(57)【要約】【課題】  レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより固相の表面に接着した組織試料または細胞試料中に含まれる、非特異的接着組織または接着細胞の除去方法を提供する。【解決手段】  レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより固相の表面に接着した組織試料または細胞試料に対してガスを吹き付ける工程を含むことを特徴とする、前記組織試料または細胞試料中に含まれる非特異的接着組織または接着細胞の除去方法、高圧ガスを成分として含有する前記非特異的接着組織または接着細胞の除去剤、ならびにガスを吹き付ける装置を含むレーザーキャプチャーマイクロダイセクション装置。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程：
レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより固相の表面に接着した組織試料または細胞試料に対してガスを吹き付ける工程；
を含むことを特徴とする、前記組織試料または細胞試料中に含まれる非特異的接着組織または接着細胞の除去方法。
【請求項２】
固相が熱可塑性転写フィルムである、請求項１記載の除去方法。
【請求項３】
高圧ガススプレーを用いてガスを吹き付けることによる、請求項１または２記載の除去方法。
【請求項４】
高圧ガススプレーがスプレー缶またはエアーガンの形態である、請求項３記載の除去方法。
【請求項５】
ガスの成分が、フロン、代替フロン、窒素または空気を含有するものである、請求項１〜４いずれか記載の除去方法。
【請求項６】
代替フロンガスがハイドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）である、請求項５記載の除去方法。
【請求項７】
ハイドロフルオロカーボンがＨＦＣ−１５２ａまたはＨＦＣ−１３４ａである、請求項６記載の除去方法。
【請求項８】
高圧ガスを成分として含有する、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより固相の表面に接着した組織試料または細胞試料中に含まれる非特異的接着組織または接着細胞の、除去剤。
【請求項９】
固相が熱可塑性転写フィルムである、請求項８記載の除去剤。
【請求項１０】
高圧ガスがスプレーの形状である、請求項８または９記載の除去剤。
【請求項１１】
高圧ガススプレーがスプレー缶またはエアーガンの形態である、請求項１０記載の除去剤。
【請求項１２】
ガスの成分が、フロン、代替フロン、窒素または空気である、請求項８〜１１いずれか記載の除去剤。
【請求項１３】
代替フロンガスがハイドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）である、請求項１２記載の除去剤。
【請求項１４】
ハイドロフルオロカーボンがＨＦＣ−１５２ａまたはＨＦＣ−１３４ａである、請求項１３記載の除去剤。
【請求項１５】
ガスを吹き付ける装置を含む、レーザーキャプチャーマイクロダイセクション装置。
【請求項１６】
ガスを吹き付ける装置がエアーガンの形態である、請求項１５記載の装置。
【請求項１７】
ガスの成分が、フロン、代替フロン、窒素または空気である、請求項１５または１６記載の装置。
【請求項１８】
代替フロンガスがハイドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）である、請求項１７記載の装置。
【請求項１９】
ハイドロフルオロカーボンがＨＦＣ−１５２ａまたはＨＦＣ−１３４ａである、請求項１８記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、レーザーキャプチャーマイクロダイセクション採取試料中に含まれる非特異的接着試料の除去方法に関する。より詳細には、本発明は、レーザーキャプチャーマイクロダイセクション採取試料に対してガスを吹き付けることにより、該試料中に含まれる非特異的接着組織または細胞を除去する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、マイクロアレイ技術等を利用することで網羅的な遺伝子発現解析を行うことが可能となっている。また、従来からのPCR法のほか、RNA増幅技術も開発され、微量組織や細胞から抽出されたRNAを出発材料として遺伝子発現解析を行うことが可能となっている。一方で、生体試料を対象とした遺伝子発現解析では臓器レベルでの解析が中心であったが、生命現象を的確に捉えるためには、さらに臓器を構成する微細組織や細胞を対象とした解析が必要になる。
【０００３】
組織切片から特定の組織・細胞を採取する方法として、最近、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションが開発された。最も広く普及しているレーザーキャプチャーダイセクションの原理は以下のとおりである。まずスライドグラス上の組織切片に熱可塑性転写フィルムを密着あるいは接近させ、顕微鏡下で組織切片を観察しつつ採取すべき組織・細胞にレーザーを照射する。レーザー照射された部位は熱可塑性転写フィルムが融解し、当該部位の組織・細胞はフィルム面に補足（接着・固定）される。レーザー照射後、組織切片から熱可塑性転写フィルムを外すと、フィルム上にはレーザーが照射された部位の組織・細胞のみが付着してくる。以上の原理により、組織切片上から特定の組織・細胞を採取することができる。
【０００４】
ところが、組織切片とスライドグラス間の接着力が弱い場合や、組織切片とスライドグラス間の接着力より組織切片内での細胞間接着が強い場合には、レーザー照射をしない部位の組織・細胞もフィルム面に接着することがある。また、静電気の作用により、組織・細胞が吸着する場合もある。非特異的にフィルム面に接着した組織・細胞は目的外のものであり、以後の解析に支障をきたす。そのため非特異的接着が起こった場合、再度、新たに試料調製から採取の工程までを行う必要がある。以上のことから、フィルム面に非特異的に接着した組織・細胞を除去する方法が検討されており、これに関して、粘着テープを用いて非特異的に接着した組織を取り除く方法が知られている（非特許文献１を参照）。しかしながら、非特異的接着組織・細胞の除去が不完全であったり、逆に目的組織・細胞が部分的に剥離する恐れがある。このようなことから、フィルム面に非特異的に接着した組織・細胞を、目的組織・細胞に影響を及ぼすことなく確実に除去する方法が求められていた。
【０００５】
【非特許文献１】Methods in Enzymology Vol. 356, pp33-49, 2002
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより組織切片から採取した組織・細胞中に含まれる非特異的接着組織・細胞を、簡便かつ正確に除去する方法を提供することにある。さらに本発明の目的は、前述の非特異的組織・細胞除去のための除去剤、および除去装置を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
前記のように、熱可塑性転写フィルムを利用したレーザーキャプチャーマイクロダイセクションでは、レーザー照射を行っていない部位の組織・細胞が非特異的にフィルムに接着することがある。これら非特異的に接着した組織・細胞は、以後の解析（遺伝子発現解析、タンパク質解析）に支障をきたす。そこで本発明者は、非特異的に接着した組織・細胞を非接触的にかつ正確に排除する方法につき鋭意検討を行った。その際、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションでは細胞１個を採取することもあれば、一定の領域（組織）を採取することもあるため、採取量に依存しない除去方法であることも重要であった。
【０００８】
本発明者は、従来精密機器やＯＡ機器などにおけるゴミやホコリ除去用に用いられてきたガススプレーを用いて、熱可塑性転写フィルムの試料接着面にガスを吹き付けた結果、予想をはるかに上回る優れた効果を発揮し、非特異的に接着した組織・細胞のみを正確に排除することができた。さらに、レーザー照射を行った目的組織・細胞にはなんら影響しないことも明らかとなった。
このように本発明の除去方法は、非特異的に接着した組織・細胞を従来になく正確に除去することができるため、その後の遺伝子発現解析やタンパク質解析の精度を大きく改善することができる。
本発明はこのような知見に基づき完成するに至ったものである。
【０００９】
すなわち本発明は、下記に掲げるものである：
（１）  以下の工程：
レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより固相の表面に接着した組織試料または細胞試料に対してガスを吹き付ける工程；
を含むことを特徴とする、前記組織試料または細胞試料中に含まれる非特異的接着組織または接着細胞の除去方法、
（２）  固相が熱可塑性転写フィルムである、前記（１）記載の除去方法、
（３）  高圧ガススプレーを用いてガスを吹き付けることによる、前記（１）または（２）記載の除去方法、
（４）  高圧ガススプレーがスプレー缶またはエアーガンの形態である、前記（３）記載の除去方法、
（５）  ガスの成分が、フロン、代替フロン、窒素または空気を含有するものである、前記（１）〜（４）いずれか記載の除去方法、
（６）  代替フロンガスがハイドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）である、前記（５）記載の除去方法、
（７）  ハイドロフルオロカーボンがＨＦＣ−１５２ａまたはＨＦＣ−１３４ａである、前記（６）記載の除去方法、
（８）  高圧ガスを成分として含有する、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより固相の表面に接着した組織試料または細胞試料中に含まれる非特異的接着組織または接着細胞の、除去剤、
（９）  固相が熱可塑性転写フィルムである、前記（８）記載の除去剤、
（１０）  高圧ガスがスプレーの形状である、前記（８）または（９）記載の除去剤、
（１１）  高圧ガススプレーがスプレー缶またはエアーガンの形態である、前記（１０）記載の除去剤、
（１２）  ガスの成分が、フロン、代替フロン、窒素または空気である、前記（８）〜（１１）いずれか記載の除去剤、
（１３）  代替フロンガスがハイドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）である、前記（１２）記載の除去剤、
（１４）  ハイドロフルオロカーボンがＨＦＣ−１５２ａまたはＨＦＣ−１３４ａである、前記（１３）記載の除去剤、
（１５）  ガスを吹き付ける装置を含む、レーザーキャプチャーマイクロダイセクション装置、
（１６）  ガスを吹き付ける装置がエアーガンの形態である、前記（１５）記載の装置、
（１７）  ガスの成分が、フロン、代替フロン、窒素または空気である、前記（１５）または（１６）記載の装置、
（１８）  代替フロンガスがハイドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）である、前記（１７）記載の装置、ならびに
（１９）  ハイドロフルオロカーボンがＨＦＣ−１５２ａまたはＨＦＣ−１３４ａである、前記（１８）記載の装置。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の非特異的接着試料の除去方法は、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより熱可塑性転写フィルム等の固相の表面に接着した組織または細胞試料から、非特異的接着試料を簡便かつ正確に除去することができる。従ってその後の遺伝子発現解析やタンパク質解析の精度を向上させることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明は、以下の工程：
レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより固相の表面に接着した組織試料または細胞試料に対してガスを吹き付ける工程；
を含むことを特徴とする、前記組織試料または細胞試料中に含まれる非特異的接着組織または接着細胞の除去方法を提供する。
【００１２】
レーザーキャプチャーマイクロダイセクションとは、組織切片の特定部分にレーザーを照射し、照射された部分を固相の表面に付着した形で摘出する手法である。ここで用いられる組織には特に制限は無く、切片化できる組織であればどのようなものであっても良い。
前記レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにおいて用いられる固相としては、具体的には熱可塑性転写フィルムが挙げられる。
【００１３】
熱可塑性転写フィルムとは、常温では粘着性を持たないが、レーザー照射により高温となった際に融解し、同時に粘着性を得る材質で作製されたフィルムである。当該熱可塑性転写フィルムは、各レーザーキャプチャーマイクロダイセクションシステムに合ったフィルムであれば、如何なるものを用いても良い。例えば、ARCTURUS社製レーザーキャプチャーマイクロダイセクションシステムでは、CapSureと呼ばれるものに組織・細胞を捕捉するが、これは円筒状のプラスチック担体に熱可塑性転写フィルムが貼付された形態のものである。
【００１４】
熱可塑性転写フィルムに試料（組織試料または細胞試料）を接着させる方法は、各レーザーキャプチャーマイクロダイセクションシステムに合った手法であれば特に限定されないが、具体的には以下の方法が例示される。
まずスライドグラス上の組織切片に熱可塑性転写フィルムを密着あるいは接近させ、顕微鏡下で組織切片を観察しつつ採取すべき組織・細胞にレーザーを照射する。レーザー照射された部位は熱可塑性転写フィルムが融解し、当該部位の組織・細胞はフィルム面に補足（接着・固定）される。レーザー照射後、組織切片から熱可塑性転写フィルムを外すと、フィルム上にはレーザーが照射された部位の組織・細胞が付着してくる。以上の工程により組織切片上から特定の組織・細胞が採取される。
【００１５】
本発明の非特異的接着組織または接着細胞の除去方法は、以上のような固相への接着を利用したレーザーキャプチャーマイクロダイセクションで採取された全ての組織試料または細胞試料に対して適用することができる。
【００１６】
本発明の非特異的接着組織または接着細胞の除去方法は、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより固相の表面に接着した組織試料または細胞試料に対してガスを吹き付ける工程を含むことを特徴とする。
ここで用いられるガスの種類としては、固相（熱可塑性転写フィルム）や採取試料に損傷を与えない種類のガスであれば、どのようなガスであっても良い。例えば当該ガスの成分として、フロン、代替フロン、窒素または空気を含有するものが挙げられる。このうち液化が容易でありかつ地球環境への影響が少ないという観点から、代替フロンガスが好ましい。当該代替フロンガスとしては、具体的にはハイドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）が挙げられる。
【００１７】
ＨＦＣとは、具体的にはＨＦＣ−２３、ＨＦＣ−３２、ＨＦＣ−４１、ＨＦＣ−１２５、ＨＦＣ−１３４、ＨＦＣ−１３４ａ、ＨＦＣ−１４３、ＨＦＣ−１４３ａ、ＨＦＣ−１５２ａ、ＨＦＣ−２２７ｅａ、ＨＦＣ−２３６ｆａ、ＨＦＣ−２４５ｃａおよびＨＦＣ−４３−１０ｍｅｅが挙げられる。好ましくはＨＦＣ−１５２ａまたはＨＦＣ−１３４ａが挙げられ、より好ましくはＨＦＣ−１５２ａが挙げられる。
【００１８】
前記本発明の除去方法において用いられるガスは、噴射性を有するガスであることを要する。噴射性を有するためには、当該ガスは、特定の容器内で圧力がかけられているガス、すなわち高圧ガスであることが好ましい。
前記高圧ガスは、噴射、すなわち試料へのガスの吹き付けを容易にするために、スプレーの形状にすることが好ましい。ここでスプレーとは、圧力をかけて物質を噴出させることのできる容器または装置を意味する。
【００１９】
容器内で圧力をかけられている高圧ガスは、スプレーを開放すること（例えばボタンを押してバルブを開く等）により、減圧され、外気中に噴射される。噴射されたガスを前記レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより採取した組織試料または細胞試料に吹き付けることにより、本発明の目的である非特異的接着組織または接着細胞の除去を達成することができる。
【００２０】
前記高圧ガススプレーは、スプレー缶またはエアーガンの形態であることが好ましい。
ここでスプレー缶とは、キャップ、ボタン・バルブ・ディップチューブ、および耐圧容器の３つの部分からなる容器である。当該スプレー缶内には、前記に挙げたフロン、代替フロン、窒素または空気といったガスが、高圧ガスとして保持される。高圧ガスとして保持されるためには、前記のガスは、容器内において、液化ガス若しくは圧縮ガスの形状であることが好ましい。
前記高圧ガスを含有するスプレー缶として、具体的には、スプレーガス圧により精密機器やＯＡ機器などのゴミやホコリを除去する目的で市販されている、種々のスプレー缶を挙げることができる（これらはエアーダスターとも呼ばれている）。
【００２１】
当該市販品とは、例えば以下のものが例示される：
セフティーダスターZ-282、セフティーダスターZ-283、エアダスターZ-287（以上ホーザン株式会社製）、エアロダスターエコZC-34、エアロダスターZC-31・32（以上株式会社エンジニア製）、エアダスターエコタイプCD-HDS1E、エアダスターCD-DSSET、エアダスターCD-DSSET2、エアダスターCD-23、エアダスターCD-22L、エアダスターエコタイプCD-22ECO、エアダスターCD-22A、エアダスターCD-21N、エアダスターエコタイプCD-21ECO、エアダスターCD-20S、エアダスターエコタイプCD-20ECO、エアダスターCD-23L（以上サンワサプライ株式会社製）、E-5060ウルトラジェット460（株式会社エツミ製）、ダストパンチ（株式会社堀内カラー製）、デジタルエアーダスター500エコタイプ、デジタルエアーダスター300エコタイプ（以上株式会社ケンコー製）、エアダスターAVC-CKAD001、エアダスターエコタイプAD-152L、エアダスターエコタイプAD-152M、エアダスターAD-MIXLL、エアダスターAD-MIXM、エアダスターAD-S134M、エアダスターAD-S134S、エアダスターAD-134AM、エアダスターAD-134AS、エアダスターAD-N134AM、エアダスターAD-N134AP、エアダスターAD-N134AS、エアダスターKAD-001〜004（以上エレコム株式会社製）。
【００２２】
前記でエアーガンとは、エアーダスターガンとも呼ばれるものであり、銃の形状をしたガス噴射装置である。当該エアーガンの末端部はホースを介することにより、前記高圧ガススプレー缶若しくはエアーコンプレッサー（空気圧縮器）などに連結されている。従って、エアーガンのレバーを引くことによりノズルからガスを噴射することができる。このようなエアーガンとして、具体的には、スプレーガス圧により精密機器やOA機器などのゴミやホコリを除去する目的で市販されている、種々のエアーガンを挙げることができる。当該市販品としては、例えばエアーダスターDS-1シリーズ（アイ・エイ・シー株式会社製）、エアーダスターガンK-601シリーズ（近畿製作所製）、ハンドエースダスター（日東工器株式会社製）などが挙げられる。
【００２３】
噴射されるガスの風量は、本発明の目的である非特異的接着組織または接着細胞が除去される程度の風量であれば特に制限は無い。具体的には、前記市販のスプレー缶やエアーガンから通常噴射される程度の風量が挙げられる。
好ましくは、例えばスプレー缶若しくはコンプレッサーの圧が、圧縮ガスであれば0.5メガパスカル以上、また液化ガスであれば0.1メガパスカル以上を挙げることができる。より好ましくは、圧縮ガスであれば１メガパスカル以上、また液化ガスであれば0.２メガパスカル以上を挙げることができる。
【００２４】
以上に示したガスを、前記レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより採取した組織試料または細胞試料に吹き付けることにより、本発明の目的である非特異的接着組織または接着細胞の除去を達成することができる。
【００２５】
本発明はまた、高圧ガスを成分として含有する、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより固相の表面に接着した組織試料または細胞試料中に含まれる非特異的接着組織または接着細胞の除去剤を提供する。すなわち、従来は精密機器等のゴミやホコリを除去するために用いられてきた高圧ガスの、新規な用途を提供する。
当該除去剤の成分である高圧ガスは前記に示した通りであり、特定の容器内で圧力がかけられているガスを意味する。
【００２６】
当該ガスの種類としては、前記したように、固相（熱可塑性転写フィルム）や採取試料に損傷を与えない種類のガスであれば、どのようなガスであっても良い。例えば当該ガスの成分として、フロン、代替フロン、窒素または空気を含有するものが挙げられる。このうち液化が容易でありかつ地球環境への影響が少ないという観点から、代替フロンガスが好ましい。当該代替フロンガスとしては、具体的にはハイドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）が挙げられる。
ＨＦＣとは、具体的にはＨＦＣ−２３、ＨＦＣ−３２、ＨＦＣ−４１、ＨＦＣ−１２５、ＨＦＣ−１３４、ＨＦＣ−１３４ａ、ＨＦＣ−１４３、ＨＦＣ−１４３ａ、ＨＦＣ−１５２ａ、ＨＦＣ−２２７ｅａ、ＨＦＣ−２３６ｆａ、ＨＦＣ−２４５ｃａおよびＨＦＣ−４３−１０ｍｅｅが挙げられる。好ましくはＨＦＣ−１５２ａまたはＨＦＣ−１３４ａが挙げられ、より好ましくはＨＦＣ−１５２ａが挙げられる。
【００２７】
前記高圧ガスは、噴射、すなわち試料へのガスの吹き付けを容易にするために、スプレーの形状にすることが好ましい。ここでスプレーとは、圧力をかけて物質を噴出させることのできる容器または装置を意味する。
【００２８】
前記高圧ガススプレーは、スプレー缶またはエアーガンの形態であることが好ましい。
ここでスプレー缶とは、キャップ、ボタン・バルブ・ディップチューブ、および耐圧容器の３つの部分からなる容器である。当該スプレー缶内には、前記に挙げたフロン、代替フロン、窒素または空気といったガスが、高圧ガスとして保持される。高圧ガスとして保持されるためには、前記のガスは、容器内において、液化ガス若しくは圧縮ガスの形状であることが好ましい。
前記高圧ガスを含有するスプレー缶として、具体的には、スプレーガス圧により精密機器やOA機器などのゴミやホコリを除去する目的で市販されている、種々のスプレー缶を挙げることができる（これらはエアーダスターとも呼ばれている）。
【００２９】
当該市販品とは、例えば以下のものが例示される：
セフティーダスターZ-282、セフティーダスターZ-283、エアダスターZ-287（以上ホーザン株式会社製）、エアロダスターエコZC-34、エアロダスターZC-31・32（以上株式会社エンジニア製）、エアダスターエコタイプCD-HDS1E、エアダスターCD-DSSET、エアダスターCD-DSSET2、エアダスターCD-23、エアダスターCD-22L、エアダスターエコタイプCD-22ECO、エアダスターCD-22A、エアダスターCD-21N、エアダスターエコタイプCD-21ECO、エアダスターCD-20S、エアダスターエコタイプCD-20ECO、エアダスターCD-23L（以上サンワサプライ株式会社製）、E-5060ウルトラジェット460（株式会社エツミ製）、ダストパンチ（株式会社堀内カラー製）、デジタルエアーダスター500エコタイプ、デジタルエアーダスター300エコタイプ（以上株式会社ケンコー製）、エアダスターAVC-CKAD001、エアダスターエコタイプAD-152L、エアダスターエコタイプAD-152M、エアダスターAD-MIXLL、エアダスターAD-MIXM、エアダスターAD-S134M、エアダスターAD-S134S、エアダスターAD-134AM、エアダスターAD-134AS、エアダスターAD-N134AM、エアダスターAD-N134AP、エアダスターAD-N134AS、エアダスターKAD-001〜004（以上エレコム株式会社製）。
【００３０】
すなわち本発明においては、これら高圧ガスを含有するスプレー缶の新規な用途（レーザーキャプチャーマイクロダイセクション採取試料における非特異的接着試料の除去用途）をも提供するものである。
【００３１】
前記でエアーガンとは、エアーダスターガンとも呼ばれるものであり、銃の形状をしたガス噴射装置である。当該エアーガンの末端部はホースを介することにより、前記高圧ガススプレー缶若しくはエアーコンプレッサーなどに連結されている。従って、エアーガンのレバーを引くことによりノズルからガスを噴射することができる。このようなエアーガンとして、具体的には、スプレーガス圧により精密機器やOA機器などのゴミやホコリを除去する目的で市販されている、種々のエアーガンを挙げることができる。当該市販品としては、例えばエアーダスターDS-1シリーズ（アイ・エイ・シー株式会社製）、エアーダスターガンK-601シリーズ（近畿製作所製）、ハンドエースダスター（日東工器株式会社製）などが挙げられる。
すなわち本発明においては、これら高圧ガスを噴射するエアーガンの新規な用途（レーザーキャプチャーマイクロダイセクション採取試料における非特異的接着試料の除去用途）をも提供するものである。
【００３２】
本発明はまた、ガスを吹き付ける装置を含む、レーザーキャプチャーマイクロダイセクション装置を提供する。
ここでガスを吹き付ける装置とは、具体的にはエアーガンを含む装置である。すなわち本発明は、エアーガンの装備されたレーザーキャプチャーマイクロダイセクション装置を提供するものである。
【００３３】
当該装置は、必要に応じてエアーコンプレッサーをさらに含むことが出来る。
エアーガンに関しては前記説明の通りであり、またエアーガンから噴射されるガスについても前述の通りである。
エアーガンを装備するレーザーキャプチャーマイクロダイセクション装置としては、例えば PixCell IIe (ARCTURUS社製)、LM100（オリンパス社製）、LM200（オリンパス社製）などが挙げられる。
【００３４】
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によりなんら限定されるものではない。
【実施例１】
【００３５】
熱可塑性転写フィルムに接着した非特異的接着試料の除去方法の検討
1)材料及び実験方法
マウスから脳を取り出し、O.C.T.コンパンド（サクラファインテクニカル社製）に沈めて凍結した。この凍結脳から厚さ１０μｍの切片を作製し、スライドグラス（ARCTURUS社製：HistoGene LCM Slide）上に貼付し-80℃で保存した。組織切片の固定・染色を以下のように行い、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションに供した。組織切片を75％エタノール、Diethyl pyrocarbonate処理水(DEPC水)の順に20秒間浸漬後、組織上にRNAlater RNA Stabilization Reagent(QIAGEN)を滴下して4分間放置し、DEPC水で軽く洗浄してからStaining Solution(ARCTURUS社製：HistoGene LCM Frozen Section Staining Kit)を滴下して染色を行いDEPC水で軽く洗浄後、75％,95%,100%エタノールの順に20秒浸漬、100％エタノールに2-3分浸漬後キシレン(関東化学)に1分間浸漬、さらにキシレンに5分間浸漬した後、風乾した。
【００３６】
固定・染色した組織切片をレーザーキャプチャーマイクロダイセクション用顕微鏡(PixCell IIe：ARCTURUS社製)にセットし、組織採取用キャップ(ARCTURUS社製：CapSure LCM Caps)を組織切片の上にのせ、レーザーパワー30 mW、15μm径のレーザーを照射して脈絡叢および海馬歯状回顆粒細胞を取得した。キャップを取り外し、熱可塑性転写フィルム面に接着した試料を実体顕微鏡(Nikon)で撮影した。またこの試料に対して高圧ガススプレー(ホーザン株式会社製：セフティーダスター Z-283)を噴射した後、同様の撮影を行った。
【００３７】
2)結果
結果を図１に示す。組織採取直後(クリーンアップ前)には接着していた非特異的接着物が、高圧ガススプレー噴射後（クリーンアップ後）は除去されており、ほぼ純粋な目的組織が得られた。この結果から、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより得られた試料（組織・細胞）から非特異的接着試料を除去するためには、ガスの噴射が非常に有効であることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明により、レーザーキャプチャーマイクロダイセクション採取試料中に含まれる非特異的接着組織または細胞を除去する方法が提供される。本発明の除去方法は、レーザーキャプチャーマイクロダイセクションにより熱可塑性転写フィルム等の固相の表面に接着した組織または細胞試料から、非特異的接着試料を簡便かつ正確に除去することができる。従ってその後の遺伝子発現解析やタンパク質解析の精度を向上させることができる。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】熱可塑性転写フィルム面に接着した試料の実態顕微鏡写真である。左図：組織採取直後(クリーンアップ前)、右図：高圧ガススプレー噴射後(クリーンアップ後)、上段：海馬歯状回顆粒細胞、下段：脈絡叢。
【図１】
2005156422.tif 000002