(57)【要約】  本発明の第１の態様は、増殖性障害の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩であって、式中、Ｘが、ＮＲ７であり；Ｒ１及びＲ２がそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、又はシクロアルキルであり；Ｒ３が、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、及びテトラヒドロピラニルから選択される６員ヘテロシクロアルキル基であり、前記ヘテロシクロアルキル基が、１又は２以上の（ＣＨ２）ｎＲ１９基でさらに置換されていてもよく；Ｒ４及びＲ４’がそれぞれ独立に、Ｈ若しくはアルキルであるか；又はＲ４及びＲ４’が一緒になって、スピロシクロアルキル基を形成し；Ｑが、ＣＨ又はＮであり；Ｒ６が、ＯＲ８又はハロゲンであり；ｎが、１、２、又は３であり；Ｒ１９が、Ｈ、アルキル、アリール、又はシクロアルキル基であり；Ｒ７及びＲ８がそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキルであり；前記化合物が次の投与レジメンに従って投与される、前記使用のための化合物又は薬学的に許容されるその塩に関する：（ｉ）約５０〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する；又は（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する；又は（iii）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する；又は（iv）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する；又は（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。さらなる請求項は、この投与レジメンに基づいた治療方法、及びそれに関係するキットに関する。【化１】 2015514703.tif 000022        （Ｉ）
2015514703.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
増殖性障害の治療に使用するための式（Ｉ）
【化１】
2015514703.tif 000013
（Ｉ）
（式中、
Ｘは、ＮＲ７であり；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、又はシクロアルキルであり；
Ｒ３は、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、及びテトラヒドロピラニルから選択される６員ヘテロシクロアルキル基であり、前記ヘテロシクロアルキル基は、１又は２以上の（ＣＨ２）ｎＲ１９基でさらに置換されていてもよく；
Ｒ４及びＲ４’はそれぞれ独立に、Ｈ若しくはアルキルであるか；又は
Ｒ４及びＲ４’は一緒になって、スピロシクロアルキル基を形成し；
Ｑは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ６は、ＯＲ８又はハロゲンであり；
ｎは、１、２、又は３であり；
Ｒ１９は、Ｈ、アルキル、アリール、又はシクロアルキル基であり；
Ｒ７及びＲ８はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩であって、
前記化合物が次の投与レジメンに従って投与される、前記使用のための化合物又は薬学的に許容されるその塩：
（ｉ）約５０〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する；又は
（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する；又は
（iii）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する；又は
（iv）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する；又は
（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。
【請求項２】
約１００〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間、好ましくは最大約１４時間の期間、より好ましくは最大約１２時間の期間、より好ましくは最大約１０時間の期間、より好ましくは最大約８時間の期間、より好ましくは最大約６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項３】
約１００〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与される、請求項１又は２に記載の使用のための化合物。
【請求項４】
約１００〜約５００ｎＭの血漿中濃度を約３〜約６時間の期間、より好ましくは約４〜６時間の期間、さらにより好ましくは約５〜約６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項５】
約５０〜約２５０ｎＭ、より好ましくは約５０〜約２００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項６】
約５０〜約２５０ｎＭ、より好ましくは約５０〜約２００ｎＭの血漿中濃度を約１０〜約１６時間の期間、より好ましくは約１２〜１６時間の期間、さらにより好ましくは約１４〜約１６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与される、請求項５に記載の使用のための化合物。
【請求項７】
約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を約３〜約６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項８】
約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内、より好ましくは約３〜約６時間以内、より好ましくは約４〜約６時間以内、さらにより好ましくは約５〜約６時間以内に実現する投与レジメンにおいて投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項９】
約１００ｎＭ〜約５００ｎＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間、より好ましくは約３〜約６時間以内の期間、より好ましくは約４〜約６時間以内の期間、さらにより好ましくは約５〜約６時間以内の期間に実現する投与レジメンにおいて投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項１０】
約５０ｎＭ〜約２００ｎＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間、より好ましくは約１０〜約１６時間以内の期間、より好ましくは約１２〜約１６時間以内の期間、さらにより好ましくは約１４〜約１６時間以内の期間に実現する投与レジメンにおいて投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
静脈注入によって投与される、請求項１〜１０のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項１２】
静脈注入によって約０．０４〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約４時間投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項１３】
静脈注入によって約０．０２〜約０．０６ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約２時間投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項１４】
静脈注入によって約０．０２〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約２時間投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項１５】
静脈注入によって約０．０１〜約０．０４ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約１０時間投与される、請求項に記載の使用のための化合物。
【請求項１６】
ボーラス注射によって投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項１７】
２又は３以上のボーラス注射によって投与される、請求項１６に記載の使用のための化合物。
【請求項１８】
式（Ｉａ）
【化２】
2015514703.tif 000014
（Ｉａ）
（式中、Ｙは、Ｏ又はＮ−（ＣＨ２）ｎＲ１９であり；
Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ４’、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、ｎ、及びＲ１９は、請求項１に定義した通りである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩である、請求項１〜１７のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項１９】
式（Ｉｂ）
【化３】
2015514703.tif 000015
（Ｉｂ）
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ４’、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ１９は、請求項１に定義した通りである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩である、請求項１〜１８のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項２０】
以下の化合物、
【表１】
2015514703.tif 000016
2015514703.tif 000017
及び薬学的に許容されるその塩から選択される、請求項１〜１９のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項２１】
増殖性障害が、がん又は白血病である、請求項１〜２０のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項２２】
がんが、固形腫瘍である、請求項２１に記載の使用のための化合物。
【請求項２３】
がんが、非機能性ｐ５３タンパク質を含む、請求項２１に記載の使用のための化合物。
【請求項２４】
がんが、ｐ５３−変異を含む、請求項２１に記載の使用のための化合物。
【請求項２５】
がんが、乳がん、直腸結腸がん、前立腺がん、食道がん、及び肺がんから選択され、より好ましくは食道がんである、請求項２１に記載の使用のための化合物。
【請求項２６】
少なくとも１種の薬学的に許容される希釈剤、賦形剤、又は担体と組み合わせて投与される、請求項１〜２５のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項２７】
増殖性障害を治療する方法であって、対象に、治療有効量の式（Ｉ）
【化４】
2015514703.tif 000018
（Ｉ）
（式中、
Ｘは、ＮＲ７であり；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、又はシクロアルキルであり；
Ｒ３は、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、及びテトラヒドロピラニルから選択される６員ヘテロシクロアルキル基であり、前記ヘテロシクロアルキル基は、１又は２以上の（ＣＨ２）ｎＲ１９基でさらに置換されていてもよく；
Ｒ４及びＲ４’はそれぞれ独立に、Ｈ若しくはアルキルであるか；又は
Ｒ４及びＲ４’は一緒になって、スピロシクロアルキル基を形成し；
Ｑは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ６は、ＯＲ８又はハロゲンであり；
ｎは、１、２、又は３であり；
Ｒ１９は、Ｈ、アルキル、アリール、又はシクロアルキル基であり；
Ｒ７及びＲ８はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩を投与するステップを含み、
前記化合物が次の投与レジメンに従って投与される、方法：
（ｉ）約５０〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する；又は
（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する；又は
（iii）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する；又は
（iv）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する；又は
（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。
【請求項２８】
増殖性障害を治療するための医薬品の調製における式（Ｉ）
【化５】
2015514703.tif 000019
（Ｉ）
（式中、
Ｘは、ＮＲ７であり；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、又はシクロアルキルであり；
Ｒ３は、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、及びテトラヒドロピラニルから選択される６員ヘテロシクロアルキル基であり、前記ヘテロシクロアルキル基は、１又は２以上の（ＣＨ２）ｎＲ１９基でさらに置換されていてもよく；
Ｒ４及びＲ４’はそれぞれ独立に、Ｈ若しくはアルキルであるか；又は
Ｒ４及びＲ４’は一緒になって、スピロシクロアルキル基を形成し；
Ｑは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ６は、ＯＲ８又はハロゲンであり；
ｎは、１、２、又は３であり；
Ｒ１９は、Ｈ、アルキル、アリール、又はシクロアルキル基であり；
Ｒ７及びＲ８はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩の使用であって、
前記化合物が次の投与レジメンに従って投与される、使用：
（ｉ）約５０〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する；又は
（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する；又は
（iii）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する；又は
（iv）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する；又は
（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。
【請求項２９】
次を含むキット：
（ａ）請求項１に記載の式（Ｉ）
【化６】
2015514703.tif 000020
（Ｉ）
（式中、
Ｘは、ＮＲ７であり；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、又はシクロアルキルであり；
Ｒ３は、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、及びテトラヒドロピラニルから選択される６員ヘテロシクロアルキル基であり、前記ヘテロシクロアルキル基は、１又は２以上の（ＣＨ２）ｎＲ１９基でさらに置換されていてもよく；
Ｒ４及びＲ４’はそれぞれ独立に、Ｈ若しくはアルキルであるか；又は
Ｒ４及びＲ４’は一緒になって、スピロシクロアルキル基を形成し；
Ｑは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ６は、ＯＲ８又はハロゲンであり；
ｎは、１、２、又は３であり；
Ｒ１９は、Ｈ、アルキル、アリール、又はシクロアルキル基であり；
Ｒ７及びＲ８はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩；
（ｂ）任意で、少なくとも１種の薬学的に許容される希釈剤、賦形剤、又は担体；及び
（ｃ）式（Ｉ）の前記化合物を次の投与レジメンに従って投与するための使用説明書：
（ｉ）約５０〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する、又は
（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する、又は
（ｉ）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する、又は
（ii）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する、又は
（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。
【請求項３０】
増殖性障害の治療に使用するための式（Ｉ）：
【化７】
2015514703.tif 000021
（Ｉ）
（式中、
Ｘは、ＮＲ７であり；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、又はシクロアルキルであり；
Ｒ３は、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、及びテトラヒドロピラニルから選択される６員ヘテロシクロアルキル基であり、前記ヘテロシクロアルキル基は、１又は２以上の（ＣＨ２）ｎＲ１９基でさらに置換されていてもよく；
Ｒ４及びＲ４’はそれぞれ独立に、Ｈ若しくはアルキルであるか；又は
Ｒ４及びＲ４’は一緒になって、スピロシクロアルキル基を形成し；
Ｑは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ６は、ＯＲ８又はハロゲンであり；
ｎは、１、２、又は３であり；
Ｒ１９は、Ｈ、アルキル、アリール、又はシクロアルキル基であり；
Ｒ７及びＲ８はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩であって、
前記化合物が、
静脈注入によって約０．０２〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約４時間；又は
静脈注入によって約０．０１〜約０．０４ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約１０時間投与される、前記化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項３１】
静脈注入によって約０．０４〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約４時間投与される、請求項２９に記載の使用のための化合物。
【請求項３２】
静脈注入によって約０．０２〜約０．０６ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約２時間投与される、請求項２９に記載の使用のための化合物。
【請求項３３】
静脈注入によって約０．０２〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約３時間投与される、請求項２９に記載の使用のための化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、増殖性障害を治療するための投与レジメンに関する。より詳細には、これに限定されるものではないが、本発明は、有益な治療域を有する特定の投与レジメンにおける小分子Ｐｌｋ１阻害剤の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ポロ様キナーゼは、細胞周期進行及びＤＮＡ損傷応答の重要な調節因子であるセリンスレオニンキナーゼのファミリーである（Petronczki et al., Curr Opin Cell Biol 2008 Dec; 20(6):650-60;、Petronczki et al., Dev. Cell 2008 May; 14(5):646-59;）。Ｐｌｋ１はがんにおいて頻繁に過剰発現され、そのレベルは侵襲性と関連し、結果を予測するための予後予測能を有する（Kanaji et al., Oncology, 2006; 70(2):126-33;）。がん細胞増殖は、小分子Ｐｌｋ１阻害剤及びＰｌｋ１アンチセンス／ｓｉＲＮＡによってインビトロ及びインビボで遮断される（Spankuch et al., Oncogene, 2007 Aug 23; 26(39):5793-807;）。Ｐｌｋ１阻害剤は、有糸分裂停止及びアポトーシスの後続誘導を引き起こす。有糸分裂及び細胞分裂におけるＰＫＬ１の中心的な役割により、急速に増殖する正常細胞もＰｌｋ１阻害剤による影響を受ける。その結果、臨床上のＰｌｋ１阻害剤は、狭い治療域を示し、顕著な血液毒性を引き起こすことが示された（Schoffski et al., Eur J Cancer, 2012, Jan; 48(2); 179-86;）。治療域を拡張する患者／腫瘍選択マーカー及び治療レジメンの確認は、これらの薬剤の開発の成功に重要である。変異体ＴＰ５３が、Ｐｌｋ１阻害剤への感受性に対するそのような予測マーカーの１種になり得ることが示された（Degenhardt et al, Clin Exp Metastasis. 2011 Dec;28(8):899-908;）。
【０００３】
以前、我々は、Ｐｌｋ１を強力及び選択的に阻害し、インビトロ及びインビボにおいて強い抗増殖活性を有するピリミドジアゼピノン小分子を同定した（Hollick et al. 2010）。ＰＬＫ阻害剤及び増殖性障害の治療におけるそれらの使用は、Cyclacel Limited社の国際特許出願公開第２００４／０６７０００号パンフレットに記載されている。
【０００４】
本発明は、小分子ＰＬＫ阻害剤を用いて増殖性障害を治療する新規な投与レジメンを提供しようとするものである。より詳細には、本発明は、治療期間の短縮及び治療域の改善を可能にする投与レジメンを提供しようとするものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際特許出願公開第２００４／０６７０００号パンフレット
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Petronczki et al., Curr Opin Cell Biol 2008 Dec; 20(6):650-60;
【非特許文献２】Petronczki et al., Dev. Cell 2008 May; 14(5):646-59;
【非特許文献３】Kanaji et al., Oncology, 2006; 70(2):126-33;
【非特許文献４】Spankuch et al., Oncogene, 2007 Aug 23; 26(39):5793-807;
【非特許文献５】Schoffski et al., Eur J Cancer, 2012, Jan; 48(2); 179-86;
【非特許文献６】Degenhardt et al, Clin Exp Metastasis. 2011 Dec;28(8):899-908;
【非特許文献７】Hollick et al. 2010
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の第１の態様は、増殖性障害の治療に使用するための式（Ｉ）
【０００８】
【化１】
2015514703.tif 000003
（Ｉ）
【０００９】
（式中、
Ｘは、ＮＲ７であり；
Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に、Ｈ、アルキル、又はシクロアルキルであり；
Ｒ３は、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、及びテトラヒドロピラニルから選択される６員ヘテロシクロアルキル基であり、前記ヘテロシクロアルキル基は、１又は２以上の（ＣＨ２）ｎＲ１９基でさらに置換されていてもよく；
Ｒ４及びＲ４’はそれぞれ独立に、Ｈ若しくはアルキルであるか；又は
Ｒ４及びＲ４’は一緒になって、スピロシクロアルキル基を形成し；
Ｑは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ６は、ＯＲ８又はハロゲンであり；
ｎは、１、２、又は３であり；
Ｒ１９は、Ｈ、アルキル、アリール、又はシクロアルキル基であり；
Ｒ７及びＲ８はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキルである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩であって、
前記化合物が次の投与レジメンに従って投与される、前記使用のための化合物又は薬学的に許容されるその塩に関する：
（ｉ）約５０ｎＭ〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する；又は
（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する；又は
（iii）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する；又は
（iv）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する；又は
（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。
【００１０】
本発明の第２の態様は、増殖性障害を治療する方法であって、対象に、上記で定義した、治療有効量の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を、次の投与レジメンに従って投与するステップを含む方法に関する：
（ｉ）約５０ｎＭ〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する；又は
（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する；又は
（iii）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する；又は
（iv）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する；又は
（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。
【００１１】
本発明の第３の態様は、増殖性障害を治療するための医薬品の調製における上記で定義した式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩の使用であって、前記化合物が次の投与レジメンに従って投与される、使用に関する：
（ｉ）約５０ｎＭ〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する；又は
（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する；又は
（iii）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する；又は
（iv）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する；又は
（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。
【００１２】
本発明の第４の態様は、次のものを含むキットに関する：
（ａ）上記で定義した式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩；
（ｂ）場合により、少なくとも１種の薬学的に許容される希釈剤、賦形剤、又は担体；及び
（ｃ）式（Ｉ）の化合物を次の投与レジメンに従って投与するための使用説明書：
（ｉ）約５０ｎＭ〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する；又は
（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する；又は
（iii）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する；又は
（iv）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する；又は
（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。
【００１３】
本発明の第５の態様は、増殖性障害の治療に使用するための上記で定義した式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩であって、前記化合物が静脈注入によって約０．０２〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約４時間投与される、前記使用のための化合物又は薬学的に許容されるその塩に関する。
【００１４】
本発明の第６の態様は、増殖性障害の治療に使用するための上記で定義した式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩であって、前記化合物が静脈注入によって約０．０１〜約０．０４ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約１０時間投与される、前記使用のための化合物又は薬学的に許容されるその塩に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
前述のように、本発明の第１の態様は、増殖性障害の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩であって、前記化合物が次の投与レジメンに従って投与される、前記使用のための化合物又は薬学的に許容されるその塩に関する：
（ｉ）約５０ｎＭ〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する；又は
（ii）約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する；又は
（iii）約５００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間に実現する；又は
（iv）約２００ｎＭ以下の最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内の期間に実現する；又は
（ｖ）約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内に実現する。
【００１６】
これまでに調査された臨床上のＰｌｋ１阻害剤は、非常に狭い治療域を示している。最も一般には、これらの薬剤に関する用量制限毒性及び有害事象は、グレード３／４の好中球減少症及び発熱性好中球減少症、血小板減少症、並びに貧血であり、これらは急速に増殖する血液細胞の阻害と関係がある。有利には、この度特許請求する投与レジメンは、高度に制御された短期治療を提供するものである。
【００１７】
この点に関して、ＰＫ研究から、式（Ｉ）のピリミドジアゼピノンＰｌｋ１阻害剤は、ヒトにおいて、これまでに調査された臨床上のＰＬＫ阻害剤よりも有意に短い半減期を有することが実証された。例を挙げると、ＭＫ１４９６は、２５〜４７時間の半減期を有し（Doi T et al. A first-in-human phase I dose-escalation study of MK-1496, first-in-class orally available novel Plk1 inhibitor, in patients with advanced solid tumors; 2011 ASCO Annual Meeting. Abstracts 3012;）、ＧＳＫ４６１３６４は、９〜１３時間の半減期を有し（Olmos D et al., Phase I study of GSK461364, a specific and competitive polo-like kinese 1 inhibitor in patients with advanced solid tumors. 2011, Clin Cancer Res, 17, 3420;）、ＢＩ２５３６は、２５時間超の半減期を有し（Gandhi L et al., An open label phase II trial of the Plk1 inhibitor BI2536 in patients with sensitive relapse small cell lung cancerl; 2009 ASCO Annual Meeting, Abstract 8108;）、ＢＩ６７２７は、約１１０時間の半減期を有する（Gil T et al. Final analysis of a phase I single dose-escalation study of the novel polo-like kinase inhibitor BI6727 in patients with advanced solid tumors; 2010 ASCO Annual Meeting, Abstract 3061;）。対照的に、式（Ｉ）の化合物は、はるかに短い半減期を一般的に有し、これにより治療時間の短縮及び治療域の改善が可能になる。
【００１８】
さらに、この度特許請求する投与レジメンはまた、感受性がん細胞と正常な増殖細胞との間の区別を可能にし、それによって、より良い治療域が実現される。驚くべきことに、式（Ｉ）の化合物を使用して、本出願人は、約６時間などの非常に短い治療期間が、がん細胞への強い抗増殖効果を保持しながら、非がん性増殖細胞へのはるかに低い抗増殖効果を有することを発見した。
【００１９】
Ｐｌｋ１阻害剤
本発明の使用に適する化合物は、上記の式（Ｉ）によって定義される。
【００２０】
本明細書では、用語「アルキル」は、置換（モノ−又はポリ−）されていても非置換でもよい、飽和直鎖及び分岐状アルキル基の両方を含む。好ましくは、アルキル基は、Ｃ１−２０アルキル基、より好ましくはＣ１−１５、さらにより好ましくはＣ１−１２アルキル基、さらにより好ましくはＣ１−６アルキル基、より好ましくはＣ１−３アルキル基である。特に好ましいアルキル基には、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、及びヘキシルがある。適切な置換基には、例えば、１又は２以上のハロ、アルコキシ、ニトロ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨ（アルキル）、又はＮ（アルキル）２基がある。好ましくは、アルキル基は、非置換である。
【００２１】
本明細書では、用語「シクロアルキル」は、置換（モノ−又はポリ−）されていても非置換でもよい環状アルキル基を指す。好ましくは、シクロアルキル基は、Ｃ３−１２シクロアルキル基、より好ましくはＣ３−６シクロアルキル基である。適切な置換基には、例えば、１又は２以上のハロ、アルコキシ、ニトロ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨ（アルキル）、又はＮ（アルキル）２基がある。
【００２２】
本明細書では、用語「アリール」は、置換（モノ−又はポリ−）されていても非置換でもよいＣ６−１２芳香族基を指す。典型的な例には、フェニル、及びナフチルなどがある。適切な置換基には、例えば、１又は２以上のハロ、アルコキシ、ニトロ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨ（アルキル）、又はＮ（アルキル）２基がある。
【００２３】
本明細書では、用語「ヘテロシクロアルキル」は、１又は２以上のヘテロ原子を含有する環状脂肪族基を指す。好ましいヘテロシクロアルキル基には、ピペリジニル、ピロリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、及びモルホリニルがある。より好ましくは、ヘテロシクロアルキル基は、Ｎ−ピペリジニル、Ｎ−ピロリジニル、Ｎ−ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、及びＮ−モルホリニルから選択される。
【００２４】
好ましい一実施形態では、化合物は、式（Ｉａ）
【００２５】
【化２】
2015514703.tif 000004
（Ｉａ）
【００２６】
（式中、Ｙは、Ｏ又はＮ−（ＣＨ２）ｎＲ１９であり；
Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ４’、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、ｎ、及びＲ１９は、請求項１に定義した通りである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩である。
【００２７】
好ましい一実施形態では、化合物は、式（Ｉｂ）
【００２８】
【化３】
2015514703.tif 000005
（Ｉｂ）
【００２９】
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ４’、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びＲ１９は、請求項１に定義した通りである）
の化合物又は薬学的に許容されるその塩である。
【００３０】
本発明の好ましい一実施形態では、Ｒ１は、Ｈ又はアルキル、より好ましくはメチルである。
【００３１】
本発明の好ましい一実施形態では、Ｒ２は、シクロアルキル、より好ましくはシクロペンチル又はシクロへキシルである。
【００３２】
本発明の好ましい一実施形態では、Ｒ７は、Ｈ又はアルキル、より好ましくはＨである。
【００３３】
本発明の好ましい一実施形態では、Ｒ４及びＲ４’はそれぞれ独立に、アルキル、より好ましくはメチルである。
【００３４】
本発明の好ましい一実施形態では、Ｒ４及びＲ４’は一緒になって、スピロシクロアルキル基、より好ましくはスピロＣ３シクロアルキル基を形成する。
【００３５】
本発明の好ましい一実施形態では、Ｒ６は、ＯＲ８、より好ましくはＯＭｅである。
【００３６】
本発明の好ましい一実施形態では、Ｒ１９は、シクロプロピルである。
【００３７】
特に好ましい一実施形態では、本発明による使用のための化合物は、以下のもの：
【００３８】
【表１】
2015514703.tif 000006
2015514703.tif 000007
【００３９】
及び薬学的に許容されるその塩から選択される。
【００４０】
本発明で使用する化合物は、Ｐｌｋ１を阻害することができる。特に好ましい一実施形態では、化合物は、約２０μＭ未満、より好ましくは約１０μＭ未満、より好ましくは約５μＭ未満、さらにより好ましくは約１μＭ又は約０．５μＭ未満、より好ましくは約０．１μＭ未満、さらにより好ましくは約０．０１μＭ未満のキナーゼ阻害に関するＩＣ５０値を示す。特に好ましい一実施形態では、化合物は、Ａ１、Ａ７、及びＡ１３から選択される。
【００４１】
投与レジメン
本明細書では、用語「血漿中濃度」は、任意の適切な技術、例えば標準ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析などで測定した式（Ｉ）の化合物の血漿中濃度を指す。この技術のさらなる詳細は、添付の実施例の項に記載している。
【００４２】
好ましい一実施形態では、化合物は、約１００〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間、好ましくは最大約１４時間の期間、より好ましくは最大約１２時間の期間、より好ましくは最大約１０時間の期間、より好ましくは最大約８時間の期間、より好ましくは最大約６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与する。
【００４３】
好ましい一実施形態では、化合物は、約１００〜約５００ｎＭの血漿中濃度を最大約６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与する。
【００４４】
好ましい一実施形態では、化合物は、約１００〜約５００ｎＭの血漿中濃度を約３〜約６時間の期間、より好ましくは約４〜６時間の期間、さらにより好ましくは約５〜約６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与する。
【００４５】
本明細書で言及する期間を、式（Ｉ）の化合物の血漿中濃度がある濃度を超えて、又はある濃度範囲内に維持されている間の時間、すなわち、血漿中濃度が必要レベルに最初に到達する時間から血漿中濃度が必要レベルよりも低下する時間までの測定された期間として定義する。
【００４６】
好ましい一実施形態では、化合物は、約５０〜約２５０ｎＭ、より好ましくは約５０〜約２００ｎＭの血漿中濃度を最大約１６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与する。
【００４７】
好ましい一実施形態では、化合物は、約５０〜約２５０ｎＭ、より好ましくは約５０〜約２００ｎＭの血漿中濃度を約１０〜約１６時間の期間、より好ましくは約１２〜１６時間の期間、さらにより好ましくは約１４〜約１６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与する。
【００４８】
好ましい一実施形態では、化合物は、約０．５μＭ〜約１μＭの血漿中濃度を約３〜約６時間の期間維持する投与レジメンにおいて投与する。
【００４９】
好ましい一実施形態では、化合物は、約０．５μＭ〜約１μＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間、より好ましくは約３〜約６時間以内の期間、より好ましくは約４〜約６時間以内の期間、さらにより好ましくは約５〜約６時間以内の期間に実現する投与レジメンにおいて投与する。
【００５０】
本明細書では、用語「Ｃｍａｘ」は、薬物の投与時から測定した場合の、式（Ｉ）の化合物がその最大又はピーク血漿中濃度に到達するのに要した時間を指す。
【００５１】
好ましい一実施形態では、化合物は、約１００ｎＭ〜約５００ｎＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約６時間以内の期間、より好ましくは約３〜約６時間以内の期間、より好ましくは約４〜約６時間以内の期間、さらにより好ましくは約５〜約６時間以内の期間に実現する投与レジメンにおいて投与する。
【００５２】
好ましい一実施形態では、前記化合物は、約５０ｎＭ〜約２００ｎＭの最高血漿中濃度（Ｃｍａｘ）を約１６時間以内、より好ましくは約１０〜約１６時間以内、より好ましくは約１２〜約１６時間以内、さらにより好ましくは約１４〜約１６時間以内に実現する投与レジメンにおいて投与する。
【００５３】
好ましい一実施形態では、化合物は、静脈注入によって投与する。
【００５４】
好ましい一実施形態では、化合物は、静脈注入によって約０．０４〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約４時間投与する。
【００５５】
好ましい一実施形態では、化合物は、静脈注入によって約０．０２〜約０．０６ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約２時間投与する。
【００５６】
好ましい一実施形態では、化合物は、静脈注入によって約０．０２〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約２時間投与する。
【００５７】
好ましい一実施形態では、化合物は、静脈注入によって約０．０１〜約０．０４ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約１０時間投与する。
【００５８】
好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物を、静脈注入によって約０．０２〜約０．０４ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約１０時間、より好ましくは１〜８時間投与する。
【００５９】
好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ａ１３であり、それを静脈注入によって約０．０４〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約４時間投与する。
【００６０】
好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ａ１であり、それを静脈注入によって約０．０２〜約０．０６ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約２時間投与する。
【００６１】
好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ａ７であり、それを静脈注入によって約０．０２〜約０．０８ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約３時間投与する。
【００６２】
好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ａ７であり、それを静脈注入によって約０．０１〜約０．０４ｍｇ／ｋｇ／分の速度で約１〜約１０時間投与する。
【００６３】
好ましい一実施形態では、化合物をボーラス注射によって投与する。この注射は、静脈内、筋肉内、くも膜下腔内、又は皮下注射によって投与することができる。
【００６４】
好ましい一実施形態では、化合物を２又は３以上のボーラス注射によって投与する。例えば、式（Ｉ）の化合物を、適切な時間間隔で分けた２又は３以上の別々の注射（例えば、２、３、又は４回の注射）、及び所望の血漿中濃度又はＣｍａｘ値の実現に適した量で投与することができる。当業者ならば、その共通の一般知識に基づいて、投与回数、時期、及び化合物の適正量を決定し、所望の血漿中濃度又はＣｍａｘ値を実現することができるであろう。
【００６５】
治療的使用
式（Ｉ）の化合物は、抗増殖活性を有することが発見され、それにより、がん、白血病、並びに乾癬及び再狭窄症などの未制御細胞増殖に関連する他の障害などの増殖性障害の治療に役立つと考えられている。
【００６６】
本明細書では、語句「医薬品の調製」は、さらなる抗増殖剤に対するスクリーニングプログラムにおける、又はそのような医薬品の製造のいずれかの段階におけるその使用に加えて、直接医薬品として上記化合物の１又は２以上を使用することを含む。
【００６７】
本明細書で定義するように、本発明の範囲内の抗増殖効果は、インビトロ全細胞アッセイにおける細胞増殖を阻害する能力によって、又は、問題のキナーゼが特定の増殖性障害と関連があると分かっている、キナーゼ阻害活性に基づいて実証することができる。このようなアッセイを使用して、化合物が本発明の状況において抗増殖性であるかどうかを決定することができる。
【００６８】
好ましくは、増殖性障害は、がん又は白血病である。増殖性障害という用語は、本明細書では広い意味で使用され、細胞周期の制御が必要とされる任意の障害、例えば、再狭窄症及び心筋症などの心血管障害、糸球体腎炎及びリウマチ性関節炎などの自己免疫障害、乾癬などの皮膚障害、マラリア、肺気腫、及び脱毛症などの抗炎症、抗真菌、抗寄生虫障害が含まれる。これらの障害では、本発明の化合物は、必要に応じて所望の細胞内でアポトーシスを誘発するか、又は静止状態を維持することができる。
【００６９】
本発明の化合物は、細胞周期における任意のステップ又は段階、例えば、核膜の形成、細胞周期の休止期（Ｇ０）からの脱却、Ｇ１進行、染色体脱凝縮、核膜の破壊、ＳＴＡＲＴ、ＤＮＡ複製の開始、ＤＮＡ複製の進行、ＤＮＡ複製の終結、中心体の重複、Ｇ２進行、有糸分裂又は減数分裂機能の活性化、染色体凝縮、中心体の分離、微小管の核形成、紡錘体の形成及び機能、微小管モータータンパク質との相互作用、染色分体の分裂及び分離、有糸分裂機能の不活化、収縮環の形成、並びに細胞質分裂機能を阻害することもある。特に、本発明の化合物は、クロマチン結合、複製複合体の形成、複製ライセンシング、リン酸化又は他の二次修飾活性、タンパク質分解、微小管結合、アクチン結合、セプチン結合、微小管組織化中心核形成活性、及び細胞周期シグナル伝達経路の要素との結合など、ある種の遺伝子機能に影響を及ぼすこともある。
【００７０】
本発明の好ましい一実施形態では、増殖性障害は、がん又は白血病、より好ましくはがんである。
【００７１】
好ましい一実施形態では、増殖性障害は、固形腫瘍である。
【００７２】
別の好ましい実施形態では、増殖性障害は、血液がんである。好ましくは、血液がんは、白血病、より好ましくは進行した白血病又は骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）である。他の例としては、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、又は慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）がある。
【００７３】
本発明の好ましい一実施形態では、がんは、非機能性ｐ５３タンパク質を含む。本明細書では、用語「非機能性ｐ５３タンパク質」は、ｐ５３が不活性、不完全、不足（ｐ５３欠損）、非存在、変異体であるか、又は機能量が存在しないがんを含む。
【００７４】
本発明の好ましい一実施形態では、がんは、ｐ５３−変異を含む。本明細書では、用語「ｐ５３−変異」は、ｐ５３タンパク質中、又はｐ５３タンパク質をコードするＴＰ３遺伝子中の変異を含むがんを指す。
【００７５】
本発明の特に好ましい一実施形態では、がんは、乳がん、直腸結腸がん、前立腺がん、食道がん、及び肺がんから選択され、より好ましくは食道がんである。
【００７６】
非常に好ましい一実施形態では、がんは、食道がんである。
【００７７】
薬学的組成物
式（Ｉ）の化合物（薬学的に許容される塩、エステル、及び薬学的に許容される溶媒和物を含む）を単体で投与することもできるが、これらは通常、特にヒト治療では、薬学的担体、賦形剤、又は希釈剤と混合して投与する。薬学的組成物は、ヒト及び獣医学においてヒト又は動物使用向けとすることができる。
【００７８】
本明細書に記載する薬学的組成物の種々多様な形態にとって適切な賦形剤の例は、「Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd Edition, (1994), Edited by A Wade and PJ Wellerに見出すことができる。
【００７９】
治療的使用に関して許容される担体又は希釈剤は、製薬分野で周知であり、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985)に記載されている。
【００８０】
適切な担体の例には、ラクトース、デンプン、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、ソルビトールなどがある。適切な希釈剤の例には、エタノール、グリセロール、及び水がある。
【００８１】
薬学的担体、賦形剤、又は希釈剤の選択は、意図した投与経路及び標準的薬務に関して選択することができる。薬学的組成物は、担体、賦形剤、若しくは希釈剤として、又はこれらに加えて、任意の適切な結合剤（複数可）、滑沢剤（複数可）、懸濁化剤（複数可）、コーティング剤（複数可）、可溶化剤（複数可）を含むことができる。
【００８２】
適切な結合剤の例には、デンプン、ゼラチン；グルコースなどの天然糖、無水ラクトース、流動性ラクトース、β−ラクトース、トウモロコシ甘味料；アカシア、トラガカント、又はアルギン酸ナトリウムなどの天然及び合成ゴム、カルボキシメチルセルロース、並びにポリエチレングリコールがある。
【００８３】
適切な滑沢剤の例には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどがある。
【００８４】
保存料、安定化剤、染料、さらにはフレーバリング剤を、薬学的組成物に付与することができる。保存料の例には、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、及びｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルがある。抗酸化剤及び懸濁化剤も使用することができる。
【００８５】
塩／エステル
式（Ｉ）の化合物は、塩又はエステル、特に薬学的に許容される塩又はエステルとして存在することができる。
【００８６】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される塩には、適切なその酸付加塩又は塩基塩がある。適切な薬学的塩の概説は、Berge et al, J Pharm Sci, 66, 1-19 (1977)に見出すことができる。例えば、塩は、鉱酸、例えば、硫酸、リン酸、若しくはハロゲン化水素酸などの強い無機酸により；酢酸などの、非置換若しくは置換（例えばハロゲンによる）された１〜４個の炭素原子のアルカンカルボン酸などの強い有機カルボン酸により；飽和若しくは不飽和ジカルボン酸、例えば、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸、若しくはテトラフタル酸により；ヒドロキシカルボン酸、例えば、アスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、若しくはクエン酸により；アミノ酸、例えば、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸により；安息香酸により；又はメタンスルホン酸若しくはｐ−トルエンスルホン酸などの、非置換若しくは置換（例えばハロゲンによる）された（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル−若しくはアリール−スルホン酸などの有機スルホン酸により形成される。好ましくは、塩は、ＨＣｌ塩である。
【００８７】
エステルは、エステル化されている官能基に応じて、有機酸又はアルコール／水酸化物を使用して形成される。有機酸には、酢酸などの、非置換若しくは置換（例えばハロゲンによる）された１〜１２個の炭素原子のアルカンカルボン酸などのカルボン酸；飽和若しくは不飽和ジカルボン酸、例えば、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸、若しくはテトラフタル酸；ヒドロキシカルボン酸、例えば、アスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、若しくはクエン酸；アミノ酸、例えば、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸；安息香酸；又はメタンスルホン酸若しくはｐ−トルエンスルホン酸など、非置換若しくは置換（例えばハロゲンによる）された（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル−若しくはアリール−スルホン酸などの有機スルホン酸がある。適切な水酸化物には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化アルミニウムなどの無機水酸化物がある。アルコールには、非置換でも、(例えばハロゲンで）置換されていてもよい１〜１２個の炭素原子のアルカンアルコールがある。
【００８８】
鏡像異性体／互変異性体
前述の本発明のすべての態様において、本発明は、適切な場合、式（Ｉ）の化合物の鏡像異性体及び互変異性体すべての使用を含む。当業者なら、光学的性質（１又は２以上のキラルの炭素原子）又は互変異性特性を有する化合物を認識するであろう。対応する鏡像異性体及び／又は互変異性体は、当技術分野で公知の方法によって単離／調製することができる。
【００８９】
立体及び幾何異性体
式（Ｉ）の化合物のいくつかは、立体異性体及び／又は幾何異性体として存在することができ、例えば、これらは、１又は２以上の不斉及び／又は幾何学的中心を有し、したがって、２又は３以上の立体異性体及び／又は幾何学的形態で存在することができる。本発明は、これらの阻害剤の個々の立体異性体及び幾何異性体並びにそれらの混合物のすべての使用を企図している。特許請求の範囲で使用する用語は、適切な機能活性を保持する前記形態を備えたこれらの形態を包含する（ただし同程度である必要はない）。
【００９０】
本発明はまた、薬剤又は薬学的に許容されるその塩のすべての適切な同位体変形物の使用を含む。本発明の薬剤又は薬学的に許容されるその塩の同位体変形物は、少なくとも１個の原子が、同じ原子番号を有するが、原子質量が自然界で通常見出される原子質量と異なる原子で置き換えられているものとして定義される。薬剤及び薬学的に許容されるその塩に組み込むことができる同位体の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、及び塩素の同位体、例えば、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、及び３６Ｃｌなどがある。薬剤及び薬学的に許容されるその塩のある種の同位体変形物、例えば、３Ｈ又は１４Ｃなどの放射性同位元素が組み込まれたものは、薬物及び／又は基質組織分布研究に有用である。トリチウム化された、すなわち３Ｈ、及び炭素１４、すなわち１４Ｃの同位元素は、調製及び検出が容易であるために特に好ましい。さらに、重水素、すなわち２Ｈなどの同位体による置換は、より大きな代謝安定性、例えば、インビボ半減期の延長又は必要投与量の減少から生じるある種の治療的利点をもたらす可能性があり、したがって、ある状況下において好ましいこともある。本発明の薬剤及び本発明の薬学的に許容されるその塩の同位体変形物は、通常、適切な試薬の適正な同位体変形物を使用して、従来の手順によって調製することができる。
【００９１】
溶媒和物
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の溶媒和物形態の使用を含む。特許請求の範囲で使用する用語は、これらの形態を包含する。
【００９２】
多形体
本発明はさらに、様々な結晶形態、多形形態、及び（無）水和形態での式（Ｉ）の化合物の使用に関する。化学化合物が、そのような化合物の合成的調製において使用される溶媒から精製及び／又は単離する方法をわずかに変更することによってこのような形態のいずれかで単離され得ることは製薬業界で十分に確立されている。
【００９３】
プロドラッグ
本発明はさらに、プロドラッグ形態での式（Ｉ）の化合物の使用を含む。このようなプロドラッグは、通常、ヒト又は哺乳動物である対象に投与すると修飾が逆戻り（reversion）することができるように、１又は２以上の適切な基が修飾されている本発明の化合物である。このような逆戻りは、通常、このような対象に生来存在する酵素によって行われるが、第２の薬剤をこのようなプロドラッグと一緒に投与して、インビボで逆戻りを行うことが可能である。このような修飾の例には、エステル（例えば、上述のいずれか）が含まれ、逆戻りは、エステラーゼなどにより行われ得る。他のこうした系は当業者に周知であろう。
【００９４】
投与
本発明で使用する薬学的組成物は、経口、直腸、経膣、非経口、筋肉内、腹腔内、動脈内、くも膜下腔内、気管支内、皮下、皮内、静脈内、経鼻、経頬、又は舌下の投与経路に適合され得る。
【００９５】
経口投与では、圧縮錠剤、ピル、錠剤、ゼラチン質カプセル剤（gellule）、ドロップ剤、及びカプセル剤が特に使用される。好ましくは、これらの組成物は、一用量当たり１〜２５０ｍｇ、より好ましくは１０〜１００ｍｇの有効成分を含有する。
【００９６】
他の投与形態は、静脈内、動脈内、くも膜下腔内、皮下、皮内、腹腔内、又は筋肉内に注射することができ、滅菌又は滅菌可能な溶液から調製される液剤又は乳剤を含む。本発明の薬学的組成物はまた、坐剤、膣坐剤、懸濁剤、乳剤、ローション剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、スプレー剤、液剤、又は散布剤の形態をしていてもよい。
【００９７】
経皮投与の代替手段は、皮膚用パッチ剤の使用による。例えば、有効成分は、ポリエチレングリコール又は流動パラフィンの水性乳剤からなるクリームに組み込むことができる。有効成分はまた、１〜１０重量％の濃度で、白色ワックス又は白色ソフトパラフィン基剤からなる軟膏中に、必要に応じて安定化剤及び保存料などと一緒に組み込むことができる。
【００９８】
注射可能な形態は、一用量当たり１０〜１０００ｍｇ、好ましくは１０〜２５０ｍｇの有効成分を含有することができる。
【００９９】
組成物は、単位剤形、すなわち単位用量を含有する別個の部分、又は単位用量の複数回分若しくはサブユニットの形態に配合することができる。
【０１００】
本発明の非常に好ましい一実施形態では、化合物は、静脈注入によって投与される。
【０１０１】
本発明の別の非常に好ましい実施形態では、化合物は、１又は２以上のボーラス注射によって投与される。
【０１０２】
投与量
当業者なら、不必要な実験を行うことなく、必要な血漿中濃度及び／又はＣｍａｘ値を実現するために、本組成物の１種の適切な用量を容易に決定して、対象に投与することができよう。一般的には、医師が、個々の患者に最適な実際の投与量を決定し、その投与量は、使用する特定の化合物の活性、その化合物の代謝安定性及び作用時間、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与様式及び時期、排泄速度、薬物の組合せ、特定の病状の重症度、並びに個々の受けている治療を含めた様々な因子に依存する。本明細書に開示する投与量は、例示的な平均的ケースである。もちろん、より高い又はより低い投与量範囲が有利となる個々の例もあり、それらは本発明の範囲内である。
【０１０３】
必要に応じて、薬剤を、体重１ｋｇ当たり０．０１〜３０ｍｇ、例えば、体重１ｋｇ当たり０．１〜１０ｍｇ、より好ましくは０．１〜１ｍｇなどの用量で投与することができる。
【０１０４】
必要に応じて、薬剤を、体重１ｋｇ当たり０．０１〜４８ｍｇ、例えば、体重１ｋｇ当たり５〜５０ｍｇ、０．５〜５ｍｇ、より好ましくは２．０〜２０ｍｇの用量で投与することができる。
【０１０５】
例示的な実施形態では、悪性腫瘍の治療のために患者に１０〜１５０ｍｇ／日の用量を１又は２以上投与する。
【０１０６】
例示的な実施形態では、悪性腫瘍の治療のために患者に５０〜１５００ｍｇ／日の用量を１又は２以上投与する。
【０１０７】
組合せ
特に好ましい実施形態では、本発明の１又は２以上の化合物は、１又は２以上の他の有効剤、例えば市販の既存の抗がん剤と組み合わせて使用される。そのような場合、本発明の化合物は、１又は２以上の他の有効剤と共に連続的に、同時に、又は順次投与することができる。
【０１０８】
一般に、抗がん剤は、組み合わせて使用する場合に、より効果的となる。特に、併用療法は、主要な毒性、作用機序、及び耐性機序（複数可）の重複を避けるために望ましい。さらに、ほとんどの薬物はまた、最短投薬間隔で、最大耐量で、投与することが望ましい。化学療法薬を組み合わせることの主な利点は、生化学的相互作用を介して、付加的効果又は可能な相乗効果を促進し、また、他の場合では、単剤による初回化学療法に反応したであろう初期腫瘍細胞における耐性の出現が減少する可能性もある。薬物の組合せを選択する際に生化学的相互作用を利用する一例は、ロイコボリンの投与により示され、５−フルオロウラシルの活性細胞内代謝物とその標的であるチミジル酸生成酵素との結合を増大させて、その細胞障害効果を増大させるものである。
【０１０９】
がん及び白血病の現在の治療では、多くの組合せが使用されている。医療行為のより広範な概説は、E. E. Vokes及びH. M. Golomb編、Springer出版の「Oncologic Therapies」に見出すことができる。
【０１１０】
有益な組合せは、最初に特定のがんの治療又はそのがんに由来する細胞株において有用であると知られているか、有用であると思われる薬剤と共に試験化合物の増殖阻害活性を研究することにより提示されることがある。この手順はまた、薬剤の投与順序、すなわち、その前に、それと同時に、又はその後に、を決定するのに使用することができる。このようなスケジューリングは、本明細書で同定するすべての周期作用薬の特徴であり得る。
【０１１１】
本発明をさらに、以下の非限定的な実施例を用いて例示する。
【実施例】
【０１１２】
化合物調製
本明細書に記載し、以下に示す実施例Ａ１〜Ａ１５などの式（Ｉ）の化合物を、国際特許出願公開第２００９０４０５６６号パンフレット（Cyclacel Limited社）に記載の方法に従って調製した。
【０１１３】
【表２】
2015514703.tif 000008
2015514703.tif 000009
2015514703.tif 000010
【０１１４】
細胞株
Ｐｌｋ１阻害剤への腫瘍感受性を、食道（ＯＥ）細胞株のパネルで研究した。使用した細胞株は、良性Ｂａｒｒｅｔｔ腺癌（ＣＰＡ）、２種のＢａｒｒｅｔｔ腺癌（ＯＥ１９及びＯＥ３３；Sigma Aldrich社）、及び２種の食道扁平上皮癌細胞株（ＯＥ２１、ＥＣＡＣＣ；及びＫＹＳＥ−４１０、ＥＣＡＣＣ）であった。ｐ５３変異及び機能状態を、下記の表に示している。
【０１１５】
【表３】
2015514703.tif 000011
【０１１６】
さらに、Ｐｌｋ１阻害剤への感受性を、肺（ＮＣＩ−Ｈ１９４４及びＮＣＩ−Ｈ２１２２、ＡＴＣＣ）、結腸直腸（ＨＣＴ１１６及びＣｏｌｏ２０５、ＥＣＡＣＣ）、乳（ＭＣＦ７、ＥＣＡＣＣ、ＭＣＦ１０Ａ、ＡＴＣＣ、及びＭＤＡ−ＭＢ２３１、ＥＣＡＣＣ）、前立腺（ＰＣ３、ＥＣＡＣＣ、及びＤＵ−１４５、ＡＴＣＣ）、白血病（ＨＥＬ、ＤＳＭＺ、及びＨＬ−６０、ＥＣＡＣＣ）において研究した。
【０１１７】
Ｐｌｋ１阻害剤の抗増殖効果
Ｐｌｋ１阻害剤の抗増殖効果を、９６ウェルフォーマット薬物ウォッシュアウト／アウトグロースアッセイにおいて研究した。細胞を９６ウェルプレートにおいて１．５〜２．５×１０３細胞／ウェルで播種し、３７℃、５％ＣＯ２で一晩インキュベートし、その後、一連の濃度の異なるＰｌｋ１阻害剤を各々添加した。細胞を、３〜２４時間の範囲の様々な期間で化合物と共にインキュベートした。次いで、化合物を含有している培地を細胞から除去し、アッセイ終了まで薬物不含培地と置き換えた。６日目に、製造業者の使用説明書に従い、標準レサズリンベースアッセイを使用して、細胞生存率を評価した（AlamarBlue、AbD Serotec、Oxford、UK）。ＩＣ５０値は、ＩＤＢＳソフトウェアを使用して決定した。
【０１１８】
薬物の血漿中濃度の測定
血漿中濃度は、以下の方法に基づく標準ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を使用して測定する。較正及び対照試料は、化合物を含むメタノール／ＤＭＳＡ（５０／５０ｖ／ｖ）の５００μｇ／ｍＬ溶液から以下のように調製する。このストック溶液を使用して、濃度２００ｎｇ／ｍｌ〜５００，０００ｎｇ／ｍｌの、試験項目の希釈標準溶液を調製する。溶液をメタノールで希釈し、使用しない場合はガラス製バイアル中で＋４℃で保存する。標準溶液を使用して、対照血漿における較正標準を調製し、最終濃度を血漿１００μｌ当たり１０ｎｇ／ｍｌ〜５０００ｎｇ／ｍｌにする。これらの標準を分析初日に調製し、必要に応じて各分析時に再調製する。内部標準をメタノール／ＤＭＳＡ（５０／５０ｖ／ｖ）に溶解させ、標準溶液ではアセトニトリルで１μｇ／ｍＬに希釈する。
【０１１９】
血漿試料を以下の方法で抽出する。各較正、品質管理、及び被検試料５０μｌを９６ウェルマイクロタイター（mictrotitre）プレートに移動させる。ダブルブランクを除いた全試料に、１μｇ／ｍＬのアセトニトリル中内部標準溶液２００μｌを添加する。アセトニトリル２００μｌをダブルブランクに添加する。試料を短時間渦動混合し、２１２８ｇで３０分間遠心分離機にかける。回収可能な上清をマイクロタイタープレートの適切なウェルに移動させ、抽出物を約４０℃のガス温度の酸素不含窒素で蒸発させる。抽出物を移動相２００μＬで再構成し、十分に混合する。プレートをシリコーンベースの予め穴を開けたウェブシールで封止し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析に使用する。
【０１２０】
ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析
ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を、以下のクロマトグラフィー条件を使用して行うことができる。
分析カラム：XBridge C18  ５０×３ｍｍ；２．５μｍ（Waters Corporation社）
カラム温度：周囲温度
接続管材：ＰＥＥＫ
移動相：１０ｍＭの酢酸アンモニウムｐＨ１０／メタノール（３５／６５ｖ／ｖ）
流速：０．３ｍｌ／分
注入量：１０μｌ
ループサイズ：２０μｌ
オートサンプラー洗浄液：メタノール／イソプロパナール／アセトン／ＴＦＡ（４０／３０／３０／０．５  ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）
ラック温度：＋６℃
【０１２１】
タンデム質量分析
インターフェース：エレクトロスプレープローブを備えたＺスプレーインターフェース
方式：ＭＲＭ（多重反応モニタリング）
極性：陽極
実行時間：５分
ドウェル時間：０．０８秒／遷移
Ｑ１及びＱ３分解能：ユニット
毛管電圧：３．５ｋＶ
脱溶媒温度：４５０℃
脱溶媒ガス流（Ｌ／時間）：約６００Ｌ／時間
ソース温度：１４０℃
コーンガス流（Ｌ／時間）：約６０Ｌ／時間
【０１２２】
試薬、化学物質、及び溶媒
酢酸アンモニウム：保証グレード
アセトニトリル：ＨＰＬＣグレード
ジメチルスルホキシド（suphoxide）：保証グレード
水：Milli-Q+  脱イオン
【０１２３】
分析機器
オートサンプラー：モデル２７７７（Waters/Micromass Corporation社）
デガッサー：モデルＡＦ（Waters/Micromass Corporation社）
ＨＰＬＣポンプ：モデル１５２５（Waters/Micromass Corporation社）
質量分析計：Quattro Premier（Waters/Micromass Corporation社）
【０１２４】
ディスポーザブル用品
ピペット  Microman（Gilson社）
１２チャネル（Rainin社）
分析用天秤  ＡＴ２６１（Mettler Toledo社）
遠心分離機  Micro Centrifuge 2-16（Sigma社）
ボルテックスミキサー  Clifton Cyclone（Clifton社）
浄水器  MilliQ+（Waters社）
【０１２５】
同等仕様の代替試薬、機器、実験装置、及びディスポーザブル用品を使用してもよい。
【０１２６】
試薬調製
移動相及び再構成溶媒
ＨＰＬＣグレードのメタノール６５０ｍｌを１０００ｍｌのDuranボトルに移動させ、１０ｍＭの酢酸アンモニウムｐＨ１０を３５０ｍｌ添加し、十分に混合する。使用前に１０分間超音波処理する。
【０１２７】
メタノール／水／ギ酸  ５０／５０／０．１（オートインジェクタ洗浄液）
ＨＰＬＣグレードのメタノール５００ｍｌをMilliQ+脱イオン水５００ｍｌに移動させ、ギ酸１ｍＬを添加する。十分に混合する。使用前に１０分間超音波処理する。
【０１２８】
結果
ピリミドジアゼピノン化合物は、ＢＡＣ及びＥＳＣＣ細胞株の増殖を良性ＯＥ細胞株より強力に阻害した。特に、化合物Ａ１、Ａ７、及びＡ１３は、ＢＡＣ及びＥＳＣＣ細胞株の増殖を良性ＯＥ細胞株より少なくとも１０倍強力に阻害した。６時間の処理が、がん細胞株と非がん細胞株との間に最大の差をもたらした。化合物ＢＩ２５３６は、すべての時点でがん細胞株と良性細胞株との間にほとんど又はまったく差を示さなかった。ピリミドジアゼピノン化合物を用いると、非がん細胞株よりもがん細胞株に対して治療域が最も高いことが、変異体及び非機能性ｐ５３を有するＯＥがん細胞株に関して観察された。
【０１２９】
これまでに調査された臨床上のＰｌｋ１阻害剤は、非常に小さな治療域を示していた。最も一般には、これらの薬剤に関する用量制限毒性及び有害事象は、グレード３／４の好中球減少症及び発熱性好中球減少症、血小板減少症、並びに貧血であり、これらは急速に増殖する血液細胞の阻害と関係がある。より良い治療域を実現するには、感受性がん細胞と正常な増殖細胞との間の区別を可能にする高度に制御された短期治療が必要である。Ｐｌｋ１阻害剤の長い消失半減期は不利である。競合する臨床上の分子は、比較的長い半減期を有する：ＧＳＫ４６１３６４；９〜１３時間（Olmos D et al., Phase I study of GSK461364, a specific and competitive polo-like kinese 1 inhibitor in patients with advanced solid tumors. 2011, Clin Cancer Res, 17, 3420;）、ＢＩ２５３６；２５時間超（Gandhi L et al., An open label phase II trial of the Plk1 inhibitor BI2536 in patients with sensitive relapse small cell lung cancerl; 2009 ASCO Annual Meeting, Abstract 8108;）、ＢＩ６７２７；約１１０時間（Gil T et al. Final analysis of a phase I single dose-escalation study of the novel polo-like kinase inhibitor BI6727 in patients with advanced solid tumors; 2010 ASCO Annual Meeting, Abstract 3061;）、ＭＫ１４９６；２５〜４７時間（Doi T et al. A first-in-human phase I dose-escalation study of MK-1496, first-in-class orally available novel Plk1 inhibitor, in patients with advanced solid tumors; 2011 ASCO Annual Meeting. Abstracts 3012;）。マウスＰＫデータ（表２）に基づいて、ピリミドジアゼピノンＰｌｋ１阻害剤は、ヒトにおいて有意により短い半減期を有し、それにより必要とされる短期治療が可能になることが期待される。
【０１３０】
【表４】
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【０１３１】
本発明の範囲及び趣旨から逸脱しない、本発明の記載態様の様々な改変形態及び変更形態は、当分野の技術者には明らかであろう。本発明を特定の好ましい実施形態に関して説明してきたが、特許請求の範囲に記載した本発明は、こうした特定の実施形態に不当に限定されるべきではないことを理解されたい。実際に、関連分野の当業者にとって明らかである本発明を実施するための記載された方式の様々な改変は、以下の特許請求の範囲内にあることが意図されている。
【０１３２】
参考文献
１．Petronczki et al., Curr Opin Cell Biol 2008 Dec; 20(6):650-60;
２．Petronczki et al., Dev. Cell 2008 May; 14(5):646-59;
３．Kanaji et al., Oncology, 2006; 70(2):126-33;
４．Spankuch et al., Oncogene, 2007 Aug 23; 26(39):5793-807;
５．Schoffski et al., Eur J Cancer, 2012, Jan; 48(2); 179-86;
６．Degenhardt et al, Clin Exp Metastasis. 2011 Dec;28(8):899-908;
７．Olmos D et al., Phase I study of GSK461364, a specific and competitive polo-like kinese 1 inhibitor in patients with advanced solid tumors. 2011, Clin Cancer Res, 17, 3420;
８．Gandhi L et al., An open label phase II trial of the Plk1 inhibitor BI2536 in patients with sensitive relapse small cell lung cancerl; 2009 ASCO Annual Meeting, Abstract 8108;
９．Gil T et al. Final analysis of a phase I single dose-escalation study of the novel polo-like kinase inhibitor BI6727 in patients with advanced solid tumors; 2010 ASCO Annual Meeting, Abstract 3061;
１０．Doi T et al. A first-in-human phase I dose-escalation study of MK-1496, first-in-class orally available novel Plk1 inhibitor, in patients with advanced solid tumors; 2011 ASCO Annual Meeting. Abstracts 3012;
１１．Rudolph D et al. BI6727, a polo-like kinase inhibitor with improved pharmacokinetic profile and broad antitumor activity; 2009, Clin Cancer Res, 15:3094.
【国際調査報告】
2015514703.tif 000023
2015514703.tif 000024