(57)【要約】【目的】コラーゲン産生促進剤又はコラーゲン架橋形成阻害剤を提供する。【構成】ビタミンＡ誘導体、コラーゲンペプチド、コリウス抽出物を特定に組み合わせたものは、優れたコラーゲン産生促進効果及びコラーゲン架橋形成抑制効果を示した。また上記のコラーゲン産生促進剤又はコラーゲン架橋形成阻害剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤は安全でシワの予防・改善に優れた皮膚の老化防止効果を示した。【特許請求の範囲】
【請求項１】
コラーゲンペプチドと、ビタミンＡ誘導体及び／又はコリウスの抽出物を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項２】
コラーゲンペプチドの平均分子量が２８０〜３０００である請求項１記載のコラーゲン産生促進剤。
【請求項３】
コリウスがコリウススクテラリオイデス（Ｃｏｌｉｕｓ  ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）である請求項１又は２記載のコラーゲン産生促進剤。
【請求項４】
コラーゲンペプチド、ビタミンＡ誘導体、コリウスの抽出物から１種又は２種以上含有することを特徴とするコラーゲン架橋形成阻害剤。
【請求項５】
コラーゲンペプチドと、ビタミンＡ誘導体及び／又はコリウスの抽出物を含有することを特徴とするコラーゲン架橋形成阻害剤。
【請求項６】
コラーゲンペプチドの平均分子量が２８０〜３０００である請求項１記載のコラーゲン架橋形成阻害剤。
【請求項７】
請求項１〜３記載のコラーゲン産生促進剤又は、請求項４〜６記載のコラーゲン架橋形成阻害剤を含有することを特徴とするシワの予防、改善用皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明が属する技術分野】
本発明は、コラーゲン産生促進剤及びコラーゲン架橋形成阻害剤に関し、特に皮膚老徴のひとつであるシワの予防、改善に有効性を発揮するコラーゲン産生促進剤及びコラーゲン架橋形成阻害剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
老化にともなう皮膚変化のひとつであるシワは、真皮結合組織の主な構成成分であるコラーゲンの減少や質的変化により皮膚弾力性の低下が起こることが原因となって発生する。シワの形成を抑制する手段として、従来からコラーゲン、ヒアルロン酸等の真皮細胞外マトリックス成分を皮膚に塗布するのが主流であった。しかし、これらは十分な効果を有するものではなかった。
【０００３】
また、近年皮膚の加齢変化を予防・改善する薬物としてビタミンＡ誘導体が注目され、広く用いられている（特許文献１、非特許文献１）。ビタミンＡ誘導体の効果は極めて多岐にわたるが、その一つとして皮膚におけるコラーゲン産生促進効果が知られている。しかし、その効果は必ずしも満足の行くものでないことから、この効果を増強する手段が強く望まれていた。
【０００４】
【特許文献１】
特開平０８−０７３３３８
【非特許文献１】
圷信子、フレグランスジャーナル、２００１、２９（２）、３７−４２
【０００５】
一方、コラーゲンの質的変化の一つに架橋形成が上げられる。コラーゲンは生体内での代謝回転が遅く、真皮結合組織中に長く存在する間にコラーゲン分子内及び分子間に架橋が起こることで、線維芽細胞の活性が低下すると共に、コラーゲンが不溶化し、結合組織本来の物性が低下して肌の弾力が低下する原因になっていた（非特許文献２，３，４）。
【０００６】
【非特許文献２】
Ｍａｕｒｏｎ，Ｐｒｏｇ．Ｆｄ．Ｎｕｔｕｒ．Ｓｃｉ．，５：５−３５，１９８１
【非特許文献３】
Ｈｏｗａｒｄ，Ｅｘｐ．Ｃｅｌｌ．Ｒｅｓ．，２２８：１３２−１３７，１９９８
【非特許文献４】
Ｔｉｏｌｌｉｅｒ，Ｅｘｐ．Ｃｅｌｌ．Ｒｅｓ．，１９１：９５−１０４，１９９０
【０００７】
そこで、コラーゲン架橋形成を阻害することにより、皮膚の老化を防止でき、しかも安全性の点でも問題のないコラーゲン架橋阻害剤が望まれていた。
【０００８】
コラーゲンを酵素分解して得られるコラーゲンペプチドに線維芽細胞におけるコラーゲン生成を促進する効果があることは知られている（特許文献２）。またコリウスの抽出物には、紫外線によるビタミンＡレセプターの減少を防ぎ、ビタミンＡ誘導体のシワ予防・改善効果を高める効果が知られている（特許文献３）。
【０００９】
【特許文献２】
特開２０００−３０９５２１号
【特許文献３】
特願２００３−２０１２０７号
【００１０】
しかしながら、コラーゲンペプチド、ビタミンＡ誘導体、コリウス抽出物を特定の組み合わせで組み合わせることにより、コラーゲン産生効果やコラーゲン架橋形成阻害効果を促進させることは報告されていなかった。
【００１１】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、このような状況下為されたものであり、コラーゲン産生を促進し、コラーゲンの架橋形成を阻害する安全性の高い成分を探索し、該成分を有効成分として含有するシワの予防、改善に優れたコラーゲン産生促進剤及びコラーゲン架橋形成阻害剤を提供することを課題とする。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
この様な事情により、本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、コラーゲンペプチドにビタミンＡ誘導体やコリウス抽出物を併用することで、コラーゲン産生促進効果を相乗的に増強することを見出した。また、ビタミンＡ誘導体、コラーゲンペプチド、コリウス抽出物にコラーゲン架橋形成阻害効果を見出し、さらにはコラーゲンペプチドにビタミンＡ誘導体やコリウス抽出物を併用することで、コラーゲン架橋形成阻害効果が相乗的に増強することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、ビタミンＡ誘導体、コラーゲンペプチド、コリウスの抽出物を含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤及びコラーゲン架橋形成阻害剤である。
【００１４】
本発明に係るコラーゲンペプチドの出発原料であるコラーゲンまたはゼラチンは、牛、豚、鳥などの骨、皮、腱またはヒラメ、カレイ、鮭、鯛、鮪、鮫などの骨、皮、腱、鱗、浮き袋等を用いることが可能である。上記コラーゲンまたはゼラチンの抽出・精製は、公知の方法を用いて行うことができる。
【００１５】
コラーゲンペプチドは、上記コラーゲンペプチドを、タンパク分解酵素を用いて加水分解することにより得ることができる。用いる酵素は、特に限定されるものではなく、トリプシン、キモトリプシン、ズブチリシン、エラスターゼ、プロリン特異性プロテアーゼ、ストレプトコッカス属の微生物が産生するプロテアーゼ、アスペルギルス属の微生物が産生するプロテアーゼ、ストレプトミセス属の微生物が産生するプロテアーゼ、リゾープス属の微生物が産生するプロテアーゼ、バチラス属の微生物が産生するプロテアーゼ、乳酸菌が産生するプロテアーゼ、パパイン、ブロメライン、ククミシン、ペプシン、サーモリシン等が利用できる。また、クロストリジューム属、ストレプトミセス属などの細菌、放線菌あるいは真菌由来のコラゲナーゼも利用可能である。また、遺伝子組み換え技術により他の菌体に産生させたプロテアーゼであっても良い。さらに、複数の酵素を混合して使用しても良い。
【００１６】
加水分解に使用する酵素量は、原料に対して重量比０．０１％〜１０％程度、好ましくは０．１〜５％程度が良く、温度条件は室温〜９０℃、好ましくは３７℃〜５５℃、反応時間は１〜２４時間、好ましくは１〜８時間処理する。またｐＨ条件は酵素添加前に最適ｐＨに調整する。加水分解終了後、加熱して酵素を失活させ、冷却後必要に応じてろ過、脱色、脱臭、脱塩、濃縮、乾燥を行うと良い。
【００１７】
本発明のコラーゲンペプチドは、酵素の種類、濃度、反応時間等、反応条件を調整することで得ることができる。コラーゲンペプチドの平均分子量は２８０〜３０００が好ましく、平均分子量５００〜１５００が特に好ましい。酵素による加水分解物は、ゲルろ過クロマトグラフィー等の公知の方法を用いて特定の分子量の分画物を得ることができる。
【００１８】
本発明に用いるシソ科の植物としては、シソ科ソレノステモン属、コリウス属などに属し、ソレノステモン・スクテラリオイデス（Ｓｏｌｅｎｏｓｔｅｍｏｎｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）、コリウス・ブルメイ（Ｃｏｌｅｕｓ  ｂｌｕｍｅｉ）、コリウス・スクテラリオイデス（Ｃｏｌｅｕｓ  ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）、コリウス・ラビアタエ（Ｃｏｌｅｕｓ  ｌａｂｉａｔａｅ）などがある。特に、ソレノステモン・スクテラリオイデス、コリウス・ブルメイは園芸品種「コリウス」として広く販売されている。中でも中国で彩葉草といわれているコリウス・スクテラリオイデスが好ましい。
【００１９】
本発明に用いる特定のシソ科に属する植物抽出物とは、植物体の葉、茎、花、根等の植物体の一部又は全草から抽出したものである。好ましくは、植物体の葉、茎から抽出したものが良い。その抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温抽出したものであっても良い。
【００２０】
抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、１，３−ブチレングリコール及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【００２１】
上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈及び濾過処理、活性炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。
【００２２】
本発明で用いられるビタミンＡ誘導体は、酢酸レチノール、パルミチン酸レチノール、ビタミンＡ油等であり、市販品を用いることができる。
【００２３】
本発明のコラーゲン産生促進剤及びコラーゲン架橋形成阻害剤には、上記ビタミンＡ誘導体、コラーゲンペプチド及びコリウスの抽出物をそのまま使用しても良く、効果を損なわない範囲内で、通常の皮膚外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤、賦形剤、安定剤、保存剤、結合剤、崩壊剤等の成分を配合することもできる。
【００２４】
本発明に用いるコラーゲン産生促進剤及びコラーゲン架橋形成阻害剤は、化粧品、医薬部外品及び医薬品のいずれにも用いることができ、その剤型としては、例えば、化粧水、クリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、軟膏、パップ剤、ペースト剤、プラスター剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、等が挙げられる。
【００２５】
本発明に用いるビタミンＡ誘導体、コラーゲンペプチド、コリウスの抽出物の配合量は特に限定されないが、本発明のコラーゲン産生促進剤及びコラーゲン架橋形成阻害剤、皮膚外用剤全量に対し、乾燥物に換算して０．０００１〜７５重量％の範囲が好ましく、さらに好ましくは０．００１〜３０重量％である。０．０００１重量％以下ではコラーゲン産生促進効果及びコラーゲン架橋形成抑制効果が低く、また７５重量％を超えても効果に大きな増強はみられにくく、効率的でない。また、添加の方法については、予め加えておいても製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【００２６】
次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量は重量％を示す。
【００２７】
製造例１  パパイン加水分解によるコラーゲンペプチド１
コラーゲンタンパクとして、鮭皮より調製したゼラチン３０ｇを蒸留水３００ｍＬに加温溶解した。パパイン（天野エンザイム社製）３００ｍｇを加え、アンモニア水にてｐＨ７．０に調製した後５０℃で１時間放置した。反応終了後、反応液を１００℃で１５分間加熱し、酵素を失活させた。次いで活性炭素処理後、凍結乾燥し平均分子量３０００のコラーゲンペプチドを得た。
【００２８】
製造例２  パパイン加水分解によるコラーゲンペプチド２
製造例１における活性炭素処理液を蒸留水で平衡化したＢｉｏ−Ｇｅｌ  Ｐ−２（ＢＩＯ−ＲＡＤ社製）によるゲル濾過クロマトグラフィーを行い、平均分子量が２０００、８００、２８０の画分を凍結乾燥した。
【００２９】
製造例３  コラゲナーゼ加水分解によるコラーゲンペプチド
コラーゲンタンパクとして、鯛鱗より調製したゼラチン３０ｇを蒸留水３００ｍＬに加温溶解した。コラゲナーゼタイプＩ（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｒｐ製）３００ｍｇを加え、アンモニア水にてｐＨ７．５に調製した後３７℃で１時間放置した。反応終了後、反応液を１００℃で１５分間加熱し、酵素を失活させた。次いで活性炭素処理後、凍結乾燥し平均分子量４００のコラーゲンペプチドを得た。
【００３０】
製造例４  パパイン及びバチラス属の微生物が産生するプロテアーゼ加水分解によるコラーゲンペプチド１
コラーゲンタンパクとして、カレイ皮より調製したゼラチン３０ｇを蒸留水３００ｍＬに加温溶解した。パパイン（天野エンザイム社製）、バチラス属の微生物が産生するプロテアーゼ（天野エンザイム社製）を各３００ｍｇ加え、アンモニア水にてｐＨ７．５に調製した後５０℃で３時間放置した。反応終了後、反応液を１００℃で１５分間加熱し、酵素を失活させた。次いで活性炭素処理後、凍結乾燥し平均分子量１５００のコラーゲンペプチドを得た。
【００３１】
製造例５  パパイン及びバチラス属の微生物が産生するプロテアーゼ加水分解によるコラーゲンペプチド２
製造例４の活性炭素処理液を蒸留水で平衡化したＢｉｏ−Ｇｅｌ  Ｐ−２（ＢＩＯ−ＲＡＤ社製）によるゲル濾過クロマトグラフィーを行い、平均分子量８００の画分を凍結乾燥した。
【００３２】
製造例６  コリウスの熱水抽出物
コリウス（Ｃｏｌｅｕｓ  ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）の全草の乾燥物２０ｇに精製水４００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してコリウスの熱水抽出物を１．８ｇ得た。
【００３３】
製造例７  コリウスのエタノール抽出物
コリウス（Ｃｏｌｅｕｓ  ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）の全草の乾燥物１００ｇにエタノール９００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固してコリウスのエタノール抽出物を５．９ｇ得た。
【００３４】
製造例８  コリウスの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物
コリウス（Ｃｏｌｅｕｓ  ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅｓ）の全草の乾燥物１００ｇに精製水１ｋｇ及び１，３−ブチレングリコール１ｋｇを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、コリウスの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を１．９ｋｇ得た。
【００３５】
実施例１  乳液１
処方                                                配合量（重量％）
１．コラーゲンペプチド（製造例４）                    １．０
２．スクワラン                                        ５．０
３．オリーブ油                                        ５．０
４．ホホバ油                                          ５．０
５．セタノール                                        １．５
６．モノステアリン酸グリセリン                        ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート        ２．０
９．香料                                              ０．１
１０．プロピレングリコール                              １．０
１１．グリセリン                                        ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１３．精製水                                          ７２．２
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００３６】
実施例２  乳液２
処方                                                配合量（重量％）
１．パルミチン酸レチノール                            １．０
２．スクワラン                                        ５．０
３．オリーブ油                                        ５．０
４．ホホバ油                                          ５．０
５．セタノール                                        １．５
６．モノステアリン酸グリセリン                        ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート        ２．０
９．香料                                              ０．１
１０．プロピレングリコール                              １．０
１１．グリセリン                                        ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１３．精製水                                          ７２．２
［製造方法］成分１〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００３７】
実施例３  乳液３
処方                                                配合量（重量％）
１．コリウスの熱水抽出物（製造例６）                  １．０
２．スクワラン                                        ５．０
３．オリーブ油                                        ５．０
４．ホホバ油                                          ５．０
５．セタノール                                        １．５
６．モノステアリン酸グリセリン                        ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート        ２．０
９．香料                                              ０．１
１０．プロピレングリコール                              １．０
１１．グリセリン                                        ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１３．精製水                                          ７２．２
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００３８】
実施例４  乳液４
処方                                                配合量（重量％）
１．コラーゲンペプチド（製造例４）                    １．０
２．パルミチン酸レチノール                            １．０
３．スクワラン                                        ５．０
４．オリーブ油                                        ５．０
５．ホホバ油                                          ５．０
６．セタノール                                        １．５
７．モノステアリン酸グリセリン                        ２．０
８．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
９．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート        ２．０
１０．香料                                              ０．１
１１．プロピレングリコール                              １．０
１２．グリセリン                                        ２．０
１３．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１４．精製水                                          ７１．２
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００３９】
実施例５  乳液５
処方                                                配合量（重量％）
１．コリウスの熱水抽出物（製造例６）                  １．０
２．パルミチン酸レチノール                            １．０
３．スクワラン                                        ５．０
４．オリーブ油                                        ５．０
５．ホホバ油                                          ５．０
６．セタノール                                        １．５
７．モノステアリン酸グリセリン                        ２．０
８．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
９．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート        ２．０
１０．香料                                              ０．１
１１．プロピレングリコール                              １．０
１２．グリセリン                                        ２．０
１３．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１４．精製水                                          ７１．２
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００４０】
実施例６  乳液６
処方                                                配合量（重量％）
１．コラーゲンペプチド（製造例４）                    １．０
２．コリウスの熱水抽出物（製造例６）                  １．０
３．スクワラン                                        ５．０
４．オリーブ油                                        ５．０
５．ホホバ油                                          ５．０
６．セタノール                                        １．５
７．モノステアリン酸グリセリン                        ２．０
８．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
９．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート        ２．０
１０．香料                                              ０．１
１１．プロピレングリコール                              １．０
１２．グリセリン                                        ２．０
１３．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１４．精製水                                          ７１．２
［製造方法］成分３〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１〜２及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００４１】
実施例７  乳液７
処方                                                配合量（重量％）
１．コラーゲンペプチド（製造例４）                    １．０
２．コリウスの熱水抽出物（製造例６）                  １．０
３．パルミチン酸レチノール                            １．０
４．スクワラン                                        ５．０
５．オリーブ油                                        ５．０
６．ホホバ油                                          ５．０
７．セタノール                                        １．５
８．モノステアリン酸グリセリン                        ２．０
９．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
１０．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート        ２．０
１１．香料                                              ０．１
１２．プロピレングリコール                              １．０
１３．グリセリン                                        ２．０
１４．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１５．精製水                                          ７０．２
［製造方法］成分３〜１０を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１〜２及び１２〜１５を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１１を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００４２】
比較例１  従来の乳液
実施例１において、コラーゲンペプチド（製造例４）を精製水に置き換えたものを従来の乳液とした。
【００４３】
実施例８  クリーム
処方                                                配合量（重量％）
１．コラーゲンペプチド（製造例４）                    １．０
２．コリウスの１，３−ブチレングリコール水溶液
抽出物（製造例８）                                １．０
３．パルミチン酸レチノール                            １．０
４．スクワラン                                        ５．５
５．オリーブ油                                        ３．０
６．ステアリン酸                                      ２．０
７．ミツロウ                                          ２．０
８．ミリスチン酸オクチルドデシル                      ３．５
９．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ３．０
１０．ベヘニルアルコール                                １．５
１１．モノステアリン酸グリセリン                        ２．５
１２．香料                                              ０．１
１３．１，３−ブチレングリコール                        ８．５
１４．パラオキシ安息香酸エチル                          ０．０５
１５．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１６．精製水                                          ６５．１５
［製造方法］成分３〜１１を加熱して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１〜２及び１３〜１６を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１２を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００４４】
実施例９  化粧水
処方                                                配合量（重量％）
１．コラーゲンペプチド（製造例３）                    １．０
２．コリウスの熱水抽出物（製造例６）                  ２．０
３．酢酸レチノール                                    ０．５
４．１，３−ブチレングリコール                        ８．０
５．グリセリン                                        ２．０
６．キサンタンガム                                    ０．０２
７．クエン酸                                          ０．０１
８．クエン酸ナトリウム                                ０．１
９．エタノール                                        ５．０
１０．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
１１．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）    ０．１
１２．香料                                              ０．１
１３．精製水                                          ８１．０７
［製造方法］成分１〜２、４〜７及び１３と、成分３及び９〜１２をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。
【００４５】
実施例１０  軟膏
処方                                                配合量（重量％）
１．コラーゲンペプチド（製造例５）                    １．０
２．コリウスの熱水抽出物（製造例６）                  ０．３
３．レチノール                                        ０．１
４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）  ２．０
５．モノステアリン酸グリセリン                      １０．０
６．流動パラフィン                                    ５．０
７．セタノール                                        ６．０
８．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
９．プロピレングリコール                            １０．０
１０．精製水                                          ６５．５
［製造方法］成分３〜７を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１〜２及８〜１０を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００４６】
実施例１１  ファンデーション
処方                                                配合量（重量％）
１．コラーゲンペプチド（製造例１）                    １．０
２．コリウスのエタノール抽出物（製造例７）            １．０
３．酢酸レチノール                                    ０．０５
４．ステアリン酸                                      ２．４
５．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート      １．０
（２０Ｅ．Ｏ．）
６．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）  ２．０
７．セタノール                                        １．０
８．液状ラノリン                                      ２．０
９．流動パラフィン                                    ３．０
１０．ミリスチン酸イソプロピル                          ６．５
１１．パラオキシ安息香酸ブチル                          ０．１
１２．カルボキシメチルセルロースナトリウム              ０．１
１３．ベントナイト                                      ０．５
１４．プロピレングリコール                              ４．０
１５．トリエタノールアミン                              １．１
１６．パラオキシ安息香酸メチル                          ０．２
１７．二酸化チタン                                      ８．０
１８．タルク                                            ４．０
１９．ベンガラ                                          １．０
２０．黄酸化鉄                                          ２．０
２１．香料                                              ０．１
２２．精製水                                          ５８．９５
［製造方法］成分３〜１１を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分２２に成分１２をよく膨潤させ、続いて、成分１〜２及び１３〜１６を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１７〜２０を加え、ホモミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この水相に油相をかき混ぜながら加え、冷却し、４５℃で成分２１を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００４７】
実施例１２  浴用剤
処方                                                配合量（重量％）
１．コラーゲンペプチド（製造例３）                    １．０
２．コリウスの熱水抽出物（製造例６）                  １．０
３．ビタミンＡ油                                      ０．１
４．炭酸水素ナトリウム                              ５０．０
５．黄色２０２号（１）                                ０．０５
６．香料                                              ０．２５
７．無水硫酸ナトリウム                              ４７．６
［製造方法］成分１〜７を均一に混合し製品とする。
【００４８】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【００４９】
実験例１  マウス皮膚におけるコラーゲン産生促進効果
６週齢のヘアレスマウスの背部皮膚に、１日１回、週５日、計３ヶ月間試料１０ｍｇ／ｍＬ（２種以上の場合は総量）を含む７０％エタノール溶液を１０μＬ／ｃｍ２塗布し、最終日に皮膚をサンプリングした。皮膚コラーゲン量はヒドロキシプロリンを定量することで行った。
【００５０】
結果を表１に示した。その結果、パルミチン酸レチノール単独処理またはコラーゲンペプチド単独処理に比べて、両者の併用時では明らかなコラーゲン産生量の増加が認められた。またこの効果は、コリウス熱水抽出物と併用することで、相乗的に高められた。
【００５１】
【表１】
2005053797.tif 000002
【００５２】
実験例２  マウス皮膚におけるコラーゲン架橋形成阻害効果
６週齢のヘアレスマウスの背部皮膚に、紫外線Ｂ波を１日当たり１００ｍＪ／ｃｍ２、１日１回、週５日、計３ヶ月間連続で照射した。照射直後に試料１０ｍｇ／ｍＬ（２種以上の場合は総量）を含む７０％エタノール溶液を１０μＬ／ｃｍ２塗布し、最終照射の翌日にコラーゲン架橋に由来する蛍光強度（励起波長３６０ｎｍ、蛍光波長４４０ｎｍ）を光ファイバー蛍光分光測定装置（ＳｋｉｎＳｋａｎ、ホリバ社製）にて測定した。
【００５３】
結果を表２に示した。その結果、パルミチン酸レチノール、コラーゲンペプチド、コリウス抽出物に優れたコラーゲン架橋形成阻害効果が認められた。またこの効果は、コラーゲンペプチドとビタミンＡ誘導体との併用や、コリウス熱水抽出物を組み合わせることで、相乗的に効果が高まった。
【００５４】
【表２】
2005053797.tif 000003
【００５５】
実験例３  使用試験
実施例１の乳液１、実施例２の乳液２、実施例３の乳液３、実施例４の乳液４、実施例５の乳液５、実施例６の乳液６、実施例７の乳液７及び比較例１の従来の乳液を用いて、各々女性３０人（３０〜４５才）を対象に２ヶ月間の使用試験を行った。使用後、しわ、たるみについてのアンケート調査を行って、老化防止効果を判定した。アンケートの評価基準は、有効なものを「優」、やや有効なものを「良」、わずかに有効なものを「可」、無効なものを「不可」として評価した。
【００５６】
これらの結果を表３に示した。実施例１〜７に示すコラーゲンペプチド、パルミチン酸レチノール、コリウスの抽出物を含有する乳液は優れた老化防止効果を示した。なお、試験期間中皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。
【００５７】
【表３】
2005053797.tif 000004
【００５８】
実施例８のクリーム、実施例９の化粧水、実施例１０の軟膏、実施例１１のファンデーション及び実施例１２の浴用剤の使用試験を行ったところ、いずれも安全で優れた老化防止効果を示した。
【００５９】
【発明の効果】
以上のことから、ビタミンＡ誘導体、コラーゲンペプチド、コリウス抽出物を特定に組み合わせたものは、優れたコラーゲン産生促進効果及びコラーゲン架橋形成抑制効果を示した。また上記のコラーゲン産生促進剤又はコラーゲン架橋形成阻害剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤は安全でシワの予防・改善に優れた皮膚の老化防止効果を示した。