(57)【要約】【課題】  ナトリウムチャネルのサイト２を選択的に阻害できる医薬を提供する。【解決手段】  下記一般式（１）で表わされる化合物を有効成分とするナトリウムチャネルのサイト２選択的阻害剤。【化１】2005206590.tif 000014〔Ｒ1 は水素原子、ハロゲン原子、アルコキシ基、又はジアルキルアミノ基を表わし、Ｒ2は水素原子、ハロゲン原子又はアルコキシ基を表わし、Ｒ3は水素原子、ヒドロキシル基、又は−Ｏ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ（ｎは１〜５の整数を表わす。）を表わし、Ｒ4は−Ｎ（Ｒ5）（Ｒ6）（Ｒ5及びＲ6は水素原子又はアルキル基を表わす。）などを表わし、ｍは０〜５の整数を表わす〕【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含むナトリウムチャネルのサイト２選択的阻害剤。
【化１】
2005206590.tif 000010
〔式中、Ｒ1 は水素原子、ハロゲン原子、Ｃ1〜Ｃ5のアルコキシ基、又はＣ2〜Ｃ6のジアルキルアミノ基を表わし、Ｒ2は水素原子、ハロゲン原子、又はＣ1〜Ｃ5のアルコキシ基を表わし、Ｒ3は水素原子、ヒドロキシル基、−Ｏ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ（式中、ｎは１〜５の整数を表わす）、又はＯ−ＣＯ−（ＣＨ2）l−ＣＯＯＨ（式中、ｌは１〜３の整数を表わす）を表わし、Ｒ4は−Ｎ（Ｒ5）（Ｒ6）（式中、Ｒ5及びＲ6はそれぞれ独立して水素原子又はＣ1〜Ｃ8のアルキル基を表わす）又は
【化２】
2005206590.tif 000011
（式中、Ａはカルボキシル基で置換されていてもよいＣ3〜Ｃ5のアルキレン基を表わす。）を表わし、ｍは０〜５の整数を表わす。〕
【請求項２】
請求項１記載のナトリウムチャネルのサイト２選択的阻害剤及びセロトニン受容体阻害剤。
【請求項３】
アミノアルコキシビベンジル類が下記（２）で表わされる化合物である請求項１又は２に記載の阻害剤。
【化３】
2005206590.tif 000012
【請求項４】
アミノアルコキシビベンジル類が下記（３）で表わされる化合物である請求項１又は２に記載の阻害剤。
【化４】
2005206590.tif 000013
【請求項５】
塩酸塩の形態の物質を有効成分として含む請求項３又は４に記載の阻害剤。
【請求項６】
請求項１記載の一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含むナトリウムチャネルのサイト２の活性化に起因する疾患の予防及び／又は治療のための医薬。
【請求項７】
請求項１記載のナトリウムチャネルのサイト２の活性化に起因する疾患及びセロトニンの同時活性化を伴う疾患の予防及び／又は治療のための医薬。
【請求項８】
アミノアルコキシビベンジル類が請求項３に記載の式（２）で表わされる化合物である請求項６又は７に記載の医薬。
【請求項９】
アミノアルコキシビベンジル類が請求項４に記載の式（３）で表わされる化合物である請求項６又は７に記載の医薬。
【請求項１０】
塩酸塩の形態の請求項８又は９に記載の医薬。
【請求項１１】
疾患が虚血性脳血管障害及び神経因性疼痛からなる群から選ばれる請求項６又は７に記載の医薬。
【請求項１２】
虚血性脳血管障害が一過性脳虚血発作及び脳梗塞からなる群から選ばれる請求項１１に記載の医薬。
【請求項１３】
神経因性疼痛が帯状疱疹後神経痛に伴う疼痛、反射性交感神経性ジストロフィーに伴う疼痛、及び糖尿病性神経障害に伴う疼痛からなる群から選ばれる請求項１１に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナトリウムチャネルのサイト２の選択的阻害作用を有する医薬に関する。さらに、本発明は、ナトリウムチャネルのサイト２の選択的阻害作用及び５HT2受容体の阻害作用を有する医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
塩酸サルポグレラートに代表される特定構造のアミノプロポキシビベンジル類は５HT2受容体に高い選択性を示す薬剤である。塩酸サルポグレラートについては、これまで脳循環障害、虚血性心疾患、末梢循環障害等の疾患における、血栓生成及び血管収縮に基づく種々の微小循環障害の改善に有効であることが知られている（特開平２−３０４０２２号公報）。
【０００３】
臨床において、塩酸サルポグレラートは、一過性脳虚血発作、脳梗塞等の虚血性脳血管障害における血栓・塞栓形成の抑制剤として有用であることが知られている（WO０３／０２６６３６号公報）。さらに、帯状疱疹後神経痛(PHN) などの神経因性疼痛の治療や、糖尿病性末梢神経障害に伴う疼痛を改善することも知られている（Pain Clinic, 19, pp.1144-1149, 1998、薬理と治療(Jpn. Pharmacol. Ther.), Vol.23, No.11, 213-219, 1995）。さらに、神経因性疼痛モデルラットの熱性痛覚過敏に対してこの化合物が有効であり、その効果が５HT2受容体阻害作用に基づくものであることが示唆されている（九州歯会誌  ５４、１１６−１２５．２０００）。
しかしながら、一方で、全く同一の神経因性疼痛モデルラットの熱性痛覚過敏に対して、この化合物が無効であったとの報告もあり（Ｐａｉｎ  ９９，１３３−１４３．２００２）、神経因性疼痛の予防及び／又は治療に対してどのような作用を有する薬剤が有効であるかは未だ明確ではない。
【０００４】
一方、最近の研究により神経細胞に存在するナトリウムチャネルのうち、ナトリウムチャネルが活性化した時に現れる部位であるナトリウムチャネルのサイト２に選択性を有する阻害剤が、虚血後の脳神経壊死を抑制したり（PNAS  ２０００；９７：４９４４）、梗塞巣を抑制し、死亡率を低下さることが報告されている（Eur．J.  Pharmacol.  ２００１（４２１）１６５）。
また、神経因性疼痛等に対して有効な治療剤の一種である局所麻酔薬、抗痙攣剤、抗不整脈剤等はナトリウムチャネルを阻害することが知られている(The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 288, pp.1151-1159, 1999)。その中で、ラモトリジン（Lamotrigine）を代表とする局所麻酔剤は  サイト２に結合し、作用を発現することが報告されている（Novartis Found Symp. 2002;241:206-18）。
しかし、塩酸サルポグレラートに代表されるような下記式（２）
【化１】
2005206590.tif 000002
で表される化合物が、ナトリウムチャネルのサイト２に選択的に結合し、その作用を阻害することは、本発明者らの知る限り、これまで報告されていない。また、ナトリウムチャネルのサイト２を阻害するとともに、セロトニン受容体を阻害する薬剤についても、これまで報告されていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の課題は、ナトリウムチャネルのサイト２を選択的に阻害できる医薬を提供することにある。本発明の別の課題は、ナトリウムチャネルのサイト２を選択的に阻害し、かつ５HT2受容体に選択的に阻害する作用を有する医薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは上記の課題を解決すべく鋭意研究を実施した結果、下記一般式（Ｉ）で表されるアミノアルコキシビベンジル類がナトリウムチャネルのサイト２を選択的に阻害することを見出した。本発明は上記の知見を基にして完成されたものである。
【０００７】
すなわち、本発明により、下記一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含むナトリウムチャネルのサイト２選択的阻害剤が提供される。
【化２】
2005206590.tif 000003
〔式中、Ｒ1 は水素原子、ハロゲン原子、Ｃ1〜Ｃ5のアルコキシ基、又はＣ2〜Ｃ6のジアルキルアミノ基を表わし、Ｒ2は水素原子、ハロゲン原子、又はＣ1〜Ｃ5のアルコキシ基を表わし、Ｒ3は水素原子、ヒドロキシル基、−Ｏ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ（式中、ｎは１〜５の整数を表わす）、又はＯ−ＣＯ−（ＣＨ2）l−ＣＯＯＨ（式中、ｌは１〜３の整数を表わす）を表わし、Ｒ4は−Ｎ（Ｒ5）（Ｒ6）（式中、Ｒ5及びＲ6はそれぞれ独立して水素原子又はＣ1〜Ｃ8のアルキル基を表わす）又は
【化３】
2005206590.tif 000004
（式中、Ａはカルボキシル基で置換されていてもよいＣ3〜Ｃ5のアルキレン基を表わす。）を表わし、ｍは０〜５の整数を表わす。〕
【０００８】
別の観点からは、上記一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含むナトリウムチャネルのサイト２選択的阻害剤及び５HT2受容体阻害剤が提供される。
【０００９】
本発明の好ましい態様によれば、アミノアルコキシビベンジル類が下記（２）で表わされる化合物である上記の阻害剤；
【化４】
2005206590.tif 000005
アミノアルコキシビベンジル類が下記（３）で表わされる化合物である上記の阻害剤；
【化５】
2005206590.tif 000006
及び、塩酸塩の形態の上記の阻害剤が提供される。
【００１０】
別の観点からは、本発明により、上記の一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含むナトリウムチャネルのサイト２の活性化に起因する疾患の予防及び／又は治療のための医薬が提供される。
【００１１】
さらに別の観点からは、本発明により、上記の一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含むナトリウムチャネルのサイト２の活性化に起因する疾患及びセロトニンの同時活性化を伴う疾患の予防及び／又は治療のための医薬が提供される。
【００１２】
この発明の好ましい態様によれば、アミノアルコキシビベンジル類が上記の式（２）で表わされる化合物である上記の医薬；アミノアルコキシビベンジル類が上記の式（３）で表わされる化合物である上記の医薬；塩酸塩の形態の物質を有効成分として含む上記の医薬；疾患が虚血性脳血管障害及び神経因性疼痛からなる群から選ばれる上記の医薬；虚血性脳血管障害が一過性脳虚血発作及び脳梗塞からなる群から選ばれる上記の医薬；及び神経因性疼痛が帯状疱疹後神経痛に伴う疼痛、反射性交感神経性ジストロフィーに伴う疼痛、及び糖尿病性神経障害に伴う疼痛からなる群から選ばれる上記の医薬が提供される。
【００１３】
また、本発明により、上記の一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含み、ナトリウムチャネルの持続的な活性化を伴う疾患の予防及び／又は治療のために用いる上記の医薬；上記の一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含み、ナトリウムチャネル及び５HT2受容体の同時活性化を伴う、あるいは該同時活性化に起因する疾患の予防及び／又は治療のために用いる上記の医薬が提供される。上記の疾患としては、例えば、虚血性脳血管障害及び神経因性疼痛、好ましくは、一過性脳虚血発作、脳梗塞、又は帯状疱疹後神経痛に伴う疼痛、反射性交感神経性ジストロフィーに伴う疼痛、及び糖尿病性神経障害に伴う疼痛が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１４】
さらに別の観点からは、本発明により、上記の医薬の製造のための上記の一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質の使用；ナトリウムチャネルのサイト２の活性化に起因する疾患、例えば、虚血性脳血管障害及び神経因性疼痛からなる群から選ばれる疾患の予防及び／又は治療方法であって、上記の一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質の予防及び／又は治療有効量をヒトを含む哺乳類動物に投与する工程を含む方法；ナトリウムチャネルの持続的な活性化を伴う疾患の予防及び／又は治療方法であって、上記の一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質の予防及び／又は治療有効量をヒトを含む哺乳類動物に投与する工程を含む方法；並びに、ナトリウムチャネル及びセロトニンの同時活性化を伴う、あるいは該同時活性化に起因する疾患の予防及び／又は治療方法であって、上記の一般式（１）で表わされるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩、及び薬学上許容し得るそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質の予防及び／又は治療有効量をヒトを含む哺乳類動物に投与する工程を含む方法が提供される。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の医薬はナトリウムチャネルのサイト２を選択的に阻害することができ、ナトリウムチャネルのサイト２の活性化に起因する疾患、例えば、虚血性脳血管障害や神経因性疼痛などの疾患の治療のための医薬として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明の阻害剤は、上記一般式（１）で表されるアミノアルコキシビベンジル類、薬学上許容し得るその塩若しくはそのエステル、並びにそれらの溶媒和物及びそれらの水和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含む。
【００１７】
Ｒ1は水素原子；塩素原子、弗素原子等のハロゲン原子；メトキシ基、エトキシ基、ブトキシ基等のＣ1〜Ｃ5のアルコキシ基；ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、メチルエチルアミノ基等のＣ2〜Ｃ6のジアルキルアミノ基を示す。Ｒ2は水素原子；塩素原子、弗素原子等のハロゲン原子；メトキシ基、エトキシ基、ブトキシ基等のＣ1〜Ｃ5のアルコキシ基を示す。Ｒ3は水素原子；ヒドロキシル基；−Ｏ−（ＣＨ2）2 −ＣＯＯＨ、−Ｏ−（ＣＨ2）3−ＣＯＯＨ等の−Ｏ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ（式中、ｎは１〜５の整数を示す）；−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ2）2−ＣＯＯＨ、−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ2）3−ＣＯＯＨ等の−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ2）l−ＣＯＯＨ（式中、ｌは１〜３の整数を示す）を示す。Ｒ4はアミノ基、若しくはメチルアミノ基、エチルアミノ基、ブチルアミノ基、ヘキシルアミノ基、ヘプチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、メチルエチルアミノ基等の炭素数１〜８のアルキル基を１〜２個有するアミノ基を示すか、又はトリメチレンアミノ基、ペンタメチレンアミノ基、３−カルボキシペンタメチレンアミノ基等の環にカルボキシル基が置換していてもよい４〜６員のポリメチレンアミノ基を表わす。
【００１８】
上記一般式（１）に包含される化合物のうち、本発明に好ましく用いられる化合物のいくつかを表−１に示す。
【００１９】
【表１】
2005206590.tif 000007
【００２０】
【表２】
2005206590.tif 000008
【００２１】
これらのなかでも、アミノアルコキシ基−ＯＣＨ2Ｃ（Ｒ3）Ｈ−（ＣＨ2）m−Ｒ4がフェニル基の２−位に結合している化合物が好ましい。また、Ｒ1は水素原子、Ｃ1〜Ｃ5のアルコキシ基、又はＣ2〜Ｃ6のジアルキルアミノ基が好ましく、Ｒ2は水素原子が好ましく、Ｒ4は少なくとも１個のＣ1〜Ｃ8のアルキル基を有するアミノ基又はトリメチレン基ないしはペンタメチレン基を有する４〜６員のポリメチレンアミノ基であるのが好ましく、ｍは０〜２の整数であることが好ましい。特に好ましいのは、Ｒ1がメトキシ基であり、Ｒ2が水素原子であり、Ｒ3が水酸基であり、Ｒ4がジメチルアミノ基であるＮｏ．１５の化合物（以下、本明細書においてこの化合物を「Ｍ−１」と呼ぶ場合がある）及びそのコハク酸エステルであるＮｏ．１４の化合物である。
【００２２】
一般式（１）で表わされる化合物の薬学的に許容される塩を形成する酸としては、例えば塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、酢酸、コハク酸、アジピン酸、プロピオン酸、酒石酸、マレイン酸、蓚酸、クエン酸、安息香酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等が用いられる。また、一般式（１）で表わされる化合物又は薬学的に許容されるその塩の溶媒和物又は水和物も用いることができる。これらのうちで特に好ましいのは、下記式（４）で表わされる（±）−１−〔Ｏ−〔２−（ｍ−メトキシフェニル）エチル〕フェノキシ〕−３−（ジメチルアミノ）−２−プロピル水素スクシナートの塩酸塩である（以下、本明細書において、この物質を「塩酸サルポグレラート」ということもある）。
【００２３】
【化６】
2005206590.tif 000009
【００２４】
一般式（１）で表されるアミノアルコキシビベンジル類、並びに薬学的に許容されるその塩及びそのエステルは公知であり、特開昭５８−３２８４７号公報に記載の方法又はそれに準じた方法により容易に合成できる。なお、上記式（４）で表される塩酸サルポグレラートは、三菱ウェルファーマ株式会社より「アンプラーグ（登録商標）」として市販されており、本発明においては市販の「アンプラーグ」をそのまま使用することも可能である。
【００２５】
本発明の阻害剤は、ナトリウムチャネルのサイト２に対する選択的阻害作用を有している。ナトリウムチャネルは細胞膜の興奮を制御する分子である。ナトリウムチャネル阻害剤の結合部位としては、サイト１ないし６の６種類のサイトが知られているが、これらのうち、サイト２は、ナトリウムチャネルを持続的に活性化させる機能と、電位依存性を変化させる機能を有していることが知られている。
【００２６】
いかなる特定の理論に拘泥するわけではないが、虚血性脳血管障害等においては、虚血時に活性化された電位依存性ナトリウムチャンネルのサイト２の関与により、ナトリウムチャネルの開口状態が、虚血時に続く病的状態においても持続され、これが細胞内への急激なナトリウムイオン流入を引き起こす。さらにこのナトリウムイオン流入により惹起された脱分極が電位依存性カルシウムチャネルも活性化し、細胞内へのカルシウムイオン流入が誘発される結果、グルタミン酸が放出され、多くの細胞傷害性カスケードが惹起されて神経細胞が機能障害に陥る。本発明の医薬は、このカスケードの最初の段階における細胞内へのナトリウムイオン流入を抑制することができ、虚血に陥った細胞を保護することが可能である。
また、神経因性疼痛は、神経の損傷や機能異常に起因する慢性の疼痛疾患であり、その病態メカニズムには、神経の損傷や機能異常によって、神経繊維上に異所性に出現するナトリウムチャネルが関与していることが知られている。特にナトリウムチャネルサイト２の主たる関与が示唆されている。本発明の医薬は、この異所性に出現するナトリウムチャネルのサイト２に選択的に結合することにより、疼痛の発現を抑制することが可能である。
【００２７】
従って、本発明の医薬は、ナトリウムチャネルのサイト２の活性化に起因する疾患の予防及び／又は治療のための医薬として有用である。ナトリウムチャネルのサイト２の活性化に起因する疾患としては、例えば、虚血性脳血管障害又は神経因性疼痛などを挙げることができる。虚血性脳血管障害としては、例えば、一過性脳虚血発作又は脳梗塞などを挙げることができ、神経因性疼痛としては、例えば、帯状疱疹後神経痛に伴う疼痛、反射性交感神経性ジストロフィーに伴う疼痛、又は糖尿病性神経障害に伴う疼痛などを挙げることができる。ここで、もっとも、本発明の医薬を適用可能な疾患は、これらの疾患に限定されることはない。
【００２８】
また、本発明の医薬は、すでに知られているように、５HT2受容体拮抗作用に基づいてセロトニンの活性化を抑制する作用を有している。本発明の医薬は、上記のようにナトリウムチャネルのサイト２の活性化を抑制することができ、合わせてセロトニンの活性化を抑制できることから、両者の抑制作用を併せ持った医薬として有用である。
なお、本発明において、セロトニンの活性化は、血小板の活性化を伴う場合がある。この観点から、本発明の医薬は、ナトリウムチャネルの活性化及びセロトニンの活性化を伴う、あるいはナトリウムチャネルの活性化及びセロトニンの活性化に起因する疾患の予防及び／又は治療のための医薬として有用である。このような疾患としては、例えば、虚血性脳血管障害及び神経因性疼痛、好ましくは、一過性脳虚血発作、脳梗塞、又は帯状疱疹後神経痛に伴う疼痛、反射性交感神経性ジストロフィーに伴う疼痛、及び糖尿病性神経障害に伴う疼痛が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２９】
本発明の医薬の投与方法は当業者が適宜選択可能である。例えば、皮下注射、静脈内注射、筋肉注射、腹腔内注射等の非経口投与、又は経口投与のいずれの投与経路を選択することも可能である。投与量は患者の年齢、健康状態、体重などの条件、同時に投与される医薬がある場合にはその種類や投与頻度などの条件、あるいは所望の効果の性質等により適宜決定することができる。一般的には、有効成分の１日投与量は０．５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、通常１〜３０ｍｇ／ｋｇ体重であり、一日あたり１回あるいはそれ以上投与することができる。
【００３０】
本発明の医薬は、上記の有効成分と１種又は２種以上の製剤用添加物とを含む医薬組成物を調製して投与することが好ましい。経口投与に適した医薬組成物としては、例えば、錠剤、カプセル剤、粉剤、液剤、エリキシル剤等を挙げることができ、非経口投与に適した医薬組成物としては、例えば、液剤あるいは懸濁化剤等の殺菌した液状の形態の医薬組成物を例示することができる。
【００３１】
医薬組成物の調製に用いられる製剤用添加物の種類は特に制限されず、種々医薬組成物の形態に応じて適宜の製剤用添加物を選択することが可能である。製剤用添加物は固体又は液体のいずれであってもよく、例えば固体担体や液状担体などを用いることができる。固体担体の例としては通常のゼラチンタイプのカプセルを用いることができる。また、例えば、有効成分を１種又は２種以上の製剤用添加物とともに、あるいは製剤用添加物を用いずに錠剤化することができ、あるいは粉末として調製して包装することができる。これらのカプセル、錠剤、粉末は、一般的には製剤の全重量に対して５〜９５重量％、好ましくは５〜９０重量％の有効成分を含むことができ、投与単位形態は５〜５００ｍｇ、好ましくは２５〜２５０ｍｇの有効成分を含有するのがよい。液状担体としては水、あるいは石油、ピーナツ油、大豆油、ミネラル油、ゴマ油等の動植物起源の油又は合成の油が用いられる。また、一般に生理食塩水、デキストロールあるいは類似のショ糖溶液、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等のグリコール類が液状担体として好ましく、特に生理食塩水を用いた注射液の場合には通常０．５〜２０％、好ましくは１〜１０％重量の有効成分を含むように調製することができる。
【実施例】
【００３２】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されることはない。なお、以下の実施例では、本発明の医薬として塩酸サルポグレラート（三菱ウェルファーマ株式会社から市販されている「アンプラ−グ（登録商標）」）及びＭ−１（上記表中のＮｏ．１５の化合物：特開昭５８−３２８４７号公報に記載の方法により製造した）を用いた。
【００３３】
例１：アンプラーグ及びＭ−１のナトリウムチャネルサイト２への結合試験
ナトリウムチャネルサイト２のソースとして、ラット脳より膜画分を調製した。インキュベーション用バッファー（50 mM Tris-HCl, pH7.4; 50 mM Hepes, 130 mM Choline-Cl, 5.4 mMKCl; 0.8 mM MgSO4・7H2O;5.5mM Glucose）に非特異性リガンドとして100μM ベラトリジン（Veratridine／シグマ社）と被検薬、site2のリカ゛ント゛として3H-Batrachotoxinin A-20-α-Benzoate（パーキンエルマー社）を添加し、37℃で30分インキュベーションした。その後、ガラスフィルターGF/B（ワットマン社）に吸着させて洗浄し、ガラスフィルター上の3H量を液体シンチレーター(パーキンエルマー社)で測定した。その結果、アンプラーグは10μMで49%の阻害を示し、Ｍ−１は10μMで70%、1μMで34%の阻害を示した。
【００３４】
例２：Ｍ−１のナトリウムチャネルサイト１への結合試験
ナトリウムチャネルサイト１のソースとしてラット脳より膜画分を調製した。インキュベーション用バッファー(Ａ：140 mM NaCl, 20 mM Tris pH7.1, 1 mM PMSF；Ｂ：75 mM Hepes/140 mM NaCl pH 7.5, Ａ：Ｂ＝1:4)に非特異性リガンドとして10 μMテトロドトキシン（Tetrodotoxin／和光純薬社）と被検薬、リガンドとして3H-Saxitoxin(アマシャム社)を添加し、37℃で30分インキュベーションした。その後、ガラスフィルターに吸着させて洗浄し、ガラスフィルター上の3H量を液体シンチレーターで測定した。その結果、Ｍ−１は10μMで27%の阻害、1μMで10%の阻害を示した。これらの結果より、アンプラーグ及びM−1は、サイト２を選択的に阻害することが明らかとなった。
【００３５】
例３：Veratridine誘発神経細胞毒性の検討
96wellプレートに播種したNeuro2A細胞（ATCC  No.CCL-131）を用いた。Veratridine 100μMとアンプラーグ、Ｍ−１、およびナトリウムチャネルサイト２阻害剤B2R561CL（ＷＯ９９１４１９９号公開公報）を添加し（いずれも10μM）、24時間後に生細胞数をCell−counting kit（和光純薬工業株式会社）にて比色法で測定した。Veratridineを添加した群をControlとし、その生細胞数を100%とした。結果を図１に示す。この結果より、アンプラーグ及びM−1は、Veratridineが誘発する神経細胞死を抑制することが明らかとなった。
【００３６】
例４
ラットにＭ−1 3 mg/kgを静脈内投与したのち、中大脳動脈を栓子にて虚血状態にした。2時間後にＭ−１ 3mg/kgを再度静脈内投与し、栓子を抜いて再かん流させた。24時間後、神経症状を観察スコア化し、脳を取りだし2 mm毎にスライスした。1%TTC溶液(和光純薬社)で染色した後に非染色部位を梗塞巣として梗塞巣面積を測定した。この結果より、M−1は、脳梗塞を有意に抑制することが明らかとなった。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】本発明の医薬の神経細胞保護作用を示した図である。
【図２】本発明の医薬が脳梗塞を抑制した結果を示した図である。
【図１】
2005206590.tif 000015
【図２】
2005206590.tif 000016