(57)【要約】【課題】従来のアフィニティー吸着体よりも、標的物質を迅速かつ簡便に分離・精製し得ると共に、物理的強度の高いアフィニティー吸着体、及び被処理液中の標的物質を迅速かつ簡便に分離・精製する方法を提供する。【解決手段】被処理液に含まれる媒体に対して実質上不溶性の支持体にリガンドが固定化されてなり、かつこれに被処理液を接触させることにより、該被処理液中に存在する前記リガンドと特異的に相互作用する物質を吸着分離するアフィニティー吸着体であって、前記支持体として、固相有機合成用樹脂を用いたもの、及び前記アフィニティー吸着体に被処理液を接触させ、その中に存在する標的物質を該吸着体に吸着させることにより、標的物質を分離・精製する方法である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
被処理液に含まれる媒体に対して実質上不溶性の支持体にリガンドが固定化されてなり、かつこれに被処理液を接触させることにより、該被処理液中に存在する前記リガンドと特異的に相互作用する物質を吸着分離するアフィニティー吸着体であって、前記支持体が固相有機合成用樹脂であることを特徴とするアフィニティー吸着体。
【請求項２】
固相有機合成用樹脂からなる支持体に、直接又はスペーサを介して共有結合により、リガンドが固定化されてなる請求項１記載のアフィニティー吸着体。
【請求項３】
光親和性基が導入された固相有機合成用樹脂からなる支持体に、光照射によりリガンドが固定化されてなる請求項２記載のアフィニティー吸着体。
【請求項４】
リガンドと特異的に相互作用する物質がタンパク質である請求項１、２又は３記載のアフィニティー吸着体。
【請求項５】
請求項１ないし４のいずれかに記載のアフィニティー吸着体に被処理液を接触させ、該被処理液中に存在する前記アフィニティー吸着体に固定化されてなるリガンドと特異的に相互作用する物質（標的物質）を、該アフィニティー吸着体に吸着させることを特徴とする標的物質の分離・精製方法。
【請求項６】
アフィニティー吸着体に固定化されてなるリガンドがリトコール酸であり、標的物質がＤＮＡポリメラーゼ類である請求項５記載の標的物質の分離・精製方法。
【請求項７】
作用機構が未知のリガンドが固定化されてなる請求項１ないし４のいずれかに記載のアフィニティー吸着体に、被処理液を接触させ、該被処理液中に存在する前記リガンドと特異的に相互作用する物質を、該アフィニティー吸着体に吸着させたのち、吸着された物質の解析を行うことを特徴とする特定物質の単離・同定方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アフィニティー吸着体及び標的物質の分離・精製方法と特定物質の単離・同定方法に関する。さらに詳しくは、本発明は、固相有機合成用樹脂からなる支持体にリガンドが固定化されてなるアフィニティー吸着体、及びこのアフィニティー吸着体に被処理液を接触させ、該被処理液中に存在する前記リガンドと特異的に相互作用する標的物質を、迅速かつ簡便に分離・精製する方法と特定物質を簡便に単離・同定する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
生物起源の物質には、酵素と基質、酵素と特異的インヒビター、抗原と抗体、レクチンと糖又は糖タンパク質、ホルモンとホルモン受容体のように、相互に特異的な親和性を示す相補的な物質の対が存在することが知られている。アフィニティー精製法は、前記の相補的な物質の対の一方の物質を用い、「対」の内の他方の物質（標的物質）を捕捉し、分離・精製する方法である。
このようなアフィニティー精製方法は、リガンド(標的物質に対して親和性のある物質）の支持体の違いにより、（１）クロマトグラフィー法、（２）抽出法、（３）膜法に大別することができる。前記のクロマトグラフィー法は、例えば多孔性アガロースゲルなどの支持体表面にリガンドを固定化させてなるアフィニティー吸着体をカラムに充填し、これに試料液、洗浄液及び溶離液を順次通液し、溶離液に精製された標的物質を回収する方法である。また、抽出法は、微小支持体やポリマーにリガンドを固定化させてなるアフィニティー吸着体を試料液に添加し、標的物質を結合させたのち、分離回収する方法である。一方、膜法は、例えば中空糸型多孔膜を支持体とし、これにリガンドを固定化させてなるアフィニティー吸着膜に、試料液を通過させ、孔表面のリガンドにより、標的物質を捕捉する方法である。
これらのアフィニティー精製方法の中で、クロマトグラフィー法が最も広く利用されている。しかしながら、このクロマトグラフィー法では、従来支持体として、アガロース、セルロース、親水性ポリビニールアルコール、アクリレート系ポリマー、ポリアクリルアミドなどが用いられているが、支持体の物理的強度が低かったり、リガンドの結合方法がやっかいであったり、分離・精製に時間を要したりするなどの問題があった。
ところで、従来、合成ペプチドをリガンドとするアフィニティー吸着体を作製する場合には、合成ペプチドを単離・精製しなければならず、煩雑な作業が必要とされていた。また、特に合成ペプチドの量が少ない小スケールの合成時には、該合成ペプチドを単離・精製してアガロースなどの支持体に固定化させるには、ロスなどによって効率が著しく低下するのを免れないという問題があった。
一方、近年、コンビナトリアル・ケミストリー（ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）の急速の発展に伴い、反応操作が簡便で自動化が容易である固相での有機反応が注目されている。この固相反応は、ペプチド固相合成において最初に適用された反応であり（例えば、非特許文献１参照）、ジビニルベンゼンなどで架橋されたポリスチレン等の高分子重合体を修飾して官能基を導入し、それを足がかりにして主要な合成を高分子重合体上で行い、最後に高分子重合体から合成物質を適当な方法で切り離して目的物を得る方法である。前記高分子重合体は、溶媒に不溶であるため、個々の反応の後処理は、基本的にはろ過で不要なものを全て洗い流すのみでよく、固相反応の操作は極めて簡略化されている。したがって、機器を用いた自動化が容易で、多種類の化合物群（ライブラリー）を合成するのに適している。
【非特許文献１】Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．， ８５， ２１４９（１９６３）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、このような事情のもとで、支持体にリガンドが固定化されてなるアフィニティー吸着体であって、従来のアフィニティー吸着体よりも、標的物質を迅速かつ簡便に分離・精製し得ると共に、物理的強度の高いアフィニティー吸着体、及びこのアフィニティー吸着体に被処理液を接触させ、その中に存在する標的物質を迅速かつ簡便に分離・精製する方法と特定物質を簡便に単離・同定する方法を提供することを目的としてなされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者らは、前記目的を達成するために鋭意研究を重ねた結果、アフィニティー吸着体における支持体として、固相有機合成用樹脂を用いることにより、その目的を達成し得ること、そして、特にリガンドとして合成ペプチドなどを支持体に固定化させる場合、支持体上で該リガンドの合成と固定化を同時に行うことができるので、極めて効率よく標的物質の分離・精製や単離・同定を行い得ることを見出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、
（１）被処理液に含まれる媒体に対して実質上不溶性の支持体にリガンドが固定化されてなり、かつこれに被処理液を接触させることにより、該被処理液中に存在する前記リガンドと特異的に相互作用する物質を吸着分離するアフィニティー吸着体であって、前記支持体が固相有機合成用樹脂であることを特徴とするアフィニティー吸着体、
（２）固相有機合成用樹脂からなる支持体に、直接又はスペーサを介して共有結合により、リガンドが固定化されてなる(１)記載のアフィニティー吸着体、
（３）光親和性基が導入された固相有機合成用樹脂からなる支持体に、光照射によりリガンドが固定化されてなる(２)記載のアフィニティー吸着体、
（４）リガンドと特異的に相互作用する物質がタンパク質である(１)、(２)又は(３)記載のアフィニティー吸着体、
（５）(１)ないし(４)のいずれかに記載のアフィニティー吸着体に被処理液を接触させ、該被処理液中に存在する前記アフィニティー吸着体に固定化されてなるリガンドと特異的に相互作用する物質（標的物質）を、該アフィニティー吸着体に吸着させることを特徴とする標的物質の分離・精製方法、
（６）アフィニティー吸着体に固定化されてなるリガンドがリトコール酸であり、標的物質がＤＮＡポリメラーゼ類である(５)記載の標的物質の分離・精製方法、及び
（７）作用機構が未知のリガンドが固定化されてなる(１)ないし(４)のいずれかに記載のアフィニティー吸着体に、被処理液を接触させ、該被処理液中に存在する前記リガンドと特異的に相互作用する物質を、該アフィニティー吸着体に吸着させたのち、吸着された物質の解析を行うことを特徴とする特定物質の単離・同定方法、
を提供するものである。
【発明の効果】
【０００５】
本発明によれば、支持体として固相有機合成用樹脂を用いることにより、従来のアフィニティー吸着体よりも、標的物質を迅速かつ簡便に分離・精製し得ると共に、物理的強度の高いアフィニティー吸着体を提供することができる。
また、前記アフィニティー吸着体を用いることにより、被処理液中に存在する標的物質を迅速かつ簡便に分離・精製する方法を提供することができる。さらに、該アフィニティー吸着体に作用機構が未知のリガンドを固定化することにより、被処理液中に存在する、前記リガンドと特異的に相互作用する物質を、簡便に単離・同定する方法を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
本発明のアフィニティー吸着体は、固相有機合成用樹脂からなる支持体にリガンドが固定化されてなるものであって、これに被処理液を接触させることにより、該被処理液中に存在する前記リガンドと特異的に相互作用する物質を吸着分離する機能を有している。
本発明において、リガンド、及び該リガンドと特異的に相互作用する物質とは、例えば酵素と基質、酵素と特異的インヒビター、抗原と抗体、レクチンと糖又は糖タンパク質、ホルモンとホルモン受容体、ＤＮＡと発がん性又は変異原生物質、プロテインＡと免疫グロブリンＧなどのように相互に特異的な親和性を示す相補的な物質の対を指し、これらの「対」のいずれかをリガンドとして支持体に固定化させるかは、「対」の種類やその他の状況に応じて適宜選択される。リガンドが固定化されたアフィニティー吸着体に、標的物質を含む被処理液を接触させると、リガンドに親和性のない物質は吸着されずに、相補的な物質（標的物質）のみが吸着される。
【０００７】
本発明のアフィニティー吸着体においては、前記リガンドを固定化させる支持体として、被処理液に含まれる媒体に対して実質上不溶性である固相有機合成用樹脂が用いられる。
この固相有機合成用樹脂は、水や有機溶媒などの媒体に実質上不溶性の母体樹脂に、直接又はスペーサを介して官能基を導入し、この官能基を足がかりにして、該樹脂上でペプチド合成を始め、その他有機合成を行うのに用いられる樹脂である。母体樹脂としては、例えばスチレン−ジビニルベンゼン共重合体樹脂などを挙げることができる。
【０００８】
また、前記母体樹脂に導入される官能基又は官能基を有するスペーサとしては、例えばアミノメチル基、ヒドロキシメチル基、メルカプトメチル基、クロロメチル基、ブロモメチル基、ホルミル基、ジメチルシリル基、アリルジメチルシリル基、ブロモアシル基、Ｎ−メチルアミノメチル基、４−(ブロモメチル)フェニルアセトアミドメチル基、４−(ブロモメチル)フェノキシメチル基、４−ヒドラジノベンゾイルアミノメチル基、ヒドロキシエチルスルファニルメチル基、(３−ホルミルインドリル)アセトアミドメチル基、(４−メトキシフェニル)ジメチルシリルプロピル基、３−[４−(トリチルチオール−４−イル)フェニル]プロピオニルアミノメチル基、(トリチルヒドロキシド−４−イル)カルボニルアミノメチル基、(トリチルクロリド−４−イル)カルボニルアミノメチル基、(トリチルアミン−４−イル)カルボニルアミノメチル基、３−(４−ヒドロキシメチルフェノキシ)プロピオニルアミノメチル基、３−(３,５−ジメトキシ−４−ホルミルフェノキシ)プロピオニルアミノメチル基、４−(４−アミノメチル−３,５−ジメトキシフェノキシ)ブタンカルボニルアミノ基、４−(４−ホルミル−３,５−ジメトキシフェノキシ)ブタンカルボニルアミノ基などが挙げられる。
【０００９】
本発明においては、前記固相有機合成用樹脂からなる支持体に、リガンドを固定化させる方法については特に制限はなく、該固相有機合成用樹脂に導入されている官能基を利用し、直接又はスペーサを介して共有結合により、固定化させることができる。この際、前記官能基の種類は、使用するリガンドの種類に応じて適宜選択するのがよい。また、リガンドを固定化させるために、支持体の固相有機合成用樹脂として、母体樹脂に直接又はスペーサを介して光親和性基、例えばアジド基、ジアジリニル基、芳香族ケト基などを導入したものを用い、紫外線などの光照射により、リガンドを固定化させることも有効である。
さらに、本発明においては、リガンドとして合成ペプチドなどの合成物質を固定化させる場合には、支持体の固相有機合成用樹脂上で、目的物質を固相合成することにより、目的物質の合成と固定化を同時に行うことができるので、極めて効率よく、アフィニティー吸着体を作製することができる。
【００１０】
このように、固相有機合成用樹脂からなる支持体にリガンドを固定化させて得られた本発明のアフィニティー吸着体は、従来のアガロースなどの支持体にリガンドを固定化させてなるアフィニティー吸着体に比べて、物理的強度が高く、また、標的物質の分離・精製を迅速かつ簡便に効率よく行うことができる。
本発明のアフィニティー吸着体においては、リガンド及び該リガンドと特異的に相互作用する物質（標的物質）については特に制限はなく、前述で例示した「対」などの中から適宜選択することができるが、特にタンパク質を標的物質とするリガンドを固定化させたものが好ましい。またその使用形態についても特に制限はなく、例えば粒状吸着体の形でカラムに充填し、アフィニティー・クロマトグラフィー用として用いてもよく、あるいは中空糸型の多孔膜の形でアフィニティー膜として用いてもよい。
【００１１】
本発明の標的物質の分離・精製方法においては、前記のようにして得られたアフィニティー吸着体に被処理液を接触させ、該被処理液中に存在する前記アフィニティー吸着体に固定化されてなるリガンドと特異的に相互作用する物質（標的物質）を、該アフィニティー吸着体に吸着させたのち、適当な溶離液で脱着させることにより、該標的物質の分離・精製を行う。
この方法においては、標的物質の種類に応じて、アフィニティー吸着体に固定化させるリガンドが選択される。例えばリガンドとして、標的物質が酵素である場合には該酵素のインヒビターを、抗体である場合には抗原を、糖又は糖タンパク質である場合にはレクチンを、ホルモンである場合にはホルモン受容体を用いることができる。
本発明の標的物質の分離・精製方法は、酵素などのタンパク質の分離・精製に好ましく適用することができる。
【００１２】
次に、酵素の分離・精製方法について、具体的に説明する。
ＤＮＡポリメラーゼα，βは真核細胞の核に存在し、それぞれＤＮＡを複製及び修復する酵素である。これらのＤＮＡポリメラーゼα，βの阻害剤として、リトコール酸が知られている。このリトコール酸は、構造式
【００１３】
【化１】
2005156372.tif 000002
【００１４】
で表される３α−ヒドロキシ−５β−コラン−２４−酸である。該リトコール酸は、哺乳類などの胆汁中に存在する胆汁酸の一つであり、コール酸あるいはデオキシコール酸から、化学的に合成することもできる。
固相有機合成用樹脂からなる支持体に前記リコール酸をリガンドとして固定化させてなるアフィニティー吸着体に、ＤＮＡポリメラーゼα又はβを含む被処理液を接触させると、該被処理液中のＤＮＡポリメラーゼα又はβは選択的に吸着される。
固相有機合成用樹脂へのリトコール酸の固定化は、遊離のリトコール酸又はそのエステル誘導体を用い、共有結合により行うことができる。また、固相有機合成用樹脂上で、コール酸又はデオキシコール酸を原料として固相合成を行い、リトコール酸の合成と固定化を同時に行ってもよい。
【００１５】
本発明の特定物資の単離・同定方法においては、固相有機合成用樹脂からなる支持体に、作用機構が未知のリガンドが固定化されてなるアフィニティー吸着体に対し、被処理液を接触させ、該被処理液中に存在する前記リガンドと特異的に相互作用する物質を、該アフィニティー吸着体に吸着（リガンドに結合）させたのち、吸着された物質を解析することにより、特定物質の単離・同定を行う。
作用機構が未知のリガンドを固相有機合成用樹脂からなる支持体に固定化させる方法としては、例えば従来公知の共有結合による固定化方法を採用してもよいし、固相有機合成用樹脂上でリガンドを合成し、リガンドの合成と固定化を同時に行ってもよい。
また、リガンドに結合した物質の解析は、例えばファージディスプレイ法などを適用することができる。
【００１６】
本発明は、アフィニティー吸着体の支持体として、固相有機合成用樹脂を用いた新規な技術であり、下記の効果を奏する。
（１）本発明のアフィニティー吸着体は、アガロースなどを支持体とする従来のアフィニティー吸着体に比べて物理的強度が高く、クロマトグラフィー用のカラム充填材の他、中空糸型のアフィニティー多孔膜などとしても用いることができる。
（２）支持体が固相有機合成用樹脂であることから、従来の支持体に比べてリガンドの固定化が容易であり、また、支持体上でリガンドの合成と固定化を同時に行うことができる。
（３）固相有機合成用樹脂を支持体とするアフィニティー吸着体は、従来のアフィニティー吸着体に比べて、標的物質を迅速かつ簡便に効率よく分離・精製することができる。また、吸着された標的物質に対し、必要に応じ、そのまま支持体上で固相化学処理を施すことができる。
（４）作用機構が未知のリガンドを、固相有機合成用樹脂に固定化又は合成と同時に固定化したアフィニティー吸着体を用いることにより、被処理液中の特定物質を容易に単離・同定することができる。
【実施例】
【００１７】
次に、本発明を実施例により、さらに詳細に説明するが、本発明は、この例によってなんら限定されるものではない。
実施例１
（１）リトコール酸（ＬＣＡ）固定化樹脂の作製
固相有機合成用樹脂として、下記の構造
【化２】
2005156372.tif 000003
を有する「Ｔｅｎｔａｇｅｌ  Ｓ  ＣＯＯＳｕ」（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｔｅｃｈ社製）を用いた。
ジメチルスルホキシド、クロロホルム及びアセトンからなる混合溶媒に、固相有機合成用樹脂「Ｔｅｎｔａｇｅｌ  Ｓ  ＣＯＯＳｕ」及びリトコール酸３−β−アラニルエステルを加え、さらにトリエチルアミン（１０当量）及びジメチルアミノピリジン（１当量）を加えて、３日間室温で撹拌した。次いで、メタノールを加えて１時間撹拌することで反応を終了させたのち、樹脂をメタノールで洗浄し、１時間真空乾燥させた。
リトコール酸の固定化量は、テトラヒドロフラン中、水酸化リチウム（１０当量）を添加し、遊離してくるリトコール酸を定量することにより行った。
なお、比較実験のため、「Ｔｅｎｔａｇｅｌ  Ｓ  ＣＯＯＳｕ」を加メタノール分解処理してなるコントロール樹脂を作製した。
（２）ＤＮＡポリメラーゼβ（以下、Ｈｉｓ−βと略記する）の吸着実験
（イ）透析用の緩衝液として、下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３種のＮａＣｌ濃度の異なる緩衝液を、それぞれ２Ｌずつ調整した。
（Ａ）緩衝液
ＮａＣｌ：１００ミリモル／Ｌ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７.５）：５０ミリモル／Ｌ
ＥＤＴＡ：１ミリモル／Ｌ
（Ｂ）緩衝液
ＮａＣｌ：２００ミリモル／Ｌ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７.５）：５０ミリモル／Ｌ
ＥＤＴＡ：１ミリモル／Ｌ
（Ｃ）緩衝液
ＮａＣｌ：５００ミリモル／Ｌ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７.５）：５０ミリモル／Ｌ
ＥＤＴＡ：１ミリモル／Ｌ
（ロ）大腸菌で発現させたＨｉｓ−βの溶液（約２〜４.５ｍｇ／ｍＬ）約３〜４ｍＬを、それぞれ上記の透析用緩衝液を用いて透析に付した。この際、透析用緩衝液は、１Ｌずつ２回で入れ換えを行った。
次いで、ＰＥＧ付ＬＣＡカラム、コントロール用のカラムを、それぞれ３本のエッペンの内の２本の中に１０ｍｇずつ入れた。続いて、前記のＮａＣｌ濃度が異なる（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）の３種類の透析用の緩衝度を、ＰＥＧ付ＬＣＡカラムとコントロール用のカラムが入ったエッペンの中に、それぞれ１０００μＬずつ加えて膨潤させた。なお、空のエッペンの中にも、前記３種類の透析用緩衝液を同量ずつ入れておく。
（ハ）上記エッペン９本の中に、透析後のＨｉｓ−βをそれぞれ２００μＬずつ入れ、一晩４℃で反応させた。一晩反応させたＰＥＧ付ＬＣＡカラムとコントロール用のカラムの入ったエッペンを氷上で静置し、カラムを沈殿させたのち、その上澄の溶液を採取した。
ブラッドフォード（Ｂｒａｄｆｏｒｄ）溶液（５倍希釈液）をエッペンの中に１ｍＬずつ入れ、その中に上記の採取したカラム上澄溶液、透析用緩衝液とＨｉｓ−βのみでカラムの入っていない溶液、検量線用に各濃度のγ−グロブリン溶液（１ｍｇ／ｍＬ、０.５ｍｇ／ｍＬ、０.２５ｍｇ／ｍＬ、０.１２５ｍｇ／ｍＬ、０ｍｇ／ｍＬ）を、それぞれ３０μＬずつ加え、よくまぜ合わせ、その後室温で１５分間放置してから、吸光度計で、波長５９５ｎｍの吸光度を測定した。
（ニ）γ−ブロブリン溶液の各濃度と吸光度との関係から検量線を作成し、その検量線を用いて、上澄溶液のタンパク質濃度と、透析用緩衝液とＨｉｓ−βのみでカラムの入っていなかった溶液のタンパク質濃度を求めた。このタンパク質濃度から、カラムに吸着したＨｉｓ−βの量を算出した。
第１表に、γ−グロブリン濃度と吸光度との関係を示し、第２表に、各カラムにおける吸光度、カラム上澄タンパク質濃度、カラム未吸着Ｈｉｓ−β量及びカラム吸着Ｈｉｓ−β量を示す。また、図１にタンパク質定量検量線を、図２に、各カラム１０ｍｇ当たりのＨｉｓ−β吸着量を柱状グラフで示す。
【００１８】
【表１】
2005156372.tif 000004
【００１９】
【表２】
2005156372.tif 000005
【００２０】
なお、第２表において、各カラムのリトコール酸の固定化量は、ＰＥＧ付ＬＣＡカラム（１）で０.１５８８μｍｏｌ／ｍｇ、ＰＥＧ付ＬＣＡカラム（２）で０.１４２１μｍｏｌ／ｍｇ、ＰＥＧ付ＬＣＡカラム（３）で０.０８８２１μｍｏｌ／ｍｇ、ＰＥＧ付ＬＣＡカラム（４）で０.０７１０４μｍｏｌ／ｍｇ、ＰＥＧ付ＬＣＡカラム（５）で０.０４０９４μｍｏｌ／ｍｇである。なお、μｍｏｌ／ｍｇは、カラム１ｍｇ当たり、吸着しているリトコール酸の量（μｍｏｌ）である。
以上の結果から、リトコール酸固定化カラムにＤＮＡポリメラーゼβ（Ｈｉｓ−β）が有意に吸着していることが分かる。また、固定化するリトコール酸の量を変化させたところ、リトコール酸の固定化量が多くなるほど、ＤＮＡポリメラーゼβが多くカラムに吸着することが分かった。
【産業上の利用可能性】
【００２１】
本発明のアフィニティー吸着体を用いることにより、被処理液中の標的物質を迅速かつ簡便に分離・精製することができ、また被処理液中の特定物質を簡便に単離・同定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】実施例１におけるタンパク質定量検量線である。
【図２】実施例１における各カラム１０ｍｇ当たりのＨｉｓ−β吸着量の柱状グラフである。
【図１】
2005156372.tif 000006
【図２】
2005156372.tif 000007