【手続補正書】
【提出日】平成22年5月10日(2010.5.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物を同定するための、宿主細胞またはＧプロテイン−結合受容体（ＧＰＣＲ）を含む宿主細胞の膜の使用であって、ここで該宿主細胞またはその膜がテスト化合物と接触し；該ＧＰＣＲは：
（ｉ）  配列番号２のアミノ酸１〜３３５；
（ｉｉ）  配列番号２のアミノ酸２〜３３５；
（ｉｉｉ）  特異的プライマー配列番号３および配列番号４を用いてヒトＤＮＡ試料にてポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって増幅可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｉｖ）  ０．１×ＳＳＣ中での６５℃における洗浄をともなう高ストリンジェンシーの条件下で配列番号１の相補体とハイブリダイズ可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｖ）  （ｉ）〜（ｉｖ）で定義されるアミノ酸配列中の一個または数個のアミノ酸の置換、欠失、または付加による、（ｉ）〜（ｉｖ）のＧＰＣＲ由来のＧＰＣＲ；
を含み、
該ＧＰＣＲの機能性を刺激する該テスト化合物の能力は、該テスト化合物が低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、宿主細胞またはＧプロテイン−結合受容体（ＧＰＣＲ）を含む宿主細胞の膜の使用。
【請求項２】
前記受容体が、組換え体である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記宿主細胞が発現ベクターを含み、該発現ベクターがＧＰＣＲをコードするポリヌクレオチドを含む、請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
前記宿主細胞が哺乳動物宿主細胞である、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項５】
前記宿主細胞が酵母宿主細胞である、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項６】
前記宿主細胞がメラニン保有細胞宿主細胞である、請求項１〜３のいずれか１項記載の使用。
【請求項７】
前記テスト化合物が、モル当たり１０，０００グラム未満の分子量を有する小分子である、請求項１〜６のいずれか１項記載の使用。
【請求項８】
前記分子量が、モル当たり５，０００グラム未満である、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
前記ＧＰＣＲが、配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項１〜８いずれか１項記載の使用。
【請求項１０】
低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物を同定するための方法であって、以下の工程：
（ａ）  テスト化合物をイン・ビトロにて宿主細胞またはＧプロテイン−結合受容体（ＧＰＣＲ）を含む宿主細胞の膜と接触させる工程であって、ここで該ＧＰＣＲが、
（ｉ）  配列番号２のアミノ酸１〜３３５；
（ｉｉ）  配列番号２のアミノ酸２〜３３５；
（ｉｉｉ）  特異的プライマー配列番号３および配列番号４を用いてヒトＤＮＡ試料にてポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって増幅可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｉｖ）  ０．１×ＳＳＣ中での６５℃における洗浄をともなう高ストリンジェンシーの条件下で配列番号１の相補体とハイブリダイズ可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｖ）  （ｉ）〜（ｉｖ）で定義されるアミノ酸配列中の一個または数個のアミノ酸の置換、欠失、または付加による、（ｉ）〜（ｉｖ）のＧＰＣＲ由来のＧＰＣＲ；
を含む、工程；
（ｂ）  該受容体の機能性を刺激するテスト化合物の能力を決定する工程；
（ｃ）  工程（ｂ）における前記受容体の機能性を刺激する化合物をイン・ビトロにて脊椎動物腸内分泌細胞またはＧＩＰを分泌可能な細胞と接触させる工程；および、
（ｄ）該化合物が該脊椎動物腸内分泌細胞または該ＧＩＰを分泌可能な細胞からのＧＩＰ分泌を刺激するか否かを決定する工程を含み、
該脊椎動物腸内分泌細胞またはＧＩＰを分泌可能な細胞からのＧＩＰ分泌を刺激するテスト化合物の能力が、該テスト化合物が、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、方法。
【請求項１１】
低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物を同定するための方法であって、以下の工程：
（ａ）  テスト化合物をイン・ビトロにて宿主細胞またはＧプロテイン−結合受容体（ＧＰＣＲ）を含む宿主細胞の膜と接触させる工程であって、ここで該ＧＰＣＲが、
（ｉ）  配列番号２のアミノ酸１〜３３５；
（ｉｉ）  配列番号２のアミノ酸２〜３３５；
（ｉｉｉ）  特異的プライマー配列番号３および配列番号４を用いてヒトＤＮＡ試料にてポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって増幅可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｉｖ）  ０．１×ＳＳＣ中での６５℃における洗浄をともなう高ストリンジェンシーの条件下で配列番号１の相補体とハイブリダイズ可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｖ）  （ｉ）〜（ｉｖ）で定義されるアミノ酸配列中の一個または数個のアミノ酸の置換、欠失、または付加による、（ｉ）〜（ｉｖ）のＧＰＣＲ由来のＧＰＣＲ；
を含む、工程；
（ｂ）  該受容体の機能性を刺激するテスト化合物の能力を決定する工程；
（ｃ）  該化合物が、工程（ｂ）における前記受容体の機能性を刺激する化合物を前もって投与した脊椎動物から得られる試料中のＧＩＰレベルを増加させるか否かを決定する工程を含み、
該脊椎動物におけるＧＩＰレベルを増加させるテスト化合物の能力が、該テスト化合物が、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、方法。
【請求項１２】
低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物を同定するための方法であって、以下の工程：
（ａ）  テスト化合物をイン・ビトロにて宿主細胞またはＧプロテイン−結合受容体（ＧＰＣＲ）を含む宿主細胞の膜と接触させる工程であって、ここで該ＧＰＣＲが、
（ｉ）  配列番号２のアミノ酸１〜３３５；
（ｉｉ）  配列番号２のアミノ酸２〜３３５；
（ｉｉｉ）  特異的プライマー配列番号３および配列番号４を用いてヒトＤＮＡ試料にてポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって増幅可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｉｖ）  ０．１×ＳＳＣ中での６５℃における洗浄をともなう高ストリンジェンシーの条件下で配列番号１の相補体とハイブリダイズ可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｖ）  （ｉ）〜（ｉｖ）で定義されるアミノ酸配列中の一個または数個のアミノ酸の置換、欠失、または付加による、（ｉ）〜（ｉｖ）のＧＰＣＲ由来のＧＰＣＲ；
を含む、工程；
（ｂ）  該受容体の機能性を刺激するテスト化合物の能力を決定する工程；
（ｃ）  試料が由来する脊椎動物における骨質量のレベルを該化合物が増加させるか否かを決定する工程であって、該脊椎動物が工程（ｂ）における前記受容体の機能性を刺激する化合物を前もって投与されている工程を含み、
該脊椎動物における骨質量を増加させるテスト化合物の能力が、該テスト化合物が、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、方法。
【請求項１３】
工程（ｃ）における前記脊椎動物が、マウス、ラット、または前記工程（ｂ）における前記受容体の機能性を刺激する化合物を投与されることに既に同意しているヒトである、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＧＰＣＲが組換え体である、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記宿主細胞が発現ベクターを含み、該発現ベクターがＧＰＣＲをコードするポリヌクレオチドを含む、請求項１０〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記決定する工程が、第二のメッセンジャーのレベルの決定を介するものである、請求項１０〜１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１７】
前記第二のメッセンジャーが環状ＡＭＰ（ｃＡＭＰ）、環状ＧＭＰ（ｃＧＭＰ）、イノシトール１，４，５−三リン酸（ＩＰ３）、ジアシルグリセロール（ＤＡＧ）、ＭＡＰキナーゼ活性、ＭＡＰＫ／ＥＲＫキナーゼキナーゼ−１（ＭＥＫＫ１）活性およびＣａ２＋よりなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ｃＡＭＰのレベルが増加する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記決定する工程が、メラニン保有細胞アッセイの使用を介するもの、前記ＧＰＣＲを含む膜へのＧＴＰγＳ結合の決定を介するもの、またはレポーターアッセイを介するものである、請求項１０〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記宿主細胞が哺乳動物宿主細胞である、請求項１０〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記宿主細胞が酵母宿主細胞である、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記宿主細胞がメラニン保有細胞宿主細胞である、請求項１０〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記テスト化合物が、モル当たり１０，０００グラム未満の分子量を有する小分子である、請求項１０〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記分子量が、モル当たり５，０００グラム未満である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＧＰＣＲが、配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項１０〜２４いずれか１項記載の方法。
【請求項２６】
低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物を同定するための方法であって、以下の工程：
（ａ）Ｇプロテイン−結合受容体１１９（ＧＰＲ１１９）アゴニストをイン・ビトロにて脊椎動物腸内分泌細胞またはＧＩＰを分泌可能な細胞と接触させる工程；および
（ｂ）ＧＰＲ１１９アゴニストが該脊椎動物腸内分泌細胞またはＧＩＰを分泌可能な細胞からのＧＩＰ分泌を刺激するか否かを決定する工程；
を含み、
ここで、該脊椎動物腸内分泌細胞またはＧＩＰを分泌可能な細胞からのＧＩＰ分泌を刺激する該ＧＰＲ１１９アゴニストの能力は、該ＧＰＲ１１９アゴニストが、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、方法。
【請求項２７】
低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物を同定するための方法であって、以下の工程：
（ａ）  Ｇプロテイン−結合受容体１１９（ＧＰＲ１１９）アゴニストが、ＧＰＲ１１９アゴニストを前もって投与した脊椎動物から得られる試料中のＧＩＰレベルを増加させるか否かを決定する工程を含み、
脊椎動物におけるＧＩＰレベルを増加させるＧＰＲ１１９アゴニストの能力が、該ＧＰＲ１１９アゴニストが、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、方法。
【請求項２８】
工程（ａ）における前記脊椎動物が、マウス、ラット、または前記ＧＰＲ１１９アゴニストを投与されることに既に同意しているヒトである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、モル当たり１０，０００グラム未満の分子量を有する小分子である、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記分子量が、モル当たり５，０００グラム未満である、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストがヒトＧＰＲ１１９のアゴニストである、請求項２６〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストは選択的ＧＰＲ１１９アゴニストである、請求項２６〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、コルチコトロピン放出因子−１（ＣＲＦ−１）受容体に対する選択性を超える少なくとも約１００倍のＧＰＲ１１９に対する選択性を有する、請求項２６〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、１０μＭの値未満のＥＣ５０を有する、請求項２６〜３３いずれか１項記載の方法。
【請求項３５】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、１μＭの値未満のＥＣ５０を有する、請求項２６〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、１００ｎＭの値未満のＥＣ５０を有する、請求項２６〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物を同定するための、Ｇプロテイン−結合受容体（ＧＰＣＲ）の使用であって、
（ａ）  該ＧＰＣＲがテスト化合物の存在下または非存在下で該受容体に対する公知のリガンドと接触し、ここで該ＧＰＣＲは：
（ｉ）  配列番号２のアミノ酸１〜３３５；
（ｉｉ）  配列番号２のアミノ酸２〜３３５；
（ｉｉｉ）  特異的プライマー配列番号３および配列番号４を用いてヒトＤＮＡ試料にてポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって増幅可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｉｖ）  ０．１×ＳＳＣ中での６５℃における洗浄をともなう高ストリンジェンシーの条件下で配列番号１の相補体とハイブリダイズ可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｖ）  （ｉ）〜（ｖ）で定義されるアミノ酸配列中の一個または数個のアミノ酸の置換、欠失、または付加による、（ｉ）〜（ｖ）のＧＰＣＲ由来のＧＰＣＲ；
を含み、
（ｂ）  前記公知のリガンドとＧＰＣＲの間の複合体が、検出可能であり；そして
（ｃ）  該テスト化合物の非存在下におけるよりも該テスト化合物の存在下において該複合体のより少数が形成されるか否かを決定する工程が、該テスト化合物が、低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、使用。
【請求項３８】
前記公知のリガンドが標識されている、請求項３７に記載の使用。
【請求項３９】
請求項３７または３８に記載の使用であって、以下：
（ｉ）  その存在下で、より少数の前記複合体が形成される前記テスト化合物をイン・ビトロにて脊椎動物腸内分泌細胞またはＧＩＰを分泌可能な細胞と接触させる工程；および、
（ｉｉ）  該テスト化合物が該脊椎動物腸内分泌細胞または該ＧＩＰを分泌可能な細胞からのＧＩＰ分泌を刺激するか否かを決定する工程をさらに含み、
該脊椎動物腸内分泌細胞またはＧＩＰを分泌可能な細胞からのＧＩＰ分泌を刺激するテスト化合物の能力が、該テスト化合物が、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、使用。
【請求項４０】
請求項３７または３８に記載の使用であって、以下：
（ｉ）  前記テスト化合物が、脊椎動物から得られる試料中のＧＩＰレベルを増加させるか否かを決定する工程であって、該脊椎動物は該テスト化合物を前もって投与されており、該テスト化合物はその存在下で、より少数の前記複合体が形成される、工程をさらに含み、
ここで脊椎動物におけるＧＩＰのレベルを増加させる該テスト化合物の能力が、該テスト化合物が、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、使用。
【請求項４１】
請求項３７または３８に記載の使用であって、以下：
（ｉ）  前記テスト化合物が、試料の由来する脊椎動物中の骨質量のレベルを増加させるか否かを決定する工程であって、該脊椎動物は該テスト化合物を投与されており、該テスト化合物はその存在下で、より少数の前記複合体が形成される、工程をさらに含み、
ここで脊椎動物における骨質量のレベルを増加させる該テスト化合物の能力が、該テスト化合物が、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、使用。
【請求項４２】
工程（ｉ）における前記脊椎動物が、マウス、ラット、または前記テスト化合物を投与されることに既に同意しているヒトである、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項４３】
前記ＧＰＣＲが、組換え体である、請求項３７〜４２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４４】
前記宿主細胞が発現ベクターを含み、該発現ベクターがＧＰＣＲをコードするポリヌクレオチドを含む、請求項３７〜４３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４５】
前記公知のアゴニストがプロテイン−結合受容体１１９（ＧＰＲ１１９）アゴニストである、請求項３７〜４４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４６】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストがヒトＧＰＲ１１９のアゴニストである、請求項４５に記載の使用。
【請求項４７】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストは選択的ＧＰＲ１１９アゴニストである、請求項４５または４６に記載の使用。
【請求項４８】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、コルチコトロピン放出因子−１（ＣＲＦ−１）受容体に対する選択性を超える少なくとも約１００倍のＧＰＲ１１９に対する選択性を有する、請求項４５〜４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、１０μＭの値未満のＥＣ５０を有する、請求項４５〜４８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５０】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、１μＭの値未満のＥＣ５０を有する、請求項４５〜４８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５１】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、１００ｎＭの値未満のＥＣ５０を有する、請求項４５〜４８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５２】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、モル当たり１０，０００グラム未満の分子量を有する小分子である、請求項４５〜５１のいずれか１項記載の使用。
【請求項５３】
前記アゴニストの分子量が、モル当たり５，０００グラム未満である、請求項５２に記載の使用。
【請求項５４】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが経口的に活性である、請求項４５〜５３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５５】
前記テスト化合物が、モル当たり１０，０００グラム未満の分子量を有する小分子である、請求項３７〜５４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５６】
前記テスト化合物の分子量が、モル当たり５，０００グラム未満である、請求項５５に記載の使用。
【請求項５７】
前記ＧＰＣＲが、配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項３７〜５６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５８】
低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物を同定するための方法であって、以下の工程：
（ａ）  Ｇプロテイン−結合受容体（ＧＰＣＲ）をイン・ビトロにてテスト化合物の存在下または非存在下で該受容体に対する公知のリガンドと接触させ、ここで該ＧＰＣＲは：
（ｉ）  配列番号２のアミノ酸１〜３３５；
（ｉｉ）  配列番号２のアミノ酸２〜３３５；
（ｉｉｉ）  特異的プライマー配列番号３および配列番号４を用いてヒトＤＮＡ試料にてポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって増幅可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｉｖ）  ０．１×ＳＳＣ中での６５℃における洗浄をともなう高ストリンジェンシーの条件下で配列番号１の相補体とハイブリダイズ可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｖ）  （ｉ）〜（ｉｖ）で定義されるアミノ酸配列中の一個または数個のアミノ酸の置換、欠失、または付加による、（ｉ）〜（ｉｖ）のＧＰＣＲ由来のＧＰＣＲ；
を含む工程；
（ｂ）  前記公知のリガンドとＧＰＣＲの間の複合体を検出する工程；そして
（ｃ）  該テスト化合物の非存在下におけるよりも該テスト化合物の存在下において該複合体のより少数が形成されるか否かを決定する工程；
（ｄ）  その存在下で、より少数の前記複合体が工程（ｃ）において形成される、前記テスト化合物をイン・ビトロにて脊椎動物腸内分泌細胞またはＧＩＰを分泌可能な細胞と接触させる工程；および、
（ｅ）  該テスト化合物が該脊椎動物腸内分泌細胞または該ＧＩＰを分泌可能な細胞からのＧＩＰ分泌を刺激するか否かを決定する工程を含み、
ここで該脊椎動物腸内分泌細胞またはＧＩＰを分泌可能な細胞からのＧＩＰ分泌を刺激するテスト化合物の能力が、該テスト化合物が、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、方法。
【請求項５９】
低骨質量によって特徴付けられる状態を予防または治療するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物を同定するための方法であって、以下の工程：
（ａ）  Ｇプロテイン−結合受容体（ＧＰＣＲ）を、テスト化合物の存在下または非存在下で該受容体に対する公知のリガンドとイン・ビトロにて接触させる工程であって、ここで該ＧＰＣＲが、
（ｉ）  配列番号２のアミノ酸１〜３３５；
（ｉｉ）  配列番号２のアミノ酸２〜３３５；
（ｉｉｉ）  特異的プライマー配列番号３および配列番号４を用いてヒトＤＮＡ試料にてポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって増幅可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｉｖ）  ０．１×ＳＳＣ中での６５℃における洗浄をともなう高ストリンジェンシーの条件下で配列番号１の相補体とハイブリダイズ可能なポリヌクレオチドによってコードされるＧＰＣＲのアミノ酸配列；
（ｖ）  （ｉ）〜（ｉｖ）で定義されるアミノ酸配列中の一個または数個のアミノ酸の置換、欠失、または付加による、（ｉ）〜（ｉｖ）のＧＰＣＲ由来のＧＰＣＲ；
を含む、工程；
（ｂ）  前記公知のリガンドとＧＰＣＲの間の複合体を検出する工程；そして
（ｃ）  該テスト化合物の非存在下におけるよりも該テスト化合物の存在下において該複合体のより少数が形成されるか否かを決定する工程；
（ｄ）その存在下で、より少数の前記複合体が工程（ｃ）で形成される化合物を、前もって投与した脊椎動物から得られた試料中のＧＩＰのレベルを、テスト化合物が増加させるか否かを決定する工程を含み、
脊椎動物においてＧＩＰのレベルを増加させる該テスト化合物の能力が、該テスト化合物が、低骨質量によって特徴付けられる状態を治療または予防するのに有用な化合物、または個体において骨質量を増加させるのに有用な化合物であることを示す、方法。