(57)【要約】【課題】副作用を生じる可能性が低く、且つ優れた効果を持つ糖尿病予防改善剤を提供する。【解決手段】本発明の第一の主題は、寄託番号がＦＥＲＭ  Ｐ−  １９６００であるヤマブシタケ株である。  本発明の第二の主題は、有効成分としてヤマブシタケを含む糖尿病予防改善剤である。  前記糖尿病予防改善剤において、ヤマブシタケの乾燥粉末、及び／又はその熱水抽出物を含むことが好適である。  前記糖尿病予防改善剤において、ヤマブシタケが寄託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−  １９６００のヤマブシタケ株であることが好適である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
寄託番号がＦＥＲＭ  Ｐ−  １９６００であるヤマブシタケ株。
【請求項２】
有効成分としてヤマブシタケを含む糖尿病予防改善剤。
【請求項３】
請求項２記載の糖尿病予防改善剤において、ヤマブシタケの乾燥粉末、及び／又はその熱水抽出物を含むことを特徴とする糖尿病予防改善剤。
【請求項４】
請求項２又は３に記載の糖尿病予防改善剤において、ヤマブシタケが寄託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−  １９６００のヤマブシタケ株であることを特徴とする糖尿病予防改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はヤマブシタケ株及びヤマブシタケを含む糖尿病予防改善剤、特に糖尿病予防改善効果を有するヤマブシタケ株に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、糖尿病や心臓病、脳卒中等の疾患は、「成人病」と呼ばれ、加齢と共に発症・進行すると考えられていた。ところが、近年これらの疾患は、年齢に関わらず、個人の生活習慣が深く関わっていることが明らかになった。そのため、食生活や運動習慣、休養、喫煙、飲酒などの生活習慣によって引き起こされる疾患は、米国での病名Life−Related Diseaseを参考にして生活習慣病と呼ばれるようになった。
【０００３】
生活習慣病の一つである糖尿病は高血糖が引き起こす複合疾患であり、慢性化した場合、網膜症、腎症、神経障害等の細小血管障害や動脈硬化の促進につながり、心筋梗塞、脳梗塞等を引き起こすことも知られている。
糖尿病には、インシュリン欠乏のためにその補充を必要とするインシュリン依存性糖尿病（I型糖尿病）と、インシュリンが十分量生産されているのにも関わらず、受容体や糖輸送担体の異常等の理由で作用が発現されないインシュリン非依存性糖尿病（II型糖尿病）とがあり、我が国ではII型糖尿病が主流となっている。
そして糖尿病の治療には、各種の運動療法、食事療法、薬物療法が施行されている。
【特許文献１】特開平    −      号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、運動療法、食事療法は、いずれも継続が困難である。また、薬物療法としては、内服薬による方法とインスリン注射による方法があるが、これらの薬物の長期にわたる投与によって副作用が問題となることがある。
また、II型糖尿病患者の膵臓β細胞数は、非糖尿病患者と比較して明らかに減少しており、この減少が膵臓β細胞機能不全の重要な因子であると考えられるが、従来の治療法は、膵臓β細胞に直接的な改善効果を期待するものではなかった。
糖尿病人口は、今後益々増加することが予測されるため、適切な予防法および改善法を早急に確立する必要性がある。
本発明は、上記従来技術の課題に鑑みなされたものであり、副作用を生じる可能性が低く、且つ優れた効果を持つ糖尿病予防改善剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
前記目的を達成するために、本発明者らが鋭意検討を行った結果、ヤマブシタケ、特に寄託番号がＦＥＲＭ  Ｐ−  １９６００であるヤマブシタケ株が優れた糖尿病予防改善効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明の第一の主題は、寄託番号がＦＥＲＭ  Ｐ−  １９６００であるヤマブシタケ株である。
本発明の第二の主題は、有効成分としてヤマブシタケを含む糖尿病予防改善剤である。
前記糖尿病予防改善剤において、ヤマブシタケの乾燥粉末、及び／又はその熱水抽出物を含むことが好適である。
前記糖尿病予防改善剤において、ヤマブシタケが寄託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−  １９６００のヤマブシタケ株であることが好適である。
【発明の効果】
【０００６】
本発明にかかるヤマブシタケ、特に寄託番号がＦＥＲＭ  Ｐ−  １９６００であるヤマブシタケ株は、副作用を生じる可能性が低く、優れた糖尿病予防改善効果を有する。
また、膵臓β細胞に直接的な改善効果が期待できるため、我が国で主流となっているII型糖尿病患者に対して、特に有効である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
以下、本発明の好適な実施形態を詳細に説明する。
ヤマブシタケ（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ  ｅｒｉｎａｃｅｕｍ）は、担子菌類、ヒダナシタケ目、サンゴハリタケ科、ハリタケ属に属する食用茸である。
子実体の形状は針状、子実体内部は海綿状組織になっている。大きさは５〜１０ｃｍ程度で、色は白色から黄褐色である。
本発明においてヤマブシタケは、子実体、該子実体の抽出物、該抽出物の乾燥物でもよいが、子実体は生のままあるいは乾燥したもののいずれでもよいが、取り扱い性、保存性及び抽出効率等の点から乾燥子実体が望ましく、有効量を効率的に摂取するためには、子実体の乾燥粉末の抽出物として用いることが好適である。
【０００８】
ヤマブシタケ抽出物を得るに先立ち、ヤマブシタケの組織を破壊処理することが好適である。これによって効率よく抽出することが出来る。ヤマブシタケの組織を破壊する手段としては、ビーズミル、ワーリングブレンダー、ホモジナイザー等の各種粉砕混合機による粉砕処理、爆砕機等による衝撃破砕処理、凍結処理、超音波処理等の物理的処理、水酸化ナトリウム等の水溶液によるアルカリ処理、セルラーゼやペクチナーゼ等の細胞壁分解作用のある酵素による処理、浸透圧処理等の化学的処理があり、これらを単独であるいは適宜に組み合わせて行なうことができる。これらの組織破壊処理のうち、ヤマブシタケの子実体を原料とした場合は粉砕処理または酵素処理が、また菌糸体を原料とした場合は酵素処理が好適である。
【０００９】
酵素処理では、公知の細胞壁分解酵素あるいは多糖分解酵素を利用でき、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、キチナーゼ、α−およびβ−グルクロニダーゼ、ペクチナーゼ、キシラナーゼ、α−およびβ−グルカナーゼ等のうちの１種または２種以上を用いることができる。ヤマブシタケを酵素処理するには、適宜に細断あるいは粉砕処理を施したヤマブシタケに前記酵素を水溶液として加え、振とうあるいは撹拌すればよい。
本発明のヤマブシタケ抽出物を得るためには、前述のように組織を破壊処理したヤマブシタケに、抽出溶媒を加え適宜攪拌し、抽出処理すればよい。
抽出溶媒としては特に限定されず、例えば、水、メタノール、エタノール等の一級アルコール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール等の多価アルコール、酢酸エチル等の低級アルキルエステル、ベンゼン、ヘキサン等の炭化水素、エチルエーテル、アセトン等が挙げられ、これらを２種以上組み合わせて用いることもできる。好ましい抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノール、１，３−ブチレングリコール又はこれらの混合溶媒が挙げられる。特に、ヤマブシタケ子実体乾燥粉末を熱水で抽出したものが好ましい。
【００１０】
また、抽出操作は常圧下、常温下で行っても良いが、１〜５気圧、６０〜１５０℃の加圧、加熱下で行なっても良い。具体的には熱水抽出した後、遠心分離や減圧濾過により抽出液と残渣に分離し、残渣をエタノール水溶液で抽出し、先の熱水抽出液と混合することが好ましい。
なお、抽出残渣に対して前記と同様の条件下で再抽出処理を行ない、この抽出操作を数回繰り返してもよい。
また、抽出物は、抽出液でもその乾燥物でもよい。乾燥物とする場合には、抽出液を減圧濃縮、殺菌、フリーズドライ、スプレードライ等の処理に供して抽出溶媒を除去する。
また、本発明においては、子実体を用いることが好適であるが、その菌糸体にも効果が期待できる。菌糸体は炭素源および窒素源を含む培地で種菌を培養して得られる生あるいは乾燥菌糸体を利用できる。乾燥したものが簡便である。
なお、本発明にかかるヤマブシタケは、平成１５年１１月２８日付で、産業技術総合研究所に受託されており、識別のための表示をＦＥＣ２０１１８５（ＴＵＨＷ株）という。
【００１１】
科学的性質等は以下の通りである。
１．科学的性質…菌の特徴：炭素源と窒素源を含む栄養培地下において、白色のコロニーを形成する。また、光学顕微鏡下において、クランプコネクション（かすがい連結）が観察される。
２．分類学上の位置…担子菌
３．培養条件
（１）培地名…ＳＭＹＡ培地（S：サッカロース、M：マルトエキストラクト、Ｙ：イーストエキストラクト、Ａ：寒天）
Ｓ，Ａ→市販品  Ｍ，Ｙ→ディフコ社製（Ｄｉｆｃｏ）
（２）培地の組成…培地１０００ｍｌ当たり
１％      サッカロース          １０ｇ
１％      マルトエキストラクト  １０ｇ
０．４％  イーストエキストラクト  ４ｇ
２％      寒天                  ２０ｇ
（３）培地のｐＨ…５．０〜７．０（最適ｐＨ５．５）
（４）培地の殺菌条件…１２１℃  ２０分
（５）培地温度…２８℃
（６）培養期間…１０日間
（７）酸素要求性…好気性
【００１２】
４．保管条件
凍結法にて保管できる。
（１）凍結条件…−８０℃
（２）保護剤…１０〜２０％グリセリン水溶液（最適は２０％）
（３）凍結後の復元率…１年で１００％、３年で９９％
５．生存試験の条件
（１）微生物の復元…４０℃
（２）接種・培養・確認法…培養条件と同一条件による。
【００１３】
本発明のヤマブシタケを使用して糖尿病予防改善剤を製造することができる。本発明の糖尿病予防改善剤は経口投与して、糖尿病の予防・改善のために適用する。糖尿病予防改善剤として用いる際の摂取量としては、症状等により異なり特に限定されないが、成人１日当たりヤマブシタケ乾燥粉末に換算して１〜２０ｇ、特に５〜１５ｇ、最適には１０〜１５ｇを摂取すれば十分に効果が期待できる。
本発明の糖尿病予防改善剤は、通常内服薬として投与される。
内服薬の場合には、常法により散剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、茶剤、懸濁化剤、流エキス剤、液剤、シロップ剤等とすることができる。なお、製剤化の際には、通常の製剤化担体、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤、賦香剤等を必要に応じて用いることができる。また、必要に応じて適当なコーティング剤等で剤皮を施すこともできる。
【実施例】
【００１４】
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。また、配合量（％）は特に記載のない限り質量％である。
ＧＯＴＯ−ＫＡＫＩＺＡＫＩラット（ＧＫラット）は、比肥満型のII型糖尿病病態モデル動物であり、日本人の糖尿病病態に近似の動物モデルであるとされている。このＧＫラットを使用し、ヤマブシタケの血糖下降作用ならびに膵β細胞への影響を中心に試験を行った。
【００１５】
［１］試験方法
１．試験ラットの予備飼育・分類（５〜６週齢）
５週齢の雄性ＧＯＴＯ−ＫＡＫＩＺＡＫＩ／Ｃｒｊラット（ＧＫラット）を日本チャールズリバー（株）より購入した。なお、購入時に糖負荷試験を行ない、１時間値が２４３〜２７２ｍｇ／ｄｌを示す雄性ラット（体重１０８〜１４３ｇ）のみを厳選して購入した。
室温２２±１℃、湿度６０±１０％に調節された飼育室において、白色蛍光灯で１日１２時間（７〜１９時明期）の光調節を行ない、飼料（ＣＲＦ−1：オリエンタル酵母工業（株））及び水道水を自由摂取させ、１週間予備飼育した。
予備飼育後、各個体の体重測定及び糖負荷試験を行ない、体重の平均値及び糖負荷試験における１２０分値の平均値がほぼ等しくなるように１群８頭の５群に分類した。
【００１６】
２．ヤマブシタケ抽出物の調製
ヤマブシタケ（寄託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−  １９６００）子実体を乾燥装置で４０〜６０℃可変方式により乾燥後、粉砕し、１６メッシュのふるいにかけて粉末とした。また、得られた粉末５ｇ、１０ｇ、１５ｇと滅菌水６００ｍｌをそれぞれリーピッヒ冷却管付き三角フラスコに加え，８０℃の湯俗中で１時間抽出後，室温まで放冷した。上清溶液をろ紙（東洋ろ紙、Ｎｏ．２、直径９０ｍｍ）でろ過し，ヤマブシタケの熱水抽出物（収率：約１００％）を得た。以下、各抽出物を５ｇ抽出物、１０ｇ抽出物、１５ｇ抽出物という。
【００１７】
３．抽出物の投与方法（６〜１７週齢）
下記の要領で、各群のラットに上記各抽出物の投与を行ない、６週齢からさらに１７週齢まで飼育した。飼料と水道水を各群とも自由摂取させた。
各抽出物は毎日午前１０時に経口投与し、抽出物投与後は滅菌水を自由摂取させた。糖負荷試験日は経口投与を行なわなかった。飼育室の環境は、温度２２±１℃、湿度６０±１０％、白色蛍光灯で１日１２時間の採光下（７〜１９時明期）とした。
【００１８】
Ａ群：無投与群
１日に体重１００ｇ当たり滅菌水道水１ｍｌを投与する（抽出物は投与しない）。
Ｂ群：５ｇ投与群
１日に体重１００ｇ当たり前記５ｇ抽出物１ｍｌを投与する（体重６０ｋｇのヒトが、１日にヤマブシタケ乾燥粉末５ｇを６００ｍｌの熱水で抽出したものを摂取するのに相当）。
Ｃ群：１０ｇ投与群
１日に体重１００ｇ当たり前記１０ｇ抽出物１ｍｌを投与する（体重６０ｋｇのヒトが、１日にヤマブシタケ乾燥粉末１０ｇを６００ｍｌの熱水で抽出したものを摂取するのに相当）。
Ｄ群：１５ｇ投与群
１日に体重１００ｇ当たり前記１５ｇ抽出物１ｍｌを投与する（体重６０ｋｇのヒトが、１日にヤマブシタケ乾燥粉末１５ｇを６００ｍｌの熱水で抽出したものを摂取するのに相当）。
Ｅ群：非糖負荷対照群
１日に体重１００ｇ当たり滅菌水道水１ｍｌを投与する（糖負荷試験及び抽出物の投与は行なわない）。
【００１９】
４．糖負荷試験
糖負荷試験は毎週１回午前中に施行した。
方法としては、糖負荷試験の前日に、全ラットを約２０時間絶食（飲料水は自由摂取）させ、２０％グルコース溶液１０ｍｌ／ｋｇを各実験動物に経口投与した。
【００２０】
［２］解析方法
１．血液検査値
＜グルコース・血糖総和＞
実験最終日の糖負荷試験直後に血糖値を測定し、その後３０，６０，９０，１２０分値を測定した。なお、血糖値の計測は、尾動脈から各時間に採血（５μｌ）を行ない、血糖検査器（グルコカード，ヘキストマリオンルセル（株））にて行った。なおＥ群は糖負荷を行なわなかった。１２０分値をグルコース値とし、直後の値、３０，６０，９０，１２０分値の合計を求め、血糖総和値とした。
＜膵インシュリン＞
膵インシュリン値は、実験最終日に各ラットから採取した膵臓の一部を用い、１２５IインシュリンによるRadio lmmuno Assay 法で測定を行った。
【００２１】
＜その他＞
実験最終日の前日に全ラットを絶食させ、翌日に深麻酔（ネンブタール,45mg/kg,i.p.）し、左心室から２０Ｇ採血針で可能な限り採血を行った。
採取した血液を用いて、生化学的検査（自動化学分析装置：Auto Lab, Radio lmmuno Assay 法）を行なった。
得られた成績は群間比較をWilcoxon U‐testで解析し５％以内の危険率を持って有意な差があると判定した（p＜0.05）。なお，全ての成績は平均値と標準誤差値で表示した。
【００２２】
［３］試験結果
結果を表１に示す。
（表１）                                                                 
Ａ群          Ｂ群          Ｃ群          Ｄ群          Ｅ群     
無投与群      5g投与群     10g投与群    15g投与群  非糖負荷対照群 
グルコース（ｍｇ／ｄｌ）
238.5±9.6    223.6±7.6    196.3±9.1＊   191.4±3.9＊   191.3±1.9＊
血糖総和（ｍｇ／ｄｌ）
1320±24      1268±36      1033±29＊     1005±39＊      521±2.3＊
フルクトサミン（μｍｏｌ／ｄｌ）
239±24     224.8±18       198±18＊      194±24＊      200±12＊ 
１，５−アンヒドログルシトール（μｇ／ｍｌ）
5.6±1.0      8.3±0.9     11.9±1.2＊    12.6±0.8＊     5.4±0.9 
膵インスリン（ｐｇ／ｍｌ）
38.9±4.2     39.5±3.0     41.8±4.0     77.9±2.4＊    42.9±4.1 
総コレステロール（ｍｇ／ｄｌ）    
108.2±1.6    112.8±1.6    121.5±2.3    129.6±1.6＊   115.8±2.1 
ＨＤＬコレステロール（ｍｇ／ｄｌ）     
74.9±0.3     76.4±0.6     78.6±0.9＊    81.3±0.7＊    72.1±0.6 
トリグリセリド（ｍｇ／ｄｌ）
24.9±2.1     26.1±1.3     33.6±2.1＊    38.2±1.9＊    31.6±1.6＊ 
＊：有意差あり
【００２３】
＜グルコース・血糖総和＞
グルコース・血糖総和値は、抽出物の投与量に従って著明な低下が認められた。特に１０ｇ投与群、１５ｇ投与群（Ｃ、Ｄ群）では、無投与群（Ａ群）と比較して、有意な差を持って上昇の抑制が認められ、グルコース値においては糖負荷を行なわなかったＥ群の値とほぼ同じであった。
よって、例え糖を多く摂取したとしても、ヤマブシタケ抽出物の摂取により、糖を摂取しない場合と同レベルまで、血糖値の上昇が抑制されることが確認された。
【００２４】
＜フルクトサミン＞
フルクトサミンは、血漿蛋白のアミノ基にグルコースが結合された糖化蛋白として存在する。血漿蛋白の半減期が１０〜１４日であるため、フルクトサミンは約２週間前の血糖状態を反映する。よってフルクトサミンの測定は、短期の血糖コントロールの指標として利用される。
フルクトサミン値も、抽出物の投与量に従って著明な低下が認められた。特に１０ｇ投与群、１５ｇ投与群（Ｃ、Ｄ群）では無投与群（Ａ群）と比較して、有意な差を持って、フルクトサミン値の低下が認められ、糖負荷を行なわなかったＥ群よりも低い値となった（正常範囲）。
よって、フルクトサミン値においても、ヤマブシタケ抽出物の摂取による、血糖値の上昇抑制効果が確認された。
【００２５】
＜１，５−アンヒドログルシトール＞
１，５−アンヒドログルシトール（1,5-AG）は、ブドウ糖についで多い単糖であり、広く生物界に存在する。主として食物から経口的に摂取され、腎臓でほとんど再吸収されると考えられているが、糖尿病の発症により尿中に排泄されるようになると、1,5-AGは特異的に低値を示す。よって1,5-AGの測定は、糖尿病の診断・治療効果判定に有用とされている。
1,5-AG値も、抽出物の投与量に従って著明な上昇が認められた。特に１０ｇ投与群、１５ｇ投与群（Ｃ、Ｄ群）では無投与群（Ａ群）と比較して、有意な差を持って、1,5-AG値の上昇が認められた。
よって、１，５−アンヒドログルシトール値に関しても、ヤマブシタケ抽出物の摂取により、糖尿病の改善が確認された。
【００２６】
＜膵インスリン＞
インスリンは、膵臓のβ細胞から分泌されるホルモンで、血液中のブドウ糖を細胞内に取り入れエネルギーとして利用する際に必要であるが、糖尿病は、このインスリンの分泌量が減少したり、インスリンの作用が低下したりすることにより、ブドウ糖が利用されずに血液中に溢れる疾患である。
膵インスリン値は、抽出物の投与量に従って著明な上昇が認められた。特に１５ｇ投与群（Ｄ群）では無投与群（Ａ群）と比較して、有意な差を持って膵インスリン値の上昇が認められた。
よって、ヤマブシタケ抽出物の摂取により、糖尿病による膵インスリン値の低下が抑制されることが確認された。
【００２７】
＜総コレステロール＞
コレステロールは、生体細胞膜の構成成分として細胞の形態・機能の維持及びステロイドホルモン、胆汁酸の前駆物質として必須の成分である。血液中には生体内の約８％が分布し、1日にその約４５％を代謝回転することによって体内のコレステロールプールを定常状態に維持している。血液中コレステロールの７０％はエステル型で、残りが遊離型として存在するが、その和を総コレステロールと呼んでいる。総コレステロールの測定により、脂質代謝異常をきたす疾患の推測ができる。
総コレステロール値は、抽出物の投与量に従って、著明な上昇が認められた。特に１５ｇ投与群（Ｄ群）では無投与群（Ａ群）と比較して、有意な差を持って総コレステロール値の上昇が認められた。
【００２８】
＜ＨＤＬコレステロール＞
高比重リポ蛋白（HDL）は、末梢から肝臓へコレステロールを逆転送して異化させる重要な役割を果たしており、細胞内に蓄積したコレステロールの除去機構にも関与している。ＨＤＬコレステロール値が低くなる疾患の一つとして糖尿病が挙げられる。
ＨＤＬコレステロール値は、抽出物の投与量に従って、著明な上昇が認められた。特に１０ｇ投与群、１５ｇ投与群（Ｃ、Ｄ群）では、無投与群（Ａ群）と比較して有意な差を持ってＨＤＬコレステロール値の上昇が認められた。
【００２９】
＜トリグリセリド＞
トリグリセリドは、ジグリセリド及びモノグリセリドと共に中性脂肪の1つであり、トリグリセリドの測定は、脂質代謝異常をきたす疾患の診断、予後の判定などの指標として実施される。
トリグリセリド値は、抽出物の投与量に従って、著明な上昇が認められた。特に１５ｇ投与群（Ｄ群）では無投与群（Ａ群）と比較して、有意な差を持ってトリグリセリド値の上昇が認められた。
【００３０】
上記の成績から、本発明にかかるヤマブシタケの投与により、糖尿病が明らかに予防改善されることが明らかとなった。
また、本発明にかかるヤマブシタケの投与により、問題となるような副作用が生じることはなかった。さらに比較として正常ラットであるＷｉｓｔｅｒ京都ラット（ＷＫＹラット）についても、試験を行なったが、抽出物の投与による血糖値の異常な下降等は見られなかった。このことから、ヤマブシタケ抽出物は異常に血糖値を下げるものではなく、また問題となる副作用を起こさないので、安全に摂取することができることがわかる。
【００３１】
２．病理所見
実験最終日に膵を摘出後，４％フォルマリン／リン酸緩衝液に浸潤させ組織観察ならびにβ細胞数計測のための試料とした。組織切片を４μｍとし、ヘマトキシリン−エオジン染色法あるいはGomori氏染色法によって、各群におけるβ細胞数の測定、及び泡沫変性、膵小島の肥大化、硝子様物質の観察を行った。
泡沫変性、膵小島の肥大化、硝子様物質はすべて膵臓の組織変性を示すものである。
β細胞は、ランゲルハンス島にあるインスリンを分泌する細胞であり、β細胞の機能低下でインスリンの分泌量が減ると、糖尿病が発病する。β細胞数はインシュリンのモノクロナール抗体を用いて免疫組織学的に検出し、PCNA染色後、顕微鏡下で５つの膵小島におけるβ細胞数を計測した。
【００３２】
なお、泡沫変性、膵小島の肥大化、硝子様物質については、無投与群との比較で評価し、β細胞数の評価基準は以下の通りとした。
−    ：９以下
＋    ：１０〜２９
＋＋  ：３０〜４９
＋＋＋：５０以上
結果を表２に示す。
（表２）                                                           
Ａ群        Ｂ群        Ｃ群        Ｄ群        
β細胞数           ＋＋        ＋＋       ＋＋＋      ＋＋＋     
泡沫変性                    変わらない   やや改善      改善       
膵小島の肥大化              変わらない   やや改善      改善       
硝子様物質                  変わらない   沈着抑制    沈着抑制     
【００３３】
β細胞数においては、抽出物の投与による著明な増量が認められた。すなわち無投与群（Ａ群）と比較して、１０ｇ投与群、１５ｇ投与群（Ｃ、Ｄ群）でβ細胞数の減少の著明な抑制が認められた。
また、泡沫変性、膵小島の肥大化、硝子様物質についても、無投与群（Ａ群）と比較して、１０ｇ投与群、１５ｇ投与群（Ｃ、Ｄ群）で著明な改善効果が認められた。
よって、泡沫変性、膵小島の肥大化、硝子様物質、β細胞数のいずれの項目においても、ヤマブシタケの摂取により、用量依存的に糖尿病の著明な予防改善効果が確認された。
【００３４】
以上の結果より、本発明にかかるヤマブシタケは、副作用を生じる可能性が低く、且つ優れた糖尿病予防改善効果を有することが確認された。
また、本発明にかかる糖尿病予防改善剤は、膵臓β細胞に直接的な改善効果が期待できるため、我が国で主流となっているII型糖尿病患者に対して、特に有効である。