(57)【要約】  生体吸収性足場材と、凍結乾燥トロンビン粉末と、凍結乾燥フィブリノゲン粉末と、溶融性バインダー粉末とを含み、すべての粉末が生体吸収性足場材に配された、止血用パッド。ＰＥＧのような溶融性バインダーが、凍結乾燥トロンビン粉末及び凍結乾燥フィブリノゲン粉末を生体吸収性足場材に結合し、傷部位における止血処置又は封止処置のような用途で破砕性、湿潤性及び性能の改善がもたらされる。
2015500059.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）生体吸収性足場材と、
ｂ）凍結乾燥トロンビン粉末と、
ｃ）凍結乾燥フィブリノゲン粉末と、
ｄ）溶融性バインダー粉末と、を含み、
該トロンビン粉末及びフィブリノゲン粉末が、該生体吸収性足場材に配され、該溶融性バインダー粉末が、該トロンビン粉末及びフィブリノゲン粉末を該生体吸収性足場材に結合する、止血用パッド。
【請求項２】
前記溶融性バインダーが、前記凍結乾燥トロンビン粉末及び／又は前記凍結乾燥フィブリノゲンを完全に包入することはなく、該溶融性バインダーは、融点が約２５℃乃至約１００℃の親水性、生体適合性、かつ生体吸収性の材料である、請求項１に記載の止血用パッド。
【請求項３】
前記溶融性バインダーが、平均分子量約２．４９×１０−２１乃至約３．３２×１０−２０ｇ（約１５００乃至約２０，０００ダルトン）のポリエチレングリコールポリマーを含む、請求項２に記載の止血用パッド。
【請求項４】
前記溶融性バインダーが、実質的に、平均分子量約４．１５×１０−２１乃至約１．３３×１０−２０ｇ（約２５００乃至約８０００ダルトン）、より好ましくは約４．１５×１０−２１乃至約６．６４×１０−２１ｇ（約２５００乃至約４０００ダルトン）のポリエチレングリコールポリマーで構成される、請求項２に記載の止血用パッド。
【請求項５】
前記バインダー粉末用の前記ポリエチレングリコールポリマーの平均分子量が約４．９８×１０−２１ｇ（約３０００ダルトン）である、請求項４に記載の止血用パッド。
【請求項６】
前記バインダー粒子が約４５マイクロメートルの数平均粒径を有する、請求項３に記載の止血用パッド。
【請求項７】
前記止血用パッド上の前記トロンビン粉末、フィブリノゲン粉末及びポリエチレングリコール粉末の総重量に対して、該凍結乾燥トロンビン粉末の重量分率が約１０〜１５％であり、該凍結乾燥フィブリノゲン粉末の重量分率が約５５〜８５％であり、該ポリエチレングリコールの重量分率が２〜２０％である、請求項３に記載の止血用パッド。
【請求項８】
前記生体吸収性足場材が、織られた又は不織の合成又は天然の生体吸収性材料或いはそれらの組み合わせである、請求項３に記載の止血用パッド。
【請求項９】
前記生体吸収性足場材が、編まれた酸化再生セルロースの層へニードルパンチされたポリグラクチン９１０不織繊維層を含む二層材料であり、前記粉末が該ポリグラクチン９１０不織繊維層にのみ配される、請求項３に記載の止血用パッド。
【請求項１０】
前記凍結乾燥トロンビン粉末及び凍結乾燥フィブリノゲン粉末が、前記止血用パッドの温度を前記ポリエチレングリコールポリマーの前記融点より高い温度に上げることによって、前記生体吸収性足場材に結合される、請求項３に記載の止血用パッド。
【請求項１１】
前記止血用パッドが、貼付時に測定して、該止血用パッドの６．４５ｃｍ２（１平方インチ）当たり約２００〜６００ＩＵのトロンビンを含有し、貼付時に測定して、該止血用パッドの６．４５ｃｍ２（１平方インチ）当たり約２０〜８０ｍｇの量でフィブリノゲンを含有し、かつ前記ポリエチレングリコールが、該止血用パッドの６．４５ｃｍ２（１平方インチ）当たり約６〜２５ｍｇの量存在する、請求項３に記載の止血用パッド。
【請求項１２】
更にＣＭＣ粉末を含む、請求項３に記載の止血用パッド。
【請求項１３】
前記ＣＭＣ粉末が、約２０マイクロメートルの数平均粒径を有し、該ＣＭＣ粉末が、前記止血用パッドの６．４５ｃｍ２（１平方インチ）当たり約１５〜２０ｍｇの量存在する、請求項１２に記載の止血用パッド。
【請求項１４】
止血用パッドを製造する方法であって、
（ａ）凍結乾燥トロンビン粉末、凍結乾燥フィブリノゲン粉末及びポリエチレングリコール粉末の非水懸濁液を形成する工程と、
（ｂ）生体再吸収性材料製の足場に該懸濁液を塗布する工程と、
（ｃ）該足場が該トロンビン粉末、該フィブリノゲン粉末、及び該ポリエチレングリコール粉末の一部を担持する状態で液体を蒸発させる工程と、
（ｄ）該足場を該ポリエチレングリコール粉末の融点を超える温度に加熱する工程と、
（ｅ）該足場を該ポリエチレングリコールの該融点より低い温度に冷却して該止血用パッドを形成する工程と、を含む方法。
【請求項１５】
前記工程（ｄ）及び（ｅ）の結果、前記ポリエチレングリコールが溶融し、かつ該ポリエチレングリコールが固化して前記凍結乾燥トロンビン粉末及び前記凍結乾燥フィブリノゲン粉末を前記足場に結合させる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記バインダー粉末が、約２．４９×１０−２１乃至約３．３２×１０−２０ｇ（約１５００乃至約２０，０００ダルトン）、より好ましくは約４．１５×１０−２１乃至約６．６４×１０−２１ｇ（約２５００乃至約４０００ダルトン）の平均分子量を有するポリエチレングリコール粉末で実質的に構成され、前記生体吸収性足場材が、織られた又は不織の合成又は天然の生体吸収性材料或いはそれらの組み合わせであり、また該ポリエチレングリコール粉末が約４５マイクロメートルの数平均粒径を有する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記生体吸収性足場材が、編まれた酸化再生セルロースの層へニードルパンチされたポリグラクチン９１０不織繊維層を含む二層材料であり、前記粉末が該ポリグラクチン９１０不織繊維層にのみ配される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記非水懸濁液がＨＦＥ−７０００を含有し、かつ前記足場に該懸濁液を塗布する工程が、該足場を該懸濁液に浸漬するか、若しくは該足場に該懸濁液を吹きつけることにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記懸濁液が、ＣＭＣ粉末粒子を更に含有する、請求項１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、広義には、止血及び組織封止を促進するための薬剤及び用品に関し、より詳しくは、フィブリノゲン及びトロンビンのような凍結乾燥止血促進タンパク質を担持する生体吸収性足場材を含む止血用パッドに関する。
【背景技術】
【０００２】
血液とは、液相中に分散した赤血球、白血球、小体、及び血小板を含む、液体の組織である。この液相は血漿であり、血漿は、酸性物質、脂質、溶解した電解質、及びタンパク質を含んでいる。この液相中に懸濁する特定のタンパク質がフィブリノゲンである。出血が発生したとき、フィブリノゲンは水及びトロンン（酵素）と反応してフィブリンを形成するが、このフィブリンは水に不溶であり、重合して血餅を形成する。
【０００３】
多種多様な状況において、ヒトを含む動物は、創傷が原因であるいは外科的処置の間に出血に見舞われ得る。いくつかの状況においては、出血は比較的軽いものであり、通常の血液凝固が、簡単な応急処置の実施に加われば、それだけで十分である。他の状況においては、相当な出血が発生し得る。これらの局面では通常、専門的な設備及び物資、並びに適切な救助を施すように訓練された人員が必要となる。
【０００４】
上述の問題に対処する取り組みにおいて、過剰な出血を抑制するための物質が開発されてきた。生体吸収性局所止血剤（ＴＡＨ）は、外科用途で広く用いられている。ＴＡＨは、ポリグラクチン（Polyglactin）９１０のようなラクチド−グリコリド系コポリマー、酸化セルロース（ＯＣ）、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）、ゼラチン、コラーゲン、キチン、キトサンなどを含む天然ポリマーから合成ポリマー及びそれらの組み合わせに至る少なくとも一部再吸収性の材料で通常作られる種々の織布又は不織布或いはスポンジに基づく製品を包含する。止血性能を改善するために、上記材料系の足場材は、トロンビン及び／又はフィブリノゲンのような生物由来の凝固因子と結合することができる。
【０００５】
現在市販されている或いは開発中の多くの止血製剤は、凍結乾燥トロンビンと組み合わせた形で凍結乾燥フィブリノゲンを利用していることがしばしばあり、その場合止血製剤は、乾燥粉末、半液体ペースト、液体製剤の形で、或いは任意に生体吸収性足場材のような支持足場材上に配した形で適用される。
【０００６】
生体吸収性足場材上の凍結乾燥トロンビン及びフィブリノゲンを含有する止血パッチ又はパッドについては、用品性能及び特性を改善する必要があり、特凍結乾燥されたタンパク質のより迅速な再構成及びより迅速な止血、破砕性の低減（すなわち、パッドの取り扱い及び／又は切断時における有効粉末の脱落低減）、及び組織接着及び傷部封止特性の改善、に結びつくパッドの湿潤性改善と関係する性能増進が必要とされる。
【０００７】
「Ｈｅｍｏａｃｔｉｖｅ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｉｒ  ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｕｓｅ」という名称の米国特許第７，３２０，９６２号には、血液に曝されたときヒドロゲルを形成する生体適合性架橋ポリマーと、血液に曝されたとき可溶になる生体適合性非架橋ポリマーとを含み、上記架橋ポリマーが上記非架橋ポリマーの乾燥マトリックス中に分散している、出血を抑止するため又は薬剤を送達するための乾燥血液活性物質が開示されている。この文献には、更、少なくとも非架橋ポリマー中に存在する可塑剤を開示し、かつその可塑剤がポリエチレングリコール、ソルビトール及びグリセロールからなる群から選択されることが記載されている。
【０００８】
「Ｈｅｍｏａｃｔｉｖｅ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｉｒ  ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｕｓｅ」という名称の米国特許第６，７０６，６９０号には、血液に曝されたときヒドロゲルを形成する乾燥物質であって、血液に曝されたときヒドロゲルを形成する生体適合性架橋ポリマーと、血液に曝されたとき溶解する生体適合性非架橋ポリマーと、生体適合性非架橋ポリマー中に存在する可塑剤と、からなり、架橋ポリマーが、非架橋ポリマーの乾燥マトリックス中に分散しており、非架橋ポリマーが、血液に曝されると１５分以内に溶解する、乾燥物質が開示されている。この文献には、更に、非架橋ポリマー中上記物質の１重量％乃至２０重量％存在する可塑剤を開示し、その可塑剤がポリエチレングリコール、ソルビトール及びグリセロールからなる群から選択されることが記載されている。
【０００９】
「ＦＲＥＥ−ＳＴＡＮＤＩＮＧ  ＢＩＯＤＥＧＲＡＤＡＢＬＥ  ＰＡＴＣＨ」という名称の米国特許出願第の２０１１／００７１４９９Ａ１号には、固体フィブリノゲンと固体トロンビンとの混合物からなるフィルムであって、自立性であり、かつ湿気に曝露されるとフィブリンパッチを形成するよう構成されたフィルムからなる用品が開示され、更に、このフィルムが更に可塑剤を含むことが記載されている。この文献には、更に、フィルムが約５乃至約３０重量パーセントのポリエチレングリコールを含む用品が開示されている。
【００１０】
「Ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ  ｗｏｖｅｎ  ｆａｂｒｉｃ」という名称の米国特許出願第２００９／００５３２８８Ａ１号には、止血剤を更に含む修正クローフート織目（modified crowfoot weave pattern）を持つ織布が開示されている。この文献には、更に、グリセロール、プロパンジオール、ポリオキシエチレングリコール（ＰＥＧ）、トレハロース、及びその組み合わせからなる群から選択される防腐剤を更に含む織布が開示されている。
【００１１】
「Ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ  ｔｅｘｔｉｌｅ」という名称の米国特許出願第２００７／０１６０６５３Ａ１号には、ガラス繊維、及び絹繊維、ポリエステル繊維、ナイロン繊維、セラミック繊維、生竹繊維又は再生成竹繊維、綿花、レーヨン繊維、リネン繊維、ラクチド及び／又はグリコリドポリマー、ラクチド／グリコリドコポリマー、トロンビン又はトロンビン含有画分からなる群から選択される１つ以上の副次繊維を含む材料と、ＲＬ血小板、ＲＬ血球、フィブリン、及びフィブリノゲンからなる群から選択される１つ以上の止血剤と、を含み、傷に貼付すると身体の止血系を活性化することができる止血布が開示されている。この文献には、更に、グリセロール、プロパンジオール、ポリオキシエチレングリコール（ＰＥＧ）、トレハロース、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される防腐剤を更に含む止血布が開示されている。
【００１２】
「ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮ  ＦＯＲ  ＳＥＡＬＩＮＧ  ＷＯＵＮＤＳ」という名称のＰＣＴ国際公開第ＷＯ  １９９７０２８８３２のＡ１号には、粘性多糖類、グリコール又はワセリンのような粘着性の非水性接着剤で繊維性マトリックスに接着した粉末フィブリノゲン及びトロンビンを含有する止血用包帯が開示されている。この非水性接着剤は、包帯が血液のような体液によって湿めらされるまでフィブリノゲンとトロンビンとの間に加水分解反応を生じさせず、また、同特許には、包帯は作製してから止血活性を失うことなく長期間保存することができると教示されている。この文献には、更に、担体と、トロンビンとフィブリノゲンとが相互作用してフィブリンを形成することがないｐＨの水、及び粘着性の非水性生体適合性接着剤からなる群から選択される接着剤によって担体に接着した凝析成分とを含む、傷からの血流量を減少させるための組成物であって、凝析成分が、組成物が凝固作用を活性化させる体液と接触したとき、傷からの血液を凝固させてその流量を減少させるだけの治療的に十分な量存在する、組成物が開示されている。この文献には、更に、接着剤が、凝析成分を担体に接着する２０℃の非水性液体である、組成物が開示されている。この文献には、更に、非水性接着剤が、プロピレングリコール、グリセロール、ワセリン、及びポリエチレングリコールからなる群から選択される、組成物が開示されている。
【００１３】
この文献には、更に、開いた出血している傷の上に貼付するかこれに挿入するパッドとして装着するのに適した繊維性マトリックスと、マトリックスの表面に存在する粉末凝固因子の混合粒子の混合物と、を含む止血用包帯であって、上記粒子が生理的ｐＨの水媒体に曝されたとき互い凝塊を形成するのに十分なだけ密に接触しており、かつ上記粒子が、生理的ｐＨの水媒体に曝されるまで混合粒子間の凝固反応を抑止する２０℃で少なくとも１００センチポアズの粘性を持つ粘着性の非水性接着剤でマトリックスに接着される、止血用包帯が記載されている。
【００１４】
この文献には、更に、開いた出血している傷の上に貼付するかこれに挿入するパッドとして装着するのに適した繊維性マトリックスと、生理的ｐＨの水媒体に曝されたとき互い凝塊を形成するのに十分なだけ密に接触してマトリックスの全体にわたって存在する粉末凝固因子の混合粒子の混合物とを含む止血用包帯であって、上記粒子が、生理的ｐＨの水媒体に曝されるまで混合粒子間の凝固反応を抑止する粘着性の非水性接着剤でマトリックスに接着され、この接着剤が、多糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール、及びワセリンからなる群から選択され接着剤であり、水３重量％未満を含有する液体の形でマトリックスに塗着される、止血用包帯が開示されている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
要約すると、一実施形態において、本発明は、改善された破砕性及び湿潤性を有する止血用パッド及びそのような止血用パッドを製造する方法を対象とし、該止血用パッドは生体吸収性又は生体再吸収性の足場材料と、凍結乾燥トロンビン粉末と、凍結乾燥フィブリノゲン粉末と、ポリエチレングリコール粉末（ＰＥＧ）とを含み、すべてが生体吸収性足場材料上に配され、ＰＥＧ粉末は、凍結乾燥トロンビン粉末及び凍結乾燥フィブリノゲン粉末を生体吸収性足場材料に結合するが、凍結乾燥トロンビン粉末及び／又は凍結乾燥フィブリノゲン粉末粒子を完全に包入することはない。本願において、生体吸収性及び生体再吸収性という用語は、身体によって分解することができ、機械的な除去を必要としない物質を指す意味で互いに互換的に使用する。
【００１６】
一実施形態において、本発明は、（ａ）凍結乾燥トロンビン粉末、凍結乾燥フィブリノゲン粉末及びポリエチレングリコール粉末の非水性液中の懸濁液を形成する工程と、（ｂ）生体再吸収性材料製の足場に懸濁液を塗布する工程と、（ｃ）足場がトロンビン粉末、フィブリノゲン粉末、及びポリエチレングリコール粉末の一部を担持する状態で液体を蒸発させる工程と、（ｄ）足場を、トロンビン及びフィブリノゲンがかなりの程度変性する温度以下でポリエチレングリコールの融点を超える温度に加熱する工程と、（ｅ）足場を周囲温度に冷却して止血用パッドを形成する工程と、を含む、止血用パッドを製造する方法を対象とする。
【００１７】
一実施形態において、本発明は、傷部位に止血処置又は組織封止を施す方法であって、（ａ）上記のような止血用パッドを形成する工程と、（ｂ）止血用パッドを傷部位に貼付する工程と、を含む、方法を対象とする。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】組織剥離試験データ及びＰＥＧ添加物の効果を示すグラフである。
【図２】試験を行ったいくつかのシステムについての漏れ試験データを示すグラフである。
【図３】ＰＥＧ３の異なる濃度に対する破砕性試験の結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
要約すると、一実施形態において、本発明は、改善された破砕性及び湿潤性を有する止血用パッド及びそのような止血用パッドを製造する方法を対象とし、該止血用パッドは生体吸収性足場材料と、凍結乾燥トロンビン粉末と、凍結乾燥フィブリノゲン粉末と、ポリエチレングリコール粉末と、を含み、すべてが生体吸収性足場材料上に配され、ＰＥＧ粉末は、凍結乾燥トロンビン粉末及び凍結乾燥フィブリノゲン粉末を生体吸収性足場材料に結合するが、凍結乾燥トロンビン粉末及び凍結乾燥フィブリノゲン粉末粒子を完全に包入することはない。
【００２０】
一実施形態において、本発明は、凍結乾燥タンパク質の生体吸収性足場材に対するより強い接着を得、かつ結果としてもたらされる止血用パッドの湿潤性／接着性を改善するために、溶融性ＰＥＧを、オプションとしてＣＭＣの存在下で、使用することによって、溶融後再凝固したＰＥＧが、近接する粒子又は粉末及び足場繊維を結合するが、粉末／粒子を完全には塗布又は包入せず、外科的環境で湿気がこれらの生物学的薬剤に接近して、容易に活性化させることができるようにする。その結果、組織接着及び封止機能が、改善されると共に、破砕性低減のための低コストの解決策がもたらされる。
【００２１】
一実施形態において、本発明は、止血又は組織封止材あるいはパッドに関する。他の実施形態においては、本発明は、傷部位に止血処置又は組織封止を施す方法であって、（ａ）上記のような止血又は組織封止材若しくはパッドを形成する工程と、（ｂ）その止血又は組織封止材若しくはパッドを傷部位に貼付する工程と、含む、方法を対象とする。
【００２２】
凍結乾燥フィブリノゲン及びトロンビンを含有する止血用パッド
一実施形態によれば、本発明は、生体吸収性足場かマトリックス上に止血促進剤を含有する、或いはオプションとして凍結乾燥止血促進剤を含有する、止血用パッドを対象とする。好ましい止血足場材の例は、天然の又は遺伝子工学的に加工された生体吸収性ポリマーあるいは合成生体吸収性ポリマー、もしくはこれらの混合物である。
【００２３】
天然の生体吸収性ポリマーあるいは遺伝子工学的に加工された生体吸収性ポリマーの例としては、タンパク質、多糖類、及びこれらの組み合わせがある。多糖類には、限定事項なしで、セルロース、酸化セルロース、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）、アルキルセルロース、例えば、メチルセルロース、アルキルヒドロアルキルセルロース、ヒドロアルキルセルロース、硫酸セルロース、カルボキシメチルセルロースの塩、カルボキシメチルセルロース、カルボキエチルセルロース、キチン、カルボキシルメチルキチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸塩、アルギン酸塩、アルギン酸、アルギン酸プロピレングリコールエステル、グリコゲン、デキストラン、硫酸デキストラン、カードラン、ペクチン、プルラン、キサンタン、コンドロイチン、コンドロイチン硫酸、カルボキシメチルデキストラン、カルボキシメチルキトサン、キトサン、デンプン、アミロース、アミロペクチン、ポリ−Ｎ−グルコサミン、ポリマンヌロン酸、ポリグルクロン酸、ポリグルロン酸、及び上記のいずれかの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。
【００２４】
合成生体吸収性ポリマーの例としては、ポリエステルポリマー、コポリマー、及び／又はこれらの組み合わせがある。ポリエステルは、通常、乳酸、ラクチド（Ｌ−、Ｄ−、メソ及びＤ、Ｌ混合物を含む）、グリコール酸、グリコリド、ε−カプロラクトン、ｐ−ジオキサノン（１，４−ジオキサン−２−オン）、及び炭酸トリメチレン（１，３−ジオキサン−２−オン）を非限定例として含むモノマーの開環重合で合成される。
【００２５】
止血促進剤はタンパク質には、プロトロンビン、トロンビン、フィブリノゲン、フィブリン、フィブロネクチン、ヘパリナーゼ、第Ｘ／Ｘａ因子、第ＶＩＩ／ＶＩＩａ因子、第ＩＸ／ＩＸａ因子、第ＸＩ／ＸＩａ因子、第ＸＩＩ／ＩＩａ因子、組織因子、バトロキソビン、アンクロッド、エカリン（ecarin）、フォン・ウィルブラント因子、コラーゲン、エラスチン、アルブミン、ゼラチン、結晶板表面糖タンパク質、バソプレシン、バソプレシン類似体、エピネフリン、セレクチン、凝結促進性毒物、プラスミノゲンアクチベーター阻害物質、血小板活性化剤、止血活性を持つ合成ペプチド、及び／又はこれらの組み合わせ含まれる。
【００２６】
本発明の実験的試験で用いた生体吸収性足場材上に凍結乾燥トロンビン及びフィブリノゲンを含有する止血用パッドは、強化型生物製剤含有止血用パッドと称し、ＯＲＣ裏当て層中にニードルパンチされたポリグラクチン９１０（ＰＧ９１０）繊維の複合材マトリックスで構成されている。マトリックスのＰＧ９１０側には、乾燥した未反応状態のヒトフィブリノゲン及びヒトトロンビンの粉末が塗布されている。強化型生物製剤含有止血用パッドを出血部位に貼付すると、タンパク質は、容易に（数秒以内に）水和されて、フィブリノゲンのフィブリンへの転換が起きる結果、フィブリン凝塊が形成される。組織表面上のフィブリン形成は、止血及び組織への接着を促進する。ここで重要なことは、組織への貼付前にはタンパク質が未反応状態に保たれることである。製造又は保存時の水の接触によるフィブリノゲンのフィブリンへの早すぎる転換（事前活性化）は、性能及び安定性にマイナスの影響を及ぼすことが起こり得る。
【００２７】
「Ｒｅｉｎｆｏｒｃｅｄ  ｂｉｏａｂｓｏｒａｂｌｅ  ｍｕｌｔｉｌａｙｅｒｅｄ  ｆａｂｒｉｃ  ｆｏｒ  ｕｓｅ  ｉｎ  ｍｅｄｉｃａｌ  ｄｅｖｉｃｅｓ」という名称のＳｈｅｔｔｙ，ｅｔ  ａｌ．の米国特許７，６６６，８０３号は、参照によってその全体を本願に援用され、第１の生体吸収性不織布と、酸化多糖類よりなる第２の生体吸収性織布又は編地とを含む、多層織布を教示する。
【００２８】
「ＲＥＩＮＦＯＲＣＥＤ  ＢＩＯＡＢＳＯＲＢＡＢＬＥ  ＭＵＬＴＩＬＡＹＥＲＥＤ  ＨＥＭＯＳＴＡＴＩＣ  ＷＯＵＮＤ  ＤＲＥＳＳＩＮＧ」という名称のＧｏｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．による米国特許出願公開第２００９／０２４６２３８  Ａ１号は参照によってその全体を本願に援用され、第１の生体吸収性不織布と、１つ以上の第２の生体吸収性織布又は編地、トロンビン及び／又はフィブリノゲンを有する多層包帯を製造する方法であって、（ａ）生体吸収性ポリマー繊維あるいは糸を約３．９４〜１１．８クリンプ／ｃｍ（１０〜３０クリンプ／インチ）の範囲でクリンプ加工する工程と、（ｂ）クリンプ加工した繊維又は糸を約０．２６〜６．３５ｃｍ（０．１〜２．５インチ）ステープル長に切断する工程と、（ｃ）約１５〜２４℃の室温で湿度を約２０〜６０％に制御しつつ、ステープルをカーディングして第１の生体吸収性不織布を形成する工程と、（ｄ）第１の生体吸収性不織布を第２の生体吸収性織布又は編地に接着する工程と、（ｅ）第１の生体吸収性不織布にトロンビン及び／又はフィブリノゲンを貼付する工程と、を含む、方法を教示する。この文献には、更、生体吸収性不織布、トロンビン及び／又はフィブリノゲンからなる包帯を製造する方法であって、（ａ）トロンビン及び／又はフィブリノゲンを過フッ素化炭化水素中に懸濁させて懸濁液を形成する工程と、（ｂ）その懸濁液を生体吸収性不織布に塗布する工程と、含む、方法が開示されている。
【００２９】
「Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｍａｋｉｎｇ  ａｎ  ｂｉｏａｂｓｏｒａｂｌｅ  ｈｅｍｏｓｔａｔ」という名称のＧｏｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．による欧州特許公開第ＥＰ  ２，０５２，７４６  Ａ２号は参照によってその全体を本願に援用される、包帯を製造する方法であって、トロンビン及び／又はフィブリノゲン粉末をこれらが不溶な過フッ素化炭化水素キャリア液中に懸濁させる工程と、得られた懸濁液を第１の生体吸収性不織布に塗布する工程と、を含む、方法が開示されている。
【００３０】
「Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｍａｋｉｎｇ  ａｎ  ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ  ｈｅｍｏｓｔａｔ」という名称のＧｏｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．の公開済み米国特許出願第２００６／００８８５８９  Ａ１号は、参照によってその全体を本願に援用され、包帯を製造する方法であって、トロンビン及び／又はフィブリノゲン粉末をこれらが不溶の過フッ素化炭化水素キャリア液に懸濁させる工程と、得られた懸濁液を第１の吸収性不織布に塗布する工程と、を含む、方法が開示されている。
【００３１】
本発明の実施に際して行われた実験において、上記文献に記載されているようして作製した生物製剤含有止血用パッドを利用した。
【００３２】
生物製剤含有止血用パッドのマトリックス成分は、ポリグラクチン９１０（ＰＧ９１０）不織繊維層の下層である編まれたＯＲＣ裏当て層で構成されている。マトリックス作製工程においては、ＰＧ９１０繊維をカーディングしてバットを得、これをＯＲＣ裏当て層にニードルパンチして強化型生物製剤含有止血用パッド用のマトリックスを作製した。
【００３３】
生物製剤含有止血用パッドの生体成分は、好ましくはヒトフィブリノゲン及びヒトトロンビン製剤原料の凍結乾燥形のものである。生物製剤含有止血用パッドの生体成分は、好ましくはヒトフィブリノゲン及びヒトトロンビン製剤原料の凍結乾燥形のものである。実験で使用した生物製剤含有止血用パッドの組成は、以下に示すデータから明らかであろう。以下に記載するような有効粉末の量に加えて、本発明の生物製剤含有止血用パッドは、任意の形態として、本文中に後述するように、種々の量のＰＥＧ３０００及びＣＭＣを塗布した。フィブリノゲン含有パッドの生体成分は、好ましくは、ヒトフィブリノゲン及びヒトトロンビンの凍結乾燥形のものである。これらの生体成分は、それぞれ、生物学的活性成分、フィブリノゲン及びトロンビン、及びその他の添加剤を含有する。フィブリノゲン含有パッドに適用されるヒトフィブリノゲン及びヒトトロンビンの組成は、フィブリノゲン２乃至２０ｍｇ／ｃｍ２及びトロンビン１〜１５０ＩＵ／ｃｍ２である。生物製剤含有止血用パッドの足場又はマトリックス成分の組成は、ＯＲＣ（裏当て層として）の約５〜３０ｍｇ／１ｃｍ２、ＰＧ９１０（担体層として）の５〜３０ｍｇ／１ｃｍ２であった、また総マトリックスは約１０〜６０ｍｇ／ｃｍ２の重量を有した。
【００３４】
生物製剤含有止血用パッドに適用したヒトフィブリノゲン及びヒトトロンビンの組成は、フィブリノゲン約２〜２０ｍｇ／ｃｍ２及びトロンビン１〜１５０ＩＵ／ｃｍ２で、塩化カルシウム、任意成分としてのアルギニン、グリシン、アルブミン、マンニトール、緩衝塩類、及び従来血漿由来製品に見られる他の任意成分としてのタンパク成分のような他の添加剤が存在した。
【実施例】
【００３５】
実施例１．生物製剤含有止血用パッドの試料作製
上記引用文献、米国特許出願公開第２００９／０２４６２３８  Ａ１号及び欧州特許公開第ＥＰ第２，０５２，７４６  Ａ２号に記載されたものと同様の手順に従って、ポリ（グリコリド−コ−ラクチド）（ＰＧＬＡ、９０／１０ｍｏｌ／ｍｏｌ）を溶融紡糸して繊維を得た。８０デニールのマルチフィラメント糸を統合処理して８００デニールの統合糸を得た。その統合糸を約１１０℃でクリンプ加工した。このクリンプ加工糸を、約３．１８ｃｍ（１．２５”）長のステープルに切断し、２０グラムのクリンプ加工ステープルを正確に秤量して、マルチローラー梳綿機（カーディング機械）の供給コンベヤベルト上に一様に配列した。環境条件（温度：２１℃／５５％  ＲＨ）を制御した。次に、ステープルをカーディングして不織布バットを作製した。そのバットを収集ローラーから取り取り出し、等しい４つの部分に切断した。それらのバットを、取り出し方向と直角な方向のカーディング機械に再度送り込んだ。この第２パスの後、バットを秤量し（１９．８ｇ：布地収率９９％）、次に圧縮した。縮したフェルトを、ＯＲＣ布地上に正確に並べ、ニードルパンチによってしっかり固着した。この多層布をトリミングし、別個の３つのイソプロピルアルコール浴で洗浄してスピン仕上げ及び全ての機械油を除去した。次に、洗浄した多層布地をオーブン中で３０分間７０℃で乾燥し、冷却した後に秤量した。
【００３６】
その後、その洗浄した多層布地を１０．２×１０．２ｃｍ（４×４”）の片に切断した。１．７０ｇの比活性度（クラウス法による）が０．３ｇ／ｇのＢＡＣ−２（Ｏｍｒｉｘ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．社）、０．３０ｇのトロンビン含有粉末（やはりＯｍｒｉｘ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．社より）、オプションとしての０．４０ｇのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、及びオプションとしての０．３０ｇのカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）粉末を約１４ｍＬの非水液体のハイドロフルオロエーテルＨＦＥ−７０００とよく混合した。布地を入れるために、１０．２×１０．２センチメートル（４×４インチ）よりわずかに大きな溜付きのトレーにスラリーを注いだ。次に、粉末を布地に十分に付着させるため、布地をスラリー中で浸漬塗布した。その結果得られた多層止血用パッドを少なくとも１５分間空気乾燥した。
【００３７】
次に、ＰＥＧを含有する試料を、オプションとしてＣＭＣも含有するいくつかの試料と共に、ＰＥＧの融点を超える温度で熱処理した。試料は、６５〜７０℃の温度設定を有する標準的な真空オーブンに約１５分間入れて加熱した。このようにして、生体吸収性足場材上に塗布された凍結乾燥トロンビン及びフィブリノゲン粒子、及びオプションとしてのＣＭＣ粒子は、ＰＥＧ融点を超える温度に加熱することによって足場材に融着される。その後、試料を室温まで放冷した。
【００３８】
ハイドロフルオロエーテル（ＨＦＥ）液は、スリーエム・コーポレーション（３Ｍ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）社から市販されている３Ｍノベック・エンジニアード・フルイドＨＦＥ−７０００（３Ｍ  Ｎｏｖｅｃ（商標））Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  Ｆｌｕｉｄ  ＨＦＥ−７０００）の１−メトキシヘプタフルオロプロパンを用いた。ＨＦＥ−７０００は不活性、不燃性の低沸点液体である。ＨＦＥ−７０００は、製造時にトロンビン及びフィブリノゲン並びにオプションとしてのＰＥＧ及び／又はＣＭＣ粉末の不活性伝達手段として使用し、製造工程で蒸発によりほぼ完全に除去される。本発明の止血用パッドの製造時には、トロンビン及びフィブリノゲン並びにオプションとしてのＰＥＧ及び／又はＣＭＣ粉末の不活性伝達手段として、任意の他の不活性、不燃性の低沸点非水液体を使用することも可能である。
【００３９】
本発明を実施するに際しては、周囲温度で固体であり、溶融温度が凍結乾燥タンパク質がかなりの程度変性する温度より低い限り、溶融性を持つ生体適合性かつ生体吸収性の任意の粉末を使用することも可能である。好ましいバインダーは、平均分子量１０００〜２０，０００ダルトンのＰＥＧであり、より好ましくはＰＥＧ  ３０００〜８０００である。この実施例では、フルカ（Fluka）から入手した融点約５６〜５９℃、数平均粒径４５ミクロンのＰＥＧ  ３０００を使用した。好ましい実施形態においては、バインダー粒子は、粒子数で少なくとも９５％が粒径約２５〜６０ミクロンの範囲、好ましくは３５〜５５ミクロンの範囲である。
【００４０】
平均粒径２０マイクロメートルのＣＭＣ（３０，０００ＰＡ  Ｃｌｅａｒ  ａｎｄ  Ｓｔａｂｌｅ）をダウ・ヴォルフ・セルロシックス（Dow Wolff Cellulosics）社から入手した。
【００４１】
ＢＡＣ−２（生物的活性成分２）は、主としてフィブリノゲンを含有する血液由来製品で、他にアルブミン、緩衝塩類、及び通常血漿由来製品中に見られる他のタンパク成分が含まれている。
【００４２】
上記のプロセスによって下記成分を含有する３種類の生物製剤含有止血用パッド試料を作製して、実験により試験を行った：
ａ）フィブリノゲン及びトロンビンを含んでいる生物製剤含有止血用パッド、
ｂ）フィブリノゲン、トロンビン及びＰＥＧを含有する生物製剤含有止血用パッド、
ｃ）フィブリノゲン、トロンビン、ＰＥＧ及びＣＭＣを含有する生物製剤含有止血用パッド。
【００４３】
少量のＰＥＧを含有する生物製剤含有止血用パッドが、剥離強度、破砕性及び湿潤性の向上を含めて予想外の特性改善効果を示した。これらの改善の機能面での効果として、活性物質の破砕性低減の他、封止特性及び組織接着特性の向上が認められた。
【００４４】
実施例２．組織剥離試験
下記のように種々異なるレベルの活性成分の濃度を用いて実験を行った：
ＢＡＣ−２フィブリノゲン含有粉末：フィブリノゲン５．０及び６．７ｍｇ／ｃｍ２又はフィブリノゲン含有ＢＡＣ−２粉末１．２７ｇ及び１．７ｇ／１０．２×１０．２ｃｍ（４×４”）生物製剤含有止血用パッド試料
【００４５】
トロンビン含有粉末：トロンビン含有粉末３００ｍｇ／１０．２×１０．２ｃｍ（４×４”）生物製剤含有止血用パッド試料。
【００４６】
ＰＥＧ：０、１００、４００ｍｇ／１０．２×１０．２ｃｍ（４”×４”）生物製剤含有止血用パッド試料。
【００４７】
ＣＭＣ：０、３００ｍｇ／１０．２×１０．２ｃｍ（４”×４”）生物製剤含有止血用パッド試料。
【００４８】
下記のようにして組織剥離試験を行った。幅１．９センチメートル、長さ約１０．２センチメートル（０．７５インチ及び約４インチ）の生物製剤含有止血用パッド試料を湿った牛の真皮組織上に載置した。すぐにこの生物製剤含有止血用パッド試料上に圧力２３．９ｋＰａ（１８０ｍｍ  Ｈｇ）を加える圧縮重しを載置して、養生及び組織に対する接着のため３分間放置した。養生に続いて、重しを取り除き、生物製剤含有止血用パッド試料をクロスヘッドに固定してから、真皮組織から９０度の角度で引き剥がし、その時の剥離力を張力計を用いて測定した。
【００４９】
ここで、表１及び図１を参照しながら、組織剥離試験の結果について説明する。
【００５０】
【表１】
2015500059.tif 000003
【００５１】
表１に示すデータの分析によって、ＰＥＧ３０００の含有量が１００乃至４００ｍｇの範囲にあると、生物製剤含有止血用パッドの組織剥離強度が著しく改善され、ＰＥＧ含有量が多ければ、より高い剥離強度が得られるということが示されている。データの更なる分析によれば、１つの試験を除いて、上記同様に、ＣＭＣ  ３０ｋの含有量が３００ｍｇあると、生物製剤含有止血用パッドの組織剥離強度が改善されるということが示されている。
【００５２】
次に、図１を参照すると、組織剥離に対する４００ｍｇのＰＥＧの影響を明確に示す組織剥離試験の個々のデータポイントと共に平均値も表示されている。このグラフには、公称量のフィブリノゲン及びトロンビン（それぞれ１７００ｍｇ及び３００ｍｇ）を含有する生物製剤含有止血用パッドについてのデータが、更に４００ｍｇのＰＥＧ  ３０００を含有する生物製剤含有止血用パッドと対比する形で示されている。これらのデータの分析は、ＰＥＧ３０００の存在によって生物製剤含有止血用パッドの組織剥離強度が著しく改善されたことを示しいている。
【００５３】
実施例３．漏れ試験
下記のようにして漏れ試験行った。生物製剤含有止血用パッドの試料を、３分間圧縮重しの下で豚血漿中で養生した。その後、試料を４．５ｍｍ径の穴がある平坦な金属製固定具上に載置し、上記と整合する穴を持つ透明なプラスチック天板を生物製剤含有止血用パッド上に全面にわたって固定した。次に、試料を、一定流量で穴から液圧流体として送り出される豚血漿に曝した。従って、唯一可能な欠陥態様は漏れだけで、漏れを生じたピーク圧力を出力として記録した。したがって、漏れは許容される唯一の故障モードであった、またピーク圧力は出力として記録された。
【００５４】
次に、表２及び図２を参照すると、２つの異なるＢＡＣ２量に対する漏れ試験の結果が示されている：１．７ｇ及び１．２７ｇのフィブリノゲン含有ＢＡＣ−２粉末／１０．２×１０．２ｃｍ（４×４”）の生物製剤含有止血用パッド試料、０及び４００ｍｇのＰＥＧ３０００、及び０及び３００ｍｇのＣＭＣ  ３０ｋ、量はすべて、１０．２×１０．２ｃｍ（４”×４”）の生物製剤含有止血用パッド試料１点当たりで示す。
【００５５】
【表２】
2015500059.tif 000004
【００５６】
データの分析は、漏れ試験においては、ＰＥＧ３０００の存在がＰＥＧを加えていない生物製剤含有止血用パッド（試料１４）と比較して生物製剤含有止血用パッド（試料１２、１３、２４）の強度を著しく改善することを示している。平均して、漏れ試験圧力の改善は、約６倍乃至約１４倍である。
【００５７】
実施例４．破砕性試験
次に、表３及び図３を参照すると、生物製剤含有止血用パッド取り扱い作業後におけるＰＥＧ３０００の４つの異なる濃度（０、１００、２００及び４００ｍｇ、濃度はすべて１０．２×１０．２ｃｍ（４”×４”）生物製剤含有止血用パッド試料を基準として）に対する破砕性試験の結果が示されている。
【００５８】
下記のようにして、取り扱いの後の粉末重量損に関する破砕性試験を行った。生物製剤含有止血用パッドの試料に、現在採用されている中における極端に厳しい取り扱い慣行を課した。１０．２×１０．２ｃｍ（４×４”）の生物製剤含有止血用パッドの重量をまず記録した。次に、止血用パッドを塗布面側を下にしてベンチトップの約７．６ｃｍ（３”）上方に片手で保持した。パッドを外科ばさみを用いて大まかに５．１×１０．２ｃｍ（２×４”）の２つの片に切断した。手で支えられていない試料片は、ベンチトップの外科用ドレープ上に自由に落下させた。その後、５．１×１０．２ｃｍ（２×４”）の２つの各試料片をベンチトップ上の外科用ドレープの３０．５ｃｍ（１２”）上方に保持し、両方共それぞれ３回落下させた。２つの試料片をてんびん秤で計量し、物質収支により元の１０．２×１０．２ｃｍ（４×４”）の試料からの粉末重量損失を計算した。使用した試料は、種々異なるＰＥＧ含有量を持ち、ＣＭＣは無含有であった。結果を表３に示す。
【００５９】
【表３】
2015500059.tif 000005
【００６０】
表３のデータの分析は、破砕性試験において、ＰＥＧ３０００の存在が、ＰＥＧを加えていない生物製剤含有止血用パッド（試料５）と比較して、生物製剤含有止血用パッドの破砕性を著しく低減させ（試料６、７、８）、粉末重量損失がＰＥＧの最高含有量４００ｍｇで約１１倍、ＰＥＧ  １００ｍｇに対応する最低含有量で約６倍低減したことを示している。
【００６１】
上述のような極端な取り扱い慣行を課した試料について、次に実施例２で記載したような組織剥離試験を行った。この試験は、０．２×１０．２ｃｍ（４×４”）の試料１点当たり１００、２００及び４００ｍｇのＰＥＧ含有量を持つ試料には、ＰＥＧ含有量０ｍｇの試料と対比して、破砕性低減、湿潤性及び組織剥離強度向上という相乗効果が見られることを実証した。前述のような標準化された極端な取り扱いを課した生物製剤含有止血用パッドの試料について組織剥離力を測定した結果は、破砕性低減と接着性向を組み合わせた相乗効果を反映するものであった。図３に示す実験結果の分析は、ＰＥＧ３０００の存在によって、極端な取り扱いを課した後の試料で剥離力が著しく改善されたことを示している。ＰＥＧ含有の肯定応答は、ＰＥＧ含有量が増加すると組織剥離強度が高くなること、ＰＥＧ無含有の試料に対してＰＥＧ  ４００ｍｇを含有する試料の場合２〜２．５倍の改善効果がもたらされること共に、組織剥離試験の結果で実証された。
【００６２】
実施例５．フィブリンゲル化試験
試料がフィブリノゲン溶液を凝結させる時間を測定するフィブリンゲル化試験（傾斜管法）を下記のようにして行ったフィブリノゲン（ＥＲＬ  ＦＩＢ３）を、濃度１０ｍｇ／ｍＬで２００のｍＭトリス（Tris）緩衝食塩水に溶解させた。本発明の生物製剤含有止血用パッド又は対照の生物製剤含有止血用パッド試料（サイズ１ｃｍ２）１２×７５ｍｍの硼珪酸ガラス管の底に置いた。管内の試料は、塗布面側を上に向けた。その後、１０ｍｇ／ｍＬのフィブリノゲン溶液２ｍＬをガラス管中に添加し、カバーをかけた後直ちに３７℃水浴中の試験管立て立てた。ガラス管を１０秒ごとに手で逆さまにした後、水浴内の試験管立てに戻す操作を行った。ガラス管を逆さまにする都度観察を行い、完全なゲル生成が観察された時、すなわち管中に明らかなバルク状の液体移動が認められなくなった時を観察の終点とした。
【００６３】
試験の結果は下記のとおりである。ＰＥＧ無含有及びＣＭＣ無含有の対照生物製剤含有止血用パッド試料については、２回の試験で試料がフィブリノゲン溶液を凝結させる時間は２３０秒及び２７０秒であった。濃度はすべて１０．２×１０．２ｃｍ（４”×４”）の生物製剤含有止血用パッド試料を基準として、ＰＥＧ３０００を４００ｍｇ及びＣＭＣ  ３００ｍｇを含有する本発明の生物製剤含有止血用パッドの場合、２回の試験で試料がフィブリノゲン溶液を凝固させる時間は９０秒及び１２０秒であった。
【００６４】
これらの結果は、ＰＥＧ及びＣＭＣを含有する生物製剤含有止血用パッドにおけるより速いフィブリノゲン溶液の凝結、従ってより速い湿潤化／より小さい疎水性／トロンビンのより優れた有効性を示している。
【００６５】
実施例６．水進入の研究
下記のようにして水進入の研究を行った。約１ｃｍ２サイズの生物製剤含有止血用パッド試料をその有効塗布面にシリンジにより供給される水滴に曝した。その後、水滴が毛管作用によって試料中に入り込む時間を測定した。
【００６６】
試験の結果は下記のとおりである。ＰＥＧ無含有の公称上の生物製剤含有止血用パッドについて、水滴が毛管作用によって試料中に入り込む時間を観察して、分のオーダー、すなわち約１〜２分より長いことが確認された。ＰＥＧ３０００を４００ｍｇ及びＣＭＣ  ３００ｍｇを含有する本発明の生物製剤含有止血用パッドでは、水滴が毛管作用によって試料中に入り込む時間はミリ秒のオーダーであった。
【００６７】
これらの結果は、ＰＥＧ及びＣＭＣ含有する生物製剤含有止血用パッドは、湿潤化がより速く、疎水性がより小さいことを示している。
【００６８】
上記の実施例は本発明の一部の実施形態を実例として示したものであるが、これらの実施例は発明の範囲を限定するものとして解釈してはならず、むしろ発明の完全な説明に寄与するものとして解釈されるべきである。
【００６９】
〔実施の態様〕
（１）  ａ）生体吸収性足場材と、
ｂ）凍結乾燥トロンビン粉末と、
ｃ）凍結乾燥フィブリノゲン粉末と、
ｄ）溶融性バインダー粉末と、を含み、
該トロンビン粉末及びフィブリノゲン粉末が、該生体吸収性足場材に配され、該溶融性バインダー粉末が、該トロンビン粉末及びフィブリノゲン粉末を該生体吸収性足場材に結合する、止血用パッド。
（２）  前記溶融性バインダーが、前記凍結乾燥トロンビン粉末及び／又は前記凍結乾燥フィブリノゲンを完全に包入することはなく、該溶融性バインダーは、融点が約２５℃乃至約１００℃の親水性、生体適合性、かつ生体吸収性の材料である、実施態様１に記載の止血用パッド。
（３）  前記溶融性バインダーが、平均分子量約２．４９×１０−２１乃至約３．３２×１０−２０ｇ（約１５００乃至約２０，０００ダルトン）のポリエチレングリコールポリマーを含む、実施態様２に記載の止血用パッド。
（４）  前記溶融性バインダーが、実質的に、平均分子量約４．１５×１０−２１乃至約１．３３×１０−２０ｇ（約２５００乃至約８０００ダルトン）、より好ましくは約４．１５×１０−２１乃至約６．６４×１０−２１ｇ（約２５００乃至約４０００ダルトン）のポリエチレングリコールポリマーで構成される、実施態様２に記載の止血用パッド。
（５）  前記バインダー粉末用の前記ポリエチレングリコールポリマーの平均分子量が約４．９８×１０−２１ｇ（約３０００ダルトン）である、実施態様４に記載の止血用パッド。
【００７０】
（６）  前記バインダー粒子が約４５マイクロメートルの数平均粒径を有する、実施態様３に記載の止血用パッド。
（７）  前記止血用パッド上の前記トロンビン粉末、フィブリノゲン粉末及びポリエチレングリコール粉末の総重量に対して、該凍結乾燥トロンビン粉末の重量分率が約１０〜１５％であり、該凍結乾燥フィブリノゲン粉末の重量分率が約５５〜８５％であり、該ポリエチレングリコールの重量分率が２〜２０％である、実施態様３に記載の止血用パッド。
（８）  前記生体吸収性足場材が、織られた又は不織の合成又は天然の生体吸収性材料或いはそれらの組み合わせである、実施態様３に記載の止血用パッド。
（９）  前記生体吸収性足場材が、編まれた酸化再生セルロースの層へニードルパンチされたポリグラクチン９１０不織繊維層を含む二層材料であり、前記粉末が該ポリグラクチン９１０不織繊維層にのみ配される、実施態様３に記載の止血用パッド。
（１０）  前記凍結乾燥トロンビン粉末及び凍結乾燥フィブリノゲン粉末が、前記止血用パッドの温度を前記ポリエチレングリコールポリマーの前記融点より高い温度に上げることによって、前記生体吸収性足場材に結合される、実施態様３に記載の止血用パッド。
【００７１】
（１１）  前記止血用パッドが、貼付時に測定して、該止血用パッドの６．４５ｃｍ２（１平方インチ）当たり約２００〜６００ＩＵのトロンビンを含有し、貼付時に測定して、該止血用パッドの６．４５ｃｍ２（１平方インチ）当たり約２０〜８０ｍｇの量でフィブリノゲンを含有し、かつ前記ポリエチレングリコールが、該止血用パッドの６．４５ｃｍ２（１平方インチ）当たり約６〜２５ｍｇの量存在する、実施態様３に記載の止血用パッド。
（１２）  更にＣＭＣ粉末を含む、実施態様３に記載の止血用パッド。
（１３）  前記ＣＭＣ粉末が、約２０マイクロメートルの数平均粒径を有し、該ＣＭＣ粉末が、前記止血用パッドの６．４５ｃｍ２（１平方インチ）当たり約１５〜２０ｍｇの量存在する、実施態様１２に記載の止血用パッド。
（１４）  止血用パッドを製造する方法であって、
（ａ）凍結乾燥トロンビン粉末、凍結乾燥フィブリノゲン粉末及びポリエチレングリコール粉末の非水懸濁液を形成する工程と、
（ｂ）生体再吸収性材料製の足場に該懸濁液を塗布する工程と、
（ｃ）該足場が該トロンビン粉末、該フィブリノゲン粉末、及び該ポリエチレングリコール粉末の一部を担持する状態で液体を蒸発させる工程と、
（ｄ）該足場を該ポリエチレングリコール粉末の融点を超える温度に加熱する工程と、
（ｅ）該足場を該ポリエチレングリコールの該融点より低い温度に冷却して該止血用パッドを形成する工程と、を含む方法。
（１５）  前記工程（ｄ）及び（ｅ）の結果、前記ポリエチレングリコールが溶融し、かつ該ポリエチレングリコールが固化して前記凍結乾燥トロンビン粉末及び前記凍結乾燥フィブリノゲン粉末を前記足場に結合させる、実施態様１４に記載の方法。
【００７２】
（１６）  前記バインダー粉末が、約２．４９×１０−２１乃至約３．３２×１０−２０ｇ（約１５００乃至約２０，０００ダルトン）、より好ましくは約４．１５×１０−２１乃至約６．６４×１０−２１ｇ（約２５００乃至約４０００ダルトン）の平均分子量を有するポリエチレングリコール粉末で実質的に構成され、前記生体吸収性足場材が、織られた又は不織の合成又は天然の生体吸収性材料或いはそれらの組み合わせであり、また該ポリエチレングリコール粉末が約４５マイクロメートルの数平均粒径を有する、実施態様１４に記載の方法。
（１７）  前記生体吸収性足場材が、編まれた酸化再生セルロースの層へニードルパンチされたポリグラクチン９１０不織繊維層を含む二層材料であり、前記粉末が該ポリグラクチン９１０不織繊維層にのみ配される、実施態様１４に記載の方法。
（１８）  前記非水懸濁液がＨＦＥ−７０００を含有し、かつ前記足場に該懸濁液を塗布する工程が、該足場を該懸濁液に浸漬するか、若しくは該足場に該懸濁液を吹きつけることにより実施される、実施態様１４に記載の方法。
（１９）  前記懸濁液が、ＣＭＣ粉末粒子を更に含有する、実施態様１４に記載の方法。
（２０）  傷部位に止血処置又は組織封止を施す方法であって、該傷部位に実施態様１に記載の止血用パッドを貼付する工程を含む、方法。
【図１】
2015500059.tif 000006
【図２】
2015500059.tif 000007
【図３】
2015500059.tif 000008
【国際調査報告】
2015500059.tif 000009
2015500059.tif 000010