(57)【要約】本明細書では、とりわけ、Ｉｒｅ１の活性を調節するための組成物およびその使用方法を記載する。
2015532287.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2015532287.tif 000020
（式中、
環Ａは、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンであり；
Ｌ１は、結合または非置換のＣ１−Ｃ５アルキレンであり；
Ｌ２は、結合、−ＮＲ６ａ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｚ２−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンであり；
Ｒ１は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎＲ１０、−ＳＯｖＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−Ｎ（Ｏ）ｍ、−ＮＲ７Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−ＯＲ１０、−ＮＲ７ＳＯｎＲ１０、−ＮＲ７Ｃ＝（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＮＲ７ＯＲ９、−ＯＣＸ３、−ＯＣＨＸ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；
Ｒ２は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸａ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎ１Ｒ１０ａ、−ＳＯｖ１ＮＲ７ａＲ８ａ、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７ａＲ８ａ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７ａＲ８ａ、−Ｎ（Ｏ）ｍ１、−ＮＲ７ａＲ８ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ａＲ８ａ、−ＯＲ１０ａ、−ＮＲ７ａＳＯｎ１Ｒ１０ａ、−ＮＲ７ａＣ＝（Ｏ）Ｒ９ａ、−ＮＲ７ａＣ（Ｏ）ＯＲ９ａ、−ＮＲ７ａＯＲ９ａ、−ＯＣＸａ３、−ＯＣＨＸａ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；
Ｒ３は、独立して、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸｂ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＳＯｖ２ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｎ（Ｏ）ｍ２、−ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＯＲ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＣ＝（Ｏ）Ｒ９ｂ、−ＮＲ７ｂＣ（Ｏ）ＯＲ９ｂ、−ＮＲ７ｂＯＲ９ｂ、−ＯＣＸｂ３、−ＯＣＨＸｂ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；
Ｒ４およびＲ５は、独立して水素または非置換のＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ６ａ、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；同じ窒素原子に結合したＲ７およびＲ８置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；同じ窒素原子に結合したＲ７ａおよびＲ８ａ置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；同じ窒素原子に結合したＲ７ｂおよびＲ８ｂ置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；
記号ｎ、ｎ１、およびｎ２の各出現は、独立して０〜４の整数であり；
記号ｍ、ｍ１、ｍ２、ｖ、ｖ１、およびｖ２の各出現は、独立して１〜２の整数であり；
前記記号ｚは、０〜２の整数であり；
前記記号ｚ２は、１〜４の整数であり；
記号Ｘ、Ｘａ、およびＸｂの各出現は、独立してハロゲンである）を有する、化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ３は、独立して、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ３は、水素である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
前記記号ｚは、１である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２は、置換または非置換のアルキルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２は、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２は、非置換のＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２は、非置換のイソプロピルである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２は、非置換のｔｅｒｔ−ブチルである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ４およびＲ５は、水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｌ１は、結合である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｌ１は、非置換のメチレンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｌ２は、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ６ａおよびＲ６ｂは、水素である、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１は、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ１は、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ１は、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ１は、置換フェニルである、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ１は、−ＣＦ３またはハロゲンで置換されたフェニルである、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
環Ａは、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
環Ａは、置換または非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレンである、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
環Ａは、非置換のナフタレニルである、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
式
【化２】
2015532287.tif 000021
（式中、
Ｌ３は、結合、−ＮＲ６ｂ−、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンである）を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項２５】
式
【化３】
2015532287.tif 000022
を有する、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
【化４】
2015532287.tif 000023
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２７】
請求項１〜２６のいずれか１項に記載の薬学的に許容される賦形剤および化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、薬学的組成物。
【請求項２８】
そのような治療を必要とする患者において疾患を治療する方法であって、治療有効量の請求項１〜２６のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を前記患者に投与することを含み、前記疾患は、神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病である、方法。
【請求項２９】
前記疾患は、神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、または糖尿病である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記疾患は、神経変性疾患である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記神経変性疾患は、網膜色素変性症、筋萎縮性側索硬化症、網膜変性症、黄斑変性症、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、プリオン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、またはクールー病である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記疾患は、脱髄性疾患である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
前記脱髄性疾患は、ウォルフラム症候群、ペリツェウス・メルツバッヘル病、横断性脊髄炎、シャルコー・マリー・トゥース病、または多発性硬化症である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記疾患は、癌である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３５】
前記癌は、多発性骨髄腫である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記疾患は、糖尿病である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３７】
前記糖尿病は、Ｉ型糖尿病である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記糖尿病は、ＩＩ型糖尿病である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記疾患は、眼疾患である、請求項２８に記載の方法。
【請求項４０】
前記眼疾患は、網膜色素変性症、網膜変性症、黄斑変性症、またはウォルフラム症候群である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記疾患は、線維性疾患である、請求項２８に記載の方法。
【請求項４２】
前記線維性疾患は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、心筋梗塞、心肥大、心不全、硬変症、アセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）肝毒性、Ｃ型肝炎肝疾患、肝脂肪変性（脂肪肝）、または肝線維症である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
Ｉｒｅ１タンパク質の活性を調節する方法であって、前記Ｉｒｅ１タンパク質を、有効量の請求項１〜２６のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩と接触させることを含む、方法。
【請求項４４】
前記調節は、阻害である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記活性は、キナーゼ活性である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記キナーゼ活性は、自己リン酸化活性である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記活性は、オリゴマー化活性である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
前記オリゴマー化活性は、二量体化活性である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記活性は、ＲＮａｓｅ活性である、請求項４４に記載の方法。
【請求項５０】
細胞は、前記Ｉｒｅ１タンパク質を含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項５１】
前記Ｉｒｅ１タンパク質の活性の前記活性は、前記細胞のアポトーシスを増加させることである、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
器官は、前記細胞を含む、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
生物は、前記細胞を含む、請求項５０に記載の方法。
【請求項５４】
前記生物は、前記Ｉｒｅ１タンパク質の活性に関連する疾患を有する、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記疾患は、神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病である、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記疾患は、神経変性疾患である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記神経変性疾患は、網膜色素変性症、筋萎縮性側索硬化症、網膜変性症、黄斑変性症、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、プリオン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、またはクールー病である、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記疾患は、脱髄性疾患である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５９】
前記脱髄性疾患は、ウォルフラム症候群、ペリツェウス・メルツバッヘル病、横断性脊髄炎、シャルコー・マリー・トゥース病、または多発性硬化症である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記脱髄性疾患は、多発性硬化症である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記疾患は、癌である、請求項５５に記載の方法。
【請求項６２】
前記癌は、多発性骨髄腫である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記疾患は、糖尿病である、請求項５５に記載の方法。
【請求項６４】
前記糖尿病は、Ｉ型糖尿病である、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記糖尿病は、ＩＩ型糖尿病である、請求項６３に記載の方法。
【請求項６６】
前記疾患は、眼疾患である、請求項５５に記載の方法。
【請求項６７】
前記眼疾患は、網膜色素変性症、網膜変性症、黄斑変性症、またはウォルフラム症候群である、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記疾患は、線維性疾患である、請求項５５に記載の方法。
【請求項６９】
前記線維性疾患は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、心筋梗塞、心肥大、心不全、硬変症、アセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）肝毒性、Ｃ型肝炎肝疾患、肝脂肪変性（脂肪肝）、または肝線維症である、請求項６８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年９月２６日に出願された米国仮特許出願第６１／７０６，０３７号、２０１３年３月１４日に出願された同第６１／７８３，９６５号、および２０１３年６月４日に出願された同第６１／８３１，０８８号の利益を主張するものであり、それらの全てが、参照により、それらの全体において、あらゆる目的で本明細書に組み込まれる。
【０００２】
連邦政府支援研究開発から創出された発明の権利に関する陳述
本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈによって承認された許可番号第ＯＤ００１９２５、ＤＫ０８０９５５、ＧＭ０８６８５８、ＯＤ００１９２６の下に政府支援により成された。政府は本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
ＡＳＣＩＩファイルとして提出された「配列表」、表、またはコンピュータ
プログラムリスト別表への言及
配列表は、２０１３年９月２４日に作成されたファイル「８４８５０＿８８４７７０＿ＳＴ２５．ＴＸＴ」（２４，５７６バイト、マシンフォーマットＩＢＭ−ＰＣ、ＭＳ−Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）オペレーションシステム）に記載され、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００４】
細胞は、小胞体（「ＥＲ」）タンパク質の折り畳み機構に対する作業負荷がその許容量を超える状態をしばしば経験する。そのような細胞は、「ＥＲストレス」を受けていると言われる。ＥＲストレスは、分泌による過剰な作業負荷、折り畳み不全の分泌タンパク質の発現、栄養素または酸素の枯渇、管腔カルシウム濃度の変化、および安静時の酸化還元状態からの逸脱から生じる可能性がある。複雑な細胞の監視および品質管理システムは、そのような混乱下でＥＲホメオスタシスを維持するように機能する。ＥＲストレス下では、分泌タンパク質が折り畳まれていない形状で小器官内に蓄積し、小胞体ストレス応答（ＵＰＲ）と呼ばれる一連の細胞内シグナル経路を誘発する。ＵＰＲシグナル伝達は、シャペロンをコードする遺伝子の転写、酸化還元酵素、脂質生合成酵素、およびＥＲ関連分解（ＥＲＡＤ）成分を増加させる（Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｋ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １０１，２４９−２５８（２０００））。
【０００５】
場合によっては、ＥＲストレスの状態が依然として強過ぎるため、ＵＰＲのホメオスタシス性出力によって改善されないこともある。そのような状況において、ＵＰＲは、戦略を切り替え、積極的にアポトーシスを誘発する（Ｚｈａｎｇ，Ｋ．＆Ｋａｕｆｍａｎ，Ｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６６，Ｓ１０２−１０９（２００６））：我々は、この破壊的なシグナル伝達状態を末端ＵＰＲと名付けた（末端ＵＰＲの特徴的事象は本明細書に記載される）。修復不能なストレスを受けた細胞のアポトーシスは、未成熟な損傷のある分泌タンパク質への曝露から多細胞生物を保護する、極端ではあるが決定的な品質管理戦略である。そのため、いくらかの細胞を失うという代償を払って、多細胞生物は、末端ＵＰＲによって誘発されるアポトーシスから一時的な恩恵を受けることができる。しかしながら、このプロセスによって死滅する細胞が多過ぎる場合、多くの致命的なヒト疾患が生じる。反対に、真性糖尿病および網膜症等の多くのヒト疾患は、ＥＲストレス下で放置状態にある細胞変性から進行する（Ｍｅｒｋｓａｍｅｒ，Ｐ．Ｉ．，ａｎｄ  Ｐａｐａ，Ｆ．Ｒ．，Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ  １２３，１００３−１００６（２０１０）；Ｐａｐａ，Ｆ．Ｒ．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ  ｉｎ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２，ａ００７６６６（２０１２）；Ｓｈｏｒｅ，Ｇ．Ｃ．，Ｐａｐａ，Ｆ．Ｒ．，および  Ｏａｋｅｓ，Ｓ．Ａ．，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２３，１４３−１４９（２０１１））。ＩＩ型糖尿病は、修復不能なＥＲストレス下でＵＰＲ媒介性アポトーシスによって引き起こされる細胞変性疾患のプロトタイプであり得る。これらの同じ原則が、膵島β細胞に対する免疫攻撃がＥＲの作業負荷を高め、残りの細胞内でＥＲストレスを引き起こすＩ型糖尿病に関わっていると考えられる。真性糖尿病の病因および病原性の原理および機構をより深く理解することは、新規の効果的な治療薬の開発の機会を増加させることにつながり得る。実験データ、および著しい細胞保護作用を得るための、ＥＲストレスに曝露されたβ細胞において末端ＵＰＲシグナル伝達の影響に打ち勝つ特許化合物の使用を通して示されるように、末端ＵＰＲシグナル伝達は、これらの条件の中核を成す。
【０００６】
ＩＲＥ１αおよびＩＲＥ１βは、折り畳まれなかったタンパク質が小器官内に蓄積した場合に活性化されるＥＲ膜貫通タンパク質である。ＩＲＥ１αは、より広く発現され、十分に研究されたファミリーメンバーである。二官能性キナーゼ／エンドリボヌクレアーゼであるＩＲＥ１αは、末端ＵＰＲへの移行を制御する。ＩＲＥ１αは、ＥＲ内腔ドメインを通して、ストレスの間にオリゴマーを形成する折り畳まれなかったタンパク質を感知する（Ｚｈｏｕ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  １０３，１４３４３−１４３４８（２００６）；Ｃｒｅｄｌｅ，Ｊ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １０２，１８７７３−１８７８４（２００５）；Ａｒａｇｏｎ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ（２００８）；Ａｒａｇｏｎ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４５７，７３６−７４０（２００９））。ＩＲＥ１αは、その細胞質側表面に、二官能性キナーゼ／ＲＮａｓｅ活性を有する。オリゴマー化は、ＩＲＥ１αのキナーゼドメインに近接して起こり、その結果としてトランス自己リン酸化する。キナーゼの自己リン酸化は、特定の部位でＸＢＰ１  ｍＲＮＡを切断してイントロンを切除するＲＮａｓｅ活性を活性化する。ＩＲＥ１αで切断されたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの再連結はオープンリーディングフレームを移動させる：スプライシングされたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの翻訳は、ＸＢＰ１ｓ（ｓ＝スプライシングされた）と称される転写因子を生成する（Ｃａｌｆｏｎ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４１５，９２−９６，（２００２）；Ｙｏｓｈｉｄａ，Ｈ．Ｃｅｌｌ  １０７，８８１−８９１（２００１））。ＸＢＰ１ｓの標的遺伝子は、ＥＲタンパク質の折り畳みおよび品質管理を強化する生成物をコードする（Ｌｅｅ，Ａ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ２３，７４４８−７４５９（２００３））。よって、ＩＲＥ１αは、ＸＢＰ１ｓを介して適応を促進する。
【０００７】
修復不能なＥＲストレス下では、ＵＰＲから正のフィードバックシグナルが発生し、重要なノードに取り込まれて増幅し、アポトーシスを誘発する。ＩＲＥ１αは、これらのアポトーシス促進性シグナルの重要なイニシエーターである。ＩＲＥ１αは、自己リン酸化を「タイマー」として利用する。改善可能なＥＲストレスは、ＲＮａｓｅ活性をＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングに限定する、低レベルの一過性自己リン酸化を引き起こす。しかしながら、持続性のキナーゼ自己リン酸化は、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅに緩い特異性を獲得させ、ＩＲＥ１αに近接する、ＥＲに局在する何千ものｍＲＮＡをエンドヌクレアーゼによって分解させる（Ｈａｎ，Ｄ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １３８，５６２−５７５，（２００９）；Ｈｏｌｌｉｅｎ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ。これらのｍＲＮＡは、共翻訳によって転座された分泌タンパク質（例えば、β細胞中のインスリン）をコードする。ｍＲＮＡの分解が続くと、ＥＲ常在性酵素をコードする転写物も枯渇し、よってＥＲのタンパク質折り畳み機構全体を不安定化する。一旦、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅが過剰活性化すると、ＸＢＰ１のスプライシングによる適応シグナルがＥＲのｍＲＮＡの破壊により影を潜め、細胞をアポトーシスに至らしめる。
【０００８】
ＩＲＥ１αの過剰活性化されたＲＮａｓｅ活性によって厳密に制御される末端ＵＰＲの特徴は、（１）ミトコンドリアのアポトーシスに至るＥＲ膜における広範なｍＲＮＡの分解（Ｈａｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １３８，５６２−５７５，（２００９））、（２）酸化促進剤チオレドキシン相互作用タンパク質（ＴＸＮＩＰ）の誘導：これは、ＮＬＲＰ３インフラマソームを活性化してインターロイキン−１βの成熟および分泌をもたらし、その結果として、糖尿病の原因となる膵島における無菌性炎症を引き起こす（Ｌｅｒｎｅｒ，Ａ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  １６，２５０−２６４，（２０１２））、および（３）翻訳の上方制御およびプレミトコンドリアカスパーゼ２の切断をもたらすプレｍｉＲＮＡ  １７の分解（Ｕｐｔｏｎ，Ｊ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３３８，８１８−８２２，（２０１２））、ならびにＴＸＮＩＰをコードするｍＲＮＡの安定化（Ｌｅｒｎｅｒ，Ａ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  １６，２５０−２６４，（２０１２））を引き起こす。
【０００９】
網膜色素変性症（ＲＰ）は、杆体および錐体光受容器、ならびに網膜色素上皮のびまん性、進行性機能障害および損失を特徴とする、臨床的および遺伝的に異質な遺伝性網膜障害の群である。現在ＲＰに苦しむ１００，０００人を超える米国人に提供する承認された治療法は存在しない。ＲＰは、不可逆性視力喪失の主な原因であるため、この状態の新しい治療手法は、医療制度に対する著しい費用削減効果があると期待されている。
【００１０】
非常に多くの証拠が、ＥＲ内で誤って折り畳まれたタンパク質の蓄積が、多くの形態のＲＰにおける中心的原因機構であることを示唆している。ＥＲのタンパク質折り畳み能力の限界を超えると、細胞は「ＥＲストレス」を受け、積極的にプログラム細胞死を起こす。例えば、ロドプシンの変異は、米国において最も一般的なＲＰの原因であり、誤って折り畳み、ＥＲ中に蓄積して高レベルのＥＲストレスの原因となる、欠損したロドプシンタンパク質をもたらす。
【００１１】
本明細書において開示されるのは、とりわけ、当該技術分野におけるこれらおよび他の問題の解決策である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｋ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １０１，２４９−２５８（２０００）
【非特許文献２】Ｚｈａｎｇ，Ｋ．＆Ｋａｕｆｍａｎ，Ｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６６，Ｓ１０２−１０９（２００６）
【非特許文献３】Ｍｅｒｋｓａｍｅｒ，Ｐ．Ｉ．，ａｎｄ  Ｐａｐａ，Ｆ．Ｒ．，Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ  １２３，１００３−１００６（２０１０）
【非特許文献４】Ｐａｐａ，Ｆ．Ｒ．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ  ｉｎ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２，ａ００７６６６（２０１２）
【非特許文献５】Ｓｈｏｒｅ，Ｇ．Ｃ．，Ｐａｐａ，Ｆ．Ｒ．，および  Ｏａｋｅｓ，Ｓ．Ａ．，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２３，１４３−１４９（２０１１）
【非特許文献６】Ｚｈｏｕ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  １０３，１４３４３−１４３４８（２００６）
【非特許文献７】Ｃｒｅｄｌｅ，Ｊ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １０２，１８７７３−１８７８４（２００５）
【非特許文献８】Ａｒａｇｏｎ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ（２００８）
【非特許文献９】Ａｒａｇｏｎ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４５７，７３６−７４０（２００９）
【非特許文献１０】Ｃａｌｆｏｎ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４１５，９２−９６，（２００２）
【非特許文献１１】Ｙｏｓｈｉｄａ，Ｈ．Ｃｅｌｌ  １０７，８８１−８９１（２００１）
【非特許文献１２】Ｌｅｅ，Ａ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ２３，７４４８−７４５９（２００３）
【非特許文献１３】Ｈａｎ，Ｄ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １３８，５６２−５７５，（２００９）
【非特許文献１４】Ｈｏｌｌｉｅｎ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ
【非特許文献１５】Ｌｅｒｎｅｒ，Ａ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  １６，２５０−２６４，（２０１２）
【非特許文献１６】Ｕｐｔｏｎ，Ｊ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３３８，８１８−８２２，（２０１２）
【発明の概要】
【００１３】
本明細書において開示されるのは、とりわけ、オリゴマー化を防止し、かつ／またはそのＲＮａｓｅ活性をアロステリックに阻害する、ＩＲＥ１αの新規ＡＴＰ競合性低分子キナーゼ阻害剤である。
【００１４】
ある態様において、式
【化１】
2015532287.tif 000003
を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩が提供され、（Ｉ）式中、環Ａは、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンであり；Ｌ１は、結合または非置換のＣ１−Ｃ５アルキレンであり；Ｌ２は、結合、−ＮＲ６ａ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｚ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン，または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンであり；Ｒ１は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎＲ１０、−ＳＯｖＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−Ｎ（Ｏ）ｍ、−ＮＲ７Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−ＯＲ１０、−ＮＲ７ＳＯｎＲ１０、−ＮＲ７Ｃ＝（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＮＲ７ＯＲ９、−ＯＣＸ３、−ＯＣＨＸ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；Ｒ２は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸａ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎ１Ｒ１０ａ、−ＳＯｖ１ＮＲ７ａＲ８ａ、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７ａＲ８ａ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７ａＲ８ａ、−Ｎ（Ｏ）ｍ１、−ＮＲ７ａＲ８ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ａＲ８ａ、−ＯＲ１０ａ、−ＮＲ７ａＳＯｎ１Ｒ１０ａ、−ＮＲ７ａＣ＝（Ｏ）Ｒ９ａ、−ＮＲ７ａＣ（Ｏ）ＯＲ９ａ、−ＮＲ７ａＯＲ９ａ、−ＯＣＸａ３、−ＯＣＨＸａ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；Ｒ３は、独立して、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸｂ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＳＯｖ２ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｎ（Ｏ）ｍ２、−ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＯＲ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＣ＝（Ｏ）Ｒ９ｂ、−ＮＲ７ｂＣ（Ｏ）ＯＲ９ｂ、−ＮＲ７ｂＯＲ９ｂ、−ＯＣＸｂ３、−ＯＣＨＸｂ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；Ｒ４およびＲ５は、独立して水素または非置換のＣ１−Ｃ６アルキルであり；Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ６ａ、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；同じ窒素原子に結合したＲ７およびＲ８置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；同じ窒素原子に結合したＲ７ａおよびＲ８ａ置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；同じ窒素原子に結合したＲ７ｂおよびＲ８ｂ置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；記号ｎ、ｎ１、およびｎ２の各出現は、独立して０〜４の整数であり；記号ｍ、ｍ１、ｍ２、ｖ、ｖ１、およびｖ２の各出現は、独立して１〜２の整数であり；記号ｚは、０〜２の整数であり；記号ｚ２は、１〜４の整数であり；記号Ｘ、Ｘａ、およびＸｂの各出現は、独立してハロゲンである。
【００１５】
別の態様において、本明細書（例えば、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、態様、実施形態、実施例、図、表、または特許請求の範囲）に記載される、薬学的に許容される賦形剤と、化合物またはその薬学的に許容される塩とを含む薬学的組成物が提供される。
【００１６】
ある態様において、そのような治療を必要とする患者において疾患を治療する方法が提供され、該方法は、治療有効量の本明細書（例えば、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、態様、実施形態、実施例、図、表、または特許請求の範囲）に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を患者に投与することを含み、疾患は、神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病である。
【００１７】
ある態様において、Ｉｒｅ１タンパク質の活性を調節する方法が提供され、該方法は、Ｉｒｅ１タンパク質を、有効量の本明細書（例えば、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、態様、実施形態、実施例、図、表、または特許請求の範囲）に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩と接触させることを含む。
【００１８】
別の態様において、本開示は、式（Ａ）
【化２】
2015532287.tif 000004
（図７にも示される）を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を提供し、式中、Ｒ１ｄ、Ｒ２ｄ、Ｒ３ｄ、Ｒ４ｄ、Ｒ５ｄ、Ｒ６ｄ、Ｒ７ｄ、Ｒ８ｄ、Ｒ９ｄ、およびＲ１０ｄは、それぞれ独立して、Ｃ２−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−Ｃ１−４アルキル−Ｒ１２ｄ、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−８シクロアルキル、単環式ヘテロサイクリル、単環式ヘテロアリール、またはフェニル、アリールであり、シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロアリール、およびフェニル基は、それぞれ、任意選択的に１個または２個のＲ１１ｄ基で置換され；各Ｒ１１ｄは、独立してＣ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＲｄ２、または−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄであり；Ｒ１２ｄは、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基によってそれぞれ任意選択的に置換され；各Ｒｄは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロサイクリル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール，およびヘテロアリールアルキルは、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲ０ｄ、ＳＲ０ｄ、ＮＲ０ｄ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、またはＮ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２である１個、２個、３個、または４個の基で任意選択的に置換され；各Ｒ０ｄは、独立して水素またはＣ１−６アルキルであり、各Ｒｄは、独立して水素、またはＣ１−６アルキルである。
【００１９】
別の態様において、Ｒ２ｄおよびＲ３ｄは、一緒になって、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基でそれぞれ任意選択的に置換され；各Ｒｄは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロサイクリル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキルは、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲ０ｄ、ＳＲ０ｄ、ＮＲ０ｄ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、またはＮ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２である１個、２個、３個、または４個の基で任意選択的に置換され、各Ｒ０ｄは、独立して水素またはＣ１−６アルキルであり、各Ｒｄは、独立して水素、またはＣ１−６アルキルである。
【００２０】
さらに別の態様において、Ｒ１ｄは、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立してハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基によってそれぞれ任意選択的に置換される。
【００２１】
一態様において、本開示は、ヒトおよびマウスＩＲＥ１αを使用してＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を活性化するための組成物および方法を対象とする。
【００２２】
別の態様において、本開示は、化合物：ＧＰ１１７（ＫＩＲＡ２）、ＧＰ１１８（ＫＩＲＡ１）、ＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）、ＧＰ１４６（ＮＭｅ）、ＧＰ１４６（Ａｍ）、式Ｂ、式（Ａ）、図７および８に示す化合物、ならびに本明細書に開示される他の誘導体化合物を使用して、ヒトおよびマウスＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を阻害するための組成物および方法を対象とする。
【００２３】
本開示はまた、本明細書に開示される化合物のいずれかを含む薬学的組成物を対象としてもよい。
【００２４】
さらなる態様において、本開示は、式（Ｂ）
【化３】
2015532287.tif 000005
を有する化合物およびその薬学的に許容される塩を提供する。
【００２５】
さらに別の態様において、本開示は、図８に示される化合物およびその薬学的に許容される塩を提供する。
【００２６】
別の態様において、本開示は、そのような治療を必要とする患者に、治療有効量の（ｉ）本明細書に開示される化合物のいずれか、または（ｉｉ）本明細書に開示される化合物のいずれかと、薬学的に許容される賦形剤、担体、もしくは希釈剤とを含む薬学的組成物、のいずれかを提供することを含む、調節解除されたＵＰＲシグナル伝達に関連する疾患を治療するための方法を提供する。
【００２７】
別の態様において、本開示は、そのような治療を必要とする患者に、治療有効量の式（Ｂ）の化合物、図７に示される化合物、および記載されるあらゆる誘導体、ならびに図８に示される化合物またはその記載もしくは示される誘導体のいずれか、あるいは（ｉｉ）本明細書に記載の式（Ｂ）の化合物またはその誘導体のいずれか、および薬学的に許容される賦形剤、担体、または希釈剤を含む薬学的組成物のいずれかを提供することを含み、式（Ｂ）の化合物は、
【化４】
2015532287.tif 000006
式（Ｂ）である、
調節解除されたＵＰＲシグナル伝達に関連する疾患を治療するための方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１−１】ＡＴＰ競合性阻害剤と二官能性キナーゼ／ＲＮａｓｅであるＩＲＥ１αとの相互作用。（ａ）Ｉ型およびＩＩ型キナーゼ阻害剤とＩＲＥ１αのＡＴＰ結合ポケットとの推奨される結合様式。左のパネルは、Ｉ型阻害剤ＡＰＹ２９が酵母ＩＲＥ１α（ＰＤＢコード３ＳＤＪ）１８と形成する接触部を示す（配列番号３）。右のパネルは、Ｓｒｃに結合した同じ阻害剤共結晶構造に基づいて、ＩＩ型阻害剤ＧＰ１１８がＩＲＥ１α（ＰＤＢコード３ＥＬ８）と形成する推奨される接触部を示す（配列番号４）（図１５も参照のこと）。（ｂ）ＩＲＥ１α調節因子のスクリーニングに使用したＸＢＰ１  ＲＮＡミニ基質アッセイ；アッセイに使用した組換えヒトＩＲＥ１α−ＩＲＥ１α＊−は、細胞質キナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインを含む残基４６９〜９７７に及ぶ；ＩＲＥ１α＊による５’ＦＡＭ−３’ＢＨＱ標識ＸＢＰ１ミニ基質の切断は、ＦＲＥＴによる脱消光をもたらす。（ｃ）様々な濃度の阻害剤、またはＤＭＳＯの存在下においてＩＲＥ１α＊によって触媒されるＸＢＰ１ミニ基質の切断反応のエンドポイント蛍光；ＳＴＦ−０８３０１０は、ＲＮａｓｅドメインを共有結合により阻害するイミンベースの化合物である；相対蛍光強度は、ＩＲＥ１α＊を用いて（１．０）またはＩＲＥ１α＊を用いずに（０）観察されたシグナルに対して増減させる（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。（ｄ）ＩＲＥ１α＊（ＧＰ１１８／ＫＩＲＡ１、ＧＰ１１７／ＫＩＲＡ２、ＧＰ１４６／ＫＩＲＡ３）のＲＮａｓｅ活性を阻害するＩＩ型キナーゼ阻害剤の構造。図中のＩｒｅ１αからのアミノ酸残基の番号は、ヒトＩｒｅ１αのアミノ酸番号を用いる（例えば、本明細書の実施例の項で番号付けされた配列番号２においてヒトＩＲＥ１ａ（４６９−９７７）配列に用いられる番号を含む）。
【図１−２】ＡＴＰ競合性阻害剤と二官能性キナーゼ／ＲＮａｓｅであるＩＲＥ１αとの相互作用。（ａ）Ｉ型およびＩＩ型キナーゼ阻害剤とＩＲＥ１αのＡＴＰ結合ポケットとの推奨される結合様式。左のパネルは、Ｉ型阻害剤ＡＰＹ２９が酵母ＩＲＥ１α（ＰＤＢコード３ＳＤＪ）１８と形成する接触部を示す（配列番号３）。右のパネルは、Ｓｒｃに結合した同じ阻害剤共結晶構造に基づいて、ＩＩ型阻害剤ＧＰ１１８がＩＲＥ１α（ＰＤＢコード３ＥＬ８）と形成する推奨される接触部を示す（配列番号４）（図１５も参照のこと）。（ｂ）ＩＲＥ１α調節因子のスクリーニングに使用したＸＢＰ１  ＲＮＡミニ基質アッセイ；アッセイに使用した組換えヒトＩＲＥ１α−ＩＲＥ１α＊−は、細胞質キナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインを含む残基４６９〜９７７に及ぶ；ＩＲＥ１α＊による５’ＦＡＭ−３’ＢＨＱ標識ＸＢＰ１ミニ基質の切断は、ＦＲＥＴによる脱消光をもたらす。（ｃ）様々な濃度の阻害剤、またはＤＭＳＯの存在下においてＩＲＥ１α＊によって触媒されるＸＢＰ１ミニ基質の切断反応のエンドポイント蛍光；ＳＴＦ−０８３０１０は、ＲＮａｓｅドメインを共有結合により阻害するイミンベースの化合物である；相対蛍光強度は、ＩＲＥ１α＊を用いて（１．０）またはＩＲＥ１α＊を用いずに（０）観察されたシグナルに対して増減させる（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。（ｄ）ＩＲＥ１α＊（ＧＰ１１８／ＫＩＲＡ１、ＧＰ１１７／ＫＩＲＡ２、ＧＰ１４６／ＫＩＲＡ３）のＲＮａｓｅ活性を阻害するＩＩ型キナーゼ阻害剤の構造。図中のＩｒｅ１αからのアミノ酸残基の番号は、ヒトＩｒｅ１αのアミノ酸番号を用いる（例えば、本明細書の実施例の項で番号付けされた配列番号２においてヒトＩＲＥ１ａ（４６９−９７７）配列に用いられる番号を含む）。
【図１−３】ＡＴＰ競合性阻害剤と二官能性キナーゼ／ＲＮａｓｅであるＩＲＥ１αとの相互作用。（ａ）Ｉ型およびＩＩ型キナーゼ阻害剤とＩＲＥ１αのＡＴＰ結合ポケットとの推奨される結合様式。左のパネルは、Ｉ型阻害剤ＡＰＹ２９が酵母ＩＲＥ１α（ＰＤＢコード３ＳＤＪ）１８と形成する接触部を示す（配列番号３）。右のパネルは、Ｓｒｃに結合した同じ阻害剤共結晶構造に基づいて、ＩＩ型阻害剤ＧＰ１１８がＩＲＥ１α（ＰＤＢコード３ＥＬ８）と形成する推奨される接触部を示す（配列番号４）（図１５も参照のこと）。（ｂ）ＩＲＥ１α調節因子のスクリーニングに使用したＸＢＰ１  ＲＮＡミニ基質アッセイ；アッセイに使用した組換えヒトＩＲＥ１α−ＩＲＥ１α＊−は、細胞質キナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインを含む残基４６９〜９７７に及ぶ；ＩＲＥ１α＊による５’ＦＡＭ−３’ＢＨＱ標識ＸＢＰ１ミニ基質の切断は、ＦＲＥＴによる脱消光をもたらす。（ｃ）様々な濃度の阻害剤、またはＤＭＳＯの存在下においてＩＲＥ１α＊によって触媒されるＸＢＰ１ミニ基質の切断反応のエンドポイント蛍光；ＳＴＦ−０８３０１０は、ＲＮａｓｅドメインを共有結合により阻害するイミンベースの化合物である；相対蛍光強度は、ＩＲＥ１α＊を用いて（１．０）またはＩＲＥ１α＊を用いずに（０）観察されたシグナルに対して増減させる（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。（ｄ）ＩＲＥ１α＊（ＧＰ１１８／ＫＩＲＡ１、ＧＰ１１７／ＫＩＲＡ２、ＧＰ１４６／ＫＩＲＡ３）のＲＮａｓｅ活性を阻害するＩＩ型キナーゼ阻害剤の構造。図中のＩｒｅ１αからのアミノ酸残基の番号は、ヒトＩｒｅ１αのアミノ酸番号を用いる（例えば、本明細書の実施例の項で番号付けされた配列番号２においてヒトＩＲＥ１ａ（４６９−９７７）配列に用いられる番号を含む）。
【図２−１】ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）は、ＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性およびオリゴマー化状態を多様に調節する。（ａ）ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６によるインビトロでのＩＲＥ１α＊自己リン酸化の阻害；上のパネルは、それぞれの阻害剤の連続２倍希釈下（８０μＭから０．００９８μＭ）における自己リン酸化レベルのオートラジオグラムを示す；下のパネルは、両方の化合物について、正規化された自己リン酸化レベルおよびＩＣ５０値を示す。（ｂ）ＩＲＥ１α＊のλ−ＰＰａｓｅ処理は、リン酸化ＩＲＥ１α＊（ｄＰ−ＩＲＥ１α＊）を生成する；抗ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１α抗体を使用した免疫ブロットを示す。（ｃ）図１ｂのアッセイ当たりの、様々な［ＡＰＹ２９］または［ＧＰ１４６］（ＫＩＲＡ３）下におけるＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性；ＥＣ５０値は、正規化した蛍光強度（平均±ＳＤ、ｎ＝３）を適合させることにより決定した。（ｄ）ＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）またはＡＰＹ２９を用いたおよび用いない、ＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊によるＸＢＰ１ミニ基質切断の尿素ＰＡＧＥ。（ｅ）ＡＰＹ２９とＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）の間のＲＮａｓｅ競合アッセイ；丸で印をつけた線は、一定のＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）および様々な［ＡＰＹ２９］下におけるＩＲＥ１α＊のＲＮＡｓｅ活性を示す；四角で印をつけた線は、一定のＡＰＹ２９および様々な［ＧＰ１４６］（ＫＩＲＡ３）下におけるＩＲＥ１α＊のＲＮＡｓｅ活性を示す；三角で印をつけた線は、一定のＳＴＦ−０８３０１０および様々な［ＡＰＹ２９］下におけるＩＲＥ１α＊のＲＮＡｓｅ活性を示す（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。
【図２−２】ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）は、ＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性およびオリゴマー化状態を多様に調節する。（ａ）ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６によるインビトロでのＩＲＥ１α＊自己リン酸化の阻害；上のパネルは、それぞれの阻害剤の連続２倍希釈下（８０μＭから０．００９８μＭ）における自己リン酸化レベルのオートラジオグラムを示す；下のパネルは、両方の化合物について、正規化された自己リン酸化レベルおよびＩＣ５０値を示す。（ｂ）ＩＲＥ１α＊のλ−ＰＰａｓｅ処理は、リン酸化ＩＲＥ１α＊（ｄＰ−ＩＲＥ１α＊）を生成する；抗ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１α抗体を使用した免疫ブロットを示す。（ｃ）図１ｂのアッセイ当たりの、様々な［ＡＰＹ２９］または［ＧＰ１４６］（ＫＩＲＡ３）下におけるＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性；ＥＣ５０値は、正規化した蛍光強度（平均±ＳＤ、ｎ＝３）を適合させることにより決定した。（ｄ）ＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）またはＡＰＹ２９を用いたおよび用いない、ＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊によるＸＢＰ１ミニ基質切断の尿素ＰＡＧＥ。（ｅ）ＡＰＹ２９とＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）の間のＲＮａｓｅ競合アッセイ；丸で印をつけた線は、一定のＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）および様々な［ＡＰＹ２９］下におけるＩＲＥ１α＊のＲＮＡｓｅ活性を示す；四角で印をつけた線は、一定のＡＰＹ２９および様々な［ＧＰ１４６］（ＫＩＲＡ３）下におけるＩＲＥ１α＊のＲＮＡｓｅ活性を示す；三角で印をつけた線は、一定のＳＴＦ−０８３０１０および様々な［ＡＰＹ２９］下におけるＩＲＥ１α＊のＲＮＡｓｅ活性を示す（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。
【図２−３】ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）は、ＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性およびオリゴマー化状態を多様に調節する。（ａ）ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６によるインビトロでのＩＲＥ１α＊自己リン酸化の阻害；上のパネルは、それぞれの阻害剤の連続２倍希釈下（８０μＭから０．００９８μＭ）における自己リン酸化レベルのオートラジオグラムを示す；下のパネルは、両方の化合物について、正規化された自己リン酸化レベルおよびＩＣ５０値を示す。（ｂ）ＩＲＥ１α＊のλ−ＰＰａｓｅ処理は、リン酸化ＩＲＥ１α＊（ｄＰ−ＩＲＥ１α＊）を生成する；抗ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１α抗体を使用した免疫ブロットを示す。（ｃ）図１ｂのアッセイ当たりの、様々な［ＡＰＹ２９］または［ＧＰ１４６］（ＫＩＲＡ３）下におけるＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性；ＥＣ５０値は、正規化した蛍光強度（平均±ＳＤ、ｎ＝３）を適合させることにより決定した。（ｄ）ＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）またはＡＰＹ２９を用いたおよび用いない、ＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊によるＸＢＰ１ミニ基質切断の尿素ＰＡＧＥ。（ｅ）ＡＰＹ２９とＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）の間のＲＮａｓｅ競合アッセイ；丸で印をつけた線は、一定のＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）および様々な［ＡＰＹ２９］下におけるＩＲＥ１α＊のＲＮＡｓｅ活性を示す；四角で印をつけた線は、一定のＡＰＹ２９および様々な［ＧＰ１４６］（ＫＩＲＡ３）下におけるＩＲＥ１α＊のＲＮＡｓｅ活性を示す；三角で印をつけた線は、一定のＳＴＦ−０８３０１０および様々な［ＡＰＹ２９］下におけるＩＲＥ１α＊のＲＮＡｓｅ活性を示す（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。
【図３−１】ＧＰ１４６とＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位との相互作用の特徴付け。（ａ）ＡＤＰに結合したヒトＩＲＥ１αのキナーゼドメインの結晶構造；ＩＣＡＴフットプリント法を用いて監視した天然システイン残基を標識して太いロッドとして示し、ＤＦＧモチーフを細い棒として示す；ｃｙｓ７１５は、ＩＲＥ１αのヒンジ領域の一部であり、その側鎖がＡＴＰ結合部位を部分的に占有する；ｃｙｓ６４５は、活性化ループ内にあり、ＤＦＧモチーフから２残基離れている；ｃｙｓ５７２は、触媒ドメインのＮ末端ローブの上部に位置し、ＡＴＰ結合部位から離れている。（ｂ）ＩＲＥ１α＊を用いたＩＣＡＴフットプリント実験の結果；ＤＭＳＯ（丸）、ＡＰＹ２９（四角）（２０μＭ）、またはＧＰ１４６（三角）（２０μＭ）の存在下でアルキル化の速度を測定した（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。（ｃ）ＧＰ１４６とＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位との相互作用のモジュールモデル；ＩＲＥ１αはＤＦＧ−ｏｕｔ不活性コンフォメーションをとっている；ＧＰ１４６のイミダゾピラジン環はアデニンポケットを占有し、３−トリフルオロメチルウレアはＤＦＧ−ｏｕｔポケットを占有する；ＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションに結合したＧＰ１４６について好ましいなポーズは決定できなかった。（ｄ）ＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションに結合したＧＰ１４６のドッキング構造を試験するために作製された対照化合物；ＧＰ１４６（ＮＭｅ）は、ＩＲＥ１αのヒンジ領域への重要な水素結合を破壊すると予測されるメチル基を含有する。ＧＰ１４６（Ａｍ）は、ナフチル環とトリフルオロメチルフェニル基との間に尿素基リンカーよりもむしろアミドを含有する；アミドリンカーは、ＤＦＧ−ｏｕｔポケットとのあまり好ましくない相互作用をもたらすことが予測される；ＩＲＥ１α＊に対する各化合物のＩＣ５０をそれらの構造の下に記載する。
【図３−２】ＧＰ１４６とＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位との相互作用の特徴付け。（ａ）ＡＤＰに結合したヒトＩＲＥ１αのキナーゼドメインの結晶構造；ＩＣＡＴフットプリント法を用いて監視した天然システイン残基を標識して太いロッドとして示し、ＤＦＧモチーフを細い棒として示す；ｃｙｓ７１５は、ＩＲＥ１αのヒンジ領域の一部であり、その側鎖がＡＴＰ結合部位を部分的に占有する；ｃｙｓ６４５は、活性化ループ内にあり、ＤＦＧモチーフから２残基離れている；ｃｙｓ５７２は、触媒ドメインのＮ末端ローブの上部に位置し、ＡＴＰ結合部位から離れている。（ｂ）ＩＲＥ１α＊を用いたＩＣＡＴフットプリント実験の結果；ＤＭＳＯ（丸）、ＡＰＹ２９（四角）（２０μＭ）、またはＧＰ１４６（三角）（２０μＭ）の存在下でアルキル化の速度を測定した（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。（ｃ）ＧＰ１４６とＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位との相互作用のモジュールモデル；ＩＲＥ１αはＤＦＧ−ｏｕｔ不活性コンフォメーションをとっている；ＧＰ１４６のイミダゾピラジン環はアデニンポケットを占有し、３−トリフルオロメチルウレアはＤＦＧ−ｏｕｔポケットを占有する；ＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションに結合したＧＰ１４６について好ましいなポーズは決定できなかった。（ｄ）ＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションに結合したＧＰ１４６のドッキング構造を試験するために作製された対照化合物；ＧＰ１４６（ＮＭｅ）は、ＩＲＥ１αのヒンジ領域への重要な水素結合を破壊すると予測されるメチル基を含有する。ＧＰ１４６（Ａｍ）は、ナフチル環とトリフルオロメチルフェニル基との間に尿素基リンカーよりもむしろアミドを含有する；アミドリンカーは、ＤＦＧ−ｏｕｔポケットとのあまり好ましくない相互作用をもたらすことが予測される；ＩＲＥ１α＊に対する各化合物のＩＣ５０をそれらの構造の下に記載する。
【図３−３】ＧＰ１４６とＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位との相互作用の特徴付け。（ａ）ＡＤＰに結合したヒトＩＲＥ１αのキナーゼドメインの結晶構造；ＩＣＡＴフットプリント法を用いて監視した天然システイン残基を標識して太いロッドとして示し、ＤＦＧモチーフを細い棒として示す；ｃｙｓ７１５は、ＩＲＥ１αのヒンジ領域の一部であり、その側鎖がＡＴＰ結合部位を部分的に占有する；ｃｙｓ６４５は、活性化ループ内にあり、ＤＦＧモチーフから２残基離れている；ｃｙｓ５７２は、触媒ドメインのＮ末端ローブの上部に位置し、ＡＴＰ結合部位から離れている。（ｂ）ＩＲＥ１α＊を用いたＩＣＡＴフットプリント実験の結果；ＤＭＳＯ（丸）、ＡＰＹ２９（四角）（２０μＭ）、またはＧＰ１４６（三角）（２０μＭ）の存在下でアルキル化の速度を測定した（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。（ｃ）ＧＰ１４６とＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位との相互作用のモジュールモデル；ＩＲＥ１αはＤＦＧ−ｏｕｔ不活性コンフォメーションをとっている；ＧＰ１４６のイミダゾピラジン環はアデニンポケットを占有し、３−トリフルオロメチルウレアはＤＦＧ−ｏｕｔポケットを占有する；ＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションに結合したＧＰ１４６について好ましいなポーズは決定できなかった。（ｄ）ＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションに結合したＧＰ１４６のドッキング構造を試験するために作製された対照化合物；ＧＰ１４６（ＮＭｅ）は、ＩＲＥ１αのヒンジ領域への重要な水素結合を破壊すると予測されるメチル基を含有する。ＧＰ１４６（Ａｍ）は、ナフチル環とトリフルオロメチルフェニル基との間に尿素基リンカーよりもむしろアミドを含有する；アミドリンカーは、ＤＦＧ−ｏｕｔポケットとのあまり好ましくない相互作用をもたらすことが予測される；ＩＲＥ１α＊に対する各化合物のＩＣ５０をそれらの構造の下に記載する。
【図４】ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６はＩＲＥ１α＊のオリゴマー化状態に差次的に影響を及ぼす。（ａ）左のパネルは、架橋剤ＤＳＳ（２５０μＭ）で処理した後のＩＲＥ１α＊の免疫ブロットを示す；増加する濃度のＩＲＥ１α＊を、ＤＭＳＯ、ＡＰＹ２９（２００μＭ）、またはＧＰ１４６（２００μＭ）とともにインキュベートした；右のパネルは、オリゴマー対モノマーＩＲＥ１α＊の比率の定量化を示す。（ｂ）Ｉ型およびＩＩ型キナーゼ阻害剤がＲＮａｓｅの活性ならびにＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊のオリゴマー状態にどのように影響を及ぼすかのモデル。
【図５−１】インビボでのＩＲＥ１αのキナーゼおよびＲＮａｓｅ活性の化学的な遺伝的調節。（ａ）ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）対照の下で「穴開き」ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａを発現するＴ−Ｒｅｘ  ２９３細胞の抗全ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１αの免疫ブロット；指示された濃度のＧＰ１４６で細胞を１時間前処理し、次いでＤｏｘ（１μＭ）で８時間誘導した；プロットは、正規化されたリン酸化レベルと、様々な［ＧＰ１４６］下でスプライシングされたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの比率を示す（平均±ＳＤ、ｎ＞＝３）。（ｂ）（ａ）に記載した細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｃ）ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａに対する“隆起状”キナーゼ阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１およびＧＰ１４６の競合；Ｄｏｘ（１μＭ）で８時間誘導する前に、ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａを発現するＴ−Ｒｅｘ  ２９３細胞をＧＰ１４６（１μＭ）±様々な［１ＮＭ−ＰＰ１］で１時間前処理した；ヒストグラムは、スプライシングされたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの比率を［ＧＰ１４６］および［１ＮＭ−ＰＰ１］の関数として示す。（ｄ）Ｉ型およびＩＩキナーゼ阻害剤によるＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの多様なアロステリック調節のモデル；過剰生成されると、ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａはオリゴマーを形成してトランス自己リン酸化し、ＲＮａｓｅによるＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを活性化する；Ｉ型阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１は、ＲＮａｓｅ活性を増加させ、その一方でＩＩ型阻害剤ＧＰ１４６は低下させる；カートゥーンは、ＩＲＥ１αにおけるモノマーサブユニットの相対的配向を区別することを意図するものではない。
【図５−２】インビボでのＩＲＥ１αのキナーゼおよびＲＮａｓｅ活性の化学的な遺伝的調節。（ａ）ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）対照の下で「穴開き」ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａを発現するＴ−Ｒｅｘ  ２９３細胞の抗全ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１αの免疫ブロット；指示された濃度のＧＰ１４６で細胞を１時間前処理し、次いでＤｏｘ（１μＭ）で８時間誘導した；プロットは、正規化されたリン酸化レベルと、様々な［ＧＰ１４６］下でスプライシングされたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの比率を示す（平均±ＳＤ、ｎ＞＝３）。（ｂ）（ａ）に記載した細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｃ）ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａに対する“隆起状”キナーゼ阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１およびＧＰ１４６の競合；Ｄｏｘ（１μＭ）で８時間誘導する前に、ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａを発現するＴ−Ｒｅｘ  ２９３細胞をＧＰ１４６（１μＭ）±様々な［１ＮＭ−ＰＰ１］で１時間前処理した；ヒストグラムは、スプライシングされたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの比率を［ＧＰ１４６］および［１ＮＭ−ＰＰ１］の関数として示す。（ｄ）Ｉ型およびＩＩキナーゼ阻害剤によるＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの多様なアロステリック調節のモデル；過剰生成されると、ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａはオリゴマーを形成してトランス自己リン酸化し、ＲＮａｓｅによるＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを活性化する；Ｉ型阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１は、ＲＮａｓｅ活性を増加させ、その一方でＩＩ型阻害剤ＧＰ１４６は低下させる；カートゥーンは、ＩＲＥ１αにおけるモノマーサブユニットの相対的配向を区別することを意図するものではない。
【図５−３】インビボでのＩＲＥ１αのキナーゼおよびＲＮａｓｅ活性の化学的な遺伝的調節。（ａ）ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）対照の下で「穴開き」ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａを発現するＴ−Ｒｅｘ  ２９３細胞の抗全ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１αの免疫ブロット；指示された濃度のＧＰ１４６で細胞を１時間前処理し、次いでＤｏｘ（１μＭ）で８時間誘導した；プロットは、正規化されたリン酸化レベルと、様々な［ＧＰ１４６］下でスプライシングされたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの比率を示す（平均±ＳＤ、ｎ＞＝３）。（ｂ）（ａ）に記載した細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｃ）ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａに対する“隆起状”キナーゼ阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１およびＧＰ１４６の競合；Ｄｏｘ（１μＭ）で８時間誘導する前に、ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａを発現するＴ−Ｒｅｘ  ２９３細胞をＧＰ１４６（１μＭ）±様々な［１ＮＭ−ＰＰ１］で１時間前処理した；ヒストグラムは、スプライシングされたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの比率を［ＧＰ１４６］および［１ＮＭ−ＰＰ１］の関数として示す。（ｄ）Ｉ型およびＩＩキナーゼ阻害剤によるＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの多様なアロステリック調節のモデル；過剰生成されると、ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａはオリゴマーを形成してトランス自己リン酸化し、ＲＮａｓｅによるＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを活性化する；Ｉ型阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１は、ＲＮａｓｅ活性を増加させ、その一方でＩＩ型阻害剤ＧＰ１４６は低下させる；カートゥーンは、ＩＲＥ１αにおけるモノマーサブユニットの相対的配向を区別することを意図するものではない。
【図５−４】インビボでのＩＲＥ１αのキナーゼおよびＲＮａｓｅ活性の化学的な遺伝的調節。（ａ）ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）対照の下で「穴開き」ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａを発現するＴ−Ｒｅｘ  ２９３細胞の抗全ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１αの免疫ブロット；指示された濃度のＧＰ１４６で細胞を１時間前処理し、次いでＤｏｘ（１μＭ）で８時間誘導した；プロットは、正規化されたリン酸化レベルと、様々な［ＧＰ１４６］下でスプライシングされたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの比率を示す（平均±ＳＤ、ｎ＞＝３）。（ｂ）（ａ）に記載した細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｃ）ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａに対する“隆起状”キナーゼ阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１およびＧＰ１４６の競合；Ｄｏｘ（１μＭ）で８時間誘導する前に、ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａを発現するＴ−Ｒｅｘ  ２９３細胞をＧＰ１４６（１μＭ）±様々な［１ＮＭ−ＰＰ１］で１時間前処理した；ヒストグラムは、スプライシングされたＸＢＰ１  ｍＲＮＡの比率を［ＧＰ１４６］および［１ＮＭ−ＰＰ１］の関数として示す。（ｄ）Ｉ型およびＩＩキナーゼ阻害剤によるＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの多様なアロステリック調節のモデル；過剰生成されると、ＩＲＥ１α  Ｉ６４２Ａはオリゴマーを形成してトランス自己リン酸化し、ＲＮａｓｅによるＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを活性化する；Ｉ型阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１は、ＲＮａｓｅ活性を増加させ、その一方でＩＩ型阻害剤ＧＰ１４６は低下させる；カートゥーンは、ＩＲＥ１αにおけるモノマーサブユニットの相対的配向を区別することを意図するものではない。
【図６−１】Ｉ型およびＩＩ型キナーゼ阻害剤を用いた、ＥＲストレス下の内在性ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性の多様な調節。（ａ）指示された濃度のＧＰ１４６またはＡＰＹ２９で１時間、その後タプシガルジン（Ｔｇ）（６ｎＭ）で４時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル；（スプライシングされた＋スプライシングされていない（ＸＢＰ１Ｕ））に対するスプレイシングされたＸＢＰ１（ＸＢＰ１Ｓ）の比率をプロットした（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。（ｂ）指示された濃度のＧＰ１４６、スニチニブ、またはＳＴＦ−０８３０１０で１時間、続いてＴｇ（６ｎＭ）で２時間前処理したＩＮＳ−１細胞からの抽出物を用いた抗全ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１αの免疫ブロット。（ｃ）（ｂ）に記載したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｄ）指示された濃度のＧＰ１４６（ＮＭｅ）で１時間、その後タプシガルジン（Ｔｇ）（６ｎＭ）で４時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｅ）Ｉ型キナーゼ阻害剤（ＡＰＹ２９）、ＩＩ型キナーゼ阻害剤（ＧＰ１４６）、およびＲＮａｓｅ阻害剤（ＳＴＦ−０８３０１０）が、ＷＴ  ＩＲＥ１αの酵素活性をどのように調節するかのモデル。ＡＰＹ２９は、ＩＲＥ１αのトランス自己リン酸化を阻害するが、オリゴマー化を促進してＲＮａｓｅドメインを活性化する；ＳＴＦ−０８３０１０は、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を阻害するが、キナーゼ活性または全体的なオリゴマー化状態には影響しない。ＧＰ１４６は、ＩＲＥ１αのキナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインの両方を阻害し、モノマー形態を安定化する；カートゥーンは、ＩＲＥ１αにおけるモノマーサブユニットの相対的配向を区別することを意図するものではない。
【図６−２】Ｉ型およびＩＩ型キナーゼ阻害剤を用いた、ＥＲストレス下の内在性ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性の多様な調節。（ａ）指示された濃度のＧＰ１４６またはＡＰＹ２９で１時間、その後タプシガルジン（Ｔｇ）（６ｎＭ）で４時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル；（スプライシングされた＋スプライシングされていない（ＸＢＰ１Ｕ））に対するスプレイシングされたＸＢＰ１（ＸＢＰ１Ｓ）の比率をプロットした（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。（ｂ）指示された濃度のＧＰ１４６、スニチニブ、またはＳＴＦ−０８３０１０で１時間、続いてＴｇ（６ｎＭ）で２時間前処理したＩＮＳ−１細胞からの抽出物を用いた抗全ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１αの免疫ブロット。（ｃ）（ｂ）に記載したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｄ）指示された濃度のＧＰ１４６（ＮＭｅ）で１時間、その後タプシガルジン（Ｔｇ）（６ｎＭ）で４時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｅ）Ｉ型キナーゼ阻害剤（ＡＰＹ２９）、ＩＩ型キナーゼ阻害剤（ＧＰ１４６）、およびＲＮａｓｅ阻害剤（ＳＴＦ−０８３０１０）が、ＷＴ  ＩＲＥ１αの酵素活性をどのように調節するかのモデル。ＡＰＹ２９は、ＩＲＥ１αのトランス自己リン酸化を阻害するが、オリゴマー化を促進してＲＮａｓｅドメインを活性化する；ＳＴＦ−０８３０１０は、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を阻害するが、キナーゼ活性または全体的なオリゴマー化状態には影響しない。ＧＰ１４６は、ＩＲＥ１αのキナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインの両方を阻害し、モノマー形態を安定化する；カートゥーンは、ＩＲＥ１αにおけるモノマーサブユニットの相対的配向を区別することを意図するものではない。
【図６−３】Ｉ型およびＩＩ型キナーゼ阻害剤を用いた、ＥＲストレス下の内在性ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性の多様な調節。（ａ）指示された濃度のＧＰ１４６またはＡＰＹ２９で１時間、その後タプシガルジン（Ｔｇ）（６ｎＭ）で４時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル；（スプライシングされた＋スプライシングされていない（ＸＢＰ１Ｕ））に対するスプレイシングされたＸＢＰ１（ＸＢＰ１Ｓ）の比率をプロットした（平均±ＳＤ、ｎ＝３）。（ｂ）指示された濃度のＧＰ１４６、スニチニブ、またはＳＴＦ−０８３０１０で１時間、続いてＴｇ（６ｎＭ）で２時間前処理したＩＮＳ−１細胞からの抽出物を用いた抗全ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１αの免疫ブロット。（ｃ）（ｂ）に記載したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｄ）指示された濃度のＧＰ１４６（ＮＭｅ）で１時間、その後タプシガルジン（Ｔｇ）（６ｎＭ）で４時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル。（ｅ）Ｉ型キナーゼ阻害剤（ＡＰＹ２９）、ＩＩ型キナーゼ阻害剤（ＧＰ１４６）、およびＲＮａｓｅ阻害剤（ＳＴＦ−０８３０１０）が、ＷＴ  ＩＲＥ１αの酵素活性をどのように調節するかのモデル。ＡＰＹ２９は、ＩＲＥ１αのトランス自己リン酸化を阻害するが、オリゴマー化を促進してＲＮａｓｅドメインを活性化する；ＳＴＦ−０８３０１０は、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を阻害するが、キナーゼ活性または全体的なオリゴマー化状態には影響しない。ＧＰ１４６は、ＩＲＥ１αのキナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインの両方を阻害し、モノマー形態を安定化する；カートゥーンは、ＩＲＥ１αにおけるモノマーサブユニットの相対的配向を区別することを意図するものではない。
【図７】化合物式（Ａ）を示し、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、それぞれ本明細書に定義される。
【図８−１】ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を調節および／または阻害する能力を示すＧＰ１４６の類似体を示す。
【図８−２】ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を調節および／または阻害する能力を示すＧＰ１４６の類似体を示す。
【図８−３】ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を調節および／または阻害する能力を示すＧＰ１４６の類似体を示す。
【図８−４】ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を調節および／または阻害する能力を示すＧＰ１４６の類似体を示す。
【図９−１】ＥＲストレス誘導性アポトーシスは、単純にＩＲＥ１αを過剰発現させることによって複製することができる。（Ａ）増加する濃度のタプシガルジン（Ｔｇ）で２４、４８、および７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（Ｂ）指示された濃度のＴｇで１２、２４、４８時間処理したＩＮＳ−１細胞の抗プロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット；抗ＧＡＰＤＨの免疫ブロットは、負荷対照としての役割を果たす。（Ｃ）ＥＲに局在するｍＲＮＡのエンドヌクレアーゼによる崩壊、末端ＵＰＲエンドポイント、およびアポトーシスを招くＥＲストレス媒介性のＩＲＥ１α活性化モデル。（Ｄ）増加する用量のドキシサイクリン（Ｄｏｘ）下で２４時間トランスジェニック野生型ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現するＩＮＳ−１安定株の抗ホスホＩＲＥ１αおよび抗Ｍｙｃの免疫ブロット；抗ＧＡＰＤＨ免疫ブロットは、負荷対照としての役割を果たす。（Ｅ）ＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現する安定な細胞を増加する濃度のＤｏｘで２４時間処理することによって誘導した後のＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物の臭化エチジウム（ＥｔＢｒ）で染色したアガロースゲル；スプライシングされていないＸＢＰ１  ｍＲＮＡのｃＤＮＡ増幅産物を２６ヌクレオチドのイントロン内のＰｓｔＩ部位で切断し、２Ｕおよび３Ｕを得る；ＩＲＥ１α媒介性のイントロンの切断およびインビボでの再結合によりＰｓｔＩ部位を除去し、１Ｓ（スプライシングされた）増幅産物を得る；＊は、スプライシングされた／スプライシングされていないＸＢＰ１ハイブリッド増幅産物である；（スプライシングされた＋スプライシングされていない）増幅産物１Ｓ／（１Ｓ＋２Ｕ＋３Ｕ）に対するスプライシングの比率をＸＢＰ１スプライシングの％として報告する；３つの独立した生物試料を使用した。（Ｆ）指示された用量のＤｏｘで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現する安定な細胞におけるインスリン１  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ（ＧＡＰＤＨに対して正規化）。（Ｇ）増加する用量のＤｏｘで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現する安定な細胞の割合。
【図９−２】ＥＲストレス誘導性アポトーシスは、単純にＩＲＥ１αを過剰発現させることによって複製することができる。（Ａ）増加する濃度のタプシガルジン（Ｔｇ）で２４、４８、および７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（Ｂ）指示された濃度のＴｇで１２、２４、４８時間処理したＩＮＳ−１細胞の抗プロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット；抗ＧＡＰＤＨの免疫ブロットは、負荷対照としての役割を果たす。（Ｃ）ＥＲに局在するｍＲＮＡのエンドヌクレアーゼによる崩壊、末端ＵＰＲエンドポイント、およびアポトーシスを招くＥＲストレス媒介性のＩＲＥ１α活性化モデル。（Ｄ）増加する用量のドキシサイクリン（Ｄｏｘ）下で２４時間トランスジェニック野生型ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現するＩＮＳ−１安定株の抗ホスホＩＲＥ１αおよび抗Ｍｙｃの免疫ブロット；抗ＧＡＰＤＨ免疫ブロットは、負荷対照としての役割を果たす。（Ｅ）ＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現する安定な細胞を増加する濃度のＤｏｘで２４時間処理することによって誘導した後のＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物の臭化エチジウム（ＥｔＢｒ）で染色したアガロースゲル；スプライシングされていないＸＢＰ１  ｍＲＮＡのｃＤＮＡ増幅産物を２６ヌクレオチドのイントロン内のＰｓｔＩ部位で切断し、２Ｕおよび３Ｕを得る；ＩＲＥ１α媒介性のイントロンの切断およびインビボでの再結合によりＰｓｔＩ部位を除去し、１Ｓ（スプライシングされた）増幅産物を得る；＊は、スプライシングされた／スプライシングされていないＸＢＰ１ハイブリッド増幅産物である；（スプライシングされた＋スプライシングされていない）増幅産物１Ｓ／（１Ｓ＋２Ｕ＋３Ｕ）に対するスプライシングの比率をＸＢＰ１スプライシングの％として報告する；３つの独立した生物試料を使用した。（Ｆ）指示された用量のＤｏｘで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現する安定な細胞におけるインスリン１  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ（ＧＡＰＤＨに対して正規化）。（Ｇ）増加する用量のＤｏｘで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現する安定な細胞の割合。
【図９−３】ＥＲストレス誘導性アポトーシスは、単純にＩＲＥ１αを過剰発現させることによって複製することができる。（Ａ）増加する濃度のタプシガルジン（Ｔｇ）で２４、４８、および７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（Ｂ）指示された濃度のＴｇで１２、２４、４８時間処理したＩＮＳ−１細胞の抗プロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット；抗ＧＡＰＤＨの免疫ブロットは、負荷対照としての役割を果たす。（Ｃ）ＥＲに局在するｍＲＮＡのエンドヌクレアーゼによる崩壊、末端ＵＰＲエンドポイント、およびアポトーシスを招くＥＲストレス媒介性のＩＲＥ１α活性化モデル。（Ｄ）増加する用量のドキシサイクリン（Ｄｏｘ）下で２４時間トランスジェニック野生型ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現するＩＮＳ−１安定株の抗ホスホＩＲＥ１αおよび抗Ｍｙｃの免疫ブロット；抗ＧＡＰＤＨ免疫ブロットは、負荷対照としての役割を果たす。（Ｅ）ＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現する安定な細胞を増加する濃度のＤｏｘで２４時間処理することによって誘導した後のＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物の臭化エチジウム（ＥｔＢｒ）で染色したアガロースゲル；スプライシングされていないＸＢＰ１  ｍＲＮＡのｃＤＮＡ増幅産物を２６ヌクレオチドのイントロン内のＰｓｔＩ部位で切断し、２Ｕおよび３Ｕを得る；ＩＲＥ１α媒介性のイントロンの切断およびインビボでの再結合によりＰｓｔＩ部位を除去し、１Ｓ（スプライシングされた）増幅産物を得る；＊は、スプライシングされた／スプライシングされていないＸＢＰ１ハイブリッド増幅産物である；（スプライシングされた＋スプライシングされていない）増幅産物１Ｓ／（１Ｓ＋２Ｕ＋３Ｕ）に対するスプライシングの比率をＸＢＰ１スプライシングの％として報告する；３つの独立した生物試料を使用した。（Ｆ）指示された用量のＤｏｘで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現する安定な細胞におけるインスリン１  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ（ＧＡＰＤＨに対して正規化）。（Ｇ）増加する用量のＤｏｘで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）を発現する安定な細胞の割合。
【図１０−１】ＩＲＥ１α活性の化学的遺伝子操作により、アポトーシスを誘発するためのＩＲＥ１αのＲＮａｓｅドメインの必要性および充足度の両方を明らかにする。（Ａ）「隆起状」キナーゼ阻害剤１ＮＭＰＰ１によるＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）「穴開き」キナーゼ変異体およびその活性化のモデル。（Ｂ）指示されたように１μＭ  １ＮＭ−ＰＰ１、１μｇ／ｍＬ  Ｄｏｘ、および６ｎＭ  Ｔｇで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）の安定なトランスジェニック細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合。（Ｃ）指示されたように１μＭ  １ＮＭ−ＰＰ１、１μｇ／ｍＬ  Ｄｏｘ、および６ｎＭ  Ｔｇで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）細胞の割合。（Ｄ）指示されたように１ＮＭ−ＰＰ１、Ｄｏｘ、およびＴｇで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）およびＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ／Ｎ９０６Ａ）の安定なトランスジェニック変異細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合。（Ｅ）指示されたように１ＮＭ−ＰＰ１、Ｄｏｘ、およびＴｇで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）およびＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ／Ｎ９０６Ａ）細胞の染色の割合。（Ｆ）指示されたように１ＮＭ−ＰＰ１、Ｄｏｘ、およびＴｇで７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）およびＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ／Ｎ９０６Ａ）変異体の安定な細胞の抗プロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。
【図１０−２】ＩＲＥ１α活性の化学的遺伝子操作により、アポトーシスを誘発するためのＩＲＥ１αのＲＮａｓｅドメインの必要性および充足度の両方を明らかにする。（Ａ）「隆起状」キナーゼ阻害剤１ＮＭＰＰ１によるＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）「穴開き」キナーゼ変異体およびその活性化のモデル。（Ｂ）指示されたように１μＭ  １ＮＭ−ＰＰ１、１μｇ／ｍＬ  Ｄｏｘ、および６ｎＭ  Ｔｇで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）の安定なトランスジェニック細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合。（Ｃ）指示されたように１μＭ  １ＮＭ−ＰＰ１、１μｇ／ｍＬ  Ｄｏｘ、および６ｎＭ  Ｔｇで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）細胞の割合。（Ｄ）指示されたように１ＮＭ−ＰＰ１、Ｄｏｘ、およびＴｇで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）およびＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ／Ｎ９０６Ａ）の安定なトランスジェニック変異細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合。（Ｅ）指示されたように１ＮＭ−ＰＰ１、Ｄｏｘ、およびＴｇで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）およびＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ／Ｎ９０６Ａ）細胞の染色の割合。（Ｆ）指示されたように１ＮＭ−ＰＰ１、Ｄｏｘ、およびＴｇで７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）およびＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ／Ｎ９０６Ａ）変異体の安定な細胞の抗プロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。
【図１０−３】ＩＲＥ１α活性の化学的遺伝子操作により、アポトーシスを誘発するためのＩＲＥ１αのＲＮａｓｅドメインの必要性および充足度の両方を明らかにする。（Ａ）「隆起状」キナーゼ阻害剤１ＮＭＰＰ１によるＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）「穴開き」キナーゼ変異体およびその活性化のモデル。（Ｂ）指示されたように１μＭ  １ＮＭ−ＰＰ１、１μｇ／ｍＬ  Ｄｏｘ、および６ｎＭ  Ｔｇで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）の安定なトランスジェニック細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合。（Ｃ）指示されたように１μＭ  １ＮＭ−ＰＰ１、１μｇ／ｍＬ  Ｄｏｘ、および６ｎＭ  Ｔｇで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）細胞の割合。（Ｄ）指示されたように１ＮＭ−ＰＰ１、Ｄｏｘ、およびＴｇで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）およびＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ／Ｎ９０６Ａ）の安定なトランスジェニック変異細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合。（Ｅ）指示されたように１ＮＭ−ＰＰ１、Ｄｏｘ、およびＴｇで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）およびＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ／Ｎ９０６Ａ）細胞の染色の割合。（Ｆ）指示されたように１ＮＭ−ＰＰ１、Ｄｏｘ、およびＴｇで７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ）およびＩＮＳ−１  ＩＲＥ１（Ｉ６４２Ｇ／Ｎ９０６Ａ）変異体の安定な細胞の抗プロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。
【図１１−１】ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの直接的な阻害は、ＩＲＥ１依存性のＥＲに局在するｍＲＮＡの分解およびＥＲストレス誘導性アポトーシスを阻止する。（Ａ）ＳＴＦ−０８３０１０（ＳＴＦ）によるＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性の阻害モデル。（Ｂ）図示されるように指示された時間、５ｎｇ／ｍＬ  Ｄｏｘおよび５０μＭ  ＳＴＦで処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合（上のパネル）。上の同じ試料について、ＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲルを示す（下のパネル）。（Ｃ）ＤｏｘおよびＳＴＦで１２、２４、４８、および７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞におけるインスリン１  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ（ＧＡＰＤＨに対して正規化）。（Ｄ）５ｎｇ／ｍＬ  Ｄｏｘおよび５０μＭ  ＳＴＦで４８時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞の抗ホスホＩＲＥ１αおよび抗全ＩＲＥ１αの免疫ブロット。（Ｅ）同じ試料の抗ホスホおよび総ＪＮＫ免疫ブロット。（Ｆ）同じ試料の抗プロカスパーゼおよび切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｇ）指示されたようにＤｏｘおよびＳＴＦで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞の染色の割合。（Ｈ）指示されたようにツニカマイシン（Ｔｍ）および５０μＭ  ＳＴＦで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（Ｉ）指示されたように０．５μｇ／ｍＬ  Ｔｍおよび５０μＭ  ＳＴＦで１６時間処理した１０週齢Ｃ５７ＢＬ６マウスの膵島に対する蛍光免疫染色；ＤＡＰＩ（左カラム）、インスリン（左から２つ目のカラム）、およびＴＵＮＥＬ（左から３つ目のカラム）について共染色；マージした画像も示す。（Ｊ）（Ｉ）のＤＡＰＩ陽性細胞に対して正規化したＴＵＮＥＬ陽性β細胞の定量化。
【図１１−２】ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの直接的な阻害は、ＩＲＥ１依存性のＥＲに局在するｍＲＮＡの分解およびＥＲストレス誘導性アポトーシスを阻止する。（Ａ）ＳＴＦ−０８３０１０（ＳＴＦ）によるＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性の阻害モデル。（Ｂ）図示されるように指示された時間、５ｎｇ／ｍＬ  Ｄｏｘおよび５０μＭ  ＳＴＦで処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合（上のパネル）。上の同じ試料について、ＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲルを示す（下のパネル）。（Ｃ）ＤｏｘおよびＳＴＦで１２、２４、４８、および７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞におけるインスリン１  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ（ＧＡＰＤＨに対して正規化）。（Ｄ）５ｎｇ／ｍＬ  Ｄｏｘおよび５０μＭ  ＳＴＦで４８時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞の抗ホスホＩＲＥ１αおよび抗全ＩＲＥ１αの免疫ブロット。（Ｅ）同じ試料の抗ホスホおよび総ＪＮＫ免疫ブロット。（Ｆ）同じ試料の抗プロカスパーゼおよび切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｇ）指示されたようにＤｏｘおよびＳＴＦで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞の染色の割合。（Ｈ）指示されたようにツニカマイシン（Ｔｍ）および５０μＭ  ＳＴＦで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（Ｉ）指示されたように０．５μｇ／ｍＬ  Ｔｍおよび５０μＭ  ＳＴＦで１６時間処理した１０週齢Ｃ５７ＢＬ６マウスの膵島に対する蛍光免疫染色；ＤＡＰＩ（左カラム）、インスリン（左から２つ目のカラム）、およびＴＵＮＥＬ（左から３つ目のカラム）について共染色；マージした画像も示す。（Ｊ）（Ｉ）のＤＡＰＩ陽性細胞に対して正規化したＴＵＮＥＬ陽性β細胞の定量化。
【図１１−３】ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの直接的な阻害は、ＩＲＥ１依存性のＥＲに局在するｍＲＮＡの分解およびＥＲストレス誘導性アポトーシスを阻止する。（Ａ）ＳＴＦ−０８３０１０（ＳＴＦ）によるＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性の阻害モデル。（Ｂ）図示されるように指示された時間、５ｎｇ／ｍＬ  Ｄｏｘおよび５０μＭ  ＳＴＦで処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合（上のパネル）。上の同じ試料について、ＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲルを示す（下のパネル）。（Ｃ）ＤｏｘおよびＳＴＦで１２、２４、４８、および７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞におけるインスリン１  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ（ＧＡＰＤＨに対して正規化）。（Ｄ）５ｎｇ／ｍＬ  Ｄｏｘおよび５０μＭ  ＳＴＦで４８時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞の抗ホスホＩＲＥ１αおよび抗全ＩＲＥ１αの免疫ブロット。（Ｅ）同じ試料の抗ホスホおよび総ＪＮＫ免疫ブロット。（Ｆ）同じ試料の抗プロカスパーゼおよび切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｇ）指示されたようにＤｏｘおよびＳＴＦで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞の染色の割合。（Ｈ）指示されたようにツニカマイシン（Ｔｍ）および５０μＭ  ＳＴＦで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（Ｉ）指示されたように０．５μｇ／ｍＬ  Ｔｍおよび５０μＭ  ＳＴＦで１６時間処理した１０週齢Ｃ５７ＢＬ６マウスの膵島に対する蛍光免疫染色；ＤＡＰＩ（左カラム）、インスリン（左から２つ目のカラム）、およびＴＵＮＥＬ（左から３つ目のカラム）について共染色；マージした画像も示す。（Ｊ）（Ｉ）のＤＡＰＩ陽性細胞に対して正規化したＴＵＮＥＬ陽性β細胞の定量化。
【図１１−４】ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの直接的な阻害は、ＩＲＥ１依存性のＥＲに局在するｍＲＮＡの分解およびＥＲストレス誘導性アポトーシスを阻止する。（Ａ）ＳＴＦ−０８３０１０（ＳＴＦ）によるＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性の阻害モデル。（Ｂ）図示されるように指示された時間、５ｎｇ／ｍＬ  Ｄｏｘおよび５０μＭ  ＳＴＦで処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞におけるＸＢＰ１のスプライシングの割合（上のパネル）。上の同じ試料について、ＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲルを示す（下のパネル）。（Ｃ）ＤｏｘおよびＳＴＦで１２、２４、４８、および７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞におけるインスリン１  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ（ＧＡＰＤＨに対して正規化）。（Ｄ）５ｎｇ／ｍＬ  Ｄｏｘおよび５０μＭ  ＳＴＦで４８時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞の抗ホスホＩＲＥ１αおよび抗全ＩＲＥ１αの免疫ブロット。（Ｅ）同じ試料の抗ホスホおよび総ＪＮＫ免疫ブロット。（Ｆ）同じ試料の抗プロカスパーゼおよび切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｇ）指示されたようにＤｏｘおよびＳＴＦで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１  ＩＲＥ１  ＷＴ安定細胞の染色の割合。（Ｈ）指示されたようにツニカマイシン（Ｔｍ）および５０μＭ  ＳＴＦで７２時間処理した後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（Ｉ）指示されたように０．５μｇ／ｍＬ  Ｔｍおよび５０μＭ  ＳＴＦで１６時間処理した１０週齢Ｃ５７ＢＬ６マウスの膵島に対する蛍光免疫染色；ＤＡＰＩ（左カラム）、インスリン（左から２つ目のカラム）、およびＴＵＮＥＬ（左から３つ目のカラム）について共染色；マージした画像も示す。（Ｊ）（Ｉ）のＤＡＰＩ陽性細胞に対して正規化したＴＵＮＥＬ陽性β細胞の定量化。
【図１２−１】ａ）５００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５で処理した７２時間後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（ｂ）２００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５で処理した８時間後のＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色下アガロースゲル。ＸＢＰ１Ｕ、スプライシングされていないＸＢＰ１；ＸＢＰ１Ｓ、スプライシングされたＸＢＰ１；下のパネルは、（スプライシングされた＋スプライシングされていない（ＸＢＰ１Ｕ））に対するスプライシングされたＸＢＰ１（ＸＢＰ１Ｓ）の比率を示す。（ｃ）５００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５または陽性対照としての５０μＭ  ＳＴＦ−０８３０１０で処理した７２時間後のＩＮＳ−１細胞におけるＣＡＳＰ３による切断の免疫ブロット。（ｄ）５００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５で処理した８時間後のＩＮＳ−１細胞におけるインスリンｍＲＮＡのｑＰＣＲ。（ｅ）ＧＰ１６５が、どのようにＥＲストレス下でＩＲＥ１α活性化を阻害することにより末端ＵＰＲをブロックするかの概略的モデル；ＩＩ型キナーゼ阻害剤として、ＧＰ１６５は、アデノシン結合ポケットに結合してＩＲＥ１αのキナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインの両方を阻害し、モノマー形態を安定化する；ＧＰ１４６を用いても同様の結果が得られる。ＧＰ１６５はＫＩＲＡ６である。
【図１２−２】ａ）５００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５で処理した７２時間後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（ｂ）２００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５で処理した８時間後のＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色下アガロースゲル。ＸＢＰ１Ｕ、スプライシングされていないＸＢＰ１；ＸＢＰ１Ｓ、スプライシングされたＸＢＰ１；下のパネルは、（スプライシングされた＋スプライシングされていない（ＸＢＰ１Ｕ））に対するスプライシングされたＸＢＰ１（ＸＢＰ１Ｓ）の比率を示す。（ｃ）５００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５または陽性対照としての５０μＭ  ＳＴＦ−０８３０１０で処理した７２時間後のＩＮＳ−１細胞におけるＣＡＳＰ３による切断の免疫ブロット。（ｄ）５００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５で処理した８時間後のＩＮＳ−１細胞におけるインスリンｍＲＮＡのｑＰＣＲ。（ｅ）ＧＰ１６５が、どのようにＥＲストレス下でＩＲＥ１α活性化を阻害することにより末端ＵＰＲをブロックするかの概略的モデル；ＩＩ型キナーゼ阻害剤として、ＧＰ１６５は、アデノシン結合ポケットに結合してＩＲＥ１αのキナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインの両方を阻害し、モノマー形態を安定化する；ＧＰ１４６を用いても同様の結果が得られる。ＧＰ１６５はＫＩＲＡ６である。
【図１２−３】ａ）５００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５で処理した７２時間後にアネキシンＶに陽性を示すＩＮＳ−１細胞の染色の割合。（ｂ）２００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５で処理した８時間後のＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色下アガロースゲル。ＸＢＰ１Ｕ、スプライシングされていないＸＢＰ１；ＸＢＰ１Ｓ、スプライシングされたＸＢＰ１；下のパネルは、（スプライシングされた＋スプライシングされていない（ＸＢＰ１Ｕ））に対するスプライシングされたＸＢＰ１（ＸＢＰ１Ｓ）の比率を示す。（ｃ）５００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５または陽性対照としての５０μＭ  ＳＴＦ−０８３０１０で処理した７２時間後のＩＮＳ−１細胞におけるＣＡＳＰ３による切断の免疫ブロット。（ｄ）５００ｎｇ／ｍｌ  Ｔｍ＋／−ＧＰ１６５で処理した８時間後のＩＮＳ−１細胞におけるインスリンｍＲＮＡのｑＰＣＲ。（ｅ）ＧＰ１６５が、どのようにＥＲストレス下でＩＲＥ１α活性化を阻害することにより末端ＵＰＲをブロックするかの概略的モデル；ＩＩ型キナーゼ阻害剤として、ＧＰ１６５は、アデノシン結合ポケットに結合してＩＲＥ１αのキナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインの両方を阻害し、モノマー形態を安定化する；ＧＰ１４６を用いても同様の結果が得られる。ＧＰ１６５はＫＩＲＡ６である。
【図１３】クマシーブルーで染色した精製ＩＲＥ１α＊のＰＡＧＥ；Ｍはタンパク質マーカー。
【図１４−１】ＸＢＰ１  ＲＮＡミニ基質アッセイにおいてＩＲＥ１α＊に対してスクリーニングしたいくつかのＩＩ型キナーゼ阻害剤の構造；様々な濃度の阻害剤の存在下でＩＲＥ１α＊によって触媒されたＸＢＰ１ミニ基質の切断反応について、相対エンドポイントである蛍光強度を示す。
【図１４−２】ＸＢＰ１  ＲＮＡミニ基質アッセイにおいてＩＲＥ１α＊に対してスクリーニングしたいくつかのＩＩ型キナーゼ阻害剤の構造；様々な濃度の阻害剤の存在下でＩＲＥ１α＊によって触媒されたＸＢＰ１ミニ基質の切断反応について、相対エンドポイントである蛍光強度を示す。
【図１４−３】ＸＢＰ１  ＲＮＡミニ基質アッセイにおいてＩＲＥ１α＊に対してスクリーニングしたいくつかのＩＩ型キナーゼ阻害剤の構造；様々な濃度の阻害剤の存在下でＩＲＥ１α＊によって触媒されたＸＢＰ１ミニ基質の切断反応について、相対エンドポイントである蛍光強度を示す。
【図１５】ＩＩ型キナーゼ阻害剤ＧＰ１１８に結合したＳｒｃの結晶構造（ＰＤＢコード３ＥＬ８）；ＳｒｃとＧＰ１１８の間の水素結合相互作用を点線で示す；Ｔｈｒ３３８を除くヒンジ領域の残基（ゲートキーパー残基）について主鎖原子の実を示す；図１ａに示すＩＲＥ１αに結合したＧＰ１１８の推奨モデルは、Ｓｒｃ−ＧＰ１１８複合体構造に基づいている。
【図１６】インビトロで転写された３５２ヌクレオチド（α３２Ｐで内部標識したＸＢＰ１  ＲＮＡ）のＩＲＥ１α＊によって媒介される切断のＧＰ１４６およびＡＰＹ２９による調節。（ａ）様々な濃度のＧＰ１４６の存在下におけるＩＲＥ１α＊によるα３２Ｐ標識したＸＢＰ１  ＲＮＡの５分切断反応の尿素ＰＡＧＥ分析。（ｂ）様々な濃度のＡＰＹ２９の存在下におけるｄＰ−ＩＲＥ１α＊によるα３２Ｐした標識ＸＢＰ１  ＲＮＡの５分切断反応の尿素ＰＡＧＥ分析。
【図１７】ＩＲＥ１α＊  ＲＮａｓｅの阻害に対するＧＰ１４６のＥＣ５０は、一定濃度のＡＰＹ２９の存在下で増加する；丸で印をつけた線は、競合物質（ＡＰＹ２９）の非存在下におけるＧＰ１４６によるＩＲＥ１α＊  ＲＮａｓｅの阻害を示す；四角で印をつけた線は、ＡＰＹ２９（２μＭ）の存在下におけるＧＰ１４６によるＩＲＥ１α＊  ＲＮａｓｅの阻害を示す。
【図１８】スニチニブは、ＩＲＥ１α＊の自己リン酸化を阻害するが、ＲＮａｓｅドメインを活性化する。（ａ）スニチニブの連続２倍希釈下（８０μＭから０．００９８μＭ）におけるＩＲＥ１α＊の自己リン酸化レベルのオートラジオグラム。（ｂ）スニチニブを用いたまたは用いない、ＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊によるＸＢＰ１ミニ基質切断の尿素ＰＡＧＥ。（ｃ）一定のＧＰ１４６（１０μＭ）および様々なスニチニブ濃度を用いた、ＩＲＥ１α＊によるＸＢＰ１ミニ基質切断の尿素ＰＡＧＥ。
【図１９】ヒトＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションを用いたＡＰＹ２９の相互作用の分子モデル。ＩＲＥ１αは、ＤＦＧ−ｉｎ活性コンフォメーションをとっている；ＡＰＹ２９のピラゾロピリミジン環は、アデニンポケットをし、３−アミノピラゾールは、キナーゼヒンジといくつかの水素結合を形成する；ＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションに結合したＡＰＹ２９について好ましいポーズは決定できなかった。
【図２０】ＧＰ１４６は、Ｔ−ＲＥｘ  ２９３細胞中のＷＴ  ＩＲＥ１αによって自己リン酸化およびＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを阻害する。（ａ）抗全ＩＲＥ１αおよび抗ホスホＩＲＥ１αの免疫ブロット、ならびにドキシサイクリン（Ｄｏｘ）対照下でＷＴ  ＩＲＥ１αを発現するＴ−ＲＥｘ  ２９３細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲル；指示された濃度のＧＰ１４６で細胞を１時間前処理し、次いでＤｏｘ（１μＭ）で８時間誘導した。（ｂ）プロットは、様々な［ＧＰ１４６］下における正規化されたリン酸化レベルを示す（平均±ＳＤ、ｎ＞＝３）。（ｃ）ＧＰ１４６（ＮＭｅ）ＷＴ  ＩＲＥ１αを発現するＴ−ＲＥｘ  ２９３細胞においてＸＢＰ１のスプライシングを阻害しない。ＷＴ  ＩＲＥ１αを発現するＴ−ＲＥｘ  ２９３細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲルを示す；指示された濃度のＧＰ１４６（ＮＭｅ）で細胞を１時間前処理し、次いでＤｏｘ（１μＭ）で８時間誘導した。
【図２１】ヒトＩＲＥ１αＩ６４２ＡのＡＴＰ結合部位に結合したＧＰ１４６の分子モデル；ＩＲＥ１αはＤＦＧ−ｏｕｔ不活性コンフォメーションをとっている；ＧＰ１４６のイミダゾピラジン環はアデニンポケットを占有し、３−トリフルオロメチルウレアはＤＦＧ−ｏｕｔポケットを占有する；ＧＰ１４６のナフチル環は、１８０度回転し、ゲートキーパー残基の隣の拡張された疎水性ポケットに到達することができる；ＩＲＥ１αＩ６４２ＡのＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションに結合したＧＰ１４６について好ましいポーズは決定できなかった。
【図２２】ＩＲＥ１α同質遺伝子的Ｔ−ＲＥｘ  ２９３安定細胞株の条件的過剰産生による強制的なＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシング；ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）対照下でＷＴ−ＩＲＥ１αまたは「穴開き」ＩＲＥ１α（１６４２Ａ）変異体のいずれかを安定に発現するＴ−ＲＥｘ  ２９３細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のＥｔＢｒ染色したアガロースゲルの定量化；Ｄｏｘ（１μＭ）で細胞を８時間誘導し、次いで１ＮＭ−ＰＰ１（５μＭ）またはＤＭＳＯの供給によりさらに４時間誘導した；エンドポイントにおける（ＸＢＰ１Ｓ＋スプライシングされていない増幅産物（ＸＢＰ１Ｕ））に対するスプライシングされたＸＢＰ１（ＸＢＰ１Ｓ）の比率をヒストグラムにプロットする（平均±ＳＤ、ｎ＞＝３）。
【図２３】放置されたＥＲストレスおよび末端ＵＰＲシグナル伝達に起因する膵島β細胞の死滅は、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病の発症の中核を成す。本明細書に記載される化合物、薬学的組成物、および方法は、ＵＰＲを調節し、ＥＲストレスおよびＵＰＲに関連する疾患を治療することができる。
【図２４】（Ａ）架橋剤ＤＳＳで処理した後のＩＲＥ１α＊の免疫ブロット；増加する濃度のＩＲＥ１α＊を、ＤＭＳＯ、ＡＰＹ２９、またはＫＩＲＡ３とともにインキュベートした。（Ｂ）型キナーゼ阻害剤がどのようにＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊の活性およびオリゴマー状態に影響を及ぼし得るかのモデル。
【図２５】ＫＩＲＡを作製するための合成戦略。
【図２６】合成および試験される代表的なＫＩＲＡ。
【図２７】（Ａ）ＩＲＥ１の活性化ループに位置するシステイン残基を標的とする不可逆的ＫＩＲＡの一般構造；代表的な求電子剤を示す。（Ｂ）ＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位の拡大図。
【図２８−１】無数のＥＲストレッサーに対する細胞の曝露の程度および期間を増加させることは、ＩＲＥ１α（自己リン酸化、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシング、ＥＲに局在化するＩｎｓ１  ｍＲＮＡの崩壊）の活性化を増加させ、最終的にアポトーシスに達するストレスによる機能不全状態へのスイッチ様移行をもたらす（詳細についてはテキストを参照）；（Ａ）増加する濃度のＴｇで継時的に処理したＩＮＳ−１細胞のアネキシンＶ染色の割合。（Ｂ）Ｔｇで処理したＩＮＳ−１細胞のプロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｃ）グリコシル化阻害剤ツニカマイシン（Ｔｍ）等の他のＥＲストレス誘導因子ついて定義することができるように、薬剤への曝露時間は、アポトーシスに移行する細胞の割合と直接関連している。（Ｄ）ＥＲストレスの増加は、内在性ＩＲＥ１αのリン酸化の漸進的増加を引き起こす。（Ｅ）ＥＲストレスの増加は、内在性ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングの漸進的増加を引き起こす。（Ｆ）ＥＲストレスの増加は、プロインスリンをコードするＥＲに局在するｍＲＮＡ  Ｉｎｓ１のエンドヌクレアーゼによる崩壊による漸進的枯渇を引き起こす。（Ｇ）ＥＲストレスの増加は、アポトーシス促進性転写因子ＣＨＯＰの漸進的誘導を引き起こす。（Ｈ）ＥＲストレス誘導因子への曝露の増加およびＥＲストレスの重症度の増加に起因する影響の図。
【図２８−２】無数のＥＲストレッサーに対する細胞の曝露の程度および期間を増加させることは、ＩＲＥ１α（自己リン酸化、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシング、ＥＲに局在化するＩｎｓ１  ｍＲＮＡの崩壊）の活性化を増加させ、最終的にアポトーシスに達するストレスによる機能不全状態へのスイッチ様移行をもたらす（詳細についてはテキストを参照）；（Ａ）増加する濃度のＴｇで継時的に処理したＩＮＳ−１細胞のアネキシンＶ染色の割合。（Ｂ）Ｔｇで処理したＩＮＳ−１細胞のプロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｃ）グリコシル化阻害剤ツニカマイシン（Ｔｍ）等の他のＥＲストレス誘導因子ついて定義することができるように、薬剤への曝露時間は、アポトーシスに移行する細胞の割合と直接関連している。（Ｄ）ＥＲストレスの増加は、内在性ＩＲＥ１αのリン酸化の漸進的増加を引き起こす。（Ｅ）ＥＲストレスの増加は、内在性ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングの漸進的増加を引き起こす。（Ｆ）ＥＲストレスの増加は、プロインスリンをコードするＥＲに局在するｍＲＮＡ  Ｉｎｓ１のエンドヌクレアーゼによる崩壊による漸進的枯渇を引き起こす。（Ｇ）ＥＲストレスの増加は、アポトーシス促進性転写因子ＣＨＯＰの漸進的誘導を引き起こす。（Ｈ）ＥＲストレス誘導因子への曝露の増加およびＥＲストレスの重症度の増加に起因する影響の図。
【図２８−３】無数のＥＲストレッサーに対する細胞の曝露の程度および期間を増加させることは、ＩＲＥ１α（自己リン酸化、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシング、ＥＲに局在化するＩｎｓ１  ｍＲＮＡの崩壊）の活性化を増加させ、最終的にアポトーシスに達するストレスによる機能不全状態へのスイッチ様移行をもたらす（詳細についてはテキストを参照）；（Ａ）増加する濃度のＴｇで継時的に処理したＩＮＳ−１細胞のアネキシンＶ染色の割合。（Ｂ）Ｔｇで処理したＩＮＳ−１細胞のプロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｃ）グリコシル化阻害剤ツニカマイシン（Ｔｍ）等の他のＥＲストレス誘導因子ついて定義することができるように、薬剤への曝露時間は、アポトーシスに移行する細胞の割合と直接関連している。（Ｄ）ＥＲストレスの増加は、内在性ＩＲＥ１αのリン酸化の漸進的増加を引き起こす。（Ｅ）ＥＲストレスの増加は、内在性ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングの漸進的増加を引き起こす。（Ｆ）ＥＲストレスの増加は、プロインスリンをコードするＥＲに局在するｍＲＮＡ  Ｉｎｓ１のエンドヌクレアーゼによる崩壊による漸進的枯渇を引き起こす。（Ｇ）ＥＲストレスの増加は、アポトーシス促進性転写因子ＣＨＯＰの漸進的誘導を引き起こす。（Ｈ）ＥＲストレス誘導因子への曝露の増加およびＥＲストレスの重症度の増加に起因する影響の図。
【図２９−１】安定なＩＮＳ−１細胞におけるＩＲＥ１αの条件的過剰産生（Ｄｏｘを使用）は、ＩＲＥ１αの自己リン酸化、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシング、Ｉｎｓ１  ｍＲＮＡのＥＲ局在性の崩壊、ｍｉＲ−１７の崩壊、ＣＨＯＰの誘導、ミトコンドリアアポトーシス経路の上流（カスパーゼ２）および下流（カスパーゼ３）のカスパーゼの蓄積および切断、ならびに炎症性（カスパーゼ１）カスパーゼ媒介性ピロトーシス、そして細胞のプログラム細胞死へのスイッチ様移行を強制することによって末端ＵＰＲを模倣する。（Ａ）増加する濃度のＤｏｘで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞の抗ホスホ−ＩＲＥ１αおよび抗Ｍｙｃ−ＩＲＥ１αの免疫ブロット。（Ｂ）［Ｄｏｘ］を増加させながら２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞からのＰｓｔＩで切断したＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のアガロースゲル。ＸＢＰ１のスプライシングの％は、（スプライシングされた＋スプライシングされていない）増幅産物１Ｓ／（１Ｓ＋２Ｕ＋３Ｕ）に対するスプライシングの比率を現す。（Ｃ）重度のＥＲストレスが、どのようにＩＲＥ１αにホメオスタシス性出力からアポトーシス性出力に切り替えさせるかのモデル。（Ｄ）［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞におけるｍｉＲ−１７のＱ−ＰＣＲ。（Ｅ）［Ｄｏｘ］を増加させながら２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞におけるインスリン１（Ｉｎｓ１）およびＣＨＯＰ  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ；［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞の抗プロインスリンの免疫ブロット。（Ｆ）［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞からのプロカスパーゼ１および切断されたカスパーゼ１、プロカスパーゼ２および切断されたカスパーゼ２の免疫ブロット、ならびに［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞からのプロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｇ）［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞のアネキシンＶ染色の割合；３つの独立した生物試料を、ＸＢＰ１のスプライシング、Ｑ−ＰＣＲ、およびアネキシンＶ染色実験に使用した；各データポイントは、平均値±ＳＤ；Ｐ値：＊＜０．０５および＊＊＜０．０１、ｎｓ＝有意差なしを表す。
【図２９−２】安定なＩＮＳ−１細胞におけるＩＲＥ１αの条件的過剰産生（Ｄｏｘを使用）は、ＩＲＥ１αの自己リン酸化、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシング、Ｉｎｓ１  ｍＲＮＡのＥＲ局在性の崩壊、ｍｉＲ−１７の崩壊、ＣＨＯＰの誘導、ミトコンドリアアポトーシス経路の上流（カスパーゼ２）および下流（カスパーゼ３）のカスパーゼの蓄積および切断、ならびに炎症性（カスパーゼ１）カスパーゼ媒介性ピロトーシス、そして細胞のプログラム細胞死へのスイッチ様移行を強制することによって末端ＵＰＲを模倣する。（Ａ）増加する濃度のＤｏｘで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞の抗ホスホ−ＩＲＥ１αおよび抗Ｍｙｃ−ＩＲＥ１αの免疫ブロット。（Ｂ）［Ｄｏｘ］を増加させながら２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞からのＰｓｔＩで切断したＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のアガロースゲル。ＸＢＰ１のスプライシングの％は、（スプライシングされた＋スプライシングされていない）増幅産物１Ｓ／（１Ｓ＋２Ｕ＋３Ｕ）に対するスプライシングの比率を現す。（Ｃ）重度のＥＲストレスが、どのようにＩＲＥ１αにホメオスタシス性出力からアポトーシス性出力に切り替えさせるかのモデル。（Ｄ）［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞におけるｍｉＲ−１７のＱ−ＰＣＲ。（Ｅ）［Ｄｏｘ］を増加させながら２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞におけるインスリン１（Ｉｎｓ１）およびＣＨＯＰ  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ；［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞の抗プロインスリンの免疫ブロット。（Ｆ）［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞からのプロカスパーゼ１および切断されたカスパーゼ１、プロカスパーゼ２および切断されたカスパーゼ２の免疫ブロット、ならびに［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞からのプロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｇ）［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞のアネキシンＶ染色の割合；３つの独立した生物試料を、ＸＢＰ１のスプライシング、Ｑ−ＰＣＲ、およびアネキシンＶ染色実験に使用した；各データポイントは、平均値±ＳＤ；Ｐ値：＊＜０．０５および＊＊＜０．０１、ｎｓ＝有意差なしを表す。
【図２９−３】安定なＩＮＳ−１細胞におけるＩＲＥ１αの条件的過剰産生（Ｄｏｘを使用）は、ＩＲＥ１αの自己リン酸化、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシング、Ｉｎｓ１  ｍＲＮＡのＥＲ局在性の崩壊、ｍｉＲ−１７の崩壊、ＣＨＯＰの誘導、ミトコンドリアアポトーシス経路の上流（カスパーゼ２）および下流（カスパーゼ３）のカスパーゼの蓄積および切断、ならびに炎症性（カスパーゼ１）カスパーゼ媒介性ピロトーシス、そして細胞のプログラム細胞死へのスイッチ様移行を強制することによって末端ＵＰＲを模倣する。（Ａ）増加する濃度のＤｏｘで２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞の抗ホスホ−ＩＲＥ１αおよび抗Ｍｙｃ−ＩＲＥ１αの免疫ブロット。（Ｂ）［Ｄｏｘ］を増加させながら２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞からのＰｓｔＩで切断したＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のアガロースゲル。ＸＢＰ１のスプライシングの％は、（スプライシングされた＋スプライシングされていない）増幅産物１Ｓ／（１Ｓ＋２Ｕ＋３Ｕ）に対するスプライシングの比率を現す。（Ｃ）重度のＥＲストレスが、どのようにＩＲＥ１αにホメオスタシス性出力からアポトーシス性出力に切り替えさせるかのモデル。（Ｄ）［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞におけるｍｉＲ−１７のＱ−ＰＣＲ。（Ｅ）［Ｄｏｘ］を増加させながら２４時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞におけるインスリン１（Ｉｎｓ１）およびＣＨＯＰ  ｍＲＮＡのＱ−ＰＣＲ；［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞の抗プロインスリンの免疫ブロット。（Ｆ）［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞からのプロカスパーゼ１および切断されたカスパーゼ１、プロカスパーゼ２および切断されたカスパーゼ２の免疫ブロット、ならびに［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞からのプロカスパーゼ３および切断されたカスパーゼ３の免疫ブロット。（Ｇ）［Ｄｏｘ］を増加させながら７２時間処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（ＷＴ）細胞のアネキシンＶ染色の割合；３つの独立した生物試料を、ＸＢＰ１のスプライシング、Ｑ−ＰＣＲ、およびアネキシンＶ染色実験に使用した；各データポイントは、平均値±ＳＤ；Ｐ値：＊＜０．０５および＊＊＜０．０１、ｎｓ＝有意差なしを表す。
【図３０−１】ＫＩＲＡ６は、ＩＲＥ１αの自己リン酸化を阻害し、オリゴマーを破壊し、ＲＮａｓｅ活性を低下させ、アポトーシスへの移行から細胞を保護する。（Ａ）ＫＩＲＡ６の構造。（Ｂ）様々な［ＫＩＲＡ６］下のＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性；５０％有効濃度（ＥＣ５０）値は、正規化した蛍光強度を適合させることにより決定した（平均±ｓ．ｄ、ｎ＝３）。（Ｃ）ＫＩＲＡ６によるインビトロでのＩＲＥ１α＊キナーゼ活性の阻害；ＩＣ５０値は、リン酸化の割合を適合させることにより決定した。（Ｄ）インビボでは、ＫＩＲＡ６は、内在性ＩＲＥ１αの自己リン酸化を用量依存性の様式で阻害する；対照的に、アルデヒドベースのＩＲＥ１α  ＲＮａｓｅ−阻害剤ＳＴＦは、ＩＲＥ１αの自己リン酸化を阻害せず、また対照化合物ＫＩＲＡ６（ｉｎ）も同様に阻害しない。（Ｅ）ＤＭＳＯまたはＫＩＲＡ６（２００μＭ）とともにインキュベートし、続いて架橋剤ＤＳＳ（２５０μＭ）で処理したＩＲＥ１α＊（ＷＴ）の免疫ブロット；右側は定量化したもの。（Ｆ）指示された濃度のＫＩＲＡ６で１時間、続いて０．５μｇ／ｍｌ  Ｔｍで８時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のアガロースゲル。（Ｇ）ＫＩＲＡ６は、ＥＲに局在するＩｎｓ１  ｍＲＮＡのエンドヌクレアーゼによる崩壊をＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを阻害するために必要な薬物の用量よりも低い用量で阻害する。（Ｈ）ＫＩＲＡは、ＩＮＳ１−１細胞のアポトーシスへの移行を抑制する。（Ｉ）０．５μｇ／ｍＬ  Ｔｍ＋／−０．５μＭ  ＫＩＲＡ６で１６時間処理した１０週齢Ｃ５７ＢＬ／６マウスからの膵島の蛍光免疫。ＤＡＰＩ、インスリン、およびＴＵＮＥＬの共染色；ＤＡＰＩ陽性細胞に対して正規化したＴＵＮＥＬ陽性β細胞（白い矢印）の定量化を示す。（Ｊ）ＫＩＲＡ６の細胞保護効果は、それらがＩｒｅ１α−／−マウス胎仔線維芽細胞（ＭＥＦ）中に存在しないためにＩＲＥ１αに依存するが、ＷＴおよびＸｂｐ１−／−ＭＥＦにおいても依然として確認することができる。（Ｋ）ＫＩＲＡ６がＩＲＥ１αを阻害することによってどのように末端ＵＰＲを阻止するかのモデル。
【図３０−２】ＫＩＲＡ６は、ＩＲＥ１αの自己リン酸化を阻害し、オリゴマーを破壊し、ＲＮａｓｅ活性を低下させ、アポトーシスへの移行から細胞を保護する。（Ａ）ＫＩＲＡ６の構造。（Ｂ）様々な［ＫＩＲＡ６］下のＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性；５０％有効濃度（ＥＣ５０）値は、正規化した蛍光強度を適合させることにより決定した（平均±ｓ．ｄ、ｎ＝３）。（Ｃ）ＫＩＲＡ６によるインビトロでのＩＲＥ１α＊キナーゼ活性の阻害；ＩＣ５０値は、リン酸化の割合を適合させることにより決定した。（Ｄ）インビボでは、ＫＩＲＡ６は、内在性ＩＲＥ１αの自己リン酸化を用量依存性の様式で阻害する；対照的に、アルデヒドベースのＩＲＥ１α  ＲＮａｓｅ−阻害剤ＳＴＦは、ＩＲＥ１αの自己リン酸化を阻害せず、また対照化合物ＫＩＲＡ６（ｉｎ）も同様に阻害しない。（Ｅ）ＤＭＳＯまたはＫＩＲＡ６（２００μＭ）とともにインキュベートし、続いて架橋剤ＤＳＳ（２５０μＭ）で処理したＩＲＥ１α＊（ＷＴ）の免疫ブロット；右側は定量化したもの。（Ｆ）指示された濃度のＫＩＲＡ６で１時間、続いて０．５μｇ／ｍｌ  Ｔｍで８時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のアガロースゲル。（Ｇ）ＫＩＲＡ６は、ＥＲに局在するＩｎｓ１  ｍＲＮＡのエンドヌクレアーゼによる崩壊をＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを阻害するために必要な薬物の用量よりも低い用量で阻害する。（Ｈ）ＫＩＲＡは、ＩＮＳ１−１細胞のアポトーシスへの移行を抑制する。（Ｉ）０．５μｇ／ｍＬ  Ｔｍ＋／−０．５μＭ  ＫＩＲＡ６で１６時間処理した１０週齢Ｃ５７ＢＬ／６マウスからの膵島の蛍光免疫。ＤＡＰＩ、インスリン、およびＴＵＮＥＬの共染色；ＤＡＰＩ陽性細胞に対して正規化したＴＵＮＥＬ陽性β細胞（白い矢印）の定量化を示す。（Ｊ）ＫＩＲＡ６の細胞保護効果は、それらがＩｒｅ１α−／−マウス胎仔線維芽細胞（ＭＥＦ）中に存在しないためにＩＲＥ１αに依存するが、ＷＴおよびＸｂｐ１−／−ＭＥＦにおいても依然として確認することができる。（Ｋ）ＫＩＲＡ６がＩＲＥ１αを阻害することによってどのように末端ＵＰＲを阻止するかのモデル。
【図３０−３】ＫＩＲＡ６は、ＩＲＥ１αの自己リン酸化を阻害し、オリゴマーを破壊し、ＲＮａｓｅ活性を低下させ、アポトーシスへの移行から細胞を保護する。（Ａ）ＫＩＲＡ６の構造。（Ｂ）様々な［ＫＩＲＡ６］下のＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性；５０％有効濃度（ＥＣ５０）値は、正規化した蛍光強度を適合させることにより決定した（平均±ｓ．ｄ、ｎ＝３）。（Ｃ）ＫＩＲＡ６によるインビトロでのＩＲＥ１α＊キナーゼ活性の阻害；ＩＣ５０値は、リン酸化の割合を適合させることにより決定した。（Ｄ）インビボでは、ＫＩＲＡ６は、内在性ＩＲＥ１αの自己リン酸化を用量依存性の様式で阻害する；対照的に、アルデヒドベースのＩＲＥ１α  ＲＮａｓｅ−阻害剤ＳＴＦは、ＩＲＥ１αの自己リン酸化を阻害せず、また対照化合物ＫＩＲＡ６（ｉｎ）も同様に阻害しない。（Ｅ）ＤＭＳＯまたはＫＩＲＡ６（２００μＭ）とともにインキュベートし、続いて架橋剤ＤＳＳ（２５０μＭ）で処理したＩＲＥ１α＊（ＷＴ）の免疫ブロット；右側は定量化したもの。（Ｆ）指示された濃度のＫＩＲＡ６で１時間、続いて０．５μｇ／ｍｌ  Ｔｍで８時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のアガロースゲル。（Ｇ）ＫＩＲＡ６は、ＥＲに局在するＩｎｓ１  ｍＲＮＡのエンドヌクレアーゼによる崩壊をＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを阻害するために必要な薬物の用量よりも低い用量で阻害する。（Ｈ）ＫＩＲＡは、ＩＮＳ１−１細胞のアポトーシスへの移行を抑制する。（Ｉ）０．５μｇ／ｍＬ  Ｔｍ＋／−０．５μＭ  ＫＩＲＡ６で１６時間処理した１０週齢Ｃ５７ＢＬ／６マウスからの膵島の蛍光免疫。ＤＡＰＩ、インスリン、およびＴＵＮＥＬの共染色；ＤＡＰＩ陽性細胞に対して正規化したＴＵＮＥＬ陽性β細胞（白い矢印）の定量化を示す。（Ｊ）ＫＩＲＡ６の細胞保護効果は、それらがＩｒｅ１α−／−マウス胎仔線維芽細胞（ＭＥＦ）中に存在しないためにＩＲＥ１αに依存するが、ＷＴおよびＸｂｐ１−／−ＭＥＦにおいても依然として確認することができる。（Ｋ）ＫＩＲＡ６がＩＲＥ１αを阻害することによってどのように末端ＵＰＲを阻止するかのモデル。
【図３０−４】ＫＩＲＡ６は、ＩＲＥ１αの自己リン酸化を阻害し、オリゴマーを破壊し、ＲＮａｓｅ活性を低下させ、アポトーシスへの移行から細胞を保護する。（Ａ）ＫＩＲＡ６の構造。（Ｂ）様々な［ＫＩＲＡ６］下のＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性；５０％有効濃度（ＥＣ５０）値は、正規化した蛍光強度を適合させることにより決定した（平均±ｓ．ｄ、ｎ＝３）。（Ｃ）ＫＩＲＡ６によるインビトロでのＩＲＥ１α＊キナーゼ活性の阻害；ＩＣ５０値は、リン酸化の割合を適合させることにより決定した。（Ｄ）インビボでは、ＫＩＲＡ６は、内在性ＩＲＥ１αの自己リン酸化を用量依存性の様式で阻害する；対照的に、アルデヒドベースのＩＲＥ１α  ＲＮａｓｅ−阻害剤ＳＴＦは、ＩＲＥ１αの自己リン酸化を阻害せず、また対照化合物ＫＩＲＡ６（ｉｎ）も同様に阻害しない。（Ｅ）ＤＭＳＯまたはＫＩＲＡ６（２００μＭ）とともにインキュベートし、続いて架橋剤ＤＳＳ（２５０μＭ）で処理したＩＲＥ１α＊（ＷＴ）の免疫ブロット；右側は定量化したもの。（Ｆ）指示された濃度のＫＩＲＡ６で１時間、続いて０．５μｇ／ｍｌ  Ｔｍで８時間前処理したＩＮＳ−１細胞からのＸＢＰ１  ｃＤＮＡ増幅産物のアガロースゲル。（Ｇ）ＫＩＲＡ６は、ＥＲに局在するＩｎｓ１  ｍＲＮＡのエンドヌクレアーゼによる崩壊をＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを阻害するために必要な薬物の用量よりも低い用量で阻害する。（Ｈ）ＫＩＲＡは、ＩＮＳ１−１細胞のアポトーシスへの移行を抑制する。（Ｉ）０．５μｇ／ｍＬ  Ｔｍ＋／−０．５μＭ  ＫＩＲＡ６で１６時間処理した１０週齢Ｃ５７ＢＬ／６マウスからの膵島の蛍光免疫。ＤＡＰＩ、インスリン、およびＴＵＮＥＬの共染色；ＤＡＰＩ陽性細胞に対して正規化したＴＵＮＥＬ陽性β細胞（白い矢印）の定量化を示す。（Ｊ）ＫＩＲＡ６の細胞保護効果は、それらがＩｒｅ１α−／−マウス胎仔線維芽細胞（ＭＥＦ）中に存在しないためにＩＲＥ１αに依存するが、ＷＴおよびＸｂｐ１−／−ＭＥＦにおいても依然として確認することができる。（Ｋ）ＫＩＲＡ６がＩＲＥ１αを阻害することによってどのように末端ＵＰＲを阻止するかのモデル。
【図３１−１】ＫＩＲＡ６は、ＩＲＥ１α＊  ＲＮＡｓｅがダイサーによって切断される部位とは異なるが、ＸＢＰ１切断部位と関連する部位にあるプレｍｉＲ−１７をエンドヌクレアーゼにより切断するのを阻害する（Ａ）、ＫＩＲＡ６は、インビトロで（Ｂ）切断部位（Ｃ）プレｍｉＲ−１７（Ｄ）のＩＲＥ１α＊によるプレｍｉＲ−１７の切断を阻止し、インビボで成熟なｍｉＲ−１７レベルをレスキューし（Ｅ）、カスパーゼ２の蓄積および切断を抑制し（Ｆ）、ＥＲストレス誘導因子に曝露されたＣ５７ＢＬ／６膵島におけるＴＸＮＩＰタンパク質の蓄積を阻止する（Ｇ）。配列レジェンド（図３１Ｂ）：配列番号１１〜１５（上から下への順序）；（図１７Ｃ）：配列番号１６。
【図３１−２】ＫＩＲＡ６は、ＩＲＥ１α＊  ＲＮＡｓｅがダイサーによって切断される部位とは異なるが、ＸＢＰ１切断部位と関連する部位にあるプレｍｉＲ−１７をエンドヌクレアーゼにより切断するのを阻害する（Ａ）、ＫＩＲＡ６は、インビトロで（Ｂ）切断部位（Ｃ）プレｍｉＲ−１７（Ｄ）のＩＲＥ１α＊によるプレｍｉＲ−１７の切断を阻止し、インビボで成熟なｍｉＲ−１７レベルをレスキューし（Ｅ）、カスパーゼ２の蓄積および切断を抑制し（Ｆ）、ＥＲストレス誘導因子に曝露されたＣ５７ＢＬ／６膵島におけるＴＸＮＩＰタンパク質の蓄積を阻止する（Ｇ）。配列レジェンド（図３１Ｂ）：配列番号１１〜１５（上から下への順序）；（図１７Ｃ）：配列番号１６。
【図３１−３】ＫＩＲＡ６は、ＩＲＥ１α＊  ＲＮＡｓｅがダイサーによって切断される部位とは異なるが、ＸＢＰ１切断部位と関連する部位にあるプレｍｉＲ−１７をエンドヌクレアーゼにより切断するのを阻害する（Ａ）、ＫＩＲＡ６は、インビトロで（Ｂ）切断部位（Ｃ）プレｍｉＲ−１７（Ｄ）のＩＲＥ１α＊によるプレｍｉＲ−１７の切断を阻止し、インビボで成熟なｍｉＲ−１７レベルをレスキューし（Ｅ）、カスパーゼ２の蓄積および切断を抑制し（Ｆ）、ＥＲストレス誘導因子に曝露されたＣ５７ＢＬ／６膵島におけるＴＸＮＩＰタンパク質の蓄積を阻止する（Ｇ）。配列レジェンド（図３１Ｂ）：配列番号１１〜１５（上から下への順序）；（図１７Ｃ）：配列番号１６。
【図３２−１】隆起状Ｉ型キナーゼ阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１は、穴開きＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）変異体のオリゴマー状態を増加させ、ＥＲストレス下でＲＮＡｓｅ活性および細胞死を促進する。（Ａ）架橋剤スベリン酸ジサクシンイミジル（ＤＳＳ）（２５０Μｍ）で処理する前に、１ＮＭ−ＰＰ１とともにインキュベートした、増加する濃度の組換えＩＲＥ１α＊（ＷＴ）、ＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）、またはＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）の免疫ブロットからのオリゴマー対モノマーＩＲＥ１α＊の比率の定量化、ならびに尿素ＰＡＧＥからの１ＮＭ−ＰＰ１（１０μＭ）とともにインキュベートした組換えＩＲＥ１α＊（ＷＴ）、ＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）、およびＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）によるα３２Ｐ標識したＸＢＰ１  ＲＮＡまたはインスリン２（Ｉｎｓ２）ＲＮＡの切断反応の経時変化の定量化。（Ｂ）１μｇ／ｍＬ  Ｄｏｘで処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）細胞＋／−１μＭ  １ＮＭ−ＰＰ１および＋／−６ｎＭ  Ｔｇにおける、ＸＢＰ１のスプライシング（２４時間）の割合、Ｑ−ＰＣＲによる相対的インスリン１（Ｉｎｓ１）ｍＲＮＡレベル（２４時間）、およびアネキシンＶ染色の割合（７２時間）；３つの独立した生物試料を各実験に使用し、平均値±ＳＤとしてプロットした；Ｐ値：＊＊＜０．０１。（Ｃ）ＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）が、どのように１ＮＭＰＰ１によって部分的に活性化され、ＥＲストレスの非存在下においてＸＢＰ１  ｍＲＮＡをスプライシングするかのモデル；修復不能なＥＲストレスによってオリゴマー状態にされる場合、１ＮＭ−ＰＰ１結合ＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）がＥＲに局在するｍＲＮＡの崩壊および末端ＵＰＲを誘導する。
【図３２−２】隆起状Ｉ型キナーゼ阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１は、穴開きＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）変異体のオリゴマー状態を増加させ、ＥＲストレス下でＲＮＡｓｅ活性および細胞死を促進する。（Ａ）架橋剤スベリン酸ジサクシンイミジル（ＤＳＳ）（２５０Μｍ）で処理する前に、１ＮＭ−ＰＰ１とともにインキュベートした、増加する濃度の組換えＩＲＥ１α＊（ＷＴ）、ＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）、またはＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）の免疫ブロットからのオリゴマー対モノマーＩＲＥ１α＊の比率の定量化、ならびに尿素ＰＡＧＥからの１ＮＭ−ＰＰ１（１０μＭ）とともにインキュベートした組換えＩＲＥ１α＊（ＷＴ）、ＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）、およびＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）によるα３２Ｐ標識したＸＢＰ１  ＲＮＡまたはインスリン２（Ｉｎｓ２）ＲＮＡの切断反応の経時変化の定量化。（Ｂ）１μｇ／ｍＬ  Ｄｏｘで処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）細胞＋／−１μＭ  １ＮＭ−ＰＰ１および＋／−６ｎＭ  Ｔｇにおける、ＸＢＰ１のスプライシング（２４時間）の割合、Ｑ−ＰＣＲによる相対的インスリン１（Ｉｎｓ１）ｍＲＮＡレベル（２４時間）、およびアネキシンＶ染色の割合（７２時間）；３つの独立した生物試料を各実験に使用し、平均値±ＳＤとしてプロットした；Ｐ値：＊＊＜０．０１。（Ｃ）ＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）が、どのように１ＮＭＰＰ１によって部分的に活性化され、ＥＲストレスの非存在下においてＸＢＰ１  ｍＲＮＡをスプライシングするかのモデル；修復不能なＥＲストレスによってオリゴマー状態にされる場合、１ＮＭ−ＰＰ１結合ＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）がＥＲに局在するｍＲＮＡの崩壊および末端ＵＰＲを誘導する。
【図３２−３】隆起状Ｉ型キナーゼ阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１は、穴開きＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）変異体のオリゴマー状態を増加させ、ＥＲストレス下でＲＮＡｓｅ活性および細胞死を促進する。（Ａ）架橋剤スベリン酸ジサクシンイミジル（ＤＳＳ）（２５０Μｍ）で処理する前に、１ＮＭ−ＰＰ１とともにインキュベートした、増加する濃度の組換えＩＲＥ１α＊（ＷＴ）、ＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）、またはＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）の免疫ブロットからのオリゴマー対モノマーＩＲＥ１α＊の比率の定量化、ならびに尿素ＰＡＧＥからの１ＮＭ−ＰＰ１（１０μＭ）とともにインキュベートした組換えＩＲＥ１α＊（ＷＴ）、ＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）、およびＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）によるα３２Ｐ標識したＸＢＰ１  ＲＮＡまたはインスリン２（Ｉｎｓ２）ＲＮＡの切断反応の経時変化の定量化。（Ｂ）１μｇ／ｍＬ  Ｄｏｘで処理したＩＮＳ−１  ＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）細胞＋／−１μＭ  １ＮＭ−ＰＰ１および＋／−６ｎＭ  Ｔｇにおける、ＸＢＰ１のスプライシング（２４時間）の割合、Ｑ−ＰＣＲによる相対的インスリン１（Ｉｎｓ１）ｍＲＮＡレベル（２４時間）、およびアネキシンＶ染色の割合（７２時間）；３つの独立した生物試料を各実験に使用し、平均値±ＳＤとしてプロットした；Ｐ値：＊＊＜０．０１。（Ｃ）ＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）が、どのように１ＮＭＰＰ１によって部分的に活性化され、ＥＲストレスの非存在下においてＸＢＰ１  ｍＲＮＡをスプライシングするかのモデル；修復不能なＥＲストレスによってオリゴマー状態にされる場合、１ＮＭ−ＰＰ１結合ＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）がＥＲに局在するｍＲＮＡの崩壊および末端ＵＰＲを誘導する。
【図３３】ＩＲＥ１αのＲＮＡｓｅの過剰活性化が細胞を末端ＵＰＲに至らしめる。本明細書に記載される化合物、薬学的組成物、および方法は、末端ＵＰＲを調節することができる。
【図３４】放置されたＥＲストレスおよび末端ＵＰＲシグナル伝達に起因する膵島β細胞の死滅は、１型および２型糖尿病の発症の中核を成す。本明細書に記載される化合物、薬学的組成物、および方法は、ＵＰＲを調節し、ＥＲストレスおよびＵＰＲに関連する疾患を治療することができる。
【図３５】放置されたＥＲストレスに起因する線維化リモデリングは、特発性肺線維症（ＩＰＦ）等の線維性疾患の発症の中核を成す。本明細書に記載される化合物、薬学的組成物、および方法は、ＵＰＲを調節し、ＥＲストレスおよびＵＰＲに関連する疾患を治療することができる。
【図３６】キナーゼ阻害剤（ＫＩＲＡ）を用いてＩＲＥ１αのＲＮＡｓｅを減弱させることによる末端ＵＰＲの阻害。
【図３７】ＫＩＲＡ６は、ＥＲストレスを受けている膵島β細胞における全ての重大な末端ＵＰＲ事象を遮断する；ＴＸＮＩＰおよびインターロイキン１−βを介した抗炎症性シグナルの阻害。
【図３８】ＩＲＥ１α  ＫＩＲＡの効力、選択性、および有効性を改善するためのカスケードの試験。
【図３９−１】ＫＩＲＡ６は、ツニカマイシンおよび変異ロドプシンによって誘導されるストレスの間に、網膜視細胞の生存を保護し、機能を保存する。（Ａ）ツニカマイシン＋／−１０μＭ  ＫＩＲＡ６を硝子体内に注入したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの眼底およびＯＣＴ画像。（Ｂ）ＤＭＳＯまたは１０μＭ  ＫＩＲＡ６を硝子体内に注入したＰ４０のＰ２３Ｈ−１ラットの眼底およびＯＣＴ画像。（Ｃ）ＤＭＳＯまたは１０μＭ  ＫＩＲＡ６の硝子体内注入後のＰ３０のＰ２３Ｈ−１ラットの網膜組織切片。（Ｄ）Ｐ３０のＰ２３Ｈ−１ラットの外顆粒層（ＯＮＬ）の厚さの定量化（ｎ＝２）；上にある厚さの線はＫＩＲＡ６であり、下にある線はＤＭＳＯである。（Ｅ）ＤＭＳＯまたは１０μＭ  ＫＩＲＡ６の硝子体内注入後のＰ４０のＰ２３Ｈ−１ラットの眼底およびＯＣＴ画像。（Ｆ）示された光強度（上）の一連の暗順応ＥＲＧ測定および単発閃光による明順応ＥＲＧ測定（＋２０ｄＢ）（下）。
【図３９−２】ＫＩＲＡ６は、ツニカマイシンおよび変異ロドプシンによって誘導されるストレスの間に、網膜視細胞の生存を保護し、機能を保存する。（Ａ）ツニカマイシン＋／−１０μＭ  ＫＩＲＡ６を硝子体内に注入したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの眼底およびＯＣＴ画像。（Ｂ）ＤＭＳＯまたは１０μＭ  ＫＩＲＡ６を硝子体内に注入したＰ４０のＰ２３Ｈ−１ラットの眼底およびＯＣＴ画像。（Ｃ）ＤＭＳＯまたは１０μＭ  ＫＩＲＡ６の硝子体内注入後のＰ３０のＰ２３Ｈ−１ラットの網膜組織切片。（Ｄ）Ｐ３０のＰ２３Ｈ−１ラットの外顆粒層（ＯＮＬ）の厚さの定量化（ｎ＝２）；上にある厚さの線はＫＩＲＡ６であり、下にある線はＤＭＳＯである。（Ｅ）ＤＭＳＯまたは１０μＭ  ＫＩＲＡ６の硝子体内注入後のＰ４０のＰ２３Ｈ−１ラットの眼底およびＯＣＴ画像。（Ｆ）示された光強度（上）の一連の暗順応ＥＲＧ測定および単発閃光による明順応ＥＲＧ測定（＋２０ｄＢ）（下）。
【図３９−３】ＫＩＲＡ６は、ツニカマイシンおよび変異ロドプシンによって誘導されるストレスの間に、網膜視細胞の生存を保護し、機能を保存する。（Ａ）ツニカマイシン＋／−１０μＭ  ＫＩＲＡ６を硝子体内に注入したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの眼底およびＯＣＴ画像。（Ｂ）ＤＭＳＯまたは１０μＭ  ＫＩＲＡ６を硝子体内に注入したＰ４０のＰ２３Ｈ−１ラットの眼底およびＯＣＴ画像。（Ｃ）ＤＭＳＯまたは１０μＭ  ＫＩＲＡ６の硝子体内注入後のＰ３０のＰ２３Ｈ−１ラットの網膜組織切片。（Ｄ）Ｐ３０のＰ２３Ｈ−１ラットの外顆粒層（ＯＮＬ）の厚さの定量化（ｎ＝２）；上にある厚さの線はＫＩＲＡ６であり、下にある線はＤＭＳＯである。（Ｅ）ＤＭＳＯまたは１０μＭ  ＫＩＲＡ６の硝子体内注入後のＰ４０のＰ２３Ｈ−１ラットの眼底およびＯＣＴ画像。（Ｆ）示された光強度（上）の一連の暗順応ＥＲＧ測定および単発閃光による明順応ＥＲＧ測定（＋２０ｄＢ）（下）。
【図４０】マウス胚性幹細胞（ＥＳＣ）由来の運動ニューロンの生存曲線。Ａ．野生型（ＷＴ）Ｈｂ９：ＧＦＰ  ＥＳＣをＧＦＰ＋運動ニューロン（ＭＮ）に分化させ、その後、指示された濃度で、ＫＩＲＡ６を用いてまたは用いずに、ブレフェルジンＡ（ＢＦＡ）で処理した。Ｂ．Ｇ９３Ａ−ＳＯＤ１／Ｈｂ９：ＧＦＰ  ＥＳＣをＧＦＰ＋ＭＮに分化させ、指示された濃度でＫＩＲＡ６で処理した：ＷＴ  Ｈｂ９：ＧＦＰ  ＥＳＣ由来のＭＮが対照としての役割を果たした。ｐ値：＊＜０．０５。ＭｕｔＳＯＤ１は、家族性筋萎縮性側索硬化症の一形態を引き起こす。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの活性化は、通常、キナーゼ自己リン酸化に依存するが（Ｔｉｒａｓｏｐｈｏｎ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ．Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ  １２，１８１２−１８２４（１９９８））、これらの２つのドメイン間にはアロステリックな関係が存在し、活性なＡＴＰ結合部位のコンフォメーションを安定化するヌクレオチド（ＡＤＰおよびＡＴＰ）ならびに低分子阻害剤が、自己リン酸化を起こさずにＲＮａｓｅを直接活性化することを可能にする（Ｐａｐａ，Ｆ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３０２，１５３３−１５３７（２００３）；Ｈａｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ３６５，７７７−７８３，（２００８）；Ｋｏｒｅｎｎｙｋｈ，Ａ．Ｖ．ｅｔ  ａｌ．ＢＭＣ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ９，４８，（２０１１））。さらに、特定のクラスのキナーゼ阻害剤（ＩＩ型と称される）は、ＩＲＥ１αの不活性なＡＴＰ結合部位のコンフォメーションを安定化し、高次オリゴマー化状態を破壊することによってそのＲＮａｓｅ活性を強力に阻害することができる（図１Ａおよび３６）（Ｗａｎｇ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ８，９８２−９８９，（２０１２））。これらの化合物は、本明細書においてキナーゼ阻害ＲＮａｓｅアテニュエーター（ＫＩＲＡ：ｋｉｎａｓｅ−ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ＲＮａｓｅ−ａｔｔｅｎｕａｔｏｒ）と名付けられる。
【００３０】
異なるクラスのＡＴＰ競合性キナーゼ阻害剤は、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を多様に調節する。ＡＰＹ２９（予測されるＩ型キナーゼ阻害剤）に結合した酵母ＩＲＥ１の共結晶構造は、キナーゼ触媒ドメインが活性コンフォメーションをとることを示す：これは、ＡＴＰおよび他のＩ型阻害剤に結合した場合にタンパク質キナーゼが典型的にとるコンフォメーションである（図１ａ）（Ｋｏｒｅｎｎｙｋｈ，Ａ．Ｖ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４５７，６８７−６９３（２００９）；Ｋｏｒｅｎｎｙｋｈ，Ａ．Ｖ．ｅｔ  ａｌ．ＢＭＣ  Ｂｉｏｌ．９，４８（２０１１））。さらに、ＡＤＰに結合した酵母ＩＲＥ１およびヒトＩＲＥ１αのさらなる２つの共結晶構造は、キナーゼドメインも同様に活性コンフォメーションをとることを示している（Ａｌｉ，Ｍ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．ＥＭＢＯ  Ｊ．３０，８９４−９０５（２０１１）；Ｌｅｅ，Ｋ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １３２，８９−１００（２００８））。活性コンフォメーションをとるＩＲＥ１αのキナーゼを安定化することにより、これらのＩ型阻害剤は、その隣接するＲＮａｓｅドメインをアロステリックに活性化するリガンドとして作用する。代替のコンフォメーションをとるＩＲＥ１αのキナーゼドメインを安定化すること、またそうすることで、そのＲＮａｓｅ活性を無効にすることが可能であるかもしれない。様々なキナーゼについて、ＡＴＰ結合部位の不活性コンフォメーションを選択的に安定化することが記載されている、あるクラスの低分子キナーゼ阻害剤（ＩＩ型阻害剤）（例として、臨床的に承認された薬物であるイマチニブおよびソラフェニブが挙げられる）（Ｌｉｕ，Ｙ．＆Ｇｒａｙ，Ｎ．Ｓ．Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２，３５８−３６４（２００６）；Ｗａｎ，Ｐ．Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １１６，８５５−８６７（２００４）；Ｓｃｈｉｎｄｌｅｒ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８９，１９３８−１９４２（２０００））の使用は、このアプローチに支持を提供する。ＩＩ型阻害剤によって安定化される不活性なＡＴＰ結合部位のコンフォメーションは、触媒的に重要なＡｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ（ＤＦＧ）モチーフの外向きの動きを特徴とするため、ＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションと称される（図１ａ）（Ｌｉｕ，Ｙ．＆Ｇｒａｙ，Ｎ．Ｓ．Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２，３５８−３６４（２００６）；Ｒａｎｊｉｔｋａｒ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１７，１９５−２０６（２０１０））。対照的に、前述の活性コンフォメーションをとるＩＲＥ１の３つ全ての共結晶構造において、キナーゼドメインは、ＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションをとる（Ｋｏｒｅｎｎｙｋｈ，Ａ．Ｖ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４５７，６８７−６９３（２００９）；Ａｌｉ，Ｍ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．ＥＭＢＯ  Ｊ．３０，８９４−９０５（２０１１）；Ｌｅｅ，Ｋ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １３２，８９−１００（２００８））。
【００３１】
高い小胞体（ＥＲ）ストレス下では、小胞体ストレス応答（ＵＰＲ）と称される細胞内シグナル経路の過剰活性化が細胞死を引き起こす。この「末端ＵＰＲ」の特徴的事象は、オリゴマーを形成すると、ＥＲに局在するｍＲＮＡおよび抑制的なマイクロＲＮＡ前駆体をエンドヌクレアーゼにより分解してアポトーシスを引き起こすＥＲ二官能性キナーゼ／エンドリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）であるＩＲＥ１αによって制御される。ヒト癌に見られるＩｒｅ１αの体細胞突然変異は、そのＲＮａｓｅのオリゴマー化およびアポトーシス機能を無効にする。ヒト生物学からのこれらの有益な結果を用いて、ＩＲＥ１αのオリゴマー化およびＲＮａｓｅ活性をアロステリックに低下させる、ＫＩＲＡ（Ｋｉｎａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ＲＮａｓｅ  Ａｔｔｅｎｕａｔｏｒ）と称されるＡＴＰ競合性キナーゼ阻害剤を開発した。そのような１つのキナーゼ阻害剤であるＫＩＲＡ６は、全てのＩＲＥ１α出力を阻害し、ＥＲストレス下で細胞の生存および機能を維持する。ＥＲストレスによって引き起こされる網膜変性症のラットモデルにおいて、硝子体内のＫＩＲＡ６は視細胞消失を阻止する。
【００３２】
Ａ．定義
本明細書で使用される略語は、化学および生物学分野におけるそれらの従来の意味を有する。本明細書に記載される化学構造および式は、化学技術分野で既知の化学価の標準規則に従って構成される。
【００３３】
置換基が、左から右に書かれたそれらの従来の化学式によって特定される場合、それらは、その構造を右から左に書くことから得られる化学的に同一な置換基を等しく包含する：例えば、−ＣＨ２Ｏ−は、−ＯＣＨ２−と同等である。本明細書で使用される用語は、名付けられた置換基とその親部分との間の結合の結合順序を示すために、シングルダッシュ「」またはダブルダッシュ「＝」が先行するかまたはその後に続いてもよい：シングルダッシュは単結合を示し、ダブルダッシュは二重結合を示す。シングルまたはダブルダッシュが存在しない場合、置換基とその親部分との間には単結合が形成されるものと理解されたく、さらに、上付き文字「ｄ」を有する置換基（例えば、Ｒｄ）は、ダッシュがそうではないことを示唆しない限り、「左から右に」読まれることが意図される。例えば、Ｃ１  Ｃ６アルコキシカルボニルオキシおよびＯＣ（Ｏ）Ｃ１  Ｃ６アルキルは、同じ官能基を示し、同様に、アリールアルキルおよび−アルキルアリールも、同じ官能基を示す。
【００３４】
本明細書で使用される「飽和」という用語は、言及される化学構造が、いかなる複数の炭素炭素結合も含有しないことを意味する。例えば、本明細書に定義される飽和シクロアルキル基は、シクロヘキシル、シクロプロピル等を含む。
【００３５】
「アルキル」という用語は、それ自体でまたは別の置換基の一部として、別途記載のない限り、直鎖（すなわち、非分岐）または分岐炭素鎖（もしくは炭素）、あるいはそれらの組み合わせを意味し、それは、完全飽和、一不飽和、または多価不飽和であってもよく、二価および多価のラジカルを含むことができ、指定された数の炭素原子を有する（すなわち、Ｃ１−Ｃ１０は、１〜１０個の炭素を意味する）。飽和炭化水素ラジカルの例として、限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、（シクロヘキシル）メチル等の基、例えば、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル等の相同体および異性体等が挙げられる。不飽和アルキル基は、１つ以上の二重結合または三重結合を有するアルキル基である。不飽和アルキル基の例として、限定されないが、ビニル、２−プロペニル、クロチル、２−イソペンテニル、２−（ブタジエニル）、２，４−ペンタジエニル、３−（１，４−ペンタジエニル）、エチニル、１−および３−プロピニル、３−ブチニル、ならびに高次の相同体および異性体が挙げられる。「アルコキシ」は、酸素リンカー（−Ｏ−）を介して分子の残りに付着しているアルキルである。実施形態において、アルキルは、別途記載のない限り、１〜１０個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖の炭化水素である。実施形態において、アルキルはアルケニルであり、「アルケニル」という用語は、その単純な通常の意味に従って使用される。実施形態において、アルケニルは、別途記載のない限り、２〜１０個の炭素を含有し、少なくとも１つの炭素炭素二重結合を含有する、直鎖または分岐鎖の炭化水素である。アルケニルの例として、限定されないが、エテニル、２プロペニル、２メチル２プロペニル、３ブテニル、４ペンテニル、５ヘキセニル、２ヘプテニル、２メチル１ヘプテニル、３デセニル、および３，７ジメチルオクタ２，６ジエニルが挙げられる。実施形態において、アルキルはアルキニルであり、「アルキニル」という用語は、その単純な通常の意味に従って使用される。実施形態において、アルキニルは、２〜１０個の炭素原子を含有し、少なくとも１つの炭素炭素三重結合を含有する、直鎖または分岐鎖の炭化水素基である。アルキニルの例として、限定されないが、アセチレニル、１プロピニル、２プロピニル、３ブチニル、２ペンチニル、および１ブチニルが挙げられる。
【００３６】
「アルキレン」という用語は、それ自体でまたは別の置換基の一部として、別途記載のない限り、限定されないが、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−によって示されるアルキルに由来する二価のラジカルを意味する。典型的には、アルキル（またはアルキレン）基は、１〜２４個の炭素原子を有し、１０個以下の炭素原子を有する基が本発明において好ましい。「低級アルキル」または「低級アルキレン」は、一般的には８個以下の炭素原子を有する、より短い鎖のアルキルまたはアルキレン基である。「アルケニレン」という用語は、それ自体でまたは別の置換基の一部として、別途記載のない限り、アルケンに由来する二価のラジカルを意味する。
【００３７】
「ヘテロアルキル」という用語は、単独で、または他の用語と組み合わせて、別途記載のない限り、少なくとも１つの炭素原子と、Ｏ、Ｎ、Ｐ、ＳｉおよびＳからなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子とを含む、安定な直鎖もしくは分岐鎖、またはそれらの組み合わせを意味し、窒素および硫黄原子は、任意選択的に酸化されてもよく、窒素ヘテロ原子は、任意で四級化されてもよい。ヘテロ原子（複数可）Ｏ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、およびＳｉは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置に、またはアルキル基が分子の残りに付着している位置に配置されてもよい。例として、限定されないが、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−ＣＨ３、−Ｓｉ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｎ−ＯＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−Ｏ−ＣＨ３、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３、および−ＣＮが挙げられる。例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−ＯＣＨ３および−ＣＨ２−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ３）３のように、最大２個または３個のヘテロ原子が連続していてもよい。
【００３８】
同様に、「ヘテロアルキレン」という用語は、それ自体でまたは別の置換基の一部として、別途記載のない限り、限定されないが、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−および−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−によって示されるヘテロアルキルに由来する二価のラジカルを意味する。ヘテロアルキレン基の場合、ヘテロ原子はまた、鎖の末端のいずれかまたは両方を占有することができる（たとえば、アルキレンオキシ、アルキレンジオキシ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノ等）。さらに、アルキレンおよびヘテロアルキレン連結基の場合、連結基の配向は、連結基の式が書かれた方向によって暗示されない。例えば、式−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’−は、−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’−および−Ｒ’Ｃ（Ｏ）２−の両方を表す。前述のように、本明細書で使用されるヘテロアルキル基は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＯＲ’、−ＳＲ’、および／または−ＳＯ２Ｒ’等の、ヘテロ原子によって分子の残りに付着している基である。−ＮＲ’Ｒ’’等の特定のヘテロアルキル基が列挙された後に「ヘテロアルキル」が列挙される場合、ヘテロアルキルおよび−ＮＲ’Ｒ’’という用語は、冗長的ではなく、互いに排他的であると理解されたい。むしろ、明確性を加えるために特定のヘテロアルキル基が列挙される。よって、「ヘテロアルキル」という用語は、本明細書において−ＮＲ’Ｒ’’等の特定のヘテロアルキル基を排除すると解釈されるべきではない。
【００３９】
「シクロアルキル」および「ヘテロシクロアルキル」という用語は、単独で、または他の用語と組み合わせて、別途記載のない限り、それぞれ、「アルキル」および「ヘテロアルキル」の環状型を意味し、全ての炭素原子価が非水素原子との結合に関与しているため、環（単数または複数）を構成する炭素が必ずしも水素に結合している必要はない。さらに、ヘテロシクロアルキルの場合、ヘテロ原子は、複素環が分子の残りに付着している位置を占有することができる。シクロアルキルの例として、限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−シクロヘキセニル、３−シクロヘキセニル、シクロヘプチル等が挙げられる。ヘテロシクロアルキルの例として、限定されないが、１−（１，２，５，６−テトラヒドロピリジル）、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−モルホリニル、３−モルホリニル、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル、テトラヒドロチエン−３−イル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニル等が挙げられる。「シクロアルキレン」および「ヘテロシクロアルキレン」は、単独でまたは別の置換基の一部として、それぞれ、シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキルに由来する二価のラジカルを意味する。
【００４０】
実施形態において、「シクロアルキル」という用語は、単環式、二環式、または多環式のシクロアルキル環系を意味する。実施形態において、単環式環系は、３〜８個の炭素原子を含有する環状炭化水素基であり、そのような基は、飽和または不飽和であってもよいが、芳香族ではない。実施形態において、シクロアルキル基は、完全に飽和している。単環式シクロアルキルの例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、およびシクロオクチルが挙げられる。二環式シクロアルキル環系は、架橋単環式環または縮合二環式環である。実施形態において、架橋単環式環は、単環式環の２つの隣接しない炭素原子が、１つおよび３つのさらなる炭素原子間のアルキレン架橋によって連結された単環式シクロアルキル環を含有する（すなわち、形態（ＣＨ２）ｗの架橋基であり、式中、ｗは、１、２、または３である）。二環式環系の代表例として、限定されないが、ビシクロ［３．１．１］ヘプタン、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ビシクロ［２．２．２］オクタン、ビシクロ［３．２．２］ノナン、ビシクロ［３．３．１］ノナン、およびビシクロ［４．２．１］ノナンが挙げられる。実施形態において、縮合二環式シクロアルキル環系は、フェニル、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、単環式ヘテロサイクリル、または単環式ヘテロアリールのいずれかに縮合した単環式シクロアルキル環を含有する。実施形態において、架橋または縮合二環式シクロアルキルは、単環式シクロアルキル環に含まれる任意の炭素原子を介して親分子部分に付着する。実施形態において、シクロアルキル基は、独立してオキソまたはチアである１個または２個の基で任意選択的に置換される。実施形態において、縮合二環式シクロアルキルは、フェニル環、５〜６員単環式シクロアルキル、５〜６員単環式シクロアルケニル、５〜６員単環式ヘテロサイクリル、または５〜６員単環式ヘテロアリールのいずれかに縮合した５〜６員単環式シクロアルキル環であり、縮合二環式シクロアルキルは、独立してオキソまたはチアである１個または２個の基によって任意選択的に置換される。実施形態において、多環式シクロアルキル環系は、（ｉ）二環式アリール、二環式ヘテロアリール、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、および二環式ヘテロサイクリルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、二環式アリール、単環式もしくは二環式ヘテロアリール、単環式もしくは二環式シクロアルキル、単環式もしくは二環式シクロアルケニル、および単環式もしくは二環式ヘテロサイクリルからなる群から独立して選択される２つの他の環系のいずれかに縮合した単環式シクロアルキル環（基本の環）である。実施形態において、多環式シクロアルキルは、基本の環に含まれる任意の炭素原子を介して親分子部分に付着する。実施形態において、多環式シクロアルキル環系は、（ｉ）二環式アリール、二環式ヘテロアリール、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、および二環式ヘテロサイクリルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、単環式ヘテロアリール、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、および単環式ヘテロサイクリルからなる群から独立して選択される２つの他の環系のいずれかに縮合した単環式シクロアルキル環（基本の環）である。多環式シクロアルキル基の例として、限定されないが、テトラデカヒドロフェナントレニル、ペルヒドロフェノチアジン−１−イル、およびペルヒドロフェノキサジン−１−イルが挙げられる。
【００４１】
実施形態において、シクロアルキルはシクロアルケニルである。「シクロアルケニル」という用語は、その単純な通常の意味に従って使用される。実施形態において、シクロアルケニルは、単環式、二環式、または多環式のシクロアルケニル環系である。実施形態において、単環式シクロアルケニル環系は、３〜８個の炭素原子を含有する環状炭化水素基であり、そのような基は、不飽和である（すなわち、少なくとも１つの環状炭素炭素二重結合を含有する）が、芳香族ではない。単環式シクロアルケニル環系の例として、シクロペンテニルおよびシクロヘキセニルが挙げられる。実施形態において、二環式シクロアルケニル環は、架橋単環式環または縮合二環式環である。実施形態において、架橋単環式環は、単環式環の２つの隣接しない炭素原子が、１つおよび３つのさらなる炭素原子間のアルキレン架橋によって連結された単環式シクロアルケニル環を含有する（すなわち、形態（ＣＨ２）ｗの架橋基であり、式中、ｗは、１、２、または３である）。二環式シクロアルケニルの代表例として、限定されないが、ノルボルネニルおよびビシクロ［２．２．２］オクト２エニルが挙げられる。実施形態において、縮合二環式シクロアルケニル環系は、フェニル、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、単環式ヘテロサイクリル、または単環式ヘテロアリールのいずれかに縮合した単環式シクロアルケニル環を含有する。実施形態において、架橋または縮合二環式シクロアルケニルは、単環式シクロアルケニル環に含まれる任意の炭素原子を介して親分子部分に付着する。実施形態において、シクロアルケニル基は、独立してオキソまたはチアである１個または２個の基で任意選択的に置換される。実施形態において、多環式シクロアルケニル環は、（ｉ）二環式アリール、二環式ヘテロアリール、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、および二環式ヘテロサイクリルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、二環式アリール、単環式もしくは二環式ヘテロアリール、単環式もしくは二環式シクロアルキル、単環式もしくは二環式シクロアルケニル、および単環式もしくは二環式ヘテロサイクリルからなる群から独立して選択される２つの環系のいずれかに縮合した単環式シクロアルケニル環（基本の環）を含有する。実施形態において、多環式シクロアルケニルは、基本の環に含まれる任意の炭素原子を介して親分子部分に付着する。実施形態において、多環式シクロアルケニル環は、（ｉ）二環式アリール、二環式ヘテロアリール、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、および二環式ヘテロサイクリルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、単環式ヘテロアリール、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、および単環式ヘテロサイクリルからなる群から独立して選択される２つの環系のいずれかに縮合した単環式シクロアルケニル環（基本の環）を含有する。
【００４２】
実施形態において、ヘテロシクロアルキルはヘテロサイクリルである。本明細書で使用される「ヘテロサイクリル」という用語は、単環式、二環式、または多環式の複素環を意味する。ヘテロサイクリル単環式複素環は、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から独立して選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含有する３、４、５、６、または７員環であり、環は、飽和または不飽和であってもよいが、芳香族ではない。３または４員環は、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１つのヘテロ原子を含有する。５員環は、０または１個の二重結合と、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１個、２個、または３個のヘテロ原子とを含有することができる。６または７員環は、０、１、または２つの二重結合と、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１個、２個、または３個のヘテロ原子とを含有する。ヘテロサイクリル単環式複素環は、ヘテロサイクリル単環式複素環に含まれる任意の炭素原子または任意の窒素原子を介して親分子部分に接続される。ヘテロサイクリル単環式複素環の代表例として、限定されないが、アゼチジニル、アゼパニル、アジリジニル、ジアゼファニル、１，３ジオキサニル、１，３ジオキソラニル、１，３ジチオラニル、１，３ジチアニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリニル、イソチアゾリジニル、イソキサゾリニル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、オキサジアゾリニル、オキサジアゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、チアジアゾリニル、チアジアゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、チオモルホリニル、１，１ジオキシドチオモルホリニル（チオモルホリンスルホン）、チオピラニル、およびトリチアニルが挙げられる。ヘテロサイクリル二環式複素環は、フェニル、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、単環式複素環、または単環式ヘテロアリールのいずれかに縮合した単環式複素環である。ヘテロサイクリル二環式複素環は、二環式環系の単環式複素環部分に含まれる任意の炭素原子または任意の窒素原子を介して親分子部分に接続される。二環式ヘテロサイクリルの代表例として、限定されないが、２，３ジヒドロベンゾフラン２イル、２，３ジヒドロベンゾフラン３イル、インドリン１イル、インドリン２イル、インドリン３イル、２，３ジヒドロベンゾチエン２イル、デカヒドロキノリニル、デカヒドロキノリニル、オクタヒドロ１Ｈインドリル、およびオクタヒドロベンゾフラニルが挙げられる。実施形態において、ヘテロサイクリル基は、独立してオキソまたはチアである１個または２個の基で任意選択的に置換される。特定の実施形態において、二環式ヘテロサイクリルは、フェニル環、５〜６員単環式シクロアルキル、５〜６員単環式シクロアルケニル、５〜６員単環式ヘテロサイクリル、または５〜６員単環式ヘテロアリールに縮合した５〜６員単環式ヘテロサイクリル環であり、二環式ヘテロサイクリルは、独立してオキソまたはチアである１個または２個の基によって任意選択的に置換される。多環式ヘテロサイクリル環系は、（ｉ）二環式アリール、二環式ヘテロアリール、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、および二環式ヘテロサイクリルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、二環式アリール、単環式もしくは二環式ヘテロアリール、単環式もしくは二環式シクロアルキル、単環式もしくは二環式シクロアルケニル、および単環式もしくは二環式ヘテロサイクリルからなる群から独立して選択される２つの他の環系のいずれかに縮合した単環式ヘテロサイクリル環（基本の環）である。多環式ヘテロサイクリルは、基本の環に含まれる任意の炭素原子または窒素原子を介して親分子部分に付着する。実施形態において、多環式ヘテロサイクリル環系は、（ｉ）二環式アリール、二環式ヘテロアリール、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、および二環式ヘテロサイクリルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、単環式ヘテロアリール、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、および単環式ヘテロサイクリルからなる群から独立して選択される２つの他の環系のいずれかに縮合した単環式ヘテロサイクリル環（基本の環）である。多環式ヘテロサイクリル基の例として、限定されないが、１０Ｈ−フェノチアジン−１０−イル、９，１０−ジヒドロアクリジン−９−イル、９，１０−ジヒドロアクリジン−１０−イル、１０Ｈ−フェノキサジン−１０−イル、１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル、１，２，３，４−テトラヒドロピリド［４，３−ｇ］イソキノリン−２−イル、１２Ｈ−ベンゾ［ｂ］フェノキサジン−１２−イル、およびドデカヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−９−イルが挙げられる。
【００４３】
「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、それ自体でまたは別の置換基の一部として、別途記載のない限り、フルオリン、クロリン、またはヨウ素原子を意味する。さらに、「ハロアルキル」等の用語は、モノハロアルキルおよびポリハロアルキルを含むことを意味する。例えば、「ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」という用語は、限定されないが、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピル等を含む。
【００４４】
「アシル」という用語は、別途記載のない限り、−Ｃ（Ｏ）Ｒを意味し、式中、Ｒは、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。
【００４５】
「アリール」という用語は、別途記載のない限り、一緒に縮合している（すなわち、縮合環アリール）かまたは共有結合的に連結した単環または複数環（好ましくは１〜３個の環）であってもよい、多価不飽和の芳香族炭化水素置換基を意味する。縮合環アリールは、縮合環のうちの少なくとも１つがアリール環である、一緒に縮合した複数の環を指す。「ヘテロアリール」という用語は、Ｎ、Ｏ、またはＳ等の少なくとも１つのヘテロ原子を含有するアリール基（または環）を指し、窒素および硫黄原子が任意選択的に酸化され、窒素原子（複数可）が任意選択的に四級化される。よって、「ヘテロアリール」という用語は、縮合環ヘテロアリール基（すなわち、縮合環のうちの少なくとも１つがヘテロ芳香族環である、一緒に縮合した複数の環）を含む。５，６縮合環ヘテロアリーレンは、一緒に縮合した２つの環を指し、一方の環が５員を有し、他方の環が６員を有し、少なくとも１つの環はヘテロアリール環である。同様に、６，６縮合環ヘテロアリーレンは、一緒に縮合した２つの環を指し、一方の環が６員を有し、他方の環が６員を有し、少なくとも１つの環はヘテロアリール環である。６，５縮合環ヘテロアリーレンは、一緒に縮合した２つの環を指し、一方の環が６員を有し、他方の環が５員を有し、少なくとも１つの環はヘテロアリール環である。ヘテロアリール基は、炭素またはヘテロ原子によって分子の残りに付着することができる。アリールおよびヘテロアリール基の非限定的な例は、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−ビフェニル、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル、３−ピラゾリル、２−イミダゾリル、４−イミダゾリル、ピラジニル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、２−フェニル−４−オキサゾリル、５−オキサゾリル、３−イソキサゾリル、４−イソキサゾリル、５−イソキサゾリル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−フリル、３−フリル、２−チエニル、３−チエニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、５−ベンゾチアゾリル、プリニル、２−ベンズイミダゾリル、５−インドリル、１−イソキノリル、５−イソキノリル、２−キノキサリニル、５−キノキサリニル、３−キノリル、および６−キノリルが挙げられる。上述のアリールおよびヘテロアリール環系の各々の置換基は、後述の許容される置換基の群から選択される。「アリーレン」および「ヘテロアリーレン」は、単独でまたは別の置換基の一部として、それぞれ、アリールおよびヘテロアリールに由来する二価のラジカル（例えば、インドリンの二価のラジカル等）を意味する。ヘテロアリール基の非限定的な例として、ピリジニル、ピリミジニル、チオエニル、チエニル、フラニル、インドリル、ベンズオキサジアゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキサニル、チアナフタニル（ｔｈｉａｎａｐｈｔｈａｎｙｌ）、ピロロピリジニル、インダゾリル、キノリニル、キノキサリニル、ピリドピラジニル、キナゾリノニル（ｑｕｉｎａｚｏｌｉｎｏｎｙｌ）、ベンゾイソキサゾリル、イミダゾピリジニル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾチオエニル、フェニル、ナフチル、ビフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、フリルチエニル、ピリジル、ピリミジル、ベンゾチアゾリル、プリニル、ベンズイミダゾリル、イソキノリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピロリル、ジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ベンゾチアジアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾロピリミジニル、ピロロピリミジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズオキサゾリル、またはキノリルが挙げられる。上記例は、置換または非置換されてもよく、上記各ヘテロアリール例の二価のラジカルは、ヘテロアリーレンの非限定的な例である。
【００４６】
実施形態において、アリールは、フェニル（すなわち、単環式アリール）、少なくとも１つのフェニル環を含有する二環式環系、または芳香族二環式環系もしくは多環式アリール環系に炭素原子のみを含有する芳香族二環式環であるが、但し、二環式または多環式アリール環系が完全に芳香族である場合、ヘテロアリール環を含有しないものとする。実施形態において、二環式アリールは、アズレニル、ナフチルであってもよいか、または単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、もしくは単環式ヘテロサイクリルに縮合したフェニルであってもよい。実施形態において、二環式アリールは、二環式系のフェニル部分に含まれる任意の炭素原子、またはナフチル環もしくはアズレニル環を伴う任意の炭素原子を介して親分子部分に付着されてもよい。実施形態において、二環式アリールの縮合単環式シクロアルキルまたは単環式ヘテロサイクリルは、１個または２個のオキソ基および／またはチア基で任意選択的に置換される。二環式アリールの代表例として、限定されないが、アズレニル、ナフチル、ジヒドロインデン１イル、ジヒドロインデン２イル、ジヒドロインデン３イル、ジヒドロインデン４イル、２，３ジヒドロインドール４イル、２，３ジヒドロインドール５イル、２，３ジヒドロインドール６イル、２，３ジヒドロインドール７イル、インデン１イル、インデン２イル、インデン３イル、インデン４イル、ジヒドロナフタレン２イル、ジヒドロナフタレン３イル、ジヒドロナフタレン４イル、ジヒドロナフタレン１イル、５，６，７，８テトラヒドロナフタレン１イル、５，６，７，８テトラヒドロナフタレン２イル、２，３ジヒドロベンゾフラン４イル、２，３ジヒドロベンゾフラン５イル、２，３ジヒドロベンゾフラン６イル、２，３ジヒドロベンゾフラン７イル、ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール４イル、ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール５イル、２Ｈクロメン２オン５イル、２Ｈクロメン２オン６イル、２Ｈクロメン２オン７イル、２Ｈクロメン２オン８イル、イソインドリン１，３ジオン４イル、イソインドリン１，３ジオン５イル、インデン１オン４イル、インデン１オン５イル、インデン１オン６イル、インデン１オン７イル、２，３ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキサン５イル、２，３ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキサン６イル、２Ｈベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン３（４Ｈ）オン５イル、２Ｈベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン３（４Ｈ）オン６イル、２Ｈベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン３（４Ｈ）オン７イル、２Ｈベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン３（４Ｈ）オン８イル、ベンゾ［ｄ］オキサジン２（３Ｈ）オン５イル、ベンゾ［ｄ］オキサジン２（３Ｈ）オン６イル、ベンゾ［ｄ］オキサジン２（３Ｈ）オン７イル、ベンゾ［ｄ］オキサジン２（３Ｈ）オン８イル、キナゾリン４（３Ｈ）オン５イル、キナゾリン４（３Ｈ）オン６イル、キナゾリン４（３Ｈ）オン７イル、キナゾリン４（３Ｈ）オン８イル、キノキサリン２（１Ｈ）オン５イル、キノキサリン２（１Ｈ）オン６イル、キノキサリン２（１Ｈ）オン７イル、キノキサリン２（１Ｈ）オン８イル、ベンゾ［ｄ］チアゾール２（３Ｈ）オン４イル、ベンゾ［ｄ］チアゾール２（３Ｈ）オン５イル、ベンゾ［ｄ］チアゾール２（３Ｈ）オン６イル、およびベンゾ［ｄ］チアゾール２（３Ｈ）オン７イルが挙げられる。実施形態において、二環式アリールは、（ｉ）ナフチルか、または（ｉｉ）５〜６員単環式シクロアルキル、５〜６員単環式シクロアルケニル、もしくは５〜６員単環式ヘテロサイクリルのいずれかに縮合したフェニル環であり、縮合シクロアルキル、シクロアルケニル、およびヘテロサイクリル基は、独立してオキソまたはチアである１個または２個の基で任意選択的に置換される。実施形態において、多環式アリール基は、（ｉ）二環式アリール、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、および二環式ヘテロサイクリルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、二環式アリール、単環式もしくは二環式シクロアルキル、単環式もしくは二環式シクロアルケニル、および単環式もしくは二環式ヘテロサイクリルからなる群から独立して選択される２つの他の環系のいずれかに縮合したフェニル環（基本の環）であるが、但し、基本の環が、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、または二環式ヘテロサイクリルに縮合している場合、基本の環は、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、または二環式ヘテロサイクリルの基本の環に縮合するものとする。実施形態において、多環式アリールは、基本の環に含まれる任意の炭素原子を介して親分子部分に付着してもよい。特定の実施形態において、多環式アリール基は、（ｉ）二環式アリール、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、および二環式ヘテロサイクリルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、および単環式ヘテロサイクリルからなる群から独立して選択される２つの他の環系のいずれかに縮合したフェニル環（基本の環）であるが、但し、基本の環が、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、または二環式ヘテロサイクリルに縮合している場合、基本の環は、二環式シクロアルキル、二環式シクロアルケニル、または二環式ヘテロサイクリルの基本の環に縮合するものとする。多環式アリール基の例として、限定されないが、アントラセン−９−イルおよびフェナントレン−９−イルが挙げられる。
【００４７】
実施形態において、本明細書で使用される「ヘテロアリール」という用語は、単環式、二環式、または多環式のヘテロアリール環系を意味する。実施形態において、単環式ヘテロアリールは、５〜６員環であってもよい。実施形態において、５員環は、２つの二重結合と、１個、２個、３個、または４個の窒素原子、および任意選択的に１個の酸素原子または硫黄原子とからなる。実施形態において、６員環は、３つの二重結合と、１個、２個、３個、または４個の窒素原子からなる。実施形態において、５または６員ヘテロアリールは、ヘテロアリールに含まれる任意の炭素原子または任意の窒素原子を介して親分子部分に接続される。単環式ヘテロアリールの代表例として、限定されないが、フリル、イミダゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピロリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、およびトリアジニルが挙げられる。実施形態において、二環式ヘテロアリールは、フェニルに縮合した単環式ヘテロアリール、単環式シクロアルキル、単環式シクロアルケニル、単環式ヘテロサイクリル、または単環式ヘテロアリールからなる。実施形態において、二環式ヘテロアリール基の縮合シクロアルキルまたはヘテロサイクリル部は、独立してオキソまたはチアである１個または２個の基で任意選択的に置換される。実施形態において、二環式ヘテロアリールが、縮合したシクロアルキル、シクロアルケニル、またはヘテロサイクリル環を含有する場合、二環式ヘテロアリール基は、二環式環系の単環式ヘテロアリール部分に含まれる任意の炭素原子または任意の窒素原子を介して親分子部分に接続される。実施形態において、二環式ヘテロアリールが、フェニル環に縮合した単環式ヘテロアリール、または単環式ヘテロアリールである場合、二環式ヘテロアリール基は、二環式環系内の任意の炭素原子または窒素原子を介して親分子部分に接続される。二環式ヘテロアリールの代表例として、限定されないが、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンズオキサジアゾリル、ベンズオキサチアジアゾリル、ベンゾチアゾリル、シンノリニル、５，６ジヒドロキノリン２イル、５，６ジヒドロイソキノリン１イル、フロピリジニル、インダゾリル、インドリル、イソキノリニル、ナフチリジニル、キノリニル、プリニル、５，６，７，８テトラヒドロキノリン２イル、５，６，７，８テトラヒドロキノリン３イル、５，６，７，８テトラヒドロキノリン４イル、５，６，７，８テトラヒドロイソキノリン１イル、チエノピリジニル、４，５，６，７テトラヒドロベンゾ［ｃ］［１，２，５］オキサジアゾリル、および６，７ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２，５］オキサジアゾル４（５Ｈ）オニルが挙げられる。実施形態において、縮合二環式ヘテロアリールは、フェニル環、５〜６員単環式シクロアルキル、５〜６員単環式シクロアルケニル、５〜６員単環式ヘテロサイクリル、または５〜６員単環式ヘテロアリールのいずれかに縮合した５〜６員単環式ヘテロアリール環であり、縮合シクロアルキル、シクロアルケニル、およびヘテロサイクリル基は、独立してオキソまたはチアである１個または２個の基で任意選択的に置換される。実施形態において、多環式ヘテロアリール基は、（ｉ）二環式アリール、二環式ヘテロアリール、二環式ヘテロサイクリル、二環式シクロアルケニル、および二環式シクロアルキルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、二環式アリール、単環式もしくは二環式ヘテロアリール、単環式もしくは二環式ヘテロサイクリル、単環式もしくは二環式シクロアルケニル、および単環式もしくは二環式シクロアルキルからなる群から選択される２つの環系のいずれかに縮合した単環式ヘテロアリール環（基本の環）である。実施形態において、多環式ヘテロアリール基は、基本の環内に含まれる任意の炭素原子または窒素原子を介して親分子部分に接続される。実施形態において、多環式ヘテロアリール基は、（ｉ）二環式アリール、二環式ヘテロアリール、二環式ヘテロサイクリル、二環式シクロアルケニル、および二環式シクロアルキルからなる群から選択される１つの環系、または（ｉｉ）フェニル、二環式アリール、単環式もしくは二環式ヘテロアリール、単環式もしくは二環式ヘテロサイクリル、単環式もしくは二環式シクロアルケニル、および単環式もしくは二環式シクロアルキルからなる群から選択される２つの環系のいずれかに縮合した単環式ヘテロアリール基（基本の環）である。多環式ヘテロアリールの例として、限定されないが、５Ｈ−［１，２，４］トリアジノ［５，６−ｂ］インドール−５−イル、２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−９−イル、９Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］インドール−９−イル、９Ｈ−カルバゾール−９−イル、アクリジン−９−イルが挙げられる。
【００４８】
縮合環ヘテロシクロアルキル−アリールは、ヘテロシクロアルキルに縮合したアリールである。縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロアリールは、ヘテロシクロアルキルに縮合したヘテロアリールである。縮合環ヘテロシクロアルキル−シクロアルキルは、シクロアルキルに縮合したヘテロシクロアルキルである。縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロシクロアルキルは、別のヘテロシクロアルキルに縮合したヘテロシクロアルキルである。縮合環ヘテロシクロアルキル−アリール、縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロアリール、縮合環ヘテロシクロアルキル−シクロアルキル、または縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロシクロアルキルは、各々独立して、非置換であってもよいか、または本明細書に記載される置換基のうちの１つ以上で置換されてもよい。
【００４９】
本明細書で使用される「オキソ」という用語は、炭素原子に二重結合した酸素を意味する。本明細書で使用される「チア」という用語は、ａ＝Ｓ基を意味する。
【００５０】
本明細書で使用される「アルキルスルホニル」という用語は、式−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ’を有する部分を意味し、式中、Ｒ’は、上に定義した置換または非置換のアルキル基である。Ｒ’は、指定された数の炭素を有してもよい（例えば、「Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル」）。
【００５１】
本明細書で使用される「アリールアルキル」および「アルキルアリール」という用語は、本明細書に定義されるアルキル基を介して親分子部分に付加された、本明細書に定義されるアリール基を意味する。アリールアルキルの代表例として、限定されないが、ベンジル、２フェニルエチル、３フェニルプロピル、および２ナフス２イルエチルが挙げられる。
【００５２】
本明細書で使用される「ヘテロアリールアルキル」および「アルキルヘテロアリール」という用語は、本明細書に定義されるアルキル基を介して親分子部分に付加された、本明細書に定義されるヘテロアリールを意味する。ヘテロアリールアルキルの代表例として、限定されないが、フール３イルメチル、１Ｈイミダゾール２イルメチル、１Ｈイミダゾール４イルメチル、１（ピリジン４イル）メチル、ピリジン３イルメチル、ピリジン４イルメチル、ピリミジン５イルメチル、２（ピリミジン２イル）ピロリル、チエン２イルメチル、およびチエン３イルメチルが挙げられる。
【００５３】
上記用語の各々（例えば、「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「アリール」、および「ヘテロアリール」）は、示されるラジカルの置換形態および非置換形態の両方を含む。各種類のラジカルの好ましい置換基を次に提供する。
【００５４】
アルキルおよびヘテロアルキルラジカル（しばしば、アルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル、およびへトロシクロアルケニルと称される基を含む）の置換基は、限定されないが、ゼロから（２ｍ’＋１）の範囲の数（式中、ｍ’は、そのようなラジカルの炭素原子の総数である）の−ＯＲ’、＝Ｏ、＝ＮＲ’、＝Ｎ−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＳＲ’、−ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’）＝ＮＲ’’’’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲＳＯ２Ｒ’、−ＮＲ’ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’Ｃ＝（Ｏ）ＮＲ’’ＮＲ’’’Ｒ’’’’、−ＣＮ、−ＮＯ２から選択される様々な基のうちの１つ以上であってもよい。Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’、およびＲ’’’’は、それぞれ、好ましくは独立して、水素、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール（例えば、１〜３個のハロゲンで置換されたアリール）、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のアルキル、アルコキシ、またはチオアルコキシ基、またはアリールアルキル基を指す。例えば、本発明の化合物が１つより多くのＲ基を含む場合、１つより多くの基が存在する場合の各Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’、およびＲ’’’’基と同様に、Ｒ基の各々は独立して選択される。Ｒ’、およびＲ’’が同じ窒素原子に付着している場合、それらは４−、５−、６−、または７−員環を形成するように窒素原子と組み合わせることができる。例えば、−ＮＲ’Ｒ’’は、限定されないが、１−ピロリジニルおよび４−モルホリニルを含む。置換基に関する上記考察から、当業者は、「アルキル」という用語が、ハロアルキル（例えば、−ＣＦ３および−ＣＨ２ＣＦ３）ならびにアシル（例えば、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＦ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣＨ３等）等の、水素基以外の基に結合した炭素原子を含む基を含むことを意味すると理解するであろう。
【００５５】
アルキルラジカルについて記載された置換基と同様に、アリールおよびヘテロアリール基の置換基は様々であり、例えば、ゼロから芳香族環系上の結合可能な原子価の総数までの範囲の数の−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＳＲ’、−ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’）＝ＮＲ’’’’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲＳＯ２Ｒ’、−ＮＲ’ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’Ｃ＝（Ｏ）ＮＲ’’ＮＲ’’’Ｒ’’’’、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ’、−Ｎ３、−ＣＨ（Ｐｈ）２、フルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、およびフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから選択され、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’、およびＲ’’’’は、好ましくは独立して、水素、置換または非置換のアルキル、置換または非置換のヘテロアルキル、置換または非置換のシクロアルキル、置換または非置換のヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、および置換または非置換のヘテロアリールから選択される。例えば、本発明の化合物が１つより多くのＲ基を含む場合、１つより多くの基が存在する場合の各Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’、およびＲ’’’’基と同様に、Ｒ基の各々は独立して選択される。
【００５６】
２つ以上の置換基を任意選択的に結合して、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキル基を形成してもよい。そのような、いわゆる環形成置換基は、典型的には、必ずではないが、環状基礎構造に付着して見出される。一実施形態において、環形成置換基は、基礎構造の隣接する環員に付着している。例えば、基礎構造の隣接する環員に付着した２つの環形成置換基は、縮合環構造を形成する。別の実施形態において、環形成置換基は、基礎構造の単一の環員に付着している。例えば、環状基礎構造の単一の環員に付着した２つの環形成置換基は、スピロ環構造を形成する。さらに別の実施形態において、環形成置換基は、基礎構造の隣接しない環員に付着している。
【００５７】
アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基のうち２つは、式−Ｔ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＲＲ’）ｑ−Ｕ−の環を任意選択的に形成してもよく、式中、ＴおよびＵは、独立して、−ＮＲ−、−Ｏ−、−ＣＲＲ’−、または単結合であり、ｑは、０〜３の整数である。代替として、アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基のうち２つは、式−Ａ−（ＣＨ２）ｒ−Ｂ−の置換基で任意選択的に置き換えられてもよく、式中、ＡおよびＢは、独立して、−ＣＲＲ’−、−Ｏ−、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−、または単結合であり、ｒは、１〜４の整数である。そのように形成された新しい環の単結合の１つは、二重結合で任意選択的に置き換えられていてもよい。代替として、アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基のうち２つは、式−（ＣＲＲ’）ｓ−Ｘ’−（Ｃ’’Ｒ’’Ｒ’’’）ｄ−の置換基で任意選択的に置き換えられてもよく、式中、ｓおよびｄは、独立して０〜３の整数であり、Ｘ’は、−Ｏ−、−ＮＲ’−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、または−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−である。置換基Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’、およびＲ’’’は、好ましくは、水素、置換または非置換のアルキル、置換または非置換のヘテロアルキル、置換または非置換のシクロアルキル、置換または非置換のヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、および置換または非置換のヘテロアリールから独立して選択される。
【００５８】
本明細書で使用される場合、「ヘテロ原子」または「環ヘテロ原子」という用語は、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、リン（Ｐ）、およびケイ素（Ｓｉ）を含むことが意図される。
【００５９】
本明細書で使用される「置換基（ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ  ｇｒｏｕｐ）」は、以下の部分から選択される基を意味する：
（Ａ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、−ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−Ｎ３、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ならびに
（Ｂ）以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換されたアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル，アリール、ヘテロアリール：
（ｉ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、−ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−Ｎ３、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ならびに
（ｉｉ）以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換されたアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル，アリール、ヘテロアリール：
（ａ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、−ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−Ｎ３、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、および
（ｂ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、−ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−Ｎ３、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、非置換ヘテロアリールから選択される少なくとも１つの置換基で置換されたアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール。
【００６０】
本明細書で使用される「サイズ限定置換基（ｓｉｚｅ−ｌｉｍｉｔｅｄ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔまたはｓｉｚｅ−ｌｉｍｉｔｅｄ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ  ｇｒｏｕｐ）」は、「置換基（ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ  ｇｒｏｕｐ）」について前述した全ての置換基から選択される基を意味し、各置換または非置換のアルキルは置換または非置換のＣ１−Ｃ２０アルキルであり、各置換または非置換のヘテロアルキルは置換または非置換の２〜２０員ヘテロアルキルであり、各置換または非置換のシクロアルキルは置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキルであり、各置換または非置換のヘテロシクロアルキルは置換または非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキルであり、各置換または非置換のアリールは置換または非置換のＣ６−Ｃ１０アリールであり、各置換または非置換のヘテロアリールは置換または非置換の５〜１０員ヘテロアリールである。
【００６１】
本明細書で使用される「低級置換基」または「低級置換基（ｌｏｗｅｒ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔまたはｌｏｗｅｒ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ  ｇｒｏｕｐ）」は、「置換基（ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ  ｇｒｏｕｐ）」について前述した全ての置換基から選択される基を意味し、各置換または非置換のアルキルは置換または非置換のＣ１−Ｃ８アルキルであり、各置換または非置換のヘテロアルキルは置換または非置換の２〜８員ヘテロアルキルであり、各置換または非置換のシクロアルキルは置換または非置換のＣ３−Ｃ７シクロアルキルであり、各置換または非置換のヘテロシクロアルキルは置換または非置換の３〜７員ヘテロシクロアルキル、各置換または非置換のアリールは置換または非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、各置換または非置換のヘテロアリールは置換または非置換の５〜９員ヘテロアリールである。
【００６２】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の化合物中に記載される各置換基は、少なくとも１つの置換基で置換される。より具体的には、いくつかの実施形態において、本明細書に記載の化合物中に記載される各置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、および／または置換ヘテロアリーレンは、少なくとも１つの置換基で置換される。他の実施形態において、これらの基の少なくとも１つまたは全てが、少なくとも１つのサイズ限定置換基で置換される。他の実施形態において、これらの基の少なくとも１つまたは全てが、少なくとも１つの低級置換基で置換される。
【００６３】
本明細書に記載の化合物の他の実施形態において、各置換もしくは非置換のアルキルは、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ２０アルキルであってもよく、各置換もしくは非置換のヘテロアルキルは、置換もしくは非置換の２〜２０員ヘテロアルキルであり、各置換もしくは非置換のシクロアルキルは、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキルであり、各置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキルであり、各置換もしくは非置換のアリールは、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリールであり、かつ／または各置換もしくは非置換のヘテロアリールは、置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリールである。本明細書に記載の化合物のいくつかの実施形態において、各置換もしくは非置換のアルキレンは、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ２０アルキレンであり、各置換もしくは非置換のヘテロアルキレンは、置換もしくは非置換の２〜２０員ヘテロアルキレンであり、各置換もしくは非置換のシクロアルキレンは、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキレンであり、各置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレンは、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキレンであり、各置換もしくは非置換のアリーレンは、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレンであり、かつ／または各置換もしくは非置換のヘテロアリーレンは、置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリーレンである。
【００６４】
いくつかの実施形態において、各置換もしくは非置換のアルキルは、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキルであり、各置換もしくは非置換のヘテロアルキルは、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキルであり、各置換もしくは非置換のシクロアルキルは、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ７シクロアルキルであり、各置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換もしくは非置換の３〜７員ヘテロシクロアルキルであり、各置換もしくは非置換のアリールは、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリールであり、かつ／または各置換もしくは非置換のヘテロアリールは、置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリールである。いくつかの実施形態において、各置換もしくは非置換のアルキレンは、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキレンであり、各置換もしくは非置換のヘテロアルキレンは、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキレンであり、各置換もしくは非置換のシクロアルキレンは、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ７シクロアルキレンであり、各置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレンは、置換もしくは非置換の３〜７員ヘテロシクロアルキレンであり、各置換もしくは非置換のアリーレンは、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレンであり、かつ／または各置換もしくは非置換のヘテロアリーレンは、置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリーレンである。いくつかの実施形態において、化合物は、後述の実施例の項に記載される化学種である。
【００６５】
「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書に記載の化合物上に見出される特定の置換基に応じて、比較的毒性の低い酸または塩基を用いて調製される活性化合物の塩を含むことが意図される。本発明の化合物が比較的酸性の官能基を含有する場合、ニートな溶媒または好適な不活性溶媒のいずれかの中で、そのような化合物の中性形態を十分な量の所望の塩基と接触させることによって、塩基付加塩を得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩の例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ、もしくはマグネシウムの塩、または同様の塩が挙げられる。本発明の化合物が比較的塩基性の官能基を含有する場合、ニートな溶媒または好適な不活性溶媒のいずれかの中で、そのような化合物の中性形態を十分な量の所望の酸と接触させることにより、酸付加塩を得ることができる。薬剤的に許容される酸付加塩の例として、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸一水素酸、リン酸、リン酸一水素酸、リン酸二水素酸、硫酸、硫酸一水素酸、ヨウ化水素酸、または亜リン酸等の無機酸に由来するもの、および酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸等の比較的毒性の低い有機酸に由来する塩が挙げられる。また、アルギン酸等のアミノ酸の塩、およびグルクロン酸またはガラクツロン酸等の有機酸の塩も含まれる（例えば、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ６６：１−１９（１９７７）を参照）。ある特定の本発明の化合物は、化合物を塩基付加塩または酸付加塩のいずれかに変換させることができる塩基性官能基および酸性官能基の両方を含有する。当業者に既知の他の薬学的に許容される担体は、本発明に好適である。塩は、対応する遊離塩基形態である水性または他のプロトン性溶媒中でより溶解度が高い傾向がある。他の場合において、調製物は、使用前に緩衝液と併せた、４．５〜５．５のｐＨ範囲の１ｍＭ〜５０ｍＭヒスチジン、０．１％〜２％スクロース、２％〜７％マンニトール中の凍結乾燥粉末であってもよい。
【００６６】
したがって、本発明の化合物は、薬学的に許容される酸等と一緒に塩として存在してもよい。本発明は、そのような塩を含む。そのような塩の例として、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩（例えば、（＋）−酒石酸塩、（−）−酒石酸塩、またはラセミ混合物を含むそれらの混合物）、コハク酸塩、安息香酸塩、およびグルタミン酸等のアミノ酸との塩が挙げられる。これらの塩は、当業者に既知の方法によって調製されてもよい。
【００６７】
化合物の中性形態は、好ましくは、塩を塩基または酸と接触させ、従来の方法で親化合物を単離することによって再生される。化合物の親形態は、極性溶媒中の溶解性等の特定の物理特性において、種々の塩形態と異なる。
【００６８】
塩形態に加えて、本発明は、プロドラッグ形態の化合物を提供する。本明細書に記載の化合物のプロドラッグは、生理的条件下で容易に化学変化を起こして本発明の化合物を提供する化合物である。さらに、プロドラッグは、生体外環境における化学的または生化学的方法によって本発明の化合物に変換することができる。例えば、プロドラッグは、好適な酵素または化学試薬とともに経皮パッチリザーバ内に入れられると、徐々に本発明の化合物に変換することができる。
【００６９】
本発明の特定の化合物は、非溶媒和形態および溶媒和形態（水和形態を含む）で存在することができる。一般的に、溶媒和形態は非溶媒和形態と等価であり、本発明の範囲内に包含される。本発明の特定の化合物は、複数の結晶形態または非晶形態で存在してもよい。一般的に、全ての物理的形態が、本発明によって企図される使用に当てはまり、本発明の範囲内であることが意図される。
【００７０】
本明細書で使用される場合、「塩」という用語は、本発明の方法に使用される化合物の酸塩または塩基塩を指す。許容される塩の説明的な例として、鉱酸（塩酸、臭化水素酸、リン酸等）の塩、有機酸（酢酸、プロピオン酸、グルタミン酸、クエン酸等）の塩、四級アンモニウム（ヨウ化メチル、ヨウ化エチル等）の塩が挙げられる。
【００７１】
本発明の特定の化合物は、不斉炭素原子（光学中心もしくはキラル中心）または二重結合を有する：絶対立体化学の観点から（Ｒ）−もしくは（Ｓ）−、またはアミノ酸の場合は（Ｄ）−もしくは（Ｌ）−と定義され得る、鏡像異性体、ラセミ体、ジアステレオマー、互変異性体、幾何異性体、立体異性体、および個々の異性体が、本発明の範囲内に包含される。本発明の化合物は、合成および／または単離するには不安定過ぎることが当該技術分野で分かっている化合物は含まない。本発明は、ラセミ形態および光学的に純粋な形態の化合物を含むことが意図される。光学的に活性な（Ｒ）−および（Ｓ）−、もしくは（Ｄ）−および（Ｌ）−異性体は、キラルシントンもしくはキラルな試薬を使用して調製することができるか、または従来技術を用いて分解することができる。本明細書に記載の化合物がオレフィン結合または他の幾何学的非対称中心を含有する場合、別途指定のない限り、化合物は、ＥおよびＺ幾何異性体の両方を含むことが意図される。
【００７２】
本明細書で使用される場合、「異性体」という用語は、同じ数および種類の原子を有し、故に同じ分子量を有するが、原子の構造的配置または立体配置に関しては異なる化合物を意味する。
【００７３】
本明細書で使用される「互変異性体」という用語は、平衡状態で存在し、ある異性体から別の異性体に容易に変換される２つ以上の構造異性体のうちの１つを指す。
【００７４】
本発明の特定の化合物が互変異性型で存在し得ることは当業者には明らかであり、化合物の全てのそのような互変異性形態が本発明の範囲内である。
【００７５】
別途記載のない限り、本明細書に示される構造は、その構造の全ての立体化学式（すなわち、各不斉中心のＲおよびＳ立体配置）を含むことも意図される。したがって、本発明の化合物の単一の立体化学異性体、ならびに鏡像異性体およびジアステレオマーの混合物は、本発明の範囲内である。
【００７６】
別途記載のない限り、本明細書に示される構造は、１つ以上の同位体が濃縮された原子の存在においてのみ異なる化合物を含むことも意図される。例えば、重水素もしくは三重水素による水素の置換、または１３Ｃ−もしくは１４Ｃ濃縮炭素による炭素の置換を除いて、本発明の構造を有する化合物は本発明の範囲内である。
【００７７】
本発明の化合物は、そのような化合物を構成する原子のうちの１つ以上に、不自然な比率の原子同位体を含有し得る。例えば、化合物は、例えば、トリチウム（３Ｈ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）、または炭素−１４（１４Ｃ）等の放射性同位元素で放射性標識することができる。本発明の化合物の全ての同位体変異は、放射性であろうとなかろうと、本発明の範囲内に包含される。
【００７８】
【化５】
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は、化学的部分が、分子または化学式の残りに結合する点を表す。
【００７９】
本明細書で使用される「ａ」または「ａｎ」という用語は、１つ以上を意味する。また、「［ｎ］で置換された」という句は、本明細書で使用される場合、特定の基が、あらゆる指定された置換基のうちの１つ以上で置換されてもよいことを意味する。例えば、アルキル基またはヘテロアリール基等の基が、「非置換Ｃ１−Ｃ２０アルキル、または非置換２〜２０員ヘテロアルキルで置換される」場合、その基は、１つ以上の非置換Ｃ１−Ｃ２０アルキル、および／または１つ以上の非置換２〜２０員ヘテロアルキルを含有してもよい。さらに、ある部分がＲ置換基で置換される場合、その基は、「Ｒで置換された」と称されてもよい。ある部分がＲで置換される場合、その部分は、少なくとも１つのＲ置換基で置換され、各Ｒ置換基は任意選択的に異なっていてもよい。
【００８０】
本発明の化合物の記載は、当業者に既知の化学結合の原則によって限定される。したがって、ある基が多くの置換基のうちの１つ以上によって置換されてもよい場合、そのような置換基は、化学結合の原則に準拠するように、また、本質的に不安定ではなく、かつ／または水性条件、中性条件、およびいくつかの既知の生理的条件等の周囲条件下で不安定になる可能性があることが当業者に既知である化合物を付与するように、選択される。例えば、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、当業者に既知の化学結合の原則に準拠して環ヘテロ原子を介して分子の残りに付着しており、それによって本質的に不安定な化合物が回避される。
【００８１】
「治療する」または「治療」という用語は、緩和；寛解；症状の軽減、または傷害、病態、もしくは状態を患者がより耐えられるものにすること；変性または減退の速度を遅延させること；変性の最終点の衰弱をより少なくすること；患者の身体的または精神低健康を向上させること等のあらゆる客観的または主観的パラメータを含む、傷害、疾患、病態、または状態の治療または回復における成功のあらゆる兆候を指す。症状の治療または回復は、理学的検査、神経精神医学的検査、および／または精神医学的評価の結果を含む、客観的または主観的パラメータに基づき得る。例えば、本明細書に記載の特定の方法は、癌（例えば、多発性骨髄腫、分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病（Ｉ型もしくはＩＩ型）を治療する。癌の発生率を減少させることにより、および／または癌の寛解を引き起こすことにより、癌を治療する。例えば、本明細書に記載の特定の方法は、癌の発現、増殖、転移、または進行を減少させるかまたは軽減するかまたは予防することによって癌を治療し；精神衛生を向上させること、精神機能を高めること、精神機能の低下を遅延させること、認知症を軽減すること、認知症の発症を遅延させること、認知技能を向上させること、認知技能の損失を減少させること、記憶力を向上させること、記憶力の低下を減少させること、または生存率を延長することによって神経変性を治療し；脱髄性疾患の症状を軽減することまたはミエリンの損失を減少させることまたはミエリンの量を増加させることまたはミエリンのレベルを増加させることによって脱髄性疾患を治療し；糖尿病の症状を軽減することまたはインスリン産生細胞の損失を減少させること膵臓細胞の損失を減少させることまたはインスリン感受性を減少させることによって糖尿病を治療し；癌の症状を軽減することによって癌を治療するか、または神経変性の症状を治療することによって神経変性を治療する。癌（例えば、多発性骨髄腫、分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病の症状は、当業者に既知であるか、または当業者によって決定されてもよい。「治療する」という用語、およびその活用形は、傷害、病態、状態、または疾患の予防（例えば、癌、神経変性疾患、脱髄性疾患、および／または糖尿病の１つ以上の症状の発生の予防）を含む。
【００８２】
「有効量」は、定められた目的（例えば、それを投与することの効果を達成する、疾患を治療する、酵素の活性を低下させる、酵素の活性を増加させる、疾患または状態の１つ以上の症状を軽減する）を達成するのに十分な量である。「有効量」の一例は、疾患の症状（単数もしくは複数）の治療、予防、または軽減に寄与するのに十分な量であり、これはまた「治療有効量」と称されてもよい。症状（単数もしくは複数）の「軽減」（およびこの句の文法上の等価物）は、症状（複数可）の重症度もしくは頻度の減少、または症状（複数可）の排除を意味する。薬物の「予防的有効量」は、対象に投与された場合に、意図される予防効果（例えば、傷害、疾患、病態、または状態の発生（もしくは再発）を予防または遅延すること、あるいは、傷害、疾患、病態、もしくは状態、またはそれらの症状の発生（もしくは再発）の可能性を低減すること）を有する薬物の量である。完全な予防効果は、必ずしも１回用量の投与によって生じる必要はなく、一連の用量の投与後にのみ生じる場合がある。したがって、予防的有効量は、１回以上の投与において投与されてもよい。本明細書で使用される「活性を低下させる量」は、アンタゴニストの非存在下と比較して酵素またはタンパク質の活性を低下させるのに必要なアンタゴニスト（阻害剤）の量を指す。本明細書で使用される「活性を増加させる量」は、アゴニストの非存在下と比較して酵素またはタンパク質の活性を増加させるのに必要なアゴニスト（アクチベーター）の量を指す。本明細書で使用される「機能を崩壊させる量」は、アンタゴニストの非存在下と比較して酵素またはタンパク質の機能を崩壊させるのに必要なアンタゴニスト（阻害剤）の量を指す。本明細書で使用される「機能を増加させる量」は、アゴニストの非存在下と比較して酵素またはタンパク質の機能を増加させるのに必要なアゴニスト（アクチベーター）の量を指す。正確な量は治療の目的に依存し、既知の技術を用いて当業者によって確認される（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ（ｖｏｌｓ．１−３，１９９２）；Ｌｌｏｙｄ，Ｔｈｅ  Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）；Ｐｉｃｋａｒ，Ｄｏｓａｇｅ  Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９）；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００３，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓを参照のこと）。
【００８３】
疾患（例えば、癌（例えば、多発性骨髄腫、分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病）に関連した物質または物質の活性もしくは機能の文脈において「関連する」又は「〜に関連する」という用語は、疾患（例えば、癌（例えば、多発性骨髄腫、分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病）が、物質または物質の活性もしくは機能によって、（全体または一部において）引き起こされるか、または疾患の症状が（全体または一部において）引き起こされることを意味する。例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）活性の増加に関連する疾患または状態の症状は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性の増加（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のリン酸化もしくはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性もしくはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性の増加、またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）シグナル伝達もしくはシグナル経路の活性、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のＲＮａｓｅ活性の増加）に（全体的にまたは一部）起因する症状であってもよい。本明細書で使用される場合、疾患に関連していると記載されるものは、原因物質である場合、疾患の治療の標的であり得る。例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の活性（例えば、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性もしくは経路）の増加に関連する疾患は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性もしくはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路、またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性もしくは経路の活性レベルを低下させるのに効果的な薬剤（例えば、本明細書に記載の化合物）を用いて治療され得る。例えば、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）に関連する疾患は、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性レベルを低下させるのに効果的な薬剤（例えば、本明細書に記載の化合物）、またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の下流化合物またはエフェクターを用いて治療され得る。例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）に関連する疾患は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性レベルを低下させるのに効果的な薬剤（例えば、本明細書に記載の化合物）、またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の下流化合物もしくはエフェクターを用いて治療され得る。
【００８４】
「対照」または「対照実験」は、その単純な通常の意味に従って使用され、実験の手順、試薬、または変数が省略されていることを除いて平行実験におけるのと同様に、実験の対象または試薬が処理される実験を指す。場合によって、対照は、実験効果を評価する上で比較の基準として使用される。
【００８５】
「接触」は、その単純な通常の意味に従って使用され、少なくとも２つの異なる種（例えば生体分子または細胞を含む化学化合物）が、反応するか、相互作用するか、または物理的に接触するのに十分に近位になることを可能にするプロセスを指す。しかしながら、結果として生じる反応産物は、添加される試薬間の反応から、または反応混合物中で生成することができる、添加される試薬のうちの１つ以上の中間体から、直接生成できることを理解されたい。「接触させること」という用語は、２つの種が反応する、相互作用する、または物理的に接触することを可能にすることを含んでもよく、２つの種は、本明細書に記載の化合物と、タンパク質または酵素（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）もしくはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）もしくはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の成分もしくはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の成分）とであってもよい。いくつかの実施形態において、接触させることは、本明細書に記載の化合物がシグナル経路に関与するタンパク質または酵素（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）タンパク質もしくはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路）と接触することを可能にすることを含む。
【００８６】
本明細書において定義される場合、タンパク質阻害剤（例えば、アンタゴニスト）相互作用に関連して「阻害」、「阻害する」、「阻害すること」等の用語は、阻害剤の非存在下におけるタンパク質の活性または機能と比較してタンパク質の活性または機能に負の影響（例えば、減少）を及ぼすことを意味する。いくつかの実施形態において、阻害は、疾患または疾患の症状の軽減を指す。いくつかの実施形態において、阻害は、シグナル伝達経路またはシグナル経路の活性における低下を指す。したがって、阻害は、少なくとも一部、部分的に、または完全に、刺激をブロックすること、活性化を抑制すること、阻止すること、もしくは遅延させること、またはシグナル伝達もしくは酵素活性もしくはタンパク質の量を不活性化すること、脱感作すること、もしくは下方制御することを含む。いくつかの実施形態において、阻害は、シグナル伝達経路またはシグナル経路（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）もしくはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）もしくはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路もしくはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路もしくはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のリン酸化によって活性化される経路）の活性の低下を指す。したがって、阻害は、少なくとも一部、部分的に、または完全に、刺激を減少させること、活性化を低下させるかもしくは抑制すること、または、疾患において増加したシグナル伝達もしくは酵素活性もしくはタンパク質の量（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）活性もしくはタンパク質のレベル、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の成分のレベルもしくは活性、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）活性もしくはタンパク質のレベル、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の成分のレベルもしくは活性：それぞれが、癌（例えば、多発性骨髄腫、もしくは分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病）と関連する）を不活性化すること、脱感作すること、もしくは下方制御することを含んでもよい。阻害は、少なくとも一部、部分的に、または完全に、刺激を減少させること、活性化を低下させるかもしくは抑制すること、または別のタンパク質のレベルを調節できるか、または細胞の生存率を増加させることができる（例えば、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の活性における低下は、非疾患対照に関連するリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の活性に増加を有するかもしくは有しない細胞の細胞生存率を増加させ得るか、またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の活性における低下は、非疾患対照に関連するＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の活性に増加を有するかもしくは有しない細胞の細胞生存率を増加させ得る）シグナル伝達もしくは酵素活性もしくはタンパク質（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）、経路においてＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）から下流のタンパク質、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）によって活性化される経路において下流のタンパク質）の量を不活性化すること、脱感作すること、もしくは下方制御することを含んでもよい。
【００８７】
本明細書において定義される場合、タンパク質アクチベーター（例えば、アゴニスト）相互作用に関連して「活性化」、「活性化する」、「活性化すること」等の用語は、アクチベーター（例えば、本明細書に記載の化合物）の非存在下におけるタンパク質の活性または機能と比較してタンパク質（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）を含む経路の成分、またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）を含む経路の成分）の活性または機能に正の影響（例えば、増加）を及ぼすことを意味する。いくつかの実施形態において、活性化は、シグナル伝達経路またはシグナル経路（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路）の活性の増加を指す。したがって、活性化は、少なくとも一部、部分的に、または完全に、刺激を増加させること、活性化を増加させるかもしくは可能にすること、または、疾患において減少したシグナル伝達もしくは酵素活性もしくはタンパク質の量（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）活性のレベル、または癌（例えば、多発性骨髄腫もしくは分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病に関連するＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）もしくはタンパク質のリン酸化によって減少したタンパク質のレベルもしくは活性）を活性化すること、感作すること、もしくは上方制御することを含んでもよい。活性化は、少なくとも一部、部分的に、または完全に、刺激を増加させること、活性化を増加させるかもしくは可能にすること、または、別のタンパク質のレベルを調節できるか、または細胞の生存率を増加させることができる（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）活性の増加は、非疾患対照に関連するＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）活性の低下を有するかもしくは有しない細胞の細胞生存率を増加させ得る）シグナル伝達もしくは酵素活性もしくはタンパク質（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の下流のタンパク質、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）によって活性化もしくは上方制御されるタンパク質、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のリン酸化によって活性化もしくは上方制御されるタンパク質）の量を活性化すること、感作すること、もしくは上方制御することを含んでもよい。
【００８８】
「調節因子」という用語は、標的分子のレベルまたは標的分子の機能を増加または低下させる組成物を指す。いくつかの実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のリン酸化またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のリン酸化によって活性化される経路の調節因子は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路に関連する疾患（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）活性もしくはタンパク質、またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の活性もしくはタンパク質、またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のリン酸化、またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のリン酸化によって活性化される経路のレベルの増加に関連する疾患、例えば、癌（例えば、多発性骨髄腫、もしくは分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病）に関連する疾患、あるいはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路によっては引き起こされないが、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の活性の調節（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路のレベルまたは活性のレベルの低下）の恩恵を受け得る疾患の１つ以上の症状の重症度を軽減する化合物である。実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路（例えば、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路）の調節因子は、抗癌剤である。実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路（例えば、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路）の調節因子は、神経保護剤である。実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路（例えば、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路）の調節因子は、脱ミエリン化防止剤である。実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の調節因子は、記憶増強剤である。実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路（例えば、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路）の調節因子は、抗糖尿病薬である。実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路（例えば、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路）の調節因子は、抗眼疾患剤である。実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路（例えば、リン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路）の調節因子は、抗線維症剤である。
【００８９】
「患者」または「それを必要とする対象」は、本明細書に提供される化合物または薬学的組成物の投与によって治療することができる疾患または状態に罹患しているかまたは罹患し易い生物を指す。非限定的な例として、ヒト、他の哺乳動物、ウシ、ラット、マウス、イヌ、サル、ヤギ、ヒツジ、ウシ、シカ、および他の非哺乳動物が挙げられる。いくつかの実施形態において、患者はヒトである。いくつかの実施形態において、患者は類人猿である。いくつかの実施形態において、患者はサルである。いくつかの実施形態において、患者はマウスである。いくつかの実施形態において、患者は実験動物である。いくつかの実施形態において、患者はラットである。いくつかの実施形態において、患者は試験動物である。いくつかの実施形態において、患者は新生動物である。いくつかの実施形態において、患者は新生児である。いくつかの実施形態において、幼若動物である。いくつかの実施形態において、患者は若年のヒトである。いくつかの実施形態において、患者は新生哺乳動物である。いくつかの実施形態において、患者は高齢動物である。いくつかの実施形態において、患者は高齢ヒトである。いくつかの実施形態において、患者は高齢哺乳動物である。いくつかの実施形態において、患者は老齢期の患者である。
【００９０】
「疾患」または「状態」は、本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る患者または対象の状態または健康状態を指す。いくつかの実施形態において、疾患は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）リン酸化、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）ＲＮａｓｅ活性、またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路活性、またはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のリン酸化によって活性化される経路のレベルの増加に関連する（例えば、それによって引き起こされる）疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、神経変性に関連する（例えば、それによって引き起こされる）疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、神経細胞死に関連する（例えば、それによって引き起こされる）疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、細胞死に関連する（例えば、それによって引き起こされる）疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、膵細胞の死滅に関連する（例えば、それによって引き起こされる）疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、インスリン産生細胞の死滅に関連する（例えば、それによって引き起こされる）疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、ミエリンの損失に関連する（例えば、それによって引き起こされる）疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、ミエリンの減少に関連する（例えば、それによって引き起こされる）疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）活性（例えば、ＲＮａｓｅ活性）、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）リン酸化、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路活性、またはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路活性のレベルの増加に関連する（例えば、それによって引き起こされる）疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、癌（例えば、多発性骨髄腫または分泌細胞癌）である。いくつかの実施形態において、疾患は神経変性疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は脱髄性疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は糖尿病である。いくつかの実施形態において、疾患は間質性肺疾患（ＩＬＤ）である。いくつかの実施形態において、疾患は特発性肺線維症（ＩＰＦ）である。いくつかの実施形態において、疾患は線維性疾患である。いくつかの実施形態において、疾患は、眼疾患（例えば、視力障害を引き起こす疾患）である。
【００９１】
疾患、障害、または状態の例として、限定されないが、癌（例えば、多発性骨髄腫または分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、および糖尿病が挙げられる。場合によって、「疾患」または「障害」は癌を指す。いくつかのさらなる場合において、「癌」は、ヒトの癌、および細胞腫、肉腫、腺癌、リンパ腫、白血病、黒色腫等を指し、それには、固形癌およびリンパ系癌、腎癌、乳癌、肺癌、膀胱癌、結腸癌、卵巣癌、前立腺癌、膵癌、胃癌、脳癌、頭頸部癌、皮膚癌、子宮癌、精巣癌、神経膠腫、食道癌、肝癌（肝細胞癌を含む）、リンパ腫（Ｂ細胞性急性リンパ芽球性リンパ腫を含む）、非ホジキンリンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫、小細胞型リンパ腫、および大細胞型リンパ腫）、ホジキンリンパ腫、白血病（ＡＭＬ、ＡＬＬ、およびＣＭＬを含む）、ならびに／または多発性骨髄腫が含まれる。
【００９２】
本明細書で使用される場合、「癌」という用語は、白血病、リンパ腫、細胞腫、および肉腫を含む、哺乳動物に見られるあらゆる種類の癌、新生物、または悪性腫瘍を指す。本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る癌の例として、多発性骨髄腫、血液癌、リンパ腫、肉腫、膀胱癌、骨癌、脳腫瘍、子宮頸癌、結腸癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、腎癌、骨髄腫、甲状腺癌、白血病、前立腺癌、乳癌（例えば、ＥＲ陽性、ＥＲ陰性、化学療法抵抗性、ハーセプチン耐性、ＨＥＲ２陽性、ドキソルビシン耐性、タモキシフェン耐性、腺管癌、小葉癌、原発性、転移性）、卵巣癌、膵癌、肝癌（例えば、肝細胞癌）、肺癌（例えば、非小細胞肺癌、扁平上皮肺癌、腺癌、大細胞肺癌、小細胞肺癌、カルチノイド、肉腫）、多形神経膠芽腫、神経膠腫、または黒色腫が挙げられる。さらなる例として、甲状腺癌、内分泌系癌、脳癌、乳癌、子宮頸癌、結腸癌、頭頸部癌、肝癌、腎癌、肺癌、非小細胞肺癌、黒色腫、中皮腫、卵巣癌、肉腫、胃癌、子宮癌または髄芽細胞腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、多形神経膠芽腫、卵巣癌、横紋筋肉腫、原発性血小板血症、原発性マクログロブリン血症、原発性脳腫瘍、癌、悪性膵臓インスリノーマ、悪性カルチノイド、膀胱癌、前悪性皮膚病変、精巣癌、リンパ腫、甲状腺癌、神経芽細胞腫、食道癌、尿生殖路癌、悪性高カルシウム血症、子宮内膜癌、副腎皮質癌、膵内分泌腺もしくは膵外分泌腺の新生物、甲状腺髄様癌、甲状腺髄様癌、黒色腫、結腸直腸癌、乳頭様甲状腺癌、肝細胞癌、乳房パジェット病、葉状腫瘍、小葉癌、腺管癌、膵星細胞癌、肝星細胞癌、または前立腺癌が挙げられる。
【００９３】
「白血病」という用語は、広義で造血器官の進行性悪性疾患を指し、概して、血液および骨髄中の白血球およびそれらの前駆細胞の異常な増殖および発生を特徴とする。白血病は、一般に、（１）疾患の期間および特徴（急性または慢性）；（２）関与する細胞の種類（骨髄系（骨髄性）、リンパ系（リンパ性）、または単球系）；および（３）血液中の異常な細胞の数の増加または非増加（白血病性または無白血病性（亜白血性））に基づいて臨床学的に分類される。本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る白血病の例として、例えば、急性非リンパ性白血病、慢性リンパ球性白血病、急性顆粒球性白血病、慢性顆粒球性白血病、急性前骨髄球性白血病、成人Ｔ細胞白血病、無白血病性白血病、白血病（ｌｅｕｋｏｃｙｔｈｅｍｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、好塩基球性白血病、芽細胞白血病、ウシ白血病、慢性骨髄性白血病、皮膚白血病、胎生細胞性白血病、好酸球性白血病、グロス白血病、へアリーセル白血病、血芽球性白血病、血球芽細胞性白血病、組織球性白血病、幹細胞性白血病、急性単球性白血病、白血球減少性白血病、リンパ性白血病、リンパ芽球性白血病、リンパ球性白血病、リンパ向性白血病、リンパ様白血病、リンパ肉腫細胞性白血病、マスト細胞白血病、巨核球性白血病、小骨髄芽球性白血病、単球性白血病、骨髄芽球性白血病、骨髄性白血病、骨髄顆粒球性白血病、骨髄単球性白血病、ネーゲリ白血病、形質細胞白血病、多発性骨髄腫、形質細胞性白血病、前骨髄球性白血病、リーダー細胞性白血病、シリング白血病、幹細胞性白血病、亜白血性白血病、または未分化細胞性白血病が挙げられる。
【００９４】
「肉腫」という用語は、一般に、胎児結合組織等の物質で構成され、一般に、繊維状または均質な物質中に埋め込まれた緊密に詰まった細胞で構成される腫瘍を指す。本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る肉腫は、軟骨肉腫、線維肉腫、リンパ肉腫、黒色肉腫、粘液肉腫、骨肉腫、アバーネシー肉腫、脂肪性肉腫、脂肪肉腫、胞状軟部肉腫、エナメル芽細胞肉腫、ブドウ状肉腫、緑色肉腫、絨毛肉腫、胎児性肉腫、ウィルムス腫瘍肉腫、子宮内膜肉腫、間質性肉腫、ユーイング肉腫、筋膜肉腫、線維芽細胞性肉腫、巨細胞肉腫、顆粒球性肉腫、ホジキン肉腫、特発性多発性色素性出血性肉腫、Ｂ細胞免疫芽球性肉腫、リンパ腫、Ｔ細胞免疫芽球性肉腫、イェンセン肉腫、カポジ肉腫、クッパー細胞肉腫、血管肉腫、白血肉腫、悪性間葉肉腫、傍骨性骨肉腫、網状赤血球肉腫、ラウス肉腫、漿液嚢胞性肉腫、滑膜肉腫、または毛細管拡張性肉腫を含む。
【００９５】
「黒色腫」という用語は、皮膚および他の器官のメラニン細胞系から生じる腫瘍を意味すると解釈される。本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る黒色腫として、例えば、末端黒子型黒色腫、無色素性黒色腫、良性若年性黒色腫、クラウドマン黒色腫、Ｓ９１黒色腫、ハーディング−パッセー黒色腫、若年性黒色腫、悪性黒子由来黒色腫、悪性黒色腫、結節性黒色腫、爪下黒色腫、または表在拡大型黒色腫が挙げられる。
【００９６】
「癌腫」という用語は、周辺組織に浸潤して転移を起こす傾向がある上皮細胞で構成された悪性新生物を指す。本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る癌腫の例として、例えば、甲状腺髄様癌、家族性甲状腺髄様癌、腺房癌、腺房細胞癌、腺嚢癌腫、腺様嚢胞癌、腺様癌、副腎皮質癌、肺胞癌、肺胞細胞癌、基底細胞癌、基底細胞性癌、類基底細胞癌、基底扁平細胞癌、細気管支肺胞上皮癌、細気管支癌、気管支原性癌、大脳様癌、胆管細胞性癌、絨毛癌、膠様癌、面皰癌、子宮体部癌、篩状癌、よろい状癌、皮膚癌、円柱状癌、円柱細胞癌、腺管癌（ｄｕｃｔ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、腺管癌（ｄｕｃｔａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、硬膜癌、胎生期癌、脳様癌、類表皮癌、腺様上皮腫、外方増殖性癌、潰瘍癌、線維癌、ゼラチン状癌腫（ｇｅｌａｔｉｎｉｆｏｒｎｉ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、ゼラチン状癌種（ｇｅｌａｔｉｎｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、巨細胞癌（ｇｉａｎｔ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、巨細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｇｉｇａｎｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、腺癌、顆粒膜細胞癌、毛母癌、血様癌、肝細胞癌、ヒュルトレ細胞癌、硝子状癌、副腎様癌、乳児胎児性癌、上皮内癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｉｎ  ｓｉｔｕ）、表皮内癌、上皮内癌（ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、クロムペッヘル癌（Ｋｒｏｍｐｅｃｈｅｒ’ｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、クルチツキー細胞癌、大細胞癌、レンズ状癌（ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、レンズ状癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒｅ）、脂肪性癌、小葉癌、リンパ上皮癌、髄様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｅｄｕｌｌａｒｅ）、髄様癌（ｍｅｄｕｌｌａｒｙ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、黒色癌、軟性癌、粘液性癌、粘液分泌癌、粘液細胞癌、粘表皮癌、粘液癌、粘液性癌、粘液腫状癌、上咽頭癌、燕麦細胞癌、骨化性癌、類骨癌、乳頭癌、門脈周囲癌、前浸潤癌、有棘細胞癌、糊状癌、腎臓の腎細胞癌、予備細胞癌、肉腫様癌、シュナイダー癌腫、硬性癌、陰嚢癌、印環細胞癌、単純癌、小細胞癌、ソレノイド癌、回転楕円面細胞癌腫、紡錘細胞癌、海綿様癌、扁平上皮癌（ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、扁平上皮癌（ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、紐癌（ｓｔｒｉｎｇ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、血管拡張性癌、毛細血管拡張性癌、移行上皮癌、結節癌、管状癌、結節性癌、疣状癌、または絨毛癌が挙げられる。
【００９７】
本明細書で使用される場合、「神経変性疾患」という用語は、対象の神経系の機能が（例えば、神経変性疾患を有しない対照対象と比較して）損なわれる疾患または状態を指す。本明細書に記載の化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る神経変性疾患の例として、アレキサンダー病、アルパース病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、毛細血管拡張性運動失調、バッテン病（シュピールマイアー・フォークト・シェーグレン・バッテン病としても知られている）、ウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）、カナバン病、コケイン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルト・ヤコブ病、前頭側頭型認知症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ハンチントン病、ＨＩＶ関連認知症、ケネディ病、クラッベ病、クールー病、レビー小体型認知症、マシャド・ジョセフ病（脊髄小脳変性症３型）、多発性硬化症、多系統萎縮症、ナルコレプシー、神経ボレリア症、パーキンソン病、ペリツェウス・メルツバッヘル病、ピック病、原発性側索硬化症、プリオン病、レフサム病、サンドホフ病、シルダー病、悪性貧血に続発する亜急性連合性脊髄変性症、統合失調症、脊髄小脳失調症（様々な特徴を伴う複数の型）、脊髄性筋萎縮症、スティール・リチャードソン・オルゼウスキー症候群、ウォルフラム症候群、横断性脊髄炎、シャルコー・マリー・トゥース病（ＣＭＴ）、または脊髄癆が挙げられる。本明細書に記載の化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る神経変性疾患の例として、網膜色素変性症、筋萎縮性側索硬化症、網膜変性症、黄斑変性症、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、プリオン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、またはクールー病が挙げられる。
【００９８】
本明細書で使用される場合、「脱髄性疾患」という用語は、対象のニューロンの髄鞘が（例えば、脱髄性疾患を有しない対照対象と比較して）損なわれているかまたは損なわれる疾患または状態を指す。本明細書に記載の化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る脱髄性疾患の例として、ウォルフラム症候群、ペリツェウス・メルツバッヘル病、横断性脊髄炎、シャルコー・マリー・トゥース病、および多発性硬化症が挙げられる。
【００９９】
本明細書で使用される場合、「糖尿病」または「真性糖尿病」という用語は、対象が高血糖を有する疾患または状態を指す。本明細書に記載の化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る糖尿病の例として、対象がインスリンを産生できないこと、または対象の代謝要求に対して十分なインスリンを産生できないことを特徴とするＩ型糖尿病（Ｉ型真性糖尿病）；インスリン抵抗性（すなわち、対象（例えば、対象の細胞）がインスリンを適切に使用できないこと）を特徴とするＩＩ型糖尿病（ＩＩ型真性糖尿病）；および妊娠中の高血糖である妊娠糖尿病が挙げられる。実施形態において、糖尿病はＩ型糖尿病である。実施形態において、糖尿病はＩＩ型糖尿病である。実施形態において、糖尿病は妊娠糖尿病である。実施形態において、糖尿病は、対象が、Ａ１Ｃテスト（例えば、６．５％以上）、空腹時血糖値試験（例えば、１２６ｍｇ／ｄＬ以上）、または経口グルコース負荷試験（例えば、２００ｍｇ／ｄＬ以上）によって決定される高血糖を有する疾患または状態である。実施形態において、糖尿病は、ウォルフラム症候群に関連する。
【０１００】
本明細書で使用される場合、「眼疾患」または「視力障害を引き起こす疾患」という用語は、対象の片目または両目の機能が（例えば、疾患を有しない対象と比較して）損なわれる疾患または状態を指す。本発明に記載の化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る眼疾患の例として、網膜色素変性症、網膜変性症、黄斑変性症、およびウォルフラム症候群が挙げられる。
【０１０１】
本明細書で使用される場合、「線維症」という用語は、過剰な線維性結合組織の形成を指す。「線維性疾患」という用語は、異常な線維症、またはその症状が（例えば、疾患を有しない対照対象と比較して）異常な線維症である疾患もしくは状態によって引き起こされる疾患または状態を指す。本発明に記載の化合物、薬学的組成物、または方法を用いて治療され得る線維性疾患の例として、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、心筋梗塞、心肥大、心不全、硬変症、アセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）肝毒性、Ｃ型肝炎肝疾患、肝脂肪変性（脂肪肝）、および肝線維症が挙げられる。
【０１０２】
本明細書で使用される「シグナル経路」という用語は、一方の成分における変化を１つ以上の他方の成分に伝達し、同様に別の成分に変化を伝達することができ、任意選択的に他のシグナル経路成分に伝えられる、細胞成分および任意選択的に細胞外成分（例えば、タンパク質、核酸、低分子、イオン、脂質）間の一連の相互作用を指す。
【０１０３】
「薬学的に許容される賦形剤」および「薬学的に許容される担体」は、活性薬剤の投与および対象による吸収を補助する物質を指し、患者に対する著しい有害な毒物学的効果を引き起こすことなく、本発明の組成物中に含めることができる。薬学的に許容される賦形剤の非限定的な例として、水、ＮａＣｌ、生理食塩水、乳酸リンゲル液、標準スクロース、標準グルコース、結合剤、充填剤、崩壊剤、滑沢剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤、食塩水（リンゲル液等）、アルコール、油、ゼラチン、炭水化物（ラクトース、アミロース、またはデンプン等）、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリジン、マンニトール、アカシアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガント、ケイ酸カルシウム、結晶セルロース、セルロース、シロップ、およびメチルセルロース、着色剤等が挙げられる。製剤は、滑沢剤（タルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱油等）；湿潤剤；乳化および懸濁剤；防腐剤（メチルおよびプロピルヒドロキシベンゾエート）；甘味剤；ならびに香味剤をさらに含むことができる。本明細書に記載の組成物は、当該技術分野で既知の手順を用いることによって患者に投与した後、活性成分の迅速な、持続的な、または遅延性の放出を提供するように配合することができる。そのような調製物は、滅菌することができ、必要であれば、例えば、滑沢剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与えるための塩、緩衝剤、着色剤、および／または本発明の化合物と有害に反応しない芳香族物質等の補助剤と混合することができる。当業者は、他の薬学的賦形剤が本発明において有用であることを理解するであろう。
【０１０４】
「調製」という用語は、活性化合物と、カプセルを提供する担体としてのカプセル化材料との配合を含むことが意図され、カプセル中で他の担体を含むかまたは含まない活性成分は担体に取り囲まれており、したがってそれと会合している。同様に、カシェ剤およびロゼンジ剤が含まれる。錠剤、散剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤、およびロゼンジ剤は、経口投与に適した固体剤形として使用することができる。
【０１０５】
本明細書で使用される場合、「投与する」という用語は、全身、局所、経口投与、坐剤としての投与、局所的接触、静脈内、非経口、腹腔内、筋肉内、病巣内、くも膜下腔内、頭蓋内、鼻腔内、もしくは皮下投与、局所（眼および粘膜（鼻腔内、膣内、および直腸内送達を含む）を含む）、肺（例えば、吸入器によるものを含む散剤もしくはエアロゾルの吸入もしくは吹送によって；気管内、鼻腔内、上皮および経皮）、経粘膜投与（例えば、頬側、舌下、口蓋、歯肉、経鼻、膣内、直腸内、もしくは経皮）、眼内、または徐放デバイス、例えばミニ浸透圧ポンプの埋め込みを含む、任意の経路による対象への投与を意味する。非経口投与は、例えば、静脈内、動脈内、筋肉内、細動脈内、皮内、皮下、腹腔内、心室内、および頭蓋内投与を含む。非経口投与は、単回ボーラス用量の形態であってもよいか、または例えば、持続注入ポンプによるものであってもよい。局所投与用の薬学的組成物および製剤は、経皮パッチ、軟膏、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、点眼剤、坐剤、噴霧剤、液剤、および散剤を含んでもよい。眼内送達のための方法は、局所投与（点眼薬）、バルーンカテーテルまたは結膜嚢に外科的に配置される眼科用インサートによる結膜下、眼周囲、または硝子体内への注射または導入を含むことができる。他の送達様式として、限定されないが、リポソーム製剤、静脈内注入、経皮パッチ等の使用が挙げられる。「同時投与」は、本明細書に記載の組成物が、１つ以上の追加の治療薬（例えば、抗癌剤、化学療法剤、眼疾患の治療薬、線維症の治療薬、脱髄性疾患の治療薬、糖尿病治療薬、または神経変性疾患の治療薬）の投与と同時に、その直前に、またはその直後に投与されることを意味する。本発明の化合物は、患者に単独投与することができるか、または同時投与することができる。本明細書に記載の組成物（例えば、化合物）はまた、抗ウイルス剤、ワクチン、抗体、免疫増強剤、免疫抑制剤、抗炎症剤等の任意の医薬品を含むことができる１つ以上の追加の活性成分と組み合わせて配合することもできる。同時投与は、化合物の個別または併用（１つより多くの化合物もしくは薬剤）の同時投与または連続投与を含むことが意図される。したがって、調製物は、所望により、他の活性物質と組み合わせることもできる（例えば、代謝分解を軽減するため）。本発明の組成物は、アプリケータースティック、溶液、懸濁剤、乳剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏、ペースト剤、ゼリー剤、塗布剤、散剤、およびエアロゾルとして配合され、局所的経路によって経皮的に送達することができる。経口調製物は、患者による消化に適した錠剤、丸剤、散剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ロゼンジ剤、カシェ剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、懸濁剤等を含む。固形調製物は、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、坐剤、および分散性顆粒剤を含む。液状調製物は、溶液、懸濁剤、および乳剤、例えば、水または水／プロピレングリコール溶液を含む。本発明の組成物は、持続放出および／または快適さを提供する成分を任意選択的に含んでもよい。そのような成分は、高分子量のアニオン性粘膜模倣ポリマー、ゲル化多糖類、および微粉化された薬物担体物質を含む。これらの化合物は、米国特許第４，９１１，９２０号、同第５，４０３，８４１号、同第５，２１２，１６２号、および同第４，８６１，７６０号により詳細に記載される。これらの特許の内容全体が、参照により、全ての目的のために本明細書に組み込まれる。本発明の組成物はまた、体内での徐放のために微粒子として送達されてもよい。例えば、微粒子は、生分解性の注射用ゲル製剤として（例えば、Ｇａｏ  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１２：８５７−８６３，１９９５を参照）、または経口投与用の微粒子として（例えば、Ｅｙｌｅｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４９：６６９−６７４，１９９７を参照）、皮下で徐々に放出する薬物含有微粒子の皮内注射によって投与することができる（Ｒａｏ，Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ  Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙｍ．Ｅｄ．７：６２３−６４５，１９９５を参照）。別の実施形態において、本発明の組成物の製剤は、細胞膜と融合するかまたは形質膜陥入されるリポソームの使用によって、すなわち、細胞の表面膜タンパク質受容体に結合してエンドサイトーシスを引き起こすリポソームに付着した受容体リガンドを用いることによって、送達することができる。リポソームを使用することにより、特に、リポソームの表面が標的細胞に特異的な受容体リガンドを担持するか、またはさもなければ特定の器官に優先的に誘導される場合、本発明の組成物の送達をインビボで標的細胞に集中させることができる（例えば、Ａｌ−Ｍｕｈａｍｍｅｄ，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌ．１３：２９３−３０６，１９９６；Ｃｈｏｎｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：６９８−７０８，１９９５；Ｏｓｔｒｏ，Ａｍ．Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．４６：１５７６−１５８７，１９８９を参照）。本発明の組成物はまた、ナノ粒子として送達することもできる。
【０１０６】
本発明によって提供される薬学的組成物は、活性成分（例えば、実施形態または実施例を含む本明細書に記載の化合物）が、治療有効量で、すなわち、その意図する目的を達成するために効果的な量で含有される組成物を含む。特定の用途に有効な実際の量は、とりわけ、治療される状態に依存する。疾患を治療するための方法において投与される場合、そのような組成物は、所望の結果、例えば、標的分子（例えば、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）、もしくはＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）シグナル伝達経路の成分、もしくはリン酸化Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）経路の成分）の活性の調節、および／または疾患の症状（例えば、癌（例えば、多発性骨髄腫もしくは分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病の症状）の軽減、排除、または進行の遅延を達成するために効果的な活性成分の量を含有する。本発明の化合物の治療有効量の決定は、特に、本明細書に記載の詳細な開示を考慮すると、十分に当業者の能力の範囲内である。
【０１０７】
哺乳動物に投与される投薬量および頻度（単回または複数回用量）は、様々な要因、例えば、その哺乳動物が別の疾患に罹患しているかどうかおよびその投与経路；レシピエントの体格、年齢、性別、健康状態、体重、ボディマス指数、および食生活；治療を受ける疾患症状の性質および程度（例えば、癌（例えば、多発性骨髄腫もしくは分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病の症状）、併用療法の種類、治療を受ける疾患からの合併症または健康に関連する問題に応じて変化し得る。他の治療計画または薬剤を、出願者の発明の方法および化合物と併せて使用することができる。確立された投薬量の調節および操作（例えば、頻度および期間）は、十分に当業者の能力の範囲内である。
【０１０８】
本明細書に記載のいずれの化合物についても、治療有効量は、細胞培養アッセイから最初に決定することができる。標的濃度は、本明細書に記載の方法または当該技術分野で既知の方法を用いて測定される、本明細書に記載の方法を達成することができる活性化合物（複数可）の濃度である。
【０１０９】
当該技術分野で周知であるように、ヒトに使用するための治療有効量は、動物モデルから決定することもできる。例えば、ヒトの用量は、動物において有効であると分かっている濃度を達成するように配合されてもよい。ヒトの投薬量は、化合物の有効性を監視することによって、また上述のように投薬量を上方または下方に調節することによって、調節することができる。前述の方法および他の方法に基づいてヒトにおける最大有効性を達成するための用量を調節することは、十分に当業者の能力の範囲内である。
【０１１０】
投薬量は、患者の要件および用いられる化合物に応じて変化し得る。本発明に関連して患者に投与される用量は、患者において経時的に有益な治療効果を達成するのに十分であるべきである。また用量のサイズは、任意の有害な副作用の存在、性質、および程度によっても決定される。特定の状況に適した投薬量の決定は、実施者の技術の範囲内である。一般的に、治療は、化合物の最大容量未満である、より少ない投薬量から開始される。その後、置かれた状況下で最大の効果に達するまで投薬量が少しずつ増量される。
【０１１１】
投薬量の量および間隔は、治療される特定の臨床適応に効果的な投与化合物のレベルを提供するように、個別に調節することができる。こうして、固体の病態の重症度に見合った治療計画を提供する。
【０１１２】
本明細書に提供される教示を活用して、実質的に毒性を引き起こさないが、特定の患者によって示される臨床症状を治療するのに有効な、効果的な予防的または治療的な治療計画を計画することができる。この計画は、化合物の効力、相対的な生物学的利用能、患者の体重、有害な副作用の存在および重症度、好ましい投与様式、ならびに選択された薬剤の毒性プロファイル等の要因を考慮することによる、活性化合物の慎重な選択を含むべきである。
【０１１３】
本明細書に記載の化合物は、癌（例えば、多発性骨髄腫もしくは分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病を治療する上で有用であることが知られている他の活性薬剤と、あるいは単独では効果的ではないかもしれないが、活性薬剤の有効性に寄与し得る補助剤と互いに組み合わせて使用することができる。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、同時投与は、１つの活性薬剤を第２の活性薬剤の０．５、１、２、４、６、８、１０、１２、１６、２０、または２４時間以内に投与することを含む。同時投与は、２つの活性薬剤を同時に、ほぼ同時に（例えば、互いの約１、５、１０、１５、２０、または３０分以内）または任意の順序で連続的に投与することを含む。いくつかの実施形態において、同時投与は、同時配合、すなわち、両方の活性薬剤を含む単一の薬学的組成物を調製することによって達成することができる。他の実施形態において、活性薬剤は、別々に配合することができる。別の実施形態において、活性薬剤および／または補助剤は、互いに連結またはコンジュゲートしてもよい。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の化合物は、癌（例えば、多発性骨髄腫もしくは分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、または糖尿病の治療（手術等）と組み合わせてもよい。
【０１１５】
「Ｉｒｅ１」または「Ｉｒｅ１α」または「ＥＲＮ１」という用語は、タンパク質「セリン／スレオニン−タンパク質キナーゼ／エンドリボヌクレアーゼＩＲＥ１」を指し、「小胞体から核へのシグナル１」としても知られている。実施形態において、「Ｉｒｅ１」または「Ｉｒｅ１α」または「ＥＲＮ１」は、ヒトタンパク質を指す。「Ｉｒｅ１」または「Ｉｒｅ１α」または「ＥＲＮ１」という用語には、タンパク質の野生型および変異形態が含まれる。実施形態において、「Ｉｒｅ１」または「Ｉｒｅ１α」または「ＥＲＮ１」は、Ｅｎｔｒｅｚ  Ｇｅｎｅ  ２０８１、ＯＭＩＭ  ６０４０３３、ＵｎｉＰｒｏｔ  Ｏ７５４６０、および／またはＲｅｆＳｅｑ（ｐｒｏｔｅｉｎ）ＮＭ＿００１４３３と関連するタンパク質を指す。実施形態において、すぐ上の参照番号は、本出願の出願日の時点で知られているタンパク質および関連する核酸を指す。実施形態において、「Ｉｒｅ１」または「Ｉｒｅ１α」または「ＥＲＮ１」は、野生型ヒトタンパク質を指す。実施形態において、「Ｉｒｅ１」または「Ｉｒｅ１α」または「ＥＲＮ１」は、野生型ヒト核酸を指す。
【０１１６】
「抗癌剤」は、その単純な通常の意味に従って使用され、抗悪性腫瘍特性、または細胞の成長もしくは増殖を阻害する能力を有する組成物（例えば、化合物、薬物、アンタゴニスト、阻害剤、調因子）を指す。いくつかの実施形態において、抗癌剤は、化学療法剤である。いくつかの実施形態において、抗癌剤は、癌を治療する方法において有用性を有すると本明細書において同定された薬剤である。いくつかの実施形態において、抗癌剤は、癌を治療するために、ＦＤＡまたは米国以外の国の同様の規制当局によって承認された薬剤である。抗癌剤の例として、限定されないが、ＭＥＫ阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗薬、植物性アルカロイド、トポイソメラーゼ阻害剤、抗癌性抗生物質、白金系化合物、副腎皮質抑制剤、エピポドフィロトキシン、抗生物質、酵素、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼシグナル伝達の阻害剤、抗体、ドキソルビシン、ビンクリスチン、エトポシド、ゲムシタビン、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ．ＲＴＭ．）、Ｇ２−Ｍ期で細胞を停止させ、かつ／または微小管の形成もしくは安定性を調節する薬剤（例えば、Ｔａｘｏｌ．ＴＭ（すなわち、パクリタキセル）、ステロイド、アロマターゼ阻害剤、ゴナドトロピン放出ホルモンアゴニスト（ＧｎＲＨ）、副腎皮質ステロイド、プロゲスチン、エストロゲン、抗エストロゲン剤、アンドロゲン、抗アンドロゲン、免疫毒素、放射免疫療法等が挙げられる。
【０１１７】
「化学療法剤（ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃまたはｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）」は、その単純な通常の意味に従って使用され、抗悪性腫瘍特性、または細胞の成長もしくは増殖を阻害する能力を有する化学組成物または化合物を指す。
【０１１８】
さらに、本明細書に記載の化合物は、限定されないが、免疫賦活薬（例えば、カルメット−ゲラン桿菌（ＢＣＧ）、レバミゾール、インターロイキン−２、αインターフェロン等）、モノクローナル抗体（例えば、抗ＣＤ２０、抗ＨＥＲ２、抗ＣＤ５２、抗ＨＬＡ−ＤＲ、および抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体）、免疫毒素（例えば、抗ＣＤ３３モノクローナル抗体−カリチアマイシン結合体、抗ＣＤ２２モノクローナル抗体−緑膿菌外毒素結合体等）、および放射免疫療法（例えば、１１１Ｉｎ、９０Ｙ、または１３１Ｉに結合した抗ＣＤ２０モノクローナル抗体等）を含む従来の免疫療法薬と同時投与することができる。
【０１１９】
さらなる実施形態において、本明細書に記載の化合物は、限定されないが、腫瘍抗原を標的とする抗体に任意選択的に結合した４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、８６Ｙ、８７Ｙ、９０Ｙ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１１７ｍＳｎ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、２１１Ａｔ、および２１２Ｂｉ等の放射性核種を含む従来の放射線治療薬と同時投与することができる。
【０１２０】
「抗糖尿病薬（ａｎｔｉ−ｄｉａｂｅｔｉｃａｇｅｎｔまたはａｎｔｉｄｉａｂｅｔｉｃａｇｅｎｔ）」は、その単純な通常の意味に従って使用され、対象の血糖値を下げる能力を有する組成物（例えば、化合物、薬物、アンタゴニスト、阻害剤、調節因子）を指す。いくつかの実施形態において、抗糖尿病薬は、糖尿病を治療する方法において有用性を有すると本明細書において同定された薬剤である。いくつかの実施形態において、抗糖尿病薬は、糖尿病を治療するために、ＦＤＡまたは米国以外の国の同様の規制当局によって承認された薬剤である。抗糖尿病薬の例として、限定されないが、インスリン、インスリン抵抗性改善薬（例えば、ビグアナイド（例えば、メトホルミン、フェンホルミン、またはブホルミン）、チアゾリジンジオン（例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、トログリタゾン））、分泌促進物質（例えば、スルホニルウレア（例えば、トルブタミド、アセトヘキサミド、トラザミド、クロルプロパミド、グリピジド、グリブリド、グリベンクラミド、グリメピリド、グリクラジド、グリコピラミド、グリキドン）、メグリチニド（例えば、レパグリニド、ナテグリニド））、αグルコシダーゼ阻害薬（例えば、ミグリトール、アカルボース、ボグリボース）、ペプチド類似体抗糖尿病薬（例えば、インクレチン（グルカゴン様ペプチド１、胃抑制ペプチド）、グルカゴン様ペプチドアゴニスト（例えば、エキセナチド、リラグルチド、タスポグルチド）、胃抑制ペプチド類似体、またはジペプチジルペプチダーゼ４阻害剤（例えば、ビルダグリプチン、シタグリプチン、サキサグリプチン、リナグリプチン、アログリプチン、セプタグリプチン（Ｓｅｐｔａｇｌｉｐｔｉｎ））、アミリンアゴニスト類似体（例えば、プラムリンチド）が挙げられる。
【０１２１】
Ｂ．組成物
ある態様において、式
【化６】
2015532287.tif 000008
を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩が提供され、（Ｉ）式中、環Ａは、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンであり；Ｌ１は、結合または非置換のＣ１−Ｃ５アルキレンであり；Ｌ２は、結合、−ＮＲ６ａ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｚ２−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン，または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンであり；Ｒ１は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎＲ１０、−ＳＯｖＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−Ｎ（Ｏ）ｍ、−ＮＲ７Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−ＯＲ１０、−ＮＲ７ＳＯｎＲ１０、−ＮＲ７Ｃ＝（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＮＲ７ＯＲ９、−ＯＣＸ３、−ＯＣＨＸ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；Ｒ２は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸａ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎ１Ｒ１０ａ、−ＳＯｖ１ＮＲ７ａＲ８ａ、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７ａＲ８ａ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７ａＲ８ａ、−Ｎ（Ｏ）ｍ１、−ＮＲ７ａＲ８ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ａＲ８ａ、−ＯＲ１０ａ、−ＮＲ７ａＳＯｎ１Ｒ１０ａ、−ＮＲ７ａＣ＝（Ｏ）Ｒ９ａ、−ＮＲ７ａＣ（Ｏ）ＯＲ９ａ、−ＮＲ７ａＯＲ９ａ、−ＯＣＸａ３、−ＯＣＨＸａ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；Ｒ３は、独立して、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸｂ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＳＯｖ２ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｎ（Ｏ）ｍ２、−ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＯＲ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＣ＝（Ｏ）Ｒ９ｂ、−ＮＲ７ｂＣ（Ｏ）ＯＲ９ｂ、−ＮＲ７ｂＯＲ９ｂ、−ＯＣＸｂ３、−ＯＣＨＸｂ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；Ｒ４およびＲ５は、独立して水素または非置換のＣ１−Ｃ６アルキルであり；Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ６ａ、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；同じ窒素原子に結合したＲ７およびＲ８置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；同じ窒素原子に結合したＲ７ａおよびＲ８ａ置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；同じ窒素原子に結合したＲ７ｂおよびＲ８ｂ置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；記号ｎ、ｎ１、およびｎ２の各出現は、独立して０〜４の整数であり；記号ｍ、ｍ１、ｍ２、ｖ、ｖ１、およびｖ２の各出現は、独立して１〜２の整数であり；記号ｚは、０〜２の整数であり；記号ｚ２は、１〜４の整数であり；記号Ｘ、Ｘａ、およびＸｂの各出現は、独立してハロゲンである。
【０１２２】
実施形態において、環Ａは、置換もしくは非置換の単環式シクロアルキレン、置換もしくは非置換の単環式ヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換の単環式アリーレン、または置換もしくは非置換の単環式ヘテロアリーレンである。実施形態において、環Ａは、置換単環式シクロアルキレン、置換単環式ヘテロシクロアルキレン、置換単環式アリーレン、または置換単環式ヘテロアリーレンである。実施形態において、環Ａは、非置換単環式シクロアルキレン、非置換単環式ヘテロシクロアルキレン、非置換単環式アリーレン、または非置換単環式ヘテロアリーレンである。
【０１２３】
実施形態において、環Ａは、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキレン、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレン、または置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリーレンである。実施形態において、環Ａは、置換Ｃ３−Ｃ８シクロアルキレン、置換３〜８員ヘテロシクロアルキレン、置換Ｃ６−Ｃ１０アリーレン、または置換５〜１０員ヘテロアリーレンである。実施形態において、環Ａは、非置換Ｃ３−Ｃ８シクロアルキレン、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキレン、非置換Ｃ６−Ｃ１０アリーレン、または非置換５〜１０員ヘテロアリーレンである。実施形態において、環Ａは、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ６シクロアルキレン、置換もしくは非置換の３〜６員ヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレン、または置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリーレンである。実施形態において、環Ａは、置換Ｃ３−Ｃ６シクロアルキレン、置換３〜６員ヘテロシクロアルキレン、置換Ｃ６−Ｃ１０アリーレン、または置換５〜９員ヘテロアリーレンである。実施形態において、環Ａは、非置換Ｃ３−Ｃ６シクロアルキレン、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキレン、非置換Ｃ６−Ｃ１０アリーレン、または非置換５〜９員ヘテロアリーレンである。
【０１２４】
実施形態において、環Ａは、置換もしくは非置換のアリーレンまたは置換もしくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、環Ａは、置換または非置換のＣ６−Ｃ１０アーレンである。実施形態において、環Ａは、非置換ナフタレニル（すなわち、二価のナフタレン部分）である。実施形態において、環Ａは、置換ナフタレニルである。実施形態において、環Ａは、非置換フェニレン（二価のベンゼン部分またはベンゼン−ジ−イル）である。実施形態において、環Ａは、置換フェニレン（二価のベンゼン部分またはベンゼン−ジ−イル）である。
【０１２５】
実施形態において、環Ａは、Ｒ４１で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキレン、Ｒ４１で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、Ｒ４１で置換されたかもしくは非置換のアリーレン、またはＲ４１で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、環Ａは、１〜６個の任意選択的に異なるＲ４１置換基で置換される。実施形態において、環Ａは、１個のＲ４１置換基で置換される。実施形態において、環Ａは、２個の任意選択的に異なるＲ４１置換基で置換される。実施形態において、環Ａは、３個の任意選択的に異なるＲ４１置換基で置換される。実施形態において、環Ａは、４個の任意選択的に異なるＲ４１置換基で置換される。実施形態において、環Ａは、５個の任意選択的に異なるＲ４１置換基で置換される。実施形態において、環Ａは、６個の任意選択的に異なるＲ４１置換基で置換される。
【０１２６】
Ｒ４１は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ４２で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ４２で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ４２で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ４２で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ４２で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ４２で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ４１は、−ＯＣＨ３である。
【０１２７】
Ｒ４２は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ４３で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ４３で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ４３で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ４３で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ４３で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ４３で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１２８】
実施形態において、Ｒ１は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎＲ１０、−ＳＯｖＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−Ｎ（Ｏ）ｍ、−ＮＲ７Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−ＯＲ１０、−ＮＲ７ＳＯｎＲ１０、−ＮＲ７Ｃ＝（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＮＲ７ＯＲ９、−ＯＣＸ３、または−ＯＣＨＸ２である。
【０１２９】
実施形態において、Ｒ１は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、水素、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、または置換ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、水素、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、水素である。実施形態において、Ｒ１は水素であり、Ｌ２は−ＮＨＣ（Ｏ）−である。
【０１３０】
実施形態において、Ｒ１は、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキル、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換もしくは非置換の２〜６員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ６シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜６員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリールである。
【０１３１】
実施形態において、Ｒ１は、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、置換フェニルである。実施形態において、Ｒ１は、非置換フェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３またはハロゲンで置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３でメタ置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−Ｆでメタ置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−Ｃｌでメタ置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−Ｂｒでメタ置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−Ｉでメタ置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＨ３でメタ置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、−ＯＣＨ２Ｐｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、または−ＣＨＯである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＣｌ３でメタ置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯでパラ置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯでメタ置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯでオルト置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯでメタ置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯでオルト置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯでパラ置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯで置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯで置換されたヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯで置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯで置換された５〜６員ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、非置換シクロヘキシルである。実施形態において、Ｒ１は、非置換シクロヘキシルである。実施形態において、Ｒ１は、非置換シクロぺニルである。実施形態において、Ｒ１は、非置換シクロぺニルである。実施形態において、Ｒ１は、非置換シクロブチルである。実施形態において、Ｒ１は、置換シクロブチルである。実施形態において、Ｒ１は、非置換シクロプロピルである。実施形態において、Ｒ１は、置換シクロプロピルである。
【０１３２】
実施形態において、Ｒ１は、ピリジニル、ピリミジニル、チオエニル、チエニル、フラニル、インドリル、ベンズオキサジアゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキサニル、チアナフタニル（ｔｈｉａｎａｐｈｔｈａｎｙｌ）、ピロロピリジニル、インダゾリル、キノリニル、キノキサリニル、ピリドピラジニル、キナゾリノニル（ｑｕｉｎａｚｏｌｉｎｏｎｙｌ）、ベンゾイソキサゾリル、イミダゾピリジニル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾチオエニル、フェニル、ナフチル、ビフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、フリルチエニル、ピリジル、ピリミジル、ベンゾチアゾリル、プリニル、ベンズイミダゾリル、イソキノリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピロリル、ジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ベンゾチアジアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾロピリミジニル、ピロロピリミジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズオキサゾリル、およびキノリルからなる群から選択される、置換または非置換のヘテロアリールである。
【０１３３】
本明細書に提供される化合物のいくつかの実施形態において、Ｒ１は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１１で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ１１で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ１１で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ１１で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ１１で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ１１で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、１〜６個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換される。実施形態において、Ｒ１は、１個のＲ１１置換基で置換される。実施形態において、Ｒ１は、２個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換される。実施形態において、Ｒ１は、３個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換される。実施形態において、Ｒ１は、４個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換される。実施形態において、Ｒ１は、５個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換される。実施形態において、Ｒ１は、６個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換される。実施形態において、Ｒ１は、７個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換される。実施形態において、Ｒ１は、１〜５個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、１個のＲ１１置換基で置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、２個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、３個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、４個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、５個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたフェニルである。実施形態において、Ｒ１は、１〜６個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、１個のＲ１１置換基で置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、２個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、３個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、４個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、５個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、６個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、７個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたアリールである。実施形態において、Ｒ１は、１〜６個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、１個のＲ１１置換基で置換されたヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、２個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、３個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、４個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、５個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、６個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１は、７個の任意選択的に異なるＲ１１置換基で置換されたヘテロアリールである。
【０１３４】
Ｒ１１は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１２で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ１２で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ１２で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ１２で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ１２で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ１２で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ１１は、−ＣＣｌ３、−ＣＦ３、−Ｃｌ、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−Ｆ、−ＯＣＨ３、−ＯＰｈ、−ＣＨ２Ｐｈ、または−ＣＨＯである。
【０１３５】
Ｒ１２は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１３で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ１３で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ１３で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ１３で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ１３で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ１３で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１３６】
実施形態において、Ｒ２は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２は、水素、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、または置換ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２は、水素、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。
【０１３７】
実施形態において、Ｒ２は、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキル、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ２は、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換もしくは非置換の２〜６員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ６シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜６員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリールである。
【０１３８】
実施形態において、Ｒ２は、置換または非置換のアルキルである。実施形態において、Ｒ２は、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換Ｃ１−Ｃ６アルキルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換メチルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換イソプロピルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換エチルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換プロピル（例えば、ｎ−プロピルまたはイソプロピル）である。実施形態において、Ｒ２は、非置換イソプロピルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換ブチル（例えば、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、またはｔｅｒｔ−ブチル）である。実施形態において、Ｒ２は、非置換のｔｅｒｔ−ブチルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換イソ−ブチルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換ペンチル（例えば、ｎ−ペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ネオペンチル、イソペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、または３−ペンチル）である。実施形態において、Ｒ２は、非置換シクロプロピルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換シクロブチルである。実施形態において、Ｒ２は、非置換シクロペンチルである。実施形態において、Ｒ２  は、非置換シクロヘキシルである。
【０１３９】
いくつかの実施形態において、Ｒ２は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１４で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ１４で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ１４−で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ１４で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ１４で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ１４で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１４０】
Ｒ１４は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１５で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ１５で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ１５で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ１５で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ１５で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ１５で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１４１】
Ｒ１５は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１６で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ１６で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ１６で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ１６で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ１６で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ１６で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１４２】
実施形態において、Ｒ３は、独立して、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸｂ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＳＯｖ２ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｎ（Ｏ）ｍ２、−ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＯＲ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＣ＝（Ｏ）Ｒ９ｂ、−ＮＲ７ｂＣ（Ｏ）ＯＲ９ｂ、−ＮＲ７ｂＯＲ９ｂ、−ＯＣＸｂ３、または−ＯＣＨＸｂ２である。実施形態において、Ｒ３は、独立して、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３は、独立して、水素、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、または置換ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３は、独立して、水素、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。
【０１４３】
実施形態において、Ｒ３は、独立して、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキル、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３は、独立して、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換もしくは非置換の２〜６員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ６シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜６員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリールである。
【０１４４】
実施形態において、Ｒ３は、独立して、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ３は、独立して水素である。実施形態において、Ｒ３は、独立してハロゲンである。
【０１４５】
いくつかの実施形態において、Ｒ３は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１７で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ１７で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ１７で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ１７で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ１７で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ１７で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１４６】
Ｒ１７は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１８で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ１８で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ１８で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ１８で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ１８で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ１８で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１４７】
Ｒ１８は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１９で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ１９で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ１９で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ１９で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ１９で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ１９で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１４８】
実施形態において、Ｒ４およびＲ５は、独立して水素である。実施形態において、Ｒ４およびＲ５は、独立して非置換Ｃ１−Ｃ６アルキルである。実施形態において、Ｒ４およびＲ５は、独立して非置換Ｃ１−Ｃ５アルキルである。実施形態において、Ｒ４およびＲ５は、独立して非置換Ｃ１−Ｃ４アルキルである。実施形態において、Ｒ４およびＲ５は、独立して非置換Ｃ１−Ｃ３アルキルである。実施形態において、Ｒ４およびＲ５は、独立して非置換Ｃ１−Ｃ２アルキルである。実施形態において、Ｒ４およびＲ５は、独立して非置換メチルである。
【０１４９】
実施形態において、Ｌ１は、結合である。実施形態において、Ｌ１は、非置換Ｃ１−Ｃ５アルキレンである。実施形態において、Ｌ１は、非置換Ｃ１−Ｃ４アルキレンである。実施形態において、Ｌ１は、非置換Ｃ１−Ｃ３アルキレンである。実施形態において、Ｌ１は、非置換Ｃ１−Ｃ２アルキレンである。実施形態において、Ｌ１は、非置換メチレンである。
【０１５０】
実施形態において、Ｌ2は、結合である。実施形態において、Ｌ２は、−ＮＲ６ａ−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｏ−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｓ−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｓ（Ｏ）−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｓ（Ｏ）２−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｚ２−である。実施形態において、Ｌ２は、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−である。実施形態において、Ｌ２は、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）Ｏ−である。実施形態において、Ｌ２は、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−である。実施形態において、Ｌ２は、−ＮＨ−である。実施形態において、Ｌ２は、−ＮＨＣ（Ｏ）−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−である。実施形態において、Ｌ２は、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−である。実施形態において、Ｌ２は、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣＨ２−である。実施形態において、Ｌ２は、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）２−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）３−である。実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）４−である。
【０１５１】
実施形態において、Ｌ２は、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、または置換ヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、非置換アルキレン、非置換ヘテロアルキレン、非置換シクロアルキレン、非置換ヘテロシクロアルキレン、非置換アリーレン、または非置換ヘテロアリーレンである。
【０１５２】
実施形態において、Ｌ２は、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキレン、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキレン、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレン、または置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ２は、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ６アルキレン、置換もしくは非置換の２〜６員ヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ６シクロアルキレン、置換もしくは非置換の３〜６員ヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレン、または置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリーレンである。
【０１５３】
いくつかの実施形態において、Ｌ２は、独立してＲ４４で置換されたかもしくは非置換のアルキレン、Ｒ４４で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキレン、Ｒ４４で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキレン、Ｒ４４で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、Ｒ４４で置換されたかもしくは非置換のアリーレン、またはＲ４４で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリーレンである。
【０１５４】
Ｒ４４は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ４５で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ４５で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ４５で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ４５で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ４５で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ４５で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１５５】
Ｒ４５は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ４６で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ４６で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ４６で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ４６で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ４６で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ４６で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１５６】
実施形態において、Ｒ６ａは、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ６ａは、水素、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、または置換ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ６ａは、水素、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ６ａは、水素である。実施形態において、Ｒ６ａは、非置換メチルである。実施形態において、Ｒ６ａは、非置換エチルである。実施形態において、Ｒ６ａは、非置換プロピルである。
【０１５７】
実施形態において、Ｒ６ａは、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキル、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ６ａは、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換もしくは非置換の２〜６員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ６シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜６員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリールである。
【０１５８】
本明細書に提供される化合物のいくつかの実施形態において、Ｒ６ａは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ２６ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ２６ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ２６ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ２６ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ２６ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ２６ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１５９】
Ｒ２６ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ２７ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ２７ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ２７ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ２７ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ２７ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ２７ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１６０】
Ｒ２７ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ２８ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ２８ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ２８ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ２８ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ２８ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ２８ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１６１】
実施形態において、Ｒ６ｂは、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ６ｂは、水素、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、または置換ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ６ｂは、水素、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ６ｂは、水素である。実施形態において、Ｒ６ｂは、非置換メチルである。実施形態において、Ｒ６ｂは、非置換エチルである。実施形態において、Ｒ６ｂは、非置換プロピルである。
【０１６２】
実施形態において、Ｒ６ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキル、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリールである。実施形態において、Ｒ６ｂは、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換もしくは非置換の２〜６員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ６シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜６員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリールである。
【０１６３】
本明細書に提供される化合物のいくつかの実施形態において、Ｒ６ｂは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ２６ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ２６ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ２６ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ２６ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ２６ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ２６ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１６４】
Ｒ２６ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ２７ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ２７ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ２７ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ２７ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ２７ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ２７ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１６５】
Ｒ２７ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ２８ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ２８ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ２８ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ２８ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ２８ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ２８ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１６６】
実施形態において、各Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、各Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して、水素、置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、または置換ヘテロアリールである。実施形態において、各Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して、水素、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。実施形態において、各Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して水素である。
【０１６７】
実施形態において、各Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキル、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリールである。実施形態において、各Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して、水素、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換もしくは非置換の２〜６員ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ６シクロアルキル、置換もしくは非置換の３〜６員ヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリール、または置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリールである。
【０１６８】
いくつかの実施形態において、Ｒ７は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ２９で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ２９で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ２９で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ２９で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ２９で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ２９で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、同じ窒素原子に結合したＲ７およびＲ８置換基は、Ｒ２９で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたはＲ２９で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールを形成するように結合されてもよい。
【０１６９】
Ｒ２９は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３０で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３０で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３０で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３０で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３０で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３０で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１７０】
Ｒ３０は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３１で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３１で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３１で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３１で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３１で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３１で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１７１】
いくつかの実施形態において、Ｒ７ａは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ２９ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ２９ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ２９ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ２９ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ２９ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ２９ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、同じ窒素原子に結合したＲ７ａおよびＲ８ａ置換基は、Ｒ２９ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたはＲ２９ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールを形成するように結合されてもよい。
【０１７２】
Ｒ２９ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３０ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３０ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３０ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３０ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３０ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３０ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１７３】
Ｒ３０ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３１ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３１ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３１ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３１ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３１ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３１ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１７４】
いくつかの実施形態において、Ｒ７ｂは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ２９ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ２９ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ２９ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ２９ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ２９ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ２９ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、同じ窒素原子に結合したＲ７ｂおよびＲ８ｂ置換基は、Ｒ２９ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたはＲ２９ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールを形成するように結合されてもよい。
【０１７５】
Ｒ２９ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３０ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３０ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３０ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３０ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３０ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３０ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１７６】
Ｒ３０ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３１ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３１ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３１ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３１ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３１ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３１ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１７７】
いくつかの実施形態において、Ｒ８は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３２で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３２で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３２で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３２で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３２で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３２で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、同じ窒素原子に結合したＲ７およびＲ８置換基は、Ｒ３２で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたはＲ３２で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールを形成するように結合されてもよい。
【０１７８】
Ｒ３２は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３３で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３３で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３３で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３３で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３３で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３３で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１７９】
Ｒ３３は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３４で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３４で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３４で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３４で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３４で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３４で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１８０】
いくつかの実施形態において、Ｒ８ａは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３２ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３２ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３２ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３２ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３２ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３２ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、同じ窒素原子に結合したＲ７ａおよびＲ８ａ置換基は、Ｒ３２ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたはＲ３２ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールを形成するように結合されてもよい。
【０１８１】
Ｒ３２ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３３ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３３ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３３ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３３ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３３ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３３ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１８２】
Ｒ３３ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３４ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３４ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３４ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３４ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３４ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３４ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１８３】
いくつかの実施形態において、Ｒ８ｂは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３２ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３２ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３２ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３２ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３２ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３２ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。実施形態において、同じ窒素原子に結合したＲ７ｂおよびＲ８ｂ置換基は、Ｒ３２ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたはＲ３２ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールを形成するように結合されてもよい。
【０１８４】
Ｒ３２ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３３ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３３ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３３ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３３ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３３ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３３ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１８５】
Ｒ３３ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３４ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３４ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３４ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３４ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３４ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３４ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１８６】
いくつかの実施形態において、Ｒ９は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３５で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３５で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３５で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３５で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３５で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３５で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１８７】
Ｒ３５は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３６で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３６で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３６で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３６で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３６で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３６で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１８８】
Ｒ３６は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３７で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３７で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３７で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３７で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３７で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３７で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１８９】
いくつかの実施形態において、Ｒ９ａは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３５ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３５ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３５ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３５ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３５ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３５ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９０】
Ｒ３５ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３６ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３６ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３６ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３６ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３６ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３６ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９１】
Ｒ３６ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３７ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３７ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３７ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３７ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３７ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３７ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９２】
いくつかの実施形態において、Ｒ９ｂは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３５ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３５ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３５ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３５ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３５ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３５ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９３】
Ｒ３５ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３６ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３６ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３６ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３６ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３６ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３６ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９４】
Ｒ３６ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３７ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３７ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３７ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３７ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３７ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３７ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９５】
いくつかの実施形態において、Ｒ１０は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３８で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３８で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３８で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３８で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３８で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３８で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９６】
Ｒ３８は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３９で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３９で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３９で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３９で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３９で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３９で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９７】
Ｒ３９は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ４０で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ４０で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ４０で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ４０で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ４０で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ４０で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９８】
いくつかの実施形態において、Ｒ１０ａは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３８ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３８ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３８ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３８ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３８ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３８ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０１９９】
Ｒ３８ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３９ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３９ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３９ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３９ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３９ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３９ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０２００】
Ｒ３９ａは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ４０ａで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ４０ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ４０ａで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ４０ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ４０ａで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ４０ａで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０２０１】
いくつかの実施形態において、Ｒ１０ｂは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３８ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３８ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３８ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３８ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３８ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３８ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０２０２】
Ｒ３８ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ３９ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ３９ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ３９ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ３９ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ３９ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ３９ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０２０３】
Ｒ３９ｂは、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ４０ｂで置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ４０ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ４０ｂで置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ４０ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ４０ｂで置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ４０ｂで置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０２０４】
実施形態において、ｖは、１である。実施形態において、ｖは、２である。実施形態において、ｖ１は、１である。実施形態において、ｖ１は、２である。実施形態において、ｖ２は、１である。実施形態において、ｖ２は、２である。実施形態において、ｍは、１である。実施形態において、ｍは、２である。実施形態において、ｍ１は、１である。実施形態において、ｍ１は、２である。実施形態において、ｍ２は、１である。実施形態において、ｍ２は、２である。実施形態において、ｎは、独立して０である。実施形態において、ｎは、独立して１である。実施形態において、ｎは、独立して２である。実施形態において、ｎは、独立して３である。実施形態において、ｎは、独立して４である。実施形態において、ｎ１は、独立して０である。実施形態において、ｎ１は、独立して１である。実施形態において、ｎ１は、独立して２である。実施形態において、ｎ１は、独立して３である。実施形態において、ｎ１は、独立して４である。実施形態において、ｎ２は、独立して０である。実施形態において、ｎ２は、独立して１である。実施形態において、ｎ２は、独立して２である。実施形態において、ｎ２は、独立して３である。実施形態において、ｎ２は、独立して４である。実施形態において、Ｘは、−Ｃｌである。実施形態において、Ｘは、−Ｂｒである。実施形態において、Ｘは、−Ｉである。実施形態において、Ｘは、−Ｆである。実施形態において、Ｘａは、−Ｃｌである。実施形態において、Ｘａは、−Ｂｒである。実施形態において、Ｘａは、−Ｉである。実施形態において、Ｘａは、−Ｆである。実施形態において、Ｘｂは、−Ｃｌである。実施形態において、Ｘｂは、−Ｂｒである。実施形態において、Ｘｂは、−Ｉである。実施形態において、Ｘｂは、−Ｆである。実施形態において、ｚは、０である。実施形態において、ｚは、１である。実施形態において、ｚは、２である。実施形態において、ｚ２は、１である。実施形態において、ｚ２は、２である。実施形態において、ｚ２は、３である。実施形態において、ｚ２は、４である。
【０２０５】
実施形態において、化合物は、式
【化７】
2015532287.tif 000009
を有し、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６ａ、Ｌ１、環Ａ、およびｚは、本明細書に記載される通りである（例えば、実施例を含む式Ｉの化合物）。
【０２０６】
Ｌ３は、結合、−Ｏ−、−ＮＲ６ｂ−、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンである。
【０２０７】
実施形態において、Ｌ３は、結合である。実施形態において、Ｌ３は、−ＮＲ６ｂ−であり、Ｒ６ｂは、実施形態を含む本明細書に定義される通りである。実施形態において、Ｌ３は、−ＮＨ−である。実施形態において、Ｌ３は、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ３は、−Ｏ−である。実施形態において、Ｌ３は、−ＯＣＨ２−である。
【０２０８】
実施形態において、Ｌ３は、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ３は、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン、または置換ヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ３は、非置換アルキレン、非置換ヘテロアルキレン、非置換シクロアルキレン、非置換ヘテロシクロアルキレン、非置換アリーレン、または非置換ヘテロアリーレンである。
【０２０９】
実施形態において、Ｌ３は、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキレン、置換もしくは非置換の２〜８員ヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキレン、置換もしくは非置換の３〜８員ヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレン、または置換もしくは非置換の５〜１０員ヘテロアリーレンである。実施形態において、Ｌ３は、置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ６アルキレン、置換もしくは非置換の２〜６員ヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ６シクロアルキレン、置換もしくは非置換の３〜６員ヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレン、または置換もしくは非置換の５〜９員ヘテロアリーレンである。
【０２１０】
いくつかの実施形態において、Ｌ３は、独立してＲ４７で置換されたかもしくは非置換のアルキレン、Ｒ４７で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキレン、Ｒ４７で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキレン、Ｒ４７で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、Ｒ４７で置換されたかもしくは非置換のアリーレン、またはＲ４７で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリーレンである。
【０２１１】
Ｒ４７は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ４８で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ４８で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ４８で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ４８で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ４８で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ４８で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０２１２】
Ｒ４８は、独立して、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ４９で置換されたかもしくは非置換のアルキル、Ｒ４９で置換されたかもしくは非置換のヘテロアルキル、Ｒ４９で置換されたかもしくは非置換のシクロアルキル、Ｒ４９で置換されたかもしくは非置換のヘテロシクロアルキル、Ｒ４９で置換されたかもしくは非置換のアリール、またはＲ４９で置換されたかもしくは非置換のヘテロアリールである。
【０２１３】
各Ｒ１３、Ｒ１６、Ｒ１９、Ｒ２８ａ、Ｒ２８ｂ、Ｒ３１、Ｒ３１ａ、Ｒ３１ｂ、Ｒ３４、Ｒ３４ａ、Ｒ３４ｂ、Ｒ３７、Ｒ３７ａ、Ｒ３７ｂ、Ｒ４０、Ｒ４０ａ、Ｒ４０ｂ、Ｒ４３、Ｒ４６、およびＲ４９は、独立して、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール、または非置換ヘテロアリールである。実施形態において、各Ｒ１３、Ｒ１６、Ｒ１９、Ｒ２８ａ、Ｒ２８ｂ、Ｒ３１、Ｒ３１ａ、Ｒ３１ｂ、Ｒ３４、Ｒ３４ａ、Ｒ３４ｂ、Ｒ３７、Ｒ３７ａ、Ｒ３７ｂ、Ｒ４０、Ｒ４０ａ、Ｒ４０ｂ、Ｒ４３、Ｒ４６、およびＲ４９は、独立して、水素、非置換Ｃ１−Ｃ８アルキル、非置換２〜８員ヘテロアルキル、非置換Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル、非置換Ｃ６−Ｃ１０アリール、または非置換５〜１０員ヘテロアリールである。実施形態において、各Ｒ１３、Ｒ１６、Ｒ１９、Ｒ２８ａ、Ｒ２８ｂ、Ｒ３１、Ｒ３１ａ、Ｒ３１ｂ、Ｒ３４、Ｒ３４ａ、Ｒ３４ｂ、Ｒ３７、Ｒ３７ａ、Ｒ３７ｂ、Ｒ４０、Ｒ４０ａ、Ｒ４０ｂ、Ｒ４３、Ｒ４６、およびＲ４９は、独立して、水素、非置換Ｃ１−Ｃ６アルキル、非置換２〜６員ヘテロアルキル、非置換Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル、非置換Ｃ６−Ｃ１０アリール、または非置換５〜９員ヘテロアリールである。実施形態において、各Ｒ１３、Ｒ１６、Ｒ１９、Ｒ２８ａ、Ｒ２８ｂ、Ｒ３１、Ｒ３１ａ、Ｒ３１ｂ、Ｒ３４、Ｒ３４ａ、Ｒ３４ｂ、Ｒ３７、Ｒ３７ａ、Ｒ３７ｂ、Ｒ４０、Ｒ４０ａ、Ｒ４０ｂ、Ｒ４３、Ｒ４６、およびＲ４９は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、または−ＯＣＨＦ２である。
【０２１４】
実施形態において、化合物は、式
【化８】
2015532287.tif 000010
を有し、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６ａ、Ｌ３、および環Ａは、本明細書に記載される通りである（例えば、実施形態を含む式ＩまたはＩＩの化合物）。
【０２１５】
実施形態において、化合物は、
【化９】
2015532287.tif 000011
【０２１６】
実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αの阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αキナーゼ活性の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αＲＮａｓｅ活性の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αのＡＴＰ結合部位に結合する。実施形態において、化合物は、ＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションのＩｒｅ１αに結合する。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αのＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションを誘導する。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αオリゴマー化の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１α二量体化の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αリン酸化の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１α自己リン酸化の阻害剤である。実施形態において、化合物は、アポトーシスの阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１α誘導性アポトーシスの阻害剤である。実施形態において、化合物は、細胞死の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１α誘導性細胞死の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αリン酸化によって誘導される経路の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αキナーゼ活性によって誘導される経路の阻害剤である。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αＲＮａｓｅ活性によって誘導される経路の阻害剤である。実施形態において、化合物は、神経細胞死の阻害剤である。実施形態において、化合物は、細胞毒性物質である。実施形態において、化合物は、抗癌剤である。実施形態において、化合物は、脱髄の阻害剤である。実施形態において、化合物は、糖尿病の阻害剤である。実施形態において、化合物は、抗糖尿病剤である。実施形態において、化合物は、神経保護剤である。実施形態において、化合物は、線維症の阻害剤である。実施形態において、化合物は、ＥＲストレス下における細胞のアポトーシスを減少させる。実施形態において、化合物は、ＥＲストレス下にある細胞のアポトーシスを減少させるが、ＥＲストレス下にはないことを除いて同じ条件下にある細胞のアポトーシスは減少させない。実施形態において、化合物は、ＥＲストレス下にはないことを除いて同じ条件下にある細胞よりも多く、ＥＲストレス下にある細胞のアポトーシスを減少させる。実施形態において、化合物は、ｍｉＲ−１７の切断を減少させる。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αに関連するｍｉＲ−１７の切断を減少させる。実施形態において、化合物は、ｍｉＲ−３４ａの切断を減少させる。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αに関連するｍｉＲ−３４ａの切断を減少させる。実施形態において、化合物は、ｍｉＲ−９６の切断を減少させる。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αに関連するｍｉＲ−９６の切断を減少させる。実施形態において、化合物は、ｍｉＲ−１２５ｂの切断を減少させる。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αに関連するｍｉＲ−１２５ｂの切断を減少させる。実施形態において、化合物は、ＸＢＰ１ｍ  ＲＮＡのスプライシングを減少させる。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αに関連するＸＢＰ１ｍ  ＲＮＡのスプライシング���減少させる。実施形態において、化合物は、ＵＰＲを減少させる。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αに関連するＵＰＲを減少させる。実施形態において、化合物は、末端ＵＰＲを減少させる。実施形態において、化合物は、Ｉｒｅ１αに関連する末端ＵＰＲを減少させる。
【０２１７】
実施形態において、化合物は、ある態様において、実施形態、実施例、図、表、または特許請求の範囲を含む、本明細書に記載の化合物である。実施形態において、化合物は、図８の化合物である。
【０２１８】
実施形態において、本明細書に記述する化合物は、化合物またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物として提供される。実施形態において、本明細書に記述する化合物は、薬学的組成物として提供されない。実施形態において、化合物は、薬学的に許容される塩に含まれる。実施形態において、化合物は、薬学的に許容される塩に含まれない。
【０２１９】
本明細書では、とりわけ、（１）低分子を用いて近傍のキナーゼドメインを薬理学的に標的とすることによりＩＲＥ１αの過剰活性ＲＮａｓｅを阻害するため、かつ（２）生きた動物（例えば、マウス）の細胞（例えば、β細胞）においてＩＲＥ１αを遮断することの生理学的効果を試験するための新しい戦略を記載する。この研究は、細胞の運命を支配するＥＲストレスシグナル伝達を操作するための薬物標的としてＩＲＥ１αを検証する。
【０２２０】
別の態様において、式（Ａ）
【化１０】
2015532287.tif 000012
（図７にも示される）を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩が本明細書に提供され、式中、Ｒ１ｄ、Ｒ２ｄ、Ｒ３ｄ、Ｒ４ｄ、Ｒ５ｄ、Ｒ６ｄ、Ｒ７ｄ、Ｒ８ｄ、Ｒ９ｄ、およびＲ１０ｄは、それぞれ独立して、Ｃ２−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−Ｃ１−４アルキル−Ｒ１２ｄ、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−８シクロアルキル、単環式ヘテロサイクリル、単環式ヘテロアリール、またはフェニル、アリールであり、シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロアリール、およびフェニル基は、それぞれ、任意選択的に１個または２個のＲ１１ｄ基で置換され；各Ｒ１１ｄは、独立してＣ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＲｄ２、または−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄであり；Ｒ１２ｄは、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基によってそれぞれ任意選択的に置換され；各Ｒｄは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロサイクリル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール，およびヘテロアリールアルキルは、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲ０ｄ、ＳＲ０ｄ、ＮＲ０ｄ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、またはＮ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２である１個、２個、３個、または４個の基で任意選択的に置換され；各Ｒ０ｄは、独立して水素またはＣ１−６アルキルであり、各Ｒｄは、独立して水素、またはＣ１−６アルキルである。
【０２２１】
別の態様において、式（Ａ）
【化１１】
2015532287.tif 000013
（図７にも示される）を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩が本明細書に提供され、式中、Ｒ１ｄ、Ｒ２ｄ、Ｒ３ｄ、Ｒ４ｄ、Ｒ５ｄ、Ｒ６ｄ、Ｒ７ｄ、Ｒ８ｄ、Ｒ９ｄ、およびＲ１０ｄは、それぞれ独立して、Ｃ２−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−Ｃ１−４アルキル−Ｒ１２ｄ、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−８シクロアルキル、単環式ヘテロサイクリル、単環式ヘテロアリール、またはフェニル、アリールであり、シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロアリール、およびフェニル基は、それぞれ、任意選択的に１個または２個のＲ１１ｄ基で置換され；各Ｒ１１ｄは、独立してＣ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＲｄ２、または−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄであり；Ｒ１２ｄは、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基によってそれぞれ任意選択的に置換され；各Ｒｄは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロサイクリル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール，およびヘテロアリールアルキルは、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲ０ｄ、ＳＲ０ｄ、ＮＲ０ｄ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、またはＮ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２である１個、２個、３個、または４個の基で任意選択的に置換され；各Ｒ０ｄは、独立して水素またはＣ１−６アルキルである。実施形態において、各Ｒｄは、独立して水素またはＣ１−６アルキルである。
【０２２２】
別の態様において、Ｒ２ｄおよびＲ３ｄは、一緒になって、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基で、それぞれ、任意選択的に置換され；各Ｒｄは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロサイクリル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキルは、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲ０ｄ、ＳＲ０ｄ、ＮＲ０ｄ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、またはＮ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２である１個、２個、３個、または４個の基で任意選択的に置換され、各Ｒ０ｄは、独立して水素またはＣ１−６アルキルであり、各Ｒｄは、独立して水素、またはＣ１−６アルキルである。
【０２２３】
別の態様において、Ｒ２ｄおよびＲ３ｄは、一緒になって、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基で、それぞれ、任意選択的に置換され；各Ｒｄは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロサイクリル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキルは、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲ０ｄ、ＳＲ０ｄ、ＮＲ０ｄ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、またはＮ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２である１個、２個、３個、または４個の基で任意選択的に置換され、各Ｒ０ｄは、独立して水素またはＣ１−６アルキルである。実施形態において、各Ｒｄは、独立して水素、またはＣ１−６アルキルである。
【０２２４】
さらに別の態様において、Ｒ１ｄは、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基で、それぞれ、任意選択的に置換される。
【０２２５】
Ｃ．薬学的組成物
別の態様において、本明細書（例えば、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、態様、実施形態、実施例、図、表、または特許請求の範囲）に記載される、薬学的に許容される賦形剤と、化合物またはその薬学的に許容される塩とを含む薬学的組成物が提供される。
【０２２６】
薬学的組成物の実施形態において、本明細書（例えば、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、態様、実施形態、実施例、図、表、または特許請求の範囲）に記載される化合物またはその薬学的に許容される塩は、治療有効量で含まれる。
【０２２７】
薬学的組成物の実施形態において、薬学的組成物は、第２の薬剤（例えば、治療剤）を含む。薬学的組成物の実施形態において、薬学的組成物は、治療有効量の第２の薬剤（例えば、治療剤）を含む。薬学的組成物の実施形態において、第２の薬剤は、癌（例えば、多発性骨髄腫もしくは分泌細胞癌）、神経変性疾患、脱髄性疾患、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は抗癌剤である。実施形態において、第２の薬剤は化学療法剤である。実施形態において、第２の薬剤は記憶力を向上させるための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、神経変性疾患を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、脱髄性疾患を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、眼疾患を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、線維性疾患を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、多発性硬化症を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、アルツハイマー病を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、パーキンソン病を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、ハンチントン病を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、プリオン病を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、筋萎縮性側索硬化症を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、糖尿病を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、網膜変性症を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、網膜色素変性症を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、黄斑変性症を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、Ｉ型糖尿病を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、ＩＩ型糖尿病を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、多発性骨髄腫を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、分泌細胞の癌を治療するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のキナーゼ活性を低下させるための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のＲＮａｓｅ活性を低下させるための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のリン酸化によって活性化される経路を阻害するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のＲＮａｓｅ活性によって活性化される経路を阻害するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）のオリゴマー化を阻害するための薬剤である。実施形態において、第２の薬剤は、アポトーシスを阻害するための薬剤である。
【０２２８】
Ｄ．方法
ある態様において、そのような治療を必要とする患者において疾患を治療する方法が提供され、該方法は、治療有効量の本明細書（例えば、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、態様、実施形態、実施例、図、表、または特許請求の範囲）に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を患者に投与することを含み、疾患は、神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病である。
【０２２９】
実施形態において、疾患は、神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、または糖尿病である。実施形態において、疾患は神経変性疾患である。実施形態において、神経変性疾患は、網膜色素変性症、筋萎縮性側索硬化症、網膜変性症、黄斑変性症、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、プリオン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、またはクールー病である。実施形態において、疾患は筋萎縮性側索硬化症である。実施形態において、疾患は網膜変性症である。実施形態において、疾患は網膜色素変性症である。実施形態において、疾患は脱髄性疾患である。実施形態において、脱髄性疾患は、ウォルフラム症候群、ペリツェウス・メルツバッヘル病、横断性脊髄炎、シャルコー・マリー・トゥース病、または多発性硬化症である。実施形態において、疾患は多発性硬化症である。実施形態において、疾患は癌である。実施形態において、癌は多発性骨髄腫である。実施形態において、疾患は糖尿病である。実施形態において、糖尿病はＩ型糖尿病である。実施形態において、糖尿病はＩＩ型糖尿病である。実施形態において、疾患は、本明細書に記載される神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病である。実施形態において、疾患は眼疾患である。実施形態において、眼疾患は網膜色素変性症である。実施形態において、眼疾患は網膜変性症である。実施形態において、眼疾患は黄斑変性症である。実施形態において、眼疾患はウォルフラム症候群である。実施形態において、疾患は特発性肺線維症（ＩＰＦ）である。実施形態において、疾患は線維性疾患である。実施形態において、線維性疾患は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、心筋梗塞、心肥大、心不全、硬変症、アセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）肝毒性、Ｃ型肝炎肝疾患、肝脂肪変性（脂肪肝）、または肝線維症である。実施形態において、疾患は、間質性肺疾患（ＩＬＤ）である。実施形態において、疾患は心筋梗塞である。実施形態において、疾患は心肥大である。実施形態において、疾患は心不全である。実施形態において、疾患は硬変症である。実施形態において、疾患はアセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）肝毒性である。実施形態において、疾患はＣ型肝炎肝疾患である。実施形態において、疾患は肝脂肪変性（脂肪肝）である。実施形態において、疾患は肝線維症である。
【０２３０】
ある態様において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）の活性を調節する方法が提供され、該方法は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）タンパク質を、有効量の本明細書（例えば、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、態様、実施形態、実施例、図、表、または特許請求の範囲）に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩と接触させることを含む。
【０２３１】
実施形態において、調節は阻害である。実施形態において、活性はキナーゼ活性である。実施形態において、キナーゼ活性は自己リン酸化活性である。実施形態において、キナーゼ活性は、トランス自己リン酸化活性である。実施形態において、活性はオリゴマー化活性である。実施形態において、オリゴマー化活性は二量体化活性である。実施形態において、活性はＲＮａｓｅ活性である。実施形態において、活性はｍｉＲ−１７切断である。実施形態において、活性はｍｉＲ−３４ａ切断である。実施形態において、活性はｍｉＲ−９６切断である。実施形態において、活性はｍｉＲ−１２５ｂ切断である。実施形態において、活性はＸＢＰ１ｍ  ＲＮＡのスプライシングである。実施形態において、活性はＵＰＲ活性化である。実施形態において、活性は末端ＵＰＲ活性化である。実施形態において、細胞はＩｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）タンパク質を含む。実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）タンパク質の活性は、細胞のアポトーシスを増加させる。実施形態において、器官は細胞を含む。実施形態において、生物は細胞を含む。実施形態において、生物は、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）タンパク質の活性と関連する疾患を有する。実施形態において、疾患は、神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病である。実施形態において、疾患は神経変性疾患である。実施形態において、神経変性疾患は、網膜色素変性症、筋萎縮性側索硬化症、網膜変性症、黄斑変性症、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、プリオン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、またはクールー病である。実施形態において、疾患は筋萎縮性側索硬化症である。実施形態において、疾患は網膜変性症である。実施形態において、疾患は網膜色素変性症である。実施形態において、疾患は脱髄性疾患である。実施形態において、脱髄性疾患は、ウォルフラム症候群、ペリツェウス・メルツバッヘル病、横断性脊髄炎、シャルコー・マリー・トゥース病、は多発性硬化症である。実施形態において、疾患は多発性硬化症である。実施形態において、疾患は癌である。実施形態において、癌は多発性骨髄腫である。実施形態において、疾患は糖尿病である。実施形態において、糖尿病はＩ型糖尿病である。実施形態において、糖尿病はＩＩ型糖尿病である。実施形態において、疾患は眼疾患である。実施形態において、眼疾患は網膜色素変性症である。実施形態において、眼疾患は網膜変性症である。実施形態において、眼疾患は黄斑変性症である。実施形態において、眼疾患はウォルフラム症候群である。実施形態において、疾患は特発性肺線維症（ＩＰＦ）である。実施形態において、疾患は線維性疾患である。実施形態において、線維性疾患は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、心筋梗塞、心肥大、心不全、硬変症、アセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）肝毒性、Ｃ型肝炎肝疾患、肝脂肪変性（脂肪肝）、または肝線維症である。実施形態において、疾患は間質性肺疾患（ＩＬＤ）である。実施形態において、疾患は心筋梗塞である。実施形態において、疾患は心肥大である。実施形態において、疾患は心不全である。実施形態において、疾患は硬変症である。実施形態において、疾患はアセ���アミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）肝毒性である。実施形態において、疾患はＣ型肝炎肝疾患である。実施形態において、疾患は肝脂肪変性（脂肪肝）である。実施形態において、疾患は肝線維症である。実施形態において、Ｉｒｅ１タンパク質はＩｒｅ１αタンパク質である。実施形態において、Ｉｒｅ１（例えば、Ｉｒｅ１α）タンパク質はヒトタンパク質である。実施形態において、Ｉｒｅ１タンパク質はヒトＩｒｅ１αタンパク質である。
【０２３２】
別の態様において、本開示は、多数のタンパク質キナーゼ標的においてキナーゼ活性部位の交互のコンフォメーションを安定化する、Ｉ型およびＩＩ型と称される２つのクラスのキナーゼ阻害剤を同定した（Ｌｉｕ，Ｙ．＆Ｇｒａｙ，Ｎ．Ｓ．Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２，３５８−３６４（２００６））。本開示は、Ｉ型キナーゼ阻害剤および新規ＩＩ型キナーゼ阻害剤のどちらも、ＩＲＥ１αのトランス自己リン酸化を遮断することによってＩＲＥ１αを修飾するが、そのＲＮａｓｅに対しては、それぞれ、触媒活性を活性化または不活性化するという多様な効果を有することを示す。本開示はさらに、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性は、そのキナーゼドメインの選択的標的を介してＵＰＲシグナル伝達を制御するように上方制御または下方制御され得るかのいずれかであることを示し、他のキナーゼに結合した酵素を同様の様式で薬理学的に調節することが可能であり得ることを予測する。
【０２３３】
さらなる態様において、本開示は、ＩＲＥ１αのキナーゼによって制御されるＲＮａｓｅは、キナーゼ阻害剤を用いて２つの異なる様式で調節できることを示す：一方のクラスのリガンドは、たとえ上流ＥＲストレスがなくても、ＩＲＥ１αのキナーゼＡＴＰ結合部位を占有してＲＮａｓｅ媒介性のＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを活性化し、第２のクラスは、たとえＥＲストレス下であっても、同じＡＴＰ結合部位を介してＲＮａｓｅを阻害することができる。よって、異なるクラスのＡＴＰ競合性阻害剤によって安定化される交互のキナーゼコンフォメーションは、オンまたはオフのいずれかの、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅのアロステリックな切り替えを引き起こすことができる。ＵＰＲの調節不全は、様々な細胞変性疾患および腫瘍性疾患と関係付けられているため、低分子によるＩＲＥ１αの制御は、病態生理学におけるＵＰＲの役割を理解し、ＥＲストレス関連疾患のための薬物を開発する努力を推進するはずである。
【０２３４】
Ｅ．追加の実施形態
１．式
【化１２】
2015532287.tif 000014
（式中、環Ａは、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンであり；Ｌ１は、結合または非置換のＣ１−Ｃ５アルキレンであり；Ｌ２は、結合、−ＮＲ６ａ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｚ２−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン，または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンであり；Ｒ１は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎＲ１０、−ＳＯｖＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７Ｒ８、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−Ｎ（Ｏ）ｍ、−ＮＲ７Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−ＯＲ１０、−ＮＲ７ＳＯｎＲ１０、−ＮＲ７Ｃ＝（Ｏ）Ｒ９、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、−ＮＲ７ＯＲ９、−ＯＣＸ３、−ＯＣＨＸ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；Ｒ２は、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸａ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎ１Ｒ１０ａ、−ＳＯｖ１ＮＲ７ａＲ８ａ、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７ａＲ８ａ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７ａＲ８ａ、−Ｎ（Ｏ）ｍ１、−ＮＲ７ａＲ８ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ａＲ８ａ、−ＯＲ１０ａ、−ＮＲ７ａＳＯｎ１Ｒ１０ａ、−ＮＲ７ａＣ＝（Ｏ）Ｒ９ａ、−ＮＲ７ａＣ（Ｏ）ＯＲ９ａ、−ＮＲ７ａＯＲ９ａ、−ＯＣＸａ３、−ＯＣＨＸａ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；Ｒ３は、独立して、水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＸｂ３、−ＣＮ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＳＯｖ２ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｎ（Ｏ）ｍ２、−ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ９ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ｂＲ８ｂ、−ＯＲ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＳＯｎ２Ｒ１０ｂ、−ＮＲ７ｂＣ＝（Ｏ）Ｒ９ｂ、−ＮＲ７ｂＣ（Ｏ）ＯＲ９ｂ、−ＮＲ７ｂＯＲ９ｂ、−ＯＣＸｂ３、−ＯＣＨＸｂ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；Ｒ４およびＲ５は、独立して水素または非置換のＣ１−Ｃ６アルキルであり；Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ６ａ、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ｂ、Ｒ９ｂ、およびＲ１０ｂは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールであり；同じ窒素原子に結合したＲ７およびＲ８置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；同じ窒素原子に結合したＲ７ａおよびＲ８ａ置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；同じ窒素原子に結合したＲ７ｂおよびＲ８ｂ置換基は、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキルまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールを形成するように任意選択的に結合してもよく；記号ｎ、ｎ１、およびｎ２の各出現は、独立して０〜４の整数であり；記号ｍ、ｍ１、ｍ２、ｖ、ｖ１、およびｖ２の各出現は、独立して１〜２の整数であり；記号ｚは、０〜２の整数であり；記号ｚ２は、１〜４の整数であり；記号Ｘ、Ｘａ、およびＸｂの各出現は、独立してハロゲンである）を有する、化合物。
【０２３５】
２．Ｒ３は、独立して、水素、ハロゲン、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、実施形態１の化合物。
【０２３６】
３．Ｒ３は、水素である、実施形態１〜２のいずれか１つの化合物。
【０２３７】
４．記号ｚは、１である、実施形態１〜３のいずれか１つの化合物。
【０２３８】
５．Ｒ２は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、実施形態１〜４のいずれか１つの化合物。
【０２３９】
６．Ｒ２は、置換または非置換のアルキルである、実施形態１〜５のいずれか１つの化合物。
【０２４０】
７．Ｒ２は、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキルである、実施形態１〜６のいずれか１つの化合物。
【０２４１】
８．Ｒ２は、非置換Ｃ１−Ｃ６アルキルである、実施形態１〜７のいずれか１つの化合物。
【０２４２】
９．Ｒ２は、非置換イソプロピルまたは非置換ｔｅｒｔ−ブチルである、実施形態１〜８のいずれか１つの化合物。
【０２４３】
１０．Ｒ４およびＲ５は、水素である、実施形態１〜９のいずれか１つの化合物。
【０２４４】
１１．Ｌ１は、結合である、実施形態１〜１０のいずれか１つの化合物。
【０２４５】
１２．Ｌ１は、非置換メチレンである、実施形態１〜１０のいずれか１つの化合物。
【０２４６】
１３．Ｌ２は、ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ−である、実施形態１〜１２のいずれか１つの化合物。
【０２４７】
１４．Ｒ６ａおよびＲ６ｂは、水素である、実施形態１〜１３のいずれか１つの化合物。
【０２４８】
１５．Ｒ１は、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、実施形態１〜１４のいずれか１つの化合物。
【０２４９】
１６．Ｒ１は、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、実施形態１〜１５のいずれか１つの化合物。
【０２５０】
１７．Ｒ１は、置換もしくは非置換のアリール、または置換もしくは非置換のヘテロアリールである、実施形態１〜１６のいずれか１つの化合物。
【０２５１】
１８．Ｒ１は、置換フェニルである、実施形態１〜１７のいずれか１つの化合物。
【０２５２】
１９．Ｒ１は、−ＣＦ３またはハロゲンで置換されたフェニルである、実施形態１〜１８のいずれか１つの化合物。
【０２５３】
２０．環Ａは、置換もしくは非置換のアリーレン、または置換もしくは非置換のヘテロアリーレンである、実施形態１〜１９のいずれか１つの化合物。
【０２５４】
２１．環Ａは、置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレンである、実施形態１〜２０のいずれか１つの化合物。
【０２５５】
２２．環Ａは、非置換ナフタレニルである、実施形態１〜２１のいずれか１つの化合物。
【０２５６】
２３．式
【化１３】
2015532287.tif 000015
（式中、Ｌ３は、結合、−ＮＲ６ｂ−、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレン、または、置換もしくは非置換のヘテロアリーレン）を有する、実施形態１〜２２のいずれか１つの化合物。
【０２５７】
２４．式
【化１４】
2015532287.tif 000016
を有する、実施形態１〜２３のいずれか１つの化合物。
【０２５８】
２５．
【化１５】
2015532287.tif 000017
からなる群から選択される、実施形態１〜２４のいずれか１つの化合物。
【０２５９】
２６．薬学的に許容される賦形剤と、実施形態１〜２５のいずれか１つの化合物とを含む、薬学的組成物。
【０２６０】
２７．そのような治療を必要とする患者において疾患を治療する方法であって、治療有効量の実施形態１〜２５のいずれか１つの化合物を前記患者に投与することを含み、疾患は、神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病である、方法。
【０２６１】
２８．疾患は、神経変性疾患である、実施形態２７の方法。
【０２６２】
２９．神経変性疾患は、網膜色素変性症、筋萎縮性側索硬化症、網膜変性症、黄斑変性症、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、プリオン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、またはクールー病である、実施形態２７および２８のいずれか１つの方法。
【０２６３】
３０．疾患は、脱髄性疾患である、実施形態２７の方法。
【０２６４】
３１．脱髄性疾患は、ウォルフラム症候群、ペリツェウス・メルツバッヘル病、横断性脊髄炎、シャルコー・マリー・トゥース病、または多発性硬化症である、実施形態２７および３０のいずれか１つの方法。
【０２６５】
３２．疾患は、癌である、実施形態２７の方法。
【０２６６】
３３．癌は、多発性骨髄腫である、実施形態２７および３２のいずれか１つの方法。
【０２６７】
３４．疾患は、糖尿病である、実施形態２７の方法。
【０２６８】
３５．糖尿病は、Ｉ型糖尿病である、実施形態２７および３４のいずれか１つの方法。
【０２６９】
３６．糖尿病は、ＩＩ型糖尿病である、実施形態２７および３４のいずれか１つの方法。
【０２７０】
３７．疾患は、眼疾患である、実施形態２７の方法。
【０２７１】
３８．眼疾患は、網膜色素変性症、網膜変性症、黄斑変性症、またはウォルフラム症候群である、実施形態２７および３７のいずれか１つの方法。
【０２７２】
３９．疾患は、線維性疾患である、実施形態２７の方法。
【０２７３】
４０．線維性疾患は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、心筋梗塞、心肥大、心不全、硬変症、アセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）肝毒性、Ｃ型肝炎肝疾患、肝脂肪変性（脂肪肝）、または肝線維症である、実施形態２７および３９のいずれか１つの方法。
【０２７４】
４１．Ｉｒｅ１タンパク質の活性を調節する方法であって、前記Ｉｒｅ１タンパク質を、有効量の実施形態１〜２５のいずれか１つの化合物と接触させることを含む、方法。
【０２７５】
４２．前記調節は、阻害である、実施形態４１の方法。
【０２７６】
４３．前記活性は、キナーゼ活性である、実施形態４１〜４２のいずれか１つの方法。
【０２７７】
４４．前記キナーゼ活性は、自己リン酸化活性である、実施形態４３の方法。
【０２７８】
４５．前記活性は、オリゴマー化活性である、実施形態４１〜４２のいずれか１つの方法。
【０２７９】
４６．前記オリゴマー化活性は、二量体化活性である、実施形態４５の方法。
【０２８０】
４７．前記活性は、ＲＮａｓｅ活性である、実施形態４１〜４２のいずれか１つの方法。
【０２８１】
４８．細胞が、前記Ｉｒｅ１タンパク質を含む、実施形態４１〜４２のいずれか１つの方法。
【０２８２】
４９．Ｉｒｅ１タンパク質の活性の前記活性は、前記細胞のアポトーシスを増加させることである、実施形態４８の方法。
【０２８３】
５０．器官は、前記細胞を含む、実施形態４８〜４９のいずれか１つの方法。
【０２８４】
５１．生物は、前記細胞を含む、実施形態４８〜５０のいずれか１つの方法。
【０２８５】
５２．前記生物は、前記Ｉｒｅ１タンパク質の活性に関連する疾患を有する、実施形態５１の方法。
【０２８６】
５３．前記疾患は、神経変性疾患、脱髄性疾患、癌、眼疾患、線維性疾患、または糖尿病である、実施形態５２の方法。
【０２８７】
５４．前記疾患は、神経変性疾患である、実施形態５３の方法。
【０２８８】
５５．神経変性疾患は、網膜色素変性症、筋萎縮性側索硬化症、網膜変性症、黄斑変性症、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、プリオン病、クロイツフェルト・ヤコブ病，またはクールー病である、実施形態５３および５４のいずれか１つの方法。
【０２８９】
５６．疾患は、癌である、実施形態５３の方法。
【０２９０】
５７．癌は、多発性骨髄腫である、実施形態５３および５６のいずれか１つの方法。
【０２９１】
５８．疾患は、糖尿病である、実施形態５３の方法。
【０２９２】
５９．糖尿病は、Ｉ型糖尿病である、実施形態５３および５８のいずれか１つの方法。
【０２９３】
６０．糖尿病は、ＩＩ型糖尿病である、実施形態５３および５８のいずれか１つの方法。
【０２９４】
６１．疾患は、脱髄性疾患である、実施形態５３の方法。
【０２９５】
６２．脱髄性疾患は、ウォルフラム症候群、ペリツェウス・メルツバッヘル病、横断性脊髄炎、シャルコー・マリー・トゥース病、または多発性硬化症である、実施形態５３および６１のいずれか１つの方法。
【０２９６】
６３．脱髄性疾患は、多発性硬化症である、実施形態５３、６１、および６２のいずれか１つの方法。
【０２９７】
６４．疾患は、眼疾患である、実施形態５３の方法。
【０２９８】
６５．眼疾患は、網膜色素変性症、網膜変性症、黄斑変性症、またはウォルフラム症候群である、実施形態５３および６４のいずれか１つの方法。
【０２９９】
６６．疾患は、線維性疾患である、実施形態５３の方法。
【０３００】
６７．線維性疾患は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、心筋梗塞、心肥大、心不全、硬変症、アセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）肝毒性、Ｃ型肝炎肝疾患、肝脂肪変性（脂肪肝）、または肝線維症である、実施形態５３および６６のいずれか１つの方法。
【０３０１】
６８．式
【化１６】
2015532287.tif 000018
（式中、Ｒ１ｄ、Ｒ２ｄ、Ｒ３ｄ、Ｒ４ｄ、Ｒ５ｄ、Ｒ６ｄ、Ｒ７ｄ、Ｒ８ｄ、Ｒ９ｄ、およびＲ１０ｄは、それぞれ独立して、Ｃ２−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−Ｃ１−４アルキル−Ｒ１２ｄ、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−８シクロアルキル、単環式ヘテロサイクリル、単環式ヘテロアリール、またはフェニル、アリールであり、シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロアリール、およびフェニル基は、それぞれ、任意選択的に１個または２個のＲ１１ｄ基で置換され；各Ｒ１１ｄは、独立してＣ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＲｄ２、または−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄであり；Ｒ１２ｄは、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基によってそれぞれ任意選択的に置換され；各Ｒｄは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロサイクリル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール，およびヘテロアリールアルキルは、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲ０ｄ、ＳＲ０ｄ、ＮＲ０ｄ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、またはＮ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２である１個、２個、３個、または４個の基で任意選択的に置換され；各Ｒ０ｄは、独立して水素またはＣ１−６アルキルであり、各Ｒｄは、独立して水素、またはＣ１−６アルキルである）の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【０３０２】
６９．式
【化１７】
2015532287.tif 000019
（式中、Ｒ１ｄは、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであって、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立して、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基によってそれぞれ任意選択的に置換され；Ｒ２ｄおよびＲ３ｄは、一緒になって、フェニル、単環式ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、または単環式ヘテロサイクリルであり、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３−８シクロアルキル、およびヘテロサイクリル基は、それぞれ独立してハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲｄ、−ＳＲｄ、−ＮＲｄ２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲｄ２、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、または−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｄ２である１個、２個、または３個の基によってそれぞれ任意選択的に置換され、各Ｒｄは、独立して水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロサイクリル，アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキルは、それぞれ独立してハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、−ＯＲ０ｄ、ＳＲ０ｄ、ＮＲ０ｄ２、Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２、Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ０ｄ、−Ｎ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ０ｄ、またはＮ（Ｒ０ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ０ｄ）２である１個、２個、３個、または４個の基で任意選択的に置換され、各Ｒ０ｄは、独立して水素またはＣ１−６アルキルであり、各Ｒｄは、独立して水素、またはＣ１−６アルキルである）の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【０３０３】
７０．実施形態６８および６９の式のいずれか、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物。
【０３０４】
７１．ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を阻害するための薬学的組成物であって、本明細書に開示される式（Ａ）、式（Ｂ）、式（Ａ）および式（Ｂ）の任意の誘導体、ＧＰ１７、ＧＰ２１、ＧＰ２９、ＤＳＡ７、ＤＳＡ８、ＧＰ１１７、ＧＰ１１８、ＧＰ１４６、ＧＰ１４６（ＮＭｅ）、ＧＰ１４６（Ａｍ）、図７および８に示される化合物、実施形態６８および６９からの式のいずれか、ならびにそれらの組み合わせを含む、薬学的組成物。
【０３０５】
７２．マウスＩＲＥ１αを含む、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を活性化するための薬学的組成物。
【０３０６】
７３．ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を阻害するための方法であって、そのような阻害を必要とする対象に、有効量の、ａ．実施形態６８の化合物、式（Ａ）、式（Ｂ）、ＧＰ１７、ＧＰ２１、ＧＰ２９、ＤＳＡ７、ＤＳＡ８、ＧＰ１１７、ＧＰ１１８、ＧＰ１４６、ＧＰ１４６（ＮＭｅ）、ＧＰ１４６（Ａｍ）、図７もしくは８に示される化合物、実施形態６８および６９の式のいずれか、およびこれらの任意の組み合わせ、またはｂ．７３（ａ）からの化合物と、薬学的に許容される賦形剤、担体、もしくは希釈剤とを含む薬学的組成物のいずれかを提供することを含む、方法。
【０３０７】
７４．ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を活性化するための方法であって、そのような阻害を必要とする対象に、有効量の、ａ．マウスＩＲＥ１α、またはｂ．マウスＩＲＥ１αと、薬学的に許容される賦形剤、担体、もしくは希釈剤とを含む薬学的組成物のいずれかを提供することを含む、方法。
【０３０８】
７５．前記Ｉｒｅ１は、Ｉｒｅ１αである、実施形態４１〜６７のいずれか１つの方法。
【０３０９】
７６．前記Ｉｒｅ１は、ヒトＩｒｅ１である、実施形態４１〜６７、および７５のいずれか１つの方法。
【実施例】
【０３１０】
Ｆ．実施例
１．ＩＲＥ１α調節因子のスクリーニングおよび最適化
本明細書に示す詳細は、例として、本発明の実施形態の例示的な考察のみを目的とするものであり、本発明の種々の実施形態の原理および概念的態様の容易に理解される記述であると考えられるものを提供するために提示される。この点において、本発明の構造の詳細を、本発明の基本的な理解に必要である以上に詳しく示すための試みは行われず、図面および／または実施例と併せて説明を読めば、当業者には、本発明のいくつかの形態がどのように実践において具現化され得るかが明らかとなる。
【０３１１】
キナーゼ阻害剤を使用した、キナーゼドメインのＡＴＰ結合部位を介したＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性の阻害。ＩＲＥ１αキナーゼ阻害剤のより強力かつ選択的な類似体の作製
【０３１２】
ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅドメインを遠隔で阻害することができるＡＴＰ競合性キナーゼ阻害剤の発見。以前の試験により、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性がキナーゼドメインの自己リン酸化に依存することが示された。本明細書では、キナーゼドメインのＡＴＰ結合部位と相互作用するリガンドが、自己リン酸化要求を回避してＲＮａｓｅドメインを活性化することができるという、キナーゼドメインとＲＮａｓｅドメインとの予想しなかった関係を示す（Ｐａｐａ，Ｆ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３０２，１５３３−１５３７（２００３））。例えば、直交性ＡＴＰ競合性阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１は、キナーゼ活性を欠くＩＲＥ１α変異体のＲＮａｓｅ活性をレスキューすることができる（Ｈａｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ３６５，７７７−７８３，（２００８））。内在性補因子ＡＤＰおよびＡＴＰを含む、野生型ＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位と相互作用する他のリガンドも、ＲＮａｓｅ活性を直接活性化することができる（Ｌｅｅ，Ｋ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １３２，８９−１００，（２００８）；Ａｌｉ，Ｍ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  ＥＭＢＯ  ｊｏｕｒｎａｌ  ３０，８９４−９０５，（２０１１））。また、ＡＴＰ競合性阻害剤ＡＰＹ２９およびスニチニブも、酵母およびマウスＩＲＥ１αのＲＮａｓｅを直接活性化する（Ｈａｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １３８，５６２−５７５，（２００９）；Ｋｏｒｅｎｎｙｋｈ，Ａ．Ｖ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４５７，６８７−６９３，（２００９））。酵母ＩＲＥ１に結合したＡＰＹ２９の結晶構造は、キナーゼ触媒ドメインが、リン酸転移を触媒することができるタンパク質キナーゼがとるコンフォメーションである活性コンフォメーションをとることを示す（Ｋｏｒｅｎｎｙｋｈ，Ａ．Ｖ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４５７，６８７−６９３，（２００９））。ＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位の活性コンフォメーションを安定化することにより、特定の補因子およびＡＴＰ競合性阻害剤が、その隣接するＲＮａｓｅドメインをアロステリックに活性化するリガンドとして作用する。そのキナーゼドメインを介してＩＲＥ１αのＲＮａｓｅをアロステリックに活性化する能力を考えると、不活性なＡＴＰ結合部位のコンフォメーションを安定化する異なるクラスのキナーゼ阻害剤を用いて、同じキナーゼドメインを介してＲＮａｓｅを阻害することも可能であるはずである。多数のタンパク質キナーゼ標的においてキナーゼ活性部位の交互のコンフォメーションを安定化する、Ｉ型およびＩＩ型と称される２つのクラスのＡＴＰ競合性キナーゼ阻害剤を同定した（図１Ａ）５１，５２。Ｉ型阻害剤は、ＡＰＹ２９およびスニチニブと同様に、活性なＡＴＰ結合部位のコンフォメーションを安定化する。対照的に、ＩＩ型阻害剤は、臨床的に承認された薬物であるイマチニブおよびソラフェニブと同様に、不活性なＡＴＰ結合部位のコンフォメーションを選択的に安定化する５３−５５。ＩＩ型阻害剤によって安定化される不活性なＡＴＰ結合部位のコンフォメーションは、触媒的に重要なＡｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ（ＤＦＧ）モチーフの外向きの動きによって特徴付けられるため、ＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションと称される（図１Ａ）５１，５２。本明細書では、ＩＩ型阻害剤の多様なパネルの作製と、それらと多くのタンパク質キナーゼとの相互作用の特徴付けについて記載する（Ｋｒｉｓｈｎａｍｕｒｔｙ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ９，４３−５０，（２０１３）；Ｈａｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ３６５，７７７−７８３，（２００８）；Ｂｒｉｇｈａｍ，Ｊ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．ＡＣＳ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．（２０１３）；Ｈｉｌｌ，Ｚ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．ＡＣＳ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．７，４８７−４９５（２０１２））。これらの薬理学的ツールは、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅをアロステリックに不活性化することができるＡＴＰ競合性阻害剤を同定するという目標への出発点としての役割を果たした。
【０３１３】
ＩＩ型阻害剤の多様なパネルを、ＩＲＥ１α＊と称されるキナーゼ／ＲＮａｓｅドメインを含有する組換え可溶性ヒトＩＲＥ１αミニタンパク質構築物（バキュロウイルスにおいて発現）のＲＮａｓｅ活性をブロックする能力についてスクリーニングした（Ｚｈａｎｇ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ｒｅｖｉｅｗｓ．Ｃａｎｃｅｒ  ９，２８−３９，（２００９））。ＩＲＥ１α＊は、基本的に自己リン酸化されるため、そのＲＮａｓｅは活性であり、ＦＲＥＴによって消光したＸＢＰ１  ＲＮＡミニ基質を用いてアッセイすることができる。このアッセイを用いて試験した全てのＩＩ型阻害剤は、ＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションを安定化することが予測されるコア結合要素を含有するが、１つのリガンドのみが、６０μＭの濃度でＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性の測定可能な阻害を示した（図１Ｃおよび１Ｄ）。これらのＩＩ型キナーゼ阻害剤は、ＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性も減弱させるため、これらはＫＩＲＡ（キナーゼ阻害ＲＮａｓｅアテニュエーター：ｋｉｎａｓｅ−ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ＲＮａｓｅ  ａｔｔｅｎｕａｔｏｒ）と名付けられた。ＫＩＲＡ１は、非受容体チロシンキナーゼＳｒｃおよびＡｂｌのＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションを安定化することが示されているピラゾロピリミジン系阻害剤である（Ｄａｒ，Ａ．Ｃ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｌｏｇｙ  １５，１０１５−１０２２（２００８））。Ｓｒｃに結合したＫＩＲＡ１の共結晶構造（ＰＤＢ：３ＥＬ８）および分子モデリングに基づいて、提案されるＩＲＥ１αとの接触点を図１Ａに示す。
【０３１４】
ＫＩＲＡ１は、効力が中程度であるにもかかわらず、より高い親和性のアロステリックなＲＮａｓｅ阻害剤を開発するための適切な出発点としての役割を果たした。多数の同様の類似体を作製し、ＲＮａｓｅ阻害について試験した。ＫＩＲＡ１のほとんどの修飾が有害であったが、ピラゾロピリミジン骨格をイミダゾピラジンコアで置き換えることにより、全体的な効力に有意な増加が得られた（ＫＩＲＡ２、図１Ｃおよび１Ｄ）。さらに、ＫＩＲＡ２のＣ−３位にある４−アニリノ基をナフチルアミン部分で置換することによりＫＩＲＡ３を得た。特に、ＫＩＲＡ３は、共有結合修飾によりＩＲＥ１αのＲＮａｓｅを直接阻害するイミンベースの低分子であるＳＴＦ−０８３０１０と同様の程度までＸＢＰ１  ＲＮＡ切断を阻害する。
【０３１５】
Ｉ型阻害剤ＡＰＹ２９（ＩＣ５０（自己リン酸化）＝０．２８μＭ）と同様に、ＫＩＲＡ３（ＩＣ５０（自己リン酸化）＝３．１μＭ）は、ＩＲＥ１α＊キナーゼのインビトロでの自己リン酸化の用量依存性の抑制を示す。したがって、ＫＩＲＡ３およびＡＰＹ２９はどちらもＩＲＥ１α＊キナーゼ阻害剤であるが、これらはそのＲＮａｓｅ活性に対して相反する効果を示し、ＡＰＹ２９がアクチベーターとして作用する。２つのキナーゼ阻害剤の違いをさらに特徴付けるために、活性化ホスファターゼを除去するためのλ−ホスファターゼを用いて、低い基礎ＲＮａｓｅ活性を有するＩＲＥ１α＊の形態を作製した。予想された通り、ＩＲＥ１α＊の脱リン酸化変異体（ｄＰ−ＩＲＥ１α＊）は、ＩＲＥ１α＊よりも有意により低い基礎ＲＮａｓｅ活性を有する；ＡＰＹ２９を増加させながらｄＰ−ＩＲＥ１α＊をインキュベートすることにより、ＸＢＰ１ミニ基質を切断する能力を徐々に回復し、約６０％のＩＲＥ１α＊レベルで定常に達する（図２Ｃ）。対照的に、ＫＩＲＡ３は、ｄＰ−ＩＲＥ１α＊の残りのＲＮａｓｅ活性を抑制する。ＡＰＹ２９およびＫＩＲＡ３の相反する効果をさらに調査するために競合実験を行った。ＡＰＹ２９の濃度を増加させると、一定濃度のＫＩＲＡ３によって引き起こされるＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ阻害が徐々に逆転する（図２Ｅ）。さらにＩ型阻害剤スニチニブも、ＫＩＲＡ３のＲＮａｓｅ阻害効果に対抗する。その一方で、ＫＩＲＡ３の濃度を増加させると、一定濃度のＡＰＹ２９の下でＲＮａｓｅ阻害が回復され、予想されたＩＣ５０の増加が見られた。予測されたように、ＡＰＹ２９は、共有結合性ＲＮａｓｅ修飾因子ＳＴＦ−０８３０１０によって引き起こされる直接的な阻害をレスキューすることはできない。総合すると、これらの結果は、ＡＰＹ２９およびＫＩＲＡ３が、同じ結合部位を介して、ＲＮａｓｅ活性に対してそれらの相反する効果を発揮していることを強く示唆するものである。
【０３１６】
薬物スニチニブは、酵母およびヒトＩＲＥ１α１６，１９のキナーゼ活性を阻害することが示されている無差別型のＩ型阻害剤である。ＧＰ１４６（ＫＩＲＡ３）と他のＩＲＥ１αのＡＴＰ競合性阻害剤との違いを調査するために、スニチニブとＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊構築物との相互作用をさらに特徴付けた。予想された通り、スニチニブは、ＩＲＥ１α＊の自己リン酸化活性の用量依存性阻害剤である（図１８ａ）。また、スニチニブは、ｄＰ−ＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性を活性化し、これは、そのＩ型ファルマコフォアと一致する（図１８ｂ）。したがって、ＡＰＹ２９およびスニチニブの両方が、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅドメインを活性化するＡＴＰ結合部位のコンフォメーションを安定化する。ＡＰＹ２９と同様に、増加する量のスニチニブは、一定濃度のＧＰ１４６の存在下でＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性をレスキューすることができる（図１８ｃ）。総合すると、これらの結果は、ＧＰ１４６が、ＩＲＥ１αの種々のＩ型ＡＴＰ競合性阻害剤によって示される常同性のＲＮａｓｅ活性化に対抗することを示している。
【０３１７】
ＫＩＲＡ３は、ＩＲＥ１αの二量体化およびオリゴマー化を阻害する
酵母および哺乳動物ＩＲＥ１タンパク質において二量体および／または高次オリゴマーが形成すると、キナーゼ／ＲＮａｓｅモノマーの自己会合がＲＮａｓｅ活性を増加させることが報告されている。さらに、秩序度は、活性と直接相関し得る。したがって、ＡＰＹ２９およびＫＩＲＡ３を用いて、ＲＮａｓｅ活性に対するそれらの相反する効果の根拠として、それらがヒトＩＲＥ１αのオリゴマー化状態に多様に影響を与えるという予想を検証した。具体的には、ＲＮａｓｅアクチベーターは、モノマーを基準値よりも高次の種にするはずである。これを確認するために、増加する濃度のＩＲＥ１α＊を、ＤＭＳＯ、または飽和濃度のＡＰＹ２９もしくはＫＩＲＡ３のいずれかとともにインキュベートし、オリゴマー（モノマーよりも大きな全ての種として定義される）対モノマーＩＲＥ１αの比率を決定した（図２４）。リガンドの非存在下において、ＩＲＥ１α＊は、オリゴマー／モノマー比における濃度依存性の増加を示す。ＡＰＹ２９は、ＩＲＥ１α＊のオリゴマー／モノマー比におけるこの濃度依存性の増加をさらに促進し、反対に、ＫＩＲＡ３は低下させる。総合すると、インビトロデータは、これらの２つのクラスのキナーゼ阻害剤が、酵素のオリゴマー化状態に相反する効果を発揮することによりＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性を多様に調節するモデルを支持する。
【０３１８】
２．組成物の合成および特徴付け
別途記載のない限り、全ての試薬は商業的供給者から入手し、精製しないで使用した。ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅシリカゲル６０  Ｆ２５４プレート上でＴＬＣを行った。室温でＢｒｕｋｅｒ  ＡＶ−３００またはＡＶ３０１機器上で１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを得、室温でＢｒｕｋｅｒ  ＡＶ−５００機器上で１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを得た。化学シフトをｐｐｍで報告し、結合定数をＨｚで報告する。１Ｈおよび１３Ｃの共鳴は、残りのＭｅＯＨを参照する。Ｂｒｕｋｅｒ  Ｅｓｑｕｉｒｅ  Ｉｏｎ  Ｔｒａｐ  ＭＳ機器上で質量分析を行った。２つの異なる溶媒系を用いた分析ＨＰＬＣにより、全ての最終化合物の純度を決定した。分析条件Ａ：［Ｃ１８（１５０ｘ２．１ｍｍ）、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ−０．１％  ＣＦ３ＣＯ２Ｈ＝３３分にわたって１：９９〜１００：０；１ｍＬ／分；２２０および２５４ｎｍで３３分間検出］分析条件Ｂ：［Ｃ１８（１５０ｘ２．１ｍｍ）、ＣＨ３ＯＨ／Ｈ２Ｏ−０．１％  ＣＦ３ＣＯ２Ｈ＝３３分にわたって１：９９〜１００：０；１ｍＬ／分；２２０および２５４ｎｍで３３分間検出］
【０３１９】
ＳＴＦ−０８３０１０、スニチニブ、ニロチニブ、およびＧＰ２１は、商業的供給者から入手した。分析ＨＰＬＣにより、全ての化合物の純度が＞９５％であることを確認した。ＡＰＹ２９およびＧＰ１１８は、以前に報告された手順に従って調製した。
【０３２０】
１−ヨード−３−イソプロピルイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−８−アミン（化合物１）
以前に記載された手順に従って化合物１を合成した。１−（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）−３−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ウレア（化合物２）。ＴＨＦ（１．９ｍＬ）中の４−アミノエニルボロン酸ピナコールエステル（５０．０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）および３−（トリフルオロメチル）フェニルイソシアネート（４６．０ｕＬ、０．３１ｍｍｏｌ）の混合物を室温で一晩撹拌した。その混合物を濃縮し、ジクロロメタンで希釈し、水で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空で濃縮し、得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）、９２．５ｍｇの化合物２を得た（収率９８％）。ＴＬＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、８０：２０ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．４；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ７．９０（ｓ，１Ｈ），７．７１−７．６８（ｍ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４８−７．４２（ｍ，３Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），１．３４（ｓ，１２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ］＋計算値Ｃ２０Ｈ２２ＢＦ３Ｎ２Ｏ３、４０６．１７；［Ｍ＋１］＋実測値４０７．５。１−（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ナフタレン−１−イル）−３−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ウレア（化合物３）。ＴＨＦ（０．９ｍＬ）中の４−アミノナフタレン−１−ボロン酸ピナコールエステル（３１．２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および３−（トリフルオロメチル）フェニルイソシアネート（２１．０μＬ、０．３１ｍｍｏｌ）の混合物を室温で一晩撹拌した。その混合物を濃縮し、ジクロロメタンで希釈し、水で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空で濃縮し、得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）、４３．６ｍｇの化合物３を得た（収率８６％）。ＴＬＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、８０：２０ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．４；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ８．８７−８．８２（ｍ，１Ｈ），８．１１−７．９１（ｍ，４Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６０−７．４７（ｍ，３Ｈ），７．３６−７．３１（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｓ，１２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ］＋計算値Ｃ２４Ｈ２４ＢＦ３Ｎ２Ｏ３，４５６．１８；［Ｍ＋１］＋実測値、４５７．３。Ｎ−（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ナフタレン−１−イル）−３−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（化合物４）。４−アミノナフタレン−１−ボロン酸ピナコールエステル（７５．０ｍｇ、０．２６７ｍｍｏｌ）、３−（トリフルオロメチル）安息香酸（６７．５ｍｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５５．１ｍｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（６８．０ｍｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（１４１μＬ、０．８０３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（７９０μＬ）に溶解し、室温で一晩撹拌した。粗混合物を酢酸エチル中で希釈し、ＮＨ４ＣｌおよびＮａ２ＣＯ３で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空で濃���した。粗有機生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製し（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）、１６．６ｍｇの化合物４を得た（収率１４％）。ＴＬＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、８０：２０ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．４；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ８．８７−８．８４（ｍ，１Ｈ），８．４１−８．３６（ｍ，２Ｈ），８．１３−８．０４（ｍ，２Ｈ），８．０１−７．９６（ｍ，１Ｈ），７．８５−７．７８（ｍ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５８−７．５５（ｍ，２Ｈ），１．４７（ｓ，１２Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ］＋計算値Ｃ２４Ｈ２３ＢＦ３ＮＯ３，４４１．１７；［Ｍ＋１］＋実測値、４４２．２。８−クロロ−１−ヨード−３−イソプロピルイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン（化合物５）。以前に公開された手順に従って化合物５を合成した。１−ヨード−３−イソプロピル−Ｎ−メチルイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−８−アミン（化合物６）。化合物５（２１．８ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（９１μＬ）中の４０％ＭｅＮＨ２溶液に溶解し、マイクロ波中、８０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空で濃縮し、２０．３ｍｇの化合物６を得た（収率９４％）。ＴＬＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、５０：５０ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．２；１Ｈ  ＮＭＲ  １Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ７．５１（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），３．４２−３．３４（ｍ，１Ｈ），３．０７（ｓ，３Ｈ），１．３７（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ］＋計算値Ｃ１０Ｈ１３ＩＮ４，３１６．０２；［Ｍ＋１］＋実測値，３１７．１．
【０３２１】
１−（４−（８−アミノ−３−イソプロピルイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−イル）フェニル）−３−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ウレア（ＫＩＲＡ２）。化合物１（２２．１ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）、化合物２（３５．５ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２．６ｍｇ、２．１μｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（１７．０ｍｇ、０．１６１ｍｍｏｌ）の混合物を、ＤＭＥ／水の３：１混合物に溶解した（２８０ｕＬ）。その混合物を８５℃で一晩加熱した。次いで、粗混合物を室温まで冷却させ、アセトニトリル／水の混合物に希釈し、逆相クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製し、１１．５ｍｇのＫＩＲＡ２を得た（収率３５％）。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ，９５：５ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．５；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ７．９５（ｓ，１Ｈ），７．６８−７．６４（ｍ，１Ｈ），７．６５−７．６３（ｍ，２Ｈ），７．６０−７．５６（ｍ，２Ｈ），７．５５−７．４８（ｍ，２Ｈ），７．３４−７．３１（ｍ，１Ｈ），７．０２−７．００（ｄｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．４９−３．４３（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ］＋計算値Ｃ２３Ｈ２１Ｆ３Ｎ６Ｏ，４５４．１７；［Ｍ＋１］＋実測値４５５．５。ＨＰＬＣ精製条件：Ｃ１８カラム（２５０ｘ２１ｍｍ）、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ−０．１％ＣＦ３ＣＯ２Ｈ＝７８分間にわたって１：９９〜１００：０；８ｍＬ／分；２２０ｎｍおよび２５４ｎｍで７８分間検出。２つの異なる溶媒系における分析ＨＰＬＣにより、ＧＰ１１７の純度が＞９８％であると判定した。
【０３２２】
１−（４−（８−アミノ−３−イソプロピルイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−イル）ナフタレン−１−イル）−３−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ウレア（ＫＩＲＡ３）。化合物１（１２．０ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）、化合物３（２１．９ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．４ｍｇ、１．２μｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（９．３ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）の混合物を、ＤＭＥ／水の３：１混合物に溶解した（１６０ｕＬ）。その混合物を８５℃で一晩加熱した。粗混合物を室温まで冷却し、アセトニトリル／水の混合物に希釈し、逆相クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製し、１２．３ｍｇのＧＰ１４６を得た（収率６１％）。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ，９５：５ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．４；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ８．２７−８．２２（ｍ，１Ｈ），８．０２−７．９６（ｍ，２Ｈ），７．９０−７．８６（ｍ，１Ｈ），７．８３−７．７９（ｍ，１Ｈ），７．７２−７．４９（ｍ，５Ｈ），７．３７−７．３２（ｍ，１Ｈ），７．０４−６．９９（ｍ，１Ｈ），３．６６−３．５５（ｍ，１Ｈ），１．５４−１．４８（ｍ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ１５４．９，１５１．６，１４９．８，１４０．２，１３５．９，１３２．９，１２９．４，１２８．７，１２８．７，１２７．１，１２６．６，１２６．６，１２５．８，１２５．７，１２１．９，１２１．９，１２１．８，１２０．２，１１８．７，１１８．７，１１５．１，１１４．６，１１２．９，１０８．４，２５．８，１９．６；［Ｍ＋１］＋実測値５０５．４。ＨＰＬＣ精製条件：Ｃ１８カラム（２５０ｘ２１ｍｍ）、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ−０．１％ＣＦ３ＣＯ２Ｈ＝７８分間にわたって１：９９〜１００：０；８ｍＬ／分；２２０ｎｍおよび２５４ｎｍで７８分間検出。２つの異なる溶媒系における分析ＨＰＬＣにより、ＧＰ１４６の純度が＞９８％であると判定した。
【０３２３】
１−（４−（３−イソプロピル−８−（メチル）イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−イル）ナフタレン−１−イル）−３−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ウレア（ＧＰ１４６（ＮＭｅ））。化合物６（１１．１ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）、化合物３（１９．３ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．３ｍｇ、１．０ｕｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（８．２ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の混合物を、ＤＭＥ／水の３：１混合物に溶解した（１３０ｕＬ）。その混合物を８５℃で一晩加熱した。粗混合物を室温まで冷却し、アセトニトリル／水の混合物に希釈し、逆相クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製し、５．０ｍｇのＧＰ１４６（ＮＭｅ）を得た（収率２７％）。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ，９５：５ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．６；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ８．２６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｓ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝９．０，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７２−７．６６（ｍ，３Ｈ），７．６２−７．５１（ｍ，２Ｈ），７．３７−７．３４（ｍ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６６−３．５７（ｍ，１Ｈ），２．９９（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，６．０Ｈｚ，６Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ１５４．９９，１５１．２２，１４８．８６，１４０．１９，１３５．９７，１３３．０４，１３１．６８，１２９．３６，１２８．９６，１２８．８０，１２８．６４，１２８．５４，１２６．９７，１２６．６３，１２５．８６，１２５．８０，１２１．９７，１２１．８４，１２０．４５，１１８．６８，１１４．９９，１１４．５５，１１３．０５，１０８．４７，２８．２５，２５．７５，１９．６０；ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ］＋計算値Ｃ２８Ｈ２５Ｆ３Ｎ６Ｏ、５１８．２；［Ｍ＋１］＋実測値５１９．５。分析ＨＰＬＣによりＧＰ１４６（ＮＭｅ）の純度が＞９８％であると判定した。
【０３２４】
Ｎ−（４−（８−アミノ−３−イソプロピルイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−イル）ナフタレン−１−イル）−３−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（ＧＰ１４６（Ａｍ））。化合物１（９．５ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）、化合物４（１６．６ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．１ｍｇ、０．９４μｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（７．３ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）の混合物を、ＤＭＥ／水の３：１混合物に溶解した（１２０μＬ）。その混合物を８５℃で一晩加熱した。粗混合物を室温まで冷却し、アセトニトリル／水の混合物に希釈し、逆相クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製し、５．３ｍｇのＧＰ１４６（Ａｍ）を得た（収率３４％）。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ，９５：５ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．５；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ８．４６（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），８．１６−８．１３（ｍ，１Ｈ），８．０１−７．９８（ｍ，１Ｈ），７．８６−７．８４（ｍ，１Ｈ），７．８１−７．７７（ｍ，２Ｈ），７．７２−７．６９（ｍ，１Ｈ），７．６８−７．６２（ｍ，２Ｈ），７．６０−７．５４（ｍ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６１−３．５２（ｍ，１Ｈ），１．５３−１．４６（ｍ，６Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ］＋計算値Ｃ２７Ｈ２２Ｆ３Ｎ５Ｏ，４８９．１８；［Ｍ＋１］＋実測値４９０．４。分析ＨＰＬＣによりＧＰ１４６（Ａｍ）の純度が＞９８％であると判定した。
【０３２５】
１−（４−（８−アミノ−３−ｔｅｒｔ−ブチルイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−イル）ナフタレン−１−イル）−３−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ウレア（ＫＩＲＡ６）。１−ヨード−３−ｔｅｒｔブチルイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−８−アミン（６０．０ｍｇ、０．１２０ｍｍｏｌ）、３（６６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（５ｍｇ、４μｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（９２８ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の混合物を、ＤＭＥ／水の３：１混合物に溶解した（０．５ｍＬ）。その混合物を８５℃で一晩加熱した。粗混合物を室温まで冷却し、アセトニトリル／水の混合物に希釈し、逆相クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製し、５３ｍｇのＫＩＲＡ６を得た。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ，９５：５ｖ／ｖ）：Ｒｆ＝０．４；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ８．２６（ｍ，１Ｈ），８．０８−７．９９（ｍ，２Ｈ），７．９０−７．８６（ｍ，１Ｈ），７．８３−７．７９（ｍ，１Ｈ），７．６９−７．５２（ｍ，５Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｍ，１Ｈ），１．６５（ｓ，９Ｈ）；１３ＣＮＭＲ（１２６ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ１５４．８，１４０．２，１３５．７，１３３．０，１３２．４，１３１．７，１３１．６，１３１．０，１３０．７，１２９．４，１２８．８，１２８．６，１２８．５，１２７．０，１２６．６，１２５．９，１２５．４，１２３．２，１２１．９，１２０．１，１１８．７，１１５．０，１１４．４，１１０．１，３３．６，２７．３；ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：［Ｍ］＋計算値Ｃ２８Ｈ２５Ｆ３Ｎ６Ｏ（Ｍ＋Ｈ＋）：５１９．２；実測値５１９．４
【０３２６】
ＩＲＥ１αの強力かつ選択的な可逆的ＩＩ型阻害剤の作製。前述のように、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性およびキナーゼ活性を不活性化することができるＩＩ型ＡＴＰ競合性阻害剤（ＫＩＲＡ３）がインビトロおよびインビボで同定されている（Ｚｈａｎｇ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ｒｅｖｉｅｗｓ．Ｃａｎｃｅｒ  ９，２８−３９，（２００９））。本明細書では、これらのＩＩ型阻害剤の効力および選択性を増加させるための試みについて記載する。構造に基づく薬物設計を用いてＫＩＲＡ３をさらに最適化した。最初に、阻害剤ドッキングプロトコルを改良するために、オン標的（ＩＲＥ１α）およびオフ標的（Ｓｒｃ）に結合したＫＩＲＡの構造の使用を含む、ＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションをとるＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位の相同性モデルを使用して類似体の合成を誘導する。本明細書では、ＩＲＥ１αの活性化ループ内の保存されていないシステインを標的とする不可逆的阻害剤の開発について記載する。ここでは、ＩＲＥ１αがＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションをとる場合に到達可能であると予測されるシステインを標的とする求電子剤を含有するＫＩＲＡ３類似体の開発について記載する。以下に詳細を記載する。
【０３２７】
ＫＩＲＡ類似体の合成：一般構造Ｚの阻害剤を作製するための合成戦略を図２５に示す。市販のアミンＺ１を、１，１’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）で活性化した（またはＥＤＣＩ、ＤＭＡＰで活性化した）カルボン酸（Ｒ１−ＣＯ２Ｈ）でアシル化した後、ＰＯＣｌ３で環化して、１位（Ｒ１）で置換されたイミダゾピリミジン（Ｚ２）を作製する（Ｍｕｌｖｉｈｉｌｌ，Ｍ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１６，１３５９−１３７５（２００８）；Ｍｕｌｖｉｈｉｌｌ，Ｍ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １７，１０９１−１０９７（２００７））。ＮＩＳで骨格をヨウ素化することによりＣ−３位に尿素置換基を導入し、（密閉反応容器内で）イソプロパノール中のアンモニアで求核置換し、尿素含有ボロン酸エステルとのパラジウム媒介性の鈴木カップリングを行う（ボックス内に示されるように調製）（Ｊｉｎ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２１，１１７６−１１８０（２０１１）；Ｗａｎｇ，Ｊ．−Ｘ．ｅｔ  ａｌ．Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．１０，２９２３−２９２６（２００８）；Ｂｏａｒｄ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．１１，５１１８−５１２１（２００９））。金属媒介性クロスカップリングを用いないでＣ−３位に置換基を導入する代替の合成経路（Ｒ２置換基）も使用することができる（Ｍｕｌｖｉｈｉｌｌ，Ｍ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １７，１０９１−１０９７（２００７））。この合成方法を用いて４０個を超える類似体が作製されてきた。代表的な阻害剤を図２６に示す。ＫＩＲＡ３のより強力な（ＩＣ５０（ＲＮａｓｅ）＝２１０ｎＭ；ＩＣ５０（キナーゼ）＝６２０ｎＭ）類似体であるＫＩＲＡ６（Ｒ１＝Ｖ；Ｒ３＝Ｂ）は、Ａｉｍ  ２において広く特性が明らかにされている。ＫＩＲＡ７（Ｒ１＝Ｖ；Ｒ３＝Ｃ）は、今日までに作成された最も強力なＫＩＲＡの１つである（ＩＣ５０（ＲＮａｓｅ）＝＜３０ｎＭ；ＩＣ５０（キナーゼ）＝３５ｎＭ）。
【０３２８】
活性化ループ内のＣｙｓ７１５を標的とする不可逆的ＫＩＲＡＩＲＥ１αキナーゼドメインは、ＤＦＧモチーフから２残基だけＣ末端側にシステイン残基（Ｃｙｓ７１５）を有する（図２７）。Ｃｙｓ７１５は、ハロアセトアミド含有ＩＣＡＴ試薬によって急速にアルキル化され、ＫＩＲＡ３下ではその速度が増加する（Ｚｈａｎｇ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ｒｅｖｉｅｗｓ．Ｃａｎｃｅｒ  ９，２８−３９，（２００９））。モデリングは、ＤＦＧモチーフが「ｏｕｔ」コンフォメーション（ＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位がＫＩＲＡに結合したときにとるコンフォメーション）をとる場合、Ｃｙｓ７１５がＫＩＲＡ骨格のＲ３置換基の近傍にあることを示唆している。ヒトカイノーム中の５１８個のキナーゼのうち、４２個は、同等の位置または隣接する位置にシステイン残基を有する（Ｌｅｐｒｏｕｌｔ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５４，１３４７−１３５５（２０１１））。しかしながら、ＩＩ型阻害剤を用いた化学的プロテオミクスプロファイリング試験は、ＩＲＥ１αを除いて、これらの４２個のキナーゼのいずれも、ＤＦＧ−ｏｕｔ不活性コンフォメーションをとることができないことを示唆している（Ｋｒｉｓｈｎａｍｕｒｔｙ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ９，４３−５０，（２０１３）；Ｂｒｉｇｈａｍ，Ｊ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．ＡＣＳ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１３０１２３１５５８２３００９）。したがって、ＫＩＲＡ骨格から提示される適切に配向された求電子剤を用いてＣｙｓ７１５を選択的に標的とすることが可能であるはずである。作製される代表的な不可逆的ＫＩＲＡを図２７に示す（パラジウム媒介性クロスカップリング中の不安定さの問題を回避するために、求電子剤は最後の合成ステップで導入される）。保存されていないシステイン残基を標的とすることにより、高度に選択的な多数の不可逆的キナーゼ阻害剤が開発されてきた（Ｋｗａｒｃｉｎｓｋｉ，Ｆ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．ＡＣＳ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．７，１９１０−１９１７（２０１２）；Ｂａｒｏｕｃｈ−Ｂｅｎｔｏｖ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ  ３３，４３−５２（２００９）；Ｚｈａｎｇ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｌｏｇｙ  １９，１４０−１５４（２０１２）；Ｚｈｏｕ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２１，６３８−６４３（２０１１）；Ｚｈｏｕ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７，２８５−２９５（２０１０）；Ｚｈｏｕ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４６２，１０７０−１０７４（２００９）；Ｓｅｒａｆｉｍｏｖａ，Ｉ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ８，４７１−４７６（２０１２）；Ｈｅｎｉｓｅ，Ｊ．Ｃ．＆Ｔａｕｎｔｏｎ，Ｊ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５４，４１３３−４１４６（２０１１）；Ｃｏｈｅｎ，Ｍ．Ｓ．ｆｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３０８，１３１８−１３２１（２００５））。
【０３２９】
３．ＧＰ１４６−ＩＲＥ１αおよびＡＰＹ２９−ＩＲＥ１αの相互作用の分析
ＡＹＰ２９およびＧＰ１４６が、同じＡＴＰ結合部位を介してそれらの相反する効果を発揮していることをさらに確認するために、一連の生化学的フットプリント実験を行った（Ｔｕ，Ｂ．Ｐ．＆Ｗａｎｇ，Ｊ．Ｃ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９６，４８６２−４８６７（１９９９）；Ｕｎｄｅｒｂａｋｋｅ，Ｅ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４７，９６７７−９６８０（２００８））。具体的には、ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６の存在下または非存在下において、ヒトＩＲＥ１α内の３つの天然システイン残基（Ｃｙｓ５７２、Ｃｙｓ６４５、およびＣｙｓ７１５）のアルキル化剤への到達可能性を判定した（図３ａ）。これらの試験のために、求電子性の同位体コードアフィニティータグ（ＩＣＡＴ）試薬を使用して、アルキル化速度のレシオメトリックな、したがって定量的な比較を可能にした（Ｕｎｄｅｒｂａｋｋｅ，Ｅ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４７，９６７７−９６８０（２００８））。Ｃｙｓ６４５およびＣｙｓ７１５は、ＩＲＥ１αのＡＴＰ結合溝内に位置するため、これらの残基の到達可能性は、この部位を占有するリガンドによって影響を受けることが予想される一方で、Ｃｙｓ５７２は、キナーゼのＮ末端ローブの上に位置する溶媒に曝露される残基である。ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６の両方がＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位を占有していることと一致して、キナーゼヒンジ領域に位置するＣｙｓ６４５は、いずれかの阻害剤の存在下においてアルキル化剤から高度に遮蔽される（図３ｂ）。対照的に、ＡＰＹ２９がアルキル化の速度を緩徐にし、ＧＰ１４６が該速度を増加させるため、これらの阻害剤はＣｙｓ７１５の到達可能性に相反する効果を発揮する。Ｃｙｓ７１５は、ＩＲＥ１αの活性化ループ内（ＤＦＧモチーフから２残基だけＣ末端側）に位置しており、ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６がこの残基に与える多様な影響は、活性化ループの異なるコンフォメーションを安定化するこれらのリガンドと一致している（図３ｂ）。予想された通り、いずれの阻害剤の存在下においても、ＩＲＥ１αのキナーゼ活性部位から遠位であるＣｙｓ５７２の到達可能性において検出可能な違いは観察されない。
【０３３０】
次に、ＧＰ１４６およびＡＰＹ２９がヒトＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位とどのように相互作用するかをよりよく理解するために、分子ドッキング実験を行った。ＡＤＰに結合したヒトＩＲＥ１αの共結晶構造（ＰＤＢコード３Ｐ２３、Ａ鎖）から、ＡＴＰ結合部位のＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションのモデルを作製した（Ａｌｉ，Ｍ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．ＥＭＢＯ  Ｊ．３０，８９４−９０５（２０１１））。ＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションをとるＩＲＥ１αの構造はまだ説明されていないが、別のキナーゼであるチロシンキナーゼＡｂｌ２の活性化ループをテンプレートとして使用して、この形態の相同性モデルを作製した。多段階式の全原子最小化および明示的な水分子動態（ＭＤ）シミュレーションを用いて、ＤＦＧ−ｉｎモデルおよびＤＦＧ−ｏｕｔモデルの両方を最適化した（Ｂｏｗｅｒｓ，Ｋ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＡＣＭ／ＩＥＥＥ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｓｕｐｅｒｃｏｍｐｕｔｉｎｇ（ＳＣ０６）（Ｔａｍｐａ，Ｆｌｏｒｉｄａ，ＵＳＡ，２００６））。予想通り、ヒトＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションに結合したＡＰＹ２９のドッキング構造は、酵母ＩＲＥ１酵素に結合したこのリガンドの構造と類似している（図１９）（Ｋｏｒｅｎｎｙｋｈ，Ａ．Ｖ．ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ４５７，６８７−６９３（２００９））。ＡＰＹ２９のピラゾール環は、キナーゼヒンジ領域と水素結合を形成し、ピリミジン部分がアデニンポケットを占有する。ＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションに結合したＡＰＹ２９の好ましいポーズを得ようという試みは失敗に終わったが、それは、このリガンドがＡＴＰ結合部位の活性コンフォメーションを排他的に安定化する能力と一致している。
【０３３１】
ＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションに結合したＧＰ１４６の最も好ましいドッキングポーズを図３ｃに示す。このポーズにおいて、このリガンドのピラゾロピリミジン環は、ヒンジ領域と２つの水素結合を形成し、アデニンポケットを占有する。ＧＰ１４６の太いナフチル環は、コア骨格にほぼ直交するコンフォメーションをとり、Ｉｌｅゲートキーパー残基に対して積み重なる。他のＩＩ型阻害剤と同様に、ＧＰ１４６のトリフルオロメチルフェニル部分が、ＤＦＧモチーフ内のＰｈｅ側鎖の動きによって形成された疎水性ポケットを占有する。ＧＰ１４６は、ヒトＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションに十分に適応しているが、ＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションに結合したこの阻害剤について好ましいポーズは観察されなかった。実際、ドッキング試験により、活性化ループ内のＤＦＧモチーフを動かさずにＧＰ１４６がＩＲＥ１αに結合できる唯一の方法は、阻害剤がキナーゼのヒンジ領域とのカノニカルな相互作用を妨害した場合のみであると予測されている。
【０３３２】
ドッキングモデルをさらに実験的に試験するために、阻害剤の効力を低下させることが予測される構造要素を含有するＧＰ１４６の類似体を作製した（図３ｄ）。ＧＰ１４６（ＮＭｅ）は、ＩＲＥ１αのヒンジ領域との相互作用を妨害することが予測されるＮメチル基を含有し、ＧＰ１４６（Ａｍ）のアミド結合は、ＤＦＧモチーフの動きによって形成される疎水性ポケットとの好ましい相互作用としてトリフルオロメチルフェニル部分を形成させないはずである。モデルと一致して、ＧＰ１４６（ＮＭｅ）およびＧＰ（１４６Ａｍ）の両方が、ＧＰ１４６と比較して著しく低い、ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を阻害する能力を示す（図３ｄ）。
【０３３３】
４．ＧＰ１４６およびＡＰＹ２９はＩＲＥ１αのオリゴマー化状態に多様に影響を及ぼす
増加する濃度のＩＲＥ１α＊を、ＤＭＳＯ、または飽和濃度のＡＰＹ２９もしくはＧＰ１４６のいずれかとともにインキュベートし、オリゴマー（モノマーよりも大きな全ての種として定義される）（ほとんど二量体）対モノマーＩＲＥ１αの比率を決定した（図４ａ）。リガンドの非存在下において、ＩＲＥ１α＊は、オリゴマー／モノマー比における濃度依存性の増加を示す。ＡＰＹ２９の存在は、ＩＲＥ１α＊のオリゴマー／モノマー比におけるこの濃度依存性の増加をさらに促進し、反対に、ＧＰ１４６は低下させる。総合すると、インビトロデータは、これらの２つのクラスのキナーゼ阻害剤が、酵素のオリゴマー化状態に相反する効果を発揮することによりＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性を多様に調節するモデルを支持する（図４ｂ）。
【０３３４】
５．拡張されたＡＴＰ結合ポケットを有するＩＲＥ１α変異体は、ＧＰ１４６に対する感受性の増加を示す
切断型のＩＲＥ１αをインビトロ試験に使用して、細胞ベースの実験を用いて、全長ＩＲＥ１α膜貫通タンパク質の多様な調節を２つのクラスのキナーゼ阻害剤を用いて再現することが可能であるかどうかを調べた。ＧＰ１４６のオン標的効果を試験し、以前に開発されたＩＲＥ１αの化学的遺伝子系を使用して確認した（Ｈａｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １３８，５６２−５７５，（２００９））。具体的には、ＷＴまたは「穴開き」ＩＲＥ１αゲートキーパー変異体Ｉ６４２Ａのいずれかを発現するテトラサイクリン誘導性の同質遺伝子的Ｔ−ＲＥｘ  ２９３安定細胞株を使用して、ＧＰ１４６がインビボでＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性をブロックできるかどうかを決定した。ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）で誘導すると、トランスジェニックＷＴ−ＩＲＥ１αまたはＩＲＥ１αＩ６４２Ａは、ＥＲ中に自発的に凝集し、トランス自己リン酸化し、上流ＥＲストレスを必要とすることなくＸＢＰ１  ｍＲＮＡをスプライシングする（図５ａおよび図２０）。予想された通り、ＧＰ１４６は、ＷＴ細胞株において、自己リン酸化およびＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを阻害する（図２０ａおよび２０ｂ）。ＩＲＥ１αとの直接的な相互作用によって生じるこれらの阻害効果と一致して、対照化合物ＧＰ１４６（ＮＭｅ）は、試験した最も高い濃度であっても、これらのパラメータのいずれにも影響を及ぼさない（図２０ｃ）。さらに、ＩＲＥ１αＩ６４２Ａの拡張されたＡＴＰ結合ポケットは、ＧＰ１４６の太いＣ−３置換基によりよく適応して感受性の増強をもたらすと仮説を立てた。実際に、ドッキング試験は、ＧＰ１４６のナフチル環が、野生型タンパク質ではなく、ＩＲＥ１αＩ６４２Ａにおいて到達可能である疎水性ポケットを占有することができることを示唆している（図２１）。この概念を裏付けるように、この変異体を介した自己リン酸化およびＸＢＰ１のスプライシングを完全に阻止するには、低いナノモル濃度のＧＰ１４６で十分であった（図５ａおよび５ｂ）。さらに、ＡｌａまたはＧｌｙゲートキーパー残基を含有する変異体キナーゼに選択的なＩ型「隆起状」阻害剤１ＮＭ−ＰＰ１の濃度を増加させることにより、ＧＰ１４６の存在下においてＩＲＥ１αＩ６４２ＡのＲＮａｓｅ活性をレスキューすることができる（図５ｃ）。
【０３３５】
データは、基本的に細胞のＸＢＰ１  ｍＲＮＡの約５０％をスプライシングする過剰発現によってのみ活性化され得るＩＲＥ１αＩ６４２Ａのモデルを示す：１ＮＭ−ＰＰ１は、ＲＮａｓｅ活性の活性をさらに増加させ、その一方でＧＰ１４６は低下させる（図５ｄ）。これらの多様な効果は、これらの阻害剤による２つの異なる様式のキナーゼ活性部位の安定化に由来し、ＡＰＹ２９がＷＴ  ＩＲＥ１αに作用するのと同様の様式で、１ＮＭ−ＰＰ１は「穴開き」ＩＲＥ１αＩ６４２Ａキナーゼに作用する。要約すると、ＩＩ型ファルマコフォアＧＰ１４６は、ＩＲＥ１αＩ６４２Ａにおいて不活性なキナーゼコンフォメーションを強化する可能性が高く、ＷＴ  ＩＲＥ１αについても同様である。
【０３３６】
６．ＧＰ１４６は、内在性ＩＲＥ１αの自己リン酸化およびＲＮａｓｅ活性の両方をインビボでブロックする
ＩＲＥ１α調節因子が、ＥＲストレス下でどのように内在性ＩＲＥ１αのキナーゼ活性およびＲＮａｓｅ活性に影響を及ぼすかをさらに調査するために、インスリンを産生する膵臓β細胞腫瘍に由来する、十分に発達した大きなＥＲを含むＩＮＳ−１ラットインスリノーマ細胞株を使用してインビボ試験を行った。これらの細胞をＥＲ  ＳＥＲＣＡ  ＡＴＰａｓｅポンプ阻害剤タプシガルジン（Ｔｇ）で処理し、ＥＲストレスと、細胞のＸＢＰ１  ｍＲＮＡの約５０％のスプライシングを引き起こすレベルのＩＲＥ１αの活性化とを誘導した（図６ａ）。インビトロでの結果を再現するように、ＧＰ１４６およびＡＰＹ２９は、ＥＲストレスによって誘導される内在性ＩＲＥ１αのＲＮａｓｅの活性化に対する相反する用量依存性の効果を示す（図６ａ）。さらに、ＧＰ１４６は、ＲＮａｓｅ活性をブロックするのと同様の濃度でＩＲＥ１αの自己リン酸化を抑止する（図６ｂおよび６ｃ）。対照化合物ＧＰ１４６（ＮＭｅ）は、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングをブロックしない（図６ｄ）。そのインビトロ活性と一致して、Ｉ型阻害剤スニチニブは、ＩＲＥ１αのキナーゼ活性を部分的に阻害することができるが、試験した濃度ではこの酵素のＲＮａｓｅ活性には影響を及ぼさない（図６ｂおよび６ｃ）。ＲＮａｓｅ阻害剤ＳＴＦ−０８３０１０も、Ｔｇで処理したＩＮＳ−１細胞において試験した。予想された通り、この化合物は、ＸＢＰ１のスプライシングを用量依存性の様式で阻害するが、ＩＲＥ１αの自己リン酸化は阻止しない（図６ｂおよび６ｃ）。したがって、ＧＰ１４６は、インビトロおよびインビボの両方でＩＲＥ１αの両方の酵素活性をブロックする能力を有すると同定された唯一の化合物である（図６ｅ）。
【０３３７】
７．ＩＲＥ１α＊およびｄＰ−ＩＲＥ１α＊の発現と精製
Ｎ末端に６−Ｈｉｓタグを有するＢａｃ−ｔｏ−Ｂａｃバキュロウイルス発現系（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、ヒトＩＲＥ１αの細胞質キナーゼドメインおよびＲＮａｓｅドメインを含有する構築物（残基４６９〜９７７、ＩＲＥ１α＊）をＳＦ９昆虫細胞において発現させ、Ｎｉ−ＮＴＡ（Ｑｉａｇｅｎ）カラムを用いて精製した。ｄＰ−ＩＲＥ１α＊を作製するために、５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＭｎＣｌ２、２ｍＭ  ＤＴＴ、０．０１％  Ｂｒｉｊ３５中、５：１のモル比（ＩＲＥα＊：λ−ＰＰａｓｅ）でＩＲＥ１α＊をλ−ＰＰａｓｅ（ＮＥＢ）と４０分室温でインキュベートすることにより基本のリン酸化部位を除去した。抗ホスホＩＲＥ１α抗体を用いた免疫ブロット法により脱リン酸化を確認した。
【０３３８】
８．化合物（ＩＲＥ１α＊）のインビトロでの特徴付け
ＩＲＥ１α＊のキナーゼ活性およびＲＮａｓｅ活性をインビトロで阻害する能力についてＫＩＲＡを試験する。図１Ｂ〜１Ｄに示したＸＢＰ１ミニ基質アッセイは、９６ウェルまたは３８４ウェルのフォーマットで行うことができ、ＲＮａｓｅのＩＣ５０を決定するために使用される。平行して、３２γ−ＡＴＰおよびＳＴＫペプチド基質２を基質として用いた９６ウェルのドットブロットアッセイにおいて、全てのＫＩＲＡについてキナーゼのＩＣ５０を決定する。全ての求電子剤含有ＫＩＲＡについて阻害の時間依存性を決定する。ＲＮａｓｅおよびキナーゼアッセイを使用して図２６中のＫＩＲＡの特性を明らかにしたところ、キナーゼとＲＮａｓｅのＩＣ５０の間に強い相関が示された。ＩＲＥ１α＊自己リン酸化アッセイにおいて最も強力なＫＩＲＡを試験する。オフ標的である可能性が高い（Ｓｒｃ、Ａｂｌ、ｐ３８α）、細胞の運命に影響を及ぼす（ｍＴｏｒ、ＩＫＫβ）、タンパク質の翻訳を下方制御する（ＰＫＲ、ＰＥＲＫ、ＧＣＮ２、ＨＲＩ）、ＩＲＥ１シグナル伝達の下流標的である（Ｊｎｋ１／２、ＭＫＫ４、ＭＫＫ７）、およびカイノーム全体を代表する（ＡｕｒＡ、Ｅｒｋ２、Ｃｄｋ２、ＥＧＦＲ、ＦＡＫ、ＭＡＰ３Ｋ５、ＰＫＡ）キナーゼのパネルに対して、ＩＣ５０（ＲＮａｓｅ）＜２００ｎＭを示す化合物の逆スクリーニングを行う。これらのスクリーンから得られたプロファイリングデータは、より選択性の高いＫＩＲＡを設計するために使用される。ＫＩＲＡ３およびＫＩＲＡ６をこのパネルの１２個のキナーゼに対して試験したところ、観察されたオフ標的阻害はチロシンキナーゼＳｒｃおよびＡｂｌに対するもののみである。したがって、構造に基づく設計戦略は、これら２つのキナーゼを逆標的として使用する（後に記載する）。
【０３３９】
９．キナーゼアッセイ
切断緩衝液（２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ（ｐＨ７．５）、０．０５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ１００、５０ｍＭ  ＫＯＡＣ、１ｍＭ  Ｍｇ（ＯＡＣ）２、１ｍＭ  ＤＴＴ）中で、阻害剤（初期濃度＝８０μＭ、２倍連続稀釈）をＩＲＥ１α＊とともに２０分インキュベートした後、１０μＣｉ［γ−３２Ｐ］ＡＴＰ（３０００  Ｃｉ／ｍｍｏｌ、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）とともに室温で３０分インキュベートした。次いで、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより試料を分離し、オートラジオグラフを作成した。化合物処理なしのＩＲＥ１α＊のバンド強度を１に、バックグラウンドを０に設定することにより、自己リン酸化レベルを定量化した。
【０３４０】
１０．インビトロＲＮａｓｅアッセイ
５’ＦＡＭ−３’ＢＨＱで標識したＸＢＰ１単一ステムループミニ基質（５’ＦＡＭ−ＣＵＧＡＧＵＣＣＧＣＡＧＣＡＣＵＣＡＧ−３’ＢＨＱ）をＤｈａｒｍａｃｏｎから購入した。０．２μＭ  ＩＲＥ１α＊またはｄＰ−ＩＲＥ１α＊を阻害剤またはＤＭＳＯとともに切断緩衝液中で２０分インキュベートした後、３μＭ  ＲＮＡ基質とともに５分インキュベートした。尿素を加えることにより反応を停止して最終濃度を４Ｍとし、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｍ５マイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）上で、それぞれ４９４ｎｍおよび５２５ｎｍの励起波長および発光波長で蛍光を検出した。ＩＲＥ１α＊とＤＭＳＯの反応のシグナルを１に、ＩＲＥ１α＊を用いない反応のシグナルを０に設定することにより蛍光強度を正規化した。また、フェノール／クロロフォルム抽出およびエタノール沈殿後、尿素ＰＡＧＥによって切断生成物も分離した。３２Ｐで内部標識したマウスＸＢＰ１  ＲＮＡも、記載されるように基質として用いた（Ｈａｎ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌ  １３８，５６２−５７５，（２００９））。
【０３４１】
１１．ＩＣＡＴフットプリント法
重いおよび軽いヨウ素化ＩＣＡＴ試薬を以前に記載されたように作製した（Ｕｎｄｅｒｂａｋｋｅ，Ｅ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．４７，９６７７−９６８０（２００８））。精製したヒトＩＲＥ１αを、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．０）、５０ｍＭ  ＫＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、および０．５ｍＭ  ＴＣＥＰ中で交換した。１つの３μＭ原液を３つの溶液に分割し、それぞれをＤＭＳＯ、ＡＰＹ２９、またはＧＰ１４６のいずれかと混合して１％  ＤＭＳＯおよび２０μＭの阻害剤を含有する溶液を得た。タンパク質溶液に重い標識試薬を加え、指定された時間に２５μＬのアリコートを採取し、過剰なＤＴＴを用いて反応を停止した。０．２％デオキシコール酸ナトリウムおよび１０％トリクロロ酢酸を用いて、氷上で１０分間試料を沈殿させた。混合物を４℃で１５分遠心分離し、ペレットを冷アセトンで洗浄した。次いで、３０μＬの２００ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．０）、７Ｍ尿素、および２．４ｍＭの軽い標識試薬にペレットを再懸濁し、暗所で３０分インキュベートした。２１０μＬの２００ｍＭ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．０）、５．７ｍＭ  ＣａＣｌ２、０．５μｇブタトリプシン（ＴＰＣＫ処理済み、Ｓｉｇｍａ）、および１２５ｎｇ  ＧｌｕＣ（Ｒｏｃｈｅ）中で溶液を希釈し、室温で一晩インキュベートした。Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＬＣＱ質量分析計に直列接続したＴｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｄｉｏｎｅｘ  Ａｃｃｌａｉｍ  Ｐｅｐｍａｐ１００  ＮａｎｏＬＣキャピラリーカラム（Ｃ１８、長さ１５０ｍｍ、内径７５μｍ、粒子径３μｍ）に試料（０．３ｐｍｏｌ）を注入した。該当するペプチドをＭＳ／ＭＳデータ（Ｓｅｑｕｅｓｔ）により同定し、対応するＸＩＣピークを積分した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用してアルキル化曲線をフィットさせた（結合−キネティクス、解離−指数関数的崩壊）。
【０３４２】
１２．分子モデリング
ＫＩＲＡとＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位との相互作用の分子モデリング：ＫＩＲＡ３およびＫＩＲＡ６がどのようにＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位と相互作用するかの見解を得るために、分子モデル実験を用いた。ＡＤＰに結合したヒトＩＲＥ１αの共結晶構造から、ＡＴＰ結合部位のＤＦＧ−ｉｎコンフォメーションのモデルを作製した。ＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションをとるＩＲＥ１αの構造はまだ説明されていないが、別のキナーゼであるチロシンキナーゼＡｂｌ２の活性化ループをテンプレートとして使用して、この形態の相同性モデルを作製した。多段階式の全原子最小化および明示的な水分子動態（ＭＤ）シミュレーションを用いて、ＤＦＧ−ｉｎモデルおよびＤＦＧ−ｏｕｔモデルの両方を最適化した。観察されたＫＩＲＡ３およびＫＩＲＡ６のＳＡＲおよびＩＩ型ファルマコフォアと一致して、これらのリガンドは、ＤＦＧモチーフが「ｏｕｔ」コンフォメーション（ＤＦＧ−ｏｕｔ）をとる場合にＩＲＥ１αのＡＴＰ結合部位においてのみ適応する。さらに、ＫＩＲＡ３およびＫＩＲＡ６の両方に最も好ましいドッキングポーズは、これらのリガンドの両方がＩＩ型阻害剤のカノニカルな接触の全てを行うことを含む。このモデルを使用すると、図３ｃに示すＫＩＲＡの予測されるドッキングスコアは、インビトロキナーゼおよびＲＮａｓｅ阻害の結果と非常に一致している。例えば、ＫＩＲＡ７（Ｒ１＝Ｖ；Ｒ３＝Ｃ：ＩＣ５０（ＲＮａｓｅ）＝＜３０ｎＭ；ＩＣ５０（キナーゼ）＝３５ｎＭ）およびＫＩＲＡ６（Ｒ１＝Ｖ；Ｒ３＝Ｂ：ＩＣ５０（ＲＮａｓｅ）＝２１０ｎＭ；ＩＣ５０（キナーゼ）＝６２０ｎＭ）は、それぞれ、有意にかつＫＩＲＡ３よりも若干好ましいＧｌｉｄｅ＿ＳＰおよびＭＭＧＢＳＡスコアを有する。さらに、このモデルは、細胞アッセイにおける対照のために不活性なＫＩＲＡ３類似体を設計するために使用されている。現在、ＩＲＥ１αの「ＤＦＧ−ｏｕｔ」不活性コンフォメーションのモデルは、ドッキングスコアに基づいて潜在的な類似体の合成を選別するために使用されている。
【０３４３】
ＡＤＰに結合したヒトＩＲＥ１αの共結晶構造（ＰＤＢコード３Ｐ２３、Ａ鎖）からＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｉｎ構造を作製した（Ａｌｉ，Ｍ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．ＥＭＢＯ  Ｊ．３０，８９４−９０５（２０１１））。この構造は、水素を指定するため、水素結合を最適化するため、および制約条件下の最小化（ｉｍｐｒｅｆ）を行うためのＭａｅｓｔｒｏ（Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ）のタンパク質調製ワークフローを用いて調製した。Ｐｒｉｍｅ（Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ）においてＤＦＧ−ｏｕｔテンプレートキナーゼ（Ａｂｌ２；ＰＤＢコード３ＧＶＵ）（配列番号６）の活性化ループを使用して、ＤＦＧ−ｏｕｔコンフォメーションをとるＩＲＥ１αの相同性モデルを構築した（Ｓａｌａｈ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５４，２３５９−２３６７（２０１１））。前述のタンパク質調製ワークフローを用いて初期ＤＦＧ−ｏｕｔモデルを最適化した。次いで、ソフトウェアパッケージＤｅｓｍｏｎｄ（ＤＥ  Ｓｈａｗ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）（Ｂｏｗｅｒｓ，Ｋ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＡＣＭ／ＩＥＥＥ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｓｕｐｅｒｃｏｍｐｕｔｉｎｇ（ＳＣ０６）（Ｔａｍｐａ，Ｆｌｏｒｉｄａ，ＵＳＡ，２００６））に実装された多段階式の全原子最小化および分子動態（ＭＤ）シミュレーションを用いて、ＤＦＧ−ｉｎモデルおよびＤＦＧ−ｏｕｔモデルの両方を最適化した。ＯＰＬＳ−ＡＡ力場、全方向に１０Åの距離の斜方晶シミュレーションボックス内のＴＩＰ４Ｐ陽溶媒モデルを用いて、対イオンを加えて最適化を実行した。ＮＰＴアンサンブルクラスを使用して３００Ｋおよび１．０１３２５バールでシミュレーションを行った。他の全ての設定は初期設定であった。生成シミュレーション時間は１２ｎｓであった。シミュレーションは、ＩＢＭ  Ｅサーバ１３５０クラスター（３６ノードの８Ｘｅｏｎ  ２．３  ＧＨＺコアおよび１２ＧＢのメモリ）で実行した。コンフォメーションの多様性および低い（安定な）ＲＭＳＤに基づいて、ＤＦＧ−ｉｎおよびＤＦＧ−ｏｕｔのシミュレーションからいくつかの後期シミュレーションフレームを抽出した。次いで、ＩＲＥ１αＩ６４２ＡのＤＦＧ−ｉｎおよびＤＦＧ−ｏｕｔモデルを作製するためにこれらのフレームを使用した。側鎖の衝突を回避するために、ＩＲＥ１αのＷＴおよびＩ６４２Ａ構造について制約条件下の（ｉｍｐｒｅｆ）最小化（Ｍａｅｓｔｒｏ，Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ）を行った。次いで、これらの構造を、さらなるモデリングのために使用した。
【０３４４】
前述のＷＴおよびＩＲＥ１αＩ６４２Ａの最適化されたＤＦＧ−ｉｎおよびＤＦＧ−ｏｕｔ構造を用いて、ＡＰＹ２９およびＧＰ１４６の初期結合ポーズを次のように作製した。イオン化状態（ｐＨ＝７）および立体異性体を作製してＧＰ１４６で２つ、ＡＰＹ２９で４つの代表値を得るために、ｌｉｇｐｒｅｐ（Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ  Ｉｎｃ．）を使用してリガンドを調製した。Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｆｉｔ  Ｄｏｃｋｉｎｇ（ＩＦＤ）（Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ  Ｉｎｃ．）プロトコルを初期設定で使用して、最初にリガンドをＩＲＥ１αのＤＦＧ−ｉｎおよびＤＦＧ−ｏｕｔモデルにドッキングさせた。ＩＦＤプロトコルは、制約条件下の受容体最小化ステップに続いて、ポーズのアンサンブルを作製するために低電位を用いたＧｌｉｄｅによるリガンドの初期の柔軟なドッキングを含む。次いで、各ポーズごとに、Ｐｒｉｍｅを使用して近傍の受容体構造を絞り込んだ。次いで、各リガンドを、その対応する最適化された低エネルギー受容体構造に再ドッキングし（Ｇｌｉｄｅを使用）、Ｇｌｉｄｅスコアによってランク付けした。タンパク質リガンド複合体をさらに最適化するために、各リガンドごとに得られた最も高いＩＦＤスコアの最良のポーズを再度ＭＤシミュレーション（生成実行８〜１０ｎｓ）に供した。ＭＤプロトコルは、最小化のための多段階手順および短時間のＭＤ実行に続いて、生成ＭＤシミュレーションを含む。生成ＭＤ実行の間に、リガンドのポーズは安定であることが観察された。次いで、これらのシミュレーションの最終フレームを、制約条件下の（ｉｍｐｒｅｆ）最小化（Ｍａｅｓｔｒｏ，Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ  Ｉｎｃ．）の後でリガンドドッキングに使用した。Ｇｌｉｄｅスコア、既知の相互作用、および目視検査に基づいて、各リガンドの最良のポーズが選択された。ＰｙＭｏｌを使用してリガンドのポーズの３Ｄプロットを生成した。
【０３４５】
１３．オリゴマー対モノマー比を決定するためのＩＲＥ１α＊の架橋結合
ＩＲＥ１−ＫＩＲＡおよびオフ標的キナーゼ−ＫＩＲＡ複合体の構造分析：十分な効力および選択性を示すＫＩＲＡについて、さらなる生化学的および生物物理学的な特徴付けを行う。図４および３０に示す架橋結合戦略を用いて、新しいＫＩＲＡ類似体がＩＲＥ１αの二量体化／オリゴマー化を阻止することができるかどうかを決定する。ＫＩＲＡ６は、ＫＩＲＡ３と同様に、ＩＲＥ１αのモノマー状態を安定化する。分析用超遠心（ＡＵＣ）を用いて、ＫＩＲＡがＩＲＥ１α４９のモノマー形態を安定化することをさらに確認する。ＩＲＥ１αおよびオフ標的キナーゼＳｒｃに結合した最も有望なＫＩＲＡの結晶構造が得られる。これらの構造は、ＩＲＥ１αのドッキングプロトコルを改良するために使用され、高い効力を有する阻害剤のコンピュータによる設計に役立つ。ＫＩＲＡ−Ｓｒｃ複合体の構造は、ＩＲＥ１αに固有の相互作用を同定するために使用され、高い選択性を有するＫＩＲＡの設計に情報を提供する。オン標的／オフ標的の構造的戦略は、トキソプラズマ・ゴンディおよびクリプトスポリジウム・パルバムＣＤＰＫ１の非常に強力かつ選択的な阻害剤を開発するために使用されている（Ｍｕｒｐｈｙ，Ｒ．Ｃ．ｅｔ  ａｌ．ＡＣＳ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１，３３１−３３５（２０１０）；Ｌａｒｓｏｎ，Ｅ．Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５５，２８０３−２８１０（２０１２）；Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｓ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５５，２４１６−２４２６（２０１２）；Ｏｊｏ，Ｋ．Ｋ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１２２，２３０１−２３０５（２０１２））。ＫＩＲＡ３に結合したＳｒｃの回析用の高品質な結晶が得られている。ＡＤＰに結合したヒトＩＲＥ１αの構造が報告されている４８。同じＩＲＥ１α発現構築物および精製プロトコルを使用して、数ミリグラムの量の同種の非リン酸化ＩＲＥ１αが得られている。このタンパク質は、現在、ＩＲＥ１α−ＫＩＲＡ３およびＩＲＥ１α−ＫＩＲＡ６複合体の回析用の高品質な結晶をスクリーニングするために使用されており、初期スクリーニングの結果は非常に有望である。
【０３４６】
増加する濃度のＩＲＥ１α＊（０．４９〜３０μＭ）をＤＭＳＯ、ＧＰ１４６（２００μＭ）、またはＡＰＹ２９（２００μＭ）とともに２０分インキュベートし、次いで、２５０μＭスベリン酸ジサクシンイミジル（ＤＳＳ）（Ｐｉｅｒｃｅ）を加えることにより１時間室温で切断緩衝液中で架橋結合させた。５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）を加えることによって反応を停止した。次いで、試料を煮沸し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ上で分離し、抗ＩＲＥ１α抗体でＩＲＥ１αについて免疫ブロットを行った（ＬＩ−ＣＯＲ  Ｏｄｙｓｓｅｙスキャナーを用いて可視化および定量化）。
【０３４７】
細胞培養およびＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシング。ＩＮＳ−１細胞を、ＲＰＭＩ、１０％ウシ胎仔血清、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ペニシリン−ストレプトマイシン、２ｍＭグルタミン、および５０ｍＭ  β−メルカプトエタノール中で増殖させた。Ｔ−ＲＥｘ  ２９３  ＩＲＥ１αまたはＩＲＥ１αＩ６４２Ａを、１０％ウシ胎仔血清およびペニシリン−ストレプトマイシンを含むＤＭＥ  Ｈ−２１中で増殖させた。化合物とともに１時間インキュベートした後、ＩＮＳ−１細胞を６ｎＭタプシガルジンで４時間処理し、Ｔ−Ｒｅｘ  ２９３  ＩＲＥ１αを発現する細胞を１μＭ  Ｄｏｘで８時間処理した。次いで、ＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用してＲＮＡを抽出し、ＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ  Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して逆転写した。以前に記載されたようにＸＢＰ１のスプライシングを行った７。使用したプライマー：ＩＮＳ−１細胞株にはセンスプライマーｒＸＢＰ  １．３Ｓ（５’−ＡＡＡＣＡＧＡＧＴＡＧＣＡＧＣＡＣＡＧＡＣＴＧＣ−３”）（配列番号７）およびアンチセンスプライマーｒＸＢＰ  １．２ＡＳ（５’−ＧＧＡＴＣＴＣＴＡＡＧＡＣＴＡＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＧ−３’）（配列番号８）、Ｔ−Ｒｅｘ  ２９３細胞株にはセンスプライマーｍＸＢＰ１．３Ｓ（５’−ＡＡＡＣＡＧＡＧＴＡＧＣＡＧＣＧＣＡＧＡＣＴＧＣ−３’）（配列番号９）およびアンチセンスプライマーｍＸＢＰ１．２ＡＳ（５’−ＧＧＡＴＣＴＣＴＡＡＡＡＣＴＡＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＧ−３’）（配列番号１０）。２．５％アガロースゲル上でＰＣＲ産物を分離し、ＥｔＢｒで染色し、ＩｍａｇｅＪにより定量化した。
【０３４８】
免疫ブロット分析。ＩＮＳ−１細胞を化合物またはＤＭＳＯとともに１時間インキュベートした後、１μＭ  Ｔｇで２時間インキュベートした。Ｔ−Ｒｅｘ  ２９３  ＩＲＥ１αを発現する細胞を化合物またはＤＭＳＯとともに１時間インキュベートし、次いで１μＭ  Ｄｏｘで８時間処理した。ＲＩＰＡ緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、０．１％  ＳＤＳ、１％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、１％デオキシコール酸ナトリウム、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１％  ＮＰ−４０、ＥＤＴＡ不含プロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ）、およびホスファターゼ阻害剤カクテル（Ｓｉｇｍａ））に細胞を溶解し、透明溶解液をＳＤＳ−ＰＡＧＥに供し、ニトロセルロースに移した。ブロッキング、抗体のインキュベーション、および洗浄は、０．０５％  Ｔｗｅｅｎ−２０（ｖ／ｖ）および５％（ｗ／ｖ）脱脂粉乳もしくはＢＳＡ、またはブロッキング緩衝液（Ｏｄｙｓｓｅｙ）を含むＰＢＳあるいはＴＢＳ中で行った。一次抗体を希釈した：ＩＲＥ１α（１：１０００）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、ホスホ−ＩＲＥ１α（１：１０００）（Ｎｏｖｕｓ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ）、ＧＡＰＤＨ（１：３０００）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、Ｍｙｃ（１：４０００）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）。近赤外色素に結合した二次抗体を使用して抗体の結合を検出し、ＬＩ−ＣＯＲ  Ｏｄｙｓｓｅｙスキャナ上で可視化した。
【０３４９】
本明細書に記載されるように、ＩＲＥ１α＊は、組換えヒト（ｒｈ）ＩＲＥ１αを意味する。ｒｈ  ＩＲＥ１αは、ヒトＩＲＥ１ａ（４６９−９７７）配列：配列番号１（ｈｉｓタグを有する）；および配列番号２（ｈｉｓタグを有しない）を有する。
１４．ＩＲＥ１αキナーゼ阻害剤で末端ＵＰＲをブロックすることがＥＲストレスによって誘導されるβ細胞の変性を阻止するかどうかを決定する。ＫＩＲＡのオン標的効果、根底にある機構、ならびにＫＩＲＡ６によるβ細胞死の回復およびＥＲストレス下での機能の保存
ＫＩＲＡを用いてＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を阻害すると、ＥＲ膜に局在するｍＲＮＡのエンドヌクレアーゼによる崩壊が停止される。ＥＲに局在するｍＲＮＡの崩壊は、末端ＵＰＲと直接関連付けられている。あるモデルは、ＥＲの構造的および機能的完全性を維持するために必要な因子（例えば、ＥＲシャペロン）をコードする重要なｍＲＮＡの枯渇が、アポトーシス効果の根底にあるかもしれないと考えている。ＩＲＥ１α  ＲＮａｓｅの標的は、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）前駆体を選択し、それらの生合成を終了させる。これらの成熟なｍｉＲは、通常、重要なアポトーシス促進性標的の遺伝子発現に対して阻害効果を発揮する；例えば、選択された４つのｍｉＲの枯渇は、（ｉ）アポトーシスイニシエーターであるカスパーゼ２の翻訳抑制解除、および（ｉｉ）酸化促進剤であるチオレドキシン相互作用タンパク質（ＴＸＮＩＰ）をコードするｍＲＮＡの安定化を引き起こす。遺伝子操作された化学的遺伝子系を使用することは、ＩＲＥ１α  ＲＮａｓｅによって誘導される細胞死のこれらの機構的な特徴的事象を解明することであり、ＫＩＲＡによってＩＲＥ１αのＲＮａｓｅ活性を阻害することの生理学的結果を理解するのに役立つ。
【０３５０】
１５．ＥＲストレスの期間および規模が、高次オリゴマー化およびＩＲＥ１αキナーゼ／ＲＮａｓｅ触媒ドメインの過剰活性化による末端ＵＰＲへの移行を決定する
細胞保護効果を厳密に調べるために、それを超えた場合に細胞をアポトーシスに至らしめるＥＲストレスの閾値を抽出した。十分に発達したＥＲを有し、インスリンを分泌するラットインスリノーマ（ＩＮＳ−１）細胞を使用して、アポトーシスを誘発するＥＲストレスの期間および規模を定量化した。ＥＲストレス誘導因子（例えば、タプシガルジン−Ｔｇ）の濃度および薬剤への曝露時間の２つの変数は、アポトーシスに陥る細胞の割合と直接関連している（図２８ＡおよびＢ）。そのような状態は、グリコシル化阻害剤ツニカマイシン（Ｔｍ）等の他のＥＲストレス誘導因子について定義することができる（図２８Ｃ）。ＥＲストレスの増加は、内在性ＩＲＥ１αのリン酸化の漸進的増加、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングの増加（図２８Ｅ）、プロインスリンをコードするＥＲに局在するｍＲＮＡ  Ｉｎｓ１のエンドヌクレアーゼによる崩壊による枯渇、（図２８Ｆ）、およびアポトーシス促進性転写因子ＣＨＯＰの誘導（図２８Ｇ）を引き起こす。
【０３５１】
これらの前述の末端ＵＰＲシグナル伝達事象は、上流ＥＲストレスが完全に存在しない状態でＩＲＥ１αの過剰発現を制御することにより、完全に模倣することができる。ＷＴ  ＩＲＥ１αを発現するテトラサイクリン誘導性の同質遺伝子的ＩＮＳ−１安定細胞株を作製した。ドキシサイクリン（ｄｏｘ）で誘導すると、トランスジェニックＩＲＥ１αタンパク質オリゴマーは、自発的にトランス自己リン酸化し、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを誘発する（図２９ＡおよびＢ）。トランスジェニック系は、［Ｄｏｘ］を増加させることで微調整され、漸進的に増加するＩＲＥ１αの誘導を引き起こす（トランスジェニックＩＲＥ１αタンパク質はＭｙｃタグを付けられる）。ホスホ／Ｍｙｃ  ＩＲＥ１αの比率は、［Ｄｏｘ］を増加させることで細かく制御可能（および測定可能）であり、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングもまた同様である。ＥＲストレス剤により用量依存性を模倣して末端ＵＰＲを起こし、［Ｄｏｘ］を増加させることにより、ＩＲＥ１αキナーゼの高リン酸化、および臨界閾値を超えるＲＮａｓｅの過剰活性化、および末端ＵＰＲの重要な特徴的事象の誘導を引き起こすことによって、末端ＵＰＲへの移行を自発的に誘発する（図２９Ｃ）。これらは、ｍｉＲ−１７（図２９Ｄ）およびＩｎｓ１  ｍＲＮＡの減少、ＣＨＯＰ  ｍＲＮＡの誘導（図２９Ｅ）、カスパーゼ１、２、および３の誘導およびタンパク質切断（図２９Ｆ）、ならびにアネキシン−Ｖ染色によって測定されるアポトーシス（図２９Ｇ）を含む。
【０３５２】
ＫＩＲＡは、ＩＲＥ１αキナーゼドメインの高次オリゴマー化を中断し、ＲＮａｓｅ活性を減弱させ、細胞が末端ＵＰＲへと移行するのを抑制する。興味深い予備データでは、ＥＲストレス誘導因子に曝露する前に細胞をＫＩＲＡ６で前処理することにより、これら全ての末端ＵＰＲエンドポイントが削減される。インビトロでは、ＫＩＲＡ６は、ＩＲＥ１α＊のＲＮａｓｅ活性およびキナーゼ活性を同様のＩＣ５０で阻害する（図３０ＢおよびＣ）。インビボでは、ＫＩＲＡ６は、内在性ＩＲＥ１αの自己リン酸化を用量依存性の様式で阻害し（図３０Ｄ）、対照的に、アルデヒドベースのＩＲＥ１α  ＲＮａｓｅ阻害剤ＳＴＦは、ＩＲＥ１αの自己リン酸化を阻害せず、また対照化合物ＫＩＲＡ６（ｉｎ）も同様に阻害しない。
【０３５３】
さらに、インビトロでは、ＫＩＲＡ６は、ＩＲＥ１α＊の濃度依存性オリゴマー化を抑制する（図３０Ｅ）。インビボでは、ＫＩＲＡ６は、Ｔｍによって誘発される内在性ＩＲＥ１α媒介性のＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを阻害する（図３０Ｆ）。興味深いことに、ＫＩＲＡ６は、ＥＲに局在するＩｎｓ１  ｍＲＮＡのエンドヌクレアーゼによる崩壊をＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングを阻害するために必要な薬物の用量よりも少ない用量で阻害する（図３０Ｇ）：この差別的効果は、Ｉｎｓ１  ｍＲＮＡの崩壊を触媒するためには高次オリゴマーが必要であるのに対し、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングには二量体で十分であるために生じる可能性がある。ＸＢＰ１  ｍＲＮＡのスプライシングとは対照的に、ＥＲに局在するエンドヌクレアーゼによるｍＲＮＡの崩壊はアポトーシスを促進し、それによって適応を促進するため、このＫＩＲＡの差動効果は、ＩＮＳ１−１細胞がアポトーシスへと移行するのを抑制する天然の「治療ウィンドウ」の存在を明らかにする（図３０Ｈ）。ＫＩＲＡ６のこれらの細胞保護効果は、Ｔｍで処理したＣ５７／ＢＬ６マウスから新しく採取した膵島を含む無数の細胞型にまで拡大適用される（図３０Ｉ）。ＫＩＲＡ６の細胞保護効果は、それらがＩｒｅ１α−／−マウス胎仔線維芽細胞（ＭＥＦ）中に存在しないためにＩＲＥ１αに依存するが、ＷＴおよびＸｂｐ１−／−ＭＥＦにおいても依然として確認することができる（図３０Ｊ）。ＫＩＲＡ６媒介性細胞保護作用のモデルを示す（図３０Ｊ）：このことから、ＩＩ型キナーゼ阻害剤KＩＲＡ６は、ＩＲＥ１αの細胞質側表面上でのキナーゼ／ＲＮＡｓｅホモオリゴマー化を抑制し、その結果として、ＥＲストレス下でのＲＮａｓｅの過活性を抑制し、アポトーシス促進性のＥＲに局在するｍＲＮＡの崩壊を阻止し、細胞にプログラム細胞死までの延長された猶予を与えると仮定される。
【０３５４】
１６．ＵＰＲおよび糖尿病
修復不能なほど高いＥＲストレスに曝露されたマウスおよびヒト膵島のβ細胞は、本明細書に記載される多くの末端ＵＰＲエンドポイントの活性化を示すであろう。ＩＲＥ１α基質としてこれまでに同定されたＥＲに局在するｍＲＮＡおよび選択されたマイクロＲＮＡを除いて、他のｍｉＲおよび小分子非コードＲＮＡはいまだに発見されておらず、関連する変化は、ＫＩＲＡによる改善の治療エンドポイントとして従うことができる末端ＵＰＲの特徴を構成するであろう。
【０３５５】
本明細書では、ＩＲＥ１αが過剰活性化するとインビボで崩壊する４つの選択されたｍｉＲの特徴付けを記載する。これらは、ｍｉＲ−１７、ｍｉＲ−３４ａ、ｍｉＲ−９６、およびｍｉＲ−１２５ｂである。ＷＴ−ＩＲＥ１α＊は、プライマーの伸長によりマッピングしたところ、ダイサーによって切断された部位とは異なる部位でプレｍｉＲ−１７をインビトロで直接切断していた。プレｍｉＲ−１７の切断部位は、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡ−（Ｇ／Ｃ）の部位と同一であり、隣接領域では多様となる。したがって、プレｍｉＲのレベルを減少させることにより、ＩＲＥ１αは、対応する成熟なｍｉＲの細胞レベルを減少させるダイサーの作用を拮抗する。興味深いことに、ＸＢＰ１  ｍＲＮＡをインビトロで切断するように１ＮＭ−ＰＰ１によって活性化することができるＩＲＥ１α＊（Ｉ６４２Ｇ）もまた、１ＮＭ−ＰＰ１下でプレｍｉＲ−１７を切断することができる。ＲＮＡｓｅ変異体であるＩＲＥ１α＊（Ｎ９０６Ａ）は、プレｍｉＲ−１７の切断のために損なわれる（図３１Ａ〜Ｃ）。これによって、ＩＲＥ１αは、過剰なＸＢＰ１  ｍＲＮＡエンドヌクレアーゼ活性を段階的な様式で示すことが可能であるという仮説が生じる。ＩＲＥ１αは、ＥＲ内腔内で折り畳まれなかったタンパク質の濃度に比例してＥＲ膜内でホモオリゴマーを形成するにつれて、徐々にトランス自己リン酸化する。さらに、ホスホアミノ酸基と他の残基との間の塩架橋は、酵母ＩＲＥ１を使用した場合に示されたように、キナーゼ／ＲＮａｓｅドメインの高次ホモオリゴマー化を増強する。よって、ＩＲＥ１αタンパク質がクラスター化して高次オリゴマーになると、そのＲＮＡ基質に対して増加する活性を獲得する。最も効率的な基質はＸＢＰ１  ｍＲＮＡであり、次に選択されたプレｍｉＲ（例えば、１７、３４ａ、９６、および１２５ｂ）が続き、その後にＥＲに局在するｍＲＮＡ基質Ｉｎｓ１が続く。
【０３５６】
高次ＩＲＥ１αオリゴマーをＫＩＲＡで破壊することにより、多くのｍｉＲ標的が非ストレス細胞に見られるレベルで保存される。４つのｍｉＲは、カスパーゼ２およびＮＬＲＰ３インフラマソームアクチベーターＴＸＮＩＰの翻訳後遺伝子制御に対して阻害効果を発揮することが分かっているため、ＫＩＲＡ６は、たとえ折り畳まれなかったタンパク質がＥＲ内腔内に依然として残っていても、これらのＥＲストレス増幅因子のレベルを低下させる。予備データは、これらの予測と一致している。細胞機能を妨げてプログラム細胞死を招くのは、ＥＲ自体に存在する折り畳まれなかったタンパク質ではなく、代わりに、ＩＲＥ１α  ＲＮａｓｅの過剰活性化による活性な末端ＵＰＲシグナル伝達であるということは、興味深い可能性である。したがって、ＩＲＥ１α  ＫＩＲＡは、不活性なＡＴＰ結合部位のコンフォメーションであるＤＦＧ−ｏｕｔを強化することによりオリゴマー化を抑制し、その結果、ＲＮａｓｅ活性を低下させてＥＲストレス誘導性の細胞死を減少させるはずである。当然の結果として、１ＮＭ−ＰＰ１等のＩ型キナーゼ阻害剤は、活性なＡＴＰ結合部位のコンフォメーションであるＤＦＧ−ｉｎを強化することによりオリゴマー化を増加させ、その結果、ＲＮａｓｅ活性を増加させてＥＲストレス誘導性の細胞死を増加させるはずである。
【０３５７】
Ｉ型キナーゼ阻害剤は、ＩＩ型キナーゼ阻害剤（ＫＩＲＡ）がＥＲストレス下で細胞死を促進する効果を拮抗する。図３２は、この概念と一致するデータを示す。ＫＩＲＡは、ＥＲストレス下にあるＩＲＥ１α（Ｉ６４２Ｇ）の細胞の化学的遺伝子系に関連して、１ＮＭ−ＰＰ１によって促進される末端ＵＰＲのエンドポイントを改善するはずである：Ｉｎｓ１および２  ｍＲＮＡの崩壊、ｍｉＲ−１７、３４ａ、９６、および１２５ｂの崩壊、カスパーゼ１、２、および３の切断、ＴＸＮＩＰ  ｍＲＮＡの安定化および翻訳、ならびにその結果としてのＩＬ−１βの成熟および分泌。細胞死のエンドポイントの測定（アネキシンＶによる染色）は、遺伝子操作した細胞系において１ＮＭ−ＰＰ１およびＫＩＲＡの競合効果の関数として行われる。インビボマウスモデルにおける試験の前段階として、外来性ＥＲストレス剤に供した新しく採取したマウス（Ｃ５７ＢＬ／６）膵島において、ならびにＩｎｓ２（Ｃ９６Ｙ）「Ａｋｉｔａ」糖尿病マウスおよび膵島におけるＩＲＥ１αの過剰発現の糖尿病の２つの同時モデルからの膵島において、ＫＩＲＡ６を用いておよび用いずに、全ての末端ＵＰＲのエンドポイントを試験する。
【０３５８】
１７．ＫＩＲＡの特徴付け
強力かつ選択的なＩＲＥ１α阻害剤を、ヒトの培養細胞株に対するそれらの一般的な毒性について試験する。毒性のない化合物については、ＡＤＭＥ、薬物動態学的特性、および毒物学的特性を決定する。好ましいＰＫ／ＡＤＭＥＴ特性を有する化合物は、プロインスリン折り畳み変異体Ａｋｉｔａ、およびマウス膵島におけるＩＲＥ１αの過剰発現の２つのマウス糖尿病モデルにおいて有効性について試験を行う。
【０３５９】
細胞毒性試験：前述の細胞モデルにおいてマイクロモル以下の効力を示す任意のＫＩＲＡを、７つの哺乳動物細胞株に対する細胞毒性アッセイに供する。これらのアッセイは、ＫＩＲＡが動物に投与された時に生じ得るあらゆる一般的なまたは組織特異的な毒性を予測する上で役立つ。以下の７つの細胞株に対してＫＩＲＡを試験した：Ｌ１２１０（マウスリンパ芽球）、Ｗ１−Ｌ２（ヒトリンパ芽球）、ＨＴ−１０８０（ヒト線維肉腫）、ＳＦ−５３９（ヒト神経膠芽腫）、ＮＣＩ−Ｈ４６０（ヒト大細胞肺癌）、ＨＣＣ−２９９８（ヒト結腸癌）、およびＨＬ−６０（ヒト前骨髄球）。このパネルは、様々な組織において細胞の毒性を予測するのに十分な多様性を提供する。モデルにおける有効性と哺乳動物細胞の細胞毒性との倍差は、おおよその治療指数（ＴＩ）を提供する。いくつかの実施形態において、インビボで試験したＫＩＲＡでは＞５０倍ＴＩが見られる。
【０３６０】
インビボＰＫ／ＡＤＭＥＴ試験：細胞アッセイにおいて十分に強力なＫＩＲＡを、マウスにおける薬物動態試験および毒性試験に供する。最初に、観察されるあらゆる毒性について、用量漸増試験において化合物の試験を行う。１ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、および１００ｍｇ／ｋｇの化合物を単回静脈内投与によりマウスに連続的に注射する。これらの単回用量試験の間、呼吸異常または神経学的異常等の急性毒性の兆候についてマウスを観察する。１０ｍｇ／ｋｇで毒性を示さない化合物をＰＫ／ＡＤＭＥ試験に供する。これは、単回用量の投与（ＩＶで１０ｍｇ／ｋｇ）、それに続く３０、６０、１２０、１８０、２４０、および３００分間隔での血液試料採取を含む。これらの実験は、ＫＩＲＡ当たり３匹のマウスの群で行われる。液体クロマトグラフィー／エレクトロスプレーイオン化質量分析の組み合わせ（ＬＣＭＳ）による化合物濃度の測定のために、血漿を分離し、アセトニトリルで抽出する。その結果は、最高濃度（Ｃｍａｘ）、細孔濃度到達時間（Ｔｍａｘ）、濃度曲線下面積（ＡＵＣ）、および半減期（Ｔ１／２）の推定値を提供する。十分な曝露を示す化合物は、本明細書に記載されるインビボ有効性試験の候補である。
【０３６１】
１８．網膜色素変性症を治療するためのＩＲＥ１αキナーゼ／エンドリボヌクレアーゼの阻害剤
ＫＩＲＡは、１００ｎＭ未満の濃度で培養細胞中のＩＲＥ１αを阻害し、ＥＲストレスの条件下で細胞の生存および機能を著しく保護する。さらに、このクラスの主要な化合物は、ロドプシンにおける変異によって引き起こされるＲＰのげっ歯類モデルにおいて有効性を示している。本明細書では、ＲＰの治療のための臨床候補を開発するための、ＫＩＲＡクラスの化合物における網膜変性症に対する効力および有効性の最適化を記載する。
【０３６２】
１９．新規キナーゼ阻害剤を用いたＩＲＥ１αのＲＮａｓｅのアロステリック調節
図３０Ａにその構造が示される、初期のＫＩＲＡのより強力な形態であるＫＩＲＡ６を開発した。この化合物は、ＩＲＥ１α＊（ＷＴ）のキナーゼ自己リン酸化およびＸＢＰ１のスプライシング活性を用量依存的に低下させる（図３０Ｂ〜Ｃ）。また、ＫＩＲＡ６は、プレｍｉＲ−１７のＩＲＥ１α＊（ＷＴ）切断を用量依存的に阻害する（図３１Ｄ）。
【０３６３】
２０．低分子の硝子体内注射
ラットの硝子体の体積に基づいて、各眼の硝子体内に２μｌを注入した。Ｔｍ（最終濃度２０μｇ／μＬ）＋／−ＫＩＲＡ６（最終濃度１０μＭ）を、ビヒクル対照としての同量のＤＭＳＯとともにＰ２１のＳＤラットに注入した。注入から４８時間後および７２時間後、ｑＰＣＲ分析のためにＴｒｉｚｏｌ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中に網膜を採取した。注入後７日目に、光干渉断層撮影（ＯＣＴ）により眼を検査し、続いて形態学的回析のために採取した。Ｐ９およびＰ１５のＰ２３ＨラットにＫＩＲＡ６（最終濃度１０μＭ）またはＤＭＳＯビヒクル対照を注入し、Ｐ４０にＯＣＴおよび形態学的回析により眼を検査した。
【０３６４】
２１．画像誘導光干渉断層撮影（ＯＣＴ）
マウスを１．５〜３％イソフルランで麻酔し、２．５％フェニレフリン塩酸塩および１％トロピカミドで散瞳させ、２．５％メチルセルロースを定期的に点眼して角膜の湿潤を維持した。Ｍｉｃｒｏｎ  ＩＩＩ網膜画像診断システム（Ｐｈｏｅｎｉｘ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｓ）を使用して眼を検査した。Ｍｉｃｒｏｎ  Ｉｍａｇｅ  Ｇｕｉｄｅｄ  ＯＣＴ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｈｏｅｎｉｘ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｓ）を用いて平均して１０〜５０回の走査によりスペクトル領域ＯＣＴ画像を取得した。
【０３６５】
２２．網膜の形態学的回析
外顆粒層（ＯＮＬ）を以前に記載されたように定量化した（Ｌｅｗｉｎ，Ａ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ４，９６７−９７１（１９９８））。端的に述べると、ＣＯ２の吸入によってラットを安楽死させ、直ちに眼球を除去し、リン酸緩衝食塩水中の２％パラホルムアルデヒドおよび２．５％グルタルアルデヒドに浸漬した。続いて、視神経頭を通る垂直子午線上で眼を二分し、Ｅｐｏｎ−Ａｒａｌｄｉｔｅ樹脂に包埋した：１μｍ切片を切り出してトルイジンブルーで染色した。Ｂｉｏｑｕａｎｔ画像分析（Ｂｉｏｑｕａｎｔ；Ｒ＆Ｍ  Ｂｉｏｍｅｔｒｉｃｓ）を使用して網膜周辺の５４ヶ所でＯＮＬの厚さを測定した。
配列番号：１
ＭＳＹＹＨＨＨＨＨＨＤＹＤＩＰＴＴＥＮＬＹＦＱＧＡＭＤＰＥ  ｈｑ  ｑｑｑｌｑｈｑｑｆｑ    ４８０
ｋｅｌｅｋｉｑｌｌｑ  ｑｑｑｑｑｌｐｆｈｐ  ｐｇｄｔａｑｄｇｅｌ  ｌｄｔｓｇｐｙｓｅｓ  ｓｇｔｓｓｐｓｔｓｐ  ｒａｓｎｈｓｌｃｓｇ    ５４０
ｓｓａｓｋａｇｓｓｐ  ｓｌｅｑｄｄｇｄｅｅ  ｔｓｖｖｉｖｇｋｉｓ  ｆｃｐｋｄｖｌｇｈｇ  ａｅｇｔｉｖｙｒｇｍ  ｆｄｎｒｄｖａｖｋｒ    ６００
ｉｌｐｅｃｆｓｆａｄ  ｒｅｖｑｌｌｒｅｓｄ  ｅｈｐｎｖｉｒｙｆｃ  ｔｅｋｄｒｑｆｑｙｉ  ａｉｅｌｃａａｔｌｑ  ｅｙｖｅｑｋｄｆａｈ    ６６０
ｌｇｌｅｐｉｔｌｌｑ  ｑｔｔｓｇｌａｈｌｈ  ｓｌｎｉｖｈｒｄｌｋ  ｐｈｎｉｌｉｓｍｐｎ  ａｈｇｋｉｋａｍｉｓ  ｄｆｇｌｃｋｋｌａｖ    ７２０
ｇｒｈｓｆｓｒｒｓｇ  ｖｐｇｔｅｇｗｉａｐ  ｅｍｌｓｅｄｃｋｅｎ  ｐｔｙｔｖｄｉｆｓａ  ｇｃｖｆｙｙｖｉｓｅ  ｇｓｈｐｆｇｋｓｌｑ    ７８０
ｒｑａｎｉｌｌｇａｃ  ｓｌｄｃｌｈｐｅｋｈ  ｅｄｖｉａｒｅｌｉｅ  ｋｍｉａｍｄｐｑｋｒ  ｐｓａｋｈｖｌｋｈｐ  ｆｆｗｓｌｅｋｑｌｑ    ８４０
ｆｆｑｄｖｓｄｒｉｅ  ｋｅｓｌｄｇｐｉｖｋ  ｑｌｅｒｇｇｒａｖｖ  ｋｍｄｗｒｅｎｉｔｖ  ｐｌｑｔｄｌｒｋｆｒ  ｔｙｋｇｇｓｖｒｄｌ    ９００
ｌｒａｍｒｎｋｋｈｈ  ｙｒｅｌｐａｅｖｒｅ  ｔｌｇｓｌｐｄｄｆｖ  ｃｙｆｔｓｒｆｐｈｌ  ｌａｈｔｙｒａｍｅｌ  ｃｓｈｅｒｌｆｑｐｙ    ９６０
ｙｆｈｅｐｐｅｐｑｐ  ｐｖｔｐｄａｌ
配列番号：２
ｈｑ  ｑｑｑｌｑｈｑｑｆｑ    ４８０
ｋｅｌｅｋｉｑｌｌｑ  ｑｑｑｑｑｌｐｆｈｐ  ｐｇｄｔａｑｄｇｅｌ  ｌｄｔｓｇｐｙｓｅｓ  ｓｇｔｓｓｐｓｔｓｐ  ｒａｓｎｈｓｌｃｓｇ    ５４０
ｓｓａｓｋａｇｓｓｐ  ｓｌｅｑｄｄｇｄｅｅ  ｔｓｖｖｉｖｇｋｉｓ  ｆｃｐｋｄｖｌｇｈｇ  ａｅｇｔｉｖｙｒｇｍ  ｆｄｎｒｄｖａｖｋｒ    ６００
ｉｌｐｅｃｆｓｆａｄ  ｒｅｖｑｌｌｒｅｓｄ  ｅｈｐｎｖｉｒｙｆｃ  ｔｅｋｄｒｑｆｑｙｉ  ａｉｅｌｃａａｔｌｑ  ｅｙｖｅｑｋｄｆａｈ    ６６０
ｌｇｌｅｐｉｔｌｌｑ  ｑｔｔｓｇｌａｈｌｈ  ｓｌｎｉｖｈｒｄｌｋ  ｐｈｎｉｌｉｓｍｐｎ  ａｈｇｋｉｋａｍｉｓ  ｄｆｇｌｃｋｋｌａｖ    ７２０
ｇｒｈｓｆｓｒｒｓｇ  ｖｐｇｔｅｇｗｉａｐ  ｅｍｌｓｅｄｃｋｅｎ  ｐｔｙｔｖｄｉｆｓａ  ｇｃｖｆｙｙｖｉｓｅ  ｇｓｈｐｆｇｋｓｌｑ    ７８０
ｒｑａｎｉｌｌｇａｃ  ｓｌｄｃｌｈｐｅｋｈ  ｅｄｖｉａｒｅｌｉｅ  ｋｍｉａｍｄｐｑｋｒ  ｐｓａｋｈｖｌｋｈｐ  ｆｆｗｓｌｅｋｑｌｑ    ８４０
ｆｆｑｄｖｓｄｒｉｅ  ｋｅｓｌｄｇｐｉｖｋ  ｑｌｅｒｇｇｒａｖｖ  ｋｍｄｗｒｅｎｉｔｖ  ｐｌｑｔｄｌｒｋｆｒ  ｔｙｋｇｇｓｖｒｄｌ    ９００
ｌｒａｍｒｎｋｋｈｈ  ｙｒｅｌｐａｅｖｒｅ  ｔｌｇｓｌｐｄｄｆｖ  ｃｙｆｔｓｒｆｐｈｌ  ｌａｈｔｙｒａｍｅｌ  ｃｓｈｅｒｌｆｑｐｙ    ９６０
ｙｆｈｅｐｐｅｐｑｐ  ｐｖｔｐｄａｌ
【０３６６】
本明細書に記載される実施例および実施形態は、例示目的のためであるに過ぎず、それらを踏まえて種々の修正または変更が当業者に提案され、本出願の主旨および範囲、ならびに添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれることを理解されたい。本明細書に引用される全ての刊行物、特許、および特許出願は、参照により、それらの全体が全ての目的のために本明細書に組み込まれる。
【図１−１】
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【図１−２】
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【図１−３】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【図２−３】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図３−３】
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【図４】
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【図５−１】
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【図５−２】
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【図５−３】
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【図５−４】
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【図６−１】
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【図６−２】
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【図６−３】
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【図７】
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【図８−１】
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【図８−２】
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【図８−３】
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【図８−４】
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【図９−１】
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【図９−２】
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【図９−３】
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【図１０−１】
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【図１０−２】
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【図１０−３】
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【図１１−１】
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【図１１−２】
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【図１１−３】
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【図１１−４】
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【図１２−１】
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【図１２−２】
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【図１２−３】
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【図１３】
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【図１４−１】
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【図１４−２】
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【図１４−３】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８−１】
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【図２８−２】
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【図２８−３】
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【図２９−１】
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【図２９−２】
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【図２９−３】
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【図３０−１】
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【図３０−２】
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【図３０−３】
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【図３０−４】
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【図３１−１】
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【図３１−２】
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【図３１−３】
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【図３２−１】
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【図３２−２】
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【図３２−３】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９−１】
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【図３９−２】
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【図３９−３】
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【図４０】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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