(57)【要約】【課題】  本発明は、生体内で重要な役割を担っている糖質を、天然に近いグリコピラノシル環を維持したまま固体状の高分子材料に固定し、医用材料として有用な材料を提供することを目的とする。【解決手段】  水酸基が完全にアセチル化された糖質の還元末端をアミノ化した後アミド化してできるグリコピラノシルアミドを介して高分子と結合し、これを脱アセチル化することにより得られる新しい高分子材料。【選択図】  図１
2005036163.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリ−（β−１、４−Ｄ−グルコサミン）誘導体に、グリコピラノシルアミド結合を介して糖質が結合した高分子材料。
【請求項２】
グリコピラノシルアミド結合を介して結合した糖質が、β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミン、２−アセチルアミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン、β−Ｄ−フコピラノシルアミン、β−Ｄ−キシロピラノシルアミン、４−Ｏ−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン、又は４−Ｏ−(β−Ｄ−グルコピラノシル)−β−Ｄ−グルコピラノシルアミンである請求項1記載の糖質が結合した高分子材料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医用材料として有用な、糖質が結合した高分子材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖質の研究が進むにつれ、糖質が生体内で情報に関して重要な役割を担っていることが明らかになってきた。細胞同士の認識やコミュニケーション、細胞の分化や増殖、接着や免疫にも関与している。癌化の際にも糖質が変化することが知られている。更に、インフルエンザやエイズなどのウイルス感染における細胞表面の糖質のかかわりも研究されている（非特許文献１参照）。
【０００３】
このように生体内で重要な働きをする糖質を医用材料として利用する研究が盛んに行われている。特に糖質を高分子に固定することにより、局所的な濃度が高まることなどのため、糖質に対する認識能が高まることが指摘されている（非特許文献２参照）。
糖鎖をスペーサー分子を介して側鎖として結合させた高分子は、肝実質細胞の培養基材として利用されている。その製法は、糖鎖の還元末端を酸化してカルボン酸とし、スペーサー分子を介して高分子に結合させる方法を用いている（特許文献１参照）。
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−３７４７２号公報
【非特許文献１】谷口直之編、「糖鎖生物学がわかる」、羊土社、２００２年１０月１５日、ｐ.１５
【非特許文献２】川嵜敏祐ら編、「糖と脂質の生物学」、共立出版、２００１年７月１日、ｐ.４８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、生体内で重要な役割を担っている糖質を、天然に近いグリコピラノシル環を維持したまま固体状の高分子材料に固定し、医用材料として有用な材料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、前記課題を解決するため、水酸基が完全にアセチル化された糖質の還元末端をアミノ化した後アミド化してできるグリコピラノシルアミドを介して高分子と結合し、これを脱アセチル化することにより得ることができる新しい高分子材料を見出し、本発明をなすに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は次の通りである。
（１）ポリ−（β−１、４−Ｄ−グルコサミン）誘導体に、グリコピラノシルアミド結合を介して糖質が結合した高分子材料。
（２）リコピラノシルアミド結合を介して結合した糖質が、β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミン、２−アセチルアミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン、β−Ｄ−フコピラノシルアミン、β−Ｄ−キシロピラノシルアミン、４−Ｏ−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン、又は４−Ｏ−(β−Ｄ−グルコピラノシル)−β−Ｄ−グルコピラノシルアミンである（1）記載の糖質が結合した高分子材料。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の糖質が結合した高分子材料は新規であり、種々の生理活性が期待できる糖質を固体材料に簡便に結合し、有用な医用材料を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明について、以下具体的に説明する。
結合する糖質の中間物質として、糖質の水酸基がアセチル化されていて、還元末端の構成糖の1位がアミノ化されたグリコピラノシルアミン類を用いる。糖質は特に限定されるものではなく、天然または非天然の、単糖、二糖、オリゴ糖などである。例えば、単糖として、グルコース、ガラクトース、マンノースなどが挙げられ、二糖としては、ラクトース、セロビオースなどが挙げられる。更に、オリゴ糖として、マルトトリオース、マルトテトラオースなどが挙げられる。また、フコースなどのデオキシ糖、Ｎ-アセチルグルコサミンなどのアミノ糖も誘導可能である。さらにグルクロン酸、シアル酸などの酸性糖も、カルボキシル基を適当な保護基で保護すれば誘導可能である。
【００１０】
糖質と高分子との結合は通常スペーサーの役割をする原子団を介して行われるが、スペーサーは必ずしも必要ではなく、直接糖質を高分子に結合してもよい。
また、スペーサーを介する場合も、先に高分子にスペーサーを結合させたものを用意し、グリコピラノシルアミンを反応してもよいし、グリコピラノシルアミンにスペーサーを結合した糖質誘導体を先に合成し、高分子に結合させてもよい。
【００１１】
これらのカルボン酸とアミノ基との縮合反応は、カップリング剤を用いてアミド結合を形成する。このとき用いるカップリング剤としては、たとえばカルボジイミド系のものが用いられる。具体的には、Ｎ、Ｎ’-ジシクロヘキシルカルボジイミドや、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドの塩酸塩などが挙げられる。
【００１２】
先にグリコピラノシルアミンにスペーサーを結合させる場合には、グリコピラノシルアミンと、ジカルボン酸の無水物を反応してもよい。この場合、ジクロロメタン、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの溶媒中、グリコシルアミンとジカルボン酸の無水物を攪拌するだけでもよく、トリエチルアミンやジイソプロピルエチルアミン、４−（ジメチルアミノ）ピリジンなどの塩基を加えてもよい。
【００１３】
水酸基をアセチル基で保護した糖質が結合した高分子を以上のような方法で得た後、脱アセチル化することにより、目的の糖質が結合した高分子を得ることができる。脱アセチル化の条件は通常のエステル加水分解の条件である、アルカリ性あるいは酸性の条件下で行われる。具体的には、水酸化ナトリウム水溶液、あるいはメタノール中ナトリウムメトキシドなどで行われる（図1参照）。
【００１４】
このとき反応液中に生じた酢酸あるいはその塩やエステルを定量することにより、通常使われるNMRなどの分析方法の適用が困難な固体状の高分子に結合している糖質であっても、糖質を保護していたアセチル基の量から糖質の結合量を簡便に知ることが可能である。そのため糖質の高分子に対する結合率について調整が容易であり、適切な量の糖質を高分子に導入することが可能となる。
【００１５】
このようにして得られた、糖質が結合した高分子は、天然に近いピラノース環を保持しているので、足場を持った糖質として、糖質と細胞との特異的相互作用により、細胞の増殖を促したり、分化を誘導するなど、組織の修復、臓器の再生に役立たせることができる。また幹細胞を必要な臓器の細胞に分化させ再生医療に用いることもできるなど、医用材料として有用な材料を提供することが可能である。
固体状の高分子を基材の原料として用いる場合、反応試薬や未反応の糖質原料を洗浄操作だけで除去するため、精製が簡略化でき、製造が容易となる。
【実施例】
【００１６】
本発明を実施例に基づいて説明する。
【００１７】
[参考例１]
（Ｎ−（２−アセトアミド−３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドの合成）
２−アセトアミド−３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン (277 mg, 0.792 mmol) を乾燥ジクロロメタン (10 mL) に溶解し、無水こはく酸 (119 mg) を加えて室温で16時間反応した。溶媒を溜去後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：アセトン：酢酸＝14：5：1）により精製し、Ｎ−（２−アセトアミド−３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (290 mg, 0.649 mmol) を得た。
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.32 (d, 1H, J = 8.4), 6.74 (d, 1H, J = 8.8), 5.16  (t, 1H, J = 8.8), 5.12 (d, 1H, J = 10.0), 5.08 (t, 1H, J = 9.3), 4.28 (dd, 1H, J = 12.5, 4.2), 4.18 (q, 1H, J = 9.5), 4.09 (dd, 1H, J = 12.5, 1.7), 3.08  3.78 (m,  H),  2.78  2.70 (m, 2H), 2.60  2.49 (m, 2H), 2.09 (3H, s), 2.06 (3H, s), 2.04 (3H, s), 1.96 (3H, s)
【００１８】
[参考例２]
（Ｎ−（２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−キシロピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドの合成）
２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−２−β−Ｄ−キシロピラノシルアミン (759 mg, 2.76 mmol) を乾燥ジクロロメタン (10 mL) に溶解し、無水こはく酸 (414 mg) を加えて室温で16時間反応した。溶媒を溜去後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：アセトン：酢酸＝14：5：1）により精製し、Ｎ−（２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−キシロピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (152 mg, 0.404 mmol) を得た。
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 6.60 (d, 1H, J = 9.2), 5.30 (d, 1H, J = 9.5), 5.17 (t, 1H, J = 9.3), 4.98 (dt, 1H, J = 10.0, 5.6), 4.90 (t, 1H, J = 9.5),  4.06 (dd, 1H, J = 11.5, 5.6), 3.43 (t, 1H, J = 11.0), 2.71  2.62 (m, 2H), 2.49 (t, 2H, J = 6.4), 2.06 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.04 (3H, s)
【００１９】
[参考例３]
（Ｎ−（２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドの合成）
２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｌ−フコピラノシルアミン (256 mg, 0.886 mmol)  を乾燥ジクロロメタン (10 mL) に溶解し、無水こはく酸 (133 mg) を加えて室温で16時間反応した。溶媒を溜去後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：アセトン：酢酸＝14：5：1）により精製し、Ｎ−（２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (274 mg, 0.703 mmol) を得た。
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 6.48 (d, 1H, J = 9.0), 5.29 (d, 1H, J = 2.2), 5.21 (t, 1H, J = 8.5), 5.14 - 5.09 (m, 2H), 3.93 (q, 1H, J = 6.3), 2.75 (dt, 2H, J = 17.6, 7.6, 2.63 (dt, 2H, J = 17.3, 6.1), 2.19 (3H, s), 2.09 (3H, s), 1.99 (3H, s), 1.19 (d, 3H, J = 6.3)
【００２０】
[参考例４]
（Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドの合成）
２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン (1.85 g, 2.90 mmol) を乾燥ジクロロメタン (10 mL) に溶解し、無水こはく酸 (436 mg) を加えて室温で16時間反応した。溶媒を溜去後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：アセトン：酢酸＝14：5：1）により精製し、Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (1.52 g, 2.12 mmol) を得た。
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 6.47 (d, 1H, J = 9.0), 5.36 (d, 1H, J = 2.7), 5.28 (t, 1H, J = 9.3), 5.10 (dd, 1H, J = 10.5, 8.1), 4.94 (dd, 1H, J = 10.3, 3.4), 4.79 (t, 1H, J = 9.5), 4.50  4.40 (m, 2H), 4.18  4.03 (m, 3H), 3.89  3.84 (m, 1H), 3.80  3.69 (m, 3H), 2.74 (dt, 1H, J = 17.8, 6.1), 2.63 (dt, 1H, J = 17.6), 2.49  2.45 (m, 1H), 2.16 (3H, s), 2.12 (3H, s), 2.07 (3H, s), 2.05 (9H, bs), 1.97 (3H, s)
【００２１】
[参考例５]
（Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドの合成）
２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン (52.0 mg, 0.0818 mmol)  を乾燥ジクロロメタン (10 mL) に溶解し、無水こはく酸 (12.3 mg) を加えて室温で16時間反応した。溶媒を溜去後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：アセトン：酢酸＝14：5：1）により精製し、Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (45.4 mg, 0.0617 mmol) を得た。
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 6.42 (d, 1H, J = 9.3), 5.37 (t, 1H, J = 5.2), 5.20 (t, 1H, J = 9.3), 5.14 (t, 1H, J = 9.3), 5.07 (t, 1H, J = 9.8), 4.93 (dd, 1H, J = 9.3, 8.6), 4.84 (t, 1H, J = 9.5), 4.50 (d, 1H, J = 6.3), 4.47 (d, 1H, J = 10.7), 4.37 (dd, 1H, J = 12.5, 4.3), 4.13 (dd, 1H, J = 12.2, 4.2), 4.04 (dd, 1H, J = 12.2, 2.2), 3.80 3.72 (m, 2H), 3.66 (ddd, 1H, J = 10.7, 8.5, 6.3), 2.80  2.69 (m, 1H), 2.67  2.58 (m, 1H), 2.49  2.45 (m, 2H), 2.13 (3H, s), 2.09 (3H, s), 2.05 (3H, s), 2.03 (6H, s), 2.01 (3H, s), 1.98 (3H, s)
【００２２】
[実施例１]
（Ｎ−（２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドと側鎖がアミノ基型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体の縮合と脱アセチル化）
側鎖がアミノ基型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体（富士紡績製、キトパールＢＣＷ-3003, 粒径300 μm, 5 mL）を、1Ｍ 水酸化ナトリウム、水、メタノール、ジクロロメタンで順次洗浄し、減圧下でよく乾燥した。Ｎ−（２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (1.80 g, 4.02 mmol) をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド (4.02 mL) に溶解し加えた後、1Ｍ Ｎ、Ｎ’-ジシクロヘキシルカルボジイミドのＮ−メチルピロリドン溶液（4.02 mL） および0.1Ｍ ４−（ジメチルアミノ）ピリジンのＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液 (4.02 mL) を加え室温で４０時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、減圧乾燥して、２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミンが結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (534 mg) を得た。
【００２３】
よく乾燥した２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミンが結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (111 mg) を、乾燥メタノール (3.9 mL) に懸濁し、1Ｍ ナトリウムメトキシドのメタノール溶液 (100 μL) を加え１６時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミンが結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (107 mg) を得た。ろ液中の酢酸の定量から、β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミン誘導体の結合量は、29.0 ％であった。
【００２４】
[実施例２]
（Ｎ−（２−アセトアミド−３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドとポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体の縮合と脱アセチル化）
側鎖がアミノ基型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体（富士紡績製、キトパールＢＣＷ-3003, 粒径300 μm, 1 mL） を、1Ｍ 水酸化ナトリウム、水、メタノール、ジクロロメタンで順次洗浄し、減圧下でよく乾燥した。Ｎ−（２−アセトアミド−３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (290 mg, 0.649 mmol) をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド (650 μL) に溶解し加えた後、1Ｍ Ｎ、Ｎ’-ジシクロヘキシルカルボジイミドのＮ−メチルピロリドン溶液 (650 μL) および0.1Ｍ ４−（ジメチルアミノ）ピリジンのＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液 (650 μL) を加え室温で４０時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、減圧乾燥した後、乾燥メタノール (3.8 mL) に懸濁し、1Ｍ ナトリウムメトキシドのメタノール溶液 (200 μL) を加え１６時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン（グルコサミニルアミン）が結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (81.0 mg) を得た。
【００２５】
[実施例３]
（Ｎ−（２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−キシロピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドとポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体の縮合と脱アセチル化）
側鎖がアミノ基型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体（富士紡績製、キトパールＢＣＷ-3003, 粒径300 μm, 1 mL） を、1Ｍ 水酸化ナトリウム、水、メタノール、ジクロロメタンで順次洗浄し、減圧下でよく乾燥した。Ｎ−（２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−キシロピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (152 mg, 0.404 mmol) をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド (404 μL) に溶解し加えた後、1Ｍ Ｎ、Ｎ’-ジシクロヘキシルカルボジイミドのＮ−メチルピロリドン (404 μL) および0.1Ｍ ４−（ジメチルアミノ）ピリジンのＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液 (404 μL) を加え室温で４０時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、減圧乾燥した後、乾燥メタノール (3.8 mL) に懸濁し、1Ｍ ナトリウムメトキシドのメタノール溶液 (200 μL) を加え１６時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、β−Ｄ−キシロピラノシルアミンが結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (82.4 mg) を得た。
【００２６】
[実施例４]
（Ｎ−（２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドとポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体の縮合と脱アセチル化）
側鎖がアミノ基型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体（富士紡績製、キトパールＢＣＷ-3003, 粒径300 μm, 1 mL）を、1Ｍ 水酸化ナトリウム、水、メタノール、ジクロロメタンで順次洗浄し、減圧下でよく乾燥した。２,３,４−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｌ−フコピラノシル−３−カルボキシプロパンアミン (274 mg, 0.703 mmol) をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド (703 μL) に溶解し加えた後、1Ｍ Ｎ、Ｎ’-ジシクロヘキシルカルボジイミドのＮ−メチルピロリドン溶液 (703 μL) および0.1Ｍ ４−（ジメチルアミノ）ピリジンのＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液 (703 μL) を加え室温で４０時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、減圧乾燥した後、乾燥メタノール (3.8 mL) に懸濁し、1Ｍ ナトリウムメトキシドのメタノール溶液 (200 μL) を加え１６時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、β−Ｌ−フコピラノシルアミンが結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (90.7 mg) を得た。
【００２７】
[実施例５]
（Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドとポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体の縮合と脱アセチル化）
側鎖がアミノ基型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体（富士紡績製、キトパールＢＣＷ-3003, 粒径300 μm, 1 mL） を、1Ｍ 水酸化ナトリウム、水、メタノール、ジクロロメタンで順次洗浄し、減圧下でよく乾燥した。（Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (515 mg, 0.700 mmol) をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド (61.7 μL) に溶解し加えた後、1Ｍ Ｎ、Ｎ’-ジシクロヘキシルカルボジイミドのＮ−メチルピロリドン溶液 (61.7 μL) および0.1Ｍ ４−（ジメチルアミノ）ピリジンのＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液 (61.7 μL) を加え室温で４０時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、減圧乾燥した後、乾燥メタノール (3.8 mL) に懸濁し、1Ｍ ナトリウムメトキシドのメタノール溶液 (200 μL) を加え１６時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、４−Ｏ−(β−Ｄ−グルコピラノシル)−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン（ラクトシルアミン）が結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (85.3 mg) を得た。
【００２８】
[実施例６]
（Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドとポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体の縮合と脱アセチル化）
側鎖がアミノ基型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体（富士紡績製、キトパールＢＣＷ-3003, 粒径300 μm, 1 mL） を、1Ｍ 水酸化ナトリウム、水、メタノール、ジクロロメタンで順次洗浄し、減圧下でよく乾燥した。（Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (45.4 mg, 0.0617 mmol)  をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド (61.7 μL) に溶解し加えた後、1Ｍ Ｎ、Ｎ’-ジシクロヘキシルカルボジイミドのＮ−メチルピロリドン溶液 (61.7 μL) および0.1Ｍ ４−（ジメチルアミノ）ピリジンのＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液 (61.7 μL) を加え室温で４０時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、減圧乾燥した後、乾燥メタノール (3.8 mL) に懸濁し、1Ｍ ナトリウムメトキシドのメタノール溶液 (200 μL) を加え１６時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、４−Ｏ−(β−Ｄ−グルコピラノシル)−β−Ｄ−グルコピラノシルアミン（セロビオシルアミン）が結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (89.5 mg) を得た。
【００２９】
[実施例７]
（２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミンと側鎖がカルボン酸型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体の縮合と脱アセチル化）
側鎖がカルボン酸型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体（富士紡績製、キトパールＣ−０１, 粒径100 μm, 5 mL） を、0.1Ｍ 塩酸、水、メタノール、ジクロロメタンで順次洗浄し、減圧下でよく乾燥したのち。乾燥ジクロロメタン (10 mL) を加えた液に、２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミン (544 mg, 1.57 mmol) と１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩 (288 mg, 1.57 mmol) 及び４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン (50 mg) を加え室温で４０時間振盪した。メタノールで洗浄後、乾燥メタノール (4 mL) に懸濁し、1Ｍ ナトリウムメトキシドのメタノール溶液 (500 μL) を加え１６時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミンが結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (438 mg) を得た。
【００３０】
[実施例８]
（２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミンと側鎖が活性化したカルボン酸型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体の縮合と脱アセチル化）
側鎖が活性化カルボン酸型のポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体（富士紡績製、キトパールＫ−６２, 粒径300 μm, 1 mL） を、0.1Ｍ塩酸、メタノール、ジクロロメタンで順次洗浄し、乾燥ジクロロメタン (1 mL) を加えた液に、２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミン (62.0 mg, 0.179 mmol) を加え室温で４０時間振盪した。メタノールで洗浄後、0.01Ｍトリス塩酸緩衝液 (ｐＨ8.0) で洗浄、ろ過後、さらに0.01Ｍ トリス塩酸緩衝液 (ｐＨ 8.0) を加え１時間振盪した。ろ過後、0.01Ｍ トリス塩酸緩衝液（ｐＨ7.5）、メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミンが結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (85.9 mg) を得た。
【００３１】
[実施例９]
（Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミドとキトサン誘導体の縮合と脱アセチル化）
キトサン誘導体（富士紡績製、キトパールＡＬ−０１, 粒径100 μm, 1 mL）を、1Ｍ水酸化ナトリウム、水、メタノール、ジクロロメタンで順次洗浄し、減圧下でよく乾燥した。（Ｎ−（２，３、６−トリ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３−カルボキシプロパンアミド (447 mg, 1.00 mmol) をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド (1.00 mL) に溶解し加えた後、1Ｍ Ｎ、Ｎ’-ジシクロヘキシルカルボジイミドのＮ−メチルピロリドン溶液 (1.00 mL) および0.1Ｍ ４−（ジメチルアミノ）ピリジンのＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液 (1.00 mL) を加え室温で４０時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、減圧乾燥した後、乾燥メタノール (3.9 mL) に懸濁し、1Ｍ ナトリウムメトキシドのメタノール溶液 (100 μL) を加え１６時間振盪した。メタノール、ジクロロメタンで洗浄し、乾燥して、β−Ｄ−ガラクトピラノシルアミンが結合したポリ−（β−１，４−Ｄ−グルコサミン）誘導体 (66.5 mg) を得た。
【産業上の利用可能性】
【００３２】
本発明の高分子材料は、医療の分野で好適に利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】本発明の代表的な高分子材料の製造方法の反応式。
【図１】
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