(57)【要約】  式（Ｉ）で表される化合物、ならびに脾臓チロシンキナーゼなどのキナーゼの阻害方法を開示する。対象に治療的有効量の式（Ｉ）で表される化合物を投与することによるキナーゼ媒介性疾患または状態の処置方法もまた開示する。
2015510942.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2015510942.tif 000014
式中：
Ｒ１は、任意にＲ３で置換されていてもよい、アリール、アリールアルキル、Ｃ５〜Ｃ６シクロアルキル、またはＣ５〜Ｃ６シクロアルキルメチルであり；
Ｒ３は独立して、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、またはＣＦ３であり；
Ｘは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、またはＣＦ３であり；
Ｙは、クロロ、ブロモ、ヨード、−Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはフェニルであり；
Ｒ２は、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルまたはＣ４〜Ｃ７ヘテロシクロアルキルであり、ここで該Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルは炭素原子において１つまたは２つのＲ４で任意に置換されていてもよく、およびここで該Ｃ４〜Ｃ７ヘテロシクロアルキルは窒素、酸素、硫黄、スルホン、およびスルホキシドからなる群から選択される１つまたは２つのヘテロ原子を有しており、かつ炭素においてＲ４でまたは窒素においてＲ５で独立して置換されており；
Ｒ４は、ヒドロキシル、ヒドロキシル（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノ、アミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ＮＨＣ１〜Ｃ３アルキル、Ｎ（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）２、Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはハロであり；
Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ３アルキルであり、ここで該Ｃ１〜Ｃ３アルキル基は１〜３個のフッ素原子で任意に置換されていてもよい
で表される化合物、またはその薬学的に許容し得る塩。
【請求項２】
Ｒ１が、Ｒ２により任意に置換されていてもよい、フェニル、ベンジル、シクロヘキシル、シクロペンチル、シクロヘキシルメチル、またはシクロペンチルメチルを表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が、窒素においてＲ５で置換されているピペリジンまたはピロリジンを表す、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ５が、メチル、エチル、トリフルオロエチル、またはイソプロピルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３が、ＨまたはＦを表す、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）−４−（（３−フェノキシフェニル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩または８−ブロモ−４−（（３−（３−フルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｙがブロモを表す、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｘが、フッ素またはメチルを表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
８−ブロモ−４−（（３−フルオロ−４−フェノキシフェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
請求項１の異性化合物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容し得る塩を、薬学的に許容し得る担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせて含む、医薬処方物。
【請求項１２】
請求項１に定義される化合物またはその薬学的に許容し得る塩の、ＦＬＴ３、ＭＥＲ、ＶＥＧＦＲ３またはＡｕｒｏｒａ−Ｂ酵素の阻害により処置できる疾患の処置のための医薬の製造のための使用。
【請求項１３】
血液学的悪性疾患、例えば白血病、リンパ腫（非ホジキンリンパ腫）、ホジキン病（ホジキンリンパ腫とも呼ばれる）、または骨髄腫、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性前骨髄球性白血病（ＡＰＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性好中球性白血病（ＣＮＬ）、急性未分化白血病（ＡＵＬ）、未分化大細胞リンパ腫（ＡＬＣＬ）、前リンパ球性白血病（ＰＭＬ）、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、成人Ｔ細胞ＡＬＬ、３系統骨髄異形成を伴うＡＭＬ（ＡＭＬ／ＴＭＤＳ）、混合系統白血病（ＭＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳｓ）、骨髄増殖性疾患（ＭＰＤ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）および骨髄性肉腫。異常発現ＦＬＴ３が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、３系統骨髄異形成を伴うＡＭＬ（ＡＭＬ／ＴＭＤＳ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、または骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を含む、成人性または小児性白血病の処置における使用のための、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容し得る塩。
【請求項１４】
自己免疫性疾患、例えば自己免疫性脳脊髄炎、多発性硬化症、ランゲルハンス細胞組織球または全身性エリテマトーデスの処置における使用のための、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容し得る塩。
【請求項１５】
悪性固形腫瘍、例えば胃癌、乳癌、非小細胞肺癌、頸癌、結腸直腸癌、前立腺癌、カポジ肉腫、頭頸部扁平上皮癌腫、子宮内膜癌腫または中皮腫の処置における使用のための、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容し得る塩。
【請求項１６】
ＦＬＴ３、ＭＥＲ、ＶＥＧＲＦ３またはＡｕｒｏｒａ−Ｂにより媒介される疾患または状態の処置方法であって、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の有効量の化合物またはその薬学的に許容し得る塩を、それを必要とする対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項１７】
化合物が単独でまたは１つまたは２つ以上の追加の治療剤と併用で投与される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
化合物が、静脈内投与、皮下投与、吸入、経口投与、直腸投与、非経口、硝子体内投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、経皮投与、局所投与、眼投与、点眼投与、口腔内投与、気管内投与、気管支投与、または舌下投与により投与される、請求項１６または１７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、米国仮特許出願No. 61/614,274、出願日２０１２年３月２２日、に対する利益および優先権を主張し、その内容をその全体で参照により本明細書に組み入れる。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
ＦＬＴ３（ＦＭＳ様チロシンキナーゼ３、Ｆｌｋ２としても公知である）はタイプＩＩＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）ファミリーのメンバーであり、造血幹細胞の増殖および分化において重要な役割を果たしている。この受容体の活性化突然変異（activating mutation）または過剰発現は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、マスト細胞症および消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）において所見される。活性化突然変異に加えて、過剰発現した野生型ＦＬＴ３による自己分泌リガンド刺激および傍分泌リガンド刺激は、悪性表現型の原因となり得る。
【０００３】
ＦＬＴ３に対するリガンドは骨髄間質細胞および他の細胞により発現し、他の成長因子とともに相乗作用し、幹細胞、前駆細胞、樹状細胞、およびナチュラルキラー細胞の増殖を刺激する。ＦＬＴ３は、骨髄増殖性などの前がん疾患、例えば血小板血症、本態性血小板増加症（ＥＴ）、血管新生骨髄化生、骨髄線維症（ＭＦ）、骨髄化生を伴う骨髄線維症（ＭＭＭ）、慢性特発性骨髄線維症（ＩＭＦ）、および真性多血症（ＰＶ）、血球減少、ならびに前悪性骨髄異形成症候群などと関係してきた。血液学的悪性疾患は、白血病、リンパ腫（非ホジキンリンパ腫）、ホジキン病（ホジキンリンパ腫とも呼ばれる）、および骨髄腫、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性前骨髄球性白血病（ＡＰＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性好中球性白血病（ＣＮＬ）、急性未分化白血病（ＡＵＬ）、未分化大細胞リンパ腫（ＡＬＣＬ）、前リンパ球性白血病（ＰＭＬ）、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、成人Ｔ細胞ＡＬＬ、３系統骨髄異形成を伴うＡＭＬ（ＡＭＬ／ＴＭＤＳ）、混合系統白血病（ＭＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳｓ）、骨髄増殖性疾患（ＭＰＤ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）および骨髄性肉腫を含む。ＦＬＴ３の異常発現が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、３系統骨髄異形成を伴うＡＭＬ（ＡＭＬ／ＴＭＤＳ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を含む、成人性および小児性白血病、において記録されてきた。
【０００４】
ＦＬＴ３受容体はまた大部分の樹状細胞前駆体において発現し、該受容体の刺激により、これらの前駆体の増殖および樹状細胞（ＤＣ）への分化が引き起こされる。樹状細胞は、自己反応性免疫応答を含むＴ細胞媒介性免疫応答の主要なイニシエーターであるため、ＦＬＴ３阻害はＤＣ媒介性炎症性および自己免疫性応答を下方制御するための機構である。一研究により、ＦＬＴ３阻害剤ＣＥＰ−７０１が、実験用自己免疫脳脊髄炎（ＥＡＥ）、多発性硬化症のマウスモデルにおけるミエリン喪失を低減させるのに効果的であると示された。高レベルのＦＬＴ３リガンドがランゲルハンス細胞組織球症および全身性エリテマトーデスの患者の血清において所見され、これによりこれらの自己免疫性疾患における樹状細胞前駆体の異常調節におけるＦＬＴ３シグナリングが示唆された（Rolland et al., J. Immunol., 2005, 174:3067-3071）。
【０００５】
がん原遺伝子受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）ＭＥＲ（ＭＥＲＴＫ、Ｎｙｋ、およびＴｙｒｏ１２としても公知である）は、ＭＥＲ／ＡＸＬ／ＴＹＲＯ３受容体キナーゼファミリーのメンバーである。造血系内において、ＭＥＲは樹状細胞単球／マクロ―ファージ、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、巨核球、および血小板において発現する。しかし、ＭＥＲは、正常のリンパ球には発現しない。Ｔ細胞ＡＬＬの研究において、ＭＥＲの異所性発現はリンパ芽球性白血病およびリンパ腫の進展に寄与することが実証された。ＭＥＲ  ＲＮＡ発現はまた、Ｅ２Ａ−ＰＢＸ１＋Ｂ−ＡＬＬにおいて実証された。ＭＥＲは、ＡｋｔおよびＥｒｋ  １／２などの、抗アポトーシスシグナリングタンパク質を活性化させると知られている。さらに、近年のマイクロアレイ研究により、ｇａｓ６、ＭＥＲに対するリガンドが、血清除去の条件下でＨＥＫ−２９３細胞の生存を促進する遺伝子であると同定された。ＭＥＲの異所性発現は、小児Ｂ細胞ＡＬＬにおいて所見された。ＭＥＲの阻害により、Ｅｒｋ１／２活性化を阻害し、アポトーシスを促進させることによりＢ−ＡＬＬ細胞のin vitroでの細胞毒性薬の感受性を増加させ、白血病のマウスモデルにおける疾患発症を遅延させた。加えて、ＭＥＲとラパマイシン（ｍＴＯＲ）シグナリング経路の哺乳類標的との間のクロストークが発見された。ＭＥＲは近年、ＡＬＬにおける新規の治療標的として注目されている（Linger et al., Blood, 2009, 114(13):2678-87）。ＭＥＲの異常発現および活性化により、白血病細胞の延命効果が提供されている。さらに、ＭＥＲの阻害により、白血病細胞の細胞毒性薬に対する感受性が強化され得る。
【０００６】
ＶＥＧＦＲ３（血管内皮成長因子受容体３、またＦＬＴ４、ＰＣＬとしても公知である）は、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）ＣおよびＤに対するＶＥＧＦＲ１、２、３ファミリーのチロシンキナーゼ受容体であり、リンパ管形成およびリンパ管内皮の維持において重要な役割をする。ＶＥＧＦは、血管形成および脈管形成の調節に関与するシグナリングタンパク質である。ＶＥＧＦ−Ｃ／ＶＥＧＦＲ−３アクシス（axis）が、リンパ内皮細胞によるだけでなくさまざまなヒト腫瘍細胞によりもまた発現することもまた知られている。リンパ内皮細胞におけるＶＥＧＦ−Ｃ／ＶＥＧＦＲ−３アクシスの活性化により、腫瘍内および腫瘍周囲におけるリンパ管の形成（リンパ管形成（lymphanogenesis））が増加されることにより、転移が促進される。ＶＥＧＦ−Ｃ／ＶＥＧＦＲ−３アクシスは、白血病細胞増殖、生存、および化学療法に対する抵抗性において決定的な役割をする。さらに、活性化ＶＥＧＦ−Ｃ／ＶＥＧＦＲ−３アクシスががん細胞移動性および浸潤能を増強し、いくつかのタイプの固形腫瘍、例えば胃癌、乳癌、非小細胞肺癌、頸癌、結腸直腸癌、前立腺癌、カポジ肉腫、頭頸部扁平上皮癌腫、子宮内膜癌腫および中皮腫などにおけるがん細胞転移を促進することが見出された（Su et al., Br. J. Cancer. 2007 96(4):541-5）。
【０００７】
ＡｕｒｏｒａファミリーＡ、Ｂ、Ｃの１つである、Ａｕｒｏｒａ−Ｂ（セリン／スレオニンキナーゼ１２およびＡＲＫ２としても公知である）は細胞内セリン／スレオニンキナーゼであり、これは極性紡錘体微小管の切断を調節することに直接的に関与することが知られており、有刺分裂の間の細胞質分裂の開始のための鍵となるレギュレーターである。Ａｕｒｏｒａ  Ｂの重要な標的はヒストンＨ３であり、これは染色体凝縮の決定的なレギュレーターである。Ａｕｒｏｒａキナーゼは、ヒトがんの進行と強く結びついてきている。Ａｕｒｏｒａ  ＡおよびＢの過剰発現は、多くのがん、例えば前立腺癌、大腸癌、膵臓癌、乳癌および甲状腺癌などにおいて観察される。急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）からのものなどの血液学的悪性細胞が、Ａｕｒｏｒａ  ＡおよびＢキナーゼを異常発現することもまた見出された（Ikezoe et al., Blood, 2006, 108:563a）。
【０００８】
ＧｌｅｅｖｅｃおよびＴａｒｃｅｖａなどの例を有する、タンパク質キナーゼは、広汎なヒト疾患を処置する新しい治療剤に対する、魅力的でかつ実績のある標的である。ＦＬＴ−３、ＭＥＲ、ＶＥＧＦＲおよびＡｕｒｏｒａ−Ｂキナーゼは、数々のヒトがん、特に白血病およびリンパ腫とのそれらの関連、およびこれらのがん細胞の増殖において果たすそれらの役割のために、特に魅力的である。
【０００９】
WO2011053861は、ＦＬＴ３（ＦＭＳ様チロシンキナーゼ）を含むがそれらに限定されない、複数のキナーゼに対する阻害活性を示すキナーゼ阻害剤を開示する。
【００１０】
それゆえ、ＦＬＴ関連疾患を処置するために有用である、ＦＬＴ３に対する強力な活性、他のキナーゼに対するより高い選択性、および良好な薬物動態プロファイルを有する、さらなる化合物を同定するという必要性が依然存在する。
【発明の概要】
【００１１】
発明の概要
本発明は、式Ｉで表される化合物、ならびにその個々の立体異性体、異性体の混合物、または薬学的に許容し得る塩
【化１】
2015510942.tif 000003
式中：
Ｒ１は、アリール、アリールアルキル、Ｃ５〜Ｃ６シクロアルキルまたはＲ３で任意に置換されていてもよいＣ５〜Ｃ６シクロアルキルメチルであり、
Ｒ３は独立して、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、またはＣＦ３であり；
【００１２】
Ｘは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３またはＣＦ３であり；
Ｙは、クロロ、ブロモ、ヨード、Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはフェニルであり；
Ｒ２は、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルまたはＣ４〜Ｃ７ヘテロシクロアルキルであり、ここで該Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルは炭素原子において１つまたは２つのＲ４で任意に置換されていてもよく、およびここで該Ｃ４〜Ｃ７ヘテロシクロアルキルは窒素、酸素、硫黄、スルホン、またはスルホキシドからなる群から選択される１つまたは２つのヘテロ原子を有し、および炭素においてＲ４でまたは窒素においてＲ５で独立して置換されている；
Ｒ４は、ヒドロキシル、ヒドロキシル（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノ、アミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ＮＨＣ１〜Ｃ３アルキル、Ｎ（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）２、Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはハロであり；
Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ３アルキルであり、ここで該Ｃ１〜Ｃ３アルキル基は１〜３個のフッ素原子で任意に置換されていてもよい；
または、その薬学的に許容し得る塩を提供する。
【００１３】
式（Ｉ）で表される化合物は、１種または２種以上のタンパク質キナーゼを阻害するのに、ならびにタンパク質キナーゼにより媒介される疾患または失調、例えばがん、自己免疫性疾患、感染、心血管疾患、および神経変性疾患などを処置するのに有用である。式（Ｉ）で表される化合物は、タンパク質キナーゼを阻害してＦＬＴ３関連性疾患を処置するのに有用である。
【００１４】
一側面において、本発明は、式（Ｉ）で表される化合物および薬学的に許容し得る担体を含む医薬組成物を提供する。ある態様において、かかる医薬組成物は、静脈内投与、皮下投与、吸入、経口投与、直腸投与、非経口投与、硝子体内投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、経皮投与、局所投与、眼（optic）投与、点眼（ophthalmic）投与、口腔内投与、気管内投与、気管支投与、または舌下投与のために処方される。他の態様において、かかる医薬組成物は、錠剤、丸剤、カプセル、液体、吸入剤、鼻腔用スプレー溶液、坐剤、溶液、ゲル、エマルション、軟膏、点眼剤または点耳剤として処方される。
【００１５】
一側面において、本発明は、かかる処置を必要とする対象に治療的有効量の式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容し得る塩、医薬組成物または医薬を投与することを含む、細胞増殖性疾患または状態、例えばがんなどを処置する方法であって、該細胞増殖性疾患または状態が、例えば、リンパ腫、骨肉腫、黒色腫、乳癌、腎臓癌、前立腺癌、結腸直腸癌、甲状腺癌、卵巣癌、膵臓癌、神経癌、肺癌、子宮癌または消化器癌を含む前記方法を提供する。一側面において、本発明は、式（Ｉ）で表される化合物またはその薬学的に許容し得る塩でのがん細胞の成長の阻害方法を提供する。
【００１６】
もう１つの側面において、本発明は、タンパク質キナーゼ媒介性疾患または状態の処置方法であって、かかる処置を必要とする対象に治療的有効量の式（Ｉ）で表される化合物または薬学的に許容し得る塩、その医薬組成物または医薬を投与することを含む前記方法を提供する。タンパク質キナーゼは、ＦＬＴ３（突然変異型、例えばＦＬＴ３  Ｄ８３５Ｙなどを含む）、ＭＥＲ、ＶＥＧＦ１およびＡｕｒｏｒａ−Ｂを含むが、それらに限定されない。
【００１７】
ある態様において、タンパク質媒介性疾患または状態は、炎症性疾患または炎症状態、呼吸器疾患または自己免疫疾患または状態、例えば、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、潰瘍性大腸炎、クローン病、気管支炎、皮膚炎、アレルギー性鼻炎、乾癬、強皮症、蕁麻疹、関節リウマチ、多発性硬化症、癌、乳癌、ＨＩＶ関連疾患または狼瘡である。
【００１８】
もう１つの側面において、本発明は、タンパク質キナーゼの阻害方法であって、それを必要とする対象に、治療的有効量の式（Ｉ）で表される化合物または薬学的に許容し得る塩あるいはその医薬組成物を投与することを含む、前記方法を提供する。タンパク質キナーゼは、ＦＬＴ３、ＭＥＲ、ＶＥＧＦ１およびＡｕｒｏｒａ−Ｂならびに突然変異体、例えばＦＬＴ３−Ｄ８３５Ｙなどを含むが、それらに限定されない。
【００１９】
もう１つの側面において、治療的有効量の式（Ｉ）で表される化合物または薬学的に許容し得る塩を対象に投与することによる心血管疾患の処置方法を提供する。かかる心血管疾患は心臓および血管に影響を及ぼし、例えば、アテローム性動脈硬化症、不整脈、狭心症、心筋虚血、心筋梗塞、心臓または血管動脈瘤、血管炎、脳卒中、四肢、器官、または組織の末梢閉塞性動脈症、器官または組織の虚血後の再潅流傷害、内毒素、外科的または外傷性ショック、高血圧、心臓弁膜症、心不全、異常血圧、血管収縮、血管異常、または炎症を含む。
【００２０】
もう１つの側面において、本発明は、対象に、治療的有効量の式（Ｉ）で表される化合物または薬学的に許容し得る塩を第２の治療剤と組み合わせて投与することによる、キナーゼ媒介性疾患または状態の処置方法を提供する。
【００２１】
本発明の化合物を用いるための上の方法において、式（Ｉ）で表される化合物または薬学的に許容し得る塩は、細胞または組織を含む系に投与される。ある態様において、式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容し得る塩、医薬組成物または医薬は、ヒトまたは動物対象に投与される。
【００２２】
本発明はまた、これらの化合物を含む組成物、これらの化合物の作製方法、これらの化合物を用いることによる酵素活性、特にＦＬＴ３およびその突然変異体ＦＬＴ２  Ｄ８３５Ｙキナーゼの活性の阻害方法、ならびに特にはキナーゼ活性の阻害が疾患転帰に影響を及ぼし得る場合の、哺乳類における疾患または疾患兆候の処置方法に関する。
【００２３】
発明の詳細な説明
本発明は、１つまたは２つ以上のタンパク質キナーゼを阻害するのに、およびタンパク質キナーゼにより媒介される疾患および障害、例えば細胞増殖性疾患を処置するのに有用な、一群の４−フェニルアミノ−ピリド［４，３，−ｄ］ピリミジン−５−オン誘導体およびその薬学的に許容し得る塩を提供する。本発明はまた、該４−フェニルアミノ−ピリド［４，３，−ｄ］ピリミジン−５−オン誘導体の合成方法および投与方法を提供する。本発明は、少なくとも１つの該化合物をそれに対する薬学的に許容し得る担体、希釈剤または賦形剤とともに含む医薬処方物を提供する。本発明はまた、４−フェニルアミノ−ピリド［４，３，−ｄ］ピリミジン−５−オン誘導体化合物の合成の間に作り出される有用な中間体を提供する。
【００２４】
本明細書において、タンパク質キナーゼを阻害するための式（Ｉ）を有する新規のクラスの化合物、およびその薬学的に許容し得る塩、Ｎ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護化誘導体、個々の異性体および異性体の混合物
【化２】
2015510942.tif 000004
【００２５】
式中：
Ｒ１は、アリール、アリールアルキル、Ｃ５〜Ｃ６シクロアルキルまたはＲ３で任意に置換されていてもよいＣ５〜Ｃ６シクロアルキルメチルであり、
Ｒ３は独立して、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、またはＣＦ３であり；
Ｘは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３またはＣＦ３であり；
Ｙは、クロロ、ブロモ、ヨード、Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはフェニルであり；
Ｒ２は、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルまたはＣ４〜Ｃ７ヘテロシクロアルキルであり、ここで該Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルは炭素原子において１つまたは２つのＲ４で任意に置換されていてもよく、およびここで該Ｃ４〜Ｃ７ヘテロシクロアルキルは窒素、酸素、硫黄、スルホン、またはスルホキシドからなる群から選択される１つまたは２つのヘテロ原子を有し、および炭素においてＲ４でまたは窒素においてＲ５で独立して置換されている；
Ｒ４は、ヒドロキシル、ヒドロキシル（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノ、アミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ＮＨＣ１〜Ｃ３アルキル、Ｎ（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）２、Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはハロであり；
Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはＣ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ３アルキルであり、ここで該Ｃ１〜Ｃ３アルキル基は１〜３個のフッ素原子で任意に置換されていてもよい；
あるいはその薬学的に許容し得る塩を開示する。
【００２６】
ある態様において、Ｒ１は、フェニル、ベンジル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチルメチル、またはシクロヘキシルメチルを表す。
ある態様において、Ｒ３は、フッ素、塩素、ＣＨ３、またはイソプロピルを表す。
ある態様において、Ｒ３は、Ｈ、メチルまたはＦを表す。
一態様において、Ｙは、クロロ、ブロモ、ヨード、メチル、またはフェニルを表す。さらなる態様において、Ｙは、クロロまたはブロモを表す。
ある態様において、Ｒ５は、メチルを表す。ある態様において、Ｒ２は、ピロリジニル、またはピペリジニルを表す。ある態様において、Ｒ２は、Ｎ−メチルピロリジニルまたはＮ−メチルピペリジニルを表す。
ある態様において、Ｒ６は、ヒドロキシル、ヒドロキシル（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノ、アミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、ＮＨＣ１〜Ｃ３アルキル、Ｎ（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）２、Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはハロを表す。ある態様において、Ｒ６は、ヒドロキシル、アミノ、またはＮ−メチルアミノを表す。
【００２７】
単独でまたはより大きな部分、例えば「アリールアルキル」または「シクロアルキル」などの一部として用いられる、用語「アルキル」は、１〜１５個の炭素原子または１〜８個の炭素原子を有する直鎖または分枝の炭化水素ラジカルを指し（特に明記しない限り）、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｉｓｏ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどを含む。アルキルは、非置換であるか、または１つまたは２つ以上の好適な置換基で置換されていることができる。
【００２８】
用語「シクロアルキル」は、単環式または多環式の炭化水素環基を指し、例えば、シクロプロピル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロデシル、シクロブチル、アダマンチル、ノルピナニル、デカリニル、ノルボルニル、シクロヘキシル、シクロペンチルなどを含む。シクロアルキル基は、非置換であるか、または１つまたは２つ以上の好適な置換基で置換されていることができる。
【００２９】
用語「ヘテロ」は、環系における少なくとも１つの炭素原子員の、少なくとも１つのヘテロ原子、例えば窒素、硫黄、および酸素などでの置き換えを指す。
【００３０】
用語「ヘテロシクロアルキル」は、炭素原子および水素原子ならびに窒素、硫黄、酸素、スルホン、またはスルホキシドから選択される、少なくとも１つのヘテロ原子、好ましくは１〜４個のヘテロ原子を含む、非芳香族単環式または多環式の環を意味する。ヘテロシクロアルキル基は、環状基において１つまたは２つ以上の炭素−炭素二重結合または炭素−ヘテロ原子二重結合を、環状基がそれらの存在により芳香性とならない限りで有することができる。
【００３１】
ヘテロシクロアルキル基の例は、アゼチジニル、アジリジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、モルホリノ、チオモルホリノ、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、テトラヒドロピラニル、ピラニルなどを含む。ヘテロシクロアルキル基は、非置換であるか、あるいは１つまたは２つ以上の好適な置換基で置換されていることができる。
【００３２】
本明細書で用いられる、用語「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを含む。
本明細書で用いられる、用語「アルコキシ」は、酸素を介して結合する上のアルキル基を指し、その例はメトキシ、エトキシ、ｉｓｏ−プロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどを含む。加えて、アルコキシはまた、ポリエーテル、例えば−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３などを指す。アルコキシは、非置換であるか、あるいは１つまたは２つ以上の好適な置換基で置換されていることができる。
【００３３】
本明細書で用いられる、用語「アリール」は、非置換または置換芳香族単環式または多環式の基を指し、例えば、フェニルおよびナフチルを含む。
用語「アリール」はまた、非芳香族炭素環式のまたはヘテロ環式の基へと縮合したフェニル環を含む。用語「アリール」は、「アリール環」、「芳香族基」、および「芳香環」と互換的に用いられ得る。ヘテロアリール基は４〜１４個の原子を有し、このうちの１〜９個は酸素、硫黄および窒素からなる群から独立して選択される。ヘテロアリール基は、５〜８員の芳香族基に１〜３個のヘテロ原子を有する。アリールまたはヘテロアリールは、単環式のまたは多環式の芳香族基であることができる。典型的なアリールおよびヘテロアリール基は、例えば、フェニル、キノリニル、インダゾイル、インドリル、ジヒドロベンゾジオキシニル、３−クロロフェニル、２，６−ジブロモフェニル、ピリジル、ピリミジニル、３−メチルピリジル、ベンゾチエニル、２，４，６−トリブロモフェニル、４−エチルベンゾチエニル、フラニル、３，４−ジエチルフラニル、ナフチル、４，７−ジクロロナフチル、ピロール、ピラゾール、イミダゾール、チアゾールなどであることができる。アリールまたはヘテロアリールは、非置換であるかあるいは１つまたは２つ以上の好適な置換基で置換されていることができる。
【００３４】
本明細書で用いられる、用語「ハロアルキル」は、ハロゲン原子で置き換えられた１つまたは２つ以上の水素原子を有する任意のアルキルラジカルを指す。ハロアルキルの例は、−ＣＦ３、−ＣＦＨ２、−ＣＦ２Ｈなどを含む。
本明細書で用いられる、用語「ヒドロキシル」または「ヒドロキシ」は、−ＯＨを指す。
本明細書で用いられる、用語「アミノ」は、−ＮＨ２を指す。
本明細書で用いられる、用語「ヒドロキシアルキル」は、アルキルラジカルの任意のヒドロキシル派生物を指す。用語「ヒドロキシアルキル」は、水酸基で置き換えられた１つまたは２つ以上の水素原子を有する任意のアルキルラジカルを含む。
【００３５】
本明細書で用いられる、「置換基」は、対象の分子内で原子へと共有結合する分子部分を指す。例えば、環置換基は、環員である原子（好ましくは炭素または窒素原子）へと共有結合する部分、例えばハロゲン、アルキル基、ハロアルキル基または他の基などであってもよい。芳香族基の置換基は、一般的には、環炭素原子へと共有結合する。用語「置換」は、分子構造における水素原子を置換基で、指定された原子の原子価が超過しないように、かつ化学的に安定な化合物（つまり、単離され、特徴付けられ、および生物学的活性に関して試験されることができる）が置換により生じるように、置き換えることを指す。
【００３６】
上に記載したとおり、ある基は非置換であるかまたは１つまたは２つ以上の好適な置換基で水素以外により、１つまたは２つ以上の利用可能な位置、典型的には１位、２位、３位、４位または５位において、１つまたは２つ以上の好適な基（これらは同一でも異なっていてもよい）により置換されることができる。ある基は、置換されるとき、１つ、２つ、３つまたは４つの独立して選択される置換基で置換されている。好適な置換基は、ハロ、アルキル、ハロアルキル、アリール、ヒドロキシ、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、アミノなどを含む。
【００３７】
本明細書で用いられる、用語「キナーゼ」は、一覧のプロテインキナーゼ、ＦＬＴ３、ＭＥＲ、Ａｕｒｏｒａ−Ｂ、ＶＥＧＦ１、およびそれらの突然変異体、例えばＦＬＴ３  Ｄ８３５Ｙなどを指すが、それらに限定されない。本明細書に記載されるキナーゼを含有するキナーゼアッセイは、キナーゼ阻害剤をそれらの選択性に関し生化学的に分析するために商業的に利用可能である。ある態様において、キナーゼは哺乳類キナーゼ、例えばヒトキナーゼなどである。
【００３８】
本明細書で用いられる、用語「皮膚科学的障害」は、皮膚障害を指す。かかる皮膚科学的障害は、皮膚の増殖性または炎症性障害、例えばアトピー性皮膚炎、水疱性障害、膠原病、接触性皮膚炎  湿疹、川崎病、酒さ、シェーグレンラルソー症候群、および蕁麻疹を含むが、それらに限定されない。
【００３９】
本明細書で用いられる、用語「呼吸器疾患」は、呼吸に関連する器官、例えば鼻、喉、喉頭、気管、気管支、および肺に影響を及ぼす疾患を指す。呼吸器疾患は、喘息、成人呼吸窮迫症候群およびアレルギー性（外因性）喘息、非アレルギー性（内因性）喘息、急性重症喘息、慢性喘息、臨床喘息、夜間喘息、アレルゲン誘発性喘息、アスピリン感受性喘息、運動誘発性喘息、等炭酸ガス過呼吸、小児発症喘息、成人発症喘息、咳変喘息、職業性喘息、ステロイド抵抗性喘息、季節性喘息、季節性アレルギー性鼻炎、通年性アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、例えば慢性気管支炎または肺気腫、肺高血圧症、間質性肺線維症および／または気道炎症および嚢胞性線維症、および低酸素症を含むが、それらに限定されない。
【００４０】
本明細書で用いられる、用語「がん」は、非制御様式で増殖する傾向にあり、およびある場合においては、転移する傾向にある、細胞の異常成長を指す。がんのタイプは、固形腫瘍、例えば以下のもの、膀胱、腸、脳、乳房、子宮内膜、心臓、腎臓、肺、リンパ組織（リンパ腫）、卵巣、膵臓または他の内分泌器官（甲状腺）、前立腺、皮膚（メラノーマ）または血液学的腫瘍（白血病など）を含むがそれらに限定されない。
【００４１】
本明細書で用いられる、用語「炎症性障害」は、疼痛（dolor、有害物質の発生および神経の刺激から）、発熱（calor、血管拡張から）、発赤（rubor、血管拡張および血流増加から）、腫脹（腫瘍、液体の過剰な流入または制限された流出から）の１つまたは２つ以上の兆候、および部分的または完全、一過性または永久的でありうる機能喪失を特徴とする疾患または状態を指す。炎症は多くの形態をとり、以下の１つまたは２つ以上である炎症を含むが、それらに限定されない：急性、接着性、萎縮性、カタル性、慢性、硬変、びまん性、播種性、滲出性、線維素性、線維化性、局所性、肉芽腫性、過形成性、肥厚性、間質性、転移性、壊死性、閉塞性、実質性、形成性（plastic）、湿性（productive）、増殖性、偽膜性、化膿性、硬化性、漿液産生性（seroplastic）、漿液性、単純性、特異性、亜急性、化膿性、毒性、外傷性、および／または潰瘍性。炎症性障害はさらに、血管（多発性動脈炎、側頭動脈炎）；関節（関節炎：結晶性、骨性、乾癬性、反応性、リウマチ、ライター）；消化管；皮膚（皮膚炎）；または多臓器および組織（全身性エリテマトーデス）に影響を及ぼすものを含むが、それらに限定されない。
【００４２】
本明細書で用いられる、用語「循環器疾患」は、心臓または血管または両方に影響を及ぼす疾患を指し、アテローム性動脈硬化症、不整脈、狭心症、心筋虚血、心筋梗塞、心臓または血管動脈瘤、血管炎、脳卒中、四肢、器官、または組織の末梢閉塞性動脈症、臓器または組織の虚血後の再潅流傷害、内毒素、外科的、または外傷性ショック、高血圧、心臓弁膜症、心不全、異常血圧、血管収縮、血管異常、または炎症を含むがそれらに限定されない。
【００４３】
本明細書で用いられる、用語「阻害剤」は、本明細書に記載される１つまたは２つ以上のキナーゼを阻害する化合物を指す。例えば、用語「ＦＬＴ３阻害剤」は、ＦＬＴ３受容体を阻害する、またはシグナリング効果を低減させる化合物を指す。
【００４４】
本明細書で用いられる、用語「薬学的に許容し得る」は、本明細書に記載される化合物の生物学的活性または特性を損なわせない材料、例えば担体または希釈剤などを指す。かかる材料は、好ましくない生物学的効果を引き起こしたり、含有されている組成物のあらゆる成分に有害な様式で相互作用したりすることなく、一個体に投与される。
本明細書で用いられる、用語「薬学的に許容し得る塩」は、それが投与される生命体に著しい刺激を引き起こさず、かつ本明細書中に記載の化合物の生物学的活性および特性を無効にしない化合物の処方物を指す。
【００４５】
本明細書で用いられる、用語「医薬組合せ」は、１つより多い活性材料の混合または組み合わせの結果生じる産物を意味する。
本明細書で用いられる、用語「医薬組成物」は、本明細書で記載される化合物の、他の化学成分、例えば担体、安定化剤、希釈剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤、および／または賦形剤などとの組み合わせを指す。
本明細書で用いられる、用語「プロドラッグ」は、in vivoで活性薬物または「親」薬物へと変換される薬剤を指す。
【００４６】
本明細書で用いられる、用語「タンパク質キナーゼ媒介性疾患」または「不適切なプロテインキナーゼ活性により媒介される障害または疾患または状態」は、本明細書に記載されるタンパク質キナーゼにより媒介されるまたは調整される全ての疾患状態を指す。かかる疾患状態は、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、潰瘍性大腸炎、クローン病、気管支炎、皮膚炎、アレルギー性鼻炎、乾癬、強皮症、蕁麻疹、水疱性障害、膠原病、接触性皮膚炎湿疹、川崎病、酒さ、シェーグレンラルソー症候群、関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性腸症候群、ＨＩＶ、狼瘡、リンパ腫、骨肉腫、黒色腫、乳癌、腎臓癌、前立腺癌、結腸直腸癌、甲状腺癌、卵巣癌、膵臓癌、神経癌、肺癌、子宮癌、消化管癌、アルツハイマー病、パーキンソン病、骨粗鬆症、骨減少症、骨軟化症、骨線維症、ページェット病、糖尿病、血管増殖性障害、眼疾患、心血管疾患、再狭窄、線維症、アテローム性動脈硬化症、不整脈、狭心症、心筋虚血、心筋梗塞、心臓または血管動脈瘤、血管炎、脳卒中、末梢閉塞性動脈症、臓器または組織の虚血後の再灌流障害、内毒素性、外科的または外傷性ショック、高血圧、心臓弁膜症、心不全、異常血圧、血管収縮、血管異常、移植拒絶ならびにウイルスおよび真菌感染症などの感染症を含むが、それらに限定されない。
【００４７】
本明細書で用いられる、用語「キナーゼ媒介性疾患」または「キナーゼ媒介性疾患」または「不適切なキナーゼ活性により媒介される障害または疾患または状態」は、キナーゼ機構により媒介または調節される全ての疾患状態を指す。例えば「ＦＬＴ３媒介性疾患」は、ＦＬＴ３機構により媒介または調節される全ての疾患状態を指す。かかるＦＬＴ３媒介性疾患は、白血病、例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）など、炎症性疾患、呼吸器疾患、自己免疫疾患、多発性硬化症、他の骨髄増殖性障害癌またはＦＬＴ３キナーゼの異常に増加したレベルに関連する状態などを含むが、それらに限定されない。
【００４８】
本明細書で用いられる、用語「ＭＥＲ媒介性疾患」または「不適切なＭＥＲ活性により媒介される失調または疾患または状態」は、ＭＥＲキナーゼ機構により媒介または調節される任意の疾患状態を指す。かかる疾患状態は、ＡＭＬ、ＡＬＬ、固形腫瘍、他の増殖性障害または異常に増加したレベルのＭＥＲキナーゼに関連する状態を含むが、それらに限定されない。
【００４９】
本明細書で用いられる、用語「ＶＥＧＦＲ３媒介性疾患」または「不適切なＶＥＧＦＲ３活性により媒介される障害または疾患または状態」は、ＶＥＧＦＲキナーゼ機構により媒介または調節される任意の疾患状態を指す。かかる疾患状態は、ＡＭＬ、ＡＬＬ、固形腫瘍、他の増殖性障害、または以異常に増加したレベルのＶＥＧＦＲ３キナーゼに関連する状態を含むが、それらに限定されない。
【００５０】
本明細書で用いられる、用語「Ａｕｒｏｒａ  Ｂ媒介性疾患」または「不適切なＡｕｒｏｒａ  Ｂ活性により媒介される障害または疾患または状態」は、Ａｕｒｏｒａ  Ｂキナーゼ機構により媒介または調節される任意の疾患状態を指す。かかる疾患状態は、ＡＭＬ、ＡＬＬ、固形腫瘍、他の増殖性障害、または異常に増加したレベルのＡｕｒｏｒａ  Ｂキナーゼに関連する状態を含むが、それら限定されない。
【００５１】
本明細書で用いられる、用語「治療的有効量」の用語は、かかる量を施与されていない対応する対象と比較して、疾患、障害または副作用の改善された処置、治癒、予防、または寛解、または疾患または障害の進行速度の低下を生じる化合物の任意の量を指す。該用語はまたその範囲内に、正常の生理学的機能を強化するのに有効な量を含む。
【００５２】
本明細書で用いられる、用語「処置する（treat）」、「処置している（treating）」または「処置（treatment）」は、疾患または状態徴候を緩和する、和らげるまたは寛解する、追加の兆候を予防する、潜在する徴候の代謝的原因を寛解するまたは予防する、疾患または状態を阻害する、疾患または状態の進行を停止する、疾患または状態を軽減する、疾患または状態の退行を引き起こさせる、疾患または状態により引き起こされた状態を軽減する、あるいは疾患または状態の兆候を予防的および／または治療的のいずれかで停止させる方法を指す。
【００５３】
本明細書で用いられる、用語「溶媒和物」は、溶質（本発明において、式（Ｉ）で表される化合物またはその薬学的に許容し得る塩）および溶媒により形成された可変化学量論の複合体を指す。本発明の目的のためのかかる溶媒は、溶質の生物学的活性を妨害してはならない。好適な溶媒の非限定的な例は、水、アセトン、メタノール、エタノールおよび酢酸を含む。好ましくは、用いられる溶媒は、薬学的に許容し得る溶媒である。好適な薬学的に許容し得る溶媒の非限定的な例は、水、エタノールおよび酢酸を含む。
【００５４】
本明細書で用いられる、用語「対象」または「患者」は、哺乳類および非哺乳類を包含する。哺乳類の例は、ヒト、チンパンジー、類人猿サル、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ；ウサギ、イヌ、ネコ、ラット、マウス、モルモットなどを含むが、それらに限定されない。
【００５５】
本明細書で用いられる、用語、対象化合物の「投与」または「投与する」は、本発明の化合物および／またはそのプロドラッグを、処置を必要とする対象へと提供することを指す。
本明細書で用いられる、用語「担体」は、本明細書に記載される化合物の細胞または組織への取り込みを促進する化学化合物または薬剤を指す。
【００５６】
本明細書で用いられる処方物、組成物または原料に関する、本明細書で用いられる用語「許容し得る」は、処置される対象の全般的な健康に持続性の有害な作用を有しないことを意味する。
本明細書で用いられる、用語「希釈剤」は、送達前に本明細書に記載される化合物を希釈するために用いられる化学化合物を指す。希釈剤はまた、本明細書に記載される化合物を安定化させるために用いることができる。
【００５７】
本明細書で用いられる、用語「有効量」または「治療的有効量」は、処置される疾患または状態の１つまたは２つ以上の兆候をある程度軽減させるであろう、投与される本明細書に記載される化合物の十分量を指す。結果は、徴候（signs）、徴候（symptoms）、または病因、あるいは生物系の任意の他の所望の変化の低減および／または緩和であることができる。例えば、治療的使用に関する「有効量」は、疾患兆候における臨床的に有意な低下を提供するのに必要な本明細書に開示される化合物を含む組成物の量である。任意の個々の場合における好適な「効果的」な量は、例えば用量漸増試験などの技術を用いて決定され得る。例示のみの様式で、治療効果的な量の本発明の化合物は、例えば、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日、または約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であり得る。
【００５８】
Ｉ．  ヒトタンパク質キナーゼ
タンパク質キナーゼは、広汎な種類の細胞プロセスの調節および細胞機能に対する制御の維持において中心的役割を果たす。タンパク質キナーゼはリン酸化のプロセスを触媒および調節し、それによってキナーゼはさまざまな細胞外シグナルに応答してタンパク質または脂質標的に向かってリン酸基に共有結合する。かかる刺激の例は、ホルモン、神経伝達物質、成長因子および分化因子、細胞周期事象、環境ストレスおよび栄養ストレスを含む。細胞外刺激は、細胞成長、遊走、分化、ホルモンの分泌、転写因子の活性化、筋肉収縮、グルコース代謝、タンパク質合成の制御、および細胞周期の調節に関連する１つまたは２つ以上の細胞応答に影響を及ぼし得る。
【００５９】
本発明の化合物は、キナーゼパネルに対してスクリーニングされ、パネル上の少なくとも１つの活性を阻害する。キナーゼの例は、ＦＬＴ３、ＭＥＲ、Ａｕｒｏｒａ−Ｂ、ＶＥＧＦ１、および変異体例えばＦＬＴ３  Ｄ８３５Ｙキナーゼなどを含むが、それらに限定されない。そのようなものとして、本発明の化合物または組成物は、かかるキナーゼに関連する疾患または障害の病理および／または徴候が寄与する疾患または障害の処置に有用である。かかる疾患または障害は、膵臓癌、甲状腺乳頭癌、卵巣癌、ヒト腺様嚢胞癌、非小細胞肺癌、分泌性乳癌腫、先天性線維肉腫、先天性中胚葉性腎腫、急性骨髄性白血病、乾癬、転移、癌関連疼痛および神経芽腫、自己免疫疾患、炎症性疾患、骨疾患、代謝性疾患、神経学的疾患および神経変性疾患、がん、心血管疾患、呼吸器疾患、アレルギーおよび喘息、アルツハイマー病、およびホルモン関連疾患、良性および悪性増殖性障害、免疫系の不適切な活性化に起因する疾患、神経系の不適切な活性化に起因する疾患、同種移植片拒絶反応、移植片対宿主病、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性による脈絡膜血管新生、乾癬、関節炎、変形性関節症、慢性関節リウマチ、関節炎における滑液パンヌス侵襲、多発性硬化症、重症筋無力症、糖尿病、糖尿病性血管障害、未熟児網膜症、小児血管腫、非小細胞肺癌、膀胱癌、頭頸部癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌、胃癌および膵臓癌、乾癬、線維症、アテローム性動脈硬化症、再狭窄、自己免疫疾患、アレルギー、呼吸器疾患、喘息、移植拒絶、炎症、血栓症、網膜血管増殖、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、骨疾患、移植または骨髄移植拒絶反応、狼瘡、慢性膵臓炎、悪液質、敗血症性ショック、線維増殖性および分化性皮膚疾患または障害、中枢神経系疾患、神経変性疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、脳または脊髄損傷後の神経損傷および軸索変性に関連する障害または状態、急性または慢性のがん、眼疾患、ウイルス感染、心臓疾患、肺（lung）または肺性（pulmonary）疾患または腎臓（kidney）または腎（renal）疾患および気管支炎を含むがそれらに限定されない。
【００６０】
本明細書に記載される化合物は、キナーゼ活性の阻害剤であり、不適切なキナーゼ活性に関連する障害の処置において、特に、キナーゼにより媒介される疾患状態の処置および予防において、治療的恩恵を有する。それゆえ、本発明の化合物は、調節および、特にキナーゼが役割を果たすシグナル伝達カスケードを阻害する方法を提供する。該方法は一般的に、本明細書に記載される有効量の化合物、プロドラッグ、許容し得る塩、水和物、溶媒和物、Ｎ−オキシドおよび／または組成物を対象に投与することをまたはキナーゼを発現する細胞に接触させ、シグナル伝達カスケードを調節または阻害することを含む。かかる方法はまた、特定のキナーゼシグナル伝達カスケードの活性化により引き起こされる下流プロセスまたは細胞性応答を調節する、特に阻害するために用いられる。該方法はまた、in vitro背景またはin vivo背景において、キナーゼ依存性シグナル伝達カスケードの活性化により特徴付けられる、引き起こされる、または関連する疾患の処置または予防に対する治療的アプローチとして実践される。
【００６１】
２．医薬組成物
式（Ｉ）で表される化合物、またはその薬学的に許容し得る塩、溶媒和物、Ｎ−オキシド、プロドラッグおよび異性体など、本明細書において提供される化合物の治療的使用のために、かかる化合物は治療的有効量で、単独でまたは医薬組成物の一部分として投与される。従って、本明細書において、式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容し得る塩および／または溶媒和物などの、本明細書において提供される少なくとも１種の化合物、ならびに１種または２種以上の薬学的に許容し得る塩、希釈剤、アジュバントまたは賦形剤を含む、医薬組成物が提供される。加えて、かかる化合物および組成物は、単独で、あるいは１種または２種以上の追加の治療剤と組み合わせて投与される。
【００６２】
かかる化合物および組成物の投与方法は、静脈内投与、吸入、経口投与、直腸投与、非経口、硝子体内投与、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、経皮投与、局所投与、眼科的投与（ophthalmic administration）、口腔内投与、気管内投与、気管支投与、舌下投与または眼投与（optic administration）を含むが、それらに限定されない。本明細書で提供される化合物は、公知の薬学的処方物、例えば経口投与用の錠剤、カプセルまたはエリキシル、直腸投与用の坐剤、非経口または筋肉内投与用の滅菌溶液または懸濁液、局所投与用のローション、ゲル、軟膏またはクリームの様式で投与される。
【００６３】
治療的有効量は、とりわけ、兆候の示される疾患、疾患の重篤度、対象の年齢および相対的な健康、投与される化合物の効力、投与様式および所望の処置に応じて変化するであろう。必要とされる用量はまた、投与の様式、処置すべき独特な状態および所望される効果に応じて変化するであろう。
【００６４】
薬学的に許容し得る塩形態は、薬学的に許容し得る酸性／アニオン性または塩基性／カチオン性塩を含む。薬学的に許容し得る酸性／アニオン性塩は、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、酒石酸水素塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストラート、エシル酸塩、フマル酸塩、グリセプタート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ムコ酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、パモ酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、およびトリエチオジド塩を含む。薬学的に許容し得る塩基性／カチオン性塩は、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩、Ｌ−リジン塩、Ｌ−アルギニン塩、アンモニウム塩、エタノールアミン塩、ピペラジン塩およびトリエタノールアミン塩を含む。
【００６５】
薬学的に許容し得る酸付加塩は、式（Ｉ）で表される化合物の遊離塩基形態の、例えば、臭化水素酸、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、コハク酸、マレイン酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、安息香酸、サリチル酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸などのナフタレンスルホン酸、またはヘキサン酸を含むがそれらに限定されない好適な無機酸または有機酸との反応により形成される。式（Ｉ）で表される化合物の薬学的に許容し得る酸付加塩は、例えば、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ギ酸塩（formarate）、酢酸塩、プロピオン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、乳酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩（例えば、２−ナフタレンスルホン酸塩）またはヘキサン酸塩を含むことができるかまたは、であることができる。
【００６６】
本発明の化合物の遊離酸または遊離塩基形態は、それぞれ、対応する塩基付加塩または酸付加塩形態から製造してもよい。例えば、酸付加塩形態にある本発明の化合物は、好適な塩基（例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど）で処置することにより対応する遊離塩基へと変換され得る。塩基付加塩形態にある本発明の化合物は、好適な酸（例えば、塩酸など）で処理することにより対応する遊離酸へと変換され得る。
【００６７】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体は、当業者に公知の方法により製造され得る（例えば、さらなる詳細に関し、Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, 1985を参照されたい；その全体の教示を、参照により本明細書に組み入れる）。
本発明の化合物の保護化誘導体は、当業者に公知の手段により作製され得る。保護基の創出および除去に利用可能な技術の詳細な記載は、T. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry,” 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999において見ることができ、その全体の教示を参照により本明細書に組み入れる。
【００６８】
本発明の化合物は、化合物のラセミ混合物の光学的に活性な分割剤との反応により一対のジアステレオ異性化合物を形成し、ジアステレオマーを分離し、光学的に純粋な光学異性体を回収することにより、それらの個々の立体異性体として製造し得る。光学異性体の分解（resolution）は、本発明の化合物の共有結合光学異性誘導体を用いて、または分解性（dissociable）複合体（例えば、結晶性ジアステレオマー塩）を用いることにより、実行し得る。ジアステレオマーは独特な物性（例えば、融点、沸点、溶解性、反応性、など）を有し、これらの非類似性を活用して容易に分離し得る。ジアステレオマーは、クロマトグラフィにより、あるいは溶解性の相違に基づいて分離／分解技術により、分離し得る。そして光学的に純粋な光学異性体は、分割剤とともに、ラセミ化を生じさせない任意の実用手段により、回収される。立体異性体のそれらのラセミ混合物からの化合物の分割に適用可能な技術のより詳細な説明は、Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions,” John Wiley And Sons, Inc., 1981において見つけることができ、その全体の教示を参照により本明細書に組み入れる。
【００６９】
本発明の医薬組成物における使用のための好適な薬学的に利用可能な担体、希釈剤、アジュバント、または賦形剤は、例えばコリドンまたはシェラック、アラビアゴム、タルク、二酸化チタンまたは糖などで作られた錠剤（被覆錠剤）、カプセル（ゼラチン）、溶液（水溶液または水−エタノール溶液）、活性物質を含有するシロップ、エマルションまたは吸入可能な粉体（種々の単糖類、例えばラクトースまたはグルコース、塩およびこれらの賦形剤の互いの混合物の）およびエアロゾル（高圧ガス含有または吸入溶液フリー）を含む。
【００７０】
用いられ得る賦形剤は、例えば、水、薬学的に許容し得る有機溶媒、例えばパラフィン（例えば、石油留分）など、植物油（例えば、落花生油またはゴマ油）、単官能基または多官能基アルコール（例えば、エタノールまたはグリセロール）、担体、例えば天然鉱物粉末など（例えば、カオリン、クレー、タルク、チョーク）、合成鉱物粉末（例えば、高分散性ケイ酸およびケイ酸塩）、糖（例えば、ショ糖、乳糖およびブドウ糖）、乳化剤（例えば、リグニン、使用済み亜硫酸パルプ廃液、メチルセルロース、デンプン及びヨウ化ポリビニルピロリドン）及び潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸およびラウリル硫酸ナトリウム）を含む。
【００７１】
式（Ｉ）で表される化合物は、本明細書においておよび実施例において記載される方法により作製される。ある態様において、式（Ｉ）で表される化合物は以下のようにして製造される：（ａ）任意に、本発明の化合物を薬学的に許容し得る塩へと変換する；（ｃ）任意に、塩形態の本発明の化合物を非塩形態へと変換する；（ｄ）任意に、非酸化形態の本発明の化合物を薬学的に許容し得るＮ−酸化物へと変換する；（ｅ）任意に、異性体の混合物から本発明の化合物の個々の異性体を分割する；（ｆ）任意に、本発明の非誘導体化化合物を薬学的に許容し得るプロドラッグ誘導体へと変換する；および（ｇ）任意に、本発明の化合物のプロドラッグ誘導体をその非誘導体化形態へと変換する。
【００７２】
本明細書に引用される全ての特許、公開出願および引例の教示は、その全体を参照により組み入れる。
【００７３】
実施例
本発明はさらに、本発明による式（Ｉ）で表される化合物の製造を説明する以下の実施例により例証される。実施例は説明の目的のみのためのものであり、本発明をいかなる様式においても限定することを意図しないし、またそのように解釈されるべきではない。当業者は、変形および修飾形が本発明の範囲を変更することなく、なされることができると考えるであろう。
【００７４】
液体クロマトグラフィ質量分析（ＬＣ−ＭＳ）法：
１．試料を、室温で流速１．５ｍＬ／分で実行するZorbax Eclipse XDB-C18（３．５μ）逆相カラム（４．６×５０ｍｍ）を有するAgilent Technologies 6120 MSDシステム上に流す。
２，移動相は、溶媒Ａ（水／０．１％ギ酸）および溶媒Ｂ（アセトニトリル／０．１％ギ酸）：９５％／５％〜０％／１００％（Ａ／Ｂ）を５分間用いる。
３．質量分析（ｍ／ｚ）をエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）を用いて記録した。
４．イオン化データを最も近い整数へと丸めた。
【００７５】
本発明は、ＰＣＴ公開番号WO2011053861に記載されるように製造することができる、化合物ａから出発する、式（Ｉ）で表される化合物に製造方法（スキーム１）を提供する。
【化３】
2015510942.tif 000005
【００７６】
化合物ｃは、化合物ａを化合物ｂとともに酸性条件下で反応させることにより製造した（スキーム１を参照）。そして、化合物ｃをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（ＤＭＦ  ＤＭＡ）、次いでエタノール中のアンモニアで処理し、化合物ｄを産出した。化合物ｅの製造は、Ｎ−ハロスクシンイミドを用いることにより成し遂げた。化合物ｅを無機酸化剤で酸化し、対応するスルホンを形成させた。該スルホン化合物に有機塩基の存在下でさまざまなアミンＲ２ＮＨ２とともにカップリング反応を行い、式（Ｉ）で表される化合物を提供した。化合物（２３８）の詳細な合成反応条件を、以下に記載する。
【００７７】
４−（（４−（３−フルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−６−メチル−２−（メチルチオ）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（２３８ｃ）；  ４０ｍｌの反応バイアルを、１０ｍｌ酢酸中のａ（１．８５ｇ、７．５２ｍｍｏｌ）、および４−（３−フルオロフェノキシ）アニリン（１．６５ｇ、８．１０ｍｍｏｌ）でチャージした。１００℃で２時間攪拌後、揮発物を減圧下で除去し、茶色残渣を産出した。残渣を塩化メチレンに溶解させ、そして飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。分離した有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、そして濃縮し、（２３９ｃ）を茶色残渣として得た。得られた粗製生成物を精製せずに次のステップで用いた。
【００７８】
４−メチル−２−（メチルチオ）−６−（４−フェノキシフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（２２２ｃ）；  （２２２ｃ）を例（２３８ｃ）の方法により４−フェノキシベンゼンアミンから製造した。
【００７９】
４−（（４−（３−フルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（２３８ｄ）；  粗製残渣（２３８ｃ）をＤＭＦ（５ｍｌ）に溶解させた。これに、ジメチル酢酸Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ／ＤＭＡ、１５ｍｍｏｌ、１．９３ｍＬ）を室温で添加した。反応混合物を１３０℃で１６時間攪拌した。揮発物を減圧下で除去し、茶色残渣を産出した。残渣を塩化メチレンに溶解させ、水で洗浄した。分離した有機層を濃縮して、茶色油を提供した。生じた油状残渣を、４０ｍＬ反応バイアル中の熱エタノール中に溶解させた。これに、３０％ａｑ．水酸化アンモニウム（２ｍＬ）溶液を添加し、そしてバイアルをよくキャップし、１００℃で４ｈ攪拌した。反応物を室温へと冷却し、固形沈殿を形成した。得られた固形物をろ過により収集し、エタノールで洗浄し、１．５８ｇの２３８ｄを橙色固体として産出した（３ステップに対し５３％）。
【００８０】
８−ブロモ−４−（（４−（３−フルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（メチルチオ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン（２３８ｅ）；  ４０ｍＬの反応バイアルを１５ｍＬのＤＭＦ中の２３８ｄ，（１．００ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）でチャージした。透明になるまで混合物を穏やかに加熱し、室温にまで冷めるようにした。混合物にＮ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ、４９８ｍｇ、２．８０ｍｍｏｌ）を添加し、１ｈ、ｒｔで攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、橙色固体を産出した。溶媒を減圧下で除去し、橙色固体を産出した。得られた固体をろ過により収集し、アセトニトリルで洗浄し、１．０４ｇ（８７％）の所望の生成物２３８ｅを提供した。
【００８１】
８−ブロモ−４−（４−（３−フルオロフェノキシ）フェニルアミノ）−２−（１−メチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩（２３８）；  ４０ｍＬの反応バイアルを１５ｍＬ  ＤＭＦ中の２３８ｅ（０．９０ｇ、１．９０ｍｍｏｌ）でチャージした。クリアな溶液を−１０℃へと冷却した。これに、ｍ−ＣＰＢＡ（１．４８ｇ、６．００ｍｍｏｌ）を−１０℃で添加した。反応物を室温へと温まるようにし、そして追加して３０ｍｉｎ、ＲＴで攪拌した。混合物にＴＥＡ（０．８３ｍＬ、６．００ｍｍｏｌ）を添加し、１−メチルピペリジン−４−アミン（６８５ｍｇ、６．００ｍｍｏｌ）を添加し、そして室温で１時間、ＬＣ−ＭＳで反応をモニタリングしながら攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、薄茶色油状残渣を産出した。残渣を塩化メチレンに溶解させ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。分離した有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、そして減圧下で濃縮し、固体を産出した。固体を最小量の塩化メチレンに溶解させ、過剰のｎ−ヘキサンで処置し、淡黄色固体を産出した。得られた固体をろ過により収集し、ｎ−ヘキサンですすぎ、そして空気中で乾燥させ、淡黄色固体を産出した。固体をＤＣＭおよびメタノールの混合物に溶解させた。クリアな溶液にジオキサン中の４Ｎ  ＨＣｌ（１２．０ｍＬ）を添加し、そして室温で６時間攪拌した。溶液を減圧下で除去し、所望の生成物を産出した（２３８、９０％収率）。
【００８２】
８−ブロモ−２−（１−メチルピペリジン−４−イルアミノ）−４−（４−フェノキシフェニルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩（２２６）；  （２３８）の方法により（２２６ｃ）から製造した。
【数１】
2015510942.tif 000006
【００８３】
【表１−１】
2015510942.tif 000007
【００８４】
【表１−２】
2015510942.tif 000008
【００８５】
【表１−３】
2015510942.tif 000009
【００８６】
【表１−４】
2015510942.tif 000010
【００８７】
表１は、式（Ｉ）で表される化合物の構造を示す。式（Ｉ）で表される特定の化合物は、以下のとおり命名される：４−（（４−（ベンジルオキシ）フェニル）アミノ）−８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）−４−（（４−フェノキシフェニル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−４−（（４−（シクロペンチルオキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−４−（（４−（シクロヘキシルメトキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）−４−（（４−（ｐ−トリルオキシ）フェニル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）−４−（（４−フェノキシフェニル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（４−（シクロペンチルメトキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−４−（（４−（シクロヘキシルオキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−クロロ−４−（（４−（シクロヘキシルオキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−４−（（４−（４−イソプロピルフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；
【００８８】
８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）−４−（（４−（ｐ−トリルオキシ）フェニル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（４−（４−フルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（４−（シクロヘキシルオキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；４−（（４−（ベンジルオキシ）フェニル）アミノ）−８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−４−（（４−（シクロペンチルメトキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−４−（（４−（４−イソプロピルフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（４−（シクロペンチルオキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（４−（３−フルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）−４−（（４−（ｏ−トリルオキシ）フェニル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（４−（３−フルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−４−（（４−（３−フルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−４−（（４−（３，４−ジフルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；
【００８９】
８−ブロモ−４−（（４−（４−クロロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（４−（３，５−ジフルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（４−（３−フルオロフェノキシ）−３−メチルフェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）−４−（（３−フェノキシフェニル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）−４−（（３−フェノキシフェニル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン；８−ブロモ−４−（（３−フルオロ−４−フェノキシフェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（３−メチル−４−フェノキシフェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；８−ブロモ−４−（（３−フルオロ−４−（３−フルオロフェノキシ）フェニル）アミノ）−２−（（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩；および８−ブロモ−２−（メチル（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ）−４−（（４−フェノキシフェニル）アミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩、８−ブロモ−２−（１−イソプロピルピペリジン−４−イルアミノ）−４−（４−フェノキシフェニルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン、８−ブロモ−２−（１−エチルピペリジン−４−イルアミノ）−４−（４−フェノキシフェニルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン、８−ブロモ−４−（４−フェノキシフェニルアミノ）−２−（１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン。
【００９０】
生物学的アッセイ
１．キナーゼ阻害アッセイ
本発明の化合物をアッセイして、ＦＬＴ３およびＪＡＫ２を限定せずに含むキナーゼを阻害するそれらの能力を測定した。
ＦＬＴ３は、タイプＩＩＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）ファミリーのメンバーである。ＦＬＴ３に対するリガンドは骨髄間質細胞および他の細胞により発現され、他の成長因子とともに相乗効果を与え、幹細胞、前駆細胞、樹状細胞、およびナチュラルキラー細胞の増殖を刺激する。ＦＬＴ３は、前悪性障害である造血障害、例えば骨髄増殖性障害、例えばＡＭＬおよびＡＬＬなどにおいて関与してきた。
【００９１】
ＪＡＫ２は、タイプＩＩシトシン受容体ファミリー（例えば、インターフェロン受容体）、ＧＭ−ＣＳＦ受容体ファミリー（ＩＬ−３Ｒ、ＩＬ−５ＲおよびＧＭ−ＣＳＦ−Ｒ）、ｇｐ１３０受容体ファミリー（例えば、ＩＬ−６）、および単鎖受容体（例えば、Ｅｐｏ−Ｒ、Ｔｐｏ−Ｒ、ＧＨ−Ｒ、ＰＲＬ−Ｒ）のメンバーによるシグナリングに関与してきた。ＴＥＬ（ＥＴＶ６）（ＴＥＬ−ＪＡＫ２）およびＰＣＭ１遺伝子とのＪＡＫ２遺伝子融合は、白血病患者において所見されてきている。さらに、ＪＡＫ２における変異は、真性多血症、本態性血小板血症、および他の骨髄増殖性疾患に関与してきている。６１７位におけるバリンのフェニルアラニンへの変化である、この変異は、造血細胞を成長因子、例えばエリスロポエチンおよびトロンボポエチンなどに対し、より感受性にさせる。
【００９２】
方法
酵素的ＦＬＴ３およびＪＡＫ２キナーゼ活性の阻害
本発明の化合物を最初に、貯蔵のために１００％ＤＭＳＯ（CALBIOCHEM（登録商標））に希釈し、キナーゼバッファーとし、１ｕＭ〜１０ｕＭの範囲の化合物濃度を作り出した。本発明の化合物の連続希釈物を９６ウェルプレート（GREINER BIOSCIENCES（登録商標））中にそれぞれ６μＬで分注した。切断ヒトＦＬＴ３野生型、変異Ｄ８３５Ｙ、およびＪＡＫ２（CARNA BIOSCIENCES（登録商標））をキナーゼバッファー中に希釈し、化合物溶液に添加し、３０分間室温で前培養した。次に、ＡＴＰ（TEKNOVA（登録商標））および基質溶液（PerkinElmer（登録商標）の提唱する製造基質、例えばＦＬＴ野生型および変異型Ｄ８３５Ｙに対してUlight（登録商標）-TKペプチドおよびＪＡＫ２に対してUlight（登録商標）-JAK1（PERKINELMER（登録商標））を、化合物溶液および酵素を含有するウェルへと添加した（それぞれ１２ｕＬ）。
【００９３】
反応混合物を、１時間培養した。培養後に、ＥＤＴＡ、水およびLance検出バッファ（PERKINELMER（登録商標））で作成した停止溶液を添加し（それぞれ１２μＬ）、リン酸化を停止させた。停止溶液の添加および５分の振とう後、ユウロピウム標識抗体（PerkinElmer（登録商標）の提唱された製造基質、例えば、ＦＬＴ３およびＪＡＫ２に対してＰＴ６６）、水、およびLance検出バッファを含有する検出溶液を反応混合物へと添加し（それぞれ１２μＬ）、再び５０分間培養した。基質リン酸化は、検出溶液の添加および５０分間の培養後に測定された６６５ｎｍ発光の関数であった。
【００９４】
結果
式（Ｉ）で表される化合物は、有用な薬理学的特性を呈した。本明細書で用いられる、阻害活性の能力（ｎＭ）を記載する方法は、表２に示される、５０％の阻害活性の値（ＩＣ５０）である。参照化合物、ＡＣ２２０（Quizartinib, Ambit）、ＰＫＣ４１２（Midostaurin, Novartis）およびスタウロスポリン（汎キナーゼ阻害剤）をＦＬＴ３に対して用いて、式（Ｉ）で表される化合物の阻害活性を判断した。参照化合物、スタウロスポリン、汎キナーゼ阻害剤をＪＡＫ２に対して独立して用いて、式（Ｉ）で表される化合物の選択性および阻害性を判断した。
【００９５】
例えば、式（Ｉ）で表される化合物２３８、つまり８−ブロモ−４−（４−（３−フルオロフェノキシ）フェニルアミノ）−２−（１−メチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩は、ＦＬＴ３野生型ならびにＡＭＬ患者において所見されるＦＬＴ３のキナーゼドメインにおいて生じる最も頻度の高い変異体である変異体Ｄ８３５Ｙのキナーゼ活性の強い阻害を示した。生化学的アッセイにおけるその効力は、臨床的に開発されたＦＬＴ３阻害剤、ＡＣ２２０およびＰＫＣ４１２のものよりも優れている。さらにそれは、ＪＡＫ２キナーゼに対する素晴らしい選択性を示し、これは参照ＰＫＣ４１２よりも優れている。表２は、式（Ｉ）で表される代表的な化合物による、ＦＬＴ３およびＪＡＫ２のＩＣ５０値を示す。表２に示されるように、参照化合物、スタウロスポリンおよびＰＫＣ−４１２は多数効力性（multi-potent）であり、キナーゼ横断的に選択性がないことが示唆され、一方で本発明の化合物は参照化合物よりも良好な効力および良好な選択性を示す。さらに、本発明の化合物はまた、アスタリスクにより表示される、WO2011053861およびPCT/US2010/ 056583の先行技術に記載されるものよりも、良好な選択性を示す。
【００９６】
表２に示されるように、化合物＊８および＊１３６は、ＰＫＣ−４１２に類似する多数キナーゼ阻害活性を示す。ＰＫＣ−４１２はまた、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）および上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の周知のアンタゴニストである。総括すると、これらのデータにより、従前報告された化合物と比較して選択性を、ならびに公知のＦＬＴ３阻害剤、ＡＣ２２０およびＰＫＣ−４１２と比較してＦＬＴ３野生型およびＤ８３５Ｙ変異型における阻害能を顕著に改善することが示唆される。
【００９７】
WO2011053861に記載される化合物＊８および＊１３６は、ＪＡＫ２を含むさまざまな試験されたキナーゼに対する多数阻害活性を示した。特にそれらは、１０ｍｇ／ｋｇの経口投与後のラットにおいて薬物曝露を示さず、それらが消化管において吸収されず、体から極めて迅速に排泄されたことを示唆した。
【００９８】
【表２】
2015510942.tif 000011
全てのデータは、ＩＣ５０値で一覧する。
【００９９】
２．細胞生存能アッセイ：ＦＬＴ３−ＩＴＤ−陽性細胞の阻害
本発明の化合物を、ヒト急性白血病細胞株（ＭＶ４−１１）におけるＦＬＴ３−ＩＴＤ（内部タンデム複写（Internal Tandem Duplication））の阻害に対するそれらの効果に関して試験する。ＦＬＴ３は主に、未成熟造血前駆細胞においてならびに成熟骨髄細胞において発現する。それは、ＫＩＴ、ＦＭＳ、およびＰＤＧＦＲを含む、タイプＩＩＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）ファミリーに属する。それはＦＬに結合することにより活性化され、増加したキナーゼ活性ならびにＳＴＡＴ５、Ｒａｓ、およびＰＩ３キナーゼを含む下流シグナリング経路の活性化を誘導する。
【０１００】
膜近傍ドメインにおけるＦＬＴ３−ＩＴＤ変異は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）において最も頻繁に観察される分子欠陥である。ＦＬＴ３−ＩＴＤはリガンド依存性二量体化、自己リン酸化および構造活性化を誘発し、造血細胞を形質変換することができる。臨床的には、ＦＬＴ３−ＩＴＤは、増加白血球数（increased leukocytosis）、増加芽球数、増加した再発率、低下した無病生存率、および乏しい全生存に公知である。それゆえ、ＦＬＴ３−ＩＴＤは、ＡＭＬ治療のための魅力的な分子標的である。
【０１０１】
方法
本発明の化合物を、ＭＶ４−１１細胞に対する細胞生存効果に関して試験した。細胞生存能アッセイのために、ヒトＦＬＴ３−ＩＴＤを発現するＭＶ４−１１細胞をAmerican Type Culture Collection（ATCC, Manassas, VA）から獲得した。この細胞株を、鉄添加１０ウシ胎児血清（BCS; Hyclone（登録商標））含有Roswell Park Memorial Institute（ＲＰＭＩ）培地（HyClone（登録商標））で維持した。ＭＶ４−１１細胞を９６ウェル培養プレート中に２×１０４細胞で播種し、そして連続希釈した化合物を添加した。３７℃での７２時間培養期間後に、細胞生存能を、生存細胞からのＡＴＰの定量化に基づくATPLite１ステップアッセイ（Perkin-Elmer（登録商標））を用いて測定した。CellTiter Aqueousアッセイ（Promega（登録商標））もまた、直交アッセイとして平行して実行した。ＩＣ５０値は、非線形回帰を用いて計算し、処置細胞対非処置対照細胞の発光または吸光における５０％低減のために必要な濃度として定義した（Prism（登録商標）Software）。
【０１０２】
結果
式（Ｉ）で表される代表的な化合物のＩＣ５０阻害データを、表３に示す。式（Ｉ）で表される化合物は、ＩＣ５０濃度における１０ｎＭよりも少ない阻害を呈した。具体的には、化合物２３７、８−ブロモ−４−（４−（シクロペンチルオキシ）フェニルアミノ）−２−（１−メチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−５（６Ｈ）−オン塩酸塩は、ＦＬＴ３  ＩＴＤ誘発性ＭＶ４−１１癌細胞株において参照ＰＫＣ−４１２により呈されるものよりも大きな阻害レベルを呈した。かかる強力な抗腫瘍活性により、本発明の化合物は、参照化合物および先行技術（ＰＣＴファイル番号：PCT/US2010/056583）に記載されるアスタリスクにより表示される化合物２０３よりもよい治療的価値がある。
【０１０３】
【表３】
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【０１０４】
３．異種移植モデル：前臨床有効性モデル
本発明の化合物が十分なin vivo有効性を示すかどうかを試験するために、それらをＭＶ４−１１癌細胞株を用いる異種移植マウスモデルにおいて試験した。
【０１０５】
方法
本発明の化合物を、ＦＬＴ３−ＩＴＤのＭＶ４−１１細胞株を用いる異種移植マウスモデルにおいて試験した。６週齢のＢａｌｂ／Ｃヌードマウスの全てのオス動物をコーンコブ含有プラスチックケージ（４〜６マウス／ケージ）に収容し、病原体フリー施設（２０〜２５℃、３０〜７０％湿度）中に１２時間明：暗周期で維持した。ＭＶ４−１１細胞懸濁液での皮下注射により、腫瘍モデルを確立した。平均腫瘍容積がおよそ４００ｍｍ３に達したとき（〜５週腫瘍移植後）、担癌マウスを２群に割り当てた（それぞれ９マウス）。３０ｍｇ／ｋｇ毎日の化合物２３８処置を開始し、２８日間継続する。ビヒクル２０％ヒドロキシ−β−シクロデキストリンを用いた。腫瘍容積を週あたり２回で測定した。適用できる場合には、それぞれの群に対する％腫瘍退縮（percent tumor regression（ＰＴＲ））を以下の式により計算するであろう：
ＰＴＲ＝１００×（腫瘍容積初期−腫瘍容積最終）／（腫瘍容積初期）
【０１０６】
結果
式（Ｉ）で表される代表的な化合物２３８は、表４において、たった４日処置後に７４．６％腫瘍退縮を、および結果的には化合物処置の１１日後に完全な腫瘍退縮を示す。この結果により、代表的な化合物は異種移植マウスモデルにおいて非常に強力な抗腫瘍活性であることを示唆し、本発明の化合物はｄｙｓ調節および／または過剰活性ＦＬＴ３誘発性疾患、例えばＡＭＬおよびＡＬＬなどに対する大いなる治療オプションであることが示唆されている。
【０１０７】
【表４】
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【０１０８】
本明細書において一覧される全ての特許、特許出願、および出版物の内容は、本明細書中に参照により組み入れる。
【０１０９】
本発明がその例示的態様へと示されおよび記載されたが、添付の特許請求の範囲に包含される発明の範囲から逸脱せずに、形式および詳細における変更をその中でなし得ることが、当業者により理解されるであろう。
【国際調査報告】
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