(57)【要約】  【解決手段】  ２つ又はそれ以上の成分の共沈により、ＰＥＧ組成物を調製し、実質的に均質な粉末を生成する方法。いくつかの実施形態によれば、２つまたはそれ以上の成分は、溶媒中に少なくとも部分的に可溶性であって、少なくとも一つの成分は、官能化ＰＥＧである。前記少なくとも２つの成分を前記溶媒と接触させることで少なくとも部分的に前記成分を溶解され、次いで共沈させられる。得られた生成物は、他の方法によって作られた生成物とは異なり、実質的に均質である。ＰＥＧ組成物は、例えばインドシアニングリーンなどの着色剤などの追加の化合物と共沈させ得る。  【選択図】      図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＰＥＧ組成物を調製する方法であって、この方法は、
溶媒を提供する工程と、
少なくとも部分的に前記溶媒に可溶な少なくとも２つの成分を提供する工程であって、前記少なくとも２つの成分のうちの少なくとも１つは官能化ＰＥＧである、前記提供する工程と、
前記少なくとも２つの成分のそれぞれを共に前記溶媒と接触させ、前記少なくとも２つの成分のそれぞれを、少なくとも部分的に前記溶媒に溶解させる工程と、
前記少なくとも２つの成分のそれぞれを共沈させて、実質的に均質な粉末を生じさせる工程と
を有する方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法において、前記少なくとも２つの成分は、官能化ＰＥＧ、同様のＭＷの非官能化ＰＥＧ、生物活性剤、抗生物質、スタチン、放射線殺菌安定剤、ペプチド、治療薬剤又はタンパク質、および／又はナノ粒子、ナノケージ／ナノシェル、着色剤、崩壊剤又は分散剤、視覚補助剤、治療薬剤及びタンパク質、崩壊剤及び／又は分散剤、放射線マーカー、フィブリン、トロンビン、放射線乳白剤、銀、抗生物質、化学療法剤、成長因子、賦形剤、崩壊剤および他の分子量のＰＥＧ、又はそれらのペグ化体から選択されるものである方法。
【請求項３】
請求項１記載の方法において、前記少なくとも２つの成分のうちの少なくとも１つが着色剤である方法。
【請求項４】
請求項３記載の方法において、前記着色剤はインドシアニングリーン（ＩｃＧ）である方法。
【請求項５】
請求項１記載の方法において、前記官能化ＰＥＧは、１又はそれ以上の求電子性基、求核性基、反応性単位、又はそれらの組み合わせを有するものである方法。
【請求項６】
請求項１記載の方法において、１又はそれ以上の前記少なくとも１つの成分は、前記溶媒と接触させる前に、少なくとも部分的に前駆体溶媒に溶解されるものである方法。
【請求項７】
請求項６記載の方法において、前記前駆体溶媒は、独立して、メタノール、２−プロパノール、エタノール、メチルｔ−ブチルエーテル、ジクロロメタン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、およびそれらの組み合わせから選択されるものである方法。
【請求項８】
請求項１記載の方法において、前記溶媒が有機溶媒である方法。
【請求項９】
請求項１記載の方法において、前記溶媒は、メタノール、２−プロパノール、エタノール、メチルｔ−ブチルエーテル、ジクロロメタン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、およびそれらの組み合わせから選択されるものである方法。
【請求項１０】
請求項１記載の方法において、前記共沈させる工程は、温度の変化、他の溶媒（エチルエーテル又は２−プロパノール）の添加のいずれかによって開始されるものである方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年３月１９日付け出願の「共沈法」と題する米国仮出願第６１／６１２，９４３号）の特権及び優先権を主張し、その全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
本出願は、化合物をブレンドする分野に関する。より詳細には、この出願は、一つ又はそれ以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）化合物を一つ又はそれ以上の他の化合物とブレンドする方法に関する。いくつかの実施形態は、係る方法から得られる均質なブレンド組成物を含む。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
医療用接着剤、シーラントおよびバリアは、しばしば、ＰＥＧ架橋成分を含むヒドロゲル材料で作られている。本明細書は、ＰＥＧ自体並びに可能な添加剤を含む係るＰＥＧ架橋成分を調製する方法を開示する。
【図面の簡単な説明】
【０００４】
本明細書に提出した図面は、本開示に包含したいくつかの実施形態又はいくつかの実施形態の特徴を示す。前記図面は、例示することを意図し、限定することを意図するものではない。参照番号は、図面の同様な要素を指す。
【図１】図１は、本明細書の開示による一つの代表的な方法のフローチャートである。
【図２】図２は、本明細書で開示されているいくつかの実施形態による、インドシアニングリーン、ＩｃＧ着色剤を用いたＰＥＧ組成物を生成する、１つの代表的な方法のフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【０００５】
この出願は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のブレンドを調製する方法を開示した。係るブレンドは、多くのプロセス及び最終用途で有用であるが、本明細書にそれぞれその全体が参考として組み込まれている、米国特許第５５８３４７３号；ＲＥ３８，１５８号；ＲＥ３８，８２７号；６３７１９７５号；及び６４５８１４７号に開示記載されているようであって、これらに限定されない、特に二液型医療用接着剤、シーラント又はバリヤーでの使用が意図されている。
【０００６】
係る医療用接着剤は、これらに限定されないが、アルブミン又はアルブミンの断片のようなタンパク質と、架橋剤がＰＥＧに基づくる架橋剤とを含む。本出願は主にＰＥＧに基づく架橋剤組成物に関する。本明細書における「医療用接着剤」と言う表示は、医療用接着剤、シーラント、バリア組成物、特にヒドロゲルに基づく組成物を含むことを意味する。
【０００７】
前記ＰＥＧ組成物は、本明細書に記載のブレンド・プロセスによって調製し得る。前記ブレンド・プロセスは、さらなる所望の分子又は化合物を、該ブレンド中に組み込むことを可能にする。これらの分子は、以下に限定されないが、分解速度、放出速度、視覚的補助、治療薬および／又はタンパク質送達を変化させること、加速されたおよび／又は一貫性の溶解時間を提供するための崩壊剤および／又は分散剤、薬物を送達するための潜在的なペグ化分子の添加、及び特定のタイプの細胞に薬物、熱、光又は他の物質を送達するための、ミクロカプセル化および／又はナノ粒子、ナノケージ／ナノシェルの組み込みを含む、多くの利点を有するが、さらなる利点および用途も明らかになるであろう。
【０００８】
医療用接着剤は、許容可能な時間内に、アレルギー反応、有害な組織反応又は全身毒性効果を生じることなく生体内で吸収又は分解されなければならない。好ましくは、適切な接着剤は、また、それが適用後、容易に吸収されることである。
【０００９】
本明細書に記載の方法に従ってブレンドしたＰＥＧを使用することによって、いくつかの既存の、ＰＥＧに基づく医療用接着剤、シーラントおよびバリアの多くの重要な特性が維持され、場合によっては改善される。本明細書に開示される方法のいくつかを使用して調製した，種々のシーラントの特性のいくつかの例を以下に示す。これらの特性の一部又はすべてが、最終医療用接着剤において望ましい。
【００１０】
シーラントバースト（ｂｕｒｓｔ）圧力は、これらに限定されないが、約９０ｍｍＨｇ〜約３００ｍｍＨｇの範囲である。いくつかの実施形態では、意図する用途に応じて、例えば異なる身体の区域は、より高いか又は低いバースト強度を必要とする場合があり、バースト圧力は、また約４０ｍｍＨｇ又はそれ以下である。
【００１１】
弾性率：３ｋＰａより高く１００ｋＰａより低い。
【００１２】
分解：約３日から約９０日を超える。
【００１３】
膨潤：限定されないが、１％未満〜２００％超過で、場合によっては縮小する。いくつかの場合において、膨潤は約０．１％、約０．５％、約０．７％、約０．９％、約１％、約３％、約５％、約７％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、約２００％、又はこれらのいずれか２つの間の範囲である。
【００１４】
シーラントの加水分解中に於いて、前記ヒドロゲルは、前記架橋剤がそれから合成された種々の構成成分に分解し、アルブミンが放出される。前記架橋剤成分は、これらに限定されないが、出発原料ＰＥＧポリマー、コハク酸、乳酸、グルタル酸及びｎ−ヒドロキシコハク酸、および又は共沈物ブレンドプロセス又は高剪断造粒プロセス又はトップスプレー法で使用された種々の官能化ＰＥＧ類からの他の分解産物を含む。
【００１５】
本発明の接着剤およびシーラント組成物は、種々の用途に使用される。幾つかの応用は、縫合糸、ステープル、テープおよび／又は包帯の補助として又はその代替として組織をシール又は共に結合するために接着剤シーラント組成物を使用することを含む。更に、これらの組成物は、いくつかの場合では、接着剤バリアとしても作用し得る。
【００１６】
架橋されたタンパク質を含む医療用接着剤は知られている。しかしながら、前記架橋剤成分を調製する、独自で異なる方法および係る医療接着剤におけるそれらの使用は、開示されていない。
【００１７】
本出願は、一つ又はそれ以上のポリエチレングリコール組成物、および／又は１つ又はそれ以上の追加の所望の分子又は化合物をブレンドするプロセスを開示する。いくつかの実施形態では、共沈法が用いられる。他の実施形態では、配合方法が採用される。いくつかの実施形態において、前記一つ又はそれ以上のポリエチレングリコール組成物は、官能化ＰＥＧである。いずれかの方法において、少なくとも１つのＰＥＧ化合物は、追加の化合物又は分子とブレンドされる。
【００１８】
前記一つ又はそれ以上のポリエチレングリコール化合物は、直鎖状又は分岐鎖状であっても、任意の適切なＰＥＧ組成物であり得る。いくつかの実施形態では、前記１つ又はそれ以上のＰＥＧ組成物は、官能化され、１官能性、２官能性、３官能又は３を超える（すなわち、ｎ>３）、官能性を有するか、又はそれらのブレンドである。前記ＰＥＧ組成物は、実質的に純粋であるか、又は他のＰＥＧ組成物とブレンドされる。前記ＰＥＧ組成物は１，０００Ｄａｌｔｏｎ／モル〜６０、００Ｄａｌｔｏｎ／モルの分子量を有する。
【００１９】
前記１つ又はそれ以上の追加の分子又は化合物は、所望の特性に貢献するか、成果を提供する、任意の分子又は化合物であり得る。適切な追加の分子又は化合物は、これらに限定されないが、追加の架橋化合物、官能化ＰＥＧ、非官能化ＰＥＧ、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルピロリジノン）、ポリ（エチルオキサゾリン）、およびポリ（エチレングリコール）−コ−ポリ（プロピレングリコール）ブロックコポリマー、ＢＨＴ又は他の放射線滅菌安定剤、医薬品、スタチン、生物活性剤、抗生物質、ペプチド、治療薬剤又はタンパク質、マイクロカプセル化された分子／薬物粒子、ナノ粒子、ナノケージ／ナノシェル、着色剤、崩壊剤、分散剤、視覚補助、放射線学的マーカー、フィブリン、トロンビン、放射線乳白剤、銀、化学療法剤、成長因子、賦形剤、他の分子量のＰＥＧ、又はそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、追加分子又は化合物がペグ化されている。いくつかの実施形態では、前記追加分子又は化合物は、ペグ化されていない。
【００２０】
多くの場合、視覚補助又は着色剤は、一つの反応物を他のそれかた区別すること、及びその場で接着剤又は最終組成を可視化するのに望ましい。例えば、シーラントは、通常ＦＤ&Ｃの系着色添加物を使用する。これらの染料は、しばしば、別個の粉末として架橋ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の粉末成分に添加される。任意の適節な着色剤又は視覚補助剤が使用されが、ＰＥＧブレンド中にインドシアニングリーン（ＩｃＧ）を組み込むことは、特にここで企図されている。
【００２１】
共沈法  
種々の混合物／ブレンドが共沈ブレンドプロセスによって作成される。いくつかの実施形態において、前記追加分子は、前記一つ又はそれ以上の官能化ポリエチレングリコール架橋剤と共に共沈される。他の実施形態では、１つ又はそれ上の追加分子は、前記共沈以前にペグ化し得る。前記一つ又はそれ以上の追加分子又は化合物は、これらに限定されるものではないが、生体適合性分子、着色剤、治療薬／タンパク質、抗生物質、ナノ粒子および／又は分散剤および崩壊剤を含む。
【００２２】
出願人らは、追加分子の有無にかかわらず、先ずＰＥＧ架橋剤と、任意の追加分子又は化合物とを溶解し、続いてブレンドした溶液を均質な粉末として沈殿させることによって、溶媒中に１つ又はそれ以上のＰＥＧ架橋剤）をブレンドするプロセスを開発した。このプロセスは、「ＰＥＧ共沈」（Ｃｏ−ｐｐｔ）と呼ぶ。この共沈プロセスは、最終粉末製品に至るまで可変材料の組成の設計によって均質な粒子を生成し、其れが使用される（例えば、生体接着剤）最終製品の物理的特性をより均一にするのである。前記ＰＥＧ粉末自体は、以下の一部又はすべて利点：均質性の増加、流動性の増加、より容易な溶解、沈降の減少などを有する
前記共沈プロセスは、すべての分子が完全に溶解又は場合により部分的に溶解しているだけのいずれかの溶剤を使用する。これらの溶媒は、以下に限定されないが、メタノール、２−プロパノール、エタノール、メチル第３級ブチルエーテル、エチルエーテル、ジクロロメタン、メタノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、アセトニトリル、およびこれらの組み合わせを含む。一つ又はそれ以上の構成成分、すなわちＰＥＧ又は追加の分子又は化合物を、他の成分と混合する以前に異なる溶媒で仕込み得る。例えば、特に、インドシアニングリーン（ＩＣＧ）は、最初ＤＭＳＯ又はメタノールに溶解して、次いでＰＥＧ溶液に加える。
【００２３】
前記ＰＥＧ溶液は、分子量が１，０００Ｄａｌｔｏｎ／モル〜６０，０００Ｄａｌｔｏｎ／モルのＰＥＧ分子を含む。前記ＰＥＧ分子は、単官能性、２官能性、ヘテロ２官能性分枝および多官能性部分の形態であり得る。非官能化ＰＥＧ（ｓ）も、同様の分子量で存在する。
【００２４】
官能化された部位は、求電子剤、求核剤又は他の反応性単位を含む。それらは、任意の比率および／又は活性部位のブレンドで存在し得る。係る求電子剤は、以下に限定されないが、ブチルアルデヒド、プロピオンアルデヒド、エポキシド、サクシニミジルカーボネート又はニトロフェニルカーボネートを含む。求核剤は、以下に限定されないが、サクシニミジルカルボキシメチル、サクシニミジルグルタレート、コハク酸サクシニミジル、又は吉草酸サクシニミジルを含む。他の反応剤部位は，以下に限定されないが、アミン、アミド、スルフヒドリル、マレイミド、オルトピリジルジスルフィド、チオール、及びアクリレートなどのビニルを含む。いくつかの実施形態に於いて、分解速度は、ＰＥＧ化合物の分解制御領域ＤＣＧ中の化学成分の選択によって制御し得る。分解が所望される場合、加水分解性又は酵素的分解可能な部分を選択し得る。加水分解的に分解可能な部分の例は、飽和ジ−カルボン酸、不飽和２酸、ポリ（グリコール酸）、ポリ（ＤＬ−乳酸）、ポリ（Ｌ−乳酸）、ポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（δ−  バレロラクトン）、ポリ（γ−ブチロラクトン）、ポリ（アミノ酸）、ポリ（無水物）、ポリ（オルトエステル）、ポリ（オルトカーボネート）、およびポリ（ホスホエステル）を含む。いくつかの実施形態において、求電子剤は、さらに乳酸の誘導体などの酸誘導体を含む。いくつかの代表的なＰＥＧは、ＰＥＧジ（サクシニミジルサクシニミド）、ＰＥＧテトラ（サクシニミジルグルタレート）−ジラクチド、などを含む。
【００２５】
生物活性剤、抗生物質、スタチン、ペプチド、治療薬剤、タンパク質（単数又は複数）、および／又はナノ粒子、ナノケージ／ナノシェルは、前記共沈プロセスを通して又は共沈プロセスで導入されるか、又は、共沈プロセスで使用された一つ又はそれ以上のＰＥＧのアームにペグ化されるかのいずれかである。
【００２６】
あるいは、崩壊剤又は分散剤もまた、ペグ化され、および／又は前記共沈に導入され得る。前記ＰＥＧブレンドに添加された、これらの物質の任意又はすべては、前記ＰＥＧが結晶化するにつれて、前記官能化ＰＥＧの非晶質構造に含まれるのである。更に、ＰＥＧ共沈乾燥工程の間に、官能化ＰＥＧの外部部分上にこれらの分子の堆積が起こるのである。
【００２７】
共沈は、種々の条件、例えば、沈殿させるための、温度変化又はエチルエーテル又は２−プロパノールのような別の溶媒に、前記混合物を添加することで起こり得る。前記共沈（ｃｏ−ｐｐｔ）は、複数のＰＥＧをブレンドするのに、生体適合性染料のあるなしにかかわらず行い得る。いくつかの例では、温度を下げることが共沈を開始する。例えば、沈殿フラスコを共沈が完了するまで氷／  ＮａＣｌ中に保持して４〜５℃に維持し得、及び／又は熱ジャケットしたを混合容器を通して温度／温度勾配を制御し得る。
【００２８】
滅菌ろ過、追加の溶解工程、蒸留、蒸発、別の溶媒交換方法、乾燥、及びその他の工程等の追加の工程は、プロセス中に使用される。前記共沈法は、二次加工も助ける実質的に均質な生成物を生ずる。例えば、前記均質性とその均一な粒径の為に、改善された流動性に加えて、前記粉末はまた、錠剤形成、凍結乾燥、および他の多くのプロセスに役立つと考えられる。均質性および均一な粒径はまた、沈降を低減すると考えられている。従来の製剤に比べて、溶解時間や労力の削減が確認されている。
【００２９】
共沈した材料のいくつかの利点は、均質な粉末、ロット間変動の低下を含み、一貫したＰＥＧ特性およびロット内追加の成分濃度、開始ＰＥＧ架橋剤の官能性に対する最小限の影響を与え乃至影響を与えず、バースト、ゲル化速度、分解、ペグ官能性などのシーラント特性に影響を与えないなどであって、さらに所望の粒経が達成され、取り扱い易さ及び充填処理を改善する可能性を与える。
【００３０】
いくつかの実施形態は、ＰＥＧ組成物を調製する方法を含むものであって、前記方法は、溶剤を提供する工程と、少なくとも部分的に前記溶媒中に可溶である、少なくとも２つの成分を提供する工程であって、少なくとも２つの成分のうちの少なくとも一つは官能化ＰＥＧである、前記工程と、前記少なくとも２つの成分のそれぞれを共に前記溶媒と接触させ、少なくとも２つの成分のそれぞれを、少なくとも部分的に前記溶媒中に溶解する工程と、少なくとも２つの成分のそれぞれを共沈させて、実質的に均質な粉末を生ずる工程とを有する。
【００３１】
いくつかの実施形態では、種々の溶媒中への種々の成分の溶解は、熱、混合、又はその両方を加えることで促進される。
【００３２】
幾つかの実施形態では、種々の溶媒の蒸発および／又は蒸留は、ブレンディングおよび／又は溶媒の交換が促進する。
【００３３】
いくつかの態様において、前記少なくとも２つの成分は、以下から選択される：官能化ＰＥＧ、同様のＭＷの非官能化ＰＥＧ、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルピロリジノン）、ポリ（エチルオキサゾリン）、およびポリ（エチレングリコール）  −コ−ポリ（プロピレングリコール）ブロックコポリマー、ＢＨＴ又は他の放射線滅菌安定剤、医薬品、スタチン、生物活性剤、抗生物質、スタチン、ペプチド（単数又は複数）、治療薬剤又はタンパク質（単数又は複数）、および／又はナノ粒子、ナノケージ／ナノシェル、着色剤、崩壊剤又は分散剤、視覚補助、治療薬およびタンパク質、崩壊剤および／又は分散剤、放射線マーカー、フィブリン、トロンビン、放射線乳白剤、銀、抗生物質、化学療法剤、成長因子、賦形剤、崩壊剤および他の分子量のＰＥＧ等、又はそれらのペグ化体。
【００３４】
いくつかの態様において、前記少なくとも２つの成分の少なくとも一方は着色剤である。いくつかの実施形態では、前記着色剤は、顔料、染料、又は視覚補助である。いくつかの実施形態では、着色剤はＩｃＧである。
【００３５】
いくつかの実施形態では、官能化されたＰＥＧは、１つ又はそれ以上の求電子基、求核基、反応性単位、又はそれらの組み合わせを有するＰＥＧを含む。
【００３６】
いくつかの実施形態では、官能化されたＰＥＧは、分枝状、直鎖状であり、ｎが官能基の数である、官能基を有し、ｎは１であり、ｎは２であり、ｎは３であるか、又はｎは３よりも大きいことがあり、又は前記ＰＥＧは、そのブレンドであり得る。
【００３７】
いくつかの実施形態では、少なくとも一つの成分の１つ又はそれ以上を少なくとも部分的に、前記溶媒と接触させる以前に、前駆体溶媒に溶解される。
【００３８】
前記前駆体溶媒は独立して、以下に限定されないが、メタノール、２−プロパノール、エタノール、メチルｔ−ブチルエーテル、ジクロロメタン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、及びそれらの組合せから選択される。
【００３９】
いくつかの実施形態では、前記溶媒は有機溶媒である。いくつかの例では、溶媒は、メタノール、２−プロパノール、エタノール、メチルｔ−ブチルエーテル、ジクロロメタン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、およびこれらの組み合わせから選択される。
【００４０】
前記共沈工程は、任意の適切な方法で開始される。いくつかの例では、この共沈工程は温度変化、別の溶媒、（例えば、エチルエーテル、又は２−プロパノール）の添加のいずれかによって開始される。
【００４１】
いくつかの実施形態では、溶媒交換を使用し得る。いくつかの実施形態では、追加の濾過および／又は殺菌工程を採用し得る。
【実施例】
【００４２】
図１は、溶解を確実にするために溶媒前駆体を用いて官能化ＰＥＧをＩｃＧとブレンドする、１つの代表的な反応のフローチャートを示す。
【００４３】
以下の手順が、異なる手法、溶媒及び非溶媒を用いる、５つの小規模共沈に対して提案された。
【００４４】
前記成分の溶解時に、少量の溶液を抜き取り、ＮＭＲ分析用に乾燥させて固形物にし、最終沈殿物の成分比の基準として使用した。
【００４５】
手順
Ｉ．２−プロパノールから再結晶、５ｇ
【００４６】
１．４アーム（ａｒｍ）ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０Ｋ（ＰＥＧ  テトラサクシミニジルグルタレートジラクチド）を４．１６ｇ秤量し、それを２５０ｍｌ丸底フラスコに添加する。
【００４７】
２．ＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００を０．８４ｇ秤量し、それを同じ２５０ｍｌフラスコに添加する。
【００４８】
３．２−プロパノール１００ｍｌ及びＢＨＴ０．０００２ｇを添加し、栓でフラスコを密封する。
【００４９】
４．前記溶液を湯浴に入れ、すべての固形物が溶解するまで混合しながら加熱する。
【００５０】
５．溶液５ｍｌを抜き取りそれを試験管に入れ、真空下で乾燥する（この試料は、成分比基準用ＮＭＲ分析用である）。
【００５１】
６．湯浴から前記フラスコを取り出し、前記丸底フラスコを撹拌プレート上に置く。
【００５２】
７．溶液を室温で２時間混合する。
【００５３】
８．前記フラスコを氷浴中に入れ、溶液を更にｌ時間混合する。
【００５４】
９．沈殿物をアルゴンガス下濾過する。
【００５５】
１０．沈殿物を真空下で一晩乾燥する。
【００５６】
１１．残留する乾燥粉末を６０ｍｌこはく色ガラス瓶に移し、手作業で、スパチュラを用いて塊を崩す。
【００５７】
１２．前記の瓶をアルゴンガスでバックフィルし、蓋をかたく閉める。
【００５８】
ＩＩ．エタノールおよびＭＴＢＥから再結晶、５ｇ
【００５９】
１．４アームＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０Ｋを４．１６ｇ秤量し、２５０ｍｌ丸底フラスコに添加する。
【００６０】
２．ＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００を０．８４ｇ秤量し、それを同じ２５０ｍｌフラスコに添加する。
【００６１】
３．エタノール４５ｍｌ、ＭＴＢＥ９５ｍｌ及びＢＨＴ０．００２ｇを添加し、栓でフラスコを密封する。
【００６２】
４．前記溶液を湯浴に入れ、すべての固形物が溶解するまで混合しながら加熱する。
【００６３】
５．溶液７ｍｌを抜き取りそれを試験管に入れ、真空下で乾燥する（この試料は、成分比基準用ＮＭＲ分析用である）。
【００６４】
６．湯浴から前記フラスコを取り出し、前記丸底フラスコを撹拌プレート上に置く。
【００６５】
７．溶液を室温で２時間混合する。
【００６６】
８．前記フラスコを氷浴中に入れ、溶液を更にｌ時間混合する。
【００６７】
９．沈殿物をアルゴンガス下濾過する。
【００６８】
１０．沈殿物を真空下で一晩乾燥する。
【００６９】
１１．残留する燥粉末を６０ｍｌこはく色ガラス瓶に移し、手作業で、スパチュラを用いて塊を崩す。
【００７０】
１２．前記の瓶をアルゴンガスでバックフィルし、蓋をかたく閉める。
【００７１】
ＩＩＩ．ジクロロメタンからエチルエーテル中に沈殿、５ｇ
【００７２】
１．４アームＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０Ｋを４．１６ｇ秤量し、１００ｍｌの丸底フラスコに入れる。
【００７３】
２．ＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００を０．８４ｇ秤量し、それを同じ２５０ｍｌフラスコに添加する。
【００７４】
３．ジクロロメタン５ｍｌを添加、栓でフラスコを密封する。
【００７５】
４．すべての固形物が溶解するまで溶液を混合する。
【００７６】
５．溶液０．２ｍｌを抜き取りそれを試験管に入れ、真空下で乾燥する（この試料は、成分比基準用ＮＭＲ分析用である）。
【００７７】
６．攪拌子を備えた５００ｍｌフラスコにエチルエーテル１００ｍｌを添加する。
【００７８】
７．ＢＨＴを０．００２ｇを前記エチルエーテルに添加し、溶解するまで混合する。
【００７９】
８．激しく混合しながら、前記ＰＥＧ溶液をゆっくり前記混合エーテルに添加する。
【００８０】
９．沈殿物を室温で１５分間混合する。
【００８１】
１０．沈殿物をアルゴンガス下濾過する。
【００８２】
１１．沈殿物を真空下一晩乾燥する。
【００８３】
１２．残留する乾燥粉末を６０ｍｌこはく色ガラス瓶に移し、手作業で、スパチュラを用いて塊を崩す。
【００８４】
１３．前記の瓶をアルゴンガスでバックフィルし、蓋をかたく閉める。
【００８５】
ＩＶ．  ジクロロメタンから２−プロパノール中に沈殿、５ｇ
【００８６】
１．４アームＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０Ｋを４．１６ｇ秤量し、１００ｍｌの丸底フラスコに入れる。
【００８７】
２．ＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００を０．８４ｇ秤量し、それを同じ２５０ｍｌフラスコに添加する。
【００８８】
３．ジクロロメタン５ｍｌを添加、栓でフラスコを密封する。
【００８９】
４．すべての固形物が溶解するまで溶液を混合する。
【００９０】
５．溶液０．２ｍｌを抜き取りそれを試験管に入れ、真空下で乾燥する（この試料は、成分比基準用ＮＭＲ分析用である）。
【００９１】
６．攪拌子を備えた５００ｍｌフラスコに２−プロパノールを１２５ｍｌ添加する。
【００９２】
７．ＢＨＴ０．００２ｇを前記エチルエーテルに添加し、溶解するまで混合する。
【００９３】
８．激しく混合しながら、ＰＥＧ溶液をゆっくり前記混合エーテルに添加する。
【００９４】
９．沈殿物を室温で１５分間混合する。
【００９５】
１０．沈殿物をアルゴンガス下濾過する。
【００９６】
１１．沈殿物を真空下一晩乾燥する。
【００９７】
１２．残留する乾燥粉末を６０ｍｌこはく色ガラス瓶に移し、手作業で、スパチュラを用いて塊を崩す。
【００９８】
１３．前記の瓶をアルゴンガスでバックフィルし、蓋をかたく閉める。
【００９９】
Ｖ．固形物になるまでジクロロメタンの蒸発、５ｇ
【０１００】
１．４アームＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０Ｋを４．１６ｇ秤量し、１００ｍｌの丸底フラスコに入れる。
【０１０１】
２．ＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００を０．８４ｇ秤量し、それを同じ２５０ｍｌフラスコに添加する。
【０１０２】
３．ジクロロメタン２５ｍｌおよびＢＨＴＯ．ＯＯＯｌｇを添加し、栓でフラスコを密封する。
【０１０３】
４．すべての固形物が溶解するまで．溶液を混合する。
【０１０４】
５．前記フラスコをロータリーエバポレーターに載せ、固形物が得られるまで、４０℃で溶媒を蒸発させる。
【０１０５】
６．フラスコに真空アダプタを取り付け、真空ポンプに接続する。
【０１０６】
７．生成物を真空下一晩乾燥する。
【０１０７】
８．真空源からフラスコを取り出し、スパチュラで固形物を崩す。
【０１０８】
９．残留する乾燥粉末を６０ｍｌこはく色ガラス瓶に移す。
１０．前記の瓶をアルゴンガスでバックフィルし、蓋をかたく閉める。
【０１０９】
実施例１（Ｉ）〜（Ｖ）
ＰＥＧ（ＳＳ）２およびＰＥＧ（ＳＧ）４ジラクチドは、生体適合性染料成無しで（５つの共沈法が成功裏に使用された）、上記開示されたのと類似の方法により調製された。
【０１１０】
【表１】
2015510824.tif 000003
【０１１１】
実験：前記４アーム−ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０ＫとＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００とを、アルゴン雰囲気下、磁気攪拌子を入れた２５０ｍＬ丸底フラスコに添加した。これに、ＢＨＴ、続いて２−プロパノールを添加した。すべての固形物が溶解するまで、混合物をアルゴン下で加熱した。加熱及び冷却プロセスを通じて、温度は、時間対でモニターした。反応混合物を熱源から取り出し、５ｍＬのサンプルを成分比率基準として標識し、高真空下で乾燥させた。残留する溶液を２時間室温で撹拌し，次いで１時間氷／塩水浴中で冷却した。生成物をアルゴン下で濾過により収集し、高真空下で一晩乾燥させた。収量：３．６ｇ
【表２】
2015510824.tif 000004
【０１１２】
実験：前記４アーム−ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０ＫとＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００とを、アルゴン雰囲気下、磁気攪拌子を入れた２５０ｍＬ丸底フラスコに添加した。これに、ＢＨＴ、続いてエタノール及びメチルｔ−ブチルエーテルを添加した。すべての固形物が溶解するまで、混合物をアルゴン下で加熱した。加熱及び冷却プロセスを通じて、温度は、時間対デモニターした。反応混合物を熱源から取り出し、５ｍＬのサンプルを成分比率基準として標識し、高真空下で乾燥させた。残留する溶液を２時間室温で撹拌し，次いで１時間氷／塩水浴中で冷却した。生成物をアルゴン下で濾過により収集し、高真空下で一晩乾燥させた。収量：４．１ｇ
【表３】
2015510824.tif 000005
【０１１３】
実験：前記４アーム−ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０ＫとＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００とを、アルゴン雰囲気下、磁気攪拌子入り２５０ｍＬ丸底フラスコに添加した。これに、すべての試薬が溶解するまで攪拌しながらシリンジによりジクロロメタンを加えた。０．２ｍＬの試料を抜き取り、成分比率基準として標識し、高真空下で乾燥させた。残留する反応混合物をエチルエーテル、ＢＨＴ、磁気撹拌子を含む５００ｍＬ丸底フラスコ中にアルゴン下で１５分間激しく攪拌しながら注いだ。生成物をアルゴン下で濾過により収集し、高真空下で一晩乾燥させた。収量：３．８ｇ
【表４】
2015510824.tif 000006
【０１１４】
実験：前記４アーム−ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０ＫとＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００とを、アルゴン雰囲気下、磁気攪拌子入り２５０ｍＬ丸底フラスコに添加した。これに、すべての試薬が溶解するまで攪拌しながらシリンジによりジクロロメタンを加えた。０．２ｍＬの試料を抜き取り、成分比率基準として標識し、高真空下で乾燥させた。残留する反応混合物を２−プロパノール、ＢＨＴ、磁気撹拌子を含む５００ｍＬ丸底フラスコ中にアルゴン下で３０分間激しく攪拌しながら注いだ。生成物をアルゴン下で濾過により収集し、高真空下で一晩乾燥させた。収量：３．２ｇ
【表５】
2015510824.tif 000007
【０１１５】
実験：前記４アーム−ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０ＫとＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００とを、アルゴン雰囲気下、磁気攪拌子入り２５０ｍＬ丸底フラスコに添加した。これに、ＢＨＴ続いて、すべての試薬が溶解するまで攪拌しながらたシリンジによりジクロロメタンを加えた。混合物を真空下濃縮し、高真空下で一晩乾燥させた。収量：３．７ｇ
【０１１６】
参照用に、初期の４アーム−ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０ＫおよびＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００をＮＭＲにより試験した。ＮＭＲによる出発物質の純度は、以下にリストしてある。
【０１１７】
【表６】
2015510824.tif 000008
【０１１８】
これらの結果から、１．９ｐｐｍの４アーム−ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０Ｋメチレン基の一つを７８０に設定し、ＮＭＲによる基準ピークとして使用した。ＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００については、２．９ｐｐｍのメチレン基を積分して、４アーム−ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０Ｋ／ＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００の比を決定することする。各実験に用いた４アーム−ＰＥＧ−ｄｌ−ＳＧ１０Ｋ及びＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００の量に基づいて、以下の表は、ＮＭＲによる各メチレンの計算値を示す。
【０１１９】
【表７】
2015510824.tif 000009
【０１２０】
ＮＭＲで得た実数値は以下の表に示されている。
【０１２１】
【表８】
2015510824.tif 000010
【０１２２】
いくつかの他のブレンドは、前駆体溶媒に着色剤（ＩｃＧ）を溶解することを含む、図２に設定した方法と同様の方法を用いて調製した。
【０１２３】
実施例２：ＩｃＧ含有ＰＥＧ（ＳＳ）２およびＰＥＧ（ＳＧ）４ジラクチド
ＰＥＧ（ＳＳ）２と、ＰＥＧ（ＳＧ）４ジラクチドと、ＩｃＧとが、単一溶液から共沈され、均質な緑色粉末を得た。ＩＰＡから結晶化。
【０１２４】
【表９】
2015510824.tif 000011
【０１２５】
前記材料は、ＩＰＡと合わせ、５０℃で攪拌した。この材料を濾過し、ドライアイス浴中で冷却した。生成物を濾過により収集し、乾燥した。収率：３８ｇ。
【０１２６】
実施例３：ＩｃＧ含有ＰＥＧ（ＳＳ）２およびＰＥＧ（ＳＧ）４
ＰＥＧ（ＳＳ）２と、ＰＥＧ（ＳＧ）４と、ＩＣＧとが、単一の溶液から共沈され、均質な緑色の粉末を生じた。ＤＳＩ混合物（ＤＳＩ４９．９ｇ）を２Ｌビーカー（００７００１）に添加した。これにＤＣＭ（１０００  ｍｌ、ロット０００２）を添加し、溶解するまで撹拌した。この混合物をグラン（ｇｌａｎ）フィルタ装置（０．１μｍのフィルター）を通して２Ｌ真空フラスコ（０２１００１）に濾過した。濾液を３Ｌ丸底フラスコ（０４２００１）に添加し、ＲＶＰ−０１上、、浴温４０℃で非常に濃厚な油になるまで濃縮した。これに、アルゴン下、ＢＨＴ（０．００８５）およびＩＰＡ（１０００ｍｌ、００４２）を加えた。この混合物を全ての固形物が溶解するまで６０℃で加熱した。これにシリンジと０．２μｍのフィルターによりＩｃＧ（ＤＭＳＯ中５７９ｍｇ）を添加した。この混合物を混合するために５分間６０℃で撹拌し、その５分後に、混合物を４Ｌ三角フラスコ（０２２００１）に注ぎ、氷／塩／水浴中で６０分間攪拌した。混合物をアルゴン下で濾過した。生成物を取り出し、乾燥した。収量：４７．８ｇ。
【０１２７】
実施例４：ＩｃＧ含有ＰＥＧ（ＳＳ）２
ＰＥＧ（ＳＳ）２と、ＩｃＧとが、単一溶液から共沈され，均質な緑色の粉末を生じた。
【０１２８】
【表１０】
2015510824.tif 000012
【０１２９】
ＳＳ−ＰＥＧ−ＳＳ３４００を６０℃でＩＰＡに溶解したが固形物は認められなかった。シリンジで、０．２μｍフィルターを通して、ＩｃＧのＤＭＳＯ溶液を添加した。混合物を６０℃に加熱し、放冷し、その後氷／塩／水浴上で、冷却した。固形物を濾過により収集し、乾燥させた。収量：３４．１ｇ。ＩｃＧ＝２０００ｐｐｍ
【０１３０】
ハンドでブレンドした材料と比較して、特に医療用接着剤／シーラントバリヤ関係で、前記共沈した材料の有用性を実証する試験プロトコールを以下に再現する。
【０１３１】
なお、これらおよび他のブレンドは、これら及び本明細書に記載並びに開示のたような、類似の方法で行い得ることを理解すべきである。開示された方法によって、広く多様なＰＥＧおよび他の材料のいずれかを、種々の用途に特に適している実質的に均質な粉末にブレンドし得る。
【０１３２】
ＰＥＧ（ｓ）用の配合技術
高剪断粒状化および粉砕
配合技術、粉砕による高剪断造粒法も本明細書で意図されている。ボウルの温度をわずかに上昇させ、ＰＥＧ（ｓ）が溶融寸前になるように制御すると、非常に「粘着性」になり、造粒し始める。したがって、この方法は、実質的に溶媒を含まない。大きな粒子が生成され、次に所望の最終粒径にまで粉砕される。かなり狭い粒径分布が達成される。この技術は、添加物、例えば、色素ＩｃＧの有無にかかわらず、ＰＥＧ（ｓ）例えば官能化されたＰＥＧの粒状化に、有用であり、粉末充填操作でうまく作動することが判明した。
【０１３３】
この方法での剪断及び温度の上昇は、問題である。これらのパラメータは、両方共、ある程度、接着剤製品におけるＰＥＧの官能性並びに延いてはゲル化速度に悪影響を与える。これは、ＰＥＧ（ｓ）粉末の周囲貯蔵寿命の短縮になり得る。しかし、これらのパラメータは、さらなる最適化で軽減し得る。
【０１３４】
トップスプレー流動床法
別の技術はトップスプレー流動床を使用する。材料を結合するのに溶媒が必要である。当材料（追加成分を含むか又は含まないＰＥＧ）は、溶媒に完全か又は僅かに溶け得る。この技術で使用される一般的な溶媒はエタノールである。代りの溶媒は、これに限定されないが２−プロパノールであろう。このプロセスでは、熱、せん断、粉砕，又は水分が関与しない。粒子は、直接所望の粒径に凝集される。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、この方法は、<８０ミクロン程度の非常に小さな粒子で始まる。この方法において、前記ブレンドは、所望の粒径に築き上げられ、出発粒径から１０倍の粒径を作り上げる。いくつかの実施形態において、前記粒径は、約５倍、約１０倍、約１５倍、又はこれらのいずれか２つの値間の範囲に増加させられる。粒径は、カートリッジのオリフィスサイズのせいで限定される。いくつかの実施形態では、このオリフィスのサイズは１０００ミクロンまでの最終粒径に限定される。粒径の密度は、カートリッジの正確な充填量を確保するように維持し得る。ＰＥＧ（ｓ）の現在の合成は、理想的には、２０００ミクロン未満であるが、種々の径の粒子を生成する。本方法は、異なる粒径で官能化ＰＥＧ（ｓ）粉末を製造する可能性を提供し、取り扱いと充填処理を容易にする所望の粒径を作成し、ロット間のバルク一貫性を有する。ロット間でＩｃＧ濃度に関してわずかな変動と、場合により配合ＰＥＧ（ｓ）の官能性にわずかな減少とがあり得る。
【０１３６】
本明細書，特に、添付の特許請求の範囲（例えば、添付の特許請求の範囲の本体）において使用される用語は、当業者によって、一般に「オープン」用語として意図されることが理解されよう（例えば、用語「包む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は「含むが以下に限定されない」として、解釈されるべきであり、用語「持つ（ｈａｖｉｎｇ）」は「少なくとも、持つ」と解釈されるべきであり、用語「有する（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は、「有するが，以下に限定されるものではない」等として解釈されるべきである）。
【０１３７】
また、理解されるべきことは、種々の化合物、組成物、方法、および装置は、種々の構成成分又は工程を「有する」「含む」又は「持つ」の「オープン」という意味（「含むが、これらに限定されない」を意味するして解釈される）で記載されているが、前記化合物、組成物、方法、および装置はまた、種々の構成成分および工程、「から本質的になる」又は「から成る」となり得るので、係る用語法は、本質的にクロ−ズドメンバー・グループとして定義するものとして解釈されるべきである。本段落は、決して、「有する」、「持つ」又は「含む」（およびそれらの他の動詞形態）の意味を限定することを意味せず、「含むが限定されない」という、特許法及び慣習と一致する、オープン・エンドの意味の語句として解釈されるべきである。本段落の意図は、単に「から成る」又は「本質的にから成る」言語で定義されるクロ−ズドメンバー・グループは、オープンエンド記述内のより狭く含まれたグループであることを示ことと、「から成る」又は「本質的にから成る」言語を採用する請求項に対する支持を提供することとである。
【０１３８】
本明細書に於いて、実質的に任意の複数および／又は単数形の用語の使用に関して、当業者は文脈および／又は出願に適切なように、複数形から単数形および／又は単数形から複数形に変換し得る。種々の単数形／複数形の組み合わせは、明確にするために、本明細書に於いては、はっきりと明記される。
【０１３９】
導入された請求項記載の特定の数が意図される場合、係る意図は明示的に特許請求の範囲に記載され、そして係る記述が存在しない場合には、係る意図は存在しないことが当業者によってなお更に理解されるであろう。例えば、理解の助けとして、以下の添付の特許請求の範囲は、請求項の記述を導入する導入句「少なくとも１つ」及び「１つ又はそれ以上」の使用を含む。しかし、係る語句の使用は、不定冠詞「ａ」又は「ａｎ」による請求項の記述の導入を、同じ請求項が導入句「１つ又はそれ以上」又は「少なくとも１つ」と、「ａ」又は「ａｎ」のような不定冠詞（例えば、「ａ」および／又は「ａｎ」は、「少なくとも１つの」又は「１つ又はそれ以上」を意味すると解釈されるべきである）とを含む場合であっても、係る導入された請求項記載を含むいかなる特定の請求項をも、唯一つの係る記述を含む実施態様に限定するということを意味するものと解釈すべきではない。同じことが、請求項の記述を導入するのに使用される定冠詞の使用についても当てはまる。その上、導入された請求項記述において特定の数が明示的に記述されている場合でも、当業者は、係る記述は、少なくとも記載された数（例えば、他の修飾無しで「２つの記述事項」だけの記述は、少なくとも２つの記述事項、又は２つ又はそれ以上を意味する）を意味すると解釈されるべきであることを認識するであろう。さらに、「Ａ、Ｂ、およびＣの少なくとも１つ」に類似の慣例が使用されるこれらの場合に、一般的に、このような構成は、当業者が前記慣例を理解する筈である意味を有するものと意図されている（例えば、「Ａ、Ｂ、およびＣの少なくとも１つを有するシステム」は、Ａ単独、Ｂ単独、Ｃ単独、ＡおよびＢ共に、ＡおよびＣ共に、ＢおよびＣ共に、及び／又はＡ、Ｂ及びＣと共に等を含むが、これらに限定されない）。
【０１４０】
さらに、説明、特許請求の範囲又は図面に於いてであっても、実質的にあらゆる択一的な言葉である及び／又はという、２つ又はそれ以上の代替の用語を提示するフレーズは、前記用語の１つ，用語のいずれか，又は両方の用語を含む可能性を意図するものと理解されるべきであることが、当業者によって更に理解されるであろう。例えば、語句「Ａ又はＢ」は「Ａ」又は「Ｂ」又は「ＡおよびＢ」の可能性を含むものと理解されるであろう。
【０１４１】
加えて、本開示の特徴又は態様がマーカッシュ・グループで記載されている場合、当業者は、本開示は、また、それによって任意の個別のメンバー又はマーカッシュ・グループのメンバーのサブグループに関しても記載されていることを認識するであろう。
【０１４２】
当業者に理解されるように、例えば、書面による説明を提供する点で、任意のおよび全ての目的には、本明細書に開示された全ての範囲も任意のおよび全ての可能な部分的な範囲及びその部分的な範囲の組み合わせを網羅するのである。任意の記載された範囲は、少なくとも２等分、３等分、４等分、５等分、１０等分などに分割され得るのを十分に説明し可能にするものとして容易に認識され得る。非限定的な例として、本明細書に記載の各範囲は、下部３分の１、中部３分の１、および上部３分の１等に容易に分解し得る。当業者により理解されるように、例えば「以下」、「少なくとも」などのようなすべての言語は、記述された数値を含み、且つ、上述したように、次いで部分的範囲に分解し得る範囲を指すのである。最後に、当業者によって理解されるように、範囲は各々の各個のメンバーを含む。したがって、例えば、１〜３個の置換基を有する基は、１，２、又は３個の置換基を有する基を指す。同様に、１〜５個の置換基を有する基は、１、２、３、４、又は５個の置換基を有する基を指す。
【０１４３】
試験プロトコル−実現可能性調査：ハンドブレンド対共沈
この試験プロトコルは、ハンドブレンドした材料を本明細書に開示された共沈法によって作製したブレンドに対して比較した、手順、分析、結果，及び結論を概説する。
【０１４４】
目的：このレポートは、着色剤インドシアニングリーン（ＩｃＧ）の存在及び不在でＰＥＧ架橋剤ブレンドの共沈（ｃｏｐｐｔ）の実現可能性研究及び試験に関して実施し、研究開発ノートブックに記録したテストとデータを提供する。すべてのノートブックはＮｅｏＭｅｎｄ  Ｎｏｔｅｂｏｏｋ  ＯＰ０５−０４Ｌａｂ  Ｎｏｔｅｂｏｏｋによる。
【０１４５】
範囲：このレポートは、インドシアニングリーン（ｃｏｐｐｔ  ＡＢ：ＩｃＧ）を含むＡＢＰＥＧブレンドを作成するのに使用された共沈プロセスからの初期および関連接着バリア、ＡＢ（Ａｄｈｅｓｉｏｎ  Ｂａｒｒｉｅｒ）製品特性を以前ハンド・ブレンドしたＡＢ  ＰＥＧ架橋剤製剤と比較するものである。これらのテストは、バースト、劣化，及び弾性率Ｇ＊を含む。
【０１４６】
目的：これまでは、ＡＢ  ＰＥＧブレンドはバルクで、重量によって調製され、手作業の機械的手段によって混合されてきた：例えば、振盪又は反転回転など。ＦＤ&Ｃ  Ｂｌｕｅ＃２は、最終的な処方へ移行する前にＡＢ  ＰＥＧブレンドに添加され、そこでインドシアニングリーン（ＩｃＧ）が前記ＰＥＧブレンドに組み込まれた。バイアルは、秤量した重量に手で充填し、バイアル間又はロット間の均質性の保証は無かった。
【０１４７】
収集されて、ここで紹介したデータは、以下を実施するために、２つのＰＥＧ調製法間の結果を比較する。
【０１４８】
第１、共沈対ハンドブレンド方法による、ＰＥＧブレンド調製のためにＡＢの化学的性質と特性について大きな差を、もしあれば、決定する。
【０１４９】
第２、インドシアニングリーン（ＩｃＧ）の添加が、２つのＡＢ成分の化学的性質を妨害することも、ＡＢ製品の特性に影響を与えることもないことを確かめる。
【０１５０】
定義
Ｃｏｐｐｔ：共沈したＰＥＧ＝ＰＥＧ（ＳＳ）２＋［ＰＥＧ（ＳＧ）４−２ＬＡ］
【０１５１】
Ｃｏｐｐｔ  ＩｃＧ：ＡＢ＝共沈したＰＥＧ（ＳＳ）２＋［ＰＥＧ（ＳＧ）４−２ＬＡ］＋インドシアニングリーン
【０１５２】
ハンドブレンドＡＢ  ＰＥＧ＝着色添加剤（ＦＤ&Ｃブルー＃２又はインドシアニングリーン）の存在また不在で、バルクで２種のＰＥＧ架橋剤を混合し、手で容器を振るか、又は容器を反転させて均質な混合物の作成を試みる。
【０１５３】
ＮＴ＝試験せず（Ｎｏｔ  Ｔｅｓｔｅｄ）
【０１５４】
コントロール時間（Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｔｉｍｅ）＝電子ビーム以前のテスト・ポイント
【０１５５】
ゼロ時間（Ｚｅｒｏ  Ｔｉｍｅ）＝電子ビーム後のテスト・ポイント
【０１５６】
ＩｃＧ＝インドシアニングリーン（Ｉｎｄｏｃｙａｎｉｎｅ  Ｇｒｅｅｎ）  
【０１５７】
ＨＳＡ＝ヒト血清アルブミン  （Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｕｍ  Ａｌｂｕｍｉｎ）
【０１５８】
ｒＨＡ＝組換えヒトアルブミン
【０１５９】
データと分析
ハンドブレンド：色素不在対ＩｃＧ存在
【０１６０】
表１は、ＡＢ製品のＰ−００３用にハンドブレンドプロセスを用いてＮｅｏｍｅｎｄ社によって調製されたロットからのデータを提供する。このデータは、製品と、電子ビーム、着色添加剤、又は共沈プロセス等の変動とに対する比較のためのベースラインを提供する。すべての材料は、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ社から購入した組換えヒトアルブミンで作られ、データは電子ビームによる滅菌を経なかった材料からだった。表１に注記されているように色素不在の遊離ブレンドＰＥＧの結果は、２つの異なるテスト調査からだった。
【０１６１】
【表１１】
2015510824.tif 000013
【０１６２】
最も単純なＡＢ  ＰＥＧ処方は、ＰＥＧ（ＳＧ）４−２ＬＡおよびＰＥＧ（ＳＳ）２−着色添加剤不在のブレンドを含む。バーストの結果は、>２００ｍｍＨｇの値を示し、インビトロ加水分解は１０日で発生する。ＩｃＧが存在したＥＷＯ−００１９のバーストと分解が、それぞれ２２６ｍｍＨｇと１０日であったので、ＩｃＧの添加は、これらの特性に大きな支障を起こしたり又は影響を与えていない。前記ＡＢ製品のこれら二つの特性の仕様は>９０ｍｍＨｇと<３０日間の加水分解とである。表１のすべての結果は、これらの基準を満たしている。弾性率は、情報だけの為にテストされている。しかし、この報告で比較される２つのＰＥＧの調製方法の最終的なヒドロゲル架橋ネットワーク及び前記ｃｏｐｐｔ方法の種々のテスト条件の、潜在的な差異を決定するのを助けるのに使用されるであろう。
【０１６３】
共沈：着色剤不在対ＩｃＧ存在
表２は、ｃｏｐｐｔ  ＡＢ及びＡＢプロジェクトＰ−００３用にＬａｙｓａｎ  Ｂｉｏ社が調製したｃｏｐｐｔ  ＡＢ：ＩｃＧを用いて調製した、電子ビーム以前の製品に対するデータを含む。この表は、上記表１からのハンドブレンドに比較するための、５つの異なる共沈プロセスに関するバースト、分解、弾性率の試験結果を提供する。サンプル１２４−１〜１２４−６は、Ｌａｙｓａｎ  Ｂｉｏ社が種々の溶媒及び条件用いて、使用した５つの異なる共沈法をカバーしている。着色添加剤は組み入れなかった。各試験の説明及び詳細については上記を参照。最後の２行のデータは、ＩｃＧを加えてｃｏｐｐｔ  ＡＢ：ＩｃＧ架橋剤を生成した、２つのｃｏｐｐｔ試験から成る。
【０１６４】
【表１２】
2015510824.tif 000014
【０１６５】
表２は、ｃｏｐｐｔ  ＡＢ  ＰＥＧのバースト圧力の結果が、ｃｏｐｐｔ方法に関係なく、又はＩＣＧ色素が存在しても，すべて>２００ｍｍＨｇであることを示す。すべてが上記の表１のバーストの結果に勝るとも劣らず、ＡＢ製品の基準>９０ｍｍＨｇを満たしている。
【０１６６】
ＩｃＧを含めて、すべてのｃｏｐｐｔ法での分解の結果は、加水分解の基準<３０日間を満たし、実際に表１に見られる分解結果とよく一致している。
【０１６７】
表２に於いて、試験したすべてのｃｏｐｐｔ方法の弾性率、Ｇ＊、は、やは、ＩｃＧの有無にかかわらず、表１にリストしてある、Ｇ＊値，即ちハンドブレンドした、着色剤含有ＰＥＧの５６．７ｋＰａ及び着色剤不在ＰＥＧの５４ｋＰと同等である。ＩｃＧが存在するか否かに関わらず、または表１のハンドブレンドしたＰＥＧのと比較しても、ｃｏｐｐｔ方法のいずれかによる架橋ネットワーク密度に有意な差はない。
【０１６８】
電子ビーム加工製品：１４．２〜１７．２  ｋＧｙで加工、ハンドブレンド対共沈
表３は、ＡＢ製品を１４．２〜１７．２  ｋＧｙの電子ビーム用量で滅菌したデータを提供する。バースト、分解、及び弾性率、Ｇ＊のデータが提示されている。タンパク質溶液の成分は、臨床バッチ２／１０／１１を除いて、Ｎｏｖｏｚｍｅ社組換えヒトアルブミンを用いて調製した材料から成り立っていた。このバッチは、Ｂａｘｔｅｒ社から購入したヒト血清アルブミン、ＨＳＡを用いて調製した。前記タンパク質溶液は、すべてｐＨ値１０．２であり、１５０ｍＭ炭酸ナトリウムで緩衝した。
【０１６９】
Ｎｅｏｍｅｎｄ社は、ハンドブレンド・プロセスを使用して４つのバッチのうち３つを調製し、４つ目のバッチは、前記共沈法を用いてＬａｙｓａｎ  Ｂｉｏ社が調製した。最初の２行は、着色剤、ＦＤ&Ｃブルー＃２を使用した、ハンドブレンドＰＥＧを含む。３行目は、ハンドブレンドＰＥＧプロセスｎｉ於けるＦＤ&Ｃブルー＃２ＩをＩｃＧで置き換えた、ＥＷＯ−００１９からの電子ビームのデータを提供し、一方、４行目は、ｃｏｐｐｔＡＢ：ＩｃＧ  Ｌａｙｓａｎ  Ｂｉｏプロセスからのデータを含む。
【０１７０】
【表１３】
2015510824.tif 000015
【０１７１】
表３に提供されている電子ビーム滅菌後のＡＢの特性に対する結果は、２つの比較データを提供する。第１、ＦＤ&Ｃブルー＃２を含めたハンドブレンド対ＩｃＧを含めたハンドブレンド。第２、ＩｃＧ又はＦＤ&Ｃブルー＃２とを含めたハンドブレンド対ｃｏｐｐｔＡＢ：ＩｃＧ。
【０１７２】
着色添加剤のハンドブレンドの比較。ＩｃＧを含めたハンドブレンドしたＰＥＧをとＦＤ&Ｃブルー＃２を含めてハンドブレンドしたＰＥＧ間の特性に有意な差はない。
【０１７３】
前記バーストの結果は、>２００ｍｍＨｇであって、成功裏に>９０  ｍｍＨｇの基準を満たす。
【０１７４】
前記分解は、すべてのケースで<３０日の基準に合格し、ＩｃＧの１０日対ＦＤ&Ｃブルー＃２の１２及び１３日の差は重要ではないし、恐らくハンドブレンド技術、ロット間の調製のばらつきによるものである。
【０１７５】
ハンドブレンド対Ｃｏｐｐｔ  ＡＢ：ＩｃＧ。ＡＢ製品の特性に於いて、電子ビーム滅菌線量１４．２〜１７．２  ｋＧｙに起因する有意な差はなく、ｃｏｐｐｔＡＢ：ＩｃＧと比較して、ＰＥＧブレンドのプロセス、ハンドブレンドＰＥＧとは無関係で、亦２つの着色添加剤ＩｃＧ及びＦＤ&Ｃブルー＃２と無関係であった。
【０１７６】
ｃｏｐｐｔ  ＡＢ：ＩｃＧ  ＰＥＧのバーストの結果は、２００±４８  ｍｍＨｇで、すべてのハンドブレンドのバーストの結果と同様である。これらの結果は、>９０ｍｍＨｇ基準を満たし、すべてのハンドブレンドＰＥＧの結果と同様である。
【０１７７】
１１日目に、ｃｏｐｐｔ  ＡＢ：ＩｃＧの分解は<３０ｄａｙ要件に合格し、ハンドブレンドの分解１０〜１３日の間に位置する。
【０１７８】
ハンドブレンド対Ｃｏｐｐｔの電子ビーム対非電子ビーム加工ＡＢの特性比較。Ｃｏｐｐｔ  ＡＢ：ＩｃＧの電子ビーム加工後材料特性は、電子ビーム加工前ハンドブレンドＡＢ、ＰＥＧとは余り変わらず、ハンドブレンドＰＥＧで使用した着色剤とは無関係である。
【０１７９】
Ｃｏｐｐｔ  ＡＢ：ＩｃＧのバースト結果は、ハンドブレンドしたＰＥＧの電子ビーム滅菌の前と後の>２００ｍｍＨｇと同様であった。すべての結果は、成功裏に>９０  ｍｍＨｇの基準を満たしている。
【０１８０】
ＡＢ：ＩｃＧ  ｃｏｐｐｔ  ＰＥＧの分解は、ハンドブレンドＰＥＧの電子ビーム滅菌の前と後の１０〜１３日間と同様であった。また、すべての結果は、<３０日の基準を満たしている。
【０１８１】
比較に用いた、３つの主要なテストであるバースト、分解及び弾性率、Ｇ＊は、ハンドブレンドと、ＡＢ  ＰＥＧ架橋剤のｃｏｐｐｔとの間に、電子ビーム以前で有意な差を示さないし、電子ビーム後のバーストおよび分解のデータは、ハンドブレンドと、ｃｏｐｐｔＡＢ：ＩｃＧとの間に有意な差を示さないのである。
【０１８２】
データはまた、分解、バースト、及び弾性率の結果は、着色添加剤ＩｃＧとは無関係であることを示している。ＩｃＧの存在によってＡＢ製品の化学特性又はＡＢの特性に大きな障害が存在しない。
【０１８３】
ＰＥＧがハンドブレンド技術か、又は共沈により調製されていても、ここでテストしたＡＢ製品の特性上の障害は、１４．２〜１７．２  ｋＧｙの電子ビーム滅菌線量では、最小であり、大きくはなかった。
【０１８４】
すべての分解データは、<３０日の基準を満たしている。
【０１８５】
すべてのバーストの結果は、バースト基準>９０ｍｍＨｇを満たしている。
【０１８６】
前記弾性率は、単なる情報として提供されるものであるが、すべての場合において、接着バリア製品に対して十分な架橋ネットワークを示した。
【０１８７】
ＰＥＧのＡＢ製品特性は、試験したすべての条件間で一貫している。従って、ＡＢ製品の化学的性質及び得られた試験特性は、電子ビーム滅菌線量１４．２〜１７．２ｋＧｙと、ＦＤ&Ｃブルー＃２又はインドシアニングリーンの存在と、最初ＡＢ  ＰＥＧ成分を調製するために使用された、ハンドブレンドプロセスに比べた共沈法とのいずれにも大きく影響されない。
【０１８８】
前記のように、共沈製品は、時間ゼロで製品は平均バースト試験圧力は、>９０ｍｍＨｇでなければならず、ＡＢ製品の分解は<３０日でなければないという、すべての承認基準にかなった。
【０１８９】
従って、実施した試験は、この共沈法により付与された、取り扱い上の一貫性の向上及び他の特性の利点を受ける一方、前記共沈生成物は、製品の要件を満たすことを示している。
【図１】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【国際調査報告】
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