(57)【要約】      （修正有）【課題】新規な抗腫瘍剤を提供すること。【解決手段】ドコサペンタエン酸（DPA）を含有する抗腫瘍剤。特に、癌免疫療法剤との併用において高い有用性がある。すなわち、ドコサペンタエン酸を７％以上含有するハープシールオイル〔ドコペン商品名（製造元：株式会社アヴ・オヴォ、発売元：株式会社仁丹ファインケミカル）〕が有用な抗腫瘍剤であり、さらに癌免疫療法剤であるIL-12産生誘導剤、例えば、β−１，３／１，６グルカン構造を有する物質との併用で極めて有用な抗腫瘍剤になる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドコサペンタエン酸を含有する抗腫瘍剤。
【請求項２】
ドコサペンタエン酸を７％以上含有するハープシールオイルである請求項１の抗腫瘍剤。
【請求項３】
ドコペン商品名である請求項２の抗腫瘍剤。
【請求項４】
経口投与される請求項１〜３の何れか一に記載の抗腫瘍剤。
【請求項５】
癌免疫療法剤と併用される請求項１〜４のいずれか一に記載の抗腫瘍剤。  
【請求項６】
癌免疫療法剤が、IL-12産生誘導剤である請求項５に記載の抗腫瘍剤。
【請求項７】
IL-12産生誘導剤が、β1,3/1,6グルカン構造を有する物質である請求項６に記載の抗腫瘍剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌治療の新たな手段を提供するものである。すなわち、新規な抗腫瘍剤を提供するものである。
【背景技術】
【０００２】
本発明者の医学博士八木田は、先にガン治療における画期的な手法として、インターロイキン１２（IL-12）を生体内で誘発する物質の有用性に着目し、キノコ菌糸体加工物がその機能を有することを発見し、新免疫療法（Novel Immunotherapy for cancer）（NITC）ともいうべきガン治療法を確立した。従来IL-12は、抗ガン効果があるものの生体内にIL-12自体を直接投与した場合には副作用を生じるために患者が治療に耐えられないという事実があり、それ自体を抗ガン剤として使用できなかった。しかし、八木田が報告したキノコ菌糸体加工物を含む製剤は、ガンの治療において著しい治癒・延命効果を達成した。つまり八木田は、IL-12を生体内で誘発できる有効量のキノコ菌糸体加工物を投与することにより、ガンの治療目的を達成した（特許文献１）。  
【０００３】
IL-12は、TNFα→IFNγ→IL-12→CTL活性というルートでキラーＴ細胞の活性化効果と増強効果をもつ。つまりIL-12の産生増強は、キラーＴ細胞の活性化と増強により抗ガン効果が期待される。  
【０００４】
ドコサペンタエン酸（DPA）を含有する組成物は、血管新生抑制作用を有することは知られている。特に、タテゴトアザラシから採れたハープシールオイル製剤であるドコペン商品名（製造元：株式会社アヴ・オヴォ、発売元：株式会社仁丹ファインケミカル）はDPAを約７％以上含むように調製されたオイルとして知られている（特許文献３）。そしてこのものが血管新生抑制作用をもつことは知られている（特許文献２）  
【０００５】
【特許文献１】特開平１０−１３９６７０号公報
【特許文献２】特開２００２−３０８７６５号公報
【特許文献３】特開２００２−０８０８８７号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、新規な抗腫瘍剤を提供することを課題とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、公知のドコサペンタエン酸（DPA）を含有する組成物、特にドコペン商品名に極めて高い抗腫瘍活性があること、特に癌免疫療法剤との併用において高い有用性を見出し本発明を完成した。  
【０００８】
すなわち本発明は、「１．ドコサペンタエン酸を含有する抗腫瘍剤。２．ドコサペンタエン酸を７％以上含有するハープシールオイルである請求項１の抗腫瘍剤。  ３．ドコペン商品名である前項２の抗腫瘍剤。４．経口投与される前項１〜３の何れか一に記載の抗腫瘍剤。５．癌免疫療法剤と併用される前項１〜４のいずれか一に記載の抗腫瘍剤。６．癌免疫療法剤が、IL-12産生誘導剤である前項５に記載の抗腫瘍剤。７．IL-12産生誘導剤が、β1,3/1,6グルカン構造を有する物質である前項６に記載の抗腫瘍剤。」からなる。
【発明の効果】
【０００９】
本発明では、公知のドコサペンタエン酸（DPA）を含有する組成物、特にドコペン商品名に極めて高い抗腫瘍活性があること、特に癌免疫療法剤との併用において高い臨床的成果を達成した。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、本発明を詳しく説明するが、本明細書中で使用されている技術的および科学的用語は、別途定義されていない限り、本発明の属する技術分野において通常の知識を有する者により普通に理解される意味を持つ。  
【００１１】
本発明者の医学博士八木田のガン新免疫療法（NITC)とは４つの異なる作用機序を組み合わせることからなる治療手段である。  第１の作用機序は、血管新生阻害物質（ベターシャーク等）を投与してガンへの血流を障害してガン縮小をはかる方法である。これは血管内皮細胞増殖因子（VEGF）を測定することでその効果は判定が可能である。血管新生阻害作用はVEGF値のマイナス（負）値（-VEGF）で評価できる。このVEGF値の代わりにFGF、HGFなどのその他の血管増殖因子を用いることも血管新生阻害能を評価することが可能である。またVEGFの替わりに血管新生阻害因子の正数値でもその評価が可能である（例えばエンドスタチン値）。本発明のドコサペンタエン酸（DPA）を含有する組成物にも血管新生阻害作用を有しており、この機能を生かしてNITCにおいて、ベターシャークと併用あるいはベターシャークの代わりに本発明のドコサペンタエン酸（DPA）を含有より好ましくは７％以上含有する組成物を使うことは可能である。  
【００１２】
第２の作用機序は、β1,3グルカン構造を担持する化合物を投与してTh1サイトカイン(TNFα、IFNγ、IL-12)を誘導してCTLを活性化する方法である。CTL活性はCD8(+)パーフォリン産生能力で判定が可能であるが、このCD8(+)パーフォリン値には細胞障害性T細胞(CTL)と免疫抑制性T細胞(STC; Suppressor T cell)とがあり、前者はガン細胞を障害し、後者の活性化は結果的にガンの増殖につながる。したがってその絶体値では評価はできない。しかし前者はIFNγが10 IU/ml以上か、もしくはIL-12値が7.8 pg/ml以上であればCTLであり、IFNγとIL-12が低値であればSTCと判定される。そこでCTL活性は、IFNγ産生能力（IFNγ値）もしくはIL-12産生能力(IL-12値)で評価が可能である。  
【００１３】
第３及び第４の作用機序であるα1,3グルカン構造を担持する化合物の投与によって活性化されるeffector細胞はNK細胞とNKT細胞である。このNKとNKT細胞とはNKR-P1(NK細胞受容体CD161(+))を共有しており、前者はCD3(-)CD161(+)の表面マーカーでNK細胞数は測定可能であり、その活性化はCD3(-)CD161(+)パーフォリン産生能力で判定が可能である。一方後者のNKT細胞はCD3(+)CD161(+)でその細胞数は測定が可能となり、そのパーフォリン産生能力（NKTP(+)と記す）でNKT細胞の活性化は測定可能である。
【００１４】
したがってガン治療における新免疫療法（NITC）であっても一般的な免疫療法であっても以下の測定項目でそれぞれのeffector細胞もしくは血管新生阻害作用を評価することが可能である。具体的には、CTL活性はIFNγあるいはIL-12の産生誘導能力で評価が可能である。NK細胞の活性化はCD3(-)CD161(+)もしくはCD3(-)CD161(+)パーフォリン値でも評価可能である。NKT細胞の活性化はCD3(+)CD161(+)もしくはCD3(+)CD161(+)パーフォリン値（NKTP値）でも評価が可能である。  
【００１５】
本発明は、上記の新免疫療法において有用な新規な抗腫瘍剤を提供するものである。新規な抗腫瘍剤は、ドコサペンタエン酸（DPA）を含有する組成物が利用でき、例えばこの組成物はドコサペンタエン酸を７％以上含有するハープシールオイルが好適に例示される。このように高度にDPAを含有する製剤としてはドコペン商品名（製造元：株式会社アヴ・オヴォ、発売元：株式会社仁丹ファインケミカル）が例示される。その調製方法は、上記特許文献２及び３が援用される。この組成物は経口投与されることが好ましい。投与量は、ドコサペンタエン酸を７％以上含有するハープシールオイル、特にドコペン商品名として約１ｇ〜１０ｇ／日程度、好ましくは３ｇ〜６ｇ／日程度である。また、投与期は一般的には１０日間〜２４ヶ月間、投与頻度は隔日又は１〜３回／日で、好ましくは連日投与である。ハープシールオイル以外にも、DPAを含有する組成物は、適宜、本発明の抗腫瘍剤として利用可能である。このような用法用量において、ドコサペンタエン酸（DPA）を含有より好ましくは７％以上含有する組成物は、抗腫瘍剤として単独でも有効である。
【００１６】
本発明では、上記ドコサペンタエン酸（DPA）を含有より好ましくは７％以上含有する組成物と癌免疫療法剤を併用使用することがより好ましい。癌免疫療法剤としては、IL-12産生誘導剤との併用は極めて好ましい。IL-12産生誘導剤は、例えば、β1,3グルカン構造を持つ茸菌糸体組成物製剤（例えばILX商品名：東西医薬研究所、ILY商品名：セイシン企業）、或はβ1,3グルカン構造を持つ各種酵母（海洋性酵母、パン酵母、NBGTM）、及びクレスチン等が利用できる。この中で、特に海洋性酵母が好ましい。本発明で使用するIL-12産生誘導剤はその産生誘導活性を誘導または増強し、さらに活性化を維持できる処方にて用いられる。すなわち、その活性化を誘導または増強し、さらに活性化を維持できる投与量、ならびに投与期間を選択して用いられる。具体的には、その投与量は、CTL活性化剤（IL-12産生誘導剤、INFγ産生誘導剤）であるβ-1,3グルカン構造を持つ化合物は１ｇ〜１０ｇ／日程度、好ましくは３ｇ〜６ｇ／日程度である。また、投与期は一般的には１０日間〜２４ヶ月間、投与頻度は隔日又は１〜３回／日で、好ましくは連日投与である。当該CTL活性化剤（IL-12産生誘導剤、INFγ産生誘導剤）は、好適には経口摂取される。  
【００１７】
本発明では、さらにチロシンキナーゼ阻害剤との併用が可能である。チロシンキナーゼ阻害剤の具体例は、ZD1839（イレッサ商品名）又はSTI571（グリベック商品名）を例示できるが、各種チロシンキナーゼ阻害剤が有効に利用できる。それらは標的分子として、HER2/neu、HER3、HER4、c-kit、PDGFR、bcr-abl、EGFR等が例示される。最も効果的な分子はEGFR又はc-kitである。チロシンキナーゼ阻害剤の投与量は、各分子標的化合物の推奨投与量に従うが、10〜500ｍｇ/日の経口投与がおこなわれる。
【００１８】
本発明では、癌免疫療法剤として、IL-12産生誘導剤に加えて、NK活性化剤又はNKT活性剤の併用が可能である。ニゲロオリゴ糖、フコイダン等のα1,3グルカン構造を持つ化合物の組成物製剤がNK活性化剤又はNKT活性剤として有用である。α1,3グルカン構造を持つ化合物は種々知られており、この既知構造とCD3（-）CD161（+）、CD3（-）CD161（+）パーフォリン産生能、CD3（+）CD161（+）、CD3（+）CD161（+）パーフォリン産生能の測定を組み合わせれば当業者は容易にNK活性化剤を特定可能である。なお、CD3（+）CD161（+）はNKT細胞の受容体NKR-P1に作用することを意味する。
【００１９】
本発明のドコサペンタエン酸（DPA）を含有する組成物、特にドコペン商品名又はその癌免疫療法剤との併用は、その適用法を選別することで肺ガン（肺扁平上皮ガン、肺腺ガン、小細胞肺ガン）、胸腺腫、甲状腺ガン、前立腺ガン、腎ガン、膀胱ガン、結腸ガン、直腸ガン、食道ガン、盲腸ガン、尿管ガン、乳ガン、子宮頸ガン、脳ガン、舌ガン、咽頭ガン、鼻腔ガン、喉頭ガン、胃ガン、肝ガン、胆管ガン、精巣ガン、卵巣ガン、子宮体ガン、転移性骨ガン、悪性黒色腫、骨肉腫、悪性リンパ腫、形質細胞腫、脂肪肉腫等の治療に有効である。
【００２０】
抗ガン（化学療法）剤、放射線、あるいはステロイド併用療法を、本発明の併用に加えて行う場合には、2種類の免疫系のうち、TNFα→IFNγ→IL-12→キラーT細胞の系統が著しく障害される。そのためこれらは本発明では用いないことが好ましい。但し抗ガン剤を投与するとき、上記の免疫系を障害しない投与法である低濃度化学療法すなわち５ＦＵ、ＵＦＴ、ミフロール、フルツロン、ＣＤＤＰ（5μg〜10μg）の低濃度やタキソテールあるいはタキソール、アドリアマイシン、マイトマイシン、ＣＰＴ−１１などの低濃度抗ガン剤の投与法等を適用することは有用である。また同様に放射線療法において低容量照射の適用、ステロイド療法においても低濃度投与等を選択する必要がある。
【実施例】
【００２１】
以下に、実施例を用いて本発明を具体的に説明するが、本発明は本実施例に限定されるものではない。
【００２２】
実施例１．マウスによる腫瘍増殖抑制試験
腫瘍細胞（Sarcoma-180）1x106個をICRマウスを1群9〜10匹で6群の背部皮下に移植し、その直後からドコサペンタエン酸を７％以上含有するハープシールオイル〔ドコペン商品名（製造元：株式会社アヴ・オヴォ、発売元：株式会社仁丹ファインケミカル）〕（500mg/kgと1000mg/kg）、クレスチン商品名（500mg/kg）およびそれらを併用したものを1日1回連続20日間経口投与した。コントロール群として何も投与しないで20日間飼育群を設定した。27日目にと殺して腫瘍重量を測定し、平均腫瘍重量よりコントロール群に対する腫瘍増殖抑制率（％）を算出した。
結果を表に示した。ドコペン商品名とクレスチン商品名は単独では５０％前後の抑制率を示したが、この両者を併用投与した群のうち、ドコペン商品名1000mg/kg群では62.7％、ドコペン商品名500mg/kg群では59.3%と有意な抑制作用を示した（P<0.05）。
以上のように、ドコペン商品名単独でも腫瘍抑制効果が認められるが、免疫賦活剤のクレスチンと併用することによってさらにその抑制効果が高まることが明らかとなった。同様の効果は、ILX商品名、ILY商品名、イミュトール（NBG）商品名及び海洋性酵母製剤でも確認できた。
【表１】
2005213229.tif 000002
【００２３】
実施例２．マウスによる腫瘍新生血管抑制作用試験
ドーサル・エア・サック（dorsal air sac）法により試験した。径５ｍｍのプラスチックリングの両面に、ミリポアフィルターをはり、その中に1x106個のMH-134腫瘍細胞を培養液とともに注入してチャンバーを作成した。マウス1群6匹に分け、マウス背部皮下にこのチャンバーを挿入した。
１群のマウスに4日間、ドコサペンタエン酸を７％以上含有するハープシールオイル〔ドコペン商品名（製造元：株式会社アヴ・オヴォ、発売元：株式会社仁丹ファインケミカル）〕1000mg/kgを経口投与し、5日目に新生血管の阻害程度を評価した。もう1群には、コントロールとしてドコペン商品名を全く投与せずに経過させて5日目に同様に阻害程度を評価した。
腫瘍からの新生血管促進物質がミリポアフィルターを透過するごとにチャンバーに接した面に新生血管が増生して観察される。この腫瘍の新生血管はラセン状を呈している。この新生血管の増生の阻害程度を、以下の評価基準に従って評価した。
（＋＋）3点：新生血管の増生が著明である
（＋）2点：新生血管が増生している
（±）1点：新生血管がやや増生している
（―）0点：新生血管の増生が全く認められない
また、抑制率は、コントロール群に対するスコアの減少率（％）で表した。
表に示したように、ドコペン商品名はコントロールに比べて25.1%の抑制率を示した。この結果から、ドコペン商品名に腫瘍新生血管阻害作用があることが明らかとなった。
【表２】
2005213229.tif 000003