(57)【要約】  水性溶媒中にフィブリノゲンを含む、固体組成物などの、固体タンパク質組成物を溶解させる方法及び装置が提示される。方法は、ある容積の固体フィブリノゲン組成物、及びヘッドスペースを含む閉じた容器の使用法を含み、ヘッドスペース内の圧力は大気圧よりも低い。容器内に水性溶媒が導入される一方で、大気圧より低い圧力が維持され、溶媒の追加の後、ヘッドスペースの大きさが低減されて、圧力が大気圧より低くなる。装置は、開示される方法における使用に好適である。
2015509084.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
水性溶媒内に固体フィブリノゲン組成物を溶解させる方法であって、
ｉ）ある容積の前記固体フィブリノゲン組成物、及びヘッドスペースを含む閉じた容器を提供する工程であって、前記ヘッドスペース内の圧力が大気圧より低い、工程と、
ｉｉ）大気圧より低い前記ヘッドスペース内の前記内圧を維持する一方で、前記固体フィブリノゲン組成物の前記容積よりも小さい容積の前記水性溶媒を前記容器に導入し、１ｍＬ当たり少なくとも４０ｍｇのフィブリノゲンを含む溶液を形成する工程と、
ｉｉｉ）ｉｉ）に続き、前記容器内の前記ヘッドスペースの大きさを、前記ヘッドスペース内の前記圧力が大気圧に等しくなるまで減少させる工程とを含む、方法。
【請求項２】
前記溶液を撹拌する工程を更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記固体フィブリノゲン組成物が、凍結乾燥ケークである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記固体フィブリノゲン組成物内の前記フィブリノゲンの密度は、少なくとも約５〜約６３ｍｇ／ｃｍ３（約５〜約６３ｍｇ／ｃｃ）未満の範囲である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記フィブリノゲンの前記密度は、約２３ｍｇ／ｃｍ３（約２３ｍｇ／ｃｃ）以下である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記得られる溶液の前記フィブリノゲン濃度は、約４０ｍｇ／ｍＬ〜約１２０ｍｇ／ｍＬである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記水性溶媒は、脱気水性溶媒である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
工程ｉ）における前記ヘッドスペースの前記内圧が約５０ｋＰａ（約５００ｍＢａｒ）以下である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
工程ｉ）における前記ヘッドスペースの前記内圧は、約０．０１２ｋＰａ（約０．１２ｍＢａｒ）以下である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記容器は、相互に流体連通する少なくとも２つの別個の部分である、前記水性溶媒を含む第１部分、及び前記固定フィブリノゲン組成物を含む第２部分を含み、前記水性溶媒は、前記容器の、前記別個の部分のうちの前記第１部分から、前記別個の部分のうちの前記第２部分へと導入される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記水性溶媒はリザーバ内に収容され、前記容器及び前記リザーバは、互いに流体連通し、前記撹拌は、前記容器と前記リザーバとの間で前記水性溶媒を繰り返し移動させることを含む、請求項２〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記容器は、前記溶液中で不溶性であり、前記溶液よりも密度の高い、少なくとも１つの不活性材料の球を含み、前記撹拌は前記容器を振盪することを含む、請求項２〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記球が、約３〜約７ｍｍの範囲の直径のビーズを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
工程ｉｉ）の完了と、工程ｉｉｉ）の開始との間に、少なくとも５秒の時間間隔を経過させることができる、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記時間間隔は、少なくとも約２０秒である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記容器内の前記溶液をインキュベートする工程を更に含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記インキュベートは、約２分以下にわたり実行される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
水性溶媒中に固体組成物を溶解させるのに好適な装置［１０、３０、５０］であって、前記装置は、
第１固体組成物を保持するのに好適な第１の閉じた容器［１２ａ］であって、前記第１の閉じた容器は閉鎖状態及び開放状態を有する第１の閉じた容器入口［１８ａ］を含み、前記閉鎖状態において、前記第１の閉じた容器入口は前記流体の通過に対して封止され、前記開放状態において、前記第１の閉じた容器入口が、前記第１の閉じた容器内へと流体連通する経路をもたらす、第１の閉じた容器［１２ａ］と、
前記第１の閉じた容器を封止するために前記第１の閉じた容器内に配置され、前記第１の閉じた容器の前記内部容積を低減させるために前記第１の閉じた容器内で少なくとも第１位置と第２位置との間で移動する間に、前記第１の閉じた容器の封止を維持するように構成される、第１可動封止要素［２２ａ］と、
前記第１の閉じた容器内の第１位置に前記第１可動封止要素を解放可能に保持するように構成された保持要素［２４］と、
前記第１の閉じた容器入口の閉鎖状態と開放状態との間での変更を制御するための第１コントローラー［２０ａ］と、を含み、
前記第１可動封止要素が前記第２位置にある間に、前記第１の閉じた容器入口が閉鎖状態にあり、その後前記第１可動封止要素が前記第１位置へと移動され、前記第１保持要素が前記第１可動封止要素を保持するとき、大気圧より低い圧力を有するヘッドスペースが形成されるか、又は、
前記装置は、大気圧より低い圧力のヘッドスペースを更に含む前記閉じた容器と、閉じた容器入口と、前記第１位置に前記第１可動封止要素を保持する前記保持要素とを備える、装置［１０、３０、５０］。
【請求項１９】
前記入口が開放位置にあり、前記保持要素が前記第１可動封止要素を解放するとき、前記第１可動封止要素は前記第１の閉じた容器内で第１位置から第２位置へと移動し、それによって前記第１の閉じた容器の前記内部容積が低減し、前記第１の閉じた容器内の前記内圧が増加する、請求項１８に記載の装置。
【請求項２０】
第１水性溶媒を保持するために好適な第１リザーバ［４２ａ］と、前記第１リザーバの封止を維持するように構成された、前記第１リザーバ内に配置される第２可動封止要素［２２ｂ］とを更に含み、前記第１リザーバは、前記第１の容器入口と流体連通するように適合された第１リザーバ出口［４６ａ］を含む、請求項１８又は１９に記載の装置。
【請求項２１】
前記第１の閉じた容器は、前端部［３４］及び後端部［３６］を有する第１シリンジバレル［３２ａ］を含み、前記前端部は前記第１の閉じた容器入口を含み、前記第１可動封止要素は、前記第１シリンジバレルの前記後端部から前記前端部へ向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第１シリンジバレル内に配置され、第１ピストンロッド［４０ａ］に接続された第１ピストンを含む、請求項１８〜２０のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２２】
前記第１リザーバは前端部［３４］及び後端部［３６］を有する第２シリンジバレル［４４ａ］を含み、前記前端部は前記第１リザーバ出口を含み、前記第２可動封止要素は、前記第２シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第２シリンジバレル内に配置され、第２ピストンロッド［４０ｂ］に接続された第２ピストンを含む、請求項２０又は２１に記載の装置。
【請求項２３】
第２固体組成物を保持するために好適な第２の閉じた容器［１２ｂ］であって、前記第２の閉じた容器は、閉鎖状態及び開放状態を有する第２の閉じた容器入口［１８ｂ］を含み、前記閉鎖状態においては前記第２の閉じた容器は前記流体の通過に対して封止され、前記開放状態においては前記第２の閉じた容器入口が、前記第２の閉じた容器内へと流体連通する経路をもたらす、第２の閉じた容器［１２ｂ］と、
前記第２の閉じた容器を封止するために、前記第２の閉じた容器内に配置され、前記第２の閉じた容器の前記内部容積を減少させるために前記第２の閉じた容器内で少なくとも第１位置と第２位置との間で移動する間に、前記第２の閉じた容器の封止を維持するように構成された、第３可動封止要素［２２ｃ］と、
前記第２の閉じた容器内の第１位置に前記第３可動封止要素を解放可能に保持するように構成された保持要素と、
前記第２の閉じた容器入口の閉鎖状態と開放状態との間の変更を制御するための第２コントローラー［２０ｂ］と、を更に含み、
前記装置は、大気圧より低い圧力のヘッドスペース［１６］を更に含む前記第２の閉じた容器、閉じた容器入口［１８ｂ］、及び前記第３可動封止要素を前記第１位置に保持する前記保持要素を備えるか、又は、前記第３可動封止要素が前記第２位置にある間に、前記第２の閉じた容器入口が閉鎖状態にあり、その後前記第３可動封止要素が前記第１位置に移動し、前記保持要素が前記第３可動封止要素を保持するとき、大気圧よりも低い圧力を有するヘッドスペースが形成される、請求項１８〜２２のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２４】
第２水性溶媒を保持するために好適な第２リザーバ［４２ｂ］と、前記第２リザーバの封止を維持するように構成された、前記第２リザーバ内に配置される第４可動封止要素［２２ｄ］とを更に含み、前記第２リザーバは、前記第２の容器入口と流体連通するように適合された第２流体出口［４６ｂ］を含む、請求項２２又は２３に記載の装置。
【請求項２５】
前記第１の閉じた容器は、前端部及び後端部を有する第１シリンジバレルであり、前記第１シリンジバレルの前記前端部は前記第１の閉じた容器入口を含み、前記第１の閉じた容器の前記第１可動封止要素は、前記第１シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第１シリンジバレル内に配置された第１ピストンを含み、
前記第１リザーバは前端部及び後端部を有する第２シリンジバレルを含み、前記第２シリンジバレルの前記前端部は前記第１リザーバ出口を含み、前記第２可動封止要素は、前記第２シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第２シリンジバレル内に配置された第２ピストンを含み、
前記第２の閉じた容器は、前端部及び後端部を有する第３シリンジバレルであり、前記第３シリンジバレルの前記前端部は、前記第２の閉じた容器入口を含み、前記第３可動封止要素は、前記第３シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第３シリンジバレル内に配置され、第３ピストンロッド［４０ｃ］に接続された第３ピストンを含み、
前記第２リザーバは前端部及び後端部を有する第４シリンジバレル［４４ｂ］を含み、前記第４シリンジバレルの前記前端部は前記第２リザーバ出口を含み、前記第４可動封止要素は、前記第４シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第４シリンジバレル内に配置され、第４ピストンロッド［４０ｄ］に接続された第４ピストンを含む、請求項２４に記載の装置。
【請求項２６】
前記第１及び前記第２の閉じた容器、並びに／又は前記第１及び前記第２のリザーバを内部に収容するための、ハウジング［６４、６６］を更に含む、請求項２４又は２５に記載の装置。
【請求項２７】
前記第１固体組成物が、固体フィブリノゲンを含む、請求項１８〜２６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２８】
前記第２固体組成物が、固体トロンビンを含む、請求項２３〜２７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２９】
前記第１ピストンは、少なくとも１つの窪み［７０］を有するピストンロッドに取り付けられ、前記保持要素は、前記窪み内に係合するように構成された少なくとも１つの突起部［７２］を含む、請求項２１〜２８のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３０】
起動されると、前記第１コントローラーを前記閉鎖状態から前記開放状態へと移動させる、コントローラー作動装置［３８］を更に含む、請求項１８〜２９のいずれか一項に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬組成物の調製の分野、より具体的には、水性溶媒中にフィブリノゲンを含む固体組成物などの、固体タンパク質組成物を溶解するための方法及び装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
フィブリノゲンは、空気及び／又は流体（例えば、組織からの血液）などの流体の漏れを防ぐために使用される、フィブリンシーラントの調製において重要な成分である。フィブリノゲンは、トロンビン及びＸＩＩＩ因子を伴う酵素反応によってフィブリンに変換される。
【０００３】
フィブリノゲンは、タンパク質の劣化を低減するために、保管する前に、例えば、凍結乾燥などにより固体形態に変換されてもよい。固体フィブリノゲン配合物は、生物学的活性を維持する一方で、室温など、少なくとも４℃の温度において、比較的長い期間にわたって、保存され得るという利点を有する。治療的用途のため、固体フィブリノゲンは、使用前に水性溶媒中に溶解させる。典型的には、接着剤の強度は、フィブリノゲンの濃度と比例するため、例えば、フィブリノゲンをフィブリンシーラントの成分として、トロンビン成分と一緒に使用する際など、多くの場合において、高いフィブリノゲン濃度を有する溶液が必要とされる。
【０００４】
フィブリノゲンは、血漿タンパク質の中で最も溶解度が低い（Ｔｈｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ  ｏｆ  Ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ  Ｈｉｇｈ  Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ＊Ｍ．Ｗ．Ｍｏｓｅｓｓｏｎ，Ｓｏｌ  Ｓｈｅｒｒｙ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９６６，５（９），ｐｐ  ２８２９〜２８３５）。したがって、例えば、高いフィブリノゲン濃度（少なくとも４０ｍｇのフィブリノゲン／ｍＬ）の溶液を得るために、固体フィブリノゲン配合物を溶解させるのは、困難であり、時間がかかる。固体フィブリノゲン成分の溶解中に、泡が生じ、ゆっくり消える際に、問題はより複雑となる。泡の存在は溶解時間を長くし、及び／又はフィブリノゲンの機能、及びフィブリノゲン溶液により調製されるフィブリンシーラントの機械的特性に悪影響を与える。
【０００５】
背景技術には、米国特許番号第６，３４９，８５０号、同第４，６５０，６７８号、同第４，９０９，２５１号、同第５，９６２，４０５号、米国特許公開番号第２００４／０００５３１０号、及び欧州特許公開番号ＥＰ  ２１３０５４９Ａ１号が挙げられる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
フィブリノゲンの溶解性を増加させるための賦形剤を添加せずに、高濃度フィブリノゲン溶液を形成するために、固体フィブリノゲンの迅速な溶解を可能にする、方法及び装置に対する、未達成の要求が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
水性溶媒中において、固体フィブリノゲン組成物などの、固体タンパク質組成物を溶解させるための方法及び装置が提示される。
【０００８】
本発明者らは、低いタンパク質密度を有する凍結乾燥「ケーク」などの固体フィブリノゲン組成物を水性溶媒中に溶解させると、より高いタンパク質密度の「ケーク」と比較して、より高い溶解レベル及びより早い溶解を生じることを見出した。更に、大気圧より低い圧力で固体組成物に水性溶媒を加え、その後容器に空気を入れずに大気圧に平衡化させ、ここにおいて可溶化プロセス中に可溶化が行われると、気泡の存在が最小化又は排除されることが見出された。
【０００９】
本明細書において使用するとき、用語「固体組成物」とは、固体組成物の総重量に基づき、約５重量％（ｗ／ｗ）以下、例えば、３重量％以下の、含水量を有する組成物を指す。
【００１０】
本発明の態様及び実施形態は、本明細書中以下、及び添付の請求項において、記載される。
【００１１】
本発明のいくつかの実施形態の態様により、水性溶媒中に固体フィブリノゲン組成物を溶解させるための方法が提示され、これは、固体フィブリノゲン組成物及びヘッドスペースの容積を含む閉じた容器を提供する工程であって、ヘッドスペース内の圧力は大気圧より低い、工程と、内部圧力を大気圧以下の圧力に維持する一方で、固体フィブリノゲン組成物のよりも小さい容積の水性溶媒を容器内に導入し、１ｍＬ当たり少なくとも４０ｍｇのフィブリノゲンを含む溶液を形成する工程と、その後容器内のヘッドスペースの大きさを、ヘッドスペースの圧力が大気圧と等しくなるまで低減させる工程とを含む。
【００１２】
いくつかの実施形態において、方法は更に、容器を撹拌する工程を含む。
【００１３】
本命細書において開示される方法は、９０秒以内に、少なくとも４０ｍｇフィブリノゲン／ｍＬの高いフィブリノゲン濃度を含む溶液をもたらす。いくつかの実施形態において、溶液は、約９０、８５、８０、７５、７０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４５、４０、又は３０秒以内に得られる。一実施形態において、濃縮したフィブリノゲン溶液が、約４５秒〜９０秒の範囲内の時間で得られる。
【００１４】
本明細書において開示される固体組成物は、固体状態の、フィブリノゲンなどのタンパク質を含む。いくつかの実施形態において、固体フィブリノゲン組成物は、主要成分としてフィブリノゲンを含むが、他のタンパク質など、他の成分を更に含んでもよい。組成物中のフィブリノゲンは、血液由来、又は遺伝子組み換えであってもよい。組成物中に存在するフィブリノゲン以外のタンパク質の例としては、フィブロネクチン、ＶＩＩＩ因子、ヴォン・ヴィレブランド因子、及びＸＩＩＩ因子が挙げられるがこれらに限定されない。本発明の一実施形態において、組成物がクリオプレシピテートから得られる。本発明の一実施形態において、フィブリン分解を遅らせるか、又は止めるために、プラスミノゲンが、クリオプレシピテートから特定的に取り除かれてもよい（米国特許番号第５，７９２，８３５号、及び同第７，１２５，５６９号に記載される）。
【００１５】
いくつかの実施形態において、フィブリノゲン組成物は、人間のフィブリノゲン（本明細書においては、ＢＡＣ、生物学的活性成分とも称される）を含む。ＢＡＣは、欧州特許番号第５３４，１７８号（これは本明細書において完全に説明されたかのように参照として組み込まれる）において記載されるヒトの血漿の、濃縮されたウイルス非活性化クリオプレシピテートであってもよく、これは主にフィブリノゲンからなる（約８５％）。組成物は、欧州特許番号第１，３９０，４８５号（これは本明細書において完全に説明されたかのように参照として組み込まれる）におけるように、プラスミノゲンが欠損していてもよく、この場合、抗フィブリン溶解剤が含まれてもよい。本発明の一実施形態において、ＢＡＣは、固体の凍結乾燥「ケーク」としてもたらされる。
【００１６】
用語「クリオプレシピテート」とは、全血から準備される凍結血漿、回収された血漿、又は血漿瀉血により回収された源血漿から、得られる、血液由来の成分を指す。クリオプレシピテートは、凍結血漿を低温、通常は０〜４℃の温度で解凍すると、フィブリノゲン及び第ＸＩＩＩ因子を含む沈殿物が形成されることで得ることができる。この沈殿物は例えば遠心分離によって回収することができる。
【００１７】
本明細書において記載される方法及び装置を使用して溶解され得る、固体組成物の形成の非限定的な例としては、凍結乾燥「ケーク」、固体粒子、粒子分散系、粉末、及びフレークが挙げられるがこれらに限定されない。異なるタンパク質密度を有する固体組成物が生成されてもよい。
【００１８】
いくつかの実施形態において、固体フィブリノゲン組成物は、凍結乾燥ケークである。「ケーク」のいずれかの圧潰を生じることなく凍結乾燥物の安定性を維持しながら、凍結乾燥「ケーク」内のフィブリノゲン密度は、約５ｍｇ／ｃｍ３（約５ｍｇ／ｃｃ）まで減少させることができる（Ｐａｒｋｅｒ  ｅｔ．ａｌ．「Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｄｒｙｉｎｇ  ｒａｔｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｍｉｃｒｏｓｃａｌｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｔｔｒｉｂｕｔｅｓ  ａｎｄ  ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ」Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ．２０１０；９９：４６１６〜４６２９）。典型的に、少なくとも５ｍｇフィブリノゲン／ｃｍ３（５ｍｇフィブリノゲン／ｃｃ）の固体「ケーク」は、圧潰することなくその独自の構造を実質的に支持することができる。
【００１９】
いくつかの実施形態において、固体フィブリノゲン組成物内のフィブリノゲンの密度は、約５〜約６３ｍｇ／ｃｍ３（約５〜約６３ｍｇ／ｃｃ）未満の範囲であり、例えば、約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、又は６２ｍｇ／ｃｃ以下である。一実施形態において、固体フィブリノゲン組成物は、約２３ｍｇ／ｃｍ３（約２３ｍｇ／ｃｃ）以下のフィブリノゲン密度を有する。
【００２０】
凍結乾燥「ケーク」などの固体は、約５〜約６３ｍｇ／ｍＬ未満の範囲、例えば、約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、又は６２ｍｇ／ｍＬ以下のフィブリノゲン濃度を有するフィブリノゲン含有溶液から調製され得る。典型的に、生じる「ケーク」の容積は、「ケーク」を調製するのに使用したフィブリノゲン含有溶液の容積と等しい。
【００２１】
いくつかの実施形態において、固体フィブリノゲン組成物は、約６３ｍｇ／ｍＬのフィブリノゲン濃度を有するＢＡＣ原液（例えば、ＥＶＩＣＥＬ（商標）内のフィブリノゲン成分）などの、ＢＡＣ原液から得られる。いくつかの実施形態において、固体フィブリノゲンは、ＢＡＣ原液の凍結乾燥から得られる。
【００２２】
いくつかの実施形態において、水性溶媒中に固体フィブリノゲン組成物を溶解させることによって得られる溶液の高いフィブリノゲン濃度は、約４０〜約１２０ｍｇの範囲のフィブリノゲン／ｍＬ、例えば、約４０、４１、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、又は１２０ｍｇフィブリノゲン／ｍＬである。一実施形態において、約６３〜約７０ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度でフィブリノゲンを含む濃縮フィブリノゲン溶液が得られる。フィブリノゲンは実質的に、完全に溶解している。
【００２３】
いくつかの実施形態において、水性溶媒は、実質的に賦形剤を有さない、注入用の水である。いくつかの実施形態において、水性溶媒は、固体組成物を含む容器に導入される前に脱気される。
【００２４】
水性溶媒中の「ケーク」を溶解させるために、「ケーク」を機械的に破砕することによって、固体分散系が任意により調製され得る。ＷＯ０８／０５３４７５（この内容は本明細書において完全に説明されたかのように、参照として組み込まれる）に記載されるように、細かい粉末を生成するためにミリング装置に、任意により、分散系が導入されてもよい。
【００２５】
水性溶媒は水を含み（いくつかの実施形態において、少なくとも５０容積％の水）、いくつかの実施形態は、追加的な材料、例えば、緩衝材及び／又は他の賦形剤、例えば、医薬的に許容可能な賦形剤（例えば、塩酸アルギニン、グリシン、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、及び塩化カルシウムから選択される１つ又は２つ以上を含む）を含み得る。水は例えば、ＢＷＦＩ（注入用の静菌性（Racteriostetic）水）、ＳＷＦＩ（注入用の無菌水）などであり得る。
【００２６】
水性溶媒中に固体フィブリノゲン組成物を溶解させることによって形成される溶液のタンパク質溶解レベルは、下記の材料及び方法の項の、「タンパク質溶解レベルの測定」に記載される通りに測定され得る。気泡の存在は視覚的に確認することができる。
【００２７】
いくつかの実施形態において、ヘッドスペース内の内圧は、最初は約５０ｋＰａ（５００ｍＢａｒ）より低く、例えば、約５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、５、２．５、２、１．５、１、０．５、０．１、０．０５又は０．０１２ｋＰａ以下である（５００、４５０、４００、３５０、３００、２５０、２００、１５０、１００、５０、２５、２０、１５、１０、５、１、０．５又は０．１２ｍＢａｒ）。一実施形態において、ヘッドスペース内の内圧は、約０．０１２ｋＰａ（０．１２ｍＢａｒ）以下である。
【００２８】
いくつかの実施形態において、閉じた容器内の内圧は、プログラミング可能な凍結乾燥装置によって、所望の内圧を達成するように装置をプログラミングし、所望の圧力が達成された際に容器を閉じることによって、所望の大気圧より低い圧力にされる。
【００２９】
いくつかの実施形態において、閉じた容器内の内圧は、閉じた容器から空気を抜く（例えば、真空ポンプを使用して）ことによって、所望の大気圧より低い圧力にされる。いくつかの実施形態において、容器内の圧力をモニタリング及び／又は調節するため、電気真空ゲージ、又は電気マノメーターが使用される。
【００３０】
一実施形態において、約２１ｍｇ／ｃｍ３（約２１ｍｇ／ｃｃ）のフィブリノゲン密度を有する固体フィブリノゲン組成物は、溶媒中で溶解し、ヘッドスペース内の圧力は約０．０１２ｋＰａ（０．１２ｍＢａｒ）である。
【００３１】
いくつかの実施形態において、容器は、相互に流体連通する少なくとも２つの別個の部分、水性溶媒を含む第１部分、及び固体フィブリノゲン組成物を含む第２部分を含み、水性溶媒は、容器の第１の別個の部分から、第２の別個の部分へと導入される。
【００３２】
いくつかの実施形態において、水性溶媒がリザーバ内に収容され、容器及びリザーバは相互に流体連通し、撹拌は容器とリザーバとの間で水性溶媒を繰り返し移動させることを含む。
【００３３】
いくつかの実施形態において、撹拌は容器を手で振盪することを含む。いくつかのこのような実施形態において、溶液の密度よりも高い密度を有する、不活性固体材料（例えば、ステンレススチールなどの金属など）の少なくとも１つの球を、手で振盪する前に容器に導入する。いくつかの実施形態において、球は、約３〜約７ｍｍの範囲の直径を有するビーズを含む。
【００３４】
いくつかの実施形態において、溶媒の容器への導入の完了と、ヘッドスペースの容積の減少開始との間に、少なくとも５秒の時間（例えば、少なくとも、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０秒）が経過してもよい。いくつかの実施形態において、時間間隔は少なくとも約２０秒である。
【００３５】
いくつかの実施形態において、ヘッドスペースの容積を低減させた後、溶液は、例えば、約２分以内の時間にわたり、容器内でインキュベートされる（すなわち、使用前に放置される）。
【００３６】
本明細書において記載される方法は、当該技術分野において既知の、瓶、凍結乾燥容器、バレル、ジャー、及びシリンジが挙げられるがこれらに限定されない任意の好適な装置又は容器を使用して実行され得る。いくつかの実施形態において、方法は、下記に記載の装置を使用して実施される。
【００３７】
本発明のいくつかの実施形態の態様により、水性溶媒中において固体組成物を溶解させるために好適な装置がもたらされ、装置は、第１固体組成物を保持するために好適な第１の閉じた容器を含み、第１の閉じた容器は閉鎖状態及び開放状態を有する第１の閉じた容器入口を含み、閉鎖状態において第１の閉じた容器入口は流体の通過に対して封止され、開放状態において第１の閉じた容器入口は第１の閉じた容器内へと流体連通する経路をもたらす。装置は更に、第１の閉じた容器を封止するために第１の閉じた容器内に配置され、第１の閉じた容器の内部容積を低減させるために第１の閉じた容器内で少なくとも第１位置と第２位置との間で移動する間に、第１の閉じた容器の封止を維持するように構成される、第１可動封止要素を含む。装置は更に、第１の閉じた容器内の第１位置に第１可動封止要素を開放可能に保持するように構成された保持要素と、閉鎖状態と開放状態との間での第１の閉じた容器入口の変化を制御するための第１コントローラーとを含む。
【００３８】
任意により、第１可動封止要素が第２位置にある間に第１の閉じた容器入口が閉鎖状態にあり、その後第１可動封止要素が第１位置に移動し、第１保持要素が第１可動封止要素を保持するとき、大気圧より低い圧力を有するヘッドスペースが形成される。あるいは装置は更に、大気圧より低い圧力のヘッドスペースを含む閉じた容器と、閉じた容器入口と、第１位置に第１可動封止要素を保持する保持要素とを備える。
【００３９】
いくつかの実施形態において、装置は更に、第１水性溶媒を保持するために好適な第１リザーバと、第１リザーバの封止を維持するように構成された第１リザーバ内に配置される第２可動封止要素とを含み、第１リザーバは、第１の閉じた容器入口と流体連通する（直接的又は間接的に）ように適合された第１リザーバ出口を含む。
【００４０】
いくつかの実施形態において、第１の閉じた容器は、前端部及び後端部を有する第１シリンジバレルであり、前端部は第１の閉じた容器入口を含み、第１可動封止要素は、第１シリンジバレルの後端部から前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、第１シリンジバレル内に配置され、第１ピストンロッドと接続された第１ピストンを含む。
【００４１】
いくつかの実施形態において、第１リザーバは前端部及び後端部を有する第２シリンジバレルを含み、前端部は第１リザーバ出口を含み、第２可動封止要素は、第２シリンジバレルの後端部から前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、第２シリンジバレル内に配置され、第２ピストンロッドに接続された第２ピストンを含む。
【００４２】
いくつかの実施形態において、入口が開放状態にあり、保持要素が第１可動封止要素を解放するとき、第１可動封止要素は第１の閉じた容器内で第１位置から第２位置へと移動し、それによって第１の閉じた容器の内部容積が低減し、第１の閉じた容器内の内圧が増加する。
【００４３】
いくつかの実施形態において、装置は更に、第２固体組成物を保持するために好適な第２の閉じた容器を含み、第２の閉じた容器は、閉鎖状態及び開放状態を有する第２の閉じた容器入口を含み、閉鎖状態においては第２の閉じた容器は流体の通過に対して封止され、開放状態においては第２の閉じた容器入口が、第２の閉じた容器内へと流体連通する経路をもたらす。このような実施形態において装置は更に、第２の閉じた容器を封止するために、第２の閉じた容器内に配置され、第２の閉じた容器の内圧を減少させるために第２の閉じた容器内で少なくとも第１位置と第２位置との間で移動する間に、第２の閉じた容器の封止を維持するように構成された、第３可動封止要素を更に含む。このような実施形態において、装置は更に、第２の閉じた容器内で第３可動封止要素を第１位置に解放可能に保持するように構成された保持要素と、第２の閉じた容器入口の閉鎖状態と開放状態との間での変化を制御するための第２コントローラーとを含む。任意により、単一の保持要素は、第１可動封止要素及び第３可動封止要素の両方を第１位置に解放可能に保持することができる。あるいは、装置は更に、第３可動封止要素を保持するための、第２保持要素を含み得る。装置は、大気圧より低い圧力のヘッドスペースを更に含む第２の閉じた容器、閉じた容器入口、及び第３可動封止要素を前記第１位置に保持する保持要素を備え、又は、第３可動封止要素が第２位置にある間に、前記第２の閉じた容器入口が閉鎖状態にあり、その後第３可動封止要素が前記第１位置に移動し、保持要素が前記第３可動封止要素を保持するとき、大気圧よりも低い圧力を有するヘッドスペースが形成される。
【００４４】
いくつかの実施形態において、装置は更に、第２水性溶媒を保持するために好適な第２リザーバと、第２リザーバの封止を維持するように構成された、第２リザーバ内に配置された第４可動封止要素とを含み、第２リザーバは、第２の閉じた容器入口と流体連通するように適合された第２流体出口を含む。
【００４５】
いくつかの実施形態において、第１の閉じた容器は、前端部及び後端部を有する第１シリンジバレルであり、第１シリンジバレルの前端部は第１の閉じた容器入口を含み、第１の閉じた容器の第１可動封止要素は、第１シリンジバレルの後端部から前端部へと摺動自在に変位可能であるように、第１シリンジバレル内に配置され、第１ピストンロッドに接続された第１ピストンを含む。このような実施形態において、第１リザーバは前端部及び後端部を有する第２シリンジバレルを含み、第２シリンジバレルの前端部は第１リザーバ出口を含み、第２可動封止要素は、第２シリンジバレルの後端部から前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、第２シリンジバレル内に配置され、第２ピストンロッドに接続された第２ピストンを含む。このような実施形態において、第２の閉じた容器は、前端部及び後端部を有する第３シリンジバレルであり、第３シリンジバレルの前端部は、第２の閉じた容器入口を含み、第３可動封止要素は第３シリンジバレルの後端部から前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、第３シリンジバレル内に配置され、第３ピストンロッドに接続された第３ピストンを含む。このような実施形態において、第２リザーバは前端部及び後端部を有する第４シリンジバレルを含み、第４シリンジバレルの前端部は第２リザーバ出口を含み、第４可動封止要素は、第４シリンジバレルの後端部から前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、第４シリンジバレル内に配置され、第４ピストンロッドに接続された第４ピストンを含む。
【００４６】
いくつかの実施形態において、装置は更に、第１及び第２の閉じた容器、及び／又は第１及び第２のリザーバを内部に収容するためのハウジングを含む。
【００４７】
いくつかの実施形態において、装置は更に、第１及び第２の閉じた容器を収容するための第１ハウジング、及び／又は第１及び第２のリザーバを内部に収容するための第２ハウジングを含む。
【００４８】
いくつかの実施形態において、第１固体組成物は固体フィブリノゲンを含む。
【００４９】
いくつかの実施形態において、第２固体組成物は固体トロンビンを含む。
【００５０】
いくつかの実施形態において、第１ピストンは、少なくとも１つの窪みを含むピストンロッドに取り付けられ、保持要素は窪み内に係合するように構成された少なくとも１つの突起部／隆起部を含む。
【００５１】
いくつかの実施形態において装置は更に、作動されると、第１コントローラー及び／又は第２コントローラーを閉鎖状態から開放状態へと動かす、コントローラー作動装置を含む。
【００５２】
本明細書において開示される方法及び装置は、いくつかの実施形態において、固体フィブリノゲン組成物が、水性溶媒中において短時間（例えば、９０秒以内）に実質的に完全に溶解し、高度に濃縮されたフィブリン溶液（例えば、少なくとも４０ｍｇ／ｍＬのフィブリン濃度を有する）が得られるようにする。いくつかの実施形態において、方法は、被験体に投与する時間、又はその付近（被験体への投与の９０秒以内）にフィブリノゲン溶液が調製されることを可能にする。
【００５３】
少なくともいくつかの実施形態において、本明細書において開示される方法及び装置により、生成されるフィブリノゲン溶液における気泡の存在が最小であるか、又は極僅かである。いくつかの実施形態において、フィブリノゲン溶液は実質的に気泡を含まない。
【００５４】
少なくともいくつかの実施形態において、方法は、フィブリノゲンの溶解度を増加させるために賦形剤の追加を必要としない。
【００５５】
少なくともいくつかの実施形態において方法は、加熱工程（例えば、室温を超える加熱）を含まない。
【００５６】
少なくともいくつかの実施形態において、可溶化が行われる容器内に空気を入らせない。
【００５７】
別段の規定がない限り、本明細書で使用される全ての技術及び科学用語は、本発明が属する技術分野における当業者によって一般的に理解されている意味と同一の意味を有する。加えて、記載、材料、方法、及び実施例は、単に例示的なものであり、限定することを意図されない。本発明を実施するうえで、本明細書に記載されるものと同様又は同等のいかなる方法及び材料も使用し得る。
【００５８】
本明細書において使用するとき、用語「溶液」とは、液体溶媒中において一部、又は実質的に完全に溶解した、少なくとも１つの物質（溶質）を含む均一な混合物を指す。「実質的に完全に溶解する」とは、溶媒内において溶質が少なくとも８９％溶解していることを意味する。
【００５９】
本明細書において使用するとき、用語「溶解」とは、溶液を得るために、固体などの物質を液体溶媒に入れることを指す。本明細書において使用するとき、「溶解」、「可溶化」、及び「再調製」は互換性がある場合がある。
【００６０】
本明細書において使用するとき、「大気圧」とは所定の位置において、表面上の空気の重さによって表面にかかる、単位面積当たりの力を指す。標準的な海面大気圧は、０．１ＭＰａ（１大気圧、又は１０００ｍＢａｒ）。
【００６１】
本明細書において使用するとき、用語「ヘッドスペース」とは、固体内の気体の容積と合わせた、閉じた容器内の液体又は気体の上の、気体容積を指す。
【００６２】
本明細書において使用するとき、用語「コントローラー」とは、液体の流れのために開いた入口をもたらすことにより、例えば、通過又は管を通じて液体の方向及び／又は流れを調節する、構成要素を指す。コントローラーは、弁、ストップコックなどであり得る。あるいは、カバー（例えば、閉じた容器のゴムキャップ又は壁部）を穿刺し、よって開いた入口をもたらすための、針などの、穿刺要素を含んでもよい。
【００６３】
本明細書において使用するとき、用語「凍結乾燥」は、溶液を凍結した後、例えば昇華によって、生体反応又は化学反応を支持しないレベルまで水分濃度を低減するプロセスを指す。本明細書において使用するとき、用語「ケーク」又は「固体ケーク」は、凍結乾燥から生じる多孔質及びスポンジ構造様組成物を指す。少なくとも５ｍｇ／ｃｍ３（５ｍｇ／ｃｃ）の固体「ケーク」は、圧潰することなくその独自の構造を実質的に支持することができることに留意する。本明細書において使用するとき、ケークに関する用語「圧潰する」とは、ケークがもはやそれ自体の構造を支持できなくなる時点を指す。
【００６４】
本明細書において使用するとき、「賦形剤」とは、医薬組成物に含まれる実質的に不活性な物質を指す。賦形剤は、例えば、貯蔵中に組成物の活性物質がそれらの化学安定性及び／又は生物活性を維持するのを確実にするために、製造プロセスを支援するために、及び／又は審美的理由で（例えば、色）添加され得る。
【００６５】
本明細書において使用するとき、用語「医薬組成物」とは、被験体に投与するための物質又は物質の混合を指す。
【００６６】
本明細書において使用するとき、用語「含む（comprising）」、「含む（including）」、「有する」、及びその文法的変形は、規定の特徴、整数、工程、又は構成要素を特定するものとしてとられるが、１つ又は２つ以上の追加的特徴、整数、工程、構成要素、又はこれらの群の追加を排除するものではない。これらの用語は、用語「〜からなる」、及び「〜から本質的になる」を包含する。
【００６７】
本明細書において使用するとき、不定冠詞「ａ」及び「ａｎ」は、文脈が明確にそうでない旨を表さない限り、「少なくとも１つの」又は「１つ又は２つ以上の」を意味する。
【００６８】
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される方法及び装置は、任意により、以下の利益の少なくとも１つをもたらす：ユーザー（例えば、外科医、又は他の医師）が、シーラントの調製のための固体組成物を含む、固体医薬組成物を迅速に溶解させることを可能にする、最小量又は極僅かな量の泡を有する溶液の形成を可能にする、非常に多孔質な及び／又は脆弱な凍結乾燥ケークを固体組成物として使用できるようにする、固体フィブリノゲン組成物から高度に濃縮したフィブリノゲン溶液の迅速な形成を可能にする、及び濃縮した固体組成物の保存、希釈、及び使用を可能にする。いくつかの実施形態において、本明細書において開示される方法及び装置は、フィブリノゲンを保存及び迅速に溶解し、生じる溶液を患者に適用するために、特に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
本発明のいくつかの実施形態は、添付の図面を参照して、本明細書において記載される。図面と共に説明を読むことにより、本発明のいくつかの実施形態がどのように実施され得るかということが、当業者にとって明らかとなる。図面は、例示的な記載の目的のためであり、実施形態における構造の詳細を、本発明の基本的理解に必要である以上に詳細に示そうとするものではない。明確性のため、図面に示されるいくつかの物体は、縮尺通りではない。
【００７０】
図面中において：
【図１Ａ】本明細書において開示される教示による装置の概略図であり、装置は固体成分を保持するための容器を含み、これは入口、容器内に配置される第１可動シール要素、及び初期状態の第１可動シール要素を解放可能に保持する保持要素を備える。
【図１Ｂ】入口が初期閉鎖状態から開放状態へと変化している状態の、図１Ａの装置の概略図である。
【図１Ｃ】可動シール要素が初期位置から第２位置へと移動した、図１Ｂの装置の概略図である。
【図２】本発明のいくつかの実施形態による装置の断面図を例示し、装置は固体成分を保持するための容器を含み、入口、容器内に配置された第１可動シール要素、第１可動シール要素を解放可能に保持する保持要素、第１コントローラー、溶媒を保持するためにリザーバを備え、入口は開いており、第２可動シール要素はリザーバ内に配置されている。
【図３】本発明のいくつかの実施形態による装置の上面図を例示する。この装置は、固体収容ユニット、及び溶媒収容ユニットを含む。
【図４】互いに切断された、図３の２つのユニットの斜視図を例示する。
【図５】図３の装置の溶媒収容ユニットの分解図を例示する。
【図６Ａ】図３の固体収容ユニットの斜視図を例示する。
【図６Ｂ】保持要素の実施形態を含む、図３の固体収容ユニットの分解図を例示する。
【図７Ａ】図６Ｂの保持要素の斜視、及び拡大図を例示する。
【図７Ｂ】図３の固体収容ユニットのシリンジのピストンロッドの斜視図を例示する。
【図８Ａ】固体収容ユニットを保持するハウジング上に位置する、図６Ｂの保持要素の側方斜視図を例示する。
【図８Ｂ】固体収容ユニットを保持するハウジング上に位置する、図６Ｂの保持要素の側方斜視図を例示する。
【図９Ａ】固体収容ユニットを保持するハウジング上に位置する、図６Ｂの保持要素の上方斜視図を例示し、保持要素は、初期位置にある。
【図９Ｂ】固体収容ユニットを保持する、ハウジング上に位置する図６Ｂの保持要素の底面斜視図を例示し、保持要素は、図９Ａと同じ初期位置にある。
【図９Ｃ】固体収容ユニットを保持する、ハウジング上に位置する、図６Ｂの保持要素の底面斜視図を例示し、保持要素は第２位置にある。
【図１０】コントローラーの実施形態の側面図を例示する。
【図１１Ａ】初期位置にある、本明細書において開示される装置の実施形態を例示する。図１１Ａは上方図を示す。
【図１１Ｂ】初期位置にある、本明細書において開示される装置の実施形態を例示する。図１１Ｂは断面側面図を示す。
【図１１Ｃ】初期位置にある、本明細書において開示される装置の実施形態を例示する。図１１Ｃは、図１１Ｂのコントローラーを含む領域の拡大図を示す。
【図１２Ａ】本発明のいくつかの実施形態による、動作の第１工程における、本明細書において開示される装置の実施形態を例示する。図１２Ａは上方図を示す。
【図１２Ｂ】本発明のいくつかの実施形態による、動作の第１工程における、本明細書において開示される装置の実施形態を例示する。図１２Ｂは断面側面図を示す。
【図１２Ｃ】本発明のいくつかの実施形態による、動作の第１工程における、本明細書において開示される装置の実施形態を例示する。図１２Ｃは、図１２Ｂのコントローラーを含む領域の拡大図を示す。
【図１３】それを通じて溶解した組成物が供給され得る、流体コネクタシステムに接続された溶媒収容ユニットを例示する。
【図１４Ａ】本発明のいくつかの実施形態による、ピストンロッド上に位置するように構成されたスペーサ要素を例示する。
【図１４Ｂ】固体収容ユニットのシリンジのピストンロッド上に位置付けられた、図１４Ａに示されるスペーサを例示する。
【発明を実施するための形態】
【００７１】
フィブリノゲンを含む固体組成物を溶解させるための方法及び装置が、本明細書において開示される。
【００７２】
いくつかの実施形態の態様により、水性溶媒中に固体フィブリノゲン組成物を溶解させるための方法が提示され、これは、ある容積の固体フィブリノゲン組成物、及びヘッドスペースを含む閉じた容器をもたらす工程であって、ヘッドスペース内における圧力は大気圧より低い、工程と、ヘッドスペース内の内部圧力を大気圧より低く維持する一方で、少なくとも４０ｍｇ／ｍＬを含む溶液を形成するための固体フィブリノゲン組成物の容積よりも小さい容積の水性溶媒を容器内に導入する工程と、その後、ヘッドスペース内の圧力が大気圧と等しくなるまで、容器内のヘッドスペースの大きさを低減させる工程とを含む。いくつかの実施形態において、方法は更に、容器を撹拌する工程を含む。いくつかの実施形態において、方法は、溶媒を固体組成物に添加した際に形成される一部溶解した溶液を撹拌する工程を含む。いくつかの実施形態において、溶解が９０秒以内に生じる。
【００７３】
いくつかの実施形態の態様により、水性溶媒内に固体組成物を溶解させるのに好適な装置がもたらされる。装置は、第１固体組成物を保持するために好適な第１の閉じた容器を含み、第１の閉じた容器は閉鎖状態及び開放状態を有する第１の閉じた容器を含み、閉鎖状態において、第１の閉じた容器入口を流体の通過に対して封止し、開放状態において、第１の閉じた容器入口が第１の閉じた容器に流体連通する経路をもたらす。装置は更に、第１の閉じた容器を封止するために第１の閉じた容器内に配置され、第１の閉じた容器の内部容積を低減させるために第１の閉じた容器内で少なくとも第１位置と第２位置との間で移動する間に、第１の閉じた容器の封止を維持するように構成される、第１可動封止要素を含む。第１位置は、容器内のヘッドスペースが大気圧より低い気圧を有するようなものであり、第２位置は、ヘッドスペースが大気圧と等しい気圧を有するようなものである。装置は更に、第１の閉じた容器内の第１位置に第１可動封止要素を解放可能に保持するように構成された第１保持要素を含む。装置は更に、第１の閉じた容器入口の閉鎖状態と開放状態との間での変更を制御するための第１コントローラーを含む。
【００７４】
第１の閉じた容器入口が閉鎖状態にあり、第１可動封止要素が第１位置にあるとき、第１の閉じた容器の圧力は大気圧よりも低い。あるいは、第１可動封止要素が第２位置にある間に第１の閉じた容器入口が閉鎖状態にあり、その後第１可動封止要素が第１位置に移動し、第１保持要素が第１可動封止要素を保持するとき、大気圧より低い圧力を有するヘッドスペースが形成される。
【００７５】
本明細書における教示の原理、使用法、及び実施は、添付の記載及び図面を参照してよりよく理解され得る。本明細書における記載及び図面を精査することにより、当業者は、過度な努力又は実験を行うことなく、本発明を実施することができる。図中において、参照番号は、全体を通じて同様の部品を示す。
【００７６】
本発明の少なくとも１つの実施形態を詳細に説明する前に、理解されたいこととして、本発明は、その用途において、以下の説明に記載した及び／又は図面に示した各構成要素及び／又は方法の構造又は構成の詳細に必ずしも限定されない。本発明は他の実施形態が可能であり、様々な方法によって実行又は実施することが可能である。本明細書において使用される表現及び用語は、記述的目的のためであり、限定としてみなされるべきではない。
【００７７】
ここで図１Ａ〜１Ｃを参照し、本明細書において開示される教示による、装置１０の概略図が示される。装置１０は、ある容積の固体組成物１４、及びヘッドスペース１６を保持する閉じた容器１２を含む。容器は、固体組成物を保持するのに好適な任意の容器であり得る。容器の例としては、ボトル、凍結乾燥容器、バレル、ジャー、及びシリンジが挙げられるがこれらに限定されない。容器は、例えば、ゴムキャップなど、第１可動封止要素によって閉じられる。容器は、ガラス、プラスチック、金属などの好適な材料で作製され得る。
【００７８】
閉じた容器１２は、水性溶媒の、閉じた容器１２の内部容積への通過を制御するための入口１８を含む。入口１８は、容器１２の内部容積への水性溶媒の流れが遮断される閉鎖状態と、入口１８が容器１２の内部容積への水性溶媒の流れの経路をもたらす開放状態とを有する。コントローラー２０は、開放状態から閉鎖状態への入口１８の変化を制御する。あるいは、いくつかの実施形態において、コントローラー２０は、水性溶媒（図示されない）を含むシリンジに取り付けられた針などの、貫通要素を含み、この貫通要素でキャップを貫通することにより、閉じた容器１２のキャップに入口１８の開放状態がもたらされる。
【００７９】
容器１２を封止するため、可動封止要素２２が容器１２内に配置される。可動封止要素２２は、容器１２内のヘッドスペース１６の容積を変化させるために容器１２内で動くことができ、ヘッドスペース１６の容積を減少させる方向で封止要素２２を動かすことにより、ヘッドスペース１６内の圧力が増加する。可動封止要素２２は、保持要素２４によって容器１２内（直接又は間接的に）で第１位置に開放可能に保持され、可動封止要素２２が第１位置にあるとき、ヘッドスペース１６の容積は、ヘッドスペース１６内の容積が大気圧より低くなるようなものである。保持要素２４は、保持要素作動装置３９（図６Ｂに図示される）に任意により接続され、これは、可動封止要素２２の保持要素２４からの解放を行う。
【００８０】
解放する際、可動封止要素２２は、第２位置へと移動し、よってヘッドスペース１６の容積が減少し、ヘッドスペース１６の圧力が、大気圧と同等まで増加する。
【００８１】
容器１２は任意により、ハウジング６４内に保持され得る（例えば、図３に図示される）。
【００８２】
装置１０は、水性溶媒を含む、リザーバ４２（例えば、図２に示される）を更に含み得る。
【００８３】
図１Ａに示されるように、初期状態において、入口１８は閉鎖状態にあり、保持要素２４は可動封止要素２２を第１位置に保持し、ヘッドスペース１６内の圧力は大気圧より低い。
【００８４】
図１Ｂは、入口１８が初期閉鎖状態から開放状態へと変化する際の装置１０の使用法を図示し、ヘッドスペース１６内の圧力が大気圧より低く維持されるように、可動封止要素２２が保持要素２４によって容器１２内で第１位置に保持される一方で、水性溶媒は、容器１２の内部容積内へと流れることができる。水性溶媒が占める容積は、固体組成物が占める容積よりも小さい。
【００８５】
図１Ｃに図示されるように、水性溶媒が容器１２の内部容積内へと流された後、可動封止要素２２は保持要素２４から解放されて、容器１２内で第２位置へと移動し、ヘッドスペース１６の容積は減少し、ヘッドスペース１６内の圧力はそれに伴って、大気圧に到達するまで、増加する。
【００８６】
いくつかの実施形態により、閉じた容器１２はシリンジバレルを含み、可動封止要素２２は、少なくとも一部がバレル内に取り囲まれたプランジャを含む。いくつかのこのような実施形態において、保持要素２４は、使用前にプランジャを第１位置に解放可能に保持する。
【００８７】
ここで図２を参照し、代表的な装置３０の側方断面図が示され、第１シリンジバレル３２は、入口１８を有する前端部３４、及び後端部３６を有し、第１可動封止要素２２ａは、第１シリンジバレル３２内に配置され、保持要素２４は、第１可動封止要素２２ａを解放可能に保持するためのものであり、コントローラー２０は入口１８を閉鎖状態から開放状態へと変化させるためのものである。コントローラー２０は、コントローラー作動装置３８に直接又は間接的に接続され、これは起動されると、コントローラー２０により入口１８を閉鎖状態から開放状態へと変化させる。
【００８８】
第１可動封止要素（図２）２２ａは、第１ピストンを操作するために、シリンジバレル３２の後端部から外に延びる第１ピストンロッド４０ａを有する、第１の摺動自在に変位可能なピストンを含む。
【００８９】
いくつかの実施形態において、保持要素２４は、ピストンロッド４０ａの後端部と、第１シリンジバレル３２の後端部３６との間に配置されたスペーサを含み、ピストンロッド４０ａが、第１シリンジバレル３２内へと前方に移動するのを防ぐ。保持要素２４は、任意により作動装置（図示されない）に接続され、これは作動されると、保持要素２４により第１可動封止要素２２ａを開放する。
【００９０】
いくつかの実施形態において、ピストンロッド４０ａに窪みがもたらされ、保持要素２４は、窪み７０（図７Ｂに示される）内に可逆的に係合するように構成された少なくとも１つの突起部７２（図６Ｂ及び７Ａに示される）を含む。
【００９１】
いくつかの実施形態において装置３０（例えば、図２）は更に、使用前に水性溶媒を収容するための、第２シリンジバレル４４と、リザーバ４２を封止するために、バレル４４内に配置された第２可動封止要素２２ｂとを含む、リザーバ４２を含む。第２ピストンを操作するためにシリンジバレル４４の後端部から外に延びる第２ピストンロッド４０ｂを有する、第２の摺動可能に変位可能なピストンを含む、第２可動封止要素２２ｂが、バレル４４内に配置される。
【００９２】
リザーバ４２は、入口１８に直接又は間接的に接続された出口４６を含む。いくつかの実施形態において、閉じた容器１２及びリザーバ４２は、溶媒中の固体組成物の溶解を促進させるために、固体組成物に水性溶媒を加えた後に、これを撹拌をできるように構成されている。いくつかの実施形態において、閉じた容器１２及びリザーバ４２は、リザーバ４２と容器１２との間の水性溶媒（水性溶媒を固体組成物に添加した後に形成される一部溶解した溶液を含む懸濁液）の反復的な移動による、撹拌を可能にするように構成される。
【００９３】
コントローラー２０は、任意により入口１８と出口４６との間に位置する。
【００９４】
図３は、本発明のいくつかの実施形態による、装置５０の上方図を例示し、装置５０は、固体組成物を収容するための固体収容ユニット５２と、溶媒を収容するための溶媒収容ユニット５４とを含む。
【００９５】
溶媒収容ユニット５２は、２つの閉じた容器１２ａ、１２ｂを含み、それぞれ入口１８ａ、１８ｂを有するシリンジバレル３２ａ、３２ｂを含み、各シリンジバレル３２ａ、３２ｂは、異なる固体組成物（例えば、それぞれ、トロンビン、及びフィブリノゲン）を収容するように構成されている。溶媒収容ユニット５４は、２つのリザーバを含み、それぞれ出口４６ａ、４６ｂを有するシリンジバレル４４ａ、４４ｂを含み、各シリンジバレル４４ａ、４４ｂは、シリンジバレル３２ａ、３２ｂにそれぞれ収容される固体組成物を溶解させるための溶媒を収容するように構成されている。シリンジバレル４４ａ、４４ｂは、同じ又は異なる水性溶媒を収容し得る。
【００９６】
シリンジバレル３２ａ、３２ｂ、４４ａ、４４ｂはそれぞれ、内部にそれぞれ配置された２２ａ、２２ｃ、２２ｂ、２２ｄ（図示されない）と、可動封止要素２２ａ、２２ｃの少なくとも一方を解放可能に保持するための保持要素２４と、入口１８ａ、１８ｂの少なくとも一方を閉鎖状態から開放状態へと変化させる少なくとも１つのコントローラー２０を含む。いくつかの実施形態において、コントローラー２０は、入口１８ａ、１８ｂの両方を閉じた状態から開いた状態へと変化させる。装置５０は任意により、入口１８ａ、１８ｂの他方を閉鎖状態から開放状態へと変化させるための、第２コントローラー２０ｂをふくみ得る。コントローラー２０ａ、２０ｂ（図６Ｂに示される）は、任意により、入口１８ａと出口４６ａの間、及び入口１８ｂと出口４６ｂとの間にそれぞれ位置付けられる。
【００９７】
装置５０は、固体収容ユニット５２を保持するためのハウジング６４、及び溶媒収容ユニット５４を保持するためのハウジング６６を含む。あるいは、固体収容ユニット５２及び溶媒収容ユニット５４は、両方とも単一のハウジング（図示されない）に保持されてもよい。またあるいは、固体収容ユニット５２及び溶媒収容ユニット５４の少なくとも一方が、ハウジングなしに設けられてもよい。保持要素２４は、任意によりハウジング６４内／上に位置する。コントローラー２０ａ及び／又は２０ｂは、任意によりハウジング６４内に位置する。
【００９８】
いくつかの実施形態により、コントローラー２０は、コントローラー作動装置３８に接続され、これは作動される際にコントローラー２０によって入口１８ａ、１８ｂの少なくとも一方を閉鎖状態から開放状態へと変化させる。第１コントローラー２０ａ及び第２コントローラー２０ｂを含むいくつかの実施形態において、各コントローラー２０ａ、２０ｂは、コントローラー作動装置３８ａ、３８ｂに接続され、コントローラー２０ａ、２０ｂは、任意により、コントローラー作動装置３８ａ、３８ｂの下に位置付けられる。あるいは、いくつかの実施形態において、単一のコントローラー作動装置３８が、図６Ａ及び６Ｂに示されるように、第１コントローラー２０ａ及び第２コントローラー２０ｂの両方を制御する。
【００９９】
少なくともコントローラー作動装置３８の起動、及びコントローラー２０ａ、２０ｂの作動の前、装置５０が初期状態にあるとき、入口１８ａ及び１８ｂは閉じて、水性溶媒がシリンジバレル３２ａ、３２ｂ内に流れるのを防ぐ。コントローラー作動装置３８を起動する際、入口１８ａ、１８ｂの少なくとも一方が閉鎖位置から開放位置へと変化するように、コントローラー２０ａ、２０ｂの少なくとも一方が起動され、水性溶媒がシリンジバレル３２ａ、３２ｂの少なくとも一方へと流入できるようにする。
【０１００】
各可動封止要素２２ａ、２２ｂ、２２ｃ、２２ｄは、ピストンを操作するために、各シリンジバレル３２ａ、４４ａ、３２ｂ、４４ｂの後端部の外にそれぞれ延びるピストンロッド４０ａ、４０ｂ、４０ｃ、４０ｄを有する、摺動自在に変位可能なピストンを含む。
【０１０１】
任意により、固体収容ユニット５２のピストンロッド４０ａ、４０ｃは、連結要素５６を介して機械的に接続され、溶媒収容ユニット５４のピストンロッド４０ｂ、４０ｄは、連結要素５８を介して機械的に接続され、よって各ユニット内のピストンロッドの対が、一緒に移動し得る。
【０１０２】
固体収容ユニット５２のシリンジバレル３２ａ、３２ｂは、溶媒収容ユニット５４のシリンジバレル４４ａ、４４ｂとそれぞれ、流体コネクタ６０、６２を介して可逆的に接続される。流体コネクタは例えば、ルア適合部であり得る。例えば、固体収容ユニット５２は、２つの雄型ルア適合部を含む流体コネクタ６０を含み、溶媒収容ユニット５２は、２つの雌型ルア適合部を含む流体コネクタ６２を含み得る。シリンジバレル３２ａ、３２ｂはそれぞれ、シリンジバレル４４ａ、４４ｂと反対側に位置付けられ、流体連通をもたらす、ルア適合部によって接続されている。
【０１０３】
装置５０が初期位置にあるとき、各シリンジバレル３２ａ、３２ｂ内のヘッドスペース１６の圧力は大気圧より低く、入口１８ａ、１８ｂは閉鎖状態にあり、保持要素２４はピストンロッド４０ａ、４０ｃを第１位置に保持し、ヘッドスペース１６内の圧力は、大気圧より低い水準に維持される。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、入口１８ａ、１８ｂを開き、それによって溶媒をシリンジバレル３２ａ、３２ｂへと流入させる工程により、ヘッドスペース１６内の圧力の増加が生じる。ヘッドスペース１６の圧力は、溶媒がシリンジバレル３２ａ、３２ｂへと入る工程の間、有利に、大気圧より低く維持される。例えば、溶解時間を短縮するために、大きな表面積を有する非常に多孔質なケークが使用されるがこれは、シリンジバレル３２に溶媒が導入される前の、シリンジバレル３２内のプランジャによる、このようなケークの圧潰を防ぐためである。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、入口１８ａ、１８ｂを開く間に、シリンジバレル３２ａ、３２ｂ内のヘッドスペース１６内の圧力と、シリンジバレル４４ａ、４４ｂ内の圧力との間の差圧を維持することにより、溶媒がシリンジバレル３２ａ、３２ｂへと自然に引き込まれるようになる。
【０１０６】
同じ実施形態により、装置５０が、それぞれ固体組成物を保持するシリンジバレル３２ａ、３２ｂを含むとき、２つの固体組成物、及び２つの溶解した固体組成物（例えば、溶液を含む溶解したフィブリノゲン、溶液を含む溶解したトロンビン）の迅速かつ同時的な投与が可能になる。
【０１０７】
図４は、雄型ルア適合部を含む流体コネクタ６０を、雌型ルア適合部を含む流体コネクタ６２から取り外すことにより、互いに切断された、図３の、固体収容ユニット５２、及び固体収容ユニット５４を示す、図３の装置５０の斜視図を例示する。
【０１０８】
図５は、シリンジバレル４４ａ、４４ｂ、各シリンジバレル４４ａ、４４ｂ内にそれぞれ位置するピストンロッド４０ｂ、４０ｄを有するピストンを含む、図３及び図４の溶媒収容ユニット５４の実施形態の分解図を例示する。各シリンジバレル４４ａ、４４ｂは、それぞれ出口４６ａ、４６ｂを有する。シリンジバレル４４ａ、４４ｂは、溶媒を収容するように構成される。シリンジバレル４４ａ、４４ｂはそれぞれ、同じ又は異なる溶媒を含み得る。
【０１０９】
図６Ａは、図３及び図４の固体収容ユニット５２の実施形態を例示し、これはハウジング６４内に収容され、任意によりハウジング６４上に位置付けられ、かつ任意により２つの「Ｕ」字型構成要素２５（図６Ｂに示される）により適所に保持された保持要素２４を含んでチャネル様構造を形成する。固体収容ユニット５２は、それぞれ固体構成要素を保持するように構成された、２つのシリンジバレル３２ａ、３２ｂを含む。各シリンジバレル３２ａ、３２ｂは、同じ又は異なる固体組成物を保持してもよい。一実施形態において、シリンジバレル３２ａは、フィブリノゲンを含む固体組成物を含み、シリンジバレル３２ｂは、トロンビンを含む固体組成物を含む。装置５０は更に、コントローラー作動装置３８を含む。
【０１１０】
図６Ｂは、図６Ａの固体収容ユニット５２の分解図を例示し、ピストンロッド４０ａ、４０ｃは、少なくとも１つの窪み７０を含み、保持要素２４（固体収容ユニット５２の後端部上、又はハウジング６４上に直接又は間接的に、任意に位置付けられた）は少なくとも１つの隆起部７２などの少なくとも１つの突起部を含み、窪み７０は隆起部７２と可逆的に係合するように構成され、それにより、装置５０が初期位置にあるとき、隆起部７２が窪み７０内に係合し、保持要素２４が少なくとも１つの可動封止要素２２ａ、２２ｃを固定位置に保持して、固体収容ユニット５２のシリンジバレル３２ａ、３２ｂ内の大気圧より低い圧力を維持する。窪み７０の位置は、ヘッドスペース１６内の所望の圧力を維持するために、バレル３２ａ、３２ｂ内のヘッドスペース１６の必要な容積によって決定される。
【０１１１】
いくつかの実施形態において、ピストンロッド４０ａ、４０ｃは、１つの窪み７０ａ、７０ｂをそれぞれ含み、保持要素２４は、それぞれ窪み７０ａ及び７０ｂの１つの係合するように構成されている、２つの隆起部７２ａ、７２ｂを含み、それにより可動封止部２２ａ、２２ｃは、保持要素２４によって保持され、バレル３２ａ、３２ｂそれぞれのヘッドスペース１６の容積は、ヘッドスペース１６内の大気圧より低い圧力をもたらすレベルに維持される。
【０１１２】
あるいは、第１ピストンロッド４０ａのみが保持要素２４の１つの隆起部７２と係合するように構成された、窪み７０を含む。いくつかの実施形態において、ピストンロッド４０ｃは、任意によりピストンロッド４０ａに接続され、それによってピストンロッド４０ａ、４０ｃの両方が保持要素２４によって最初に第１位置に保持され、それによって大気圧より低い圧力が、各シリンジバレル３２ａ、３２ｂ内のヘッドスペース１６において維持される。あるいは、ピストンロッド４０ａ、４０ｃは、大気圧よりも低い圧力が、シリンジバレル３２ａのヘッドスペース１６のみにおいて維持されるように、分離されてもよい。
【０１１３】
更に任意により、ピストンロッド４０ａ、４０ｃの１つ又は２つ以上が、ヘッドスペース１６内で異なる任意の圧力レベルをもたらすように、ピストンロッド４０ａ及び／又は４０ｃに沿った異なる場所に位置する、２つ以上の窪み７０を含み得る。
【０１１４】
図６Ｂに更に示されるように、コントローラー２０ａ、２０ｂは、コントローラー作動装置３８に接続され、これは作動された際に（例えば、装置５０の動作の第１工程においてユーザーによって下方に押される）、第１コントローラー２０ａによって入口１８ａを閉鎖状態から開放状態に変化させ、溶媒が固体収容ユニット５２のシリンジバレル３２ａへと流れるのを可能にし、第２コントローラー２０ｂによって入口１８ｂを閉鎖状態から開放状態に変化させ、溶媒がシリンジバレル３２ｂに流れるのを可能にする。任意により、単一のコントローラー２０が入口１８ａ及び１８ｂを閉鎖位置から開放位置へと同時に変化させる。
【０１１５】
保持要素２４は任意により、保持要素作動装置３９を含むか、又はこれに接続され、これは作動されたとき（例えば、装置５０の動作の第２工程においてユーザーによって下方におされる）、可動封止要素２２ａ、２２ｃの少なくとも一方が保持要素２４から解放されて、少なくとも１つの可動封止要素２２ａ、２２ｃが容器内で移動できるようにする。任意により、可動封止要素２２ａ、２２ｃのそれぞれが、保持要素２４から同時に解放される。あるいは、装置５０は、各可動封止要素２２ａ、２２ｃをそれぞれ個別に保持するための保持要素２４ａ、２４ｂを含み得る。保持要素作動装置３９は、任意により、単一の保持要素２４を作動し、各可動封止要素２２ａ、２２ｃを同時に解放する。あるいは、装置５０は、保持要素２４ａ、２４ｂをそれぞれ作動させるための、個別の保持要素作動装置３９ａ、３９ｂを含み得る。
【０１１６】
いくつかの実施形態において、装置５０の初期位置において、固体組成物を含む各シリンジバレル３２ａ、３２ｂは、ヘッドスペース１６内に大気圧以下の圧力を有し、コントローラー２０（又はコントローラー２０ａ、２０ｂ）は閉じ、ピストンロッド４０ａ、４０ｃは、保持要素２４によって第１位置に保持されて、シリンジバレル３２ａ、３２ｂのヘッドスペース１６において大気圧より低い圧力を維持して、環境における大気圧とバレル３２ａ、３２ｂのヘッドスペース１６内の大気圧より低い圧力との間における差圧により、ピストンロッド４０ａ、４０ｃがシリンジバレル３２ａ、３２ｂに吸い込まれるのを防ぐ。
【０１１７】
図７Ａは、隆起部７２ａ、７２ｂ、及び保持要素作動装置３９を含む、保持要素２４の実施形態の斜視図及び拡大図を例示する。保持要素２４は、狭い基部７４、及びより広い上部７６を含む。このような実施形態において、上部７６の幅により「Ｕ」字型構成要素２５（図６Ｂに示される）によって形成されるチャネル様構造において、保持要素２４が下方に押されるのが防がれる。
【０１１８】
図７Ｂは、本明細書において開示されるいくつかの実施形態による、固体収容ユニット５２のシリンジバレル３２ａ、３２ｂのピストンロッド４０ａ、４０ｃの実施形態の斜視図を例示する。窪み７０ａ、７０ｂは、それぞれ隆起部７２ａ、７２ｂと係合するように構成される。
【０１１９】
図８Ａ及び８Ｂは、固体収容ユニット５２のシリンジバレル３２ａ、３２ｂを一緒に保持する、ハウジング６４の近位端上に位置する、隆起部７２ａ、７２ｂを含む、保持要素２４の実施形態の斜視図を例示する。図８Ａにおいて、保持要素２４は、作動前に第１位置７８にあり、隆起部７２ａ、７２ｂはそれぞれ、窪み７０ａ、７０ｂ内に係合する。図８Ｂにおいて、保持要素作動装置３９により作動させ、隆起部７２ａ、７２ｂを窪み７０ａ、７０ｂから係合離脱させた後、保持要素２４は、ハウジング６４の第２位置８０へと移動する。
【０１２０】
図９Ａは、作動前の、第１位置７８における保持要素２４の実施形態の上方斜視図を例示し、保持要素２４の隆起部７２ａ、７２ｂは、ピストロンロッド４０ａ、４０ｃに沿って固定位置に位置する２つの窪み７０ａ、７０ｂ内に係合し、よってピストンロッド４０ａ、４０ｃは、第１位置に保持される。
【０１２１】
図９Ｂは、図９Ａと同じ位置にある保持要素２４の実施形態の底面斜視図を例示する。
【０１２２】
図９Ｃは、保持要素作動装置３９による作動の後、第２位置８０における、保持要素２４の実施形態の底面斜視図を例示し、隆起部７２ａ、７２ｂは、窪み７０ａ、７０ｂから係合離脱し、それによって保持要素２４がピストンロッド４０ａ、４０ｃから解放され、よってピストンロッド４０ａ、４０ｃは、それぞれシリンジバレル３２ａ、３２ｂ内で自由に移動する。
【０１２３】
図１０は、実質的に円筒形の部分８２、及びより広い凹状の下部８４を有する、コントローラー２０の実施形態の側面図を例示する。コントローラー２０の作動の前に、固体組成物を含むシリンジバレル３２ａ、３２ｂと、水性溶媒を含むシリンジバレル４４ａ、４４ｂとの間の流路に、より広い部分８４が位置し、それによって、シリンジバレル４４ａ、４４ｂからシリンジバレル３２ａ、３２ｂへの溶媒の流れが物理的に遮断される。コントローラー作動装置３８がコントローラー２０を作動するとき、コントローラー２０は、円筒形部分８２が流路に位置するように移動し、シリンジバレル４４ａ、４４ｂからシリンジバレル３２ａ、３２ｂへと溶媒の流れが、円筒形部分８２の周囲で生じ得る。一実施形態において、コントローラー２０が作動する際に流路は開いたままである。
【０１２４】
図１１Ａ〜Ｃは、初期状態にある装置５０を例示し、溶媒はシリンジバレル４４ａ、４４ｂ内に収容され、入口１８ａ、１８ｂは、コントローラー２０によって維持されて閉じた位置にある。図１１Ａ上面図を示し、図１１Ｂは、側断面図を示し、図１１Ｃは、コントローラー２０を含む領域の拡大図を示す。この図において、ピストンロッド４０ａ、４０ｃは、ヘッドスペース１６が大気圧より低い圧力に維持されるように、ヘッドスペース１６の容積を維持するように、初期位置にある。その後、コントローラー作動装置３８が作動されて、コントローラー２０により、例えば、流路からコントローラー２０のより広い凹状の下部８４を取り除くことにより、入口１８ａ、１８ｂが閉鎖状態から開放状態へと変化する。周囲環境の大気圧と、シリンジ３２ａ、３２ｂ内のヘッドスペース１６の大気圧より低い圧力との間の差圧により、溶媒収容ユニット５４のピストンロッド４０ｂ、４０ｄは、シリンジバレル４４ａ、４４ｂへと引き込まれ、よってシリンジバレル４４ａ、４４ｂからシリンジバレル３２ａ、３２ｂへとそれぞれ溶媒が流れる。
【０１２５】
図１２Ａ〜Ｃは、シリンジバレル４４ａ、４４ｂからシリンジバレル３２ａ、３２ｂへと溶媒が移動した後の、装置５０を例示する。図１２Ａは、上面図を示し、図１２Ｂは、側方断面図を示し、図１２Ｃは、コントローラー２０を含む領域の拡大図を示す。この段階において、コントローラー２０の実質的に円筒形の部分８２が、流体流路に位置する。
【０１２６】
図１３は、固体収容ユニット５２から切断され、ルア適合部を含む流体コネクタ６０、６２を含む流体コネクタシステム８６に接続された、溶媒収容ユニット５４を例示し、溶媒中の２つの固体組成物の溶解により形成された溶液が、コネクタ６０、６２を通じて被験体に投与され得る。流体コネクタシステム８６は任意により、多数の流体チャネルをもたらすために、多数のルーメンを有するカテーテルを含む。
【０１２７】
図１４は、トンネル状構造９０を有するスペーサ８８を含む保持要素２４の実施形態を例示し、これは任意により剛性材料を含み、固体収容ユニット５２のピストンロッド４０ａ、４０ｃの上に（任意により、ピストンロッド４０ａ、４０ｃの後端部と、固体組成物を含むシリンジバレル３２の後端部との間に）位置付けられるように構成される。
【０１２８】
図１４Ｂは、固体収容ユニット５２のシリンジバレル３２のピストンロッド４０上に位置付けられた、スペーサ８８を例示する。このような実施形態において、スペーサ８８は、ピストンロッド４０が、シリンジバレル３２に引き込まれるのを防ぐ。スペーサ８８をピストンロッド４０から取り除くと、ピストンロッド４０は、解放されて、シリンジバレル３２へと引き込まれる。スペーサ８８の長さ及び位置は、ヘッドスペース１６に必要な圧力をもたらすために、シリンジバレル３２内に必要なヘッドスペース１６の容積によって決定される。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、装置５０の動作順序は以下を含む：
初期位置において、固体収容ユニット５２、及び液体／溶媒収容ユニット５４は、互いに接続され（例えば、ルア適合部を含む、流体コネクタ６０、６２により）、溶媒収容ユニット５４のシリンジバレル４４ａ、４４ｂと、固体収容ユニット５２のシリンジバレル３２ａ、３２ｂとの間に流体連通をもたらすように構成されている。この段階において、入口１８ａ、１８ｂは閉鎖され、シリンジバレル４４ａ、４４ｂからシリンジバレル３２ａ、３２ｂへの流体の流れを防ぐ。シリンジバレル４４ａ、４４ｂ内の溶媒が占める容積は、シリンジバレル３２ａ、３２ｂ内の固体組成物が占める容積よりも小さい。シリンジバレル３２ａ、３２ｂ内の、ヘッドスペース１６内の圧力は、大気圧より低い。シリンジバレル４４ａ、４４ｂ内のヘッドスペース内の圧力は、例えば、大気圧などの、環境圧と等しい。固体収容ユニット５２のシリンジのピストンロッド４０ａ、４０ｃは、先に記載されたように、保持要素２４を使用して、これらの対応するバレル内に一部包囲された、それらの初期位置に維持される。
【０１３０】
第１工程において、ユーザーは、コントローラー作動装置３８を、下方に押すことによって作動し、よってコントローラー２０ａ、２０ｂを作動し、入口１８ａ、１８ｂ、及び出口４６ａ、４６ｂを開くことにより、シリンジバレル４４ａからシリンジバレル３２ａへ、シリンジバレル４４ｂからシリンジバレル３２ｂへと流体が流れることを可能にする。溶媒がシリンジバレル３２ａ、３２ｂに流入すると、バレル３２ａ、３２ｂ内のヘッドスペース１６内の圧力は、大気圧より低い。
【０１３１】
一実施形態において、コントローラー作動装置３８を起動した後に、流体接続が開いたままである。
【０１３２】
第２段階において、溶媒がシリンジバレル３２ａ、３２ｂに導入された後、ユーザーが保持要素作動装置３９を起動し（任意により、保持要素２４の一部である）、固体収容ユニット５２のピストンロッド４０ａ、４０ｃの解放を生じる。その後、シリンジバレル３２ａ、３２ｂの、環境の大気圧より低い圧力により、ピストンロッド４０ａ、４０ｃはそれらの対応するシリンジバレル３２ａ、３２ｂに引き込まれ、それによってヘッドスペース１６内の圧力が大気圧と等しくなるまで、バレル３２ａ、３２ｂのヘッドスペース１６内における圧力の増加を生じる。
【０１３３】
本明細書において開示される原理により、圧力の増加は、シリンジ内に気体を導入することなく、シリンジバレル３２ａ、３２ｂ内のヘッドスペースを減少させることによって達成される。有利なことに、ヘッドスペース１６内の圧力レベルの変化は、気泡の形成を排除又は最小化し、泡がほぼ完全に存在しない状態で、固体組成物の懸濁液を撹拌することを可能にする。
【０１３４】
完全な溶解を促進し、固体組成物が溶媒中で完全に溶解している溶液を形成するため、シリンジバレル４４ａと３２ａとの間、及びシリンジバレル４４ｂと３２ｂとの間で懸濁液を数回移動させることによって、ピストンロッド４０ａ、４０ｂ、４０ｃ、４０ｄを使用して、懸濁液を撹拌することができる。溶解又は再調製が完了した後、ユーザーは、ユニット５２をユニット５４から切断し、例えば、流体コネクタシステム８６（これを通じて２つの再調製された溶液が供給され得る）を接続することによって、再調製された溶液を所望の位置に投与することができる。
【０１３５】
本発明のいくつかの機構は、明確性のために別個の実施形態の文脈において記載されているが、これはまた、単一の実施形態において組み合わせて提示されてもよい。逆に、本発明の様々な特徴は、簡潔さのために、単一の実施形態の文脈において記載されているが、これはまた、別個に、若しくは任意の好適なサブコンビネーションで、又は本発明の他の記載される実施形態において好適にもたらされてもよい。様々な実施形態の文脈において記載されるいくつかの機構は、その実施形態がそれらの要素なしには動作不可能である場合を除き、これらの実施形態の本質的機構であるものとみなされない。
【０１３６】
本発明は、その特定の実施形態と共に記載されてきたが、多くの代替、修正、及びバリエーションが、当業者には明白であることが、明らかである。したがって、添付の請求項の範囲内である、これらの代替、修正、及びバリエーション全てを包含することが意図される。
【０１３７】
本出願のいずれかの参照文献の引用又は指定は、このような文献が本発明の先行技術として利用可能であることを認めるものと解釈されるべきではない。
【実施例】
【０１３８】
材料及び方法
凍結乾燥
凍結乾燥は、Ｃｈｒｉｓｔ  Ｅｐｓｉｌｏｎ  ２−８Ｄ凍結乾燥剤を使用して、表１に示される周期によって実行された。凍結乾燥は、円筒形のバイアル瓶又はカップで実行され、凍結乾燥プロセスが完了した際に密封された。凍結乾燥プロセスは、固体の三次元フィブリノゲン「ケーク」を生成した。
【０１３９】
【表１】
2015509084.tif 000003
【０１４０】
任意により、０．０１２ｋＰａ（０．１２ｍＢａｒ）の圧力は、工程１３の後、凍結乾燥バイアル瓶を密閉する前に、凍結乾燥バイアル瓶内の圧力を、所望の圧力まで増加させることによってもたらすことができる。
【０１４１】
Ｃｌａｕｓｓ凝固時間方法
この方法は、凝固時間機械（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ  Ｓｔａｇｏ  Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）を使用して、一定量のトロンビンの存在下における凝固時間によって、凝固可能なフィブリノゲン濃度を測定する。サンプルに関して測定される凝固時間が、標準的フィブリノゲンにより生成される較正曲線により得られるものと比較される。使用される方法は、Ｅｕ．Ｐｈ．ａｓｓａｙ  ０９０３／１９９７の修正である（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐａｉｅａ，Ｆｉｂｒｉｎ  ｓｅａｌａｎｔ  ｋｉｔ．１９９７；０９０３：８５８；及び、Ｃｌａｕｓｓ  Ａ．Ｇｅｒｉｎｎｕｎｇｓｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｓｃｈｅ  Ｓｃｈｎｅｌｌｍｅｔｈｏｄｅ  ｚｕｒ  Ｂｅｓｔｉｍｍｕｎｇ  ｄｅｓ  Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎｓ．Ａｃｔａ  Ｈａｅｍａｔｏｌ．１９５７；１７：２３７〜２４６に説明される）。
【０１４２】
脱気した再蒸留水（脱気ＤＤＷ）の調製
再蒸留水（ＤＤＷ）は、それ以上水面上に気泡が現れなくなるまで、真空下で撹拌された。
【０１４３】
フィブリノゲン原液
５５〜８５ｍｇ／ｍＬの凝固可能なフィブリノゲン濃度を有する、ＥＶＩＣＥＬ（登録商標）Ｆｉｂｒｉｎ  Ｓｅａｌａｎｔ  （Ｏｍｒｉｘ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｌｔｄ．）における、生物学的活性成分（ＢＡＣ）溶液が、以下に記載される全ての実験においてフィブリノゲン原液として使用された。
【０１４４】
タンパク質溶解濃度の測定
凍結乾燥及び溶解後のフィブリノゲン試験溶液、及びＢＡＣフィブリノゲン原液を含む対照溶液（これは、凍結乾燥及び溶解に供されなかった）の、光学的濃度（ＯＤ）が測定された。
【０１４５】
各フィブリノゲン試験溶液からの１５０μＬのサンプルが、ＤＤＷと１：４００で希釈され、純粋なＤＤＷに対して２８０〜３２０ｎｍでＯＤが測定された。ＵＬＴＲＡＳＰＥＣ  ２１００プロ分光計（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して、アクリルキュベット（Ｓａｒｓｔｅｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ；Ｃａｔ．ｎｕｍｂｅｒ  ６７．７４０）内で測定が行われた。
【０１４６】
対照溶液のＯＤは１００％とされた。以下の式に従って、計算が行われ、結果は％で表現された：
【０１４７】
【数１】
2015509084.tif 000004
【０１４８】
実施例１：固体フィブリノゲンを溶解させて、濃縮したフィブリノゲン溶液を得る。
上記の凍結乾燥により得られる、固体三次元フィブリノゲン低濃度「ケーク」のフィブリノゲン密度の、水性溶媒中のタンパク質溶解度に対する影響が、試験された。ｍｇ／ｃｍ３（ｍｇ／ｃｃ）で表される、凍結乾燥後のタンパク質溶液から得られた「ケーク」のタンパク質密度は、凍結乾燥前の溶液中のタンパク質濃度ｍｇ／ｍＬと実質的に等しい。したがって、凍結乾燥の前に原液を希釈することにより、未希釈の原液の凍結乾燥により得られる「ケーク」の密度よりも低い密度の「ケーク」が生じた。「ケーク」の容積は、「ケーク」を調製するために使用した溶液の容積と実質的に等しい。「ケーク」の容積と等しい容積中の「ケーク」の溶解は、「ケーク」を調製するために使用した溶液の濃度と等しい濃度を有する溶液を生じ、一方で固体「ケーク」の容積よりも小さい容積における「ケーク」の溶解は、「ケーク」を調製するために使用した溶液の濃度よりも高い濃度を有する溶液を生じる。
【０１４９】
様々なフィブリノゲン濃度を有する低密度「ケーク」を調製するため、６３ｍｇ／ｍＬフィブリノゲンを含むフィブリノゲン原液（先の材料及び方法の項に記載される）が、ＤＤＷで希釈され、２１〜４２ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度を有するフィブリノゲン溶液が得られた。希釈した溶液、及び未希釈のフィブリノゲン原液を含む対照サンプルが凍結乾燥されて、様々なフィブリノゲン密度を有する「ケーク」を生じた。「ケーク」は、水性溶媒に溶解し、タンパク質の溶解度は、以下に記載されるように測定される。
【０１５０】
より具体的に５ｍＬの原型は、ＤＤＷにより希釈されて、４２、３２、及び２１ｍｇ／ｍＬの凝固可能なフィブリノゲン濃度を有する、希釈溶液が生じ、それぞれ、最終的な容積は７．５、１０、及び１５ｍＬであった。次の工程において、フィブリノゲン原液を含む５ｍＬの対照サンプル、及び希釈用液の最終的な容積が、それぞれ、シリンジに適合することができるケークを生成するように設計された、円筒形ガラスカップ（直径３０ｍｍ、高さ２５ｍｍ）へと移され、材料及び方法の項に記載される周期によって凍結乾燥に供された。この実験において、円筒形のガラスカップはキャップされなかった。
【０１５１】
凍結乾燥周期の終了時において、６３（対照サンプル）、４２、３２、及び２１ｍｇ／ｃｍ３（希釈試験サンプル）（６３、４２、３２、及び２１ｍｇ／ｃｃ）のフィブリノゲン密度を有する、凍結乾燥した「ケーク」が得られた。各「ケーク」は、円筒形ガラスカップから取り除かれて、５０ｍＬシリンジ（ＰＩＣ  Ｉｎｄｏｌｏｒ，Ｉｔａｌｙ）に適合された（シリンジのプランジャを取り除き、「ケーク」をシリンジのバレル内に挿入し、その後バレルのプランジャを再配置した）。５０ｍＬシリンジが、三方ストップコック（Ｍｅｄｉｐｈａｒｍ，ＵＫ）の第１接続点に接続され、５ｍＬ脱気ＤＤＷ（上記の通り調製される）を含む５ｍＬシリンジ（ＴＥＲＵＭＯ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）がストップコックの第２接続点に接続され、２０μｍフィルター（ＭＤＩ，Ｉｎｄｉａ；Ｃａｔ．ｎｕｍｂｅｒ  ＳＹＰＰ０６１１ＭＮＸＸ１０４）が第３接続ポイントに接続された。
【０１５２】
希釈した溶液から得られる低密度「ケーク」はそれぞれ、以下の方法の１つにより、６３ｍｇ／ｍＬの最終フィブリノゲン濃度（とりわけ止血剤として使用される、フィブリノゲン原液の濃度と同程度）を有する溶液を得るために、２２±２℃の温度で、５ｍＬ  ＤＤＷにおいて溶解された。
【０１５３】
方法１：三方ストップコックは、脱気ＤＤＷを含む５ｍＬシリンジと、低密度「ケーク」を収容する５０ｍＬシリンジとの間の流体連通を可能にするように設定され、脱気ＤＤＷが５０ｍＬシリンジに導入された。脱気ＤＤＷを５０ｍＬシリンジに導入した後、このように形成された一部溶解したフィブリノゲンを含む溶液が一方のシリンジから他方へと、シリンジのプランジャを前後に動かすことによって３回移動させ、フィブリノゲンの溶解を向上させた。シリンジアセンブリは、室温で２分間インキュベートされ、実質的に完全に溶解したフィブリノゲンを含む溶液が得られた。脱気ＤＤＷの導入からインキュベーションの終わりまでの全体的な時間は約１５０秒であった。その後、溶解していない粒子を溶液から取り除くために、２０μｍフィルターを通じてフィブリノゲン溶液を流すように、三方ストップコックが設定された。
【０１５４】
方法２：溶解は、方法１で先に記載されたものと同様の方法で行われたが、一部溶解したフィブリノゲンを含む溶液が一方のシリンジから他方へと５回移動されて、生じた溶液は、インキュベーション時間なしにすぐに濾過された。脱気ＤＤＷの導入から、２つのシリンジの間の溶液の５回の移動の終了時までの時間は、約３０秒であった。
【０１５５】
溶液中の溶解したタンパク質の割合は、材料及び方法の項の「タンパク質溶解度の測定」において記載されるように測定された。結果を以下の表２に示す。
【０１５６】
【表２】
2015509084.tif 000005
＊  測定は３回行われた
【０１５７】
水中により低いタンパク質密度の「ケーク」を溶解させると、より高いタンパク質密度の「ケーク」で両方の溶解方法により得られるものと比較して、より高い割合のタンパク質溶解度を生じることが観察された。この実験において、インキュベーションを含み、１５０秒続く、方法１を使用して、２１ｍｇ／ｃｍ３（２１ｍｇ／ｃｃ）のフィブリノゲン密度を有する、凍結乾燥「ケーク」を溶解させる間に、最適なタンパク質溶解度が得られた。この結果は、インキュベーション及び混合又は撹拌が重要であり、固体フィブリノゲン配合物を溶解させるために比較的長い時間が必要であることを示す。注目すべきは、「ケーク」が圧潰することなく凍結乾燥物の安定性を維持する一方で、凍結乾燥「ケーク」内のフィブリノゲン密度は５ｍｇ／ｃｍ３（５ｍｇ／ｃｃ）まで減少し得ることである（Ｐａｒｋｅｒ  ｅｔ．ａｌ．「Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｄｒｙｉｎｇ  ｒａｔｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｍｉｃｒｏｓｃａｌｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｔｔｒｉｂｕｔｅｓ  ａｎｄ  ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ」．Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ．２０１０；９９：４６１６〜４６２９）。
【０１５８】
溶液の視覚検査により、上記の方法による凍結乾燥「ケーク」の溶解は、気泡のある溶液の形成を生じることがわかった。
【０１５９】
実施例２：溶解中におけるフォーム消失速度に対する圧力の影響。
【０１６０】
大気圧より低い圧力条件と、その後の大気圧（１００ｋＰｚ（１０００ｍＢａｒ））への平衡化とを使用して、凍結乾燥した低密度フィブリノゲン「ケーク」の溶解中に形成されるフォームの消失の速度に対する圧力の効果が試験された。
【０１６１】
この目的のため２１ｍｇ／ｃｍ３（２１ｍｇ／ｃｃ）のフィブリノゲン濃度を有する「ケーク」が調製された。それぞれが１５ｍＬで、２１ｍｇ／ｍＬの凝固可能なフィブリノゲン濃度を有する、８つの試験溶液が、上記のように、６３ｍｇ／ｍＬものフィブリノゲン濃度を有する５ｍＬの原液を１０ｍＬ  ＤＤＷで希釈することによって調製された。溶液はそれぞれ、５０ｍＬのガラスバイアル瓶内で凍結乾燥された。８つの凍結乾燥バイアル瓶の一部がゴムキャップにより被覆され、材料及び方法の項の表１に記載されるように凍結乾燥された。凍結乾燥周期の終了時において、２１ｍｇ／ｃｍ３（２１ｍｇ／ｃｃ）のフィブリノゲン密度を有する乾燥「ケーク」が得られた。
【０１６２】
「ケーク」は、以下の大気圧より低い圧力に供された：０．０１２、１０、２５、又は５０ｋＰｚ（０．１２、１００、２５０、又は５００ｍＢａｒ）。この目的において、「ケーク」を含むガラスバイアル便は、凍結乾燥器内の圧力を必要な圧力まで調節して、ゴムキャップ上の凍結乾燥器シェルフを下げることによって、封止及びキャップされた。各圧力において試験するために、同一のサンプルが提供された。
【０１６３】
試験サンプルの「ケーク」はその後、室温（２２±２℃）で、ＤＤＷ内で溶解されて、以下のように、６３ｍｇ／ｍＬのフィブリノゲン濃度を有する溶液をもたらす。まず、バイアル瓶内の圧力を特定の大気圧より低い気圧に維持しながら、２３Ｇ針（Ｍｅｄｉ  ｐｌｕｓ，Ｃｈｉｎａ）に接続された５ｍＬシリンジ（Ｔｅｒｕｍｏ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）を使用して、４．４ｍＬの脱気ＤＤＷが、ゴムキャップを通じて「ケーク」を収容するバイアル瓶へと注入された。針は、注射後、ゴムキャップ内に留まらせた。脱気ＤＤＷがバイアル瓶に注入された２０秒後、シリンジを針から切断して、針を通じてバイアル瓶に周囲空気を入れることにより、バイアル瓶内の圧力が大気圧へと平衡化された。各圧力レベルにおける１つのサンプルがこの方法で溶解された。
【０１６４】
各圧力レベルにおける第２（対照）サンプルの「ケーク」の溶解が、２２±２℃、大気圧において、脱気ＤＤＷを注入することにより、以下のように行われた：まず、バイアル瓶内の圧力を大気圧にするために、バイアル瓶のキャップが僅かに開かれ、その後４．４ｍＬの脱気ＤＤＷがバイアル瓶に追加されて、６３ｍｇ／ｍＬの凝固可能なフィブリノゲンの濃度が達成された（原液の濃度に関して）。気泡が消えるまでに必要な時間が、脱気ＤＤＷが凍結乾燥低濃度「ケーク」に追加された時間から、溶液の表面の１／３が上方から可視となる時間まで測定された。結果を以下の表３に示す。
【０１６５】
【表３】
2015509084.tif 000006
＊  測定は３回行われた。
＊＊  脱気ＤＤＷの導入から、溶液の表面積の１／３が上方から可視となる時点まで。
＊＊＊  １００ｋＰａ（１０００ｍＢａｒ）までの圧力の増加に伴って、バイアル瓶内の空気が増加した。
【０１６６】
大気圧より低い圧力の後に、大気圧へと平衡化させることにより、対照群（大気圧下で脱気ＤＤＷを注入する）と比較して気泡消散速度が高くなることが見出された。脱気ＤＤＷを追加する間にバイアル瓶内の圧力は、気泡消散時間との直接的な相関を示す（すなわち、脱気ＤＤＷの追加中のバイアル瓶内の低圧は、短い気泡消散時間を生じた）。この実験において、最適な結果は、０．０１２ｋＰａ（０．１２ｍＢａｒ）の圧力で低濃度「ケーク」にＤＤＷを追加し、２０秒インキュベートし、その後大気圧に平衡化させることにより、観察された。
【０１６７】
これらの結果は、凍結乾燥フィブリノゲン「ケーク」の溶解中の気泡の存在を最小化するためには、大気圧より低い圧力の後、大気圧に平衡化させながら、溶媒を有利に加えるということを示す。
【０１６８】
実施例３：気泡形成、タンパク質溶解レベル、及び溶解速度に対する溶液撹拌の効果。
前の実験は、大気圧より低い圧力において、凍結乾燥した低密度「ケーク」を溶解させ、バイアル瓶に空気を導入して、凍結乾燥バイアル瓶の圧力を大気圧へと平衡化させると、より短い気泡消散時間を生じることを示す。
【０１６９】
溶解時間を短縮し、均一な溶液を得るために、混合物の撹拌が望ましい。以下の実験において、大気圧への平衡化は、バイアル瓶に空気を導入せずに機械的に実行され、その後、溶液撹拌の、タンパク質溶解レベル、溶解速度、及び気泡消散に対する影響が試験された。溶液の撹拌は、２つの異なる方法により行われる：Ａ−２つの接続されたシリンジを使用して、溶液を一方のシリンジから他方に移動する（すなわち、往復混合装置を使用する）、又はＢ−溶液を含む容器を手で振盪する。両方の実験において、室温（２２±２℃）で溶解が行われ、追加されたＤＤＷは２２±２℃の温度であった。
【０１７０】
Ａ．往復混合装置によって溶液を撹拌する。
低密度「ケーク」は以下のように調製される：６３ｍｇ／ｍＬの凝固可能なフィブリノゲンを有する４ｍＬのフィブリノゲン原液は、ＤＤＷで希釈されて、４８、３２、及び２１ｍｇ／ｍＬの凝固可能なフィブリノゲン濃度を有する溶液が得られた。６、８、及び１２ｍＬの最終的な容積がそれぞれ、以下の希釈工程により得られた。次の工程において、未希釈フィブリノゲン原液、及び希釈した溶液の最終的な容積各４ｍＬが、材料及び方法区分において記載される周期によって凍結乾燥された。凍結乾燥手順は、特別に設計された円筒形ガラスカップにおいて実行された（直径：２３ｍｍ／高さ：２５ｍｍ）。
【０１７１】
希釈溶液の最終的な容積が、ガラスカップの容積（５ｍＬ）より大きい場合、希釈溶液は、１つのガラスカップ（すなわち、６３ｍｇ／ｍＬ−１カップ、４８ｍｇ／ｍＬ−２カップ、３２ｍｇ／ｍＬ−２カップ、２１ｍｇ／ｍＬ−３カップ）。この実験において、円筒形ガラスカップは、凍結乾燥周期の終了時において、大気圧よりも低い圧力条件下においてキャップ又は封止されなかった。４つの異なるフィブリノゲン溶液の凍結乾燥が、６３、４８、３２、及び２１ｍｇ／ｃｍ３（６３、４８、３２、及び２１ｍｇ／ｃｃ）のフィブリノゲン密度を有する、凍結乾燥「ケーク」を生じる。その後、シリンジのプランジャを取り除き、「ケーク」をシリンジのバレルに挿入し、プランジャをバレルに戻すことによって、各得られた凍結乾燥「ケーク」が１２ｍＬシリンジに適合された。凍結乾燥に２つ以上のカップが使用された場合において、全ての得られたケークは、同じバレルに挿入された。１２ｍＬシリンジが三方ストップコック（Ｍｅｄｉｐｈａｒｍ，ＵＫ）の第１接続点に接続され、およそ３．６ｍＬの脱気ＤＤＷ（材料及び方法の項で記載されたように調製される）を含む第２の１２ｍＬシリンジがストップコックの第２接続点に接続され、真空ポンプ（ＫＮＦ  Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ）が真空マノメーター（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ）により、第３接続点に接続された。
【０１７２】
低密度「ケーク」はその後、大気圧より低い圧力レベルに供された。この目的のため、三方ストップコックは、真空ポンプと、凍結乾燥「ケーク」とを保持する１２ｍＬシリンジとの間の流体連通を可能にするように設定され、凍結乾燥「ケーク」を保持する１２ｍＬシリンジのプランジャはアルミニウムスペーサによってシリンジバレルの上部に保持されて、プランジャは適所に保持され、低密度「ケーク」を大気圧より低い圧力に供する工程中において、これがシリンジのバレルに引き込まれるのが防がれる。真空ポンプにより、凍結乾燥「ケーク」を保持する１２ｍＬシリンジから空気が出されて、所定の圧力の２．５、２０、又は５０ｋＰａ（２５、２００、又は５００ｍＢａｒ）がもたらされる。別の試験グループにおいて、シリンジ内の圧力が１００ｋＰａ（１０００ｍＢａｒ）であるように、空気がシリンジのバレルから抜き出されなかった。
【０１７３】
以下の方法を使用して、凍結乾燥「ケーク」がＤＤＷ内で溶解されて、６３ｍｇ／ｍＬのフィブリノゲン濃度（未希釈の原液）を有する溶液がもたらされた：三方ストップコックは、脱気ＤＤＷ（３．６ｍＬ）を保持する１２ｍＬシリンジと、凍結乾燥「ケーク」を保持する１２ｍＬシリンジとの間の流体連通を可能にするように設定され、その結果脱気ＤＤＷが凍結乾燥「ケーク」を保持するシリンジに脱気ＤＤＷが流れる工程と、大気圧よりも低い圧力を維持する一方で、一部溶解したフィブリノゲンを含む溶液をもたらす工程。この工程において、一部溶解したフィブリノゲンを含む溶液を保持するシリンジ内の圧力は、前の工程の間の圧力よりも高いが、依然として大気圧よりは低い。その後、シリンジ内の圧力は、プランジャからアルミニウムスペーサを取り除き、プランジャを押してプランジャをバレル内に進めることによって、空気の不在下で大気圧と平衡化した。圧力の平衡化は、その後、実施例２（大気圧との平衡化は、周囲の空気からバイアル瓶へと空気を導入することにより行われた）とは異なり、空気又は気体を導入せずに機械的に行われた。シリンジアセンブリは、一部溶解したフィブリノゲンを含む溶液を含んで３０秒間立てて放置され、同時に真空ポンプが三方ストップコックから切断された。次の工程において、一部溶解したフィブリノゲンを含む溶液は、カスタマイズされた溶解機器を使用して、溶液を３．８ｃｍ／秒で一方のシリンジから他方へと１０回移動することにより撹拌され、実質的に完全に溶解したフィブリノゲンを含む溶液が得られた。つまり、カスタマイズした溶解機器は、それぞれシリンジを含む、互いに向かい合う２つのシリンジポンプを含む。２つのシリンジポンプのシリンジは、水の通過を制御し、固体収容シリンジ内の真空を維持するために、弁を含む接続要素で、一緒に接続される。第１シリンジポンプが第１シリンジのプランジャを引くときに、第２シリンジポンプは第２シリンジのプランジャを押し、かつその反対も同様であるように、２つのシリンジポンプは同期的に機能する。
【０１７４】
その後、完全に溶解したフィブリノゲンを含む溶液を保持するシリンジが、三方ストップコックから切断され、溶液は２０μｍフィルターを通じて濾過されて、いずれかの溶解していない物質が溶液から分離した。
【０１７５】
大気圧下における凍結乾燥された低密度「ケーク」の溶解は、上記と同じ方法で行われたがただし、アルミニウムスペーサは使用されず、全体的な溶解工程における圧力は、大気圧と等しかった。脱気ＤＤＷの導入から、溶液が２つのシリンジの間での溶液の１０度目の移動の終了時までの時間は、４５秒であった。
【０１７６】
上記の条件下において固体タンパク質が溶解する能力を評価するため、溶液内のタンパク質溶解レベルが、材料及び方法の項で「タンパク質溶解レベルの測定」として記載されたのと同じように測定された。気泡の存在が視覚的に検査された。
【０１７７】
結果を以下の表４に示す。
【０１７８】
【表４】
2015509084.tif 000007
＊  不動とは、未溶解の粒子によってシリンジが阻害されるために、溶解機器がプランジャを動かせないことを意味する。
＊＊  各実験は、５回繰り返された。
【０１７９】
結果は、２０ｋＰａ（２００ｍＢａｒ）の圧力下、例えば、２．５ｋＰａ（２５ｍＢａｒ）、の後に空気を導入することなく大気圧と平衡化させる間に、４２ｍｇ／ｃｍ３（４２ｍｇ／ｃｃ）より低いフィブリノゲン密度（例えば、３２ｍｇ／ｃｍ３（３２ｍｇ／ｃｃ）又は２１ｍｇ／ｃｍ３（２１ｍｇ／ｃｃ））を有する凍結乾燥「ケーク」を溶解させて、溶液を撹拌すると（例えば、２つのシリンジの間で溶液を往復させる）、４５秒の短時間内に１００％のタンパク質溶解が得られた。２．５ｋＰａ（２５ｍＢａｒ）の圧力下における溶解の後に有意な量の気泡は観察されず、一方でより高い圧力レベルは、有意な気泡の形成を生じた。
【０１８０】
Ｂ−溶液を含む容器を手で振盪することにより撹拌する。
撹拌は、ステンレススチール球（stainless steel sphere）の存在下で溶液を含むシリンジを手で振盪することによって行われた。
【０１８１】
手による振盪の効果を調べるため、２３、３５、４７、及び７０ｍｇ／ｃｍ３（２３、３５、４７、及び７０ｍｇ／ｃｃ）のフィブリノゲン密度を有する、凍結乾燥「ケーク」は、それぞれ、２３、３５、４７、及び７０ｍｇ／ｍＬをそれぞれ有するフィブリノゲン溶液から、上記の方法で調製された。つまり、４ｍＬフィブリノゲン原液は、上記のように、ＤＤＷで２３、３５、４７ｍｇ／ｍＬのフィブリノゲン濃度まで希釈された。各希釈されたフィブリノゲン溶液の総容積、及び未希釈フィブリノゲン原液の４ｍＬサンプルは、表１の凍結乾燥周期に従って凍結乾燥された。凍結乾燥「ケーク」を含むバイアル瓶は、凍結乾燥周期の終了時に低圧条件下でキャップ又は封止されなかった。得られた低密度「ケーク」は、４つのステンレススチール球と共に、上記の１２ｍＬシリンジのバレル内へと挿入された。２つの異なるステンレススチール球が、この実験において使用された：４ｍｍ直径の球（重さ２６０ｍｇ）及び６．４ｍｍ直径の球。
【０１８２】
１２ｍＬシリンジが三方ストップコック（Ｍｅｄｉｐｈａｒｍ，ＵＫ）の第１接続点に接続され、およそ４．３５ｍＬの脱気ＤＤＷ（上記のように調製される）を含む５ｍＬシリンジ（ＴＥＲＵＭＯ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）がストップコックの第２接続点に接続され、真空ポンプ（ＫＮＦ  Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ）が真空マノメーター（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ）により、第３接続点に接続された。
【０１８３】
その後、低密度「ケーク」が２．５ｋＰａ（２５ｍＢａｒ）の圧力レベルに供された。このため、三方ストップコックは、凍結乾燥「ケーク」を保持するシリンジと、真空ポンプとの間に流体連通を可能にするように設定され、「ケーク」を保持するシリンジのプランジャーは、上記のようにスペーサによってシリンジのバレルの上部で適所に固定された。真空ポンプによって、凍結乾燥「ケーク」を保持するシリンジから空気が、２．５ｋＰａ（２５ｍＢａｒ）の圧力に達するまで抜かれた。空気を抜いた後、三方ストップコックは、脱気ＤＤＷを保持するシリンジから凍結乾燥「ケーク」への流体連通を可能にするように設定され、一部溶解したフィブリノゲンを含む溶液が得られた。アルミニウムスペーサが取り除かれ、その結果、シリンジに空気を導入せずに、溶液を保持するシリンジ内の圧力が、大気圧と平衡化した。「ケーク」に脱気ＤＤＷを導入した３０秒後に、一部が溶解したフィブリノゲンを含む溶液を含むシリンジが、三方ストップコックと共にシリンジアセンブリから切断され、手で６０秒間振盪されて、バレル内のステンレススチール球が動き、実質的に完全に溶解したフィブリノゲンを含む溶液がもたらされる。脱気ＤＤＷを導入してから、手による振盪の終了時までの時間は約９０秒であった。
【０１８４】
その後三方ストップコックが、２０μｍフィルターに接続され、実質的に完全に溶解したフィブリノゲンを含む溶液が濾過されて、いずれかの未溶解物質が溶液から分離された。タンパク質溶解度が上記のように決定された。気泡の存在が視覚的に検査された。
【０１８５】
各試験グループにおいて、実験は３回繰り返して行われた。結果を表５に示す。
【０１８６】
【表５】
2015509084.tif 000008
【０１８７】
２．５ｋＰａ（２５ｍＢａｒ）の低圧力で、その後空気を導入せずに大気圧に平衡化させて、低フィブリノゲン密度（例えば、４７ｍｇ／ｃｍ３（４７ｍｇ／ｃｃ）以下）を有する、凍結乾燥「ケーク」を溶解させ、大きな球（例えば、６．４ｍｍの直径を有する）で溶液を手で振盪することにより、９０秒の短時間内に完全なタンパク質の溶解が得られたことが観察される。試験グループのいずれにおいても、有意な量の気泡は観察されなかった。
【０１８８】
対照的に、凍結乾燥した「ケーク」内のタンパク質密度の、タンパク質溶解レベルに対する効果を試験する実施例１においては、完全なタンパク質の溶解（９７．４±９．８％）が、１５０秒以内に得られ、これはこれらの実験において完全な溶解に必要な時間（４５又は９０秒）よりも、１．７〜３．４倍の長さである。
【０１８９】
〔実施の態様〕
（１）  水性溶媒内に固体フィブリノゲン組成物を溶解させる方法であって、
ｉ）ある容積の前記固体フィブリノゲン組成物、及びヘッドスペースを含む閉じた容器を提供する工程であって、前記ヘッドスペース内の圧力が大気圧より低い（sub-atmospheric pressure）、工程と、
ｉｉ）大気圧より低い前記ヘッドスペース内の前記内圧を維持する一方で、前記固体フィブリノゲン組成物の前記容積よりも小さい容積の前記水性溶媒を前記容器に導入し、１ｍＬ当たり少なくとも４０ｍｇのフィブリノゲンを含む溶液を形成する工程と、
ｉｉｉ）ｉｉ）に続き、前記容器内の前記ヘッドスペースの大きさを、前記ヘッドスペース内の前記圧力が大気圧に等しくなるまで減少させる工程とを含む、方法。
（２）  前記溶液を撹拌する工程を更に含む、実施態様１に記載の方法。
（３）  前記固体フィブリノゲン組成物が、凍結乾燥ケークである、実施態様１又は２に記載の方法。
（４）  前記固体フィブリノゲン組成物内の前記フィブリノゲンの密度は、少なくとも約５〜約６３ｍｇ／ｃｍ３（約５〜約６３ｍｇ／ｃｃ）未満の範囲である、実施態様１〜３のいずれかに記載の方法。
（５）  前記フィブリノゲンの前記密度は、約２３ｍｇ／ｃｍ３（約２３ｍｇ／ｃｃ）以下である、実施態様４に記載の方法。
【０１９０】
（６）  前記得られる溶液の前記フィブリノゲン濃度は、約４０ｍｇ／ｍＬ〜約１２０ｍｇ／ｍＬである、実施態様１〜５のいずれかに記載の方法。
（７）  前記水性溶媒は、脱気水性溶媒である、実施態様１〜６のいずれかに記載の方法。
（８）  工程ｉ）における前記ヘッドスペースの前記内圧が約５０ｋＰａ（約５００ｍＢａｒ）以下である、実施態様１〜７のいずれかに記載の方法。
（９）  工程ｉ）における前記ヘッドスペースの前記内圧は、約０．０１２ｋＰａ（約０．１２ｍＢａｒ）以下である、実施態様８に記載の方法。
（１０）  前記容器は、相互に流体連通する少なくとも２つの別個の部分である、前記水性溶媒を含む第１部分、及び前記固定フィブリノゲン組成物を含む第２部分を含み、前記水性溶媒は、前記容器の、前記別個の部分のうちの前記第１部分から、前記別個の部分のうちの前記第２部分へと導入される、実施態様１〜９のいずれかに記載の方法。
【０１９１】
（１１）  前記水性溶媒はリザーバ内に収容され、前記容器及び前記リザーバは、互いに流体連通し、前記撹拌は、前記容器と前記リザーバとの間で前記水性溶媒を繰り返し移動させることを含む、実施態様２〜９のいずれかに記載の方法。
（１２）  前記容器は、前記溶液中で不溶性であり、前記溶液よりも密度の高い、少なくとも１つの不活性材料の球を含み、前記撹拌は前記容器を振盪することを含む、実施態様２〜１０のいずれかに記載の方法。
（１３）  前記球が、約３〜約７ｍｍの範囲の直径のビーズを含む、実施態様１２に記載の方法。
（１４）  工程ｉｉ）の完了と、工程ｉｉｉ）の開始との間に、少なくとも５秒の時間間隔を経過させることができる、実施態様１〜１３のいずれかに記載の方法。
（１５）  前記時間間隔は、少なくとも約２０秒である、実施態様１４に記載の方法。
【０１９２】
（１６）  前記容器内の前記溶液をインキュベートする工程を更に含む、実施態様１〜１５のいずれかに記載の方法。
（１７）  前記インキュベートは、約２分以下にわたり実行される、実施態様１６に記載の方法。
（１８）  水性溶媒中に固体組成物を溶解させるのに好適な装置［１０、３０、５０］であって、前記装置は、
第１固体組成物を保持するのに好適な第１の閉じた容器［１２ａ］であって、前記第１の閉じた容器は閉鎖状態及び開放状態を有する第１の閉じた容器入口［１８ａ］を含み、前記閉鎖状態において、前記第１の閉じた容器入口は前記流体の通過に対して封止され、前記開放状態において、前記第１の閉じた容器入口が、前記第１の閉じた容器内へと流体連通する経路をもたらす、第１の閉じた容器［１２ａ］と、
前記第１の閉じた容器を封止するために前記第１の閉じた容器内に配置され、前記第１の閉じた容器の前記内部容積を低減させるために前記第１の閉じた容器内で少なくとも第１位置と第２位置との間で移動する間に、前記第１の閉じた容器の封止を維持するように構成される、第１可動封止要素［２２ａ］と、
前記第１の閉じた容器内の第１位置に前記第１可動封止要素を解放可能に保持するように構成された保持要素［２４］と、
前記第１の閉じた容器入口の閉鎖状態と開放状態との間での変更を制御するための第１コントローラー［２０ａ］と、を含み、
前記第１可動封止要素が前記第２位置にある間に、前記第１の閉じた容器入口が閉鎖状態にあり、その後前記第１可動封止要素が前記第１位置へと移動され、前記第１保持要素が前記第１可動封止要素を保持するとき、大気圧より低い圧力を有するヘッドスペースが形成されるか、又は、
前記装置は、大気圧より低い圧力のヘッドスペースを更に含む前記閉じた容器と、閉じた容器入口と、前記第１位置に前記第１可動封止要素を保持する前記保持要素とを備える、装置［１０、３０、５０］。
（１９）  前記入口が開放位置にあり、前記保持要素が前記第１可動封止要素を解放するとき、前記第１可動封止要素は前記第１の閉じた容器内で第１位置から第２位置へと移動し、それによって前記第１の閉じた容器の前記内部容積が低減し、前記第１の閉じた容器内の前記内圧が増加する、実施態様１８に記載の装置。
（２０）  第１水性溶媒を保持するために好適な第１リザーバ［４２ａ］と、前記第１リザーバの封止を維持するように構成された、前記第１リザーバ内に配置される第２可動封止要素［２２ｂ］とを更に含み、前記第１リザーバは、前記第１の容器入口と流体連通するように適合された第１リザーバ出口［４６ａ］を含む、実施態様１８又は１９に記載の装置。
【０１９３】
（２１）  前記第１の閉じた容器は、前端部［３４］及び後端部［３６］を有する第１シリンジバレル［３２ａ］を含み、前記前端部は前記第１の閉じた容器入口を含み、前記第１可動封止要素は、前記第１シリンジバレルの前記後端部から前記前端部へ向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第１シリンジバレル内に配置され、第１ピストンロッド［４０ａ］に接続された第１ピストンを含む、実施態様１８〜２０のいずれかに記載の装置。
（２２）  前記第１リザーバは前端部［３４］及び後端部［３６］を有する第２シリンジバレル［４４ａ］を含み、前記前端部は前記第１リザーバ出口を含み、前記第２可動封止要素は、前記第２シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第２シリンジバレル内に配置され、第２ピストンロッド［４０ｂ］に接続された第２ピストンを含む、実施態様２０又は２１に記載の装置。
（２３）  第２固体組成物を保持するために好適な第２の閉じた容器［１２ｂ］であって、前記第２の閉じた容器は、閉鎖状態及び開放状態を有する第２の閉じた容器入口［１８ｂ］を含み、前記閉鎖状態においては前記第２の閉じた容器は前記流体の通過に対して封止され、前記開放状態においては前記第２の閉じた容器入口が、前記第２の閉じた容器内へと流体連通する経路をもたらす、第２の閉じた容器［１２ｂ］と、
前記第２の閉じた容器を封止するために、前記第２の閉じた容器内に配置され、前記第２の閉じた容器の前記内部容積を減少させるために前記第２の閉じた容器内で少なくとも第１位置と第２位置との間で移動する間に、前記第２の閉じた容器の封止を維持するように構成された、第３可動封止要素［２２ｃ］と、
前記第２の閉じた容器内の第１位置に前記第３可動封止要素を解放可能に保持するように構成された保持要素と、
前記第２の閉じた容器入口の閉鎖状態と開放状態との間の変更を制御するための第２コントローラー［２０ｂ］と、を更に含み、
前記装置は、大気圧より低い圧力のヘッドスペース［１６］を更に含む前記第２の閉じた容器、閉じた容器入口［１８ｂ］、及び前記第３可動封止要素を前記第１位置に保持する前記保持要素を備えるか、又は、前記第３可動封止要素が前記第２位置にある間に、前記第２の閉じた容器入口が閉鎖状態にあり、その後前記第３可動封止要素が前記第１位置に移動し、前記保持要素が前記第３可動封止要素を保持するとき、大気圧よりも低い圧力を有するヘッドスペースが形成される、実施態様１８〜２２のいずれかに記載の装置。
（２４）  第２水性溶媒を保持するために好適な第２リザーバ［４２ｂ］と、前記第２リザーバの封止を維持するように構成された、前記第２リザーバ内に配置される第４可動封止要素［２２ｄ］とを更に含み、前記第２リザーバは、前記第２の容器入口と流体連通するように適合された第２流体出口［４６ｂ］を含む、実施態様２２又は２３に記載の装置。
（２５）  前記第１の閉じた容器は、前端部及び後端部を有する第１シリンジバレルであり、前記第１シリンジバレルの前記前端部は前記第１の閉じた容器入口を含み、前記第１の閉じた容器の前記第１可動封止要素は、前記第１シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第１シリンジバレル内に配置された第１ピストンを含み、
前記第１リザーバは前端部及び後端部を有する第２シリンジバレルを含み、前記第２シリンジバレルの前記前端部は前記第１リザーバ出口を含み、前記第２可動封止要素は、前記第２シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第２シリンジバレル内に配置された第２ピストンを含み、
前記第２の閉じた容器は、前端部及び後端部を有する第３シリンジバレルであり、前記第３シリンジバレルの前記前端部は、前記第２の閉じた容器入口を含み、前記第３可動封止要素は、前記第３シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第３シリンジバレル内に配置され、第３ピストンロッド［４０ｃ］に接続された第３ピストンを含み、
前記第２リザーバは前端部及び後端部を有する第４シリンジバレル［４４ｂ］を含み、前記第４シリンジバレルの前記前端部は前記第２リザーバ出口を含み、前記第４可動封止要素は、前記第４シリンジバレルの前記後端部から前記前端部に向かって摺動自在に変位可能であるように、前記第４シリンジバレル内に配置され、第４ピストンロッド［４０ｄ］に接続された第４ピストンを含む、実施態様２４に記載の装置。
【０１９４】
（２６）  前記第１及び前記第２の閉じた容器、並びに／又は前記第１及び前記第２のリザーバを内部に収容するための、ハウジング［６４、６６］を更に含む、実施態様２４又は２５に記載の装置。
（２７）  前記第１固体組成物が、固体フィブリノゲンを含む、実施態様１８〜２６のいずれかに記載の装置。
（２８）  前記第２固体組成物が、固体トロンビンを含む、実施態様２３〜２７のいずれかに記載の装置。
（２９）  前記第１ピストンは、少なくとも１つの窪み［７０］を有するピストンロッドに取り付けられ、前記保持要素は、前記窪み内に係合するように構成された少なくとも１つの突起部［７２］を含む、実施態様２１〜２８のいずれかに記載の装置。
（３０）  起動されると、前記第１コントローラーを前記閉鎖状態から前記開放状態へと移動させる、コントローラー作動装置［３８］を更に含む、実施態様１８〜２９のいずれかに記載の装置。
【図１Ａ】
2015509084.tif 000009
【図１Ｂ】
2015509084.tif 000010
【図１Ｃ】
2015509084.tif 000011
【図２】
2015509084.tif 000012
【図３】
2015509084.tif 000013
【図４】
2015509084.tif 000014
【図５】
2015509084.tif 000015
【図６Ａ】
2015509084.tif 000016
【図６Ｂ】
2015509084.tif 000017
【図７Ａ】
2015509084.tif 000018
【図７Ｂ】
2015509084.tif 000019
【図８Ａ】
2015509084.tif 000020
【図８Ｂ】
2015509084.tif 000021
【図９Ａ】
2015509084.tif 000022
【図９Ｂ】
2015509084.tif 000023
【図９Ｃ】
2015509084.tif 000024
【図１０】
2015509084.tif 000025
【図１１Ａ】
2015509084.tif 000026
【図１１Ｂ】
2015509084.tif 000027
【図１１Ｃ】
2015509084.tif 000028
【図１２Ａ】
2015509084.tif 000029
【図１２Ｂ】
2015509084.tif 000030
【図１２Ｃ】
2015509084.tif 000031
【図１３】
2015509084.tif 000032
【図１４Ａ】
2015509084.tif 000033
【図１４Ｂ】
2015509084.tif 000034
【国際調査報告】
2015509084.tif 000035
2015509084.tif 000036
2015509084.tif 000037