(57)【要約】慢性腎疾患に伴う骨ミネラル代謝異常または原発性副甲状腺機能亢進症もしくは二次性副甲状腺機能亢進症に起因する他の障害に罹患している被験体を処置するための方法が記載されている。当該方法は、血液透析を受けている患者における血清副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）レベルおよびカルシウムレベルを低下させることにおいて有効である。本明細書に記載の方法は、腎疾患の進行を遅らせることおよび腎機能を保持することにおいても有効である。当該記載の方法において使用される組成物も提供され、これはカルシウム感知受容体（ＣａＳＲ）のアゴニストとして機能するカルシウム模倣薬を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体における慢性腎疾患に伴う骨ミネラル代謝異常（ＣＫＤ−ＭＢＤ）を処置するための方法であって、
一般式：
Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７
（式中、
Ｘ１はチオール含有基を含むサブユニットであり；
Ｘ５はカチオン性サブユニットであり；
Ｘ６は非カチオン性サブユニットであり；
Ｘ７はカチオン性サブユニットであり；
Ｘ２、Ｘ３およびＸ４のうちの少なくとも２つは、独立して、カチオン性サブユニットである）
を含む治療有効量のカルシウム模倣薬を投与する工程を含む方法。
【請求項２】
前記カルシウム模倣薬がペプチドである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記カルシウム模倣薬がＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記被験体が透析前である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記被験体が病期第３期または病期第４期の慢性腎疾患と診断されている、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記障害が尿毒症を特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記障害が副甲状腺過形成を特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記障害が軟部組織石灰化を特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記障害が腎不全を特徴とする、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本願は、２０１１年１１月１０日に出願された米国仮特許出願第６１／５５８，３８９号の利益を主張し、この米国仮特許出願の全体は、本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
配列表への参照
配列表が、テキストファイルの形で、２０１２年１１月１２日に作成され、「６３２００８０２２ＷＯ００．ｔｘｔ」（８５，４００バイト）という名称で、ＥＦＳにより電子的に提出された。この配列表の内容は、その全体が本明細書中に参考として援用される。
【０００３】
技術分野
本開示は、カルシウム模倣薬、ＣａＳＲアゴニストを含む薬学的組成物および患者の処置においてそれらを使用するための方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
背景
カルシウムの恒常性は、それによって体が適切なカルシウムレベルを維持する機構である。このプロセスは高度に制御されていて、カルシウムの骨における吸収、輸送、貯蔵、他の組織における沈着、および排出の間の複雑な相互作用に関与する。ＰＴＨは、血清カルシウムレベルの制御因子であり、骨吸収のプロセスを通じて骨からのカルシウムの放出を増強すること；尿細管からのカルシウムの再吸収を増加させること；および、ビタミンＤの活性型である１，２５−（ＯＨ）２ビタミンＤの産生を増加させることによって腸におけるカルシウムの吸収を増強することによって、血液中のカルシウムの濃度を増加させるように機能する。ＰＴＨは、リンの腎臓からの排出も刺激し、骨からの放出を増加させる。
【０００５】
ＰＴＨの分泌は、副甲状腺細胞の細胞表面上で発現され、細胞外のカルシウムイオン（Ｃａ２＋）の濃度のわずかな変動を検出し、ＰＴＨの分泌を変化させることによって応答するＧタンパク質共役受容体である、カルシウム感知受容体（ＣａＳＲ）によって制御される。Ｃａ２＋によってＣａＳＲが活性化されることにより、数秒から数分に、ＰＴＨの分泌が阻害され、このプロセスは、受容体のプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）リン酸化によって調節され得る。ＣａＳＲは、骨芽細胞および腎臓においても発現され、そこで腎臓のＣａ２＋排出を制御する。
【０００６】
さらに、ＰＴＨは、リンの恒常性を制御する。ＰＴＨは、頂端膜（刷子縁膜）および側底膜の両方における副甲状腺ホルモン受容体１（ＰＴＨＲ１）を刺激する。ＰＴＨＲ１が刺激されることにより、刷子縁膜上の腎臓Ｎａ＋／ホスフェート（ＮａＰｉ−ＩＩａ）共輸送体の内部移行による減少の結果としてホスフェート（Ｐｉ）の尿中排出が増加する。
【０００７】
ＰＴＨは、骨における骨芽細胞および破骨細胞の制御にも関与する。ＰＴＨは、骨吸収および腎臓におけるカルシウムの吸収を増加させることによって、血清Ｃａ２＋を増加させる。ＰＴＨにより骨芽細胞が刺激されてＲＡＮＫリガンド（ＲＡＮＫＬ）が産生し、それがＲＡＮＫ受容体に結合し、破骨細胞が活性化され、骨吸収の増加および血清Ｃａ２＋の増加につながる。オステオプロテゲリン（ＯＰＧ）は、ＲＡＮＫＬに対するおとり受容体であり、骨吸収を遮断する。骨粗鬆症は、破骨細胞による骨吸収および骨芽細胞による骨形成のプロセス間の不均衡によって引き起こされる。
【０００８】
ヒトの体は、およそ１ｋｇのカルシウムを含有し、その９９％が骨に存在する。正常状態下で、循環しているカルシウムイオン（Ｃａ２＋）は、約８〜１０ｍｇ／ｄＬ（すなわち、２．２５〜２．５ｍｍｏｌ／Ｌ；約６００ｍｇ）のレベルにしっかりと維持されている。およそ１ｇの、元素のカルシウム（Ｃａ２＋）が毎日経口摂取されている。この量のうち、およそ１日当たり２００ｍｇが吸収され、１日当たり８００ｍｇが排出される。さらに、およそ１日当たり５００ｍｇが骨吸収によって放出される、または骨中に沈着する。１日当たり約１０ｇのＣａ２＋が腎臓を通して濾過され、その約２００ｍｇが尿中に現れ、残りは再吸収される。
【０００９】
高カルシウム血症は、血液中のカルシウムレベルの上昇である。急性高カルシウム血症は、胃腸の症状（食欲不振、悪心、嘔吐）；腎臓の症状（多尿症、多飲多渇症）、神経筋の症状（うつ病、錯乱、昏迷、昏睡）および心臓の症状（徐脈、第１度房室の）を招く可能性がある。慢性高カルシウム血症は、胃腸の症状（消化不良、便秘、膵炎）；腎臓の症状（腎結石症、腎石灰症）、神経筋の症状（衰弱）および心臓の症状（高血圧ブロック（ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ｂｌｏｃｋ）、ジギタリス感受性）も伴う。心臓のリズムの異常が、結果として生じ得、ＱＴ間隔短縮およびＴ波拡大というＥＫＧ所見により、高カルシウム血症が示唆される。高カルシウム血症は無症候性であり得、症状は一般的には高カルシウムレベル（１２．０ｍｇ／ｄＬまたは３ｍｍｏｌ／ｌ）で起こる。重篤な高カルシウム血症（１５〜１６ｍｇ／ｄＬまたは３．７５〜４ｍｍｏｌ／ｌを超える）は、医学的救急とみなされる：これらのレベルにおいて、昏睡および心停止が、結果として生じ得る。
【００１０】
高カルシウム血症は、副甲状腺機能亢進症によって頻繁に引き起こされ、過剰な骨吸収および血清カルシウムレベルの上昇につながる。原発性孤発性副甲状腺機能亢進症（ｐｒｉｍａｒｙ  ｓｐｏｒａｄｉｃ  ｈｙｐｅｒｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｉｓｍ）では、単独の副甲状腺腫によってＰＴＨが過剰産生される；一般的ではないが、多発性腺腫またはびまん性副甲状腺過形成も原因であり得る。ＰＴＨの分泌が増加することは、Ｃａ２＋およびホスフェート（Ｐｉ）の放出を伴う骨吸収の正味の増加につながる。また、ＰＴＨは腎臓におけるＣａ２＋の再吸収を増強し、ホスフェート（Ｐｉ）の再吸収を阻害し、その結果、血清カルシウムが正味増加し、ホスフェートが減少する。
【００１１】
二次性副甲状腺機能亢進症（ＳＨＰＴ）は、血清Ｃａ２＋レベルが減少することによってＰＴＨの分泌が刺激されると起こる。二次性副甲状腺機能亢進症の１つの原因は、多嚢胞性腎疾患または慢性腎盂腎炎における慢性腎不全などの慢性腎不全（慢性腎疾患またはＣＫＤとも称される）、または血液透析患者における慢性腎不全などの慢性腎不全（末期腎疾患またはＥＳＲＤとも称される）である。不十分なカルシウム摂取、ＧＩ障害、腎不全、ビタミンＤ欠乏症、および腎性高カルシウム尿症から生じる低カルシウム血症に応答して過剰なＰＴＨが産生され得る。三次性副甲状腺機能亢進症は、長期にわたる二次性副甲状腺機能亢進症および高カルシウム血症の後に起こり得る。
【００１２】
ＣＫＤは、進行性の腎機能喪失を特徴とする。Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ’ｓ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｏｕｔｃｏｍｅｓ  Ｑｕａｌｉｔｙ  Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ（ＮＫＦ  ＫＤＯＱＩ（商標））は、ＣＫＤを、腎損傷または＜６０ｍＬ／分／１．７３ｍ２の糸球体濾過速度（ＧＦＲ）が３カ月以上持続することのいずれかと定義している。腎損傷は、血液検査もしくは尿検査または画像診断における異常を含めた病理的な異常または腎損傷のマーカーとして顕在化し得る。
【００１３】
ＣＫＤの最も一般的な原因のうちの２つは高血圧症と真性糖尿病（１型および２型）である。ＣＫＤの他の原因としては、糸球体腎炎、腎盂腎炎、および多嚢胞性疾患が挙げられる。さらに、イブプロフェンおよびアセトアミノフェンを長期にわたって使用することにより、ＣＫＤの別の原因である鎮痛薬ニューロパチー（ａｎａｌｇｅｓｉｃ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）が生じ得る。
【００１４】
ＫＤＯＱＩガイドラインでは、ＣＫＤ患者を推定ＧＦＲのレベルおよび尿中タンパク質の有無に基づいて５つの病期に分ける。病期第１期の患者は腎損傷を有し、ＧＦＲが正常であるまたは高い（≧９０ｍＬ／分／１．７３ｍ２）。病期第２期の患者は腎損傷を有し、ＧＦＲが軽度に減少している（６０〜８９ｍＬ／分／１．７３ｍ２）。病期第３期の患者はＧＦＲが中程度に減少している（３０〜５９ｍＬ／分／１．７３ｍ２）。病期第４期の患者はＧＦＲが重度に減少している（１５〜２９ｍＬ／分／１．７３ｍ２）。病期第５期の患者は腎不全を有する（ＧＦＲ≦１５ｍＬ／分／１．７３ｍ２）。
【００１５】
病期第１期または２期の患者は、一般には、腎臓が損傷を受けていることを示すいかなる症状も有さず、それらの状態は、多くの場合、診断されないままになる。しかし、腎機能が減退し続けるにつれ、過剰量の尿素および通常腎臓によって排出される他の窒素性老廃物が血液中で増大し始め、尿毒症と称される状態に至る。病期第３期の患者では、高血圧症、貧血および／または早期骨量減少などの腎不全の合併症が生じる可能性がより高い。病期第４期の患者では腎損傷が進行しており、心血管系合併症の可能性がより高い。病期第５期のＣＫＤでは末期腎疾患（ＥＳＲＤ）とも称される腎不全に達し、その後、透析または腎移植の処置の選択肢を伴う腎代替療法が行われる。
【００１６】
慢性腎疾患に伴う骨ミネラル代謝異常（ＣＫＤ−ＭＢＤ）は、ＣＫＤおよびＥＳＲＤに関連する複雑な障害であり、血液および骨塩恒常性（カルシウムおよびリン）ならびにビタミンＤ代謝［１，２５（ＯＨ）２Ｄ］の欠陥によりＰＴＨレベルが過剰になる。これらの変化は、病期第３期のＣＫＤ患者および病期第４期のＣＫＤ患者において起こる腎機能の著しい喪失と併せてＣＫＤの初期に始まり、ＣＫＤがＥＳＲＤに進行するにしたがって徐々に悪化する。ＰＴＨレベルの上昇は、さらに、ミネラル不均衡（特にカルシウムおよびリン）を増悪させ、また、これらの患者における罹患率および死亡率の主な原因である（約６６％の５年死亡率）骨異栄養症、血管石灰化、左室肥大および心血管系の事象のリスクの増加を含めた、種々の器官系における病理学的な影響に関連づけられる。
【００１７】
悪性腫瘍は非ＰＴＨ媒介性高カルシウム血症の一般的な原因である。悪性腫瘍の高カルシウム血症は、珍しいが重篤な癌の合併症であり、癌患者の１０％〜２０％に影響を及ぼしており、充実性腫瘍および白血病のどちらとも一緒に起こり得る。この状態は突然発症し、極めて不良な予後を有し、生存期間中央値はたった６週間である。増殖因子（ＧＦ）は、腫瘍細胞における副甲状腺ホルモン関連タンパク質（ＰＴＨｒＰ）の産生を制御する。腫瘍細胞が自己分泌ＧＦによって刺激されてＰＴＨｒＰの産生が増加し、それが骨吸収の増強につながる可能性がある。骨転移性の腫瘍細胞もＰＴＨｒＰを分泌する可能性があり、それにより骨が再吸収され得、追加的なＧＦが放出され、それが今度はパラ分泌的に作用してＰＴＨｒＰ産生をさらに増強する。
経口投与される小分子カルシウム模倣薬であるシナカルセトＨＣｌ（Ｓｅｎｓｉｐａｒ（登録商標））は、米国およびヨーロッパにおいて、透析を受けているＣＫＤ患者におけるＳＨＰＴの処置に関して、および副甲状癌の患者における高カルシウム血症の処置に関して承認された。ペプチドカルシウム模倣薬も記載されている（米国特許公開第２０１１／００２８３９４号および同第２００９／００２３６５２号（どちらもその全体が参照により本明細書に組み込まれる））。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１８】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１１／００２８３９４号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２００９／００２３６５２号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本明細書には、カルシウム模倣薬（時にはＣａＳＲアゴニストと称される）を、それを必要とする被験体に投与するための方法が記載されている。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬を、それを必要とする患者において血清カルシウムレベルの低下における安定かつ長期の有効性がもたらされる投薬レジメンに従って投与する。
【００２０】
簡単な要旨
一態様では、本開示は、被験体において長期にわたるＰＴＨ抑制をもたらすための方法であって、治療有効用量のカルシウム模倣薬を被験体に投与する工程を含む方法を提供する。一般には、被験体はＰＴＨレベルの上昇を特徴とする疾患、障害または状態を有する。いくつかの実施形態では、被験体は二次性副甲状腺機能亢進症を有する。他の実施形態では、被験体は、二次性副甲状腺機能亢進症を有さない。いくつかの実施形態では、被験体はＣＫＤを有する。他の実施形態では、被験体はＣＫＤを有さない。いくつかの実施形態では、ＰＴＨ抑制は、カルシウム模倣薬の最終投薬後１６時間超続く。いくつかの実施形態では、ＰＴＨ抑制は、カルシウム模倣薬の最終投薬後４８時間超続く。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。
【００２１】
一実施形態では、被験体は、尿毒症、副甲状腺過形成、軟部組織石灰化および／または腎不全に罹患している。
【００２２】
一実施形態では、本開示は、被験体における慢性腎疾患に伴う骨ミネラル代謝異常（ＣＫＤ−ＭＢＤ）を処置するための方法を提供する。
【００２３】
一実施形態では、被験体は二次性副甲状腺機能亢進症を有する。別の実施形態では、被験体は、二次性副甲状腺機能亢進症を有さない。
【００２４】
一実施形態では、被験体は透析前である。別の実施形態では、被験体は透析を現在受けている。
【００２５】
一実施形態では、被験体は、病期第３期の慢性腎疾患と診断されている。別の実施形態では、被験体は、病期第４期の慢性腎疾患と診断されている。
【００２６】
別の態様では、本開示は、被験体における副甲状腺の過形成を低下させるための方法であって、治療有効用量のカルシウム模倣薬を被験体に投与する工程を含む方法を提供する。一般には、被験体はＰＴＨレベルの上昇または高カルシウム血症を特徴とする疾患、障害または状態を有する。いくつかの実施形態では、被験体は二次性副甲状腺機能亢進症を有する。他の実施形態では、被験体は、二次性副甲状腺機能亢進症を有さない。いくつかの実施形態では、被験体はＣＫＤを有する。他の実施形態では、被験体はＣＫＤを有さない。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はＰＴＨの長期にわたる抑制をもたらすものである。
【００２７】
別の態様では、本開示は、被験体における軟部組織石灰化を低下させるための方法であって、治療有効用量のカルシウム模倣薬を被験体に投与する工程を含む方法を提供する。一般には、被験体は高カルシウム血症を特徴とする疾患、障害または状態を有する。いくつかの実施形態では、被験体は二次性副甲状腺機能亢進症を有する。他の実施形態では、被験体は、二次性副甲状腺機能亢進症を有さない。いくつかの実施形態では、被験体はＣＫＤを有する。他の実施形態では、被験体はＣＫＤを有さない。一実施形態では、血管石灰化は動脈壁石灰化である。いくつかの実施形態では、血管石灰化は大動脈石灰化である。いくつかの実施形態では、軟部組織石灰化は腎実質石灰化または血管石灰化である。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はＰＴＨの長期にわたる抑制をもたらすものである。
【００２８】
別の態様では、本開示は、被験体における腎機能の減退を遅らせるための方法であって、治療有効用量のカルシウム模倣薬を被験体に投与する工程を含む方法を提供する。関連する態様では、本開示は、被験体における腎機能を保持または改善するための方法であって、治療有効用量のカルシウム模倣薬を被験体に投与する工程を含む方法を提供する。一般には、被験体は血清クレアチニンレベルの上昇を特徴とする疾患、障害または状態を有する。いくつかの実施形態では、被験体は二次性副甲状腺機能亢進症を有する。他の実施形態では、被験体は、二次性副甲状腺機能亢進症を有さない。いくつかの実施形態では、被験体はＣＫＤを有する。他の実施形態では、被験体はＣＫＤを有さない。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はＰＴＨの長期にわたる抑制をもたらすものである。
【００２９】
別の態様では、本開示は、被験体における正常な生理的制御に対する副甲状腺の応答性を増加させるまたは保持するための方法であって、治療有効用量のカルシウム模倣薬を被験体に投与する工程を含む方法を提供する。一般には、被験体は副甲状腺の応答性の減少を特徴とする疾患、障害または状態を有する。いくつかの実施形態では、副甲状腺受容体を増加させるまたは保持する。いくつかの実施形態では、副甲状腺受容体はＣａＳＲである。いくつかの実施形態では、副甲状腺受容体はＦＧＦＲ１である。いくつかの実施形態では、副甲状腺受容体はビタミンＤ受容体である。いくつかの実施形態では、被験体は二次性副甲状腺機能亢進症を有する。他の実施形態では、被験体は、二次性副甲状腺機能亢進症を有さない。いくつかの実施形態では、被験体はＣＫＤを有する。他の実施形態では、被験体はＣＫＤを有さない。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はＰＴＨの長期にわたる抑制をもたらすものである。
【００３０】
別の態様では、本開示は、被験体における慢性腎疾患の進行を遅らせるための方法であって、治療有効用量のカルシウム模倣薬を被験体に投与する工程を含む方法を提供する。関連する実施形態では、本開示は、被験体における慢性腎疾患の進行を維持するまたは逆転させるための方法であって、治療有効用量のカルシウム模倣薬を被験体に投与する工程を含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、被験体は二次性副甲状腺機能亢進症を有する。他の実施形態では、被験体は、二次性副甲状腺機能亢進症を有さない。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はＰＴＨの長期にわたる抑制をもたらすものである。
【００３１】
一実施形態では、被験体において長期にわたるＰＴＨ抑制をもたらすための方法であって、被験体に治療有効量のカルシウム模倣薬を投与する工程を含む方法が提供される。
【００３２】
一実施形態では、ＰＴＨ抑制は、カルシウム模倣薬の最終投薬後１６時間超続く。別の実施形態では、ＰＴＨ抑制は、カルシウム模倣薬の最終投薬後４８時間超続く。
【００３３】
一実施形態では、当該方法は、投与前の血清ＰＴＨ濃度と比較して有効である、被験体におけるＰＴＨを減少させる活性を有する、カルシウム模倣薬の第１の用量を提供する工程と、第１の用量を提供した４８〜９６時間後、４８〜７６時間後または４０〜６５時間後に、カルシウム模倣薬のその後の用量を提供する工程とを含む。別の実施形態では、第１の用量は、投与後３０分以内に血清ＰＴＨ濃度を少なくとも約４０％減少させるために有効である。さらに別の実施形態では、第１の用量は、血清ＰＴＨ濃度の低下を投与後少なくとも４０時間にわたって維持するために有効である。
【００３４】
一実施形態では、投与する工程は、非経口的に投与する工程を含む。別の実施形態では、投与する工程は、３日ごとに投与する工程を含む。
【００３５】
一実施形態では、投与する工程は、血清ＰＴＨ濃度の低下を投与後少なくとも７２時間にわたって維持するために有効である。
【００３６】
一実施形態では、その後の用量を提供する工程は、その後の用量の非経口投与を提供する工程を含む。
【００３７】
一実施形態では、その後の用量を提供する工程は、その後の用量を、第１の用量を提供してから約３日後に提供する工程を含む。
【００３８】
一実施形態では、カルシウム模倣薬の治療有効用量は、約０．５〜１０ｍｇ／ｋｇ、約１〜８ｍｇ／ｋｇ、約２〜７ｍｇ／ｋｇ、約３〜５ｍｇ／ｋｇまたは約１〜５ｍｇ／ｋｇである。別の実施形態では、化合物の用量は、約０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇまたは１０．０ｍｇ／ｋｇである。
【００３９】
別の態様では、本開示は、カルシウム模倣薬を被験体に投与するための投薬レジメンを提供する。いくつかの実施形態では、投薬レジメンは、カルシウム模倣薬の第１の用量を提供する工程と、第１の用量を提供した２４〜９６時間後にカルシウム模倣薬のその後の用量を提供する工程とを含む。いくつかの実施形態では、被験体は二次性副甲状腺機能亢進症を有する。他の実施形態では、被験体は、二次性副甲状腺機能亢進症を有さない。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。いくつかの実施形態では、カルシウム模倣薬はＰＴＨの長期にわたる抑制をもたらすものである。
【００４０】
一実施形態では、カルシウム模倣薬の第１の用量は、被験体におけるＰＴＨを減少させるために有効であり、その減少は第１の用量を投与する前の血清ＰＴＨ濃度と比較したものである。一実施形態では、血清ＰＴＨ濃度は、カルシウム模倣薬を投与した後約２０分以内、２５分以内、３０分以内、３５分以内、または４０分以内に少なくとも約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、または約５５％減少する。別の実施形態では、第１の用量は、血清ＰＴＨ濃度を、カルシウム模倣薬を投与した後約２０分以内、２５分以内、３０分以内、３５分以内、または４０分以内に約２０％〜５０％、２５％〜５０％、約２５％〜４０％、約３０％〜５０％、約３５％〜５０％または約３０％〜４５％減少させるために有効である。
【００４１】
一実施形態では、第１の用量は、投与後少なくとも約２４時間、３０時間、３５時間、４０時間、４５時間、４８時間、５０時間または５５時間にわたって血清ＰＴＨ濃度の低下を維持するために有効な量である。
【００４２】
一実施形態では、カルシウム模倣薬の第１の用量は、約０．５〜１０ｍｇ／ｋｇ、約１〜８ｍｇ／ｋｇ、約２〜７ｍｇ／ｋｇ、約３〜５ｍｇ／ｋｇまたは約１〜５ｍｇ／ｋｇである。別の実施形態では、化合物の用量は約０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇまたは１０．０ｍｇ／ｋｇである。
【００４３】
一実施形態では、カルシウム模倣薬の第１の用量を非経口的に、静脈内にまたは経皮的に投与する。
【００４４】
一実施形態では、カルシウム模倣薬の第１の用量を血液透析の前に投与する。別の実施形態では、第１の用量を血液透析の約６０分前、約３０分前、約１５分前または約５分前に投与する。さらに別の実施形態では、第１の用量を血液透析の約１〜５分前、約１〜１０分前、約５〜１５分前、約１５〜１０分前または約３０〜６０分前に投与する。
【００４５】
一実施形態では、カルシウム模倣薬の第１の用量を血液透析中に投与する。
【００４６】
一実施形態では、カルシウム模倣薬の第１の用量を血液透析が完了した後に投与する。別の実施形態では、第１の用量を、血液透析が完了した約６０分後、約３０分後、約１５分後、または約５分後に投与する。さらに別の実施形態では、第１の用量を、血液透析が完了した約１〜５分後、約１〜１０分後、約５〜１５分後、約１５〜１０分後、約３０〜６０分後、約０．５〜１時間後、約１〜２時間後、約１〜３時間後、約２〜３時間後、または約３〜４時間後に投与する。
【００４７】
一実施形態では、カルシウム模倣薬のその後の用量は、第１の用量を提供した約２４時間〜４８時間後、２４時間〜３６時間後、３６時間〜４８時間後、３６時間〜７２時間後、３８時間〜７２時間後、または４８時間〜９６時間後。
【００４８】
一実施形態では、その後の用量を２日ごと、３日ごと、または４日ごとに投与する。
【００４９】
一実施形態では、カルシウム模倣薬の第１の用量および／またはその後の用量を非経口的に、静脈内にまたは経皮的に投与する。
【００５０】
一実施形態では、処置レジメンは、カルシウム模倣薬を第２の治療剤と組み合わせて投与する工程を含む。
【００５１】
一実施形態では、第２の治療剤はビタミンＤ、ビタミンＤ類似体またはシナカルセト塩酸塩である。
【００５２】
別の実施形態では、カルシウム模倣薬は、カルシウム感知受容体との結合についてシナカルセトと競合しない。
【００５３】
一実施形態では、ペプチドカルシウム模倣薬は、式Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７（式中、Ｘ１はチオール含有基を含むサブユニットであり；Ｘ５はカチオン性サブユニットであり；Ｘ６は非カチオン性サブユニットであり；Ｘ７はカチオン性サブユニットであり；Ｘ２、Ｘ３およびＸ４のうちの少なくとも１つ、好ましくは、２つは、独立して、カチオン性サブユニットであり；  ここで、カルシウム模倣薬は副甲状腺ホルモン濃度を減少させる活性を有する）を含む。
【００５４】
一実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。
【００５５】
一実施形態では、副甲状腺ホルモン濃度の減少は、カルシウム模倣薬を用いて処置された被験体における血液中または血漿中の副甲状腺ホルモン濃度が処置前の被験体における血液中または血漿中の副甲状腺ホルモン濃度と比較して減少することである。別の実施形態では、副甲状腺ホルモン濃度の減少はヒスタミン応答なしに実現される。
【００５６】
別の実施形態では、Ｘ３およびＸ４は、非カチオン性であり、一方Ｘ１、Ｘ５、Ｘ６およびＸ７はカチオン性である。
【００５７】
一実施形態では、Ｘ１サブユニットはチオール含有アミノ酸残基である。別の実施形態では、Ｘ１サブユニットのチオール基は有機チオール含有部分である。
【００５８】
別の実施形態では、Ｘ１サブユニットがチオール含有アミノ酸残基である場合、それはＬ−システイン、Ｄ−システイン、グルタチオン、アセチル化システイン、ホモシステインおよびペグ化システインからなる群から選択される。
【００５９】
さらに別の実施形態では、有機チオール含有部分は、チオールアルキル部分またはチオアシル部分、例えば３−メルカプトプロピルまたは３−メルカプトプロピオニルなど、メルカプトプロピオン酸、メルカプト酢酸、チオベンジル、またはチオプロピルから選択される。さらに別の実施形態では、有機チオール含有部分はメルカプトプロピオン酸である。
【００６０】
さらに別の実施形態では、Ｘ１サブユニットはアセチル基、ベンゾイル基、ブチル基、またはアセチル化されたベータアラニンなどの別のアミノ酸を含むように化学的に修飾されている。
【００６１】
さらに別の実施形態では、Ｘ１サブユニットはチオール部分を含み、Ｘ１サブユニットは第２のチオール部分に共有結合によってつながっている。
【００６２】
別の実施形態では、式Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７はアミノ酸残基の連続した配列（本明細書では（Ｘａａ１）−（Ｘａａ２）−（Ｘａａ３）−（Ｘａａ４）−（Ｘａａ５）−（Ｘａａ６）−（Ｘａａ７）、配列番号１と称される）または有機化合物サブユニット（非アミノ酸残基）の配列で構成される。
【００６３】
別の実施形態では、アミノ酸残基の連続した配列は、Ｌ−アミノ酸残基の連続した配列、Ｄ−アミノ酸残基の連続した配列、Ｌ−アミノ酸残基とＤ−アミノ酸残基の混合物の連続した配列、またはアミノ酸残基と非天然アミノ酸残基の混合物である。
【００６４】
別の実施形態では、アミノ酸残基の連続した配列は、細胞膜を通る輸送を促進するための化合物に連結されている。別の実施形態では、アミノ酸残基の連続した配列は、組織の１つ以上の層の内部への、またはそれを通る配列の送達を増強する化合物に連結されている。
【００６５】
別の実施形態では、アミノ酸残基の連続した配列は、長さが８〜５０アミノ酸残基、８〜４０アミノ酸残基、８〜３０アミノ酸残基または８〜２０アミノ酸残基のアミノ酸残基の配列内に含有される。さらに別の実施形態では、アミノ酸残基の連続した配列は、長さが８〜１９アミノ酸残基、８〜１８アミノ酸残基、８〜１７アミノ酸残基、８〜１６アミノ酸残基、８〜１５アミノ酸残基、８〜１４アミノ酸残基、８〜１３アミノ酸残基、８〜１２アミノ酸残基、８〜１１アミノ酸残基、８〜１０アミノ酸残基、または８〜９アミノ酸残基のアミノ酸残基の配列内に含有される。
【００６６】
別の実施形態では、Ｘ３サブユニットはカチオン性アミノ酸残基である。
【００６７】
別の実施形態では、Ｘ２サブユニットは非カチオン性アミノ酸残基であり、別の実施形態では、Ｘ４サブユニットは非カチオン性アミノ酸残基である。一実施形態では、非カチオン性アミノ酸残基はＤ−アミノ酸である。
【００６８】
別の実施形態では、Ｘ３およびＸ４はカチオン性Ｄ−アミノ酸残基である。
【００６９】
別の実施形態では、Ｘ５サブユニットはＤ−アミノ酸残基である。
【００７０】
別の態様では、任意の当該記載の化合物における連続した配列は、Ｘ１サブユニット内のチオール含有基を介して、第２の連続した配列に共有結合で結合している。例えば、第２の連続した配列は、連続した配列と同一であってよい（二量体が形成される）、または、連続した配列が細胞膜を通って移動するのを促進する部分に結合している場合にそうであるように、非同一であってよい。
【００７１】
別の態様では、ペプチドｃａｒｒｒａｒ（配列番号２）で構成されるカルシウム模倣薬が提供され、該ペプチドは、そのＮ末端残基においてＣｙｓ残基とコンジュゲートしている。
【００７２】
一実施形態では、ペプチドカルシウム模倣薬はＮ末端、Ｃ末端、またはその両方において化学的に改変されている。
【００７３】
別の実施形態では、ペプチドカルシウム模倣薬のＮ末端はアセチル化によって化学的に改変されており、Ｃ末端はアミド化によって化学的に改変されている。
【００７４】
別の実施形態では、ペプチドカルシウム模倣薬はＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）である。
【００７５】
一実施形態では、カルシウム模倣薬の治療有効用量は、約０．５〜１０ｍｇ／ｋｇ、約１〜８ｍｇ／ｋｇ、約２〜７ｍｇ／ｋｇ、約３〜５ｍｇ／ｋｇまたは約１〜５ｍｇ／ｋｇである。別の実施形態では、化合物の用量は、約０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇまたは１０．０ｍｇ／ｋｇである。
【００７６】
一実施形態では、カルシウム模倣薬を非経口的に投与する。別の実施形態では、カルシウム模倣薬を経皮的にまたは皮下に投与する。
【００７７】
本明細書に記載の任意の態様または実施形態では、配列の任意の１つ以上が特許請求の範囲から個々に除外または除去されることが企図される。ある特定の実施形態では、配列番号１６２〜１８２の任意の１つ以上で識別されるペプチドが、個々に、または任意の組み合わせで、特許請求された化合物、組成物および方法から排除される。
【図面の簡単な説明】
【００７８】
【図１】図１は、１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＩＶ）、１０ｍｇ／ｋｇの用量のシナカルセト（ＰＯ）または食塩水（ＩＶ）で処置した５／６Ｎｘラットにおける、最終投薬の６時間後、１６時間後および４８時間後のＰＴＨレベル（投薬前ベースラインからの％変化）を示すグラフである。
【００７９】
【図２−１】図２Ａ〜Ｂは、ＢｒｄＵを使用して染色した組織切片の顕微鏡写真である。切片は、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した５／６Ｎｘラットから（図２Ａ）および無処置の対照から（図２Ｂ）得た副甲状腺組織のものである。
【００８０】
【図２−２】図２Ｃは、処置した５／６Ｎｘラットおよび無処置の５／６Ｎｘラットから得た組織切片におけるＢｒｄＵ陽性細胞の数を比較している、ＢｒｄＵ染色の定量的な結果を提供するグラフである。図２Ｄは、処置した５／６Ｎｘラットおよび無処置の５／６Ｎｘラットからの正規化された副甲状腺の重量を示すグラフである。
【００８１】
【図３Ａ】図３Ａ〜Ｂは、フォンコッサ法を用いてカルシウムについて染色した組織切片の顕微鏡写真である。切片は、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した５／６Ｎｘラットから（図３Ａ）およびビヒクルを与えた対照５／６Ｎｘラットから（図３Ｂ）得た腎臓組織のものである。
【図３Ｂ】図３Ａ〜Ｂは、フォンコッサ法を用いてカルシウムについて染色した組織切片の顕微鏡写真である。切片は、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した５／６Ｎｘラットから（図３Ａ）およびビヒクルを与えた対照５／６Ｎｘラットから（図３Ｂ）得た腎臓組織のものである。
【００８２】
【図３Ｃ】図３Ｃは、原子発光分析法によって測定された、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した５／６Ｎｘラットから（図２Ａ）および無処置の対照から得た大動脈および腎臓の切片の石灰化の定量的な結果を提供するグラフである。
【００８３】
【図４】図４は、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）またはビヒクルで処置した５／６Ｎｘラットにおける血清クレアチニン（ｓＣｒ）レベルのパーセント変化を示すグラフである。
【００８４】
【図５Ａ】図５Ａ〜Ｃはそれぞれ、ＣａＳＲ、ＦＧＦＲ１およびＶＤＲについてそれぞれ染色した組織切片の顕微鏡写真ならびに定量的な結果（総面積の％）を提供するグラフを含む図である。切片は、正常ラットから、および３ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）またはビヒクルで処置した５／６Ｎｘラットから得た副甲状腺組織のものである。
【図５Ｂ】図５Ａ〜Ｃはそれぞれ、ＣａＳＲ、ＦＧＦＲ１およびＶＤＲについてそれぞれ染色した組織切片の顕微鏡写真ならびに定量的な結果（総面積の％）を提供するグラフを含む図である。切片は、正常ラットから、および３ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）またはビヒクルで処置した５／６Ｎｘラットから得た副甲状腺組織のものである。
【図５Ｃ】図５Ａ〜Ｃはそれぞれ、ＣａＳＲ、ＦＧＦＲ１およびＶＤＲについてそれぞれ染色した組織切片の顕微鏡写真ならびに定量的な結果（総面積の％）を提供するグラフを含む図である。切片は、正常ラットから、および３ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）またはビヒクルで処置した５／６Ｎｘラットから得た副甲状腺組織のものである。
【００８５】
【図６】図６Ａは、投薬レジメンを要約した概略図である。図６Ｂは、図６Ａにおいて要約されている投薬レジメンに従って０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇおよび３ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）で処置した５／６Ｎｘラットにおける、１週間のウォッシュアウトウォッシュアウト期間後の血漿ＰＴＨレベル（ｐｇ／ｍＬ）を示すグラフである。
【００８６】
【図７】図７は、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）（ＳＣ）またはビヒクル（ＳＣ）で処置したアデニン誘発性慢性腎不全のラットにおける、投薬前、および処置の２週間後および４週間後のＰＴＨレベル（ｐｇ／ｍＬ）を正常ラット（アデニンなし）のものと比較して示すグラフである。
【００８７】
【図８】図８は、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）（ＳＣ）またはビヒクル（ＳＣ）で処置したアデニン誘発性慢性腎不全のラットにおける処置の４週間後のＳＣｒ（ｍｇ／ｄＬ）を、正常ラット（アデニンなし）のものと比較して示すグラフである。
【００８８】
【図９】図９は、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）（ＳＣ）またはビヒクル（ＳＣ）で処置したアデニン誘発性慢性腎不全のラットにおける、処置の４週間後の血清リン（Ｐ）（ｍｇ／ｄＬ）を正常ラット（アデニンなし）のものと比較して示すグラフである。
【００８９】
【図１０】図１０は、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）（ＳＣ）またはビヒクル（ＳＣ）で処置したアデニン誘発性慢性腎不全のラットにおける、処置の４週間後の総Ｃａ（ｍｇ／ｄＬ）を正常ラット（アデニンなし）のものと比較して示すグラフである。
【００９０】
【図１１】図１１は、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）（ＳＣ）またはビヒクル（ＳＣ）で処置したアデニン誘発性慢性腎不全のラットにおける、処置の４週間後のＣａおよびＰの生成物を正常ラット（アデニンなし）のものと比較して示すグラフである。
【００９１】
【図１２】図１２は、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）（ＳＣ）またはビヒクル（ＳＣ）で処置したアデニン誘発性慢性腎不全のラットにおける、処置の４週間後の正規化された副甲状腺の重量（体重１ｋｇ当たりのｍｇ）を正常ラット（アデニンなし）のＰＴＧの重量と比較して示すグラフである。
【００９２】
【図１３】図１３は、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）（ＳＣ）またはビヒクル（ＳＣ）で処置したアデニン誘発性慢性腎不全のラットにおける、処置の４週間後のフォンコッサスコア（大動脈石灰化）を正常ラット（アデニンなし）のものと比較して示すグラフである。フォンコッサスコア０は、石灰化が検出されなかったことを示し、１は０〜２０％の石灰化を示し、２は２０〜４０％の石灰化を示し、３は４０〜６０％の石灰化を示し、４は６０〜８０％の石灰化を示し、５は＞８０％の石灰化を示す。
【００９３】
【図１４】図１４は、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を単回ＩＶボーラス（５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇまたは６０ｍｇ）として受けた、血液透析を受けているＳＨＰＴを有するＣＫＤ−ＢＭＤ被験体における、時間（時間）の関数としてのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）レベル（ｎｇ／ｍｌ）のグラフである。
【００９４】
【図１５】図１５は、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を単回ＩＶボーラス（５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇまたは６０ｍｇ）として、またはプラセボを受けた、血液透析を受けているＳＨＰＴを有するＣＫＤ−ＢＭＤ被験体における、時間（時間）の関数としての血清ｉＰＴＨのベースラインからのパーセント変化のグラフである。
【００９５】
【図１６】図１６は、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を単回ＩＶボーラス（５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇまたは６０ｍｇ）として、またはプラセボを受けた、血液透析を受けているＳＨＰＴを有するＣＫＤ−ＢＭＤ被験体における補正カルシウム（ｃＣａ）（ｍｇ／ｄＬ）の、時間（時間）の関数としてのグラフである。
【００９６】
【図１７】図１７は、時間の関数としての、ベースラインである投薬前の値に対するパーセントとしての血清ｉＰＴＨのグラフであり、ここで、被験体が次の１０ｍｇ用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を受ける直前（「薬物トラフ」の間）に血清試料を取得した。
【００９７】
【図１８】図１８は、１０ｍｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した４週間の期間中の、ベースラインである投薬前の値に対するパーセントとしてのｉＰＴＨの平均パーセント変化のグラフである。
【００９８】
【図１９】図１９は、１０ｍｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を４週間にわたって投与し、その後４週間、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を投与せずに経過観察した被験体から取得した試料中の血清ｉＰＴＨの量のグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００９９】
本主題は、本明細書に含まれる好ましい実施形態および実施例の以下の詳細な説明を参照することによってより容易に理解することができる。
【０１００】
詳細な説明
Ｉ．定義
本出願の範囲内では、別段の指定のない限り、本出願の用語の定義および技法の実例は、いくつかの周知の参考文献、例えば：Ｓａｍｂｒｏｏｋ、Ｊ．ら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ（１９８９年）；Ｇｏｅｄｄｅｌ、Ｄ．編、Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、１８５巻、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ（１９９１年）；「Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ」Ｄｅｕｔｓｈｃｅｒ、Ｍ．Ｐ．編、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ（１９８９年）；Ｉｎｎｉｓら、ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ  ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ（１９９０年）；Ｆｒｅｓｈｎｅｙ、Ｒ．Ｉ．、Ｃｕｌｔｕｒｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌｓ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｉｃ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ、第２版、Ａｌａｎ  Ｌｉｓｓ、Ｉｎｃ．  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ（１９８７年）；Ｍｕｒｒａｙ、Ｅ．Ｊ．編、Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、１０９〜１２８頁、Ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．、Ｃｌｉｆｔｏｎ、ＮＪおよびＬｅｗｉｎ、Ｂ．、Ｇｅｎｅｓ  ＶＩ、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９７年）などのいずれかにおいて見ることができる。
【０１０１】
本明細書で使用される単数形「ａ（１つの）」、「ａｎ（１つの）」および「ｔｈｅ（その）」は、別段の指定のない限り、複数の参照対象を含む。例えば、「ａ（１つの）」モジュレーターペプチドは、１つ以上のモジュレーターペプチドを包含する。
【０１０２】
本明細書で使用される化合物は、化合物を被験体に投与すると、血漿副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）が、化合物を投与する前の血漿ＰＴＨ濃度と比較して低減する場合に、「副甲状腺ホルモンレベルを減少させる活性」または「ＰＴＨを低減させる活性」を有する。一実施形態では、ＰＴＨレベルの減少は、化合物を投与した１時間後に、化合物を投与する前のＰＴＨレベルよりも少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９５％低いことである。
【０１０３】
本明細書で使用される、「ヒスタミン応答がないこと」または「ヒスタミン応答の欠如」は、本明細書に記載のアッセイにおいてｉｎ  ｖｉｔｒｏで測定したところ、１５倍、１４倍、１３倍、１２倍、１１倍、１０倍、９倍、８倍、７倍、６倍、５倍、４倍、または３倍未満のヒスタミンの増加をもたらす化合物の用量を意味する。倍数変化は、化合物と一緒にインキュベートする前のヒスタミンレベルおよび化合物と一緒に１５分間インキュベートした後のヒスタミンレベルに基づいて決定する。
【０１０４】
本明細書で使用される、「被験体」とは、ヒト被験体または動物被験体を指す。ヒト被験体は、「患者」と称することもできる。
【０１０５】
本明細書で使用される、「治療有効量」とは、所望の治療効果をもたらすために必要な量である。例えば、状態を処置するための方法において、治療有効量は、状態の発生を阻害する、減少させるまたは逆転させる量である。一態様では、治療有効量とは、血清クレアチニンレベルを減少させるまたは血清クレアチニンレベルの増加を予防するカルシウム模倣化合物の量を意味する。別の態様では、治療有効量とは、血管もしくは他の軟部組織の石灰化の量を低下させる、または血管もしくは他の軟部組織の石灰化の進行を遅らせるカルシウム模倣化合物の量を意味する。別の態様では、治療有効量とは、ＰＴＨ受容体の発現を増加させる、またはＰＴＨ受容体の発現の減少を遅らせるカルシウム模倣化合物の量を意味する。別の態様では、治療有効量とは、肥大した副甲状腺のサイズまたは重量を低下させる、または副甲状腺肥大の進行を遅らせるカルシウム模倣化合物の量を意味する。別の態様では、治療有効量とは、血管または他の軟部組織の石灰化の量を低下させる、または血管または他の軟部組織の石灰化の進行を遅らせるカルシウム模倣化合物の量を意味する。高カルシウム血症の被験体における血清カルシウムを低下させるための方法では、治療有効量は、血清カルシウムレベルを少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％または２５％低下させるために必要な量である。カルシウムは、総カルシウムとしてまたはカルシウムイオンとして測定することができる。別の例として、ｉｎ  ｖｉｖｏでＰＴＨを低減させるための方法では、治療有効量は、ＰＴＨレベルを少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％または２５％低下させるために必要な量である。
【０１０６】
本明細書で使用される、「処置」または「処置すること」という用語は、病的状態の発生を阻害する、減少させるまたは逆転させる量の化合物または薬学的組成物を必要とする人への投与を包含する。疾患および障害の処置とは、本明細書では、本発明の化合物（またはその薬学的塩、誘導体もしくはプロドラッグ）または該化合物を含有する薬学的組成物を、それを必要とすると考えられる被験体（すなわち、動物、例えばヒトなどの哺乳動物）への治療的投与も包含するものとする。処置とは、化合物または薬学的組成物を、それを必要とすると診断されていない被験体への投与、すなわち、被験体への予防的投与も包含する。一般に、被験体は、免許を持つ医師および／または権限を与えられた医療実践者によって最初に診断され、本発明の化合物（複数可）または組成物の投与による予防的処置および／または治療的処置のためのレジメンを提案、推奨または処方される。
【０１０７】
本明細書で使用される、「経皮的」という用語は、本明細書に記載の処置方法では、治療有効量のカルシウム模倣剤を皮膚に塗布して化合物を体循環に送達し、このようにして所望の治療効果を実現することを意味する。
【０１０８】
本明細書で使用される、「アミノ酸」は、天然アミノ酸および非天然アミノ酸を指す。２０種の天然に存在するアミノ酸（Ｌ−異性体）は接頭辞「Ｌ−」を持つ（アキラルであるグリシン以外）３文字コード、また大文字の１文字コードで示される：アラニン（「Ｌ−Ａｌａ」または「Ａ」）、アルギニン（「Ｌ−Ａｒｇ」または「Ｒ」）、アスパラギン（「Ｌ−Ａｓｎ」または「Ｎ」）、アスパラギン酸（「Ｌ−Ａｓｐ」または「Ｄ」）、システイン（「Ｌ−Ｃｙｓ」または「Ｃ」）、グルタミン（「Ｌ−Ｇｌｎ」または「Ｑ」）、グルタミン酸（「Ｌ−Ｇｌｕ」または「Ｅ」）、グリシン（「Ｇｌｙ」または「Ｇ」）、ヒスチジン（「Ｌ−Ｈｉｓ」または「Ｈ」）、イソロイシン（「Ｌ−Ｉｌｅ」または「Ｉ」）、ロイシン（「Ｌ−Ｌｅｕ」または「Ｌ」）、リジン（「Ｌ−Ｌｙｓ」または「Ｋ」）、メチオニン（「Ｌ−Ｍｅｔ」または「Ｍ」）、フェニルアラニン（「Ｌ−Ｐｈｅ」または「Ｆ」）、プロリン（「Ｌ−Ｐｒｏ」または「Ｐ」）、セリン（「Ｌ−Ｓｅｒ」または「Ｓ」）、トレオニン（「Ｌ−Ｔｈｒ」または「Ｔ」）、トリプトファン（「Ｌ−Ｔｒｐ」または「Ｗ」）、チロシン（「Ｌ−Ｔｙｒ」または「Ｙ」）およびバリン（「Ｌ−Ｖａｌ」または「Ｖ」）。Ｌ−ノルロイシンおよびＬ−ノルバリンは、それぞれ（ＮＬｅｕ）および（ＮＶａｌ）と表すことができる。キラルである１９種の天然に存在するアミノ酸は、接頭辞「Ｄ−」を持つ３文字コードまたは小文字の１文字コードで示される対応するＤ−異性体を有する：アラニン（「Ｄ−Ａｌａ」または「ａ」）、アルギニン（「Ｄ−Ａｒｇ」または「ｒ」）、アスパラギン（「Ｄ−Ａｓｎ」または「ａ」）、アスパラギン酸（「Ｄ−Ａｓｐ」または「ｄ」）、システイン（「Ｄ−Ｃｙｓ」または「ｃ」）、グルタミン（「Ｄ−Ｇｌｎ」または「ｑ」）、グルタミン酸（「Ｄ−Ｇｌｕ」または「ｅ」）、ヒスチジン（「Ｄ−Ｈｉｓ」または「ｈ」）、イソロイシン（「Ｄ−Ｉｌｅ」または「ｉ」）、ロイシン（「Ｄ−Ｌｅｕ」または「ｌ」）、リジン（「Ｄ−Ｌｙｓ」または「ｋ」）、メチオニン（「Ｄ−Ｍｅｔ」または「ｍ」）、フェニルアラニン（「Ｄ−Ｐｈｅ」または「ｆ」）、プロリン（「Ｄ−Ｐｒｏ」または「ｐ」）、セリン（「Ｄ−Ｓｅｒ」または「ｓ」）、トレオニン（「Ｄ−Ｔｈｒ」または「ｔ」）、トリプトファン（「Ｄ−Ｔｒｐ」または「ｗ」）、チロシン（「Ｄ−Ｔｙｒ」または「ｙ」）およびバリン（「Ｄ−Ｖａｌ」または「ｖ」）。Ｄ−ノルロイシンおよびＤ−ノルバリンは、それぞれ（ｄＮＬｅｕ）および（ｄＮＶａｌ）と表すことができる。「アミノ酸残基」は、多くの場合、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質の単量体サブユニットに関して使用され、「アミノ酸」は、多くの場合、遊離分子に関して使用されるが、当技術分野におけるこれらの用語の使用は、重複および変動する。「アミノ酸」および「アミノ酸残基」という用語は互換的に使用され、文脈に応じてペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質の遊離分子または単量体サブユニットを指す場合がある。
【０１０９】
２つのアミノ酸配列のパーセント「相同性」またはパーセント「同一性」を決定するために、最適に比較する目的で配列を位置合わせする（例えば、一方のポリペプチドの配列に、他方のポリペプチドと最適に位置合わせするためのギャップを導入することができる）。次に、対応するアミノ酸位のアミノ酸残基を比較する。一方の配列における位置を、他方の配列における対応する位置と同じアミノ酸残基が占める場合に、それらの分子はその位置において同一である。本明細書で使用されるアミノ酸または核酸の「相同性」は、アミノ酸または核酸の「同一性」に相当する。したがって、２つの配列間のパーセント配列同一性は、それらの配列が共有する同一の位置の数の関数である（すなわち、パーセント配列同一性＝同一の位置の数／位置の総数×１００）。２つのポリペプチド配列間のパーセント配列同一性は、Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩ  ソフトウェアパッケージ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、５７９１  Ｖａｎ  Ａｌｌｅｎ  Ｗａｙ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ  ９２００８）を使用して決定することができる。ギャップ開始ペナルティ１０およびギャップ伸長ペナルティ０．１を、２つのポリペプチドのパーセント同一性を決定するために使用する。他のパラメータは全て初期設定に設定する。
【０１１０】
「カチオン性アミノ酸」は、例えば側鎖、または「Ｒ基」が、生理的なｐＨでプロトンを受け取って正に荷電し得るアミン官能基または他の官能基、例えばグアニジン部分またはイミダゾール部分などを含有するアミノ酸残基の場合のように、生理的なｐＨ（７．４）で正味の正電荷を有するアミノ酸残基を意味する。カチオン性アミノ酸残基としては、アルギニン、リジン、ヒスチジン、２，３−ジアミノプロピオン酸（Ｄａｐ）、２，４−ジアミノ酪酸（Ｄａｂ）、オルニチン、およびホモアルギニンが挙げられる。
【０１１１】
「カチオン性サブユニット」は、生理的なｐＨ（７．４）で正味の正電荷を有するサブユニットを意味する。
【０１１２】
「非カチオン性アミノ酸」とは、例えば、側鎖、または「Ｒ基」が中性（中性極性および中性非極性）のアミノ酸残基および酸性のアミノ酸残基の場合のように、生理的なｐＨ（７．４）で電荷を有さない、または正味の負電荷を有するアミノ酸残基を意図する。非カチオン性アミノ酸としては、炭化水素アルキル部分または芳香族部分であるＲ基を持つ残基（例えば、バリン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン）；中性の、極性Ｒ基を持つ残基（アスパラギン、システイン、グルタミン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン）；または中性の、非極性Ｒ基を持つ残基（グリシン、メチオニン、プロリン、バリン、イソロイシン）が挙げられる。酸性のＲ基を持つ非カチオン性アミノ酸としては、アスパラギン酸およびグルタミン酸が挙げられる。
【０１１３】
本明細書で使用される、「保存されたアミノ酸置換」は、選択されたポリペプチドまたはタンパク質の活性または三次構造物に顕著な変化をもたらさない置換である。そのような置換は、一般には、選択されたアミノ酸残基を同様の物理化学的性質を有する異なるアミノ酸残基と交換することを含む。アミノ酸およびアミノ酸残基を物理化学的性質によってグループ化することは、当業者に公知である。例えば、天然に存在するアミノ酸の中で、同様の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーが当技術分野で定義されており、それらとしては、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、無電荷極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分枝側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が挙げられる。
【０１１４】
「サブユニット」とは、２つ以上の他の単量体単位に結合してポリマー化合物を形成する単量体単位を意図し、サブユニットはポリマー化合物の要素の最も短い繰り返しパターンである。例示的なサブユニットはアミノ酸であり、それが連結すると、当技術分野でペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質と称されるものなどのポリマー化合物が形成される。
【０１１５】
本明細書で使用される、「化学的架橋」は、２つ以上の分子の共有結合を指す。
【０１１６】
ペプチドまたはペプチド断片は、それが少なくとも１つの、親ペプチドまたは親ポリペプチドの５つのアミノ酸残基、より好ましくは８つのアミノ酸残基の連続した配列と同一または相同であるアミノ酸配列を有する場合に、親ペプチドまたは親ポリペプチドに「由来する」。
【０１１７】
本明細書で使用される、「副甲状腺機能亢進症」という用語は、別段の指定のない限り、原発性の、二次性の、および三次性の副甲状腺機能亢進症を指す。
【０１１８】
「皮内の」という用語は、本明細書に記載の治療方法では、治療有効量のカルシウム模倣化合物を皮膚に塗布して化合物を角質層の下の皮膚の層に送達し、このようにして所望の治療効果を実現することを意味する。
【０１１９】
本明細書で使用される、「単離された」または「精製された」ポリペプチドまたはその生物学的に活性な部分は、組換えＤＮＡ技法によって産生された場合は、細胞材料の一部を、または、化学的に合成された場合は、化学的前駆体もしくは他の化学物質を含まない。「細胞材料を実質的に含まない」という言葉は、ポリペプチドが、それが天然に生じた、または組換えによって産生された細胞の細胞構成成分の一部から分離されているポリペプチド調製物を包含する。ポリペプチドまたはその生物学的に活性な部分が組換えによって産生される場合、培地を実質的に含まない、すなわち、培地が、ポリペプチド調製物の体積の約２０％未満、より好ましくは約１０％未満、および最も好ましくは約５％未満に相当することも好ましい。「化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含まない」という言葉は、ポリペプチドが、ポリペプチドの合成に関与する化学的前駆体または他の化学物質から分離されているポリペプチド調製物を包含する。一実施形態では、「化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含まない」という言葉は、約３０％未満の（乾燥重量で）化学的前駆体または他の化学物質、好ましくは約２０％未満の化学的前駆体または他の化学物質、より好ましくは約１５％未満の化学的前駆体または他の化学物質、さらにより好ましくは約１０％未満の化学的前駆体または他の化学物質、および最も好ましくは約５％未満の化学的前駆体または他の化学物質を有するポリペプチド調製物を包含する。好ましい実施形態において、単離されたポリペプチド、またはその生物学的に活性な部分は、ドメインポリペプチドを得たのと同じ生物体由来の汚染ポリペプチドを欠いている。
【０１２０】
本明細書で使用される「高分子」は、一般には約９００ダルトンを超える分子量を有するペプチド、ポリペプチド、タンパク質または核酸などの分子を指す。
【０１２１】
「ポリマー」とは、共有結合によって結合した、２つ以上の同一のサブユニットまたは同一でないサブユニットの直鎖を指す。
【０１２２】
本明細書で使用される、「ペプチド」および「ポリペプチド」は、そのサイズにかかわらず、ペプチド結合によって連結したアミノ酸残基の鎖でできている任意のポリマーを指す。「タンパク質」は、多くの場合、比較的大きなポリペプチドに関して使用され、および「ペプチド」は、多くの場合、小さなポリペプチドに関して使用されるが、当技術分野におけるこれらの用語の使用は、重複および変動する。したがって、簡単にするために、「ペプチド」という用語を本明細書で使用するが、ある場合には、当技術分野では同じポリマーを「ポリペプチド」と称することもある。別段の指定のない限り、ペプチドの配列は、アミノ末端からカルボキシル末端の順に示されている。
【０１２３】
本明細書で使用される「チオール含有基」または「チオール含有部分」は、硫黄−水素結合（−ＳＨ）を含み、生理的条件下で別のチオールと反応してジスルフィド結合を形成することができる官能基を意味する。別のチオールとジスルフィド結合を形成することができるチオールは、本明細書では「反応性チオール」と称される。好ましい実施形態では、チオール含有基は化合物の主鎖から６原子未満離れている。より好ましい実施形態では、チオール含有基は構造物（−ＳＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−）−を有する。
【０１２４】
本明細書で使用される、「低分子」は、有機分子などの高分子以外の分子を指し、一般には１０００ダルトン未満の分子量を有する。
【０１２５】
別段の指定がない限り、本明細書で言及される全ての文書は、その全体が参照により組み込まれる。
ＩＩ．カルシウム模倣薬を治療的に使用するための方法
【０１２６】
一態様では、本明細書に記載のカルシウム模倣薬を、それを必要とする被験体に投与して、高カルシウム血症に関連する症状を処置および／または改善する。原発性副甲状腺機能亢進症および悪性腫瘍は高カルシウム血症の症例の約９０％を占める。高カルシウム血症に関連する他の疾患としては、これらに限定されないが、副甲状腺機能の異常、原発性副甲状腺機能亢進症、孤立性副甲状腺腫（ｓｏｌｉｔａｒｙ  ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ  ａｄｅｎｏｍａ）、原発性副甲状腺過形成、副甲状腺癌、多発性内分泌腫瘍（ＭＥＮ）、家族性孤立性副甲状腺機能亢進症、家族性低カルシウム尿性高カルシウム血症／家族性良性高カルシウム血症、悪性腫瘍、転移を伴う固形腫瘍（例えば、乳がんまたはＰＴＨｒＰ媒介性であってよい古典的扁平上皮癌）、高カルシウム血症の体液性媒介を伴う固形腫瘍（例えば、肺がん（最も一般的には非小細胞肺がん）、または腎がん、褐色細胞腫）、血液学的悪性疾患（多発性骨髄腫、リンパ腫、白血病）、サルコイドーシスおよび他の肉芽腫性疾患、ビタミンＤ代謝障害、ビタミンＤ過剰症（ビタミンＤ中毒症）、１，２５（ＯＨ）２Ｄレベルの上昇、乳児期の特発性高カルシウム血症、横紋筋融解症後の反発性高カルシウム血症（ｒｅｂｏｕｎｄ  ｈｙｐｅｒｃａｌｃａｅｍｉａ）、骨のターンオーバー速度が高いことに関連する障害、甲状腺機能亢進症、骨のパジェット病、腎不全、重度の二次性副甲状腺機能亢進症、ミルク−アルカリ症候群が挙げられる。高カルシウム血症は、リチウムの使用、チアジドの使用、ビタミンＡ中毒症およびアルミニウム中毒症、ならびに長期にわたる固定にも起因し得る。一実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。別の実施形態では、カルシウム模倣薬はＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）である。
【０１２７】
別の態様では、本明細書に記載のカルシウム模倣薬を使用して、それを必要とする被験体における腎損傷、血管石灰化、または副甲状腺過形成の進行を阻害する、減少させるまたは低下させる。一実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。別の実施形態では、カルシウム模倣薬はＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）である。
【０１２８】
一実施形態では、カルシウム模倣薬を、血液透析を受けている末期腎疾患（ＥＳＲＤ）患者におけるＣＫＤ−ＭＢＤを処置するために週に３回投与される静脈内（ＩＶ）生成物として投与する。別の実施形態では、カルシウム模倣薬を毎日の経皮パッチによって投与する（例えば、病期第３期または病期第４期のＣＫＤを有すると分類される被験体に対して）。
【０１２９】
一態様では、本明細書に記載のカルシウム模倣薬を、初期慢性腎疾患（ＣＫＤ）および／または慢性腎疾患に伴う骨ミネラル代謝異常（ＣＫＤ−ＭＢＤ）のリスクがあるまたはそれと診断された被験体に投与する。被験体は透析を受けていてもよく、被験体は透析前であってもよい。いくつかの実施形態では、被験体は、病期第１期、病期第２期、病期第３期、病期第４期または病期第５期のＣＫＤを有すると分類されてよい。
【０１３０】
別の態様では、本明細書に記載の組成物を使用して、よく認識されており、慢性腎疾患の一般的な合併症である軟部組織石灰化を示す、またはそれが発生するリスクがある被験体を処置する。そのような個体は、例えば、アテローム性動脈硬化症、狭窄症、再狭窄、腎不全、糖尿病、人工器官移植、組織傷害または加齢性血管疾患などの状態に関連する血管石灰化を有してもよく、またはそれを発生するリスクがあってもよい。別の態様では、本明細書に記載の組成物を使用して、血清クレアチニンレベルの上昇を示す、またはそれが発生するリスクがある被験体を処置する。別の態様では、本明細書に記載の組成物を使用して、副甲状腺肥大を示す、またはそれが発生するリスクがある被験体を処置する。別の態様では、本明細書に記載の組成物を使用して、リンレベルの上昇を示すまたはそれが発生するリスクがある被験体を処置する。別の態様では、本明細書に記載の組成物を使用して、ＰＴＨ受容体の発現の低下を示すまたはそれが発生するリスクがある被験体を処置する。これらの状態の予後的指標および臨床的指標は当技術分野で公知である。本発明の方法によって処置される個体は、例えば、糖尿病、慢性腎疾患、腎不全、腎移植または腎臓透析に関連する全身ミネラル不均衡を有してよい。
ＩＩＩ．本明細書に記載のカルシウム模倣薬の治療有効性
【０１３１】
ＰＴＨを低下させるためのカルシウム模倣薬の使用を、ＣＫＤのラットモデルである５／６腎摘出（５／６Ｎｘ；Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｗｉｌｍｉｎｇｈａｍ、ＭＡ）を使用して評価した。動物を、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）、（１ｍｇ／ｋｇ、ＩＶ）またはシナカルセト（１０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ）で処置した。動物に、２８日間、毎日投薬した。血清ＰＴＨレベルを最終投薬の６時間後、１６時間後および４８時間後に測定した。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物では、長期の毎日の投薬後にＰＴＨが長期にわたって低下した（実施例１Ａ、図１を参照されたい）。シナカルセトで処置した動物では投薬の１６時間後および４８時間後に血清ＰＴＨの増加が示されたが、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物では、最終投薬の６時間後および１６時間後にベースラインから５０％超の減少が示され、投薬の４８時間後にはベースラインＰＴＨから２５％〜５０％の減少が示された。これらの結果により、カルシウム模倣薬を、これらに限定することなく、ＣＫＤ、二次性副甲状腺機能亢進症および原発性副甲状腺機能亢進症を含めた、ＰＴＨの増加に関連する疾患および状態に対する治療剤として有効に使用することができるという結論が支持される。
【０１３２】
別の研究では、５／６Ｎｘラットモデルを使用して、カルシウム模倣薬の副甲状腺の増殖に対する効果を決定した。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物（３ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ）では副甲状腺過形成が劇的に低下した（実施例１Ｂ、図２Ａ〜Ｄ）。これらの結果により、カルシウム模倣薬を用いた処置が副甲状腺の増殖を低下させることに有効であるという結論が支持される。
【０１３３】
５／６Ｎｘラットモデルを使用して別の研究を行って、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の異所性石灰化（すなわち、軟部組織において起こる不適切なバイオミネラリゼーション）に対する効果を調べた。ＣＫＤ患者では腎臓石灰化の発生率が高い。また、透析を受けているＣＫＤの患者では、年齢を釣り合わせた、冠動脈疾患が血管造影で証明された個体よりも冠状動脈石灰化が２〜５倍多い。石灰化は、アテローム性動脈硬化斑負荷量および心筋梗塞のリスクの増加、末梢血管疾患における虚血性エピソードの増加ならびに血管形成術後の解離のリスクの増加と相関する。
【０１３４】
カルシウム模倣薬投与の異所性石灰化に対する効果を、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を５／６Ｎｘラットに投与することによって研究した（実施例１Ｃ）。６週間にわたって３ｍｇ／ｋｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物では、無処置の５／６Ｎｘラットと比較して腎臓石灰化が低下したことが見いだされた（図３Ａ〜Ｂ）。６週間にわたって３ｍｇ／ｋｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した５／６Ｎｘラットでは、無処置の対応物よりも大動脈および腎臓組織の石灰化が少なかった（図３Ｃ）。その結果により、カルシウム模倣薬を投与することが軟部組織石灰化を低下させることに有効であるという結論が導かれる。
【０１３５】
血清クレアチニン（ｓＣｒ）の測定により、腎不全の進行、および薬学的作用剤（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｇｅｎｔ）によりその進行を遅らせることができるかどうかを評価するための手段がもたらされる。クレアチニンのレベルが高いことにより、糸球体濾過速度が低下し、その結果、老廃物を排出する腎臓の能力が低下していることが示される。０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇおよびビヒクル対照を用いて、６週間にわたって週に３回の投薬で処置した５／６Ｎｘラットにおいて血清クレアチニンレベルをモニターした（実施例１Ｃ）。３ｍｇ／ｋｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物では、血清中のクレアチニンレベルが減少したが、０．３ｍｇ／ｋｇで処置した動物および１ｍｇ／ｋｇで処置した動物では２週目には血清クレアチニンのレベルが減少し、また、クレアチニンレベルの増加はビヒクルで処置した動物において観察されたものよりも低かった。そのデータにより、血清クレアチニンの上昇が数週間にわたって用量依存的に抑制されることが示され、カルシウム模倣薬を投与することが腎不全の進行を遅らせることに有効であるという結論が支持される。
【０１３６】
同様に、慢性腎不全のアデニン誘発性ラットモデルにおいてＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）を使用して、ＰＴＨを低下させるためのカルシウム模倣薬の使用を評価した。結果は上記の結果と一致した（実施例２を参照されたい）。
【０１３７】
血液透析を週に３回受けている被験体におけるＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の効果を調べるために臨床試験を設計した。その試験は、二重盲検式無作為化プラセボ対照多施設試験であった。実施例３に記載の結果は、本明細書に記載のカルシウム模倣薬により、ＰＴＨの分泌および合成を低下させ、同時に、血清ＰＴＨ、亜リン酸およびカルシウムを低減させ、それにより、ＣＫＤ−ＭＢＤの３つの主要な生化学的異常の全てを改善することができることを示す。
【０１３８】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の薬物動態プロファイルの試験により、カルシウム模倣薬のクリアランス速度がおよそ２Ｌ／時間と比較的遅く、ペプチドへの総血漿曝露は投与した用量に比例したことが示される（実施例３Ａ）。これらのデータは、カルシウム模倣薬の長期にわたる効果を示し、これにより、血液透析患者に１週間当たり２〜３回、またはおそらく１週間当たり２〜４回の頻度で投薬することが支持される。好ましい実施形態では、カルシウム模倣薬はＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）である。
【０１３９】
血清ｉＰＴＨおよびカルシウムレベルを低下させるためのカルシウム模倣薬の有効性もこの臨床試験において観察された。被験体に、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の単回ＩＶボーラスを、血液透析が完了した２〜４時間後に投与し、被験体からの血液を、血清ｉＰＴＨレベルおよび補正カルシウムレベルの変化について分析した（実施例２Ｂ）。投与した用量は５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇまたは６０ｍｇであった。図５に示されるように、投薬から３０分以内にｉＰＴＨの用量依存的な減少が起こった。そのデータにより、約２０ｍｇ以上の用量で、または約２０ｍｇから約１００ｍｇまでにわたる用量で、ペプチドによってなされるｉＰＴＨ抑制が透析間の（ｉｎｔｅｒｄｉａｌｙｔｉｃ）期間中持続したので、本明細書に記載のカルシウム模倣薬を血液透析患者に投与することが支持される。例えばＩＶボーラス、または腹膜注射を用いて、そのような用量により、投薬後５〜４５分以内、または投薬後約１０分〜３０分以内、または投薬後約１時間以内に（ｗｉｔｈ  ａｂｏｕｔ  ａｎ  ｈｏｕｒ）血清ｉＰＴＨの減少がもたらされ得る。
【０１４０】
実施例２Ｂに記載の通り、投与されたカルシウム模倣薬は補正した血清カルシウムレベルの低下にも有効であった。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の約５ｍｇから約６０ｍｇまでにわたる用量により、補正した血清カルシウムが約１０％〜１４％低下した。試験中のいかなる時点においても、補正カルシウムレベルが７．５ｍｇ／ｄＬを下回った被験体はいなかった。
【０１４１】
したがって、一実施形態では、ＣａＳＲ活性を調節するカルシウム模倣薬は、血液中のＰＴＨまたはカルシウムのレベルが過剰である被験体を処置すること、または、例えば、高カルシウム血症と診断された患者などの患者におけるカルシウムの恒常性の喪失の影響を逆転させることに有効である。別の実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。
【０１４２】
臨床研究により、さらに安全性データがもたらされ、それにより、カルシウム模倣薬を投与することの耐容性は非常に良好であり、下痢、悪心や嘔吐の報告はないことが示された（実施例２Ｃ）。したがって、治療有効量の本明細書に記載のカルシウム模倣薬の投与は、治療有効量の経口用カルシウム模倣薬に関連する数および頻度と比較して、副作用の発生が少なく、有害事象の頻度が低い可能性がある。
【０１４３】
別の態様では、本明細書に記載のカルシウム模倣薬は疾患修飾効果を有し、したがって、カルシウム模倣薬の治療効果は薬物処置を停止した後数週間にわたって続く。一実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。
【０１４４】
一実施形態では、カルシウム模倣薬は、ＣａＳＲ、ビタミンＤ受容体およびＦＧＦ−２３補助受容体を含めた、副甲状腺における重要な受容体の喪失を予防することに有効である（実施例１Ｅ）。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を５／６Ｎｘラットに３ｍｇ／ｋｇの用量で６週間にわたって投与した後、副甲状腺の切片を作製し、染色して、ＣａＳＲ、ビタミンＤ受容体およびＦＧＦ−２３補助受容体の発現レベルを観察した。それぞれの場合において、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を投与することにより、受容体の発現が、ビヒクル対照で処置したラット由来の腺において認められる発現と比較して増加した。これらのデータにより、本明細書に記載のカルシウム模倣薬を用いた処置は、１つまたは複数の副甲状腺の受容体の発現を維持し、かつ／または増加させ、それにより、疾患の過程を潜在的に改変することによって副甲状腺の応答性を改善することができるという結論が支持される。
【０１４５】
別の調査において、５／６Ｎｘラットを、１週間にわたって３ｍｇ／ｋｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の４用量で処置し、その後１週間のウォッシュアウトウォッシュアウト期間（薬物の休み）をおいた（実施例３Ｂ）。処置したラットでは、１週間のウォッシュアウトウォッシュアウト期間後に測定し、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の第１の用量を投与する前のベースラインＰＴＨと比較したところ、ベースラインＰＴＨが５０％低下した。いくつかの実施形態では、治療有効量のカルシウム模倣薬を投与することにより、血液透析を受けている被験体において、血清ＰＴＨが、カルシウム模倣薬の第１の用量の前の血清ＰＴＨと比較して２５％〜７５％低下、または４０％〜５０％低下し、低下は、カルシウム模倣薬の最後の用量を投与した１〜７日後、３〜８日後または５〜１０日後に測定された。
【０１４６】
上記の疾患修飾効果は、血液透析患者を１０ｍｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で１週間当たり３回、４週間にわたって処置した臨床試験においても観察された。患者がＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の次の用量を受ける直前に起こる薬物トラフ時に血清ＰＴＨレベルを測定した。実施例４において考察されている通り、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した患者では、２７日目に測定したところ、ベースラインＰＴＨが、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の第１の用量の前に測定されたベースラインＰＴＨと比較して約５０％低下した。そのデータにより、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）が血液透析患者において疾患修飾効果を有することがさらに支持される。
【０１４７】
好ましい実施形態では、腎損傷、血管石灰化、副甲状腺過形成、高カルシウム血症および／または副甲状腺機能亢進症に罹患している被験体を、当該記載のカルシウム模倣薬を使用して処置する。
【０１４８】
無処置の、中程度に重度の副甲状腺機能亢進症を伴うＳＨＰＴ患者は多くの場合、ベースラインの循環しているインタクトなＰＴＨレベル３００ｐｇ／ｍｌ超を有し、６００ｐｇ／ｍＬを超え得るレベルを有する。好ましい実施形態では、ＰＴＨレベルの減少を、処置前のベースラインレベルを下回るインタクトなＰＴＨの減少として測定する。別の実施形態では、所望のＰＴＨの減少とは、米国腎臓財団または腎障害および腎不全の処置における他の専門家によって確立された一般的に認められているガイドライン中の血漿ＰＴＨレベルをもたらすことである。
【０１４９】
別の態様では、副甲状腺機能亢進症、高カルシウム血症および／または骨疾患を処置するための方法であって、記載の化合物の治療有効量を投与する工程を含む方法が提供される。別の実施形態では、被験体を、記載の化合物を１つまたは複数の他の治療的に有効な作用剤と組み合わせて処置することができる。
【０１５０】
別の態様では、当該記載の化合物を、ＰＴＨまたはＰＴＨの影響を低下させるために有効な量で投与する。いくつかの実施形態では、血漿ＰＴＨは、当該記載の化合物を投与した後少なくとも１０時間にわたって、処置前のベースラインレベルから少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２５％または３０％低下する。特定の実施形態では、血漿ＰＴＨは投与した１０時間後に少なくとも２０％低下する。好ましい実施形態では、血漿ＰＴＨは、当該記載の化合物を投与した後少なくとも４８時間にわたって、処置前のベースラインレベルから１５〜４０％、好ましくは２０〜５０％、より好ましくは３０〜７０％低下する。
【０１５１】
別の態様では、当該記載の化合物を、血清カルシウムまたはカルシウムの影響を減少させるために有効な量で投与する。いくつかの実施形態では、血清カルシウムは、上記化合物を投与した後少なくとも１０時間にわたって、処置前のレベルから少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％または２５％低下する。いくつかの好ましい実施形態では、血清カルシウムは、投与した１０時間後に少なくとも５％低下する。いくつかの好ましい実施形態では、血清カルシウムは、当該記載の化合物を投与した後少なくとも４８時間にわたって、処置前のレベルから５〜１０％、好ましくは５〜２０％低下する。
【０１５２】
別の態様では、それを必要とする被験体において腎損傷を低下させるための方法であって、記載の化合物の治療有効量を投与する工程であって、それによって血清クレアチニンのレベルが、投与の約２週間後、４週間後または６週間後に測定した際に処置前のレベルから少なくとも約１％、５％、または１０％減少する工程を含む方法が提供される。一実施形態では、血清クレアチニンのレベルは、投与の約２週間後、４週間後または６週間後に測定した際に処置前のレベルから約５％未満、１０％未満、２０％未満、３０％未満または４０％未満増加する。
【０１５３】
血清カルシウム、骨代謝およびＰＴＨの間の関連性に基づいて、当該記載の化合物は、副甲状腺機能亢進症に加えて、さまざまな形態の骨疾患および／または高カルシウム血症の処置のために有益であると考えられる。当該記載の化合物は、非経口的に投与することができ、胃腸の有害作用を伴わない可能性があり、チトクロムＰ４５０によって代謝されず、かつ血漿ＰＴＨおよびカルシウムをより有効に低下させることができるので、現在通用している治療剤と比較して利点を有し得る。
【０１５４】
上記の通り、当該記載の方法は、上記化合物を、単独で、または１つまたは複数の他の治療的に有効な作用剤と組み合わせて用いることができる。そのような他の治療的に有効な作用剤としては、これらに限定されないが、アレンドロネートおよびリセドロネートなどの吸収抑制ビスホスホネート剤；〈αｖβ３アンタゴニストなどのインテグリン遮断薬；ホルモン補充療法において使用される結合型エストロゲン、例えば、Ｐｒｅｍｐｒｏ（商標）、Ｐｒｅｍａｒｉｎ（商標）およびＥｎｄｏｍｅｔｒｉｏｎ（商標）；選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、例えば、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ＣＰ−３３６，１５６（Ｐｆｉｚｅｒ）およびラソフォキシフェン；カテプシン（ｃａｔｈｅｓｐｉｎ）Ｋ阻害剤；ビタミンＤ療法；ビタミンＤ類似体、例えば、Ｚｅｍｐｌａｒ（商標）（パリカルシトール）；Ｃａｌｃｉｊｅｘ（登録商標）（カルシトリオール）、Ｈｅｃｔｏｒｏｌ（登録商標）（ドキセルカルシフェロール）、Ｏｎｅ−Ａｌｐｈａ（登録商標）（アルファカルシドール）およびＣｙｔｏｃｈｒｏｍから開発された中のＣＴＡ−０１８、ＣＴＡＰ２０１およびＣＴＡＰ１０１として公知の類似体など；Ｓｅｎｓｉｐａｒ（登録商標）（シナカルセト）などの他のカルシウム模倣薬；ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸トランスポーターファミリーの阻害剤、ＳＬＣ３４（２つの腎臓アイソフォームであるＮａＰｉ−ＩＩａおよびＮａＰｉ−ＩＩｃ、ならびに腸のＮａＰｉ−ＩＩｂトランスポーターを含む）；フォスファトニン（ｐｈｏｓｐｈａｔｏｎｉｎ）（ＦＧＦ−２３、ｓＦＲＰ４、ＭＥＰＥまたはＦＧＦ−７を含む）；低用量ＰＴＨ処置（エストロゲンあり、またはなし）；カルシトニン；ＲＡＮＫリガンドの阻害剤；ＲＡＮＫリガンドに対する抗体、オステオプロテゲリン；アデノシンアンタゴニスト（ａｄｅｎｓｏｓｉｎｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ）；およびＡＴＰプロトンポンプ阻害剤を用いた処置が挙げられる。
【０１５５】
一実施形態では、記載の化合物を、ＰＴＨレベルおよび血清カルシウムレベルの両方を減少させるために十分な用量で投与する。別の実施形態では、記載の化合物を、血清カルシウムレベルに有意に影響を及ぼすことなくＰＴＨを減少させるために十分な用量で投与する  。さらなる実施形態では、記載の化合物を、血清カルシウムレベルに有意に影響を及ぼすことなくＰＴＨを増加させるために十分な用量で投与する。
ＩＶ．カルシウム感知受容体アゴニスト
【０１５６】
本明細書に記載の方法は、カルシウム模倣薬の被験体への投与を含む。そのようなアゴニストは、米国特許第６，０１１，０６８号および同第６，０３１，００３号ならびに米国特許公開第２０１１／００２８３９４号および同第２００９／００２３６５２号（それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【０１５７】
一実施形態では、当該方法は、カルシウム模倣薬を上記患者に投与する工程を含む。別の実施形態では、カルシウム模倣薬はシナカルセト塩酸塩である。さらに別の実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。］］］
【０１５８】
一実施形態では、当該方法は、カルシウム模倣薬を上記患者に投与する工程を含む。別の実施形態では、カルシウム模倣薬はペプチドである。さらに別の実施形態では、カルシウム模倣薬は、式：Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７（式中、Ｘ１はチオール含有基を含むサブユニットであり；Ｘ５はカチオン性サブユニットであり；Ｘ６は非カチオン性サブユニットであり；Ｘ７はカチオン性サブユニットであり；Ｘ２、Ｘ３およびＸ４のうちの少なくとも１つ、好ましくは、２つは、独立して、カチオン性サブユニットである）を含むペプチドを含む。
【０１５９】
一実施形態では、カルシウム模倣薬は、配列ｃａｒｒｒａｒ（配列番号２）を含む化合物である。別の実施形態では、カルシウム模倣薬は、ペプチドｃａｒｒｒａｒ（配列番号２）で構成されるコンジュゲートであり、該ペプチドがそのＮ末端残基においてＣｙｓ残基とコンジュゲートしている。好ましい実施形態では、コンジュゲートはＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）である。本発明は、配列番号３などの特定の好ましい実施形態に関して記載されている場合があるが、本開示は、米国特許第６，０１１，０６８号および同第６，０３１，００３号ならびに米国特許公開第２０１１／００２８３９４号および同第２００９／００２３６５２号（それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている化合物およびコンジュゲートを含めた他のカルシウム模倣薬にも適用されることは当業者の理解の範囲内である。同様に、本発明は、血液透析などの特定の好ましい実施形態に関して記載されている場合があるが、本開示は、腹膜透析などの他の形態の透析、および毎日の血液透析などの他の手法にも適用されることは当業者の理解の範囲内である。
【０１６０】
好ましい実施形態では、チオール含有コンジュゲート基はＮ末端キャップおよびＣ末端キャップの両方を有する。いくつかの実施形態では、チオール含有コンジュゲート基は、それ自体が配列番号１６１のアミノ酸配列を含むペプチドである。いくつかの実施形態では、チオール含有コンジュゲート基と上記ペプチドは同じである（すなわち、コンジュゲートは二量体である）。
【０１６１】
別の実施形態では、化合物はコンジュゲートの形態であり、Ｘ１位にあるチオール含有サブユニットがジスルフィド結合によってＬ−Ｃｙｓ残基と連結している。これらの化合物は、例えば、以下の構造を有する：
【化１】
2015502346.tif 000002
【０１６２】
本明細書で使用される表示法では、Ｘ１サブユニットのチオール含有部分に連結している化合物は、括弧付きで識別され、これらの例示的なコンジュゲートでは、（Ｃ）で示される化合物Ｌ−ＣｙｓはＸ１サブユニットのチオール含有部分に連結している：Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）およびＡｃ−ｃ（Ａｃ−Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号１４１）。
【０１６３】
当該記載のアゴニストを医薬品としてヒトおよび動物に投与する場合、単独で、または、例えば０．１〜９９％（より好ましくは、１０〜３０％）の活性成分を薬学的に許容されるキャリアと組み合わせて含有する薬学的組成物として、与えることができる。他の実施形態では、薬学的組成物は、０．２〜２５％、好ましくは０．５〜５％または０．５〜２％の活性成分を含有してよい。これらの化合物は、療法のために、ヒトおよび他の動物（代理人整理番号  ６３２００−８０２２  １７７６４０７０  １８）に、例えば、経口、皮下注射、皮下デポ剤、静脈内注射、静脈内注入もしくは皮下注入を含めた任意の適切な投与経路によって投与することができる。
【０１６４】
これらのアゴニストは、治療のために、ヒトおよび他の動物に、任意の適切な投与経路によって投与することができる。
【０１６５】
ペプチドカルシウム模倣薬は以前に記載されている（米国特許公開第２０１１／００２８３９４号および同第２００９／００２３６５２号（どちらもその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。１つの例示的なペプチドカルシウム模倣薬は、本明細書では、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）と称され、構造：
【化２】
2015502346.tif 000003
を有する。以下の表１において追加的な構造が提供される。
【表１−１】
2015502346.tif 000004
【表１−２】
2015502346.tif 000005
【表１−３】
2015502346.tif 000006
【表１−４】
2015502346.tif 000007
【表１−５】
2015502346.tif 000008
【表１−６】
2015502346.tif 000009
【表１−７】
2015502346.tif 000010
【表１−８】
2015502346.tif 000011
ＧＳ＝酸化型グルタチオン；ｄＨｃｙ＝Ｄ−ホモシステイン；Ｍｐａ＝メルカプトプロピオン酸；ＰＥＧ＝ポリエチレングリコール。
【０１６６】
Ｖ．製剤
当該記載の化合物および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤またはキャリアを含む薬学的組成物が提供される。そのような薬学的組成物を調製する方法は、一般には当該記載の化合物をキャリアおよび、必要に応じて、１つ以上のアクセサリー成分と結びつけるステップを含む。当該記載の化合物および／またはそれを含む薬学的組成物は、当業者に公知の従来の方法によって薬学的に許容できる剤形に製剤化することができる。一般には、製剤は、当該記載の化合物を液体キャリアまたは細かく分割された固体キャリア、またはその両方に結びつけ、次いで、必要であれば、産物を形づくることによって均一かつ密接に調製する。
【０１６７】
非経口投与に適した本発明の薬学的組成物は、１つ以上の当該記載の化合物を、糖、アルコール、アミノ酸、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、意図されたレシピエントの血液との等張性を製剤に与える溶質または懸濁剤または増粘剤を含有してよい、１つ以上の薬学的に許容できる滅菌の等張性の水溶液または非水性溶液、分散液、懸濁液もしくはエマルジョン、または使用する直前に滅菌の注射可能な溶液もしくは分散液中に再構成することができる滅菌粉末と組み合わせて含む。
【０１６８】
本発明の薬学的組成物に利用することができる適切な水性キャリアおよび非水性キャリアの例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、および適切なそれらの混合物、オリーブ油などの植物油、ならびにオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが挙げられる。妥当な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料を使用することによって、分散物の場合では必要な粒子サイズを維持することによって、および界面活性剤を使用することによって維持することができる。
【０１６９】
これらの薬学的組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤などのアジュバントも含有してよい。当該記載の化合物に対する微生物の作用の予防は、さまざまな抗細菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などを含めることによって確実にすることができる。糖、塩化ナトリウムなどの等張化剤（ａｇｅｎｔｓ  ｔｏ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｔｏｎｉｃｉｔｙ）などを組成物に含めることも望ましい場合がある。さらに、注射可能な薬学的形態の吸収時間の延長を、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅延させる作用剤を含めることによってもたらすことができる。
【０１７０】
場合によっては、薬物の効果を長引かせるために、皮下注射または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅くすることが望ましい。これは、水溶性が乏しい結晶性材料または非結晶性材料の液体懸濁液を使用することによって実現することができる。このとき、薬物の吸収速度はその溶解速度に左右され、その溶解速度は同様に、結晶サイズおよび結晶形に左右され得る。あるいは、非経口投与された薬物形態の遅延吸収は、油状のビヒクルに薬物を溶解または懸濁させることによって実現される。
【０１７１】
例えば、当該記載の化合物は、固形の薬物を液体で再構成することによって作製された液剤の形態でヒトに送達することができる。この溶液は、注入液、例えば注射用水、０．９％塩化ナトリウム注射液、５％ブドウ糖注射液および乳酸リンゲル注射液などでさらに希釈することができる。再構成され、希釈された液剤は、最大効力を送達するために４〜６時間以内に使用することが好ましい。あるいは、当該記載の化合物は、錠剤またはカプセルの形態でヒトに送達することができる。
【０１７２】
注射可能なデポ剤の形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中に当該記載の化合物をマイクロカプセル封入したマトリクスを形成することによって作製する。ポリマーに対する薬物の比率、および利用した特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（酸無水物）が挙げられる。デポ剤注射製剤は、薬物を体組織と適合性のリポソームまたはマイクロエマルジョンに閉じ込めることによっても調製される。
【０１７３】
当該記載の化合物を医薬品としてヒトおよび動物に投与する場合、単独で、または例えば、０．１％〜９９％（より好ましくは、１０％〜３０％）の活性成分を薬学的に許容されるキャリアと組み合わせて含有する薬学的組成物として、与えることができる。他の実施形態では、薬学的組成物は、０．２〜２５％、好ましくは０．５〜５％または０．５〜２％の活性成分を含有してよい。これらの化合物は、療法のために、ヒトおよび他の動物に、例えば、皮下注射、皮下デポ剤、静脈内注射、静脈内注入または皮下注入を含めた任意の適切な投与経路によって投与することができる。これらの化合物は、急速に（＜１分以内）ボーラスとして、または長期間にわたって（数分間、数時間または数日間にわたって）さらにゆっくりと投与することができる。これらの化合物は、毎日または何日にもわたって、連続的に、または断続的に送達することができる。一実施形態では、化合物は、経皮的に（例えば、パッチ、マイクロニードル、マイクロポア、軟膏剤、マイクロジェットまたはナノジェットを使用して）投与することができる。
【０１７４】
選択された投与経路にかかわらず、適切な水和物の形態で使用することができる当該記載の化合物、および／またはその薬学的組成物は、当業者に公知の従来の方法によって薬学的に許容できる剤形に製剤化される。
【０１７５】
薬学的組成物中の活性成分の実際の投薬レベルは、特定の患者、組成物、および投与形態に対する所望の治療反応を実現するために有効なある量の活性成分を得るために、患者に対して有毒になることなく変更してよい。
【０１７６】
選択される投薬レベルは、利用される特定の当該記載の化合物、またはそのエステル、塩もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、利用されている特定の化合物が排出または代謝される速度、吸収の速度および程度、治療の持続時間、利用される特定の化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または材料、治療される患者の年齢、性別、重量、状態、全体的な健康および以前の病歴、および医学の分野で周知の同様の因子を含めた種々の因子に左右される。
【０１７７】
当技術分野における通常の技術を有する医師または獣医師は、必要な薬学的組成物の有効量を容易に決定し、処方することができる。例えば、医師または獣医師は、薬学的組成物中に利用される当該記載の化合物の用量を、所望の治療効果を実現するために必要なレベルよりも低いレベルで開始し、所望の効果が実現されるまで徐々に投与量を増加させることができる。
【０１７８】
一般に、当該記載の化合物の適切な１日用量は、治療効果をもたらすために有効な最低用量である化合物の量になる。そのような有効量は、一般に、上記の因子に左右される。一般に、患者に対する当該記載の化合物の静脈内用量、筋肉内用量、経皮用量、脳室内用量および皮下用量は、示した効果のために使用する場合、１時間当たり体重１キログラム当たり約１μｇ〜約５ｍｇにわたる。他の実施形態では、用量は、１時間当たり体重１キログラム当たり約５μｇ〜約２．５ｍｇにわたる。さらなる実施形態では、用量は、１時間当たり体重１キログラム当たり約５μｇ〜約１ｍｇにわたる。
【０１７９】
望ましい場合には、当該記載の化合物の有効な１日用量は、１日を通して適切な間隔で、必要に応じて、単位剤形で別々に投与される、２つの、３つの、４つの、５つの、６つの、またはそれを超える副用量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅ）として投与することができる。一実施形態では、当該記載の化合物を１日当たり１回用量として投与する。さらなる実施形態では、化合物を連続的に、静脈内経路または他の経路を介して投与する。他の実施形態では、化合物を毎日よりも少ない頻度で、例えば、２〜３日ごとに投与する。なおも他の実施形態では、化合物を週に１回以下の頻度の透析治療と併せて投与する。
【０１８０】
この治療を受けている被験体は、一般に、霊長類、特にヒト、ならびに他の哺乳動物、例えばウマ、ウシ、ブタおよびヒツジなど；ならびに家禽および愛玩動物を含めた、それを必要とする任意の動物である。
【０１８１】
当該記載の化合物は、それとして、または薬学的に許容されるキャリアと混合して投与することができ、抗菌性剤、例えばペニシリン、セファロスポリン、アミノグリコシドおよびグリコペプチドなどと併せて投与することもできる。したがって、連結的療法（ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｅ  ｔｈｅｒａｐｙ）は、最初に投与した活性化合物の治療効果が、次の活性化合物が投与されたときに完全には消失していないようなやり方で、活性化合物を逐次的に投与すること、同時に投与すること、および別々に投与することを含む。
【０１８２】
開示の化合物の投与経路
これらの化合物は、治療のために、任意の適切な投与経路によってヒトおよび他の動物に投与することができる。本明細書で使用される投与「経路」という用語は、これらに限定されないが、皮下注射、皮下デポ剤、静脈内注射、静脈内注入もしくは皮下注入、眼内注射、皮内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、気管内投与、脂肪内（ｉｎｔｒａａｄｉｐｏｓａｌ）投与、関節内投与、くも膜下腔内投与、硬膜外投与、吸入、鼻腔内投与、舌下投与、頬側投与、直腸内投与、膣内投与、槽内投与および局所投与、経皮投与、または局所送達による投与（例えばカテーテルまたはステントによる）を含むものとする。
【０１８３】
体に薬物を経皮的に送達することは、生物学的に活性な物質を被験体に全身送達するため、特に、タンパク質およびペプチドなどの経口的な生物学的利用能が乏しい物質を送達するために、望ましく、かつ都合のよい方法である。送達の経皮的経路は、物質が体内に侵入するのに対する有効な関門としての機能を果たす皮膚の角質層外層に浸透することができる小さな（例えば、約１，０００ダルトン未満の）親油性化合物、例えば、スコポラミンおよびニコチンで特に成功している。角質層の下は、生存表皮であり、それは血管を含有しないが、いくつかの神経を有する。さらに深部は真皮であり、それは、血管、リンパ管および神経を含有する。角質層関門を横断する薬物は、一般に、吸収および全身への分布のために、真皮内の毛細血管に拡散することができる。
【０１８４】
経皮送達における科学技術的な進歩は、タンパク質およびペプチドなどの、親水性の高分子量の化合物を、皮膚を横断して送達することの当技術分野における必要性に取り組むことに焦点が置かれてきた。１つの手法は、化学的方法または物理的方法を使用して角質層を破壊して角質層によってもたらされる関門を弱めることを伴う。低侵襲の技法を使用して皮膚内にミクロン寸法の輸送経路（マイクロポア）（特に、角質層内のマイクロポア）を創出することを伴う皮膚マイクロポレーション技法は、ごく最近の手法である。皮膚（角質層）内にマイクロポアを創出するための技法としては、熱マイクロポレーションまたは熱アブレーション、マイクロニードルアレイ、フォノフォレーシス、レーザーアブレーションおよび高周波アブレーションが挙げられる（ＰｒａｕｓｎｉｔｚおよびＬａｎｇｅｒ（２００８年）Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １１巻：１２６１〜６８頁；Ａｒｏｒａら、Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、３６４巻：２２７頁（２００８年）；Ｎａｎｄａら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、３巻：２３３頁（２００６年）；Ｍｅｉｄａｎら  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊ．  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、１１巻：３１２頁（２００４年））。
【０１８５】
上記の通り、ＰＴＨの分泌は、副甲状腺細胞の細胞表面で発現されるＣａＳＲによって制御される。したがって、ＣａＳＲを活性化するために、作用剤または化合物を副甲状腺細胞に送達しなければならない。カルシウム模倣剤の経皮送達は、角質層をわたる送達を実現し、副甲状腺細胞に到達する全身曝露をもたらさなければならない。今まで、当技術分野では、治療的な利益のために十分な量、具体的には、ＰＴＨを減少させるため、かつ／または高カルシウム血症の治療、減弱、緩和および／または軽減のために十分な量でカルシウム模倣化合物を経皮的に送達することができるかどうかは実証されていない。
【０１８６】
カルシウム模倣薬に加えて、１，２５−（ＯＨ）２ビタミンＤ３類似体が、慢性腎疾患および末期腎疾患に伴う副甲状腺機能亢進症の患者に対して最も一般的に使用される治療薬である。ビタミンＤ類似体は、腸における食餌性カルシウムの吸収を促進することによって作用し、ＰＴＨの合成および分泌を阻害することによってＰＴＨレベルを低下させる。ビタミンＤの静脈内送達および経口送達が治療的に使用されてきたが、今まで、当技術分野では、ビタミンＤ類似体、例えば、ＺＥＭＰＬＡＲ（商標）（パリカルシトール）、ＣＡＬＣＩＪＥＸ（登録商標）（カルシトリオール）、ＯＮＥ−ＡＬＰＨＡ（登録商標）（アルファカルシドール）およびＨＥＣＴＯＲＯＬ（登録商標）（ドキセルカルシフェロール）などを、治療的な利益のために十分な量で、具体的には副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）を減少させるために十分な量で経皮的に送達することができるかどうかは実証されていない。さらに、当技術分野では、カルシウム模倣剤を、ビタミンＤ類似体と組み合わせて（別々の製剤として、または共製剤（ｃｏ−ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）としてのいずれかで）、治療的な利益のために十分な量で、具体的にはＰＴＨを減少させるために十分な量で経皮送達によって同時投与することによって、副甲状腺機能亢進症に罹患している患者に有効な治療がもたらされるかどうかは実証されていない。
【０１８７】
カルシウム模倣剤は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）を減少させるため、および／または高カルシウム血症を治療するために局所送達または全身送達するために、角質層、および／または表皮の他の層を横断して投与することができる。一実施形態では、マイクロポレーションによってカルシウム模倣剤を送達する。マイクロポレーションのためのいくつもの技法１つのいずれも意図されており、そのいくつかが簡単に説明されている。
【０１８８】
マイクロポレーションは、角質層を突破して、本明細書に記載のカルシウム模倣剤を皮膚の表面を通して、かつ皮膚基底層および／または血流の内部に送達するために、機械的な手段および／または外部駆動力によって実現することができる。
【０１８９】
第１の実施形態では、マイクロポレーション技法は、皮膚の特定の領域の角質層を、基底表皮を著しく傷つけることなく角質層を切除するために十分な波長のパルスレーザー光、パルス幅、パルスエネルギー、パルス数、およびパルス繰り返し数を使用して切除することである。次いで、カルシウム模倣剤を切除領域に塗布する。レーザー誘起応力波（ＬＩＳＷ）と称される別のレーザーアブレーションマイクロポレーション技法は、強力なパルスレーザーによって生成する広帯域、単極かつ圧縮性の波を伴う。ＬＩＳＷは、組織と相互作用して角質層内の脂質を破壊し、それにより角質層の内部に細胞間チャネルが一過性に創出される。角質層内のこれらのチャネル、またはマイクロポアにより、カルシウム模倣剤が侵入することが可能になる。
【０１９０】
ソノフォレーシスまたはフォノフォレーシスは、超音波エネルギーを使用する、別のマイクロポレーション技法である。超音波は、２０ＫＨｚを超える周波数を保有する音波である。超音波は、連続的に、またはパルス状でのいずれかで適用することができ、さまざまな周波数および強度の範囲で適用することができる（Ｎａｎｄａら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、３巻：２３３頁（２００６年））。
【０１９１】
別のマイクロポレーション技法は、マイクロニードルアレイの使用を伴う。マイクロニードルのアレイは、被験体の皮膚領域に適用した場合、角質層に穴をあけ、神経を著しく刺激する深さ、または毛細血管を穿刺する深さまでは浸透しない。したがって患者は、カルシウム模倣剤を送達するマイクロポアを生成するためにマイクロニードルアレイを適用した際、不快感または痛みを感じない、またはわずかしか感じない。
【０１９２】
中空または充実したマイクロニードルで構成されるマイクロニードルアレイであって、カルシウム模倣剤を、ニードルの外面にコーティングすることまたは中空のニードルの内部から分配することができるマイクロニードルアレイが意図されている。マイクロニードルアレイの例は、例えば、Ｎａｎｄａら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、３巻：２３３頁（２００６年）およびＭｅｉｄａｎら  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊ．  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、１１巻：３１２頁（２００４年）に記載されている。第１世代のマイクロニードルアレイは、外側に治療剤をコーティングした充実したシリコンマイクロニードルで構成されていた。ニードルのマイクロアレイを皮膚に押しつけ、約１０秒後に取り除くと、ニードル上の作用剤の体内への浸透が容易に実現された。第２世代のマイクロニードルアレイは、充実したまたは中空のシリコン、ポリカーボネート、チタンまたは他の適切なポリマーのマイクロニードルで構成され、治療用化合物の液剤でコーティングされている、または治療用化合物の液剤で満たされていた。新しい世代のマイクロニードルアレイは、生分解性ポリマーから調製され、治療剤でコーティングしたニードルの先端部分が角質層内にとどまり、ゆっくりと溶解する。
【０１９３】
マイクロニードルは、金属、セラミックス、半導体、有機物、ポリマーおよび複合物を含めた種々の材料から構築することができる。構築物の例示的な材料としては、薬学的グレードのステンレス鋼、金、チタン、ニッケル、鉄、スズ、クロム、銅、パラジウム、白金、これらの金属または他の金属の合金、ケイ素、二酸化ケイ素、およびポリマーが挙げられる。代表的な生分解性ポリマーとしては、乳酸およびグリコール酸などのヒドロキシ酸のポリマー、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリラクチド−ｃｏ−グリコリド、およびポリ（エチレングリコール）との共重合体、ポリ酸無水物、ポリ（オルト）エステル、ポリウレタン、ポリ（酪酸）、ポリ（吉草酸）、およびポリ（ラクチド−ｃｏ−カプロラクトン）が挙げられる。代表的な非生分解性ポリマーとしては、ポリカーボネート、ポリエステル、およびポリアクリルアミドが挙げられる。
【０１９４】
マイクロニードルは、まっすぐな軸または先細の軸を有してよい。一実施形態では、マイクロニードルの直径は、マイクロニードルの基部末端において最大であり、基部の遠位末端点まで先細になる。マイクロニードルは、まっすぐな（先細でない）部分および先細の部分の両方を含む軸を有するように製作することもできる。該ニードルは、先細の末端を全く有さなくてもよい、すなわち単に先端部分がとがっていない円柱または先端部分が平らな円柱であってよい。実質的に均一な直径を有するが、１点に向けて先細になっていない中空のマイクロニードルは、本明細書では「マイクロチューブ」と言及される。本明細書で使用される、「マイクロニードル」という用語は、別段の指定のない限り、マイクロチューブおよび先細のニードルの両方を包含する。
【０１９５】
電気穿孔は、皮膚にマイクロポアを創出するための別の技法である。この手法では、角質層の内部に一過性の、浸透性の細孔を創出するために、マイクロ秒またはミリ秒の長さの高圧の電気パルスの印加を使用する。
【０１９６】
他のマイクロポレーション技法は、皮膚にマイクロチャネルを創出するために電波の使用を含む。熱アブレーションは、分子量が大きい化合物の経皮的な送達を実現するためのさらに別の手法である。
【０１９７】
出願人らは、低用量のカルシウム模倣剤を、ＳＨＰＴを治療するために長期間にわたって治療的に投与することができることを発見した。これは、現在通用している他のカルシウム模倣薬（例えば、シナカルセト塩酸塩）の必要用量と著しく異なる。
【０１９８】
ＶＩ．併用療法
上記の通り、使用方法は、単独で、または高カルシウム血症および／または骨疾患を治療するための他の手法と組み合わせて使用することができる。そのような他の手法としては、これらに限定されないが、ビスホスホネート剤、インテグリン遮断薬、ホルモン補充療法、選択的なエストロゲン受容体モジュレーター、カテプシンＫ阻害剤、ビタミンＤ療法、ビタミンＤ類似体、例えばＺＥＭＰＬＡＲ（商標）（パリカルシトール）、ＣＡＬＣＩＪＥＸ（登録商標）（カルシトリオール）、ＯＮＥ−ＡＬＰＨＡ（登録商標）（アルファカルシドール）およびＨＥＣＴＯＲＯＬ（登録商標）（ドキセルカルシフェロール）など、抗炎症剤、低用量ＰＴＨ療法（エストロゲンあり、またはなし）、カルシウム模倣薬、ホスフェート結合剤、カルシトニン、ＲＡＮＫリガンドの阻害剤、ＲＡＮＫリガンドに対する抗体、オステオプロテゲリン、アデノシンアンタゴニスト、およびＡＴＰプロトンポンプ阻害剤などの作用剤を用いた治療が挙げられる。
【０１９９】
一実施形態では、併用療法では、ビタミンＤまたはビタミンＤ類似体をカルシウム模倣剤と組み合わせて使用する。ビタミンＤはカルシウムの吸収に役立ち、カルシウムおよびリン（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ）の正常な血中レベルを維持するように機能する。ＰＴＨは、腸におけるカルシウムの吸収を、ビタミンＤの活性型である１，２５−（ＯＨ）２ビタミンＤの産生を増加させることによって増強するように働く。ＰＴＨは、腎臓からのリンの排出も刺激し、骨からの放出を増加させる。
【０２００】
上記の通り、二次性副甲状腺機能亢進症は、活性なビタミンＤホルモンのレベルが不十分であることに関連する副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）の上昇を特徴とする。二次性副甲状腺機能亢進症（ｈｙｐｅｒｐａｒａｔｈｒｙｏｉｄｉｓｍ）の治療において、ビタミンＤまたはビタミンＤ類似体を使用して、上昇したＰＴＨレベルを低下させることができる。一実施形態では、本発明は、カルシウム模倣剤およびビタミンＤ類似体を含む薬学的組成物を包含する。
【０２０１】
一実施形態では、本発明は、カルシウム模倣剤およびＺＥＭＰＬＡＲ（商標）（パリカルシトール）を含む薬学的組成物を包含する。パリカルシトールは、ビタミンＤの代謝活性型であるカルシトリオールの合成類似体である。Ｚｅｍｐｌａｒの推奨初回用量は、ベースラインであるインタクトな副甲状腺ホルモン（ｉＰＴＨ）レベルに基づく。ベースラインのｉＰＴＨレベルが５００ｐｇ／ｍＬ以下の場合は、１日用量は１μｇであり、「１週間に３回」用量（多くて１日おきで投与される）は２μｇである。ベースラインのｉＰＴＨが５００ｐｇ／ｍＬを超える場合は、１日用量は２μｇであり、「１週間に３回」用量（１日おき以下で投与される）は４μｇである。その後、投薬は、血清カルシウムおよび血清リンをモニターしながら、個別化し、血清血漿ｉＰＴＨレベルに基づかなければならない。パリカルシトールは、米国特許第５，２４６，９２５号および米国特許第５，５８７，４９７号に記載されている。
【０２０２】
別の実施形態では、本発明は、カルシウム模倣剤およびＣＡＬＣＩＪＥＸ（登録商標）（カルシトリオール）を含む薬学的組成物を包含する。カルシトリオールはビタミンＤの代謝活性型である。ＣＡＬＣＩＪＥＸ（登録商業）（経口）に対して推奨される初回投与量は１日当たり０．２５μである。この量は、４〜８週間おきに、１日当たり０．２５μｇずつ増加させることができる。正常なカルシウムレベル、またはほんのわずかだけ低下したカルシウムレベルが、１日おきに０．２５μｇの投与量に応答し得る。透析を受けている患者に対しては、ＣＡＬＣＩＪＥＸ（登録商業）（ＩＶ）の推奨初回用量は、１週間当たり３回、１日おきに０．０２μｇ／ｋｇ（１〜２μｇ）である。この量は、２〜４週間ごとに０．５〜１μｇずつ増加させることができる。カルシトリオールは、米国特許第６，０５１，５６７号および米国特許第６，２６５，３９２号および米国特許第６，２７４，１６９号に記載されている。
【０２０３】
一実施形態では、カルシウム模倣剤およびＨＥＣＴＯＲＯＬ（登録商標）（ドキセルカルシフェロール）を含む薬学的組成物が提供される。ドキセルカルシフェロールは、ｉｎ
ｖｉｖｏにおいて代謝的活性化を受けて、天然に存在する、ビタミンＤの生物学的活性型である１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ２を形成する、ビタミンＤの合成類似体である。ＨＥＣＴＯＲＯＬ（登録商標）の推奨初回用量は、毎週３回、透析時に（およそ１日おきに）１０μｇの投与である。初回用量は、必要に応じて、血中ｉＰＴＨを１５０〜３００ｐｇ／ｍＬの範囲に低減させるように、調整するべきである。用量は、ｉＰＴＨが５０％低減されない場合、および標的範囲に到達できない場合は、８週間間隔で２．５μｇずつ増加させることができる。ＨＥＣＴＯＲＯＬの最大の推奨用量は、１週間に３回、透析時に２０μｇ、１週間当たり合計６０μｇの投与である。ドキセルカルシフェロールは、米国特許第５，６０２，１１６号および米国特許第５，８６１，３８６号および米国特許第５，８６９，４７３号および米国特許第６，９０３，０８３号に記載されている。
【０２０４】
組み合わせレジメンにおいて利用するための療法（治療法または手順）の特定の組み合わせは、所望の治療法および／または手順と、実現される所望の治療効果との適合性を考慮にいれる。利用する療法により、同じ障害に対して所望の効果を実現することができる（例えば、発明の化合物は、同じ障害を治療するために使用される別の作用剤と同時に投与することができる）、または、異なる効果を実現することができる（例えば、任意の有害作用の制御）ことも理解されよう。本明細書で使用される、特定の疾患または状態を治療または予防するために通常投与される追加的な治療剤は、「治療されている疾患または状態に適している」ことが公知である。
【０２０５】
本明細書で定義した本発明の併用治療は、前記治療の個々の構成成分を同時に、逐次的に、または別々に投与することとして実現することができる。
【０２０６】
化合物またはその薬学的に許容される組成物は、埋め込み型の医療用デバイス、生物侵食性（ｂｉｏ−ｅｒｏｄｉｂｌｅ）ポリマー、埋め込み型ポンプ、および坐剤をコーティングするためにも組成物に組み込むことができる。したがって、別の態様では、上で概説されているような当該記載の化合物を含む、埋め込み型デバイスをコーティングするための組成物、および埋め込み型デバイスをコーティングするために適したキャリアが意図されている。さらに別の態様では、上で概説されている化合物を含む組成物、および前記埋め込み型デバイスをコーティングするのに適したキャリアでコーティングされた埋め込み型デバイスが包含される。
【０２０７】
適切なコーティングおよびコーティングされた埋め込み型デバイスの一般的な調製は、米国特許番号第６，０９９，５６２号；同第５，８８６，０２６号；および同第５，３０４，１２１号に記載されている。コーティングは、一般には、ヒドロゲルポリマー、ポリメチルジシロキサン、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール、ポリラクチド、エチレン酢酸ビニル、ならびにそれらの混合物などの生体適合性ポリマー材料である。コーティングは、必要に応じて、フルオロシリコーン、多糖（ｐｏｌｙｓａｃｃａｒｉｄｅ）、ポリエチレングリコール、リン脂質またはそれらの組み合わせの適切な保護膜によりさらに覆って、組成物に制御放出特性を与えることができる。
【０２０８】
ＶＩＩ．治療の有効性を決定するための潜在的な臨床マーカー
当該記載の治療方法の有効性の決定は、種々の方法によって決定することができる。
【０２０９】
血清カルシウムの正常なレベルは、８．８ｍｇ／ｄＬ〜１０．４ｍｇ／ｄＬ（２．２ｍｍｏｌ／Ｌ〜２．６ｍｍｏｌ／Ｌ）の範囲内である。ある特定の場合では、治療の有効性は、これらに限定されないが、血清総カルシウムおよび血清カルシウムイオン、アルブミン、血漿ＰＴＨ、ＰＴＨｒＰ、ホスフェート、ビタミンＤ、およびマグネシウムを含めた、カルシウムに関連する血清および尿のマーカーを測定することによって決定することができる。
【０２１０】
他の場合では、有効性は、骨塩密度（ＢＭＤ）を測定することによって、または、血清中または尿中の、骨形成および／または骨吸収についての生化学的マーカーを測定することによって決定することができる。潜在的な骨形成マーカーとしては、これらに限定されないが、総アルカリホスファターゼ、骨アルカリホスファターゼ、オステオカルシン、低カルボキシル化オステオカルシン、Ｃ末端Ｉ型プロコラーゲンプロペプチド、およびＮ末端Ｉ型プロコラーゲンプロペプチドが挙げられる。潜在的な骨吸収マーカーとしては、これらに限定されないが、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリジン、グリコシル−ガラクトシルヒドロキシリジン、ガラクトシルヒドロキシリジン、ピリジノリン、デオキシピリジノリン、Ｉ型コラーゲンＮ末端架橋テロペプチド、Ｉ型コラーゲンＣ末端架橋テロペプチド、ＭＭＰによって生成されたＩ型コラーゲンＣ末端架橋テロペプチド、骨シアロタンパク質、酸性ホスファターゼおよび酒石酸抵抗性酸性ホスファターゼが挙げられる。
【０２１１】
他の場合では、有効性は、投薬前の（ベースライン）レベルと比較したパーセントＰＴＨ低下によって、および／または患者に有益であると一般に認められている（例えば、米国腎臓財団によって確立されたガイドライン）望ましいＰＴＨレベルの実現によって決定することができる。さらに他の場合では、有効性は、副甲状腺機能亢進症疾患に関連する副甲状腺過形成における低下を測定することによって決定することができる。
【０２１２】
当該記載の治療方法を、治療を必要とする被験体に施すと、治療方法により、例えば、血清総カルシウム、血清カルシウムイオン、血中総カルシウム、血中カルシウムイオン、アルブミン、血漿ＰＴＨ、血中ＰＴＨ、ＰＴＨｒＰ、ホスフェート、ビタミンＤ、マグネシウム、骨塩密度（ＢＭＤ）、総アルカリホスファターゼ、骨アルカリホスファターゼ、オステオカルシン、低カルボキシル化オステオカルシン、Ｃ末端Ｉ型プロコラーゲンプロペプチド、Ｎ末端Ｉ型プロコラーゲンプロペプチド、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリジン、グリコシル−ガラクトシルヒドロキシリジン、ガラクトシルヒドロキシリジン、ピリジノリン、デオキシピリジノリン、Ｉ型コラーゲンＮ末端架橋テロペプチド、Ｉ型コラーゲンＣ末端架橋テロペプチド、ＭＭＰによって生成されたＩ型コラーゲンＣ末端架橋テロペプチド、骨シアロタンパク質、酸性ホスファターゼおよび酒石酸抵抗性酸性ホスファターゼの１つ以上を測定したところ、効果がもたらされることが予想される。効果は、予防的治療ならびに現存する疾患の治療も含む。
【０２１３】
生物学的に有効な分子は、共有結合または非共有結合性の相互作用で、当該記載のペプチドに作動可能に連結していてよい。特定の実施形態では、作動可能に連結した生物学的に有効な分子は、連結した分子の一部分として化合物に性質を付与することによって、当該記載の化合物の薬物動態を変化させ得る。生物学的に有効な分子によって当該記載の化合物に付与され得る性質のいくつかとしては、これらに限定されないが、化合物が体内の離れた場所に送達されること；化合物の活性が体の所望の場所に集中し、他の場所でのその効果が低下すること；化合物を用いた治療の副作用が低下すること；化合物の浸透性が変わること；化合物の生物学的利用能または体への送達速度が変わること；化合物を用いた治療の効果の長さが変わること；化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける化学的安定性が変化すること；化合物のｉｎ  ｖｉｖｏにおける安定性、半減期、クリアランス、吸収、分布および／または排出が変化すること；化合物の効果の開始速度および減衰速度が変化すること；化合物が効果を有することが可能になることによって許容作用（ｐｅｒｍｉｓｓｉｖｅ  ａｃｔｉｏｎ）がもたらされることが挙げられる。
【０２１４】
別の態様では、当該記載の化合物は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）とコンジュゲートさせることができる。選択されたＰＥＧは、任意の都合のよい分子量のものであってよく、直鎖状または分枝状であってよく、必要に応じて、リンカーによってコンジュゲートすることができる。ＰＥＧの平均分子量は、好ましくは、約２キロダルトン（ｋＤａ）〜約１００ｋＤａ、より好ましくは約５ｋＤａ〜約４０ｋＤａにわたる。あるいは、使用するＰＥＧ部分は、２ｋＤａ、３ｋＤａ、４ｋＤａ、５ｋＤａ、６ｋＤａ、７ｋＤａ、８ｋＤａ、９ｋＤａ、１０ｋＤａ、１１ｋＤａ、１２ｋＤａ、１３ｋＤａ、１４ｋＤａ、１５ｋＤａ、１６ｋＤａ、１７ｋＤａ、１８ｋＤａ、１９ｋＤａ、２０ｋＤａであってよい。
【０２１５】
当該記載の化合物は、化合物上の任意の位置に位置する適切なアミノ酸残基を通じてＰＥＧとコンジュゲートさせることができる。当該記載の化合物は、必要に応じて、ＰＥＧがコンジュゲートされた、例えば、リジンなどの追加的なアミン含有残基を含めた追加的なアミノ酸残基を含有してよい。
【０２１６】
ペグ化ペプチドにより、コンジュゲートされたペプチドの血清半減期が増加することが当技術分野で公知である。ペグ化ペプチドを形成するための種々の方法が当技術分野で公知である。例えば、ＰＥＧ部分は、アミノ末端に、カルボキシ末端に、または特許請求されたペプチドの側鎖によって、必要に応じて連結基の存在によって連結させることができる。他の実施形態では、ＰＥＧ部分はシステインなどのチオール含有アミノ酸の硫黄に連結させることができる、または、リジンなどのアミン含有アミノ酸の側鎖に結び合わせることができる。
【０２１７】
ＰＥＧ基は、一般に、ＰＥＧ部分の反応性基（例えば、アルデヒド、アミン、オキシム、ヒドラジン  チオール、エステル、またはカルボン酸基）を通じて、当該記載の化合物のアミノ末端、カルボキシ末端、または側鎖の位置に位置してよい当該記載の化合物の反応性基（例えば、アルデヒド、アミン、オキシム、ヒドラジン、エステル、酸基またはチオール基）に、アシル化またはアルキル化によって当該記載の化合物に結合する。合成ペプチドのペグ化を調製するための１つの手法は、溶液中でコンジュゲート結合によって、それぞれが他方に対して相互に反応性である官能基を有するペプチドとＰＥＧ部分を結合させることからなる。ペプチドは、従来の液相合成技法または固相合成技法を使用して容易に調製することができる。ペプチドとＰＥＧをコンジュゲートすることは、一般には、水相で行い、逆相ＨＰＬＣによってモニターすることができる。ペグ化ペプチドは、当業者に公知の標準の技法を使用して容易に精製し、特徴づけることができる。
【０２１８】
１つ以上の個々の当該記載の化合物のサブユニットは、特定の側鎖または末端残基と反応することが公知のさまざまな誘導体化剤で修飾することもできる。例えば、リジニル（ｌｙｓｉｎｙｌ）残基およびアミノ末端残基を、リジニル残基またはアミノ残基の電荷を逆転させる無水コハク酸または他の同様のカルボン酸の無水物と反応させることができる。他の適切な試薬としては、例えば、メチルピコリンイミデートなどのイミドエステル；ピリドキサール；ピリドキサールリン酸；クロロボロヒドリド；トリニトロベンゼンスルホン酸；Ｏ−メチルイソ尿素；２，４，−ペンタンジオン；およびトランスアミナーゼによって触媒されるグリオキサル酸との反応が挙げられる。アルギニル残基は、従来の作用剤、例えば、フェニルグリオキサール、２，３−ブタンジオン、１，２−シクロヘキサンジオン、およびニンヒドリンとの反応によって修飾することができる。
【０２１９】
さらに、当該記載の化合物は、生物分析的なＥＬＩＳＡ測定用の抗体を開発するため、ならびに免疫原性を評価するために有用な免疫原性残基を提供する非カチオン性残基を含むように修飾することができる。例えば、当該記載の化合物は、チロシン残基および／またはグリシン残基を組み込むことによって修飾することができる。チロシル残基の特異的な修飾は、チロシル残基に分光標識を導入することに関して特に興味深い。非限定的な例としては、芳香族ジアゾニウム化合物またはテトラニトロメタンとの反応が挙げられる。最も一般的には、Ｎ−アセチルイミダゾールおよびテトラニトロメタンを使用して、それぞれＯ−アセチルチロシル誘導体および３−ニトロ誘導体を形成する。
【０２２０】
ＶＩＩ．当該開示の化合物を含むキット
本発明は、本発明の治療レジメンを実行するためのキットも提供する。そのようなキットは、治療有効量の、ＣａＳＲモジュレーターとしての活性を有する当該記載の化合物を、薬学的に許容される形態で、単独で、または薬学的に許容される形態の他の作用剤と組み合わせて含む。好ましい薬学的形態としては、滅菌生理食塩水、ブドウ糖溶液、緩衝溶液、滅菌水、または他の薬学的に許容される滅菌流体と組み合わせた当該記載の化合物が挙げられる。あるいは、組成物は、抗菌剤または静菌剤を含んでよい。あるいは、組成物は、凍結乾燥または乾燥されていてよい。この場合、キットは、注射用溶液を形成するための、薬学的に許容される溶液、好ましくは滅菌された溶液をさらに含んでよい。別の実施形態では、キットは、組成物を注射するための、好ましくは滅菌形態に包装されたニードルまたはシリンジをさらに含んでよい。他の実施形態では、キットは、組成物を被験体に投与するための指示手段をさらに含む。指示手段は、折込み書面、オーディオテープ、視聴覚テープ、または組成物を被験体に投与することについて指示する任意の他の手段であってよい。
【０２２１】
一実施形態では、キットは、（ｉ）ＣａＳＲモジュレーターとしての活性を有する当該記載の化合物を含有する第１の容器；および（ｉｉ）使用するための指示手段を含む。別の実施形態では、キットは、（ｉ）本明細書に記載の化合物を含有する第１の容器、および（ｉｉ）希釈または再構成するための、薬学的に許容されるビヒクルを含有する第２の容器を含む。
【０２２２】
別の実施形態では、キットは、（ｉ）ＣａＳＲモジュレーターとしての活性を有する当該記載の化合物を含有する第１の容器；（ｉｉ）抗高カルシウム血症剤を含有する第２の容器；および（ｉｉｉ）使用するための指示手段を含む。
【０２２３】
一実施形態では、抗高カルシウム血症剤は、ビスホスホネート剤、ホルモン補充治療剤、ビタミンＤ療法、ビタミンＤ類似体、例えば、ＺＥＭＰＬＡＲ（商標）（パリカルシトール）；ＣＡＬＣＩＪＥＸ（登録商標）（カルシトリオール）、ＯＮＥ−ＡＬＰＨＡ（登録商標）（アルファカルシドール）およびＨＥＣＴＯＲＯＬ（登録商標）（ドキセルカルシフェロール）、低用量ＰＴＨ（エストロゲンあり、またはなし）、ならびにカルシトニンからなる群から選択される作用剤である。
【０２２４】
関連する態様では、本発明は、上記のキットの内容物を含む製造品を提供する。例えば、本発明は、単独の、または他の作用剤と組み合わせた有効量の当該記載のペプチド、および本明細書に記載の疾患を治療するための使用について示す指示手段を含む製造品を提供する。
【実施例】
【０２２５】
以下の実施例は、本明細書に記載の化合物および方法を例示するために提供され、本明細書に記載の化合物および方法を限定するために提供されるのではない。当業者は、本明細書に記載の主題の真の主旨および範囲から逸脱することなく、さまざまな改変を行うことができる。
（実施例１）
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２で処置した動物における疾患の進行
【０２２６】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の治療有効性を、腎不全の５／６腎摘出（Ｎｘ）ラットモデルを使用して評価した。雄の５／６ＮｘラットをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ）から入手した。これらのラットは一方の腎臓および他方の腎臓の２／３の外科的除去を受けており、また、高リン酸食を与えた。動物を用いる全ての実験手順は、ＩＡＣＵＣガイドラインに従って実施した。統計解析はボンフェローニの事後検定を伴う一元配置ＡＮＯＶＡを用いて実施した。ｐ値は全て公称である。
Ａ．ＰＴＨ抑制
【０２２７】
雄の５／６Ｎｘラットに、ＩＶ注射による１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＩＶ）、食塩水（ＩＶ）、または１０ｍｇ／ｋｇの用量のシナカルセト（ＰＯ）を、２８日間、毎日投薬した。ＰＴＨの測定のために尾静脈血液試料を定期的に取得した。ＰＴＨを、Ｉｍｍｕｔｏｐｉｃｓ  ＢｉｏＡｃｔｉｖｅ  Ｉｎｔａｃｔ  ＥＬＩＳＡ（Ｃａｔ番号６０−２７００；Ｉｍｍｕｔｏｐｉｃｓ、Ｓａｎ  Ｃｌｅｍｅｎｔｅ、ＣＡ）を使用して測定した。
【０２２８】
４週間後、平均ベースラインＰＴＨレベルは４１３〜４９８ｐｇ／ｍＬにわたった（図１）。最終投薬の６時間後に取得された測定値により、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物およびシナカルセトで処置した動物においてＰＴＨレベルが低下したことが示される。最終投薬の１６時間後および４８時間後に取得された測定値により、シナカルセトで処置した動物においてはＰＴＨレベルが増加したが、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物ではＰＴＨレベルが抑制されたままであったことが示される。
Ｂ．副甲状腺過形成
【０２２９】
雄の５／６Ｎｘラットに、３ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）を週に３回、６週間にわたって投薬した。対照の動物は無処置であった。屠殺時に、副甲状腺過形成の程度を測定するための免疫組織学的（ＩＨＣ）分析用の組織試料を取り出した。
【０２３０】
動物由来の副甲状腺を、ブロモデオキシウリジン（５−ブロモ−２’−デオキシウリジン、ＢｒｄＵ）を使用して分析した。
【０２３１】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物由来の副甲状腺では、ＢｒｄＵ陽性細胞が無処置の対照と比較して少なく（図２Ａ〜Ｃ）、これは、処置した動物において副甲状腺の増殖が低下したことを示していた。
【０２３２】
さらに、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物では、副甲状腺の重量が無処置の対照と比較して低下した（図２Ｄ）。
Ｃ．異所性石灰化
【０２３３】
雄の５／６Ｎｘラットに、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）、またはビヒクル対照（ＳＣ）を週に３回、６週間にわたって投薬した。屠殺時に、残りの腎臓の切片を、フォンコッサ法を用いてカルシウム染色についてＩＨＣによって分析した。図３Ａ〜Ｂに示されているように、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（３ｍｇ／ｋｇ）で処置した動物由来の腎臓切片では対照の動物由来の腎臓切片よりも石灰化が少なかった。
【０２３４】
雄の５／６Ｎｘラットに、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）を３ｍｇ／ｋｇの用量で週に３回、６週間にわたって投薬した。対照の動物は無処置であった。屠殺時に、大動脈組織試料および腎臓組織試料を取り出し、原子発光分析法を用いて分析した。図３Ｃに示されているように、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物由来の大動脈および腎臓ではカルシウム含有量が無処置の動物よりも実質的に少なかった。
Ｄ．腎機能
【０２３５】
雄の５／６Ｎｘラットに、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）、またはビヒクル対照（ＳＣ）を週に３回、６週間にわたって投薬した。尾静脈血液試料を定期的に取得して、ＱｕａｎｔｉＣｈｒｏｍ（商標）キット（ＤＩＣＴ−５００；ＢｉｏＡｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｈａｙｗａｒｄ、ＣＡ）を使用して腎機能のマーカーである血清クレアチニンを測定した。
【０２３６】
平均ベースラインクレアチニンレベル（処置前）は、約１．０６ｍｇ／ｄＬから約１．０９ｍｇ／ｄＬまでにわたった。６週間の試験にわたって、ビヒクルを受けた動物では血清クレアチニンの大きな増加が示された（図４）。対照的に、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物では、血清クレアチニンの上昇が６週間の試験にわたって用量依存的に抑制された。
Ｅ．ＰＴＨ受容体の発現
【０２３７】
雄のＮｘラットに、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）を３ｍｇ／ｋｇの用量で週に３回、６週間にわたって投薬した。年齢を釣り合わせた正常ラットを対照として使用した。屠殺時に、５／６Ｎｘラット由来の副甲状腺および対照由来の副甲状腺を取り出し、抗体を使用して組織切片を染色して、ＣａＳＲ、ビタミンＤ受容体およびＦＧＦＲ１タンパク質を検出した。
【０２３８】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で処置した動物の副甲状腺において、正常対照の副甲状腺におけるものよりも高レベルのＣａＳＲ（図５Ａ）、ＦＧＦＲ１（図５Ｂ）およびビタミンＤ受容体（図５Ｃ）が認められた。
Ｆ．ウォッシュアウト後のベースラインＰＴＨ
【０２３９】
雄のＮｘラットを、１週間にわたり、１ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）（ＳＣ）を用いて、１日目、３日目、６日目および８日目に処置した（図６Ａ）。８日目の投薬の後に１週間のウォッシュアウトを行った。
【０２４０】
図６Ｂに示されているように、３ｍｇ／ｋｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を受けているラットでは、１週間のウォッシュアウト後に測定したところベースラインＰＴＨが５０％低下した。
（実施例２）
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２で処置した動物における疾患の進行
【０２４１】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）の治療有効性を、ラットにおける慢性腎不全のアデニン誘発性モデルを使用して評価した。ラットをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ）から入手した。ラットに０．７５％アデニン（Ｔｅｋｌａｄ  Ｃｕｓｔｏｍ  Ｄｉｅｔ）を含有する低タンパク質（２．５％）、高リン（０．９２％）食を与えた。動物を、ビヒクル（１０ｍＭのコハク酸、０．８５％ＮａＣｌ、０．９％ベンジルアルコール、ｐＨ４．５）の皮下投薬または０．３ｍｇ／ｋｇまたは１ｍｇ／ｋｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）（ＳＣ）の皮下投薬を、４週間にわたって毎日受けるように無作為に割り当てた。対照群にはアデニン無しの同一の高リン食および組織を与えた。食餌の開始時に処置を開始した。動物を用いる全ての実験手順は、ＩＡＣＵＣガイドラインに従って実施した。統計解析はボンフェローニの事後検定を伴う一元配置ＡＮＯＶＡを用いて実施した。ｐ値は全て公称である。
Ａ．ＰＴＨ抑制
【０２４２】
尿毒症のラットにおけるＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）処置のＰＴＨレベルに対する効果が図７に示されている。血漿ＰＴＨを、Ｉｍｍｕｎｏｔｏｐｉｃｓ  ＢｉｏＡｃｔｉｖｅ  Ｉｎｔａｃｔ  ＥＬＩＳＡ（Ｉｍｍｕｔｏｐｉｃｓ、Ｓａｎ  Ｃｌｅｍｅｎｔｅ、ＣＡ）を使用して測定した。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）を投薬する前には、全ての処置群の血漿ＰＴＨレベルは同様であった。アデニンなし対照の動物では、４週間の試験にわたって一貫した血漿ＰＴＨレベルが維持された。ビヒクルで処置した尿毒症の動物については試験の経過にわたってＰＴＨレベルが有意に上昇した。０．３ｍｇ／ｋｇまたは１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で２週間および４週間にわたって処置した尿毒症の動物では、ビヒクルで処置した動物よりも血漿ＰＴＨが有意に低かった。
Ｂ．クレアチニン抑制
【０２４３】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）処置の血清クレアチニンレベルに対する効果が図８に示されている。ＱｕａｎｔｉＣｈｒｏｍ（商標）キット（ＢｉｏＡｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｈａｙｗａｒｄ、ＣＡ）を使用して血清クレアチニンを測定した。ビヒクルで処置した尿毒症の動物からの血清クレアチニンレベルは、４週間の終わりには、尿毒症でない動物の対照群と比較しておよそ８〜１０倍高かった。０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で処置した尿毒症の動物では、血清クレアチニンレベルがビヒクルで処置した尿毒症のラットと比較して有意に低かった。１ｍｇ／ｋｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）の用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で処置した尿毒症の動物では、血清クレアチニンレベルがビヒクルで処置した対照と比較しておよそ５０％低かった。
Ｃ．リン抑制
【０２４４】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）処置の血清リンレベルに対する効果が図９に示されている。血清リンレベルは、尿毒症の動物において尿毒症でない対照と比較して増加したが、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で４週間にわたって処置した尿毒症の動物では、血清リンレベルの有意な低下が示された。
Ｄ．血清カルシウム抑制
【０２４５】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）処置の血清カルシウムレベルに対する効果が図１０に示されている。尿毒症のラットにおける血清カルシウムレベルは対照ラットにおけるカルシウムレベルと同様であったが、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で４週間にわたって処置した尿毒症の動物では、血清カルシウムがビヒクルで処置したラットと比較して用量依存的に有意に低下した。
Ｅ．血清カルシウム−リン抑制
【０２４６】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）処置の血清カルシウム−リン生成物レベルに対する効果が図１１に示されている。Ｃｏｂａｓ  ｃ−５０１分析器を使用してリンおよびカルシウムを決定した。４週間にわたってビヒクルで処置した尿毒症の動物では、カルシウム−リン生成物が尿毒症でない動物と比較しておよそ２．５倍増加した。０．３ｍｇ／ｋｇまたは１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で４週間にわたって処置した尿毒症の動物では、血清カルシウム−リン生成物がそれぞれおよそ２０％および４０％の低下を示した。
Ｆ．副甲状腺過形成
【０２４７】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）処置の副甲状腺腫大に対する効果も慢性腎不全のアデニン誘発性ラットモデルを使用して決定した。０．３ｍｇ／ｋｇまたは１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で４週間にわたって処置した後、尿毒症のラットを屠殺し、副甲状腺を取り出し、トリミングし、秤量した。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で処置した群の副甲状腺の重量はビヒクルで処置した群由来の副甲状腺と比較して有意に低下した。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で処置した群の副甲状腺の重量は尿毒症でない動物由来の副甲状腺と比較して有意差がなかった。
Ｇ．血管石灰化
【０２４８】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）処置の血管石灰化に対する効果も慢性腎不全のアデニン誘発性ラットモデルを使用して決定した。０．３ｍｇ／ｋｇまたは１ｍｇ／ｋｇの用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で４週間にわたって処置した後、尿毒症のラットを屠殺し、大動脈組織を分析した。大動脈組織を処理し、アリザリンレッドおよびフォンコッサ法によって染色して、血管のミネラル化を可視化した。０〜５のスコアリングシステムを使用して、全ての動物からのフォンコッサ染色された大動脈の同一の切片を盲検式でスコア化した。アリザリンレッドおよびフォンコッサ染色の結果により、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で処置した尿毒症のラット由来の大動脈ではミネラル化がわずかであった、または全くなかったことが示された。図１３に示されているように、ビヒクルで処置した尿毒症の動物の６７％（１０／１５）で大動脈ミネラル化を示す陽性フォンコッサ染色が実証された。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ｒｒａｒａｒ−ＮＨ２（配列番号２８）で処置した尿毒症のラットは、感知できるフォンコッサ染色のないことが実証された。０．３ｍｇ／ｋｇ処置群の動物１匹のみで、いくらかの最小のミネラル化が示された。
（実施例３）
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２の単回投薬ならびにｉＰＴＨおよびカルシウムに対する効果
【０２４９】
臨床研究を実施して、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の漸増単一用量をＣＫＤ−ＢＭＤおよびＳＨＰＴと診断された患者、ならびに血液透析を受けていた患者にＩＶボーラスによって投与することの安全性および耐容性を評価した。データを生成して、患者の血清中のインタクトなＰＴＨ（ｉＰＴＨ）および血清カルシウムの変化ならびに単一用量のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の生物学的利用能を評価した。
【０２５０】
週に３回血液透析（ＨＤ）を受けている被験体における二重盲検無作為化プラセボ対照多施設試験を設計し、実施した。主要な組み入れ基準は、試験を開始する前の少なくとも３カ月にわたる血液透析、血清ｉＰＴＨレベルが３００ｐｇ／ｍＬを超えること、血清ｃＣａ（補正カルシウム）レベルが９．０ｍｇ／ｄＬ以上であること、および安定した用量の活性ビタミンＤまたは類似体、ホスフェート結合剤、およびカルシウム補充剤を受けていることを含んだ。
【０２５１】
２期間交叉デザイン（ｔｗｏ−ｐｅｒｉｏｄ  ｃｒｏｓｓｏｖｅｒ  ｄｅｓｉｇｎ）でコホート１、２および３を処置した。各コホートに４被験体を登録し、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）、その後にプラセボ、またはプラセボ、その後にＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）へ１：１に無作為化した。コホート１〜３に対するＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の用量レベルは５ｍｇ、１０ｍｇおよび２０ｍｇであった。コホート４には８被験体を登録し、並行群の４０ｍｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）またはプラセボへ１：１に無作為化した。コホート５には８被験体を登録し、並行群の６０ｍｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）またはプラセボへ１：１に無作為化した。
【０２５２】
被験体を、週の最後のＨＤセッション後に臨床研究ユニットに入院させ、血液透析のために退院する前の３日の透析間の期間にわたって観察した。ＨＤ完了の２〜４時間後にＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）またはプラセボをＩＶボーラス注射によって投与した。
【０２５３】
血清ｉＰＴＨレベルを、Ｒｏｃｈｅ  Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）分析器で電気化学発光免疫測定法（ＥＣＬＩＡ）を用いて決定した。カルシウムレベルをアルブミン＜４ｇ／ｄＬに対して以下の方程式を用いて調整した：ｃＣａ＝［ｍｇ／ｄＬ単位の測定されたＣａ］＋［４−（ｇ／ｄＬ単位のアルブミン）］×０．８。
【０２５４】
試験薬投与後７日間を通して有害事象を捕捉した。
Ａ．非コンパートメント解析を用いた幾何平均ＰＫパラメータ
【０２５５】
処置した被験体から得た試料に対して薬物動態（ＰＫ）解析を実施して、投与したＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の生物学的利用能を決定した。以下の表２および図１４において示されている結果により、評価した用量範囲にわたって、全身曝露が用量関連様式で増加したことが示されている。Ｃｍａｘ値およびＡＵＣａｌｌ値に認められるように、観察されたＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）総血漿曝露の増加は投与した用量に適度に比例した。幾何平均終末相消失半減期（８１．７時間〜１７５時間）は、評価した用量範囲にわたって適度に同等であるようであった。定常状態（Ｖｓｓ）値としてのクリアランス（ＣＬ）および分布容積は評価した範囲にわたって用量に依存しないようである。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の総クリアランスは、およそ約２Ｌ／時間であった。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）は血液透析によって中心コンパートメントから容易に消失した。血液透析クリアランスが約３３Ｌ／時間と推定された。
【表２】
2015502346.tif 000012
Ｂ．Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２の血清中のｉＰＴＨレベルおよび補正カルシウムレベルに対する効果
【０２５６】
この試験ではＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）投与の血清中のｉＰＴＨレベルおよび補正カルシウムレベルに対する効果も決定した。血液透析が完了した２〜４時間後に、被験体にＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の単回ＩＶボーラスを投与した。次いで、各被験体由来の血液を分析して、ｉＰＴＨレベルおよび補正カルシウムレベルを決定した。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を投与した後のｉＰＴＨレベルのパーセント変化が図１５に示されている。Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を用いた処置では、全ての用量でｉＰＴＨが用量依存的に減少した。その変化は投薬後３０分以内に起こった。ｉＰＴＨ抑制の持続時間も用量依存的であり、３日の透析間の期間中、２０ｍｇ以上のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の用量に関連して持続的に低下した。
【０２５７】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）単一用量投与の補正カルシウムレベルに対する効果が図１６に示されている。１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇまたは６０ｍｇを投薬したＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）群における平均補正カルシウムは観察期間中に約１０〜１４％まで低下し、最も大きな平均減少は４０ｍｇ群で起こった。プラセボ群および５ｍｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）群では経時的に平均補正カルシウムに明らかな変化はなかった。
Ｃ．Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２の投与に関する安全性プロファイル
【０２５８】
被験体のそれぞれで起こった有害事象を、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）またはプラセボを投与した後７日間記録した。データは以下の表３に示されている。１０ｍｇ用量コホート内のプラセボで処置した１被験体において単一の重篤な有害事象が起こった。この被験体はＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を受ける前に試験を中止した。悪心、嘔吐または下痢の報告はなかった。
【表３】
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（実施例４）
薬物臨床試験の反復用量
【０２５９】
血液透析患者を、１０ｍｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）で１週間当たり３回、４週間にわたって処置した。被験体が次のＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）処置を受ける直前の薬物トラフ時に血清ｉＰＴＨレベルを測定した。図１７に示されているデータにより、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を用いた処置を受けている被験体では、ｉＰＴＨレベルが４週間にわたって着実に減少したことが示されている。
【０２６０】
ベースラインからの血清ＰＴＨレベルのパーセント変化に関してもデータを解析した。図１８に示されているように、Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）投薬の最終日の血清ｉＰＴＨのベースラインレベルは、投薬の１日目のレベルよりも約５０％低い。
【０２６１】
Ａｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）の最終投薬後の４週間の経過観察期間中、さらに被験体由来の血清試料を分析した。図１９に示されているデータは、１０ｍｇ／ｋｇのＡｃ−ｃ（Ｃ）ａｒｒｒａｒ−ＮＨ２（配列番号３）を投与した４週間の処置期間中および４週間の経過観察期間中の被験体における血清ｉＰＴＨのレベルを示す。
【図１】
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【図２−２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｃ】
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【図４】
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【図６】
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【図７】
2015502346.tif 000020
【図８】
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【図９】
2015502346.tif 000022
【図１０】
2015502346.tif 000023
【図１１】
2015502346.tif 000024
【図１２】
2015502346.tif 000025
【図１３】
2015502346.tif 000026
【図１４】
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【図１５】
2015502346.tif 000028
【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２−１】
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【図３Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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2015502346.tif 000039
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