(57)【要約】【課題】感染した細菌の菌種の特定を、誰でも、何処でも、何時でも、簡単に、迅速に、且つ正確に検査でき、適切な抗生物質を早期投与でき、乳房炎による後遺症を可能なかぎり低減でき、経済的損失を抑制できる乳房炎に罹患した乳牛に於ける原因菌種の簡易検査方法を提供する。【解決手段】所定量の検体乳１を検査容器２に採取し、所定量の微細活性炭３を検査容器２内に加え、検査容器２を振って微細活性炭３に検体乳１を接触させ、静置して微細活性炭３を沈殿させ、検査容器２を傾けて微細活性炭３が残るよう不要な検体乳１を捨て、検査容器２内に試験紙４をセットし、検査容器２の底部を携帯加熱器７で加熱し、微細活性炭３に吸着した濃縮分析物を蒸発させて、蒸気を試験紙４のインドール試験片５に反応させ、検体乳１中のインドールの有無をインドール試験片５の反応を見て判定する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳房炎に罹患した乳牛の検体乳から感染している細菌の菌種を特定するための検査方法であって、所定量の検体乳を検査容器に採取し、所定量の微細活性炭を検査容器内に加え、検査容器を振って微細活性炭に検体乳をまんべんなく接触させ、静置して或いは遠心せしめて微細活性炭を沈殿させ、検査容器を傾けて微細活性炭が検査容器底部内に残るように不要な検体乳を捨て、検査容器内に試験紙をセットし、検査容器の底部を携帯加熱器で加熱し、微細活性炭に吸着されている濃縮分析物を蒸発せしめて、その蒸気を試験紙のインドール試験片に反応させ、検体乳中のインドールの有無をインドール試験片の反応を見て判定することを特徴とした乳房炎に罹患した乳牛に於ける原因菌種の簡易検査方法。
【請求項２】
前記検査容器としては、試験管を使用し、前記試験紙としては、略く字状に屈曲している帯板状の取付片を形成し、この取付片の屈曲内側面の下端から所定距離離れた位置にインドール試験片を配したものを使用し、前記携帯加熱器としては、ライターを使用することを特徴とした請求項１記載の乳房炎に罹患した乳牛に於ける原因菌種の簡易検査方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、乳房炎（特に、急性乳房炎）に罹患した乳牛の検体乳から感染している細菌の菌種を特定できるようにした検査方法であって、乳牛の飼育現場に於いて、誰でも、何処でも、何時でも、簡単に、迅速に、且つ正確に検査できて、細菌の菌種に対応した適切な抗生物質を早期投与し、乳房炎による乳牛の後遺症を可能なかぎり低減できるようにすべく開発された乳房炎に罹患した乳牛に於ける原因菌種の簡易検査方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、乳牛が乳房炎に罹っていることを判定する手段としては、例えば、特許文献１に示すような乳汁状態判別装置等が開示されている。
【０００３】
そして、乳房炎（特に、急性乳房炎）に罹患した乳牛は、最悪の場合死に至るケースや、治癒した場合でも後遺症として乳腺の繊維化が起こり、乳量の低下によって経済的な負担が増え、廃牛となったりするケースが多くある。
【０００４】
ところで、乳牛の乳房炎の主原因は、細菌感染によるもので、その治療としては、抗生物質の早期投与が効果的となっている。特に、発熱を伴う急性乳房炎の場合は、転帰が早い（症状の悪化が早い）ため、発見次第早期の治療が必要となっている。
【０００５】
更に、急性乳房炎の主要な原因菌としては、大腸菌（桿菌）、クレブシエラ（桿菌）、ブドウ球菌（球菌）等があり、これらは、急性症状が似ているが、先ず、球菌と桿菌とで異なる抗生物質を投与する必要がある。特に、大腸菌による乳房炎であった場合には、転帰が早いため（症状の悪化が早いため）、１分でも早い投与が必要である。
【０００６】
また、治療に際しては、先ず、大腸菌感染かその他の細菌感染かの判別が必要となる。すなわち、抗生物質を選択する際に、大腸菌に効く薬剤は他の細菌（ブドウ球菌）に無効で、他の細菌（ブドウ球菌）に効く薬剤は大腸菌に無効となるためである。
【０００７】
そして、従来の原因菌の検査手段としては、直接菌を分離する方法や、ＰＣＲによる菌の遺伝子を検査する方法があるが、共に検査に２〜３日かかることや、ある程度の設備と整った検査室が必要となることから、緊急に治療が必要な急性乳房炎にはあまり役に立たないものであった。
【０００８】
そのため、緊急な治療には、菌種に対応した抗生物質を選ばなければならないが、短時間での検査方法がなかったため、菌種不明のまま独自の感と経験によって抗生物質を選択し、投与していた。
【０００９】
【特許文献１】特開平８−１３６５３４号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
その結果、投与した抗生物質が不適合であった場合は、症状が一層悪化して、乳牛として利用できなくなり、経済的な損失がかなり大きい問題が残されていた。
そして、前述の如きリスクを低減するためにも、乳牛の検体乳から感染している細菌の菌種の特定を、誰でも、何処でも、何時でも、簡単に、迅速に、且つ正確に検査でき、しかも、経済的な負担も少なくて済むような原因菌種の簡易検査方法を提供する必要があった。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
しかして、請求項１記載の原因菌種の簡易検査方法にあっては、乳房炎に罹患した乳牛の検体乳１から感染している細菌の菌種を特定するための検査方法であって、所定量の検体乳１を検査容器２に採取し、所定量の微細活性炭３を検査容器２内に加え、検査容器２を振って微細活性炭３に検体乳１をまんべんなく接触させ、静置して或いは遠心せしめて微細活性炭３を沈殿させ、検査容器２を傾けて微細活性炭３が検査容器２底部内に残るように不要な検体乳１を捨て、検査容器２内に試験紙４をセットし、検査容器２の底部を携帯加熱器７で加熱し、微細活性炭３に吸着されている濃縮分析物を蒸発せしめて、その蒸気を試験紙４のインドール試験片５に反応させ、検体乳１中のインドールの有無をインドール試験片５の反応を見て判定する手段を採用した。
【００１２】
また、請求項２記載の原因菌種の簡易検査方法にあっては、前記検査容器２としては、試験管を使用し、前記試験紙４としては、略く字状に屈曲している帯板状の取付片６を形成し、この取付片６の屈曲内側面の下端から所定距離離れた位置にインドール試験片５を配したものを使用し、前記携帯加熱器７としては、ライターを使用する手段を採用した。
【発明の効果】
【００１３】
従って、請求項１記載の原因菌種の簡易検査方法によれば、乳牛の検体乳１から感染している細菌の菌種の特定を、誰でも、何処でも（乳牛の飼育現場でも）、何時でも、簡単に、迅速に、且つ正確に検査できるようになる。ひいては、細菌の菌種に対応した適切な抗生物質を早期投与でき、効果の高い早期治療が期待でき、乳房炎による乳牛の後遺症を可能なかぎり低減できて、経済的な損失を抑制することができるようになる。
特に、転帰が早く１分でも早い抗生物質の投与が必要な大腸菌による乳房炎であった場合、その特定が確実に、迅速に、且つ正確に行えるものとなる。
【００１４】
また、請求項２記載の原因菌種の簡易検査方法によれば、特別な機械器具が不要となり、経済的な負担が少なく、手軽に検査が行えるものとなる。
【００１５】
特に、取付片６の下端から所定距離離れた位置にインドール試験片５を配した試験紙４を使用するので、検査容器２底部に残った微細活性炭３の上方にインドール試験片５を確実に配置できるようになり、微細活性炭３に吸着されている濃縮分析物の蒸気が、インドール試験片５に確実に触れるようになり、より正確な反応が得られるようになる。
【００１６】
更に、略く字状に屈曲している帯板状の取付片６を形成し、この取付片６の屈曲内側面にインドール試験片５を配した試験紙４を使用するので、インドール試験片５が検査容器２の内壁面に触れることがなくなり、試験紙４を検査容器２内にセットする際に、検査容器２内壁面に付着していた残留検体乳１にインドール試験片５が触れるような虞れのないものとなり、インドール試験片５の正確な反応が期待できるようになる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
以下、本発明を図示例に基づいて説明すると、次の通りである。
本発明は、乳房炎に罹患した乳牛の検体乳１から感染している細菌の菌種（特に、大腸菌）を特定するための簡易検査方法である。すなわち、乳牛の飼育現場でも感染している細菌の菌種（大腸菌）を簡単に特定でき、細菌の菌種に対応した適切な抗生物質を早期に投与できるようにするためのものである。
【００１８】
具体的には、先ず、所定量の検体乳１を、検査容器２に採取し、所定量の微細活性炭３を検査容器２内に加え、検査容器２を振って（転倒混和させて）微細活性炭３に検体乳１をまんべんなく接触させる。尚、所定量の微細活性炭３を検査容器２内に入れてから、所定量の検体乳１を検査容器２内に入れるようにしても良い。
【００１９】
そして、静置して或いは遠心せしめて微細活性炭３を沈殿させてから、検査容器２を傾けて微細活性炭３が検査容器２底部内に残るように不要な検体乳１を捨てる。
【００２０】
次に、検査容器２内に試験紙４をセットし、検査容器２の底部を携帯加熱器７で加熱し、微細活性炭３に吸着されている濃縮分析物を蒸発せしめて、濃縮分析物の蒸気を試験紙４のインドール試験片５に反応させ、検体乳１中のインドールの有無をインドール試験片５の反応を見て判定する。
【実施例】
【００２１】
前記検体乳１は、例えば、スポイト等を利用して３〜５ｍｌ程度の量を検査容器２内に入れるようにする。
【００２２】
また、前記検査容器２は、例えば、比較的小さな試験管等が利用される。
【００２３】
更に、前記微細活性炭３は、例えば、０．１〜０．３ｍｍ程度の大きさの粒状のもの（或いは、粉状のもの）が利用され、これを０．１ｇ程度検査容器２内に入れるようにして検査する。尚、粒状の微細活性炭３を利用することで、検体乳１中でも速やかに沈むようになる（沈殿し易いものとなる）。
ところで、微細活性炭３は、検体乳１中成分を吸着して濃縮分析物をつくり、しかも、加熱によって濃縮分析物を蒸発（気化）できるような吸収剤物質として利用されており、同様な機能を有するものであれば、その材質は活性炭に限定されるものではない。
【００２４】
そして、前記試験紙４は、例えば、取付片６とインドール試験片５とからなり、インドール試験片５は、インドールに反応すると直ちに赤色に変化するようなものが使用される。
すなわち、インドール試験片５は、例えば、パラジメチルアミノベンズアルデヒド５ｇと、リン酸１０ｍｌと、メタノール５０ｍｌとで組成されたよう液をろ紙に染み込ませた後、乾燥して構成されている。
【００２５】
ところで、インドール試験片５が検査するインドールは、大腸菌特有の酵素（トリプトファナーゼ）が乳汁中のトリプトファンに作用して生成されるもので、インドール試験片５が赤色してインドールの存在が確認されることで、大腸菌感染が証明されたこととなる。一方、インドール試験片５が赤色に変化しない場合は、インドールの存在が確認できず（トリプトファナーゼを持たず）、大腸菌感染ではなく、クレブシエラ等による感染であることが証明されたこととなる。
【００２６】
また、インドール試験片５は、例えば、幅が５〜８ｍｍで、長さが１０〜２０ｍｍ程度の略矩形状を呈しており、しかも、略く字状に屈曲している帯板状の取付片６の屈曲内側面の下端から所定距離（例えば、５ｍｍ程度）離れた位置に配されている。すなわち、検査容器２底部に残った微細活性炭３に直接触れることなく、その上方にインドール試験片５を確実に配置できて、微細活性炭３に吸着されている濃縮分析物の蒸気が、インドール試験片５に確実に触れて、正確な反応が得られるようにしてある。
【００２７】
更に、インドール試験片５は、取付片６の屈曲内側面に配されており、インドール試験片５が検査容器２の内壁面に触れず、検査容器２内壁面に付着していた残留検体乳１にインドール試験片５が触れないようにして、正確な反応が得られるようにしてある。
【００２８】
加えて、インドール試験片５は、例えば、左右側縁部分が取付片６の左右側縁より僅かに突出するように形成しても良い。すなわち、微細活性炭３に吸着されている濃縮分析物の蒸気が、インドール試験片５により触れ易くして、より正確な反応が得られるようになる。
尚、微細活性炭３に吸着されている濃縮分析物の蒸気が、インドール試験片５により触れ易くすべく、取付片６の左右側縁部分の一部を切欠き（或いは中央部分の一部を切欠き）、インドール試験片５の露出部分が多くなるようにして、より正確な反応が得られるようにしても良い。
【００２９】
取付片６は、例えば、適宜合成樹脂、或いは紙等によって略く字状に屈曲している帯板状（例えば、幅が５〜７ｍｍで、長さが１２０ｍｍ）に構成されたものが利用される。
【００３０】
また、前記携帯加熱器７は、例えば、手軽に使用できるライター等が用いられ、特に、ある程度の火力があって、風の影響を受け難いものが好ましい。
【００３１】
ところで、検体乳１の具体的採取手段、採取量、検査容器２の具体的構成、形状、寸法、材質、微細活性炭３の具体的寸法、形状、使用量、試験紙４の具体的構成、形状、寸法、インドール試験片５の具体的構成、形状、寸法、取付片６への配設位置、取付片６の具体的構成、形状、寸法、材質、携帯加熱器７の具体的構成、形状、寸法等は、適宜自由に設定、変更できるものである。
【００３２】
尚、反応に要するインドール濃度と量は、例えば、インドールを０．５ｐｐｍ添加した牛乳を３ｍｌ程度用いた場合で十分な反応結果（赤色反応）が得られたことから、インドールを０．５ｐｐｍ以上含有する検体乳１が３〜５ｍｌ程度必要で、微細活性炭３で抽出する濃縮分析物の量が多ければ更に感度を増すようになる。すなわち、微細活性炭３で抽出する濃縮分析物の量の増減で検出感度を調節できるものである。
【００３３】
更に、検査容器２を傾けて微細活性炭３が検査容器２底部内に残るように不要な検体乳１を捨てるときに、検査容器２中に残る検体乳１を適宜吸い取り紙等によって吸い取るようにして、より正確な反応が得られるようにしても良い。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】本発明の原因菌種の簡易検査方法を例示するブロック図である。
【図２】本発明の原因菌種の簡易検査方法を例示する概略説明図である。
【図３】本発明の原因菌種の簡易検査方法で利用される試験紙を例示する斜視図である。
【符号の説明】
【００３５】
１      検体乳
２      検査容器
３      微細活性炭
４      試験紙
５      インドール試験片
６      取付片
７      携帯加熱器
【図１】
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【図２】
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【図３】
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