(57)【要約】【課題】木材由来の抽出成分の影響を受けず、信頼性が高く、高感度で、簡便且つ迅速に、木材の初期腐朽の診断を行うための方法の提供。【解決手段】木材試料からの抽出液にポリカチオン化合物を接触させる工程を抗原抗体反応を利用した診断システムに導入すること、或は、木材試料に接触させる抽出用液にポリカチオン化合物を添加することにより、抗原抗体反応の特異性に与える木材由来の抽出成分の悪影響を回避し、初期の腐朽段階にある木材を、高い信頼性で、高感度で、簡便且つ迅速に診断する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗原抗体反応を用いる木材の腐朽診断方法であって、該診断方法が、
Ａ）木材試料に液体を加えて、木材腐朽菌由来の抗原を抽出する工程、
Ｂ）Ａの工程を経た溶液を、木材腐朽菌由来の抗原と反応する抗体と接触させる工程、
Ｃ）抗原抗体反応の進行を観察する工程、
の手順で行われ、Ａ及び／又はＢの工程に使用する液体及び／又は溶液にポリカチオン化合物を共存及び／又は接触させることを特徴とする木材腐朽診断方法。
【請求項２】
ポリカチオン化合物が、ポリアリルアミンである請求項１記載の木材腐朽診断方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
信頼性が極めて高く、簡便且つ迅速に、木材腐朽菌による木材の初期腐朽を診断する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
木材は、建築用材を中心に広範に用いられている優れた材料であるが、生物的な劣化を受けやすいという欠点がある。木材の生物的な劣化は、シロアリ等の昆虫に由来するものと、木材腐朽菌等の微生物に由来するものに大別されるが、木材腐朽菌、特に、褐色腐朽菌による木材の腐朽は、建築用材に頻発し、しかも、木材強度に対して重大な影響を及ぼすため、深刻な問題となっている。この問題に対処するためには、定期的に木材建造物での腐朽の有無をチェックすることが有用である。しかしながら、木材建造物における、従来の腐朽検出方法は、木材表面を打撃して反響音を識別する方法、釘を打ち込む際の抵抗力により検出する方法、音波を利用して検出する方法等であり、これらの方法は、木材腐朽が十分に進行した木材に対しては有効であるが、初期段階の腐朽の検出は困難であるという欠点があった。また、これらの方法は木製用材に含まれる水分含有率の影響を大きく受けるため、信頼性に欠けるものであった。
【０００３】
こうした課題に対して、米国特許第５５６３０４０号（特許文献１）では、イムノクロマトグラフィーの原理を利用した木材の初期腐朽の検出方法及びその装置が提案されている。この方法は、抗キシラナーゼモノクローナル抗体を、ポリエステルのシートの捕捉域に固定化し、さらに、抗キシラナーゼポリクローナル抗体標識ラテックス粒子を捕捉域から離れた位置（担体域）に供し、試験対象となる木材抽出物をポリエステルシートの担体域の末端に供し、担体域と捕捉域上でのクロマトグラフィーを行うものである。木材抽出物中にキシラナーゼが存在する場合、すなわち木材が腐朽している場合、キシラナーゼ、抗キシラナーゼ抗体、及び標識されたキシラナーゼ抗体の複合体が形成され、目視観察可能なシグナルが形成され、これによって木材の腐朽が検出されるという方法である。
【０００４】
このような抗原抗体反応を利用した方法は、原理的には高感度でかつ高い特異性を有する有用な方法である。しかしながら、試験対象となる木材は、スギ、ベイツガ、ヒノキ、マツ、アピトン等、多岐にわたっており、その木材のそれぞれに様々な天然成分が含まれている。従って、抗原抗体反応の原理に基づく腐朽検出を実施する際に、木材に由来する多くの成分が、抗原と共に木材抽出物として抽出され、これらの抗原以外の抽出成分が、抗原抗体反応の特異性に影響を与え、その結果、腐朽診断の信頼性を低下させるという問題点があった。
【０００５】
一方、特公昭６２−２９７４６（特許文献２）、特公昭６３−８４２６（特許文献３）では、エチレンジアミン４酢酸塩、塩酸グアニジン、ヨウ化塩及びチオシアン酸塩を単独で或は併用して抗原抗体反応における非特異的反応を消去する方法を開示している。また、特開平９−２０３７３５（特許文献４）では、エチレンジアミン４酢酸、イミノ２酢酸、ヒドロキシエチルイミノ２酢酸等の金属イオンマスキング剤を共存させることにより、免疫学的反応における非特異反応を抑制する方法を開示している。しかしながら、これらの特許に開示された方法は、抗原抗体反応の原理に基づく腐朽検出を実施する際に、木材に由来する多くの成分が、抗原と共に木材抽出物として抽出され、これらの抗原以外の抽出成分が、抗原抗体反応の特異性に影響を与え、その結果、腐朽診断の信頼性を低下させるという問題点を解決するものではなかった。
【０００６】
【特許文献１】米国特許第５５６３０４０号
【特許文献２】特公昭６２−２９７４６号
【特許文献３】特公昭６３−８４２６号
【特許文献４】特開平９−２０３７３５号
【非特許文献１】Ｈａｊｉｍｅ  Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４６，２１０７−２１１５（１９８２）
【非特許文献２】Ｃ．Ａ．Ｃｌａｕｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｗｏｏｄ  Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．２７，２１９−２２８（１９９３）
【非特許文献３】Ｊ．Ｗ．Ｐａｌｆｒｅｙｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｗｏｏｄ  Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅｓ”，Ｂｉｏｄｅｔｅｒｉｏｒ７，７０９−７１３（１９８８）
【非特許文献４】Ｃ．Ａ．Ｃｌａｕｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅａｒｌｙ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｒｏｗｎ−ｒｏｔ  ｄｅｃａｙ  ｉｎ  ｓｏｕｔｈｅｒｎ  ｙｅｌｌｏｗ  ｐｉｎｅ  ｕｓｉｎｇ  ｉｍｍｕｎｏｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ”,Ｗｏｏｄ  Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．２６，１−８（１９９１）
【非特許文献５】Ｙｏｏｎ  Ｓｏｏ  Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．, “Ｔｈｅ    Ｕｓｅ  ｏｆ  ＥＬＩＳＡ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｗｈｉｔｅ−ａｎｄ  Ｂｒｏｗｎ−Ｒｏｔ  Ｆｕｎｇｉ”，Ｈｏｌｚｆｏｒｓｃｈｕｎｇ  ４５，４０３−４０６（１９９１）
【非特許文献６】Ｙｏｏｎ  Ｓｏｏ  Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．,“Ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｆｕｎｇａｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｔｙｒｏｍｙｃｅｓ  ｐａｌｓｔｒｉｓ  ｕｓｉｎｇ  ＴＥＭ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｇｏｌｄ  Ｌａｂｅｌｌｉｎｇ”，Ｍｏｋｕｚａｉ  Ｇａｋｋａｉｓｈｉ  ３８，４９０−４９４（１９９２）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
従って、本発明の課題は、信頼性が高く、高感度で、簡便且つ迅速に、木材の初期腐朽の診断を行うための方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、木材自体に含まれる成分が、抗原抗体反応に与える影響、及びこの影響を回避するための方法について鋭意検討を行った。その結果、木材試料からの抽出液にポリカチオン化合物を接触させる工程を抗原抗体反応を利用した診断システムに導入すること、或は、木材試料に接触させる抽出用液にポリカチオン化合物を添加することにより、初期の腐朽段階にある木材を、高い信頼性で、高感度で、簡便且つ迅速に、診断できることを見出し、本発明を完成させるに至った。
すなわち本発明は以下のものを提供するものである。
（１）抗原抗体反応を用いる木材の腐朽診断方法であって、該診断方法が、
Ａ）木材試料に液体を加えて、木材腐朽菌由来の抗原を抽出する工程、
Ｂ）Ａの工程を経た溶液を、木材腐朽菌由来の抗原と反応する抗体と接触させる工程
Ｃ）抗原抗体反応の進行を観察する工程の手順で行われ、Ａ及び／又はＢの工程に使用する液体及び／又は溶液にポリカチオン化合物を共存及び／又は接触させることを特徴とする木材腐朽診断方法。
（２）ポリカチオン化合物が、ポリアリルアミンである（１）記載の木材腐朽診断方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明方法は、抗原抗体反応の原理に基づく腐朽検出を実施する際、抗原以外の木材由来の抽出成分が与える悪影響を回避することが出来るため、木材腐朽菌による木材の腐朽を特異的に判定可能であり、誤診断の恐れが極めて低い。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下に本発明を実施するための好ましい例として、各工程を詳細に説明する。
Ａの工程は、木材試料中の木材腐朽菌に由来する抗原を抽出するために、木材試料に抽出用の液体を接触させ、抽出を行う工程である。この工程で用いる抽出用の液体にポリカチオン化合物を共存させること、或は木材試料を抽出した抽出液にポリカチオン化合物を添加することにより、木材抽出成分が抗原抗体反応に与える影響を回避できる。本発明で用いるポリカチオン化合物は、ポリアリルアミン、エチレンジアミン、ポリエチレンポリアミン、ポリエチレンイミン等の分子内に複数のカチオン性の構造部分を有する化合物であるが、特にポリアリルアミンが好適に用いられる。また、ポリカチオン性の性質を保持していれば、誘導体化や修飾を受けた構造を有する化合物であっても、本発明の目的で使用可能である。これらのポリカチオン化合物の分子量は、５００から１００００００、より好適には５０００から１０００００のものが用いられる。またこれらのポリカチオン化合物の使用濃度は、抽出液へ添加した際の、抽出液中での濃度として１０〜５００００ｐｐｍ、より好適には１００〜５０００ｐｐｍである。またこれらの化合物は、Ｃｌ−、Ｆ−、Ｂｒ−、Ｉ−、有機酸イオンを陰イオン性の構造部分として含有するものが好適に使用される。この工程で抽出される抗原とは、木材腐朽菌に特徴的な生産物であればいかなる物質も抗原として利用可能であるが、好ましくはβ−１，４−キシラナーゼ、β−１，４−マンナナーゼ、β−１，４−グルカナーゼ、β−１，３−グルカナーゼ、ラミナリナーゼであり、より好ましくはβ−１，４−キシラナーゼ、β−１，４−マンナナーゼである。本発明で用いる木材試料とは、木材切断片、木材のドリル片、のこくず、または木粉等、検査を行う木材から採取される試料を指している。本発明で用いる木材試料に加える液体とは、水あるいは水に何らかの溶質を溶解させたものである。溶質としては、非イオン系界面活性剤等の界面活性剤、糖類、無機塩類等の浸透圧調整剤、無機塩類、有機酸の塩等のｐＨ調整剤等が単独あるいは組み合わせて使用される。抽出時間は任意の時間を設定可能であるが、好ましくは１分から１時間である。また抽出の効率を向上させるために超音波処理あるいはホモジナイザー処理を併用することも有用である。
【００１１】
Ｂ及びＣの工程は、Ａの工程で得られた抽出液を木材腐朽菌由来の抗原と反応する抗体と接触させ、抗原抗体反応の進行を観察する工程であり、好適には、イムノクロマトグラフィーの原理に基づく工程である。すなわち、上記Ａの工程を経た溶液を、木材腐朽菌由来の抗原を認識する抗体が固定化され、且つこの抗体と離れた位置に前記抗原を認識する抗体を結合した可動性のマトリックスを有する媒体に接触させ、展開した後、媒体に固定化された木材腐朽菌由来の抗原を認識する抗体及び可動性マトリックスに結合した前記抗原を認識する抗体及び前記抗原の複合体を視覚的に観察する工程である。なお、Ｂの工程とＣの工程を同時に実施することも可能である。上記の媒体とは、一般に毛管作用を有する公知の材料を指している。この例としては、セルロースあるいはニトロセルロース等のセルロース修飾体、ガラス、ナイロン、ポリエチレン、ポリエステルから成る多孔性の膜状の材料を挙げることが出来る。またこの様な媒体の強度を高めるために、使用する媒体よりも強度の高い何らかの材料を媒体の片面或は両面にラミネートすることは、実使用上、有用である。さらにこの様な媒体を何らかのハウジングで梱包して使用することも、実使用上、有用である。本発明で用いる抗原を認識する抗体とは、モノクローナル抗体及び／またはポリクローナル抗体を指しているが、可動性マトリックスに結合した抗体としてはポリクローナル抗体を、媒体に固定化された抗体としてはモノクローナル抗体を使用することがより好ましい。本発明で用いる可動性マトリックスとは、媒体に展開出来る粒子のことを指しており、この例としては、金属コロイド、非金属コロイドまたは着色ラテックス粒子等の着色粒子が使用可能であるが、金コロイド、着色ラテックス粒子が好ましい。可動性マトリックスの粒径は、１ｎｍ〜２μｍが好ましいが、金コロイドを用いる場合、その粒径は、５ｎｍ〜０．５μｍ程度、着色ラテックスの場合５０ｎｍ〜１．５μｍ程度がより好ましい。なお、Ｂ及びＣの工程として、ＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍ−ｌｉｎｋｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ）法として知られる検出方法を行うことも可能である。すなわち、媒体上の固定化された一次抗体が存在する部位に、上記Ａの工程を経た溶液を加え洗浄し、次に指標酵素が結合し抗原を認識可能な二次抗体を含有する溶液を同じ部位に加え、再洗浄後、指標酵素の酵素活性を  検出する工程である。
【実施例】
【００１２】
以下に実施例をあげて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものではない。
【００１３】
（１）褐色腐朽菌由来抗原（キシラナーゼ）の精製  
褐色腐朽菌  Serpula lacrymans(Wulf. Ex Fr.) Schroster, FFPRI 0739をスギ木片（３ｃｍ×３ｃｍ×３ｃｍ）５０個に接種し、２７°Ｃで８週間保温した。これら褐色腐朽木片を、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ-１００（シグマアルドリッチジャパン）を含むＰＢＳ（０．８％ＮａＣｌ を含む２０ｍＭ リン酸緩衝液，ｐＨ７．２）に浸漬し、超音波処理を３０分行い、褐色腐朽菌の生産するキシラナーゼを抽出した。得られた抽出液を、濾紙で濾過した後、硫酸アンモニウム沈殿処理（８０％飽和）し、一夜放置後、遠心分離（１００００ｒｐｍ、３０分）して沈殿を集めた。得られた沈殿を少量のＰＢＳに溶解し、この粗酵素液をＴＯＹＯＰＥＡＲＬ  ＨＷ-５５Ｆ（シグマアルドリッチジャパン）カラムクロマトグラフィー及びＴＯＹＯＰＥＡＲＬ  ＤＥＡＥ−６５０Ｍ（シグマアルドリッチジャパン）カラムクロマトグラフィーにかけ、粗酵素液中のキシラナーゼを精製した。なお、キシラナーゼ活性の測定は、ＤＮＳ法  非特許文献１（Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ, ４６，２１０７−２１１５（１９８２））により行い、キシラナーゼ１Ｕは、ｐＨ ５、３０℃の条件下１分間に１μｍｏｌｅのキシロースを生成する酵素量と定義した。
【００１４】
（２）モノクローナル抗体の調製  
褐色腐朽菌のキシラナーゼに対するマウスのモノクローナル抗体の調製は、非特許文献２（Ｗｏｏｄ  Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．２７，２１９−２２８（１９９３））の方法に従った。すなわち、（１）で得た抗原（キシラナーゼ）１０μｇ当り５０％フロイント完全アジュバント０．５ｍｌを加え、これを、６週齢のＢＡＬＢ／ｃマウスに腹腔内（ＩＰ）投与して免疫化した後、２週間の間隔をあけ、同じ抗原のＰＢＳ溶液をＩＰ投与して追加免疫を行った。４週間後に、マウスから採血し、その血清をＥＬＩＳＡ法を用いて試験した。融合の５日前に、最も高い力価を持つマウスに、０．１ｍｌを静脈内投与により接種し、さらに、融合２日前に０．５ｍｌをＩＰ投与により接種した。脾臓を取り出し、収集した脾臓細胞を１０７個のＮＳ−１骨髄種細胞と融合させた。融合細胞をペニシリン、ストレプトマイシン、２０％胎児ウシ血清（Ｇｉｂｃｏ）、ヒポキサンチン、アミノプテリン、チミジンを含むＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ 最小必須培地（ＤＭＥ、Ｇｉｂｃｏ）に懸濁し、滅菌した９６−ｗｅｌｌの細胞培養プレートに添加した。その後、ＥＬＩＳＡとウエスタンブロット法を用いて、抗原に特異的なモノクロナール抗体を産生するハイブリドーマを選択し、このハイブリドーマの培養と培養液からの精製によってモノクロナール抗体を得た。
【００１５】
（３）ポリクローナル抗体の調製  
褐色腐朽菌由来の精製抗原（キシラナーゼ）を１：１の割合でフロイント完全アジュバント（ＤＩＦＣＯ）と混合後、ウサギの複数の部位に皮下注射した。接種から３０日後のウサギに、フロイント完全アジュバント（ＤＩＦＣＯ）と混合した抗原の筋内投与による追加免疫を行い、７〜１０日後に全採血を行い、得られた抗血清を、（１）で得られた抗原を固定化したＣＮＢｒ−活性化セファロース４Ｂレジンと接触させ、その後、洗浄、溶出を行うことでポリクローナル抗体を取得した。
【００１６】
（４）腐朽診断キットの調製   
（３）で得られた褐色腐朽菌由来キシラナーゼ特異ポリクローナル抗体を金コロイドと結合させて標識し、得られたコロイド溶液をガラス繊維でできた不織布に含浸させて乾燥させたものを試薬紙（Ａ）として準備した。次に、ニトロセルロース製の判定紙（Ｂ）に、褐色腐朽菌由来キシラナーゼ特異モノクローナル抗体液（Ｃ）をライン状に吹き付け、乾燥させた。そして、ＰＥＴ製のプラスチック台紙（Ｄ）に判定紙（Ｂ）、試薬紙（Ａ）、抽出液スポット部となるガラス繊維でできた不織布（Ｅ）、吸収帯となるセルロース繊維（Ｆ）を図−1に示した方法で組み合わせ、イムノクロマトグラフィーの原理に基づく腐朽診断キットを準備した。
【００１７】
（５）各種木材試料の調製  
３ｃｍＸ３ｃｍＸ３ｃｍのスギ辺材、ベイツガ材、ヒノキ辺材、マツ辺材、アピトン材を用意し、粉砕機を用いて木粉状に粉砕して木材試料とした。
【００１８】
実施例１：
各種木材の腐朽診断キット判定に及ぼす影響  
（５）で調製した各種木材試料１ｇ当り、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００（シグマアルドリッチジャパン）を含むＰＢＳ（０．８％ ＮａＣｌ を含む２０ｍＭリン酸緩衝液，ｐＨ７．２）１０ｍｌを添加して、１０分間放置することにより、木材試料からの抽出操作を行った。
【００１９】
得られた抽出液と（４）記載の腐朽診断キットを用いて、各種木材の腐朽診断キットの判定に及ぼす影響を調べた。抽出液にポリアリルアミン塩酸塩を１０００ｐｐｍ添加して各種木材の腐朽診断キットの判定に及ぼす影響を調べたものを実施例1として表−１に示した。抽出液に添加物を加えない場合、エチレンジアミン４酢酸塩、塩酸グアニジン、ヨウ化塩、チオシアン酸塩、ヨウ化塩とエチレンジアミン４酢酸塩の混合物をそれぞれ抽出液に添加した場合の結果を比較例１〜６として表−1に示した。
【００２０】
その結果、抽出液すなわち０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を含むＰＢＳに対する添加物が無い場合、試験した全ての木片で擬陽性反応（±〜＋＋）を与え、抽出液にエチレンジアミン４酢酸塩、塩酸グアニジン、ヨウ化塩、チオシアン酸塩、ヨウ化塩とエチレンジアミン4酢酸塩の混合物を加えた場合でもその擬陽性反応は低下しなかったが、抽出液にポリアリルアミン塩酸塩を、抽出液中での濃度が１０００ｐｐｍとなるように添加した場合、木材に由来する擬陽性反応を完全に抑制することが可能であった。
【００２１】
実施例２：
診断キットによる腐朽判定試験  
まず、腐朽木片を調製するために、培養基としてスギ辺材（３ｃｍ×３ｃｍ×１ｃｍ）１０個および純水２０ｍｌを５００ｍｌ容三角フラスコに入れ、綿栓した後オートクレーブ滅菌（１２１℃、３０分）した。なお各スギ辺材木片には予め番号を付し、６０℃、４８時間乾燥後その全乾重量を測定しておいた。そして、こうした培養基を含む三角フラスコを６本用意し、木材腐朽菌であるオオウズラタケ（Fomitopsis palustris）、キチリメンタケ（Gloeophyllum trabeum）、あるいはイドタケ（Coniophora puteana）、木材表面汚染菌であるAspergillus nigerあるいはGliocladium virens の５種類の菌株をそれぞれ接種したもの、菌の接種を行わず無菌状態を保ったものを準備し、これらを２４℃で４週間保温した。
木材腐朽菌が木材に生育すると、木材腐朽菌は木材構成成分を分解し、木材重量が減少する。一般に木材重量減少率５〜１０％の腐朽木材が初期腐朽段階といわれている。木材腐朽度を調べる尺度として木材重量減少率を用いて初期腐朽段階であることを確認することとした。保温期間４週間目にスギ木片４個を取り出し、内２個の木片は菌糸を取り除いた後、６０℃、４８時間乾燥させ、その木片の重量減少率を測定した。残りの２個の木片からは、手動ドリルを用いて小木片状の木材試料を採取し、この木材試料１g当り、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００（シグマアルドリッチジャパン）を含むＰＢＳ（０．８％ ＮａＣｌを含む２０ｍＭ リン酸緩衝液，ｐＨ７．２）１０ｍｌを添加して、１時間放置することにより、木片からの抽出操作を行った。得られた抽出液を用いて（４）記載の腐朽診断キットによる腐朽判定試験を実施した。抽出液にポリアリルアミン塩酸塩を１０００ｐｐｍの濃度で添加した場合の結果を実施例２として表−２に示した。また抽出液にポリアリルアミン塩酸塩を添加しない場合の結果を比較例７として表−２に示した。
その結果、ポリアリルアミン塩酸塩を抽出液に添加した後、イムノクロマトグラフィーを実施することで、重量減少率７〜１０％程度の初期腐朽段階にある腐朽木材を選択的に検出でき、検出感度を低下させることも無く、しかも、木材自体の影響を排除できることが示された。
【００２２】
【表１】
2005241358.tif 000002
【００２３】
【表２】
2005241358.tif 000003
【産業上の利用可能性】
【００２４】
本発明方法は、信頼性が極めて高く、簡便且つ迅速に、木材腐朽菌による木材の初期腐朽を診断する方法であり、広範な建築材、保存処理材などにおける腐朽度の判断に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】イムノクロマトグラフィーの原理に基づく腐朽診断の調整を示した説明図である。
【符号の説明】
【００２６】
Ａ    ガラス繊維不織布製試薬紙
Ｂ    ニトロセルロース製判定紙
Ｃ    キシラナーゼ特異モノクロール抗体の吹き付け部位（判定ライン部位）
Ｄ    ＰＥＴ製台紙
Ｅ    ガラス繊維製抽出液スポット部
Ｆ    セルロース繊維製吸収帯
【図１】
2005241358.tif 000004