(57)【要約】【課題】抗原抗体反応又はＤＮＡの相補反応を利用したクロマトグラフ法において検出不可能な測定物質の検出を可能とする装置の提供。【解決手段】図１中の３の吸収多孔質素材片の孔を物理的に埋めることで、高感度の測定を可能にする装置。【効果】  高感度で正確な各種測定ができる。【選択図】    図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗原抗体反応又はＤＮＡの相補反応を利用したクロマトグラフ法における吸収多孔質素材片（図１  ３）に固形物を溶解した液体、又はゲル状物質を液化した状態で流し込み、固形化又はゲル化することで吸収多孔質素材片の孔がふさがれ、吸収多孔質素材片の層はシグナルを発する物質を直接標識された特異結合性の物質や測定物質が移動できない状態となるが、唯一、流し込む物質の液量を調整することで、吸収多孔質素材片の表面付近部の孔が固形化する前の固形物又はゲル化する前のゲル化物の重みにより空洞化され、空洞化部分が確保されることで、シグナルを発する物質が直接標識された特異結合性の物質や測定物質は吸収多孔質素材片の表面付近部のみを移動することによって、本来吸収多孔質素材片の深層部や中間層部において固定化されるはずであったシグナルを発する物質を直接標識された特異結合性の物質−測定物質−判定部に固定化された特異的結合性の物質の複合体が著しく減少し、一方、吸収多孔質素材片の表面付近部分の特異的結合性の物質が固定化された判定部に複合体は集約され、そのため判定部に現れる陽性像が確認しやすくなるとともに、低濃度の測定物質とシグナルを発する物質を直接標識された特異結合性の物質が吸収多孔質素材片における空間が狭くなるため反応機会が得やすい状態となり、シグナルを発する物質を直接標識された特異結合性の物質−測定物質−判定部に固定化された特異的結合性の物質の複合体が形成しやすくなる２つの理由よって低濃度の測定物質の検出が可能となる検査用具。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】本発明は、抗原抗体反応又はＤＮＡの相補反応といった特異的結合反応を利用したクロマトグラフ法の検定に関するものである。
【背景技術】
【０００２】現在、感染症の判定など簡易に行う抗原抗体反応又はＤＮＡの相補反応を利用したクロマトグラフ法の原理を用いた測定装置があり、従来の多種に及ぶ試験装置やキットに比較して操作性が優れかつ短時間に測定が出来るようになった。しかし、蛋白質、免疫グロブリン、ホルモン、ステロイド、薬品、ウイルス、殺菌、核酸、天然物、毒素、ホルモン、又は農薬等の生理活性物質又は環境汚染物質の中には、極微量で作用するものが非常に多い。依然十分な感度が得られていなかったり、測定不可能な項目がある。
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】抗原抗体反応又はＤＮＡの相補反応を利用したクロマトグラフ法では感度不足のため検出不可能な項目の測定を可能にするとともに、既に製品化され十分な感度が得られない項目においても、検査の信頼性の向上という課題の改善につながる。
【０００４】また測定物質の濃度が低い項目の検出において、プロゾーン現象が起こりづらいため、測定物質の濃度が低い項目の測定に適している。
【課題を解決するための手段】
【０００５】ラテックス、金属ゾル体、染料、酵素又は生体物質を標識した抗体やＤＮＡは吸収多孔質素材片の孔を固形物質又はゲル状物質で埋めることで、表面付近部のみを移動するため、吸収多孔質素材片の深層部や中間層部への無駄な標識抗体や標識ＤＮＡの存在が著しく減少し、判定部において吸収多孔質素材片の表面付近部の標識抗体や標識ＤＮＡの存在が過大し、テストラインの確認に必要なシグナルに標識抗体や標識ＤＮＡが利用される度合いが著しく高くなる。
低濃度の測定物質と標識抗体や標識ＤＮＡが吸収多孔質素材片における空間が狭くなるため反応機会が得やすい状態となり、標識抗体や標識ＤＮＡ−測定物質−固定化された特異的結合性の物質の複合体が形成しやすくなる。
【０００６】判定部とは図１に示すテストライン（４）及びコントロールライン（５）など、試験結果を示す部分のことである。
【０００７】吸収多孔質素材片はニトロセルロース等の素材が用いられるが、素材には厚みがあるため、目視では判定部における着色標識体の全てを確認できているのではなく、吸収多孔質素材片の表面付近部のみを確認している。多くの着色標識体は判定の際に役に立っていないのが現状である。そこで、製造の技術、コストの問題上、薄い吸収多孔質素材片がつくりづらいことを、固形物やゲル状物質を液体化し、それを用いて吸収多孔質素材片の深層部及び中間層部孔の孔をふさぐことで補い、物理的に着色標識体が確認しやすい状態にする。
【０００８】吸収多孔質素材片の表面付近部の孔を完全にふさがないために、完全に固形化又はゲル化する前に孔埋め材を重さや毛細現象によって表面付近部から中間層部及び深層部に浸透させるとともに、完全にふさぐための容量よりも少ない容量の孔埋め材を吸収多孔質素材片に浸透させる。
【０００９】吸収多孔質素材片の深層部及び中間層部の孔を固形物やゲル状物質で埋めることにより高感度化が期待できるのに対し、素材の選定次第では、反応に直接関与しないことにより既存する反応系の吸収多孔質素材片にこの処理を行なうだけで非特異反応が全く生じない可能性もある。
【発明の効果】
【００１０】本発明により蛋白質、免疫グロブリン、ホルモン、ステロイド、薬品、ウイルス、殺菌、核酸、天然物、毒素、ホルモン等を抗原抗体反応又はＤＮＡの相補反応を利用したクロマトグラフ測定装置を用いて高感度で検出することが可能となる。
【００１１】シグナルを発する物質の例として、金属ゾル体、ラテックス、染料、ペルオキシダーゼとそれに反応する発色基質、アルカリホスファターゼとそれに反応する発色基質などがある。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】本発明方法の実施において使用するクロマトグラフ測定装置とその使用態様の一例を示す図。上の図は上から見たのもの。下の図はその断面図。
【図２】本発明方法の実施において使用する吸収多孔質素材片のその処理による影響の模式図の一例を示す図。
【符号の説明】
【００１３】１  サンプルパッド
２  標識試薬パッド
３  吸収多孔質素材片
４  テストライン
５  コントロールライン
６  吸収パッド
７  裏打ち材
８  吸収多孔質素材片の表面部
９  埋まっていない孔
１０  埋まっている孔
１１  吸収多孔質素材片の層
１２  裏打ち材
【００１４】図１は、抗原抗体反応又はＤＮＡの相補反応を利用したクロマトグラフ試験片の一例を示すもので、図中１はサンプルパッド、２は標識試薬パッド、３はニトロセルロース膜等からなる吸収多孔質素材片、４はテストライン、５はコントロールライン、６は吸収パッド、７は裏打ち材を表す。上の図は上から見もので、下の図はその断面図。通常、サンプルパッドに検体及び抽出液を滴下し、標識試薬パッドに塗布済みの着色標識体を標識物質保持片から遊離させ、ニトロセルロース膜等からなる吸収多孔質素材片へと移動させる。移動した着色標識体は測定物質を介して判定部に結合し、陽性であればテストラインの確認が可能である。またコントロールラインが出現することで、試験の正常性が示される。その後不用な検体、抽出液、着色標識体等が吸収パッドに吸収される。
【実施例】
【００１５】図２は吸収多孔質素材片（３）及び裏打ち材（７）の断面を拡大した図であり孔埋め材を使用して吸収多孔質素材片の深層部及び中間層部の孔を埋め、表面付近部分の孔のみが孔埋め材により埋めないように処理したことを示す図である。これにより標識抗体や標識ＤＮＡが表面付近部分の埋まっていない孔（９）を移動し、本来深層部及び中間層部の孔を移動するはずであった標識抗体や標識ＤＮＡが表面付近部の埋まっていない孔（９）に集約する。その結果テストラインの確認に必要のない深層部及び中間部の標識抗体や標識ＤＮＡが著しく減少し、テストラインの確認に必要な表面付近部の標識抗体や標識ＤＮＡが著しく増えることによる感度の上昇効果と、測定物質と標識抗体や標識ＤＮＡとの吸収多孔質素材片における移動空間が狭く反応機会が得やすい状態となることで感度の上昇効果が得られる。
【図１】
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【図２】
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