(57)【要約】【課題】国民の健康を脅かすであろう動脈硬化を予防・治療するにあたり、食品又は食品に準ずるものから有効成分を見いだす必要がある。本発明はCimicifuga racemosaに見出されたシクロアルタン型トリテルペンサポニン類の有する生体調節機能を利用して、動脈硬化の予防・治療に有効な薬剤、又は飲食品を提供することを課題とする。【解決手段】シクロアルタン型トリテルペンサポニンを有効成分とし、アドレナリンβ１受容体に対する拮抗作用を特徴とする血圧降下剤、拮抗剤、その飲食品としての利用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
シクロアルタン型トリテルペンサポニンを有効成分とし、アドレナリンβ１受容体に対する拮抗作用を特徴とする血圧降下剤。
【請求項２】
シクロアルタン型トリテルペンサポニンを有効成分とし、アドレナリンβ１受容体に対する拮抗作用を特徴とする拮抗剤。
【請求項３】
シクロアルタン型トリテルペンサポニンが
actein,
23-epi-26-deoxyactein,
cimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
cimigenol  3-O-D-xylopyranoside,
25-O-acetylcimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
25-O-acetylcimigenol  3-O-D-xylopyranoside,
12-hydroxycimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
cimiracemoside F,
25-O-methoxycimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
12,21-dihydroxycimigenol  3-O-L-arabinopyranoside
のいずれか1種以上であることを特徴とする請求項１記載の血圧降下剤。
【請求項４】
シクロアルタン型トリテルペンサポニンが
actein,
23-epi-26-deoxyactein,
cimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
cimigenol  3-O-D-xylopyranoside,
25-O-acetylcimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
25-O-acetylcimigenol  3-O-D-xylopyranoside,
12-hydroxycimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
cimiracemoside F,
25-O-methoxycimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
12,21-dihydroxycimigenol  3-O-L-arabinopyranoside
のいずれか1種以上であることを特徴とする請求項２記載の拮抗剤。
【請求項５】
シクロアルタン型トリテルペンサポニンを有効成分とし、アドレナリンβ１受容体に対する拮抗作用を特徴とする動脈硬化予防・改善作用を持つ飲食品。
【請求項６】
シクロアルタン型トリテルペンサポニンが
actein,
23-epi-26-deoxyactein,
cimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
cimigenol  3-O-D-xylopyranoside,
25-O-acetylcimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
25-O-acetylcimigenol  3-O-D-xylopyranoside,
12-hydroxycimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
cimiracemoside F,
25-O-methoxycimigenol  3-O-L-arabinopyranoside,
12,21-dihydroxycimigenol  3-O-L-arabinopyranoside
のいずれか1種以上であることを特徴とする請求項５記載の飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シクロアルタン型トリテルペンサポニンの構造を有する化合物の用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、食生活の高脂肪・高カロリー化により、国民の肥満・高血圧傾向が徐々に進んでいる。上半身肥満、耐糖能異常、高中性脂肪、高血圧は「死の四重奏」と呼ばれ、これらが重なると加速度的に動脈硬化や心疾患の罹患率が高まり、生命を脅かすとされている。このような生理学的異常の発現には、遺伝因子とともに食生活をはじめとする環境因子が大きく関わっているため、予防・改善するためには時として生活習慣を大きく変える必要があり、持続困難な自己規制を強いられることがある。誰もが受け入れられるような簡便な動脈硬化予防・改善手段が望まれている。
【０００３】
近年、食品又はこれに準ずる天然物から様々な有用物質が見出され、その生理機能を生かした機能性食品がブームになりつつある。機能性食品は、半健常な人が日常的に摂取することで血圧、血液脂質、血糖値等の改善が期待され、簡便な健康増進・疾病予防手段を提供しうる。シクロアルタン型トリテルペンサポニン類は、いずれもキンポウゲ科サラシナショウマ属の草木であるCimicifuga racemosaに見出されたものである。Cimicifuga racemosaは、古くから北米のインディアン達によって痛み止めや更年期障害の改善を目的に食され、現在も食用ハーブとして欧米で流通している。Cimicifuga racemosaのエキスには既に血圧降下作用に関する報告があり、その活性物質がシミシフーガ酸等であること、作用機序がノルエピネフリンによる血管収縮に対する拮抗作用であることが知られている（非特許文献１）。しかしながらシクロアルタン型トリテルペンサポニン類が、アドレナリンβ１受容体に対する拮抗作用を通じて血圧降下作用を示すと言った知見は現時点で見あたらない。
【非特許文献１】M.Noguchi et.al,Biol.Pharm.Bull.21（11）1163-1168（1998）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
今後も国民の健康を脅かすであろう動脈硬化を予防・治療するにあたり、食品又は食品に準ずるものから有効成分を見いだす必要がある。本発明はCimicifuga racemosaに見出されたシクロアルタン型トリテルペンサポニン類の有する生体調節機能を利用して、動脈硬化の予防・治療に有効な薬剤、又は飲食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は上記目的を達成するためになされたもので、Cimicifuga racemosaに見出されたシクロアルタン型トリテルペンサポニン類が、これまで知られていなかったような生理活性を有することを動物実験により確認して本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち本発明は、シクロアルタン型トリテルペンサポニンを有効成分とし、アドレナリンβ１受容体に対する拮抗作用を特徴とする血圧降下剤または拮抗剤である。また、本発明はシクロアルタン型トリテルペンサポニン類を有効成分し、動脈硬化予防・改善作用を持つ飲食品である。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、シクロアルタン型トリテルペンサポニンを有効成分とし、従来にない動脈硬化予防・改善作用を持つ医薬品・飲食品を提供することができる。本発明のシクロアルタン型トリテルペンサポニン類を含有する医薬品及び飲食品は、動脈硬化予防・改善作用を有するので、成人病・生活習慣病の予防及び治療上有効なものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
シクロアルタン型トリテルペンサポニン類については、植物体から抽出・精製したものと、化学的に合成したもののどちらを使っても良い。また抽出材料はCimicifuga racemosaの植物体に限定せず、シクロアルタン型トリテルペンサポニン類を含むものであればいかなる天然物であっても良い。
【０００９】
植物からのシクロアルタン型トリテルペンサポニン類の抽出・精製、並びにシクロアルタン型トリテルペンサポニン類の合成に際しては、医薬品もしくは飲食品に使用可能な標品が得られることを条件としていかなる方法を使っても良く、得られた標品の純度は限定しない。また、適当な賦形剤と混合しても差し支えない。
【００１０】
得られたシクロアルタン型トリテルペンサポニン類は、経口の医薬品として用いることができ、また食品素材と混合して飲食品とすることができる。性状としては固体状又は液体状を呈し、医薬品としては経口剤として錠剤、カプセル剤、顆粒剤、シロップ剤等の剤型をとる。
【００１１】
シクロアルタン型トリテルペンサポニン類を医薬品として人体に投与するときは、１回あたり０．１〜１００ｍｇ（乾燥重量）／ｋｇ体重の量、好ましくは０．１〜４ｍｇ（乾燥重量）／ｋｇ体重の量を、１日に１ないし数回経口投与する。飲食品とする場合、これと混合する食品素材は固形物（粉状、薄片状、塊状など）、半固形物（ゼリー状、水飴状など）、もしくは液状物等のいずれであっても良い。飲食品１ｇあたりの植物体あるいはエキス含有量は、５〜２００ｍｇ（乾燥重量）であることが望ましい。
【実施例１】
【００１２】
（化合物の精製）
Cimicifuga racemosaの根および根茎（5.2kg）を熱MeOHで抽出（3時間2回）し、抽出液を減圧下濃縮した。濃縮エキス（445g）を30%MeOHにて懸濁させ、Diaion  HP-20カラムクロマトグラフィーに付し、30%MeOH、50％MeOH、MeOH、EtOH、EtOAcで順次極性を下げながら溶出させ、5つの粗画分に分画した。
【００１３】
【化１】
2005239551.tif 000002
【００１４】
得られたMeOH溶出画分（181g）をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（19:1， 9:1，4:1，2:1）→MeOH］により7つの画分（Frs.A〜G）に分画した。
Fr.Cをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（19:1）］、 オクタデシルシラン化（ODS）シリカゲルカラムクロマトグラフィー［CH3CN-H2O（1:1）］、セファデックスLH-20（MeOH）により、さらに5つ（Frs.C-1〜C-5）に分画した。Fr.C-2をMeOHに溶解し、室温で放置しておいたところ沈殿が生じた。沈殿物を濾取した。ODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー［CH3CN-H2O（3:4）］、シリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（30:1，19:1）］、セミ分取ODS  HPLC［CH3CN-MeOH-H2O（5:5:4）］を繰り返し行うことにより精製して、化合物CRW-2（1.6g）を単離した。
【００１５】
Fr.C-3をMeOHに溶解し、室温で放置しておいたところ沈殿が生じた。沈殿物を濾取した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（30:1，19:1）］、ODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー［CH3CN-H2O（1:1）］、セミ分取ODS  HPLC［CH3CN-MeOH-H2O（1:1:1）］を繰り返し行うことにより精製して、化合物CRW-1（3.2g）を単離した。
【００１６】
Fr.C-4をMeOHに溶解し、室温で放置しておいたところ沈殿が生じた。沈殿物を濾取した。濾液について、シリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（30:1，19:1）］、セファデックスLH-20（MeOH）、ODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー［CH3CN-H2O（1:1）］を繰り返し行うことにより精製して、化合物CR-2（102mg）を単離した。
【００１７】
Fr.DをMeOHに溶解し、室温で放置しておいたところ沈殿が生じた。沈殿物を濾取した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（19:1，12:1）］、セミ分取ODS HPLC ［CH3CN-H2O（1:1）］を繰り返し行うことにより精製して、化合物CRW-3（141mg）、化合物CRW-4（160mg）を単離した。濾液について、シリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（25:1,  19:1）］、ODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー［CH3CN-H2O
（2:1， 5:3）］、セミ分取ODS  HPLC［CH3CN-H2O（5:3）］を繰り返し行うことにより精製して、化合物CRW-5（131mg）、化合物CRW-6（153mg）を単離した。
【００１８】
Fr.Eをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（12:1）］、Sephadex LH-20 （MeOH）により、さらに6つ（Frs.E-1〜E-6）に分画した。Fr.E-4をMeOHに溶解し、室温で放置しておいたところ沈殿が生じた。沈殿物を濾取した。濾液についてシリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（19:1，12:1）］、ODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー［MeOH-H2O（8:2）］、セミ分取ODS  HPLC［CH3CN-H2O（5:8）］を繰り返し行うことにより精製して、化合物CRW-8（120mg）を単離した。
【００１９】
Fr.E-5をMeOHに溶解し、室温で放置しておいたところ沈殿が生じた。沈殿物を濾取し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（12:1）］、ODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー［MeOH-H2O（8:5）］を繰り返し行うことにより精製して、化合物CRW-7（126mg）を単離した。
【００２０】
Fr.E-6をMeOHに溶解し、室温で放置しておいたところ沈殿が生じた。沈殿物を濾取し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー［CHCl3-MeOH（19:1，10:1）］。ODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー［CH3CN-H2O（1:1）］、ODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー［MeOH-H2O（8:5）］を繰り返し行うことにより精製して、化合物CR-5（55.1mg）を単離した。
【００２１】
上述で単離したシクロアルタン型トリテルペンサポニンCRW-1〜8、CR-2、CR-5の化合物名および構造式を以下に示す。
CRW-1：actein
CRW-2：23-epi-26-deoxyactein
CRW-3：cimigenol 3-O-L-arabinopyranoside
CRW-4：cimigenol 3-O-D-xylopyranoside
CRW-5：25-O-acetylcimigenol 3-O-L-arabinopyranoside
CRW-6：25-O-acetylcimigenol 3-O-D-xylopyranoside
CRW-7：12-hydroxycimigenol 3-O-L-arabinopyranoside
CRW-8：cimiracemoside F
CR-2：25-O-methoxycimigenol 3-O-L-arabinopyranoside
CR-5：12,21-dihydroxycimigenol 3-O-L-arabinopyranoside
【００２２】
【化２】
2005239551.tif 000003
【実施例２】
【００２３】
（錠剤、カプセル剤）
化合物ＣＲ−２                  １０．０ｇ
乳糖                            ７５．０g
ステアリン酸マグネシウム        １５．０g
合  計                        １００．０g
上記の各重量部を均一に混合し、常法に従って錠剤、カプセル剤とした。
【実施例３】
【００２４】
（錠剤、カプセル剤）
シクロアルタン型トリテルペンサポニン高含有
シミシフーガエキス              １０．０g
乳糖                            ７５．０g
ステアリン酸マグネシウム        １５．０g
合  計                        １００．０g
上記の各重量部を均一に混合し、常法に従って錠剤、カプセル剤とした。
【実施例４】
【００２５】
（散剤、顆粒剤）
化合物ＣＲ−２                  ２０．０g
澱粉                            ３０．０g
乳糖                            ５０．０g
合  計                        １００．０g
上記の各重量部を均一に混合し、常法に従って散剤、顆粒剤とした。
【実施例５】
【００２６】
（散剤、顆粒剤）
シクロアルタン型トリテルペンサポニン高含有
シミシフーガエキス              ２０．０g
澱粉                            ３０．０g
乳糖                            ５０．０g
合  計                        １００．０g
上記の各重量部を均一に混合し、常法に従って散剤、顆粒剤とした。
【実施例６】
【００２７】
（飴）
ショ糖                          ２０．０g
水飴（75％固形分）              ７０．０g
水                                ９．５g
着色料                            ０．４５g
香  料                            ０．０４５g
化合物ＣＲＷ−６                  ０．００５g  
合  計                        １００．０g
上記の各重量部の各成分を用い、常法に従って飴とした。
【実施例７】
【００２８】
（飴）
ショ糖                        ２０．０g
水飴（75％固形分）            ７０．０g
水                              ９．５g
着色料                          ０．４５g
香  料                          ０．０４５g
シクロアルタン型トリテルペンサポニン高含有
シミシフーガエキス              ０．００５g  
合  計                      １００．０g
上記の各重量部の各成分を用い、常法に従って飴とした。
【実施例８】
【００２９】
（ジュース）
濃縮ミカン果汁                １５．０g
果  糖                          ５．０g
クエン酸                        ０．２g
香  料                          ０．１g
色  素                          ０．１５g
アスコルビン酸ナトリウム        ０．０４８g
化合物ＣＲＷ−７                ０．００２g
水                            ７９．５g
合  計                      １００．０g
上記の各重量部の各成分を用い、常法に従ってジュースとした。
【実施例９】
【００３０】
（クッキー）
薄力粉                       ３２．０g
全  卵                       １６．０g
バター                       １６．０g
砂  糖                       ２５．０g
水                         １０．８g
ベーキングパウダー             ０．１９８g
化合物ＣＲＷ−７               ０．００２g  
合  計                    １００．０g
上記の各重量部の各成分を用い、常法に従ってクッキーとした。
【実施例１０】
【００３１】
（クッキー）
薄力粉                       ３２．０g
全  卵                       １６．０g
バター                       １６．０g
砂  糖                       ２５．０g
水                         １０．８g
ベーキングパウダー             ０．１９８g
シクロアルタン型トリテルペンサポニン高含有
シミシフーガエキス             ０．００２g  
合  計                      １００．０g
上記の各重量部の各成分を用い、常法に従ってクッキーとした。
【実施例１１】
【００３２】
（シミシフーガエキスの血圧降下作用）
38週齢の雄性自然発症高血圧ラット（SHR）を用いて検討した。6匹のSHRを1週間予備飼育した後、シミシフーガエキスを1g/kgの用量で経口投与した。エキス投与前から投与2時間後まで経時的に収縮期血圧（最高血圧）を測定したところ、投与前に229.8±3.8mmHgであった血圧が、投与2時間後には194.0±8.1mmHgまで有意（p<0.01）に低下した。
【実施例１２】
【００３３】
（シミシフーガエキスのアドレナリンβ１受容体拮抗作用）
７週齢の雄性ICR系マウスを用いて検討した。一群3匹のマウスに、蒸留水（対照剤）または1g/kgのシミシフーガエキスを経口投与し、80mg/kgのフェントバルビタールを腹腔内投与して麻酔した。さらに0.01mg/kgのイソプロテレノールを静脈内投与し、投与前後の心拍数を測定して比較した。水を与えた対照マウスではイソプロテレノールの投与により心拍数が150±5.8回／分と増加したのに対し、シミシフーガエキスを投与したマウスでは106.7±6.7回／分の増加に止まった。この結果より、シミシフーガエキスがアドレナリンβ１受容体の阻害作用を有することが確認された。
【実施例１３】
【００３４】
（シクロアルタン型トリテルペンサポニンのアドレナリンβ１受容体拮抗作用）
前述の１０種類のシクロアルタン型トリテルペンサポニンについて、アドレナリンβ１受容体の阻害作用を評価した。4週齢の雌性Hartley系モルモットより心臓を摘出し、心房標本を調製してマグヌス測定を行った。まず心房標本を緩衝液で満たしたチャンバーにつるし、アドレナリンβ１作動薬であるイソプロテレノールを最終濃度10-10から10-6Mになるよう、濃度を上げながら順次に添加し、陽性変力作用を測定した。次いで同様な測定系に、最終濃度1mg/mlのシミシフーガエキス、もしくは0.1mg/mlのシクロアルタン型トリテルペンサポニンもしくは陽性対照薬のプロプラノール（10-6M）を添加した条件で陽性変力作用を調べ、これらの化合物を添加しなかった最初の条件と比較して、陽性変力作用の増加がどの程度抑制されたかを以てアドレナリンβ１受容体活性阻害率とした。その結果、図１に示した通りシミシフーガのエキスとその1/10濃度のシクロアルタン型トリテルペンサポニン（CRW-1〜8、CR-2、CR-5）は、10〜70％のアドレナリンβ１受容体阻害率を示した。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】実施例１３において、１０種類のシクロアルタン型トリテルペンサポニンについて、アドレナリンβ１受容体の阻害作用を評価を示す図である。
【図１】
2005239551.tif 000004