(57)【要約】【課題】  安全性に優れ、日常的に長期間にわたり服用・摂取が可能であって、ヒトを含めた動物の感染症の原因となる病原性ウイルス、特にインフルエンザウイルスに対して抗ウイルス作用を有する抗ウイルス剤を提供する。【解決手段】  ラクトパーオキシダーゼ、並びにラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素を有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤であって、特にインフルエンザウイルスに対して抗ウイルス作用を示す抗ウイルス剤。さらに、前記抗ウイルス剤を含有する飲食品又は飼料。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトパーオキシダーゼを有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤。
【請求項２】
ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素を有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤。
【請求項３】
インフルエンザウイルスに対して抗ウイルス作用を有することを特徴とする請求項２に記載の抗ウイルス剤。
【請求項４】
請求項１〜請求項３のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤を含有する飲食品又は飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ラクトパーオキシダーゼを有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤、並びに、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素を有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤に関する。さらに、本発明の他の発明は、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素を有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤を含有する飲食品および飼料に関する。
【背景技術】
【０００２】
自然界には、ヒトや動物に感染症を引き起こす種々の微生物が存在する。それらの微生物は、細菌、マイコプラズマ、リケッチア、クラミジア、真菌、原虫、ウイルスに分類される。ウイルスの遺伝物質はデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）又はリボ核酸（ＲＮＡ）であるが、細菌やその他の微生物がエネルギー代謝系を持ち、従属栄養で増殖するのに対し、ウイルスは、宿主細胞に寄生することによってのみ増殖が可能である（例えば、非特許文献１）。
【０００３】
インフルエンザウイルス感染症は、冬期に流行するが、悪性腫瘍、心疾患、脳血管疾患等を基礎疾患に持つ患者、老人、乳幼児はインフルエンザ感染のハイリスク群であり、命にかかわる重篤な感染につながることも多い。また、ＲＳ（Respiratory Syncytial）ウイルスは、通常、健康な成人には感染しないが、小児では上部呼吸器感染の主要な原因となる。
【０００４】
微生物による感染症の中でも、特に細菌感染症に対しては、有効な抗生物質が開発されており、効果的な治療が行なわれているが、ウイルス感染症には抗生物質が有効に作用しない。抗生物質による化学療法の急速な進歩に比べると、ウイルス感染症の治療薬としての抗ウイルス剤の開発は、現在でもそれほど進んでいないのが現状である。いままでに開発された抗ウイルス剤には、ウイルス核酸の複製をターゲットとする核酸類似体のアシクロビル、アジドチミジン、リバビリン、ノイラミニダーゼ阻害剤のザナミビル（４−グアニジノノイラミン酸）、プロテアーゼ阻害剤のインジナビル等がある。これらの医薬品である抗ウイルス剤は薬効が強いものの、投与による副作用は臨床上の大きな問題を有している。このような状況から、安全で副作用が少なく、長期間にわたって摂取することが可能な抗ウイルス作用を示す有効成分の探索が続けられてきた。
【０００５】
ラクトパーオキシダーゼは、牛乳等の哺乳類の乳汁をはじめ、唾液、涙液、気道粘液等の分泌液に含有される酸化還元酵素である（例えば、非特許文献２）。ラクトパーオキシダーゼは、分子量約８万の蛋白質であり、補酵素として分子内に一つのヘムを含有している（例えば、非特許文献３）。ラクトパーオキシダーゼには、抗菌性、抗酸化活性、抗がん作用、免疫調節作用等の多様な生物機能が報告されており、生体防御に関与する重要な蛋白質であることが明らかにされている（例えば、非特許文献４又は非特許文献５）。
【０００６】
ラクトパーオキシダーゼは、動物の組織や体液に広く含有されるチオシアン酸（ＳＣＮ−）を過酸化水素の存在下で酸化することによって、抗菌物質であるヒポチオシアン酸（ＯＳＣＮ−）を生成させる（例えば、非特許文献６）。ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素（又は過酸化水素を供与できる化合物：本発明においては、過酸化水素供与体と記載することがある。）から構成される反応系は様々な効果を発揮することが明らかにされ、ヘリコバクタピロリ感染の治療用医薬を製造するためのラクトペルオキシダーゼ、ペルオキシドドナーおよびチオシアネートの使用（例えば、特許文献１）、ペルオキシダーゼの予防および治療への応用（例えば、特許文献２）、パーオキシダーゼ−チオシアン酸イオン及び又はハロゲノイオン−過酸化水素系を含む乳酸菌発酵食品の製造法（例えば、特許文献３）、二酵素系歯みがき（例えば、特許文献４）、殺菌剤組成物（例えば、特許文献５）、パーオキシダーゼを含有する乳酸菌スターター、発酵乳製品及びそれらの製造法（例えば、特許文献６）など、産業上の利用に関して、すでに多様な用途への応用が開示されている。さらに、本発明者らによってウレアーゼ不活性化組成物および飲食品（例えば、特許文献７）に関する技術を開示している。
【０００７】
また、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素の三成分の組み合わせは、１型単純ヘルペスウイルス、ＲＳウィルス、エコーウイルス、ヒト免疫不全ウイルス等に対して抗ウイルス活性を示すことが既に明らかにされている（例えば、非特許文献７又は非特許文献８）。
【０００８】
【特許文献１】特表２０００−５０９３６７号公報
【特許文献２】特許第３４７８８２１号公報
【特許文献３】特開昭６２−２２８２２４号公報
【特許文献４】特公平４−２５９２４号公報
【特許文献５】特開平１−６１４２７号公報
【特許文献６】特許第３００７６８６号公報
【特許文献７】特開２００２−２３８５５４号公報
【０００９】
【非特許文献１】医科ウイルス学、改訂第２版、大里外誉郎編、南江堂発行、２０００年、ｐ．１５−２４
【非特許文献２】アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・アンド・クリティカル・ケアー・メディスン（American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine）、アメリカ、第１６６巻、２００２年、ｐ．Ｓ５７−Ｓ６１
【非特許文献３】ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ニュートリション（British Journal of Nutrition）、イギリス、第８４巻、２０００年、ｐ．Ｓ１９−Ｓ２５
【非特許文献４】ライフ・サイエンシーズ（Life Sciences）、イギリス、第４７巻、１９９０年、ｐ．７０３−７０９
【非特許文献５】ジャーナル・オブ・デイリー・リサーチ（Journal of Dairy Research）、イギリス、第６３巻、１９９６年、ｐ．２５７−２６７
【非特許文献６】アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・セル・アンド・モレキュラー・バイオロジー（American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology）、アメリカ、第２０巻、２０００年、ｐ．６４２−６４４
【非特許文献７】アンチバイラル・リサーチ（Antiviral Research）、オランダ、第２６巻、１９９５年、ｐ．１６１−１７１
【非特許文献８】ジャーナル・デ・バイオロジー・ブッカレ（Journal de biologie buccale）、フランス、第１８巻、１９９０年、ｐ．２５１−２５３
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
前記非特許文献７又は非特許文献８には、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素の三成分の組み合わせが、１型単純ヘルペスウイルス、ＲＳウィルス、エコーウイルス、ヒト免疫不全ウイルス等に対して抗ウイルス活性を示すことが記載されていたが、この三成分では未だインフルエンザウイルス感染症の予防法や治療法について十分な検討がなされていなかった。そこで、本発明者らは、インフルエンザウイルス感染症が冬期に流行し、悪性腫瘍、心疾患、脳血管疾患等を基礎疾患に持つ患者、老人、乳幼児がインフルエンザ感染のハイリスク群であることをふまえ、副作用がほとんど無く、汎用性が高い素材である乳蛋白質のラクトパーオキシダーゼに関し、チオシアン酸、及び過酸化水素が有効成分として追加された系について抗ウイルス作用を鋭意検討した結果、インフルエンザウイルスに対して顕著な抗ウイルス作用が確認されたことから、本発明を完成するに至った。
【００１１】
本発明の目的は、安全性に優れ、日常的に長期間にわたり服用・摂取が可能であって、ヒトを含めた動物の感染症の原因となる病原性ウイルス、特にインフルエンザウイルスに対して抗ウイルス作用を有する抗ウイルス剤を提供することである。
【００１２】
本発明の他の目的は、前記抗ウイルス剤を含有する飲食品又は飼料を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
前記課題を解決する本発明の第一の発明は、ラクトパーオキシダーゼを有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤である。
【００１４】
前記課題を解決する本発明の第二の発明は、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素を有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤であって、インフルエンザウイルスに対して抗ウイルス作用を有することを好ましい態様としている。
【００１５】
前記課題を解決する本発明の第三の発明は、前記第一の発明又は第二の発明に記載の抗ウイルス剤を含有する飲食品又は飼料である。
【発明の効果】
【００１６】
本発明は、日常的に摂取可能な安全性の高いラクトパーオキシダーゼを有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤、並びにラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素を有効成分として含有することを特徴とする抗ウイルス剤、さらに、前記抗ウイルス剤を含有する飲食品、又は飼料に関するものであり、本発明によって奏される効果は次のとおりである。
【００１７】
（１）ヒトを含む動物の感染症の原因となる病原性ウイルスの感染性を不活性化する。
（２）ヒトに対する安全性が高く、日常的に摂取することによってウイルスに対する感染防御効果を高めることができる。
（３）ラクトパーオキシダーゼに、チオシアン酸、及び過酸化水素が有効成分として追加された抗ウイルス剤は、インフルエンザウイルスに対して顕著な抗ウイルス作用を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
次に、本発明の好ましい実施形態について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の好ましい実施形態に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更することができるものである。尚、本明細書において百分率は特に断りのない限り質量による表示である。
【００１９】
本発明において、抗ウイルス作用とは、ヒトや動物の感染症の原因となる病原性ウイルスの感染性を不活性化する作用を意味する。本発明において、抗ウイルス剤とは、ヒトや動物に感染症を引き起こす病原性ウイルスの感染性を不活性化させる作用を持つ成分を有する薬剤を意味し、ヒトに対する安全性が高く、日常的に投与することによってウイルスに対する感染防御効果が発揮される特徴を併せ持つ。
【００２０】
本発明の抗ウイルス剤は、ラクトパーオキシダーゼ、若しくは、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素を有効成分とすることが好ましい。尚、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素を有効成分とする抗ウイルス剤において、チオシアン酸及び過酸化水素は、該化合物及び該化合物の薬学的に許容される塩類を有効成分とすることができるとともに、該化合物をもともと含有する食物や該化合物を産生することが可能な食物（本発明においては、これらを総称して供与体；チオシアン酸供与体、過酸化水素供与体、と記載することがある。）を、本発明の抗ウイルス剤の有効成分であるチオシアン酸及び過酸化水素の代わり含有させることも可能である。
【００２１】
前記チオシアン酸及び過酸化水素をもともと含有する食物や該化合物を産生することが可能な食物としては、抗ウイルス剤の形態によって適宜選択することが可能であるが、例えば以下のものが例示される。チオシアン酸に関しては、例えば、哺乳類の乳に含有されるチオシアン酸、並びにキャベツ、ブロッコリー、カリフラワー又はカブ等の１種又は２種以上から選択される野菜に含有されるチオシアン酸等が例示され、様々な形態のチオシアン酸を利用することが可能である。尚、本発明の抗ウイルス剤を飲食品へ含有させる場合、安全性の面を考慮すると、チオシアン酸は野菜から供給されることが好ましく、野菜を磨り潰す又はミキサーなどで粉砕することなどによって液状化して調製された野菜汁について、そのまま又は凍結乾燥法などにより乾燥して得た粉末を使用して、本発明の抗ウイルス剤の有効成分として含有させることが可能である。
【００２２】
また、過酸化水素に関しては、例えば、低い酸化還元電位を持つことによって、酸素分子を還元して過酸化水素を発生させることが可能なヒドロキシヒドロキノン等のポリフェノール、オキシダーゼ反応により過酸化水素を発生させることが可能なグルコースオキシダーゼ及びグルコース、キサンチンオキシダーゼ及びキサンチン等の各組み合わせによるオキシダーゼ・基質混合物、並びに過酸化水素を産生するラクトバシルス属（Lactobacillus）又はストレプトコッカス属（Streptococcus）等の乳酸菌等が例示される。尚、本発明の抗ウイルス剤を飲食品へ含有させる場合、安全性の面を考慮すると、過酸化水素はオキシダーゼ・基質混合物又は乳酸菌から供給されることが好ましい。尚、以下に野菜から産生されるチオシアン酸、乳酸菌から産生される過酸化水素について、それぞれ参考例１及び参考例２として例示する。
【００２３】
〔参考例１〕
キャベツ１ｋｇを家庭用ミキサーにかけ、粉砕して得られた液体を濾紙で濾過することによって野菜汁を作成した。この野菜汁のチオシアン酸濃度をバスらの方法［インディアン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー・アンド・ファーマコロジー（Indian Journal of Physiology and Pharmacology）、第３０巻、第２４１〜２４７ページ、１９８６年］を用いて測定したところ、０．００４８％であった。
【００２４】
〔参考例２〕
乳脂肪含量３．５％、無脂乳固形分含量９．２％の生乳１０ｋｇを均質化し、９０〜９２℃で１０分間加熱殺菌した。約４２℃に冷却し、スターターとして市販のストレプトコッカス・サーモフィルス（Streptococcus thermophilus）およびラクトバシラス・ブルガリカス（Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）の牛乳カルチャーをそれぞれ１００ｇずつ添加した。発酵タンク内で充分に攪拌し、４２〜４５℃で４時間静置して発酵させた。この発酵乳を攪拌しながら５〜８℃に冷却し、次いでホモゲナイザーで均質化することによって均質化発酵乳を得た。この発酵乳の過酸化水素濃度をギリランドの方法［ジャーナル・オブ・デイリー・サイエンス（Journal of Dairy Science）、第５２巻、第３２１乃至３２４頁、１９６９年］で測定したところ、０．０００１４％であった。
【００２５】
本発明の抗ウイルス剤の有効成分であるラクトパーオキシダーゼは、ウシ、ヒト、ヤギ、ヒツジ、ウマ等の哺乳類の初乳、移行乳、常乳、末期乳又はこれらの乳の処理物である脱脂乳、ホエー等から常法（例えば、イオンクロマトグラフィー等）によって分離されたラクトパーオキシダーゼを使用できる。また、より簡便には、市販のラクトパーオキシダーゼ（例えばバイオポール社製等）を使用することができる。また、遺伝子操作に基づく微生物、動物細胞、トランスジェニック動物等によって生産された組換えラクトパーオキシダーゼを、抗ウイルス作用を有する範囲で使用することも可能である。
【００２６】
本発明の抗ウイルス剤における抗ウイルス活性は、常法により、例えば動物培養細胞を用いたプラーク抑制法により測定することができる。例えば、ウイルスを加えない培養系、及びウイルスを加えるが抗ウイルス剤を加えない培養系をコントロールとし、プラーク形成数を測定して、コントロールに対する割合（％）が５０％以下に抑制された場合に、抗ウイルス活性ありと判定することが可能である〔例えば、［アンチバイラル・リサーチ（Antiviral Research）、オランダ、第２２巻、１９９３年、ｐ．１７５−１８８］、［ジャーナル・オブ・ジェネラル・バイロロジー（Journal of General Virology）、イギリス、第７１巻、１９９０年、ｐ．２１４９−２１５５］を参照〕。
【００２７】
本発明の抗ウイルス剤の製剤中に含まれるラクトパーオキシダーゼの量は特に限定されず適宜選択すればよいが、例えば通常製剤中に０．００１質量％以上、好ましくは０．０１〜１０質量％とするのがよい。本発明の製剤の投与方法は特に限定されず、各種製剤形態、患者の年齢、性別、その他の条件、患者の症状の程度等に応じて決定される。本発明の製剤の有効成分の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度、その他の条件等により適宜選択される。通常有効成分としてのラクトパーオキシダーゼの量は、０．０２〜２００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．２〜２０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲となる量を目安とするのが良く、１日１回又は複数回に分けて投与することができる。
【００２８】
本発明の抗ウイルス剤の製剤中に含まれるラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素の量は特に限定されず適宜選択すればよいが、例えば通常製剤中に以下に示す含有量であることが好ましい。すなわち、ラクトパーオキシダーゼの含有量は少なくとも０．０００５質量％以上であることが好ましく、特に好ましくは０．００１〜１質量％である。また、チオシアン酸の含有量は少なくとも０．０００５質量％以上であることが好ましく、特に好ましくは０．００５〜０．０５質量％である。さらに、過酸化水素の含有量は少なくとも０．０００１〜０．２質量％が好ましく、特に好ましくは０．００１〜０．０１質量％である。本発明の製剤の投与方法は特に限定されず、各種製剤形態、患者の年齢、性別、その他の条件、患者の症状の程度等に応じて決定される。本発明の製剤の有効成分の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度、その他の条件等により適宜選択される。通常有効成分として、それぞれ、ラクトパーオキシダーゼの量は、０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０２〜２ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、チオシアン酸の量は、０．０１〜１ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．１〜１ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、過酸化水素の量は、０．００２〜０．４ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０２〜０．２ｍｇ／ｋｇ／日の範囲となる量を目安とするのが良く、１日１回又は複数回に分けて投与することができる。尚、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素を有効成分とする抗ウイルス剤の各成分の含有量が前記範囲であれば、インフルエンザウイルスに対して顕著な抗ウイルス作用を示し、ウイルスが原因の感染症による症状を改善させる作用を有する。
【００２９】
製剤化にあたっては、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、注射剤用溶剤等の添加剤を使用することが可能である。賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビット等の糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α−デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプン等のデンプン誘導体；結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等のセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム等の珪酸塩誘導体；リン酸カルシウム等のリン酸塩誘導体；炭酸カルシウム等の炭酸塩誘導体；硫酸カルシウム等の硫酸塩誘導体等が挙げられ、結合剤としては、例えば、上記賦形剤の他、ゼラチン；ポリビニルピロリドン；マグロゴール等が挙げられ、崩壊剤としては、例えば、上記賦形剤の他、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン等の化学修飾されたデンプン又はセルロース誘導体等が挙げられ、滑沢剤としては、例えば、タルク；ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等のステアリン酸金属塩；コロイドシリカ；ビーガム、ゲイロウ等のワックス類；硼酸；グリコール；フマル酸、アジピン酸等のカルボン酸類；安息香酸ナトリウム等のカルボン酸ナトリウム塩；硫酸ナトリウム等の硫酸類塩；ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム等のラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物等の珪酸類；デンプン誘導体等が挙げられ、安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール等のアルコール類；塩化ベンザルコニウム；無水酢酸；ソルビン酸等が挙げられ、矯味矯臭剤としては、例えば、甘味料、酸味料、香料等が挙げられ、注射剤用溶剤としては、例えば、水、エタノール、グリセリン等が挙げられる。
【００３０】
本発明の抗ウイルス剤の投与経路としては、例えば、経口投与、経腸投与等の非経口投与が挙げられる。投与剤形としては、例えば、噴霧剤、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、シロップ剤、乳剤、座剤、注射剤、軟膏、テープ剤等が挙げられる。また、本発明の抗ウイルス剤は、飲食品、飼料等に配合して投与することもできる。
【００３１】
本発明の抗ウイルス剤を飲食品に含有させる場合は、例えば、本発明の抗ウイルス剤の有効成分に、デキストリン、デンプン等の糖類；ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、アラビアゴム等の多糖類；大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類等を配合することにより飲食品を製造できる。また、本発明の抗ウイルス剤を含有する飲食品の形態としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物、パン；経腸栄養食；機能性食品等が挙げられる。
【００３２】
本発明の抗ウイルス剤を飼料に含有させる場合は、例えば、本発明の抗ウイルス剤の有効成分に、トウモロコシ、小麦、大麦、ライ麦、マイロ等の穀類；大豆油粕、ナタネ油粕、ヤシ油粕、アマニ油粕等の植物性油粕類；フスマ、麦糠、米糠、脱脂米糠等の糠類；コーングルテンミール、コーンジャムミール等の製造粕類；魚粉、脱脂粉乳、ホエー、イエローグリース、タロー等の動物性飼料類；トラル酵母、ビール酵母等の酵母類；第三リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の鉱物質飼料；油脂類；単体アミノ酸；糖類等を配合することにより飼料を製造できる。本発明の抗ウイルス剤を含有する飼料の形態としては、ペットフード、家畜飼料、養魚飼料等が挙げられる。
【００３３】
尚、本発明の飲食品又は飼料は、以下に示す効能を表示した飲食品又は飼料とすることができる。すなわち、抗ウイルス作用等としての効能、を表示することができる。ここに、「表示」とは、前記効能を需要者に対して知らしめる行為を意味し、例えば、本発明の飲食品又は飼料の商品若しくは商品の包装・広告等に前記効能を付する行為、付したものを譲渡、引き渡し、展示等をする行為等があるが、特に特定保健用食品〔健康増進法施行規則（平成１５年４月３０日、日本国厚生労働省令第８６号）の第１２条第１項第５号参照〕として表示する態様が好ましい。
【００３４】
本発明の抗ウイルス剤は、単独で使用することも可能であるが、その他の抗ウイルス剤と併用して使用してもよい。併用することによって、抗ウイルス作用を高めることができる。併用する抗ウイルス剤は、本発明の組成物中に有効成分として含有させてもよいし、本発明の抗ウイルス剤中には含有させずに別個の薬剤として組み合わせて商品化してもよい。
【００３５】
次に試験例を示して本発明を詳細に説明する。
［試験例１］
本試験は、本発明の抗ウイルス剤の有効成分であるラクトパーオキシダーゼの病原性ウイルスに対する抗ウイルス作用を調べるために行った。
【００３６】
（１）試料の調製
ラクトパーオキシダーゼ（シグマ社製）を、精製水に１０ｍｇ／ｍｌの濃度に溶解し、ポアサイズ０．２μｍのフィルターで濾過滅菌して試験試料１を調製した。供試ウイルスとして、パラミクソウイルス科（エンベロープを有する一本鎖ＲＮＡウイルス）に属するＲＳウイルスＡ２株を使用した。また、対照ウイルスとして、オルソミクソウイルス科（エンベロープを有する一本鎖ＲＮＡウイルス）に属するインフルエンザウイルスＡ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）株を使用した。培養動物細胞として、ＲＳウイルスにはＨｅｐ２細胞、インフルエンザウイルスにはＭＤＣＫ細胞をそれぞれ使用し、血清添加イーグルＭＥＭ培地（日水製薬社製）を用いて直径６０ｍｍのディッシュ中で単層になるまで培養した。
【００３７】
（２）試験方法
ＲＳウイルスは、リン酸緩衝生理食塩水０．２ｍｌ中に１００プラーク形成単位（以下、ＰＦＵと略記する。）となるように添加した。インフルエンザウイルスは、１％ウシ血清アルブミン添加リン酸緩衝生理食塩水０．２ｍｌ中に１００ＰＦＵとなるように添加した。これらの溶液に、試験試料１を２μｌ（終濃度１００μｇ／ｍｌ）添加して、３７℃で１時間保温した。コントロールには何も添加せず、３７℃で１時間保温した。これらのウイルス処理液の全量を直径６０ｍｍのディッシュで単層に培養した動物細胞に添加し、３７℃で１時間保温した。
【００３８】
次に、リン酸緩衝生理食塩水でディッシュを洗浄した。ＲＳウイルス処理液を添加した培養細胞は、０．８％メチルセルロース添加イーグルＭＥＭ培地５ｍｌを重層して５日間培養した。インフルエンザウイルス処理液を添加した培養細胞は、０．８％アガロース添加イーグルＭＥＭ培地５ｍｌを重層して３日間培養した。培養終了後の単層培養動物細胞は、５％ホルマリン溶液で固定し、０．０３％メチレンブルー溶液で染色した。単層培養動物細胞に検出されたプラーク形成数を測定し、試験試料１のコントロールに対する割合（％）を［アンチバイラル・リサーチ（Antiviral Research）、オランダ、第２２巻、１９９３年、ｐ．１７５−１８８］、［ジャーナル・オブ・ジェネラル・バイロロジー（Journal of General Virology）、イギリス、第７１巻、１９９０年、ｐ．２１４９−２１５５］に記載の方法で算出した。なお、これらの実験操作は、２回実施して平均値を算出した。
【００３９】
（３）試験結果
本試験の結果は表１に示すとおりである。ラクトパーオキシダーゼのコントロールに対するプラーク形成率は、ＲＳウイルスに対して４９．４％を示した。また、対照ウイルスであるインフルエンザウイルスに対しては、８２．９％であった。したがって、ラクトパーオキシダーゼは、ＲＳウイルスに対して抗ウイルス作用を持つことが明らかになった。
【００４０】
【表１】
2005232133.tif 000002
【００４１】
［試験例２］
本試験は、本発明の抗ウイルス剤の有効成分であるラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素について、インフルエンザウイルスに対する抗ウイルス作用を調べるために行った。
【００４２】
（１）試料の調製
ラクトパーオキシダーゼ（シグマ社製）は精製水に１ｍｇ／ｍｌの濃度に溶解した。チオシアン酸ナトリウム（ナカライテスク社製）は精製水に１ｍｇ／ｍｌの濃度に溶解した。カタラーゼ（和光純薬社製）はリン酸緩衝生理食塩水に０．２ｍｇ／ｍｌの濃度に溶解した。これらの溶液は、それぞれポアサイズ０．２μｍのフィルターで濾過滅菌した。３０％過酸化水素水（和光純薬社製）は精製水で１００倍に希釈した。供試ウイルスとして、インフルエンザウイルスＡ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）株を使用した〔アンチバイラル・リサーチ（Antiviral Research）、オランダ、第２２巻、第１７５〜１８８ページ、１９９３年〕。ＭＤＣＫ細胞は、血清添加イーグルＭＥＭ培地（日水製薬社製）を用いて直径６０ｍｍのディッシュ中で単層になるまで培養した。
【００４３】
（２）試験方法
インフルエンザウイルスは、２％ウシ血清アルブミン添加リン酸緩衝生理食塩水０．５ｍｌ中に５００ＰＦＵとなるように添加した。試験群Ａは、ウイルス溶液０．５ｍｌに、ラクトパーオキシダーゼ溶液８μｌ（終濃度０．０００８％）、チオシアン酸ナトリウム溶液５３．５８μｌ（終濃度０．００５％）、リン酸緩衝生理食塩水３９１．７μｌを添加して混合し、過酸化水素溶液６．８μｌ（終濃度０．００２％）を添加して全量を１ｍｌとした。試験群Ｂは、ウイルス溶液０．５ｍｌに、チオシアン酸ナトリウム溶液５３．５８μｌ、リン酸緩衝生理食塩水３９９．７μｌを添加して混合し、過酸化水素溶液６．８μｌを添加して全量を１ｍｌとした。試験群Ｃは、ウイルス溶液０．５ｍｌに、ラクトパーオキシダーゼ溶液８μｌ、リン酸緩衝生理食塩水４４５．２μｌを添加して混合し、過酸化水素溶液６．８μｌを添加して全量を１ｍｌとした。試験群Ｄは、ウイルス溶液０．５ｍｌに、ラクトパーオキシダーゼ溶液８μｌ、チオシアン酸ナトリウム溶液５３．５８μｌ、リン酸緩衝生理食塩水３９８．５μｌを添加して混合し、全量を１ｍｌとした。
【００４４】
コントロールには、ウイルス溶液０．５ｍｌにリン酸緩衝生理食塩水０．５ｍｌを添加して全量を１ｍｌとした。これらの溶液を３７℃で１時間インキュベートした後、カタラーゼ溶液４０μｌを添加して混合した。このウイルス処理液０．２ｍｌを直径６０ｍｍのディッシュで単層に培養したＭＤＣＫ細胞に添加し、３７℃で１時間インキュベートした。次に、リン酸緩衝生理食塩水でディッシュを洗浄し、０．８％アガロース添加イーグルＭＥＭ培地５ｍｌを重層して３日間培養した。培養終了後の細胞は、５％ホルマリン溶液で固定し、０．０３％メチレンブルー溶液で染色した。単層培養動物細胞に検出されたプラーク形成数を測定し、各試験群のコントロールに対する割合（％）を試験例１と同様の方法で算出した。なお、これらの実験操作は、２回実施して平均値を算出した。
【００４５】
（３）試験結果
本試験の結果は表２に示すとおりである。コントロールに対するプラーク形成率は、試験群Ａ：０．３％、試験群Ｂ：１０７．９％、試験群Ｃ：９７．８％、試験群Ｄ：１０６．３％であった。したがって、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素の三成分はインフルエンザウイルスに対して抗ウイルス作用を示すことが明らかになった。これらの三成分のうち、いずれか二成分を添加した場合には抗ウイルス作用は確認されず、また試験例１の試験結果から明らかなとおり、ラクトパーオキシダーゼのみ（一成分）では、インフルエンザウイルスに対して抗ウイルス作用は確認されていないことから、ラクトパーオキシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素の三成分を有効成分とする本発明の抗ウイルス剤は、インフルエンザウイルスに対して顕著な抗ウイルス作用を示すことが判明した。
【００４６】
なお、過酸化水素に替えて、過酸化水素供与体であるグルコースおよびグルコースオキシダーゼを使用した場合にも同様の抗ウイルス作用が確認された。
【００４７】
【表２】
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【００４８】
次に実施例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００４９】
ラクトパーオキシダーゼ（バイオポール社製）５０ｇ、ラクチュロース粉末（森永乳業社製）１００ｇ、マルツデキストリン（松谷化学工業社製）７３５ｇ、脱脂粉乳（森永乳業社製）８５ｇ、ステビア甘味料（三栄源エフ・エフ・アイ社製）１ｇ、ヨーグルト・フレーバー（三栄源エフ・エフ・アイ社製）５ｇ、グリセリン脂肪酸エステル製剤（理研ビタミン社製）２４ｇの各粉末を添加して均一に混合し、打錠機（畑鉄鋼所社製）を使用して、錠剤１錠当り０．５ｇとし、１２錠／分の打錠速度、９．８ＫＰａの圧力で前記混合粉末を連続的に打錠し、ラクトパーオキシダーゼ含有タブレット１８００錠（約９００ｇ）を製造した。尚、製造した錠剤はＲＳウイルスに対して抗ウイルス作用を有することが確認された。
【実施例２】
【００５０】
乳脂肪含量３．５％、無脂乳固形分含量９．２％の生乳１０ｋｇを均質化し、９０〜９２℃で１０分間加熱殺菌した。約４２℃に冷却し、スターターとして市販のストレプトコッカス・サーモフィルス（Streptococcus thermophilus）およびラクトバシラス・ブルガリカス（Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）の牛乳カルチャーをそれぞれ１００ｇずつ添加した。発酵タンク内で充分に攪拌し、４２〜４５℃で４時間静置して発酵させた。この発酵乳を攪拌しながら５〜８℃に冷却し、次いでホモゲナイザーで均質化することによって均質化発酵乳を調製した。次に、１７％のグラニュウ糖（東洋精糖社製）液５ｋｇにペクチン（三栄源ＦＦＩ社製）６０ｇを添加して、９０〜９２℃で１０分間殺菌した後、５〜８℃に冷却して糖液を調製した。また、キャベツ３ｋｇを家庭用ミキサーにかけて濾紙（ワットマン社製）で濾過し、９０〜９２℃で１０分間殺菌した後、５〜８℃に冷却して野菜汁９００ｇを調製した。更に、ラクトパーオキシダーゼ０．８ｇ（バイオポール社製）を水４０ｇに溶解し、メンブラン・フィルター（ミリポア社製）で無菌濾過してラクトパーオキシダーゼ溶液を得た。これらの方法で調製した均質化発酵乳、糖液、野菜汁、及びラクトパーオキシダーゼ溶液のそれぞれ全量をタンク内で十分に混合し、紙容器に充填した後、密封してドリンクヨーグルトを製造した。尚、製造したドリンクヨーグルトについて、試験例２の系にてインフルエンザウイルスに対する抗ウイルス作用を検討した結果、該ドリンクヨーグルトはインフルエンザウイルスに対して抗ウイルス作用を有することが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００５１】
本発明の抗ウイルス剤により、ヒトに対する安全性が高く、ヒトを含む動物の感染症の原因となる病原性ウイルスの感染性を不活性化することが可能であり、日常的に摂取することによってウイルスに対する感染防御効果を高めることができる。また、インフルエンザウイルスに対して顕著な抗ウイルス作用を示すので、既存の抗ウイルス剤に代わるインフルエンザウイルス治療剤を提供することが可能である。