(57)【要約】【課題】マラリア、住血吸虫症及び癌を予防及び治療する方法及び手段を提供すること。【解決手段】スピロ又はジスピロ１，２，４−トリオキソラン類を用いてマラリア、住血吸虫症及び癌を治療及び予防する方法を提供する。好ましい１，２，４−トリオキソラン類は、トリオキソラングループの一方の側にスピロアダマンタン基を、トリオキソラングループの他方の側にスピロシクロヘキシル環を含むものである。この場合、スピロシクロヘキシル環の４位は置換されていることが好ましい。アルテミシニン半合成誘導体と比較すると、本発明の化合物は構造的に単純であり、合成が容易であり、毒性がなく、且つマラリア寄生虫に対する効力が大きい。【特許請求の範囲】
【請求項１】
スピロ又はジスピロ１，２，４−トリオキソランが、ＯＺ２７１、ＯＺ２７２、ＯＺ２７３、ＯＺ２７４、ＯＺ２７５、ＯＺ２７６、ＯＺ２７７、ＯＺ２７８、ＯＺ２７９、ＯＺ２８０、ＯＺ２８１、ＯＺ２８２、ＯＺ２８３、ＯＺ２８４、ＯＺ２８５、ＯＺ２８６、ＯＺ２８７、ＯＺ２８８、ＯＺ２８９、ＯＺ２９０、ＯＺ２９１、ＯＺ２９２、ＯＺ２９３、ＯＺ２９４、ＯＺ２９５、ＯＺ２９６、ＯＺ２９７、ＯＺ２９８、ＯＺ２９９、ＯＺ３００、ＯＺ３０１、ＯＺ３０２、ＯＺ３０３、ＯＺ３０４、ＯＺ３０５、ＯＺ３０６、ＯＺ３０７、ＯＺ３０８、ＯＺ３０９、ＯＺ３１０、ＯＺ３１１、ＯＺ３１２、ＯＺ３１３、ＯＺ３１４、ＯＺ３１５、ＯＺ３１６、ＯＺ３１７、ＯＺ３１８、ＯＺ３１９、ＯＺ３２０、ＯＺ３２１、ＯＺ３２２、ＯＺ３２３、ＯＺ３２４、ＯＺ３２５、ＯＺ３２６、ＯＺ３２７、ＯＺ３２８、ＯＺ３２９、ＯＺ３３０、ＯＺ３３１、ＯＺ３３２、ＯＺ３３３、ＯＺ３３４、ＯＺ３３５、ＯＺ３３６、ＯＺ３３７、ＯＺ３３８、ＯＺ３３９、ＯＺ３４０、ＯＺ３４１、ＯＺ３４２、ＯＺ３４３、ＯＺ３４４、ＯＺ３４５、ＯＺ３４６、ＯＺ３４７、ＯＺ３４８、ＯＺ３４９、ＯＺ３５０、ＯＺ３５１、ＯＺ３５２、ＯＺ３５３、ＯＺ３５４、ＯＺ３５５、ＯＺ３５６、ＯＺ３５７、ＯＺ３５８、ＯＺ３５９、ＯＺ３６０、ＯＺ３６１、ＯＺ３６２、ＯＺ３６３、ＯＺ３６４、ＯＺ３６５、ＯＺ３６６、ＯＺ３６７、ＯＺ３６８、及びＯＺ３６９から成る群より選択されるものである、スピロ又はジスピロ１，２，４−トリオキソラン。
【請求項２】
ＯＺ２７７、ＯＺ３４９、ＯＺ３５１、ＯＺ３５４、ＯＺ３５７、ＯＺ３５９、及びＯＺ３６８から成る群より選択される、請求項１記載のスピロ又はジスピロ１，２，４−トリオキソラン。
【請求項３】
マラリア予防若しくはマラリア治療に有効な量の、ＯＺ２７１、ＯＺ２７２、ＯＺ２７３、ＯＺ２７４、ＯＺ２７５、ＯＺ２７６、ＯＺ２７７、ＯＺ２７８、ＯＺ２７９、ＯＺ２８０、ＯＺ２８１、ＯＺ２８２、ＯＺ２８３、ＯＺ２８４、ＯＺ２８５、ＯＺ２８６、ＯＺ２８７、ＯＺ２８８、ＯＺ２８９、ＯＺ２９０、ＯＺ２９１、ＯＺ２９２、ＯＺ２９３、ＯＺ２９４、ＯＺ２９５、ＯＺ２９６、ＯＺ２９７、ＯＺ２９８、ＯＺ２９９、ＯＺ３００、ＯＺ３０１、ＯＺ３０２、ＯＺ３０３、ＯＺ３０４、ＯＺ３０５、ＯＺ３０６、ＯＺ３０７、ＯＺ３０８、ＯＺ３０９、ＯＺ３１０、ＯＺ３１１、ＯＺ３１２、ＯＺ３１３、ＯＺ３１４、ＯＺ３１５、ＯＺ３１６、ＯＺ３１７、ＯＺ３１８、ＯＺ３１９、ＯＺ３２０、ＯＺ３２１、ＯＺ３２２、ＯＺ３２３、ＯＺ３２４、ＯＺ３２５、ＯＺ３２６、ＯＺ３２７、ＯＺ３２８、ＯＺ３２９、ＯＺ３３０、ＯＺ３３１、ＯＺ３３２、ＯＺ３３３、ＯＺ３３４、ＯＺ３３５、ＯＺ３３６、ＯＺ３３７、ＯＺ３３８、ＯＺ３３９、ＯＺ３４０、ＯＺ３４１、ＯＺ３４２、ＯＺ３４３、ＯＺ３４４、ＯＺ３４５、ＯＺ３４６、ＯＺ３４７、ＯＺ３４８、ＯＺ３４９、ＯＺ３５０、ＯＺ３５１、ＯＺ３５２、ＯＺ３５３、ＯＺ３５４、ＯＺ３５５、ＯＺ３５６、ＯＺ３５７、ＯＺ３５８、ＯＺ３５９、ＯＺ３６０、ＯＺ３６１、ＯＺ３６２、ＯＺ３６３、ＯＺ３６４、ＯＺ３６５、ＯＺ３６６、ＯＺ３６７、ＯＺ３６８、及びＯＺ３６９から成る群より選択されるスピロ又はジスピロ１，２，４−トリオキソラン、そのプロドラッグ類及びそれらの光学異性体、及び薬学的に許容しうる担体を含むマラリアを予防及び治療するための医薬組成物。
【請求項４】
該トリオキソランが、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩化水素、臭化水素、ヨウ化水素、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イソチオネート）、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、蓚酸塩、パルミトエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバール酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアネート、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、及びウンデカン酸塩からなる群より選択される塩を含むものである、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
該トリオキソランが、シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ｐ−トシレート、シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ハイドロジェン  メイリエート（ｍａｌｅａｔｅ）、シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ハイドロクロライド、シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ハイドロジェン  タータレート、及びシス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ハイドロジェン  サクシネートから成る群より選択されるものである、請求項４記載の組成物。
【請求項６】
シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ハイドロジェン  メイリエート（ｍａｌｅａｔｅ）。
【請求項７】
薬学的に許容しうる担体中のマラリア予防又はマラリア治療に有効な量のスピロ又はジスピロ１，２，４−トリオキソランを投与する工程を含むマラリアを予防又は治療する方法であって、該トリオキソランがＯＺ２７１、ＯＺ２７２、ＯＺ２７３、ＯＺ２７４、ＯＺ２７５、ＯＺ２７６、ＯＺ２７７、ＯＺ２７８、ＯＺ２７９、ＯＺ２８０、ＯＺ２８１、ＯＺ２８２、ＯＺ２８３、ＯＺ２８４、ＯＺ２８５、ＯＺ２８６、ＯＺ２８７、ＯＺ２８８、ＯＺ２８９、ＯＺ２９０、ＯＺ２９１、ＯＺ２９２、ＯＺ２９３、ＯＺ２９４、ＯＺ２９５、ＯＺ２９６、ＯＺ２９７、ＯＺ２９８、ＯＺ２９９、ＯＺ３００、ＯＺ３０１、ＯＺ３０２、ＯＺ３０３、ＯＺ３０４、ＯＺ３０５、ＯＺ３０６、ＯＺ３０７、ＯＺ３０８、ＯＺ３０９、ＯＺ３１０、ＯＺ３１１、ＯＺ３１２、ＯＺ３１３、ＯＺ３１４、ＯＺ３１５、ＯＺ３１６、ＯＺ３１７、ＯＺ３１８、ＯＺ３１９、ＯＺ３２０、ＯＺ３２１、ＯＺ３２２、ＯＺ３２３、ＯＺ３２４、ＯＺ３２５、ＯＺ３２６、ＯＺ３２７、ＯＺ３２８、ＯＺ３２９、ＯＺ３３０、ＯＺ３３１、ＯＺ３３２、ＯＺ３３３、ＯＺ３３４、ＯＺ３３５、ＯＺ３３６、ＯＺ３３７、ＯＺ３３８、ＯＺ３３９、ＯＺ３４０、ＯＺ３４１、ＯＺ３４２、ＯＺ３４３、ＯＺ３４４、ＯＺ３４５、ＯＺ３４６、ＯＺ３４７、ＯＺ３４８、ＯＺ３４９、ＯＺ３５０、ＯＺ３５１、ＯＺ３５２、ＯＺ３５３、ＯＺ３５４、ＯＺ３５５、ＯＺ３５６、ＯＺ３５７、ＯＺ３５８、ＯＺ３５９、ＯＺ３６０、ＯＺ３６１、ＯＺ３６２、ＯＺ３６３、ＯＺ３６４、ＯＺ３６５、ＯＺ３６６、ＯＺ３６７、ＯＺ３６８、及びＯＺ３６９から成る群より選択されるものである方法。
【請求項８】
マラリアの予防又はマラリアの治療に有効な量のスピロ又はジスピロ１，２，４−トリオキソラン、そのプロドラッグ及びそれらの光学異性体を、薬学的に許容しうる担体と混合する工程を含むマラリアを予防及び治療するための組成物を製造する方法であって、該トリオキソランがＯＺ２７１、ＯＺ２７２、ＯＺ２７３、ＯＺ２７４、ＯＺ２７５、ＯＺ２７６、ＯＺ２７７、ＯＺ２７８、ＯＺ２７９、ＯＺ２８０、ＯＺ２８１、ＯＺ２８２、ＯＺ２８３、ＯＺ２８４、ＯＺ２８５、ＯＺ２８６、ＯＺ２８７、ＯＺ２８８、ＯＺ２８９、ＯＺ２９０、ＯＺ２９１、ＯＺ２９２、ＯＺ２９３、ＯＺ２９４、ＯＺ２９５、ＯＺ２９６、ＯＺ２９７、ＯＺ２９８、ＯＺ２９９、ＯＺ３００、ＯＺ３０１、ＯＺ３０２、ＯＺ３０３、ＯＺ３０４、ＯＺ３０５、ＯＺ３０６、ＯＺ３０７、ＯＺ３０８、ＯＺ３０９、ＯＺ３１０、ＯＺ３１１、ＯＺ３１２、ＯＺ３１３、ＯＺ３１４、ＯＺ３１５、ＯＺ３１６、ＯＺ３１７、ＯＺ３１８、ＯＺ３１９、ＯＺ３２０、ＯＺ３２１、ＯＺ３２２、ＯＺ３２３、ＯＺ３２４、ＯＺ３２５、ＯＺ３２６、ＯＺ３２７、ＯＺ３２８、ＯＺ３２９、ＯＺ３３０、ＯＺ３３１、ＯＺ３３２、ＯＺ３３３、ＯＺ３３４、ＯＺ３３５、ＯＺ３３６、ＯＺ３３７、ＯＺ３３８、ＯＺ３３９、ＯＺ３４０、ＯＺ３４１、ＯＺ３４２、ＯＺ３４３、ＯＺ３４４、ＯＺ３４５、ＯＺ３４６、ＯＺ３４７、ＯＺ３４８、ＯＺ３４９、ＯＺ３５０、ＯＺ３５１、ＯＺ３５２、ＯＺ３５３、ＯＺ３５４、ＯＺ３５５、ＯＺ３５６、ＯＺ３５７、ＯＺ３５８、ＯＺ３５９、ＯＺ３６０、ＯＺ３６１、ＯＺ３６２、ＯＺ３６３、ＯＺ３６４、ＯＺ３６５、ＯＺ３６６、ＯＺ３６７、ＯＺ３６８、及びＯＺ３６９から成る群より選択されるものである方法。
【請求項９】
薬学的に許容しうる担体中の癌の治療に有効な量のスピロ又はジスピロ１，２，４−トリオキソランを投与する工程を含む癌を治療する方法であって、該トリオキソランがＯＺ２７１、ＯＺ２７２、ＯＺ２７３、ＯＺ２７４、ＯＺ２７５、ＯＺ２７６、ＯＺ２７７、ＯＺ２７８、ＯＺ２７９、ＯＺ２８０、ＯＺ２８１、ＯＺ２８２、ＯＺ２８３、ＯＺ２８４、ＯＺ２８５、ＯＺ２８６、ＯＺ２８７、ＯＺ２８８、ＯＺ２８９、ＯＺ２９０、ＯＺ２９１、ＯＺ２９２、ＯＺ２９３、ＯＺ２９４、ＯＺ２９５、ＯＺ２９６、ＯＺ２９７、ＯＺ２９８、ＯＺ２９９、ＯＺ３００、ＯＺ３０１、ＯＺ３０２、ＯＺ３０３、ＯＺ３０４、ＯＺ３０５、ＯＺ３０６、ＯＺ３０７、ＯＺ３０８、ＯＺ３０９、ＯＺ３１０、ＯＺ３１１、ＯＺ３１２、ＯＺ３１３、ＯＺ３１４、ＯＺ３１５、ＯＺ３１６、ＯＺ３１７、ＯＺ３１８、ＯＺ３１９、ＯＺ３２０、ＯＺ３２１、ＯＺ３２２、ＯＺ３２３、ＯＺ３２４、ＯＺ３２５、ＯＺ３２６、ＯＺ３２７、ＯＺ３２８、ＯＺ３２９、ＯＺ３３０、ＯＺ３３１、ＯＺ３３２、ＯＺ３３３、ＯＺ３３４、ＯＺ３３５、ＯＺ３３６、ＯＺ３３７、ＯＺ３３８、ＯＺ３３９、ＯＺ３４０、ＯＺ３４１、ＯＺ３４２、ＯＺ３４３、ＯＺ３４４、ＯＺ３４５、ＯＺ３４６、ＯＺ３４７、ＯＺ３４８、ＯＺ３４９、ＯＺ３５０、ＯＺ３５１、ＯＺ３５２、ＯＺ３５３、ＯＺ３５４、ＯＺ３５５、ＯＺ３５６、ＯＺ３５７、ＯＺ３５８、ＯＺ３５９、ＯＺ３６０、ＯＺ３６１、ＯＺ３６２、ＯＺ３６３、ＯＺ３６４、ＯＺ３６５、ＯＺ３６６、ＯＺ３６７、ＯＺ３６８、及びＯＺ３６９から成る群より選択されるものである方法。
【請求項１０】
薬学的に許容しうる担体中の住血吸虫症の予防又は治療に有効な量のスピロ又はジスピロ１，２，４−トリオキソランを投与する工程を含む住血吸虫症を予防又は治療する方法であって、該トリオキソランがＯＺ２７１、ＯＺ２７２、ＯＺ２７３、ＯＺ２７４、ＯＺ２７５、ＯＺ２７６、ＯＺ２７７、ＯＺ２７８、ＯＺ２７９、ＯＺ２８０、ＯＺ２８１、ＯＺ２８２、ＯＺ２８３、ＯＺ２８４、ＯＺ２８５、ＯＺ２８６、ＯＺ２８７、ＯＺ２８８、ＯＺ２８９、ＯＺ２９０、ＯＺ２９１、ＯＺ２９２、ＯＺ２９３、ＯＺ２９４、ＯＺ２９５、ＯＺ２９６、ＯＺ２９７、ＯＺ２９８、ＯＺ２９９、ＯＺ３００、ＯＺ３０１、ＯＺ３０２、ＯＺ３０３、ＯＺ３０４、ＯＺ３０５、ＯＺ３０６、ＯＺ３０７、ＯＺ３０８、ＯＺ３０９、ＯＺ３１０、ＯＺ３１１、ＯＺ３１２、ＯＺ３１３、ＯＺ３１４、ＯＺ３１５、ＯＺ３１６、ＯＺ３１７、ＯＺ３１８、ＯＺ３１９、ＯＺ３２０、ＯＺ３２１、ＯＺ３２２、ＯＺ３２３、ＯＺ３２４、ＯＺ３２５、ＯＺ３２６、ＯＺ３２７、ＯＺ３２８、ＯＺ３２９、ＯＺ３３０、ＯＺ３３１、ＯＺ３３２、ＯＺ３３３、ＯＺ３３４、ＯＺ３３５、ＯＺ３３６、ＯＺ３３７、ＯＺ３３８、ＯＺ３３９、ＯＺ３４０、ＯＺ３４１、ＯＺ３４２、ＯＺ３４３、ＯＺ３４４、ＯＺ３４５、ＯＺ３４６、ＯＺ３４７、ＯＺ３４８、ＯＺ３４９、ＯＺ３５０、ＯＺ３５１、ＯＺ３５２、ＯＺ３５３、ＯＺ３５４、ＯＺ３５５、ＯＺ３５６、ＯＺ３５７、ＯＺ３５８、ＯＺ３５９、ＯＺ３６０、ＯＺ３６１、ＯＺ３６２、ＯＺ３６３、ＯＺ３６４、ＯＺ３６５、ＯＺ３６６、ＯＺ３６７、ＯＺ３６８、及びＯＺ３６９から成る群より選択されるものである方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はマラリアを治療するための組成物及び方法に関する。
とりわけ、本発明はスピロ及びジスピロ−トリオキソラン類を含む医薬組成物及びそれらの使用方法及び製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
マラリアは、赤血球内に原虫の寄生虫が存在することから結果として生ずる急性であるがしばしば慢性の感染性疾病である。プラスモディウム属の単細胞寄生虫により惹起されるマラリアは雌の蚊に刺されることによりヒトから伝染する。
【０００３】
北アメリカ及び世界の他の温暖な地域でかつて猛威をふるったが、今日ではマラリアはほとんどが熱帯及び亜熱帯の国々で起こっている。毎年、４億人から６億人の人々がこの疾病と接触し、１５０万人から２７０万人がこの病気のために死亡する。
【０００４】
プラスモディウム・ヴィヴァクス、プラスモディウム・ファルシパルム、プラスモディウム・マラリエー、及びプラスモディウム・オヴァーレを含む原虫寄生虫プラスモディウムの四つの種が一般にマラリアの原因である。この４種のうちで、プラスモディウム・ファルシパルムは最も危険であり、マラリアの全臨床事例の半分の原因であり、この疾病による死亡の９０％の原因である。
【０００５】
マラリアの伝染は、既にマラリア寄生虫に感染しているヒトを雌の蚊が刺すときに始まる。感染した蚊が別のヒトを刺すと、その蚊の唾液中の胞子小体が血液中に移送され、次いでそれは肝臓に移行する。肝臓では、胞子小体は急速に分裂し、次に血流に入り、そこで赤血球に侵入する。これらの血液細胞の内部で、分裂小体が赤血球を破裂させるまで分裂小体が迅速に増殖し、分裂小体の新しい世代を血流中に放出する、それは次いで他の赤血球に感染する。
【０００６】
マラリアと関連する症状は一般に赤血球の破裂と関連する。赤血球の破壊は老廃物、毒素、及び他の破砕物を血液中に流す。これは、今度は高熱を惹き起こし感染した個体を消耗させ寝たきりとする。プラスモディウム・ファルシパルムによる反復感染及び／又は１回の感染と関連するさらに重篤な症状には、貧血、激しい頭痛、痙攣、精神錯乱、そして場合によっては死亡が含まれる。
【０００７】
マラリアの治療はマラリア寄生虫が薬物に対する耐性を獲得する能力を持つことにより特に困難とされてきた。南アメリカのキナノキ属の木の樹皮から抽出される抗マラリア化合物であるキニーネは、現存する最も古くそして最も効果的な医薬の一つである。キニーネの欠点は作用期間が短く、疾病の再発を防止できないことである。さらに、キニーネは目眩から聾までに及ぶ副作用を伴う。
【０００８】
クロロキンはキニーネに類似の合成化合物である。これは、その効果、製造の容易さ、及び副作用を一般的に起こさないことにより、１９４０年代にそれが開発されたとき、マラリアに対する第一選択の薬物となった。しかしながら、ここ数十年で、世界の多くの地域のマラリア寄生虫はクロロキンに対し耐性となった。
【０００９】
メフロキンはマラリアの治療に用いられてきたキニーネの別の合成類似体である。しかしながら、マラリア寄生虫はメフロキンに対しても耐性を獲得した。メフロキンは、一部の患者で幻覚や激しい悪夢を含む望ましくない中枢神経性の副作用も伴う。
【００１０】
抗葉酸薬物はその増殖を阻害することによりマラリア寄生虫に対して効果を有する。この寄生虫は抗葉酸薬に対しても抵抗性を獲得したが、この薬物は今なお他の種の抗マラリア剤と組み合わせて有効に使用することができる。しかしながら、マラリアを治療する場合に組み合わせ治療を使用することは、不便でもあり、そして高価であるという欠点を有する。
【００１１】
マラリア治療におけるより最近の発展は、独特の１，２，４−トリオキサンヘテロサイクリック薬物団（pharmacophore)を含む薬物アルテミシニンで例示されるような、ペルオキシド官能基の使用である。アルテミシニンの抗マラリア作用は、マラリア寄生虫内の遊離のヘム分子の鉄とアルテミシニンとの反応によるものであり、遊離基が形成されて細胞の破壊をもたらすのである。
【００１２】
天然に生ずるエンドペルオキシド・セスキテルペン・ラクトン（非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３を参照）であるアルテミシニン（キングハオス）の発見により、その分子的作用機作を解明するため（非特許文献４、非特許文献５を参照）、そして新規な抗マラリア活性を持つペルオキシドを同定するため（非特許文献６を参照）大変な努力が開始された。多数の合成１，２，４−トリオキサン類、１，２，４，５−テトラオキサン類、及び他のエンドペルオキシド類が調製された。
【００１３】
臨床的に有用な半合成アルテミシニン誘導体は急速に作用する強力な抗マラリア薬であるが、これらは、再発、神経毒性（非特許文献７を参照）及び代謝の不安定化（非特許文献８を参照）などの幾つかの不利益を有する。これらの化合物のかなりの数はイン・ビトロで極めて活性であるが、大部分は経口活性が低い（非特許文献９、非特許文献１０を参照）。そしてそれ以来多数の合成抗マラリア活性を持つ１，２，４−トリオキサンが調製されてきた（非特許文献１１、非特許文献１２を参照）。
【非特許文献１】メシュニックら，１９９６、
【非特許文献２】ヴロマンら，１９９９、
【非特許文献３】ディングラら，２０００
【非特許文献４】ジェフォード，１９９７、
【非特許文献５】カミングら，１９９７
【非特許文献６】ドングとヴェンナーストローム，２００１
【非特許文献７】ヴェッシェら，１９９４
【非特許文献８】ホワイト，１９９４
【非特許文献９】ホワイト，１９９４、
【非特許文献１０】ブァン・アグトメルら，１９９９
【非特許文献１１】カミングら，１９９６
【非特許文献１２】ジェフォード，１９９７
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
しかしながら、新たなペルオキシド抗マラリア物質、殊に容易に合成され、且つ神経毒性が無く、薬物動態学的に改良された特性、例えば改良された安定性、経口吸収などを持つものを同定する必要が当分野には存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
従って、スピロ及びジスピロ１，２，４−トリオキソラン類を用いてマラリアを予防及び治療するための組成物及び方法を提供することが本発明の第一の目的である。
【００１６】
毒性を持たないスピロ及びジスピロ１，２，４−トリオキソラン類を用いてマラリアを予防及び治療するための組成物及び方法を提供することが本発明のさらなる目的である。
【００１７】
代謝的に安定で且つ経口的に活性なスピロ及びジスピロ１，２，４−トリオキソラン類を用いてマラリアを予防及び治療するための組成物及び方法を提供することが本発明のさらなる目的である。
【００１８】
スピロ及びジスピロ１，２，４−トリオキソラン類を用いて４日以上の治療計画を含まないマラリアを予防しそして費用に対して効果の高い治療を行なうための組成物及び方法を提供することが本発明のさらなる目的である。
【００１９】
単独の治療剤として又は他の薬剤との併用でのいずれかで用い得るスピロ及びジスピロ１，２，４−トリオキソラン類を用いたマラリアを予防及び治療するための組成物及び方法を提供することが本発明のさらなる目的である。
【００２０】
マラリアを予防及び治療するための組成物を合成するための新規な中間体を提供することが本発明のさらなる目的である。
【００２１】
上記の目的並びに他の目的のそれぞれを達成するための方法及び手段は以下に記載する本発明の詳細な説明から明らかとなるであろう。
【００２２】
発明の概要
本発明はスピロ及びジスピロ１，２，４−トリオキソラン、それらのプロドラッグ及び類似体を用いてマラリアを治療するための方法及び組成物を記述する。本発明のトリオキソランは、イン・ビボ活性を良好にすることを目的としてトリオキソラン環に化学的及び代謝的安定性を付与するためこのトリオキソラン複素環の一つの側鎖に立体的に障害を与える。一つの実施態様では、スピロ及びジスピロトリオキソランは非置換、モノ−、ジ−、ポリ−置換されたＣ5 〜Ｃ12のスピロシクロアルキル基で立体障害を与えられており、これはスピロアダマンタンであってよい。この実施態様では、スピロ及びジスピロトリオキソランは、４−位で官能基化若しくは置換されているスピロシクロヘキシル又は窒素原子で官能基化若しくは置換されているスピロピペリジル環を含んでもよい。別の一実施態様では、本発明のトリオキソランは最も好ましくは弱塩基である置換基に連結するスピロシクロヘキシル環の４位からのアルキル橋を含む。本発明は該化合物の鏡像異性体形だけでなく、アキラル、アキラルジアステレオマー、ラセミ混合物をも包含する。
【００２３】
本発明のトリオキソランはプラスモディウム寄生虫に対し素晴らしい効力及び有効性を持ち、そして低い神経毒性を持つ。さらに、トリオキソランの幾つかは経口投与及び非経口投与に適している。さらに、アルテミシニン半合成誘導体と比べ、本発明の化合物は構造的に単純であり、合成が容易且つ安価であり、単独で又は他の抗マラリア剤と組み合わせて有効に使用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２４】
本発明はマラリアの予防及び治療に使用するためのスピロ及びジスピロ１，２，４−トリオキソランの開発に関する。本発明は、トリオキソラン複素環の少なくとも一つの側鎖が相対的に立体障害を受けているトリオキソランがこのトリオキソラン環に代謝的且つ化学的安定性を付与し、それにより殊に経口投与の場合に、より良好なイン・ビボ活性を付与するという予想外な発見に基づいている。
【００２５】
本明細書で用いられるとき用語「予防に有効な量」とは、マラリア寄生虫による感染及びそれに続く疾病を阻害若しくは防止するのに有効な本発明の化合物の濃度を意味する。同様に、「治療に有効な量」とは、マラリア寄生虫の濃度の増加を阻止するという意味でマラリアを治療し、マラリア寄生虫の濃度を減少させ、及び／又はマラリア感染を「治癒」する、即ち感染後３０日間生存させるのに有効な化合物の濃度を指す。
【００２６】
テトラ置換トリオキソランは先行文献（グリースバウムら，１９９７ａ，１９９７ｂ）に基づけば比較的安定なペルオキシド化合物である。これは、一部には、α−水素原子が無いためである。本発明者らは優れた抗マラリア効力及び経口有効性の両方を持つトリオキソラン群の新たな化合物を合成した。さらに、本発明の化合物は低毒性であり、他のアルテミシニン様薬物と比べ有利な短期間治療計画を可能にすると信じられる、マラリアの治療に役立つ半減期を有する。これらの化合物はまたマラリア予防に使用しうる。
【００２７】
先の出願では、本発明者らは下記の構造式を有するある種の新規なテトラ置換トリオキソラン類を開示した。即ち
【００２８】
【化１】
2005060396.tif 000002
【００２９】
上式中、
Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、及びＲ4 は、その環に化学的及び代謝的安定性を与えるためにトリオキソラン環に対して十分な立体障害を与える環状系、非環状系、及び官能基の組合せを表す。Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、及びＲ4 は同一でも異なっていてもよく、そして任意選択的に置換されている直鎖状又は分岐したアルキル基、アリール基、又はアルカリル（alkaryl ）基であってもよい。代替的に、Ｒ1 とＲ2 が一緒になって及び／又はＲ3 とＲ4 が一緒になって一つ以上の酸素原子、硫黄原子若しくは窒素原子で任意選択的に中断され、且つ任意選択的に置換された脂環式基を形成してもよい。Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、及びＲ4 のいずれかが水素であることはない。
【００３０】
一つの実施態様では、該化合物はＲ1 とＲ2 が一緒になって及び／又はＲ3 とＲ4 が一緒になって一つ以上の酸素原子、硫黄原子若しくは窒素原子で任意選択的に中断され、且つ任意選択的に置換されたモノ−若しくはジ−置換のＣ5 〜Ｃ12スピロシクロアルキル基となる化合物を含む。別の一実施態様では、Ｒ1 とＲ2 が一緒になって又はＲ3 とＲ4 が一緒になってスピロアダマンタンとなる。
【００３１】
本発明は下記の構造を有するトリオキソラン化合物の新たな実施態様を開示する。
【００３２】
【化２】
2005060396.tif 000003
【００３３】
このスピロシクロヘキシル環は一つ以上の酸素原子、硫黄原子若しくは窒素原子により任意選択的に中断されてもよい。この点で、Ｒ1 とＲ2 は同一でも異なっていてもよく、水素であってもよく、置換された若しくは置換されていない鎖状若しくは分枝状のアルキル、アリール、及びアルカリール基、及び一つ以上の酸素原子、硫黄原子若しくは窒素原子により中断されてもよい置換された若しくは置換されていない脂環式基、一つ以上の酸素原子、硫黄原子若しくは窒素原子、ヒドロキシル基若しくはハロゲンにより中断されてもよい置換された若しくは置換されていない芳香環若しくは複素環の基であってもよい。一つの実施態様では、Ｒ1 とＲ2 はアミドである。その４位のアミドを含む置換基は、意外にも、良好な経口吸収、良好な抗マラリア活性及び良好な薬物動態学、即ちマラリアの予防及び治療に適しており有利な吸収速度、代謝速度及び消失速度を有する抗マラリア化合物を生ずることが発見された。
【００３４】
別の実施態様では、本発明の化合物は下記の構造式を有する。
【００３５】
【化３】
2005060396.tif 000004
【００３６】
ここで、Ｒ3 は（ＣＨ2 ）n −Ｙである。この式で、Ｙは、一つの実施態様では非酸性の、別の実施態様では弱い塩基の官能基を表す。このＹ官能基はアルキル、ケトン、酸、アルコール、アミン、アミド、スルホンアミド、グアニジン、エーテル、エステル、オキシム、尿素、オキシムエーテル、スルホン、ラクトン、カルバメート、セミカルバゾン、フェニル、又は複素環であってもよい。一つの実施態様では、ｎ＝１である。このアルキル「架橋」基は本発明の抗マラリア化合物の代謝的安定性（即ち、経口活性及び薬物動態学）を改良することが見出された。
【００３７】
本発明の別の一実施態様では、トリオキソラン類は弱塩基であり、これらは高い固有の能力と良好な経口活性の理想的な組合せを提供する。二つの有望なトリオキソラン構造のサブタイプはトリオキソランアミンＯＺ２０９とトリオキソラン酸ＯＺ７８の弱塩基性アミドである。これらの化合物は次の二つの構造式の一つを持つ。
【００３８】
【化４】
2005060396.tif 000005
【００３９】
本発明の範囲内に包含されるスピロシクロヘキシル環の４位の他の置換基も存在しうる。このスピロシクロヘキシル環は４位以外の他の位置で置換されてもよい。例えば、本発明者らは、優れた抗マラリア能を示すスピロシクロヘキシル環の２位で置換された幾つかの化合物を合成した。
【００４０】
本発明の別の実施態様では、該化合物は４位の置換基をスピロシクロヘキシル環に連結するアルキル基を含んでいる。一つの実施態様では、該アルキル基はメチル又はエチルである。別の実施態様では、このアルキル基はメチルである。該置換基はスピロシクロヘキシル環の４位に直接結合してもよい。
【００４１】
本発明者らは二つの経口的に活性なリード化合物であるジスピロ−１，２，４−トリオキソラン、ＯＺ０３とＯＺ０５を同定した。
【００４２】
【化５】
2005060396.tif 000006
【００４３】
これらのトリオキソランはＰ．ファルシパルムに対してイン・ビトロで１〜５ｎｇ／ｍｌの間のＩＣ50s を有し、神経芽細胞腫細胞株で又はレインテスト（Rane test)でのマウスに６４０ｍｇ／ｋｇの１回投与でいずれの化合物についても毒性の証拠はないから、多分良好な治療指数を有する。これらの結果は幾つかの三環系トリオキソランのイン・ビトロ抗マラリア能の弱さを開示し、その中の最良のものでもＰ．ファルシパルムに対してイン・ビトロで２０００ｎｇ／ｍｌのＩＣ50を有することを示す公表されたデータ（デ  アルメイダ  バーボサら，１９９２、１９９６）と対照的である。
【００４４】
アルテミシニン半合成誘導体と比較してこれらのトリオキソランの顕著な特徴はそれらの構造の単純さである。トリオキサン類（ジェフォード，１９９７、カミングら，１９９７）及びテトラオキサン類（ヴェンネルストロムら，２０００）の両者に優るトリオキソラン類の能力の有利さは、構造的に多様な、非対称的な、そして多くの場合アキラルな化合物により便利に到達しうることである。
【００４５】
以下に示すものは、本発明の教示に従って合成された幾つかのジスピロ１，２，４−トリオキソラン類である。「ＯＺ」は、便利のために本出願の残りの全てにわたって用いられるこれらの化合物に対する内輪の名称である。ＯＺ０１〜ＯＺ２７０の構造は先の米国特許出願番号０９／８８６，６６６号（米国特許番号第６，４８６，１９９号）及びＰＣＴ／０２／１９７６７において既に開示された。従って、本明細書では繰り返さない。
【００４６】
【化６】
2005060396.tif 000007
【００４７】
【化７】
2005060396.tif 000008
【００４８】
【化８】
2005060396.tif 000009
【００４９】
【化９】
2005060396.tif 000010
【００５０】
【化１０】
2005060396.tif 000011
【００５１】
【化１１】
2005060396.tif 000012
【００５２】
【化１２】
2005060396.tif 000013
【００５３】
【化１３】
2005060396.tif 000014
【００５４】
【化１４】
2005060396.tif 000015
【００５５】
【化１５】
2005060396.tif 000016
【００５６】
【化１６】
2005060396.tif 000017
【００５７】
本発明のプロトタイプのトリオキソランはＯＺ０３とＯＺ０５である。これまでに同定された好ましい化合物には、ＯＺ０３、ＯＺ０５、ＯＺ１１、ＯＺ２５、ＯＺ２７、ＯＺ６１、ＯＺ７１、ＯＺ７８、ＯＺ１２７、ＯＺ１４５、ＯＺ１５６、ＯＺ１６３、ＯＺ１７５、ＯＺ１７７、ＯＺ１７９、ＯＺ１８１、ＯＺ１８９、ＯＺ２０５、ＯＺ２０７、ＯＺ２０９、ＯＺ２１０、ＯＺ２１９、ＯＺ２２７、ＯＺ２２９、ＯＺ２３５、ＯＺ２５５、ＯＺ２５６、ＯＺ２５７、ＯＺ２６３、ＯＺ２６４、ＯＺ２６５、ＯＺ２６６、ＯＺ２６７、ＯＺ２６８、ＯＺ２６９、ＯＺ２７０、ＯＺ２７１、ＯＺ２７７、ＯＺ２８１、ＯＺ２７９、ＯＺ２８８、ＯＺ２８９、ＯＺ２９０、ＯＺ２９６、ＯＺ２９７、ＯＺ２９８、ＯＺ３０１、ＯＺ３０５、ＯＺ３０９、ＯＺ３１５、ＯＺ３１７、ＯＺ３１９、ＯＺ３２０、ＯＺ３２３、ＯＺ３２９、ＯＺ３３３、ＯＺ３３５、ＯＺ３３６、ＯＺ３３７、ＯＺ３３８、ＯＺ３３９、ＯＺ３４３、ＯＺ３４９、ＯＺ３５１、ＯＺ３５３、ＯＺ３５４、ＯＺ３５７、ＯＺ３５８、ＯＺ３５９、ＯＺ３６５、及びＯＺ３６８が含まれる。最も好ましい化合物はＯＺ７８、ＯＺ１６３、ＯＺ１８１、ＯＺ２０７、ＯＺ２０９、ＯＺ２５５、ＯＺ２５６、ＯＺ２５７、ＯＺ２６３、ＯＺ２６４、ＯＺ２６７、ＯＺ２７１、ＯＺ２７７、ＯＺ２７９、ＯＺ３０１、ＯＺ３０５、ＯＺ３１５、ＯＺ３１７、ＯＺ３１９、ＯＺ３２３、ＯＺ３２９、ＯＺ３３８、ＯＺ３３９、ＯＺ３４９、ＯＺ３５１、ＯＺ３５４、ＯＺ３５７、ＯＺ３５９、及びＯＺ３６８であり、ＯＺ２７７とＯＺ２７９がこれまでに同定された化合物の中で最良である。一般に、マラリア寄生虫に対して最も高いイン・ビトロ効力は、スピロシクロヘキシル環の４位が官能基化若しくは置換されたトリオキソランに対して得られる。一般論として、非対称的なアキラルなトリオキソラン類も好ましい。
【００５８】
これらのスピロ及びジスピロ１，２，４−トリオキソラン類のアルテミシニン半合成誘導体と比較した場合の顕著な特性はそれらの構造の単純さであり合成のし易さである。例えば、ジスピロトリオキソラン類は、対称的ジスピロシクロヘキシルトリオキソランについて以下に例示するように、グリースバウムらの方法（１９９７ａ，１９９７ｂ）に従って必要なシクロアルカノン誘導体の存在下でシクロアルカノンのＯ−メチルオキシムの共オゾン分解により容易に合成しうる。
【００５９】
【化１７】
2005060396.tif 000018
【００６０】
この共オゾン分解反応の収率が低い場合は、該Ｏ−メチルオキシムとケトンを「逆にする」と、収率は劇的に改良できる。この新規な手順はスピロ及びジスピロトリオキソラン類を合成するための独特の便利な方法を提供する。このオキシムエーテル経路のアルケン法に優る利点としては、出発原料の合成の便利さ（オキシムエーテル対テトラ置換アルケン）、対の反応基質の賢明な選択による所望のトリオキソランの形成のより高い収率及びより高い選択性が挙げられる。このトリオキソラン類は結晶化又はフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製しうる。それらの構造及び純度は分析用ＨＰＬＣ、 1Ｈ及び13Ｃ  ＮＭＲ、ＩＲ、融点及び元素分析により確認しうる。
【００６１】
オキシムエーテルとケトンからトリオキソランの形成は３−工程プロセスであると仮定される。このプロセスの順番はオキシムの二重結合へのオゾンの親電子的付加反応による一次オゾン化物の形成により始まる。第二に、この極めて不安定な一次付加物は比較的安定な亜硝酸メチルの同時放出により一部駆動されて反応性のカルボニルオキシドに分解する。第三に、このカルボニルオキシドはケトンとの〔３＋２〕シクロ付加反応を受けて二級オゾン化物又は１，２，４−トリオキソランを生ずる。これが段階的な組換えプロセスなのか協奏的組換えプロセスなのかは未だ決定されていない。
【００６２】
【化１８】
2005060396.tif 000019
【００６３】
上に例示したように、ＯＺ０３の合成により、新たなジスピロトリオキソラン類の大部分はスピロアダマンタンを含み、必要なシクロアルカノン誘導体の存在下でアダマンタノンＯ−メチルオキシムの共オゾン分解により合成できる。この共オゾン分解反応の好ましい反応溶媒はペンタンやシクロヘキサンなどの炭化水素溶媒である。より極性の強い溶媒はこの反応の収率を低下させる傾向がある。ケトン類がペンタン又はシクロヘキサンに容易に溶解しない場合には、混合溶媒（ペンタン／メチレンクロリド）又はメチレンクロリド単独が使用しうる。オキシムエーテルとケトンの割合は幾つかの要因によって決定される。一部の反応では、ジペルオキシド（１，２，４，５−テトラオキサン）の形成を避けるため、ジケトンからのジオゾン化物の形成を排除するため、そしてペンタンに容易に溶解しうるケトンとの反応を促進するために、過剰のケトン（２：１）が用いられる。探索合成段階では最も普通に、ケトンがペンタンに容易に溶解せず、反応物の処理で除去するのに費用がかかり又は除去が困難な場合には特に、ケトンのオキシムエーテルに対する割合１：１が使用されうる。大規模のトリオキソラン合成では、精製の問題を惹起しないケトンの所望のトリオキソラン生産物へのより高い変換を達成するため、１．５倍過剰のオキシムエーテルを使用することができる。
【００６４】
共オゾン分解法で直接得ることが困難な、ある場合には直接得ることが不可能なトリオキソラン標的化合物（カシマら，１９８７）を合成するためにオゾン分解後の変換が用いられた幾つかの例がある。トリオキソラン三級アルコールＯＺ９０及びＯＺ１０８はそれぞれトリオキソランケトンＯＺ０５及びトリオキソランエステルＯＺ７０のメチルリチウム処理により得ることができる。
【００６５】
【化１９】
2005060396.tif 000020
他の反応では、トリオキソランラクトンＯＺ１７及びトリオキソランアルコールＯＺ３２がＯＺ０５のそれぞれｍ−ＣＰＢＡ及びホウ水素化ナトリウムで処理することにより得られた。さらに、種々のオキシムエーテル、ヒドラゾン、ケタール、及びアミン（トリアセトキシホウ水素化ナトリウムで還元的アミノ化）もトリオキソランケトンＯＺ０５から良収率から高収率で得られた。上記の例では、トリオキソランケトンＯＺ０５は、そのケトン官能基が官能基変換の便利な手段を提供するので鍵となる中間体であることが明らかである。
【００６６】
【化２０】
2005060396.tif 000021
【００６７】
還元剤に対するこれらのトリオキソラン類の安定性についてのさらなる証拠は、ホウ水素化リチウムとトリエチルホウ水素化リチウムの混合物でトリオキソランエステルＯＺ７０とＯＺ６１の対応するトリオキソランアルコールＯＺ１１９とＯＺ８９への還元により、及びトリオキソランフタルイミドＯＺ１３６とＯＺ１４６の対応するトリオキソランアミンＯＺ１３７とＯＺ２０９へのヒドラジン分解により示される。
【００６８】
【化２１】
2005060396.tif 000022
【００６９】
下記の例に示すように、トリオキソランエステル類はそれらの対応するトリオキソラン酸に便利に変換することができる。
【００７０】
【化２２】
2005060396.tif 000023
【００７１】
トリオキソランケトンＯＺ０５、トリオキソランアミンメシレートＯＺ２０９、トリオキソランエステルＯＺ６１及びトリオキソラン酸ＯＺ７８に加え、トリオキソランアルコールＯＺ１１９とＯＺ８９はオゾン分解合成変換のための鍵となる中間体でありそしてそうであり続けるであろう。最近の例はＯＺ１１９のメシレート誘導体と１，２，４−トリアゾールナトリウム塩の間の反応でのトリオキソラントリアゾールＯＺ１７７の合成である。
【００７２】
【化２３】
2005060396.tif 000024
【００７３】
オキシムメチルエーテルを用いる共オゾン分解法は構造的に多様なトリオキソランへの迅速な、柔軟な、且つ予想可能な合成法を提供することが見出された。実際、ＯＺ０５（１００ミリモル）、ＯＺ６１（１００ミリモル）、及びＯＺ１４６（６０ミリモル）を含む重要な建築用ブロックとして役立った幾つかの鍵となるトリオキソラン類が、通常の５〜１０ミリモル規模に優る反応収率を低下させることなく大規模に調製された。さらに、ＯＺ６１とＯＺ１４６は粗反応混合物にエタノールを添加することにより便利に白色の固体として単離することができる。
【００７４】
示差走査熱量法（ＤＳＣ）実験（カメンガとエプル，１９９５）により、これらの化合物がアルテミシニンに匹敵する良好な熱安定性を有することが明らかにされた。その平均Ｔｍ（分解）は、アルテミシニンのＴｍ（分解）１８１℃に比べ、１６０±１５℃であった。これらのトリオキソランの熱分解はトリオキソラン環のペルオキシド結合の等方性分解により生成する１，５ジラジカルの形成により開始されると考えられる。
【００７５】
標的トリオキソランの大部分は対称的なスピロアダマンタン構造枠組みを含むので、それらの立体化学はほとんど出発原料ケトン構造又はオゾン分解後の反応で用いられる試薬の関数である。ＯＺ２７及び他の同様に１，４−置換されたトリオキソラン類については、二つのアキラルなジアステレオマーが可能である。しかしながら、ＯＺ２７で例示されるように、これらのトリオキソラン類の大部分は二つのアキラルなジアステレオマーの混合物としてではなく１個のアキラルなジアステレオマーとして単離された。例えば、ＯＺ２７では、トリオキソラン環とフェニル置換基は６員環の中で１，４の関係にあるのでキラリティは存在しない。このような化合物は対称面を有する。
【００７６】
【化２４】
2005060396.tif 000025
【００７７】
Ｘ線結晶学により決定すると、ＯＺ７８、ＯＺ２０９及びそれらの誘導体の立体化学の割当ては該ペルオキシド酸素がアキシャル位にある場合シスであると決定された。
【００７８】
出発原料である２−アダマンタノンはアルドリッチ・ケミカル社から、又はＴＣＩアメリカン・オーガニック・ケミカルズ社から得てもよく、又は合成してもよい。当業者は該出発原料及び本発明の化合物を合成する他の適当な手段を容易に確認することができる。
【００７９】
本発明のスピロ及びジスピロトリオキソラン組成物は一般的にマラリアの予防及び治療に用いられる。本発明のトリオキソラン組成物は薬学的に許容しうる担体と共に投与される。該担体が本発明のトリオキソラン化合物の安定性又は生体利用可能性を明らかに妨害しない限り、如何なる薬学的に許容しうる担体も本発明の目的に一般的に使用しうる。
【００８０】
本発明のトリオキソランは、ヒト及び他の動物被験体を含む温血動物に効果的に薬学的に許容できる剤形で、例えば、局所剤、洗浄剤、経口剤、座薬、非経口的即ち注入可能な投与剤形で、局所的に、口腔内に、舌下に、又は鼻孔内スプレーとして、又は薬物を送達するのに有効な任意の他の方法で、投与できる。投与経路は標的細胞に該薬物を送達及び／又は局在化するのに最適なように設計することが好ましい。
【００８１】
活性化合物、即ちトリオキソランに加えて、本発明の医薬組成物は該活性化合物を薬学的に使用できる調製物に処理するのを促進する適当な賦形剤及び補助剤を含んでもよい。経口投与剤形は錠剤、カプセル及び顆粒を含む。直腸投与できる調製物には座薬が含まれる。他の投与剤形には、非経口的又は経口的に投与するのに適した溶液や、頬内又は舌下で投与できる組成物が含まれる。
【００８２】
本発明の医薬調製物はそれ自体当分野で良く知られた方法で製造される。例えば、医薬調製物は通常の混合、顆粒化、糖衣錠形成、溶解、凍結乾燥などの処理により製造されうる。使用する方法は、最終的には用いられる活性成分の物理的性質に依存する。
【００８３】
適当な賦形剤は、特に、例えば砂糖、乳糖若しくはスクロース、マンニトール若しくはソルビトール、セルローズ調製物及び／又はリン酸カルシウム、例えばリン酸三カルシウム若しくはリン酸水素カルシウムなどの充填剤、並びに例えばトウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、馬鈴薯デンプンなどのデンプン、ペースト、ゼラチン、トラガカンタガム、メチルセルローズ、ヒドロキシプロピルメチルセルローズ、カルボキシメチルセルローズナトリウム、及び／又はポリビニルピロリドンなどの結合剤である。必要ならば、上記のデンプン類並びにカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、又はアルギン酸若しくはアルギン酸ナトリウムなどのその塩などの崩壊剤を添加してもよい。補助剤は、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸若しくはステアリン酸マグネシウムやステアリン酸カルシウムなどのその塩及び／又はポリエチレングリコールなどの流動性調節剤や潤滑剤である。経口投与剤形は、必要ならば胃液に対して耐性な適当な被覆を行なっててもよい。
【００８４】
この目的で砂糖の濃溶液が用いられる。この溶液には任意選択的にアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール及び／又は二酸化チタン、ラッカー溶液及び適当な有機溶媒若しくは溶媒混合物を含めてもよい。胃液に耐性な被覆を行なうためには、アセチルセルローズフタレート若しくはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートなどの適当なセルロース調製物、色素及び顔料が、例えば同定のために又は異なる組み合わせの化合物の投与を区別するために錠剤の被覆に添加してもよい。
【００８５】
経口で使用される他の薬学的調製物には、ゼラチンから作られるプッシュ・フィット・カプセル、並びにゼラチン及びグリセロール又はソルビトールなどの可塑剤から作られる柔らかい密封カプセルが含まれる。このプッシュ−フィットカプセルは、顆粒の形状の活性化合物を、乳糖のような充填剤、デンプンのような結合剤及び／又はタルク若しくはステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤及び任意選択的に安定剤と共に含むことができる。ソフトカプセルでは、活性化合物は脂肪油、液体パラフィン又は液体ポリエチレングリコールなどの適当な液体に溶解若しくは懸濁させることが好ましい。さらに安定剤を加えてもよい。直腸経由で使用できる可能な薬学的調製物には、例えば、活性化合物と座薬基材との組み合わせから成る座薬が含まれる。適当な座薬基材は、例えば天然若しくは合成のトリグリセリド、パラフィン炭化水素、ポリエチレングリコール、又は高級アルカノールである。さらに、活性化合物と基材の組み合わせから成るゼラチン直腸カプセルを用いることも可能である。可能な基材には、例えば液体トリグリセリド、ポリエチレングリコール、又はパラフィン炭化水素が含まれる。
【００８６】
非経口投与のための適当な製剤には、水溶性の形若しくは水分散性の形の活性化合物の水性溶液が含まれる。さらに、適当な油性の注射用懸濁液としての活性化合物の懸濁液を投与してもよい。適当な親油性溶媒若しくはビークルには、例えば脂肪油、ゴマ油、又はオレイン酸エチル若しくはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステルが含まれる。水性注射用懸濁液は、懸濁液の粘度を高める物質、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール及び／又はデキストランを含んでもよい。このような組成物は、保存剤、加湿剤、乳化剤及び分散剤などの添加物を含んでもよい。これらはまた、例えば細菌捕捉フィルターを通す濾過により、又はこの組成物中に殺菌剤を組み込むことにより滅菌してもよい。これらは、投与前に滅菌した水、食塩水若しくは他の注射可能な媒体に溶解若しくは懸濁できる滅菌固形組成物の剤形で製造することもできる。
【００８７】
従来からの担体と共に投与することに加え、活性成分は、携帯可能な薬物注入ポンプなどの当業者に知られた様々な特殊な薬物送達手法により投与してもよい。
【００８８】
本発明のトリオキソラン組成物は薬学的に許容できる担体と共にマラリア感染を阻止し及び／又は活発な感染を治療するのに十分な量で投与される。本発明のトリオキソラン組成物は毒性が極めて低く、高投与量でさえも副作用の程度は低い。トリオキソラン組成物の投与範囲は、それが予防のために用いられるのか又は活発な感染の治療のために用いられるのか、投与経路、投与計画などの幾つかの要因に依存して変化する。一般に、トリオキソランの治療のための用量は約０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であるが、約１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲が好ましい。上記の用量は１回投与として投与しても、複数投与に分割して投与してもよい。トリオキソラン組成物は毎日１回から数回投与してもよい。マラリア防止のために、典型的な投与計画は、例えばマラリア曝露の１〜２週間前に始めて週に２．０〜１０００ｍｇ／ｋｇ摂取し、曝露後１〜２週まで摂取する。
【００８９】
本発明のスピロ及びジスピロトリオキソラン類は薬学的に有効な任意の塩の形で投与しうる。このような塩は当分野で良く知られており、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩化水素、臭化水素、ヨウ化水素、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イソチオネート）、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、蓚酸塩、パルミトエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバール酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアネート、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、及びウンデカン酸塩を含むがこれらに限定されない。好ましい塩はトリオキソラン化合物の生体利用性を増加させる塩である。これは、トリオキソランの化学構造、それに組み込まれる担体、投与経路などを含む幾つかの因子に依存する。
【００９０】
本発明のスピロ及びジスピロトリオキソラン類は住血吸虫症の治療に有効であることが見出された。住血吸虫症は熱帯地域及び亜熱帯地域での社会経済学的及び公共衛生上の重要性という観点からはマラリアの後の二次群に位置する。この疾病は７４の開発途上国での風土病であり、田園の農業地域及び都会の周辺地域で２億人を越える人々が感染している。全世界で５億〜６億の人々がこの疾病の危険に曝されていると推定される。
【００９１】
ヒト住血吸虫症の主要な形態は、水性扁形動物、又は住血吸虫と呼ばれるブラッドフルークス（住血吸虫の別名）の五つのスピーシーズにより惹起される。これらのスピーシーズの一つはシストソーマ・マンソニであり、これはアフリカ、東地中海、カリブ海，及び南アメリカの５３の国々で報告された。この寄生虫は、主に農業及び漁業に従事している人々の間で、感染した表層水と接触することにより身体に入る。この寄生虫は通常ケルカリア期又は幼虫期の間に宿主に感染する。宿主内に一旦入ると、このケルカリアは成虫即ち住血吸虫に生育する。
【００９２】
住血吸虫に対する現在の治療は、予防、即ちケルカリアによる宿主の感染の防止に主力が注がれている。現在、プラジクァンテルが住血吸虫症の治療に最も広く使用されている薬である。アルテメーテルは住血吸虫症の予防に活性を示したが、成虫のＳ．マンソニに対する活性を示さなかった。
【００９３】
本発明のスピロ及びジスピロトリオキソラン類は、マラリア寄生虫の治療に関して上に概述した用量及び投与法で投与された場合、ケルカリア及び成虫のＳ．マンソニ、Ｓ．ジャポニクムの両者に対して活性であることが意外にもここに発見された。本発明のトリオキソランはまた、Ｓ．ヘマトビウムに対しても活性であると思われる。住血吸虫症の治療に使用するために同定された好ましい化合物は、ＯＺ０５、ＯＺ１１、ＯＺ２３、ＯＺ２５、ＯＺ２８、ＯＺ３２、ＯＺ７１、ＯＺ７８、ＯＺ８９、ＯＺ９０、ＯＺ１１９、ＯＺ１４５、ＯＺ１７９、ＯＺ２０５、ＯＺ２０７、及びＯＺ２０９を含む。最も好ましい化合物はＯＺ７８、ＯＺ２０７、及びＯＺ２０９である。スピロ及びジスピロトリオキソラン類の好ましい投与量レベルは経口で約１００〜２００ｍｇ／ｋｇ／日である。本発明のプロトタイプのトリオキソランはＯＺ０３及びＯＺ０５である。  
【００９４】
本発明のスピロ及びジスピロトリオキソラン類は癌の治療にも有効性を有する。ヘム及び鉄と反応するエンドペルオキシド部分を有する化合物は癌細胞を殺す能力を示した（例えば、米国特許第５，５７８，６３７号を参照。本特許の開示は参照により本明細書にインコーポレートされる）。アルテミシニンについて指摘されたように、マラリア寄生虫に対するトリオキソランの作用機作はマラリア寄生虫内の遊離のヘム分子中の鉄と反応して細胞の破壊をもたらす遊離基を形成するトリオキソラン化合物の能力に基づいている。同様に、トリオキソラン類は、正常細胞よりもより高い速度で鉄を取り込む癌細胞膜上のトランスフェリン受容体の濃度がより高いことにより癌細胞に対して選択的である。本発明のトリオキソラン類の存在下で、癌細胞は高濃度の遊離基を蓄積し細胞死に至らしめる。癌治療のために、本発明のトリオキソラン類は上に概述した投与量及び投与方法で投与されうる。
【００９５】
担体成分と適合しうるトリオキソラン類以外の他の薬物も担体に組み込んでよい。このような薬物は当業者に容易に確認され、例えば、抗生物質、他の抗マラリア物質、抗炎症薬などが含まれうる。
【００９６】
本発明は、上記のトリオキソラン化合物それ自体のみでなく、該化合物に代謝されるそれらのプロドラッグや類似物及び生物学的に活性なそれらの塩類、並びに同一の医学的結果を与える光学異性体の使用をも意図することが理解される。
【００９７】
以下の実施例は本発明を例示するために示すものであって本発明を制限するものではない。従って、これらは様々な製剤の変更並びに送達方法の変更がなされうること、そしてそれらが本発明の精神の中になお含まれるという理解の下に提供されるものである。
【実施例１】
【００９８】
ＯＺ２７１〜ＯＺ３６９の抗マラリア活性
抗マラリア検定法
非同調貯蔵培養から誘導したパルモディウムファルシパルムの赤血球内型に対する半自動微量希釈検定法により種々のＯＺ化合物を試験した。使用した培養培地はヒトＡ+ 型血清、２５ｍＭヘペス、２５ｍＭのＮａＨＣＯ3 （ｐＨ７．３）を１０％補足したＰＲＭＩ１６４０であった。ヒトＡ+ 型赤血球は宿主細胞として役立つ。培養は３％Ｏ2 、４％ＣＯ2 、及び９３％Ｎ2 の雰囲気下でモジュール方式の加湿した部屋で３７℃で保存した。
【００９９】
化合物はＤＭＳＯ中に溶解し（１０ｍｇ／ｍｌ）、完全培養培地で予め希釈し、９６穴ミクロタイタープレート中に連続２倍希釈で６４倍の範囲を超えて二連で滴定した。２．５％の赤血球中に０．７５％の初期パラシテミアを含む（感染した赤血球のパーセンテージとして表された）寄生虫培養物を添加した後、試験プレートを上記の条件下で７２時間インキュベートした。寄生虫培養物の増殖は試験の終了の１６時間前に添加した放射標識〔 3Ｈ〕−ヒポキサンチンの取り込みにより測定した。５０％阻害濃度（ＩＣ50）はロジット回帰分析により推計した。化合物は対照のＰ．ファルシパルム株、Ｋ１株（クロロキン耐性のタイランド）及びＮＦ５４株（標準的抗マラリア物質に感受性の起源未知のエアポート株）に対して試験した。
【０１００】
ＳＴＩ１回投与のイン・ビボスクリーニングでは、Ｐ．ベルゲイ（Ｐ．ｂｅｒｇｈｅｉ）のＡＮＫＡ株で感染させたモロＳＰＦ又はＮＭＲＩマウス（１群３〜５匹のマウス）を用いた。トリオキソラン類は標準的懸濁用ビークル（ＳＳＶ）中の３ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇの１回投与で経口投与された。ＳＳＶは、０．５％ｗ／ｖＣＭＣ、０．５％ｖ／ｖベンジルアルコール、０．４％ｖ／ｖトゥイーン８０、及び０．９％ｗ／ｖ塩化ナトリウムを水中に含む。抗マラリア活性は無処理の対照群と比べたときの感染３日後におけるパラシテミアの減少パーセント及び生存時間により測定した。感染後３０日の生存は治癒と考えられる。ＰＣＴ／０２／１９７６７では、表１はトリオキソラン類ＯＺ０１〜ＯＺ２７０についてのデータを対照、フェノザン、アルテミシニン、アルテエーテル、アルテメーテル、及びアルテスネートと共に提供した。このデータは抗マラリア活性がトリオキソランペルオキシド結合が鉄（II) 種に過剰に曝されるか立体的に接近し得ない場合の双方で低下することを示した。抗マラリア活性に影響を与える他の要因には、ペルオキシド結合への初期の電子伝達に続くβ切断により形成される炭素ラジカルの安定性及び炭素ラジカルと潜在的薬物標的の間の相互作用に及ぼすペルオキシド結合から離れた立体的効果の影響が含まれる。このデータはまたトリオキソランカルボン酸が通常それらの炭化水素、エステル、及びヒドロキサム酸対応物よりも活性が低いことをも証明した。
【０１０１】
下記のものはＯＺ２７１〜ＯＺ３６９についての活性データである。
【０１０２】
【表１】
2005060396.tif 000026
【０１０３】
【表１−１】
2005060396.tif 000027
【０１０４】
【表１−２】
2005060396.tif 000028
【０１０５】
【表１−３】
2005060396.tif 000029
【０１０６】
【表１−４】
2005060396.tif 000030
【０１０７】
比較分析のため、データは対照の抗マラリア薬であるアルテメーテル（ＡＭ）、アルテスネート（ＡＳ）、クロロキン（ＣＱ）、及びメフロキン（ＭＦＱ）についても示してある。
【０１０８】
この新たな活性データは、トリオキソランカルボン酸が通常それらの炭化水素、エステル、アミド、及びヒドロキサン酸の対応物よりも活性が低いことを示している。カルボン酸やアミンなどのイオン化しうる官能基の位置も活性に決定的に重要である。固有の高い効力と良好な経口活性の最良の組合せは弱塩基の官能基が存在する場合に見出される。
【実施例２】
【０１０９】
ＯＺ１１、ＯＺ２７、ＯＺ７８、ＯＺ１５６、ＯＺ１７５、ＯＺ１７７、ＯＺ２０７、ＯＺ２０９、ＯＺ２７７、及びＯＺ２７９の作用開始と再発
作用の開始と再発の実験
薬物の作用の開始は、感染３日後（０日）に５匹の動物の群に１００ｍｇ／ｋｇ（ＳＳＶビークル）の１回固定経口投与した後、測定された。この点でのパラシテミアは通常２５〜４０％である。感染した対照は感染後６日を超えて生存しない。パラシテミアの減少は処理後１２、２４及び４８時間に監視する。再発（５％より多いパラシテミア）の時点は１４日間毎日の血液スメアにより評価し、その後６０日まで断続的に評価した。
【０１１０】
この実験の開始部分は如何に迅速に化合物が寄生虫負荷を減少させるかを明らかにする。この実験の再発部分は寄生虫に対する該化合物の効力についての情報を提供する。再発が長期間遅延することは該化合物の極めて良好な抗寄生虫効果又は長い半減期を持つ化合物によるとすることができる。
【０１１１】
トリオキソラン類及びアルテミシニン類は両方ともパラシテミアの迅速な減少をもたらし、これらが迅速に作用する抗マラリア物質であることを確認する。クロロキン及びこれらのペルオキシド抗マラリア物質の両方とは対照的に、メフロキンは作用の開始が遅い。再発（５％より多いパラシテミア）はアルテミシニン及びアルテスネートについては極めて迅速に起こる。再発の時間はより親油性のアルテミシニン誘導体であるアルテメーテル及びアルテエーテルについては増加した。
【０１１２】
アルテメーテルとは対照的に、親油性のトリオキソランであるＯＺ１１及びＯＺ２７については再発は遙かにゆっくりと起こった。ＯＺ２７の再発時間は特に顕著であり、メフロキンの再発時間よりも優れていた。しかしながら、比較的極性のトリオキソランであるＯＺ７８、ＯＺ１７５及びＯＺ２７７についての再発時間はアルテメーテルの再発時間に極めて類似していた。ＯＺ１５６／ＯＺ１７７対の中のより親油性のトリオキソラン（ＯＺ１５６）は再発の最長遅延をもたらし、その時間はクロロキンよりもより長く、しかしメフロキンよりも短かった。ＯＺ１７７とＯＺ２７９の再発時間はクロロキンのそれとほぼ同等であった。
【０１１３】
驚くべきことに、アミノメチルトリオキソランであるＯＺ１６３（塩化物）の二つの異なる形の塩（ＯＺ２０７はトシレート、ＯＺ２０９はメシレート）であるＯＺ２０７とＯＺ２０９については再発は観察されなかった。これらの二つのトリオキソランの再発データは、これらがより強力な抗マラリア物質であるか又は半合成アルテミシニン類のいずれよりも長い半減期を有するかのいずれかであることを示唆する。
【０１１４】
【表２】
2005060396.tif 000031
【実施例３】
【０１１５】
シストソーマ・スピーシーズに対するトリオキソラン類の効果
シストソーマ・ジャポニクムに対するトリオキソランＯＺ２０７の効果
【０１１６】
【表３】
2005060396.tif 000032
【０１１７】
表３は、ＯＺ２０７の４００ｍｇ／ｋｇ群における平均総寄生虫負荷量及び平均雌寄生虫負荷量がアルテメーテルの４００ｍｇ／ｋｇ群におけるそれらよりも有意に低かったことを示す（Ｐ＜０．０１）。ＯＺ２０７の２００ｍｇ／ｋｇ群における平均雌寄生虫負荷量もアルテメーテル群におけるそれよりも有意に低かった（Ｐ＜０．０１）。
【０１１８】
２１日齢の幼住血吸虫に対するトリオキソラン類の効果
処理後２１日目にマウスを１００匹のシストソーマ・マンソニのケルカリエで感染させた。各群はトリオキソランの２００ｍｇ／ｋｇの単回投与で経口的に処理した。無処理のマウスは対照とした。全ての群は処理後４週で殺し、肝臓と腸を摘出し分離した。その肝臓及び腸を圧縮し、生きている雄及び雌の寄生虫を観察し計測することができた。該化合物の効果は平均の総及び雌寄生虫の負荷量で評価した。その結果を表４に示す。
【０１１９】
住血吸虫成虫（４９日齢）に対するトリオキソラン類の効果
処理後４９日目にマウスを１００匹のシストソーマ・マンソニのケルカリエで感染させた。各群はＯＺ化合物の２００、４００、及び６００ｍｇ／ｋｇの単回投与で経口的に処理した。無処理のマウスは対照とした。全ての群は処理後４週で殺し、肝臓及び腸を摘出し分離した。その肝臓及び腸を圧縮し、生きている雄及び雌の寄生虫を観察し計測することができた。該化合物の効果は平均の総及び雌寄生虫負荷量で評価した。その結果を表４に示す。
【０１２０】
【表４】
2005060396.tif 000033
【実施例４】
【０１２１】
Ｐ．ベルゲイに対するトリオキソラン類の活性
単回投与のＥＤ50／ＥＤ90／ＥＤ99の測定では、プラスモディウム・ベルゲイのＡＮＫＡ株で感染させたモロＳＰＦマウス又はＮＭＲＩマウス（３匹の群）を感染後１日目に処理した。トリオキソラン類は標準的懸濁ビークル（ＳＳＶ）に溶解若しくは懸濁し、経口及び皮下に１０、６、３、１、０．３及び０．１の単回投与で投与した。このＳＳＶは水中の０．５％ｗ／ｖＣＭＣ、０．５％ｖ／ｖベンジルアルコール、０．４％ｖ／ｖトゥイーン８０、及び０．９％ｗ／ｖ塩化ナトリウムから成る。抗マラリア活性は感染３日後における寄生虫血症の減少パーセントにより測定された。ＥＤ50／ＥＤ90値は非線形当てはめにより計算した。
【０１２２】
【表５】
2005060396.tif 000034
【０１２３】
表５はＳＳＶ製剤でのトリオキソラン類の経口投与により得られたＥＤ50／ＥＤ90／ＥＤ99データを示す。比較的親油性のアルテメーテルはより極性の強いアルテスネートやアルテリネートよりも実質的に活性がより高い。対照的に、最も活性の高いトリオキソラン類（ＯＺ１８１、ＯＺ２０７、ＯＺ２０９）−これは同一アミノトリオキソランの異なる形の塩である−、及びアミドトリオキソラン類であるＯＺ２７７及びＯＺ２７９は比較的極性の化合物である。
【実施例５】
【０１２４】
ＯＺ２７９、ＯＺ２７７、ＯＺ２５６、及びＯＺ２０９の投与
ラット及びイヌにおけるＯＺ２７９、ＯＺ２７７、ＯＺ２５６、及びＯＺ２０９の投与の結果に基づいて、本発明者らは同じ化合物のヒトにおける予測最適投与量を決定した。アルテスネートは参照化合物としてリストした。
【０１２５】
【表６】
2005060396.tif 000035
【実施例６】
【０１２６】
マラリア感染の治療及び予防における選択されたＯＺ化合物の有効性
１８±２ｇの重量のモロＮＭＲＩ雄マウス（フューアルビノＳＰＦ動物）を実験の０日目にドナーマウスからの２×１０7 Ｐ．ベルゲイＡＮＫＡ株で感染させた赤血球を用いて静脈注射（ｉ．ｖ．）により感染させた。約３０％の寄生虫血症を持つドナーマウスからヘパリン化した血液を採取し、１０8 の寄生した赤血球／ｍｌまで生理食塩水で希釈した。この懸濁液の一部（０．２ｍｌ）をマウスの実験群と対照群にｉ．ｖ．注射した。無処理の対照マウスでは、寄生虫血症は感染３日後までに４０〜５０％に、そして感染４日後までに７０〜８０％に一様に上昇した。これらのマウスは感染後５日目と７日目の間に死滅した。この実験を通して、マウスは２２〜２３℃に空調された動物室のマクロロンII型ケージ中で３〜５匹の群として飼育された。ｋｇ体重当たり４５ｍｇのｐ−アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）を含む食事（ＮＡＦＡＧ・ＦＵＴＴＥＲフードＮo ９００９ＰＡＢ−４５）及び水道水を自由に摂らせた。
【０１２７】
ＯＺ化合物は、ＳＳＶ（水中、０．５％ｗ／ｖＣＭＣ、０．５％ｖ／ｖベンジルアルコール、０．４％ｖ／ｖトゥイーン８０、及び０．９％ｗ／ｖ塩化ナトリウム）を含む溶液若しくは懸濁液のいずれかとして適当な濃度で調製された。これらの化合物はマウスのグラム当たり０．０１ｍｌの総量で経口的に投与された。これらの化合物の活性は以下の節で概述する種々の方法で測定した。生存時間も記録され、感染後３０日までの生存は治癒とみなされた。
【０１２８】
第一の実験は、感染後１日、２日及び３日目に投与された３×１０ｍｇ／ｋｇの分割経口投与対感染後１日目に投与された１×３０ｍｇ／ｋｇの単回経口投与から成るものであった。感染４日後に、全ての動物の血液スメアを調製し、ギームサ（Ｇｉｅｍｓａ）で染色した。寄生虫血症は顕微鏡により決定した。対照群の平均値（１００％とする）と実験群の平均値との差を計算し、減少パーセントとして表した。化合物はＳＳＶビークルに溶かし経口投与した。その結果は以下の表７に示す。
【０１２９】
【表７】
2005060396.tif 000036
【０１３０】
表７に示すように、これらのトリオキソラン類の３×１０ｍｇ／ｋｇの投与により、該感染マウスは３／５と５／５の間で治癒した。この同じ投与量で、どの標準的抗マラリア薬も該感染マウスのいずれをも治癒しなかった。１×３０ｍｇ／ｋｇ投与では、テストした全てのトリオキソラン類は感染３日後で９９．９％より高い活性を示した。
【０１３１】
第二の実験は、感染後１日、２日及び３日目に投与された３×３ｍｇ／ｋｇ及び３×１ｍｇ／ｋｇの分割経口投与から成るものであった。感染４日後に、全ての動物の血液スメアを調製し、ギームサで染色した。寄生虫血症は顕微鏡により決定し、対照群の平均値（１００％とする）と実験群の平均値との差を計算し、減少パーセントとして表した。化合物はＳＳＶビークル中に溶解して経口投与した。その結果は表８に示す。
【０１３２】
【表８】
2005060396.tif 000037
【０１３３】
表８に示すように、３×３ｍｇ／ｋｇ投与では、１４個のトリオキソラン類が１００％の活性を有し、高い生存数を示した。これらのうちで、ＯＺ３０１、ＯＺ３２９、ＯＺ３３９、ＯＺ３４９、及びＯＺ３５７はそれぞれ感染マウスの１／５、２／５、３／５、２／５、及び１／５を治癒した。３×１ｍｇ／ｋｇ投与では、トリオキソラン類の大部分が対照の抗マラリア薬よりもより効力が大であった。これらのうちの１６個は９０％以上の活性を有していた。ＯＺ２０９、ＯＺ３２９、及びＯＺ３３６は３×１ｍｇ／ｋｇ投与で９９％より大きな活性を持つ唯一のトリオキソラン類であった。試験したＯＺ３４３〜ＯＺ３６８は全て対照の抗マラリア薬よりも活性が高かった。
【０１３４】
これらの化合物の予防的活性を、感染前の様々な時期に５匹の動物からなる異なる群に１００ｍｇ／ｋｇの単回経口投与を行なった後に比較した。次いで無処理対照群を含む全ての群を同時に感染させた。寄生虫血症は感染３日後に各動物について測定し、薬を与えなかった動物のレベルと比較して寄生虫血症のレベルの減少パーセントを決定した。その結果を表９に示す。
【０１３５】
【表９】
2005060396.tif 000038
【０１３６】
ＯＺ２０９の独特の予防特性（３日間の保護、ＭＦＱと同じ）がＯＺ２７１についても見出された。
【実施例７】
【０１３７】
ＯＺ２７７塩の化学的特性
ＯＺ２７７の塩基型の下記のトシレート、マレイン酸塩、塩化水素、酒石酸塩、及びコハク酸塩を合成した。
シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ｐ−トシレート
シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ハイドロジェン  メイリエート
シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ハイドロクロライド
シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ハイドロジェン  タータレート
シス−アダマンタン−２−スピロ−３’−８’−〔〔〔（２’−アミノ−２’−メチルプロピル）アミノ〕カルボニル〕メチル〕−１’，２’，４’−トリオキサスピロ〔４．５〕デカン  ハイドロジェン  サクシネート
【０１３８】
【表１０】
2005060396.tif 000039
【実施例８】
【０１３９】
ＯＺ２７７マレイン酸塩の調製
原材料
物質                        量                      モル当量
ＯＺ２７７（塩基型）          ６０．００ｇ              １．００
マレイン酸                    １７．４０ｇ              ０．９８
エタノール                    ２４０ｍｌ
ヘプタン                      ７８０ｍｌ
【０１４０】
プロセス
−２０〜２５℃でエタノール（１５０ｍｌ）を添加する、
−攪拌しながら、２０〜２５℃でＯＺ２７７（６０ｇ）を添加する、
−２０〜２５℃で１０分間攪拌し、清澄な溶液を得る、
−２０〜２５℃でマレイン酸（９０ｍｌのエタノール中の１７．４ｇ）の溶液を攪拌      しながら１時間かけて滴下して添加する、
−攪拌しながら、２０〜２５℃でヘプタン（７２０ｍｌ）を添加する、
−２０〜２５℃で４時間攪拌する、
−固体を濾過し、ヘプタン（６０ｍｌ）で洗浄する、
−生成物を吸引乾燥する、
−２０〜２５℃で真空下に生成物を乾燥する。
得られた生成物は６５〜７０ｇである。
【０１４１】
本発明のスピロ及びジスピロ１，２，４−トリオキソラン組成物は上記の式の範囲内のトリオキソラン類、又はこれらの化合物のプロドラッグ又は類似物又はＤ型若しくはＬ型のラセミ混合物を含みうることが認められるべきである。本発明はこれらの化合物の生物学的に活性な塩形を全て含むことも意図する。また、本明細書に記載された組成物の小さな投与量の変更や範囲の調剤の変更がなされうるものであり、これらもなお本明細書の範囲及び精神の中に含まれるものである。
【０１４２】
特定の組成物や有効性の理論などを参照して本発明を説明してきたが、本発明がこれらの例示的な実施態様又は機作により限定されることが意図されるものでないこと、そして添付された請求の範囲により規定された本発明の範囲若しくは精神から逸脱することなく変更がなされ得ることは当業者には明らかなことである。このような自明の変更及び修正は全て請求の範囲で規定された本発明の範囲内に含まれることが意図される。請求の範囲は、論旨が具体的に逆のことを指摘しない限り、請求された成分及び工程をそこに意図された目的を達成するのに有効なように任意の順序でカバーすることを意図する。