(57)【要約】    【課題】  高血圧症および脳卒中、糖尿病などの循環器障害の治療と予防に対して有用な薬剤および健康食品に関する。    【構成】  本発明の循環器疾患治療剤は、フェルラ酸および／または該フェルラ酸の生理学的に許容される塩を少なくとも１種以上を含有するものであり、また、健康食品は、フェルラ酸および／または該フェルラ酸の生理学的に許容される塩を少なくとも１種以上を飲食品中に含有するものである。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
フェルラ酸および／または該フェルラ酸の生理学的に許容される塩を少なくとも１種以上を含有することを特徴とする循環器疾患治療剤。
【請求項２】
脳血管疾患治療剤であることを特徴とする請求項１記載の循環器疾患治療剤。
【請求項３】
高血圧治療剤であることを特徴とする請求項１記載の循環器疾患治療剤。
【請求項４】
微細血管保護作用を有するものであることを特徴とする請求項１記載の循環器疾患治療剤。
【請求項５】
体重増加抑制作用を有するものであることを特徴とする請求項１記載の循環器疾患治療剤。
【請求項６】
フェルラ酸および／または該フェルラ酸の生理学的に許容される塩を少なくとも１種以上を飲食品中に含有することを特徴とする健康食品。
【請求項７】
飲食品が動物用であることを特徴とする請求項６記載の健康食品。
【請求項８】
体重増加抑制作用を有するものであることを特徴とする請求項６、または請求項７記載の健康食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フェルラ酸（Ferulic acid）および／または生理学的に許容されるフェルラ酸塩における新規な薬理作用である血圧低下作用、脳卒中発症抑制作用、微細血管保護作用、および体重増加抑制作用に基づく高血圧症および高血圧性脳血管疾患、糖尿病などの治療と予防に有用な薬剤、および健康食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、フェルラ酸は米、大麦、小麦などの穀物、アスパラ、トマト、オリーブの実、イチゴ、柑橘類、黒糖、その他の多くの植物の細胞壁に存在する。例えば、米糠から得られる医薬品用素材としてγ−オリザノールではその中に各種のステロールとエステル体を形成して存在する。米糠は、精米の副産物として日本国内で年間約１００万トンが生産され、コメ油の原料などに使われているが、さらにこの貴重な天然資源の活用法の開発が求められている。フェルラ酸にはシス体とトランス体の２種類の異性体が存在するが、γ−オリザノール中に含まれるフェルラ酸はトランス体である。トランス体は、γ−オリザノールを含む米糠由来の原料をアルカリ加水分解する方法により得られる。フェルラ酸の作用は、例えば、抗酸化作用（特許文献１、非特許文献１）、紫外線吸収作用（特許文献２、非特許文献２）、抗ＨＢＶ剤（特許文献３）、細胞分化促進剤（特許文献４）、活性酸素消去剤（特許文献５）、ホスホリパーゼＡ２阻害剤（特許文献６）、パ−オキシナイトライト（ONOO- : peroxynitrite ）の捕捉作用（非特許文献３）およびコラーゲンの合成抑制作用（特許文献７）などが公知であるが、本発明による抗高血圧作用および脳卒中などの脳血管障害に対する治療効果、ならびに脳および末梢の微細血管の保護効果、体重増加抑制効果については知られていない。
【０００３】
高血圧症は、主要臓器である脳、心臓および腎臓における血管性の合併症の基礎疾患である。高血圧症の薬物治療は高血圧緊急時の場合を除き、脳虚血あるいは心機能などへの悪影響を回避するために、目標血圧値まで時間をかけて徐々に降圧する方法がとられている。一般に軽度の高血圧症あるいは高血圧症の合併症の予防と進展抑制においては、食塩摂取制限などの食生活の改善、規則的な運動および体重制限などによるライフスタイルの修正が推奨されている。しかしながら生活習慣の改善による効果には限界があり、薬物療法あるいはその補助療法としての高血圧発症時における健康食品を必要としており、このことは、ペット動物にあっても同様である。
【特許文献１】特開平７−３００４１２号公報
【非特許文献１】Graf E., Free Radical Biology & Medicine Vol.13 435-484 (1992)
【特許文献２】特開平１−１３０１６号公報
【非特許文献２】村上太郎ほか FOOD Style Vol.21 61-65 (1999)
【特許文献３】特開平４−２３４３１９号公報
【特許文献４】特開平５−３１０５２６号公報
【特許文献５】特開平７−３３０４１２号公報
【特許文献６】特開平７−３３０６１１号公報
【非特許文献３】Pannala A. et al.,  Free Radical Biology & Medicine Vol.24 594-606 (1998)
【特許文献７】特開平９−４０５５３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
わが国においては、生活習慣の欧米化により高脂肪・高蛋白食などの高カロリー食の摂取による肥満などに起因する生活習慣病の増加と人口の高齢化社会によって、糖尿病、高血圧症およびその合併症である脳卒中、心肥大、心筋梗塞、鬱血性心不全、冠動脈狭窄などの循環器系疾患の増大が危惧されている。従って、これらの疾患の予防法と治療法の開発は、早期に解決すべき社会的重要課題である。なかでも脳卒中は、わが国において癌、心疾患に次ぐ三大死因の一つであるが、降圧療法の発達により脳出血による死亡は減少したものの、逆に脳梗塞などの死に至らない軽症の脳卒中は増加傾向にある。脳卒中にもとづく痴呆、意欲の低下、ＱＯＬの低下などの脳神経障害の増加するなか、このような病態の発症と進展を防止し、且つ予後の改善に経済的で安全且つ効果的な方法の開発が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、上記の課題に答えるため主食の米に含まれる成分について、鋭意研究を行った結果、フェルラ酸および／またはフェルラ酸の生理学的に許容される塩が高血圧および脳卒中ならびに脳血管内皮障害等の血管病変、微細血管の異常に基づく疾患である糖尿病、動脈硬化症、痴呆等に対する優れた抑制効果、また、微細血管保護作用や体重増加抑制作用を示し、且つ副作用が少ないことを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００６】
即ち、本発明の循環器疾患治療剤は、フェルラ酸および／またはフェルラ酸の生理学的に許容される塩（以下、フェルラ酸系化合物、ＦＡともいう）を少なくとも１種以上を有効成分として含有することを特徴とする。
【０００７】
循環器疾患治療剤が脳血管疾患治療剤であることを特徴とする。
【０００８】
循環器疾患治療剤が高血圧治療剤であることを特徴とする。
【０００９】
循環器疾患治療剤が微細血管保護作用を有するものであることを特徴とする。  循環器疾患治療剤が体重増加抑制作用を有するものであることを特徴とする。  本発明の健康食品は、フェルラ酸および／または該フェルラ酸の生理学的に許容される塩を少なくとも１種以上を飲食品中に有効成分として含有することを特徴とする。
【００１０】
上記の飲食品が動物用であることを特徴とする。
【００１１】
健康食品が体重増加抑制作用を有するものであることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１２】
本発明はフェルラ酸とその塩の新規な用途に関する。より詳しくは、高血圧症および高血圧性あるいは虚血性の臓器病変、とりわけ脳血管の変性障害を伴う脳卒中や脳梗塞、また、糖尿病、動脈硬化、痴呆等の微細血管の異常に基づく疾患などの予防と治療に関する。より具体的には、天然物由来の医薬品、特定保健用食品、健康食品類の有効成分として高血圧症の緩徐な治療およびその補助療法および／または一過性脳虚血発作、酸化的ストレス状態の改善、脳血栓、脳梗塞、クモ膜下出血および脳卒中などにおける脳血管性神経障害の治療、補助療法、病気予後の改善に対して有用であり、且つ、動物用飲食品の有効成分として高血圧性あるいは虚血性の血管病変、ならびに体重増加抑制に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
フェルラ酸はシス体とトランス体の２種類の異性体のいずれも使用することができる。また、フェルラ酸の生理学的に許容される塩としては、下記一般式
【００１４】
【化１】
2005314435.tif 000002
【００１５】
で示され、式中、Ｂはフェルラ酸と一体となり塩を形成する塩基性成分であり、例えばナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛などの金属イオン類であり、アルギニン、アルギニンエチルエステル、リジン、リジンエチルエステルなどのアミノ酸化合物を挙げることが出来る。
【００１６】
通常、フェルラ酸のアミノ酸塩化合物は、フェルラ酸１当量比に対して１または２当量比のアミノ酸化合物とから製造することができる。アミノ酸化合物は、必要に応じてフェルラ酸１当量比に対して３〜１０当量比の過剰量を使用することができる。
【００１７】
本発明において、フェルラ酸系化合物は公知の製剤技術によって錠剤、顆粒剤、散剤、リピッドマイクロスフェア、硬カプセル剤、軟カプセル剤、リポゾーム、軟膏、湿布剤、点眼剤、輸液、血液透析液、腹膜透析液、液剤などの任意の製剤形態をとることができ、使用目的に応じて適切な投与法を選択して使用することができる。本発明の製剤を構成する成分例としては、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、被覆剤、付湿剤、安定化剤、溶解補助剤、精製水、ｐＨ調整剤、保存剤、荷電リポゾーム担体、コラーゲン、ポリビニールピロリドン、水溶性高分子化合物などを挙げることができ、投与形態に応じて選択し公知の慣用される製造法により調製することができる。
【００１８】
さらに本発明化合物は、米飯、味噌、醤油、カップ麺を含む各種の麺類、カレールー、シチュー、各種スープ類、ソーセージ、竹輪、蒲鉾、はんぺんなどの練り製品、ドレッング類、パン類、粉ミルク、ヨーグルド、乳飲料、乳酸飲料、トマト飲料、清涼飲料、スポーツ飲料、チョコレート、クッキー、チーウインガム、アメなどに添加して特定保健用食品、健康食品などに使用することができる。本発明化合物を含む食品類においては、必要に応じて食物繊維、乳清蛋白質、乳清蛋白質加水分解物、糖類、ビタミンＡ、ビタミンＢ1 、リボフラビン、リボフラビン燐酸エステル、アスコルビン酸、ビタミンＤなどのレチノール類、ビタミンＥなどのトコフェロール類、シアノコバラミン、ビオチン、ニコチン酸アミド、葉酸、パントテン酸カルシウム、タウリン、カゼイン、レシチン、モノグリセライド、ポリグリセライド、および葉緑素などの中から適宜選択し、添加して使用することができる。また、動物用の餌に本発明化合物を添加して、動物用健康食品として肥満、糖尿病および高血圧等の血管疾患に起因する各種病態の改善に有用である。
【００１９】
本発明化合物の投与量は、投与経路、治療対象となる病態の種類と程度、患者の年齢と性別、体重、投与薬物に対する感受性、投与時期と投与間隔などによって異なるが、通常成人において一日当たり約 1〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜３００ｍｇを症状と投与経路に応じて増減することが出来る。動物に対しては、餌に０．０１〜５％、好ましくは０．１〜５％を混合して使用し、症状に応じて増減するとよい。
以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例】
【００２０】
下記の実施例で使用するフェルラ酸−Ｌ−アルギニン塩の調製方法は下記の通りである。
【００２１】
Ｌ−アルギニン 17.4 g (0.1 mol) の水溶液 (100 ml) に攪拌下、フェルラ酸19.43 g のエタノール溶液 (50 ml)  を滴下して塩を形成させた後、減圧濃縮して粗結晶を得た。これを水から再結晶して mp １６０℃（分解）の無色結晶（収率８７％) を得た。
【００２２】
（実施例１）
（自然発症高血圧ラットに対する降圧作用の評価）
自然発症高血圧ラット（SHR : SHR 等疾患モデル共同研究会より購入）と比較対照動物には正常血圧を示すＷＫＹラット（Wistar-Kyoto rat）に対し、試験開始（５週齢）と同時に飲料水として１％食塩水と、被験物質としてフェルラ酸 (ＦＡ）を飼料（粉末飼料ＳＰ：船橋農場より購入）に倍散希釈法により混合した被験物質混入飼料を試験期間中自由摂取させた。
【００２３】
血圧測定は非観血式自動血圧計（株式会社理研開発）を用いて収縮期血圧を毎週１回測定した。６週目の血圧、体重測定後、ＦＡ混入飼料からＦＡを除いた普通飼料に置換、それ以降も同様に１２週目まで血圧、体重を測定した。その結果を表１と表２に示した。
【００２４】
表中、被験物質非投与対照群は１％食塩水のみ摂取させたもの、ＦＡ1.8 ％投与群は、１％食塩水と1.8 ％ＦＡとを併用摂取したもの、ＦＡ2.7 ％投与群は１％食塩水と2.7 ％ＦＡとを併用摂取したものである。
【００２５】
なお、下記表１〜表７における変化の有意差検定は、平均値±標準誤差を算出したのち、対応のない Student′s t-testにもとづき統計処理したものである。Ｐは被験物質非投与対照群との有意差検定（ｔ−検定法）を示し、危険率５％未満（ｐ＜０．０５）を有意差ありとした。また、* を付していない場合は、被験物質非投与対照群に比較し有意な差が無かった場合である。
【００２６】
（表１）
ＳＨＲに対するフェルラ酸（ＦＡ）の降圧効果
───────────────────────────────────
前値（０週）    ６週目      ９週目        １２週目
被験物質非投与対照群
血圧 (mmHg)   134.4 ±4.3   221.4 ±4.6     237.3 ±7.2   236.3 ± 7.6
体重 (g)      135.8 ±2.3   301.0 ±4.8     308.6 ±5.8   333.8 ± 4.1
動物例数(n)         7             7               6  1)         6  1) 
ＦＡ1.8 ％投与群
血圧 (mmHg)   128.5 ±2.2   201.1 ±6.2 *   225.6 ±6.1   233.6 ± 6.0
体重 (g)      135.5 ±1.8   264.8 ±4.1 **  293.8 ±5.0   307.0 ± 6.7
動物例数(n)         6             6               6             ５ 2) 
ＦＡ2.7 ％投与群
血圧 (mmHg)   135.4 ±2.7   192.0 ±2.5***  211.8 ±3.1** 217.7 ± 4.7
体重 (g)      136.8 ±1.5   239.5 ±3.4**   292.1 ±3.0   309.4 ± 3.1
動物例数(n)         7             7               7              7
───────────────────────────────────
*   P ＜ 0.05 、**  P ＜ 0.01 、*** P ＜ 0.001
1)：  ７−８週目に１例死亡、  2)：  ９−１０週目に１例死亡  （６週目以降、ＦＡ混入飼料を普通飼料に置換）。
【００２７】
（表２）
ＷＫＹラットに対するフェルラ酸の降圧効果
───────────────────────────────────
前値（０週）    ６週目        ９週目        １２週目
被験物質非投与  ＷＫＹ対照群
血圧 (mmHg)    99.7 ±3.0   124.0 ±3.9     124.0 ±3.7   124.2 ± 6.4
体重 (g)      123.1 ±1.8   302.2 ±4.1     337.2 ±2.9   349.2 ±12.0
動物例数(n)         7             7             7             7 
ＦＡ2.7 ％投与ＷＫＹ
血圧 (mmHg)    99.5 ±3.1   128.4 ±4.7     124.0 ±3.7   135.5 ± 2.8
体重 (g)      122.2 ±2.8   263.2 ±4.3**   310.1 ±7.3** 349.2 ±12.0
動物例数(n)        7             7               7             7
───────────────────────────────────
**  P ＜ 0.01 。
【００２８】
薬効評価：ＦＡは、ＳＨＲに対する６週間の投与期間中において用量依存的に有意な降圧作用を示した。一方、ＦＡは正常血圧値を示すＷＫＹラットに対して降圧作用を示さず、自然発症高血圧ラットの血圧上昇に対して降圧作用を有することから、高血圧動物に選択的な作用を有することが明らかである。
【００２９】
また、表１及び表２から、ＳＨＲおよびＷＫＹに対するＦＡ投与群は、体重の有意な抑制がみられた。その後の解剖所見では、被験物質非投与対照群に比較し、被験物質投与群では著明な下腹部の脂肪重量の減少が観察されたことから、体脂肪の蓄積抑制作用を有することが示唆された。
【００３０】
（実施例２）
（自然発症脳卒中ラットに対する降圧作用の評価）
自然発症脳卒中ラット(SHR-SP: SHR  等疾患モデル共同研究会より購入）に対し、試験開始（５週齢）と同時に飲料水として１％食塩水と、被験物質としてフェルラ酸 (ＦＡ）およびフェルラ酸アルギニン塩 (ＦＡ−Ａｒｇ）をそれぞれ飼料（粉末飼料ＳＰ：船橋農場より購入）に倍散希釈法により混合した被験物質混入飼料を試験期間中自由摂取させた。
【００３１】
血圧測定は、非観血式自動血圧計（株式会社理研開発）を用いて収縮期血圧および心拍数を毎週１回測定した。血圧測定の期間は、動物に対する血圧測定時に生じるストレスにより高血圧発症の亢進あるいは死期を早めるなどの副次的作用をまねく可能性があるので、５週目までとした。６週目以降は症状の発症ならびに発症の程度、死亡の有無、体重などの観察を７週目まで行った。
【００３２】
表中、被験物質非投与対照群は１％食塩水のみ単独摂取したもの、ＦＡ1.8 ％投与群は、１％食塩水と1.8 ％ＦＡとを併用摂取したもの、ＦＡ−Ａｒｇ 1.8％投与群は１％食塩水と 1.8％ＦＡ−Ａｒｇとを併用摂取したものである。
【００３３】
（表３）
自然発症脳卒中ラット (ＳＨＲ−ＳＰ) に対するフェルラ酸 (ＦＡ）とフェルラ酸アルギニン塩 (ＦＡ−Ａｒｇ）の降圧効果
───────────────────────────────────
前値（０週）      ２週目      ４週目          ７週目
被験物質非投与対照群
血圧 (mmHg)   124.5 ±9.0   172.7 ±4.8   218.4 ±5.0       NT
体重 (g)      102.0 ±4.8   169.4 ±6.2   213.0 ±6.5   173.0 ±14.5
動物例数(n)         7             7             7             4  1) 
ＦＡ1.8 ％投与群
血圧 (mmHg)   124.5 ±5.5   150.2 ±6.1*  203.4 ±4.6*      NT
体重 (g)       94.0 ±2.3   148.8 ±3.3*  198.2 ±3.1   233.0 ± 3.8 ***動物例数(n)         7             7             7             7 
ＦＡ−Ａｒｇ 1.8％投与群
血圧 (mmHg)   122.8 ±4.6   155.2 ±4.6*  196.1 ± 5.8*     NT
体重 (g)      103.2 ±3.2   156.7 ±3.8   204.4 ± 4.5  226.4 ±10.9* 
動物例数(n)         7             7             7             7 
───────────────────────────────────
*   P ＜ 0.05 、  ***   P ＜0.001 
1)  ：  ３例死亡
NT: 血圧測定せず（５週目以降は測定せず、実施例２の方法の項で説明）。
【００３４】
表３から、被験物質非投与ＳＨＲ−ＳＰ対照群は、４週目以降７週目にかけて神経症状の発症に伴って著明な体重減少がみられ、７例中３例が死亡した。一方、被験物質投与群では７週目まで体重は増加し、死亡例も見られなかった。
【００３５】
（表４）
被験物質のＳＨＲ−ＳＰに対する神経症状の発症遅延および延命効果
───────────────────────────────────
被験物質    例数  神経症状発症まで    発症から死亡まで    平均死亡日数
(n)   の平均日数          の平均日数
被験物質非投与対照群
7     41.6 ± 2.1          5.1 ± 1.8       46.7 ± 5.1
ＦＡ 1.8％投与群
7     59.6 ± 1.4***      10.4 ± 0.6*      70.0 ± 1.8*** 
ＦＡ−Ａｒｇ塩 1.8％投与群
7     65.4 ± 4.8***       8.2 ± 2.2       73.9 ± 4.7*** 
───────────────────────────────────
＊  P < 0.05、   ***  P < 0.001 。
【００３６】
試験結果の判定：
被験物質非投与ＳＨＲ−ＳＰ対照群と比較し、２週目以降ＦＡ投与群、ＦＡ−Ａｒｇ塩投与群に有意な降圧効果が観察された（表３）。
【００３７】
表４の試験結果は被験物質非投与ＳＨＲ−ＳＰ対照群と比較してＦＡ投与群およびＦＡ−Ａｒｇ塩投与群において、明らかな神経症状発症遅延効果および延命効果を示している。
【００３８】
（実施例３）
（自然発症脳卒中ラットに対する脳内微細血管保護作用の評価）
自然発症脳卒中ラット(SHR-SP: SHR  等疾患モデル共同研究会より購入）に対し試験開始（５週齢）と同時に0.003 ％のＬ−ニトロアルギニンメチルエステル（Ｌ−ＮＡＭＥ：血管内皮での一酸化窒素合成阻害剤）混入飲料水と、被験物質としてフェルラ酸 (ＦＡ）およびフェルラ酸アルギニン塩 (ＦＡ−Ａｒｇ）をそれぞれ飼料に混合し、0.003 ％Ｌ−ＮＡＭＥ飲料水と並行して試験期間（８週間）中自由摂取させた。試験期間中、体重の測定を週１回行った。
【００３９】
血圧測定は非観血式自動血圧計（株式会社理研開発）を用いて収縮期血圧および心拍数を毎週１回測定した。血圧測定の期間は、動物に対する血圧測定時に生じるストレスにより高血圧発症の亢進あるいは死期を早めるなどの副次的作用をまねく可能性があるので、動物の症状を観察しながら、本実験（実施例）の場合には８週目までとした。試験期間中、症状の発症ならびに発症の程度、死亡の有無、体重などの観察を８週目まで行った。
【００４０】
表中、被験物質非投与対照群は 0.003％Ｌ−ＮＡＭＥ飲料水のみ単独摂取したもの、ＦＡ2.7 ％投与群は 0.003％Ｌ−ＮＡＭＥ飲料水と2.7 ％ＦＡとを併用摂取したもの、ＦＡ−Ａｒｇ 1.8％投与群は 0.003％Ｌ−ＮＡＭＥ飲料水と 1.8％ＦＡ−Ａｒｇとを併用摂取したものである。
【００４１】
（表５）
自然発症脳卒中ラット (ＳＨＲ−ＳＰ) に対するフェルラ酸 (ＦＡ）とフェルラ酸アルギニン塩 (ＦＡ−Ａｒｇ）の降圧効果
───────────────────────────────────
前値（０週）      ２週目      ４週目
被験物質非投与対照群
血圧 (mmHg)           114.4 ±3.2   154.3 ±2.8   208.0 ± 7.5  
体重 (g)              106.0 ±1.4   186.0 ±2.2   210.3 ±15.8  
動物例数(n)                 7             7             7 
ＦＡ2.7 ％投与群
血圧 (mmHg)           115.0 ±4.7   141.4 ±3.1*   185.1± 1.9*   
体重 (g)              107.7 ±1.9   137.6 ±3.0*** 175.9± 3.2    
動物例数(n)                 7             7             7   
ＦＡ−Ａｒｇ 1.8％投与群
血圧 (mmHg)           116.0 ±4.3   146.4 ±5.0*   183.6± 5.7*   
体重 (g)              102.7 ±2.9   179.9 ±4.0    225.7± 3.0    
動物例数(n)                 7             7             7         
──────────────────────────────────
*   P ＜ 0.05 、  ***   P ＜0.001 。
【００４２】
（表６）
自然発症脳卒中ラット (ＳＨＲ−ＳＰ) に対するフェルラ酸 (ＦＡ）とフェルラ酸アルギニン塩 (ＦＡ−Ａｒｇ）の降圧効果（続き）
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６週目            ８週目
被験物質非投与対照群
血圧 (mmHg)                 222.7 ±19.2      228.0 ±28.0
体重 (g)                    222.5 ±27.2      233.0 ±40.0
動物例数(n)                       4  1)             2  2)  
ＦＡ2.7 ％投与群
血圧 (mmHg)                  203.1±7.5        207.8± 6.0  
体重 (g)                     195.1±5.0        213.5± 7.4  
動物例数(n)                       7                 6  3) 
ＦＡ−Ａｒｇ 1.8％投与群
血圧 (mmHg)                  205.7±7.7        221.8± 7.1  
体重 (g)                     244.3±4.2*       263.6± 6.9  
動物例数(n)                       7                 5  4) 
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*   P ＜ 0.05 、***   P ＜0.001 
1) ：  ５週目に２例、６週目に１例死亡、 2) ：  ７週目に１例、８週目に１例死亡、 3) ：  ６週目に血圧および体重測定後に事故死、 4) ：  ７週目に１例、８週目に１例死亡。
【００４３】
（表７）
被験物質のＳＨＲ−ＳＰに対する神経症状の発症遅延および延命効果
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被験物質        例数      神経症状発症まで        平均死亡日数
(n)       の平均日数
被験物質非投与対照群
7         38.9 ± 5.3   (6/7)     44.7 ± 4.0  (5/7) 
ＦＡ 2.7％投与群
６  1)     56.0 ± 0.0** (0/6)     56.0 ± 0.0* (0/6) 
ＦＡ−Ａｒｇ塩 1.8％投与群
7         54.9 ± 1.1*  (2/7)     55.0 ± 1.0* (2/7) 
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*  P < 0.05、  **  P < 0.01
（  ）：（発症あるいは死亡した動物数／用いた動物数）、 1) ：６週目の血圧測定直後に事故死。
【００４４】
（試験結果の判定）
表７の試験結果から、被験物質非投与対照群においてはＬ−ＮＡＭＥにより血圧は急激に上昇し、さらに、脳内微細血管は脆弱となり、８週間の観察期間中に７例中５例が死亡したが、ＦＡ投与群およびＦＡ−Ａｒｇ塩投与群においては明らかな予防効果が見られた。また、表７から被験物質非投与ＳＨＲ−ＳＰ対照群と比較し、投与開始からの神経症状の発症あるいは死亡までの平均日数も有意に延長していたことから、ＦＡ投与群、ＦＡ−Ａｒｇ塩投与群の順で脳内微細血管が保護されたことが示唆された。