【手続補正書】
【提出日】平成22年10月4日(2010.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次に示す植物の抽出物を含有する、骨の老化および骨の老化が関与する疾病の予防又は改善のための経口投与用組成物。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiola rosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）
【請求項２】
前記植物の抽出物は、８．９ｍＵ／μｇ（酵素活性／植物抽出物）溶液において、マトリックスメタロプロテアーゼ９（ＭＭＰ−９）に４０％以上の阻害作用を有するものであることを特徴とする、請求項１に記載の経口投与組成物。
【請求項３】
食品であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の経口投与組成物。
【請求項４】
次の工程を経て製造されるものであることを特徴とする、請求項１〜３何れか１項に記載の経口投与組成物。
（工程１）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiola rosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）から選択される植物の植物体に抽出溶媒を加え、抽出物を作製する。
（工程２）前記抽出物の８．９ｍＵ／μｇ（酵素活性／植物抽出物溶液）溶液において、マトリックスメタロプロテアーゼ９（ＭＭＰ−９）に４０％以上の活性阻害が存したものを原料として選択する。
（工程３）工程２で原料として選択された抽出物と、製剤化のための成分とを用いて、製剤を製造する。
【請求項５】
前記骨の老化は、破骨細胞の骨吸収作用の亢進によるものであることを特徴とする、請求項１〜４何れか１項に記載の経口投与組成物。
【請求項６】
前記骨の老化が関与する疾患が、骨粗鬆症であることを特徴とする、請求項１〜５何れか
１項に記載の経口投与組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
骨は生体の骨格としてその構造を維持する上で必要不可欠であると同時に、生体内でのカルシウムの貯蔵庫としての機能も合わせ持つ非常に重要な組織である。骨は骨芽細胞による骨形成と、破骨細胞による骨吸収とのバランスにたった、骨代謝を維持することにより、その強度を保つためのリモデリングとカルシウム供給を行っている。加齢やホルモンバランスの変化などにより骨代謝のバランスが崩れて、破骨細胞の行う骨吸収が優位となることにより骨量減少をきたし、骨強度が低下して骨粗しょう症などの疾病が発生することが知られている。骨基質の大部分はコラーゲンからなり、骨代謝の際のコラーゲン分解は重要な要素で、骨組織にもコラーゲナーゼ群として、ＭＭＰ−１及びＭＭＰ−１３、ゼラチナーゼ群として、ＭＭＰ−２とＭＭＰ−９、ストロメライシン群としてＭＭＰ−３、さらに膜結合型のＭＴ１−ＭＭＰなどのマトリックスメタロプロテアーゼの存在が報告されている。中でも、骨吸収を司る破骨細胞ではＭＭＰ−９が強く発現しており（例えば、特許文献１、特許文献２、特許文献３を参照）、骨吸収の大きな要素としてＭＭＰ−９の活性の亢進が推定される。このＭＭＰ−９活性を阻害することにより、骨代謝のバランスを整え、骨の老化（脆弱化）を防ぐことができると推定されているが、この様な機能を有する成分であって、日常摂取できるものはまだ見いだせていないのが現状である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
この様な状況に鑑みて、本発明者らは、日常に於いて摂取しうるＭＭＰ−９活性を阻害する成分及びその摂取手段を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、次に示す植物の抽出物が優れたＭＭＰ−９（マトリックスメタロプロテアーゼ９）阻害作用を有し、これを含有する経口投与組成物が、骨老化および疾病の予防又は改善に有用であることを見いだし、発明を完成させるに至った。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiola rosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）
即ち、本発明は、以下に示す通りである。
（１）次に示す植物の抽出物を含有する、骨の老化および骨の老化が関与する疾病の予防又は改善のための経口投与組成物。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiola rosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）
（２）前記植物の抽出物は、８．９ｍＵ／μｇ（酵素活性／植物抽出物）溶液において、マトリックスメタロプロテアーゼ９（ＭＭＰ−９）に４０％以上の阻害作用を有するものであることを特徴とする、（１）に記載の経口投与組成物。
（３）食品であることを特徴とする、（１）又は（２）に記載の経口投与組成物。
（４）次の工程を経て製造されるものであることを特徴とする、（１）〜（３）何れかに記載の経口投与組成物。
（工程１）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiola rosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）、トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）から選択される植物の植物体に抽出溶媒を加え、抽出物を作製する。
（工程２）前記抽出物は、８．９ｍＵ／μｇ（酵素活性／植物抽出物）溶液において、マトリックスメタロプロテアーゼ９（ＭＭＰ−９）に４０％以上の活性阻害が存したものを原料として選択する。
（工程３）工程２で原料として選択された抽出物と、製剤化のための成分とを用いて、製剤を製造する。
（５）前記骨の老化は、破骨細胞の骨吸収活性の亢進によるものであることを特徴とする、（１）〜（４）何れかに記載の経口投与組成物。
（６）前記骨の老化が関与する疾患は、骨粗鬆症であることを特徴とする、（１）〜（５）何れかに記載の経口投与組成物。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
本発明の経口投与用の組成物は、骨の老化およびこの老化に関与する疾病の予防又は改善のためのものであって、次に示す植物の抽出物から選択される１種乃至は２種以上を含有することを特徴とする。抽出物の作製は、常法に従って行えば良く、植物体１質量部に対して、溶媒１〜１００質量部を加え、常温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬し、所望により濾過などで不溶物を取り除き、所望により減圧溜去、凍結乾燥等で溶媒を除去することも出来る。更に、これらの抽出物をカラムクロマトグラフィーや液液抽出などで分画精製することも出来る。カラムクロマトグラフィーとしては、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、「ダイアイオンＨＰ−２０」のようなイオン交換樹脂、ＯＤＳ等が好適に例示できる。勿論、植物体の一部又は全部を粉砕など加工しただけのものも本発明の抽出物に含まれる。これらの植物体は何れも充分な食経験の存するものであり、食物としての摂取が可能なものである。故に日常的な摂取ができるほどに安全性が確保されている。
（植物）サルノコシカケ科カバノアナタケ（Fuscoporia obliqua）、ハマウツボ科カンカニクジュヨウ（Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight）、ベンケイソウ科コウケイテン（Rhodiola rosea  L.）、ウコギ科エゾウコギ（Acanthopanax senticosus Harms）トチュウ科トチュウ（Eucommia ulmoides）
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
斯くして得られた抽出物は、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害活性、特に、マトリックスメタロプロテアーゼ９（ＭＭＰ−９）阻害作用に優れ、これにより骨の老化およびかかる老化に関与した疾病が悪化するのを防ぐ作用を有する。骨の老化に関与した疾患としては、例えば、破骨細胞の活性が亢進し、骨を形成するカルシウムが血中に溶出し骨質
量が減少する骨質量減少症、これが更に悪化し、骨に空洞を形成する骨粗鬆症などが例示できる。又、骨吸収が抑制されることにより骨代謝は骨形成に傾き、損失したカルシウムが再度骨に沈着するので、前記抽出物を摂取することにより、前記疾病の改善にもつながる。
この様な作用を発揮するためには、これらの抽出物は、一日あたり１０〜１００００ｍｇを１回乃至は数回に分けて、経口経路で投与されることが好ましい。この時留意すべきことは、ＭＭＰ−９の阻害活性が、８．９ｍＵ／μｇ（酵素活性／植物抽出物）溶液において、４０％以上存することを確認することである。阻害活性は既存のＭＭＰ−９阻害活性測定用のキット、例えば、フナコシ薬品株式会社から販売されている、「MMP−9 Colorimetric Assay Kit (AK-410)」等を用い、測定することが出来る。阻害活性は、（１−検体存在下のプロテアーゼの反応速度／検体非存在下でのプロテアーゼの反応速度）×１００の式で算出される。前記のＭＭＰ−９の阻害活性が４０％を下回るときには、骨の老化の抑制、骨の老化に関与する疾病の予防乃至は改善の効果を発現しない場合が存する。