(57)【要約】【課題】  強いチロシナーゼ活性抑制作用を有し、シミ・ソバカスなど皮膚の色素沈着に対してすぐれた予防並びに症状改善効果を発揮して皮膚を若々しく健全な状態に保持し改善すると共に、皮膚に対する刺激等が少なく生体安全性にもすぐれた新規な美白成分を天然物中に見出し、かかる成分を化粧料中に配合することにより、顕著な美白・美肌化効果と高い生体安全性とを具えた化粧料を提供すること。【解決手段】キキョウ科ツルニンジン属に属する植物の抽出物を化粧料に配合する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
キキョウ科ツルニンジン属に属する植物の抽出物を配合したことを特徴とする化粧料。
【請求項２】
キキョウ科ツルニンジン属に属する植物としてヒカゲノツルニンジン（Codonopsis pilosula）を用いる請求項１に記載の化粧料。
【請求項３】
ヒカゲノツルニンジンの根（党参）を用いる請求項２に記載の化粧料。
【請求項４】
美白用である請求項１〜３に記載の化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚に対してすぐれた美白・美肌化作用を示し、基礎化粧料をはじめ、メイクアップ化粧料、浴用剤などとして有用な化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
日焼け或いは加齢に伴って生ずる色素沈着、特にシミ、ソバカスを予防或いは改善し、皮膚を若々しく健全な状態に保持することを目的として、従来より種々の美白剤が提案され、それらを配合した化粧料が上市されている。しかしながら、それら従来の美白剤によっては、美白・美肌化効果と皮膚安全性の双方を十分満足せしめることは困難であり、かかる点の改善された美白剤を含む新規な化粧料が求められている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明者らは、かかる従来技術の問題点に鑑み、皮膚安全性の観点から天然物由来の新たな美白有効成分を見出すべく鋭意研究を行った結果、キキョウ科ツルニンジン属の植物の抽出物が顕著なチロシナーゼ活性抑制作用を示し、これによって美白・美肌化効果と皮膚安全性にすぐれた化粧料の提供が可能となることを見出し、本発明を完成した。
【０００４】
キキョウ科ツルニンジン属植物の示す生理活性については、例えばヒカゲノツルニンジン（Codonopsis pilosula）の根（生薬の「党参」）に、胃腸虚弱や食欲不振等の症状改善効果、育毛効果或いは皮脂腺機能賦活効果等のあることが知られているが、ツルニンジン属植物の抽出物が顕著なチロシナーゼ活性抑制作用を有することについては、従来何らの知見も存在せず本発明をまって初めて明らかとなったところである。
【０００５】
【特許文献１】特開平２−４８５１５号
【特許文献２】特開昭６１−２００９２２号
【非特許文献１】中薬大辞典、第３巻、１９０９頁（昭和６０年、小学館）
【課題を解決するための手段】
【０００６】
即ち本発明は、キキョウ科ツルニンジン属の植物の抽出物を配合したことを特徴とする化粧料である。
なお、本明細書において化粧料なる文言は、所謂化粧料のほかに医薬部外品までも含む広義で用いる。
【発明の効果】
【０００７】
キキョウ科ツルニンジン属植物の抽出物を配合してなる本発明の化粧料は、有効成分として含む該抽出物の示す強いチロシナーゼ活性抑制作用により、シミ、ソバカスなど皮膚の色素沈着を顕著に抑制或は軽減すると共に、該抽出物が天然物由来のものであるため皮膚に対する刺激等が少なく安全性にすぐれている。      
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明で用いるキキョウ科ツルニンジン属の植物としては、例えばヒカゲノツルニンジン（Codonopsis pilosula）、ジイソブ（Codonopsis laroceolata）、バアソブ（Codonopsis ussuriensis）、ツブカワニンジン（Codonopsis lanceolata）などが挙げられる。
それらのうちでも、得られる抽出物のチロシナーゼ活性抑制作用の観点、さらには原料入手の容易さ等の点からヒカゲノツルニンジンの使用が最も好ましい。
【０００９】
それらキキョウ科ツルニンジン属植物の抽出物を調製する場合、該植物の抽出部位には特に限定はなく、例えば種子、葉、茎、根、全草など適宜の部分を用いることができるが、なかでも根の使用が最も好ましく、特にヒカゲノツルニンジンの根を用いた場合に好結果が得られる。
【００１０】
抽出物の調製は、ツルニンジン属植物の抽出対象部位を、必要ならば予め水洗して異物を除いた後、そのままもしくは乾燥した上、必要に応じて細切或いは粉砕し、浸漬法、向流抽出法など常法に従って抽出溶媒と接触せしめることによって行うことができる。
【００１１】
ここで抽出溶媒としては、水；メタノール、エタノール、プロパノールなどの低級アルコール類；エチレングリコール、プロピレングリコール、１、３−ブチレングリコール、グリセリンなどの多価アルコール類；酢酸エチル、酢酸ブチル、プロピオン酸メチルなどのエステル類；アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類；エチルエーテル、イソプロピルエーテルなどのエーテル類；ｎ−ヘキサン、トルエン、クロロホルムなどの炭化水素系溶媒などが挙げられ、それらは単独でもしくは二種以上混合して用いられる。
【００１２】
それら抽出溶媒のうちでも、得られる抽出物のチロシナーゼ活性抑制作用の観点から、また化粧料への幅広い適用が可能であるという点からも、本発明に於いては水、低級アルコール類或いは多価アルコール類などの親水性溶媒が好適に用いられる。この親水性溶媒を用いる場合の好ましい例としては、例えば水もしくは低級アルコール類（特にエタノール）の単独使用、或いは水と低級アルコール類（特にエタノール）との混合溶媒又は水と多価アルコール類（特に１，３−ブチレングリコールもしくはプロピレングリコール）との混合溶媒の使用等が挙げられるが、なかでも水の単独使用が最も好ましい。
【００１３】
混合溶媒を用いる場合、各溶媒の混合比は、例えば水とエタノール、水と１，３−ブチレングリコール、或いは水とプロピレングリコールとの混合溶媒であれば、いずれも重量比で１：１〜１０：１程度の範囲とすることが好ましい。
【００１４】
抽出物の調製に際して、抽出液のｐＨに特に限定はないが一般には４〜８の範囲とすることが好ましく、かかる意味で、必要ならば前記の抽出溶媒に、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウムなどのアルカリ性調整剤や、クエン酸、塩酸、リン酸、硫酸などの酸性調整剤等を配合し、所望のｐＨとなるように調整してもよい。
【００１５】
抽出温度、抽出時間、浴比等の抽出条件は、用いる溶媒の種類やｐＨ、或いは植物の抽出部位・細切度等によっても異なるが、例えば水を抽出溶媒とする浸漬法の場合であれば、抽出温度は一般に１〜８０℃、好ましくは２〜４０℃の範囲であり、又抽出時間は、４℃の冷温抽出の場合で１２時間〜１０日間、特に２４時間〜７日間、室温抽出の場合で６時間〜７日間、特に２４時間〜４日間、８０℃の高温抽出の場合で３０分〜２時間、特に１時間〜６時間の範囲である。浸漬法の場合、浴比は重量比で、植物体に対して溶媒が一般に５〜５０倍量、好ましくは１０〜３０倍量の範囲となるようにするのがよい。
【００１６】
かくして得られる抽出物溶液は、一般にはｐＨを４〜８に調整した上、これをそのまま化粧料配合剤として使用してもよく、又必要ならば減圧濃縮等により適宜の濃度として用いてもよい。さらに場合によっては、スプレードライ法、凍結乾燥法など常法に従って粉末化することもできる。
【００１７】
以上の如くして調製される本発明のキキョウ科ツルニンジン属植物の抽出物は、後に試験例１〜５に示す通り、顕著なチロシナーゼ活性直接阻害作用、細胞内チロシナーゼ活性阻害作用、さらには細胞内メラニン生成抑制作用を有すると共に、皮膚に対する刺激性が少なく生体安全性にもすぐれ、シミやソバカスの発生を予防し或いはそれらの症状を改善して肌を若々しく健全な状態に維持することを目的として化粧料に配合して極めて有用なものである。  従って、本発明によればかかるキキョウ科ツルニンジン属植物の抽出物を含有する美白、美肌化化粧料が提供される。
【００１８】
本発明のキキョウ科ツルニンジン属植物の抽出物を含む化粧料としては、例えば乳液、クリーム、ローション、エッセンス、パックなどの基礎化粧料、口紅、ファンデーション、リクイドファンデーション、メイクアッププレスパウダー、ほほ紅、白粉などのメイクアップ化粧料、洗顔料、ボディーシャンプー、石けんなどの清浄用化粧料、さらには浴剤等が挙げられるが、勿論これらに限定されるものではない。
【００１９】
本発明の化粧料に於けるキキョウ科ツルニンジン属植物抽出物の配合量は、抽出物の固形分として、基礎化粧料の場合は、一般に０．００２〜１．０重量％、好ましくは０．０２〜０．２重量％の範囲、メイクアップ化粧料の場合は、一般に０．００２〜１．０重量％、好ましくは０．０２〜０．２重量％の範囲、又清浄用化粧料の場合は、一般に０．００２〜１０．０重量％、好ましくは０．０２〜７．０重量％の範囲である。
【００２０】
本発明の化粧料には、必須成分のキキョウ科ツルニンジン属植物抽出物のほかに、通常化粧料に用いられる成分、例えば油性成分、界面活性剤（合成系、天然物系）、保湿剤、増粘剤、防腐・殺菌剤、粉体成分、紫外線吸収剤、抗酸化剤、色素、香料等を必要に応じて適宜配合することができる。又、本発明のキキョウ科ツルニンジン属植物抽出物の有効性、特長を損なわない限り、他の生理活性成分を組み合わせ化粧料に配合することも何ら差し支えない。
【００２１】
ここで、油性成分としては、例えばオリーブ油、ホホバ油、ヒマシ油、大豆油、米油、米胚芽油、ヤシ油、パーム油、カカオ油、メドウフォーム油、シアーバター、ティーツリー油、アボガド油、マカデミアナッツ油、植物由来スクワランなどの植物由来の油脂類；ミンク油、タートル油などの動物由来の油脂類；ミツロウ、カルナウバロウ、ライスワックス、ラノリンなどのロウ類；流動パラフィン、ワセリン、パラフィンワックス、スクワランなどの炭化水素類；ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、ｃｉｓ−１１−エイコセン酸などの脂肪酸類；ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコールなどの高級アルコール類；ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オレイン酸ブチル、２−エチルヘキシルグリセライド、高級脂肪酸オクチルドデシル（ステアリン酸オクチルドデシル等）などの合成エステル類及び合成トリグリセライド類等が挙げられる。
【００２２】
界面活性剤としては，例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルなどの非イオン界面活性剤；脂肪酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレン脂肪アミン硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル燐酸塩、α−スルホン化脂肪酸アルキルエステル塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル燐酸塩などのアニオン界面活性剤；第四級アンモニウム塩、第一級〜第三級脂肪アミン塩、トリアルキルベンジルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、２−アルキル−１−アルキル−１−ヒドロキシエチルイミダゾリニウム塩、Ｎ，Ｎ−ジアルキルモルフォルニウム塩、ポリエチレンポリアミン脂肪酸アミド塩などのカチオン界面活性剤；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−アルキル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニオベタイン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリアルキル−Ｎ−アルキレンアンモニオカルボキシベタイン、Ｎ−アシルアミドプロピル−Ｎ′，Ｎ′−ジメチル−Ｎ′−β−ヒドロキシプロピルアンモニオスルホベタインなどの両性界面活性剤等を使用することができる。
又、乳化剤乃至乳化助剤として、酵素処理ステビアなどのステビア誘導体、レシチン及びその誘導体、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀など）、ジュアゼイロ（Rhamnaceae zizyphus joazeiro)抽出物等を配合することもできる。
【００２３】
保湿剤としては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ピロリドンカルボン酸ナトリウム等があり、さらにトレハロース等の糖類、乳酸菌醗酵米、ムコ多糖類（例えば、ヒアルロン酸及びその誘導体、コンドロイチン及びその誘導体、ヘパリン及びその誘導体など）、エラスチン及びその誘導体、コラーゲン及びその誘導体、ＮＭＦ関連物質、乳酸、尿素、高級脂肪酸オクチルドデシル、海藻抽出物、ビャッキュウ抽出物、魚介類由来コラーゲン及びその誘導体、各種アミノ酸及びそれらの誘導体が挙げられる。
【００２４】
増粘剤としては、例えばアルギン酸、寒天、カラギーナン、フコイダン等の褐藻、緑藻或いは紅藻由来成分、ビャッキュウ抽出物、ペクチン、ローカストビーンガム、アロエ多糖体等の多糖類、キサンタンガム、トラガントガム、グアーガム等のガム類、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導体、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸・メタクリル酸共重合体等の合成高分子類；ヒアルロン酸及びその誘導体、ポリグルタミン酸及びその誘導体等が挙げられる。
【００２５】
防腐・殺菌剤としては、例えば尿素；パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチルなどのパラオキシ安息香酸エステル類；フェノキシエタノール、ジクロロフェン、ヘキサクロロフェン、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、サリチル酸、エタノール、ウンデシレン酸、フェノール類、ジャマール（イミダゾデイニールウレア）、１，２−ペンタンジオール、各種精油類、樹皮乾留物等がある。
【００２６】
粉体成分としては、例えばセリサイト、酸化チタン、タルク、カオリン、ベントナイト、酸化亜鉛、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、酸化ジルコニウム、硫酸バリウム、無水ケイ酸、雲母、ナイロンパウダー、ポリエチレンパウダー、シルクパウダー、セルロース系パウダー、穀類（米、麦、トウモロコシ、キビなど）のパウダー、豆類（大豆、小豆など）のパウダー等がある。
【００２７】
紫外線吸収剤としては、例えばパラアミノ安息香酸エチル、パラジメチルアミノ安息香酸エチルヘキシル、サリチル酸アミル及びその誘導体、パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル、桂皮酸オクチル、オキシベンゾン、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸塩、４−ターシャリーブチル−４−メトキシベンゾイルメタン、２−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、アロエ抽出物等がある。
【００２８】
抗酸化剤としては、例えばブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、ビタミンＥ及びその誘導体、ビャッキュウ抽出物、イネ抽出物等がある。
【００２９】
生理活性成分としては、例えば美白成分として、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、コウジ酸及びその誘導体、アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン誘導体、エラグ酸及びその誘導体、レゾルシノール誘導体、ソウハクヒ抽出物、ユキノシタ抽出物、米糠抽出物、米糠抽出物加水分解物、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀類）、白芥子加水分解抽出物、ムラサキシキブ抽出物、パンダヌス・アマリリフォリウス(Pandanus amaryllifolius Roxb.)抽出物、アルカンジェリシア・フラバ（Arcangelicia flava Merrilli）抽出物、カミツレ抽出物（商品名：カモミラET)、コンブ等の海藻の抽出物、アマモ等の海草の抽出物、リノール酸及びその誘導体もしくは加工物（例えばリポソーム化リノール酸など）、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体等が、又皮膚老化防止・美肌化成分として、動物又は魚由来のコラーゲン及びその誘導体、エラスチン及びその誘導体、ニコチン酸及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体（ジカリウム塩等）、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、アラントイン、α−ヒドロキシ酸類、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、ゲンチアナエキス、甘草エキス、ハトムギエキス、カミツレエキス、ニンジンエキス、アロエエキスなどの生薬抽出エキス、米抽出物加水分解物、米糠抽出物加水分解物、米醗酵エキス、ミツイシコンブ抽出物、アナアオサ抽出物、アマモ等の海草の抽出物、ソウハクヒエキス、ジュアゼイロ（Rhamnaceae zizyphus joazeiro)抽出物等がある。
【００３０】
上記のコウジ酸誘導体としては、例えばコウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸ジブチレートなどのコウジ酸エステル類、コウジ酸エーテル類、コウジ酸グルコシドなどのコウジ酸糖誘導体等が、アスコルビン酸誘導体としては、例えばＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルマグネシウムなどのアスコルビン酸エステル塩類、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド（２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸）、Ｌ−アスコルビン酸−５−グルコシド（５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸）などのアスコルビン酸糖誘導体、それらアスコルビン酸糖誘導体の６位アシル化物（アシル基は、ヘキサノイル基、オクタノイル基、デカノイル基など）、Ｌ−アスコルビン酸テトライソパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸テトララウリン酸エステルなどのＬ−アスコルビン酸テトラ脂肪酸エステル類、３−Ｏ−エチルアスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸−６−Ｏ−パルミテートナトリウム等が、ハイドロキノン誘導体としては、アルブチン（ハイドロキノン−β−Ｄ−グルコピラノシド）、α−アルブチン（ハイドロキノン−α−Ｄ−グルコピラノシド）等が、レゾルシノール誘導体としては、例えば４−ｎ−ブチルレゾルシノール、４−イソアミルレゾルシノール等が、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体としては、例えば２，５−ジアセトキシ安息香酸、２−アセトキシ−５−ヒドロキシ安息香酸、２−ヒドロキシ−５−プロピオニルオキシ安息香酸等が、ニコチン酸誘導体としては、例えばニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等が、ビタミンＥ誘導体としては、例えばビタミンＥニコチネート、ビタミンＥリノレート等が、α−ヒドロキシ酸としては、例えば乳酸、リンゴ酸、コハク酸、クエン酸、α−ヒドロキシオクタン酸等がある。
【００３１】
次に、製造例、実施例(処方例)及び試験例によって本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。なお、以下に於いて、部はすべて重量部を、また％はすべて重量％を意味する。
【００３２】
製造例１  ツルニンジン属植物抽出物溶液の調製（１）
ヒカゲノツルニンジン（Codonopsis pilosula）の根の乾燥細切物１００ｇに精製水１０００ｇを加え、４℃で１２時間抽出した。得られた抽出液をろ過して、淡黄色透明の抽出物溶液（固形分濃度：２．４６％）８７５ｇを得た。
【００３３】
製造例２．ツルニンジン属植物抽出物溶液の調製(2)
ヒカゲノツルニンジンの根の乾燥細切物１００ｇに精製水１０００ｇを加え、８０℃で１時間抽出した。得られた抽出液をろ過して、淡黄色透明の抽出物溶液（固形分濃度：２．６０％）９２５ｇを得た。
【００３４】
製造例３．ツルニンジン属植物抽出物溶液の調製(3)
ヒカゲノツルニンジンの全草の乾燥細切物１００ｇに３０％１，３−ブチレングリコール水溶液１０００ｇを加え、８０℃で１時間抽出した。得られた抽出液をろ過して、黄褐色透明の抽出物溶液（固形分濃度：２．０８％）８８０ｇを得た。
【００３５】
製造例４．ツルニンジン属植物抽出物溶液の調製(4)
ヒカゲノツルニンジン（Salicornea herbacea）の根の乾燥細切物１００ｇに５０％エタノール水溶液１０００ｇを加え、４℃で１２時間抽出した。得られた抽出液をろ過して、淡黄色透明の抽出物溶液（固形分濃度：１．９２％）９１８ｇを得た。
【００３６】
製造例５．ツルニンジン属植物抽出物溶液の調製(5)
製造例１と同様にして得られた抽出物溶液１００ｍｌを１０ｍｌに濃縮した後凍結乾燥し、抽出物粉末２．４ｇを得た。
【００３７】
製造例６．ツルニンジン属植物抽出物溶液の調製(6)
製造例１に於いて、ヒカゲノツルニンジンの根に代えてジイソブ（Condonopsis laroceolata）の根を用いるほかは製造例１と同様にして、黄色透明の抽出物溶液（固形分濃度：２．７９％）８９０ｇを得た。
【００３８】
実施例１．クリーム
［Ａ成分］                                                        部
流動パラフィン                                                ５．０
ヘキサラン    （注１）                                        ４．０
パラフィン                                                    ５．０
グリセリルモノステアレート                                    ２．０
ポリオキシエチレン（20）ソルビタンモノステアレート           ６．０
ブチルパラベン                                                ０．１
（注１）株式会社テクノーブル製 トリオクタン酸グリセリル        
［Ｂ成分］
製造例１の抽出物溶液                                          ５．０
グリセリン                                                    ５．０
カルボキシメチルモノステアレート                              ０．１
モイストン・Ｃ    （注２）                                    １．０
精製水                                        全量が１００部となる量
（注２）株式会社テクノーブル製 ＮＭＦ成分 
［Ｃ成分］
香料                                                           適量 
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合してクリームを得た。
【００３９】
実施例２．クリーム
実施例１のＢ成分中製造例１の抽出物溶液に代えて製造例２の抽出物溶液を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを得た。
【００４０】
実施例３．乳液
［Ａ成分］                                                          部
流動パラフィン                                              ６．０
ヘキサラン                                                  ４．０
ホホバ油                                                    １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート        ２．０
大豆レシチン                                                １．５
メチルパラベン                                              ０．１５
エチルパラベン                                              ０．０３
［Ｂ成分］
製造例１の抽出物溶液                                        ５．０
グリセリン                                                  ３．０
１、３−ブチレングリコール                                  ２．０
カルボキシメチルセルロース                                  ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム                                      ０．０１
精製水                                       全量が１００部となる量 
［Ｃ成分］
香料                                                           適量 
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。こ
れを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００４１】
実施例４．ローション
［成分］                                                            部
製造例３の抽出物溶液                                          ５．０
エタノール                                                  １０．０
グリセリン                                                    ３．０
１、３−ブチレングリコール                                    ２．０
メチルパラベン                                                ０．２
クエン酸                                                      ０．１
クエン酸ナトリウム                                            ０．３
カルボキシビニルポリマー                                      ０．１
香料                                                           適量 
水酸化カリウム                                                 適量
精製水                                       全量が１００部となる量 
上記の成分を混合してローションを得た。
【００４２】
実施例５．化粧水
［Ａ成分］                                                          部
オリーブ油                                                    １．０
ポリオキシエチレン（５．５）セチルアルコール                  ５．０
ブチルパラベン                                                ０．１
［Ｂ成分］
製造例４の抽出物溶液                                          ５．０
エタノール                                                    ５．０
グリセリン                                                    ５．０
１，３−ブチレングリコール                                    ５．０
メチルパラベン                                                ０．１
水酸化カリウム                                                  適量
精製水                                       全量が１００部となる量 
［Ｃ成分］
香料                                                           適量 
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加温後、Ａ成分にＢ成分を加えて攪拌し、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。
これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えて攪拌混合し、さらに３０℃以下まで冷却して化粧水を得た。
【００４３】
実施例６．乳液
実施例３のＢ成分中、製造例１の抽出物溶液に代えて製造例２の抽出物溶液を用いるほかは実施例３と同様にして乳液を得た。
【００４４】
実施例７．乳液
実施例３のＢ成分中、製造例１の抽出物溶液に代えて製造例３の抽出物溶液を用いるほかは実施例３と同様にして乳液を得た。
【００４５】
実施例８．乳液
実施例３のＢ成分中、製造例１の抽出物溶液に代えて製造例６の抽出物溶液を用いるほかは実施例３と同様にして乳液を得た。
【００４６】
実施例９．乳液
［Ａ成分］                                                            部
流動パラフィン                                                 ６．０
ヘキサラン                                                     ４．０
ホホバ油                                                       １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレー             ２．０
大豆レシチン                                                   １．５
メチルパラベン                                                ０．１５
エチルパラベン                                                ０．０３
［Ｂ成分］
製造例１の抽出物溶液                                           ５．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                             ２．０
水酸化カリウム                                                 ０．５
グリセリン                                                     ３．０
１、３−ブチレングリコール                                     ２．０
カルボキシメチルセルロース                                     ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム                                        ０．０１
精製水                                          全量が１００部となる量 
［Ｃ成分］
香料                                                             適量 
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００４７】
製造例１０．乳液
実施例９のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム２．０部を用いるほかは実施例９と同様にして乳液を得た。
【００４８】
実施例１１．乳液
実施例９のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム２．０部を用いるほかは実施例９と同様にして乳液を得た。
【００４９】
実施例１２．乳液
実施例９のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてアルブチン２．０部を用いるほかは実施例９と同様にして乳液を得た。
【００５０】
実施例１３．乳液
実施例９のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えて米糠抽出物加水分解物（株式会社テクノーブル製、商品名「グレイスノウ＊雪＊ＨＰ」、固形分濃度3.5％）５．０部を用いるほかは実施例９と同様にして乳液を得た。
【００５１】
実施例１４．乳液
実施例９のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えて白芥子抽出物（株式会社テクノーブル製、商品名「シナブランカ−ＷＨ」、固形分濃度1.0％）５．０部を用いるほかは実施例９と同様にして乳液を得た。
【００５２】
実施例１５．乳液
実施例９のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてγ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸１．０部を用いるほかは実施例９と同様にして乳液を得た。
【００５３】
実施例１６．プレストパウダー
［Ａ成分］                                                        部
ベンガラ                                                      ０．５
黄酸化鉄                                                      １．５
黒酸化鉄                                                      ０．１
酸化チタン                                                  １０．０
ナイロンパウダー                                              ４．０
セリサイト                                    全量が１００部となる量
マイカ                                                      ２３．０
タルク                                                      ２５．０
製造例５の抽出物粉末                                          ０．１
［Ｂ成分］
スクワラン                                                    １．０
メチルポリシロキサン                                          ４．０
プロピルパラベン                                              ０．１
デヒドロ酢酸                                                  ０．１
流動パラフィン                                                ２．０
香料                                                           適量 
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ混合攪拌し混合した後、２００メッシュのタイラーメッシュの篩にかけ、得られた混合粉末を金型に打型してプレストパウダーを得た。
【００５４】
実施例１７．リクイドファンデーション
［Ａ成分］                                                          部
ステアリン酸                                                  ２．４
モノステアリン酸プロピレングリコール                          ２．０
セトステアリルアルコール                                      ０．２
液状ラノリン                                                  ２．０
流動パラフィン                                                ３．０
ミリスチン酸イソプロピル                                      ８．５
プロピルパラベン                                            ０．０５
［Ｂ成分］
製造例２の抽出物溶液                                          ５．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム                          ０．２
ベントナイト                                                  ０．５
プロピレングリコール                                          ４．０
トリエタノールアミン                                          １．１
メチルパラベン                                                ０．１
精製水                                        全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
酸化チタン                                                    ８．０
タルク                                                        ４．０
着色顔料                                                        適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ加温した後混合攪拌した。これを再加温し、上記のＣ成分を添加して型に流し込み、室温になるまで攪拌してリキッドファンデーションを得た。
【００５５】
実施例１８．クリームファンデーション
［Ａ成分］                                                          部
ステアリン酸                                                ５．０
セタノール                                                  ２．０
モノステアリン酸グリセリル                                  ３．０
流動パラフィン                                              ５．０
スクワラン                                                  ３．０
ミリスチン酸イソプロピル                                    ８．０
ポリオキシエチレン（２０）モノステアリン酸グリセリル        ２．０
プロピルパラベン                                            ０．１
［Ｂ成分］
製造例３の抽出物溶液                                        ５．０
ソルビトール                                                ３．０
１，３−ブチレングリコール                                  ５．０
トリエタノールアミン                                        １．５
メチルパラベン                                              ０．１
精製水                                      全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
酸化チタン                                                  ８．０
タルク                                                      ２．０
カオリン                                                    ５．０
ベントナイト                                                １．０
着色顔料                                                    適  量
［Ｄ成分］
香料                                                        ０．３
Ｃ成分を混合し、粉砕機で粉砕した。Ｂ成分を混合し、これに粉砕したＣ成分を加え、コロイドミルで均一分散させた。Ａ成分及び均一分散させたＢ、Ｃ成分をそれぞれ８０℃に加温後、Ｂ、Ｃ成分にＡ成分を攪拌しながら加え、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。これを５０℃まで冷却した後、Ｄ成分を加えて攪拌混合し、さらに攪拌しながら３０℃以下まで冷却してクリームファンデーションを得た。
【００５６】
実施例１９．ボディシャンプー
［Ａ成分］                                                          部
Ｎ−ラウロイルメチルアラニンナトリウム                    ２５．０
ヤシ油脂肪酸カリウム液（４０％）                          ２６．０
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド                              ３．０
メチルパラベン                                              ０．１
［Ｂ成分］
製造例３の抽出物溶液                                        ５．０
１，３−ブチレングリコール                                  ２．０
精製水                                      全量が１００部となる量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してボディシャンプーを得た。
【００５７】
実施例２０．石けん
［Ａ成分］                                                          部
硬化ヒマシ油                                              ２６．０
ヤシ油                                                    １０．０
オリーブ油                                                  ４．０
［Ｂ成分］
水酸化ナトリウム                                            ６．０
砂糖                                                      １０．０
グリセリン                                                  ５．０
製造例５の抽出物粉末                                        ０．１
精製水                                      全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
エタノール                                                ２０．０
香料                                                          適量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加えてケン化した。これを攪拌しながら５０℃まで冷却し、Ｃ成分を加えた。これを型に流し込み冷却した後、室温下で数日間乾燥させ、充分に乾燥したものを型から取りだして石けんを得た。
【００５８】
比較例  クリーム
実施例１に於いて、製造例１のツルニンジン属植物抽出物５．０部に代えて、アルブチン２．０部を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを調製した。
【００５９】
対照例  クリーム
実施例１に於いて、製造例１のツルニンジン属植物抽出物に代えて精製水を用いるほかは実施例１と同様にしてクリームを調製した。
【００６０】
試験例１．チロシナーゼ活性直接阻害作用
マッシュルーム由来のチロシナーゼを用いて、本発明のツルニンジン属植物のチロシナーゼ活性に対する直接阻害作用を調べた。
［試験方法］
製造例２の抽出物溶液1.0mLに、マックイルベイン緩衝液0.9mL、0.03％Ｌ−チロシン溶液1.0mL及びマッシュルーム由来チロシナーゼ溶液を混合し、37℃で３０分間反応させ、波長475nmに於ける吸光度を測定した。
なお比較のため、製造例２の抽出物溶液の代わりに１mMアルブチン溶液を添加した場合（ポジティブコントロール）及び試料無添加の場合（ブランク）についても、同様の試験を実施した。
【００６１】
［試験結果］
結果を表１に示す。
【表１】
2005145888.tif 000002
【００６２】
表１の結果から本発明のツルニンジン属植物抽出物が顕著なチロシナーゼ活性直接阻害作用を有することが判る。
なお、ポジティブコントロールとして用いたアルブチンも顕著にチロシナーゼ活性を阻害したことから、試験系が正常であったことが確認された。
【００６３】
試験例２．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用
［試験方法］
培養Ｂ１６マウスメラノーマ細胞を、９６穴マイクロプレートに８×１０３個／穴播種し、１０％仔牛血清（FBS）含有イーグル最少必須培地（MEM）中、３７℃、５％ＣＯ２の条件下に１日間プレ培養した後、１０％FBS含有イーグルMEMで製造例１の抽出物溶液を２．５又は５．０％の濃度（溶液として）となるように希釈した液に置換し、同条件で２日間培養した。
次に培養液を除去し、0.3mg/mLのＭＴＴ溶液を添加するか、もしくは界面活性剤（Triton X-100）と５mMＬ−ドーパ溶液を添加して３７℃で反応を行った後、マイクロプレートリーダー（Model 450、バイオラッド社製）を用い、５７０−６３０nmでＭＴＴ値を、又波長４９０nmでドーパ値をそれぞれ測定した。
なお、比較のため、製造例１の抽出物溶液の代わりに、３mMのアルブチンを添加した場合及び試料無添加の場合（ブランク）についても、同様の試験を行った。
【００６４】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表２に示した。
【表２】
2005145888.tif 000003
【００６５】
表２の結果から、本発明のツルニンジン属植物抽出物が、細胞活性の低下を伴うことなく、細胞内チロシナーゼ活性を有意に抑制することが判る。
なお、ポジティブコントロールとして用いたアルブチンも顕著にチロシナーゼ活性を阻害したことから、試験系が正常であったことが確認された。
【００６６】
試験例３．細胞内メラニン合成抑制試験
［試験方法］
培養Ｂ１６メラノーマ細胞を、フラスコに５．０×１０５個播種し、１０％FBS含有イーグルMEM中、３７℃、５％ＣＯ２の条件下でプレ培養を行った後、１０％FBS含有イーグルMEMで製造例２の抽出物溶液を５．０％の濃度（溶液として）となるように希釈した液に交換し、同条件で３日間培養した。
次に、培養液を除去し、細胞を回収した後、0.1N NaOH含有10％DMSO溶液を加えて細胞内容物を抽出した。この抽出液について、分光光度計（U-2000、株式会社日立製）を用い波長475nmでメラニン量を、又プロテインアッセイキット（バイオラッド社製）でタンパク質量を測定した。
ここに得られた結果から、タンパク質量当たりのメラニン量を算出し、コントロールに於ける当該メラニン量を１００としたときの試料添加時の当該メラニン量の相対値をメラニン合成率として表した。
なお比較のため、製造例２の抽出物溶液の代わりに３mMアルブチン溶液を添加した場合及び試料無添加の場合（ブランク）についても、同様の試験を実施した。
【００６７】
［結果］
上記の試験で得られた結果を表３に示した。
【表３】
2005145888.tif 000004
【００６８】
表３の結果から、本発明のツルニンジン属植物抽出物が細胞内メラニン合成を有意に抑制することが判る。
なお、ポジティブコントロールとして用いたアルブチンも顕著にメラニン合成を阻害したことから、試験系が正常であったことが確認された。
【００６９】
試験例４．皮膚刺激性  
［試料］
(1)製造例１で得られた抽出物溶液を日局親水ワセリンに５％の濃度となるよ     うに練合したもの（本発明試料）
(2)日局親水ワセリン（対照）
【００７０】
［試験方法］
年齢２０〜５０歳の成人男子５名を被験者とし、各々の上腕部内側をエタノールで拭って皮脂を除去し、該部位に、フィンチャンバーのアルミ板に各試料をそれぞれ０．２ｇ宛塗布したものを貼付した。２４時間後にフィンチャンバーを除去し、皮膚刺激の程度をつぎに述べる方法並びに基準により判定した。
［判定］
パッチ除去後１時間後、２４時間後及び４８時間後に、貼付部位の紅斑及び浮腫の状況を、以下の「ドレイズ法による皮膚刺激性判定基準」に基づき目視判定し、被験者５名の平均値を求めた。
（紅斑）
スコア 皮膚の状態
０    ：  紅斑なし
１    ：  極く軽度の紅斑
２    ：  明らかな紅斑
３    ：  中程度から強い紅斑
４    ：  深紅色の強い紅斑に軽い痂皮形成
（浮腫）
スコア 皮膚の状態
０    ：  浮腫なし
１    ：  極く軽度の浮腫
２    ：  明らかな浮腫（周囲と明らかに区別可能）
３    ：  中程度の浮腫（１mm以上の盛り上がり）
４    ：  強い浮腫（さらに周囲にも広がり）
【００７１】
［結果］
結果を表４に示す。
【表４】
2005145888.tif 000005
【００７２】
表４の結果から明らかな通り、ツルニンジン属植物の抽出物は皮膚に対する刺激が殆どなく、生体安全性に極めてすぐれている。
【００７３】
試験例５  モニターテスト
実施例１、比較例及び対照例の各クリームについて、モニターテストにより皮膚色素沈着に対する抑制効果並びに皮膚刺激性を調べた。
［試験方法］
無作為に抽出した年齢１８〜５０歳の女性２０名を被験者とし、各クリームを１日２回（朝、晩）、1ヵ月間左上腕部にそれぞれ塗布し、塗布部の色素沈着の状態及び皮膚の紅斑を目視で観察し、以下の評価基準に基づいて評価した。
【００７４】
［評価基準］
（色素沈着）
Ａ：なくなった
Ｂ：明らかに少なくなった
Ｃ：いくらか少なくなった
Ｄ：殆ど変化がなかった
Ｅ：かえって多くなった
（紅斑）
Ａ：対照例と差がない
Ｂ：対照例と殆ど差がない
Ｃ：対照例に比べて多少紅斑が目立つ
Ｄ：対照例に比べて相当紅斑が目立つ
Ｅ：対照例に比べて明らかに紅斑が目立つ
【００７５】
［結果］
結果を表５に示す。
【表５】
2005145888.tif 000006
【００７６】
表５に示す通り、本発明のツルニンジン属植物抽出物を配合したクリームは、すぐれた色素沈着防止効果を具え、しかも皮膚に対する刺激が少なく安全性が高い。