(57)【要約】【課題】ヒトの腸内細菌叢の改善、すなわち腸内のビフィズス菌、乳酸菌等の有用菌の増殖を促進し、クロストリジウム菌、大腸菌等の有害菌の増殖を抑制することによって、ヒトの健康の増進に有効な腸内環境改善用組成物を提供することを目的とする。【解決手段】分子量１０，０００以上１２０，０００以下であって、その３０％（ｗ／ｖ）水溶液の粘度が５〜１５ｍＰａ・ｓ（２５℃，Ｂ型粘度計）、１％（ｗ／ｖ）水溶液のｐＨが５〜７であるポリガラクトース及び／又はポリガラクトース誘導体を含有させることにより上記課題を解決する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
分子量１０，０００以上１２０，０００以下であって、その３０％（ｗ／ｖ）水溶液の粘度が５〜１５ｍＰａ・ｓ（２５℃，Ｂ型粘度計）、１％（ｗ／ｖ）水溶液のｐＨが５〜７であるポリガラクトース及び／又はポリガラクトース誘導体を含有することを特徴とする腸内環境改善用組成物。
【請求項２】
ポリガラクトース及び／又はポリガラクトース誘導体中の全糖質に対するガラクトース含量が８２〜９０ｍｏｌ％であることを特徴とする請求項１記載の腸内環境改善用組成物。
【請求項３】
ポリガラクトース及び／又はポリガラクトース誘導体がラリックス（Ｌａｒｉｘ）属由来であることを特徴とする請求項１又は２記載の腸内環境改善用組成物。
【請求項４】
請求項１〜３いずれかに記載の腸内環境改善用組成物を含有する飲食品。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は腸内環境改善用組成物に関する。詳しくは、腸内有用菌増殖効果及び／又は腸内有害菌増殖抑制効果を有する腸内環境改善用組成物に関する。より詳しくは、ヒトの腸内細菌叢の改善、すなわち腸内のビフィズス菌、乳酸菌等の有用菌の増殖を促進し、クロストリジウム菌、大腸菌等の有害菌の増殖を抑制することによって、ヒトの健康の増進に有効な腸内環境改善用組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
現在、腸内の有用菌を増加させるために種々のビフィズス菌製剤やヨーグルトなどが開発されているが、ヒトの生体内での胃酸，胆汁酸などの上部消化管バリヤーの通過，増殖部位としての下部消化管における増殖可能性といった生菌の定着ならびに増殖能力が大きな問題となっている。
一方、腸内における有用菌の増殖に必要な因子として最も重要なものは糖類であると考えられ、ラクチュロース，パラチノース，フラクトオリゴ糖，ラフィノース，スタキオース，キシロオリゴ糖などの種々の糖類がビフィズス菌，乳酸菌等の有用菌の増殖にとって有効であるとされており、これらを含有した飲食物も提案されている。しかし、これらの糖類は、一部の大腸菌，クロストリジウム属細菌等の有害菌に対しても資化性があり、これらの細菌も増殖することがある。従って、上記糖類が有用菌に選択的に資化されるわけではなく、ヒトの腸内で有用菌の菌数のみが特異的には増加しない。
近年、アラビアガムやポリデキストロースのような比較的低粘度の多糖類が、上記の有用菌を選択的に増殖させると同時に有害菌を選択的に抑制し、その結果として腸内の有害物質の生成量を減少させる作用を有することが明らかになってきている。（例えば、非特許文献１、２参照。）
しかしながら、上記のような比較的低粘度の多糖類でも、生理機能が期待できる必要量を飲食品に添加すると高粘度となってしまうため、食品においては舌ざわりが悪くなったり、飲料においては喉ごしが悪くなったりするという問題が生じる。かかる理由により生理機能が期待できる必要量を日常的に摂取することが困難となっている。
【０００３】
【非特許文献１】
浅野悠輔，「アラビアガム（アカシアガム）の腸内環境改善機能」，食品と開発，ＣＭＰジャパン株式会社，平成１４年４月，第３７巻，第４号，ｐ．１４−１７
【非特許文献２】
崎山淳子，「ライテス（ポリデキストロース）の食物繊維としての幅広い生理機能  −穏かに効くプレバイオティック−」，食品と開発，ＣＭＰジャパン株式会社，平成１４年４月，第３７巻，第４号，ｐ．１８−１９
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、ヒトの生体内で、腸内細菌のうち有用菌であるビフィズス菌，乳酸菌等を選択的に増殖させ、有害菌であるクロストリジウム菌等を選択的に抑制する、極めて低粘度で、かつｐＨを変化させることのない腸内環境改善用組成物を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記課題を解決すべく検討を行った結果、分子量１０，０００以上１２０，０００以下であって、その３０％（ｗ／ｖ）水溶液の粘度が５〜１５ｍＰａ・ｓ（２５℃，Ｂ型粘度計）、１％（ｗ／ｖ）水溶液のｐＨが５〜７であるポリガラクトース及び／又はポリガラクトース誘導体を含有する組成物が腸内環境を改善させることを見出し、本発明を完成させるに至った。すなわち本発明は、ヒトの腸内有用菌増殖促進効果，腸内有害菌増殖抑制効果を有する腸内環境改善用組成物に関するものである。
【０００６】
【本発明の実施の形態】
以下本発明を詳述する。
本発明における腸内環境改善とは、腸内における有用菌の増殖を促進すること又は有害菌の増殖を抑制することである。例えば、ビフィズス菌や乳酸菌のようにヒト又は動物の病原菌，ウイルス等に対する感染防御，栄養，有害菌増殖抑制等の面で有利に働く有用菌の増殖を促進させることができる。一方、クロストリジウム菌のように発癌，肝臓疾患，動脈硬化症，高血圧症，自発性感染症等に関係している有害菌の増殖を抑制することもできる。
【０００７】
本発明におけるポリガラクトースとは、ガラクトースのみで構成されるオリゴ糖又は多糖である。結合様式は特に限定しないが、好ましくはβ１，３結合を有するポリガラクトースが良く、最も好ましくはβ１，３結合直鎖ポリガラクトースが良い。
また、本発明におけるポリガラクトース誘導体とは、特に限定するものではないが、例えば、ポリガラクトースが誘導体化されたものである。例えば、合成による誘導体化、植物，動物等の天然品から得ることができる。誘導体化の様式は、特に限定されるものではなく、グルコース，フルクトース，ガラクトース，アラビノース、キシロース等からなる糖鎖を側鎖として修飾、スルホニル基，アミノ基，カルボキシル基等による糖質中のヒドロキシル基の置換、さらにはエステル化，アセチル化等による糖質中のヒドロキシル基に対する修飾、等が挙げられる。好ましくはアラビノース及び／又はガラクトースを側鎖に有するポリガラクトースが良く、最も好ましくはアラビノース及び／又はガラクトースを側鎖に有するβ１，３直鎖ポリガラクトースが良い。
【０００８】
本発明におけるポリガラクトース又はポリガラクトース誘導体は、天然品，合成品等特に起源は限定しないが、好ましくはラリックス（Ｌａｒｉｘ）属の植物由来のポリガラクトース誘導体、より好ましくはラリックスレプトレピス（Ｌａｒｉｘ  ｌｅｐｔｏｌｅｐｉｓ），ラリックスケンフェリ（Ｌａｒｉｘ  ｋａｅｍｐｆｅｒｉ），ラリックスカジャンデリ（Ｌａｒｉｘ  ｃａｊａｎｄｅｒｉ），ラリックスデチヅ（Ｌａｒｉｘ  ｄｅｃｉｄｕ），ラリックスグメンリニイ（Ｌａｒｉｘ  ｇｍｅｎｌｉｎｉｉ），ラリックスグリフィチアナ（Ｌａｒｉｘ  ｇｒｉｆｆｉｔｈｉａｎａ），ラリックスシブリカ（Ｌａｒｉｘ  ｓｉｂｒｉｃａ），ラリックスデクヅア（Ｌａｒｉｘ  ｄｅｃｕｄｕａ），ラリックスオルゲンシス（Ｌａｒｉｘ  ｏｌｇｅｎｓｉｓ）由来のポリガラクトース誘導体が良く、最も好ましくはラリックスレプトレピス（Ｌａｒｉｘ  ｌｅｐｔｏｌｅｐｉｓ）由来のポリガラクトース誘導体が良い。
【０００９】
本発明におけるポリガラクトース及び／又はポリガラクトース誘導体の粘度は、２５℃におけるＢ型粘度計による測定で３０％（ｗ／ｖ）水溶液において５〜１５ｍＰａ・ｓであることが好ましい。さらに好ましくは７〜１４ｍＰａ・ｓが良く、最も好ましくは９〜１３ｍＰａ・ｓが良い。１５ｍＰａ・ｓ以上では、効果を得るのに必要な摂取量を含有させたときに、喉ごしが問題となり得るからである。粘度はＢ型粘度計にてローターＮｏ．１、２０ｒｐｍ、２５℃で測定した。
本発明におけるポリガラクトース及び／又はポリガラクトース誘導体のｐＨは、１％（ｗ／ｖ）水溶液で５〜７であることが好ましい。例えば、飲料に添加するとき、ｐＨが大きく変化し強アルカリ性又は強酸性になると、食品加工時に他成分に影響したり、また飲食時に口内に刺激性を与えたりする問題が生じると想定されるからである。
本発明におけるポリガラクトース又はポリガラクトース誘導体の分子量は、１０，０００以上１２０，０００以下であることが好ましい。さらに好ましくは１２，０００以上１００，０００以下、最も好ましくは１５，０００以上２５，０００以下が良い。分子量１０，０００未満では十分な腸内環境改善効果を発揮せず、また分子量１２０，０００を超えると粘度が高くなるという問題が生じるためである。ここで、分子量は、ゲル濾過用カラム（例えば、Ａｍａｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社製Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ  Ｓ−３００）を用いたゲル濾過クロマトグラフィーにて、標準物質から得られる検量線に基づき算出した。標準物質としては、例えば平均分子量が既知のデキストランを使用することができる。
【００１０】
本発明におけるポリガラクトース及び／又はポリガラクトース誘導体中の全糖質に対するガラクトース含量は、特に限定しないが、好ましくは８２〜９０ｍｏｌ％の範囲が良い。さらに好ましくは、全糖質に対するガラクトース含量が８３〜８８ｍｏｌ％の範囲、最も好ましくは８４〜８６ｍｏｌ％の範囲が良い。ここで、全糖質に対するガラクトース含量は、例えば、本発明における腸内環境改善用組成物中の糖質を酸分解しＨＰＡＥ−ＰＡＤ法にて単糖組成を明らかにすることにより、求めることができる。また、ＨＰＡＥ−ＰＡＤ法はダイオネクス社の糖類分析システムＤＸｃ−５００を用いると便利である。
また、本発明における腸内環境改善用組成物中の食物繊維含量（ＡＯＡＣ法）は、特に限定しないが、好ましくは７０〜１００％、最も好ましくは８５〜１００％が良い。
【００１１】
本発明における腸内環境改善用組成物は、経口摂取により効果が得られる。また、添加する飲食品は特に問わず、飲料、乳製品、菓子類等のいずれに添加しても良い。例えば、飲料としては天然果汁，果汁飲料，果汁入り清涼飲料，果肉飲料，果粒入り果実飲料，野菜飲料，豆乳・豆乳飲料，コーヒー飲料，お茶飲料，粉末飲料，炭酸飲料，濃縮飲料，スポーツ飲料，栄養飲料，アルコール飲料等、乳製品としては牛乳・加工乳，ヨーグルト類，チーズ，アイスクリーム，乳酸菌飲料，調製粉乳，クリーム等、菓子類としてはガム，キャンディー，クッキー，チョコレート，ビスケット等が挙げられる。
本発明における腸内環境改善用組成物の飲食品への添加量は特に限定されるものではないが、通常１〜３０％（ｗ／ｖ）が良く、好ましくは２〜１５％（ｗ／ｖ）が良く、最も好ましくは３〜１０％（ｗ／ｖ）が良い。
本発明における腸内環境改善用組成物は、他の食品及び／又は食品添加物と併用することができる。併用成分としては、安定剤，乳化剤，酸化防止剤，調味料，栄養強化剤，香料等が挙げられる。
本発明における腸内環境改善用組成物は、他の腸内環境改善効果を有する食品成分と併用することができる。腸内環境改善効果を有する食品成分としては、例えば、オリゴ糖，食物繊維，グルコン酸，茶抽出物等が挙げられる。
以下、実施例において本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００１２】
【実施例】
実施例１
ラリックスレプトレピス（Ｌａｒｉｘ  ｌｅｐｔｏｌｅｐｉｓ）のチップ２００ｇを冷水に浸して一時間抽出を行い、得られた抽出液を濾過し不溶解分を除去し、続いて分画分子量１０，０００のフィルターを用いた限外ろ過により低分子量の物質を取り除いた後、脱水、乾燥することによって、白色の粉末である本発明品１を１５．３ｇ得た。本発明品１の性状は、粘度１１．５ｍＰａ・ｓ（３０％（ｗ／ｖ）、２５℃、Ｂ型粘度計）、ｐＨ５．２（１％（ｗ／ｖ））、食物繊維含量９４．２％であった。また、本発明品１のポリガラクトース誘導体は、分子量分布１２，０００〜１００，０００、平均分子量２０，０００、全糖質中のガラクトース含量８６．１ｍｏｌ％、さらにその構造は、側鎖にガラクトースとアラビノースを持ち、主鎖がβ１，３結合しているポリガラクトースであった。
本発明品１の粘度は、Ｂ型粘度計にてローターＮｏ．１を使用し、２０ｒｐｍ、２５℃、３０％（ｗ／ｖ）水溶液の条件で測定した。
本発明品１のｐＨについて、ｐＨメーターにて１％（ｗ／ｖ）水溶液で測定した。
本発明品１の食物繊維含量はＡＯＡＣ法を用いて測定した。
本発明品１の分子量分布及び平均分子量は、サイズ排除ゲルろ過法を用いて評価した。詳しくは、１０ｍｇの本発明品１を５．０ｍＬの０．１Ｍ  ＮａＣｌ水溶液に溶解し、０．１Ｍ  ＮａＣｌ水溶液で平衡化したＳｅｐｈａｃｒｙｌ  Ｓ−３００カラム（２．３ｃｍ×１１０ｃｍ）に注入し、０．５ｍＬ／ｍｉｎの流速で溶出させた。７．０ｍＬずつ分取し、各フラクションの糖をフェノール硫酸法でそれぞれ検出した。ゲル濾過カラムは分子量分布が既知の標準デキストランを用いて検定し、片対数グラフにより分子量を求めた。
本発明品１の単糖組成は、酸分解後ＨＰＡＥ−ＰＡＤ法にてダイオネクス社の糖類分析システムＤＸｃ−５００を用いて分析を行った。詳細な結果としては、ガラクトース８６．１ｍｏｌ％、アラビノース１２．２ｍｏｌ％、グルコース０．２ｍｏｌ％、その他の糖質１．５ｍｏｌ％であった。
本発明品１中のポリガラクトース誘導体の構造解析は、メチル化分析及びＮＭＲ解析により行った。
【００１３】
実施例２
ラリックスケンフェリ（Ｌａｒｉｘ  ｋａｅｍｐｆｅｒｉ）のチップ２００ｇを冷水に浸して一時間抽出を行い、得られた抽出液を濾過し不溶解分を除去し、続いて分画分子量１０，０００のフィルターを用いた限外ろ過により低分子量の物質を取り除いた後、脱水、乾燥することによって、白色の粉末である本発明品２を１２．３ｇ得た。本発明品２の性状は、粘度１３．９ｍＰａ・ｓ（３０％（ｗ／ｖ）、２５℃、Ｂ型粘度計）、ｐＨ５．１（１％（ｗ／ｖ））、食物繊維含量９２．２％であった。また、本発明品２のポリガラクトース誘導体は、分子量分布１２，０００〜８０，０００、平均分子量１９，０００、全糖質中のガラクトース含量８３．０ｍｏｌ％、さらにその構造は、側鎖にガラクトースとアラビノースを持ち、主鎖がβ１，３結合しているポリガラクトースであった。
本発明品２の粘度、ｐＨ、食物繊維含量、分子量分布及び平均分子量、全糖質中のガラクトース含量は、発明品１と同様の方法により測定した。また、本発明品２のポリガラクトース誘導体の構造解析も発明品１と同様の方法で行った。
また、ガラクトースが８３．０ｍｏｌ％、アラビノース１３．９ｍｏｌ％、グルコース０．４ｍｏｌ％、その他の糖質が２．７ｍｏｌ％であった。
【００１４】
比較例１
ラリックスラリチナ（Ｌａｒｉｘ  ｌａｒｉｃｉｎａ）のチップ２００ｇを冷水に浸して一時間抽出を行い、得られた抽出液を濾過し不溶解分を除去した後、濾液に含まれるタンニン酸、リグニン等のフェノール性物質を除去し、分画分子量１０，０００のフィルターを用いた限外ろ過により低分子量の物質を取り除いた後、脱水、乾燥することによって、白色の粉末である比較品１が８．９ｇ得られた。比較品１の性状は、粘度１６．１ｍＰａ・ｓ（３０％（ｗ／ｖ）、２５℃、Ｂ型粘度計）、ｐＨ４．７（１％（ｗ／ｖ））、食物繊維含量９３．２％であった。また、比較品１のポリガラクトース誘導体は、分子量分布１２，０００〜８０，０００、平均分子量２０，０００、全糖質中のガラクトース含量７９．８ｍｏｌ％、さらにその構造は、側鎖にガラクトースとアラビノースを持ち、主鎖がβ１，３結合しているポリガラクトースであった。
【００１５】
比較品１の平均分子量、粘度、ｐＨ、全糖質中のガラクトース含量、食物繊維含量は、発明品１と同様の方法により測定した。また、比較品１中のポリガラクトース誘導体の構造解析も発明品１と同様の方法で行った。
また、比較品１の単糖組成は、ガラクトース７９．９ｍｏｌ％、アラビノース１２．７ｍｏｌ％、グルコース０．８ｍｏｌ％、その他の糖質６．６ｍｏｌ％であった。
【００１６】
比較例２
実施例１で得られた本発明品１に関して、βガラクトシダーゼを用いて部分的にガラクトース同士のβ１，３結合を切断したものを、比較品２とした。分子量分布４，０００〜９，０００、平均分子量６，５００、粘度６．８ｍＰａ・ｓ（３０％（ｗ／ｖ）、２５℃、Ｂ型粘度計）、ｐＨ５．２（１％（ｗ／ｖ））であった。
【００１７】
比較例３
市販のアラビアガムを比較品３とした。分子量分布１５０，０００〜５００，０００、平均分子量は３００，０００、粘度２００ｍＰａ・ｓ（３０％（ｗ／ｖ）、２５℃、Ｂ型粘度計）、ｐＨ４．０（１％（ｗ／ｖ））であった。アラビアガムの構造は、側鎖にガラクトース，グルコース，ラフィノース，アラビノースを持つポリガラクトースである。（例えば、非特許文献２参照。）
【００１８】
試験例１
本発明品１を用い、表１の処方で試験用飲料を調製した。
【００１９】
【表１】
2005047819.tif 000002
【００２０】
健康な成人１２名を対象に通常の食生活をしているコントロールの期間中に２回糞便を採取し、その後、試験用飲料を毎食１本ずつ１２日間摂取させ、その５日目，７日目，１１日目，１３日目の４回糞便を採取した。その後、上記飲料の摂取を中止し、中止してから１３日目，１５日目の２回糞便を採取した。
以上合計８回の糞便採取時に、糞便中の腸内細菌の菌数，検出率及び占有率を求めた。菌数と検出率については表２に、占有率については表３に、それぞれ示した。なお、表２と表３は、上記飲料の飲用前，飲用中−１（飲用開始５日目と７日目），飲用中−２（飲用開始１１日目と１３日目），飲用中止後の４つの期間に分けて結果が示されている。又、各期間において２回ずつ糞便の採取を行い、数値は合計２４検体の平均を示した。
【００２１】
【表２】
2005047819.tif 000003
【００２２】
菌数については糞便湿重量１ｇあたりの対数値で示した。また、検出率については（  ）内に示し、例えば２０／２４であれば２４例中２０例に検出されたことを意味する。
表２に示したように本発明品１を含有する上記飲料を飲用することにより各種腸内細菌中で有用菌であるビフィズス菌及び乳酸菌の菌数の有意な増加が認められ、検出率については有用菌である乳酸菌の有意な増加が認められた。一方、各種腸内細菌中で有害菌であるクロストリジウム菌の菌数の有意な減少が認められた。
【００２３】
【表３】
2005047819.tif 000004
【００２４】
数値の単位は％で示している。
一方、表３に示したように、本発明品１摂取により、有用菌であるビフィズス菌及び乳酸菌の占有率の有意な増加が認められ、有害菌であるクロストリジウム菌の占有率の有意な減少が認められた。
これらより明らかなように、本発明品は、腸内のビフィズス菌，乳酸菌といった有用菌の増殖を促進し、腸内のクロストリジウム菌といった有害菌の増殖を抑制する効果を有することが分かった。
【００２５】
試験例２
本発明品２についても試験例１と同様の方法で試験用飲料を調製し、健康な成人１２名を対象に同様の試験を行った。その結果については、菌数と検出率については表４に、占有率については表５に、それぞれ示した。
【００２６】
【表４】
2005047819.tif 000005
【００２７】
【表５】
2005047819.tif 000006
【００２８】
表４に示したように、本発明品２を含有する上記飲料を飲用することにより各種腸内細菌中で有用菌であるビフィズス菌及び乳酸菌の菌数の有意な増加が認められ、検出率については有用菌である乳酸菌の有意な増加が認められた。一方、各種腸内細菌中で有害菌であるクロストリジウム菌の菌数の有意な減少が認められた。
一方、表５に示したように、本発明品２摂取により、有用菌であるビフィズス菌及び乳酸菌の占有率の有意な増加が認められ、有害菌であるクロストリジウム菌の占有率の有意な減少が認められた。
これらより明らかなように、本発明品は、腸内のビフィズス菌、乳酸菌といった有用菌の増殖を促進し、腸内のクロストリジウム菌といった有害菌の増殖を抑制する効果を有することが分かった。
【００２９】
試験例３
比較品１についても試験例１と同様の方法で試験用飲料を調製し、健康な成人１２名を対象に同様の試験を行った。その結果については、菌数と検出率については表６に、占有率については表７に、それぞれ示した。
【００３０】
【表６】
2005047819.tif 000007
【００３１】
【表７】
2005047819.tif 000008
【００３２】
表６と表７より明らかなように比較品１を含有する飲料を飲用しても腸内環境改善効果は得られなかった。
【００３３】
試験例４
比較品２についても試験例１と同様の方法で試験用飲料を調製し、健康な成人１２名を対象に同様の試験を行った。その結果については、菌数と検出率については表８に、占有率については表９に、それぞれ示した。
【００３４】
【表８】
2005047819.tif 000009
【００３５】
【表９】
2005047819.tif 000010
【００３６】
表８と表９より明らかなように比較品２を含有する飲料を飲用しても腸内環境改善効果は得られなかった。
【００３７】
試験例５
比較品３についても試験例１と同様の方法で試験用飲料の調製を試みたが、粘度が高く、喉ごしが悪い飲料であったので、試験を行うに至らなかった。
【００３８】
【発明の効果】
以上のように、本発明にかかる腸内環境改善用組成物によれば、腸内細菌のうち有用菌であるビフィズス菌、乳酸菌等を選択的に増殖させ、有害菌であるクロストリジウム菌等を選択的に抑制する、極めて低粘度かつｐＨ一定の腸内環境改善組成物を提供することができるため食品産業に大いに貢献できるものである。