(57)【要約】【課題】ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害抗高脂血症薬の合成中間体として有用である（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロン（下式（３））の簡便な製法の提供。【解決手段】芳香環を有するアルデヒドを基質とするアルドラーゼ存在下、ベンジルオキシアセトアルデヒドとアセトアルデヒドとを反応させて、下式（２）で表される６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソースを製造した後、【化１】2005229858.tif 000015（式中、Ｒは、シアノ基、水酸基、ハロゲン原子、炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数１〜６のアルコキシ基を表し、ｎは０〜５の整数を表す。）  これを酸化して下式（３）で表される（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンを製造する。【化２】2005229858.tif 000016（式中、Ｒ及びｎは、前記と同義である。）【選択図】          なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式（１）で表されるベンジルオキシアセトアルデヒドに、芳香環を有するアルデヒドを基質とするアルドラーゼ存在下、アセトアルデヒドを作用させ、
【化１】
2005229858.tif 000012
(式中、Ｒは、シアノ基、水酸基、ハロゲン原子、炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数１〜６のアルコキシ基を表し、ｎは０〜５の整数を表す。)
下式（２）で表される６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソースとした後、
【化２】
2005229858.tif 000013
(式中、Ｒ及びｎは、前記と同義である。)
これを酸化する下式（３）で表される（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンの製法。
【化３】
2005229858.tif 000014
(式中、Ｒ及びｎは、前記と同義である。)
【請求項２】
前記式（２）で表される新規な６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソース。
【請求項３】
芳香環を有するアルデヒドを基質とするアルドラーゼが２−デオキシリボース−５−リン酸アルドラーゼである請求項１に記載の（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンの製法。
【請求項４】
２−デオキシリボース−５−リン酸アルドラーゼが大腸菌由来である請求項３に記載の（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンの製法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はコンパクチン（下式（４））に代表される３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル補酵素Ａレダクターゼ（以下、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼと記載。）阻害抗高脂血症薬の合成中間体として有用である（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロン（下式（３））を、新規化合物である６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソース（下式（２））を経て製造する製法に関する。
【０００２】
【化１】
2005229858.tif 000002
【０００３】
【化２】
2005229858.tif 000003
【０００４】
(式中、Ｒは、シアノ基、水酸基、ハロゲン原子、炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数１〜６のアルコキシ基を表し、ｎは０〜５の整数を表す。)
【０００５】
【化３】
2005229858.tif 000004
【０００６】
(式中、Ｒ及びｎは、前記と同義である。)
【背景技術】
【０００７】
ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害抗高脂血症薬の有用な合成中間体としては、（４Ｒ，６Ｓ）−６−無置換ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロン（前記式（３））及び６−クロロメチル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソース（下式（１１））が知られており、種々合成法が検討されている。
【０００８】
（４Ｒ，６Ｓ）−６−無置換ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンの製造方法としては、特許文献１に、ベンジルグリシジルエーテルとプロピオール酸エチルとを反応させて、６−ベンジルオキシ−５−ヒドロキシ−２−ヘキシン酸エチル（下式（６））を得た後、エポキシ環の還元的開環により目的物（化合物（１０））を合成する方法が記載されている。
【０００９】
【化４】
2005229858.tif 000005
【００１０】
しかしながら、この製造方法では、６−ベンジルオキシ−５−ヒドロキシ−２−ヘキシン酸エチル（前記式（６））を合成する際に、発火性のｎ-ブチルリチウムを用いなければならない。加えて、化合物（９）から、目的化合物（１０）を得るためのエポキシ環の還元的開環工程では、毒性の高い塩化水銀を使用する必要があり安全性に問題があった。また、この製造方法は多工程を必要とするため工業的な製法としては問題点が多い。
【００１１】
一方、（４Ｒ，６Ｓ）−６−クロロメチル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソース（下式（１１））の製造法としては、非特許文献２及び４に、アルドラーゼを用いて、クロロアセトアルデヒドとアセトアルデヒドとを反応させる製造方法が記載されている。（下式（１２）参照）
【００１２】
【化５】
2005229858.tif 000006
【００１３】
【化６】
2005229858.tif 000007
【００１４】
しかし、この製造法は、毒物であるクロロアセトアルデヒドを使用しなければならず、安全性に問題がある。
【００１５】
アルドラーゼの基質特異性については、非特許文献４及び６に、ベンズアルデヒド等の芳香環を有するアルデヒドは基質となりえず、反応が進行しないとの報告がなされている。更に、ベンジルオキシアセトアルデヒドを基質とするアルドラーゼの反応例は知られていない。
【特許文献１】特開平１１−２４０８７７号公報
【特許文献２】特開２０００−２９０２１４号公報
【特許文献３】特開２００３−２５０５５３号公報
【特許文献４】米国特許  特許番号４，６８３，１９５
【特許文献５】米国特許  特許番号４，６８３，２０２
【非特許文献１】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｓｏｃｉｅｔｙ．，１１７，１９９５，ｐ．３３３３−３３３９
【非特許文献２】Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，１１．，２００１，ｐ．４３−５２
【非特許文献３】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｓｏｃｉｅｔｙ．，１１２，１９９０，ｐ．２０１３−２０１４
【非特許文献４】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｓｏｃｉｅｔｙ．，１１７，１９９５，ｐ．７５８５−７５９１
【非特許文献５】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，６８，２００３，ｐ．４１００−４１０３
【非特許文献６】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｓｏｃｉｅｔｙ．，１１２，１９９０，ｐ．３０１８−３０２８
【非特許文献７】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ  １．，１９９０，ｐ．１８０９−１８１２
【非特許文献８】Ｓａｍｂｒｏｏｋ、Ｒｕｓｓｅｌ著「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，  Ｎ．  Ｙ．，  ２００１」
【非特許文献９】Ａｐｐｌ．  Ｅｎｖｉｒｏｎ．  Ｍｉｃｒｏｃｉｏｌ．  ６３．ｐ．４５０４−４５１０  （１９９７）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
本発明は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害抗高脂血症薬の合成中間体として有用である（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロン（前記式（３））の簡便な製法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明者は、ベンジルオキシアセトアルデヒドを基質とするアルドラーゼの反応により、新規な中間体６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソース（前記式（２））を製造した後、これを酸化してＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害抗高脂血症薬の有用な合成中間体である（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンを製造する製造方法を見出し、本発明を完成した。
【００１８】
即ち、本発明は次の通りである。
第１の発明は、芳香環を有するアルデヒドを基質とするアルドラーゼ存在下、下式（１）で表されるベンジルオキシアセトアルデヒドとアセトアルデヒドとを反応させて
【００１９】
【化７】
2005229858.tif 000008
【００２０】
（式中、Ｒは、シアノ基、水酸基、ハロゲン原子、炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数１〜６のアルコキシ基を表し、ｎは０〜５の整数を表す。）
【００２１】
下式（２）で表される６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソースを製造した後、
【００２２】
【化８】
2005229858.tif 000009
【００２３】
（式中、Ｒ及びｎは、前記と同義である。）
【００２４】
これを酸化して下式（３）で表される（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンを製造する（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンの製法に関するものである。
【００２５】
【化９】
2005229858.tif 000010
【００２６】
（式中、Ｒ及びｎは、前記と同義である。）
【００２７】
第２の発明は、上記の（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンの製法に有用な合成中間体である新規化合物、６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソースに関するものである。
【発明の効果】
【００２８】
本発明により、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害抗高脂血症薬の合成中間体として有用な（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロン（前記式（３））を安全且つ少ない工程数で簡便に製造することが出来る。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
第１の発明の方法により、芳香環を有するアルデヒドを基質とするアルドラーゼ存在下、ベンジルオキシアセトアルデヒド（前記式（１））とアセトアルデヒドとを反応させて新規な６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソース（前記式（２））を製造することができる。
【００３０】
この反応は、トリス塩酸緩衝液やトリエタノールアミン緩衝液等の緩衝液中に、基質であるベンジルオキシアセトアルデヒド及びアセトアルデヒドを溶解又は分散した状態で行う事ができる。
ここで、緩衝液の水素イオン濃度（ｐＨ）は３〜１２であり、好ましくは５〜９である。
【００３１】
この反応では、基質の前記緩衝液への溶解性を高めるために、メタノール、エタノール、アセトン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）等の水と相溶性を有する有機溶媒を添加することもできる。
これらの有機溶媒の使用量は、前記緩衝液に対して０．０１〜３０重量％であることが好ましい。
【００３２】
また、この反応は、トルエン、ジエチルエーテル、ヘキサンや、酢酸エチル等の水と相溶性を有しない有機溶媒と前記緩衝液を用いて２相系で反応を行うことも可能であり、更には、これらの有機溶媒中で、前記緩衝液を用いることなく反応を行うこともできる。
【００３３】
本発明に使用されるベンジルオキシアセトアルデヒド（前記式（１））は、市販のものを使用することができるが、特許文献２に記載の方法に従って２−ベンジルオキシエタノールを酸化することによって製造することも出来る。
ベンジルオキシアセトアルデヒド（前記式（１））の反応液中の濃度は、特に制限されないが、通常、０．０１〜２０重量％が好ましい。
【００３４】
また、アセトアルデヒドとしては、市販のものを使用することができる。
アセトアルデヒドの使用量は、ベンジルオキシアセトアルデヒド１モルに対して２〜２０モルであり、好ましくは２〜１０モルである。
【００３５】
この反応の基質であるベンジルオキシアセトアルデヒド（式（１））及びアセトアルデヒドの添加方法は、特に限定されず、一括或いは分割して添加することができる。
またこれらの基質は、水又は前記有機溶媒に予め溶解して添加することもできる。
この反応の反応温度は、使用する芳香環を有するアルデヒドを基質とするアルドラーゼの熱安定性により異なるが、通常１〜８０℃である。
【００３６】
この反応で使用される芳香環を有するアルデヒドを基質とするアルドラーゼは、その基質特異性として、ベンズアルデヒド等の芳香環を有するアルデヒドを基質とするものであり、例えば、２−デオキシリボース−５−リン酸アルドラーゼ（以下、ＤＥＲＡと記載）が挙げられる。
このＤＥＲＡとしては、非特許文献１に記載の大腸菌由来のものを用いることができるが、特許文献３に記載の超好熱菌由来のアルドラーゼ等を用いることもできる。
また、これらの天然型のアルドラーゼのみならず、遺伝子組換え等の手法により一部のアミノ酸が置換或いは欠失したものや、アミノ酸を付加したものも、アルドラーゼとしての機能を維持する限り用いることができる。
【００３７】
この反応で使用される上記アルドラーゼの使用形体としては、通常、単離精製されたものをそのまま使用するが、ポリアクリルアミドゲル、カラギーナンゲル等の担体に固定化して使用することもできる。また、アルドラーゼ遺伝子を組み込んだ組換え体生物（大腸菌など）を培養して得られる細胞（菌体など）をそのまま使用することもできる。更には、同細胞を公知の手法によって処理して得られる処理物、或いは粗精製画分を使用することもできる。また、無細胞蛋白質合成系によるアルドラーゼの調製における反応液、及び同反応液からアルドラーゼ活性画分を粗精製画分として用いることも可能である。
【００３８】
この反応で製造される６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソース（前記式（２））の単離・精製は、抽出、蒸留或いはカラムクロマトグラフィー等の公知の方法により行うことができる。
【００３９】
上記反応で得られる６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソース（前記式（２））を酸化することで、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害抗高脂血症薬の合成中間体として有用である（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロン（前記式（３））を製造することができる。
【００４０】
ここで、酸化方法としては、アノメリック炭素上の水酸基を選択的に酸化してラクトンが得られる方法であれば特に制限はなく、炭酸バリウム存在下臭素水による酸化（非特許文献５）、炭酸銀／セライト（Ｆｅｔｉｚｏｎ試薬）による酸化（非特許文献６）、活性化二酸化マンガンによる方法（非特許文献７）等が挙げられる。
【００４１】
この反応で製造される（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロン（前記式（３））は、抽出、蒸留あるいはカラムクロマトグラフィー等の公知の方法により単離することが出来る。
【実施例】
【００４２】
［参考例］
（１）アルドラーゼ酵素発現大腸菌の作成
以下の遺伝子の取扱いは、非特許文献１０に準じて行った。
ＤＥＲＡをコードする遺伝子（以下、ｄｅｏＣ遺伝子と記載）がクローニングされたプラスミドベクターを持った形質転換エッセリシア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）ＤＨ５α（ＡＴＣＣ８６９６３株  非特許文献１参照）を、５０μｇ／ｍｌのカルベニシリン（ＳＩＧＭＡ社製）を含有するＬＢ培地（１Ｌ（リットル）中、トリプトン１０ｇ、酵母エキス５ｇ、塩化ナトリウム５ｇ）にて、一晩培養した。培養により得た菌体から、プラスミドを分離精製するＱＩＡｐｒｅｐ  Ｓｐｉｎ  Ｍｉｎｉｐｒｅｐ  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社製）を用いてｐＢＲ３２２／ｄｅｏＣを取得した。
ｄｅｏＣ遺伝子の５'末端配列に制限酵素ＥｃｏＲＩ認識配列を付加し（配列番号１）および３'末端配列に制限酵素ＨｉｎｄIII認識配列を付加（配列番号２）したプライマーを作成し、このプライマーを用いてｐＢＲ３２２／ｄｅｏＣを鋳型にＰＣＲ反応（特許文献４，６及び非特許文献１２）を行った。
【００４３】
得られたＰＣＲ反応物をＭｉｎＥｌｕｔｅ  ＰＣＲ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社製）にて精製した。得られた精製物を制限酵素ＥｃｏＲＩおよびＨｉｎｄＩＩＩ（ＴａＫａＲａ社製）にて消化した後、同様の酵素で消化したプラスミドベクターｐＵＣ１８（ＴＯＹＯＢＯ社製）とＱｕｉｃｋ  Ｌｉｇａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＮＥＢ社製）を用いて連結し、ｐＵＣ１８／ｄｅｏＣを作成した。
【００４４】
得られたｐＵＣ１８／ｄｅｏＣにより、Ｅ．  ｃｏｌｉ  ＪＭ１０９（ＴＯＹＯＢＯ社製）を塩化カルシウム法で形質転換した。この形質転換株を５０μｇ／ｍｌのカルベニシリンを含むＬＢ寒天培地に塗布し、生育したクローンを取得した。
【００４５】
得られたクローンからプラスミド（ｐＵＣ１８／ｄｅｏＣ）を取得し、ＡＢＩ  ＰＲＩＳＭ  ３１０  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（アプライドバイオシステム社製）にてクローニングして得られたｄｅｏＣ遺伝子の塩基配列の決定及び解析を行ったところ、ｄｅｏＣ遺伝子配列、配列番号Ｘ０３２２４（ＧｅｎＢａｎｋ、ＥＭＢＡＬのデータベース）に一致した。
【００４６】
（２）酵素触媒製造
テリフィックブロス（１Ｌ中、トリプトン  １２ｇ、酵母エキス  ２４ｇ、グリセロール４ｍｌ、リン酸二カリウム１２．５ｇ、リン酸カリウム２．３ｇ）培地１０Ｌを１２０℃で、２０分間加熱殺菌した。その培地にカルベニシリンを５０μｇ／ｍｌとなるように添加した後、参考例（１）で調製した組換え大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ  ＪＭ１０９  ｐＵＣ１８／ｄｅｏＣ）を接種し、３７℃で通気及び撹拌しながら、濁度（ＯＤ６６０ｎｍ）が０．６になるまで培養した。その後、濃度が１ｍＭになるようにＩＰＴＧ（イソプロピル−β−チオガラクトピラノシド）を加え、さらに１２時間培養した。
【００４７】
培養終了後、遠心分離（８０００ｒｐｍ、１０分）により集菌し、０．８５％食塩水で洗菌し、湿菌体重量の４倍量の０．２Ｍ  トリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５、２ｍＭ  エチレンジアミン４酢酸（ＥＤＴＡ），１ｍＭ  ジチオスレイトールを含む）に懸濁した。  この菌体懸濁液を氷冷下、超音波破砕処理を行い、破砕物の懸濁物質を遠心分離で除去し酵素液を調製した。
【００４８】
次に、この酵素液に１％（ｗ／ｖ）になるように硫酸ストレプトマイシンを加え、２０分間、４℃で放置したあと、遠心分離（１５０００ｒｐｍ、２０分）し、核酸を沈殿画分として取り除いた。得られた上清に硫酸アンモニウムを、濃度が４０重量％になるように加え、４℃にて３０分間撹拌した。その後、遠心分離（１５０００ｒｐｍ、２０分）し、得られた上清に硫酸アンモニウムを濃度が６５重量％になるように加え４℃にて３０分間撹拌した。次いで、遠心分離（１５０００ｒｐｍ、２０分）により硫安沈殿画分を得た。少量の０．２Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５、２ｍＭ  ＥＤＴＡ，１ｍＭ  ジチオスレイトールを含む）に硫安沈殿画分を溶解したものを、脱塩のため透析膜に加えて透析を行った後、凍結乾燥し、１ｇ当たり１０、０００ｕｎｉｔのアルドラーゼ活性を有するアルドラーゼ酵素粉末２．８ｇを得た。
【００４９】
（３）アルドラーゼ活性測定
アルドラーゼの活性測定は非特許文献１に従いアルドラーゼにより２−デオキシリボース-５-リン酸の分解反応によって生じるアセトアルデヒドを、アルコールデヒドロゲナーゼで還元する時に共役して減少する補酵素ＮＡＤＨの減少速度を測定することで行った。
【００５０】
［実施例１］
６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ-ヘキソースの合成
ベンジルオキシアセトアルデヒド１．５ｇを０．１Ｍトリエタノールアミン緩衝液（ｐＨ７．３、１ｍＭ  ＥＤＴＡ）３６０ｍｌを加えたものに、氷冷下アセトアルデヒド８．８ｇを加えた。
この溶液に、アルドラーゼ酵素粉末４ｇ（１００００ｕｎｉｔ／ｇ）を加え、密栓し３０℃で７日間撹拌した。
反応終了後、８００ｍｌアセトンを加え、４℃にて３０分撹拌し、不溶化した変性タンパクを沈殿させたのち減圧ろ過し、ろ液を減圧濃縮して、アセトンを留去した。
得られた残渣を酢酸エチルで抽出（１００ｍｌ×３）し、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製（展開溶媒：ｎ-ヘキサン／酢酸エチル＝２／８）することにより無色透明液体である６-Ｏ-ベンジル-２，４-ジデオキシ-Ｄ-エリスロ-ヘキソース０．８３ｇ（収率３５％）を得た。
以下に、その物性を示す。
【００５１】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ  ＣＤＣｌ３）：δ１．５４２-１．８２３（ｍ，４Ｈ），３．４８１-３．５４５（ｍ，２Ｈ），  ４．２５０-４．３０３（ｍ，１Ｈ），４．４５９-４．５０６（ｍ，１Ｈ），４．５７８（ｓ，２Ｈ），５．１４３（ｄｄ，Ｊ＝１．５，９．３Ｈｚ  １Ｈ，β），５．３７０（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，１Ｈ，α），７．２６２-７．３４９（ｍ，５Ｈ）
【００５２】
ＩＲ（ｃｍ-１）：３３９２，２９２４，１１１３，７３７，６９９  ｃｍ-１
【００５３】
［実施例２］
（４Ｒ，６Ｓ）−６−ベンジルオキシメチル−４−ヒドロキシ−テトラヒドロ−２−ピロンの合成
６−Ｏ−ベンジル−２，４−ジデオキシ−Ｄ−エリスロ−ヘキソース０．３ｇ（１．２６ｍｍｏｌ）をジオキサン１０ｍｌに溶解させた。次いで、水２０ｍｌと炭酸バリウム０．８８ｇ（４．５ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下、撹拌しながら、臭素０．６４ｇ（０．２ｍｌ：４ｍｍｏｌ）をガラスピペットにて、ゆっくり加えた。
一晩撹拌を続けた後、チオ硫酸ナトリウムを溶液の臭素色（褐色）が消えるまで適量加え、残存臭素を処理した。その後、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣を中圧カラムクロマト（山善製ＳＩ-４０Ｂ）にて精製（展開溶媒：ｎ-ヘキサン／酢酸エチル＝２／８）することにより、無色、透明液体である（４Ｒ，６Ｓ）-６-ベンジルオキシメチル-４-ヒドロキシ-テトラヒドロ-２-ピロン２１０ｍｇ（収率７０％）を得た。
以下に、その物性を示す。
【００５４】
2005229858.tif 000011
【００５５】
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ  ＣＤＣｌ３）  ：δ１．９６５-２．０２１（ｍ，２Ｈ），２．５８６-２．７５９（ｍ，２Ｈ），３．６３３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．２，４．４Ｈｚ），３．７０４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．７，４．４Ｈｚ），４．４１９-４．４６５（ｍ，１ｓ），４．５８４（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝１４．４，１２．０Ｈｚ），４．８４１-４．８７７（ｍ，１Ｈ），７．２６０-７．３７３（ｍ，５Ｈ）
【００５６】
ＩＲ（ｃｍ-１）：３４２５，２９２４，１７１５，１２５４
【配列表】
2005229858000001.app