【手続補正書】
【提出日】平成22年7月22日(2010.7.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学修飾したダイヤモンド／ＤＬＣ（Diamond-like Carbon）チップを活性化試薬により活性化した後、蛋白質／ペプチドを前記チップ上にスポッティングしてカップリング反応を行う、チップ上に蛋白質／ペプチドを固定する方法であって、活性化試薬により活性化した後、チップを洗浄した洗浄水の乾燥処理として３０〜１２０分間の減圧乾燥処理を行い、かつ、カップリング反応後、３０〜４５℃で２〜４時間乾燥させることを特徴とする蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項２】
洗浄水が、MilliQ水であることを特徴とする請求項１記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項３】
スポッティング添加剤としてジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を用いることを特徴とする請求項１又は２記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項４】
２０〜４０％ＤＭＳＯ又は２０〜４０％ＰＥＧを用いることを特徴とする請求項３記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項５】
３０％ＤＭＳＯ又は３０％ＰＥＧを用いることを特徴とする請求項４記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項６】
活性化試薬が、ＷＳＣＤ・ＨＣｌ及びＮＨＳを含有する溶液であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項７】
カップリング反応を行った後、未反応活性基のブロッキング操作を行うことを特徴とする請求項１〜６のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項８】
蛋白質／ペプチドが、抗原又は抗体であることを特徴とする請求項１〜７のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項９】
抗原がアレルゲンであることを特徴とする請求項８記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項１０】
アレルゲンがアレルゲンエピトープ又はアレルゲンエピトープを含むペプチドであることを特徴とする請求項９記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項１１】
アレルゲンエピトープ又はアレルゲンエピトープを含むペプチドとして、化学修飾されたペプチドを用いることを特徴とする請求項１０記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項１２】
アレルゲンエピトープを含むペプチドとして、ＭＨＣクラスII分子に結合するペプチド部分のＮ末端側及び／又はＣ末端側に少なくとも２個以上のアミノ酸が付加されたエピトープ含有ペプチドを用いることを特徴とする請求項１０記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項１３】
アレルゲンエピトープを含むペプチドとして、アレルゲンのエピトープを含むプロテアーゼ分解ペプチドを用いることを特徴とする請求項１０〜１２のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項１４】
プロテアーゼ分解ペプチドが、トリプシン分解ペプチドであることを特徴とする請求項１３記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項１５】
アレルゲンとして、食物アレルゲンを用いることを特徴とする請求項１０〜１４のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項１６】
食物アレルゲンとして、カゼインナトリウム、α−カゼイン、β−カゼイン、κ−カゼイン、α−ラクトアルブミン、β−ラクトグロブリン、オボムコイド、オボアルブミン、コンアルブミンから選ばれる１種又は２種以上のアレルゲンを用いることを特徴とする請求項１５記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法で得られた蛋白質／ペプチド固定化チップ。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
すなわち本発明は、（１）化学修飾したダイヤモンド／ＤＬＣ（Diamond-like Carbon）チップを活性化試薬により活性化した後、蛋白質／ペプチドを前記チップ上にスポッティングしてカップリング反応を行う、チップ上に蛋白質／ペプチドを固定する方法であって、活性化試薬により活性化した後、チップを洗浄した洗浄水の乾燥処理として３０〜１２０分間の減圧乾燥処理を行い、かつ、カップリング反応後、３０〜４５℃で２〜４時間乾燥させることを特徴とする蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（２）洗浄水が、MilliQ水であることを特徴とする上記（１）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（３）スポッティング添加剤としてジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を用いることを特徴とする上記（１）又は（２）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（４）２０〜４０％ＤＭＳＯ又は２０〜４０％ＰＥＧを用いることを特徴とする上記（３）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（５）３０％ＤＭＳＯ又は３０％ＰＥＧを用いることを特徴とする上記（４）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（６）活性化試薬が、ＷＳＣＤ・ＨＣｌ及びＮＨＳを含有する溶液であることを特徴とする上記（１）〜（５）のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（７）カップリング反応を行った後、未反応活性基のブロッキング操作を行うことを特徴とする上記（１）〜（６）のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（８）蛋白質／ペプチドが、抗原又は抗体であることを特徴とする上記（１）〜（７）のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法に関する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
さらに本発明は、（９）抗原がアレルゲンであることを特徴とする上記（８）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（１０）アレルゲンがアレルゲンエピトープ又はアレルゲンエピトープを含むペプチドであることを特徴とする上記（９）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（１１）アレルゲンエピトープ又はアレルゲンエピトープを含むペプチドとして、化学修飾されたペプチドを用いることを特徴とする上記（１０）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（１２）アレルゲンエピトープを含むペプチドとして、ＭＨＣクラスII分子に結合するペプチド部分のＮ末端側及び／又はＣ末端側に少なくとも２個以上のアミノ酸が付加されたエピトープ含有ペプチドを用いることを特徴とする上記（１０）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（１３）アレルゲンエピトープを含むペプチドとして、アレルゲンのエピトープを含むプロテアーゼ分解ペプチドを用いることを特徴とする上記（１０）〜（１２）のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（１４）プロテアーゼ分解ペプチドが、トリプシン分解ペプチドであることを特徴とする上記（１３）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（１５）アレルゲンとして、食物アレルゲンを用いることを特徴とする上記（１０）〜（１４）のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（１６）食物アレルゲンとして、カゼインナトリウム、α−カゼイン、β−カゼイン、κ−カゼイン、α−ラクトアルブミン、β−ラクトグロブリン、オボムコイド、オボアルブミン、コンアルブミンから選ばれる１種又は２種以上のアレルゲンを用いることを特徴とする上記（１５）記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法や、（１７）上記（１）〜（１６）のいずれか記載の蛋白質／ペプチドの固定化方法で得られた蛋白質／ペプチド固定化チップに関する。