(57)【要約】 【課題】  本発明は、摂取エネルギー制限下において、糖質利用能を改善及び維持することで糖尿病の予防に役立つ食生活を提供することを課題とする。【解決手段】大豆ペプチドを摂取することで、摂取期間中の糖質利用能が改善されるだけでなく、摂取を止めた後も効果が持続するという知見に基づき、大豆ペプチドを有効成分とする糖尿病の予防用組成物を提供するものである。【選択図】  なし。【特許請求の範囲】
【請求項１】
大豆ペプチドを有効成分とする糖尿病の予防用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖質の酸化能力の改善効果を有する大豆ペプチドを有効成分とする糖尿病の予防及び改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は，日常最も頻繁に遭遇するありふれた疾患であり，食生活はその発症から予防・治療の全ての面において深く関与している。糖尿病患者は糖質の利用能力が低下しているため、健常人よりも呼吸商が低い。糖尿病の食餌療法はカロリー制限を基本とするが、単にエネルギー摂取量を下げるだけでは、脂肪組織量と共に筋量が減少してしまい、そのことが糖質の利用能を低くするという負の側面を有する。それゆえに糖尿病の予防・治療に有効な食品には，摂取エネルギー制限下でも筋量・エネルギー消費量を減少させない機能が求められる。
【０００３】
近年、新規なたん白源として、たん白の加水分解物であるペプチドが注目されている。ペプチドは、たん白に比べて溶解性、吸収性が良く加工特性に優れる。ペプチドの種類は多岐に亘り、卵、乳、肉、魚等の動物性たん白由来のもの、大豆たん白、小麦たん白等の植物性たん白由来のものがある。中でも植物たん白は、食生活の多様化に伴い動物性食品の摂取量が増加し、動物性食品／植物性食品の摂取バランスが崩れから来る様々な疾患が増加する中で、意識して摂取する必要性が強く説かれている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、摂取エネルギー制限下において、糖質利用能を改善及び維持することで糖尿病の予防に役立つ食生活を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは上記課題に対して鋭意検討を行った結果、大豆ペプチドを摂取することで、摂取期間中の糖質利用能が改善されるだけでなく、摂取を止めた後も効果が持続することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち本発明は、大豆ペプチドを有効成分とする糖尿病の予防用組成物を提供するものである。
【発明の効果】
【０００６】
本発明における組成物は、摂取期間のみでなく摂取を止めた後も、糖質利用能力の改善効果が持続する、糖尿病の予防に役立つものである。また同じく植物性である小麦由来のグルテンペプチドと異なり、大豆ペプチドはアミノ酸組成に偏りがなく、組成物のたん白源がこれのみに限定されても、アミノ酸の摂取バランスを崩すことがない。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明における大豆ペプチドの製法は特に問わないが、大豆たん白の酵素分解による方法が好ましい。酸による分解方法でも良いが、中和時に多量の塩が発生したり、発がん性物質が生成といった問題が生じ易い。大豆ペプチドの平均鎖長は２〜５０が好ましく、より好ましくは平均ペプチド鎖長４〜１０である。鎖長が長すぎると消化吸収が悪くなり、短すぎると悪風味が出てくる。
【０００８】
大豆たん白を酵素で分解した本発明におけるペプチドの製造法の一例を以下に示す。
ペプチドは大豆たん白を水系下（大豆たん白スラリーもしくは溶液）に酵素を用いて加水分解して得ることが出来る。本発明の大豆たん白は安価に手に入る材料として、豆乳、濃縮大豆たん白、あるいは分離大豆たん白、脱脂大豆、大豆ホエーたん白などを使用し得るが、その中で分離大豆たん白が好ましい。酵素処理に供する大豆たん白溶液の濃度は１〜３０重量％、好ましくは５〜１５重量％、より好ましくは８〜１２重量％が適当である。この濃度が低くても酵素分解に支障はないが、生産性が落ちて好ましくない。大豆たん白溶液の濃度が高すぎると一旦分解されたペプチドどうしの重合が強くなるためか、十分分解するのに多量の酵素量を必要とし好ましくない。
【０００９】
上記たん白分解酵素（プロテアーゼ）は、エキソプロテアーゼ又はエンドプロテアーゼを単独又は併用することができ、動物起源、植物起源あるいは微生物起源であるかは問わない。具体的には、セリンプロテアーゼ（動物由来のトリプシン、キモトリプシン、微生物由来のズブチリシン、カルボキシペプチダーゼ等）、チオールプロテアーゼ（植物由来のパパイン、フィシン、ブロメライン等）、カルボキシプロテアーゼ（動物由来のペプシン等）を用いることができる。更に、具体的にはアスペルギルス・オリゼ起源の「プロチンＦＮ」（大和化成株式会社製）、ストレプトマイセス・グリセウス起源の「アクチナーゼ」（科研製薬株式会社製）、バチルス・リケホルミス由来の「アルカラーゼ」（Novozymes Japan Ltd.製）、バチルス・ズブチルス由来の「プロチンＡ」（大和化成株式会社製）等を例示できる。また、エンドプロテアーゼを含有する酵素としては、「プロテアーゼＳ」（天野製薬株式会社製）、「ソモアーゼ」（大和化成株式会社製）や「プロチンＡＣ−１０」（大和化成株式会社製）が、エキソプロテアーゼおよびエンドプロテアーゼを含有するたん白分解酵素として「プロテアーゼＭ」（天野製薬株式会社製）が例示できる。
【００１０】
加水分解の条件は用いるたん白分解酵素の種類により異なり、そのたん白分解酵素の作用pH域、作用温度域で、大豆たん白を加水分解するに充分な量を用いて行えば良い。糖尿病の予防用組成物であり、且つ塩分制限食（例えば、経管栄養食等）としての用途を考慮した場合は、pHが５〜１０、好ましくはpH６〜９であれば中和による塩の生成を軽減できて好ましい。加水分解の程度は、平均ペプチド鎖長２〜２０、好ましくは５〜１０が適当である。
【００１１】
本発明における組成物は、飲食品又はサプリメントとして用いることができる。飲食品、サプリメントの形態は問わず、粉末状、固形状、顆粒状、流動物状、液状等そのいずれであっても良く、特に限定されない。
【００１２】
本発明における組成物当たりの大豆ペプチドの配合量は、５重量％以上、好ましくは３０〜６０重量％である。少なすぎると効果を得るために多量に摂取せねばならず、多すぎると大豆ペプチド独特の風味が強く感じられ好ましくない。
【００１３】
大豆ペプチドは、大豆たん白を加水分解したものであることから非常に安全であり、糖尿病の予防に、哺乳動物（例、ヒト、ウシ、ウマ、ブタ、イヌ、ネコ、マウス、ラット、ウサギ等）に、例えば経口的に摂取させることができる。通常、大豆ペプチドとして一日当たり、概ね０．５ｇ以上、好ましくは０．５ｇ〜５０ｇ、より好ましくは３ｇ〜１５ｇ摂取できる量の組成物を一日１〜数回に分けて与えるのが適当であるが、大豆ペプチドは、アミノ酸組成に偏りがなく、またその安全性から摂取量の上限は特に限定するものではない。この摂取により、糖質利用能が改善され、糖尿病の予防効果が発揮される。
【００１４】
本発明における組成物は、特に摂取期間に限定はないが、３週間以上続けて摂取することが好ましい。継続的に摂取することで摂取を止めた後も、改良された体質が維持され、糖質利用能の改善効果が持続する。
【００１５】
以下に本発明で用いた分析法を記す。
＊平均鎖長：ＴＮＢＳ法に従い、ペプチドの平均鎖長を測定した。
【００１６】
＜大豆ペプチドの製造例＞
分離大豆たん白（不二製油株式会社製、「ニューフジプロ−Ｒ」）30kgをpH7.0の９％水溶液とし、たん白分解酵素（天野製薬株式会社製、「プロテアーゼＳ」）1.2kgを作用させ60℃で５時間加水分解した後、この液に８kg/cm2圧の蒸気を吹き込んで140℃で７秒間殺菌後、スプレードライで粉末乾燥させた。得られたペプチドの平均鎖長は６であった。
＜試験例＞
【００１７】
上記製造例で得た大豆ペプチドの糖質利用能の改善効果を、マウスを用いて調べた。糖質利用能の指標として、呼吸商を用いた。
6週齢のKK-Ay雄マウス20匹（日本クレア）およびStd ddYマウス8匹（オリエンタル酵母）を、個別ケージで8週間飼育した（室温23 ± 1℃、湿度55 ± 5%）。このうちStd ddYマウスは、飼育期間中を通じて、市販の固形飼料MF（オリエンタル酵母）を自由摂取させた。KK-Ayマウスは、6週齢から9週齢までの最初の4週間は、肥満及び糖尿病を誘発するために、高脂肪食（エネルギー比30%）と水を自由摂取させた。マウスは、体重分布が均等になるように3群に分け、10から14週齢までの5週間は、1群には高脂肪食 (HF食群)を引き続き自由摂取させた。残りの2群は、カゼイン (カゼイン食群)、SPI-H (大豆ペプチド食群)を窒素源(5.6％)とする高たん白低脂肪食を制限給餌した。飼料摂取量は、高脂肪食摂取期間の全てのマウスの平均エネルギー摂取量の約60%になるように、一律4.4 gを毎日17時に与えた。水は自由摂取させた。表１に市販の固形飼料ＭＦ，高脂肪食、各高たん白低脂肪食の組成を示す。
【００１８】
＜表１＞
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【００１９】
飼育期間中は、毎週１回、24時間の呼気ガス測定を行った。測定時間中は、呼気ガス測定用のチャンバー内で飼育し、酸素消費量・二酸化炭素排出量・呼吸商を呼気ガス分析装置（RL-６００、アルコシステム製）で連続的に測定した。呼気ガス分析装置（RL-６００、アルコシステム製）はガス濃度の測定に質量分析を使用しており、装置は、質量分析部及び導入部、制御用コンピューターから構成される。質量分析部は一日一回、CO2-3%; O2-15%; N2バランス、O2-18%; N2バランスの2種の校正ガス（住友ガス製）を用い、校正を行った後使用した。チャンバーはマウスが入る大室とガスを撹拌するための小室の2室よりなり、前者内部のガスは後者にて撹拌され均一化された後、質量分析部に導入される。
【００２０】
同時に測定できる検体数を増やすために、チャンバーと質量分析部の経路上に２台の回路切り替え機（サンプラー、アルコシステム製）を設けた。各サンプラーに６個のチャンバーを接続し、各チャンバーとサンプラーを接続するホースの長さは全て等しくした。また一台のサンプラーには、大気導入用のホースを接続した。各サンプラーは制御用コンピューターによってRL-600と協調的に制御され、各回路を流れるガスの流量を測定すると共に質量分析機に導入するガスを順次切り替えた。ラインの切り替えは、大気、ライン1、ライン2・・・ライン１２と順次1分間毎に行い、最後の1秒間の酸素、二酸化炭素濃度を各ラインのデータとして取得した。
酸素摂取量（VO2）、二酸化炭素排出量（VCO2）、呼吸商（RQ）は以下の式により算出した。
VO2=((FEN2/FIN2)*FIO2-FEO2)*VT*10,
VCO2=(FEVCO2-FICO2)*VT*10,  
RQ= VCO2/ VO2,
FEN2、FEO2、FECO2はそれぞれ、ラインの窒素濃度、酸素濃度、二酸化炭素濃度であり、FIN2、FIO2、FICO2はそれぞれ大気の窒素濃度、酸素濃度、二酸化炭素濃度、VTは標準状態（0℃, 1 atm）に補正した流量である。
【００２１】
測定は毎回15時から開始し、飼育期間中と同様に、17時に4.4gの飼料を与え、マウスは翌日15時までに与えた飼料を食べきることを確認した。
測定の際に給餌した飼料は、高たん白食摂取1、2、3週間目には、各群が摂取しているSPI-H食、カゼイン食を与えた。摂取4週間目には、全ての群にカゼイン食を摂取させ、その後の呼気ガス成分を測定した。摂取30日目には、SPI-H食、カゼイン食に1.35%の13C-ロイシンを含む飼料を与えた。13C-ロイシンを添加する飼料を調整する際には、飼料のアミノ酸組成が変化しないように、たん白の一部をアミノ酸混合物に置き換えた。
【００２２】
＜結果＞  ddYマウスでは食後に呼吸商の顕著な上昇が見られたが、高脂肪食を自由摂取して糖尿病が進行したKK-Ayマウスでは、１週間大豆ペプチド食又はカゼイン食を与えただけでは、食後の呼吸商はほとんど上昇しなかった（図１）。2-3週間、高たん白食を摂取したKK-Ayマウスは、ddYマウスとほぼ同程度に食後の呼吸商が回復した。中でも大豆ペプチド食を摂取した群は、カゼイン食を摂取した群に比べて食後の呼吸商の上昇が大きかった（図２、図３）。４週間目にこれら両群のマウスに、全て同じ飼料（カゼイン食）を摂取させたところ、3週目で見られた呼吸商の差は消失しなかった（図４、図５）。また飼料中に添加した13C-ロイシンの酸化量から、たん白の酸化量は、両群の間に差がないことがわかった。摂取3週間後に観察された呼吸商の相違が、たん白の酸化量によるものでなく、糖質・脂質の酸化量の違いに起因することが示された。
【００２３】
以上より、II型糖尿病患者が摂取エネルギー量を制限するときに、大豆ペプチドを2-3週間摂取すると糖質利用能が維持される可能性が見いだされた。さらに、摂取を止めても糖質利用能は保たれることが分かった。すなわち効果を得るために、常に大豆ペプチドを摂取し続ける必要が無いため、食にバラエティーを与え食生活をより豊かにする。大豆ペプチドの糖質利用能に対する作用は一過性ではなく継続的であり、体質レベルで変化をもたらすと考えられた。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】7日目のddYマウス及び KK-Ayマウスの呼吸商。
【図２】各高たん白食を摂取して21日目のKK-Ayマウスの呼吸商及びその平均値。
【図３】各高たん白食を摂取して21日目のKK-Ayマウスの呼吸商の平均値。
【図４】各高たん白食を27日間摂取後にカゼイン食を摂取した28日目のKK-Ayマウスマウスの呼吸商及びその平均値。
【図５】各高たん白食を27日間摂取後にカゼイン食を摂取した28日目のKK-Ayマウスマウスの呼吸商の平均値。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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