(57)【要約】  本発明は、オステオポンチン変異体を含む医薬組成物および栄養サプリメントと、腫瘍を発生させる癌を処置または防止するための、そうした組成物およびサプリメントの医学的使用とに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の処置または防止に使用されるＯＰＮ変異体において、
配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含む
ことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項２】
請求項１に記載のＯＰＮ変異体において、前記癌腫瘍は高レベルのＯＰＮを有することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項３】
請求項１または２に記載のＯＰＮ変異体において、前記処置または防止は経口投与によることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項４】
請求項１乃至３の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記処置または防止は非経口投与、たとえば静脈内投与または腹腔内投与によることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項５】
請求項１乃至４の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、腫瘍細胞の増殖または複製を抑制することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項６】
請求項１乃至５の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、腫瘍増殖を抑制することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項７】
請求項１乃至６の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、腫瘍細胞の増殖または複製を防止することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項８】
請求項１乃至７の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、腫瘍増殖を防止することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項９】
請求項１乃至８の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有する被検体の転移のリスクを低下させることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１０】
請求項１乃至９の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有する被検体の転移を防止することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１１】
請求項１乃至１０の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、処置される前記被検体は、高レベルのＯＰＮを有する少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１２】
請求項１乃至１１の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記癌腫瘍を有する前記被検体は、その血漿中に高濃度のＯＰＮを有することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１３】
請求項１乃至１２の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体が投与される前記被検体は、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を発症するリスクが高いことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１４】
請求項１乃至１３の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、処置される前記被検体の約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約５ｇ／ｋｇ体重の範囲の１日投与量で投与されることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１５】
請求項１乃至１４の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として少なくとも１０％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含むことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１６】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１０〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲の活性ＯＰＮ分子、および前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１０〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含むことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１７】
請求項１乃至１６の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１０〜４０％（ｗ／ｗ）の範囲の活性ＯＰＮ分子、および前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として６０〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含むことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１８】
請求項１乃至１７の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として少なくとも１０％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含むことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１９】
請求項１乃至１８の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、ウシ乳汁から単離されることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項２０】
請求項１乃至１９の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、配列番号１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／または配列番号１の１７〜１６３番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントであることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項２１】
請求項１乃至２０の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントであることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項２２】
癌を処置または防止する方法において、癌を有する被検体または癌になるリスクがある被検体に、前記癌を処置または防止するのに効果的な量のＯＰＮ変異体を投与するステップ、ただし前記癌は少なくとも１つの癌腫瘍を含む、前記投与するステップを含み、
前記ＯＰＮ変異体は、配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含む
ことを特徴とする方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の癌を処置または防止する方法において、前記癌を有する被検体または前記癌になるリスクがある被検体に、腫瘍細胞の増殖または複製を抑制するのに効果的な量のＯＰＮ変異体を投与するステップを含み、前記ＯＰＮ変異体は、配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含むことを特徴とする方法。
【請求項２３】
少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有する被検体において転移のリスクを低下させるまたは転移を防止する方法において、転移の前記リスクを低下させるまたは転移を防止するのに効果的な量のＯＰＮ変異体を前記被検体に投与するステップを含み、
前記ＯＰＮ変異体は、配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含む
ことを特徴とする方法。
【請求項２４】
−配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含むＯＰＮ変異体、および
−薬学的に許容されるキャリア
を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２５】
請求項２４に記載の医薬組成物において、０．０１〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲の量で前記ＯＰＮ変異体を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２６】
請求項２４または２５に記載の医薬組成物において、１種または複数種の別の治療薬をさらに含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２７】
請求項２６に記載の医薬組成物において、前記１種または複数種の別の治療薬は抗癌剤を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２８】
請求項２４乃至２７の何れか１項に記載の医薬組成物において、経口投与、舌下投与、口腔内投与、経鼻投与または静脈内投与用に製剤化されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２９】
−配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含む栄養学的に有効な量のＯＰＮ変異体、および
−炭水化物源、脂質源およびタンパク源からなる群から選択される１種または複数種の成分を含むことを特徴とする栄養サプリメント。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オステオポンチン変異体を含む医薬組成物および栄養サプリメントと、腫瘍を発生させる癌を処置または防止するための、そうしたＯＰＮ変異体の医学的使用とに関する。
【背景技術】
【０００２】
オステオポンチン（ＯＰＮ）は、石灰化した骨のコラーゲン性細胞外マトリックスから最初に単離された分泌型接着性糖リンタンパク質である（Ｆｒａｎｚｅｎ  １９８５）。ＯＰＮは、骨芽細胞、動脈平滑筋細胞、白血球を含む多くの異なる細胞型、いくつかの種類の上皮細胞、および系譜の異なる形質転換細胞に発現する（Ｄｅｎｈａｒｄｔ  １９９５）。したがって、ＯＰＮは、多くの組織、たとえば腎臓、胎盤、内耳の分泌上皮および神経節、ならびに脈管系の平滑筋で検出されている（Ｂｕｔｌｅｒ  １９９６）。ＯＰＮはまた、多くの体液、たとえば血漿、尿、胆汁および乳汁にも存在し、多くの形質転換細胞で高発現を示す（Ｓｅｎｇｅｒ  １９８８）。このタンパク質は高酸性で、アミノ酸の約２５％がアスパルテート／アスパラギン酸およびグルタメート／グルタミン酸であり、ＯＰＮは、多くのリン酸化アミノ酸を有する（Ｓｏｒｅｎｓｅｎ  １９９４）。
【発明の概要】
【０００３】
本発明者らは、経口投与されたオステオポンチン変異体が癌腫瘍の増殖を抑制し、さらには癌腫瘍の増殖を防止することができるという驚くべき発見をした。この作用はまったく予想外であった。まず第１に、ＯＰＮの投与が癌の処置に関連して有益な作用を有すると報告されたことがない。第２に、経口投与されたタンパク質およびペプチドが胃腸管系外で薬効を有することは、非常に驚くべきことである。
【０００４】
したがって、本発明の一態様は、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の処置または防止に使用されるＯＰＮ変異体に関する。
【０００５】
たとえば、本発明の一態様は、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の処置または防止に使用されるＯＰＮ変異体であって、
配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含むＯＰＮ変異体に関する。
【０００６】
本発明の文脈では、「癌腫瘍を含む癌」という用語は、患者上または患者内に少なくとも１つの癌腫瘍が形成される癌疾患に関する。少なくとも１つの癌腫瘍は、癌の原発癌腫瘍でも、あるいはその後の転移でもよい。
【０００７】
本発明のさらなる態様は、癌を処置または防止する方法であって、癌を有する被検体または癌になるリスクがある被検体に、前記癌を処置または防止するのに効果的な量のＯＰＮ変異体を投与することを含み、前記癌は少なくとも１つの癌腫瘍を含む、方法に関する。
【０００８】
本発明の別の態様は、
−ＯＰＮ変異体、および
−薬学的に許容されるキャリア
を含む医薬組成物に関する。
【０００９】
本発明の別の態様は、
−栄養学的に有効な量のＯＰＮ変異体、および
−炭水化物源、脂質源およびタンパク源からなる群から選択される１種または複数種の成分を含む栄養サプリメントに関する。
【００１０】
本明細書に提供されるいくつかの態様は、腫瘍細胞塊を有する被検体に、腫瘍細胞の増殖または複製を抑制するのに効果的な量のＯＰＮ変異体を投与することを含む方法に関する。
【００１１】
ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体は約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約１ｇ／ｍｌの濃度で投与される。他の実施形態では、ＯＰＮ変異体は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約５ｇ／ｋｇ体重の量で投与される。
【００１２】
特定の実施形態では、ＯＰＮ変異体は粘膜投与される。他の実施形態では、ＯＰＮ変異体は、経口投与、舌下投与、口腔内投与または経鼻投与される。
【００１３】
いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は皮下腫瘍細胞であってもよく、前述の実施形態の何れか１つでは、腫瘍細胞は、乳房、頸部、卵巣、前立腺、肺、結腸、直腸、膵臓、胃、腎臓または甲状腺にあってもよい。
【００１４】
ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体はウシ乳汁から単離される。ＯＰＮ変異体は、たとえばウシ乳汁ＯＰＮであってもよい。
【００１５】
特定の実施形態では、ＯＰＮ変異体は組換えＯＰＮである。
【００１６】
いくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は、ＯＰＮ変異体の精製された供給源として提供される。ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体を提供する精製された供給源は、少なくとも純度約９５％である。
【００１７】
本明細書に提供される他の態様は、ＯＰＮ変異体を、好ましくは腫瘍細胞の増殖または複製を抑制するのに効果的なＯＰＮ変異体の量で含み、さらに薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物に関する。
【００１８】
ある種の実施形態では、医薬組成物中のＯＰＮ変異体の量は約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約１ｇ／ｍｌである。
【００１９】
特定の実施形態では、医薬組成物は粘膜投与用に製剤化される。医薬組成物は、たとえば経口投与用、舌下投与用、口腔内投与用または鼻腔投与用に製剤化されてもよい。
【００２０】
いくつかの実施形態では、薬学的に許容されるキャリアは、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、糖溶液、ソルビトール、緩衝液、食塩水および水からなる群から選択される。
【００２１】
ある種の実施形態では、医薬組成物は固体、液体またはエマルジョンである。
【００２２】
特定の実施形態では、医薬組成物は錠剤または噴霧剤として投与される。
【００２３】
前述の実施形態の何れか１つでは、医薬組成物は矯味剤を含む。
【００２４】
前述の実施形態の何れか１つでは、医薬組成物は、１種または複数種の抗癌標的化治療剤または化学療法剤を含んでもよい。
【００２５】
前述の実施形態の何れか１つでは、医薬組成物は１種または複数種の免疫抑制剤または免疫賦活剤を含んでもよい。
【００２６】
本明細書に提供される他の態様は、ＯＰＮ変異体を、好ましくは腫瘍細胞の増殖または複製を抑制するのに効果的なＯＰＮ変異体の量で含む栄養サプリメントに関する。
【００２７】
いくつかの実施形態では、サプリメントは液体または粉末である。
【００２８】
ある種の実施形態では、サプリメントは１種もしくは複数種の果実、１種もしくは複数種の野菜、ヨーグルト、乳汁、アイスクリームまたはこれらの組み合わせを含む。
【００２９】
前述の実施形態の何れか１つでは、サプリメントはタンパク質、ビタミン、ミネラル、酸化防止剤、プレバイオティクス、プロバイオティクスまたはこれらの組み合わせで強化してもよい。
【００３０】
前述の実施形態の何れか１つでは、サプリメントはラクトースフリーおよび／またはグルテンフリーであってもよい。
【００３１】
ある種の実施形態では、サプリメントは有機サプリメントである。
【００３２】
いくつかの実施形態では、サプリメントはスムージーまたはジュースであり、他の実施形態では、サプリメントは乳汁である。
【００３３】
本発明のこれらおよび他の態様について、下記の図面および詳細な説明と共に記載する。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１Ａ】図１Ａは、０日目から様々な濃度でＯＰＮ調製物の経口投与を行ったマウスの腫瘍容積（ｃｍ３、＋／−ＳＥＭ）を示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、５日目から様々な濃度でＯＰＮ調製物の経口投与を行ったマウスの腫瘍容積（ｃｍ３、＋／−ＳＥＭ）を示す。
【図２Ａ】図２Ａは、１５日目の全群の腫瘍の大きさの比較を示す。有意差が示される。
【図２Ｂ】図２Ｂは、１７日目の全群の腫瘍の大きさの比較を示す。有意差が示される。
【図２Ｃ】図２Ｃは、１９日目の全群の腫瘍の大きさの比較を示す。有意差が示される。
【図３】図３は、３回の独立した実験結果をまとめて、対照およびＯＰＮ（０．３ｍｇ／ｍｌを含む飲料水）を与えたマウスの腫瘍の大きさの平均を示す。Ｎ＝３０（０ｍｇ／ｍｌのＯＰＮ調製物）または３２（０．３ｍｇ／ｍｌのＯＰＮ調製物）。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
前述のように、本発明の一態様は、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の処置または防止に使用されるＯＰＮ変異体に関する。
【００３６】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ変異体は、配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含む、あるいはさらにはそれらからなる。
【００３７】
本発明の文脈において「オステオポンチン変異体」または「ＯＰＮ変異体」という用語は、たとえば哺乳動物の乳汁で見出され得る未変性ＯＰＮ、および未変性ＯＰＮの配列に対してわずかなアミノ酸配列の変化を含む人工ＯＰＮの両方に関する。ＯＰＮ変異体は、たとえばＯＰＮの天然の供給源、たとえば哺乳動物の乳汁、好ましくはウシ乳汁から精製により調製してもよいし、あるいは発酵または合成により調製してもよい。「オステオポンチン変異体」または「ＯＰＮ変異体」という用語は、たとえばＯＰＮ分子、およびＯＰＮ分子の加水分解または切断によりＯＰＮ分子から得られたペプチドである、組成物、たとえば製薬または栄養補助サプリメントの成分に関する。
【００３８】
本発明の文脈において「オステオポンチン分子」または「ＯＰＮ分子」という用語は、所定のアミノ酸配列を持つＯＰＮ分子群に関する。こうした群は、ＯＰＮ分子のいくつかのホスホ−アイソフォームおよびグリコ−アイソフォームを含んでもよい。
【００３９】
ＯＰＮ変異体はさらに第２の活性ＯＰＮ分子、およびさらに別の活性ＯＰＮ分子を含んでもよい。
【００４０】
明らかなように、ＯＰＮ変異体は薬理活性ＯＰＮ変異体であり、１つまたは複数の薬理活性ＯＰＮ分子（単数または複数）および／またはＯＰＮ分子の１つまたは複数の薬理活性フラグメント（単数または複数）を含む。本発明の文脈では、ＯＰＮ変異体、活性ＯＰＮ分子またはＯＰＮ分子のフラグメントは、哺乳動物被検体の癌腫瘍の増殖を低下させることができるならば、「薬理活性」または「活性」と見なされる。ＯＰＮ変異体、または個々のＯＰＮ分子またはＯＰＮ分子のフラグメントの薬理活性は、たとえば実施例１に概説した手順を用いて試験することができる。
【００４１】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、本ＯＰＮ分子は、配列番号１（ウシＯＰＮ；ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｅｎｔｒｙ  Ｐ３１０９６）に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するペプチドである。たとえば、活性ＯＰＮ分子は、配列番号１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するペプチドであってもよい。好ましくは、活性ＯＰＮ分子は、配列番号１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するペプチドである。なお一層好ましくは、活性ＯＰＮ分子は、たとえば配列番号１に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するペプチドであってもよい。活性ＯＰＮ分子は、たとえば配列番号１のアミノ酸配列を有してもよい。
【００４２】
本発明の文脈では、「配列同一性」という用語は、好ましくは同じ長さの２つのアミノ酸配列間または２つの核酸配列間の同一性の程度の定量的指標に関する。比較対象の２つの配列が同じ長さでない場合、できるだけ一致するようにアライメントを行わなければならない。配列同一性は、以下の通り計算することができ
（Ｎｒｅｆ−Ｎｄｉｆ）＊１００）／（Ｎｒｅｆ）
式中、Ｎｄｉｆは、アライメントを行った際に２つの配列において同一でない残基の総数であり、Ｎｒｅｆは、参照配列の残基数である。したがって、ＤＮＡ配列ＡＧＴＣＡＧＴＣは配列ＡＡＴＣＡＡＴＣと７５％の配列同一性を有することになる（Ｎｄｉｆ＝２およびＮｒｅｆ＝８）。ギャップは、個々の残基（単数または複数）の非同一性と見なされる、すなわちＤＮＡ配列ＡＧＴＧＴＣはＤＮＡ配列ＡＧＴＣＡＧＴＣと７５％の配列同一性を有する（Ｎｄｉｆ＝２およびＮｒｅｆ＝８）。配列同一性は、たとえば適切なＢＬＡＳＴプログラム、たとえば国立バイオテクノロジー情報センター（ＮＣＢＩ：Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ），ＵＳＡが提供するＢＬＡＳＴｐ−アルゴリズムを用いて計算してもよい。
【００４３】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、活性ＯＰＮ分子は、配列番号２（ヒトＯＰＮ；ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｅｎｔｒｙ  Ｐ１０４５１）に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するペプチドである。たとえば、活性ＯＰＮ分子は、配列番号２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するペプチドであってもよい。好ましくは、活性ＯＰＮ分子は、配列番号２に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するペプチドである。なお一層好ましくは、活性ＯＰＮ分子は、配列番号２に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するペプチドであってもよい。
【００４４】
本発明の他の好ましい実施形態では、活性ＯＰＮ分子はヒトＯＰＮ（配列番号２）である。
【００４５】
あるいはまたは加えて、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよい。
【００４６】
本発明の文脈では、「オステオポンチン分子の活性フラグメント」または「ＯＰＮ分子の活性フラグメント」という用語は、所定のアミノ酸配列を有する、ＯＰＮ分子の活性フラグメント群に関する。こうした群は、ＯＰＮ分子の活性フラグメントのいくつかのホスホ−アイソフォームおよびグリコ−アイソフォームをさらに含んでもよい。「ＯＰＮ分子の活性フラグメント」は、好ましくはたとえば哺乳動物の乳汁で見出され得るＯＰＮ分子の天然の長いｎ−末端フラグメント、およびＯＰＮ分子の天然の長いｎ−末端フラグメントの配列に対してわずかなアミノ酸配列の変化を含む、ＯＰＮ分子の人工の長いｎ−末端フラグメントである。ＯＰＮ分子の活性フラグメントは、たとえばＯＰＮフラグメントの天然の供給源、たとえば哺乳動物の乳汁、好ましくはウシ乳汁から精製により調製してもよいし、あるいは発酵または合成により調製してもよい。
【００４７】
したがって、本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ変異体は活性ＯＰＮ分子の第１群およびＯＰＮ分子の活性フラグメントの第２の群を含む。これらの群は、この場合も、活性ＯＰＮ分子およびＯＰＮ分子の活性フラグメントのいくつかのホスホ−アイソフォームおよびグリコ−アイソフォームを含んでもよい。
【００４８】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ分子の活性フラグメントは、配列番号１の１７〜１６３番目（ウシＯＰＮの１７〜１６３番目；ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｅｎｔｒｙ  Ｐ３１０９６）の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するペプチドである。たとえば、ＯＰＮ分子の活性フラグメントは、配列番号１の１７〜１６３番目の配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するペプチドであってもよい。好ましくは、ＯＰＮ分子の活性フラグメントは、配列番号１の１７〜１６３番目の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するペプチドである。なお一層好ましくは、ＯＰＮ分子の活性フラグメントは、たとえば配列番号１の１７〜１６３番目の配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するペプチドであってもよい。
【００４９】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ分子の活性フラグメントは、配列番号２の１７〜１７０番目（ヒトＯＰＮの１７〜１７０番目；ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ  Ｅｎｔｒｙ  Ｐ１０４５１）の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するペプチドである。たとえば、ＯＰＮ分子の活性フラグメントは、配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するペプチドであってもよい。好ましくは、ＯＰＮ分子の活性フラグメントは、配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するペプチドである。なお一層好ましくは、ＯＰＮ分子の活性フラグメントは、配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するペプチドであってもよい。
【００５０】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ変異体は未変性ＯＰＮ、すなわち哺乳動物に、たとえば哺乳動物の乳汁に自然に発生するＯＰＮ変異体である。
【００５１】
本発明のいくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、総量として少なくとも１０％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含む。ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、たとえば、総量として少なくとも１５％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよい。あるいは、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、総量として少なくとも３０％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよい。ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、たとえば、総量として少なくとも５０％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよい。
【００５２】
さらに高い含有量の活性フラグメントが望ましい場合があり、したがって、本発明のいくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、総量として少なくとも６０％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含む。ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、たとえば、総量として少なくとも７０％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよい。あるいは、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、総量として少なくとも８０％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよい。ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、たとえば、総量として少なくとも９０％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよい。たとえば、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、総量として少なくとも９５％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよい。
【００５３】
本発明のいくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は、ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１０〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲の活性ＯＰＮ分子、およびＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１０〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含む。
【００５４】
本発明のいくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は、ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１０〜４０％（ｗ／ｗ）の範囲の活性ＯＰＮ分子、およびＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として６０〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含む。
【００５５】
たとえば、ＯＰＮ変異体は、ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１５〜３５％（ｗ／ｗ）の範囲の活性ＯＰＮ分子、およびＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として７５〜８５％（ｗ／ｗ）の範囲のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよい。
【００５６】
本発明のいくつかのいくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として少なくとも１０％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含むＯＰＮ変異体。
【００５７】
ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、たとえば総量として少なくとも１５％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含んでもよい。あるいは、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、総量として少なくとも３０％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含んでもよい。ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、たとえば総量として少なくとも５０％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含んでもよい。
【００５８】
さらに高い含有量の活性フラグメントが望ましい場合があり、したがって、本発明のいくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、総量として少なくとも６０％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含む。ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、たとえば総量として少なくとも７０％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含んでもよい。あるいは、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、総量として少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含んでもよい。ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、たとえば総量として少なくとも９０％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含んでもよい。たとえば、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ変異体の総重量に対して、総量として少なくとも９５％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含んでもよい。
【００５９】
本発明のいくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は、ウシ乳汁から単離される。
【００６０】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ変異体はウシＯＰＮである。ウシＯＰＮは、たとえばウシ乳汁から単離してもよく、その場合、通常リン酸化およびグリコシル化の両方。さらに、脱リン酸化および／または脱グリコシル化形態のウシ乳汁由来のＯＰＮを使用することも可能である。
【００６１】
ウシ乳汁ＯＰＮは、ウシ全長ＯＰＮ（配列番号１）および切断されたＯＰＮアイソフォーム（配列番号１の１７〜１６３番目の配列を有するペプチド）の両方を含む。
【００６２】
したがって、本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ変異体は、配列番号１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および配列番号１の１７〜１６３番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントを含む、あるいはさらにはそれらからなる。
【００６３】
たとえば、ＯＰＮ変異体は、配列番号１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および配列番号１の１７〜１６３番目の配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよいし、あるいはそれらからなってもよい。あるいは、ＯＰＮ変異体は、配列番号１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および配列番号１の１７〜１６３番目の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよいし、あるいはそれらからなってもよい。たとえば、ＯＰＮ変異体は、配列番号１の配列を有する活性ＯＰＮ分子、および配列番号１の１７〜１６３番目の配列を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよいし、あるいはそれらからなってもよい。
【００６４】
本発明のいくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよいし、あるいはそれらからなってもよい。
【００６５】
たとえば、ＯＰＮ変異体は、配列番号２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよいし、あるいはそれらからなってもよい。あるいは、ＯＰＮ変異体は、配列番号２に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよいし、あるいはそれらからなってもよい。たとえば、ＯＰＮ変異体は、配列番号２の配列を有する活性ＯＰＮ分子、および配列番号２の１７〜１７０番目の配列を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントを含んでもよいし、あるいはそれらからなってもよい。
【００６６】
癌腫瘍は、異常な細胞増殖または複製を特徴とするいくつかの腫瘍細胞（腫瘍性細胞）を含む。場合によっては、異常な細胞増殖（たとえば細胞の局在領域における）の結果、腫瘍細胞塊（新生物、充実性病変）が形成される。異常な細胞増殖は、腫瘍細胞塊を形成しない細胞の増殖にも関連する。異常細胞は、正常な細胞と比較して異常な（たとえば高い）分裂速度を示すことがある。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は前癌性または悪性である。悪性腫瘍細胞は癌細胞と呼ばれることもあり、隣接する組織または体内の他の部位に転移するまたは広がり、そこで新たな腫瘍として増殖する能力を有し得る。
【００６７】
少なくとも１つの癌腫瘍が高レベルのＯＰＮを有すると特に好ましい。
【００６８】
したがって、本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ変異体は、高レベルのＯＰＮを有する少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の処置または防止に使用される。
【００６９】
本発明の別の好ましい実施形態では、腫瘍は、腫瘍を有する被検体の血漿中に高濃度のＯＰＮを誘導することができる。
【００７０】
ある種の実施形態では、腫瘍細胞は上皮由来である。上皮細胞は、体の全表面を覆い、そして体の管腔性構造の大部分（内皮で覆われた血管、リンパ管および心臓内部と、中皮で覆われた胸腔および腹腔とを除く）の内面を覆う１つまたは複数の層にある。
【００７１】
上皮性腫瘍には、良性および前癌性上皮性腫瘍、たとえば乳腺線維腺腫および結腸腺腫、ならびに悪性上皮性腫瘍がある。悪性上皮性腫瘍として、癌腫とも呼ばれる原発腫瘍、および上皮由来の転移とも呼ばれる二次腫瘍がある。癌腫としては、細葉細胞癌、腺房癌、肺胞上皮腺癌（腺様嚢胞癌、腺筋上皮腫、篩状癌および円柱腫とも呼ばれる）、腺癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ａｄｅｎｏｍａｔｏｓｕｍ）、腺癌、副腎皮質の癌腫、肺胞癌、肺胞上皮細胞癌（細気管支癌、肺胞上皮細胞腫瘍および肺腺腫症とも呼ばれる）、基底細胞癌（ｂａｓａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、基底細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｂａｓｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）（基底細胞癌（ｂａｓａｌｏｍａまたはｂａｓｉｌｏｍａ）および毛母癌とも呼ばれる）、類基底癌、基底扁平細胞癌、乳癌、気管支肺胞上皮癌、細気管支癌、気管支原性癌、脳様癌（ｃｅｒｅｂｒｉｆｏｒｍ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、胆管細胞癌（胆管腫および胆管癌（ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）とも呼ばれる）、絨毛癌（ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液性癌、面皰癌、子宮体癌、篩状癌、鎧状癌、皮膚癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｕｔａｎｅｕｍ）、円柱癌（ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、円柱細胞癌、管癌（ｄｕｃｔ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、硬性癌、胎児性癌、脳様癌（ｅｎｃｅｐｈａｌｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、眼球癌、類表皮癌、アデノイド上皮癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｅ  ａｄｅｎｏｉｄｅｓ）、潰瘍癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｅｘｕｌｃｅｒｅ）、線維性癌、膠様癌（ｇｅｌａｔｉｎｉｆｏｒｍ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、膠様癌（ｇｅｌａｔｉｎｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、巨細胞癌、巨細胞（ｇｉｇａｎｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、腺癌（ｇｌａｎｄｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、顆粒膜細胞癌、毛母癌、血液様癌（ｈｅｍａｔｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、肝細胞癌（ヘパトーマ、悪性ヘパトーマおよび肝細胞癌（ｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）とも呼ばれる）、Ｈｕｒｔｈｌｅ細胞癌、硝子様癌（ｈｙａｌｉｎｅ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、副腎様癌（ｈｙｐｅｒｎｅｐｈｒｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、乳児性胎児性癌、上皮内癌、表皮内癌、上皮内癌、Ｋｒｏｍｐｅｃｈｅｒ癌（Ｋｒｏｍｐｅｃｈｅｒ’ｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、Ｋｕｌｃｈｉｔｚｋｙ細胞癌、レンズ状癌（ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、レンズ状癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒｅ）、脂肪性癌（ｌｉｐｏｍａｔｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、リンパ上皮癌、乳腺癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍａｓｔｉｔｏｉｄｅｓ）、髄様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｅｄｕｌｌａｒｅ）、髄様癌（ｍｅｄｕｌｌａｒｙ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、黒色癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｅｌａｎｏｄｅｓ）、黒色癌（ｍｅｌａｎｏｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液癌（ｍｕｃｉｎｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｕｃｉｐａｒｕｍ）、粘液細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｕｃｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、粘表皮癌、粘液癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｕｃｏｓｕｍ）、粘液癌（ｍｕｃｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液腫様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｙ���ｏｍａｔｏｄｅｓ）、上咽頭癌、黒色癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｎｉｇｒｕｍ）、燕麦細胞癌、骨化癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｏｓｓｉｆｉｃａｎｓ）、骨様癌（ｏｓｔｅｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、卵巣癌、乳頭癌、門脈周囲癌、前浸潤癌、前立腺癌、腎臓の腎細胞癌（腎臓の腺癌および副腎様癌（ｈｙｐｅｒｎｅｐｈｏｒｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）とも呼ばれる）、予備細胞癌、肉腫様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｓａｒｃｏｍａｔｏｄｅｓ）、シュナイダー癌（ｓｃｈｅｉｎｄｅｒｉａｎ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、硬性癌（ｓｃｉｒｒｈｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、陰嚢癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｓｃｒｏｔｉ）、印環細胞癌、単純癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｓｉｍｐｌｅｘ）、小細胞癌、ソラノイド癌（ｓｏｌａｎｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、球状細胞精巣癌（ｓｐｈｅｒｏｉｄａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、紡錘細胞癌、海綿様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｓｐｏｎｇｉｏｓｕｍ）、扁平上皮癌（ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、扁平上皮癌（ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、紐癌（ｓｔｒｉｎｇ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、毛細管拡張性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔａｔｉｃｕｍ）、毛細管拡張性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔｏｄｅｓ）、移行上皮癌、結節性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）、結節性癌（ｔｕｂｅｒｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、疣状癌および絨毛癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｖｉｌｏｓｕｍ）が挙げられる。
【００７２】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、癌腫瘍は線維肉腫である。
【００７３】
他の実施形態では、腫瘍細胞は間葉系由来であり、たとえば、肉腫を形成する腫瘍細胞である。肉腫は、骨組織および軟部組織に発生する稀な間葉系新生物である。様々な種類の肉腫として、脂肪肉腫（たとえば粘液性脂肪肉腫および多形型脂肪肉腫）、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、悪性末梢神経鞘腫瘍（悪性シュワン腫、神経線維肉腫または神経原性肉腫とも呼ばれる）、ユーイング腫瘍（たとえば骨のユーイング肉腫、骨外性［骨でない］ユーイング肉腫、および原始神経外胚葉性腫瘍［ＰＮＥＴ］）、滑膜肉腫、血管肉腫（ａｎｇｉｏｓａｒｃｏｍａ）、血管肉腫（ｈｅｍａｎｇｉｏｓａｒｃｏｍａ）、リンパ管肉腫、カポジ肉腫、血管内皮種、線維肉腫、類腱腫（侵襲性線維腫症とも呼ばれる）、隆起性皮膚線維肉腫（ＤＦＳＰ）、悪性線維性組織球腫（ＭＦＨ）、血管周囲細胞腫、悪性間葉腫、胞状軟部肉腫、類上皮肉腫、明細胞肉腫、線維形成性小細胞腫瘍、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）（ＧＩ間質肉腫とも呼ばれる）、骨肉腫（骨原性肉腫とも呼ばれる）−骨格および骨外性、ならびに軟骨肉腫が挙げられる。
【００７４】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、癌腫瘍は腺癌または乳癌である。
【００７５】
いくつかの実施形態では、腫瘍細胞はメラニン細胞由来である。メラノーマは、皮膚および他の器官のメラニン細胞系から生じる腫瘍である。メラノーマの例として、悪性黒子型メラノーマ、表在性拡大型メラノーマ、結節型メラノーマおよび末端黒子型メラノーマが挙げられる。
【００７６】
なお他の実施形態では、腫瘍細胞として、に見られるものが挙げられる胆道癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、上皮内新生物、たとえばボーエン病およびパジェット病、肝癌、口腔癌、たとえば扁平上皮癌、肉腫、たとえば線維肉腫および骨肉腫、皮膚癌、たとえばメラノーマ、カポジ肉腫、精巣癌、たとえば胚腫瘍（セミノーマ、非セミノーマ（奇形腫、絨毛癌（ｃｈｏｒｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）））、間質性腫瘍および胚細胞腫瘍、甲状腺癌、たとえば甲状腺癌および髄様癌（ｍｅｄｕｌｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、ならびに腎癌、たとえば腺癌およびウィルムス腫瘍が挙げられる。
【００７７】
特定の実施形態では、腫瘍細胞は骨、筋肉または結合組織から発生することがある。腫瘍細胞は骨および結合組織の原発腫瘍（たとえば肉腫）に見られてもよい。
【００７８】
他の実施形態では、腫瘍細胞は転移性であってもよい。いくつかの実施形態では、転移性腫瘍は上皮由来である。癌腫は、乳癌で観察されるように骨に転移することも、場合によっては結腸癌と同様に肝臓に転移することもある。本明細書に提供される方法は、転移の部位および／または原発腫瘍の部位に関係なく、転移性腫瘍の増殖または複製を抑制することに関する。
【００７９】
ＯＰＮ変異体は、たとえばＯＰＮ分子を含んでもよい。本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ変異体はＯＰＮ分子を含んでもよいし、あるいはそれからなってもよい。
【００８０】
ＯＰＮ変異体、または個々の活性ＯＰＮ分子もしくはまたはＯＰＮ分子の活性フラグメントは、こうした化合物の天然の供給源から単離することができる。あるいは、ＯＰＮ変異体は発酵または化学合成により調製してもよい。
【００８１】
ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体は乳汁から単離され、特定の実施形態では、乳汁はウシ乳汁である。他の実施形態では、ＯＰＮ変異体は飼い慣らされた他の泌乳哺乳動物、たとえばヤギ、ヒツジ、水牛、ラマおよびラクダから単離される。乳汁からＯＰＮ変異体を単離する方法については、たとえば、開示内容全体を本明細書に援用する米国特許第７，２５９，２４３号明細書を参照されたい。
【００８２】
いくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体の供給源は、ＯＰＮ変異体に関して精製されている。いくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体の供給源は、少なくとも純度約５０％〜約６０％、少なくとも約６０％〜約７０％、または少なくとも約７０％〜約８０％である。いくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体の供給源は少なくとも純度約８０％〜約９０％であり、他の実施形態では、ＯＰＮ変異体の供給源は、少なくとも純度約９０％〜約９５％以上である。ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体の精製された供給源は、少なくとも純度約９５％、たとえば純度９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９．５％以上である。
【００８３】
特定の実施形態では、ＯＰＮ変異体の精製された供給源は、精製されたウシＯＰＮ調製物、たとえばＬａｃｐｒｏｄａｎ  ＯＰＮ−１０（登録商標）（Ａｒｌａ  Ｆｏｏｄｓ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ，Ｖｉｂｙ，Ｄｅｎｍａｒｋ）（米国特許第７，２５９，２４３号明細書も参照されたい）である。Ｌａｃｐｒｏｄａｎ  ＯＰＮ−１０（登録商標）は、約２２％（ｗ／ｗ）の全長ウシ乳汁ＯＰＮおよび約６５％（ｗ／ｗ）のウシ乳汁ＯＰＮアイソフォーム（全長ＯＰＮの切断型）を含む。
【００８４】
他の実施形態では、ＯＰＮ変異体は組換えタンパク質またはペプチドである。
【００８５】
ＯＰＮ変異体は、いくつかの方法で投与することができる。
【００８６】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、処置または防止は経口投与による。経口投与は、たとえば舌下投与および／または口腔内投与を含んでもよい。あるいはまたは加えて、経口投与は、ＯＰＮ変異体が胃腸管系に入ることを意味してもよい。
【００８７】
あるいは、ＯＰＮ変異体は非経口的に、たとえば注射または注入により投与してもよい。したがって、本発明のいくつかの好ましい実施形態では、処置または防止は、たとえばＯＰＮ変異体の静脈内（ＩＶ）投与によってもよい。本発明の他の好ましい実施形態では、処置または防止は、たとえば筋肉内投与または皮下投与、たとえば筋肉内注射または皮下注射によってもよい。本発明の他の好ましい実施形態では、処置または防止は、たとえば腹腔内投与、たとえば腹腔内注射によってもよい。
【００８８】
本発明のさらなる実施形態では、処置または防止は、たとえば鼻腔投与によってもよい。
【００８９】
本発明のいくつかの実施形態では、処置または防止は、腫瘍細胞の増殖または複製を抑制するおよび／または低下させるためのものである。たとえば、処置または防止は、腫瘍細胞の複製を防止するためのものであってもよい。処置または防止は、たとえば腫瘍細胞の増殖を防止するためのものでであってもよい。
【００９０】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、本明細書に提供される医学的使用および方法は、腫瘍細胞の増殖または複製をその由来部位に関わらず抑制するおよび／または低下させることに関する。
【００９１】
処置または防止はまた、癌腫瘍の増殖を抑制し、および／または低下させてもよい。
【００９２】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、処置は、癌腫瘍の増殖を防止するためのものである。たとえば、処置は、癌腫瘍の癌細胞の増殖および／または複製を防止するためのものであってもよい。
【００９３】
本発明のいくつかの実施形態では、処置または防止は、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有する被検体における転移リスクを低下させるためのものである。たとえば、処置または防止は、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有する被検体における転移を防止するためのものであってもよい。
【００９４】
処置または防止は、たとえば腫瘍細胞の増殖または複製を防止してもよい。
【００９５】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、処置される被検体はヒト被験者である。
【００９６】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、処置される被検体は高レベルのＯＰＮを有する少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有する。
【００９７】
本発明の文脈では、癌腫瘍におけるＯＰＮのレベルが少なくとも１ナノグラム／マイクログラムタンパク質である場合、癌腫瘍は高レベルのＯＰＮを有する。癌腫瘍におけるＯＰＮのレベルは、実施例３に従い判定される。本発明のいくつかの実施形態では、癌腫瘍は、癌腫瘍におけるＯＰＮのレベルが少なくとも５ナノグラム／マイクログラムタンパク質である場合、高レベルのＯＰＮを有すると見なされる。たとえば、癌腫瘍は、癌腫瘍におけるＯＰＮのレベルが少なくとも１０ナノグラム／マイクログラムタンパク質である場合、高レベルのＯＰＮを有すると見なしてもよい。本発明の他の実施形態では、癌腫瘍は、癌腫瘍におけるＯＰＮのレベルが少なくとも２０ナノグラム／マイクログラムタンパク質である場合、高レベルのＯＰＮを有すると見なされる。たとえば、癌腫瘍は、癌腫瘍におけるＯＰＮのレベルが少なくとも５０ナノグラム／マイクログラムタンパク質である場合、高レベルのＯＰＮを有すると見なしてもよい。
【００９８】
あるいは、癌腫瘍における高レベルのＯＰＮは、本質的にヒト腫瘍サンプルについて記載された免疫組織化学により判定してもよい（Ｔｕｃｋ  １９９８）。４〜６ミクロンのホルマリン固定パラフィン包埋腫瘍組織切片を再水和し、０．０１Ｍのクエン酸Ｎａ、ｐＨ６．０中、１２分間沸騰させて抗原賦活化に供する。５％ヤギ血清でブロッキング後、抗オステオポンチン抗体（Ｒ＆Ｄ＃ＡＦ８０８またはＳａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ｍＡＫ２Ａ１）を製造者の指示に従い希釈し、組織切片と１時間インキュベートする。二次抗体とのインキュベーションおよび検出については、ビオチン化抗ヤギ抗体およびアビジン−ビオチン複合体（Ｖｅｃｔｏｒ  ｃａｔ  ＃ＰＫ−６１０５）を含むＶｅｃｔｏｒ  ＡＢＣ  Ｅｌｉｔｅキットを用いて行う。検出は、ジアミノベンジジン（ＤＡＢ、キットに含まれる）で染色して行う。染色の範囲および強度は顕微鏡により判定し、（Ｔｕｃｋ  １９９８）に記載の半定量的システムにより分類する。スコアが４を超える腫瘍サンプルを、高レベルのＯＰＮを有すると見なす。
【００９９】
本発明の他の好ましい実施形態では、癌腫瘍を有する被検体はその血液から得られる血漿中に高濃度のＯＰＮを有する。
【０１００】
本発明の文脈では、被検体は、ＯＰＮの血漿中濃度が少なくとも８０ナノグラム／ｍＬである場合、その血漿中に高濃度のＯＰＮを有する。被検体の血液から得られた血漿中のＯＰＮの濃度は、実施例４に従い判定される。本発明のいくつかの実施形態では、被検体は、ＯＰＮの血漿中濃度が少なくとも１００ナノグラム／ｍＬである場合、その血漿中に高濃度のＯＰＮを有する。たとえば、被検体は、ＯＰＮの血漿中濃度が少なくとも１２０ナノグラム／ｍＬである場合、その血漿中に高濃度のＯＰＮを有し得る。本発明の他の実施形態では、被検体は、ＯＰＮの血漿中濃度が少なくとも１４０ナノグラム／ｍＬである場合、その血漿中に高濃度のＯＰＮを有する。たとえば、被検体は、ＯＰＮの血漿中濃度が少なくとも１８０ナノグラム／ｍＬである場合、その血漿中に高濃度のＯＰＮを有し得る。
【０１０１】
癌腫瘍または血漿中に測定されるＯＰＮは、被検体により産生されたＯＰＮであり、本ＯＰＮ変異体と同一でなくてもよい点に留意されたい。
【０１０２】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ変異体が投与されるまたは投与される予定の被検体は、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を発症するリスクが高い。
【０１０３】
本発明の文脈では、被検体は、癌腫瘍を発症する被検体の生涯リスクが、性別、年齢および民族性が一致する一般集団の人で計算された生涯リスクより少なくとも２０％高い場合、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を発症するリスクが高いと見なされる。
【０１０４】
高リスクの例として、乳癌の第１度近親者を持つ５５歳の女性が挙げられる。この女性の乳癌を発症する生涯リスクは、一般集団より３６％高い（たとえば米国国立癌研究所（ＮＣＩ）の科学者が設計した対話型ツールであるｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ／ｂｃｒｉｓｋｔｏｏｌ／のＢｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｉｓｋ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｔｏｏｌを参照）。
【０１０５】
高リスクは、遺伝または環境状況または被検体の生活様式に起因する場合がある。
【０１０６】
本発明のいくつかの実施形態では、高リスクは環境状況に起因する。こうした被検体は、たとえばかなりの量の放射性照射またはかなりの量の発癌物質に曝されたことがあるかもしれない。
【０１０７】
本発明の他の実施形態では、高リスクは被検体の生活様式に起因する。こうした被検体は、たとえばタバコ喫煙者または元タバコ喫煙者であるかもしれない。
【０１０８】
本発明のなお他の実施形態では、高リスクは被検体の親の遺伝形質に起因する。こうした被検体は、たとえば乳癌、肺癌、卵巣癌または結腸癌を有する少なくとも１人の第１度近親者、たとえば母親、父親、姉妹または兄弟を有するかもしれない。
【０１０９】
癌を発症するリスクが高い被検体は、たとえば少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の発症の高リスクに関連する遺伝子プロファイルを有し得る。
【０１１０】
本発明の文脈では、「遺伝子プロファイル」という用語は、被検体がその親から受け継いだ遺伝子、および環境状況に起因する遺伝子突然変異の両方に関する。
【０１１１】
本発明のいくつかの実施形態では、遺伝子プロファイルは、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の発症の高リスクに関連する少なくとも１つの受け継がれた遺伝子を含む。こうした遺伝子の例として、ＢＲＣＡ１遺伝子またはＢＲＣＡ２遺伝子がある。たとえばＮｅｌｓｏｎ  ２００５を参照されたい。
【０１１２】
本発明の文脈では、癌を発症する生涯リスクが、遺伝子プロファイルのキャリアにおいて非キャリアの場合より少なくとも２０％高い場合、その遺伝子プロファイルは、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の発症の高リスクに関連すると見なされる。
【０１１３】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、処置されるまたは処置される予定の被検体は、別のタイプの抗癌処置でも処置される。そうした他の種類の抗癌処置の例として、たとえば化学療法、化学防止、標的治療、骨髄移植、放射線処置、外科手術またはこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１１４】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、ＯＰＮ変異体は、処置される被検体の約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約５ｇ／ｋｇ体重の範囲の１日投与量で投与される。
【０１１５】
腫瘍細胞の増殖速度、およびその結果としての腫瘍細胞塊の全体の大きさは、低下させることができ、ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体を被検体に投与（たとえば経口）する場合、その被検体で統計学的に有意に低下させることができる。有効量のＯＰＮ変異体を被検体に投与したことによる腫瘍細胞増殖の抑制は、被検体にＯＰＮ変異体を投与する前の同じ腫瘍の腫瘍細胞の増殖速度に関連する、あるいは有効量のＯＰＮ変異体を投与されていない被検体の同等の腫瘍（塊の当初の大きさおよび細胞型が同等）の腫瘍細胞の増殖に関連する。腫瘍の細胞増殖とは、細胞分裂もしくは複製の速度、または腫瘍細胞塊の全体の大きさ（たとえば体積または周径）をいう場合がある。腫瘍細胞塊の測定方法は、当該技術分野において周知である。たとえば、本明細書に援用するＴｏｍａｙｋｏ  １９８９を参照されたい。
【０１１６】
本発明の文脈では、癌腫瘍の大きさとは腫瘍の体積をいう。癌腫瘍の増殖速度とは、単位時間当たりの腫瘍の体積増加をいう。癌腫瘍の体積は、従来の画像技術、たとえばＭＲＩスキャナーまたは超音波イメージングにより判定してもよい。
【０１１７】
ある種の実施形態では、腫瘍細胞塊の増殖速度または大きさを、治療有効量のＯＰＮ変異体が投与されていない同様の腫瘍の増殖速度または大きさと比較して少なくとも約５％〜約１０％低下させることができる。他の実施形態では、腫瘍細胞塊を少なくとも約１０％〜約１５％、少なくとも約１５％〜約２０％、少なくとも約２０％〜約２５％、少なくとも約２５％〜約３０％、少なくとも約３０％〜約３５％、少なくとも約３５％〜約４０％、少なくとも約４０％〜約４５％、少なくとも約４５％〜約５０％、少なくとも約５０％〜約５５％、少なくとも約５５％〜約６０％、少なくとも約６０％〜約６５％、少なくとも約６５％〜約７０％、少なくとも約７０％〜約７５％、少なくとも約７５％〜約８０％、少なくとも約８０％〜約８５％または少なくとも約８５％〜約９０％以上低下させることができる。なお他の実施形態では、腫瘍細胞塊を少なくとも約５０％低下させる。特定の実施形態では、腫瘍細胞塊を少なくとも約７５％低下させる。
【０１１８】
あるいは、腫瘍細胞塊の増殖速度を、治療有効量のＯＰＮ変異体が投与されていない同様の腫瘍の増殖速度または大きさと比較して約５％〜約１００％低下させることができる。たとえば、腫瘍細胞塊の増殖速度を約２０％〜約９５％低下させることができる。好ましくは、腫瘍細胞塊の増殖速度を約４０％〜約１００％低下させる。なお一層好ましくは、腫瘍細胞塊の増殖速度を約６０％〜約１００％低下させる。
【０１１９】
ＯＰＮ変異体は、本明細書に記載するように、腫瘍細胞の増殖または複製を抑制するのに効果的な量で被検体に投与してもよい。ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体は約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約１ｍｇ／ｍｌの濃度で投与してもよい。いくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は、約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約０．１ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約０．１５ｍｇ／ｍｌ、約０．１５ｍｇ／ｍｌ〜約０．２ｍｇ／ｍｌ、約０．２５ｍｇ／ｍｌ〜約０．３ｍｇ／ｍｌ、約０．３ｍｇ／ｍｌ〜約０．３５ｍｇ／ｍｌ、約０．３５ｍｇ／ｍｌ〜約０．４ｍｇ／ｍｌ、約０．４ｍｇ／ｍｌ〜約０．４５ｍｇ／ｍｌ、約０．４５ｍｇ／ｍｌ〜約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．５５ｍｇ／ｍｌ〜約０．６ｍｇ／ｍｌ、約０．６ｍｇ／ｍｌ〜約０．６５ｍｇ／ｍｌ、約０．６５ｍｇ／ｍｌ〜約０．７ｍｇ／ｍｌ、約０．７ｍｇ／ｍｌ〜約０．７５ｍｇ／ｍｌ、約０．７５ｍｇ／ｍｌ〜約０．８ｍｇ／ｍｌ、約０．８５ｍｇ／ｍｌ〜約０．９ｍｇ／ｍｌ、約０．９ｍｇ／ｍｌ〜約０．９５ｍｇ／ｍｌまたは約０．９５ｍｇ／ｍｌ〜約１ｍｇ／ｍｌの濃度で投与してもよい。一実施形態では、ＯＰＮ変異体は０．０３ｍｇ／ｍｌの濃度で投与してもよい。別の実施形態では、ＯＰＮ変異体は０．１２ｍｇ／ｍｌの濃度で投与してもよい。なお別の実施形態では、ＯＰＮ変異体は０．３ｍｇ／ｍｌの濃度で投与してもよい。
【０１２０】
特定の実施形態では、ＯＰＮ変異体は約１ｍｇ／ｍｌ〜約０．１ｇ／ｍｌの濃度で投与してもよい。いくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は約１ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約１５ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約２５ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ〜約３０ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約３５ｍｇ／ｍｌ、約３５ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ〜約４５ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ〜約５５ｍｇ／ｍｌ、約５５ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌ、約６０ｍｇ／ｍｌ〜約６５ｍｇ／ｍｌ、約６５ｍｇ／ｍｌ〜約７０ｍｇ／ｍｌ、約７０ｍｇ／ｍｌ〜約７５ｍｇ／ｍｌ、約７５ｍｇ／ｍｌ〜約８０ｍｇ／ｍｌ、約８０ｍｇ／ｍｌ〜約８５ｍｇ／ｍｌ、約８５ｍｇ／ｍｌ〜約９０ｍｇ／ｍｌ、約９０ｍｇ／ｍｌ〜約９５ｍｇ／ｍｌまたは約９５ｍｇ／ｍｌ〜約０．１ｇ／ｍｌの濃度で投与してもよい。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は約０．１ｇ／ｍｌ〜約１ｇ／ｍｌの濃度で投与してもよい。他の実施形態では、ＯＰＮ変異体は約０．１ｇ／ｍｌ〜約０．１５ｇ／ｍｌ、約０．１５ｇ／ｍｌ〜約０．２ｇ／ｍｌ、約０．２ｇ／ｍｌ〜約０．２５ｇ／ｍｌ、約０．２５ｇ／ｍｌ〜約０．３ｇ／ｍｌ、約０．３ｇ／ｍｌ〜約０．３５ｇ／ｍｌ、約０．３５ｇ／ｍｌ〜約０．４ｇ／ｍｌ、約０．４ｇ／ｍｌ〜約０．４５ｇ／ｍｌ、約０．４５ｇ／ｍｌ〜約０．５ｇ／ｍｌ、約０．５ｇ／ｍｌ〜約０．５５ｇ／ｍｌ、約０．５５ｇ／ｍｌ〜約０．６ｇ／ｍｌ、約０．６ｇ／ｍｌ〜約０．６５ｇ／ｍｌ、約０．６５ｇ／ｍｌ〜約０．７ｇ／ｍｌ、約０．７ｇ／ｍｌ〜約０．７５ｇ／ｍｌ、約０．７５ｇ／ｍｌ〜約０．８ｇ／ｍｌ、約０．８ｇ／ｍｌ〜約０．８５ｇ／ｍｌ、約０．８５ｇ／ｍｌ〜約０．９ｇ／ｍｌ、約０．９ｇ／ｍｌ〜約０．９５ｇ／ｍｌまたは約０．９５ｇ／ｍｌ〜約１ｇ／ｍｌの濃度で投与してもよい。
【０１２２】
ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体は約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重の１日投与量で投与してもよい。本発明の文脈では、ＯＰＮ変異体の１日投与量の文脈で言及される「ｍｇ／ｋｇ」または「ｇ／ｋｇ」という単位は、処置される被検体の体重１ｋｇ当たりのＯＰＮ変異体の１日量（ｍｇまたはｇ単位）に関する。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約０．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約０．２ｍｇ／ｋｇ、約０．２５ｍｇ／ｋｇ〜約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約０．３５ｍｇ／ｋｇ、約０．３５ｍｇ／ｋｇ〜約０．４ｍｇ／ｋｇ、約０．４ｍｇ／ｋｇ〜約０．４５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．５５ｍｇ／ｋｇ〜約０．６ｍｇ／ｋｇ、約０．６ｍｇ／ｋｇ〜約０．６５ｍｇ／ｋｇ、約０．６５ｍｇ／ｋｇ〜約０．７ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約０．７５ｍｇ／ｋｇ、約０．７５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８ｍｇ／ｋｇ、約０．８５ｍｇ／ｋｇ〜約０．９ｍｇ／ｋｇ、約０．９ｍｇ／ｋｇ〜約０．９５ｍｇ／ｋｇまたは約０．９５ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇの１日投与量で投与してもよい。
【０１２４】
他の実施形態では、ＯＰＮ変異体は約１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．１ｇ／ｋｇ体重の１日投与量で投与してもよい。他の別の実施形態では、ＯＰＮ変異体は約１ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ〜約３５ｍｇ／ｋｇ、約３５ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約４５ｍｇ／ｋｇ、約４５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約５５ｍｇ／ｋｇ、約５５ｍｇ／ｋｇ〜約６０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ〜約６５ｍｇ／ｋｇ、約６５ｍｇ／ｋｇ〜約７０ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇ〜約７５ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ〜約８０ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ〜約８５ｍｇ／ｋｇ、約８５ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ〜約９５ｍｇ／ｋｇまたは約９５ｍｇ／ｋｇ〜約０．１ｇ／ｋｇの１日投与量で投与してもよい。
【０１２５】
本発明のいくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は約０．１ｇ／ｋｇ体重〜約１ｇ／ｋｇ体重の１日投与量で投与してもよい。ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体は約０．１ｇ／ｋｇ〜約０．１５ｇ／ｋｇ、約０．１５ｇ／ｋｇ〜約０．２ｇ／ｋｇ、約０．２ｇ／ｋｇ〜約０．２５ｇ／ｋｇ、約０．２５ｇ／ｋｇ〜約０．３ｇ／ｋｇ、約０．３ｇ／ｋｇ〜約０．３５ｇ／ｋｇ、約０．３５ｇ／ｋｇ〜約０．４ｇ／ｋｇ、約０．４ｇ／ｋｇ〜約０．４５ｇ／ｋｇ、約０．４５ｇ／ｋｇ〜約０．５ｇ／ｋｇ、約０．５ｇ／ｋｇ〜約０．５５ｇ／ｋｇ、約０．５５ｇ／ｋｇ〜約０．６ｇ／ｋｇ、約０．６ｇ／ｋｇ〜約０．６５ｇ／ｋｇ、約０．６５ｇ／ｋｇ〜約０．７ｇ／ｋｇ、約０．７ｇ／ｋｇ〜約０．７５ｇ／ｋｇ、約０．７５ｇ／ｋｇ〜約０．８ｇ／ｋｇ、約０．８ｇ／ｋｇ〜約０．８５ｇ／ｋｇ、約０．８５ｇ／ｋｇ〜約０．９ｇ／ｋｇ、約０．９ｇ／ｋｇ〜約０．９５ｇ／ｋｇまたは約０．９５ｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇの１日投与量で投与してもよい。
【０１２６】
特定の実施形態では、ＯＰＮ変異体は約１ｇ／ｋｇ体重〜約５ｇ／ｋｇ体重の１日投与量で投与してもよい。いくつかの実施形態では、ＯＰＮ変異体は約１ｇ／ｋｇ〜約１．５ｇ／ｋｇ、約１．５ｇ／ｋｇ〜約２ｇ／ｋｇ、約２ｇ／ｋｇ〜約２．５ｇ／ｋｇ、約２．５ｇ／ｋｇ〜約３ｇ／ｋｇ、約３ｇ／ｋｇ〜約３．５ｇ／ｋｇ、約３．５ｇ／ｋｇ〜約４ｇ／ｋｇ、約４ｇ／ｋｇ〜約４．５ｇ／ｋｇ、約４．５ｇ／ｋｇ〜約５ｇ／ｋｇの１日投与量で投与してもよい。
【０１２７】
ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜５ｇ／ｋｇの範囲の１日投与量で投与する。たとえば、ＯＰＮ変異体は約１ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｇ／ｋｇの範囲の１日投与量で投与してもよい。あるいは、ＯＰＮ変異体は約０．００５ｇ／ｋｇ〜０．２ｇ／ｋｇの範囲の１日投与量で投与してもよい。ＯＰＮ変異体は、たとえば約０．０１ｇ／ｋｇ〜０．１ｇ／ｋｇの範囲の１日投与量で投与してもよい。
【０１２８】
他の実施形態では、ＯＰＮ変異体は、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜３００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の１日投与量で投与する。たとえば、ＯＰＮ変異体は約５ｍｇ／ｋｇ体重〜２５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の１日投与量で投与してもよい。あるいは、ＯＰＮ変異体は約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜２００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の１日投与量で投与してもよい。ＯＰＮ変異体は、たとえば約３０ｍｇ／ｋｇ体重〜１５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の１日投与量で投与してもよい。
【０１２９】
さらに本発明の一態様は、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の処置または防止に使用される薬物の製造における、ＯＰＮ変異体を含むあるいはさらにはそれからなるＯＰＮ変異体の使用に関する。
【０１３０】
さらに本発明の一態様は、癌を処置または防止する方法であって、癌を有する被検体または癌になるリスクがある被検体に、前記癌を処理または防止するのに効果的なＯＰＮ変異体を含む、あるいはさらにはそれらからなるＯＰＮ変異体を投与することを含み、前記癌は少なくとも１つの癌腫瘍を含む、方法に関する。
【０１３１】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、本方法は、癌を有する被検体または癌になるリスクがある被検体に、腫瘍細胞の増殖または複製を抑制するのに効果的なＯＰＮ変異体を含む、あるいはさらにはそれらからなるＯＰＮ変異体を投与することを含む。
【０１３２】
処置方法は、たとえば少なくとも１つの癌腫瘍、たとえば高レベルのＯＰＮを有する癌腫瘍を含む癌を有する被検体において転移のリスクを低下させるまたは転移を防止する方法であって、転移のリスクを低下させるあるいはさらには転移を防止するのに効果的な量のＯＰＮ変異体を被検体に投与することを含む方法であってもよい。
【０１３３】
本発明の一態様は、ＯＰＮ変異体またはＯＰＮ変異体を含む医薬組成物を腫瘍細胞の増殖または複製を抑制するのに効果的な量で被検体に投与することにより、被検体の腫瘍細胞の増殖または複製を抑制する方法に関する。そうした有効量は、本明細書で治療有効量ということもある。
【０１３４】
「有効量」または「治療有効量」という用語は、本明細書で使用する場合、被検体に直接投与されるＯＰＮ変異体の量、または医薬組成物もしくは栄養サプリメントに含まれるＯＰＮ変異体の量が、記載された効果、たとえば被検体の腫瘍増殖の抑制および／または腫瘍細胞の増殖もしくは複製の抑制を引き起こすのに十分な量であることを意味する。有効量は、当業者、たとえば開業医により経験的に判定することができる。たとえば腫瘍増殖および／または腫瘍細胞の増殖もしくは複製を抑制するのに効果的なＯＰＮ変異体の量を判定する際は、被検体の年齢、身長および体重などの因子を考慮してもよい。
【０１３５】
本発明の別の態様は、
−ＯＰＮ変異体、および
−薬学的に許容されるキャリア
を含む医薬組成物に関する。
【０１３６】
ＯＰＮ変異体は、好ましくは薬学的有効量で存在する。
【０１３７】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、医薬組成物は０．０１〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含む。たとえば、医薬組成物は０．１〜８０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含む。あるいは、医薬組成物は１〜７０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。
【０１３８】
本発明のいくつかの実施形態では、医薬組成物は５〜６０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含む。たとえば、医薬組成物は１０〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。あるいは、医薬組成物は０．１〜２０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。
【０１３９】
ＯＰＮ変異体に加えて、医薬組成物は、１種または複数種の別の治療薬（単数または複数）をさらに含んでもよい。１種または複数種の別の治療薬（単数または複数）は、好ましくは抗癌剤である。
【０１４０】
標的化治療薬の例として、小分子、たとえばメシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、ＳＴＩ&#8211;５７１とも呼ばれる）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＺＤ１８３９とも呼ばれる）、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標））、Ｂｃｌ−２阻害剤（たとえばオバトクラキスメシレート、ＡＢＴ−２６３およびゴシポール）、ＰＡＲＰ阻害剤（たとえばイニパリブ、オラパリブ）、ヤヌスキナーゼ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、アパチニブ（選択的ＶＥＧＦ受容体２阻害剤）およびサリノマイシンが挙げられる。標的化治療薬の例としてさらに、モノクローナル抗体、たとえばリツキシマブ（ＭＡＢＴＨＥＲＡ（登録商標）またはＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）として販売されている）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＡＴＩＮ（登録商標））が挙げられる。例としてさらに、抗体−薬剤コンジュゲートが挙げられる。
【０１４１】
化学療法剤の例として、アルキル化剤（たとえばシスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、メクロレタミン、シクロホスファミド、クロラムブシル、イホスファミド）、代謝拮抗薬（たとえばプリン（アザチオプリン、メルカプトプリンなど）およびピリミジン）、植物アルカロイドおよびテルペノイド（たとえばビンカアルカロイド類、たとえばビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビンおよびビンデシン、ポドフィロトキシンならびにタキサン）、トポイソメラーゼ阻害剤（たとえばイリノテカン、トポテカン、アムサクリン、エトポシド、リン酸エトポシドおよびテニポシド）、および細胞障害性阻害剤（たとえばアクチノマイシン、たとえばアクチノマイシンＤ、アントラサイクリン、たとえばドキソルビシン（Ｌ０１ＤＢ０１）、ダウノルビシン（Ｌ０１ＤＢ０２）、バルルビシン、イダルビシン、エピルビシン（Ｌ０１ＤＢ０３）、および他の細胞障害性抗生物質、たとえばブレオマイシン（Ｌ０１ＤＣ０１）、プリカマイシン（Ｌ０１ＤＣ０２）およびマイトマイシン（Ｌ０１ＤＣ０３））が挙げられる。
【０１４２】
有用な治療薬の別の例にはインテグリン遮断剤、たとえばαｖβ３インテグリン遮断剤、たとえばシレンギチドがある。
【０１４３】
免疫抑制薬の例として、糖質コルチコイド、細胞増殖阻害薬（たとえばアルキル化剤および代謝拮抗薬、たとえば葉酸アナログ（たとえばメトトレキサート）、プリンアナログ（たとえばアザチオプリン、メルカプトプリン）、ピリミジンアナログおよびタンパク質合成阻害剤）、抗体（たとえばポリクローナルおよびモノクローナル）、イムノフィリンに作用する薬剤（たとえばシクロスポリン、タクロリムス、シロリムス）ならびに他の薬剤、たとえばインターフェロン、オピオイド、ＴＮＦ結合タンパク質、ミコフェノレートおよび低分子生物学的製剤（たとえばフィンゴリモド、ミリオシン）が挙げられる。
【０１４４】
本明細書に記載の他の態様は、ＯＰＮ変異体と、薬学的に許容されるキャリア、１種もしくは複数種の混和異性のある固体もしくは液体充填剤、または１種もしくは複数種の希釈液またはヒトまたは他の動物への投与に適した被包剤とを含む医薬組成物を含む。キャリア（または他の作用物質）は、処置される被検体への投与に適切であると見なされるために、十分に純粋かつ十分に低毒性であるべきである。キャリアは不活性であってもよいし、あるいはそれ自体薬学的に好ましい特性を有していてもよい。ＯＰＮ変異体と組み合わせて使用されるキャリアの量は、ＯＰＮ変異体の送達量および有効性（たとえばＯＰＮ変異体の細胞への送達量または細胞によるＯＰＮ変異体の取り込み）を改善するのに十分な量であってもよく、当業者が経験的に判定してもよい。
【０１４５】
本明細書に記載の医薬組成物に含まれていてもよい別のキャリアまたは他の（不活性）作用物質の例として、糖、たとえばラクトース、グルコースおよびサッカロース；デンプン、たとえばコーンスターチおよびポテトスターチ；セルロースおよびその誘導体、たとえばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよびメチルセルロース；粉末状トラガントガム；ゼラチン；タルク；固体滑沢剤、たとえばステアリン酸（ｓｔｅａｒｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）およびステアリン酸マグネシウム；硫酸カルシウム、植物油、たとえばピーナッツバター、綿実油およびトウモロコシ油；ポリオール、たとえばプロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール；アルギン酸；乳化剤、たとえばＴＷＥＥＮ（登録商標）；湿潤剤、たとえばラウリル硫酸ナトリウム；色素；矯味薬；ペレット化剤；安定剤；酸化防止剤；防腐剤；パイロジェンフリー水；生理的な等張液、グルコース溶液およびリン酸緩衝液；甘味料、たとえばグリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール、サッカロース）；矯味薬；着香剤；色素；および防腐剤、たとえばメチル−またはｎ−プロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエート、ソルビン酸、メチルパラベン、ベンゾエートが挙げられる。
【０１４６】
医薬組成物に、本発明の化合物の活性に大きな影響を与えない任意の活性薬を加えてもよい。こうした活性薬として、抗癌標的化治療薬および化学療法剤、ならびに免疫抑制剤または免疫賦活剤が挙げられる。
【０１４７】
ある種の実施形態では、ＯＰＮ変異体を含む医薬組成物を粘膜投与および／または経口投与用に製剤化する。本組成物は、従来の無毒の薬学的に許容されるキャリア、補助剤および媒体を含む標準的な剤形で経口投与、舌下投与または口腔内投与してもよい。「経口」または「経口的に」という用語は、「舌下」もしくは「舌下に」または「口腔内」もしくは「口腔内に」を包含し得る。
【０１４８】
粘膜投与および／または経口投与に特有の薬学的に許容されるキャリアは、当該技術分野において公知であり、１種または複数種の糖、デンプン、セルロースおよびその誘導体、モルト、ゼラチン、タルク、硫酸カルシウム、植物油、合成油、ポリオール、アルギン酸、リン酸緩衝液、乳化剤、生理的な等張液、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、糖溶液、ソルビトールおよび水が挙げられる。こうした組成物は粘滑薬をさらに含んでもよい。
【０１４９】
経口投与に好適な形態として、錠剤もしくは顆粒剤、硬もしくは軟カプセル、香錠、トローチ、水中もしくは油中懸濁剤、エマルジョン、分散性粉末もしくは顆粒、またはシロップ剤もしくはエリキシル剤が挙げられる。経口投与用に製剤化される医薬組成物は、こうした組成物の調製に関する当該技術分野において公知の任意の方法に従い調製することができる。
【０１５０】
錠剤は典型的には、従来の薬学的に適合性のある助剤、たとえば不活性希釈剤、たとえば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、マンニトール、ラクトースおよびセルロース；バインダー、たとえばデンプン、ゼラチンおよびサッカロース；分散剤、たとえばデンプン、アルギン酸およびクロスカルメロース；滑沢剤、たとえばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸およびタルクを含む。粉末組成物の流動性特性を改善するため、流動促進剤、たとえば二酸化ケイ素を使用してもよい。外観の観点から、ＦＤ＆Ｃ色素などの色素を加えてもよい。甘味料および矯味薬、たとえばアスパルテーム、サッカリン、メントール、ペパーミントおよび果実香料は、チュアブル錠の補助剤として有用である。カプセル剤（持続放出および遅延放出調製物を含む）は典型的には、上述の１種または複数種の固体希釈薬を含む。キャリア成分の選択は、多くの場合、二次的因子、たとえば風味、価格および保存性によって決まる。
【０１５１】
錠剤またはカプセル剤の形態の医薬組成物はまた、従来の方法により典型的にはｐＨ依存性コーティングでコーティングしてもよい。こうした剤形は典型的には、セルロースアセテートフタレート、ポリビニルアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、エチルセルロース、Ｅｕｄｒａｇｉｔコーティング、ワックスおよびセラックならびに他の材料の中から１種または複数種の成分を含む。
【０１５２】
ＯＰＮ変異体を含む経口投与用の調製物は、ＯＰＮ変異体を不活性な固体希釈薬、たとえば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムおよびカオリンと混合した硬質ゼラチンカプセルとして製剤化しても、あるいはＯＰＮ変異体を水または油媒体、たとえばピーナッツバター、流動パラフィンまたはオリーブ油と混合した軟質ゼラチンカプセルの形態で製剤化してもよい。
【０１５３】
水性懸濁液は、水性懸濁液を得るのに好適な賦形剤との混合物中にＯＰＮ変異体を含んでもよい。こうした賦形剤は、懸濁化剤、たとえば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガントガムおよびアラビアガム；分散剤または湿潤剤；天然ホスファチド、たとえばレシチン、またはアルキレノキシドと脂肪酸との縮合生成物、たとえば、ステアリン酸ポリオキシエチレン、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコール、たとえばヘプタデカエチレンオキシセタノールとの縮合生成物、またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールから得られる部分エステルとの縮合生成物、たとえば置換ポリオキシエチレンソルビトール、またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物から得られる部分エステルとの縮合生成物、たとえば、置換ポリオキシエチレンソルビタンであってもよい。水性懸濁液は、一部の防腐剤、たとえばエチル−またはｎ−プロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエートをさらに含んでもよい。
【０１５４】
油懸濁液は、ＯＰＮ変異体を植物油、たとえば、ピーナッツバター、オリーブ油、ゴマ油およびヤシ油に、または鉱油、たとえば流動パラフィンに懸濁することにより調製することができる。油懸濁液は、粘度付与剤、たとえば、蜜蝋、固形パラフィンまたはセチルアルコールを含んでもよい。上記のような一部の甘味料、および矯味薬を加えて飲みやすい経口調製物を得てもよい。こうした組成物は、酸化防止剤、たとえばアスコルビン酸を加えて保存してもよい。
【０１５５】
ＯＰＮ変異体が不十分な溶解度を示す場合、可溶化法を使用してもよい。こうした方法は当業者に公知であり、共溶媒、たとえばジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の使用、界面活性剤、たとえばＴＷＥＥＮ（登録商標）の使用、または炭酸水素ナトリウム水溶液への溶解、および他の方法を含む。
【０１５６】
本明細書に記載の医薬組成物はまた水中油型エマルジョンの形態であってもよい。油相は、植物油、たとえばオリーブ油またはピーナッツバターでも、あるいは鉱油、たとえば流動パラフィンでも、あるいはこれらの混合物でもよい。適切な乳化剤は、天然ガム、たとえばアラビアガムまたはトラガントガム、天然ホスファチド、たとえば大豆レシチン、およびエステルまたは脂肪酸およびヘキシトール無水物から得られる部分エステル、たとえば、ソルビタンモノオレエート、および前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、たとえば、ポリオキシエチレンソルビタンオレエートであってもよい。
【０１５７】
水性懸濁液の調製に好適な分散性の粉末および顆粒は、分散剤または湿潤剤、懸濁化剤および１種または複数種の防腐剤との混合物中にＯＰＮ変異体を含む。適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤として、上記に既に例示した薬が挙げられる。
【０１５８】
一実施形態では、ＯＰＮ変異体またはＯＰＮ変異体を含む医薬組成物は、経鼻投与剤形（たとえば鼻スプレー）で投与してもよい。こうした組成物は典型的には、１種または複数種の充填剤、たとえばサッカロース、ソルビトールおよびマンニトールと、バインダー、たとえばアラビアガム、微結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースとを含む。上述の流動促進剤、滑沢剤、甘味料、色素、酸化防止剤および矯味薬をさらに加えてもよい。
【０１５９】
従来の噴射剤（たとえば、ジクロロジフルオロメタンおよびトリクロロフルオロメタン）を用いて乾燥粉末の形態またはエアロゾルの形態で投与してもよい吸入用の医薬組成物は、溶液、懸濁液またはエマルジョン中で製剤化してもよい。
【０１６０】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、医薬組成物は、経口投与、舌下投与、口腔内投与または鼻腔投与用に製剤化する。
【０１６１】
本発明の他の実施形態では、医薬組成物は、静脈内投与用、たとえば注射用に製剤化する。
【０１６２】
本発明のいくつかの実施形態では、医薬組成物は、成人被検体に対して９０％〜１１０％（ｗ／ｗ）の１日投与量を含む剤形である。本発明の他の実施形態では、医薬組成物は、成人被検体に対して４５％〜５５％（ｗ／ｗ）の１日投与量を含む剤形である。本発明のさらなる実施形態では、医薬組成物は、成人被検体に対して２８％〜３８％（ｗ／ｗ）の１日投与量を含む剤形である。
【０１６３】
本発明のいくつかの実施形態では、医薬組成物は、単位剤形当たり０．１ｍｇ〜１０ｇの範囲の量でＯＰＮ変異体を含む剤形である。たとえば、経口剤形は、単位剤形当たり１ｍｇ〜１ｇの範囲の量のＯＰＮ変異体を含んでもよい。あるいは、経口剤形は、単位剤形当たり１０ｍｇ〜８００ｍｇの範囲の量のＯＰＮ変異体を含んでもよい。経口剤形は、たとえば単位剤形当たり２５ｍｇ〜５００ｍｇの範囲の量のＯＰＮ変異体を含んでもよい。
【０１６４】
さらに本発明の一態様は、
−栄養学的に有効な量のＯＰＮ変異体、および
−炭水化物源、脂質源およびタンパク源からなる群から選択される１種または複数種の成分
を含む栄養サプリメントに関する。
【０１６５】
本発明のいくつかの好ましい実施形態では、栄養サプリメントは、０．０１〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含む。たとえば、栄養サプリメントは、０．１〜８０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。あるいは、栄養サプリメントは、１〜７０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。
【０１６６】
本発明のいくつかの実施形態では、栄養サプリメントは、５〜６０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含む。たとえば、栄養サプリメントは、１０〜５０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。あるいは、栄養サプリメントは、０．１〜２０％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。
【０１６７】
本発明の他の実施形態では、栄養サプリメントは、０．００１〜５％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含む。たとえば、栄養サプリメントは、０．００５〜２％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。あるいは、栄養サプリメントは、０．０１〜１％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。栄養サプリメントは、たとえば０．０５〜０．５％（ｗ／ｗ）の範囲の量でＯＰＮ変異体を含んでもよい。
【０１６８】
ＯＰＮ変異体を含む栄養サプリメントは、液体形態または粉末形態（たとえば缶詰または瓶詰の液体飲料）として予め包装してもよい。いくつかの実施形態では、粉末形態は、別の栄養素を供給するため食品または飲料に加えてもよい。ある種の実施形態では、栄養飲料は、たとえば、果実、野菜、ヨーグルト、乳汁および／またはアイスクリームと製剤化してもよい。いくつかの実施形態では、栄養サプリメントはスムージー状にしたものにブレンドする。特定の実施形態では、栄養飲料は、たとえば、タンパク質、ビタミン、ミネラル、酸化防止剤、プロバイオティクスおよび／またはプレバイオティクスで強化する。ある種の実施形態では、栄養飲料はラクトースフリーおよび／またはグルテンフリーである。いくつかの実施形態では、栄養サプリメントは有機サプリメントである。小児用栄養飲料の例として、ＰＥＤＩＡＳＵＲＥ（登録商標）、ＰＥＤＩＡＳＭＡＲＴ（登録商標）、およびＲＥＳＯＵＲＣＥ（登録商標）Ｊｕｓｔ  Ｆｏｒ  Ｋｉｄｓが挙げられる。成人用栄養飲料として、ＥＮＳＵＲＥ（登録商標）、ＢＯＯＳＴ（登録商標）、ＮＥＳＴＬＥ（登録商標）ＣＡＲＮＡＴＩＯＮ（登録商標）ＩＮＳＴＡＮＴ  ＢＲＥＡＫＦＡＳＴ（登録商標）、ＧＬＵＣＥＲＮＡ（登録商標）、ＧＬＹＴＲＯＬ（登録商標）、ＮＵＴＲＥＮ（登録商標）およびＰＥＰＴＡＭＥＮ（登録商標）が挙げられる。栄養サプリメントは、乳汁、豆乳および雌ウシ乳汁の両方（たとえば全脂、半脱脂または低脂肪、脱脂または無脂肪（たとえばＣｒａｖｅｎｄａｌｅ）、ラクトースフリー（たとえばＬＡＣＴＯＦＲＥＥ（登録商標）））をさらに含む。
【０１６９】
本明細書に記載の栄養サプリメントに含まれるＯＰＮ変異体の量は、ＯＰＮ変異体を含む医薬組成物に関する上述の量と同一または同様であってもよいが、より少ない量でも、あるいはより多い量でもよい。特定の実施形態では、栄養サプリメント中のＯＰＮ変異体の量は約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約１ｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、被検体は哺乳動物であってもよい。いくつかの実施形態では、被検体はマウス、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、ブタまたはウマでもよい一方、他の実施形態では、被検体はヒトである。
【０１７０】
本発明はその用途において、以下の説明に記載されたまたは図面に示した構成の詳細および構成要素の配置に限定されるものではない。本発明は、他の実施形態が可能であり、様々な方法で実施または実行することができる。さらに、本明細書に使用した表現および用語は、説明を目的としたものであり、限定するものと見なしてはならない。本明細書の「を含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、または「を有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「を含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「を含む（ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ）」、およびその変形は、その後に記載した項目およびその等価物のほか、追加項目を包含することを意図している。
【０１７１】
前述の特許、特許出願および参考文献は各々、特に本明細書に参照した教示内容について本明細書に援用する。
【０１７２】
本発明の少なくとも１つの実施形態のいくつかの態様について以上の通り記載してきたが、当業者であれば様々な変更、修正および改良に容易に想到することが理解されよう。こうした変更、修正および改良は本開示の一部であることを意図しており、本発明の精神および範囲内にあることを意図している。したがって、前述の記載および図面は単に例示に過ぎない。
【実施例】
【０１７３】
実施例１：腫瘍を持つ１２９Ｂ６Ｆ１マウスへのオステオポンチンの経口投与
ウシＯＰＮ調製物（Ｌａｃｐｒｏｄａｎ  ＯＰＮ−１０（登録商標）、Ａｒｌａ  Ｆｏｏｄｓ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ，Ｖｉｂｙ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を脱イオン水に溶解させ、濾過し、腫瘍を持つ１２９Ｂ６Ｆ１マウスに腫瘍細胞接種の当日（０日目）または５日後（５日目）の何れかから、０．０３ｍｇ／ｍｌ、０．１２ｍｇ／ｍｌまたは０．３ｍｇ／ｍｌの最終濃度で投与した。マウスに最初に５×１０４マイコプラズマ（ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）フリーｒａｓ形質転換２７５−３−２マウス線維芽細胞を接種した（Ｗｕ  ２０００を参照）。腫瘍の大きさをカリパスで測定し、腫瘍が動物の体重の２０％になるまでモニターし、その時点でマウスを屠殺し、組織／血漿サンプルを採取した。統計学的有意性は、１元配置分散分析と、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ  ｐｏｓｔ−ｔｅｓｔとを用いて計算した。
【０１７４】
腫瘍は最初に９日目に検出した。１９日目から、一部の腫瘍が非常に大きく増殖したのでマウスを屠殺する必要があった。実験は２５日目に終了した。図１Ａは、腫瘍注射時のＯＰＮ調製物の投与が腫瘍の大きさに１７日間大きな影響を与えなかったことを示す。腫瘍細胞の注射から５日後にＯＰＮ調製物の投与を開始しても、０．１２ｍｇ／ｍｌ群および０．３ｍｇ／ｍｌ群の両方においてそれぞれ１５日間および１７日間腫瘍の大きさに統計学的に有意な減少は認められなかった（図１ｂ）。図２は、１５日目、１７日目および１９日目の全群における腫瘍の大きさの比較を示す。有意差が示される。図３は、３回の独立した実験結果をまとめた、対照およびＯＰＮを与えたマウスの腫瘍の大きさの平均を示す。Ｎ＝３０（０ｍｇ／ｍｌのＯＰＮ調製物）または３２（０．３ｍｇ／ｍｌのＯＰＮ調製物）。
【０１７５】
これらの結果から、経口投与されたウシＯＰＮ調製物が癌腫瘍の増殖速度を抑制し、さらには腫瘍増殖を防止することができることが明確に示される。マウスに投与されたタンパク質の量、約１．５ｍｇは、その総タンパク質摂取量を大きく変化させるものではなく、本処置のマウス体重に対する影響もまったくない。したがって、本処置が腫瘍または関連する宿主細胞に対して特異的な作用を有し、腫瘍の増殖を遅延させると結論される。投薬実験からは、使用した最も高用量、０．３ｍｇ／ｍｌのＯＰＮ調製物が最も効果的であり、さらに高用量にすると、腫瘍増殖に対する効果が大きくなる可能性がある。
【０１７６】
実施例２：乳癌マウスモデルにおける、経口投与されたＯＰＮの原発腫瘍の増殖および転移に対する作用
４Ｔ１細胞は形質転換されたマウス乳腺上皮細胞（Ａｓｌａｋｓｏｎ  １９９２）であり、マウス乳腺への同所性注射後に転移性腫瘍を形成する（Ｌｅｌｅｋａｋｉｓ  １９９９）。この自然転移の形成（他の組織も含まれ得るが主に肺への）は、こうした細胞の重要な特徴であり、直接注射の転移モデルよりヒト癌における転移の発生を忠実に反映する。したがって、こうした細胞は悪性ヒト乳癌のモデルとして広く使用される。４Ｔ１細胞はまた、腫瘍の最大増殖に必要とされる高レベルのＯＰＮを発現する（Ｍｉ  ２００４）。
【０１７７】
Ａ．マウス腫瘍の発生。４Ｔ１細胞をＡＴＣＣから入手する。最初の実験においてＯＰＮの発現を確認し、細胞をマイコプラズマ（ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）について試験し、必要なら修正する。細胞を指数増殖中に回収し、洗浄し、１×１０５細胞を３６匹の同系Ｂａｌｂ／ｃマウスの乳腺脂肪織に注射する。マウスを３群に無作為に割り付け、腫瘍細胞注射から５日後、そのうち２群に０．３ｍｇ／ｍｌのＯＰＮ調製物を含む飲料水を投与する。４Ｔ１細胞はすぐに腫瘍を形成し、腫瘍は７〜１０日後に検出され、２５〜３０日までに最大腫瘍容積になると予想される。何れか１つの乳腺腫瘍が体重の２０％になるか、あるいは何らかの病変が検出されたら、対照マウスおよびＯＰＮを与えたマウスの１群（各群ｎ＝１２）を屠殺する。予想通り、ＯＰＮを与えた動物の原発腫瘍の増殖が抑制される場合、その腫瘍が体重の２０％になるまで、ＯＰＮを与えたマウスの第２の群を維持する。屠殺時に剖検を行い、転移部位を確認する。血液、腫瘍、肺および他の転移性組織を採取する。
【０１７８】
Ｂ．マウス組織の解析。低温保存、ホルムアルデヒド固定および生化学的解析のため、原発腫瘍を横方向の３つの切片に分ける。総転移量を判定するため肺を固定し、表面の小結節をカウントし、いくつかの肺切片の組織学的検査により総転移量を評価する。主要評価項目として、マウス１匹当たりの表面転移数を、ＯＰＮの経口投与に供したマウスと対照マウスとの間で比較する。原発腫瘍の増殖速度に差が見られれば、様々な腫瘍の血管密度および血管形態をＣＤ３１およびｖＷＦ染色により評価し、リンパ管密度をＬＹＶＥ−１に対して染色して評価する。時間が許せば、ＶＥＧＦシグナル伝達の状況を解析する。様々なＶＥＧＦアイソフォームの発現、ＶＥＧＦ受容体の発現およびそうした受容体のリン酸化のレベルをウエスタンブロットにより評価して、ＯＰＮの経口投与によりＶＥＧＦシグナル伝達が変化するという仮説を検証する。これらの解析を原発腫瘍および転移病変の両方で行う。
【０１７９】
Ｃ．予想される結果。我々の仮説および以前のデータから、ＯＰＮ変異体の経口投与が、４Ｔ１細胞を注射したマウスの原発性乳腺腫瘍の増殖を抑制することが示唆される。もしこの通りであり、ＯＰＮを与えたマウスの対応する総転移量が減少すれば、ＯＰＮを与えたマウスの別の群を設定し、腫瘍を対照腫瘍と同じ大きさに増殖させ、その時点でマウスを屠殺し、総転移量を判定する。これらの動物に対照と比較して転移数の減少が見られれば、ＯＰＮの経口投与が転移に直接作用すると結論される。我々は、ＯＰＮ変異体の経口投与の結果、ＶＥＧＦシグナル伝達経路の活性の増強に伴い、血管の大きさが増大し得ると予想する。
【０１８０】
実施例３：腫瘍におけるＯＰＮレベルの判定
本例は、腫瘍のＯＰＮレベルをどのように判定するかについて記載する。
【０１８１】
サンプル調製：
当該腫瘍のサンプルを採取し、その後急速凍結し、プロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｃａｔ＃  ０５  ８９２  ７９１  ００１）の存在下でホモジナイズする（約５０ｍｇの腫瘍サンプル／０．２５ｍｌの緩衝液を含むＣｅｌｌ  Ｌｙｓｉｓ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，ｃａｔ＃  ９８０３）。均質化は、プラスチック製乳鉢を用いて１．８ｍｌのエッペンドルフチューブにて氷上で３０秒〜１分間行う。
【０１８２】
総タンパク質の判定：
腫瘍抽出物のタンパク質濃度を、ビシンコニン酸（ＢＣＡ）アッセイキット（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃａｔ＃  ２３２２７）を用いて判定する。
【０１８３】
ＯＰＮレベルの判定：
ＯＰＮレベル組織抽出物は、血液サンプルを採取する被検体に固有の組換えＯＰＮに対して作製された抗体を用いてＥＬＩＳＡにより判定する。
【０１８４】
ヒト被験者の場合には、ヒト血清ＯＰＮに対するモノクローナル抗体を使用すべきである。たとえば製造者の指示に従い、Ａｓｓａｙ  Ｄｅｓｉｇｎｓ  Ｋｉｔ（Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃａｔ＃  ＡＤＩ−９００−１４２）を使用してもよい。本アッセイは、２〜３２ｎｇ／ｍｌの様々な濃度の精製された組換えヒトＯＰＮの対照サンプルで較正する。
【０１８５】
マウス被検体の場合には、マウス血清ＯＰＮに対するモノクローナル抗体を使用すべきである。たとえば製造者の指示に従い、Ｍｏｕｓｅ  Ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ＥＬＩＳＡ  Ｄｕｏｓｅｔ  Ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｃａｔ＃  ＤＹ４４１）を使用してもよい。本アッセイは、３１〜１０００ｐｇ／ｍｌの様々な濃度の精製された組換えマウス血清ＯＰＮの対照サンプルで較正する。
【０１８６】
得られた腫瘍中のＯＰＮレベルは、腫瘍サンプル中の総タンパク質１マイクログラム当たりのＯＰＮのナノグラムで示される。
【０１８７】
実施例４：血漿中のＯＰＮの濃度の判定
本例は、血漿中のＯＰＮの濃度をどのように判定するかについて記載する。
【０１８８】
サンプル調製：
血漿は、血液１ｍＬ当たり１．８ｍｇのＮａ−ＥＤＴＡの存在下で、被検体から採取した血液から調製する。
【０１８９】
ＯＰＮ濃度の判定：
ＯＰＮの濃度は、血液サンプルを採取する被検体に固有の組換えＯＰＮに対して作製されたモノクローナル抗体を用いてＥＬＩＳＡにより判定する。
【０１９０】
ヒト被験者の場合には、ヒト血清ＯＰＮに対するモノクローナル抗体を使用すべきである。たとえば製造者の指示に従い、Ａｓｓａｙ  Ｄｅｓｉｇｎｓ  Ｋｉｔ（Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃａｔ＃  ＡＤＩ−９００−１４２）を使用してもよい。正常ヒト血漿中のＯＰＮのレベルは１４〜４５ｎｇ／ｍｌの範囲である。本アッセイは、２〜３２ｎｇ／ｍｌの様々な濃度の精製された組換えヒトＯＰＮの対照サンプルで較正する。
【０１９１】
マウス被検体の場合には、マウス血清ＯＰＮに対するモノクローナル抗体を使用すべきである。たとえば製造者の指示に従い、Ｍｏｕｓｅ  Ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ＥＬＩＳＡ  Ｄｕｏｓｅｔ  Ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ），Ｃａｔ＃  ＤＹ４４１）を使用してもよい。本アッセイは、３１〜１０００ｐｇ／ｍｌの様々な濃度の精製された組換えマウス血清ＯＰＮの対照サンプルで較正する。
【０１９２】
得られた血漿中のＯＰＮレベルは、血漿１ｍＬ当たりのＯＰＮのナノグラムで示される。
【０１９３】
参考文献
Ａｓｌａｋｓｏｎ  １９９２：Ａｓｌａｋｓｏｎ，Ｃ．Ｊ．，ａｎｄ  Ｍｉｌｌｅｒ，Ｆ．Ｒ．（１９９２）．Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｅｖｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｐｒｏｃｅｓｓ  ｄｅｆｉｎｅｄ  ｂｙ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌ  ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ａ  ｍｏｕｓｅ  ｍａｍｍａｒｙ  ｔｕｍｏｒ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ５２，１３９９−１４０５
Ａｎｂｏｒｇｈ  ２００９：Ａｎｂｏｒｇｈ，Ｐ．Ｈ．，Ｗｉｌｓｏｎ，Ｓ．Ｍ．，Ｔｕｃｋ，Ａ．Ｂ．，Ｗｉｎｑｕｉｓｔ，Ｅ．，Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｎ．，Ｈａｒｔ，Ｒ．，Ｋｏｎ，Ｓ．，Ｍａｅｄａ，Ｍ．，Ｕｅｄｅ，Ｔ．，Ｓｔｉｔｔ，Ｌ．Ｗ．，ｅｔ  ａｌ．（２００９）．Ｎｅｗ  ｄｕａｌ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ＥＬＩＳＡ  ｆｏｒ  ｍｅａｓｕｒｉｎｇ  ｐｌａｓｍａ  ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ａｓ  ａ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ：ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ＥＬＩＳＡｓ．Ｃｌｉｎ  Ｃｈｅｍ  ５５，８９５−９０３
Ｂｕｔｌｅｒ  １９９６：Ｂｕｔｌｅｒ  Ｗ  Ｔ，ｅｔ  ａｌ．１９９６．Ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ．Ｉｎ  Ｂｉｌｅｚｅｋｉａｎ  Ｊ  Ｐ，Ｒａｉ  Ｌ  Ｇ，Ｒｏｄａｎ  Ｇ  Ａ（ｅｄｓ．）Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  ｂｏｎｅ  ｂｉｏｌｏｇｙ．Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．，ｐｐ．１６７−１８１
Ｄｅｎｈａｒｄｔ  １９９５：Ｄｅｎｈａｒｄｔ  Ｄ  Ｔ，ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．）１９９５．Ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ：ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｃｅｌｌ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ａｎｄ  ａｄｈｅｓｉｏｎ．Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，７６０
Ｆｅｎｇ  ２０００：Ｆｅｎｇ，Ｆ．，ａｎｄ  Ｒｉｔｔｌｉｎｇ，Ｓ．Ｒ．（２０００）．Ｍａｍｍａｒｙ  ｔｕｍｏｒ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｉｎ  ＭＭＴＶ−ｃ−ｍｙｃ／ＭＭＴＶ−ｖ−Ｈａ−ｒａｓ  ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｉｃｅ  ｉｓ  ｕｎａｆｆｅｃｔｅｄ  ｂｙ  ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．Ｔｒｅａｔ．６３，７１−７９
Ｆｒａｎｚｅｎ  １９８５：Ｆｒａｎｚｅｎ  Ａ，Ｈｅｉｎｅｇ  １９８５．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．２３２：７１５−７２４
Ｌｅｌｅｋａｋｉｓ  １９９９：Ｌｅｌｅｋａｋｉｓ，Ｍ．，Ｍｏｓｅｌｅｙ，Ｊ．Ｍ．，Ｍａｒｔｉｎ，Ｔ．Ｊ．，Ｈａｒｄｓ，Ｄ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｅ．，Ｈｏ，Ｐ．，Ｌｏｗｅｎ，Ｄ．，Ｊａｖｎｉ，Ｊ．，Ｍｉｌｌｅｒ，Ｆ．Ｒ．，Ｓｌａｖｉｎ，Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９９）．Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｏｒｔｈｏｔｏｐｉｃ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ｔｏ  ｂｏｎｅ．ＣｌｉｎＥｘｐＭｅｔａｓｔａｓｉｓ  １７，１６３−１７０
Ｍｉ  ２００４：Ｍｉ，Ｚ．，Ｇｕｏ，Ｈ．，Ｗａｉ，Ｐ．Ｙ．，Ｇａｏ，Ｃ．，Ｗｅｉ，Ｊ．，ａｎｄ  Ｋｕｏ，Ｐ．Ｃ．（２００４）．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃａｌｌｙ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｓｕｂｃｌｏｎｅｓ  ｏｆ  ｍｕｒｉｎｅ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｂｅｈａｖｉｏｒ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７９，４６６５９−４６６６７
Ｎｅｌｓｏｎ  ２００５：Ｎｅｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌｕｍｅ  １４３，Ｎｕｍｂｅｒ  ５，６  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２００５，ｐ．３６２−３７９
Ｒｉｔｔｌｉｎｇ  １９９７：Ｒｉｔｔｌｉｎｇ，Ｓ．Ｒ．，ａｎｄ  Ｎｏｖｉｃｋ，Ｋ．Ｅ．（１９９７）．Ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｍａｍｍａｒｙ  ｇｌａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ．Ｃｅｌｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ８，１０６１−１０６９
Ｒｉｔｔｌｉｎｇ  ２００２：Ｒｉｔｔｌｉｎｇ，Ｓ．Ｒ．，Ｃｈｅｎ，Ｙ．，Ｆｅｎｇ，Ｆ．，ａｎｄ  Ｗｕ，Ｙ．（２００２）．Ｔｕｍｏｒ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ｉｓ  ｓｏｌｕｂｌｅ，ｎｏｔ  ｍａｔｒｉｘ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７７，９１７５−９１８２
Ｓｅｎｇｅｒ  １９８８：Ｓｅｎｇｅｒ  Ｄ  Ｒ，ｅｔ  ａｌ．１９８８．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４８：５７７０−５７７４
Ｓｏｒｅｎｓｅｎ  １９９４：Ｓｏｒｅｎｓｅｎ  Ｅ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．１９９４．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉ．４：２０４０−２０４９
Ｔｏｍａｙｋｏ  １９８９：Ｔｏｍａｙｋｏ  ａｎｄ  Ｒｅｙｎｏｌｄｓ；Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（１９８９），Ｖｏｌ．２４，Ｎｏ．３，ｐ．１４８−１５４
Ｔｕｃｋ  １９９８：Ｔｕｃｋ，Ａ．Ｂ．，Ｏ’Ｍａｌｌｅｙ，Ｆ．Ｐ．，Ｓｉｎｇｈａｌ，Ｈ．，Ｈａｒｒｉｓ，Ｊ．Ｆ．，Ｔｏｎｋｉｎ，Ｋ．Ｓ．，Ｋｅｒｋｖｌｉｅｔ，Ｎ．，Ｓａａｄ，Ｚ．，Ｄｏｉｇ，Ｇ．Ｓ．，ａｎｄ  Ｃｈａｍｂｅｒｓ，Ａ．Ｆ．（１９９８）．Ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ａ  ｇｒｏｕｐ  ｏｆ  ｌｙｍｐｈ  ｎｏｄｅ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  ７９，５０２−５０８
Ｗｕ  ２０００：Ｗｕ，Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ（２０００）８３：１５６−１６３
【図１ａ】
2015500836.tif 000002
【図１ｂ】
2015500836.tif 000003
【図２ａ】
2015500836.tif 000004
【図２ｂ】
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【図２ｃ】
2015500836.tif 000006
【図３】
2015500836.tif 000007
【配列表】
2015500836000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成25年11月15日(2013.11.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌の処置または防止に使用されるＯＰＮ変異体において、
配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含む
ことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項２】
請求項１に記載のＯＰＮ変異体において、前記癌腫瘍は高レベルのＯＰＮを有することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項３】
請求項１または２に記載のＯＰＮ変異体において、前記処置または防止は経口投与によることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項４】
請求項１乃至３の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記処置または防止は非経口投与、たとえば静脈内投与または腹腔内投与によることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項５】
請求項１乃至４の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、腫瘍細胞の増殖または複製を抑制することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項６】
請求項１乃至５の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、腫瘍増殖を抑制することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項７】
請求項１乃至６の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、腫瘍細胞の増殖または複製を防止することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項８】
請求項１乃至７の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、腫瘍増殖を防止することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項９】
請求項１乃至８の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有する被検体の転移のリスクを低下させることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１０】
請求項１乃至９の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有する被検体の転移を防止することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１１】
請求項１乃至１０の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、処置される前記被検体は、高レベルのＯＰＮを有する少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１２】
請求項１乃至１１の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記癌腫瘍を有する前記被検体は、その血漿中に高濃度のＯＰＮを有することを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１３】
請求項１乃至１２の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体が投与される前記被検体は、少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を発症するリスクが高いことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１４】
請求項１乃至１３の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、処置される前記被検体の約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約５ｇ／ｋｇ体重の範囲の１日投与量で投与されることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１５】
請求項１乃至１４の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として少なくとも１０％（ｗ／ｗ）のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含むことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１６】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１０〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲の活性ＯＰＮ分子、および前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１０〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含むことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１７】
請求項１乃至１６の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として１０〜４０％（ｗ／ｗ）の範囲の活性ＯＰＮ分子、および前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として６０〜９０％（ｗ／ｗ）の範囲のＯＰＮ分子の活性フラグメントを含むことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１８】
請求項１乃至１７の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、前記ＯＰＮ変異体の総重量に対して総量として少なくとも１０％（ｗ／ｗ）の活性ＯＰＮ分子を含むことを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項１９】
請求項１乃至１８の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、ウシ乳汁から単離されることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項２０】
請求項１乃至１９の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、配列番号１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／または配列番号１の１７〜１６３番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントであることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項２１】
請求項１乃至２０の何れか１項に記載のＯＰＮ変異体において、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するＯＰＮ分子の活性フラグメントであることを特徴とするＯＰＮ変異体。
【請求項２２】
癌を処置または防止する方法において、癌を有する被検体または癌になるリスクがある被検体に、前記癌を処置または防止するのに効果的な量のＯＰＮ変異体を投与するステップ、ただし前記癌は少なくとも１つの癌腫瘍を含む、前記投与するステップを含み、
前記ＯＰＮ変異体は、配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含む
ことを特徴とする方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の癌を処置または防止する方法において、前記癌を有する被検体または前記癌になるリスクがある被検体に、腫瘍細胞の増殖または複製を抑制するのに効果的な量のＯＰＮ変異体を投与するステップを含み、前記ＯＰＮ変異体は、配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含むことを特徴とする方法。
【請求項２４】
少なくとも１つの癌腫瘍を含む癌を有する被検体において転移のリスクを低下させるまたは転移を防止する方法において、転移の前記リスクを低下させるまたは転移を防止するのに効果的な量のＯＰＮ変異体を前記被検体に投与するステップを含み、
前記ＯＰＮ変異体は、配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含む
ことを特徴とする方法。
【請求項２５】
−配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含むＯＰＮ変異体、および
−薬学的に許容されるキャリア
を含む医薬組成物において、
抗癌剤を含む１種または複数種の別の治療薬（単数または複数）をさらに含むこと
を特徴とする医薬組成物。
【請求項２６】
請求項２５に記載の医薬組成物において、経口投与、舌下投与、口腔内投与、経鼻投与または静脈内投与用に製剤化されることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２７】
−配列番号１または配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する活性ＯＰＮ分子、および／またはＯＰＮ分子の活性フラグメントであって、配列番号１の１７〜１６３番目の配列または配列番号２の１７〜１７０番目の配列に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するフラグメントを含む栄養学的に有効な量のＯＰＮ変異体、および
−炭水化物源、脂質源およびタンパク源からなる群から選択される１種または複数種の成分
を含むことを特徴とする栄養サプリメント。
【国際調査報告】
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2015500836.tif 000009
2015500836.tif 000010
2015500836.tif 000011