(57)【要約】【課題】  超強力小麦系統を効率的に作出する方法を提供すること。【解決手段】  以下の工程を含む、超強力小麦系統の作出方法。  （ａ）5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方を有する小麦品種又は系統を交配親とする小麦系統から、小麦種子を採取する工程  （ｂ）小麦種子タンパク質の高分子量グルテニンをドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法で分離し、低分子量グルテニンを二次元ゲル電気泳動法で分離する工程  （ｃ）各ゲル上のグルテニンの分離パターンにおいて、5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方が認められる小麦種子を採取した小麦系統を選抜する工程  （ｄ）選抜した小麦系統を自殖、又は、他の小麦品種又は系統と交配することによって、その後代において超強力小麦系統を得る工程【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程を含む、超強力小麦系統の作出方法。
（ａ）5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方を有する小麦品種又は系統を交配親とする小麦系統から、小麦種子を採取する工程
（ｂ）小麦種子タンパク質の高分子量グルテニンをドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法で分離し、低分子量グルテニンを二次元ゲル電気泳動法で分離する工程
（ｃ）各ゲル上のグルテニンの分離パターンにおいて、5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方が認められる小麦種子を採取した小麦系統を選抜する工程
（ｄ）選抜した小麦系統を自殖、又は、他の小麦品種又は系統と交配することによって、その後代において超強力小麦系統を得る工程
【請求項２】
二次ゲル電気泳動法が、一次元目に等電点ゲル電気泳動法を行い、二次元目にドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法を行うものである、請求項１に記載の作出方法。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の作出方法によって得られる、5＋10高分子量グルテニンサブユニット及び42kD低分子量グルテニンの両方を有することを特徴とする、超強力小麦系統。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、超強力小麦粉の原料となる種子を産する小麦系統（以下、超強力小麦系統という）の作出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
超強力小麦はカナダの小麦銘柄の一つであり、極めて強い物性を有する。超強力小麦は、現在流通拡大しつつある冷凍生地製パンに適することや、国内産小麦にブレンドすることでその脆弱な生地物性を改善できることなどが明らかされてきた。例えば、グルテンの弱い国内産小麦粉に超強力粉を一定量混合することによって、小麦粉中のグルテンを改質した改質小麦粉を得る方法が提案されている（特許文献１）。ところが、近年、ポストハーベストの問題や国内自給率向上などの観点から、外国産小麦粉よりも国内産小麦粉の需要が拡大し、その需要に応えるために、外国産の超強力粉をブレンドするのではなく、国内産の超強力小麦品種を作出する試みがなされている。しかしながら、これまで超強力小麦品種の作出は、世代の進んだ系統での生産物（収穫した種子を製粉して得た小麦粉）の品質検定を拠り所にしていたことから、非常に非効率的であった。
【０００３】
一方、小麦種子中のタンパク組成と品質との相関が調べられた結果、5＋10高分子量グルテニンサブユニットと42kD低分子量グルテニンをあわせもつ系統が超強力小麦になることが明らかにされた（非特許文献１）。従って、かかる系統を効率的に選抜するために種子タンパクの分離・同定を正確に行う必要があるが、これまで行われているドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法によっては、42kD低分子量グルテニンと、別の低分子量グルテニンとの区別がつきにくいなどの問題があった。
【０００４】
【特許文献１】特開2002-350559号公報
【非特許文献１】Takata et al. 2001, Breeding Sci 51:143-146
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、本発明の課題は、超強力性を付与する5＋10高分子量グルテニンサブユニットと42kD低分子量グルテニンの分離・同定を正確に行って、効率的に超強力小麦系統を作出する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、小麦種子タンパク質の5＋10高分子量グルテニンサブユニットと42kD低分子量グルテニンを、ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（以下、SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法という）と二次元ゲル電気泳動法を組み合わせることによって正確に分離・同定できることを見出した。さらに、各電気泳動のゲル上の分離パターンに基づいて超強力小麦品種の候補系統を作出することに成功した。本発明はかかる知見により完成されたものである。
【０００７】
即ち、本発明は以下の発明を包含する。
（１）以下の工程を含む、超強力小麦系統の作出方法。
（ａ）5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方を有する小麦品種又は系統を交配親とする小麦系統から、小麦種子を採取する工程
（ｂ）小麦種子タンパク質の高分子量グルテニンをSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法で分離し、低分子量グルテニンを二次元ゲル電気泳動法で分離する工程
（ｃ）各ゲル上のグルテニンの分離パターンにおいて、5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方が認められる小麦種子を採取した小麦系統を選抜する工程
（ｄ）選抜した小麦系統を自殖、又は、他の小麦品種又は系統と交配することによって、その後代において超強力小麦系統を得る工程
（２）二次ゲル電気泳動法が、一次元目に等電点ゲル電気泳動法を行い、二次元目にSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法を行うものである、（１）に記載の作出方法。
（３）（１）又は（２）の作出方法によって得られる、5＋10高分子量グルテニンサブユニット及び42kD低分子量グルテニンの両方を有することを特徴とする、超強力小麦系統。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の方法によれば、超強力小麦品種の候補系統を迅速にかつ確実に作出することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明の超強力小麦系統の作出方法は以下の工程を含む。
（ａ）5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方を有する小麦品種又は系統を交配親とする小麦系統から、小麦種子を採取する工程
（ｂ）小麦種子タンパク質の高分子量グルテニンをSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法で分離し、低分子量グルテニンを二次元ゲル電気泳動法で分離する工程
（ｃ）各ゲル上のグルテニンの分離パターンにおいて、5+10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方が認められる小麦種子を採取した小麦系統を選抜する工程
（ｄ）選抜した小麦系統を自殖、又は、他の小麦品種又は系統と交配することによって、その後代において超強力小麦系統を得る工程
本発明において、「超強力小麦系統」とは、超強力小麦粉の原料となる小麦品種の候補系統をいい、超強力小麦粉とは、ピン型のミキサーで通常の市販強力粉（例えば、商品名 日清製粉カメリヤ等）の1.2倍以上、更に好ましくは、1.5倍以上のミキシング時間（ミキシング時のモーターの電流値がピークに達するまでの時間）を示す小麦粉をいう。
【００１０】
本発明の方法によって作出できる「超強力小麦系統」は、超強力性となるグルテニンタンパク質組成、具体的には5＋10高分子量グルテニンサブユニット及び42kD低分子量グルテニンの両方を有することを特徴とする。
【００１１】
本明細書において、「高分子量グルテニン」（HMW-GS）とは、SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動によるみかけの分子量が80〜130kDのグルテニンをいい、「低分子量グルテニン」（LMW-GS）とは、SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動によるみかけの分子量が10〜70kDのグルテニンをいう（Bietz and Wall, Cereal Chem, 49, 416-430, 1972)。また、「高分子量グルテニンサブユニット」とは、上記の「高分子量グルテニン」の集団を構成する個々のバンドをいい、その番号付けは易動度の小さいもの（みかけの分子量の大きいもの）から順に行われている（Payne and Lawrence, Cereal Res Comm, 11, 29-35, 1983）。本発明の高分子量グルテニンサブユニットの「5＋10」は、Glu-D1座にコードされている、７種の対立遺伝子の産物である、5＋10、2＋12、3＋12、4＋12、2＋10、2.2＋12、2＋11の「5＋10」に相当するものである。
【００１２】
以下、各工程について詳細に説明する。
まず、工程（ａ）では、5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方を有する小麦品種又は系統を交配親（片親）とする小麦系統から小麦種子を採取する。
【００１３】
5＋10高分子量グルテニンサブユニット及び42kD低分子量グルテニンの両方を有する小麦品種又は系統としては、例えば、「Glenlea」、カンザス州立大学育成系統「KS831957」、北海道農業試験場育成系統「勝系33号」、「I-176」等が挙げられる。
【００１４】
また、5＋10高分子量グルテニンサブユニットのみを有する小麦品種又は系統としては、例えば、「Neepawa」、「AC Barrie」、「キタノカオリ」、北海道農業試験場育成系統「勝系32号」、「I-171」等が挙げられ、42kD低分子量グルテニンのみを有する小麦品種又は系統としては、例えば、北海道農業試験場育成系統「勝系34号」、「I-181」等が挙げられる。
【００１５】
ここで、5＋10高分子量グルテニンサブユニット及び42kD低分子量グルテニンの両方を有する小麦品種又は系統を用いる場合、交配相手としては任意の小麦品種又は系統を用いることができる。また、5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの一方のみを有する小麦品種又は系統を用いる場合、例えば5＋10高分子量グルテニンサブユニットのみを有する小麦品種又は系統である場合は、交配相手としては、42kD低分子量グルテニンを有する小麦品種又は系統を用いればよい。
交配相手となる小麦品種は、いずれも国内産小麦品種又は系統であることが好ましい。
【００１６】
また、この交配により得られ、小麦種子を採取する小麦系統は、代表的にはＦ１世代の系統であるが、超強力性以外の形質を確認する上でＦ２〜Ｆ１０まで進めた系統であってもよい。
【００１７】
次に、電気泳動に供するために小麦種子からタンパク質を抽出する。小麦種子は、前処理は必要なくそのまま用いてもよいが、抽出効率を高める上で均一に粉砕されていることが好ましい。小麦種子からのタンパク質抽出は、例えばSinghら（J Cereal Sci, 14, 203-208, 1991）とMelasら(Cereal Chem, 71, 234-237, 1994)の方法を改変して行うことができ、後記実施例に詳細に記載する。
【００１８】
工程（ｂ）では、上記のようにして得られた小麦種子タンパク質の高分子量グルテニンをSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法により分離し、低分子量グルテニンを一次元目に等電点ゲル電気泳動法、二次元目にSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法を用いる二次元ゲル電気泳動法によって分離する。
【００１９】
高分子量グルテニンのSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法による分離は、例えば、Leammli（Nature, 227, 680-685, 1970）に記載の方法、低分子量グルテニンの二次元ゲル電気泳動法による分離は、Gorgら(Electrophoresis, 9, 531-546, 1988)に記載の方法を参照して行うことができ、ゲル濃度、試料適用量、電圧、通電時間等の泳動条件は、適宜選択・調整すればよい。例えば、SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動では、高分子量グルテニン、低分子量グルテニンの分離とも、ゲル濃度を１０〜１５％とすればよい。
【００２０】
また、等電点ゲル電気泳動では、グルテニンの分離能を上げる上で、ｐＨ範囲が６〜１１の等電点ゲルを用いることが好ましい。
【００２１】
上記各電気泳動後におけるゲル上のグルテニンの分離パターン（バンド状又はスポット状）の可視化手段は、銀染色法、蛍光染色法、クマシーブリリアントブルー染色法（CBB）のいずれであってもよいが、感度の点からクマシーブリリアントブルー染色法が好ましい。
【００２２】
工程（ｃ）では、(ｂ）の各電気泳動後におけるゲル上のグルテニンの分離パターンにおいて、5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンの少なくとも一方が認められたものを特定し、このパターンを呈した小麦種子を採取した小麦系統を選抜する。
【００２３】
最後に、工程（ｄ）では、工程（ｃ）で選抜した小麦系統を自殖、又は、他の小麦品種又は系統との交配によって、その後代において超強力小麦品種の候補系統を得る。
【００２４】
具体的にいうと、工程（ｃ）において、5＋10高分子量グルテニンサブユニット及び42kD低分子量グルテニンの両方が認められた小麦種子である場合は、それを採取した小麦系統を自殖させればよい。また、工程（ｃ）において、5＋10高分子量グルテニンサブユニット又は42kD低分子量グルテニンのいずれか一方、例えば5＋10高分子量グルテニンサブユニットのみが認められた小麦種子である場合は、それを採取した小麦系統と、42kD低分子量グルテニンを有する小麦品種又は系統を交配すればよい。
【実施例】
【００２５】
以下、実施例によって本発明を更に具体的に説明するが、これらの実施例は本発明を何ら限定するものでない。
【００２６】
（実施例１）  小麦グルテニンタンパクの分離と同定
（１）小麦種子タンパクの抽出
試料として、(i)5＋10高分子量グルテニンサブユニット及び42kD低分子量グルテニンをもつ超強力小麦品種「Glenlea」の種子、(ii)5＋10高分子量グルテニンサブユニット遺伝子の対立遺伝子により2＋12高分子量グルテニンユニットをもつ小麦品種「ハルユタカ」の種子、(iii)5＋10高分子量グルテニンサブユニット及び42kD低分子量グルテニン遺伝子の対立遺伝子により48kD低分子量グルテニンをもつ小麦品種「春のあけぼの」の種子、(iv)「ハルユタカ」と「Glenlea」とのＦ１個体から採取した種子、(v)「春のあけぼの」と「Glenlea」とのＦ１個体から採取した種子を用いた。
【００２７】
小麦種子タンパクの抽出は、Singhら（J Cereal Sci, 14, 203-208, 1991）とMelasら(Cereal Chem, 71, 234-237, 1994)の方法を改変して行った。まず、各品種系統の種子を粉砕し、粉120mg当り1.5 mlの割合で抽出バッファーSA [50%(v/v) １−プロパノール、 0.08 M トリス塩酸塩（Tris-HCl, pH 8.0)]を加え、60℃で30分間振とうした。アルブミン、グロブリン、グリアジン画分を除去するため、遠心分離（18000×g、20℃）の後、上清を廃棄した。さらに、この抽出操作を２回繰り返して得た沈殿を60 mMのジチオスレイトール（DTT）を含むSA中で、65℃で１時間インキュベートした。上清に1.4%(v/v)ビニルピリジンを含むSAを等量加え、65℃で30分インキュベートした。これに４倍の容量のアセトンを加え、グルテニン画分を沈殿させ、遠心分離の後、沈殿を65℃で乾燥させた。この沈殿を、8M尿素、2%トリトンX-100（w/v）、20mM DTT、2% IPG buffer （pH6-11、w/v；アマシャムファルマシアバイオテク社製）からなる400μlのlysis bufferに溶解し、後の電気泳動に用いた。
【００２８】
（２）高分子量グルテニンの分離
高分子量グルテニンは、Leammli（Nature, 227, 680-685,1970)の方法に従い、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動により分離した。12.5%のSDS-ポリアクリルアミドスラブゲル（13.5×11cm）を作製し、１レーンあたり、（１）のグルテニン溶液7.5μlをサンプルとして用いた。泳動は室温で、25mAの定電流条件で行った。0.25%のクマシーブリリアントブルー（CBB、w/v）を用い、一晩染色してタンパクの検出を行った。
【００２９】
（３）低分子量グルテニンの分離
低分子量グルテニンは、Gorgら(Electrophoresis, 9, 531-546, 1988)の方法に基づき、二次元ゲル電気泳動を用いた次の操作方法によって、分離・同定した。まず、（１）のグルテニン溶液50μlを含む250μlのlysisバッファー中で乾燥ゲル（Immobiline dry strip, pH 6-11、13cm長;アマシャムファルマシアバイオテク社製）を膨潤させ、試料をゲル中へ添加した。一次元目の等電点ゲル電気泳動は、Multiphor II （アマシャムファルマシアバイオテク製）を用いて、300Vで１分行った後、1.5時間の間に徐々に電圧を3500Vまで上昇させ、その後さらに3500Vで４時間行った。このゲルを6M尿素、30%グリセロール、2%SDS、0.00625% BPB、0.5% DTT、50 mMトリス（pH 6.8）を含む溶液中で10分平衡化し、二次元目の電気泳動に供試した。二次元目については、（２）と同様の条件で、Ruby 600（アマシャムファルマシアバイオテク製）を用いSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行ったが、濃縮ゲルは用いず、上述した平衡化したゲルを、分離用スラブゲル（16×15cm）の上に直接載せ、0.5％アガロースを含む0.125Mトリス（pH 6.8）で固定した。これを泳動バッファーの温度を20℃に保ちながら、30mAで15分通電した後、6mAで15時間泳動を行った。二次元目の泳動の終わったゲルは0.25% CBBで一晩染色し、タンパクを検出した。
【００３０】
（４）同定結果
図１Ａに、「ハルユタカ」種子、「Glenlea」種子、「ハルユタカ」と「Glenlea」とのＦ１個体から採取したＦ２種子（5＋10HGと2＋12HGをヘテロで持つ）のグルテニン画分のSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動図を示す（レーン1：「ハルユタカ」、レーン２：「Glenlea」、レーン３：「ハルユタカ」と「Glenlea」とのＦ２（ヘテロ）、図の左：タンパク質のサイズマーカーの位置）。
【００３１】
図１Ａに示されるように、「Glenlea」のもつ5＋10高分子量グルテニンサブユニット（5＋10HG）はバンドＢ及びＣとして、「ハルユタカ」のもつ2＋12高分子量グルテニンサブユニット（2＋12HG）はバンドＡ及びＤとして同定された。また、「ハルユタカ」と「Glenlea」とのＦ２（ヘテロ）は、バンドＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄを併せ持った。
【００３２】
図１Ｂに、「春のあけぼの」種子、「Glenlea」種子、「春のあけぼの」と「Glenlea」とのＦ１個体から採取したＦ２種子（48kLGと42kLGをヘテロで持つ）のグルテニン画分のSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動図を示す（レーン1：「Glenlea」、レーン２：「春のあけぼの」と「Glenlea」とのＦ２(ヘテロ）、レーン３：「春のあけぼの」、図左：タンパク質のサイズマーカーの位置）。図１Ｂに示されるように、「Glenlea」のもつ42kD低分子量グルテニン（42kLG）、「春のあけぼの」のもつ48kD低分子量グルテニン（48kLG）は同定されたが、両者のＦ２(ヘテロ）は、48kLGと42kLGの両方を含むはずであるが、低分子量グルテニンを明確に分離・同定できなかった。
【００３３】
また、図２Ａに、「Glenlea」種子のグルテニン画分の二次元ゲル電気泳動図を示す（横方向：等電点ゲル電気泳動（左端がpH11、右端がpH6）、縦方向：SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動、M：タンパク質のサイズマーカー）。
【００３４】
また、図２Ｂに、「春のあけぼの」種子、「Glenlea」種子、「春のあけぼの」と「Glenlea」とのＦ１個体から採取したＦ２種子のグルテニン画分の二次元ゲル電気泳動図を示す（1：「Glenlea」、２：「春のあけぼの」と「Glenlea」とのＦ２(ヘテロ）、３：「春のあけぼの」、図左：タンパク質のサイズマーカーの位置）。
【００３５】
図２Ｂに示される通り、「Glenlea」のもつ42kD低分子量グルテニン（42kLG）は、１から３のスポットとして同定され、「春のあけぼの」のもつ48kD低分子量グルテニン（48kLG）は、４から８のスポットとして同定された。また、両者のＦ１個体より収穫したＦ２(ヘテロ）では、１から８すべてのスポットが検出され、42kLG、48kLG双方の構成スポットの全てを含むことが確認された。
【００３６】
以上の結果から、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動法と二次元ゲル電気泳動法とを組み合わせて、超強力小麦特性の確認に必要な小麦種子中のグルテニン組成を明確に分離・同定することができた。
【００３７】
（実施例２）  超強力小麦系統の作出（１）
5＋10HGと42kLGの両方をもつ小麦系統：カンザス州立大学育成系統「KS831957」と、どちらももたない小麦品種：「ホロシリコムギ」を用いて、一般的な方法に従いＦ２種子を得た。
【００３８】
まず、片方の小麦が開花する２〜３日前におしべをピンセットで取り去り（除雄）、パーチメント袋（硫酸紙）をかぶせ、２〜３日後に袋をはずし、この小麦のめしべに他方の小麦の花粉を毛筆用の筆でふりかけた。他からの花粉の飛来を避けるために再び袋をかぶせた。その約40日後に雑種個体（Ｆ１個体 ）を得た。次に、得られた雑種個体（Ｆ１個体）を、他からの花粉の飛来を避けるための開花２〜３日前にパーチメント袋（硫酸紙）をかぶせるようにして自家受粉させてＦ２ 種子を得た。
【００３９】
得られたＦ２ 種子についてグルテニン組成を一粒ずつ前記実施例１に記載の方法に従ってSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動法と二次元ゲル電気泳動法で分析した。ただし、種子は半分に分割し、胚を含まない半粒に由来する種子タンパクのみについて上記分析を実施した。そのうち、5＋10HGと42kLGを両方ホモでもつもの、5＋10HGのみホモでもつもの、42kLGのみをホモでもつものを選抜した。
【００４０】
それぞれの残り半粒の胚から植物体を養成し、上述と同様の方法で自家受粉させ種子を得た。さらに、同様の方法で４世代進め、上述のＦ２個体の後代系統として、5＋10HGと42ｋLGを両方ホモでもつ「I-176」、5＋10HGのみホモでもつ「I-171」、さらに、42ｋLGのみをホモでもつ「I-181」を作出した。
【００４１】
作出した上記系統からそれぞれ得た小麦粉を用いて、PT（ミキシングピークタイム）、BDw（ブレイクダウン）、SDSS（SDSセディメンテーションボリューム）、SLV(比容積)の項目について製パン性を評価した（表１）。表中の値は1999年に収穫した種子から得られた結果であり、「I-171」、「I-181」、「I-176」はそれぞれＦ６世代である。
【００４２】
【表１】
2005117990.tif 000002
【００４３】
表１に示すように、「I-171」や「I-181」由来の小麦粉は、5＋10HGと42kLGを両方もたない「ホロシリコムギ」より、PT、SDSS、SLVの値が大きいことから、製パン性が優れていたが、「KS831957」なみの超強力性の性質を示したのは「I-176」のみであった。
【００４４】
以上より、本発明の方法によれば、5＋10 HGと42kLGを両方もつ超強力小麦系統を効率的に作出でき、かつ作出された超強力小麦系統は優れた製パン性を示した。
【００４５】
（実施例３）  超強力小麦系統の作出（２）
5＋10HGのみをホモでもつ「勝系32号」と、42kLGのみをホモでもつ「勝系34号」を、実施例２と同様の方法で交配してＦ２個体を得た。これらの個体から、単粒系統法（SSD法）により世代を進め、組み換え型自殖系統（RIL）を得た。これらの系統について、実施例１で示したSDS-ポリアクリルアミド電気泳動法と二次元ゲル電気泳動法により、5＋10HG及び42kLGを両方ホモでもつ系統、5＋10HGのみをホモでもつ系統、42kLGのみをホモでもつ系統、そして両方もたない系統に分類し、それぞれのグループごとに、得られた種子から製粉し、PT（ミキシングピークタイム）、EA（エンベロープエリア）、SDSS（SDSセディメンテーションボリューム）の項目についてその物性を評価した（表２）。表中の値は2002年に収穫したF6世代の種子から得られた２反復の結果の平均値である。
【００４６】
【表２】
2005117990.tif 000003
【００４７】
表２に示すように、5＋10HGのみをホモでもつ系統群ならびに42kLGのみをホモでもつ系統群は、両方もたない系統群に比較し、PT、EA、SDSSについていずれの値も高かったが、超強力粉なみの値を示したのは、5＋10HG及び42kLGを両方ホモでもつ系統群のみであった。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】図１Ａは、「ハルユタカ」種子、「Glenlea」種子、「ハルユタカ」と「Glenlea」とのＦ１個体から収穫したＦ２種子のグルテニン画分のSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動図を示す（レーン1：「ハルユタカ」、レーン２：「Glenlea」、レーン３：「ハルユタカ」と「Glenlea」とのＦ２（ヘテロ）、図の左：タンパク質のサイズマーカーの位置）。図１Ｂは、「春のあけぼの」種子、「Glenlea」種子、「春のあけぼの」と「Glenlea」とのＦ１個体から収穫したＦ２種子のグルテニン画分のSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動図を示す（レーン1：「Glenlea」、レーン２：「春のあけぼの」と「Glenlea」とのＦ２（ヘテロ）、レーン３：「春のあけぼの」、図左：タンパク質のサイズマーカーの位置）。
【図２】図２Ａは、「Glenlea」種子のグルテニン画分の二次元ゲル電気泳動法図を示す（横方向：等電点ゲル電気泳動（左端がpH11、右端がpH6）、縦方向：SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動、M：タンパク質のサイズマーカー）。図２Ｂは、「春のあけぼの」種子、「Glenlea」種子、「春のあけぼの」と「Glenlea」とのＦ１個体から収穫したＦ２種子のグルテニン画分の二次元ゲル電気泳動図で、図２Ａの点線で囲んだ部分を拡大した図である（1：「Glenlea」、２：「春のあけぼの」と「Glenlea」とのＦ２（ヘテロ）、３：「春のあけぼの」、図左：タンパク質のサイズマーカーの位置）。
【図１】
2005117990.tif 000004
【図２】
2005117990.tif 000005