(57)【要約】【課題】生体内のアポリポプロテインＤの分解を抑制することにより、神経の維持や再生の促進、神経の変性又は損傷に関わる疾患の予防又は治療に有用な医薬を提供する。【解決手段】ラウリン酸又はオレイン酸を有効成分とするアポリポプロテインＤ分解抑制剤。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラウリン酸又はオレイン酸を有効成分とするアポリポプロテインＤ分解抑制剤。
【請求項２】
ラウリン酸又はオレイン酸を投与することを特徴とするアポリポプロテインＤの分解抑制方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、コレステロールやアラキドン酸等の代謝や輸送に関与するアポリポプロテインＤの分解を抑制するアポリポプロテインＤ分解抑制剤に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
ヒトのアポリポプロテインＤ（ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄ）は、血漿中の高比重リポタンパク質（ｈｉｇｈ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ＨＤＬ））に見出された分子量２９ｋＤａの糖タンパク質であり、その１次構造からリポカリンファミリーに属する。アポリポプロテインＤ遺伝子は、副腎、膵臓、腎臓、胎盤、脾臓、卵巣、精巣、脳及び抹消神経や脳脊髄液など、多くの組織で発現している。また、アポクリン汗腺においてもその発現が知られている。また、アポリポプロテインＤは、女性の乳房嚢胞患者の嚢胞液に高濃度の存在が認められている。
一方、アポリポプロテインＤは、生体内のプロテアーゼや、皮膚常在菌であるＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｅｐｉｄｅｒｕｍｉｄｉｓの産生するプロテアーゼによって分解される。
【０００３】
アポリポプロテインＤは、神経等の組織や器官において、神経の維持や再生、損傷をうけた神経の修復等に関わる特異的な化合物、例えばコレステロール、ステロイドホルモン、ビリルビン、アラキドン酸等と結合し、当該化合物の代謝や輸送に関与していると考えられている（例えば、非特許文献１参照）。
【０００４】
また、精神分裂症の患者においては、赤血球や繊維芽細胞などのリン脂質やコレステロール及び必須脂肪酸であるアラキドン酸が減少することが知られているが、これと併せて、血漿中のアポリポプロテインＤ濃度が健常者と比べて減少していることが明らかにされている（例えば、非特許文献２参照）。
【０００５】
従って、アポリポプロテインＤの分解を抑制して、アポリポプロテインＤ量の低下を防ぐことができれば、神経の維持や再生、精神分裂症、その他の神経の変性又は損傷に関わる疾病、例えばアルツハイマー症、ニーマン−パイク病タイプＣ（Ｎｉｅｍａｎ−Ｐｉｃｋ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｔｙｐｅ  Ｃ（ＮＰＣ））、ウンフェルト・ルンボルグ病の予防又は治療に有効である。
【０００６】
本発明は、生体内のアポリポプロテインＤの分解を抑制することにより、神経の維持や再生の促進、神経の変性又は損傷に関る疾患の予防又は治療に有用な医薬を提供することを目的とする。
【０００７】
【非特許文献１】
Ｅｒｉｃ  Ｒａｓｓａｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ．１４８２：１８５−１９８，  ２０００
【非特許文献２】Ｔｈｏｍａｓ  ＥＡ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ，  ９８：４０６６−４０７１，  ２００１
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、天然物の中からアポリポプロテインＤの分解を抑制する成分を探索した結果、特定の脂肪酸にアポリポプロテインＤの分解抑制作用があることを見出した。
【０００９】
すなわち本発明は、ラウリン酸又はオレイン酸を有効成分とするアポリポプロテインＤ分解抑制剤を提供するものである。
【００１０】
また本発明は、ラウリン酸又はオレイン酸を投与することを特徴とするアポリポプロテインＤの分解抑制方法を提供するものである。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本発明のアポリポプロテインＤ分解抑制剤の有効成分であるラウリン酸及びオレイン酸は、いずれも殆どの生物に広く分布している脂肪酸で、食用としても使用されていることから、長期に投与しても安全性の高い物質である。
ラウリン酸及びオレイン酸は、ヤシ油、オリーブ油、カカオ脂、パーム油、パーム核油、牛脂脂、豚脂肪、イワシ油、ニシン油等から取得することでもよく、また  ルナックＬ−５５、ルナックＬ−９８、ルナックＯ−Ａ、ルナックＯ−Ｖ、ルナックＯ−ＬＬ−Ｖ，ルナックＳＯ−９０Ｌ等の市販品を用いてもよい。
斯かるラウリン酸及びオレイン酸は、単独で用いても両者を混合して用いてもよい。
【００１２】
アポリポプロテインＤは、神経等の組織や器官において、神経の維持や再生の促進、損傷した神経の修復等に関わる特異的な化合物、例えばコレステロール、ステロイドホルモン、ビリルビン、アラキドン酸等と結合し、当該化合物の代謝や輸送に関与していると考えられている（前記非特許文献１）。
【００１３】
例えば、抹消神経系において、神経の再分化にはミエリン鞘からのコレステロールの放出が必要であるが、アポリポプロテインＤはコレステロールを結合、運搬することで再分化の間、コレステロールの再利用や恒常性の維持に関っている（前記非特許文献１）。また、アポリポプロテインＤは、傷をおった抹消神経において、脂質の再分配の機能を有していると考えられている。さらに、損傷を受けた神経ではビリルビンが生成することが知られており、アポリポプロテインＤはこの毒性化合物の排出にも関与しているとも考えられている（前記非特許文献１）。
【００１４】
アポリポプロテインＤは、脳幹神経系でも同様の機能を有している。例えばアルツハイマー症の患者の海馬及び脳脊髄液中のアポリポプロテインＤ濃度は同じ年齢の健常者に対してそれぞれ６０％及び３５０％増加していることが報告されている。アポリポプロテインＤとアポリポプロテインＥの濃度には相関がないが、アルツハイマー患者の脳脊髄液中のアポリポプロテインＤ濃度はアポリポプロテインＥ遺伝子によって影響される。アポリポプロテインＥ４の対立遺伝子によって、アルツハイマー患者の脳脊髄液のアポリポプロテインＤ濃度が増加するが、これはアポリポプロテインＤが末梢神経や脳幹神経系の維持や修復におけるアポリポプロテインＥの機能を補うためと考えられる。すなわち、アルツハイマー患者のアポリポプロテインＤ発現の増加は、損傷を受けた脳内にステロール、ステロイド、アラキドン酸などを輸送するために機能していると考えられている（前記非特許文献１）。
【００１５】
また、精神分裂症の患者においては、血漿中のアポリポプロテインＤ濃度は健常者と比べて減少していることが明らかにされている。アポリポプロテインＤはアラキドン酸と結合するが、この結果は精神分裂症患者の赤血球や繊維芽細胞などのリン脂質やコレステロール及び必須脂肪酸であるアラキドン酸の減少と一致している（前記非特許文献２）。
【００１６】
ラウリン酸及びオレイン酸は、後記実施例に示すように、プロテアーゼによるアポリポプロテインＤの分解を抑制する。従って、ラウリン酸及びオレイン酸を有効量投与することによりアポリポプロテインＤの分解を抑制することができ、ラウリン酸及びオレイン酸を有効量含有するアポリポプロテインＤ分解抑制剤は、神経の維持や再生の促進、或いは精神分裂症や神経の変性又は損傷に関る疾患、例えばアルツハイマー症、ニーマン−パイク病タイプＣ（Ｎｉｅｍａｎ−Ｐｉｃｋ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｔｙｐｅ  Ｃ（ＮＰＣ））、ウンフェルト・ルンボルグ病等の予防又は治療のための医薬として有用である。
【００１７】
尚、アポリポプロテインＤは、におい分子の一つである３−メチル−２−ヘキセン酸（３Ｍ２Ｈ）のキャリア蛋白質でもある。すなわち、３Ｍ２ＨがアポリポプロテインＤと結合した形で皮膚表面へ分泌され、皮膚表面に存在する皮膚常在菌のもつプロテアーゼによってアポリポプロテインＤが分解され、不快臭を発生することが報告されている（Ｚｅｎｇ  Ｃ，  ｅｔ  ａｌ，  Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ，  ９３  ：  ６６２６−６６３０，  １９９６）。従って、本発明のアポリポプロテインＤ分解抑制剤は、不快な体臭の発生を抑制するデオドラント剤としても有用である。
【００１８】
本発明のアポリポプロテインＤ分解抑制剤は、錠剤、カプセル剤等の内服剤、注射剤、軟膏、水剤、エキス剤、ローション剤、乳剤、クリーム、ローション、ジェル、フォーム、エッセンス、ファンデーション、パック、スティック、パウダー、パウダースプレー、ポンプスプレー、シート等の外用剤とすることができる。
尚、外用剤とする場合には、医薬や化粧料成分として一般に使用されている油分、界面活性剤、紫外線吸収剤、アルコール類、キレート剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、増粘剤、色素類、香料、各種皮膚栄養剤等を任意に組合せて配合することができる。
【００１９】
本発明のアポリポプロテインＤ分解抑制剤におけるラウリン酸又はオレイン酸の含有量は、通常全組成の０．００１〜５０重量％、好ましくは０．０１〜１０重量％、特に０．０５〜５重量％が好ましい。
【００２０】
本発明アポリポプロテインＤ分解抑制剤の投与量は、用法、患者の年令、性別、体重、疾患の度合い等により適宜選択することができるが、好ましくは、１日当たり１〜１０００ｍｇ、より好ましくは１０〜２００ｍｇであり、これを１日１回ないし数回に分けて投与するのが適当である。
【００２１】
【実施例】
実施例１  アポリポプロテインＤの分解抑制作用
アポリポプロテインＤ含有サンプルとしてヒト濃縮汗、プロテアーゼとしてＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｅｐｉｄｅｒｕｍｉｄｉｓ菌体を用い、ラウリン酸及びオレイン酸のアポリポプロテインＤ分解抑制作用を検討した。
【００２２】
（１）汗の調製
アポクリン臭を有する男性の脇の下を、蒸留水１．５ｍＬを湿らせた脱脂綿で拭き取り、この脱脂綿を絞り、回収した液（５７．５ｍＬ）を０．４５μｍのフィルターでろ過した後、ＭＩＬＬＩＰＯＲのセントリプレップＹＭ−１０で濃縮をし、再度蒸留水を添加して同様にセントリプレップＹＭ−１０で濃縮し、低分子を除去した。これを濃縮汗とした。
【００２３】
（２）上記方法（１）によって調製した濃縮汗０．０４ｍＬに０．０３ｍＬの１００ｍＭトリス−ＨＣｌバッファー、０．０２ｍＬの蒸留水及びラウリン酸（シグマ社）及びオレイン酸（シグマ社）を添加し、ｐＨ７．２、２０ｍＭトリスーＨＣｌバッファーで洗浄（３回）したＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｅｐｉｄｅｒｕｍｉｄｉｓを最終菌体量が約１０８ｃｆｕ／ｍＬになるように摂取し、３７℃、２４時間インキュベートした後、抗体染色を行った。菌体処理濃縮汗のＳＤＳポリアクリルアミド電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）はレディゲルＪ（分離ゲル濃度１５％、バイオラッド）を用いた。抗体染色はＳＤＳ−ＰＡＧＥで分離したタンパク質をゲルからＰＶＤＦフィルター（ミリポア、Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎトランスファー膜）上へ電気的に転写後、一次抗体に抗アポリポプロテインＤモノクローナルマウス抗体（ＲＤＩ社）、二次抗体にＨＲＰ標識の抗マウスＩｇ抗体（アマシャム  ファルマシアバイオテク社）を用い、ＥＣＬ  Ｐｌｕｓウェスタンブロッティング検出システム（アマシャム  ファルマシア  バイオテク社）によって、アポリポプロテインＤを検出後、画像処理を行い、アポリポプロテインＤの残存率（＝サンプルのアポリポプロテインＤ量／未処理汗中のアポリポプロテインＤ量×１００）を算出した。結果を図１及び図２に示す。
【００２４】
濃縮汗をＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｅｐｉｄｅｒｕｍｉｄｉｓ処理することによって、濃縮汗中のアポリポプロテインＤが分解され減少するのに対して、ラウリン酸又はオレイン酸を添加することにより、アポリポプロテインＤの分解が抑制された。
【００２５】
【発明の効果】
本発明のアポリポプロテインＤ分解抑制剤は、生体内のアポリポプロテインＤの分解を抑制させることから、神経の維持や再生の促進、或いは精神分裂症や神経の変性又は損傷に関る疾患の予防又は治療のための医薬として有用である。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、オレイン酸酸のアポリポプロテインＤの分解抑制効果を示す図である。
【図２】図２は、ラウリン酸のアポリポプロテインＤの分解抑制効果を示す図である。
【図１】
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【図２】
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