(57)【要約】【課題】  本発明は、フィルタ部材が設けられた筒状体内の試料に対して遠心力により押圧部材を押圧させて安全かつ効率良く破砕する試料破砕器具及び方法を提供する。【解決手段】  両端が開口する貫通穴を有する筒状体と、前記筒状体の一端側において前記貫通孔内に取り付けられたフィルタ部材と、前記筒状体の前記穴内に他端側から滑動自在に密封して挿入される押圧部材と、を備え、前記押圧部材が前記押圧部材と前記フィルタ部材との間に配置された前記試料を前記フィルタ部材に対して押圧するよう前記押圧部材に力を作用させて、前記フィルタ部材内に前記試料を強制的に通過させ、前記試料を破砕することを特徴とする試料破砕器具。【選択図】図１
2005246155.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料を破砕するための器具において、
両端が開口する貫通穴を有する筒状体と、
前記筒状体の一端側において前記貫通孔内に取り付けられたフィルタ部材と、
前記筒状体の前記穴内に他端側から滑動自在に密封して挿入される押圧部材と、を備え、
前記押圧部材が前記押圧部材と前記フィルタ部材との間に配置された前記試料を前記フィルタ部材に対して押圧するよう前記押圧部材に力を作用させて、前記フィルタ部材内に前記試料を強制的に通過させ、前記試料を破砕することを特徴とする試料破砕器具。
【請求項２】
請求項１記載の試料破砕器具において、前記押圧部材に作用させる力は、遠心力である試料破砕器具。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の試料破砕器具において、前記押圧部材は、試料に面する端面に、半径方向に伸びる突部が設けられ、前記力により前記フィルタ部材内に前記試料を強制的に通過させる前に、前記押圧部材を前記フィルタ部材に関して回転させながら押圧することにより前記試料を擦り潰し可能である試料破砕器具。
【請求項４】
請求項１乃至３の何れか１項に記載の試料破砕器具において、溝が、前記押圧部材の試料側先端近傍の外周面上に周方向に伸びるよう設けられ、Ｏ−リングがその溝に嵌められた試料破砕器具。
【請求項５】
請求項１乃至４の何れか１項に記載の試料破砕器具において、前記フィルタ部材は、軸直交断面の直径が５０乃至２００マイクロメートルである複数の貫通孔を有する試料破砕器具。
【請求項６】
請求項１乃至５の何れか１項に記載の試料破砕器具において、前記フィルタ部材は、厚さ１乃至３ミリメートルの板状である試料破砕器具。
【請求項７】
請求項１乃至６の何れか１項に記載の試料破砕器具において、前記フィルタ部材が前記筒状体から脱落することを防止するための脱落防止部が、前記筒状体の一端開口部近傍に設けられた試料破砕器具。
【請求項８】
試料を破砕するための方法において、
両端が開口する貫通穴の一端側にフィルタ部材が取付けられた筒状体を用意するステップと、
前記筒状体の穴内に他端開口部側から前記試料を配置するステップと、
前記他端開口部側から押圧部材を滑動自在に密封して挿入するステップと、
前記押圧部材が前記試料を前記フィルタ部材に対して押圧するよう前記押圧部材に遠心力を作用させて、前記試料を前記フィルタ部材内に強制的に通過させるステップと、を備える、
ことを特徴とする試料破砕方法。
【請求項９】
請求項８記載の試料破砕方法において、前記押圧部材は、試料に面する端面に、半径方向に伸びる突部が設けられ、前記押圧部材に遠心力を作用させる前に、前記押圧部材を前記フィルタ部材に関して回転させながら押圧することにより試料を擦り潰すステップを更に備える試料方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、試料を安全且つ効率よく破砕する器具及びその方法に関し、詳細にはフィルタ部材が設けられた筒状体内の試料に対して遠心力により押圧部材を押圧させて安全かつ効率良く破砕する試料破砕器具及び方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
多くの理化学分野において、試料分析に基づく研究は欠かすことのできない重要な工程である。特に生物学、とりわけ人畜の医薬品研究、診断薬研究において重要な工程である。試料を分析するには、まず試料を「破砕」して「均一化（ホモジナイズ）」することが必要である。特に生体試料について、タンパク質抽出、又はＰＣＲ分析用のＲＮＡ，ＤＮＡの調製等を行うためには、細胞膜、細胞壁等の構造支持体を物理的（機械的）に又は化学的に破砕する必要がある。ここで、「破砕」とは、「試料の組織や細胞を物理的（機械的）に破壊すること」をいい、「均一化（ホモジナイズ）」とは、「試料の組織や細胞を物理的（機械的）に破壊し、適宜緩衝液を加えて懸濁液を作成すること」をいう。
【０００３】
従来の破砕法として、ポッター型ホモジナイザー（例えば、非特許文献１参照。）、ロータ・ステータ方式ホモジナイザー（例えば、非特許文献２参照。）、ボールミル（例えば、非特許文献３参照。）等の器具を使用する方法がある。
しかしながら、これら従来の破砕法では、熱が発生し、その熱が試料を変性させ得る（試料本来の特性を損い得る）。そうすると、生体内での働き及び構造を反映した分析結果を得ることができないおそれがある（特に蛋白質、核酸、及び多糖等の高分子成分は、熱による変性を避けて、均一化する必要がある。）。また、これら従来の破砕法は、試料数が増加した場合、試料同士の混交を避けるために、使用した器具を洗浄する必要がある（これらのホモジナイザーは、高価であり、「使い捨て」できないから、使用後洗浄して、複数回使用する必要がある。）。
また、特にポッター型ホモジナイザー及びロータ・ステータ方式ホモジナイザーは、操作が開放系であるから、病原性の試料を扱う場合、周囲を汚染する危険がある。
【０００４】
一方、上記発生熱により試料を変性させる問題及び周囲を汚染する問題を解決し得る従来の破砕法として、キアゲン社製のキアシュレッダー（例えば、非特許文献４参照。）を用いて試料を破砕する方法がある。この方法は、遠心力によって試料をキアシュレッダー内のフィルタに対して押圧し、強制的にフィルタ内に試料を通過させて、試料を破砕する方法である。
【０００５】
【非特許文献１】「研究用総合機器カタログ  ７００００  ２００１→２００３」，アズワン株式会社，２００１年１１月，ｐ．９４４
【非特許文献２】「研究用総合機器カタログ  ７００００  ２００１→２００３」，アズワン株式会社，２００１年１１月，ｐ．９４４
【非特許文献３】「研究用総合機器カタログ  ７００００  ２００１→２００３」，アズワン株式会社，２００１年１１月，ｐ．９４６
【非特許文献４】「ＱＩＡＧＥＮプロダクトガイド２００４」，キアゲン株式会社，２００３年，ｐ．２５８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、キアシュレッダーを用いる破砕方法は、遠心力が試料自体にしか作用しないため、フィルタに対して試料を押圧する力は小さい。したがって、この方法によれば、他の従来の破砕方法と比較して破砕効率が悪く、適応できる試料が限られる問題がある。
【０００７】
本発明は、破砕効率を悪化させることなく、上記発生熱により試料を変性させる問題及び周囲を汚染する問題を同時に解決し得る安価で使い捨て可能な試料破砕器具及び試料破砕方法を提供することを目的とする。
さらに本発明は、脳組織や肝臓組織等の比較的堅い試料を効率良く破砕可能な試料破砕器具及び試料破砕方法を提供することを目的とする。
［課題を解決するための手段及びその効果］
【０００８】
（１）上記問題点を解決するための本発明の試料を破砕するための器具は、両端が開口する貫通穴を有する筒状体と、前記筒状体の一端側において前記貫通孔内に取り付けられたフィルタ部材と、前記筒状体の前記穴内に他端側から滑動自在に密封して挿入される押圧部材と、を備え、前記押圧部材が前記押圧部材と前記フィルタ部材との間に配置された前記試料を前記フィルタ部材に対して押圧するよう前記押圧部材に力を作用させて、前記フィルタ部材内に前記試料を強制的に通過させ、前記試料を破砕することを特徴とする。
したがって、本発明の試料破砕器具によれば、簡単な構造であるからその製造コストを低減でき、使い捨てが可能であり、同じ器具を複数の試料の「破砕」に供して、試料同士が混交することを防止し得る効果がある。
また押圧部材が筒状体の穴内に密封して挿入されるから、試料の逆流を防ぎ、実施者の安全の確保、及び周辺環境への汚染を防止し得る効果がある。
さらに、フィルタ部材内に試料を強制的に通過させる際に、押圧部材に力を作用させるから、試料の「破砕」効率を向上し得る効果がある。
（２）好ましくは、前記押圧部材に作用させる力は、遠心力である。
したがって、本発明の試料破砕器具により試料を「破砕」する際、市販の遠心分離機を使用可能であるから、作業内容を簡便化し得るとともに、複数の試料を同時に「破砕」することができるから、作業効率を上げ得る効果がある。
（３）また好ましくは、前記押圧部材は、試料に面する端面に、半径方向に伸びる突部が設けられ、前記力により前記フィルタ部材内に前記試料を強制的に通過させる前に、前記押圧部材を前記フィルタ部材に関して回転させながら押圧することにより前記試料を擦り潰し可能である。
したがって、試料を事前に擦り潰すから、試料（特に脳組織や肝臓組織等の比較的堅い試料）「破砕効率」を上げ得る効果がある。
（４）また好ましくは、溝が、前記押圧部材の試料側先端近傍の外周面上に周方向に伸びるよう設けられ、Ｏ−リングがその溝に嵌められている。
したがって、押圧部材により、筒状体の穴を確実に密封し得る効果がある。
（５）また好ましくは、前記フィルタ部材は、軸直交断面の直径が５０乃至２００マイクロメートルである複数の貫通孔を有する。
したがって、所望の試料を「破砕」し得る効果がある。
（６）また好ましくは、前記フィルタ部材は、厚さ１乃至３ミリメートルの板状である。
したがって、所望の試料を「破砕」し得るとともに、フィルタ部材が所望の強度を有する効果がある。
（７）また好ましくは、前記フィルタ部材が前記筒状体から脱落することを防止するための脱落防止部が、前記筒状体の一端開口部近傍に設けられている。
したがって、試料を「破砕」する際、フィルタ部材が前記筒状体から脱落することを防止し得る効果がある。
【０００９】
（８）上記問題点を解決するための本発明の試料を破砕するための方法は、両端が開口する貫通穴の一端側にフィルタ部材が取付けられた筒状体を用意するステップと、前記筒状体の穴内に他端開口部側から前記試料を配置するステップと、前記他端開口部側から押圧部材を滑動自在に密封して挿入するステップと、前記押圧部材が前記試料を前記フィルタ部材に対して押圧するよう前記押圧部材に遠心力を作用させて、前記試料を前記フィルタ部材内に強制的に通過させるステップと、を備える、ことを特徴とする。
この方法による効果は大略、上記（１）及び（２）に記載した効果と同様である。
（９）好ましくは、前記押圧部材は、試料に面する端面に、半径方向に伸びる突部が設けられ、前記押圧部材に遠心力を作用させる前に、前記押圧部材を前記フィルタ部材に関して回転させながら押圧することにより試料を擦り潰すステップを更に備える。
この方法による効果は大略、上記（３）に記載した効果と同様である。
【実施例】
【００１０】
本発明に係る試料破砕器具の一実施形態を図１乃至図５を使用して説明する。
図１中、試料破砕器具１は大略、筒状体としての破砕用チューブ１１と、フィルタ部材としてのフィルタ１２と、押圧部材としての破砕棒２０とからなる。
【００１１】
図１中、破砕用チューブ１１は、テーパー部１１ｄとその縮径側端部から伸びる円筒部１１ｅとからなる一体成型（例えば、射出成形）されたプラスチック製の両端が開口（１１ｂ及び１１ｆ）する貫通穴を有する略円筒体である。ここで、テーパー部１１ｄが破砕用チューブ１１に設けられた理由は、破砕棒２０を破砕用チューブ１１に対して挿入しやすくするためである。また、破砕用チューブ１１は、その中に配置された試料３０を視認できるように（無色又は有色）透明であることが好ましいが、例えば試料３０が光により変性しやすい性質を有する場合は、外部からの光を遮断するよう不透明でもよい。
テーパー部１１ｄの拡径側端部（同図中、上端部）にはリング状フランジ１１ａが設けられ、その周上に所定距離離間し、下端方向へ伸びる２つの爪状固定部１１ｃが設けられる。円筒部１１ｅの下端開口部１１ｆは、図３に示す如く、互いに直行するよう直径方向に伸びる２枚の板状の脱落防止部１１ｇが設けられる。脱落防止部１１ｇは、試料３０を破砕する際にフィルタ１２が脱落するのを防止する。なお、脱落防止部１１ｇは、例えば、半径方向内方へ伸びる突部（図示せず）等の他の構成でもよいし、また設けられなくともよい。なお、破砕用チューブ１１は他の材質でもよい。また破砕用チューブ１１は、テーパー部１１ｄを有さない円筒体でもよいし、またフランジ１１ａを有さなくともよい。
【００１２】
円盤状フィルタ１２は、円筒部１１ｅの内径より僅かに大きい外径を有し、脱落防止部１１ｇ上の円筒部１１ｅの内周面に嵌着される。フィルタ１２は、軸直交断面の直径が５０マイクロメートル〜２００マイクロメートルの貫通孔が設けられた厚み１ｍｍ〜３mmの市販のポリプロピレン製又はガラス製の硬質フィルタである。なお、フィルタ１２は、ポリプロピレン製の場合、例えば、ドイツのポーレックス（ＰＯＲＥＸ）社製フィルタであり、またガラス製の場合、例えば、柴田科学社製フィルタであるから、詳細な説明を省略する。勿論、フィルタ１２の構成及び材質は、試料３０に適合する他の所望の構成及び材質のものでもよい。
【００１３】
破砕棒２０は大略、破砕棒本体２１、及びＯ−リング２２からなり、破砕用チューブ１１に滑動自在に且つ回転自在に密封挿入される。なお、破砕棒２０は、破砕用チューブ１１に対して回転自在でなくともよい。破砕棒本体２１は、把持部２１ａ、接続部２１ｃ、及び試料押圧部２１ｄが一体成型（例えば、射出成形）されたプラスチック製のものである。把持部２１ａは、円柱であり、実施者が破砕棒２０を回転させやすいように周方向等分割（同図中、１２分割）位置にローレット２１ｂが設けられる。なお、ローレット２１ｂは設けられなくともよいし、また把持部２１ａは、実施者が持ちやすい多角形柱状体（図示せず）等の他の柱状体でもよい。接続部２１ｃは、周方向４分割位置に４枚の平板が配設された柱状体である。なお、接続部２１ｃは、他の多角形柱状体（図示せず）でもよい。
【００１４】
押圧部２１ｄは、破砕用チューブ１１の円筒部１１ｅの内径より僅かに小さい外径を有する円柱であり、その試料側先端（同図中、下端）近傍の外周面に周方向に伸びる溝２１ｅが設けられる。溝２１ｅには、Ｏ−リング２２が嵌められ、破砕棒２０が破砕用チューブ１１に挿入された際に、その押圧部２１ｄが破砕用チューブ１１の円筒部１１ｅを密封る。Ｏ−リング２２を用いて破砕用チューブ１１（円筒部１１ｅ）を密封する理由は、Ｏ−リング２２を用いて破砕用チューブ１１を密封することにより、「擦り潰し」た試料３０の逆流を防ぎ、実施者の安全の確保、及び周辺環境への汚染を防止するためである（特に、病原性の試料を扱う場合、重要である）。なお、押圧部２１ｄは、Ｏ−リング２２が設けられなくともよいが、この場合は、上記「擦り潰し」た試料３０の逆流を防ぐため、押圧部２１ｄの外形は、破砕用チューブ１１の円筒部１１ｅの内径と同一である（押圧部２１ｄが弾性材料からなる場合、押圧部２１ｄの外形は、円筒部１１ｅの内径より僅かに大きくともよい）。
【００１５】
押圧部２１ｄの下端面２１ｆには、図２に示す如く、互いに直行するよう半径方向に伸びる（すなわち、周方向４分割する）４本の突部２１ｇが設けられる。なお、突部２１ｇの本数は、４本以外でもよいし、また無くともよい。
なお、破砕棒２０は、一体成形しなくともよいし、プラスチック以外の他の所望材料からなってもよく、また、把持部２１ａ及び押圧部２１ｄを直接接続してなり、接続部２１ｃがなくともよい。
【００１６】
上述の如く、本発明の試料破砕器具は、簡単な構造であるからその製造コストを低減でき、安価であるから使い捨てが可能である。これにより、同じ器具を複数の試料の「破砕」に供して、試料同士が混交することを防止し得る（試料同士の混交を防止することは、研究及び試験を実施する場合の前提条件である）。
【００１７】
次に、試料破砕器具１を使用した試料破砕方法を図１、図４及び図５を用いて説明する。
破砕用チューブ１１の穴内に他端（図１中、上端）開口部側からフィルタ１２上に試料３０を配置し、さらに同開口部側から破砕棒２０を滑動自在に密封して挿入する。しかる後、図４に示す如く、試料回収用チューブ４０に破砕用チューブ１１を挿入する。これにより、「破砕」された試料３０を回収用チューブ４０に直接回収することが可能となる。なお、回収用チューブ４０を使用せず、「破砕」された試料３０を他の所望の採取用容器に採取してもよい。
【００１８】
ここで、回収用チューブ４０は大略、図４に示す如く、有底円筒体のチューブ本体４０ａと、その開口端４０ｂから半径方向外方へ伸びるリング状フランジ４０ｃとからなり、市販のプラスチック製である（例えば、エッペンドルフ社製又はトレフ社製等の１．５ｍｌ又は２ｍｌチューブ）。フランジ部４０ｃは、その下面の周方向等分位置に突部４０ｄが設けられる。開口端４０ｂに嵌挿される筒状密封部４０ｇを有するキャップ部４０ｆが、可撓性接続部４０ｅを介してフランジ部４０ｃに取り付けられる。キャップ部４０ｆは、フック部４０ｈを更に有し、キャップ部４０ｆを閉じた際に、フック部４０ｈがフランジ部４０ｃに係合して、ロック可能である。
【００１９】
なお、試料回収用チューブ４０に破砕用チューブ１１を挿入した際、破砕用チューブ１１は、そのフランジ部１１ａが回収用チューブ４０のフランジ部４０ｃに当接し、２つの爪状固定部１１ｃ間に回収用チューブ４０の可撓性接続部４０ｅを位置決めして、破砕用チューブ１１は、試料回収用チューブ４０に対して位置決め固定される。このとき、回収用チューブ４０のキャップ部４０ｆは閉じられていない。
【００２０】
続いて、破砕棒２０をフィルタ１２に関して回転させながら押圧することにより試料３０を「擦り潰す」（以下、適宜「擦潰し工程」という）。なお、この「擦潰し工程」は、特に脳組織や肝臓組織等の比較的堅い試料を「破砕」する際の「破砕効率（「破砕」された試料の回収率）」を上げるのに有効であるが、この「擦潰し工程」はなくともよい（後述する［実験例１］を参照）。
【００２１】
試料３０を充分「擦り潰し」た後、市販の遠心分離機５０を使用して、試料３０を「破砕」する。すなわち、遠心分離機５０の回転盤５１のチューブ保持用穴５１ａに、試料回収用チューブ４０に挿入したままの状態の破砕用チューブ１１をその下端から挿入し、回転盤５１を所定数回転させて、破砕棒２０が試料３０をフィルタ１２に対して押圧するよう破砕棒２０に遠心力を作用させる。
そうすると、試料３０は、フィルタ１２内に強制的に通過させられて、試料３０が「破砕」され、回収用チューブ４０に回収される（その回収後、適宜回収用チューブ４０のキャップ部４０ｆは閉じられる）。なお、破砕用チューブ１１が遠心分離機５０にセットされている間は、「破砕」された試料３０が、回収用チューブ４０から漏れ出すことはないが（例えば、遠心分離機５０のチューブ保持用穴５１ａの軸線方向は、回転盤５１の回転面に対して、斜め下方向であり、上記漏出は防止される）、破砕用チューブ１１及び回収用チューブ４０間にシール手段（例えば、破砕用チューブ１１の外側所定位置に設けられたＯ−リング（図示せず））を設けてもよい。
【００２２】
本発明の試料破砕器具１によれば、遠心分離機５０を使用して試料３０を「破砕」することが可能であるから、実施者が手作業で試料を「破砕」する必要があるポッター型ホモジナイザー等と比較して、作業内容を簡便化できる。また遠心分離機５０は、複数の回収用チューブ４０の遠心分離を同時に行うことが可能であるから、複数の試料３０を同時に「破砕」することができ、試料を１つずつ「破砕」する必要がある上記従来技術のポッター型ホモジナイザー、及びロータ・ステータ方式ホモジナイザー等と比較して、作業効率（又は作業処理速度）を上げることができる。
【００２３】
なお、遠心分離機５０は冷却機能付きであることが好ましい。これにより、「破砕」中に発生する摩擦熱等により試料３０が熱変成することを防ぐとともに、内因性の酵素等による分解を防ぎ、「均一化された」試料３０から目的物質を破損することなく抽出することができる。
また遠心分離機５０を使用せず、実施者が指で破砕棒２０を直接押圧する等の機械的な力により、破砕棒２０を押圧してもよい。
［実験例１］
【００２４】
表１は、上記従来技術のキアシュレッダー及び本発明の試料破砕器具を夫々用いて、生体試料であるウシの脳延髄組織の破砕効率（「破砕」された試料の回収率）を比較した実験結果である。すなわち、キアシュレッダーを用いて、破砕棒により試料を「擦り潰す」ことなく、試料自体に作用する遠心力のみにより試料をフィルタ内に強制的に通過させて、試料を「破砕」した際の試料の回収率と、本発明の試料破砕器具を用いて、試料自体に作用する遠心力のみならず破砕棒に作用する遠心力により試料をフィルタ内に強制的に通過させて、試料を「破砕」した際の試料の回収率とを比較した実験結果である。なお、本発明の試料破砕器具を用いた実験は、「擦潰し工程」を事前に設けた場合及び「擦潰し工程」を事前に設けない場合の２通りの条件下でおこなった。
ここで、キアシュレッダー及び本発明の試料破砕器具を用いたいずれの実験も、エッペンドルフ形マイクロチューブ用遠心分離機を用いて、試料を１００００〜１５０００rpmの回転速度で１分間回転させることによりおこなった。
【００２５】
同表中、左から（以下同様）第１列「試料重量」欄に記載の数値はキアシュレッダーに用いた実験に使用した試料の実測値であり、第２列「回収重量」欄に記載の数値はキアシュレッダーを用いた実験によりフィルタを通過して回収された試料の重量であり、第３列「回収率」欄に記載の数値は上記「回収重量」を上記「試料重量」で除したものである。
他方、第４〜９列の各欄に記載の各数値は夫々、本発明の試料破砕器具を用いて、条件を変えて得られた実験結果である。すなわち、上記第４〜６列の各欄に記載の数値は、「擦潰し工程」を事前に設けないが、破砕用チューブに破砕棒を挿入し、試料自体に作用する遠心力のみならず破砕棒に作用する遠心力により試料を「破砕」した場合の上記第１〜３列の各欄に記載の数値と同様の数値であり、上記第７〜９列の各欄に記載の数値は、「擦潰し工程」を事前に行い、さらに破砕用チューブに破砕棒を挿入して、破砕棒に作用する遠心力により試料を「破砕」した場合の上記第１〜３列の各欄に記載の数値と同様の数値である。
【００２６】
この実験結果によれば、先ずキアシュレッダーを用いた回収率と、本発明の試料破砕器具を用い「擦潰し工程」を設けない場合の回収率とを比較すると、キアシュレッダーを用いた回収率は１０％程度であるのに対し、本発明の試料破砕器具を用いた回収率は概ね３９〜５４％である（表１参照）。
すなわち、本発明の試料破砕器具を用いることにより、試料自体に作用する遠心力のみならず破砕棒に作用する遠心力により試料を「破砕」するから、従来技術（キアシュレッダー）に比較して、飛躍的に試料の回収率（破砕効率）を向上させることが可能である。
【００２７】
続いて、本発明の試料破砕器具を用い、「擦潰し工程」を設けない場合の回収率と、「擦潰し工程」を設けた場合の回収率とを比較すると、「擦潰し工程」を設けない場合の回収率は概ね３９〜５４％であるのに対し、「擦潰し工程」を設けた場合の回収率は概ね４７〜５９％である（表１参照）。
すなわち、「擦潰し工程」を設けることにより、試料の回収率（破砕効率）をさらに向上させることが可能である。
【００２８】
【表１】
2005246155.tif 000003
［実験例２］
【００２９】
次に、本発明の試料破砕器具を使用して、生体試料以外の試料を「破砕」した実験結果を表２に示す。
この実験の背景は、以下のとおりである。すなわち、ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動により分離されたタンパク質をさらに分析するためにはゲルからタンパク質を抽出する必要がある。ゲルからのタンパク質の抽出効率を上げるためにはゲルを破砕する必要があるが、従来、適切な破砕法がなかった。
【００３０】
続いて、実験内容の具体的な説明をする。
タンパク質としてのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を１２％ポリアクリルアミド溶液に０．７％となるよう溶かしこみ、スラブゲル作成装置（厚さ０．７５ｍｍ）中でＴＥＭＥＤ及び過硫酸アンモニウムを用いて重合させる。アクリルアミドが充分重合し、ゲル化した後、ゲルを正確に１８０mgの重さに切り取る。切り取ったゲルの一方は、そのままエッペンドルフ・チューブに挿入し、他方は本発明の試料破砕器具を用いて「破砕」し回収用チューブに「破砕」したゲルを回収する。夫々のゲルに０．５ｍｌの蒸留水を加え震盪した後、一定時間毎に、蒸留水に溶け出したＢＳＡを、紫外線吸収（２８０ｎｍ）によって定量する。
【００３１】
夫々のゲルからのＢＳＡの抽出率を表２に示す。すなわち、同表中、上から（以下同様）第１行に記載の数値は抽出時間（経過時間）であり、第２行に記載の数値は「破砕」していないゲルからのＢＳＡの抽出率であり、第３行に記載の数値は本発明の試料破砕器具を用いて「破砕」したゲルからのＢＳＡの抽出率である。なお、抽出率は、ゲルに封入されていない０．７%のＢＳＡ溶液に０．５ｍｌの蒸留水を加えた溶液の紫外線吸収を１００％として計算している。
【００３２】
この実験結果によれば、上記「破砕」していないゲルは、６０％抽出するまでに２時間以上を要したのに対し、本発明の試料破砕器具で「破砕」したゲルは、５分後には６０％以上のＢＳＡが抽出された（表２参照）。さらに１日経過後の最終的な抽出率を比較すると、上記「破砕」していないゲルは、６２％であるのに対し、本発明の試料破砕器具で「破砕」したゲルは、７２％であり、本発明の試料破砕器具で「破砕」したゲルの方が高い（表２参照）。
すなわち、生体試料以外の試料についても、本発明の試料破砕器具は、その目的に応じて簡便で効率よく試料を「破砕」することが可能である。
【００３３】
【表２】
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【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】本発明の試料破砕器具の一実施形態を説明するための試料破砕器具の分解斜視図である。（実施例１）
【図２】図１中、筒状体の底面部分の斜視図である。（実施例１）
【図３】図１中、押圧部材の底面部分の斜視図である。（実施例１）
【図４】試料破砕器具及び試料回収用チューブの分解斜視図である。（実施例１）
【図５】試料破砕器具がセットされた遠心分離機の斜視図である。（実施例１）
【符号の説明】
【００３５】
１    試料破砕器具
１１  筒状体
１２  フィルタ部材
２０  押圧部材
３０  試料
【図１】
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【図２】
2005246155.tif 000006
【図３】
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【図４】
2005246155.tif 000008
【図５】
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