(57)【要約】  オリガヌムの濃縮物または抽出物を別の植物の少なくとも１種の濃縮物または抽出物と組み合わせて含む、細菌感染症の治療に使用するための組成物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
オリガヌムの濃縮物または抽出物を、別の植物の少なくとも１種の濃縮物または抽出物と組み合わせて含む、細菌感染症の治療に使用するための組成物。
【請求項２】
前記濃縮物または抽出物が、植物の地上部に由来する、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項３】
前記植物が、セリ科、ヒユ科、バラ科、スグリ科、キク科、ハンニチバナ科、シソ科、マメ科、およびグミ科の植物から選択される、請求項１または２に記載の使用のための組成物。
【請求項４】
前記植物が、Ａｅｇｏｐｏｄｉｕｍ属、Ｓａｌｉｃｏｒｎｉａ属、Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ属、Ｃｙｄｏｎｉａ属、Ｓｏｒｂｕｓ属、Ｒｉｂｅｓ属、Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ属、Ｃｉｓｔｕｓ属、Ｇｅｕｍ属、Ｓｉｄｅｒｉｔｉｓ属、Ｃｉｃｅｒ属、Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ属、およびＰｒｕｎｕｓ属から選択される、請求項３に記載の使用のための組成物。
【請求項５】
食用の植物が、Ａｅｇｏｐｏｄｉｕｍ  ｐｏｄａｇｒａｒｉａ、Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ  ｂｏｎｕｓ−ｈｅｎｒｉｃｕｓ、Ｓｏｒｂｕｓ  ｔｅｒｍｉｎａｌｉｓ、Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍ、Ｒｉｂｅｓ  ｒｕｂｒｕｍ、Ｃｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓ、Ｃｙｄｏｎｉａ  ｏｂｌｏｎｇａ、Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ  ｉｎｔｙｂｕｓ、Ｓａｌｉｃｏｒｎｉａ  ｅｕｒｏｐａｅａ、Ｇｅｕｍ  ｕｒｂａｎｕｍ、Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ  ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ、Ｓｉｄｅｒｉｔｉｓ  ｓｃａｒｄｉｃａ、Ｃｉｃｅｒ  ａｒｉｅｔｉｎｕｍ、およびＰｒｕｎｕｓ  ｓｐｉｎｏｓａから選択される、請求項４に記載の使用のための組成物。
【請求項６】
前記細菌感染症が、病原細菌により引き起こされる、請求項１から５のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項７】
前記病原細菌が、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ属、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ属、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ属、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ属、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ属、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ属、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ属、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ属、Ｖｉｂｒｉｏ属、Ｔｒｉｐｏｎｅｍａ属、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ属、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ属、Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ属、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ属、Ｂｏｒｒｅｌｉａ属、Ｂｒｕｃｅｌｌａ属、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ属、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ属、Ｌｉｓｔｅｒｉａ属、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ属、Ｐｒｏｔｅｕｓ属、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ属、Ｓｈｉｇｅｌｌａ属、Ｓｐｈａｅｒｏｐｈｏｒｕｓ属、Ｙｅｒｓｉｎｉａ属、またはそれらの組み合わせから選択される、請求項６に記載の使用のための組成物。
【請求項８】
前記細菌が、抗生物質耐性細菌である、請求項６または７に記載の使用のための組成物。
【請求項９】
前記抗生物質耐性細菌が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌である、請求項８に記載の使用のための組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、液体、乾燥または半固体の形態である、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１１】
前記抽出物が、水性抽出物またはアルコール性抽出物である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、経口、鼻腔内、または局所投与される、請求項１から１１のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、点鼻剤、吸入用混合物、エアゾール、口内洗浄液、マウススプレー、点鼻スプレー、またはルームスプレーの形態である、請求項１から１２のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、錠剤、コーティング錠、発泡錠、カプセル、粉剤、顆粒、糖衣錠、トローチ、丸剤、アンプル、ドロップ、坐剤、エマルション、軟膏、ゲル、チンキ剤、パスタ剤、クリーム、湿布、うがい液、または植物ジュースの形態である、請求項１から１２のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１５】
前記細菌感染症が、消化管の感染症、尿生殖路の感染症、鼻炎、扁桃炎、咽頭炎、気管支炎、肺炎を含めた気道の感染症、腎炎、肝炎、腹膜炎、心内膜炎、髄膜炎、骨髄炎を含めた内臓の感染症、眼、耳の感染症ならびに皮膚および皮下の感染症、下痢、皮膚疾患、毒素性ショック症候群、菌血症、敗血症、ならびに結核である、請求項１から１４のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項１６】
前記細菌が、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、およびＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａから選択される、請求項１から８または１０から１５のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細菌感染症を治療するための、オリガヌムの濃縮物または抽出物を含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
多くの疾患は、細菌感染によって引き起こされる。細菌感染との戦いは、現代医学において、重要なポイントの一つである。１９４０年代における抗生物質の開発によって、医師は、何百万人もの命を救ってきた細菌感染症に立ち向かう強力な手段を得た。しかし、抗生物質が、広く、時には不適切に使用されていることから、抗生物質耐性を有する細菌株が出現し始めた。これらの新規で、さらに強力な細菌は、一般の福祉および健康への深刻な脅威となる。
【０００３】
細菌感染症は、様々な細菌により引き起こされる可能性がある。それらの細菌によって、軽度な病気から、直ちに治療介入が必要な生命に関わる病気（細菌性髄膜炎など）がもたらされる。一般的な細菌感染症としては、例えば、肺炎、耳感染症、下痢、尿路感染症、および皮膚疾患が挙げられる。
【０００４】
細菌感染症の治療は、ほとんどの場合、宿主を害さずに侵入細菌を死滅させること（殺菌的作用様式）、または侵入細菌の増殖を阻害すること（静菌的作用様式）を目的とした抗生物質を使用することにより実現される。抗生物質の有効性は、作用機序、薬物分布、感染部位、宿主の免疫状態、および細菌の耐性因子に依存する。抗生物質は、いくつかの機序によって働く。抗生物質の中には、細菌の細胞壁の形成を阻害するものがある。細胞のタンパク質合成を妨げる抗生物質もある。さらに、代謝を阻害する、またはＤＮＡ合成および／または細胞膜透過性を妨げる抗生物質もある。
【０００５】
１９４０年代における発見以来、多くの抗生物質は、一般的な細菌感染症に対する有効性を失っている。なぜなら、細菌が、入院、医療経費、および死亡率を増加させることにつながる薬物耐性を有するようになったからである。
【０００６】
特に、通性嫌気性グラム陽性球菌である黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）は、例えば、バンコマイシンを含めた、すべての一般的な抗生物質に対して耐性を有するので、現在、最も危険な微生物の一つとみなされている。黄色ブドウ球菌は、丘疹、膿痂疹、せつ、蜂巣炎毛包炎（ｃｅｌｌｕｌｉｔｉｓ  ｆｏｌｌｉｃｕｌｉｔｉｓ）、よう、熱傷様皮膚症候群、および膿瘍などの軽い皮膚感染症から、肺炎、髄膜炎、骨髄炎、心内膜炎、毒素性ショック症候群、菌血症、および敗血症などの生命に関わる疾患に至る範囲の様々な疾患を引き起こし得る。その発生は、皮膚感染、軟部組織感染、呼吸器感染、骨感染、関節感染、血管内感染から創傷感染によるものである。特に、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）は、β−ラクタム系だけでなく、多くの他の抗微生物剤にも耐性を有するようになったので厄介である。ＭＲＳＡは、病院や老人ホームで見られることが極めて多く、そこでは開放創を有する患者、侵襲型機器を有する患者、および免疫系の働きが低下している患者の感染のリスクが、一般の人々よりも高い。
【０００７】
細菌感染症を治療するための代替的な方法は、静菌性の栄養物の使用からなる。例えば、Ｏｒｉｇａｎｕｍ属の植物は、その抗菌活性について何世紀にもわたって知られている。
【０００８】
オリガヌム精油は、呼吸器感染症、慢性炎症、尿路感染症、赤痢、および黄疸を治療するために、長い間、極東および中近東の文化圏において使用されてきた。多くのｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究は、オリガヌム油、またはその最も活性な構成成分であるカルバクロールおよびチモールが、様々な細菌の増殖を阻害することを示している。
【０００９】
例えば、Ｈａｍｍｅｒらは、９種の細菌に対する活性について、５２種の植物油を調査した。オリガヌム油は、ヒトの創傷感染症を引き起こす死滅させにくい細菌であるＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの増殖を阻害する僅か３種の油のうちの一つであった。総合的に、オリガヌム油は、レモングラス油を除く、試験したすべての油より、細菌の増殖を阻害することにおいて優れていた（Ｈａｍｍｅｒ，Ｋ．ら、Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  １９９９、８６、９８５〜９９０）。
【００１０】
Ｂａｒｅｔｔａらは、２５種の細菌に対して、セージ油、ローズマリー油、月桂樹油、およびコリアンダー油に加えて、オリガヌム油を試験した。Ｂａｒｅｔｔａらは、オリガヌム油が、試験した細菌のほとんどに対して、最も広範で最も高い活性を示し、実際、オリガヌム油が、調査中の２５種の細菌株のうち１９種を強力に阻害することを認めた（Ｂａｒｅｔｔａ，Ｍ．Ｔ．ら、Ｊ．Ｅｓｓｅｎｔ．Ｏｉｌ  Ｒｅｓ．１９９８、１０、６１８〜６２７）。
【００１１】
種々の研究において、オリガヌム油は、黄色ブドウ球菌の増殖の阻害において、有効な活性を示すことが実証されている。
【００１２】
例えば、Ｃｅｌｉｋらは、ＭＲＳＡの菌株を含めたいくつかの黄色ブドウ球菌の菌株に対する、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｈｙｐｅｒｉｃｉｆｏｌｉｕｍの精油の抗菌活性を調査した。結果は、Ｏ．ｈｙｐｅｒｉｃｉｆｏｌｉｕｍが、その抗菌活性および抗酸化活性を理由に、食物および医薬において使用される可能性があることを示した（Ｃｅｌｉｋ，Ａ．；Ｎｕｒ  Ｈｅｒｋｅｎ，Ｅ．；Ａｒｓｌａｎ，Ｉ．；Ｚａｆｅｒ  Ｏｚｅｌ，Ｍ．；Ｍｅｒｃａｎ，Ｎ、Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．Ｒｅｓ．２０１０、２４、１５６８〜１５７７）。
【００１３】
別の研究は、３属に関係する異なる２３種に属するグラム陽性細菌分離株１１１株に対して、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅから抽出した精油の抗菌活性を、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅから抽出した浸出液および煎じ液と比較して調査した。精油および浸出液は、とりわけＳ．ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓおよび黄色ブドウ球菌に対して抗菌活性を示したが、グラム陽性細菌分離株は、オリガヌムの煎じ液に耐性を有することが判明した（Ｓａｅｅｄ，Ｓ．；Ｔａｒｉｑ，Ｐ、Ｐａｋ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．２００９、２２、４２１〜４２４）。
【００１４】
オリガヌム油の抗菌効果は、マウスで行ったｉｎ  ｖｉｖｏ研究でも実証された。オリガヌム油は、培養において、０．２５ｍｇ／ｍＬで、黄色ブドウ球菌の２株（ＡＴＣＣ＃１４１５４および＃１４７７５）に対して殺菌性であることが示された。ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、モノラウリンの効果はオリガヌム油と酷似していた。それらの組み合わせは、それぞれ０．１２５ｍｇ／ｍＬの濃度で、殺菌性であった。二つの別個のｉｎ  ｖｉｖｏ実験において、注入した黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ＃１４７７５）は、１週間以内に、すべての１４匹の未処置マウスを死滅させた。処置したマウスにおいて、３０日間、毎日オリガヌム油を経口で与えられたとき、３分の１超が、３０日間生存した（６／１４）。オリガヌム油とモノラウリンとの組み合わせを毎日与えられたとき、６０％超のマウスが生存した（５／８）。この研究は、モノラウリンと組み合わさったオリガヌム油が、黄色ブドウ球菌感染症を予防および治療するのに有用な抗菌剤となり得ることを示している。
【００１５】
オリガヌムの抗菌特性を調査している研究のほとんどは、蒸留によって得られた精油を使用している。オリガヌムの葉をエタノールに溶解することにより得られた抽出物は、その抽出物の抗酸化活性および抗炎症活性を調査した、Ｙｏｓｈｉｎｏらによって記載されている。しかし、この研究は、オリガヌムの抗菌特性に関するものではない（Ｙｏｓｈｉｎｏ  Ｋ．；Ｈｉｇａｓｈｉ，Ｎ．、Ｋｏｇａ，Ｋ．、Ｊ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｃｉ．２００６、５２、１６９〜１７３）。
【００１６】
さらなる調査は、マイクロ波無溶媒抽出（ＳＦＭＥ）、超臨界流体抽出、または水蒸気蒸留によって得られるオリガヌム精油に集中している。Ｋａｒａｋａｙａらによって行われた研究は、異なるマイクロ波電力でのマイクロ波無溶媒抽出、および水蒸気蒸留によって得られた精油が、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎａｓｅｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７の生存を阻害するが、黄色ブドウ球菌の生存が影響されないことを明らかにした。
【００１７】
上記の研究は、植物から活性化合物が単離される方法に、オリガヌム属の抗菌活性が依存することを示している。実施された研究のほとんどによれば、蒸留によって得られるオリガヌム精油は、細菌の増殖を阻害する最も大きな可能性を示すと思われる。
【００１８】
薬用植物の活性プロフィールの有効性を高める異なる戦略は、相乗的に有効性を高めるように、異なるハーブを組み合わせることからなる。例えば、ＷＯ−Ａ−２０１００９１４１５は、フルーツ酸およびアルカンジオールと組み合わせた、低濃度の精油と植物抽出物と、場合により溶媒とを含有する抗菌組成物を記載している。しかし、この発明は、任意選択の成分としての、オリガヌム抽出物の使用について触れておらず、さらに、この発明による組成物は、薬物としてではなく、クリームまたは石鹸製品などのパーソナルケア製品において使用することができる。
【００１９】
ＵＳ−Ａ−２０１０００９２５８１は、Ａｒｃｅｕｔｈｏｂｉｕｍ属に属する植物、例えば、Ａｒｃｅｕｔｈｏｂｉｕｍ  Ａｍｅｒｉｃａｎｕｍからの抽出物を含む抗菌組成物に関するものである。その組成物は、ＭＲＳＡに対して活性を示し、医薬組成物または消毒剤において使用することができる。言うまでもなく、オリガヌムは、潜在的な成分として、この文献に挙げられていない。
【００２０】
セイヨウワサビおよびキンレンカの抽出物からなる組成物が、Ａｒｚｔｅ  Ｚｅｉｔｕｎｇ（１６．１２．２００２）に記載されている。前記組成物のＭＲＳＡに対する静菌活性は、成分のカラシ油から得られる。しかし、その組成物は、全く、オリガヌムに関するものではない。
【００２１】
ＷＯ−Ａ−２０１００４９５４２は、とりわけＭＲＳＡに対して抗菌活性を示す、少なくとも１種の植物材料の少なくとも１種の抽出物の加水分解物を対象とする。この文献には、様々な潜在的な植物材料が挙げられているが、オリガヌムに由来する抽出物は挙げられていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２２】
【特許文献１】ＷＯ−Ａ−２０１００９１４１５
【特許文献２】ＵＳ−Ａ−２０１０００９２５８１
【特許文献３】ＷＯ−Ａ−２０１００４９５４２
【非特許文献】
【００２３】
【非特許文献１】Ｈａｍｍｅｒ，Ｋ．ら、Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  １９９９、８６、９８５〜９９０
【非特許文献２】Ｂａｒｅｔｔａ，Ｍ．Ｔ．ら、Ｊ．Ｅｓｓｅｎｔ．Ｏｉｌ  Ｒｅｓ．１９９８、１０、６１８〜６２７
【非特許文献３】Ｃｅｌｉｋ，Ａ．；Ｎｕｒ  Ｈｅｒｋｅｎ，Ｅ．；Ａｒｓｌａｎ，Ｉ．；Ｚａｆｅｒ  Ｏｚｅｌ，Ｍ．；Ｍｅｒｃａｎ，Ｎ、Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．Ｒｅｓ．２０１０、２４、１５６８〜１５７７
【非特許文献４】Ｓａｅｅｄ，Ｓ．；Ｔａｒｉｑ，Ｐ、Ｐａｋ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．２００９、２２、４２１〜４２４
【非特許文献５】Ｙｏｓｈｉｎｏ  Ｋ．；Ｈｉｇａｓｈｉ，Ｎ．、Ｋｏｇａ，Ｋ．、Ｊ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｃｉ．２００６、５２、１６９〜１７３
【非特許文献６】Ａｒｚｔｅ  Ｚｅｉｔｕｎｇ（１６．１２．２００２）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
したがって、本発明の目的は、細菌感染症を治療するための新規および有効な抗菌組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
この目的は、オリガヌムの濃縮物または抽出物を、別の植物の少なくとも１種の濃縮物または抽出物と組み合わせて含む、細菌感染症の治療に使用する組成物によって達成される。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅとＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍとの組み合わせを使用したときのＭＲＳＡの増殖の阻害結果を示す図。
【図２】Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅとＣｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓとの組み合わせを使用したときのＭＲＳＡの増殖の阻害結果を示す図。
【図３】Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの抽出物の、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓに対する抗菌活性を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
本発明によるオリガヌムの濃縮物または抽出物は、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ａｃｕｔｉｄｅｎｓ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ａｍａｎｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｃａｌｃａｒａｔｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｃｏｍｐａｃｔｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｄｉｃｔａｍｎｕｓ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｌａｅｖｉｇａｔｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｌｅｐｔｏｃｌａｄｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｌｉｂａｎｏｔｉｃｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｍａｊｏｒａｎａ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｍｉｃｒｏｐｈｙｌｌｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｓｃａｂｒｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｓｉｐｙｌｅｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｓｙｒｉａｃｕｍ種、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ種から抽出することができる。本発明による好ましいオリガヌム種は、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅである。
【００２８】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の好ましい実施形態では、本発明による組成物は、別の植物の少なくとも１種の抽出物と組み合わせた、オリガヌム属の抽出物である。
【００２９】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明のさらに好ましい実施形態では、使用のための前記組成物の濃縮物または抽出物は、植物の地上部由来である。
【００３０】
用語「植物」は、葉、小枝、花、果実、および種子を含めた、植物の地上部のすべての部分を指す。
【００３１】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の好ましい実施形態では、使用のための組成物の植物は、セリ科（Ａｐｉａｃｅａｅ）、ヒユ科（Ａｒｍａｒａｎｔｈａｃｅａｅ）、バラ科（Ｒｏｓａｃｅａｅ）、スグリ科（Ｇｒｏｓｓｕｌａｒｉａｃｅａｅ）、キク科（Ａｓｔｅｒｅｒａｃｅａｅ）、ハンニチバナ科（Ｃｉｓｔａｃｅａｅ）、シソ科（Ｌａｍｉａｃｅａｅ）、マメ科（Ｆａｂａｃｅａｅ）、およびグミ科（Ｅｌａｅａｇｎａｃｅａｅ）の植物から選択される。
【００３２】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の別の好ましい実施形態では、使用のための組成物の植物は、Ａｅｇｏｐｏｄｉｕｍ属、Ｓａｌｉｃｏｒｎｉａ属、Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ属、Ｃｙｄｏｎｉａ属、Ｓｏｒｂｕｓ属、Ｒｉｂｅｓ属、Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ属、Ｃｉｓｔｕｓ属、Ｇｅｕｍ属、Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ属、Ｓｉｄｅｒｉｔｉｓ属、Ｃｉｃｅｒ属、およびＰｒｕｎｕｓ属から選択される。
【００３３】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明のより好ましい実施形態では、使用のための組成物の植物は、Ａｅｇｏｐｏｄｉｕｍ  ｐｏｄａｇｒａｒｉａ、Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ  ｂｏｎｕｓ−ｈｅｎｒｉｃｕｓ、Ｓｏｒｂｕｓ  ｔｅｒｍｉｎａｌｉｓ、Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍ、Ｒｉｂｅｓ  ｒｕｂｒｕｍ、Ｃｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓ、Ｃｙｄｏｎｉａ  ｏｂｌｏｎｇａ、Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ  ｉｎｔｙｂｕｓ、Ｓａｌｉｃｏｒｎｉａ  ｅｕｒｏｐａｅａ、Ｇｅｕｍ  ｕｒｂａｎｕｍ、Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ  ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ、Ｓｉｄｅｒｉｔｉｓ  ｓｃａｒｄｉｃａ、Ｃｉｃｅｒ  ａｒｉｅｔｉｎｕｍ、およびＰｒｕｎｕｓ  ｓｐｉｎｏｓａから選択される。
【００３４】
本発明による濃縮物または抽出物を調製するために、植物の地上部のすべての要素を使用することができる。好ましくは、葉、小枝、および花が使用される。好ましくは、植物材料は、ざく切りされる。
【００３５】
本発明によれば、用語「濃縮物」は、新鮮な植物からの水分の除去により対象のハーブから得られる、すべての生成物について代表的に使用される。
【００３６】
本発明によれば、用語「抽出物」は、冷浸またはパーコレーションなどの、溶媒を用いた抽出により対象のハーブから得られる、すべての生成物について代表的に使用される。
【００３７】
抽出に関して、植物の地上部は、生の状態でまたは乾燥させて、冷浸またはパーコレーションにかけられる。より好ましい実施形態では、乾燥させた植物材料が使用される。
【００３８】
植物部分は、例えば、それらを擦るまたは切ることにより、抽出前に、適切な方法で細かくすることができる。あるいは、植物部分は、抽出前に、搾ることによりジュースを作るために、収穫後すぐに、つまり、生の状態で、圧搾することができる。
【００３９】
一般に、葉、小枝および花を含めた植物部分の抽出は、適切な溶媒を用いて行われる。適切な溶媒は、水、アルコール、例えば、メタノール、エタノール、もしくはイソプロピルアルコール、または塩素化溶媒、例えば、ジクロロメタン、ならびに、アセトン、アセチルアセトン、酢酸エチル、アンモニア、もしくは氷酢酸、さらには、超臨界二酸化炭素である。前述した溶媒の混合物も使用することができる。
【００４０】
さらに、ブタの脂肪などの脂肪、蜜蝋などの蝋、またはオリーブ油およびアーモンド油などの油を、抽出のために使用することができる。好ましくは、アーモンド油が使用される。
【００４１】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の好ましい実施形態では、使用のための組成物の抽出物は、水抽出物またはアルコール抽出物である。前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、より好ましい実施形態では、水、または水とメタノールもしくはエタノールとの混合物が使用される。
【００４２】
抽出は、通常、使用される溶媒の沸点に応じて、２５〜１００℃の間の温度で行われる。９５〜１００℃での抽出が好ましい。
【００４３】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の別の好ましい実施形態では、抽出は、通常、１分〜８時間、より好ましくは、１〜３時間で行われ、特に、抽出は、１時間で行われる。
【００４４】
できる限り高い収率を実現するために、植物材料を、数回抽出することができる。好ましくは、抽出は、２〜６回、好ましくは、３回繰り返される。この場合、異なる抽出ステップにおいて、異なる溶媒を使用することも可能であり、溶媒を用いる抽出の後に、脂肪、蝋、または油を用いる抽出を続けることもでき、その逆も可能である。
【００４５】
冷浸法は、通常、室温で、水とエタノールとの混合物を用いて、その溶媒混合物を植物の要素に注ぎ、５〜９日、好ましくは７日間おいておくことにより、前述の期間の間行われる。
【００４６】
本発明によれば、植物部分のパーコレーションは、通常、水を植物部分に通すことにより、９５〜１００℃で４〜５時間、植物部分を水で処理することによって実現される。
【００４７】
粗製抽出物は、使用する前に、濃縮、および／または乾燥、および／またはさらに加工することもできる。乾燥抽出物を製造するために、溶媒を、例えば、噴霧乾燥、凍結乾燥、または真空乾燥によって、液状未加工抽出物、濃縮抽出物、または精製抽出物から取り除くことができる。さらなる加工は、懸濁物質を抽出物から除去するために、例えば、当業者に公知の精製ステップ、例えば、遠心分離、ろ過、およびデカンテーションを含むことができる。カラムクロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー、もしくはＨＰＬＣなどのクロマトグラフィー、または水蒸気蒸留も、精製のために使用される。好ましい実施形態では、粗製生成物は、さらなる精製ステップなしで使用される。
【００４８】
本発明による、使用のための組成物は、抽出を行う前に、Ｏｒｉｇａｎｕｍおよび別の植物の地上部を混合することによって製造することができる。代替として好ましくは、Ｏｒｉｇａｎｕｍの濃縮物または抽出物は、本発明による使用のための組成物を得るために、別の植物の抽出物と混合される。
【００４９】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の好ましい実施形態では、本発明による組成物は、Ｏｒｉｇａｎｕｍの濃縮物または抽出物と、別の植物のものとを、１：１０〜１０：１、好ましくは１：５〜５：１、より好ましくは１：２〜２：１、特に１：１の比率で含む。
【００５０】
Ｏｒｉｇａｎｕｍと他の植物との組み合わせは、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／セリ科、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／ヒユ科、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／バラ科、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／スグリ科、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／キク科、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／ハンニチバナ科、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／シソ科、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／マメ科、およびＯｒｉｇａｎｕｍ／グミ科を含む。Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ａｅｇｏｐｏｄｉｕｍ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｓａｌｉｃｏｒｎｉａ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｙｄｏｎｉａ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｓｏｒｂｕｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｒｉｂｅｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｉｓｔｕｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｇｅｕｍ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｓｉｄｅｒｉｔｉｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｉｃｅｒ、およびＯｒｉｇａｎｕｍ／Ｐｒｕｎｕｓの組み合わせが好ましい。Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ａｅｇｏｐｏｄｉｕｍ  ｐｏｄａｇｒａｒｉａ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ  ｂｏｎｕｓ−ｈｅｎｒｉｃｕｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｓｏｒｂｕｓ  ｔｅｒｍｉｎａｌｉｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｒｉｂｅｓ  ｒｕｂｒｕｍ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｙｄｏｎｉａ  ｏｂｌｏｎｇａ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ  ｉｎｔｙｂｕｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｓａｌｉｃｏｒｎｉａ  ｅｕｒｐａｅａ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｇｅｕｍ  ｕｒｂａｎｕｍ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ  ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｓｉｄｅｒｉｔｉｓ  ｓｃａｒｄｉｃａ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｉｃｅｒ  ａｒｉｅｔｉｎｕｍ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｐｒｕｎｕｓ  ｓｐｉｎｏｓａの組み合わせがより好ましい。特に、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ／Ｃｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ／Ｒｉｂｕｓ  ｎｉｇｒｕｍ、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ／Ｃｙｄｏｎｉａ  ｏｂｌｏｎｇａ、およびＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ／Ａｅｇｏｐｏｄｉｕｍ  ｐｏｄａｇｒａｒｉａの組み合わせが好ましい。
【００５１】
前または後の実施形態のいずれかと組み合わせた好ましい実施形態では、本発明による組成物は、Ｏｒｉｇａｎｕｍと、２種以上の植物との組み合わせを含む。好ましい実施形態は、Ｏｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｉｓｔｕｓ／Ｒｉｂｅｓ、およびＯｒｉｇａｎｕｍ／Ｃｙｄｏｎｉａ／Ａｅｇｏｐｏｄｉｕｍ、特に、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ／Ｃｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓ／Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍ、およびＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ／Ｃｙｄｏｎｉａ  ｏｂｌｏｎｇａ／Ａｅｇｏｐｏｄｉｕｍ  ｐｏｄａｇｒａｒｉａである。
【００５２】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の好ましい実施形態では、本発明による組成物は、液体、乾燥または半固体の形態である。
【００５３】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の別の好ましい実施形態では、細菌感染症は、病原細菌により引き起こされる。
【００５４】
本明細書で使用する用語「病原細菌」は、細菌感染症を引き起こす細菌を指す。病原細菌としては、小さな球桿菌；小さい、丸い、卵形の桿菌；大きい、平滑末端の桿菌；小さい、細い、多形性の桿菌；卵形から球形の桿菌；長い、細い、フレキシブルな、渦巻き状またはらせん状の形をした桿菌；細い、短い桿菌；単極べん毛を有する湾曲した桿菌；およびインゲンマメの形をした桿菌を形成する、グラム陽性細菌およびグラム陰性細菌の両方が挙げられる。
【００５５】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の好ましい実施形態では、細菌感染症は、消化管の感染症、尿生殖路の感染症、気道の感染症、例えば、鼻炎、扁桃炎、咽頭炎、気管支炎、肺炎、内臓の感染症、例えば、腎炎、肝炎、腹膜炎、心内膜炎、髄膜炎、骨髄炎、眼、耳の感染症ならびに皮膚および皮下の感染症、下痢、皮膚疾患、毒素性ショック症候群、菌血症、敗血症、ならびに結核である。
【００５６】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明のさらに別の好ましい実施形態では、病原細菌は、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ属、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ属、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ属、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ属、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ属、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ属、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ属、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ属、Ｖｉｂｒｉｏ属、Ｔｒｉｐｏｎｅｍａ属、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ属、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ属、Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ属、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ属、Ｂｏｒｒｅｌｉａ属、Ｂｒｕｃｅｌｌａ属、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ属、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ属、Ｌｉｓｔｅｒｉａ属、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ属、Ｐｒｏｔｅｕｓ属、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ属、Ｓｈｉｇｅｌｌａ属、Ｓｐｈａｅｒｏｐｈｏｒｕｓ属、Ｙｅｒｓｉｎｉａ属、またはそれらの組み合わせから選択される。
【００５７】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明のさらに好ましい実施形態では、細菌は、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、およびＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａから選択される。
【００５８】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明のさらに好ましい実施形態では、細菌は、抗生物質耐性細菌である。本明細書で使用する「抗生物質耐性」は、抗生物質が細菌に適用されたときに、一般的な抗生物質、例えば、β−ラクタム系抗生物質、テトラサイクリン、アミノグリコシド、マクロライド系抗生物質、リンコマイシン系抗生物質、ジャイレース阻害剤（キノロン）、スルホンアミドおよびトリメトプリム、グリコペプチド系抗生物質、ポリペプチド系抗生物質、ならびにニトロイミダゾール誘導体によって、殺菌性も静菌効果も実現されないことを意味する。
【００５９】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の別の好ましい実施形態では、抗生物質耐性細菌は、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌を表す。用語「メチシリン耐性」は、本明細書では、「多耐性」および「バンコマイシン耐性」と同義に使用される。
【００６０】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の好ましい実施形態では、使用のための組成物は、経口、鼻腔内、または局所投与される。
【００６１】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、別の好ましい実施形態では、使用のための組成物は、点鼻剤（ｎａｓａｌ  ａｇｅｎｔ）、吸入用混合物、エアゾール、口内洗浄液、マウススプレー、点鼻スプレー、またはルームスプレーの形態である。より好ましくは、該組成物は、マウススプレー、点鼻スプレー、またはルームスプレーの形態、特に、点鼻スプレーの形態である。
【００６２】
より好ましい実施形態では、該組成物は、エアゾールまたはルームスプレーの形態である。好ましくは、本発明による液体または固体組成物は、この形態に使用される。エアゾールまたはルームスプレーは、抽出物に加えて、医薬的に無害の物質、担体媒体、および補助剤を含有することもできる。エアゾールまたはルームスプレーは、細菌が接触するまたは潜在的に接触し得る対象物および部屋、特に、人々、動物、および／または食品を輸送するすべてのタイプの輸送手段を消毒するために使用することができる。例えば、ウイルスの蔓延を予防し、その結果、人々の感染のリスクを最小にするために、離陸前の飛行機を、本発明によるエアゾールでまたは本発明によるルームスプレーでスプレーすることができる。そのエアゾールまたはルームスプレーは、人々に何らかの毒性作用を少しも引き起こさないので、人々の存在下でも、例えば、待合室でも噴霧することができる。
【００６３】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、本発明の特に好ましい実施形態では、該組成物は、特に、気道および副鼻腔の疾患を誘発する細菌を処理するために、点鼻スプレーとして適用される。この場合、該組成物が、液体抽出物の形態であることが好ましい。
【００６４】
前に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、別の好ましい実施形態では、本発明による、使用のための組成物は、錠剤、コーティング錠、発泡錠、カプセル、粉剤、顆粒、糖衣錠、トローチ、丸剤、アンプル、ドロップ、坐剤、エマルション、軟膏、ゲル、チンキ剤、パスタ剤、クリーム、湿布、うがい液、または植物ジュースの形態である。
【００６５】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、経口適用に関して、該組成物は、好ましくは、錠剤の形態で投与される。この場合、該組成物が、乾燥抽出物の形態であることが好ましい。
【００６６】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた、別の好ましい実施形態において、該組成物は、特に、口腔および喉上部の細菌感染症を治療するために、溶液、特に、うがい液、口内洗浄液、またはチンキ剤として、本発明に従って使用することができる。
【００６７】
前または後に挙げる実施形態のいずれか一つと組み合わせた坐剤は、本発明による組成物の直腸内または膣内投与のための好ましい実施形態である。
【００６８】
局所投与に関して、本発明による使用のための組成物は、エマルション、軟膏、ゲル、チンキ剤、パスタ剤、クリーム、または湿布の形態で投与される。この場合、好ましくは、該組成物は、活性物質が、脂肪、蝋、または油を用いた抽出により植物から取り出される抽出物の形態で使用される。この抽出物は、乾燥抽出物にさらに加工され、その後に、脂肪、蝋、または油と混合される、またはそれらに溶解されることがさらに好ましい。
【００６９】
適用形態における該組成物の濃度は、適用のタイプに応じて変わる。一般に、該組成物の量は、固体の適用形態について、投与単位あたり、０．５〜１０００ｍｇになる。好ましくは、該組成物の量は、単位あたり、１〜５００ｍｇになる。液体の適用形態において、該組成物を、１μｇ／ｍｌ〜１００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは、２５μｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度にすることができる。半固体の適用形態の場合、該組成物の含有量は、１〜９０重量％、好ましくは、５〜７５重量％になる。
【００７０】
ビタミンおよびミネラルなどのさらなる要素を、本発明に従って使用される組成物に添加することができる。
【００７１】
該組成物は、例えば、動物の餌料、または食品、例えば、飲料に添加することもできる。抽出物の形態において、組成物自体を、お茶として浸出させることもできる。しかし、お茶を入れるために、植物部分、例えば、オリガヌム属の植物の葉に直接お湯を注ぐことも可能である。さらに、該組成物を、栄養補助食品の構成成分にすることができ、冬季にそれを摂取することは、身体の防御を強めること、および細菌感染症を治療することの一助になり得る。
【００７２】
以下の例は、本発明を説明する。
【００７３】
液体抽出物および乾燥抽出物を製造するための一般的手順
採集した植物材料を、目視検査して、本来のものでない、傷んでいる、または侵食されている部分を取り除く。
【００７４】
精製した材料を、温室でテーブルの上に広げ、乾燥させるため紙で覆う。植物部分を、毎日ひっくり返し、本来のものではなく傷んだ部分について目検し、その部分を取り除く。植物材料の残留水分を、定期的に測定する。植物材料は、その残留水分率が、最大１０％である場合、さらに加工するのに良い。
【００７５】
植物材料をざく切りして、ビーカーに移し、冷えた蒸留水を（植物材料の１０〜３０倍の量）添加する。得られた混合物を、撹拌しながらホットプレートで沸騰するまで加熱する。沸騰を１時間継続させる。
【００７６】
熱い液体をこし、残留した植物材料を搾る。得られた水抽出物を、ボトルに直接入れる。
【００７７】
乾燥抽出物を製造するために、液体抽出物を金属のボウルに入れて、溶媒が完全に蒸発するまで乾燥用オーブンで８０℃で濃縮する。残留物を、金属のボウルからこすり取り、秤量する。あるいは、液体抽出物を、当業者に公知の標準的手順に従って凍結乾燥する。
【００７８】
Ｏｒｉｇａｎｕｍの抽出物の調製
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅのすべての地上部を、抽出のために使用する。
【００７９】
一般的手順に従って、ざく切りした１５０ｇのＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅを１５００ｍｌの蒸留水中で１時間加熱する。得られた水抽出物を、ボトルに直接入れる。
【００８０】
Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの抽出物の調製
Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの葉を、抽出のために使用する。
【００８１】
一般的手順に従って、ざく切りした２６．７ｇのＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの葉を、８００ｍｌの蒸留水中で１時間加熱する。得られた水抽出物を、ボトルに直接入れる。
【００８２】
Ｃｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓの抽出物の調製
Ｃｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓの花および小枝を、抽出のために使用する。
【００８３】
一般的手順に従って、ざく切りした１００ｇのＣｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓ材料を、１５００ｍｌの蒸留水中で１時間加熱する。得られた水抽出物を、ボトルに直接入れる。
【００８４】
黄色ブドウ球菌に対するＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ、Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍ、およびＣｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓの抗菌効果
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ（試験物質Ａ）
調合：Ｈ２Ｏ中５ｍｇ／ｍｌ；固体物質（凍結乾燥）
【００８５】
試験系：
試験モデル：ミューラー・ヒントン寒天培地（ＭＨ寒天培地）における黄色ブドウ球菌（ＵＳＡ３００＝ＭＲＳＡ）
試験群：物質Ａ（５ｍｇ）
手順：凍結乾燥した抽出物を水に溶解した。１００μｌのＭＲＳＡ溶液を、ＭＨ寒天培地で平板培養した。その後、ＭＨ寒天培地にあけた８ｍｍの穴を、１００μｌの抽出溶液で満たした。３７℃で２２時間後、その穴を、増殖の阻害について光学的に調べた。
ＭＲＳＡ細菌の適用：１０−３／１．６３×１０５／１００μｌ／寒天培地プレート
一晩のＭＲＳＡ培養：８ｍｌのＴＢＳ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
【００８６】
Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍ（試験物質Ｂ）
調合：Ｈ２Ｏ中５ｍｇ／ｍｌ；固体物質（凍結乾燥）
【００８７】
試験系：
試験モデル：ミューラー・ヒントン寒天培地（ＭＨ寒天培地）における黄色ブドウ球菌（ＵＳＡ３００＝ＭＲＳＡ）
試験群：物質Ｂ（５ｍｇ）
手順：凍結乾燥した抽出物を水に溶解した。１００μｌのＭＲＳＡ溶液を、ＭＨ寒天培地で平板培養した。その後、ＭＨ寒天培地にあけた８ｍｍの穴を、１００μｌの抽出溶液で満たした。３７℃で２２時間後、その穴を、増殖の阻害について光学的に調べた。
ＭＲＳＡ細菌の適用：１０−３／１．６３×１０５／１００μｌ／寒天培地プレート
一晩のＭＲＳＡ培養：８ｍｌのＴＢＳ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
【００８８】
Ｃｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓ（試験物質Ｃ）
調合：Ｈ２Ｏ中２．５ｍｇ／ｍｌ；固体物質（凍結乾燥）
【００８９】
試験系：
試験モデル：ミューラー・ヒントン寒天培地（ＭＨ寒天培地）における黄色ブドウ球菌（ＵＳＡ３００＝ＭＲＳＡ）
試験群：物質Ｃ（２．５ｍｇ）
手順：凍結乾燥した抽出物を水に溶解した。１００μｌのＭＲＳＡ溶液を、ＭＨ寒天培地で平板培養した。その後、ＭＨ寒天培地にあけた８ｍｍの穴を、１００μｌの抽出溶液で満たした。３７℃で２２時間後、その穴を、増殖の阻害について光学的に調べた。
ＭＲＳＡ細菌の適用：１０−３／１．６３×１０５／１００μｌ／寒天培地プレート
一晩のＭＲＳＡ培養：８ｍｌのＴＢＳ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
【００９０】
黄色ブドウ球菌に対するＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの相乗的な抗菌効果
試験対象物
試験物質：Ａ（＝Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ）＋Ｂ（＝Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍ）
調合：物質Ａ：Ｈ２Ｏ中５ｍｇ／ｍｌ；固体物質（凍結乾燥）；物質Ｂ：Ｈ２Ｏ中５ｍｇ／ｍｌ；固体物質（凍結乾燥）
【００９１】
試験系：
試験モデル：ミューラー・ヒントン寒天培地（ＭＨ寒天培地）における黄色ブドウ球菌（ＵＳＡ３００＝ＭＲＳＡ）
試験群：物質Ａ（５ｍｇ）＋物質Ｂ（５ｍｇ）
手順：凍結乾燥した抽出物を水に溶解した。１００μｌのＭＲＳＡ溶液を、ＭＨ寒天培地で平板培養した。その後、ＭＨ寒天培地にあけた８ｍｍの穴を、１００μｌの物質溶液で満たした。３７℃で２２時間後、その穴を、増殖の阻害について光学的に調べた。
ＭＲＳＡ細菌の適用：１０−３／１．６３×１０５／１００μｌ／寒天培地プレート
一晩のＭＲＳＡ培養：８ｍｌのＴＢＳ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
【００９２】
結果：
図１から分かるように、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅとＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍとの組み合わせを使用したとき、ＭＲＳＡの増殖のより十分な阻害が得られる。
【００９３】
黄色ブドウ球菌に対するＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＣｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓの相乗的な抗菌効果
試験物質：Ａ（＝Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅ）＋Ｃ（＝Ｃｉｓｔｕｓ）
調合：物質Ａ：Ｈ２Ｏ中５ｍｇ／ｍｌ；固体物質（凍結乾燥）；物質Ｃ：Ｈ２Ｏ中２．５ｍｇ／ｍｌ；固体物質（凍結乾燥）
【００９４】
試験系：
試験モデル：ミューラー・ヒントン寒天培地（ＭＨ寒天培地）における黄色ブドウ球菌（ＵＳＡ３００＝ＭＲＳＡ）
試験群：物質Ａ（５ｍｇ）＋物質Ｃ（２．５ｍｇ）
手順：凍結乾燥した抽出物を水に溶解した。１００μｌのＭＲＳＡ溶液を、ＭＨ寒天培地で平板培養した。その後、ＭＨ寒天培地にあけた８ｍｍの穴を、１００μｌの物質溶液で満たした。３７℃で２２時間後、その穴を、増殖の阻害について光学的に調べた。
ＭＲＳＡ細菌の適用：１０−３／１．６３×１０５／１００μｌ／寒天培地プレート
一晩のＭＲＳＡ培養：８ｍｌのＴＢＳ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
【００９５】
結果：
図２から分かるように、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅとＣｉｓｔｕｓ  ｉｎｃａｎｕｓとの組み合わせを使用したとき、ＭＲＳＡの増殖のより十分な阻害が得られる。
【００９６】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓに対するＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの抗菌効果
ＯｒｉｇａｎｕｍおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物の調製
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅのすべての地上部、およびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの葉を、抽出のために使用する。
【００９７】
一般的手順に従って、ざく切りした７０ｇのＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅと、ざく切りした３０ｇのＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの葉を、１０００ｍｌの蒸留水中で１時間ボイルする。得られた水抽出物をろ過し、５分間再度ボイルする。得られた抽出物を、直接ボトルに入れる。液体抽出物の濃度は、３０．５ｍｇ／ｍｌである。
【００９８】
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅの乾燥抽出物の調製
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅのすべての地上部を、抽出のために使用する。
【００９９】
一般的手順に従って、ざく切りした１５０ｇのＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅを、１５００ｍｌの蒸留水中で、１時間加熱する。得られた水抽出物を、当業者に公知の標準的手順で乾燥する。乾燥物質の含有量は、乾燥抽出物の総重量に対して、少なくとも９２重量％である。
【０１００】
Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの乾燥抽出物の調製
Ｒｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの葉を、抽出のために使用する。
【０１０１】
一般的手順に従って、ざく切りした２６．７ｇのＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの葉を、８００ｍｌの蒸留水中で１時間加熱する。得られた水抽出物を、当業者に公知の標準的手順で乾燥する。乾燥物質の含有量は、乾燥抽出物の総重量に対して、少なくとも９２重量％である。
【０１０２】
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの乾燥抽出物の調製
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅの乾燥抽出物とＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの乾燥抽出物とを、１：１の重量比でよく混合する。
【０１０３】
手順
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験における、ＢａｃＬｉｇｈｔによる生存率アッセイ
ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ  ＢａｃＬｉｇｈｔ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ｋｉｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｐｒｏｂｅｓ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）は、２種の核酸染色剤、すなわち、緑色蛍光ＳＹＴＯ９染色剤および赤色蛍光ヨウ化プロピジウム染色剤を採用している。生細胞について、小分子のＳＹＴＯ９は、生細胞および死（非生存）細胞に浸透させるために使用するのに対して、対比染色剤のヨウ化プロピジウムは、死細胞のみを染める。
【０１０４】
生存率アッセイを、製造者の指示に従って行い、９６ウェルプレートリーダーにおいて蛍光強度を測定した。食塩溶液中のＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓの懸濁物を一晩培養後に調製し、細菌の５０％を熱で不活化させた（１時間、９５℃）。
【０１０５】
上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの乾燥抽出物を、超音波を使用して蒸留水に溶解した。Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物を、さらに希釈することなく直接使用した。以下の保存溶液、すなわち、
１）８ｍｇ／ｍｌのＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよび８ｍｇ／ｍｌのＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍ（上記の乾燥抽出物から）
２）０．８ｍｇ／ｍｌのＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよび０．８ｍｇ／ｍｌのＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍ（上記の乾燥抽出物から）
３）３０．５ｍｇ／ｍｌ（上記の液体抽出物から）
を調製し、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓに対する抗菌活性について試験した。
【０１０６】
生菌を、各保存溶液と１：１で混合し、１０分間インキュベートした。その後、これらの懸濁物を、熱で不活化させた細菌と混合した（０：１００、５：９５、２５：７５、４５：５５、５０：５０）。体積０．５μｌのＢａｃＬｉｇｈｔ染色溶液（成分Ａおよび成分Ｂ、１：１）を、２５０μｌのこれらの混合物に添加した。染色したものを、暗所で１０分間インキュベートした。各試料からの１００μｌの量を、ピペットでマイクロタイタープレートに入れ、蛍光度を測定した。励起波長を４７０ｎｍで、発光を、生細胞について５３０ｎｍで記録し、非生細胞について６２０ｎｍで記録した。測定は、懸濁物の不均質性を均質化するために繰り返し行った。記録したデータを評価するために、生細胞と死（非生存）細胞との比を、比＝発光（生細菌）／発光（死菌）に従って算出した。食塩溶液による実験は、参照／陰性対照として役立てた。
【０１０７】
結果：
図３から分かるように、Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの抽出物は、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓに対する抗菌活性を示す。
【０１０８】
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物の調製
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅのすべての地上部、およびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの葉を、抽出のために使用する。
【０１０９】
一般的手順に従って、ざく切りした７０ｇのＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅと、ざく切りした３０ｇのＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの葉を、１０００ｍｌの蒸留水中で１時間ボイルする。得られた水抽出物をろ過し、５分間再度ボイルする。得られた抽出物を、直接ボトルに入れる。純粋な液体抽出物の濃度は、３０．５ｍｇ／ｍｌである。その抽出物を、所与の比率でＬＢ培地でさらに希釈する。
【０１１０】
黄色ブドウ球菌の阻止域アッセイ
試験系：
一晩のＭＲＳＡ培養：８ｍｌのＴＢＳ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
試験モデル：ミューラー・ヒントン寒天培地（ＭＨ寒天培地）におけるＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ（ＵＳＡ３００＝ＭＲＳＡ）
試験群：上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物；純粋、１：２および１：４希釈
手順：１００μｌのＭＲＳＡ溶液を、ＭＨ寒天培地で平板培養した。その後、ＭＨ寒天培地にあけた８ｍｍの穴を、所与の濃度の１００μｌの液体抽出物で満たした。３７℃で２２時間後、その穴を、増殖の阻害について光学的に調べた。
ＭＲＳＡ細菌の適用：：１０−３／１．６３×１０５／１００μｌ／寒天培地プレート
【０１１１】
結果：
ＭＲＳＡの増殖の阻害を認めた。Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの純粋な抽出物を使用したとき、ＭＨ寒天培地に２８ｍｍの阻止域を認めた。１：２の希釈（抽出物：ＬＢ培地）で、阻止域は、１９ｍｍであり、１：４の希釈（抽出物：ＬＢ培地）で、阻止域は、１３ｍｍであった。
【０１１２】
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの阻止域アッセイ
試験系：
一晩のＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ培養：８ｍｌのＬＢ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪、ＬＢ培地において１：１００で希釈
試験モデル：ミューラー・ヒントン寒天培地（ＭＨ寒天培地）におけるＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ
試験群：上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物；純粋
手順：１００μｌのＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ溶液を、ＭＨ寒天培地で平板培養した。その後、ＭＨ寒天培地にあけた８ｍｍの穴を、所与の濃度の１００μｌの液体抽出物で満たした。３７℃で２２時間後、その穴を、増殖の阻害について光学的に調べた。
【０１１３】
結果：
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの増殖の阻害を認めた。ＭＨ寒天培地に１０ｍｍの阻止域を認めた。
【０１１４】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａの阻止域のアッセイ
試験系：
一晩のＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ培養：８ｍｌのＬＢ培地において１０μｌ、２２時間、２７℃、振盪、ＬＢ培地において１：１０００で希釈
試験モデル：ミューラー・ヒントン寒天培地（ＭＨ寒天培地）におけるＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ
試験群：上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物；純粋、１：２希釈
手順：１００μｌのＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ溶液を、ＭＨ寒天培地で平板培養した。その後、ＭＨ寒天培地にあけた８ｍｍの穴を、所与の濃度の１００μｌの液体抽出物で満たした。２７℃で２２時間後、その穴を、増殖の阻害について光学的に調べた。
【０１１５】
結果：
Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａの増殖の阻害を認めた。Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの純粋な抽出物を使用したとき、ＭＨ寒天培地に１４ｍｍの阻止域を認めた。１：２の希釈（抽出物：ＬＢ培地）で、阻止域は１０ｍｍであった。
【０１１６】
液体抽出物によるＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの増殖曲線
試験系：
一晩のＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの培養：８ｍｌのＬＢ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
試験モデル：ミューラー・ヒントン寒天培地（ＭＨ寒天培地）におけるＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ
１０ｍｌの混合物を、以下の通りに調製した：
ａ）ＬＢ培地
ｂ）ＬＢ培地＋５０μｌのＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ
ｃ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（４：１）
ｄ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（４：１）＋５０μｌのＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ。
手順：これらの混合物５０μｌを、測光キュベット中で４５０μｌのＬＢ培地で希釈し、ＯＤ測定を、０時間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、２４時間、４８時間後に６００ｎｍにて行った。
【０１１７】
結果：
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物は、４８時間をも超える長時間にわたりＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍの増殖を強力に阻害する。
【０１１８】
液体抽出物による、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの増殖曲線
試験系：
一晩のＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ培養：８ｍｌのＬＢ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
１０ｍｌの混合物を、以下の通りに調製した：
ａ）ＬＢ培地
ｂ）ＬＢ培地＋５０μｌのＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ
ｃ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（２：１）
ｄ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（４：１）
ｅ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（２：１）＋５０μｌのＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ
ｆ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（４：１）＋５０μｌのＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ。
手順：これらの混合物１００μｌを、測光キュベット中で９００μｌのＬＢ培地で希釈し、ＯＤ測定を、０時間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、２４時間、４８時間後に６００ｎｍにて行った。
【０１１９】
結果：
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物を１：２の希釈で使用した場合、その液体抽出物は、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａの増殖を約８時間阻害する。その液体抽出物は、１：４の希釈では８時間後に細菌増殖を強力に阻害する。
【０１２０】
液体抽出物によるＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａの増殖曲線
試験系：
一晩のＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａの培養：８ｍｌのＬＢ培地において１０μｌ、２２時間、２７℃、振盪
１０ｍｌの混合物を以下の通り調製した：
ａ）ＬＢ培地
ｂ）ＬＢ培地＋５０μｌのＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ
ｃ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（２：１）
ｄ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（４：１）
ｅ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（２：１）＋５０μｌのＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ
ｆ）ＬＢ培地＋上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物（４：１）＋５０μｌのＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ。
手順：これらの混合物１００μｌを、測光キュベット中で９００μｌのＬＢ培地で希釈し、ＯＤ測定を、０時間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、２４時間、４８時間後に６００ｎｍにて行った。
【０１２１】
結果：
Ｏｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物は、両方の希釈でＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａの増殖を約８時間阻害する。
【０１２２】
ＭＩＣ５０アッセイ
ＭＩＣ５０値は、５０％の微生物の増殖を阻害するのに必要とされる最小阻害濃度を示す。
【０１２３】
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍのＭＩＣ５０アッセイ
試験系：
一晩のＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ培養：８ｍｌのＬＢ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
試験群：上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物；純粋、１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２、１：６４、および１：１２８（ＬＢ培地中で希釈）
手順：９ｍｌのＬＢ培地に、一晩の培養物を１ｍｌ播種し、光度計で０．５から０．６の間のＯＤ６００が測定されるまで、撹拌器中、３７℃でインキュベートした。細菌を、Ｎｅｕｂａｕｅｒ  Ｚａｈｌｋａｍｍｅｒで計数し、２５×１０５／ｍｌ培地へと希釈した。上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物２ｍｌ（純粋、ＬＢ培地で１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２、１：６４、および１：１２８に希釈）に、２００μｌ（約５×１０５）のＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍを播種した。細菌を含まない液体抽出物の希釈物ならびに２ｍｌのＬＢ培地または細菌を含むＬＢ培地を、対照として供した。撹拌器中、３７℃で１９時間インキュベーション。その混合物を測光キュベット中で１：１０に希釈し、ＯＤを６００ｎｍで決定した。
【０１２４】
結果：
ＭＩＣ５０に達した平均希釈は、１：９（抽出物：ＬＢ培地）である。
【０１２５】
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａのＭＩＣ５０アッセイ
試験系：
一晩のＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ培養：８ｍｌのＬＢ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
試験群：上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物；純粋、１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２、１：６４、１：１２８、１：２５６、１：５１２（ＬＢ培地中で希釈）
手順：９ｍｌのＬＢ培地に、一晩の培養物を１ｍｌ播種し、光度計で０．５から０．６の間のＯＤ６００が測定されるまで、撹拌器中、３７℃でインキュベートした。細菌を、Ｎｅｕｂａｕｅｒ  Ｚａｈｌｋａｍｍｅｒで計数し、２５×１０５／ｍｌ培地へと希釈した。上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物２ｍｌ（純粋、ＬＢ培地で１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２、１：６４、１：１２８、１：２５６、１：５１２に希釈）に、２００μｌ（約５×１０５）のＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａを播種した。細菌を含まない液体抽出物の希釈物ならびに２ｍｌのＬＢ培地または細菌を含むＬＢ培地を、対照として供した。撹拌器中、３７℃で１９時間インキュベーション。その混合物を、測光キュベット中で１：１０に希釈し、ＯＤを６００ｎｍで決定した。
【０１２６】
結果：
ＭＩＣ５０に達した平均希釈は、１：７０（抽出物：ＬＢ培地）である。
【０１２７】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａのＭＩＣ５０アッセイ
試験系：
一晩のＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ培養：８ｍｌのＬＢ培地において１０μｌ、２２時間、２７℃、振盪
試験群；上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物；純粋、１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２、１：６４、１：１２８、１：２５６、１：５１２（ＬＢ培地中で希釈）
手順：９ｍｌのＬＢ培地に、一晩の培養物を１ｍｌ播種し、光度計で０．５から０．６の間のＯＤ６００が測定されるまで、撹拌器中、３７℃でインキュベートした。細菌を、Ｎｅｕｂａｕｅｒ  Ｚａｈｌｋａｍｍｅｒで計数し、２５×１０５／ｍｌ培地へと希釈した。上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物２ｍｌ（純粋、ＬＢ培地で１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２、１：６４、１：１２８、１：２５６、１：５１２に希釈）に、２００μｌ（約５×１０５）のＹｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａを播種した。細菌を含まない液体抽出物の希釈物ならびに２ｍｌのＬＢ培地または細菌を含むＬＢ培地を、対照として供した。撹拌器中、２７℃で１９時間インキュベーション。その混合物を、測光キュベット中で１：１０に希釈し、ＯＤを６００ｎｍで決定した。
【０１２８】
結果：
ＭＩＣ５０に達した平均希釈は、１：５０（抽出物：ＬＢ培地）である。
【０１２９】
黄色ブドウ球菌のＭＩＣ５０アッセイ
試験系：
一晩のＭＲＳＡの培養：８ｍｌのＬＢ培地において１０μｌ、２２時間、３７℃、振盪
試験群；上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物；純粋、１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２、１：６４、１：１２８、１：２５６、１：５１２（ＬＢ培地中で希釈）
手順：９ｍｌのＬＢ培地に、一晩の培養物を１ｍｌ播種し、光度計で０．５から０．６の間のＯＤ６００が測定されるまで、撹拌器中、３７℃でインキュベートした。細菌を、Ｎｅｕｂａｕｅｒ  Ｚａｈｌｋａｍｍｅｒで計数し、２５×１０５／ｍｌ培地へと希釈した。上記のＯｒｉｇａｎｕｍ  ｖｕｌｇａｒｅおよびＲｉｂｅｓ  ｎｉｇｒｕｍの液体抽出物２ｍｌ（純粋、ＬＢ培地で１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２、１：６４、１：１２８、１：２５６、１：５１２に希釈）に、２００μｌ（約５×１０５）の黄色ブドウ球菌を播種した。細菌を含まない液体抽出物の希釈物ならびに２ｍｌのＬＢ培地または細菌を含むＬＢ培地を、対照として供した。撹拌器中、３７℃で１９時間インキュベーション。その混合物を、測光キュベット中で１：１０に希釈し、ＯＤを６００ｎｍで決定した。
【０１３０】
結果：
ＭＩＣ５０に達した平均希釈は、１：７３（抽出物：ＬＢ培地）である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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