(57)【要約】【課題】新規多発性硬化症治療用の薬剤組成物の提供。【解決手段】有効量のＰＤＥ  ＩＶ阻害剤及び消炎性又は免疫変性性薬剤及び薬物学的に認容性の担持剤を含有することを特徴とする薬剤組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
多発性硬化症の治療又は予防のための医薬組成物において、薬物学的に認容性の担持剤中に、インターフェロン誘導体および式ＩＩ：
【化１】
2005320345.tif 000006
［式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ等しい又は異なるもので、少なくとも一つはメチル以外のＣ１〜Ｃ１８−アルキル、ヘテロ環、又は１個以上のハロゲン原子、ヒドロキシ、カルボキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、又はアミノ基で置換されているＣ１〜Ｃ５−アルキルであり；Ｒ’は水素原子、アルキル、アリール又はアシルであり；Ｘは酸素原子又は硫黄原子である］の化合物およびその薬物学的に認容性の塩であるＰＤＥ  ＩＶ阻害剤の組合せの有効量を含有することを特徴とする、多発性硬化症の治療又は予防のための医薬組成物。
【請求項２】
インターフェロン誘導体がインターフェロン−βである請求項１記載の組成物。
【請求項３】
インターフェロン−βがインターフェロン−β−１ｂである、請求項２記載の組成物。
【請求項４】
式ＩＩ：
【化２】
2005320345.tif 000007
［式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ等しい又は異なるもので、少なくとも一つはメチル以外のＣ１〜Ｃ１８−アルキル、ヘテロ環、又は１個以上のハロゲン原子、ヒドロキシ、カルボキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、又はアミノ基で置換されているＣ１〜Ｃ５−アルキルであり；Ｒ’は水素原子、アルキル、アリール又はアシルであり；Ｘは酸素原子又は硫黄原子である］の化合物およびその薬物学的に認容性のその塩であるＰＤＥ  ＩＶ阻害剤およびインターフェロン誘導体の、多発性硬化症の治療又は予防のために有用な医薬組成物を製造するための使用。
【請求項５】
多発性硬化症の治療又は予防のための医薬組成物において、薬物学的に認容性の担持剤中に、式ＩＩ：
【化３】
2005320345.tif 000008
［式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ等しい又は異なるもので、少なくとも一つはメチル以外のＣ１〜Ｃ１８−アルキル、ヘテロ環、又は１個以上のハロゲン原子、ヒドロキシ、カルボキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、又はアミノ基で置換されているＣ１〜Ｃ５−アルキルであり；Ｒ’は水素原子、アルキル、アリール又はアシルであり；Ｘは酸素原子又は硫黄原子である］の化合物およびその薬物学的に認容性の塩であるＰＤＥ  ＩＶ阻害剤の有効量を含有することを特徴とする、多発性硬化症の治療又は予防のための医薬組成物。
【請求項６】
式ＩＩ：
【化４】
2005320345.tif 000009
［式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ等しい又は異なるもので、少なくとも一つはメチル以外のＣ１〜Ｃ１８−アルキル、ヘテロ環、又は１個以上のハロゲン原子、ヒドロキシ、カルボキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、又はアミノ基で置換されているＣ１〜Ｃ５−アルキルであり；Ｒ’は水素原子、アルキル、アリール又はアシルであり；Ｘは酸素原子又は硫黄原子である］の化合物およびその薬物学的に認容性の塩であるＰＤＥ  ＩＶ阻害剤の多発性硬化症の治療又は予防のために有用な医薬組成物を製造するための使用。
【請求項７】
一つのパッケージ中に、多発性硬化症を治療または予防するために組合せて使用するための医薬組成物を別々のコンテイナー中に含有するキットにおいて、第１のコンテイナーが式ＩＩ：
【化５】
2005320345.tif 000010
［式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ等しい又は異なるもので、少なくとも一つはメチル以外のＣ１〜Ｃ１８−アルキル、ヘテロ環、又は１個以上のハロゲン原子、ヒドロキシ、カルボキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、又はアミノ基で置換されているＣ１〜Ｃ５−アルキルであり；Ｒ’は水素原子、アルキル、アリール又はアシルであり；Ｘは酸素原子又は硫黄原子である］の化合物およびその薬物学的に認容性の塩であるＰＤＥ  ＩＶ阻害剤を含有する医薬調合物を含有し、かつ
第２のコンテイナー中に、インターフェロン誘導体を含有する医薬調合物を含有している、キット。
【請求項８】
インターフェロン誘導体がインターフェロン−βである請求項７記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は多発性硬化症治療用のＰＤＥ  ＩＶ阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
髄鞘脱落症は、神経繊維を包囲している髄鞘の破損を包含する脳及び脊髄の重大な疾患である。髄鞘脱落の結果として、運動障害、視覚損失及び知覚変化を包含する種々の神経症状が現れる。多発性硬化症（ＭＳ）は、髄鞘脱落症の最も一般的なものである。これは、視神経の焦点障害、脊髄及び脳の病状発生（ｅｐｉｓｏｄｅ）で特徴付けられる疾病である。これは、遺伝学的に羅病性の母集団中で起こりうる自己免疫機構により惹起されるＣＮＳ中の特徴的な髄鞘脱落を伴う重症の慢性の不能性疾患である。典型的に、これは、神経学的機能障害に引き続く軽減（再発−軽減）の再発性病状発生を生じるが、これは慢性でもあり得る。ＭＳはよく研究されている疾患であるが、その詳細な経過はなお不明瞭のままである。一つの説明は、幼児期に最も屡々作用する環境要因が、通常はサプレッサー細胞によりコントロールされているＴ−細胞の特定の母集団（ミエリン−付随抗原、例えばＭＢＰ、ＭＡＰ、ＭＯＰ又はその他の攻撃能力を有する）を活性化するということである。多くのＭＳの場合に、結果として、非特異的ストレスがＢＢＢの開始、浮腫、Ｔ−細胞及びマクロファージの移入及び活性化を伴う病勢悪化及び引き続く乏枝神経膠−付随ミエリンの破壊をもたらし、引き続くミエリン再生の試みに失敗し、最後に神経膠はん痕（ＭＳの再発−軽減）を伴う。ＭＲＩで可視化可能なこれらの病勢悪化は、場所に応じて重大な機能的不能、更に再発回数の増加と結びつき、この疾病（及び攻撃される抗原）は、より一般化され、少ないクリアカット間隔（ＭＳの進行形、二次又は一次）で進行し、かつ回復不能を増加し、かつ存続し、これが（殆ど若い人口における）人生の損傷を起こさせ、雇用及び独立人生の損失（病院生活及び場合によっては死）を伴う。
【０００３】
最近まで、治療は実験的に行われているが全く成功していない。Ｃｅｃｉｌ’ｓ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｗｙｎｇａａｒｄｅｎ，１９９３）参照。古典的な非特異的免疫抑制治療（コルチコステロイドを包含）及び静細胞剤は、通常この一連の状態及び疾病経過を変えることに失敗しており、それというのも、おそらくこれらは、これらの患者に認容性が低く、同様に内因性の免疫抑制メカニズムをも同様に抑制するからである。治療の検討に関しては、例えばＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ａｄａｍｓ  等．，１９９３）を参照。最近のインターフェロン−β−１ｂを用いる非特異的免疫変性治療は、初期の再発／軽減ＭＳを有する患者における疾病のない期間を延長することが示されているが、これら患者の大多数においては、病変悪化は完全には阻止できず、治療の最初の３年間の不能に対する効果もなお小さい。コルチコステロイド治療は、これら病勢悪化のいくつかの急性症状を緩和する（おそらく浮腫の減少による）が、長期間予後には作用しない。しかしながら、この病勢悪化を制御不能にし、不能にする自己免疫のメカニズムの活性化、延長及び増大を伴う全ての病勢悪化を抑制することが最も重要であると思われる。この疾病重症度及び進行に作用する付加的な薬剤に対する必要性も残っている。
【０００４】
最近の、臨床、生物化学及び造影技術における進歩は、臨床医に、このような病勢悪化を非常に早い段階で予測させ診断させることを可能にし、従って、最大の治療効果を得るための種々の治療計画を組み合わせることが可能になった。例えばインターフェロン−β−１ｂ（又は特異的特異的な免疫変性剤例えばコポリマーＩ、同様にＭＳ抗原への認容性を誘起する）を用いる非特異的メカニズムを用いる免疫変性治療は、この疾病の開始の前に与える必要であるような１００％までは作用しないが、臨床的病勢悪化の数を、脳中の病変においても明らかにかつ著しく減少することができる。幸いにも、疾病活性化を完全に把握するためのターゲットに関して、開発されている新規診断技術（例えば、γ−インターフェロン、ＴＮＦ−αの増加、血液中の活性化された特異的Ｔ−細胞の数の増加、新規特異的ＭＲＩ及び他の造影技術及び臨床観察）は、非常に早期の病勢悪化の開始を検知する能力を有する。
【非特許文献１】Ｃｅｃｉｌ’ｓ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｗｙｎｇａａｒｄｅｎ，１９９３）
【非特許文献２】Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ａｄａｍｓ  等．，１９９３）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、病勢悪化のいくつかの症状の上にのみに作用するのではなく、これらを完全に阻止し、従って、疾病進行を抑制することのできる強力かつ有効な薬剤が必要である。しかしながら、例えば末梢Ｔ−細胞活性化、内皮付着、血液−脳バリアの開放及びＴ−細胞−マクロファージ／ミクログリア相互反応の活性化、引き続く乏枝神経膠損傷及び髄鞘脱落時に正に自己免疫条件ではなく、慢性使用で防御メカニズムに作用することを意図する新規治療計画は、内因性損傷性薬剤及び作用（例えば腫瘍発生）に対すると同様に外因性（例えば細菌、寄生虫又はウイルス感染）に対する損傷性の重大な防御メカニズムでもある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の１態様は、良好な認容性の長期持続性治療を、多くの薬剤又はその組合せ物により攻撃的に治療できるだけである早期病勢悪化を予言し、又は検知する新規診断法の使用と結びつけて、疾病病勢悪化、延長及び進行に致命的な影響を有する頑固なＣＮＳ病変を生じさせないことを確保することである。更に、最大の効果を達成するための種々のメカニズムとの治療の組合せは、治療の認容性（ＭＳにおけるインターフェロン−β−１ｂの作用は、用量依存性であることが示されているので、より高いかつ１００％の効果を達成するためにはより高い用量が期待できるが、重大な副作用の増加はこのタイプの治療を妨げる）を改良し、最終的にこの用量維持と抗−病勢悪化治療との新規組み合わせは、単独治療時におけるこれら薬剤の高用量及び長時間使用により引き起こされうる副作用の危険を明らかに減少させる結果をもたらす。実際に、基本的な用量維持治療をそれが必要である場合（例えば病勢悪化の間又はその直前に）にのみこの新規治療計画の使用と組合せる場合には、補足的及び相乗的な治療法の双方の副作用は滅多に起こらず、この形の治療は、最適の臨床結果を達成するために組み合わせることができる。病勢悪化の短時間治療のこの新規コンセプトにおいても、更なる損傷及び進行を防ぐために種々の薬剤を組み合わせることができる。従って、細胞毒性のサイトカイン及びケモカインの合成の抑制は、それらの放出を抑制し、双方が、例えば血液−脳バリアを横切る流通の同時抑制により効果が増強されうる薬剤又は最終的組織損傷を抑制−又は逆行−する薬剤（例えば神経成長ファクター、カルシポトリオールス、カルパインインヒビターなど）と組み合わせることができる。
【０００７】
【表１】
2005320345.tif 000002
【０００８】
【表２】
2005320345.tif 000003
【０００９】
多くの化合物がこれらのＭＳメカニズムの一つ以上を攻撃でき、通常、特別なメカニズムに付随している典型的な危険及び副作用を有するが、我々の実験研究は、意外にも、ホスホジエステラーゼＩＶの阻害剤、例えばロリプラムはヒトＭＳ細胞上に、並びにこの疾病の種々の動物モデル中（例えば、種々の種属でのＥＡＥ、ＥＡＮ）で、非常に高い作用を示し；更に、ヒトの種々の症状で、種々の生物学的パラメータ上での安全性及び効果が既に認められた。これらの組み合わされたメカニズムを用いると、単独治療でも又は他の用量維持治療との組合せにおいても低い用量が、ＭＳの病勢悪化の再発の予防又は減少又は治療のために非常に低い副作用（他の治療に比べて）で使用できることが明らかである。
【００１０】
更に、同じ又はより低い（例外的にはより高い）用量で、これら薬剤は、最大効果を達成するために付加的及び相乗的効果（及び従って前記のような進行の抑制）を、最小の副作用で達成するために、１〜９に記載のような他の化合物と組み合わせることができる。
【００１１】
従って、本発明の１態様は、有効量のＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤（ＰＤＥ  ＩＶ阻害剤）及び抗炎症剤又は免疫変性剤を適用することよりなる、ＭＳを治療又は予防する方法に関する。
【００１２】
本発明で使用するのに好適なホスホジエステラーゼＰＤＥ阻害剤は、最新の分類（Ｊ．Ａ．Ｂｅａｖｏ  ａｎｄ  Ｄ．Ａ．Ｒｅｉｆｓｎｙｄｅｒ，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｓｃｉ．１１；１５０−１５５，１９９０）によればシクロアデノシン−３’，５’−モノホスフェート（ｃＡＭＰ）ＰＤＥタイプＩＶ（ＰＥＤ  ＩＶ）阻害剤であるのが有利であり、Ｕ．Ｓ．４１９３６２９、ＷＯ９２／０２２２０、Ｕ．Ｓ．４１８６１２９；ＥＰ２４７７２５；Ｕ．Ｓ．５０６４８５４；Ｎ．Ａ．Ｓａｃｃａｍｏｎｏ  等．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３４，２９１−２９８，１９９１；Ｆ．Ｊ．Ｖｉｎｉｃｋ  等．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３４，８６−８９，１９９１；Ｊ．Ａ．Ｌｏｗｅ  等．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３４．，６２４−６２８，１９９１に記載の化合物をも包含するが、これらに限定されるものではない：
１，３−ジブチル−３，７−ジヒドロ−７−（２−オキソプロピル）−１Ｈ−プリン−２，６−ジオン（ｄｅｎｂｕｆｙｌｌｉｎｅ、ＢＲＬ３０８９２）；
４−［（３−ブトキシ−４−メトキシフェニル）メチル］−２−イミダゾリジノン（ＲＯ２０−１７２４）；
５，６−ジエトキシベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（ｔｉｂｅｎｅｌａｓｔ、ＬＹ１８６６５５）；
３−エチル−１−（３−ニトロフェニル）−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−キナゾリンジオン（ｎｉｔｒａｑｕａｚｏｎｅ、ＴＶＸ  ２７０６）；
６−（３，６−ジヒドロ−６−メチル−２−オキソ−２Ｈ−１，３，４−チアジアジン−５−イル）−１−（３、４−ジメトキシベンゾイル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−４，４−ジメチルキノリン（ＥＭＤ５４６２２）；
１−エチル−４−［（１−メチルエチリデン）ヒドラジノ］−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸エチルエステル（ｅｔａｚｏｌａｔｅ）；
Ｎ−ヒドロキシ−５，６−ジメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボキシイミダミド（Ｏｒｇ  ３００２９）；
２−アミノ−６−メチル−４−プロピル（１，２，４）トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５（４Ｈ）−オン（ＩＣＩ  ６３１９７）；
６−［４−（ジフルオロメトキシ）−３−メトキシフェニル］−３（２Ｈ）−ピリダジノン（ｚａｒｄａｖｅｒｉｎｅ）ペントキシフィリン（ｐｅｎｔｏｘｉｆｉｌｌｉｎｅ）；プロペントフィリン（ｐｒｏｐｅｎｔｏｆｉｌｌｉｎｅ）；ビンポセチン（ｖｉｎｐｏｃｅｔｉｎｅ）；及びこれらの薬物学的に認容性の塩。
【００１３】
有利なＰＤＥ  ＩＶ阻害剤は、式Ｉ：
【００１４】
【化１】
2005320345.tif 000004
［式中、Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ヘテロ環、又はＯＲ５であり、ここで、Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ３〜Ｃ７−シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６−アルケニル、Ｃ３〜Ｃ７−アルキニル、Ｃ３〜Ｃ７−シクロアルキル−Ｃ１〜Ｃ２−アルキル、アリール、アラルキル、ヘテロ環又は１個以上のハロゲン原子で置換されたＣ１〜Ｃ６−アルキル、ヒドロキシ、カルボキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシカルボニル又はアルキルで置換されていてよいアミノ基であり；
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ２〜Ｃ４−アルケニル又はＣ２〜Ｃ４−アルキニルであり；
Ｒ３は、水素原子、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、アリール、アラルキル、又は１個以上のメチル基で置換されていてよいアリール又はＣ１〜Ｃ６−アルカノイルであり；
Ｒ４は、水素原子又はＣ１〜Ｃ６−アルキルであり；
Ｙは、直接結合又はＣＨ２基であり；
Ｘは、ＣＨ２、ＣＨ２−ＣＨ２、ＮＨ又は酸素原子である］のラセミ性及び光学的に活性の化合物及びその薬物学的に認容性の塩である。
【００１５】
式Ｉの有利な化合物は、式中のＲ２がメチルで、Ｒ３が水素原子又はＣ１〜Ｃ６−アルカノイルであり、Ｒ１がＯＲ５であり、Ｒ５がＣ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ３〜Ｃ７−シクロアルキル又は３−テトラヒドロフラニルであり、Ｒ４が水素又はＣ１〜Ｃ４−アルキルであり、ＸがＣＨ２基又は酸素である化合物である。
【００１６】
式Ｉの殊に有利な化合物は、式中のＲ３が水素であるものである。
【００１７】
特別な例は、４−（３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル）−２−ピロリジノン（ロリプラム）である。
【００１８】
ここで用いられている用語「アルキル」には、直鎖又は分枝鎖のアルキル基、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、２−メチル-ブチル、２，２−ジメチルプロピル及びヘキシルを包含する。
【００１９】
ここで用いられている用語「アルケニル」は、ビニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−プロピニル又は３−メチル−２−プロペニルを包含することを意味するが、これらのみに限定されない。
【００２０】
ここで用いられている「シクロアルキル」又は「シクロアルキルアルキル」は、炭素原子数３〜７の基、例えばシクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロペンチル又はシクロヘキシルを包含することを意味する。
【００２１】
ここで使用されている用語「アリール」又は「アラルキル」は、芳香環又は炭素原子数６〜１０の環系、有利に単環、例えばフェニル、ベンジル、フェネチル又はナフチルを意味する。
【００２２】
ここで使用されている用語「ヘテロ環」は、１個の酸素、硫黄又は窒素原子を有する５〜６員の飽和環、例えば２−及び３−テトラヒドロピラニル、２−及び３−テトラヒドロフラニル、ピロリジノ、２−及び３−ピロリジル、ピペリジニノ、２−、３−及び４−ピペリジル及び相応するＮ−アルキルピロリジル及びピペリジル環を意味し、ここでアルキルは炭素原子１〜４のものを意味するが、これらに限定されるものではない。本発明の範囲内には、１個以上のヘテロ原子を有するヘテロ環、例えばモルホリノ、ピペラジノ又はＮ−アルキルピペラジノも包含される。
【００２３】
ここで使用されている用語「ハロゲン」は、全てのハロゲン、即ち塩素、フッ素、臭素及びヨウ素を意味する。
【００２４】
式Ｉの化合物の製造は、前記特許明細書中又は米国特許第４１５３７１３号；同４１８６１２９号；及び同第５２９８６２８号；ＷＯ８６／０２２６８号；又はＥＰ  ０２４７７２５号明細書に記載の方法で実施することができる。ロリプラムは、４−［（３−シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］−２−ピロリジノンである。例えばＭｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ、１１ｔｈ．ｅｄｉｔｉｏｎ、ｐｐ  １３１２−１３１３を参照。ロリプラム及び関連化合物は、例えば米国特許第４１９３９２６号によって製造できる。
【００２５】
本発明で使用するために好適である消炎性及び免疫変性性薬剤には、限定されるものではないが、次のものが包含される：
１．インターフェロン誘導体、例えばベタセロン（ｂｅｔａｓｅｒｏｎｅ）、β−インターフェロン、β−インターフェロンムテイン、
２．プロスタン誘導体、例えばＰＣＴ／ＤＥ９３／００１３に記載の化合物、例えばイロプロスト（ｉｌｏｐｒｏｓｔ）、シカプロスト（ｃｉｃａｐｒｏｓｔ）；
３．グルココルチコイド、例えばコルチゾール、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメサゾン；
４．免疫抑制剤、例えばサイクロスポリンＡ、ＦＫ−５０６、メトキサレン（ｍｅｔｈｏｘｓａｌｅｎｅ）、サリドマイド（ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ）、スルファサラジン（ｓｕｌｆａｓａｌａｚｉｎｅ）、アザチオプリン（ａｚａｔｈｉｏｐｒｉｎｅ）、メトトレキセート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）；
５．リポキシゲナーゼ阻害剤、例えばジロイトン（ｚｉｌｅｕｔｏｎｅ）、ＭＫ−８８６、ＷＹ−５０２９５、ＳＣ−４５６６２、ＳＣ−４１６６１Ａ、ＢＩ−Ｌ−３５７；
６．ロイコトリエン拮抗剤、例えばドイツ特許（ＤＥ）４００９１１７号；ドイツ特許出願Ｐ４２４２３９０．２；ＷＯ９２０１６７５に記載の化合物；ＳＣ−４１９３０；ＳＣ−５０６０５；ＳＣ−５１１４６；ＬＹ２５５２８３（Ｄ．ｋ．Ｈｅｒｒｏｎ  等．，ＦＡＳＥＢ  Ｊ；Ａｂｓｔｒ．４７２９、１９８８）；ＬＹ  ２２３９８２（Ｄ．Ｍ．Ｇａｐｉｎｓｋｉ  等．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３３：２７８９−２８１３、１９９０）；例えばＪ．Ｍｏｒｒｉｓ  等のＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２９：１４３−１４６、１９８８、Ｃ．Ｅ．Ｂｕｒｇｏｓ  等．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３０：５０８１−５０８４、１９８９；Ｂ．Ｍ．Ｔａｙｌｏｒ  等．，Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ４２：２１１−２２４、１９９１に記載のＵ−７５３０２及び類縁体；Ｕ．Ｓ．５０１９５７３に記載の化合物；及び例えばＫ．Ｋｉｓｈｉｋａｗａ  等のＡｄｖ．Ｐｒｏｓｔａｇｌ．Ｔｈｒｏｍｂｏｘ．Ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ  Ｒｅｓ．２１：４０７−４１０、１９９０；Ｍ．Ｋｏｎｎｏ  等のＡｄｖ．Ｐｒｏｓｔａｇｌ．Ｔｈｒｏｍｂｏｘ．Ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ  Ｒｅｓ．２１：４１１−４１４、１９９０に記載のＯＮＯ−ＬＢ−４５７及び類縁体； 例えばＵ．Ｓ．４９６３５８３に記載のＷＦ−１１６０５及び類縁体；ＷＯ９１１８６０１、ＷＯ９１１８８７９；ＷＯ９１１８８８０及びＷＯ９１１８８８３に記載の化合物；
７．抗炎症性物質、例えばＬ．Ｎｏｒｏｎｈａ−Ｂｌａｂ．等のＧａｓｔｒｏｅｎｔｒｏｌｏｇｙ  １０２（Ｓｕｐｐｌ．）Ａ６７２，１９９２に記載のＮＰＣ  １６５７０、ＮＰＣ１７９２３；Ｒ．Ｎ．Ｂｕｃｈ等のＰｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：３５５−３５９、１９９１；Ｓ．Ｐｏｕ  等のＢｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４５：２１２３−２１２７、１９９３に記載のＮＰＣ  １５６６９及び類縁体；
８．ペプチド誘導体、例えばＡＣＴＨ及び類縁体；可溶性ＴＮＦ−レセプター；ＴＮＦ−抗体；インターロイキン、他のサイトカイン、Ｔ−細胞タンパク質の可溶性レセプター；インターロイキン、他のサイトカイン、Ｔ−細胞タンパク質のレセプターに対する抗体；
９．種々の神経成長ファクターの合成の活性化剤としてのカルシポトリオール（ｃａｌｃｉｐｏｔｒｉｏｌｓ）及びその類縁体又は生長ファクターそれ自体又は乏枝神経膠生長を促進し（又はそれらのアポトシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）又は破壊を阻止する）、髄鞘再生を増強するその小ペプチド。
【００２６】
本発明によるデータは、ヒトＭＳ細胞並びに髄鞘脱落（例えば種々のＥＡＥモデル）の種々の動物モデルにおけるその作用効果において、これらの種々の新規薬剤は、少ない副作用で良好な保護を達成するために組み合わせることができることを示している。
【００２７】
「免疫変性性薬剤」とは、例えば免疫系上に、直接又は間接的に、例えば免疫系中の細胞、例えばＴ−細胞、Ｂ−細胞、マクロファージ又は他のＡＰＣ細胞の細胞活性を刺激又は抑制することにより又は免疫系を刺激、抑制又は変性する免疫系の外側の成分、例えばホルモン、レセプターアゴニスト又はアンタゴニスト及び神経伝達剤に作用することにより作用する薬剤を意味し；免疫変性性薬剤は、例えば免疫抑制剤又は免疫刺激剤であってよい。
【００２８】
「消炎性薬剤」とは、例えば炎症応答、即ち損傷に対する組織応答を治療する薬剤、例えば免疫性の、脈管又はリンパ系を治療する薬剤を意味する。
【００２９】
更に、この新規の組合せ治療計画には、多くのプロセスがあり、ここでは、ＭＳの想定症状がミエリン特異性自己免疫Ｔ−細胞へのサプレッサーＴ−細胞作用の障害を包含する当初の特異的又は非特異的な経過の後に現存の又は未来の薬剤結びつけられうる（単純なスケジュール参照）：
本発明は、有効量の式Ｉ又はＩＩの化合物単独、有利にロリプラム、ＩＶ型ホスホジエステラーゼを適用することよりなる、ＭＳを治療又は予防する方法にも関する。
【００３０】
本発明は、１態様では、多発性硬化症の予防又は治療に有用である式ＩＩのラセミ性又は光学活性の４−（ポリアルコキシフェニル）−２−ピロリドンに関する：
【００３１】
【化２】
2005320345.tif 000005
［式中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ等しい又は異なるもので、少なくとも一つはメチル以外の炭素原子数１８までを有する炭化水素、ヘテロ環、又は１個以上のハロゲン原子、ヒドロキシ、カルボキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、又はアミノ基で置換されている炭素原子数１〜５のアルキルであり；Ｒ’は水素原子、アルキル、アリール又はアシルであり；Ｘは酸素原子又は硫黄原子である］。
【００３２】
これら化合物及びそれを製造する方法は、例えばＵ．Ｓ．特許第４１９３９２６及びＷＯ９２／０２２２０に記載されている。
【００３３】
本発明による有利な化合物はロリプラムである。ロリプラムは、４−［（３−シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］−２−ピロリジノンである。Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ  １１ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ、１３１２−１３１３参照。これは、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ、Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙから市場で入手しうるか、又は例えばベルギー特許第８２６９２３号又は米国特許第４１９３９２６号により製造できる。これは、通常、抗抑鬱剤（Ａｎｔｉｄｅｐｒｅｓｓａｎｔ）として有用である、例えばＵ．Ｓｃｈｗａｂｅ  等．，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２，９００（１９７６）；Ｈ．Ｗａｃｈｔｅｌ，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２，２６７（１９８３）；Ｈ．Ｗａｃｈｔｅｌ  ａｎｄ  Ｈ．Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．２５，１１１９（１９８６）；Ｗ．Ｋｒａｕｓｅ  ａｎｄ  Ｇ．Ｋｕｅｈｎｅ，Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃａ  １８，５６１（１９８８）。憂鬱症へのロリプラムの臨床評価は、Ｅ．Ｚｅｌｌｅｒ等．，Ｐｈａｒｍａｃｏｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  １７、１８８（１９８４）に報告されている。重症の憂鬱症におけるアミトリプチリン（ａｍｉｔｒｉｐｔｙｌｉｎｅ，ｑ．ｖ．）との比較臨床治験は、Ｆ．Ｅｃｋｍａｎｎ等のＣｕｒｒ．Ｔｈｅｒ．Ｒｅｓ．４３、２９１（１９８８）に報告されている。ロリプラムの誘導体、即ちロリプラムに構造的に関連している化合物、例えば式Ｉのものも本発明により使用でき、ＭＳの予防及び／又は治療で有効である。
【００３４】
本発明は、ＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤、有利に式Ｉの化合物、殊にロリプラムを多発性硬化症（ＭＳ）において、この疾病の重症化、症状及び／又は再発の周期性を防止し、かつ／又は改善するために使用すること、例えば、症状が激発する病状の時期間隔を延長させ、かつ／又はこの疾病に伴う進行性免疫又は自己免疫の応答を抑制するために使用することにも関する。
【００３５】
従って、本発明はこのような化合物、例えば有効量の式Ｉ又はＩＩのもの、有利にロリプラムのＭＳの予防又は治療のために患者に適用することに関する。前記化合物、例えばロリプラムの適用量は、この疾病の症状又は疾病再発を予防し又は改善するために、又はこの疾病の最終的な経過に影響する、例えば脳中での炎症性応答、炎症性病変の発現、神経細胞又は神経膠細胞死及び／又は髄鞘脱落及びこの疾病の病因に付随する典型的な症状を遮断するために有効な量である。
【００３６】
本発明は、式Ｉ又はＩＩの化合物、有利にＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤、有利にロリプラム又は前記のような薬剤の組合せ物よりなる、多発性硬化症の予防又は治療に有用である医薬組成物をも提供する。この方法によれば、式Ｉ又はＩＩの化合物又は薬剤混合物を、例えば単独用量で、複数用量で、例えば皮内注射又は埋め込まれた浸透ポンプのような持続性放出手段により適用することができる。
【００３７】
本発明によれば、記載の各々の化合物の有効量を含有する式Ｉ又はＩＩの医薬組成物又は前記のような組成物を、多発性硬化症、例えば種々の多発性硬化変態例えば視神経脊髄炎（Ｄｅｖｉｃ’ｓ  症）、拡散性硬化症、転移性硬化症、急性拡散性脳脊髄炎及び視神経炎を有する患者に適用することができる。
【００３８】
予防されるか又は改善されるか又は治療されるＭＳの症候群には次のものが包含される：１以上の肢の弱化及び／又は麻痺；体躯又は四肢の周りの極端できついバンド様感覚の刺激；片足又は両足の疲労又は弱いコントロール性から痙攣又は運動失調性の不全麻痺に至る；極度活動性の腱反射；腹部反射の消失；Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ’ｓ徴候；眼球後又は視神経炎；歩行時の不安定；脳幹症状（複視症、めまい、嘔吐）；排尿障害；半身不随；三叉神経通；他の痛み症候群；眼振症及び運動失調；小脳−型失調；Ｃｈａｒｃｏｔ’ｓ  ３徴候；複眼；両側核内眼痛；顔筋肉の筋肉麻痺又は知覚麻痺；難聴、耳鳴り；不定形幻聴（蝸牛殻連結による）；めまい及び嘔吐（前庭連結）；一時的顔面麻痺又は三叉神経痛の麻痺；膀胱機能障害；多幸症；憂鬱症；痴呆症；無感覚症；下部背部の疼痛；手又は両足の鋭い、焼けるような、僅かな局部的痛み及び腰部痛；神経欠損の突然攻撃；吃音及び失調；四肢の発作的痛及び知覚不全；閃光；発作的掻痒；及び／又は手、手首及び肘から下肢の範囲の屈曲（筋張力不全）硬直の形をとる硬直性卒中。ＭＳを有する患者は、これら症状の１以上又はＭＳに典型的に付随するその他の臨床的顕徴を有し、一つ以上は、本発明の化合物を適用することにより改善することができる。
【００３９】
ＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤、例えばロリプラム又は後者の他の薬剤との組合せ物の適用は、ＭＳに伴う生理学的及び病理学的悪化、例えば脳及び神経系の他の領域での炎症性応答、血液−脳バリアの破損又は破壊、脳中の病変の発現、組織破壊、髄鞘脱落、自己免疫炎症性応答、急性又は慢性炎症性応答、神経細胞死及び／又は神経膠死を遮断又は減少させることもできる。
【００４０】
本発明の作用剤は、多焦点、ＣＮＳ、再発及び軽減経過を包含する種々の型のＭＳ；多焦点、ＣＮＳ進行性経過；片側の再発及び軽減経過；及び他の複数の硬化症の変態の治療のために有用である。例えばＪａｍｅｓ  Ｂ．Ｗｙｎｇａａｒｄｅｎ，１９８８発行Ｃｅｃｉｌ’ｓ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅを参照。
【００４１】
ロリプラム及び他のＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤及びこれと他の薬剤との組合せ物の適用の効果には、例えば、この疾病の予防、この疾病の症状の改善、年間悪化率の減少（例えば１年当たりの病状発生回数の減少）、この疾病の進行の減速又は脳障害の発現（例えばＭＲＩスキャンで同定されるような）の減少を包含する。前記疾病、例えばＭＳの病状発生再発は、例えばＭＳ発症に伴うこの症状（前記のような症状）の重症度を軽減するか、又は病状発生が症状の激化及び悪化により特徴付けられる場合には、病状発生までの間の期間を、例えば数日、数週間、数か月又は数年延長させ、又は脳炎症病変の発現を阻止し又は遅らせることにより、改善することができる。例えばＡｄｍｓ，Ｒ．Ｄ．，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，１９９３，７７７頁の神経学的炎症性病変の記載を参照。
【００４２】
本発明で使用できる、他の特に好適なＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤には、ＷＯ９３／１９０６８に記載の化合物である化合物ＲＯ  ２０−１７２４（４−［（３−ブトキシ−４−メトキシフェニル）メチル］−２−イミダゾリジノン）、ＩＣＩ  ６３１９７（２−アミノ−６−メチル−４−プロピル［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５（４Ｈ）−オン）、デンブフィリン（ｄｅｎｂｕｆｙｌｌｉｎｅ）及びエタゾレート（ｅｔａｚｏｌａｔｅ）が包含される。
「ＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤」「特異的ＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤」及び類似表現は、公知の型、例えばＩ、ＩＩ又はＩＩＩ型のホスホジエステラーゼに比べる際に、化合物が選択的にＩＶ型のホスホジエステラーゼに結合するか又は阻害するような選択的、即ち特異的な阻害剤を意味し、例えばここで、この化合物は、ＩＶ型ホスホジエステラーゼに関して低いＩＣ５０（より有効）を有し、他の公知の、例えばＩ、ＩＩ又はＩＩＩ型のホスホジエステラーゼに比べてＩＶ型のホスホエステラーゼに関して、ＩＣ５０は、例えば２倍、５倍、１０倍、５０倍又はより有効である。ＩＶ型ホスホジエステラーゼに関する本発明による化合物のこのような選択性は、他の手段、例えばそのターゲットへ拡散される方式によって、例えばこの化合物は、ＩＶ型ホスホジエステラーゼを有する特別な型の組織又は細胞をターゲットとする薬剤と組み合わせることができる方式；それが宿主メタボリズム及び／又は生理学的に相互に反応する方式；又はＰＤＥ阻害剤の活性化が所望の細胞又は組織中に存在するが他の中には存在しない酵素により達成される所でのＰＤＥ阻害剤先駆薬剤を合成することによっても、与えられ得る。
【００４３】
ＩＶ型ホスホジエステラーゼの特異的阻害は、通常は、例えばＲｅｅｖｅｓ  等．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，２４１：５３５−５４１，１９７７；に記載の方法に従って、例えばＳｃｈａｄｅ  等．，Ｅｕｒｏｐ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２３０：９−１４，１９９３；又はＷＯ９３／１９０６８に記載のようなマクロファージ検定により測定することができる。ホスホジエステラーゼ特異性及びその測定法に関しては、例えばＮｉｃｈｏｌｓｏｎ  等．，Ｔｅｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，１２：１９−２７（１９９１）を参照。
【００４４】
本発明によるＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤、例えばロリプラムの活性は、例えば実験的なアレルギー性髄鞘脱落性脳炎（ＥＡＥ）、ＣＮＳの実験的Ｔ−リンパ球開始疾病に羅病している動物で検定できる。これは、例えば噛歯類動物、モルモット、兎及び霊長動物中で、動物を例えばヒト脳からのミエリンで免疫化することにより及び／又は長時間に渡るコルチコステロイド適用により形成することができる。これは動物に、ＥＡＥ羅病動物から得たＴ−リンパ球を注射することにより形成することもできる。
【００４５】
特に、この活性は、例えばヒト脳からのミエリンで免疫化されたカリトリクス  ジャックス（Ｃａｌｌｉｔｈｒｉｘ  Ｊａｃｃｕｓ：きぬざる）で検定することができる。このきぬざるは、人の特定段階のＭＳ疾病におけると実質的に同様な組織病理学及び神経学的症状を有するＥＡＥを展開する。
【００４６】
本発明は、一般に、ＰＤＥ  ＩＶ阻害剤とインターフェロン誘導体、プロスタン誘導体、グルココルチコイド、免疫抑制剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、ロイコトリエン拮抗剤、消炎物質、ペプチド誘導体又はカルシポテリオール又は類似物との組合せ物を用いるＭＳの治療に関する。
【００４７】
有利な組合せ物は、ＰＤＥ  ＩＶ阻害剤及びインターフェロン誘導体、プロスタン誘導体又はロイコトリエン拮抗剤、例えばベタセロン、イロプロスト、シカプロスト又は５−［（Ｅ）−（２Ｓ）−２（１Ｅ，３Ｅ）−（５Ｓ）−５−ヒドロキシ−６，６−トリメチレン−９−フェニル−１，３−ノナジエン−８−イニル）−シクロへキシリデン］−ペンタノイック酸又はそのエステルよりなる。
【００４８】
本発明による薬剤組成物は、通常、賦形剤、担持剤、アジュバント及び緩衝剤を包含する製剤学的に慣用される物質（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ（１９９０）参照）を含有して製造される。この組成物は、例えば非経腸、経腸、経口、筋肉内、局所的、腹腔内、静脈から、エーロゾルにより、直接、ＣＮＳの脳脊髄液中へｉｎｔｒａｔｈｅｃｌｌｙに、又は埋め込まれたミニ−オスモテイックポンプ（例えば、ＡＬＺＡ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ  １０９５０，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ  ９４３０３で製造されたＡＬＺＥＴポンプ）を用いる持続性放出により、又は他の効果を達成するために有用な方法で適用されうる。
【００４９】
慣用の賦形剤には、薬剤と有害に反応しない非経腸、経腸又は局所適用に好適である薬剤学的に認容性の有機又は無機の担持物質が包含される。薬剤学的に認容性の好適なアジュバントには、水、塩溶液、アルコール、アラビアゴム、植物油、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、サリチル酸、ビスコースパラフィン、香油、脂肪酸モノグリセリド及びジグリセリド、ペンタエリスリトール脂肪酸エステル、ヒドロキシ−メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、シクロデキストリン等が包含されるがこれらのみに限定されるものではない。製剤は滅菌することができ、所望の場合には、活性物質と有害に反応しない安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響するための塩、緩衝剤、着色剤、フレーバリング及び／又は芳香物質等と混合することができる。
【００５０】
非経腸適用のためには、注射用の無菌溶液、有利には、油性又は水性溶液、同様に懸濁液、エマルジヨン又は坐剤を包含する埋め込み剤が特に好適である。アンプルは有利な単位適用形である。
【００５１】
経腸適用のためには、錠剤、糖衣丸、坐剤又は炭化水素担持剤又は結合剤を有するカプセルが特に好適である。担持剤はラクトース、トウモロコシ澱粉、バレイショ澱粉又はこれらの混合物であってよい。甘味付きベヒクルを使用する場合には、シロップ又はエレキシールが使用できる。
【００５２】
この組成物は、場合により製剤学的に慣用の添加剤、例えば緩衝剤、電解質、例えば塩化ナトリウム、酸化防止剤、例えばアスコルビン酸、アジュバント、例えばメチルセルロース、ラクトース及びマンニット及び／又は界面活性剤、例えばレシチン及びツイーン及び／又はフレーバリングのための芳香物質、例えば精油を添加して水溶液として処方することもできる。
【００５３】
ＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤及び薬剤組成物の量は、通常ここに記載の情報に基づき、例えばＥＡＥモデルを用いて決定できる。しかしながらＭＳ治療で有効な任意の量をこの疾病の改善又は治療のために適用することができる。用量は、常法で決定でき、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｕｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ（１９９０）参照。この組成物は、単一適用単位又は複数適用単位で、例えば１日当たり２回、３回又は４回で、又は薬剤を連続的に拡散するオスモテイックポンプを用いて適用することができる。ＩＶ型ホスホジエステラーゼ阻害剤は、同時に消炎性薬剤、免疫変性性薬剤等として、単一又は分割用量単位で、又は薬剤を異なる時間で又は例えば連続的に適用することができる。
【００５４】
適用すべき成分又は組成物の正確な用量は、臨床医の指示により、かつ例えば適用される化合物の能力、患者の年齢、体重、症状及び応答により決定される。
【００５５】
一般に、ＰＤＥ  ＩＶ阻害剤は、単独で、約０．００５〜２ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、有利に０．１〜７ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、又は０．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、より有利には０．００５〜０．１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの量で、かつ免疫変性又は抗炎症性薬剤等は、単独で、プロスタサイクリンに関しては約０．０１μｇ／ｋｇ／ｄａｙの量で、又はステロイドに関しては約１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙまでの量で適用される。本発明によれば、後者は、単純な付加的効果で予想されるよりも低い用量で、例えばＰＤＥ  ＩＶ阻害剤に関しては約０．０００５ｍｇ〜０．０１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙで、及び免疫変性性薬剤又は抗炎症性薬剤に関しては約０．００１μｇ／ｋｇ／ｄａｙ〜約１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙで適用することができる。
【００５６】
本発明は、成分を別々に適用することができる活性成分の組合せ物を用いるＭＳの治療に関するので、本発明はキットの形の別々の薬剤組成物を組み合わせることにも関する。このキットの形は、特に別々の成分が異なる適用形（即ち経口及び非経腸的に）で、又は異なる適用間隔で適用される場合に特に有利である。
【００５７】
当業者にとっては、先の記載を用いて、本発明をその充分な範囲まで利用できることは困難なく信じられる。従って、次の有利な特異的態様は、単に説明のためであり、この記載の残りを限定するものではない。
【００５８】
前記のかつ次の実施例中で、全ての温度は  未修整の摂氏温度；かつ他に指示のない限り、「部」及び「％」は「重量部」及び「重量％」である。
図面の簡単な記載
添付の図面と関連させて考えると、本発明の種々の他の目的、態様及び付随利点がより充分に明らかになるであろう、ここで類似関連文字は、複数の図面を通して類似又は同じ部分を示しており：ここで、
図１は、噛歯類におけるロリプラムによる実験的アレルギー脳脊髄炎（ＥＡＥ）の予防を示している。Ａ、Ｂ及びＣはＤＭＳＯ中のロリプラム（１０ｍｇ／ｋｇ）を適用し、Ｄ及びＦは同量のＤＭＳＯを適用した。ヒト脊髄ホモジェネートで免疫化された噛歯類に、免疫化の５日後にロリプラム又はプラセボを適用した。
【００５９】
図２は、ＥＡＥを有する噛歯類のロリプラムを用いる治療を示している。
【実施例】
【００６０】
例１
ロリプラムはＳｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ（Ｂｅｒｌｉｎ）で製造され、４−［（３−シクロペンチルオキシ）−４−メトキシペンチル］−２−ピロリジノンの（＋）及び（−）ラセミ体よりなっている。これを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に２０ｍｇ/ｍｌで溶かした。
【００６１】
剖検材料から、 Ｍ．Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ（Ｈ３７  Ｒａ株）を含有する完全フロインドアジュバント（ＣＦＡ）中のヒト脳白色物質ホモジェネートを製造した。
【００６２】
Ｍａｓｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｂｏｓｔｏｎ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｔｔｓからボルデテラ・ペルトウス・ワクチン（Ｂｏｒｄｅｌｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ  ｖａｃｃｉｎｅ）を得た。
【００６３】
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｙからゾフラン（Ｚｏｆｒａｎ）を得た。
【００６４】
Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ｐｒｉｍａｔｅ  Ｃｅｎｔｅｒから噛歯類を得、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏのガイドラインに従って保育した。
【００６５】
動物を、腋窩（ｄｏｒａｌ  ａｘｉｌｌａ）及び鼠頚部上の４部位での皮内注射（０．６ｍｌ）により死Ｍ．Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ（Ｈ３７  Ｒａ株）３ｍｇ／ｍｌを含有するＣＥＡ中のヒト脳白色物質ホモジェネート（２００ｍｇ）で、免疫化した。免疫化のその日及び再び２日後に不活化ボルデテラ・ペルトウシス１０×１０１０を食塩水１０ｍｌ中で静脈注射した。
【００６６】
免疫化後５日目に、動物の後頚部にＤＭＳＯ（プラセボ）又はロリプラムを含有するＤＭＳＯを１０ｍｇ／ｋｇの用量で皮下注射した。唾液分泌、嘔吐、過剰グルーミング及び首振りを防止するために、ＤＭＳＯ又はロリプラム含有ＤＭＳＯを用いる処置を、ゾフラン（Ｏｄａｎｓｅｔｒｏｎ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ，Ｇｌａｘｏ）０．３〜０．６ｍｇ／ｋｇの筋肉内注射により２０分先行させた。このような処置をこの研究の間にわたり各４８時間毎に繰り返した。
【００６７】
動物を毎日観察し、臨床症状の重症度を記録するための標準化された記録システムを提示した：
０．  正常
１．  嗜眠、食欲不振、体重減少
２．  運動失調、ふるえ
３．  盲目、下肢両側麻痺又は片側麻痺
４．  四肢麻痺
５．  瀕死  。
【００６８】
種々異なる時間で、動物を麻酔させ、ＭＲＩにかけた。
【００６９】
実験１：ロリプラム処置によるＥＡＥの予防
噛歯類を前記のように脳脊髄ホモジェネートで免疫化した。免疫化後の５日に、３匹の噛歯類にＤＭＳＯ中のロリプラム（１０ｍｇ／ｋｇ）を適用した。図１のＡ、Ｂ及びＣを参照。２匹の噛歯類に、同じ間隔で同量のＤＭＳＯを適用した。図１のＤ及びＥを参照。この治療を４８時間毎に繰り返した。
【００７０】
ＤＭＳＯ（プラセボ）で処置した動物は、免疫化の１５日後に絶えずＥＡＥで臨床症状を発生した；図１のＤ及びＥ参照。ロリプラム処置した動物のいずれでも、観察の８週間の間に症状を生じなかった；図１のＡ、Ｂ及びＣ参照。
【００７１】
磁気共鳴造影（ＭＲＩ）分析は、ＥＡＥ症状を有する２動物が脳内に１以上の病変を示し、これは、マグネビスト（ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ，ＤＴＰＡ）で増強され、ＥＡＥ又はＭＳ中に認められる脈管炎症病変に一致する活性浮腫応答を示している（Ａｌｖｏｒｄ等）。ロリプラム処置された動物のいずれでも観察の８週間の間の検出可能な病変を示さなかった。
【００７２】
ロリプラム排除の後のＥＡＥの発症
免疫化の後６０日に、処置された動物から処理を除きＥＡＥの徴候を観察した。２匹の噛歯類は、ロリプラム排除後１７日にＥＡＥの臨床的徴候を示し始めた。
【００７３】
実験２：ロリプラムによる活性ＥＡＥの処置
先の実験では、ロリプラムはＥＡＥを防止できたことが明白に示されていた。ロリプラムが活性ＥＡＥに作用することができるか否かを測定することは重要である。この実験で、噛歯類を前記のように免疫化して慢性ＥＡＥの症状を発生させ、引き続きロリプラムで処置した。動物を、先の実験に記載と同様に適用されたＤＭＳＯ中のロリプラムの増加性用量で処置した。生理学的症状を記載のようにモニターし、処置の前及び後にＭＲＩ分析を行った（図２参照）。
【００７４】
動物は、処置開始後１０日に著しい改良を示した。動物は、ロリプラム処置開始後１４日にＭＲＩ改良を示し、この時点から、症状は緩徐な改良を伴って安定化された。
【００７５】
実験１の結果は、ロリプラム処置がＥＡＥの神経症状をブロックしたことを示している。このＭＲＩ結果は、この炎症応答がブロックされ、髄鞘脱落は起こらなかったことを示している。非処置対照動物は、ＭＲＩ分析によれば、ＥＡＥ及び炎症性病変を明らかに発生した。処置された動物が、処置を除いた場合にＥＡＥを発生した事実は、脳ホモジェネートに対する免疫応答がこの疾病を充分に開始させたが病因論での引き続く過程はブロックされたことを示している。実験２の結果は、ロリプラム処置は活性疾病を抑制できることを示している。
【００７６】
例２
ロリプラム単独又は前記のような種々の組合せ物の自己免疫プロセスを変性する能力を評価するために、ＭＳ患者及びリュイスラット（Ｌｅｗｉｓ  ｒａｔ）からのＭＢＰ−特異的Ｔ−細胞による試験管内でのＴＮＦ生産への影響を調査した。ＭＢＰは、ＭＳ中の主カンデイダート（ｍａｊｏｒ  ｃａｎｄｉｄａｔｅ）抗原であり、Ｔ−細胞仲介免疫は、その病因論において決定的に重要である。ＥＡＥに対すると同様に、ヒトにおけるＭＢＰ−特異的Ｔ−細胞は、屡々Ｔｈ１型分泌インターフェロン（ＩＮＦ）−γ及びＴＮＦ／ＬＴの細胞毒性であり、ＥＡＥ中で脳炎発生性でもあるエピトープを認識する。
【００７７】
ロリプラムは、選択的に、ヒトＭＢＰ−特異的Ｔ−セルライン（ＴＣＬ）によるＴＮＦ生産を用量依存性方式で単独に又は組み合わせて抑制した。
【００７８】
脳炎発生ＣＤ４＋ＭＢＰ−特異的ラットＴＣＬ（Ｌ１４０２）を用いて、同様な結果が判明した。細胞毒性バイオアッセイで測定されたＴＮＦ／ＬＴ（リンパ球毒素）生産は、ヒトの線に匹敵する用量範囲で抑制された。更に、抑制は立体特異的であり、（−）−エナンチオマーでは（＋）−エナンチオマーより５５倍有効であった。（−）ロリプラム、（＋）ロリプラム及び単独適用（−）−ロリプラムのＥＤ５０は、それぞれ２０ｎＭ、２８０ｎＭ及び１１００ｎＭであった。先の調査は、ロリプラムによるｃＡＭＰ  ＰＤＥの抑制は立体特異的であることを示している。マウス及びラッテにおける前脳組織内での３Ｈ−ロリプラムとの生体内及び試験管内結合データは、（−）−エナンチオマーは、（＋）−エナンチオマーよりも１５〜３０倍の高い親和性を立証した。この発見の線において、本発明におけるデータは、ロリプラムがヒト及びラッテの自己反応性Ｔ−細胞中でのＴＮＦ／ＬＴ生産を、細胞内ｃＡＭＰ  ＰＤＥ依存性メカニズムで抑制することを強く暗示している。
【００７９】
ＴＮＦ及びＬＴは、双方とも自己反応性Ｔ−細胞により生産される。ＣＤ４＋細胞は、ＮＯＤマウスの自己免疫インシュリチス（ｉｎｓｕｌｉｔｉｓ）におけるＴＥＮの主要源であると報告されている。ここで使用されているＴＮＦ／ＬＴ検査のためのサイトカインバイオアッセイは、ＴＮＦ及びＬＴに対して敏感であるが、前者に対して２００倍も敏感である。
【００８０】
生体内検査のこの結果は、我々にルイスラッテにおける活性免疫化の後のＥＡＥ（ａＥＡＥ）及び養子細胞トランスファー（ｔＥＡＥ）の処置実験を行うための助言を与えた。ロリプラムを７日〜２３日間ａＥＡＥに単独処置として又は種々の組合せとして適用する際に、神経学的症状の発現は完全に防止された。臨床的に明白なＥＡＥで、症状の発症の６時間以内に処置を開始した。処置群では疾病は単にゆっくり進行したが、対照では重症のＥＡＥが発症した。ロリプラム処置動物のいずれにおいても、４度（対麻痺）の発症はなかったが、ベヒクル処置された対照群の４〜７動物は、典型的な実験における障害のレベルに達した。ｔＥＡＥで同様な効果が観察された。予防的処置は、結果的に対照における２．５±２．５（ｎ＝５）（ｐ＜０．０１）に比べて、処置された群では０．３±０．１１（ｎ＝５）の平均最大スコア（ＭＭＮ）の低い症状のみを示した。症状の発生後の処置も、最大重症度における著しい減少をもたらした（処置群：ＭＳ０．７±０．１０、ｎ＝５；ベヒクル処置対照群：２．４５±０．５６、ｎ＝５、ｐ０．０１）。
【００８１】
更に、長時間予防又は一時的抑制作用の区別のために、動物に活性免疫化の日から１１日まで薬剤を適用した。この方法において、処置された動物におけるａＥＡＥは３．５日遅らされたが、この疾病の重症度及び期間は対照に比べて同様であった。このことは、ＥＡＥ及び予想されるＴＮＦ／ＬＴ生産の抑制は一時的であり、ロリプラムによる自己反応性のＴ−細胞の消失は、例えばシクロホスファミドの場合と同様に見込みがないことを示している。
【００８２】
組織学的分析を、ａＥＡＥを有する選択された動物上で実施した。予防的に処置された動物中では僅かなかつ温和な細胞病変のみが存在した。対照では、臨床的徴候の発生の後に処置された２〜３動物が対照におけると同様な細胞浸潤を示した。
【００８３】
先行調査は、中枢神経系における炎症浸潤は、神経学的損傷の度合いと関連する必要がないことを示していた。ミエリン乏枝神経膠グリコプロテイン（ＭＯＧ）−特異的Ｔ−細胞で誘導されたＥＡＥ上での研究で、神経学的徴候の減少がマクロファージ及び異常発達組織炎症の減少に帰因したが、血管周辺炎症及びＴＮＦ、ＩＦＮ−ガンマ及びインターロイキン−６の合成は明らかに存在した。しかしながら、本発明の系では、このような現象に対して、処置された動物のいくらかにおける麻痺の時間的発生及び浸潤の形態学的に類似の発現を論じている。本発明は、臨床的に明白なＥＡＥのロリプラム処置の間に、その他の効果に付加的な局所的ＴＮＦ生産の抑制が、組織学的及び臨床的評価との間の矛盾にかかわらず決定的であることを提案している。インシトウ（ｉｎ  ｓｉｔｕ）ハイブリダイゼーシヨンを用いて、最近、ＣＮＳ中のＴＮＦ表現細胞の存在が、ＥＡＥでの臨床的徴候と関連していることが示された。この研究を用いると、ＥＡＥ及びＭＳ病変−炎症細胞、神経膠細胞又は双方中におけるロリプラム敏感細胞型を同定できる。
【００８４】
対照的に、ロリプラムは、その多くの効果において、ＭＳ及び他の患者において、殊に適当な組合せで、これらまたは他の実験に示されているように、既に記載された状況におけるように多大の治療的使用に期待できる。
【００８５】
前記の実験は、前記実験で用いられているこの発明一般的に又は特別に記載の反応成分及び／又はの処理条件を変更することによっても、同様な成功率で繰り返すことができる。
【００８６】
前記のことから、当業者ならば、本発明の主な特徴を容易に確認することができ、この思想及び範囲を逸脱することなしに、種々の用途及び条件に適合させるために本発明の種々の変更及び変性をすることができる。
【図面の簡単な説明】
【００８７】
【図１】実験１のＭＲＩ分析の結果を示すグラフ図。
【図２】実験２のＭＲＩ分析の結果を示すグラフ図。
【図１】
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【図２】
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