(57)【要約】  本発明は、一般式（Ｉ）を有する新規ランチペプチド（ランチオニン含有ペプチド）化合物、その調製のためのプロセス、前記プロセスの鍵となる中間体、これらの医薬的に許容される塩およびこれらを含有する医薬組成物、および疼痛の治療におけるこれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）を有するペプチド化合物であって、
【化１】
2015530869.tif 000007
Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｈ、または単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類およびこれらの対応するデオキシ誘導体から選択される糖部分から選択され；
Ｒ３および／またはＲ４は、独立して、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＲ６Ｒ７から選択され、Ｒ６および／またはＲ７は、独立して、
・水素
・１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
・ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル、
・ハロ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換されたナフチルラジカル、
・式
−（ＣＨ２）ｎＯＲ８
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ８は、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル
をあらわす〕
・式
−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ９および／またはＲ１０は、独立して、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル
をあらわし、
※Ｒ９とＲ１０とを合わせ、−（ＣＨ２）３、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２、−（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）２をあらわすか、または
※Ｒ９およびＲ１０は、隣接する窒素原子と合わせて、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、ピリジル、ベンジルおよび置換ベンジルから選択される置換基で、４位で置換されていてもよいピペラジン部分をあらわし、フェニル部分は、クロロ、ブロモ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシから選択される１個または２個の置換基を有する〕
をあらわし；
Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２として選択され、Ｒ１１および／またはＲ１２は、独立して、
・水素、
・１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル；
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル、
・ハロ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換されたナフチルラジカル、
・式
−（ＣＨ２）ｎＯＲ８
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ８は、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル
をあらわす〕
・式
−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ９および／またはＲ１０は、独立して、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル
をあらわし、
※Ｒ９とＲ１０とを合わせ、−（ＣＨ２）３、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２、−（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）２をあらわすか、または
※Ｒ９およびＲ１０は、隣接する窒素原子と合わせて、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、ピリジル、ベンジルおよび置換ベンジルから選択される置換基で、４位で置換されていてもよいピペラジン部分をあらわし、フェニル部分は、クロロ、ブロモ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシから選択される１個または２個の置換基を有する〕
をあらわし；
・Ｒ１１またはＲ１２が水素である場合、Ｒ１２またはＲ１１は、−ＣＯ−Ｒ１３であり、Ｒ１３は、
○ＮＨ２、
○１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
○２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
○２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
○独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル；
○独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
○独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル、
○ハロ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換されたナフチルラジカル、
○式
−（ＣＨ２）ｎＯＲ８
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ８は、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル
をあらわす〕、
○式
−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ９および／またはＲ１０は、独立して、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル
をあらわし、
※Ｒ９とＲ１０とを合わせ、−（ＣＨ２）３、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２、−（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）２をあらわすか、または
※Ｒ９およびＲ１０は、隣接する窒素原子と合わせて、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、ピリジル、ベンジルおよび置換ベンジルから選択される置換基で、４位で置換されていてもよいピペラジン部分をあらわし、フェニル部分は、クロロ、ブロモ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシから選択される１個または２個の置換基を有する〕
をあらわし；
Ｘおよび／またはＹは、それぞれ、Ｄｈａ（デヒドロアラニン）およびＳｅｒ（セリン）から独立して選択されてもよいペプチド鎖の１６位および２０位のアミノ酸をあらわし；
Ｚ１およびＺ２は、独立して、Ｓ基、Ｓ−Ｏ−基、Ｓ＝Ｏ基、Ｏ−−Ｓ＝Ｏ基およびＯ＝Ｓ＝Ｏ基から選択される、ペプチド化合物。
【請求項２】
前記デオキシ誘導体が６−デオキシ誘導体であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項３】
前記単糖類が、グルコース、マンノース、ガラクトースから選択されることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項４】
前記糖部分が、６−デオキシグルコース、６−デオキシガラクトース（フコース）、６−デオキシ−マンノース（ラムノース）から選択されることを特徴とする、
請求項２に記載のペプチド化合物。
【請求項５】
前記二糖類が、スクロース、ラクトース、マルトースから選択されることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項６】
前記糖部分が、以下の式（ＩＩ）を有することを特徴とする、
請求項２に記載のペプチド化合物。
【化２】
2015530869.tif 000008
【請求項７】
ペプチド鎖の１６位にＤｈａ残基が存在し、一方、ペプチド鎖の２０位にＳｅｒ残基が存在することを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項８】
ペプチド鎖の１６位にＳｅｒ残基が存在し、一方、ペプチド鎖の２０位にＤｈａ残基が存在することを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項９】
前記Ｚ１およびＺ２が、独立してＳとして選択されることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１０】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位の前記ＹがＳｅｒであり、前記Ｚ１およびＺ２がＳであり、前記Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、前記Ｒ２がＨであり、前記Ｒ４がＯＨであり、前記Ｒ３がＮＨ２であり、前記Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１１】
１６位の前記ＸがＳｅｒであり、２０位の前記ＹがＤｈａであり、前記Ｚ１およびＺ２がＳであり、前記Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、前記Ｒ２がＨであり、前記Ｒ４がＯＨであり、前記Ｒ３がＮＨ２であり、前記Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１２】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位の前記ＹがＳｅｒであり、前記Ｚ１およびＺ２がＳであり、前記Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、前記Ｒ２がＨであり、前記Ｒ４がＯＨであり、前記Ｒ３がＯＨであり、前記Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１３】
１６位の前記ＸがＳｅｒであり、２０位の前記ＹがＤｈａであり、前記Ｚ１およびＺ２がＳであり、前記Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、前記Ｒ２がＨであり、前記Ｒ４がＯＨであり、前記Ｒ３がＯＨであり、前記Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１４】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位の前記ＹがＳｅｒであり、前記Ｚ１およびＺ２がＳであり、前記Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、前記Ｒ２がＨであり、前記Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７が−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０であり、ｎ＝３、Ｒ９＝Ｒ１０＝ＣＨ３）であり、前記Ｒ３がＮＨ２であり、前記Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１５】
１６位の前記ＸがＳｅｒであり、２０位のＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７が−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０であり、ｎ＝３、Ｒ９＝Ｒ１０＝ＣＨ３である）であり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１６】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位の前記ＹがＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、前記Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、前記Ｒ２がＨであり、前記Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、前記Ｒ３がＮＨ２であり、前記Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１７】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位のＹがＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１８】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位のＹがＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）、Ｒ３がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１９】
１６位の前記ＸがＳｅｒであり、２０位のＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、Ｒ３がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項２０】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位のＹがＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１がＨであり、Ｒ１２が、１〜２０個の炭素原子を含むアルキルから、−ＣＨ２−シクロヘキサンとして選択される）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項２１】
１６位の前記ＸがＳｅｒであり、２０位のＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１がＨであり、Ｒ１２が、１〜２０個の炭素原子を含むアルキルから、−ＣＨ２−シクロヘキサンとして選択される）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項２２】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位の前記ＹがＳｅｒであり、前記Ｚ１およびＺ２がＳであり、前記Ｒ１が、以下の式（ＩＩＩ）
【化３】
2015530869.tif 000009
を有する化合物であり、前記Ｒ２がＨであり、前記Ｒ４がＯＨであり、前記Ｒ３がＮＨ２であり、前記Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項２３】
１６位の前記ＸがＳｅｒであり、２０位の前記ＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、以下の式（ＩＩＩ）
【化４】
2015530869.tif 000010
を有する化合物であり、前記Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項２４】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位のＹがＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項２５】
１６位の前記ＸがＳｅｒであり、２０位のＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１がＨであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項２６】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位のＹがＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７が−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０であり、ｎ＝２、Ｒ９＝Ｒ１０＝Ｈ）であり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項２７】
１６位の前記ＸがＳｅｒであり、２０位のＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７が−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０であり、ｎ＝２、Ｒ９＝Ｒ１０＝Ｈ）であり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項２８】
Ｄｅｕｔｓｃｈｅ  Ｓａｍｍｌｕｎｇ  ｖｏｎ  Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ  ｕｎｄ  Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ  ＧｍｂＨ（ＤＳＭＺ）に２０１０年９月２９日に寄託された、寄託番号ＤＳＭ２４０５９を有するＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９。
【請求項２９】
Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９、または式（Ｉ）の前記化合物を製造する能力を維持するその改変体または変異体を培養することと、菌糸体および／または発酵ブロスから式（Ｉ）の化合物を回収することと、クロマトグラフィー手段によって純粋な物質を単離することとを含む、
請求項１に記載のペプチド化合物を調製するためのプロセス。
【請求項３０】
式（Ｉ）の化合物が、半合成によって化学的に改変され、および／または生理学的に許容される塩に変換されるさらなる工程を含むことを特徴とする、
請求項２９に記載のプロセス。
【請求項３１】
配列番号１として特定されるＤＮＡ配列：
ＧＴＧＣＡＧＧＡＧＡ  ＴＣＣＴＧＧＡＧＣＴ  ＧＣＡＧＧＡＧＣＴＧ  ＣＣＧＴＣＧＧＣＣＴ  ＣＧＧＣＣＡＣＧＧＡ  ＧＧＡＣＡＴＧＣＣＧ
ＣＴＧＧＴＣＡＧＣＡ  ＣＧＣＴＣＡＧＣＧＴ  ＣＡＧＣＴＣＧＣＣＧ  ＴＧＣＣＣＣＧＧＣＴ  ＧＧＣＣＧＡＧＣＴＣ  ＣＴＴＣＡＣＣＴＧＧ  ＴＣＧＡＡＣＴＧＣＴ  ＧＡ。
【請求項３２】
配列番号２の前駆体ペプチド：
１  ＶＱＥＩＬＥＬＱＥＬＰＳＡＳＡＴＥＤＭＰＬ  ＶＳＴＬＳＶＳＳＰＣＰＧＷＰＳＳＦＴＷＳＮＣ。
【請求項３３】
請求項１に記載のペプチド化合物の製造に使用するための
請求項２８に記載のＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９。
【請求項３４】
医薬として使用するための
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項３５】
疼痛の治療に使用するための
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項３６】
前記疼痛が慢性神経因性疼痛である、
請求項３５に記載のペプチド化合物。
【請求項３７】
通常の賦形剤に加え、請求項１に記載のペプチド化合物を活性成分として少なくとも含む
医薬組成物。
【請求項３８】
医薬として使用するための
請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
疼痛の治療に使用するための
請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記疼痛が慢性神経因性疼痛である、
請求項３９に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
ランチペプチドは、ブドウ球菌、乳酸杆菌および放線菌のような細菌によって、リボソームで合成されるペプチドである。ランチペプチドに共通の構造特徴は、非標準アミノ酸ランチオニンの存在であり、ペプチド構造に立体配座安定性を与える。ランチペプチドのある特定の例は、ラビリントペプチンによってあらわされ、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸ラビオニン（Ｌａｂ）を含有する。ラビオニンは、２個のＳｅｒ残基および１個のＣｙｓ残基から作られる。生合成の間に、両方のセリン残基が脱水してデヒドロアラニン（Ｄｈａ）になる。Ｃ末端Ｃｙｓ残基が、中央のＤｈａに付加することによってチオエーテル架橋を形成し、エノレート中間体を生成し、次いで、第２のＮ末端Ｄｈａに付加し、ラビオニン構造を形成する。当該技術分野で最初に知られたラビリントペプチンは、ラビリントペプチンＡ２である（Ｍｅｉｄｌら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１０、４９、１１５１−１１５４）。ラビリントペプチンＡ２は、１８アミノ酸からなり、非常に疎水性である。
【０００２】
ラビリントペプチンＡ２は、主に疎水性アミノ酸からなる球状構造を有する。外見上、この構造は、２個のノナペプチドに分けることができる。これらのノナペプチドは、それぞれ、ジスルフィド結合を形成するＣ末端Ｃｙｓ残基を有する。
【０００３】
ＷＯ  ２００８／０４０４６９号は、１８アミノ酸長の高度に架橋したペプチド構造で構成されるラビリントペプチンであると定義され、配列がＸＤＷＸＬＷＥＸＣＸＴＧＸＬＦＡＸＣであり、２個のＣｙｓ残基がジスルフィド架橋を形成し、各Ｘが、独立して架橋構造に含まれる非天然アミノ酸の１つをあらわす、Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ  ｎａｍｉｂｉｅｎｓｉｓ（ＤＳＭ６３１３）から得ることができる化合物を記載する。この化合物は、抗菌活性、抗ウイルス活性および神経因性疼痛および炎症性疼痛に対する活性を特徴とすると記載されている。
【０００４】
本発明は、新規ランチペプチド化合物、このような化合物を製造する方法およびこれらの使用を提供する。本発明のこれらの態様および他の態様を本明細書に記載する。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、一般式（Ｉ）を有する微生物由来のペプチド化合物、その医薬的に許容される塩、その医薬組成物および医薬としてのこれらの使用に関する。
【化１】
2015530869.tif 000002
【０００６】
式（Ｉ）の化合物は、ラビオニンアミノ酸残基の存在を特徴とする新規ランチペプチドである。特に、本発明の式（Ｉ）の化合物は、新規であり、主に、異なるアミノ酸配列、本発明の化合物の構造において、遊離システイン残基の非存在に起因するジスルフィド架橋の非存在、以前に記載されたことはないラビオニンアミノ酸の誘導体であるメチルラビオニン誘導体の存在、およびトリプトファン残基の置換が少なくとも存在するという点で、当該技術分野の既知のランチペプチド化合物とは異なる。特に、本発明の式（Ｉ）の化合物は、既知の化合物とは異なるモル分子電荷を特徴とし、従来技術の化合物に特徴的な１８アミノ酸の代わりに２２アミノ酸が存在することを特徴とする。ジスルフィド架橋の非存在、および本発明の環の生成に関与しない１１位および１４位の間のアミノ酸残基の存在によって、式（Ｉ）の化合物は、既知の化合物と比較して、もっと柔軟になり、さらなる立体配座に適合する。さらに、ジスルフィド架橋は、酸化還元反応を非常に受けやすく、従って、本発明の式（Ｉ）の化合物では起こり得ない。
【０００７】
本発明によれば、一般式（Ｉ）を参照すると、Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｈ、または単糖類、好ましくは、６−デオキシヘキソースおよびこれらの対応する誘導体、特に、６−デオキシグルコース、６−デオキシガラクトース（フコース）、６−デオキシ−マンノース（ラムノース）、二糖類（例えば、スクロース、ラクトース、マルトース）、三糖類またはオリゴ糖類およびこれらの対応するデオキシ誘導体から選択される糖部分から選択され、一方、Ｒ３および／またはＲ４は、独立して、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＲ６Ｒ７から選択され、Ｒ６および／またはＲ７は、独立して、
・水素
・１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル、
・ハロ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換されたナフチルラジカル、
・式
−（ＣＨ２）ｎＯＲ８
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ８は、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル
をあらわす〕
・式
−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ９および／またはＲ１０は、独立して、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル
をあらわし、
※Ｒ９とＲ１０とを合わせ、−（ＣＨ２）３、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２、−（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）２をあらわすか、または
※Ｒ９およびＲ１０は、隣接する窒素原子と合わせて、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、ピリジル、ベンジルおよび置換ベンジルから選択される置換基で、４位で置換されていてもよいピペラジン部分をあらわし、フェニル部分は、クロロ、ブロモ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシから選択される１個または２個の置換基を有する〕
をあらわす。
【０００８】
常に、本発明によれば、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２として選択され、Ｒ１１および／またはＲ１２は、独立して、
・水素、
・１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル；
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル、
・ハロ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換されたナフチルラジカル、
・式
−（ＣＨ２）ｎＯＲ８
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ８は、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル
をあらわす〕
・式
−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ９および／またはＲ１０は、独立して、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル
をあらわし、
※Ｒ９とＲ１０とを合わせ、−（ＣＨ２）３、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２、−（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）２をあらわすか、または
※Ｒ９およびＲ１０は、隣接する窒素原子と合わせて、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、ピリジル、ベンジルおよび置換ベンジルから選択される置換基で、４位で置換されていてもよいピペラジン部分をあらわし、フェニル部分は、クロロ、ブロモ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシから選択される１個または２個の置換基を有する〕
をあらわし；
・Ｒ１１またはＲ１２が水素である場合、Ｒ１２またはＲ１１は、−ＣＯ−Ｒ１３であり、Ｒ１３は、
○ＮＨ２、
○１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
○２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
○２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
○独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル；
○独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
○独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル、
○ハロ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換されたナフチルラジカル、
○式
−（ＣＨ２）ｎＯＲ８
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ８は、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル
をあらわす〕、
○式
−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ９および／またはＲ１０は、独立して、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル
をあらわし、
※Ｒ９とＲ１０とを合わせ、−（ＣＨ２）３、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２、−（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）２をあらわすか、または
※Ｒ９およびＲ１０は、隣接する窒素原子と合わせて、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、ピリジル、ベンジルおよび置換ベンジルから選択される置換基で、４位で置換されていてもよいピペラジン部分をあらわし、フェニル部分は、クロロ、ブロモ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシから選択される１個または２個の置換基を有する〕
をあらわす。
【０００９】
一般式（Ｉ）を参照し、Ｘおよび／またはＹは、それぞれ、Ｄｈａ（デヒドロアラニン）およびＳｅｒ（セリン）から独立して選択されてもよいペプチド鎖の１６位および２０位のアミノ酸をあらわす。特に、本発明の好ましい実施形態において、１６位にＤｈａ残基が存在し、一方、２０位にＳｅｒ残基が存在する。常に、本発明の好ましい実施形態によれば、１６位にＳｅｒ残基が存在し、一方、２０位にＤｈａ残基が存在する。
【００１０】
Ｚ１およびＺ２は、独立して、Ｓ基、Ｓ−Ｏ−基、Ｓ＝Ｏ基、Ｏ−−Ｓ＝Ｏ基およびＯ＝Ｓ＝Ｏ基から選択される。
【００１１】
「（Ｃ１〜Ｃ２０）アルキル」という用語は、１〜２０個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖のアルキル鎖、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、１−メチルプロピル、ヘキシル、オクチル、デシルをあらわす。
【００１２】
特に、本発明によれば、１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）という用語は、前記アルキルが、環状アルキル構造でさらに置換されていてもよいことを意味し、本発明の範囲内の例は、例えば、−ＣＨ２−シクロヘキサンである。２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）および２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）という用語も、同じことを意図している。
【００１３】
「（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル」という用語は、１〜４個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖のアルキル鎖、例えば、メチル、エチル、プロピル、１−メチルエチル、ブチル、１−メチルプロピルまたは１，１−ジメチルエチルをあらわす。
【００１４】
「（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル」という用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチル、シクロオクチルから選択されるシクロアルキル基をあらわす。
【００１５】
「（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ」という用語は、１〜４個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖のアルコキシ鎖、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、１−メチルエトキシ、ブトキシ、１−メチルプロポキシおよび１，１−ジメチルエトキシをあらわす。
【００１６】
糖部分という用語は、本明細書で使用される場合、単糖類（例えば、グルコース、マンノース、ガラクトース）、二糖類（例えば、スクロース、ラクトース、マルトース）、三糖類またはオリゴ糖類から選択されることを意図している。特に好ましくは、６−デオキシヘキソース、特に、６−デオキシグルコース、６−デオキシガラクトース、６−デオキシマンノース、二糖類（例えば、スクロース、ラクトース、マルトース）、三糖類またはオリゴ糖類およびこれらの対応するデオキシ誘導体である。
【００１７】
特に、本発明によれば、トリプトファン残基の好ましい置換Ｒ１および／またはＲ２は、単糖類、好ましくは、６−デオキシヘキソース、特に、６−デオキシグルコース、６−デオキシガラクトース（フコース）、６−デオキシ−マンノース（ラムノース）、二糖類（例えば、スクロース、ラクトース、マルトース）、三糖類またはオリゴ糖類およびこれらの対応するデオキシ誘導体から選択される糖部分である。さらに好ましくは、糖部分は、以下の式（ＩＩ）
【化２】
2015530869.tif 000003
を有する６−デオキシヘキソースとして選択される。
【００１８】
本発明は、光学的に純粋な化合物および式（Ｉ）の化合物の立体異性体混合物、例えば、エナンチオマー混合物およびジアステレオマー混合物にも関する。
【００１９】
特に指示のない限り、式（Ｉ）の化合物の立体中心は、Ｒ立体配座および／またはＳ立体配座で存在していてもよい。
【００２０】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、Ｚ１およびＺ２は、独立して、Ｓとして選択される。
【００２１】
本発明の好ましい一実施形態によれば、１６位のＸはＤｈａであり、２０位のＹはＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５はＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２はＨ）である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ａと呼ばれる。
【００２２】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、１６位のＸはＳｅｒであり、２０位のＹはＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２はＨである）である。本発明のこの化合物は、ＮＡＩ−１１２ｂと呼ばれる。
【００２３】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、１６位のＸはＤｈａであり、２０位のＹはＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＯＨであり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２はＨである）である。本発明のこの化合物は、ＮＡＩ−１１２ｃと呼ばれる。
【００２４】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、１６位のＸはＳｅｒであり、２０位のＹはＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＯＨであり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２はＨである）である。本発明のこの化合物は、ＮＡＩ−１１２ｄと呼ばれる。
【００２５】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、１６位のＸはＤｈａであり、２０位のＹはＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＮＲ６Ｒ７（Ｒ６はＨであり、Ｒ７は−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０であり、ｎ＝３、Ｒ９＝Ｒ１０＝ＣＨ３）であり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２はＨである）である。本発明のこの化合物は、ＮＡＩ−１１２ｅと呼ばれる。
【００２６】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、１６位のＸはＳｅｒであり、２０位のＹはＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＮＲ６Ｒ７（Ｒ６はＨであり、Ｒ７は−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０であり、ｎ＝３、Ｒ９＝Ｒ１０＝ＣＨ３）であり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２はＨである）である。本発明のこの化合物は、ＮＡＩ−１１２ｆと呼ばれる。
【００２７】
常に、本発明によれば、別の好ましい実施形態は、１６位のＸがＤｈａであり、２０位のＹがＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２はＨである）である場合である。本発明のこの化合物は、ＮＡＩ−１１２ｇと呼ばれる。
【００２８】
別の好ましい実施形態は、１６位のＸがＳｅｒであり、２０位のＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２はＨである）である場合である。本発明のこの化合物は、ＮＡＩ−１１２ｈと呼ばれる。
【００２９】
本発明の好ましい実施形態は、１６位のＸがＤｈａであり、２０位のＹがＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）である式（Ｉ）の化合物である。本発明のこの化合物は、ＮＡＩ−１１２ｉと呼ばれる。
【００３０】
本発明の別の好ましい実施形態は、１６位のＸがＳｅｒであり、２０位のＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）、Ｒ３がＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７がベンジルである）であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）である式（Ｉ）の化合物である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ｌと呼ばれる。
【００３１】
本発明のさらに好ましい実施形態によれば、１６位のＸはＤｈａであり、２０位のＹはＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１がＨであり、Ｒ１２が、１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）から選択され、特に、−ＣＨ２−シクロヘキサンとして選択される）である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ｍと呼ばれる。
【００３２】
本発明のさらに好ましい実施形態によれば、１６位のＸはＳｅｒであり、２０位のＹはＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１がＨであり、Ｒ１２が、１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）から選択され、特に、−ＣＨ２−シクロヘキサンとして選択される）である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ｎと呼ばれる。
【００３３】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、１６位のＸはＤｈａであり、２０位のＹはＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、以下の式（ＩＩＩ）
【化３】
2015530869.tif 000004
を有する化合物であり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５はＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ｏと呼ばれる。
【００３４】
本発明の別の好ましい実施形態によれば、１６位のＸはＳｅｒであり、２０位のＹはＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、以下の式（ＩＩＩ）
【化４】
2015530869.tif 000005
を有する化合物であり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ｐと呼ばれる。
【００３５】
本発明の好ましい一実施形態によれば、１６位のＸはＤｈａであり、２０位のＹはＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ｑと呼ばれる。
【００３６】
本発明の好ましい一実施形態によれば、１６位のＸはＳｅｒであり、２０位のＹはＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ｒと呼ばれる。
【００３７】
本発明の好ましい一実施形態によれば、１６位のＸがＤｈａであり、２０位のＹはＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７が−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０であり、ｎ＝２、Ｒ９＝Ｒ１０＝Ｈ）であり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ｓと呼ばれる。
【００３８】
本発明の好ましい一実施形態によれば、１６位のＸはＳｅｒであり、２０位のＹはＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＮＲ６Ｒ７ＮＲ６Ｒ７（Ｒ６がＨであり、Ｒ７が−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０であり、ｎ＝２、Ｒ９＝Ｒ１０＝Ｈ）であり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）である。本発明のこの好ましい化合物は、ＮＡＩ−１１２ｔと呼ばれる。
【００３９】
さらに、本発明の目的は、一般式（Ｉ）を有する新規化合物を調製するためのプロセスである。式（Ｉ）の化合物を調製するためのプロセスは、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．（以下、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９として特定される（Ｄｅｕｔｓｃｈｅ  Ｓａｍｍｌｕｎｇ  ｖｏｎ  Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ  ｕｎｄ  Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ  ＧｍｂＨ（ＤＳＭＺ）に２０１０年９月２９日に寄託、寄託番号ＤＳＭ２４０５９を有する）、または式（Ｉ）の前記化合物を製造する能力を維持するその改変体または変異体を培養することと、菌糸体および／または発酵ブロスから式（Ｉ）の化合物を回収することと、クロマトグラフィー手段によって純粋な物質を単離することとを含む。このプロセスは、場合により、式（Ｉ）の化合物が半合成によって化学的に改変され、および／または生理学的に許容される塩に変換されるさらなる工程を含む。
【００４０】
さらに、本発明の目的は、配列番号１によって定義されるようなＤＮＡ配列
ＧＴＧＣＡＧＧＡＧＡ  ＴＣＣＴＧＧＡＧＣＴ  ＧＣＡＧＧＡＧＣＴＧ  ＣＣＧＴＣＧＧＣＣＴ  ＣＧＧＣＣＡＣＧＧＡ  ＧＧＡＣＡＴＧＣＣＧ  ＣＴＧＧＴＣＡＧＣＡ  ＣＧＣＴＣＡＧＣＧＴ  ＣＡＧＣＴＣＧＣＣＧ  ＴＧＣＣＣＣＧＧＣＴ  ＧＧＣＣＧＡＧＣＴＣ  ＣＴＴＣＡＣＣＴＧＧ  ＴＣＧＡＡＣＴＧＣＴ  ＧＡ
であり、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９から単離されるような遺伝子１１２−ｌａｂＡをあらわす。
【００４１】
前記配列番号１によってコードされる前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列は、１６位のＸはＤｈａであり、２０位のＹはＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２はＳであり、Ｒ１は、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２はＨであり、Ｒ４はＯＨであり、Ｒ３はＮＨ２であり、Ｒ５はＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２はＨである）（ＮＡＩ−１１２ａ）；または１６位のＸがＳｅｒであり、２０位のＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）である一般式（Ｉ）の化合物（ＮＡＩ−１１２ｂ）を製造するためにＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９によって使用されるような、配列番号２
ＶＱＥＩＬＥＬＱＥＬＰＳＡＳＡＴＥＤＭＰＬ  ＶＳＴＬＳＶＳＳＰＣＰＧＷＰＳＳＦＴＷＳＮＣ
で与えられる。
【００４２】
本発明によれば、「ランチペプチドＮＡＩ−１１２ａ／ｂ」という用語、または単純に「ＮＡＩ−１１２ａ／ｂ」は、別段の定めがない限り、上に記載したような上述の一般式（Ｉ）の新規化合物を指す。ＮＡＩ−１１２ａおよびＮＡＩ−１１２ｂも、配列番号３および４で特定される。
【００４３】
常に、本発明によれば、ＮＡＩ−１１２ａのアミノ酸配列は、配列番号３
Ｖａｌ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｌｅｕ  Ｘａａ  Ｖａｌ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｐｒｏ  Ｘａａ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ｔｒｐ  Ｐｒｏ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｐｈｅ  Ｘａａ  Ｔｒｐ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｘａａ
で与えられ、ここで、２位にあるアミノ酸（例えば、Ｘａａとして示される）は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸ラビオニン（Ｌａｂ）に属するＮ末端残基であり、３位のアミノ酸は、デヒドロブチリン（Ｄｈｂ）であり、５位のアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸ラビオニン（Ｌａｂ）に属する中央残基であり、１０位に属するアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸ラビオニン（Ｌａｂ）に属するＣ末端残基であり、１５位のアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸メチルラビオニン（Ｍｅ−Ｌａｂ）に属するＮ末端残基であり、１６位のアミノ酸は、デヒドロアラニン（Ｄｈａ）であり、１８位のアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸メチルラビオニン（Ｍｅ−Ｌａｂ）に属する中央残基であり、２２位のアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸メチルラビオニン（Ｍｅ−Ｌａｂ）に属するＣ末端残基である。
【００４４】
常に、本発明によれば、ＮＡＩ−１１２ｂのアミノ酸配列は、配列番号４
Ｖａｌ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｌｅｕ  Ｘａａ  Ｖａｌ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｐｒｏ  Ｘａａ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ｔｒｐ  Ｐｒｏ  Ｘａａ  Ｓｅｒ  Ｐｈｅ  Ｘａａ  Ｔｒｐ  Ｘａａ  Ａｓｎ  Ｘａａ
で与えられ、ここで、２位にあるアミノ酸（例えば、Ｘａａとして示される）は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸ラビオニン（Ｌａｂ）に属するＮ末端残基であり、３位のアミノ酸は、デヒドロブチリン（Ｄｈｂ）であり、５位のアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸ラビオニン（Ｌａｂ）に属する中央残基であり、１０位に属するアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸ラビオニン（Ｌａｂ）に属するＣ末端残基であり、１５位のアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸メチルラビオニン（Ｍｅ−Ｌａｂ）に属するＮ末端残基であり、１８位のアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸メチルラビオニン（Ｍｅ−Ｌａｂ）に属する中央残基であり、２０位のアミノ酸は、デヒドロアラニン（Ｄｈａ）であり、２２位のアミノ酸は、炭素環が翻訳後修飾されたアミノ酸メチルラビオニン（Ｍｅ−Ｌａｂ）に属するＣ末端残基である。
【００４５】
本発明は、縮合剤存在下、少なくとも式（Ｉ）の出発化合物（少なくとも１つのＲ３またはＲ４がＯＨである）と、少なくとも一般式ＮＲ６Ｒ７の選択したアミン（Ｒ６およびＲ７は上に定義したとおりである）との縮合反応の少なくとも１つのさらなる工程を含むことを特徴とする、式（Ｉ）の化合物を調製するためのプロセスにも関する。
【００４６】
この反応は、縮合剤存在下、溶媒存在下で行われる。縮合反応に有用な好ましい不活性有機非プロトン性溶媒は、一連の反応を妨害せず、出発物質を少なくとも部分的に可溶化することができる溶媒である。例えば、式（Ｉ）にすでに示したものから選択される化合物。溶媒は、有機アミド、グリコールおよびポリオールのエーテル、ホスホラミド誘導体、スルホキシドから選択することができる。好ましくは、溶媒は、ジメチルホルムアミド、ジメトキシエタン、ヘキサメチルホスホロアミド、ジメチルスルホキシド、ジオキサン、Ｎ−メチルピロリドンおよびこれらの混合物から選択される。
【００４７】
好ましくは、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）が使用される。本発明の縮合剤は、有機化合物（特に、ペプチド）中のアミノ結合の生成に適した縮合剤である。縮合剤の代表例は、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を含むか、または含まない）、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）ウロミウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（７  オキサベンゾトリアゾール−１−イル）ウラニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、ベンゾトリアゾリル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、ベンゾトリアゾリルオキシ−トリス−（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）および（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、フェニルまたはヘテロ環リン酸アジド、例えば、ジフェニルリン酸アジド、ジモルホリルリン酸アジドである。好ましい縮合剤は、ＰｙＢＯＰである。縮合剤は、一般的に、わずかにモル過剰で使用され（例えば、２．２〜５）、好ましくは、モル過剰の縮合剤は、式（Ｉ）のランチペプチド出発化合物のモル量の約２．５倍である。本発明の方法によれば、通常は、式（Ｉ）の化合物に対してわずかにモル過剰のアミンが用いられる。一般的に、２〜４０倍のモル過剰の選択したアミンが用いられるが、１５〜３０倍のモル過剰が好ましい。アミンＮＲ６Ｒ７を対応する塩として用いる場合（例えば、塩酸塩）、少なくとも、式（Ｉ）の化合物と反応するアミンＮＲ６Ｒ７の遊離塩基を得るためのモル割合の適切な塩基を加えることが必要である。この場合、塩基が過剰であることが一般的に好ましい。アミンＨＮＲ６Ｒ７に対して少なくとも等モル量、好ましくは、約１．２倍モル過剰で、塩を形成する塩基を反応混合物に加えることが簡便である。前記塩を形成する塩基の例は、三級有機脂肪族アミンまたは脂環式アミン、例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン（ＴＥＡ）、Ｎ−メチルピロリデンまたはヘテロ環塩基、例えば、ピコリンなど、アルカリ金属（例えば、ナトリウムおよびカリウム）炭酸水素塩および炭酸塩である。反応温度は、特定の出発物質および反応条件にかなり依存して変わるだろう。一般的に、０℃〜５０℃の温度、好ましくは、室温でアミド化反応を行うことが好ましい。さらに、反応時間は、他の反応パラメータに依存してかなり変動し、一般的に、縮合は、約１〜４時間で終了する。アミンＨＮＲ６Ｒ７が、さらに一級アミノ基を含有する場合、必要な場合には、望ましい生成物を得るために、当該技術分野で知られているように保護されてもよい。本発明のプロセス中に加えられる条件に耐性があり、式（Ｉ）のランチペプチドのコア部分の安定性に影響を与えない条件下で簡単に除去され得る任意の適切なアミノ部分の保護基をここで利用することができる。アミノ官能基の適切な保護基は、例えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｊ．Ｗｉｌｅｙ、Ｎ．Ｙ．、１９８１に記載される群から選択することができる。特に��この場合には、アミノ部分をアシル化することによって作られる保護基が好ましい。本明細書に記載するプロセスで使用される保護基は、一般的に、ペプチド合成で使用される。明らかに、次いで、望ましい最終製品を得るために、脱保護工程が必要である。一般的に、一連の反応は、当該技術分野で既知の方法に従って、ＨＰＬＣによって監視される。この分析結果に基づき、一連の反応を評価し、反応をいつ止めるべきか、それ自体が既知の技術に従って、例えば、非溶媒の添加による沈殿、溶媒を用いた抽出を、さらに一般的な分離操作および精製（例えば、カラムクロマトグラフィー）と組み合わせて、反応物の処理をいつ開始するかを決定することができるだろう。本発明の方法論および上の例によれば、常に本発明によって一連の化合物を調製することができる。
【００４８】
別のさらなる工程は、還元剤存在下、少なくとも式（Ｉ）の出発化合物（Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２であり、Ｒ１１およびＲ１２がＨである）と、少なくとも適切なカルボニル化合物との反応を含んでもよい。
【００４９】
この反応は、還元剤存在下、溶媒存在下で行われる。この反応で有用な好ましい不活性有機非プロトン性溶媒は、一連の反応を妨害せず、出発物質を少なくとも部分的に可溶化することができる溶媒である。例えば、式（Ｉ）にすでに示したものから選択される化合物。溶媒は、有機アミド、グリコールおよびポリオールのエーテル、ホスホラミド誘導体、スルホキシドから選択することができる。好ましくは、溶媒は、ジメチルホルムアミド、ジメトキシエタン、ジメチルスルホキシド、ジオキサン、テトラヒドロフラン、水、Ｎ−メチルピロリドンおよびこれらの混合物から選択される。
【００５０】
好ましくは、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）が使用される。本発明の還元剤は、式（Ｉ）の出発化合物（Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２であり、Ｒ１１およびＲ１２がＨである）に存在するアミンと、適切なカルボニル化合物との縮合によって作られるイミンを還元するのに適した還元剤である。還元剤の代表例は、水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ４）、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＣＮＢＨ３）、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素カリウムである。好ましい還元剤は、ＮａＣＮＢＨ３である。縮合剤は、一般的に、わずかにモル過剰で使用され（例えば、２．２〜５）、好ましくは、モル過剰の縮合剤は、式（Ｉ）のランチペプチド出発化合物のモル量の約２．５倍である。本発明の方法によれば、通常は、式（Ｉ）の化合物に対してわずかにモル過剰のカルボニル化合物が用いられる。一般的に、２〜４０倍のモル過剰の選択したカルボニル化合物が用いられるが、１５〜３０倍のモル過剰が好ましい。一般的に、０℃〜５０℃の温度、好ましくは、室温でアルキル化反応を行うことが好ましい。さらに、反応時間は、他の反応パラメータに依存してかなり変動し、一般的に、縮合は、約１〜４時間で終了する。カルボニル化合物が、さらに一級アミノ基を含有する場合、望ましい生成物を得るために、当該技術分野で知られているように保護されてもよい。本発明のプロセス中に加えられる条件に耐性があり、式（Ｉ）のランチペプチドのコア部分の安定性に影響を与えない条件下で簡単に除去され得る任意の適切なアミノ部分の保護基をここで利用することができる。アミノ官能基の適切な保護基は、例えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｊ．Ｗｉｌｅｙ、Ｎ．Ｙ．、１９８１に記載される群から選択することができる。特に、この場合には、アミノ部分をアシル化することによって作られる保護基が好ましい。本明細書に記載するプロセスで使用される保護基は、一般的に、ペプチド合成で使用される。明らかに、次いで、望ましい最終製品を得るために、脱保護工程が必要である。一般的に、一連の反応は、当該技術分野で既知の方法に従って、ＨＰＬＣによって監視される。この分析結果に基づき、一連の反応を評価し、反応をいつ止めるべきか、それ自体が既知の技術に従って、例えば、非溶媒の添加による沈殿、溶媒を用いた抽出を、さらに一般的な分離操作および精製（例えば、カラムクロマトグラフィー）と組み合わせて、反応物の処理をいつ開始するかを決定することができるだろう。
【００５１】
別のさらなる工程は、最終的には、触媒、例えば、ヨウ化カリウム（ＫＩ）存在下、少なくとも式（Ｉ）の出発化合物（Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２であり、Ｒ１１およびＲ１２がＨである）と、少なくとも式Ｒ１１Ｘ（またはＲ１２Ｘ）の適切なハロゲン化化合物（Ｘが、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであってもよい）との反応を含んでいてもよい。この反応は、触媒剤存在下、溶媒存在下で行われる。この反応で有用な好ましい不活性有機非プロトン性溶媒は、一連の反応を妨害せず、出発物質を少なくとも部分的に可溶化することができる溶媒である。例えば、式（Ｉ）にすでに示したものから選択される化合物。溶媒は、有機アミド、グリコールおよびポリオールのエーテル、ホスホラミド誘導体、スルホキシドから選択することができる。好ましくは、溶媒は、ジメチルホルムアミド、ジメトキシエタン、ジメチルスルホキシド、ジオキサン、テトラヒドロフラン、水、Ｎ−メチルピロリドンおよびこれらの混合物から選択される。
【００５２】
好ましくは、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）が使用される。ハロゲン化化合物が、一般的に、わずかにモル過剰で使用される（例えば、２．２〜５）。本発明の方法によれば、通常は、ハロゲン化化合物は、式（Ｉ）の化合物に対してわずかにモル過剰で使用される。一般的に、２〜４０倍のモル過剰の選択したハロゲン化化合物が用いられるが、１５〜３０倍のモル過剰が好ましい。一般的に、０℃〜５０℃の温度、好ましくは、室温でアルキル化反応を行うことが好ましい。さらに、反応時間は、他の反応パラメータに依存してかなり変動し、一般的に、縮合は、約１〜４時間で終了する。一般的に、一連の反応は、当該技術分野で既知の方法に従って、ＨＰＬＣによって監視される。この分析結果に基づき、一連の反応を評価し、反応をいつ止めるべきか、それ自体が既知の技術に従って、例えば、非溶媒の添加による沈殿、溶媒を用いた抽出を、さらに一般的な分離操作および精製（例えば、カラムクロマトグラフィー）と組み合わせて、反応物の処理をいつ開始するかを決定することができるだろう。
【００５３】
本発明の方法論および上の例によれば、常に本発明によって一連の化合物を調製することができる。本発明の化合物を、経口投与、局所投与または非経口投与することができ、実行すべき治療に依存して好ましい投与経路で投与することができる。投与経路に依存して、これらの化合物を種々の投薬形態に配合してもよい。経口投与のための調剤薬は、カプセル、錠剤、液体溶液または懸濁物の形態であってもよい。当該技術分野で知られているように、カプセルおよび錠剤は、活性成分に加え、従来の賦形剤、例えば、希釈剤、例えば、ラクトース、リン酸カルシウム、ソルビトールなど、滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、結合剤、例えば、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、アカシア、香味剤、許容可能な崩壊剤および湿潤剤を含んでいても良い。一般的に水性または油性の溶液または懸濁物の形態の液体調剤薬は、従来の添加剤、例えば、懸濁剤を含んでいてもよい。局所使用のために、本発明の式（Ｉ）の化合物を、鼻および喉または気管支組織の粘膜を通って吸収するのに適切な形態で調製してもよく、簡便には、液体スプレーまたは吸入剤、トローチ剤、または喉への塗り薬の形態にしてもよい。眼用薬のために、調剤薬は、液体または半液体の形態で存在していてもよい。局所塗布は、軟膏、クリーム、ローション、塗り薬または粉末として疎水性または親水性の塩基に配合してもよい。直腸投与のために、本発明の式（Ｉ）の化合物を、従来のビヒクル、例えば、ココアバター、ワックス、クジラろうまたはポリエチレングリコールおよびこれらの誘導体と混合した坐剤の形態で投与する。注射用組成物は、油性または水性のビヒクルの懸濁物、溶液またはエマルションのような形態をしていてもよく、配合剤、例えば、懸濁剤、安定化剤および／または分散剤を含有していてもよい。または、活性成分は、適切なビヒクル（例えば、滅菌水）を用いて送達するときに再構築するための粉末形態であってもよい。投与される有効成分の量は、例えば、治療される被検体の大きさおよび状態、投与経路および投与頻度、関与する原因物質など、種々の因子によって変わる。
【００５４】
本発明は、医薬として使用するための式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５５】
本発明は、さらに、疼痛の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５６】
本発明によれば、式（Ｉ）の化合物は、慢性疼痛および重篤な疼痛の治療に用いられる。具体的には、本発明の式（Ｉ）の化合物は、炎症性疼痛および神経因性疼痛、例えば、癌の疼痛および化学療法によって誘発される疼痛、偏頭痛および局所的および全身的な麻酔に適している。
【００５７】
本発明の化合物は、一般的に、体重１ｋｇあたり、約０．０３〜約３０ｍｇの活性成分を含む投薬量が効果的である。特定の化合物、疼痛および患者の特徴に依存して、有効な投薬量を１日に１回投与してもよく、または１日に２〜４回に分けて投与してもよい。特に望ましい組成物は、単位あたり約３０〜約５００ｍｇを含有する投薬単位の形態で調製される。
【００５８】
本発明の化合物は、他の薬物、例えば、別の鎮痛剤または第２の症状または異なる状態の原因を治療することを意図した薬剤と組み合わせて使用することもできる。従って、本発明の化合物と他の承認薬物との組成物および／または組み合わせおよび／または会合も本発明の範囲に入る。
【００５９】
その塩、配合物および組成物を含む本発明の式（Ｉ）の新規化合物を、疼痛を予防および治療するためのヒト用または動物用の医薬に使用する鎮痛調剤薬の活性成分として効果的に使用することができる。
【００６０】
本発明は、ヒトまたは動物の体の特定の治療方法または予防方法に使用するための医薬を製造するための式（Ｉ）の化合物またはその組成物の使用も提供する。
【００６１】
式（Ｉ）の化合物は、そのまま、または医薬的に許容され得る担体との混合物で投与することができる。
【００６２】
好ましくは、疼痛の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物を、他の既知の鎮痛剤、例えば、ガバペンチン、プレガバリン、三環系抗うつ剤（限定されないが、イミプラミン、アミトリプチリン、デシプラミンおよびノルトリプチリンを含む）、植物由来アヘン薬（例えば、モルヒネおよびコデイン）、合成オピオイド受容体アゴニスト（限定されないが、フェンタニル、オキシコドン、トラマドール、ブプレノルフィン、メタドン、ヒドロモルフォン、ペンタゾシンおよびペチジンを含む）および非ステロイド系鎮痛薬（限定されないが、アスピリン、インドメタシン、イブプロフェン、フルルビプロフェン、カルプロフェン、スリンダク、ジクロフェナクおよびパラセタモールを含む）と組み合わせて投与することもできる。
【００６３】
被検体に投与したとき、最初に投与されたものの治療効果が完全に消えない様式での式（Ｉ）の化合物の逐次投与、同時投与および別個の投与を含む併用療法も、本発明の保護範囲に含まれる。
【００６４】
本発明の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容され得る付加塩を、非経口投与、経口投与または局所投与に適した形態に配合してもよい。
【００６５】
（株および発酵）
式（Ｉ）の化合物の製造は、これを産生することが可能なＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．株（すなわち、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９、または式（Ｉ）の化合物を産生する能力を維持するその改変体または変異体）を培養し、培養ブロス全体および／または分離した菌糸体および／または濾過した発酵ブロスから得られるランチペプチドを単離し、単離したランチペプチドをクロマトグラフィー手段によって精製することによって達成される。
【００６６】
好ましい一実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物の製造は、炭素、窒素および無機塩の容易に消化可能または使用可能な供給源を含有する水性栄養媒体中、好気条件で行われる。発酵分野で通常使用される多くの栄養媒体を使用することができるが、好ましい炭素源は、デンプン、デキストリン、グルコース、マルトース、グリセロールなどである。好ましい窒素源は、大豆ミール、ペプトン、肉抽出物、加水分解カゼイン、トリプトン、コーンスティープリカー、綿実粕、酵母抽出物などである。
【００６７】
ナトリウムイオン、カリウムイオン、鉄イオン、亜鉛イオン、コバルトイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、アンモニウムイオン、塩化物イオン、炭酸イオン、硫酸イオン、リン酸イオン、硝酸イオンなどを得ることができる可溶性塩を特定の培地に組み込むことができる。
【００６８】
式（Ｉ）の化合物を産生する株を、好ましくは、発酵管または振とうフラスコで前培養し、次いで、この培養物を使用し、かなりの量の物質を産生するための発酵用反応瓶に接種する。前培養に使用する培地は、もっと大きな発酵に使用するのと同じであってもよいが、他の培地を使用してもよい。
【００６９】
好ましい一態様によれば、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９株をＳ１プレートで成長させ（詳細な情報は、実験部分に記載する）、この株は、明るいオレンジ色のコロニーを生成する。
【００７０】
式（Ｉ）の化合物を産生するＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９を成長させるための温度は、２６〜３５℃、好ましくは、２８〜３２℃である。発酵中、ランチペプチドの産生をＨＰＬＣ分析によって監視することができる。式（Ｉ）の化合物の最大産生は、一般的に、発酵７２時間より後から１９２時間より前に起こる。
【００７１】
このように、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物を産生することができるＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９またはその改変体または変異体を培養することによって産生され、培養ブロスおよび／または菌糸体中に見出される。
【００７２】
（ＡＣＴＩＮＯＰＬＡＮＥＳ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９７  １６Ｓ  ｒＲＮＡ遺伝子配列）
Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９株の１６ｒＲＮＡ遺伝子（１６Ｓ  ｒＤＮＡ）、すなわち、１４１９ヌクレオチドの部分的な配列は、配列番号５で報告される。この配列を、公的なデータベースに寄託された配列と比較し、種々のＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ株の１６Ｓ  ｒＲＮＡ遺伝子配列に関連することがわかっている。関連している場合であっても、この配列は、明確に公的データベースに寄託された配列とは異なる。
【００７３】
他の微生物と同様に、ランチペプチドＮＡＩ−１１２ａ／ｂを産生する株の特徴は、変動する。例えば、この株の人工改変体および変異体は、種々の既知の突然変異源、例えば、紫外線および化学物質、例えば、亜硝酸、Ｎ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンおよび多くのその他の物質を用いた処理によって得ることができる。Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．  ＤＳＭ２４０５９株のすべての天然および人工の改変体および変異体は、ランチペプチドＮＡＩ−１１２ａ／ｂを産生することができる。
【００７４】
配列番号５（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９株の１６Ｓ  ｒＲＮＡ遺伝子）
１    ＧＣＧＧＣＧＴＧＣＴ  ＴＡＡＣＡＣＡＴＧＣ  ＡＡＧＴＣＧＡＧＣＧ  ＧＡＡＡＧＧＣＣＣＴ  ＴＣＧＧＧＧＴＡＣＴ
５１    ＣＧＡＧＣＧＧＣＫＡ  ＡＣＧＧＧＴＧＡＧＴ  ＡＡＣＡＣＧＴＧＡＧ  ＡＡＡＣＣＴＧＣＣＣ  ＴＧＧＡＣＴＴＴＧＧ
１０１    ＧＡＴＡＡＣＣＣＴＣ  ＧＧＡＡＡＣＧＧＧＧ  ＧＣＴＡＡＴＡＣＣＧ  ＡＡＴＡＣＧＡＣＴＴ  ＡＣＣＣＴＣＧＣＡＴ
１５１    ＧＧＧＧＧＴＴＧＧＴ  ＧＧＡＡＡＧＴＴＴＴ  ＴＣＧＧＴＣＴＧＧＧ  ＡＴＧＧＴＣＴＣＧＣ  ＧＧＣＣＴＡＴＣＡＧ
２０１    ＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧ  ＧＧＧＴＡＡＴＧＧＣ  ＣＴＡＣＣＡＡＧＧＣ  ＧＡＣＧＡＣＧＧＧＴ  ＡＧＣＣＧＧＣＣＴＧ
２５１    ＡＮＡＧＧＧＣＧＡＣ  ＣＧＧＣＣＡＣＡＣＴ  ＧＧＧＡＣＴＧＡＧＡ  ＣＡＣＧＧＣＣＣＡＧ  ＡＣＴＣＣＴＡＣＧＧ
３０１    ＧＡＧＧＣＡＧＣＡＧ  ＴＧＧＧＧＡＡＴＡＴ  ＴＧＣＡＣＡＡＴＧＧ  ＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴ  ＧＡＴＧＣＡＧＣＧＡ
３５１    ＣＧＣＣＧＣＧＴＧＡ  ＧＧＧＡＴＧＡＣＧＧ  ＣＣＴＴＣＧＧＧＴＴ  ＧＴＡＡＡＣＣＴＣＴ  ＴＴＣＡＧＣＡＧＧＧ
４０１    ＡＣＧＡＡＧＣＧＣＡ  ＡＧＴＧＡＣＧＧＴＡ  ＣＣＴＧＣＡＧＡＡＧ  ＡＡＧＣＧＣＣＧＧＣ  ＣＡＡＣＴＡＣＧＴＧ
４５１    ＣＣＡＧＣＡＧＣＣＧ  ＣＧＧＴＡＡＧＡＣＧ  ＴＡＧＧＧＣＧＣＧＡ  ＧＣＧＴＴＧＴＣＣＧ  ＧＡＴＴＴＡＴＴＧＧ
５０１    ＧＣＧＴＡＡＡＧＡＧ  ＣＴＣＧＴＡＧＧＣＧ  ＧＣＴＴＧＴＣＧＣＧ  ＴＣＧＡＣＴＧＴＧＡ  ＡＡＡＣＣＣＧＣＧＧ
５５１    ＣＴＣＡＡＣＣＧＣＧ  ＧＧＣＣＴＧＣＡＧＴ  ＣＧＡＴＡＣＧＧＧＣ  ＡＧＧＣＴＡＧＡＧＴ  ＴＣＧＧＴＡＧＧＧＧ
６０１    ＡＧＡＣＴＧＧＡＡＴ  ＴＣＣＴＧＧＴＧＴＡ  ＧＣＧＧＴＧＡＡＡＴ  ＧＣＧＣＡＧＡＴＡＴ  ＣＡＧＧＡＧＧＡＡＣ
６５１    ＡＣＣＧＡＴＧＧＣＧ  ＡＡＧＧＣＡＧＧＴＣ  ＴＣＴＧＧＧＣＣＧＡ  ＴＡＣＴＧＡＣＧＣＴ  ＧＡＧＧＡＧＣＧＡＡ
７０１    ＡＧＣＧＴＧＧＧＧＡ  ＧＣＧＡＡＣＡＧＧＡ  ＴＴＡＧＡＴＡＣＣＣ  ＴＧＧＴＡＧＴＣＣＡ  ＣＧＣＴＧＴＡＡＡＣ
７５１    ＧＴＴＧＧＧＣＧＣＴ  ＡＧＧＴＧＴＧＧＧＧ  ＧＡＣＣＴＣＴＣＣＧ  ＧＴＴＣＴＣＴＧＴＧ  ＣＣＧＣＡＧＣＴＡＡ
８０１    ＣＧＣＡＴＴＡＡＧＣ  ＧＣＣＣＣＧＣＣＴＧ  ＧＧＧＡＧＴＡＣＧＧ  ＣＣＧＣＡＡＧＧＣＴ  ＡＡＡＡＣＴＣＡＡＡ
８５１    ＧＧＡＡＴＴＧＡＣＧ  ＧＧＧＧＣＣＣＧＣＡ  ＣＡＡＧＣＧＧＣＧＧ  ＡＧＣＡＴＧＣＧＧＡ  ＴＴＡＡＴＴＣＧＡＴ
９０１    ＧＣＡＡＣＧＣＧＡＡ  ＧＡＡＣＣＴＴＡＣＣ  ＴＧＧＧＴＴＴＧＡＣ  ＡＴＣＧＣＣＧＧＡＡ  ＡＡＣＴＣＧＣＡＧＡ
９５１    ＧＡＴＧＣＧＧＧＧＴ  ＣＣＴＴＣＧＧＧＧＣ  ＣＧＧＴＧＡＣＡＧＧ  ＴＧＧＴＧＣＡＴＧＧ  ＣＴＧＴＣＧＴＣＡＧ
１００１    ＣＴＣＧＴＧＴＣＧＴ  ＧＡＧＡＴＧＴＴＧＧ  ＧＴＴＡＡＧＴＣＣＣ  ＧＣＡＡＣＧＡＧＣＧ  ＣＡＡＣＣＣＴＣＧＴ
１０５１    ＴＣＧＡＴＧＴＴＧＣ  ＣＡＧＣＧＣＧＴＴＡ  ＴＧＧＣＧＧＧＧＡＣ  ＴＣＡＴＣＧＡＡＧＡ  ＣＴＧＣＣＧＧＧＴＣ
１１０１    ＡＡＣＴＣＧＧＡＧＧ  ＡＡＧＧＴＧＧＧＧＡ  ＴＧＡＣＧＴＣＡＡＧ  ＴＣＡＴＣＡＴＧＣＣ  ＣＣＴＴＡＴＧＴＣＣ
１１５１    ＡＧＧＧＣＴＴＣＡＣ  ＧＣＡＴＧＣＴＡＣＡ  ＡＴＧＧＣＣＧＧＴＡ  ＣＡＡＡＧＧＧＣＴＧ  ＣＧＡＴＡＣＣＧＴＧ
１２０１    ＡＧＧＴＧＧＡＧＣＧ  ＡＡＴＣＣＣＡＡＡＡ  ＡＧＣＣＧＧＴＣＴＣ  ＡＧＴＴＣＧＧＡＴＣ  ＧＧＧＧＴＣＴＧＣＡ
１２５１    ＡＣＴＣＧＡＣＣＣＣ  ＧＴＧＡＡＧＴＣＧＧ  ＡＧＴＣＧＣＴＡＧＴ  ＡＡＴＣＧＣＡＧＡＴ  ＣＡＧＣＡＡＣＧＣＴ
１３０１    ＧＣＧＧＴＧＡＡＴＡ  ＣＧＴＴＣＣＣＧＧＧ  ＣＣＴＴＧＴＡＣＡＣ  ＡＣＣＧＣＣＣＧＴＣ  ＡＣＧＴＣＡＣＧＡＡ
１３５１    ＡＧＴＣＧＧＣＡＡＣ  ＡＣＣＣＧＡＡＧＣＣ  ＧＧＴＧＧＣＣＴＡＡ  ＣＣＣＧＴＡＡＡＧＧ  ＧＡＧＧＧＡＧＣＣＧ
１４０１    ＴＣＧＡＡＧＧＴＧＧ  ＧＧＣＴＧＧＣＧＡ
【００７５】
（前駆体ペプチド遺伝子の配列）
Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９のドラフト遺伝子配列は、４５４技術によって得られる。合計１９０．０００の配列を作成し、１９００のアセンブリしたコンティグに７４．１Ｍｂの配列を得る。Ｂｌａｓｔ分析（ｈｔｔｐ：／／ｂｌａｓｔ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／Ｂｌａｓｔ．ｃｇｉ）を使用し、式（Ｉ）の化合物の部分的なアミノ酸配列を用いてＮＡＩ−１１２の前駆体ペプチドをコードする遺伝子を特定し、１１２−ｌａｂＡ遺伝子を特定し、この遺伝子は、前駆体ペプチドにラビオニンアミノ酸残基を組み込むのに必要なＬａｂＫＣ改変酵素をコードする遺伝子によって切断される。配列番号１によって定義されるような１１２−ｌａｂＡのＤＮＡ配列（すなわち、１３２ヌクレオチド）は、１６位のＸがＤｈａであり、２０位のＹがＳｅｒであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである一般式（Ｉ）の化合物（ＮＡＩ−１１２ａ）または１６位のＸがＳｅｒであり、２０位のＹがＤｈａであり、Ｚ１およびＺ２がＳであり、Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、Ｒ２がＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ３がＮＨ２であり、Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである一般式（Ｉ）の化合物（ＮＡＩ−１１２ｂ）を産生するために、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９によって使用されるような配列番号２によって定義されるような前駆体ペプチド１１２−ＬａｂＡをコードする。
【００７６】
この前駆体ペプチドは、前駆体ペプチドの酵素による処理に必要な２１−ａａリーダーペプチドと、一般式（Ｉ）の成熟ランチペプチドを産生するように翻訳後修飾される２２−ａａプロペプチドとを含有する。１１２−ＬａｂＡのａａ配列は、Ｓｅｒ２／Ｓｅｒ５／Ｃｙｓ１０およびＳｅｒ１５／Ｔｈｒ１８およびＣｙｓ２２モチーフが、一般式（Ｉ）の化合物に示されるような対応するラビオニンおよびメチルラビオニンを作成するための前駆体として役立つことを示す。
【００７７】
（配列番号１（化合物の前駆体ペプチドをコードするＤＮＡ配列））
ＧＴＧＣＡＧＧＡＧＡ  ＴＣＣＴＧＧＡＧＣＴ  ＧＣＡＧＧＡＧＣＴＧ  ＣＣＧＴＣＧＧＣＣＴ１  ＣＧＧＣＣＡＣＧＧＡ  ＧＧＡＣＡＴＧＣＣＧ
６１  ＣＴＧＧＴＣＡＧＣＡ  ＣＧＣＴＣＡＧＣＧＴ  ＣＡＧＣＴＣＧＣＣＧ  ＴＧＣＣＣＣＧＧＣＴ  ＧＧＣＣＧＡＧＣＴＣ  ＣＴＴＣＡＣＣＴＧＧ  
１２１  ＴＣＧＡＡＣＴＧＣＴ  ＧＡ  
【００７８】
（配列番号２（化合物の前駆体ペプチド））
ＶＱＥＩＬＥＬＱＥＬＰＳＡＳＡＴＥＤＭＰＬ  ＶＳＴＬＳＶＳＳＰＣＰＧＷＰＳＳＦＴＷＳＮＣ
【００７９】
（式（Ｉ）の化合物の抽出および精製）
式（Ｉ）の化合物は、菌糸体と、発酵ブロスを濾過したフラクションの両方にほぼ均等に分布していることがわかっている。培養物を処理し、透明ブロスから菌糸体を分離してもよく、菌糸体を水混和性溶媒で抽出し、使用した菌糸体を除去した後に式（Ｉ）の化合物を含む溶液を得てもよい。
【００８０】
次いで、この菌糸体抽出物を別個に処理してもよく、または上澄みフラクションについて以下に報告する手順に従って、上澄みを含むプール液で処理してもよい。水混和性溶媒が、菌糸体抽出物からランチペプチドを回収する操作を妨害し得る場合、水混和性溶媒を蒸留によって除去してもよく、または妨害しない濃度になるまで水で希釈してもよい。
【００８１】
「水混和性溶媒」との用語は、本明細書で使用する場合、当該技術分野で現在与えられているこの用語の意味を有することを意図しており、使用条件で合理的に広い濃度範囲で水と混和する溶媒を指す。本発明の化合物の抽出に使用可能な水混和性有機溶媒の例は、低級アルカノール、例えば、（Ｃ１〜Ｃ３）アルカノール、例えば、メタノール、エタノールおよびプロパノール；フェニル（Ｃ１〜Ｃ３）アルカノール、例えば、ベンジルアルコール；低級ケトン、例えば、（Ｃ３〜Ｃ４）ケトン、例えば、アセトンおよびエチルメチルケトン；環状エーテル、例えば、ジオキサンおよびテトラヒドロフラン；グリコールおよびこれらの部分的なエーテル化生成物、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコールおよびエチレングリコールモノメチルエーテル、低級アミド、例えば、ジメチルホルムアミドおよびジエチルホルムアミド；酢酸ジメチルスルホキシドおよびアセトニトリルである。
【００８２】
産生する微生物の発酵ブロス上澄みからの式（Ｉ）の化合物の回収は、溶媒を用いた抽出、非溶媒を加えることによる沈殿を含む本質的に既知の技術に従って、または溶液のｐＨを変えることによって、分配クロマトグラフィー、逆相分配クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、分子排除クロマトグラフィーなどによって、または上述の２つ以上の技術の組み合わせによって行われる。
【００８３】
水不混和性有機溶媒を用い、濾過した発酵ブロスから式（Ｉ）の化合物を回収するための手順の後、可能ならば沈殿剤を加えることによって、濃縮した抽出物からの沈殿を行う。この場合にも、「水不混和性溶媒」は、本明細書で使用する場合、当該技術分野で現在与えられているこの用語の意味を有することを意図しており、使用条件で、意図した使用に適した合理的に広い濃度範囲で水とわずかに混和するか、またはほとんど混和しない溶媒を指す。
【００８４】
発酵ブロスから本発明の化合物を抽出するのに使用可能な水不混和性有機溶媒の例は、直鎖、分枝鎖または環状であってもよい少なくとも４個の炭素原子を含むアルカノール、例えば、ｎ−ブタノール、１−ペンタノール、２−ペンタノール、３−ペンタノール、１−ヘキサノール、２−ヘキサノール、３−ヘキサノール、３，３−ジメチル−１−ブタノール、４−メチル−１−ペンタノール、３−メチル−１−ペンタノール、２，２−ジメチル−３−ペンタノール、２，４−ジメチル−３−ペンタノール、４，４−ジメチル−２−ペンタノール、５−メチル−２−ヘキサノール、１−ヘプタノール、２−ヘプタノール、５−メチル−１−ヘキサノール、２−エチル−１−ヘキサノール、２−メチル−３−ヘキサノール、１−オクタノール、２−オクタノール、シクロペンタノール、２−シクロペンチルエタノール、３−シクロペンチル−１−プロパノール、シクロヘキサノール、シクロヘプタノール、シクロオクタノール、２，３−ジメチル−シクロヘキサノール，４−エチルシクロヘキサノール、シクロオクチルメタノール、６−メチル−５−ヘプテン−２−オール、１−ノナノール、２−ノナノール、１−デカノール、２−デカノールおよび３−デカノール；少なくとも５個の炭素原子を含むケトン、例えば、メチルイソプロピルケトン、メチルイソブチルケトン、メチル−ｎ  アミルケトン、メチルイソアミルケトンおよびこれらの混合物である。当該技術分野で知られているように、濾過した発酵ブロスからの生成物の抽出は、ｐＨを適切な値に調節することによって、および／または抽出溶媒に可溶性のランチペプチドとのイオン対を形成する適切な有機塩を加えることによって改良されるだろう。当該技術分野で知られているように、相分離は、水相に塩を加えることによって改良されるだろう。
【００８５】
抽出の後、かなりの量の水を含む有機相を回収するとき、有機相から水を共沸することが簡便であろう。一般的に、この共沸には、水と最低限の共沸混合物を生成することができる溶媒を加えることが必要であり、次いで、必要な場合、所望な生成物を沈殿させるために沈殿剤を加える。水と最低限の共沸混合物を生成することができる有機溶媒の代表例は、ｎ−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ブチルエーテル、炭素  テトラクロリド、クロロホルム、シクロヘキサン、２，５−ジメチルフラン、ヘキサンおよびｍ−キシレンであり、好ましい溶媒は、ｎ−ブタノールである。沈殿剤の例は、石油エーテル、低級アルキルエーテル、例えば、エチルエーテル、プロピルエーテルおよびブチルエーテルおよび低級アルキルケトン、例えば、アセトンである。
【００８６】
式（Ｉ）の化合物を回収するための代替的な手順によれば、濾過した発酵ブロスを吸着マトリックスと接触させ、次いで、極性の水混和性溶媒またはこれらの混合物で溶出し、減圧下で油性残渣になるまで濃縮し、上にすでに述べた種類の沈殿剤を用いて沈殿させることができる。
【００８７】
本発明の化合物の回収に簡便に使用可能な吸着マトリックスの例は、ポリスチレンまたは混合ポリスチレン−ジビニルベンゼン樹脂（例えば、Ｍ１１２またはＳ１１２、Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．；Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＸＡＤ２またはＸＡＤ４、Ｒｏｈｍ  ＆  Ｈａａｓ；Ｄｉａｉｏｎ  ＨＰ  ２０、Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ）、アクリル樹脂（例えば、ＸＡＤ７またはＸＡＤ８、Ｒｏｈｍ  ＆  Ｈａａｓ）、ポリアミド、例えば、ポリカプロラクタム、ナイロンおよび架橋したポリビニルピロリドン（例えば、ポリアミド−ＣＣ  ６、ポリアミド−ＳＣ  ６、ポリアミド−ＣＣ  ６．６、ポリアミド−ＣＣ  ６ＡＣおよびポリアミド−ＳＣ  ６ＡＣ、Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ  ＆  Ｃｏ．、ドイツ；ＰＡ  ４００、Ｍ．Ｗｏｅｌｍ  ＡＧ、ドイツ）；およびポリビニルピロリドン樹脂ＰＶＰ−ＣＬ（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｅ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ．、ＫＧ、ドイツ）および孔径が制御された架橋デキストラン（例えば、Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）ＬＨ−２０、Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｆｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ＡＢ）である。好ましくは、ポリスチレン樹脂を使用し、特に好ましくは、Ｄｉａｉｏｎ  ＨＰ２０樹脂である。ポリスチレン樹脂、ポリスチレン−ジビニルベンゼン樹脂、ポリアミド樹脂またはアクリル樹脂の場合、好ましい溶出液は、水混和性溶媒またはその水性混合物である。
【００８８】
水性混合物は、適切なｐＨ値でバッファーを含有していてもよい。この場合でも、「水混和性溶媒」という用語は、本明細書および特許請求の範囲で使用する場合、上述のように当該技術分野で現在与えられているこの用語の意味を有することを意図している。
【００８９】
本発明の式（Ｉ）のランチペプチド化合物の単離および精製のための連続的な手順を、ブロス上澄みおよび／または菌糸体からプールした抽出物で行ってもよい。例えば、濾過した発酵ブロスまたは上澄みに含まれる式（Ｉ）の生成物のランチペプチド化合物の一部が、吸収樹脂への吸収によって回収される場合、および菌糸体に含まれるランチペプチドの一部が水混和性溶媒を用いて菌糸体から抽出され、その後に吸収樹脂への吸着によって回収される場合、場合により、濃縮し、次いで、単一の収穫物として処理した後に、この２セットの吸収樹脂それぞれから溶出したフラクションを合わせてもよい。
【００９０】
または、別個の抽出段階に利用されるこの２セットの吸収樹脂が、同じ種類であり、同じ機能的特徴を有する場合、これらを一緒にプールし、例えば、混合物に対し、水混和性溶媒またはこれらの水との混合物を用いて均一の溶出工程を行ってもよい。
【００９１】
いずれにしても、式（Ｉ）の未精製化合物を回収するのに適した手順であればよく、別個の抽出段階に由来する生成物の組み合わせから得られる未精製物質の混合物に対し、通常は、連続した精製工程を行う。式（Ｉ）の未精製化合物の精製は、任意の既知の技術によって達成することができるが、好ましくは、クロマトグラフィー手順を用いて行われる。
【００９２】
これらのクロマトグラフィー手順の例は、回収工程に関連して報告されるものであり、上述の水混和性溶媒または水混和性溶媒との水性混合物を用いて溶出する、固定相、例えば、シリカゲル、アルミナ、活性化ケイ酸マグネシウムなどによるクロマトグラフィー、または種々の機能的誘導体化を伴うシラン化シリカゲルでの逆相クロマトグラフィーも含む。
【００９３】
例えば、固定相としてＲＰ−８またはＲＰ−１８を用い、ＨＣＯＯＮＨ４バッファー：ＣＨ３ＣＮまたはトリフルオロ酢酸（０．１％）：ＣＨ３ＣＮ混合物を溶出系として用い、分取ＨＰＬＣクロマトグラフィーを使用してもよい。１回の実施または繰り返しの実施で、精製工程から回収された活性フラクションを一緒にプールし、減圧下で濃縮し、上述の種類の沈殿剤を加えることによって沈殿させ、乾燥させるか、または凍結乾燥させる。
【００９４】
生成物が残留量のギ酸アンモニウムまたは他の緩衝塩を含む場合には、固体相抽出カラム（例えば、逆相樹脂カラム、例えば、ＳＰＥ  Ｓｕｐｅｒｃｌｅａｎ  ＬＣＰｌ８  Ｓｕｐｅｌｃｏ（Ｂｅｌｌｅｆｏｎｔｅ  ＰＡ、ＵＳＡ））への式（Ｉ）の化合物の吸収、次いで、蒸留水を用いた洗浄および適切な水性溶媒混合物、例えば、メタノール：水を用いた溶出によってこれらを除去してもよい。次いで、式（Ｉ）の化合物を、溶出溶媒を除去することによって回収する。
【００９５】
したがって、式（Ｉ）の精製した化合物を乾燥させた調剤薬を白色粉末として得た。当該技術分野では一般的なように、製造工程および回収、精製工程を、ＨＰＬＣまたは質量分光計と接続したＨＰＬＣを含む種々の分析手順によって監視してもよい。
【図面の簡単な説明】
【００９６】
【図１Ａ】図１Ａは、ＮＡＩ−１１２ａ／ｂのフラグメント化パターンの低解像度スペクトルをあらわす。
【図１Ｂ】図１Ｂは、ｍ／ｚ  １１８４に二重にプロトン化したイオンを示すＮＡＩ−１１２ａ／ｂ  ＭＳフルスキャン高解像度スペクトルをあらわす。
【図２】図２は、ＫＢｒ中のＮＡＩ−１１２ａ／ｂのＩＲスペクトルをあらわす。
【図３】図３は、アセトニトリル：水に溶解した抗生物質ＮＡＩ−１１２ａ／ｂのＵＶスペクトルをあらわす。
【図４】図４は、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＭＸ  ６００分光計、２５℃、アセトニトリル−ｄ３：Ｄ２Ｏ／Ｈ２Ｏ混合物中で記録したＮＡＩ−１１２ａ／ｂの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルをあらわす。
【図５】図５は、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＭＸ  ６００分光計、２５℃、アセトニトリル−ｄ３：Ｄ２Ｏ／Ｈ２Ｏ混合物中で記録したＮＡＩ−１１２ａ／ｂのＨＳＱＣスペクトルをあらわす。
【図６】図６は、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＭＸ  ６００分光計、２５℃、アセトニトリル−ｄ３：Ｄ２Ｏ／Ｈ２Ｏ混合物中で記録したＨＭＢＣスペクトルをあらわす。
【図７】図７は、ｍ／ｚ  １１８４．９で二重にプロトン化したイオンを示すＮＡＩ−１１２ｃ／ｄフルスキャン低解像度スペクトルをあらわす。
【図８】図８は、ｍ／ｚ  １２２６．２で二重にプロトン化したイオンを示すＮＡＩ−１１２ｅ／ｆフルスキャン低解像度スペクトルをあらわす。
【図９】図９は、ｍ／ｚ  １２２８．５で二重にプロトン化したイオンを示すＮＡＩ−１１２ｇ／ｈフルスキャン低解像度スペクトルをあらわす。
【図１０】図１０は、ｍ／ｚ  １２７３．６で二重にプロトン化したイオンを示すＮＡＩ−１１２ｉ／ｌフルスキャン低解像度スペクトルをあらわす。
【図１１】図１１は、ｍ／ｚ  １２３２．４で二重にプロトン化したイオンを示すＮＡＩ−１１２ｍ／ｎフルスキャン低解像度スペクトルをあらわす。
【図１２】図１２は、ｍ／ｚ  １２０３．９で二重にプロトン化したイオンを示すＮＡＩ−１１２ｏ／ｐフルスキャン低解像度スペクトルをあらわす。
【図１３】図１３は、ｍ／ｚ  １１１１．３で二重にプロトン化したイオンを示すＮＡＩ−１１２ｑ／ｒフルスキャン低解像度スペクトルをあらわす。
【図１４】図１４は、ｍ／ｚ  １２０５．３で二重にプロトン化したイオンを示すＮＡＩ−１１２ｓ／ｔフルスキャン低解像度スペクトルをあらわす。
【図１５】図１５は、末梢性ニューロパチーの坐骨神経構築モデルにおけるＮＡＩ−１１２ａ／ｂの抗侵害受容効果をあらわす。
【図１６】図１６は、マウスのホルマリンモデルにおけるＮＡＩ−１１２ａ／ｂの抗炎症効果をあらわす。
【実施例】
【００９７】
本発明を以下に与えられる実施例によってよりよく記載し、実施例は、本願発明をいかなる様式にも限定しない。
【００９８】
（実施例１）
（ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂの調製）
（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９の発酵方法）
Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９をＳ１プレートに２８℃、２〜３週間維持する。Ｓ１は、オートミール６０、寒天１８、ＦｅＳＯ４×７Ｈ２Ｏ  ０．００１、ＭｎＣｌ２×４Ｈ２Ｏ  ０．００１、ＺｎＳＯ４×７Ｈ２Ｏ  ０．００１で構成される（ｇ／Ｌ）。固体オートミールを適切な容積の蒸留水に懸濁させ、２０分沸騰させ、チーズクロスによって濾過する。残りの要素を加え、蒸留水を用いて所定容積にして、ｐＨを７．２に調節した後、１２１℃で２０分間滅菌する。１個のＳ１プレートの微生物内容物を、デキストロース一水和物１０、トウモロコシデキストリン２４、酵母抽出物５、大豆ペプトン５（ｇ／Ｌ）で構成される種培地１００ｍＬを含有する５００ｍＬエレンマイヤーフラスコに擦りつけ、接種する。培地を蒸留水で調製し、ｐＨを７．２に調節した後、１２１℃で２０分間滅菌する。接種したフラスコを、２００ｒｐｍで操作する回転シェーカーで、２８℃で成長させる。２〜３日後、５％のこの培養物を、同じ発酵培地を含む第２の一連のフラスコに接種する。４８時間インキュベートした後、７５０ｍＬを、デキストロース一水和物１０、マルトース１０、酵母抽出物２、大豆ミール８および炭酸カルシウム４（ｇ／Ｌ）で構成される１５Ｌの産生培地を含む１９．５ｍＬバイオリアクターに移す。培地を蒸留水で調製し、ｐＨを７．３に調節した後、１２１℃で２５分間滅菌する。デキストロース一水和物を別個に滅菌し、発酵機を冷却した後に加える。６００ｒｐｍで攪拌しつつ、発酵を３０℃、０．５ｖｖｍエアレーションで行い、９０時間後に培養物を収穫する。ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂの製造を、培養ブロス全体を所定容積のメタノールで２回抽出し、攪拌しつつ、混合物を５０℃で１時間インキュベートした後、以下に記載するようにＨＰＬＣによって監視する。
【００９９】
（ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂの回収および精製）
発酵ブロス（２Ｌ）をメタノール２Ｌに加え、ＡｃＯＨ（１００ｍＬ）を加えることによってｐＨを４．５に下げる。混合物を室温で１時間振り混ぜ、ブフナーで濾過する。濾過した溶液を、容積が減るまで蒸発させ（６００ｍＬ）、１００ｍＬずつ６個に分け、それぞれを、Ｖａｃ  Ｍａｓｔｅｒシステム（Ｓｔｅｐｂｉｏ）の１０ｇのＦｌａｓｈ  Ｃ１８充填カラム（Ｉｓｏｌｕｔｅ、Ｂｉｏｔａｇｅ）に投入する。投入した溶液をアセトニトリル：水  ２５：７５（３０ｍＬ）で洗浄し、アセトニトリル：水  １：１（３０ｍＬ）で抽出する。ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂの存在について、以下に記載するような分析ＨＰＬＣ方法によって溶出したフラクションを監視し、減圧下で濃縮する。
【０１００】
上に記載したように調製した未精製ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂ（１２０ｍｇ）を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  ＲＦ  Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ  Ｍｅｄｉｕｍ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｓｙｓｔｅｍを用い、８６ｇの逆相Ｃ１８  ＲｅｄｉＳｅｐ  ＲＦカラム（粒径４０〜６３μｍ、孔径６０Å、２３０〜４００メッシュ）の中圧クロマトグラフィーで精製する。この樹脂を、相Ａ：相Ｂ  ８：２（ｖ／ｖ）の混合物で、６０ｍｌ／分であらかじめ平衡状態にしておき、次いで、３０％の相Ｂで１分間、次いで、相Ｂが３０％から６０％までの１６分の線形勾配で連続的に溶出する。相Ａは、０．０５％ＴＦＡを含む水であり、相Ｂは、０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリルである。ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂを含有するフラクションをプールし、減圧下で濃縮し、水から凍結乾燥させ、５７ｍｇの精製したＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂを得る。
【０１０１】
（実施例２：ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂの代替となる回収および精製）
実施例１に記載するように調製した発酵ブロス（５Ｌ）に、メタノール１Ｌを加え、ＡｃＯＨ（５０ｍＬ）を加えることによって、ｐＨを４．５まで下げる。混合物を室温で１時間振り混ぜ、ブフナーで濾過する。菌糸体を含有する濃縮部分をメタノール１Ｌに加え、３時間攪拌し、濾過し、菌糸体抽出物１．５Ｌを得る。抽出物を濃縮し、凍結乾燥させ、２６０ｍｇの未精製ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂを回収する。
【０１０２】
Ｗａｔｅｒｓ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱおよびＷａｔｅｒｓ  ２９９６  Ｐｈｏｔｏｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒを取り付けたＷａｔｅｒｓ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｌｙｎｘ  Ａｕｔｏｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍを用い、上に記載するように調製した未精製ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂ（２６０ｍｇ）を、分取高速液体クロマトグラフィーによって精製する。未精製物を、相Ａ：相Ｂ  １：１（ｖ／ｖ）の混合物であらかじめ平衡状態にしたＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８カラム（５μｍ  ＯＢＤ、１９×１００ｍｍ）で精製し、次いで、相Ｂが５０％から７０％までの１０分の線形勾配で、２０ｍｌ／分で溶出する。相Ａは、０．０５％ＴＦＡを含む水であり、相Ｂは、０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリルである。ＮＡＩ−１１２を含有するフラクションをプールし、減圧下で濃縮し、水から凍結乾燥させ、７０ｍｇの精製したＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂを得る。
【０１０３】
ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒｅ  ＲＰ１８カラム５μ（１２５×４ｍｍ）を取り付けたＳｈｉｍａｄｚｕ装置（ＬＣ  ２０１０Ａ−ＨＴ液体クロマトグラフィー、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｊａｐａｎ）を用い、流速１ｍｌ／分および温度５０℃で溶出させ、好ましい分析ＨＰＬＣ技術を行う。多段階プログラムで溶出する。時間＝０（１０％  相Ｂ）；時間＝２０分（５０％  相Ｂ）；時間＝２１分（８０％  相Ｂ）；時間＝２５分（８０％  相Ｂ）；時間＝２６分（１０％  相Ｂ）；時間＝３５分（１０％  相Ｂ）。相Ａおよび相Ｂは、それぞれ、水中およびアセトニトリル中の０．０５％  ＴＦＡ（ｖ／ｖ）である。ＵＶ検出は、２３０ｎｍおよび２７０ｎｍで行う。これらのＨＰＬＣ条件で、ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂは、１７．５分の保持時間を示す。
【０１０４】
好ましい分析ＨＰＬＣ−ＭＳ技術は、Ａｓｃｅｎｔｉｓ  ｅｘｐｒｅｓｓ  Ｓｕｐｅｌｃｏ  ＲＰ１８カラム２．７μ（５０×４．６ｍｍ）を取り付けたＡｇｉｌｅｎｔ  １１００シリーズ液体クロマトグラフィーで、流速１ｍｌ／分、温度４０℃で溶出して行われる。多段階プログラムで溶出する。時間＝０（５％  相Ｂ）；時間＝６分（９５％  相Ｂ）；時間＝７分（１００％  相Ｂ）；時間＝７．２分（５％  相Ｂ）；時間＝１０分（５％  相Ｂ）。相Ａおよび相Ｂは、それぞれ、水中およびアセトニトリル中の０．０５％  ＴＦＡ（ｖ／ｖ）である。ＵＶ検出は、２２０ｎｍで行う。カラムからの流出物を１：１の比率で分け、一部を光ダイオードアレイ検出器に流用し、残りの部分を、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｅｓｑｕｉｒｅ３０００  ｐｌｕｓイオン捕捉型質量分光計のＥＳＩインターフェースに流用する。
【０１０５】
質量分光計による分析を以下の条件で行う。
サンプル注入口の条件：シースガス（Ｎ２）５０ｐｓｉ；乾燥ガス１０Ｌ／分；キャピラリーヒーター３６５℃；
サンプル投入口の容積設定：正の極性；キャピラリー電圧  −４０００Ｖ；エンドプレートオフセット  −５００Ｖ；
スキャン条件：最大イオン時間  ２００ｍｓ；イオン時間  ５ｍｓ；フルマイクロスキャン３；
セグメント：持続時間１０分、スキャンイベントポジティブ（１００〜２４００ｍ／ｚ）。
【０１０６】
これらの分析ＨＰＬＣ−ＭＳ条件下、ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂは、３．９分の保持時間を示す。
【０１０７】
化合物ＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂが、酸官能基および塩基官能基を含むため、従来の手順に従って適切な塩基または酸を用いて塩を形成することができ、不活性塩の形態で存在していてもよい。ランチペプチド（例えば、ＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂ）は、酸形態または不活性塩の形態で得られる場合、塩基を用い、対応する非毒性の医薬的に許容され得る塩に変換してもよい。適切な塩としては、アルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩、典型的には、ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシウムの塩およびアンモニウム塩および置換アンモニウム塩が挙げられる。代表的な置換アンモニウム塩としては、一級、二級または三級（Ｃ１〜Ｃ４）のアルキルアンモニウムおよびヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアンモニウム塩が挙げられ、本発明の一実施形態によれば、ベンザチン、プロカイン、ヒドラバミンおよび同様の水不溶性の非毒性の医薬的に許容され得る塩が挙げられる。本発明の化合物の別の好ましい種類の塩は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニンまたはリジン）またはアミノ糖（例えば、グルコサミン）などとの塩基性付加塩によってあらわされる。
【０１０８】
アルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩は、金属塩を調製するために一般的に用いられる通常の手順に従って調製される。一例として、酸形態または不活性塩形態のランチペプチドＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂを最小量の適切な溶媒（典型的には、低級アルカノールまたは低級アルカノール水混合物）に溶解し、得られた溶液に、化学量論量の適切な選択した塩基を徐々に加え、非溶媒を添加することによって、得られた塩を沈殿させる。次いで、生成するアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩は、濾過または溶媒の蒸発によって回収される。
【０１０９】
または、凍結乾燥によって、実質的に無水形態でこれらの塩を調製することができ、この場合には、望ましい塩を含有し、適切に選択されたアルカリ金属またはアルカリ土類金属の炭酸塩または水酸化物を、７．０〜８．５のｐＨを得るような量で用い、ランチペプチドＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂの塩化から得られる水溶液を、不溶解物から濾過し、凍結乾燥させる。実質的に上の手順に従って、適切な溶媒中、適切に選択したアミンを式（Ｉ）の化合物の溶液に加え、次いで、溶媒および過剰のアミン試薬を蒸発させるか、または、濃縮溶液を凍結乾燥させることによって、有機アンモニウム塩を調製することができる。
【０１１０】
酸を用いた式（Ｉ）の化合物の付加塩も調製することができる。本発明の化合物の代表的で適切な酸付加塩としては、有機酸および無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、コハク酸、クエン酸、アスコルビン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、パルミチン酸、コリン酸、パモ酸、粘液酸、グルタミン酸、ショウノウ酸、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホ酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、桂皮酸などの酸を用いて標準的な反応によって作られる塩が挙げられる。酸を用いたランチペプチドＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂの付加塩は、塩基の代わりに試薬として適切に選択された酸を用い、塩基との塩を調製するために使用されるように、実質的に類似の様式で調製することができる。
【０１１１】
このようにして作られる医薬的に許容され得る塩は、本発明の一部でもある。「医薬的に許容され得る」塩は、温血動物の治療に有用である。
【０１１２】
本発明の化合物の非塩（または内部塩）から、対応する非毒性の付加塩への変換、およびその逆（すなわち、本発明の化合物のさらなる塩から、非塩形態への変換）は、通常の技術の範囲内であり、本発明に包含される。
【０１１３】
（ＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂの物理化学特徴）
（Ａ）質量分析計：
Ｂｒｕｋｅｒ較正混合物を用い、エレクトロスプレー源を取り付けたＢｒｕｋｅｒ  Ｅｓｑｕｉｒｅ３０００  ｐｌｕｓ装置でのＭＳ実験において、ＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂは、最も小さい同位体組成物に対応するｍ／ｚ＝１１８４．５で二重のプロトン化されたイオンを与える。ＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂのフラグメント化パターンは、以下のイオンが存在する。ｍ／ｚ  １１１１で二重のプロトン化されたイオンおよび９７４、１３９３、１２４７、９０７、１４６０および１３１４で１種類のプロトン化されたイオン。エレクトロスプレー条件は、以下のとおりである。キャピラリー温度：３６５℃；キャピラリー電圧：−４ｋＶ；注入モード５μｌ／分。０．１％ＴＦＡを含むメタノール／水  ５０／５０（ｖ／ｖ）の０．２ｍｇ／ｍｌ溶液から記録したフラグメント化パターンのスペクトルを図１Ａに報告する。
【０１１４】
ナノ−ＥＳＩ源を取り付け、Ｏｒｂｉｔｒａｐ  Ｍａｓｓ分析機を取り付けたＥｘａｃｔｉｖｅ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）分光計の実験において、ＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂは、１０００００ｍ／Δｍの解像度で、ｍ／ｚ＝１１８４．０２３１で二重のプロトン化したイオンの高解像度質量を与える。質量スペクトルを図１Ｂに報告する。
【０１１５】
（Ｂ）Ｂｒｕｋｅｒ  ＦＴ−ＩＲ分光計ＩＦＳ  ４８型を用い、ＫＢｒ中で記録したＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂの赤外線スペクトルは、３３９３；２９６２；１６７０；１５２２；１４５７；１２０３；１１３８（ｃｍｄ）で吸収最大を示す。赤外スペクトルを図２に報告する。
【０１１６】
（Ｃ）ＨＰＬＣ分析中、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ検出器ＳＰＤ−Ｍ１０Ａ  ＶＰ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、日本）を用いた水／アセトニトリル（比率５６：４４）中の０．１％ＴＦＡで行ったＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂのＵＶスペクトルは、２２９ｎｍおよび２８１ｎｍに２つの肩部を示す。ＵＶスペクトルを図３に報告する。
【０１１７】
（Ｄ）１Ｈ−ＮＭＲおよび２Ｄ実験は、５０μＬのＨ２Ｏを加えつつ、または加えずに、ＣＤ３ＣＮ／Ｄ２Ｏ  ５０／４０（ｖ／ｖ）混合物において、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＭＸ  ６００分光計で、２５℃で記録した。必要な場合、水抑制シーケンスを適用する。内部標準として、１．９９ｐｐｍでのアセトニトリルの残留シグナルが考慮される。
【０１１８】
ＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを図４に報告する。ＣＤ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／Ｄ２Ｏ  ５０／１０／４０（ｖ／ｖ）に溶解したＮＡＩ−１１２の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、内部標準としてＣＤ３ＣＮ（１．９９ｐｐｍ）を用い、６００ＭＨｚで以下のシグナル群を示す（単位ｐｐｍ）［δ＝ｐｐｍ、多重度；（属性）］：
０．７０（ＣＨ３）、０．７６（ＣＨ３）、０．８２（ＣＨ３）、０．８７（ＣＨ３）、０．９１（ＣＨ３）、０．９９（ＣＨ３）、１．１６（ＣＨ３）、１．４６（ＣＨ３）、１．６２（ＣＨ３）、１．４５−１．６６（ＣＨ２）、１．７７−３．３３（βおよびγのＣＨおよびＣＨ２）、３．３７−４．９９（αおよびβのＣＨおよびＣＨ２）、３．１７、３．５２、４．０４、４．５５および５．８１（糖脂肪族およびアノマーのプロトン）、４．８３−５．０３（ＤｈａのβＣＨ２）、５．８０（ＤｈｂのβＣＨ）、７．０４−８．５９（芳香族およびペプチドのＮＨ）。
【０１１９】
（Ｅ）ＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂは、以下の１３Ｃシグナル群を示す［δ＝ｐｐｍ；（属性）］：１１．８−２２（脂肪族ＣＨ３）、２２．２−４０．１（βおよびγのＣＨおよびＣＨ２）、４２．５−６２（αおよびβのＣＨおよびＣＨ２）、１０８．４−１３７．３（芳香族のＣＨおよび四級炭素）、１６８−１７６（ペプチドのカルボニル）。ＮＡＩ−１１２ａまたはＮＡＩ−１１２ｂのＨＳＱＣスペクトルおよびＨＭＢＣスペクトルを図５および図６に報告する。
【０１２０】
（ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂのアミノ酸組成）
（Ａ）ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂの「耐酸性」アミノ酸の決定
ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂを完全に加水分解し、酸処理に耐性があるアミノ酸要素を特定する。この手法では、酸に弱いアミノ酸は検出されない。
【０１２１】
加水分解物（Ｖａｃｕｃｅｌｌを用い、６Ｎ  ＨＣｌ、１０５℃で２４時間、またはＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒマイクロ波を用い、１６０℃で５分）を、４−（３−イソチオシアナトピロリジン−１−イル）−７−ニトロ−２，１，３−ベンゾオキサジアゾール［（Ｒ）−（−）−ＮＢＤ−ＰｙＮＣＳ］で誘導体化した後に、同様に誘導体化した標準アミノ酸の混合物と比較して、ＨＰＬＣ−ＭＳによって分析する。
【０１２２】
同時に行うＤＡＤおよびＭＳ検出を用い、液体クロマトグラフィーシステムで定性ＨＰＬＣ分析を行う。ＨＰＬＣ方法は、以下の条件を使用する。Ａｓｃｅｎｔｉｓ  ｅｘｐｒｅｓｓ  Ｓｕｐｅｌｃｏ  ＲＰ１８、２．７μ（５０×４．６ｍｍ）カラム、４０℃に設定；流速１ｍＬ／分；水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）としての相Ａ；アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）としての相Ｂ；以下のような溶出プログラム
【表１】
2015530869.tif 000006
【０１２３】
ＭＳ条件は、以下のとおりである。
分光計：標準的なエレクトロスプレー源を備えるＢｒｕｋｅｒ  Ｅｓｑｕｉｒｅ３０００  ｐｌｕｓ
キャピラリー温度：３６５℃
キャピラリー電圧：−４ｋＶ
エンドプレートオフセット：−５００Ｖ
シースガス（Ｎ２）：５０ｐｓｉ。
【０１２４】
ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂの加水分解物で得られたＨＰＬＣ／ＭＳクロマトグラムにおいて、トリプトファン、グリシン、プロリン、バリン、ロイシンまたはイソロイシン、フェニルアラニンといったアミノ酸を、他の同定されていないピークとともに同定する。
【０１２５】
（ＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂのＮ末端アミノ酸の同定）
１ｍｇのＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂをメタノール１．５ｍＬに溶解する。トリエチルアミン（５０μＬ）およびフェニルイソチオシアネート（１０μＬ）を加え、反応物を６０℃で１時間攪拌する。溶液をヘキサン：ジクロロメタン  ８：２（３×３００μＬ）で抽出し、乾燥するまで蒸発させ、５０％ＴＦＡ  Ｈ２Ｏ溶液（５００μＬ）で抽出し、６０℃で１時間反応させる。反応溶液をＨＰＬＣ−ＭＳによって直接分析し、Ｎ末端のバリンを失った後、先端を切断したペプチドに対応するｍ／ｚ  １１３４．９ａｍｕの二重の帯電したピークを示す。
【０１２６】
（実施例３：ＮＡＩ−１１２ｓ／ＮＡＩ−１１２ｔの合成）
１０ｍｇのＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂのＤＭＦ１．２ｍＬの攪拌溶液に、２μＬのエチレンジアミンおよび４ｍｇのＰｙＢＯＰを加え、反応混合物を攪拌しつつ室温で１時間保持する。中性ｐＨになるまで２Ｎ  ＨＣｌ（１００μＬ）を加えることによって反応をクエンチし、次いで、水で希釈する。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  ＲＦ  Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ  Ｍｅｄｉｕｍ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｓｙｓｔｅｍを用いることによって、４．３ｇの逆相Ｃ１８  ＲｅｄｉＳｅｐ  ＲＦカラム（粒径４０〜６３μｍ、孔径６０Å、２３０〜４００メッシュ）での中圧クロマトグラフィーを用い、サンプルを精製する。この樹脂を、相Ａ：相Ｂ  ７：３（ｖ／ｖ）の混合物であらかじめ平衡状態にしておき、次いで、相Ｂが３０％から７０％までの１０分の線形勾配で、１８ｍｌ／分で溶出する。相Ａは、水中の５０ｍＭ  ＨＣＯＯＮＨ４であり、相Ｂは、アセトニトリルである。望ましいアミドを含有するフラクションを集め、容積が減るまで蒸発させ、凍結乾燥させる。得られた化合物は、１２０５．３ａｍｕで二重にプロトン化するピークを示す。
【０１２７】
（実施例４：ＮＡＩ−１１２ｇ／ＮＡＩ−１１２ｈの合成）
３０ｍｇのＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂのＤＭＦ３ｍＬの攪拌溶液に、４μＬのベンジルアミンおよび７ｍｇのＰｙＢＯＰを加え、反応混合物を攪拌しつつ、室温で一晩保持する。中性ｐＨになるまで２Ｎ  ＨＣｌ（１００μＬ）を加えることによって反応をクエンチし、次いで、水で希釈する。実施例３に記載されるような中圧クロマトグラフィーによってサンプルを調製する。得られた化合物は、ｍ／ｚ  １２２８．５ａｍｕで二重のプロトン化したピークを示す。
【０１２８】
（実施例５：ＮＡＩ−１１２ｉ／ＮＡＩ−１１２ｌの合成）
３０ｍｇのＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂのＤＭＦ３ｍＬの攪拌溶液のｐＨを０．１Ｍ  ＮａＯＨで８．５に調節する。続けて、４μＬのベンジルアミンおよび７ｍｇのＰｙＢＯＰを加え、反応混合物を攪拌しつつ、室温で一晩保持する。中性ｐＨになるまで２Ｎ  ＨＣｌ（１００μＬ）を加えることによって反応をクエンチし、次いで、水で希釈する。実施例３に記載されるような中圧クロマトグラフィーによってサンプルを調製する。得られた化合物は、ｍ／ｚ  １２７３．６ａｍｕで二重のプロトン化したピークを示す。
【０１２９】
（実施例６：ＮＡＩ−１１２ｏ／ＮＡＩ−１１２ｐの合成）
３０ｍｇのＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂを２００μＬのＤＭＦおよび１．８ｍＬおよびアセトンに溶解する。この溶液に、３ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸を加え、反応混合物を攪拌しつつ、４５℃で５時間保持し、その後に、ＨＰＬＣ−ＭＳモニターは、変換率が５０％であることを示す。実施例３に記載されるような中圧クロマトグラフィーによってサンプルを調製する。得られた化合物は、ｍ／ｚ  １２０３．９ａｍｕで二重のプロトン化したピークを示す。
【０１３０】
（実施例７：ＮＡＩ−１１２ｑ／ＮＡＩ−１１２ｒの合成）
５０ｍｇのＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂを５ｍＬの５０％  ＴＦＡに溶解し、室温で１週間攪拌する。この時間経過後、許容範囲の量の望ましい化合物がＨＰＬＣ−ＭＳ分析によって検出され、１Ｍ  ＮａＯＨ（１００μＬ）でｐＨを中和することによって、反応をクエンチする。実施例３に記載されるような中圧クロマトグラフィーによってサンプルを調製する。得られた化合物は、ｍ／ｚ  １１１１．３ａｍｕで二重のプロトン化したピークを示す。
【０１３１】
（実施例８：ＮＡＩ−１１２ｅ／ＮＡＩ−１１２ｆの合成）
２０ｍｇのＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂのＤＭＦ２ｍＬの攪拌溶液に、３μＬの３−（ジメチルアミノ）−１−プロピルアミンおよび９ｍｇのＰｙＢＯＰを加え、反応混合物を攪拌しつつ、室温で３時間保持する。中性ｐＨになるまで２Ｎ  ＨＣｌ（１００μＬ）を加えることによって反応をクエンチし、次いで、水で希釈する。実施例３に記載されるような中圧クロマトグラフィーによってサンプルを調製する。得られた化合物は、ｍ／ｚ  １２２５．９ａｍｕで二重のプロトン化したピークを示す。
【０１３２】
（実施例９：ＮＡＩ−１１２ｍ／ＮＡＩ−１１２ｎの合成）
２７ｍｇのＮＡＩ−１１２ａ／ＮＡＩ−１１２ｂの乾燥ＤＭＦ２ｍＬの攪拌溶液に、９μＬのシクロヘキサンカルボキサアルデヒドを加え、反応混合物を攪拌しつつ、室温で３０分保持する。連続して、１ｍｇのＮａＣＮＢＨ３を加え、混合物を攪拌しつつ、室温で２０分保持する。水で希釈することによって反応をクエンチする。実施例３に記載されるような中圧クロマトグラフィーによってサンプルを調製する。得られた化合物は、ｍ／ｚ  １２３２．４ａｍｕで二重のプロトン化したピークを示す。
【０１３３】
（実施例１０：ＮＡＩ−１１２ｃ／ＮＡＩ−１１２ｄの合成）
実施例１に記載したように調製したＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ２４０５９の発酵ブロス（２Ｌ）を、収穫した後に０．１Ｍ  ＮａＯＨでｐＨ８にする。生成物の回収を実施例１または実施例２のいずれかに記載したように行う。得られた化合物は、ｍ／ｚ  １１８４．９ａｍｕで二重のプロトン化したピークを示す。
【０１３４】
（実施例１１：侵害受容性疼痛の鎮痛活性）
ＢｅｎｎｅｔｔおよびＸｉｅ（１９８８）に従って坐骨神経の結紮を行う。２〜３％のイソフルランを用いてマウスを麻酔し、小さな切開によって、中大腿部で左側坐骨神経を露出させ、２箇所の（２ｍｍ間隔をあけた）別個の部位で絹糸を用いて縛る。１回の筋肉縫合および皮膚クリップによって傷を閉じ、ストレプトマイシンをまぶす。シャム手術した動物（ネガティブコントロール）において、神経を露出させるが、縛らない。
【０１３５】
すべての実験を、静かな部屋で「盲検」で行い、実験を行う科学者は、試験時間に処理プロトコルを知らない（盲検手順）。本願発明者らは、背部表面に加えられた一定の機械的な圧力から足を引っ込めるまでの反応時間（秒単位）を測定することによって、機械的な痛覚過敏を評価する。円錐先端（直径＝３ｍｍ）に入れられた１５ｇの較正されたガラスシリンダー（直径＝１０ｍｍ）を使用し、機械的な力を加える。スタンドに接続した２個の環の間に錘を垂直にかけ、垂直方向の移動を自由にする。１８０秒のカットオフ時間を使用する。薬物投薬の後、種々の時間に同側（本実験）および反対側（コントロール）の足で退避閾値を測定する。足底試験装置（Ｕｇｏ  Ｂａｓｉｌｅ、イタリア）を用い、足底表面に加えられた熱による痛覚過敏を、放射熱（熱強度：赤外線３．０）の集束ビームから足を引っ込めるまでの反応時間を測定するＨａｒｇｒｅａｖｅｓら（１９８８）の方法によって測定する。カットオフ時間を３０秒に設定する。損傷した同側の足について、退避閾値を測定する。
【０１３６】
接触性アロディニア（ＤＰＡ）：ワイヤメッシュの床を有する小さな閉じられた試験場（２０ｃｍ×１８．５ｃｍ×１３ｃｍ）に動物を個々に５分間放置する。試験する足の足底面の下にフィラメントを直接存在するように、ＤＰＡデバイスを動物の下に配置する。試験を開始したとき、デバイスが、フィラメントが足に接触するまで上がり、動物が足を引っ込めるまで、または最大力５ｇに達するまで、力を徐々に大きくしていく。ＤＰＡは、足を引っ込めたときの力と退避反応時間を自動で記録する（退避が起こるまで、デバイスが力を徐々に大きくしていくため、反応時間と最大力は直接的な関係がある）。
【０１３７】
ＮＡＩ−１１２ａ／ｂを３、１０および３０ｍｇ／ｋｇの投薬量で腹腔内投与し、投薬してから３時間後に疼痛挙動を測定する。図１５に示されるように、確立された痛覚過敏および異痛を迅速に回復させるために、ＮＡＩ−１１２ａ／ｂの１回投与で十分である。図１５は、末梢性ニューロパチーの坐骨神経の構築モデルにおいて、ＮＡＩ−１１２ａ／ｂの抗侵害受容効果を示す。ＮＡＩ−１１２ａ／ｂ（３〜３０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）は、機械的痛覚過敏（Ａ）および熱的痛覚過敏（Ｂ）を減らし（秒単位で測定）、機械的な異痛（Ｃ；グラム単位で測定）を減らす。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１  対ビヒクル；＃＃＃ｐ＜０．００１  対シャム手術したマウス。
【０１３８】
（実施例１２：炎症性疼痛の鎮痛活性）
左後足の足底表面にホルマリンを注射し、その応答は、動物が注射した足をなめるのに費やす時間量である。ホルマリンを注射してから、最初の５分間継続する初期段階および１０〜５０分続く後期段階といった、高頻度のなめる運動がある２つの別個の期間を特定することができる。それぞれ５分のブロックにおいて、４５分間、防衛反射挙動（注射された足をなめたり、噛んだりする）を監視する。
【０１３９】
ホルマリン注射の前に、ＮＡＩ−１１２ａ／ｂを１、３、１０および３０ｍｇ／ｋｇの投薬量で腹腔内注射する。図１６に示されるように、３ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇの最大投薬量で、第１段階および第２段階の両方を減らすことができる。図１６は、マウスのホルマリンモデルにおいて、ＮＡＩ−１１２ａ／ｂの抗炎症効果を示す。ＮＡＩ−１１２ａ／ｂ（１〜１０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）は、炎症のある足をなめ、噛むのに費やす時間を短くする（秒単位で測定）。＊ｐ＜０．０５および＊＊ｐ＜０．０１  対ビヒクル治療したマウス。
【図１Ａ】
2015530869.tif 000011
【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【配列表】
2015530869000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成27年7月7日(2015.7.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）を有するペプチド化合物であって、
【化１】
2015530869.tif 000028
Ｒ１およびＲ２は、独立して、Ｈ、または単糖類、二糖類、三糖類、オリゴ糖類およびこれらの対応するデオキシ誘導体から選択される糖部分から選択され；
Ｒ３および／またはＲ４は、独立して、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＲ６Ｒ７から選択され、Ｒ６および／またはＲ７は、独立して、
・水素
・１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
・ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル、
・ハロ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換されたナフチルラジカル、
・式
−（ＣＨ２）ｎＯＲ８
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ８は、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル
をあらわす〕
・式
−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ９および／またはＲ１０は、独立して、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル
をあらわし、
※Ｒ９とＲ１０とを合わせ、−（ＣＨ２）３、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２、−（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）２をあらわすか、または
※Ｒ９およびＲ１０は、隣接する窒素原子と合わせて、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、ピリジル、ベンジルおよび置換ベンジルから選択される置換基で、４位で置換されていてもよいピペラジン部分をあらわし、フェニル部分は、クロロ、ブロモ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシから選択される１個または２個の置換基を有する〕
をあらわし；
Ｒ５は、ＮＲ１１Ｒ１２として選択され、Ｒ１１および／またはＲ１２は、独立して、
・水素、
・１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル；
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
・独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル、
・ハロ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換されたナフチルラジカル、
・式
−（ＣＨ２）ｎＯＲ８
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ８は、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル
をあらわす〕
・式
−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ９および／またはＲ１０は、独立して、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル
をあらわし、
※Ｒ９とＲ１０とを合わせ、−（ＣＨ２）３、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２、−（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）２をあらわすか、または
※Ｒ９およびＲ１０は、隣接する窒素原子と合わせて、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、ピリジル、ベンジルおよび置換ベンジルから選択される置換基で、４位で置換されていてもよいピペラジン部分をあらわし、フェニル部分は、クロロ、ブロモ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシから選択される１個または２個の置換基を有する〕
をあらわし；
・Ｒ１１またはＲ１２が水素である場合、Ｒ１２またはＲ１１は、−ＣＯ−Ｒ１３であり、Ｒ１３は、
○ＮＨ２、
○１〜２０個の炭素原子を含むアルキル（前記アルキルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
○２〜２０個の炭素原子を含むアルケニル（前記アルケニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
○２〜２０個の炭素原子を含むアルキニル（前記アルキニルは、直鎖、分枝鎖、環状またはこれらの組み合わせである）；
○独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル；
○独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
○独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル、
○ハロ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換されたナフチルラジカル、
○式
−（ＣＨ２）ｎＯＲ８
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ８は、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル
をあらわす〕、
○式
−（ＣＨ２）ｎＮＲ９Ｒ１０
の基〔式中、ｎは、２〜８の整数をあらわし、Ｒ９および／またはＲ１０は、独立して、
※水素または
※（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、または
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、３〜８個の炭素原子を含むシクロアルキル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基は、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、フェニルラジカル、
※独立して、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシ、フェニル、フェニル−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキル、フェノキシ、フェノキシ−１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルから独立して選択される１個または２個の置換基によってフェニル環上で場合により置換され、フェニル基およびフェニル低級アルキルのフェニル部分、フェノキシ基およびフェノキシ−低級アルキル基が、ハロ、シアノ、１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルキルおよび１〜３個のハロゲン原子で場合により置換された１〜４個の炭素原子を含む低級アルコキシから選択される１個または２個の置換基によって場合により置換された、ベンジルラジカル
をあらわし、
※Ｒ９とＲ１０とを合わせ、−（ＣＨ２）３、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）２、−（ＣＨ２）２−Ｓ−（ＣＨ２）２をあらわすか、または
※Ｒ９およびＲ１０は、隣接する窒素原子と合わせて、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、ピリジル、ベンジルおよび置換ベンジルから選択される置換基で、４位で置換されていてもよいピペラジン部分をあらわし、フェニル部分は、クロロ、ブロモ、ニトロ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシから選択される１個または２個の置換基を有する〕
をあらわし；
Ｘおよび／またはＹは、それぞれ、Ｄｈａ（デヒドロアラニン）およびＳｅｒ（セリン）から独立して選択されてもよいペプチド鎖の１６位および２０位のアミノ酸をあらわし；
Ｚ１およびＺ２は、独立して、Ｓ基、Ｓ−Ｏ−基、Ｓ＝Ｏ基、Ｏ−−Ｓ＝Ｏ基およびＯ＝Ｓ＝Ｏ基から選択される、ペプチド化合物。
【請求項２】
前記デオキシ誘導体が６−デオキシ誘導体であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項３】
前記糖部分が、以下の式（ＩＩ）を有することを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【化２】
2015530869.tif 000029
【請求項４】
ペプチド鎖の１６位にＤｈａ残基が存在し、一方、ペプチド鎖の２０位にＳｅｒ残基が存在することを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項５】
ペプチド鎖の１６位にＳｅｒ残基が存在し、一方、ペプチド鎖の２０位にＤｈａ残基が存在することを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項６】
前記Ｚ１およびＺ２が、独立してＳとして選択されることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項７】
１６位の前記ＸがＤｈａであり、２０位の前記ＹがＳｅｒであり、前記Ｚ１およびＺ２がＳであり、前記Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、前記Ｒ２がＨであり、前記Ｒ４がＯＨであり、前記Ｒ３がＮＨ２であり、前記Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項８】
１６位の前記ＸがＳｅｒであり、２０位の前記ＹがＤｈａであり、前記Ｚ１およびＺ２がＳであり、前記Ｒ１が、式（ＩＩ）の６−デオキシヘキソースであり、前記Ｒ２がＨであり、前記Ｒ４がＯＨであり、前記Ｒ３がＮＨ２であり、前記Ｒ５がＮＲ１１Ｒ１２（Ｒ１１およびＲ１２がＨである）であることを特徴とする、
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項９】
Ｄｅｕｔｓｃｈｅ  Ｓａｍｍｌｕｎｇ  ｖｏｎ  Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ  ｕｎｄ  Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ  ＧｍｂＨ（ＤＳＭＺ）に２０１０年９月２９日に寄託された、寄託番号ＤＳＭ２４０５９を有するＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９。
【請求項１０】
Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９を培養することと、菌糸体および／または発酵ブロスから式（Ｉ）の化合物を回収することと、クロマトグラフィー手段によって純粋な物質を単離することとを含む、
請求項１に記載のペプチド化合物を調製するためのプロセス。
【請求項１１】
式（Ｉ）の化合物が、半合成によって化学的に改変され、および／または生理学的に許容される塩に変換されるさらなる工程を含むことを特徴とする、
請求項１０に記載のプロセス。
【請求項１２】
配列番号１として特定されるＤＮＡ配列：
ＧＴＧＣＡＧＧＡＧＡ  ＴＣＣＴＧＧＡＧＣＴ  ＧＣＡＧＧＡＧＣＴＧ  ＣＣＧＴＣＧＧＣＣＴ  ＣＧＧＣＣＡＣＧＧＡ  ＧＧＡＣＡＴＧＣＣＧ
ＣＴＧＧＴＣＡＧＣＡ  ＣＧＣＴＣＡＧＣＧＴ  ＣＡＧＣＴＣＧＣＣＧ  ＴＧＣＣＣＣＧＧＣＴ  ＧＧＣＣＧＡＧＣＴＣ  ＣＴＴＣＡＣＣＴＧＧ  ＴＣＧＡＡＣＴＧＣＴ  ＧＡ。
【請求項１３】
配列番号２の前駆体ペプチド：
１  ＶＱＥＩＬＥＬＱＥＬＰＳＡＳＡＴＥＤＭＰＬ  ＶＳＴＬＳＶＳＳＰＣＰＧＷＰＳＳＦＴＷＳＮＣ。
【請求項１４】
請求項１に記載のペプチド化合物の製造に使用するための
請求項９に記載のＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｓｐ．ＤＳＭ  ２４０５９。
【請求項１５】
医薬として使用するための
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１６】
疼痛の治療に使用するための
請求項１に記載のペプチド化合物。
【請求項１７】
前記疼痛が慢性神経因性疼痛である、
請求項１６に記載のペプチド化合物。
【請求項１８】
通常の賦形剤に加え、請求項１に記載のペプチド化合物を活性成分として少なくとも含む
医薬組成物。
【請求項１９】
医薬として使用するための
請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
疼痛の治療に使用するための
請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記疼痛が慢性神経因性疼痛である、
請求項２０に記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
2015530869.tif 000030
2015530869.tif 000031
2015530869.tif 000032