(57)【要約】【課題】  本発明は、特異的結合物をＢ／Ｆ分離を行わず、高速で感度及び精度よく測定しうる光学的測定装置を提供する。【解決手段】  流体試料中の特異的結合物を光学的に測定する装置であって、蛍光標識又は光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバーと結合した被測定物質と、特異的に結合して前記特異的結合物を構成しうる第１の特異的結合メンバーが、一表面に固定されている反応部と、出光側縁面を有する透明な導波路の他表面に透明な中間層及び光吸収層が順次積層されており、導波路の屈折率をｎw 、中間層の屈折率をｎm 、液体試料の屈折率をｎs とすると、各屈折率が下記式（１）を満足することを特徴とする光学的測定装置。ｎw ＞ｎm ≧ｎs   ・・・（１）【選択図】  図７
2005156527.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
流体試料中の特異的結合物を光学的に測定する装置であって、
蛍光標識又は光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバーと結合した被測定物質と
、特異的に結合して前記特異的結合物を構成しうる第１の特異的結合メンバーが、一表面
に固定されている反応部と、出光側縁面を有する透明な導波路の他表面に透明な中間層及
び光吸収層が順次積層されており、導波路の屈折率をｎw 、中間層の屈折率をｎm 、流料
の屈折率をｎs とすると、各屈折率が下記式（１）を満足することを特徴とする光学的測
定装置。
ｎw ＞ｎm ≧ｎs   ・・・（１）
【請求項２】
導波路の前記一表面に、光遮光性層が反応部を除いて積層されていることを特徴とする
請求項１記載の光学的測定装置。
【請求項３】
導波路の前記一表面に、透明な第２の中間層及び光遮光性層が反応部を除いて順次積層
されていることを特徴とする請求項１記載の光学的測定装置。
【請求項４】
導波路の前記一表面に、透明な第２の中間層及び第２の光吸収層が反応部を除いて順次
積層されていることを特徴とする請求項１記載の光学的測定装置。
【請求項５】
導波路の前記一表面に、透明な第２の中間層、第２の光吸収層及び光遮光性層が反応部
を除いて順次積層されていることを特徴とする請求項１記載の光学的測定装置。
【請求項６】
導波路の前記一表面に、複数の反応部が形成されていることを特徴とする請求項１〜５
のいずれか１項記載の光学的測定装置。
【請求項７】
導波路が、ガラス、石英、アクリル系樹脂、ポリエステル系樹脂、ポリカーボネート樹
脂及びポリスチレン系樹脂よりなる群から選ばれた材料よりなることを特徴とする請求項
１〜６のいずれか１項記載の光学的測定装置。
【請求項８】
中間層が、流体試料の屈折率をｎs とほぼ同一の屈折率を有する物質であることを特徴
とする請求項１〜７のいずれか１項記載の光学的測定装置。
【請求項９】
中間層が、水又はアクリル系樹脂粘着剤であることを特徴とする請求項８記載の光学的
測定装置。
【請求項１０】
導波路の出光側縁面から反応部までの距離が、蛍光又は散乱光が導波路内を全反射し
て伝播する１往復の距離の２倍以上であることを特徴とする請求項１〜９のいずれか１項
記載の光学的測定装置。
【請求項１１】
蛍光標識又は光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバーと、被測定物質を含む
流体試料を、請求項１〜１０項のいずれか１項記載の光学的測定装置の反応部に供給し、
被測定物質を介して、蛍光標識又は光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバーと
、反応部に固定された第１の特異的結合メンバーとを結合させ、特異的結合物を形成した
後、該特異的結合物に光線を照射し、蛍光標識又は光散乱標識によって変換又は散乱され
た蛍光又は散乱光を導波路に導入し、導波路を反射しながら伝播し、出光側縁面から出光
した蛍光又は散乱光を受光素子で測定することを特徴とする特異的結合物の光学的測定方
法。
【請求項１２】
被測定物質が抗体又は抗原であり、第１の特異的結合メンバーと第２の特異的結合メン
バーはそれに特異的に結合する抗原又は抗体であることを特徴とする請求項１１記載の特
異的結合物の光学的測定方法。
【請求項１３】
蛍光標識が、希土類金属錯体であることを特徴とする請求項１１又は１２記載の特異的
結合物の光学的測定方法。
【請求項１４】
蛍光標識が、蛍光を発生する化合物を含有する合成樹脂粒子であることを特徴とする請
求項１１、１２又は１３記載の特異的結合物の光学的測定方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、光学的測定装置及びそれを用いた特異的結合物の光学的測定方法に関し、詳
細には、蛍光標識又は光散乱標識によって変換又は散乱された蛍光又は散乱光を反射させ
ながら伝播する導波路の表面において、蛍光標識又は光散乱標識が結合された第２の特異
的結合メンバーと被測定物質を結合させ、更に、被測定物質と第１の特異的結合メンバー
と結合させた後、光線を照射して蛍光標識又は光散乱標識によって変換又は散乱された蛍
光又は散乱光を導波路に導入し、導波路を反射させながら伝播させ、導波路の出光側縁面
から出光した蛍光又は散乱光を測定して特異的結合物を測定し、ひいては流体試料中の被
測定物質を測定する光学的測定装置及光学的測定方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来から、光源からの光線を光導波路を通して全反射させながら伝播させ、抗原抗体反
応により光導波路の表面近傍に拘束された蛍光物質をエバネッセント波成分により励起し
、これにより生じる蛍光の強度を測定することにより間接的に免疫反応の程度を測定する
蛍光免疫測定装置の研究が行われている。
【０００３】
測定感度、測定精度の優れた蛍光免疫測定装置として、導入された励起光を全反射させ
ながら伝播させる光導波路の表面において抗原抗体反応を行なわせ、さらに蛍光物質で標
識された物質を反応させ、上記励起光のエバネッセント波成分により励起される蛍光物質
が発する蛍光を光導波路に導入し、全反射させながら伝播させ、光導波路から出射される
蛍光に基づいて免疫反応の程度を測定する蛍光免疫測定装置において、６５０ｎｍ近傍に
吸収のピークがある蛍光物質を用い、６３５ｎｍ近傍の波長の光を励起光として採用した
ことを特徴とする蛍光免疫測定装置が提案されている（例えば、特許文献１参照。）。
【特許文献１】特開平７−６３７５６号公報
【０００４】
しかしながら、上記の蛍光免疫測定装置においては、照射する光線は特定波長のレーザ
光線を特定の角度（導波路内で全反射する角度）で照射しなければならず、白熱電球、キ
セノンランプ等の普通の光源を使用することができないので、装置が大型化し、コストが
高く且つ測定が困難であった。
【０００５】
又、異なる導波路を用いた特異的結合分析物の測定方法として、流体試料中の１種以上
の特異的結合分析物の存在又は量の検出方法であって、（ａ）（ｉ）流体試料よりも大き
い屈折率をもつ透明エレメントと、（ｉｉ）受光縁部と、（ｉｉｉ）エレメントの表面の
複数の部位に固定された少なくとも１個の同系結合対の第１の特異的結合メンバーを含む
反応表面（該反応表面の他の非部位部分には特異的結合メンバーを固定しない）とを備え
る導波路デバイス（ここで、前記第１の特異的結合メンバーは、所望により中間同系結合
対を介して、少なくとも１種の分析物と特異的に結合することが可能である）を準備する
段階と、（ｂ）前記１種以上の分析物を含む疑いのある試料と第２の同系結合対の特異的
結合メンバーに結合した光散乱ラベルとに反応表面を接触させ（ここで、該第２の同系結
合対の特異的結合メンバーは、所望により中間同系結合対を介して、サンドイッチアッセ
イの場合には前記１種以上の分析物と特異的に結合することが可能であり、競合アッセイ
の場合には前記第１の同系結合対の固定化した第１の特異的結合メンバーに結合すること
が可能である）、試料中の分析物の量に比例して複数の部位に結合した光散乱ラベル複合
体を形成する段階と、（ｃ）導波路の内部で内部全反射を生じるのに有効な光を導波路の
受光縁部に照射し、全反応表面を同時に照射する段階と、（ｄ）散乱光が存在する場合に
は前記表面の各部位及び非部位部分から実質的に同時に散乱光を集光する段階と、（ｅ）
各部位の光散乱度を（ｉ）非部位部分の光散乱度、もしくは（ｉｉ）別の部位の光散乱度
、又はその両者と比較し、各部位の光散乱を該部位の固定化特異的結合メンバーに特異的
な分析物の存在又は量と相関させる段階を含む前記方法が提案されている（例えば、特許
文献２参照。）。
【特許文献２】特表平１０−５０６１９０号公報
【０００６】
上記方法では、光源として、可視、紫外及び近ＩＲスペクトルのエネルギーを含む、ほ
ぼ任意の電磁エネルギー源が可能であり、レーザ、発光ダイオード、フラッシュランプ、
アーク灯、白熱電球、蛍光放電灯等が記載されている。
【０００７】
しかし、導波路デバイスの受光縁部から透明エレメント内部に光線を照射するのであり
、透明エレメントの厚みは非常に薄いので、この厚みより幅の狭いスリットを通して光線
を照射しなければならず、反応表面まで届く光線の量が少なくなり、ノイズの影響を受け
易くなるという欠点があった。
【０００８】
又、導波路デバイスの受光縁部の面精度が低いと、全反射する光線のみならず、全反射
しない光線も反応表面まで届き、この光線が流体試料中に入光し、流体試料中に残存して
いる第２の同系結合対の特異的結合メンバーに結合した光散乱ラベルに到達し、散乱光が
発生するために測定精度が悪くなるという欠点があった。
【０００９】
更に、反応表面が広く、流体試料が広く存在すると、散乱光を測定する測定画像が大き
くなり、ノイズの影響が大きくなり、測定感度が低下するという欠点があった。
【００１０】
又、従来は、高感度、高精度の分析を行おうとするとＢ／Ｆ分離が必要であったが、Ｂ
／Ｆ分離の工程は煩雑な処理が必要であるため、短時間で分析を行うことが出来ないとい
う欠点があった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、上記欠点に鑑み、任意の光源を使用して被測定物質に光線を照射し、
蛍光標識又は光散乱標識によって変換又は散乱された蛍光又は散乱光を導波路内に導入し
、導波路内を反射させながら伝播させると共に、全反射しない蛍光又は散乱光を除去し、
全反射した蛍光又は散乱光のみを、導波路の端縁面で測定することにより、特異的結合物
をＢ／Ｆ分離を行わず、高速で感度及び精度よく測定しうる光学的測定装置及びそれを用
いた特異的結合物の光学的測定方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
請求項１記載の光学的測定装置は、流体試料中の特異的結合物を光学的に測定する装置
であって、蛍光標識又は光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバーと結合した被
測定物質と、特異的に結合して前記特異的結合物を構成しうる第１の特異的結合メンバー
が、一表面に固定されている反応部と、出光側縁面を有する透明な導波路の他表面に透明
な中間層及び光吸収層が順次積層されており、導波路の屈折率をｎw 、中間層の屈折率を
ｎm 、流体試料の屈折率をｎs とすると、各屈折率が下記式（１）を満足することを特徴
とする。
ｎw ＞ｎm ≧ｎs   ・・・（１）
【００１３】
請求項１記載の光学的測定装置を図面を参照して説明する。図１は請求項１記載の光学
的測定装置の一例を示す断面図である。
【００１４】
図中Ａは出光側縁面１１を有する透明な導波路であり、導波路Ａの一表面に反応部１３
が形成され、他表面に透明な中間層Ｂ及び光吸収層Ｃが順次積層されて光学的測定装置１
が形成されている。尚、１５、１５は導波路Ａと光吸収層Ｃを接着すると共に両者の間隔
を一定に保持するためのスペーサーである。
【００１５】
上記導波路Ａは、蛍光標識又は光散乱標識によって変換又は散乱された蛍光又は散乱光
が全反射しながら伝播するのであるから、光学的に透明な材料からなるフィルム、シート
状物又は板状体であり、一側面が出光側縁面１１となされ、一表面が反応部１３となされ
ている。
【００１６】
上記光学的に透明な材料としては、例えば、ガラス、石英、アクリル系樹脂、フッ素樹
脂、ポリカーボネート樹脂、芳香族ポリエステル樹脂、ポリアリレート樹脂、エポキシ樹
脂、シリコン樹脂、ポリスチレン系樹脂、ポリイミド樹脂及びそのフッ素化物等が挙げら
れ、ガラス、石英、アクリル系樹脂、芳香族ポリエステル樹脂、ポリカーボネート樹脂及
びポリスチレン系樹脂が好ましい。
【００１７】
上記アクリル系樹脂としては、例えば、ポリメチルメタアクリレート（屈折率＝１．４
９０）、ポリベンジルメタクリレート（屈折率＝１．５６８）、ポリフェニルメタクリレ
ート（屈折率＝１．５７１）、ポリ１−フェニルエチルメタクリレート（屈折率＝１．５
４９）、ポリシクロヘキシルメタクリレート（屈折率＝１．５０７）、メチルメタアクリ
レート−ベンジルメタクリレート共重合体、メチルメタアクリレート−フェニルメタクリ
レート共重合体、メチルメタアクリレート−１，１，２−トリフルオロエチルメタクリレ
ート共重合体、メチルメタアクリレート−スチレン共重合体等が挙げられる。
【００１８】
又、上記ポリエステル樹脂としては、例えば、ポリエチレンテレフタレート等が挙げら
れる。
【００１９】
導波路Ａの屈折率ｎw は流体試料の屈折率ｎs より大きくなければならず、流体試料が
水溶液の場合、水の屈折率は１．３３であるから、ｎw ＞１．３３であり、好ましくは、
ｎw ＞１．４９である。
【００２０】
導波路Ａの厚みは、蛍光標識又は光散乱標識によって変換又は散乱された蛍光又は散乱
光の波長の１０〜１０００倍が好ましく、一般に５〜６００μｍが好ましく、より好まし
くは１５〜１００μｍである。
【００２１】
上記反応部１３には、蛍光標識又は光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバー
と結合した被測定物質と、特異的に結合して前記特異的結合物を構成しうる第１の特異的
結合メンバーが固定されている。
【００２２】
上記第１の特異的結合メンバーは、測定すべき被測定物質により異なるが、例えば、酵
素、微生物、抗原、抗体、抗体断片、レクチン、レセプター、イオノフォア、プロトンポ
ンプ、生体膜、人工生体素子、ＤＮＡの分子、ＲＮＡの分子、タンパク質、糖鎖、糖タン
パク質、メタロプロティンよりなる群から選ばれた１種もしくはこれらの混合物等が挙げ
られる。
【００２３】
上記第１の特異的結合メンバーを反応部に固定する方法は、従来公知の任意の方法が採
用されてよく、例えば、反応部表面に上記第１の特異的結合メンバーと共有結合しうる反
応基を有する合成樹脂の層を被覆し、上記第１の特異的結合メンバーと共有結合させる方
法、タンパク質等の上記第１の特異的結合メンバーが吸着しうる化合物層を反応部表面に
被覆し、上記第１の特異的結合メンバーを吸着させる方法等が挙げられる。
【００２４】
上記蛍光標識は、光線の照射を受けた際に光線を変換することにより蛍光を発生する物
質であり、例えば、光線の照射を受けた際に蛍光を発生する化合物、この蛍光を発生する
化合物を含有する合成樹脂粒子等が挙げられる。
【００２５】
上記蛍光を発生する化合物としては、例えば、フルオレインイソチオシアネート、フル
オレセイン、フルオレセインＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、６−（（（４−（
４，４−ジフルオロ−５−（２−チエニル）４−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−５−イ
ンダセン−３−イル）フェノキシ）アセチル）アミノ）ヘキサン酸、スクシンイミジルエ
ステル、４−アセトアミド−４’−イソシアナトスチルベン−２，２’−ジスルホン酸、
７−アミノ−４−メチルクマリン、7-アミノ-4- トリメチルクマリン、Ｎ−（４−アニリ
ノ−１−ナフチル）マレイミド、ダンシルクロライド、４’６−ジアミジノ−２−フェニ
ルインドール、５−（４，６−ジクロトリアジン−２−イル）アミノフルオレセイン、４
，４’−ジイソチオシアナトスチルベン−２，２’−ジスルホン酸、エオシンイソチオシ
アネート、エリトロシンＢ、フルオレサミン、フルオレセイン−５（６）−カルボキシア
ミドカプロン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、５−イソチオシアネート（ｉｓ
ｏｔｈｉｏｓｙａｎａｎｔｅ）ジアセテート、４−メチルウンベリフェロン、ｏ−フタル
ジアルデヒド、ＱＦＩＴＣ、ローダミンＢイソチオシアネート、硫酸ローダミン１０１酸
クロライド、テトラメチルローダミンイソチオシアネート、２’，７’−ジフルオロフル
オレセイン、シアニン系色素、ローダミン、希土類金属錯体等が挙げられ、発光寿命の長
い希土類金属錯体が好適に使用される。
【００２６】
上記希土類金属錯体を構成する希土類金属としては、例えば、スカンジウム、イットリ
ウム、及び、ランタン、セリウム、プラセオジウム、ネオジム、プロメチウム、サマリウ
ム、ユウロピウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウム、エルビウ
ム、ツリウム、イッテルビウム、ルテチウム等のランタノイド族金属等が挙げられ、サマ
リウム、ユウロピウム、テルビウム及びジスプロシウムが好適に使用される。
【００２７】
上記希土類金属と共に希土類金属錯体を構成するリガンドとしては、希土類金属と反応
して蛍光を発生する希土類金属錯体を構成しうるものであれば、特に限定されず、例えば
、エチレンジアミン四酢酸類、４，７−ビス−（クロロスルフォフェニル）−１，１０−
フェナントロリン−２，９−ジカルボキシリックアシッド、４，４’−ビス−１”，１”
，１”，２”，２”，３”，３”−ヘプタフルオロ−４”，６”−ヘキサンジオン−６”
−イル）−クロロスルホ−ｏ−テルフェニル、ヘキサフルオロアセチルアセトン、トリフ
ェニルホスフィンオキシド、ジフェニルスルホキシド、１，１０−フェナントロリン等が
挙げられる。
【００２８】
上記蛍光を発生する化合物を含有する合成樹脂粒子は、蛍光を発生する化合物を流体試
料に溶解した場合に比較し、発生する蛍光の強度が流体試料中の共存物質によって低下さ
れることが少ないので好ましい。
【００２９】
上記蛍光を発生する化合物を合成樹脂粒子に含有させる方法は従来公知の任意の方法が
採用されてよく、例えば、蛍光を発生する化合物の存在下で重合性モノマーを乳化重合、
懸濁重合等の重合方法で重合する方法が挙げられる。
【００３０】
上記重合性モノマーとしては、例えば、スチレン、α−メチルスチレン、ｏ−ビニルト
ルエン、ｍ−ビニルトルエン、ｐ−ビニルトルエン等の芳香族ビニル化合物；メチル（メ
タ）アクリレート、エチル（メタ）アクリレート、ｎ−プロピル（メタ）アクリレート、
ｉ−プロピル（メタ）アクリレート、ｎ−ブチル（メタ）アクリレート、ｔ−ブチル（メ
タ）アクリレート、ｎ−ヘキシル（メタ）アクリレート、２−エチルヘキシル（メタ）ア
クリレート、シクロヘキシル（メタ）アクリレート等のアクリレート類；（メタ）アクリ
ロニトリル、シアン化ビニリデン等のシアン化ビニル化合物；塩化ビニル、塩化ビニリデ
ン、フッ化ビニル、フッ化ビニリデン、テトラフルオロエチレン等のハロゲン化ビニル化
合物；酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル等のビニルエステルなどが挙げられる。
【００３１】
上記重合性モノマーは、これらの重合性モノマーを重合する際に一般に共重合されてい
る単官能性モノマーや多官能性モノマーが共重合されてよく、単官能性モノマーとしては
、例えば、（メタ）アクリル酸、無水マレイン酸、グリシジルアクリレート等が挙げられ
、多官能性モノマーとしては、例えば、ジビニルベンゼン、（ポリ）エチレングリコール
ジ（メタ）アクリレート、（ポリ）プロピレングリコールジ（メタ）アクリレート、トリ
メチロールプロパントリ（メタ）アクリレート等が挙げられる。
【００３２】
上記合成樹脂粒子中の蛍光を発生する化合物の含有量は、少なくなると蛍光の発生量が
少なくなり測定感度が低下し、多くなると蛍光を発生する化合物を溶解しているのと同様
になるので、合成樹脂粒子中５〜８０重量％が好ましく、より好ましくは１５〜６０重量
％である。
【００３３】
上記合成樹脂粒子は大きくなると、第１の特異的結合メンバーが固定されている間隔に
対して、合成樹脂粒子のほうが大きくなり、合成樹脂粒子がすべての第１の特異的結合メ
ンバーに付くことが難しくなる。又、第１の特異的結合メンバーについた合成樹脂粒子が
近づきすぎて重なると蛍光が干渉し消光する恐れがある。一方、合成樹脂粒子が小さすぎ
ると光量が小さくなるため、１０μｍ以下が好ましく、より好ましくは２０ｎｍ〜５００
ｎｍであり、更に好ましくは３０ｎｍ〜２００ｎｍである。
【００３４】
このような粒子径の小さい合成樹脂粒子を合成するには、重合性モノマーの微小液滴を
作製し重合すればよく、例えば、重合性モノマーと乳化剤、分散剤、重合開始剤等の必要
成分との混合液をホモジナイザー、マイクロミキサー、マイクロチャンネル等に供給して
微小液滴を作製し常法に従って重合すればよい。
【００３５】
上記光散乱標識は、光線の照射を受けた際に光線を散乱しうる化合物又は微粒子であり
、例えば、金，銀など金属のコロイド微粒子凝集体、ＣｄＳ、ＣｄＳｅなどのカルコゲナ
イト微粒子、ポリスチレン樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリ（メタ）アクリル樹脂など
のポリマー微粒子、シリカゲル、アルミナ、酸化チタンなどの無機酸化物微粒子、これら
の２種以上の組合せによるコアシェル微粒子等が挙げられる。又、上記ポリマー微粒子及
び無機酸化物微粒子は、染色されていてもよいし、蛍光分子や金属ナノ粒子が分散されて
いてもよい。
【００３６】
上記光散乱標識粒子の大きさは、特に限定されるものではないが、一般に１０ｎｍ〜１
０μｍであり、好ましくは５０ｎｍ〜５００ｎｍであり、更に好ましくは７０〜２００ｎ
ｍである。
【００３７】
上記第２の特異的結合メンバーは、測定すべき被測定物質に特異的に結合しうるもので
あり、第１の特異的結合メンバーと第２の特異的結合メンバーの間に被測定物質をサンド
ウィッチすることができるものである。
【００３８】
従って、第２の特異的結合メンバーとしては、被測定物質及び第１の特異的結合メンバ
ーに対応して異なるが、例えば、酵素、微生物、抗原、抗体、抗体断片、レクチン、レセ
プター、イオノフォア、プロトンポンプ、生体膜、人工生体素子、ＤＮＡの分子、ＲＮＡ
の分子、タンパク質、糖鎖、糖タンパク質、メタロプロティンよりなる群から選ばれた１
種もしくはこれらの混合物等が挙げられる。
【００３９】
従って、免疫測定方法の場合には、被測定物質が抗体又は抗原であり、第１の特異的結
合メンバーと第２の特異的結合メンバーとしては、それに特異的に反応する抗原又は抗体
が使用される。
【００４０】
反応部１３で発生した蛍光又は散乱光が導波路Ａ内を反射して導波路Ａの出光側縁面ま
で伝播する間に、導波路Ａ内を全反射しない蛍光又は散乱光を除去するのであるから、全
反射しない蛍光又は散乱光が導波路Ａ内でなるべく多く反射するのが好ましい。
【００４１】
従って、上記反応部１３から出光側縁面１１までの距離は、蛍光又は散乱光が導波路（
Ａ）内を全反射して伝播する１往復の距離の２倍以上であることが好ましく、より好まし
くは２０倍以上である。
【００４２】
上記透明な中間層Ｂは、導波路Ａの他表面に積層され、導波路Ａを伝播してくる蛍光又
は散乱光のうち全反射しない蛍光又は散乱光が入光する層であるから、透明で屈折率ｎm 
が下記式（１）を満足する必要がある。
ｎw ＞ｎm ≧ｎs   ・・・（１）
【００４３】
即ち、中間層Ｂの屈折率ｎm 及び流体試料の屈折率ｎs が、導波路Ａの屈折率ｎw より
大きくなると、導波路Ａに導入された蛍光又は散乱光の全てが導波路Ａ内を全反射せず、
中間層Ｂに入射するようになり、又、流体試料の屈折率ｎs が中間層Ｂの屈折率ｎm より
大きくなると、流体試料の浮遊蛍光標識又は光散乱標識で励起された蛍光又は散乱光が導
波路Ａ内を全反射することがあるからである。
【００４４】
上記透明な中間層Ｂを構成する材料としては、フッ素化エポキシ系樹脂、アクリル系樹
脂、フッ素化アクリル系樹脂、水等が挙げられる。
【００４５】
流体試料の屈折率ｎs と中間層Ｂの屈折率ｎm が同一であると、導波路Ａ内で全反射し
ない光線が全て中間層Ｂに吸収できるので流体試料の屈折率ｎs とほぼ同一の屈折率を有
する物質が好ましく、水が好適に使用される。
【００４６】
又、中間層Ｂを構成する材料が導波路Ａと光吸収層Ｃを粘接着しうる材料であると、導
波路Ａと光吸収層Ｃを粘接着すると同時に中間層Ｂを形成することができるのでアクリル
系樹脂粘接着剤、アクリル系樹脂粘接着フィルム又はテープが好適に使用される。
【００４７】
尚、中間層Ｂを構成する材料が水の場合はスペーサー１５が必要で、導波路Ａと光吸収
層Ｃの間に空隙を形成し、水を注入して中間層Ｂを形成するが、その他の材料で構成する
場合はなくてもよい。
【００４８】
中間層Ｂの厚みは特に限定されるものではないが、薄くなると水を注入して中間層を形
成することが困難になり、アクリル系樹脂粘接着フィルム又はテープを貼付して中間層を
形成することが困難になる等中間層の形成が困難になり、厚くなっても全反射しない蛍光
又は散乱光が入光する効果は向上せず、光学的測定装置の厚みが厚くなるので、０．６〜
１０００μｍが好ましい。
【００４９】
上記光吸収層Ｃは、中間層Ｂに入光してきた蛍光又は散乱光を吸光する層であり、吸光
することにより、導波路Ａ内の全反射しない蛍光又は散乱光をなくすのであるから、着色
された、特に、黒色に着色された合成樹脂板が好ましい。
【００５０】
上記合成樹脂としては、例えば、オレフィン系樹脂、塩化ビニル系樹脂、ポリスチレン
系樹脂、アクリル系樹脂、ＡＢＳ樹脂、フッ素系樹脂、ポリカーボネート系樹脂、ポリエ
ステル系樹脂、ポリアリレート系樹脂、エポキシ系樹脂、シリコン系樹脂、ポリイミド系
樹脂等の熱可塑性樹脂、熱硬化性樹脂及び光硬化性樹脂が挙げられる。
【００５１】
着色は、上記合成樹脂に着色剤を練りこんでもよいし、合成樹脂層の表面に着色剤層を
積層してもよく、該着色剤としては、例えば、アゾ系、フタロシアニン系、スレン系、染
料レーキ系等の有機系着色剤；カーボンブラック、酸化物系、クロム酸モリブデン系、硫
化物・セレン化物系、フェロシアン化物等の無機系着色剤が挙げられ、黒色に着色可能な
カーボンブラックが好ましい。
【００５２】
上記光吸収層Ｃに金属を用いる場合は、その表面を化成処理、めっき、陽極酸化、電解
着色などを施し、黒化処理したものを用いることができる。例えば、黒アルマイト処理さ
れたアルミニウム板などが挙げられる。好ましくは、黒化処理の前に金属の表面を艶消し
（機械梨地、化学エッチング）処理をすると無反射に近くなるのでより好ましい。
【００５３】
請求項２記載の光学的測定装置は、導波路の前記一表面に、光遮光性層が反応部を除い
て積層されていることを特徴とする請求項１記載の光学的測定装置である。図２は請求項
２記載の光学的測定装置の一例を示す断面図である。
【００５４】
図中Ａは出光側縁面１１を有する透明な導波路であり、導波路Ａの一表面に反応部１３
が形成されるとともに、この一表面に反応部１３を除いて光遮光性層Ｄが積層され、他表
面に透明な中間層Ｂ及び光吸収層Ｃが順次積層されて光学的測定装置１が形成されている
。尚、１５、１５はスペーサーである。
【００５５】
光遮光性層Ｄは、導波路Ａの一表面を遮光し、一表面から導波路Ａに光が侵入すること
がないようにする層であり、光学的測定装置１の光学的測定精度の向上に寄与する。
【００５６】
光遮光性層Ｄは、光を遮光しうる層であればよいが、遮光性に優れたアルミニウムフィ
ルム又はシートや上記黒色に着色された合成樹脂板や黒色処理された金属板が好適に使用
される。
【００５７】
請求項３記載の光学的測定装置は、導波路の前記一表面に、透明な第２の中間層及び光
遮光性層が反応部を除いて順次積層されていることを特徴とする請求項１記載の光学的測
定装置である。図３は請求項３記載の光学的測定装置の一例を示す断面図である。
【００５８】
図中Ａは出光側縁面１１を有する透明な導波路であり、導波路Ａの前記一表面に反応部
１３が形成されるとともに、この一表面に反応部１３を除いて透明な第２の中間層Ｂ’及
び光遮光性層Ｄが積層され、他表面に透明な中間層Ｂ及び光吸収層Ｃが順次積層されて光
学的測定装置１が形成されている。尚、導波路Ａの一表面に積層されている中間層Ｂ’と
導波路Ａの他表面に積層されている中間層Ｂは同一であり、１５、１５はスペーサーであ
る。
【００５９】
光遮光性層Ｄは、導波路Ａの一表面を遮光し、一表面から導波路Ａに光が侵入すること
がないようにする層であり、中間層Ｂ’は中間層Ｂと同様に、導波路Ａを伝播してくる蛍
光又は散乱光のうち全反射しない蛍光又は散乱光が入光する層なので、全反射しない蛍光
又は散乱光をより減衰することができ、光学的測定装置１の光学的測定精度の向上に寄与
する。
【００６０】
請求項４記載の光学的測定装置は、導波路の前記一表面に、透明な第２の中間層及び第
２の光吸収層が反応部を除いて順次積層されていることを特徴とする請求項１記載の光学
的測定装置である。図４は請求項４記載の光学的測定装置の一例を示す断面図である。
【００６１】
図中Ａは出光側縁面１１を有する透明な導波路であり、導波路Ａの前記一表面に反応部
１３が形成されるとともに、この一表面に反応部１３を除いて透明な第２の中間層Ｂ’及
び第２の光吸収層Ｃ’が積層され、他表面に透明な中間層Ｂ及び光吸収層Ｃが順次積層さ
れて光学的測定装置１が形成されている。
【００６２】
尚、導波路Ａの一表面に積層されている中間層Ｂ’及び光吸収層Ｃ’と、導波路Ａの他
表面に積層されている中間層Ｂ及び光吸収層Ｃはそれぞれ同一であり、１５、１５はスペ
ーサーである。
【００６３】
中間層Ｂ’は中間層Ｂと同様に、導波路Ａを伝播してくる蛍光又は散乱光のうち全反射
しない蛍光又は散乱光が入光する層であり、光吸収層Ｃ’は光吸収層Ｃと同様に中間層Ｂ
’に入光してきた蛍光又は散乱光を吸収する層なので、全反射しない蛍光又は散乱光をよ
り減衰することができ、光学的測定装置１の光学的測定精度の向上に寄与する。
【００６４】
請求項５記載の光学的測定装置は、導波路の前記一表面に、透明な第２の中間層、第２
の光吸収層及び光遮光性層が反応部を除いて順次積層されていることを特徴とする請求項
１記載の光学的測定装置である。図５は請求項５記載の光学的測定装置の一例を示す断面
図である。
【００６５】
図中Ａは出光側縁面１１を有する透明な導波路であり、導波路Ａの前記一表面に反応部
１３が形成されるとともに、この一表面に反応部１３を除いて透明な第２の中間層Ｂ’、
第２の光吸収層Ｃ’及び光遮光性層Ｄが積層され、他表面に透明な中間層Ｂ及び光吸収層
Ｃが順次積層されて光学的測定装置１が形成されている。
【００６６】
尚、導波路Ａの前記一表面に積層されている透明な第２の中間層Ｂ’及び第２の光吸収
層Ｃ’と、導波路Ａの他表面に積層されている中間層Ｂ及び光吸収層Ｃはそれぞれ同一で
ある。
【００６７】
中間層Ｂ’は中間層Ｂと同様に、導波路Ａを伝播してくる蛍光又は散乱光のうち全反射
しない蛍光又は散乱光が入光する層であり、光吸収層Ｃ’は光吸収層Ｃと同様に中間層Ｂ
’に入光してきた蛍光又は散乱光を吸収する層なので、全反射しない蛍光又は散乱光をよ
り減衰することができ、更に光遮光性層Ｄは、光吸収層Ｃを遮光し、一表面から導波路Ａ
に光が侵入することを防止するので光学的測定装置１の光学的測定精度の向上に寄与する
。
【００６８】
又、光吸収層Ｃに、光吸収層Ｃを遮光し、導波路Ａの他表面側から導波路Ａに光が侵入
することを防止する目的で光遮光性層Ｄが積層されてもよい。
【００６９】
請求項６記載の光学的測定装置は、導波路の前記一表面に、複数の反応部が形成されて
いることを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項記載の光学的測定装置である。図６は
請求項６記載の光学的測定装置の一例を示す平面図である。
【００７０】
図中１は、平面視略矩形の光学的測定装置であり、図において左側側面が切りかかれ６
個の凸部１７、１７・・が形成され、各凸部に反応部１３、１３・・が形成されている。
この光学的測定装置においては６種の流体試料を同時に測定することができる。
【００７１】
請求項１２記載の特異的結合物の光学的測定方法は、蛍光標識又は光散乱標識が結合さ
れた第２の特異的結合メンバーと、被測定物質を含む流体試料を、請求項１〜１１項のい
ずれか１項記載の光学的測定装置の反応部に供給し、被測定物質を介して、蛍光標識又は
光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバーと、反応部に固定された第１の特異的
結合メンバーとを結合させ、特異的結合物を形成した後、該特異的結合物に光線を照射し
、蛍光標識又は光散乱標識によって変換又は散乱された蛍光又は散乱光を導波路（Ａ）に
導入し、導波路（Ａ）を反射しながら伝播し、出光側縁面から出光した蛍光又は散乱光を
受光素子で測定することを特徴とする。
【００７２】
次に、請求項１２記載の特異的結合物の光学的測定方法を図面を参照して説明する。図
７は、光学的測定装置をもちいて特異的結合物の光学的測定方法の１例を示す模式図であ
り、図８は、蛍光標識又は光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバーと、被測定
物質被測定物質と、第１の特異的結合メンバーが結合した特異的結合物が反応部表面に固
定されている状態を示す模式図である。
【００７３】
図中１は光学的測定装置であり、出光側縁面１１を有する透明な導波路Ａと透明な中間
層Ｂ及び光吸収層Ｃが積層されて形成されている。導波路Ａの出光側縁面１１と対向面付
近の１表面１２に第１の特異的結合メンバー５が固定された反応部１３が形成されている
。１５はスペーサーであり、導波路Ａの他表面１４の端部と光吸収層Ｃの端部を接着し、
水１６が注入されて中間層Ｂが形成されている。
【００７４】
上記特異的結合物の光学的測定方法において、最初の工程は、蛍光標識又は光散乱標識
が結合された第２の特異的結合メンバーと、被測定物質を含む流体試料を、請求項１〜１
１項のいずれか１項記載の光学的測定装置の反応部に供給し、被測定物質を介して、蛍光
標識又は光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバーと、反応部に固定された第１
の特異的結合メンバーとを結合させ、特異的結合物を形成する工程である。
【００７５】
即ち、流体試料２に含まれる被測定物質６よりも多量の、蛍光標識又は光散乱標識８が
結合された第２の特異的結合メンバー７と、被測定物質６を含む流体試料を反応部１３に
供給すると、被測定物質６は、蛍光標識又は光散乱標識８が結合された第２の特異的結合
メンバー７と特異的に結合するとともに、反応部１３に固定された第１の特異的結合メン
バー５とも特異的に結合し、蛍光標識又は光散乱標識８が結合された第２の特異的結合メ
ンバー７と被測定物質６と第１の特異的結合メンバー５が結合した特異的結合物９が形成
される。
【００７６】
そして、第１の特異的結合メンバー５は反応部１３に固定されているので、特異的結合
物９は反応部１３に固定されている。又、過剰の蛍光標識又は光散乱標識８が結合された
第２の特異的結合メンバー７は流体試料２中に浮遊している。
【００７７】
次に、特異的結合物に光線を照射し、蛍光標識又は光散乱標識８により変換又は散乱さ
れた蛍光又は散乱光を導波路Ａに導入し、導波路Ａを反射しながら伝播し、出光側縁面か
ら出光した蛍光又は散乱光を受光素子４で測定する。
【００７８】
即ち、光源３から矢印Ｅのように反応部１３（流体試料２）に光線を照射すると、流体
試料２中の蛍光標識又は光散乱標識８により変換又は散乱された蛍光又は散乱光が発生す
る。
【００７９】
流体試料２中を浮遊している第２の特異的結合メンバー７に結合した蛍光標識又は光散
乱標識８により変換又は散乱された蛍光又は散乱光のうち、導波路Ａ表面で全反射されう
る浅い入射角を有する光線は導波路Ａ表面で全反射されてしまい、導波路Ａ表面で全反射
されない深い入射角を有している光線だけが光線Ｇで示したように導波路Ａ内に入射する
。
【００８０】
導波路Ａに入射された光線Ｇは導波路Ａ表面で全反射しない深い角度の光線であるから
、光線Ｇは導波路Ａを横切り、導波路Ａの他表面１４から中間層Ｂに入射し、光吸収層Ｃ
で一部吸収されると共に一部反射される。
【００８１】
反射された光線Ｇは、再度導波路Ａに入射し、導波路Ａの一表面１２で反射され導波路
Ａの他表面１４から中間層Ｂに入射し、光吸収層Ｃで一部吸収されると共に一部反射され
る。光線Ｇは、上記反射及び光吸収が繰り返され、減衰してなくなってしまう。
【００８２】
一方、反応部１３に固定されている特異的結合物９に含まれる蛍光標識又は光散乱標識
８により変換又は散乱された蛍光又は散乱光も、浅い角度の入射角を有する光線と深い角
度入射角を有する光線があるが、深い角度入射角を有する光線は、上記光線Ｇと同様に反
射及び光吸収が繰り返され、減衰してなくなってしまう。
【００８３】
浅い角度の入射角を有する光線は、光線Ｆで示したように、導波路Ａを全反射しながら
伝播し、出光側縁面１１から出光するので、出光した蛍光又は散乱光を受光素子４で受光
し、電気的処理により測定する。又、出光した光線を、蛍光又は散乱光を選択的に透過す
るフィルターを介して受光してもよい。
【００８４】
上記光源としては、公知の任意の光源が使用可能であり、例えば、レーザー、発光ダイ
オード、フラッシュランプ、アーク灯、白熱電球、蛍光灯、キセノンランプ、水銀灯等が
挙げられ、光線も任意の光線が使用可能であり、例えば、可視光線、紫外線、赤外線等が
挙げられる。
【００８５】
上記受光素子としては、光線を感知しうる任意の計測装置が使用可能であるが、一般に
フォトダイオード、ＣＭＯＳカメラ、ＣＣＤカメラ等が好適に使用される。
【発明の効果】
【００８６】
本発明の光学的測定装置及びそれを用いた特異的結合物の光学的測定方法の構成は上述
の通りであるから、任意の光源を使用して容易に照射することができ、導波路に固定され
た特異的結合物に存在する蛍光標識又は光分散標識以外の蛍光標識又は光分散標識によっ
て変換又は散乱された蛍光又は分散光は、導波路を伝播する際に減衰され光学測定装置ま
で到達しないので、Ｂ／Ｆ分離を行わず、高速で簡単に特異的結合物を感度及び精度よく
測定することができる。
【００８７】
又、導波路Ａ表面の反応部に固定された特異的結合物中の蛍光標識又は光散乱標識によ
って変換又は散乱された蛍光又は分散光のうち、入射角の浅い光線のみを効率よく伝播す
ることができるので、導波路を薄くすることができ、光学的測定装置は薄肉化が可能であ
り、測定する光線は明るくなり測定感度が優れている。従って、流体試料中の被測定物質
を感度及び精度よく測定することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００８８】
以下、本発明の実施例を説明するが、本発明は下記の例に限定されるものではない。
【実施例】
【００８９】
（実施例１）
ヒトヘモグロビンに対するモノクロール抗体とヒトグリコヘモグロビンＡ１ｃに対する
モノクロール抗体の作製
ヒトヘモグロビンとヒトグリコヘモグロビンＡ１ｃをフロイントコンプリートアジュバ
ントに充分に分散させた溶液（２０μｇ／ｍｌ）１００μｌをＢａｌｂ／ｃマウスに２週
間置きに４回免疫した。
【００９０】
免疫終了の２週間後に、免疫されたＢａｌｂ／ｃマウスの脾臓を摘出し、１０６個の脾
細胞を得た。得られた脾細胞をミエローマ細胞とＰＥＧ（ポリエチレングリコール）の存
在下で融合させ培養した。増殖した細胞の上澄みを採取しＥＬＩＳＡ法により各抗体の有
無を調査した。
【００９１】
各抗体が陽性の細胞を限界希釈法により試験し、各抗体を産生している細胞を確認した
。この細胞を大量に培養し、Ｂａｌｂ／ｃマウス腹腔に注射し、２週間後から３日おきに
腹水を採取してヒトヘモグロビンに対するモノクロール抗体とヒトグリコヘモグロビンＡ
１ｃに対するモノクロール抗体を得た。
【００９２】
蛍光合成樹脂粒子の作製
ガラス製重合器に、水８０重量部とドデシルスルホン酸ナトリウム１．５重量部を供給
し、攪拌してドデシルスルホン酸ナトリウムを溶解した後、スチレン２０重量部、希土類
金属錯体（ユウロピウムに配位したヘキサフルオロアセチルアセトン・  トリオクチルフ
ォスフィンオキシド配位子錯体）４重量部及びアゾビスイソブチロニトリル０，１５重量
部を供給し、冷却しながらホモジナイザーで高速分散し、乳化液を得た。
【００９３】
得られた乳化液をホモジナイザーで高速分散しながら、窒素置換し、温水で８０℃まで
昇温し、８０℃で８時間重合して、体積平均粒子径が１２０ｎｍの蛍光合成樹脂粒子を得
た。
【００９４】
抗ヒトグリコヘモグロビンＡ１ｃ抗体吸着蛍光合成樹脂粒子の作製
０．０５Ｍグリシン緩衝液（ｐＨ８．６）に抗ヒトグリコヘモグロビンＡ１ｃ抗体を溶
解し、濃度が１ｍｇ／ｍｌの抗体溶液を得た。
【００９５】
上記の得られた蛍光合成樹脂粒子を０．０５Ｍグリシン緩衝液（ｐＨ８．６）で３回洗
浄した後、蛍光合成樹脂粒子濃度が１．０重量％になるように０．０５Ｍグリシン緩衝液
（ｐＨ８．６）に分散し、得られた分散液１ｍｌに対し、得られた抗体溶液０．５ｍｌを
添加し、３５℃で１時間攪拌混合した。
【００９６】
次に、牛血清アルブミンの１．０重量％リン酸食塩緩衝液（ｐＨ７．２）を１ｍｌ添加
し、常温で１時間攪拌混合した後、遠心分離（１５０００ｒｐｍ、１時間）し、リン酸食
塩緩衝液（ｐＨ７．２）で洗浄した。この遠心分離及び洗浄を３回行った後、得られた抗
ヒトグリコヘモグロビンＡ１ｃ抗体吸着蛍光合成樹脂粒子に２ｍｌのリン酸食塩緩衝液（
ｐＨ７．２）を添加し、超音波ホジナイザーで攪拌し、抗ヒトグリコヘモグロビンＡ１ｃ
抗体吸着蛍光合成樹脂粒子の分散リン酸食塩緩衝液を得た。
【００９７】
反応部の作製
導波路（Ａ）として、長さ１０ｍｍ、幅１ｍｍ、厚さ１００μｍの透明ポリメチルメタ
クリレートシートを使用し、ポリメチルメタクリレートシート（導波路（Ａ））の反応部
１３の位置を蒸留水で洗浄した後、ヒトヘモグロビンに対するモノクロール抗体及びヒト
グリコヘモグロビンＡ１ｃに対するモノクロール抗体を、濃度が１ｍｇ／ｍｌになるよう
に０．１Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ９．０）に溶解した緩衝液を、注射針で反応部１３表
面に供給し、３０℃で１時間静置した。
【００９８】
次に、０．１Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ９．０）で洗浄した後、牛血清アルブミンの１
．０重量％リン酸食塩緩衝液（ｐＨ７．２）を供給し、３０℃で１時間静置することによ
り、上記モノクロール抗体で被覆されていない反応部１３表面を被覆した。
【００９９】
次いで、再度、０．１Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ９．０）で洗浄した後、０．１Ｍトリ
ス塩酸緩衝液（ｐＨ９．０）で被覆してポリメチルメタクリレートシート（導波路（Ａ）
）上に反応部１３を形成した。
【０１００】
光学的測定装置の作製
導波路（Ａ）として、上記反応部１３が作製された透明ポリメチルメタクリレートシー
トを使用し、光吸収層（Ｃ）としてＡＢＳ樹脂とカーボンブラックよりなる、長さ１０ｍ
ｍ、幅３ｍｍ、厚さ１００μｍの黒色ＡＢＳ樹脂系シートを使用した。
【０１０１】
図１に示したように、黒色ＡＢＳ樹脂系シート（光吸収層（Ｃ））の一面の周囲に厚さ
０．５ｍｍの黒色ＡＢＳ樹脂系シートよりなるスペーサー１５を貼付し、その上に、反応
部１３側が上になるようにポリメチルメタクリレートシート（導波路（Ａ））を貼付し、
両者によって形成された空間に注射器で水１６を注入して中間層（Ｂ）を形成して測定装
置を得た。
【０１０２】
測定用血液試料の作製
被験者の血液を採取後、直ちに全血１ｍｌ当りフッ化ナトリウム（血液抗凝固剤）１０
ｍｇ添加し、次いで、血液３μｌを溶血試薬を添加し１５０倍に希釈して、希釈血液試料
を得た。
【０１０３】
尚、溶血試薬は、ポリオキシエチレン（１０）オクチルフェニルエーテル（Ｐｈａｒｍ
ａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｎｃ社製、商品名「ＴｒｉｔｏｎＸ−１００」）を０．１重量％
と除去試薬としてテトラポリリン酸０．１重量％を溶解してなる０．０５Ｍリン酸緩衝液
（ｐＨ６．０）を使用した。
【０１０４】
得られた血液試料をＡ１ｃ専用測定装置（液体クロマトグラフィ、京都第一科学社製、
商品名「Ｈｉ−ＡｕｔｏＡ１ｃＨＡ−８１２１」に供給し、ヒトグリコヘモグロビンＡ１
ｃ濃度を測定し、その結果に基づいて、血液試料に、更に、上記溶血試薬を添加しヒトグ
リコヘモグロビンＡ１ｃ濃度３％、５％、１０％及び１２％の測定用血液試料を作製した
。
【０１０５】
測定
得られた測定用血液試料に、過剰の抗ヒトグリコヘモグロビンＡ１ｃ抗体吸着蛍光合成
樹脂粒子の分散リン酸食塩緩衝液を供給、混合した後、５分間静置し、得られた混合液５
０ｍｌを光学的測定装置の反応部１３に供給した。
【０１０６】
光源３としてキセノンランプを使用して０．１Ｊ／Ｆｌａｓｈの光線を２０００回／秒
の間隔で１０００回照射し、受光素子４としてフォトダイオードを使用し、導波路（Ａ）
の出光側縁面１１から出光してきた波長６５０ｎｍ付近の光線の強度を測定した。
【０１０７】
得られた光線強度とヒトグリコヘモグロビンＡ１ｃ濃度をグラフにプロットしたところ
直線のグラフが得られ、上記光学的測定装置でヒトグリコヘモグロビンＡ１ｃ濃度を測定
することができることが分かった。
【図面の簡単な説明】
【０１０８】
【図１】透明な導波路の表面に透明な中間層と光吸収層が積層された本発明の光学的測定装置の一例を示す断面図である。
【図２】図１の中間層と反対側の表面に光遮光性層が積層された光学的測定装置の一例を示す断面図である。
【図３】図１の中間層と反対側の表面に透明な中間層と光遮光性層が積層された光学的測定装置の一例を示す断面図である。
【図４】図１の中間層と反対側の表面に透明な中間層と光吸収層が積層された光学的測定装置の一例を示す断面図である。
【図５】図１の中間層と反対側の表面に透明な中間層と光吸収層と光遮光性層が積層された光学的測定装置の一例を示す断面図である。
【図６】導波路の表面に複数の反応部が形成された光学的測定装置の一例を示す平面図である。
【図７】光学的測定装置をもちいて特異的結合物の光学的測定方法の一例を示す模式図である。
【図８】蛍光標識又は光散乱標識が結合された第２の特異的結合メンバーと、被測定物質と、第１の特異的結合メンバーが結合した特異的結合物が反応部表面に固定されている状態を示す模式図である。
【符号の説明】
【０１０９】
１  光学的測定装置
Ａ  導波路
Ｂ  中間層
Ｃ  光吸収層
Ｄ  光遮光層
２  流体試料
３  光源
４  受光素子
５  第１の特異的結合メンバー
６  被測定物質
７  第２の特異的結合メンバー
８  蛍光標識又は光散乱標識
９  特異的結合物
１１  出光側縁面
１３  反応部
１５  スペーサー
１６  水
１７  凸部
【図１】
2005156527.tif 000003
【図２】
2005156527.tif 000004
【図３】
2005156527.tif 000005
【図４】
2005156527.tif 000006
【図５】
2005156527.tif 000007
【図６】
2005156527.tif 000008
【図７】
2005156527.tif 000009
【図８】
2005156527.tif 000010