(57)【要約】【課題】液体中で、活性を失うことなく化学物質を基板に確実に固定することができ、基板に固定された１種又は２種以上の化学物質と検体との液体中での相互作用検出が可能なバイオチップを提供する。【解決手段】各々に異なる化学物質を結合した２種以上の化学物質結合担体を、液体中において、基板に固定したことを特徴とするバイオチップを用いる。また、上記のバイオチップを用いた、検体と化学物質との相互作用を液体中において検出する方法であって、検体と、化学物質結合担体を固定した基板とを接触させる工程、基板の所定範囲のみの相互作用を検出する工程、を含む方法を用いる。【選択図】  図４ 
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
担体に化学物質を結合した化学物質結合担体を、液体中において、基板に固定したことを特徴とするバイオチップ。
【請求項２】
各々に異なる化学物質を結合した２種以上の化学物質結合担体を、液体中において、基板に固定したことを特徴とする、請求項１に記載のバイオチップ。
【請求項３】
担体の最大長さが１〜１０μｍである、請求項１または２に記載のバイオチップ。
【請求項４】
担体がアガロース、セルロース、シリカ、アクリル酸樹脂より選ばれる少なくとも１種からなる、請求項１ないし３のいずれかに記載のバイオチップ。
【請求項５】
化学物質が生体物質である、請求項１ないし４のいずれかに記載のバイオチップ。
【請求項６】
生体物質が、タンパク質、ペプチド、ＤＮＡ、ＲＮＡ、糖鎖、細胞から成る群より選ばれる少なくとも１種である、請求項５に記載のバイオチップ。
【請求項７】
請求項１ないし６のいずれかに記載のバイオチップを製造する方法であって、
液体中において、化学物質結合担体を基板に固定する工程を含むことを特徴とする、方法。
【請求項８】
請求項１ないし６のいずれかに記載のバイオチップを製造する方法であって、
液体中において、化学物質結合担体を基板に配置する工程を含むことを特徴とする、方法。
【請求項９】
請求項１ないし６のいずれかに記載のバイオチップを製造する方法であって、
液体中において、化学物質結合担体を基板に配置する工程、および
液体中において、化学物質結合担体を基板に固定する工程、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１０】
化学物質結合担体を基板に配置する工程が、レーザーマニピュレーションにより行われる、請求項８または９に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１ないし６のいずれかに記載のバイオチップを用いた、検体と化学物質との相互作用を液体中において検出する方法であって、
検体と、化学物質結合担体を固定した基板とを接触させる工程、
基板の所定範囲のみの相互作用を検出する工程、
を含む方法。
【請求項１２】
所定範囲のみの相互作用を検出する工程が、ＳＮＯＭプローブを用いて励起させた蛍光を検出することを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バイオチップ、およびその製造方法、ならびに該チップを用いた化学物質の相互作用検出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、タンパク質・ＤＮＡ等の機能解析においては、バイオチップ関連技術の重要性が認識されている。バイオチップとしては、プロテインチップ、ＤＮＡチップ、糖鎖チップ、細胞チップと称されるものが一般に広く知られている。例えば、バイオチップの一形態であるプロテインチップは、基板にタンパク質を固定し、相互作用するタンパク質を検出するための手段として用いられている。
以下、バイオチップの従来の技術について、プロテインチップを例として簡単に説明する。
【０００３】
（ｉ）  最も一般的なプロテインチップの例としては、タンパク質含有液状試料を基板に滴下し、この基板に滴下したタンパク質含有液状試料を乾燥させることにより、タンパク質を基板に固定するようにした態様のものがある（従来技術（ｉ））。
【０００４】
（ｉｉ）  また、プロテインチップの他の例としては、基板上において数箇所の領域のそれぞれにタンパク質を結合させるための金属薄膜が塗布形成されたガラス基板を化学的処理したものをチップとして採用し、まず前述した領域ごとに異なるタンパク質含有液状試料を流通させ、基板上の化学物質および抗原抗体にタンパク質含有液状試料のタンパク質を結合させて基板に固定し、次いで領域ごとに異なる検体（液状検体）を流通させ、基板に固定したタンパク質と検体との相互作用を検出するようにしたものがある（従来技術（ｉｉ））。この従来技術（ｉｉ）においては、基板に固定されたタンパク質と検体との相互作用の検出には、２分子間の結合や解離といった質量変化について表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）シグナルを検出する方法が採られている。
【０００５】
（ｉｉｉ）  さらに、上記従来技術（ｉｉ）のように表面プラズモン共鳴センサを用いるプロテインチップの他の例としては、基板上にポリスチレン微粒子を吸着させ、その上から金を蒸着してポリスチレン微粒子上に金粒子を形成した態様のものがある（従来技術（ｉｉｉ）：特許文献１参照）。この従来技術（ｉｉｉ）においては、チップにＳ偏向光を所定範囲の角度で照射した際に生じる正反射光を分光することにより得られる反射スペクトルの吸収極大波長を測定して分子吸着を検出する方法が採られている。
【０００６】
（ｉｖ）  さらにまた、プロテインチップの他の例としては、基板に固定するための結晶性タンパク質を昆虫ウイルスによって生成し、結晶タンパク質封入体と称されるものを用い、タンパク質を基板に固定してなる態様のものがある（従来技術（ｉｖ）：特許文献２参照）。
【特許文献１】特開２００２−３６５２１０号公報
【特許文献２】特開２００３−１５５３００号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、上述した先行技術においては、以下のような問題がある。
【０００８】
従来技術（ｉ）においては、タンパク質を基板に固定するにあたり、タンパク質含有液状試料を基板上に滴下し、この基板上に滴下したタンパク質含有液状試料を乾燥させることによって、タンパク質を基板に固定するようにしており、乾燥させる際に、タンパク質の活性が失われてしまい、正常な相互作用の検出が困難であるという問題がある。
【０００９】
従来技術（ｉｉ）においては、基板上において数箇所の領域ごとに異なる検体（液状検体）を流通させる際に、タンパク質の定着度が弱い場合には、基板からタンパク質が流失してしまい、相互作用の検出が困難であるという問題があるほか、基板上の数箇所の領域にタンパク質を固定するにすぎず、多種の検体について同時に相互作用の検出を行なうには適していない。
【００１０】
従来技術（ｉｉｉ）においては、上記従来技術（ｉｉ）と同様に、基板上において数箇所の領域ごとに異なる検体（液状検体）を流通させる際に、タンパク質の定着度が弱い場合には、基板からタンパク質が流失してしまい、相互作用の検出が困難であるという問題があるほか、基板上の数箇所の領域にタンパク質を固定するにすぎず、多種の検体について同時に相互作用の検出を行なうには適していない。
【００１１】
従来技術（ｉｖ）においては、チップの製造にあたり、基板に固定する結晶性タンパク質が昆虫ウイルスによって生成され、この結晶性タンパク質を封入することによって製造されるようになっており、チップの製造方法がきわめて煩雑であり、膨大な手間、時間、および費用を要するうえ、熟練者によらなければならないという問題がある。しかも、昆虫ウイルスによって生成されるものであり、プロテインチップへの適用にとどまる。
【００１２】
このように、何れの従来技術においても、タンパク質の基板への固定の際に活性が失われてしまうおそれがある、タンパク質の定着度が弱い部分については相互作用の検出が困難である、煩雑なチップの製造にあたり煩雑な手順が強いられる、などといったすべての問題を解決しうる技術は見られず、これらを解決する有用な技術の開発が切望されている。
【００１３】
本発明は上述した従来技術の問題に着目し、これを解決しようとするものであり、具体的には以下のバイオチップ、およびその製造方法、ならびに該チップを用いた化学物質の相互作用検出方法を提供することを目的とする。
【００１４】
本発明の第１の目的は、液体中で、活性を失うことなく化学物質を基板に確実に固定することができ、基板に固定された１種又は２種以上の化学物質と検体との液体中での相互作用検出が可能なバイオチップを提供することにある。
【００１５】
本発明の第２の目的は、液体中で、活性を失うことなく化学物質を基板に確実に固定することができ、基板に固定された１種又は２種以上の化学物質と検体との液体中での相互作用検出が可能なバイオチップを製造することができるバイオチップの製造方法を提供することにある。
【００１６】
本発明の第３の目的は、液体中で、活性を失うことなく化学物質が基板に確実に固定され、基板に固定された１種又は２種以上の化学物質と検体との相互作用検出を行なうに際し、ノイズ検出を回避し、適切に相互作用を検出することができ、微量検体での化学物質の相互作用検出が可能な化学物質の相互作用検出方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、担体に化学物質を結合した化学物質結合担体を、液体中において、基板に固定したことを特徴とするバイオチップである。
本発明により、液体中において、検体と化学物質との相互作用を検出することが可能となる。
【００１８】
また、本発明は、各々に異なる化学物質を結合した２種以上の化学物質結合担体を、液体中において、基板に固定したことを特徴とする、上記のバイオチップである。
本発明により、液体中において、検体と２種以上の化学物質との相互作用を検出することが可能となる。
【００１９】
さらに、本発明は、担体の最大長さが１〜１０μｍである、上記のバイオチップである。
本発明により、集積度の高いバイオチップとすることが可能となる。
【００２０】
また、本発明は、担体がアガロース、セルロース、シリカ、アクリル酸樹脂より選ばれる少なくとも１種からなる、上記のバイオチップである。
本発明により、汎用の液体クロマトグラフィー用の担体を用いることが可能となる。
【００２１】
さらに、本発明は、化学物質が生体物質である、上記のバイオチップである。
また、本発明は、生体物質が、タンパク質、ペプチド、ＤＮＡ、ＲＮＡ、糖鎖、細胞から成る群より選ばれる少なくとも１種である、上記のバイオチップである。
これらの発明により、検体と生体物質との相互作用を検出することが可能となる。
【００２２】
さらに、本発明は、上記のバイオチップを製造する方法であって、液体中において、化学物質結合担体を基板に固定する工程を含むことを特徴とする、方法である。
本発明により、活性を失うことなくバイオチップを製造することが可能となる。
【００２３】
また、本発明は、上記のバイオチップを製造する方法であって、液体中において、化学物質結合担体を基板に配置する工程を含むことを特徴とする、方法である。
本発明により、基板の所望の位置に担体を配置することが可能となる。
【００２４】
さらに、本発明は、上記のバイオチップを製造する方法であって、液体中において、化学物質結合担体を基板に配置する工程、および液体中において、化学物質結合担体を基板に固定する工程、を含むことを特徴とする方法である。
本発明により、基板の所望の位置に担体を配置し、活性を失うことなくバイオチップを製造することが可能となる。
【００２５】
さらに、本発明は、化学物質結合担体を基板に配置する工程が、レーザーマニピュレーションにより行われる、上記の方法である。
本発明により、基板の所望の位置に担体を配置することが可能となる。
【００２６】
また、本発明は、上記のバイオチップを用いた、検体と化学物質との相互作用を液体中において検出する方法であって、検体と、化学物質結合担体を固定した基板とを接触させる工程、基板の所定範囲のみの相互作用を検出する工程、を含む方法である。
本発明により、基板の所定の範囲のみについて相互作用を検出するため、効率的な検出を行うことが可能となる。
【００２７】
さらに、本発明は、所定範囲のみの相互作用を検出する工程が、ＳＮＯＭプローブを用いて励起させた蛍光を検出することを特徴とする、上記の方法である。
本発明により、効率的に所定範囲の相互作用を検出することが可能となる。
【発明の効果】
【００２８】
本発明のバイオチップによれば、液体中において、担体に化学物質を結合させることにより得られた１種又は２種以上の化学物質結合担体が基板に固定されるようになっており、活性を失うことなく化学物質を基板に確実に固定することができ、基板に固定された１種又は２種以上の化学物質と検体との相互作用検出が可能なバイオチップを提供することができる。
【００２９】
また、本発明のバイオチップの製造方法によれば、バイオチップを製造するにあたり、液体中において、担体に化学物質を結合させることにより得られた１種又は２種以上の化学物質結合担体が、基板に固定されるようになっており、活性を失うことなく化学物質を基板に確実に固定することができ、基板に固定された１種又は２種以上の化学物質と検体との相互作用検出が可能なバイオチップを製造することができる。
【００３０】
さらに、本発明のバイオチップを用いた化学物質の相互作用検出方法によれば、バイオチップの基板に固定した化学物質結合担体の化学物質と、所望の検体の化学物質との相互作用を検出するにあたり、液体中において、担体に化学物質を結合した１種又は２種以上の化学物質結合担体を固定した基板上において、所定範囲のみについて相互作用が検出されるようになっており、活性を失うことなく化学物質が基板に確実に固定され、基板に固定された１種又は２種以上の化学物質と検体の化学物質との相互作用検出を行なうに際し、ノイズ検出を回避し、適切に相互作用を検出することができるうえ、微量検体での化学物質の相互作用検出が可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３１】
以下、本発明の実施形態を図面に基づいて説明する。
まず、本発明のバイオチップの構成の一例について説明する。
図１は、本発明のバイオチップの一例を示す概念図である。
本実施形態のバイオチップ１００は、図１に示すように、液体中（図示せず）において、複数の担体（ビーズ）１２１，１３１，１４１・・・に対して担体（ビーズ）１２１，１３１，１４１・・・ごとに異なる化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・が結合された２種以上の化学物質結合担体（化学物質結合ビーズ）１２０，１３０，１４０・・・を基板１１０に固定した態様のものである。
【００３２】
ここで、化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・としては、タンパク質、ペプチド、ＤＮＡ、糖鎖、細胞等といった生体分子が掲げられる。したがって、タンパク質を基板に固定した場合にはプロテインチップを構成することになり、ＤＮＡを基板に固定した場合にはＤＮＡチップを構成することになり、目的に応じた任意の化学物質を用いることができる。
【００３３】
本発明に用いる液体としては、緩衝液等を挙げることができる。この液体内において化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・が基板１１０に固定されるようになっているので、化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・の化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・については、活性が失われるのを回避し、活性を適切に維持することができる。
【００３４】
基板１１０の材質としては、ニトロセルロース膜、ＰＶＤＥ膜、金属、ガラス等を挙げることができる。基板１１０としては、特に、アミノ結合させる手段や、物理的吸着する手段や、チオール結合させる手段、抗原抗体反応させる手段等によってガラスを化学的処理した態様のものを採用すれば、粒子状の担体に結合された化学物質の基板への固定を容易に行なうことができるといった効果が得られる。
【００３５】
担体１２１，１３１，１４１・・・の材質としては、アガロース、セルロース、シリカ、アクリル酸樹脂、各種液体クロマトグラフィー用充填剤等を挙げることができる。
なお、担体１２１，１３１，１４１・・・の形状については、特に限定されない。
【００３６】
これらの担体１２１，１３１，１４１・・・の大きさとしては、特に制限はないが、最大長さ１μｍ〜１０μｍのものが好ましく、これらの大きさのものを採用すれば、チップ自体を大幅に小型化することができ、微量検体での検出および解析が可能になるといった効果が得られる。ここで、最大長さとは、担体において最大となる部分の長さをいい、ビーズ状で有れば、その直径を意味する。
【００３７】
この担体１２１，１３１，１４１・・・に化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・を結合させる手段としては、例えば、アミノ結合させる手段や、物理的吸着する手段や、チオール結合させる手段、抗原抗体反応させる手段等が挙げられる。
【００３８】
また、化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・を基板１１０に固定する手段としては、例えば、基板表面に化学的処理（アミノ結合させる手段や、物理的吸着する手段や、チオール結合させる手段、抗原抗体反応させる手段等）、もしくは生物学的修飾（抗体、レセプター等）といった処理をする手段、あるいは照射光により基板を光変化させて固定する手段、を採用することができる。
【００３９】
このバイオチップ１００では、液体中において、複数の担体１２１，１３１，１４１に対して担体１２１，１３１，１４１ごとに異なる化学物質Ａ，Ｂ，Ｃを結合させることにより得られた２種以上の化学物質結合担体１２０，１３０，１４０が基板１１０に固定されるようになっており、活性を失うことなく化学物質Ａ，Ｂ，Ｃを基板１１０に確実に固定することができ、基板１１０に固定された２種以上の化学物質Ａ，Ｂ，Ｃと検体の化学物質Ｘとの相互作用検出が可能である。
【００４０】
次に、本発明のバイオチップの製造方法について説明する。
図２は、本発明のバイオチップの製造方法を示すフローチャートである。
上述したバイオチップ１００を製造するにあたっては、液体中（図示せず）において、担体１２１，１３１，１４１・・・ごとに異なる化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・が結合された２種以上の複数の化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・を、基板１１０に固定する手順を採っている。
【００４１】
さらに詳細に、このバイオチップの製造方法について説明する。
まず、化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・を得るために、担体１２１，１３１，１４１・・・に所望の化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・をそれぞれ結合させる。化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・を担体１２１，１３１，１４１・・・に結合させるにあたっては、上述したように、例えば、アミノ結合させる手段や、物理的吸着する手段や、チオール結合させる手段、抗原抗体反応させる手段等を挙げることができる。
【００４２】
次に、担体１２１，１３１，１４１・・・に化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・を結合させた化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・を基板１１０に配置し、固定する。
【００４３】
化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・を基板１１０に配置するにあたっては、光ピンセットなどのレーザーマニピュレーションにより行うことができる。
【００４４】
また、化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・を基板１１０に固定するにあたっては、上述したように、例えば、基板表面に化学的処理（アミノ結合させる手段や、物理的吸着する手段や、チオール結合させる手段、抗原抗体反応させる手段等）、もしくは生物学的修飾（抗体、レセプター等）といった処理をする手段、あるいは照射光により基板を光変化させて固定する手段を挙げることができる。
【００４５】
このバイオチップ１００の製造方法では、バイオチップ１００を製造するにあたり、液体中において、複数の担体１２１，１３１，１４１・・・に対して担体１２１，１３１，１４１ごとに異なる化学物質Ａ，Ｂ，Ｃを結合させることにより得られた２種以上の化学物質結合担体１２０，１３０，１４０が、基板１１０に固定されるようになっており、活性を失うことなく化学物質Ａ，Ｂ，Ｃを担体を介して基板１１０に確実に固定することができ、担体を介して基板１１０に固定された二種以上の化学物質Ａ，Ｂ，Ｃと検体の化学物質Ｘとの相互作用検出が可能なバイオチップ１１０を製造することができる。
【００４６】
次に、本発明のバイオチップを用いた化学物質の相互作用検出方法について説明する。
図３は、本発明のバイオチップを用いた化学物質の相互作用検出方法を示すフローチャートである。
上述したバイオチップ１００の基板１１０に固定した化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・の化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・と、所望の検体の化学物質Ｘとの相互作用を検出するにあたっては、液体中（図示せず）において、担体１２１，１３１，１４１・・・ごとに異なる化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・が結合された２種以上の化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・を固定した基板１１０上において所定範囲のみについて、相互作用を検出する。
【００４７】
ここで、相互作用検出には、例えば、化学物質結合担体の化学物質をタンパク質とした場合において、検体である化学物質を蛍光標識し、その蛍光を検出する手段や、タンパク質と検体との２分子間の結合や解離に伴う質量変化を表面プラズモン共鳴シグナルとして検出する手段や、電気化学活性物質で標識した検体の電気化学的な測定をする手段等を採用することができる。
【００４８】
この実施形態において、より具体的には、化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・の化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・に相互作用する検体の化学物質Ｘの検出解析は、このバイオチップ１００に蛍光標識した検体の化学物質Ｘを滴下することで化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・の化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・に相互作用している検体の化学物質Ｘの蛍光を検出することができる。特に、近接場光顕微鏡（Ｓｃａｎｎｉｇ  Ｎｅａｒ−ｆｉｅｌｄ  Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｒｐｙ：ＳＮＯＭ）のプローブを用いて、化学物質結合担体１２０，１３０，１４０・・・の周域において数ｎｍ付近のみを蛍光励起させ、担体１２１，１３１，１４１・・・に結合させた化学物質Ａ，Ｂ，Ｃ・・・に相互作用している蛍光標識した検体の化学物質Ｘのみの蛍光を検出することができる。
【００４９】
このバイオチップ１００を用いた化学物質の相互作用検出方法では、図４に示されるように、バイオチップ１００の基板１１０に固定した化学物質結合担体１２０，１３０，１４０の化学物質Ａ，Ｂ，Ｃと、所望の検体の化学物質Ｘとの相互作用を検出するにあたり、液体中において、複数の担体１２１，１３１，１４１に対して担体１２１，１３１，１４１ごとに異なる化学物質Ａ，Ｂ，Ｃが結合された２種以上の化学物質結合担体１２０，１３０，１４０を固定した基板１１０上に添って、固定した化学物質結合担体１２０，１３０，１４０の各化学物質Ａ，Ｂ，Ｃの周域（所定範囲）のみについて、相互作用が検出されるようになっており、活性を失うことなく化学物質Ａ，Ｂ，Ｃが担体を介して基板１１０に確実に固定され、担体を介して基板１１０に固定された二種以上の化学物質Ａ，Ｂ，Ｃと検体の化学物質Ｘとの相互作用検出を行なうに際し、ノイズ検出を回避し、適切に相互作用を検出することができるうえ、微量検体での化学物質の相互作用検出が可能である。
【００５０】
図５（ａ）および（ｂ）には、異なる検体を滴下したバイオチップにおいて、それぞれの蛍光状態が示されている。このように本実施形態では、異なる検体の各々について相互作用パターンを容易に把握することができる。
【実施例】
【００５１】
以下、本発明のより具体的な例について簡単に説明するが、本発明は、以下の例に限定されるものではない。
【００５２】
ここでは、糖鎖解析のために、糖鎖と糖鎖を特異的に認識するタンパク質の総称であるレクチンとの相互作用を観察する。
【００５３】
レクチンと糖鎖の相互作用は解離定数が１０−６Ｍ程度と知られており、この値は生体内で最も弱い結合とされている。このような弱い相互作用を測定するためには、糖鎖もレクチンも活性を維持している状態で、かつバインディングフリーでない溶液中での測定が有用である。
【００５４】
ここで、糖鎖の解析を試みるために、まずレクチンチップを準備する。レクチンは失活しやすいので、活性を保つように溶液中での固定が有用である。
【００５５】
レクチンチップは、レクチンを小粒体に結合させたものを１粒子ずつ基板に固定していく。例えば、レクチンクロマトグラフィーの充填剤に使われているレクチン結合担体（粒子径１μｍ〜１０μｍ）を溶液中で１粒子ずつ固定することにより、活性を保った状態でのレクチンチップを準備することができる。
【００５６】
レクチン結合担体の固定には、例えば、光ピンセットを用いることによりレクチンを傷つけることなく任意の位置に配置することができる。また、レクチン結合担体だけでなく、どのような生体分子が結合していても固定が可能であるので、レクチンチップだけでなく、ＤＮＡチップや、その他生体分子チップ等のあらゆるバイオチップにも適用することができる。
【００５７】
レクチンに相互作用する糖鎖の解析は、準備したレクチンチップに蛍光標識した糖鎖を滴下することによりレクチンに相互作用している糖鎖の蛍光観察を行なう。この蛍光観察は、例えば蛍光顕微鏡を用いて蛍光観察する、もしくは近接場光顕微鏡（Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｎｅａｒ−ｆｉｅｌｄ  Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｒｐｙ：ＳＮＯＭ）のプローブを用いてレクチン結合担体から数１０ｎｍ付近のみを蛍光励起させることでレクチンに相互作用している蛍光標識糖鎖のみの蛍光を観察することができる。
【００５８】
同様のレクチンチップを用いて各種の糖鎖の蛍光観察を行なうことにより、同様のレクチンチップに対して各々の糖鎖ごとに異なった相互作用パターンの蛍光観察を行なうことができる。
【００５９】
このように、レクチンチップに対する各々の糖鎖結合パターンを解析し、プロファイルすることにより、未知の糖鎖の特徴付けについての可能性を期待することができる。
【産業上の利用可能性】
【００６０】
本発明のバイオチップ、およびその製造方法、ならびに該チップを用いた化学物質の相互作用検出方法は、タンパク質・ＤＮＡ等の機能解析におけるバイオチップ関連技術産業での利用を期待することができる。
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】図１は、本発明のバイオチップ（プロテインチップ）の構成の一例を示す概念図である。ここで、（ａ）はバイオチップの外観全体を示す平面図であり、（ｂ）は（ａ）のｂにて示す部分を拡大して示す平面図であり、（ｃ）は（ｂ）の一部をさらに拡大して示す概略正面図である。
【図２】図２は、本発明のバイオチップの製造方法を示すフローチャートである。
【図３】図３は、本発明のバイオチップを用いた化学物質の相互作用検出方法を示すフローチャートである。
【図４】図４は、本発明において検体を滴下した状態を示す概略正面図である。
【図５】図５は、本発明においてバイオチップにおいて蛍光状態を示す平面図である。ここで、（ａ）および（ｂ）は、異なる検体を滴下したものである。
【符号の説明】
【００６２】
１００  バイオチップ
１１０  基板
１２０，１３０，１４０  化学物質結合担体
１２１，１３１，１４１  担体
Ａ，Ｂ，Ｃ  化学物質
Ｘ  化学物質（検体）
【図１】
2005257275.tif 000003
【図２】
2005257275.tif 000004
【図３】
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【図４】
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【図５】
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