(57)【要約】    【課題】  皮膚に対して有効であるが不安定な有効成分や刺激感等の理由により高濃度で配合することのできなかった有効成分を高濃度で保持したリポソーム水溶液を、特殊な装置を用いずに調製し、経時安定性に優れた皮膚化粧料用基剤および皮膚化粧料を提供する。    【解決手段】  皮膚に対する有効成分を油相および／または水相に添加し、リポソームの骨格を形成するリン脂質類と膜安定化剤となる油溶性成分を加熱溶解して油相を調製し、高濃度の糖類水溶液をリポソーム膜相転移温度以上に保持して油相に少量ずつ攪拌しながら添加してラメラ液晶を形成し、さらにリポソーム膜相転移温度以上で水相を攪拌添加して、皮膚に対する有効成分を保持するリポソーム水溶液を調製したのち、該リポソーム水溶液を凍結乾燥することを特徴とする皮膚化粧料用基剤の製造方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚に対する有効成分を油相および／または水相に添加し、リポソームの骨格を形成するリン脂質類と膜安定化剤となる油溶性成分を加熱溶解して油相を調製し、高濃度の糖類水溶液をリポソーム膜相転移温度以上に保持して油相に少量ずつ攪拌しながら添加してラメラ液晶を形成し、さらにリポソーム膜相転移温度以上で水相を攪拌添加して、皮膚に対する有効成分を保持するリポソーム水溶液を調製したのち、該リポソーム水溶液を凍結乾燥することを特徴とする皮膚化粧料用基剤の製造方法。
【請求項２】
皮膚に対する有効成分のうち油溶性の有効成分を、前記油相に添加することを特徴とする請求項１に記載の皮膚化粧料用基剤の製造方法。
【請求項３】
皮膚に対する有効成分のうち水溶性の有効成分を、前記水相に添加することを特徴とする請求項１に記載の皮膚化粧料用基剤の製造方法。
【請求項４】
皮膚に対する有効成分のうち未変性のコラーゲンおよび／またはその誘導体を、前記調製したリポソーム水溶液を冷却してリポソーム表面に吸着させることを特徴とする請求項１に記載の皮膚化粧料用基剤の製造方法。
【請求項５】
前記油相に、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、エチレングリコール、イソプレングリコールおよびジプロピレングリコール等から選ばれる少なくとも１種の多価アルコールを添加することを特徴とする請求項１に記載の皮膚化粧料用基剤の製造方法。
【請求項６】
前記油溶性の有効成分が、β−カロチン、ルテイン、リノール酸、レチノールおよびビタミンAから選ばれる少なくとも１種であることを特徴とする請求項２に記載の皮膚化粧料用基剤の製造方法。
【請求項７】
前記水溶性の有効成分が、ビタミンＣ、α-あるいはβ-ヒドロキシ酸、酵母抽出物など、経時的に安定性の維持しがたい物質から選ばれる少なくとも１種であることを特徴とする請求項３に記載の皮膚化粧料用基剤の製造方法。
【請求項８】
前記糖類水溶液が、トレハロース、マンニトールおよびマルトース、キシリトール、ブドウ糖、ショ糖の単糖および二糖類から選ばれる少なくとも１種の水溶液であることを特徴とする請求項１ないし請求項７のいずれか１項に記載の皮膚化粧料用基剤の製造方法。
【請求項９】
前記糖類水溶液の糖濃度が、２０wt％以上であることを特徴とする請求項１ないし請求項８のいずれか１項に記載の皮膚化粧料用基剤の製造方法。
【請求項１０】
請求項１ないし請求項９のいずれか１項に記載した方法により製造した皮膚化粧料用基剤を含むことを特徴とする皮膚化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚に対して有効であるが不安定な有効成分を高濃度で安定に有する皮膚化粧料用基剤の製造方法および皮膚化粧料に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
これまで主に肌に対し高い効果が期待されると言われている皮膚化粧料用有効成分として、例えばビタミンＣ（美白効果）、ビタミンA（皮膚老化防止・抗しわ効果）、β-グルカンを含む酵母・酵母抽出液（皮膚免疫機能活性・抗しわ効果）、リノール酸（美白・保湿（皮膚老化防止）効果）、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、サリチル酸等のα−あるいはβ−ヒドロキシ酸（皮膚のくすみならびにしわの低減効果）、未変性コラーゲン及びその誘導体（サクシニルコラーゲン、ミリスチルサクシニルコラーゲン等）（保湿効果、抗しわ効果）等が知られており、これら各成分の効能については数多く研究がなされている。
【０００３】
しかし、これらの各成分は、いずれも肌に対し高い効果を有しているものの、その経時に伴う化学的安定性が非常に低かったり、あるいは皮膚吸収性が低かったりまたは刺激感等の副作用があったり、さらには常温恒温下にて短時間で分離や変色および変臭が生じてしまう等の問題があった。
【０００４】
そのため、これらの有効成分の肌への効果を維持しながら各成分を化粧料へ配合するには、それぞれの成分を化学的に変性して安定化型にして配合したり、水溶性の有効成分を油溶性にして皮膚吸収性を向上させたり、成分の配合量を極微量にした剤形での検討がなされている。
【０００５】
ここで安定化された有効成分とは、たとえば、安定型ビタミンＣ誘導体（ビタミンＣリン酸マグネシウム塩、及びビタミンＣグルコシド等）や安定型ビタミンA誘導体（パルミチン酸レチノール等）などがあげられ、また、油溶性にされた有効成分としては、例えばビタミンＣパルミテート等がある。
【０００６】
さらに、現在では一般によく使用されているコラーゲン及びその誘導体は水溶液中においていかなる温度においても一定な物ではなく、ある温度以上ではコラーゲン構造特有の３次元構造が崩壊してしまい、いわゆる“変性”を生じてしまうため、常にある一定温度を保ちこの３次元のコラーゲン構造を維持することが重要となる。しかし、近年汎用されつつある魚ならびに海洋物由来のコラーゲンの変性温度は非常に低く、一般には未変性の状態で保つには３０℃以下の条件を満たさなければならないと言うのが現状である。
【０００７】
しかし、上記のいずれの有効成分においても、肌に効率よく、本来の高い効果をもたらすためには、これらの有効成分を変性していない状態で肌へ浸透させることが必須である。
【０００８】
従って、化粧料分野においては生体（肌）へのこれら有効成分の効果効能を損なうことなく、有用な状態のままで化粧料へ安定配合することが重要であるとされる。
【０００９】
一方、製剤の観点から、リポソーム剤形は、その構造が人の皮膚のおける細胞間脂質構造に非常に類似していることから、粒子サイズをコントロールすれば一般の化粧料剤形に比べ肌への浸透性が高く、また二分子膜構造から成り立っているため、水性、油性物質の両方を取り込むことができる。しかしながら、均一微細なリポソームを調製するためには、疎水性であるレシチン等のリン脂質を特殊な装置を用いて、分散させなければならないといった難点があった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明が解決しようとする課題は、前記皮膚に対して有効であるが不安定な有効成分や刺激感等の理由により高濃度で配合することのできなかった有効成分を高濃度で保持したリポソーム水溶液を、特殊な装置を用いずに調製し、経時安定性に優れた皮膚化粧料用基剤および皮膚化粧料を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
すなわち、本発明は、皮膚に対する有効成分を油相および／または水相に添加し、リポソームを形成するリン脂質類、膜安定化剤となる油溶性成分とを加熱溶解して油相を調製し、高濃度の糖類水溶液をリポソーム膜相転移温度以上に保持して油相に攪拌しながら少量ずつ添加し、さらにリポソーム膜相転移温度以上で水相を攪拌添加して、皮膚に対する有効成分を保持するリポソーム水溶液を調製したのち、該リポソーム水溶液を凍結乾燥することを特徴とする皮膚化粧料用基剤の製造方法および該製造方法によって製造した皮膚化粧料用基剤を有することを特徴とする皮膚化粧料に関するものである。
【００１２】
すなわち、本発明における皮膚化粧料用基剤とは、一般的に不安定、あるいは刺激感があるとされていた皮膚に対する有効成分を保持するリポソーム水溶液を特殊な装置を用いずに調製し、さらに凍結乾燥したものである。
【発明の効果】
【００１３】
本発明は、皮膚に対して有効であるが不安定であったり、刺激性の点で高濃度配合が困難であった有効成分を、通常の乳化釜を用いてリポソームに高濃度で保持することができ、さらに凍結乾燥することにより、これらの有効成分を経時的に安定化することができるという効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
このようにして、皮膚化粧料用基剤を調製することにより、ビタミンＣやリノール酸等のように水溶液状態では化学的に不安定であったり、水にも油にも不溶性の純粋なβ-グルカン等のような経時的に分離しやすいものであったり、α−ヒドロキシ酸等のように高い保持効率を維持できないもの、さらには水溶液中におけるコラーゲンのようにある温度以上ですぐに変性を生じ分子構造を変えてしまうものであっても、凍結乾燥することで経時的に安定化と高い保持効率が図れ、かつ、高温状態でも安定にその皮膚化粧料用基剤を保つことが出来る。
【００１５】
さらに、従来技術ではこのような不安定成分を高保持した均一リポソーム水溶液を化粧料製品として大量に製造することは非常に困難であり、一般には高圧ホモジナイザー等の特殊機器を用いることが必須とされており、効率よく大量に製造することは困難であった。
【００１６】
それ故、このように不安定な成分をリポソームに高配合することは、研究レベルでは可能であっても製造スケールへと転用されることはなかった。
【００１７】
しかし、本発明における不安定な有効成分を高保持したリポソーム水溶液は、一般の工場等に設置され使用されている乳化釜のみで製造が可能であり、特殊な装置などを用いることなく製造できるものである。
【００１８】
本発明において、リポソーム水溶液を特殊な装置を用いず、乳化釜等の一般的な装置を用いて調製する方法は以下の通りである。
【００１９】
すなわち、まず、油相を調製する。油相は、リポソームを形成するリン脂質類と、膜安定化剤となる油溶性成分を加熱溶解して調製する。
【００２０】
次いで、油相に、リポソーム膜相転移温度以上で、高濃度の糖類水溶液を少量ずつ攪拌添加した後、水相を攪拌添加してリポソーム水溶液を調製する。
【００２１】
本発明方法において、特殊な装置を用いずに、通常の乳化釜を用いて、リポソーム水溶液を調製できる理由は、高濃度の糖類水溶液を用いることで、疎水性効果を利用し、水に溶解しにくいリン脂質の膨潤型ラメラ液晶を形成させ、より水に分散溶解しやすくすることが可能となるため、と考えられる。
【００２２】
本発明において、皮膚に対する有効成分として、油溶性のものとしては、例えば、β―カロチン、ルテイン、リノール酸、レチノールおよびビタミンAから選ばれる少なくとも１種を挙げることができる。
【００２３】
これらの油溶性の有効成分は、油相に添加してリポソーム水溶液を調製すればよい。
【００２４】
本発明において、水溶性の有効成分としては、例えば、ビタミンＣ、α-あるいはβ-ヒドロキシ酸、酵母抽出物など、経時的に安定性の維持しがたい物質から選ばれる少なくとも１種を挙げることができる。
【００２５】
これらの水溶性の有効成分は、水相に添加してリポソーム水溶液を調製すればよい。
【００２６】
ただし、有効成分のうち未変性のコラーゲンおよび／またはその誘導体はすべての水相を投入しリポソーム水溶液を調製し、冷却した後、約30℃以下で配合し、リポソーム表面にそのまま吸着させればよい。
【００２７】
本発明方法において、リポソームを形成するリン脂質類としては、例えばホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、リゾホスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、スフィンゴ糖脂質、卵黄レシチン、大豆レシチン等の天然もしくは合成のリン脂質または水素添加リン脂質等を挙げることができる。
本発明において、膜安定化成分となる油溶性成分としては、例えばコレステロール類、たとえばコレステロール、コレステロール硫酸、およびその塩、コレステロールのアルキルエステル、フィトステロール、フィトステロール硫酸、及びその塩、フィトステロールのアルキルエステル、グリセロ糖脂質、セチルガラクトサイドの如きアシルグルコシド、ジアルキル型合成界面活性剤、N-アシル-スフィンゴシン又はその硫酸エステル、N-アシルスフィンゴ糖脂質、N-高級アシルグルタチオンの一種または二種以上の混合物を挙げることができる。
【００２８】
なお油相には、これらのリン脂質類、ならびに油溶性成分をより溶解させやすくするため、多価アルコールを配合してもよい。多価アルコールとしては、たとえば１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、エチレングリコール、イソプレングリコールおよびジプロピレングリコール等から選ばれる少なくとも１種を挙げることができる。
【００２９】
本発明において、油相に加える糖類水溶液とは、糖類を有する水溶液であれば特に限定されないが、例えばトレハロース、マンニトールおよびショ糖から選ばれる少なくとも１種を高濃度で含有する水溶液である。濃度は、２０wt％以上、好ましくは３０wt％以上、より好ましくは５０wt％以上である。高濃度の糖類水溶液を油相に少量ずつ攪拌添加することにより、膨潤型ラメラ液晶が形成されるうえ、糖類は、凍結乾燥した際に膜融合防止剤であり賦型剤にもなる。
【００３０】
以下、より具体的にリポソーム水溶液を調製する方法の一実施形態を示す。
【００３１】
まず初めに、リポソームを形成する骨格となるリン脂質類と膜安定化剤となるコレステロール等の油溶性成分（リポソーム水溶液当たり、リン脂質0.05〜10％、好ましくは0.3〜5%、コレステロール等の油溶性成分0.005〜5%、好ましくは0.05〜2％）および皮膚に対する有効成分のうち油溶性のものを予め1,3-ブチレングリコール等の多価アルコール（リポソーム水溶液当たり、0.1〜5%、好ましくは0.5〜3％）と共に加熱（80〜85℃）して完全に溶解させ、使用する乳化釜へ投入する。なお、このときの釜の攪拌速度は最大速度とする。
【００３２】
次に高濃度の糖類水溶液を、膜の相転移温度（例えば、ジステアロイルフォスファチジルコリン；54.9℃）以上、好ましくは８０〜９０℃にて保温し、先の乳化釜へごく僅かずつ添加し、ラメラ液晶を形成させる。なお、このときの釜の攪拌速度は最大速度とする。
【００３３】
高濃度の糖類水溶液を全て投入した段階で、上述の相転移温度以上、好ましくは８０〜９０℃に加熱した水溶性の有効成分を含む水相をゆっくり投入する。なお、このときの釜の攪拌速度は最大速度とする。このプロセスを採用することで、平均で500nm以下の均一なリポソーム水溶液が通常の乳化釜で得られる。
【００３４】
全てが投入終了した時点で、数分間８０〜９０℃恒温下で攪拌を行い、その後、冷却する。
【００３５】
場合によっては、感触改良材として高分子ならびにカルボキシメチルデキストランなどの多糖類を配合し粘度を上げる場合には、これらの原料は最後に配合する。
【００３６】
こうして得られた高い保持効率で有効成分を有するリポソーム水溶液を、その後、凍結乾燥することで、物理的・化学的に不安定あるいは刺激感の強い有効成分を高い保持効率で有した本発明の皮膚化粧料用基剤が得られる。
【００３７】
本発明において、調製したリポソーム水溶液を凍結乾燥するには、一般的な定法にて凍結乾燥を行えばよい。
【００３８】
本発明の皮膚化粧料用基剤は、有効成分を保持するリポソーム水溶液が凍結乾燥されているため、凍結乾燥状態であれば、不安定な有効成分であっても、経時的に変化することが少ない。
【００３９】
従って、乾燥やシミ、しわ、くすみ等の肌トラブルを有する消費者は、化粧に際して、この皮膚化粧料用基剤に水などを加えて分散させて皮膚化粧料を調製し、肌に塗布すれば、有効成分がリポソーム粒子に内包されているため刺激感も少なく、またより安定な状態のまま効率的に肌へ有効成分が浸透される。
【００４０】
リポソーム水溶液調製時における前記有効成分の含有量としては、通常0.001〜10w/w%の割合となるように皮膚化粧料を調製すればよい。
【００４１】
本発明における皮膚化粧料の剤形の例としては、特に限定されず、例えば、乳液、クリーム、化粧水、パック、マッサージ料などの化粧品ならびにボディ用化粧料や医薬部外品等とすることができる。
【００４２】
なお、本発明のリポソーム水溶液の調製において、通常の化粧料に配合される成分、例えば、海洋深層水、油剤、粉体、界面活性剤、水、アルコール、増粘剤、保湿剤、高分子化合物、ゲル化剤、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤、酸化防止剤、色素、防腐剤、香料、顔料、薬剤、美容成分等を本発明の効果、および製剤の安定性を損なわない範囲で適宜選択して用いることができる。これらの通常の化粧料に配合される成分のうち、油溶性のものは油相に、水溶性のものは水相に添加すればよい。
【００４３】
上記海洋深層水とは、表面海水が沈降していて層を形成しているもので低温、清浄で栄養塩に富む固有水であり、その取水海域は海岸線から１０００〜４０００ｍ沖、好ましくは２０００〜３０００ｍ沖であり、取水深度は２５０〜５００ｍ、好ましくは３００〜４００ｍから取水したものである。
【００４４】
海洋深層水は、数多くのミネラル成分を含有していることから、保湿性に優れ、また、浸透性に優れていることから、化粧料に配合させている有効成分の皮膚内への浸透を促すと考えられる。
【００４５】
凍結乾燥前のリポソーム水溶液調整時における海洋深層水の配合基準としては、２０〜８０％であり、好ましくは５０〜６０％である。
【００４６】
上記油剤としては、油脂類、炭化水素類、ロウ類、脂肪酸、合成エステル類を挙げることができる。
【００４７】
油脂類としては、ホホバ油、ヒマシ油、オリーブ油、大豆油、ヤシ油、パーム油、カカオ油、ミンク油、タートル油等が挙げられる。
【００４８】
炭化水素類としては、流動パラフィン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス、スクワラン等が挙げられる。
【００４９】
ロウ類としては、ミツロウ、ラノリン、カルナバロウ、キャンデリラロウ等が挙げられる。
【００５０】
脂肪酸としては、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸等が挙げられる。
【００５１】
合成エステル類としては、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オレイン酸ブチル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、モノステアリン酸プロピレングリコール、乳酸ミリスチル、リンゴ酸イソステアリル、モノステアリン酸グリセリン、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム等が挙げられる。
【００５２】
これらの油剤は、凍結乾燥前のリポソーム水溶液調製時における配合量としては、通常あわせて0〜50w/w%の割合で配合される。
【００５３】
上記アルコールとしては、エタノール、1,3-ブチレングリコール、プロピレングリコール、ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール等が挙げられる。
【００５４】
凍結乾燥前のリポソーム水溶液調製時における低級アルコール類は、通常0〜10 w/w%の割合で配合される。
【００５５】
上記界面活性剤としては、グリセリン脂肪酸エステル類、ソルビタン脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンアルキルエーテル類、ヤシ油脂肪酸モノエタノールアミド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ラウリル硫酸ナトリウム、ピログルタミン酸イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル、アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ポリオキシエチレンステアリルエーテル、ジアルキルスルホコハク酸、臭化セチルピリジニウム、塩化-n-オクタデシルトリメチルアンモニウム、モノアルキルリン酸、N-アシルスルタミン酸、N-アシルグルタミン、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート、ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン還元ラノリン等が挙げられる。
【００５６】
界面活性剤は、凍結乾燥前のリポソーム水溶液調製時における配合量としては、通常0〜2w/w%の割合で配合させる。
【００５７】
上記増粘剤としては、カルボキシビニルポリマー、メチルポリシロキサン、デキストラン、カルボキシメチルセルロース、カラギーンナン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルデキストランならびにその塩類（カルボキシメチルデキストランナトリウムなど）等が挙げられる。
【００５８】
増粘剤は、凍結乾燥前のリポソーム水溶液調製時における配合量としては、通常0〜1w/w%の割合で配合される。
【００５９】
上記保湿剤としては、グリセリン、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、ピログルタミン酸、アセチルグルタミン酸、ヒアルロン酸、プロシアニジン等が挙げられる。
【００６０】
保湿剤は、凍結乾燥前のリポソーム水溶液調製時における配合量としては、通常0〜１０%の割合で配合される。
【００６１】
上記防腐剤としては、安息香酸、サリチル酸、デヒドロ酢酸あるいはそれらの塩類、パラオキシ安息香酸エステル類のフェノール類、トリクロサンハロカルバン等が挙げられる。
【００６２】
防腐剤は、凍結乾燥前のリポソーム水溶液調製時における配合量としては、通常0〜0.５w/w%の割合で配合される。
【００６３】
上記香料は、通常化粧料に使用するものであればどのような香料を用いてもよい。
【００６４】
上記顔料としては、酸化鉄、二酸化チタン、酸化亜鉛、カオリン、タルク等が挙げられる。
【００６５】
顔料は、凍結乾燥前のリポソーム水溶液調製時における配合量としては、凍結乾燥前のリポソーム水溶液調製時における配合量としては、通常0〜５w/w%の割合で配合される。
【００６６】
上記薬剤としては、小麦胚芽油、ビタミンB2、ビタミンE、アスコルビン酸-2-リン酸マグネシウムあるいはナトリウム、D-パントテールアルコール、グリチルリチン酸ジカリウム、グルタチオン、UV吸収剤、キレート剤、植物抽出物、微生物代謝物/抽出物等が挙げられる。
【００６７】
薬剤は、凍結乾燥前のリポソーム水溶液調製時における配合量としては、通常0〜3w/w%の割合で配合される。
【００６８】
上記水としては、水道水、ミネラルウォーター、かん水、海水、超純水、極地氷由来水、含鉱水、精製水等が挙げられる。
【００６９】
水は任意の割合で配合される。
【００７０】
本発明の皮膚化粧料の剤形は任意であり、例えば、可溶化系乳化剤形あるいは分散型の剤形をとることがある。
【００７１】
本発明における皮膚化粧料としては、化粧水、乳液、美容液、クリーム、洗顔料、パック、ジェル等のスキンケア製品、乳化ファンデーション等の製品が挙げられる。
【００７２】
以下に、本発明の実施例および試験例を示す。なお、本実施例により本発明が限定されるものではない。
【実施例１】
【００７３】
レシチン１．０ｇ、コレステロール０．５ｇ、１，３−ブチレングリコール２ｇ、パラベン０．１ｇを加熱溶解して乳化釜に投入し、最大攪拌速度で攪拌した。２０％トレハロース水溶液２０ｇ、
１０％マンニトール水溶液５ｇを８５℃に保持し、先の乳化釜へごく僅かずつ添加し、ラメラ液晶を形成させた。攪拌は最大攪拌速度で行った。糖類水溶液を全て投入した後、最大攪拌速度にて攪拌を行いながら冷却し、４０℃になった段階で、常温の１０％ビタミンＣ水溶液３０ｇをゆっくりと投入した。このときの釜の攪拌速度は、最大速度として、リポソーム水溶液を調製した。得られたリポソーム水溶液を凍結乾燥して、ビタミンＣ含有凍結乾燥リポソームを調製した。
【比較例１】
【００７４】
凍結乾燥しない以外は実施例１と同一処方の水溶液状のバルクを調製した。
【００７５】
実施例１の凍結乾燥バルクと、比較例１の水溶液状のバルクを日光照射下ならびにUV照射下に１週間、ならびに１ヶ月間放置し、その際の各種バルクの状態変化に付き観察を行った。その結果を表１に示す。
【００７６】
試験例１
実施例１で調製した「ビタミンＣ含有凍結乾燥リポソーム」ならびに比較例１で調製した「ビタミンＣ含有リポソーム水溶液」を用いて、日光照射ならびにUV照射を行った際の各種溶液の経時に伴う安定性試験を行い、各サンプルの外観の変化を評価した。
【００７７】
すなわち、実施例１で調製した凍結乾燥バルクと比較例１で調製した水溶液状のバルクを日光照射下ならびにUV照射下に１週間、ならびに１ヶ月間放置し、その際の各種バルクの状態変化に付き観察を行った。その結果を表１に示す。
【００７８】
この表からも明らかなように、比較例のビタミンＣを含有したリポソーム水溶液は、すぐに黄色系に色素変化を生じるが、本発明のリポソームを凍結乾燥することでより各種条件下におけるバルクの安定性が向上した。
【００７９】
【表１】
2005179313.tif 000002
【実施例２】
【００８０】
実施例１に準じて高い抗酸化能を有する酵母抽出物を３％配合した凍結乾燥リポソームを調製した（配合割合は凍結乾燥リポソームを基準とする）。この凍結乾燥リポソームを被験者１０人の腕に塗布し、ラジカルスカベンジ効果を評価した。なお、通常、この酵母抽出物は、その安定性が非常に低いことから一般には最大の配合％は１％未満と言われている。
【００８１】
試験例２
実施例２で調製した凍結乾燥バルク0.8gに精製水を加えよく振り全量が５ｇとなるように調製したバルクを被験者１０人の上腕に塗布した後、表皮を採取し、その表皮を用いてFe2+を触媒としてH2O2の分解をしてin vitroでヒドロキシラジカルを発生させ測定を行い、ラジカルスカベンジ効果を評価した。その結果を表２に示す。
【００８２】
【表２】
2005179313.tif 000003
【実施例３】
【００８３】
実施例１に準じて高純度リノール酸を３％配合した凍結乾燥リポソームを調製した（配合割合は凍結乾燥リポソームを基準とする）。クリームを被験者１０人の顔に塗布し、目視、ならびに画像解析により、しわの改善効果を評価をおこなった。
なお、ここで用いたリノール酸は安定化型のものではないため、一般には１％未満の配合でも酸敗臭が生じるためその配合はごく僅か１％未満とされている。
【００８４】
試験例３
実施例３で調製した凍結乾燥バルク0.8gに精製水を加えよく振り全量が５ｇとなるように調製したバルク（エッセンス）を１０人の被験者の顔に塗布し、packman SFL等級システムを用いて２人の評価者が個々に、20人の患者の口と目周辺部位のシワを評価した。
【００８５】
また30人の被験者の皮膚表面のシリコンレプリカを作成し、そのうちの10個をランダムに選び、画像解析によりしわの改善効果を評価した。なお、ここで用いたリノール酸は安定化型のものではないため、一般には１％未満の配合でも酸敗臭が生じるためその配合はごく僅か１％未満とされている。その結果を表３に示す。
【００８６】
【表３】
2005179313.tif 000004
【産業上の利用可能性】
【００８７】
本発明により、皮膚に対して有効であるが不安定であったり、刺激性の点で高濃度配合が困難であった有効成分を、通常の乳化釜を用いてリポソームに高濃度で保持することができ、さらに凍結乾燥することにより、これらの有効成分を経時的に安定化することができるので、皮膚化粧料として有用である。