【手続補正書】
【提出日】平成22年4月22日(2010.4.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
真核生物細胞の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの少なくとも１つはセンス方向にあり、且つ別のコピーの少なくとも一つがアンチセンス方向にあって、前記多重コピーは真核生物細胞中で機能し得る単一のプロモーター配列の制御下に機能可能に配置されている遺伝子構築物で細胞培養物又は組織培養物中の真核生物細胞を形質転換することを含む、形質転換真核生物細胞を生体外で製造する方法。
【請求項２】
真核生物細胞の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの少なくとも１つはセンス方向にあり、且つ別のコピーの少なくとも一つがアンチセンス方向にあって、前記多重コピーは真核生物細胞中で機能し得る単一のプロモーター配列の制御下に機能可能に配置されている遺伝子構築物で細胞培養物又は組織養物中の真核生物細胞を形質転換することを含む、真核生物細胞中でRNA分子を生体外で製造する方法。
【請求項３】
真核生物細胞の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの１つが第1のプロモーター配列にセンス方向で機能可能に接続しており、前記多重コピーの他の１つが第2のプロモーターに機能可能に接続しており、前記第1及び第2のプロモーターが真核生物細胞で機能可能である遺伝子構築物で細胞培養物又は組織培養物中の真核生物細胞を形質転換することを含む、形質転換真核生物細胞を生体外で製造する方法。
【請求項４】
真核生物細胞の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの１つが第1のプロモーター配列にセンス方向で機能可能に接続しており、前記多重コピーの他の１つが第2のプロモーターに機能可能に接続しており、前記第1及び第2のプロモーターが真核生物細胞で機能可能である遺伝子構築物で細胞培養物又は組織培養物中の真核生物細胞を形質転換することを含む、RNA分子を生体外で製造する方法。
【請求項５】
細胞が動物細胞である、請求項１〜４のいずれか1項記載の方法。
【請求項６】
真核生物の標的遺伝子の発現を抑制し、遅延させ又は低減させるための組成物であって、活性成分として遺伝子構築物を含み、前記遺伝子構築物が真核生物細胞の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの少なくとも１つはセンス方向にあり、且つ別のコピーの少なくとも一つがアンチセンス方向にあって、前記多重コピーは真核生物細胞中で機能し得る単一のプロモーター配列の制御下に機能可能に配置されている、前記組成物。
【請求項７】
標的遺伝子の発現を抑制し、遅延させ又は低減させるための組成物であって、活性成分として遺伝子構築物を含み、前記遺伝子構築物が真核生物の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの１つが第1のプロモーター配列にセンス方向で機能可能に接続しており、前記多重コピーの他の１つが第2のプロモーターに機能可能に接続しており、前記第1及び第2のプロモーターが真核生物細胞で機能可能である、前記組成物。
【請求項８】
疾病の治療および／または予防のための組成物であって、活性性成分として遺伝子構築物を含み、前記遺伝子構築物が真核生物細胞の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの少なくとも１つはセンス方向にあり、且つ別のコピーの少なくとも一つがアンチセンス方向にあって、前記多重コピーは真核生物細胞中で機能し得る単一のプロモーター配列の制御下に機能可能に配置されている、前記組成物。
【請求項９】
疾病の治療および／または予防のための組成物であって、活性性成分として遺伝子構築物を含み、前記遺伝子構築物が真核生物の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの１つが第1のプロモーター配列にセンス方向で機能可能に接続しており、前記多重コピーの他の１つが第2のプロモーターに機能可能に接続しており、前記第1及び第2のプロモーターが真核生物細胞で機能可能である、前記組成物。
【請求項１０】
ヌクレオチド配列の多重コピーが標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域と同一である、請求項６〜９のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１１】
多重コピーが分断されたパリンドローム配列として存在する、請求項６〜１０のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１２】
多重コピーがヌクレオチドの配列を含むスタッファー断片によって空間的に隔てられている、請求項６〜１１のいずれか1項記載の組成物。
【請求項１３】
ヌクレオチド配列が100ヌクレオチド長までである、請求項６〜１２のいずれか1項記載の組成物。
【請求項１４】
疾病の治療および／または予防のための医薬の調製における合成遺伝子構築物の使用であって、前記遺伝子構築物が真核生物細胞の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの少なくとも１つはセンス方向にあり、且つ別のコピーの少なくとも一つがアンチセンス方向にあって、前記多重コピーは真核生物細胞中で機能し得る単一のプロモーター配列の制御下に機能可能に配置されている、前記使用。
【請求項１５】
疾病の治療および／または予防のための医薬の調製における合成遺伝子構築物の使用であって、前記遺伝子構築物が真核生物の標的遺伝子または前記標的遺伝子の領域に少なくとも95％同一である２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含み、前記多重コピーの１つが第1のプロモーター配列にセンス方向で機能可能に接続しており、前記多重コピーの他の１つが第2のプロモーターに機能可能に接続しており、前記第1及び第2のプロモーターが真核生物細胞で機能可能である、前記使用。
【請求項１６】
真核生物細胞が動物細胞である、請求項１４または１５記載の使用。
【請求項１７】
(a)標的遺伝子のヌクレオチド配列又はその領域又はそれに相補的な配列と実質的に同一な２０ヌクレオチドより長いヌクレオチド配列の多重コピーを含む核酸分子であって、前記多重コピーが分断されたパリンドローム配列として存在する前記核酸分子を選択すること、
(b)機能しうるように単一プロモーター配列の制御下にある前記核酸分子を含む合成遺伝子を製造すること、
(c)前記合成遺伝子を単離された動物細胞に導入すること、
(d)前記合成遺伝子を前記細胞中で発現させること、
を含む、単離された動物細胞中の標的遺伝子の発現を抑制し、遅延させ又は低減させる方法であって、但し、前記標的遺伝子のmRNA産物転写が排他的に抑制または低減されるのではない、前記方法。
【請求項１８】
標的遺伝子が細胞に対して内因性である、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
標的遺伝子が細胞に対して非内因性である、請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
標的遺伝子がウイルス遺伝子である、請求項１９記載の方法。