(57)【要約】【課題】  海水魚を対象とした初期生活段階の影響評価試験を容易に実施する。【解決手段】  水温２５℃〜２８℃で且つ光照射時間が１日あたり１２時間〜１８時間の環境水下にクマノミ類の親魚をおき、定期的に産卵をさせ、孵化した仔魚を回収し且つ通常海水と試験海水とに収容し、孵化仔魚にワムシに代えてアルテミアのみを投与して生育し、通常海水と試験海水とにおけるクマノミ類の生残率や成長速度などの比較から、試験海水に含有した試験対象物質の海水魚に対する影響を調べる。【選択図】        なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クマノミ類の孵化仔魚にワムシに代えてアルテミアのみを投与することを特徴とするクマノミ類の生育方法。
【請求項２】
水温２５℃〜２８℃で且つ光照射時間が１日あたり１２時間〜１８時間の環境水下にクマノミ類の親魚をおき、前記クマノミ類の孵化仔魚を得ることを特徴とする請求項１記載のクマノミ類の生育方法。
【請求項３】
請求項１または２記載の方法により生育しているクマノミ類の環境水に試験対象要因を与え、前記クマノミ類に対する前記試験対象要因の影響を調べることを特徴とする影響評価試験方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、海水魚の生育方法および当該方法により生育させる海水魚を用いた影響評価試験方法に関する。さらに詳述すると、本発明は、クマノミ類の生育方法および当該方法により生育させるクマノミ類を用いた影響評価試験方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
クマノミ類は観賞魚としても人気が高く、現在流通する大部分のクマノミ類は天然海域で採捕されたものであるが、クマノミ類の繁殖も一部行われている。海水魚の繁殖においては、孵化仔魚の餌料としてワムシが専ら用いられており、特許文献１にはワムシの安定供給を図るべくワムシを卵で保存する方法が開示されている。クマノミ類の繁殖においても、他の海水魚と同様に、初期餌料にはワムシが用いられている。一方で、特許文献２に示されるようにワムシに代わる初期配合飼料も開発されている。
【０００３】
ところで、水生生物の影響評価試験においては、専ら淡水魚が用いられている。影響評価試験は、水生生物の環境水に試験対象要因を与え、例えば環境水中に毒性物質などの試験対象物質を含有させ、あるいは環境水に汚濁水を使用し、あるいは環境水の水槽を振動状態などの試験対象環境下に置いて、水生生物の生残率、成長速度、遊泳障害などから、水生生物に対する試験対象要因の影響を調べるものである。孵化後から１ヶ月程度経過するまでの初期生活段階の水生生物は、毒性物質などの試験対象要因に対する感受性が高いことから、初期生活段階での影響評価試験の実施が極めて重要である。淡水魚については、繁殖および飼育が容易な種類が多く、初期生活段階についても影響評価試験法が確立しており、さらに特許文献３に示されるように試験法の簡易化も図られている。
【０００４】
【特許文献１】特開２００２−３０６０１５号
【特許文献２】特開平９−３０８４３９号
【特許文献３】特開２００３−８３９５４号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
現在流通する大部分のクマノミ類は天然海域で採捕されたものであり、流通量の増加に伴い、資源量への影響が懸念される。このため、クマノミ類の人工繁殖量の更なる増加が望まれ、良質なクマノミ類を生育する技術および計画的にクマノミ類の卵や孵化仔魚を確保する技術が望まれる。
【０００６】
しかしながら、従来の海水魚の繁殖において孵化仔魚の餌料として用いられるワムシは、維持および培養を常時行わねばならず、多大な労力を要する。特許文献１の技術によりワムシを卵で保存した場合でも、孵化仔魚に給餌する前に、増殖、栄養強化などの煩雑な作業が必要となる。また、ワムシは孵化後すぐに水を体内に常時取り込むようになるため、ワムシの孵化や培養に用いる飼育水に有害物質や病原菌などの有害物が含まれる場合には、ワムシに当該有害物が取り込まれ、当該ワムシを摂餌する海水魚に有害物が取り込まれる虞がある。一方、特許文献２に示されるような配合飼料は、水中を泳ぐ生物餌料と異なり、当初水面に浮かび徐々に沈んで沈殿するため、孵化仔魚が常時摂餌することが難しく、ワムシと完全に代替できるまでに至っていないのが実情である。また、海水魚の産卵条件はほとんど解明されておらず、計画的に卵や孵化仔魚を確保することが困難である。
【０００７】
他方、従来の水生生物の影響評価試験においては専ら淡水魚が用いられているが、近年、海域生態系の上位種であり産業上も重要な海水魚に対する影響評価試験が求められるようになってきている。しかしながら、海水魚の孵化仔魚は、淡水魚の孵化仔魚と比べて一般に小型であり、清浄な環境でさえも生残率が低いため、正確な影響評価試験の実施が難しく、適当な試験対象種も確立されていない。加えて、海水魚に対して影響評価試験を行なう場合、孵化仔魚に給餌するワムシは水を体内に常時取り込むため、環境水中に含まれる試験対象要因にワムシ自体が影響を受けてしまい、試験対象魚そのものに対する試験対象要因の影響を正確に観察することが難しい。このため、海水魚を対象とした初期生活段階の影響評価試験の実施は極めて難しいものとなっているのが現状である。
【０００８】
そこで本発明は、良質なクマノミ類を簡便に生育する方法を提供することを目的とする。また本発明は、計画的にクマノミ類の卵や孵化仔魚を確保する方法を提供することを目的とする。さらに本発明は、上記方法により生育させるクマノミ類を用いて影響評価試験を行う方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
かかる目的を達成するため、本願発明者らは調査および飼育実験を積み重ねた結果、クマノミ類の孵化仔魚はワムシを用いずにアルテミアのみでも生育できることを見出した。海水魚の孵化仔魚の口はきわめて小さくまた消化能力も弱いため、孵化後しばらくはワムシを与え、その後、徐々にアルテミアや配合飼料に切り替えていくのが常識であったが、本願発明者らはクマノミ類の孵化仔魚が海水魚の中では比較的大型であることに着目し、クマノミ類の孵化仔魚にアルテミアを与えたところ、問題なく摂餌して順調に生育することを知見するに至った。
【００１０】
請求項１記載のクマノミ類の生育方法は、かかる知見に基づくものであり、クマノミ類の孵化仔魚にワムシに代えてアルテミアのみを投与するようにしている。
【００１１】
したがって、初期餌料としてワムシを用いることなくクマノミ類を生育することができる。アルテミアは乾燥耐久卵として広く流通しており、入手および保管が容易で、海水に浸漬することによって１日ないし２日程度で孵化して餌料として利用できることから、維持および培養が常時必要なワムシと比べてきわめて準備が容易な生物餌料である。さらに、アルテミアは水中を泳ぎ懸濁状態となるので、沈殿してしまう配合飼料と異なり、クマノミ類の孵化仔魚が常時摂餌し易い利点もある。さらに、アルテミアは孵化後、１日程度は開口しないため、孵化に用いた海水に有害物が含まれる場合でも、アルテミアに有害物が取り込まれることを防止でき、アルテミアを摂餌するクマノミ類の仔魚に有害物が取り込まれてしまうのを防止できる。従って、クマノミ類を簡便に生育でき、良質なクマノミ類を繁殖させることができる。
【００１２】
また、本願発明者らはクマノミ類の親魚の飼育実験を積み重ねた結果、水温２５℃〜２８℃で且つ光照射時間が１日あたり１２時間〜１８時間の環境水下にクマノミ類の親魚をおくことで、上記クマノミ類の親魚は、およそ２週間に１回の頻度で定期的に産卵を繰り返すことを知見するに至った。上記の水温および光照射の条件は、天然海域におけるクマノミ類の繁殖時期および繁殖海域の水温および日照条件に相当するものである。
【００１３】
請求項２記載の発明は、かかる知見に基づくものであり、請求項１記載のクマノミ類の生育方法において、水温２５℃〜２８℃で且つ光照射時間が１日あたり１２時間〜１８時間の環境水下にクマノミ類の親魚をおき、クマノミ類の孵化仔魚を得るようにしている。
【００１４】
したがって、クマノミ類の親魚に定期的に産卵をさせて、良質なクマノミ類の卵や孵化仔魚を安定して得ることができる。
【００１５】
また、請求項３記載の影響評価試験方法は、請求項１または２記載の方法により生育しているクマノミ類の環境水に試験対象要因を与えて、クマノミ類に対する試験対象要因の影響を調べるようにしている。
【００１６】
アルテミアは孵化後１日程度は開口しないため、環境水中に含まれる試験対象要因の影響を受け難い。従って、試験対象要因の餌料生物への影響は考慮せずに、試験対象魚であるクマノミ類そのものに対する試験対象要因の影響を正確に観察することが可能となる。したがって、これまで極めて困難であった初期発生段階も含めての海水魚を対象とした影響評価試験を、容易に実施することができる。
【発明の効果】
【００１７】
しかして請求項１記載のクマノミ類の生育方法によれば、クマノミ類の孵化仔魚にワムシに代えてアルテミアのみを投与するので、初期餌料としてワムシを用いることなくクマノミ類を生育することができる。従って、ワムシを常時維持培養する煩雑な手間は不要となる。またアルテミアは孵化後１日程度は開口しないため、餌料を介して有害物がクマノミ類に取り込まれてしまうことを防止できる。さらに、アルテミアは水中を泳ぎ懸濁状態となるので、沈殿してしまう配合飼料と異なり、クマノミ類の孵化仔魚が常時摂餌し易い利点もある。従って、本発明によれば、クマノミ類を簡便に生育でき、良質なクマノミ類を容易に繁殖させることができる。
【００１８】
さらに、請求項２記載のクマノミ類の生育方法によれば、天然海域におけるクマノミ類の繁殖時期および繁殖海域の水温および日照条件に相当する水温２５℃〜２８℃で且つ光照射時間が１日あたり１２時間〜１８時間の環境水下にクマノミ類の親魚をおくので、クマノミ類の親魚に定期的に産卵をさせて、良質なクマノミ類の卵や孵化仔魚を安定して得ることができる。
【００１９】
さらに、請求項３記載の影響評価試験方法によれば、環境水中に含まれる試験対象要因の影響を受け難いアルテミアをクマノミ類の孵化仔魚に餌料として与えるので、試験対象要因の餌料生物への影響は考慮せずに、試験対象魚であるクマノミ類そのものに対する試験対象要因の影響を正確に観察することが可能となる。したがって、これまで極めて困難であった初期発生段階も含めての海水魚を対象とした影響評価試験を、容易に実施することができる。また、試験対象魚の安定供給も容易となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
以下、本発明のクマノミ類の生育方法および当該クマノミ類を用いた影響評価試験方法の実施の一形態を詳細に説明する。このクマノミ類の生育方法は、クマノミ類の孵化仔魚にワムシに代えてアルテミアのみを投与するようにしている。
【００２１】
アルテミア（ブラインシュリンプ）は、乾燥耐久卵として広く流通しており、入手および保管が容易で、海水に浸漬することによって１日ないし２日程度で孵化して餌料として利用できる。アルテミア耐久卵を例えば天然海水を用いて孵化させ、孵化したアルテミア（ブラインシュリンプ幼生）を初期生活段階のクマノミ類の仔魚に与える。初期生活段階は例えば孵化直後から１ヶ月程度経過するまでの期間である。アルテミアの投与は例えば毎日１回行い、給餌量は、例えば２４時間後に摂餌しきれなかったアルテミアが飼育水１ｍｌあたり１個体以上残るように調整することが好ましい。クマノミ類孵化仔魚が孵化後１ヶ月程度経過した時点で、アルテミアに加えて配合飼料または魚介類の細切物を投与し、徐々にアルテミアの給餌量を減らすと共に配合飼料または魚介類の細切物の給餌量を増やし、やがて配合飼料または魚介類の細切物のみの給餌に切り替える。
【００２２】
従って、初期餌料としてワムシを用いることなくクマノミ類を生育することができ、ワムシを常時維持培養する煩雑な手間は不要となる。またアルテミアは孵化後１日程度は開口しないため、餌料を介して有害物がクマノミ類に取り込まれてしまうことを防止できる。さらに、アルテミアは水中を泳ぎ懸濁状態となるので、沈殿してしまう配合飼料と異なり、クマノミ類の孵化仔魚が常時摂餌し易い利点もある。従って、クマノミ類を簡便に生育でき、良質なクマノミ類を容易に繁殖させることができる。
【００２３】
また、本実施形態では、水温２５℃〜２８℃で且つ光照射時間が１日あたり１２時間〜１８時間の環境水下にクマノミ類の親魚をおき、クマノミ類の孵化仔魚を得るようにしている。清浄な天然海水を入れた飼育水槽にクマノミ類の親魚を収容して、飼育水槽に設置した既存の水温調節装置により水温を２５℃〜２８℃の範囲に調節する。光照射の調節は、例えば水槽照明および室内の天井照明をタイマーにより定期的に点灯および消灯させて、水槽照明および室内の天井照明の連続点灯時間を１日あたり１２時間〜１８時間の範囲に調節する。尚、飼育水内の照明点灯時の照度は例えば１，０００ルクス〜１００，０００ルクス程度が好ましく、照明消灯時の照度は例えば１０ルクス以下とすることが好ましい。上記の水温および光照射の条件は、天然海域におけるクマノミ類の繁殖時期および繁殖海域の水温および日照条件に相当し、上記クマノミ類の親魚は、およそ２週間に１回の頻度で定期的に産卵を繰り返す。従って、良質なクマノミ類の卵や孵化仔魚を安定して得ることができる。
【００２４】
本発明の影響評価試験方法は、上記方法により生育するクマノミ類の環境水に試験対象要因を与え、クマノミ類に対する試験対象要因の影響を調べるようにしている。例えば、上記方法よりクマノミ類の親魚に産ませた卵は、産卵後の９日〜１０日目あたりの照明消灯後に孵化する。孵化した仔魚を回収し、清浄な天然海水（以下、通常海水と呼ぶ。）と、当該天然海水に試験対象物質を含ませたもの（以下、試験海水と呼ぶ。）とに、それぞれ収容する。通常海水に収容した孵化仔魚ならびに試験海水に収容した孵化仔魚に、それぞれ上記方法よりアルテミアを投与する。通常海水におけるクマノミ類の孵化仔魚と試験海水におけるクマノミ類の孵化仔魚とで、生残率、成長速度などを比較し、海水魚に対する試験対象物質の影響を調べる。
【００２５】
アルテミアは孵化後１日程度は開口しないため、試験海水中に含まれる試験対象物質の影響を受け難い。従って、試験対象物質の餌料生物への影響は考慮せずに、試験対象魚であるクマノミ類そのものに対する試験対象物質の影響を正確に観察することが可能となる。本発明により、これまで極めて困難であった初期発生段階も含めての海水魚を対象とした影響評価試験を容易に実施することができる。
【実施例】
【００２６】
室内に設置した循環濾過式水槽に１組のカクレクマノミ親魚を収容し、飼育した。循環濾過式水槽は、容量１８０リットルでアクリル製の飼育槽と、容量８０リットルで網目状プラスチック濾材が充填された濾過槽と、ポンプ（株式会社イワキ製「ＲＭＤ−４０」）と、水温調節装置（株式会社レイシー製「ＲＺ−２５０Ｙ」）と、紫外線照射装置（有限会社東熱製、出力３０Ｗ）と、メタルハライドランプの水槽照明（株式会社レイシー製「ＬＵＣ−１５０」）とで構成されるものを用いた。飼育槽には、清浄な天然海水と、直径３０ｃｍ程度の岩石１個と、直径２０ｃｍ程度のハタゴイソギンチャクを投入した。水温調節装置により水温は２５〜２８℃に調節し、タイマーにより水槽照明および室内の天井照明を１日１２〜１８時間点灯し、残りの時間はほぼ暗黒とした。
【００２７】
この結果、図１に示すようにおよそ２週間に１回の頻度で２年以上の長期にわたり定期的に産卵を繰り返した。産卵後、９日〜１０日目あたりの照明消灯後に孵化するため、あらかじめ飼育槽の排水口側にゴースネットで作製したトラップを設け、水流により孵化仔魚をトラップに導入し、翌朝、トラップより孵化仔魚を回収した。これにより４００尾前後の孵化仔魚をほぼ２週間間隔で得ることができた。
【００２８】
さらに上記方法で得たカクレクマノミ孵化仔魚を、試験対象物質としての銅を含む試験海水と通常海水中とにそれぞれ収容し、餌料としてアルテミアを投与して２週間にわたる初期生活段階毒性試験を実施した。試験海水は、海水中の銅濃度が、４０マイクログラム／リットル、８０マイクログラム／リットル、１６０マイクログラム／リットル、３２０マイクログラム／リットル、６４０マイクログラム／リットルの５種類を用いた。
【００２９】
上記毒性試験の結果を図２に示す。図２中の◆のプロットが通常海水での孵化仔魚の生残率の経時変化を示し、■のプロットが銅濃度が４０マイクログラム／リットルの試験海水での孵化仔魚の生残率の経時変化を示し、●のプロットが銅濃度が８０マイクログラム／リットルの試験海水での孵化仔魚の生残率の経時変化を示し、◇のプロットが銅濃度が１６０マイクログラム／リットルの試験海水での孵化仔魚の生残率の経時変化を示し、□のプロットが銅濃度が３２０マイクログラム／リットルの試験海水での孵化仔魚の生残率の経時変化を示し、○のプロットが銅濃度が６４０マイクログラム／リットルの試験海水での孵化仔魚の生残率の経時変化を示す。図２に示す結果から、海水中の銅濃度が３２０マイクログラム／リットル程度までは、生残率は通常海水と変わらないか、むしろ向上するが、銅濃度が６４０マイクログラム／リットルでは通常海水よりも生残率が低下することが明らかとなった。
【００３０】
なお、上述の実施形態は本発明の好適な実施の一例ではあるがこれに限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において種々変形実施可能である。例えば本発明方法により生育するクマノミ類を用いて行う影響評価試験は、環境水中に試験対象の毒性物質を含有させる毒性試験には限定されない。例えば環境水として試験対象海域の汚染海水を使用し、あるいは環境水の水槽を振動状態などの試験対象環境下に置いて、クマノミ類の生残率、成長速度、遊泳障害などから、海水魚に対する試験対象要因の影響を調べるものであっても良い。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】１組のカクレクマノミから得られた孵化仔魚数の推移を示すグラフであり、横軸は時間経過（１目盛は１ヶ月）を示し、縦軸は孵化仔魚数を示す。
【図２】カクレクマノミの孵化仔魚を用いた銅に対する初期生活段階毒性試験の結果を示すグラフであり、横軸は飼育日数を示し、縦軸は生残率［％］を示す。
【図１】
2005192535.tif 000002
【図２】
2005192535.tif 000003