(57)【要約】【課題】  抗動脈硬化作用を有する物質を、副作用の心配がない天然物の中から見出し、当該物質を機能性食品、健康食品などとして利用する技術を開発すること。【解決手段】  フコステロール−３ケト体及び／又はフコステロールを含有することを特徴とする抗動脈硬化作用を有する組成物並びに該組成物を含有する食品又は食品素材。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
フコステロール−３ケト体及び／又はフコステロールを含有することを特徴とする抗動脈硬化作用を有する組成物。
【請求項２】
請求項１記載の組成物を含有する食品又は食品素材。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フコステロール−３ケト体及び／又はフコステロールの用途に関し、詳しくはフコステロール−３ケト体及び／又はフコステロールを含有する抗動脈硬化作用を有する組成物並びに該組成物を含有する食品又は食品素材に関する。
【背景技術】
【０００２】
昆布は北海道独自の特産品であり、鍋料理、みそ汁、昆布巻きなど日本の食卓に欠かせぬ食材である。そればかりでなく、最近は昆布に代表される海藻類が生活習慣病の予防に有用な機能性食品としても見直されている（非特許文献１、２）。
しかし、海藻類に含まれる特定の成分と当該成分により奏される効果との関係については、未だ解明されていないことが多い。
【０００３】
【非特許文献１】「海藻と成人病予防−のぎへんのほん−」、西沢  一俊著、研成社発行、183頁（1993）
【非特許文献２】「根コンブで健康になる  ミネラル、繊維が健康の秘密！」、新星出版社発行、158頁（1990）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
近年、わが国は高齢化社会と化していることから、今後加齢に伴い動脈硬化症等の増加が予想されている。これらの病気の予防、改善には、抗動脈硬化作用を有する食品などを日常生活での通常の食事を通して継続的に摂取することが有効である。
本発明の目的は、抗動脈硬化作用を有する物質を、継続的に摂取しても副作用の心配がない天然物の中から見出し、当該物質を機能性食品、健康食品などとして利用する技術を開発することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、養殖コンブの仮根(商品名：ガニアシ)より抽出し、単離・精製したフコステロール−３ケト体及びフコステロールについて鋭意検討したところ、これらの化合物が優れた抗動脈硬化作用を有していることを見出し、かかる知見に基づいて本発明を完成するに至った。
【０００６】
請求項１記載の本発明は、フコステロール−３ケト体及び／又はフコステロールを含有することを特徴とする抗動脈硬化作用を有する組成物である。
請求項２記載の本発明は、請求項１記載の組成物を含有する食品又は食品素材である。
【発明の効果】
【０００７】
請求項１記載の本発明により、海藻に由来するフコステロール−３ケト体及び／又はフコステロールを有効成分とする抗動脈硬化作用を有する組成物が提供される。
この組成物は、請求項２に記載したように、食品もしくは食品素材として日常的に摂取して、動脈硬化症の予防、改善に資することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
上記したように、本発明はフコステロール−３ケト体及び／又はフコステロールを含有することを特徴とする抗動脈硬化作用を有する組成物並びに当該組成物を含有する食品又は食品素材に関する。
本発明に係るフコステロール−３ケト体〔stigmast-4,24(28)-diene-3-one〕は、下記の構造式（１）で表され、フコステロール〔cycloartenol〕は、構造式（２）で表されるものである。
【０００９】
【化１】
2005104887.tif 000002
【００１０】
【化２】
2005104887.tif 000003
【００１１】
フコステロール−３ケト体及びフコステロールは、海藻類、例えば褐藻類などに、細胞膜の構成成分として存在する。これらの化合物は、海藻類から溶媒を用いて抽出することによって得ることができる。原料の海藻類は、海から採取される天然物であってもよく、養殖されたものであってもよい。
フコステロール−３ケト体及びフコステロールは、海藻類の様々な部位に存在するので、どの部位からも得ることが可能であるが、経済性を考慮すると、仮根部を原料とし、抽出することが好ましい。
【００１２】
海藻類からフコステロール−３ケト体やフコステロールを抽出するには、溶媒、特にヘキサン、エーテル、酢酸エチル、クロロホルム、アセトン、エタノール、メタノール等の有機溶媒を使用する。海藻類は、予め細かく粉砕しておき、必要に応じて、さらに乾燥する。
海藻類と溶媒の割合は、例えば溶媒としてヘキサンを用いる場合、重量比で１：１〜５、好ましくは１：１．５が適当である。通常は、室温で１〜２０日間、好ましくは１０日間浸出する。
【００１３】
このようにして得られた抽出液は、フコステロール−３ケト体及びフコステロールを含む粗製物として用いることが可能であるが、通常は該抽出液を採取して目的のフコステロール-３ケト体及びフコステロールを単離、精製する。
１例を示すと、ヘキサン抽出エキスを有機溶媒（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１〜１０）に溶解し、アミノ基結合シリカゲルを加えてよく攪拌した後、吸引ろ過によりシリカゲルを除去する。残ったシリカゲルをさらに有機溶媒（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１〜１０）にて洗浄する操作を複数回（５〜１５回）行う。これにより、含有するカルボン酸成分が除去される。次いで、洗浄液を集めて、これを減圧濃縮してエキスを得る。
このエキスをシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：３５〜１００：０）で分離し、フラクション１〜４に分ける。フラクション２を逆相ＨＰＬＣで分離してフコステロール−３ケト体を得る。一方、フラクション３を逆相ＨＰＬＣで分離してフコステロールを得る。
【００１４】
抗動脈硬化作用を有する組成物におけるフコステロール−３ケト体とフコステロールは単独で用いられる他、両者を併用してもよい。両者を併用すると、吸収効率が上昇する可能性があるので、好ましい。
組成物中におけるこれら化合物の添加量については、抗動脈硬化作用を十分に発揮できる量であれば良く、例えばフコステロール−３ケト体の単独使用の場合は、３０〜８０μmol/L、好ましくは４０〜６０μmol/Lが適当である。また、フコステロールの単独使用の場合は、８０〜１２０μmol/L、好ましくは９０〜１１０μmol/Lが適当である。両者を併用する場合は、これらの数値を考慮して適宜決定すればよい。
本発明に係る組成物には、必要に応じて、例えば増量剤、賦形剤、甘味料、香料などの常用の成分を適宜加えることができる。また、組成物の形状には、制限がなく液状、固形状、粉状、顆粒状など任意である。
【００１５】
本発明に係る組成物は、１日１回で摂取してもよく、数回に分けて摂取してもよい。この組成物は、日常的に食品として利用されている海藻類に由来する物質を有効成分としているので、長期間にわたって連続して摂取しても副作用の心配がなく、人体への危険性はない。この組成物は、食品や食品素材に加えて機能性食品等として用いても良く、あるいは医薬品として錠剤、散剤、カプセル剤などの形態で経口摂取したり、注射剤として用いることもできる。
【実施例】
【００１６】
以下において、本発明を実施例などにより詳しく説明するが、本発明はこれらによって限定されるものではない。
【００１７】
製造例１
フコステロール３−ケト体及びフコステロールの抽出、単離、精製
1.養殖コンブ（褐藻類）仮根よりヘキサン抽出エキスの調製
乾燥・粉砕した養殖コンブ仮根粉末（商品名：ガニアシ、共成製薬（株）製）９ｋｇにヘキサン１５Ｌを加え、１０日間浸出後、固−液分離を行ってろ液を採取した。次いで、ろ液を減圧濃縮してヘキサン抽出エキス１５ｇを得た。
2.ヘキサン抽出エキスよりフコステロール３−ケト体およびフコステロールの単離
上記のヘキサン抽出エキス１５ｇを有機溶媒（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）  Ｌに溶解し、アミノ基結合シリカゲルNH-DM1020 (Fuji silysia chemical製)１５０ｇを加えてよく撹拌した後、シリカゲルを吸引ろ過により除去した。残ったシリカゲルを有機溶媒（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）５〜１０Ｌにて４〜５回洗浄し、集めた洗浄液を減圧濃縮して８．１ｇのエキスを得た。
このエキスをシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝３：９７〜１００：０）で分離し、フラクション１〜４に分離した。
次に、フラクション２(３．９ｇ)を逆相HPLC (Mightysil RP-18 CH3CN:H2O:CH3COOH=90:10:0.5)で分離し、フコステロール３−ケト体１．４ｇ(０．０１６％)を得た。また、フラクション３(１．２ｇ)を逆相HPLC (Mightysil RP-18 CH3CN:H2O:CH3COOH=90:10:0.5)で分離し、フコステロール０．１ｇ(０．００１１％)を得た。
【００１８】
実施例１
フコステロール３−ケト体及びフコステロールのラット大動脈平滑筋細胞増殖抑制作用
活性試験
コンフルエントになるまで培養したラット胎児胸部大動脈平滑筋細胞(A10)を１２穴プレートに１ウェル当たり２×１０4個播種し、１０％ウシ胎児血清(FBS, Fetal Bovine Serum)含有DMEM培地中でサブコンフルエントまで培養した（２４時間）。ウシ胎児血清（10%）、被験物質（フコステロール３−ケト体は０．０６１ｍＭ／Ｌ、フコステロールは０．０９７ｍＭ／Ｌ添加）の存在下でラット胎児胸部大動脈平滑筋細胞を１週間培養した。
培養開始１週間後、被験物質非存在下でラット胎児胸部大動脈平滑筋細胞を培養した細胞数と被験物質存在下で培養した細胞数を血球計算板を用いて計測した。結果を表１及び図１に示す。得られた測定値を比較することにより、ラット平滑筋細胞の増殖抑制度を決定した。なお、有意差の判定にはｔ検定を採用した。
【００１９】
【表１】
2005104887.tif 000004
【産業上の利用可能性】
【００２０】
本発明の組成物は、従来より食品として用いられ、安全性において問題のない海藻類に由来する物質を有効成分としており、食品や食品素材などに添加して機能性食品あるいは健康食品として利用される他、医薬品分野での利用も期待される。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】ラット血管平滑筋細胞に対するフコステロール３−ケト体又はフコステロールの増殖抑制試験の結果を示す図である。
【図１】
2005104887.tif 000005