(57)【要約】【課題】Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患、特にＴｈ２細胞数の増加に起因する免疫疾患の予防剤又は治療剤として用いることができるＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤を提供する。【解決手段】ビタミンＥ及びβ−カロテンを有効成分として含有するＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤である。また本発明は、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス調節を生じる量のビタミンＥ及びβ−カロチンを有効成分として含有する食品である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
薬効を奏する量のビタミンＥ及びβ−カロテンを有効成分として含有するＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤。
【請求項２】
Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患の予防剤又は治療剤として用いられる請求項１記載の調節剤。
【請求項３】
上記Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患がＴｈ２細胞数の増加に起因する免疫疾患である請求項１又は２記載の調節剤。
【請求項４】
上記免疫疾患が、アレルギー疾患、全身性自己免疫疾患又は潰瘍性大腸炎である請求項１、２又は３記載の調節剤。
【請求項５】
Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス調節が生じる量のビタミンＥ及びβ−カロテンを有効成分として含有する食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ビタミンＥ及びβ−カロテンを有効成分として含有するＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤に関する。更に詳しくは、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患、特に、Ｔｈ２細胞数の増加による免疫疾患の予防剤又は治療剤として有効なＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤及びかかる調節機能を発揮する食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
免疫応答の制御の中心であるヘルパーＴ細胞は、産生するサイトカインの違いからヘルパーＴ細胞１型（以下、「Ｔｈ１細胞」と略記する）とヘルパーＴ細胞２型（以下、「Ｔｈ２細胞」と略記する）に二分される。Ｔｈ１細胞は、インターロイキン２（ＩＬ−２）、インターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）、ＴＮＦ−β等の細胞性免疫を制御するサイトカインを分泌する。一方、Ｔｈ２細胞は、液性免疫を制御するＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６，ＩＬ−１０、ＩＬ−１３等のサイトカインを産生し、Ｂ細胞の抗体産生を促進する。
【０００３】
Ｔｈ１細胞及びＴｈ２細胞の前駆体であるナイーブＴ細胞は、サイトカインの種類により、Ｔｈ１細胞あるいはＴｈ２細胞への分化が決定される。主にマクロファージから産生されるＩＬ−１２や、ＮＫ細胞及びＴｈ１細胞自身から産生されるＩＦＮ−γは、ナイーブＴ細胞からＴｈ１細胞への分化を促進する。一方、マスト細胞、ＮＫＴ細胞及びＴｈ２細胞自身から産生されるＩＬ−４はＴｈ２細胞への分化を促進する。このＩＦＮ−γとＩＬ−４は、互いに干渉し合い相手の働きを抑制している。このように、Ｔｈ１細胞とＴｈ２細胞の間には相互にそれぞれのサイトカインによる制御が働き、バランスを保っていると考えられている。近年、このＴｈ１／Ｔｈ２バランスの破綻が様々な疾患の原因、悪化の要因となりうることが明らかになってきた。
【０００４】
Ｔｈ１細胞は、ウイルスや細菌に対する感染防御や、癌に対する免疫防御といった細胞性免疫を制御しているが、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスがＴｈ１細胞側に片寄ってしまうと、Ｉ型糖尿病、慢性関節リウマチ、臓器特異的自己免疫疾患、クローン病、多発性硬化症等
、様々な疾患が引き起こされる。逆に、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスがＴｈ２細胞側に片寄ることによって引き起こされる疾患としては、アレルギー疾患、全身性自己免疫疾患、潰瘍性大腸炎等が挙げられ、後天性ヒト免疫不全症においては、罹患後にＴｈ２細胞側に片寄ることが知られている。この中でも特に、アトピー性皮膚炎や花粉症、気管支喘息、食物アレルギー等に代表されるアレルギー疾患は、年々患者数も増加し大きな社会的問題となっている。しかしながら、現在その治療法としては、抗アレルギー剤や抗ヒスタミン剤等を用いた薬物療法が主であり、このような薬物療法ではアレルギーの発症を抑制したり、アレルギー症状を緩和させることはできても、アレルギー体質そのものを改善することや健康な人がアレルギー体質になるのを予防することはできない。
【０００５】
上述したような、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスの破綻により引き起こされる様々な疾患の予防剤又は治療剤として、Ｔｈ１細胞又はＴｈ２細胞による免疫系の過剰応答を抑制し、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスを正常な状態に戻す薬剤が望まれている。特に、Ｔｈ２細胞数の増加による免疫疾患の治療方法として、Ｔｈ１細胞の活性を促進させるサイトカインを投与する等して、Ｔｈ２細胞側に片寄ったＴｈ１／Ｔｈ２バランスをＴｈ１細胞側に移行させる試みがなされている。例えば、ラフィノースを投与することでＴｈ１細胞の分化増殖を促進させ、Ｔｈ２細胞側に片寄ったＴｈ１／Ｔｈ２バランスを是正する方法が報告されている（特許文献１参照）。しかしながら、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスの破綻は、Ｔｈ１系疾患またはＴｈ２系疾患のどちらか一方しか引き起こさないというわけではない。Ｔｈ１細胞及びＴｈ２細胞の両者が過剰応答することで、Ｔｈ１系及びＴｈ２系の両方の疾患が引き起こされることもあり得る。従ってＴｈ１系免疫の活性を促進するような方法では、Ｔｈ１細胞による免疫系の過剰応答が促進され、その結果Ｔｈ１系疾患、或いはＴｈ１系及びＴｈ２系の両方の疾患を引き起こしかねない。また、Ｔｈ２系疾患の他の治療方法として、Ｔｈ２細胞の活性を抑制する方法も試みられているが、この場合も副作用としてＴｈ１細胞が活性化され、その結果Ｔｈ１系疾患を招く危惧があった。
【０００６】
一方、ビタミンＥ及びβ−カロテンは、食品や医薬品の酸化防止剤として一般に使用されているが、免疫反応を高める作用についても報告されている。更に、ビタミンＥとβ−カロテンとの組み合わせによる効果については、例えばコンパニオンアニマルに、ビタミンＥ、ルテイン及びβ−カロテンの三種の酸化防止剤の組み合わせを有効量含有する餌を与えることにより、免疫反応を高めることが報告されているが、Ｔｈ２系免疫の過剰応答を抑制しＴｈ１／Ｔｈ２バランスを正常に戻す効果については記載されていない（特許文献２参照。）。
【特許文献１】特開２００１−２８８０９３号公報
【特許文献２】特表２００３−５０００７６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、Ｔｈ１細胞の活性を上げることなくＴｈ２系免疫の過剰応答を抑制し、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスを正常に戻すことができるＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究した結果、β−カロテンとビタミンＥを組み合わせて用いることにより、Ｔｈ２系免疫の過剰応答を抑制できることを発見した。この発明は、上記発見に基づき完成された。
【０００９】
本発明は、以下の（１）〜（５）に記載のものを提供する。
（１）薬効を奏する量のビタミンＥ及びβ−カロテンを有効成分として含有するＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤。
（２）Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患の予防剤又は治療剤として用いられる（１）記載の調節剤。
（３）上記Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患がＴｈ２細胞数の増加に起因する免疫疾患である（１）又は（２）記載の調節剤。
（４）上記免疫疾患が、アレルギー疾患、全身性自己免疫疾患又は潰瘍性大腸炎である（１）、（２）又は（３）記載の調節剤。
（５）Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス調節が生じる量のビタミンＥ及びβ−カロテンを有効成分として含有する食品。
【００１０】
本明細書において、「Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤」とは、Ｔｈ２系免疫の過剰応答を抑制し、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスを正常に戻す、或いは正常に近づけるものをいう。更には、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスの正常な人が、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患を発症しないように、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスの正常な状態を維持させるものをいう。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤は、Ｔｈ２系免疫の過剰応答を抑制し、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスを正常に戻す機能を有するため、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患、特にＴｈ２細胞数の増加による免疫疾患の予防剤又は治療剤として有用である。具体的には、アトピー性皮膚炎や花粉症、気管支喘息、食物アレルギー等に代表されるアレルギー疾患や、全身性自己免疫疾患、潰瘍性大腸炎、らい腫型ハンセン病の予防剤又は治療剤、更には後天性ヒト免疫不全症の治療剤として非常に有用である。特に、アレルギー疾患においては、従来の治療法のようにアレルギーの発症を抑制したり、アレルギー症状を緩和させるのではなく、アレルギー体質そのものを改善することや健康な人がアレルギー体質になるのを予防することができるという非常に優れた効果を有する。更に、従来ではＴｈ２系の免疫応答を抑制する際に、副作用としてＴｈ１細胞の活性化を亢進し、その結果Ｔｈ１系疾患を引き起こす恐れがあったが、本発明の調節剤を用いれば、Ｔｈ１細胞の活性化を亢進することなくＴｈ２系の免疫応答を抑制できるため、Ｔｈ１系疾患の発症を危惧をする必要がない。
【００１２】
また、本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤に含有されているビタミンＥ及びβ−カロテンは、共に天然食品由来のもので、食品や栄養補助食品として摂取され続けてきたものである。従って、安全性が高く副作用の心配がないため、長期間摂取することも可能である。更に、医薬品としてだけでなく、特定保健用食品や健康食品等の食品として日常的に容易に摂取することが可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤は、ビタミンＥとβ−カロテンを有効成分として含有するものであり、ビタミンＥとβ−カロテンとを組み合わせて摂取することでＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤として優れた効果を奏する。
【００１４】
本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤に用いられるビタミンＥとしては、一般にビタミンＥと総称される全ての化合物及びその誘導体が挙げられ、具体的には、天然型ビタミンＥであるｄ体のα−、β−、γ−およびδ−トコフェロールとα−、β−、γ−およびδ−トコトリエノール、その合成体であるｄｌ体のα−、β−、γ−およびδ−トコフェロールとα−、β−、γ−およびδ−トコトリエノール、更にこれらの誘導体である、酢酸ｄ−α−トコフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、コハク酸ｄ−α−トコフェロール、コハク酸ｄｌ−α−トコフェロール等が挙げられる。好ましくは、α−トコフェロールを用いる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を適宜組み合わせて使用することもできる。また、これらビタミンＥのＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤への含有量は、投与される者の年齢、体重、疾患、症状、投与方法等によって異なるが、通常、成人１日当りの投与量がα−トコフェロールとして１０〜１０００ｍｇ、好ましくは６０〜６００ｍｇとなるように調製するのが望ましい。
【００１５】
本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤に用いられるβ−カロテンとしては、天然原料から精製したものでも、公知の合成方法で製造されたものでもよい。また、天然のβ−カロテンは、通常α−カロテンやγ−カロテン等の各種カロテンとの混合物として存在しているため、本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤において、β−カロテンをこれら各種カロテンとの混合物として使用することも可能である。また、β−カロテンのＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤への含有量は、投与される者の年齢、体重、疾患、症状、投与方法等によって異なるが、通常、成人１日当りの投与量が０．１〜９．０ｍｇ、好ましくは０．５〜６．０ｍｇとなるように調製するのが望ましい。
【００１６】
本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤は、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患、特にＴｈ２細胞数の増加による免疫疾患の予防剤又は治療剤として投与できる。その投与形態としては、経口投与の他、経皮投与や静脈注射等の非経口投与による方法が挙げられ、安全に効果的に投与することができれば、これらに限定されるものではない。しかし、容易で且つ簡便であるという点から、経口投与が好ましい。
【００１７】
また本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤は、ビタミンＥ及びβ−カロテンを有効成分とし、これをそのまま、若しくは公知の医薬品担体を加えて常法に従い製剤化することができる。例えば、経口投与の場合では、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤、乳剤、懸濁剤、丸剤等の形態に製剤化することができる。
【００１８】
更に、本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調整剤は、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランス不全疾患、特にＴｈ２細胞数の増加による免疫疾患の予防又は治療の効果を有する食品の形態とすることもできる。例えば、麺類、パン、菓子類、清涼飲料、乳製品等の一般の食品にビタミンＥ及びβ−カロテンを添加することにより容易に製造することができ、特定保健用食品や健康食品として利用することができる。このような食品の形態であれば、日常的に容易に摂取することが可能であり、非常に有用である。
【００１９】
次に、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲はこれに限定されるものではない。
【実施例１】
【００２０】
ビタミンＥとβ−カロテンの摂取がＩｇＥ抗体の産生能に及ぼす影響について、以下のようにして調べた。試験動物としては、Ｔｈ２系が優勢な系統であるＢＡＬＢ／ｃマウスを用いた。
【００２１】
（飼料の調製）
次のようにしてコントロール飼料と３種類の試験飼料を調製した。まず、コントロール飼料として、カゼイン２０重量％、Ｄ，Ｌ−メチオニン０．３重量％、コーンオイル５重量％、ラード５重量％、α−コーンスターチ４０重量％、スークロース２０重量％、セルロース４．７５重量％、ビタミン混合１重量％、ミネラル混合３．５重量％、塩化コリン０．２重量％、コール酸ナトリウム０．２５重量％になるように調製した。なお、前記ビタミン混合中には、α−トコフェロールが、コントロール飼料に対し０．００５重量％含有されている。次に、試験飼料（Ａ〜Ｃ）を以下の様にして調製した。試験飼料Ａは、コントロール飼料の内、セルロースを４．７４５重量％に減らし、α−トコフェロールを０．００５重量％添加した。試験飼料Ｂは、コントロール飼料の内、セルロースを４．７重量％に減らし、β−カロテンを０．０５重量％添加した。試験飼料Ｃは、コントロール飼料の内、セルロースを４．６９５重量％に減らし、α−トコフェロールを０．００５重量％、β−カロテンを０．０５重量％添加した。
【００２２】
（試験方法）
ＢＡＬＢ／ｃマウス（雌）６週令２０匹を４群に分け、上述したコントロール飼料及び試験飼料（Ａ〜Ｃ）の４種類の飼料をそれぞれ自由摂取させた。試験開始３週間後、マウスの皮下に免疫原となるタンパク質（オボアルブミン１μｇ）を注入することにより、このタンパク質でマウスを感作した。更に２週間後、同様にして追加免疫を行い、その１週間後に血液を採取し抗血清を得た。
【００２３】
得られた抗血清中の抗原特異的ＩｇＥ抗体価を受動皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）反応により測定した。得られた抗血清を、各々１／５０、１／１００、１／２００、１／３００となるように希釈し、予め毛を刈っておいたラットの背部に皮内注射した。３日後、オボアルブミンとエバンスブルーとを溶解した生理食塩水をラットに静脈注射した。すると、抗血清を皮内注射したラットの背部のポイントに、すみやかに色素漏出が観察された。２時間後、ラットの背部皮膚を剥がして撮影した。その写真を図１に示す。
【００２４】
更に、得られた抗血清中の総ＩｇＥ抗体価をサンドイッチＥＬＩＳＡ法により測定した。９６ウェルのプレートに抗ＩｇＧ抗体を結合させ、洗浄、ブロッキングを行った後、得られた抗血清を加え反応させた。洗浄後、酵素標識抗マウスＩｇＥ抗体を加え、洗浄した後、基質を加えて発色させ、マイクロプレートリーダを用いて吸光度を測定した。結果を図２に示す。なお、測定結果は、平均値及び標準偏差を求め、Ｆｉｓｈｅｒ'ｓ  ＰＬＳＤにより群間の有意差検定を行った。その結果、コントロール飼料群と試験飼料Ｃ群、及び試験飼料Ｂ群と試験飼料Ｃ群との間にそれぞれ有意差が認められ（Ｐ＜０．０５)、その他の群間には有意差が認められなかった。
【００２５】
図１及び図２から明らかなように、α−トコフェロール含有量が多い試験飼料Ａ群では、コントロール飼料群に比べて、特異的ＩｇＥ抗体価、総ＩｇＥ抗体価ともにわずかに低下した。また、β−カロテン含有量が多い試験飼料Ｂ群においては、コントロール飼料群と比べて、特異的ＩｇＥ抗体価、総ＩｇＥ抗体価ともにほとんど差が見られなかった。一方、α−トコフェロール含有量及びβ−カロテン含有量が多い試験飼料Ｃ群においては、コントロール飼料群と比べて、特異的ＩｇＥ抗体価、総ＩｇＥ抗体価ともに著しく低下した。これらの結果から、α−トコフェロール又はβ−カロテンを単独で摂取するよりも、両者を同時に有効量摂取することで著しくＩｇＥ抗体の産生が抑制されることが分かった。
【実施例２】
【００２６】
ビタミンＥとβ−カロテンの摂取がＴｈ１／Ｔｈ２バランスに及ぼす影響について、以下のようにして調べた。
【００２７】
ＢＡＬＢ／ｃマウス（雌）６週令６匹を２群に分け、コントロール群にはコントロール飼料（カゼイン２０重量％、Ｄ，Ｌ−メチオニン０．３重量％、コーンオイル５重量％、ラード５重量％、α−コーンスターチ４０重量％、スークロース２０重量％、セルロース４．７５重量％、ビタミン混合１重量％、ミネラル混合３．５重量％、塩化コリン０．２重量％、コール酸ナトリウム０．２５重量％）を、試験群にはコントロール飼料の内、セルロースを４．６５重量％に減らし、ビタミンＥとしてα−トコフェロールを０．０５重量％及びβ−カロテンを０．０５重量％添加した試験飼料を用意し、自由摂取させた。試験開始３週間後、マウスの皮下に免疫原となるタンパク質（オボアルブミン１μｇ）を注入することにより、このタンパク質でマウスを感作した。更に２週間後、同様にして追加免疫を行い、その１週間後に、清浄な環境下で、マウスより脾臓を摘出し、脾臓細胞を常法により調製した後、免疫に用いたオボアルブミンを加えた培地にて培養した。３日間培養後、細胞から培養上清中へ分泌されたサイトカイン量を測定した。測定は、市販のキットを用いサンドイッチＥＬＩＳＡ法により行った。結果を表１に示す。なお、測定結果は、平均値及び標準偏差で表した。
【００２８】
【表１】
2005272368.tif 000002
【００２９】
表１から明らかなように、コントロール飼料群のマウスと比較して、試験飼料群のマウスではＩＬ−４とＩＬ−５の産生能が著しく低下していた。これらのサイトカインは、Ｔｈ２細胞より分泌されるので、試験飼料はＢＡＬＢ／ｃマウスのＴｈ２機能を抑制する効果があることが示された。一方、ＩＬ−１２産生能は試験飼料群において亢進が認められたが、ＩＦＮ−γ産生能では両群間で差が認められなかった。従って、ＩＦＮ−γの産生能の結果から、試験飼料はＴｈ１機能を亢進させないことが示された。すなわちα−トコフェロールとβ−カロテンとを有効量摂取することで、Ｔｈ１系の免疫応答を亢進することなく、Ｔｈ２免疫応答を抑制する効果が得られることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００３０】
本発明のビタミンＥ及びβ−カロテンを用いたＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤は、アトピー性皮膚炎や花粉症、気管支喘息、食物アレルギー等に代表されるアレルギー疾患や、全身性自己免疫疾患、潰瘍性大腸炎、らい腫型ハンセン病の予防剤又は治療剤、更には後天性ヒト免疫不全症の治療剤として利用できる。また、本発明のＴｈ１／Ｔｈ２バランス調節剤に含有されているビタミンＥ及びβ−カロテンは、共に天然食品由来のもので、安全性が高く副作用の心配がないため、医薬品としてだけでなく、特定保健用食品や健康食品等の食品として日常的に容易に摂取することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】図１は、α−トコフェロール及びβ−カロテンがＩｇＥ抗体産生に及ぼす影響について、ＰＣＡ反応試験における結果を示す写真図である。
【図２】図２は、α−トコフェロール及びβ−カロテンがＩｇＥ抗体産生に及ぼす影響について、サンドイッチＥＬＩＳＡ法により血清中の総ＩｇＥ抗体価を測定した結果を示すグラフ図である。
【図１】
2005272368.tif 000003
【図２】
2005272368.tif 000004