(57)【要約】  哺乳動物源由来のＥＣＭ足場成分と、スタチン及びキチン誘導体から成る群から選択される少なくとも一つの追加の生物活性成分とを含む細胞外マトリックス（ＥＣＭ）組成物を含む、損傷した、又は罹患した生体組織を再建、置換、又は修復するための組成物。
2015532922.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
損傷した生体組織を治療するための流動化された組成物であって、
哺乳動物源由来の細胞外マトリックス（ＥＣＭ）足場成分を含むＥＣＭ組成物と、
スタチン及びキチン誘導体から成る群から選択される少なくとも一つの追加の生物活性成分を含む、組成物。
【請求項２】
前記ＥＣＭ足場成分が、小腸粘膜下層（ＳＩＳ）、膀胱粘膜下層（ＵＢＳ）、膀胱の上皮基底膜（ＵＢＭ）、肝臓基底膜（ＬＢＭ）、胃粘膜下層（ＳＳ）、動物源由来のコラーゲン、植物源由来のコラーゲン、細胞からの培養物の合成細胞外マトリックス、真皮細胞外マトリックス、皮下細胞外マトリックス、大腸細胞外マトリックス、胎盤細胞外マトリックス、修飾細胞外マトリックス、心臓細胞外マトリックス、および肺細胞外マトリックスから成る群から選択されたＥＣＭ材料を含むことを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ＥＣＭ材料が粒子状ＥＣＭ材料を含むことを特徴とする請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記粒子状ＥＣＭ材料が、約５００ミクロン以下の粒径を有することを特徴とする請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記粒子状ＥＣＭ材料の粒径が約２０〜３００ミクロンの範囲にあることを特徴とする請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
前記ＥＣＭ組成物が、水及び生理食塩水から成る群から選択される流動化成分を含むことを特徴とする請求項３に記載の組成物。
【請求項７】
前記ＥＣＭ組成物が前記流動化成分を約０．００１〜２００ｍｇ／ｍｌの範囲で含むことを特徴とする請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記スタチンが、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、及びシンバスタチンから成る群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記キチン誘導体がキトサンを含むことを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
第１の生物活性成分が、抗生物質、抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗疼痛剤、麻酔薬、鎮痛薬、ステロイド性抗炎症薬、非ステロイド性抗炎症薬、抗悪性腫瘍薬、鎮痙薬、細胞‐細胞外マトリックス相互作用のモジュレータ、タンパク質、ホルモン、酵素及び酵素阻害剤、抗凝固剤、抗血栓剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、修飾ＤＮＡ及びＲＮＡ、ＮＳＡＩＤ、ＤＮＡの阻害剤、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核タンパク質、及び血管拡張剤から成る群から選択される薬物を含むことを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記第１の生物活性成分が、ヒト胚幹細胞、胎児細胞、胎児心筋細胞、筋線維芽細胞、間葉系幹細胞、自家移植拡張心筋細胞、脂肪細胞、全能性細胞、多能性細胞、血液幹細胞、筋芽細胞、成体幹細胞、骨髄細胞、間葉系細胞、胚性幹細胞、実質細胞、上皮細胞、内皮細胞、中皮細胞、線維芽細胞、筋線維芽細胞、骨芽細胞、軟骨細胞、外因性細胞、内因性細胞、幹細胞、造血性幹細胞、多能性幹細胞、骨髄由来前駆細胞、前駆細胞、心筋細胞、骨格細胞、未分化細胞、多能性前駆細胞、単能性前駆細胞、単球、心筋細胞、心筋芽細胞、骨格筋芽細胞、マクロファージ、毛細血管内皮細胞、異種細胞、及び同種細胞から成る群から選択される細胞を含むことを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体組織を治療するための方法に関する。より詳細に、本発明は、損傷した又は罹患した組織、具体的に、心血管組織を治療するための方法及びシステムに関する。
【背景技術】
【０００２】
心筋梗塞は虚血性心疾患／冠動脈疾患の一般的な症状である。世界保健機関は、２００４年、世界の死者の１２．２％が虚血性心疾患の結果として発生したと見積もった。虚血性心疾患は又、中所得ないし高所得国の一番目の死因であり、より低所得な国では呼吸器感染に次いで二番目の死因と見なされた。Ｔｈｅ Ｇｌｏｂａｌ Ｂｕｒｄｅｎ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅ： 世界保健機関２００４ｕｐｄａｔｅ、ジュネーブ（２００８年）。世界で年間３００万を超える人々がＳＴ上昇型急性心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）の症状を示し、４００万の人々が非ＳＴ上昇型急性心筋梗塞（ＮＳＴＥＭＩ）の症状を示す。Ｗｈｉｔｅら、Ａｃｕｔｅ Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ Ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ、ランセット３７２（９６３８）、頁５７０〜８４（２００８年８月）。
【０００３】
虚血性心疾患による死亡率は、ほとんどの高所得国では鈍化又は減少しているが、心血管疾患は依然として、２００８年、米国の全死者の３人に１人の割合を占めた。Ｒｏｇｅｒら、Ｅｘｅｃｕｔｉｖｅ ｓｕｍｍａｒｙ：Ｈｅａｒｔ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｓｔｒｏｋｅ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ‐‐２０１２ｕｐｄａｔｅ:Ａ ｒｅｐｏｒｔ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｈｅａｒｔ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ １２５ （１）、頁１８８〜９７(２０１２年１月)。
【０００４】
対照的に、虚血性心疾患は、発展途上国において、より一般的な死因になってきている。インドの例では、虚血性心疾患は、２００４年までに一番目の死亡原因となり、１４６万の死者（全体の死者の１４％）を計上した。虚血性心疾患によるインドでの死者は又、１９８５〜２０１５年の間に倍増すると予想された。Ｇｕｐｔａら、Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｃａｕｓａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｒｏｎａｒｙ Ｈｅａｒｔ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｓｔｒｏｋｅ ｉｎ Ｉｎｄｉａ、Ｈｅａｒｔ ９４ （１）、頁１６〜２６(２００８年１月)。
【０００５】
世界的に、虚血性心疾患による障害調整生存年（ＤＡＬＹ）の損失は２０３０年に全体のＤＡＬＹの５．５％を占め、そのことによりそれは（単極性うつ病性障害に次ぐ）二番目に最も重要な障害の原因になり、且つこのときまでに死亡の一番の原因になると予測される。
【０００６】
心筋梗塞（虚血性心疾患の一般的な症状）は、冠状動脈が閉塞し、もはや心筋組織に血液を供給することができないときに多くの場合発生し、それは心筋細胞の死を引き起こす。心筋梗塞が発生すると、適切な血流をもはや受け取らなくなった心筋組織は最終的に死亡し（有効な介入なしで）、いずれ瘢痕組織に置き換わる。
【０００７】
心筋梗塞の数秒以内に、低灌流心筋細胞はもはや収縮することなく、異常な壁運動、梗塞内又はその周囲の高い壁応力、及び心室機能の低下に至る。梗塞組織と正常な組織との間の結合部の高い応力は、梗塞領域の拡大及びリモデリング、すなわち、いずれ心筋細胞イベントのカスケードシーケンスにつながる。
【０００８】
心筋梗塞を治療するための様々な方法が多くの場合に用いられる。そのような方法は、様々な薬物の全身送達を介して心筋梗塞に関連する血行動態を安定させることや、血栓溶解療法又は血管形成術及びステントを介して閉塞した血管の開通性を回復させることを含む。
【０００９】
心筋梗塞を治療するためのいくつかの追加の方法は、血管新生の刺激を通じて虚血領域への血流を再確立することに関する。虚血領域の血流を再確立することは、心筋梗塞に関連する症状を軽減、及び／又は心機能を改善し得、多くの場合にそうなるであろう。
【００１０】
血流を再確立し心臓を回復させるためのいくつかの方法は、バイパス手術又は血管形成術のような侵襲性外科手術を伴う。他の方法は、血液の流れを促進するために、梗塞及び虚血領域（複数の）を通じて穿孔するためにレーザーを使用する。当業者が容易に理解できるように、記載の方法に関連する数多くのリスクが現在も存在する。
【００１１】
心筋梗塞を治療するためのさらなる方法は、梗塞及び／又は虚血領域（すなわち、患部又は損傷した心血管組織）への生物活性剤又は薬物の直接的又は選択的な送達である。患部心血管組織への生物活性剤又は薬物の直接の送達は、多くの場合、いくつかの理由のために、全身送達よりも好ましい。主な理由として、全身送達によって起こり得る希薄な濃度と比較して、患部心血管組織内へ直接送達され得るような薬剤の濃度は実質的に高いことが挙げられる。もう一つの理由として、患部心血管組織で所望の薬剤濃度を得るために典型的に必要とされる薬物の投与量によって生じ得、及び多くの場合に生ずるであろう全身毒性のリスクが挙げられる。
【００１２】
生物活性剤又は薬物を、患部心血管組織、例えば、損傷した心筋組織に送達する一つの一般的な方法は、心臓内の患部心血管組織に薬剤を直接注入するために、脈管構造を通して心臓内へカテーテルを進めることを含む。
【００１３】
患部心血管組織へ生物活性剤又は薬物を送達する別の方法は、開胸手術中の組織内への心外膜直接注入を含む。患部心血管組織に投与することができる、及び投与されてきた生物活性剤は、抗血栓剤のような種々の薬物、例えば、ヘパリン、ヒルジン、及びチクロピジンを含み、及び成熟して能動的に収縮する心筋細胞になることができる、又は心筋組織を再生することができる細胞を含む。そのような細胞の例は、筋細胞、筋芽細胞、間葉系幹細胞、及び多能性細胞を含む。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
しかしながら今日まで、患部心血管組織の細胞治療は、その可能性を最大限に達成するには至らず、それは部分的に、不適当な血管新生により、移植細胞が虚血領域（複数の）又は部位内で生存及び損傷した組織を再生できないことによる。
【００１５】
従って、組織生存を促進し患部又は損傷した心血管組織の新血管形成及び再生を誘導する生物活性剤及び薬物（並びに薬理組成物）、及びそれを、患部心血管組織へ送達するための改良された方法を提供することが望ましい。
【００１６】
それ故本発明の目的は、組織生存を促進し、損傷した心血管組織の新血管形成及び再生を誘導する生物活性剤及び薬物（並びに薬理組成物）を提供することである。
【００１７】
本発明の他の目的は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）組成物を提供することであり、該ＥＣＭ組成物は、損傷した生体組織、特に心血管組織に送達されるとき、新血管形成、宿主組織の増殖、バイオリモデリング、及び心血管組織や部位特異的な構造的、機能的特性を有する関連する構造の再生を誘発する。
【００１８】
さらに、本発明の他の目的は、ＥＣＭ組成物を損傷した又は罹患した生体組織、特に心血管組織に直接投与するための、改良された方法及びシステムを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本発明は、損傷した又は罹患した生体組織、特に心血管組織を治療するための方法及びシステムに関する。いくつかの実施形態で、方法は、本発明に係る少なくとも一つの薬理組成物を、損傷した又は罹患した生体組織に直接に送達又は投与することを含む。
【００２０】
好適な実施形態で、薬理組成物は、少なくとも一つのＥＣＭ材料を含む細胞外マトリックス（ＥＣＭ）組成物を含む。
【００２１】
本発明に従って、ＥＣＭ材料は、小腸、大腸、胃、肺、肝臓、腎臓、膵臓、胎盤、心臓、膀胱、前立腺、成長するエナメルの周囲組織、成長する骨の周囲組織、及び任意の哺乳動物の器官からの任意の胎児組織を含む様々な哺乳動物組織源からの由来であり得、それを調製するための方法により得られる。
【００２２】
いくつかの実施形態で、ＥＣＭ組成物はさらに、損傷した組織の治療及び又は組織の再生プロセスを容易にするための一つ以上の追加の生物活性成分を含む。
【００２３】
いくつかの実施形態で、従ってＥＣＭ組成物は、少なくとも一つの薬物又は薬理組成物を含み、抗生物質、抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗疼痛剤（anti-pain agents）、麻酔薬、鎮痛薬、ステロイド性抗炎症薬、非ステロイド性抗炎症薬、抗悪性腫瘍薬、鎮痙薬、細胞‐細胞外マトリックス間相互作用のモジュレータ、タンパク質、ホルモン、酵素及び酵素阻害剤、抗凝固剤及び／又は抗血栓剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、修飾ＤＮＡ及びＲＮＡ、ＮＳＡＩＤ、ＤＮＡ又はＲＮＡ若しくはタンパク質合成の阻害剤、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核タンパク質、細胞移動を調節する化合物、組織の増殖及び成長を調節する化合物、及び血管拡張剤を含み得るがこれらに限定されない。
【００２４】
本発明のいくつかの実施形態で、薬物は特に、抗炎症薬又は抗炎症組成物を含む。
【００２５】
本発明のいくつかの実施形態で、生物活性成分はスタチンを含む。本発明に従って、適合するスタチンは、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、及びシンバスタチンを含むがこれらに限定されない。
【００２６】
本発明のいくつかの実施形態で、生物活性成分はキトサン又はその誘導体を含む。
【００２７】
本発明のいくつかの実施形態で、生物活性成分は細胞を含む。
【００２８】
本発明のいくつかの実施形態で、生物活性成分はタンパク質を含む。
【００２９】
本発明のいくつかの実施形態で、ＥＣＭ組成物は、該ＥＣＭ組成物の損傷した又は罹患した組織への注入を容易にするように製剤化される（すなわち、注入可能なＥＣＭ組成物）。
【００３０】
本発明のいくつかの実施形態において、本発明に係る一つ以上のＥＣＭ組成物が多針注入システムにより損傷した心血管組織に直接投与される。本発明に従って、ＥＣＭ組成物は、心臓壁及び／又はそれに関連する種々の心血管構造、心外膜、心内膜、及び心筋等に直接投与され得る。
【００３１】
さらなる特徴及び利点が、添付の図面に図示されているように、本発明の好適な実施形態に係る以下のより具体的な記載から明らかになるであろう。図面の同様の参照文字は、図面を通して、概して、同じ部分又は同じ要素を指す。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】図１は正常な心臓を図示する。
【図２】図２は虚血性梗塞領域を有する心臓である。
【図３Ａ】図３Ａは、本発明に従って、ＥＣＭ組成物を生体組織、例えば心血管組織に直接投与するのに適した多針注入装置の一つの実施形態の分解斜視図である。
【図３Ｂ】図３Ｂは、本発明に従って、図３Ａに図示された多針注入装置の組み立て斜視図である。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本発明を詳細に説明する前に、本発明は、具体的に例示された装置、システム、組成物または方法に限定されることなく、当然に変化し得ることが理解されるべきである。従って、本発明の実施において、本明細書に記載されるものと同様又は均等な多数のシステム、組成物及び方法が使用され得るが、本明細書においては、好適なシステム、組成物及び方法が説明される。
【００３４】
本発明に係るシステム、薬理組成物及び方法は、薬理組成物（及び生物活性剤並びに薬物）の心血管組織への投与（又は送達）との関連で説明され記載されるが、本発明のシステム、組成物及び方法はそのような送達に限定されない。本発明に従って、本発明のシステム及び方法は、薬理組成物（及び生物活性剤並びに薬物）を、胃腸組織、呼吸器組織を含むがこれらに限定されない多数の追加の生体組織に投与するために使用され得る。
【００３５】
本発明に係る薬理組成物を生体組織へ送達する好適な方法は組織内への直接注入を含むが、薬理組成物の送達は直接注入に限定されないことも理解されるべきである。本発明に従って、本発明の薬理組成物は、局所投与等の他の従来の手段により生体組織へ送達され得る。
【００３６】
さらに、本明細書で使用される用語は、本発明の具体的な実施形態を説明することのみを目的とし、限定することを意図しないことが理解されるべきである。
【００３７】
他に画定しない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的な用語は、本発明が属する分野の当業者によって共通して理解されるものと同様の意味を有する。
【００３８】
さらに、本明細書において前後に参照される全ての公表、特許及び特許出願は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００３９】
最後に、発明の詳細な説明及び添付の特許請求の範囲で使用される、単数形「一つの（ａ）」、「一つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈が別途明白に指示しない限り、複数形の参照を含む。よって、例えば、「抗炎症薬」への言及は、２つ以上のそのような作用剤等を含む。
【００４０】
定義
用語「心臓組織の損傷」、「心臓組織の傷害」、及び「心血管組織の損傷」は、本明細書において互換的に使用され、心外膜、心内膜、及び／又は心筋の損傷を含む疾病、疾患、傷害又は損傷によって引き起こされた心血管系又は心臓内の任意の異常な組織の領域を意味し、含む。心血管組織損傷の原因の例としては、急性又は慢性ストレス（全身性高血圧、肺高血圧症、弁機能障害等）、冠動脈不全、虚血又は梗塞、炎症性疾患及び心筋症が含まれるがこれらに限定されない。
【００４１】
当技術分野でよく知られるように、心血管組織の損傷は、ほとんどの場合、心筋への損傷又は傷害を伴い、それ故、本開示の目的のために、心筋の損傷又は傷害は心血管組織の損傷と同等である。
【００４２】
本明細書で使用される用語「損傷した組織」は生体組織を意味し、含み、特に、外傷によって損傷又は傷害を受けた心血管組織、虚血組織、梗塞組織、又は組織への正常な血流に妨害を引き起こすいずれかの手段によって損傷した組織を意味し、含む。
【００４３】
用語「予防する」及び「予防すること」は本明細書において互換的に使用され、疾病、症状、又は疾患の頻度又は重症度を低減させることを意味し、含む。該用語は疾病、症状、又は疾患の完全な除去を要しない。むしろこの用語は、疾病発生の機会を低減することを含む。
【００４４】
用語「治療する」及び「治療」は、本明細書において互換的に使用され、疾病、病状、又は疾患を治す、改善する、安定化させる、又は予防する意図を有する患者の医学的管理を意味し、含む。用語は、「積極的治療」、すなわち、疾病、病状、又は疾患の改善を特に目的とする治療と、「原因療法」、すなわち、疾病、病状、又は疾患に関連する原因の除去を目的とする治療を含む。
【００４５】
用語「治療する」及び「治療」はさらに、「待機療法」、すなわち、疾病、病状、又は疾患を治すというよりは症状の軽減のために設計された治療、「予防的治療」、すなわち、関連する疾病、病状、又は疾患の発現を最小限にする、又は部分的若しくは完全に抑えることを目的とする治療、及び「支持療法」、すなわち、関連する疾病、病状、又は疾患の改善を目的とする他の特定の療法を補うために使用される治療を含む。
【００４６】
本明細書で使用する用語「心室再構築（リモデリング）」は、ストレス又は傷害に続いて、心臓組織のサイズ、形状、及び機能の変化をもたらす一連のイベント（遺伝子発現の変化、分子変化、細胞変化及び間質性変化を含む場合がある）を意味し、含む。当技術分野でよく知られているように、リモデリングは、心筋梗塞、圧負荷（例えば、大動脈弁狭窄、高血圧）、容量負荷（例えば、弁逆流）、炎症性心疾患（例えば、心筋炎）の後に発生する場合があり、又は特発性症例（例えば、特発性拡張型心筋症）中に発生する場合がある。
【００４７】
本明細書で使用する用語「血管新生」は、既存の血管からの新たな血管の成長を伴う生理的プロセスを意味する。
【００４８】
本明細書で使用する用語「新血管形成」は、血液又は血液成分によって灌流され得る機能的血管ネットワークの形成を意味し、含む。新血管形成は、血管新生、出芽（budding）血管新生、嵌入（intussuceptive）血管新生、萌出（sprouting）血管新生、治療的血管新生及び脈管形成を含む。
【００４９】
用語「細胞外マトリックス」、「細胞外マトリックス材料」、及び「ＥＣＭ材料」は、本明細書において互換的に使用され、動物組織の細胞間に見られ、組織内で構造的要素として機能するコラーゲンを豊富に含む物質を意味する。それは典型的に、細胞によって分泌されるタンパク質及び多糖類の混合物を含む。細胞外マトリックスは、種々の方法で単離し処理することができる。細胞外マトリックス（ＥＣＭ）材料は、小腸粘膜下層、胃粘膜下層、膀胱粘膜下層、組織粘膜、硬膜、肝臓基底膜、心膜又は他の組織から単離することができる。単離及び処理を受けて、それは、一般に、細胞外マトリックス又はＥＣＭ材料と呼ばれる。
【００５０】
用語「薬物」、「医薬品」、「作用剤」、「活性剤」、「薬剤」、及び「活性剤製剤」は、本明細書において互換的に使用され、何らかの治療的効果、多くの場合は有益な効果をもたらす、作用剤、薬剤、化合物、組成物又はそれらの混合物、例えばその製剤等を意味し、含む。これは、温血動物、ヒト及び霊長類；鳥類；ネコ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ウマ及びブタ等の家庭や農場の動物；マウス、ラット及びモルモット等の実験動物；魚；爬虫類；動物園や野生の動物等の動物において局所的、又は全身的な影響又は複数の影響をもたらす任意の生理活性物質又は薬理活性物質を含む。
【００５１】
用語「薬物」、「医薬品」、「作用剤」、「活性剤」、「薬剤」、及び「活性剤製剤」は、従って、抗生物質、抗ウイルス剤、鎮痛剤、ステロイド性抗炎症薬、非ステロイド性抗炎症薬、抗悪性腫瘍薬、鎮痙薬、細胞‐細胞外マトリックス相互作用のモジュレータ、タンパク質、ホルモン、酵素および酵素阻害剤、抗凝固剤及び／又は抗血栓剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、修飾ＤＮＡやＲＮＡ、ＮＳＡＩＤ、ＤＮＡ、ＲＮＡ、又はタンパク質合成阻害剤、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核タンパク質、細胞移動を調節する化合物、組織の増殖及び成長を調節する化合物、及び血管拡張剤を意味し含むが、これらに限定されない。
【００５２】
用語「抗炎症薬」及び「抗炎症剤」も本明細書において互換的に使用され、「薬物」及び／又は「活性剤製剤」を意味し、含み、それは治療上有効な量が対象に投与されるとき、身体上の組織の炎症、すなわち、有害物資及び傷害された組織の両方を破壊し、弱め、遮断するように働く、組織の傷害又は破壊に対する組織の防御反応を防ぎ、又は治療する。従って、抗炎症剤は、アルクロフェナク、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、アルゲストンアセトニド、アルファアミラーゼ、アムシナファル、アムシナフィド、アンフェナクナトリウム、アミプリロース塩酸塩、アナキンラ、アニロラク、アニトラザフェン、アパゾン、バルサラジド二ナトリウム、ベンダザック、ベノキサプロフェン、ベンジダミン塩酸塩、ブロメライン、ブロペラモール、ブデソニド、カルプロフェン、シクロプロフェン、シンタゾン、クリプロフェン、プロピオン酸クロベタゾール、酪酸クロベタゾン、クロピラク、プロピオン酸クロチカゾン、コルメタゾンアセテート、コルトドキソン、デカン酸塩、デフラザコート、デラテストリル、デポテストステロン、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾンジプロピオネート、ジクロフェナクカリウム、ジクロフェナクナトリウム、二酢酸ジフロラゾン、ジフルミドンナトリウム、ジフルニサル、ジフルプレドナート、ジフタロン、ジメチルスルホキシド、ドロシノニド、エンドリソン、エンリモマブ、エノリカムナトリウム、エピリゾール、エトドラク、エトフェナマート、フェルビナク、フェナモール、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェンドサール、フェンピパロン、フェンチアザク、フラザロン、フルアザコルト、フルフェナム酸、フルミゾール、フルニソリド酢酸、フルニキシン、フルニキシンメグルミン、フルオコルチンブチル、フルオロメトロン酢酸塩、フルクァゾン、フルルビプロフェン、フルレトフェン、プロピオン酸フルチカゾン、フラプロフェン、フロブフェン、ハルシノニド、ハロベタゾールプロピオン酸、酢酸ハロプレドン、イブフェナク、イブプロフェン、イブプロフェンアルミニウム、イブプロフェンピコノール、イロニダップ、インドメタシン、インドメタシンナトリウム、インドプロフェン、インドキソール、イントラゾール、イソフルプレドン酢酸、イソキセパク、イソキシカム、ケトプロフェン、塩酸ロフェミゾール、ロモキシカム、エタボン酸ロテプレドノール、メクロフェナム酸ナトリウム、メクロフェナム酸、メクロリゾンジブチレート、メフェナム酸、メサラミン、メセクラゾン、メステロロン、メタンドロステノロン、メテノロン、メテノロン酢酸エステル、スレプタン酸メチルプレドニゾロン、モミフルマート、ナブメトン、ナンドロロン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、ナプロキソール、ニマゾン、オルサラジンナトリウム、オルゴテイン、オルパノキシン、オキサンドロロン、オキサプロジン、オキシフェンブタゾン、オキシメトロン、パラニリン塩酸塩、ペントサンポリ硫酸ナトリウム、フェンブタゾンナトリウムグリセラート、ピルフェニドン、ピロキシカム、ケイ皮酸ピロキシカム、ピロキシカムオラミン、ピルプロフェン、プレドナザート、プリフェロン、プロドール酸、プロカゾン、プロキサゾール、プロキサゾールクエン酸塩、リメキソロン、ロマザリット、サルコレクス、サルナセジン、サルサレート、サンギナリウムクロリド、セクラゾン、セルメタシン、スタノゾロール、スドキシカム、スリンダク、スプロフェン、タルメタシン、タルニフルマート、タロサラート、テブフェロン、テニダップ、テニダップナトリウム、テノキシカム、テシカム、テシミド、テストステロン、テストステロンブレンド、テトリダミン、チオピナク、チクソコルトールピバル酸エステル、トルメチン、トルメチンナトリウム、トリクロニド、トリフルミダート、ジドメタシン、及びゾメピラックナトリウムを含むが、これらに限定されない。
【００５３】
本明細書で使用する用語「キトサン」は、変化量のβ（１→４）結合したＮ‐アセチル‐２アミノ‐２‐デオキシ‐Ｄ‐グルコース残基及び２‐アミノ‐２‐デオキシ‐Ｄグルコース残基から成る鎖状多糖のファミリー、及びそれらの全ての誘導体を意味し、含む。
【００５４】
用語「活性剤製剤」、「薬物製剤」、及び「作用剤製剤」も本明細書において互換的に使用され、１つ又は複数の薬学的に許容される担体及び／又は追加の不活性成分と任意で組み合わせられる活性剤（及びキトサン）を意味し、含む。本発明に従って、製剤は、溶液又は担体中の懸濁液の形態のいずれかであり得る。
【００５５】
本明細書で使用する用語「薬理組成物」は、「薬物」、及び／又は「細胞外マトリックス材料」、及び／又は「薬物製剤」、及び／又は任意の追加の作用剤、又は本明細書において特定される成分を含む組成物を意味し、含む。
【００５６】
本明細書で使用される用語「治療上有効」は、投与される「薬理組成物」、及び／又は「薬物」、及び／又は「活性剤製剤」の量が、一つ以上の原因、症状、又は疾病若しくは疾患の続発症を改善するために十分な量であることを意味する。そのような改善は、原因、症状、疾病又は疾患の続発症の減少又は変更のみを要し、必ずしも除去を要しない。
【００５７】
用語「送達」及び「投与」は本明細書において互換的に使用され、「薬理組成物」又は「薬物」あるいは「活性剤製剤」を、機能剤又は製剤あるいは組成物を治療部位に送達するために適合するいずれかの方法によって、治療部位、例えば損傷した組織に与えることを意味し、含む。送達方法の例は、直接注入、経皮的送達、及び治療部位での局所適用を含むがこれらに限定されない。
【００５８】
本明細書で使用する用語「経皮的」は、切れ目、切開、穴、カニューレ、管状アクセススリーブ又はポート等の形態に関わらず、患者又は対象の皮膚を通じた任意の貫通を意味し、含む。
【００５９】
用語「患者」及び「対象」は本明細書において互換的に使用され、温血動物、ヒト及び霊長類；鳥類；ネコ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ウマ及びブタ等の家庭や農場の動物；マウス、ラット及びモルモット等の実験動物；魚；爬虫類；動物園や野生の動物等を意味し、含む。
【００６０】
用語「含む（comprise）」、及び「含む（comprising）」、「含む（comprises）のような変化形は、「含むが、限定されない」ことを意味し、例えば、他の添加物、成分、整数または工程を排除することを意図しない。
【００６１】
以下の開示は、本発明の１つ以上の実施形態を実施するための最良の形態を実施可能にするようにさらに説明するため提供される。本開示はさらに、いかなる場合も本発明を限定するのではなく、本発明の原理及びその利点について理解と認識を高めるために提供される。本発明は、本出願の係属中になされる任意の補正及びそれらの請求項から生ずる全ての均等物を含む添付の特許請求の範囲によってのみ画定される。
【００６２】
当業者に容易に理解されるように、本発明は、損傷した又は罹患した生体組織を治療する従来技術の方法に関連する不利点及び欠点を実質的に低減又は排除する。
【００６３】
概して、本開示は、薬理組成物（及び／又は薬物及び／又は製剤）の損傷した又は罹患した組織への「直接」送達を介して、損傷した又は罹患した生体組織、特に、心血管組織を治療する方法及びシステムに関する。本発明に従って、本発明に係る薬理組成物の治療有効量の損傷した又は罹患した組織への送達は、新血管形成、宿主組織の増殖、バイオリモデリング及び新しい組織の再生を誘導する。
【００６４】
本発明に従って、薬理組成物は、混合液、混合エマルジョン、混合ゲル、混合ペースト、又は混合固体粒子を含み得る。
【００６５】
いくつかの実施形態で、本発明に係る一つ以上の薬理組成物は、２０１２年９月２４日に出願された同時係属出願第６１／７０４，６３４号に開示されているような、及び図３Ａ、３Ｂに図示されているような多針注入システムを介して損傷した又は罹患した組織に直接投与される。
【００６６】
好適な実施形態において、薬理組成物は少なくとも一つの細胞外マトリックス（以下、「ＥＣＭ材料」）を含む細胞外マトリックス（ＥＣＭ）組成物を含む。
【００６７】
本発明に従って、ＥＣＭ材料は、米国特許第７，５５０，００４号、第７，２４４，４４４号、第６，３７９，７１０号、第６，３５８，２８４号、第６，２０６，９３１号、第５，７３３，３３７号、及び第４，９０２，５０８号、並びに米国出願第１２／７０７，４２７号（これらはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているように、種々の哺乳動物組織源から、及びそれを調製する方法により得ることができる。哺乳動物組織源は、小腸、大腸、胃、肺、肝臓、腎臓、膵臓、胎盤、心臓、膀胱、前立腺、成長するエナメルの周囲組織、成長骨の周囲組織、及び哺乳動物の器官からの任意の胎児組織を含むがこれらに限定されない。
【００６８】
当技術分野でよく知られるように、膀胱粘膜下層は、粘膜（移行上皮層及び固有層を含む）、粘膜下層、３層の筋層、及び外膜（疎性結合組織層）を有する細胞外マトリックスである。この一般的な構成は、小腸粘膜下層（ＳＩＳ）及び胃粘膜下層（ＳＳ）についても同様である。
【００６９】
肝臓や膵臓等の他の組織は、基底膜と呼ばれるＥＣＭ材料を有する。基底膜は、一般に、粘膜下層に見られるような種類の引張強さを示さない。しかしながら、他の有用な特性が、肝臓、膵臓、胎盤及び肺組織のような組織（それらの全てが基底膜又は間膜（肺の場合）のいずれかを有する）のＥＣＭ材料から日和見的に採用される場合がある。例えば、膵臓の細胞外膜は、膵臓機能に不可欠なベータ島細胞を支持する。又、例えば、肝臓は、それ自体を再生することができる一つの組織として知られ、従って、特別な性質が肝臓基底膜中に存在する場合があり、そのプロセスを容易にするのに役立つ。成長する歯のエナメル質及び成長する骨の周囲のＥＣＭ材料も又、骨及びエナメル質の硬組織の成長及び分化を支持するという点で、他のマトリックスを超える特定の利点を有する。
【００７０】
本発明に従って、ＥＣＭ材料は、全体的又は部分的に使用することができ、そのことにより、例えば、ＥＣＭ材料は基底膜（又は移行上皮層）と下にある粘膜固有層、粘膜下層、筋層、及び漿膜のみを含む場合がある。組成物のＥＣＭ材料成分は、これらの層のいずれか又は全部を含む場合があり、従って恐らく、粘膜下層を除いて、基底膜部分のみを含み得る。しかしながら、一般に、及び特に、粘膜下層はｉｎ ｖｉｖｏの組織再生のために必要な活性増殖因子及び他のタンパク質を含有し支持すると考えられるので、いずれかの所与のソースからのＥＣＭ又はマトリックス組成物は、細胞の成長や分化、組織再生を支持する活性な細胞外マトリックス部分を含むであろう。
【００７１】
本発明の目的のために、哺乳動物組織のいずれかからのＥＣＭ材料は、広くＥＣＭ材料と称されるいくつかの基本的に分離できない層から成る。例えば、基底膜を粘膜下層から分離することは、それらの層が薄くそれらを互いに剥離することができないため、不可能でないとしても非常に困難であると考えられ、その特定の層からのＥＣＭ材料は、粘膜下層とともにいくらかの基底膜を恐らく必然的に含むであろう。
【００７２】
本発明に従って、ＥＣＭ材料は、本発明のＥＣＭ組成物を形成するために、米国特許第５，２７５，８２６号、第６，５７９，５３８号、及び第６，９３３，３２６号に記載されるように、粒子状に形成され、及び流動化される場合がある。
【００７３】
本発明に従って、粒子状ＥＣＭ材料を形成するために種々の従来の手段を使用することができる。いくつかの実施形態において、ＥＣＭ材料はシート状に形成され、流動化され（又は水和され）、必要に応じて、凍結され、粉砕される。
【００７４】
本発明のいくつかの実施形態で、粉末のＥＣＭ材料は、その後、所望の粒径を達成するためにフィルターにかけられる。従って、いくつかの実施形態において、ＥＣＭ材料は、２０００ミクロン以下の粒径を有する。いくつかの実施形態において、ＥＣＭ材料は、好ましくは５００ミクロン以下の粒径を有する。好適な実施形態において、ＥＣＭ材料は、約２０ミクロン乃至約３００ミクロンの範囲にある粒径を有する。
【００７５】
本発明に従って、流動化又は乳化組成物（液体または半固体の形態）は、種々の特定の濃度のＥＣＭ材料を含むことができる。本発明のいくつかの実施形態では、ＥＣＭ材料の濃度は、約５％より高く、より好ましくは、約２０％より高く、さらにより好ましくは、約７０％より高い。
【００７６】
本発明に従って、粒子状のＥＣＭ材料は、種々の従来のバッファー材料によって流動化又は水和することができる。適切なバッファー材料は、限定されないが、水及び生理食塩水を含む。
【００７７】
本発明に従って、本発明のＥＣＭ組成物は二つ以上の哺乳動物源からのＥＣＭ材料も含み得る。従って、例えば組成物は、限定ではなく例示的に、小腸粘膜下層、肝臓基底膜、胃粘膜下層、膀胱粘膜下層、胎盤基底膜、膵臓基底膜、大腸粘膜下層、肺間質性膜、気道粘膜下層、心臓ＥＣＭ材料、真皮マトリックス、及び概して、哺乳動物の胎児組織のいずれかからのＥＣＭ材料のようなソースからのＥＣＭ材料の組み合わせを含み得る。ＥＣＭ材料源は又、異なる哺乳動物又は哺乳動物のまったく別の種を含み得る。
【００７８】
ＥＣＭ組成物は、従って、３つの哺乳類の組織源、４つの哺乳類の組織源、５つの哺乳類の組織源、６つの哺乳類の組織源、そして恐らく１０又はそれより多い組織源からのＥＣＭ材料を含み得る。組織源は、同じ哺乳動物（例えば、同じウシ、同じブタ、同じげっ歯類、同じヒト等）、哺乳動物の同じ種（例えば、ウシ、ブタ、げっ歯類、ヒト）、又は異なる哺乳動物だが同じ種（例えばウシ１とウシ２、又はブタ１とブタ２）、あるいは哺乳動物の異なる種（例えば、ブタからの肝臓マトリックス、ウシからの小腸粘膜下層、イヌからの膀胱粘膜下層、すべてが組成物中で一緒に混合される）由来であり得る。
【００７９】
本発明に従って、記載された組織源のいずれか一つは、本発明のＥＣＭ組成物で使用するために、所望の形態（液体、半固体、又は固体の形態）に製剤化（又は処理）され得る材料を提供することができる。
【００８０】
本発明によれば、ＥＣＭ組成物の液体又は半固体成分（すなわち液体、ゲル、エマルジョン又はペースト）は、種々の濃度を含むことができる。好ましくは、ＥＣＭ組成物の液体又は半固体成分の濃度は、約０．００１ｍｇ／ｍｌから約２００ｍｇ／ｍｌの範囲にある。従って、適切な濃度の範囲は、約５ｍｇ／ｍｌから約１５０ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌから約１２５ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌから約１００ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍｇ／ｍｌから約７５ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌから約６０ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌから約５０ｍｇ／ｍｌ、約３５ｍｇ／ｍｌから約４５ｍｇ／ｍｌ、及び約４０ｍｇ／ｍｌから約４２ｍｇ／ｍｌを含むが、これらに限定されない。
【００８１】
記載の濃度範囲は、しかし、単なる例示であり、網羅的又は限定的であることを意図するものではない。挙げられた任意の範囲内の任意の値が、ＥＣＭ組成物の液体又は半固体成分の濃度のために、合理的かつ有用な値と見なされることが理解される。
【００８２】
本発明によれば、２つのＥＣＭ材料のゲルエマルジョン又はペーストを形成する乾燥粒子又は再構成粒子は、種々の割合で一緒に混合することもできる。例えば、粒子は、５０％の膵臓基底膜と混合した５０％の小腸粘膜下層を含み得る。次いで、混合物を同様に、生理食塩水等の適切なバッファーで水和することにより流動化され得る。
【００８３】
上述のように、本発明のいくつかの実施形態で、ＥＣＭ組成物は、損傷した組織又は心血管組織内へ注入されるように製剤化される、すなわち、注入可能なＥＣＭ組成物である。本発明のいくつかの実施形態で、注入可能なＥＣＭ組成物は従って、約７０％の粒子状ＥＣＭ材料及び約３０％の完全に加水分解されたＥＣＭゲルを含む。
【００８４】
本発明に従って、本発明の薬理組成物はさらに、損傷した組織の治療の助けになる、及び／又は組織再生プロセスを容易にするための一つ以上の追加の生物活性剤又は生物活性成分を含み得る。
【００８５】
いくつかの実施形態で、本発明の薬理組成物は従って、少なくとも一つの薬物又は薬理組成物を含み、それは、抗生物質又は抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗疼痛剤、麻酔薬、鎮痛薬、ステロイド性抗炎症薬、非ステロイド性抗炎症薬、抗悪性腫瘍薬、鎮痙薬、細胞‐細胞外マトリックス相互作用のモジュレータ、タンパク質、ホルモン、酵素及び酵素阻害剤、抗凝固剤及び／又は抗血栓剤、ＤＮＡ、ＲＮＡ、修飾ＤＮＡ及びＲＮＡ、ＮＳＡＩＤ、ＤＮＡ、ＲＮＡ又はタンパク質合成阻害剤、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核タンパク質、細胞移動を調節する化合物、組織の増殖及び成長を調節する化合物、及び血管拡張剤を含み得るが、これらに限定されない。
【００８６】
適合する薬物及び／又は薬理組成物は従って、アトロピン、トロピカミド、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾン、ベタメタゾン、リン酸ベタメタゾン、プレドニゾロン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、フルオシノロンアセトニド、酢酸アネコルタブ、ブデソニド、シクロスポリン、ＦＫ‐５０６、ラパマイシン、ルボキシスタウリン、ミドスタウリン、フルルビプロフェン、スプロフェン、ケトプロフェン、ジクロフェナク、ケトロラク、ネパフェナク、リドカイン、ネオマイシン、ポリミキシン ｂ、バシトラシン、グラミシジン、ゲンタマイシン、オキシテトラサイクリン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、トブラマイシン、アミカシン、バンコマイシン、セファゾリン、チカルシリン、クロラムフェニコール、ミコナゾール、イトラコナゾール、トリフルリジン、ビダラビン、ガンシクロビル、アシクロビル、シドフォビル、ａｒａ‐ａｍｐ、ホスカルネット、イドクスウリジン、アデホビルジピボキシル、メトトレキサート、カルボプラチン、フェニレフリン、エピネフリン、ジピベフリン、チモロール、６‐ヒドロキシドーパミン、ベタキソロール、ピロカルピン、カルバコール、フィゾスチグミン、デメカリウム、ドルゾラミド、ブリンゾラミド、ラタノプロスト、ヒアルロン酸ナトリウム、インスリン、ベルテポルフィン、ペガプタニブ、ラニビズマブ、及び他の抗体、抗悪性腫瘍薬、ＶＥＧＦ抗体、毛様体神経栄養因子、脳由来神経栄養因子、ｂＦＧＦ、カスパーゼ‐１阻害剤、カスパーゼ‐３阻害剤、α‐アドレナリン受容体アゴニスト、ＮＭＤＡアンタゴニスト、グリア細胞系由来神経栄養因子（ＧＤＮＦ）、色素上皮由来因子（ＰＥＤＦ）、及びＮＴ‐３、ＮＴ‐４、ＮＧＦ、ＩＧＦ‐２を含むがこれらに限定されない。
【００８７】
本発明に従って、本発明に係るＥＣＭ組成物に付加される薬物の量は、当然ながら薬物によって様々であろう。例えば、一つの実施形態において、薬物はジクロフェナク（ボルタレン（商標））を含み、ＥＣＭ組成物に含まれるジクロフェナクの量は、好適に、１０μｇ〜７５ｍｇの範囲にある。
【００８８】
本発明のいくつかの実施形態で、薬物は特に、抗炎症剤を含む。本発明に従って適合する抗炎症剤は、アルクロフェナク、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、アルゲストンアセトニド、アルファアミラーゼ、アムシナファル、アムシナフィド、アンフェナクナトリウム、アミプリロース塩酸塩、アナキンラ、アニロラク、アニトラザフェン、アパゾン、バルサラジド二ナトリウム、ベンダザック、ベノキサプロフェン、ベンジダミン塩酸塩、ブロメライン、ブロペラモール、ブデソニド、カルプロフェン、シクロプロフェン、シンタゾン、クリプロフェン、プロピオン酸クロベタゾール、酪酸クロベタゾン、クロピラク、プロピオン酸クロチカゾン、コルメタゾンアセテート、コルトドキソン、デカン酸塩、デフラザコート、デラテストリル、デポテストステロン、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾンジプロピオネート、ジクロフェナクカリウム、ジクロフェナクナトリウム、二酢酸ジフロラゾン、ジフルミドンナトリウム、ジフルニサル、ジフルプレドナート、ジフタロン、ジメチルスルホキシド、ドロシノニド、エンドリソン、エンリモマブ、エノリカムナトリウム、エピリゾール、エトドラク、エトフェナマート、フェルビナク、フェナモール、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェンドサール、フェンピパロン、フェンチアザク、フラザロン、フルアザコルト、フルフェナム酸、フルミゾール、フルニソリド酢酸、フルニキシン、フルニキシンメグルミン、フルオコルチンブチル、フルオロメトロン酢酸塩、フルクァゾン、フルルビプロフェン、フルレトフェン、プロピオン酸フルチカゾン、フラプロフェン、フロブフェン、ハルシノニド、ハロベタゾールプロピオン酸、酢酸ハロプレドン、イブフェナク、イブプロフェン、イブプロフェンアルミニウム、イブプロフェンピコノール、イロニダップ、インドメタシン、インドメタシンナトリウム、インドプロフェン、インドキソール、イントラゾール、イソフルプレドン酢酸、イソキセパク、イソキシカム、ケトプロフェン、塩酸ロフェミゾール、ロモキシカム、エタボン酸ロテプレドノール、メクロフェナム酸ナトリウム、メクロフェナム酸、メクロリゾンジブチレート、メフェナム酸、メサラミン、メセクラゾン、メステロロン、メタンドロステノロン、メテノロン、メテノロン酢酸エステル、スレプタン酸メチルプレドニゾロン、モミフルマート、ナブメトン、ナンドロロン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、ナプロキソール、ニマゾン、オルサラジンナトリウム、オルゴテイン、オルパノキシン、オキサンドロロン、オキサプロジン、オキシフェンブタゾン、オキシメトロン、パラニリン塩酸塩、ペントサンポリ硫酸ナトリウム、フェンブタゾンナトリウムグリセラート、ピルフェニドン、ピロキシカム、ケイ皮酸ピロキシカム、ピロキシカムオラミン、ピルプロフェン、プレドナザート、プリフェロン、プロドール酸、プロカゾン、プロキサゾール、プロキサゾールクエン酸塩、リメキソロン、ロマザリット、サルコレクス、サルナセジン、サルサレート、サンギナリウムクロリド、セクラゾン、セルメタシン、スタノゾロール、スドキシカム、スリンダク、スプロフェン、タルメタシン、タルニフルマート、タロサラート、テブフェロン、テニダップ、テニダップナトリウム、テノキシカム、テシカム、テシミド、テストステロン、テストステロンブレンド、テトリダミン、チオピナク、チクソコルトールピバル酸エステル、トルメチン、トルメチンナトリウム、トリクロニド、トリフルミダート、ジドメタシン、及びゾメピラックナトリウムを含むが、これらに限定されない。
【００８９】
本発明に従って、本発明に係るＥＣＭ組成物に付加される抗炎症薬の量は、同様に、抗炎症薬によって様々であろう。例えば、本発明の一つの実施形態において、薬物はイブプロフェン（アドビル（商標））を含み、ＥＣＭ組成物に含まれるイブプロフェンの量は、好適に、１００μｇ〜２００ｍｇの範囲にある。
【００９０】
本発明のいくつかの実施形態で、薬物はスタチン、すなわち、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害薬を含む。本発明に従って、適合するスタチンは、アトルバスタチン（リピトール（商標））、セリバスタチン、フルバスタチン（レスコール（商標））、ロバスタチン（メバコール（商標）、アルトコール（商標）、アルトプレブ（商標））、メバスタチン、ピタバスタチン（リバロ（商標）、ピタバ（商標））、プラバスタチン（プラバコール（商標）、セレクチン（商標）、リポスタット（商標））、ロスバスタチン（クレストール（商標））、及びシンバスタチン（ゾコール（商標）、リペックス（商標））を含むがこれらに限定されない。スタチンと他の作用剤との組み合わせを含むいくつかの活性剤、エゼチミブ／シンバスタチン（バイトリン（商標））等も適合する。
【００９１】
出願人は、スタチンが、いくつかの有益な生化学的作用や生化学的活性を提供する、多数の有益な特性を示すことを見出した。そこからもたらされる特性及び有益な作用が以下に詳細に説明される。
【００９２】
抗コレステロール性特性／作用
当技術分野で知られるように、スタチンは、主に、肝臓におけるコレステロール産生のレベルを低下させるように機能する薬剤の一群である。コレステロールのより低いレベルは、コレステロール生合成経路のメバロン酸の産生を制限するスタチンによって達成される。スタチンは、拮抗的にＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害し、分子が非常に似ているので、スタチンがコレステロール生合成経路でＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素に実際に取って替わり、メバロン酸が生成される速度を減少させ、続いて肝臓でコレステロールが生成される速度を減少させる。
【００９３】
抗炎症性特性／作用
スタチンは、血管壁細胞、及び心血管系への多数の追加的な望ましい影響も有する。これの１つの具体例は、トロンボキサンＡ２（ＴＸＡ２）である。スタチンはＴＸＡ２の低減を助けることができ、ひいては心血管系における血小板活性化を低下させる。
【００９４】
ＴＸＡ２は血管収縮因子としても知られ、その血小板活性及び血小板凝集への影響、並びにその細胞接着分子及びケモカインの発現を増強させる能力により、組織傷害中及び炎症中に特に重要である。このことはスタチンがＴＸＡ２の減少により炎症の低減に役立つことを可能にし、そのことによって、血管収縮が減少し、血小板活性及び血小板凝集が減少し、同様に細胞接着分子及びケモカインの増強が減少する。
【００９５】
スタチンはさらに、ｒａｓホモログ遺伝子ファミリー、メンバーＡ（ＲｈｏＡ）の活性化を阻害することにより血管壁細胞及び心血管系に影響を与える。ＲｈｏＡの活性化を阻害することはさらに、マクロファージ増殖、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ‐ＰＡ）、プラスミノーゲン活性化抑制因子１型（ＰＡＩ‐１）、平滑筋細胞（ＳＭＣ）の増殖、一酸化窒素（ＮＯ）産生、エンドセリン、及びアンジオテンシン受容体のような多数の系に影響を与える。スタチンがＲｈｏＡの活性化を阻害すると、結果としての影響は、血管の炎症、平滑筋細胞の産生及びサイズ、とりわけ血管収縮を含む心血管系の多くの生理反応に見られ得る。
【００９６】
ＲｈｏＡの活性化を阻害することによりマクロファージ増殖が低減されると、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）及び組織因子（ＴＦ）が低減される。ＭＭＰは、創傷治癒及び炎症において重要な役割を果たすメタロプロテアーゼ酵素のより大きなファミリーの要素である。ＭＭＰは、活性化された好中球及びマクロファージ（炎症細胞）によって産生される。
【００９７】
スタチンはマクロファージ増殖を低下させることにより、炎症因子を減らすのに役立ち、それによりＭＭＰの産生が低減される。ＭＭＰは創傷部位で血栓又は損傷したＥＣＭに含まれるＥＣＭに結合するので、ＭＭＰが低減されると血栓の存在も低減されることになる。マクロファージ増殖の減少は、組織因子（ＴＦ）の存在も低下させる。
【００９８】
ＴＦは、トロンビン形成の開始に必要なタンパク質である。この因子は又、細胞が凝固カスケードを開始できるようにする。特に、ＭＭＰの減少と連動して、ＴＦの存在が減少すれば心血管系での血栓の存在が減少することになる。
【００９９】
プラーク安定化特性／作用
減少したＭＭＰ及び減少したＴＦはプラークの安定性の増大にもつながり、このことは、プラークの部分が破裂してより小さい管内で詰まる可能性を減少させることにより、脳卒中又は心筋梗塞を予防することに役立つ場合がある。プラークの安定性はさらに、アテローム性動脈硬化を減少させることに役立つ。
【０１００】
線溶特性／作用
ＲｈｏＡ活性化の阻害は又、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ‐ＰＡ）及びプラスミノーゲン活性化抑制因子１型（ＰＡＩ‐１）の存在に影響を与える。Ｔ‐ＰＡは、血餅の分解に関与するタンパク質であり、内皮細胞に見出される。それは酵素としてプラスミノーゲンのプラスミン、血餅の分解（線溶）に関与する主要な酵素への変換を触媒する。
【０１０１】
ＰＡＩ‐１はｔ‐ＰＡの主な抑制因子として機能するタンパク質である。従ってＰＡＩ‐１は、線溶の主な抑制因子である。スタチンによりＲｈｏＡ活性化が阻害されてｔ‐ＰＡの存在が増大しＰＡＩ‐１が減少すると、フィブリンが高分子メッシュの止血栓を形成する機会が減少することにより血栓性の影響の低減が認められる。スタチンの使用から生じたＭＭＰ及びＴＦの低減は、増大するｔ‐ＰＡ及び減少するＰＡＩ‐１と協働し、血栓の潜在性をさらに低減させる。
【０１０２】
ＮＯ規制特性／作用
ＲｈｏＡ活性化の阻害は又、心血管系における一酸化窒素（ＮＯ）の存在に影響を与える。内皮は周囲の平滑筋にリラックスさせるシグナルを送るためにＮＯを使い、そのことにより血管が拡張し血流が増大する。ＮＯは、血管平滑筋の収縮及び成長、血小板凝集、及び内皮への白血球接着を抑制することにより、血管の恒常性に寄与する。それらの因子は、典型的にはスタチンの投与で典型的であるような方法で調節されるとき、ＮＯが内皮機能不全の低減に役立つことを可能にするものである。白血球接着の減少は、細胞外マトリックスとともに局所的にともに投与されるとき、スタチンに関連するＮＯの産生がどのように望ましい炎症の低減に役立つかの具体的な例である。
【０１０３】
ＲｈｏＡ活性化阻害特性／作用
スタチンの投与は、エンドセリン及びアンジオテンシン受容体の存在に作用し得る。エンドセリン及びアンジオテンシン受容体は又、スタチン投与に関連する次のＲｈｏＡ活性化の阻害により影響され得る。
【０１０４】
エンドセリンは、血管を収縮させ、血圧を上昇させるタンパク質である。ＥＴ‐１、ＥＴ‐２、及びＥＴ‐３の３つのイソ型があり、ＥＴ‐１は、スタチン及びＲｈｏＡ活性化阻害に主に影響されるイソ型である。内皮からのＥＴ‐１の分泌は血管収縮のシグナルであり、局所的な細胞の成長及び生存に影響する。ＥＴ‐１は、アテローム性動脈硬化及び高血圧等の血管疾患の発症および進行に関わってきた。スタチン及びＲｈｏＡ活性化阻害に関連するＥＴ‐１の存在の減少は、血管収縮の減少及び前述の血管疾患の進行の減少をもたらす。
【０１０５】
アンジオテンシン受容体は、主なエフェクターホルモンアンジオテンシンＩＩの血管収縮刺激のシグナル伝達に関与するタンパク質共役型受容体である。アンジオテンシン受容体ＩＩタイプＩ（ＡＴ‐１）は、スタチン投与及びＲｈｏＡ活性化阻害により主に影響を受けるアンジオテンシン受容体である。ＡＴ‐１は、とりわけ、血管収縮、心臓肥大、血管平滑筋細胞増殖を媒介する。スタチン投与及びＲｈｏＡ活性化阻害に伴うＡＴ‐１の減少は、心血管系における血管収縮の減少をもたらす。
【０１０６】
Ｃ反応性タンパク質低減特性／作用
Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）もスタチン投与によって影響を受ける。ＣＲＰは、血液中に見いだされ、それらのレベルは炎症のレベルの差異に応じて逸脱する。ＣＲＰレベルは、スタチンの投与に応じて減少する。このことは、スタチンが炎症の低減に与える影響の結果として機能する。
【０１０７】
接着分子低減特性／作用
接着分子は、細胞の表面に位置し、炎症及び血管内皮細胞におけるトロンビン形成に関連するタンパク質である。炎症のより多い発生は、細胞接着分子のより多い発生を伴う。スタチンは、内皮上の接着分子の存在を減少させるように機能する。このことは、白血球及びその後のプラークの付着に係る付着機構を除去することによって炎症を軽減するのに役立ち、その結果、アテローム性動脈硬化の機会を低下させる。
【０１０８】
Ｒａｃ‐１低減特性／作用
Ｒａｃ‐１は、ヒトの細胞に見いだされるタンパク質である。それは、内皮細胞遊走、細管形成、付着性、透過性において中心的な役割を果たす。Ｒａｃ‐１の発現は、スタチンの投与に影響される場合があり、具体的に、スタチンによってＲａｃ‐１が減少する。Ｒａｃ‐１の存在が減少することは又、活性酸素種（ＲＯＳ）の減少をもたらす。ＲＯＳは、細胞シグナル伝達及び恒常性において重要な役割を有する化学反応性分子である。
【０１０９】
心血管系へのスタチンの利益、特に、心血管系内の炎症に対する効果に鑑みて、出願人は、スタチンで含浸された、コーティングされた、被覆された、又は他の方法によりスタチンと接触するＥＣＭ材料を心血管組織へ投与することから生ずる大きな利益を見出した。
【０１１０】
スタチンの典型的な全身投与は、毎日１０ｍｇ〜８０ｍｇの範囲にある。しかしながら、いくつかの事例で、治療上有効な局所レベルに到達するために必要とされるスタチンの投与量は、肝臓や筋肉組織等の異なる器官系内に様々な毒性をもたらす場合があることが当技術分野でよく知られている。しかしながら、本発明のＥＣＭ材料又は組成物中に組み込まれた、又はＥＣＭ材料又は組成物と接触して提供されるスタチン投与の直接の性質により、治療上有効な投与量は非常に小さくなり得、それによって全身毒性の可能性を実質的に低減させることができる。
【０１１１】
本発明に従って、本発明の薬理組成物に添加されるスタチンの量は、好適に２０ｍｇ未満、より好適に、約１０ｍｇ未満である。
【０１１２】
本発明のいくつかの実施形態において、ＥＣＭ材料は、１００μｇ〜５ｍｇのスタチンを含む。本発明のいくつかの実施形態において、ＥＣＭ材料は、５００μｇ〜２ｍｇのスタチンを含む。
【０１１３】
本発明のいくつかの態様において、生物活性剤は、キトサン又はその誘導体を含む。
【０１１４】
キトサンは、医療分野での使用においてそれを優れた薬剤とする広い範囲の有利な生化学的特性を示す。以下に説明されるキトサンの生化学的特性は、生体適合性、生分解性及び非毒性を含む。鎮痛性、止血性、抗菌性、酸化防止性等の追加の特性も報告されている。Ａｒａｎａｚら、Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｔｉｎ ａｎｄ Ｃｈｉｔｏｓａｎ、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ、ｖｏｌ.３、頁２０３〜２３０（２００９）；及び、Ｋｕｍａｒ ＭＮＶＲ、Ａ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｃｈｉｔｉｎ ａｎｄ Ｃｈｉｔｏｓａｎ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｒｅａｃｔ. Ｆｕｎｃｔ. Ｐｏｌｍ.、ｖｏｌ. ４６、頁１〜２７（２０００）参照。
【０１１５】
当技術分野でよく知られるように、キチン及びキトサンは、変化量のβ（１→４）結合したＮ‐アセチル‐２アミノ‐２‐デオキシ‐Ｄ‐グルコースの残基（以下、Ａ残基という）、及び２‐アミノ‐２‐デオキシ‐Ｄグルコース残基（以下、Ｄ残基という）から成る鎖状多糖のファミリーとして典型的に説明される。
【０１１６】
キチンのサンプルは少量のＤユニットを有し、従って、ポリマーは、酸性水性媒体に不溶性である。一方、キトサンのサンプル中のＤユニットの量は、ポリマーを酸性水性媒体中に溶解させるように十分に多い。何名かの著者は、キトサンを少なくとも６０％のＤ残基を有するポリマーと考える。Ｓ. Ａｉｂａ、Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｃｈｉｔｏｓａｎ：４. Ｌｙｓｏｚｙｍｉｃ Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｐａｒｔｉａｌｌｙ Ｎ−Ａｃｅｔｙｌａｔｅｄ Ｃｈｉｔｏｓａｎｓ、Ｊ. Ｂｉｏｌ. Ｍａｃｒｏｍｏｌ.、ｖｏｌ. １４（４）、頁２２５〜２２８（１９９２）参照。
【０１１７】
キチンは、セルロースに次いで、事実上２番目に最も豊富な天然ポリマーであり、それはとりわけ、多種多数の無脊椎動物（甲殻類の外骨格、昆虫類の表皮）及び菌類の細胞壁の構造中に見出される。一方、キトサンは、いくつかの菌類（ケカビ科）に天然に存在するのみである。
【０１１８】
キトサンは、キチンのアセトアミド基の加水分解によって調製される。これは通常、糖環におけるＣ２‐Ｃ３置換基のトランス配列によって与えられるような基の抵抗により、厳しいアルカリ加水分解処理により行われる。
【０１１９】
以下に詳細に記載され検討されるように、キトサンは、医療分野での使用においてそれを優れた薬剤とする広い範囲の有利な生化学的特性を示す。
【０１２０】
生分解特性／作用
キトサンは哺乳類には存在しないがいくつかのタンパク質分解酵素（リゾチーム、パパイン、ペプシン・・・）によってｉｎ ｖｉｖｏで容易に分解し得る。キトサンの生物学的分解が、可変長さの毒性のないオリゴ糖の放出につながり、それは続いてグリコサミノグリカン及び糖タンパク質に組み込まれ、代謝経路へつながり、又は排出されることも見出された。Ｐａｎｇｂｕｒｎら、Ｌｙｓｏｚｙｍｅ Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐａｒｔｉａｌｌｙ Ｄｅａｃｅｔｙｌａｔｅｄ Ｃｈｉｔｉｎ, ｉｔｓ Ｆｉｌｍｓ ａｎｄ Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ、ｖｏｌ. ３（２）、頁１０５〜１０８(１９８２)。
【０１２１】
生体適合特性／作用
キトサンは非常によい適合性、特に細胞適合性も示す。キトサンの向上した細胞適合性は、心筋、内皮、及び上皮細胞、線維芽細胞、肝細胞、軟骨細胞、及びケラチノサイトによりｉｎ ｖｉｔｒｏで証明されている。Ｃｈａｔｅｌｅｔら、Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ Ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ ｏｎ Ｓｏｍｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ Ｃｈｉｔｏｓａｎ Ｆｉｌｍｓ、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ、ｖｏｌ. ２２（３）、頁２６１〜２６８（２００１）参照。
【０１２２】
鎮痛特性／作用
キトサンが非常に有利な鎮痛特性（又は効果）を示すことが報告されている。Ｏｋａｍｏｔｏらは、酢酸の腹腔内投与による炎症性疼痛に対するキトサンの鎮痛効果を特に検討した。Ｏｋａｍｏｔｏら、Ａｎａｌｇｅｓｉｃ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｃｈｉｔｉｎ ａｎｄ Ｃｈｉｔｏｓａｎ、Ｃａｒｂｏｈｙｄ. Ｐｏｌｙ.、ｖｏｌ. ４９、頁２４９〜２５２（２００２）参照。
【０１２３】
Ｏｋａｍｏｔｏらは、そのポリカチオン性の性質のためにキトサンの遊離一級アミノ基がプロトンイオンの存在下でプロトン化し、それによってｐＨを低減させることができ、それが鎮痛性の根本原因であることを見出した。実験データから、又、鎮痛効果は主として、痛みに関連する主な成分（又は物質）の一つであるブラジキニンを吸収することによることも結論付けられた。
【０１２４】
止血特性／作用
キトサン、並びに硫酸化キトサンオリゴマーが、ｉｎ ｖｉｔｒｏの試験で抗凝固活性を示すことも報告された。血球膜は負に帯電しているので、キトサンの抗凝固活性は、その正電荷に関連すると考えられる。Ｒａｏら、Ｕｓｅ ｏｆ Ｃｈｉｔｏｓａｎ ａｓ Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌ： Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｉｔｓ Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ Ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ、Ｊ. Ｂｉｏｍｅｄ. Ｍａｔ. Ｒｅｓ.、ｖｏｌ. ３４、頁２１〜２８（１９９７）参照。
【０１２５】
キトサンが、上皮タイトジャンクションを開口させることにより透過促進剤として作用することも報告されている。この作用の基礎となる機序は、正に帯電したキトサンとタイトジャンクション関連タンパク質の再形成をもたらす細胞膜の相互作用に基づくと考えられる。Ｓｍｉｔｈら、Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｃｈｉｔｏｓａｎ ｏｎ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ Ｃｅｌｌ Ｔｉｇｈｔ Ｊｕｎｃｔｉｏｎｓ、Ｐｈａｒｍ. Ｒｅｓ.、ｖｏｌ. ２１（１）、頁４３〜４９（２００４）参照。
【０１２６】
抗菌特性／作用
キチン、キトサン、及びそれらの誘導体の細菌、酵母菌及び真菌等の微生物の異なる群に対する抗菌活性も近年注目されている。キトサンによる微生物細胞の阻害の原因として二つの主な機序が示唆されている。
【０１２７】
第一の機序は、細胞表面の陰イオン基との相互作用を含み、キトサンのポリカチオン性の性質により、細胞の周囲に不透過層を形成させ、それは本質的な溶質の移動を防ぐ。
【０１２８】
第二の機序は、細胞核への浸透により、ＲＮＡ及びタンパク質合成を抑制することを含む。Ｌｉｕら、Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ Ａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｔｏｓａｎ ａｎｄ Ｃａｒｂｏｘｙｍａｔｈｙｌａｔｅｄ Ｃｈｉｔｏｓａｎ、Ｊ. Ａｐｐｌ. Ｐｏｌｙｍ. Ｓｃｉ.、ｖｏｌ. ７９（７）、頁１３２４〜１３３５（２００１）参照。
【０１２９】
抗酸化特性／作用
キトサンは、異なるラジカル種に対して有意な捕捉能も示した。結果は、市販の酸化防止剤を用いて得られたものに匹敵する。Ｐａｒｋら、Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃａｌ Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｙ Ｄｅａｃｅｔｙｌａｔｅｄ Ｃｈｉｔｏｓａｎｓ、Ｃａｒｂｏｈｙｄ. Ｐｏｌｙｍ.、ｖｏｌ. ５５（１）、頁１７〜２２（２００４）参照。
【０１３０】
組織修復特性／作用
キトサンの前述の特性によって、キトサンは、損傷組織の修復を強化することができ、ほとんどの場合において強化するであろう。実際に、キトサンが、ＰＭＮ、マクロファージ、線維芽細胞及び血管内皮細胞等の免疫細胞及び炎症細胞を活性化することが見出された。Ｕｅｎｏら、Ｔｏｐｉｃａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｗｏｕｎｄ Ｈｅａｌｉｎｇ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｈｉｔｏｓａｎ、Ａｄｖ. Ｄｒｕｇ Ｄｅｌ. Ｒｅｓ.、ｖｏｌ. ５２、頁１０５〜１１５（２００１）参照。
【０１３１】
キトサンオリゴマーは組織修復特性も示した。組織修復特性は線維芽細胞増殖因子に影響を与えることによる線維芽細胞の産生を刺激するそれらの能力に起因することが示唆された。その後のコラーゲン産生は結合組織の形成をさらに促進する。
【０１３２】
本発明によれば、本発明の薬理組成物に添加されるキトサンの量は、５０ｍｌ未満が好ましく、より好ましくは、約２０ｍｌ未満である。
【０１３３】
本発明のいくつかの実施形態で、キトサンは、米国公開第２００８／０２５４１０４号及び第２００９／００６２８４９号に開示されているように（それらの全体が本明細書に組み込まれる）、高分子ネットワークに組み込まれる。
【０１３４】
本発明のいくつかの実施形態で、生物活性剤は細胞を含む。本発明に従って、細胞は、限定することなく、幹細胞を含む場合があり、例えば、ヒト胚幹細胞、胎児細胞、胎児心筋細胞、筋線維芽細胞、間葉系幹細胞、自家移植拡張心筋細胞、脂肪細胞、全能性細胞、多能性細胞、血液幹細胞、筋芽細胞、成体幹細胞、骨髄細胞、間葉系細胞、胚性幹細胞、実質細胞、上皮細胞、内皮細胞、中皮細胞、線維芽細胞、筋線維芽細胞、骨芽細胞、軟骨細胞、外因性細胞、内因性細胞、幹細胞、造血性幹細胞、多能性幹細胞、骨髄由来前駆細胞、前駆細胞、心筋細胞、骨格細胞、未分化細胞、多能性前駆細胞、単能性前駆細胞、単球、心筋細胞、心筋芽細胞、骨格筋芽細胞、マクロファージ、毛細血管内皮細胞、異種細胞、及び同種細胞等を含む場合がある。
【０１３５】
本発明のいくつかの実施形態で、生物活性剤はタンパク質を含む。本発明に従って、タンパク質は、限定することなく、増殖因子、コラーゲン、プロテオグリカン、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）鎖、糖タンパク質、サイトカイン、細胞表面付随性タンパク質、細胞接着分子（ＣＡＭ）、血管新生増殖因子、内皮リガンド、マトリカイン、マトリックスメタロプロテアーゼ、カドヘリン、免疫グロブリン、線維性コラーゲン、非線維性コラーゲン、基底膜コラーゲン、マルチプレキシン、小型ロイシンリッチプロテオグリカン、デコリン、ビグリカン、フィブロモジュリン、ケラトカン、ルミカン、エピフィカン、ヘパラン硫酸プロテオグリカン、パールカン、アグリン、テスティカン、シンデカン、グリピカン、セルグリシン、セレクチン、レクチカン、アグリカン、ベルシカン、ニューロカン、ブレビカン、細胞質内ドメイン‐４４（ＣＤ４４）、マクロファージ刺激因子、アミロイド前駆体タンパク質、ヘパリン、コンドロイチン硫酸Ｂ（デルマタン硫酸）、コンドロイチン硫酸Ａ、ヘパラン硫酸、ヒアルロン酸、フィブロネクチン（Ｆｎ）、テネイシン、エラスチン、フィブリリン、ラミニン、ニドジェン／エンタクチン、フィビュリンI、フィビュリンII、インテグリン、膜貫通分子、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、形質転換増殖因子アルファ（ＴＧＦ‐アルファ）、形質転換増殖因子ベータ（ＴＧＦ‐ベータ）、線維芽細胞増殖因子‐２（ＦＧＦ‐２）（別名、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ））、トロンボスポンジン、オステオポンチン、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）、および血管内皮増殖因子（vascular epithelial growth factor）（ＶＥＧＦ）を含み得る。
【０１３６】
本発明に従って、上で参照した生物活性剤は、任意の形態を含むことができる。本発明のいくつかの実施形態において、生物活性成分又は複数の成分、例えば、シンバスタチン及び／又はキトサンは、マイクロカプセルを含み、それはその中に収容される薬剤が遅れて送達されるようにする。
【０１３７】
本発明の範囲内で送達され得る追加の適切な薬理組成物は、特許公開第２００７００１４８７４号、第２００７００１４８７３号、第２００７００１４８７２号、第２００７００１４８７１号、第２００７００１４８７０号、第２００７００１４８６９号、及び第２００７００１４８６８号に開示される（それらはその全体が参照により明示的に本明細書に組み込まれる）。
【０１３８】
上述のように、本発明のいくつかの実施形態で、本発明の一つ又は複数のＥＣＭ組成物は、独自の多針注入システムを介して損傷した又は罹患した心血管組織に直接投与又は送達される。当業者には容易に理解されるように、本発明の薬理組成物は一つ又は複数の従来の注入装置及びシステム、例えば、注射器を介して損傷した組織に送達される場合もある。本発明の従って、ＥＣＭ組成物は、心臓壁及び／又はそれに関連する種々の心血管構造に直接投与され得る。
【０１３９】
ここで図１を参照して、正常な心臓１００が図示されている。心臓壁１０２は、心内膜と言われる単一の扁平上皮の内部の層から成る。心内膜は心筋（厚さが一定でない心臓筋）に重なり、心膜と言われる多層組織構造内に包まれる。臓側心膜又は心外膜と言われる心膜の最も内側の層が心筋を覆う。線維性心膜と言われる心膜の最も外側の層が、壁側心膜を胸骨、大血管及び横隔膜に付着させる。
【０１４０】
本発明に従って、ＥＣＭ組成物は記載の構造のそれぞれ、特に心筋に送達され得、新血管形成、宿主組織の増殖、及びバイオリモデリングが誘導される。
【０１４１】
ここで図２を参照して、虚血性梗塞領域２０２、及び、健康な非虚血性の心筋組織２０６に取り囲まれた梗塞周囲領域２０４を有する心臓２００が図示される。
【０１４２】
上述のように、心筋梗塞、すなわち、心筋のかなりの部分の壊死につながる不可逆的な心筋傷害は、心室機能の急激な低下、及びストレス下で梗塞組織の拡張をもたらす場合がある。このことは心筋細胞イベントの連鎖反応シーケンスを引き起こす。多くの場合、この進行性の心筋梗塞の拡張及びリモデリングは、心室機能の低下及び心不全につながる。
【０１４３】
心筋梗塞が発生すると、適切な血流を受けなくなった心筋組織は死に、瘢痕組織に置き換わる。この梗塞組織は収縮期に収縮することができず、実際に収縮期に伸展を受ける場合があり、即時の心室機能の低下につがる。梗塞組織のこの異常な動きは、まだ生き残った梗塞周囲組織（正常組織と梗塞組織との間の接合部の組織）への電気的活動の遅れた伝導や異常な伝導を引き起こし、又、梗塞周囲組織へ余分な構造的ストレスをかける。
【０１４４】
即時の血行力学作用に加えて、梗塞した心臓組織は、三つの主要なプロセス、梗塞拡大、梗塞伸展、及び心室リモデリングを経る。これらの因子は、個別に及び組み合わせにより、梗塞部位から離れた心臓組織に見られる最終的な機能不全に寄与する。
【０１４５】
梗塞拡大は、梗塞域内の組織の固定した、永久的な、不均衡な局所的薄膜化及び拡張である。梗塞伸展は、心筋梗塞に続く追加の心筋壊死である。梗塞伸展は、梗塞組織の全質量の増加をもたらす。
【０１４６】
しかしながら、上述のように、心筋梗塞の記載された作用は、本発明のＥＣＭ組成物を梗塞心血管組織へ直接投与することにより改善又は除去され得る。又、本明細書に示唆されるように、本発明のＥＣＭ組成物は特に、新血管形成、宿主組織増殖、バイオリモデリング、及び部位特異的な構造的及び機能的特性を備えた新たな心臓組織構造の再生を誘導するであろう。梗塞心筋組織へＥＣＭ組成物を投与する好適な手段は、図３Ａ及び図３Ｂに図示された多針注入装置３００を介した直接注入、及び同時係属出願第６１／７０４，６３４号に記載された関連する制御システムを含む。
【０１４７】
実施例
以下の実施例は、当業者が本発明をより明確に理解し及び本発明を実施できるようにするために提供される。それらは本発明の範囲を限定するものと見なされるべきではなく、単に本発明の代表として説明される。
【０１４８】
五つ（５）のブタの心臓が仔ブタから得られた。除去後、心臓は生理食塩水浴に保存された。
【０１４９】
第１の心臓を浴から取り出した。心臓壁の厚さは、Ａスキャン超音波センサを用いて、４ｍｍから２ｃｍより大きい範囲にあることが決定された。
【０１５０】
図２及び図３に図示されたような本発明に係る多針注入システムが提供され、注入手順のために調製された。
【０１５１】
本発明のＥＣＭ組成物も提供された。ＥＣＭ組成物は二つの成分、ブタの腸由来のＥＣＭ（すなわち、ＳＩＳ）粒子及びＳＩＳゲルを含んだ。ＳＩＳ粒子はＳＩＳ材料を含み、それは低温で特定の粒径に粉砕され、その後解凍されて送達のために注射器に充填された。粒径は５０〜３５０ミクロンの範囲であった。
【０１５２】
ＳＩＳゲルはＳＩＳ材料を含み、それは低温で粉砕され、酸中の酵素消化を受け、凍結乾燥され、所定の濃度に再構成された。ＳＩＳゲルはその後の消毒及び中和処理も施された。ＳＩＳゲルも注射器に充填された。
【０１５３】
材料は、処理を通して低温状態に維持された。
【０１５４】
注入可能なＥＣＭ組成物を得るために、約４ｃｃのＳＩＳゲルを６ｃｃの粒子状ＳＩＳと混合した。
【０１５５】
注入可能なＥＣＭ組成物は、その後、注入装置のリザーバに移された。
【０１５６】
注入制御システムが続いて以下の送達パラメータ：２０及び３０ミリ秒、並びに約６０〜１２０ｐｓｉの範囲にある圧力での二つ（２）の等しいパルスを与えるために設定された。記載のパラメータは、パルス当たり約０．５〜１．０ｍｌの範囲でＥＣＭ組成物が送達されるようにした。
【０１５７】
ＥＣＭ組成物はその後第１の心臓の壁内に送達された。心臓壁の注入部分はその後、ＥＣＭ組成物の送達パターンを評価するために、視覚的に、及びＢスキャン超音波（すなわち、エコー）センサにより観察された。それぞれの針の注入部位で実質的に一様な送達（すなわち、量及び広がり）が観察された。
【０１５８】
心臓壁の注入部分は又切断されて送達パターンを観察された。手順は、送達が一様であり、且つそれぞれの針の注入部位の所定の針の深さで、心室腔から望ましい安全域を有することを確認した。
【０１５９】
上に記載された試験手順は同様に残りの四つ（４）のブタの心臓についても用いられた。変化したパラメータは、ＥＣＭ組成物におけるＳＩＳゲルの割合のみであった。
【０１６０】
第２の心臓では、ＥＣＭ組成物は第１の心臓に使用されたＥＣＭ組成物と同様であり、すなわち、約４ｃｃのＳＩＳゲルと６ｃｃの粒子状ＳＩＳであった。
【０１６１】
第３及び第４の心臓では、ＥＣＭ組成物は約２ｃｃのＳＩＳゲルと８ｃｃの粒子状ＳＩＳを含んだ。
【０１６２】
第５の心臓では、ＳＩＳゲルは使用されなかった。ＥＣＭ組成物は従って、約１０ｃｃの粒子状ＳＩＳを含んだ。
【０１６３】
それぞれの例で、送達は同様に一様であり、それぞれの針の注入部位の所定の針の深さで、心室腔から望ましい安全域を有していた。
【０１６４】
実施例２
連続してマイクロスフィアを冠動脈に注入することによりＣＨＦが誘導された仔ブタが提供された。
【０１６５】
図２及び図３に図示されているような本発明に係る多針注入システムが本発明のＥＣＭ組成物の注入のために用意された。
【０１６６】
実施例１に記載されたようなＥＣＭ組成物も提供された。組成物の混合物は混合された約４ｃｃのＳＩＳゲルと６ｃｃの粒子状ＳＩＳを含み、注入可能なＥＣＭ組成物が得られた。
【０１６７】
注入可能なＥＣＭ組成物は、その後、注入装置のリザーバに移された。
【０１６８】
注入制御システムが同様に、以下の送達パラメータ：２０及び３０ミリ秒、並びに約６０〜１２０ｐｓｉの範囲にある圧力における二つ（２）の等しいパルスを与えるために設定された。記載のパラメータは、パルス当たり約０．５〜１．０ｍｌの範囲でＥＣＭ組成物を送達するようにした。
【０１６９】
ブタの心臓は、その後露出された。Ａ Ｂスキャン超音波センサが続いて、梗塞領域の深さを評価するために使用された。
【０１７０】
続いてＥＣＭ組成物が梗塞領域に送達された。心臓壁の注入部分はその後、ＥＣＭ組成物の送達パターンを評価するために、視覚的に、及びＢスキャン超音波（すなわち、エコー）センサを用いて観察された。それぞれの針の注入部位で実質的に一様な送達（すなわち、量及び広がり）が観察された。ＥＣＭ組成物は又、心室壁の外に出ることなく、梗塞領域に留まった。
【０１７１】
さらに、溢出や塞栓は観察されなかった。
【０１７２】
続いて補助人工心臓を心尖に配置し、動物は何事もなく回復した。
【０１７３】
本発明に従って、２〜４週間以内に、梗塞領域に近接して、新血管形成、宿主組織の増殖、バイオリモデリング、新しい組織の再生が観察される。
【０１７４】
当業者には容易に理解されるように、本発明は、損傷した心臓組織を治療するための従来技術の方法及びシステムと比較して多数の利点を提供する。とりわけ、以下のような利点がある。
・損傷した生体組織、特に、新血管組織に送達されたときに、新血管形成を誘導し、損傷した心血管組織の生存及び再生を促進する薬理組成物の提供。
・損傷した生体組織、特に、新血管組織に送達されたときに、宿主組織の増殖、バイオリモデリング、及び部位特異的な構造的及び機能的特性を有する心血管組織構造の再生を誘導する細胞外マトリックス（ＥＣＭ）組成物の提供。
・薬理組成物、特に、ＥＣＭ組成物を損傷した又は罹患した生体組織に直接に投与するための改良された方法及びシステムの提供。
【０１７５】
本発明の思想及び範囲から逸脱することなく、当業者は、種々の変更及び修正を本発明に加え、種々の用法及び条件に適合させ得る。このように、これらの変更及び修正は、適切に、公正に、及び意図されて、以下の特許請求の範囲の均等物の全範囲内にある。
【図１】
2015532922.tif 000003
【図２】
2015532922.tif 000004
【図３Ａ】
2015532922.tif 000005
【図３Ｂ】
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【国際調査報告】
2015532922.tif 000007