(57)【要約】【課題】            抗ウイルス活性を有する薬草エキスを提供することにある。【解決手段】        フラクタス・リグストリ・ルシジ（セイヨウイボタノキ果実）の微粉砕果実、リゾマ・ポリゴナチ（黄精）、ヘルバ・アグリモニエ（金水引）、ラジクス・リューマニエ・グルチノーザ・コンキタエ（スチーム処理地黄）又はこれらの混合物を低極性溶媒で抽出することにより製造された薬草エキス、及びその薬草エキスをウイルスと接触させることによるウイルスのin vitroの拮抗方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
フラクタス・リグストリ・ルシジ（セイヨウイボタノキ果実）の微粉砕果実、リゾマ・ポリゴナチ（黄精）、ヘルバ・アグリモニエ（金水引）、ラジクス・リューマニエ・グルチノーザ・コンキタエ（スチーム処理地黄）又はこれらの混合物を少なくとも一種の低極性溶媒で抽出することにより調製された抗ウイルス活性を有する薬草エキス。
【請求項２】
前抽出工程が必要により前記抽出工程の前にメタノール及びエタノールからなる群から選ばれた溶媒を使用することにより行なわれてもよい、請求項１記載の薬草エキス。
【請求項３】
精製工程が前記抽出工程の後に含まれる、請求項１記載の薬草エキス。
【請求項４】
前記精製工程がシリカゲルを使用することにより行なわれる、請求項３記載の薬草エキス。
【請求項５】
前記精製工程が溶離溶液としてジクロロメタン／酢酸エチルを用いて行なわれる、請求項４記載の薬草エキス。
【請求項６】
前記低極性溶媒が10未満の比誘電率を有する溶媒を含む、請求項１記載の薬草エキス。
【請求項７】
前記低極性溶媒が酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、シクロヘキサン、ノルマルヘキサン、ノルマルブチルアルコール、又はベンゼンを含む、請求項６記載の薬草エキス。
【請求項８】
前記ウイルスがエンテロウイルスである、請求項１記載の薬草エキス。
【請求項９】
少なくとも一種の低極性溶媒による、フラクタス・リグストリ・ルシジ（セイヨウイボタノキ果実）の微粉砕果実、リゾマ・ポリゴナチ（黄精）、ヘルバ・アグリモニエ（金水引）、ラジクス・リューマニエ・グルチノーザ・コンキタエ（スチーム処理地黄）又はこれらの混合物からの抗ウイルス活性を有する薬草エキスの製造方法。
【請求項１０】
前抽出工程が必要により前記抽出工程の前にメタノールからエタノールに至る範囲の溶媒を使用することにより行なわれてもよい、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
精製工程が前記抽出工程の後に含まれる、請求項９記載の方法。
【請求項１２】
前記精製工程がシリカゲルを使用することにより行なわれる、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
前記精製工程が溶離溶液としてジクロロメタン／酢酸エチルを用いて行なわれる、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記低極性溶媒が10未満の比誘電率を有する溶媒を含む、請求項９記載の方法。
【請求項１５】
前記低極性溶媒が酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、シクロヘキサン、ノルマルヘキサン、ノルマルブチルアルコール、又はベンゼンを含む、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前記ウイルスがエンテロウイルスである、請求項９記載の方法。
【請求項１７】
ウイルスを請求項１記載の薬草から抽出された物質に暴露させることによるウイルスにin vitroで拮抗する方法。
【請求項１８】
前記ウイルスがエンテロウイルスである、請求項１７記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は抗ウイルス活性を有する薬草エキスに関する。更に詳しくは、本発明はセイヨウイボタノキ果実、黄精、金水引、スチーム処理地黄又はこれらの混合物を低極性溶媒で抽出することにより製造された薬草エキス、及びその薬草エキスをウイルスと接触させることによりウイルスにin vitroで拮抗する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ウイルスは異なる感染経路、例えば、空気、液滴、又は接触により広がることにより種々の疾患を導入する。毎年、春及び秋に、台湾は消化道の感染性疾患により攻撃され、これらが島にかなり影響し、大衆、特に乳児及び幼児に脅威である。エンテロウイルスは患者の口又は鼻の分泌物、排泄物、又は噴霧と接触するヒトを感染する。それらは高い人工密度が利用できる場所で広がり易い。特定の治療がエンテロウイルス感染症に打ち勝つのに見つからなかったので、医師はしばしば支持治療を使用してウイルスから防御する。加えて、多種の挑戦的エンテロウイルスが存在する。それ故、たとえヒトが或る型のエンテロウイルスにより感染されたとしても、彼又は彼女はその他の型に対する長寿免疫を得ない。ウイルスにより感染されることを防止する方法は必要な時にはいつでも手を洗い、清潔かつ換気された家に住み、呼吸器を装着し、感染されたヒトとの接触を制止することである。
米国特許第6,214,350号明細書はリグストラム・ルシダム（Ligustrum lucidum）及び／又はリグストラム・ジャポニカム（L. japonicum）の果実からの水性エキスに関する。それは前記エキスを下記の工程で調製する方法を明らかにする。リグストラム・ルシダム及び／又はリグストラム・ジャポニカム又はこれらの混合物が水に暴露されてこれらの不溶性内容物を除去し、水溶液が酸性にされて酸沈殿物を得、次いでこれが精製される。前記特許はリグストラム・ルシダム及び／又はリグストラム・ジャポニカムの果実からの前記水性エキスがＢ型肝炎(HBC)、Ｃ型肝炎(HCV)、及びヒト免疫不全ウイルス(HIV)を治療するのに使用し得ることを明らかにしている。
米国特許第5,888,527号明細書は茶からの水性エキスに関する。活性カテキン及び紅茶ポリフェノールを含む前記エキスが菌類、細菌、及びインフルエンザウイルスに拮抗するのに使用される。
現在まで、低極性溶媒を使用することによりリグストラム・ルシダムの果実からエキスを得る方法、又はこのようなエキスを使用してウイルス、特にピコルナウイルスのサブグループである、エンテロウイルスに拮抗する方法に関して公表された書類は見つからなかった。加えて、水は高度に極性の物質であり、異なるウイルスが異なって作用し、また医薬に対しかなり特異性であるので、先に示された従来技術のいずれもが本発明の概念又は実施に拡張し得ない。更に、ウイルス性疾患又は症候を薬草で予防又は治療することについての要望が存する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明はセイヨウイボタノキ果実（医薬名：フラクタス・リグストリ・ルシジ；植物名：リグストラム・ルシダム Ait）、黄精（医薬名：リゾマ・ポリゴナチ(Rhizoma Polygonati)；植物名：ポリゴナタム・シビリカム Red、ポリゴナタム・キンギアナム(P. kingianum) Coll.et Hemsl、又はポリゴナタム・クブルトネマ(P. cvrtonema) Hua）、金水引（医薬名：ヘルバ・アグリモニエ(Herba Agrimoniae)；植物名：アグルモンラ・アロザ(Agrlmonla allosa) Ledeb）、スチーム処理地黄（医薬名：ラジクス・リューマニエ・グルチノーザ・コンキタエ(Radix Rehmanniae Glutinosae Conquitae)；植物名：リューマニア・グルチノーザ(Rehmannia Glutinosa) (Gaertn.) Libosch）又はこれらの混合物を少なくとも一種の低極性溶媒で抽出することにより抗ウイルス活性を有する薬草エキスを提供することを目的とする。
本発明の別の目的はセイヨウイボタノキ果実、黄精、金水引、スチーム処理地黄又はこれらの混合物から少なくとも一種の低極性溶媒で抗ウイルス活性を有する薬草エキスを製造する方法を明らかにすることである。
本発明の第三の目的は本発明においてウイルスを抗ウイルス活性を有する薬草エキスに暴露させることによりin vitroでウイルスに拮抗する方法を明らかにすることである。
本発明は抗ウイルス活性を有する薬草エキスがin vitroでウイルスに拮抗するのに使用される好ましい実施態様を明らかにする。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００４】
本発明に使用される薬草の医薬名、植物名、科名が表１に示される。
【０００５】
【表１】
2005002094.tif 000002
【０００６】
セイヨウイボタノキ果実（フラクタス・リグストリ・ルシジ）は植物リグストラム・ルシダムAitの果実である。それはモクセイ科に属する。
黄精（リゾマ・ポリゴナチ）は植物ポリゴナタム・シビリカムRed、P.キンギアナムColl.et Hemsl、又はP.クブルトネマHuaの根茎である。それらはユリ科に属する。
金水引（ヘルバ・アグリモニエ）は植物アグルモンラ・アロザLedebの地上部分又は全体である。それはバラ科に属する。
スチーム処理地黄（ラジクス・リューマニエ・グルチノーザ・コンキタエ）は蒸解され、次いで乾燥された植物リューマニア・グルチノーザ(Gaertn.)Liboschの根である。それはゴマノハグサ科に属する。
オウゴン根（ラジクス・スクテラリエ）は植物スクテラリア・バイカレンシスGeorgiの乾燥された根である。それは唇形科に属する。
オウバク（コルテックス・フェロデンドリ）は植物フェロデンドロン・チャイネンスSchneidor又はP.アムレンスRupr.の乾燥された樹皮である。それらはメギ科に属する。
【０００７】
特別な指示は先に示された公知の工程を説明するのに必要ではなく、これらは粗薬草を加工するのに使用され、本発明に含まれる。本発明の記載は粗薬草を特定するが、植物の特定部分だけでなく、大衆ストアー又は薬草ストアーから得られた粗薬草を加工するために上記工程に従うことにより得られたものに限定されない。
一般に、抽出は薬草から有効物質をとるのに最も普通の方法の一つである。普通の抽出剤として、水、メタノール、エタノール、及びアセトンが挙げられ、これらの全てが高極性を特徴とする。極性は分子の構造依存性の物理的特徴であり、双極子モーメント及び比誘電率により示し得る。
水は80付近の比誘電率を有する高極性溶媒である。それは薬草細胞に浸透するのに強力である。高極性は、水素結合形成に加えて、高沸点及び凝縮のし難さをもたらす。そして、更に、水抽出物はかびがはえ易い。また、極性の高い、メタノール、エタノール、及びアセトン（これらは全て水にあらゆる濃度で溶解し得る親水性溶媒である）は、約31.2、26.0、及び21.5の比誘電率を有する。再度、これらの溶媒は薬草細胞への強力な浸透を示す。しかしながら、極性は水の極性より低いので、沸点がまた低下される。親油性溶媒、例えば、軽質石油エーテル（比誘電率約1.8）、ベンゼン（比誘電率約2.3）、エーテル（比誘電率約4.3）、クロロホルム（比誘電率約5.2）、及び酢酸エチル（比誘電率約6.1）は水に溶解し難く、又は明らかに溶解できない溶媒である。これらの溶媒は低沸点及び薬草細胞への弱い浸透を有する。
【０００８】
本発明は従来技術に使用された高極性溶媒（例えば、水）に代えて低極性溶媒を抽出剤として使用して、セイヨウイボタノキ果実、黄精、金水引、スチーム処理地黄から抗ウイルスエキスを製造する。本発明は上記薬草のいずれもだけでなく、その一種より多い薬物の混合物を含む。
本発明はセイヨウイボタノキ果実、黄精、金水引、スチーム処理地黄又はこれらの混合物を少なくとも一種の低極性溶媒で抽出することにより抗ウイルス活性を有する薬草エキスを提供することを目的とする。
一層良好な抽出結果を出すために、一種以上の前記薬草は、パウンディング、粉砕、又は切断により本発明において明らかにされた抽出の前にできるだけ小さい粒子に物理的にされるべきである。抽出を促進するために、一種以上の前記薬草を小粒子、又は、最良には、粉末に粉砕することが好ましい。
本発明の記載は“低極性”溶媒という用語を10未満の比誘電率を有する溶媒と定義し、これらとして、酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、シクロヘキサン、ノルマルヘキサン、ノルマルブチルアルコール、ベンゼン、又はこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の好ましい実施態様はジクロロメタン、ノルマルヘキサン、又はノルマルブチルアルコールの低極性溶媒を使用する。
本発明において明らかにされた抽出工程を進める前に、メタノール、エタノール又はこれらの混合物による前抽出工程が前もって微粉砕された前記粗薬草の一種以上について必要により行なわれてもよい。前記記載はメタノール及びエタノールの両方が26〜31の比誘電率を有する高極性親水性溶媒であることを示した。しかしながら、タンパク質、グリース、及びワックス以外の、薬草細胞中の物質はメタノール又はエタノールに多少溶解し得るので、抽出剤としてメタノールもしくはエタノール（又はこれらの混合物）を使用する前記前抽出工程は後の抽出工程（そこでは低極性溶媒が本発明において明らかにされたように使用されるであろう）を助けるであろう。
【０００９】
低極性溶媒を使用することにより一種以上の前記粗薬草から抽出された物質は広範囲の用途のために調製し得る。本発明において明らかにされた抽出工程が完結される場合、種々の工程が続いて必要により前記物質を精製するのに行なわれてもよい。前記精製に特別な指示を与えることは必要ではなく、これはその分野の殆どの専門家に公知である。前記精製の方法として、クロマトグラフィー、結晶化、濾過、及び沈降が挙げられる。選択が前記精製の目的に従ってなされるべきである。
本発明の好ましい実施態様は低極性溶媒を使用することにより一種以上の前記粗薬草から抽出された物質を精製する工程を含む。前記実施態様は、例えば、濾過方法を使用して不溶性内容物を除去する。本発明の別の好ましい実施態様は精製工程でシリカゲルを使用し、ジクロロメタン及び酢酸エチルが抽出剤として使用される。
本発明の別の目的はセイヨウイボタノキ果実、黄精、金水引、スチーム処理地黄又はこれらの混合物から少なくとも一種の低極性溶媒で抗ウイルス活性を有する薬草エキスを製造する方法を明らかにすることである。抽出工程を進める前に、前抽出工程がメタノール、エタノール又はこれらの混合物を用いて必要により行なわれてもよい。再度、精製工程が精製された有効な内容物を得るために一種以上の低極性溶媒で抽出された物質について行なわれてもよい。
本発明の第三の目的はウイルスを本発明において調製された抗ウイルス活性を有する薬草エキスに暴露させることによりin vitroでウイルスに拮抗する方法を明らかにすることである。
本発明の記載は“ウイルス”という用語をピコルナウイルスのあらゆるウイルス、好ましくはエンテロウイルス、更に好ましくはエンテロウイルス型71と特別に定義する。
【００１０】
本発明における抗ウイルス活性を有する薬草エキスは精製後かつ／又は精製されずに使用されてもよく、又は更に好ましくは、処方を構成するのに従来使用される担体、希釈剤、賦形剤、又はアジュバントとともに使用されてもよい。その目的のために、それらは適切かつ公知の様式で成形された乳化可能な凝縮物、例えば、石鹸浴、洗剤、洗浄粉末、又はシャンプー；塗料の如き、被覆に使用し得る粉餌；噴霧剤の如き、直接噴霧し得る溶液；飲料水及び健康食品の如き、希釈溶液；玩具及びワイピングラッグの如き、或る物体を入れるのに使用し得る内容物；溶解可能な粉末、ダスト、又は粒子；或いは適当なラップに密閉し得る物質、例えば、エアーフィルター、水濾材、マスクの内容物、又は濾過膜であってもよい。それらが組み合わせて使用される場合、それらはその目的及び用途に重要な周囲の条件に基づいて、例えば、スプリンキング、噴霧化、噴霧、散布、被覆、又は乳化により加工されてもよい。組み合わせは追加のアジュバント、例えば、安定剤、消泡剤、粘度改質剤、粘着付与剤、又は特別な効果のためのその他の処方箋を含んでもよい。
本発明における抗ウイルス活性を有する薬草エキスは通常組み合わせとして使用される。前記物質はまた増進された抗ウイルス活性及び改良された効力を出すためにその他の物質、例えば、その他の抗ウイルス薬もしくはそれらの混合物又は栄養成分と同時又は逐次使用されてもよい。
本発明における抗ウイルス活性を有する薬草エキスはウイルス（好ましくはエンテロウイルス、更に好ましくはエンテロウイルス型71）を処理し、それから予防する効力を有する多種薬剤の組み合わせを調製するために必要により使用されてもよい。前記組み合わせは軽度又は重度のエンテロウイルス感染症を治療又は予防するのに使用し得る。本発明における抗ウイルス活性を有する薬草エキスは独立に、又は単一投薬もしくは多投薬における薬物用の医療上許される担体もしくは賦形剤と組み合わせて使用されてもよい。医療上許される担体もしくは希釈剤又はあらゆるその他の既知のアジュバント及び賦形剤が従来の技術で調製し得る。Remington's Pharmaceutical Sciences, 19編, Gennaro編集, Mack Polishing House, Easton, PA (1995)を参照のこと。
多薬剤の前記組み合わせは適当な薬剤アプローチ、例えば、経口投与による、又は直腸、鼻腔、肺、顔（頬及び舌下を含む）、皮膚、槽、内部腹膜、膣、及び非消化道（皮下組織、筋肉内、髄管内、静脈内、及び皮内組織を含む）を介するアプローチに特別な様式で調製し得る。最良の薬剤アプローチは通常の症候、治療すべき患者の年齢、治癒すべき症候の特徴、及び選ばれた活性内容物に基づいて決められるべきであることに注目することが必要である。
【００１１】
多薬剤の前記組み合わせは固体状態、例えば、カプセル、錠剤、糖被覆錠剤、ピル、粉末、及び粒子に調製し得る。公知の技術を使用することにより、前記組み合わせは錠剤被覆（例えば、腸皮）とともに調製されてもよく、又は、例えば、適当な時にいつでも連続的に、又は徐々に放出するために、活性内容物の放出を調節するように調製されてもよい。
経口投与用の液体は溶液、エマルション、懸濁液、シロップ薬物、及びエリキシル剤であってもよい。
非消化道中の投薬のための多薬剤の組み合わせとして、滅菌水／無水溶液の注射液、分散剤、懸濁液、エマルション、及び使用前に滅菌注射液又は分散剤に溶解されるべきである滅菌粉末が挙げられる。
また、幾つかのその他の投薬方法、例えば、座薬、噴霧薬物、軟膏、凍結薬、ゼラチン、吸入、皮膚パッチ、及び移植材等がある。
本発明における抗ウイルス活性を有する薬草エキスの実際の用量は投薬頻度及び方法、治療すべき患者の性別、年齢、体重、及び全般の状態、治癒すべき症候の特徴及び重度、並びに合併症に基づいて決められるべきである。
幾つかの実施例が本発明を説明するために以下に示されるが、特許請求の範囲を限定することを目的とするものではない。
【実施例１】
【００１２】
セイヨウイボタノキ果実からのエキスの調製
通常の市場からの出所の新鮮なセイヨウイボタノキ果実1.5kgを室温でエタノールで６サイクル（夫々について2kg）にわたって前抽出する。前記前抽出からの抽出物をジクロロメタン1-2kgで更に抽出する。前記抽出からのエキスをシリカゲルで装填されたカラムに注入する。抽出剤としてのジクロロメタン／酢酸エチル溶液（10:1-1:5）を用いて、本発明におけるセイヨウイボタノキ果実からのエキス80gを調製する。
【実施例２】
【００１３】
黄精からのエキスの調製
工程は前記実施例１の工程と同じである。前記実施例１のセイヨウイボタノキ果実の量に等しい量の黄精をノルマルヘキサンで抽出し、精製して本発明における黄精からのエキスを調製する。
【実施例３】
【００１４】
金水引からのエキスの調製
工程は前記実施例１の工程と同じである。前記実施例１のセイヨウイボタノキ果実の量に等しい量の金水引をノルマルヘキサンで抽出し、精製して本発明における金水引からのエキスを調製する。
【実施例４】
【００１５】
スチーム処理地黄からのエキスの調製
工程は前記実施例１の工程と同じである。前記実施例１のセイヨウイボタノキ果実の量に等しい量のスチーム処理地黄をジクロロメタン及びノルマルブチルアルコール溶液で抽出し、精製して本発明におけるスチーム処理地黄からのエキスを調製する。
【実施例５】
【００１６】
細胞培養
横紋筋肉腫(RD)細胞（出所：チャン・グン病院のウイルス研究室）を10％ウシ胎児血清を含むDMEM（ギブコ）溶液に添加する。前記培養溶液を５％CO2を含む37℃のインキュベーターに入れて前記細胞を培養する。継代培養を進めるために、1X食塩加リン酸緩衝液(PBS)を使用して細胞を２回洗浄する。次いで、適当な量の0.25％トリプシン-EDTA（ギブコ）を添加して前記細胞を処理する。前記細胞が培養皿の表面から落ちる時に、10％ウシ胎児血清を含むDMEM溶液を添加する。その溶液を撹拌して前記細胞を皿内に均等に分布させる。皿を５％CO2を含む37℃のインキュベーターに入れて前記細胞を培養する。
【実施例６】
【００１７】
ウイルス培養
エンテロウイルス71/Tw/2231/98（出所：チャン・グン病院のウイルス研究室）をウシ胎児血清を含まない培養液で希釈する。RD細胞を10％ウシ胎児血清を含むDMEM溶液中で培養する。皿の約90％に前記細胞を入れる時に、それらを1xPBSで一度だけ洗浄する。次いで前記の希釈されたウイルス溶液を添加する。その混合物を１時間にわたって吸収のために５％CO2を含む35℃のインキュベーターに入れる。次いで２％ウシ胎児血清を含むDMEM溶液を添加する。その混合物を35℃のインキュベーター（５％CO2が前記ウイルスを培養するのに利用できる）に入れる。ラウンディング及び落下の細胞変性が前記細胞の95％より多くについて観察される時に、上澄みを集め、遠心分離処理し、凍結し、解凍し、-80℃の冷蔵庫中で貯蔵する。
【実施例７】
【００１８】
毒性試験
前記実施例５で培養された細胞を96穴細胞培養皿に入れ、次いで試験すべき薬物と混合する。その混合物を１時間放置し、その後に２％ウシ胎児血清を含むDMEM溶液を添加する。その混合物を５％CO2を含む35℃のインキュベーターに入れて前記細胞を3-4日にわたって培養する。読み取り前に、５％ホルマリンを添加して1-2時間にわたってその状態を定着する。次いで0.1％クリスタルバイオレット（J.T.ベーカー）を添加して2-3分間にわたって前記細胞を染色する。細胞を水洗した後、OD570nm値を測定する。
【実施例８】
【００１９】
中和試験
前記実施例５で培養された細胞を96穴培養皿に入れる。特定量のウイルス溶液を試験すべきエキスと混合する。その混合物を１時間の吸収のために培養液に添加する。次いで２％ウシ胎児血清を含むDMEM溶液を添加する。その混合物を５％CO2を含む35℃のインキュベーターに入れて前記細胞を3-4日にわたって培養する。読み取り前に、５％ホルマリンを添加して1-2時間にわたってその状態を定着する。次いで0.1％クリスタルバイオレット（J.T.ベーカー）を添加して2-3分間にわたって前記細胞を染色する。細胞を水洗した後、OD570nm値を測定する。
【００２０】
参考例
前記実施例１の工程と同じ工程で、黄精、金水引、スチーム処理地黄、オウゴン根及びオウバクを高極性溶媒：水で抽出する。
前記実施例１と同じく、セイヨウイボタノキ果実をエタノールで抽出し、次いでメタノールで抽出する。次いで、酢酸エチル：水(1:1)溶液を２層の分離のために使用して、有機相及び水相の両方中にエキスを得る。
中和試験を前記実施例５のように行なって本発明の前記実施例1-4及び前記参考例で得られた薬草エキスのウイルス不活化効力を測定する。
前記中和試験はエンテロウイルス型71が本発明においてセイヨウイボタノキ果実からジクロロメタンを使用して調製される0.66mg/mlの濃度のエキス中に浸漬される場合にそれが45％だけ不活化されることを示す。また、不活化効果が本発明において低極性溶媒で調製されたその他のエキスから観察される。例えば、エンテロウイルス型71はジクロロメタン／ノルマルブチルアルコールを使用することによりスチーム処理地黄から調製される0.1-0.25mg/mlの濃度のエキス、ノルマルヘキサンを使用する黄精からの0.1-0.5mg/mlの濃度のエキス、又はノルマルヘキサンを使用する金水引からの0.125-0.25mg/mlの濃度のエキスに浸漬される場合にそれが不活化されることが観察される。その他の高極性溶媒を使用することにより調製されたエキスと比較して、本発明において得られたエキスは顕著な抗ウイルス活性を示す。水が抽出剤として使用される先の米国特許と比較するために、本発明の参考例はまた水を使用してセイヨウイボタノキ果実を抽出する。不活化効力はセイヨウイボタノキ果実からの水溶性エキス中でエンテロウイルス型71に対して見られなかった。
【００２１】
更に、毒性試験はセイヨウイボタノキ果実を抽出することにより本発明において調製されたエキスがRD細胞に対し0.247mg/mlの50％致死用量（LC50）を有することを示す。即ち、RD細胞はその他のエキスの用量よりも高い用量の前記エキスに耐え得る。
前記試験結果から、本発明において調製された薬草エキスはエンテロウイルス、特にエンテロウイルス型71に拮抗するのに十分であると結論し得る。それ故、前記薬草エキスはウイルスを吸収し得る材料、例えば、エアーフィルター、濾過膜、マスク、石鹸浴、水フィルター、被覆物、及びワイピングラッグに使用し得る。前記材料はウイルスを吸収し得るので、人体が前記ウイルスとの感染性接触から保護される。更に、抗ウイルス活性を有する物質はまたウイルスを不活化するために前記材料に利用し得る。不活化されたウイルスは人体を何ら感染しない。このような方法で、ウイルスが広がる経路が遮断される。本発明は広がるウイルスに対し闘うのにかなりの補助を加えるので、工業上の適用が利用できる。本発明は広がるウイルスに対する闘いを補助するのに顕著な潜在性を示すので、工業上の適用が利用できる。
本発明において先に明らかにされた好ましい実施態様は本発明を限定することを目的とするものではない。種々の変化及び改良が本発明の精神又は範囲から逸脱しないでなし得ることが当業者に明らかである。本発明の保護の範囲は特許請求の範囲に特定されたものと考えられるべきである。