(57)【要約】【課題】有機溶媒の使用を極力避けて生体内分解性および徐放性能を併せもち、３日間以上にわたりヒト成長ホルモンが徐放され、初期バースト放出が抑制され、ヒト成長ホルモン含有率も１０％  以上とすることができ、ヒト成長ホルモンを定量的に最大２０％まで吸着封入することができ、かつ分散性、通針性も良好であるヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤及びその製造方法を提供すること。【解決手段】多孔性アパタイト誘導体、ヒト成長ホルモンおよび水溶性２価金属化合物からなること。多孔性アパタイト誘導体の微粒子をヒト成長ホルモン含有の水中に撹拌・分散し、水溶液が該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤した後、水溶性２価金属化合物を含む水溶液を添加し、水溶性２価金属化合物を該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤させ、その後、安定剤などの添加物を加えて凍結または真空乾燥させることによって製造されること。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
多孔性アパタイト誘導体と、その多孔性アパタイト誘導体に含有されるヒト成長ホルモンおよび水溶性２価金属化合物からなることを特徴とするヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤。
【請求項２】
多孔性アパタイト誘導体がヒドロキシアパタイトの構成成分であるカルシウムの一部を製造時に亜鉛に置換した多孔性アパタイト誘導体であることを特徴とする請求項１記載のヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤。
【請求項３】
多孔性アパタイト誘導体の亜鉛置換または含有率が０．１〜２．０であることを特徴とする請求項２記載のヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤。
【請求項４】
多孔性アパタイト誘導体中のヒト成長ホルモン含有量が１０〜４０％であることを特徴とする請求項２記載のヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤。
【請求項５】
水溶性２価金属化合物が亜鉛化合物であることを特徴とする請求項１記載のヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤。
【請求項６】
水溶性２価金属化合物が塩化亜鉛であることを特徴とする請求項４記載のヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤。
【請求項７】
多孔性アパタイト誘導体の微粒子をヒト成長ホルモン含有の水中に撹拌・分散し、水溶液が該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤したのち水溶性２価金属化合物を含む水溶液を添加し、水溶性２価金属化合物を該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤させ、その後、安定剤などの添加物を加えて凍結または真空乾燥させることによって製造されることを特徴とするヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生体内で消失する多孔性アパタイト誘導体の微粒子を基剤とするヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤およびその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
水溶性薬物の長期間にわたる徐放性注射剤は、これまでポリ乳酸・グリコール酸（ＰＬＧＡ）を基剤にしてその多くは検討されてきた（例えば、特許文献１，特許文献２，特許文献３参照）。又、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）を含有するＰＬＧＡを基剤とした徐放性マイクロカプセルが報告されている（例えば、非特許文献１参照）。又、ＬＨＲＨアゴニストであるリュープロレリンを含有するＰＬＧＡを基剤とした徐放性マイクロカプセルが報告されている（例えば、非特許文献２参照）。ＰＬＧＡは生体内で加水分解して消失する生体内消化性の基剤で注射剤の基剤としては好ましい性質を有している。しかし、一般的にＰＬＧＡを使用する徐放性製剤を製造する際には、それを溶解する有機溶剤を使用するが、ｈＧＨは、有機溶剤中で変性し、一部が失活する。このような活性の低下は、有効性を損なうのみならず、生体にもわるい影響をもたらす危険性がある。さらに、ｈＧＨは、水溶性が高く、ＰＬＧＡ製剤を用いると投与初期に過剰な放出をすることは避けられない。その他、ハイドロゲルなどの使用が報告されているが通常の注射投与は困難である。すなわち、ゲルが注入可能となる太い針を使用しなければならず、患者にとって好ましいものではない。また、ヒドロキシアパタイトと生物活性薬剤であるヒト成長ホルモンを用いた徐放性粒子についてすでに報告はある（例えば非特許文献３、非特許文献４参照）。しかし、いずれも２成分系であり、アパタイトの粒子径も４０から８０μｍ  あるいは２００μｍと大きくそのため注射するのが困難であり、又、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける徐放効果は不明である。又、アパタイト粒子に吸着したｈＧＨ量（封入量）も１％  以下と小さいものであった。
【０００３】
【特許文献１】
特開平１１−２８６４０３（請求項１）
【特許文献２】
特開２０００−２３９１０４（請求項１）
【特許文献３】
特開２００２−３２６９６０（請求項１３，１５）
【非特許文献１】
Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  ２：  ７９５−７９９，  １９９６
【非特許文献２】
Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，  ３６：  １０９５−１１０３，  １９８８
【非特許文献３】
Ｈ．  Ｇａｕｔｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ：  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｍａｔｅｒｉａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ４０，  ６０６−６１３，  １９９８
【非特許文献４】
Ｊ．  Ｇｕｉｃｈｅｕｘ  ｅｔ  ａｌ：  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｍａｔｅｒｉａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ３４，  １６５−１７０，  １９９７
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
ｈＧＨの徐放性製剤に関して、徐放性基剤には、投与後、薬物放出が終了する頃に生体内から消失するいわゆる生体内分解性あるいは生体内消失性の性質を有する素材を選定しなければならない。又、その製造に際しては、有機溶媒の使用を極力避けて徐放性製剤を調製し、ｈＧＨの変性を回避すると同時に投与初期に過剰の薬物が放出される初期バースト放出も小さいものでなければならない。又、微粒子製剤中の薬物封入量は１０重量％以上とし、細い注射針でも容易に投与可能であり、薬物徐放期間は少なくとも３日間以上にわたる製剤を調製するものでなければならない。
【０００５】
本発明者らは、これらの問題を解決するために、多孔性アパタイト誘導体の微粒子を利用することによって、生体内分解性および徐放性能を併せもつ製剤が有機溶媒を使用することなしに得られることをみいだした。さらに、ｈＧＨ及び水溶性２価金属化合物を併用することによって少なくとも３日間以上にわたりｈＧＨが徐放されること、ならびに初期バースト放出が抑制されることをみいだした。さらに、ｈＧＨ含有率も１０％  以上とすることができ、最大２０％のｈＧＨを定量的に吸着含有させることができることを見いだした。また、得られた微粒子製剤は、分散性、通針性も良好で２７Ｇの注射針を容易に通過することを見いだした。
【０００６】
そこで、本発明は、有機溶媒の使用を極力回避し生体内分解性および徐放性能を併せもち、３日間以上にわたりヒト成長ホルモンが徐放され、初期バースト放出が抑制され、ヒト成長ホルモン含有率も１０％  以上とすることができ、最大２０％のヒト成長ホルモンを定量的に吸着含有させることができ、かつ分散性、通針性も良好であるヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤及びその製造方法を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
ヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤は、
多孔性アパタイト誘導体と、その多孔性アパタイト誘導体に含有されるヒト成長ホルモンおよび水溶性多価金属化合物からなるものであり、水溶性多価金属化合物としては、塩化亜鉛、塩化カルシウム、水酸化カルシウム、塩化鉄、水酸化鉄、塩化コバルト、塩化アルミニウム、酢酸亜鉛などがあげられるが、なかでも水溶性２価金属化合物が最も好ましい。水溶性２価金属化合物としては亜鉛化合物及びカルシウム化合物が好適であるが、塩化亜鉛が最も好ましい。その他酢酸亜鉛、塩化カルシウム等も好適である。
又、多孔性アパタイト誘導体がヒドロキシアパタイトの構成成分であるカルシウムの一部を製造時に亜鉛に置換または含有させた多孔性アパタイト誘導体であることが好適である。
又、多孔性アパタイト誘導体の亜鉛置換率が０．１〜２．０であることが好適である。
又、多孔性アパタイト誘導体中のヒト成長ホルモン含有量が１０〜４０％であることが好適である。
【０００８】
さらに、本発明のヒト成長ホルモンの徐放性微粒子製剤の製造方法は、多孔性アパタイト誘導体の微粒子をヒト成長ホルモン含有の水中に撹拌・分散し、水溶液が該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤した後、水溶性２価金属化合物を含む水溶液を添加し、水溶性２価金属化合物を該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤させ、その後、安定剤などの添加物を加えて凍結または真空乾燥させることからなる。
【０００９】
ここで得られるｈＧＨの徐放性微粒子製剤は、水にゆっくりと溶解する多孔性アパタイト誘導体（ヒドロキシアパタイトの構成成分であるカルシウムの一部を他の金属に置換した多孔性アパタイト誘導体、好ましくは亜鉛置換体）、ｈＧＨおよび水溶性２価金属化合物からなる該ｈＧＨの徐放性微粒子製剤である。さらに好ましくは、水に溶解する多孔性アパタイト誘導体のうちカルシウムの亜鉛置換または含有率が０．１〜２．０である上記の徐放性微粒子製剤で、このとき、水溶性２価金属化合物が亜鉛化合物である上記のｈＧＨの徐放性微粒子製剤である。
【００１０】
上記のｈＧＨ徐放性微粒子製剤の基本的な製造方法は、多孔性アパタイト誘導体の微粒子をｈＧＨ含有の水中に分散し、十分に水溶液が該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤したのち水溶性２価金属化合物を含む水溶液を添加し、水溶性２価金属化合物を十分に該多孔性アパタイト誘導体中に浸潤させる。その後、適当な安定剤などの添加物を加えて凍結または真空乾燥することによってｈＧＨを含む多孔性アパタイト誘導体微粒子を基剤とする粉末の徐放性微粒子製剤を得る。実際に投与するときには、この粉末を適当な分散媒中に分散させて、皮下または筋肉内などに注射投与する。
【００１１】
このようにして得られた微粒子を室温で多量の精製水中に分散させることによって封入したｈＧＨの脱離を測定すると、多孔性アパタイト誘導体類により異なるが、多孔性アパタイト誘導体類に対するｈＧＨの量が一定量以下の場合にはｈＧＨは脱離しなかった。すなわち、ｈＧＨは、多孔性アパタイト誘導体類の細孔内に浸潤して吸着しているものと考えられる。
【００１２】
ここで使用する多孔性アパタイト誘導体の微粒子は、既知の方法で得ることができる。たとえば、「山口喬・柳田博明編、牧島亮男・青木秀希著：セラミックスサイエンスシリーズ７バイオセラミックス．技報堂出版株式会社、７−９ページ，１９８４」に記載されている方法などが挙げられる。多孔性アパタイト誘導体としては、ヒドロキシアパタイトの組成としてＣａの一部を亜鉛（Ｚｎ）で置換したものが最も好ましい。その置換率または含有率（ヒドロキシアパタイトのＣａ１０原子に対する置換されたＺｎの原子数）は、０．１〜５．０が好ましく、０．５〜２．０がより好ましい。このとき、（Ｃａ＋Ｚｎ）／Ｐの比率によって生体内での消失速度が異なり、１．６７よりも小さい方が水に溶けやすく、すなわち生体内で消失する速度が速くなる。（Ｃａ＋Ｚｎ）／Ｐの比が１．６７〜１．５１の範囲内であることが好ましい。また、ヒドロキシアパタイトを製造するときの処理温度は、低い方が水に溶けやすく、したがって生体内での消失速度も速くなる。処理温度は、室温〜８００℃が用いられるが、１５０℃〜６００℃が好ましい。さらには１５０℃〜４００℃がより好ましい。８００℃以上で焼成されると生体内で消失しなくなる。また、１００℃以下で処理すると粒子同士が凝集しやすくなり、通常の注射投与が困難となる。微粒子の粒子径は、処理温度で制御できるが０．１μｍ〜１００μｍの範囲で使用できる。このうち、０．１μｍ〜２０μｍが好ましい。さらには、０．２μｍ〜１０μｍがより好ましく利用できる。
【００１３】
ｈＧＨの多孔性アパタイト誘導体への吸着率はＺｎ置換率または含有率の大きい誘導体の方がはるかに大きかった。これは亜鉛を置換または含有させることで、有意に比表面積・気孔率が高くなるためである。吸着率が大きいほど徐放性製剤の総投与量が少なくなり好ましい。好ましい吸着率は、ｈＧＨの徐放期間によって異なるが、一般的には、多孔性アパタイト誘導体の２〜３０重量％である。このうち５〜２５重量％が好ましく用いられる。さらには１０重量％以上吸着するものがより好ましい。
【００１４】
多孔性アパタイト誘導体にｈＧＨを吸着させた後、添加する水溶性２価金属化合物は、ＺｎまたはＣａ化合物が好ましい。なかでもＺｎ化合物がもっとも好ましい。その使用量は、塩化亜鉛換算で多孔性アパタイト誘導体の１０〜１００重量％の範囲が好ましく、十分な徐放性を維持させるには、２０〜７０重量％が好ましい。使用される水溶性２価金属化合物は、塩化物、有機酸の塩が好んで用いられる。たとえば塩化亜鉛、酢酸亜鉛、塩化カルシウムなどが挙げられる。
【００１５】
最終的に得られた徐放性微粒子製剤の粒子径は、通常の投与に用いられる注射針を通過すればよい。実際には、注射針の径は細いほど患者に対する恐怖心も小さい。注射針の太さをあらわす国際基準で２５Ｇ以下（数字が大きいほど細くなる）の太さの針を通過することが好ましい。さらには２７Ｇ以下の太さの針を通過することがより好ましい。このため、徐放性微粒子製剤の粒子径は小さいほど好ましいが、極端に小さくすると薬物の保持量が少なくなり、かつ、初期バースト放出が大きくなる。したがって粒子径は、０．５μｍ〜２０μｍが好ましく、さらに０．５〜１０μｍがより好ましい。以上のようにして得られたｈＧＨを含有する徐放性微粒子製剤の徐放期間は、ＨＡＰ誘導体の焼成温度、２価金属化合物の使用量により制御でき、３日間以上にわたりｈＧＨ徐放が可能である。１週間以上にわたる徐放も可能で、実用的には１週間以上の徐放が好ましい。
【００１６】
【実施例】
以下に実施例をあげて本発明を詳細に記載するがもちろんこの例に限定されるものではない。
（実施例１）
１８０℃で焼成した多孔性ヒドロキシアパタイト粒子（ＨＡＰ）あるいは多孔性アパタイト誘導体（ＨＡＰ−Ｚｎ−０．５：  カルシウム９．５原子に対して亜鉛が０．５原子）５０ｍｇにＰＤ−１０カラム（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ）を用いて脱塩処理したヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）溶液（２５ｍｇ／ｍＬ）をＨＡＰに対しては２００μＬ，  ＨＡＰ−Ｚｎ−０．５に対しては７００μＬ添加し、タッチミキサーで１分間攪拌した。次に、水を最終液量が２．５ｍＬとなるようにそれぞれ添加し、さらに１分間攪拌した。３分静置させた後、３，０００  ｒｐｍ，  ３分間の遠心処理を行い、得られた沈殿に水２．５ｍＬを添加し、１分間攪拌した。再度、３，０００  ｒｐｍ，  ３分間の遠心処理を行い、得られた沈殿に１０．２ｍｇ／ｍＬ塩化亜鉛（和光純薬，  大阪）水溶液０．３３３ｍＬ（塩化亜鉛２５ｍｍｏｌ），  １ｍＬ（７５ｍｍｏｌ），  ２ｍＬ（１５０ｍｍｏｌ）を加え、タッチミキサーで攪拌した後、凍結乾燥して粉末状のサンプルを調製した。コントロールとして塩化亜鉛溶液のかわりに水を添加したサンプルも調製した。得られたサンプルの平均粒子径（体積換算）は、６〜８μｍで、最大２０μｍであった。得られたＨＡＰ−ｈＧＨおよびＨＡＰ−Ｚｎ−０．５−ｈＧＨサンプル中のｈＧＨ含量は、ｍｉｃｒｏ  ＢＣＡ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｓｓａｙ  ｋｉｔ  （Ｐｉｅｒｃｅ）により定量した。さらに、得られたサンプルのｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける放出性を比較した。放出性の評価方法は、以下の通りである。得られたそれぞれのサンプルを５ｍｇ精秤し、これにＰＢＳ（生理的食塩リン酸緩衝液）を０．２５０ｍＬ添加し、３７℃で攪拌した。３０００ｒｐｍ，  ３ｍｉｎ遠心処理によって経時的に上清を回収し、ゲル濾過ＨＰＬＣ分析（ＴＯＳＯ  Ｇ２０００ＳＷ−ｘｌ）により上清中に放出されたｈＧＨ量を定量し、サンプル中に含まれる総ｈＧＨ量に対する割合を算出した。この結果を表１  に示す。コントロールとして作製したｈＧＨのみをＨＡＰに作用させたサンプルに対して、塩化亜鉛を添加したサンプルでは塩化亜鉛の添加量に応じて、ＰＢＳ中へのｈＧＨの放出が顕著に抑制された。
【００１７】
表１    ｈＧＨを吸着させた多孔性アパタイト類微粒子製剤のｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける放出性に及ぼす塩化亜鉛の効果
2005008545.tif 000002
【００１８】
（実施例２）
ＨＡＰ中のカルシウムの一部を亜鉛に置換した３種類の多孔性アパタイト誘導体（ＨＡＰ−Ｚｎ−０．１：カルシウム９．９原子に対して亜鉛が０．１原子；  ＨＡＰ−Ｚｎ−０．５：カルシウム９．５原子に対して亜鉛が０．５原子；  ＨＡＰ−Ｚｎ−１．０：カルシウム９．０原子に対して亜鉛が１．０原子）及びＨＡＰ（すべて１８０度焼成品）１０ｍｇに対して、ＰＤ−１０カラムを用いて脱塩処理したｈＧＨ溶液（１０ｍｇ／ｍＬ）をそれぞれ５０μＬ、１００μＬ、２００μＬ、４００μＬ添加し、タッチミキサーで１分間攪拌した。さらに、水を最終的に  ５００μＬとなるように添加し１分間タッチミキサーで攪拌した。３分間静置させた後、３，０００  ｒｐｍ  ３分間の遠心処理を行い、得られた沈殿中に含まれるｈＧＨ量を、ｍｉｃｒｏ  ＢＣＡ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｓｓａｙ  ｋｉｔ  （Ｐｉｅｒｃｅ）により定量し、各サンプル中のｈＧＨ量を比較した。この操作によって各サンプル中には多孔性アパタイト誘導体類中に吸着したｈＧＨのみが検出されることになる。その結果を表２に示す。得られたサンプルの平均粒子径（体積換算）は、６〜８μｍで、最大２０μｍであった。亜鉛を置換した多孔性アパタイト誘導体では、亜鉛を置換していないＨＡＰと比較してｈＧＨの吸着量が有意に増加し、また導入された亜鉛の割合が増加するにつれ、ｈＧＨの吸着量は大きく増大した。ＨＡＰ−Ｚｎ−１．０を１０ｍｇ用いたときｈＧＨ作用量が２ｍｇまでは作用したｈＧＨ量の全てが吸着した。このときのｈＧＨ含有率は２０％である。
【００１９】
表２    多孔性アパタイト誘導体類中に吸着したｈＧＨ量の比較
2005008545.tif 000003
【００２０】
（実施例３）
ＨＡＰまたはＨＡＰ−Ｚｎ−０．５，  ５０ｍｇに対してｈＧＨ溶液（１０ｍｇ／ｍＬ）をＨＡＰに対しては０．５ｍＬ，  ＨＡＰ−Ｚｎ−０．５に対しては１．７５ｍＬ添加し、タッチミキサーで１分間攪拌した。次に、水を最終液量が２．５ｍＬとなるようにそれぞれ添加しさらに１分間タッチミキサーで攪拌した。３分間静置させた後、３，０００  ｒｐｍ，  ３分間の遠心処理を行い、得られた沈殿に水２．５ｍＬを添加し、再度１分間攪拌した。再度、３，０００  ｒｐｍ，  ３分間の遠心処理を行い、得られた沈殿に１０．２ｍｇ／ｍＬ塩化亜鉛（ＷＡＫＯ）水溶液をＨＡＰ−ｈＧＨには１ｍＬ  （７５ｍｍｏｌ）  、ＨＡＰ−Ｚｎ−ｈＧＨには２．２５ｍＬ（１８８ｍｍｏｌ）を加え、タッチミキサーで攪拌した後、凍結乾燥してサンプルを調製した（ＨＡＰ−ｈＧＨ  −塩化亜鉛，  ＨＡＰ−Ｚｎ−ｈＧＨ  −塩化亜鉛と記す）。コントロールとして塩化亜鉛溶液のかわりに水を添加したサンプルも調製した（ＨＡＰ−ｈＧＨあるいはＨＡＰ−Ｚｎ−ｈＧＨと記す）。得られたサンプルの平均粒子径（体積換算）は、コールターカウンターで測定したときいずれも６〜８μｍであった。得られたＨＡＰ−ｈＧＨおよびＨＡＰ−Ｚｎ−ｈＧＨサンプル中のｈＧＨ含量は、ｍｉｃｒｏ  ＢＣＡ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｓｓａｙ  ｋｉｔ  （Ｐｉｅｒｃｅ）により定量した。ＨＡＰ−ｈＧＨ，  ＨＡＰ−ｈＧＨ−塩化亜鉛，  ＨＡＰ−Ｚｎ−ｈＧＨ−塩化亜鉛を０．５％ＣＭＣ−Ｎａ，  ５％ｍａｎｎｉｔｏｌ，  ０．１％  Ｔｗｅｅｎ  ８０で懸濁し、雄性ＳＤ系ラットの背部皮下に１０ＩＵ／ｋｇ  （１ＩＵ：  ０．３５ｍｇ）で投与した。またｈＧＨを同じ溶媒で溶解させたものもコントロールとして投与を行った。
まず、投与時の各製剤の分散性及び通針性を表３に示す。ＨＡＰ−ｈＧＨでは分散性が悪く、２７Ｇの注射針を通過しなかった。それに対し、ＨＡＰ−Ｚｎ−ｈＧＨや塩化亜鉛を添加した製剤では、分散性、通針性は改善された。２７Ｇの注射針の通過性は、とりわけＨＡＰ−Ｚｎ−ｈＧＨ−塩化亜鉛が他の通過した２製剤に比べてより容易に通過した。
投与後、１，２，４，８時間後、以後１日毎に尾静脈より採血を行い、ｈＧＨの血中濃度をＥテスト「ＴＯＳＯＨ」  ＩＩ  （ＨＧＨ）を用いて測定した（全自動ＥＩＡ装置ＡＩＡ−６０００  （東ソー株式会社））。この結果を表４に示す。ｈＧＨ溶液を投与した場合、ｈＧＨは速やかに血中から消失し、投与８時間後には血中にｈＧＨは検出されなかった。また、ＨＡＰ−ｈＧＨの場合、初期に高いバーストが認められた。これに対し、ＨＡＰ−ｈＧＨ−塩化亜鉛では、著しく初期のバーストが抑えられ、１週間にわたる徐放効果が認められた。さらに、ＨＡＰ−Ｚｎ−ｈＧＨ−塩化亜鉛ではｈＧＨ含量を高められるとともに、血中ｈＧＨ濃度の持続性も高まることが確認された。また、投与２０日目に皮下に残存する製剤を肉眼で観察したところほとんどが消失していることが認められた。
【００２１】
表３    ｈＧＨを含有する多孔性アパタイト類微粒子製剤の通針性および分散性の比較
2005008545.tif 000004
【００２２】
表４    多孔性アパタイト類微粒子製剤をラット皮下に投与後の血中ｈＧＨ濃度推移
2005008545.tif 000005