(57)【要約】【課題】  ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートを溶解する適当な溶媒を見つけ、光散乱法を用いることにより、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの絶対分子量と分子量分布分析法を提供する。【解決手段】  ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートを酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液で溶解したものを試料溶液とし、酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液を移動相とするＧＰＣ−ＭＡＬＬＳに付して分析するヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの分子量分布分析法を提供する。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートを酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液で溶解したものを試料溶液とし、酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液を移動相として、光散乱法によるゲルパーミエーションクロマトグラフに付して分析することを特徴とするヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの絶対分子量および分子量分布測定方法。
【請求項２】
上記ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートを溶解する上記混合溶液について、上記酢酸緩衝液と上記Ｎ，Ｎ―ジメチルホルムアミドの混合体積比が、９：１から８：２である請求項１に記載の測定方法。
【請求項３】
上記移動相として用いる上記混合溶液について、上記酢酸緩衝液と上記Ｎ，Ｎ―ジメチルホルムアミドの混合体積比が、９：１から８：２である請求項２に記載の測定方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの分析法に関する。さらに詳しくは、光散乱法によるゲルパーミエーションクロマトグラフ（以下、ＧＰＣ―ＭＡＬＬＳという）を用いた、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの品質管理、性能評価に好適な分析法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートは、医薬品添加物のセルロース誘導体であり、ｐＨ依存溶解性を示すことから主に薬物放出性の制御のコーティング剤として用いられる、アニオン性の高分子である。
【０００３】
したがって、かかる材料に使用するためにも、その品質管理、性能評価等が必要で、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの絶対分子量と分子量分布を測定することが望まれている。
【０００４】
これまで、特許文献１にはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの分子量をクロロホルムとメタノールの混合溶液で溶解した後、この溶液をクロロホルムとメタノールの混合溶液を移動相とするゲルパーミエーションクロマトグラフに付して分析する方法が知られている。一方、高分子の分子量測定方法としては、非特許文献１のごとく、このゲルパーミエーションクロマトグラフ測定法に光散乱測定法を付したＧＰＣ−ＭＡＬＬＳ法が知られている。
【０００５】
【特許文献１】特開平５−２６８６２号公報
【非特許文献１】Ｋ．Ｊｕｍｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  ２９（１９９６）１０５−１０９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの分子量をクロロホルムとメタノールの混合溶液で溶解した後、この溶液をクロロホルムとメタノールの混合溶液を移動相とするゲルパーミエーションクロマトグラフに付して分析する方法では、有機溶媒同士の混合により、溶液にゆらぎが生じるため、濃度比に対する屈折率比を測定することができない。そして、この測定値が得られないために、光散乱法を用いた測定ができず、絶対分子量を求めることが不可能であった。
本発明は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートを溶解する適当な溶媒を見つけ、光散乱法を用いることにより、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの絶対分子量と分子量分布分析法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決するため、鋭意検討した結果、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートが酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶媒に溶解することを見出し、本発明をなすに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートを酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液で溶解したものを試料溶液とし、酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液を移動相とするＧＰＣ−ＭＡＬＬＳに付して分析するヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの分子量分布分析法を提供する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの絶対分子量と分子量分布の測定を効率よく正確に行うことができ、得られた結果によりヒドロキシプロピルメチルセルロースの品質管理、性能評価が簡単に行えるという効果を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明に用いるヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートは、置換基にフタリル基とメトキシル基とヒドロキシプロポキシル基を持つセルロースである。それぞれの好ましい置換度は、フタリル基が２１〜２７重量％、メトキシル基が１８〜２４重量％、ヒドロキシプロポキシル基が５〜１０重量％である。
【００１１】
本発明によれば、酢酸緩衝液は、溶解用及び移動相用として用いられる。
本発明に用いる酢酸緩衝液は、好ましくは酢酸と酢酸塩の組み合わせである。酢酸塩としては、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム等であり、好ましくは酢酸ナトリウムである。
酢酸と酢酸塩の好ましい濃度は、どちらも０．０２〜０．１ｍｏｌ・ｄｍ-3の範囲であれば良いが、緩衝液のｐＨは５．５〜５．８程度であることが望ましい。これよりｐＨが低いとヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートが完全に溶解しない場合があり、これよりｐＨが高いとヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートが溶液中でイオン化しにくくなり、カラムで分離しにくくなるおそれがあるためである。
【００１２】
本発明に用いるＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドは、市販のものを使用しても、精製して用いてもどちらでもよい。
【００１３】
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートを溶解する混合溶液について、酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合比は、酢酸緩衝液が主となる体積比、例えば９／１から８／２が好ましい。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの添加量がこれより少ないと、吸着を防ぐ作用が弱くなるおそれがあり、添加量がこれより多いとヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの溶解性が悪くなり、ミクロゲルが存在するおそれがある。
【００１４】
酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液にヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートを溶解させるには、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートをビーカーに入れ、そこに適当量の混合溶媒を加えるだけでよいが、その手法は問わない。
溶解に必要な酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液の量は、試料量に左右されるのは勿論であるが、溶解されるヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの試料溶液中の濃度は、好ましくは０．０１〜０．５重量％、より好ましくは０．０５〜０．２重量％程度である。
なお、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートは、測定する前に、メンブランフィルター等を用いてろ過し、溶液中の不純物を除いておくとよい。
【００１５】
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートに酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液を加えると、ヒドロキシプロピルメチルセルロースが溶解し、それをＧＰＣ−ＭＡＬＬＳに付す。ＧＰＣ−ＭＡＬＬＳに付すには公知の試料導入装置を使用でき、これにより、所定量の溶液をＧＰＣ−ＭＡＬＬＳに注入できる。
【００１６】
ＧＰＣ−ＭＡＬＬＳに注入された溶液は、酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合溶液を移動相として分離カラムに付される。
ＧＰＣ−ＭＡＬＬＳの移動相と溶解用の溶液とは同一であることが、装置の操作上更に好ましい。従って、溶解用の混合溶液について、酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合体積比が９：１から８：２の場合、移動相用の混合溶液について、酢酸緩衝液とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの混合体積比は、好ましくは９：１から８：２である。
【００１７】
ＧＰＣ−ＭＡＬＬＳでもちいる分離カラムとしては、汎用の高分子ゲルを充填したものが使用可能であり、例えば、ポリヒドロキシメタクリレート系ゲルの充填カラムが好適な例として挙げられる。
【００１８】
また、ＧＰＣ−ＭＡＬＬＳの検出手段としては、例えば、多角度光散乱検出器と示差屈折率検出器を併用できる。その他に、低角度光散乱検出器と示差屈折率検出器を組み合わせたＧＰＣ−ＬＡＬＬＳ法も測定に使用できる。これは、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートは紫外部に吸収を持たないからである。また、これらを併用することにより、測定試料のカラムへの吸着状態や、分子鎖の切断状態を知ることができ、絶対分子量の測定が可能になる。
【００１９】
本発明によれば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの溶解液についてのＧＰＣ−ＭＡＬＬＳからの分離液を分画して捕集することにより、ヒドロキシプロピルメチルセルロースの絶対分子量と分子量分布を得られる。
本発明の絶対分子量は、好ましくは重量平均絶対分子量であり、異なる物質を標準として求められる相対的なものではなく、光散乱法における理論式から求められる絶対的な値の重量分率による平均値である。
本発明の分子量分布は、重量平均分子量を数平均分子量で割った値である。
【実施例】
【００２０】
本発明の方法を実施する装置構成例を図面に基づいて説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
図１は、本発明の方法を実施する装置の一例で、１は移動相貯流漕、２はオンラインデガッサー、３は送液ポンプ、４はマニュアルインジェクター、５はカラム、６はカラムオーブン、７は多角度光散乱検出器、８は示差屈折率検出器、９はデータ処理装置である。
【００２１】
分析に際しては、移動相貯流漕１からポンプ３によりあらかじめ移動相を流し、定常状態を作る。次に、マニュアルインジェクター４から試料を注入する。注入された試料は、移動相によりカラムオーブン６の中のカラム５に送られ、多角度光散乱検出器７と、示差屈折率検出器８により、絶対分子量および分子量分布が検出される。このデータをデータ処理装置９で処理し、分子量の計算を行う。
【００２２】
以上の装置を用いて、次の分析条件で分析を行った。
試料の前処理
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰ−５５：信越化学工業社製）１０ｍｇを１０ｍｌの移動相（下記のもの）に溶解し、メンブランフィルター（孔径０．４５μｍ、ＡＤＶＡＮＴＥＣ社製）でろ過した。
【００２３】
移動相溶液の調製
２．４６ｇの酢酸ナトリウムと０．１ｇの酢酸、５．８４４ｇの塩化ナトリウムを蒸留水に溶解して１リットルとし、酢酸緩衝液を調製した（ｐＨ５．６）。この溶液を孔径０．４５μｍのミリカップ（ＭＩＬＬＩＰＯＲＥ社製）でろ過した。ろ過した酢酸緩衝液９０体積部に対して、１０体積部のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（和光純薬社製）を加えて撹拌し、移動相とした。
【００２４】
屈折率の濃度変化の比例係数（以下、「ｄｎ／ｄｃ」とも略す。）
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰ−５５：信越化学工業社製）を、上記の混合溶液に溶解して、濃度の異なる（０．０５Ｗ／Ｖ％〜０．３Ｗ／Ｖ％）５種類の溶液を作成する。これを高感度示差屈折率系（ＤＲＭ−１０２１：大塚電子社製）を用いて、静的光散乱法によりｄｎ／ｄｃを測定した。
【００２５】
分析条件
カラム：Ｓｈｏｄｅｘ  ＯＨｐａｋ  ＳＢ−８０６ＭＨＱ（昭和電工社製）
移動相：酢酸緩衝液（ｐＨ５．６）／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（体積比９／１）
デガッサー：ＥＲＣ−３１１５（ＥＲＣ  Ｉｎｃ．社製）
流  量：１．０ｍｌ／ｍｉｎ
温  度：４０℃
インジェクター：モデル７１２５（レオダイン社製）
多角度光散乱検出器：ＤＡＷＮ  ＤＳＰ（Ｗｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ製）
示差屈折率検出器：ＲＩ−７１（昭和電工社製）
ｄｎ／ｄｃ：０．１５２ｍＬ／ｇ
【００２６】
分析結果
上記分析条件で分析した結果、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの重量平均分子量は４５，６００ｇ／ｍｏｌで、分子量分布（重量平均分子量を数平均分子量で割った値）は２．３９であった。
測定したヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの重合度が、原料であるヒドロキシプロピルメチルセルロースの重合度よりも低くなったことから、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの重合度が正しく測定されたと推測される。
また、その結果を図２に示す。図２のピークはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートのピークで、本発明によれば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートが感度良く分析できることが分かる。なお、図２において、縦軸は光散乱強度と屈折率の信号強度、横軸は保持時間を表わす。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】本発明の構成を実施するための装置の例を示す。
【図２】本発明の方法により分析した結果を示す。
【符号の説明】
【００２８】
１  移動相貯流漕
２  オンラインデガッサー
３  送液ポンプ
４  マニュアルインジェクター
５  カラム
６  カラムオーブン
７  多角度光散乱検出器
８  示差屈折率検出器
９  データ処理装置
【図１】
2005077165.tif 000002
【図２】
2005077165.tif 000003