(57)【要約】【課題】  本発明の課題は、天然物由来の血圧降下剤を提供することである。【解決手段】  本発明は、クダモノトケイソウ果皮抽出物からなる血圧降下剤並びにプロスタグランジンI2合成促進剤に関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クダモノトケイソウ抽出物および／またはその処理物を有効成分として含有する血圧降下剤。
【請求項２】
クダモノトケイソウ抽出物が果皮抽出物である請求項１記載の血圧降下剤。
【請求項３】
クダモノトケイソウ抽出物および／またはその処理物を有効成分として含有するプロスタグランジンI2合成促進剤。
【請求項４】
クダモノトケイソウ抽出物が果皮抽出物である請求項３記載のプロスタグランジンI2合成促進剤。
【請求項５】
食品に添加するための請求項１または２に記載の血圧降下剤。
【請求項６】
食品に添加するための請求項３または４に記載のプロスタグランジンI2合成促進剤。
【請求項７】
クダモノトケイソウを搾汁または粉砕する工程、該搾汁または該粉砕物を抽出する工程、および必要に応じて該搾汁または該粉砕物またはその抽出物に濃縮処理および／または精製処理を行う工程を含む、請求項１または２に記載の血圧降下剤の製造方法。
【請求項８】
クダモノトケイソウを搾汁または粉砕する工程、該搾汁または該粉砕物を抽出する工程、および必要に応じて該搾汁または該粉砕物またはその抽出物に濃縮処理および／または精製処理を行う工程を含む、請求項３または４に記載のプロスタグランジンI2合成促進剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高血圧症などの疾患の治療または予防に利用できる血圧降下剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
高血圧治療薬としては、従来よりカルシウム拮抗薬、アンジオテンシンI変換酵素阻害薬、アンジオテンシンII受容体拮抗薬、α受容体遮断薬、β受容体遮断薬、利尿剤、プロスタグランジンI2などが知られている。このうち、カルシウム拮抗薬は血管収縮に必要なカルシウム（Ca）の血管細胞への取り込みを阻害することにより、血管を拡張させ血圧の上昇を防ぐ。アンジオテンシンI変換酵素阻害薬はアンジオテンシンIがIIに変換されるのに必要なアンジオテンシンI変換酵素の作用を抑制し、血管を収縮させるアンジオテンシンIIの生成を阻害する。アンジオテンシンII受容体拮抗薬は内因性昇圧物質アンジオテンシンIIと受容体レベルで拮抗することにより降圧作用を示す。α受容体遮断薬は交感神経を抑えて血管を拡げる。β受容体遮断薬は心臓の働きを抑えて、血圧を下げる。利尿薬は腎臓の機能単位であるネフロンの尿細管や集合管に作用し、体内のナトリウム（Na）と水分の排泄（利尿）を促し、体液量（血液量）を減らす事によって血圧を下げる。また、プロスタグランジンI2は血管拡張を引き起こし、血圧を下げ、また血小板の凝集を抑制する生理活性が顕著で、難病とされる肺高血圧症に有効であるとされている。
【０００３】
食品成分から由来する血圧降下物質が知られているが、殆どがペプチド性のアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤であり、一部は「血圧が高めの方に」の表示が許可された特定保健用食品として商品化されている。また、杜仲茶には杜仲葉配糖体と呼ばれる各種の成分が含まれている。ゲニポシド酸は杜仲葉配糖体の中での代表的な成分で、副交感神経を刺激することにより、血管平滑筋弛緩させ血管を拡張することにより、血圧降下作用のあることが確認されている。また、発芽玄米やギャバロン茶などに含まれるガンマ-アミノ酪酸（GABA）も血圧降下作用のあることが知られている。また、クミスクチン（ネコノヒゲ）は利尿作用を促進し血圧を下げることが知られている。これはクミスクチンに多量に含まれているカリウムのためであると考えられている。
【０００４】
このように食品や植物には血圧降下作用のあるものが種々知られているが、それぞれの血圧降下作用はさほど強いものではなく、効能がより強く、より安全かつ製造コストが低く、より味覚のよい材料が求められている。
【０００５】
なお、クダモノトケイソウのアンジオテンシン変換酵素阻害活性が報告されているが（特許文献１）、動物実験による血圧降下作用は証明されていない。一方、果皮メタノール抽出物の成分、機能については報告がなく、また、該メタノール抽出成分が血圧降下作用あるいはプロスタグランジンI2合成促進作用を有することは知られていなかった。
【０００６】
【特許文献１】特開2001-335494号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、安全性の高い食品系植物由来の血圧降下剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、食品系植物抽出物の血圧降下作用を鋭意調べた結果、クダモノトケイソウ果皮のメタノール抽出物が血圧降下作用並びに血管拡張作用を有するプロスタグランジンI2の合成を促進する作用を有することを見出し、本発明を完成させるに至った。食用とされるクダモノトケイソウ果肉にはβカロチン、各種ビタミン、クエン酸、カリウム、カルシウム、鉄分、ポリフェノールなど多種の健康によい有用成分が含まれているとされているが、血圧降下作用を有することは実験上は証明されていない。
【０００９】
すなわち、本発明は以下の発明を包含する。
（１）  クダモノトケイソウ抽出物および／またはその処理物を有効成分として含有する血圧降下剤、
（２）  クダモノトケイソウ抽出物が果皮抽出物である（１）の血圧降下剤、
（３）  クダモノトケイソウ抽出物および／またはその処理物を有効成分として含有するプロスタグランジンI2合成促進剤、
（４）  クダモノトケイソウ抽出物が果皮抽出物である（３）のプロスタグランジンI2合成促進剤、
（５）  食品に添加するための（１）または（２）の血圧降下剤、
（６）  食品に添加するための（３）または（４）のプロスタグランジンI2合成促進剤、
（７）  クダモノトケイソウを搾汁または粉砕する工程、該搾汁または該粉砕物を抽出する工程、および必要に応じて該搾汁または該粉砕物またはその抽出物に濃縮処理および／または精製処理を行う工程を含む、（１）または（２）の血圧降下剤の製造方法、ならびに
（８）  クダモノトケイソウを搾汁または粉砕する工程、該搾汁または該粉砕物を抽出する工程、および必要に応じて該搾汁または該粉砕物またはその抽出物に濃縮処理および／または精製処理を行う工程を含む、（３）または（４）のプロスタグランジンI2合成促進剤の製造方法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明により、安全性が高い食品系植物由来の血圧降下剤が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、上記本発明について詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらの説明に拘束されることはなく、以下の例示以外についても、本発明の趣旨を損なわない範囲で適宜実施し得る。
【００１２】
本発明は、クダモノトケイソウ抽出物を含む血圧降下剤に関する。
【００１３】
クダモノトケイソウ抽出物としては、果肉、果実、葉、茎または根の抽出物が含まれていてもよいが、果皮抽出物の割合が高いほど好ましい。
【００１４】
クダモノトケイソウ（別名パッションフルーツ、Passiflora edulis）は南米原産のつる性多年生熱帯果樹であり、現在では世界中の熱帯、亜熱帯地域に広まっており、オーストラリアや東南アジア、台湾などで産業的に栽培され、日本では沖縄での生産が一番多いが、奄美諸島、小笠原諸島でも栽培されている。本発明に使用するクダモノトケイソウの品種と産地は、特に限定されるものではない。
【００１５】
本発明に使用できるクダモノトケイソウ果皮抽出物は植物全体、果肉、果実、果皮、葉または根の搾汁をそのまま用いることができるが、植物全体、果肉、果実、果皮、葉または根を破砕、粉砕等により粉末化処理したものを用いてもよい。また、該搾汁または該粉砕物の抽出物または該搾汁または該粉砕物またはその抽出物の処理物として用いることもできる。ここで、「抽出物」とは、植物全体、果肉、果実、果皮、葉または根に含まれる成分を、水、エタノール等の溶媒に溶解させて抽出し適宜乾燥させた、通常は液体または固体の物質を指し、「処理物」とは、搾汁、粉末または抽出物に対してさらに濃縮処理や精製処理等を行うことにより得られる物質を指すものとする。
【００１６】
植物を抽出物として用いる場合、抽出時間は10分〜１時間程度、特に30分程度が好ましく、また抽出に使用する溶媒量は原料に対して質量比で２倍量〜10倍量、特に５倍量が好ましい。抽出溶媒は、任意の溶媒であってよく、例えばメタノール、エタノール、酢酸エチル、その他の有機溶媒、および水のうち１種または２種以上を用いることができる。好ましくは、エタノールと水の混合溶媒を用いる。また、溶媒抽出の過程でケイソウ土を加えてもよい。さらに場合により、抽出後、ろ過または遠心分離により抽出残渣を除き抽出液を得ることができる。
【００１７】
また、搾汁、粉末または抽出液を濃縮処理することもできる。さらに、搾汁、粉末または抽出液には糖分や有機酸が非常に多く含まれるため、それらを除く精製工程を行うことも好ましい。精製処理の方法として、順相または逆相クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、ゲルろ過等が挙げられる。これらの方法を適宜組合せて用いることもできる。例えばクダモノトケイソウの果皮をミキサー等で細かく破砕した後、抽出溶媒中で攪拌し、遠心分離または濾過により不溶物を除去し、上清または濾液を減圧下で乾燥することにより粉末として得ることが出来る。本発明において「果皮」とは、果実の外側の厚い皮の部分、すなわち果実からゼリー状の果肉と種子を除いた部分を意味するが、一般に言う果肉の部分が付着していてもよい。抽出溶媒は任意の溶媒であってよく、例えばメチルアルコール、エチルアルコール、酢酸エチル、その他の有機溶媒、および水のうち１種または２種以上を用いることができる。
【００１８】
さらに、クダモノトケイソウに由来し、プロスタグランジンI2合成促進活性を示す物質を公知の方法で得ることができ、これらの物質を含む組成物も本発明のクダモノトケイソウ抽出物を有効成分として含有するプロスタグランジンI2合成促進剤に含まれる。
【００１９】
本発明の、クダモノトケイソウ果皮抽出物からなる血圧降下剤は抽出物それ自体であっても、または通常用いられる固体または液体の担体、乳化分散剤等により錠剤、粉剤、乳剤、カプセル剤等の剤形に製剤化されたものであってもよい。上記担体としては、水、ゼラチン、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、ラクトース、植物油等が挙げられる。該血圧降下剤は更なる成分を含んでいてもよい。
【００２０】
本発明の血圧降下剤剤中でのクダモノトケイソウ果皮抽出物の含有量は、投与目的、投与経路、剤形等によって適宜変更し得るが、例えば、その含有量は製剤全重量に対して0.1〜90重量％である。
【００２１】
本発明の血圧降下剤は医薬として用いるほか、種々の食品中に添加して特定保健用食品または機能性食品として用いることができる。かかる食品として、清涼飲料、乳酸飲料、スープ、ジャム、菓子類などが挙げられる。本発明の血圧降下剤はまた、ペットフード、飼料などに添加してペットや家畜の高血圧症の予防、改善に用いることもできる。
【００２２】
本発明の血圧降下剤の使用形態は使用目的に応じた任意の形態であってよく、例えば経口的投与、皮膚や粘膜への塗布が例示される。
【００２３】
本発明の血圧降下剤の投与量は特に限定されるものではなく、例えば、高血圧症患者の年齢、性別、体重、症状の程度、又は投与方法などに応じて適宜決定することができる。例えば、軽症の高血圧症患者にクダモノトケイソウ果皮抽出物からなる血圧降下剤を経口投与の場合には、１日当たり１mg/kg体重〜200mg/kg体重であることが好ましい。１日の投与回数は、限定されず１回から数回投与すればよい。
【００２４】
本発明の血圧降下剤を特定保健用食品または機能性食品に添加する場合には目的に応じて適量を添加することができる。クダモノトケイソウ果皮抽出物からなる血圧降下剤が食品中に例えば10〜100重量％含有されるように添加する。
【００２５】
さらに、本発明はクダモノトケイソウ抽出物を有効成分として含有し、血圧降下作用を有するものであることを特徴とし、血圧改善のために用いられるものである旨の表示を付した飲食品をも包含する。
【実施例】
【００２６】
以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。
【００２７】
実施例１  クダモノトケイソウ果皮抽出物からなる血圧降下剤の製造法
クダモノトケイソウの果実３個から剥いた果皮（150g）をミキサーで細かく破砕した後、メタノール200mlを加え、電磁スターラーにより400rpm、60分間攪拌した。次いで、濾紙（アドバンテック東洋製濾紙、NO.2、直径30cm）による濾過を行って不溶物を除去した濾液を回収した。濾液をロータリエバポレーターで濃縮し、さらに真空ポンプによる減圧下で乾燥することにより、紫色の粉末3.6gを得た。
【００２８】
実施例２  血圧降下作用の測定
実験動物として、雄性自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ、チャールス・リバー社より購入）を１群６匹として用いた。ＳＨＲは通常飼育を行い、14週齢以上で、収縮期血圧が200ｍｍＨｇ程度に達した時点で実験を行った。クダモノトケイソウ果皮抽出物を蒸留水に溶解し、投与量が10mg/kg体重、50mg/kg体重となるよう胃ゾンデを用いて、単回経口投与した。投与直前及び投与1、3、5、7、24時間後の血圧を非観血式血圧計MK-2000（室町機械株式会社製）を用いて尾動脈圧の変化を尾カフ（Tail-Cuff）法により測定した。対照として、ＳＨＲに同様に蒸留水を投与し血圧を測定した。
【００２９】
測定された収縮期血圧の経時変化を図１に示す。収縮期血圧は2標本t検定の結果、有意差があり、クダモノトケイソウ果皮抽出物は投与1時間後には顕著な血圧降下作用を示した。
【００３０】
実施例３  ウシ大動脈内皮細胞におけるプロスタグランジンI2合成促進作用
ウシ大動脈内皮細胞（継代数２、25cm2培養フラスコ入り、大日本製薬（セルシステムズ社）より購入）をCS-C培地（D-MEM培地とハムF12培地を1：1に等比混合した培地に、10％ウシ胎児血清、15mM HEPES、Acidic FGF、ヘパリンを添加した培地、セルシステムズ社より購入）に分散させ、コラーゲンをコーティングした24穴（1穴２cm2）のプレート1枚に添加して、5％ CO2存在下、37℃で３日間の培養を行った。次にプレートの各穴の培地を捨て、１mlのKrebs-Ringer bicarbonate (KRB)緩衝液（NaCl 129mM、NaHCO3 ５mM、KCl 4.8mM、KH2PO41.2mM、CaCl2 1.0mM、MgSO4 1.2mM、Glucose 2.8mM、 Bovine serum albumin 0.1%、HEPES 10mM、pH 7.4）にて各穴を２回洗浄した。その後、360μlのKRB緩衝液に40μlの試料（１〜８mg/mlのクダモノトケイソウ果皮抽出物、ポジティブコントロールとしての10μMカルシウムイオノフォアA23187、または対照としての蒸留水）を加えた溶液400μlを各穴に添加し、５％CO2存在下、37℃で30分間静置した。なお、試料添加時における細胞数は1穴あたり2.2 x 105個である。その後、上清300μlを回収して、遠心により混入した細胞を除去した。プロスタグランジンI2の6,9-エポキシド構造は不安定で、安定な6-ケトプロスタグランジンF1αに変換されるため、上清中の6-ケトプロスタグランジンF1αの濃度を、6-ケトプロスタグランジンF1αELISAシステム（アマシャムバイオサイエンス社より購入）を用いた酵素免疫測定法により測定した。その結果を表１ に示す。
【００３１】
表１は30分の間に溶液中へ放出された6-ケトプロスタグランジンF1α量を、蒸留水添加時の6-ケトプロスタグランジンF1α量（対照）を100％として比較した値（n=3の平均値）で示した。クダモノトケイソウ果皮抽出物にプロスタグランジンI2合成促進作用が認められた。
【００３２】
次に、ロッシュ社のMTT(3-[4,5-dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromid)キットにより細胞増殖に対するクダモノトケイソウ果皮抽出物の影響を検討したところ、表１の濃度範囲では細胞増殖に対して影響のないことが確認できた。
【００３３】
【表１】
2005350433.tif 000002
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】高血圧自然発症ラットへのクダモノトケイソウ果皮抽出物の単回経口投与による血圧の変化を示す図である。
【図１】
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