(57)【要約】【課題】プロテインチロシンキナーゼ、特にＳｒｃファミリーキナーゼに対して強力な阻害活性を有し、医薬品として有用な新規な化合物を提供する。【解決手段】一般式（Ｉ）：【化１】2005008581.tif 000072〔式中、Ｒ１は非置換もしくは置換フェニル等であり、Ｒ２は水素、低級アルキル、ハロ低級アルキル、シクロアルキル、非置換もしくは置換フェニル、ヘテロアリール等であり、Ｒ３は水素、ハロゲンまたはアラルキルであり、Ａは水素、低級アルキル、Ｒ４またはＮＲ５Ｒ６である〕で表される化合物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
2005008581.tif 000065
〔式中、
Ｒ１は、以下のａ）〜ｃ）：
ａ）非置換もしくはＸ１、Ｘ２およびＸ３からなる群から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基、
ｂ）ヘテロアリール基、または
ｃ）アラルキル基であり、
ここで、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、それぞれ独立して、以下のａ）〜ｇ）：
ａ）ハロゲン原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）ハロ低級アルキル基、
ｄ）低級アルコキシ基、
ｅ）ジ低級アルキルアミノ基、
ｆ）環状アミノ基、または
ｇ）以下からなる群：ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルコキシ基であり；
Ｒ２は、以下のａ）〜ｇ）：
ａ）水素原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）ハロ低級アルキル基、
ｄ）シクロアルキル基、
ｅ）以下からなる群：水酸基、低級アルコキシ基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基、ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルキル基であり、
ｆ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基、または
ｇ）ヘテロアリール基であり；
Ｒ３は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基またはアラルキル基であり；
Ａは、以下のａ）〜ｄ）：
ａ）水素原子、
ｂ）低級アルキル、
ｃ）Ｒ４、または
ｄ）ＮＲ５Ｒ６であり；
Ｒ４は、非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基および水酸基から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基であり、
Ｒ５は、水素原子、低級アルキル基、シクロアルキル基またはシクロアルキル低級アルキル基であり；
Ｒ６は、以下のａ）〜ｇ）：
ａ）水素原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）シクロアルキル低級アルキル基、
ｅ）Ｒ４、
ｆ）アラルキル基、
ｇ）以下の式：
【化２】
2005008581.tif 000066
で表される基を表すか、あるいはＲ５とＲ６が、それらが結合している窒素原子と一緒になって式：
【化３】
2005008581.tif 000067
で表される基を形成し；
Ｒ７は、水素原子または低級アルキル基であり；
Ｒ８は、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルキル基、スルファニル低級アルキル基、低級アルキルスルファニル低級アルキル基、アラルキル基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基またはカルバモイル基であり；
Ｒ９は、水酸基、アミノ基、低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、低級アルコキシカルボニルアミノ基、低級アルコキシカルボニル低級アルキルアミノ基、カルバモイル基、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基またはホスホノオキシ基であり；
Ｒ１０は、水酸基またはアミノ基であり；
Ｒ１１は、水酸基、ヒドロキシ低級アルキル基またはアミノ基であり；
ａは、０、１または２であり；
Ａ１は、結合またはＣ１−４アルキレン基であり；
Ａ２は、結合またはＣ１−６アルキレン基であり；
Ａ３は、Ｃ１−６アルキレン基であり；
Ａ４は、結合またはＣ１−６アルキレン基であり；
Ａ５は、Ｃ１−６アルキレン基である〕
で表される化合物またはそのプロドラッグ、あるいはそれらの薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１が、非置換もしくはＸ１、Ｘ２およびＸ３からなる群から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基であり、
ここで、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、以下のａ）〜ｆ）：
ａ）ハロゲン原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）低級アルコキシ基、
ｄ）ジ低級アルキルアミノ基、
ｅ）環状アミノ基、または
ｆ）以下からなる群：ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルコキシ基であり、
Ｒ３が、水素原子であり；
Ａが、ＮＲ５Ｒ６であり；
Ｒ５が、水素原子、低級アルキル基、シクロアルキル基またはシクロアルキル低級アルキル基であり；
Ｒ６が、以下のａ）〜ｇ）：
ａ）水素原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）シクロアルキル低級アルキル基、
ｅ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基および水酸基から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基、
ｆ）アラルキル基、
ｇ）以下の式：
【化４】
2005008581.tif 000068
で表される基を表すか、あるいはＲ５とＲ６が、それらが結合している窒素原子と一緒になって式：
【化５】
2005008581.tif 000069
で表される基を形成し；
Ｒ７が、水素原子または低級アルキル基であり；
Ｒ８が、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルキル基、スルファニル低級アルキル基、低級アルキルスルファニル低級アルキル基、アラルキル基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基またはカルバモイル基であり；
Ｒ９が、水酸基、アミノ基、低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、カルバモイル基、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基またはホスホノオキシ基であり；
Ｒ１０が、水酸基またはアミノ基であり；
Ｒ１１が、水酸基、ヒドロキシ低級アルキル基またはアミノ基であり；
ａが、０、１または２であり；
Ａ１が、結合またはＣ１−４アルキレン基であり；
Ａ２が、結合またはＣ１−６アルキレン基であり；
Ａ３が、Ｃ１−６アルキレン基であり；
Ａ４が、結合またはＣ１−６アルキレン基であり；
Ａ５が、Ｃ１−６アルキレン基である、請求項１に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項３】
Ａが、式：
【化６】
2005008581.tif 000070
で表される基であり、
ここで、Ｒ７が、水素原子または低級アルキル基であり、
Ｒ８が、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルキル基またはアラルキル基であり、
Ｒ９は、水酸基、アミノ基、低級アルキルアミノ基、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基またはホスホノオキシ基であり、
Ａ１が、結合またはＣ１−４アルキレン基である、請求項２に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項４】
Ａが、式：
【化７】
2005008581.tif 000071
で表される基であり、
ここで、Ａ４が、結合またはＣ１−６アルキレン基であり、
Ａ５が、Ｃ１−６アルキレン基であり、
Ｒ１１が、水酸基またはヒドロキシ低級アルキル基である、請求項２に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ１が、非置換もしくはＸ１、Ｘ２およびＸ３からなる群から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基であり、
ここで、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、以下のａ）またはｂ）：
ａ）低級アルコキシ基、または
ｂ）以下からなる群：ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルコキシ基である、請求項３または４に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項６】
以下の化合物群：
（Ｒ）−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（２−ヒドロキシメチルピロリジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルブチルアミノ）−５−イソプロピルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルプロピルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルブチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−５−シクロプロピル−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルプロピルアミノ）−２−（４−モルホリン−４−イルフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−（２−フルオロフェニル）−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルプロピルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−５−シクロプロピル−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルプロピルアミノ）−２−［３−メトキシ−５−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）フェニルアミノ］ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；
７−（２−アミノ−２−メチルプロピルアミノ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；
７−（２−アミノ−２−メチルプロピルアミノ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−エチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；
７−（２−アミノ−２−メチルプロピルアミノ）−５−（２−クロロフェニル）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド；および
（Ｒ）−リン酸−モノ−｛２−［３−カルバモイル−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イルアミノ］｝−３−メチルブチル、
またはその薬理学的に許容される塩から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、プロテインチロシンキナーゼ関連疾患の治療または予防剤。
【請求項９】
前記プロテインチロシンキナーゼ関連疾患が、癌である、請求項８に記載の治療または予防剤。
【請求項１０】
前記プロテインチロシンキナーゼ関連疾患が、骨粗しょう症、パジェット病、高カルシウム血症または変形性関節炎である、請求項８に記載の治療または予防剤。
【請求項１１】
前記プロテインチロシンキナーゼ関連疾患が、パーキンソン病、てんかん、脳浮腫または急性期脳梗塞である、請求項８に記載の治療または予防剤。
【請求項１２】
前記プロテインチロシンキナーゼ関連疾患が、Ｔ細胞関連疾患である、請求項８に記載の治療または予防剤。
【請求項１３】
前記Ｔ細胞関連疾患が、自己免疫性疾患、移植片対宿主病、臓器移植による拒絶反応である、請求項１２に記載の治療または予防剤。
【請求項１４】
前記プロテインチロシンキナーゼが、Ｓｒｃファミリーキナーゼである、請求項８に記載の治療または予防剤。
【請求項１５】
前記プロテインチロシンキナーゼが、Ｓｒｃである、請求項８に記載の治療または予防剤。
【請求項１６】
前記プロテインチロシンキナーゼが、Ｌｃｋである、請求項８に記載の治療または予防剤。
【請求項１７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩と、Ｓｒｃファミリーキナーゼ阻害剤以外の骨疾患用剤、抗パーキンソン剤、抗てんかん薬、急性期脳梗塞治療薬およびＴ細胞関連疾患治療薬から選択される少なくとも１種とを組み合わせてなる医薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、プロテインチロシンキナーゼ阻害作用、特にＳｒｃファミリーキナーゼ阻害作用を有する新規なピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体、それを含有する医薬組成物およびそれらの用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】
プロテインチロシンキナーゼは、細胞蛋白質の特定のチロシン残基のリン酸化を触媒する酵素であり、細胞の活性化、増殖および分化の調節に重要な役割を果たしている（例えば、非特許文献１参照）。このプロテインチロシンキナーゼの異常な発現、刺激または変異は、様々な疾病をもたらすと考えられている。
【０００３】
Ｓｒｃファミリーキナーゼは、非レセプター型プロテインチロシンキナーゼの１つである。Ｓｒｃファミリーキナーゼのメンバーとして、８つのキナーゼ（Ｓｒｃ，  Ｙｅｓ，  Ｆｙｎ，  Ｆｇｒ，  Ｂｌｋ，  Ｌｃｋ，  ＬｙｎおよびＨｃｋ）が発見されている。Ｓｒｃファミリーキナーゼは、正常細胞においては高度に制御されており、細胞外刺激のない状態では、不活性なコンフォーメーションに維持されている。
【０００４】
Ｓｒｃは、多くのヒトの癌において活性化されている。例えば、乳癌（例えば、非特許文献２参照）、胃癌、結腸癌、直腸癌（例えば、非特許文献３および４参照）、非小細胞肺癌（例えば、非特許文献５参照）、卵巣癌（例えば、非特許文献６参照）など）において、非常に活性化されていることが知られている。Ｓｒｃ活性の変化は、細胞周期の変化と関連しており（例えば、非特許文献７参照）、Ｓｒｃ活性の調節の変化は、腫瘍形成とも関連している（例えば、非特許文献８、９、１０および１１参照）。さらに卵巣癌および直腸癌細胞に発現されたアンチセンスＳｒｃは、癌の増殖を阻害することが示されている（例えば、非特許文献６および１２参照）。従って、Ｓｒｃの阻害剤は、癌細胞の増殖を抑制すると期待される。
【０００５】
Ｓｒｃは、また、破骨細胞の骨吸収の制御に関与している（例えば、非特許文献１３、１４、１５および１６参照）。Ｓｒｃ遺伝子のノックアウトマウスは、骨石灰化を引き起こすことが示されている（例えば、非特許文献１３参照）。また、Ｓｒｃ阻害剤であるＨｅｒｂｉｍｙｃｉｎ  Ａは、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて破骨細胞の骨吸収を阻害することが知られている（例えば、非特許文献１７参照）。従って、Ｓｒｃの阻害剤は、骨疾患（例えば、骨粗しょう症、パジェト病、高カルシウム血症、変形性関節炎など）の予防または治療薬として有用であると期待される。
【０００６】
Ｓｒｃは、神経細胞のＮＭＤＡ受容体の活性化の制御に関与している（例えば、非特許文献１８参照）。Ｓｒｃ阻害剤は神経細胞内へのＣａ２＋の流入を抑制することにより、グルタミン酸の興奮毒性を解除し神経保護作用を示すと考えられる。またＳｒｃは、ＭＭＰ−９（ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ９）の産生抑制にも関与している（例えば、非特許文献１９参照）。ＭＭＰ−９は、脳卒中や脳損傷などの脳虚血に応答して産生され、血液脳関門の破綻を引き起こす１つの原因であると考えられている。この脳虚血後の血液脳関門の破綻は、脳浮腫や急性期脳梗塞をもたらすと考えられている。また脳梗塞モデルにおいて虚血再灌流後に、Ｓｒｃキナーゼが神経細胞に強発現することが報告されている。またＳｒｃは、炎症性細胞の遊走や接着にも関与しており、Ｓｒｃ阻害剤は炎症部位への好中球の接着阻害や好中球からの活性酸素産生を抑制すると考えられる（例えば、非特許文献２０参照）。このようにＳｒｃ阻害剤は、脳保護作用を有するので、パーキンソン病、てんかん、脳浮腫、急性期脳梗塞などの予防または治療薬として有用であると期待される。
【０００７】
Ｌｃｋは、免疫応答におけるＴ細胞の活性化に関係している。Ｔ細胞が、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を介して抗原提示細胞上の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）に提示された抗原と結合すると、そのシグナルは細胞質内に伝達され、ＴＣＲ／ＣＤ３ζ鎖中の  ｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ−ｂａｓｅｄ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｍｏｔｉｆｓ（ＩＴＡＭ）と称される部位のチロシン残基が、Ｌｃｋによってリン酸化される。ＺＡＰ−７０は、このリン酸化されたＩＴＡＭにリクルートされ、ＬｃｋによってＺＡＰ−７０のチロシン残基がリン酸化されるとＺＡＰ−７０は活性化される。活性化されたＺＡＰ−７０は、さらに下流へのシグナル伝達を媒介し、細胞内Ｃａ２＋の動員、インターロイキン２の産生、Ｔ細胞の増殖などを引き起こす（例えば、非特許文献２１参照）。従ってＬｃｋの阻害剤は、Ｔ細胞が関与する疾患、例えば、自己免疫疾患（乾癬、アトピー性皮膚炎、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ネフローゼ症候群など）、移植片対宿主病、臓器移植による拒絶反応の抑制などの治療薬として有用であると期待される。
【０００８】
Ｒｉｅｄ  Ｗ．らは、下記一般式：
【化８】
2005008581.tif 000002
（式中、Ｒａは、シアノまたはカルバモイルである）で表されるピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体を開示している（例えば、非特許文献２２参照）。
【０００９】
Ａｎｄｒｅｗ  Ｓ．Ｔ．らは、下記一般式：
【化９】
2005008581.tif 000003
（式中、Ｒｂは、シアノ、カルバモイルまたは−Ｃ（Ｏ）Ｎ＝Ｎ（ＣＨ３）２であり；Ｒｃは、フェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、３−トリフルオロフェニル、３−ピリジルまたは４−ピリジルであり；Ｒｄは、水素、メチルまたはトリフルオロメチルである；Ｘは、ＣＨ２、Ｏ、ＳまたはＮ（Ｒｅ）であり；Ｒｅは、メチル、フェニル、ベンジル、２−ピリジルである）で表される、血圧降下剤、抗不安薬、認知機能障害治療薬として有用なピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体を開示しているが、プロテインチロシンキナーゼ阻害作用については開示も示唆もされていない（例えば、特許文献１参照）。
【００１０】
【非特許文献１】
Ｓｃｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒ  Ｊ．ら，  「Ｎｅｕｒｏｎ」，  １９９２年，  ９巻，  ｐ．３８３−３９１
【非特許文献２】
Ｍｕｔｈｕｓｗａｍｙら，  「Ｏｎｃｏｇｅｎｅ」，  １９９５年，  １１巻，  ｐ．１８０１−１８１０
【非特許文献３】
Ｃａｒｔｗｒｉｇｈｔ  ＣＡ．ら，  「Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ」，  １９９０年，  ８７巻，  ｐ．５５８−５６２
【非特許文献４】
Ｍａｏら，  「Ｏｎｃｏｇｅｎｅ」，  １９９７年，  １５巻，  ｐ．３０８３−３０９０
【非特許文献５】
Ｂｕｄｄｅ  ＲＪＡ．ら，  「Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．」，  １９９４年，  １４巻，  ｐ．１７１−１７５
【非特許文献６】
Ｗｉｅｎｅｒ  ＪＲ．ら，  「Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」，  １９９９年，  ５巻，  ｐ．２１６４−２１７０
【非特許文献７】
Ｃｈａｃｋａｌａｐａｒａｍｐｉｌ  Ｉ．ら，  「Ｃｅｌｌ」，  １９８８年，  ５２巻，  ｐ．８０１−８１０
【非特許文献８】
Ｂｏｌｅｎ  ＪＢ．ら，  「Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．」，  １９８５年，  ８２巻，  ｐ．７２７５−７２７９
【非特許文献９】
Ｂｏｌｅｎ  ＪＢ．ら，  「Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ｒｅｓ．」，  １９８７年，  １巻，  ｐ．１４９−１６８
【非特許文献１０】
Ｚｈｅｎｇ  ＸＭ．ら，  「Ｎａｔｕｒｅ」，  １９９２年，  ３５９巻，  ｐ．３３６−３３９
【非特許文献１１】
Ｓａｂｅ  Ｈ．ら，  「Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．」，  １９９２年，  １２巻，  ｐ．４７０６−４７１３
【非特許文献１２】
Ｓｔａｌｅｙら，  「Ｃｅｌｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｄｉｆｆ．」，  １９９７年，  ８巻，  ｐ．２６９
【非特許文献１３】
Ｓｏｒｉａｎｏら，  「Ｃｅｌｌ」，  １９９１年，  ６４巻，  ｐ．６９３−７０２
【非特許文献１４】
Ｂｏｙｃｅら，  「Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．」，  １９９２年，  ９０巻，  ｐ．１６２２−１６２７
【非特許文献１５】
Ｙｏｎｅｄａら，  「Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．」，  １９９３年，  ９１巻，  ｐ．２７９１−２７９５
【非特許文献１６】
Ｍｉｓｓｂａｃｈら，  「Ｂｏｎｅ」，  １９９９年，  ２４巻，  ｐ．４３７−４４９
【非特許文献１７】
Ｒｏｄａｎ  ＧＡ．ら，  「Ｓｃｉｅｎｃｅ」，  ２０００年，  ２８９巻，  ｐ．１５０８−１５１４
【非特許文献１８】
Ｌｕ  ＷＹ．ら，  「Ｎａｔ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．」，  １９９９年，  ２巻，  ｐ．３３１−３３８
【非特許文献１９】
Ｓａｔｏ  Ｈ．ら，  「Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．」，  １９９３年，  ３１巻，  ｐ．２３４６０−２３４６８
【非特許文献２０】
Ｍｏｃｓａｉ  Ａ．ら，  「Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．」，  １９９９年，  １６２巻，  ｐ．１１２０−１１２６
【非特許文献２１】
Ｃｈｕ  ＤＨ．ら，  「Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ」，  １９９８年，  １６５巻，  ｐ．１６７−１８０
【非特許文献２２】
Ｒｉｅｄ  Ｗ．ら，  「Ｃｈｅｍｉｋｅｒ−Ｚｅｉｔｕｎｇ」，  １９８９年，  １１３巻，  ５号，  ｐ．１８１−１８３
【特許文献１】
米国特許第４５７６９４３号明細書
【００１１】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、プロテインチロシンキナーゼ阻害作用、好ましくはＳｒｃファミリーキナーゼ阻害作用を有する新規な化合物を提供することである。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、一般式（Ｉ）で表されるピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体が、優れたＳｒｃファミリーキナーゼ阻害作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、一般式（Ｉ）：
【化１０】
2005008581.tif 000004
〔式中、
Ｒ１は、以下のａ）〜ｃ）：
ａ）非置換もしくはＸ１、Ｘ２およびＸ３からなる群から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基、
ｂ）ヘテロアリール基、または
ｃ）アラルキル基であり、
ここで、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、それぞれ独立して、以下のａ）〜ｇ）：
ａ）ハロゲン原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）ハロ低級アルキル基、
ｄ）低級アルコキシ基、
ｅ）ジ低級アルキルアミノ基、
ｆ）環状アミノ基、または
ｇ）以下からなる群：ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルコキシ基であり；
Ｒ２は、以下のａ）〜ｇ）：
ａ）水素原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）ハロ低級アルキル基、
ｄ）シクロアルキル基、
ｅ）以下からなる群：水酸基、低級アルコキシ基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基、ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルキル基であり、
ｆ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、ハロ低級アルキル基および低級アルコキシ基から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基、または
ｇ）ヘテロアリール基であり；
Ｒ３は、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基またはアラルキル基であり；
Ａは、以下のａ）〜ｄ）：
ａ）水素原子、
ｂ）低級アルキル、
ｃ）Ｒ４、または
ｄ）ＮＲ５Ｒ６であり；
Ｒ４は、非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基および水酸基から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基であり、
Ｒ５は、水素原子、低級アルキル基、シクロアルキル基またはシクロアルキル低級アルキル基であり；
Ｒ６は、以下のａ）〜ｇ）：
ａ）水素原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）シクロアルキル低級アルキル基、
ｅ）Ｒ４、
ｆ）アラルキル基、
ｇ）以下の式：
【化１１】
2005008581.tif 000005
で表される基を表すか、あるいはＲ５とＲ６が、それらが結合している窒素原子と一緒になって式：
【化１２】
2005008581.tif 000006
で表される基を形成し；
Ｒ７は、水素原子または低級アルキル基であり；
Ｒ８は、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルキル基、スルファニル低級アルキル基、低級アルキルスルファニル低級アルキル基、アラルキル基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基またはカルバモイル基であり；
Ｒ９は、水酸基、アミノ基、低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、低級アルコキシカルボニルアミノ基、低級アルコキシカルボニル低級アルキルアミノ基、カルバモイル基、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基またはホスホノオキシ基であり；
Ｒ１０は、水酸基またはアミノ基であり；
Ｒ１１は、水酸基、ヒドロキシ低級アルキル基またはアミノ基であり；
ａは、０、１または２であり；
Ａ１は、結合またはＣ１−４アルキレン基であり；
Ａ２は、結合またはＣ１−６アルキレン基であり；
Ａ３は、Ｃ１−６アルキレン基であり；
Ａ４は、結合またはＣ１−６アルキレン基であり；
Ａ５は、Ｃ１−６アルキレン基である〕
で表される化合物またはそのプロドラッグ、あるいはそれらの薬理学的に許容される塩に関する。
【００１４】
また別の局面において、本発明は、前記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物に関する。
【００１５】
さらに別の局面において、本発明は、前記一般式（Ｉ）に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、Ｓｒｃファミリーキナーゼ関連疾患の治療または予防剤に関する。
【００１６】
前記一般式（Ｉ）で表される化合物において、下記の用語は、特に断らない限り、以下の意味を有する。
【００１７】
「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を表し、好適には、フッ素原子または塩素原子である。
【００１８】
「低級アルキル基」とは、直鎖または分岐鎖状の炭素数１〜６のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、１，２−ジメチルプロピル基、ヘキシル基、イソヘキシル基などが挙げられる。
【００１９】
「ハロ低級アルキル基」とは、１〜３個の同種または異種のハロゲン原子で置換された低級アルキル基を意味し、例えば、フルオロメチル基、ジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基などが挙げられ、好適にはトリフルオロメチル基である。
【００２０】
「ヒドロキシ低級アルキル基」とは、水酸基で置換された低級アルキル基を意味し、例えば、ヒドロキシメチル基、２−ヒドロキシエチル基、１−ヒドロキシエチル基、３−ヒドロキシプロピル基、４−ヒドロキシブチル基などが挙げられ、好適にはヒドロキシメチル基または１−ヒドロキシエチル基である。
【００２１】
「スルファニル低級アルキル基」とは、ＳＨ基で置換された低級アルキル基を意味し、例えば、スルファニルメチル基、２−スルファニルエチル基、１−スルファニルエチル基、３−スルファニルプロピル基、４−スルファニルブチル基などが挙げられ、好適にはスルファニルメチル基である。
【００２２】
「低級アルキルスルファニル低級アルキル基」とは、低級アルキルスルファニル基で置換された低級アルキル基を意味し、例えば、メチルスルファニルメチル基、２−メチルスルファニルエチル基、１−メチルスルファニルエチル基、３−メチルスルファニルプロピル基などが挙げられ、好適にはメチルスルファニルメチル基である。
【００２３】
「シクロアルキル基」とは、３〜８員の飽和環状炭化水素を意味し、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基が挙げられ、好適にはシクロプロピル基である。
【００２４】
「シクロアルキル低級アルキル基」とは、シクロアルキル基で置換された低級アルキル基を意味し、例えば、シクロプロピルメチル基、シクロブチルメチル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシルメチル基などが挙げられ、好適にはシクロプロピルメチル基である。
【００２５】
「低級アルコキシ基」とは、直鎖または分岐鎖状の炭素数１〜６のアルコキシ基を意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基などが挙げられ、好適には炭素数１〜４のアルコキシ基であり、さらに好適にはメトキシ基またはエトキシ基であり、最も好適にはメトキシ基である。
【００２６】
「低級アルキルアミノ基」とは、低級アルキル基で置換されたアミノ基を意味し、例えば、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、ブチルアミノ基などが挙げられ、好適にはメチルアミノ基である。
【００２７】
「ジ低級アルキルアミノ基」とは、同一のまたは異なる低級アルキル基でニ置換されたアミノ基を意味し、例えば、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基などが挙げられ、好適にはジメチルアミノ基である。
【００２８】
「Ｃ１−４アルキレン基」とは、炭素数１〜４の２価の直鎖飽和炭化水素鎖を意味し、当該炭化水素鎖は必要に応じて１〜３個のメチル基で置換されてもよい。当該Ｃ１−４アルキレン基の具体例として、例えば、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−、−Ｃ（ＣＨ３）２−、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−などが挙げられる。
【００２９】
「Ｃ１−６アルキレン基」とは、炭素数１〜６の２価の直鎖飽和炭化水素鎖を意味し、当該炭化水素鎖は必要に応じて１〜３個のメチル基で置換されてもよい。当該Ｃ１−６アルキレン基の具体例として、例えば、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−、−Ｃ（ＣＨ３）２−、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２−、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−などの基が挙げられる。
【００３０】
「低級アルコキシカルボニル基」とは、（低級アルコキシ）−ＣＯ−で表される基を意味し、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ペンチルオキシカルボニル基、ヘキシルオキシカルボニル基などが挙げられる。
【００３１】
「低級アルコキシカルボニルアミノ基」とは、（低級アルコキシ）−ＣＯＮＨ−で表される基を意味し、例えば、メトキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ基などが挙げられる。
【００３２】
「低級アルコキシカルボニル低級アルキルアミノ基」とは、（低級アルコキシ）−ＣＯ−Ｎ（低級アルキル）−で表される基を意味し、例えば、メトキシカルボニル−Ｎ−メチルアミノ基、エトキシカルボニル−Ｎ−メチルアミノ基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メチルアミノ基などが挙げられる。
【００３３】
「ヘテロアリール基」とは、１〜５個の炭素原子ならびにＯ、ＮおよびＳ原子からなる群から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する５〜６員の単環式芳香族複素環、あるいは１〜９個の炭素原子ならびにＯ、ＮおよびＳ原子からなる群から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する８〜１０員のニ環式芳香族複素環を意味する。単環式芳香族複素環としては、例えば、ピロリル、フラニル、チエニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、テトラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−チアジアゾリル、トリアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジルおよびピリダジニルなどが挙げられ、好適にはピリジルである。ニ環式芳香族複素環としては、例えば、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、キノリル、イソキノリル、フタラジニル、ベンズイミダゾリルなどが挙げられ、好適にはインドリルである。これらの複素環の全ての位置異性体が考えられる（例えば、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジルなど）。またこれらの複素環は、必要に応じてハロゲン原子、低級アルキル基または低級アルコキシ基から独立して選択される１〜５個の基で置換することができる。
【００３４】
「アラルキル基」とは、非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基および水酸基から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基、またはヘテロアリール基で置換された低級アルキル基を意味し、例えば、ベンジル基、フェネチル基、３−フェニルプロピル基、４−メトキシベンジル基、３，４−ジメトキシベンジル基、３，５−ジメトキシベンジル基、４−ヒドロキシベンジル基、３，４−ジヒドロキシベンジル基、インドール−３−イルメチル基などが挙げられる。
【００３５】
「環状アミン」または「環状アミノ基」とは、環内に−ＮＨ−、−Ｏ−または−Ｓ−を含んでもよい、５〜７員の環状アミンを意味し、例えば、１−ピロリジル基、ピペリジノ基、ピペラジノ基、モルホリノ基、チオモルホリノ基などが挙げられ、好適にはモルホリノ基またはピペラジノ基である。
【００３６】
「低級アシル基」とは、（低級アルキル）−ＣＯ−で表される基を意味し、例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基などが挙げられる。
【００３７】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物において１つまたはそれ以上の不斉炭素原子が存在する場合、本発明は各々の不斉炭素原子がＲ配置の化合物、Ｓ配置の化合物、およびそれらの任意の組み合せの化合物のいずれも包含する。またそれらのラセミ化合物、ラセミ混合物、単一のエナンチオマー、ジアステレオマー混合物が本発明の範囲に含まれる。本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物において幾何学異性が存在する場合、本発明はその幾何学異性体のいずれも包含する。さらに本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物には、水和物やエタノール等の医薬品として許容される溶媒との溶媒和物も含まれる。
【００３８】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物は、塩の形態で存在することができる。このような塩としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの鉱酸との付加塩、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、プロピオン酸、クエン酸、コハク酸、酒石酸、フマル酸、酪酸、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、炭酸、グルタミン酸、アスパラギン酸等の有機酸との付加塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩等の無機塩基との塩、トリエチルアミン、ピペリジン、モルホリン、リジン等の有機塩基との塩を挙げることができる。
【００３９】
本発明において「プロドラッグ」とは生体内において前記一般式（Ｉ）に変換される化合物を意味し、このようなプロドラッグはまた本発明の範囲内である。プロドラッグの様々な形態が当該分野で周知である。
【００４０】
例えば、前記一般式（Ｉ）で表される化合物が水酸基を有する場合、プロドラッグとして、当該水酸基の水素原子と、以下のような基：低級アシル基（例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、ピバロイル基など）；低級アルコキシカルボニル基（例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基など）；またはスクシノイル基との置換により形成される化合物が挙げられる。また前記一般式（Ｉ）で表される化合物が、−ＮＨまたは−ＮＨ２のようなアミノ基を有する場合、プロドラッグとして、当該アミノ基の水素原子と、以下のような基：低級アシル基（例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、ピバロイル基など）；または低級アルコキシカルボニル基（例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基など）との置換により形成される化合物が挙げられる。これらのプロドラッグ化合物は、自体公知の方法によって化合物（Ｉ）から製造することができる。
【００４１】
一般式（Ｉ）で表される化合物の好ましい実施態様は、
Ｒ１が、非置換もしくはＸ１、Ｘ２およびＸ３からなる群から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基であり、
ここで、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３が、それぞれ独立して、以下のａ）〜ｆ）：
ａ）ハロゲン原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）低級アルコキシ基、
ｄ）ジ低級アルキルアミノ基、
ｅ）環状アミノ基、または
ｆ）以下からなる群：ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルコキシ基であり、
Ｒ３が、水素原子であり；
Ａが、ＮＲ５Ｒ６であり；
Ｒ５が、水素原子、低級アルキル基、シクロアルキル基またはシクロアルキル低級アルキル基であり；
Ｒ６が、以下のａ）〜ｇ）：
ａ）水素原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）シクロアルキル基、
ｄ）シクロアルキル低級アルキル基、
ｅ）非置換もしくは以下からなる群：ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基および水酸基から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基、
ｆ）アラルキル基、
ｇ）以下の式：
【化１３】
2005008581.tif 000007
で表される基を表すか、あるいはＲ５とＲ６が、それらが結合している窒素原子と一緒になって式：
【化１４】
2005008581.tif 000008
で表される基を形成し；
Ｒ７が、水素原子または低級アルキル基であり；
Ｒ８が、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルキル基、スルファニル低級アルキル基、低級アルキルスルファニル低級アルキル基、アラルキル基、カルボキシ基、低級アルコキシカルボニル基またはカルバモイル基であり；
Ｒ９が、水酸基、アミノ基、低級アルキルアミノ基、ジ低級アルキルアミノ基、カルバモイル基、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基またはホスホノオキシ基であり；
Ｒ１０が、水酸基またはアミノ基であり；
Ｒ１１が、水酸基、ヒドロキシ低級アルキル基またはアミノ基であり；
ａが、０、１または２であり；
Ａ１が、結合またはＣ１−４アルキレン基であり；
Ａ２が、結合またはＣ１−６アルキレン基であり；
Ａ３が、Ｃ１−６アルキレン基であり；
Ａ４が、結合またはＣ１−６アルキレン基であり；
Ａ５が、Ｃ１−６アルキレン基である化合物またはその薬理学的に許容される塩である。
【００４２】
一般式（Ｉ）で表される化合物のさらに好ましい実施態様は、
Ｒ１が、非置換もしくはＸ１、Ｘ２およびＸ３からなる群から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基であり、
ここで、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、好ましくは、それぞれ独立して以下のａ）〜ｆ）：
ａ）ハロゲン原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）低級アルコキシ基、
ｄ）ジ低級アルキルアミノ基、
ｅ）環状アミノ基、または
ｆ）以下からなる群：ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルコキシ基であり、
さらに好ましくは、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、それぞれ独立して以下のａ）またはｂ）：
ａ）低級アルコキシ基、または
ｂ）以下からなる群：ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルコキシ基であり；
Ｒ３が、水素原子であり；
Ａが、式：
【化１５】
2005008581.tif 000009
で表される基であり、
ここで、Ｒ７が、水素原子または低級アルキル基であり、
Ｒ８が、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシ低級アルキル基またはアラルキル基であり、
Ｒ９が、水酸基、アミノ基、低級アルキルアミノ基、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基またはホスホノオキシ基であり、
Ａ１が、結合またはＣ１−４アルキレン基である化合物またはその薬理学的に許容される塩である。
【００４３】
一般式（Ｉ）で表される化合物の別のさらに好ましい実施態様は、
Ｒ１が、非置換もしくはＸ１、Ｘ２およびＸ３からなる群から独立して選択される１〜３個の基で置換されるフェニル基であり、
ここで、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、好ましくは、それぞれ独立して以下のａ）〜ｆ）：
ａ）ハロゲン原子、
ｂ）低級アルキル基、
ｃ）低級アルコキシ基、
ｄ）ジ低級アルキルアミノ基、
ｅ）環状アミノ基、または
ｆ）以下からなる群：ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルコキシ基であり、
さらに好ましくは、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は、それぞれ独立して以下のａ）またはｂ）：
ａ）低級アルコキシ基、または
ｂ）以下からなる群：ジ低級アルキルアミノ基および環状アミノ基から選択される基で置換される低級アルコキシ基であり；
Ｒ３が、水素原子であり；
Ａが、式：
【化１６】
2005008581.tif 000010
で表される基であり、
ここで、Ａ４が、結合またはＣ１−６アルキレン基であり、さらに好ましくは結合であり、
Ａ５が、Ｃ１−６アルキレン基であり、さらに好ましくはＣ３−４アルキレン基であり、最も好ましくは−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−であり、
Ｒ１１が、水酸基またはヒドロキシ低級アルキル基であり、さらに好ましくは水酸基またはヒドロキシメチル基であり、最も好ましくはヒドロキシメチル基である化合物またはその薬理学的に許容される塩である。
【００４４】
一般式（Ｉ）で表される化合物の特に好ましい実施態様の具体例は、以下の化合物またはその薬理学的に許容される塩である：
（Ｒ）−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（２−ヒドロキシメチルピロリジン−１−イル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物１４）；
（Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルブチルアミノ）−５−イソプロピルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物２８）；
（Ｒ）−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルプロピルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物３０）；
（Ｓ）−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルブチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物３１）；
（Ｓ）−５−シクロプロピル−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルプロピルアミノ）−２−（４−モルホリン−４−イルフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物４１）；
（Ｒ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−（２−フルオロフェニル）−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルプロピルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物４２）；
（Ｓ）−５−シクロプロピル−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルプロピルアミノ）−２−［３−メトキシ−５−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）フェニルアミノ］ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物４５）；
７−（２−アミノ−２−メチルプロピルアミノ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物５８）；
７−（２−アミノ−２−メチルプロピルアミノ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−エチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物６７）；
７−（２−アミノ−２−メチルプロピルアミノ）−５−（２−クロロフェニル）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物７２）；または
（Ｒ）−リン酸−モノ−｛２−［３−カルバモイル−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イルアミノ］｝−３−メチルブチル（化合物１２２）。
【００４５】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物は、スキーム１〜４に示す方法により製造することができる。
【００４６】
【化１７】
2005008581.tif 000011
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は前記と同義であり、Ｒ２０は低級アルキル基を表す）
【００４７】
工程１−１
３，３−ビス（メチルスルファニル）−２−シアノアクリロニトリル（ＸＸ）とアミン誘導体（ＸＸＩ）とを、無溶媒または溶媒中で反応させることにより、ジシアノ誘導体（ＸＸＩＩ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１−メチル−２−ピロリドン、ジメチルスルホキシド、メタノール、エタノール、およびそれらの混合溶媒等が挙げられる。その反応温度は通常、室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度によって異なるが、通常、１日間〜３日間である。
【００４８】
工程１−２
このジシアノ誘導体（ＸＸＩＩ）を、不活性溶媒中でヒドラジンと反応させることによりピラゾール誘導体（ＸＸＩＩＩ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１−メチル−２−ピロリドン、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。その反応温度は通常、室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度によって異なるが、通常、１時間〜２４時間である。
【００４９】
工程１−３
ピラゾール誘導体（ＸＸＩＩＩ）とβ−ケトエステル誘導体（ＸＸＩＶ）とを、酸の存在下に、無溶媒又は溶媒中で反応させることにより化合物（ＸＸＶ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール等が挙げられる。酸としては、塩酸、硫酸などの鉱酸、酢酸などの有機酸などが挙げられる。その反応温度は通常室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度によって異なるが、通常、１時間〜３日間である。
【００５０】
工程１−４
この化合物（ＸＸＶ）と塩素化剤（例えば、オキシ塩化リンなど）とを、無溶媒または不活性溶媒中、塩基の存在下で反応させることにより化合物（ＸＸＶＩ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、トルエンなどが挙げられる。塩基としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン等が挙げられる。その反応温度は通常、室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度によって異なるが、通常、１時間〜１２時間である。
【００５１】
工程１−５
化合物（ＸＸＶＩ）とアミン誘導体（ＸＸＶＩＩ）とを不活性溶媒中、塩基（例えば、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなど）の存在下に反応させることにより、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体（ＸＸＶＩＩＩ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１−メチル−２−ピロリドン、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。その温度は通常、室温から還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１時間〜３日間程度である。
【００５２】
工程１−６
このピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体（ＸＸＶＩＩＩ）を、適切な溶媒中で塩基を用いて加水分解することにより、イミダゾ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体（Ｉａ）へ変換することができる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、水、ジメチルスルホキシド、１，４−ジオキサン、１，１，１−トリフルオロエタノールおよびそれらの混合溶媒等が挙げられる。塩基としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドなどが挙げられ、必要に応じて過酸化水素水を添加することができる。その反応温度は通常、室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１時間〜３日間である。
【００５３】
【化１８】
2005008581.tif 000012
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５およびＲ６は前記と同義である）
【００５４】
工程２−１
イソチオシアネート誘導体（ＸＸＩＸ）とマロノニトリルとを不活性溶媒中、塩基（例えば、水酸化ナトリウムなど）の存在下に反応させ、更にメチル化剤によりメチル化することにより、ジシアノ誘導体（ＸＸＩＩ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１−メチル−２−ピロリドン、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。その温度は通常、０℃〜室温であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１時間〜３日間程度である。
以下、ジシアノ誘導体（ＸＸＩＩ）は、工程１−２〜工程１−６と同様にして反応させることにより、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体（Ｉａ）に変換することができる。
【００５５】
【化１９】
2005008581.tif 000013
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は前記と同義であり、Ｒ２１は水素原子、低級アルキル基またはＲ４を表し、Ｒ４は前記と同義である）
【００５６】
工程３−１および３−２
ピラゾール誘導体（ＸＸＩＩＩ）とβ−ジカルボニル誘導体（ＸＸＸ）とを、工程１−３と同様に反応させることにより化合物（ＸＸＸＩ）が得られる。続いて、この化合物（ＸＸＸＩ）は、工程１−６と同様に加水分解することにより、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体（Ｉｂ）へと変換することができる。
【００５７】
【化２０】
2005008581.tif 000014
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６およびＲ２０は前記と同義である）
【００５８】
工程４−１
２−シアノ−３，３−ビス（メチルスルファニル）アクリル酸エステル誘導体（ＸＸＸＩＩ）とアミン誘導体（ＸＸＩ）とを、無溶媒または溶媒中で反応させることにより化合物（ＸＸＸＩＩＩ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１−メチル−２−ピロリドン、ジメチルスルホキシド、メタノール、エタノール、およびそれらの混合溶媒等が挙げられる。その反応温度は通常、室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度によって異なるが、通常、１日間〜３日間である。
【００５９】
工程４−２
この化合物（ＸＸＸＩＩＩ）を、不活性溶媒中でヒドラジンと反応させることによりピラゾール化合物（ＸＸＸＩＶ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１−メチル−２−ピロリドン、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。その反応温度は通常、０℃〜室温であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度によって異なるが、通常、１時間〜３日間である。
【００６０】
工程４−３
ピラゾール誘導体（ＸＸＸＩＶ）とβ−ケトエステル誘導体（ＸＸＩＶ）とを、酸の存在下に、無溶媒または溶媒中で反応させることにより、化合物（ＸＸＸＶ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール等が挙げられる。酸としては、塩酸、硫酸などの鉱酸、酢酸などの有機酸などが挙げられる。その反応温度は通常室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度によって異なるが、通常、１時間〜３日間である。
【００６１】
工程４−４
この化合物（ＸＸＸＶ）と塩素化剤（例えば、オキシ塩化リンなど）とを、無溶媒または不活性溶媒中、塩基存在下で反応させることにより化合物（ＸＸＸＶＩ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、トルエンなどが挙げられる。塩基としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン等が挙げられる。その反応温度は通常、室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度によって異なるが、通常、１時間〜１２時間である。
【００６２】
工程４−５
化合物（ＸＸＸＶＩ）とアミン誘導体（ＸＸＶＩＩ）とを、不活性溶媒中、塩基（例えば、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなど）の存在下に反応させることにより、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体（ＸＸＸＶＩＩ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１−メチル−２−ピロリドン、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。その温度は通常、室温から還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１時間〜３日間程度である。
【００６３】
工程４−６
このピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体（ＸＸＸＶＩＩ）を、適切な溶媒中で塩基を用いて加水分解することにより、イミダゾ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体（ＸＸＸＶＩＩＩ）へ変換することができる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、水、ジメチルスルホキシド、１，４−ジオキサンおよびそれらの混合溶媒等が挙げられる。塩基としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドなどが挙げられ、必要に応じて過酸化水素水を添加することができる。その反応温度は通常、室温〜還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１時間〜３日間である。
【００６４】
工程４−７
化合物（ＸＸＸＶＩＩＩ）とアンモニアとを、不活性溶媒中、塩基（例えば、ピリジンなど）および縮合剤の存在下に反応させることにより、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体（Ｉａ）が得られる。当該反応に用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１−メチル−２−ピロリドン、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。縮合剤としては、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル、カルボジイミダゾール、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩などが挙げられる。その温度は通常、室温から還流温度であり、反応時間は使用する原料物質や溶媒、反応温度等により異なるが、通常、１時間〜３日間程度である。
【００６５】
上記に示したスキームは、本発明の化合物またはその製造中間体を製造するための方法のいくつかの例示であり、当業者には容易に理解され得るようにこれらのスキームの様々な改変が可能である。
本発明化合物を製造する際、必要に応じて、原料ないし中間体の段階で適切な保護基を導入し、しかる後、適切な段階で保護基を除去し、所望の化合物を得ることが可能である。このような保護基の選択、導入および除去は当業者には周知であり、例えば、アミノ基、水酸基、カルボキシル基等の官能基の保護基として、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎおよびＰ．Ｇ．Ｗｕｔｓ，「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」第３版に記載された保護基が挙げられ、これらの保護基を官能基の種類に応じて、適宜、導入、除去することができる。
【００６６】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物、および当該化合物を製造するために使用される中間体は、必要に応じて、当該分野の当業者には周知の単離・精製手段である溶媒抽出、結晶化、再結晶、クロマトグラフィー、分取高速液体クロマトグラフィーなどの操作を行うことにより、単離・精製することができる。
【００６７】
このようにして製造される本発明の化合物は、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、特にＳｒｃおよび／またはＬｃｋキナーゼ阻害作用を有するので、Ｓｒｃファミリーキナーゼ活性の異常に起因する疾患の予防または治療薬として有用である。
例えば、本発明の化合物は、優れたＳｒｃキナーゼ阻害作用を有するのでＳｒｃ活性の亢進に関連した癌細胞の増殖抑制に有用であり、特に乳癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、非小細胞癌、卵巣癌などの治療薬として有用である。
【００６８】
本発明の化合物は、優れたＳｒｃ阻害作用を有し、破骨細胞の吸収阻害作用を示すので骨疾患、例えば、骨粗しょう症、パジェト病、高カルシウム血症、変形性関節炎などの予防または治療薬として有用である。また、本発明の化合物は、必要に応じて、Ｓｒｃファミリーキナーゼ阻害剤以外の骨疾患治療薬と組み合わせて使用することができる。このような骨疾患治療薬としては、例えば、ビスホスホネート剤（例えば、エチドロン二ナトリウム、ゾレドロン酸水和物、チルドロン酸二ナトリウム、アレンドロン酸ナトリウム水和物、クロドロン酸ナトリウム水和物、レセドロン酸ナトリウム水和物など）；活性型ビタミンＤ剤（例えば、カルシトリオール、セカルシフェロール、ファレカルシトリオール、アルファカルシドールなど）；プロゲステロンアゴニスト（例えば、トリメゲストンなど）；エストロゲンアゴニスト（例えば、エストラジオール、ゲストデンなど）；アンドロゲン拮抗剤（例えば、酢酸オサテロンなど）；ビタミンＫ剤（例えば、メナテトレニンなど）；イプリフラボン、エルカトニン、カルシトニンなどが挙げられる。
【００６９】
本発明の化合物は、優れたＳｒｃ阻害作用を持ち、脳保護作用を有するのでパーキンソン病、てんかん、脳浮腫、急性期脳梗塞などの予防または治療薬として有用である。また、本発明の化合物は、必要に応じて、Ｓｒｃファミリーキナーゼ阻害剤以外の脳保護薬（例えば、抗パーキンソン剤、抗てんかん薬、急性期脳梗塞治療薬など）と組み合わせて使用することができる。本発明の化合物と組み合わせて使用できる抗パーキンソン剤としては、例えば、ドーパミンＤ２アゴニスト（例えば、カベルゴリン、メシル酸ブロモクリプチン、テルグリド、塩酸タリペキソール、塩酸ロピニロール、メシル酸ペルゴリド、塩酸プラミペキソールなど）；ドーパミンアゴニスト（例えば、レボドパ、ドロキシドパ、メレボドパなど）；ＣＯＭＴ（ｃａｔｅｃｈｏｌ  Ｏ−ｍｅｔｈｙｌ  ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）阻害剤（例えば、トルカポン、エンタカポンなど）；ＮＭＤＡ拮抗剤（例えば、ブジピンなど）；モノアミンオキダーゼＢ阻害剤（例えば、塩酸セレギリンなど）などが挙げられる。本発明の化合物と組み合わせて使用できる抗てんかん薬としては、例えば、ベンゾジアゼピンアゴニスト（例えば、クロバザム、クロナゼパム、ニトラゼパムなど）；ＧＡＢＡアゴニスト（例えば、ガバペンチン、プロガバイド、トピラマートなど）；ナトリウムチャネル拮抗剤（例えば、フェニトイン、ホスフェニトインナトリウム、オクスカルバゼピン、カルバマゼピンなど）；フェノバルビタール、プリミドン、バルプロ酸ナトリウム、ゾニサミド、ビガバトリン、ラモトリギン、フェルバメイト、塩酸タイアガビンなどが挙げられる。本発明の化合物と組み合わせて使用できる急性期脳梗塞治療薬としては、例えば、血栓溶解剤（例えば、ｔ−ＰＡ（ｔｉｓｓｕｅ  ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ）、ウロキナーゼなど）；トロンビン阻害剤（例えば、アルガトロバンなど）；ＴＸＡ２合成酵素阻害剤（例えば、オザグレルナトリウムなど）；ラジカル消去剤（例えば、エブセレン、エダラボン、ニカラベンなど）；５−ＨＴ１Ａアゴニスト（例えば、ＳＵＮ−Ｎ４０５７、ＢＡＹｘ３７０２など）；ＮＭＤＡ拮抗剤（例えば、アプチガネルなど）；ＡＭＰＡ拮抗剤（例えば、Ｓ−１７４６など）；塩酸ジラゼプ、シチコリンなどが挙げられる。
【００７０】
本発明の化合物は、優れたＬｃｋ阻害作用を有するので、Ｔ細胞が関与する疾患、例えば、自己免疫疾患（乾癬、アトピー性皮膚炎、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ネフローゼ症候群など）、移植片対宿主病、臓器移植による拒絶反応の抑制などの予防または治療薬として有用である。また、本発明の化合物は、必要に応じて、Ｓｒｃファミリーキナーゼ阻害剤以外のＴ細胞関連疾患の治療薬と組み合わせて使用することができる。このようなＴ細胞関連疾患の治療薬としては、例えば、免疫抑制剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス水和物、ラパマイシン、アザチオプリン、メトトレキサートなど）；ＣＯＸ−２阻害剤（例えば、セレコキシブ、ロフェコキシブ、バルデコキシブ、パレコキシブ、エトリコキシブなど）；ステロイド（例えば、プレドニゾン、デキサメタゾンなど）；非ステロイド性抗炎症剤（例えば、インドメタシン、ケトプロフェン、イブプロフェンなど）；抗ＣＤ−３抗体（ムロモナブ）、抗ＣＤ−４抗体（セデリズマブ）、抗ＣＤ４５ＲＢ抗体、抗ＩＣＡＭ−３、抗ＩＬ−２レセプター抗体、抗ＴＮＦ−α抗体などが挙げられる。
【００７１】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物を実際の治療に用いる場合、用法に応じ種々の剤型のものが使用される。このような剤型としては例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤、注射剤、液剤、軟膏剤、坐剤、貼付剤などを挙げることができ、経口または非経口的に投与される。
これらの医薬組成物は、その剤型に応じ製剤学的に公知の手法により、適切な賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤などの医薬品添加物と適宜混合または希釈・溶解することにより調剤することができる。
【００７２】
本発明の医薬組成物を実際の治療に用いる場合、その有効成分である前記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩の投与量は患者の年齢、性別、体重、疾患および治療の程度等により適宜決定されるが、経口投与の場合成人１日当たり約０．０１ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲で、非経口投与の場合は、成人１日当たり約０．００１ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲で、一回または数回に分けて適宜投与することができる。
【００７３】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩と、Ｓｒｃファミリーキナーゼ阻害剤以外の骨疾患用剤、抗パーキンソン剤、抗てんかん薬、脳浮腫治療薬、急性期脳梗塞治療薬およびＴ細胞関連疾患治療薬から選択される少なくとも１種とを組み合わせてなる医薬は、これらの有効成分を別々にまたは同時に、薬理学的に許容される賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤などと混合し、医薬組成物として経口または非経口的に投与することができる。このとき有効成分を別々に製剤化した場合、別々に製剤化したものを使用時に希釈剤などを用いて混合して投与することができるが、別々に製剤化したものを、別々に、同時に、または時間差をおいて同一対象に投与してもよい。
【００７４】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩と、Ｓｒｃファミリーキナーゼ阻害剤以外の骨疾患用剤、抗パーキンソン剤、抗てんかん薬、脳浮腫治療薬、急性期脳梗塞治療薬およびＴ細胞関連疾患治療薬から選択される少なくとも１種とを組み合わせてなる医薬において、薬剤の配合比は、患者の年齢、性別、および体重、症状、投与時間、剤形、投与方法、薬剤の組み合わせなどにより、適宜選択することができる。
【００７５】
【発明の実施の形態】
本発明の内容を以下の参考例、実施例および試験例でさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの内容に限定されるものではない。
【００７６】
【実施例】
参考例１−１
２−シアノ−３−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−３−メチルスルファニルアクリロニトリル
３，３−ビス（メチルスルファニル）−２−シアノアクリロニトリル  （１０．５６ｇ）と３，５−ジメトキシアニリン（９．５５ｇ）のエタノール（１００ｍＬ）溶液を、一晩加熱還流した。室温まで冷却後、析出物を濾取して、表題化合物（１３．９７ｇ）を得た。
３，５−ジメトキシアニリンの代わりに対応するアミンを用い、参考例１−１と同様にして、参考例１−２〜参考例１−１５を合成した。これらを表１に示した。
【００７７】
【表１】
2005008581.tif 000015
2005008581.tif 000016
【００７８】
参考例２−１
５−アミノ−３−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（方法Ａ）
参考例１−１（１０．０ｇ）とヒドラジン一水和物（２．１０ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）溶液を、１００℃にて２時間撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物に水を加え、析出物を濾取して、表題化合物（９．５３ｇ）を得た。
参考例１−１の代わりに参考例１−２〜１−１４を用い、参考例２−１と同様にして、参考例２−２〜参考例２−１４を合成した。これらを表２に示した。
【００７９】
５−アミノ−３−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（方法Ｂ）
水酸化ナトリウム（１．３ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）懸濁液に、マロノニトリル（１．７ｇ）及び３，５−ジメトキシフェニルイソチオシアネート（５．０ｇ）を加え、室温下一晩撹拌した。反応混合物にヨウ化メチル（２．４ｍＬ）を加え、室温にて一晩撹拌した。過剰なヨウ化メチルを減圧下留去後、ヒドラジン一水和物（１．５ｍＬ）を加え、１００℃にて一晩撹拌した。反応混合物に水（３０ｍＬ）を加え、室温にて一晩撹拌した。析出物を濾取し、表題化合物（４．３７ｇ）を得た。
【００８０】
【表２】
2005008581.tif 000017
2005008581.tif 000018
【００８１】
参考例３−１
２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−メチル−７−オキソ−４，７−ジヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル
参考例２−１（１．３ｇ）の酢酸（１０ｍＬ）溶液に、３−オキソブタン酸エチル（７２０ｍｇ）を加え、１２０℃にて一晩撹拌した。反応混合物に水（２０ｍＬ）を加え、析出物を濾取して、表題化合物（１．１９ｇ）を得た。
参考例３−１と同様にして、参考例３−２〜参考例３−２９を合成した。これらを表３に示した。
【００８２】
【表３】
2005008581.tif 000019
2005008581.tif 000020
2005008581.tif 000021
2005008581.tif 000022
【００８３】
参考例３−３０
２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−ジメチルアミノメチル−７−オキソ−４，７−ジヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル
参考例３−７（１９９．３ｍｇ）のメタノール（３．７ｍＬ）懸濁液に、２ｍｏｌ／Ｌ  ジメチルアミン−メタノール溶液（０．６１ｍＬ）を加え、１２０℃で１．５時間撹拌した。室温に冷却後、反応混合物を減圧下濃縮し、表題化合物（２０６．５ｍｇ）を得た。これを表３に示した。
【００８４】
参考例４−１
７−クロロ−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル
参考例３−１（１６３ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（１ｍＬ）懸濁液に、オキシ塩化リン（１ｍＬ）を加えて６０℃にて２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、析出物を濾取して、表題化合物（１７２ｍｇ）を得た。
参考例４−１と同様にして、参考例４−３〜参考例４−２９を合成した。これらを表４に示した。
【００８５】
参考例４−２
１−（３−シアノ−５−イソプロピル−２−フェニルアミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）−２，６−ジメチルピリジニウムクロリド
参考例３−２（４４５ｍｇ）と２，６−ジメチルピリジン（２．８９ｍＬ）の懸濁液にオキシ塩化リン（２．９７ｍＬ）を加え、６０℃にて４時間撹拌した。室温に冷却後、反応液を氷水（３０ｇ）に添加し、室温下撹拌した。析出物を濾取し、水で洗浄後、減圧乾燥して、表題化合物（９０５ｍｇ）を得た。
【００８６】
参考例４−３０
７−クロロ−５−メチル−２−ｐ−トルイルアミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル
参考例２−１１（３０ｍｇ）の酢酸（０．５ｍＬ）溶液に、３−オキソブタン酸エチル（２０μＬ）を加え、還流下一晩撹拌した。析出物を濾取して、２−（４−メチルフェニルアミノ）−５−メチル−７−オキソ−４，７−ジヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル（３４ｍｇ）を得た。
この２−（４−メチルフェニルアミノ）−５−メチル−７−オキソ−４，７−ジヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル（３３ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（０．５ｍＬ）の懸濁液にオキシ塩化リン（２２０μＬ）を加え、６０℃にて２時間撹拌した。反応液を氷水に添加後、析出物を濾取し、表題化合物（２７ｍｇ）を得た。
参考例４−３０と同様にして、参考例４−３１〜参考例４−３３を合成した。これらを表４に示した。
【００８７】
参考例４−３４
２−ベンジルアミノ−７−クロロ−５−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル
参考例１−１５（２２９ｍｇ）とヒドラジン一水和物（０．０８ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．００ｍＬ）溶液を、１００℃にて２時間撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物に水を加え、析出物を濾取して、５−アミノ−３−ベンジルアミノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（７８．４ｍｇ）を得た。
この５−アミノ−３−ベンジルアミノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニトリル（３０ｍｇ）の酢酸（０．５ｍＬ）溶液に、３−オキソブタン酸エチル（０．０２ｍＬ）を加え、還流下一晩撹拌した。析出物を濾取して、３−ベンジルアミノ−５−メチル−７−オキソ−４，７−ジヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル（２０ｍｇ）を得た。
この３−ベンジルアミノ−５−メチル−７−オキソ−４，７−ジヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル（２０ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（０．２５ｍＬ）の懸濁液にオキシ塩化リン（０．１４ｍＬ）を加え、６０℃にて２時間撹拌した。反応液を氷水に添加後、析出物を濾取し、表題化合物（１２ｍｇ）を得た。これを表４に示した。
【００８８】
【表４】
2005008581.tif 000023
2005008581.tif 000024
2005008581.tif 000025
2005008581.tif 000026
2005008581.tif 000027
【００８９】
参考例５−１
（Ｒ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（２−ヒドロキシメチルピロリジン−１−イル）−５−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル
参考例４−１  （３５ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）に懸濁し、Ｄ−プロリノール（１２ｍｇ）とジイソプロピルエチルアミン（２０μＬ）を加え、６０℃にて３０分撹拌し、更に室温にて一晩撹拌した。反応混合物に水を加え、析出物を濾取し、粗生成物を得た。この粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：塩化メチレン／メタノール＝１０／１）にて精製し、表題化合物（２４ｍｇ）を得た。
参考例５−１と同様にして、参考例５−２〜参考例５−１０２及び参考例５−１０４〜参考例５−１０７を合成した。これらを表５に示した。
【００９０】
【表５】
2005008581.tif 000028
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2005008581.tif 000042
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【００９１】
参考例５−１０３
｛２−［３−シアノ−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−（２−ヒドロキシエチル）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イルアミノ］−１，１−ジメチルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
参考例５−６６  （９７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）溶液に、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４９ｍｇ）を加え、室温下２日間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出物を１０％食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去して粗生成物を得た。この粗生成物をアミノプロピルシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル）にて精製し、［７−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチルプロピルアミノ）−３−シアノ−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］酢酸メチル（９０ｍｇ）を得た。
この［７−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチルプロピルアミノ）−３−シアノ−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］酢酸メチル（８５ｍｇ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）溶液に、テトラヒドロホウ酸リチウム（１３ｍｇ）を加え、５０℃で３時間撹拌し、更に室温下２日間撹拌した。反応混合物に水及び１０％クエン酸を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出物を１０％食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去して表題化合物（７９ｍｇ）を得た。これを表５に示した。
【００９２】
参考例５−１０８
２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−メチル−７−フェニルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボニトリル
参考例２−１（１３０ｍｇ）の酢酸（１ｍＬ）溶液に、ベンゾイルアセトン（８２ｍｇ）を加え、１２０℃で一晩撹拌した。反応混合物に水（２ｍＬ）を加え、析出物を濾取して、表題化合物（１０１ｍｇ）を得た。
ベンゾイルアセトンの代わりに５，５−ジメチルヘキサン−２，４−ジオンを用い、参考例５−１０８と同様にして、参考例５−１０９を合成した。これらを表５に示した。
【００９３】
参考例６−１
２−シアノ−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−３−メチルスルファニルアクリル酸エチル
２−シアノ−３，３−ビス（メチルスルファニル）アクリル酸エチル  （５．０ｇ）と３，５−ジメトキシアニリン（３．５２ｇ）のエタノール（１００ｍＬ）溶液を、一晩加熱還流した。室温まで冷却後、析出物を濾取して、表題化合物（５．１９ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ：１．３５  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．９Ｈｚ），  ２．３１（３Ｈ，  ｓ），  ３．７９（６Ｈ，  ｓ），  ４．２７（２Ｈ，  ｑ，  Ｊ＝６．９Ｈｚ），  ６．３８（１Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝２．２Ｈｚ），  ６．４６（２Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝２．２Ｈｚ），  １１．４２  （１Ｈ，  ｂｒｓ）
【００９４】
参考例６−２
５−アミノ−３−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチル
参考例６−１（４．９７ｇ）とヒドラジン一水和物（８９７μＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）懸濁液を、１００℃にて２時間撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物に水を加え、析出物を濾取して、表題化合物（４．２７ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１．３０（３Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．９Ｈｚ），  ３．７０（６Ｈ，  ｓ），  ４．２３（２Ｈ，  ｑ，  Ｊ＝６．９Ｈｚ），  ５．９５−６．０５（２Ｈ，  ｍ），  ６．７５−６．８０（２Ｈ，  ｍ），  ８．０２（１Ｈ，  ｂｒｓ）
【００９５】
参考例６−３
２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−オキソ−５−トリフルオロメチル−４，７−ジヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボン酸エチル
参考例６−２（２５０ｍｇ）の酢酸（１ｍＬ）溶液に、４，４，４−トリフルオロ−３−オキソブタン酸メチル（１１６μＬ）を加え、１２０℃にて一晩撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出物を１０％−食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去して、表題化合物（２９８ｍｇ）を得た。
ＭＳ  （ＥＳＩ，  ｍ／ｚ）：  ４２７  （Ｍ＋Ｈ）＋
【００９６】
参考例６−４
７−クロロ−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−トリフルオロメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボン酸エチル
参考例６−３（２７６ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（１．２３ｍＬ）懸濁液に、オキシ塩化リン（１．２ｍＬ）を加えて６０℃にて２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、析出物を濾取して、表題化合物（２２６ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１．３７（３Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝７．３Ｈｚ），  ３．７８（６Ｈ，  ｓ），  ４．４１（２Ｈ，  ｑ，  Ｊ＝７．３Ｈｚ），  ６．２１（１Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝２．２Ｈｚ），  ７．１１（２Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝２．２Ｈｚ），  ８．０７（１Ｈ，  ｓ），  ９．１１（１Ｈ，  ｓ）
【００９７】
参考例６−５
７−（２−アミノ−２−メチルプロピルアミノ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−トリフルオロメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボン酸エチル
参考例６−４（１０２ｍｇ）の１−メチル−２−ピロリドン（１．０ｍＬ）溶液に、２−メチルプロパン−１，２−ジアミン（７２μＬ）を加え、室温下終夜撹拌した。反応混合物に水（３ｍＬ）を加え、析出物を濾取し、表題化合物（９４ｍｇ）を得た。
同様にして参考例６−６を合成した。これらを表６に示した。
【００９８】
参考例６−７
７−（２−アミノ−２−メチルプロピルアミノ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−トリフルオロメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボン酸
参考例６−５（５２．３ｍｇ）のエタノール（０．５ｍＬ）懸濁液に、５ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム（４２μＬ）を加え、５０℃で４時間撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物に２ｍｏｌ／Ｌ  塩酸を加え、析出物を濾取し、表題化合物（３５ｍｇ）を得た。
同様にして参考例６−８を合成した。これらを表６に示した。
【００９９】
【表６】
2005008581.tif 000044
【０１００】
実施例１
（Ｒ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（２−ヒドロキシメチルピロリジン−１−イル）−５−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物１）
参考例５−１（２４ｍｇ）のジメチルスルホキシド（１ｍＬ）及びエタノール（１ｍＬ）懸濁液に、５．０ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（１０６μＬ）、３０％過酸化水素水（６０μＬ）を加え、室温下１時間撹拌した。更に３０％過酸化水素水（６０μＬ）を加え、５０℃で一晩撹拌した。室温下冷却後、１．０ｍｏｌ／Ｌ塩酸（５３０μＬ）加え、生じた沈殿物を濾取、減圧乾燥して表題化合物（１７ｍｇ）を得た。
参考例５−１の代わりに参考例５−２〜参考例５−１０７を用い、実施例１と同様にして、化合物２〜化合物４７、化合物４９及び化合物５１〜化合物１０９を合成した。これらを表７に示した。
【０１０１】
【表７】
2005008581.tif 000045
2005008581.tif 000046
2005008581.tif 000047
2005008581.tif 000048
2005008581.tif 000049
2005008581.tif 000050
2005008581.tif 000051
2005008581.tif 000052
2005008581.tif 000053
2005008581.tif 000054
2005008581.tif 000055
2005008581.tif 000056
2005008581.tif 000057
2005008581.tif 000058
2005008581.tif 000059
2005008581.tif 000060
【０１０２】
実施例２
（Ｒ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−７−（１−ヒドロキシメチル−２−メチルプロピルアミノ）−５−トリフルオロメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物４８）
参考例６−８（６５ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液に、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（８８．１ｍｇ）、炭酸アンモニウム（３１．９ｍｇ）及びピリジン（３３μＬ）を加え、室温下終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水及び１０％食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。得られた残渣をアミノプロピルシリカゲルクロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル）にて精製し、表題化合物（６１ｍｇ）を得た。これを表７に示した。
【０１０３】
実施例３
｛２−［３−カルバモイル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−トリフルオロメチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イルアミノ］−１，１−ジメチルエチル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（化合物５０）
参考例６−７（２６ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液に、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（３６．３ｍｇ）、炭酸アンモニウム（１３．２ｍｇ）、及びピリジン（１４μＬ）を加え、室温下終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水及び１０％食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。得られた残渣を分取用アミノプロピルシリカゲル薄層クロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル／ヘキサン＝１／１）にて精製し、表題化合物（７．４ｍｇ）を得た。これを表７に示した。
【０１０４】
実施例４
７−（２−アミノエチルアミノ）−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド塩酸塩（化合物１１０）
化合物４９（０．０２０ｇ）を飽和塩化水素―エタノール溶液（１ｍＬ）に溶解し、室温で２時間撹拌した。反応液を濃縮して、表題化合物（０．０１６ｇ）を合成した。
化合物４９の代わりに化合物５０〜化合物５６、化合物５８、６１、６７及び７３を用い、実施例４と同様にして、化合物１１１〜化合物１２１を合成した。これらを表８に示した。
【０１０５】
【表８】
2005008581.tif 000061
2005008581.tif 000062
【０１０６】
実施例５
（Ｒ）−リン酸−モノ−｛２−［３−カルバモイル−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イルアミノ］｝−３−メチルブチル（化合物１２２）
化合物３０  （４９ｍｇ）  のテトラヒドロフラン  （０．５ｍＬ）  溶液に、１Ｈ−テトラゾール  （１５ｍｇ）  及びジベンジル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルホスホロアミダイト（５６ｍｇ）  を加え、室温下２０分間撹拌した。−４０℃に冷却後、ｍ−クロロ過安息香酸  （２８ｍｇ）  を加え、同条件下３０分間撹拌した。反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を留去した。得られた残渣を分取用アミノプロピルシリカゲル薄層クロマトグラフィー（展開溶媒：酢酸エチル／ヘキサン＝１／１）にて精製し、（Ｒ）−リン酸−ジベンジル−２−［３−カルバモイル−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イルアミノ］−３−メチルブチル（３８ｍｇ）を得た。
この（Ｒ）−リン酸−ジベンジル−２−［３−カルバモイル−５−シクロプロピル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イルアミノ］−３−メチルブチル（２９ｍｇ）  及び１０％パラジウムカーボン粉末（１０ｍｇ）の酢酸（１ｍＬ）懸濁液を水素雰囲気下、室温にて２時間撹拌した。セライトを用いてパラジウムカーボン粉末をろ去後、ろ液を減圧下濃縮し、表題化合物（２２ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：０．８５−１．１０（１０Ｈ，  ｍ），  ２．００−２．１５（２Ｈ，ｍ），  ３．７７（６Ｈ，  ｓ），  ３．８０−３．９０（１Ｈ，  ｍ），  ３．９５−４．０５（２Ｈ，  ｍ），  ６．０６（１Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝２．２Ｈｚ），  ６．４９（１Ｈ，  ｓ），  ６．９０（２Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝２．２Ｈｚ），  ６．９８（１Ｈ，  ｂｒｄ，  Ｊ＝９．５Ｈｚ），  ７．３２（１Ｈ，  ｍ），  ７．４４（１Ｈ，  ｍ），  ９．５８（１Ｈ，  ｓ）
【０１０７】
実施例６
２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−メチル−７−フェニルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物１２３）
参考例５−１０８（４０ｍｇ）のジメチルスルホキシド（０．５ｍＬ）及びエタノール（０．５ｍＬ）懸濁液に、５．０ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（３２０μＬ）、３０％過酸化水素水（１８０μＬ）を加え、室温下１時間撹拌した。更に３０％過酸化水素水（１８０μＬ）を加え、５０℃で一晩撹拌した。室温下冷却後、１．０ｍｏｌ／Ｌ塩酸（１ｍＬ）加え、生じた沈殿物を濾取、減圧乾燥して表題化合物（１４ｍｇ）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ，  ｍ／ｚ）：  ４０４（Ｍ＋Ｈ）＋
参考例５−１０８の代わりに参考例５−１０９を用い、実施例６と同様にして以下の化合物を合成した。
７―ｔｅｒｔ−ブチル−２−（３，５−ジメトキシフェニルアミノ）−５−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（化合物１２４）
ＭＳ（ＥＳＩ，  ｍ／ｚ）：  ３８４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１０８】
試験例１
ｃ−ｓｒｃ  チロシンキナーゼ阻害作用試験
１）ｃ−ｓｒｃタンパク質のクローニング、発現、および精製
ヒトｃ−ｓｒｃのキナーゼドメイン（ＳＥＲ２５１−ＰＨＥ５２３）は、ヒト胎盤ｃＤＮＡから、ＰＣＲ（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｃｈａｉｎ  ｒｅａｃｔｉｏｎ）法を用いて、ｐＥＴ−１９ｂ発現ベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ社）のＮｄｅおよびＸｈｏＩ部位へクローニングした。更に、このヒトｃ−ｓｒｃキナーゼドメインを、その５’末端にｐＥＴ−１９ｂのＨｉｓタグの遺伝子を結合した形で、ＢＡＣ−ＴＯ−ＢＡＣ（登録商標）バキュロウイルス発現システム（ＧＩＢＣＯ  ＢＲＬ社）に含まれるベクターｐＦＡＳＴＢＡＣ１に組み込んだ。このプラスミドＤＮＡをバキュロウイルス発現システムに含まれるコンピテントセルＤＨ１０ＢＡＣに形質導入し、組み換えウイルスのＤＮＡを作製した。さらに組み換えウイルスのＤＮＡをＳｆ−９細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）にトランスフェクションすることにより組み換えウイルス（培養上清）を得た。
この組み換えウイルスを感染させたＨｉｇｈ  Ｆｉｖｅ（登録商標）昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を回収し、超音波処理によって細胞を溶解した。可溶性画分を遠心分離した後、上清をＴＡＬＯＮ（登録商標）メタルアフィニティーレジン（ＣＬＯＮＴＥＣＨ社）と混合し、レジンにｃ−ｓｒｃキナーゼドメインのＨｉｓタグ融合タンパク質を吸着させた。レジンを数回洗浄した後、イミダゾールを含むバッファーでｃ−ｓｒｃキナーゼドメインのＨｉｓタグ融合タンパク質を溶出した。
【０１０９】
２）ｃ−ｓｒｃチロシンキナーゼ阻害アッセイ
被験化合物のｃ−ｓｒｃ阻害活性を、分光光度計を用いた共役酵素アッセイで測定した。１０ｎｍｏｌ／Ｌ  ｃ−ｓｒｃキナーゼドメインタンパク質とジメチルスルホキシドで溶解した様々な濃度の被験化合物を０．１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．６、２０ｍｍｏｌ／Ｌ  ＭｇＣｌ２、２．５ｍｍｏｌ／Ｌホスホエノールピルベート、０．２ｍｍｏｌ／Ｌ  ＮＡＤＨ、１５０μｇ／ｍＬピルベートキナーゼ、５０μｇ／ｍＬラクテートデヒドロゲナーゼ、０．５ｍｍｏｌ／Ｌ  ｃ−ｓｒｃペプチド）中で３０℃、１０分間静置した。ｃ−ｓｒｃペプチド（アミノ酸配列：  ＡＥＥＥＩＹＧＥＦＥＡＫＫＫＫ）は、ｃ−ｓｒｃチロシンキナーゼ触媒反応のリン酸基受容体基質として使用した。酵素反応は、５０μｍｏｌ／ＬのＡＴＰ添加で開始し、３０℃に設定した分光光度計で単位時間あたりの３４０ｎｍ  の吸収減少量（速度Ｖ（ｍＯＤ／ｍｉｎ））を測定した。阻害剤濃度に対する速度値Ｖ（ｍＯＤ／ｍｉｎ）を酵素速度解析ソフトウェアーＰｌａｔｅ  Ｋｉ（Ｂｉｏ  Ｋｉｎ，Ｌｔｄ．）に入力し、Ｋｉ値を算出した。これらの結果を表９に示した。
【０１１０】
【表９】
2005008581.tif 000063
【０１１１】
試験例２
Ｌｃｋ  チロシンキナーゼ阻害作用試験
３）Ｌｃｋタンパク質のクローニング、発現、および精製
ヒトＬｃｋのキナーゼドメイン（Ｇｌｎ２２５−Ｐｒｏ５０９）は、ヒト脾臓Ｍａｒａｔｈｏｎ−Ｒｅａｄｙ（登録商標）ｃＤＮＡ（ＣＬＯＮＴＥＣＨ社）から、ＰＣＲ法を用いて、ｐＥＴ−１９ｂ発現ベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ社）のＮｄｅおよびＸｈｏＩ部位へクローニングした。更に、このヒトＬｃｋキナーゼドメインを、その５’末端にｐＥＴ−１９ｂのＨｉｓタグの遺伝子を結合した形で、ＢＡＣ−ＴＯ−ＢＡＣ（登録商標）バキュロウイルス発現システム（ＧＩＢＣＯ  ＢＲＬ社）に含まれるベクターｐＦＡＳＴＢＡＣ１に組み込んだ。このプラスミドＤＮＡをバキュロウイルス発現システムに含まれるコンピテントセルＤＨ１０ＢＡＣに形質導入し、組み換えウイルスのＤＮＡを作製した。さらに組み換えウイルスのＤＮＡをＳｆ−９細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）にトランスフェクションすることにより組み換えウイルス（培養上清）を得た。
この組み換えウイルスを感染させたＨｉｇｈ  Ｆｉｖｅ（登録商標）昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を回収し、超音波処理によって細胞を溶解した。可溶性画分を遠心分離した後、上清をＴＡＬＯＮ（登録商標）メタルアフィニティーレジン（ＣＬＯＮＴＥＣＨ社）と混合し、レジンにＬｃｋキナーゼドメインのＨｉｓタグ融合タンパク質を吸着させた。レジンを数回洗浄した後、イミダゾールを含むバッファーでＬｃｋキナーゼドメインのＨｉｓタグ融合タンパク質を溶出した。
【０１１２】
４）Ｌｃｋチロシンキナーゼ阻害アッセイ
被験化合物のＬｃｋ阻害活性を、分光光度計を用いた共役酵素アッセイで測定した。１０ｎｍｏｌ／Ｌ  Ｌｃｋキナーゼドメインタンパク質とジメチルスルホキシドで溶解した様々な濃度の被験化合物を０．１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．６、２０ｍｍｏｌ／Ｌ  ＭｇＣｌ２、２．５ｍｍｏｌ／Ｌホスホエノールピルベート、０．２ｍｍｏｌ／Ｌ  ＮＡＤＨ、１５０μｇ／ｍＬピルベートキナーゼ、５０μｇ／ｍＬラクテートデヒドロゲナーゼ、０．５ｍｍｏｌ／Ｌ  ｃ−ｓｒｃペプチド）中で３０℃、１０分間静置した。ｃ−ｓｒｃペプチド（アミノ酸配列：  ＡＥＥＥＩＹＧＥＦＥＡＫＫＫＫ）は、Ｌｃｋチロシンキナーゼ触媒反応のリン酸基受容体基質として使用した。酵素反応は、５０μｍｏｌ／ＬのＡＴＰ添加で開始し、３０℃に設定した分光光度計で単位時間あたりの３４０ｎｍ  の吸収減少量（速度Ｖ（ｍＯＤ／ｍｉｎ））を測定した。阻害剤濃度に対する速度値Ｖ（ｍＯＤ／ｍｉｎ）を酵素速度解析ソフトウェアーＰｌａｔｅ  Ｋｉ（Ｂｉｏ  Ｋｉｎ，Ｌｔｄ．）に入力し、Ｋｉ値を算出した。これらの結果を表１０に示した。
【０１１３】
【表１０】
2005008581.tif 000064
【０１１４】
【発明の効果】
本発明の一般式（Ｉ）で表されるピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体は、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、特にＳｒｃおよび／またはＬｃｋキナーゼに対して強力な阻害作用を有する。従って本発明の化合物は、Ｓｒｃファミリーキナーゼ関連疾患の治療または予防薬として有用であり、特に癌、骨粗しょう症、パジェット病、高カルシウム血症、変形性関節炎、パーキンソン病、てんかん、脳浮腫、急性期脳梗塞、自己免疫性疾患、移植片対宿主病、臓器移植による拒絶反応などの治療または予防剤として好適である。