(57)【要約】  【課題】メラニン凝集ホルモン受容体阻害剤の有効な疾患、特に、肥満症の予防又は治療薬として有用な化合物を提供すること。  【解決手段】シンナミル基のベンゼン環上にリンカーを介しピペリジン等の含窒素飽和へテロ環が結合することを特徴とする、4-ベンゾイルアミノ-1-シンナミルピペリジン誘導体又はその塩。  【効果】この化合物はメラニン凝集ホルモン受容体阻害作用に基づく良好な摂食抑制活性を有するため、医薬、特に抗肥満薬として有用である。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（I）で示される1-シンナミルピペリジン誘導体又はその塩。
【化１】
2005325031.tif 000021
(式中の記号は以下の意味を有する。
R1a、R1b及びR1c:同一又は互いに異なって、H、低級アルキル、ハロゲン、ハロゲノ低級アルキル、-OH、-O-低級アルキル、-S-低級アルキル又は-NO2、
R2:H又は低級アルキル、
X:-O-、-S-又は-NH-、
n:0、1、2、3又は4、
Het:単環式含窒素飽和ヘテロ環。)
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬、特にメラニン凝集ホルモン受容体阻害作用を有し、抗肥満薬として有用な1-シンナミルピペリジン誘導体、及びその製薬学的に許容される塩に関する。
【背景技術】
【０００２】
肥満は、一つに脂肪組織重量の増加した状態と定義され、エネルギー摂取と消費のバランスの破綻により生じる。過食、運動不足といった現代の生活習慣は、エネルギー収支を正に導き、世界各国における肥満人口の急激な増加に関与している(例えば、非特許文献1参照)。近年、肥満は単なる体型の問題にとどまらず、糖尿病、及び高脂血症を含む生活習慣病のリスクファクターであることが明らかとなってきた(例えば、非特許文献1参照)。
メラニン凝集ホルモン(Melanin-Concentrating-Hormone、以下MCH)は、鮭の下垂体より初めて単離された環状ペプチドホルモンである(例えば、非特許文献2参照)。その後、ラット、ヒトなどでもそのホモログが単離された(例えば、非特許文献3及び4参照)。
一方、SLC-1と称する遺伝子が得られたが、該遺伝子がMCH受容体の一つをコードする遺伝子であることが明らかとなった(例えば、非特許文献5参照)。SLC-1はヒトおよびラットの海馬、偏桃核、視床、中脳、橋、及び視床下部を含む脳の多くの領域に発現している(例えば、非特許文献6および7参照)。視床下部においては摂食およびエネルギーバランス制御に関与する弓状核、腹内側核、背内側核、及び孤束核に分布が見られ、MCHはエネルギーホメオスタシス制御を媒介する可能性が示唆されている(例えば、非特許文献8参照)。実際、SLC-1阻害剤がMCH誘発摂食および嗜好食の摂取を抑制し、高脂肪食による体重増加を抑制した(例えば、非特許文献9および10参照)。従って、MCH受容体阻害剤、特にSLC-1阻害剤は抗肥満薬として有用であると考えられる。
【０００３】
これまでにMCH受容体阻害作用或いはSLC-1阻害作用を有する化合物が報告されている。例えば、前記非特許文献9及び10には、各々テトラヒドロナフタレン誘導体及び4-フェニルピペリジン誘導体が開示されている。その他、下記一般式で示される化合物が報告されている（特許文献1）。
【化２】
2005325031.tif 000002
(式中、Arは置換基を有していてもよく、縮合してもよい芳香環、X1は置換基を有していてもよく、主鎖の原子数が1ないし5である2価の鎖状基、X4は結合手等、X2は非環式炭化水素基等、X3は結合手または置換基を有していてもよい2価の非環式炭化水素基、R2は塩基性置換基。詳細は当該公報参照。)
【０００４】
また、下記一般式で示される化合物が、MCH受容体阻害作用を有することが報告されている(特許文献2)。
【化３】
2005325031.tif 000003
(式中、R1〜R8は同一若しくは互いに異なって、水素原子、ハロゲン、C1-C6アルキル又はC1-C6アルコキシ等、R9〜R19は独立して水素原子又はC1-C6アルキル、Wは窒素原子又はC-Ra、Raは水素原子又は水酸基等、Xはハロゲン、シアノ又はニトロ等、Yは酸素原子、硫黄原子、-S(O)-又は-SO2-、ZはC1-C6アルキル等。詳細は当該公報参照。)
【０００５】
一方、これまでに、4-ベンゾイルアミノ-1-シンナミルピペリジン構造を有する化合物が報告されている。例えば、下記一般式で示される化合物が、ミクロソームトリグリセリド移入蛋白の阻害作用を有し、肥満の予防又は治療に有用であることが報告されている(特許文献3)。
【化４】
2005325031.tif 000004
(式中、R1はアルキル、アルケニル又はアリールアルケニル等[これらは有効な炭素原子を介してハロゲン、アルコキシ、アリールオキシ等から選択される1、2又は3個の基で置換されていてもよい]、R5は炭素数2以上のアルキル、アルケニル又はアリール等、R6は水素原子等。詳細は当該公報参照。)
当該公報には、該化合物のMCH受容体又はSLC-1の阻害活性に関して何らの記載もない。
【０００６】
また、下記一般式で記載される化合物がドーパミン拮抗及びセロトニン作動活性を有し、精神病又は躁病等の治療に有用であることが報告されている（特許文献4）。また、特許文献5〜8中に、特許文献4と類似の構造及び作用を有する化合物が記載されている。
【化５】
2005325031.tif 000005
(式中、Rはハロゲン原子又はヒドロキシ基等、R1は水素原子又はアミノ基等、R2はニトロ基若しくはトリフルオロメチル基等、R8は水素原子等、R5〜R7はそれぞれが水素原子等、Wは低級アルケニル基等、R4中のR8〜R10は水素原子、若しくはハロゲン原子、又は低級アルコキシ等。詳細は当該公報参照。)
特許文献4〜8のいずれにおいても、該化合物のMCH受容体阻害作用に関する記載はなく、また、シンナミル基のベンゼン環上にリンカーを介して含窒素飽和ヘテロ環を有する化合物については、開示も示唆もない。
【０００７】
【非特許文献１】Kopelman P.G. (2000) Nature 404、 635-643
【非特許文献２】Kawauchi、H. et al. (1983) Nature 305、 321-323
【非特許文献３】Nahon、J.L. et al. (1989) Endocrinology 125、 2056-2065
【非特許文献４】Presse、F. et al. (1990) Mol.Endocrinol. 4、 632-637
【非特許文献５】Saito、Y. et al. (1999) Nature 400、 265-269
【非特許文献６】Kolakowski L. F. et al. (1996) FEBS Lett.398、 253-258
【非特許文献７】Lembo P. M. C. et al. (1999) Nature Cell Biol. 1、 267-271
【非特許文献８】Hervieu G. J. et al. (2000) Eur. J. Neurosci. 12、 1194-1216
【非特許文献９】Takekawa S. et al. (2002) Eur. J. Phramacol. 438、 129-135
【非特許文献１０】Borowski B. et al. (2002) Nature Med. 8、 825-830
【特許文献１】特開2001-226269号公報
【特許文献２】国際公開第02/004433号パンフレット
【特許文献３】特開平07-165712号公報
【特許文献４】特開昭53-087365号公報
【特許文献５】特開昭53-090267号公報
【特許文献６】特開昭53-087364号公報
【特許文献７】アイルランド国特許発明第46270号明細書
【特許文献８】スイス国特許出願公開第628885号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の課題は、MCH受容体阻害作用に基づく良好な摂食抑制作用を有し、新規な抗肥満薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者等は、MCH受容体阻害作用を有する化合物につき鋭意検討した結果、下記一般式に示される、シンナミル基のベンゼン環上にリンカーを介しピペリジン等の含窒素飽和ヘテロ環が結合することを特徴とする、4-ベンゾイルアミノ-1-シンナミルピペリジン誘導体が、MCH受容体阻害作用に基づく良好な摂食抑制活性を有することを確認し、これを有効成分とする医薬組成物が、優れた抗肥満薬となりうることを知見して本発明を完成した。
即ち、本発明は下記一般式（I）で示される新規な1-シンナミルピペリジン誘導体又はその塩に関する。
【００１０】
【化６】
2005325031.tif 000006
(式中の記号は以下の意味を有する。
R1a、R1b及びR1c:同一又は互いに異なって、H、低級アルキル、ハロゲン、ハロゲノ低級アルキル、-OH、-O-低級アルキル、-S-低級アルキル又は-NO2、
R2:H又は低級アルキル、
X:-O-、-S-又は-NH-、
n:0、1、2、3又は4、
Het:単環式含窒素飽和ヘテロ環。以下同様。)
【発明の効果】
【００１１】
本発明化合物は、MCH受容体阻害作用に基づく良好な摂食抑制活性を有していることから、抗肥満薬、或いは肥満に起因する生活習慣病の予防又は治療薬として有用である。
すなわち、後記のように、本発明化合物は優れたMCH受容体阻害作用を示し、マウス絶食誘発摂食に対して良好な抑制作用を有する。また、本化合物は、医薬品開発において近年問題となっているQT延長作用のない効果的な抗肥満薬として期待される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、本発明について詳述する。
本明細書中の一般式の定義において「低級」なる用語は、特に断らない限り、炭素数が1〜6(以後、C1-6と略す)の直鎖又は分枝状の炭素鎖を意味する。従って「低級アルキル」とはC1-6アルキルであり、好ましくはメチル、エチル、プロピル基の直鎖状のアルキル、及びイソプロピル、ブチル、イソブチル、tert-ブチル基等の分枝状のアルキルである。メチル、エチル、プロピル及びイソプロピル基が特に好ましい。
「ハロゲン」は、F、Cl、Br及びIを示す。「ハロゲノ低級アルキル」とは、好ましくは1個以上のハロゲンで置換されたC1-6アルキルを意味し、より好ましくは1個以上のFで置換されたC1-6アルキルであり、更に好ましくは、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル及びトリフルオロエチル基である。
【００１３】
「単環式含窒素飽和ヘテロ環」としては、1つのN原子を含み、更にN、S及びOからなるヘテロ原子を1つ含んでいてもよい4〜8員飽和若しくは一部不飽和の単環ヘテロ環基であり、好ましくは、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、アゼパニル、ジアゼパニル、モルホリニル、チオモルホリニル及びテトラヒドロピリジル基、より好ましくはアゼチジニル、ピロリジニル及びピペリジニル基である。
【００１４】
一般式(I)で示される化合物において、好ましい態様は以下のとおりである。R1a、R1b及びR1cとして好ましくは、同一または互いに異なって、H、メチル、エチル、F、Cl、Br、-OMe又は-S-Me、より好ましくはH、F、Cl又は-OMeである;
R2としてはHが好ましい;
Xとしては-O-が好ましい;
nとしては0が好ましい;
Hetとしてはアゼチジニル、ピロリジニル又はピペリジニルが好ましい。
本発明において特に好ましい化合物は、下記(I-a)で示される誘導体及びその塩である。
【化７】
2005325031.tif 000007
(式中、R1a〜R1cは前記と同じ意味を有し、mは0又は1を、kは0又は1を示す。)
【００１５】
本発明化合物にはアミド結合の回転障害に基づく互変異性体が存在する場合がある。本発明にはこれらの異性体の各々及び混合物も包含される。
また、本発明化合物は不斉炭素原子を有する場合があり、これに基づく(R)体、(S)体の光学異性体が存在しうる。本発明はこれらの光学異性体の混合物や単離されたものを全て包含する。また、本発明には、本発明化合物を放射性同位元素でラベルした化合物を包含する。
【００１６】
本発明化合物の製薬学的に許容される塩としては、具体的には塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等の有機酸との酸付加塩等が挙げられる。
更に、本発明化合物には、薬理学的に許容されるプロドラッグも含まれる。薬理学的に許容されるプロドラッグとは、加溶媒分解により又は生理学的条件下で本発明のNH2、OH、CO2H等に変換できる基を有する化合物である。プロドラッグを形成する基としては、Prog. Med.、 5、 2157-2161 (1985)や「医薬品の開発」(廣川書店、1990年)第7巻 分子設計p163-198に記載の基が挙げられる。
さらに、本発明化合物及びその塩には、各種の水和物や溶媒和物及び結晶多形の物質が包含される。
【００１７】
(製造法)
本発明化合物及びその塩は、その基本骨格或いは置換基の種類に基づく特徴を利用し、種々の公知の合成法を適用して製造することができる。その際、官能基の種類によっては、当該官能基を原料乃至中間体の段階で適当な保護基で保護、又は当該官能基に容易に転化可能な基に置き換えておくことが製造技術上効果的な場合がある。このような官能基としては例えばアミノ基、水酸基、カルボキシル基等であり、それらの保護基としては例えばグリーン(T. W. Greene)及びウッツ(P. G. M. Wuts)著、「Protective Groups in Organic Synthesis(第3版、1999年)」に記載の保護基を挙げることができ、これらを反応条件に応じて適宜選択して用いればよい。このような方法では、当該保護基を導入して反応を行った後、必要に応じて保護基を除去、或いは所望の基に転化することにより、所望の化合物を得ることができる。
また、本発明化合物(I)のプロドラッグは上記保護基と同様、原料乃至中間体の段階で特定の基を導入、或いは得られた本発明化合物(I)を用い、反応を行うことで製造できる。反応は通常のエステル化、アミド化、脱水等、当業者により公知の方法を適用することにより行うことができる。
以下に本発明化合物又はその中間体の代表的な製造法について説明するが、これらの製造法に限定されるものではない。
【００１８】
(第1製造法)
【化８】
2005325031.tif 000008
(上記式中、X1はOH又は脱離基[ハロゲン、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール-1-イルオキシ、メトキシ、フェノキシ及びアジド基等]を表す。以下同様。)
本発明化合物(I)は、一般式(1)で表される化合物と一般式(2)で表される化合物とを、アミド化反応に供することにより得られる。
式(2)においてX1がOHである化合物を用いる場合、本反応は、化合物(1)及び化合物(2)を等量或いは一方を過剰に用い、縮合試薬(ジシクロヘキシルカルボジイミド、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド又は1,1'-カルボニルジイミダゾール(CDI)等)の存在下、反応に不活性な溶媒中、冷却下乃至加熱下で攪拌しながら行われる。上述の反応に不活性な溶媒としては、例えばジクロロメタン、1,2-ジクロロエタン(DCE)、クロロホルム、ベンゼン、トルエン、キシレン、エーテル、テトラヒドロフラン(THF)、ジオキサン、酢酸エチル(EtOAc)、エタノール、メタノール、2-プロパノール、アセトニトリル、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、N,N-ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドン、ジメチルイミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド(DMSO)、アセトン、メチルエチルケトン又は水等や、これらの均一系及び不均一系混合溶媒が挙げられるが、種々の反応条件に応じて適宜選択される。塩基(例えばトリエチルアミン(TEA)、ジイソプロピルエチルアミン及びピリジン等の有機塩基、又は炭酸カリウム及び炭酸水素ナトリウム等の無機塩基)の存在下、反応を行うことが好ましい場合がある。また、クロロギ酸エチルやクロロギ酸イソブチルを用いる混合酸無水物法等、通常アミド化に使用される縮合法を利用することもできる。
また、式(2)においてX1が前記脱離基である反応性誘導体を用いる場合、前記同様の塩基の存在下或いは非存在下に、アミン化合物(1)と反応させる。このような反応性誘導体は対応するカルボン酸化合物から容易に導く事が可能であり、例えばX1がハロゲンである反応性誘導体は、カルボン酸化合物をチオニルクロリド、オキザリルクロリド又はオキシ塩化リン等のハロゲン化試剤で処理すればよい。
以上のアミド化反応については、例えば、M.Bodanszky著「Peptide Chemistry」(1988年、p55-73)、泉屋信夫ら「ペプチド合成の基礎と実験」(1985年、p89-142)に詳細に記載されており、これらを参考に実施することができる。
【００１９】
(第2製造法)
【化９】
2005325031.tif 000009
本発明化合物(I)は、一般式(3)で表されるアミン化合物と一般式(4)で表されるホルミル化合物とを、還元的アミノ化反応に供することにより得られる。
本反応では、まず、化合物(1)及び(2)を等量或いは一方を過剰に用い、第1製造法に記載の反応に不活性な溶媒中、冷却下乃至加熱下で攪拌し脱水縮合を行う。次いで、反応系に水素化シアノホウ素ナトリウム、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム、水素化ホウ素ナトリウム又はギ酸等の還元剤を加え、冷却下乃至加熱下攪拌して還元反応を行う。酸(例えばチタニウムテトライソプロポキシド等のルイス酸、酢酸又はp-トルエンスルホン酸等)の存在下に反応させるのが、反応を円滑に進行させる上で有利な場合がある。上述の還元については水素雰囲気下或いはギ酸アンモニウム等の水素供与剤存在下、パラジウム(Pd)、又は白金(Pt)等の金属触媒を用いて前記の反応に不活性な溶媒中接触水素還元することによっても行われる。
還元剤の添加時期は化合物(3)及び化合物(4)の混合直後に入れても、また、時間をおいて入れても良い。
以上の還元的アミノ化反応に関しては、例えば、日本化学会編「実験化学講座(丸善)」(第4版、20巻、1992年、p300)に詳細に記載されており、これを参考に実施することができる。
【００２０】
(第3製造法)
本発明化合物(I)は、一般式(3)で表されるアミン化合物、一般式(5)で表されるWittig試薬又はHorner-Emmons試薬、及び一般式(6)で表されるアルデヒド化合物を用い、アルキル化とオレフィン化の反応を組み合わせて製造することができる。
【化１０】
2005325031.tif 000010
(上記式中、X2は脱離基[ハロゲン、メタンスルホニルオキシ又はp-トルエンスルホニルオキシ等]、X3はWittig試薬又はHorner-Emmons試薬に用いられる基[ホスホニウム塩又は亜リン酸ジエステル等]を表す。以下同様。)
本反応は、等量から過剰量の塩基(例えばTEA及びジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基又は炭酸カリウム、炭酸ナトリウム及び炭酸セシウム等の無機塩基)存在下、化合物(3)、化合物(5)及び化合物(6)を第1製造法に記載の反応に不活性な溶媒中、等量またはいずれかを過剰量用いて、冷却下乃至加熱下攪拌しながら行われる。添加剤(ヨウ化テトラ-n-ブチルアンモニウム又はヨウ化カリウム等)の存在下に反応させるのが、反応を円滑に進行させる上で有利な場合がある。
先に化合物(3)と化合物(5)とを反応させ、一旦中間体を単離した後、化合物(6)との反応を行っても良い。また、先に化合物(5)と化合物(6)とを反応させ、一旦中間体を単離した後、化合物(3)との反応を行っても良い。
【００２１】
(原料化合物の製造法)
原料化合物(1)又は(3)は、それぞれ対応する原料化合物から、前記第2製造法の還元的アミノ化反応又は第1製造法のアミド化反応、あるいは第3製造法のアルキル化及びオレフィン化反応と同様の方法を用い、以下の反応経路により製造できる。
【化１１】
2005325031.tif 000011
(上記式中、P1及びP2はアミノ基の保護基を表す。)
【００２２】
原料化合物(6)は、下記反応経路に従って製造できる。ここで、置換反応は、反応に不活性な溶媒中、等量または一方を過剰量用いて、冷却下乃至加熱下攪拌しながら行われる。塩基(例えば炭酸カリウム、炭酸ナトリウム及び炭酸セシウム等の無機塩基、TEA及びジイソプロピルエチルアミン等の有機塩基、カリウムtert-ブトキシド及びナトリウムtert-ブトキシド等の金属アルコキシド、又は水素化ナトリウム及び水素化リチウム等)の存在下に反応させるのが、反応を円滑に進行させる上で有利な場合がある。また、還元反応は、例えば、日本化学会編「実験化学講座(丸善)」(第4版、21巻、1991年、p89)に詳細に記載されており、これらを参考に実施することができる。
【化１２】
2005325031.tif 000012
(上記式中。X4はフルオロ基又はクロロ基等の脱離基を表す。以下同様。)
【００２３】
原料化合物(4)は、下記反応経路に従って製造することができる。ここで縮合反応は日本化学会編「実験化学講座(丸善)」(第4版、19巻、1992年、p57)に記載の方法を、還元反応は日本化学会編「実験化学講座(丸善)」(第4版、21巻、1991年、p83)に記載の方法を、また、酸化反応は日本化学会編「実験化学講座(丸善)」(第4版、21巻、1991年、p2)に記載の方法を、各々参考に実施することができる。
なお、還元反応においては、化合物(15)の保護基を除去しカルボキシル基とした化合物を用いて、これを直接還元する方法、又はカルボキシル基を第1製造法に記載の手法で反応性誘導体に導いた後に還元する方法、によっても行うことが可能である。
【化１３】
2005325031.tif 000013
(上記式中、P3はカルボキシル基の保護基を表す。) 
【００２４】
このようにして製造された本発明化合物又は原料化合物は、遊離のまま、あるいはその塩として単離される。当該化合物の塩は遊離の塩基である本発明化合物に通常の造塩反応を付すことにより製造できる。また本発明化合物又はその塩は、その水和物、その溶媒和物、あるいは結晶多形の物質として単離精製される。単離・精製は抽出、濃縮、留去、結晶化、濾過、再結晶、各種クロマトグラフィー等の通常の化学操作を適用して行われる。
各種の異性体は異性体間の物理化学的な性質の差を利用して常法により単離できる。例えば光学異性体は、ラセミ化合物を光学活性な有機酸(酒石酸等)とのジアステレオマー塩に導いた後に分別再結晶する方法、或いはキラル充填材を用いたカラムクロマトグラフィー等の手法により、各々分離精製することができる。また、光学活性化合物は適切な光学活性化合物を原料として用いることにより製造することもできる。
【００２５】
本発明化合物又はその塩の1種又は2種以上を有効成分として含有する医薬組成物は、通常製剤化に用いられる担体や賦形剤、その他の添加剤を用いて調製される。
投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、或いは静注、筋注等の注射剤、坐剤、経皮剤、経鼻剤或いは吸入剤等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。投与量は症状、投与対象の年齢、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定されるが、通常、経口投与の場合、成人1日当たり0.001 mg/kg乃至100 mg/kg程度であり、これを1回で、或いは2〜4回に分けて投与する。また、症状によって静脈投与される場合は、通常、成人1回当たり0.0001 mg/kg乃至10 mg/kgの範囲で1日に1回乃至複数回投与される。また、吸入の場合は、通常、成人1回当たり0.0001 mg/kg乃至1 mg/kgの範囲で1日に1回乃至複数回投与される。
本発明による経口投与のための固体組成物としては、錠剤、散剤、顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては、一つ又はそれ以上の活性物質が、少なくとも一つの不活性な賦形剤、例えば乳糖、マンニトール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等と混合される。組成物は、常法に従って、不活性な添加剤、例えばステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤やカルボキシメチルスターチナトリウム等の崩壊剤、溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤又は丸剤は必要により糖衣又は胃溶性若しくは腸溶性コーティング剤で被膜してもよい。
【００２６】
経口投与のための液体組成物は、薬剤的に許容される乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含み、一般的に用いられる不活性な溶剤、例えば精製水、エタノールを含む。この組成物は不活性な溶剤以外に可溶化剤、湿潤剤、懸濁化剤のような補助剤、甘味剤、矯味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。
非経口投与のための注射剤としては、無菌の水性又は非水性の液剤、懸濁剤、乳剤を含む。水性の溶剤としては、例えば注射用蒸留水及び生理食塩水が含まれる。非水性の溶剤としては、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物油、エタノールのようなアルコール類、ポリソルベート80(商品名)等がある。このような組成物は、さらに等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤を含んでもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の配合又は照射によって無菌化される。また、これらは無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌水又は無菌の注射用溶媒に溶解、懸濁して使用することもできる。
【実施例】
【００２７】
以下、実施例に基づき本発明を更に詳細に説明する。本発明化合物は下記実施例に記載の化合物に限定されるものではない。また原料化合物の製法を参考例に示す。また、後記表7の化合物は下記実施例や前記製造法に記載の方法とほぼ同様にして、或いはそれらの方法より当業者に自明な若干の変法を適用することにより、容易に製造することができる。
実施例、参考例及び後記表中の記号は各々以下の意味を有する。
Rf.:参考例番号;  Ex.:実施例番号;  Structure:構造式;  Salt:付加塩;  Data:物理化学的性状(FA: FAB-MS (M+1);  EI: EI-MS (M+);  ESI: ESI-MS (M+1);  LC: LC-MS (M+1);  N:NMR(DMSO-d6、TMS内部標準)の特徴的ピークδppm);  NO.:化合物番号;  Me:メチル;  Et:エチル;  iPr:イソプロピル;  Boc:tert-ブトキシカルボニル;  fum:フマル酸塩;  2HCl:2塩酸塩;  無記載:フリー体
【００２８】
参考例1
(±)-4-ヒドロキシアゼパン-1-カルボン酸 tert-ブチル5.16gのDMF40ml溶液にtert-ブトキシカリウム3.36gを加え、60℃で1時間攪拌した後、4-フルオロベンゾニトリル2.42gを加えて、60℃で2時間攪拌した。反応液を室温まで冷却した後、減圧下に溶媒を留去し、残渣をEtOAcで希釈した。水及び飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下に溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(EtOAc:ヘキサン=1:4→1:3)で精製し、無色油状の(±)-4-(4-シアノフェノキシ)アゼパン-1-カルボン酸 tert-ブチル4.36gを得た。FA:317
参考例2
(±)-4-(4-シアノフェノキシ)アゼパン-1-カルボン酸 tert-ブチル4.30gのトルエン80ml溶液に、-78℃で攪拌下、反応液の温度が-60℃を超えないように水素化ジイソブチルアルミニウム(1.0mol/l トルエン溶液)41mlを滴下した。-78℃で2時間攪拌した後、同温度でメタノール及び飽和酒石酸ナトリウムカリウム水溶液を滴下し、ゆっくりと室温まで昇温した。不溶物を濾去した後、減圧下に溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(EtOAc:ヘキサン=1:4)で精製して、淡黄色油状の(±)-4-(4-ホルミルフェノキシ)アゼパン-1-カルボン酸 tert-ブチル4.06gを得た。FA:320
参考例3
水素化ナトリウム1.4gのTHF50ml懸濁液に氷冷下ジエチルホスホノ酢酸エチル6.3mlを加え、30分間攪拌した後、4-(4-ホルミルフェノキシ)ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル8.1g、THF30ml溶液を滴下した。室温まで徐々に昇温して一晩攪拌した後、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、EtOAcを用いて抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に溶媒を留去した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(EtOAc:ヘキサン=1:6→1:4)で精製し、無色油状の4-{4-[(1E)-3-エトキシ-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]フェノキシ}ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル8.23gを得た。FA:376
参考例4
4-{4-[(1E)-3-エトキシ-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]フェノキシ}ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル8.2gのTHF44ml溶液に-78℃撹拌下水素化ジイソブチルアルミニウム1.0Mトルエン溶液51mlを内温が-60℃を越えない範囲で徐々に滴下し、2時間攪拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え室温に昇温し、EtOAcを加え、5%硫酸水素カリウム溶液で洗浄した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下に溶媒を留去し、淡黄色粉末の4-{4-[(1E)-3-ヒドロキシプロパ-1-エン-1-イル]フェノキシ}ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル7.2gを得た。FA:334
【００２９】
参考例5
4-{4-[(1E)-3-ヒドロキシプロパ-1-エン-1-イル]フェノキシ}ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル2.00gのジクロロメタン50ml溶液に、室温撹拌下酸化マンガン（IV）5.00gを加え一晩攪拌した。セライトを用いて濾過した後、減圧下に溶媒を留去し、淡黄色粉末の4-{4-[(1E)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]フェノキシ}ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル2.00gを得た。FA:332
参考例6
ピペリジン-4-イルカルバミン酸 tert-ブチル4.01gのジクロロメタン65ml溶液に4-{4-[(1E)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]フェノキシ}ピペリジン-1-カルボン酸tert-ブチル6.64g及び酢酸3.44mlを加え、室温で1.5時間攪拌した後、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム12.73gを加え、室温で65時間攪拌した。反応液をEtOAc200mlで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に溶媒を留去した後、残渣をジイソプロピルエーテルで洗浄し、無色固体の4-[4-((1E)-3-{4-[(tert-ブトキシカルボニル)アミノ]ピペリジン-1-イル}プロパ-1-エン-1-イル)フェノキシ]ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル7.83gを得た。FA:516
参考例7
4-[4-((1E)-3-{4-[(tert-ブトキシカルボニル)アミノ]ピペリジン-1-イル}プロパ-1-エン-1-イル)フェノキシ]ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル7.82gのEtOAc20ml溶液に、氷冷下4M塩酸-EtOAc60mlを加え、徐々に室温まで昇温しながら3時間攪拌した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣をEtOAcで洗浄した。得られた化合物をクロロホルム200mlに溶解し、1M水酸化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下に溶媒を留去し、淡黄色油状の1-{(2E)-3-[4-(ピペリジン-4-イルオキシ)フェニル]プロパ-2-エン-1-イル}ピペリジン-4-アミン7.83gを得た。FA:316
参考例8
1-{(2E)-3-[4-(ピペリジン-4-イルオキシ)フェニル]プロパ-2-エン-1-イル}ピペリジン-4-アミン1.61gのベンゼン20ml溶液に、ベンズアルデヒド0.54gを加え、加熱還流下、生成する水を共沸により除去しながら、5時間攪拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジ-tert-ブチル ジカルボナート1.11gを加え、室温で16時間攪拌した。次いで、1M硫酸水素カリウム水溶液6.6mlを加えて室温で2時間攪拌した後、濃アンモニア水0.88gを加え、室温で1時間攪拌した。クロロホルム30mlで3回抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム:メタノール:濃アンモニア水=90:10:1)で精製し、無色固体の4-{4-[(1E)-3-(4-アミノピペリジン-1-イル)プロパ-1-エン-1-イル]フェノキシ}ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル1.57gを得た。FA:416
【００３０】
参考例9
4-フルオロ-3-ヒドロキシ安息香酸メチル0.51gのアセトニトリル15ml溶液に炭酸カリウム0.62g及び2-ヨードプロパン0.44mlを加え、室温で24時間攪拌した後、60℃で11時間攪拌した。反応液を室温まで冷却した後、水で希釈し、EtOAcで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、 無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(EtOAc:ヘキサン=1:10)で精製し、無色油状の4-フルオロ-3-イソプロポキシ安息香酸メチル0.66gを得た。EI:212
参考例10
4-フルオロ-3-イソプロポキシ安息香酸メチル0.59gのメタノール14ml溶液に、1M水酸化ナトリウム水溶液7ml溶液を加え、60℃で14時間攪拌した。反応液を室温まで冷却した後、減圧下に溶媒を留去し、残渣に1M塩酸水溶液を加えて酸性とした。析出物を濾取した後、水で洗浄し、無色固体の4-フルオロ-3-イソプロポキシ安息香酸0.55gを得た。FA:197 (M-1)
参考例11
3-クロロ-5-メトキシ安息香酸0.74gのDMF10ml溶液に、N-エチル-N'-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド 塩酸塩0.99g及び1-ヒドロキシベンゾトリアゾール0.70gを加えた後、氷冷下、1時間攪拌し、4-アミノピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル0.79gを加え、室温で18時間攪拌した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣をEtOAcで洗浄し、無色固体の4-[(3-クロロ-5-メトキシベンゾイル)アミノ]ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル1.24gを得た。ESI:369
参考例12
4-[(3-クロロ-5-メトキシベンゾイル)アミノ]ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル1.22gのEtOAc3ml溶液に、氷冷下、4M塩酸-EtOAc9mlを加え、ゆっくり室温まで昇温しながら2時間攪拌した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣を酢酸エチルで洗浄し、無色固体の3-クロロ-5-メトキシ-N-ピペリジン-4-イルベンズアミド 塩酸塩を得た。この化合物を1M水酸化ナトリウム水溶液に溶解した後、クロロホルムで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣をEtOAc-ヘキサン混合溶媒で洗浄し、無色固体の3-クロロ-5-メトキシ-N-ピペリジン-4-イルベンズアミド0.88gを得た。ESI:269
参考例13〜35
参考例1と同様の方法により参考例13の化合物を、参考例2と同様の方法により参考例14の化合物を、参考例3と同様の方法により参考例15から18の化合物を、参考例4と同様の方法により参考例19から22の化合物を、参考例5と同様の方法により参考例23から26の化合物を、参考例10と同様の方法により参考例27の化合物を、参考例11と同様の方法により参考例28から31の化合物を、参考例12と同様の方法により参考例32から35の化合物を各々製造した。参考例13から35の化合物の構造式と物理化学的性状を後記表2に示す。
【００３１】
実施例1
3-クロロ-4-フルオロ-N-ピペリジン-4-イルベンズアミド0.26gの2-プロパノール10ml溶液に、臭化(2-クロロエチル)トリフェニルホスホニウム0.45g、炭酸カリウム0.70g、よう化テトラ-n-ブチルアンモニウム0.07g及び3-(4-ホルミルフェノキシ)アゼチジン-1-カルボン酸 tert-ブチル0.28gを加え、加熱還流下、16時間攪拌した。室温まで冷却した後、減圧下に溶媒を留去した。残渣をEtOAcで希釈し、水及び飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下に溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム:メタノール:濃アンモニア水=98:2:0.2)で精製して、油状の3-[4-((1E)-3-{4-[(3-クロロ-4-フルオロベンゾイル)アミノ]ピペリジン-1-イル}プロパ-1-エン-1-イル)フェノキシ]アゼチジン-1-カルボン酸 tert-ブチル0.11gを得た。
得られた化合物0.106gのEtOAc2ml溶液に、氷冷下、4M塩酸-EtOAc6mlを加え、ゆっくり室温まで昇温しながら2時間攪拌した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣を酢酸エチル-メタノールの混合溶媒で洗浄し、無色固体のN-(1-{(2E)-3-[4-(アゼチジン-3-イルオキシ)フェニル]プロパ-2-エン-1-イル}ピペリジン-4-イル)-3-クロロ-4-フルオロベンズアミド 塩酸塩0.042gを得た。
実施例2
3-クロロ-4-フルオロ安息香酸87mg及び4-{4-[(1E)-3-(4-アミノピペリジン-1-イル)プロパ-1-エン-1-イル]フェノキシ}ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル207mgのDMF10ml溶液に、N-エチル-N'-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド 塩酸塩143mg及び1-ヒドロキシベンゾトリアゾール114mgを加え、室温で19時間攪拌した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣をEtOAcで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム:メタノール=20:1)で精製し、淡黄色無晶状粉末の4-[4-((1E)-3-{4-[(3-クロロ-4-フルオロベンゾイル)アミノ]ピペリジン-1-イル}プロパ-1-エン-1-イル)フェノキシ]ピペリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル254mgを得た。
得られた化合物185mgから、実施例1と同様の方法によりBocを除去し、無晶状粉末の3-クロロ-4-フルオロ-N-(1-{(2E)-3-[4-(ピペリジン-4-イルオキシ)フェニル]プロパ-2-エン-1-イル}ピペリジン-4-イル)ベンズアミド 塩酸塩176mgを得た。
【００３２】
実施例3
3-クロロ-4-フルオロ-N-ピペリジン-4-イルベンズアミド0.13g及び(3S)-3-{4-[(1E)-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル]フェノキシ}ピロリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル0.16gのジクロロメタン5ml溶液に、酢酸0.09mlを加え、室温で1.5時間攪拌した後、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム0.32gを加えて、室温で14時間攪拌した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣をEtOAcで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下に溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム:メタノール:濃アンモニア水=98:2:0.2)で精製し、無色無晶状粉末の(3S)-3-[4-((1E)-3-{4-[(3-クロロ-4-フルオロベンゾイル)アミノ]ピペリジン-1-イル}プロパ-1-エン-1-イル)フェノキシ]ピロリジン-1-カルボン酸 tert-ブチル0.24gを得た。
得られた化合物0.23gから、実施例1と同様の方法によりBocを除去し、無色固体の3-クロロ-4-フルオロ-N-[1-((2E)-3-{4-[(3S)-ピロリジン-3-イルオキシ]フェニル}プロパ-2-エン-1-イル)ピペリジン-4-イル]ベンズアミド 塩酸塩0.158gを得た。
実施例4
3-クロロ-4-フルオロ-N-ピペリジン-4-イルベンズアミド0.124g及び(2E)-3-[4-(3-ピロリジン-1-イルプロポキシ)フェニル]アクリルアルデヒドのTHF5ml懸濁液に酢酸0.28mlを加え、室温で30分間攪拌した後、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム0.31gを加えて、室温で5時間攪拌した。反応液に炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてアルカリ性とした後、EtOAcで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム:メタノール:濃アンモニア水=10:1:0.1)で精製し、無色固体の3-クロロ-4-フルオロ-N-(1-((2E)-3-[4-(3-ピロリジン-1-イルプロポキシ)フェニル]プロパ-2-エン-1-イル)ピペリジン-4-イル)ベンズアミド0.23gを得た。この化合物0.21gのエタノール溶液にフマル酸0.046gを加え、室温で1時間攪拌した。減圧下に溶媒を留去した後、残渣をEtOAcで洗浄し、無色固体の3-クロロ-4-フルオロ-N-(1-{(2E)-3-[4-(3-ピロリジン-1-イルプロポキシ)フェニル]プロパ-2-エン-1-イル}ピペリジン-4-イル)ベンズアミド フマル酸塩0.161gを得た。
実施例5〜36
実施例1と同様の方法により実施例5の化合物を、実施例2と同様の方法により、6から25の化合物を、実施例3と同様の方法により実施例26から35の化合物を、実施例4と同様の方法により実施例36の化合物を各々製造した。各実施例化合物の構造式と物理化学的性状を後記表3から6に示す。
【００３３】
実施例37
(i) マウスSLC-1遺伝子の単離と発現ベクターへのクローニング及びSLC-1安定発現細胞の作製
マウスSLC-1をコードする全長cDNA(配列番号3)は、PCRにより取得した。SLC-1をコードする遺伝子の増幅には、マウス脳由来のcDNAを鋳型に、フォワードプライマーとして5'-ggaaagcttgccgccatggatytgcaagcctcgttgc-3'(配列番号1)、 リバースプライマーとして5'-ggactcgagtcaggtgcctttgctttctgtc-3'(配列番号2)を用いた。PCRはPfuTurbo DNA Polymerase (Stratagene社)を用い、94℃(30秒)/60℃(30秒)/74℃(1分)のサイクルを35回繰り返した。その結果、1062塩基のオープンリーディングフレーム(配列番号:3)を有するDNA断片が増幅された。この断片をpcDNA3.1/Zeo(+) (Invitrogen社)のHindIII/XhoIサイトに挿入し、マウスSLC-1発現ベクタ-を構築した。
TypeI Collagenをコートした10cm培養シャーレ(旭テクノグラス社)に293細胞を1x106細胞で播種して24時間培養後、0.8μgのpcDNA3.1/Hygro(+)(Invitrogen社)及び7.2μgのpSRE-Luc (Clontech社)をFuGENE6(Boeringer Mannheim社)を用いて遺伝子導入した。遺伝子導入40時間後に新たに10cm培養シャーレに播種しなおし、100μg/mlのhygromycin (Boehringer Mannheim社)で選択し、生き残ってコロニーを形成した細胞を回収し、SRE-lucierase遺伝子安定導入細胞を得た。更にこの細胞に同様にマウスSLC-1発現ベクタ-をFuGENE6(Boeringer Mannheim社)を用いて遺伝子導入し、40μg/mlのzeocin (Invitrogen社)で選択し、本発明のマウスSLC-1安定発現細胞を得た。
【００３４】
(ii) 被験物のルシフェラーゼレポーターアッセイを用いたマウスSLC-1アンタゴニスト活性の測定
作製したマウスSLC-1安定発現細胞を96ウェルプレートに1ウェルあたり9x103個播種して37℃で24時間培養した。被検物を添加し、37℃で10分間培養後、MCHを最終濃度50nMになるように添加した。このとき、被検物未添加、及びMCH未刺激群を作り、被検物のSLC-1活性化阻害率の算出に用いた。37℃で4時間反応後、培地を廃棄し、細胞溶解液(12.5mM Tris HCl(pH7.8)、 1mM DTT、 5%  glycerol、 0.5% Triton-X100)を含んだルシフェリン基質液(3.8mM Tricine、 0.3mM MgC03、 0.5mM MgSO4、 20μM EDTA、 24mM DTT、 0.015% CoenzymeA、 40μM ATP、 0.01% ルシフェリン)を1ウェルあたり150μl加えて溶解、反応させた。続いてルシフェラーゼの活性をルミノメーター(ML3000;ダイナテックラボラトリーズ社)を用いて測定した。SLC-1活性化阻害率(%)=(被験物とMCHを添加したときのルシフェラーゼ活性-何も添加していないときのルシフェラーゼ活性)/(MCHのみを添加したときのルシフェラーゼ活性-何も添加していないときのルシフェラーゼ活性x100として、阻害率から被験物のIC50値を算出した。
本発明化合物は優れたメラニン凝集ホルモン受容体阻害作用を示した。代表的な実施例化合物につき結果を下表に示す。
【００３５】
【表１】
2005325031.tif 000014
実施例38
絶食誘発摂食に対する作用
(i)動物
雄性ddyマウス(7-9週令,日本SLC株式会社)を使用した。動物は標準飼育条件下(明期 7:30 - 20:30, 室温23 ± 2 ℃, 湿度55 ± 10 % )で飼育し,給餌および飲水は自由に行わせた。全ての実験は明期に実施した。
(ii)絶食誘発摂食実験
入荷1週間後に個別飼育ケージに移し、1週間慣化した後に実験を実施した。16時間絶食したマウスに化合物もしくはvehicleを皮下もしくは経口投与し、投与1時間後に餌を与え、給餌から1時間後までの摂食量を測定した。
(iii)化合物溶液調整
化合物は4-12% DMSO(関東化学株式会社)および4-12%クレモホール(ナカライテスク株式会社)を含む生理食塩水もしくは蒸留水に溶解、もしくは0.5% メチルセルロース(純正化学株式会社)を含む蒸留水に懸濁した。
(iv)データ解析
結果は平均値±S.E.M.で表示した。統計ツールにはSAS (ver. 6.11)を使用し, vehicle群との比較はDunnett's testで行った。
本発明化合物は良好な摂食抑制作用を示した。
【００３６】
【表２】
2005325031.tif 000015
【００３７】
【表３】
2005325031.tif 000016
【００３８】
【表４】
2005325031.tif 000017
【００３９】
【表５】
2005325031.tif 000018
【００４０】
【表６】
2005325031.tif 000019
【００４１】
【表７】
2005325031.tif 000020
【配列表フリーテキスト】
【００４２】
以下の配列表の数字見出し＜223＞には、「Artificial Sequence」の説明を記載する。具体的には、配列表の配列番号1, 2の配列で表される各塩基配列は、人工的に合成したプライマー配列である。
【配列表】
2005325031000001.app