(57)【要約】【課題】  ４種類のデオキシヌクレオシドを単離することなく、４種類が混合した状態で４種類のデオキシヌクレオシド（デオキシアデノシン、デオキシシチジン、デオキシグアノシン、およびチミジン）のそれぞれの塩基部および糖部水酸基へ、選択的に必要な保護基を導入し、ＤＮＡ合成試薬前駆体を得る方法の提供。【解決手段】  デオキシアデノシン、デオキシシチジン、デオキシグアノシンおよびチミジンの４種類のデオキシヌクレオシドの混合物中の各々のデオキシヌクレオシドの塩基部に、４種類のデオキシヌクレオシドが混合した状態で選択的に保護基を導入することを含む、塩基部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを製造する方法および該方法により製造したチミジンを除いたヌクレオシド塩基部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを混合した状態で、糖部５’位水酸基へジメトキシトリチル基（または、モノメトキシトリチル基または、トリチル基）を導入する、塩基部および糖部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを製造する方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
デオキシアデノシン、デオキシシチジン、デオキシグアノシンおよびチミジンの４種類のデオキシヌクレオシドの混合物中のチミジンを除くデオキシヌクレオシドの塩基部に、４種類のデオキシヌクレオシドが混合した状態で選択的にＤＮＡ合成に必要な保護基を導入することを含む、チミジンを除いたヌクレオシドの塩基部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを製造する方法。
【請求項２】
デオキシシチジンに選択的にアシル基を導入する工程ならびにデオキシアデノシンおよびデオキシグアノシンに選択的にＮ,Ｎ-ジアルキルホルムアミジン基を導入する工程を含む、請求項１に記載のチミジンを除いたヌクレオシドの塩基部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを製造する方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の方法により製造したチミジンを除いたヌクレオシド塩基部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを混合した状態で、糖部５’位水酸基へトリメトキシトリチル基、ジメトキシトリチル基、モノメトキシトリチル基およびトリチル基からなる群から選択される基を導入する、塩基部および糖部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを製造する方法。
【請求項４】
請求項３に記載の方法により塩基部および糖部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシド混合物をクロマトグラフィーにより分離することを含む、塩基部および糖部に保護基が導入されたデオキシヌクレオシドを製造する方法。
【請求項５】
塩基部および糖部に保護基が導入されたデオキシヌクレオシドがＤＮＡ合成試薬前駆体である、請求項１から４のいずれか１項に記載の塩基部および糖部に保護基が導入されたデオキシヌクレオシドを製造する方法。
【請求項６】
魚類の白子等の海洋産業廃棄物から得られる核酸粗分解物を原料とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の塩基部および糖部に保護基が導入されたデオキシヌクレオシドを製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は核酸合成化学における、オリゴデオキシヌクレオチド合成、またはＤＮＡ合成に必要な試薬に関し、具体的には混合状態のヌクレオシドへ選択的に保護基を導入し、ＤＮＡ合成試薬前駆体（フォスフォロアミダイト試薬、およびＨ-フォスフォネート試薬の前駆体）を合成する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
オリゴデオキシヌクレオチド、またはＤＮＡの化学合成は、主にフォスフォロアミダイト法（特許文献１：特開平１-３０１６９１）を用いて核酸自動合成機により行われている。またＨ-フォスフォネート法（Nucleic Acids Research, 1986, Vol.14, No.13, 5399-5407）による合成も知られており、現在ではこの両方の合成法に対応した合成試薬が一般的に市販されている。これらの２つのＤＮＡ化学合成法では、いずれにおいても、ＤＮＡを構成する４種類のヌクレオシドについて各々のＤＮＡ合成試薬が必要となる。従来は、各々のＤＮＡ合成試薬を、原料となるヌクレオシドから別々に合成し、ＤＮＡ化学合成に用いてきた。各々のＤＮＡ合成試薬はヌクレオシドの核酸塩基部に必要に応じて保護基を導入した後、糖部５’位水酸基をジメトキシトリチル化、３’位水酸基をフォスフォロアミダイト化、またはＨ-フォスフォネート化することで得られる。従来のＤＮＡ合成試薬は核酸塩基部の保護基として、デオキシアデノシンではベンゾイル基、アセチル基、フェノキシアセチル基、イソブチリル基、デオキシグアノシンではイソブチリル基、イソプロピルフェノキシアセチル基、アセチル基、デオキシシチジンでは、アセチル基、ベンゾイル基、イソブチリル基などのアシル基系のものが良く利用されている。デオキシチミジンでは塩基部の保護基を必要としない。これらの保護基を導入したヌクレオシドは通常、ヌクレオシドの糖部水酸基に一度トリメチルシリル基などの一時的な保護基を導入した後、塩基部にアシル基を導入し、糖部水酸基保護基を除去するという工程により合成される。一方、プリンヌクレオシドではＮ,Ｎ-ジアルキルホルムアミジン基を用いたＤＮＡ合成も報告されている（Nucleic Acids Research, 1983, Vol.11, No.22, 8031-8036, Tetrahedron Letters, 1983, Vol.24, No.29, 2953-2956, Journal of the American Chemical Society, 1986, Vol.108, No.8, 2040-2048, Tetrahedron Letters, 1990, Vol.31, No.50, 7269-7272）。デオキシアデノシンではアシル基の導入によりグリコシド結合の酸性条件下での安定性が低下するため、ＤＮＡ合成の問題点とされてきた。この問題の解決法としてＮ,Ｎ-ジアルキルホルムアミジン基が開発された。
【０００３】
これらのＤＮＡ合成試薬の原料となる４種類のヌクレオシドは、魚類白子などの天然原料から単離精製されている。そして、この各々のヌクレオシドについて塩基部への保護基の導入、糖部５’位水酸基のジメトキシトリチル化後、さらに３’位水酸基のフォスフォロアミダイト化、またはＨ-フォスフォネート化によりＤＮＡ合成試薬を得ていた。これらの各段階においては分離精製操作が必要なため、４種類のＤＮＡ合成試薬全てを得るには多大の労力とコストがかかっていた。
【０００４】
４種類のヌクレオシドを単離精製する方法は種々存在するが、簡便な方法として、例えば、魚類の白子からデオキシヌクレオシドを製造する方法が報告されていた（ＷＯ９９／４９０７４）。該方法においては、魚類の白子をアルカリで処理して、ＤＮＡを適当な大きさのポリデオキシヌクレオシドに加水分解するとともに二本鎖から一本鎖に変換し、さらにヌクレアーゼＰ１と酸性ホスファターゼを作用させることによりデオキシヌクレオシドの混合物を得て、得られた混合物から各デオキシヌクレオシドをクロマトグラフィーにより分離・取得するという方法であった。
【特許文献１】特開平１-３０１６９１
【特許文献２】WO99/49074号公報
【非特許文献１】Nucleic Acids Research, 1986, Vol.14, No.13, 5399-5407
【非特許文献２】Nucleic Acids Research, 1983, Vol.11, No.22, 8031-8036
【非特許文献３】Tetrahedron Letters, 1983, Vol.24, No.29, 2953-2956
【非特許文献４】Journal of the American Chemical Society, 1986, Vol.108, No.8, 2040-2048
【非特許文献５】Tetrahedron Letters, 1990, Vol.31, No.50, 7269-7272
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、４種類のデオキシヌクレオシドを単離することなく、４種類が混合した状態で４種類のデオキシヌクレオシド（デオキシアデノシン、デオキシシチジン、デオキシグアノシンおよびチミジン）のそれぞれの塩基部へ選択的に、必要な保護基を導入し、さらに糖部５’位水酸基のジメトキシトリチル化を行った後に、ＤＮＡ合成試薬前駆体を単離精製する方法を提供することを目的とする。導入する保護基はオリゴデオキシヌクレオチド（ＤＮＡ）合成に適用可能なものとし、更にＤＮＡ合成後に常法により除去できるものとする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は日本国内、特に北海道で豊富に確保できるサケの白子から得られるデオキシヌクレオシドを原料とし、安価なＤＮＡ合成試薬前駆体の供給を目指す。
【０００７】
上述のように、各々のＤＮＡ合成試薬はデオキシヌクレオシド塩基部に必要に応じて保護基を導入した後、糖部５’位水酸基をジメトキシトリチル化し、ＤＮＡ合成試薬前駆体を得て、さらに３’位水酸基をフォスフォロアミダイト化、またはＨ-フォスフォネート化することにより得られる。本発明者等は、海洋産業廃棄物である魚類白子等から得ることができる４種類のデオキシヌクレオシド混合物から、それぞれのヌクレオシド合成中間体を単離精製することなく、混合状態のままでの選択的な保護基の導入技術を駆使し、同時に４種類のＤＮＡ合成試薬前駆体を得る方法について鋭意検討を行った。
【０００８】
本発明者等は、サケ白子より得られるＤＮＡ分解物、すなわち４種のデオキシヌクレオシドの混合物を原料とし、それぞれを単離精製することなく混合状態において選択的に必要な保護基を導入し、糖部５’位水酸基をジメトキシトリチル化後、各々のヌクレオシド保護体を単離することにより、デオキシヌクレオシドの分離精製に懸かるコスト、その後の各工程に必要なコストの削減を可能とし、安価なＤＮＡ合成試薬前駆体の供給が可能となることを見出した。
【０００９】
本発明において、原料となるデオキシヌクレオシド粗精製物は魚類などの白子から得ることができる（ＷＯ９９／４９０７４）。上記製造法は、先ず白子をアルカリで処理後、核酸分解酵素であるヌクレアーゼ、およびホスファターゼで処理してデオキシヌクレオシドへと変換し、これをクロマトグラフィーにより分離精製するものである。本ＤＮＡ合成試薬前駆体合成法では、酵素処理後の各デオキシヌクレオシドを分離精製する必要はなく、混合状態のデオキシヌクレオシドを原料とするものである。
【００１０】
すなわち、本発明は以下の通りである。
[１]  デオキシアデノシン、デオキシシチジン、デオキシグアノシンおよびチミジンの４種類のデオキシヌクレオシドの混合物中のチミジンを除く各々のデオキシヌクレオシドの塩基部に、４種類のデオキシヌクレオシドが混合した状態で選択的にＤＮＡ合成に必要な保護基を導入することを含む、チミジンを除いたヌクレオシドの塩基部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを製造する方法、
[２]  デオキシシチジンに選択的にアシル基を導入する工程ならびにデオキシアデノシンおよびデオキシグアノシンに選択的にＮ,Ｎ-ジアルキルホルムアミジン基を導入する工程を含む、[１]の塩基部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを製造する方法、
[３]  [１]または[２]の方法により製造したチミジン以外の塩基部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを混合した状態で、糖部５’位水酸基へトリメトキシトリチル基、ジメトキシトリチル基、モノメトキシトリチル基およびトリチル基からなる群から選択される基を導入する、塩基部および糖部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシドを製造する方法、
[４]  [３]の方法により塩基部および糖部に保護基が導入された４種類のデオキシヌクレオシド混合物をクロマトグラフィーにより分離することを含む、塩基部および糖部に保護基が導入されたデオキシヌクレオシドを製造する方法、
[５]  塩基部および糖部に保護基が導入されたデオキシヌクレオシドがＤＮＡ合成試薬（フォスフォロアミダイト試薬、およびＨ-フォスフォネート試薬）前駆体である、[１]から[４]のいずれかの塩基部および糖部に保護基が導入されたデオキシヌクレオシドを製造する方法、ならびに
[６]  魚類の白子等の海洋産業廃棄物から得られる核酸粗分解物を原料とする、[１]〜[５]のいずれかの塩基部および糖部に保護基が導入されたデオキシヌクレオシドを製造する方法。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の方法によれば、４種類のデオキシヌクレオシドを分離精製することなく、４種類が混合した状態で、デオキシヌクレオシドのＤＮＡ合成試薬前駆体を迅速にかつ低コストで一度に得ることができる。本発明の方法で得られたＤＮＡ合成試薬前駆体を用いることにより、より低コストでのＤＮＡ合成試薬（フォスフォロアミダイト試薬、およびＨ-フォスフォネート試薬）の供給が可能となり、ＤＮＡの化学合成にかかるコストを低減することが可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明の保護基が導入されたデオキシヌクレオシドの由来は限定されず、４種類のデオキシヌクレオシドが混合状態で含まれているものならば本発明の方法に用いることができる。デオキシヌクレオシドの混合物は、例えば魚類の精巣、ビール酵母等のＤＮＡを含む天然物から得ることができる。魚類の精巣としては、例えばサケの白子が挙げられる。魚類の白子は水産加工の副産物（海洋産業廃棄物）として、安価に大量に入手することができる。魚の種類は限定されないが、ます、さけ、にしん、たら等が挙げられる。白子は、生のもの、冷凍したもの、乾燥したものいずれも用いることができる。
【００１３】
本発明のデオキシヌクレオシドは、デオキシアデノシン、デオキシグアノシン、デオキシシチジン、チミジンの４種類をいい、保護基とはチミジンを除いた各デオキシヌクレオシドの塩基部のアミノ基を保護するための保護基、および／または糖部５’位の水酸基を保護するための保護基をいう。
【００１４】
本発明の保護基が導入されたデオキシヌクレオシドを製造するためには、まず魚類の精巣から核酸粗分解物を得る。核酸粗分解物とは、ＤＮＡのフォスフォジエステル結合が切断されデオキシモノヌクレオシドを多く含む核酸調製物をいう。核酸粗分解物を得る方法は、限定されないが、例えば動物の精巣を水酸化ナトリウム、アンモニア等のアルカリ試薬で処理し、さらにヌクレアーゼ等のＤＮＡ分解酵素、フォスファターゼ等のリン酸化合物を加水分解する酵素で処理すればよい。このような方法として、例えばＷＯ９９／４９０７４号公報に記載の方法が挙げられる。例えば、さけの白子10kgから約350〜400ｇのデオキシヌクレオシド（ｄＡ:約110〜130g，ｄＣ:約60〜90g，ｄＧ:約60〜100g，Ｔ:約80〜100g）が得られる。
【００１５】
このようにして、得られた核酸粗分解物中には、４種類のデオキシヌクレオシドが混合状態で含まれている。本発明の方法においては、４種類のデオキシヌクレオシドが混合した状態のまま、各ヌクレオシドの塩基部および糖部に保護基を導入することができる。
【００１６】
保護基には、上述のように塩基部のアミノ基の保護基と糖部の５’位の水酸基の保護基が含まれる。塩基部アミノ基の保護基としては、デオキシシチジンに対しては、アシル基が用いられる。アシル基は、アシル化剤として酸無水物が使用できるものであれば特に限定されず、具体的には、アセチル基、フェノキシアセチル基、ベンゾイル基、プロピオニル基、イソブチリル基などがある。デオキシアデノシンおよびデオキシグアノシンに対してはＮ,Ｎ-ジアルキルホルムアミジン基が用いられる。Ｎ,Ｎ-ジアルキルホルムアミジン基としては、Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジエチルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジブチルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジメチルアセトアミジン基、Ｎ-メチルピロリジン基などがある。糖部５’位水酸基の保護基としては、ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）、モノメトキシトリチル（ＭＭＴｒ）、トリメトキシトリチル（ＴＭＴｒ）、トリチル（Ｔｒ）などのトリチル基が挙げられる。
【００１７】
デオキシヌクレオシドの塩基部の保護は例えば以下のようにして行うことができる。
上記の核酸粗分解物であって、４種類のデオキシヌクレオシドが混合状態で含まれるもの（図１の最上部の「４種類のヌクレオシド混合状態」で示される混合物）を充分に乾燥させた後、無水アセトニトリルを添加して縣濁液とする。この縣濁液に無水酢酸を添加し、室温〜５０℃で１〜２４時間攪拌することにより選択的にデオキシシチジンに対してアセチル基を導入することができる（図１の「ｄＣ選択的アシル化」で示される部分）。フェノキシアセチル基、ベンゾイル基、プロピオニル基、イソブチリル基を導入する場合には無水酢酸の替わりにそれぞれに対応する酸無水物を添加すればよい（図１の「ｄＣ選択的アシル化」で示される部分においてのＲ１）。薄層クロマトグラフィーにて反応の完結を確認した後、反応液を室温に戻し、１０％ピリジンを含むメタノール溶液を添加して過剰の無水酢酸と反応させる。次いで、溶媒をアスピレーター留去等により除去し、さらに混合物を減圧下乾燥させる。得られた混合物に無水メタノールを添加して縣濁液とし、ここへＮ,Ｎ-ジエチルホルムアミドジメチルアセタールを添加して、室温で１〜２４時間攪拌することによりデオキシアデノシンおよびデオキシグアノシンに対してＮ,Ｎ-ジエチルホルムアミジン基を導入することができる（図１の「ｄＡ，ｄＧ選択的ジアルキルホルムアミジン化」で示される部分）。Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジブチルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジメチルアセトアミジン基、Ｎ-メチルピロリジン基を導入する場合には、Ｎ,Ｎ-ジエチルホルムアミドジメチルアセタールの替わりに、各々に対応するＮ,Ｎ-ジアルキルホルムアミドジメチルアセタール、またはＮ,Ｎ-ジアルキルホルムアミドジエチルアセタールを添加すればよい（図１の「ｄＡ, ｄＧ選択的ジアルキルホルムアミジン化」で示される部分においてのＲ２）。但し、保護基を導入した４種類のデオキシヌクレオシドをクロマトグラフィーで分離する際の分離の精度を考慮するとＮ,Ｎ-ジエチルホルムアミジン基を導入するのが望ましい。
【００１８】
次いで、溶媒をアスピレーター留去等により除去し、減圧下乾燥、またはピリジンとの共沸により乾燥する。得られたデオキシヌクレオシド混合物をピリジンに溶解し、塩化ジメトキシトリチルを添加し、室温で１〜２４時間攪拌することにより糖部５’位水酸基をジメトキシトリチル化する。反応液にエタノールを少量加えて過剰の試薬を分解した後、反応液にクロロホルムを加えて、分液操作を行う。ＤＮＡ合成試薬前駆体としては、糖部５’位水酸基の保護基はジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）基が望ましいが、トリメトキシトリチル（ＴＭＴｒ）体、モノメトキシトリチル（ＭＭＴｒ）体、トリチル（Ｔｒ）体を同様な方法により合成することもできる。この場合、塩化ジメトキシトリチルのかわりにそれぞれに対応する塩化化合物を用いる。
【００１９】
このようにして、ＤＮＡ合成試薬前駆体が得られる。本発明において、ＤＮＡ合成試薬前駆体は、塩基部のアミノ基および糖部５’位の水酸基が保護されたデオキシヌクレオシドをいう。
【００２０】
次いで、４種類のＤＮＡ合成試薬前駆体の混合物から各デオキシヌクレオシドのＤＮＡ合成試薬前駆体をクロマトグラフィーにより分離精製する。この際、糖部の水酸基がジメトキシトリチル化されているため、４種類のＤＮＡ合成試薬前駆体は脂溶性となり、一般的なシリカゲルカラムクラマトグラフィーにより容易に分離することが可能である。
【００２１】
このようにして分離精製したＤＮＡ合成試薬前駆体は、常法に従ってフォスフォロアミダイト化することでフォスフォロアミダイト試薬，またはＨ-フォスフォネート化することでＨ-フォスフォネート試薬へと変換可能である。いずれのＤＮＡ合成試薬も現在、核酸自動合成機で広く一般に用いられている。
【００２２】
本発明を以下の実施例によって具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
【実施例１】
【００２３】
アルゴン雰囲気下、４種類のデオキシヌクレオシド（デオキシアデノシン、デオキシシチジン、デオキシグアノシン、およびチミジン）混合物（市販品を混合したもの、各０．２５ｍｍｏｌ）を無水アセトニトリル（１０ｍｌ）に縣濁して５０℃に加熱し、無水酢酸（０．５ｍｌ，５ｍｍｏｌ）を加えて１時間撹拌することによりデオキシシチジン（ｄＣ）選択的にアセチル基を導入した。薄層クロマトグラフィーにより反応が終了したことを確認した後に加熱を止め、１０％のピリジンを含むメタノール溶液（１０ｍｌ）を加えて３０分撹拌した。この反応液の溶媒をアスピレーター留去した後、真空ポンプで減圧乾燥した。
【００２４】
アルゴン雰囲気下、乾燥した混合物を無水メタノール（１０ｍｌ）に縣濁し、Ｎ,Ｎ-ジエチルホルムアミドジメチルアセタール（０．４３ｍｌ，２ｍｍｏｌ）を加えて室温で１時間撹拌することにより、デオキシアデノシン（ｄＡ）およびデオキシグアノシン（ｄＧ）選択的にＮ,Ｎ-ジエチルホルムアミジン基を導入した。この反応液の溶媒を再度アスピレーター留去した後、真空ポンプで減圧乾燥した。
【００２５】
アルゴン雰囲気下、混合物をピリジン（１０ｍｌ）に溶解し、塩化ジメトキシトリチル（６８０ｍｇ，２ｍｍｏｌ）を加えて室温で１時間撹拌することにより、４種のヌクレオシド各々の糖部５’位水酸基にジメトキシトリチル基を導入した。薄層クロマトグラフィーにより反応が終了したことを確認した後に、エタノール（０．５ｍｌ）を加えて過剰の試薬を分解した。この反応液にクロロホルムを加えて、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、および飽和食塩水で洗浄した。有機層をアスピレーターにより濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム−メタノール）により分離精製し、５’-Ｏ-ジメトキシトリチルチミジン（１１５ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）、５’-Ｏ-ジメトキシトリチル-Ｎ６-Ｎ,Ｎ-ジエチルホルムアミジノアデノシン（８２ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、５’-Ｏ-ジメトキシトリチル-Ｎ４-アセチルシチジン（９１ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）、および５’-Ｏ-ジメトキシトリチル-Ｎ２-Ｎ,Ｎ-ジエチルホルムアミジノグアノシン（１０１ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）をそれぞれ得た。
【００２６】
デオキシシチジンに導入できるアシル基は、アシル化剤としての酸無水物が入手可能なものであれば特に制限ざれず、具体的には、アセチル基、フェノキシアセチル基、ベンゾイル基、プロピオニル基、イソブチリル基などがある。アデノシン、グアノシンに導入するＮ,Ｎ-ジアルキルホルムアミジン基としては、Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジエチルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-ジブチルホルムアミジン基、Ｎ,Ｎ-メチルアセトアミジン基、Ｎ-メチルピロリジン基などがある。
【産業上の利用可能性】
【００２７】
デオキシヌクレオシドのフォスフォロアミダイト試薬、およびＨ-フォスフォネート試薬はオリゴデオキシヌクレオチド、またはＤＮＡの化学合成に用いられる。本発明の方法によれば、オリゴデオキシヌクレオチド、またはＤＮＡの化学合成の原料となる４種類のデオキシヌクレオシドフォスフォロアミダイト体、およびＨ-フォスフォネート体が迅速に低コストで製造するとこができ、その結果としてオリゴデオキシヌクレオチド、またはＤＮＡの合成に費やす費用を低減することが可能である。特に、本発明の方法においては、海洋産業廃棄物として大量に得られる魚類の白子等を原料として用いることができ、水産業上も極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】デオキシヌクレオシド混合状態からのＤＮＡ合成試薬前駆体の製造の工程を示す図である。
【図１】
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