(57)【要約】狂犬病ワクチンの効力を、ＴＬＲアゴニスト（好ましくは、ＴＬＲ７アゴニスト）と不溶性金属塩（好ましくは、アルミニウム塩）との混合物を使用して狂犬病ウイルス免疫原をアジュバント化することによって増強することができる。ＴＬＲアゴニストを、典型的には、金属塩に吸着させる。狂犬病ウイルス免疫原を金属塩に吸着させることもできる。したがって、本発明は、（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ヒトＴＬＲ７アゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物。
【請求項２】
（ｉ）不溶性アルミニウム塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物。
【請求項３】
（ｉ）水酸化アルミニウムアジュバント、（ｉｉ）該水酸化アルミニウムに吸着した化合物「Ｋ２」またはその薬学的に許容され得る塩、および（ｉｉｉ）不活化狂犬病ウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項４】
（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物であって、該組成物のｐＨが６と８との間である、免疫原性組成物。
【請求項５】
（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原、および（ｉｖ）例えば、ｐＫａが５〜９の範囲のｐＨ緩衝液を含む免疫原性組成物。
【請求項６】
前記金属塩が水酸化アルミニウムなどのアルミニウム塩である、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
Ａｌ＋＋＋濃度が１０〜５００μｇ／ｍｌである請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
８０％超の前記ＴＬＲアゴニストが前記不溶性金属塩に吸着している、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
前記ＴＬＲアゴニストがＴＬＲ７アゴニストである、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＴＬＲアゴニストが前記不溶性金属塩に吸着している、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
前記ＴＬＲアゴニストおよび前記狂犬病免疫原の両方が前記金属塩に吸着している、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記ＴＬＲアゴニストが、本明細書中の式「Ｋ」の化合物またはその薬学的に許容され得る塩である、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
前記ＴＬＲアゴニストが化合物Ｋ２である、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、（ａ）凍結乾燥されていないか、（ｂ）水性形態であるが、凍結乾燥物の水による再構成によって調製されない、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
前記組成物が、（ａ）ジサッカライドを含まないか、（ｂ）２０ｍｇ／ｍｌ未満のジサッカライドを有する、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物がポリゲリンを含まない、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１７】
前記組成物がヒトアルブミンを含まない、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１８】
前記組成物が抗生物質を含まない、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１９】
前記ＴＬＲアゴニストが、不溶性金属塩に吸着可能な少なくとも１つの吸着性部分を含む、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項２０】
前記吸着性部分がホスフェートまたはホスホネートである、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記ＴＬＲアゴニストが、本明細書に定義の式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）、（Ｇ）、（Ｈ）、（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｊ）、または（Ｋ）を有する、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項２２】
前記ＴＬＲアゴニストが、国際公開２０１２／０３１１４０号に定義の化合物１〜１０２のうちの１つまたはその薬学的に許容され得る塩である、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項２３】
ヒスチジン緩衝液を含む前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項２４】
ｐＨが６．１と７．９との間である、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
【請求項２５】
被験体における免疫応答を引き起こす方法であって、該被験体に前記請求項のいずれかに記載の組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２６】
前記請求項のいずれかに記載の免疫原性組成物を調製するための方法であって、前記方法が、不溶性金属塩、ＴＬＲアゴニスト、および狂犬病ウイルス免疫原を混合する工程を含む、方法。この方法により、上記の免疫原性組成物を得ることができる。
【請求項２７】
免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）狂犬病ウイルス免疫原をＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩を含む混合物と組み合わせる工程；（ｉｉ）不溶性金属塩をＴＬＲアゴニストおよび狂犬病ウイルス免疫原を含む混合物と組み合わせる工程；または（ｉｉｉ）ＴＬＲアゴニストを不溶性金属塩および狂犬病ウイルス免疫原を含む混合物と組み合わせる工程のうちの１つを含む、方法。
【請求項２８】
免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストと可溶性アルミニウム塩との水性混合物を調製し、次いで、該ＴＬＲアゴニストが吸着した沈殿アルミニウム塩を形成するために非アルミニウム塩を該水性混合物に添加する工程；および（ｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を該沈殿塩およびその吸着アゴニストと混合する工程を含む、方法。
【請求項２９】
免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストと可溶性アルミニウム塩との水性混合物を（ｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原の緩衝化水性混合物と混合する工程であって、前記混合する工程により、該ＴＬＲアゴニストおよび該免疫原が吸着したアルミニウム塩が沈殿する、混合する工程を含む、方法。本発明はまた、この方法によって得られるか得ることができる免疫原性組成物を提供する。
【請求項３０】
滅菌免疫原性組成物を調製する方法であって、（ｉ）狂犬病ウイルス免疫原を（ｉｉ）ＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩の滅菌複合体と組み合わせる工程を含む、方法。滅菌複合体を、（ａ）ＴＬＲアゴニストと不溶性金属塩とを混合し、その結果、該ＴＬＲアゴニストが該不溶性金属塩に吸着して該複合体を形成する工程；および（ｂ）該複合体を滅菌する工程を含む方法によって調製することができる。
【請求項３１】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載の組成物を調製するための請求項２６〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
（ａ）不溶性金属塩に吸着した第１のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；（ｂ）不溶性金属塩に吸着した第２のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；および（ｃ）狂犬病ウイルス免疫原を含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１２年３月７日に出願された米国特許仮出願第６１／６０７，９７５号の利益を請求し、その完全な内容は、全ての目的について本明細書中に参照として組み込まれる。
【０００２】
本発明は、狂犬病ウイルスワクチン分野にある。
【背景技術】
【０００３】
ＲＡＢＡＶＥＲＴとしても公知の製品名ＲＡＢＩＰＵＲは、狂犬病ウイルスに対するヒトワクチンである（１）。このワクチン中の免疫原は不活化狂犬病ウイルスである。このウイルスは精製ニワトリ胚細胞（ＰＣＥＣ）で成長させ、β−プロピオラクトンを使用して不活化される。各用量は、世界保健機関の要件に従って少なくとも２．５ＩＵの不活化狂犬病ウイルス（Ｆｌｕｒｙ  ＬＥＰ株）を含み、アジュバント化されていない。ワクチンは、滅菌水（１ｍｌ／用量）で再構成し、その後に筋肉内または皮内のいずれかで注射するための凍結乾燥粉末として供給される。このワクチンを、（ｉ）曝露前ワクチンとして感染リスクのある患者に通常は３〜４週間にわたって３用量で投与するか、（ｉｉ）暴露後ワクチンとして通常は３〜４週間にわたって４〜５用量で投与するか、（ｉｉｉ）追加免疫ワクチンとして、早期免疫化の１年後に最初に投与するが、その後２〜５年毎に投与する。特に重篤な暴露後ワクチン接種状況において、被験体は抗狂犬病免疫グロブリン（例えば、２０ＩＵのヒト抗狂犬病Ｉｇ）の投与を受けることもできる。
【０００４】
他のヒト狂犬病ワクチンには、ＲＡＢＩＶＡＣ（ヒト二倍体細胞で成長させたウイルスから調製）、ＶＡＸＩＲＡＢ（精製アヒル胚細胞を使用して調製）、およびベロ細胞培養で増殖したウイルスから調製した種々の製品（例えば、ＶＥＲＯＲＡＢ（２）、ＩＭＯＶＡＸ、ＣＨＥＮＧＤＡ）が挙げられる。これらは、しばしば、製品名ＲＡＢＩＰＵＲと類似の方法で使用される。例えば、製品名ＶＥＲＯＲＡＢを、β−プロピオラクトンで不活化し、凍結乾燥物として処方し、非アジュバント化形態で投与し、その曝露前レジメン、暴露後レジメン、および追加免疫レジメンはＲＡＢＩＰＵＲのレジメンに類似する。
【０００５】
ウシワクチンは、アブリジンを使用するか使用しないで水酸化アルミニウムでアジュバント化されており（３）、狂犬病ウイルス糖タンパク質に基づいた動物用の製品名ＲＡＢＩＳＩＮは用量あたり１．７ｍｇの水酸化アルミニウムを含むが、ヒト狂犬病ワクチンは典型的にはアジュバント化されない。ＢｉｏＰｏｒｔ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎのＲＶＡヒトワクチンはアルミニウム塩アジュバントに吸着していたが（４）、文献５ではヒト狂犬病ワクチンがアルミニウムアジュバントを含むべきかどうかが問われており、含むことが有利でないことが見出された。したがって、筆者は、ヒトでの使用のためにはアルミニウムベースのアジュバントを狂犬病ワクチンから排除することを推奨していた。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｖｏｄｏｐｉｊａ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９９）  Ｖａｃｃｉｎｅ  １７：１７３９−４１．
【非特許文献２】Ｔｏｏｖｅｙ  （２００７）  Ｔｒａｖｅｌ  Ｍｅｄ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  ５：３２７−４８．
【非特許文献３】Ｃｏｒｔｅｓ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９３）  Ｒｅｖ．  ｓｃｉ．  ｔｅｃｈ．  Ｏｆｆ．  ｉｎｔ．  Ｅｐｉｚ．  １２：９４１−５５．
【非特許文献４】Ｂｅｒｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９０）  Ａｍ  Ｊ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  ８０：４７６−８．
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
発明の開示
本発明の目的は、ヒトでの使用に適切なさらに改良された狂犬病ワクチンを提供すること、特に、既存のワクチンに伴う困難を克服するワクチンを提供することである。
【０００８】
既存のヒトワクチンに関連する１つの問題は、数週間にわたって複数回投与を必要とすることが認識されていないことである。曝露前使用について、しばしば、曝露リスクの４週間前未満（例えば、海外旅行の４週間前未満）にワクチン接種レジメンが開始され、したがって、完全なレジメンが不完全なままである。曝露後使用について、しばしば、完全レジメン（特に５用量レジメン）が完了されない。したがって、これらの状況では、患者は、ワクチンの利点を完全に受けず、狂犬病から防御し得ない。
【０００９】
現在のワクチンに関するさらなる問題は、これらのワクチンによって長期間持続する防御が得られず、したがって、およそ５年毎に追加免疫を必要とすることである。
【００１０】
さらに、狂犬病ワクチンの信頼できる供給能力は制限されており、例えば、２００８年の終わり頃では、米国における供給不足は深刻であった。
【００１１】
最後に、既存のワクチンは比較的高レベルの抗生物質が残存し、これらが安全であるとしても、一般的な製品純度という点で望ましくない。
【００１２】
本発明者は、適切にアジュバント化されたワクチンの使用によってこれらの全ての問題に取り組むことができることを理解している。いくつかのアジュバントは、より高い免疫力価を提供することができ、この力価をより迅速に達成することができるので、より短期のタイムスケールでのより少数の用量を使用して良好な防御を得ることができる。同様に、アジュバントは持続性応答を得ることができるので、頻繁に追加免疫する必要性が回避される。最後に、アジュバントの使用によって免疫原性は等価であるがより少ない抗原を含むワクチンを得ることができ、したがって、一定量のウイルスからより個別的な用量が得られ、最終ワクチン中の抗生物質の使用量も少なくなる。
【００１３】
これらの目的を達成するために、狂犬病ワクチンを、ＴＬＲアゴニストと不溶性金属塩との混合物でアジュバント化することができる。ＴＬＲアゴニストを、典型的には、文献６に開示のように金属塩に吸着させ、狂犬病ウイルス抗原を金属塩に吸着させることもできる。
したがって、本発明は、（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物を提供する。組成物は、好ましくは、１つ以上の以下の特徴を有する。
−金属塩は、水酸化アルミニウムなどのアルミニウム塩である。
−ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ７アゴニスト、理想的には、ヒトＴＬＲ７のアゴニストである。
−ＴＬＲアゴニストを、不溶性金属塩に吸着させ、理想的には、少なくとも５０％のＴＬＲアゴニストが吸着されている。
−ＴＬＲアゴニストおよび狂犬病免疫原を共に金属塩に吸着させ、理想的には、少なくとも５０％のＴＬＲアゴニストおよび少なくとも５０％の免疫原が吸着されている。
−ＴＬＲアゴニストは、本明細書中の式「Ｋ」の化合物であり、理想的には、化合物「Ｋ２」またはその薬学的に許容され得る塩である。
−組成物は凍結乾燥されておらず、凍結乾燥物の水性再構成によって調製されない。
−組成物は、分配させるために水性形態で製剤化されている。
−組成物は、ジサッカライド（例えば、スクロース）を含まないか、２０ｍｇ／ｍｌ未満のジサッカライド（例えば、スクロース）を有する。
−組成物は、ポリゲリン（尿素と分解ゼラチン由来のポリペプチドとの架橋ポリマー）が存在しない。
−組成物は、ネオマイシン、クロルテトラサイクリン、および／またはアンホテリシンＢのうちの少なくとも１つが存在せず、好ましくは、抗生物質が存在しない。
−組成物を、単位用量あたり２．５ＩＵ未満（例えば、０．５ｍｌの投薬体積について５ＩＵ／ｍｌ未満または１ｍｌの投薬体積について２．５ＩＵ／ｍｌ未満）含む。
−組成物を、以下に考察するように、迅速な投与レジメンで投与する。
−組成物を、０．０５ｍｌと０．９ｍｌとの間の投薬体積（例えば、０．１ｍｌまたは０．５ｍｌの投薬体積）で投与する。
−組成物の重量オスモル濃度が２００ｍＯｓｍ／ｋｇと４００ｍＯｓｍ／ｋｇとの間である。
−組成物はヒトアルブミンを含まない。
−狂犬病ウイルス免疫原を、Ｖｅｒｏ細胞またはＭＲＣ−５細胞中で産生させる。
【００１４】
例えば、本発明は、以下を提供する。
−（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ヒトＴＬＲ７アゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物。
−（ｉ）不溶性アルミニウム塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物。
−（ｉ）水酸化アルミニウムアジュバント、（ｉｉ）前記水酸化アルミニウムに吸着した化合物「Ｋ２」またはその薬学的に許容され得る塩、および（ｉｉｉ）不活化狂犬病ウイルスを含む免疫原性組成物。
【００１５】
本発明はまた、（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物であって、前記組成物のｐＨが６と８との間である、免疫原性組成物を提供する。
【００１６】
本発明はまた、（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原、および（ｉｖ）例えば、ｐＫａが５〜９の範囲のｐＨ緩衝液を含む免疫原性組成物を提供する。
【００１７】
本発明はまた、（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物であって、前記組成物が抗生物質を含まない、免疫原性組成物を提供する。
【００１８】
本発明はまた、（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）５ＩＵ／ｍｌ未満の濃度（例えば、２．５ＩＵ／ｍｌ未満の濃度）の狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物を提供する。
【００１９】
本発明はまた、（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含み、狂犬病ウイルス免疫原の濃度が単位用量あたり２．５ＩＵ未満である単位用量形態の免疫原性組成物を提供する。
【００２０】
本発明はまた、免疫原性組成物を調製するための方法であって、前記方法が、不溶性金属塩、ＴＬＲアゴニスト、および狂犬病ウイルス免疫原を混合する工程を含む、方法を提供する。この方法により、上記の免疫原性組成物を提供することができる。
【００２１】
本発明はまた、免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）狂犬病ウイルス免疫原をＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩を含む混合物と組み合わせる工程；（ｉｉ）不溶性金属塩をＴＬＲアゴニストおよび狂犬病ウイルス免疫原を含む混合物と組み合わせる工程；または（ｉｉｉ）ＴＬＲアゴニストを不溶性金属塩および狂犬病ウイルス免疫原を含む混合物と組み合わせる工程のうちの１つを含む、方法を提供する。
【００２２】
本発明はまた、（ａ）不溶性金属塩に吸着した第１のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；（ｂ）不溶性金属塩に吸着した第２のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；および（ｃ）狂犬病ウイルス免疫原を含む組成物を提供する。
【００２３】
本発明はまた、免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストと可溶性アルミニウム塩との水性混合物を調製し、前記ＴＬＲアゴニストが吸着した沈殿アルミニウム塩を形成するために非アルミニウム塩を前記水性混合物に添加する工程；および（ｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を前記沈殿塩およびその吸着アゴニストと混合する工程を含む、方法を提供する。
【００２４】
本発明はまた、免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストと可溶性アルミニウム塩との水性混合物を（ｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原の緩衝化水性混合物と混合する工程であって、前記混合する工程により、前記ＴＬＲアゴニストおよび免疫原が吸着したアルミニウム塩が沈殿する、方法を提供する。本発明はまた、この方法によって得られるか得ることができる免疫原性組成物を提供する。
【００２５】
本発明はまた、滅菌免疫原性組成物を調製する方法であって、（ｉ）狂犬病ウイルス免疫原を（ｉｉ）ＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩の滅菌複合体と組み合わせる工程を含む、方法を提供する。滅菌複合体を、（ａ）ＴＬＲアゴニストと不溶性金属塩とを混合し、その結果、前記ＴＬＲアゴニストが前記不溶性金属塩に吸着して複合体を形成する、混合する工程；および（ｂ）前記複合体を滅菌する工程を含む方法によって調製することができる。オートクレーブ（または類似の手順（７））によって都合よく滅菌を達成することができる。代替法として、滅菌複合体を、（ａ）ＴＬＲアゴニストの溶液または懸濁液を滅菌し、（ｂ）滅菌した溶液または懸濁液を滅菌不溶性金属塩と組み合わせること；または（ａ）不溶性金属塩を滅菌し、（ｂ）滅菌した不溶性金属塩をＴＬＲアゴニストの滅菌溶液または滅菌懸濁液と組み合わせること；または（ａ）ＴＬＲアゴニストの滅菌溶液または滅菌懸濁液を（ｂ）滅菌不溶性金属塩と組み合わせることによって調製することができる。ＴＬＲアゴニスト溶液／懸濁液を濾過滅菌によって都合よく滅菌を達成することができ、この材料を濃縮形態で調製することができる。不溶性金属塩を、オートクレーブによって都合よく滅菌を達成することができる。滅菌不溶性金属塩は、典型的には、水性懸濁液である。
【００２６】
本発明はまた、組成物を、（ａ）たった１用量または２用量で曝露前に防御されるように投与するか；（ｂ）たった１、２、または３用量で曝露後に防御されるように投与するか、（ｃ）１週間以内に個別の３用量によって投与する本発明の免疫原性組成物の投与のための投与レジメンを提供する。
不溶性金属塩
【００２７】
ＴＬＲアゴニストを不溶性金属塩に吸着させて、狂犬病ウイルス免疫原のアジュバント化のための吸着複合体を形成することができる。例えば、ＴＬＲアゴニストを、不溶性カルシウム塩（例えば、リン酸カルシウム）または、好ましくは、不溶性アルミニウム塩に吸着させることができる。かかるアルミニウム塩は、ワクチンにおける長い使用歴がある。
【００２８】
有用なアルミニウム塩には、水酸化アルミニウムおよびリン酸アルミニウムアジュバントが含まれるが、これらに限定されない。かかる塩は、例えば、文献８の第８章および第９章に記載されている。水酸化物イオンを含むアルミニウム塩は、これらの水酸化物イオンがリガンド交換を容易に受け得るので、本発明で使用するのに好ましい不溶性金属塩である。したがって、ＴＬＲアゴニストの吸着のための好ましい塩は、水酸化アルミニウムおよび／またはヒドロキシリン酸アルミニウムである。これらは、リン含有基（例えば、リン酸基、ホスホン酸基）とのリガンド交換を容易に受けて安定した吸着を提供することができる表面ヒドロキシル部分を有する。水酸化アルミニウムアジュバントが最も好ましい。
【００２９】
「水酸化アルミニウム」として一般に公知のアジュバントは、典型的には、通常少なくとも部分的に結晶性であるオキシ水酸化アルミニウム塩である。式ＡｌＯ（ＯＨ）で表すことができるオキシ水酸化アルミニウムを、赤外（ＩＲ）分光学、特に、１０７０ｃｍ−１での吸収バンドおよび３０９０〜３１００ｃｍ−１での強いショルダーの存在によって他のアルミニウム化合物（水酸化アルミニウムＡｌ（ＯＨ）３など）と区別することができる（文献８の第９章）。水酸化アルミニウムアジュバントの結晶化度は、半分の高さの回折バンドの幅（ＷＨＨ）に反映され、不完全結晶性粒子は、より小さな結晶サイズに起因するより大きな線幅拡大を示す。ＷＨＨが増加するにつれて表面積が増加し、より高いＷＨＨ値を有するアジュバントは、抗原吸着能がより高いことが認められている。繊維状の形態（例えば、透過型電子顕微鏡写真からわかるように）は、水酸化アルミニウムアジュバントに典型的であり、例えば、直径約２ｎｍの針状粒子を有する。水酸化アルミニウムアジュバントのｐＩは、典型的には、約１１である（すなわち、アジュバント自体は、生理学的ｐＨで正の表面電荷を有する）。水酸化アルミニウムアジュバントについて、ｐＨ７．４で１ｍｇのＡｌ＋＋＋あたり１．８〜２．６ｍｇタンパク質の吸着能が報告されている。
【００３０】
「リン酸アルミニウム」として一般に公知のアジュバントは、典型的には、ヒドロキシリン酸アルミニウムであり、これはしばしば少量の硫酸塩も含む（すなわち、ヒドロキシリン酸硫酸アルミニウム）。アジュバントを沈殿によって得ることができ、沈殿している間の反応条件および濃度は塩内のホスフェートのヒドロキシルに対する置換度に影響を及ぼす。ヒドロキシホスフェートのＰＯ４／Ａｌモル比は、一般に、０．３と１．２との間である。ヒドロキシホスフェートを、ヒドロキシル基の存在によってＡｌＰＯ４と厳密に区別することができる。例えば、３１６４ｃｍ−１でのＩＲスペクトルバンド（例えば、２００℃への加熱時）は、構造的ヒドロキシルの存在を示す（文献８の第９章）。
【００３１】
リン酸アルミニウムアジュバントのＰＯ４／Ａｌ３＋モル比は、一般に、０．３と１．２との間、好ましくは０．８と１．２との間、より好ましくは０．９５±０．１である。リン酸アルミニウムは、特にヒドロキシリン酸塩について一般に無定形である。典型的なアジュバントは、ＰＯ４／Ａｌモル比が０．８４と０．９２との間の無定形のヒドロキシリン酸アルミニウムであり、０．６ｍｇ  Ａｌ３＋／ｍｌを含む。リン酸アルミニウムは、一般に、粒子（例えば、透過型電子顕微鏡写真からわかるように、５０ｎｍの範囲の一次粒子を有するプレート様形状）である。任意の抗原吸着後の典型的な粒子の直径は、０．５〜２０μｍ（例えば、約５〜１０μｍ）の範囲である。リン酸アルミニウムアジュバントについて、ｐＨ７．４での１ｍｇのＡｌ＋＋＋あたりの０．７〜１．５ｍｇタンパク質の吸着能が報告されている。
【００３２】
リン酸アルミニウムのゼロ電荷点（ＰＺＣ）は、ホスフェートのヒドロキシルに対する置換度に反比例し、この置換度は、沈殿による塩の調製のために使用される反応条件および反応物の濃度に応じて変動し得る。ＰＺＣはまた、溶液中の遊離リン酸イオン濃度の変化（リン酸イオンの増加＝酸性ＰＺＣの増加）またはヒスチジン緩衝液（ＰＺＣをより塩基性にする）などの緩衝液の添加によって変化する。本発明に従って使用したリン酸アルミニウムのＰＺＣは、一般に、４．０と７．０との間、より好ましくは５．０と６．５との間（例えば、約５．７）である。
【００３３】
溶液中で、リン酸アルミニウムおよび水酸化物アジュバントの両方は、直径１〜１０μｍの安定な多孔質凝集体を形成する傾向がある（９）。
【００３４】
金属塩に吸着したＴＬＲアゴニストを含む組成物はまた、緩衝液（例えば、リン酸緩衝液またはヒスチジン緩衝液またはＴｒｉｓ緩衝液）を含むことができる。しかし、かかる組成物がリン酸緩衝液を含む場合、緩衝液中のリン酸イオン濃度は、５０ｍＭ未満（例えば、４０ｍＭ未満、３０ｍＭ未満、２０ｍＭ未満、１０ｍＭ未満、または５ｍＭ未満）または１〜１５ｍＭであることが好ましい。ヒスチジン緩衝液が好ましい（例えば、１〜５０ｍＭ、５〜２５ｍＭ、または約１０ｍＭ）。
本発明で有用な吸着性金属塩の不溶性のために、吸着したＴＬＲアゴニストを含む組成物は、一般に、混濁した外観の懸濁液である。これは夾雑細菌の増殖を隠し得るので、本発明の組成物は、チオメルサールまたは２−フェノキシエタノールなどの防腐剤を含んでもよい。組成物は実質的に水銀材料が存在しない（例えば、１０μｇ／ｍｌ未満）（例えば、チオメルサールが存在しない）ことが好ましい。水銀を含まない組成物がより好ましい。防腐剤が存在しない組成物も可能である。
【００３５】
組成物は水酸化アルミニウムおよびリン酸アルミニウムの両方の混合物を含むことができ、ＴＬＲアゴニストをこれらの塩の一方または両方に吸着させてもよい。
【００３６】
患者に投与するための組成物中のＡｌ＋＋＋濃度は、好ましくは、１０ｍｇ／ｍｌ未満（例えば、５ｍｇ／ｍｌ以下、４ｍｇ／ｍｌ以下、３ｍｇ／ｍｌ以下、２ｍｇ／ｍｌ以下、１ｍｇ／ｍｌ以下など）である。本発明の組成物中の好ましいＡｌ＋＋＋範囲は、０．３ｍｇ／ｍｌと１ｍｇ／ｍｌとの間または０．３〜０．５ｍｇ／ｍｌである。最大０．８５ｍｇ／用量が好ましい。ＴＬＲアゴニストを含めることによってアルミニウム塩のアジュバント効果を改善することができるので、本発明は用量あたりのＡｌ＋＋＋量を有利に低下させることを可能とし、それにより、本発明の組成物は、単位用量あたり１０μｇと２５０μｇとの間のＡｌ＋＋＋を有用に含むことができる。現在の小児用ワクチンは、典型的には、少なくとも３００μｇのＡｌ＋＋＋を含む。濃度に関して、本発明の組成物のＡｌ＋＋＋濃度は、１０μｇ／ｍｌと５００μｇ／ｍｌとの間（例えば、１０〜３００μｇ／ｍｌ、１０〜２００μｇ／ｍｌ、または１０〜１００μｇ／ｍｌ）であり得る。
【００３７】
一般に、組成物がＴＬＲアゴニストおよびアルミニウム塩の両方を含む場合、アゴニストのＡｌ＋＋＋に対する重量比は、５：１未満（例えば、４：１未満、３：１未満、２：１未満、または１：１未満）である。したがって、例えば、Ａｌ＋＋＋濃度が０．５ｍｇ／ｍｌである場合、ＴＬＲアゴニストの最高濃度は１．５ｍｇ／ｍｌである。しかし、より高いまたはより低いレベルを使用することができる。
【００３８】
組成物中のアゴニストの少なくとも５０％（質量基準）が金属塩に吸着することが好ましい（例えば、６０％以上、７０％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９２％以上、９４％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、さらに１００％）。
ＴＬＲアゴニスト
【００３９】
本発明の組成物は、ＴＬＲアゴニスト（すなわち、Ｔｏｌｌ様受容体を刺激することができる化合物）を含む。最も好ましくは、ＴＬＲアゴニストは、ヒトＴＬＲのアゴニストである。ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、またはＴＬＲ１１のいずれかを活性化することができ、好ましくは、ヒトＴＬＲ７を活性化することができる。
【００４０】
任意の特定のＴｏｌｌ様受容体に対する化合物のアゴニスト活性を、標準的なアッセイによって決定することができる。ＩｍｇｅｎｅｘおよびＩｎｖｉｖｏｇｅｎなどの企業は、ヒトＴＬＲ遺伝子およびＮＦκＢ、加えてＴＬＲ活性化経路を測定するのに適切なレポーター遺伝子で安定に同時トランスフェクションした細胞株を供給している。これらの細胞株を感度（広範な動作範囲ダイナミクス）に合わせてデザインし、高処理スクリーニングのために使用することができる。１つまたは２つの特異的ＴＬＲの構成的発現は、かかる細胞株における典型である。文献１０も参照のこと。多数のＴＬＲアゴニストが当該分野で公知であり、例えば、文献１１はＴＬＲ２アゴニストである一定のリポペプチド分子を記載しており、文献１２〜１５はそれぞれＴＬＲ７の小分子アゴニストクラスを記載しており、文献１６および１７は、疾患処置のためのＴＬＲ７アゴニストおよびＴＬＲ８アゴニストを記載している。
【００４１】
本発明で使用されるＴＬＲアゴニストは、理想的には、少なくとも１つの吸着性部分を含む。ＴＬＲアゴニスト中にかかる部分を含めることにより、不溶性金属塩にそれらを吸着させることを可能とし（例えば、リガンド交換または任意の他の適切な機構による）、その免疫学的挙動を改良する（文献６を参照のこと）。リン含有吸着性部分が特に有用であるので、吸着性部分は、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィネート、ホスホナイト、ホスフィナイトなどを含んでもよい。
【００４２】
好ましくは、ＴＬＲアゴニストは、少なくとも１つのホスホン酸基を含む。
【００４３】
したがって、好ましい実施形態では、本発明の組成物は、ホスホン酸基を含むＴＬＲ７アゴニストを含む。このホスホン酸基は、アゴニストを不溶性金属塩（アルミニウム塩など）に吸着させることができる。
【００４４】
本発明で有用なＴＬＲアゴニストは、単一の吸着性部分を含んでもよいし、また１つを超える（例えば、２個と１５個との間の）吸着性部分を含んでもよい。典型的には、化合物は１、２、または３個の吸着性部分を含む。
【００４５】
本発明で有用なリン含有ＴＬＲアゴニストを、式（Ａ１）：
【化１】
2015509520.tif 000002
（式中、
ＲＸおよびＲＹは、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから独立して選択され；
Ｘは、共有結合、Ｏ、およびＮＨから選択され；
Ｙは、共有結合、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ、およびＮＨから選択され；
Ｌは、例えば、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基とそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ１〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンオキシ、および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択されるリンカーであり；
各ｐは、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され；
ｑは１、２、３、および４から選択され；
ｎは１、２、および３から選択され；
ＡはＴＬＲアゴニスト部分である）によって示すことができる。
【００４６】
１つの実施形態では、式（Ａ１）のＴＬＲアゴニストは以下の通りである。ＲＸおよびＲＹはＨであり；ＸはＯであり；Ｌは、１〜２個のハロゲン原子でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐは１、２、および３から選択され；ｑは１および２から選択され；ｎは１である。したがって、これらの実施形態では、吸着性部分はリン酸基を含む。
【００４７】
他の実施形態では、式（Ａ１）のＴＬＲアゴニストは以下のとおりである。ＲＸおよびＲＹはＨであり；Ｘは共有結合であり；Ｌは、１〜２個のハロゲン原子でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；ｐは１、２、または３から選択され；ｑは１または２から選択され；ｎは１である。したがって、これらの実施形態では、吸着性部分はホスホン酸基を含む。
【００４８】
式（Ａ１）に有用な「Ａ」部分には、本明細書中で定義されているか、または文献４〜１７および２９〜４７に開示の以下の化合物のいずれかのラジカルが含まれるが、これらに限定されない。
【化２】
2015509520.tif 000003
【００４９】
いくつかの実施形態では、ＴＬＲアゴニスト部分「Ａ」の分子量は１０００Ｄａ未満である。いくつかの実施形態では、式（Ａ１）のＴＬＲアゴニストの分子量は１０００Ｄａ未満である。
【００５０】
好ましいＴＬＲアゴニストは水溶性である。したがって、ＴＬＲアゴニストは、水を含むｐＨ７の水性緩衝液中２５℃にて１気圧で混合した場合に、少なくとも５０μｇ／ｍｌの濃度を有する溶液が得られる均一な溶液を形成することができる。したがって、用語「水溶性」は、これらの条件下で少ししか溶けない物質が排除される。
【００５１】
有用なＴＬＲアゴニストには、以下で詳述される式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）、（Ｇ）、（Ｈ）、（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｊ）、または（Ｋ）を有するものが含まれる。他の有用なＴＬＲアゴニストは、文献６に定義される化合物１〜１０２である。好ましいＴＬＲ７アゴニストは、式（Ｋ）（以下で同定した化合物Ｋ２など）を有する。これらを、塩（例えば、Ｋ２のアルギニン塩）として使用することができる。
【００５２】
好ましいＴＬＲ４アゴニストは、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）のアナログである。例えば、有用なＴＬＲ４アゴニストは、３ｄ−ＭＰＬ（すなわち、３−Ｏ−脱アシル化モノホスホリルリピドＡ（３−Ｏ−ｄｅａｃｙｌａｔｅｄ  ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌ  ｌｉｐｉｄ  Ａ）；３−Ｏ−脱アシル化モノホスホリルリピドＡ（３−ｄｅ−Ｏ−ａｃｙｌａｔｅｄ  ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌ  ｌｉｐｉｄ  Ａ）または３−Ｏ−デスアシル−４’−モノホスホリルリピドＡとしても公知）である。この名称は、モノホスホリルリピドＡ中の還元末端グルコサミンの３位が脱アシル化されていることを示す。３ｄ−ＭＰＬはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｍｉｎｎｅｓｏｔａのヘプトース欠損（ｈｅｐｔｏｓｅｌｅｓｓ）変異体から調製されており、リピドＡに化学的に類似しているが、酸不安定性ホスホリル基および塩基不安定性アシル基を欠く。３ｄ−ＭＰＬは、単球／マクロファージ系の細胞を活性化し、いくつかのサイトカイン（ＩＬ−１、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−α、およびＧＭ−ＣＳＦが含まれる）の放出を刺激する。３ｄ−ＭＰＬの調製は文献１８に最初に記載されており、その製品は、Ｃｏｒｉｘａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって製造販売されている。３ｄ−ＭＰＬはＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅによって使用されるＡＳ０４アジュバント中に存在する。さらなる詳細は、文献１９〜２２に見出すことができる。しかし、いくつかの実施形態では、本発明は、リン酸アルミニウムと３ｄＭＰＬとの組み合わせを使用しない。
【００５３】
典型的な組成物は、２５μｇ／ｍｌと２００μｇ／ｍｌとの間の濃度（例えば、５０〜１５０μｇ／ｍｌ、７５〜１２５μｇ／ｍｌ、９０〜１１０μｇ／ｍｌ、または約１００μｇ／ｍｌの範囲）で３ｄ−ＭＰＬを含む。通常は、用量あたり２５〜７５μｇ（例えば、４５〜５５μｇ）の３ｄ−ＭＰＬまたは用量あたり約５０μｇの３ｄ−ＭＰＬを投与する。
３ｄ−ＭＰＬは、そのアシル化によって変動する（例えば、３、４、５、または６本のアシル鎖を有し、異なる長さであり得る）関連分子の混合物の形態を取ることができる。２つのグルコサミン（２−デオキシ−２−アミノ−グルコースとしても公知）モノサッカライドはその２位炭素（すなわち、２位および２’位）でＮアシル化されており、３’位にもＯ−アシル化が存在する。炭素２に結合した基は、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＲ１Ｒ１’を有する。炭素２’に結合した基は、式−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＲ２Ｒ２’を有する。炭素３’に結合した基は式−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＲ３Ｒ３’を有する。代表的な構造は、以下である。
【化３】
2015509520.tif 000004
【００５４】
基Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、それぞれ独立して−（ＣＨ２）ｎ−ＣＨ３である。値ｎは、好ましくは８と１６との間、より好ましくは９と１２との間であり、最も好ましくは１０である。
【００５５】
基Ｒ１’、Ｒ２’、およびＲ３’は、独立して、以下であり得る：（ａ）−Ｈ；（ｂ）−ＯＨ；または（ｃ）−Ｏ−ＣＯ−Ｒ４、ここで、Ｒ４は−Ｈまたは−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨ３のいずれかであり、値ｍは、好ましくは８と１６との間、より好ましくは１０、１２、または１４である。２位では、ｍは、好ましくは１４である。２’位では、ｍは、好ましくは１０である。３’位では、ｍは、好ましくは１２である。したがって、基Ｒ１’、Ｒ２’、およびＲ３’は、好ましくは、ドデカン酸、テトラデカン酸、またはヘキサデカン酸由来の−Ｏ−アシル基である。
【００５６】
Ｒ１’、Ｒ２’、およびＲ３’が全て−Ｈである場合、３ｄ−ＭＰＬは、たった３つのアシル鎖（２、２’、および３’位上に１つずつ）を有する。Ｒ１’、Ｒ２’、およびＲ３’のうちの２つのみが−Ｈである場合、３ｄ−ＭＰＬは、４本のアシル鎖を有し得る。Ｒ１’、Ｒ２’、およびＲ３’の１つのみが−Ｈである場合、３ｄ−ＭＰＬは５本のアシル鎖を有し得る。Ｒ１’、Ｒ２’、およびＲ３’のいずれも−Ｈではない場合、３ｄ−ＭＰＬは６本のアシル鎖を有し得る。本発明で使用される３ｄ−ＭＰＬは、３〜６本のアシル鎖を有するこれらの形態の混合物であり得るが、混合物中に６本のアシル鎖を有する３ｄ−ＭＰＬを含むことが好ましく、特に、６本のアシル鎖形態が全３ｄ−ＭＰＬの少なくとも１０重量％（例えば、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、またはこれより多く）を占めることを確実にすることが好ましい。６本のアシル鎖を有する３ｄ−ＭＰＬは、最もアジュバント活性が高い形態であることが見出されている。
【００５７】
したがって、本発明での使用に最も好ましい３ｄ−ＭＰＬ形態は以下である。
【化４】
2015509520.tif 000005
【００５８】
３ｄ−ＭＰＬを混合物の形態で使用する場合、本発明の組成物中での３ｄ−ＭＰＬの量または濃度に関する言及は、混合物中での３ｄ−ＭＰＬ種の組み合わせについての言及である。
【００５９】
水性条件下で、３ｄ−ＭＰＬは、例えば、直径１５０ｎｍ未満または５００ｎｍ超の異なるサイズを有するミセル凝集体または粒子を形成することができる。これらのいずれかまたは両方を本発明で使用することができ、より良い粒子を日常的なアッセイによって選択することができる。より小さい粒子（例えば、３ｄ−ＭＰＬの透明な水性懸濁液を得るのに十分な小さい）は、その優れた活性により、本発明での使用に好ましい（２３）。好ましい粒子の平均粒径は、１５０ｎｍ未満、より好ましくは１２０ｎｍ未満であり、さらに平均粒径１００ｎｍ未満であり得る。しかし、ほとんどの場合、平均粒径は、５０ｎｍ未満ではない。３ｄ−ＭＰＬがリン酸アルミニウムに吸着する場合、３Ｄ−ＭＰＬの粒径を直接測定することは不可能かもしれないが、吸着する前に粒径を測定することができる。粒径を、平均粒径を明らかにする日常的な動的光散乱技術によって評価することができる。粒径がｘｎｍであるという場合、一般に、ほぼこの平均の粒子の分布であるが、粒子数の少なくとも５０％（例えば、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、またはそれよりも多く）の粒子は、ｘ±２５％の範囲内の直径を有する。
【００６０】
本発明の組成物は、１つを超えるＴＬＲアゴニストを含むことができる。これら２つのアゴニストは相互に異なり、同一のＴＬＲまたは異なるＴＬＲを標的とすることができる。両アゴニストを金属塩に吸着させることができる。
【００６１】
いくつかの実施形態では、本発明にはアブリジンを含む組成物を含まない。
狂犬病ウイルス免疫原
【００６２】
本発明の組成物は、例えば、文献２４の第２７章に記載の狂犬病ウイルス免疫原を含む。免疫原は、一般に、不活化狂犬病ウイルスビリオンである。これらの免疫原を、基本的には、細胞培養物の上清（通常、例えば、密度勾配遠心分離を使用して濃縮および／または精製される）などの無細胞ウイルスの不活化およびその後の不活化ウイルスの濃縮によって調製することができる。典型的には、β−プロピオラクトン処理（例えば、１：４０００の比率）によって不活化するが、ホルマリンおよび紫外線処理も使用する。培養上清を、限外濾過、ゾーン遠心分離、超遠心分離などによって濃縮することができる。不活化ウイルスを限外濾過によって濃縮することができる。
【００６３】
ワクチン株を、任意の適切な細胞基質（ニワトリ胚（ＰＣＥＣ）、アヒル胚、ヒト培養線維芽細胞、ＷＩ−３８、ＭＲＣ−５、胎児アカゲザル肺、初代シリアンハムスター腎臓、ベロ細胞株、ＭＤＣＫ細胞株など）上で増殖させることができる（文献２７の第２２〜３３章を参照のこと）。これらの異なる細胞基質上で増殖したウイルスを、その糖型に基づいて区別することができる。例えば、ベロ細胞中で増殖したウイルスがサル糖型を有するのに対して、ＰＣＥＣおよびアヒル細胞はトリ糖型を産生し、ＭＲＣ−５細胞はヒト糖型を産生する。神経組織（例えば、ウサギの脊髄、またはウサギ、ヒツジ、ヤギ、もしくは授乳期マウス由来の脳）上でウイルスを増殖させた以前の方法（文献２７の第１９〜２１章参照）は、夾雑リスクのために好ましくない。
【００６４】
狂犬病ウイルス免疫原を、任意の適切な狂犬病ウイルス株から調製することができる。公知の狂犬病ウイルス株には、以下が含まれるが、これらに限定されない：ＡＶＯ１、ＣＶＳ、ＥＲＡ、Ｋｅｌｅｖ、ＨＥＰ−ＦＬＵＲＹ、Ｎｉｓｈｉｇａｈａｒａ  ＲＣＥＨ、Ｏｎｔａｒｉｏ  ｆｏｘ、Ｏｎｔａｒｉｏ  ｓｋｕｎｋ、Ｐａｓｔｅｕｒ  ／  ＰＶ、Ｐｉｔｔｍａｎ  Ｍｏｏｒｅ（ＰＭ）、Ｓｔｒｅｅｔ  Ａｌａｂａｍａ  Ｄｕｆｆｅｒｉｎ（ＳＡＤ）Ｂ１９、ＳＡＤ−Ｂｅｒｎ、ＥＲＡ、ＳＡＧ、ＳＡＧ２、Ｖｎｕｋｏｖｏ−３２、Ｅｔｈ２００３、ＲＣ−ＨＬ株、Ｎｉｓｈｉｇａｈａｒａ、ＳＨＢＲＶ−１８、ＳＲＶ９、Ｎｉ−ＣＥ、Ｆｌｕｒｙ−ＬＥＰ、およびＫｉｓｓｌｉｎｇ狂犬病ウイルス株。ワクチン産生に特に重要な株は、ＰＶ、Ｐｉｔｍａｎ−Ｍｏｏｒｅ、ＣＶＳ、Ｆｌｕｒｙ  ＬＥＰ、Ｆｌｕｒｙ  ＨＥＰ、Ｋｅｌｅｖ、およびＥＲＡである。特に有用な２種の株は、ＶＥＲＯＬＡＢで使用されるＰｉｔｍａｎ−Ｍｏｏｒｅ株（またはＷｉｓｔａｒ狂犬病ＰＭ／ＷＩ３８−１５０３−３Ｍ株）およびＲＡＢＩＰＵＲで使用されるＦｌｕｒｙ  ＬＥＰ株である。
【００６５】
本発明の免疫原性組成物は、有効用量の狂犬病ウイルス免疫原を含む。ヒト筋肉内注射について、ＷＨＯガイドラインに従うと、単位用量は、２．５ＩＵ以上の狂犬病ウイルス免疫原を含む。この効力を、標準的なプロトコール（例えば、文献２５（付録２）、２６（付録１）、および２７（第３６〜４３章）を参照のこと）によって測定することができる。したがって、本発明のワクチンは、単位用量あたり２．５ＩＵ以上の狂犬病ウイルス免疫原を含むことができる。しかし、本発明の有利な実施形態では、より少量の免疫原（すなわち、単位用量あたり２．５ＩＵ未満）の使用によって防御することができる（２８）。したがって、ワクチンは、０．１〜２．４ＩＵ／用量（０．５〜２．０ＩＵ／用量、または１．０〜２．０または１．０〜１．５または１．５〜２．０ＩＵ／用量など）を含むことができる。１ｍｌの投薬体積を使用して、ＩＵ／ｍｌを単位とする免疫原の濃度は、ＩＵ／用量と同一である。したがって、より小さな投薬体積（０．５ｍｌなど）を使用して、濃度が変更される（したがって、例えば、組成物は、５ＩＵ／ｍｌ以上または０．２〜４．８ＩＵ／ｍｌなどの濃度で狂犬病免疫原を含むことができる）。
【００６６】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、狂犬病ウイルス免疫原を含み、異なる生物（例えば、細菌または別のウイルス）由来の免疫原も含む。
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、および（Ｈ）−ＴＬＲ７アゴニスト
【００６７】
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、および（Ｈ）：
【化５】
2015509520.tif 000006
（式中、
（ａ）Ｐ３は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３、および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐＯｓ−および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ４は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリール、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；但し、Ｐ３およびＰ４のうちの少なくとも１つが−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし、
（ｂ）Ｐ５は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ６は、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびＯＨから選択される１〜３個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換された）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ならびに−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐＯｓ−、−ＮＨＣ１〜Ｃ６アルキル、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；但し、Ｐ５、Ｐ６、およびＰ７のうちの少なくとも１つが−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし；
（ｃ）Ｐ８は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ＯＨでそれぞれ任意選択的に置換された−ＮＨＣ１〜Ｃ６アルキル、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ９およびＰ１０は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、（ＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルでそれぞれ任意選択的に置換された）−ＮＨＣ１〜Ｃ６アルキル、ならびに−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）からそれぞれ独立して選択され；但し、Ｐ８、Ｐ９、またはＰ１０のうちの少なくとも１つが−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし；
（ｄ）Ｐ１６および各Ｐ１８は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）からそれぞれ独立して選択され；Ｐ１７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルキルヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリール−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）、およびＣ１〜Ｃ６アルキルまたはヘテロシクリルから選択される１〜２個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換された−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され、但し、Ｐ１６、Ｐ１７、またはＰ１８のうちの少なくとも１つが−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）部分を含むことを条件とし；
ＲＸおよびＲＹは、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから独立して選択され；
ＲＣ、ＲＤ、およびＲＨは、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルからそれぞれ独立して選択され；
ＸＣはＣＨおよびＮから選択され；
ＲＥは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ハロゲン、および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；
ＸＥは、共有結合、ＣＲＥ２ＲＥ３、およびＮＲＥ４から選択され；
ＲＥ２、ＲＥ３、およびＲＥ４は、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから独立して選択され；
ＸＨ１−ＸＨ２は、−ＣＲＨ２ＲＨ３−、−ＣＲＨ２ＲＨ３−ＣＲＨ２ＲＨ３−、−Ｃ（Ｏ）ＣＲＨ２ＲＨ３−、−Ｃ（Ｏ）ＣＲＨ２ＲＨ３−、−ＣＲＨ２ＲＨ３Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＨ４Ｃ（Ｏ）−、Ｃ（Ｏ）ＮＲＨ４−、ＣＲＨ２ＲＨ３Ｓ（Ｏ）２、および−ＣＲＨ２＝ＣＲＨ２−から選択され；
ＲＨ２、ＲＨ３、およびＲＨ４は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＰ１８からそれぞれ独立して選択され；
ＸＨ３はＮおよびＣＮから選択され；
Ｘは、共有結合、Ｏ、およびＮＨから選択され；
Ｙは、共有結合、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ、およびＮＨから選択され；
Ｌは、共有結合、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ１〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンオキシ、および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；
ｍは０または１から選択され；
各ｐは、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され；
ｑは１、２、３、および４から選択され；
ｓは０および１から選択される）のいずれかの化合物であり得る。
式（Ｇ）−ＴＬＲ８アゴニスト
【００６８】
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｇ）：
【化６】
2015509520.tif 000007
（式中、
Ｐ１１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ＮＲＶＲＷ、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；
Ｐ１２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＶＲＷで任意選択的に置換されたアリール、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；
Ｐ１３、Ｐ１４、およびＰ１５は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から独立して選択され；
但し、Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１３、Ｐ１４、またはＰ１５のうちの少なくとも１つが−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし；
ＲＶおよびＲＷは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから独立して選択されるか、これらが結合する窒素原子と共に４〜７員の複素環を形成し；
ＸＧは、Ｃ、ＣＨ、およびＮから選択され；
【化７】
2015509520.tif 000008
は任意選択的な二重結合を示し、ここで、
【化８】
2015509520.tif 000009
が二重結合である場合、ＸＧはＣであり；
ＲＧは、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
Ｘは、共有結合、Ｏ、およびＮＨから選択され；
Ｙは、共有結合、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ、およびＮＨから選択され；
Ｌは、共有結合、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ１〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンオキシ、および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；
各ｐは、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
ｑは、１、２、３、および４から選択される）の化合物であり得る。
式（Ｉ）および（ＩＩ）−ＴＬＲ７アゴニスト（１３）
【００６９】
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｉ）または式（ＩＩ）：
【化９】
2015509520.tif 000010
（式中、
Ｚは−ＮＨ２または−ＯＨであり；
Ｘ１は、アルキレン、置換アルキレン、アルケニレン、置換アルケニレン、アルキニレン、置換アルキニレン、カルボシクリレン、置換カルボシクリレン、ヘテロシクリレン、または置換ヘテロシクリレンであり；
Ｌ１は、共有結合、アリーレン、置換アリーレン、ヘテロシクリレン、置換ヘテロシクリレン、カルボシクリレン、置換カルボシクリレン、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、Ｓ（Ｏ）２、−ＮＲ５−、または−Ｏ−であり、
Ｘ２は、共有結合、アルキレン、または置換アルキレンであり；
Ｌ２は、−ＮＲ５−、Ｎ（Ｒ５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、Ｓ（Ｏ）２、または共有結合であり；
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アリール、置換アリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、または置換ヘテロシクリルアルキルであり；
Ｙ１およびＹ２は、それぞれ独立して、共有結合、−Ｏ−、または−ＮＲ５−であるか、−Ｙ１−Ｒ１および−Ｙ２−Ｒ２は、それぞれ独立して、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ６Ｒ７）であり；
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、Ｈ、アルキル、置換アルキル、カルボシクリル、置換カルボシクリル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロシクリルアルキル、置換ヘテロシクリルアルキル、−アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５、−（置換アルキレン）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５、−アルキレン−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−（置換アルキレン）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５、−アルキレン−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５、または−（置換アルキレン）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５であり、
Ｒ４は、Ｈ、ハロゲン、−ＯＨ、−Ｏ−アルキル、−Ｏ−アルキレン−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５、−ＳＨ、または−ＮＨ（Ｒ５）であり；
Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７はそれぞれ、独立して、Ｈ、アルキル、置換アルキル、カルボシクリル、置換カルボシクリル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロシクリルアルキル、または置換ヘテロシクリルアルキルである）の化合物であり得る。
式（Ｊ）−ＴＬＲ２アゴニスト（２９）
【００７０】
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｊ）：
【化１０】
2015509520.tif 000011
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ７〜Ｃ１８アルキル、または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２はＣ７〜Ｃ１８アルキルであり；
Ｒ３はＣ７〜Ｃ１８アルキルであり；
Ｌ１は、−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−、または−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−であり；
Ｌ２は、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−、または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−であり；
Ｒ４は−Ｌ３Ｒ５または−Ｌ４Ｒ５であり；
Ｒ５は、−Ｎ（Ｒ７）２、−ＯＲ７、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｌ３Ｒ８、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｌ４Ｒ８、−ＯＬ３Ｒ６、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｌ３Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｌ４Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ７、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ７、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ６アリール、Ｃ１０アリール、Ｃ１４アリール、Ｏ、Ｓ、およびＮから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５〜１４員環のヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、またはＯ、Ｓ、およびＮから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５〜６員環のヘテロシクロアルキルであり、ここで、Ｒ５のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、それぞれ、非置換であるか、Ｒ５のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、−ＯＲ９、−ＯＬ３Ｒ６、−ＯＬ４Ｒ６、−ＯＲ７、および−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７から独立して選択される１〜３個の置換基でそれぞれ置換され、
Ｌ３はＣ１〜Ｃ１０アルキレンであり、ここで、Ｌ３のＣ１〜Ｃ１０アルキレンは非置換であるか、Ｌ３のＣ１〜Ｃ１０アルキレンは１〜４個のＲ６基で置換されるか、Ｌ３のＣ１〜Ｃ１０アルキレンは、同一炭素原子上で２個のＣ１〜Ｃ６アルキル基で置換され、前記２個のＣ１〜Ｃ６アルキル基が結合する炭素原子と共にＣ３〜Ｃ８シクロアルキル（ｃｙｃｌｏａｋｙｌ）を形成し；
Ｌ４は、−（（ＣＲ７Ｒ７）ｐＯ）ｑ（ＣＲ１０Ｒ１０）ｐ−または−（ＣＲ１１Ｒ１１）（（ＣＲ７Ｒ７）ｐＯ）ｑ（ＣＲ１０Ｒ１０）ｐ−であり、ここで、各Ｒ１１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であり、前記Ｃ１〜Ｃ６アルキル基が結合する炭素原子と共にＣ３〜Ｃ８シクロアルキル（ｃｙｃｌｏａｋｙｌ）を形成し；
各Ｒ６は、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、１〜２個のヒドロキシル基で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、−ＯＲ７、−Ｎ（Ｒ７）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、Ｃ６アリール、Ｃ１０アリール、およびＣ１４アリールから独立して選択され；
各Ｒ７は、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから独立して選択され；
Ｒ８は、−ＳＲ７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、ならびにＯおよびＮから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５〜６員環のヘテロシクロアルキルから選択され；
Ｒ９はフェニルであり；
各Ｒ１０は、Ｈおよびハロから独立して選択され；
各ｐは、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
【００７１】
ｑは１、２、３、または４である）の化合物であり得る。
【００７２】
好ましくは、Ｒ５は、Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｌ３−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｌ４−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−ＯＬ３−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｌ３−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｌ４−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７）２である。
（Ｊ）のいくつかの実施形態では、Ｒ１はＨである。（Ｊ）の他の実施形態では、Ｒ１は−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１５アルキルである。
（Ｊ）のいくつかの実施形態では、（ｉ）Ｌ１は−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−であり、Ｌ２は、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−、または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−である；または（ｉｉ）Ｌ１は−ＣＨ２Ｏ−であり、Ｌ２は、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−、または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−である；または（ｉｉｉ）Ｌ１は−ＣＨ２ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−であり、Ｌ２は、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−、または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−である；または（ｉｖ）Ｌ１は−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−であり、Ｌ２は−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｏ−、ＮＲ７Ｃ（Ｏ）−、または−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７−である。
【００７３】
（Ｊ）のいくつかの実施形態では、（ｉ）Ｌ１は−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−であり、Ｌ２は−ＯＣ（Ｏ）−である；または（ｉｉ）Ｌ１は−ＣＨ２Ｏ−であり、Ｌ２は−Ｏ−である；または（ｉｉｉ）Ｌ１は−ＣＨ２Ｏ−であり、Ｌ２は−ＮＨＣ（Ｏ）−である；または（ｉｖ）Ｌ１は−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−であり、Ｌ２は−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−である。
【００７４】
（Ｊ）のいくつかの実施形態では、（ｉ）Ｒ２は−Ｃ１１アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１１アルキルである；または（ｉｉ）Ｒ２は−Ｃ１６アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１６アルキルである；または（ｉｉｉ）Ｒ２は−Ｃ１６アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１１アルキルである；または（ｉｖ）Ｒ２は−Ｃ１２アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１２アルキルである；または（ｖ）Ｒ２は−Ｃ７アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ７アルキルである；または（ｖｉ）Ｒ２は−Ｃ９アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ９アルキルである；または（ｖｉｉ）Ｒ２は−Ｃ８アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ８アルキルである；または（ｖｉｉｉ）Ｒ２は−Ｃ１３アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１３アルキルである；または（ｉｘ）Ｒ２は−Ｃ１２アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１１アルキルである；または（ｘ）Ｒ２は−Ｃ１２アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１２アルキルである；または（ｘｉ）Ｒ２は−Ｃ１０アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１０アルキルである；または（ｘｉｉ）Ｒ２は−−Ｃ１５アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１５アルキルである。
【００７５】
（Ｊ）のいくつかの実施形態では、Ｒ２は−Ｃ１１アルキルであり、Ｒ３は−Ｃ１１アルキルである。
【００７６】
（Ｊ）のいくつかの実施形態では、Ｌ３はＣ１〜Ｃ１０アルキレンであり、ここで、Ｌ３のＣ１〜Ｃ１０アルキレンは、非置換であるか、１〜４個のＲ６基に置換される。
【００７７】
（Ｊ）のいくつかの実施形態では、Ｌ４は−（（ＣＲ７Ｒ７）ｐＯ）ｑ（ＣＲ１０Ｒ１０）ｐ−であり；各Ｒ１０は、ＨおよびＦから独立して選択され；各ｐは、２、３、および４から独立して選択される。
【００７８】
（Ｊ）のいくつかの実施形態では、各Ｒ６は、メチル、エチル、ｉ−プロピル、ｉ−ブチル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＯＨ、−Ｆ、−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、およびフェニルから独立して選択される。
【００７９】
（Ｊ）のいくつかの実施形態では、各Ｒ７は、Ｈ、メチル、およびエチルから独立して選択される。
式（Ｋ）（３０）
【００８０】
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｋ）：
【化１１】
2015509520.tif 000012
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｒ５）２ＯＨ、−Ｌ１Ｒ５、−Ｌ１Ｒ６、−Ｌ２Ｒ５、−Ｌ２Ｒ６、−ＯＬ２Ｒ５、または−ＯＬ２Ｒ６であり；
Ｌ１は−Ｃ（Ｏ）−または−Ｏ−であり；
Ｌ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、または−（（ＣＲ４Ｒ４）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−であり、ここで、Ｌ２のＣ１〜Ｃ６アルキレンおよびＣ２〜Ｃ６アルケニレンは、１〜４個のフルオロ基で任意選択的に置換され；
各Ｌ３は、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＲ４Ｒ４）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から独立して選択され、ここで、Ｌ３のＣ１〜Ｃ６アルキレンは、１〜４個のフルオロ基で任意選択的に置換され；
Ｌ４はアリーレンまたはヘテロアリーレンであり；
Ｒ２は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−Ｌ３Ｒ５、−Ｌ１Ｒ５、−Ｌ３Ｒ７、−Ｌ３Ｌ４Ｌ３Ｒ７、−Ｌ３Ｌ４Ｒ５、−Ｌ３Ｌ４Ｌ３Ｒ５、−ＯＬ３Ｒ５、−ＯＬ３Ｒ７、−ＯＬ３Ｌ４Ｒ７、−ＯＬ３Ｌ４Ｌ３Ｒ７、−ＯＲ８、−ＯＬ３Ｌ４Ｒ５、−ＯＬ３Ｌ４Ｌ３Ｒ５、および−Ｃ（Ｒ５）２ＯＨから選択され；
各Ｒ４は、Ｈおよびフルオロから独立して選択され；
Ｒ５は−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ９）２であり、
Ｒ６は−ＣＦ２Ｐ（Ｏ）（ＯＲ９）２または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０であり；
Ｒ７は−ＣＦ２Ｐ（Ｏ）（ＯＲ９）２または−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０であり；
Ｒ８はＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
各Ｒ９は、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから独立して選択され；
Ｒ１０はＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり；
各ｐは、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
ｑは１、２、３、または４である）の化合物であり得る。
【００８１】
式（Ｋ）の化合物は、好ましくは、式（Ｋ’）：
【化１２】
2015509520.tif 000013
（式中、
Ｐ１は、Ｈ、ＣＯＯＨで任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；
Ｐ２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；
但し、Ｐ１およびＰ２のうちの少なくとも１つが−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）であることを条件とし；
ＲＢは、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
ＲＸおよびＲＹは、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから独立して選択され；
Ｘは、共有結合、Ｏ、およびＮＨから選択され；
Ｙは、共有結合、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ、およびＮＨから選択され；
Ｌは、共有結合、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基とそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレン、Ｃ１〜Ｃ６アルケニレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンオキシ、および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；
各ｐは、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され；
ｑは、１、２、３、および４から選択される）である。
【００８２】
式（Ｋ’）のいくつかの実施形態では、Ｐ１は、ＣＯＯＨで任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；ＲＢはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは、１および２から選択される。
式（Ｆ）−ＴＬＲ７アゴニスト（１４）
【００８３】
ＴＬＲアゴニストは、式（Ｆ）：
【化１３】
2015509520.tif 000014
（式中、
Ｘ３はＮであり；
Ｘ４はＮまたはＣＲ３であり、
Ｘ５は−ＣＲ４＝ＣＲ５−であり；
Ｒ１およびＲ２はＨであり；
Ｒ３はＨであり；
Ｒ４およびＲ５は、Ｈ、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＨＮ（Ｒ９）２、−ＳＲ７、−（ＣＨ２）ｎＯＲ７、−（ＣＨ２）ｎＲ７、−ＬＲ８、−ＬＲ１０、−ＯＬＲ８、−ＯＬＲ１０、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルからそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｒ４およびＲ５のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ７、−ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（０Ｒ１０）２．−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、および−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８から独立して選択される１〜３個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換され；
または、Ｒ３およびＲ４、またはＲ４およびＲ５、またはＲ５およびＲ６は、隣接する環原子上に存在する場合、任意選択的に共に連結して５〜６員環を形成することができ、ここで、５〜６員環は、Ｒ７で任意選択的に置換され；
各Ｌは、結合、−（Ｏ（ＣＨ２）ｍ）ｔ−、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレン、およびＣ２〜Ｃ６アルキニレンから独立して選択され、ここで、ＬのＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレン、およびＣ２〜Ｃ６アルキニレンは、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換され；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ７のＣ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、１〜３個のＲ１３基でそれぞれ任意選択的に置換され、各Ｒ１３は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−ＯＬＲ９、−ＬＲ１０、−ＬＯＲ１０、−ＯＬＲ１０、−ＬＲ８、−ＬＯＲ８、−ＯＬＲ８、−ＬＳＲ８、−ＬＳＲ１０、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＬＯＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１１、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ８、−ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｒ１０、−ＬＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＳ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＳ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ８ＯＨ、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立して選択され；
各Ｒ８は、Ｈ、−ＣＨ（Ｒ１０）２、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシから独立して選択され、ここで、Ｒ８のＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシ基は、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＲ９、−ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立して選択される１〜３個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換され；
各Ｒ９は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、およびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルから独立して選択されるか、各Ｒ９は、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａＩｋｙｌ）であり、Ｒ９が結合するＮと共にＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルを形成し、ここで、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル環は、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択されるさらなるヘテロ原子を任意選択的に含み、Ｒ９のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）０Ｒ１１、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立して選択される１〜３個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換され；
各Ｒ１０は、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールから独立して選択され、ここで、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基は、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−ＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２から選択される１〜３個の置換基で任意選択的に置換され；
Ｒ１１およびＲ１２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｒ１１およびＲ１２のＣ１〜Ｃ６アルキル（ａＩｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、ハロゲン、−ＣＮ、Ｒ８、−ＯＲ８、Ｃ（Ｏ）Ｒ８、ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシから独立して選択される１〜３個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換され；
または、Ｒ１１およびＲ１２は、それぞれ独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ１１およびＲ１２が結合するＮ原子と共にＮ、Ｏ、およびＳから選択されるさらなるヘテロ原子を任意選択的に含む任意選択的に置換されたＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル環を形成し；
環Ａはアリールまたはヘテロアリールであり、ここで、環Ａのアリールおよびヘテロアリール基は１〜３個のＲＡ基で任意選択的に置換され、各ＲＡは、−Ｒ８、−Ｒ７、−ＯＲ７、−ＯＲ８、−Ｒ１０、−ＯＲ１０、−ＳＲ８、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９Ｃ（Ｓ）Ｒ８、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−ＮＲ９ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＣＯ２Ｒ８、−（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｓ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ８）Ｒ８、−Ｃ（ＮＯＲ８）Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＳＯ２Ｒ８、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｎ（０Ｒ８）Ｒ８、−ＣＨ＝ＣＨＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ９）２、および−（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（Ｏ）Ｒ８から独立して選択されるか、環Ａ上の２個の隣接するＲＡ置換基が、環員（ｒｉｎｇ  ｍｅｍｂｅｒ）として２個までのヘテロ原子を含む５〜６員環を形成し；
ｎは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、または８であり；
各ｍは、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
ｔは、１、２、３、４、５、６、７、または８である）の化合物であり得る。
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｇ）、および（Ｈ）
【００８４】
上記で考察のように、ＴＬＲアゴニストは、式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｇ）、または（Ｈ）のＴＬＲアゴニストであり得る。
【００８５】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、および（Ｈ）の「親」化合物は、有用なＴＬＲ７アゴニストであるが（文献１２〜１５および３１〜４７を参照のこと）、リン含有部分の結合によって本明細書中で好ましく修飾される。
【００８６】
式（Ｃ）、（Ｄ）、および（Ｅ）のいくつかの実施形態では、化合物は、以下に示す式（Ｃ｀）、（Ｄ｀）、および（Ｅ｀）の構造を有する。
【化１４】
2015509520.tif 000015
【化１５】
2015509520.tif 000016
【００８７】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、および（Ｈ）の本発明の実施形態は、式（Ｃ｀）、（Ｄ｀）、（Ｅ｀）、および（Ｈ｀）にも適用する。
【００８８】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、および（Ｈ）のいくつかの実施形態では、ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【００８９】
式（Ｃ）の他の実施形態では、Ｐ３は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３、および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐＯｓ−および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ４は−Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリールおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；ＸＣはＣＨであり；Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基とそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１または２である。
【００９０】
式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、および（Ｈ）の他の実施形態では、Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【００９１】
式（Ｃ）の他の実施形態では、Ｐ３は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３、および−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐＯｓ−および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；Ｐ４は、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリールおよび−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択され；ＸＣはＮであり；Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【００９２】
式（Ｄ）の他の実施形態では、Ｐ５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、および−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）から選択される。
【００９３】
式（Ｄ）の他の実施形態では、ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【００９４】
式（Ｄ）の他の実施形態では、Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【００９５】
式（Ｅ）の他の実施形態では、ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【００９６】
式（Ｅ）の他の実施形態では、Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【００９７】
式（Ｅ）の他の実施形態では、ＸＥはＣＨ２であり、Ｐ８は、−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）で任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルコキシである。
【００９８】
式（Ｅ）の他の実施形態では、Ｐ９は、ＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルで任意選択的に置換された−ＮＨＣ１〜Ｃ６アルキルならびに−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）である。
【００９９】
いくつかの実施形態では、式（Ｃ）の化合物は、Ｐ４が−Ｙ−Ｌ−Ｘ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲＸ）（ＯＲＹ）である化合物ではない。
【０１００】
いくつかの実施形態では、式（Ｃ）の化合物では、Ｐ４は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６アルキルアリールから選択される。
【０１０１】
式（Ｈ）のいくつかの実施形態では、ＸＨ１−ＸＨ２はＣＲＨ２ＲＨ３であり、ＲＨ２およびＲＨ３はＨであり、ＸＨ３はＮであり、Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【０１０２】
式（Ｈ）のいくつかの実施形態では、ＸＨ１−ＸＨ２はＣＲＨ２ＲＨ３であり、ＲＨ２およびＲＨ３はＨであり、ＸＨ３はＮであり、ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【０１０３】
式（Ｇ）の「親」化合物は、有用なＴＬＲ８アゴニストであるが（文献１６および１７を参照のこと）、吸着を可能とするリン含有部分の結合によって本明細書中で好ましく修飾される。式（Ｇ）のいくつかの実施形態では、化合物は、式（Ｇ｀）：
【化１６】
2015509520.tif 000017
の構造を有する。
【０１０４】
式（Ｇ）または（Ｇ｀）のいくつかの実施形態では、ＸＧはＣであり、
【化１７】
2015509520.tif 000018
は二重結合を示す。
【０１０５】
式（Ｇ）または（Ｇ｀）のいくつかの実施形態では、Ｘは共有結合であり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基とそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
【０１０６】
式（Ｇ）または（Ｇ｀）のいくつかの実施形態では、ＸはＯであり；Ｌは、ハロ、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２から独立して選択される１〜４個の置換基でそれぞれ任意選択的に置換されたＣ１〜Ｃ６アルキレンおよび−（（ＣＨ２）ｐＯ）ｑ（ＣＨ２）ｐ−から選択され；各ｐは、１、２、および３から独立して選択され；ｑは１および２から選択される。
薬学的組成物および生成物
【０１０７】
本発明は種々の免疫原性組成物を提供する。これらは、理想的には、ヒトでの使用に適切な薬学的組成物である。薬学的組成物は、通常、ＴＬＲアゴニスト、不溶性金属塩、および／または免疫原に加えて他の成分を含む。例えば、薬学的組成物は、典型的には、１つ以上の薬学的キャリアおよび／または賦形剤を含む。かかる成分についての徹底的な考察は、文献４８で入手可能である。
【０１０８】
薬学的組成物は、好ましくは、特に投与時点で水性形態であるが、薬学的組成物は、非水性液体形態または乾燥形態（例えば、ゼラチンカプセルとしてか、または凍結乾燥物としてなど）でも存在し得る。
【０１０９】
薬学的組成物は、１つ以上の防腐剤（チオメルサールまたは２−フェノキシエタノールなど）を含んでもよい。水銀を含まない組成物が好ましく、防腐剤を含まないワクチンを調製することができる。
【０１１０】
薬学的組成物は、例えば、浸透圧を調節するための生理学的塩（ナトリウム塩など）を含むことができる。塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）がその典型であり、これは１ｍｇ／ｍｌと２０ｍｇ／ｍｌとの間（例えば、１０±２ｍｇ／ｍｌまたは９ｍｇ／ｍｌ）で存在し得る。存在し得る他の塩には、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸二ナトリウム無水物、塩化マグネシウム、塩化カルシウムなどが含まれる。
【０１１１】
薬学的組成物の重量オスモル濃度は、２００ｍＯｓｍ／ｋｇと４００ｍＯｓｍ／ｋｇとの間（例えば、２４０〜３６０ｍＯｓｍ／ｋｇまたは２９０〜３１０ｍＯｓｍ／ｋｇ）であり得る。組成物は、ヒトと等張であり得る。
【０１１２】
薬学的組成物は、淡水（例えば、ｗ．ｆ．ｉ．）中に化合物（不溶性金属塩を含むか含まない）を含んでもよいが、通常は１つ以上の緩衝液を含む。典型的な緩衝液には、以下が含まれる：リン酸緩衝液（第５の態様を除く）；Ｔｒｉｓ緩衝液；ホウ酸緩衝液；コハク酸緩衝液；ヒスチジン緩衝液（特に、水酸化アルミニウムアジュバントを含む場合）；またはクエン酸緩衝液。緩衝塩は、典型的には、５〜２０ｍＭの範囲で含まれる。リン酸緩衝液を使用する場合、リン酸イオン濃度は、いくつかの実施形態では、５０ｍＭ未満（上記を参照のこと）（例えば、１０ｍＭ未満）であるべきである。
【０１１３】
薬学的組成物は、典型的には、ｐＨ５．０とｐＨ９．５との間（例えば、ｐＨ６．０とｐＨ８．０との間）である。
【０１１４】
薬学的組成物は、好ましくは、無菌である。
【０１１５】
薬学的組成物は、好ましくは、非発熱性（例えば、１ＥＵ（内毒素単位、標準的測定）／用量未満、好ましくは０．１ＥＵ／用量未満を含有する）。
【０１１６】
薬学的組成物は、好ましくは、グルテンが存在しない。
【０１１７】
薬学的組成物はポリゲリンを含むことができるが（製品名ＲＡＢＩＰＵＲなど）、いくつかの実施形態では、組成物はポリゲリンが存在しない。
【０１１８】
薬学的組成物はヒトアルブミンを含むことができるが（製品名ＲＡＢＩＰＵＲなど）、好ましい実施形態では、組成物はヒトアルブミンが存在せず、理想的には、いかなる血清成分も実質的に存在しない。
【０１１９】
薬学的組成物は、抗生物質（典型的には、細胞培養物由来の残存抗生物質）（製品名ＲＡＢＩＰＵＲ中にみられる抗生物質（ネオマイシン、クロルテトラサイクリン、およびアンホテリシンＢ）など）を含むことができるが、いくつかの実施形態では、組成物は抗生物質が存在しない。
【０１２０】
薬学的組成物は、動物（特に、ヒト）患者への投与に適切であり、したがって、ヒトおよび動物における用途の両方が含まれる。薬学的組成物を、患者に組成物を投与する工程を含む、患者における免疫応答を引き起こす方法で使用し得る。組成物を、被験体が病原体に曝露される前および／または被験体が病原体に暴露された後に投与し得る。
【０１２１】
薬学的組成物を、単位用量形態で調製してもよい。いくつかの実施形態では、単位用量は、０．０５〜１．５ｍｌの体積（例えば、筋肉内注射については約０．５ｍｌもしくは約１．０ｍｌまたは皮内注射についてはより小さな体積（例えば、０．１ｍｌ））を有し得る。
【０１２２】
本発明はまた、例えば、単位用量を含む本発明の薬学的組成物を含む送達デバイス（例えば、シリンジ、ネブライザー、噴霧器、吸入器、皮膚パッチなど）を提供する。このデバイスを使用して、脊椎動物被験体に組成物を投与することができる。
【０１２３】
本発明はまた、例えば、単位用量を含む本発明の薬学的組成物を含む滅菌容器（例えば、バイアル）を提供する。
【０１２４】
本発明はまた、単位用量の本発明の薬学的組成物を提供する。
【０１２５】
本発明はまた、本発明の薬学的組成物を含む密封容器を提供する。適切な容器には、例えば、バイアルが含まれる。
【０１２６】
本発明はまた、第１および第２のキット成分を含むキットであって、（ｉ）第１のキット成分が不溶性金属塩および少なくとも１つの狂犬病ウイルス免疫原を含み；（ｉｉ）第２のキット成分がＴＬＲアゴニストを含む、キットを提供する。第２の成分は、理想的には、不溶性金属塩を含まず、そして／または狂犬病ウイルス免疫原を含まない。第１および第２の成分を組み合わせて、被験体への投与に適切な組成物を提供することができる。
【０１２７】
本発明はまた、第１および第２のキット成分を含むキットであって、（ｉ）第１のキット成分が不溶性金属塩およびＴＬＲアゴニストを含み；（ｉｉ）第２のキット成分が少なくとも１つの狂犬病ウイルス免疫原を含む、キットを提供する。第２の成分は、理想的には、不溶性金属塩および／またはＴＬＲアゴニストを含まない。いくつかの実施形態では、第２の成分は凍結乾燥されている。第１および第２の成分を組み合わせて、被験体への投与に適切な薬学的組成物を提供することができる。
【０１２８】
本発明はまた、第１および第２のキット成分を含むキットであって、（ｉ）第１のキット成分が少なくとも１つの狂犬病ウイルス免疫原およびＴＬＲアゴニストを含み；（ｉｉ）第２のキット成分が不溶性金属塩を含む、キットを提供する。第２の成分は、理想的には、狂犬病ウイルス免疫原および／またはＴＬＲアゴニストを含まない。第１および第２の成分を組み合わせて、被験体への投与に適切な薬学的組成物を提供することができる。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、これらのキットは、２つのバイアルを含む。他の実施形態では、キットは、１つの予め充填されたシリンジおよび１つのバイアルを含み、注射前に前記シリンジの内容物を前記バイアルの内容物と混合する。シリンジ／バイアルという配置は、バイアルの内容物が凍結乾燥されている場合に有用である。しかし、通常、第１および第２のキット成分は共に水性液体形態である。
【０１３０】
本発明の薬学的組成物を、種々の形態で調製してもよい。例えば、組成物を、溶液または懸濁液のいずれかとしての注射剤として調製してもよい。注射前の液体ビヒクルによる溶液または懸濁液に適切な固体形態を調製することもできるが（例えば、凍結乾燥組成物または噴霧−凍結乾燥組成物）、液体組成物が好ましい。組成物を、局所投与のために（例えば、軟膏、クリーム、または粉末として）調製してもよい。組成物を、経口投与のために（例えば、錠剤またはカプセルとして、噴霧剤として、またはシロップ（任意選択的に風味づけされる）として）調製してもよい。組成物を、例えば、微粉末または噴霧剤を使用した吸入器による肺投与のために調製してもよい。組成物を、坐剤またはペッサリーとして調製してもよい。組成物を、例えば、噴霧剤または点滴剤として鼻、耳、または眼への投与のために調製してもよい。組成物は、組み合わされる組成物が患者への投与直前に再構成されるようにデザインされたキット形態であり得る。筋肉内または皮内投与のための注射剤が典型的である。
【０１３１】
組成物は、有効量（すなわち、単回用量または一連の投与の一部のいずれかとして個体に投与した場合に同時投与した狂犬病ウイルス免疫原に対する免疫応答の増強に有効な量）のＴＬＲアゴニストを含む。この量は、処置すべき個体の健康状態および生理的状態、処置すべき個体の年齢、分類群（例えば、非ヒト霊長類、霊長類など）、個体の免疫系が抗体を合成する能力、所望の防御度、ワクチンの剤形、処置を担当する医師の医学的状態の評価、および他の関連する要因に応じて変動し得る。この量は比較的広範囲に及び、日常的試験によって決定することができる。１〜１０００μｇ／用量の量を使用することができる（例えば、５〜１００μｇ／用量または１０〜１００μｇ／用量、理想的には、３００μｇ／用量以下（例えば、約５μｇ、１０μｇ、２０μｇ、２５μｇ、５０μｇ、または１００μｇ／用量））。したがって、本発明の組成物中のＴＬＲアゴニスト濃度は、２〜２０００μｇ／ｍｌ（例えば、１０〜２００μｇ／ｍｌ、または約１０、２０、４０、５０、１００、または２００μｇ／ｍｌ、理想的には、６００μｇ／ｍｌ以下）であり得る。
処置方法および免疫原性組成物の投与
【０１３２】
本発明は、ヒトにおける免疫応答を引き起こすのに適切であるが、非ヒト動物（特に、イヌ、ネコ、フェレット、ウサギ、スカンク、またはキツネなどの哺乳動物）被験体でも有用であり得る。本発明にしたがって調製した組成物を使用して、小児および成人の両方を処置してもよい。
【０１３３】
本発明は、本発明の組成物を被験体に投与する工程を含む、被験体の免疫応答を引き起こす方法を提供する。本発明はまた、被験体の免疫応答を引き起こす方法で用いる本発明の組成物を提供する。本発明はまた、被験体の免疫応答を引き起こすための医薬（例えば、ワクチン）の製造における（ｉ）本明細書中に定義のＴＬＲアゴニストおよび（ｉｉ）不溶性金属塩および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原の使用を提供する。
【０１３４】
これらの方法および使用は、ヒトまたは非ヒト供給源（例えば、ウマ免疫グロブリン）に由来し得る抗狂犬病免疫グロブリン（例えば、製品名ＩＭＯＧＡＭ）の同時投与を含んでもよいが、非ヒト材料を使用する場合、理想的には、患者は最初に非ヒト材料に対する感受性をチェックすべきである。免疫グロブリンを、一般に、ヒト抗狂犬病免疫グロブリンについては２０ＩＵ／ｋｇ体重、またはウマ免疫グロブリン（またはＦ（ａｂ’）２生成物）については４０ＩＵ／ｋｇ体重の単回用量で投与する。免疫グロブリンを、最初のワクチン投与と同時であるが、身体の別の部分に投与する。免疫グロブリンの全てまたはコンパートメント症候群の可能性を回避することが解剖学的に可能なほどの量を、創傷部位内または創傷部位周囲に投与すべきである。もしあれば、残存免疫グロブリンを、ワクチン投与部位から離れた部位に筋肉内注射すべきである。
【０１３５】
これらの方法および使用によって刺激された免疫応答には、一般に、抗体応答、好ましくは防御的抗体応答が含まれる。免疫応答には、細胞性応答も含まれ得る。免疫化後の抗体および細胞性免疫応答の評価方法は、当該分野で周知である。狂犬病ワクチンについて、標準的試験は、ウイルス中和抗体を測定する（例えば、文献２７の第１５〜１７章を参照のこと）。狂犬病ウイルスの防御レベルは、一般に、標準血清の国際基準を参照して較正された、少なくとも０．５ＩＵ／ｍｌの中和抗体（Ｎａｂ）血中力価であることが認められる。Ｎａｂ力価測定のための種々のアッセイ技術が利用可能であり、この技術には、迅速蛍光フォーカス抑制試験（ＲＦＦＩＴ；文献２７の第１５章）、マウス中和試験（ＭＮＴ；文献２７の第１６章）、および蛍光抗体ウイルス中和（ＦＡＶＮ）試験（４９）が含まれる。いくつかの国において、５倍希釈でのＲＦＦＩＴの完全阻害を、防御基準として使用している。
【０１３６】
したがって、本発明の方法および使用によって刺激された免疫応答を、ヒト被験体に投与する場合、少なくとも０．５ＩＵ／ｍｌ（組成物投与から１４日後に測定）の血清Ｎａｂ力価によって明らかにすべきである。好ましい本発明の組成物は、ヒトに投与した場合、この防御効力を達成することができる。理想的には、組成物は、患者が免疫化完了から少なくとも５年間（例えば、６年間、７年間、８年間、９年間、１０年間、またはこれより長く）少なくとも０．５ＩＵ／ｍｌの血清Ｎａｂ力価を確実に維持するのに十分な免疫原性を示す。
【０１３７】
本発明の免疫原性組成物の投与は、一般に、注射による投与である。これは、皮下、皮内、または筋肉内経路による投与であり得る。筋肉内注射が好ましいが、皮内注射によって良好な結果を達成することもできる。
【０１３８】
本発明の免疫原性組成物を、一般に、感染リスクのある者に投与する。これらの者には、以下が含まれるが、これらに限定されない：獣医師；動物取扱者；研究室作業者（いくつかの分野）；狂犬病ウイルス、または狂犬病の可能性があるコウモリ、アライグマ、スカンク、ネコ、またはイヌと頻繁に接触する活動をしている者；地域特有の狂犬病を有する国への旅行者；狂犬病が比較的一般的な地域（アフリカ、アジア、およびラテンアメリカ内の開発途上国など）で動物に接触する可能性が高い海外旅行者。これらの者は、乳児（例えば、０〜２歳）、小児（例えば、２〜１２歳）、青年（例えば、１３〜１８歳）、成人（例えば、１９〜５５歳）、または高齢者（例えば、５６歳以上）であり得る。
【０１３９】
本発明の方法および使用は、上記で提供し、以下により詳細に記載している投与レジメンを使用することができる。より一般的には、単回投与レジメン（特に、追加免疫を行う場合）または複数回投与レジメン（特に、曝露前および曝露後の免疫化のため）によって免疫化することができる。複数回投与を、典型的には、異なる時間で、少なくとも１週間間隔で（例えば、約２週間、約３週間、約４週間、約６週間、約８週間、約１０週間、約１２週間など）投与するが、実質的に同時に異なる部位に複数の注射を行うことができるので、より短期の間隔での注射も使用することができる。本発明で使用することができる公知のレジメンには、以下が含まれる：０、７、および２８日目または０、７、および２１日目の筋肉内または皮内注射；０、３、７、１４、および２８／３０日目に筋肉内注射によって用量を投与する「エッセン」レジメン；０日目に各腕に１用量投与し、その後に７日目および２１日目に三角筋に注射する簡易多部位（ａｂｂｒｅｖｉａｔｅｄ  ｍｕｌｔｉｓｉｔｅ）「２−１−１」スケジュール；０、３、７、および１４日目の４用量の筋肉内注射を含む曝露後レジメン；０、３、７、および２８日目の三角筋および大腿筋の両方における皮内注射を用いた２部位レジメンである「２−２−２−０−２」レジメン；３日間間隔の２つの筋肉内注射または皮内注射；０日目の８つの皮内投与、７日目の７つの皮内投与、次いで、２８日目および９０日目の単回皮内投与を用いた「８−０−４−０−１−１」レジメン；ならびに左および右の三角筋および大腿筋にわたって分布させた４つの注射を使用した１回の来院による４部位皮内レジメン。これらのレジメンのいくつかは曝露前使用（例えば、０／７／２８日目）により適切であり、他のレジメンは曝露後使用により適切である（例えば、エッセンまたは２−１−１または８−０−４−０−１−１または２−２−２−０−２）。免疫グロブリンの同時投与（上記を参照のこと）はまた、これらのレジメンのうちのいくつか（特に、曝露後レジメン）で役立ち得、いくつかの場合、ウマ免疫グロブリンが好ましい（５０）。
【０１４０】
しかし、本発明の有利な実施形態では、これらの公知のレジメンよりも少ない用量を使用して、防御を達成することができる。例えば、本発明の組成物を使用した有利な曝露前レジメンは、全部で１または２用量を含むことができ、本発明の組成物を使用した有利な暴露後レジメンは、全部で１、２、または３用量を含むことができる。
【０１４１】
本発明の利点のさらなる活用方法では複数回投与スケジュールで投与される投与回数を減少させないが、より短い期間にわたって投与される。例えば、３回投与スケジュール（理想的には、曝露前免疫化用）は、０、３、および７日目の投与（すなわち、１週間以内に３用量全てを投与する）を含むことができる。
【０１４２】
本発明はまた、公知のワクチンを使用する場合よりも迅速に、ヒトにおいて有利に防御を達成することができる。例えば、（ｉ）本発明の組成物の単回投与または（ｉｉ）複数回投与レジメンにおける最初の投与の３週間以内またはそれより短い期間内（例えば、２週間以内、またはさらに１週間以内）に防御することができる。
【０１４３】
有用な追加免疫実施形態では、免疫原性組成物を少なくとも６年間、狂犬病ワクチンを投与されていなかった患者に投与する。
化学基
【０１４４】
他で具体的に定義されていない限り、本明細書中で考察された化学基は、本明細書中で使用する場合、以下の意味を有する。
用語「アルキル」には、以下を含む飽和炭化水素残基が含まれる。
−１０原子まで（Ｃ１〜Ｃ１０）、または６原子まで（Ｃ１〜Ｃ６）、または４原子まで（Ｃ１〜Ｃ４）の直鎖の基。かかるアルキル基の例には、Ｃ１−メチル、Ｃ２−エチル、Ｃ３−プロピル、およびＣ４−ｎ−ブチルが含まれるが、これらに限定されない。
−３原子と１０原子との間（Ｃ３〜Ｃ１０）、または７原子まで（Ｃ３〜Ｃ７）、または４原子まで（Ｃ３〜Ｃ４）の分岐鎖の基。かかるアルキル基の例には、Ｃ３−イソ−プロピル、Ｃ４−ｓｅｃ−ブチル、Ｃ４−イソ−ブチル、Ｃ４−ｔｅｒｔ−ブチル、およびＣ５−ｎｅｏ−ペンチルが含まれるが、これらに限定されない。
【０１４５】
用語「アルキレン」は、アルキル基由来の２価炭化水素ラジカルをいい、上記定義にしたがって解釈されるものとする。
【０１４６】
用語「アルケニル」には、以下を含む一不飽和炭化水素残基が含まれる。
−２原子と６原子との間（Ｃ２〜Ｃ６）の直鎖の基。かかるアルケニル基の例には、Ｃ２−ビニル、Ｃ３−１−プロペニル、Ｃ３−アリル、Ｃ４−２−ブテニルが含まれるが、これらに限定されない。
−３原子と８原子との間（Ｃ３〜Ｃ８）の分岐鎖の基。かかるアルケニル基の例には、Ｃ４−２−メチル−２−プロペニルおよびＣ６−２，３−ジメチル−２−ブテニルが含まれるが、これらに限定されない。
【０１４７】
用語「アルケニレン」は、アルケニル基由来の２価炭化水素ラジカルをいい、上記定義にしたがって解釈されるものとする。
用語「アルコキシ」には、以下を含むＯ結合炭化水素残基が含まれる。
−１原子と６原子との間（Ｃ１〜Ｃ６）または１原子と４原子との間（Ｃ１〜Ｃ４）の直鎖の基。かかるアルコキシ基の例には、Ｃ１−メトキシ、Ｃ２−エトキシ、Ｃ３−ｎ−プロポキシ、およびＣ４−ｎ−ブトキシが含まれるが、これらに限定されない。
−３原子と６原子との間（Ｃ３〜Ｃ６）または３原子と４原子との間（Ｃ３〜Ｃ４）の分岐鎖の基。かかるアルコキシ基の例には、Ｃ３−イソ−プロポキシ、およびＣ４−ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシが含まれるが、これらに限定されない。
【０１４８】
ハロは、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、およびＩから選択される。ハロは、好ましくは、Ｆである。
【０１４９】
用語「アリール」には、６または１０個の炭素原子を含む単環の芳香環系または縮合した芳香環系が含まれ、ここで、他で記載しない限り、各アリールを、上記定義のように、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、ＯＨ、ハロ、ＣＮ、ＣＯＯＲ１４、ＣＦ３、およびＮＲ１４Ｒ１５から独立して選択される５個までの置換基で任意選択的に置換してもよい。典型的には、アリールは、１、２、または３個の置換基で任意選択的に置換される。任意選択的な置換基は、上記の置換基から選択される。適切なアリール基の例には、フェニルおよびナフチル（上記のようにそれぞれ任意選択的に置換される）が含まれる。アリーレンは、アリール基由来の２価のラジカルをいい、上記定義にしたがって解釈されるものとする。
【０１５０】
用語「ヘテロアリール」には、１または２個のＮ原子、任意選択的に、ＮＲ１４原子、または１つのＮＲ１４原子およびＳ原子またはＯ原子、または１つのＳ原子、または１つのＯ原子を含む５、６、９、または１０員の単環または二環式の芳香環が含まれ；ここで、以下の定義のように、他で記載しない限り、前記ヘテロアリールを、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、ＯＨ、ハロ、ＣＮ、ＣＯＯＲ１４、ＣＦ３、およびＮＲ１４Ｒ１５から独立して選択される１、２、または３個の置換基と任意選択的に置換してもよい。適切なヘテロアリール基の例には、チエニル、フラニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾイル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、テトラゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、キノリニル、およびイソキノリニル（上記のように任意選択的に置換される）が含まれる。ヘテロアリーレンは、ヘテロアリール由来の２価ラジカルをいい、上記定義にしたがって解釈されるものとする。
【０１５１】
用語「ヘテロシクリル」は、Ｃ結合またはＮ結合の３〜１０員の非芳香族単環または二環であり、ここで、前記ヘテロシクロアルキル環は、可能であれば、Ｎ、ＮＲ１４、Ｓ（Ｏ）ｑ、およびＯから独立して選択される１、２、または３個のヘテロ原子を含み；前記ヘテロシクロアルキル環は、可能であれば、１または２つの二重結合を任意選択的に含み、炭素上で、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、ＯＨ、ＣＮ、ＣＦ３、ハロ、ＣＯＯＲ１４、ＮＲ１４Ｒ１５、およびアリールから独立して選択される１または２個の置換基と任意選択的に置換される。
【０１５２】
上記定義では、Ｒ１４およびＲ１５は、Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルから独立して選択される。
【０１５３】
例えば、式（Ｃ）の場合のＰ３基に関する不特定の、すなわち、「浮遊（ｆｌｏａｔｉｎｇ）」結合によって分子コアに結合した置換基を使用して構造式を定義する場合、この定義は、浮遊結合が存在する環上の任意の原子に不特定の置換基が結合する一方で、その原子に許容可能な原子価に適合する場合を含む。
【０１５４】
互変異性型（すなわち、ケト型またはエノール型）（例えば、式（Ｃ）または（Ｈ）の化合物）で存在し得る本発明の化合物の場合、特定の化合物という言及には、任意選択的に、全てのかかる互変異性型が含まれる。
通則
【０１５５】
用語「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「〜が含まれる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「〜からなる」を包含する。例えば、Ｘ「を含む」組成物は、排他的にＸからなり得るか、いくらかの付加物を含み得る（例えば、Ｘ＋Ｙ）。
【０１５６】
用語「実質的に」は、「完全に」を排除しない。例えば、Ｙを「実質的に含まない」組成物は、Ｙを完全に含まなくてもよい。必要ならば、用語「実質的に」は、本発明の定義から省略され得る。
【０１５７】
数値ｘに関する用語「約」は任意であり、例えば、ｘ±１０％を意味する。
【０１５８】
具体的に記載しない限り、２つ以上の成分を混合する工程を含む方法は、任意の特定の混合順序を必要としない。したがって、成分を、任意の順序で混合することができる。３つの成分が存在する場合、２成分を相互に組み合わせることができ、次いで、この組み合わせを第３の成分と組み合わせることなどができる。
【０１５９】
動物（特に、ウシ）由来の材料が細胞培養で典型的に使用されるので、この材料は、伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）、特に、ウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）が存在しない供給源から得られるべきである。
【０１６０】
化合物を組成物の一部として身体に投与する場合、この化合物を、適切なプロドラッグと代替的に置換してもよい。
【０１６１】
本発明で使用されるリン含有基は、周囲環境のｐＨ（例えば、リン含有基を溶解する溶媒のｐＨ）に応じて多数のプロトン化形態および脱プロトン化形態で存在し得る。したがって、特定の形態を例示し得るが、他で言及しない限り、それは単なる代表例であることを意図し、特定のプロトン化形態や脱プロトン化形態に限定されない。例えば、リン酸基の場合、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２としてこれを例示するが、この定義には、酸性条件下で存在し得るプロトン化形態−［ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ２）（ＯＨ）］＋および−［ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ２）２］２＋ならびに塩基性条件下で存在し得る脱プロトン化形態−［ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（Ｏ）］−および［ＯＰ（Ｏ）（Ｏ）２］２−が含まれる。
【０１６２】
本明細書中に開示の化合物は、薬学的に許容され得る塩として存在することができる。したがって、化合物を、その薬学的に許容され得る塩、すなわち、生理学的にまたは毒物学的に許容され得る塩（適切な場合、薬学的に許容され得る塩基付加塩および薬学的に許容され得る酸付加塩が含まれる）の形態で使用してもよい。
【図面の簡単な説明】
【０１６３】
【図１】図１は、０．１ＩＵまたは１．０ＩＵのいずれかの狂犬病免疫原を投与したマウスにおける２０日目および３５日目のマウスにおけるＲＦＦＩＴ中和力価を示す。各群内の４本のバーは、左から右に、以下を示す：非アジュバント化；Ａｌ−Ｈでのアジュバント化；Ａｌ−Ｈおよび１００μｇ  Ｋ２でのアジュバント化；Ａｌ−Ｈおよび２５μｇ  Ｋ２でのアジュバント化。
【０１６４】
【図２】図２は、１．０ＩＵの非アジュバント化狂犬病免疫原またはＡｌ−ＨまたはＡｌ−Ｈ／Ｋ２でアジュバント化した０．１ＩＵのワクチンを投与したマウスにおける２０、３５、４９、および９０日目のマウスにおけるＲＦＦＩＴ中和力価を示す。各群内の３本バーは、左から右に、以下を示す：非アジュバント化；Ａｌ−Ｈでのアジュバント化；Ａｌ−Ｈおよび２５μｇ  Ｋ２でのアジュバント化。
【図３】図３は、同一の時間および群についての抗糖タンパク質ＩｇＧ力価を示す。
【０１６５】
【図４】図４は、マウスにおけるＲＦＦＩＴ中和力価を示す。４本のバーの左側の群は１．０ＩＵの免疫原を投与したマウスの結果を示し；右側の群は０．１ＩＵの免疫原を投与した結果を示す。各群では、力価を、左から右に、以下のように示す：３回投与後非アジュバント化；２回投与後Ａｌ−Ｈ；および２回投与後Ａｌ−Ｈ／Ｋ２（２５μｇ）。
【図５】図５は、同一群についての抗糖タンパク質ＩｇＧ力価を示す。
【０１６６】
【図６】図６および７は、２０、３５、４９、９０、および１８０日目のＲＦＦＩＴ  Ｎａｂ力価を示す。図６は１．０ＩＵの免疫原を使用したデータを示すのに対して、図７は０．１ＩＵの免疫原についてのデータを示す。データは、非アジュバント化（◆）、Ａｌ−Ｈ（●）、またはＡｌ−Ｈ／Ｋ２（２５μｇ）（■）についてのデータである。
【図７】図６および７は、２０、３５、４９、９０、および１８０日目のＲＦＦＩＴ  Ｎａｂ力価を示す。図６は１．０ＩＵの免疫原を使用したデータを示すのに対して、図７は０．１ＩＵの免疫原についてのデータを示す。データは、非アジュバント化（◆）、Ａｌ−Ｈ（●）、またはＡｌ−Ｈ／Ｋ２（２５μｇ）（■）についてのデータである。
【０１６７】
【図８】図８は、Ａ〜Ｈ群における３５日目のＲＦＦＩＴ  Ｎａｂ力価を示す。白抜きのバーは２用量を投与したマウス由来のデータを示し（４ｗｐ２）；影付きのバーは３用量を投与したマウスについてのデータを示す（２ｗｐ３）。
【０１６８】
【図９】図９は、３用量の非アジュバント化ワクチン（Ｂ）または２用量のアジュバント化ワクチン（ＣおよびＥ）後のＲＦＦＩＴ  Ｎａｂ力価を示す。Ｃ群はＡｌ−Ｈのみを有していたのに対して、Ｅ群はＡｌ−Ｈ／Ｋ２を有していた。
【０１６９】
【図１０Ａ】図１０は、（Ａ）２用量または（Ｂ）３用量のワクチン後の抗狂犬病中和力価を示す。データは、非アジュバント化（◆）、Ａｌ−Ｈ（■）、またはＡｌ−Ｈ／Ｋ２（２５μｇ）（▲）についてのデータである。
【図１０Ｂ】図１０は、（Ａ）２用量または（Ｂ）３用量のワクチン後の抗狂犬病中和力価を示す。データは、非アジュバント化（◆）、Ａｌ−Ｈ（■）、またはＡｌ−Ｈ／Ｋ２（２５μｇ）（▲）についてのデータである。
【発明を実施するための形態】
【０１７０】
ワクチンの調製
文献３０および５１は、上記で考察した式（Ｋ）を有するＴＬＲ７アゴニストを開示している。これらの化合物のうちの１つである３−（５−アミノ−２−（２−メチル−４−（２−（２−（２−ホスホノエトキシ）エトキシ）エトキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］−［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパン酸を、以後、化合物「Ｋ２」：
【化１８】
2015509520.tif 000019
という。
【０１７１】
化合物Ｋ２を４ｍｇ／ｍｌで水に添加し、次いで、確実に完全に溶解させるために、室温で１５分間撹拌しながら１Ｍ  ＮａＯＨを添加する。この材料を水酸化アルミニウムアジュバント（Ａｌ−Ｈ）の懸濁液に添加して、所望の最終濃度にする。この混合物を周囲温度で２時間振盪して確実に完全吸着させ、次いで、ヒスチジン緩衝液成分を添加する（１０ｍＭヒスチジン緩衝液、ｐＨ６．５）。
【０１７２】
この化合物を、アルギニン塩一水和物（９８ｍｇの化合物を１．７ｍｌの０．１Ｍアルギニンを含む８０／２０メタノール／水と混合して５７ｍｇ／ｍｌ溶液を得て、その後に７ｍｌエタノール添加して塩を沈殿させることによって得た）として使用することもできる。この場合、Ａｌ−Ｈとの混合前の溶解のためにＮａＯＨは必要ないと考えられる。
【０１７３】
最終Ｋ２濃度が１０、５０、２５０、または５００μｇ／ｍｌ（投薬体積１００μｌの１、５、２５、または５０μｇ用量のＫ２を提供する）であり、Ａｌ−Ｈ濃度は常に３ｍｇ／ｍｌである４つの異なる混合物を調製する。全強度で９５％超の化合物Ｋ２をＡｌ−Ｈに吸着させる。吸着したアジュバントを、以後、「Ａｌ−Ｈ／Ｋ２」という。
【０１７４】
狂犬病ウイルスを精製ニワトリ胚細胞（ＰＣＥＣ）培養で増殖させ、精製ウイルスをβ−プロピオラクトンで不活化し（例えば、文献２７の第２８章を参照のこと）、次いで、精製してワクチン「ＲＶ」を提供する。ＲＶ中のウイルスの最終濃度は２．５ＩＵ／ｍｌ以上であった。
【０１７５】
ＲＶワクチンをＡｌ−ＨまたはＡｌ−Ｈ／Ｋ２（２５μｇまたは１００μｇ  Ｋ２／用量のいずれか）と混合してアジュバント化ワクチンを得た。
免疫化研究Ａ
【０１７６】
Ｂａｌｂ／ｃマウスに、０．１ＩＵまたは１．０ＩＵの投薬強度でアジュバント化ＲＶまたは非アジュバント化ＲＶを投与した。０、７、および２１日目にマウスにワクチンを投与し、免疫応答を、２０（２ｗｐ２）、３５（２ｗｐ３）、４９（４ｗｐ３）、９０、および１８０日目に評価した。免疫応答を、Ｎａｂ力価（ＲＦＦＩＴ）または抗糖タンパク質ＩｇＧ力価によって評価した。
【０１７７】
８つのマウス群を以下に示し、群１および２はＲＡＢＩＰＵＲを示した。
【表１】
2015509520.tif 000020
【０１７８】
図１中の結果は、Ｒａｂｉｐｕｒ（非アジュバント化）と比較してＡｌ−Ｈ／Ｋ２が２ｗｐ２および２ｗｐ３でＮａｂ力価を増強することを示す。
【０１７９】
図２および３中の結果は、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を使用してより低い用量のワクチンで良好な免疫応答を達成することができ、１０倍の用量（１ＩＵ）の非アジュバント化免疫原を使用した場合よりも０．１ＩＵアジュバント化免疫原を使用してより高い力価が達成されたことを示す。
【０１８０】
図４および５中の結果は、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２は、より少ない免疫化を使用して良好な免疫応答を達成することができ、アジュバント化ワクチンを使用した場合、２ｗｐ２で、非アジュバント化ワクチンを使用した場合に２ｗｐ３（すなわち、１回のさらなる投与後）で認められるよりも高い力価が達成されたことを示す。
【０１８１】
図６および７中の結果は、両免疫原用量で、９０日目および１８０日目（すなわち、免疫化完了から数カ月後）でさえもアジュバント化ワクチン中のＮａｂ力価は高いままであることを示す。
【０１８２】
結論として、アルミニウム塩およびＴＬＲ７アゴニストの使用により、以下を示す：抗狂犬病中和力価が増強されること；１／１０の用量の免疫原を使用した場合でさえもより高い抗狂犬病力価が得られ、それにより、精製ウイルスのバッチからより多くの用量が生成されることを可能とすること；より少ない投与後に良好な力価が得られ、これは、より少ない加速的な免疫化が可能であることを意味すること、および；より良好な持続性を有する力価が得られ、これは、追加免疫の頻度を低くすることが可能であることを意味すること。
免疫化研究Ｂ
【０１８３】
Ｂａｌｂ／ｃマウスに、０．１ＩＵの投薬強度でアジュバント化ＲＶまたは非アジュバント化ＲＶを投与した。ワクチンを、（ｉ）０および７日目または（ｉｉ）０、７、および２１日目のいずれかにマウスに投与した。免疫応答を、Ｎａｂ力価（ＲＦＦＩＴ）によって２０（２ｗｐ２）、３５（２ｗｐ３）、４９（４ｗｐ３）、９０、および１８０日目に評価した。
【０１８４】
６つのマウス群を以下に示し、群１および２はＲＡＢＩＰＵＲを示した。
【表２】
2015509520.tif 000021
【０１８５】
図８中の結果は、Ｎａｂ力価はＡｌ−Ｈのみと比較した場合にＡｌ−Ｈ／Ｋ２によって非常に増強されることを示す。図９（３５日目に採取した血液についてのＲＦＦＩＴ力価）は、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を使用して狂犬病免疫原の免疫化用量を減少させることができ（より少数の注射を使用）：Ｃ群（Ａｌ−Ｈ、２用量）中の力価はＢ群（３非アジュバント化用量）における力価と類似しているが、Ｅ群（２用量、Ａｌ−Ｈ／Ｋ２アジュバント）における力価よりはるかに低いことを示す。
【０１８６】
図１０は、９０日目までのＮａｂ力価を示す。Ａｌ−Ｈ／Ｋ２を使用した力価（▲）は、２用量（図１０Ａ）または３用量（図１０Ｂ）を使用した両方で、他の群よりも高く、持続性も示す。
【０１８７】
本発明を単なる一例として記載しており、本発明の範囲および精神の範囲内のままで修正が行われ得ると理解される。
【表３−１】
2015509520.tif 000022
【表３−２】
2015509520.tif 000023
【図１】
2015509520.tif 000024
【図２】
2015509520.tif 000025
【図３】
2015509520.tif 000026
【図４】
2015509520.tif 000027
【図５】
2015509520.tif 000028
【図６】
2015509520.tif 000029
【図７】
2015509520.tif 000030
【図８】
2015509520.tif 000031
【図９】
2015509520.tif 000032
【図１０Ａ】
2015509520.tif 000033
【図１０Ｂ】
2015509520.tif 000034
【手続補正書】
【提出日】平成26年11月5日(2014.11.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ヒトＴＬＲ７アゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物。
【請求項２】
（ｉ）不溶性アルミニウム塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物。
【請求項３】
（ｉ）水酸化アルミニウムアジュバント、（ｉｉ）該水酸化アルミニウムに吸着した化合物「Ｋ２」またはその薬学的に許容され得る塩、および（ｉｉｉ）不活化狂犬病ウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項４】
（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物であって、該組成物のｐＨが６と８との間である、免疫原性組成物。
【請求項５】
（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原、および（ｉｖ）例えば、ｐＫａが５〜９の範囲のｐＨ緩衝液を含む免疫原性組成物。
【請求項６】
前記金属塩が水酸化アルミニウムなどのアルミニウム塩である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
Ａｌ＋＋＋濃度が１０〜５００μｇ／ｍｌである請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
８０％超の前記ＴＬＲアゴニストが前記不溶性金属塩に吸着している、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記ＴＬＲアゴニストがＴＬＲ７アゴニストである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＴＬＲアゴニストが前記不溶性金属塩に吸着している、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ＴＬＲアゴニストおよび前記狂犬病免疫原の両方が前記金属塩に吸着している、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記ＴＬＲアゴニストが、本明細書中の式「Ｋ」の化合物またはその薬学的に許容され得る塩である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記ＴＬＲアゴニストが化合物Ｋ２である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、（ａ）凍結乾燥されていないか、（ｂ）水性形態であるが、凍結乾燥物の水による再構成によって調製されない、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記組成物が、（ａ）ジサッカライドを含まないか、（ｂ）２０ｍｇ／ｍｌ未満のジサッカライドを有する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物がポリゲリンを含まない、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記組成物がヒトアルブミンを含まない、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記組成物が抗生物質を含まない、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記ＴＬＲアゴニストが、不溶性金属塩に吸着可能な少なくとも１つの吸着性部分を含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
前記吸着性部分がホスフェートまたはホスホネートである、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記ＴＬＲアゴニストが、本明細書に定義の式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）、（Ｇ）、（Ｈ）、（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｊ）、または（Ｋ）を有する、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２２】
前記ＴＬＲアゴニストが、国際公開２０１２／０３１１４０号に定義の化合物１〜１０２のうちの１つまたはその薬学的に許容され得る塩である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２３】
ヒスチジン緩衝液を含む請求項１〜２２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２４】
ｐＨが６．１と７．９との間である、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれかに記載の免疫原性組成物を調製するための方法であって、前記方法が、不溶性金属塩、ＴＬＲアゴニスト、および狂犬病ウイルス免疫原を混合する工程を含む、方法。
【請求項２６】
免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）狂犬病ウイルス免疫原をＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩を含む混合物と組み合わせる工程；（ｉｉ）不溶性金属塩をＴＬＲアゴニストおよび狂犬病ウイルス免疫原を含む混合物と組み合わせる工程；または（ｉｉｉ）ＴＬＲアゴニストを不溶性金属塩および狂犬病ウイルス免疫原を含む混合物と組み合わせる工程のうちの１つを含む、方法。
【請求項２７】
免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストと可溶性アルミニウム塩との水性混合物を調製し、次いで、該ＴＬＲアゴニストが吸着した沈殿アルミニウム塩を形成するために非アルミニウム塩を該水性混合物に添加する工程；および（ｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を該沈殿塩およびその吸着アゴニストと混合する工程を含む、方法。
【請求項２８】
免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストと可溶性アルミニウム塩との水性混合物を（ｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原の緩衝化水性混合物と混合する工程であって、前記混合する工程により、該ＴＬＲアゴニストおよび該免疫原が吸着したアルミニウム塩が沈殿する、混合する工程を含む、方法。
【請求項２９】
滅菌免疫原性組成物を調製する方法であって、（ｉ）狂犬病ウイルス免疫原を（ｉｉ）ＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩の滅菌複合体と組み合わせる工程を含む、方法。
【請求項３０】
前記滅菌複合体を、
（ａ）前記ＴＬＲアゴニストと不溶性金属塩とを混合し、その結果、前記ＴＬＲアゴニストが前記不溶性金属塩に吸着して前記複合体を形成する工程；および
（ｂ）前記複合体を滅菌する工程
を含む方法によって調製することができる、請求項２９に記載の滅菌免疫原性組成物を調製する方法。
【請求項３１】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載の組成物を調製するための請求項２５〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
（ａ）不溶性金属塩に吸着した第１のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；（ｂ）不溶性金属塩に吸着した第２のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；および（ｃ）狂犬病ウイルス免疫原を含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６２】
本明細書中に開示の化合物は、薬学的に許容され得る塩として存在することができる。したがって、化合物を、その薬学的に許容され得る塩、すなわち、生理学的にまたは毒物学的に許容され得る塩（適切な場合、薬学的に許容され得る塩基付加塩および薬学的に許容され得る酸付加塩が含まれる）の形態で使用してもよい。
上記に加えて、本発明は以下を提供する:
（項目１）
（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ヒトＴＬＲ７アゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物。
（項目２）
（ｉ）不溶性アルミニウム塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物。
（項目３）
（ｉ）水酸化アルミニウムアジュバント、（ｉｉ）該水酸化アルミニウムに吸着した化合物「Ｋ２」またはその薬学的に許容され得る塩、および（ｉｉｉ）不活化狂犬病ウイルスを含む免疫原性組成物。
（項目４）
（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、および（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を含む免疫原性組成物であって、該組成物のｐＨが６と８との間である、免疫原性組成物。
（項目５）
（ｉ）不溶性金属塩、（ｉｉ）ＴＬＲアゴニスト、（ｉｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原、および（ｉｖ）例えば、ｐＫａが５〜９の範囲のｐＨ緩衝液を含む免疫原性組成物。
（項目６）
前記金属塩が水酸化アルミニウムなどのアルミニウム塩である、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目７）
Ａｌ＋＋＋濃度が１０〜５００μｇ／ｍｌである項目６に記載の組成物。
（項目８）
８０％超の前記ＴＬＲアゴニストが前記不溶性金属塩に吸着している、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目９）
前記ＴＬＲアゴニストがＴＬＲ７アゴニストである、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目１０）
前記ＴＬＲアゴニストが前記不溶性金属塩に吸着している、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目１１）
前記ＴＬＲアゴニストおよび前記狂犬病免疫原の両方が前記金属塩に吸着している、項目１０に記載の組成物。
（項目１２）
前記ＴＬＲアゴニストが、本明細書中の式「Ｋ」の化合物またはその薬学的に許容され得る塩である、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目１３）
前記ＴＬＲアゴニストが化合物Ｋ２である、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目１４）
前記組成物が、（ａ）凍結乾燥されていないか、（ｂ）水性形態であるが、凍結乾燥物の水による再構成によって調製されない、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目１５）
前記組成物が、（ａ）ジサッカライドを含まないか、（ｂ）２０ｍｇ／ｍｌ未満のジサッカライドを有する、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目１６）
前記組成物がポリゲリンを含まない、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目１７）
前記組成物がヒトアルブミンを含まない、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目１８）
前記組成物が抗生物質を含まない、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目１９）
前記ＴＬＲアゴニストが、不溶性金属塩に吸着可能な少なくとも１つの吸着性部分を含む、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目２０）
前記吸着性部分がホスフェートまたはホスホネートである、項目１９に記載の組成物。
（項目２１）
前記ＴＬＲアゴニストが、本明細書に定義の式（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）、（Ｇ）、（Ｈ）、（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｊ）、または（Ｋ）を有する、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目２２）
前記ＴＬＲアゴニストが、国際公開２０１２／０３１１４０号に定義の化合物１〜１０２のうちの１つまたはその薬学的に許容され得る塩である、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目２３）
ヒスチジン緩衝液を含む前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目２４）
ｐＨが６．１と７．９との間である、前記項目のいずれかに記載の組成物。
（項目２５）
被験体における免疫応答を引き起こす方法であって、該被験体に前記項目のいずれかに記載の組成物を投与する工程を含む、方法。
（項目２６）
前記項目のいずれかに記載の免疫原性組成物を調製するための方法であって、前記方法が、不溶性金属塩、ＴＬＲアゴニスト、および狂犬病ウイルス免疫原を混合する工程を含む、方法。この方法により、上記の免疫原性組成物を得ることができる。
（項目２７）
免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）狂犬病ウイルス免疫原をＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩を含む混合物と組み合わせる工程；（ｉｉ）不溶性金属塩をＴＬＲアゴニストおよび狂犬病ウイルス免疫原を含む混合物と組み合わせる工程；または（ｉｉｉ）ＴＬＲアゴニストを不溶性金属塩および狂犬病ウイルス免疫原を含む混合物と組み合わせる工程のうちの１つを含む、方法。
（項目２８）
免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストと可溶性アルミニウム塩との水性混合物を調製し、次いで、該ＴＬＲアゴニストが吸着した沈殿アルミニウム塩を形成するために非アルミニウム塩を該水性混合物に添加する工程；および（ｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原を該沈殿塩およびその吸着アゴニストと混合する工程を含む、方法。
（項目２９）
免疫原性組成物を調製するための方法であって、（ｉ）ＴＬＲアゴニストと可溶性アルミニウム塩との水性混合物を（ｉｉ）狂犬病ウイルス免疫原の緩衝化水性混合物と混合する工程であって、前記混合する工程により、該ＴＬＲアゴニストおよび該免疫原が吸着したアルミニウム塩が沈殿する、混合する工程を含む、方法。本発明はまた、この方法によって得られるか得ることができる免疫原性組成物を提供する。
（項目３０）
滅菌免疫原性組成物を調製する方法であって、（ｉ）狂犬病ウイルス免疫原を（ｉｉ）ＴＬＲアゴニストおよび不溶性金属塩の滅菌複合体と組み合わせる工程を含む、方法。滅菌複合体を、（ａ）ＴＬＲアゴニストと不溶性金属塩とを混合し、その結果、該ＴＬＲアゴニストが該不溶性金属塩に吸着して該複合体を形成する工程；および（ｂ）該複合体を滅菌する工程を含む方法によって調製することができる。
（項目３１）
項目１〜２４のいずれか１項に記載の組成物を調製するための項目２６〜３０のいずれか１項に記載の方法。
（項目３２）
（ａ）不溶性金属塩に吸着した第１のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；（ｂ）不溶性金属塩に吸着した第２のＴＬＲアゴニストを含むアジュバント複合体；および（ｃ）狂犬病ウイルス免疫原を含む組成物。
【国際調査報告】
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