(57)【要約】【課題】  試料中に含まれるコリンエステラーゼ活性阻害の性質を示す残留農薬の測定方法であり、簡便、迅速かつ選択性よく農薬を測定する方法を提供する。【解決手段】  農薬を含む試料溶液中に、予めコリンエステラーゼ、コリンオキシダーゼ及び発色試薬などの試料中に含まれるコリンエステラーゼに対して特異性を示す基質及び遊離コリンが過酸化水素に変換される反応量を把握するための試薬をあらかじめ添加して、酵素の安定化と試料中に含まれるコリンエステラーゼに対して特異性を示す基質及び遊離コリンを過酸化水素に変換するに十分な時間をかけてインキュベートを行なった後、コリンエステラーゼに対して特異性を示す基質溶液を添加し、その後、添加基質のコリンエステラーゼによる加水分解によって発生する過酸化水素の変化量を着色度合いによって測定した結果と、理想溶液中で同様のシーケンスに従って過酸化水素の変化量を測定した結果との比較から、試料溶液中に含まれる残留農薬濃度を算出する。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
コリンエステラーゼの活性阻害を利用した農作物中に含まれるコリンエステラーゼ阻害性農薬を測定する方法において、農薬を含む試料溶液中に、コリンエステラーゼ、コリンオキシダーゼ及び発色試薬などの反応量を把握するための試薬を予め添加して、酵素の安定化と本測定手法における妨害物質であって試料中に既に含まれている、コリンエステラーゼに対して特異性を示す基質及び遊離コリンを過酸化水素に変換するに十分な時間をかけてインキュベートを行った後、コリンエステラーゼに対して特異性を示す基質溶液を添加し、その後、添加基質のコリンエステラーゼによって加水分解される量を、何らかの手段を用いて測定した結果と、理想溶液中で同様のシーケンスに従って測定した結果との比較から、試料溶液中に含まれる残留農薬濃度を算出することを特徴とする残留農薬測定方法。
【請求項２】
前記インキュベートにおける前記コリンオキシダーゼの添加量は、比活性測定でヨウ化アセチルチオコリンがアセチルコリンエステラーゼにより分解される量（α）と比活性測定で塩化コリンがコリンオキシダーゼにより分解される量（β）とのモル比（β／α）が５０乃至１００となるように、前記コリンエステラーゼの添加量よりも過剰に添加してなる請求項１記載の残留農薬測定方法。
【請求項３】
前記コリンエステラーゼに対して特異性を示す基質は、酵素がアセチルコリンエステラーゼである場合にはヨウ化アセチルコリンとしてなる請求項１又は２に記載の残留農薬測定方法。
【請求項４】
前記コリンエステラーゼに対して特異性を示す基質は、酵素がブチリルコリンエステラーゼである場合にはヨウ化ブチリルコリンとしてなる請求項１から３のいずれかに記載の残留農薬測定方法。
【請求項５】
前記ヨウ化アセチルコリンの最終濃度が０．１〜０．３ｍＭである請求項３記載の残留農薬測定方法。
【請求項６】
測定系におけるｐＨをコリンエステラーゼ活性の至適ｐＨに調整するための緩衝液と、試料に当初から含まれるイオン種が測定系に混入した場合のイオン強度変化の影響を緩和するための多量の電解質と、を含む理想溶液を使用してなる請求項１又は２記載の残留農薬測定方法。
【請求項７】
試料の抽出乾固成分を、ｐＨ６程度の弱酸性溶液で溶解した後、前記理想溶液中に含まれる成分を最終濃度で同じになるように調整した請求項６記載の残留農薬測定方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、農作物などの試料中に含まれるコリンエステラーゼ活性阻害能を有する残留農薬を測定するための残留農薬測定方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
有機リン系農薬やカルバメート系農薬は、有機塩素系の農薬等と比較して、自然界で分解され易いため、殺虫剤、殺菌剤、除草剤として古くから広く使用されている。しかしながら、これらの中でも有機リン系殺虫剤やカルバメート系殺虫剤とその代謝生成物は、コリンエステラーゼ活性阻害を引き起こす典型的な酵素毒であり、動物体内に蓄積されると神経系を著しく害するため、食品危険度管理又は環境汚染管理的な見地から、安全性確保のため、これら農薬の検査を行う機会が近年増加している。
【０００３】
従来、上記殺虫剤等の検出には、ガスクロマトグラフやガスクロマトグラフ質量分析計等の精密分析装置を用いて行っている。しかしながら、このような分析装置を用いた検出方法は、サンプル中に含まれている成分を網羅的に、精度良く検出できるものの、測定装置が高価であり、測定操作が煩雑で熟練を要し、時間がかかる。また、測定毎に機器校正のため農薬を使用せざるを得ない等の問題もある。
【０００４】
一方、前述したように、有機リン系殺虫剤やカルバメート系殺虫剤が典型的なコリンエステラーゼの阻害性物質であることから、農薬の共存によるコリンエステラーゼの酵素触媒能（加水分解速度）低下を捉え、間接的に、これら農薬の共存量を算出する簡便な農薬の検査方法がある。
【０００５】
コリンエステラーゼの加水分解速度を測定する方法には、例えばコリンエステラーゼを単独使用し、アセチルチオコリンやブチリルチオコリンを基質に選択して反応生成物が電気化学的に活性であるチオコリンに変換し、未修飾の電極を用いて電解酸化検出する方法や（例えば、非特許文献１参照。）、チオコリンをチオール官能性試薬により発色して吸光度検出測定する方法がある（例えば、特許文献１参照。）。
【０００６】
しかし、前者の方法では、グラファイト電極を用いた場合、チオコリンの電解酸化には700mV vs. Ag/AgClという正の電位を印加する必要があり、この印加電位では、測定液に含まれるチオコリン以外の成分も酸化する可能性があり、しかも、チオコリンは溶存酸素などにより容易に酸化されるためコリンエステラーゼ活性を正確に求めることはできない。後者の方法では、試料溶液中の濁度や着色の影響、さらに発色剤、着色物が反応性に富むという欠点を有する。
【０００７】
そこで、コリンエステラーゼの触媒作用による基質の加水分解速度を直接測定しにくい問題を克服するために、コリンエステラーゼの後続にコリンオキシダーゼを共使用することにより、コリンエステラーゼ触媒活性により生成したコリンをより簡便かつ選択的に検出できる過酸化水素に変換し、種々の検出手段により測定する多くの方法が技術提案されてきた。
【０００８】
しかし、コリンオキシダーゼの基質であるコリンは検査対象となる植物組織中に遊離、又は結合物の形（例えば、レシチン）として広く分布し、植物成長調整剤としても散布されるため、測定溶液中に共存する遊離コリンは過酸化水素に変換され、測定ノイズに関与し、コリンオキシダーゼを共使用することの弊害があった。
【０００９】
【非特許文献１】Ｒ．Buck．Ｅlectrochim.Acta,36,p243（1991）
【特許文献１】特許第2927221号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、上記問題点にかんがみ、測定ノイズ成分である試料中に含まれる遊離コリンの影響を極力減じて測定することができ、ミカエリス−メンテンス型酵素の動力学的処理により農作物等に含まれるコリンエステラーゼ阻害性農薬の濃度算出が容易となるための方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記課題を解決するため本発明は、測定前段階において試料溶液中にコリンエステラーゼとコリンオキシダーゼとを添加、一定時間のインキュベートを行うことより遊離コリンを過酸化水素へ変換し、コリンエステラーゼ特異性基質を添加した後の過酸化水素濃度の変化率を捉える方法を講じた。これにより、遊離コリンの測定精度に及ぼす影響の防止と、ミカエリス−メンテンス型酵素の動力学的処理による容易な濃度算出が可能となった。
【００１２】
すなわち、本発明は、以下のような構成から成る。
（１）コリンエステラーゼ阻害性農薬の共存により変化するコリンエステラーゼ活性は、コリンエステラーゼとコリンオキシダーゼとの共役酵素反応によるコリンエステラーゼ特異性基質の分解に起因する過酸化水素を検出する方法で測定を行い、かつ測定溶液中に少なくともコリンエステラーゼ、コリンオキシダーゼ、緩衝溶液、及びコリンエステラーゼ特異性基質を含むことを特徴とするコリンエステラーゼ阻害性農薬の測定方法とした。
（２）過酸化水素の発色反応系を用いた吸光度測定などによる前記過酸化水素の検出を行うことによりコリンエステラーゼ阻害性農薬を定量する（１）記載の測定方法とした。
（３）前記コリンエステラーゼは、厳密には、アセチルコリンエステラーゼ、又はブチリルコリンエステラーゼであり、該酵素の由来は特に限定されないが、好適には電気ウナギ由来のアセチルコリンエステラーゼである（１）記載のコリンエステラーゼとした。
（４）アセチルコリンエステラーゼ、又はブチリルコリンエステラーゼに対して基質特異性を示すものならば、アセチルチオコリン及びブチリルチオコリンを選択しない限りにおいて、特に限定されないが、好適にはヨウ化アセチルコリンである（１）記載のコリンエステラーゼ特異性基質とした。
（５）被測定対象物質が、厳密には、アセチルコリンエステラーゼ、又はブチリルコリンエステラーゼに対して高い阻害能を有するN−メチルカルバメート系殺虫剤、ホスフェート型有機リン系殺虫剤、又はチオノ型有機リン系殺虫剤、ジチオ型有機リン系殺虫剤を酸化処理して得られるホスフェート型の酸化生成物である（１）記載のコリンエステラーゼ阻害性農薬とした。
（６）コリンオキシダーゼ、コリンエステラーゼおよび必要により過酸化水素量を測定するための反応試薬は順不同で先に添加し、一定時間経過後、最後に、コリンエステラーゼ特異性基質を添加する順序で行われる（１）記載の測定溶液中への酵素、基質の添加とした。
（７）コリンオキシダーゼ活性がコリンエステラーゼ活性と比較して大となるよう添加される（１）記載の該酵素の添加量とした。
（８）前記（６）の添加順序を踏むことにより測定溶液中へ混在する遊離コリンの過酸化水素への変換を行い、測定前段階における過酸化水素濃度を安定させ、コリンエステラーゼ特異性基質を添加した後の過酸化水素濃度の変化率（時間微分値）を捉え、同様の過程を踏み、理想溶液中で測定した値との比較からコリンエステラーゼ阻害性農薬による活性阻害率を算出する方法とした。
（９）前記（８）記載の活性阻害率と予め測定したコリンエステラーゼ阻害性農薬のコリンエステラーゼ阻害能を表す定数：Ｋｉ、のデータベースとをミカエリス−メンテンス型酵素の動力学的計算に代入することで、測定溶液中に含まれるコリンエステラーゼ阻害性農薬濃度の換算を行うことを特徴とするコリンエステラーゼ阻害性農薬の定量方法とした。
（１０）前記（８）記載の理想溶液は、測定を行うために十分な酵素活性が得られ、かつ被測定対象物質を加水分解しないｐＨに保つための緩衝溶液と、イオン強度を調整するために添加する多量の無関係塩との組成とした。
（１１）前記（１）記載の緩衝溶液は、前記（８）記載の理想溶液と同組成、かつ同量とした。
【発明の効果】
【００１３】
以上のように本発明によれば、コリンエステラーゼの活性阻害を利用した測定溶液中に含まれるコリンエステラーゼ阻害性農薬の測定を簡便、かつ迅速に行うための方法を提供するものであって、従来、コリンエステラーゼとコリンオキシダーゼとを共役した場合問題であった試料溶液中に含まれる遊離コリンの測定精度に及ぼす影響のキャンセルを可能にする、簡易な優れた測定方法である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下、本発明を実施するための最良の形態について、図面を参照して詳細に説明する。実施する形態は後述の一例にとらわれるものではなく、過酸化水素の発生量をリアルタイムにセンシングできる手法であればよい。
【００１５】
図１は本発明の残留農薬測定方法を実施するための測定装置の構成を示す概略側面図であり、図２は測定装置のセンサ部の使用状態を示す側面図であり、図３は測定装置の概略平面図であり、図４は測定装置に使用する洗浄槽の拡大説明図であり、図５は測定装置のセンサ部の断面図であり、図６は測定装置の制御部を示す概略ブロック図である。
【００１６】
図１、図２及び図３において本発明の残留農薬測定方法を実施するための装置は、過酸化水素生成に伴う発色による透過光量変化を検知する（捉える）センサ５と、試料溶液中に酵素と基質を添加して酵素活性阻害反応を起こさせる反応槽９と、該反応槽９へ浸漬したセンサ５を洗浄すると同時にリファレンス用の透過光量をチェックする洗浄槽１６と、理想溶液中での透過光量変化をチェックするための比較反応槽１５と、前記センサ５を反応槽９、洗浄槽１６及び比較反応槽１５へ浸漬させるためのセンサ移動手段２と、反応槽９，１５に基質溶液を添加する試薬添加ノズル７とから主要部が構成される。
【００１７】
前記吸光度を測定するセンサ５は、図５のような形状をしており、着色溶液が入る溝
３９の両端は光が通りかつ密閉するためのガラス窓３５ａ，３５ｂがあり、ランプ３６の光がバンドパスフィルタ３７、光ファイバー３３ａ、ミラー３４ａ及びガラス窓３５ａを介して溶液中に侵入し、溶液中を通過した光はガラス窓３５ｂ、ミラー３４ｂ及び光ファイバー３３ｂを介してディテクタ３８に受光される構造となっている。バンドパスフィルタは発色物質の最大吸収波長付近にピーク透過波長を持つもので、シリコンフォトダイオードなどの安価な素材で形成されるディテクタ３８により透過光量が測定される。このセンサ５の迷光は装置全体を遮光することにより実現される。そして、該センサ５の検出部の他端側には、センサ５を支持するセンサ固定体４が設けられ、該センサ固定体４は垂直方向に移動するセンサ昇降装置３に支持されている。該センサ昇降装置３は、ステップモータなどの駆動源と、センサ５の位置センサ１２とにより形成され、ステップモータの正・逆回転によりセンサ５を液面に浸漬することと、センサ５を液面から引き上げることとを制御することができる。また、前記センサ昇降装置３には、前記センサ固定体４を水平方向に移動するために、回転アーム２の一端が接続されている。該回転アーム２の他端には、回転アーム２を平面視で所定角度回転させるアーム回転モータ１と、回転アーム２の水平位置センサ１４が設けられている。該アーム回転モータ１のステップ状の正・逆回転及び水平位置センサ１４により、反応槽９、洗浄槽１６及び比較反応槽１５の上方にセンサ５を随時移動することができる。
【００１８】
前記反応槽９は、試料溶液を入れるとともに、反応液１０となるコリンオキシダーゼ、コリンエステラーゼ及びコリンエステラーゼ特異性基質、発色試薬（例えば４−アミノアンチピリンとフェノールとペルオキシターゼの混合液）を添加して、農薬共存下での過酸化水素生成反応を行う。また、各反応槽底部には攪拌回転子１１ａが挿入されており、マグネットスターラ（図示せず）により撹拌される。前記比較反応槽１５には、初期段階ではコリンオキシダーゼ、コリンエステラーゼおよび発色試薬のみ添加されており、任意のタイミングでコリンエステラーゼ特異性基質を添加し、その溶液の吸光度変化を観察する。前記洗浄槽１６には、センサ５のガラス窓面を洗浄し、リファレンス用の投光量を測定するための測定波長域に吸収を持たない無関係塩を含む緩衝溶液が入れられている。該洗浄槽には洗浄水１９を適時新鮮で清浄な液に交換できるように、槽側壁下部に洗浄水導入管１７が、槽底壁上部に洗浄水排出管１８がそれぞれ設けられている（図４参照）。
【００１９】
反応槽９及び比較反応槽１５に基質溶液を添加する試薬添加ノズル７は、前記回転アーム２先端に垂下したノズル支持棒６と、該ノズル支持棒６の先端に固定したノズル支持体１３によって支持されており、両反応槽９，１５から飛散させることなく試薬を添加させることができる。前記試薬添加ノズル７にはチューブ８が接続されており、図示しない薬液タンクから試薬が定量供給される。また、試薬添加ノズル７と該試薬添加ノズルに接続するチューブ８（８ａ，８ｂ）は試薬ごとに複数個設けるのが好ましく、例えば、反応液となるコリンオキシダーゼ、コリンエステラーゼ、コリンエステラーゼ特異性基質及び発色試薬ごとに専用のものを備えるのがよい。
【００２０】
回転アーム２の代わりに各槽の測定ステージを回転駆動することにより、反応槽９、洗浄槽１６及び比較反応槽１５の位置を順次入れ替えて測定を実施しても良い。この場合、回転アーム２の機械的な動きの負担を軽減することができる。
【００２１】
図６は測定装置の制御部を示す概略ブロック図である。前記センサ５を主要部とする測定部２７は、信号処理回路２５を介して制御パソコン２３に接続され、該パソコン２３に接続されたプリンター２４などの表示器により農薬濃度を測定することができる。符号２８は洗浄水供給管３２に接続されたウォーターポンプであって、前記洗浄槽１６に洗浄水１９を供給できるよう、コントローラ３０を介してパソコン２３により制御される構成となっている。また、符号２９は試薬類供給チューブ３１に接続された分注器であって、前記反応槽９，１５に発色試薬を定量供給させるように、コントローラ３０を介してパソコン２３により制御される構成となっている。
【００２２】
以下、本発明のコリンエステラーゼ阻害性残留農薬の測定を行う工程について、順に追って説明する。まず、第一工程は検査対象となる農作物から抽出を行い、大雑把なクリーンアップ操作により調製した農薬を含む試料溶液の入った反応槽９に、コリンエステラーゼ溶液とコリンオキシダーゼ溶液と前記発色試薬を添加した後、該試料溶液を一定時間放置することより構成される。また、比較反応槽１５には同濃度のコリンエステラーゼ溶液とコリンオキシダーゼ溶液と前記発色試薬のみで構成しておく。該第一工程の間、センサ５は洗浄槽１６中での待機状態にあり、リファレンス光量を測定しておく。該第一工程において、反応槽９の該試料溶液中に含まれる測定ノイズとなる遊離コリンがコリンオキシダーゼの触媒作用により順にベタインアルデヒド、ベタインに分解され、副生成物として過酸化水素が生成する。この時生成した過酸化水素が前記発色試薬により分解、発色することにより測定前の透過光量が安定化する。また、該試料溶液中に含まれる被測定農薬とコリンエステラーゼとの接触を行うことにより、コリンエステラーゼ阻害を促進し、測定感度を高める効果が得られる。さらに、該試料溶液中に含まれる該添加酵素類に対して非特異的な活性阻害を行う物質と該添加酵素類とを接触させることにより、該添加酵素類の安定化も図れる。
【００２３】
前記第一工程における添加酵素量は、コリンオキシダーゼの方がコリンエステラーゼよりも過剰であり、コリンオキシダーゼ市販品（和光純薬社製、カタログＮｏ．０３７−１４４０１）とアセチルコリンエステラーゼ市販品（シグマ社製、カタログＮｏ．Ｃ２８８８）との組み合わせで行う場合においては、製品表示してある比活性を基にして言えば、測定時における最終濃度で、コリンオキシダーゼは０．５Ｕ／ｍｌ以上、コリンエステラーゼは０．００５Ｕ／ｍｌ以下となるよう添加する。該酵素添加量比率により、コリンエステラ−ゼ特異性基質の分解が全反応での律速段階にすることが可能となり、コリンエステラーゼとコリンオキシダーゼとの共役酵素反応によるコリンエステラーゼ活性測定が可能となる。
【００２４】
また、比較反応槽１５および洗浄槽１６中に入れられている無関係塩の強電解質を含む緩衝溶液は、反応槽９中に入れられている該試料溶液中においても同濃度で添加してある。センサ５が各槽間を移動した場合の、環境変化による測定値への影響を緩和することが可能となる。
【００２５】
第二工程では、反応槽９中及び比較反応槽１５中にコリンエステラ−ゼ特異性基質の添加を行った後、溶液攪拌条件下で一定時間の放置を行うことで構成される。また、該第二工程の間、センサ５は反応槽９、比較反応槽１５及び洗浄槽１６の間を一定時間毎に各槽でのデータ採取（図７参照）のため移動させる。そして、反応槽９中及び比較反応槽１５中において、コリンエステラーゼの活性度合いにより過酸化水素が生成され、その過酸化水素が発色試薬により分解されて発色量が増加する。この発色量の増加速度は過酸化水素の生成速度に追従するのである。
【００２６】
また、該第二工程におけるコリンエステラ−ゼ特異性基質は前記第一工程でアセチルコリンエステラーゼ市販品を添加した場合に、ヨウ化アセチルコリンを選択することが最適であり、測定時における最終濃度で０．１〜０．３ｍＭの範囲がよい。好ましくは、０．２ｍＭとなるよう分注器２９で定容量を分取し、添加ノズル７を介して添加するとよい。また、ヨウ化アセチルコリンの水溶液は、常温、照射下において緩やかに加水分解しコリンとなるため、測定値への影響を考慮し、ヨウ化アセチルコリン溶液は遮光容器に入れ、５℃以下の冷却槽中で保存することが好ましい。
【００２７】
次に、吸光度測定値の時間変化率（吸光度の増加速度：ｄａ／ｄｔ）を記録する（図８参照）。測定の終了は該吸光度の増加速度：ｄａ／ｄｔが定常値となったか否かにより判断し、該吸光度の増加速度：ｄａ／ｄｔが定常値とならない場合は、任意に設定した時間とする。
【００２８】
さらに、ここで得られる吸光度信号を説明する。センサ５を用いて行う吸光度の増加速度：ｄａ／ｄｔは、前記第二工程での間、該反応槽９中にコリンオキシダーゼを添加し、測定試料中に当初含まれる遊離コリンを過酸化水素に変換したことで、該第二工程で添加を行ったコリンエステラ−ゼ特異性基質（例えばアセチルコリン）のコリンエステラーゼによる加水分解に起因する、該反応槽９中及び比較反応槽１５中における過酸化水素濃度の変化を捉えることが可能となる（図７参照）。また、既知の通り、ミカエリス−メンテンス型酵素の遊離状態での使用により、吸光度変化は該酵素による基質分解速度に応答するため、該出力信号：ｄａ／ｄｔから、該反応槽９中における、コリンエステラーゼ阻害性農薬共存下でのコリンエステラーゼ活性を測定することが可能となる。
【００２９】
また、反応槽９中のコリンエステラーゼ阻害性残留農薬の影響を受けた吸光度信号と、比較反応槽１５中のコリンエステラーゼ阻害性農薬の影響を受けていない吸光度信号とを区別するために、それぞれ（ｄａ／ｄｔ）ｉと（ｄａ／ｄｔ）ｎとで表現する。
【００３０】
さらに、２つの吸光度測定値の比：Ｒ．Ａ．（Ｒｅｌａｔｉｖｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ）＝（ｄａ／ｄｔ）ｉ／（ｄａ／ｄｔ）ｎを（１）式に示した、既知のミカエリス−メンテンス型酵素の拮抗阻害反応における動力学的計算に適用することが可能となる。
【数１】
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つまりは、（１）式を変換した（２）式に、コリンエステラーゼ阻害性農薬によるコリンエステラーゼ活性阻害率を表すＲ．Ａ．と、予め測定したコリンエステラーゼ阻害性農薬のコリンエステラーゼ阻害能を表す定数：Ｋｉ、のデータベースを代入すれば、試料溶液中に含まれるコリンエステラーゼ阻害性農薬の濃度算出が可能となる。
【数２】
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【００３１】
本発明によれば、前述した従来技術などに比べ、試料溶液中に含まれる遊離コリンの影響を受けないことによるＳ／Ｎ比改善のため、測定精度が向上する。また、ミカエリス−メンテンス型酵素の動力学的処理が容易となる。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】本発明の残留農薬測定方法を実施するための測定装置の構成を示す概略側面図である。
【図２】測定装置のセンサ部の使用状態を示す側面図である。
【図３】測定装置の概略平面図である。
【図４】測定装置に使用する洗浄槽の拡大説明図である。
【図５】センサ部の構造図である。
【図６】測定装置の制御部を示す概略ブロック図である。
【図７】反応槽中での過酸化水素濃度変化を説明するための図である。
【図８】基質添加後の出力信号の時間微分値変化を説明するための図である。
【符号の説明】
【００３３】
１  アーム回転モータ
２  回転アーム
３  センサー昇降装置
４  センサー固定体
５  センサー
６  ノズル支持棒
７  試薬添加ノズル
８  チューブ
９  反応槽
１０  反応液
１１  攪拌回転子
１２  位置センサー
１３  ノズル支持体
１４  水平位置センサー
１５  比較反応槽
１６  洗浄槽
１７  洗浄水導入管
１８  洗浄水排出管
１９  洗浄水
２３  パソコン
２４  プリンター
２５  信号処理回路
２６  測定器本体
２７  測定部
２８  ウォーターポンプ
２９  分注器
３０  コントローラー
３１  試薬類供給チューブ
３２  洗浄水供給管
３３  光ファイバー
３４  ミラー
３５  ガラス窓
３６  ランプ
３７  バンドパスフィルター
３８  ディテクタ
３９  溝
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
2005110535.tif 000010
【図７】
2005110535.tif 000011
【図８】
2005110535.tif 000012