(57)【要約】  水性製剤中の遊離疎水性活性物質を決定する方法であって、疎水性活性物質をカプセル封入することと、カプセル封入された疎水性活性物質を含む製剤を調製することと、シクロデキストリンを製剤に添加して、それによっていずれの遊離疎水性活性物質も連行することと、遊離疎水性活性物質の量を定量することとを含む、方法が記載される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
水性製剤中の遊離疎水性活性物質を決定する方法であって、
疎水性活性物質をカプセル封入することと、
カプセル封入された疎水性活性物質を含む製剤を調製することと、
シクロデキストリンを前記製剤に添加して、それによっていずれの遊離疎水性活性物質も連行することと、
遊離疎水性活性物質の量を定量することと、を含む、方法。
【請求項２】
シクロデキストリンを前記製剤に添加した後に、前記製剤を遠心分離する追加のステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記シクロデキストリンは、α−シクロデキストリンである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記シクロデキストリンは、β−シクロデキストリンである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
少なくとも１つのシクロデキストリン誘導体、
シクロイヌロヘキソース（ｃｙｃｌｏｉｎｕｌｏｈｅｘｏｓｅ）、シクロイヌロヘプトース（ｃｙｃｌｏｉｎｕｌｏｈｅｐｔｏｓｅ）、シクロイヌロクトース（ｃｙｃｌｏｉｎｕｌｏｃｔｏｓｅ）、カリクサレン（ｃａｌｙｘａｒｅｎｅｓ）、またはキャビタンド（ｃａｖｉｔａｎｄｓ）を前記製剤に添加することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
遊離疎水性活性物質の量を定量するステップは、ＨＰＬＣを使用して行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記疎水性活性物質は、パーソナルケア活性物質である、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年９月２４日に出願された米国仮特許出願第６１／７０４，６６４号からの優先権を主張するものであり、この特許出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
疎水性活性物質のカプセル封入は、パーソナルケア、ホームケア、抗菌、生命科学、および農産業に影響を及ぼす、ことのほか重要な研究分野である。一般に、カプセル封入は、マイクロスケールに基づくものであり、疎水性活性物質を分解または製剤中の他の材料との所望されない相互作用から保護し、また時には制御放出も提供する。
【０００３】
水性ポリウレタン分散剤、ポリ尿素分散剤、メラミン−ホルムアルデヒド分散剤、ポリ（メタ）アクリレート分散剤、および尿素−ホルムアルデヒド分散剤等の、いくつかの従来のカプセル封入技術が存在しており、どこで改善が生じ得るかを決定するためにカプセル封入効率が試験されることは重要である。しかしながら、シェル厚ならびに架橋結合化学反応および密度に応じて、いくつかのカプセル封入された粒子は、従来の有機溶媒抽出方法によって試験されるには虚弱すぎる。従来の方法によってかかる粒子を試験することは、疎水性活性物質の破裂または放出、およびそれ故に、カプセル封入されていない（または遊離）疎水性活性物質の不正確な決定につながることが理解されるべきである。
【０００４】
したがって、それほど破壊的でない、新たな試験方法が必要とされる。
【発明を実施するための形態】
【０００５】
一実施形態において、本発明は、水性製剤中の遊離疎水性活性物質を決定する方法であって、疎水性活性物質をカプセル封入することと、カプセル封入された疎水性活性物質を含む製剤を調製することと、シクロデキストリンを製剤に添加して、それによっていずれの遊離疎水性活性物質も連行することと、遊離疎水性活性物質の量を定量することとを含む、方法を含む。
【０００６】
「疎水性活性物質」は、当該技術分野において有益な薬剤、すなわち、パーソナルケア、ホームケア、抗菌、生命科学、および農業用途において直接の性能便益を付与する薬剤として認識される、水不溶性の成分を指す。非限定的な例として、アボベンゾンは、日焼け止め製剤用の疎水性活性成分であるが、一方で白色ワセリンは、皮膚軟化薬として有用ではあるが、日焼け止め製剤用の成分ではない。
【０００７】
「水性製剤」は、水系製剤を指す。一実施形態において、水性製剤は、水系エマルションまたは水系マイクロエマルションである。本発明の水性製剤の非限定的例としては、日焼け止め剤、水性芳香製剤、抗菌性制御製剤、農薬、殺虫製剤、織物柔軟剤、洗剤、パーソナルケアおよび衛生用品、汚染防止製剤、および除草剤が挙げられる。
【０００８】
一実施形態において、疎水性活性物質は、水性ポリウレタン分散剤、ポリ尿素分散剤、メラミン−ホルムアルデヒド分散剤、ポリ（メタ）アクリレート分散剤、および尿素−ホルムアルデヒド分散剤等の、従来のカプセル封入技術を介してカプセル封入される。活性物質をカプセル封入する方法の非限定的例としては、とりわけ、米国特許公開第２０１０／０２６０６８７号、米国特許公開第２０１１／００５９１４４号、米国特許公開第２０１０／０３１０６７１号、国際公開第９８／０３０６５号の特許公開に記載されるものが挙げられる。一実施形態において、疎水性活性物質は、新たな開発途上にあるカプセル封入技術を介してカプセル封入される。
【０００９】
実施中に、本記載の方法が利用を見出し、これは、何のカプセル封入技術も１００パーセント効率的ではなく、どれほどの疎水性活性物質がカプセル封入されないまま残っているか（このカプセル封入されていない部分は、本明細書で「遊離疎水性活性物質」と称される）を定量することが必要であるためである。
【００１０】
シクロデキストリンは、大きい疎水性空洞を有する環状多糖類である。一実施形態において、シクロデキストリンは、α−シクロデキストリン（下の構造Ｉを参照されたい）である。一実施形態において、シクロデキストリンは、β−シクロデキストリン（下の構造ＩＩを参照されたい）である。
【化１】
2015537189.tif 000002
一実施形態において、シクロデキストリンは、α−シクロデキストリンおよびβ−シクロデキストリンの混合物である。一実施形態において、シクロデキストリンは、γ−シクロデキストリンである。一実施形態において、シクロデキストリンは、シクロデキストリン誘導体のメチル、トリアセチルヒドロキシプロピル、またはヒドロキシエチル誘導体である。
【００１１】
１つの代替的な実施形態において、シクロデキストリンは、シクロイヌロヘキソース（ｃｙｃｌｏｉｎｕｌｏｈｅｘｏｓｅ）、シクロイヌロヘプトース（ｃｙｃｌｏｉｎｕｌｏｈｅｐｔｏｓｅ）、シクロイヌロクトース（ｃｙｃｌｏｉｎｕｌｏｃｔｏｓｅ）、カリクサレン（ｃａｌｙｘａｒｅｎｅｓ）、またはキャビタンド（ｃａｖｉｔａｎｄｓ）等の、疎水性空洞を有する環状オリゴ糖と組み合わされる。１つの代替的な実施形態において、シクロデキストリンは、シクロイヌロヘキソース、シクロイヌロヘプトース、シクロイヌロクトース、カリクサレン、およびまたはキャビタンドのうちの少なくとも１つによって置換される。
【００１２】
理論に拘束されるものではないが、水性環境において、いずれのカプセル封入されていない疎水性活性物質も、シクロデキストリンの疎水性内部と複合体化するようになると考えられている。理論に関わらず、我々は、水中で、疎水性活性物質とシクロデキストリンとの間の非常に高い結合定数を観察してきた。したがって、本方法が水性製剤と共に使用されることは、必須の特長である。
【００１３】
一実施形態において、シクロデキストリンは、固体として添加される。しかしながら、好ましい実施形態において、シクロデキストリンは、水溶液として添加される。一実施形態において、シクロデキストリン溶液は、２５％固体である。一実施形態において、シクロデキストリンは、水溶液として添加され、マイクロカプセル封入された構成成分を含有する製剤に対して２５％固体まで希釈される。
【００１４】
一実施形態において、シクロデキストリンを、マイクロカプセル封入された構成成分を含有する製剤に添加した後に、製剤を遠心分離する追加のステップが行われる。シクロデキストリンおよび複合体化された疎水性活性物質を含有する画分は、除去される。得られた複合体は、所望の疎水性活性物質を検出するために、従来のＨＰＬＣ法を使用して分析することができる。
【００１５】
本発明の１つの利点は、カプセル封入されていない疎水性活性物質が、比較的穏やかな条件下で、有機溶媒、例えば、キシレン、トルエン、ベンゼン等を使用することなく、抽出されるということである。
【００１６】
実施例
次の実施例は、本発明のいくつかの実施形態の例示説明となるものである。
【００１７】
実施例１
本発明の方法を試験するために、マイクロカプセル封入された日焼け止め活性物質を含有する製剤（「バッチＡ」）を、最初にポリビニルアルコール（ＰＶＡ；Ｃｅｌａｎｅｓｅ提供のＣＥＬＶＯＬ  ２０５）を、９０℃まで加熱しながら水中に溶解させて、ＰＶＡ溶液を形成することにより水相を作製することによって、調製する。ＰＶＡ溶液を５５℃まで冷却する。油相を、最初にＵＶ吸収剤である、ホモサレート（３，３，５−トリメチルシクロヘキシル２−ヒドロキシ安息香酸塩（ＰＡＲＳＯＬ（登録商標）））１部、オクトクリレン（２−エチルヘキシル２−シアノ−３，３−ジフェニル−２−プロペン酸塩（ＰＡＲＳＯＬ（登録商標）３４０））１部、およびアボベンゾン（ブチルメトキシジベンゾイルメタン（ＰＡＲＳＯＬ（登録商標）１７８９））２部を、８０℃まで加熱しながら混合することによって調製する。７ｇのポリメチレンポリフェニルイソシアネート（ＰＡＰＩ（商標）２７）を、９３ｇのＵＶ吸収剤の混合物に、５５℃で穏やかに混合しながら添加して、油相を形成する。水相を油相に緩徐に移し、同時に、両者を５０℃の温度で維持する。混合物を、９０００ｒｐｍのせん断速度で５〜１０分間、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ高せん断ホモジナイザーに供する。次いでエマルションを、４．６ｇのエチレンジアミンの、４１．８ｇの水溶液で処理し、５０℃で２０分間混合して、マイクロカプセル封入されたアボベンゾンスラリー（１１．９２％  Ａｖｏ．）を形成する。
【００１８】
実施例２（比較用）
実施例１のカプセル封入方法の効率を慣習的に決定するために、すなわち、バッチＡ中のカプセル封入されていないアボベンゾンの量を定量するために、実施例１に実質的に従った製剤を調整する。
【００１９】
従来の溶媒（キシレン）抽出プロセスを使用して、バイアル中に、１００〜２００ｍｇのバッチＡ、続いて５ｍＬの脱イオン水を添加する。希釈されたスラリーを、３０分間、オービタルシェーカーを用いて混合する。次いで、５ｍＬのキシレンを、スラリーに添加し、続いて表１に列挙される時間にわたって混合する。
【００２０】
有機（上部）層を、１６，０００ｒｐｍで１５分間の遠心分離により分離する。清澄な上清をピペットで吸い上げ、ＨＰＬＣ分析に使用する。ＨＰＬＣ分析のための条件は、下にあるように記載される：
カラム：Ｒｅｓｔｅｋ  Ｕｌｔｒａ  Ｃ１８  １５０ｘ４ｍｍ（または均等物）
移動相：アセトニトリル：水（Ｖ／Ｖ）：７３：２７
流速：２．５ｍＬ／分
分析時間：８分間、無勾配
検出：３１０ｎｍ（ホモサレート／オキソクリレン（ｏｘｏｃｒｙｌｅｎｅ）／アボベンゾン）または３６０ｎｍ（アボベンゾンのみ）
【００２１】
表１は、経時的に検出された、カプセル封入（ｅｎｃａｐｓｕｌｔｅｄ）されていないアボベンゾンのパーセンテージを示す（検出されたアボベンゾンレベル対理論上の総アボベンゾンレベルの比率として算出）。
【表１】
2015537189.tif 000003
したがって、従来の溶媒抽出は、カプセル封入されていないアボベンゾン（それは経時的に増加するべきではない）を定量する、重大な問題を有するようである。理論に拘束されることを望むものではないが、有機溶媒が最初に遊離活性物質を過小検出し、次いでアボベンゾンをマイクロカプセルから経時的に浸出させるかまたは所望されない様態で抽出するようである。
【００２２】
実施例３
実施例１のカプセル封入方法の効率を決定するために、すなわち、本発明の一実施形態によりバッチＡ中のカプセル封入されていないアボベンゾンの量を定量するために、実施例１に実質的に従った製剤を調整する。
【００２３】
シクロデキストリンとの複合体化を通じた、カプセル封入されていないアボベンゾンの測定を次のように遂行する。バイアル中に、１００〜２００ｍｇのバッチＡ、続いて５ｍＬの脱イオン水および５ｍＬのシクロデキストリン水溶液（５０重量％、Ｃａｖａｓｏｌ  Ｗ７Ｍ  ＴＬ、Ｗａｃｋｅｒ  Ｃｈｅｍｉｃａｌにより供給される）を添加する。希釈されたスラリーを、それぞれ１、２、３、および４時間、オービタルシェーカーを用いて混合する。１ｍＬの混合物を除去し、１６，０００ｒｐｍで１５分間遠心分離する。清澄な上清をピペットで吸い上げ、ＨＰＬＣ分析に使用する。ＨＰＬＣ分析のための条件は、上にあるように記載され、（カラム：Ｒｅｓｔｅｋ  Ｕｌｔｒａ  Ｃ１８  １５０ｘ４ｍｍ（または均等物）、移動相：アセトニトリル：水（Ｖ／Ｖ）：７３：２７、流速：２．５ｍＬ／分、送液時間：８分間、無勾配、検出：３１０ｎｍ（ホモサレート／オキソクリレン（ｏｘｏｃｒｙｌｅｎｅ）／アボベンゾン）または３６０ｎｍ（アボベンゾンのみ））である。
【００２４】
表２は、経時的に検出された、カプセル封入（ｅｎｃａｐｓｕｌｔｅｄ）されていないアボベンゾンのパーセンテージを示す（検出されたアボベンゾンレベル対理論上の総アボベンゾンレベルの比率として算出）。
【表２】
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見ることができるように、本発明のこの実施形態は、経時的に適度に安定している、カプセル封入されていないアボベンゾンを定量する方法を提供する。
【国際調査報告】
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