【手続補正書】
【提出日】平成21年12月26日(2009.12.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
心房利尿ホルモン（ＡＮＰ）、脳ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）、Ｃタイプ利尿ホルモン（ＣＮＰ）、ウロジラチン（Ｐ−Ｕｒｏ）およびこれらの前駆体と派生物質からなる群から選ばれた１種又は２種以上の物質を活性成分として含有し、薬剤学上通常用いられる希釈液、賦形剤、充填剤または助剤を含有していてもよい組織器官の修復再生用製剤。
【請求項２】
拡張型心筋症を含む慢性心不全の治療のために用いられることを特徴とする、請求項１記載の組織器官の修復再生用製剤。
【請求項３】
外傷による組織欠損の修復のために用いられることを特徴とする、請求項１記載の組織器官の修復再生用製剤。
【請求項４】
閉塞性動脈硬化症の治療のために用いられることを特徴とする、請求項１記載の組織器官の修復再生用製剤。
【請求項５】
骨・軟骨組織傷害の改善修復のために用いられることを特徴とする、請求項１記載の組織器官の修復再生用製剤。
【請求項６】
発毛・育毛・増毛のために用いられることを特徴とする、請求項１記載の組織器官の修復再生用製剤。
【請求項７】
皮膚、粘膜又は皮下組織傷害の改善修復のために用いられることを特徴とする、請求項１記載の組織器官の修復再生用製剤。
【請求項８】
心房利尿ホルモン（ＡＮＰ）、脳ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）、Ｃタイプ利尿ホルモン（ＣＮＰ）、ウロジラチン（Ｐ−Ｕｒｏ）およびこれらの前駆体と派生物質からなる群から選ばれた１種又は２種以上の物質を活性成分として含有する化粧品類。
【請求項９】
心房利尿ホルモン（ＡＮＰ）、脳ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）、Ｃタイプ利尿ホルモン（ＣＮＰ）、ウロジラチン（Ｐ−Ｕｒｏ）およびこれらの前駆体と派生物質からなる群から選ばれた１種又は２種以上の物質を活性成分として含有する細胞培養添加剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
多臓器に対する多彩なＡＮＰの生理活性を受容体結合反応に関しＡＮＰと競合することにより修飾または抑制させる薬剤の報告には、ラット・ＡＮＰのＮ端、Ｃ端及び環状構造の一部を欠如させた合成リガンドＣ-ＡＮＦ(Science, 238, 675-678, 1987)やヒト・ＡＮＰ［７-28］の逆並行２量体の１組のジスルフィド結合をＬ-α-aminosuberic acidで置換したアナログ（Analog） III(FEBS Lett., 248, 28-34, 1989)などがある。他方、発明者らによって、ＡＮＰがその生物学的活性として鶏胚心筋細胞増殖促進作用等を有することが見いだされているが、ANPファミリー分子群の細胞や組織器官の再生修復あるいは皮膚毛髪ならびに骨や軟骨形成に対する作用は未だ知られていない。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
従来の細胞組織修復技術における問題点は、分化した細胞ほど再生されにくい点にある。すなわち、中枢神経や心筋のような特に分化の進んだ細胞／組織の場合、一度、生体内で何らかの傷害を被ったときには、従来の治療では再生が不可能に近い。また、禿げは毛髪の減少した状態を代表し、脱毛、少毛、毛髪の太さや色調、弾性や剛直性などの様々な変化によって特徴づけられる一方、皮膚および皮下組織傷害は、外傷、やけど、化学刺激、アレルギー、炎症、感染症、循環不全、生理的な老化などが原因となる皮膚や皮下組織の脱落、荒れなどであり、表皮や真皮、支持組織の破損がみられる。禿げの改善治療法としてはミノキシジル、アデノシン、FGF7を投与する方法が知られているが、現実には未だ著効を示す場合は多くない。じょく創、皮膚組織の傷害の場合は、各種軟膏、血流改善剤、ＦＧＦ、創処置手術、化粧品類など多様な対処法が講じられるが、回復や改善速度には全身の栄養や局所の清潔と修復能力が基本的に影響し、従来法での効果は充分とは言えない。すなわち、従来法による毛髪の成長や皮膚組織の改善には限界があり、新たな有効な製剤や治療法の開発が待たれる。次に健康な骨では限界を超える強い外力や反復した外力が加わることにより骨が破壊されて骨折が生じる。一方、病的な骨は骨自体がもろくなり軽微な外力でも骨折が起こる。骨折は形態と程度により完全骨折、不完全骨折、単純骨折、複雑骨折があるが、治療の基本は整復後一定期間固定し安静を保つことである。骨折の治療期間を短縮できることは患者にとって日常生活、社会活動に早期に復帰できることになり多大な恩恵がある。しかしながら今までに骨折の治療期間短縮のために使用されている薬剤は知られていない。変形性関節炎やリューマチ等は軟骨損傷を伴うことで知られていて多くの薬剤が開発されてきた。しかしながら軟骨組織を増殖させる薬剤はまだ市販されていない。虫歯や歯肉の病気、あるいは怪我などにより失しなった歯を補うための治療方法としてインプラントが知られている。インプラントではハイドロキシアパタイトのような人工骨移植材が用いられているが、手術の成功率を上げるために骨増殖能を有する蛋白製剤の使用が望まれている。骨組織再生に米国で臨床使用されている増殖因子にBMP-2があるが、日本ではまだ承認されていない状況である。安全性、有効性が臨床で確認された製剤が求められている。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
発明者はペプチドホルモンであるＡＮＰ、ＢＮＰ、ＣＮＰ、ウロジラチンおよびこれらの組み合わせを、さらにはこれらと共通の様式にて機能する製剤を、心筋を含む生体組織の修復再生用製剤として、さらには発毛育毛増毛用製剤および／またはじょく創，肌荒れ、火傷、壊死、乾癬等皮膚粘膜と皮下・骨・軟骨組織傷害の改善修復用に使用することを発案した。そして、更に、前記修復再生用製剤の場合には、ＮＰファミリー分子群以外の細胞増殖因子または組織修復因子及び／又は細胞組織成長促進剤を含むものも発明した。また、ニュートラルエンドペプチダーゼ阻害剤、抗心房利尿ホルモンファミリー分子抗体、または心房利尿ホルモン作用修飾剤を更に含む生体組織修復再生用製剤を発明した。そして、また、本発明者は、心房利尿ホルモン（ＡＮＰ）、脳ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）、Ｃタイプ利尿ホルモン（ＣＮＰ）、リン酸化ウロジラチン（Ｐ−Ｕｒｏ）およびこれらの前駆体と派生物質のいずれかを発現するヌクレオチド配列を含む遺伝子およびベクター、またはこれらの組み合わせを活性成分として含有し、薬剤学上通常用いられる希釈液、賦形剤、充填剤または助剤を含有していてもよい組成物からなる組織器官の修復再生製剤、発毛育毛増毛用製剤および／またはじょく創、肌荒れ、火傷等皮膚粘膜と皮下・骨・軟骨組織傷害の改善修復用製剤を発明した。また、前記発毛育毛増毛用製剤やじょく創、肌荒れ、火傷等皮膚粘膜と皮下組織傷害の改善修復用製剤の場合には、前記活性成分以外に、他の増殖因子及び／又は毛髪成長促進剤を更に含んでいてもよい。また、ニュートラルエンドペプチダーゼ阻害剤、抗心房利尿ホルモンファミリー分子抗体、または心房利尿ホルモン作用修飾剤を更に含んでいてもよい。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
本発明では、生体および各種培養細胞をもちいて、まず組織器官の再生や修復に及ぼすANPファミリー分子の作用を確認した。次に、拡張型心筋症の患者においてANPの継続的反復投与によるひ薄化心筋への再生活性化効果を確認した。更に外胚葉系細胞や組織の障害、特に禿げ脱毛および／または皮膚傷害の改善と手術後組織回復と再生のプロセスにおいてANPファミリー分子の向毛髪発育作用および向皮膚再生改善作用と組織回復効果を検討し、新規製剤および新規製剤による処置方法を試験した。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
また、本発明の製剤の手術後創部に対する作用は、対照の自然治癒部位と比べて、より早期の創部の盛り上がりと閉鎖治癒およびより少ない瘢痕化にて代表される。ことに潰瘍部位の早期閉鎖は閉塞性動脈硬化症による壊疽や長期臥床によるじょく創の処置に有用である。この作用は培養細胞による成績で示されたことからも、血流依存性とは異なるものであり、直接の標的細胞への修復と増殖効果は各種組織器官の再生修復に有用である。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
培養細胞を用いた試験では、細胞傷害を加えた細胞群において対照と比べてANP投与のときに明らかに修復能力が高かったこと、および細胞コロニーと細胞配列ネットワークの形成がANP投与でのみ可能であったことは、NPファミリー分子の組織修復と再生誘導能を実証した。培養細胞へのＡＮＰの添加によりＢＭＰ-２の産生が経時的に増大した。ＢＭＰ−２が骨・軟骨形成カスケードにおいて重要な役割を果たしている増殖因子であることからANPは骨・軟骨の形成・再生にトリガーを引く重要な役割を有していることが判明した。さらにANPがＢＭＰ２など成長因子の発現を修飾したことは既知の成長因子群作用の調節者としてのＡＮＰファミリーの役割を示した。このことは外来性投与では機能を果たせない成長因子群が関わる再生や修復であっても、ＡＮＰファミリー分子が、これら成長因子の内因性産生や機能発現を調整して再生や修復を誘導できることをしめした。また、ＡＮＰファミリーが細胞周期関連因子（サイクリンD１）や細胞種特異的蛋白（KRT15）およびエピモルフィンの発現レベルをも高めたことは組織修復および再生を細胞や組織の有すべき本来の姿に加速して誘導できることを示した。実際に、臨床上、ANPを局所投与したときの皮膚のひび割れや切創手術創の修復が未使用時と比べて迅速であり、皮膚のつや、張り、しっとりさが良好であったことは細胞試験の結果と合致するものであった。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
このＮＰファミリー組成物は、静脈内注入または静脈内ボーラス投与等で全身に投与される。拡張型心筋症を含む慢性心不全の場合、１００μｇから１０００μｇのＡＮＰの点滴静脈内投与を週１回から７回を２ヶ月以上継続投与するのが望ましい。比較的軽症の場合は、２週間に１回の投与を３ヶ月以上継続してもよい。また、本発明の製剤は、発毛育毛増毛あるいはじょく創、肌荒れ、傷口、壊疽、手術創、または骨折、軟骨損傷、火傷等皮膚粘膜と皮下組織傷害の改善修復用製剤の場合には、単独又は保護薬剤とともに、経皮投与、皮下投与、筋肉内投与、インハレーションあるいは病変部への塗布や注入、噴霧等による局所投与が可能である。局所投与では、ローションやミスト、またはクリームやゲル貼付剤として局部周辺に投与することもできる。禿や肌荒れの場合では、ローションやミスト、またはクリームやＯＤＴ貼付剤によって経頭皮投与するのが好ましい。投与量は、１回あたりＡＮＰでは１０ｎｇから１００μｇであるのが好ましく、１０ｎｇから１μｇであるのが特に好ましい。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
本発明のNP群は、既知の製剤の代わりに使用することもできるし、既知の製剤と組み合わせて使用することもできる。例えば、拡張型心筋症においては利尿剤、βブロッカー剤、ACE阻害剤などの薬剤と併用投与できる。また、増毛育毛においてはミノキシジル、フィナステリド、塩化カルプロニウム、アデノシン、天然物抽出産物、アミノ酸類、馬鬣油、など各種増育毛成分との配合が可能である。そして、骨や軟骨の修復再生においてはBMP-2のような他の骨増殖因子と一緒に用いることもできる。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
また、本発明のNPファミリー分子を配合した化粧料素材、化粧料の形態を製造することができる。化粧料には、植物油のような油脂類、高級脂肪酸、高級アルコール、シリコーン、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン界面活性剤、防腐剤、糖類、金属イオン封鎖剤、水溶性高分子のような高分子、増粘剤、粉体成分、紫外線吸収剤、紫外線遮断剤、ヒアルロン酸のような保湿剤、香料、ｐＨ調整剤等を含有させることができる。ビタミン類、EGFのような細胞増殖因子、皮膚賦活剤、血行促進剤、常在菌コントロール剤、活性酸素消去剤、抗炎症剤、美白剤、殺菌剤等の他の薬効成分、生理活性成分を含有させることもできる。