(57)【要約】    【課題】  木材腐朽性食用きのこの菌床栽培において、大量に発生する廃菌床を有効に再利用する方法を提供する。    【解決手段】  正常株の木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の廃菌床から、きのこ子実体形成促進物質を含有する画分を抽出することを特徴とする木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の抽出方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
正常株の木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の廃菌床を低級アルコールで抽出し、得られた低級アルコール抽出残渣を熱水抽出して得られる画分に含まれる木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質。
【請求項２】
前記木材腐朽性食用きのこが、エノキタケ、シイタケ、ナメコ、ブナシメジ、マイタケ、エリンギまたはヒラタケであることを特徴とする請求項１に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質。
【請求項３】
前記低級アルコールがメタノールであることを特徴とする請求項１に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質。
【請求項４】
正常株の木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の廃菌床から、きのこ子実体形成促進物質を含有する画分を抽出することを特徴とする木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の抽出方法。
【請求項５】
前記画分が、前記廃菌床を低級アルコールで抽出し、得られた低級アルコール抽出残渣を熱水抽出して得られる画分であることを特徴とする請求項４に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の抽出方法。
【請求項６】
前記木材腐朽性食用きのこが、エノキタケ、シイタケ、ナメコ、ブナシメジ、マイタケ、エリンギまたはヒラタケであることを特徴とする請求項４に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の抽出方法。
【請求項７】
前記低級アルコールがメタノールであることを特徴とする請求項５に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の抽出方法。
【請求項８】
正常株の木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の廃菌床から抽出した、きのこ子実体形成促進物質を含有する画分を培地に添加することを特徴とする木材腐朽性食用きのこの菌床栽培方法。
【請求項９】
前記画分が、前記廃菌床を低級アルコール抽出し、得られた低級アルコール抽出残渣を熱水抽出して得られる画分であることを特徴とする請求項８に記載された木材腐朽性食用きのこの菌床栽培方法。
【請求項１０】
前記木材腐朽性食用きのこが、エノキタケ、シイタケ、ナメコ、ブナシメジ、マイタケ、エリンギまたはヒラタケであることを特徴とする請求項１に記載された木材腐朽性菌床栽培方法。
【請求項１１】
前記低級アルコールがメタノールであることを特徴とする請求項８に記載された木材腐朽性食用きのこの菌床栽培方法。
【請求項１２】
正常株の木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の廃菌床から請求項4に記載された子実体形成促進物質を抽出し、菌床に添加して培地を製造し、木材腐朽性食用きのこの劣化を回避することを特徴とする木材腐朽性食用きのこの菌床栽培方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、木材腐朽性の食用きのこ廃菌床を有効利用した食用きのこ子実体形成促進物質、その抽出方法および木材腐朽性の食用きのこの菌床栽培方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
きのこの人工栽培は元々は原木栽培として始まったが、昭和４０年頃から徐々にオガ粉と栄養剤を混合した培地を使用し、屋内で湿度と温度を管理する菌床栽培へと移行した。菌床栽培が行われるようになると、きのこの安定供給が可能となり、その消費量も飛躍的に増加した。例えば、１９８０年から２０００年の２０年間に、一人当たりの野菜類の購入量の中で最も高い増加率を示した品目は、「しめじ、なめこ、えのきたけ」であり、その増加率は実に３３０．６％である。また、シイタケも１０９．９％の増加率を示し、第４位となっている（総理府統計局・家計調査年報から）。この間、生鮮野菜の購入量そのものは、全体としては７％減少しているので、きのこの消費量の伸びは際だっている。
【０００３】
一方、きのこの生産量が増大するとともに、使用済み培地（以下、「廃菌床」と呼ぶ）の量も膨大となっている。
【０００４】
廃菌床は、従来堆肥として利用される以外は廃棄されていた。しかし、培地の原料となるオガ粉の供給不足が深刻化しており、さらにまた環境問題への関心も高まってきたため、廃菌床の再利用方法が本格的に検討されるようになってきた。
【０００５】
廃菌床の再利用法として、例えば、きのこ栽培用培地としての再利用、家畜の飼料ならびに敷料として再利用、クワガタ・カブトムシの飼料材料としての利用、などがある。これらの従来技術は、廃菌床のリサイクルに重点が置かれている。
【０００６】
したがって、きのこの培地栽培においては、これ以上の廃菌床を出さないことは勿論、使用するオガ粉も必要最小限にすることが重要となっている。
【０００７】
木材腐朽性の食用きのこであるエノキタケにおいても、廃菌床の添加栽培実験を行い、再度栽培用培地として使用できるかを検討した例がある（非特許文献１）。しかし、一般的には廃菌床の積極的なリサイクルは行われておらず、エノキタケの廃菌床は野外に放置され、悪臭や虫の発生源、土壌の汚染源となっている。
【０００８】
さらにエノキタケ等の木材腐朽性の食用きのこの菌床栽培で生じる問題のひとつとして、劣化が挙げられる。劣化とは、継代培養を行っていく間に、きのこが子実体分化能力を徐々に失っていく現象である。劣化により子実体の奇形化、発生不良などの問題が生じる。この劣化は、エノキタケのみならず、マイタケ、シイタケ、ブナシメジなど、あらゆる菌床栽培による食用きのこに起こる可能性がある。
【０００９】
【非特許文献１】松原喜光、「エノキタケ培地への廃オガクズ添加試験」、昭和63年度長野県野菜花き試験場試験成績書、p141-p143、1988
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明が解決しようとする課題は、木材腐朽性の食用きのこの菌床栽培において、大量に発生する廃菌床を有効に再利用する方法を提供することである。
【００１１】
また、さらに本発明が解決しようとする課題は、劣化を防止する木材腐朽性の食用きのこの栽培方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、正常株のエノキタケの廃菌床中には、子実体形成物質が含まれていることを見出し、本発明を完成するに到った。
【００１３】
すなわち、上記課題を解決するための手段は、以下の通りである。
（１）  正常株の木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の廃菌床を低級アルコールで抽出し、得られた低級アルコール抽出残渣を熱水抽出して得られる画分に含まれる木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質。
（２）  前記木材腐朽性食用きのこが、エノキタケ、シイタケ、ナメコ、ブナシメジ、マイタケ、エリンギまたはヒラタケであることを特徴とする（１）に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質。
（３）  前記低級アルコールがメタノールであることを特徴とする（１）に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質。
（４）  正常株の木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の廃菌床から、きのこ子実体形成促進物質を含有する画分を抽出することを特徴とする木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の抽出方法。
（５）  前記画分が、前記廃菌床を低級アルコールで抽出し、得られた低級アルコール抽出残渣を熱水抽出して得られる画分であることを特徴とする（４）に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の抽出方法。
（６）  前記木材腐朽性食用きのこが、エノキタケ、シイタケ、ナメコ、ブナシメジ、マイタケ、エリンギまたはヒラタケであることを特徴とする（４）に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の抽出方法。
（７）  前記低級アルコールがメタノールであることを特徴とする（５）に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の抽出方法。
（８）  正常株の木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の廃菌床から抽出した、きのこ子実体形成促進物質を含有する画分を培地に添加することを特徴とする木材腐朽性食用きのこの菌床栽培方法。
（９）  前記画分が、前記廃菌床を低級アルコール抽出し、得られた低級アルコール抽出残渣を熱水抽出して得られる画分であることを特徴とする（８）に記載された木材腐朽性食用きのこの菌床栽培方法。
（１０）  前記木材腐朽性食用きのこが、エノキタケ、シイタケ、ナメコ、ブナシメジ、マイタケ、エリンギまたはヒラタケであることを特徴とする（８）に記載された木材腐朽性食用きのこの菌床栽培方法。
（１１）  前記低級アルコールがメタノールであることを特徴とする（８）に記載された木材腐朽性食用きのこの菌床栽培方法。
（１２）  正常株の木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の廃菌床の一部を添加して培地を製造し、食用きのこを菌床栽培することを特徴とする木材腐朽性食用きのこの菌床栽培方法。
【発明の効果】
【００１４】
請求項１〜請求項３に記載された木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質は、廃菌床から得られるため、廃菌床の有効利用に有用である。また、この請求項１〜請求項３に記載された食用きのこ子実体形成促進物質は、木材腐朽性食用きのこの培地に添加することにより劣化を防いで食用きのこを菌床栽培することが可能である。
【００１５】
請求項４〜請求項７に記載された方法により、木材腐朽性食用きのこ廃菌床から食用きのこの栽培に有用な子実体形成促進物資を抽出することができ、廃菌床を有効に利用することができる。
【００１６】
請求項８〜１２に記載された方法により、劣化を防いでより効率的に木材腐朽性食用きのこの子実体を菌床栽培することが可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明の対象となる木材腐朽性食用きのことは、一般に白色腐朽菌と呼ばれる木材を分解する能力を持つ担子菌のうち、子実体が食用となりうるものであり、菌床栽培可能な木材腐朽性食用きのこであれば特に限定されないが、例えばエノキタケ、シイタケ、ナメコ、ブナジメジ、マイタケ、エリンギまたはヒラタケ等を挙げることができる。
【００１８】
本発明における廃菌床とは、木材腐朽性食用きのこを菌床栽培した後の使用済み培地である。通常食用きのこを菌床培地に用いる培地は、オガ粉を主成分とし、適宜米糠、ふすま、等の食品副産物由来の栄養剤を定法に従って添加すればよい。
【００１９】
本発明の、木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質は、木材腐朽性食用きのこを菌床培養する際に、木材腐朽性食用きのこから生産され、培地中に含まれるものであるが、その詳細な構造な不明である。
【００２０】
本発明の、木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質を廃菌床から抽出するには、まず廃菌床を低級アルコールで抽出する。この際に使用される低級アルコールとしては、例えばメタノール、エタノール、ブタノール、イソプロパノール等を挙げることができる。好ましくは低極性から中極性までの多種多様な化合物を効率的に抽出することができる等の理由によりメタノールが好適に用いられる。
【００２１】
低級アルコールで廃菌床を抽出するには、例えば廃菌床３７０ｇに対し２Lの低級アルコールを用い、各々の低級アルコールの沸点で８〜１０時間抽出を行う。
【００２２】
廃菌床を低級アルコールで抽出した後、得られる抽出残渣を、熱水抽出することにより、木材腐朽性食用きのこ形成促進物質を有する画分が得られる。
【００２３】
抽出残渣を熱水抽出するには、例えば抽出残渣２８０ｇに対し1.5Lのイオン交換水を用い、１００℃で８〜１０時間抽出を行う。
【００２４】
なお、本発明における正常株の木材腐朽性食用きのことは、通常の栽培法によって正常な子実体形成を行い、充分な収穫量が得られる株とする。一方、病原菌の感染によらない、子実体の奇形、変色、収量の低下、発生の異常などが見られる現象を、「劣化」としている。
【００２５】
本発明の木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質は、木材腐朽性食用きのこの菌床培地に添加すると、通常の木材腐朽性食用きのこの子実体形成を促進するばかりでなく、木材腐朽性食用きのこの菌床栽培における劣化を防止することができる。
【００２６】
本発明の木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質の添加割合は、例えば木材腐朽性食用きのこの菌床培地当たり、上記画分として0.01〜0.5wt％、好ましくは0.05〜0.2wt％培地を作る際に添加し、その後は通常の栽培法にのっとって栽培する。添加割合が0.01%wt％未満では効果が見られず、また0.5wt％を超えると子実体形成に異常を生じる点で好ましくない。
【００２７】
さらに、本発明の木材腐朽性食用きのこ子実体形成促進物質は、劣化を防止するだけではなく、すでに劣化した木材腐朽性食用きのこを正常株に回復させる能力も有している。
【００２８】
実施例
以下に実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００２９】
なお、実施例で使用した木材腐朽性食用きのこの菌株は、以下の通りである。
使用菌株：純白系エノキタケＡとその劣化株Ｂ
【実施例１】
【００３０】
オガ粉・米ぬか培地（オガ粉と米ぬかの重量比1：1、培地水分率63〜64%、以下同様）を800ｍｌのポリプロピレン製容器に充填して、正常株Ａを温度18℃、湿度70〜80％で18日間栽培し、菌かき・芽出しを行い、その約10日後に子実体を収穫した後、廃菌床の培地の上半分をかき出し新しいオガ粉・米ぬか培地に詰めてからオートクレーブで滅菌した。その後、得られた培地に劣化株Ｂを接種して同様に栽培した（例１）。同時に、対象として１００％新しいオガ粉・米ぬか培地に劣化株Ｂを接種したものを同様に栽培した（例２）。
【００３１】
栽培の結果を図１に示す。図１に示した写真から明らかなように、例２では発生不良が認められたのに対し、例１では明らかに発生不良が改善されていた。
【００３２】
このことは、正常株Ａの培養によって培地中に生産された子実体形成促進物質が、劣化株Ｂの劣化を抑制していることを示している。
【００３３】
また、エノキタケの劣化とは、菌株が何らかの原因で子実体形成促進物質を生産できなくなっているために起こり、外から子実体形成促進物質を補ってやることによって、回復する可逆的な減少であることも示唆している。
【実施例２】
【００３４】
正常株Ａの廃菌床を図２に示したスキームに従って分画し、それぞれ画分１、画分２、画分３、画分４に分けた。次に、少量の試料を用いてエノキタケの子実体形成能力を判定するため、ＹＢＬＢ法（特許第3289065号）による各画分の検定を行った。この方法では、数ｍｌのＹＢＬＢ培地でエノキタケ菌糸を数日間培養し、培地中のＢＴＢ（ブロモチモールブルー）の脱色度から子実体形成能力を判断する。すなわち、ＢＴＢの脱色度が高いほど、子実体形成能力が高いことを示す。
【００３５】
まず、劣化株ＢのＹＢＬＢ脱色活性を向上させる画分について検討した。２４穴マイクロプレートにＹＢＬＢを１ｍｌづつ分注し、画分１、２、３、４をそれぞれ２．０ｍｇ／ｍｌ（０．２％）になるように添加して劣化株Ｂのコロニー断片を接種した。その結果、画分４を添加した区分に、ＹＢＬＢが青緑から黄色に変化したものが多く認められた。すなわち、画分４は、エノキタケの子実体生産能力を向上させる活性を示した。その結果を表１に示す。
【００３６】
【表１】
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また、画分４の濃度を０〜２．０ｍｇ／ｍｌ（０．２％）に変化させると、脱色率の高い劣化株Ｂが増し、ＹＢＬＢ脱色活性の画分４に対する濃度依存性を確認することができた。その結果を図3に示す。
【００３７】
次に、劣化株Ｂの廃菌床からも正常株Ａと同様に画分４を調製し、濃度０．２％でＹＢＬＢアッセイを行った。その結果、劣化株Ｂの廃菌床由来の画分４は、正常株Ａの廃菌床由来の画分４よりＹＢＬＢの脱色度を上げる効果が劣っていた。その結果を表２に示す。
【００３８】
【表２】
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以上の結果から、正常株のエノキタケの廃菌床中には、子実体の形成を促進する物質が含まれること、またそえは廃菌床の低級アルコール抽出残渣の熱水抽出画分に含まれること、当物質を補うことによって「劣化」が回復することが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００３９】
本発明により、食用きのこの廃菌床を単にリサイクル可能な基材とするだけでなく、食用きのこ生産に有用な子実体形成促進物質を含んだ原材料とすることができる。
【００４０】
本発明の子実体形成促進物質は、食用きのこの劣化を防止もしくは回復することができ、食用きのこの生産に大きく寄与する。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】実施例１で栽培した、例１および例２の結果を示す代用写真。
【図２】実施例２の分画のスキーム。
【図３】各濃度の分画４を添加したＹＢＬＢで劣化株Ｂを培養した時の脱色度（％；横軸）とコロニー断片の数（縦軸）の関係を示すグラフ。
【図２】
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【図３】
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【図１】
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