(57)【要約】  本発明は、化合物、並びに医学的障害の診断及び／又は治療におけるそれらの使用に関する。一部の実施形態において、該化合物は、がんの検出に使用することができる。該化合物は、二酸部分を含むことができる。一部の実施形態において、該二酸部分はジカルボン酸を含み、一部の実施形態において、該二酸部分はジテトラゾールを含む。
2015516965.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2015516965.tif 000053
（式中、Ｒ１１は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基であり、ここで、Ｒ１１又はＲ１２のそれぞれは場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に結合されており、或いはＲ１１又はＲ１２のそれぞれは場合によって、診断用マーカー又は治療用薬剤に結合されている）
で表される化合物。
【請求項２】
Ｒ１１がＨであり、Ｒ１２がＣ５−アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式Ｉ’：
【化２】
2015516965.tif 000054
で表される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
式（ＩＩ）：
【化３】
2015516965.tif 000055
（式中、Ｒ１１は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基であり、ここで、Ｒ１１又はＲ１２のそれぞれは場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に結合されているか、或いはＲ１１又はＲ１２のそれぞれは場合によって、診断用マーカー又は治療用薬剤に結合されている）
で表される化合物。
【請求項５】
Ｒ１１がＨ又はＣＨ３であり、Ｒ１２がＣ５−アルキルである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
式ＩＩ’：
【化４】
2015516965.tif 000056
で表される、請求項４に記載の化合物。
【請求項７】
式（ＩＩＩ）：
【化５】
2015516965.tif 000057
（式中、Ｒ１３及びＲ１４は、独立に、Ｈ、又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１５は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基であり、ここで、Ｒ１３、Ｒ１４又はＲ１５のそれぞれは場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に結合されているか、或いはＲ１３、Ｒ１４又はＲ１５のそれぞれは場合によって、診断用マーカー又は治療用薬剤に結合されている）
で表される化合物。
【請求項８】
Ｒ１３及びＲ１４が、独立に、水素又はＣＨ３であり、Ｒ１５がアルキルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
式ＩＩＩ’：
【化６】
2015516965.tif 000058
で表される、請求項７に記載の化合物。
【請求項１０】
式（ＩＶ）：
【化７】
2015516965.tif 000059
（式中、芳香族環Ａｒは、４、５又は６個の原子を含み、カルボキシ基で置換されていない該芳香族環原子は、炭素、窒素、酸素又は硫黄から独立に選択され、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基であって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に結合されている基であり；或いはＲ１２は場合によって、診断用マーカー又は治療用薬剤に結合されている）
で表される化合物。
【請求項１１】
式ＩＶａ：
【化８】
2015516965.tif 000060
で表される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
式ＩＶｂ：
【化９】
2015516965.tif 000061
で表される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１３】
式（Ｖ）：
【化１０】
2015516965.tif 000062
［式中、Ｒ４は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）であり、Ｒ４又はＲ１２のそれぞれは場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に結合されているか、或いはＲ４又はＲ１２のそれぞれは場合によって、診断用マーカー又は治療用薬剤に結合されている］
で表される化合物。
【請求項１４】
式Ｖ（式中、Ｒ４はＣＨ３であり、Ｒ１２は、診断用マーカーに結合されている直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基である）で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
式Ｖ［式中、Ｒ４は、診断用マーカーに場合によって結合されているＣ１、Ｃ２又はＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）である］で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１６】
式Ｖ（式中、Ｒ４はＣＨ３であり、Ｒ１２は、ＤＮＡインターカレーターに結合されているＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６−アルキルである）で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１７】
ＤＮＡインターカレーターがベルベリンであり、化合物がＡＰＯ−６８１と称される、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
式Ｖ（式中、Ｒ４はＣＨ３であり、Ｒ１２は、チューブリンリガンドに結合されているＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６−アルキルである）で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１９】
チューブリンリガンドがコルヒチンであり、化合物がＡＰＯ−６９７と称される、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
式Ｖ（Ｒ４はＣＨ３であり、Ｒ１２は、熱ショックタンパク質リガンドに結合されているＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６−アルキルである）で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２１】
式Ｖ（Ｒ４はＣＨ３であり、Ｒ１２は、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤に結合されているＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６−アルキルである）で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２２】
式Ｖａ：
【化１１】
2015516965.tif 000063
で表される、放射標識化されている２−（４−（１８フルオロメチル）フェネチル）−２−メチルマロン酸である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２３】
式Ｖｂ：
【化１２】
2015516965.tif 000064
で表され、ＡＰＯ−６２３（ＵＢ−１２７５１）とも称される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２４】
式Ｖｂｐ：
【化１３】
2015516965.tif 000065
（式中、Ｘ１及びＸ２のそれぞれは、独立に、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され、但し、Ｘ１及びＸ２の双方が同時にＨであることはない）
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２５】
１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで１８Ｆ放射標識化されている、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２６】
式Ｖｂ’：
【化１４】
2015516965.tif 000066
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２７】
式Ｖｂ’’：
【化１５】
2015516965.tif 000067
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２８】
式Ｖｃ：
【化１６】
2015516965.tif 000068
で表され、ＡＰＯ−６４６（ＵＢ−１２８１８）とも称される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２９】
式Ｖｃｐ：
【化１７】
2015516965.tif 000069
（式中、Ｘ１は、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３０】
１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルでさらに１８Ｆ放射標識化されている、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３１】
式Ｖｃ’：
【化１８】
2015516965.tif 000070
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３２】
式Ｖｄ：
【化１９】
2015516965.tif 000071
で表され、ＡＰＯ−６５０（ＵＢ−１３２９５）とも称される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３３】
式Ｖｄｐ：
【化２０】
2015516965.tif 000072
（式中、Ｘ１及びＸ２のそれぞれは、独立に、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；但し、Ｘ１及びＸ２の双方が同時にＨであることはない）
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３４】
１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで１８Ｆ放射標識化されている、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３５】
式Ｖｄ’：
【化２１】
2015516965.tif 000073
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３６】
式Ｖｄ’’：
【化２２】
2015516965.tif 000074
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３７】
式Ｖｅ：
【化２３】
2015516965.tif 000075
で表され、ＡＰＯ−６８１とも称される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３８】
式Ｖｅｐ：
【化２４】
2015516965.tif 000076
（式中、Ｘ１は、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択される）
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３９】
１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで１８Ｆ放射標識化されている、請求項３７に記載の化合物。
【請求項４０】
式Ｖｅ’：
【化２５】
2015516965.tif 000077
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項４１】
式Ｖｆ：
【化２６】
2015516965.tif 000078
で表され、ＡＰＯ−６９７とも称される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項４２】
式Ｖｆｐ：
【化２７】
2015516965.tif 000079
（式中、Ｘ１及びＸ２のそれぞれは、独立に、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；但し、Ｘ１及びＸ２の双方が同時にＨであることはない）
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項４３】
１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで１８Ｆ放射標識化されている、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４４】
式Ｖｆ’：
【化２８】
2015516965.tif 000080
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項４５】
式Ｖｆ’’：
【化２９】
2015516965.tif 000081
で表される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項４６】
式（ＶＩ）：
【化３０】
2015516965.tif 000082
（式中、シクロアルキルＡＬは、３、４、５又は６個の炭素を含み、Ｒ１２は、診断用マーカー又は治療用薬剤に結合されているＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８若しくはＣ９−アルキルである）
で表される化合物。
【請求項４７】
式（ＶＩＩ）：
【化３１】
2015516965.tif 000083
［式中、Ｒ４は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）であり、Ｒ４又はＲ１２のそれぞれは場合によって、診断用マーカー又は治療用薬剤に結合されている］
で表される化合物。
【請求項４８】
式ＶＩＩａ：
【化３２】
2015516965.tif 000084
で表される、請求項４７に記載の化合物。
【請求項４９】
式ＶＩＩａｐ：
【化３３】
2015516965.tif 000085
（式中、Ｘ１及びＸ２のそれぞれは、独立に、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができ；但し、Ｘ１及びＸ２の双方がＨであることはない）
で表される、請求項４７に記載の化合物。
【請求項５０】
式ＶＩＩａ’：
【化３４】
2015516965.tif 000086
で表される、請求項４７に記載の化合物。
【請求項５１】
臨床的画像処理又は診断の目的でマーカーを結合させるための化合物であって、式（ＶＩＩＩ）：
【化３５】
2015516965.tif 000087
（式中、Ｒは、式Ｉ〜ＶＩＩによって表される化合物のいずれかを表し、Ｘは脱離基である）
の構造で表される、上記化合物。
【請求項５２】
Ｘがハライド又はスルホナートである、請求項５１に記載の化合物。
【請求項５３】
式ＶＩＩＩ’：
【化３６】
2015516965.tif 000088
［式中、Ｒ１１は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）であり；Ｙは保護基であり、Ｘは脱離基である］
で表される、請求項５１に記載の化合物。
【請求項５４】
式ＶＩＩＩ’’：
【化３７】
2015516965.tif 000089
［式中、Ｒ４は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）であり；Ｙは保護基であり、Ｘは脱離基である］
で表される、請求項５３に記載の化合物。
【請求項５５】
Ｙが、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ベンジルから成る群から選択され、Ｘがハロゲン又はスルホナートである、請求項５３又は５４に記載の化合物。
【請求項５６】
正常な形質膜組織の撹乱及び変化を起こしている細胞に選択的に結合するための方法であって、細胞集団を請求項１から５０までのいずれか一項に記載の化合物と接触させることを含む、上記方法。
【請求項５７】
画像処理のためのマーカーが結合されている請求項１から５０までのいずれか一項に記載の化合物を、死滅過程にある細胞にインビボで選択的に結合する方法であって、対象に化合物を投与すること、並びにＸ線、ＣＴスキャン、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及び陽子放出断層撮影（ＰＥＴ）の中の１つ又は複数から選択される画像処理技術を使用して対象を画像処理することを含む、上記方法。
【請求項５８】
対象のがんを治療する方法であって、抗がん薬に結合されている請求項１から５０までのいずれか一項に記載の化合物を対象に注入することを含む、上記方法。
【請求項５９】
対象のがんを検出する方法であって、請求項１から５０までのいずれか一項に記載の化合物を対象に投与すること、並びにＸ線、ＣＴスキャン、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及び陽子放出断層撮影（ＰＥＴ）の中の１つ又は複数から選択される画像処理技術を使用して対象を画像処理することを含む、上記方法。
【請求項６０】
対象のがんの治療を監視する法であって、化学療法による治療の前、間、後に請求項１から５０までのいずれか一項に記載の化合物を対象に投与すること、並びにＸ線、ＣＴスキャン、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及び陽子放出断層撮影（ＰＥＴ）の中の１つ又は複数から選択される画像処理技術を使用して対象を画像処理することを含み、画像処理のシグナルの減少が、化学療法による治療が成功していることを示す。上記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化合物、並びに医学的障害の診断及び／又は治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
無傷の真核細胞の形質膜（外膜）は、高度に組織された構造によって特徴付けられる。この高レベルの膜組織は、とりわけ、膜を構成する特定の脂質の分子構造、膜を構成する種々の脂質種の間の比率、膜の外葉と内葉との間のリン脂質の分布によって、及び膜タンパク質成分によって決定される。
【０００３】
高レベルの形質膜組織の維持は、正常な細胞生理機能にとって必須であるが、一方、細胞形質膜の正常な組織の実質的な撹乱及び変化（ＰＮＯＭ）は、数多くの生理学的及び病理学的条件で発生し、多数の疾患を特徴付ける。このような変化及び撹乱は、形態学的レベル（アポトーシスを起こしている細胞で観察される膜ブレブ形成）及び分子レベルの双方で、明白になる可能性がある。ＰＮＯＭとしては、とりわけ、通常的には膜二重層の内葉にほとんど完全に限定されるアミノリン脂質、主としてホスファチジルセリン（ＰＳ）及びホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）の細胞表面への移動、並びにスフィンゴミエリン（ＳＭ）及びホスファチジルコリン（ＰＣ）の膜の外葉から内葉への相互移動を伴う、膜リン脂質の無秩序移動（ｓｃｒａｍｂｌｉｎｇ）及び再分布が挙げられる。この再分布は、細胞膜脂質の非対称性の喪失と呼ばれることがある。膜脂質の非対称性の喪失に加えて、ＰＮＯＭは、また、膜リン脂質の詰め込みレベルの低下及び膜流動性の増加としばしば関連付けられる。
【０００４】
これらの変化は、細胞表面を、いくつかの凝固因子複合体、例えば、テナーゼ及びプロトロンビナーゼタンパク質複合体の会合のための触媒プラットフォームにする上で重要な役割を演じる。したがって、血小板の活性化は、ＰＮＯＭを起こしている血小板膜と関連付けられ、これらの変化は、正常な血液凝固において、並びに数多くの障害における異常で過剰な血液凝固の開始及び／又は伝播において、重要な因子を構成する。これらの障害としては、とりわけ、動脈若しくは静脈血栓症、又は血栓塞栓症［例えば、脳卒中、心筋梗塞、深部静脈血栓症（ＤＶＴ）、播種性血管内凝固（ＤＩＣ）、血栓性血小板減少性紫斑など］、不安定なアテローム性動脈硬化プラーク、鎌状赤血球症、β−サラセミア、抗リン脂質抗体症候群［とりわけ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）］、及び膜微粒子の脱落と関連する障害、例えば、心肺バイパスと関連する神経機能障害が挙げられる。
【０００５】
アポトーシスは、細胞膜の変化／撹乱が起こるもう１つの主な状況である。アポトーシスは、本来的に備わっている細胞の自己破壊又は「自殺」のプログラムであり、それは、あらゆる真核細胞に備わっている。刺激の引き金を引くことに応答して、細胞は、細胞収縮、細胞膜のブレブ形成、クロマチンの凝縮及び断片化、細胞の膜に結合された粒子のクラスター（アポトーシス体）への変換の完結からなる事象の高度に特徴的なカスケードを引き起こし、その後、マクロファージによって飲み込まれる。ＰＮＯＭは、アポトーシスの普遍的現象である。それは、アポトーシスカスケードの初期に、おそらくは、細胞が死滅過程へゆだねられた時点に発生し、また、マクロファージによるアポトーシス細胞の認識及び除去における重要因子であることが示されている。
【０００６】
最近、ＰＮＯＭとアポトーシス細胞の強力な凝血促進活性との間に、強固な相互関係が指摘されている。アポトーシス内皮細胞におけるＰＮＯＭ、例えば、アテローム性動脈硬化プラーク中で発生するものは、おそらく、血栓性血管障害の病因において重要な役割を演じる。
【０００７】
アポトーシス細胞は、また、腫瘍内で見出される。腫瘍中での加速された細胞増殖のため、すべての細胞が十分な血液供給を受けるとは限らず、腫瘍内での虚血及びアポトーシスの増加をもたらす。この現象を認識すると、腫瘍内に存在するアポトーシス細胞を、腫瘍を確認するための、及び腫瘍の生物学的挙動を細胞レベルで追跡し、例えば、腫瘍に対する治療の生物学的効果に関する早期評価を提供するための特定のアポトーシスマーカーにとっての標的とすることができる。
【０００８】
アポトーシス及び血栓症は、それぞれ、大多数の内科的障害において重要な役割を有するので、これらの生物学的過程を検出するための手段を有することが望ましい。アポトーシスに特異的な化合物を、アポトーシス細胞を検出するために、並びに診断及び／又は治療の目的でアポトーシス細胞を標的化するために使用することができる。
【０００９】
ＰＮＯＭ膜へ選択的に結合するためのマロン酸部分構造を有する化合物が、Ｚｉｖらへの国際公開第２００５／０６７３８８号中に記載されている。具体的には、化合物ＭＬ−１０、すなわち（５−フルオロペンチル）（メチル）プロパン二酸（又は５−フルオロペンチル−２−メチル−マロン酸）が使用された。
【化１】
2015516965.tif 000003
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
腫瘍及びその他の病理を標的にするための手段は、公知であり、改善されているが、より特異的で且つ効率的な標的指向化及び療法が有益である可能性がある。
【００１１】
本発明の実施形態は、図と関連させて次の詳細な説明からより完全に理解され、認識されるであろう。図は、共通の尺度ではなく、類似の参照数字は、対応する類似の又は同様の要素を示す。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ＣＤ９５処理Ｊｕｒｋａｔ細胞における、本発明による６種の例示的化合物のインビトロでの取り込みを、ＭＬ−１０と比較して示した図である。取り込みは、βカウンターを使用して測定した。ｚＶＡＤで処置された細胞は、試験されたすべての候補化合物において、取り込みを低下させる表現型を対照値（１として示す）まで逆転させた。三つ組みで実施された３回の独立実験の平均±ＳＤを示す。
【００１３】
【図２】ＡＰＯ−６５０の腫瘍／血液取り込み比率をＭＬ−１０と比較して示す図である。無胸腺ヌードマウスにＨＣＴ−１１６ヒト結腸直腸がん細胞を接種した。マウスに、トリチウム化されたＭＬ−１０及びＡＰＯ−６５０を静脈内注射して１時間半後に、サンプルを集めた。血液サンプルを採取した後、動物を屠殺した。血液及び腫瘍サンプルの放射能を、β−カウンターで測定した。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明は、細胞形質膜の正常な組織の撹乱を起こしている細胞（ＰＮＯＭ細胞）に選択的に結合するための化合物を提供する。本発明の化合物は、ＰＮＯＭ細胞を選択的に標的とする利点を有し、また同時に、比較的小さな分子量、及び潜在的に好都合な薬物動態プロフィールを特徴とする。
【００１５】
本発明の一実施形態によれば、該化合物は二酸部分を含み、ここで、二酸部分の対数で表記した第１酸解離定数（ｐＫａ１）は約１．５〜３．９の間にあり、対数で表記した第２酸解離定数（ｐＫａ２）は約５．０〜６．５の間にある。一部の実施形態において、二酸部分はジ−カルボン酸を含み、一部の実施形態において、二酸部分はジ−テトラゾールを含む。
【００１６】
本発明の実施形態による化合物は、診断で使用することができる。一部の実施形態において、それらの化合物は、がんを検出するのに使用することができる。本発明の一実施形態によれば、化合物は、画像処理技術、例えば、Ｘ線、ＣＴスキャン、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）又は放射性同位体スキャン、例えば、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）若しくは陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）と共に使用できるマーカーを含むことができる。
【００１７】
一実施形態において、マーカーは、金属イオンＴｃ、オキソ−Ｔｃ、Ｉｎ、Ｃｕ、Ｇａ、Ｘｅ、Ｔｌ及びＲｅ、オキソ−Ｒｅ、並びに共有結合で連結された原子のそれぞれの放射性同位体；ＳＰＥＣＴなどの放射性同位体スキャンのための１２３Ｉ及び１３１Ｉ；ＭＲＩのためのＧｄ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）又はＭｎ（ＩＩ）；並びにＰＥＴスキャンのための１８Ｆ、１５Ｏ、１８Ｏ、１１Ｃ、１３Ｃ、１２４Ｉ、１３Ｎ及び７５Ｂｒなどの検出可能な標識である。
【００１８】
別の実施形態において、本発明の実施形態による化合物は、治療効果を有する（すなわち、疾患を治療するのに有用である）薬剤又は放射性同位体を含むか、それらに結合されている。薬剤としては、がんを治療するための薬物、例えば、限定はされないが、カンプトテシン、カンプトテシン類似体、ニトロソウレアなどの細胞傷害性薬剤、又は抗がん活性を備えた別の薬剤（レナリドミドなど）を挙げることができる。治療用薬剤は、また、イットリウム９０、ヨウ素１３１、レニウム１８８、ホルミウム１６６、インジウム１１１、ルテチウム１７７などの治療用放射性同位体、又は治療目的に有用である放射線を放出するその他の放射性同位体であることができる。
【００１９】
本発明の実施形態による化合物は、ＰＮＯＭ細胞の形質膜の（これらの膜を健常細胞の膜から区別する）構造変化に対応して設計される。
【００２０】
本発明の化合物は、ＰＮＯＭ細胞によって特徴付けられる広範な種類の医学的状態の検出及び診断のために使用することができる。ＰＮＯＭ細胞によって特徴付けられる臨床状態の例は次の通りである：
【００２１】
過剰なアポトーシスの発生によって特徴付けられる疾患：例えば、変性障害、神経変性障害（例えば、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン舞踏病）、ＡＩＤＳ、ＡＬＳ、プリオン病、骨髄異形成症候群、虚血性若しくは中毒性傷害、移植拒絶中の移植細胞喪失；腫瘍、及び特に、高度に悪性／侵襲性の腫瘍も、過剰な組織増殖に加えたアポトーシスの増大によってしばしば特徴付けられる。
【００２２】
過剰な血液凝固によって明示される疾患：ここで、ＰＮＯＭは、血小板の活性化中に、及び／又はその他の細胞要素（例えば、内皮細胞）の活性化中若しくはそれらの要素に対する傷害中に発生する。これらの疾患としては、とりわけ、動脈若しくは静脈血栓症、血栓塞栓症、例えば、心筋梗塞、脳卒中、深部静脈血栓症、播種性静脈内凝固（ＤＩＣ）、血栓性血小板減少性紫斑（ＴＴＰ）、鎌状赤血球症、サラセミア、抗リン脂質抗体症候群、全身性エリテマトーデスが挙げられる。
【００２３】
炎症性障害、及び／又は免疫介在性の病因若しくは発生機序と関連した疾患：抗リン脂質抗体症候群、全身性エリテマトーデスなどの自己免疫障害；リウマチ様関節炎、強皮症などの結合組織障害；甲状腺炎；天疱瘡又は結節性紅斑などの皮膚科学的障害；自己免疫性血液障害；重症筋無力症などの自己免疫性神経障害；多発性硬化症；潰瘍性大腸炎などの炎症性腸障害；血管炎。
【００２４】
アテローム性動脈硬化性プラーク、及び特に、不安定で脆弱且つ破裂しやすいプラークも、アポトーシスマクロファージ、アポトーシス平滑筋細胞、アポトーシス内皮細胞、及び活性化血小板などのＰＮＯＭ細胞によって特徴付けられる。このような活性化された血小板は、血栓中で遭遇し、不安定なアテローム性動脈硬化性プラークとしばしば関連している。
【００２５】
検出は、また、それぞれの疾患を有することが既知である者において、疾患の重症度を評価する目的で、並びに疾患の推移及び／又は種々の治療モダリティーへの応答を監視するために実施することができる。このような監視の非限定的例が、抗がん療法に対する応答の評価である。化学療法又は放射線療法などのほとんどの抗腫瘍治療は、アポトーシスの誘導によってそれらの効果を発揮するので、療法で誘導される腫瘍細胞のアポトーシスの本発明の化合物による検出は、抗腫瘍剤に対する腫瘍の感受性の度合を教示することができる。これによって、抗がん治療の施与時期とその有効性の適切な評価時期との間の遅延期間を実質上短縮することができる。
【００２６】
さらに、検出は、また、抗がん治療の有害効果を監視するのに使用することができる。このような有害効果の大きな部分は、胃腸管上皮又は骨髄造血系の細胞などの正常ではあるが敏感な細胞の、治療で誘発される不適当なアポトーシスによる。
【００２７】
さらに、検出は、腫瘍侵襲性のレベルとしばしば相互に関連する、腫瘍内の本来的に備わったアポトーシス負荷の特徴付けを目指すことができ；且つ転移内で頻繁に発生する本来的に備わったアポトーシスの検出を介して、転移の検出を支援することもできる。
【００２８】
同様に、アポトーシスは、移植片拒絶中の細胞喪失において重要な役割を演じるので、本発明の化合物は、臓器移植後の移植片の生存を監視するのに有用である可能性がある。
【００２９】
さらに、検出は、細胞保護治療に対する応答を監視することを目指し、かくして、種々の疾患（例えば、前に挙げた疾患）において細胞喪失を抑える能力のある薬物のスクリーニング及び開発を、細胞死の評価の測定を可能にすることによって援助することができる。
【００３０】
このアプローチによれば、本発明は、全身、臓器、組織、組織培養物から選択される細胞集団、又は任意のその他の細胞集団におけるＰＮＯＭ細胞の検出方法であって、（ｉ）細胞集団を本発明の実施形態のいずれかによる化合物と接触させること、及び（ｉｉ）細胞集団に結合されている化合物の量を測定することを含み、集団内の細胞に結合されている有意な量の化合物の検出が、該細胞がＰＮＯＭ細胞であることを示す、上記方法に関連している。
【００３１】
本発明の別の実施形態において、本発明は、組織又は細胞培養サンプル中でのＰＮＯＭ細胞のインビトロ又はエクスビボでの検出方法に関連付けられ、該方法は、（ｉ）サンプルを本発明の実施形態による化合物と、化合物をＰＮＯＭ細胞の膜に結合させることを可能にする条件下で接触させること、及び（ｉｉ）細胞に結合されている化合物の量を検出することを含み；結合されている化合物の有意な量の存在は、組織又は細胞培養物内でのＰＮＯＭ細胞の存在を示す。
【００３２】
インビトロ又はエクスビボ研究における検出ステップは、例えば、本発明の蛍光標識化化合物の場合には、限定はされないが、広範に市販されている装置上での細胞の可視化を可能にするフローサイトメトリー分析によることができる。細胞を可視化するのに蛍光を使用する例では、単一の１５ｍＷアルゴンイオンレーザービーム（４８８ｎｍ）を使用してＦＩＴＣの蛍光を励起し、５３０ｎｍのバンドパスフィルターを使用して蛍光データを収集して、ヒストグラムを得る。蛍光性細胞の割合は、例えば、Ｌｙｓｉｓ  ＩＩソフトウェア又は任意のその他のソフトウェアを使用して計算することができる。該検出方法を、本発明の実施形態で、抗がん薬などの治療薬をスクリーニングするのに使用することができる。
【００３３】
結合の作用は、結合の相違を測定する方法にとりわけ依存する。本発明の方法は、例えば、ＰＮＯＭ細胞の出現によって特徴付けられる疾患を診断するのに使用することができるが、前述の疾患のいずれかに限定されるものではない。
【００３４】
本発明の一実施形態によれば、一般式Ａ−Ｂ：
Ａ（二酸の頭部部分）−Ｂ（尾部部分）
で示される化合物が提供され、式中、Ａは二酸の頭部部分であり、Ｂは尾部部分である。
【００３５】
ここで、二酸部分は、対数で表記して約１．５〜３．９の間の第１酸解離定数（ｐＫａ１）及び約５．０〜６．５の間の第２酸解離定数（ｐＫａ２）を有し、二酸部分は、次の構造から選択されるジ−カルボン酸又はジ−テトラゾールを含む：
【化２】
2015516965.tif 000004
【００３６】
ここで、尾部部分は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）であることができ、前記基は場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に結合されており；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる。尾部部分は、診断用マーカー又は治療用薬剤に結合されていてもよい。
【００３７】
本発明の一実施形態による化合物は、式（Ｉ）：
【化３】
2015516965.tif 000005
（式中、Ｒ１１は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基であり、Ｒ１１又はＲ１２のそれぞれは場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に独立に結合されており；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）
で表される。一部の実施形態において、Ｒ１１又はＲ１２のそれぞれは場合によって、診断用マーカー又は前記のような治療用薬剤に独立に結合されている。
【００３８】
一実施形態によれば、式Ｉで表される化合物であって、式中のＲ１１はＨであり、Ｒ１２は、診断用マーカーに場合によって結合されているＣ５−アルキルである化合物が提供される。
【００３９】
本発明の一部の実施形態において、脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルである。
【００４０】
一実施形態によれば、放射標識化された２−（５−１８フルオロペンチリデン）マロン酸である、式Ｉで表される化合物が提供される。
【００４１】
本発明の別の実施形態による化合物は、式（ＩＩ）：
【化４】
2015516965.tif 000006
（式中、Ｒ１１は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基であり、Ｒ１１又はＲ１２のそれぞれは場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に独立に結合されているか；或いはＲ１１又はＲ１２のそれぞれは場合によって、診断用マーカー又は前記のような治療用薬剤に独立に結合されている）
で表される。
【００４２】
本発明の一実施形態によれば、式ＩＩで表される化合物であって、式中のＲ１１がＨ又はＣＨ３であり、Ｒ１２が、診断用マーカーに結合されているＣ５−アルキルである化合物が提供される。
【００４３】
本発明の一実施形態によれば、放射標識化された２−（５−１８フルオロペンチル）−３−メチルマレイン酸である、式ＩＩで表される化合物が提供される。
【００４４】
本発明の一部の実施形態による化合物は、式（ＩＩＩ）：
【化５】
2015516965.tif 000007
（式中、Ｒ１３及びＲ１４は、独立に、Ｈ、Ｃ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１５は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基であり、Ｒ１３、Ｒ１４又はＲ１５のそれぞれは場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に結合されているか、或いはＲ１３、Ｒ１４又はＲ１５のそれぞれは場合によって、診断用マーカー又は前記のような治療用薬剤に結合されている）
で表される。
【００４５】
本発明の一実施形態によれば、式ＩＩＩによって表される化合物であって、式中のＲ１３及びＲ１４がＣＨ３であり、Ｒ１５が、診断用マーカーに結合されているアルキルである化合物が提供される。
【００４６】
一実施形態によれば、放射標識化された２−（５−１８フルオロペンチル）−３−メチレンコハク酸である、式ＩＩＩで表される化合物が提供される。
【００４７】
本発明の別の実施形態による化合物は、式（ＩＶ）：
【化６】
2015516965.tif 000008
（式中、芳香族環Ａｒは、４、５又は６個の原子を含み、カルボキシ基で置換されていない芳香族の環原子は、炭素、窒素、酸素又は硫黄から独立に選択され、Ｒ１２はフッ素原子、脱離基、又は診断用若しくは治療用マーカーであるか、或いはＲ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基であり、Ｒ１２は場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に結合されており、或いはＲ１２は場合によって、診断用マーカー又は前記のような治療用薬剤に結合されている）
で表される。
【００４８】
本発明の実施形態によれば、式ＩＶで表される化合物であって、式中のＡｒがＣ６環であり、Ｒ１２が、診断用マーカーに結合されているＣ３又はＣ５−アルキルである化合物が提供される。
【００４９】
本発明の一実施形態によれば、式ＩＶｐ：
【化７】
2015516965.tif 000009
（式中、Ｘ１は、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラートの、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）
で表される化合物が提供される。本発明の実施形態によれば、これは、放射標識化された分子のための前駆体である。
【００５０】
本発明の実施形態によれば、放射標識化された４−（５−１８フルオロペンチル）フタル酸である、式ＩＶａで表される化合物が提供される。
【００５１】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６３０（ＵＢ−１２４９７）とも呼ばれる式ＩＶｂ：
【化８】
2015516965.tif 000010
で表される化合物（４−（３−１８フルオロプロピル）フタル酸）が提供される。
【００５２】
本発明の別の実施形態による化合物は、式（Ｖ）：
【化９】
2015516965.tif 000011
［式中、Ｒ４は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）であり、Ｒ４又はＲ１２のそれぞれは場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基（該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）に、或いはマーカー又は前記のような治療用薬剤に結合されている］
で表される。
【００５３】
一実施形態によれば、式Ｖで表される化合物であって、式中のＲ４がＣＨ３であり、Ｒ１２が、診断用マーカーに結合されているアルキルである化合物が提供される。
【００５４】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖで表される化合物であって、式中のＲ４が、診断用マーカーに場合によって結合されているＣ１、Ｃ２又はＣ３−アルキルであり、Ｒ１２が、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）である化合物が提供される。
【００５５】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖで表される化合物であって、式中のＲ４がＣＨ３であり、Ｒ１２が、ＤＮＡインターカレーターに結合されているＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６−アルキルである化合物が提供される。本発明の実施形態において、ＤＮＡインターカレーターがベルベリンであるなら、化合物はＡＰＯ−６８１と称される。
【００５６】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖで表される化合物であって、式中のＲ４がＣＨ３であり、Ｒ１２が、チューブリンリガンドに結合されているＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６−アルキルである化合物が提供される。一実施形態において、チューブリンリガンドがコルヒチンであるなら、化合物はＡＰＯ−６９７と称される。
【００５７】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖで表される化合物であって、式中のＲ４がＣＨ３であり、Ｒ１２が、例えばＨｓｐ９０などの熱ショックタンパク質リガンドに結合されているＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６−アルキルである化合物が提供される。
【００５８】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖで表される化合物であって、式中のＲ４がＣＨ３であり、Ｒ１２が、限定はされないがアザシチジンなどのＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤に結合されているＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６−アルキルである化合物が提供される。
【００５９】
本発明の一実施形態によれば、放射標識化された２−（４−（１８フルオロメチル）フェネチル）−２−メチルマロン酸である化合物が提供される。
【００６０】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６２３（ＵＢ−１２７５１）とも称される、式Ｖｂ：
【化１０】
2015516965.tif 000012
で表される化合物が提供される。一部の実施形態において、ＡＰＯ−６２３は、１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで１８Ｆ放射標識化されていてもよい。
【００６１】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖｂｐ：
【化１１】
2015516965.tif 000013
（式中、Ｘ１及びＸ２のそれぞれは、独立に、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラー、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）
で表される化合物が提供される。一実施形態によれば、脱離基は、１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで置換されていてもよい。
【００６２】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６２３分子が１８Ｆで放射標識化されている、式Ｖｂ’：
【化１２】
2015516965.tif 000014
で表される化合物が提供される。
【００６３】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６２３分子が１８Ｆで放射標識化されている、式Ｖｂ’’：
【化１３】
2015516965.tif 000015
で表される化合物が提供される。
【００６４】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６４６（ＵＢ−１２８１８）とも称される、式Ｖｃ：
【化１４】
2015516965.tif 000016
で表される化合物が提供される。一部の実施形態において、ＡＰＯ−６４６は、１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで１８Ｆ放射標識化されていてもよい。
【００６５】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖｃｐ：
【化１５】
2015516965.tif 000017
（式中、Ｘ１は、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）
で表される化合物が提供される。
【００６６】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６４６分子が１８Ｆで放射標識化されている、式Ｖｖｃ’：
【化１６】
2015516965.tif 000018
で表される化合物が提供される。
【００６７】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６５０（ＵＢ−１３２９５）とも称される、式Ｖｄ：
【化１７】
2015516965.tif 000019
で表される化合物が提供される。一部の実施形態において、ＡＰＯ−６５０は、１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで１８Ｆ放射標識化されていてもよい。
【００６８】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖｄｐ：
【化１８】
2015516965.tif 000020
（式中、Ｘ１及びＸ２のそれぞれは、独立に、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）
で表される化合物が提供される。
【００６９】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６５０分子がさらに１８Ｆで放射標識化されている、式Ｖｄ’：
【化１９】
2015516965.tif 000021
で表される化合物が提供される。
【００７０】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６５０分子が１８Ｆで放射標識化されている、式Ｖｄ’’：
【化２０】
2015516965.tif 000022
で表される化合物が提供される。
【００７１】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６８１とも称される、式Ｖｅ：
【化２１】
2015516965.tif 000023
で表される化合物が提供される。一部の実施形態において、ＡＰＯ−６８１は、１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで１８Ｆ放射標識化されていてもよい。
【００７２】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖｅｐ：
【化２２】
2015516965.tif 000024
（式中、Ｘ１は、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）
で表される化合物が提供される。
【００７３】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６８１分子がさらに１８Ｆで放射標識化されている、式Ｖｅ’：
【化２３】
2015516965.tif 000025
で表される化合物が提供される。
【００７４】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６９７とも称される、式Ｖｆ：
【化２４】
2015516965.tif 000026
で表される化合物が提供される。一部の実施形態において、ＡＰＯ−６９７は、１８Ｆ又は１８Ｆ−Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキルで１８Ｆ放射標識化されていてもよい。
【００７５】
本発明の一実施形態によれば、式Ｖｆｐ：
【化２５】
2015516965.tif 000027
（式中、Ｘ１及びＸ２のそれぞれは、独立に、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；該脱離基は、メスルホナート、例えば、シラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）
で表される化合物が提供される。
【００７６】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６９７分子が１８Ｆで放射標識化されている、式Ｖｆ’：
【化２６】
2015516965.tif 000028
で表される化合物が提供される。
【００７７】
本発明の一実施形態によれば、ＡＰＯ−６９７分子がさらに１８Ｆで放射標識化されている、式Ｖｆ’’：
【化２７】
2015516965.tif 000029
で表される化合物が提供される。
【００７８】
本発明の別の実施形態による化合物は、式（ＶＩ）：
【化２８】
2015516965.tif 000030
（式中、シクロアルキルＡＬは、３、４、５又は６個の炭素を含み、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基であって、場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に場合によって結合されており；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができ；或いはＲ１２は場合によって、診断用マーカー又は前記のような治療用薬剤に結合されている）
で表される。
【００７９】
本発明の別の実施形態による化合物は、式（ＶＩＩ）：
【化２９】
2015516965.tif 000031
［式中、Ｒ４は、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３−アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８又はＣ９−アルキル又はアルキレン基（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）であり、Ｒ４又はＲ１２のそれぞれは場合によって、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基に結合されており；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができ；或いは一部の実施形態において、Ｒ４又はＲ１２のそれぞれは場合によって、診断用マーカー又は前記のような治療用薬剤に結合されている］
で表される。
【００８０】
本発明の一実施形態によれば、Ｒ４はＣＨ３であり、Ｒ１２は診断用マーカーに結合されているＣ４アルキルである。
【００８１】
本発明の一実施形態によれば、５，５'（ヘプタン−２，２−ジイル）ビス（１Ｈ−テトラゾール）である、式ＩＩａ：
【化３０】
2015516965.tif 000032
で表される化合物が提供される。
【００８２】
本発明の一実施形態によれば、式ＶＩＩａｐ：
【化３１】
2015516965.tif 000033
（式中、Ｘ１及びＸ２のそれぞれは、独立に、Ｈ、脱離基、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルキル脱離基、又はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５若しくはＣ６−アルコキシ脱離基から選択され；該脱離基は、スルホナート、例えば、メシラート、トシラート、ノシラート若しくはブロシラート、又はニトロ若しくはハロゲンで置換されたフェニルであることができる）
で表される化合物が提供される。
【００８３】
本発明の一実施形態によれば、分子がさらに１８Ｆで放射標識化されており、５，５'（７−１８フルオロヘプタン−２，２−ジイル）ビス（１Ｈ−テトラゾール）と、さらにはＡＰＯ−６００（ＵＢ−１２４９５）とも称される、式ＶＩＩａ’：
【化３２】
2015516965.tif 000034
で表される化合物が提供される。
【００８４】
本発明の一部の実施形態によれば、本発明の化合物（該化合物は診断用マーカーに結合されている）を対象に投与すること、並びにＸ線、ＣＴスキャン、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及び陽子放出断層撮影（ＰＥＴ）の中の１つ又は複数から選択される画像処理技術を使用して対象を画像処理することを含む、対象におけるがんを検出する方法が提供される。
【００８５】
本発明の一部の実施形態によれば、本発明の実施形態による化合物（該化合物は、診断用マーカーに結合されている）を化学療法による治療の前、間及び後に対象に投与すること、並びにＸ線、ＣＴスキャン、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及び陽子放出断層撮影（ＰＥＴ）の中の１つ又は複数から選択される画像処理技術を使用して対象を画像処理することを含む、対象におけるがん治療を監視する方法が提供され、ここで、治療の後又は間での画像処理のシグナルの低下は、化学療法での治療が成功していることを示す。
【００８６】
本発明の一部の実施形態において、放射標識化されていない状態の本発明の化合物を、放射標識化するための手段と一緒に含むキットが提供される。
【００８７】
画像処理用マーカーとして使用される１８Ｆなどの特定の放射性同位体の短い半減期のため、例えば、臨床的ＰＥＴ画像法の目的でのこのようなマーカーの結合は、患者への診断用化合物の投与の直前に実施される可能性がある。したがって、患者へ投与する前に１８Ｆなどの放射性同位体で置換される予定の部分を含む前駆体を合成することが有用である可能性がある。
【００８８】
例１の化合物５、例５の化合物５、及び例６の化合物５は、本発明の実施形態による前駆体の例である。
【００８９】
一実施形態において、式（ＶＩＩＩ）：
【化３３】
2015516965.tif 000035
（式中、Ｒは、前記の化合物のいずれかを表し、Ｘは、脱離基、例えば、ハライド、例えば、Ｂｒ若しくはＣｌ、又はスルホナート、例えば、メシラート、トシラート及びトリフラートである）
の前駆体化合物が提供される。一部の実施形態によれば、化合物の官能基を、保護基で保護することができる。
【００９０】
２種の例示的前駆体を、式ＶＩＩＩ’及びＶＩＩＩ’’：
【化３４】
2015516965.tif 000036
の化合物で示す。
【００９１】
式中、Ｒ１１及びＲ４は、それぞれ独立に、Ｈ又はＣ１、Ｃ２若しくはＣ３アルキルであり、Ｒ１２は、直鎖又は分枝鎖Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８若しくはＣ９−アルキル又はアルキレン（１つ又は２つの環を含むアリール又はヘテロアリールで置換されていてもよい）であり；Ｙは、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ベンジルなどの保護基であり；Ｘは、脱離基、例えば、ハライド、例えば、Ｂｒ若しくはＣｌ又はスルホナート、例えば、メシラート、トシラート及びトリフラートである。
【００９２】
ＰＥＴ画像法のために前駆体を１８Ｆで標識する方法は、１８Ｆ原子を前駆体に結合し、それによって化合物をＰＥＴ画像法のために１８Ｆで放射標識化するステップを含む。１８Ｆ原子を前駆体へ結合することは、クリプトフィックス（Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ）を介するフッ素化など、公知の方法で行うことができる。任意選択で、前駆体の官能基を、１８Ｆ原子を結合するステップに先立って、適切な保護基で保護することができる。その後、１８Ｆ原子の結合ステップの後に、前記保護基を除去してもよい。
【００９３】
マーカーが金属原子（例えば、それぞれＭＲＩ又はＳＰＥＣＴのためのＧｄ、９９ｍＴｃ又はオキソ−９９ｍＴｃ）である場合、化合物は金属キレート剤を含む。キレート剤中の金属配位原子は、窒素、硫黄又は酸素原子であることができる。本発明の実施形態において、キレート剤は、ジアミンジチオール、モノアミン−モノアミド−ビスチオール（ＭＡＭＡ）、トリアミド−モノチオール、及びモノアミン−ジアミド−モノチオールである。このような場合、金属原子との錯形成の前にキレート剤に結合されている又はキレート剤を含む化合物である化合物−キレート前駆体、及び金属原子を含む錯体の双方は、本発明の範囲に包含される。
【００９４】
蛍光で検出する場合、本発明の化合物は、当技術分野で公知の任意の蛍光プローブから選択される蛍光基を含むことができる。このようなプローブの例が、５−（ジメチルアミノ）ナフタレン−１−スルホニルアミド（ダンシル−アミド）、及びフルオレセインである。
【実施例】
【００９５】
本発明を理解し、それを実際にどのように実施できるかを知るために、次の実施例を記載する。実施例は、本発明の化合物の合成を対象とし、実施例は、本発明の化合物が死滅過程にある細胞へ選択的に結合する能力を対象とする。
（例１）
２−（５−フルオロペンチリデン）マロン酸（式Ｉの化合物の例示的実施形態）の合成
【化３５】
2015516965.tif 000037
【００９６】
３ｇの５−ヒドロキシペンタナール（１）を１．５当量の３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン及び０．１当量のｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（ＰＰＴＳ）と１３５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中で処理する。類似の合成において、出発化合物として他のヒドロキシアルカナール（典型的には、分枝鎖又は直鎖Ｃ２−１０アルキル）を使用して、他の実施形態の式Ｉの化合物を得ることができる。後処理及び精製の後、１．４５ｇ（３３％）の生成物（２）が得られる。１．０当量のマロン酸ジエチルの無水ＴＨＦ溶液に窒素下で２当量のＮａＨを添加し、１０分後に１．０当量のアルデヒド（２）を添加する。反応混合物を還流し、１０時間後に、完全な転化を観察することができ、９０％の収率がもたらされる。ＰＰＴＳを用いるテトラヒドロピラン（ＴＨＰ）の脱保護は、エタノール中、５５℃で行われる。後処理後、アルコール（４）を定量的収率で得て、それをメシル化反応にそのまま使用することができる。メシラート（５）を得て、クリプトフィックスを介するフッ素化を実施する。化合物（６）を、７５％の収率で得て、これを酸性条件下で加水分解してその対応する二酸（７）とすることができる。
【００９７】
２−（５−フルオロペンチリデン）マロン酸化合物の１Ｈ  ＮＭＲ［例えば、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ４００（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳが内部標準］は以下の結果を示す：δ 1.29 (m, 2H, CH2), 1.49 (m, 2H, CH2), 2.18 (m, 2H, CH2), 4.09 (m, 2H, CH2F), 7.00 (t, 1H, C=CH), 11.00 (s, 2H, COOH).
（例２）
２−（５−フルオロペンチル）−３−メチルマレイン酸（式ＩＩの化合物の例示的実施形態）の合成
【化３６】
2015516965.tif 000038
【００９８】
５−フルオロペンチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中１Ｍ溶液０．６ｍＬ、１．２ミリモル）を、臭化第一銅−ジメチルスルフィド複合体（ＣｕＢｒ・Ｍｅ２Ｓ、０．２５ｇ、１．２０ミリモル）のＴＨＦ（６ｍＬ）懸濁液に−４０℃で滴加する。生じる懸濁液を−４０℃で２時間撹拌し、次いで−７８℃まで冷却し、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の新たに蒸留されたアセチレンジカルボン酸ジメチル（０．１４ｇ、１．００ミリモル）を滴加する。反応混合物を４０分間撹拌し、次いでＨＭＰＡのＴＨＦ溶液（１：１、２ｍＬ）を添加すると、不均一混合物が生じるが、ほとんど均一になる。続いて、ＭｅＩ（２．５ミリモル、０．３６ｇ、０．１６ｍＬ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を添加し、撹拌を−７８℃で５分間継続する。混合物を室温まで一夜温めた後に、反応混合物に飽和ＮＨ４Ｃｌ水（２ｍＬ、１０％アンモニア水でｐＨ８に調整された）を−２０℃で添加する。混合物を２０℃で３０分間撹拌し、次いで、エーテルと水との間に分配させる。水層をエーテル（３×１０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を、さらなるＮＨ４Ｃｌ水（２０ｍＬ）、水（２×２０ｍＬ）及びブライン（２０ｍＬ）で逐次的に洗浄する。乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮、及びフラッシュカラムクロマトグラフィーでの精製により、３６５ｍｇの化合物（２）を得ることができる。
【００９９】
他の出発原料、例えば、Ｂ−Ｃ１−９マグネシウムクロリド（Ｂは、マーカー、又は薬剤など他の物質である）及び臭化第一銅・ジ−（Ｃ１−３）スルフィド複合体を使用して、式ＩＩの他の実施形態の化合物を得ることができる。
【０１００】
化合物（２）（５０ｍｇ）のＴＨＦ−Ｈ２Ｏ（１：１、２ｍＬ）溶液に１．０Ｎ  ＬｉＯＨ（２当量）を添加し、ＴＬＣで出発原料の消失が示されるまで、混合物を室温で撹拌する。溶媒を真空で除去し、残存している固体を、酸性Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）に溶解する。この溶液を凍結乾燥して、化合物（３）（Ｅ及びＺ異性体）を得る。
【０１０１】
２−（５−フルオロペンチル）−３−メチルマレイン酸化合物の１Ｈ  ＮＭＲ［例えば、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ４００（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳが内部標準］は以下の結果を示す：δ 1.29 (m, 4H, CH2), 1.49 (m, 2H, CH2), 2.41 (t, 2H, =CCH2), 2.43 (s, 3H, =CCH3), 4.09 (m, 2H, CH2F), 11.00 (s, 2H, COOH).
（例３）
２−（５−フルオロペンチル）−３−メチレンコハク酸（式ＩＩＩの化合物の例示的実施形態）の合成
【化３７】
2015516965.tif 000039
【０１０２】
他の出発原料、例えば、Ｂ−Ｃ１−９マグネシウムブロミド錯体（Ｂは、マーカー、又は薬剤のような他の物質である）を使用して、式ＩＩＩの他の実施形態の化合物を得ることができる。
（例４）
４−（５−フルオロペンチル）フタル酸（式ＩＶの化合物の例示的実施形態）の合成
【化３８】
2015516965.tif 000040
【０１０３】
化合物（１）（３１．１３ｇ）のＭｅＯＨ（４００ｍＬ）溶液にアルゴン下でＰｄ／Ｃ（１．０２ｇ）を添加する。次いで、フラスコに水素ガスを仕込み、反応混合物を水素雰囲気化に、室温で２４時間撹拌する。次いで、反応混合物を、セライトを使用して濾過し、濾液を真空下で濃縮する。化合物（２）を２５．１６ｇ（９１％）の収量で得ることができる、化合物（２）（２４．９９ｇ）を含むフラスコに希ＨＣｌ（２００ｍＬ）を徐々に添加する。反応混合物を、室温で１時間撹拌し、−１０℃まで冷却する。次いで、反応混合物に、ＮａＮＯ２（１１．１８ｇ）のＨ２Ｏ（７０ｍＬ）溶液を５℃で徐々に添加し、−１０℃で３０分間撹拌する。生じる混合物を、ＫＩ（３５．９６ｇ）のＨ２Ｏ（３００ｍＬ）溶液を含む別のフラスコに徐々に添加する。添加を終了した後、混合物を３０分間撹拌する。次いで、有機層をＥｔ２Ｏで３回抽出し、続いて飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥する。濾過し、溶媒を蒸発させた後、生じる粗生成物を、溶離液としてＣＨＣｌ３を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物（３）を２９．３ｇ（８０％）の収量で得ることができる。化合物（３）（５．０１ｇ）のヨウ化５−フルオロペンチル（３．３８ｇ）、Ｃｕ（２．８１ｇ）、２，２−ビピリジン（０．４８ｇ）及びＤＭＳＯ（２０ｍＬ）との混合物をアルゴン下に１１０℃で３２時間撹拌する。冷却された後、反応物を、セライトを使用して濾過し、有機物をＥｔ２Ｏで抽出し、続いてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥する。粗生成物を、溶離液としてＣＨＣｌ３を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物（４）を７．６２ｇ（８３％）の収量で得る。化合物（４）（０．５０ｇ）、３０％ＫＯＨ水溶液（１５ｍＬ）及びＭｅＯＨ（１０ｍＬ）の混合物を９０℃で２４時間撹拌する。次いで、反応混合物を、容積が１０ｍＬに減少するまで濃縮し、濃ＨＣｌで酸性とする。次いで、生じる混合物を濾過し、ＣＨＣｌ３で洗浄し、溶媒を蒸発させて、化合物（５）を０．４５５ｇ（９９．５％）の収量で得る。出発化合物として他の化合物を使用して、同様の合成で、式ＩＶの他の実施形態の化合物を得ることができる。
【０１０４】
４−（５−フルオロペンチル）フタル酸化合物の１Ｈ  ＮＭＲ［例えば、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ４００（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳが内部標準］は以下の結果を示す：δ 1.29 (m, 2H, CH2), 1.49 (m, 2H, CH2), 1.59 (m, 2H, CH2), 2.62 (m, 2H, CH2-Ar), 4.09 (m, 2H, CH2F), 7.37-7.61 (m, 3H, Ar), 11.00 (s, 2H, COOH).
（例４ａ）
４−（１，１，２，２−テトラトリチウム−３−フルオロプロピル）ベンゼン−１，２−ジカルボン酸（式ＩＶａの化合物）の合成
【化３９】
2015516965.tif 000041
【０１０５】
４−ブロモベンゼン−１，２−ジカルボン酸１，２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２５５５）の合成
５ｇ（２０．４ミリモル、１当量）の４−ブロモフタル酸及び５０ｍＬの乾燥ＤＣＭを高圧反応器中に仕込んだ。濃硫酸（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を−７０℃まで冷却した。３０ｍＬのイソブチレンを凝縮させ、混合物に一度に添加した。反応混合物を、密閉した反応器中、室温で一夜撹拌した。次いで、ＴＬＣで反応を調べると、出発原料の完全な消失を示した。反応器を開け、混合物を撹拌して残留イソブチレンを放出させた。混合物に６０ｍＬの１０％ＮａＯＨ水溶液を添加し、ＤＣＭを蒸発させた。残留物を２×８０ｍＬの酢酸エチルで抽出し、合わせた有機物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。濃縮後に、帯黄褐色オイルを得た。収量：７．３ｇ（２０．５ミリモル、１００％）。
【０１０６】
４−（３−ヒドロキシプロパ−１−イン−１−イル）ベンゼン−１，２−ジカルボン酸１，２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２５７０）の合成
７．３ｇ（２０．５ミリモル、１当量）のＵＢ−１２５５５を７５ｍＬの乾燥トルエンに溶解した。溶液を脱気し、アルゴンで不活性雰囲気とした。溶液に、１．２９ｍＬ（２２ミリモル、１．１当量）のプロパルギルアルコール、０．１５ｇ（０．８ミリモル、０．０４当量）のヨウ化銅（Ｉ）、３．６５ｍＬ（２６ミリモル、１．３当量）のトリエチルアミン、及び１．１６ｇ（１ミリモル、０．０５当量）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）を添加した。反応混合物を８０℃まで加熱し、一夜撹拌した。混合物を、セライトの詰め物を通し、濾液を２×４０ｍＬの１Ｍ  ＨＣｌ水溶液で洗浄した。濃縮された粗生成物をカラムクロマトグラフィー（２２０ｇのシリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製した。収量：３．８ｇ（１１．４ミリモル、５５．６％）。
【０１０７】
４−（３−フルオロプロパ−１−イン−１−イル）ベンゼン−１，２−ジカルボン酸１，２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２５７２）の合成
１．３ｇ（３．９ミリモル、１当量）のＵＢ−１２５７０を１５ｍＬのＤＣＭに溶解し、溶液を０℃まで冷却した。溶液に１．２ｍＬ（９ミリモル、２．３当量）のＤＡＳＴを添加し、冷却された反応混合物を１時間撹拌し、次いで、室温に戻し、一夜撹拌すると、反応は完結していた。混合物を、１５ｍＬの氷冷ＮａＨＣＯ３水溶液に滴加した。層を分離し、有機相を濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（２０ｇのシリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、予想される生成物を明黄色オイルとして得た。収量：４１０ｍｇ（１．２３ミリモル、３１．４％）。
【０１０８】
４−（３−フルオロプロパ−１−イン−１−イル）ベンゼン−１，２−ジカルボン酸（ＵＢ−１２５７３）の合成
４１０ｍｇ（１．２３ミリモル、１当量）のＵＢ−１２５７２のＤＣＭ（８ｍＬ）溶液に、４ｍＬのＴＦＡを添加し、混合物を２時間撹拌した。ＴＬＣは、反応の完結を示した。反応混合物を濃縮し、残留物を３ｍＬのヘプタンに懸濁した。懸濁液を濾過し、ヘプタンで洗浄し、乾燥した。淡褐色固体が得られた。収量：２７５ｍｇ（１．２３ミリモル、１００％）。
【０１０９】
［３Ｈ］ＡＰＯ−６３０の合成
ＵＢ−１２５７３（３ｍｇ）を３ｍＬのエタノールに溶解し、２．５ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃ触媒を添加した。混合物をトリチウムガスと４時間反応させた。触媒を濾別し、混合物を濃縮した。粗材料にエタノールを添加し、再び濃縮して、移動できるトリチウムを除去した。残留物をエタノールに再溶解し、ＨＰＬＣで精製した。
【０１１０】
５回の分取注入から集めた生成物画分を、注意深く濃縮し、５ｍＬ（重量で測定して）のＨＰＬＣ級エタノールに再溶解し、全放射能を測定し、６．６ｍＣｉであることが見出された。溶液を重量で測定して６．６ｍＬまで希釈した（１．０ｍＣｉ／ｍＬ）。
トリチウム化されたヨウ化メチルを非放射性ヨウ化メチルで置き換えると非放射性類似体ＡＰＯ−６３０をもたらすであろう。
（例５）
２−（４−（フルオロメチル）フェネチル）−２−メチルマロン酸（式Ｖのの化合物の例示的実施形態）の合成
【化４０】
2015516965.tif 000042
【０１１１】
他の化合物を出発化合物として使用し、同様の合成で、式Ｖの他の実施形態の化合物を得ることができる。
（例５ａ）
｛２−［４−（メチル）フェニル］１，１，２，２−テトラトリチウム−エチル｝−２−メチルプロパン二酸（式Ｖａの化合物）の合成
【化４１】
2015516965.tif 000043
【０１１２】
［（４−ブロモフェニル）メトキシ］（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシラン（ＵＢ−１２５８９）の合成
アルゴン雰囲気中で、２０．０ｇ（１０７ミリモル、１当量）の４−ブロモベンジルアルコールを８０ｍＬのＤＣＭに溶解した。溶液を水浴中に浸け、室温で撹拌した。溶液に、１４．６ｇ（２１４ミリモル、２当量）のイミダゾールを添加し、続いてｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（１６．１ｇ、１０７ミリモル、１当量、４０ｍＬのＤＣＭに溶解された）を滴加した。１時間後、ＧＣによれば、反応は完結していた。反応混合物を、１００ｍＬの水、次いで１００ｍＬの１Ｍ  ＨＣｌ水溶液、１００ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、最後に１００ｍＬのブラインで洗浄した。有機溶液をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮した。淡黄色オイルが得られた。収量：３１．５ｇ（１０４．５ミリモル、９７．６％）。
【０１１３】
［２−（４−｛［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］メチル｝フェニル）エチニル］トリメチルシラン（ＵＢ−１２５９０）の合成
３１．５ｇ（１０４．５ミリモル、１当量）のＵＢ−１２５８９を１２０ｍＬのトリエチルアミンに溶解した。溶液に、０．４ｇ（２．１ミリモル、０．０２当量）のヨウ化銅（Ｉ）及び２．４ｇ（２．１ミリモル、０．０２当量）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）を添加し、反応混合物を脱気し、続いてアルゴンで不活性雰囲気とした。溶液に、１５．２ｍＬ（１０９．７ミリモル、１．０５当量）のＴＭＳ−アセチレンを一度に添加した。生じた褐色懸濁液を予熱された油浴（７０℃）に浸けた。１時間後に反応物をサンプリングすると、ＧＣで反応は観察されなかった。７０℃で一夜撹拌した後に、反応を再度評価すると、完結していることが見出された。反応混合物を室温まで冷却し、セライトの詰め物を通して濾過した。詰め物を１００ｍＬのメタノールで洗浄した。溶液を合わせ、濃縮し、１００ｍＬのｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（ＭＴＢＥ）に再溶解した。溶液を濾過し（無機塩を除去するため）、濃縮した。粗材料を、いかなる精製もせずに、次の合成ステップで使用した。
【０１１４】
ｔｅｒｔ−ブチル［（４−エチニルフェニル）メトキシ］ジメチルシラン（ＵＢ−１２５５１）の合成
粗品ＵＢ−１２５９０を１００ｍＬのメタノールに溶解し、溶液に１ｇのＫ２ＣＯ３を添加した。混合物を外界温度で１時間撹拌し、次いでサンプリングした。ＧＣによれば、ＴＭＳ保護基の開裂は完了していた。反応混合物を、セライトの詰め物を通して濾過し、濾液をシリカゲル及び活性炭で清澄化した。材料を、カラムクロマトグラフィー（３６ｇのシリカゲル、ｎ−ヘキサン：トルエン＝４：１）を使用してさらに精製した。収量：１４．５ｇ、ＧＣ：８６．４％。
【０１１５】
｛［４−（２−ブロモエチニル）フェニル］メトキシ｝（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシラン（ＵＢ−１２５５４）の合成
バッチＳＩ−１４６８．１２からの１４ｇのＵＢ−１２５５１を８５ｍＬの乾燥アセトンに溶解した。混合物に０．３３ｇ（１．９５ミリモル、約０．０４当量）のＡｇＮＯ３を添加した。反応混合物を、アルゴン雰囲気下に室温で撹拌し、９．５７ｇ（５３．７４ミリモル、約１．１当量）のＮ−ブロモスクシンイミドを５０分間にわたって５分割して添加し、次いで、混合物をさらに９０分間撹拌した。反応物をサンプリングし、ＴＬＣにより反応の完結が見出された。
【０１１６】
反応混合物を４５０ｍＬのヘプタン中に注ぎ入れ、１０分間撹拌した。生じたスラリーを濾過し、濾液をシリカゲルで清澄化した。収量：１８．１ｇ（粗生成物、＞１００％）。
【０１１７】
２−メチルプロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２５２７）の合成
５．０ｇ（２３ミリモル、１当量）のマロン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを２５ｍＬのＤＣＭに溶解した。溶液に、２５ｍＬの５０％ＮａＯＨ水溶液及び７８５ｍｇ（２．３ミリモル、０．１当量）の硫酸水素テトラブチルアンモニウムを添加した。撹拌された混合物に１．６ｍＬ（２５．４ミリモル、１．１当量）のヨウ化メチルを一度に添加し、混合物を室温で一夜撹拌した。ＧＣで反応を評価すると、反応は不完全であることが見出された。さらに０．２ｍＬのヨウ化メチルを添加し、３時間後に、次の反応チェックは、出発原料であるマロン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの完全消失を示した。氷冷された反応混合物に４０ｍＬの水を添加し、相を分離し、水層を２×２５ｍＬのＤＣＭで抽出した。合わせた有機相を、水及びブラインで洗浄し、次いで濃縮した。濃縮中に、結晶の形成が観察され、それゆえ材料を２０ｍＬのＭＴＢＥに再溶解した。溶液を２０ｍＬの水で洗浄し、次いで、水相を２×２０ｍＬのＭＴＢＥで逆抽出した。合わせた有機物を濃縮した。収量：５．０ｇ（約１８．２ミリモル、約７９．１２％）。
【０１１８】
２−［２−（４−｛［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］メチル｝フェニル）−エチニル］−２−メチルプロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２６８２）の合成
１５ｍＬの乾燥ＴＨＦ中の５．０ｇ（約１８．２ミリモル、１．５当量）のＵＢ−１２５２７に９．１ｍＬのビス（トリメチルシリル）アミドナトリウム（１８．２ミリモル、１．５当量、ＴＨＦ中２Ｍ）を滴加し、混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物に、ＵＢ−１２５５４の乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を１５分にわたって添加した。ＴＬＣで反応を監視した。３．５時間後（ＴＬＣによれば約７０％の転化）に、６０ｍＬの飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を添加して反応を止めた。有機層を分離し、水層を３×２０ｍＬのＭＴＢＥで洗浄した。合わせた有機相を、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濃縮した。粗生成物をトルエンで溶離する２１ｇのシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーで精製した。収量：３．５ｇ。ＥＳＩ−ＭＳで同定した（［Ｍ＋Ｎａ］＋：４９７）。
【０１１９】
２−｛２−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチニル｝−２−メチルプロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２６８３）の合成
ＵＢ−１２６８２（３．５ｇ）を１０ｍＬの乾燥ＴＨＦに溶解し、フラスコをアルゴンで不活性雰囲気にした。溶液に、７．４ｍＬ（７．４ミリモル、約１当量）のテトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＨＦ中１Ｍ）を添加し、ＴＬＣで、室温でのＴＢＤＭＳ保護基の開裂を監視した。反応は２．５時間で完結した。溶液を濃縮し、２５ｍＬのＭＴＢＥと１０ｍＬの水との間に分配させた。有機相を、３×１０ｍＬの水及び１０ｍＬのブラインでさらに洗浄した。有機溶液をＭｇＳＯ４上で乾燥し、濃縮した。収量：２．３ｇ（６．４ミリモル）。
【０１２０】
２−｛２−［４−（フルオロメチル）フェニル］エチニル｝−２−メチルプロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２６８４）の合成
ＵＢ−１２６８３（１．５ｇ、４．２ミリモル、１当量）を乾燥ＤＣＭに溶解し、溶液を−７０℃未満まで冷却し、２ｍＬのＤＣＭに溶解した０．８ｍＬ（６．２ミリモル、１．５当量）のＤＡＳＴを添加した。温度を−７０℃未満で１時間維持し、次いで反応物をサンプリングし、ＴＬＣでチェックした。出発原料の転化は完全であった。反応混合物を、５０ｍＬの氷冷Ｎａ２ＣＯ３中に注ぎ入れ、相を分離し、次いで、水層を２×２０ｍＬのＤＣＭで抽出した。有機物を合わせ、濃縮し、粗生成物を、３０ｇのシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）を使用して精製した。収量：２５０ｍｇ（０．６９ミリモル、１６．７％）。
【０１２１】
２−｛２−［４−（フルオロメチル）フェニル］エチニル｝−２−メチルプロパン二酸（ＵＢ−１２５６０）の合成
２００ｍｇのＵＢ−１２６８４を２ｍＬのＴＦＡに溶解し、反応物を１時間撹拌し、ＴＬＣで反応の完結を見出した。サンプルを濃縮して、褐色オイルを得た。粗のＵＢ−１２５６０をＬＣ−ＭＳで分析し、１８．８０のピークを予想生成物として同定した（［Ｍ−Ｈ］：２４９）。
【０１２２】
［３Ｈ］ＡＰＯ−６２３の合成
ＵＢ−１２５６０（７．８ｍｇ）を３ｍＬのエタノールに溶解し、３ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃ触媒を添加した。混合物を、トリチウムガスと３時間反応させた。触媒を濾別し、混合物を濃縮した。粗材料にエタノールを添加し、再び濃縮して、移動できるトリチウムを除去した。残留物をエタノールに再溶解し、ＨＰＬＣで精製した。４回の分取注入から集められた生成物画分を、注意深く濃縮し、３ｍＬ（重量で測定して）のＨＰＬＣ級エタノールに再溶解し、全放射能を測定し、６．５ｍＣｉであることが見出された。溶液を重量で測定して６．５ｍＬに希釈した（１．０ｍＣｉ／ｍＬ）。
トリチウムガスを水素ガスで置き換えると、非放射性類似体ＡＰＯ−６２３がもたらされるであろう。
（例５ｂ）
［５−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）ペンチル］プロパン二酸２−トリトリチウムメチル（式Ｖｄの化合物）の合成
【化４２】
2015516965.tif 000044
【０１２３】
２−ニトロ−１−｛５−［（トリメチルシリル）オキシ］ペンチル｝−１Ｈ−イミダゾール（ＵＢ−１２８２０）の合成
２−ニトロイミダゾール（２．０ｇ、１７．７ミリモル、１当量）を１７０ｍＬのアセトニトリル及び４０ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した。溶液に、［（５−ブロモペンチル）オキシ］トリメチルシラン（ＵＢ−１２８１９、７．４６ｇ、３１．０ミリモル、１．７５当量）及び７．３７ｇ（５３．０７ミリモル、３．０当量）の炭酸カリウムを添加した。反応混合物を６０℃で２４時間撹拌した。ＩＰＣ（ＴＬＣ、ヘキサン：アセトン＝１：１）は、反応の完結を示した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーで精製した。収量：３．０６ｇ（１１．２６ミリモル、６３．６％）の明黄色オイル。同定：ＥＳＩ−ＭＳ（［Ｍ＋Ｈ＋］＝２７２、［Ｍ＋Ｎａ＋］＝２９４）。
【０１２４】
１−（５−クロロペンチル）−２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール（ＵＢ−１２９０８）の合成
表題化合物は、ＵＢ−１２８２０の脱保護、及び形成されたアルコールとトシルクロリドとの反応の副生成物として形成された。トシラートは、少量成分としてのみ形成された。６０６ｍｇ（２．２３ミリモル、１．０当量）のＵＢ−１２８２０を１０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、６．７ｍＬ（３当量）の１Ｍテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド／テトラヒドロフラン溶液を添加した。混合物を、外界温度で４時間撹拌し、ＴＬＣで監視した。反応が完結した後、テトラヒドロフランを蒸発させ、１０ｍＬのジクロロメタンを添加し、１０ｍＬの水で４回洗浄した。１回目の水相を１０ｍＬのジクロロメタンで２回抽出した。有機相を合わせ、溶媒を蒸発させた。３回、１０ｍＬのイソプロパノールを、次いで５ｍＬのメタノールを生成物から蒸発させた。５１０ｍｇの生成物を黄色オイルとして単離した。オイルを２０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、溶液に、５８９ｍｇ（３．１ミリモル、１．４当量）のｐ−トルエンスルホニルクロリド及び７２０μＬ（５．１ミリモル、２．３当量）のトリエチルアミンを添加し、外界温度で撹拌した。ＴＬＣは、反応が徐々に進行することを示した。５時間後、温度を３７℃まで上昇させた。一夜撹拌した後、反応は完結していなかったが、ＴＬＣは、複数の成分を示しているので後処理に供した。反応混合物を１０ｍＬのブラインで４回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーで分画した。工程を、１．４ｇのＵＢ−１２８２０を使用して繰り返した。単離された生成物を合わせ、３３８ｍｇのＵＢ−１２８２１及び５３１ｍｇのＵＢ−１２９０８を単離し、後者を、ＵＢ−１２９０９を合成するための出発原料として選択した。収率（ＵＢ−１２９０８）：３３．２％。同定：ＥＳＩ−ＭＳ（［Ｍ＋Ｈ＋］＝２１８、［Ｍ＋Ｎａ＋］＝２４０、［Ｍ＋ＭｅＯＨ＋Ｎａ＋］＝２７２、［２Ｍ＋Ｎａ＋］＝４５７）。
【０１２５】
１−（５−ヨードペンチル）−２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール（ＵＢ−１２９０９）の合成
ＵＢ−１２９０８（５３１ｍｇ、２．４４ミリモル）を２０ｍＬのアセトンに溶解し、７１８ｍｇのヨウ化ナトリウム（４．８ミリモル、２当量）を添加した。混合物を５８℃で２４時間撹拌した。固体を濾過し、アセトンで洗浄し、転化率を計算した。転化率は約６０％であったので、３５９ｍｇのヨウ化ナトリウム（２．４ミリモル、１当量）を追加し、撹拌を５８℃で２４時間継続した。反応混合物を濾過し、溶媒を蒸発させた。残留物を４×５ｍＬのジクロロメタンで洗浄し、濾過した。溶媒を蒸発させた。同定：ＥＳＩ−ＭＳ（［Ｍ＋Ｎａ＋］＝３３２、［Ｍ＋Ｎａ＋ＣＨ３ＯＨ＋］＝３６４、［２Ｍ＋Ｎａ＋］：６４１）。
【０１２６】
２−［５−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）ペンチル］プロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２８２２）の合成
マロン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（７９７ｍｇ、３．６８ミリモル、２．０当量）及び２１６ｍｇ（２．２５ミリモル、１．２当量）のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを１５ｍＬのＴＨＦに０℃で溶解した。１時間撹拌した後、５６９ｍｇのＵＢ−１２９０９（１．８５ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液を０℃で添加した。混合物を２時間撹拌した。ＩＰＣ  ＴＬＣ（ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）は、転化の完了を示した。反応混合物に２Ｎ  ＨＣｌ水溶液（ｐＨ約１）を添加して反応を止め、次いで、ＴＨＦを回転蒸発によって除去した。残留物に１０ｍＬの酢酸エチルを添加し、水相を分離し、有機相を水及びブラインで洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製して、３５０ｍｇ（０．８８ミリモル、４７．６％）のＵＢ−１２８２２を得た。同定：ＥＳＩ−ＭＳ（［Ｍ＋Ｎａ＋］：４２０、［Ｍ＋Ｋ＋］：４３６、［２Ｍ＋Ｎａ＋］：８１７、［２Ｍ＋Ｋ＋］：８３３）。
【０１２７】
［３Ｈ］ＡＰＯ−６４６の合成
４ｍＬのサンプル用バイアル瓶中に、１９ｍｇ（０．２ミリモル）のナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、及びＵＢ−１２８２２のＴＨＦ溶液３ｍＬ（１７．５ｍｇ／ｍＬ、０．１３ミリモル）を秤量した。バイアル瓶にアルゴンを吹き込み、密閉し、混合物を、冷却することなしに３０分間撹拌した。この反応混合物の０．１ｍＬのアリコート（約４．３マイクロモルの脱プロトン化されたＵＢ−１２８２２）を、０．２ｍＬのサンプル用バイアル瓶中に移し、１００ｍＣｉのヨウ化メチル（約１．３マイクロモル、０．１ｍＬのトルエン中）を添加した。反応混合物を室温で２０時間撹拌した。混合物を、穏やかな窒素流により蒸発させ、残留物に、０．１ｍＬのトリフルオロ酢酸を添加した。６時間後に反応は完結していることが見出された（ＨＰＬＣ）。反応混合物を濃縮し、残留物を１０ｍＬのエタノールに溶解した。粗生成物の放射能は：３０ｍＣｉ。粗生成物をＨＰＬＣで精製した。
トリチウム化されたヨウ化メチルを非放射性ヨウ化メチルで置き換えると、非放射性類似体がもたらされるであろう。
（例５ｃ）
２−メチル−２−｛４−［（５−ニトロ−１，３−チアゾール−２−イル）トリトリチウムメチルアミノ］ブチル｝プロパン二酸（式Ｖｆの化合物）の合成
【化４３】
2015516965.tif 000045
【０１２８】
２−メチルマロン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２５２７）の合成
マロン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４０ｇ、１８４．９ミリモル、１．０当量）を２００ｍＬのジクロロメタンに溶解した。この溶液に、７．２ｇ（１８．５ミリモル、０．１当量）の硫酸水素テトラブチルアンモニウム、及び１００ｇの水素化ナトリウムの水（２００ｍＬ）溶液を添加し、撹拌され濁った溶液に、１２．７ｍＬ（２０３．５ミリモル、１．１当量）のヨウ化メチルを冷却することなしに滴加した。反応の進行をＧＣで監視した。さらなる量のヨウ化メチル（合わせて３．７５ｍＬ、６１ミリモル、０．３３当量）を分割して添加し、反応を完結した。混合物を３００ｍＬの水で希釈し、有機相を分離し、水相をジクロロメタン（３×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機物を、水及びブラインで洗浄し、乾燥、濃縮した。残留物を２００ｍＬのｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（ＭＴＢＥ）に再溶解し、２００ｍＬの水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濃縮した。収量：４０．３６ｇ（１７５ミリモル、９４．７％）の暗黄色オイル。ＧＣ：８０．６％。
【０１２９】
２−（４−ブロモブチル）−２−メチルプロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１３２７４）の合成
ＵＢ−１２５２７（２０．０ｇ、８６．８ミリモル、１．０当量）の加塩された氷で冷却（−１０〜０℃）された乾燥テトラヒドロフラン（１９０ｍＬ）溶液に、３．４７ｇ（８６．８ミリモル、１．０当量、６０％／ミネラルオイル）の水素化ナトリウムを添加した。混合物を室温まで温め、次いで３０分間撹拌した。生じた白色懸濁液に、１５．５ｍＬ（１３０ミリモル、１．５当量）の１，４−ジブロモブタンを添加し、混合物を一夜撹拌した。混合物を濃縮し、残留物を２５０ｍＬの水及び２５０ｍＬのＭＴＢＥに溶解した。相を分離し、有機物を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濃縮した。粗生成物を精留（０．７〜０．８ミリバール、１１１〜１２５℃）により精製した。収量：１４．４ｇ（３９．５ミリモル、４５．５％）の無色明澄なオイル。ＧＣ：９６．７％。
【０１３０】
２−（４−アミノブチル）−２−メチルプロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１３２７５）の合成
ＵＢ−１３２７４（７．０ｇ、１９．２ミリモル）を７０ｍＬのジメチルスルホキシドに溶解し、２．５ｇのアジ化ナトリウム（３８．３ミリモル、２．０当量）を添加した。混合物を室温で撹拌すると、反応は３時間後に完結した（ＧＣ）。反応混合物を７００ｍＬの水中に注ぎ入れ、次いで溶液を３×１４０ｍＬのジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機物を約８０ｍＬまで濃縮した。残留物に、１００ｍＬのＴＨＦ、１０．０ｇ（３８．３ミリモル、２．０当量）のトリフェニルホスフィン、及び６ｍＬの水を添加した。反応混合物を一夜撹拌した。ＴＬＣ（メタノール：ジクロロメタン＝１：１、ニンヒドリンで可視化）によれば反応は完結していた。混合物を濃縮し、３０ｍＬのエタノールとの反復濃縮により乾燥した。粗生成物を２００ｇのシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（溶離液：ＥｔＯＡｃ：メタノール＝１：１）で精製した。収量：５．１５ｇ（１７．０８ミリモル、８９．２％）のオパール色オイル。同定：ＥＳＩ−ＭＳ（［Ｍ＋］：３０２、［Ｍ＋Ｎａ＋］：３２４）。
【０１３１】
２−メチル−２−｛４−［（５−ニトロ−１，３−チアゾール−２−イル）アミノ］ブチル｝プロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１３１０９）の合成
ＵＢ−１３２７５（１．０ｇ、３．３１ミリモル、１．０当量）及び６９０ｍｇ（３．３１ミリモル、１．０当量）の２−ブロモ−５−ニトロチアゾールを１０ｍＬのアセトニトリルに溶解した。この溶液に、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（１．１６ｍＬ、６．６２ミリモル、２．０当量）を添加し、反応混合物を加熱しないで２時間撹拌した。ＴＬＣ（ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）によれば、反応は完結していなかった。混合物に、０．２ｇのさらなるＵＢ−１３２７５を添加し、反応物を２時間撹拌した。ＴＬＣは、２−ブロモ−５−ニトロチアゾールの完全転化を示した。反応混合物を濃縮し、予想生成物をカラムクロマトグラフィー（５０ｇのシリカゲル、ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝２：１）で単離した。収量：５５０ｍｇ（１．２８ミリモル、３１．７％）。同定：ＥＳＩ−ＭＳ（［Ｍ＋Ｈ＋］：４３０、［Ｍ＋Ｎａ＋］：４５２、［２Ｍ＋Ｎａ＋］：８８１）。
【０１３２】
［３Ｈ］ＡＰＯ−６５０の合成
１．０ｍＬの乾燥ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に１０．０ｍｇのＵＢ−１３１０９を溶解した。４ｍＬのサンプル用バイアル瓶中に、０．２ｍＬの前記ＤＭＦ溶液（約０．００４７ミリモル、４当量）、及び２ｍｇの炭酸カリウムを秤量した。この混合物に、１００ｍＣｉのヨウ化メチル（５００ｍＣｉ／ｍＬトルエン、約０．００１３ミリモル、１当量）を添加し、バイアル瓶を直ちに密閉し、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物を１ｍＬのジクロロメタン及び０．２ｍＬのトリフルオロ酢酸に溶解した。室温で一夜撹拌した後、反応混合物をサンプリングし、ＨＰＬＣで分析した。予想生成物の形成が、１０．０９分に観察された。反応混合物を濃縮し、残留物を０．２ｍＬのメタノールに溶解した。粗生成物をＨＰＬＣで精製した。
トリチウム化されたヨウ化メチルを非放射性ヨウ化メチルで置き換えると、非放射性類似体がもたらされるであろう。
（例５ｄ）
２−メチル−２−｛４−［（５−ニトロ−１，３−チアゾール−２−イル）トリトリチウムメチルアミノ］ブチル｝プロパン二酸（式Ｖｉの化合物）の合成
【化４４】
2015516965.tif 000046
【０１３３】
２−メチルプロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１２５２７）の合成
１Ｌの三口フラスコに、４０．０ｇ（１８４．９ミリモル、１．０当量）のマロン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル、２００ｍＬのジクロロメタン、７．２ｍＬ（１８．５ミリモル、０．１当量）の硫酸水素テトラブチルアンモニウム、及び２００ｍＬの５０％ＮａＯＨ水溶液を仕込んだ。生じた二相混合物に、１２．７ｍＬ（２０３．４ミリモル、１．１当量）のヨードメタンを室温で添加し、反応混合物を室温で４時間撹拌した。反応を監視するため、十分に撹拌された反応混合物の少量サンプルを、水とＥｔＯＡｃとの混合物に添加し、有機相をＧＣで分析した。反応混合物中に水（３００ｍＬ）を１０℃で滴加した。層を分離し、水層をジクロロメタン（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固し、黄色オイルとして３５．６ｇのＵＢ−１２５２７を得た。生成物の収量：３５．６ｇ（１５４．６ミリモル、８３．６％）黄色オイル。分析：ＧＣ：８９．０％。
【０１３４】
塩化ベルベルビン（ＵＢ−１２９６９）の合成
３０．０ｇ（８０．７ミリモル、１．０当量）の塩化ベルベリン水和物を薄めないで真空下（１．０ミリバール）に、１９０℃で１時間加熱した。粗生成物をエタノール（８０ｍＬ）から再結晶した。収量：２４．８ｇ（６９．３ミリモル、８５．９％）赤色固体。
【０１３５】
２−（５−ブロモペンチル）−２−メチルプロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１３０２１）の合成
１Ｌの三口フラスコに、３２．０ｇ（１３８．９ミリモル、１．０当量）のＵＢ−１２５２７、及び３００ｍＬの乾燥テトラヒドロフランを仕込んだ。溶液を０℃まで冷却し、５．６ｇ（１３８．９ミリモル、１．０当量）のＮａＨを、少しずつ分割して添加した。添加した後、反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで、４８．０ｇ（２０８．４ミリモル、２．０当量）の１，５−ジブロモペンタンを添加した。
【０１３６】
反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応を監視するため、十分に撹拌された反応混合物の少量サンプルを、水とＭＴＢＥとの混合物に添加し、有機相をＧＣで分析した。反応混合物を濃縮乾固し、残留物をＭＴＢＥ（４００ｍＬ）に溶解し、水（２５０ｍＬ）及びブライン（２５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固し、黄色オイルとして７３．６ｇのＵＢ−１３０２１を得た。粗生成物を真空蒸留（１２５〜１４５℃、１．７ミリバール）で精製した。生成物の収量：３１．７ｇ（８２．２ミリモル、５９．１％）黄色オイル。分析：ＧＣ：９６．２％。
【０１３７】
１６−｛［７−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］−６−メチル−７−オキソヘプチル］オキシ｝−１７−メトキシ−５，７−ジオキサ−１３−λ｛５｝−アザペンタシクロ［１１．８．０．０｛２，１０｝．０｛４，８｝．０｛１５，２０｝ヘニコサ−１（２１），２（１０），３，８，１３，１５，１７，１９−オクタエン−１３−イリウムブロミド（ＵＢ−１３０２６）の合成
２５０ｍＬの三口フラスコに、１０．０ｇ（２７．９ミリモル、１．０当量）の塩化ベルベルビン、１００ｍＬの乾燥ＤＭＦ、及び１５．９ｇ（４１．９ミリモル、１．５当量）のＵＢ−１３０２１を仕込み、反応混合物を１００℃で２時間撹拌した。反応を監視するために、十分に撹拌された反応混合物の少量サンプルを、メタノールに添加し、ＴＬＣ（シリカプレート、溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝８５／１５）で分析した。反応混合物を濃縮乾固し、残留物をジエチルエーテルに懸濁し、濾過し、粗生成物（２１ｇ）をカラムクロマトグラフィー（６００ｇのシリカゲル、５Ｌの溶離液（ジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝８５／１５））で精製した。収量：１４．０ｇ（２０．６ミリモル、７３．８％）黄色固体。分析：ＨＰＬＣ：９７．１％。
【０１３８】
ＡＰＯ−６８１の合成
５００ｍＬの三口フラスコに、１０．０ｇ（１４．３ミリモル）のＵＢ−１３０２６、１００ｍＬのジクロロメタン、及び５０ｍＬのトリフルオロ酢酸を仕込んだ。褐色溶液を室温で１時間撹拌した。反応を監視するために、十分に撹拌された反応混合物の水層の少量サンプルを、ＴＬＣ（シリカプレート、溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝８５／１５）で分析した。反応混合物を濃縮乾固して、１３．０ｇの褐色油状生成物を得た。この粗生成物をエタノール（４００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）との混合物に溶解し、イオン交換樹脂（Ａｍｂｅｒｊｅｔ４２００、Ｃｌ−型）と共に一夜撹拌した。溶液の色は黄色に変わった。樹脂を、濾過により除去し、エタノール及び水で逐次的に洗浄した。濾液を濃縮して、６．５ｇの黄色固体を９４．７％（ＨＰＬＣ）の純度で得た。粗生成物を、溶離液（３．０Ｌ）としてジクロロメタン／ＭｅＯＨ＝８５／１５を使用する、シリカ（１５０ｇ）でのクロマトグラフィーに供して、５．２ｇの黄色固体を９５．８％の純度で得た。収量：５．２ｇ（９．６ミリモル、６７．０％）黄色固体。分析：ＨＰＬＣ：９５．８％。
【０１３９】
１Ｈ  ＮＭＲ［Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ５００（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，ＴＭＳが内部標準］：δ 1.22 (s, 3H, CH3), 1.24 (t, 2H, CH2), 1.44 (t, 2H, CH2), 1.70 (t, 2H, CH2), 1.84 (t, 2H, CH2), 3.19 (t, 2H, CH2), 4.05 (s, 3H, OCH3), 4.27 (t, 2H, OCH2), 4.97 (t, 2H, CH2), 6.17 (s, 2H, O-CH2-O), 7.08 (s, 1H, Ar-H), 7.78 (s, 1H, Ar-H), 7.97 (d, 1H, Ar-H), 8.18 (d, 1H, Ar-H), 8.92 (s, 1H, Ar-H), 9.73 (s, 1H, Ar-H).
同定：ＥＳＩ−ＭＳ（［Ｍ＋Ｈ＋］＝５０８、［Ｍ＋Ｎａ＋］＝５３０）。
（例５ｅ）
２−メチル−２−（５−｛［（１０Ｓ）−３，４，５，１４−テトラメトキシ−１３−オキソトリシクロ［９．５．０．０｛２，７｝］ヘキサデカ−１（１６），２，４，６，１１，１４−ヘキサエン−１０−イル］カルバモイル｝ペンチル）プロパン二酸（式Ｖｋの化合物）の合成
【化４５】
2015516965.tif 000047
【０１４０】
１−メチルヘキサン−１，１，６−トリカルボン酸１，１−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル６−メチル（ＵＢ−１３１９５）の合成
１００ｍＬの三口フラスコに、５．７ｇ（１７．８ミリモル、１．０当量）の２−メチルマロン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル、３０ｍＬの乾燥テトラヒドロフランを仕込み、生じた溶液を０℃まで冷却した。十分に撹拌された反応混合物中に、７８３ｍｇ（１９．６ミリモル、１．１当量）の水素化ナトリウムを０℃で分割して添加した。添加した後、反応混合物を室温に戻し、３．７ｇ（１７．８ミリモル、１．０当量）の６−ブロモヘキサン酸メチルエステルのテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）溶液を添加し、反応混合物を一夜還流した。反応を監視するために、十分に撹拌された反応混合物の少量サンプルを、水と酢酸エチルとの混合物に添加し、有機相をＴＬＣ（シリカプレート、溶離液：ヘキサン／ＭＴＢＥ＝５／１）で分析した。反応が完結したので、反応混合物に、水（３０ｍＬ）及び酢酸エチル（５０ｍＬ）を添加した。層を分離し、水層を酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固した。粗生成物（７．６ｇ）を真空蒸留（１２８〜１３２℃／０．９ミリバール）で精製した。生成物の収量：２．７ｇ（７．５ミリモル、４２％）無色オイル。分析：ＧＣ：９８．３％。
【０１４１】
８−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−７−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］−７−メチル−８−オキソオクタン酸（ＵＢ−１３２１２）の合成
１００ｍＬの三口フラスコに、２．７ｇ（７．５ミリモル、１．０当量）のＵＢ−１３１９５及び３０ｍＬのメタノールを仕込んだ。この混合物に、０．９ｇ（３７．７ミリモル、５．０当量）の水酸化リチウムの水（１５ｍＬ）溶液を、内温を１０℃未満に維持しながら滴加した。添加した後、反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応を監視するために、十分に撹拌された反応混合物の少量のサンプルを、リン酸水溶液と酢酸エチルとの混合物中に添加し、有機相をＴＬＣ（シリカプレート、溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）で分析した。反応は完結していた。
【０１４２】
反応混合物を濃縮し、残留物を水（２０ｍＬ）に溶解し、８５％リン酸水溶液（５ｍＬ）を用いてｐＨを３〜４に調整し、ＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固した。生成物の収量：２．５ｇ（７．４ミリモル、９９％）無色のオイル。分析：ＧＣ：９１．３％。
【０１４３】
Ｎ−デスアセチルコルヒチン（ＵＢ−１３１２１）の合成
第１ステップ：２５０ｍＬの三口フラスコに、９．０ｇ（２６．０ミリモル、１．０当量）のコルヒチン、９０ｍＬのアセトニトリル、２．８ｇ（２６．０ミリモル、１．０当量）の４−ジメチルアミノピリジン、６．３ｍＬ（５２．０ミリモル、２．０当量）のトリエチルアミン、及び１１．８ｇ（６２．０ミリモル、２．４当量）の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを仕込み、反応混合物を１００℃で３時間撹拌した。次いで、１１．４ｇ（５２．０ミリモル、２．０当量）の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを添加して、反応混合物を１００℃でさらに２時間撹拌した。反応を監視するために、十分に撹拌された反応混合物の少量のサンプルを、クエン酸水溶液と酢酸エチルとの混合物中に添加し、有機相をＴＬＣ（シリカプレート、溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／４）で分析した。ほぼ１０％の出発原料及び９０％の生成物が検出された。反応混合物を半分の容積まで濃縮し、クロロホルム（３００ｍＬ）を添加した。生じた溶液を５％クエン酸水溶液（３×１００ｍＬ）で洗浄した。有機相を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固して、１７．８ｇの暗褐色オイルを得た。
【０１４４】
第２ステップ：第１ステップの生成物を２７ｍＬのメタノールに溶解し、０．９ｍＬ（２６．０ミリモル、１．０当量）の３０％ナトリウムメトキシド／メタノール溶液を室温で滴加した。得られた暗褐色溶液を１時間撹拌した。反応を監視するため、十分に撹拌された反応混合物の少量のサンプルを、ＴＬＣ（シリカプレート、溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／４）で分析した。ほぼ２０％のコルヒチン及び７０〜７５％の生成物が検出された。反応混合物にブライン（１５０ｍＬ）を添加し、水溶液をジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固して、１２．７ｇの褐色発泡物を得た。
【０１４５】
第３ステップ：第２ステップの生成物を１８ｍＬのトリフルオロ酢酸に室温で溶解し、１５分間撹拌した。反応を監視するため、十分に撹拌された反応混合物の少量のサンプルを、ＴＬＣ（シリカプレート、溶離液：メチルエチルケトン／酢酸／水＝１６／３／２．５）で分析した。ほぼ２５％のコルヒチン及び７０〜７５％の生成物が検出された。反応混合物を濃縮し、残留物を５％クエン酸水溶液（１８０ｍＬ）中に取り、ジクロロメタン（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。水層のｐＨを、１０％  ＮａＯＨ水溶液で１０に調整し、次いでジクロロメタン（３×１８０ｍＬ）で抽出した。有機相を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固して、５．７ｇの褐色泡状物を得た。粗生成物を、溶離液としてメチルエチルケトン／酢酸／水＝１６／３／２．５を使用するフラッシュクロマトグラフィーで精製した。生成物の収量：４．０ｇ（１１．２ミリモル、４３％）黄色固体。
【０１４６】
２−メチル−２−（５−｛［（１０Ｓ）−３，４，５，１４−テトラメトキシ−１３−オキソトリシクロ［９．５．０．０｛２，７｝］ヘキサデカ−１（１６），２，４，６，１１，１４−ヘキサエン−１０−イル］カルバモイル｝ペンチル）プロパン二酸１，３−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（ＵＢ−１３１４７）の合成
２５０ｍＬの三口フラスコに、２．３３ｇ（６．８ミリモル、１．０当量）のＵＢ−１３２１２、４０ｍＬの乾燥ジクロロメタン、２．４２ｇ（６．８ミリモル、１．０当量、ＡＢ−１２４４．１２）のＵＢ−１３１２１、０．９１ｇ（６．８ミリモル、１．０当量）のＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物、及び１．４２ｇ（７．４ミリモル、１．１当量）のＥＤＣを仕込み、反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応を監視するため、十分に撹拌された反応混合物の少量のサンプルを、水と酢酸エチルとの混合物に添加し、有機相をＴＬＣ（シリカプレート、溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝９／１）で分析した。反応は完結していた。反応混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ｍＬ）及びブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固して、５．３ｇの褐色泡状物を得た。粗生成物を、溶離液（８００ｍＬ）としてジクロロメタン／メタノール＝９５／５を使用するシリカでのカラムクロマトグラフィーで精製した。生成物の収量：２．１０ｇ（３．１ミリモル、４５％）赤色泡状物。
【０１４７】
ＡＰＯ−６９７の合成
１００ｍＬの三口フラスコに、２．１ｇ（３．１ミリモル、１．０当量）のＵＢ−１３１４７、２０ｍＬのジクロロメタン、及び１０ｍＬのトリフルオロ酢酸を仕込んだ。溶液を室温で２時間撹拌した。反応を監視するため、十分に撹拌された反応混合物の少量のサンプルを、ＴＬＣ（シリカプレート、溶離液：ジクロロメタン／メタノール＝９／１）で分析した。反応は完結していた。反応混合物を濃縮し、得られた暗褐色油状残留物を、溶離液（７００ｍＬ）としてジクロロメタン／メタノール＝９５／５を使用するシリカ（６８ｇ）でのカラムクロマトグラフィーで精製した。収量：１．４ｇ（２．５ミリモル、８１％）ベージュ色固体。分析：ＨＰＬＣ：９７．６％。
【０１４８】
１Ｈ  ＮＭＲ［Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ５００（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，ＴＭＳが内部標準］：δ 1.18 (m, 6H, CH2), 1.21 (s, 3H, CH3), 1.42 (d, 2H, CH2), 1.63 (t, 1H, CH), 1.65 (t, 1H, CH), 1.84 (s, 2H, CH2), 2.10 (t, 1H, CH), 2.58 (t, 1H, CH), 3.53 (s, 3H, CH3), 3.83 (s, 3H, CH3), 3.87 (s, 3H, CH3), 4.32 (s, 1H, CH-N), 6.76 (s, 1H, Ar-H), 7.01 (s, 1H, Ar-H), 7.10 (d, 2H, Ar-H), 8.48 (s, 1H, NH).
ＥＳＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝５７２、［Ｍ＋Ｎａ］＋＝５９４。
ＡＰＯ−６９７は、ＡＰＯ−６９８の非放射性類似体である。
（例６）
５，５'（７−フルオロヘプタン−２，２−ジイル）ビス（１Ｈ−テトラゾール）（式ＶＩＩの化合物の例示的実施形態）の合成
【化４６】
2015516965.tif 000048
【０１４９】
３ｇの５−ブロモ−１−ペンタノール（１）を、１３５ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中、１．５当量の３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン及び０．１当量のｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（ＰＰＴＳ）と処理する。ブロモＣ１−９アルコールなどの他の出発原料を使用して式ＶＩＩの他の実施形態の化合物を得ることもできる。
【０１５０】
後処理し、精製した後に、１．４５ｇ（３３％）の生成物（２）が得られる。１．０当量のメチルマロニトリルを、１当量のＮａＨで脱プロトンし、１．０当量のブロマイド（２）を触媒量のＫＩと一緒に５０℃で添加する。１０時間後に、完全な転化を観察することができ、９０％の収率を得ることができる。テトラヒドロピラン（ＴＨＰ）の脱保護は、エタノール中でＰＰＴＳを用い５５℃で行うことができる。後処理後、アルコール（４）が定量的収率で得られ、それをそのままメシル化反応に使用する。メシラート（５）を得たら、クリプトフィックスを介するフッ素化を実施することができる。化合物（６）が、６８％の収率で得られる。化合物（６）に、１２ｍＬのＤＭＦ、１０当量の酢酸、トリエチルアミン及びアジ化ナトリウムを、それぞれ添加する。生じる混合物を１４０℃で１９時間撹拌する。水及び１Ｎ  ＨＣｌを添加する。固体を濾別し、水で洗浄する。化合物（７）が６０％の収率で得られる。
【０１５１】
５，５’（７−フルオロヘプタン−２，２−ジイル）ビス（１Ｈ−テトラゾール）化合物の１Ｈ  ＮＭＲ［例えば、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ４００（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳが内部標準］は以下の結果を示す：δ 1.29 (m, 4H, CH2), 1.49 (m, 2H, CH2), 1.77 (s, 3H, Me), 1.87 (t, 2H, CH2), 4.09 (m, 2H, CH2F).
（例６ａ）
１−フルオロ−３，４−ジトリチウム−６，６−ジ（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘプタン（式ＶＩＩａの化合物）の合成
【化４７】
2015516965.tif 000049
【０１５２】
（ブタ−３−イン−１−イルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシラン（ＵＢ−１２５２４）の合成
３０．２６ｇ（４２８．０ミリモル、１当量）の３−ブチン−１−オールを５００ｍＬのＴＨＦに溶解した。この溶液に、７１．３４ｇ（１．０２７モル、２．４当量）のイミダゾール及び７７．９５ｇ（５１３．５ミリモル、１．２当量）のＴＢＤＭＳＣｌを添加し、反応混合物を激しく５時間撹拌した。次いで、混合物を、短いシリカの詰め物を通過させ、濃縮し、Ｖｉｇｒｅｕｘカラムを使用し、真空中で分留した。収量：４０．０４ｇ（２０６．３ミリモル、４８％）。ＧＣ：９５％。
【０１５３】
５−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］ペンタ−２−イン−１−オール（ＵＢ−１２５２５）の合成
４０．０４ｇ（２０７．６ミリモル、１当量）のＵＢ−１２５２４を４９０ｍＬのジエチルエーテルに溶解し、−７８℃まで冷却した。この溶液に、９４．４８ｍＬ（２３６．２ミリモル、１．１４当量）のｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ）、続いて３１．４２ｇ（１０４６．３ミリモル、５．０４当量）のパラホルムアルデヒドを添加した。次いで、アセトン／ドライアイス浴を取り去り、混合物を室温に戻した。
【０１５４】
一夜撹拌した後、２００ｍＬの飽和塩化アンモニウム水溶液を添加して反応を止めた。ＴＨＦを回転蒸発で除去した。残留物をジエチルエーテル（４×１００ｍＬ）で抽出し、有機相を合わせ、セライトの詰め物を通過させ、１００ｍＬの容積まで濃縮し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮した。収量：４．０６ｇ。
【０１５５】
４−メチルベンゼン−１−スルホン酸５−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］ペンタ−２−イン−１−イル（ＵＢ−１２５２６）の合成
４７．０６ｇ（２１９．５ミリモル、１当量）のＵＢ−１２５２５及び５０．７７ｇ（２６３．４ミリモル、１．２当量）のｐ−トルエンスルホニルクロリドを４５０ｍＬのジエチルエーテルに溶解し、−１０℃まで冷却し、撹拌された反応混合物に１２４．３３ｇ（２．１９５モル、１０当量）の水酸化カリウムを５分割して添加した。混合物を室温に戻し、４時間撹拌した。ＴＬＣによれば反応は完結していた。反応混合物を１３００ｍＬの氷冷水中に注ぎ入れた。有機相を分離し、次いで水相をジエチルエーテル（５×１００ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、セライトの詰め物を通して濾過し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮した。予備精製を、５００ｇのシリカゲルの詰め物を使用し、約２５００ｍＬ（ヘキサン：アセトン＝４：１）で溶離して実施した。最終精製を、フラッシュクロマトグラフィーを使用して達成した。収量：２６．６０ｇ（７２．１７ミリモル、３３％）。
【０１５６】
２−メチルプロパンジニトリル（ＵＢ−１２５６９）の合成
３０．０ｇ（４５４ミリモル、２当量）のマロノニトリルを１４．１ｍＬ（２２６．８ミリモル、１当量）のヨウ化メチル及び２．９ｇ（９ミリモル、０．０４当量）のＴＢＡＢと激しく撹拌して混合した。混合物を室温で３０分間撹拌し、続いて氷浴中で冷却した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２５．５ｇ、２２６．８ミリモル、１当量）を徐々に添加した。混合物を、さらなる冷却なしに撹拌すると、自由流動スラリーは１５〜２０分で固化した。混合物を１００ｍＬの水に懸濁し、２×１００ｍＬのＤＣＭで抽出した。有機相（濁った乳液）を、含浸相分離紙を通して濾過し、濃縮した。粗生成物を精留により精製し、７．７ｇ（ＧＣ：９０％）の予想生成物を単離した。この材料に８ｍＬのヘキサンを添加し、生じた乳液を激しく撹拌すると、結晶化した。それを濾過し、２×３ｍＬの冷ヘキサンで洗浄し、乾燥した。収量：４．２ｇ（５２．４ミリモル、１１．５％）。ＧＣ：９５．６％。
【０１５７】
２−｛５−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］ペンタ−２−イン−１−イル｝−２−メチルプロパンジニトリル（ＵＢ−１２５７６）の合成
１５ｍＬのＴＨＦに溶解した２．７ｇ（３３．６ミリモル、１当量）のＵＢ−１２５６９に、１８．５０ｍＬ（３６．９６ミリモル、１．１当量）のＮａＨＭＤＳ（ＴＨＦ中２Ｍ溶液）を０℃で添加し。３０分間撹拌した。混合物を室温まで加熱し、さらに３０分間撹拌し、次いで１２．４７０ｇ（３３．６０ミリモル、１当量）のＵＢ−１２５２６のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液を添加した。反応混合物を５０℃まで加熱し、５時間撹拌し、ＴＬＣでチェックした。２００ｍＬの水を添加して反応を止め、生じた混合物を５×５０ｍＬの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、濾過した。明澄な溶液を濃縮乾固し、残留物をカラムクロマトグラフィー（３２ｇのシリカゲル、ｎ−ヘキサン：アセトン＝２０：１）で精製した。収量：９．１ｇ（３２．９ミリモル、９７．９％）。
【０１５８】
２−（５−ヒドロキシペンタ−２−イン−１−イル）−２−メチルプロパンジニトリル（ＵＢ−１２５７７）の合成
９．１ｇ（３２．９ミリモル）のＵＢ−１２５７６を酢酸：ＴＨＦ：水＝９：２：１の混合物（１８０ｍＬ）に溶解し、混合物を３５℃の油浴に浸け、４時間撹拌した。ＴＬＣによれば反応は完結していた。ＴＨＦを除去し、残留物に水（２５ｍＬ）を添加した。混合物をジエチルエーテル（４×５０ｍＬ）で抽出した。合わせたエーテル抽出物を、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（５×３０ｍＬ）及びブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄し、次いで濃縮乾固した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（２５０ｇのシリカゲル、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で精製した。収量：３．６ｇ（２２．２ミリモル、６７．５％）。ＧＣ：９４％。
【０１５９】
２−（５−フルオロペンタ−２−イン−１−イル）−２−メチルプロパンジニトリル（ＵＢ−１２６２６）の合成
ＵＢ−１２５７７（２．５０ｇ、１５．５ミリモル、１当量）を２０ｍＬのＤＣＭに溶解し、溶液を−３０℃まで冷却した。５ｇ（３１．０ミリモル、２当量）のＤＡＳＴのＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を６０分にわたって滴加した。反応混合物を−３０℃でさらに１時間撹拌し、室温に戻し、４時間撹拌した。反応混合物を５０ｍＬの氷冷ＮａＨＣＯ３水溶液中に注ぎ入れ、生じた混合物のｐＨを、Ｎａ２ＣＯ３飽和水溶液を添加して８に調整した。有機層を分離し、水相をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した。収量：４８５ｍｇ（２．９５ミリモル、１９．０％）。
【０１６０】
２−（５−フルオロペンタ−２−エン−１−イル）−２−メチルプロパンジニトリル（ＵＢ−１２７４１）の合成
１０６ｍｇ（０．６４ミリモル）のＵＢ−１２６２６を、１０ｍＬの酢酸エチル中、４ｍｇのＬｉｎｄｌａｒ触媒及び４０μＬのキノリンの存在下で２４時間水素化した。ＧＣによれば反応は完結していなかったので、さらに８ｍｇの触媒を添加し、混合物を２４時間水素化した。ＧＣによれば反応が完結していたので、触媒を濾別し、濾液を濃縮し、２ｍＬのＤＣＭに再溶解し、１Ｎ塩酸で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮した。収量：６０ｍｇ（０．３６ミリモル、５６．３％）。
【０１６１】
５−［７−フルオロ−２−（１Ｈ−１，２，３，４−テトラゾール−５−イル）ヘプタ−４−エン−２−イル］−１Ｈ−１，２，３，４−テトラゾール（ＵＢ−１２７７８）の合成
ＵＢ−１２７４１（４５ｍｇ、０．２７ミリモル、１当量）を０．７ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに溶解し、この溶液に、７６ｍｇ（１．１６ミリモル、４．３当量）のアジ化ナトリウム及び２４８ｍｇ（１．０８ミリモル、４当量）の臭化亜鉛を添加した。懸濁液を１００℃まで加熱し、４．５時間撹拌した。混合物を冷却し、水で希釈し、１ｍＬの２Ｎ  ＨＣｌ水溶液を添加した。混合物を４×１ｍＬの酢酸エチルで抽出し、有機物を合わせ、濃縮した。この材料を、５ｍＬのエタノールからの反復蒸発によって乾燥した。収量：粗生成物で１１４ｍｇ。ＬＣ−ＭＳで同定した（［Ｍ−Ｈ］：２５１）。
【０１６２】
［３Ｈ］ＡＰＯ−６００の合成
ＵＢ−１２７７８（１７ｍｇ）を３ｍＬのエタノールに溶解し、３ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃ触媒を添加した。混合物をトリチウムガスと３時間反応させた。触媒を濾別し、混合物を濃縮した。粗材料にエタノールを添加し、再び濃縮して、移動できるトリチウムを除去した。残留物をエタノールに再溶解し、ＨＰＬＣで精製した。５回の分取注入から集めた生成物画分を注意深く濃縮し、１０ｍＬ（重量で測定して）のＨＰＬＣ級エタノールに再溶解し、全放射能を測定し、１０．５ｍＣｉであることが見出された（１．０５ｍＣｉ／ｍＬ）。
トリチウムガスを水素ガスで置き換えると、非放射性類似体ＡＰＯ−６００がもたらされるであろう。
（例７）
インビトロでのスクリーニング
【０１６３】
本発明の化合物のインビトロでのスクリーニングには、造血系由来がん細胞系のアポトーシス誘導モデル、Ｊｕｒｋａｔを使用した。該モデルは、高度に特徴的であり、処置により５０〜６０％のアポトーシスを誘導することが示された。
【０１６４】
Ｊｕｒｋａｔ細胞を、３７℃、５％ＣＯ２の加湿インキュベーター中、１０％ウシ胎児血清、４ｍＭ  Ｌ−グルタミン，１００Ｕ／ｍＬペニシリン、及び１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンで補足されたＲＰＭＩ培地中で培養した。細胞を計数し、ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩水（ＨＢＳ）中に再懸濁した。
【０１６５】
アポトーシスの誘導：１０７細胞／ｍＬを、０．１μｇ／ｍＬの抗−Ｆａｓ（ＣＤ９５）抗体と共に２時間インキュベートした。アポトーシス阻害（特異対照）に関し、誘導及び対照細胞を、５０μＭの特定のカスパーゼ阻害剤Ｚｖａｄと共にインキュベートした。２μＣｉのトリチウム化化合物又は参照としてのＭＬ−１０を細胞に３０分間添加した。インキュベーションは、すべて３７℃で実施した。トリチウム化化合物とのインキュベーションの後に、細胞をＨＢＳで２回洗浄し、シンチレーション液に移し、β−カウンターを使用して放射能を監視した。取り込み比率を、標準的なＤＰＭ読み取りを使用して計算した。対照の非処理での取り込み値を１と設定し、ＣＤ９５処理細胞の取り込みの増加倍数を使用して、アポトーシス細胞中への特異的蓄積を求めた。図１からわかるように、３つの候補化合物（ＡＰＯ−６００、ＡＰＯ−６３０及びＡＰＯ−６９８）は、トレーサーのアポトーシス細胞中への高い取り込みを立証した。取り込みは、ＭＬ−１０に比較して２〜３倍、高かった（図１）。
（例８）
インビボでのスクリーニング
【０１６６】
ＭＬ−１０及び本発明の化合物のインビボでの蓄積を評価するために、ヒト結腸直腸がん細胞ＨＣＴ−１１６異種移植片中への取り込みを監視した。無胸腺ヌードマウスに、１０６ＨＣＴ−１１６細胞を皮下で接種した。腫瘍形成の後、マウスにＭＬ−１０及びＡＰＯ−６５０を屠殺の３０及び９０分前に静脈内で投与した（ｎ≧８）。動物を屠殺するに先立って末梢血サンプルを採取した。腫瘍を切り離し、ホモジナイズし、すべてのサンプルをシンチレーション液中で較正した後、β−カウンター中で放射能を測定した。シグナル対のノイズ比を調べるため、腫瘍中への取り込みと血液中への取り込みとの比率を計算した。図２からわかるように、ＡＰＯ−６５０は、６倍の腫瘍／血液比を示し、標的細胞中での滞留増加及び／又は血液からの急速なクリアランスを示している。
（例９）
インビボでのスクリーニング
【０１６７】
ＡＰＯ−６９８薬物動態特性を測定するために、その非標識類似体、ＡＰＯ−６９７を使用した。表１に、２種の非標識（非放射性）類似体、ＭＬ−１０及びＡＰＯ−６９７に関してＣＤ１マウスで実施された薬物動態研究を要約する。表からわかるように、ＡＰＯ−６９７は、ＭＬ−１０に比較して、より短いｔ１／２及びより大きな分布容積及び総クリアランスを示した。血液中分布値は、双方の化合物の赤血球への低い分布を示した（表２）。２種のトリチウム化候補化合物の薬物動態評価は、化学療法で治療されたマウスではＡＰＯ−６３０及びＡＰＯ−６５０の双方に関して、及び非治療マウスではＡＰＯ−６５０に関してより短い半減期を示した（表３）。
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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