(57)【要約】【課題】本発明は、Ｂ型肝炎，Ｃ型慢性肝炎，腎癌，皮膚黒腫，慢性骨髄性白血病等の予防・治療のみならず、ストレス等により低下した免疫系の賦活や日常的な免疫力維持のために使用することが可能なインターフェロン産生促進剤を提供することを目的とする。【解決手段】優れたインターフェロン産生促進作用を有する南天抽出物及び／又は黒糖をインターフェロン産生促進剤として用いる。得られたインターフェロン産生促進剤は、特にインターフェロンβの産生促進作用に優れており、Ｂ型肝炎，Ｃ型慢性肝炎，腎癌，皮膚黒腫，慢性骨髄性白血病等の予防・治療のみならず、ストレスなどにより低下した免疫系の賦活や日常的な免疫力維持のために使用することができる。また、南天抽出物及び／又は黒糖を有効成分とするインターフェロン産生促進剤を種々の組成物に配合することにより、インターフェロン産生促進作用を有する組成物を得ることが出来る。【選択図】          なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
南天抽出物及び／又は黒糖を有効成分とするインターフェロン産生促進剤。
【請求項２】
インターフェロン産生促進剤がインターフェロンβの産生促進剤である請求項１に記載のインターフェロン産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、インターフェロン産生促進剤に関し、さらに詳しくは南天抽出物及び／又は黒糖を有効成分とするインターフェロン産生促進剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
インターフェロンは、ウィルス感染などに際して、ほとんどの動物細胞が産生する分子量約２万の糖蛋白質であり、インターフェロンと接触した細胞に抗ウィルス状態を誘起して、多種類のウィルスの増殖を阻止し、ウィルス感染初期の生体防御機構の一環として機能する。インターフェロンには、ウィルス増殖抑制機能のみならず、腫瘍細胞の増殖抑制やナチュラルキラー細胞の活性の増強をはじめ多様な免疫調節作用があり、現在ではＢ型肝炎，Ｃ型慢性肝炎，腎癌，皮膚黒腫，慢性骨髄性白血病の治療薬として用いられている。また、ストレスによってアドレナリンやコルチコゾン等のストレスホルモンが分泌された場合には、免疫細胞全体の機能が全般的に抑制され、感染症罹患の危険性が高まるため、インターフェロンの産生促進剤には抗ストレス効果を期待することもできる。
【０００３】
インターフェロンは、α型（白血球型），β型（線維芽細胞型），γ型（活性化リンパ球型）の３種に大別される。α型とβ型は、構造上の類似性が比較的に高く、それらの作用するレセプターも共通しているが、γ型は前２者との構造上の類似性もなく、作用するレセプターも異なっている。α型，β型，γ型はすべて抗ウィルス作用を示すが、α，β型はＣ型慢性肝炎をはじめとして、腎癌，皮膚黒腫，慢性骨髄性白血病等の悪性腫瘍の治療に用いられているが、γ型はインターロイキン類の一員として位置付けられるようになってきている。
【０００４】
これまでに報告されているインターフェロン産生促進剤としては、ローヤルゼリー中から分離された成分（特許文献１参照）、三核型ポリメチン系シアニン色素（特許文献２参照）等が挙げられる。
【０００５】
【特許文献１】
特開平４−２８２３２３号公報
【特許文献２】
特開２００３−１３７７８４号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
従来用いられているインターフェロン産生促進剤は、その作用が必ずしも十分ではない場合や副作用等の点から汎用性に欠ける場合があるなど、作用効果や使用性の面ですべてを満足できるものが少ないのが現状であった。このため、より優れたインターフェロン産生促進剤の開発が期待されており、本発明はこのような事情に鑑みてなされたものである。従って、本発明の目的は、Ｂ型肝炎，Ｃ型慢性肝炎，腎癌，皮膚黒腫，慢性骨髄性白血病等の予防・治療のみならず、ストレス等により低下した免疫系の賦活や日常的な免疫力維持のために使用することが可能なインターフェロン産生促進剤を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するために、種々の物質についてインターフェロン産生促進作用に関する検討を行った。その結果、南天抽出物と黒糖に優れたインターフェロン産生促進作用を見出し、さらに検討を重ね、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は、南天抽出物及び／又は黒糖を有効成分とするインターフェロン産生促進剤に関するものであり、特にインターフェロンβの産生促進作用に優れるインターフェロン産生促進剤に関するものである。得られたインターフェロン産生促進剤はＢ型肝炎，Ｃ型慢性肝炎，腎癌，皮膚黒腫，慢性骨髄性白血病等の予防・治療のみならず、ストレスなどにより低下した免疫系の賦活や日常的な免疫力維持のために使用することが可能である。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明に用いられる南天抽出物の出発原料となる南天は、メギ科ナンテン属の植物であり、果実の赤いナンテン（Ｎａｎｄｉｎａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ）と果実の白いシロナンテン（Ｎａｎｄｉｎａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ  ｖａｒ．ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ）が知られている。抽出には、ナンテン（Ｎａｎｄｉｎａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ）あるいはシロナンテン（Ｎａｎｄｉｎａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ  ｖａｒ．ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ）の葉，花，実，根，芽，幹等のいずれの部位を用いても構わないが、原料の入手の容易性や効果の点から、特に実の抽出物が好ましい。抽出の際は、生のまま用いてもよいが、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶媒に浸漬するか、超臨界流体や亜臨界流体を用いた抽出方法でも行うことができる。抽出効率を上げるため、撹拌や抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、１時間〜１４日間程度とするのが適切である。
【００１０】
抽出溶媒としては、水の他、メタノール，エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級アルコール、１，３−ブチレングリコール，プロピレングリコール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の多価アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸ブチル，酢酸エチル等のエステル類、アセトン，エチルメチルケトン等のケトン類等の溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよく、水や二酸化炭素，エチレン，プロピレン，エタノール，メタノール，アンモニア等の１種又は２種以上の超臨界流体や亜臨界流体を用いてもよい。これらの抽出溶媒の中でも、使用性や効果の点から、特にエタノール水溶液を用いるのが好ましい。
【００１１】
南天の上記溶媒による抽出物は、そのままでも使用することができるが、濃縮，乾固した物を水や極性溶媒に再度溶解したり、或いはこれらの生理作用を損なわない範囲で脱色，脱臭，脱塩等の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラフィー等による分画処理を行った後に用いてもよい。南天の前記抽出物やその処理物及び分画物は、各処理及び分画後に凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることもできる。
【００１２】
なお、本発明で用いる南天抽出物には、南天の葉，花，実，根，芽，幹等のいずれかの部位をそのまま乾燥し、粉末化したものも含まれ、南天エキスとして市販されているものを用いてもよい。
【００１３】
また、黒糖は、サトウキビ（Ｓａｃｃｈａｒｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｒｕｍ  Ｌ．）を粉砕・圧搾して得られた糖汁に活性炭・石灰等を用いて不純物を取り除いた後、加熱により煮詰めて固形化したものである。本発明においては、黒糖をそのまま用いてもよいが、さらに抽出や吸着樹脂を用いたカラムクロマトグラフィー等により分画処理を行った抽出物や分画物を用いることもできる。
【００１４】
本発明に係る南天抽出物及び黒糖は、優れたインターフェロンの産生促進作用を示し、特にインターフェロンβの産生促進作用に優れている。このため、南天抽出物及び黒糖は、インターフェロン産生促進剤として使用することができ、Ｂ型肝炎，Ｃ型慢性肝炎，腎癌，皮膚黒腫，慢性骨髄性白血病等の予防・治療、ストレスなどにより低下した免疫系の賦活や日常的な免疫力維持のための使用にも適している。
【００１５】
南天抽出物及び／又は黒糖を有効成分とするインターフェロン産生促進剤は、単独でも使用することが出来るが、医薬品，食品，飲料，化粧品等の種々の組成物に配合することにより、インターフェロン産生促進作用を有する組成物を得ることが出来る。インターフェロン産生促進剤を含有する組成物は、経口又は非経口での投与が可能であり、Ｂ型肝炎，Ｃ型慢性肝炎，腎癌，皮膚黒腫，慢性骨髄性白血病等の予防・治療のみならず、ストレスなどにより低下した免疫系の賦活や日常的な免疫力維持のための使用にも適している。
【００１６】
南天抽出物及び／又は黒糖を有効成分とするインターフェロン産生促進剤を配合する組成物の剤型は任意であるが、医薬品の場合には、錠剤，カプセル剤，顆粒剤，散剤，液剤，シロップ剤，うがい液等による経口投与又は貼付剤，点滴剤などによる非経口投与に用いられる一般的な剤型が挙げられる。化粧品の場合には、ローション等の可溶化系、乳液・クリーム等の乳化系，噴射剤と共に充填したエアゾール，軟膏剤，粉末，顆粒等の種々の剤型として提供することができる。また、食品の場合には、ドリンク剤，清涼飲料水，ドレッシング等の液剤，ガム・ドロップ剤，チョコレートのような固形剤，その他ヨーグルト，ゼリー，パン，惣菜，調味料等の一般的な剤型とすることができる。
【００１７】
南天抽出物及び／又は黒糖を有効成分とするインターフェロン産生促進剤を含有する組成物には、医薬品，食品，飲料，化粧品に使用される賦形剤，結合剤，増量剤，崩壊剤，界面活性剤，滑沢剤，分散剤，緩衝剤，防腐剤，保存剤，矯味剤，香料，保湿剤，粉体，色素，乳化剤，可溶化剤，洗浄剤，紫外線吸収剤，増粘剤，薬剤，樹脂，アルコール類等を適宜配合することができる。また、本発明の効果を損なわない範囲において、他のインターフェロン産生促進剤との併用も可能である。
【００１８】
【実施例】
さらに実施例により、本発明の特徴について詳細に説明する。まず、本発明の南天抽出物及び黒糖の製造例を示す。
【００１９】
［南天抽出物：製造例１］
シロナンテン（Ｎａｎｄｉｎａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ  ｖａｒ．ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ）の実の乾燥粉砕物１ｋｇに５０重量％エタノール水溶液を１０リットル加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、南天抽出物１を得た。
【００２０】
［南天抽出物：製造例２］
シロナンテン（Ｎａｎｄｉｎａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ  ｖａｒ．ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ）の実の乾燥粉砕物１ｋｇに水を１０リットル加え、９０℃にて６時間還流して抽出した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、南天抽出物２を得た。
【００２１】
［南天抽出物：製造例３］
ナンテン（Ｎａｎｄｉｎａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ）の葉の乾燥粉砕物１ｋｇに３０重量％エタノール水溶液を１０リットル加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、南天抽出物３を得た。
【００２２】
［黒糖：製造例４］
サトウキビ（Ｓａｃｃｈａｒｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｒｕｍ  Ｌ．）を粉砕・圧搾して得られた糖汁に石灰を加えて加熱し、沈殿した不純物を取り除いた。その後、さらに７５〜８０℃に加熱して濃縮し、２５℃まで冷却して固形化し、黒糖を得た。
【００２３】
次に、南天抽出物と黒糖のインターフェロン産生促進作用について示す。試料には、南天抽出物１（製造例１）と黒糖（製造例４）を用いた。
試料１：南天抽出物０．５ｍｇ／ｍＬ
試料２：黒糖０．５ｍｇ／ｍＬ
試料３：南天抽出物０．１２５ｍｇ／ｍＬ及び黒糖０．１２５ｍｇ／ｍＬ
試料４：南天抽出物０．２５ｍｇ／ｍＬ及び黒糖０．２５ｍｇ／ｍＬ
試料５：南天抽出物０．５ｍｇ／ｍＬ及び黒糖０．５ｍｇ／ｍＬ
【００２４】
評価は、以下の手順で行った。ヒト骨肉種細胞株ＭＧ−６３細胞を５％ＦＢＳ−ＤＭＥＭ培地で３．０×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬに調製し、１ウェル当り３００μＬの細胞懸濁液を４８ウェルプレートに播き、３７℃，５％ＣＯ２インキュベーターにて２４時間培養した。翌日、培養上清を除去し、５％ＦＢＳ−ＤＭＥＭ培地で希釈した試料溶液を３００μＬ添加し、２４時間培養した。その後、０．２μｇ／ｍＬのポリ（Ｉ）・ポリ（Ｃ），５μｇ／ｍＬのシクロヘキシミド，各試料を添加した２％ＦＢＳ−ＤＭＥＭ培地に交換して４時間培養した。次に、４μｇ／ｍＬのアクチノマイシンＤを添加し、さらに１時間培養した。培養上清を除去し、リン酸緩衝液で２回洗浄し、２％ＦＢＳ−ＤＭＥＭ培地に交換して１２時間培養後に、培養上清中のインターフェロンβ量を、ＥＬＩＳＡ法により定量した。これらの評価結果を、ブランクのインターフェロンβ産生量を１００とした場合の相対値にて表１に示す。なお、表中の＊及び＊＊は、ｔ検定における有意確率Ｐ値に対し、有意確率５％未満の危険率（Ｐ＜０．０５）で有意差が認められたものを＊で、有意確率１％未満の危険率（Ｐ＜０．０１）で有意差が認められたものを＊＊で表したものである。
【００２５】
【表１】
2005008577.tif 000002
【００２６】
表１より明らかなように、南天抽出物と黒糖を添加した培地では、有意なインターフェロン産生促進作用が認められた。特に、南天抽出物と黒糖をそれぞれ０．５ｍｇ／ｍＬ添加した場合（試料１，２）には、ブランクと比較して危険率５％未満で有意なインターフェロン産生促進作用が認められ、さらに南天抽出物と黒糖を同時に０．２５〜１．０ｍｇ／ｍＬ同時に添加した場合（試料３〜５）には、ブランクと比較して危険率１％未満で有意なインターフェロン産生促進作用が認められた。これらことから、南天抽出物と黒糖は、優れたインターフェロン産生促進作用を有し、南天抽出物と黒糖を併用した場合には、それぞれを単独で添加した場合よりも優れたインターフェロン産生促進作用を発揮することが明らかとなった。
【００２７】
【発明の効果】
以上詳述したように、本発明によれば、優れた効果を発揮するインターフェロン産生促進剤を提供することができる。また、該インターフェロン産生促進剤を種々の組成物に配合することにより、インターフェロン産生促進作用を有する組成物を得ることが出来る。