(57)【要約】【課題】関節リュウマチにおける滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生を抑制し、炎症等の抑制、悪化の予防及び／又は治療に有用な組成物の提供。【解決手段】グルコサミン塩を有効成分とする滑膜細胞の炎症性メディエーター、例えば一酸化窒素（NＯ）、プロスタグランジンE２及びインターロイキン−８（IL−８）の産生抑制組成物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルコサミン塩を有効成分とする滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制組成物。
【請求項２】
炎症性メディエーターが一酸化窒素（NＯ）、プロスタグランジンE２及びインターロイキン−８（IL−８）からなる群から選択される少なくとも１つである上記（１）に記載の滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制組成物。    
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グルコサミン塩を有効成分とする滑膜細胞の炎症性メデイエーター抑制組成物に関する。関節リウマチにおける炎症等の予防及び／又は抑制用の薬剤、飲食物等として利用することが出来るものである。
【背景技術】
【０００２】
滑膜細胞は関節の滑膜を形成している細胞で、滑液にプロテオグルカンを供給していると考えられている。しかし、関節リウマチなどの疾患においては、滑膜細胞はＩＬ−１βの刺激により、炎症性メディエーター、例えば、一酸化窒素（ＮＯ）（Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ）、プロスタグランジンE２（prostaglandin E２）及びインターロイキン−８（ＩＬ−８）などを産生し、炎症を悪化させる一因になっており、また、炎症に伴う滑膜細胞の異常増殖により、関節軟骨を滑膜組織が覆い軟骨を侵す等関節リウマチを悪化させていると考えられている。
一方、グルコサミンは，結合組織や軟骨組織に多く分布し，各器官の強度，柔軟性，弾力性を維持するのに寄与している。また、グルコサミンは軟骨グリコサミノグリカンの前駆物質でり、生体内でN−アセチル‐グルコサミンやN−アセチル‐ガラクトサミンに変換された後，ヒアルロン酸やコンドロイチン硫酸，デルマタン硫酸などの軟骨グリコサミノグリカンの構成成分として取り込まれることから，近年，変形性関節症への予防・治療効果が注目されている。そして，日本とアメリカでは健康食品として，またヨーロッパではすでに変形性関節症の治療薬として実際に使用されている。そのため，関節軟骨の修復作用を中心にグルコサミンの研究が行われてきた。そして今までの研究によって，グルコサミンが関節軟骨におけるグリコサミノグリカンの合成を高めることと，その分解を抑制することが明らかにされた。
また、グルコサミン塩、特に硫酸塩または塩酸塩等は特許文献１もしくは特許文献２等に開示された方法で製造され、該USPにはカプセル剤または錠剤等の形で、関節症治療剤等として使用されることが開示されている。
そして、近年本発明者らはグルコサミンが、白血球における頬粒球の主要成分の１つである好中球の機能、例えば遊走能、異物の貪食作用、顆粒放出能、活性酸素放出能等を抑制する作用があることを見出し、好中球の関与する炎症の抑制剤としても有用と考えられることを先に示した（特許文献３）。
【特許文献１】時公平１−２８７５７
【特許文献２】USP３，６８３，０７６
【特許文献３】特開２００２−２６５３６５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
関節リウマチは自己免疫疾患と考えられており、免疫抑制剤などでの治療が試みられている。しかし、未だに根本的に治療する薬剤もなく、対象療法である抗炎症剤を使用して、炎症を抑えているが治癒または悪化の防止若しくは予防等はなかなか難しい。従って、関節リウマチに対する治癒または悪化の防止若しくは予防等のできる薬剤の開発が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
関節リウマチにおいては、滑膜細胞がＩＬ−１βの刺激により、炎症性メデイエーターを産生し、そのメデイエーターの刺激により、炎症を悪化させ、軟骨の浸食、滑膜細胞の過剰増殖を引き起こすなど、関節リウマチを次第に悪化させる一因となっていると考えられる。そこで本発明者らは、滑膜細胞の炎症を抑制して、その過剰増殖を抑制できれば関節リウマチの悪化を防ぐことができる可能性があると考えて、滑膜細胞、特にヒト滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制をする物質を種々探索した結果、グルコサミンにその作用があることを見出し、本発明を完成した。
【０００５】
即ち本発明は
（１）グルコサミン塩を有効成分とする滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生
抑制組成物、
（２）炎症性メディエーターが一酸化窒素（ＮＯ：Nitric oxide）、プロスタグランジンE２（prostaglandin E２）及びインターロイキン−８（IL−８）からなる群から選択される少なくとも１つである上記（１）に記載の滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制組成物、
に関するものである。
グルコサミン塩は体内に吸収されて、滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生を抑制するので、関節リウマチの悪化が抑制され若しくは改善されるもの期待される。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、グルコサミン塩は、関節リウマチにおける滑膜細胞のＩＬ−１βでの刺激による炎症性メデイエーターの産生を抑制するので、炎症や滑膜細胞の過剰増殖が抑えられる可能性があり、さらに、グルコサミンは体内に吸収されて、関節軟骨の修復作用を有することから、関節リウマチの悪化を抑制し、さらには改善する可能性があると考えられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明を以下により詳しく説明する。
本発明におけるグルコサミン塩としては薬理学的に許容されるものであれば特に制限はなく、無機酸塩、有機酸塩いずれも使用できるが一般的には硫酸塩もしくは塩酸塩等の無機塩が使用され、本発明においては塩酸塩が好ましい。有機酸塩としては例えば酢酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩等が挙げられる。
【０００８】
本発明における滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制組成物は、グルコサミン塩単独でもよいが、通常グルコサミン塩を担体、賦形剤、助剤（矯味剤、香料、甘味料、結合剤）等の医薬用又は食品用等に使用される添加剤と共に常法に従って、液剤又は固形剤例えば錠剤、顆粒剤、粉剤、カプセル剤、ゼリー剤若しくは健康食品、一般食品用の飲食物等の組成物として使用することが出来る。坦体又は賦形剤としては、水、糖類等を挙げることが出来る。これらにおけるグルコサミン塩の含量は、特に限定はなく、通常０．２％（質量％：以下同じ）以上、好ましくは１％以上で、最大１００％までよい。
従って、本発明における滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制組成物は、滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制作用を発揮する限り、グルコサミン塩単独、賦形剤などを混合して製剤化したもの、また食品、嗜好品などと混合したもの何れをも含むものである。
【０００９】
グルコサミン塩を飲食品に配合して本発明における滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制組成物として摂取する場合は、適当に飲食物と混合して摂取すれば良く、グルコサミン塩を混合しうる飲食物は特に限定されず、牛乳などの乳飲料、ドリンク剤等の飲料やハム、ソーセージ等の食物などを挙げることが出来る。
これらの食品中におけるグルコサミン塩の含量は特に限定されないが通常食品全体に対して０．１％ 以上、好ましくは０．３％以上、より好ましくは０．５％以上であり、上限は特に無いが味覚等の点から通常１０％以下、好ましくは５％以下、更に好ましくは４％ 以下である。
本発明の滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制組成物でのグルコサミン塩の投与量は通常成人当たり１日０．３g以上、より好ましくは０．５g以上、更に好ましくは１g以上で、上限は毒性もほとんどないので特に制限はないが、通常２０g以下、好ましくは１０g以下、更に好ましくは５g以下程度である。
【００１０】
本発明の滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生抑制組成物は、上記したように、滑膜細胞の炎症性メディエーターの産生、放出によってもたらされる炎症等の疾患、特に関節リウマチ等の治療及び予防剤等として有用と考えられる。
次に、本発明を実施例により、具体的に説明する。
【実施例１】
【００１１】
グルコサミンによる、ＩＬ−１βの刺激によるヒト滑膜細胞の一酸化窒素産生阻害
ヒト関節リウマチの滑膜から調製した滑膜細胞を、グルコサミン非存在下（コントロール）又はグルコサミン存在下（０．０１ｍＭ／ｍｌ、０．１ｍＭ／ｍｌ、１ｍＭ／ｍｌ、）で 、４ng／ｍｌのＩＬ‐１βを含む培地（１０％牛胎児血清（ＦＣＳ）を含むＲＰＭ１６４０培地）で室温において４８時間培養した（ＩＬ‐１βでの刺激）後、培養上清を回収した。そして、この上清を用いてグリース（Ｇｒｉｅｓｓ）法で一酸化窒素の産生を測定した。その結果を図１に示す。
図１から明らかなように、一酸化窒素産生抑制はグルコサミン濃度に依存しており、１ｍＭ濃度では明らかに、ＩＬ−１βの刺激による滑膜細胞のNO産生を阻害した。
【実施例２】
【００１２】
グルコサミンによる、ＩＬ−１βの刺激によるヒト滑膜細胞のプロスタグランジン E２（ＰＥＧ２）産生阻害
ヒト関節リウマチの滑膜から調製した滑膜細胞を、グルコサミン非存在下（コントロール）又はグルコサミン存在下（０．０１ｍＭ／ｍｌ、０．１ｍＭ／ｍｌ、１ｍＭ／ｍｌ、）で 、４ng／ｍｌのＩＬ‐１βを含む培地（１０％牛胎児血清（ＦＣＳ）を含むＲＰＭ１６４０培地）で室温において４８時間培養した（ＩＬ‐１βでの刺激）後、培養上清を回収した。そして、この上清を用いてＰＥＧ２をＥＬＩＳＡ法で測定した。その結果を図２に示す。
図２から明らかなように、ＰＥＧ２産生抑制はグルコサミン濃度に依存しており、１ｍＭ濃度では明らかに、滑膜細胞のＰＥＧ２産生を阻害した。
【実施例３】
【００１３】
グルコサミンによる、ＩＬ−１βの刺激によるヒト滑膜細胞のＩＬ‐８産生阻害
ヒト関節リウマチの滑膜から調製した滑膜細胞を、グルコサミン非存在下（コントロール）又はグルコサミン存在下（０．０１ｍＭ／ｍｌ、０．１ｍＭ／ｍｌ、１ｍＭ／ｍｌ、）で 、４ng／ｍｌのＩＬ‐１βを含む培地（１０％牛胎児血清（ＦＣＳ）を含むＲＰＭ１６４０培地）で室温において４８時間培養した（ＩＬ‐１βでの刺激）後、培養上清を回収した。そして、この上清を用いてＥＬＩＳＡ法でＩＬ‐８の産生を測定した。その結果を図３に示す。
図３から明らかなように、ＩＬ‐８産生抑制はグルコサミン濃度に依存しており、１ｍＭ濃度では明らかに、滑膜細胞のＩＬ‐８産生を阻害した。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】添加するグルコサミン塩濃度とＩＬ−１βの刺激による滑膜細胞の一酸化窒素産生量の変化を示す棒グラフ。
【図２】添加するグルコサミン塩濃度とＩＬ−１βの刺激による滑膜細胞のプロスタグランジン E２産生量の変化を示す棒グラフ。
【図３】添加するグルコサミン塩濃度とＩＬ−１βの刺激による滑膜細胞のＩＬ‐８産生量の変化を示す棒グラフ。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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