(57)【要約】連続溶媒生体材料が記載される。実施形態は、有機溶媒中で製造され、溶媒が放散されて患者に使用される材料を含み、患者内でそれらは水を吸収してヒドロゲルを形成する。これらの材料は、とりわけ、治療剤の送達、組織増大、及び放射線マーキングに有用である。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
水溶性生物製剤の粉末の周囲にオルガノゲルを形成することを含む医療材料の製造方法であって、
水溶性生物製剤の粉末がオルガノゲルに分散している製造方法。
【請求項２】
前記水溶性生物製剤が、少なくとも約１０，０００ダルトンの分子質量を有するタンパク質であり、糖が前記タンパク質と会合している、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記粉末が第一の粉末であり、前記方法が第二の水溶性生物製剤を含む第二の粉末を更に含み、前記第一の粉末と前記第二の粉末がオルガノゲル全体に分散している、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記オルガノゲルが水溶液の非存在下で形成される、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記オルガノゲルから溶媒を除去し、それによりキセロゲルを形成することを更に含む、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記溶媒が、真空除去、凍結乾燥、及び凍結とそれに続く真空の適用からなる群から選択される方法により除去される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記キセロゲルが、水溶液への曝露時にヒドロゲルである、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記ヒドロゲルが形成される時、前記水溶性生物製剤が固相で実質的に粉末中に留まり、前記ヒドロゲルが哺乳動物中インビボで生理溶液に曝される時、ある期間にわたりゆっくりと溶解する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記生物製剤が、二次構造及び／又は三次構造を有するタンパク質であり、前記タンパク質が、例えば、酵素結合免疫吸着法及び等電点電気泳動法により測定可能な変性を実質的に含まないコンフォメーションで放出される、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記オルガノゲルが共有結合性架橋した親水性ポリマーを含む、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記オルガノゲルが、オルガノゲルを形成し、溶媒が除去されてキセロゲルが形成された後、水溶液への曝露時にヒドロゲルを形成するブロックコポリマーを含む、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記オルガノゲルから溶媒を除去し、水溶液への曝露時にヒドロゲルを形成するキセロゲルを製造し、前記ヒドロゲルが、エステル、カーボネート、無水物、及びオルトカーボネートからなる群から選択される加水分解で分解可能な結合の自然な加水分解による生分解性である、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記オルガノゲルがイオン結合性架橋したポリマーを含む、請求項１〜９又は１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記オルガノゲルが、アルギネート、ゲラン、コラーゲン、及び多糖からなる群から選択される要素を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
オルガノゲル、オルガノゲルから製造されたキセロゲル、又はオルガノゲルから製造されたヒドロゲルから複数の粒子を形成することを更に含む、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
有機溶媒中で前駆体からオルガノゲルを形成することであって、前記前駆体が化学反応して共有結合を形成し、それによりオルガノゲルを形成することを含み、前記オルガノゲルが共有結合性架橋している、請求項１〜１０又は１４〜１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
前記前駆体が、フリーラジカル重合により反応して、オルガノゲルを形成する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記前駆体が、第一の官能基を含む第一の前駆体であり、第二の官能基を含む第二の前駆体を更に含み、前記第一の官能基と前記第二の官能基が有機溶媒中で反応性があり、共有結合を形成する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記第一の官能基及び前記第二の官能基が、求電子体及び求核体からなる群からそれぞれ選択され、前記第一の官能基及び前記第二の官能基の間の反応が、共有結合を形成する求電子求核反応である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記求電子基が、スクシミド、スクシンイミドエステル、ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、マレイミド、スクシネート、ニトロフェニルカーボネート、アルデヒド、ビニルスルホン、アジド、ヒドラジド、イソシアネート、ジイソシアネート、トシル、トレシル、又はカルボニルジイミダゾールを含む、請求項１８又は１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記求核基が、一級アミン又は一級チオールを含む、請求項１８〜２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
前記第一の前駆体及び前記第二の前駆体が水溶性である、請求項１８〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記第一の前駆体と前記第二の前駆体のいずれか又は両方が合成ポリマーを含む、請求項１８〜２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
前記第一の前駆体が、ポリエチレングリコール、ポリアクリル酸、ポリビニルピロリドン、及びこれらのブロックコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、請求項１８〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
前記水溶性生物製剤が、フルオロキノロン、モキシフロキサシン、トラボプロスト、デキサメタゾン、抗生物質、又は前庭毒素からなる群から選択される治療剤を含む、請求項１〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記オルガノゲルがドメインの形成により物理的に架橋しており、
前記方法が、有機溶媒中で、前駆体からオルガノゲルを形成することを更に含み、前駆体は、第一ブロック及び第二ブロックを含むブロックコポリマーである、請求項１〜９、１１〜１２、１４〜１５、又は２４〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記前駆体と前記有機溶媒の混合物を加熱すること、前記溶液を放冷すること、それにより、前記コポリマー前駆体の少なくとも第一ブロックを沈殿させることを含み、前記ドメインが少なくとも前記第一ブロックを含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記前駆体を、前記コポリマー性前駆体を溶解する前記第一の有機溶媒中に混合することであって、前記コポリマー性前駆体の全ブロックは第一の有機溶媒に可溶であること、及び
前記第一の有機溶媒と混和性である第二の有機溶媒を加えることであって、前記コポリマー性前駆体の第一ブロックは前記第二の有機溶媒に不溶性であり、前記第二の溶媒は前記ドメインの形成に有効であり、前記ドメインが前記コポリマーの第一ブロックを含むこと
を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記コポリマー性前駆体が、ポリエチレングリコールからなる群から選択されるブロックを含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記オルガノゲルが疎水性材料を含まない、請求項１〜１０又は１２〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
前記生物製剤の変性を回避する方法に従って、前記生物製剤の粉末を製造すること、及びいったん粉末を製造したら、前記医療材料を患者に使用するまで、粉末の水への曝露を防止することを含む、請求項１〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
請求項１〜３１のいずれかに記載の方法により製造された生体材料。
【請求項３３】
治療用水溶性生物製剤の制御された放出のための生体材料であって、薬学的に許容できるキセロゲル中に分散した前記生物製剤の固体粒子を含む前記薬学的に許容できるキセロゲルを含み、前記キセロゲルが水に曝露されるとヒドロゲルになる生体材料。
【請求項３４】
前記キセロゲルが共有結合性架橋した親水性ポリマーを含む、及び／又は前記水溶性生物製剤が二次構造及び／又は三次構造を有するタンパク質である、請求項３３に記載の生体材料。
【請求項３５】
前記ヒドロゲルが形成される時、前記水溶性生物製剤が実質的に固相に留まり、前記ヒドロゲルが哺乳動物中インビボで生理溶液に曝される時、ある期間にわたりゆっくりと溶解する、請求項３３又は３４に記載の生体材料。
【請求項３６】
前記オルガノゲルが共有結合性架橋した親水性ポリマーを含む、請求項３３〜３５のいずれかに記載の生体材料。
【請求項３７】
前記キセロゲルが、水中での水和の後に、エステル、カーボネート、無水物、及びオルトカーボネートからなる群から選択される加水分解により分解可能な結合の自然な加水分解による生分解性である、請求項３３〜３６のいずれかに記載の生体材料。
【請求項３８】
前記キセロゲルが、第一の官能基を含む第一の前駆体と第二の官能基を含む第二の前駆体の化学反応生成物であり、前記第一の官能基と前記第二の官能基が反応して共有結合を形成する、請求項３３〜３７のいずれかに記載の生体材料。
【請求項３９】
請求項３３〜３８のいずれかに記載の生体材料を、患者の組織と接触させて配置することを含む、制御された薬物送達方法。
【請求項４０】
前記組織が、腹腔内空間、筋肉、真皮、表皮、自然な内腔又は空洞、腹腔、前立腺、直腸、前立腺と直腸の間の位置、胸、放射目標と健康な組織の間の組織、及び脈管構造を含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
請求項１〜４０のいずれかに記載の生体材料を含むキット。
【請求項４２】
前記生体材料が、水への曝露時にヒドロゲル粒子を形成するキセロゲル粒子の集団である、請求項４１に記載のキット。
【請求項４３】
オルガノゲルを形成すること、
前記オルガノゲルからキセロゲルを製造すること、及び
前記キセロゲルを粒子の集団として提供することを含み、前記キセロゲルが水溶液への曝露時にヒドロゲルである、医療材料の製造方法。
【請求項４４】
粒子の複数の集団であって、インビボで異なる分解速度を有する集団を製造すること、及び集団を混合して所望の分解性能を有する生体材料を製造することを含む、請求項４３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本特許出願は、引用により本明細書に組み込まれる、２０１１年１２月５日に出願された米国特許出願第６１／５６６，７６８号明細書の優先権を主張する。
【０００２】
技術分野は、全般的に薬物の制御された放出に関し、小粒子からのタンパク質の送達を含む。
【背景技術】
【０００３】
治療剤には、送達手段が有効であることが必要である。薬物送達は、医薬化合物が投与されてヒト又は動物において治療効果を達成することに関連する。時間とともに薬剤を放出させる送達機構は有用である。薬物送達技術は、製品の効能及び安全性の向上並びに患者の便利さ及びコンプライアンスのために、薬物の放出プロファイル、吸収、分布、又は薬物消失を変更するのに役立ちうる。
【０００４】
これらの分野における膨大な研究にもかかわらず、タンパク質を含む生物製剤を使用する療法の有用性及び成功は、生物製剤のインビボでの安定性の乏しさのために、きわめて限定されたままである。医薬加工技術におけるタンパク質は有機溶媒に曝露されるべきではないという従来の知識にもかかわらず、多くの溶媒が使用可能であることが観察された。第一の溶媒が加工における有機溶媒であり第二の溶媒がインビボの生理液である２溶媒送達系の実施形態を含む、そのような溶媒を使用する方法が記載される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の実施形態は、キセロゲルのマトリックスに分散した、タンパク質粉末又は他の水溶性生物製剤を含むキセロゲルである。キセロゲルは、使用の時点で水和して、組織内に配置されていてよく、そこで時間とともにタンパク質を制御可能に放出する。この実施形態及び他の実施形態は以下に詳述される。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１Ａ】生体材料の形成を表す。
【図１Ｂ】図１Ａの生体材料の微細構造を表す。
【図１Ｃ】生体材料の代替実施形態の微細構造を表す。
【図２Ａ】３７℃の生理溶液中の経時的なオボアルブミンの放出を示すＨＰＬＣデータのプロットである。
【図２Ｂ】ヒドロゲルの完全溶解でのタンパク質レベルに標準化された後の図２Ａのデータのプロットである。
【図３】ｐＨ８．５で３７℃の生理溶液及びｐＨ７．４で３７℃の生理溶液中の経時的なオボアルブミンの放出を示すＨＰＬＣデータのプロットである。データは、完全溶解でのタンパク質レベルに標準化されている。
【図４】３７℃の生理溶液中の経時的なＩｇＧの放出を示すＨＰＬＣデータのプロットである。
【図５】ヒドロゲルの完全な溶解でのタンパク質レベルに標準化された後の図４のデータのプロットである。
【図６】ヒドロゲルビヒクルの組み合わせからのアルブミンの計算された放出プロファイルを示すプロットである。
【図７】ヒドロゲルビヒクルの組み合わせからのアルブミンの計算された放出プロファイルを示すプロットである。
【図８】生体材料の適用のための、眼とその周囲の種々の部位の図解である。
【図９Ａ】眼の中に生体材料を配置する方法の図解であり、眼の中に針を挿入するプロセスを表す。
【図９Ｂ】図９Ａの眼の中の生体材料を受け入れる部位の種々の例を表す。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
本発明の一実施形態は、キセロゲルのマトリックス中に分散した、タンパク質粉末又は他の水溶性生物製剤粉末を含むキセロゲルである。キセロゲルは、使用時に水和されて、組織内に配置されていてよく、そこで時間とともにタンパク質を制御可能に放出する。粉末は、タンパク質の微粒子を含む。キセロゲルマトリックスは、水和すると、架橋したマトリックスでできたヒドロゲルである。タンパク質は固相にあり、マトリックスが侵食されるまで実質的に可溶性ではなく、浸食によりタンパク質は溶解状態になるようにされる。マトリックスは、タンパク質を細胞、酵素変性、及び望まれない局所反応から保護する。タンパク質は、徐々の溶媒和により放出されるまで実質的に固相にあり、それにより、変性、自己加水分解、タンパク質加水分解、及び有効性の喪失を起こすか又は抗原性を作り得る局所化学反応から保護される。
【０００８】
図１Ａは、このプロセス（又は方法）の実施形態を表すが、従来の手段により、タンパク質の二次構造、及び存在する場合三次構造又は四次構造を保つように調製されたタンパク質粒子１００で出発する。これらは、前駆体１０２、１０４と有機溶媒１０６中で組み合わされる。混合物は、例えば、キャスティング１０８して、ロッド１１０として、粒子及び／又は球体１１２として、成形品１１４として、生体材料の望ましい形状を得るように処理される。溶媒は構造から放散され（ストリップされ又は除去され）、材料は水に曝露されるとヒドロゲルを形成するだろう。キセロゲルが実際に患者に使用される時点まで、プロセス全体は、水の非存在下及び／又は疎水性材料の非存在下で実施され得る。図１Ｂは、このプロセスにより製造された生体材料１２０の微細構造を表す。この構造は、材料の製造及び使用のプロセスにわたる材料：オルガノゲル、キセロゲル、次いでヒドロゲルを表す。架橋したマトリックスは、互いに共有結合で反応した前駆体１２４でできている。水溶性生物製剤の粒子１２２は、マトリックス内に分散している。マトリックスは連続相であり、粒子はその内部に広がっていて、分散相とも呼ばれる不連続相である。
【０００９】
代替実施形態は、図１Ｃに示される通り、疎水性ドメインの形成により物理的に架橋したブロックコポリマー前駆体を使用するものである。生体材料１３０は、マトリックス中に分散した生物製剤粒子１３２を有する。前駆体は、親水性ブロック１３４及び疎水性ブロック１３６を有する。疎水性ブロック１３６は自己組織化して疎水性ドメイン１３８を形成し、それは前駆体間に物理的な架橋を作り出す。物理的な架橋という用語は、非共有結合性結合した架橋を意味する。疎水性ドメイン、並びにポリウレタンのハード／ソフトセグメント又は他のセグメント化ポリマーはそのような例の１つである。イオン性架橋はもう１つの例である。架橋という用語は当業者によりよく理解されており、当業者は、共有結合性架橋を、物理的な架橋から、並びにイオン性、疎水性、及び結晶性ドメインなどの物理的架橋のサブタイプから直ちに区別できるだろう。
【００１０】
他の薬物送達手法は、例えばリポソーム又はミセルによりタンパク質をカプセル化し、又は粒子の製造においてポリマー又は他の作用剤を使用するナノ粒子を製造してきた。ヒドロゲルにおける薬物送達は、一般的に、例えば、ヒドロゲルを、リポソーム、ミセル中に、又はポリマーなどの結合剤との混合物中に配置することにより、ヒドロゲルからタンパク質を隔離することを対象としてきた。他の手法は、タンパク質の溶解を防ぐためにタンパク質に材料を直接吸着させることを対象としてきた。他の手法は、米国特許出願公開第２００８／０１８７５６８号明細書に開示される通り、送達プロセスにおいてタンパク質を沈殿させることであった。他の手法は、ヒドロゲル全体に可溶性タンパク質が分散しているヒドロゲルを使用し、ヒドロゲル浸食が放出を制御するものである。
【００１１】
このような取り組みの全てにもかかわらず、タンパク質を含む生物製剤を使用する持続放出療法の有用性及び成功は、生物製剤のインビボでの安定性が低い傾向があるために、限定されている。また、コンフォメーション（構造、形態又は配置）の喪失は効能の喪失につながることがあるだけでなく、望ましくない作用を起こすか、又は免疫応答を引き起こすことにより有害にもなり得る。非常に多くの取り組みにもかかわらず、Ｗｕ  ａｎｄ  Ｊｉｎ，ＡＡＰＳ  ＰｈａｍＳｃｉＴｅｃｈ  ９（４）：１２１８−１２２９（２００８）に記載されている通り、現実世界の臨床的な価値を有するのに充分に有効な一般的に適用可能な解決策は全くなかった。
【００１２】
しかし、驚くべきことに、本明細書に提供される実施形態は、タンパク質又は他の生物製剤の溶解度及びマトリックスからの放出が、生物製剤を好適なマトリックス中に固相粒子として配置することにより制御でき、そのため、ポリマー、カプセル材料、結合剤などを含むこれらの他の手法が必要でないことを示す。さらに、生物製剤は、インビボの水性環境においてすら変性を起こしにくい。マトリックス内の粒子は水溶性であるが、コーティングなどを全く有さないにもかかわらず、溶解するのが遅く、生理溶液へのそれらの溶解は、通常は分又は時間で測定されるだろうが、数日、数週、又は数か月に延びることがある。さらに、他の予期せぬ驚くべき結果が観察された。すなわち、生物製剤は、マトリックス内に必ず非常に高い濃度で存在しているとしても、凝集する傾向がない。生物製剤は非常にゆっくりと粒子から出てくるようである。第一の動作原理は、本発明はそれに限定されないが、高度に可動性のポリマー−例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）又はポリエチレンイミンなどのポリマー−でできたマトリックスの分子鎖が、自身の周囲に排除体積を形成し、それがすぐ近くにある他の高分子の溶解度を限定するというものである。この構造属性は、マトリックス内で物理的なトラップにより固相にタンパク質を閉じ込めるだけでなく、高分子の溶解も限定し、そのためタンパク質粒子は溶解状態へと動くことができない。粒子及びタンパク質が水との溶媒和により膨潤し始めると、それらは、マトリックスが少なくとも部分的に溶解するまでマトリックスにより拘束される。そのため、架橋密度が低下し、分子鎖がさらに別々に動くにつれ、トラップされた高分子粒子の徐々の溶解が促進される。これらのプロセスは、次のように予期せぬ驚くべき結果を与える。生物製剤は、マトリックスからのその放出の時間に比較的近くなるまで、固相に留まる。したがって、タンパク質又は他の生物製剤は、長時間溶解状態にあるという有害な作用に曝露されないので、安定である。放出も、マトリックスからの高分子の拡散により制限されており、高分子の分子量並びにマトリックス形成ポリマーの特性により影響される。第二の動作原理は第一の原理を補うものであり、同様に本発明が限定される機構でない。マトリックスの分子鎖は、タンパク質が溶解できないように、タンパク質の近くの水分子と会合している。この第二の原理は、ＰＥＧなどの高度に可動性で、親水性で、直鎖のポリマーに当てはまる。ＰＥＧの他に、選択されたタンパク質と排除体積効果を示す他の水溶性ポリマー又はコポリマーを選択できる。例えば、ポリアクリル酸、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、及びポリヒドロキシエチルメタクリラート（ＰＨＥＭＡ）などのポリマーが一般的にそのような作用を持つだろう。一部の多糖類もこれらの作用を有する。ＰＥＧ及び／又はこれらの他のポリマーも、オルガノゲル中に固体として取り込まれ得る。それらは、水の存在下で、すなわちヒドロゲル中で可溶性になるだろう。さらに、非架橋ＰＥＧ及びＰＬＵＲＯＮＩＣなどのＰＥＧコポリマーは、タンパク質と共にヒドロゲル中にトラップされて排除体積効果を増大させ、それによりタンパク質を固体状態に保ち得る添加剤である。
【００１３】
本明細書に開示される系の一態様は、タンパク質粒子を水和性キセロゲル中に配置することにより起こる、放出期間にわたる制御の大幅な増大に関する。実施例１〜２は、水溶性生物製剤の粒子を含むキセロゲルの形成に利用されるプロセスを詳述する。タンパク質アルブミン及び免疫グロブリン（ＩｇＧ）を、水溶性治療剤タンパク質のモデル化に使用した。これらのタンパク質の粉末を調製した。粉末粒子を有機溶媒中でヒドロゲル前駆体と組み合わせ、オルガノゲルを形成した。実施例１の表１〜５は、分散したタンパク質粉末を含むオルガノゲルの例を述べる。オルガノゲルを粉砕して、ふるいにかけて粒子の集団にし、それから有機溶媒を除いてキセロゲルを形成した。実施例２は、キセロゲルからのタンパク質の放出を記載する。
【００１４】
図２〜５に表される通り、タンパク質は完全に放出された。意外にも、マトリックスが分解するにつれタンパク質が可溶化するのを妨げる、オルガノゲル前駆体とタンパク質との検出可能な反応は全くなかった。実際、これらのタンパク質及びタンパク質全般は、使用された求電子前駆体などの強力な求電子体に対して潜在的に非常に反応性のあるアミン及びチオール官能基を含んでいた。これらの求電子官能基との反応が予想されたが、反応がなかったのは、ゲル化の前に、ゲル形成性前駆体が液相にあった一方で、タンパク質を非溶解又は実質的に固相のままにしたことにより、これらの反応が防がれたことを示す。放出曲線は放出の速度に対して良好な制御を示し、数時間の急速な放出から数か月の放出の範囲であった。
【００１５】
さらに、放出の速度及び速度論は、図６及び７に示される通り、種々のセットの粒子を互いに組み合わせてさらに制御できる。これらは、時間及び医薬剤形中の薬物の濃度に依存しない速度で薬物を送達する能力である実質的に零次の放出が望ましいことを表す。零次放出機構は、時間とともに一定量の薬物が放出されることを確実にし、薬物濃度が治療域（効能）内に留まる時間の量を最大にする一方で、潜在的なピーク値／トラフ値変動及び副作用を最小限にする。
【００１６】
オルガノゲル−ヒドロゲルを調製するプロセス及び材料、水溶性生物製剤の２溶媒送達系
第一の実施形態は、共有結合性架橋したマトリックスの形成を含む。水溶性生物製剤の微粉末は、水溶性生物製剤、例えばタンパク質を溶媒和しない有機溶媒中で、調製され、懸濁される。粉末という用語は、乾燥粒子の集団を意味するように本明細書で広く使用される。粒子という用語は広く、球体、涙滴形状、小ロッド、及び他の不規則な形状を含む。一般に、粉末は、公知の大きさ、形状、及び分布（相加平均又は平均値からの分散）を持つ制御された粒子組成物を与えるように処理されている。タンパク質粉末は、典型的には、スクロース又はトレハロースなどの安定化糖を含む。これらの糖類は、一般的に水溶性であり、有機溶媒可溶性でない。これらが、水和してヒドロゲルを形成する時点までプロセスを通してタンパク質と共に留まることが見出された。有機溶媒中で互いに反応して架橋オルガノゲルを形成する能力を有するマトリックス前駆体が調製される。前駆体は、有機溶媒に可溶性であるように選択される。前駆体と水溶性生物製剤粉末は、水溶性生物製剤粒子が、前駆体間の共有結合の形成時に形成するマトリックス全体に分散するように有機溶媒中で混合される。有機溶媒中に形成するマトリックスは、オルガノゲルと呼ばれる。溶媒は除去されて、キセロゲルを形成する。水中での水和と同時に、マトリックスは、内部で共有結合性架橋したヒドロゲルを形成する。有機溶媒は生物製剤及び前駆体（類）と有効で、放散可能（又は除去可能）（すなわち、薬学的に許容できない残渣を残さずに除去可能）でなくてはならないが、前駆体はインビボの水性環境において有効でなくてはならないので、このプロセスは連続的な２溶媒プロセスである。タンパク質はどの時点でも有機相と水相の両方に曝露されることはない。水溶液中のタンパク質が、有機液体又は固体又は気泡との界面に曝露されることは、タンパク質の吸着及び変性の一因であると考えられる。オルガノゲルからキセロゲルへ、それからヒドロゲルへの連続プロセスは界面曝露の可能性をなくし、すなわち、実施形態は、空気、気体、水、有機溶媒の任意の組み合わせの間の界面に水溶性生物製剤が曝露されずに実施される、本明細書に記載されるプロセスを含む。
【００１７】
他の実施形態は、マトリックス前駆体などの液体反応性ポリマーを利用することによる共有結合性架橋したゲル（本明細書で、偽オルガノゲルとも称される）の形成である。有機溶媒の非存在下で、例えば融解状態で互いに反応することによる、架橋オルガノゲルを形成する能力を有するマトリックス前駆体が調製される。前駆体及び水溶性生物製剤粉末は、前駆体ポリマーを液化するのには充分高いが、タンパク質の安定性を維持するには充分に低い温度で混合される。そのような温度の例は、約１０℃から約７５℃、又は約６０℃まで、又は約７５℃までである。当業者は、明示的に述べられた値の間の全値及び範囲が企図され、詳細に書かれたかのように本明細書に組み込まれることをすぐに認識するだろう。混合条件は、水溶性生物製剤粒子が、前駆体間の共有結合の形成と同時に形成するマトリックス全体に分布するように利用される。例えば、反応はポリマーのメルト中で実施されるが、メルトという用語は溶媒が全く存在しないことを意味する。しかし、例えば、生物製剤、糖類、タンパク質、緩衝剤などの他の物質はメルト中に存在し得る。実施形態は、医療材料（又は医用材料）を製造する材料及びプロセス（又は方法）であって、水溶性生物製剤の粉末がゲルに分散している状態で、粉末の周囲にゲルを形成することを含み、ゲルの形成が、１種以上の前駆体のメルトを調製すること及び前駆体を共有結合性架橋することを含む材料及びプロセスを含む。前記ゲルは、その体積の大部分、例えば、約３０％から約９５％ｖ／ｖが生物製剤又は他の固体（例えば、糖類、緩衝塩類）により占められることがある。当業者は、明示的に述べられた値の間の全値及び範囲、例えば、少なくとも３０％ｖ／ｖ又は約４０％から約７５％などが企図され、詳細に書かれたかのように本明細書に組み込まれることをすぐに認識するだろう。
【００１８】
連続２溶媒プロセスの他の実施形態は、物理的な架橋を有する架橋材料を形成することを含む。そのような一実施形態は、ブロックコポリマーを前駆体として使用する。前駆体は、親液性（溶媒を好む）ブロックと疎液性（溶媒を嫌う）ブロックを有する。これらの前駆体（類）は有機溶媒に加えられ、物理的に架橋したマトリックスを形成する。特定の有機溶媒中で沈殿してオルガノゲルを形成するブロック（セグメントとも称される）は、水中で沈殿してヒドロゲルを形成するのと同じセグメントのことも、そうでないこともある。１種以上のブロック又はセグメント部分は疎水性であり、１種以上のブロック又はセグメント部分は親水性であるので、溶媒を放散させた（又は除去した）後、得られたキセロゲルは水溶液中でヒドロゲルを形成する。関連する実施形態は、２種の有機溶媒を使用する。ブロックコポリマー性前駆体は第一の有機溶媒に溶解する。次いで、コポリマー溶液は、第一の溶媒と混和性であるが、コポリマーの少なくとも１種のセグメントの非溶媒である第二の有機溶媒と混合される。疎液性ドメインがオルガノゲルを形成する。他の実施形態は第一及び第二の有機溶媒を使用し、オルガノゲル及び生物製剤の粒子が同じ工程で形成されるように、第二の有機溶媒を使用して生物製剤を沈殿させる。
【００１９】
連続的な２溶媒プロセスの他の実施形態は、加熱ゲル化である。約−２０℃から約７０℃の範囲の温度の有機溶媒中で溶液からオルガノゲルに移る前駆体は、生物製剤と共に、前駆体が溶解状態にある温度の有機溶媒中に配置される。次いで、溶液はゲル化点より低い第二の温度に冷却されて、前駆体はオルガノゲルを形成する。したがって、オルガノゲルを製造するプロセスは、溶媒を加熱してコポリマーを溶解させ、次いで溶液を冷却して、コポリマーの少なくとも１種のセグメントを沈殿させることである。次いで、溶媒が放散されて（strippped：ストリップ又は除去されて）、キセロゲルが製造される。前駆体は、キセロゲルが生理的温度でヒドロゲルであるように選択される。
【００２０】
これらのプロセスでの使用に適合したブロックコポリマーには、ＰＥＧの多くのコポリマーがある。ＰＥＧは親水性であり、多くの有機溶媒に親液性である。他の親水性ポリマー及びポリマー性セグメントは、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポリ無水マレイン酸、ＰＶＰ、ＰＨＥＭＡ、多糖類、ポリエチレンイミン、ポリビニルアミンポリアクリルアミド（類）などである。他のブロックは、疎水性且つ有機溶媒に疎液性であるように選択される。これらの他のブロックの例は、ポリブチレンテレフタラート（ＰＢＴ）、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリトリメチレンカーボナート、ポリジオキサノン、及びポリプロピレンオキシド（ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ、ＰＯＬＯＸＡＭＥＲＳ）などのポリアルキルエーテルである。コポリマーは、各種類のブロックを１種以上有してよい。
【００２１】
これらのプロセスは、水溶性生物製剤が、最初に調製される時点からインビボに配置されるまで水と全く接触しないように実施できる。水溶性生物製剤は、源又は製造場所で精製された形態でいったん得られると、その後、ゲル製造プロセスの間、水に溶解されないか、且つ／又は水に曝露されないようにさらに処理できる。水への曝露は種々の問題を起こし得る。問題の１つは、タンパク質が時間とともに加水分解して、ゆっくりと分解することである。別な問題は、タンパク質が、いったん溶解すると、再配列し得ることや、二量体又は三量体などの準安定凝集体を形成し得ることである。
【００２２】
本発明の実施形態は、疎水性ポリマー及び／又は疎水性溶媒の非存在下で実施されるこれらのプロセスを含む。疎水性ブロックポリマーを必要とする実施形態は、疎水性でないプロセスでは実施できないが、当業者は、どのプロセスが適応可能かを容易に識別できる。一実施形態は、オルガノゲル工程及びその後の工程の両方で、生物製剤粒子の存在下及び疎水性材料の非存在下で、親水性前駆体が有機溶媒中で共有結合性架橋することを可能にする。いくつかの実施形態において、疎水性である溶媒は、溶媒によっては不利益なしに存在でき、実施形態は、溶媒以外の疎水性物質の非存在；及び／又は疎水性ポリマーの非存在；及び／又は疎水性ポリマーセグメントの非存在を含む。
【００２３】
従来の知識は、有機溶媒が一般的にタンパク質を変性させることを教示する。いくつかの生命科学プロセスは、例えば診断又は分析設定において、ある程度の変性を許容し得る。しかし、医薬分野においては、低い程度の変性ですら望ましくない。変性したタンパク質は、溶解度の低下からコミュナルな凝集（ｃｏｍｍｕｎａｌ  ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ）まで広範囲の特性を示し得る。コミュナルな凝集は、疎水性タンパク質が互いに接近し、水に露出する総面積を低下させる凝集を含む。距離の減少は、永久又は準安定な会合を起こし得る。タンパク質が変性すると、その二次構造及び三次構造は変化するが、アミノ酸の間の一次構造のペプチド結合は一般的に無傷のまま残る。
【００２４】
しかし、驚くべきことに、固相に残されたタンパク質を、大規模な変性なしに特定の有機溶媒に曝露させることができることが発見された。無水条件下で扱われる完全に無水の有機溶媒が好ましい。有機溶媒への曝露による変性は、タンパク質がすでに水溶液中にあるか、且つ／又は有機溶媒、若しくは有機／水性混合溶媒（例えば、エタノール／水）がタンパク質粒子を溶解させるか、若しくは限定される方法ですら膨潤させる傾向を有する場合に起こり得る。タンパク質−溶媒適合性は、曝露とそれに続く特性化試験によりタンパク質が変性されたか、且つ／又は１種以上の化学基の置換若しくは変化を受けたかを決定することにより、実験的に確認できる。有機溶媒適合性は、対象タンパク質を対象溶媒に適切な期間浸漬し、濾過及び真空乾燥などによりタンパク質を除き、次いでタンパク質の回収をＨＰＬＣ又は他の適切な分析方法により試験して、簡単に試験できる。タンパク質を傷つけないままにする可能性が最も高い溶媒は無水で疎水性であるが、ゲル形成性前駆体分子にとっても良溶媒でなくてはならない。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）前駆体の場合、塩化メチレン及び炭酸ジメチルなどの溶媒が使用されてきた。アセトン（又はアセトン／水）、酢酸エチル、テトラヒドロフランなどの他の溶媒も有用になり得る。二酸化炭素などの超臨界流体溶媒も、オルガノゲルの形成に有用になり得る。
【００２５】
前駆体は、本明細書の別の所に詳細に記載されている。多くの有用な前駆体が複数の前駆体として利用可能である。第一の前駆体が溶媒−タンパク質混合物に加えられ、それに続いて第一の前駆体との反応性がある第二の前駆体が加えられ架橋が形成される。第一の前駆体は、さらなる化学成分の非存在下では、タンパク質と共有結合を形成する反応性のない官能基のみを有するように選択できる。タンパク質は、特定の求電子官能基と反応して共有結合を形成するのに利用できるアミン及びチオール並びに他の化学反応に利用できるカルボキシル及びヒドロキシルを有する。したがって、前駆体はこれらの官能基と反応しないように選択してよい。例えば、前駆体は、アミン及び／又はチオール及び／又はヒドロキシル及び／又はカルボキシルを有し、タンパク質と反応性でないことがある。したがって、本発明の一実施形態は、第一のタンパク質非反応性前駆体をタンパク質−有機溶媒混合物に加えること、及び次いで第一の前駆体と反応性のある第二の前駆体を加えることを含む。
【００２６】
水溶性生物製剤粒子は、結合剤、脂肪酸、疎水性材料、界面活性剤、脂類、リン脂質、油類、ワックス、ミセル、リポソーム、及びナノカプセルの１つ以上を含まないことがある。水溶性生物製剤粒子を含むオルガノゲル又はキセロゲルも、上記の１つ以上を含まないことがある。キセルゲル中のタンパク質又は他の水溶性生物製剤は全て固相にあることがあり、全て結晶性のことも、部分的に結晶性のことも、基本的に結晶を含まないこともある（９０％ｗ／ｗ超結晶がないことを意味する；当業者は、明示的に述べられた範囲内の全値及び範囲が企図されることをすぐに認識するだろう）。
【００２７】
キセロゲル−水溶性生物製剤材料は、所望の形状に形成できる。方法の１つは、所望の形状を有する型の中で前駆体を反応させることである。構造は、溶媒の除去の前又は後に型から取り除かれる。材料は、本明細書の別のところにより詳細に記載される通り、破壊して粒子にしてもよい。
【００２８】
有機溶媒中にマトリックスを形成した後、溶媒を除去して、キセロゲルを形成できる。潜在的なプロセスは、例えば、非溶媒による沈殿、窒素を流すことによる乾燥、真空乾燥、凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇ）、熱と真空の組み合わせ、及び凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｉｏｎ）がある。
【００２９】
融解した前駆体が第三の溶媒なしで使用される場合、溶媒除去プロセスを利用する必要は全くない。冷却すると、材料は、ゴム状固体（Ｔｍより上の場合）、半剛性半結晶性材料（Ｔｍより下の場合）、又は剛性ガラス状固体（Ｔｇより下の場合）を形成する。これらの材料は、有機溶媒から形成されたキセルゲルよりも密度が高い。他の物質、例えば、治療剤、緩衝剤塩類、可視化剤の粒子で満たされている場合、固体粒子が細孔を作りそれを埋めるので、それらは多孔性が高くなり得る。
【００３０】
これらのプロセスは全て水溶性生物製剤なしで実施できる。粒子を含む材料は、生物製剤なしで多くの用途に有用である。用途には、例えば、組織増大、充填剤、及び放射線療法における組織分離がある。
【００３１】
さらに、これらのプロセスは全て、生物製剤の代りの追加の治療剤又は生物製剤に加える追加の治療剤と共に実施できる。そのような追加の治療剤には、肉眼で認識できる可視化剤及び放射線不透剤又は材料がある。
【００３２】
粒子調製
オルガノゲルを形成し、次いで粒子にし、その次にそれを処理して有機溶媒又は複数の溶媒を除去して、キセロゲルを形成できる。注射可能な形態のためには、オルガノゲルは、細断しても、均質化しても、押し出ても、ふるいにかけても、切り刻んでも、さいの目に切っても、他の方法で粒子形態にしてもよい。或いは、オルガノゲルは、懸濁したタンパク質粒子を含む液滴又は成形物品として形成できる。
【００３３】
オルガノゲル粒子を製造する一プロセスは、マトリックスを製造し、それを破壊してオルガノゲル粒子を製造することを含む。例えば、マトリックスは、本明細書に記載される前駆体で製造され、次いでそれが破壊される。ある技術は、オルガノゲルをタンパク質粒子と共に調製し、それを、例えば、ボールミル中で、又は乳鉢と乳棒で粉砕することを含む。マトリックスは、ナイフ又はワイヤーで細断しても、さいの目に切ってもよい。或いは、マトリックスは、ブレンダー又はホモジナイザー中で切り刻んでよい。別のプロセスは、オルガノゲルをメッシュに押し通し、断片を回収し、所望の大きさに達するまでそれを同じメッシュ又は他のメッシュに通すことを含む。
【００３４】
水溶性生物製剤、例えばタンパク質は、オルガノゲルへの分散の前に粒子として調製される。噴霧乾燥又は沈殿などの多くのタンパク質粒子化技術が存在し、対象とするタンパク質がそのような処理と適合性があるならば利用できる。粒子調製の実施形態は、実質的な変性のない生物製剤を、例えば、業者から、又は動物若しくはリコンビナントな源から受け取ることを含む。固相はタンパク質にとって安定な形態である。タンパク質は、凍結乾燥されるか、濃縮されるか、受け取ったままで使用される。次いで、タンパク質は、固体状態で処理し、任意に酸素のない環境で、高温、湿気を避けることにより、変性なしに微粉末として調製される。粉末は、例えば、粉砕、ボールミリング、凍結粉砕、ミクロ流動化（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｉｎｇ）、又は乳鉢と乳棒により、それに続いて固体のタンパク質をふるいにかけることにより調製することができる。タンパク質は、対象とするタンパク質が可溶性でない適合性のある無水有機溶媒中で、タンパク質を固体形態に保ったままでも処理できる。所望の範囲への粒径の低減は、例えば、適合性のある有機溶媒中の固体タンパク質懸濁液の粉砕、ボールミリング、ジェットミリングにより達成できる。高せん断速度処理、高圧、及び急激な温度変化は、タンパク質の不安定さにつながるので、最低限にしなければならない。したがって、タンパク質又は他の水溶性生物製剤を、損傷を回避する方法で扱うように注意を払わなければならず、粒子製造の常用のプロセスの利用を好適であると思うべきではなく、好適な再設計及び結果の試験なしに有用であると期待しないものとする。
【００３５】
タンパク質の粉末という用語は、１種以上のタンパク質からできた粉末を意味する。同様に、水溶性生物製剤の粉末は、１種以上の水溶性生物製剤でできた粒子を含む粉末である。タンパク質粒子中のタンパク質又は生物製剤粒子中の生物製剤は、互いに会合して、結合剤又はカプセル化材料がない場合でも乾燥粒子に機械的一体性及び構造を与える。これらの粉末は、リポソーム、ミセル、若しくはナノカプセル、タンパク質若しくは生物製剤を実質的にカプセル化する他の技術などのカプセル化又は手法を利用するタンパク質又は生物製剤の送達とは異なる。それらを含む粉末及び／又はキセロゲル又はヒドロゲルは、カプセル化材料を含まず、リポソーム、ミセル、又はナノカプセルを含まないことがある。さらに、結合剤、非ペプチドポリマー、界面活性剤、油類、脂類、ワックス、疎水性ポリマー、４つのＣＨ２基より長いアルキル鎖を含むポリマー、リン脂質、ミセル形成性ポリマー、ミセル形成性組成物、両親媒物質、多糖類、３種以上の糖の多糖類、脂肪酸、及び脂質の１つ以上を含まないタンパク質粒子又は水溶性生物製剤粒子を製造できる。凍結乾燥、噴霧乾燥、又は他の方法で処理されたタンパク質はトレハロースなどの糖類と共に製剤化させることが多く、凍結乾燥又はタンパク質調製に利用される他のプロセスにわたってタンパク質が安定化される。これらの糖類は、オルガノゲル／キセロゲルプロセス全体にわたって粒子内に残存することが許され得る。粒子は、約２０％から約１００％（乾燥ｗ／ｗ）のタンパク質を含むように製造することができる。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全ての範囲及び値、例えば、約５０％から約８０％又は少なくとも９０％若しくは少なくとも約９９％が企図されることをすぐに認識するだろう。
【００３６】
生物製剤の粒子、又はオルガノゲルの粒子、又はキセロゲルの粒子は、種々の方法により、望ましい大きさの範囲及び分布を持つ集団に分離することができる。大きさが１ミクロンから数ｍｍで、粒子径の平均及び範囲が狭い分布とともに制御可能な、非常に微細な分粒の制御が利用できる。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全ての範囲及び値、例えば、約１から約１０μｍ又は約１から約３０μｍが企図されることをすぐに認識するだろう。約１から約５００ミクロンは有用であるそのようなもう１つの範囲であり、大きさはその範囲全体にあり、平均は範囲内の１つの値であり、標準偏差は例えば、約１％から約１００％など平均値周囲に中心を持つ。粒子を分粒する簡単な方法は、注文製又は標準のふるいのメッシュサイズを利用することを含む。標準的な米国及びタイラーメッシュサイズの他に、ふるいは、Ｍａｒｋｅｔ  Ｇｒａｄｅ、Ｍｉｌｌ  Ｇｒａｄｅ、及びＴｅｎｓｉｌｅ  Ｂｏｌｔｉｎｇ  Ｃｌｏｔｈでも通常利用される。メッシュに押し通される材料は変形を示すことがあるので、粒径はメッシュサイズに正確に合致しない。それでも、メッシュサイズは、所望の粒径範囲を得るために選択できる。タンパク質粒子が有機又は油相に分布される粒径分析器は通常利用されている。顕微鏡法も、粒径の決定に通常利用される。回転楕円面状の粒子は、最長の中心軸（粒子の幾何学的中心を通る直線）が他の中心軸の長さの約２倍以下であり、粒子が文字通り球状であるか、又は不規則な形状を有する粒子を意味する。ロッド状粒子は、長軸方向の中心軸が最短の中心軸の約２倍を超える粒子を意味する。実施形態は、インビボで異なる分解速度を有する粒子の複数の集団を製造し、集団を混合して、所望の分解性能を有する生体材料を製造することを含む。
【００３７】
変性のない水溶性生物製剤の送達
これらのプロセスは、タンパク質又は他の水溶性生物製剤で実施できる。これらは、ペプチド及びタンパク質を含む。タンパク質という用語は、本明細書では、少なくとも約５０００ダルトンのペプチドを意味する。ペプチドという用語は、本明細書では、任意の大きさのペプチドを意味する。オリゴペプチドという用語は、約５０００ダルトンまでの質量を有するペプチドを意味する。ペプチドには、治療用のタンパク質及びペプチド、抗体、抗体断片、短鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、成長因子、血管新生因子、及びインスリンがある。他の水溶性生物製剤には、炭水化物、多糖類、核酸、アンチセンス核酸、ＲＮＡ、ＤＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、及びアプタマーがある。本明細書での説明はタンパク質に関して述べられているものが多いが、方法は一般的に他の水溶性生物製剤にも適用できる。
【００３８】
タンパク質は容易に変性する。しかし、本明細書に記載される通り、タンパク質は、結合剤、親油性材料、界面活性剤、又は他の予防成分が全く使用されていない場合を含んで、実質的に変性なしに送達できる。実質的に変性がないという用語は、タンパク質の化学構造の修飾なしに（化学基の付加又は既存の化学基の変化なしに）、且つタンパク質のコンフォメーション（構造、形態又は配置）、すなわち二次及び／又は三次及び／又は四次構造の変化なしに粒子に処理されるタンパク質を意味する。この文脈での実質的にという用語は、エピトープの変性に関して酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）により、０．２を超える等電点（ｐＩ）のシフトに関して等電点電気泳動法（ＩＥＦ）により、常用の条件下で試験した平均試験群で、処理されたタンパク質と対照のタンパク質の間に有意な差（ｐ値＜０．０５）が全く見られないことを意味するが、試験又はタンパク質の安定性及び全目的のために引用により本明細書に組み込まれる米国特許出願第１３／２３４，４２８号明細書を参照されたい。矛盾がある場合、本明細書が優先する。タンパク質一次構造は、アミノ酸配列を意味する。その生物学的機能を発揮できるために、タンパク質は、水素結合、イオン性相互作用、ファンデルワールス力、及び疎水性充填などのいくつかの非共有結合的な相互作用により動かされて１つ以上の特定の空間的コンフォメーションに折りたたまれる。二次構造という用語は、局所的な折り畳みなど局所的なタンパク質構造を意味する。三次構造は、折り畳みを含む特定の三次元コンフォメーションを意味する。二次構造及び／又は三次構造を有するタンパク質は、このように局所的及び全般的な構造組織化を示す。対照的に、特定のコンフォメーションを全く持たない直鎖ペプチドは、二次構造及び／又は三次構造を持たない。ネイティブという用語は、インビボで天然にみられるままを意味し、そのためタンパク質は粒子に処理されて、ネイティブなコンフォメーションで放出され得る。
【００３９】
タンパク質は、酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、円二色性（ＣＤ）、及びフーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）を含む種々の技術により変性に関して試験できる。これらの試験により、分子量の変化、末端基の変化、結合の変化、疎水性又は体積排除の変化、及び抗原部位が現れること／隠れることなどのパラメーターが報告される。一般に、処理の後のネイティブなコンフォメーションを示すのに充分であるＩＥＦ及びＥＬＩＳＡによる試験を設計することができるが、他の試験及び試験の組み合わせを代替的に利用できる。
【００４０】
実験により、変性のないタンパク質の処理及び送達に寄与するいくつかの因子が制御できることが示された。タンパク質は粉末として調製できるが、粉末粒径は、最終的なオルガノゲルの大きさに照らして選択される。タンパク質用の有機溶媒は全て、タンパク質が有機溶媒により溶媒和されず、タンパク質と適合性があるように選択できる。他の因子は酸素であり、酸素の除去は変性を回避するために処理において有益である。他の因子は化学反応である。これらは、タンパク質が埋め込まれる時まで、タンパク質を固相に、タンパク質を溶解する溶媒を含まないまま保つことにより、回避され得る。
【００４１】
粒子調製の一実施形態は、実質的な変性のないタンパク質を、例えば、業者又は動物若しくはリコンビナントな源から受け取ることを含む。タンパク質は、凍結乾燥され、噴霧乾燥され、若しくは濃縮されるか、又は受け取ったまま使用される。次いで、タンパク質は、固体状態で処理され、場合により酸素のない環境で、高温、湿気を避けることにより、変性なしに微粉末として調製される。粉末は、例えば、固体のタンパク質を粉砕、ボールミリング、又は乳鉢と乳棒により調製できる。
【００４２】
タンパク質剤又は他の水溶性生物製剤を粒子にすることは、固相から薬剤を送達するために有用な第一の工程になり得る。しかし、それは、マトリックスからの良好に制御された放出又は長期間にわたる有効な放出を達成するための充分な工程ではない。しかし、埋め込みと同時に、粒子は、水が粒子に接触して薬剤を溶媒和するにつれ急速に溶解する傾向があるだろう。ヒドロゲル中の粒子の場合、例えば、水はヒドロゲルに浸透し、粒子と接触する。しかし、意外にも、ヒドロゲル中の粒子の中の水溶性生物製剤が溶解するのを防ぐことが可能である。そのようにするいくつかの機構は本明細書に記載されているが、本発明を特定の作用理論に限定するように利用されるものではない。機構の１つは、明らかに、薬剤が粒子から動くのを防ぐマトリックスの利用に関連する。そして、薬剤の分子が溶解しても、それは局所的な部位に留まり、その局所部位を飽和させて他の薬剤分子のさらなる溶媒和を防ぐだろう。他の機構は、マトリックスの溶媒和に関連し、それは潜在的に可溶性である薬剤と水を求めて競争するが、マトリックスは薬剤の溶媒和に干渉する体積排除効果を有する。
【００４３】
これらの機構は、密なマトリックスの分子鎖の間に空間を得ることに関連する。オルガノゲルマトリックス（したがって、キセロゲル及びヒドロゲルマトリックス）の架橋密度は、架橋剤（類）として使用される前駆体（類）及び他の前駆体（類）の全体的な分子量並びに前駆体分子あたり利用できる官能基の数により制御される。５００などの架橋間の低い分子量は、１０，０００などの架橋間のより高い分子量に比較してはるかに高い架橋密度を与えるだろう。架橋密度は、架橋剤及び官能性ポリマー溶液の全体的な固形分パーセントによっても制御され得る。架橋密度を制御するさらに他の方法は、求核官能基と求電子官能基の化学量論を調整することによる。１対１の比は、最高の架橋密度につながる。架橋部位間の距離が長い前駆体は、一般的に柔らかく、より変形しやすい、より弾性のあるゲルを形成する。このように、ポリエチレングリコールなどの水溶性セグメントの長さが増すと、弾性が増して、所望の物性を生み出す傾向がある。そのため、特定の実施形態は、２，０００から１００，０００の範囲の分子量を有する水溶性セグメントを持つ前駆体を対象とする。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値、例えば、１０，０００から３５，０００が企図されることをすぐに認識するだろう。ヒドロゲルの固形分は、その機械的性質及び生体適合性に影響を与えることができ、競合する要件間のバランスを反映する。例えば、約２．５％から約２０％、その間の全ての範囲及び値を含んで、例えば、約２．５％から約１０％、約５％から約１５％、又は約１５％未満の比較的低い固形分が有用である。特定の性質の達成が、単に、関与する前駆体の一般的な種類に基づいて想定されるべきではないように、当業者は、同じ材料を利用して、非常に異なる機械的性質及び性能を有する、広範囲な構造を持つマトリックスを製造できることを認識するだろう。
【００４４】
水溶性生物製剤及び他の治療剤の送達
種々の水溶性生物製剤及び／又は他の治療剤は、本明細書に記載される系により送達できる。タンパク質粉末を含むキセロゲル粒子を利用して、水溶性生物製剤及び／又は他の治療剤を送達できる。粒子は、キセロゲル内で投与できる。キセロゲルは、例えば、少なくとも２ｃｍ３の体積を有する（当業者は明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値、例えば、約２から約２０ｃｍ３が企図されることをすぐに認識するだろう）事前に形成した構造にも、粒子の集団にもなり得る。或いは、キセロゲル粒子は、直接でも薬学的に許容できる結合剤又は担体中でも投与できる。他の材料はキセロゲル粒子を含み得る。水溶性薬剤は、キセロゲル内の粉末として送達できる薬剤の一分類である。疎水性薬剤又は小分子薬剤（水溶性又は疎水性）などの他の薬剤は、キセロゲル中に混合しても、キセロゲルと混合してもよい。
【００４５】
タンパク質は水溶性薬剤の一分類である。タンパク質が取り込まれ、実質的な変性なしに、且つ／又はそのネイティブなコンフォメーションで放出されるように、キセロゲル粒子を処理できる。数種の抗血管内皮細胞増殖因子（抗ＶＥＧＦ）剤は、治療剤タンパク質である。抗ＶＥＧＦ療法は、特定の癌の治療において、加齢黄斑変性において重要である。それらには、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ）などのモノクローナル抗体、ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ）などの抗体誘導体、又はＶＥＧＦにより刺激されるチロシンキナーゼを阻害する小分子：ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ）、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ）、アキシチニブ、及びパゾパニブがあり得る（これらの療法の一部は、ＶＥＧＦではなくＶＥＧＦ受容体を標的としている）。
【００４６】
いくつかの従来の目薬の送達系は、薬物を局所用点眼剤で送達する。例えば、白内障及び硝子体網膜手術の後、抗生物質が、２，３時間ごとに数日間滴下により投与される。さらに、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）などの他の薬物も、頻繁に与えられる必要があり得る。これらの点眼剤の一部、例えばＲＥＳＴＡＳＩＳ（Ａｌｌｅｒｇａｎ）は、その投与に関連して刺痛及び灼熱感を有する。ＲＥＳＴＡＳＩＳはドライアイに適応され、患者は一日に数回使用する必要がある。同様に、嚢胞様黄斑浮腫、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）、及び糖尿病性網膜症などの他の眼病の治療も、ステロイド薬又はＮＳＡＩＤ薬の投与を必要とする。黄斑変性などのいくつかの血管増殖性疾患は、ＶＥＧＦ阻害剤の硝子体内注射を利用して治療される。これらには、ＬＵＣＥＮＴＩＳ及びＡＶＡＳＴＩＮ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）並びにＭＡＣＵＧＥＮ（ＯＳＩ）などの薬物がある。そのような薬物は、本明細書に記載されるヒドロゲル−及び−粒子系を使用して送達することができ、繰り返し投薬する工程が避けられる。例えば、薬物を、毎日、毎週、若しくは毎月新たに適用することも、薬物の投与に局所点眼剤を使用することもない。
【００４７】
種々の薬物送達系が公知である。これらの種々の他の系は一般的に、硝子体内埋め込み型リザーバータイプの系、生分解性デポー系、又は除去が必要なインプラント（非浸食性）を含む。この点での技術水準は、Ｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ（Ｊａｆｆｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔａｙｌｏｒ  ＆  Ｆｒａｎｃｉｓ  ｐｕｂ．，２００６）などの教科書に詳細に記載されている。しかし、これらのインプラントのほとんどは、期間終了時に除去する必要があるか、その標的部位から離れることがあるか、眼の後部で視覚の妨げになり得るか、又は大量の酸性分解産物の遊離によりそれ自体炎症性になり得るかのいずれかである。そのため、これらのインプラントは、非常に高い薬物濃度で非常に小さく作られている。それらが小さいとしても、２５Ｇ（２５ゲージ）を超える大きさの針により、又は埋め込み若しくは必要に応じて除去のための外科的手法送達系により配置する必要がある。一般的に、これらは、生分解性手法又は除去可能なリザーバー手法を利用する、薬物溶液の硝子体液又は硝子体内インプラントへの局所注射である。例えば、硝子体液へ送達される局所注射には、抗ＶＥＧＦ剤ＬＵＣＥＮＴＩＳ又はＡＶＡＳＴＩＮがある。ＰＯＳＵＲＤＥＸ（Ａｌｌｅｒｇａｎ）は、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）又は網膜静脈閉塞症に適応される生分解性インプラントであり、硝子体腔への送達に２２ゲージの注射器送達系が使用される。これらは、薬物送達期間設定の短い強力な薬物である。治療剤は、ポリ乳酸／ポリグリコール酸ポリマーマトリックスを含むデキサメタゾンである。糖尿病性網膜症に対するＰＯＳＵＲＤＥＸの治験は進行している。そして、例えば、ＭＥＤＩＤＵＲＥインプラント（ＰＳＩＶＩＤＡ）は、ＤＭＥ適応症に使用される。このインプラントの治療剤はフルオシノロンアセトニドであり、公称送達寿命は１８か月又は３６か月である（２バージョン）。トリアムシノロンアセトニドを収容する硝子体内の除去可能なインプラントが試験されている。その公称送達寿命は約２年であり、外科的な埋め込みが必要である。その適応症はＤＭＥである。
【００４８】
これらの従来の系と対照的に、これらの治療剤又は他の治療剤は、キセロゲル粒子の集団又は粒子を含む系を利用して送達できる。キセロゲル粒子は薬剤を含む。キセロゲルは、生理液への曝露と同時に、液体を吸収して、眼にとって生体適合性であるヒドロゲルを形成するが、それは他の環境とは明確に異なる環境である。炎症性が最低限である材料を使用すると、多くの場合眼において有害である血管形成が回避される。生体適合性眼用材料はこのように意図されない血管形成を回避する。いくつかの態様において、酸性分解産物を回避すると、この目的が達成される。さらに、ヒドロゲル及び親水性材料（水への溶解度が少なくともリットルあたり１グラムである成分、例えば、ポリエチレングリコール／オキシド）の使用により、炎症細胞の流入も最低限になる。このプロセスは、非ヒドロゲル又は剛性のリザーバー系眼用インプラントの従来の使用とは対照的である。さらに、特定のタンパク質は、生体適合性を高めるために避けられることがある。例えば、コラーゲン又はフィブリン糊は、分解につれて生物活性を促進するシグナルを放出するので、炎症又は望ましくない細胞反応を促進する傾向がある。その代わりに、合成材料又は通常天然にみられないペプチド配列が使用される。さらに、例えば、分解しない熱形成ゲルで起こるような慢性異物反応を回避するために生分解性材料が利用され得る。さらに、軟質の材料又は周囲の組織の形状に従うようにインサイチュで製造される材料は眼の歪みを最低限にし、低膨張性材料は、膨張により起こる視界の歪みをなくすために使用できる。高ｐＨ又は低ｐＨの材料は、形成、導入、又は分解段階のいずれでも避けられ得る。
【００４９】
キセロゲルは、ステロイド、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）、抗癌剤、抗生物質などを含む、いくつかのクラスの薬物（及び局所並びに全身送達用の体の他の部分への薬物）と共に調製され、その送達に利用され得る。キセロゲルを利用して、薬物及び治療剤、例えば、抗炎症剤（例えば、ジクロフェナク）、鎮痛剤（例えば、ブピバカイン）、カルシウムチャネルブロッカー（例えば、ニフェジピン）、抗生物質（例えば、シプロフロキサシン）、細胞周期阻害剤（例えば、シンバスタチン）、タンパク質（例えば、インスリン）を送達できる。粒子を利用して、例えば、ステロイド、ＮＳＡＩＤＳ、抗生物質、鎮痛剤、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）の阻害剤、化学療法剤、抗ウイルス薬などのいくつかのクラスの薬物を送達できる。ＮＳＡＩＤＳの例は、イブプロフェン、メクロフェナム酸ナトリウム、メファナム酸（mefanamic acid又はメフェナム酸）、サルサレート、スリンダク、トルメチンナトリウム、ケトプロフェン、ジフルニサル、ピロキシカム、ナプロキセン、エトドラク、フルルビプロフェン、フェノプロフェンカルシウム、インドメタシン、セロキシブ（ｃｅｌｏｘｉｂ）、ケトロラック、及びネパフェナクである。薬物自体は、小分子、タンパク質、ＲＮＡ断片、タンパク質、グリコサミノグリカン、炭水化物、核酸、無機及び有機の生物活性化合物であり得るが、具体的な生物活性剤には、酵素、抗生物質、抗新生物剤、局所麻酔剤、ホルモン、血管新生剤、抗血管新生剤、成長因子、抗体、神経伝達物質、向精神薬、抗癌剤、化学療法剤、生殖器に影響を与える薬剤、遺伝子、及びオリゴヌクレオチド、又は他の配列（ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎｓ）があるがこれらに限定されない。
【００５０】
種々の薬物又は他の治療剤は、これらのキセロゲル粒子又は他のキセロゲル構造を利用して送達できる。薬剤又は薬物のファミリー及び薬剤の適応症の例のリストが与えられる。薬剤は、適応される状態を治療する方法の一部としても、適応される状態を治療する組成物を製造する方法の一部としても使用できる。例えば、ＡＺＯＰＴ（ブリンゾラミド眼科用懸濁剤）を、高眼圧又は開放隅角緑内障の患者の眼内圧亢進の治療に使用できる。ポビドンヨード眼科用液剤中のＢＥＴＡＤＩＮＥは、眼周囲領域の準備処置及び眼表面の洗浄に利用できる。ＢＥＴＯＰＴＩＣ（塩酸ベタキソロール）は、眼内圧を下げるために、又は慢性開放隅角緑内障及び／若しくは高眼圧に利用できる。ＣＩＬＯＸＡＮ（塩酸シプロフロキサシン眼科用液剤）は、微生物の感受性株により起こされる感染症を治療するのに利用できる。ＮＡＴＡＣＹＮ（ナタマイシン眼科用懸濁剤）は、真菌性眼瞼炎、結膜炎、及び角膜炎の治療に利用できる。ＮＥＶＡＮＡＣ（ネパンフェナク（Ｎｅｐａｎｆｅｎａｃ）眼科用懸濁液）は、白内障手術に関連した疼痛及び炎症の治療に利用できる。ＴＲＡＶＡＴＡＮ（トラボプロスト眼科用液剤）は、眼内圧亢進の低減−開放隅角緑内障又は高眼圧に利用できる。ＦＭＬ  ＦＯＲＴＥ（フルオロメトロン眼科用懸濁液）は、眼瞼結膜及び眼球結膜、角膜、及び眼球前部のコルチコステロイド反応性炎症の治療に利用できる。ＬＵＭＩＧＡＮ（ビマトプロスト眼科用液剤）は、眼内圧亢進の低減−開放隅角緑内障又は高眼圧に利用できる。ＰＲＥＤ  ＦＯＲＴＥ（酢酸プレドニゾロン）は、眼瞼結膜及び眼球結膜、角膜、並びに眼球前部のステロイド反応性炎症の治療に利用できる。ＰＲＯＰＩＮＥ（塩酸ジピベフリン）は、慢性開放隅角緑内障における眼内圧の制御に利用できる。ＲＥＳＴＡＳＩＳ（シクロスポリン眼科用乳剤）は、例えば、乾性角結膜炎に関連する眼炎症がある患者などの患者の涙産生を増加させるのに利用できる。ＡＬＲＥＸ（エタボン酸ロテプレドノール眼科用懸濁剤）は、季節性アレルギー性結膜炎の一時的な緩和に利用できる。ＬＯＴＥＭＡＸ（エタボン酸ロテプレドノール眼科用懸濁液）は、眼瞼結膜及び眼球結膜、角膜、並びに眼球前部のステロイド反応性炎症の治療に利用できる。ＭＡＣＵＧＥＮ（ペガプタニブナトリウム注射液）は、新生血管型（ウェット）加齢黄斑変性の治療に利用できる。ＯＰＴＩＶＡＲ（塩酸アゼラスチン）は、アレルギー性結膜炎に関連する眼のかゆみの治療に利用できる。ＸＡＬＡＴＡＮ（ラタノプロスト眼科用液剤）は、例えば、開放隅角緑内障又は高眼圧の患者の眼内圧亢進を低減するのに利用できる。ＢＥＴＩＭＯＬ（チモロール眼科用液剤）は、高眼圧又は開放隅角緑内障の患者の眼内圧亢進の治療に利用できる。ラタノプロストは、プロスタノイド選択性ＦＰ受容体作動剤である、遊離酸形態のプロドラッグである。ラタノプロストは、副作用をほとんど起こさずに緑内障患者の眼内圧を低下させる。ラタノプロストは水溶液への溶解度が比較的低いが、溶媒蒸発を利用する微小球の製造に通常利用される有機溶媒に容易に溶ける。
【００５１】
送達用の薬剤のさらなる実施形態は、標的ペプチドにインビボで特異的に結合して標的ペプチドとその天然の受容体又は他のリガンドとの相互作用を防ぐものがある。ＡＶＡＳＴＩＮは、例えば、ＶＥＧＦに結合する抗体である。そして、ＡＦＬＩＢＥＲＣＥＰＴは、ＶＥＧＦ受容体の部分を含んでＶＥＧＦをトラップする融合タンパク質である。ＩＬ−１受容体の細胞外ドメインを利用するＩＬ−１トラップも公知である。トラップは、ＩＬ−１が細胞表面の受容体に結合して活性化するのを阻害する。送達用の薬剤の実施形態は、核酸、例えば、アプタマーを含む。ペガプタニブ（ＭＡＣＵＧＥＮ）は、例えば、ペグ化された抗ＶＥＧＦアプタマーである。粒子−及び−ヒドロゲル送達プロセスの利点は、アプタマーがその放出までインビボの環境から保護されていることである。送達用の薬剤のさらなる実施形態は高分子薬物であり、これは、従来の小分子薬物より著しく大きい薬物、すなわち、オリゴヌクレオチド（アプタマー、アンチセンス、ＲＮＡｉ）、リボザイム、遺伝子療法核酸、リコンビナントペプチド、及び抗体などの薬物を意味する用語である。
【００５２】
一実施形態は、アレルギー性結膜炎の医薬の延長した放出を含む。例えば、ケトチフェン、抗ヒスタミン剤及び肥満細胞安定剤を粒子中に与えて、本明細書に記載される通り有効量で眼に放出して、アレルギー性結膜炎を治療できる。季節性アレルギー性結膜炎（ＳＡＣ）及び通年性アレルギー性結膜炎（ＰＡＣ）はアレルギー性結膜疾患である。症状には、かゆみ及びピンクから赤味を帯びた眼がある。これらの２つの眼の症状は肥満細胞により媒介される。症状を緩和する非特異的な手段には、従来、冷湿布、代用涙液による洗眼、及びアレルゲンの回避がある。治療は、従来、抗ヒスタミン肥満細胞安定剤、二重機構抗アレルゲン剤、又は局所抗ヒスタミン剤からなる。コルチコステロイドは有効かもしれないが、副作用のため、春季角結膜炎（ＶＫＣ）及びアトピー性角結膜炎（ＡＫＣ）などのより重症な形態のアレルギー性結膜炎用にとっておかれる。
【００５３】
モキシフロキサシンはＶＩＧＡＭＯＸの有効成分であり、眼の細菌感染を治療又は予防するための使用に認可されたフルオロキノロンである。用量は、典型的には、０．５％溶液１滴であり、１日３回１週間以上投与される。
【００５４】
ＶＫＣ及びＡＫＣは慢性のアレルギー性疾患であり、好酸球、結膜繊維芽細胞、上皮細胞、肥満細胞、及び／又はＴＨ２リンパ球が、結膜の生化学的特徴及び組織特徴をさらに悪化させる。ＶＫＣ及びＡＫＣは、アレルギー性結膜炎の抑制に使用される医薬品により治療できる。
【００５５】
浸透剤（Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔｓ）は作用剤であり、本明細書に記載されるゲル、ヒドロゲル、オルガノゲル、キセロゲル、及び生体材料に含まれてよい。これらは、薬物が意図される組織に浸透するのを助ける作用剤である。浸透剤は、組織に対して必要に応じて選択でき、例えば、皮膚に対する浸透剤、鼓膜に対する浸透剤、眼に対する浸透剤である。
【００５６】
キセロゲル粒子のブレンディング及び集団
粒子の集団（薬剤の粉末粒子及び／又はキセロゲル／ヒドロゲル粒子）は、複数のセットの粒子を含み得る。キセロゲル／ヒドロゲルという用語は、キセロゲル及び／又はヒドロゲルとして水和されたキセロゲル（ｘｅｒｏｇｅｌｓ−ｈｙｄｒａｔｅｄ−ａｓ−ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ）を意味する。例えば、集団は、放射線不透剤を含むいくらかのキセロゲル粒子を含み得るが、これらの粒子は集団内で１セットを形成している。他のセットは粒径を対象とし、セットは別個の形状又は粒径分布を有する。議論された通り、粒子は良好に制御された大きさで製造可能であり、そのようにして、集団中に組み合わせるために種々のセットに製造及び分割できる。
【００５７】
あるセットは、特定の分解性を有する粒子（キセロゲル／ヒドロゲル）でできている。一実施形態は、それぞれ別個の分解性プロファイルを有する複数のセットを含む。異なる分解速度は、異なる放出プロファイルを与える。実施例２に関する図６及び７に示される通り、異なるセットの粒子の組み合わせを製造して、所望のプロファイルを達成できる。分解時間は３から１０００日を含む。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値が企図されることをすぐに認識するだろう。例えば、第一のセットの中央分解時間が約５から約８日のことがあり、第二のセットの中央時間が約３０から約９０日のことがあり、第三のセットの中央時間が約１８０から約３６０日のことがある。
【００５８】
キセロゲル／ヒドロゲル粒子をブレンドして、所望のタンパク質放出プロファイルを達成することができる。異なる分解速度（ヒドロゲルとして）を有するゲルを組み合わせて、単一のゲルの本質的に非線形な放出プロファイルを補う一定又は一定に近い放出を与えることができる。
【００５９】
キセロゲル／ヒドロゲル粒子の集団は、複数のセットの薬剤を含んでよい。例えば、ある粒子は第一の治療剤を含むように製造でき、これらの粒子は集団内で１セットを形成する。他のセットは他の薬剤を有してよい。薬剤の例には、水溶性生物製剤、タンパク質、ペプチド、核酸、小分子薬物、及び疎水性薬剤がある。他のセットは、粒径を対象とすることがあり、セットは別個の形状又は粒径分布を有する。議論された通り、粒子は、良好に制御された大きさに製造でき、集団中に組み合わせるために種々のセットに分割できる。これらの種々のセットは、自由に、組み合わせ及び部分組み合わせ中に混合及び調和でき、例えば：大きさ、分解性、治療剤、及び可視化剤である。
【００６０】
キセロゲル／ヒドロゲルは、粉末形態でない薬剤をさらに含み得る。薬剤は、キセロゲル／ヒドロゲルと共に配置されても、キセロゲル／ヒドロゲルと共に使用される他のビヒクルの溶液と混合されてもよい。例えば、キセロゲル粒子の集団は、薬物溶液をさらに含む水又は塩水を加えることにより、使用時に水和されてヒドロゲルを形成することができる。そのような薬物又は薬剤は、初期の多量の放出を与えるためにキセロゲル／ヒドロゲル中の粉末である薬剤と同じでもよく、二次療法又は可視化用でもよい。
【００６１】
潤滑性
集団は、小さいゲージの針により手作業で注射するための大きさ及び潤滑性をもって製造できる。直径が約４０から約１００ミクロンの回転楕円面状粒子に粉砕された親水性ヒドロゲルは充分小さいので、３０ゲージの針による手作業の注射が可能である。親水性ヒドロゲル粒子は、全目的のために本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１１／０１４２９３６号明細書（矛盾がある場合、本明細書が優先する）に報告の通り、小さいゲージの針／カテーテルを通るのが困難であることが観察された。粒径は、抵抗並びに溶液の粘度に寄与する。粒子は、針を詰まらせる傾向があった。抵抗力は、流体の粘度に比例するので、より粘性の流体は、小さい開口部を通って押し進むのにより多くの力が必要である。
【００６２】
米国特許出願公開第２０１１／０１４２９３６号明細書に報告される通り、粒子の溶媒の粘度を上げると、カテーテル及び／又は針を通る抵抗が低くなり得ることが意外にも見出された。この低下は、高オスモル濃度を有する溶媒の使用に起因し得る。特定の理論に拘束はされないが、これらの作用剤の添加による注射性の向上は、粒子の収縮、粘度に対する粒子対粒子の寄与を減らす粒子間の自由水の増加、及び自由水の粘度増加により起こったが、それは粒子を針の中に且つ針の外へ引っ張るのを助け、歪み及び詰まりを防いだ。直鎖ポリマーの使用は、沈降を防ぎ溶媒と共に粒子が動くのを促進するのに有用なチキソトロピック性にさらに寄与し得るが、小さな開口部から押し出されるとずり減粘を示す。この手法は、他の問題、すなわち、粒子が沈降し他の方法で拾い上げを逃れる傾向があったので、粒子を溶液から針／カテーテルを通して動かすことが困難だったが、これも解決するのが観察された。水性溶媒中の粒子の溶液が小さい穴の開口部を通って排除されるのが観察された。溶媒は優先的にアプリケーターから動いて出る傾向があり、過剰の粒子を後に残し、それはアプリケーターから取り除くことができないか、又はアプリケーターを詰まらせ、又はある場合には、取り除くことはできるが、手持ちサイズの針を操作する平均的な使用者には合わない不適切に大きな力を利用しなければならない。しかし、浸透圧剤（ｏｓｍｏｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ）の添加は、アプリケーターから粒子を出すのを助ける粘度及び／又はチキソトロピック挙動に寄与した。
【００６３】
本発明の実施形態は、複数のキセロゲル／ヒドロゲル粒子への浸透圧剤の添加を含む。そのような作用剤の例に塩類及びポリマーがある。実施形態は、ポリマー、直鎖ポリマー、親水性ポリマー、又はこれらの組み合わせを含む。実施形態は、分子量が約５００から約１００，０００のポリマーを含む。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値、例えば、分子量約５０００から約５０，０００が企図されることをすぐに認識するだろう。実施形態は、例えば、約１％から約５０％ｗ／ｗの浸透圧剤の濃度を含む。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値、例えば、１０％から３０％が企図されることをすぐに認識するだろう。作用剤及びヒドロゲルは患者に導入され、そのキットの一部になり得る。
【００６４】
前駆体
マトリックスは、水溶性生物製剤の粒子を含むように調製し、使用することができる。したがって、埋め込み可能なマトリックスを製造する実施形態が本明細書に提供される。そのようなマトリックスには、多孔性が約２０％ｖ／ｖを超えるマトリックスがある。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値が企図されることをすぐに認識するだろう。前駆体は有機溶媒に溶解されて、オルガノゲルが製造され得る。オルガノゲルは、三次元架橋ネットワークに捕捉された液体有機相から構成される非結晶性で非ガラス状の固体材料である。液体は、例えば、有機溶媒、鉱油、又は植物油でよい。溶媒の溶解度及び容量は、オルガノゲルの弾性及び堅さにとって重要な特性である。或いは、前駆体分子は、それ自身、自身の有機マトリックスを形成する可能性があることがあり、第三の有機溶媒の必要性がなくなる。前駆体という用語は、架橋マトリックスの一部になる成分を意味する。架橋してマトリックスになるポリマーは前駆体であるが、マトリックス中に単に存在しているだけである塩又はタンパク質は前駆体でない。
【００６５】
オルガノゲルから溶媒（使用される場合）を除去すると、キセロゲル、乾燥したゲルを与える。例えば、凍結乾燥により形成されたキセロゲルは、高い多孔性（少なくとも約２０％、大きい表面積、及び小さい細孔径を有することがある。親水性材料により製造されたキセロゲルは、水溶液に曝されるとヒドロゲルを形成する。多孔性の高いキセロゲルは、より密度の高いキセロゲルよりも急速に水和する。ヒドロゲルは、水に溶解せず、その構造内に多量の（２０％超）水を保持する材料である。実際に、９０％を超える含水量がしばしば知られている。ヒドロゲルは、水溶性分子を架橋して、基本的に無限の分子量のネットワークを形成することにより形成することができる。高含水量のヒドロゲルは、典型的には柔らかく、しなやかな材料である。米国特許出願公開第２００９／００１７０９７号明細書、同第２０１１／０１４２９３６号明細書、及び同第２０１２／００７１８６５号明細書に記載されるヒドロゲル及び薬物送達系は、本明細書に提供される手引きに従って、本明細書の材料及び方法と共に使用するために適合され得る。これらの引用文献は、全目的のために本明細書に組み込まれ、矛盾する場合には本明細書が優先する。
【００６６】
オルガノゲル及びヒドロゲルは、天然ポリマーからも、合成ポリマーからも、生合成ポリマーからも形成できる。天然ポリマーには、グルコスミノグリカン（glycosminoglycans又はグリコサミノグリカン）、多糖類、及びタンパク質があり得る。グリコサミノグリカンのいくつかの例には、デルマタン硫酸、ヒアルロン酸、硫酸コンドロイチン、キチン、ヘパリン、ケラタン硫酸、ケラト硫酸、及びこれらの誘導体がある。一般に、グリコサミノグリカンは天然源から抽出され、精製され、誘導体化される。しかし、それらは、合成により製造することも、細菌などの改変された微生物により合成することもできる。これらの材料は、天然の可溶性の状態から部分的に可溶性又は水膨潤性又はヒドロゲル状態に、合成により修飾することができる。この修飾は、種々の周知の技術、例えば、カルボキシル及び／又はヒドロキシル又はアミン基などの電離性又は水素結合性の官能基を、他のより疎水性の基と結合させるか、それらと置き換えて達成できる。
【００６７】
例えば、ヒアルロン酸に付いているカルボキシル基を、アルコールによりエステル化して、ヒアルロン酸の溶解度を低下させることができる。そのようなプロセスは、ヒアルロン酸製品の種々の製造業者（Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｃｏｒｐ．，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡなど）により利用されて、ヒドロゲルを形成するヒアルロン酸系シート、繊維、及び織物が作られている。カルボキシメチルセルロース又は酸化再生セルロースなどの他の天然の多糖類、天然ゴム、寒天、アグロース（agrose又はアガロース）、アルギン酸ナトリウム、カラギーナン、フコイダン、ファーセレラン、ラミナラン、イバラノリ（ｈｙｐｎｅａ）、キリンサイ（ｅｕｃｈｅｕｍａ）、アラビアゴム、ガッチゴム、カラヤゴム、トラガカントゴム、ローカストビーンゴム、アラビノガラクタン、ペクチン、アミロペクチン、ゼラチン、プロピレングリコールなどのポリオールと架橋したカルボキシメチルセルロースゴム又はアルギナートゴムなどの親水性コロイドなども、水性の環境と接触するとヒドロゲルを形成する。
【００６８】
合成オルガノゲル又はヒドロゲルは、生物学的に安定にも、生分解性にもなり得る。生物学的に安定な親水性ポリマー材料の例は、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリラート）、ポリ（電解質錯体）、加水分解性又は他の方法で分解可能な結合と架橋したポリ（ビニルアセタート）、及び水膨潤性Ｎ−ビニルラクタムである。他のヒドロゲルには、ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）として知られる親水性ヒドロゲル、酸性カルボキシポリマー（カルボマー樹脂は、Ｃ１０−Ｃ３０アルキルアクリラートにより修飾された、高分子量の、アリルペンタエリトリトール−架橋アクリル酸系ポリマーである）、ポリアクリルアミド、ポリアクリル酸、スターチグラフトコポリマー、アクリラートポリマー、エステル架橋ポリグルカンがある。そのようなヒドロゲルは、例えば、Ｅｔｅｓの米国特許第３，６４０，７４１号明細書、Ｈａｒｔｏｐの米国特許第３，８６５，１０８号明細書、Ｄｅｎｚｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．の米国特許第３，９９２，５６２号明細書、Ｍａｎｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．の米国特許第４，００２，１７３号明細書、Ａｒｎｏｌｄの米国特許第４，０１４，３３５号明細書、及びＭｉｃｈａｅｌｓの米国特許第４，２０７，８９３号明細書に記載されており、これらは全て引用により本明細書に組み込まれるが、矛盾する場合は本明細書が優先する。
【００６９】
ヒドロゲル及びオルガノゲルは、前駆体から作ることができる。前駆体は、ヒドロゲル／オルガノゲルではないが、互いに架橋してヒドロゲル／オルガノゲルを形成する。架橋は、共有結合によっても、物理的結合によっても形成できる。物理的結合の例は、イオン結合、前駆体分子セグメントの疎水性会合、及び前駆体分子セグメントの結晶化である。前駆体にきっかけを与えて、架橋ヒドロゲルを形成するように反応させることができる。前駆体は重合性であることがあり、常にではないが多くの場合重合性前駆体である架橋剤を含む。例えば、重合性前駆体は、互いに反応してマトリックス及び／又は繰り返し単位からできたポリマーを形成する官能基を有する前駆体である。前駆体はポリマーでよい。
【００７０】
例えば、いくつかの前駆体は、付加重合とも称される連鎖成長重合により反応し、二重又は三重化学結合を組み込んだモノマーを互いに連結することを含む。これらの不飽和モノマーは、開いて他のモノマーと連結して繰り返し鎖を形成できる、特別な内部結合を有する。モノマーは、他の基と反応してポリマーを形成する少なくとも１つの基を持つ重合性分子である。マクロモノマー（又はマクロマー）は、多くの場合末端に、モノマーとしての作用を可能にする少なくとも１つの反応基を有するポリマー又はオリゴマーである。各マクロモノマー分子は、反応基の反応によりポリマーに結合する。そのため、２つ以上のモノマー又は他の官能基を有するマクロモノマーは、共有結合性架橋を形成する傾向がある。付加重合は、例えば、ポリプロピレン又はポリ塩化ビニルの製造に関与する。付加重合の種類の１つはリビング重合である。
【００７１】
例えば、いくつかの前駆体は、モノマーが縮合反応により結合する場合に起こる重縮合により反応する。典型的には、これらの反応は、アルコール、アミン、又はカルボン酸（又は他のカルボキシル誘導体）官能基を組み込んだ分子の反応により達成できる。アミンがカルボン酸と反応すると、アミド又はペプチド結合が形成され、水が放出される。例えば、本明細書に明示的に開示されているものと矛盾しない程度に引用により本明細書に全体として組み込まれる米国特許第６，９５８，２１２号明細書にある通り、いくつかの縮合反応は求核アシル置換の後に起こる。
【００７２】
いくつかの前駆体は、連鎖成長機構により反応する。連鎖成長ポリマーは、モノマー又はマクロモノマーと反応中心との反応により形成されるポリマーと定義される。反応中心は、化学化合物が関与する反応の開始剤である化合物内の特定の位置である。連鎖成長ポリマー化学作用において、これは、成長鎖の連鎖成長の点でもある。反応中心は、通常、本質的に、ラジカル性、アニオン性、又はカチオン性であるが、別な形態をとることもある。連鎖成長系はフリーラジカル重合を含み、それは、開始、成長、及び停止のプロセスを含む。開始は、ラジカル開始剤、例えば、有機過酸化物分子から作られる、成長に必要なフリーラジカルの製造である。停止は、ラジカルがさらなる成長を妨げるように反応すると起こる。最もよくみられる停止の方法は、２つのラジカル種が互いに反応して一分子を形成するカップリングによる。
【００７３】
いくつかの前駆体は、逐次成長機構により反応し、モノマーの官能基の間の逐次反応により形成されたポリマーである。ほとんどの逐次成長ポリマーは、縮合ポリマーとも分類されるが、逐次成長ポリマーが全て縮合物を放出するわけではない。
【００７４】
モノマーはポリマーでも小さな分子でもよい。ポリマーは、多くの小さな分子（モノマー）を規則的なパターンで結合させて形成された高分子量分子である。オリゴマーは、約２０未満のモノマー繰り返し単位を有するポリマーである。小さい分子は、一般に、約２０００ダルトン未満である分子を意味する。
【００７５】
このように、前駆体は、アクリル酸又はビニルカプロラクタムなどの小さい分子でも、アクリラートでキャップされたポリエチレングリコール（ＰＥＧ−ジアクリラート）などの重合性基を含むより大きな分子でも、本明細書に明示的に開示されているものと矛盾しない程度にそれぞれ引用により本明細書に全体として組み込まれているＤｕｎｎ  ｅｔ  ａｌの米国特許第４，９３８，７６３号明細書、Ｃｏｈｎ  ｅｔ  ａｌの米国特許第第５，１００，９９２号及び同第４，８２６，９４５号明細書、又はＤｅＬｕｃａ  ｅｔ  ａｌの米国特許第４，７４１，８７２号及び同第５，１６０，７４５号明細書のものなどエチレン性不飽和基を含む他のポリマーでもよい。
【００７６】
共有結合性架橋したヒドロゲルを形成するために、前駆体は共有結合性架橋されなければならない。一般に、ポリマー性前駆体は、２つ以上の点で他のポリマー性前駆体に結合するポリマーであり、各点は同じポリマー又は異なるポリマーへの連結である。少なくとも２つの反応中心（例えば、フリーラジカル重合において）を持つ前駆体は、各反応基が異なる成長ポリマー鎖の形成に関与できるので、架橋剤として作用できる。とりわけ、反応中心のない官能基の場合、架橋には、前駆体種類の少なくとも１つに３つ以上のそのような官能基が必要である。例えば、多くの求電子求核反応は、求電子官能基及び求核官能基を消費するので、前駆体が架橋を形成するには第三の官能基が必要とされる。そのため、そのような前駆体は３つ以上の官能基を有することがあり、２つ以上の官能基を有する前駆体により架橋され得る。架橋された分子は、イオン結合又は共有結合、物理的な力、又は他の引力により架橋され得る。しかし、共有結合性架橋は、典型的には、安定性及び反応物生成物の構造における予測可能性を与えるだろう。
【００７７】
いくつかの実施形態において、各前駆体は多官能性であるが、これは、ある前駆体に付いている求核官能基が他の前駆体についている求電子官能基と反応して共有結合を形成できるように、２つ以上の求電子又は求核官能基を含むことを意味する。少なくとも一方の前駆体は３つ以上の官能基を含み、そのため、求電子求核反応の結果として、前駆体は結合して架橋したポリマー生成物を形成する。
【００７８】
前駆体は、生物学的に不活性で親水性の部分、例えばコアを有することがある。分岐ポリマーの場合、コアは、コアから伸びるアームに結合した分子の連続する部分を意味し、アームは官能基を有し、それは分岐の末端であることが多い。親水性の前駆体又は前駆体部分は、水溶液に対して少なくとも１ｇ／１００ｍＬの溶解度を有する。親水性部分は、例えば、ポリエーテル、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリエチレンオキシド−コ−ポリプロピレンオキシド（ＰＰＯ）、コ−ポリエチレンオキシドブロック又はランダムコポリマーなどのポリアルキレンオキシド、並びにポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリ（ビニルピロリジノン）（ＰＶＰ）、ポリ（アミノ酸、デキストラン、又はタンパク質でよい。前駆体はポリアルキレングリコール部分を有してよく、ポリエチレングリコール系でよく、少なくとも重量で約８０％又は９０％のポリマーがポリエチレンオキシド繰り返しを含む。ポリエーテル及びより詳細にはポリ（オキシアルキレン）又はポリ（エチレングリコール）又はポリエチレングリコールは一般的に親水性である。これらの分野において慣例である通り、ＰＥＧという用語は、ヒドロキシル末端基があるＰＥＯも、ヒドロキシル末端基がないＰＥＯも意味するように使用される。
【００７９】
前駆体は、高分子（すなわちマクロマー）でもよく、それは分子量が千から数百万の範囲にある分子である。しかし、いくつかの実施形態において、前駆体の少なくとも１つは、約１０００Ｄａ以下の小分子である。高分子は、約１０００Ｄａ以下の小分子と組み合わせて反応する場合、好ましくは分子量が小分子の少なくとも５倍から５０倍であり、好ましくは約６０，０００Ｄａ未満である。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値が企図されることをすぐに認識するだろう。より好ましい範囲は、分子量が、架橋剤の約７倍から約３０倍である高分子であり、最も好ましい範囲は、重量で約１０倍から２０倍の差である。さらに、７，０００から４０，０００の分子量又は１０，０００から２０，０００の分子量のように、５，０００から５０，０００の高分子の分子量が有用である。
【００８０】
特定のマクロマー前駆体は、明示的に開示されているものと矛盾しない程度に引用により本明細書に全体として組み込まれているＨｕｂｂｅｌｌ  ｅｔ  ａｌの米国特許第５，４１０，０１６号明細書に記載されている架橋性で生分解性で水溶性のマクロマーである。これらのマクロマーは、少なくとも２つの重合性基を、少なくとも１つの分解性領域により分離して有することを特徴とする。
【００８１】
合成前駆体を使用できる。合成は、天然にみられず、ヒトにも通常みられない分子を意味する。いくつかの合成前駆体は、アミノ酸を含まず、天然にみられるアミノ酸配列も含まない。いくつかの合成前駆体は、天然にみられず通常人体にも見られないポリペプチドであり、例えば、ジ、トリ−、又はテトラ−リジンである。いくつかの合成分子はアミノ酸残基を有するが、隣接しているものは１、２、又は３つのみで、アミノ酸又はその集団は非天然のポリマー又は基により分離されている。そのため、多糖類又はその誘導体は合成ではない。
【００８２】
或いは、天然のタンパク質又は多糖類、例えば、コラーゲン、フィブリン（ノーゲン）、アルブミン、アルギナート、ヒアルロン酸、及びヘパリンは、これらの方法による使用に適合され得る。これらの天然分子は、化学的誘導体化、例えば、合成ポリマー装飾をさらに含み得る。天然分子は、そのネイティブな求核体によっても、例えば、本明細書に明示的に開示されているものと矛盾しない程度にそれぞれ引用により組み込まれている米国特許第５，３０４，５９５号、同第５，３２４，７７５号、同第６，３７１，９７５号、及び同第７，１２９，２１０号明細書にある通り官能基により誘導体化された後でも架橋することができる。天然は、天然にみられる分子を意味する。天然のポリマー、例えばタンパク質又はグリコサミノグリカン、例えば、コラーゲン、フィブリノーゲン、アルブミン、及びフィブリンは、求電子官能基を持つ反応性前駆体種を利用して架橋できる。体内に通常みられる天然のポリマーは、体内に存在するプロテアーゼによりタンパク分解的に分解される。そのようなポリマーは、それらのアミノ酸についているアミン、チオール、又はカルボキシルなどの官能基により反応させても、誘導体化して活性化可能な官能基を有してもよい。天然のポリマーはヒドロゲルに利用可能であるが、そのゲル化までの時間及び最終的な機械的性質は、追加の官能基の適切な導入及び好適な反応条件、例えばｐＨの選択により制御されなければならない。
【００８３】
前駆体は、生じるヒドロゲルが必要な量の水、例えば少なくとも約２０％の水を保持するならば、疎水性部分と共に製造できる。いくつかの場合において、それでも、前駆体は、親水性部分も有するので、水に可溶性である。他の場合において、前駆体は水中に分散する（懸濁液）が、それでも反応性で架橋材料を形成する。いくつかの疎水性部分は、複数のアルキル、ポリプロピレン、アルキル鎖、又は他の基を含み得る。疎水性部分を持ついくつかの前駆体は、ＰＬＵＲＯＮＩＣ  Ｆ６８、ＪＥＦＦＡＭＩＮＥ、又はＴＥＣＴＲＯＮＩＣの商標で販売されている。疎水性分子又はコポリマーなどの疎水性部分は、分子（例えば、ポリマー又はコポリマー）を凝集させて、ミセル又は疎水性ドメインを水性連続相に含む微小球を形成するほど疎水性であるもの又は、単独で試験すると、ｐＨ約７から約７．５で温度が約３０℃から約５０℃の水の水溶液から沈殿するか、又はその水溶液内にある場合他の方法で相を変えるほど疎水性であるものである。
【００８４】
前駆体の中にはデンドリマーにも他の高度に分岐した材料にもなり得るものがあることを念頭に置くと、前駆体は、例えば、それぞれ末端を有する２〜１００のアームを有し得る。ヒドロゲル前駆体についているアームは、架橋性官能基をポリマーコアに接続する化学基の直鎖を意味する。いくつかの実施形態は、３から３００のアームを持つ前駆体である。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値が、例えば、４から１６、８から１００、又は少なくとも６アームが企図されることをすぐに認識するだろう。
【００８５】
このため、ヒドロゲルは、例えば、第一のセットの官能基を持つマルチアームの前駆体及び第二のセットの官能基を有する低分子量前駆体から製造できる。例えば、６アーム又は８アームの前駆体は、末端が一級アミンであり、アームの分子量が約１，０００から約４０，０００である親水性アーム、例えば、ポリエチレングリコールを有し得る。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値が企図されることをすぐに認識するだろう。そのような前駆体は比較的小さな前駆体、例えば、分子量が約１００から約５０００、又は約８００以下、１０００以下、２０００以下、若しくは５０００以下で、少なくとも約３つの官能基、又は約３から約１６の官能基を有する分子と混合され得る。当業者は、明示的に表現されたこれらの値の間の全範囲及び値が企図されることをすぐに認識するだろう。そのような小分子は、ポリマーでも非ポリマーでもよく、天然でも合成でもよい。
【００８６】
デンドリマーでない前駆体を使用できる。樹枝状分子は、原子が中心コアから放射状に広がる多くのアーム及びサブアームに配列している高度に分岐した放射相称ポリマーである。デンドリマーは、対称性と多分散性の両方の評価に基づく構造の完全性の程度により特徴づけられ、合成には特定の化学的プロセスが必要である。しがたって、当業者は、デンドリマー前駆体を非デンドリマー前駆体から容易に区別できる。デンドリマーは、ある環境においてその成分ポリマーの溶解度に典型的に依存し、その周囲の溶媒又は溶質、例えば、温度、ｐＨ、又はイオン含量の変化に実質的に従って変化し得る形状を有する。
【００８７】
前駆体は、例えば、米国特許出願公開第２００４／００８６４７９号及び同第２００４／０１３１５８２号明細書並びに国際公開第０７００５２４９号、同第０７００１９２６号、及び同第０６０３１３５８号パンフレット又はその米国対応特許にある通りデンドリマーでよい。デンドリマーは、例えば、米国特許出願公開第２００４／０１３１５８２号及び同第２００４／００８６４７９号明細書並びに国際公開第０６０３１３８８号及び同第０６０３１３８８号パンフレットにある通り、多官能性前駆体としても有用になり得る。米国及びＰＣＴ出願のそれぞれは、本明細書に明示的に開示されているものと矛盾しない程度にそれぞれ引用により本明細書に全体として組み込まれている。デンドリマーは、高度に秩序があり、高い表面積対体積比を有し、潜在的な機能化のための多数の末端基を示す。実施形態は、デンドリマーでない多官能性前駆体を含む。
【００８８】
いくつかの実施形態は、５つ以下の残基、例えば、少なくとも１つのアミン、チオール、カルボキシル、又はヒドロキシル側鎖を含むアミノ酸のオリゴペプチド配列から基本的になる前駆体を含む。残基は、天然にみられるか、又はその誘導体化されたアミノ酸である。そのようなオリゴペプチドの骨格は天然でも合成でもよい。いくつかの実施形態において、２つ以上のアミノ酸のペプチドは、合成の骨格と組み合わされて前駆体が作られる。そのような前駆体の特定の実施形態は、分子量が約１００から約１０，０００、又は約３００から約５００の範囲である。当業者は、明示的に表された範囲内の全範囲及び値が企図されることをすぐに認識するだろう。
【００８９】
前駆体は、メタロプロテイナーゼ及び／又はコラゲナーゼによる付着を受けやすい配列を含まないことを含む、導入部位に存在する酵素により切断可能なアミノ酸配列を含まないように調製できる。さらに、前駆体は、全てのアミノ酸を含まないようにも、約５０、３０、２０、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、又は１つのアミノ酸を超えるアミノ酸配列を含まないようにも製造できる。前駆体は非タンパク質でもよく、これはそれらが天然に存在するタンパク質でなく、天然に存在するタンパク質の切断によって製造できず、タンパク質への合成材料の付加によって製造できないことを意味する。前駆体は、非コラーゲン、非フィブリン、非フィブリノーゲン、及び非アルブミンであり得るが、それは、それらがこれらタンパク質のいずれかでなく、これらのタンパク質の１つの化学誘導体でないことを意味する。非タンパク質前駆体の使用及びアミノ酸配列の限定された使用は、免疫反応の回避、望まれない細胞認識の回避、及び天然源から誘導されたタンパク質の使用に関連する危険の回避に有用になり得る。前駆体は非糖類でもよく（糖類を含まない）、基本的に非糖類でもよい（前駆体分子量の約５％ｗ／ｗを超える糖類を含まない。そのため、前駆体は、例えば、ヒアルロン酸、ヘパリン、又はゲラン（gellan）（又はジェラン）を除外する。前駆体は、非タンパク質と非糖質の両方でもよい。
【００９０】
ペプチドを前駆体として使用できる。一般に、より大きな配列（例えば、タンパク質）も使用できるが、約１０残基未満のペプチドが好ましい。当業者は、これらの明示的な範囲内の全ての範囲及び値、例えば、１〜１０、２〜９、３〜１０、１、２、３、４、５、６、又は７が含まれることをすぐに認識するだろう。いくつかのアミノ酸は、求核基（例えば、一級アミン又はチオール）又は求核基又は求電子基を組み込むために必要に応じて誘導体化され得る基（例えば、カルボキシル又はヒドロキシル）を有する。合成により生成したポリアミノ酸ポリマーは、それらが天然にみられず、天然の生体分子に同一でないように操作される場合、合成であると通常考えられる。
【００９１】
いくつかのオルガノゲル及びヒドロゲルは、ポリエチレングリコール含有前駆体により製造される。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ、高分子量で存在する場合ポリエチレンオキシドとも称される）は、ｎが少なくとも３である繰り返し単位（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎを有するポリマーを意味する。そのため、ポリエチレングリコールを有するポリマー性前駆体は、直列で互いに結合した少なくとも３つのこれらの繰り返し単位を有する。ポリマー又はアームのポリエチレングリコール含量は、ポリマー又はアームにあるポリエチレングリコール基を、他の基が間に入っていても、全て加算して計算される。そのため、少なくとも１０００ＭＷポリエチレングリコールを有するアームは、合計で少なくとも１０００ＭＷになるのに充分なＣＨ２ＣＨ２Ｏ基を有する。これらの分野で常用の用語である通り、ポリエチレングリコールポリマーは、必ずしも末端がヒドロキシル基である分子を意味しない。分子量は、記号ｋを使用して千単位で略され、例えば、１５Ｋは分子量１５，０００、すなわち１５，０００ダルトンを意味する。ＳＧは、スクシンイミジルグルタラートを意味する。ＳＳは、スクシンイミジルスクシナートを意味する。ＳＡＰは、スクシンイミジルアジパートを意味する。ＳＡＺは、スクシンイミジルアゼラートを意味する。ＳＳ、ＳＧ、ＳＡＰ、及びＳＡＺは、水中で加水分解により分解するエステル基を有するスクシンイミジルエステルである。そのため、加水分解可能とは、存在して分解を媒介する酵素又は細胞が全くない状態で、過剰の水の中で、インビトロで自然に分解する材料を意味する。分解の時間は、目視により判断して材料の実際上の消失を意味する。トリリジン（ＬＬＬとも略記される）は合成のトリペプチドである。ＰＥＧ及び／又はヒドロゲル、並びにこれらを含む組成物は、薬学的に許容できる形態で提供でき、それは高度に精製されて、汚染物、例えばパイロジェンを含まないことを意味する。
【００９２】
官能基
共有結合性架橋のための前駆体は、患者の外側又はインサイチュのいずれかで互いに反応して材料を形成する官能基を有する。官能基は、一般的には重合用の重合性基を有するか、求電子求核反応で互いに反応するか、他の重合反応に関与するように構成されている。重合反応の種々の態様が、本明細書の前駆体の項で議論されている。
【００９３】
そのため、いくつかの実施形態において、本明細書に明示的に開示されているものと矛盾しない程度にそれぞれ引用により本明細書に全体として組み込まれる米国特許第５，４１０，０１６号又は同第６，１４９，９３１号明細書にある通り、前駆体は、重合分野で利用される光開始又はレドックス系により活性化される重合性基、例えば、カルボジイミダゾール、スルホニルクロリド、クロロカーボナート、ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル、スクシンイミジルエステル、又はスルファスクシンイミジルエステルである求電子官能基を有する。求核官能基は、例えば、アミン、ヒドロキシル、カルボキシル、及びチオールであり得る。他の種類の求電子体は、例えば、とりわけポリマーの反応のためのマイケル付加スキームを記載する米国特許第６，９５８，２１２号明細書にある通り、アシルである。
【００９４】
アルコール又はカルボン酸などの特定の官能基は、生理的条件（例えば、ｐＨ７．２〜１１．０、３７℃）でアミンなどの他の官能基と通常反応しない。しかし、そのような官能基は、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドなどの活性化基を使用して、より反応性を高めることができる。特定の活性化基には、カルボニルジイミダゾール、スルホニルクロリド、アリールハライド、スルホスクシンイミジルエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル、スクシンイミジルエステル、エポキシド、アルデヒド、マレイミド、イミドエステルなどがある。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル又はＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミド（ＮＨＳ）基は、タンパク質又はアミン含有ポリマー、例えば、アミノ末端ポリエチレングリコールの架橋に有用な基である。ＮＨＳアミン反応の利点は、反応速度が好都合であるが、ゲル化速度がｐＨ又は濃度により調製できる点である。ＮＨＳアミン架橋反応は、副生成物としてＮ−ヒドロキシスクシンイミドを形成する。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドのスルホン化又はエトキシ化形態は、水に対する溶解度が比較的高く、そのため体から迅速に排出される。ＮＨＳ−アミン架橋反応は、水溶液中且つ緩衝剤、例えば、リン酸緩衝剤（ｐＨ５．０−７．５）、トリエタノールアミン緩衝剤（ｐＨ７．５−９．０）、又はホウ酸緩衝剤（ｐＨ９．０−１２）、又は重炭酸ナトリウム緩衝剤（ｐＨ９．０−１０．０）の存在下で実施できる。ＮＨＳ系架橋剤及び官能性ポリマーの水溶液は、好ましくは、ＮＨＳ基と水との反応のため架橋反応の直前に作られる。これらの基の反応速度は、これらの溶液をより低いｐＨ（ｐＨ４〜７）に保つことにより遅くさせることができる。緩衝剤は、体内に導入されるヒドロゲルにも含まれてよい。
【００９５】
いくつかの実施形態において、求核前駆体と求電子前駆体の両方が架橋反応に使用される限り、各前駆体は、求核官能基のみ又は求電子官能基のみを含む。そのため、例えば、架橋剤がアミンなどの求核官能基を有する場合、官能性ポリマーは、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドなどの求電子官能基を有し得る。その一方で、架橋剤が、スルホスクシンイミドなどの求電子官能基を有する場合、官能性ポリマーはアミン又はチオールなどの求核官能基を有し得る。例えば、タンパク質、ポリ（アリルアミン）、又はアミン末端二官能性又は多官能性ポリ（エチレングリコール）などの官能性ポリマーを使用できる。
【００９６】
一実施形態は、それぞれ３から１６の求核官能基を有する反応性前駆体種及びそれぞれ２から１２の求電子官能基を有する反応性前駆体種を有する。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値が企図されることをすぐに認識するだろう。
【００９７】
官能基は、例えば、求核体と反応性のある求電子体、具体的な求核体、例えば、一級アミンと反応性のある基、体液中で材料とアミド結合を形成する基、カルボキシルとアミド結合を形成する基、活性酸官能基、又はこれらの組み合わせになり得る。官能基は、例えば、強力な求電子官能基でよく、これは、ｐＨ９．０の水溶液中で、室温及び室圧で一級アミンと共有結合を効果的に形成する求電子官能基、及び／又はマイケル型反応により反応する求電子基を意味する。強力な求電子体は、マイケル型反応に関与しない型のことも、マイケル型反応に関与する型のこともある。
【００９８】
マイケル型反応は、共役不飽和系への求核体の１，４−付加反応を意味する。付加機構は、純粋に極性であるか、又はラジカル様中間状態（類）により進行することがある。ルイス酸又は適切に設計された水素結合種は触媒として作用できる。コンジュゲーション（共役、結合）という用語は、炭素−炭素、炭素−ヘテロ原子、又はヘテロ原子−ヘテロ原子多重結合と単結合が交互になることと、合成ポリマー又はタンパク質などの高分子への官能基の連結の両方を意味し得る。マイケル型反応は、本明細書に明示的に開示されているものと矛盾しない程度に全目的のために引用により本明細書に全体として組み込まれている米国特許第６，９５８，２１２号明細書に詳細に議論されている。
【００９９】
マイケル型反応に関与しない強力な求電子体の例は、スクシンイミド、スクシンイミジルエステル、又はＮＨＳエステルである。マイケル型求電子体の例は、アクリラート、メタクリラート、メチルメタクリラート、及び他の不飽和重合性基である。
【０１００】
開始系
いくつかの前駆体は、開始剤を利用して反応する。開始剤基は、フリーラジカル重合反応を開始できる化学基である。例えば、それは、別な成分としても、前駆体についているペンダント基としても存在し得る。開始剤基には、熱開始剤、光活性化開始剤、及び酸化還元（レドックス）系がある。長波ＵＶ及び可視光光活性化開始剤には、例えば、エチルエオシン基、２，２−ジメトキシ−２−フェニルアセトフェノン基、他のアセトフェノン誘導体、チオキサントン基、ベンゾフェノン基、及びカンファキノン基がある。熱反応性開始剤の例には、４，４’アゾビス（４−シアノペンタン酸）基、及び過酸化ベンゾイル基の類似体がある。Ｗａｋｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ．，Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，Ｖａ．から市販のＶ−０４４などのいくつかの市販の低温フリーラジカル開始剤を利用して、体温でフリーラジカル架橋反応を開始して、上述のモノマーによるヒドロゲルコーティングを形成できる。
【０１０１】
金属イオンを、レドックス開始剤系において酸化剤又は還元剤のどちらとしても使用できる。例えば、第一鉄イオンを、ペルオキシド又はヒドロペルオキシドと組み合わせて重合を開始しても、重合系の一部としてもよい。この場合、第一鉄イオンは還元剤として作用するだろう。或いは、金属イオンは酸化剤として作用し得る。例えば、セリウムイオン（セリウムの＋４価状態）は、カルボン酸及びウレタンを含む種々の有機基と相互作用して、金属イオンに電子を除去し、有機基に開始ラジカルを残す。そのような系において、金属イオンは酸化剤として作用する。どちらの役割にも潜在的に好適な金属イオンは、遷移金属イオン、ランタニド、及びアクチニドのいずれでもよく、それらは少なくとも２つの容易に利用可能な酸化状態を有する。特に有用な金属イオンは、わずか１つの電荷の差により分けられた少なくとも２つの状態を有する。これらのうち、最も普通に使用されるのは、第二鉄／第一鉄、第二銅／第一銅；四価セリウム／三価セリウム；三価コバルト／二価コバルト；バナジウム酸塩Ｖ対ＩＶ；過マンガン酸塩；及び三価マンガン／二価マンガンである。過酸化水素、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド、ｔ−ブチルペルオキシド、ベンゾイルペルオキシド、クミルペルオキシドを含むペルオキシド及びヒドロペルオキシドなどの過酸素含有化合物を使用できる。
【０１０２】
開始系の例は、ある溶液中の過酸素化合物と、他の溶液中の遷移金属などの反応性イオンの組み合わせである。この場合、外部の重合開始剤は全く必要とされず、２つの相補的な反応性官能基含有部分が適用部位で相互作用する場合、重合は、自然に、外部エネルギーを加えなくても、外部エネルギー源を使用しなくても進行する。
【０１０３】
可視化剤
可視化剤は、キセロゲル／ヒドロゲル中で粉末として使用できる。ヒドロゲルが有効量の作用剤を含む場合ヒドロゲルを利用する使用者が目的物を観察できるように、それは、ヒトの眼に検出できる波長で光を反射又は放出する。画像化のために機械の支援を必要とする作用剤は、本明細書においてイメージング剤と称され、例には、放射線造影剤及び超音波造影剤がある。
【０１０４】
いくつかの生体適合性可視化剤は、ＦＤ＆Ｃ  ＢＬＵＥ  ＃１、ＦＤ＆Ｃ  ＢＬＵＥ  ＃２、及びメチレンブルーである。これらの作用剤は、好ましくは、最終的な求電子求核反応性前駆体種混合物に、０．０５ｍｇ／ｍｌを超える濃度で、好ましくは少なくとも０．１から約１２ｍｇ／ｍｌの濃度範囲で、より好ましくは０．１から４．０ｍｇ／ｍｌの範囲で存在するが、より高い濃度も、可視化剤の溶解度の限度まで潜在的に利用され得る。可視化剤は、キセロゲル／ヒドロゲルの分子ネットワークに共有結合で連結することができ、そのようにして、患者に適用された後ヒドロゲルが加水分解して溶解に至るまで、可視化を維持する。
【０１０５】
可視化剤は、医療用の埋込み式医療装置での使用に好適な種々の非毒性着色物質、例えば、ＦＤ＆Ｃ  ＢＬＵＥ染料３及び６、オエシン、メチレンブルー、インドシアニングリーン、又は合成縫合糸に通常存在する着色染料のいずれからも選択してよい。ＮＨＳ−フルオレセインなどの反応性の可視化剤を使用して、可視化剤を、キセロゲル／ヒドロゲルの分子ネットワーク中に組み込むことができる。可視化剤は、反応性前駆体種、例えば架橋剤と官能性ポリマー溶液のどちらと共に存在してもよい。好ましい着色物質は、ヒドロゲルに化学的に結合することも、化学的に結合しないこともある。可視化剤は、少量、例えば、１％重量／体積、より好ましくは０．０１％重量／体積未満、最も好ましくは０．００１％重量／体積未満の濃度で使用できる。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値が企図されることをすぐに認識するだろう。作用剤は、粒子の位置をはっきり示す傾向があり、その存在及び溶解速度を示す。
【０１０６】
生分解
キセロゲルは、生理溶液中で水和すると、ヒドロゲルが機械的強度を失い、ついには水分解性基の加水分解によりインビトロで過剰の水の中に消散することにより測定可能な通り、水分解性であるヒドロゲルが形成されるようにオルガノゲルから形成できる。この試験は、細胞又はプロテアーゼにより促進される分解とは対照的なプロセスである、加水分解により促進されるインビボの溶解を予測する。しかし、重要なことは、ポリ無水物又は従来使用されている分解して酸性成分になる他の分解性材料は、組織に炎症を起こす傾向がある。しかし、ヒドロゲルは、そのような材料を除外することができ、ポリ無水物、無水物結合、又は酸若しくは二酸に分解する前駆体を含まないことがある。水への溶解とも称される水の溶媒和による分解という用語は、マトリックスが徐々に溶解状態になるプロセスを意味し、これは、共有結合性架橋した材料及び水に不溶性の材料では起こり得ないプロセスである。
【０１０７】
例えば、ＳＧ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルグルタラート）、ＳＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルスクシナート）、ＳＣ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルカーボナート）、ＳＡＰ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルアジパート）、又はＳＡＺ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルアゼラート）などの求電子基を使用して、加水分解を受けやすいエステル結合を有することができる。ピメラート、スベラート、アゼラート、又はセバカート結合などの、より直鎖の疎水性結合も使用できるが、これらの結合は、スクシナート、グルタラート、又はアジパート結合よりも分解性が低い。分岐、環式、又は他の疎水性結合も利用できる。ポリエチレングリコール及び他の前駆体は、これらの基と共に調製できる。架橋したヒドロゲルの分解は、水分解性材料が使用される場合、生分解性セグメントの水により促進される加水分解により進行し得る。エステル結合を含むポリマーを含めて、エステル付近に基を加えるか除いて分解速度を増加させるか減少させて、所望の分解速度を与えることができる。そのため、分解性セグメントを利用して、２，３日から数か月の所望の分解プロファイルを持つヒドロゲルを構成することが可能である。ポリグリコラートが生分解性セグメントとして使用される場合、例えば、架橋ポリマーは、ネットワークの架橋密度に依存して約１から約３０日で分解するように作ることができるだろう。同様に、ポリカプロラクトン系架橋ネットワークは、約１から約８か月で分解するように作ることができる。分解時間は、一般に、以下の順で、使用される分解性セグメントの種類に応じて変化する：ポリグリコラート＜ポリラクタート＜ポリトリメチレンカーボナート＜ポリカプロラクトン。そのため、分解性セグメントを使用して、２，３日から数か月の所望の分解プロファイルを持つヒドロゲルを構成することが可能である。
【０１０８】
オルガノゲル及び／又はキセロゲル及び／又はヒドロゲル及び／又は前駆体中の生分解性結合は、水分解性でも、酵素分解性でもよい。実例となる水分解性生分解性結合には、グリコライド、ｄｌ−ラクチド、１−ラクチド、ジオキサノン、エステル、カーボナート、及びトリメチレンカーボナートのポリマー、コポリマー、及びオリゴマーがある。実例となる酵素生分解性結合には、メタロプロテイナーゼ及びコラゲナーゼにより切断可能なペプチド結合がある。生分解性結合の例には、ポリ（ヒドロキシ酸）、ポリ（オルトカーボナート）、ポリ（無水物）、ポリ（ラクトン）、ポリ（アミノ酸）、ポリ（カーボナート）、及びポリ（ホスホナート）のポリマー及びコポリマーがある。
【０１０９】
生体適合性架橋マトリックスが生分解性又は吸収性であることが望ましい場合、官能基の間に存在する生分解性結合を有する１種以上の前駆体を使用できる。生分解性結合は、任意に、マトリックス製造に使用される１種以上の前駆体の水溶性コアとしても作用できる。それぞれの手法では、生分解性結合は、得られる生分解性生体適合性架橋ポリマーが所望の期間の後に分解又は吸収されるように選択することができる。
【０１１０】
マトリックス材料は、分解産物が循環系に吸収され、基本的には腎臓濾過により体から排出されるように選択できる。マトリックス材料は、生理溶液中のヒドロゲルでよい。一方法は、前駆体の間の結合が分解されて前駆体又は共有結合性架橋プロセスにより起こった小さな変化を有する前駆体に戻る、体内で分解されない前駆体を選択することである。この手法は、酵素プロセスにより分解される生物学的マトリックス材料及び／又はマクロファージにより片づけられる材料、又は事実上水溶性でない副生成物を生み出す生物学的マトリックス材料を選択することとは対照的である。腎臓濾過により体から排出される材料は、当業者に公知である技術を利用して、標識をつけ、尿中で検出することができる。他の体内の系へのこれらの材料の一部の少なくとも理論的な損失があるだろうが、材料の通常の末路は腎臓排出プロセスである。そのため、基本的に排出されるという用語は、通常腎臓を通って排出される材料を意味する。
【０１１１】
投与
キセロゲルの投与は、対象とする部位に直接実施できる。例えば、キセロゲルの微小凸レンズを角膜に適用でき、フィルムを真皮又は表皮に適用できる。キセロゲル粒子を吸入により投与できる。粉末送達系を使用して、組織に直接キセロゲル粉末を注射できる。
【０１１２】
キセロゲルの投与は、およそ使用の時点で、又は使用の点で、水和も含み得る。キセロゲルは、水溶液、例えば生理食塩水に曝されて、水を吸収してヒドロゲルを形成する。ヒドロゲルは、直接、外科的に、又は針若しくはカテーテルによる注射により埋め込まれる。
【０１１３】
本発明の実施形態は、眼又は眼の付近への投与を含む。哺乳動物の眼の構造は、３つの主な層又は膜、線維膜、血管膜、及び神経膜に分けることができる。線維膜は、眼球強膜としても知られ、角膜及び強膜からなる眼球の外層である。強膜は眼の支持壁であり、眼にその白色のほとんどを与える。それは角膜（眼の透明な前部）から眼の奥の視神経に延びる。強膜は、繊維質で、弾力がある保護組織であり、密に詰まったコラーゲン繊維からなり約７０％の水を含む。
【０１１４】
線維膜に重なって結膜がある。結膜は、強膜（眼の白い部分）を覆う膜であり、瞼の内側を覆う。それは、涙腺よりは少量の涙ではあるが、粘液及び涙の産生により眼を潤滑するのを助ける。結膜は、典型的には、３つの部分に分けられる：（ａ）瞼を覆う結膜である眼瞼又は瞼結膜；眼瞼結膜は上結膜円蓋及び下結膜円蓋で折れ曲がり、眼球結膜になる、（ｂ）結膜円蓋：瞼の内側部分と眼球が会う場所の結膜、（ｃ）眼結膜又は眼球結膜：強膜の上で眼球を覆う結膜。結膜のこの領域はしっかりと結合しており、眼球の動きと共に動く。結膜は、強膜を事実上取り囲み、覆い、強膜に付着している。それは、細胞組織及び結合組織を有し、ある程度弾性があり、除去したり、裂いたり、他の方法で取り外して、強膜の表面部分を露出することができる。
【０１１５】
血管膜は、眼球血管膜としても知られ、虹彩、毛様体、及び脈絡膜を含む血管を分布する中層である。脈絡膜は、網膜細胞に酸素を供給し呼吸の老廃物を除く血管を含む。神経膜は、眼球神経膜としても知られ、網膜を含む内部感覚器官である。網膜は、光感受性の桿体細胞及び錐体細胞並びに関連する神経を含む。網膜は比較的なめらかな（しかし湾曲している）層である。それは、それが異なる２つの点、中心窩及び視神経乳頭を有する。中心窩は、レンズに直接向かい合った網膜のくぼみであり、錐体細胞が密に詰まっている。中心窩は、黄斑の一部である。中心窩は、主にヒトの色覚を担い、読むことに必要な高度な視力を可能にする。視神経乳頭は、視神経が網膜を貫いてその内側で神経細胞につながる、網膜上の点である。
【０１１６】
哺乳動物の眼は、２つの主な部分、前部及び後部に分けることができる。前部は、前房及び後房からなる。前房は、虹彩の前で角膜内皮の後ろに位置し、瞳孔、虹彩、毛様体、及び水性流体を含む。後房は、虹彩の後ろで水晶体面の前に位置し、水晶体及び小帯線維が、水性環境中で前嚢と後嚢の間に位置している。
【０１１７】
角膜及び水晶体は、網膜に焦点を合わせるように光を集束するのに役立つ。水晶体は、虹彩の後ろにあり、第二の体液を通して網膜に光を集束させる凸状の弾力のある円板である。それは、チン小帯と知られる提靭帯の環により毛様体に結合している。毛様体筋が緩和して遠くの物体に焦点が合うと、それを水晶体に結合している線維が伸び、水晶体が平らになる。光が眼に入り、角膜を通り、２種の体液の第一の房水へと入る。眼の全体的な屈折力のおよそ２／３は、固定した曲率を有する角膜から来る。房水は、角膜を眼の水晶体に接続し、角膜の凸形状を維持するのを助け（水晶体での光の集束に必要）、角膜内皮に栄養物を与える透明な塊である。
【０１１８】
後部は、水晶体の後ろで網膜の前に位置する。それは、前部硝子体膜及びその後ろの全構造、硝子体液、網膜、ｃ、及び視神経を含み眼のおよそ２／３である。水晶体の反対には、第二の体液、硝子体液があり、その全面が、水晶体、毛様体、提靭帯、及び網膜と境を接している。それは、屈折なしに光を通し、眼の形状を維持するのを助け、繊細な水晶体を浮かせている。
【０１１９】
図８は、眼２００又はその付近の送達のための特定の点を占めす。眼２００は、強膜２１２、虹彩２１４、角膜２２２、硝子体２３２、小帯隙２４２、中心窩２３６、網膜２３８、及び視神経２２５を含む。送達の一領域は局所的に２６０であり、領域２６０は眼２００の表面にドットで示されている。他の領域は、数字２６２に示される硝子体内、又は数字２６４により示される経強膜である。使用時に、例えば、注射器２６６、カテーテル（図示せず）、又は他の装置を使用して、キセロゲル（又はゲル又はヒドロゲル又はその前駆体）を、任意に針２６８を通して眼に、２６２での硝子体内又は２７２での眼球周囲のいずれかで送達する。他の領域は、結膜下であり（図示せず）、結膜２１１の下で強膜２１２の上である。薬物又は他の治療剤は眼球内空間に放出される。眼の後部の疾患の場合、薬物は、眼球周囲又は硝子体内経路により標的化されて、おおよその領域２７４を標的とすることができ、そこで薬物は生物機能と相互作用して、療法を達成する。一実施形態は、網膜２３８と接触するか、又は網膜２３８付近で網膜と接触しないキセロゲルの配置である。例えば、キセロゲル、ヒドロゲル、及び／又は粒子（又はロッド、微小球、単一の材料、ビーズ、又は本明細書に記載される他の形状）を、網膜２３８に隣接するか、又はその上の位置に送達できる。ヒドロゲルは、好都合には、硝子体ゲル中に固定され、粒子の拡散をさせない。対照的に、ロッド又はすべりやすい微小球を使用する他の系は、固定、及び、眼の動き又は眼をこすることに反応する拡散又は移動を与えない。網膜又はその付近に（又は他の位置に）デポーを配置すると、意図される部位に高濃度が達成でき、有効な治療のための薬物を送達するのに小粒子が利用可能である。対照的に、大きすぎて拡散又は移動できない球体、ロッド、又は他の形状は、有効な制御放出のためには不都合である体積／表面積定量（ration又は比）を有する。キセロゲル、ヒドロゲル、及び／又は粒子、又は粒子を含む他の材料の配置のための他の領域は、例えば、眼の涙点に挿入される涙点プラグ（シリコーン、多糖、ヒドロゲル、又は他の材料）中に粒子を配置することによる、涙点（図示せず）内である。
【０１２０】
薬物送達デポーが眼内又は眼の付近に形成され得る部位には、とりわけ、前房、硝子体（硝子体内配置）、上強膜、テノン嚢下空間内（下結膜円蓋）、結膜下、角膜又は結膜の表面がある。結膜下、眼球後方、又はテノン嚢下配置を利用する眼科用ヒドロゲルインプラントの眼球周囲薬物送達は、局所及び全身経路に比べて、網膜により安全で向上した薬物送達系を与える可能性を有する。
【０１２１】
インサイチュ配置の例は、図９Ａで硝子体内インプラントに関して示されている。図９Ａにおいて、キセロロゲル（xerorogel又はキセロゲル）インプラントは、眼３１０の切開部３９０を明視化（ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ）するために固定されている拡大鏡３９４の描写により示される通り、角膜縁の約２．５ｍｍ後方に、毛様体扁平部切開部３９０を通り、網膜下カニューレ３９２を使用して硝子体内注射されるが、それは、必要に応じて切開又は他の方法で結膜を除いた後に実施され得る。次いで、網膜下カニューレ３９２（又は他の適切なカニューレ）が切開部３９０を通って挿入され、所望の標的部位、例えば、３９６、３９８、３００（図９Ｂ）部位のうち少なくとも１つに眼内配置されるが、そこにキセロゲル（類）は導入され、その後インサイチュでヒドロゲルを形成する。キセロゲルは吸収性のゲル３０２、３０４、及び／又は３０６に形成し、所望の標的部位に付着する。治療剤を含む粒子がゲル又は複数のゲルに含まれていてよい。重大なことは、前駆体を配置するのに、微細なゲージの針を使用できることである。実施形態は、２５ゲージの針による配置を含む。さらなる実施形態は、２５ゲージよりも小さい直径、例えば、２６、２７、３０、３１、３２ゲージの針の使用を含む。
【０１２２】
硝子体内インサイチュインプラント実施形態は、眼病の治療における有効な治療剤の効能及び薬物動態を向上させることができ、いくつかの方法で患者の副作用を最小限にできる。第一に、インプラントは、具体的な疾患部位で硝子体中に配置でき、局所又は全身経路を回避して、それにより薬物のバイオアベイラビリティーを増大させる。第二に、インプラントは、長期間、具体的な標的組織部位での局所治療濃度を維持する。第三に、硝子体内注射の回数が、１２か月の治療レジメンにわたり著しく低減され、それにより、感染、網膜剥離、及び硝子体中の薬物が眼の下壁に向かって、硝子体中心又は黄斑の一部から離れて移動するまで起こり得る一時的な視力障害（硝子体中に浮いている白い斑点）という患者のリスクを低減するだろう。
【０１２３】
キセロゲル又はヒドロゲルとして水和されたキセロゲル（キセロゲル／ヒドロゲル）は、結膜が存在しても存在しなくても強膜組織に配置できる。キセロゲル／ヒドロゲルは、強膜又は強膜付近の他の組織に付着して、意図される組織を通る薬物拡散を促進することも、安定なデポーを与えて必要に応じて治療剤を向けることもできる。ＲＥＳＵＲＥ（登録商標）シーラントなどのヒドロゲル接着剤を、付着助剤として利用できる。いくつかの実施形態において、組織を強膜から持ち上げてキセロゲル／ヒドロゲルの埋め込み又は注射のために強膜の特定の領域に接近できるように、眼の結膜は、取り除かれても、細断されても、切り裂かれても、切り取られても（ｔｅａｓｅｄ−ｆｒｅｅ）よい。キセロゲル／ヒドロゲルは、表面上に層をつくるように、且つ表面に付着するように配置される。結膜は、まだ存在して接触するための充分な機械的完全性を保持している場合、組織に接触するようにされ得る。いくつかの実施形態において、キセロゲル／ヒドロゲルは、少なくとも５０％、７５％、８０％、９０％、又は９９％ｗ／ｗの水溶性前駆体（水又は溶媒又は非ヒドロゲル成分の重量が無視されるように、親水性前駆体の重量を測定し、全ての前駆体の重量で割ることにより計算する）で構成されて、ヒドロゲルの非付着性が高められる。いくつかの実施形態において、そのような親水性前駆体は実質的にＰＥＯを含む。いくつかの実施形態において、細胞有糸分裂、細胞遊走、又はマクロファージの遊走若しくは活性化を含む生物学的機構により媒介される組織付着を低減する薬物、例えば、抗炎症剤、抗有糸分裂剤、抗生物質、ＰＡＣＬＩＴＡＸＥＬ、ＭＩＴＯＭＹＣＩＮ、又はタキソールなどが含まれる。
【０１２４】
他の実施形態において、強膜は実質的に結膜から取り除かれない。結膜は、強膜の多く又は全てを覆う重要な組織の塊である。針又はカテーテル又はトロカールで、結膜に穴をあけても、貫通してもよく、前駆体は強膜と結膜の間の空間に導入される。インプラントのこの配置は、結膜下位置と称される。いくつかの場合、結膜に穴をあけて、組織の間の自然な潜在的空間に近づくことができ、そこが前駆体により満たされる。他の場合、潜在的又は実際にある空間は、前駆体が導入され得るように、強膜と結膜の間の付着を壊すトロカール、スプレッダーなどにより機械的に作られる。結膜は、有用な量のキセロゲルが、そのような自然な空間又は作られた空間に導入又は押し込まれるのを可能にする充分な弾性を有する。したがって、いくつかの場合で、キセロゲル／ヒドロゲル体積は約０．２５から約５ｍｌである。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値、例えば、約１ｍｌ又は０．５ｍｌから約１．５ｍｌが企図されることをすぐに認識するだろう。
【０１２５】
さらに、ヒドロゲルを形成したキセロゲルの除去も、眼球内部にあろうと眼球周囲にあろうと、インプラントが硝子体腔に位置する場合は硝子体切除カッターを、インプラントが強膜表面上に位置する場合はマニュアルＩ／Ａ注射器及びカニューレを、又は洗浄／吸引ハンドピースを使用して容易に達成される。これは、いくつかの従来の非吸収性インプラントの除去に必要とされる大がかりな手術手順と対照をなす。
【０１２６】
さらなる実施形態において、キセロゲル／ヒドロゲル材料は、患者の中に、例えば、皮下、筋肉内、腹腔内を含む組織又は臓器内に、体の潜在的な空間内に、又は自然な空洞若しくは開口部に配置することができる。材料は、経時的な薬剤の放出のためのデポーを与える。そのため、実施形態は、配置のための約０．５から約５００ｍｌの体積を含む（粒子の集団が送達される場合総体積を意味する）。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値、例えば、１から１０ｍｌ又は５から５０ｍｌが企図されることをすぐに認識するだろう。例えば、腹腔内又は筋肉内注射は、数時間、数日、又は数週間にわたる薬剤の延長された制御放出のための有用な部分である。
【０１２７】
本明細書に記載される材料は、薬物又は他の治療剤（例えば、イメージング剤又はマーカー）を送達できる。一適用様式は、キセロゲル／ヒドロゲル粒子と他の材料（例えば、治療剤、緩衝剤、促進剤、開始剤）の混合物を、針、カニューレ、カテーテル、又は中空ワイヤーにより部位に適用することである。混合物は、手作業で制御される注射器又は機械的に制御される注射器、例えば、シリンジポンプを使用して送達できる。或いは、二重の注射器又は多筒式注射器又は多腔型系を使用して、キセロゲル／ヒドロゲル粒子を、部位又は部位の近くで、水和流体及び／又は他の薬剤と混合できる。
【０１２８】
キセロゲルは、部位へ流動可能な形態で、例えば、流動可能な粒子として提供できる。キセロゲルは、液体中に懸濁されて、部位に適用できる。キセロゲル粒子は、３から５フレンチカテーテル、又は１０から３０ゲージの針から手作業で通るための最大直径を持つように製造できる。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値、例えば２５から３０ゲージが企図されることをすぐに認識するだろう。小さい針の使用は、敏感な器官である眼の中では特に好都合である。他の器官への適用も、例えば、出血又は他の損傷を制御するのに好都合である。粒子は、ヒドロゲルをつくり、次いでそれをより小さな断片に破壊することにより形成できる。材料は、例えば、ボールミル内で又は乳鉢と乳棒で粉砕され、又はナイフ又はワイヤーで細断又はさいの目に切ることができる。或いは、材料をブレンダー中で切り刻んでもよい。他のプロセスは、オルガノゲル又はゲル工程の材料をメッシュに押し通し、断片を回収し、所望のサイズに到達するまでそれを同じメッシュ又は他のメッシュに通し、それに続いてキセロゲルを製造することを含む。キセロゲル／ヒドロゲルは、治療剤が充填された粒子を含んでよい。ヒドロゲル粒子の一部又は全ては、治療剤が充填された粒子を含んでよい。いくつかの実施形態において、第一の治療剤が充填された第一のセットの治療剤充填粒子が第一のセットのキセロゲル粒子の内部に含まれ、第二の治療剤が充填された第二のセットの治療剤充填粒子が第二のセットのキセロゲル粒子の内部に含まれる。このようにして、複数の薬剤が単一のインプラントから放出され得る。粒子の実施形態には、球体、ロッド、又は円板などの特定の形状のものがある。
【０１２９】
実施形態は、複数のキセロゲル／ヒドロゲル粒子の配置を含む。キセロゲル／ヒドロゲル粒子は、治療剤、例えば、抗ＶＥＧＦなどのタンパク質を含んでよい。粒子は、２７ゲージ又はより小さい直径の針を手作業で通るための大きさを持つように製造できる。粒子を針に押し通すための圧力は手作業で与えることができる。
【０１３０】
粒子を送達する代替法は、付形された物品としてゲルを予備形成し、次いで材料を体内に導入することである。例えば、キセロゲル／ヒドロゲルを、球体、ロッド、円筒、又は他の形状として形成できる。実施例は、１種以上の薬剤の皮下埋め込み及び送達のためのキセロゲル／ヒドロゲルの中実ロッドを含む。
【０１３１】
本明細書に述べられるキセロゲル／ヒドロゲルは、組織増大のために使用できる。皮膚増大（ｄｅｒｍａｌ  ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ）のためのコラーゲンの使用は周知である。キセロゲル／ヒドロゲル、例えば粒子は、皮膚充填剤のために、又は組織増大のために使用できる。実施形態は、複数の粒子を組織に注射又は他の方法で配置すること、又はインサイチュでヒドロゲルを形成することを含む。材料は、意図される部位に注射しても、他の方法で配置されてもよい。
【０１３２】
本明細書に述べられるキセロゲル／ヒドロゲルを使用して組織を分離し、組織の１つにより受け止められる放射能の線量を低減できる。矛盾する場合には本明細書が優先するとして引用により本明細書に全目的のために組み込まれる米国特許第７，７４４，９１３号明細書に述べられている通り、スペーサー材料を患者に配置することができる。特定の実施形態は、第一の組織位置と第二の組織位置の間の位置にスペーサーを導入して、第一の組織位置と第二の組織位置の間の距離を増加させることを含む方法である。さらに、少なくとも第一の組織位置又は第二の組織位置に、ある線量の放射能を投与する工程があるだろう。例えば、一方法は、治療量の放射線を患者に送達することであって、生体適合性で生分解性の粒子状キセロゲル、例えば、粒子の集団を任意に放射線不透含量と共に第一の組織位置と第二の組織位置の間に導入して、第一の組織位置と第二の組織位置の間の距離を増加させること及び充填剤装置の存在により第一の組織位置が、スペーサーがない場合に第一の組織位置が受け取るだろう放射線の線量に比べて少ない放射線の線量を受け取るように第二の組織位置を治療量の放射線で治療することを含む方法である。スペーサーは、患者中でヒドロゲルを形成するキセロゲルとして導入されてよく、それは患者内でスペーサー−ヒドロゲルの生分解により除去される。一例は、第一の組織位置が直腸に関連し、第二の組織位置が前立腺に関連する場合である。放射線の低減量はさまざまになり得る。実施形態は少なくとも約１０％から約９０％を含む。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値、例えば少なくとも約５０％が企図されることをすぐに認識するだろう。或いは、第一の組織又は第二の組織が、他の組織（複数可）からの分離の結果としてより少ない量の放射線を受け取るように、放射線は、第三の組織に向けられてよい。第一の組織と第二の組織は体内で互いに隣接していても、他の組織により互いに離れていてもよい。組織を分離するスペーサー体積は、治療すべき組織及び互いに分離すべき組織の配置に依存する。多くの場合、約２０立方センチメートル（ｃｃ又はｍｌ）の体積が好適である。他の実施形態において、わずか約１ｃｃが必要とされることがある。他の体積は、約５〜１０００ｃｃの範囲である。当業者は、明示的に述べられた範囲内の全範囲及び値、例えば、１０〜３０ｃｃが企図されることをすぐに認識するだろう。いくつかの実施形態において、スペーサーは、組織が伸びて、スペーサーを収容し、それにより、他の方法で容易に可能であるよりも多い体積のスペーサーを受け入れるように、異なる時間に２つの投与量で投与される。スペーサーにより分離すべき組織には、例えば、直腸、前立腺、及び乳房（又は胸）、又はその一部の少なくとも１つがある。例えば、乳房（又は胸）の第一の部分を第二の部分から分離することができる。
【０１３３】
キット
キセロゲルがキットに保存され、患者で使用するために必要な場合にヒドロゲルにされるように、キセロゲルからヒドロゲルを製造するキット又は系を調製できる。キットは、キセロゲル形態のキセロゲルを適用するために製造できる。アプリケーターを、キセロゲル及び／又はヒドロゲルと組み合わせて使用できる。キットは、医学的に許容できる条件を利用して製造され、無菌状態、純度、及び薬学的に許容できる調製を有する成分を含む。キットは必要に応じてアプリケーター並びに説明書を含むことがある。治療剤を含むキセロゲル粒子は、キットにあるか、又は別に与えられる溶液と混合するために利用可能なことがある。キセロゲル成分は、ヒドロゲルを形成するキセロゲルであって、キセロゲルが患者内に配置される複数の粒子の形態であるキセロゲルの１つ以上の容器として、又は単一のインプラントとして提供され得る。溶媒／溶液をキット中又は別々に提供でき、或いは、成分を溶媒と事前混合してもよい。キットは、混合及び／又は送達のための注射器及び／又は針を含んでよい。キット又は系は、本明細書に述べられる成分を含んでよい。
【０１３４】
いくつかの実施形態は、送達のためのキセロゲル粒子を含む単一のアプリケーター、例えば、１つの注射器を与えるが、水溶液が水和のためにアプリケーターに加えられ、それに続いて注射器を使用して材料が患者に配置される。キセロゲル粒子溶媒は基本的に水であり得るが、溶媒の約９９％ｖ／ｖが水であることを意味し、望まれる場合塩類又は緩衝剤が存在する。安全で生体適合性のある他の溶媒、例えばジメチルスルホキシドを使用してよい。キセロゲル粒子は、タンパク質及び／又は他の薬剤の粉末をさらに含んでよい。
【０１３５】
前駆体及び／又はキット全体の包装は、好ましくは、酸素のない乾燥条件下で実施される。前駆体及び／又はキット成分は、水分にも酸素にも透過性でない密封容器、例えば、ガラス又は金属（箔）容器に配置することができる。
【０１３６】
タンパク質粉末、又は他の固相、水溶性生物製剤を含むキセロゲルは、埋め込み可能な材料の製造プロセスの最後にガンマ線滅菌することができる。代わりに、又はさらに、キットの組み立て及び密封の前及び／又は後のいずれでも滅菌プロセスがあってよい。この技術において、低湿度条件が役立つことが多い。固相分散粉末が、ガンマ線照射下で凝集物の形成及び架橋を起こしにくいことが観察された。ガンマ線滅菌は一般にタンパク質又はペプチド生物製剤を損なうと考えられているので、この結果は意外であり驚くべきものである。特定の動作原理に拘束されないが、小さい粒径及び湿気のないことがこれらの望まれない反応を不利にすると考えられる。
【０１３７】
さらなる説明
（１）本発明の第一の実施形態は、水溶性生物製剤の粉末がオルガノゲルに分散している状態で粉末の周囲にオルガノゲルを形成することを含む医療材料（又は医用材料）を製造するプロセス（又は方法）を対象とする。（２）本発明の第二の実施形態は、水溶性生物製剤の粉末がゲルに分散している状態で粉末の周囲にゲルを形成することを含み、ゲルの形成が１種以上の前駆体のメルトを調製すること及び前駆体を共有結合性架橋することを含む医療材料を製造するプロセスを対象とする。（３）本発明の第三の実施形態は、生物製剤の粉末の粒子がオルガノゲルに分散している状態で粒子の周囲にオルガノゲルを形成すること及びオルガノゲルから溶媒を除去して、それによりキセロゲルを形成することを含む医療材料を製造するプロセスであって、水の非存在下で実施されるプロセスを対象とする。（４）本発明の第四の実施形態は、メルトからオルガノゲル又はゲルを形成すること、（オルガノ）ゲルからキセロゲルを製造すること、及びキセロゲルを粒子の集団として与えることを含み、キセロゲルが水溶液への曝露時にヒドロゲルである、医療材料を製造するプロセスを対象とする。（５）本発明の第五の実施形態は、実施形態Ｉ〜ＩＶのいずれかにある薬学的に許容できる材料を対象とする。（６）本発明の第六の実施形態は、分散したタンパク質粒子を含む薬学的に許容できる生分解性キセロゲルを含む医療材料であって、タンパク質が治療剤であり二次構造及び／又は三次構造を有する医療材料を対象とする。さらに、前記タンパク質は、実質的に変性のないコンフォメーションで、水溶液中で、粒子から放出され得る。（７）本発明の第七の実施形態は、キセロゲル中に分散している生物製剤の固体粒子を含む薬学的に許容できるキセロゲルであって、（任意に、キセロゲルは疎水性材料を含まず）、水に曝露されるとヒドロゲルであるキセロゲルを含む治療用水溶性生物製剤の制御放出のための（薬学的に許容できる）生体材料を対象とする。（８）第八の実施形態は、実施形態ＶＩ又はＶＩＩの材料のいずれかを製造する方法である。
【０１３８】
さらなる実施形態は：（９）（水溶性）生物製剤がタンパク質である、１〜８のいずれかの通り（１０）タンパク質が少なくとも約１０，０００ダルトンの分子質量を有し、糖がタンパク質に会合している、１〜９のいずれかの通り（１１）粉末が使用され、第一の粉末であり、プロセスが、第二の水溶性生物製剤を含む第二の粉末をさらに含み、第一の粉末及び第二の粉末がオルガノゲル全体に分散している、１〜１０のいずれかにある通り（１２）粉末が使用され、約１μｍから約１０μｍの平均粒径を有する、１〜１１のいずれかの通り（１３）オルガノゲルが水溶液の非存在下で形成される、１〜１２のいずれかの通り（１４）必要に応じてオルガノゲルから溶媒を除去して、それによりキセロゲルを形成することを含む、１〜１３のいずれかの通り（１５）真空除去、凍結乾燥、及び凍結とそれに続く真空の適用からなる群から選択されるプロセスにより溶媒を除去することを含む、１〜１４のいずれかの通り（１６）キセロゲルを含み、キセロゲルが水溶液への曝露時にヒドロゲルである、１〜１５のいずれかの通り（１７）粉末を含み、ヒドロゲルが形成される時、（水溶性）生物製剤が固相において実質的に粉末中に留まり、ヒドロゲルが哺乳動物中インビボで生理溶液に曝される時、ある期間にわたりゆっくりと溶解する、１〜１５のいずれかの通り（１８）ある期間における前記溶解が約１週から約５２週の範囲である、１７の通り（１９））ゲル中の生物製剤が二次構造及び／又は三次構造を有するタンパク質であり、タンパク質が、例えば、酵素結合免疫吸着法及び等電点電気泳動により測定可能な変性を実質的に含まないコンフォメーションで放出される、１〜１８のいずれかの通り（２０）ゲル又はオルガノゲル又はキセロゲルが、共有結合性架橋した親水性ポリマーを含む、１〜１９のいずれかの通り（２１）ゲルオルガノゲル、又はキセロゲルオルガノゲルが、ポリエチレンオキシド、ポリビニルピロリジノン、ヒアルロン酸、ポリヒドロキシエチルメタクリラート（又はポリヒドロキシエチルメタクリレート）、及びこれらのブロックコポリマーからなる群から選択される共有結合性架橋した親水性ポリマーを含む、１〜２０のいずれかの通り（２２）ヒドロゲルが存在する場合、ヒドロゲルが、エステル、カーボナート（又はカーボネート）、無水物、及びオルトカーボナートからなる群から選択される加水分解で分解する結合の自然な加水分解により生分解性である、１〜２１のいずれかの通り（２３）オルガノゲルが存在する場合、オルガノゲルが、オルガノゲルを形成し、溶媒が除去されてキセロゲルが形成した後に、水溶液への曝露時にヒドロゲルを形成するブロックコポリマーを含む、１〜２２のいずれかの通り（２４）オルガノゲルが存在する場合、オルガノゲル（及びヒドロゲル）がイオン結合性架橋したポリマーを含む、オルガノゲルが含む、１〜２３のいずれかの通り（２５）オルガノゲルが存在する場合、オルガノゲルが、アルギナート（又はアルギネート）、ゲラン、コラーゲン、及び多糖からなる群から選択される要素を含む、１〜２４のいずれかの通り（２５）（ａ）ゲル（ｂ）オルガノゲル（ｃ）ゲル若しくはオルガノゲルから作られたキセロゲル、又は（ｄ）ゲ��若しくはオルガノゲルから作られたヒドロゲルから複数の粒子を形成することを含む、１〜２４のいずれかの通り（２６）オルガノゲルが存在する場合、有機溶媒中で前駆体からオルガノゲルを形成することであって、前駆体が化学反応して共有結合を形成し、それによりオルガノゲルが形成され、オルガノゲルが共有結合性架橋している、１〜２５のいずれかの通り（２７）前駆体がフリーラジカル重合により反応して、オルガノゲルが形成される、１〜２６のいずれかの通り（２８）前駆体が、第一の官能基を含む第一の前駆体であり、第二の官能基を含む第二の前駆体をさらに含み、第一の官能基と第二の官能基が有機溶媒中で反応性であり、共有結合を形成する、１〜２７のいずれかの通り（２９）第一の官能基及び第二の官能基が、求電子体及び求核体からなる群からそれぞれ選択され、第一の官能基と第二の官能基の間の反応が、共有結合を形成する求電子求核反応である、２８の通り（３０）求電子基が、スクシミド（succimide又はスクシンイミド）、スクシンイミドエステル、ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、マレイミド、スクシナート（又はスクシネート）、ニトロフェニルカーボナート、アルデヒド、ビニルスルホン、アジド、ヒドラジド、イソシアナート（又はイソシアネート）、ジイソシアナート、トシル、トレシル、又はカルボニルジイミダゾールを含む、２８又は２９の通り（３１）求核基が、一級アミン又は一級チオールを含む、２８〜３０のいずれかの通り（３２）第一の前駆体及び第二の前駆体が水溶性である、２８〜３１のいずれかの通り（３３）第一の前駆体と第二の前駆体の少なくとも一方が合成ポリマーを含む、２８〜３２のいずれかの通り（３４）第一の前駆体が、ポリエチレングリコール、ポリアクリル酸、ポリビニルピロリドン、及びこれらのブロックコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含む、２８〜３３のいずれかの通り（３５）オルガノゲルを含み、オルガノゲルを、ロッド、シート、粒子、球体、及びこれらの少なくとも１つの集団からなる群から選択される構造として調製することを含む、１〜３４のいずれかの通り（３６）治療剤を含むか、治療剤をさらに含み、薬剤が、フルオロキノロン、モキシフロキサシン、トラボプロスト、デキサメタゾン、抗生物質、又は前庭毒素（ｖｅｓｔｉｂｕｌｏｔｏｘｉｎ）を含む、１〜３５のいずれかの通り（３７）オルガノゲルが浸透促進剤をさらに含む、３６の通り（３８）オルガノゲルがドメインの形成により物理的に架橋しており、プロセスが、有機溶媒中で、第一ブロック及び第二ブロックを含むブロックコポリマーである前駆体からオルガノゲルを形成することを含む、１〜８のいずれかの通り（３９）前駆体と有機溶媒の混合物を加熱し、溶液を放冷し、それによりコポリマー性前駆体の少なくとも第一ブロックを沈殿させることを含み、前記ドメインが少なくとも第一ブロックを含む、３８の通り、（４０）前駆体を、コポリマー性前駆体を溶解させる第一の有機溶媒中で、コポリマー性前駆体のブロックの全てが第一の有機溶媒に可溶性である状態で混合すること及び第一の有機溶媒と混和性である第二の有機溶媒を加えることであって、コポリマー性前駆体の第一ブロックが第二の有機溶媒に不溶��であり、第二の溶媒がドメインの形成に有効であり、ドメインがコポリマーの第一ブロックを含むことを含む、３８又は３９の通り（４１）コポリマー性前駆体が、ポリエチレングリコールからなる群から選択されるブロックを含む、３８〜４０のいずれかの通り（４２）コポリマー性前駆体が、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリトリメチレンカーボナート、ポリジオキサノン、ポリアルキル、ポリブチレンテレフタラート、及びポリリジンからなる群から選択される第二のブロックをさらに含む、３８〜４１のいずれかの通り（４３）オルガノゲルが疎水性材料を含まず；或いは、疎水性ポリマーを含まないか、又は溶媒（幾分疎水性のことがある）を例外として全ての疎水性材料を含まない、１〜３７のいずれかの通り（４４）生物製剤の変性を回避する方法に従って生物製剤の粉末を調製すること及びいったん粉末が調製されたら、粉末の水への曝露を防ぐことを含む、１〜４３のいずれかの通り（４５）生物製剤が、二次構造及び／又は三次構造を有する治療用タンパク質である、１〜４４のいずれかの通り（４６）キセロゲルを含み、キセロゲルが水に曝露された後ヒドロゲルである、１〜４５のいずれかの通り（４７）ヒドロゲル、又はゲル／オルガノゲル／キセロゲルから作られたヒドロゲルが生分解性である、１〜４６のいずれかの通り（４８）キセロゲルを含み、ヒドロゲル及び粒子の塩溶液中への配置後約１か月から約６か月の時点で薬剤の放出の累積量が薬剤の９０％ｗ／ｗに達する、１〜４７のいずれかの通り（４９）１〜４８のいずれかの通りの生体材料（５０）キセロゲルが共有結合性架橋した親水性ポリマーを含む、１〜４９のいずれかの通りの生体材料（５１）水溶性生物製剤が二次構造及び／又は三次構造を有するタンパク質である、１〜５０のいずれかの通りの生体材料（５２）ヒドロゲルが形成される時、水溶性生物製剤が実質的に固相に留まり、ヒドロゲルが哺乳動物中インビボで生理溶液に曝される時、ある期間にわたってゆっくりと溶解する、１〜５１のいずれかの通りである生体材料（５３）オルガノゲルを含み、オルガノゲルが共有結合性架橋した親水性ポリマーを含む、１〜５２のいずれかの通りである生体材料（５４）ポリマーが、ポリエチレンオキシド、ポリビニルピロリジノン、ヒアルロン酸、ポリヒドロキシエチルメタクリラート、及びこれらのブロックコポリマーからなる群から選択される要素を含む、５３の生体材料（５４）材料が、ロッド、シート、粒子、球体、及びこれらの集合からなる群から選択される構造である、１〜５３のいずれかの通り（５５）キセロゲル又は下記からなる群から選択される方法（ａ）オルガノゲルを製造し、それを破壊して集合のための粒子を形成すること、（ｂ）キセロゲルを製造し、キセロゲルを破壊して集合のための粒子を形成すること、及び（ｃ）オルガノゲルを、集合のための複数の粒子として製造することであって、前記粒子から有機溶媒（類）が放散されてキセロゲルが製造されることにより、キセロゲルを粒子の集合として提供するプロセスを含む、１〜５４のいずれか（５６）粒子の複数の集団であってインビボで異なる分解速度を有する集団を製造すること及び集団を混合して、所望の分解性能を有する生��材料を製造することを含む、５５にある通りのプロセスである。
【０１３９】
これらの実施形態１〜５６は、ポリマー、生物製剤又はタンパク質、及びアプリケーターを有するキットとしてさらに調製できるが、キットは滅菌容器中にある。これらの実施形態１〜５６は、材料、又はプロセスの１つにより製造された材料を、患者の組織と接触させて配置することによりさらに実施できる。組織の例は、腹腔内空間、筋肉、真皮、表皮、自然な内腔又は空洞、腹腔、前立腺、直腸、前立腺と直腸の間の位置、胸（又は乳房）、放射目標と健康な組織の間の組織、及び脈管構造（又は血管系）である。
【実施例】
【０１４０】
実施例１．タンパク質粒子を含むオルガノゲル及びキセロゲルの調製
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）化合物
以下の構造を持つＰＥＧ化合物を得た。
【０１４１】
【表１】
2015502957.tif 000003
【０１４２】
ＰＥＧ溶液の調製
以下の表にある通り、ＰＥＧ粉末を秤量して、１０ｍｌメスシリンダーに入れた。
【０１４３】
【表２】
2015502957.tif 000004
【０１４４】
【表３】
2015502957.tif 000005
【０１４５】
ＰＥＧが溶解すると、塩化メチレンを１０ｍＬの標線まで加えた。
【０１４６】
粉砕したオボアルブミンの調製
窒素を満たしたグローブバッグ中で、オボアルブミン（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；ＬＳ００３０４８）を乳鉢と乳棒を使用して粉砕し、ステンレススチールのふるいに通して２０μｍ未満の粒子にした。
【０１４７】
オボアルブミンオルガノゲルの調製
粉砕したオボアルブミンを、ポリエチレンの雌のルアーロック注射器に量り入れた。ＰＥＧアミン溶液をオボアルブミンと混合して懸濁液を形成した。ＰＥＧエステル溶液を雄のポリエチレンルアーロック注射器に入れた。注射器を合わせ、溶液を注射器対注射器で１０秒間混合し、雄の注射器内で１０分間静置し、その間にタンパク質を含むゲルが形成した。注射器を切り開き、ゲル−タンパク質の円筒を取り除いた。ゲルを真空下に一晩おいて乾燥させた。以下の表は、この方法で調製した試料をまとめる。
【０１４８】
【表４】
2015502957.tif 000006
【０１４９】
オボアルブミン−ＰＥＧキセロゲルの調製
オボアルブミンオルガノゲルを収容する注射器を切り開き、ゲル−タンパク質の円筒を取り除いた。ゲルを真空下において乾燥させた。乾燥したキセロゲルを、上部空間を窒素で満たして５℃で保存した。
【０１５０】
粉砕したウサギＩｇＧの調製
窒素を満たしたグローブバッグ中で、ウサギＩｇＧ（ウサギ血清由来のＩｇＧ；Ｓｉｇｍａ；＞９５％）を、乳鉢と乳棒を使用して手作業で粉砕し、ステンレススチールのふるいに通して２０μｍ未満にした。
【０１５１】
ウサギＩｇＧオルガノゲルの調製
粉砕したウサギＩｇＧを、ポリエチレン製雌のルアーロック注射器に量り入れた。ＰＥＧアミン溶液をオボアルブミンと混合して懸濁液を形成した。ＰＥＧエステル溶液を雄のポリエチレンのルアーロック注射器に入れた。注射器を合わせ、溶液を注射器対注射器で１０秒間混合し、雄の注射器中で１０分間静置すると、タンパク質を含むゲルが形成した。注射器を切り開いて、ゲル−タンパク質の円筒を取り除いた。ゲルを真空下に一晩おいて乾燥させた。以下の表は、この方法で調製した試料をまとめる。以下の表は、この方法で調製した試料をまとめる。
【０１５２】
【表５】
2015502957.tif 000007
【０１５３】
ウサギＩｇＧ−ＰＥＧキセロゲルの調製
ウサギＩｇＧオルガノゲルを収容している注射器を切り開き、ゲル−タンパク質の円筒を取り除いた。ゲルを真空下に一晩おいて乾燥させた。乾燥したキセロゲルを、上部空間を窒素で満たして５℃で保存した。
【０１５４】
実施例２．ヒドロゲルからのタンパク質のインビトロ放出
緩衝溶液中のタンパク質の安定性
オボアルブミン（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；ＬＳ００３０４８）及びウサギＩｇＧ（ウサギ血清由来のＩｇＧ；Ｓｉｇｍａ；＞９５％）を、ＴＲＩＳ緩衝液に０．０６５ｍｇ／ｍｌで溶解させた。初期の試料を、ベースライン用及び種々の時点で採り、緩衝液中のタンパク質の安定性を決定した。試料を、ＨＰＬＣ及びＥＬＩＳＡによりタンパク質含量に関して分析した。結果を以下の表にまとめる。
【０１５５】
【表６】
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【０１５６】
【表７】
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【０１５７】
結果は、タンパク質が加速インビトロタンパク質放出試験に使用するのに充分安定であることを示す。
【０１５８】
インビトロタンパク質持続放出試験
実施例１のキセロゲルの試料を切り、秤量し、５０ｍＬ遠心管中で５０ｍｌのＴＲＩＳ緩衝液に加えた。ステンレススチールの溶解ケージ（ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｃａｇｅｓ）を使用して、試料を遠心管の下半分で保持した。管を、３７℃で５０ＲＰＭの振とう水槽に沈めた。
【０１５９】
【表８】
2015502957.tif 000010
【０１６０】
緩衝媒体試料を、２時間、４時間、８時間で、次いで、ゲルが分解するまで８時間ごとに採取した。緩衝培地を、全ての時点で完全に交換した。試料を回収し、ＨＰＬＣ及びＥＬＩＳＡにより分析した。結果を、以下の図２〜５にグラフで表す。
【０１６１】
薬物放出プロファイルの個別化
種々のビヒクルの組み合わせを使用して、治療剤の放出速度を個別化することができる。種々の粒子の放出速度を組み合わせ、図６及び７に描写する通り、複合総放出速度を計算した。図６は、約１０から約６０時間の実質的に零次の放出速度を描写する。図７は、微調整した系を描写する。最初の２４時間に初期の噴出を与える第一の放出があり、それに続いて約２４から約１００時間の追加の零次放出がある。零次放出は、材料の最終的な溶解にわたり持続する。
【０１６２】
実施例３．前駆体のメルトからの架橋ゲルの形成
０．８６ｇの約１５，０００ダルトンでＳＳ末端の８アーム分岐鎖ＰＥＧ（８ａ１５ＫＳＳ）を５０℃で融解させた。１．１４ｇの約２０，０００ダルトンで一級アミン末端の８アーム分岐鎖ＰＥＧ（８ａ２０ＫＮＨ２）を、０．５ｇのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）粉末と共に、１０ｍｌ注射器に量り入れ、次いで、６０℃の水浴に浸して、８ａ２０ＫＮＨ２を溶解させた。８ａ１５ＫＳＳメルトの液滴を５０℃のホットプレート表面で、８ａ２０ＫＮＨ２メルト／ＢＳＡの液滴の隣に置いた。液滴を素早く混合すると、２秒以内にゲル化した。形成したゲルは、顕微鏡で観察すると固体形態のＢＳＡ粒子を含んでいる。
【０１６３】
形成したゲルを、Ｔｒｉｓ−緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）ｐＨ８．５緩衝液を満たしたシンチレーションバイアルに移し、ポリマーを迅速に加水分解して、ＢＳＡを放出させた。
【０１６４】
ゲル分解の後、得られたＴＢＳ放出媒体が透明であることに気付いたが、これはＴＢＳ中のＢＳＡの可溶性を示し、凝集又は変性の点でタンパク質溶解度に対する処理の効果を示さなかった。
【０１６５】
特許、特許出願、特許公報、及び本明細書に述べられた参考文献は、全目的のために本明細書に引用により組み込まれる。矛盾する場合には、本明細書が優先する。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
2015502957.tif 000012
【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
2015502957.tif 000016
【図４】
2015502957.tif 000017
【図５】
2015502957.tif 000018
【図６】
2015502957.tif 000019
【図７】
2015502957.tif 000020
【図８】
2015502957.tif 000021
【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【国際調査報告】
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2015502957.tif 000026