(57)【要約】【課題】            アデノシンＡ2a受容体アゴニストの投与が必要な疾患を治療又は予防するための組成物を提供する。【解決手段】        式（Ｉ）：    【化１】2005023064.tif 000010[式中、Ａは窒素原子又はＣ−Ｇなどであり；Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアリール基、置換されてもよい複素環基などであり；Ｙ及びＺはそれぞれ独立に、窒素原子又はＣ−Ｒ8であり、Ｙ及びＺが同時にＣ−Ｒ8をとるとき２つのＲ8は同一でも異なっていてもよく；Ｘは窒素原子又はＣ−Ｒ10であり；さらにＹがＣ−Ｒ8であり、ＸがＣ−Ｒ10又はＺがＣ−Ｒ8である場合、Ｒ8及びＲ10あるいは２つのＲ8が一緒になってヘテロ原子を含むか含まずして環を形成してもよい]で表される縮合複素環化合物又はその塩を有効成分として用いる。【選択図】          なし。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2005023064.tif 000009
[式中、Ａは窒素原子又はＣ−Ｇ基｛ＧはＣＮ、ＮＯ2、ＳＯ2Ｒ3基（Ｒ3は、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）、ＣＯ2Ｒ4基（Ｒ4は、水素原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）、ＣＨＯ、ＳＯ2ＮＲaＲb基（Ｒa及びＲbはそれぞれ独立に、水素原子、水酸基、アルコキシ基、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基であるか又はＲa及びがＲb一緒になって環を形成する）又はＣＯＮＲaＲb基（Ｒa及びＲbは前述の通りである）｝であり；
Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基、置換されてもよい複素環基、−Ｂ1−Ｒ5基（Ｂ1はＣＯ、ＣＯＯ、Ｏ、ＯＣＯ、ＯＳＯ2、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ2であり、Ｒ5は、水素原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）、置換されてもよいアミノ基又はＮ＝ＣＲ6Ｒ7基（Ｒ6及びＲ7はそれぞれ独立に、水素原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）であり；
Ｙ及びＺはそれぞれ独立に、窒素原子又はＣ−Ｒ8基｛Ｒ8は、水素原子、ハロゲン原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基、置換されてもよい複素環基、−Ｂ2−Ｒ9基（Ｂ2はＣＯ、ＣＯＯ、Ｏ、ＯＣＯ、ＯＳＯ2、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ2であり、Ｒ9は、水素原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）、置換されてもよいアミノ基、シアノ基又はニトロ基である｝であり、Ｙ及びＺが同時にＣ−Ｒ8基をとるとき２つのＲ8は同一でも異なっていてもよく；
Ｘは窒素原子又はＣ−Ｒ10基｛Ｒ10は、水素原子、ハロゲン原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、−Ｂ2−Ｒ9基（Ｂ2及びＲ9は前述の通りである）、置換されてもよいアミノ基、シアノ基又はニトロ基である｝であり；
さらにＹがＣ−Ｒ8基であり、ＸがＣ−Ｒ10基又はＺがＣ−Ｒ8基である場合、Ｒ8及びＲ10あるいは２つのＲ8が一緒になってヘテロ原子を含むか含まずして環を形成してもよい]で表される縮合複素環化合物又はその塩を有効成分として含有するアデノシンＡ2a受容体アゴニストの投与が必要な疾患を治療又は予防するための組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する創傷治癒促進剤。
【請求項３】
創傷が皮膚潰瘍、下腿潰瘍、熱傷潰瘍、凍傷潰瘍、外傷性潰瘍、褥瘡、静脈性潰瘍、動脈性潰瘍、帯状疱疹後潰瘍、放射線潰瘍、薬物潰瘍、糖尿病性潰瘍又は術後潰瘍である請求項２の創傷治癒促進剤。
【請求項４】
請求項１に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する睡眠誘導剤。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する解熱剤。
【請求項６】
請求項１に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する血圧降下剤。
【請求項７】
請求項１に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する免疫細胞機能又はサイトカイン産生の異常亢進を伴う疾患の治療薬又は予防薬。
【請求項８】
疾患が自己免疫疾患、癩病性結節紅斑、ベーチェット病、狼瘡紅斑症、アフタ性潰瘍、癌や感染症における悪液質、敗血症ショック、成人呼吸窮迫症候群、変形性関節症、多発性硬化症、クローン病、炎症性腸疾患、多臓器不全、マラリア、髄膜炎、肝炎、後天性免疫不全症候群、蕁麻疹、食物アレルギー、アナフィラキシーショック、好酸球増加症候群、喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、その他のアレルギー性疾患、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、Ｉ型糖尿病、橋本甲状腺炎、重症筋無力症、多発性硬化症、臓器特異的自己免疫疾患及び、臓器移植に伴う拒絶反応から選択される少なくとも１種である請求項７に記載の免疫細胞機能及び/又はサイトカイン産生の異常亢進を伴う疾患の治療薬又は予防薬。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する好中球機能の異常亢進を伴う疾患の治療薬又は予防薬。
【請求項１０】
疾患が、気管の疾患、男性勃起機能障害、癲癇、脳虚血、末梢血管性疾患、虚血後再潅流損傷、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、皮膚炎、湿疹、潰瘍性大腸炎、クローン病、炎症性腸炎、ヘリコバクター・ピロリ性胃炎、非ヘリコバクター・ピロリ性胃炎及び、胃腸管に対する非ステロイド系抗炎症剤誘導損傷から選択される少なくとも１種である請求項９に記載の好中球機能の異常亢進を伴う疾患の治療薬又は予防薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アデノシンＡ2a受容体アゴニストの投与が必要な疾患を治療又は予防するための組成物に関し、創傷治癒促進剤などの医薬として有用である。
【背景技術】
【０００２】
アデノシン受容体は生体内に広く分布する7回膜貫通型Gタンパク質共役受容体であり、これまでにＡ1、Ａ2a、Ａ2b及びＡ3の4種のサブタイプが存在することが知られている。Ａ1とＡ3はアデニレートシクラーゼ抑制型Giタンパク質に、Ａ2aとＡ2bは活性型Gsタンパク質にそれぞれ共役し、２次メッセンジャーであるcAMP濃度を調節することにより様々な生理機能に重要な役割を果たしているものと考えられる。Ａ1とＡ2a受容体はアデノシンに対して高親和性であるのに対し、Ａ2bとＡ3受容体は低親和性であり、これらサブタイプにより生体内の各組織における局在、分布がそれぞれ異なっている。また、アゴニストによるアデノシンＡ2a受容体への刺激は、創傷治癒促進、睡眠、体温低下、血圧低下、免疫細胞機能抑制、好中球機能抑制、腫瘍壊死因子-α（TNF-α）やインターロイキン−２(ＩＬ−２)などのサイトカイン産生抑制などの様々な作用を誘発することが報告されている。
【０００３】
一方、後記式（Ｉ）の縮合複素環化合物は、糖尿病の予防又は治療剤の有効成分としてＷＯ０２／４０４８５に記載されている化合物である。しかしながら、これらの化合物がアデノシンＡ2a受容体アゴニスト作用を有することは知られていない。
【０００４】
【特許文献１】国際公開公報  ＷＯ０２／４０４８５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明者らは、特定の縮合複素環化合物又はその塩がアデノシンＡ2aアゴニスト作用を有することを見出し、本発明を提案するに至った。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
すなわち本発明は、式（Ｉ）：
【０００７】
【化１】
2005023064.tif 000002
【０００８】
[式中、Ａは窒素原子又はＣ−Ｇ基｛ＧはＣＮ、ＮＯ2、ＳＯ2Ｒ3基（Ｒ3は、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）、ＣＯ2Ｒ4基（Ｒ4は、水素原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）、ＣＨＯ、ＳＯ2ＮＲaＲb基（Ｒa及びＲbはそれぞれ独立に、水素原子、水酸基、アルコキシ基、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基であるか又はＲa及びがＲb一緒になって環を形成する）又はＣＯＮＲaＲb基（Ｒa及びＲbは前述の通りである）｝であり；
Ｒ1及びＲ2はそれぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基、置換されてもよい複素環基、−Ｂ1−Ｒ5基（Ｂ1はＣＯ、ＣＯＯ、Ｏ、ＯＣＯ、ＯＳＯ2、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ2であり、Ｒ5は、水素原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）、置換されてもよいアミノ基又はＮ＝ＣＲ6Ｒ7基（Ｒ6及びＲ7はそれぞれ独立に、水素原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）であり；
Ｙ及びＺはそれぞれ独立に、窒素原子又はＣ−Ｒ8基｛Ｒ8は、水素原子、ハロゲン原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基、置換されてもよい複素環基、−Ｂ2−Ｒ9基（Ｂ2はＣＯ、ＣＯＯ、Ｏ、ＯＣＯ、ＯＳＯ2、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ2であり、Ｒ9は、水素原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基又は置換されてもよい複素環基である）、置換されてもよいアミノ基、シアノ基又はニトロ基である｝であり、Ｙ及びＺが同時にＣ−Ｒ8基をとるとき２つのＲ8は同一でも異なっていてもよく；
Ｘは窒素原子又はＣ−Ｒ10基｛Ｒ10は、水素原子、ハロゲン原子、置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基、置換されてもよいアルキニル基、置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、−Ｂ2−Ｒ9基（Ｂ2及びＲ9は前述の通りである）、置換されてもよいアミノ基、シアノ基又はニトロ基である｝であり；
さらにＹがＣ−Ｒ8基であり、ＸがＣ−Ｒ10基又はＺがＣ−Ｒ8基である場合、Ｒ8及びＲ10あるいは２つのＲ8が一緒になってヘテロ原子を含むか含まずして環を形成してもよい]で表される縮合複素環化合物又はその塩を有効成分として含有するアデノシンＡ2a受容体アゴニストの投与が必要な疾患を治療又は予防するための組成物に関する。
【０００９】
前記式（Ｉ）の縮合複素環化合物の塩は、薬学的に許容される塩であればよく、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩などの鉱酸塩；ｐ−トルエンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩などの有機酸塩；カリウム塩、ナトリウム塩などのようなアルカリ金属塩；カルシウム塩のようなアルカリ土類金属塩；トリエタノールアミン塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機アミン塩などが挙げられる。また、これらの塩の中で結晶水をもつものもある。
【００１０】
式（Ｉ）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒa及びＲbで表される置換されてもよいアルキル基のアルキル部分としては、一般に炭素数１〜１９のもの、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、オクチル基、ノニル基、デシル基、ノナデシル基などが挙げられ、それらは直鎖又は枝分かれ脂肪鎖の構造異性のものも含む。
【００１１】
式（Ｉ）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒa及びＲbで表される置換されてもよいアルケニル基のアルケニル部分、また置換されてもよいアルキニル基のアルキニル部分としては、一般に炭素数２〜１８のものが挙げられ、それらは直鎖又は枝分かれ脂肪鎖の構造異性のものも含む。
【００１２】
式（Ｉ）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒa及びＲbで表される置換されてもよいシクロアルキル基のシクロアルキル部分、また置換されてもよいシクロアルケニル基のシクロアルケニル部分としては、一般に炭素数３〜１０のものが挙げられ、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基などの単環式基の他、縮合型多環式基、架橋型多環式基なども挙げられる。
【００１３】
式（Ｉ）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒa及びＲbで表される置換されてもよいアリール基のアリール部分としては、フェニル基の他、ナフチル基のような縮合型多環式基が挙げられる。
【００１４】
式（Ｉ）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒa及びＲbで表される置換されてもよい複素環基の複素環部分としては、ピロリル基、ピロリニル基、ピロリジニル基、フラニル基、ジヒドロフラニル基、テトラヒドロフラニル基、チエニル基、ジヒドロチエニル基、テトラヒドロチエニル基、ピラゾリル基、ピラゾリニル基、ピラゾリジニル基、イミダゾリル基、イミダゾリニル基、イミダゾリジニル基、オキサゾリル基、オキサゾリニル基、オキサゾリジニル基、イソオキサゾリル基、イソオキサゾリニル基、イソオキサゾリジニル基、チアゾリル基、チアゾリニル基、チアゾリジニル基、イソチアゾリル基、イソチアゾリニル基、イソチアゾリジニル基、オキサジアゾリル基、オキサジアゾリニル基、オキサジアゾリジニル基、チアジアゾリル基、チアジアゾリニル基、チアジアゾリジニル基、トリアゾリル基、トリアゾリニル基、トリアゾリジニル基、テトラゾリル基、テトラゾリニル基、テトラゾリジニル基、ジオキソリル基、ジオキソラニル基、ジチオリル基、ジチオラニル基、ピリジル基、ジヒドロピリジル基、テトラヒドロピリジル基、ピペリジニル基、ピリミジル基、ジヒドロピリミジル基、テトラヒドロピリミジル基、ヘキサヒドロピリミジル基、ピリダジニル基、ジヒドロピリダジニル基、テトラヒドロピリダジニル基、ヘキサヒドロピリダジニル基、ピラジニル基、ジヒドロピラジニル基、テトラヒドロピラジニル基、ピペラジニル基、ピラニル基、ジヒドロピラニル基、テトラヒドロピラニル基、ジオキシニル基、ジオキセニル基、ジオキサニル基、ジチアニル基、モルホリニル基などの単環式複素環基；チエノチエニル基、ジヒドロシクロペンタチエニル基、インドリル基、テトラヒドロインドリル基、イソインドリル基、テトラヒドロイソインドリル基、ベンゾチエニル基、テトラヒドロベンゾチエニル基、ベンゾフラニル基、テトラヒドロベンゾフラニル基、ベンゾオキサゾリル基、テトラヒドロベンゾオキサゾリル基、ベンゾイソオキサゾリル基、テトラヒドロベンゾイソオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、テトラヒドロベンゾチアゾリル基、ベンゾイソチアゾリル基、テトラヒドロベンゾイソチアゾリル基、ベンゾイミダゾリル基、テトラヒドロベンゾイミダゾリル基、ベンゾジオキソリル基、ベンゾジチオリル基、ベンゾジオキサニル基、ベンゾジチアニル基、キノリニル基、イソキノリニル基、キナゾリニル基、キノキサリニル基、フタラジニル基、ナフチリジニル基、プリニル基などのような縮合型多環式複素環基；キヌクリジニル基などのような架橋型多環式複素環基などが挙げられる。
【００１５】
式（Ｉ）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒa及びＲbで表される置換されてもよいアルキル基、置換されてもよいアルケニル基及び置換されてもよいアルキニル基の二次置換基としては、ハロゲン原子、水酸基、メルカプト基、置換可アルコキシ基、置換可アルキルチオ基、置換可アルケニルオキシ基、置換可アルケニルチオ基、置換可アルキニルオキシ基、置換可アルキニルチオ基、置換可シクロアルキル基、置換可シクロアルケニル基、置換可シクロアルコキシ基、置換可シクロアルキルチオ基、置換可シクロアルケニルオキシ基、置換可シクロアルケニルチオ基、置換可アルコキシカルボニル基、置換可アルキルカルボニル基、置換可アルキルカルボニルオキシ基、置換可アルケニルオキシカルボニル基、置換可アルケニルカルボニル基、置換可アルケニルカルボニルオキシ基、置換可アルキニルオキシカルボニル基、置換可アルキニルカルボニル基、置換可アルキニルカルボニルオキシ基、置換可シクロアルコキシカルボニル基、置換可シクロアルキルカルボニル基、置換可シクロアルキルカルボニルオキシ基、置換可シクロアルケニルオキシカルボニル基、置換可シクロアルケニルカルボニル基、置換可シクロアルケニルカルボニルオキシ基、置換可アリール基、置換可アリールオキシ基、置換可アリールチオ基、置換可アリールオキシカルボニル基、置換可アリールカルボニル基、置換可アリールカルボニルオキシ基、置換可複素環基、置換可複素環オキシ基、置換可複素環チオ基、置換可複素環オキシカルボニル基、置換可複素環カルボニル基、置換可複素環カルボニルオキシ基、置換可アミノ基、シアノ基、ニトロ基、カルボキシル基、置換可アミノカルボニル基、置換可アルキルスルホニル基、置換可アルケニルスルホニル基、置換可アルキニルスルホニル基、置換可シクロアルキルスルホニル基、置換可シクロアルケニルスルホニル基、置換可アリールスルホニル基、置換可複素環スルホニル基、置換可アミノスルホニル基などが挙げられ、それら置換基の数は１個であっても２個以上であってもよく、置換基の数が２個以上の場合には、それらの置換基は同一であっても異なっていてもよい。
【００１６】
式（Ｉ）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒa及びＲbで表される置換されてもよいシクロアルキル基、置換されてもよいシクロアルケニル基、置換されてもよいアリール基及び置換されてもよい複素環基の二次置換基としては、ハロゲン原子、水酸基、メルカプト基、置換可アルキル基、置換可アルケニル基、置換可アルキニル基、置換可アルコキシ基、置換可アルキルチオ基、置換可アルケニルオキシ基、置換可アルケニルチオ基、置換可アルキニルオキシ基、置換可アルキニルチオ基、置換可シクロアルキル基、置換可シクロアルケニル基、置換可シクロアルコキシ基、置換可シクロアルキルチオ基、置換可シクロアルケニルオキシ基、置換可シクロアルケニルチオ基、置換可アルコキシカルボニル基、置換可アルキルカルボニル基、置換可アルキルカルボニルオキシ基、置換可アルケニルオキシカルボニル基、置換可アルケニルカルボニル基、置換可アルケニルカルボニルオキシ基、置換可アルキニルオキシカルボニル基、置換可アルキニルカルボニル基、置換可アルキニルカルボニルオキシ基、置換可シクロアルコキシカルボニル基、置換可シクロアルキルカルボニル基、置換可シクロアルキルカルボニルオキシ基、置換可シクロアルケニルオキシカルボニル基、置換可シクロアルケニルカルボニル基、置換可シクロアルケニルカルボニルオキシ基、置換可アリール基、置換可アリールオキシ基、置換可アリールチオ基、置換可アリールオキシカルボニル基、置換可アリールカルボニル基、置換可アリールカルボニルオキシ基、置換可複素環基、置換可複素環オキシ基、置換可複素環チオ基、置換可複素環オキシカルボニル基、置換可複素環カルボニル基、置換可複素環カルボニルオキシ基、置換可アミノ基、シアノ基、ニトロ基、カルボキシル基、置換可アミノカルボニル基、置換可アルキルスルホニル基、置換可アルケニルスルホニル基、置換可アルキニルスルホニル基、置換可シクロアルキルスルホニル基、置換可シクロアルケニルスルホニル基、置換可アリールスルホニル基、置換可複素環スルホニル基、置換可アミノスルホニル基などが挙げられ、それら置換基の数は１個であっても２個以上であってもよく、置換基の数が2個以上の場合には、それらの置換基は同一であっても異なっていてもよい。
【００１７】
式（Ｉ）中のＲ1、Ｒ2、Ｒ8及びＲ10で表される置換されてもよいアミノ基の二次置換基としては、水酸基、置換可アルキル基、置換可アルケニル基、置換可アルキニル基、置換可アルコキシ基、置換可アルケニルオキシ基、置換可アルキニルオキシ基、置換可シクロアルキル基、置換可シクロアルケニル基、置換可シクロアルコキシ基、置換可シクロアルケニルオキシ基、置換可アルコキシカルボニル基、置換可アルキルカルボニル基、置換可アルケニルオキシカルボニル基、置換可アルケニルカルボニル基、置換可アルキニルオキシカルボニル基、置換可アルキニルカルボニル基、置換可シクロアルコキシカルボニル基、置換可シクロアルキルカルボニル基、置換可シクロアルケニルオキシカルボニル基、置換可シクロアルケニルカルボニル基、置換可アリール基、置換可アリールオキシ基、置換可アリールオキシカルボニル基、置換可アリールカルボニル基、置換可複素環基、置換可複素環オキシ基、置換可複素環オキシカルボニル基、置換可複素環カルボニル基、置換可アミノカルボニル基、置換可アルキルスルホニル基、置換可アルケニルスルホニル基、置換可アルキニルスルホニル基、置換可シクロアルキルスルホニル基、置換可シクロアルケニルスルホニル基、置換可アリールスルホニル基、置換可複素環スルホニル基、置換可アミノスルホニル基などが挙げられ、それら二次置換基の数は１個であっても２個であってもよく、２個の場合、それらは同一であっても異なっていてもよい。また、２個の二次置換基が一緒になってヘテロ原子を含むか含まずして環を形成してもよい。
【００１８】
上記二次置換基のうち、置換可である各基の三次置換基としては、ハロゲン原子、水酸基、メルカプト基、シアノ基、ニトロ基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、アリール基、複素環基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基、シクロアルキルオキシ基、シクロアルケニルオキシ基、アリールオキシ基、複素環オキシ基、アルキルチオ基、アルケニルチオ基、アルキニルチオ基、シクロアルキルチオ基、シクロアルケニルチオ基、アリールチオ基、複素環チオ基、アルキルスルホニル基、アルケニルスルホニル基、アルキニルスルホニル基、シクロアルキルスルホニル基、シクロアルケニルスルホニル基、アリールスルホニル基、複素環スルホニル基、アルキルカルボニル基、アルケニルカルボニル基、アルキニルカルボニル基、シクロアルキルカルボニル基、シクロアルケニルカルボニル基、アリールカルボニル基、複素環カルボニル基、アルキルオキシカルボニル基、アルケニルオキシカルボニル基、アルキニルオキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル基、シクロアルケニルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、複素環オキシカルボニル基、アミノカルボニル基、アルキルアミノカルボニル基、ジアルキルアミノカルボニル基、アルケニルアミノカルボニル基、アルキニルアミノカルボニル基、シクロアルキルアミノカルボニル基、シクロアルケニルアミノカルボニル基、アリールアミノカルボニル基、複素環アミノカルボニル基、アミノスルホニル基、アルキルアミノスルホニル基、ジアルキルアミノスルホニル基、アルケニルアミノスルホニル基、アルキニルアミノスルホニル基、シクロアルキルアミノスルホニル基、シクロアルケニルアミノスルホニル基、アリールアミノスルホニル基、複素環アミノスルホニル基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルケニルアミノ基、アルキニルアミノ基、シクロアルキルアミノ基、シクロアルケニルアミノ基、アリールアミノ基、複素環アミノ基、アルキルカルボニルアミノ基、アルケニルカルボニルアミノ基、アルキニルカルボニルアミノ基、シクロアルキルカルボニルアミノ基、シクロアルケニルカルボニルアミノ基、アリールカルボニルアミノ基、複素環カルボニルアミノ基、アルキルスルホニルアミノ基、アルケニルスルホニルアミノ基、アルキニルスルホニルアミノ基、シクロアルキルスルホニルアミノ基、シクロアルケニルスルホニルアミノ基、アリールスルホニルアミノ基、複素環スルホニルアミノ基などが挙げられ、それら三次置換基の数は１個であっても２個以上であってもよく、２個以上の場合、それら置換基は同一であっても異なっていてもよい。さらに、二次置換基が２個の三次置換基により置換されたアミノ基である場合、その三次置換基が一緒になってヘテロ原子を含むか含まずして環を形成してもよい。
【００１９】
また、これら三次置換基のアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、シクロアルキル部分、シクロアルケニル部分、アリール部分、複素環部分は、さらにハロゲン原子、水酸基、メルカプト基、シアノ基、ニトロ基、カルボキシル基、アミノ基、アルキル基、ハロアルキル基、アルコキシ基、ハロアルコキシ基、アルキルチオ基、ハロアルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基、アルキルアミノカルボニル基、ジアルキルアミノカルボニル基、アミノスルホニル基、アルキルアミノスルホニル基、ジアルキルアミノスルホニル基、、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルカルボニルアミノ基、アルキルスルホニルアミノ基、シクロアルキル基、アリール基、複素環基などの四次置換基で置換されていてもよく、それら置換基の数は１個であっても２個以上であってもよく、置換基の数が2個以上の場合には、それらの置換基は同一であっても異なっていてもよい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
次に、本発明の望ましい実施形態のいくつかを記載するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２１】
（１）ＡがＣ−Ｇ基（Ｇは前述の通りである）であり；Ｒ1及びＲ2がそれぞれ独立に、水素原子、置換されてもよいアルキル基、−Ｂ1−Ｒ5基（Ｂ1及びＲ5は前述の通りである）又は置換されてもよいアミノ基であり、Ｙ及びＺがそれぞれ独立に、窒素原子又はＣ−Ｒ8基｛Ｒ8が水素原子、置換されてもよいアリール基又は−Ｂ2−Ｒ9基（Ｂ2及びＲ9は前述の通りである）である｝であり、Ｘが窒素原子又はＣ−Ｒ10基（Ｒ10は水素原子又はハロゲン原子である）である式（Ｉ）の縮合複素環化合物又はその塩。
（２）ＧがＣＮ、ＣＯ2Ｒ4基（Ｒ4は前述の通りである）、ＳＯ2ＮＲaＲb基又はＣＯＮＲaＲb基（Ｒa及びＲbは前述の通りである）である（１）の縮合複素環化合物又はその塩。
（３）Ｒ1及びＲ2がそれぞれ独立に、−Ｂ1−Ｒ5基（Ｂ1及びＲ5は前述の通りである）又は置換されてもよいアミノ基である（１）又は（２）の縮合複素環化合物又はその塩。
（４）Ｒ1が−Ｂ1−Ｒ5基（Ｂ1及びＲ5は前述の通りである）であり、Ｒ2が置換されてもよいアミノ基である（３）の縮合複素環化合物又はその塩。
（５）Ｂ1がＳであり、Ｒ5が置換されてもよいアルキル基である（４）の縮合複素環化合物又はその塩。
（６）Ｂ2がＳであり、Ｒ9が置換されてもよいアルキル基である（１）の縮合複素環化合物又はその塩。
（７）Ｒ4が水素原子又は置換されてもよいアルキル基である（２）、（３）、（４）又は（５）の縮合複素環化合物又はその塩。
（８）Ｒa及びＲbがそれぞれ独立に水素原子又は置換されてもよいアルキル基である（２）の縮合複素環化合物又はその塩。
（９）Ｒ1及びＲ2の置換されてもよいアミノ基が、水酸基、置換可アルキル基、置換可アルキニル基、置換可アルコキシ基、置換可アリール基、置換可アリールオキシ基又は置換可複素環基で置換されてもよいアミノ基である（１）の縮合複素環化合物又はその塩。
（１０）置換可アルキル基が、アリール基、複素環基、アルコキシ基、アリールオキシ基又はアルキルオキシカルボニル基で置換されてもよいアルキル基である（９）の縮合複素環化合物又はその塩。
（１１）アリール基がハロゲン原子で置換されてもよいフェニル基である（１０）の縮合複素環化合物又はその塩。
（１２）複素環基がチエニル基、ジオキソラニル基、ピリジル基又はジオキサニル基である（１０）の縮合複素環化合物又はその塩。
（１３）アルコキシ基がアルコキシ基で置換されてもよいアルコキシ基である（１０）の縮合複素環化合物又はその塩。
（１４）置換可アルコキシ基がアリールアルコキシ基である（９）の縮合複素環化合物又はその塩。
（１５）置換可アリール基がハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基又はアルキル基で置換されてもよいフェニル基である（９）の縮合複素環化合物又はその塩。
（１６）置換可複素環基がベンゾチアゾリル基又はベンゾジオキソリル基である（９）の縮合複素環化合物又はその塩。
【００２２】
前記式（Ｉ）の化合物又はその塩は、アデノシンA2a受容体へのアゴニスト作用を有し、創傷治癒の促進、睡眠誘導、体温低下、血圧低下、免疫細胞機能の抑制、好中球機能の抑制、ＴＮＦ−α、ＩＬ−２、ＩＬ−４、インターフェロンγのようなサイトカインの産生抑制などの薬理作用を有する。
【００２３】
したがって、式（Ｉ）の化合物又はその塩は、皮膚潰瘍、下腿潰瘍、熱傷潰瘍、凍傷潰瘍、外傷性潰瘍、褥瘡、静脈性潰瘍、動脈性潰瘍、帯状疱疹後潰瘍、放射線潰瘍、薬物潰瘍、糖尿病性潰瘍、術後潰瘍などの治療又は予防に使用される創傷治癒促進剤；不眠症、精神病性疾患などの治療又は予防に使用される睡眠誘導剤；発熱性疾患の治療又は予防に使用される解熱剤；高血圧の治療又は予防に使用される血圧降下剤；免疫細胞機能及び/又はサイトカイン産生の異常亢進を伴う疾患の治療薬又は予防薬；好中球機能の異常亢進を伴う疾患の治療薬又は予防薬などの有効成分として有用である。
【００２４】
前記した免疫細胞機能及び/又はサイトカイン産生の異常亢進を伴う疾患としては、自己免疫疾患、癩病性結節紅斑、ベーチェット病、狼瘡紅斑症、アフタ性潰瘍、癌や感染症における悪液質、敗血症ショック、成人呼吸窮迫症候群、変形性関節症、多発性硬化症、クローン病、炎症性腸疾患、多臓器不全、マラリア、髄膜炎、肝炎、後天性免疫不全症候群、蕁麻疹、食物アレルギー、アナフィラキシーショック、好酸球増加症候群、喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、その他のアレルギー性疾患、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、Ｉ型糖尿病、橋本甲状腺炎、重症筋無力症、多発性硬化症、その他の臓器特異的自己免疫疾患、及び、臓器移植に伴う拒絶反応などが挙げられる。
【００２５】
前記した好中球機能の異常亢進を伴う疾患としては、成人性呼吸困難症候群（ARDS）、気管支炎、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺炎、嚢胞性線維症、喘息、気腫、気管支拡張症、慢性副鼻腔炎及び鼻炎のような気管の疾患、男性勃起機能障害、癲癇、脳虚血、末梢血管性疾患、虚血後再潅流損傷、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、皮膚炎、湿疹、潰瘍性大腸炎、クローン病、炎症性腸炎、ヘリコバクター・ピロリ（Heriobacter pylori）性胃炎、非ヘリコバクター・ピロリ性胃炎、胃腸管に対する非ステロイド系抗炎症剤誘導損傷などが挙げられる。
【００２６】
前記式（Ｉ）の化合物又はその塩の使用に関し、具体的には次の実施形態がある。
（１）アデノシンＡ2a受容体アゴニストの投与が必要な疾患を治療又は予防する薬剤を製造するための式（Ｉ）の化合物又はその塩の使用。
（２）創傷治癒促進剤を製造するための式（Ｉ）の化合物又はその塩の使用。
（３）睡眠誘導剤を製造するための式（Ｉ）の化合物又はその塩の使用。
（４）解熱剤を製造するための式（Ｉ）の化合物又はその塩の使用。
（５）血圧降下剤を製造するための式（Ｉ）の化合物又はその塩の使用。
（６）免疫細胞機能及び/又はサイトカイン産生の異常亢進を伴う疾患の治療薬又は予防薬を製造するための式（Ｉ）の化合物又はその塩の使用。
（７）好中球機能の異常亢進を伴う疾患の治療薬又は予防薬を製造するための式（Ｉ）の化合物又はその塩の使用。
（８）式（Ｉ）の化合物又はその塩の有効量を人を含む哺乳動物に投与することからなるアデノシンＡ2a受容体アゴニストの投与が必要な疾患を治療又は予防する方法。
（９）式（Ｉ）の化合物又はその塩の有効量を人を含む哺乳動物に投与することからなる創傷を治療又は予防する方法。
（１０）式（Ｉ）の化合物又はその塩の有効量を人を含む哺乳動物に投与することからなる睡眠障害を治療又は予防する方法。
（１１）式（Ｉ）の化合物又はその塩の有効量を人を含む哺乳動物に投与することからなる発熱性疾患を治療又は予防する方法。
（１２）式（Ｉ）の化合物又はその塩の有効量を人を含む哺乳動物に投与することからなる高血圧を治療又は予防する方法。
（１３）式（Ｉ）の化合物又はその塩の有効量を人を含む哺乳動物に投与することからなる免疫細胞機能及び/又はサイトカイン産生の異常亢進を伴う疾患を治療又は予防する方法。
（１４）式（Ｉ）の化合物又はその塩の有効量を人を含む哺乳動物に投与することからなる好中球機能の異常亢進を伴う疾患を治療又は予防する方法。
【００２７】
前記式（Ｉ）の化合物又はその塩は通常、一般的な医薬製剤の形態（例えば、第１４改正日本薬局方に規定する方法）で用いられる。この医薬製剤は通常使用される充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤等の希釈剤あるいは賦形剤を用いて調製される。医薬製剤としては各種の形態が治療目的に応じて選択でき、錠剤、丸剤、散剤、粉剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、液剤、懸濁剤、乳剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）、スプレー、エアロゾル、クリーム、軟膏、ローション、経皮剤（パッチ剤、マトリクス剤、テープ）、ゲル剤等が一例として挙げられる。
【００２８】
錠剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で公知のものを広く使用でき、例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グリセリン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等が例示できる。更に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
【００２９】
丸剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来公知のものを広く使用でき、例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナランカンテン等の崩壊剤等が例示できる。
【００３０】
坐剤の形態に成形するに際しては、担体として従来公知のものを広く使用でき、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等を挙げることができる。
【００３１】
注射剤として調製される場合には、液剤、乳剤及び懸濁剤は殺菌され、かつ血液と等張であるのが好ましく、これら液剤、乳剤及び懸濁剤の形態に成形するに際しては、希釈剤としてこの分野において慣用されているものを全て使用でき、例えば水、乳酸水溶液、エチルアルコール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を挙げることができる。なお、この場合等張性の溶液を調製するに充分な量の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを医薬製剤中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。更に必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他の医薬品を医薬製剤中に含有せしめてもよい。
【００３２】
本発明組成物中に含有されるべき前記式（Ｉ）の化合物又はその塩の量は、特に限定されず広範囲に適宜選択されるが、通常全組成物中１〜７０重量％、好ましくは５〜５０重量％とするのが望ましい態様である。
【００３３】
本発明組成物の投与方法は特に制限はなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等に応じた方法で経口的又は非経口的に投与される。例えば経口的に投与される場合には、錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤等が望ましい態様として挙げられる。非経口的には、局所投与剤、注射剤、経皮剤、経鼻剤、経肺剤、坐剤等の形で投与することができる。注射剤の場合には単独であるいはブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更には必要に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与されるのが望ましい態様である。また、坐剤の場合には直腸内投与されるのが望ましい態様である。なお、本発明組成物を創傷治癒剤として用いる場合、局所投与剤の形で投与するのが望ましい。局所投与剤の投与する方法としては、例えばスプレー、エアロゾル、クリーム、軟膏、ローション、経皮剤、ゲル剤などの製剤形態で、或いは、本発明組成物を各種創傷被覆材に含ませて患部の皮膚などに投与する方法が挙げられる。又、局所投与後の患部は各種創傷被覆材で保護することもできる。
【００３４】
本発明組成物の投与量は用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等により適宜選択されるが、通常有効成分である前記式（Ｉ）の化合物又はその塩の量は１日当り体重１ｋｇ当り約０．０５〜５０ｍｇとするのがよく、１回又は数回に分けて投与することができる。また、投与単位形態中に有効成分を１〜１０００ｍｇ含有せしめるのが望ましい態様である。
【００３５】
本発明組成物は、例えば、抗ウイルス薬、抗菌薬、抗生物質、抗寄生虫薬、抗真菌薬、鎮痒薬、鎮痛薬、抗炎症薬、消毒薬、蛋白分解酵素薬、肉芽・表皮形成促進薬、創傷被覆剤など種々の薬剤の少なくとも一つを包含することができ、アデノシンＡ2a受容体アゴニストの投与が必要な疾患の治療又は予防に、より優れた効果が発現される場合がある。
【００３６】
前記式（Ｉ）の化合物又はその塩は、公知の方法又はそれらに準じた方法、例えばＷＯ０２／４０４８５に記載された方法で製造できる。第１表に式（Ｉ）の化合物の具体例を示すが、式（Ｉ）の化合物はこれらに限定される訳ではない。
【００３７】
【表１】
2005023064.tif 000003
【００３８】
【表２】
2005023064.tif 000004
【００３９】
【表３】
2005023064.tif 000005
【実施例】
【００４０】
次に本発明に係わる試験例を記載するが、本発明はこれらに限定されるわけではない。
【００４１】
試験例１（創傷治癒促進作用）
雄性ICRマウス（体重22±2g）をヘキソバルビタール麻酔下（90mg/kg、腹腔内投与）に肩と背部の体毛を剃り直径12mmのシャープパンチで皮膚を削除した。その直後に1.5%CMC-Naで懸濁した被験化合物30μg/20μLを皮膚切除部に塗布した。その後1日1回被験化合物を連日塗布し、1、3、5、7、9及び11日後に創傷面積を測定した。創傷面積は、透明なプラスチックシートを創傷部に乗せ傷口境界線をトレースした後、イメージアナライザ（Life Science Resources Vista, Version 3.0）にて計測した。傷口の修復速度をCT50（wound half-closure time）として評価した。なお、CT50はGraph-Pad Prism（Graph Pad Software USA）を用いて算出した。試験は5匹／群で実施し、被験物質投与群と溶媒対照群との平均値の差の検定は、スチューデントのｔ検定により行った。結果を第２表に示す。
【００４２】
【表４】
2005023064.tif 000006
【００４３】
試験例２（睡眠誘発作用）
雄性ICRマウス（体重22±2g）に対し、0.25%CMC-Naに懸濁した被験化合物を150mg/kg経口投与し、更に1時間後、90mg/kgのヘキソバルビタールナトリウムを腹腔内投与する。その後、光反射反応の回復を指標に睡眠時間を測定する。試験は1群3匹として実施する。被験化合物の代わりに溶媒のみを投与した群の平均睡眠時間を基に算出した睡眠延長時間率を％Prolongationとして評価する。その結果、本発明化合物が睡眠誘発作用を有することが判る。
【００４４】
試験例３（体温低下作用）
雄性ICRマウス（体重22±2g）に対し、0.25%CMC-Naに懸濁した被験化合物を150mg/kg経口投与し、その直後より直腸温度を測定する（Thermolert, TH-5）。更に30、60．90及び120分後の体温測定を行い、投与前の体温と比較して平均5%以上の変動があった場合、被験化合物投与による有意な変動があるものと見なす。試験は1群3匹として実施する。その結果、本発明化合物が体温低下作用を有することが判る。
【００４５】
試験例４（血圧低下作用）
雄性のWistar-Okamoto由来の自然発症高血圧（SHR）ラット（体重250±20g）に対し、0.25%CMC-Naに懸濁した被験化合物を150mg/kg経口投与し、その直後より間接法にて血圧を測定する（Blood-Pressure Indirect Sensors & Model B60, IITC USA）。更に1、2及び4時間後の血圧測定を行い、投与前の血圧と比較して平均10%以上の変動があった場合、被験化合物投与による有意な変動があるものと見なす。試験は1群3匹として実施する。その結果、本発明化合物が血圧低下作用を有することが判る。
【００４６】
試験例５（ヒト末梢血単核細胞におけるサイトカイン産生抑制作用）
(1)IL-2産生抑制作用
ヒト末梢血単核球細胞を20μg/mLのコンカナバリンA（ConA）で刺激し、被験化合物10μM共存下、培養16時間後のIL-2産生量を酵素免疫測定法にて測定する。その結果、本発明化合物はIL-2産生抑制作用を有することが判る。なお、結果は溶媒対照群のサイトカイン量と比較した抑制率で表わす。
【００４７】
(2)IL-4産生抑制作用
MDS Pharma Service社での委託試験にて、Code No.308400の基本操作手順に基づき実施された。即ち、ヒト末梢血単核球細胞を20μg/mLのコンカナバリンA（ConA）で刺激し、被験化合物10μM共存下、培養16時間後のIL-4産生量を酵素免疫測定法にて測定する。その結果、本発明化合物はIL-4産生抑制作用を有することが判る。なお、結果は溶媒対照群のサイトカイン量と比較した抑制率で表わす。
【００４８】
(3)INF-γ産生抑制作用
ヒト末梢血単核球細胞を20μg/mLのコンカナバリンA（ConA）で刺激し、被験化合物10μM共存下、培養16時間後のIFN-γ産生量を酵素免疫測定法にて測定する。その結果、本発明化合物はINF-γ産生抑制作用を有することが判る。なお、結果は、溶媒対照群のサイトカイン量と比較した抑制率で表わす。
【００４９】
(4)TNF-α産生抑制作用
ヒト末梢血単核球細胞を25ng/mLのリポポリサッカライド（LPS）で刺激し、被験化合物10μM共存下、培養16時間後のTNF-α産生量を酵素免疫測定法にて測定する。その結果、本発明化合物はTNF-α産生抑制作用を有することが判る。なお、結果は、溶媒対照群のサイトカイン量と比較した抑制率で表わす。
【００５０】
試験例６（アデノシンＡ2a受容体への結合親和性試験）
アデノシンＡ2a受容体を発現させたヒトリコンビナントHEK-293細胞懸濁液にトリチウム標識した 50nMの[3H]CGS21680と被験化合物10μMを加え、そのアデノシンＡ2a受容体への結合親和性の指標となる[3H]CGS21680の結合阻害活性を液体シンチレーションカンターにて測定した。結果を結合阻害率（%）として第３表に示す。
【００５１】
【表５】
2005023064.tif 000007
【００５２】
試験例７（マウス脾臓細胞におけるIL-2産生抑制作用）
供試化合物のアデノシンA2a受容体アゴニスト作用は、Ｔ細胞受容体刺激により誘発されるIL-2の産生阻害活性を指標に評価した。即ち、マウス脾臓細胞を抗マウスＣＤ３抗体及びヒトリコンビナントＩＬ−２（ジェンザイム Ｎｏ．２２０２）を処理することによりサイトカイン産生を誘発した。このサイトカイン産生系に供試化合物を添加しその抑制作用を以下の方法により測定した。ホウ酸緩衝生理食塩溶液（ｐＨ８．５）にて１０〜２０μｇ／ｍｌに調製した抗マウスＣＤ３抗体を９６穴細胞培養プレートに５０μｌ／穴ずつ分注し、４℃で１８時間放置した。未反応液を除去し、ハンクス緩衝液で１回洗浄後、１０％牛胎児血清（ＦＣＳ）含有ＲＰＭＩ液で１０ｎｇ／ｍｌに調製したＩＬ−２を５０μｌ／穴ずつ分注した。ここで陰性対照群では抗ＣＤ３抗体及びＩＬ−２を除いて溶液のみを処理した。続いて、供試化合物希釈液を５０μｌ／穴ずつ分注し（最終濃度１０μＭ）、これにＢａｌｂ／ｃマウス（雌、７〜10週齢）の脾臓から調製した１×１０７個／ｍｌの細胞懸濁液を１００μl／穴ずつ分注した。インキュベーター内（３７℃、５％炭酸ガス）にて培養４０〜４８時間後、培養上清を回収し、ＥＬＩＳＡ法にてサイトカイン産生量を測定した。
【００５３】
ＩＬ−２のサイトカイン産生量はをそれぞれ以下の方法にて測定した。即ち、ＩＬ−２産生量の定量は、以下に示すＥＬＩＳＡ法にて行った。まず、１次抗体として、ラット抗マウスIL-２抗体（ファーミンジェン、ＣｏｄｅＮｏ．１８１６１Ｄ）を炭酸緩衝液（ｐＨ９．５）にて１μg/mlに希釈し、５０μｌ／穴ずつ９６ウェルプレート（ＩＷＡＫＩ、ＣｏｄｅＮｏ．３８６０−０９６）にまき、一晩（１６〜２４時間）４℃にてコートした。その後、プレートは、１０％ＦＣＳ含有リン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．２（ブロッキングバッファ）にて３７℃で２時間ブロッキングした（２５０μｌ／穴）。プレートを０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０（ナカライテスク、ＣｏｄｅＮｏ．２８１−５１）を含むＰＢＳ（洗浄用バッファ）を用いて４回洗浄し、培養上清希釈液を５０μl／穴ずつまき、室温にて１時間インキュベートした。検量線作成のため、リコンビナントマウスＩＬ−２(Ｒ＆Ｄシステムズ、ＣｏｄｅＮｏ．４０２−ＭＬ）を使用した。プレートを洗浄用バッファを用いて４回洗浄し、二次抗体としてビオチン標識ラット抗マウスＩＬ−２抗体（ファーミンジェン、ＣｏｄｅＮｏ．１８１７２Ｄ）を０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０含有ブロッキングバッファにて０．５μｇ／ｍｌに希釈したものを加え（５０μl／穴）、室温にて1時間インキュベートした。プレートを洗浄バッファにて４回洗浄後、ストレプトアビジン標識ペルオキシダーゼ（プロザイム、ＣｏｄｅＮｏ．ＣＪ３０Ｈ００１）を０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０含有ブロッキングバッファにて８００倍希釈したものを加え（５０μl／穴）、室温、１５分間反応した。プレートを洗浄バッファにて４回洗浄し、ＴＮＢ基質溶液（シグマ、ＣｏｄｅＮｏ．Ｔ−８６６５）１００μｌ／穴を加えて１０〜２０分間発色させた。１Ｍ硫酸溶液を１００μｌ／穴を加えて反応を停止後、マイクロプレートリーダー（スペクトラマックス、和光純薬工業）を用いて（波長４５０ｎｍ）吸光度を測定した。
【００５４】
各実験は、デュプリケートで行い、各々のサイトカイン産生量の平均値を求めた。また、該平均値より、以下の式にて抑制率（％）を求めた。
抑制率（％）＝｛１−（Ｔ−Ｎ）／（Ｐ−Ｎ）｝×１００
ここで、Ｔは供試化合物処理群の平均値、Ｎは陰性対照群の平均値、Ｐは陽性対照群の平均値を各々表す。このようにして測定した各サイトカイン産生抑制率を各々第４表に示す。
【００５５】
【表６】
2005023064.tif 000008