【手続補正書】
【提出日】平成21年11月24日(2009.11.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１）次に示す植物から選択される植物の抽出物と、２）アルカリ土類金属塩と３）アセチル化されていてもよいグルコサミン及び／又はその塩とを含有する、関節炎・関節症の予防又は改善のための経口投与組成物。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiola属）、ウコギ科エゾウコギ（Eleutherococcus senticosus）、シソ科ヒキオコシ（Isodon japonicus  Hara）、トウダイグサ科アカメガシワ（Mallotus japonicus Mueller-Arg）、マメ科セイヨウエビラハギ（Melilotus officinalis）、キク科エキナケア・パリダ（Echinacea pallida）、バラ科サンザシ（Crataegus cuneata）、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）、褐藻類、緑藻類、紅藻類
【請求項２】
前記植物の抽出物は、０．１％溶液において、下記の式で表されるプロテアーゼ阻害作用が、マトリックスメタロプロテアーゼ１３阻害作用について４０％以上であることを特徴とする、請求項１に記載の経口投与組成物。
【数１】
2008156256.tif 000001
【請求項３】
前記アルカリ土類金属は、カルシウムであることを特徴とする、請求項１又は２に記載の経口投与組成物。
【請求項４】
前記アルカリ土類金属塩は、抽出物と複合体化した後、含有させることを特徴とする、請求項１〜３何れか１項に記載の経口投与組成物。
【請求項５】
食品であることを特徴とする、請求項１〜４何れか１項に記載の経口投与組成物。
【請求項６】
次の工程を経て製造されるものであることを特徴とする、請求項１〜５何れか１項に記載の経口投与組成物。
（工程１）サルノコシカケ科カバノアナタケ、ベンケイソウ科コウケイテン、ウコギ科エゾウコギ、シソ科ヒキオコシ、トウダイグサ科アカメガシワ、マメ科セイヨウエビラハギ
、キク科エキナケア・パリダ及びバラ科サンザシ、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）、褐藻類、緑藻類、紅藻類から選択される植物の植物体に抽出溶媒を加え、抽出物を作製する。
（工程２）前記抽出物の０．１％溶液におけるマトリックスメタロプロテアーゼ１３活性阻害作用を測定し、該マトリックスメタロプロテアーゼ１３活性阻害が５０％以上存したものを原料として選択する。
（工程３）工程２で原料として選択された抽出物の水溶液と、アルカリ土類金属塩とを混練りし、揮発分を除去した後、粉砕して製造中間体を作製する。
（工程４）工程３で作製した製造中間体と、アセチル化されていても良いグルコサミン及び／又はその塩と、製剤化の為の任意成分とを用いて製剤を作製する。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
関節炎・関節症について、経年的骨質量の低下により、関節を構成する骨部分の強度が低下し、変形して周囲の神経を刺激することにより、痛みを発したり、周囲の組織を圧迫して炎症を起こしたりして、これが一因になっているケースもあると言われている。この為、カルシウムを補給し骨質量を維持することが、骨強度を維持し、変形を抑制し、以て関節炎・関節症の発症、重篤化を予防できることが既に知られている（例えば、特許文献３、特許文献４、特許文献５を参照）。しかしながら、この効果を詳細に調べると、骨に対する効果の割に関節炎に対する効果が低いことが判明しているが、その原因については詳細が不明である。又、関節炎・関節症に対しては、アセチル化されていても良いグルコサミンの投与により症状の悪化を防いだり、改善を目指す方法もとられている。これは関節炎・関節症の原因の一つに、アセチル化されていても良いグルコサミンの生合成が、分解に追いつかず、不足することが存するためで、不足するアセチル化されていても良いグルコサミンを投与し、補うことにより関節炎・関節症が改善出来ると言われている（例えば、特許文献６、特許文献７、特許文献８を参照）。しかしながら、アセチル化されていても良いグルコサミンの投与により、生体内のアセチル化されていても良いグルコサミン量が高まっているにもかかわらず、関節炎・関節症が改善しない場合も存し、その原因の究明も求められていた。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
一方、関節炎・関節症に関しては、マトリックスメタロプロテアーゼ（以下ＭＭＰと称することもある）が関与していることは既に知られている（例えば、特許文献９、特許文献１０を参照）。しかしながら、サルノコシカケ科カバノアナタケ、ベンケイソウ科コウケイテン、ウコギ科エゾウコギ、シソ科ヒキオコシ、トウダイグサ科アカメガシワ、マメ科セイヨウエビラハギ、キク科エキナケア・パリダ及びバラ科サンザシ、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）、褐藻類、緑藻類、紅藻類から選択される植物の植物体の抽出物にＭＭＰ活性阻害作用を有する物質が含まれていることも全く知られていなかった。更に、前記抽出物とカルシウムなどのアルカリ土類金属塩とアセチル化されていても良いグルコサミンとをともに含有させた経口投与組成物が、関節症・関節炎の治療乃至は予防に有用なことも全く知られていない。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
この様な状況に鑑みて、本発明者らは、関節炎・関節症の予防と改善に有用な手段を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、サルノコシカケ科カバノアナタケ、ベンケイソウ科コウケイテン、ウコギ科エゾウコギ、シソ科ヒキオコシ、トウダイグサ科アカメガシワ、マメ科セイヨウエビラハギ、キク科エキナケア・パリダ及びバラ科サンザシ、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）、褐藻類、緑藻類、紅藻類から選択される植物の植物体の抽出物を共存させることにより、カルシウムなどのアルカリ土類金属塩やアセチル化されていても良いグルコサミンの関節炎に対する作用が向上し、且つ、ＭＭＰ１３抑制作用による、関節炎・関節症の治療・予防効果も発現し、関節炎・関節症に顕著な作用を示すことを見いだし、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は以下に示すとおりである。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
（１）１）次に示す植物から選択される植物の抽出物と、２）アルカリ土類金属塩と３）アセチル化されていてもよいグルコサミン及び／又はその塩とを含有する、関節炎・関節症の予防又は改善のための経口投与組成物。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiola属）、ウコギ科エゾウコギ（Eleutherococcus senticosus）、シソ科ヒキオコシ（Isodon japonicus Hara）、トウダイグサ科アカメガシワ（Mallotus japonicus Mueller-Arg）、マメ科セイヨウエビラハギ（Melilotus officinalis）、キク科エキナケア・パリダ（Echinacea pallida）、バラ科サンザシ（Crataegus cuneata）、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）、褐藻類、緑藻類、紅藻類
（２）前記植物の抽出物は、０．１％溶液において、下記の式で表されるプロテアーゼ阻害作用が、マトリックスメタロプロテアーゼ１３阻害作用について４０％以上であることを特徴とする、請求項１に記載の経口投与組成物。
【数１】
2008156256.tif 000002
（３）前記アルカリ土類金属は、カルシウムであることを特徴とする、（１）又は（２）に記載の経口投与組成物。
（４）前記アルカリ土類金属塩は、抽出物と複合体化した後、含有させることを特徴とする、（１）〜（３）何れか１項に記載の経口投与組成物。
（５）食品であることを特徴とする、（１）〜（４）何れか１項に記載の経口投与組成物。
（６）次の工程を経て製造されるものであることを特徴とする、（１）〜（５）何れか１項に記載の経口投与組成物。
（工程１）サルノコシカケ科カバノアナタケ、ベンケイソウ科コウケイテン、ウコギ科エゾウコギ、シソ科ヒキオコシ、トウダイグサ科アカメガシワ、マメ科セイヨウエビラハギ、キク科エキナケア・パリダ及びバラ科サンザシ、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）、褐藻類、緑藻類、紅藻類から選択される植物の植物体に抽出溶媒を加え、抽出物を作製する。
（工程２）前記抽出物の０．１％溶液におけるマトリックスメタロプロテアーゼ１３活性阻害作用を測定し、該マトリックスメタロプロテアーゼ１３活性阻害が５０％以上存した
ものを原料として選択する。
（工程３）工程２で原料として選択された抽出物の水溶液と、アルカリ土類金属塩とを混練りし、揮発分を除去した後、粉砕して製造中間体を作製する。
（工程４）工程３で作製した製造中間体と、アセチル化されていても良いグルコサミン及び／又はその塩と、製剤化の為の任意成分とを用いて製剤を作製する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
（１）本発明の経口投与組成物の必須成分である抽出物
本発明の経口投与組成物は、次に示す植物の抽出物を必須成分として含有することを特徴とする。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiola属）、ウコギ科エゾウコギ（Eleutherococcus senticosus）、シソ科ヒキオコシ（Isodon japonicus Hara）、トウダイグサ科アカメガシワ（Mallotus japonicus Mueller-Arg）、マメ科セイヨウエビラハギ（Melilotus officinalis）、キク科エキナケア・パリダ（Echinacea pallida）、バラ科サンザシ（Crataegus cuneata）、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）、褐藻類、緑藻類、紅藻類
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
斯くして得られた抽出物は、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害活性、特に、マトリックスメタロプロテアーゼ１３（ＭＭＰ１３）阻害作用に優れ、これにより、関節炎・関節症を緩和したり、関節炎・関節症が悪化するのを防ぐ作用を有する。加えて、カルシウムなどの吸収を高め、関節などにおける、骨吸収等による関節の骨損失を抑え、関節変形からの炎症発現を抑制し、これらの相乗作用により、関節炎・関節症の発症予防、悪化予防、症状改善効果を奏する。この様な作用を発揮するためには、これらの抽出物は、一日あたり１０〜１００００ｍｇを１回乃至は数回に分けて、経口経路で投与されることが好ましい。この時留意すべきことは、ＭＭＰ１３阻害活性が、抽出物の０．１％溶液において、４０％以上存することを確認することである。阻害活性は既存のＭＭＰ１３阻害活性測定用のキット、例えば、フナコシ薬品株式会社から販売されている、「MMP13 Colorimetric Assay Kit (AK-412)」等を用い、測定することが出来る。阻害活性は、（１−検体存在下のプロテアーゼの反応速度／検体非存在下でのプロテアーゼの反応速度）×１００の式で算出される。前記のＭＭＰ１３の阻害活性が４０％を下回るときには、前記作用を発現しない場合が存する。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
（３）本発明の経口投与組成物の必須成分であるアセチル化されていてもよいグルコサミン
本発明の経口投与組成物は、アセチル化されていても良いグルコサミンを必須成分として含有することを特徴とする。グルコサミンは既に試薬品としても、或いは、食品用の原
料としても市販されているものが存し、この様なグルコサミンを購入し使用することが出来る。グルコサミンの基源としては、例えば、エビ、カニなどの甲殻類が好ましく例示できる。グルコサミンをアセチル化する方法は、常法に従えば良く、例えば、トリエチルアミンやピリジンなどを溶媒に用い、アセチルクロライドを等量乃至若干過剰に反応させればよい。アセチル化グルコサミンはこの様に調整して使用することも出来るし、既に市販されている試薬や食品用の原料を購入して利用することも出来る。この様な市販品としては、例えば、グルコサミンである商品名『ナチュラルグルコサミン』やＮ−アセチルグルコサミンである商品名『マリンスウィート』（いずれも焼津水産化学工業株式会社販売）などが好適に例示できる。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
（３）本発明の経口投与組成物
本発明の経口投与組成物は、前記必須成分を含有し、関節炎・関節症用のものであることを特徴とする。本発明の経口投与組成物としては、経口投与される特徴を備えていれば特段の限定無く、例えば、経口投与医薬組成物、食品、飲み物などが好適に例示できる。この中では、食品が特に好ましく、中でも特定の機能を期待される特定保健用食品などの食品が特に好ましい。本発明の経口投与組成物には、前記の必須成分以外に、通常食品組成物で使用される任意成分を含有することが出来る。前記製剤化のための任意成分としては、例えば、乳糖、デキストリン、シクロデキストリンなどの賦形剤、デンプン、セルロースなどの崩壊剤、ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアガムなどの結合剤、ペクチン、レシチンなどの乳化・分散剤、白糖、蜂蜜、麦芽糖などの矯味剤、シェラック、ゼラチンなどの被覆剤などが好適に例示できる。かかる必須成分と任意成分とを常法に従って、錠剤、散剤、顆粒剤、菓子等に加工することにより、本発明の経口投与組成物は製造できる。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
＜参考例＞
製造例で作製した抽出物１〜２１について、ＭＭＰ１３阻害作用を指標に本発明の必須成分として使用可能か否かを検討した。各サンプルの０．１質量％水溶液（抽出物１のみ０．０１質量％）を用い、ＭＭＰ１３阻害活性は「ＭＭＰ１３  Colorimetric Assay Kit
(AK-412)」を用いて測定した。結果を阻害率（％）として表１に示す。これより、抽出物１９の分画物の一部を除いては、何れの抽出物も０．１質量％でＭＭＰ１３阻害活性が４０％以上であることがわかる。従って、１９−１、１９−３、１９−４、１９−８以外は、何れの抽出物も本発明の経口投与組成物として好適であることが判明した。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５３】
前記の参考例でＭＭＰ１３活性阻害を測定した抽出物を用いて、下記の表２の処方に従って、本発明の経口投与組成物である、食品（錠剤）を作製した。即ち、イの成分４０質
量部に５０質量部の水を加え、擂壊機で１０分間混練りし、これを凍結乾燥し、再び擂壊機に戻し、粉砕し、これを他の成分とともに「ニューマルメライザー」（不二パウダル株式会社製）に仕込み、送風攪拌下、水１００ｍｌを噴霧し、造粒し、４０℃の温風を３時間送風して、乾燥させ、これを打錠して、錠剤１（１００ｍｇ）を得た。同様に、抽出物１９−２を表１におけるＭＭＰ１３阻害活性が３０％である抽出物１９−３に置換した比較例１、抽出物１９−２をデキストリンに置換したプラシーボ１、リン酸カルシウムをデキストリンに置換したプラシーボ２、「ナチュラルグルコサミン」をデキストリンに置換したプラシーボ３も同様に作製した。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
＜試験例１＞
関節炎・関節症に悩む人２５人を選抜して、５人ずつ５群に分け、１群には錠剤１を、１群には比較例１を、１群にはプラシーボ１を、１群にはプラシーボ２を、残る１群にはプラシーボ３を渡し、６０日間朝晩２錠ずつ摂取してもらい、その後に関節炎・関節症の改善度を、著しく改善した、明らかに改善した、わずかに改善した、殆ど改善しない、変わらない、悪化した、のカテゴリーに分けてどれであったかをアンケートにて答えてもらった結果を表３に示す。これより、本発明の経口投与組成物は関節炎・関節症の改善効果に優れることがわかる。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
錠剤１と同様に下記の表４の処方に従って、本発明の経口投与組成物である錠剤２（食品）を製造した。このものを関節炎・関節症に悩む人に３０日間朝晩２錠ずつ摂取してもらったところ、関節炎・関節症は快方に向かった。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
錠剤１と同様に下記の表５の処方に従って、本発明の経口投与組成物である錠剤３（食品）を製造した。このものを関節炎・関節症に悩む人に３０日間朝晩２錠ずつ摂取してもらったところ、関節炎・関節症は快方に向かった。