ，  ＮＨ），  ６．６７（２Ｈ，  ｓ，  ｍａｌｅｉｍｉｄｅ），  ７．０８（１Ｈ，  ｓ，  ＮＨ）
ＦＡＢ−ＭＳ：理論値（Ｃ１７Ｈ２６Ｎ３Ｏ７  （Ｍ＋Ｈ）＋）ｍ／ｚ  ３８４、測定値：３８４
【００３６】
【実施例３】
［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＯＨ（８）の合成：
（１）Ｇｌｙｃｙｌ−Ｎε−Ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ・ＴＦＡ（５）の合成
実施例２で得られた化合物（４）（１９１．５ｍｇ，  ０．５０ｍｍｏｌ）をアニソール（５０μＬ）に溶かし、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ，９５０μＬ）を少しずつ加え、そのまま室温で撹拌した。１時間後、Ｎ２ガスを用いてＴＦＡを留去し、エーテルを加えた。析出した結晶をろ取し、白色結晶の化合物Ｇｌｙｃｙｌ−Ｎε−Ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ・ＴＦＡ（５）を１１２．６ｍｇ（収率６６．２％）得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  １．３３−１．９５（６Ｈ，  ｍ，（ＣＨ２）３），  ４．４２（１Ｈ，  ｓ，  ＣＨ），  ６．６８（２Ｈ，  ｓ，  ｍａｌｅｉｍｉｄｅ）
ＦＡＢ−ＭＳ：理論値（Ｃ１２Ｈ１８Ｎ３Ｏ５  （Ｍ＋Ｈ）＋）ｍ／ｚ  ２８４、測定値：２８４
【００３７】
（２）Ｎ−Ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ  ｔｒｉｃａｒｂｏｎｙｌ（ｃａｒｂｏｘｙｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｄｉｅｎｙｌ）ｒｈｅｎｉｕｍ（［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＳｕ）（７）の合成
［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＨ（６）をジクロロメタン（２００μＬ）に溶解し、ＮＨＳ（２．０ｍｇ，  １７．３μｍｏｌ）、ＤＣＣ（２．０ｍｇ，  ９．７μｍｏｌ）を加え、室温で５分間撹拌した。Ｎ２ガスにて溶媒を除去した後、アセトニトリルに溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣにて精製した。放射化学的収率（７６％）、放射化学的純度（９５％以上）はそれぞれクロロホルムを展開溶媒とするＴＬＣ（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ  ３）により求めた。
【００３８】
（３）［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＯＨ（８）の合成
Ｇｌｙｃｙｌ−  Ｎε−ｍａｌｅｏｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ・ＴＦＡ（５）（１２．５ｍｇ，  ３６．７μｍｏｌ）をＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ；  ８０μＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ；  ６．３μＬ，  ３６．７μｍｏｌ）を少しずつ加えた後、ＤＭＦ（９０μＬ）に溶解した［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＳｕ（７）を少しずつ加えた。室温で１時間程撹拌した後、逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ−ＨＰＬＣ）にて精製した。ＲＰ−ＨＰＬＣはＣｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＡＲ−３００（４．６  ｘ  １５０ｍｍ，  Ｎａｃａｌａｉ  Ｔｅｓｑｕｅ）を用い、０．１％  ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ（ＴＦＡ）を含有する水（Ａ）と０．１％  ＴＦＡ  を含有するアセトニトリル（Ｂ）をＡ：Ｂ  ＝  ８０：２０からＡ：Ｂ  ＝  ２０：８０へ３０分間で変換するｇｒａｄｉｅｎｔ法により、流速１．０ｍＬ／ｍｉｎで溶出した。放射化学的収率（４９．６％）、放射化学的純度（９１％以上）はそれぞれクロロホルムを展開溶媒とするＴＬＣ（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ  ３）により求めた。
【００３９】
【実施例４】
［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂの合成：（１）Ｆａｂフラグメントのチオール化（２−イミノチオラン（２−ＩＴ）接合Ｆａｂの合成）
２ｍＭのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含む、０．１６Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ８．５）を用いてＦａｂを調整し（１．０ｍｇ／ｍＬ，  ２００μＬ）、同じ緩衝液に溶解した２−イミノチオラン（２−ＩＴ；２．５ｍｇ／ｍＬ，  ７．４μＬ）を加え、３０分間静かに撹拌した。２ｍＭのＥＤＴＡを含む０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ  ６．０）で平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−５０を用いたスピンカラム法により、過剰の２−ＩＴを除去した。１分子あたりに導入されたチオールの数は２，２’−ジピリジルジスルフィド（ＤＰＳ）を用いて測定した。その結果、２−ＩＴによりチオール化した抗体Ｆａｂフラグメントは抗体一分子当たり３．０個のチオール基を有していた。
【００４０】
（２）［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂの合成
［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＯＨ（８）に上記のチオール化したＦａｂ（１ｍｇ／ｍＬ，  １００μＬ）を加え、９０分間静かに撹拌した。次いで０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ  ６．０）に溶かしたヨードアセトアミド（１４．８μＬ，  １０．０ｍｇ／ｍＬ）を加え、３０分間撹拌した。０．５Ｍの酢酸緩衝液（ｐＨ  ６．０）で平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−５０を用いるスピンカラム法により精製した。
上記（１）で得られたチオール化抗体Ｆａｂフラグメントに、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＧＫ（Ｍ）−ＯＨ（８）を混ぜ合わせることにより、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＧＫ（Ｍ）−ＩＴ−Ｆａｂを放射化学的収率３０％、放射化学的純度９０％以上で得た。
【００４１】
【実施例５】
［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂの合成：
実施例３−（２）で得られた［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＳｕ（７）を１０μＬのＤＭＦに溶解し、Ｆａｂ溶液１００μＬ（１ｍｇ／ｍＬ，  ０．１６Ｍホウ酸緩衝液ｐＨ  ９．５）にゆっくり加えた。１時間後、０．５Ｍの酢酸緩衝液（ｐＨ  ６．０）で平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−５０を用いるスピンカラム法により精製した。放射化学的収率、放射化学的純度はそれぞれ生理食塩水を展開溶媒とするＴＬＣにより求めた。その結果、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂは、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−ＣＯＯＳｕ（７）と抗体Ｆａｂフラグメントを混ぜ合わせることにより、放射化学的収率３０％、放射化学的純度９５％以上で得られた。
【００４２】
【実施例６】
［１２５Ｉ］ＨＭＬ−ＩＴ−Ｆａｂの合成：
［１２５Ｉ］ＨＭＬ−ＩＴ−Ｆａｂは藤岡らの方法（非特許文献１８参照）に従い合成した。
ＨＭＬ（ε−Ｎ−マレオイル−Ｌ−リジン）の有機スズ前駆体を１％の酢酸を含むメタノールに溶解し、［１２５Ｉ］ＮａＩ及び酸化剤であるＮ−クロルコハク酸を加えて、［１２５Ｉ］ＨＭＬを合成した。この［１２５Ｉ］ＨＭＬに、実施例５と同様の方法でチオール化したＦａｂを加え、スピンカラム法により精製して［１２５Ｉ］ＨＭＬ−ＩＴ−Ｆａｂを得た。
【００４３】
【実施例７】
マウス体内分布試験
実施例４で得られた［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂと実施例６で得られた［１２５Ｉ］ＨＭＬ−ＩＴ−Ｆａｂの混液、あるいは実施例５で得られた［１８８Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂをそれぞれ生理食塩水に溶解し、一群３−４匹の６週齡ｄｄＹ系雄性マウスに一匹あたり１１．１ｋＢｑ（１００μｌ）になるように尾静脈から投与した。投与１０，３０分，１，３，６時間後に屠殺して臓器を摘出し、重量と放射能を測定した。また、投与後６時間までに排泄された糞便と尿を採取し、放射能を測定した。更に投与後６時間までに排泄された尿を０．４５μｍのフィルターでろ過した後、分子篩ＨＰＬＣにより分析した。また低分子画分の分析は尿を１０−ｋＤａの限外濾過膜で濾過し、濾液を逆相ＨＰＬＣで分析して尿中に排泄された放射能の化学形を検討した。この時、逆相ＨＰＬＣは、Ｃｏｓｍｏｓｉｌ  ５Ｃ１８−ＡＲ−３００（４．６  ｘ  １５０ｍｍ，  Ｎａｃａｌａｉ  Ｔｅｓｑｕｅ）を用い、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含有する水（Ａ）と０．１％  ＴＦＡを含有するアセトニトリル（Ｂ）をＡ：Ｂ  ＝  ８０：２０からＡ：Ｂ  ＝  ２０：８０へ３０分間で変換するｇｒａｄｉｅｎｔ法により、流速１．０ｍＬ／ｍｉｎで溶出した。分子篩ＨＰＬＣは５  Ｄｉｏｌ−３００（７．５  ｘ  ６００ｍｍ，  Ｎａｃａｌａｉ  Ｔｅｓｑｕｅ）を用い、溶出溶媒として０．１Ｍリン酸緩衝液ｐＨ  ６．８により溶出した。溶出液はフラクションコレクター（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｎｃｅｓ，  ＲｅｄｉＦｒａｃ）により０．５分間隔で分取後、Ａｕｔｏ  ｗｅｌｌ  γｓｙｓｔｅｍ（ＡＲＣ−３８０Ｍ，  Ａｌｏｋａ）で放射能を測定した。
【００４４】
正常マウスにおける［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂ、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂ、［１２５Ｉ］ＨＭＬ−ＩＴ−Ｆａｂの体内放射能分布を検討した結果を表１−３に示す。表中の放射能量の値は、平均値（標準偏差）を、％ＩＤ／ｇ（臓器重量（ｇ）当りの全投与放射能に対する百分率）で示した。いずれのＲＩ標識抗体フラグメントの血液からの消失速度は同程度であった。また、いずれのＲＩ標識抗体フラグメントの肝臓や腸間への放射能集積に相違は観られなかった。一方、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂと［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂとの腎臓への放射能集積には投与早期から大きな相違が観察された。
［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂは投与後３０分を最大値とする腎臓への集積を示したが、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂは［１２５Ｉ］ＨＭＬ−ＩＴ−Ｆａｂと同様に投与早期から腎臓の放射能を大きく低減した。
【００４５】
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【００４６】
【実施例８】
腎臓の被曝線量の推定比較
実施例７で示した通り、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂをマウスに投与した際、腎臓への放射能集積とそれに続く消失が観察された。一方、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂは［１２５Ｉ］ＨＭＬ−ＩＴ−Ｆａｂと同様にマウスに投与後、早期から腎臓への放射能集積を低減した（図１）。図１の四角印は、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂ投与群、三角印は［１２５Ｉ］ＨＭＬ−ＩＴ−Ｆａｂ投与群、丸印は［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂ投与群を示す。
それぞれの標識抗体の腎集積面積の比較から、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂは腎臓への被曝線量を［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂの１／３以下に低減することが示された。
【００４７】
【実施例９】
尿中放射能の分析
［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂをマウス尾静脈に投与し、６時間後までに尿中に排泄された放射能量の分析を行った（図２）。分子篩ＨＰＬＣで分析したところ、５０％以上の放射能が低分子画分に溶出された（図２（Ａ））。さらに、分子量１万カットの限外濾過膜により溶出した低分子画分をＲＰ−ＨＰＬＣによって分析したところ、６５％以上の放射能がＣｐＴＲ−Ｇｌｙに一致する保持時間に溶出された（図２（Ｂ））。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂ、［１２５Ｉ］ＨＭＬ−ＩＴ−Ｆａｂ、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｆａｂ投与後のマウスの放射能量の生体内分布を示した図である。％ＩＤ／ｇは、臓器重量（ｇ）当りの全投与放射能に対する百分率を平均値で示した値である。
【図２】図２は、［１８６Ｒｅ］ＣｐＴＲ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｍａｌｅ）−ＩＴ−Ｆａｂ投与後６時間後までに、マウスの尿中に排泄された放射能量を示した図である。（Ａ）は分子篩ＨＰＬＣで分析した結果であり、（Ｂ）は逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ−ＨＰＬＣ）で分析した結果である。
【図１】
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【図２】
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