(57)【要約】【課題】  培地上で腸球菌を簡便に分離、検出し、かつE.faeciumとE.faecalisを簡便かつ確実に鑑別するための培地および／または方法の提供。【課題を解決するための手段】  還元系発色試薬を含む培地であって、Enterococcus faeciumが還元系発色試薬を発色せしめない、前記培地およびそれらを用いる方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
還元系発色試薬を含む培地であって、Enterococcus faeciumが還元系発色試薬を発色せしめない、前記培地。
【請求項２】
還元系発色試薬が、２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロライドである、請求項１に記載の培地。
【請求項３】
ペプトン、グルコース、イーストエキスおよびカンテンをさらに含む、請求項１または２に記載の培地。
【請求項４】
ペプトン４〜６g/l、グルコース０．２〜２g/l、イーストエキス１〜４g/lおよびカンテン８〜１８g/lを含む、請求項３に記載の培地。
【請求項５】
β−グルコシダーゼ発色基質をさらに含む、請求項１〜４のいずれかに記載の培地。
【請求項６】
β−グルコシダーゼ発色基質が、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシドである、請求項５に記載の培地。
【請求項７】
グラム陰性菌抗菌物質をさらに含む、請求項１〜６のいずれかに記載の培地。
【請求項８】
グラム陰性菌抗菌物質が、硫酸タリウムである、請求項７に記載の培地。
【請求項９】
バンコマイシンをさらに含む、請求項１〜８のいずれかに記載の培地。
【請求項１０】
検体中のEnterococcus faeciumおよびEnterococcus faecalisを鑑別するための方法であって、下記各工程を含む、前記方法：
ａ）検体を、Enterococcus faeciumが還元系発色試薬を発色せしめない還元系発色試薬を含む培地に接種する工程；
ｂ）培養中または培養後のコロニーの色を観察し、前記両菌種を鑑別する工程。
【請求項１１】
培地が、β−グルコシダーゼ発色基質をさらに含む、請求項１１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腸球菌分離培地であって、特に病因菌となりうるEnterococcus faecium（以下E.faeciumと略す）とEnterococcus faecalis（以下E.faecalisと略す）を分離培地上で鑑別するための前記培地および／またはそれを用いた腸球菌を鑑別するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
腸球菌は、ヒト腸管内や口腔などの常在菌であり、これまでに１９菌種が見つかっている。これらの病原性はきわめて弱いが、ときに日和見感染症として、心内膜炎、尿路感染症、敗血症などを引き起こすことがある。糞便や尿などの臨床材料から分離される腸球菌では、その８０〜９０％がE.faecalisであり、残りの大部分がE.faeciumである（非特許文献1）。そのため、臨床上この２菌種が重要であるとされている。
【０００３】
E.faecalisおよびE.faeciumでは抗生物質に対する感受性が異なっており、特にE.faeciumの臨床分離株の約70％はペニシリン系抗生物質に対する耐性を有している。そのため、両菌種では治療法が異っており、両菌種の鑑別が検査の早い段階で行われるべきであるとされている。
近年、バンコマイシンに耐性を持つ腸球菌（Vancomycin resistant enterococcus、以下ＶＲＥと略す）が見つかった。ＶＲＥはバンコマイシンに耐性を示すが、病原性や抗生物質に対する耐性など、その他の性質に関しては差異がないとされている。このＶＲＥにおいても、その検出事例ではE.faecalisおよびE.faeciumがほとんどを占めており、両菌種の鑑別は重要であるとされている。
【０００４】
腸球菌を検出する方法としては、培地成分に５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシドやエスクリン等を単独で含有させる方法（非特許文献２）があり、主として食品用培地として市販されている。しかしながら、この方法では、全ての腸球菌がコロニー及びコロニー周囲を青や黒〜黒灰色の単一色に変化させるため、菌種の鑑別はできない。
【０００５】
ＶＲＥを検出する方法としては、E.faecalisおよびE.faecium両菌種の鑑別を目的として、２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロライドを培地に含有させて、コロニーの色調により両菌種を鑑別する培地が、臨床用として市販されている（特許文献１、非特許文献３）。しかし、この培地ではE.faecalisは濃赤色、E.faeciumはピンク色と同系色の呈色反応を示すことから、両菌種の鑑別が困難であるという問題がある。
上記の通り、とくに臨床現場においては早期かつ確実な鑑別および判断が望まれているにもかかわらず、従来の方法または培地においてはE.faecalisおよびE.faecium両菌種の確実な鑑別ができず、簡易、迅速に鑑別する目的は十分に満たされていない。
【０００６】
【特許文献１】特開２００３−７０４９５号公報
【非特許文献１】厚生労働省インターネットホームページ、＜URL :http://icnet.umin.ac.jp/other/vre/htm＞
【非特許文献２】Merck KGaAインターネットホームページ、＜URL : http://service.merck.de/microbiology/＞
【非特許文献３】日本ベクトンディッキソン株式会社インターネットホームページ、＜URL : http://www.bdj.co.jp/press/3tqe0k000000mrlm.html＞
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、本発明が解決しようとする課題は、培地上で腸球菌を簡便に分離、検出し、かつE.faeciumとE.faecalisを簡便かつ確実に鑑別するための培地および／または方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記問題点を解決すべく鋭意研究する中で、驚くべきことに、E.faecalisとE.faeciumがそれぞれ異なる呈色反応を示す培地を用いることによって上記両菌種の確実な鑑別が可能であることを見出し、さらに研究を進めた結果、本発明を完成するに至った。そして、還元系発色試薬に加えてβ−グルコシダーゼ発色基質を培地中に含ませ、培地で培養したところ、コロニーの色調によって腸球菌を一つの培地によって検出でき、該培地がE.faecalisとE.faeciumの簡易な検出、鑑別に好適であることも見出した。
【０００９】
すなわち、本発明は、還元系発色試薬を含む培地であって、E.faeciumが還元系発色試薬を発色せしめない、前記培地に関する。
また、本発明は、還元系発色試薬が、２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロライドである、前記培地に関する。
さらに、本発明は、ペプトン、グルコース、イーストエキスおよびカンテンをさらに含む、前記培地に関する。
【００１０】
また、本発明は、ペプトン４〜６g/l、グルコース０．２〜２g/l、イーストエキス１〜４g/lおよびカンテン８〜１８g/lを含む、前記培地に関する。
さらに、本発明は、β−グルコシダーゼ発色基質をさらに含む、前記培地に関する。
また、本発明は、β−グルコシダーゼ発色基質が、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシドである、前記培地に関する。
【００１１】
さらに、本発明は、グラム陰性菌抗菌物質をさらに含む、前記培地に関する。
また、本発明は、グラム陰性菌抗菌物質が、硫酸タリウムである、前記培地に関する。
さらに、本発明は、バンコマイシンをさらに含む、前記培地に関する。
【００１２】
さらにまた、本発明は、検体中のEnterococcus faeciumおよびEnterococcus faecalisを鑑別するための方法であって、下記各工程を含む、前記方法に関する：
ａ）検体を、Enterococcus faeciumが還元系発色試薬を発色せしめない還元系発色試薬を含む培地に接種する工程；
ｂ）培養中または培養後のコロニーの色を観察し、前記両菌種を鑑別する工程。
そして、本発明は、培地が、β−グルコシダーゼ発色基質をさらに含む、前記方法に関する。
【００１３】
従来技術において、E.faecalisおよびE.faeciumの発色度合が異なる培地は知られているが（例えば特許文献１、非特許文献３）、E.faecalisのみが還元系発色試薬を発色せしめ、E.faeciumは還元系発色試薬を発色せしめない培地については過去に知見はない。すなわち、本発明の培地は、還元系発色試薬を含むが、E.faecalisのコロニーのみが該培地中の還元系発色試薬を発色せしめ、E.faeciumは還元系発色試薬を発色せしめない培地として初めてのものである。
また、本発明の方法は、検体を、E.faeciumが還元系発色試薬を発色せしめない還元系発色試薬を含む培地に接種した後、培養後のコロニーの色を観察し、発色が観察された場合にはE.faecalisの存在を確認することによってE.faecalisとE.faeciumとを鑑別するものである。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の培地は、還元系発色試薬を含むが、E.faecalisのコロニーのみが該培地中の還元系発色試薬を発色せしめ、E.faeciumは還元系発色試薬を発色せしめない。したがって、本発明の培地によれば、腸球菌を分離、検出し、かつE.faecalisとE.faeciumとを鑑別することができる。
また、本発明の培地のうち、還元系発色試薬が、２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロライドであるものにおいては、E.faecalisによる発色反応がより明確に行われる。したがって、該培地によれば、E.faecalisとE.faeciumとの鑑別をより確実に行うことができる。
本発明の培地のうち、ペプトン、グルコース、イーストエキスおよびカンテンをさらに含むものにおいては、腸球菌の培養がより効率的行われ、かつE.faeciumによる還元系発色試薬の発色が抑制される。したがって、該培地によれば、E.faecalisとE.faeciumとの鑑別をより一層確実に行うことができる。
【００１５】
また、本発明の培地のうち、ペプトン４〜６g/l、グルコース０．２〜２g/l、イーストエキス１〜４g/lおよびカンテン８〜１８g/lを含むものにおいては、腸球菌の培養がさらにより効率的に行われ、かつE.faeciumによる還元系発色試薬の発色が抑制される。したがって、該培地によれば、E.faecalisとE.faeciumとの鑑別をさらにより一層確実に行うことができる。
さらに、本発明の培地のうち、β−グルコシダーゼ発色基質をさらに含むものにおいては、検体中のE.faeciumおよびE.faecalisがより迅速に検出される。したがって、該培地によれば、E.faecalisとE.faeciumとの鑑別をより効率的に行うことができる。
また、本発明の培地のうち、β−グルコシダーゼ発色基質が、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシドであるものにおいては、E.faeciumによる発色反応がより明瞭に行われる。したがって、該培地によれば、E.faecalisとE.faeciumとの鑑別をより確実に行うことができる。
【００１６】
さらに、本発明の培地のうち、グラム陰性菌抗菌物質、とくに硫酸タリウムをさらに含むものにおいては、検出対象でないグラム陰性菌の発育を抑制することができる。したがって、該培地によれば、E.faecalisとE.faeciumとの鑑別をより確実に行うことができる。
本発明の培地のうち、バンコマイシンをさらに含むものにおいては、バンコマイシン感受性腸球菌の発育が抑制され、ＶＲＥ検出培地として機能する。したがって、該培地によれば、バンコマイシン耐性のE.faecalisとバンコマイシン耐性のE.faeciumとの鑑別をより確実に行うことができる。
【００１７】
このように、本発明の腸球菌検出用培地は、還元系発色試薬もしくはβ−グルコシダーゼ発色基質および還元系発色試薬を含むため、コロニーの色調によって腸球菌を検出することができ、該培地にバンコマイシンを含むＶＲＥ検出用培地上でE.faeciumとE.faecalisのコロニーが異なった色調を呈する。したがって、本発明の培地によれば、簡便かつ明確にE.faeciumとE.faecalisの鑑別を行えるようになり、該培地を用いた鑑別結果によって適切な医療情報をより早期に臨床医に提供することができる。
【００１８】
本発明の方法においては、検体を、E.faeciumが還元系発色試薬を発色せしめない還元系発色試薬を含む培地に接種した後、培養中または培養後のコロニーの色を観察し、発色が観察された場合にはE.faecalisの存在を確認できる。したがって、本発明の方法によれば、培地上で腸球菌を簡便に分離、検出し、かつE.faecalisとE.faeciumとを簡便かつ確実に鑑別することができる。
本発明の方法のうち、培地がβ−グルコシダーゼ発色基質をさらに含むものにおいては、検体中のE.faecalisおよびE.faeciumがより迅速に検出される。したがって、該方法によれば、E.faecalisとE.faeciumとの鑑別をより効率的に行うことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
本発明における腸球菌検出用培地は、還元系発色試薬を含有し、E.faeciumが還元系発色試薬を発色させない培地である。すなわち、前記還元系発色試薬は、E.faecium の発育に伴う変化は無く、E.faecalisの発育に伴って代謝され発色するものである。たとえば、２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロライド（ＴＴＣ）、３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロマイド（ＭＴＴ）、３，３−（３，３−ジメトキシ−４，４−ビフェニレン）−ビス−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムクロライド（テトラゾリウムブルー）などのテトラゾリウム塩を使用することができる。
使用される還元系発色試薬の培地中の濃度は０．００１ｇ／ｌ〜１０ｇ／ｌの範囲が好ましく、０．０１ｇ／ｌ〜１ｇ／ｌの範囲がより好ましく、０．０５ｇ／ｌ〜０．５ｇ／ｌの範囲が最も好ましい。
【００２０】
本発明の、E.faeciumが還元系発色試薬を発色させない培地は、還元系発色試薬がE.faecalisの発育に伴って代謝され発色するが、E.faeciumの発育に伴う代謝では発色しない性能を有する培地であるため、E.faeciumが還元系発色試薬を発色させないように、栄養成分等の培地成分や各成分使用量を好ましく設定した培地であることができる。
本発明による培地の成分としては、窒素源成分、炭素源成分、ビタミン成分および支持体成分が好ましい。
【００２１】
窒素源成分としては、ペプトンなどのオリゴペプチドおよびアミノ酸が好ましい。
炭素源成分としては、グルコースなどの糖が好ましい。
ビタミン成分としては、各種ビタミン類の単体および／またはその混合物の他、イーストエキスが好ましい。
支持体成分としては、カンテンが好ましく、必要に応じて、浸透圧調節成分として、食塩、塩化マグネシウム、塩化カルシウムなどのハロゲン化金属を添加してもよい。
【００２２】
したがって、本発明の培地のうち、ペプトン、グルコース、イーストエキス、カンテンをさらに含むものが好ましい。また、ペプトン４〜６g/l、グルコース０．２〜２g/l、イーストエキス１〜４g/lおよびカンテン８〜１８g/lを含む培地はより好ましい。
【００２３】
本発明の培地のうち、β−グルコシダーゼ発色基質をさらに含むもの、すなわち、還元系発色試薬およびβ−グルコシダーゼ発色基質を含有する培地は好ましい。
使用されるβ−グルコシダーゼ発色基質の培地中の濃度は、０．００１ｇ／ｌ〜１ｇ／ｌの範囲が好ましく、０．００５ｇ／ｌ〜０．５ｇ／ｌの範囲がより好ましく、０．０１ｇ／ｌ〜０．１ｇ／ｌの範囲が最も好ましい。
【００２４】
β−グルコシダーゼ発色基質は、腸球菌が産生するβ−グルコシダーゼにより、β−グルコシダーゼ発色基質の色原体を遊離することで発色するものである。たとえば、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｘ−Ｇｌｕ）、５−ブロモ−６−クロロ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシド、６−クロロ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシド、３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシド、５−ブロモ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシドなどのインドリル−グルコピラノシド、ｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド、４−メチル−ウンベリフェリル−β−Ｄ−グルコピラノシドなどが本発明の培地において用いられる。
【００２５】
β−グルコシダーゼ発色基質をさらに含む本発明の培地においては、還元系発色試薬とβ−グルコシダーゼ発色基質の発色する色が、それぞれ相互に異なる系統の色に発色するものであると好ましい。具体的には、例えば還元系発色試薬としてＴＴＣを用いる場合、β−グルコシダーゼ発色基質による発色を赤系統以外の色にする。したがって、この場合のβ−グルコシダーゼ発色基質としては、前記赤色に対して明確に視認される青色に発色するＸ−Ｇｌｕが特に好ましい。
【００２６】
本発明の培地のうち、バンコマイシンまたはバンコマイシンと同様にグリコペプチド系抗菌薬であるテイコプラニンを含むものは、ＶＲＥ検出培地として用い得るため好ましい。バンコマイシンを含むものはとくに好ましい。
用いられるグリコペプチド系抗菌薬の濃度は、１ｍｇ／ｌ〜２５６ｍｇ／ｌの範囲が好ましく、４ｍｇ／ｌ〜１２８ｍｇ／ｌの範囲がより好ましく、６ｍｇ／ｌ〜６４ｍｇ／ｌの範囲が最も好ましい。
【００２７】
本発明の培地のうち、グラム陰性菌発育抑制物質を含むものにおいては、検体中のグラム陰性菌の生育が阻害されるため好ましい。用いられるグラム陰性菌発育抑制物質の例は、ポリミキシンＢ、アズトレオナム、アジ化ナトリウム、Ｔｗｅｅｎ８０、硫酸タリウム等であり、硫酸タリウムが好ましい。
用いられるグラム陰性菌発育抑制物質の培地中の濃度は０．１ｇ／ｌ〜０．６ｇ／ｌの範囲が好ましく、０．２ｇ／ｌ〜０．５ｇ／ｌの範囲がより好ましく、０．３〜０．４ｇ／ｌの範囲が最も好ましい。また、これらの物質は単独で使用しても、数種類を混合して使用しても良い。
培地のｐＨとしては、腸球菌が有効に発育する６．５〜７．５が好ましく、６．８〜７．２がより好ましい。
【００２８】
本発明の培地は以下のように用いられる。
まず、当該培地に検体を接種し、３０〜４５℃で１２〜４８時間培養する。培養後または培養時に、コロニーの着色や蛍光などの特性を観察する。腸球菌は着色したコロニーとして検出される。ＴＴＣのような還元系発色試薬を用いた場合の本発明の培地においては、コロニーが赤色に発色した場合、E.faecalisが検出される。発色しない場合には、E.faecalisは存在しないことが明らかになる。この場合、必要に応じて、他の成分からなる培地によってE.faeciumの検出を行う。
【００２９】
ＴＴＣのような還元系発色試薬に加えてＸ−Ｇｌｕのようなβ−グルコシダーゼ発色基質をさらに含む本発明の培地においては、コロニーが赤色に発色すればE.faecalisが検出され、発色が青色である場合にはE.faeciumが検出される。すなわち、両菌種が鑑別される。
【００３０】
還元系発色試薬に加えてβ−グルコシダーゼ発色基質をさらに含む本発明の培地においては、還元系発色試薬およびβ−グルコシダーゼ発色基質をあらかじめ培地に含有させていても良く、検体接種時またはその後に培地に含ませても良い。また、これらの物質を培地に含有させる順序は問わない。利便性の面から、あらかじめ培地に含有させておくことが好ましい。
なお、還元系発色試薬に加えてβ−グルコシダーゼ発色基質をさらに含む本発明の培地にE.faecalisが接種された場合、E.faecalisは還元系発色試薬およびβ−グルコシダーゼ発色基質のいずれに対しても反応する。還元系発色試薬としてＴＴＣ、β−グルコシダーゼ発色基質としてＸ−Ｇｌｕを用いた本発明の培地においては、結果として生じるコロニーは赤色である。ただし、時間の経過に伴って、赤色発色部位の周囲に青色がにじみ出てくる場合がある。
【００３１】
本発明の培地に適用される検体としては、尿、血漿などの臨床検体、肉類などの食品検体、病院内で感染したドアノブ、手すり、壁ぬぐい液などの院内検体などが挙げられる。
【００３２】
本発明の培地は、還元系発色試薬または還元系発色試薬およびβ−グルコシダーゼ発色基質を含む成分をすべて含んだ寒天状、液状、粉末状の形状で提供することができ、シャーレなどの容器にかかる形状の培地を小分けして使い切りの形態で提供することもできる。携帯性、利便性の面から、シャーレなどの容器で提供することが好ましい。
【００３３】
また、E.faeciumが還元系発色試薬を代謝しない培地と、同じ容器に収納または別々の容器に収納した還元系発色試薬ならびにβ−グルコシダーゼ発色基質を、キットとして提供することもできる。この場合、携帯性、利便性を考慮して検体接種棒や白金耳などの器具を含有させることが好ましい。
【００３４】
本発明の、検体中のE.faeciumおよびE.faecalisを鑑別するための方法は、下記各工程を含む：
ａ）検体を、E.faeciumが還元系発色試薬を発色せしめない還元系発色試薬を含む培地に接種する工程；
ｂ）培養中または培養後のコロニーの色を観察し、前記両菌種を鑑別する工程。
【００３５】
コロニーが発色した場合にはE.faecalisが検出される。
コロニーが発色しなかった場合には、同一の検体を、Ｘ−Ｇｌｕのようなβ−グルコシダーゼ発色基質を含む培地にも接種して発色を調べる工程を含むものは好ましい。この場合、例えば、β−グルコシダーゼ発色基質を含む培地における発色が青色であることが確認された場合には、E.faeciumが検出される。
本発明の方法のうち、培地が、β−グルコシダーゼ発色基質をさらに含むものは、E.faecalisおよびE.faeciumの検出を同時に行えるため好ましい。
接種後の培養時間は、培地中の各成分の種類に依存するが、３０〜４５℃で１２〜４８時間のものが効率的であり、かつ操作が簡便であるため好ましい。
【００３６】
以下に本発明を実施例によってさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
（実施例１）
表１に示す濃度の組成を有する本発明の培地を調製した。供試菌株をソイビーンカゼインダイジェスト寒天培地で３５℃、２４時間培養後、コロニーを採取し滅菌生理食塩水で希釈した。希釈液を本発明の培地に接種し、３５℃、４８時間培養を行った。
表２に示すように、E.faeciumは青色のコロニーを形成し、E.faecalisは赤色のコロニーを形成し、グラム陰性桿菌の発育が阻止された。これにより本発明の培地によってE.faecalisおよびE.faeciumが簡便に検出され、鑑別される。
なお、表中の「トリプトン」は、（ＯＸＯＩＤ）社製ペプトンの商品名である
【００３７】
【表１】
2005130768.tif 000002
【００３８】
【表２】
2005130768.tif 000003
【００３９】
（実施例２）
表１に示す培地の組成にさらにバンコマイシン６ｍｇ／ｌを加えた培地を調製した。供試菌株をソイビーンカゼインダイジェスト寒天培地で３５℃、２４時間培養後、コロニーを採取し滅菌生理食塩水で希釈した。希釈液を本発明の培地に接種し、３５℃、４８時間培養を行った。表３に示すように、バンコマイシン耐性のE.faeciumは青色のコロニーを形成し、バンコマイシン耐性E.faecalisは赤色のコロニーを形成し、バンコマイシン感受性腸球菌やグラム陰性桿菌の発育が阻止された。これにより本発明の培地はバンコマイシン耐性を有するE.faecalisおよびE.faeciumを簡便に検出し、鑑別することがわかる。
【００４０】
【表３】
2005130768.tif 000004
【００４１】
（実施例３）培地組成の検討
供試菌株をソイビーンカゼインダイジェスト寒天培地で３５℃、２４時間培養後、コロニーを採取し滅菌生理食塩水で希釈した。希釈液を表４に示す濃度組成の培地に接種し、３５℃、２４〜４８時間培養を行った。その結果、表５に示すように、培地１（ＳＰＣＡ）においてE.faecalis ２株はいずれもＴＴＣを還元し赤色のコロニーを、E.faeciumはＴＴＣを還元せず白色のコロニーを形成し、菌種を識別することができた。一方、培地２、３、４は両菌種とも赤色のコロニーを形成したため、菌種は識別できなかった。
【００４２】
【表４】
2005130768.tif 000005
【００４３】
【表５】
2005130768.tif 000006
【００４４】
次に、表６に示すように培地１の成分であるカゼインのパンクレアチン消化物、酵母エキス、グルコースの量を変更して発育性および両菌種のコロニーの色調を比較した。
その結果、表７に示すようにいずれの菌株も酵母エキスを除くと発育不良になり、酵母エキスを含まない状態でカゼインのパンクレアチン消化物またはグルコース量を増加させても改善されなかった。また、培地８は４８時間培養した場合、E.faeciumにおいて一部桃色のコロニーが見られた。
【００４５】
【表６】
2005130768.tif 000007
【００４６】
【表７】
2005130768.tif 000008
【００４７】
これらの結果から、本発明は培地１の組成において最も好適に実施されることが明らかになった。
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明の培地は、ＶＲＥの感染治療に対する医療業、バンコマイシン類似の抗菌剤が使用された食品などの検査機関などで利用されるため、関連産業の発展に寄与するところ大である。