(57)【要約】【課題】  原料の入手が容易で、安全性が高く、様々なタイプのウイルスを効率よく吸着できるウイルス捕捉組成物、及びそれを吸着させたウイルス捕捉フィルターを提供する。【解決手段】  ウイルス捕捉組成物の有効成分として、燕窩の水抽出物及び／又は燕窩の酵素処理物を含有させる。また、前記ウイルス捕捉組成物（３）をフィルター（２）に吸着させることによりウイルス捕捉フィルター（１）を得る。本ウイルス補足組成物はスプレー剤の形態であることが好ましい。また、ウイルス捕捉フィルターは、マスクフィルター、空気清浄器用フィルター、又はエアコン用フィルターであることが好ましい。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
燕窩の水抽出物及び／又は燕窩の酵素処理物を有効成分として含有することを特徴とするウイルス捕捉組成物。
【請求項２】
スプレー剤の形態である請求項１に記載のウイルス捕捉組成物。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のウイルス捕捉組成物をフィルターに吸着させたことを特徴とするウイルス捕捉フィルター。
【請求項４】
前記フィルターは、マスクフィルター、空気清浄器用フィルター、又はエアコン用フィルターである請求項３に記載のウイルス捕捉フィルター。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マスクやフィルターに吸着させることにより、空気中に浮遊しているウイルスを吸着し、ウイルスが人体に入るのを防止することができるウイルス捕捉組成物、及び該組成物を吸着させたウイルス捕捉フィルターに関する。
【背景技術】
【０００２】
ウイルスは、病原体としてわれわれの生活に深い関わりをもっており、ヒトに感染するウイルスとして、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ＥＢウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、インフルエンザウイルス、ポリオウイルス、日本脳炎ウイルス、エイズウイルスなどの様々なウイルスが知られている。
【０００３】
例えばインフルエンザは、数年〜数十年の周期で大流行し、感染すると高熱、頭痛、咽頭痛、全身倦怠などの臨床症状を示す。特に小児では脳症・脳炎、高齢者では細菌の二次感染による肺炎などを引き起こし、死亡する場合もある。
【０００４】
インフルエンザウイルスは、人ごみでの空気感染や飛沫感染によって流行することが知られており、その予防方法としては、ワクチン接種やウイルスが人体に入るのを防止するためにマスクを装着することが行われている。
【０００５】
しかしながら、インフルエンザウイルスはその抗原構造が頻繁に変化するため、ワクチンによる予防効果が長続きしないという問題があった。
【０００６】
また、ウイルスの大きさは非常に小さく、通常のマスクではウイルスが透過してしまうため、予防方法としては十分ではなかった。
【０００７】
そのため、空気中のウイルスを効率よく捕捉し、不活性化するマスクやフィルターの開発が進められている。
【０００８】
例えば、下記特許文献１には、茶の抽出成分を添着したエレクトレットフィルタからなる抗ウイルスマスクが開示されている。
【０００９】
また、下記特許文献２には、インフルエンザウイルスのヘマグルチニン部位に吸着する吸着剤を、シートに担持させたインフルエンザウイルス捕捉フィルターが開示されている。
【００１０】
また、下記特許文献３には、Ｃａ／Ｐ比が１．０〜２．０のリン酸カルシウム系化合物を０．１〜１０重量％含有することを特徴とするマスク用抗菌・抗ウイルススプレーが開示されており、該スプレーをマスクに噴霧することにより、抗菌処理などの施されていない市販のガーゼマスクや不織布マスクに優れた抗菌・抗ウイルス性を付与できることが記載されている。
【００１１】
また、下記特許文献４には、マンノース結合型レクチンが、親水性高分子鎖を介して疎水性高分子鎖よりなる基材に結合されている抗ウイルス素材からなり、フィルター構造を有することを特徴とする抗ウイルス素材が開示されている。
【００１２】
また、下記特許文献５には、インフルエンザウイルスを不活化する薬剤としてクロルヘキシジンの有機酸または無機酸の塩類を水溶液あるいは合成樹脂分散液と併用して、空気清浄器のフィルター部分に処理してなることを特徴とするインフルエンザウイルス不活化剤が開示されている。
【００１３】
また、下記特許文献６には、不織布状の集塵フィルターに防カビ性を有する素材と抗菌性を有する素材と抗ウイルス性を有する素材を添着させた防カビ抗菌抗ウイルスフィルターが開示されている。
【００１４】
また、下記特許文献７には、抗菌性複合体を樹脂中に含むフィラメントと、樹脂表面に抗菌性複合体を付着あるいは接着させたフィラメントとのうち少なくとも一方からなる織物あるいは不織布あるいはその併用物から構成したことを特徴とする抗菌性フィルターが開示されている。
【特許文献１】特開２００２−１３６６１５号公報
【特許文献２】特開２００２−５８７３０号公報
【特許文献３】特開平１１−１９９４０３号公報
【特許文献４】特開平１０−５２４８２号公報
【特許文献５】特開平１０−４５５０５号公報
【特許文献６】特開平１０−３１５号公報
【特許文献７】特開平７−３１８１２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
しかしながら、マスクやフィルターにリン酸カルシウムを付着させた場合、目詰まりし易くなり、ウイルス吸着性と通気性の両機能を十分に満足させることは難しかった。
【００１６】
また、カテキン類等の抗菌剤は比較的少量でもウイルス不活性化能を発揮するが、酸化による変質を起こしやすく、効果が持続しないという問題があった。更に、他の抗菌剤においては、人体に直接装着するマスクフィルター等に用いた場合、安全性の面で問題があった。
【００１７】
一方、スルファチド、ガラクトシルセラミド、マンノース結合型レクチン等のウイルスを吸着する物質は、大量に入手することが困難であり、また非常に高価であるという欠点があった。
【００１８】
したがって、本発明の目的は、原料の入手が容易で、安全性が高く、様々なタイプのウイルスを効率よく吸着できるウイルス捕捉組成物、及びそれを吸着させたウイルス捕捉フィルターを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
上記目的を達成するため、本発明のウイルス捕捉組成物は、燕窩の水抽出物及び／又は燕窩の酵素処理物を有効成分として含有することを特徴とする。
【００２０】
本ウイルス捕捉組成物は、燕窩の水抽出物及び／又は燕窩の酵素処理物を有効成分として含有することにより、効率よくウイルスを吸着することができる。すなわち、燕窩の水抽出物及び／又は燕窩の酵素処理物が、ウイルスが宿主に吸着・感染する際に重要な働きをする感染基に結合することにより、ウイルスを不活性化することができ、ウイルスの抗原構造の変化に左右されることなくその効果を持続することができる。また、燕窩は食品として広く食されているので、入手が容易であり、安全性も高い。
【００２１】
本発明のウイルス捕捉組成物は、スプレー剤の形態であることが好ましい。この態様によれば、抗菌処理などの施されていない市販のマスクやフィルターに噴霧することにより、容易にそれらにウイルス捕捉能を付与することができる。
【００２２】
また、本発明のウイルス捕捉フィルターは、前記ウイルス捕捉組成物をフィルターに吸着させたことを特徴とする。
【００２３】
本発明のウイルス捕捉フィルターは、マスクフィルター、空気清浄器用フィルター、又はエアコン用フィルターであることが好ましい。
【００２４】
本ウイルス捕捉フィルターは、燕窩の水抽出物及び／又は燕窩の酵素処理物を有効成分として含有するウイルス捕捉組成物を吸着させているので、空気中のウイルスを効率よく捕捉し、ウイルス感染を防止することができる。
【発明の効果】
【００２５】
本発明によれば、食品である燕窩由来の成分を有効成分として含有することにより、安全性が高く、インフルエンザウイルス、コロナウイルス、ＳＡＲＳウイルス等の様々なタイプのウイルスを効率よく吸着できるウイルス捕捉組成物を提供できる。そして、本ウイルス捕捉組成物をフィルターに吸着させることにより、空気中のウイルスを効率よく捕捉し、ウイルス感染を予防することができるウイルス捕捉フィルターを提供できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
燕窩は、アナツバメが自らの唾液を糸状にして作る巣であり、中国では古くから高級な食材として食されているほか、肺疾患、健胃、去痰、皮膚の若返り、滋養強壮等の医療効果のある食品としても用いられている。また、その成分としては、タンパク質と糖質を多く含み、また、脂質はほとんど含まれていない。
【００２７】
一般に市販されている燕窩には、自然の洞窟で採取されたもの（cave nest）と屋内で養殖したもの（house nest）があるが、両者とも用いることができる。また、採取した燕窩から毛や糞等の汚れを取り除いて洗浄しただけのものから、燕窩のクズを集めて漂白と洗浄を繰り返して成形したものまで様々な種類があるが、前処理において過度の洗浄や漂白等が行われていない燕窩を用いることが好ましい。
【００２８】
本発明の燕窩水抽出物は、例えば以下のようにして得ることができる。粒径２ｍｍ以下、好ましくは１５０μｍ以下の大きさに粉砕した燕窩に、その質量の１０〜１，０００倍量の水を加えて、１〜１００℃、０．５〜４８時間静置又は撹拌して抽出を行った後、濾過して濾液を得る。この濾液はそのまま、又は適宜濃縮して濃縮液とし、本発明のウイルス捕捉組成物とすることができる。また、これらを凍結乾燥又は噴霧乾燥して粉末化してもよい。
【００２９】
また、燕窩の酵素処理物は、上記と同様の大きさに粉砕した燕窩に、その質量の１０〜１，０００倍量の水又は熱水を加えて上記と同様にして抽出した抽出液（濾過前の溶液）、前記抽出液を濾過した濾液、又は前記抽出液を６０〜１３０℃、５〜３０分間加熱処理した溶液を酵素処理して得ることができる。
【００３０】
上記酵素としては、プロテアーゼが好ましく、例えば一般に食品用の酵素として市販されているものを１種又は２種以上組合せて用いることができる。具体的には、「パンクレアチンＦ」（商品名、天野製薬製）、「アロアーゼＡＰ−１０」（商品名、ヤクルト薬品工業製）、「パパインソルブル」（商品名、ヤクルト薬品工業製）、「耐熱性プロテアーゼ  サモアーゼ」（商品名、大和化成製）等が例示できる。
【００３１】
また、酵素処理条件は、特に制限はなく、溶液のｐＨを使用する酵素の至適ｐＨに調整して酵素を適量加え、酵素の至適温度で０．５〜２４時間反応させた後、加熱処理するなどして酵素を失活させればよい。この反応液を濾過して得られる濾液は、そのまま、又は適宜濃縮して濃縮液とし、本発明のウイルス捕捉組成物とすることができる。また、これらを凍結乾燥又は噴霧乾燥して粉末化してもよい。
【００３２】
上記酵素処理物の平均分子量は５００〜２０万が好ましく、２，０００〜７万がより好ましい。
【００３３】
本発明のウイルス捕捉組成物は、上記のようにして得られた燕窩水抽出物又はその酵素処理物以外に、各種糖分、蛋白質、脂質、ミネラル、ビタミン、食物繊維、アルコール、界面活性剤、保存料等の成分を含むことができる。
【００３４】
本発明のウイルス捕捉剤の形態は特に制限はないが、溶液剤やスプレー剤とすることが好ましい。これにより、市販のマスクやフィルターに噴霧等することにより、容易にそれらにウイルス捕捉能を付与することができる。また、本ウイルス捕捉組成物は、食品由来の成分であるので安全性が高く、吸入剤等として直接人体に使用することもできる。
【００３５】
本発明のウイルス捕捉組成物における燕窩の水抽出物及び／又は燕窩の酵素処理物の含有量は、０．１〜１０，０００μｇ／ｍＬが好ましく、０．２〜４００μｇ／ｍＬがより好ましい。
【００３６】
次に、本発明のウイルス捕捉フィルターについて説明する。      
本発明のウイルス捕捉フィルターは、上記ウイルス捕捉組成物を、例えば不織布や織布等からなるフィルターに吸着させることにより得ることができる。不織布や織布の材質としては、ポリエステル、ポリアミド、ポリアクリル、ポリプロピレン、レーヨン、木綿、木材パルプ等が例示できる。
【００３７】
また、フィルターとしては、マスクフィルター、空気清浄器用フィルター、エアコン用フィルター等が好ましく例示できる。なお、空気循環経路中に設置された「水タンク」内にウイルス捕捉剤を添加する方法を採用することもできる。
【００３８】
本ウイルス捕捉フィルターは、例えば、不織布や織布等からなるフィルター材料を所定の形状に成形してなるフィルターを溶液状のウイルス捕捉組成物に浸漬した後乾燥させる方法や、上記フィルターにウイルス捕捉組成物をスプレーした後乾燥させる方法により得ることができる。また、紙、布、繊維等のフィルター材料にウイルス捕捉組成物を予め吸着させておき、これらのフィルター材料を用いて所定の形状のフィルターを製造してもよい。更に、ウイルス捕捉組成物を吸着させた不織布や織布等をフィルターの間に挿入してもよい。
【００３９】
フィルターへの本ウイルス捕捉組成物の付与量は、特に制限されないが、通常、燕窩の水抽出物及び／又は燕窩の酵素処理物を、固形分として好ましくは０．１〜１０，０００μｇ／ｍＬ、より好ましくは０．２〜４００μｇ／ｍＬ含む溶液に浸漬するか、あるいは該溶液をフィルター全体に均一にスプレーすればよい。なお、本ウイルス捕捉組成物含有液に、不織布で作られたマスクを浸漬して含浸させたときの液量は、しぼり方の強さにもよるが、約３〜１０ｇ／マスクとなる。
【００４０】
図１には、本発明のウイルス捕捉組成物を吸着させたマスクフィルターの一実施形態が示されている。この実施形態においては、（Ａ）に示すように、マスクフィルター本体２に本ウイルス捕捉組成物３を均一にスプレーし、乾燥させることにより吸着させている。
【００４１】
このようにして得られたウイルス捕捉マスクフィルター１を（Ｂ）に示すように装着することにより、空気中のウイルスがウイルス捕捉マスクフィルター１に吸着されるので、口や鼻からのウイルスの侵入を防ぐことができる。なお、洗濯などによりウイルス捕捉組成物が洗い流されても、再度本ウイルス捕捉組成物３をスプレーして乾燥させることによりウイルス捕捉能を簡単に付与できる。
【００４２】
また、図２には、本発明のウイルス捕捉組成物を吸着させた空気清浄器用フィルターの一実施形態が示されている。この実施形態においても（Ａ）に示すように空気清浄器用フィルター本体４に本ウイルス捕捉組成物３を均一にスプレーし、乾燥させることにより吸着させている。なお、フィルター本体４の乾燥は、空気清浄器５にフィルター本体４を装着して運転することにより行うこともできる。
【００４３】
このようにして得られた空気清浄器用ウイルス捕捉フィルターを装着した空気清浄器５を運転することにより、（Ｂ）に示すように空気中のウイルスが空気清浄器用ウイルス捕捉フィルターに吸着されて、きれいな空気が排出される。
【実施例１】
【００４４】
表１に示すような各サンプルを調製して、以下の試験に用いた。
【００４５】
【表１】
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【００４６】
（１）感染中和試験
インフルエンザウイルスに感染にしたMDCK（Madian-Darby Canine Kidney）単層細胞から放出される乳酸脱水素酵素（LDH）の活性を測定することにより、ヒトインフルエンザウイルスによる細胞膜の破壊度を測定した（C-T Guo, C-H Wong, T Kajimoto, T Miura, Y Ida, L R Juneja, M J Kim, H Masuda, T Suzuki, and Y Suzuki. Synthetic sialylphosphatidyl-ethanolamine derivatives bind to human influenza A viruses and inhibit viral infection. Glycoconjugate J., 1998, 15(11):1099-1108参照）。
【００４７】
すなわち、約１００TCID５０（５０％ Tissue-Culuture Infectious Dose：５０％組織培養感染量）のインフルエンザウイルス（A/PR/8/34（H1N1）又はA/Aichi/2/68（H3N2））、及び表１に示す各サンプル（終濃度１〜５０００μｇ/ｍＬ）を含むEMEM培地（Eagles Minimum Essential Medium）を、９６穴タイタープレート（平底）に単層培養したMDCK細胞へ接種し、３４．５℃で５時間培養した。
【００４８】
培養後、液を除去し、１００μＬの同培地に懸濁した。さらに３４．５℃で２０時間培養し、得られた培養液の１２．５μＬを１００ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．２）で４倍に希釈し、５０μＬの反応液（２ｍＭ NAD、２００ｍ−unit/ｍＬのディアフォラーゼ、１９０ｍＭ乳酸リチウム、０．７８ｍＭニトロブルーテトラゾリウム、１００ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．２））を添加した。３７℃で１０分インキュベートした後、１００μＬの０．５Ｍ塩酸を添加して反応を停止させた。５５０ｎｍの吸光度（対照は６３０ｎｍ）を測定してLDH活性を求めた。なお、陽性対照としてフェツイン（Fetuin）を用いた。フェツインは、ウシ胎児血清に含まれる成分で、インフルエンザ中和活性を有していることが知られている。その結果を図３に示す。
【００４９】
図３（Ａ）、（Ｂ）に示すように、サンプル１のヒトインフルエンザウイルス（A/PR/8/34（H1N1）とA/Aichi/2/68（H3N2））に対するIC50は、８０μｇ/ｍＬであり、陽性対照としたフェツインの阻害活性に比べて２〜８倍の強い阻害活性を有することが分かった。一方、サンプル２は、ヒトインフルエンザウイルス（A/PR/8/34（H1N1））に対してフェツインとほぼ同等の阻害活性を有することが分かった。
【００５０】
なお、上記の各サンプルについて、MDCK単層細胞を用いて、２倍づつ希釈燕窩溶液（始濃度５ｍｇ/ｍＬ）を含むEMEM培地を９６穴タイタープレート（平底）に単層培養したMDCK細胞へ加えて３７℃で２５時間培養し、得られた培養液の乳酸脱水素酵素（LDH）の活性を測定することにより、細胞毒性があるかを調べたところ、すべてのサンプルでMDCK細胞に対して細胞毒性を示さず、安全性が高いことが分かった。
【００５１】
（２）赤血球凝集阻害試験
９６穴タイタープレート（Ｕ底）の各ウェルにＰＢＳを２５μＬずつ分注し、被検サンプル（サンプル１、２）溶液２５μＬをタイタープレートの１列目に入れ、マイクロピペットで数回吸引吐出を行った。１列目のウエルの２５μＬを２列目に移し、マイクロピペットで数回吸引吐出を行った。この操作を３列目へ、４列目へと同様に行い、２倍希釈列を作製した。
【００５２】
各ウェルに、表２に示す各ウイルスを含む溶液を２５μＬずつ分注した後、タイタープレートを緩やかにゆすり、その後４℃で６０分放置した。そして、各ウェルに０．５％(V/V)ヒト赤血球浮遊液を５０μＬずつ分注して、タイタープレートを緩やかにゆすり、その後４℃で６０分放置してから、各ウェルの底部への赤血球の沈降状態により凝集の有無を判定し、各サンプルの、凝集阻害を起こすことのできた最低濃度を算出した。その結果を表２に示す。
【００５３】
【表２】
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【００５４】
表２に示すように、サンプル１は、調べたインフルエンザウイルス（ヒト、トリ或いはブタから分離されたウイルス）中、A/Swine/Colorado/1/77（H3N2）を除いたウイルスに対して非常に低濃度で赤血球凝集阻害活性を示すことが分かる。一方、サンプル２は、A/Memphis/1/71とA/Swine/Colorado/1/77（H3N2）を除いたウイルスに対して低濃度で赤血球凝集阻害活性を示すことが分かる。
【００５５】
以上の結果から、サンプル１、２は、幅広いタイプのインフルエンザウイルスに対して吸着能を有していることが分かった。
【００５６】
（３）サンプル１及びサンプル２に含まれるシアル酸分子種と含量
インフルエンザウイルスは、シアル酸を含む特定の糖鎖を認識し、結合することが明らかになっている。そこで、燕窩におけるシアル酸の分子種及び含量を以下の方法で調べた（Hara, S.,Yamaguchi, M., Takemori, Y., Nakamura, M., Ohkura, Y.:Highly sensitive determination of N-acetyl- and N-glycolylneuraminic acids in human serum and urine and rat serum by reversed-phase liquid chromatography with fluorescence detection. J. Chromatogr., 377, 111-119 (1980)、Hara, S., Takemori, Y., Yamaguchi, M., Nakamura, M., Ohkura, Y.: Fluorometric high-performance liquid chromatography of N-acetyl and N-glycolylneuraminic acids and its application to their microdetermination inn human and animal sare. Analytical Biochem., 164, 138-145 (1987)参照）。
【００５７】
すなわち、各サンプルを２０μＬの２Ｍ酢酸中で８０Ｃ、３時間加熱してシアル酸のグリコシド結合を加水分解した後、蛍光試薬（Sodium hydrosulfate １５．７ｍｇ、2-mercaptoethanol ３５０μＬ及びdiamino4,5-methylenedioxybenzene 2HCl（以下DMB、同仁化学）７．９ｍｇに水を加え５ｍＬに調製したもの）２０μＬを加え、暗所で５０℃、２．５時間加熱した。
【００５８】
この反応液のうち、１０μＬをCOSMOSIL/COSMOGELカラム（商品名、ナカライテスク社製）を用いたＨＰＬＣにてシアル酸の蛍光誘導体を分離し、分光蛍光光度計（商品名「650-10S」 HITACHI製）にて検出した。その結果を図４に示す。
【００５９】
図４に示すように、サンプル１及びサンプル２はいずれもシアル酸を含み、Ｎ−アセチルノイラミン酸（NeuAc）が主要分子種であることが判明した。また、比率は少ないがＮ−グリコリルイラミン酸（NeuGc）も含まれることが分かった。また、サンプル１のＮ−アセチルノイラミン酸含量（１２．２５％）は、サンプル２（６．５２％）に比べて約２倍高く、Ｎ−グリコリルイラミン酸含量は、サンプル１で０．４１％、サンプル２では０．０９％であった。
【００６０】
この結果から、サンプル１、２中に含まれるシアル酸は、ヒトのシアル酸分子種とよく似ており、これらシアル酸を含むタンパク質、ペプチドあるいは脂質分子がインフルエンザウイルスと結合する成分であることが示唆された。
【００６１】
また、サンプル１は、サンプル２に比べて高いインフルエンザウイルス結合活性及び感染阻害活性が認められたが、この事実とサンプル１はサンプル２に比べてシアル酸含量が高いことは良く相関していることからも、サンプル中のシアル酸含有分子が抗インフルエンザ活性を有することが示唆される。
【００６２】
（４）ＳＤＳ―アクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）により分離した糖ペプチドへのインフルエンザウイルスの結合性を以下の方法で調べた（Takashi Suzuki, Mikiko Tsukimoto, Masato Kobayashi, Akira Yamada, Yoshihiro Kawaoka, Robert G. Webster, Yasuo Suzuki: Sialoglycoproteins that Bind Influenza A Virus and Resist Viral Neuraminidase in Different Animal Sera. J. Gen. Virology, 75, 1769-1774 (1994)参照）。
【００６３】
すなわち、ＰＢＳに溶解したサンプル１又はサンプル２（０．２ｍｇ）を、等量のＳＤＳ−ＰＡＧＥ用試料調製用緩衝液（２％ＳＤＳ、１０％グリセリン、０．００１％ Bromphenol Blue、含有０．０６２５Ｍトリス緩衝液、ｐＨ６．８）で希釈した。各サンプルは沸騰水浴中で５分間処理し、非還元下、１０−２０％の濃度のＳＤＳ−ポリアクリルアミド（ＳＤＳ−ＰＡＧＥプレート：商品名「ET-1020L」、アトー社製）により分離した。
【００６４】
ゲルに展開された糖ペプチドはPolyvinylidene difluoride（ＰＶＤＦ）膜（第一化学社製）に転写し（２ｍＡ／ｃｍで３０分間通電）、５％ウシ血性アルブミン（ＢＳＡ）−ＰＢＳ溶液（０．２ｍＬ／ｃｍ）で４℃、１５時間ブロッキングした。このＰＶＤＦ膜をＰＢＳで５回洗浄後、２ＨＡＵに調製したインフルエンザウイルス−０．２５％ＢＳＡ−ＰＢＳ懸濁液を加え、ウイルスノイラミニダーゼの影響を避けるために４℃で１５時間穏やかに振盪した。その後、ウイルス懸濁液を除き、ＰＶＤＦ膜をＰＢＳで５回洗浄後、抗インフルエンザ抗体を加えて４℃で２時間振盪した。抗体溶液を取り除き、このＰＶＤＦ膜をＰＢＳで５回洗浄後、VECTASTAIN KitのＡＢＣ（ペルオキシダーゼ）キット（商品名、Vector Laboratories, Inc製）の０．２５％ＢＳＡ−ＰＢＳ溶液を加え、４℃で２時間振盪した。このＰＶＤＦ膜をＰＢＳで５回洗浄後、０．１Ｍ酢酸（ｐＨ６．０）１０ｍＬに、発色液（１１０ｍＭ 4-chloro-1-naphtholのアセトニトリル溶液２００μＬ、６０ｍＭ N,N-diethyl-p-phenylenediamine-dihydrochlorideのアセトニトリル溶液２００μＬ、３１％過酸化水素水１μＬを混和したもの）を用いてウイルスの結合を調べた。その結果を図５に示す。
【００６５】
図５に示すように、サンプル１及びサンプル２はいずれもインフルエンザウイルス（A/Aichi/2/68(H3N2)、A/Memphis/1/71(H3N2)）と結合するバンド（図中矢印で示すバンド）が確認された。一方、ウイルスを加えないで他の操作を全て同じように処理した対照実験（Virus(-)）ではウイルスに結合するバンドは確認できないので、上記のバンドはウイルスに特異的に結合できる糖ペプチドであると考えられた。また、クマシーブリリアントブルー（ＣＢＢ）（タンパク質やペプチドを染色できる）によるバンドの染色度合いはサンプル１、２ともにほぼ同じであるが、ウイルスとの結合性は、サンプル１の方がサンプル２よりも強く、その種類も多いことが明らかとなった。この結果から、サンプル１中には、インフルエンザウイルスと結合するシアル酸を含む糖ペプチドがサンプル２に比べてより豊富に含まれていることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００６６】
本発明のウイルス捕捉組成物は、食品由来の成分を有効成分としているので安全性が高く、また、様々なタイプのウイルスに対して吸着能を有しているので、ウイルスの感染予防剤等として利用することができる。また、本ウイルス捕捉組成物をマスクやフィルターに付与することにより、空気中のウイルスを効率よく吸着除去し、ウイルス感染を防ぐことができるウイルス捕捉フィルターを簡単に得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００６７】
【図１】本発明のウイルス捕捉フィルターの一実施形態を示す図である。
【図２】本発明のウイルス捕捉フィルターの別の実施形態を示す図である。
【図３】本発明のウイルス捕捉組成物のインフルエンザウイルス感染中和活性を調べた結果を示す図表である。
【図４】本発明のウイルス捕捉組成物に含まれるシアル酸分子種と含量を調べた結果を示す図表である。
【図５】本発明のウイルス捕捉組成物に含まれる糖ペプチドをＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分離し、インフルエンザウイルスとの結合性を調べた結果を示す図である。
【符号の説明】
【００６８】
１．ウイルス捕捉マスクフィルター
２．マスクフィルター本体
３．ウイルス捕捉組成物
４．空気清浄器用フィルター本体
５．空気清浄器
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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