(57)【要約】【課題】  足場材の内部にまで骨髄細胞を浸透させることができる生体組織補填体製造装置を提供することを目的としている。【解決手段】  ブロック状または顆粒状のリン酸カルシウム多孔体２、および細胞懸濁液７を収容する容器１３と、前記容器１３内に収容された前記細胞懸濁液７に、前記容器１３の高さ方向に旋回する旋回流Ｃ１を生じさせる攪拌手段１１，１２とを備える生体組織補填体製造装置１０を提供する。【選択図】      図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ブロック状または顆粒状のリン酸カルシウム多孔体、および細胞懸濁液を収容する容器と、
前記容器内に収容された前記細胞懸濁液に、前記容器の高さ方向に旋回する旋回流を生じさせる攪拌手段とを備える生体組織補填体製造装置。
【請求項２】
前記攪拌手段が、マグネチックスターラと、該マグネチックスターラにより回転させられるプロペラ型の攪拌子とを有する請求項１に記載の生体組織補填体製造装置。
【請求項３】
前記撹拌子の鉛直上方に、円筒状の内面を有する同径部と、該同径部の下部に下方に向かって径寸法が漸次大きくなるテーパ面を有する拡径部とを備える中空チューブが配置されている請求項２に記載の生体組織補填体製造装置。
【請求項４】
前記中空チューブの外側で、かつ前記同径部と前記拡径部との境目に、前記リン酸カルシウム多孔体が上面に載置されるメッシュ体が配置されている請求項３に記載の生体組織補填体製造装置。
【請求項５】
前記撹拌子の直径と、前記拡径部の最大径とが、略同じになるように設定されている請求項３または請求項４に記載の生体組織補填体製造装置。
【請求項６】
前記攪拌手段が、駆動部により駆動される回転軸と、該回転軸の外表面に螺旋状に設けられたスクリュ部とを有する請求項１に記載の生体組織補填体製造装置。
【請求項７】
前記スクリュ部の半径方向外方に、該スクリュ部を取り囲むガード部が設けられている請求項６に記載の生体組織補填体製造装置。
【請求項８】
前記攪拌手段が、駆動部により駆動される回転軸と、該回転軸の下端に設けられた円筒回転子とを有する請求項１に記載の生体組織補填体製造装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、生体組織補填体製造装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、骨腫瘍摘出や外傷等により生じた骨の欠損部に、骨補填材を補填することにより、骨を再生させて欠損部を修復することが可能になってきている。骨補填材としては、ハイドロキシアパタイト（ＨＡＰ）やリン酸三カルシウム（ＴＣＰ）が知られているが、体内に異物を残さないとする考え方から、例えば、β−ＴＣＰのようなリン酸カルシウム多孔体からなる足場材が使用される。このような足場材を骨欠損部の骨細胞に接触させておくと、破骨細胞がβ−ＴＣＰを吸収し、骨芽細胞が新しい骨を形成する、いわゆるリモデリングが行われる。すなわち、骨欠損部に補填された骨補填材は、経時的に自家骨に置換されていくことになる（例えば、非特許文献１参照）。
【０００３】
骨補填材の形態としては、一般に、立方体ブロック状、顆粒状等の形態が知られており、骨欠損部の形態に合わせて、適宜選択されるようになっている。比較的広範囲にわたる骨欠損部の場合には、大きめの立方体ブロック状の骨補填材によって大部分の容積を埋めるとともに、それよりも小さい立方体ブロック状の骨補填材によって隙間を埋め、さらに小さな隙間には顆粒状の骨補填材を充填することが行われる。
【非特許文献１】植村他２名，「生分解性β−ＴＣＰ多孔材料を用いた骨におけるティッシュエンジニアリング−生体内で強度を増す新しい材料オスフェリオン−」，メディカル朝日，朝日新聞社，２００１年１０月１日，第３０巻，第１０号，ｐ．４６−４９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
また、骨の再生を速めるため、足場材に予め骨髄細胞が滴下あるいは塗布により播種されたものを骨欠損部に接触させたり、あるいは骨の再生をさらに速めるため、足場材に予め骨髄細胞が滴下あるいは塗布により播種されたものを所定の培地内で培養して骨髄細胞をある程度成長させた後、骨欠損部に接触させたりすることも行われている。
【０００５】
しかしながら、足場材に骨髄細胞を滴下あるいは塗布した場合、骨髄細胞が足場材の表面にしか付着せず、足場材の内部にまで骨髄細胞が浸透していないため、足場材の中心部における骨の再生がなかなか進まず、骨の再生に多大な時間がかかるといった問題点があった。
【０００６】
この発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、足場材の内部にまで骨髄細胞を浸透させることができる生体組織補填体製造装置を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記目的を達成するために、この発明は、以下の手段を提供する。
この発明は、ブロック状または顆粒状のリン酸カルシウム多孔体、および細胞懸濁液を収容する容器と、前記容器内に収容された前記細胞懸濁液に、前記容器の高さ方向に旋回する旋回流を生じさせる攪拌手段とを備える生体組織補填体製造装置を提供する。
この発明によれば、撹拌手段により容器内に投入された細胞懸濁液に、容器の高さ方向に旋回する旋回流が与えられることとなる。このとき、細胞懸濁液とリン酸カルシウム多孔体との比重が異なるために、両者間に相対速度が生じ、この相対速度によって、細胞懸濁液内の骨髄細胞とリン酸カルシウム多孔体とが十分に接触させられることになる。
【０００８】
上記発明においては、前記攪拌手段が、マグネチックスターラと、該マグネチックスターラにより回転させられるプロペラ型の攪拌子とを有することが好ましい。
この発明によれば、比較的安価なマグネチックスターラが作動させられることにより、容器内の底部に配置されたプロペラ型の撹拌子が回転し、容器の中心部に撹拌子から液面に向かって上昇流が形成されるとともに、容器の周縁部に液面から容器の内表面に沿って下降流が形成され、容器内に投入された細胞懸濁液に、容器の高さ方向に旋回する旋回流が与えられることとなる。
【０００９】
また、上記発明においては、前記撹拌子の鉛直上方に、円筒状の内面を有する同径部と、該同径部の下部に下方に向かって径寸法が漸次大きくなるテーパ面を有する拡径部とを備える中空チューブが配置されていることが好ましい。
この発明によれば、撹拌子から出た上向きの流れ（上昇流）が、径寸法が上方に向かって漸次小さくなるテーパ面の内面に沿って流れることによりその流速が速められることとなる。
【００１０】
さらに、上記発明においては、前記中空チューブの外側で、かつ前記同径部と前記拡径部との境目に、前記リン酸カルシウム多孔体が上面に載置されるメッシュ体が配置されていることが好ましい。
この発明によれば、メッシュ体の上面に載置されるとともにその動きが制限されたリン酸カルシウム多孔体に、流速の速められた下降流が衝突することとなり、両者間の相対速度がさらに大きくなる。
【００１１】
さらにまた、上記発明においては、前記撹拌子の直径と、前記拡径部の最大径とが、略同じになるように設定されていることが好ましい。
この発明によれば、攪拌子を出た上向きの流れ（上昇流）のすべてが最も効率よくテーパ面の内面に導かれるようになっており、その流速が最も効率よく速められることとなる。ただし、プロペラ形状を変えることにより、逆の旋回流を形成させても問題はない。
【００１２】
上記発明においては、前記攪拌手段が、駆動部により駆動される回転軸と、該回転軸の外表面に螺旋状に設けられたスクリュ部とを有することが好ましい。
この発明によれば、駆動部により回転軸が作動させられることにより、容器内に配置された螺旋状のスクリュ部が回転し、容器の中心部に液面から容器の底面に向かって下降流（あるいは容器の中心部に容器の底面から液面に向かって上昇流）が形成されるとともに、容器の周縁部に容器の底面から容器の内表面に沿って上昇流（あるいは容器の周縁部に液面から容器の内表面に沿って下降流）が形成され、容器内に投入された細胞懸濁液に、容器の高さ方向に旋回する旋回流が与えられることとなる。
【００１３】
また、上記発明においては、前記スクリュ部の半径方向外方に、該スクリュ部を取り囲むガード部が設けられていることが好ましい。
この発明によれば、ガード部によりスクリュ部とリン酸カルシウム多孔体との接触が防止されることとなる。
【００１４】
上記発明においては、前記攪拌手段が、駆動部により駆動される回転軸と、該回転軸の下端に設けられた円筒回転子とを有することが好ましい。
この発明によれば、駆動部により回転軸が作動させられることにより、容器内に配置された円筒回転子が回転し、細胞懸濁液が円筒回転子の外周面を内周とするドーナツ状の層となって上下に複数段に重なり合った状態で容器内を周回しながら流れる層状の安定な流れ（層流）が形成され、容器内に投入された細胞懸濁液に、容器の高さ方向に旋回する旋回流（オイラー渦）が与えられることとなる。
【発明の効果】
【００１５】
この発明によれば、撹拌手段によって作り出された旋回流により、細胞懸濁液とリン酸カルシウム多孔体との間に比重差による相対速度が生じ、この相対速度によって、細胞懸濁液内の骨髄細胞とリン酸カルシウム多孔体とが接触させられることになるので、骨髄細胞をリン酸カルシウム多孔体の内部にまで浸透させることができて、リン酸カルシウム多孔体の内部にまで骨髄細胞が浸透した生体組織補填体を製造することができるという効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下、この発明の第１実施形態に係る生体組織補填体製造装置について、図面を参照して説明する。
図１（ａ）に示すように、この実施形態に係る生体組織補填体製造装置１０は、マグネチックスターラ（攪拌手段）１１と、攪拌子（攪拌手段）１２と、容器１３と、中空チューブ１４と、メッシュ体１５とを主たる要素として構成されたものである。
マグネチックスターラ１１は、その内部でモータ（図示せず）により強力な磁石（図示せず）を回転させ、容器１３内に入れられた攪拌子１２を磁力で回転させて、容器１３内に入れられた試薬等の液体を攪拌するものである。
攪拌子１２は、磁石をテフロン（登録商標）で包み込んだ回転子あるいはスターラーバーとも呼ばれるものであり、プロペラ型（あるいは翼型）に形成されたものである。
容器１３は、円筒中空の、例えばビーカーのような形状をした器で、底部外周縁部に大きな丸み（Ｒ部）１３ａを有するものである。
【００１７】
中空チューブ１４は、下方に拡径部１４ａを有し、上方に同径部１４ｂを有する中空のダクトであり、図示しない固定手段により容器１３に対して取り外し可能に固定されている。
中空チューブ１４の下端内径Ｌ、すなわち、拡径部１４ａの最も拡がった部分の内径Ｌは、前述した攪拌子１２の直径ｄと同じかそれよりも若干大きくなるように作られており、攪拌子１２により作り出された流れがすべて拡径部１４ａ内に流入するようになっている。また、中空チューブ１４の上端は、中空チューブ１４が容器１３に固定されたときに容器１３の上端から上方に突出しないように、かつ容器１３内に入れられる液体の液面よりも上方に突出しないようになっている。
メッシュ体１５は、中空チューブ１４の同径部１４ｂの外径に相当する内径を有するとともに、容器１３の内径に相当する外径を有する平面視ドーナツ状の、例えば金属製の網（金網）であり、中空チューブ１４の拡径部１４ａと同径部１４ｂとの境目（すなわち、拡径部１４ａと同径部１４ｂとの繋ぎ目あるいは接続部）に配置されている。
【００１８】
このように構成された生体組織補填体製造装置１０を作動させると、すなわち、マグネチックスターラ１４を作動させて、容器１３内の攪拌子１２を回転させると、図１（ｂ）に示すように、容器１３内に入れられた試薬等の液体は、図中に示す矢印の方向に流動して、旋回流Ｃ１を形成するようになっている。
【００１９】
このような生体組織補填体製造装置１０を用いて、生体組織補填体１を製造する方法について以下に説明する。
まずはじめに、例えば、図１（ｃ）に示すように、メッシュ体１５の上に立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２と、細胞懸濁液７とを容器１３内に投入する。このとき、リン酸カルシウム多孔体２は、メッシュ体１５の上側、すなわち、中空チューブ１４の外表面、容器１３の内表面、およびメッシュ体１５の上面で形成された空間Ｓ１内に配置されるよう、容器１３内に投入される。
立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２は、図４に示すような工程を経て製造される。立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２の材料としては、例えば、β−ＴＣＰを用いる。リン酸カルシウム多孔体２は、例えば、図４（ａ）に示されるように、浅底の箱状容器３内に、β−ＴＣＰを所定の媒体に混合してなるスラリー４を所定の深さになるまで注入し、これを焼結することにより、図４（ｂ）に示されるように、平板状のリン酸カルシウム多孔体５を製造する。次いで、これを賽の目に切断することにより図４（ｃ）に示されるように立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２が得られる。
このようにして得られた各立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２は、平板状のリン酸カルシウム多孔体５の一部を切り出したものであり、その内部から表面に至るまでの体積の全域において均質な気孔率を有するように構成されている。
また、細胞懸濁液７は、例えば、提供者から取り出した骨髄細胞８と、所定の培養液とを混合したものである。培養液は、例えば、ＭＥＭ（Minimal Essential
Medium：最小必須培地）、抗生剤を任意の配合比率で混合したものである。
【００２０】
つぎに、図１（ｄ）に示すように、生体組織補填体製造装置１０を作動させて、上述したように細胞懸濁液７を容器１３内で矢印の方向に流動させる。すると、リン酸カルシウム多孔体２はメッシュ体１５によりその動きが制限されるため、略その場にとどまることになり、一方、細胞懸濁液７は図中矢印の方向に流動することになって、両者間に相対速度が生じ、この相対速度によって細胞懸濁液７内の骨髄細胞８とリン酸カルシウム多孔体２とが接触させられることになる。
リン酸カルシウム多孔体２は、上述したように、内部から表面に至るまで均一な気孔率を有するように形成されているので、細胞懸濁液７内に浮遊する骨髄細胞８は、リン酸カルシウム多孔体２の表面に接触するとこれに容易に付着することができる。そして、リン酸カルシウム多孔体２の表面に付着した骨髄細胞８は、リン酸カルシウム多孔体２の周囲に発生している旋回流Ｃ１によってリン酸カルシウム多孔体２の内部に浸透させられることになる。その結果、図１（ｅ）に示されるように、リン酸カルシウム多孔体（足場材）２の内部にまで骨髄細胞８が浸透した生体組織補填体１を製造することができる。
【００２１】
また、攪拌子１２の直径ｄと拡径部１４ａの底部内径Ｌとが略同じ大きさを有するように形成されていると好適である。
これにより、攪拌子１２を出た流れのすべてが最も効率よく拡径部１４ａ内に集められるようになっているとともに、同径部１４ｂを通過する際にその流速が速められることとなって、骨髄細胞８がリン酸カルシウム多孔体２のさらに奥深い内部にまで浸透させられることになる。すなわち、リン酸カルシウム多孔体（足場材）２のさらに奥深い内部にまで骨髄細胞８を浸透させることができる。
【００２２】
さらに、容器１３の底部に大きな丸み（Ｒ部）１３ａが設けられていることにより、メッシュ体１５を通過して容器１３の底部に達した細胞懸濁液７が、容器１３の底部に沿ってよどみを形成することなく円滑に攪拌子１２の方へ導かれることとなるので、細胞懸濁液７の全体を効率よく流動させることができて、細胞懸濁液７内に浮遊する骨髄細胞８をリン酸カルシウム多孔体２の表面と数多く接触させることができる。
なお、メッシュ体１５の網目の大きさは、旋回流の流れをよくするため、利用するリン酸カルシウム多孔体２の大きさよりも小さい網目であればよい。
また、プロペラ形状を変えることにより、逆の旋回流を形成させても問題はない。
【００２３】
この発明による生体組織補填体製造装置の第２実施形態について、図２を用いて説明する。
図２（ａ）に示すように、この実施形態に係る生体組織補填体製造装置２０は、攪拌機（攪拌手段）２１と、容器２２とを主たる要素として構成されたものである。
攪拌機２１は、図示しない駆動部（例えば、モータなど）により駆動される回転軸２３と、この回転軸２３の外表面に一定の幅、一定の厚み、および一定のピッチで螺旋状に設けられたスクリュ部２４と、このスクリュ部２４の外周端にスクリュ部２４の下端から所定高さ設けられたガード部２５とを有するものである。
回転軸２３は、一定の径を有する中実の軸であり、前述した駆動部により図中の矢印の方向（すなわち、図の上方から見て時計方向）に回転させられるものである。
スクリュ部２４は、回転軸２３の一端（下端）近傍から他端（上端）に向かって、容器２２の高さと略同じ距離だけ形成されている。
ガード部２５は、スクリュ部２４の一端（下端）近傍から他端（上端）に向かって、スクリュ部２４の高さの略２／３に相当する距離だけ形成されている。このガード部２５は、その一端側の１／３にメッシュ構造からなるメッシュ部２５ａを有し、その他端側の２／３に非メッシュ構造（単なる薄板構造）からなる非メッシュ部２５ｂを有している。また、メッシュ部２５ａのメッシュの大きさは、骨髄細胞８は通過することができるが、リン酸カルシウム多孔体２は通過することができないような大きさに形成されている。
容器２２は、円筒中空でかつ高さ方向全体にわたって同一の径を有する器、すなわち、平坦な底面を有するものである。
【００２４】
このように構成された生体組織補填体製造装置２０を作動させると、すなわち、駆動部を作動させることにより回転軸２３を回転させ、スクリュ部２４およびガード部２５を回転させると、図２（ｂ）に示すように、容器２２内に入れられた試薬等の液体は、図中に示す矢印の方向に流動して、旋回流Ｃ２を形成するようになっている。
【００２５】
このような生体組織補填体製造装置２０を用いて、生体組織補填体１を製造する方法について以下に説明する。
まずはじめに、例えば、図２（ｃ）に示すように、立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２と、細胞懸濁液７とを容器２２内に投入する。このとき、リン酸カルシウム多孔体２は、ガード部２５の外側、すなわち、ガード部２５の外表面、容器２２の底面、および容器２２の内表面で形成された空間Ｓ２内に配置されるよう、容器２２内に投入される。
立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２は、図４に示すような工程を経て製造される。立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２の材料としては、例えば、β−ＴＣＰを用いる。リン酸カルシウム多孔体２は、例えば、図４（ａ）に示されるように、浅底の箱状容器３内に、β−ＴＣＰを所定の媒体に混合してなるスラリー４を所定の深さになるまで注入し、これを焼結することにより、図４（ｂ）に示されるように、平板状のリン酸カルシウム多孔体５を製造する。次いで、これを賽の目に切断することにより図４（ｃ）に示されるように立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２が得られる。
このようにして得られた各立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２は、平板状のリン酸カルシウム多孔体５の一部を切り出したものであり、その内部から表面に至るまでの体積の全域において均質な気孔率を有するように構成されている。
また、細胞懸濁液７は、例えば、提供者から取り出した骨髄細胞８と、所定の培養液とを混合したものである。培養液は、例えば、ＭＥＭ（Minimal Essential
Medium：最小必須培地）、抗生剤を任意の配合比率で混合したものである。
【００２６】
つぎに、図２（ｄ）に示すように、生体組織補填体製造装置２０を作動させて、上述したように細胞懸濁液７を容器２２内で矢印の方向に流動させる。すると、リン酸カルシウム多孔体２はガード部２５のメッシュ部２５ａから半径方向外側に流れ出る細胞懸濁液７により容器２２の底部内表面に押しつけられるようになりその動きが制限されようになるため、略その場にとどまることになり、一方、細胞懸濁液７は図中矢印の方向に流動することになって、両者間に相対速度が生じ、この相対速度によって細胞懸濁液７内の骨髄細胞８とリン酸カルシウム多孔体２とが接触させられることになる。
リン酸カルシウム多孔体２は、上述したように、内部から表面に至るまで均一な気孔率を有するように形成されているので、細胞懸濁液７内に浮遊する骨髄細胞８は、リン酸カルシウム多孔体２の表面に接触するとこれに容易に付着することができる。そして、リン酸カルシウム多孔体２の表面に付着した骨髄細胞８は、リン酸カルシウム多孔体２の周囲に発生している旋回流Ｃ２によってリン酸カルシウム多孔体２の内部に浸透させられることになる。その結果、図２（ｅ）に示されるように、リン酸カルシウム多孔体（足場材）２の内部にまで骨髄細胞８が浸透した生体組織補填体１を製造することができる。
【００２７】
この発明による生体組織補填体製造装置の第３実施形態について、図３を用いて説明する。
図３（ａ）に示すように、この実施形態に係る生体組織補填体製造装置３０は、攪拌機（攪拌手段）３１と、容器３２とを主たる要素として構成されたものである。
攪拌機３１は、図示しない駆動部（例えば、モータなど）により駆動される回転軸３３と、この回転軸３３の下端面に接して設けられた円筒回転子３４とを有するものである。
回転軸３３は、一定の径を有する中実の軸であり、前述した駆動部により図中の矢印の方向（すなわち、図の上方から見て時計方向）に回転させられるものである。
円筒回転子３４は、一定の径を有する円筒中実の回転体であり、回転軸３３とともに容器３２の同心同軸上で回転させられるものである。
容器３２は、円筒中空でかつ高さ方向全体にわたって同一の径を有する器、すなわち、平坦な底面を有するものである。
【００２８】
このように構成された生体組織補填体製造装置３０を作動させると、すなわち、駆動部を作動させることにより回転軸３３を回転させるとともに、円筒回転子３４を回転させると、図３（ｂ）に示すように、容器３２内に入れられた試薬等の液体は、図中に示す矢印の方向に流動して、旋回流（テイラー渦ともいう）Ｃ３を形成するようになっている。
ここで、テイラー渦と称せられる渦流は、容器３２内で円筒回転子３４をある回転数で周方向に回転させたときに、細胞懸濁液７が円筒回転子３４の外周面を内周とするドーナツ状の層となって上下に複数段に重なり合った状態で容器３２内を周回しながら流れる層状の安定な流れ（層流）をいう。
【００２９】
このような生体組織補填体製造装置３０を用いて、生体組織補填体１を製造する方法について以下に説明する。
まずはじめに、例えば、図３（ｃ）に示すように、立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２と、細胞懸濁液７とを容器３２内に投入する。このとき、リン酸カルシウム多孔体２は、円筒回転子３４の外側、すなわち、円筒回転子３４の外表面、容器３２の底面、および容器３２の内表面で形成された空間Ｓ３内に配置されるよう、容器３２内に投入される。
立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２は、図４に示すような工程を経て製造される。立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２の材料としては、例えば、β−ＴＣＰを用いる。リン酸カルシウム多孔体２は、例えば、図４（ａ）に示されるように、浅底の箱状容器３内に、β−ＴＣＰを所定の媒体に混合してなるスラリー４を所定の深さになるまで注入し、これを焼結することにより、同図（ｂ）に示されるように、平板状のリン酸カルシウム多孔体５を製造する。次いで、これを賽の目に切断することにより同図（ｃ）に示されるように立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２が得られる。
このようにして得られた各立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２は、平板状のリン酸カルシウム多孔体５の一部を切り出したものであり、その内部から表面に至るまでの体積の全域において均質な気孔率を有するように構成されている。
また、細胞懸濁液７は、例えば、提供者から取り出した骨髄細胞８と、所定の培養液とを混合したものである。培養液は、例えば、ＭＥＭ(Minimal Essential Medium：最小必須培地)、抗生剤を任意の配合比率で混合したものである。
【００３０】
つぎに、図３（ｄ）に示すように、生体組織補填体製造装置３０を作動させて、上述したように細胞懸濁液７を容器３２内で矢印の方向に流動させる。このようにすることで、容器３２内には旋回流Ｃ３が発生するので、細胞懸濁液７およびリン酸カルシウム多孔体２は、旋回流Ｃ３によって容器３２内の同一の流路を流れるようになる。この場合において、細胞懸濁液７とリン酸カルシウム多孔体２との比重が異なるために、両者間に相対速度が生じ、この相対速度によって、細胞懸濁液７内の骨髄細胞８とリン酸カルシウム多孔体２とが接触させられることになる。
リン酸カルシウム多孔体２は、上述したように、内部から表面に至るまで均一な気孔率を有するように形成されているので、細胞懸濁液７内に浮遊する骨髄細胞８は、リン酸カルシウム多孔体２の表面に接触するとこれに容易に付着することができる。そして、リン酸カルシウム多孔体２の表面に付着した骨髄細胞８は、リン酸カルシウム多孔体２の周囲に発生している旋回流Ｃ３によってリン酸カルシウム多孔体２の内部に浸透させられることになる。その結果、図３（ｅ）に示されるように、リン酸カルシウム多孔体（足場材）２の内部にまで骨髄細胞８が浸透した生体組織補填体１を製造することができる。
【００３１】
なお、上述した実施形態では、立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２を例に挙げて説明したが、この発明はこのような立方体ブロック状のものに限定されるものではなく、これに代えて、顆粒状、あるいは他の形態のブロック状のリン酸カルシウム多孔体を容器内に収容して、骨髄細胞８を浸透させることもできる。この際、第１実施形態のところで述べたメッシュ体１５のメッシュの大きさ、および第２実施形態のところで述べたメッシュ構造のメッシュの大きさはそれぞれ、顆粒状のリン酸カルシウム多孔体の大きさよりも小さくする必要がある。
【００３２】
また、単一の大きさの立方体ブロック状のリン酸カルシウム多孔体２のみを容器に収容して骨髄細胞８を浸透させることにしたが、これに代えて、異なるサイズのリン酸カルシウム多孔体を同時に収容して骨髄細胞８を浸透させるようにすることもできる。
この際、第１実施形態のところで述べたメッシュ体１５のメッシュの大きさ、および第２実施形態のところで述べたメッシュ構造のメッシュの大きさはそれぞれ、顆粒状のリン酸カルシウム多孔体の大きさ、あるいは最も小さいリン酸カルシウム多孔体の大きさよりも小さくする必要がある。
【００３３】
さらに、リン酸カルシウム多孔体２の例としてβ−ＴＣＰを例に挙げたが、これに代えて、ＨＡＰ他のリン酸カルシウム多孔体を採用してもよい。
【００３４】
さらにまた、上述した実施形態に係る生体組織補填体１を、容器内でさらに培養して骨髄細胞８を成長させることとしてもよい。この場合には、容器内に貯留した培地内に収容し、静置あるいは還流しながら、所定の培養条件、例えば、温度３７℃±０．５℃、湿度１００％、ＣＯ２濃度５％の条件下において培養する。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】この発明に係る生体組織補填体製造装置の第１実施形態を示す図であって、（ａ）は全体斜視図、（ｂ）は側断面図、（ｃ）ないし（ｅ）は生体組織補填体の製造工程を示す説明図である。
【図２】この発明に係る生体組織補填体製造装置の第２実施形態を示す図であって、（ａ）は全体斜視図、（ｂ）は側断面図、（ｃ）ないし（ｅ）は生体組織補填体の製造工程を示す説明図である。
【図３】この発明に係る生体組織補填体製造装置の第３実施形態を示す図であって、（ａ）は全体斜視図、（ｂ）は側断面図、（ｃ）ないし（ｅ）は生体組織補填体の製造工程を示す説明図である。
【図４】生体組織補填体の製造工程の一部を示す説明図である。
【符号の説明】
【００３６】
２    リン酸カルシウム多孔体
７    細胞懸濁液
１０    生体組織補填体製造装置
１１    マグネチックスターラ（攪拌手段）
１２    撹拌子（攪拌手段）
１３    容器
１４    中空チューブ
１４ａ  拡径部
１４ｂ  同径部
１５    メッシュ体
２０    生体組織補填体製造装置
２２    容器
２３    回転軸（攪拌手段）
２４    スクリュ部
２５    ガード部
３０    生体組織補填体製造装置
３２    容器
３３    回転軸（攪拌手段）
３４    円筒回転子（攪拌手段）
Ｃ１    旋回流
Ｃ２    旋回流
Ｃ３    旋回流
【図１】
2005334225.tif 000003
【図２】
2005334225.tif 000004
【図３】
2005334225.tif 000005
【図４】
2005334225.tif 000006