(57)【要約】【目的】ネンジュモの抽出物を含有することを特徴とする細胞増殖促進剤及び皮膚外用剤を提供する。【構成】本発明は、ネンジュモの抽出物を含有することを特徴とする細胞増殖促進剤及び皮膚外用剤である。本発明で用いられるネンジュモは、ネンジュモ属の陸上藻で、ハッサイ(学名：Ｎｏｓｔｏｃ  ｃｏｍｍｕｎｅ  Ｖａｕｃｈ．  ｖａｒ．  ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍｅ)やイシクラゲ(学名：Ｎｏｓｔｏｃ  ｃｏｍｍｕｎｅ  Ｖａｕｃｈ．)などが挙げられる。 【特許請求の範囲】
【請求項１】
ネンジュモの抽出物を含有することを特徴とする細胞増殖促進剤。
【請求項２】
請求項１の細胞増殖促進剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な細胞増殖促進剤および皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ネンジュモは、藍藻の一種で、紫外線遮蔽能、抗菌作用、抗カビ作用、抗アレルギー作用そしてテストステロン−５α−リダクターゼ阻害作用が知られている（特許文献１〜５）が、細胞増殖促進作用は知られていない。
【０００３】
【特許文献１】特開昭６０−１３７０９
【特許文献２】特開平６−１１６１５９
【特許文献３】特開平７−２４２６８９
【特許文献４】特開平１０−２６５３９９
【特許文献５】特開２００２−６８９４３
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
表皮ケラチノサイトの分裂能低下にともなう表皮ターンオーバー速度の遅延が皮膚老化の原因のひとつと考えられる。そこで、表皮ケラチノサイトの分裂を促進することが皮膚老化の抑制につながると考えられる。表皮ケラチノサイトの分裂を促進する物質としては、ＥＧＦ、エストロジェン等が知られているが、これらの物質は安定性に問題があり、またその効果も十分ではなく、安定して表皮ケラチノサイト等の分裂を促進する細胞増殖促進剤が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記実情に鑑み、本発明者らは、安定で表皮ケラチノサイト等の分裂を促進する細胞増殖促進剤を見出すべく誠意研究を行った結果、ネンジュモの抽出物がその目的に合致することを見出し、本発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、ネンジュモの抽出物を含有することを特徴とする細胞増殖促進剤および皮膚外用剤に関するものである。
【０００７】
本発明で用いられるネンジュモは、藍藻綱ネンジュモ科ネンジュモ属の陸上藻で、ハッサイ(学名：Ｎｏｓｔｏｃ  ｃｏｍｍｕｎｅ  Ｖａｕｃｈ．  ｖａｒ．  ｆｌａｇｅｌｌｉｆｏｒｍｅ)やイシクラゲ(Ｎｏｓｔｏｃ  ｃｏｍｍｕｎｅ  Ｖａｕｃｈ．)などが挙げられる。近年、循環器系疾患や癌などの成人病の予防・治療などに効果があるとして注目されている。また、髪菜として中国料理に利用されているので、市販品を利用することができる。
【０００８】
本発明で使用するネンジュモの抽出物とは、例えば、市販されている髪菜の乾燥品を細断し抽出することができる。その調製方法は特に限定されず、例えば加熱抽出したものであってもよいし、常温抽出されたものであってもよい。
【０００９】
抽出する溶媒としては、例えば、水、低級１価アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、１−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノールなど）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンなど）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトンなど）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチルなど）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィンなど）、エーテル類（エチルエーテル、プロピルエーテルなど）が挙げられる。好ましくは、水、低級１価アルコールおよび液状多価アルコールがよく、特に好ましくは、水、エタノール、１，３−ブチレングリコールおよびプロピレングリコールがよい。また二酸化炭素などを用いた超臨界抽出も用いることができる。これらの溶媒は１種でも２種以上を混合して用いてもよい。
【００１０】
これらの抽出物は、抽出した溶媒のまま用いてもよく、必要に応じて、濃縮、希釈、ろ過などの処理をして用いてもよい。さらには、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥などの処理を行い、乾燥物として用いてもよい。
【００１１】
本発明のネンジュモの抽出物を含有することを特徴とする細胞増殖促進剤は、安定して表皮ケラチノサイト等の分裂を促進する細胞増殖促進作用を有するので、皮膚の老化の防止等に有用である。
【００１２】
本発明に関わる細胞増殖促進剤を上記の目的で用いるには、通常全身的または局所的に投与される。投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間などにより異なるが、通常成人１人当たり１回に１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは２０ｍｇ〜２００ｍｇの範囲で１日１回から数回投与される。もちろん前記したように、投与量は種々の条件で変動するので、上記投与範囲より少ない量で十分な場合もあるし、また、範囲を超えて投与する必要のある場合もある。
【００１３】
本発明の細胞増殖促進剤には、上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、希釈剤を用いることもできる。希釈剤としては固体、液体、半固体でも良く、例えば、次のものが挙げられる。すなわち、賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、香料、保存料、溶解補助剤、溶剤等である。具体的には、乳糖、ショ糖、ソルビット、マンニット、澱粉、沈降性炭酸カルシウム、重質酸化マグネシウム、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、セルロースまたはその誘導体、アミロペクチン、ポリビニルアルコール、ゼラチン、界面活性剤、水、生理食塩水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、カカオ脂、ラウリン脂、ワセリン、パラフィン、高級アルコール等である。
【００１４】
本発明における皮膚外用剤の代表的な製剤としては、クリーム、乳液、ローション、ヘアトニック、スプレー、パック、溶液剤、軟膏、乳剤、懸濁剤のような塗布剤などが挙げられる。これらの製剤には、有効成分以外に、水、エタノールのような低級アルコール、セタノールのような高級アルコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールのような多価アルコール、ヒドロキシプロピルセルロースのようなセルロース類、動物性および植物性の油脂およびロウ、ワセリンのような炭化水素、シリコン、界面活性剤、酸化亜鉛などを配合することができる。
【００１５】
本発明に用いる上記細胞増殖促進剤の配合量は、本発明の皮膚外用剤全量に対し、固形物に換算して０．０００１重量％以上、好ましくは０．００１〜９０重量％の配合が良い。また、添加の方法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【発明の効果】
【００１６】
本発明のネンジュモの抽出物は優れたケラチノサイトの細胞増殖促進効果を示す。また、本発明の細胞増殖促進剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤は優れた皮膚の老化防止効果を示した。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
次に、本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、本発明の処方例および実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量の部とは重量部を、％とは重量％を示す。
【実施例１】
【００１８】
製造例１  ネンジュモ熱水抽出物
ネンジュモ（髪菜）の細断品１００ｇに、精製水１ｋｇを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を減圧濃縮し、凍結乾燥してネンジュモ熱水抽出物を１０ｇ得た。
【００１９】
比較例１  クロレラ熱水抽出物
クロレラ乾燥品１００ｇに、精製水１ｋｇを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を減圧濃縮し、凍結乾燥してクロレラ熱水抽出物を９ｇ得た。
【００２０】
製造例２  ネンジュモ５０％１，３−ＢＧ抽出物
ネンジュモ（髪菜）の細断品１００ｇに、精製水５００ｇと１，３−ブチレングリコール５００ｇを加え、室温で２週間抽出した。抽出後、ろ過し、ネンジュモの５０％１，３−ＢＧ抽出物を９５０ｇ得た。
【００２１】
製造例３  ネンジュモエタノール抽出物
ネンジュモ（髪菜）１００ｇに、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液を１ｋｇを加え、室温で２週間抽出した。得られた抽出液を減圧濃縮し、ペースト状の抽出物を５ｇ得た。
【実施例２】
【００２２】
処方例１  ローション
処方                                                              配合量
１．ネンジュモ熱水抽出物（製造例１）                              ０．１部
２．１，３−ブチレングリコール                                    ８．０  
３．グリセリン                                                    ２．０
４．キサンタンガム                                                ０．０２  
５．クエン酸                                                      ０．０１  
６．クエン酸ナトリウム                                            ０．１
７．エタノール                                                    ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）                ０．１
１０．香料                                                        ０．１
１１．精製水                                                    ８４．４７
［製造方法］成分１〜６および１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合しろ過して製品とする。
【００２３】
比較例２  従来のローション
処方例１においてネンジュモ熱水抽出物を精製水に置き換えたものを従来のローションとした。
【００２４】
処方例２  クリーム
処方                                                              配合量
１．ネンジュモ熱水抽出物（製造例１）                              ０．０５部
２．スクワラン                                                    ５．５
３．オリーブ油                                                    ３．０  
４．ステアリン酸                                                  ２．０
５．ミツロウ                                                      ２．０  
６．ミリスチン酸オクチルドデシル                                  ３．５    
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）              ３．０    
８．ベヘニルアルコール                                            １．５    
９．モノステアリン酸グリセリン                                    ２．５    
１０．香料                                                        ０．１    
１１．１，３−ブチレングリコール                                  ８．５    
１２．パラオキシ安息香酸エチル                                    ０．０５  
１３．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．２    
１４．精製水                                                    ６８．１
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１および１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００２５】
処方例３  乳液
処方                                                              配合量
１．ネンジュモエタノール抽出物（製造例３）                        ０．５部
２．スクワラン                                                    ５．０    
３．オリーブ油                                                    ５．０    
４．ホホバ油                                                      ５．０    
５．セタノール                                                    １．５    
６．モノステアリン酸グリセリン                                    ２．０    
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）              ３．０    
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．）    ２．０    
９．香料                                                          ０．１    
１０．プロピレングリコール                                        １．０      
１１．グリセリン                                                  ２．０  
１２．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．２    
１３．精製水                                                    ７２．７
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１および１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００２６】
処方例４  ヘアトニック
処方                                                              配合量
１．エタノール                                                    ６０．０部
２．ネンジュモ５０％１，３−抽出物（製造例２）                      ２．０    
３．グリセリン                                                      ２．０    
４．精製水                                                        ３６．０
［製造方法］ネンジュモの抽出物をエタノールに溶解し、グリセリン、精製水を加え、十分かく拌混合し、製品とする。
【００２７】
処方例５  パック  
処方                                                              配合量
１．ネンジュモ熱水抽出物（製造例１）                              ０．１部
２．ポリビニルアルコール                                        １２．０  
３．エタノール                                                    ５．０    
４．１，３−ブチレングリコール                                    ８．０    
５．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．２    
６．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．）                ０．５    
７．クエン酸                                                      ０．１    
８．クエン酸ナトリウム                                            ０．３    
９．香料                                                          ０．１
１０．精製水                                                    ７３．７
［製造方法］成分１〜１０を均一に溶解し製品とする。
【００２８】
次に本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【実施例３】
【００２９】
ケラチノサイトの細胞増殖促進試験
培養ケラチノサイトの細胞増殖促進効果を下記の条件にて測定した。
【００３０】
マウスケラチノサイト由来Ｐａｍ２１２細胞を３５ｍｍディッシュに３０，０００個播種し、試料を最終濃度で１μｇ／ｍｌとなるように添加した０．５％ウシ胎児血清を含むＥａｇｌｅ’ｓ  ＭＥＭ培養液で３７℃、５％ＣＯ２条件下、６日間培養した。その後、０．２５％トリプシン溶液にて細胞を剥離し、血球計算盤を用いて細胞数を測定した。コントロールの細胞数に対する試料添加時の細胞数値からケラチノサイトの細胞増殖促進率を求めた。比較例として、製造例１と同様にして調製したクロレラ抽出物を用いた（比較例１）。
【００３１】
これらの試験結果を表１に示した。その結果、ネンジュモの抽出物には優れたケラチノサイトの細胞増殖促進効果が認められた。
【００３２】
【表１】
2005132734.tif 000002
【実施例４】
【００３３】
使用試験
処方例１のローション及び比較例２の従来のローションを用いて、各々女性３０人（３０〜４５才）を対象に２ヶ月間の使用試験を行った。使用後、しわ、たるみ、肌の弾力についてのアンケート調査を行って、老化防止効果を判定した。アンケートの評価基準は、有効なものを「優」、やや有効なものを「良」、わずかに有効なものを「可」、無効なものを「不可」として評価した。
【００３４】
これらの結果を表２に示した。処方例１のネンジュモの抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤は優れた老化防止効果を示した。なお、試験期間中皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。
【００３５】
【表２】
2005132734.tif 000003
【００３６】
処方例２のクリーム、処方例３の乳液の使用試験を行ったところ、いずれも安全で優れた老化防止効果を示した。
【産業上の利用可能性】
【００３７】
本発明は、皮膚の老化防止効果を有する細胞増殖促進剤および皮膚外用剤を提供する。