(57)【要約】【課題】ホットフラッシュ等の閉経症候群を緩和する優れた機能を発揮するとともに、体に悪い副作用を与えない安全性を備えている閉経症候群緩和素材を提供すること。【解決手段】エストロゲン様作用物質とスーパーオキシドジスムターゼ様活性物質とを有効成分として含有することを特徴とする。【選択図】      図１
2005041803.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
エストロゲン様作用物質とスーパーオキシドジスムターゼ様活性物質とを有効成分として含有することを特徴とする閉経症候群緩和素材。
【請求項２】
原料としての大豆胚芽を麹菌によって発酵させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物を更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりエストロゲン様作用物質とスーパーオキシドジスムターゼ様活性物質とを含有する生成物を有効成分として含有することを特徴とする閉経症候群緩和素材。
【請求項３】
前記生成物は、少なくとも７０重量％のダイゼインを含有し、かつ、スーパーオキシドジスムターゼ様活性が５００単位／ｇ以上あることを特徴とする請求項２に記載の閉経症候群緩和素材。
【請求項４】
スーパーオキシドジスムターゼ様活性物質を更に含有していることを特徴とする請求項２または請求項３に記載の閉経症候群緩和素材。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、人間や哺乳動物の卵巣からのエストロゲンの分泌低下に伴なって女性の体に発症するホットフラッシュ（突然のほてり、発汗などの症状）等の閉経症候群の緩和に有効な機能を有する閉経症候群緩和素材に関する。
【０００２】
【従来の技術と発明が解決しようとする課題】
一般に、ホットフラッシュ等の閉経症候群は女性にとって大きな障害若しくは負担になるために、その発症の未然防止や、発症した場合の緩和が望まれている。
【０００３】
とりわけ、欧米人女性のホットフラッシュは深刻であるために、閉経症候群の緩和を目的とするホルモン補充療法（ＨＲＴ＝  Ｈｏｒｍｏｎｅ  Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ  Ｔｈｅｒａｐｙ）の利用率が日本人女性に比べてかなり高い。しかしながら、近年、このＨＲＴに対しては乳癌リスクや循環器系疾患のリスクが高まるとして問題視されるようになった。日本人女性においても食事の欧米化や社会進出などでホットフラッシュで悩む比率が増加しているともいわれている。
【０００４】
しかし、ホットフラッシュの原因には色々な説があり、はっきりとした原因はまだ分かっていない状況であり、エストロゲンの分泌低下で発生することから女性ホルモン製剤の補充によるＨＲＴに基づく治療が主流となっており、それに代る安全で、しかも効能の高い機能性素材が望まれる所であった。その機能性素材としてはエストロゲン様の作用を有する大豆イソフラボンやザクロエキスや中枢神経系に作用する漢方薬素材やブラックコホシュ等が利用されていたが、女性ホルモン製剤の効能には及んではいない。
【０００５】
本発明はこれらの点に鑑みてなされたものであり、ホットフラッシュ等の閉経症候群を緩和する優れた機能を発揮するとともに、体に悪い副作用を与えない安全性を備えている閉経症候群緩和素材を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者はホットフラッシュ等の閉経症候群（以下、「ホットフラッシュ」という）の発生の原因およびその緩和策について鋭意研究を重ねることにより、ホットフラッシュが発生する新たな理由を見出すとともに、今までにないホットフラッシュの緩和機能を有する素材を発見して本発明を完成させるに至った。
【０００７】
このホットフラッシュが発生する新たな理由について更に説明すると、ホットフラッシュの原因には色々な説があり、はっきりとした原因はまだ分かっていない。例えば、エストロゲンレベルが低下し、ゴナドトロピンの増加、自律神経機能の変調による説や、黄体化ホルモン（ＬＨ）の拍動性分泌とホットフラッシュの発現が一致するとする説、エストロゲン低下により視床下部におけるカテコールエストロゲンが少なくなり、カテコールアミン優位がホットフラッシュを起こすとする説、更にはエストロゲンレベルの低下によるカルシトニン遺伝子関連ペプタイド（ＣＧＲＰ）の過剰分泌とする説などがある。
【０００８】
一方、更年期障害をエストロゲンの欠乏による症状だけに限定しようという考え方は欧米ではすでに一般化している。すなわち、ホットフラッシュはエストロゲン欠乏の急性症状といえる血管運動障害で、正常時では自律神経の調節によって収縮したり、拡張したりして発汗を促し、体温の調節を行なっているが、この時期に自律神経がうまく働かなくなるために生じる症状と考えられている。
【０００９】
エストロゲンは血中では大半が性ホルモン結合グロブリン蛋白（Ｓｅｘ  Ｈｏｒｍｏｎｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｇｌｏｂｕｌｉｎ；ＳＨＢＧ）に結合して存在しているが、閉経後にエストロゲンが体内で合成されなくなると結合型のエストロゲンよりも遊離型エストロゲン濃度の急激な低下が問題となる。すなわち、結合型のエストロゲンではなく遊離型エストロゲンが細胞内への侵入や受容体に結合に関与するためであるが、血中の遊離型エストロゲン濃度が低下すれば充分な量が細胞内に取り込まれなくなり、エストロゲンレセプターと結合するに至らなくなる。尚、ここでは以後エストロゲンとは遊離型エストロゲンのことを言う。
【００１０】
本来血管系においてはエストロゲンが血管内皮にあるエストロゲンレセプターに作用し、動脈血管の弛緩に関係すると言われているが、ホットフラッシュの原因に関しては今まで報告がなかった。すなわち、エストロゲンが血管内皮あるＮＯ産生細胞のエストロゲンレセプターに結合すると、ｅＮＯＳｍＲＮＡが発現すると同時に細胞Ｃａ濃度が上昇し、ｅＮＯＳ（内皮型ＮＯ合成酵素：ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ  ）が活性化されることでＮＯ産生され、ＮＯが遊離され、それが血管平滑筋細胞の可溶性グアニル酸シクラーゼを活性化し、サイクリックＧＭＰ（ｃＧＭＰ）の産生増加を介して血管を弛緩させる（Ｍｕｒａｄ，  Ｆ．，  ｅｔ  ａｌ．，；Ａｄｖ．  Ｃｙｃｌｉｃ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｒｅｓ．，１９７９，  １１，  １７５−２０４．  ）が、血中エストロゲン濃度の低下が起こると、血管は弛緩しなくなる。このように閉経後の女性においては血管運動神経を司る自律神経系が急激に働かなくなり、自律神経失調症状に陥りやすくなる。元来、内因性ＮＯを介する神経であるＮＯ作動性神経ではノルアドレナリン（ＮＡ）作動性神経も血管系に作用している。すなわち、血管や尿路系ではＮＡ作動性神経と消化器や気道系ではコリン作動性神経とがそれぞれ生理的な拮抗作用を示しながら、血管平滑筋の緊張性調節機構を担っているといわれている。閉経前女性の場合はエストロゲンがＮＯ産生に働くために、ＮＡ作動性神経を働かす必要はなく、よってカテコールアミンであるノルエピネフリンの放出は抑制されている。しかしながら、女性が閉経するとエストロゲンの分泌が低下し、ｅＮＯＳｍＲＮＡの発現が減るので、血管の弛緩機能、すなわち、血管運動神経機能が低下し、ＮＡ作動性神経が優位に働くようになり、ノルエピネフリンが放出されるからホットフラッシュが生じると考えられる。
【００１１】
一方、血管内皮のｅＮＯＳで産生されたＮＯは非常に不安定で、活性酸素などにより変化が生じやすいといわれている。一般に女性は閉経後は血中の活性酸素が高まるといわれている。その証明として閉経前女性は男性よりも動脈硬化性心疾患の罹患率がきわめて低いという報告がある（Ｃａｓｔｅｌｌｉ，  Ｗ．  Ｐ．，；１９８４，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．，  ２Ａ，  Ｓｕｐｐｌ．，  ４−１２  及びＫｎｏｐ，  Ｒ．  Ｈ．，；  Ｊ．  Ｒｅｐｒｏｄ．  Ｍｅｄ．，  １９８６，  ３１，  ９１３−９２１  ）。さらに閉経後や閉経前に卵巣を摘出した場合には高くなることも報告されている（Ｗｅｉｎｒｅｂ，  Ｈ．  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，；Ａｎｎ．  Ｉｎｔ．  Ｍｅｄ．，  １９５７，  ４６，  ２８５−３００  及びＯｌｉｖｅｒ，  Ｍ．  Ｆ．，  ｅｔ  ａｌ．，；１９７６，  １７７，  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐａｒｋ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ  ）。すなわち、エストロゲンは抗酸化剤として働いているということに他ならない。Ａｓａｄａら（Ａｓａｄａ，  Ｙ．，  ｅｔ  ａｌ．，；Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｎｕｔｒ．，２０００，  ８，  ２４５−２５２）は閉経後の女性は血清中の脂質の過酸化レベルを閉経前の女性と比較した所、有意に閉経後に過酸化脂質レベルが高まることを報告している。このようにエストロゲンの低下により、女性は閉経後には血中の活性酸素量が増加するので、ホットフラッシュの緩和にはエストロゲンと同じように活性酸素を消去させる手立てが必要となる。前述したＮＯの機能低下に影響が考えられるからである。その原因は活性酸素であるスーパーオキシドアニオン（Ｏ２−）がある。すなわち、ＮＯとこの活性酸素と結合し、ぺルオキシナイトライト（ＯＮＯＯ−）への代謝が亢進するからである。ＮＯの機能低下を改善させるには抗酸化剤やＳＯＤが非常に重要となる。何故なら、閉経前の女性においてはエストロゲンの代謝物である抗酸化能の高いカテコールエストロゲンが機能しているからである。
【００１２】
このように、女性は閉経後にエストロゲンの分泌低下が起こり、血管運動神経系の作用に変化が生じる。すなわち、本来はエストロゲンの分泌によりＮＯ作動生神経が働いたのが、それに代わる神経系であるＮＡ作動性神経が作用するためで、閉経前と異なり、血管運動神経系のこのような変化でホットフラッシュが起こる可能性が充分に考えられる。すなわち、動脈の内皮細胞にあるｅＮＯＳが働かなくなることがホットフラッシュが生じる切っ掛けと考えられる。以上のことからエストロゲン様作用物質とスーパーオキシドジスムターゼ（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ  ｄｉｓｍｕｔａｓｅ）様活性物質とを有効成分として含有していることで今までにはないホットフラッシュの緩和に優れた機能を持った素材になることが明かとなった。
【００１３】
更に、このようにして発生するホットフラッシュを日米において比較分析すると、日本人女性においては約５０％が更年期障害を経験せずに過ごしており、更年期障害の治療経験のある者は約１０％で、残り４０％は１年以内か１年以上更年期障害を経験しても治療せずに自然に治癒しているという報告（後山尚久；産婦人科治療、１９９７，  ７５，  ３６３．）がある。しかしながら、米国人の女性において８０％以上がホットフラッシュを経験し、ホルモン補充療法を約３０％の人が受けており、更に多くの女性が治療を受けている。日本人には虚証あるいは虚弱体質といわれる低血圧気味の女性が多い。この女性は心臓から血液を送出すパワーが不足しているので、更年期のエストロゲンの分泌低下による動脈血管の弛緩作用が弱まっても、元々低血圧気味であるためＮＡ作動性神経が高まっても症状として出ないと考えられる。しかしながら、米国人の女性は動物性蛋白質や動物性脂肪の多い欧米型食事をすることで体脂肪量も多いことが原因で体内エストロゲン分泌量は日本人の女性に比べて高いし、閉経後にエストロゲン分泌が低レベルに下がる期間も長いと考えられる。そのためにエストロゲン分泌低下によるＮＯ産生が低下する期間が長くなることや、心臓機能が強いことで、ＮＡ作動性神経の高まりが原因のホットフラッシュが生じる期間が長く、更にその程度や頻度が日本人の女性に比べて多くなるのではないかと考えられる。
【００１４】
次に、このようなホットフラッシュが発生する新たな理由に対応してホットフラッシュを緩和させる素材について更に説明すると、本発明者は、本発明者が特許第３０１４１４５号においてすでに提案している生成物であって、「原料となる大豆等の豆類の大豆胚芽を用いて、この大豆胚芽に対して麹菌を用いて製麹処理を施すとともにその生成物に対して加水し、分解処理を施して、イソフラボンアグリコンを多量に含有する生成物やフィチン酸が完全に分解除去された生成物」を生成し、この生成物に対して本発明者等が特開２０００−２８１６７３号公報において提案している生成方法に従って、更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンを濃縮した生成物（アグリマックス（ＡｇｌｙＭａｘ）：ニチモウ株式会社の登録商標、以下「アグリマックス」という）を発明した。この「アグリマックス」にはイソフラボンアグリコン以外の大豆胚芽麹菌発酵産物も含まれているが、活性酸素を消去する作用であるスーパーオキシドジスムターゼ様活性（ＳＯＤ様活性）（＝Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ  Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ）が非常に高いことが特徴である。すなわち、「アグリマックス」はイソフラボンアグリコンを約７０％に濃縮したもののＳＯＤ様活性は１２，０００単位／ｇであった。デキストリンでイソフラボンアグリコンを３０％に希釈した場合は１，３００単位／ｇであった。
【００１５】
このようにして生成されたイソフラボンアグリコンにはエストロゲン様作用があることは周知のことである。
【００１６】
更に、製麹に用いられる麹菌は複数の酵素を有する微生物であり、原料の大豆胚芽にはイソフラボン以外にサポニンなど生理機能を有する成分が含まれている。従って、発酵工程中に複合的な酵素分解が生じ、大豆胚芽中の成分の機能性が高まった可能性があり、麹菌による発酵大豆胚芽からイソフラボンを抽出・濃縮するプロセスにおいて、それらの生理機能を持った成分が「アグリマックス」に混入している可能性がある。例えば、「アグリマックス」は他のイソフラボン素材に比べてＳＯＤ様活性が高い。キッコーマン社の同じ濃度のアグリコン型イソフラボン製品（製品名：ソイアクト（ＳｏｙＡｃｔ））のＳＯＤ様活性は６０単位／ｇであり、同じ大豆胚芽から抽出・濃縮されたグリコシド型イソフラボン製品が２２０単位／ｇであるから、「アグリマックス」は１３００単位／ｇときわめて高いといえる。「アグリマックス」のＳＯＤ様活性を高めている成分はイソフラボンアグリコンではなく、麹菌発酵で酵素分解された成分と考えられる。
【００１７】
以上のことから、「アグリマックス」はイソフラボンアグリコンによるエストロゲン様作用を有しており、さらにはイソフラボングリコシドに比べて体内への吸収が良いので体内に吸収された後の機能面で優れている。このことをさらに詳しく説明すると、ラットの動物試験ではあるが、Ｙａｓｕｄａら（Ｙａｓｕｄａ，  Ｔ．  ｅｔ  ａｌ  ；Ｂｉｏ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｂｕｌｌ．，  １９９４；１７，  １３６９−１３７４  ）はイソフラボンアグリコン（ダイゼイン６０ｍｇ／ｋｇＢＷ）とイソフラボングリコシド（ダイジン１００ｍｇ／ｋｇＢＷ）を投与し、その代謝を調べている。ダイジンはダイゼイン（アグリコン型）に加水分解された後に吸収されることを明らかにしており、また尿中の両者の排泄物比較ではダイゼイン投与ではグルクロン酸や硫酸抱合されていない遊離型ダイゼイン量がダイジン投与に比べて高い結果が得られている。
【００１８】
更に、Ｓｆａｋｉａｎｏｓら（Ｓｆａｋｉａｎｏｓ，  Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ  ；  Ｊ．  Ｎｕｔｒ．，  １９９７；１２７，  １２６０−１２６８  ）はラットの動物試験でイソフラボンアグリコン（ゲニステイン）投与による吸収および代謝に関して詳しい研究を行っている。ゲニステイン投与の低用量では末梢血液中にはほとんどがグルクロン酸抱合型ゲニステインであったが、高用量にすると遊離型ゲニステイン濃度が高まることを報告している。すなわち、イソフラボンアグリコン投与量を高めれば、血液中に遊離型イソフラボンアグリコン濃度が高まることが示唆できる。遊離型イソフラボンアグリコンとして血中に高濃度に存在することで細胞内への侵入や受容体への結合に関与することができるが、血中の濃度が低下すれば充分な量が細胞内に取り込まれなくなり、エストロゲンレセプターと結合するに至らなくなるからである。このことは前述した遊離型エストロゲンの存在と同じ理屈である。閉経後の女性で遊離型エストロゲンの血中濃度が低下するのを遊離型イソフラボンアグリコンが代って作用することがいえる。さらに「アグリマックス」にはそれ以外の成分による高いＳＯＤ様活性の両方を有しているので、従来の大豆イソフラボン製品以上に高いホットフラッシュ緩和機能があることが分かった。
【００１９】
このように「アグリマックス」にはエストロゲンと同様にエストロゲンレセプターにイソフラボンアグリコンが結合することでＮＯ産生が起こり、更には産生したＮＯの機能低下を抑制するＳＯＤ様活性を有していることによりＮＯの機能低下に抑制的に働き、血管運動神経系に対して確実に作用する働きが高いと考えられる。すなわち、エストロゲン分泌のある閉経前の健康状態に回復させる機能がダイゼインやゲニステインのようなピュアなイソフラボンよりも優れているといえる。何故なら、ピュアなイソフラボンのＳＯＤ様活性は低いからである。
【００２０】
更に、ダイゼインやゲニステインの別な機能としてはｃＡＭＰやｃＧＭＰの分解に関わるｃＡＭＰフォスフォジエステラーゼの働きを阻害するという報告もある（Ｍｉｃｈａｅｌ，  Ｒ．，  ｅｔ  ａｌ．，；Ｍｏｌｅｃｕｌｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  ２０００，  ５７，  ７３８−７４５．  ）ので、ダイゼインが豊富に含有されている「アグリマックス」のＮＯ産生能はこの点からも期待できる。
【００２１】
このように本発明者は「アグリマックス」が閉経後の女性に生じる更年期障害のとりわけホットフラッシュに対する緩和機能に優れていることを発見して本発明を完成させた。
【００２２】
このようにしてなされた本発明の閉経症候群緩和素材は、エストロゲン様作用物質とスーパーオキシドジスムターゼ様活性物質とを有効成分として含有することを特徴とする。このようにして形成されている本発明の閉経症候群緩和素材は、有効成分のエストロゲン様作用物質とスーパーオキシドジスムターゼ様活性物質（以下、「ＳＯＤ様活性物質」という）がホットフラッシュの緩和に有効な作用を発揮することができ、しかも安全性も高いものとなる。
【００２３】
また、本発明の閉経症候群緩和素材は、原料としての大豆胚芽を麹菌によって発酵させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物を更に溶媒を用いて抽出濃縮することにより機能性の高いエストロゲン様作用物質とスーパーオキシドジスムターゼ様活性物質とを含有する生成物を有効成分として含有することを特徴とする。このようにして形成されている本発明の閉経症候群緩和素材は、「アグリマックス」を有効成分としているために、より確実にホットフラッシュの緩和に有効な作用を発揮することができ、しかも安全性も高いものとなる。
【００２４】
この濃縮された「アグリマックス」の組成としては、少なくとも７０重量％のダイゼインを含有し、かつ、スーパーオキシドジスムターゼ様活性が５００単位／ｇ以上あるようにするとよい。このようにして形成されている本発明の閉経症候群緩和素材は、更に確実にホットフラッシュの緩和に有効な作用を発揮することができ、しかも安全性も高いものとなる。
【００２５】
また、本発明の閉経症候群緩和素材としては、更にスーパーオキシドジスムターゼ様活性を有する物質、例えばシベリア霊芝、アップルペクチン等を含有していることを特徴とする。このようにして形成されている本発明の閉経症候群緩和素材は、アグリコン等からなる有効成分による作用効果と、ＳＯＤ様活性を備えた物質による作用効果とが相乗的に作用するために、より一層確実にホットフラッシュの緩和に有効な作用を発揮することができ、しかも安全性も高いものとなる。
【００２６】
【発明の実施形態】
以下、本発明の実施形態を説明する。
【００２７】
本実施形態においては、本発明者が特許第３０１４１４５号において既に提案している生成物であって、「原料となる大豆等の豆類に対して麹菌を用いて製麹処理を施すとともにその生成物に対して加水分解処理を施して、イソフラボンアグリコンを多量に含有する生成物やフイチン酸が完全に分解除去された生成物」において、原料として大豆胚芽を用い、本発明者等が提案している特開２０００−２８１６７３号公報に示す生成方法に従って、更に溶媒を用いて抽出濃縮することによりイソフラボンアグリコンが例えば３０重量％以上の濃縮物とした生成物とする。
【００２８】
図１は前記特許第３０１４１４５号において提案している生成物であって、豆類の１種である大豆胚芽のイソフラボン化合物の配糖体を分解して、アグリコンを多量に含むイソフラボン化合物を生成した生成物の製造方法の１実施形態および同時に大豆粕中のフィチン酸を除去した生成物の製造方法の１実施形態を示す工程図である。
【００２９】
まず、アグリコンを多量に含むイソフラボン化合物を生成した生成物を製造する場合について説明する。
【００３０】
図１の工程に沿って説明すると、先ず大豆胚芽を蒸煮する。この蒸煮を施すことにより、麹菌の増殖が容易となる。また、この大豆胚芽の蒸煮は製造目的等に応じてバッチ式や連続式で行うと良い。
【００３１】
そして、この蒸煮が終了した大豆胚芽を一旦冷却して、大豆胚芽中の水分量を麹菌が増殖可能な量（例えば、３７重量％）とさせる。
【００３２】
このようにして水分量を整えられた大豆胚芽に対して、本発明方法が以下のようにして行なわれる。
【００３３】
即ち、蒸煮が終了した大豆胚芽を殺菌し、冷却した後、大豆胚芽と麹菌との配合割合を、例えば大豆胚芽を４００ｋｇに対して麹菌胞子を  ８×１０７    個／ｇに調整した種麹（精白米にて調整）を２００ｇを混合した。更に、製麹のスタート時には３２℃に冷却した後、品温が４０℃になるまで通風しないで４０℃になった時点で通風しながら、温度上昇を抑えた。スタートから約１７時間後の最初の撹拌（盛工程）を行った。大豆胚芽の熱を冷まし、撹拌後品温が３５℃前後になるように通風しながら、温度をコントロールをした。次いで約８時間後に２回目の撹拌（仲工程）を行い、熱を冷ました。再び品温を通風で３５℃前後にコントロールし、更に約１６時間後に３回目の撹拌（仕舞工程）を前回同様に行った。その後は品温が約３８℃になるように通風しながら、温度コントロールし、スタートから４８時間後に製麹を終了させた。製麹終了後、水分含量が５０％になるように撹拌しながら、水分調整を行い、品温が約５０℃になるように加温後、４８時間以上麹菌の酵素で大豆胚芽中のイソフラボン化合物の大部分がアグリコン体になるまで加水分解した。表１の通り本発明による処理により大豆胚芽のイソフラボン化合物はアグリコン体のダイゼインが主体となるように多量に得られた。
【００３４】
この製麹に用いる麹菌としては、古くからの日本独特の発酵食品やテンペに用いられている麹菌であり、食品として安全なアスペルギルス・ウサミ、アスペルギルス・カワチ、アスペルギルス・アワモリ、アスペルギルス・サイトイ、アスペルギルス・オリゼー、アスペルギルス・ニガー等アスペルギルス属およびリゾープス属等からなる麹菌を用いるとよい。
【００３５】
この発酵時間については、使用する麹菌の種類に応じて、少なくとも２４時間以上であり、大豆粕中のイソフラボン化合物の配糖体を十分に分解させるに十分な発酵時間とするとよい。
【００３６】
この蛋白質の加水分解については、使用する麹菌の種類に応じて、大豆胚芽中のイソフラボン化合物の配糖体を十分に低減させるに十分な加水分解時間ならびに加水分解温度とするとよい。
【００３７】
このようにすれば、発酵の初期において有機酸を生成して大豆胚芽中の雑菌の増殖を抑制し、２次汚染の心配がなくなり、大豆胚芽を原料とした生成物を大量生産することができる。また、低水分としなくともイソフラボン化合物の配糖体を十分に低減させる処理を施すことができる。
【００３８】
続いて、本実施形態においては加水分解によって得られた生成物を、特開２０００−２８１６７３号公報に示す方法に従って、（１）親水性有機溶媒を用いて溶媒抽出し、（２）抽出して得た親水性有機溶液に疎水性有機溶媒を用いて液液分離し、（３）液液分離して得た親水性有機溶液に疎水性有機溶媒を用いて液液分離し、そして（４）必要に応じて、液液分離して得た疎水性有機溶液を濃縮乾燥することにより、表１のようなイソフラボンアグリコンが３０重量％以上の濃縮物を得た。この場合のイソフラボンアグリコンとしては、ダイゼインが約７０重量％含有されている。更に、スーパーオキシドジスムターゼ様活性を５００単位／ｇ以上含有している。
【００３９】
【表１】
2005041803.tif 000003
【００４０】
【実施例】
次に、本発明のエストロゲン様作用物質とスーパーオキシドジスムターゼ様活性物質とを有効成分として含有する閉経症候群緩和素材によるホットフラッシュの緩和作用を説明する。
【００４１】
本実施例においては、ホットフラッシュの緩和作用を測定しやすい雌ＳＤラットの卵巣摘出ラット（ＯＶＸラット）に対して実験を行った。
【００４２】
ａ）試験方法
１）雌ＳＤラット（７週齢）を用意し、１週間の予備飼育を行い、健康で各区で体重も揃った検体となる雌ＳＤラット（８週齢）を育成した。予備飼育の翌日より２８日間に亘り、表２に示す組成の高脂肪飼料を自由摂取として育生した。給水としては、井水（３ｐｐｍ塩素添加）を自由摂取させた。更に、飼育施設環境として、設定温湿度を２３±２℃、５５±１０％とし、空調方式を換気（１５回／１時間）とし、証明時間を８：００ａ．ｍ．〜８：００ｐ．ｍ．とし、飼育設備をステルス製代謝ケージとした。
【００４３】
【表２】
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【００４４】
２）餌料の投与
比較区１（表中、Ｓｈａｍ群）には健康な雌ＳＤラットを６匹入れ、試験区１（表中、ＯＶＸ群）、試験区２（表中、ＡｇｌｙＭａｘ群）、試験区３（表中、ゲニステイン群）、試験区４（表中、ダイゼイン群）および試験区５（表中、１７β−エストラジオール群）とにそれぞれ雌ＳＤラットのＯＶＸラットを６匹づつ分け、比較区１および試験区２には通常の餌のみを給餌し、試験区２、３および４には、アグリマックス、ゲニステインおよびダイゼインをそれぞれイソフラボンアグリコン量として体重Ｋｇあたり２０ｍｇとなるように餌に添加しながら投与し、試験区５には１７β−エストラジオールを、１日当たり１μｇ／匹を餌に添加しながら投与した。
【００４５】
３）採尿、採血、各測定項日の測定
高脂肪飼料およびアグリマックス、ゲニステイン、ダイゼインおよび１７β−エストラジオールの投与期間中、０、７、１４、２１、２８日目に２４時間の蓄尿による採尿を行った。そして、尿中のＮＯ２／ＮＯ３の測定を行った。２８日間の投与終了後、２４時間の絶食を行い、エーテル麻酔下で解剖を行い、解剖した雌ラットより子宮重量を体重１００ｇ当たりの重量として測定し、体内脂肪を検出するために後腹壁脂肪、腸管膜脂肪、腎周囲脂肪および卵巣周囲脂肪を摘出して体重１００ｇ当たりの重量を測定した。
【００４６】
４）データの統計学的処理
各区の測定結果は各測定項目毎に平均値±標準偏差で表し、有意差検定はＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ−ｔ法を用いた。なお、検定は両側検定とし、有意水準は５および１％とする。
【００４７】
ｂ）試験結果
１）状態観察
試験期間中の一般状態観察については特に異常は観察されなかった。
【００４８】
２）体重の測定結果は表３に示す通りである。
【００４９】
【表３】
2005041803.tif 000005
【００５０】
３）摂餌量の測定結果は表４に示す通りである。
【００５１】
【表４】
2005041803.tif 000006
【００５２】
４）尿中のＮＯ２／ＮＯ３の測定結果は表５に示す通りである。
【００５３】
【表５】
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【００５４】
５）子宮重量の測定結果は表６に示す通りである。
【００５５】
【表６】
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【００５６】
６）後腹壁脂肪、腸管膜脂肪、腎周囲脂肪および卵巣周囲脂肪の測定結果は表７に示す通りである。
【００５７】
【表７】
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【００５８】
ｃ）評価
卵巣を摘出していないＳｈａｍ群に比べて卵巣摘出したＯＶＸ群では血中ＮＯ量が有意に下がり、ゲニステイン群やダイゼイン群はまったく血中のＮＯ量は増加しなかったが、  ＡｇｌｙＭａｘ群では１７β−エストラジオール投与には及ばなかったものの７目頃から血中ＮＯ量が増加が確認でき、２１日目ではＯＶＸの普通餌群やゲニステイン群、ダイゼイン群に対して有意的な増加が得られた。更に２８日目にはＳｈａｍ群レベルまで達した。あくまでも推測であるが、１７β−エストラジオール投与群よりも血中ＮＯ量の上昇に時間がかかった結果から見て、１７β−エストラジオールに比べて即効性の面で劣るのかもしれないが、閉経後の女性でエストロゲンによって誘導される動脈の内皮細胞にあるｅＮＯＳが働かなくなることが交感神経活動亢進（ｓｙｍｐａｔｈｉｃｏｔｏｎｉａ  ）や血管運動神経障害につながる可能性が高く、そのことでホットフラッシュとなるのであれば、「アグリマックス」はゲニステインやダイゼインに比べ、ホットフラッシュの緩和機能はかなり優れているという裏付けになる結果といえる。
【００５９】
このような「アグリマックス」の機能は「アグリマックス」中のアグリコン型イソフラボン以外の有効な成分がエストロゲン作用を助長していると考えられる。何故なら動物試験ではあるが、「アグリマックス」がピュアなゲニステインやダイゼインに比べてエストロゲン作用が強く出る結果が得られたことは「アグリマックス」にはエストロゲンレセプターに結合するアグリコン型イソフラボンと更には産生したＮＯの機能低下を抑制するＳＯＤ様活性を有していることによりＮＯの機能低下に抑制的に働き、動脈血管の弛緩に対して確実に作用する可能性が高いと考えられ、結果的にも尿中ＮＯ量に有意的な差異が得られた。
【００６０】
更に、「アグリマックス」、ゲニステイン、ダイゼインは同じアグリコン型イソフラボン量にして投与した試験であったが、ダイゼインはゲニステインに比べて脂質代謝異常の改善機能に優れていることが分かり、また、「アグリマックス」はダイゼインよりも更に機能性に優れている。このことより、「アグリマックス」の閉経後女性モデル動物実験における機能は、イソフラボンアグリコンの他にＳＯＤ様活性物質と相乗的に作用することによるものであることが分かる。
【００６１】
このことは「アグリマックス」が副作用もなく、ホットフラッシュの緩和作用があることが示唆できる結果といえた。
【００６２】
なお、本発明は前記実施の形態並びに実施例に限定されるものではなく、必要に応じて変更することができる。本発明の閉経症候群緩和素材は前記実施例のように経口投与の他に点滴によって体内に吸収させるようにしてもよい。
【００６３】
【発明の効果】
このように本発明の閉経症候群緩和素材は構成され作用するものであるから、ホットフラッシュ等の閉経症候群を緩和する優れた機能を発揮するとともに、体に悪い副作用を与えない安全性を備えているという優れた効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【図１】大豆胚芽中のイソフラボン化合物のうち薬理作用の高いアグリコンを生成する製造方法の１実施形態を示す工程図
【図１】
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