(57)【要約】【課題】日常生活における抑うつ感、落ち込み感、意欲低下、興味の低下、いらいら感、不安感、注意集中の困難といった諸症状を改善することによって、軽度のうつ病もしくはうつ状態を改善し、重度のうつ病への移行を未然に防止しうる薬剤を提供する。【解決手段】マイタケを配合したことを特徴とするモノアミン再取り込み阻害剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マイタケを配合したことを特徴とするモノアミン再取り込み阻害剤。
【請求項２】
マイタケを配合したことを特徴とするノルアドレナリン再取込阻害剤。
【請求項３】
マイタケを配合したことを特徴とする、軽度のうつ病もしくはうつ状態の予防または改善剤。
【請求項４】
マイタケを配合したことを特徴とする、軽度のうつ病もしくはうつ状態の精神症状の予防または改善剤。
【請求項５】
マイタケを配合したことを特徴とする、抑うつ気分の予防または改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抑うつ感、いらいら感、意欲低下、注意集中の困難等を改善することによって、軽度のうつ病もしくはうつ状態を改善し、重度のうつ病への移行を未然に防止することができる生薬成分配合薬剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
うつ病およびうつ状態は長期間にわたる抑うつ感や憂うつ感、落ち込み感などの抑うつ気分、意欲低下、無気力感やおっくう、興味・関心の低下などの精神運動抑制、いらいら感、不安、激越、注意力の低下、集中力の低下などの思考制止等の精神症状、また、主に不眠や作業中の眠気などの睡眠障害、下痢、便秘、食欲不振などの消化器系障害、体重減少、性機能障害や性欲の低下等の身体症状によって日常生活に大きな支障を来す疾病である。近年、このような症状を呈する患者の数が増加しており、最も頻繁に罹患する精神疾患の一つとして、あるいは、代表的な現代病の一つとして認知されつつある。
【０００３】
そして、現代のようなストレス社会にあっては、重度のうつ病患者の増大もさることながら、うつ状態を呈している生活者が急増し、深刻な社会問題になっている。このうつ状態が持続すると軽度のうつ病を発症させ、やがては重度のうつ病へ移行する可能性も有している。うつ病もしくはうつ状態を発症していることを本人は自覚し難く、周囲から見ても分かり難いという傾向があり、早期の発見、治療を困難にしている。しかしながら、初期のうつ状態においても、抑うつ感、いらいら感、意欲低下、注意集中の困難等の症状を自覚していることが多く、日常生活において、これらの自覚症状の改善に努めていくことが、軽度のうつ病もしくはうつ状態の予防及び治療、引いては重度のうつ病の予防に繋がると考えられる。
【０００４】
うつ病およびうつ状態の発症機序としては多くの仮説が唱えられているが、脳内モノアミン作動性神経系の機能低下が発症に大きく関与していることが多くの研究によって明らかにされている。うつ病およびうつ状態の治療の基本は発症要因を調整しながら休養をとることであるが、実際には薬物療法が治療の中心となっており、このような薬物として低下した脳内モノアミン作動性神経系の機能を賦活化させる合成医薬品や生薬等の天然物が知られている。
【０００５】
合成医薬品としては、モノアミン酸化酵素（MAO）阻害薬、三環系抗うつ薬、四環系抗うつ薬、選択的セロトニン再取り込み阻害薬、セロトニン-ノルアドレナリン再取り込み阻害薬および可逆性MAO-A阻害薬等がある。中でも近年多く用いられている薬剤はモノアミン再取り込み阻害作用を主作用とするものである。しかし、これらの薬剤は優れた効果を有する一方、かすみ目、口渇、便秘、尿の貯留、起立性低血圧、頻脈、不整脈、鎮静作用、てんかん誘発作用、悪性症候群などの副作用も伴うので、軽度から中等度のうつ病およびうつ状態への処方には注意が必要である（非特許文献１および２参照）。
【０００６】
また、天然物としては、セイヨウオトギリソウ（Hypericum perforatum L.）が良く知られている。セイヨウオトギリソウは過去に西洋文化圏の中で医療用の植物として伝統的に使用されていたという多くの事例があり、近年軽度ないし中等度のうつ病を適応症として用いられている。しかし、薬物代謝酵素の誘導による医薬品との相互作用が問題となっている。
【０００７】
さらに、うつ病もしくはうつ状態に有効な天然物としては、ムイラプアマ（特許文献１参照）、エゾウコギ（特許文献２参照）、茯苓（特許文献３参照）、しいたけ及びしめじ（特許文献４参照）などが知られている。百合（非特許文献３参照）及び霊芝（非特許文献４参照）も、うつ状態あるいは虚労、神経衰弱症に対する薬能を有していることが知られている。
【０００８】
マイタケ（舞茸，Grifala frondosa （Fr.） S. F.Gray）は、サルノコシカケ科マイタケ属の菌類である。広葉樹の老大木の根元に群生し、幅２〜５cmで扇形〜へら形の傘が多数重なり合い押し合って集団状となり、径30cmもの大株になる。縦断すると内部は根もとの太い柄から幾重も分技を重ね、小枝の先端に小形の傘（マイタケ形）をつける。傘の表面はねずみ色〜黒褐色、下面の管孔面は白い。霊芝の肉質は非常に固く食用になりにくいが、マイタケの肉質は白くやわらかで歯切れがよいため、マイタケは一流の食用菌として店頭に並んでおり、人工栽培も盛んである。マイタケは、いろいろな地域で多食されていることから安全性は高いものと考えられる。また、近年マイタケには、抗腫瘍作用が知られており、マイタケを含む多くの健康食品も販売されている。しかし、マイタケのうつ病およびうつ症状、あるいは抑うつ気分に対する作用は報告されていない。
【０００９】
【特許文献１】特開２０００-１１９１８７
【特許文献２】特開２００２-２８４６９５
【特許文献３】特開平９-２０８４８１
【特許文献４】特開２００２-５８４５０
【非特許文献１】三浦 貞則  著「SNRIの登場とその歴史的背景」、臨床精神薬理、3（4）、星和書店、ｐ．３１１−３１８、２０００年
【非特許文献２】田島 治  著「SNRIの相互作用と副作用」、臨床精神薬理、3（4）、星和書店、ｐ．３５３−３６１1、２０００年
【非特許文献３】難波恒雄  著「和漢薬百科図鑑」１、ｐ．６８−７０、１９９３年
【非特許文献４】難波恒雄  著「和漢薬百科図鑑」２、ｐ．２４７−２５０、１９９３年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の目的は、日常生活における抑うつ感、落ち込み感、意欲低下、興味の低下、いらいら感、不安感、注意集中の困難といった諸症状を改善することによって、軽度のうつ病もしくはうつ状態を改善し、重度のうつ病への移行を未然に防止しうる薬剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは上記課題を解決するべく鋭意検討した結果、マイタケが、モノアミン再取り込み阻害作用、特に、強いノルアドレナリン再取り込み阻害作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、合成医薬と異なり、副作用が少なく、医薬品、医薬部外品、食品等の種々の形態で長期間の服用が可能なマイタケは、現代人の多くが潜在的に罹患している軽度のうつ病もしくはうつ状態の予防及び改善に極めて有効であるとの知見を得るに至った。
【００１２】
本発明の態様は以下のようになる。
（１）マイタケを配合したことを特徴とするモノアミン再取り込み阻害剤。
（２）マイタケを配合したことを特徴とするノルアドレナリン再取込阻害剤。
（３）マイタケを配合したことを特徴とする、軽度のうつ病もしくはうつ状態の予防または改善剤。（４）マイタケを配合したことを特徴とする、軽度のうつ病もしくはうつ状態の精神症状の予防または改善剤。
（５）マイタケを配合したことを特徴とする、抑うつ気分の予防または改善剤。
【発明の効果】
【００１３】
本発明により、副作用が少なく、長期間継続して服用しても安全な、抑うつ気分等の軽度のうつ病もしくはうつ状態の予防または改善用薬剤の提供が可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
マイタケは、サルノコシカケ科マイタケ属の菌類である。マイタケはそのまま摂取しても良いが、マイタケエキスとした方が効率的に摂取することができ、好ましい。エキスは、水、低級脂肪族アルコール（メタノール、エタノール、イソプロピルアルコールなど）、低級脂肪族ケトン（アセトンなど）、あるいはこれらを含む溶媒により当業者が通常行う抽出処理により容易に製造することができる。製造したエキスは、加熱処理、凍結乾燥あるいは減圧乾燥などの処理により、濃縮エキスや乾燥エキスにすることができる。
【００１５】
マイタケは、単独で使用することができるが、必要ならば発明の効果を損なわない質的および量的範囲で、任意の担体（水溶性ビタミン、脂溶性ビタミン、ビタミン誘導体、ミネラル、生薬、生薬のエキス、有機酸、補酵素）などと混合することができる。
【００１６】
本発明の阻害剤または予防もしくは改善剤は、通常使用される任意成分を含有する錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、液剤などの剤形で経口により投与することができる。任意配合成分としては、例えば、賦形剤、結合剤、被覆剤、滑沢剤、糖衣剤、崩壊剤、増量剤、矯味矯臭剤、乳化・可溶化・分散剤、安定剤、ｐＨ調製剤、等張剤などがあげられる。これらを常法に従って処理することにより、本発明の阻害剤等を製造することができる。
【００１７】
軽度のうつ病もしくはうつ状態の予防または改善剤として使用する場合のマイタケの投与量は、年齢、性別、体重などによって異なるが、通常、原生薬換算で成人１日あたり約50mg〜500000mg、好ましくは500mg〜50000mgである。
【００１８】
「剤」には、医薬品のみならず、医薬部外品、食品等も含まれる。
【実施例】
【００１９】
以下に実施例および試験例を挙げ、本発明をさらに具体的に説明する。
【００２０】
（実施例１）
中華人民共和国浙江省を産地とするマイタケ  Grifala frondosa （Fr.） S. F.Gray よりなるマイタケ乾燥物100質量部に対し、50％エタノール溶液1000質量部を加えて抽出した後、エタノールを留去した。さらに、減圧濃縮を行うことにより、エキスを得た。  
上記抽出処理により得たエキスは、エキス収率22.32％、乾燥減量30.8％、原生薬対比3.1であった。
【００２１】
（実施例２）
新潟県を生産地とするマイタケ乾燥物を用いて熱アルコール水によりエキス抽出を行い、粉末状に加工したエキスを得た。上記抽出処理により得たエキスは、原生薬対比3.0であった。
【００２２】
（試験例１）
実施例１で得られたマイタケエキスについて、下記の試験法によりモノアミン再取り込み阻害活性を評価する試験を行った。
【００２３】
（１）粗シナプトソームの調製
７〜10週齢の雄性Crj：CD (SD) IGSラット（日本チャールス・リバー株式会社）の脳を摘出した後、氷冷条件下にて、前頭皮質、視床下部および線条体を素早く分割した。氷冷条件下にて各脳部位より血管を除去した後、それぞれ0.32mol/Lスクロースにてホモジナイズし、1000×g、４℃条件下の遠心分離により粗核画分を分離した。得られた上清より、20000×g、４℃条件下の遠心分離により粗シナプトソームを調製した（用時調整）。
【００２４】
（２）緩衝液の調整
ドパミンおよびセロトニン再取り込み阻害反応試験に用いる緩衝液は、118mmol/LのNaCl、4.7mmol/LのKCl、1.2mmol/LのMgSO4、1.2mmol/LのKH2PO4、25.0mmol/LのNaHCO3、1.27mmol/LのCaCl2、11.0mmol/Lのグルコース、0.1mmol/Lのパージリン、1.14mmol/Lのアスコルビン酸、0.067mmol/LのEDTA2Naをモノアミン再取り込み阻害反応試験時に最終反応濃度となるように調製した。ノルアドレナリン再取り込み阻害反応試験に用いる緩衝液は、119mmol/LのNaCl、4.8mmol/LのKCl、1.2mmol/LのMgSO4、2.0mmol/LのCaCl2、10.0mmol/Lのグルコース、0.1mmol/Lのパージリン、5.68mmol/Lのアスコルビン酸、25mmol/LのTrisをモノアミン再取り込み阻害反応試験時に最終反応濃度となるように調製した。緩衝液は氷冷条件下にて、95％酸素および5％二酸化炭素混合ガスを通気した（用時調製）。
【００２５】
（３）粗シナプトソーム標本の調製
粗シナプトソーム標本は、前頭皮質、視床下部および線条体より調製された粗シナプトソームを、モノアミン再取り込み阻害反応試験時に湿組織重量換算として400〜800倍になるように緩衝液にて希釈し、調製した（用時調製）。
【００２６】
（４）取り込み測定用［3H］標識モノアミン溶液の調製
［3H］ノルアドレナリン、［3H］ドパミン、［3H］セロトニン溶液は、モノアミン再取り込み阻害反応試験時に5nmol/Lの濃度になるように緩衝液にて希釈し、調製した（用時調製）。
【００２７】
（５）エキス溶液の調製
エキスは、エキス製造実施例１にて製造したマイタケエキスを用い、乾燥原生薬重量換算として初回25g/Lの濃度に成るように25％DMSO溶液に溶解した。その後、モノアミン再取り込み阻害反応試験時に0.25v/v％のDMSO、10mg/L、30mg/L、100mg/Lの最終濃度になるように希釈した。
【００２８】
（６）モノアミン再取り込み阻害反応試験
マイクロチューブに50μLのエキス溶液および350μLの粗シナプトソーム標本を添加し、混和した後に、25℃、15分間の前反応処置を行った。その後、100μLの［3H］標識モノアミン溶液を添加し、25℃、２時間の反応処置を行った。総取り込み量を算出するために、エキス溶液を添加せず、緩衝液を添加したマイクロチューブを用意した。非特異的取り込み量を算出するために、エキスあるいは緩衝液を添加せず、ノルアドレナリン再取り込み阻害反応時には最終濃度１μmol/Lになるようにデシプラミン塩酸塩を、セロトニン再取り込み阻害反応時には最終濃度10μmol/Lになるようにクロミプラミン塩酸塩を、ドパミン再取り込み阻害反応時には最終濃度10μmol/Lになるようにドパミン塩酸塩を添加したマイクロチューブを用意した。さらに、ノルアドレナリン再取り込み阻害反応試験では、エキスおよびデシプラミンの両溶液を添加したマイクロチューブを用意した。各濃度３点測定にて反応試験を行うために、同内容のマイクロチューブを３本用意した。
【００２９】
（７）［3H］標識モノアミン取り込み量の測定
上記の反応後、速やかに0.3v/v%ポリエチレンイミンに湿潤したガラス濾紙を用いて、吸引ろ過した。濾紙は0.9w/v% NaClよりなる生理食塩水1mLを用いて、２回洗浄し、45〜50℃にて60分以上乾燥した。濾紙上の［3H］標識モノアミンの放射活性は常法の液体シンチレーションおよびシンチレーションカウンターを用いて測定した。
【００３０】
（８）モノアミン再取り込み阻害率（％）の算出
総取り込み量から非特異的取り込み量を差し引き、特異的取り込み量とした。エキスのモノアミン再取り込み阻害率は、エキス添加による特異的取り込み量の減少率を阻害率とした。試験結果を表１に示す。
【００３１】
【表１】
2005325096.tif 000002
【００３２】
（試験例２）
実施例1で得られたマイタケエキスについて、下記の試験法によりマウス強制水泳試験における抗うつ作用を評価した。
【００３３】
（１）使用動物
試験時に６〜９週齢の雄性Crj : CD-1 (ICR) マウス（日本チャールス・リバー株式会社）を用いた。動物は、入手日を含めて少なくとも５日以上、飼料、水分自由摂取条件下にて、飼育した。飼育条件は室温23±3℃、湿度50±20%、照明時間12時間、換気回数10回以上/時間、８〜12匹/ケージとした。
【００３４】
（２）エキス溶液の調製
エキス溶液は、実施例1にて製造したマイタケエキスを用い、乾燥原生薬重量換算として初回6.4g/10mLの濃度に成るように1w/v％POE(60)硬化ヒマシ油（ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油-60）水溶液に懸濁した。その後、1.6g/10mLおよび3.2g/10mLの濃度になるように希釈し、調製した。
【００３５】
（３）マウス強制水泳試験
マウス強制水泳試験では、動物のうつ状態を無動化時間として表す。従って、無動時間が延長した場合はうつ状態を惹起あるいは悪化したと判断し、無動時間を短縮した場合は改善あるいは予防したと判断する。また、この無動化時間はノルアドレナリン再取り込み阻害作用を有する抗うつ薬によって抑制されることが広く知られている（Willner P.:Animal models of depression: an overview、Pharmacol.Ther.、45(3)、425-455、1990参照）。
【００３６】
強制水泳試験は２回の強制水泳負荷により構成される。強制水泳負荷は、25℃の水を水深11cmまで注いだ直径13cmの円形水槽にマウスを入水させることにより実施する。マウスの無動化行動の発現有無を判断し、強制水泳負荷開始の１分後から６分後までの５分間の無動化時間を測定した。１回目の強制水泳負荷時の無動化時間により、各処置群の平均無動化時間が均一になるように群分けを実施した。群分け実施後、エキス溶液を１日１回、12日間、明期に経口投与した。２回目の強制水泳負荷は、最終エキス投与の１時間後に実施した。２回目の強制水泳負荷時の５分間における無動化時間を有意に短縮した場合に、抗うつ作用ありと判断した。１群あたりの例数（匹数）は12例とし、試験結果は平均値（標準誤差）で表示した。有意差検定はStudentのｔ-検定を用い、危険率５％未満（P<0.05）にて有意とした。マウスの強制水泳試験における無動化時間に対する作用結果を表２に示す。なお、表中「＊」はp<0.05 対0g/kg投与群（未投与群）を示す。
【００３７】
【表２】
2005325096.tif 000003
【００３８】
（試験例３）
実施例２で得られたマイタケ乾燥エキスについて、下記の試験法によりラット強制水泳試験における抗うつ作用を評価した。
【００３９】
（１）使用動物
試験時に８週齢の雄性Slc :Wistar ラット（日本エスエルシー株式会社）を用いた。動物は、入手日を含めて少なくとも５日以上、飼料、水分自由摂取条件下にて、飼育した。飼育条件は室温23±3℃、湿度50±20%、照明時間12時間、換気回数10回以上/時間、４匹/ケージとした。
【００４０】
（２）エキス溶液の調製
エキス溶液は、実施例２にて得られたマイタケ乾燥エキスを用い、乾燥原生薬重量換算として初回9.6 g/10mLの濃度に成るように1w/v％POE(60)硬化ヒマシ油（ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油-60）水溶液に懸濁した。その後、3.2 g/10mLおよび6.4 g/10mLの濃度になるように希釈し、調製した。
【００４１】
（３）ラット強制水泳試験
マウス強制水泳試験方法と同様に、ラット強制水泳試験も２回の強制水泳負荷により構成される。強制水泳負荷は、25℃の水を水深25cmまで注いだ直径30cmの円形水槽にラットを入水させることにより実施した。１回目の強制水泳負荷後、エキス溶液を１日１回、５日間、明期に経口投与した。２回目の強制水泳負荷は、最終エキス投与の１時間後に実施した。２回目の強制水泳負荷時の５分間における無動化時間を有意に短縮した場合に、抗うつ作用ありと判断した。１群あたりの例数（匹数）は16または18例とし、試験結果は平均値（標準誤差）で表示した。有意差検定はStudentのｔ-検定を用い、危険率５％未満（P<0.05）にて有意とした。ラットの強制水泳試験における無動化時間に対する作用結果を表３に示す。なお、表中「＊」はp<0.05 対0g/kg投与群（未投与群）を示す。
【００４２】
【表３】
2005325096.tif 000004
【００４３】
試験例１より、マイタケは強いモノアミン再取り込み阻害作用を示した。また、試験例２より、マウス強制水泳試験における無動化時間をマイタケエキスは有意に短縮した。さらに、試験例３より、ラット強制水泳試験における無動化時間をマイタケ乾燥エキスは有意に短縮した。
【００４４】
以上の結果から、マイタケは、軽度のうつ病もしくはうつ状態の予防または改善に有効であることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００４５】
本発明により、軽度のうつ病もしくはうつ状態の予防または改善に有効な医薬品、医薬部外品および食品の提供が期待される。