(57)【要約】【課題】  食品、医薬品、医薬部外品、化粧品等の分野で有用な新規なトリテルペン化合物及びそれらの誘導体を提供するとともに、それらを含むシクロオキシゲナーゼ阻害剤及びリポキシゲナーゼ阻害剤を提供する。【解決手段】  本発明はツガサルノコシカケから抽出された特定の構造を有する新規トリテルペン化合物及びそれらの誘導体であり、さらには当該抽出単離物のいずれか１つの化合物を含有するシクロオキシゲナーゼ及び／又はリポキシゲナーゼ阻害剤である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）〜（９）で表されることを特徴とするトリテルペン化合物及びそれらの誘導体。
【化１】
2005213144.tif 000019
（式中のＲ1及びＲ2は、上記に示す組み合わせである。）
【化２】
2005213144.tif 000020
【化３】
2005213144.tif 000021
（式中のＲ3、Ｒ4及びＲ5は、上記に示す組み合わせである。）
また、式（１）〜（９）における、Ｒ2及びＲ5のａ〜ｄは下記構造で示される。
【化４】
2005213144.tif 000022
【請求項２】
式（１）〜（９）の少なくともいずれか１つで表される化合物を含有することを特徴とするシクロオキシゲナーゼ及び／又はリポキシゲナーゼ阻害剤。
【請求項３】
下記式（１０）〜（１２）の少なくともいずれか１つで表される化合物を含有することを特徴とするシクロオキシゲナーゼ及び／又はリポキシゲナーゼ阻害剤。
【化５】
2005213144.tif 000023
（式中のＲ6、Ｒ7及びＲ8は、右記に示す組み合わせである。また、Ｒ8のａ及びｂは前記Ｒ2のａ及びｂと同じ構造である。）
【化６】
2005213144.tif 000024
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品、医薬品、医薬部外品及び化粧品等の分野で有用な新規トリテルペン化合物及びそれらの誘導体に関するものである。それらの化合物は、例えば、シクロオキシゲナーゼ及び／又はリポキシゲナーゼ阻害剤として有用である。
【背景技術】
【０００２】
生体内の様々な組織に存在し、細胞膜を構成する不飽和脂肪酸のアラキドン酸は、シクロオキシゲナーゼ（以下、ＣＯＸと略記する）又はリポキシゲナーゼ（以下、ＬＯと略記する）が関与する代謝によって、ケミカルメディエーターであるプロスタグランジン（以下、ＰＧと略記する）やロイコトリエン（以下、ＬＴと略記する）などを生成する。
【０００３】
ＣＯＸは２種類のアイソザイム（ＣＯＸ−１とＣＯＸ−２）から構成されることが知られており（非特許文献１）、そのうちＣＯＸ−１は胃や腸等の消化管、腎臓、卵巣、精嚢及び血小板等に存在する構成酵素であり、胃液分泌、利尿、および血小板凝集等の生理的な役割を担っている。ＣＯＸ−２はサイトカインや発癌プロモーター及びホルモン等の刺激により新たに産生される誘導酵素であり、炎症反応、血管新生、アポトーシス、発癌、排卵、分娩及び骨吸収等に関与している（例えば、非特許文献２など）。ＣＯＸと疾患との関係について、リューマチや関節炎はＣＯＸ−２が原因であるという報告が多数あり、また近年の研究により、癌やアルツハイマー病との関与も報告されている（例えば、非特許文献３など）。
【０００４】
一方、ＬＯの代謝産物であるＬＴの薬理作用は、気道抵抗上昇作用や気管粘膜分泌促進作用、その他炎症反応系では、血管透過性亢進作用や白血球遊走作用などの様々な作用を持っている（例えば、非特許文献４〜６など）。ＬＯには５−ＬＯ、８−ＬＯ、１２−ＬＯ及び１５−ＬＯなど複数のリポキシゲナーゼの存在が確認されており、例えば炎症性疾患やアレルギー性疾患では５−ＬＯが主に関与する。ＣＯＸ−２と同様に５−ＬＯは、サイトカインなどの刺激によって酵素活性が発現し、痛みや炎症の助長に働くとされ、関節炎もこれらが原因であると考えられている。また、従来動脈硬化では１５−ＬＯあるいは１２−ＬＯが関与すると言われていたが、最近、動脈硬化巣に存在するＬＯは、５−ＬＯが大部分であることが報告され、５−ＬＯの阻害により炎症と動脈硬化が抑制できる可能性も示唆されている（例えば、非特許文献７及び８など）。
【０００５】
上記ＣＯＸ−２阻害剤として、例えばセレコクシブやロフェコクシブなどが、関節炎やリューマチの症状を緩和する医薬品として開発されており、また、５−ＬＯ活性を抑制又は阻害する化合物は、鼻炎、皮膚炎やアレルギー性疾患などの予防或いは治療剤として期待されている（例えば、特許文献１〜３など）。さらに、ＣＯＸ阻害作用及び５−ＬＯ阻害作用の両方を併せ持つデュアルインヒビターは、５−ＬＯの代謝産物であるＬＴが、ＰＧ以外の炎症性伝達物質であるばかりか、非ステロイド型抗炎症剤により誘発される副作用にも影響を及ぼすとされていることから、単純なＣＯＸ阻害剤よりも抗炎症作用や安全性の面で優れたものになると考えられている（例えば、特許文献４〜６や非特許文献９〜１１など）。
【０００６】
一方、種々の植物やキノコ類に含まれる生理活性成分に関して、様々なトリテルペン化合物が抗腫瘍剤、血管新生抑制剤、抗アレルギー剤、養毛料やニキビ治療などの医薬品、医薬部外品や化粧品等の分野において検討されている。例えば、タイ産植物トリコサンテス・トリクスピダータから抽出された抗腫瘍効果及び血管新生抑制効果を有するトリテルペン化合物や、食用菊、西洋タンポポなどのキク科植物花弁から抽出された抗アレルギー効果を有するトリテルペン化合物などが報告されている（例えば、特許文献７〜９など）。そのほか、特定のラノスタン系トリテルペン化合物の取得等に関する報告がある（非特許文献１２及び１３）。
【０００７】
【特許文献１】特開２００３−１７６２６４公報（特許請求の範囲）
【特許文献２】特開２００３−１６０５５４公報（特許請求の範囲）
【特許文献３】特表２００３−５２２８０３公報（発明の詳細な説明）
【特許文献４】特表平８−５００１０１公報（特許請求の範囲）
【特許文献５】特開平８−２５３４７０公報（特許請求の範囲）
【特許文献６】特開平８−１１３５３６公報（課題を解決するための手段）
【特許文献７】特開２００３−３２１４９１公報（課題を解決するための手段）
【特許文献８】特開２００３−２７７２６７公報（発明の実施の形態）
【特許文献９】特開２０００−１６９４９７公報（課題を解決するための手段）
【非特許文献１】平田結喜緒、森田育男編，「ＣＯＸ−１とＣＯＸ−２」，メディカルレビュー社，１９９６年，ｐ１０５−１１８
【非特許文献２】中村秀夫，日薬理誌，２００１年，１１８巻，ｐ２１９−２３０
【非特許文献３】室田誠逸、山本尚三編，「現代化学増刊３８  プロスタグランジン研究の新展開」，東京化学同人，２００１年
【非特許文献４】Adams G. K. III，Lichtenstein L. M.，J.Immunol., 1979, 122, 555-562
【非特許文献５】Watanabe-Kohno S.，Yasui K.，et. al.，Jpn. J. Pharmacol., 1992, 60，209-216
【非特許文献６】Coles S. J.，Neill K. H. et. al.，Prostaglandins，1983, 25, 155-170
【非特許文献７】Lotzer K.，Habenicht A. J.，Arterioscler Thromb Vasc Biol.，2003, 23，E32-36
【非特許文献８】Spanbroek R.，Grabner R.，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，2003, 100，1238-1243
【非特許文献９】Guslandi M.，Prostaglandins Leukotrienes Med.，1987, 26，203-208
【非特許文献１０】Asako H.，Kubes P.，Am. J. Physiol.，1992, 262，G903-G908
【非特許文献１１】Charlier C.，Michaux C.，Eur. J. Med. Chem.，2003, 38，645-659
【非特許文献１２】Keller, A.C.et al ., phytochemistry., 1996, 41, 1041-1046
【非特許文献１３】Rosecke, J. et al ., phytochemistry., 2000, 54, 603-610
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、上述のような状況をふまえ、食品、医薬品、医薬部外品、化粧品等の分野で有用な新規なトリテルペン化合物及びそれらの誘導体を提供するとともに、それらを含むシクロオキシゲナーゼ及び／又はリポキシゲナーゼ阻害剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者等は、上記課題を解決するため鋭意研究を行った結果、多孔菌科ツガサルノコシカケ属ツガサルノコシカケ（Fomitopsis pinicola）の低級アルコール抽出エキスより新規なトリテルペン化合物及びそれらの誘導体の単離に成功し、さらに、これらの化合物が優れたシクロオキシゲナーゼ阻害作用及びリポキシゲナーゼ阻害作用を有していることを見出し、本発明を完成したのである。
すなわち、本発明は下記式（１）〜（９）で表されることを特徴とするトリテルペン化合物及びそれらの誘導体であり、さらには、式（１）〜（１２）の少なくともいずれか１つで表される化合物を含有することを特徴とするシクロオキシゲナーゼ及び／又はリポキシゲナーゼ阻害剤である。
【００１０】
【化１】
2005213144.tif 000002
（式中のＲ1及びＲ2は、上記に示す組み合わせである。）
【００１１】
【化２】
2005213144.tif 000003
【００１２】
【化３】
2005213144.tif 000004
（式中のＲ3、Ｒ4及びＲ5は、上記に示す組み合わせである。）
【００１３】
【化４】
2005213144.tif 000005
（式中のＲ6、Ｒ7及びＲ8は、右記に示す組み合わせである。）
【００１４】
【化５】
2005213144.tif 000006
また、式（１）及び式（３）〜（１１）におけるＲ2、Ｒ5及びＲ8のａ〜ｄは下記構造で示される。
【００１５】
【化６】
2005213144.tif 000007
【発明の効果】
【００１６】
本発明の新規なトリテルペン化合物及びそれらの誘導体は優れたシクロオキシゲナーゼ阻害効果及びリポキシゲナーゼ阻害効果を有しており、食品、医薬品、医薬部外品及び化粧品等の分野に利用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明のトリテルペン化合物及びそれらの誘導体は、化学合成によって得てもよいが、例えば、多孔菌科ツガサルノコシカケ属ツガサルノコシカケ（Fomitopsis pinicola）の子実体から容易に抽出することができる。このツガサルノコシカケは、日本全国に広く分布する多孔菌科のキノコである。
【００１８】
ツガサルノコシカケ（Fomitopsis pinicola）から上記トリテルペン化合物及びそれらの誘導体を抽出するには、例えば当該キノコの子実体を、抽出効率を向上させる観点から適当な大きさに細かく裁断して、例えば、水、親水性有機溶媒又はこれらの混合溶媒を使用して室温（２０〜２５℃）程度の温度で浸漬し抽出処理するか、溶媒の沸点程度の温度で抽出処理する。親水性有機溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級アルコールなどが挙げられ、これら親水性有機溶媒と水との混合溶媒などを用いることができる。なお、水と親水性有機溶媒との混合系溶媒を使用する場合には、親水性有機溶媒の含有率が５０〜８０％（容積％）となるように調製することが好ましい。
【００１９】
さらに、上記の操作で得られた抽出エキスを減圧濃縮し、適量の水を加え、例えば酢酸エチルなど疎水性有機溶媒で抽出分配する。得られた有機層の抽出物を濃縮或いはそのまま、通常用いられるシリカゲルカラムクロマトグラフィーや分取高速液体クロマトグラフィー等を組み合わせて分画することにより、本発明の新規トリテルペン化合物（１）〜化合物（９）や、それ以外の化合物（１０）〜化合物（１２）を単離・精製することができる。
【００２０】
本発明の新規トリテルペン化合物及びそれらの誘導体である化合物（１）〜化合物（９）や、それ以外の化合物（１０）〜化合物（１２）を、食品、医薬品、医薬部外品及び化粧品等として用いる場合、前記の如くしてツガサルノコシカケから単離したものでも良いが、精製前の抽出物を用いても良い。抽出物としては、これらの化合物のうち少なくとも１種を含有する粗抽出物を用いても良いが、特に医薬品に用いる場合は純度の高い精製物を用いることが好ましい。
【００２１】
かくして得られる本発明の新規トリテルペン化合物及びそれらの誘導体である化合物（１）〜化合物（９）や、それ以外の化合物（１０）〜化合物（１２）は、後述の如くシクロオキシゲナーゼ阻害作用及びリポキシゲナーゼ阻害作用を有するため、食品、医薬品、医薬部外品や化粧品等の処方に配合して使用することができる。
【００２２】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２３】
（化合物の抽出・単離）
多孔菌科ツガサルノコシカケ属ツガサルノコシカケ（Fomitopsis pinicola）子実体を出発原料として下記の操作を行い、化合物（１）から化合物（１２）を単離した。
【００２４】
徳島県下で採集したツガサルノコシカケ（５５０ｇ）子実体を、室温（約２３℃）下７０％エタノールで抽出、減圧下で溶媒を留去、残渣を酢酸エチルで分配して抽出物（２３．０ｇ）を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。溶出は、ジイソプロピルエーテル：メタノール（５０：１、容積比、以下同様）及びジイソプロピルエーテル：メタノール（２５：６）の順に行い、３画分（以下、Ｆｒ．１〜Ｆｒ．３と称する）に分画した。さらに各々の画分を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー及び分取高速液体クロマトグラフィー（以下、ＨＰＬＣと略記する）に付した。
なお、シリカゲルカラムクロマトグラフィーでの、目的とする画分の確認は、展開溶媒にジイソプロピルエーテル：メタノール（２５：１）並びにジイソプロピルエーテル：メタノール：水（２５：８：０．１）を用いた薄層クロマトグラフィー（Ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ６０Ｆ−２５４、Ｍｅｒｃｋ社製）を行い、３０％硫酸噴霧、加熱後の呈色反応により判断した。
【００２５】
画分Ｆｒ．１はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出は、ジイソプロピルエーテル：メタノール：水の容積比を、２５：４：０．１から６０：４０：１まで変更）を行い、この粗画分に対して、下記に示す分取ＨＰＬＣを行った。移動相にはメタノール：水＝７５：２５から１００：０（グラジュエント溶出）を用い、その溶出液を分画、減圧下溶媒留去し、化合物（１）２６．０ｍｇ、化合物（３）７．１ｍｇ、化合物（４）５９．４ｍｇ及び化合物（６）１２．９ｍｇを取得した。
【００２６】
画分Ｆｒ．２はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出は、ジイソプロピルエーテル：メタノールの容積比を、５０：１から３０：１まで変更）を行い、このうちの低極性画分に対し、再度、ジイソプロピルエーテル：メタノール（容積比を７：３から６：４まで変更）でシリカゲルカラムクロマトグラフィーを実施した。この粗画分に対して、下記に示す条件の分取ＨＰＬＣを行った。移動相にはメタノール：水＝７０：３０から１００：０（グラジュエント溶出）を用い、その溶出液を分画、減圧下溶媒留去し、化合物（２）３１．７ｍｇ、化合物（５）１１．９ｍｇ、化合物（７）８．４ｍｇ及び化合物（９）２．０ｍｇを取得した。
【００２７】
残りの高極性画分に対して、再度、ジイソプロピルエーテル：メタノール（容積比を５０：１から２５：１まで変更）でシリカゲルカラムクロマトグラフィーを実施した。この粗画分に対して、下記に示す条件の分取ＨＰＬＣを行った。移動相にはメタノール：水＝９０：１０を用い、その溶出液を分画、減圧下溶媒留去し、化合物（８）１０．８ｍｇを取得した。
【００２８】
画分Ｆｒ．３はシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出は、ｎ−ヘキサン：酢酸エチルの容積比を、８：２から１：１まで変更）を行い、再度、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル（５：２）でシリカゲルカラムクロマトグラフィーを実施した。この粗画分に対して、下記に示す条件の分取ＨＰＬＣを行った。移動相には、メタノール：水＝７０：３０から１００：０（グラジュエント溶出）を用い、その溶出液を分画、減圧下溶媒留去し、化合物（１０）１３．１ｍｇ、化合物（１１）２８．１ｍｇ及び化合物（１２）８．６ｍｇを取得した。
【００２９】
＜分取ＨＰＬＣの条件＞
○固定相 ：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  Ｃ３０−ＵＧ−５（野村化学製）、カラム径  ：２０ｍｍφ、カラム長：２５０ｍｍ
○移動相流量：８ｍＬ／ｍｉｎ
○検出：ＵＶ２０３ｎｍ
【００３０】
上記の方法でツガサルノコシカケから単離した化合物は、２次元核磁気共鳴スペクトル測定を主体とする各種スペクトルデータ、酸加水分解による糖の同定及び文献（Keller, A.C.et al ., phytochemistry., 1996, 41, 1041-1046、Rosecke, J. et al ., phytochemistry., 2000, 54, 603-610）を参考にして、化合物（１）〜化合物（１２）の構造を決定し確認した。
【００３１】
より詳細には、化合物（１）〜化合物（１２）の各化合物について、融点、旋光度、赤外吸収（以下、ＩＲと略記）スペクトル、核磁気共鳴（以下、ＮＭＲと略記）スペクトル、質量分析（以下、ＭＳと略記）スペクトルを測定した。
融点は、柳本製微量融点測定装置により測定し、すべて未補正である。旋光度は、日本分光製ＤＩＰ−１０００型を用いてメタノール溶液で測定した。ＩＲスペクトルは、日本分光製ＦＴ−ＩＲ４１０型分光光度計で拡散反射法を用いて測定した。ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ製Ｕｎｉｔｙ−６００または日本電子製ＥＣＰ−４００で、重ピリジン（以下、C5D5Nと略記）を測定溶媒に、テトラメチルシランを内部標準として測定した。また、ＮＭＲスペクトル解析では、化学シフト（δ値）をｐｐｍ単位で、結合定数をＨｚ単位で示し、略号を使用し、各々 s; singlet, d; doublet, t; triplet, m; multiplet, br; broad, dd; double doublet, dt; double tripletで表した。さらに、ピークの帰属は、トリテルペン骨格や糖鎖(xylはキシロースの略号である)の炭素番号をもとに表記した。ＭＳスペクトルは、日本電子ＡＸ−５００型高分解能質量分析計を用い、マトリックスにメタ−ニトロベンジルアルコールを用いて高速原子衝撃法（以下、ＦＡＢと略記）により測定した。
【００３２】
上記の操作及び構造解析から、ツガサルノコシカケから単離した本発明の新規なトリテルペン化合物及びそれらの誘導体である化合物（１）〜化合物（９）の構造式及び理化学的性質は以下の通りである。
【００３３】
化合物（１）の構造式
【化７】
2005213144.tif 000008
【００３４】
化合物（１）の理化学的性質
○性状：白色粉末
○融点：182 - 184 ℃
○旋光度：[α]25D +2.5 °(c 1.0，MeOH）
○ＩＲスペクトル：FT-IR (dry film) νmax 3370, 1730, 1700, 1070cm-1
○ＮＭＲスペクトル：
１）1H-NMR (C5D5N)；δ 0.85 (3H, s, Me-30), 0.89 (3H, s, Me-29), 0.92 (3H, s, Me-19), 1.02 (3H, s, Me-28), 1.03 (6H, d, J=6.3 Hz, Me-26, 27), 1.07 (3H, s, Me-18), 1.75 (3H, s, Me-6'), 3.04 (1H, d, J=14.7 Hz, H2-2'), 3.10 (1H, d, J=14.7 Hz, H2-2'), 3.18 (2H, s, H2-4'), 4.87 (1H, br, H2-31), 4.93 (2H, br, H-3 and H2-31), 6.24 (1H, d, J=7.5 Hz, H-1 of xyl)
２）13C-NMR(C5D5N)；解析結果は表１及び表２に示した。
○ＭＳスペクトル：FAB-MS m/z 745 [M(C42H66O11)‐H]‐
【００３５】
化合物（２）の構造式
【化８】
2005213144.tif 000009
【００３６】
化合物（２）の理化学的性質
○性状：無色の針状結晶
○融点：221 - 223 ℃
○旋光度：[α]25D +6.4 °(c 1.1, MeOH) 
○ＩＲスペクトル：FT-IR (dry film)νmax 3370, 1700, 1070, 1040 cm-1
○ＮＭＲスペクトル：
１）1H-NMR (C5D5N)；δ 1.05 (3H, s, Me-18), 1.06 (3H, s, Me-29), 1.13 (6H, s, Me-19, 29), 1.45 (3H, s, Me-30), 1.59 (3H, s, Me-26), 1.61 (3H, s, Me-27), 4.52 (1H, t, J=6.8 Hz, H-16), 5.34 (1H, m, H-24), 5.35 (1H, d, J=6.0 Hz, H-11), 5.56 (1H, d, J=5.8 Hz, H-7)
２）13C-NMR (C5D5N)；解析結果は表１に示した。
○ＭＳスペクトル： FAB-MS m/z 467 [M(C30H44O4) - H]-
【００３７】
化合物（３）の構造式
【化９】
2005213144.tif 000010
【００３８】
化合物（３）の理化学的性質
○性状: 白色粉末
○旋光度：[α]25D -11.8°(c 0.7, MeOH) 
○ＩＲスペクトル： FT-IR (dry film)νmax 3400, 1710, 1060, 1040 cm-1
○ＮＭＲスペクトル：
１）1H-NMR (C5D5N)；δ 0.81 (3H, s, Me-18), 0.85 (3H, s, Me-30), 0.87 (3H, s, Me-29), 0.99 (3H, s, Me-28), 1.02 (3H, s, Me-19), 1.67 (3H, s, Me-27) , 1.68 (3H, s, Me-28), 1.76 (3H, s, Me-6'), 3.05 (1H, d, J=14.7 Hz, H2-2'),  3.10 (1H, d, J=14.7 Hz, H2-2'), 3.19 (2H, s, H2-4'), 3.89 (1H, dd, J=9.8, 3.6 Hz, H2-21), 4.20 (1H, dd, J=9.8, 7.4 Hz, H2-21), 4.79 (1H, d, J=7.5 Hz, H-1 of xyl), 4.96 (1H, s, H-3), 5.28 (1H, m, H-24)
２）13C-NMR (C5D5N)；解析結果は表１及び表２に示した。
○ＭＳスペクトル： FAB-MS m/z 717 [M(C41H66O10) - H]-
【００３９】
化合物（４）の構造式
【化１０】
2005213144.tif 000011
【００４０】
化合物（４）の理化学的性質
○性状：白色粉末
○融点：159 - 160 ℃
○旋光度：[α]25D +6.5°(c 4.0, MeOH);
○ＩＲスペクトル： FT-IR (dry film)νmax 3400, 1710, 1070, 1040 cm-1
○ＮＭＲスペクトル：
１）1H-NMR (C5D5N)；δ 0.85 (6H, s, Me-29, 30), 0.91 (3H, s, Me-19), 1.00 (3H, s, Me-28), 1.05 (3H, s, Me-18), 1.63 (6H, s, Me-26, 27), 1.73 (3H, s, Me-6'), 3.05 (2H, m, H2-2'), 3.16 (2H, m, H2-4'), 4.93 (1H, br, H-3), 5.26 (1H, m, H-24), 6.24 (1H, d, J=7.3 Hz, H-1 of xyl)
２）13C-NMR (C5D5N)；解析結果は表１及び表２に示した。
○ＭＳスペクトル： FAB-MS m/z 731 [M(C41H64O11) - H]-
【００４１】
化合物（５）の構造式
【化１１】
2005213144.tif 000012
【００４２】
化合物（５）の理化学的性質
○性状: 白色粉末
○旋光度：[α]25D +51.9°(c 0.7, MeOH)
○ＩＲスペクトル： FT-IR (dry film)νmax 3370, 1700, 1070, 1040 cm-1
○ＮＭＲスペクトル：
１）1H-NMR (C5D5N)；δ 0.98 (3H, s, Me-18), 1.06 (3H, s, Me-19), 1.07 (3H, s, Me-29), 1.13 (3H, s, Me-28), 1.33 (3H, s, Me-30), 1.60 (3H, s, Me-26), 1.66 (3H, s, Me-27), 3.94 (1H, dd, J=10.6, 5.3 Hz, H2-21), 4.10 (1H, br, J=10.6 Hz, H2-21), 4.60 (1H, t, J=7.2 Hz, H-15), 5.29 (1H, m, H-24)
２）13C-NMR (C5D5N)；解析結果は表１に示した。
○ＭＳスペクトル： FAB-MS m/z 455 [M(C30H48O3) - H]-
【００４３】
化合物（６）の構造式
【化１２】
2005213144.tif 000013
【００４４】
化合物（６）の理化学的性質
○性状：無色の針状結晶
○融点:158 - 159 ℃
○旋光度：[α]25D +0.2°(c 0.9, MeOH);
○ＩＲスペクトル： FT-IR (dry film)νmax 3400, 1710, 1070, 1040 cm-1
○ＮＭＲスペクトル：
１）1H-NMR (C5D5N)；δ 0.86 (3H, s, Me-30), 0.88 (3H, s, Me-29), 0.95 (3H, s, Me-19), 1.01 (3H, s, Me-28), 1.03 (3H, s, Me-18), 1.49 (6H, s, Me-26, 27), 1.74 (3H, s, Me-6'), 3.05 (2H, s, H2-2'), 3.16 (2H, s, H2-4'), 4.94 (1H, s, H-3), 6.14 (1H, d, J=15.4 Hz, H-24), 6.18 (1H, br, J=15.4 Hz, H-23)
２）13C-NMR (C5D5N)；解析結果は表１及び表２に示した。
○ＭＳスペクトル： FAB-MS m/z 615 [M(C36H56O8) - H]-
【００４５】
化合物（７）の構造式
【化１３】
2005213144.tif 000014
【００４６】
化合物（７）の理化学的性質
○性状: 白色粉末
○旋光度：[α]25D +23.8°(c 0.9, MeOH) 
○ＩＲスペクトル： FT-IR (dry film)νmax 3400, 1710, 1070, 1040 cm-1
○ＮＭＲスペクトル：
１）1H-NMR (C5D5N)； δ 0.97 (3H, s, Me-30), 0.99 (3H, s, Me-19), 1.04 (6H, s, Me-18, 29), 1.13 (3H, s, Me-28), 1.90 (3H, s, Me-27), 4.49 (1H, t, J=5.8 Hz, H-24), 4.94 (1H, br, H2-31), 5.22 (1H, br, H2-31)
２）13C-NMR (C5D5N)；解析結果は表１に示した。
○ＭＳスペクトル： FAB-MS m/z 469 [M(C30H46O4) - H]-
【００４７】
化合物（８）の構造式
【化１４】
2005213144.tif 000015
【００４８】
化合物（８）の理化学的性質
○性状: 白色粉末
○旋光度 ; [α]25D -2.3°(c 0.6, MeOH);
○ＩＲスペクトル： FT-IR (dry film)νmax 3400, 1710, 1070, 1040 cm-1
○ＮＭＲスペクトル：
１）1H-NMR (C5D5N)；δ 0.85 (3H, s, Me-30), 0.91 (3H, s, Me-29), 0.94 (3H, s, Me-19), 1.00 (3H, s, Me-28), 1.01 (6H, d, J=6.3 Hz, Me-26, 27), 1.02 (3H, s, Me-18), 1.73 (3H, s, Me-6'), 3.05 (2H, s, H2-2'), 3.16 (2H, s, H2-4'), 4.88 (1H, br, H2-31), 4.92 (2H, br, H-3, H2-31)
２）13C-NMR (C5D5N)；解析結果は表１及び表２に示した。
○ＭＳスペクトル：FAB-MS m/z 613 [M(C37H58O7) - H]-
【００４９】
化合物（９）の構造式
【化１５】
2005213144.tif 000016
【００５０】
化合物（９）の理化学的性質
○性状: 白色粉末
○旋光度 ;[α]25D +23.7°(c 0.2, MeOH);
○ＩＲスペクトル：FT-IR (dry film)νmax 3400, 1710, 1070, 1040 cm-1
○ＮＭＲスペクトル：
１）1H-NMR (C5D5N)；δ 1.03 (3H, s, Me-18), 1.05 (3H, s, Me-29), 1.12 (3H, s, Me-18), 1.19 (3H, s, Me-28), 1.59 (3H, s, Me-26), 1.65 (3H, s, Me-27), 4.63 (1H, t, J=6.0 Hz, H-15), 5.29 (1H, m, H-24)
２）13C-NMR (C5D5N)；解析結果は表１に示した。
○ＭＳスペクトル;FAB-MS m/z 469 [M(C30H46O4) - H]-
【００５１】
【表１】
2005213144.tif 000017
【００５２】
【表２】
2005213144.tif 000018
【実施例２】
【００５３】
（ＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２阻害活性評価試験）
実施例１で取得した化合物（１）〜化合物（８）及びそれ以外の化合物（１０）〜化合物（１２）の各々について、ＣＯＸ−１阻害活性及びＣＯＸ−２阻害活性を測定した。
酵素には、ＣＯＸ−１としてヒツジ精嚢ミクロソーム（カイマンケミカル社製）、ＣＯＸ−２としてヒツジ胎盤由来ＣＯＸ−２精製品（カイマンケミカル社製）を使用し、各酵素によるアラキドン酸の減少率を酵素活性とした。この酵素反応系で、化合物の各々を被検試料として添加し、以下の通り操作してＣＯＸ−１阻害活性及びＣＯＸ−２阻害活性を算出した。
【００５４】
すなわち、２．９ｍＭフェノール及び１．４ｍＭのヘマチンを含む１４３ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ７．５）７０μＬに、１０％ジメチルスルホキシド水溶液に溶解させた被検試料（２×１０-3Ｍ、１０μＬ）を加えた後、ＣＯＸ−１あるいはＣＯＸ−２溶液（２ＩＵ、１０μＬ）を添加して混和した。これを３７℃で２分間プレインキュべートを行った。次いで、１００ｍＭトリス緩衝液で濃度を２５．５μＭに調整した放射性標識［1-14Ｃ］アラキドン酸（アマシャム・ファルマシア・バイオテク社製）を、１０μＬ（０．１４μＣｉ）加えて混和した。これを３７℃で２分間反応させた後、すぐに氷冷した。
【００５５】
ＣＯＸ活性の算出は、柳と小松の方法（Biochem. Pharmacol.,25，937-941,1976）を参考に行った。すなわち、反応液にｎ−ヘキサン：酢酸エチル（２：１）混合液を０．４ｍＬ加えて３０秒間撹拌した後、遠心分離して未反応のアラキドン酸を含む有機層を除去した。同様の抽出操作を２回繰り返した後、水層に５０μＬのエタノールを加えて３０秒間攪拌した。その後、２，０００×ｇで１分間遠心し、水層０．１ｍＬを液体シンチレーションカウンター用バイアルに移した。これにシンチレーターとしてクリアゾル１（ナカライテスク社製）を２ｍＬ加え、ＰＧＥ2分画カクテルとした。放射活性を液体シンチレ−ションカウンター（ＡＬＯＫＡ社製ＬＳＣ−１０００）で測定し、放射活性の割合を算出してＰＧＥ2転換率とした。
【００５６】
陽性対照として、６−ジンゲロール（２×１０-3Ｍ、１０μＬ）を、被検試料の代わりに用いて同様に操作した。
被検試料を添加しなかった時のアラキドン酸の減少率を１００％とし、各被検試料を添加した時のアラキドン酸の減少率との差［１００（％）−アラキドン酸の減少率（％）］をＣＯＸ阻害率（％）とした。その結果を図１に示す。
【実施例３】
【００５７】
（５−ＬＯ阻害活性評価試験）
実施例１で得られた化合物（１）〜化合物（８）及びそれ以外の化合物（１０）〜化合物（１２）の各々について、５−ＬＯ阻害活性を測定した。
５−ＬＯ阻害活性の測定には、ラット好塩基性白血病細胞（ＲＢＬ−１、大日本製薬）を使用し、これによるアラキドン酸から５−ＨＥＴＥへの転換率を酵素活性として算出した。活性測定は、以下のように行った。
【００５８】
１０％ジメチルスルホキシド水溶液に溶解した被検試料（２×１０-3Ｍ、５μＬ）に、１００ｍＭ塩化カルシウム水溶液１０μＬとアラキドン酸のメタノール溶液（１０ｍｇ／ｍＬ、１０μＬ）を加え、３７℃で５分間ブレインキュベーションした。これに、０．１５Ｍスクロース、０．５ｍＭ ＥＤＴＡ及び１ｍＭグルタチオンを含有する２５ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）中にＲＢＬ−１細胞（１×１０7ｃｅｌｌ／ｍＬ）を分散させた縣濁液４７５μＬを添加して攪拌し、３７℃で３分間反応させた。その後、メタノールを５００μＬ加えて反応を停止し、この溶液を２０℃、４０００ｒｐｍで１５分間遠心した。この上清４００μＬを分取してＨＰＬＣ分析を行った。
【００５９】
ＨＰＬＣ分析は、Ｗａｔｅｒｓ製ポンプ６００Ｅ、 日本分光製検出器８７０−ＵＶ、およびナカライテスク製カラムＣＯＳＭＯＳＩＬ  ５Ｃ18−ＭＳ（内径４．６×長さ１５０ｍｍ）を用い、０．０４％の酢酸を含む６０％アセトニトリル−水溶液で溶出し、検出波長ＵＶ２３５ｎｍでピーク面積を測定した。
【００６０】
陽性対照には、１０％ジメチルスルホキシド水溶液に溶解した６−ジンゲロール（１×１０-3Ｍ、５μＬ）を被検試料の代わりに用いた。
被検試料を添加しなかった時の５−ＨＥＴＥ転換率を１００％とし、各被検試料を添加した時の５−ＨＥＴＥ転換率との差［１００（％）−５−ＨＥＴＥ転換率（％）］を５−ＬＯ阻害率（％）とした。その結果を図２に示す。
【産業上の利用可能性】
【００６１】
本発明の新規なトリテルペン化合物及びそれらの誘導体は優れたシクロオキシゲナーゼ阻害効果およびリポキシゲナーゼ阻害効果を有しており、食品、医薬品、医薬部外品および化粧品等の分野に利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】本発明のトリテルペン化合物及びそれらの誘導体によるＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２阻害作用を示した図面である。
【図２】本発明のトリテルペン化合物及びそれらの誘導体による５−ＬＯ阻害作用を示した図面である。
【図１】
2005213144.tif 000025
【図２】
2005213144.tif 000026