(57)【要約】【課題】  優れた育毛・養毛効果および脱毛予防効果を発揮し、安全に使用できる育毛剤を提供する。【解決手段】  繊維芽細胞増殖因子５（ＦＧＦ−５）作用は、毛母細胞において毛の成長を阻害し毛周期を成長期から退行期へ移行させる作用を有する。エピガロカテキン、エピガロカテキンガレート、あるいはこれらを含む植物抽出物、好ましくは茶から水または水以外の溶媒による抽出で得られた抽出物には、そうしたＦＧＦ-５作用を阻害する活性がある。したがって、エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートまたはそれらを含む植物抽出物を1種以上含有する育毛剤は、毛母細胞の増殖を維持し、直接的に毛の成長を促進する作用する成分を含有するために、ＦＧＦ−５による毛周期制御に立脚して優れた育毛・養毛効果を発揮する。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
エピガロカテキンまたはエピガロカテキンガレートを含み、繊維芽細胞増殖因子５（ＦＧＦ−５）の作用を阻害する活性を示すことを特徴とする植物抽出物。
【請求項２】
茶を水または水以外の溶媒で抽出することにより得られる、請求項１に記載の植物抽出物。
【請求項３】
エピガロカテキンまたはエピガロカテキンガレートを有効成分として含有することを特徴とする育毛剤。
【請求項４】
請求項１または２に記載の植物抽出物を含むことを特徴とする育毛剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エピガロカテキンもしくはエピガロカテキンガレートを含有する育毛剤に関し、さらにエピガロカテキンまたはエピガロカテキンガレートを含み、繊維芽細胞増殖因子５（ＦＧＦ−５）の作用を阻害する活性を示す植物抽出物、ならびにこれを含有する育毛剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、開発されてきた育毛・養毛剤の多くは、発毛を阻害する過剰皮脂分泌を抑制したり、頭皮などの血行不良を解消したり、あるいは男性ホルモンの作用を抑制することにより発毛を促すことを狙いとしている。他方、マツエキスに見られるように古来より植物由来の発育毛剤が存在しており、その育毛作用の実体は詳らかでないが、民間療法において使用されてきた。このように多数の育毛・養毛剤が存在しているが、薄毛・脱毛の種類による効果の個人差も大きいためか、薄毛・脱毛に対して普遍的に効果を示すものは今のところ存在しない。
【０００３】
新規の育毛・養毛剤成分として育毛・養毛効果を有する物質の探索が今も精力的になされてきているが、真に実効性のある新規物質は、容易には見出されない。このような現状から、高齢化と多ストレスの社会を反映して薄毛・脱毛に対し、普遍的に効果を発揮する育毛・養毛剤のニーズは、依然として、また今後とも高いと言える。
【０００４】
ところで毛は一定の速さで絶えず成長するのではなく、成長期と休止期を繰返しながら成長する。成長期から休止期までの毛の成長と脱毛のサイクル（毛周期）は、身体部位および人間の場合には毛1本ごとに相違する。毛母細胞の毛周期に影響を与える物質の一つ
である変換成長因子（ＴＧＦ）βは、毛周期を成長期から退行期、休止期へ移行させる作用を示す。その作用を抑制するアンタゴニストが見出され、新規な育毛成分として提案されている。
【０００５】
本発明者らは、上記ＴＧＦβとは異なるサイトカイン、繊維芽細胞増殖因子５（以下、「ＦＧＦ−５」ともいう。）の生物活性にも毛周期の制御があることを見出した。ＦＧＦ−５タンパク質は、多彩な生理作用を示す繊維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）ファミリーに属する。本発明者らの研究により、ＦＧＦ−５は、毛の成長を阻害し、毛周期を成長期から退行期へ移行させる作用を有していることが明らかとなった。成長期の毛胞に大量に発現するＦＧＦ−５Ｓ（ＦＧＦ−５の短鎖形分子）は、ＦＧＦ−５に対しアンタゴニスト活性を示すことにより、成長期から退行期への移行を遅らせ、毛成長を促進することも明らかとなった（非特許文献1〜4参照）。本願出願人は、これまでに線維芽細胞成長因子５を動物に投与することにより、投与部位において毛周期異常が誘発されて脱毛症モデルとなりうることを見出だして、この発見に基づく脱毛症モデルを提案している（特許文献１）。
【特許文献１】特開２００１−３４３３８３号公報
【非特許文献１】Ozawa K, Suzuki S, Asada Mら J.Biol.Chem. 273:29262-29271 (1998)
【非特許文献２】Suzuki S, Kato T, Takimoto Hら J. Invest. Dermatol．111：963-972（1998）
【非特許文献３】Suzuki S, Ota Y, Ozawa K, Imamura T  J.Invest. Dermatol. 114: 456-463 (2000)
【非特許文献４】Ota Y, Saitoh Y, Suzuki SらBiochem. Biophys. Res. Commun. 290: 169-176(2002)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明者らは、ＦＧＦ−５作用の研究過程で、この作用を阻害する活性を持つ物質が優れた効果を発揮する育毛剤として利用できるとの着想を得て、毛成長に抑制的に働くＦＧＦ−５作用に対し、阻害作用を有するか、またはアンタゴニストとなる物質を見出すべく、鋭意研究を進めた。その結果、本発明者らはエピガロカテキン、エピガロカテキンガレートがその目的に合致する物質であることを見出して、本発明を完成した。
【０００７】
本発明は、有効成分としてＦＧＦ−５阻害作用を有するエピガロカテキン、エピガロカテキンガレートを含有する育毛剤、あるいはこれらの有効成分を含み、低刺激性で副作用の少ない育毛剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の植物抽出物は、エピガロカテキンまたはエピガロカテキンガレートを含み、ＦＧＦ−５の作用を阻害する活性を示すことを特徴としている。
上記の植物抽出物は、好ましくは茶を水または水以外の溶媒で抽出することにより得られる抽出物である。
【０００９】
本発明の育毛剤は、エピガロカテキンまたはエピガロカテキンガレートを有効成分として含有することを特徴としている。
さらに上記の植物抽出物を含むことを特徴とする育毛剤も本発明に含まれる。
【発明の効果】
【００１０】
ＦＧＦ−５は、毛母細胞において、毛の成長を阻害し毛周期を成長期から退行期へ移行させる作用を有する。かかるＦＧＦ−５の作用をエピガロカテキンまたはエピガロカテキンガレートは阻害する。本発明の植物抽出物を含有する育毛剤は、毛母細胞増殖に直接的に作用する成分として、エピガロカテキンまたはエピガロカテキンガレートを含有するために、優れた育毛・養毛効果および脱毛予防効果を発揮する。その有効成分が植物からの抽出物であるため、安全に使用できてほとんど副作用がない。
【００１１】
〔発明の具体的説明〕
本発明に係る植物抽出物は、エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートを含む植物抽出物であり、好ましくは茶を水または水以外の溶媒で抽出して得られる抽出物であり、ＦＧＦ−５作用を阻害する活性を有することを特徴としている。このような抽出物は、育毛剤に配合すれば発育毛効果が発揮される。
【００１２】
発毛サイクルにおけるＦＧＦ−５の役割
本発明者らの研究により、ＦＧＦ−５は、毛の成長を阻害し、毛周期を成長期から退行期へ移行させる作用を有していることが初めて明らかとなった。一方、毛包の根元にある毛乳頭は、毛母細胞の増殖や分化を調節することにより毛の成長を制御している。退行期になると毛母細胞は消失してしまうが、毛乳頭細胞は活動が低下するもののその数は減らない。次の成長期には、毛乳頭細胞が再び活性化し、その作用によって毛母細胞が新たに増殖・分化し始める。毛乳頭細胞そのものは変わっていないため、前の成長期と同じ太さの毛を作ることができる。したがって、成長期から退行期・休止期に移る引き金の役割を担っているＦＧＦ−５の作用を何らかの方法で抑制すれば、成長期だけが延長される。成長期をこのように長くする物質は、優れた育毛・養毛効果を発揮すると期待される。そうした物質、またはこれを含有する植物抽出物などはＦＧＦ-５の毛周期異常を誘発する作
用を抑制すること、すなわち育毛・養毛効果を有することとなる。
【００１３】
実際、成長期の毛胞に大量に発現するＦＧＦ−５の短鎖形分子であるＦＧＦ−５Ｓは、
ＦＧＦ−５に対しアンタゴニスト活性を示すことにより、成長期から退行期への移行を遅らせ、毛成長を促進することが報告されている。本発明者らは、さらに研究を進め、植物または海藻類から得られる抽出物がＦＧＦ−５作用を阻害する活性を有することを見出した。後述するように、その抽出物による阻害作用は、培養細胞を用いて、ＦＧＦ−５による細胞増殖促進作用に対する抑制を調べることによって確認された。
【００１４】
茶、エイジツなどの植物抽出物には、ＦＧＦ−５Ｓに似たアンタゴニスト活性を持つ1
種または複数の物質が含まれるか、あるいはＦＧＦ−５に直接阻害作用を及ぼす阻害物質が存在するかもしれない。このような抽出物によるＦＧＦ−５阻害の機作および活性物質の実体は、今後の研究結果に待たねばならないが、次に述べるエピガロカテキン、エピガロカテキンガレートもその候補物質である。
【００１５】
繊維芽細胞増殖因子５（ＦＧＦ−５）の阻害物質
エピガロカテキン（epigallocatechin）、エピガロカテキンガレート（epigallocatechin gallate）は、ＦＧＦ−５の上記作用を阻害する活性を有することが本発明者によって明らかにされた。エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートは、下記式で表される。
【００１６】
【化１】
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【００１７】
エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートは、茶葉などに含まれているカテキンとして総称される化合物グループに属する。茶抽出物がＦＧＦ−５作用を阻害する活性を有するのは、ＦＧＦ−５阻害物質と考えられる成分のエピガロカテキン、エピガロカテキンガレートがこの茶抽出物中に含有されるためである。茶カテキンは、緑茶浸出液中の可溶成分の大半を占め、（−）−エピガロカテキンガレート、（−）−エピカテキンガレート、（−）−エピガロカテキン、（−）−エピカテキン、（＋）−ガロカテキン、（＋）−カテキンの６種類がある。なかでも（−）−エピガロカテキンガレート（（−）−ＥＧＣＧ）が一番多く含まれている。このカテキン類には坑酸化作用、抗菌、脱臭作用などの生理作用を有することが分かっている。本発明者らにより、エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートは、ＦＧＦ−５の作用を抑制することを通じて育毛効果もあることが初めて示された。
【００１８】
緑茶に含まれるエピカテキンおよびエピガロカテキンの没食子酸（gallic acid）エス
テルを「緑茶タンニン」と称する。ウーロン茶、紅茶には典型的な縮合型タンニンであるカテキンオリゴマーが含まれるのに対し、緑茶にはカテキンモノマーが主でオリゴマーは
ほとんど含まれない。
【００１９】
エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートによるＦＧＦ−５作用の阻害
エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートが、ＦＧＦ−５の作用を阻害する活性を有することは、in vitroの測定方法により確認された。その方法は、ＦＧＦ−５およびインターロイキン−３（ＩＬ-３）両方に対して感受性を示す培養細胞を用いて、ＦＧＦ−
５作用の阻害を調べる試験である。このような培養細胞のＦＧＦ-５依存的な増殖が抑制
されれば、細胞培養液に添加した被検体の植物抽出物または物質が、ＦＧＦ−５による細胞増殖の刺激作用を阻害したこととなる。
【００２０】
上記in vitro評価方法では、ＦＧＦ−５ならびにＦＧＦ−５以外の増殖促進物質、たとえばサイトカイン、一例としてＩＬ-３の両方に対して感受性の培養細胞、具体的にはFR-Ba/F3細胞が使用される。このFR-Ba/F3細胞は、「Ba/F3細胞」へ発現カセット付の「ＦＧＦ−Receptor 1c」cDNAを遺伝子導入することにより、安定的に「ＦＧＦ−Receptor 1c」を発現させた細胞株である。ここでＦＧＦ−Receptor 1c（以下「ＦＲ」と略す）とは、
ＦＧＦ−５のレセプター（ＦＧＦ−Receptor）を意味する。 FR-Ba/F3細胞の親細胞株「Ba/F3細胞株（マウスのＩＬ−３依存性proＢ細胞）」は、理研セルバンクを始め、様々な
ところから入手できる。当業者にとり、既存の遺伝子工学技術を用いて、「ＦＧＦ−Receptor 1c」を発現するcDNAを得て、上記親細胞株に遺伝子導入することは、通常の遺伝子
工学操作の範囲内である。
【００２１】
FR-Ba/F3細胞は、その親株「Ba/F3細胞」と同様にＩＬ-３依存性（ＦＧＦ-５と同様に
幅広い細胞の増殖を刺激し促進する別種のサイトカインであるＩＬ−３が存在しないと、生存・増殖できない性質）である。加えて、FR-Ba/F3細胞は、ＦＲを発現させたことによりＦＧＦ-５（ＦＧＦ-１，２にも）に対する応答性を獲得し、ＩＬ−３が存在しなくとも、ＦＧＦ-５およびヘパリン（ＦＧＦがＦＲに結合し、そのシグナルを細胞内へ入力する
際にはヘパリンの結合も併せて必要とされる）が存在すれば、生存・増殖が可能であるという特徴を有する。
【００２２】
植物抽出物
本発明の植物抽出物は、エピガロカテキンまたはエピガロカテキンガレートを含み、ＦＧＦ−５の作用を阻害する活性を示すことを特徴としている。エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートを含有する植物抽出物は、植物から水または水以外の溶媒で抽出することにより得ることができる。ここで「植物抽出物」とは、植物体、たとえば葉、茎、花、実、根、などの植物体の一部、全草または樹液などを生のまま、または乾燥して、必要ならさらに粉砕、加熱処理などの必要な加工処理した後に、水または後述の溶媒にて抽出することにより得られる各種溶媒抽出液、その希釈液、その濃縮液、またはその乾燥末を意味する。このような植物抽出物が、ＦＧＦ−５の作用を阻害する活性を有するかどうかについては、培養細胞を用いる上記のインビトロ測定方法により評価される。
【００２３】
上記植物抽出物を調製する工程は、夾雑物もしくは共存物を除去し、あるいは精選するためのもので、当業界で通常用いられている技術、たとえば、洗浄、粉砕、剥皮、研磨、圧搾、篩別などの方法を使用することができる。植物体から抽出液を作製する工程は、水、塩類を含有する溶液、あるいは適当な抽出溶剤を用いて行なうことができる。
【００２４】
抽出は、抽出溶媒に浸漬して行なう。効率を上げるために、連続的または間歇的な撹拌をするか、あるいは抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。抽出温度は、通常５℃から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は、抽出原体の性状、抽出溶媒の種類、抽出温度などによっても異なるが、一般に１〜14日程度とするのが適当である。抽出操作は、ソックスレー抽出器などの抽出器具を使用して連続抽出してもよい。その抽
出方法は、特に限定されず、通常の方法、たとえば加熱抽出したものであってもよいし、常温抽出であってもよい。さらに常圧下の他に、加圧下で抽出を行なってもよい。
【００２５】
抽出に使用する溶媒として、水の他に、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノールなどの低級アルコール系溶媒、ポリエチレングリコール、1,3-ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリンなどの多価アルコール系溶媒、エチルエーテル、プロピルエーテルなどのエーテル系溶媒、アセトン、エチルメチルケトンなどのケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチルなどのエステル系溶媒などの極性有機溶媒を用いることができる。特に、物質の溶解性に優れ、かつ凝固点および沸点が比較的低い溶媒が好ましく用いられる。上記の溶媒から1種または2種以上を選択して抽出に用いられる。抽出する植物の種類、部位、性状などに応じて、抽出溶剤を適宜選択すればよい。たとえば、皮膚炎を起こすシュウ酸カルシウムなどが多く含まれる植物の場合には、水と上記有機溶媒とを組み合わせた複数の溶剤を交互に使用することによる抽出操作により、または混合溶媒を用いる分配による抽出により、不適切な成分を選択的に除去した抽出物を得ることもできる。あるいは、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水などを用いることもできる。必要ならば、たとえば特開昭62-172096号公報に開
示されている二酸化炭素の超臨界状態の流体による方法を採用してもよい。
【００２６】
このようにして得られた粗抽出物は、そのままでも本発明に係る育毛剤に有効成分として含有させることは可能である。保存、育毛剤の形態など製剤化の要件を考慮すると、さらに減圧濃縮、希釈、ろ過などの分画処理を適宜行ない、育毛・養毛作用の有効物質を有する画分の形態で供してもよい。その分画処理の程度は任意であり、必要に応じて行われる。すなわち、濃縮、乾燥、または水もしくは極性溶媒への再溶解といった操作、あるいは生理作用を損なわない範囲で、公知の方法により脱色、脱臭、脱塩などの精製処理、カラムクロマトグラフィーなどによる分画処理による精製をさらに行なってもよい。あるいは、抽出した溶液を、濃縮、噴霧乾燥、凍結乾燥などの処理を行なって乾燥物としてもよい。
【００２７】
本発明の植物抽出物を調製するために原料として用いられる植物として、特に限定されないが、最も好ましくは生の茶、茶葉から加工された緑茶から選ばれる。茶（学名  Camellia sinensis）は、ツバキ科に属する植物である。本発明で使用する茶の抽出物には、
茶樹から採取した茶葉などから直接抽出して得られる抽出物のほか、お茶の製品である緑茶から抽出して得られるエキスも含まれる。茶は、生のまま抽出工程に供してもよいが、抽出効率を考慮すると、細切、乾燥、粉砕などの処理を行なった後に抽出を行なうことが望ましい。その抽出方法は特に限定されず、上記の方法を用いてもよい。
【００２８】
育毛剤
発毛・育毛の生理メカニズムを担う毛乳頭細胞機能とこれを制御する分子の作用に立脚する育毛物質を有効成分に含む育毛・養毛剤でなければ、満足すべき発育毛効果を得られない。かかる観点から完成された本発明の育毛剤は、上記のＦＧＦ−５の作用を阻害する植物抽出物を1種または2種以上、あるいはエピガロカテキン、エピガロカテキンガレートを有効成分として含有する。同様に、当該植物抽出物を1種または2種以上、あるいはエピガロカテキン、エピガロカテキンガレートを有効成分として含有する化粧料としても利用できる。これらの育毛剤および化粧料は、含有する有効成分の作用が発毛の分子的機作に裏づけられており、しかもその成分が天然素材に由来するという特徴を有している。
【００２９】
本発明の育毛剤として、好ましい態様は、茶を水または水以外の溶媒で抽出することにより得られ、エピガロカテキンまたはエピガロカテキンガレートを含み、繊維芽細胞増殖因子５（ＦＧＦ−５）の作用を阻害する活性を示すことを特徴とする抽出物を含有する育毛剤である。
【００３０】
有効成分として選択されたエピガロカテキン、エピガロカテキンガレート、あるいは上記植物抽出物、1種または2種以上とともに、下記の成分を所定量、常法に従って混合などの操作を施すことにより製造することができる。
【００３１】
育毛剤全量に対する上記植物抽出物の添加量は、用いる植物の種類、抽出溶媒および抽出条件、抽出後の処理などにより異なる。液状の育毛剤全量に対するその量は、植物を粉砕処理後に抽出溶媒に浸漬し抽出して得られる上清の状態で、好適には0.001〜5.0重量％、より好ましくは0.1〜1重量％である。ここで上清の状態とは、後述のように、乾燥植物体100ｇに対して、抽出溶媒1リットルを使用して抽出し、抽出液を静置した上清または遠心分離後の上清を基準とする。0.001％未満では、所期の発育毛促進効果が得られず、逆
に5％を超えると、その効果は頭打ちであるにもかかわらず、コストが上昇するだけであ
る。育毛剤が、乳状、ゼリー状、ペースト状など半固形または流動状の場合には、植物抽出物末などを上記上清の量に基づいて換算した割合で添加すればよい。エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートを単体として配合する場合、その添加量は植物抽出物の場合よりも少なくてもよい。
【００３２】
上記の育毛剤および化粧料は、液剤状、乳剤状、ゲル状、クリーム状、軟膏状、フォーム状、ミスト状、ジェル状など、種々の剤型をとり得る。具体的には育毛剤は、ヘアトニック、ヘアジェル、ヘアクリーム、ヘアトリーメントローション、ヘアフォーム、ヘアミスト、ヘアシャンプー、ヘアリンスなどの形態で提供される。
【００３３】
本発明の育毛剤には、上記必須成分の他に上記抽出物の作用を損なわない範囲で、油性成分、ヒアルロン酸、セラミドなどの保湿剤、α−トコフェロール、アスコルビン酸誘導体などの抗酸化剤、界面活性剤、紫外線吸収剤、局所刺激剤、毛包賦活剤、香料、色素、防菌防黴剤、ｐＨ調整剤、増粘剤、賦形剤、清涼剤などの一般的な育毛剤用添加物を任意に組み合わせて適宜、含有させることができる。さらにキレート化剤などの安定化剤、経皮吸収促進剤なども加えてもよい。化粧料についても同様である。
【００３４】
また、頭皮状態の正常化に有効とされる他の育毛促進成分を併用することにより、育毛・養毛効果の相乗作用を図ることもできる。この目的には、常用の血行促進剤、抗脂漏剤、角質溶解剤などがある。
【００３５】
本発明の育毛剤は、症状や体質にかかわらず育毛を促進し、著しい抜毛の改善、治療、種々の脱毛症にも著効を発揮する。また適用の主な対象は、ヒトの頭髪であるが、イヌ、ネコ、カナリヤ、インコといった愛玩動物の毛並み改善などにも使用できる。さらに毛を採取するか、毛皮を利用するメンヨウ、カシミヤ山羊、アルパカ、アンゴラウサギ、ミンク、キツネなどの動物にも適用して発育毛を促進し毛の色つやを良くすることで、毛または毛皮製品の品質を高める一助となる。
【００３６】
上記化粧料は、一般皮膚化粧料のほか、医薬部外品、薬用化粧料等を包含するもので、油／水型、水／油型の乳化化粧料、クリーム、化粧乳液、油性化粧料、化粧水、ファンデーション、パック剤など、種々の形態および用途で用いることができる。
【００３７】
化粧料全量に対し、本発明の上記抽出物を添加する量は、用いる植物の種類、抽出溶媒および抽出条件、抽出後の処理などにより異なるが、抽出して得られる上清状態の抽出液について、上記育毛剤の場合の濃度に準ずる。すなわち、液状化粧料全量に対し、0.001
〜5.0重量％、好ましくは0.1〜1重量％とする。化粧料が、乳状、ゼリー状、ペースト状
など半固形または流動状の場合には、植物抽出物末などを前記上清量に基づき換算した割合で添加する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３８】
〔実施例〕
以下、本発明について実施例を挙げてさらに説明を加えるが、本発明がこのような実施例にのみに限定されるものではない。なお特にことわらない限り、％は、重量％である。
【実施例１】
【００３９】
植物抽出物の調製
エピガロカテキンは和光純薬工業（株）から、エピガロカテキンガレートはＳＩＧＭＡ社からの市販製品を用いた。茶の抽出物として、「化粧品種別配合成分規格（粧配規）」に収録され市販されている、「茶エキス」（（株）常盤植物化学研究所、商品名「茶エキスS」）をそのまま適宜希釈して用いた。
【実施例２】
【００４０】
培養細胞を用いるＦＧＦ−５阻害物質の検出
ＦＧＦ−５およびインターロイキン−３（ＩＬ-３）に応答性のあるFR-Ba/F3細胞を、10％ウシ胎児血清を含む培養液中で培養した。「茶エキス」またはエピガロカテキン、エ
ピガロカテキンガレートの用量は希釈倍率を変えて少なくとも数点設定し、添加効果を用量依存性（dose-dependence）から検討した。96穴培養用プレート（ファルコン社製）に
、10,000細胞／ウェルで播き換え、培養液に1μg/mlのＦＧＦ−５または10ng/mlのＩＬ−３（ポジティブ・コントロール用）、さらに適当に希釈した被験物質（実施例１のエピガロカテキン、エピガロカテキンガレートおよび「茶エキス」）およびベヒクルである50％エタノールを添加して３日間培養した。その後、各ウェルにセルカウンティングキット（和光純薬製）を添加し、３時間培養した後、マイクロプレートリーダーを用いて細胞増殖を調べた。その結果を図１に示す。エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートならびに「茶エキス」は、ＩＬ-３依存的な増殖に比べて、ＦＧＦ-５依存的なFR-Ba/F3細胞増殖をいずれも低濃度で阻害した。これらの結果からエピガロカテキン、エピガロカテキンガレートならびに茶抽出物は、選択的にＦＧＦ−５阻害活性を持つことが示された。
【実施例３】
【００４１】
ヘアートニック剤の調製
エタノール55重量部、ポリオキシエチレン（8）オレイルアルコールエーテル2重量部、精製水36重量部に実施例1で得た植物抽出物（あるいはエピガロカテキンもしくはエピガ
ロカテキンガレート）、1重量部を混合配合する。さらに常法に従い、メントールなどの
香料、酢酸トコフェロールなどの抗酸化剤、サリチル酸などの保存剤、着色剤、ｐＨ調整剤を適量配合して、ヘアトニックタイプの育毛剤を形成する。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】図１は、FR-Ba/F3培養細胞のＦＧＦ-５依存的、ならびにＩＬ-３依存的な増殖に及ぼす、エピガロカテキン、エピガロカテキンガレートおよび「茶エキス」の阻害作用を示す。横軸は、培地中の被検体である物質の濃度（μg／ml）または植物抽出物の濃度（単位：％（V/V））である。いずれの図においてもＦＧＦ−５およびＩＬ−３は、それぞれ次のとおり表示される。  ■：ＦＧＦ−５  □：ＩＬ−３
【図１】
2005330238.tif 000004