(57)【要約】  本発明は、ガンボジェニック酸誘導体、前記ガンボジェニック酸誘導体の塩、及び前記ガンボジェニック酸誘導体の調製方法と抗腫瘍薬における使用を提供し、前記ガンボジェニック酸誘導体は、構造式（Ｉ）又は（ＩＩ）で示される構造を有する。本発明が提供するガンボジェニック酸誘導体は、ガンボジェニック酸と比べて、より良い抗腫瘍活性を有する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式（Ｉ）又は（ＩＩ）で示される分子構造を有することを特徴とする、ガンボジェニック酸誘導体。
2015502348.tif 000035
2015502348.tif 000036
ただし、
Ａは、−ＣＯ−又は−ＨＣ（ＯＨ）−である。
Ｒ２は、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；アリール又はＣ１〜Ｃ１０アルキル置換アリール；ヘテロアリール；Ｃ１〜Ｃ１０アルキル置換アシル又はアリール置換アシルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。
Ｒ３は、水素；Ｃ１〜Ｃ１０アルキル置換アシル又はアリール置換アシルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。Ｒは、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル又はＣ３〜Ｃ１０のシクロアルケニル；フェニル又はＣ１〜Ｃ１０アルキル置換フェニル；Ｃ２〜Ｃ６のアルキニル；直鎖又は分岐鎖アルキルアミノ、直鎖又は分岐鎖アルケニルアミノを含む第二級アミノ基含有求核試薬；アリールアミノ又はアリールアルキルアミノ、アルキニルアミノと、α，β−不飽和ケトンとが付加して得られるアミンといった置換基から選ばれるいずれか一種である。
Ｒ１は、
−ＯＲ４、
2015502348.tif 000037
又は
2015502348.tif 000038
から選ばれるいずれかである。
ただし、Ｒ４は、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル、又は、オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；１、２又は３個のヘテロ原子で置換されたＣ１〜Ｃ１０のアルキル；アリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、アシル、−ＯＣＨ２Ｏ−、ハロゲン、ハロゲン化アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むアリールアルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリール、Ｃ１アミノアシル及びＣ６アミノアシルのうちのいずれか１個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルキニルといった基から選ばれる１個である。
Ｒ５とＲ６は、それぞれ、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル、又は、オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ１〜Ｃ１０アルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；１、２又は３個のヘテロ原子で置換されたＣ１〜Ｃ１０のアルキル；アリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、アシル、−ＯＣＨ２Ｏ−、ハロゲン、ハロゲン化アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むアリールアルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリールとＣ１〜Ｃ６アミノアシルのうちのいずれか一個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルキニルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。
ｓ、ｔは、いずれも正整数であり、且つ、ｓとｔの和は２〜１０の自然数である。
ｍは、０、１、２又は３であり、環におけるＲ７置換基の数を表す。
ｎは、０、１、２又は３であり、環におけるＢの数を表す。Ｂは、炭素、窒素又は酸素である。
Ｘは、炭素であり、Ｒ７、Ｒ８はＲ５と同様な基であるか、カルボニル、イミド基、ニトロソ、イソニトロソである。又は、Ｘは、第３級窒素であり、Ｒ８は、酸素であり、Ｘとともに窒素酸化物を形成する。
且つ、構造式（Ｉ）におけるＲ４、Ｒ２、Ｒ３、Ｒは同時に水素であることはない。
【請求項２】
構造式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）又は（Ｖ）で示される構造を有することを特徴とする、請求項１に記載のガンボジェニック酸誘導体。
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2015502348.tif 000040
2015502348.tif 000041
ただし、構造式（ＩＩＩ）において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は同時に水素であることはない。構造式（Ｖ）において、Ｒ、Ｒ２、Ｒ３は同時に水素であることはない。
【請求項３】
Ｒ４は、水素；メチル；エチル；プロピル；イソプロピル；ブチル；イソブチル；ｔ−ブチル；へキシル；オクチル；オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ１〜Ｃ１０アルキル；シクロへキシル；シクロペンチル；シクロプロピル；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３；−ＯＣＨ２Ｏ−、ハロゲン、ハロゲン化アルキル、ヒドロキシ、−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＣＨ３；ベンジル；フェネチル；フェニルプロピル；テトラヒドロピロリル；ペピリジル；モルホリノ；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＮＨＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２（Ｎ−エチルテトラヒドロピロール）、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）；アシル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリールとＣ１〜Ｃ６アミノアシルのうちのいずれか一個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ４〜Ｃ１０アルキニルといった基から選ばれるいずれか一個であることを特徴とする、請求項１に記載のガンボジェニック酸誘導体。
【請求項４】
Ｒ５とＲ６は、それぞれ、水素；メチル；エチル；プロピル；イソプロピル；ブチル；イソブチル；ｔ−ブチル；へキシル；オクチル；ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ１〜Ｃ１０アルキル；シクロへキシル；シクロペンチル；シクロプロピル；ベンジル；フェネチル；フェニルプロピル；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＮＨＣＨ３；−ＣＨ２（Ｎ−エチルテトラヒドロピロール）；テトラヒドロピロリル；ペピリジル；モルホリノ；−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）；アシル、−ＯＣＨ２Ｏ−、ハロゲン、ハロゲン化アルキル、ヒドロキシアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリールとＣ１〜Ｃ６アミン酸基のうちのいずれか一個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ４〜Ｃ１０アルキニルといった置換基から選ばれるいずれか一種であることを特徴とする、請求項１に記載のガンボジェニック酸誘導体。
【請求項５】
Ｒ３は、水素、ホルミル、アセチル、カルバモイル、ベンゾイル、ベンゾイルフェニルアセチルといった置換基のうちのいずれか一種であることを特徴とする、請求項１に記載のガンボジェニック酸誘導体。
【請求項６】
Ｒ２は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、へキシル、オクチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロへキシル、シクロヘブチル、ベンジル、フェネチル、フラニル、ピラニル、２Ｈ−ピロリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ホルミル、アセチル、カルバモイル、ベンゾイル、ベンゾイルフェニルアセチルといった置換基のうちのいずれか一種であることを特徴とする、請求項１に記載のガンボジェニック酸誘導体。
【請求項７】
Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、へキシル、オクチル、シクロへキシル、シクロペンチル、エテニル、ブテニル、ヘキセニル、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、フェニル、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピル、ブチニル、ヘキシニル、モルホリノ、ペピリジル、ピペラジルといった置換基のうちのいずれか一種であることを特徴とする、請求項１に記載のガンボジェニック酸誘導体。
【請求項８】
Ｒ１は、好ましくは
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又は
2015502348.tif 000043
から選ばれることを特徴とする、請求項１に記載のガンボジェニック酸誘導体。
ただし、Ｒ７は、Ｒ５に定義される置換基と同様な置換基、カルボニル、イミド基、ニトロソ、イソニトロソといった基のうちのいずれか１個である。
ｍは、０、１、２又は３である。
Ｂは、窒素、炭素又は酸素である。
ｎは、０、１、２又は３である。
Ｒ８は、Ｒ５と同様な基であるか、酸素であり、Ｘとともに窒素酸化物を形成する。
【請求項９】
無機酸、有機酸、無機アルカリ又は有機アルカリと共に形成された塩であることを特徴とする請求項１に記載のガンボジェニック酸誘導体の塩。
【請求項１０】
ガンボジェニック酸又は構造式（ＶＩ）のガンボジェニック酸誘導体には、Ｒ２とＲ３を導入して、構造式（ＶＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を調製する工程を含むことを特徴とするガンボジェニック酸誘導体の調製方法。
2015502348.tif 000044
【請求項１１】
構造式（ＶＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体のＣ６位の炭素におけるカルボニルを還元して構造式（ＶＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を調製すること、および／又はＲ４ＯＨ、Ｒ５Ｒ６ＮＨ又は
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とエステル化又は酸化して、構造式（ＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を調製することを特徴とする、ガンボジェニック酸誘導体の調製方法。
2015502348.tif 000046
【請求項１２】
ガンボジェニック酸、又は構造式（ＶＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体、又は構造式（ＶＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を原料として、アルカリ条件下で、過酸化剤と反応して、Ｃ９とＣ１０位の炭素の間の二重結合を酸化して、構造式（ＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を生成することを特徴とする、ガンボジェニック酸誘導体の調製方法。
【請求項１３】
有機銅試薬ＲＣｕは、ガンボジェニック酸、又は構造式（ＶＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体、又は構造式（ＶＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体のＣ９とＣ１０位の炭素の間の二重結合に１，４−付加して、構造式（Ｉ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を生成することを特徴とする、ガンボジェニック酸誘導体の調製方法。
【請求項１４】
活性成分が請求項１に記載のガンボジェニック酸誘導体を含む、抗腫瘍薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍薬、及びその調製方法と使用に関して、特に、ガンボジェニック酸誘導体、及びその調製方法と使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
人の寿命の延長、及び生活飲食習慣の変化に伴って、がん患者が年々に増えている。ＷＨＯデータにより、がんは既に人類の主な致死性疾患の一つになり、がん患者が増えつつあることが分かる。がんは死亡の原因として、２００８年に１３．８％を占め、２０１５年に１５％以上を占めることが見積もられる。
【０００３】
現在、臨底上に悪性腫瘍を治療する主な手段は、手術、放射線治療、化学療法の単独使用又は組み合わせである。近年、悪性腫瘍の化学療法の進展は、腫瘍患者の生存時間を顕著に延長させたが、腫瘍細胞の高異質性と多剤耐性の発生に面して、従来の抗腫瘍薬はやはり臨底のニーズに応えることができない。細胞毒性薬は、化学療法薬の主な組成部分として、腫瘍治療において非常に重要な役割を果たしている。今まで、このような薬物は相変わらず抗腫瘍薬の主な市場を占めて、これらの中には、天然生成物から得られた化学療法薬、例えばパクリタキセル類薬物等が含まれ、その治療効果が明らかであるので、よく臨底に用いられる抗がん薬物になっている。
【０００４】
しかし、細胞毒性化学療法薬を長期間使用すると、腫瘍の多剤耐性を引き起こし、このような薬物の治療効果を大幅に低減させ、医者も薬物の投与量を増加することで治療効果を高めることしかできず、薬物の使用の安全性を低減した。これは、細胞毒性薬は、腫瘍細胞を殺すと同時に、正常な細胞をも殺し、不良反応が出るためである。全ての細胞毒薬物は、通常、薬効用量で、患者に不良反応をもたらすとともに、薬物の投与量の増加につれて、不良反応が倍増する。したがって、化学療法薬の最大使用量は厳格に制限されている。言い換えれば、細胞毒性化学療法薬に対する化学療法耐性が生じると、投与量を増加することで治療効果を高めることは無理であり、唯一の可能な方法は別の有効な化学療法薬に変更することである。これは、臨底医者が選択して使用できるようにより多くの有効な化学療法薬を研究して開発する必要があるが、残念なことに、今まで、開発された有効な悪性腫瘍化学療法薬はそれほど多くない。
【０００５】
新規で有效な抗腫瘍薬を研究して開発することは、悪性腫瘍の基礎と臨底の研究分野における最も切実な任務の一つに間違いない。
【０００６】
藤黄（Ｇａｍｂｏｇｅ）は、藤黄の本の黄色の樹脂であり、インド、ベトナム等の地方に産して、国内の産地は雲南、湖南、湖北の辺りにあり、絵画用の黄色の顔料とすることができる。明代の李時珍著の『本草綱目  草七  藤黄』には、「今、画家が用いる藤黄は、全て煎じられてなるものである。」と記載されており、藤黄は、漢方薬において、腫瘍の生長を抑制し、難治性の癰の生長を抑制する働きを有する漢方薬である。ガンボジェニック酸（構造式（Ｘで示される。）、数字は炭素の位置の順序の番号を表す）は、藤黄における有効な成分の一つである。研究によると、ガンボジェニック酸は、エクスビボとインビボで悪性腫瘍の生長を抑制し、腫瘍細胞の死滅を誘導し、多種の腫瘍に対して強い抗腫瘍活性を示し、抗腫瘍スペクトルが広く悪性腫瘍細胞に選択的に作用するという特徴を持つことが既に報道されている。
2015502348.tif 000003
【０００７】
１９９１年に、曲宝璽ら（中国腫瘍臨底、１９９１年第１８巻第１期、第５０ページ）は、実験研究によって、ガンボジェニック酸は、抗がんスペクトルが広く毒性が低い特徴を持ち、Ｓ１８０、ＡＲＳ腹水がん、白血病Ｐ３８８、Ｌｅｗｉｓ肺がんと肺腺がんＬａ７９５等の固形がんに対して良い抑制作用を持ち、がんの転移に対しても顕著な抑制効果を持つことが分かった。そして、ガンボジック酸（藤黄から抽出されるもう一つの抗腫瘍成分である。）と比較すると、ガンボジェニック酸は、マウス白血病Ｌ１２１０に対する抑制作用がより強く、最高の生存期間延長率がガンボジック酸の２．４５倍である。。ガンボジェニック酸のＬ１２１０白血病細胞の周期への影響の研究結果から分かるように、ガンボジェニック酸（点滴静注、１０ｍｇ／ｋｇ）は、Ｓ期の細胞を減少させ、Ｇ１期の細胞を増加させることができ、ガンボジェニック酸がＧ１−Ｓ期の細胞の進行を抑制することができることを説明した。
【０００８】
程卉ら（漢方薬、２００８年、第３９巻第２期、第２３６ページ）はＭＴＴ方法にてガンボジェニック酸の多種類の悪性腫瘍細胞の増殖に対する抑制作用を観察した結果、ガンボジェニック酸が、ヒト結腸がん細胞（ＨＣＴ−８）、ヒト肝がん細胞（ＢＥＬ−７４０２）、ヒト胃がん細胞（ＢＧＣ−８２３）、ヒト非小細胞肺がん細胞（Ａ５４９）とヒト卵巣がん細胞（Ａ２７８０）の増殖に対して顕著な抑制作用を持つことが分かる。
【０００９】
ガンボジェニック酸は、よく見られる漢方薬である藤黄の有效成分として、豊富な源があり、抽出プロセスが簡単で、コストが安価であり、これらの要素によって、抗腫瘍治療薬としてガンボジェニック酸を開発することは広い前景がある。
【００１０】
特許ＣＮ１７１８１８３Ａに開示されているガンボジェニック酸製剤は、ヒト肝がんＢＥＬ−７４０２、ヒト肝がん７７２１、ヒト乳腺がんＭＣＦ−７とヒト子宮頸がんＨｅｌａ細胞のいずれかに対しても抑制作用を有し、そのうち、ヒト肝がん細胞がもっとも敏感である。特許ＣＮ１７１８１８４Ａに開示されているガンボジェニック酸複合物について、ガンボジェニック酸をモロキシジン、アマンタジン、シタラビン、マトリン等の抗腫瘍薬と組み合わせて用い、肝がん、腸がん、肺がん等の腫瘍を治療する面で効果がより顕著であり、刺激性と毒性が共に低減される。特許ＣＮ１０１９４７２０４Ａに開示されているガンボジェニック酸固体脂質ナノ粒子について、ガンボジェニック酸を固体ナノ粒子として、生物学的利用能を高め、刺激性を低減し、薬効時間を延長した。
【００１１】
現在臨底に用いられる薬物と比較すると、天然生成物のガンボジェニック酸はまだ、生成物の活性が強くなく、安全用量のウィンドウ（ｗｉｎｄｏｗ）が狭い等の欠点があり、その開発と使用を制限した。したがって、ガンボジェニック酸の活性を高め、製薬性を強めるように、ガンボジェニック酸に構造変更と修飾を行う必要が十分にある。
【発明の概要】
【００１２】
天然生成物のガンボジェニック酸の活性が強くないことに対して、本発明は、ガンボジェニック酸誘導体を提供し、それはより良い抗腫瘍活性を有するから、抗腫瘍薬の研究のリード化合物又は抗腫瘍薬を求めるために新たな候補化合物を提供する。
【００１３】
本発明の一つ目の局面は、構造式（Ｉ）〜（ＩＩ）のうちのいずれか一個で示される分子構造を有するガンボジェニック酸誘導体を提供する。
2015502348.tif 000004
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ただし、
Ａは、−ＣＯ−又は−ＨＣ（ＯＨ）−である。
Ｒ１は、
１）−ＯＲ４（ただし、Ｒ４は、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル、又は、オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；１、２又は３個のヘテロ原子で置換されたＣ１〜Ｃ１０のアルキル；アリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、アシル、−ＯＣＨ２Ｏ−、ハロゲン、ハロゲン化アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むアリールアルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリール、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシルのうちのいずれか一個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルキニルといった基から選ばれるいずれか一個である。）、
２）−ＮＲ５Ｒ６
（ただし、Ｒ５とＲ６は、同じであってもよく異なってもよく、それぞれ、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル、又は、オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ１〜Ｃ１０アルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；１、２又は３個のヘテロ原子で置換されたＣ１〜Ｃ１０のアルキル；アリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、アシル、−ＯＣＨ２Ｏ−、ハロゲン、ハロゲン化アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むアリールアルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリールとＣ１〜Ｃ６アミノアシルのうちのいずれか一個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルキニルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。）、
2015502348.tif 000006
（ただし、ｓ、ｔは、いずれも正整数であり、且つ、ｓとｔの和は２〜１０の自然数である。ｍは、０、１、２又は３であり、環におけるＲ７置換基の数を表す。
ｎは、０、１、２又は３であり、環におけるＢの数を表す。Ｂは、炭素、窒素又は酸素である。
Ｒ７、Ｒ８は、Ｒ５と同様な基であるか、カルボニル、イミド基、ニトロソ、イソニトロソである。又は、Ｂが第３級窒素であるときに、Ｒ８は酸素であり、Ｂとともに窒素酸化物を形成する。）
から選ばれる。
Ｒ２は、水素、直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル、Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル、アリール又はＣ１〜Ｃ１０アルキル置換アリール、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル置換アシル又はアリール置換アシルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。Ｒ３は、水素、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル置換アシル又はアリール置換アシルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。
Ｒは、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル又はＣ３〜Ｃ１０のシクロアルケニル；フェニル又はＣ１〜Ｃ１０アルキル置換フェニル；Ｃ２〜Ｃ６のアルキニル；直鎖又は分岐鎖アルキルアミノ、直鎖又は分岐鎖アルケニルアミノを含む第二級アミノ基含有求核試薬；アリールアミノ又はアリールアルキルアミノ、アルキニルアミノと、α，s−不飽和ケトンとが付加して得られるアミンといった置換基から選ばれるいずれか一種である。
しかし、構造式（Ｉ）において、Ｒ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、同時に水素であることはない。
【００１４】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体の好ましい実施形態では、前記ガンボジェニック酸誘導体は、構造式（ＩＩＩ）〜（Ｖ）のうちのいずれか一個で示される分子構造を有する。
2015502348.tif 000007
2015502348.tif 000008
2015502348.tif 000009
【００１５】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体のもう一つの好ましい実施形態では、前記ガンボジェニック酸誘導体は、構造式（ＶＩ）で示される分子構造を有する。
2015502348.tif 000010
【００１６】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体の構造式において、Ｒ１は、好ましくは、
１）−ＯＲ４
（ただし、Ｒ４は、水素；メチル；エチル；プロピル；イソプロピル；ブチル；イソブチル；ｔ−ブチル；へキシル；オクチル；オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ１〜Ｃ１０アルキル；シクロへキシル；シクロペンチル；シクロプロピル；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３；−ＯＣＨ２Ｏ−；ハロゲン；ハロゲン化アルキル；ヒドロキシ；−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＣＨ３；ベンジル；フェネチル；フェニルプロピル；テトラヒドロピロリル；ペピリジル；モルホリノ；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＮＨＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２（Ｎ−エチルテトラヒドロピロール）；−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）；アシル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリールとＣ１〜Ｃ６アミノアシルのうちのいずれか一個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ４〜Ｃ１０のアルキニルといった基から選ばれるいずれか一個である。）、
２）−ＮＲ５Ｒ６
（ただし、Ｒ５とＲ６は、同じであってもよく異なってもよく、それぞれ、水素；メチル；エチル；プロピル；イソプロピル；ブチル；イソブチル；ｔ−ブチル；へキシル；オクチル；ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルアミノ、オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ１〜Ｃ１０アルキル；シクロへキシル；シクロペンチル；シクロプロピル；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＣＨ３；−ＣＨ２（Ｎ−エチルテトラヒドロピロール）；テトラヒドロピロリル；ペピリジル；モルホリノ；ベンジル；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＮＨＣＨ３；−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ３；フェネチル；フェニルプロピル；−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）；アシル、−ＯＣＨ２Ｏ−、ハロゲン、ハロゲン化アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリールとＣ１〜Ｃ６アミノアシルのうちのいずれか一個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ４〜Ｃ１０のアルキニルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。）
といった構造から選ばれるいずれか一種である。
Ｒ３は、水素、ホルミル、アセチル、カルバモイル、ベンゾイル、フェニルアセチルといった置換基のうちのいずれか一種である。
Ｒ２は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、へキシル、オクチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロへキシル、シクロヘブチル、ベンジル、フェネチル、フラニル、ピラニル、２Ｈ−ピロリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ホルミル、アセチル、カルバモイル、ベンゾイル、フェニルアセチルといった置換基のうちのいずれか一種である。
Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、へキシル、オクチル、シクロへキシル、シクロペンチル、エテニル、ブテニル、ヘキセニル、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、フェニル、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピル、ブチニル、ヘキシニル、モルホリノ、ペピリジル、ピペラジルといった置換基のうちのいずれか一種である。
【００１７】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体のさらに好ましい実施形態では、
Ａは、−ＣＯ−又は−ＨＣ（ＯＨ）−である。
Ｒ１は、好ましくは、
2015502348.tif 000011
（ただし、Ｒ７は、
Ｒ５に定義される置換基と同様な置換基、カルボニル、イミド基、ニトロソといった基のうちのいずれか一個である。
ｍ、ｎは、０、１、２又は３である。
Ｂは、炭素、窒素又は酸素である。
Ｒ８は、Ｒ５と同様な基であるか、酸素であり、Ｘと共に窒素酸化物を形成する。）、
2015502348.tif 000012
（ただし、Ｒ７は、Ｒ５に定義される置換基と同様な置換基、カルボニル、イミド基、イソニトロソといった基のうちのいずれか一個である。
ｍ、ｎは、０、１、２又は３である。
Ｂは、炭素、窒素又は酸素である。
Ｒ８は、Ｒ５と同様な基であるか、酸素であり、Ｘと共に窒素酸化物を形成する。）
から選ばれる。
【００１８】
本発明の二つ目の局面は、前記ガンボジェニック酸誘導体の塩を提供し、前記塩は、１）無機酸とともに形成した塩、例えば、塩酸塩、炭酸塩、硫酸塩；２）有機アルカリとともに形成した塩；又は３）無機アルカリとともに形成した塩；４）有機酸とともに形成した塩であってもよい。
【００１９】
本発明の三つ目の局面は、ガンボジェニック酸又は構造式（ＶＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体には、Ｒ２とＲ３を導入して、構造式（ＶＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を調製するガンボジェニック酸誘導体の調製方法を提供し、そのうち、Ｒ２とＲ３を導入する順序が変更可能である。
【００２０】
そのうち、Ｒ３は、酸ハライドＲ３又は酸無水物（Ｒ３）２Ｏと縮合することによって導入される。Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。
【００２１】
Ｒ２は、アルキル置換アシル、アリール置換アシルである時に、Ｒ３と同様にして導入される。Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル又はヘテロアリールである時に、Ｒ２のハロゲン化物とエーテル化反応することによって導入される。
【００２２】
その後、Ｃ６位の炭素におけるカルボニルを還元して構造式（ＶＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を調製すること、及び／又は、Ｒ４ＯＨ、Ｒ５Ｒ６ＮＨ又は
2015502348.tif 000013
とエステル化又は酸化して構造式（ＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を調製することを行う。
【００２３】
そのうち、Ｒ２及び／又はＲ３の縮合反応溶媒は、クロロメタン（例えば、ジクロロメタン、クロロホルム）、クロロエタン、テトラヒドロフラン等であってもよく、反応温度は、２０〜４０℃が好ましい。必要に応じて、酸結合剤（例えば、トリエチルアミン、ピリジン）を入れてもよく、触媒（例えば、ＤＭＡＰ）を入れてもよい。Ｒ２とＲ３が異なる場合には、酸ハライド又は酸無水物とガンボジェニック酸とのモル比は?５：１である。
【００２４】
Ｒ２のハロゲン化物は、Ｒ２Ｂｒ、Ｒ２Ｉであってもよく、反応条件は、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム又は炭酸セシウム等の炭酸塩又は重炭酸塩が存在する条件下で行うことが好ましく、反応溶媒は、ＤＭＡ、ＤＭＦ等の極性溶媒が好ましい。
【００２５】
Ｃ６位の炭素におけるカルボニルの還元反応に用いられる還元剤は、水酸化ホウ素ナトリウム、水酸化ホウ素リチウム等を含み、用いられる溶媒は、Ｃ１〜Ｃ５のアルコール、テトラヒドロフランを含む。
2015502348.tif 000014
2015502348.tif 000015
【００２６】
本発明の四つ目の局面は、ガンボジェニック酸、又は構造式（ＶＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体、又は構造式（ＶＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を原料として、アルカリ性の条件下で、過酸化剤と反応して、Ｃ９とＣ１０位の炭素の間の二重結合を酸化して、構造式（ＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を生成する二種目のガンボジェニック酸誘導体の調製方法を提供する。
【００２７】
中では、示される過酸化水素の濃度は、３０％であることが好ましい。反応溶媒は、水であることが好ましく、示されるアルカリは、水に溶解できる水酸化物、例えばＮａＯＨ、ＫＯＨ等である。
【００２８】
本発明の五つ目の局面は、有機銅試薬ＲＣｕは、ガンボジェニック酸、又は構造式（ＶＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体、又は構造式（ＶＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体のＣ９とＣ１０位の炭素の間の二重結合に１，４−付加して、構造式（Ｉ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を生成する、三種目のガンボジェニック酸誘導体の調製方法を提供する。
【００２９】
中では、示される付加反応溶媒は、テトラヒドロフラン、二塩化炭素等であることが好ましく、反応温度は、−１０〜５０℃であることが好ましく、−２０℃であることが好ましい。
【００３０】
本発明の別の局面は、前記ガンボジェニック酸誘導体の抗腫瘍薬における使用を提供する。
【００３１】
前記ガンボジェニック酸抗腫瘍薬は、注射剤、粉体注射剤（ｐｏｗｄｅｒ−ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）等の剤形であってもよい。
【００３２】
前記腫瘍は、ヒト皮膚がん、ヒト甲状腺がん、ヒト乳腺がん、ヒト胃がん、ヒト結腸直腸がん、ヒト肝がん、ヒト肺がん、ヒト卵巣がん、ヒト頭頚部がん、ヒト腎がん、ヒト膀胱がん、ヒト肉腫（骨、軟骨、横紋筋等）、ヒト悪性リンパ腫、ヒト白血病、ヒト前立腺がん、ヒト悪性神経膠腫、ヒト子宮頸がん、ヒト食道がん、ヒト精巣がん、ヒト悪性奇形腫等を含む。
【００３３】
実験検証により、本発明が提供するガンボジェニック酸誘導体は、ガンボジェニック酸と比べると、より良い抗腫瘍活性を有し、安全性がより良く、且つ調製が簡単であることが分かる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】図１は、本発明の一つの実施例におけるガンボジェニック酸誘導体の調製フローである。
【図２】図２は、本発明のもう一つの実施例におけるガンボジェニック酸誘導体の調製フローである。
【図３】図３は、本発明の三つ目の実施例におけるガンボジェニック酸誘導体の調製フローである。
【図４】図４は、本発明の四つ目の実施例におけるガンボジェニック酸誘導体の調製フローである。
【図５】図５は、本発明の五つ目の実施例におけるガンボジェニック酸誘導体の調製フローである。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
本発明は、ガンボジェニック酸誘導体、前記ガンボジェニック酸誘導体の塩、及び前記ガンボジェニック酸誘導体の調製方法と使用を提供する。
【００３６】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体の構造は、構造式（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）で示される通りであり、好ましくは、構造式（ＩＩＩ）〜（ＶＩ）のうちのいずれか一種である。
【００３７】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体の調製方法の一つ目の実施例フローは、図１に示される通りであり、ガンボジェニック酸を原料として、Ｒ２とＲ３を導入して、そのうち、Ｒ２とＲ３を導入する順序が調整可能である。
【００３８】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体の調製方法の二つ目の実施例フローは、図２に示される通りであり、ガンボジェニック酸、又は一つ目の実施例で調製されたガンボジェニック酸誘導体を原料として、Ｃ６位の炭素のカルボニルをヒドロキシに還元する。
【００３９】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体の調製方法の三つ目の実施例フローは、図３に示される通りであり、ガンボジェニック酸、一つ目の実施例又は二つ目の実施例で調製されたガンボジェニック酸誘導体を原料として、Ｒ４ＯＨとエステル化して、又はＲ５Ｒ６ＮＨ又は
2015502348.tif 000016
と酸化してガンボジェニック酸誘導体を調製する。
【００４０】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体の調製方法の四つ目の実施例フローは、図４に示される通りであり、ガンボジェニック酸、又は構造式（ＶＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体、又は構造式（ＶＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を原料として、Ｃ８とＣ９位の炭素の間の二重結合を酸化して、ガンボジェニック酸誘導体を調製する。
【００４１】
本発明の前記ガンボジェニック酸誘導体の調製方法の五つ目の実施例フローは、図５に示される通りであり、ガンボジェニック酸、又は構造式（ＶＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体、又は構造式（ＶＩＩＩ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を原料として、有機銅試薬ＲＣｕがＣ８とＣ９位の炭素の間の二重結合に１，４−付加して、構造式（Ｉ）で示されるガンボジェニック酸誘導体を生成する。
【００４２】
前記の図面１〜５、及び構造式（Ｉ）〜（ＶＩＩＩ）において、
Ａは、−ＣＯ−又は−ＨＣ（ＯＨ）−である。
Ｒ１は、
１）−ＯＲ４（ただし、Ｒ４は、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル、又は、オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；１、２又は３個のヘテロ原子で置換されたＣ１〜Ｃ１０のアルキル；アリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、アシル、−ＯＣＨ２Ｏ−、ハロゲン、ハロゲン化アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むアリールアルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリール、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシルのうちのいずれか一個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルキニルといった基から選ばれるいずれか一個である。
２）−ＮＲ５Ｒ６
（ただし、Ｒ５とＲ６は、同じであってもよく異なってもよく、それぞれ、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル、又は、オキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するＣ１〜Ｃ１０アルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；１、２又は３個のヘテロ原子で置換されたＣ１〜Ｃ１０のアルキル；アリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、アシル、−ＯＣＨ２Ｏ−、ハロゲン、ハロゲン化アルキル、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、ヒドロキシ、アシルオキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むアリールアルキル；ヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキル、及び、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アリールアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、カルバモイル、アリールとＣ１〜Ｃ６アミノアシルのうちのいずれか一個の置換基を有するヘテロアリールで置換されたＣ１〜Ｃ１０アルキルを含むヘテロアリールアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のシクロアルケニル；Ｃ４〜Ｃ１０のアルキニル、又は、オキシ、ハロゲン、芳香環基、アリールアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アルカノイルオキシ、アミド基、Ｃ１〜Ｃ６アミノアシル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシアシル、アリールオキシ及びヘテロ原子を１、２又は３個含むＣ１〜Ｃ１０ヘテロアルキルのうちのいずれか１〜３個の置換基を有するアルキニルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。）、
2015502348.tif 000017
（ただし、ｓ、ｔは、いずれも正整数であり、且つ、ｓとｔの和は２〜１０の自然数である。
ｍは、０、１、２又は３であり、環におけるＲ７置換基の数を表す。
ｎは、０、１、２又は３であり、環におけるＢの数を表す。Ｂは、炭素、窒素又は酸素である。
Ｒ７、Ｒ８は、Ｒ５と同様な基であるか、カルボニル、イミド基、ニトロソ、イソニトロソである。又は、Ｂが第３級窒素である時に、Ｒ８は酸素であり、Ｂとともに窒素酸化物を形成する。）
から選ばれる。
Ｒ２は、水素、直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル、Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル、アリール又はＣ１〜Ｃ１０アルキル置換アリール、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル置換アシル又はアリール置換アシルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。
Ｒ３は、水素、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル置換アシル又はアリール置換アシルといった置換基から選ばれるいずれか一種である。
Ｒは、水素；直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ１０のアルキル；Ｃ３〜Ｃ８のシクロアルキル；直鎖又は分岐鎖のＣ２〜Ｃ１０のアルケニル又はＣ３〜Ｃ１０のシクロアルケニル；フェニル又はＣ１〜Ｃ１０アルキル置換フェニル；Ｃ２〜Ｃ６のアルキニル；直鎖又は分岐鎖アルキルアミノ、直鎖又は分岐鎖アルケニルアミノを含む第二級アミノ基含有求核試薬；アリールアミノ又はアリールアルキルアミノ、アルキニルアミノと、α，β−不飽和ケトンとが付加して得られるアミンといった置換基から選ばれるいずれか一種である。
しかし、構造式（Ｉ）において、Ｒ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、同時に水素であることはない。
【００４３】
以下、本発明をよりよく理解するように、具体的な実施例によって本発明の前記したガンボジェニック酸誘導体、及びその調製方法と使用について詳細に紹介して説明するが、下記実施例は本発明の範囲を制限するものではないことに留意すべきである。
【００４４】
実施例１    ガンボジェニック酸メチルの調製
構造式（ＶＩ）において、Ｒ１はメチルである。
【００４５】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、６．５ｍｇの炭酸水素ナトリウム、１ｍｌのＤＭＡ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド）、１５μｌのヨードメタンを順に入れる。
【００４６】
室温で光を避けて反応させて、反応が完成した程度をＴＬＣによって追跡し、反応が終了した後、反応液を５０ｍｌの水に注いで、エチルエーテルで抽出して、食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、クロマトグラフ分離して（溶出剤は、酢酸エチル／リグロインであり、体積比１：１２である。）、９ｍｇのオレンジ色のゼリーが得られる。
【００４７】
実施例２    ６−メトキシガンボジェニック酸メチル
構造式（ＩＩＩ）において、Ｒ１はメチルであり、Ｒ２はメチルであり、Ｒ３はＨである。
【００４８】
図１を参照して、２５ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇの実施例１で調製されたガンボジェニック酸メチル、１２ｍｇの炭酸カリウム、１ｍｌのＤＭＡ、１５μｌのヨードメタンを順に入れる。
【００４９】
室温で光を避けて反応させて、反応が終了した後、反応液を５０ｍｌの水に注いで、エチルエーテルで抽出して、水洗して、乾燥して、クロマトグラフ分離して（溶出剤は、酢酸エチル／リグロインであり、体積比１：１２である。）、１２ｍｇのオレンジ色のゼリーが得られる。
【００５０】
実施例３    ガンボジェニック酸エチル
構造式（ＶＩ）において、Ｒ１はエチルである。
【００５１】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、６．５ｍｇの炭酸水素ナトリウム、１ｍｌのＤＭＡ、１５μｌのブロモエタンを順に入れる。
【００５２】
室温で光を避けて反応させて、反応が終了した後、反応液を５０ｍｌの水に注いで、エチルエーテルで抽出して、クロマトグラフ分離して（溶出剤は、酢酸エチル／リグロインであり、体積比１：１２である。）、９ｍｇのオレンジ色のゼリーが得られる。
【００５３】
実施例４    ６−エトキシガンボジェニック酸エチル
構造式（ＩＩＩ）において、Ｒ１はエチルであり、Ｒ２はエチルであり、Ｒ３はＨである。
【００５４】
図１を参照して、２５ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇの実施例１で調製されたガンボジェニック酸エチル、６ｍｇの炭酸カリウム、１ｍｌのＤＭＡ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド）、１５μｌのブロモエタンを順に入れる。
【００５５】
室温で光を避けて反応させて、反応が終了した後、反応液を５０ｍｌの水に注いで、エチルエーテルで抽出して、水洗して、乾燥して、クロマトグラフ分離して（溶出剤は、酢酸エチル／リグロインであり、体積比１：１２である。）、９ｍｇのオレンジ色のゼリーが得られる。
【００５６】
実施例５    ガンボジルピペリジン（Ｇａｍｂｏｇｙｌ  ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅ）
構造式（ＶＩ）において、Ｒ１は
2015502348.tif 000018
である。
【００５７】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、１５．６ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、６ｍｇの１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、３．６ｍｇの１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、４．８μｌの無水ピペリジン及び０．４ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【００５８】
自然に室温に昇温してから、攪拌して反応させる。反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して５ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００５９】
実施例６    ガンボジルジエチルアミン
Ｒ１は−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ３）２である。
【００６０】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、６ｍｇのＥＤＣＩ、３．６ｍｇのＨＯＢＴ、１０μｌのエチレンジアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【００６１】
自然に室温に昇温してから、攪拌して反応させる。反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤が酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００６２】
実施例７    ガンボジルモルホリン
Ｒ１は
2015502348.tif 000019
である。
【００６３】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、１５．６ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、６ｍｇのＨＯＢＴ、５μｌのモルホリン及び０．４ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【００６４】
自然に室温に昇温してから、攪拌して反応させて、３ｍｇのＨＯＢＴ、５μｌのモルホリンを追加して、反応を続けさせる。
【００６５】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤はクロロホルム／酢酸エチル（体積比８：１）であり、溶出して５ｍｇのオレンジ色のゼリーが得られる。
【００６６】
実施例８    １２−ヒドロキシガンボジェニック酸
１２−ヒドロキシガンボジェニック酸の構造式は、次の通りである。
2015502348.tif 000020
【００６７】
図２を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、４ｍｌのメタノールを入れて、氷塩浴で−５℃までに冷却する。４４ｍｇの水酸化ホウ素ナトリウムを投入する。乾燥した環境で、１ｈ反応させて、自然に室温に昇温して、３ｈ後に反応が完成する。
【００６８】
３Ｍの塩酸水溶液を入れて反応をクエンチングさせて、５０ｍｌの酢酸エチルで反応液を希釈して、０．５Ｍの塩酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥してから、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／ジクロロメタン（体積比１：４）であり、溶出して９ｍｇのオレンジ色のゼリーが得られる。
【００６９】
実施例９    ８，９−エポキシガンボジェニック酸
８，９−エポキシガンボジェニック酸の構造式は、次の通りである。
2015502348.tif 000021
【００７０】
図４を参照して、１０ｍｌの反応瓶に５０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌの２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液、０．２ｍｌの過酸化水素水を入れる。
【００７１】
室温で反応させて、反応が終了した後、酢酸エチルで抽出して、１．０Ｍの塩酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥してから、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン（体積比１：３）であり、溶出して１２ｍｇのオレンジ色のゼリーが得られる。
【００７２】
実施例１０    ガンボジル−ｎ−ブチルアミン
即ち、構造式（ＶＩ）において、Ａは−ＣＯ−であり、Ｒ１は−ＮＨ−（ＣＨ２）３−ＣＨ３である。
【００７３】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃以下に冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、６μｌのｎ−ブチルアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。自然に室温に昇温して、攪拌して反応させる。
【００７４】
反応が停止した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、粗生成物をシリカゲルカラムでクロマトグラフして、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：８：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００７５】
実施例１１    ガンボジルウンデシルアミン
即ち、構造式（ＶＩ）において、Ａは−ＣＯ−であり、Ｒ１は−ＮＨ−（ＣＨ２）１０−ＣＨ３である。
【００７６】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃以下までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、６μｌのｎ−ウンデシルアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。自然に室温に昇温して、攪拌して反応させる。
【００７７】
反応が停止した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、粗生成物をシリカゲルカラムでクロマトグラフして、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：８：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００７８】
実施例１２    ガンボジルイソプロピルアミン
即ち、構造式（ＶＩ）において、Ａは−ＣＯ−であり、Ｒ１は−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ３）２である。
【００７９】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃以下までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、５μｌのイソプロピルアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。自然に室温に昇温して、攪拌して反応させる。
【００８０】
反応が停止した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、粗生成物をシリカゲルカラムでクロマトグラフして、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：８：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００８１】
実施例１３    ガンボジルジプロピルアミン
即ち、構造式（ＶＩ）において、Ａは−ＣＯ−であり、Ｒ１は−ＮＨＲ５Ｒ６であり、中では、Ｒ５とＲ６はいずれもプロピルである。
【００８２】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃以下までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、８μｌのジプロピルアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。自然に室温に昇温して、攪拌して反応させる。
【００８３】
反応が停止した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、粗生成物をシリカゲルカラムでクロマトグラフして、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００８４】
実施例１４    ガンボジルイソブチルアミン
即ち、構造式（ＶＩ）において、Ａは−ＣＯ−であり、Ｒ１は−ＮＨ−Ｃ（ＣＨ３）−ＣＨ２ＣＨ３である。
【００８５】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃以下までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、６μｌのイソブチルアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。自然に室温に昇温して、攪拌して反応させる。
【００８６】
反応が停止した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、粗生成物をシリカゲルカラムでクロマトグラフして、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：８：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００８７】
実施例１５    ガンボジル（２，６−ジメチルピペリジン）
Ｒ１は
2015502348.tif 000022
である。
【００８８】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、８μｌの２，６−ジメチルピペリジン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【００８９】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で三回に分けて洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／ベンゼン（体積比１：８）であり、溶出して５ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００９０】
実施例１６    ガンボジルテトラヒドロピロール
Ｒ１は
2015502348.tif 000023
である。
【００９１】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、５μｌのピロリジン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【００９２】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で三回に分けて洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン（体積比１：４）であり、溶出して６ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００９３】
実施例１７    ガンボジェニック酸シクロヘキシルアミン
Ｒ１は
2015502348.tif 000024
である。
【００９４】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、７μｌのシクロヘキシルアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【００９５】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００９６】
実施例１８    ガンボジル（エトキシエチルアミン）
Ｒ１は−ＮＨ−（ＣＨ２）２Ｏ−ＣＨ２ＣＨ３である。
【００９７】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、５ｍｇのエトキシエチルアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【００９８】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して５ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【００９９】
実施例１９    ガンボジェニック酸ベンジルアミン
Ｒ１は
2015502348.tif 000025
である。
【０１００】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、７μｌのベンジルアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【０１０１】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して５ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【０１０２】
実施例２０    ガンボジルエトキシカルボニルメチルアミン
Ｒ１は−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＯ−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３である。
【０１０３】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、１０ｍｇのグリシンエチルエステル及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【０１０４】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【０１０５】
実施例２１    ガンボジルピペラジン
Ｒ１は
2015502348.tif 000026
である。
【０１０６】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、４ｍｇのピペラジン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【０１０７】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／メタノール（体積比１０：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【０１０８】
実施例２２    ガンボジルメチルピペラジン及びそのクエン酸塩
Ｒ１は
2015502348.tif 000027
である。
【０１０９】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、７μｌのメチルピペラジン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【０１１０】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【０１１１】
ガンボジルメチルピペラジンをエタノールに溶解して、クエン酸のエタノール溶液を滴下して、加熱して、生成された沈殿を溶解させて、冷却して淡黄色の沈殿を析出し、濾過して、乾燥になるまでべーキングして、ガンボジルメチルピペラジンクエン酸塩が得られる。
【０１１２】
実施例２３    ガンボジルベンジルピペラジン及びそのクエン酸塩
Ｒ１は
2015502348.tif 000028
である。
【０１１３】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、１１μｌのベンジルピペラジン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【０１１４】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【０１１５】
実施例２４    ガンボジル（４−アセチルピペラジン）
Ｒ１は
2015502348.tif 000029
である。
【０１１６】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、５ｍｇのアセチルピペラジン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【０１１７】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【０１１８】
実施例２５    ガンボジルシクロプロピルアミン
Ｒ１は
2015502348.tif 000030
である。
【０１１９】
１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、５μｌのシクロプロピルアミン及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【０１２０】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン（体積比１：８）であり、溶出して５ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【０１２１】
実施例２６    ガンボジェニック酸（３−メトキシテトラヒドロピロール）
Ｒ１は
2015502348.tif 000031
である。
【０１２２】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、６ｍｇの３−メトキシテトラヒドロピロール及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【０１２３】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して４ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【０１２４】
実施例２７    ガンボジェニック酸［３−（３−メトキシテトラヒドロピロリル）プロピル］エステル
Ｒ１は
2015502348.tif 000032
である。
【０１２５】
図３を参照して、１０ｍｌの反応瓶に、２０ｍｇのガンボジェニック酸、０．５ｍｌのジクロロメタンを入れて、氷浴で０℃までに冷却して、１０ｍｇのＥＤＣＩ、４．５ｍｇのＨＯＢＴ、１０ｍｇの３−（３−メトキシテトラヒドロピロリル）プロパノール及び０．５ｍｌのジクロロメタンを配合してなる溶液を滴下する。
【０１２６】
反応が終了した後、５０ｍｌのジクロロメタンで反応液を希釈して、０．５Ｍの硫酸水溶液、飽和食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、溶媒を蒸留除去して、クロマトグラフ分離して、溶出剤は酢酸エチル／リグロイン／ジクロロメタン（体積比１：４：１）であり、溶出して７ｍｇの黄色のゼリーが得られる。
【０１２７】
実施例２８    １０−メチルガンボジェニック酸
構造式（Ｖ）において、Ｒ２とＲ３はＨであり、Ｒはメチルである。
【０１２８】
図５を参照して、５ｍｌの反応瓶に、２４ｍｇのマグネシウム、１ｍｌのエチルエーテルを入れて、０．０７ｍｌのヨードメタンを滴下して、システムにマイクロ沸騰（ｍｉｃｒｏ−ｂｏｉｌｉｎｇ）を保持させて、澄んだグリニャール試薬が得られ、１００ｍｇのヨード化第一銅をテトラヒドロフランに溶解して、懸濁液を形成し、−４０℃までに冷却して、調製されたグリニャール試薬を０．１ｍｌ入れて、グレーの懸濁液を生成するまで反応させる。
【０１２９】
ガンボジェニック酸（２０ｍｇ）のテトラヒドロフラン溶液を入れて、−２０℃で反応させる。
【０１３０】
反応が終了した後、１Ｍの塩酸で反応をクエンチングさせ、エチルエーテルで抽出して、クロマトグラフ分離して７ｍｇのオレンジ色のゼリーが得られる。
【０１３１】
本発明において合成した化合物について、それぞれ、スルホローダミンＢ蛋白染色法（ｓｕｌｆｏｒｈｏｄａｌｎｉｎｅ  Ｂ，ＳＲＢ）とミクロ培養テトラゾリウム（ｍｉｃｒｏｃｕｌｔｕｒｅ  ｔｅｔｒａｚｏｌｉｎｅ，ＭＴＴ）比色法で、体外における抗腫瘍活性の研究（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９８８，４８（３）：５８９）を行う。
【０１３２】
被験化合物：６−メトキシガンボジェニック酸メチル、ガンボジェニック酸エチル、６−エトキシガンボジェニック酸エチル、６−アセチルガンボジェニック酸、ガンボジルピペリジン、ガンボジルジエチルアミン、ガンボジルモルホリン、１２−ヒドロキシガンボジェニック酸といった被験化合物と陽性対照物質であるガンボジェニック酸を、濃度勾配が１０−４Ｍ、１０−５Ｍ、１０−６Ｍ、１０−７Ｍ、１０−８Ｍとなるようにジメチルスルホキシドで希釈する。
【０１３３】
下記の内容において、
抑制率（％）＝［（対照グループのＯＤ値−投薬グループのＯＤ値）／対照グループのＯＤ値］×１００％
【０１３４】
結果として、次のように評定する
無効：１０−５Ｍにおける抑制率＜８５％である。
効果が弱い：１０−５Ｍにおける抑制率?８５％又は１０−６Ｍにおける抑制率＞５０％である。
効果が強い：１０−６Ｍにおける抑制率?７５％又は１０−７Ｍにおける抑制率＞５０％である。
【０１３５】
一、Ｃａｌ２７腫瘍細胞の生長に対する抑制
ヒト口腔扁平上皮がん細胞Ｃａｌ２７を１０％ウシ胎児血清を含むＤＭＥＭで培養して、測定時に指数増殖期の細胞を配合して細胞懸濁液とし、９６ウェル培養プレートに接種する。実験グループでは、ウェルごとに、それぞれ異なる濃度の被験化合物を１０μｌ入れ、ブランク対照グループでは、等体積の最高濃度の溶媒（即ち、１０−４Ｍのジメチルスルホキシド）を含むＤＭＥＭ培養液を入れ、３７℃、５％二酸化炭素の条件下で７２時間培養した後、トリクロロ酢酸で固定して、ウェルごとに１００μｌのＳＲＢ液を入れ、結合していないＳＲＢを洗浄して除去して、自動分光光度プレートリーダーで５５０ｎｍにおけるＯＤ値を測定する。薬物が添加されなかった腫瘍細胞グループをブランク対照として、薬物の当該腫瘍細胞の生長に対する抑制率を計算し、その結果を表１に示す。
【０１３６】
表１    被験化合物のＣａｌ２７腫瘍細胞の生長に対する抑制率
2015502348.tif 000033
【０１３７】
表２    被験化合物のＭＣＦ−７腫瘍細胞の生長に対する抑制率
2015502348.tif 000034
【０１３８】
二、ヒト乳腺がんＭＣＦ−７腫瘍細胞の生長に対する抑制
ヒト乳腺がんＭＣＦ−７細胞を１０％ウシ胎児血清を含むＤＭＥＭで培養し、測定時に指数増殖期の細胞を配合して細胞懸濁液とし、９６ウェル培養プレートに接種する。実験グループでは、ウェルごとに、それぞれ異なる濃度の被験化合物を入れ、ブランク対照グループでは、等体積の最高濃度の溶媒（即ち、１０−４Ｍのジメチルスルホキシド）を含むＤＭＥＭ培養液を入れ、３７℃、５％二酸化炭素の条件下で７２時間培養した後、ウェルごとに、最終濃度１ｍｇ／ｍｌになるまでＭＴＴ液を入れ、４時間培養し、上清を吸引除去して、２００μｌのＤＭＳＯを入れて結晶を溶解して、自動分光光度プレートリーダーで４９０ｎｍにおけるＯＤ値を測定する。薬物が添加されなかった腫瘍細胞グループをブランク対照として、薬物の当該腫瘍細胞の生長に対する抑制率を計算し、その結果を表２に示す。
【０１３９】
前記した表から、本発明により調製されたガンボジェニック酸誘導体は、より強い腫瘍細胞生長抑制作用を有することが分かる。
【０１４０】
以上、本発明の具体的な実施例について詳細に説明したが、それは例にすぎず、本発明は、上記した具体的な実施例に制限されるものではない。当業者にとって、本発明に対して行った同等な修正と置換は全て本発明の範疇にある。したがって、本発明の精神と範囲を逸脱しない限り行った同等な変更と修正は、全て本発明の範囲に含まれるべきである。
【図１】
2015502348.tif 000047
【図２】
2015502348.tif 000048
【図３】
2015502348.tif 000049
【図４】
2015502348.tif 000050
【図５】
2015502348.tif 000051
【国際調査報告】
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2015502348.tif 000053
2015502348.tif 000054
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2015502348.tif 000056
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