【手続補正書】
【提出日】平成22年9月30日(2010.9.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造ＣＤＲＬ１−ＣＤＲＬ２−ＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸であって、ここで、
（ｉ）ＣＤＲＬ１が、配列番号１８（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）ＣＤＲＬ２が、配列番号１９（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含み、そして
（ｉｉｉ）ＣＤＲＬ３が、配列番号２０（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含む、
単離された核酸。
【請求項２】
ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２およびＣＤＲＬ３が、ヒトまたはヒト化免疫グロブリンフレームワーク領域の間に挿入される、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項３】
前記ヌクレオチド配列が、配列番号１７３（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ１−３９．１  カッパ軽鎖可変領域）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域をコードする、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項４】
前記ヌクレオチド配列が、配列番号１７７（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ１−３９．１＋カッパ定常（Ｋｍ（３）アロタイプ（対立遺伝子２））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域をコードする、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項５】
構造ＣＤＲＨ１−ＣＤＲＨ２−ＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸であって、ここで、
（ｉ）ＣＤＲＨ１が、配列番号１５（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含み、
（ｉｉ）ＣＤＲＨ２が、配列番号２０３（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５−５１．１）のアミノ酸配列を含み、そして
（ｉｉｉ）ＣＤＲＨ３が、配列番号１７（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含む、
単離された核酸。
【請求項６】
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２およびＣＤＲＨ３が、ヒトまたはヒト化免疫グロブリンフレームワーク領域の間に挿入される、請求項５に記載の単離された核酸。
【請求項７】
前記ヌクレオチド配列が、配列番号１６９（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５−５１．１重鎖可変領域）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域をコードする、請求項５に記載の単離された核酸。
【請求項８】
前記ヌクレオチド配列が、配列番号１７１（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５−５１．１＋ＩｇＧ１定常（Ｇ１ｍ（１７，１）アロタイプ））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖配列をコードする、請求項５に記載の単離された核酸。
【請求項９】
前記ヌクレオチド配列が、配列番号２１０（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５−５１．１＋ＩｇＧ１定常Ｇ１ｍ（３）アロタイプ（対立遺伝子２））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖配列をコードする、請求項５に記載の単離された核酸。
【請求項１０】
請求項１に記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項１１】
請求項５に記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項１２】
請求項１に記載の核酸をさらに含む、請求項１１に記載の発現ベクター。
【請求項１３】
請求項１０に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１４】
請求項１１に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１５】
請求項１２に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１６】
請求項１０に記載の発現ベクターをさらに含む、請求項１４に記載の宿主細胞。
【請求項１７】
免疫グロブリン重鎖可変領域または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを作製する方法であって、該方法は、以下：
（ａ）請求項１３または１４に記載の宿主細胞を、該宿主細胞が該免疫グロブリン重鎖可変領域または該免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを発現する条件下で増殖させる工程；および
（ｂ）該免疫グロブリン重鎖可変領域または該免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを精製する工程
を包含する、方法。
【請求項１８】
ヒト肝細胞成長因子（ＨＧＦ）に結合するモノクローナル抗体または該抗体の抗原結合フラグメントを作製する方法であって、該方法は、以下：
（ｉ）請求項１５または１６に記載の宿主細胞を、前記免疫グロブリン重鎖可変領域を含むポリペプチドと、前記免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドの発現を可能にする条件下で増殖させ、それによって、該抗体または該抗体の抗原結合フラグメントを産生させる工程；および
（ｉｉ）該抗体または該抗体の抗原結合フラグメントを精製する工程
を包含する、方法。
【請求項１９】
腫瘍細胞の増殖を抑制または低下させるための組成物であって、該組成物は、ヒト肝細胞成長因子（ＨＧＦ）に結合する抗体または該抗体の抗原結合フラグメントの、該腫瘍細胞の増殖を抑制または低下させるために有効な量を含み、該抗体は、以下：
（ｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号２０のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む、免疫グロブリン軽鎖可変領域；ならびに
（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号１７のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む、免疫グロブリン重鎖可変領域
を含む、組成物。
【請求項２０】
哺乳動物において腫瘍の成長を抑制または低減させるための組成物であって、該組成物は、ヒト肝細胞成長因子（ＨＧＦ）に結合する抗体または該抗体の抗原結合フラグメントの、該腫瘍の成長を抑制または低減させるために有効な量を含み、該抗体は、以下：
（ｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号２０のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；ならびに
（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号１７のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域
を含む、組成物。
【請求項２１】
哺乳動物において腫瘍を処置するための組成物であって、該組成物は、ヒト肝細胞成長因子（ＨＧＦ）に結合する抗体または該抗体の抗原結合フラグメントの有効量を含み、該抗体は、以下：
（ｉ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号２０のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；ならびに
（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号１７のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域
を含む、組成物。
【請求項２２】
前記抗体が、配列番号１７３のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域および配列番号１６９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域または該抗体の抗原結合フラグメントを含む、請求項１９〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２３】
前記抗体が、配列番号１７７の免疫グロブリン軽鎖および配列番号１７１の免疫グロブリン重鎖または該抗体の抗原結合フラグメントを含む、請求項１９〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２４】
ヒト肝細胞成長因子（ＨＧＦ）に結合する単離された結合タンパク質であって、該結合タンパク質は、以下：
（ａ）（ｉ）配列番号１８（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号１９（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号２０（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；および
（ｉｉ）配列番号１５（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号１６（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号１７（２Ｂ８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；ならびに
（ｂ）（ｉ）配列番号８（１Ａ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号９（１Ａ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号１０（１Ａ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；および
（ｉｉ）配列番号５（１Ａ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号６（１Ａ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号７（１Ａ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；
（ｃ）（ｉ）配列番号３８（３Ｂ６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号３９（３Ｂ６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号４０（３Ｂ６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；および
（ｉｉ）配列番号３５（３Ｂ６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号３６（３Ｂ６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号３７（３Ｂ６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；
（ｄ）（ｉ）配列番号５８（１Ｄ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号５９（１Ｄ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号６０（１Ｄ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；および
（ｉｉ）配列番号５５（１Ｄ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号５６（１Ｄ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号５７（１Ｄ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；ならびに
（ｅ）（ｉ）配列番号６８（１Ｆ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号６９（１Ｆ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号７０（１Ｆ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域；および
（ｉｉ）配列番号６５（１Ｆ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号６６（１Ｆ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号６７（１Ｆ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域
からなる群より選択される免疫グロブリン軽鎖可変領域および免疫グロブリン重鎖可変領域を含む、単離された結合タンパク質。
【請求項２５】
前記相補性決定領域（ＣＤＲ）の配列が、ヒトまたはヒト化フレームワーク配列の間に挿入される、請求項２４に記載の結合タンパク質。
【請求項２６】
ヒト肝細胞成長因子（ＨＧＦ）に結合する単離された結合タンパク質であって、該結合タンパク質は、以下：
（ａ）配列番号４（１Ａ３）の残基２１−１２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域、および
配列番号２（１Ａ３）の残基２０−１４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；
（ｂ）配列番号３４（３Ｂ６）の残基２３−１２９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域、および
配列番号３２（３Ｂ６）の残基２０−１３９のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；
（ｃ）配列番号５４（１Ｄ３）の残基２１−１２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域、および
配列番号５２（１Ｄ３）の残基２０−１４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；
（ｄ）配列番号６４（１Ｆ３）の残基２１−１２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域、および
配列番号６２（１Ｆ３）の残基２０−１４１のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；
（ｅ）配列番号１４（２Ｂ８）の残基２１−１２７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域、および
配列番号１２（２Ｂ８）の残基２０−１３７のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；
（ｆ）配列番号１７３（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ１−３９．１軽鎖可変領域）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域および配列番号１６５（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５ａ．１重鎖可変領域）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；
（ｇ）配列番号１７９（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ３−１５．１軽鎖可変領域）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域および配列番号１６５（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５ａ．１重鎖可変領域）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域；ならびに
（ｈ）配列番号１７９（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ３−１５．１軽鎖可変領域）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域および配列番号１６９（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５−５１．１重鎖可変領域）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖可変領域
からなる群より選択される免疫グロブリン軽鎖可変領域および免疫グロブリン重鎖可変領域を含む、単離された結合タンパク質。
【請求項２７】
ヒト肝細胞成長因子（ＨＧＦ）に結合する単離された結合タンパク質であって、該結合タンパク質は、以下：
（ａ）配列番号１２５（１Ａ３＋カッパ定常），のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖および配列番号１２３（１Ａ３＋ＩｇＧ１定常）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖；
（ｂ）配列番号１３７（３Ｂ６＋カッパ定常）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖および配列番号１３５（３Ｂ６＋ＩｇＧ１定常）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖；
（ｃ）配列番号１４５（１Ｄ３＋カッパ定常）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖および配列番号１４３（１Ｄ３＋ＩｇＧ１定常）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖；
（ｄ）配列番号１４９（１Ｆ３＋カッパ定常）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖および配列番号１４７（１Ｆ３＋ＩｇＧ１定常）のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖；
（ｅ）配列番号１７７（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ１−３９．１＋カッパ定常（Ｋｍ（３）アロタイプ（対立遺伝子２））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖および配列番号１６７（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５ａ．１＋ＩｇＧ１定常（Ｇ１ｍ（１７，１）アロタイプ））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖；
（ｆ）配列番号１７７（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ１−３９．１＋カッパ定常（Ｋｍ（３）アロタイプ（対立遺伝子２））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖および配列番号２１０（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５−５１．１＋ＩｇＧ１定常Ｇ１ｍ（３）アロタイプ（対立遺伝子２））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖；
（ｇ）配列番号１８１（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ３−１５．１＋カッパ定常（Ｋｍ（３）アロタイプ（対立遺伝子２））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖および配列番号１６７（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５ａ．１＋ＩｇＧ１定常（Ｇ１ｍ（１７，１）アロタイプ））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖；
（ｈ）配列番号１８１（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ３−１５．１＋カッパ定常（Ｋｍ（３）アロタイプ（対立遺伝子２））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖および配列番号１７１（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５−５１．１＋ＩｇＧ１定常（Ｇ１ｍ（１７，１）アロタイプ））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖；ならびに
（ｉ）配列番号１８１（Ｈｕ２Ｂ８  Ｋｖ３−１５．１＋カッパ定常（Ｋｍ（３）アロタイプ（対立遺伝子２））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン軽鎖および配列番号２１０（Ｈｕ２Ｂ８  Ｈｖ５−５１．１＋ＩｇＧ１定常Ｇ１ｍ（３）アロタイプ（対立遺伝子２））のアミノ酸配列を含む免疫グロブリン重鎖
からなる群より選択される免疫グロブリン軽鎖および免疫グロブリン重鎖を含む、単離された結合タンパク質。
【請求項２８】
モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項２９】
請求項２４に記載の免疫グロブリン軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項３０】
請求項２４に記載の免疫グロブリン重鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項３１】
請求項２９および／または請求項３０に記載の核酸配列を含む、発現ベクター。
【請求項３２】
請求項２４に記載の免疫グロブリン軽鎖および／または請求項２４に記載の免疫グロブリン重鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を含む核酸配列を含む、少なくとも１つの発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項３３】
免疫グロブリン重鎖可変領域または免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを作製する方法であって、該方法は、以下：
（ａ）請求項３２に記載の宿主細胞を、該宿主細胞が該免疫グロブリン重鎖可変領域または該免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを発現する条件下で増殖させる工程；および
（ｂ）該免疫グロブリン重鎖可変領域または該免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドを精製する工程
を包含する、方法。
【請求項３４】
ヒト肝細胞成長因子（ＨＧＦ）に結合する結合タンパク質を作製する方法であって、該結合タンパク質は、モノクローナル抗体のようなインタクトな抗体またはその抗原結合フラグメントであって、該方法は、以下：
（ａ）請求項３２に記載の宿主細胞を、該宿主細胞が前記免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むポリペプチドと前記免疫グロブリン重鎖可変領域を含むポリペプチドを発現する条件下で増殖させる工程；および
（ｂ）該抗体または該抗体の抗原結合フラグメントを精製する工程
を包含する、方法。
【請求項３５】
腫瘍細胞の増殖を抑制または低下させるための組成物であって、該組成物は、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の結合タンパク質の、該腫瘍細胞の増殖を抑制または低下させるために有効な量を含む、組成物。
【請求項３６】
哺乳動物において腫瘍の成長を抑制または低減させるための組成物であって、該組成物は、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の結合タンパク質の、該腫瘍の成長を抑制または低減させるために有効な量を含む、組成物。
【請求項３７】
哺乳動物において腫瘍を処置するための組成物であって、該組成物は、請求項２４〜２７のいずれか１項に記載の結合タンパク質の有効量を含む、組成物。