【手続補正書】
【提出日】平成22年5月14日(2010.5.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
防御タンパク質を含むトランスジェニック植物細胞であって、該防御タンパク質が環境的分解からの保護を提供し、そして配列番号２の残基１−６０６または１−６２７に対応するポリ免疫グロブリン受容体からのアミノ酸残基を有し、配列番号２の残基６２８−７５５に対応するアミノ酸残基を含まないものである、トランスジェニック植物細胞。
【請求項２】
抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来重鎖、抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来軽鎖または免疫グロブリンＪ鎖からなる群から選択される少なくとも１つの付加的分子も含む、請求項１記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項３】
該免疫グロブリンが、該免疫グロブリン重鎖と会合した抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来軽鎖を更に含む、請求項２記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項４】
該免疫グロブリンが、該防御タンパク質と会合した抗原結合ドメインを有する第２免疫グロブリン由来重鎖を更に含む、請求項２または３に記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項５】
該免疫グロブリンが、該第２免疫グロブリン由来重鎖に結合した抗原結合ドメインを有する第２免疫グロブリン由来軽鎖を更に含む、請求項４記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項６】
該免疫グロブリンが、該免疫グロブリン由来重鎖の少なくとも１つに結合した免疫グロブリンＪ鎖を更に含む、請求項２から５のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項７】
該免疫グロブリンが治療的免疫グロブリンである、請求項１から６のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項８】
該治療的免疫グロブリンが粘膜病原体抗原に結合する、請求項７記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項９】
該治療的免疫グロブリンが虫歯の予防ができる、請求項８記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１０】
その抗原結合ドメインがＳ．mutans血清型ｃ、ｅおよびｆならびにＳ．sobrinus血清型ｄおよびｇに由来の抗原に結合できる、請求項２から９のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１１】
該防御タンパク質が、配列番号２のアミノ酸残基１−６０６または１−６２７を含む、請求項１記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１２】
ポリ免疫グロブリン受容体が配列番号４である、請求項１に記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１３】
該防御タンパク質が：
ａ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８および配列番号１０：ドメインＩ、ドメインII、ドメインIII、ドメインIV、ドメインＶおよびドメインVIのアミノ酸残基５５３−６０６または５５３−６２７から成る群から選択された第１動物のポリ免疫グロブリン受容体由来である少なくとも１個の部分を含む第１部分；および
ｂ）該第１部分を含まず、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８および配列番号１０：ドメインＩ、ドメインII、ドメインIII、ドメインIV、ドメインＶおよびドメインVIのアミノ酸残基５５３−６０６または５５３−６２７から成る群から選択される第２動物のポリ免疫グロブリン受容体由来である少なくとも１個のドメインを含む、第２部分
を含む（ここで、該第１部分および該第２部分は、一緒になって配列番号２のアミノ酸残基１−６０６に対応するタンパク質を形成する)、請求項３記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１４】
第１動物がヒトであり、第２動物がウサギである、請求項１３記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１５】
免疫グロブリン由来重鎖が、少なくともＩｇＭまたはＩｇＡ重鎖または任意のサブタイプの部分を含む、請求項２から１０、１３または１４のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１６】
免疫グロブリン由来重鎖が、二つの異なる免疫グロブリンのアイソタイプ由来の免疫グロブリンから成る、請求項２から１０、１３または１４のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１７】
免疫グロブリンドメインが
ａ）マウスＩｇＧのＣH１およびマウスＩｇＡのＣH２およびＣH３領域；
ｂ）マウスＩｇＧのＣH１およびＣH２およびマウスＩｇＡのＣH２およびＣH３領域；
からなる群から選択される、請求項１６記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１８】
該抗原結合ドメインがＧuy's13重鎖可変領域に実質的に対応する、請求項２から１０または１３から１７のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項１９】
該抗原結合ドメインがＧuy's13軽鎖可変領域に対応する、請求項２から１０または１３から１７のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項２０】
請求項１に定義の防御タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含むトランスジェニック植物細胞であって、該防御タンパク質が配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８および配列番号１０から成る群から選択されるポリペプチドのアミノ酸残基１−６０６または１−６２７に対応するアミノ酸配列を有する、トランスジェニック植物細胞。
【請求項２１】
抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来重鎖、抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来軽鎖または免疫グロブリンＪ鎖からなる群から選択される少なくとも１つの分子をコードする第２ヌクレオチド配列も含む、請求項２０記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項２２】
第２ヌクレオチド配列が、抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン重鎖をコーするものである；および更に抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来軽鎖をコードする第３ヌクレオチド配列も含む、請求項２１記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項２３】
免疫グロブリンＪ鎖をコードする第４ヌクレオチド配列も含む、請求項２２記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項２４】
請求項１に定義の防御タンパク質をコードするヌクレオチド配列（ここで、該防御タンパク質が配列番号２のアミノ酸残基１−６０６または１−６２７に対応するアミノ酸配列を有する)、および抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン重鎖をコードするヌクレオチド配列を含む、トランスジェニック植物細胞。
【請求項２５】
植物細胞が双子葉植物または単子葉植物由来である、請求項１から２４のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項２６】
植物細胞がナス科植物由来である、請求項１から２５のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項２７】
植物細胞がアルファルファ細胞である、請求項１から２５のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項２８】
植物細胞がタバコ植物由来である、請求項１から２５のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項２９】
植物細胞が植物の一部である、請求項１から２８のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞。
【請求項３０】
（ａ）転写プロモーターに操作可能に結合した免疫グロブリン由来の防御タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクターの植物細胞への挿入(ここで、該防御タンパク質は、環境的分解からの保護を提供し、そして配列番号２の残基１−６０６または１−６２７に対応するアミノ酸残基を含む)；および
（ｂ）転写プロモーターに操作可能に結合した抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来重鎖をコードするヌクレオチドを含む発現ベクターの同じ植物細胞への挿入：の段階を含む、請求項１から２９のいずれかに記載のトランスジェニック植物細胞の製造方法。
【請求項３１】
（ｃ）転写プロモーターに操作可能に結合した抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来軽鎖をコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクターの同じ植物細胞への挿入：の段階を更に含む、請求項３０記載の方法。
【請求項３２】
転写プロモーターに操作可能に結合した免疫グロブリン由来Ｊ鎖をコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクターの同じ植物細胞への挿入の段階を更に含む、請求項３０または３１のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
免疫グロブリン由来重鎖が免疫グロブリンアルファ鎖であり、免疫グロブリン由来軽鎖が免疫グロブリンカッパまたはラムダ鎖である、請求項３０から３２のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
免疫グロブリン由来重鎖が免疫グロブリンアルファ鎖および免疫グロブリンガンマ鎖の部分を含む、請求項３０から３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３５】
植物細胞が植物の一部である、請求項３０から３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
更に植物を生育させることを含む、請求項３５記載の方法
【請求項３７】
植物が、双子葉植物、単子葉植物、ナス科植物、マメ科植物、アルファルファまたはタバコ植物由来である、請求項３５または３６に記載の方法。
【請求項３８】
免疫グロブリン由来重鎖がキメラ免疫グロブリン重鎖である、請求項３４から３７のいずれかに記載の方法。
【請求項３９】
請求項２９記載の植物の一部を、圧力下に剪断し、治療的免疫グロブリンおよび植物高分子物質を植物のアポプラストまたはシンプラスト由来の液体中に含み、固体植物由来材料を含むパルプを製造する段階を含む、植物高分子物質を含む治療的免疫グロブリン組成物の製造方法。
【請求項４０】
液体から固体植物由来材料を分離する段階を更に含む、請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
植物の一部が葉、幹、根、塊根、果実または全植物である、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４２】
剪断が、植物のアポプラストまたはシンプラストから液体を放出させる機械的装置により達成される、請求項４１記載の方法。
【請求項４３】
分離が遠心、沈殿、フロキュレーションまたは濾過によるものである、請求項４０記載の方法。
【請求項４４】
ａ）植物細胞への操作可能に結合した
ｉ）抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来重鎖、
ii）抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来軽鎖、
iii）免疫グロブリンＪ鎖および
iv）防御タンパク質（ここで、該防御タンパク質は環境的分解からの保護を提供し、そして配列番号２の残基１−６０６または１−６２７に対応するポリ免疫グロブリン受容体からのアミノ酸を含み、ここで、配列番号２のアミノ酸残基６２８−７５５は存在しない）：をコードするヌクレオチド配列の挿入；および
ｂ）該細胞の、該免疫グロブリン由来重および軽鎖、該免疫グロブリンＪ鎖および該防御タンパク質の免疫グロブリン分子の製造および集合を可能にする条件下での維持：
の段階を含む、重、軽およびＪ鎖および防御タンパク質を有する集合免疫グロブリンの製造方法。
【請求項４５】
請求項４４の工程ａ）に従い製造したトランスジェニック植物細胞を、タンパク質製造および免疫グロブリン分子集合を可能にする条件下で維持することによる、重、軽およびＪ鎖および防御タンパク質を有する集合免疫グロブリンの製造方法。
【請求項４６】
ａ）免疫グロブリン重鎖由来の抗原結合ドメインをコードするヌクレオチド配列の免疫グロブリンアルファ重鎖由来の少なくとも一つのドメインをコードするヌクレオチド配列へ操作可能に結合させ、キメラ免疫グロブリン重鎖をコードするヌクレオチドを形成させる；
ｂ）防御タンパク質（ここで、該防御タンパク質は環境的分解からの保護を提供し、そして配列番号２の残基１−６０６または１−６２７に対応するポリ免疫グロブリン受容体からのアミノ酸を含み、ここで、配列番号２のアミノ酸残基６２８−７５５は存在しない）、抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来軽鎖および免疫グロブリンＪ鎖からなる群から選択される少なくとも一つの他の分子もまた含むトランスジェニック植物細胞中で該キメラ免疫グロブリン重鎖をコードするヌクレオチド配列を発現させ、キメラ免疫グロブリン重鎖を製造させる；および
ｃ）それによりキメラ免疫グロブリン重鎖を少なくとも一つの分子と集合させ、環境条件に耐性な免疫グロブリンを形成させる段階を含む、環境条件に耐性な免疫グロブリンの製造方法。
【請求項４７】
他の分子が防御タンパク質であり、トランスジェニック植物細胞がまた抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来軽鎖および免疫グロブリンＪ鎖も含む、請求項４６記載の方法。
【請求項４８】
ａ）免疫グロブリン重鎖由来の抗原結合ドメインをコードするヌクレオチド配列が、免疫グロブリンアルファ重鎖由来の少なくとも一つのドメインをコードするヌクレオチド配列に操作可能に結合している、キメラ免疫グロブリン重鎖をコードするヌクレオチド配列；
ｂ）防御タンパク質（ここで、該防御タンパク質は環境的分解からの保護を提供し、そして配列番号２の残基１−６０６または１−６２７に対応するポリ免疫グロブリン受容体からのアミノ酸を含み、ここで、配列番号２のアミノ酸残基６２８−７５５は存在しない）、抗原結合ドメインを有する免疫グロブリン由来軽鎖および免疫グロブリンＪ鎖からなる群から選択される少なくとも一つの他の分子；
を含む植物細胞をタンパク質製造および免疫グロブリンを可能にする条件下に維持し、それによりキメラ免疫グロブリン重鎖を少なくとも一つの分子と集合させ、環境条件に耐性な免疫グロブリンを形成させることによる、環境条件に耐性な免疫グロブリンの製造方法。
【請求項４９】
それぞれ多量体ペプチド分子の異なるポリペプチドをコードする４つの異なるトランスジーンから成り、ここで、それぞれのその異なるポリペプチオドの少なくとも一つが多量体ペプチド分子中で互いに結合しており、ここで、該４つのトランスジーンの少なくとも１個が防御タンパク質をコードしている（ここで、該防御タンパク質は環境的分解からの保護を提供し、そして配列番号２の残基１−６０６または１−６２７に対応するポリ免疫グロブリン受容体からのアミノ酸を含み、ここで、配列番号２のアミノ酸残基６２８−７５５は存在しない）、トランスジェニック植物。
【請求項５０】
４つのトランスジーンの少なくとも一つが、少なくとも抗原結合ドメインの部分を有する免疫グロブリン由来重鎖をコードするトランスジーンである、請求項４９記載のトランスジェニック植物。
【請求項５１】
４つのトランスジーンの少なくとも一つが、少なくとも抗原結合ドメインの部分を有する免疫グロブリン由来軽鎖をコードするトランスジーンである、請求項４９記載のトランスジェニック植物。
【請求項５２】
４つのトランスジーンの少なくとも一つが、免疫グロブリンＪ鎖をコードするトランスジーンである、請求項４９記載のトランスジェニック植物。
【請求項５３】
４つのトランスジーンの少なくとも一つが、キメラ免疫グロブリン重鎖をコードするトランスジーンである、請求項４９記載のトランスジェニック植物。
【請求項５４】
キメラ免疫グロブリン重鎖が、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＤである免疫グロブリン重鎖由来の少なくとも一つの免疫グロブリンドメインを含み、ＩｇＡまたはＩｇＭ由来の防御タンパク質結合ドメインもまた含む、請求項５３記載のトランスジェニック植物。
【請求項５５】
免疫グロブリン重鎖が、ヒト、囓歯類、ウサギ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、家禽、イヌ、ネコまたは霊長類免疫グロブリン由来重鎖である、請求項５３記載のトランスジェニック植物。
【請求項５６】
防御タンパク質結合ドメインがヒト、囓歯類、ウサギ、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコまたは霊長類のＩｇＡ由来である、請求項５３記載のトランスジェニック植物。
【請求項５７】
キメラ免疫グロブリン重鎖がマウスＩｇＧ１の免疫グロブリン鎖を含み、防御タンパク質結合ドメインがマウスＩｇＡまたはＩｇＭ由来である、請求項５３記載のトランスジェニック植物。
【請求項５８】
キメラ免疫グロブリン重鎖がヒトＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＤまたはＩｇＥの免疫グロブリンドメインを含み、防御タンパク質結合ドメインがヒトＩｇＡまたはＩｇＭ由来である、請求項５３記載のトランスジェニック植物。