(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）の化合物およびその治療的使用に関する：2015505555.tif 000135用語Ｚ、ＹおよびＲ１は、特許請求の範囲に定義されるとおりである。
2015505555.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2015505555.tif 000133
［式中、
各Ｚは独立に、（Ａｌｋ）ｎ−Ｒｎ−（Ａｌｋ）ｎ−Ｘであり、
ここで、各Ａｌｋは独立に、各々所望により置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ１２）アルキレンまたは（Ｃ２−Ｃ１２）アルケニレンであり、
各ｎは独立に、０または１であり、
各Ｒは独立に、所望により置換されていてもよいアリーレンもしくはヘテロアリーレンまたは所望により置換されていてもよいシクロアルキレンもしくは複素環式、−Ｏ−、−Ｓ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｓ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＡ−、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲＡ−、−ＳＯ２ＮＲＡ−、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＡＳＯ２−もしくは−ＮＲＡ−であり、ここで、ＲＡは、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキル（シクロアルキル）、Ｃ１−Ｃ６アルキル（Ｃ１−Ｃ６アルコキシ）またはＣ１−Ｃ６アルコキシであり、
各Ｘは独立に、ハロゲン、−Ｈ、−ＯＲＡ、ＮＲＡＲＡ、所望により置換されていてもよいアリールもしくはヘテロアリールまたは所望により置換されていてもよいシクロアルキルもしくは複素環式、ＣＮもしくはＣ（ハロゲン）ａＨｂ（式中、ａは１、２または３であり、ｂは（３−ａ）である）であり、
Ｙは、所望により置換されていてもよいアリールもしくはヘテロアリールまたは所望により置換されていてもよいシクロアルキルもしくは複素環式であり、
Ｒ１は、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである］
で示される化合物または医薬上許容されるその塩。
【請求項２】
ＲＡが、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
少なくとも１つのＺが、Ｈ、ハロゲン、所望により置換されていてもよいアリール、所望により置換されていてもよいヘテロアリール、所望により置換されていてもよい窒素含有複素環、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＯＲＡである、前記の請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項４】
一方のＺ基が、Ｈ、ハロゲン、ＯＲＡまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、もう一方のＺ基が、所望により置換されていてもよいアリールまたは所望により置換されていてもよい窒素含有複素環である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
窒素含有複素環が、ＮＲＡＲＡで置換されている、請求項３または請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
少なくとも１つのＺが、（Ａｌｋ）ｎ−所望により置換されていてもよいアリーレン−（Ａｌｋ）ｎ−所望により置換されていてもよい複素環である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１がＨである、前記の請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ｃ１−Ｃ６アルキルが、シクロアルキル部分を含む、前記の請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｙが、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ＯＲＡ、ハロゲンまたはＣ１−Ｃ６アルコキシで所望により置換されていてもよいフェニルまたはヘテロアリールである、前記の請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙが、ピリジル、ピロリル、フェニルまたはメチル、Ｏ−メチル、臭素または塩素で置換されたフェニルである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
式Ｉａ：
【化２】
2015505555.tif 000134
［式中、
Ｚ１およびＺ２は独立に、（Ａｌｋ）ｎ−Ｒｎ−（Ａｌｋ）ｎ−Ｘであり、
Ａｌｋ、ｎ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＲＡおよびＲ１は、請求項１に定義されるとおりである］
を有する、前記の請求項のいずれかに記載の化合物または医薬上許容されるその塩。
【請求項１２】
Ｚ１が、ハロゲン、フェニル、ＯＲＡまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｚ２が、所望により置換されていてもよいアリールまたは所望により置換されていてもよい複素環である、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｚ２が、ハロゲン、ＣＦ３、シクロプロピル、フェニル、ＯＲＡまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｚ１が、所望により置換されていてもよいアリールまたは所望により置換されていてもよい複素環である、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１４】
複素環または窒素含有複素環が、所望により置換されていてもよいピペリジン、ピペラジンまたはモルホリンである、前記の請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項１５】
以下に列挙される化合物のうちの１種または医薬上許容されるその塩である、前記の請求項のいずれかに記載の化合物：
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド；
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド；
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（４−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド；
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−フェニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド；または
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ピペリジン−１−イル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
Ｎ−｛４−［（３Ｒ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピロリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−メチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−エチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（３−ジメチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−ブロモ−４−［（Ｒ）−３−（シクロペンチルメチル−アミノ）−ピペリジン−１−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−イソブチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−ブロモ−４−［（Ｒ）−３−（２，２−ジメチル−プロピルアミノ）−ピペリジン−１−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−ブロモ−４−［（Ｒ）−３−（シクロプロピルメチル−アミノ）−ピペリジン−１−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（４−クロロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（４−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（４−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
Ｎ−｛４−［（３Ｒ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、
１−（４−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（４−クロロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（４−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピロリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
Ｎ−｛４−［（３Ｒ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−５−シクロプロピル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ピペリジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−｛［（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミノ］−メチル｝−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ピロリジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［４−（４−フルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ジメチルアミノメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［４−（３−フルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−メチルアミノメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−モルホリン−４−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［４−（３，３−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ジメチルアミノメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３−フルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３，３−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−アゼチジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（５−ピロリジン−１−イルメチル−チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（５−ピロリジン−１−イルメチル−チオフェン−３−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イルメチル）−チオフェン−３−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ピロリジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−フェニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−シアノ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３−ジメチルアミノ−２，２−ジメチル−プロポキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３−モルホリン−４−イル−プロポキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（１−メチル−ピペリジン−３−イルメトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（オキセタン−３−イルオキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（３Ｒ，４Ｒ）−３−アミノ−４−シクロプロピル−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（２−フルオロ−４−ピロリジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ピロリジン−１−イル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ピリジン−３−イル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−（３−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−（２−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−（２−シアノ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−（３−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（１−メチル−ピペリジン−３−イルオキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［４−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［１−（２−ジエチルアミノ−エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド、
１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（３−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（３−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（２−クロロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（２−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、
１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド。
【請求項１６】
前記の請求項のいずれかに記載の化合物と、１種以上の医薬上許容される担体および／または賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項１７】
治療において使用するための、前記の請求項のいずれかに記載の化合物または組成物。
【請求項１８】
プロテインキナーゼ活性の阻害に対して反応性である状態の治療のための、前記の請求項のいずれかに記載の化合物または組成物。
【請求項１９】
プロテインキナーゼ活性の阻害に対して反応性である状態を患っている哺乳類を治療する方法であって、哺乳類においてプロテインキナーゼ活性を阻害するのに有効な、請求項１から１５のいずれかに記載の化合物の一定量を、哺乳類に投与することを含む、方法。
【請求項２０】
プロテインキナーゼがＣＨＫ１である、請求項１８または請求項１９に記載の化合物、組成物または方法。
【請求項２１】
プロテインキナーゼまたはＣＨＫ１活性の阻害に対して反応性である状態が、癌および自己免疫障害から選択される、請求項１８から２０のいずれかに記載の化合物または方法。
【請求項２２】
前記自己免疫障害が、臓器移植拒絶、ループス、多発性硬化症、リウマチ関節炎および変形性関節症である、請求項２１に記載の化合物または方法。
【請求項２３】
癌の治療のための、前記の請求項のいずれかに記載の化合物または方法。
【請求項２４】
放射線療法または化学療法と組み合わせた投与による癌の治療のための、請求項２３に記載の化合物または方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、チェックポイントキナーゼ１（ＣＨＫ１）阻害活性を有する新規１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン誘導体、細胞増殖異常の阻害による癌の治療に関連した医薬におけるこのような化合物の使用およびこのような化合物を含有する医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＤＮＡ損傷性細胞傷害性化学療法薬および電離放射線が、現在の癌治療計画の中心である。これらの治療は、特に、さまざまな腫瘍に対して組み合わせて投与された場合に有効であり、当面、癌治療の標準治療のままである可能性が高い。これらの薬剤は、その作用機序のために、全体的な有効性を制限する制約を有する。これらの薬剤はＤＮＡを標的とするので、任意の細胞、特に、活発に置き換わり、従って、腫瘍細胞特異性を欠くものに対して有効である。投与は、普通、正常組織、特に、消化管、血液システムおよびその他の臓器などの活発に分裂する細胞成分を有するものに、最大耐容量（ＭＴＤ）で狭い治療係数および毒性をもたらす。多数の患者の腫瘍を薬物に対して不応性にする獲得耐性または内因性耐性は、これらの薬剤の有用性をさらに制限し得る。活性薬物の細胞レベルの低下（増大した代謝、解毒または能動流出による）、ＤＮＡ修復の増大、ｐ５３の喪失またはアポトーシスシグナル伝達の減弱を含めた複数の機序が、獲得耐性に貢献し得る。
【０００３】
複数の機序（例えば、トポイソメラーゼ阻害、直接ＤＮＡアルキル化またはデオキシリボヌクレオチドの還元）によってＤＮＡ損傷を誘導するにもかかわらず、シスプラチン、イリノテカンまたはゲムシタビンなどのＤＮＡ損傷性細胞傷害性化学療法薬は、細胞周期チェックポイントを活性化する。細胞周期チェックポイントは、ＤＮＡ複製および分裂の忠実度を保護し、細胞周期事象の正しいタイミングを確実にするために存在する。ＤＮＡは、置き換えられ得ないので、これらの経路は、ゲノム完全性を保護し、癌の発生を防ぐことにおいて重要である。チェックポイントは、細胞周期の複数の期に存在し、ＤＮＡ損傷に応じて細胞周期のＧ１期、Ｓ期またはＧ２期の間に活性化され得る。あるいは、有糸分裂チェックポイントは、双極紡錘体との不適当な染色体結合によって活性化され、正確な染色体分離を確実にし、異数性から保護するために存在する。哺乳類細胞では、重要なエフェクタータンパク質は、ｐ５３およびチェックポイントキナーゼＣｈｋ１およびＣｈｋ２である。ヒト癌の大きな割合が、ｐ５３経路に欠陥があり、いくつかの形態では、それによって、機能的Ｇ１チェックポイントを欠いている。したがって、これらのヒト腫瘍は、ＤＮＡ損傷性侵襲に応じてそれらを保護するためにＣｈｋキナーゼに高度に頼っている。
【０００４】
ＤＮＡ損傷剤は、電離放射線とともに、ＤＮＡ損傷チェックポイントを活性化し、Ｇ１、Ｓにおいて、またはＧ２−Ｍ移行で細胞周期停止を誘導する。二本鎖を認識するＭｒｅ１１複合体（Ｍｒｅ１１、Ｒａｄ５０およびＮｂｓ１）などの損傷センサーが壊れるか、または複製ストレスを認識するＲａｄ１７およびＲａｄ９−Ｈｕｓ１−Ｒａｄ１複合体が、中心的な形質導入キナーゼＡＴＭおよびＡＴＲを活性化する。順に、これらのキナーゼは、エフェクターキナーゼＣｈｋ１およびＣｈｋ２を直接的に活性化する。Ｃｈｋ１およびＣｈｋ２は、ホスファターゼのＣｄｃ２５ファミリーを負に調節し、それによって、細胞周期進行を防ぎ、ならびに修復タンパク質を直接的に調節して、損傷修復の増大をもたらす。これによって、細胞が、複製を中止し、損傷を受けたＤＮＡを修復し、次いで、複製を再開することが可能になる。生化学研究および遺伝子研究によって、Ｃｈｋ１が、Ｓ−およびＧ２−Ｍチェックポイントにとって必要であり、不可欠であるということが実証された。
【０００５】
したがって、Ｃｈｋ１阻害は、ｐ５３経路に欠陥のある癌においてＤＮＡ損傷性化学療法薬の致死性を高めるための新規治療戦略に相当する。残りの無傷のチェックポイントの抑止は、腫瘍細胞死の増大をもたらすはずである。ゲムシタビン、イリノテカンおよびパクリタキセルを含めたＣｈｋ１阻害剤は、細胞傷害性化学療法薬の範囲の増強（ｐｏｔｅｎｔａｔｉａｔｉｏｎ）を、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよび一定の範囲のヒト癌の前臨床モデルにおいて実証した。この「合成致死性」アプローチは、正常細胞はその機能的ｐ５３経路によって保護されたままであるはずであるので、全身毒性を高めることなく化学療法薬の治療活性を増大するはずである。したがって、Ｃｈｋ１阻害剤は、ヒト癌の多様な選択の治療のために、広い範囲の細胞傷害性化学療法薬と組み合わされる可能性を有する。このアプローチは、ゲムシタビン、イリノテカンおよびシタラビンと組み合わせて、現在、第Ｉ相／第ＩＩ相臨床評価を受けているいくつかのＣｈｋ１の小分子阻害剤（ＧＤＣ０４２５、ＧＤＣ０５７５、ＬＹ２６０３６１８およびＬＹ２６０６３６８）を用いて臨床試験されるよう開始されている。ＡＺＤ７７６２、ＰＦ００４７７７３６、ＳＣＨ９００７７６およびＸＬ８４４を含めたさらなる薬剤が、第Ｉ相試験を受けたが、これらの薬剤の開発は、その後停止された。
【０００６】
特許文献１および特許文献２には、ＣＨＫ１および／またはＣＨＫ２阻害剤としてピロロピリジンが開示されている。
【０００７】
ここで、特定の１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン誘導体が、ＣＨＫ１阻害剤としての有効性を示すことがわかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２００９／１４０３２０号
【特許文献２】国際公開第２００９／０８９３５２号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、例えば、癌の治療のためのＣＨＫ１阻害剤として有用である置換１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン化合物のクラスに関する。４および５位に任意選択の置換を有し、また３位に置換ピラゾリルアミド連結基によるコア１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン鋳型が、本発明が関連する化合物の特徴を特徴付ける原理である。
【００１１】
本発明は、式Ｉ：
【００１２】
【化１】
2015505555.tif 000003
【００１３】
［式中、
各Ｚは独立に、（Ａｌｋ）ｎ−Ｒｎ−（Ａｌｋ）ｎ−Ｘであり、
ここで、各Ａｌｋは独立に、各々所望により置換されていてもよい、（Ｃ１−Ｃ１２）アルキレンまたは（Ｃ２−Ｃ１２）アルケニレンであり、
各ｎは独立に、０または１であり、
各Ｒは独立に、所望により置換されていてもよいアリーレンもしくはヘテロアリーレンであるか、または所望により置換されていてもよいシクロアルキレンもしくは複素環式、−Ｏ−、−Ｓ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｓ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＡ−、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲＡ−、−ＳＯ２ＮＲＡ−、−ＮＲＡＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＡＳＯ２−または−ＮＲＡ−であり、ここで、ＲＡは、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ１−Ｃ６アルキル（シクロアルキル）、Ｃ１−Ｃ６アルキル（Ｃ１−Ｃ６アルコキシ）またはＣ１−Ｃ６アルコキシであり、
各Ｘは独立に、ハロゲン、−Ｈ、−ＯＲＡ、ＮＲＡＲＡ、所望により置換されていてもよいアリールもしくはヘテロアリールまたは所望により置換されていてもよいシクロアルキルまたは複素環式、ＣＮまたはＣ（ハロゲン）ａＨｂ（式中、ａは、１、２または３であり、ｂは、（３−ａ）である）、
Ｙは、所望により置換されていてもよいアリールもしくはヘテロアリールまたは所望により置換されていてもよいシクロアルキルもしくは複素環式であり、
Ｒ１は、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
好ましい実施形態の説明
技術用語
本明細書において、用語「（Ｃａ−Ｃｂ）アルキル」（式中、ａおよびｂは、整数である）とは、ａ〜ｂ個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルラジカルを指す。したがって、ａが１であり、ｂが６である場合は、例えば、この用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルを含む。
【００１５】
本明細書において、用語「（Ｃａ−Ｃｂ）アルキレン」（式中、ａおよびｂは、整数である）とは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−および−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２−などの、ａ〜ｂ個の炭素原子および２つの満たされていない原子価を有する飽和炭化水素鎖を指す。誤解を避けるために、二価分枝鎖（Ｃａ−Ｃｂ）アルキレンラジカルは、炭化水素鎖の炭素のうち１つが、シクロアルキル環の環炭素である（すなわち、スピロ中心である）ものを含むということは理解されなければならない。
【００１６】
本明細書において、用語「シクロアルキル」とは、３〜８個の炭素原子を有する飽和炭素環式ラジカルを指し、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを含む。
【００１７】
本明細書において、用語「炭素環式」とは、環原子が、すべて炭素である単環式または二環式ラジカルを指し、単環式アリール、シクロアルキルおよびシクロアルケニルラジカルを含み、ただし、存在する単一環は、８員を越える環メンバーを有さない。「炭素環式」基とは、単一架橋されたまたは多重架橋された環状アルキル基を含む。
【００１８】
本明細書において、用語「アリール」とは、単環式、二環式または三環式炭素環式芳香族ラジカルを指す。このようなラジカルの例示的なものとして、フェニル、ビフェニルおよびナフチルがある。
【００１９】
本明細書において、用語「ヘテロアリール」とは、Ｓ、ＮおよびＯから選択される１個以上のヘテロ原子を含有する単環式、二環式または三環式芳香族ラジカルを指す。このようなラジカルの例示的なものとして、チエニル、ベンゾチエニル、フリル、ベンゾフリル、ピロリル、イミダゾリル、ベンゾイミダゾリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、イソチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、ベンゾキサゾリル、イソキサゾリル、ベンゾイソキサゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、ベンゾトリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリルおよびインダゾリルがある。
【００２０】
本明細書において、無条件の用語「ヘテロシクリル」または「複素環式」は、上記で定義されるような「ヘテロアリール」を含み、特に、Ｓ、ＮおよびＯから選択される１個以上のヘテロ原子を含有する単環式、二環式または三環式非芳香族ラジカル、別の単環式非芳香族ラジカルもしくは単環式炭素環式ラジカルと共有結合している１個以上のこのようなヘテロ原子を含有する単環式非芳香族ラジカルからなる基、および単一架橋または多重架橋しているＳ、ＮおよびＯから選択される１個以上のヘテロ原子を含有する単環式、二環式または三環式非芳香族ラジカルを指す。このようなラジカルの例示的なものとして、ピロリル、フラニル、チエニル、ピペリジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピリミジニル、モルホリニル、ピペラジニル、インドリル、モルホリニル、ベンゾフラニル、ピラニル、イソキサゾリル、ベンゾイミダゾリル、メチレンジオキシフェニル、エチレンジオキシフェニル、マレイミドおよびスクシンイミド基がある。
【００２１】
それが生じる関連において特に断りのない限り、本明細書における任意の部分に適用されるような用語「置換された」とは、例えば、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、メルカプト、メルカプト（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、ハロ（フルオロおよびクロロを含めた）、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロ、ニトリル（−ＣＮ）、オキソ、フェニル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＲＡ、−ＣＯＲＡ、−ＳＯ２ＲＡ、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＣＯＮＨＲＡ、−ＳＯ２ＮＨＲＡ、−ＣＯＮＲＡＲＢ、−ＳＯ２ＮＲＡＲＢ、−ＮＨ２、−ＮＨＲＡ、−ＮＲＡＲＢ、−ＯＣＯＮＨ２、−ＯＣＯＮＨＲＡ、−ＯＣＯＮＲＡＲＢ、−ＮＨＣＯＲＡ、−ＮＨＢＣＯＯＲＡ、−ＮＲＢＣＯＯＲＡ、−ＮＨＳＯ２ＯＲＡ、−ＮＲＢＳＯ２ＯＲＡ、−ＮＨＣＯＮＨ２、−ＮＲＡＣＯＮＨ２、−ＮＨＣＯＮＨＲＢ、−ＮＲＡＣＯＮＨＲＢ、−ＮＨＣＯＮＲＡＲＢまたは−ＮＲＡＣＯＮＲＡＲＢ（式中、ＲＡおよびＲＢは独立に、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であるか、またはＲＡおよびＲＢは、同一窒素と結合している場合には、モルホリニル、ピペリジニルもしくはピペラジニル環などの環状アミノ環を形成し得る）から選択される少なくとも１つの置換基で置換されていることを意味する。「任意選択の置換基」または「置換基」は、前述の置換基の１種であり得る。
【００２２】
本明細書において、用語「塩」とは、塩基付加塩、酸付加塩および第四級塩を含む。酸性である本発明の化合物は、アルカリ金属水酸化物、例えば、水酸化ナトリウムおよびカリウム、アルカリ土類金属水酸化物、例えば、水酸化カルシウム、バリウムおよびマグネシウムなどの塩基と、有機塩基、例えば、Ｎ−エチルピペリジン、ジベンジルアミンなどと医薬上または獣医学上許容される塩を含めた塩を形成し得る。塩基性である化合物（Ｉ）は、無機酸、例えば、塩酸または臭化水素酸などのハロゲン化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸など、有機酸、例えば、酢酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸などと、医薬上または獣医学上許容される塩を含めた塩を形成し得る。
【００２３】
適した塩に関する概説については、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｂｙ  Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  Ｗｅｒｍｕｔｈ  （Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ、２００２）を参照のこと。
【００２４】
本発明の化合物は、水和物および溶媒和物として単離可能であると予測される。用語「溶媒和物」は、本明細書において、本発明の化合物および化学量論量の１種以上の医薬上許容される溶媒分子、例えば、エタノールを含む分子複合体を説明するために使用される。用語「水和物」は、前記溶媒がＨ２Ｏである場合に使用される。式（Ｉ）の化合物への本明細書における任意の言及は、このような水和物および溶媒和物を含むと理解されなければならない。
【００２５】
不斉原子の存在または回転制限のために、１種以上の立体異性形で存在し得る本発明が関連する化合物は、各キラル中心でＲまたはＳ立体化学を有するいくつかの立体異性体として、または各キラル軸でＲまたはＳ立体化学を有するアトロプ異性体として存在し得る。本発明は、すべてのこのような鏡像異性体およびジアステレオ異性体およびこれらの混合物を含む。
【００２６】
式（Ｉ）の化合物のいわゆる「プロドラッグ」もまた、本発明の範囲内にある。それ自体薬理活性をほとんど有さないか、全く有さないものであり得る式（Ｉ）の化合物のこのような特定の誘導体は、身体中または身体上に投与されると、例えば、加水切断によって所望の活性を有する式（Ｉ）の化合物に変換され得る。このような誘導体は、「プロドラッグ」と呼ばれる。プロドラッグの使用に関するさらなる情報は、Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、第１４巻、ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  （Ｔ．  ＨｉｇｕｃｈｉおよびＷ．  Ｓｔｅｌｌａ）およびＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９８７年（Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）に見出すことができる。
【００２７】
本発明に従うプロドラッグは、例えば、式（Ｉ）の化合物中に存在する適当な官能基を、例えば、Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｂｙ  Ｈ．  Ｂｕｎｄｇａａｒｄ  （Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５）に記載されるような「プロ部分」として当業者に公知の特定の部分と置換することによって製造され得る。
【００２８】
また、本発明の範囲内に、式（Ｉ）の化合物の代謝産物、すなわち、薬物の投与の際にｉｎ  ｖｉｖｏで形成された化合物も含まれる。代謝産物のいくつかの例として、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物が、メチル基を含有する場合の、そのヒドロキシメチル誘導体（−ＣＨ３→−ＣＨ２ＯＨ）：
（ｉｉ）式（Ｉ）の化合物が、アルコキシ基を含有する場合の、そのヒドロキシ誘導体（−ＯＲ→−ＯＨ）、
（ｉｉｉ）式（Ｉ）の化合物が、第三級アミノ基を含有する場合の、その第二級アミノ誘導体（−ＮＲ１Ｒ２→−ＮＨＲ１または−ＮＨＲ２）、
（ｉｖ）式（Ｉ）の化合物が、第二級アミノ基を含有する場合の、その第一級誘導体（−ＮＨＲ１→−ＮＨ２）、
（ｖ）式（Ｉ）の化合物が、フェニル部分を含有する場合の、そのフェノール誘導体（−Ｐｈ→−ＰｈＯＨ）、および
（ｖｉ）式（Ｉ）の化合物が、アミド基を含有する場合の、そのカルボン酸誘導体（−ＣＯＮＨ２＞ＣＯＯＨ）
が挙げられる。
【００２９】
好ましい実施形態
化合物（Ｉ）中に存在する可変性の置換基を、ここでさらに説明する。さらなる記載において、任意の開示された置換基または置換基クラスは、その他の開示された置換基クラスのいずれかとの任意の組合せで存在し得るということは理解されなければならない。可変性置換基の特定の例として、本明細書における実施例の化合物中に存在するものが挙げられる。
【００３０】
好ましくは、基「Ａｌｋ」は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンまたは（Ｃ２−Ｃ６）アルケニレンである。
【００３１】
好ましくは、「Ｚ」基の少なくとも１つは、ピリジン環の４または５位のいずれかに位置する。より好ましくは、少なくとも１つのＺ基は、環の５位に位置する。最も好ましくは、Ｚ基は、環の４および５位に位置する。
【００３２】
好ましくは、Ｘおよび／またはＺは、可溶性基である。多数のこのような可溶性基は、医薬品化学において公知である。可溶性基の例として、モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロリジニル、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、ジエチルアミノ、シクロヘキシルアミノ、シクロペンチルアミノ、メトキシエチルアミノ、ピペリジン−４−イル、Ｎ−アセチルピペラジニル、メチルスルホニルアミノ、チオモルホリニル、チオモルホリニルジオキシド、４−ヒドロキシエチルピペリジニルおよび４−ヒドロキシピペリジニルがある。
【００３３】
好ましい実施形態では、Ｙは、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ＯＲＡ、ハロゲンまたはＣ１−Ｃ６アルコキシで所望により置換されていてもよいフェニルまたはヘテロアリールである。より好ましくは、Ｙは、ピリジル、ピロリル、フェニルまたはメチル、Ｏ−メチル、臭素または塩素で置換されたフェニルである。
【００３４】
なおさらに好ましい実施形態では、Ｙは、所望により置換されていてもよいアリールである。好ましくは、Ｙは、所望により置換されていてもよいフェニルである。より好ましくは、Ｙは、非置換フェニルである。
【００３５】
好ましくは、本発明の化合物は、特定の実施例のものまたはその医薬上許容される塩に従う。
【００３６】
Ｒ１は、好ましくは、ＨまたはＭｅである。より好ましくは、Ｒ１はＨである。
【００３７】
ＲＡは、好ましくは、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである。一実施形態では、ＲＡは、−ＣＨ２−シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロペンチルまたは−ＣＨ２−シクロヘキシルなどの−Ｃ１−Ｃ６アルキル（シクロアルキル）である。
【００３８】
一実施形態では、少なくとも１つのＺが、Ｈ、ハロゲン、所望により置換されていてもよいアリール、所望により置換されていてもよいヘテロアリール、所望により置換されていてもよい窒素含有複素環、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはＯＲＡである。特定の好ましい実施形態では、窒素含有複素環上の任意選択の置換基は、ＮＲＡＲＡである。
【００３９】
好ましい実施形態では、一方のＺ基は、Ｈ、ハロゲン、ＯＲＡまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、もう一方のＺ基は、所望により置換されていてもよいアリールまたは所望により置換されていてもよい窒素含有複素環である。特に好ましい実施形態では、窒素含有複素環上の任意選択の置換基は、ＮＲＡＲＡである。
【００４０】
好ましい実施形態では、Ｚは、（Ａｌｋ）ｎ−所望により置換されていてもよいアリーレン−（Ａｌｋ）ｎ−所望により置換されていてもよい複素環である。
【００４１】
代替の好ましい実施形態では、Ｚは、所望により置換されていてもよいヘテロアリールまたは所望により置換されていてもよい窒素含有複素環である。
【００４２】
好ましい実施形態では、本発明の化合物は、式（Ｉａ）：
【００４３】
【化２】
2015505555.tif 000004
【００４４】
［式中、
Ｚ１およびＺ２は独立に、（Ａｌｋ）ｎ−Ｒｎ−（Ａｌｋ）ｎ−Ｘであり；
Ａｌｋ、ｎ、Ｒ、Ｘ、Ｙ、ＲＡおよびＲ１は、請求項１に記載の通りである］
で示される化合物または医薬上許容されるその塩に従う。
【００４５】
好ましくは、式（Ｉａ）の化合物では、Ｚ１は、ハロゲン、フェニル、ＯＲＡまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｚ２は、所望により置換されていてもよいアリールまたは所望により置換されていてもよい複素環である。
【００４６】
好ましくは、式（Ｉａ）の化合物では、Ｚ２は、ハロゲン、ＣＦ３、シクロプロピル、フェニル、ＯＲＡまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｚ１は、所望により置換されていてもよいアリールまたは所望により置換されていてもよい複素環である。
【００４７】
好ましくは、用語「複素環」または「窒素含有複素環」は、式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物の関連において使用される場合、所望により置換されていてもよいピペリジン、ピペラジンまたはモルホリン環を表す。
【００４８】
一実施形態では、Ｚ１は、Ｒ−Ｘであり、Ｚ２はＸである。
【００４９】
一代替実施形態では、Ｚ２は、Ｒ−Ｘであり、Ｚ１はＸである。
【００５０】
さらなる実施形態では、Ｚ１は、Ｒ−Ａｌｋ−Ｘであり、Ｚ２はＸである。
【００５１】
なおさらなる実施形態では、Ｚ２は、Ｒ−Ａｌｋ−Ｘであり、Ｚ１はＸである。
【００５２】
有用性
本発明は、ヒトまたは動物対象、より好ましくは、哺乳類、より好ましくは、ヒト対象について使用され得る。
【００５３】
本明細書において、用語「治療」とは、本明細書において、予防的処置を含む。
【００５４】
本発明の化合物は、癌および臓器移植拒絶、ループス、多発性硬化症、リウマチ関節炎および変形性関節症などの自己免疫障害の治療において単独で使用され得る。ＣＨＫ１の阻害剤は、癌治療のための現行のＤＮＡ損傷誘導性放射線療法または化学療法計画の有効性の改善において有用性を実証した。式（Ｉ）の化合物は、癌の治療のために、放射線療法または１種以上の細胞傷害性もしくは細胞分裂阻害薬または細胞毒性もしくは細胞分裂停止を誘導する薬物と組み合わせて使用され得る。本発明の化合物およびその他の成分は、同一医薬製剤中にあっても、同時または逐次投与のために別個の製剤中にあってもよい。
【００５５】
化学療法薬、放射線療法薬ならびにその他の活性薬剤および補助薬剤の限定されない例は、以下に示される。
【００５６】
（ｉ）アルキル化剤
【００５７】
（ｉｉ）ナイトロジェンマスタード、例えば
2015505555.tif 000005
【００５８】
（ｉｉｉ）ニトロソウレア、例えば
2015505555.tif 000006
【００５９】
（ｉｖ）エチレンイミン／メチル−メラミン、例えば
2015505555.tif 000007
【００６０】
（ｖ）アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン
【００６１】
（ｖｉ）トリアジン、例えば、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）
【００６２】
（ｖｉｉ）抗代謝産物、例えば、葉酸類似体、例えば
2015505555.tif 000008
【００６３】
（ｖｉｉｉ）ピリミジン類似体、例えば
2015505555.tif 000009
【００６４】
（ｉｘ）プリン類似体、例えば
2015505555.tif 000010
【００６５】
（ｘ）Ｉ型トポイソメラーゼ阻害剤、例えば
2015505555.tif 000011
【００６６】
（ｘｉ）生物反応修飾物質、例えば、Ｇ−ＣＳＦおよびＧＭ−ＣＳＦ
【００６７】
（ｘｉｉ）分化剤、例えば、レチノイン酸誘導体
【００６８】
（ｘｉｉｉ）ホルモンおよびアンタゴニスト
【００６９】
（ｘｉｖ）副腎皮質ステロイド／アンタゴニスト、例えば
2015505555.tif 000012
【００７０】
（ｘｖ）プロゲスチン、例えば
2015505555.tif 000013
【００７１】
（ｘｖｉ）エストロゲン、例えば
2015505555.tif 000014
【００７２】
（ｘｖｉｉ）抗エストロゲン、例えば、タモキシフェン
【００７３】
（ｘｖｉｉｉ）アンドロゲン（Ａｎｄｏｇｅｎｓ）、例えば
2015505555.tif 000015
【００７４】
（ｘｉｘ）抗アンドロゲン、例えば
2015505555.tif 000016
【００７５】
（ｘｘ）非ステロイド性抗アンドロゲン
【００７６】
（ｘｘｉ）天然物
【００７７】
（ｘｘｉｉ）有糸分裂阻害剤
【００７８】
（ｘｘｉｉｉ）タキサン、例えば
2015505555.tif 000017
【００７９】
（ｘｘｉｖ）エピポドフィロトキシン、例えば、エトポシドまたはテニポシド
【００８０】
（ｘｘｖ）抗生物質、例えば
2015505555.tif 000018
【００８１】
（ｘｘｖｉ）Ｌ−アスパラギナーゼおよびＬ−アルギナーゼなどの酵素
【００８２】
（ｘｘｖｉｉ）放射線増感剤、例えば
2015505555.tif 000019
【００８３】
（ｘｘｖｉｉｉ）プラチナ配位錯体、例えば
2015505555.tif 000020
【００８４】
（ｘｘｉｘ）置換尿素、例えば、ヒドロキシ尿素
【００８５】
（ｘｘｘ）メチルヒドラジン（Ｍｅｔｈｙｈｙｄｒａｚｉｎｅ）誘導体、例えば、Ｎ−メチルヒドラジン（ＭＩＨ）およびプロカルバジン
【００８６】
（ｘｘｘｉ）副腎皮質抑制剤ミトカン（ｍｉｔｏｃａｎｅ）（ｏ，ｐ’−ＤＤＤ）アミノグルテチミド（ａｉｎｏｇｌｕｔｅｔｈｉｍｉｄｅ）
【００８７】
（ｘｘｘｉｉ）インターフェロン（α、β、γ）およびインターロイキン−２などのサイトカイン
【００８８】
（ｘｘｘｉｉｉ）光増感剤、例えば
2015505555.tif 000021
【００８９】
（ｘｘｘｉｖ）照射、例えば
2015505555.tif 000022
【００９０】
（ｘｘｘｖ）分子標的治療薬
2015505555.tif 000023
【００９１】
ＣＨＫ１阻害剤は、最近、それだけには限らないが、卵巣癌、トリプルネガティブ乳癌、神経芽腫、黒色腫、膵臓癌、血液癌およびファンコニー貧血などのＤＮＡ修復経路に欠陥のある癌を含めた多様な範囲のヒト癌において単一剤として前臨床活性を示した。
【００９２】
任意の個々の患者の特定の用量レベルは、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与の時間、投与の経路、排泄の速度、薬物の組合せおよび原因機序および治療を受けている個々の疾患の重篤度を含めたさまざまな因子に応じて変わるということは理解されよう。一般に、経口投与可能な製剤の適した用量は、普通、１日あたり１回、２回または３回、０．１〜３０００ｍｇの範囲または注入またはその他の経路によって投与される同等な１日量となる。しかし、投薬の最適用量レベルおよび頻度は、当技術分野において慣例であるように臨床試験によって決定される。
【００９３】
本発明が関係している化合物は、その薬物動態特性と一致する任意の経路による投与のために調製され得る。経口投与可能な組成物は、経口、局所または滅菌非経口溶液または懸濁液などの、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、トローチ剤、液体またはゲル調製物の形態であり得る。経口投与用の錠剤およびカプセル剤は、単位用量調製物形態であり得、結合剤、例えば、シロップ、アラビアガム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカントまたはポリビニル−ピロリドン、増量剤、例えば、ラクトース、糖、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン、錠剤化滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ、崩壊剤、例えば、ジャガイモデンプンまたはラウリル硫酸ナトリウムなどの許容される湿潤剤などの従来の賦形剤を含有し得る。錠剤は、普通の薬務において周知の方法に従ってコーティングされ得る。経口液体調製物は、例えば、水性または油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形態であり得、または使用前にＨ２Ｏまたはその他の適したビヒクルを用いる再構成のための乾燥製品として提示され得る。このような液体調製物は、沈殿防止剤、例えば、ソルビトール、シロップ、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン水素化食用脂（ｇｅｌａｔｉｎ  ｈｙｄｒｏｇｅｎａｔｅｄ  ｅｄｉｂｌｅ  ｆａｔｓ）、乳化剤、例えば、レシチン、ソルビタンモノオレエートまたはアラビアガム、非水性ビヒクル（食用油を含み得る）、例えば、アーモンドオイル、分画ココナッツオイル、グリセリン、プロピレングリコールまたはエチルアルコールなどの油性エステル、保存料、例えば、メチルまたはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾエートまたはソルビン酸などの従来の添加物および必要に応じて、従来の矯味剤または着色剤を含有し得る。
【００９４】
皮膚への局所適用用には、薬物は、クリーム、ローションまたは軟膏に作り上げられ得る。薬物のために使用され得るクリームまたは軟膏処方は、例えば、英国薬局方などの薬剤学の標準的な教本に記載されるような当技術分野で周知の従来処方である。
【００９５】
有効成分はまた、滅菌媒体中で非経口的に投与され得る。ビヒクルおよび使用される濃度に応じて、薬物はビヒクルに懸濁されても、溶解されてもよい。局所麻酔薬、防腐剤および緩衝剤などのアジュバントがビヒクル中に溶解され得ることが有利である。
【００９６】
本発明が関連している化合物（Ｉ）の合成については複数の合成戦略があるが、すべてが、合成有機化学者に公知の既知化学に頼っている。したがって、式（Ｉ）の化合物は、標準的な文献に記載される、当業者に周知である手順に従って合成され得る。通常の文献供給源は、「Ａｄｖａｎｃｅｄ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」第４版（Ｗｉｌｅｙ）、Ｊ  Ｍａｒｃｈ、「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ」第２版（Ｗｉｌｅｙ）、Ｒ．Ｃ．  Ｌａｒｏｃｋ、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」第２版（Ｐｅｒｇａｍｏｎ）、Ａ．Ｒ．  Ｋａｔｒｉｔｚｋｙ）、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、「Ａｃｃ．  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｓ．」、「Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｖ」中に見られるものなどの総説または標準的な文献検索オンラインによって、または「Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｂｓｔｒａｃｔｓ」もしくは「Ｂｅｉｌｓｔｅｉｎ」などの第２の供給源によって特定される主要な文献供給源がある。このような文献法は、本明細書における調製実施例のものおよびそれに類似の方法を含む。
【００９７】
それによって本発明の化合物が調製され得る、一般に有機化学の技術分野で公知の方法の例は、以下の反応スキームおよび手順に含まれている。
【００９８】
スキーム１
【化３】
2015505555.tif 000024
【００９９】
スキーム２
【化４】
2015505555.tif 000025
【０１００】
スキーム３
【化５】
2015505555.tif 000026
【０１０１】
スキーム４
【化６】
2015505555.tif 000027
【０１０２】
スキーム５
【化７】
2015505555.tif 000028
【０１０３】
スキーム６
【化８】
2015505555.tif 000029
【０１０４】
スキーム７
【化９】
2015505555.tif 000030
【０１０５】
スキーム８
【化１０】
2015505555.tif 000031
【０１０６】
スキーム９
【化１１】
2015505555.tif 000032
【実施例】
【０１０７】
以下の実施例により本発明の特定の化合物の調製を説明するが、それらの実施例は本発明の全範囲を限定することを意図したものではない。当業者は、本明細書に記載する化学合成は、本発明の他の化合物を調製するために適応され得ることを認識しなくてはならない。実際には、本発明の化合物を調製するための代替方法は本発明の範囲内であると考えられる。
【０１０８】
実施例１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０１０９】
【化１２】
2015505555.tif 000033
【０１１０】
標題化合物を、スキーム１で概略を示した経路によって調製した。
【０１１１】
ステップ１：５−ブロモ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
０℃にて、発煙硝酸（２．５ｍＬ）の撹拌溶液に、５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（４７０ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）を分けて加えた。添加後、反応液を、０℃で３０分間撹拌し、その後、氷／Ｈ２Ｏ混合物（２５ｍＬ）に注意深く加え、３０分間撹拌した。固体を濾過によって分離し、濾過ケーキを、多量のＨ２Ｏ、次いで、イソヘキサンで洗浄した後、真空乾燥させ、標題の目的化合物を得た、４８４ｍｇ、８４％。
【０１１２】
ステップ２：５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミンの調製
８５℃にて、５−ブロモ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンを氷酢酸（６ｍＬ）に加えて撹拌し、これに、塩化スズ（ＩＩ）二水和物（９３６ｍｇ、４．１５ｍｍｏｌ）の濃ＨＣｌ（１ｍＬ）溶液を滴下した。添加後、反応液を、８５℃でさらに２時間加熱し、その後、室温まで放冷した。反応混合物を高速撹拌下の氷／Ｈ２Ｏ混合物（３０ｍＬ）上に注ぎ、５０％水酸化ナトリウム水溶液を注意深く加えることによりｐＨを９に調整した。この水性混合物をＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物を、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮し、目的化合物を得た、１１５ｍｇ、６６％。
【０１１３】
ステップ３：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドの調製
５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミン（６０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（６２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５７ｍｇ、８０ｕＬ、０．５６ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１ｍＬ）に加えて撹拌した。Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＨＡＴＵ）（１０６ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で４時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃと飽和硫酸水素ナトリウム溶液とで分液し、有機層を、分離し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し（×４）、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、褐色固体を得た。残渣を、最初に、５０％ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ、次いで、５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出するＳｉＯ２によるフラッシュクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を黄褐色固体として得た、３５ｍｇ、３１％。
【０１１４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．２２分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝３９６［Ｍ＋Ｈ］，３９４［Ｍ−Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｄ，１Ｈ），８．４５（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｄ，１Ｈ），９．８８（ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０１１５】
実施例２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０１１６】
【化１３】
2015505555.tif 000034
【０１１７】
標題化合物を、スキーム１で概略を示した経路によって、実施例１、ステップ１、ステップ２およびステップ３として記載した方法論を用いて、ステップ１において、５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（１５０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物をクリーム色固体として単離した、６０．３ｍｇ、３５．８％。
【０１１８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９５分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝３１８［Ｍ＋Ｈ］，３１６［Ｍ−Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．４１（ｓ，２Ｈ），７．０６（ｄｄ，１Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．７４（ｄ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｄｄ，１Ｈ），８．２２（ｄｄ，１Ｈ），８．４４（ｓ，１Ｈ），９．８７（ｓ，１Ｈ），１１．４１（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０１１９】
実施例３：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（４−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０１２０】
【化１４】
2015505555.tif 000035
【０１２１】
標題化合物を、スキーム１で示したものと同様の経路によって調製した。
【０１２２】
ステップ１：４−ブロモ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
０℃にて、濃Ｈ２ＳＯ４（０．６４ｍＬ）溶液に、濃ＨＮＯ３（０．９３ｍＬ）を滴下した。４−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２ｇ、１０．１５ｍｍｏｌ）の濃Ｈ２ＳＯ４（９ｍＬ）溶液をゆっくり加え、温度を０℃に保った。添加後、反応液を、０℃でさらに１時間撹拌した後に、高速撹拌下の氷／Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）上に注意深く注いだ。懸濁液を３０分間撹拌し、その後、固体を濾過によって分離した。濾過ケーキを、多量のＨ２Ｏで洗浄した後、４０℃で真空乾燥させ、目的化合物を得た、１．９ｇ、７７．３％
【０１２３】
ステップ２：４−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミンの調製
４−ブロモ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（５００ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）を、４８％臭化水素酸水溶液（４ｍＬ）に加えて７０℃で加熱し、その後、塩化スズ（ＩＩ）二水和物（２．２６ｇ、１０ｍｍｏｌ）を分けて加えた。添加後、反応液を、７０℃でさらに１時間加熱し、その後、冷却した後に、撹拌下の氷／Ｈ２Ｏ（１５ｍＬ）に注意深く加えた。この溶液を、水酸化ナトリウム溶液を用いてｐＨ１２に塩基性化し、不溶性物質を濾過によって分離した。濾液をＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物を、Ｈ２Ｏおよび飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。これにより目的化合物を得、２３０ｍｇ、５２．５％、そしてそれを、さらなる精製を行わずに用いた。
【０１２４】
ステップ３：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（４−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドの調製
実施例１、ステップ３に記載のとおりに、５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミンの代わりに４−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミン（１１７ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、１４５ｍｇ、６６．５％）を調製した。
【０１２５】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．１２分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝３９６［Ｍ＋Ｈ］，３９４［Ｍ−Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．３９（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，６Ｈ），７．６１（ｄ，１Ｈ），８．０３（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｄ，１Ｈ），８．３９（ｓ，１Ｈ），９．４３（ｓ，１Ｈ），１１．９９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０１２６】
実施例４：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−フェニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０１２７】
【化１５】
2015505555.tif 000036
【０１２８】
標題化合物を、実施例１に基づいて調製した。
【０１２９】
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（５０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（１６．９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（５３．９ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（９．５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１．１ｍＬ：０．１２ｍＬ）に加えて合わせ、十分に脱気した。反応混合物をマイクロ波照射下で１２０℃で１時間加熱し、その後、それをＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃの別の一部で抽出した。合わせた有機相を、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、褐色ゴム状物質を得た。この粗物質を、ＤＣＭ〜５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的生成物を淡褐色固体として得た、２７ｍｇ、５４％。
【０１３０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．２３分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝３９４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，６Ｈ），７．５（ｍ，２Ｈ），７．７１（ｄｄ，２Ｈ），７．８３（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｄ，１Ｈ），８．５４（ｄ，１Ｈ），９．９２（ｓ，１Ｈ），１１．５１（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）．
【０１３１】
実施例５：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ピペリジン−１−イル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０１３２】
【化１６】
2015505555.tif 000037
【０１３３】
標題化合物を、実施例１に基づいて調製した。
【０１３４】
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（７５ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、ピペリジン（０．０３ｍＬ、０．２８ｍｍｏｌ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシビフェニル（８．８３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）、クロロ−（２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシ−１，１’−ビフェニル）［２−（２−アミノエチル）フェニル］パラジウム（ＩＩ）−メチル−ｔ−ブチルエーテル付加物（１５．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を０．５〜２．０ｍＬマイクロ波バイアルに入れた。バイアルを密封し、真空引きを行い、窒素で充填し戻した。リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液（０．４５ｍＬ、０．４５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を６５℃で１８時間加熱した。反応液を放冷し、混合物を、１Ｎ  ＨＣｌでクエンチし、ＤＣＭで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥させ（相分離器）、溶媒を真空除去し、褐色固体を得た。この粗物質を、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、褐色固体を得た、１１ｍｇ、１４％。
【０１３５】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．０２分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４０１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．４９−１．５１（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．７３（ｍ，４Ｈ），３．０１−３．０７（ｍ，４Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．６９（ｓ，１Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），８．４４（ｓ，１Ｈ），９．７５（ｓ，１Ｈ），１１．１１（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０１３６】
実施例６：Ｎ−｛４−［（３Ｒ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド
【０１３７】
【化１７】
2015505555.tif 000038
【０１３８】
標題化合物を、スキーム２で概略を示した経路によって調製した。
【０１３９】
ステップ１：４−ブロモ−１−［トリス（プロパン−２−イル）シリル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
０℃にて、４−ブロモ−１Ｈ−ピロロピリジン（２ｇ、１０．１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４５ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム、６０％鉱油中分散液（０．４９ｇ、１２．１８ｍｍｏｌ）を分けて加え、１５分間撹拌した。その後、０℃にて、トリイソプロピルシリルクロリド（２．３１ｇ、２．５７ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下した。添加後、冷却を止め、反応混合物をＲＴに到達させ、そして、それをさらに１時間撹拌した。その後、懸濁液を、約０〜５℃まで冷却し、飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬ）でクエンチした。水相をＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、黄色油状物質を得た。粗物質を、イソヘキサンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的化合物を油状物質として得た、３．５ｇ、９７．６％。
【０１４０】
ステップ２：４−フルオロ−１−［トリス（プロパン−２−イル）シリル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
窒素雰囲気下、−７８℃にて、４−ブロモ−１−［トリス（プロパン−２−イル）シリル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２．０ｇ、５．６６ｍｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ（６０ｍＬ）溶液に、ｎ−ブチルリチウム、２．５Ｍヘキサン溶液（２．５２ｍＬ、１１．３ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を−７８℃で３０分間および−５℃で４５分間撹拌し、淡黄色溶液を得た。得られた溶液を、−７８℃まで冷却し、Ｎ−フルオロビス（フェニルスルホニル）アミン（２．０５ｇ、６．５１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を滴下した。混合物を、−７８℃でさらに３時間撹拌し、その後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えることによりクエンチした。有機層を分離し、水層をＥｔ２Ｏ（２×５０ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。溶液を、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、黄色ゴム状物質となるまで濃縮した。粗物質を、イソヘキサンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的化合物を無色油状物質として得た、１．３ｇ、７８．５％。
【０１４１】
ステップ３：５−ブロモ−４−フルオロ−１−［トリス（プロパン−２−イル）シリル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
−７８℃にて、４−フルオロ−１−［トリス（プロパン−２−イル）シリル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（８３３．０ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３４ｍＬ）溶液を、ｓｅｃ−ブチルリチウム、１．４Ｍシクロヘキサン溶液（４．４８ｍＬ、６．２７ｍｍｏｌ）にて滴下処理した。反応液を−７８℃で１時間撹拌した。四臭化炭素（２．３６ｇ、７．１２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６．３ｍＬ）溶液を滴下し、反応液を−７８℃でさらに１時間撹拌した。反応液を、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えることによりクエンチした。混合物をイソヘキサン（×２）で抽出し、合わせた抽出物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。溶液を、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、褐色油状物質となるまで濃縮した。粗物質を、イソヘキサンで溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的化合物を黄色ゴム状物質として得、そしてそれを静置して固化した、０．９７ｇ、９１．７％。
【０１４２】
ステップ４：５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
ＲＴにて、５−ブロモ−４−フルオロ−１−［トリス（プロパン−２−イル）シリル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（９７０ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１６．５ｍＬ）溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド、１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液（２．６１ｍＬ、２．６１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、ＲＴで２０分間撹拌し、その後、Ｈ２ＯとＥｔ２Ｏとで分液した。有機層を分離し、水層をより多くの量のＥｔ２Ｏ（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮し、褐色ゴム状物質を得た。
【０１４３】
粗物質を、イソヘキサン〜４０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（勾配）で溶出する自動クロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的化合物を灰白色固体として得た、０．３２３ｇ、５７．５％。
【０１４４】
ステップ５：５−ブロモ−４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
０℃にて、発煙硝酸（１．６ｍＬ）に、５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（０．３２３ｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を分けて加えた。添加後、反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、その後、高速撹拌下の氷／Ｈ２Ｏ（２５ｍＬ）に注意深く加えた。懸濁液をさらに３０分間撹拌し、その後、固体を濾過によって集め、濾過ケーキを、多量のＨ２Ｏ、次いで、イソヘキサンで洗浄した後、６０℃で真空乾燥させた。これにより目的化合物を灰白色固体として得た、０．３３５ｇ、８５．８％。
【０１４５】
ステップ６：５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミンの調製
０℃にて、５−ブロモ−４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（０．７１７ｇ、２．７６ｍｍｏｌ）の６Ｎ  ＨＣｌ（２１ｍＬ）溶液に、塩化スズ（ＩＩ）二水和物（２．６２ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を分けて加え、その後、冷却を止め、反応液をＲＴで１時間撹拌した。反応混合物を、冷却し、氷／Ｈ２Ｏ混合物（５０ｍＬ）上に注ぎ、５０％水酸化ナトリウム溶液を注意深く加えることによりｐＨ８に塩基性化した。これをＤＣＭ／イソプロピルアルコール（３：１；ｖ：ｖ）（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮し、褐色固体を得た。これにより目的化合物を褐色固体として得た、０．６１３ｇ、９６．５％。
【０１４６】
ステップ７：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドの調製
これを、実施例１、ステップ３として記載した方法論を用いて調製した、０．８５ｇ、７７．０％。
【０１４７】
ステップ８：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（４０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（９７ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）およびｎ−ブタノール（２ｍＬ）を、２〜５ｍＬマイクロ波バイアルに入れて合わせた。内容物をマイクロ波照射下で１６０℃で８時間加熱し、その後、反応混合物を真空濃縮した。残渣をＤＣＭ（３ｍＬ）に溶かし、その後、ＲＴにてＴＦＡ（３ｍＬ）を加え、撹拌を３時間続けた。溶媒を真空除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶かし、そしてそれを、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３×２０ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム水溶液飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮し、濃黄色ゴム状物質を得た。この粗物質を、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動クロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有することが分かった画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を淡黄色固体として得た、１０．２ｍｇ、２１．４％。
【０１４８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７７分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９４．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１３−１．２０（ｍ，１Ｈ），１．４４−１．５３（ｍ，１Ｈ），１．６２−１．７７（ｍ，２Ｈ），２．８８−２．９８（ｍ，２Ｈ），３．１０−３．１９（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２６−７．４０（ｍ，５Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．５２（ｓ，１Ｈ），９．７７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７１（ｓ，１Ｈ）３個のプロトンは観測されなかった
【０１４９】
実施例７：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピロリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０１５０】
【化１８】
2015505555.tif 000039
【０１５１】
実施例６に記載のとおりに、ステップ８において、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりに（Ｒ）−ピロリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１８０ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、５０．６ｍｇ、５４．５％）を調製した。
【０１５２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７３分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８０．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６８−１．７５（ｍ，１Ｈ），１．７８−１．８７（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），２．１２−２．２１（ｍ，１Ｈ），３．００−３．０３（ｍ，１Ｈ），３．３９−３．４５（ｍ，１Ｈ），３．５２−３．５８（ｍ，２Ｈ），３．６６−３．７０（ｍ，１Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４０（ｍ，５Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．２５（ｓ，１Ｈ），８．６７（ｓ，１Ｈ），９．８１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６３（ｓ，１Ｈ）
【０１５３】
実施例８：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−メチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０１５４】
【化１９】
2015505555.tif 000040
【０１５５】
実施例６に記載のとおりに、ステップ８において、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりにカルバミン酸，Ｎ−メチル−Ｎ−（３Ｒ）−３−ピペリジニル−，１，１−ジメチルエチルエステル（２５９ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、６３．４ｍｇ、５１．７％）を調製した。
【０１５６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７８分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５１０．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．２８−１．３５（ｍ，１Ｈ），１．４７−１．５２（ｍ，１Ｈ），１．６２−１．６８（ｍ，１Ｈ），１．７２−１．７９（ｍ，１Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．５６−２．６１（ｍ，１Ｈ），２．９５−２．９９（ｍ，１Ｈ），３．０９−３．１８（ｍ，１Ｈ），３．２１−３．２７（ｍ，１Ｈ），３．４５−３．５２（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２６−７．３９（ｍ，５Ｈ），７．７９（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），９．８２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７０（ｓ，１Ｈ）１個のプロトンは観測されなかった
【０１５７】
実施例９：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−エチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０１５８】
【化２０】
2015505555.tif 000041
【０１５９】
実施例６に記載のとおりに、ステップ８において、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりにカルバミン酸，Ｎ−エチル−Ｎ−（３Ｒ）−３−ピペリジニル−，１，１−ジメチルエチルエステル（１１６ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、３４．８ｍｇ、３９．４％）を調製した。
【０１６０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８１分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５２４．５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．８７（ｔ，３Ｈ），１．２３−１．２８（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．５６（ｍ，１Ｈ），１．７１−１．７３（ｍ，２Ｈ），２．４５（ｑ，２Ｈ），２．７２−２．７８（ｍ，１Ｈ），２．９９−３．０５（ｍ，１Ｈ），３．１４−３．２１（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２６−７．３９（ｍ，５Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），８．４５（ｓ，１Ｈ），９．７０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７３（ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０１６１】
実施例１０：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０１６２】
【化２１】
2015505555.tif 000042
【０１６３】
実施例６に記載のとおりに、ステップ８において、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりに（Ｒ）−ピロリジン−３−オール（８４ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（淡橙色固体、４７ｍｇ、５１．０％）を調製した。
【０１６４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．３０分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８３．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．９４−１．９９（ｍ，１Ｈ），２．２４−２．３３（ｍ，１Ｈ），３．１４−３．１７（ｍ，１Ｈ），３．４３−３．４９（ｍ，１Ｈ），３．５３−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．６４−３．６８（ｍ，１Ｈ），４．５４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．３７（ｓ，２Ｈ），５．５０（ｄ，１Ｈ），７．２９−７．３９（ｍ，５Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ），８．１４（ｓ，１Ｈ），８．２７（ｓ，１Ｈ），８．６０（ｓ，１Ｈ），９．７２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６３（ｓ，１Ｈ）
【０１６５】
実施例１１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０１６６】
【化２２】
2015505555.tif 000043
【０１６７】
実施例６に記載のとおりに、ステップ８において、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりに（Ｒ）−３−ヒドロキシピペリジン塩酸塩（８３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を用い、塩基として炭酸カリウム（８３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（淡黄色固体、３．６ｍｇ、６．０％）を調製した。
【０１６８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．３５分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９５．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．４８−１．５４（ｍ，２Ｈ），１．６３−１．６８（ｍ，１Ｈ），１．７８−１．８７（ｍ，１Ｈ），２．９７−３．０７（ｍ，２Ｈ），３．５４−３．６３（ｍ，１Ｈ），３．８４−３．９０（ｍ，１Ｈ），５．３３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），７．２６−７．３９（ｍ，５Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），８．６２（ｓ，１Ｈ），９．９１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｓ，１Ｈ）１個のプロトンは観測されなかった
【０１６９】
実施例１２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（３−ジメチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０１７０】
【化２３】
2015505555.tif 000044
【０１７１】
実施例６に記載のとおりに、ステップ８において、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりにジメチル−ピペリジン−３−イル−アミン（１１６ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（淡黄色固体、５１．９ｍｇ、５４．９％）を調製した。
【０１７２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７８分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５２４．５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．３１−１．３７（ｍ，１Ｈ），１．５４−１．５８（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．９９（ｓ，６Ｈ），２．２１−２．２５（ｍ，１Ｈ），３．１０−３．１９（ｍ，３Ｈ），４．２６−４．４６（ｍ，１Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２５−７．２７（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），９．６１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７３（ｓ，１Ｈ）
【０１７３】
実施例１３：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−ブロモ−４−［（Ｒ）−３−（シクロペンチルメチル−アミノ）−ピペリジン−１−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０１７４】
【化２４】
2015505555.tif 000045
【０１７５】
標題化合物を、実施例６に基づいて調製した。
【０１７６】
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（４０．０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、酢酸（０．０１ｍＬ、０．１７ｍｍｏｌ）およびシクロペンタンカルバルデヒド（１０．８ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）に加えて撹拌した。反応混合物を、ＲＴで１０分間撹拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４２．４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１８時間撹拌しておいた。反応混合物を、重炭酸ナトリウム溶液で塩基性化し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を、合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を、ＤＣＭ〜５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有することが分かった画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を黄色固体として得た、５．６ｍｇ、１２．１％。
【０１７７】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．００分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５７６．６［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．９４−１．８０（ｍ，１４Ｈ），２．２４−２．３２（ｍ，２Ｈ），２．５９−２．６６（ｍ，１Ｈ），２．９３−３．６８（ｍ，３Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２５−７．２６（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），８．０３（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），９．６６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７２（ｄ，１Ｈ）
【０１７８】
実施例１４：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−４−（（Ｒ）−３−イソブチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０１７９】
【化２５】
2015505555.tif 000046
【０１８０】
実施例１３に記載のとおりに、シクロペンタンカルバルデヒドの代わりにイソブチルアルデイヒド（ｉｓｏｂｕｔｙｒａｌｄｅｙｈｙｄｅ）（９．９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、３８．１ｍｇ、６８．４％）を調製した。
【０１８１】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９１分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝５５２．５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．７４（ｄ，６Ｈ），１．１４−１．２０（ｍ，１Ｈ），１．４０−１．５０（ｍ，１Ｈ），１．５２−１．５８（ｍ，１Ｈ），１．６９−１．７１（ｍ，２Ｈ），２．１３−２．２２（ｍ，２Ｈ），２．５８−２．６２（ｍ，１Ｈ），２．９５−３．００（ｍ，１Ｈ），３．１０−３．１５（ｍ，１Ｈ），３．２１−３．２７（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２５−７．２７（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．６６（ｄ，１Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．４１（ｓ，１Ｈ），９．６２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０１８２】
実施例１５：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−ブロモ−４−［（Ｒ）−３−（２，２−ジメチル−プロピルアミノ）−ピペリジン−１−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０１８３】
【化２６】
2015505555.tif 000047
【０１８４】
実施例１３に記載のとおりに、シクロペンタンカルバルデヒドの代わりにイソブチルアルデイヒド（ｉｓｏｂｕｔｙｒａｌｄｅｈｙｄｅ）（９．９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、３８．１ｍｇ、６８．４％）を調製した。
【０１８５】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９６分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５６６．５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．７５（ｓ，９Ｈ），１．０８−１．１３（ｍ，２Ｈ），１．５３−１．５８（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．７４（ｍ，２Ｈ），２．１０−２．１７（ｍ，２Ｈ），２．９７−３．０８（ｍ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２３−７．２６（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），８．００（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｓ，１Ｈ），９．５２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７４（ｓ，１Ｈ）３個のプロトンは観測されなかった
【０１８６】
実施例１６：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−ブロモ−４−［（Ｒ）−３−（シクロプロピルメチル−アミノ）−ピペリジン−１−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０１８７】
【化２７】
2015505555.tif 000048
【０１８８】
実施例１３に記載のとおりに、シクロペンタンカルバルデヒドの代わりにシクロプロピルカルボキシアルデヒド（７．７ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、１８．４ｍｇ、４１．９％）を調製した。
【０１８９】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８８分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝５５０．５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．０９−０．０２（ｍ，２Ｈ），０．２３−０．２６（ｍ，２Ｈ），０．６４−０．７１（ｍ，１Ｈ），１．２５−１．３０（ｍ，１Ｈ），１．５１−１．５６（ｍ，１Ｈ），１．６８−１．７７（ｍ，２Ｈ），２．１８−２．２９（ｍ，２Ｈ），２．７１−２．７７（ｍ，１Ｈ），２．９６−３．０３（ｍ，１Ｈ），３．１６−３．２８（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２５−７．２７（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．７３（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），９．７４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７１（ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０１９０】
実施例１７：１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０１９１】
【化２８】
2015505555.tif 000049
【０１９２】
実施例６に記載のとおりに、ステップ７において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１５７ｍｇ、０．７１５ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物を調製した。
【０１９３】
１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の調製
４−ピラゾールカルボン酸エチル（１．５ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（４．４４ｇ、３２．１ｍｍｏｌ）をアセトン（４５ｍＬ）に加えて撹拌した。これに、４−フルオロベンジルブロミド（１．３８ｍＬ、１１．２４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で１８時間加熱した。反応液をＲＴまで冷却し、固体を濾過によって分離した。濾過ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を真空濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（３６ｍＬ）に溶かし、ＫＯＨ（１．２０ｇ、２１．４ｍｍｏｌ）の水（７．２ｍＬ）溶液を加えた。反応液を、２時間還流し、冷却し、溶媒を真空除去した。残渣を、少量のＨ２Ｏで希釈し、５℃まで冷却し、１Ｍ  ＨＣｌ溶液を注意深く加えることにより酸性化し、生成物を沈殿させた。１０分間撹拌した後、固体を、濾過によって集め、水、イソヘキサンでよく洗浄し、４０℃で１８時間真空乾燥させ、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸を白色固体として得た、２．３５ｇ、９９．６％。
標題化合物を淡黄色固体として単離した、２０．５ｍｇ、１７．３％。
【０１９４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８０分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝５１４．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１２−１．２５（ｍ，１Ｈ），１．４３−１．５３（ｍ，１Ｈ），１．６５−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．９５−２．３０（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），２．８７−３．００（ｍ，２Ｈ），３．０１−３．２０（ｍ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２１（ｄｄ，２Ｈ），７．３３（ｄｄ，２Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），９．７５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）１個のプロトンは観測されなかった
【０１９５】
実施例１８：１−（４−クロロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０１９６】
【化２９】
2015505555.tif 000050
【０１９７】
実施例６に記載のとおりに、ステップ７において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸についての記載と同様に調製した１−（４−クロロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１６３ｍｇ、０．７１５ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（淡黄色固体、１９．６ｍｇ、１７．３％）を調製した。
【０１９８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８７分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝５３０．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１１−１．２０（ｍ，１Ｈ），１．４３−１．７９（ｍ，５Ｈ），２．８６−２．９８（ｍ，２Ｈ），３．０９−３．２０（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２８（ｄ，２Ｈ），７．４４（ｄ，２Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），９．７７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）１個のプロトンは観測されなかった
【０１９９】
実施例１９：１−（４−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２００】
【化３０】
2015505555.tif 000051
【０２０１】
実施例６に記載のとおりに、ステップ７において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸についての記載と同様に調製した１−（４−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１５５ｍｇ、０．７１５ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（黄褐色固体、２２ｍｇ、１８．５％）を調製した。ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８５分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝５０８．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１１−１．２５（ｍ，１Ｈ），１．４３−１．５３（ｍ，１Ｈ），１．６５−１．７７（ｍ，２Ｈ），２．１３−２．７０（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），２．８８−３．０１（ｍ，２Ｈ），３．０８−３．２０（ｍ，２Ｈ），５．３６（ｓ，２Ｈ），７．１５−７．２１（ｍ，４Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），９．７４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）１個のプロトンは観測されなかった
【０２０２】
実施例２０：１−（４−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２０３】
【化３１】
2015505555.tif 000052
【０２０４】
実施例６に記載のとおりに、ステップ７において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸についての記載と同様に調製した１−（４−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１６６ｍｇ、０．７１５ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（黄褐色固体、１６．２ｍｇ、１３．７％）を調製した。
【０２０５】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７９分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝５２４．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１０−１．２７（ｍ，１Ｈ），１．４３−１．５３（ｍ，１Ｈ），１．６４−１．９５（ｍ，４Ｈ），２．８７−２．９９（ｍ，２Ｈ），３．０９−３．２１（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），５．３２（ｓ，２Ｈ），６．９２（ｄ，２Ｈ），７．２５（ｄ，２Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），８．０１（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．４４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），９．７３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）１個のプロトンは観測されなかった
【０２０６】
実施例２１：１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２０７】
【化３２】
2015505555.tif 000053
【０２０８】
実施例６に記載のとおりに、ステップ７において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに、実施例８１、ステップ１における１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸についての記載と同様に調製した１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１５０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（黄色固体、４０ｍｇ、６８．７％）を調製した。それを、ｐＨ４での分取ＨＰＬＣによる精製を行って、ギ酸塩として単離した。
【０２０９】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．８７分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：ｄ  １．２１−１．３４（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），１．４０−１．５３（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），１．５９−１．６８（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），１．７８−１．８６（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），２．９８−３．０８（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），３．１３−３．２９（ｂｒ  ｍ，３Ｈ），３．３３−３．４４（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），５．５２（ｓ，２Ｈ），７．１０（ｄ，１Ｈ），７．３１−７．３５（ｍ，１Ｈ），７．５４（ｓ，１Ｈ），７．７８−７．８２（ｍ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），８．４９−８．５６（ｍ，２Ｈ），９．７７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）３個のプロトンは観測されなかった
【０２１０】
実施例２２：１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２１１】
【化３３】
2015505555.tif 000054
【０２１２】
実施例６に記載のとおりに、ステップ７において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに、実施例８１、ステップ１における１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸についての記載と同様に調製した１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１５０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（黄褐色固体、９．５ｍｇ、３８％）を調製した。
【０２１３】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．８３分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：ｄ  １．４３−１．５５（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），１．６１−１．６９（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），１．７２−１．７９（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），３．０３−３．２２（ｂｒ  ｍ，４Ｈ），５．４８（ｓ，２Ｈ），７．３９−７．４３（ｍ，１Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），７．６６−７．６９（ｍ，１Ｈ），８．０５（ｓ，１Ｈ），８．２２（ｓ，１Ｈ），８．５０−８．５５（ｍ，３Ｈ），９．６１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．８１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４個のプロトンは観測されなかった
【０２１４】
実施例２３：１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２１５】
【化３４】
2015505555.tif 000055
【０２１６】
実施例６に記載のとおりに、ステップ７において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに、実施例８１、ステップ１に記載する１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（２２５ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（黄褐色固体、２５ｍｇ、２４％）を調製した。
【０２１７】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．７４分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝質量なし［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：ｄ  １．１０−１．２０（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），１．４４−１．５４（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），１．６１−１．８０（ｂｒ  ｍ，２Ｈ），２．８７−２．９９（ｂｒ  ｍ，２Ｈ），３．０９−３．２３（ｂｒ  ｍ，２Ｈ），５．５１（ｓ，２Ｈ），７．１５（ｄ，２Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｄ，２Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ），９．８２（ｓ，１Ｈ），１１．７２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４個のプロトンは観測されなかった
【０２１８】
実施例２４：Ｎ−｛４−［（３Ｒ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド
【０２１９】
【化３５】
2015505555.tif 000056
【０２２０】
標題化合物を、スキーム２で概略を示したものと類似した経路によって調製した。
【０２２１】
実施例６、ステップ１およびステップ２に記載のとおりに、標題化合物を調製した。
【０２２２】
ステップ３：５−クロロ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン
−７８℃にて、４−フルオロ−１−［トリス（プロパン−２−イル）シリル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２ｇ、６．８４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８０ｍＬ）溶液を、ｓｅｃ−ブチルリチウム、１．４Ｍシクロヘキサン溶液（４．４８ｍＬ、６．２７ｍｍｏｌ）にて滴下処理した。反応液を−７８℃で０．５時間撹拌した。ヘキサクロロエタン（４．０５ｇ、１７．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を滴下し、反応液を−７８℃でさらに０．５時間撹拌した。反応液を、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えることによりクエンチした。混合物をイソヘキサン（×２）で抽出し、合わせた抽出物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。溶液を、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、黄色ゴム状物質となるまで濃縮した。
【０２２３】
粗物質をＴＨＦ（５０ｍＬ）に加えて撹拌し、ＲＴにて、テトラブチルアンモニウムフルオリド、１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液（６．８４ｍＬ、６．８４ｍｍｏｌ）を滴下した。反応液をＲＴでさらに１時間撹拌した後、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＡｃを加えた。有機層を分離し、水相をＥｔＯＡｃの別の一部で抽出した。合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮し、淡橙色固体を得た。粗残渣を、イソヘキサン〜４０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサンで溶出する自動フラッシュクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有する画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的生成物を白色固体として得た、１．０ｇ、８５．７％。
【０２２４】
ステップ４：５−クロロ−４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
これを、実施例６、ステップ５として記載した方法論を用いて、５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに５−クロロ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（１ｇ、５．８６ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を白色固体として単離した、１．１５ｇ、９１．１％。
【０２２５】
ステップ５：５−クロロ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミンの調製
これを、実施例６、ステップ６として記載した方法論を用いて、５−ブロモ−４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに５−クロロ−４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２０２．９ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を固体として単離した、１６７．４ｍｇ、９５．８％。
【０２２６】
ステップ６：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドの調製
５−クロロ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミン（１６７．４ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）を、Ｅｔ３Ｎ（０．２５ｍＬ、１．８０ｍｍｏｌ）および１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（２００．６ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）とともに、ＤＭＦ（９．０ｍＬ）に加えて撹拌した。ＨＡＴＵ（３４２．２ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴで２時間撹拌した。反応混合物を、Ｈ２Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液（４×６０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、褐色ゴム状物質を得た。これを、Ｅｔ２Ｏでトリチュレーションし、濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄した後、４０℃で真空乾燥させた。これにより標題化合物を灰白色固体として得た、２４０．５ｍｇ、７２．１％。
【０２２７】
ステップ７：標題化合物：Ｎ−｛４−［（３Ｒ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（１００．０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）のｎ−ＢｕＯＨ（５．４ｍＬ）溶液を、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２７０．８ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）で処理し、マイクロ波照射下で１６０℃で６時間加熱した。溶媒を真空除去し、残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶かした。ＴＦＡ（５ｍＬ）を加え、反応液をＲＴで１８時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、残渣を、ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）に溶かし、アンモニア水溶液（２×５０ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物をクリーム色固体として得た、５３．６ｍｇ、４４．１％。
【０２２８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７７分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４５０．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１６−１．２１（ｍ，１Ｈ），１．４５−１．４９（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．７４（ｍ，４Ｈ），２．９０−２．９４（ｍ，２Ｈ），３．１３−３．１６（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２６−７．３９（ｍ，５Ｈ），７．７３（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ），９．７３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６８（ｓ，１Ｈ）１個のプロトンは観測されなかった
【０２２９】
実施例２５：１−（４−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２３０】
【化３６】
2015505555.tif 000057
【０２３１】
実施例２４に記載のとおりに、ステップ６において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（４−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（２５６．３ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、２４ｍｇ、２８．４％）を調製した。
【０２３２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８２分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４６４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ）ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：    ，１．１８（ｍ，１Ｈ），１．５２（ｍ，２Ｈ），１．６８（ｍ，２Ｈ），２．３３（２，３Ｈ），２．９１（ｍ，２Ｈ），３．１４（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｍ，２Ｈ），５．３６（ｓ，２Ｈ），７．１９（ｍ，４Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），８．０３（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｓ，１Ｈ），９．７３（ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｓ，１Ｈ）
【０２３３】
実施例２６：１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２３４】
【化３７】
2015505555.tif 000058
【０２３５】
実施例２４に記載のとおりに、ステップ６において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（２６１ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、２４．２ｍｇ、２０．１％）を調製した。
【０２３６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７７分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４６８．５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１８−１．２３（ｍ，１Ｈ），１．４５−１．５０（ｍ，１Ｈ），１．６８−１．７０（ｍ，２Ｈ），２．９４−２．９９（ｍ，２Ｈ），３．１１−３．１３（ｍ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．１９−７．２３（ｍ，２Ｈ），７．３２−７．３６（ｍ，２Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｓ，１Ｈ），９．６９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）３個のプロトンは観測されなかった
【０２３７】
実施例２７：１−（４−クロロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２３８】
【化３８】
2015505555.tif 000059
【０２３９】
実施例２４に記載のとおりに、ステップ６において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（４−クロロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（２８０．５ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（クリーム色固体、２２．１ｍｇ、１８．４％）を調製した。
【０２４０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８４分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８４．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１５−１．２０（ｍ，１Ｈ），１．４５−１．４９（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．７２（ｍ，２Ｈ），２．９２−２．９６（ｍ，２Ｈ），３．１３−３．１６（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２９（ｄ，２Ｈ），７．４４（ｄ，２Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ），９．７２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）３個のプロトンは観測されなかった
【０２４１】
実施例２８：１−（４−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２４２】
【化３９】
2015505555.tif 000060
【０２４３】
実施例２４に記載のとおりに、ステップ６において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（４−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（２７５．３ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（白色固体、２４ｍｇ、１９．８％）を調製した。
【０２４４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７７分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８０［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１７（ｍ，１Ｈ），１．４９（ｍ，２Ｈ），１．７１（ｍ，２Ｈ），２．９１（ｍ，２Ｈ），３．１４（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｍ，２Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ），５．３３（ｓ，２Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ  ８．６８，２Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ  ８．６５，２Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），８．０１（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），９．７１（ｓ，１Ｈ），１１．６５（ｓ，１Ｈ）
【０２４５】
実施例２９：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピロリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２４６】
【化４０】
2015505555.tif 000061
【０２４７】
実施例２４に記載のとおりに、ステップ７において、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりに（Ｒ）−ピロリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５１．１ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）を用いて、標題化合物（白色固体、４２．５ｍｇ、６０．１％）を調製した。
【０２４８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７１分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４３６．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６６−１．７２（ｍ，１Ｈ），２．０９−２．１７（ｍ，１Ｈ），３．０２−３．０５（ｍ，１Ｈ），３．３７−３．４３（ｍ，１Ｈ），３．５１−３．５８（ｍ，２Ｈ），３．６３−３．６８（ｍ，１Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．３９（ｍ，５Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．１４（ｓ，１Ｈ），８．６６（ｓ，１Ｈ），９．７８（ｓ，１Ｈ），１１．６０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０２４９】
実施例３０：Ｎ−｛４−［（３Ｒ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−５−シクロプロピル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキサミド
【０２５０】
【化４１】
2015505555.tif 000062
【０２５１】
標題化合物を、実施例５３、ステップ１の生成物である、（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから調製した。
【０２５２】
（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２９ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）、シクロプロピルボロン酸（８．４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５．１ｍｇ、０．０１ｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（２７．６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（４．５ｍＬ）／Ｈ２ＯＨ２Ｏ（０．５ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れ、脱気した。内容物をマイクロ波照射下で１２０℃で１時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃとＨ２ＯＨ２Ｏとで分液し、その後、有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃの別の一部で抽出した。合わせた有機相を、飽和重炭酸水素ナトリウム水溶液、Ｈ２ＯＨ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、粗（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−シクロプロピル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを黄色油状物質として得た。
【０２５３】
この物質を、塩酸、１．２５Ｍ  ＭｅＯＨ溶液（５ｍＬ）に溶かし、マイクロ波照射を８０℃で１時間行った。揮発性物質を真空除去し、残渣を、最小量のＭｅＯＨに溶かし、ＭｅＯＨで湿らせておいたＳＣＸ２イオン交換カラムへ注いだ。カラムをＤＣＭ、ＭｅＯＨで洗浄し、標題化合物を、アンモニア、３．５Ｍ  ＭｅＯＨ溶液を用いて溶出した。この溶液を真空濃縮し、残渣を、ｐＨ４にて、次いで、ｐＨ９にて、分取ＨＰＬＣにより精製した。物質を、アセトンに溶かし、炭酸カリウムプラグを介して濾過した。濾液を真空濃縮し、標題化合物を固体として得た、１．５ｍｇ、６．８％。
【０２５４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．５６分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４５６［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ４  ＭｅＯＨ）：δ０．７２−１．０７（ｍ，４Ｈ），１．２０−２．１８（ｍ，５Ｈ），３．１６−３．２４（ｍ，１Ｈ），３．３７−３．５２（ｍ，３Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４２（ｍ，５Ｈ），７．６６（ｓ，１Ｈ），７．９６（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．３２（ｓ，１Ｈ）５個のプロトンは観測されなかった
【０２５５】
実施例３１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２５６】
【化４２】
2015505555.tif 000063
【０２５７】
標題化合物を、スキーム９で概略を示した経路によって調製した。実施例６に記載のとおりに、標題化合物を調製した。ステップ３において、求電子物質として、四臭化炭素の代わりに（２Ｒ，８ａＳ）−（＋）−（カンホリルスルホニル）オキサジリジン（２．５５ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）を用いた。通常の後処理、イソヘキサン、次いで、５％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサンで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製を行って、目的中間体、４−フルオロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−インドール−５−オールを淡黄色油状物質として単離した、０．９１ｇ、６６．５％。
【０２５８】
ステップ４：２，２−ジメチル−プロピオン酸４−フルオロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの調製
４−フルオロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−インドール−５−オール（１ｇ、３．２４ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（０．４５ｍＬ、３．２４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に、ピバロイルクロリド（０．８ｍＬ、６．５ｍｍｏｌ）を加え、ＲＴで３時間撹拌した。混合物を、ＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。粗物質を、フラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、標題化合物を透明な油状物質として得た０．５５ｇ、４３．２％。
【０２５９】
ステップ５：２，２−ジメチル−プロピオン酸４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの調製
０℃にて、２，２−ジメチル−プロピオン酸４−フルオロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステル（５５０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド、１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液（２．８ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ）を滴下した。添加後、撹拌をＲＴでさらに１．５時間続けた。ＥｔＯＡｃを加え、混合物をＨ２Ｏおよび飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機相を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮し、得られた粗物質を、３３％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を白色固体として得た、２７０ｍｇ、８１．６％。
【０２６０】
ステップ６：２，２−ジメチル−プロピオン酸４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの調製
これを、実施例６、ステップ５として記載した方法論を用いて、５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに２，２−ジメチル−プロピオン酸４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステル（２７０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を淡黄色固体として単離した、３２１ｍｇ、９９．９％。
【０２６１】
ステップ７：２，２−ジメチル−プロピオン酸４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの調製
２，２−ジメチル−プロピオン酸４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステル（９５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８１ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（８９ｕＬ、０．５１ｍｍｏｌ）および１−ブタノール（２ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、その後、マイクロ波照射下で１２０℃で２時間加熱した。混合物を真空濃縮し、残渣を、２５％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を黄色固体として得た、７３ｍｇ、４６．５％。
【０２６２】
ステップ８：２，２−ジメチル−プロピオン酸３−アミノ−４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの調製
２，２−ジメチル−プロピオン酸４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステル（７３ｍｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（０．２ｍＬ）をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に加えた混合物に、ラネーニッケル、５０％スラリーＨ２Ｏ（１０ｍｇ）溶液を加えた。反応液を水素雰囲気、ＲＴで１８時間撹拌した。触媒を濾過によって除去し、濾液を真空濃縮し、標題化合物を褐色固体として得た、６８ｍｇ、１００％。
【０２６３】
ステップ９：２，２−ジメチル−プロピオン酸３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの調製
ＲＴにて、２，２−ジメチル−プロピオン酸３−アミノ−４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステル（６８ｍｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）および１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（３２ｍｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に加えて撹拌した。これに、トリエチルアミン（０．０４ｍＬ、５．７４ｍｍｏｌ）、続いて、ＨＡＴＵ（６０ｍｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で５時間撹拌した。得られた溶液を真空濃縮し、得られた褐色ゴム状物質をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に溶かした。それを、Ｈ２Ｏ（２×６０ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質をフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、標題化合物を褐色固体として得た、６３ｍｇ、６４．８％。
【０２６４】
ステップ１０：（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
２，２−ジメチル−プロピオン酸３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステル（３８２ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ、のエタノール（１５ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ水溶液、４Ｎ（１．５ｍＬ、６ｍｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴで２時間撹拌した。溶媒を真空除去し、残渣をＨＣｌ、６ＮでｐＨ７に注意深く中和した。混合物をＥｔＯＡｃ（３×４０ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物を、飽和塩化ナトリウム水溶液（×３）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。粗物質を、６％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーで２回精製し、純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を淡褐色固体として得た、１１５ｍｇ、３４．９％。
【０２６５】
ステップ１１：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１５ｍｇ、０．２１６ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４ｍＬ）に加えて撹拌し、塩酸、４Ｎ  ＭｅＯＨ溶液（１ｍＬ）を加えた。混合物をＲＴで１８時間撹拌し、その後、水酸化アンモニウム溶液を注意深く加えることにより中和した（ｐＨ７）。ＤＣＭ（７０ｍＬ）を加え、混合物を、Ｈ２Ｏ（２×２０ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物を塩酸塩として得た、７５ｍｇ、８０．５％。
【０２６６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．０２分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４３２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間７．５分（長時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：  １．３５−１．４８（ｍ，２Ｈ），１．５９−１．６９（ｍ，１Ｈ），１．８４−１．９１（ｍ，１Ｈ），２．９９−３．１１（ｍ，２Ｈ），３．１７−３．３８（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２４−７．２８（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．４０（ｍ，３Ｈ），７．５０（ｄ，１Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ），７．９９（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），９．３１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），９．５２（ｓ，１Ｈ），１１．３９（ｓ，１Ｈ）１個のプロトンは観測されなかった
【０２６７】
実施例３２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２６８】
【化４３】
2015505555.tif 000064
【０２６９】
標題化合物を、実施例３１のステップ３の生成物である、４−フルオロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−インドール−５−オールから調製した。
【０２７０】
ステップ１：４−フルオロ−５−メトキシ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
０℃にて、４−フルオロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−インドール−５−オール（８０５ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（８９２ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液に、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（６８８ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）を滴下し、反応液を１０分間撹拌した。ＭｅＯＨ（１ｍＬ、２４．７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を０℃でさらに１時間、次いで、ＲＴで１時間撹拌した。溶液を、濃黄色ゴム状物質となるまで真空濃縮した。粗物質を、イソヘキサン〜３％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサンで溶出するカラムクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を淡黄色油状物質として得た、６８０ｍｇ、８０．８％。
【０２７１】
ステップ２：４−フルオロ−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
これを、実施例３１、ステップ５として記載した方法論を用いて、２，２−ジメチル−プロピオン酸４−フルオロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの代わりに４−フルオロ−５−メトキシ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（６３０ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を淡黄色固体として単離した、２８５ｍｇ、８７．８％。
【０２７２】
ステップ３：４−フルオロ−５−メトキシ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
これを、実施例６、ステップ５として記載した方法論を用いて、５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに４−フルオロ−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２８０ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を淡黄色固体として単離した、３２５ｍｇ、９１．３％。
【０２７３】
ステップ４：［（Ｒ）−１−（５−メトキシ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
これを、実施例３１、ステップ７として記載した方法論を用いて、２，２−ジメチル−プロピオン酸４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの代わりに４−フルオロ−５−メトキシ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２７０ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を黄色固体として単離した、３８５ｍｇ、７６．９％。
【０２７４】
ステップ５：［（Ｒ）−１−（３−アミノ−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
これを、実施例３１、ステップ８として記載した方法論を用いて、２，２−ジメチル−プロピオン酸４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの代わりに［（Ｒ）−１−（５−メトキシ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３０ｍｇ、０．３３２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を褐色油状物質として単離した、１２０ｍｇ、１００％。
【０２７５】
ステップ６：（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
これを、実施例３１、ステップ９として記載した方法論を用いて、２，２−ジメチル−プロピオン酸３−アミノ−４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの代わりに［（Ｒ）−１−（３−アミノ−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２０ｍｇ、０．３３２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を淡褐色固体として単離した、６８ｍｇ、３７．５％。
【０２７６】
ステップ７：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
０℃にて、（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３２０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）溶液に、塩酸、３．０Ｍ  ＭｅＯＨ溶液（２ｍＬ）を加えた。添加後、反応混合物を、５０℃で３時間撹拌し、その後、真空濃縮した。残渣を飽和炭酸ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）と２０％ＭｅＯＨ・ＤＣＭ溶液（１００ｍＬ）とで分液した。有機層を、分離し、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空除去し、粗物質をフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、標題化合物を灰白色固体として得た、１０５ｍｇ、７３％。
【０２７７】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．１４分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４４６［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間７．５分（長時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１５−１．２５（ｍ，１Ｈ），１．４０−１．５１（ｍ，１Ｈ），１．６７−１．７６（ｍ，２Ｈ），２．２５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），２．８２−２．９４（ｍ，２Ｈ），３．００−３．０８（ｍ，２Ｈ），３．１９−３．２５（ｍ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２５−７．４０（ｍ，５Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．０１（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），８．５４（ｓ，１Ｈ），９．７１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）．
【０２７８】
実施例３３：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２７９】
【化４４】
2015505555.tif 000065
【０２８０】
標題化合物を、実施例５３、ステップ１の生成物である、（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから調製した。
【０２８１】
（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４８．０ｍｇ、０．０８ｍＭｍｏｌ）、メチルボロン酸（８．７０ｍｇ、０．１５ｍＭｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（７．０ｍｇ、０．０１ｍＭｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（２２．１ｍｇ、０．１６ｍＭｍｏｌ）とＴＨＦ（４．５ｍＬ）／Ｈ２Ｏ（０．５ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れ、脱気した。内容物をマイクロ波照射下で１２０℃で２時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとで分液し、その後、有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃの別の一部で抽出した。合わせた有機相を、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去した。粗生成物を、イソヘキサン〜１５％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。
【０２８２】
これを、ＤＣＭ（５ｍＬ）に溶かし、トリフルオロ酢酸（０．０５ｍＬ、０．６ｍＭｍｏｌ）を滴下し、反応液をＲＴで２時間撹拌した。トリフルオロ酢酸（０．０５ｍＬ、０．６ｍＭｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴでさらに１時間撹拌した。揮発性物質を真空除去し、残渣をＤＣＭとＨ２Ｏとで分液した。有機層を、分離し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、揮発性物質を真空除去した。残渣を、ｐＨ９での分取ＨＰＬＣにより精製し、アセトンに溶かし、炭酸カリウムプラグを介して濾過した。濾液を真空濃縮し、標題化合物を固体として得た、４ｍｇ、１１．５％。
【０２８３】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．６１分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４３０［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ４  ＭｅＯＨ）δ１．１１−１．２３（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．６４（ｍ，１Ｈ），１．６９−１．７６（ｍ，１Ｈ），１．７８−１．８７（ｍ，１Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ），２．８３−２．９７（ｍ，２Ｈ），３．０８−３．２３（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．６２（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ）５個のプロトンは観測されなかった
【０２８４】
実施例３４：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ピペリジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２８５】
【化４５】
2015505555.tif 000066
【０２８６】
標題化合物を、スキーム３で概略を示した経路によって作製した。標題化合物を、実施例１に基づいて調製した。
【０２８７】
ステップ１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ホルミル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（１００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、４−ホルミルフェニルボロン酸（４１．６ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１０３．７ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１８．３ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２．１ｍＬ：０．２３ｍＬ）に加えて合わせ、十分に脱気した。反応混合物をマイクロ波照射下で１２０℃で１時間加熱した。反応液を、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄し、水相をＥｔＯＡｃで再度抽出し、合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、褐色ゴム状物質を得た。この粗物質を、ＤＣＭ〜７％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的生成物を淡黄色固体として得た、７６．５ｍｇ、７１．９％。
【０２８８】
ステップ２：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ピペリジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ホルミル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（７６．５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびピペリジン（０．０５ｍＬ、０．５４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６ｍＬ）に加えてＲＴで１０分間撹拌した。ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１９０．８ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴで１８時間撹拌した。反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加えることによりクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮し、黄色ゴム状物質を得た。
【０２８９】
粗物質を、ＤＣＭ〜１６％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、標題化合物をクリーム色固体として得た、３５．２ｍｇ、３９．５％。
【０２９０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９０分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９１．５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．３９−１．４１（ｍ，２Ｈ），１．４８−１．５２（ｍ，４Ｈ），２．３２−２．３５（ｍ，４Ｈ），３．４７（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２９−７．３４（ｍ，３Ｈ），７．３６−７．４１（ｍ，４Ｈ），７．６４（ｄ，２Ｈ），７．８２（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．４９（ｄ，１Ｈ），８．５３（ｄ，１Ｈ），９．９０（ｓ，１Ｈ），１１．４９（ｄ，１Ｈ）
【０２９１】
実施例３５：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−｛［（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミノ］−メチル｝−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２９２】
【化４６】
2015505555.tif 000067
【０２９３】
標題化合物を、実施例３４、ステップ１に記載のとおりに、ステップ２について記載したプロトコールに対する次の変更のとおりに調製した。
【０２９４】
ステップ２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−｛［（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミノ］−メチル｝−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
ｒｔｐにて、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ホルミル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解した。これに、（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミン（１５８．６ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（０．０５０ｍＬ）を加えた。その後、溶液に真空引きを行い、Ｎ２で充填し戻した。１０％パラジウム炭（２５．３ｍｇ）を加え、その後、反応液に真空引きを行い、もう一度Ｎ２で充填し戻し、次いで、真空引きを行い、Ｈ２で充填し戻した。その後、反応液をＨ２下、４５℃で１６時間撹拌した。反応混合物に、さらに１５当量のアミンおよびＡｃＯＨ  ５０ｕＬを加え、反応液をＨ２下、４５℃でさらに２４時間加熱した。触媒を、濾過によって分離し、濾過ケーキをＤＭＦのさらなる一部（１ｍＬ）で洗浄した。濾液を真空濃縮し、残渣を、最初に、ｐＨ４にて、次いで、ｐＨ９にて、分取ＨＰＬＣにより精製し、褐色固体として標題化合物、７．９ｍｇ、１３．５％を得た。
【０２９５】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９１分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ２．１９（ｓ，３Ｈ），２．５４（ｔ，２Ｈ），３．２４（ｓ，３Ｈ），３．４７（ｔ，２Ｈ），３．５５（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２７−７．３５（ｍ，７Ｈ），７．６６（ｍ，２Ｈ），７．８２（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｄ，１Ｈ），８．５３（ｄ，１Ｈ），９．９１（ｓ，１Ｈ），１１．４９（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０２９６】
実施例３６：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ピロリジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０２９７】
【化４７】
2015505555.tif 000068
【０２９８】
標題化合物を、実施例３４に記載のとおりに、ステップ２において、ピペリジンの代わりにピロリジン（２５．６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを、ｐＨ４での分取ＨＰＬＣによる精製を行って、ギ酸塩として単離した、２１ｍｇ、３７．１％。
【０２９９】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８７分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４７７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６９−１．７６（ｍ，４Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４５（ｍ，７Ｈ），７．６５−７．６８（ｍ，２Ｈ），７．８２（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．４９−８．５１（ｍ，１Ｈ），８．５３−８．５５（ｍ，１Ｈ），９．９２（ｓ，１Ｈ），１１．４９（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）６個のプロトンは観測されなかった
【０３００】
実施例３７：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［４−（４−フルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３０１】
【化４８】
2015505555.tif 000069
【０３０２】
標題化合物を、実施例３４に記載のとおりに、ステップ２において、ピペリジンの代わりに４−フルオロ−ピペリジン塩酸塩（９９．４ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを、ＤＣＭ〜８％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによる精製と、アセトニトリルでのトリチュレーションを行って、白色固体として単離した、２１ｍｇ、３４％。
【０３０３】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９３分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５０９［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６７−１．９２（ｍ，４Ｈ），２．３２（ｍ，２Ｈ），２．５２（ｍ，２Ｈ），３．５２（ｓ，２Ｈ），４．６１−４．７６（ｍ，１Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２９−７．４２（ｍ，７Ｈ），７．６６（ｍ，２Ｈ），７．８２（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７−８．５３（ｍ，３Ｈ），９．９０（ｓ，１Ｈ），１１．４９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０３０４】
実施例３８：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ジメチルアミノメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３０５】
【化４９】
2015505555.tif 000070
【０３０６】
標題化合物を、実施例３５に記載のとおりに、ステップ２において、（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミンの代わりにジメチルアミン、２．０Ｍ  ＴＨＦ溶液（１．０７ｍＬ、２．１４ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを、ｐＨ９での分取ＨＰＬＣによる精製を行って、０．５当量のギ酸塩を含有する黄色固体として単離した、４．４ｍｇ、１３．７％。
【０３０７】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８４分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４５１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ２．１８（ｓ，６Ｈ），３．４５（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４２（ｍ，７Ｈ），７．６７（ｍ，２Ｈ），７．８２（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），８．２２（ｓ，０．５Ｈ‐ギ酸塩）、８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｄ，１Ｈ），８．５４（ｄ，１Ｈ），９．９１（ｓ，１Ｈ），１１．４９（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０３０８】
実施例３９：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［４−（３−フルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３０９】
【化５０】
2015505555.tif 000071
【０３１０】
標題化合物を、実施例３４に記載のとおりに、ステップ２において、ピペリジンの代わりに３−フルオロ−ピペリジン塩酸塩（９９．４ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによる精製と、アセトニトリルでのトリチュレーションを行って、白色固体として単離した、１７ｍｇ、２８％。。
【０３１１】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９１分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５０９［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．４４−１．５６（ｍ，２Ｈ），１．６８−１．８７（ｍ，２Ｈ），２．２４−２．４４（ｍ，２Ｈ），２．６６−２．７５（ｍ，２Ｈ），３．５６（ｓ，２Ｈ），４．５５−４．７１（ｍ，１Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２９−７．４２（ｍ，７Ｈ），７．６６（ｍ，２Ｈ），７．８２（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７−８．５３（ｍ，３Ｈ），９．９０（ｓ，１Ｈ），１１．４９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０３１２】
実施例４０：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−メチルアミノメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３１３】
【化５１】
2015505555.tif 000072
【０３１４】
標題化合物を、実施例３５に記載のとおりに、ステップ２において、（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミンの代わりにメチルアミン、２．０Ｍ  ＴＨＦ溶液（１．０７ｍＬ、２．１４ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを、ｐＨ４での分取ＨＰＬＣによる精製を行って、ピンク色固体として単離した、４ｍｇ、１２．９％。
【０３１５】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８３分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４３７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ２．３７（ｓ，３Ｈ），３．８３（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．４８（ｍ，２Ｈ），７．６９（ｍ，２Ｈ），７．８２（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．３６（ｓ，１Ｈ），８．４９（ｓ，１Ｈ），８．５２（ｄ，１Ｈ），８．５５（ｄ，１Ｈ），９．９６（ｓ，１Ｈ），１１．５２（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０３１６】
実施例４１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−モルホリン−４−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３１７】
【化５２】
2015505555.tif 000073
【０３１８】
標題化合物を、実施例３４に記載のとおりに、ステップ２において、ピペリジンの代わりにモルホリン（５１．７ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを、ＤＣＭ−５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出するカラムクロマトグラフィーおよびｐＨ４での分取ＨＰＬＣによる精製を行って、灰白色固体として単離した、２８．４ｍｇ、４８．６％。
【０３１９】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８６分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ２．３８（ｍ，４Ｈ），３．５１（ｓ，２Ｈ），３．５９（ｍ，４Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４５（ｍ，７Ｈ），７．６７（ｍ，２Ｈ），７．８１（ｄ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．４９（ｄ，１Ｈ），８．５３（ｄ，１Ｈ），９．９１（ｓ，１Ｈ），１１．４９（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０３２０】
実施例４２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［４−（３，３−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３２１】
【化５３】
2015505555.tif 000074
【０３２２】
標題化合物を、実施例３４に記載のとおりに、ステップ２において、ピペリジンの代わりに３，３−ジフルオロピロリジン塩酸塩（１０２．２ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによる精製と、アセトニトリルでのトリチュレーションを行って、白色固体として単離した、２２ｍｇ、３６．２％。
【０３２３】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．１７分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５１３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ２．２６（ｍ，２Ｈ），２．７２（ｔ，２Ｈ），２．８８（ｔ，２Ｈ），３．６７（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２９−７．４４（ｍ，７Ｈ），７．６９（ｍ，２Ｈ），７．８２（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７−８．５３（ｍ，３Ｈ），９．９０（ｓ，１Ｈ），１１．５０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０３２４】
実施例４３：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ジメチルアミノメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３２５】
【化５４】
2015505555.tif 000075
【０３２６】
標題化合物を、スキーム４で概略を示した経路によって調製した。標題化合物を、実施例１に基づいて調製した。
【０３２７】
ステップ１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド  ９３．５ｇ、８．８３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７５ｍｌ）溶液に、テトラブチルアンモニウム硫酸水素塩０．４５ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、水酸化ナトリウム水溶液（５０％、ｗ／ｖ、７ｍＬ）およびトシルクロリド（２．０２ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、ＲＴで４時間撹拌し、その後、ＤＣＭで希釈した。それを、１Ｍ  ＨＣｌ水溶液、飽和重炭酸塩水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を、イソヘキサン〜７５％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製した。これにより目的化合物を褐色泡状物質として得た、３．５１ｇ、６１．４％。
【０３２８】
ステップ２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ホルミル−フェニル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（５９５ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）、３−ホルミルフェニルボロン酸（１９５ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４４８ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（３９．６ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ／１ｍＬ）に加えて合わせ、十分に脱気した。反応混合物をマイクロ波照射下で１２０℃で１時間加熱した。反応液を、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄し、水相をＥｔＯＡｃで再度抽出し、合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、褐色ゴム状物質を得た。この粗物質を、イソヘキサン〜５０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン〜ＥｔＯＡｃ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的生成物を黄色固体として得た、４２０ｍｇ、６７．５％。
【０３２９】
ステップ３：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ジメチルアミノメチル−フェニル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ホルミル−フェニル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（１００ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１ｍＬ）溶液に、４Ａモレキュラーシーブス、続いて、ジメチルアミン、２．０Ｍ  ＴＨＦ溶液（４ｍＬ、８ｍｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴで３時間撹拌した。ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（７２．１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴで１８時間撹拌した。無機物質を濾過によって分離し、濾液をＤＣＭで希釈した。溶液を、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出する自動カラムクロマトグラフィーを用いて精製した。純化合物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、目的化合物を無色ガラス状物質として得た、６１ｍｇ、５８．０％。
【０３３０】
ステップ４：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ジメチルアミノメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ジメチルアミノメチル−フェニル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（６１ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１ｍＬ）の混合物に溶解し、最小量のＨ２Ｏに溶かした水酸化カリウム（２６．６ｍｇ、０．４７４ｍｍｏｌ）を加えた。ＲＴで１８時間撹拌した後、反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、撹拌を続けた。１時間後、固体を濾過によって分離し、濾過ケーキを、Ｈ２Ｏで洗浄した後、４０℃で真空乾燥させた。これにより標題化合物を黄色固体として得た、１５ｍｇ、３３．２％。
【０３３１】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．９９分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４５１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ２．１８（ｓ，６Ｈ），３．４７（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２５−７．４６（ｍ，７Ｈ），７．５８−７．６３（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５０−８．５３（ｍ，２Ｈ），９．９５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０３３２】
実施例４４：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３−フルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３３３】
【化５５】
2015505555.tif 000076
【０３３４】
標題化合物を、実施例４３に記載のとおりに、ステップ３において、ピペリジンの代わりに３−フルオロピペリジン塩酸塩（４７．５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを、ｐＨ９での分取ＨＰＬＣによる精製を行って、黄色粉末として単離した、１１．７ｍｇ、１８．１％。
【０３３５】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．０４分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５０９［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．４０−１．６０（ｍ，２Ｈ），１．６７−１．９０（ｍ，２Ｈ），２．２４−２．３２（ｍ，１Ｈ），２．３６−２．４８（ｍ，２Ｈ），２．６６−２．７６（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｓ，２Ｈ），４．５４−４．７４（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４０（ｍ，６Ｈ），７．４５（ｄｄ，１Ｈ），７．５８−７．６２（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｄ，１Ｈ），８．５２（ｄ，１Ｈ），），９．９６（ｓ，１Ｈ），１１．５１（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０３３６】
実施例４５：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３，３−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３３７】
【化５６】
2015505555.tif 000077
【０３３８】
標題化合物を、実施例４３に記載のとおりに、ステップ３において、ピペリジンの代わりに３，３−ジフルオロピペリジン塩酸塩（１２４ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を用い、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリドの代わりに水素化シアノホウ素ナトリウム（１３．１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を用いて調製した。
【０３３９】
ステップ４：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３，３−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［３−（３，３−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（１００ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１３８ｍｇ、１ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（４ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、マイクロ波照射下で１００℃で３０分間加熱した。反応混合物を、Ｈ２Ｏで希釈し、ＤＣＭ／ＩＰＡ（３：１）混合物で抽出した。有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を最小量のＭｅＯＨに溶かし、その後、溶液が白濁し始めるまでＥｔ２Ｏを加えた。これを１時間静置し、その後、結晶を、濾別し、４０℃で真空乾燥させ、標題化合物を黄色結晶として得た、３０．３ｍｇ、３８．６％。
【０３４０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．１７分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５２７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６２−１．７１（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．９５（ｍ，２Ｈ），２．４２−２．４８（ｍ，２Ｈ），２．６１−２．７０（ｍ，２Ｈ），３．６７（ｓ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４０（ｍ，６Ｈ），７．４７（ｄｄ，１Ｈ），７．５９−７．６３（ｍ，２Ｈ），７．８３（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．４９（ｄ，１Ｈ），８．５２（ｄ，１Ｈ），９．９４（ｓ，１Ｈ），１１．５２（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０３４１】
実施例４６：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−アゼチジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３４２】
【化５７】
2015505555.tif 000078
【０３４３】
標題化合物を、実施例４５に記載のとおりに、ステップ３において、ピペリジンの代わりにアゼチジン（３８．７ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ステップ４において、生成物は、Ｈ２Ｏで希釈した後に沈殿し、それを、濾過によって集め、Ｈ２Ｏ、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、４０℃で真空乾燥させ、標題化合物を灰白色固体として得た、２６．７ｍｇ、２５．６％。
【０３４４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．００分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４６３．２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．９４−２．０２（ｍ，２Ｈ），３．１２−３．１８（ｍ，４Ｈ），３．６０（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２２−７．４６（ｍ，７Ｈ），７．５４−７．６０（ｍ，２Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４６−８．５３（ｍ，３Ｈ），９．８−１０．２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１−１２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０３４５】
実施例４７：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イルメチル）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３４６】
【化５８】
2015505555.tif 000079
【０３４７】
標題化合物を、実施例４５に記載のとおりに、ステップ３において、ピペリジンの代わりに３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩（１１４ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を用い、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリドの代わりに水素化シアノホウ素ナトリウム（１３．１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ステップ４において、生成物は、Ｈ２Ｏで希釈した後に沈殿し、それを、濾過によって集め、Ｈ２Ｏ、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、４０℃で真空乾燥させ、標題化合物をクリーム色粉末として得た、２３．４ｍｇ、３８．８％。
【０３４８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．１５分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９９．２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ３．６４（ｔ，４Ｈ），３．８１（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，６Ｈ），７．４５（ｄｄ，１Ｈ），７．５９−７．６５（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｄ，１Ｈ），８．５３（ｄ，１Ｈ），９．９５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０３４９】
実施例４８：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（５−ピロリジン−１−イルメチル−チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３５０】
【化５９】
2015505555.tif 000080
【０３５１】
標題化合物を、実施例４３に記載のとおりに、ステップ２において、３−ホルミルフェニルボロン酸の代わりに５−ホルミル−２−チオフェンボロン酸  ６７．１ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を用い、Ｋ２ＣＯ３の代わりに２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液  ７６．３ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を用い、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２の代わりにテトラキス（１９．６ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）を用い、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１０：１）の代わりに１，４−ジオキサン／ＴＨＦ（４ｍＬ：２ｍＬ）を用いて調製した。反応混合物をマイクロ波照射下で１５０℃で２時間加熱した。反応液を、３：１  ＤＣＭ／ＩＰＡで希釈し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を最小量のＤＣＭに溶解し、Ｅｔ２Ｏを加え、目的の、脱保護された、鈴木反応生成物（Ｓｕｚｕｋｉ  ｐｒｏｄｕｃｔ）、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（５−ホルミル−チオフェン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドを沈殿させた、６８ｍｇ、４３．８％。ステップ３において、ピロリジン（４５．３ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）をピペリジンの代わりに用い、水素化シアノホウ素ナトリウム（１５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）をナトリウムトリアセトキシボロヒドリドの代わりに用いた。ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィー、ｐＨ４での分取ＨＰＬＣによる精製、最後に、Ｅｔ２Ｏでのトリチュレーションを行って、標題化合物を白色固体として単離した、５ｍｇ、６．５％。
【０３５２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．９４分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６８−１．７６（ｍ，４Ｈ），３．７９（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．９５（ｄ，１Ｈ），７．２７−７．４１（ｍ，６Ｈ），７．８２（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４４（ｄ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｄ，１Ｈ），９．９４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４個のプロトンは観測されなかった
【０３５３】
実施例４９：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（５−ピロリジン−１−イルメチル−チオフェン−３−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３５４】
【化６０】
2015505555.tif 000081
【０３５５】
標題化合物を、実施例４３に記載のとおりに、ステップ２において、３−ホルミルフェニルボロン酸の代わりに５−ホルミル−３−チオフェンボロン酸（６７．１ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を用い、Ｋ２ＣＯ３の代わりに２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（７６．３ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を用い、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２の代わりにテトラキス（１９．６ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）を用い、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１０：１）の代わりに１，４−ジオキサン（４ｍＬ）を用いて調製した。反応混合物マイクロ波照射下で１５０℃で２０分間加熱した。反応液を、ＤＣＭで希釈し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を最小量のＤＣＭに溶解し、Ｅｔ２Ｏを加え、目的の鈴木反応生成物を褐色粉末として沈殿させた、１４２ｍｇ、６４．９％。ステップ３において、ピロリジン（３４．２ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）をピペリジンの代わりに用い、水素化シアノホウ素ナトリウム（１１．３ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をナトリウムトリアセトキシボロヒドリドの代わりに用いた。ステップ４において、炭酸カリウム（８３．２ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（４ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、マイクロ波照射下で１００℃で３０分間加熱した。反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、沈殿物を、濾過によって集め、Ｈ２Ｏ、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、４０℃で真空乾燥させ、標題化合物をクリーム色粉末として得た、１２．８ｍｇ、２２％。
【０３５６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．９４分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６８−１．７６（ｍ，４Ｈ），３．８２（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４２（ｍ，６Ｈ），７．６８（ｄ，１Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４６（ｄ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．５９（ｄ，１Ｈ），９．８３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１−１２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４個のプロトンは観測されなかった
【０３５７】
実施例５０：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［５−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イルメチル）−チオフェン−３−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３５８】
【化６１】
2015505555.tif 000082
【０３５９】
標題化合物を実施例４９に記載のとおりに、ステップ３において、ピロリジンの代わりに３，３−ジフルオロ−アゼチジン塩酸塩（９４．５ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを、ステップ４に記載した同じ手順を行って、クリーム色粉末として単離した、２７．５ｍｇ、５３．４％。
【０３６０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．１９分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５０５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ３．６７（ｔ，４Ｈ），３．９６（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．４４−７．４６（ｍ，１Ｈ），７．７２（ｄ，１Ｈ），７．７８（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），８．４５（ｄ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５９（ｄ，１Ｈ），９．８８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．４７（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０３６１】
実施例５１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ピロリジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３６２】
【化６２】
2015505555.tif 000083
【０３６３】
標題化合物を、実施例４３に記載のとおりに、ステップ３において、ジメチルアミン、２．０Ｍ  ＴＨＦ溶液の代わりにピロリジン（３０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ステップ４において、炭酸カリウム（７１．９ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（３ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、マイクロ波照射下で１００℃で３０分間加熱した。反応混合物を、半量となるまで真空濃縮した。Ｈ２Ｏを残渣に加え、沈殿物を、濾過によって集め、Ｈ２Ｏ、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、４０℃で真空乾燥させ、標題化合物をクリーム色粉末として得た、３８ｍｇ、７６．８％。
【０３６４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．０４分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４７７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６６−１．７４（ｍ，４Ｈ），２．４２−２．５０（ｍ，４Ｈ），３．６５（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４５（ｍ，７Ｈ），７．５６−７．６４（ｍ，２Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．４９−８．５２（ｍ，２Ｈ），９．８−１０．１２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．１２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０３６５】
実施例５２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３６６】
【化６３】
2015505555.tif 000084
【０３６７】
標題化合物を、スキーム２で概略を示したものと類似した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例６に記載のとおりに、ステップ３において、四臭化炭素の代わりにＮ−フルオロビス（フェニルスルホニル）アミン（１．０８ｇ、３．４２ｍｍｏｌ）を用いて調製し、目的中間体を白色固体として単離した、１３４ｍｇ、６３．４％。ステップ８からの粗物質を、ＤＣＭ-１６％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィー、次いで、ｐＨ４での分取ＨＰＬＣによって精製した。標題化合物を白色固体として単離した、３４．３ｍｇ、４６．６％。
【０３６８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．７０分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４３４．５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．３３−１．３８（ｍ，２Ｈ），１．６０−１．６３（ｍ，１Ｈ），１．７４−１．７６（ｍ，１Ｈ），２．９８−３．１４（ｍ，４Ｈ），３．４６−３．４８（ｍ，１Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２４−７．２６（ｍ，２Ｈ），７．３１−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．５２（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｄ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），９．７０（ｓ，１Ｈ），１１．７０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０３６９】
実施例５３：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−フェニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３７０】
【化６４】
2015505555.tif 000085
【０３７１】
標題化合物を、スキーム３で概略を示した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例６のステップ７の生成物である、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドから調製した。
【０３７２】
ステップ１：（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（０．４４５ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０８ｇ、５．３７ｍｍｏｌ）およびｎ−ブタノール（１５ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせた。内容物をマイクロ波照射下で１６０℃で６時間加熱し、その後、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈した。溶液をＨ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮し、褐色ゴム状物質を得た。この粗物質を、イソヘキサン−５０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン−ＥｔＯＡｃ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有することが分かった画分を、合わせ、真空濃縮し、目的化合物を黄色粉末として得た、４４３．２ｍｇ、６９．４％。
【０３７３】
ステップ２：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−フェニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製。
フェニルボロン酸（１７．９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４８．４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（３４．６ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（８．０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（４．５ｍＬ：０．５ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、十分に脱気した。反応混合物をマイクロ波照射下で１００℃で１時間加熱し、その後、それをＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃの別の一部で抽出した。合わせた有機相を、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、褐色ゴム状物質を得た。この物質を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶かし、氷浴中で冷却し、続いて、ＴＦＡ（０．０３ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）の滴下を行った。撹拌をＲＴで４時間続け、溶媒を真空除去した。粗物質を、ＤＣＭ−１５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、標題化合物を固体として得た、２２ｍｇ、５５％。
【０３７４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８２分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．３５−１．４５（ｍ，２Ｈ），１．５６−１．６７（ｍ，１Ｈ），２．２５−２．３７（ｍ，１Ｈ），２．７６−３．０４（ｍ，３Ｈ），３．１３−３．２２（ｍ，１Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），７．１８−７．８２（ｍ，１１Ｈ），７．８９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．０５（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），９．５３（ｓ，１Ｈ），１１．７４（ｓ，１Ｈ）
【０３７５】
実施例５４：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−シアノ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０３７６】
【化６５】
2015505555.tif 000086
【０３７７】
標題化合物を、実施例５３、ステップ１の生成物である、（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから調製した。
【０３７８】
（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２１ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、ジシアノ亜鉛（７．５ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（６．１ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（５ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、脱気した。内容物をマイクロ波照射下で１２０℃で１時間加熱した。ジシアノ亜鉛（２．１ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（２．０ｍｇ）のさらなる一部を加え、脱気した。内容物をマイクロ波照射下で１２０℃で２時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとで分液し、その後、有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃの別の一部で抽出した。合わせた有機相を、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、褐色ゴム状物質を得た。粗生成物を、イソヘキサン−５０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン−ＥｔＯＡｃ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−シアノ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。
【０３７９】
この物質を、塩酸、１．２５Ｍ  ＭｅＯＨ溶液（５ｍＬ）に溶かし、マイクロ波照射を８０℃で１時間行った。揮発性物質を真空除去し、残渣を、最小量のＭｅＯＨに溶かし、ＭｅＯＨで湿らせておいたＳＣＸ２イオン交換カラムへ注いだ。カラムをＤＣＭ、ＭｅＯＨで洗浄し、標題化合物を、アンモニア、３．５Ｍ  ＭｅＯＨ溶液を用いて溶出した。この溶液を真空濃縮し、標題化合物を白色固体として得た、３ｍｇ、１９．３％。
【０３８０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．６７分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４４１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ４  ＭｅＯＨ）：δ１．３５−１．９８（ｍ，４Ｈ），３．１８−３．２６（ｍ，１Ｈ），３．４７−３．５６（ｍ，１Ｈ），３．８４−３．９０（ｍ，１Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２４−７．４０（ｍ，５Ｈ），７．４３（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），８．３６（ｓ，１Ｈ）６個のプロトンは観測されなかった
【０３８１】
実施例５５：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３８２】
【化６６】
2015505555.tif 000087
【０３８３】
標題化合物を、スキーム５で概略を示した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例４３、ステップ１の生成物である、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドから調製した。
【０３８４】
ステップ１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェノール（４０８ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（８５０ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（６４０ｍｇ、４．６３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５６．５ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１２ｍＬ：１．２ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、十分に脱気した。反応混合物をマイクロ波照射下で１２０℃で１時間加熱し、その後、それをＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃの別の一部で抽出した。合わせた有機相を、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去した。粗生成物を、イソヘキサン〜５０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン〜ＥｔＯＡｃ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的化合物を黄色ガラス状物質として得た、５１８ｍｇ、５９．５％。
【０３８５】
ステップ２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［３−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ヒドロキシ−フェニル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（８０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）および４−（２−クロロエチル）モルホリン塩酸塩（３７．０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（３ｍＬ）に加えて合わせ、これに、Ｃｓ２ＣＯ３（１３８．７ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を、６０℃で３時間加熱し、その後、ＲＴまで放冷した。反応混合物を、Ｈ２Ｏで希釈し、ＤＣＭ（×２）で抽出した。合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液（×４）洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製し、目的化合物を黄色ガラス状物質として得た、５０ｍｇ、５２．１％。
【０３８６】
ステップ３：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［３−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（５０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）炭酸カリウム（５１．１ｍｇ、０３７ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（４ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、マイクロ波照射下で１００℃で３０分間加熱した。反応混合物を、真空で半量に減らし、Ｈ２Ｏで希釈した。混合物をＲＴで１時間撹拌し、沈殿物を、濾過によって集め、Ｈ２Ｏ、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、４０℃で真空乾燥させた。これにより標題化合物を淡黄色粉末として得た、２０ｍｇ、５１．８％。
【０３８７】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．０２分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５２３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ２．７２（ｔ，２Ｈ），３．５６−３．６１（ｍ，４Ｈ），４．１８（ｔ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．９２−６．９６（ｍ，１Ｈ），７．２４−７．４２（ｍ，８Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｄ，１Ｈ），８．５５（ｄ，１Ｈ），９．９０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．３−１１．７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４個のプロトンは観測されなかった．
【０３８８】
実施例５６：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３−ジメチルアミノ−２，２−ジメチル−プロポキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３８９】
【化６７】
2015505555.tif 000088
【０３９０】
（３−クロロ−２，２−ジメチル−プロピル）−ジメチル−アミン塩酸塩の調製
ＲＴにて、３−ジメチルアミノ−２，２−ジメチル−プロパン−１−オール（５ｇ、３８．１ｍｍｏｌ）のトルエン（１００ｍＬ）溶液に、ＤＭＦ（１滴）、続いて、塩化チオニル（５ｇ、４１．９ｍｍｏｌ）を滴下した。添加後、反応液を、３時間加熱還流し、その後、ＲＴまで放冷した。溶媒を真空除去し、トルエン（５０ｍＬ）を加え、真空除去した。このプロセスをさらに３回繰り返した。トルエン（５０ｍＬ）を加え、固体を、１０分間の音波処理により砕いた。固体を、濾過によって集め、トルエン、イソヘキサンでよく洗浄し、真空乾燥させた。これにより目的化合物を薄褐色固体として得た、６．６８ｇ、９４％。
【０３９１】
標題化合物を、実施例５５に記載のとおりに、ステップ２において、４−（２−クロロエチル）モルホリン塩酸塩の代わりに（３−クロロ−２，２−ジメチル−プロピル）−ジメチル−アミン塩酸塩（３０．１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を用いて調製し、ただし、加熱は６０℃で１８時間行った。それを、ステップ３に記載した同じ手順を行って、淡黄色粉末として単離した、６．５ｍｇ、３３．７％。
【０３９２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．１０分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５２３．２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．９８（ｓ，６Ｈ），２．２２（ｓ，６Ｈ），２．２６（ｓ，２Ｈ），３．７８（ｓ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．９２−６．９６（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．４２（ｍ，８Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５１−８．５６（ｍ，２Ｈ），９．９２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０３９３】
実施例５７：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（３−モルホリン−４−イル−プロポキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３９４】
【化６８】
2015505555.tif 000089
【０３９５】
標題化合物を、実施例５５に記載のとおりに、ステップ２において、４−（２−クロロエチル）モルホリンの代わりに４−（３−クロロプロピル）モルホリン（３１．９ｍｇ、０．１９５ｍｍｏｌ）を用いて調製し、ただし、加熱は６０℃で１８時間行った。それを、ステップ３に記載した同じ手順と、ｐＨ４での分取ＨＰＬＣによる追加の精製を行って、粉末として単離した、８ｍｇ、２０．２％。
【０３９６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．０６分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５３７．２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．９１（五重線（ｑｕｉｎｔｅｔ），２Ｈ），２．３３−２．４０（ｍ，４Ｈ），２．４４（ｔ，２Ｈ），３．５３−３．６０（ｍ，４Ｈ），４．１０（ｔ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ）６．９０−６．９６（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．４２（ｍ，８Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．５１−８．５６（ｍ，２Ｈ），９．９２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０３９７】
実施例５８：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（１−メチル−ピペリジン−３−イルメトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０３９８】
【化６９】
2015505555.tif 000090
【０３９９】
標題化合物を、実施例５５に記載のとおりに、ステップ２において、４−（２−クロロエチル）モルホリン塩酸塩の代わりに３−ブロモメチル−１−メチル−ピペリジン（４０．７ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を用いて調製し、ただし、加熱は７０℃で１８時間行った。それを、ステップ３に記載した同じ手順を行って、白色粉末として単離した、８．８ｍｇ、３８％。
【０４００】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．０１分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５２１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．０３−１．１４（ｍ，１Ｈ），１．４４−１．５６（ｍ，１Ｈ），１．６０−１．６８（ｍ，１Ｈ），１．７０−１．８４（ｍ，２Ｈ），１．８４−１．９４（ｍ，１Ｈ），１．９８−２．０６（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．５９−２．６６（ｍ，１Ｈ），２．８０−２．８６（ｍ，１Ｈ），３．８８−３．９８（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．９０−６．９６（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．４２（ｍ，８Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｓ，Ｈ），８．５３（ｄｄ，２Ｈ），９．９１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０４０１】
実施例５９：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（オキセタン−３−イルオキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０４０２】
【化７０】
2015505555.tif 000091
【０４０３】
標題化合物を、実施例５５に記載のとおりに、ステップ２において、４−（２−クロロエチル）モルホリン塩酸塩の代わりに３−ヨード−オキセタン（３５．９ｍｇ、０．１９５ｍｍｏｌ）を用いて調製し、ただし、加熱は６０℃で１８時間行った。それを、ステップ３に記載した同じ手順と、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによる追加の精製を行って、ベージュ色粉末として単離した、４ｍｇ、１０．９％。
【０４０４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．１７分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４６６．２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ４．５９（ｄｄ，２Ｈ），４．９７（ｄｄ，２Ｈ），５．３７−５．４３（ｍ，３Ｈ）６．７４−６．７８（ｍ，１Ｈ），７．１２−７．１４（ｍ，１Ｈ），７．２８−７．４４（ｍ，７Ｈ），７．８２（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｄ，１Ｈ），８．５４（ｄ，１Ｈ），９．９０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５２（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０４０５】
実施例６０：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０４０６】
【化７１】
2015505555.tif 000092
【０４０７】
標題化合物を、スキーム６で概略を示した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例４３のステップ１の生成物である、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドから調製した。
【０４０８】
ステップ１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（２１５ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（２１８．２ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）、酢酸ナトリウム（９６．１ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（２ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせた。内容物を、Ｎ２をスパージングすることにより脱気し、その後、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１４．３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を加え、混合物をマイクロ波照射下１４０℃で１時間加熱した。ビス（ピナコラト）ジボロン（７８．９ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を加え、内容物を、Ｎ２をスパージングすることにより脱気した。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（７．１ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を加え、反応液をマイクロ波照射下で１４０℃で３０分間加熱した。反応混合物を、ＤＣＭで希釈し、飽和塩化ナトリウム水溶液（×４）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去した。粗生成物を、イソヘキサン〜５０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン〜ＥｔＯＡｃ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製し、目的化合物を黄色ゴム状物質として得た、１８５ｍｇ、７９．３％。
【０４０９】
ステップ２：１−［２−（３−ブロモ−フェノキシ）−エチル］−ピロリジンの調製
３−ブロモフェノール（５ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）、１−（２−クロロエチル）ピロリジン塩酸塩（５．９ｇ、３４．７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１００ｍＬ）に加えて撹拌した。炭酸セシウム（１８．８３ｇ、５７．８ｍｍｏｌ）を加え、反応液を１００℃で４時間加熱した。反応液を冷却し、溶媒を真空除去した。残渣を、ＥｔＯＡｃに溶かし、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液（×４）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、５０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン、次いで、６７％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、目的化合物を褐色油状物質として得た１．２４ｇ、１５．９％。
【０４１０】
ステップ３：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［３−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
標題化合物を、実施例５５に記載のとおりに、ステップ１において、３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェノールの代わりに１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（７２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を用い、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの代わりに１−［２−（３−ブロモ−フェノキシ）−エチル］−ピロリジン６５．１ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を用いて調製した。粗生成物を、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製し、目的化合物をベージュ色ガラス状物質として得た、３８ｍｇ、４７．９％。
【０４１１】
ステップ４：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミドの調製
標題化合物を、実施例５５に記載のとおりに、ステップ３において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［３−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの代わりに１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［３−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（３８ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を用いて調製した。通常の後処理と、得られた固体のアセトニトリルでのトリチュレーションを行って、標題化合物をベージュ色粉末として単離した、８．６ｍｇ、２９．５％。
【０４１２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．９９分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５０７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６４−１．７３（ｍ，４Ｈ），２．８２（ｔ，２Ｈ），４．１５（ｔ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．９２−６．９６（ｍ，１Ｈ），７．２４−７．４２（ｍ，８Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｄ，１Ｈ），８．５５（ｄ，１Ｈ），９．９１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．３４−１１．６４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４個のプロトンは観測されなかった
【０４１３】
実施例６１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（３Ｒ，４Ｒ）−３−アミノ−４−シクロプロピル−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０４１４】
【化７２】
2015505555.tif 000093
【０４１５】
標題化合物を、スキーム２で概略を示した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例６のステップ７の生成物である、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドと、（（３Ｒ，４Ｒ）−４−シクロプロピル−ピペリジン−３−イル）−ホスホルアミド酸ジエチルエステルから調製した。
【０４１６】
（（３Ｒ，４Ｒ）−４−シクロプロピル−ピペリジン−３−イル）−ホスホルアミド酸ジエチルエステルの調製
ステップ１：３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルの調製
１，２，３，６−テトラヒドロピリジン（５．２４ｇ、６３ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（３０ｍＬ）に加えて撹拌し、０℃まで冷却した。Ｅｔ３Ｎ（９．６ｇ、９５ｍｍｏｌ）、続いて、クロロギ酸ベンジル（１１．３ｇ、６６．２ｍｍｏｌ）を滴下した。添加後、反応液を５℃で３０分間、次いで、ＲＴで２時間撹拌した。反応混合物を、飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、イソヘキサン〜１０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、標題化合物を無色油状物質として得た、９．８ｇ、７１．６％。
【０４１７】
ステップ２：７−オキサ−３−アザ−ビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボン酸ベンジルエステルの調製
０℃にて、７−オキサ−３−アザ−ビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボン酸ベンジルエステル（６．８６ｇ、３１．６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６５ｍＬ）溶液に、ｍ−ＣＰＢＡ（８．２８ｇ、４８ｍｍｏｌ）を分けて加えた。添加後、反応液を５℃で２０分間、次いで、ＲＴで４時間維持した。反応混合物をＥｔ２Ｏ（１５０ｍＬ）で希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨ溶液（２×５０ｍＬ）、飽和チオ硫酸ナトリウム溶液（２×５０ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機相を、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、イソヘキサン〜１０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的化合物を無色ゴム状物質として得た、５．８８ｇ、７９．８％。
【０４１８】
ステップ３：４−アジド−３−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルおよび３−アジド−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルの調製
７−オキサ−３−アザ−ビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボン酸ベンジルエステル（３．３５ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ  ５：１（４８ｍＬ）に溶解し、塩化アンモニウム（０．７７ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）、続いて、アジ化ナトリウム（１．８７ｇ、２８．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を６５℃で１８時間加熱した。ＭｅＯＨを真空除去し、残渣を、Ｈ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、Ｅｔ２Ｏ（×２）で抽出した。合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮し、目的の位置異性体混合物を無色油状物質として得た、３．８４ｇ、９６．９％。混合物は、３：１比（３：１）の４−アジド−３−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルと３−アジド−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルを含んでいた。
【０４１９】
ステップ４：４−アジド−３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルおよび３−アジド−４−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルの調製
４−アジド−３−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルおよび３−アジド−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（３．８４ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１８ｍＬ）に溶解し、ピリジン（２．９７ｇ、３７．５３ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃まで冷却し、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（５．５６ｇ、２９．２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７ｍＬ）溶液を滴下した。反応液をＲＴで６８時間撹拌した。ピリジン（１．９６ｇ、２４．８ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホニルクロリド（１ｇ、５．２５ｍｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴで２４時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、白色固体を得、そしてそれを、ＥｔＯＡｃに溶解し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、イソヘキサン〜５０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製し、目的の位置異性体混合物を無色油状物質として得た、５．６２ｇ、９４％。混合物は、ある比（７７：２３）の４−アジド−３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルと３−アジド−４−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルを含んでいた。
【０４２０】
ステップ５：４−アミノ−３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルおよび３−アミノ−４−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルの調製
０℃にて、硫酸銅（ＩＩ）五水和物（１．０４ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（３００ｍｇ、７．９３ｍｍｏｌ）を分けて加えた。５分後、４−アジド−３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルおよび３−アジド−４−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（３．５７ｇ、８．２９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）溶液を滴下し、続いて、水素化ホウ素ナトリウム（６００ｍｇ、１５．８６ｍｍｏｌ）を分けて加えた。添加後、撹拌を０℃で１時間続けた。反応混合物を、セライトプラグを介して濾過し、真空濃縮した。残渣を、ＤＣＭに溶かし、その後、Ｈ２Ｏ、飽和塩化アンモニウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。目的の位置異性体混合物を無色油状物質として得た、２．７７ｇ、８３．３％。
【０４２１】
ステップ６：４−（ジエトキシ−ホスホリルアミノ）−３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルおよび３−（ジエトキシ−ホスホリルアミノ）−４−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルの調製
４−アミノ−３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルおよび３−アミノ−４−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル  ２．７７ｇ、６．８４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２２ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（１．３８ｇ、１３．６８ｍｍｏｌ）を加え、溶液を０℃まで冷却した。クロロリン酸ジエチル（１．３ｇ、７．５２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を３０分かけてＲＴに到達させた。クロロリン酸ジエチル（０．２４ｇ  １．３８ｍｍｏｌ）を加え、ＲＴで３０分間撹拌した。反応液をＨ２Ｏで希釈し、有機相を、分離し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。ＥｔＯＡｃを残渣に加え、生じた結晶を、濾過によって集め、真空乾燥させ、目的化合物を得た、０．６０４ｇ、１６．４％。濾液を真空濃縮し、残渣を、ＥｔＯＡｃで溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製し、さらなる量の目的化合物をコルルレス（ｃｏｌｕｒｌｅｓｓ）油状物質として得た、２．７６ｇ、７４．８％。
【０４２２】
ステップ７：７−（ジエトキシ−ホスホリル）−３，７−ジアザ−ビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボン酸ベンジルエステルの調製
【０４２３】
０℃にて、４−（ジエトキシ−ホスホリルアミノ）−３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルおよび３−（ジエトキシ−ホスホリルアミノ）−４−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（２．６ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム、６０％鉱油中分散液（２８８．６ｍｇ、７．２１ｍｍｏｌ）を分けて加えた。反応液を、３０分間撹拌し、その後、Ｈ２Ｏで希釈した。混合物をＥｔＯＡｃ（×２）で抽出し、合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃで溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製し、目的化合物を無色油状物質として得た、１．３４ｇ、７６．５％。
【０４２４】
ステップ８：（３Ｒ，４Ｒ）−４−シクロプロピル−３−（ジエトキシ−ホスホリルアミノ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステルの調製
−３０℃にて、ヨウ化銅（Ｉ）（３８．８ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）懸濁液に、シクロプロピルマグネシウムブロミド、０．５Ｍ  ＴＨＦ溶液（１６．３ｍＬ、８．１５ｍｍｏｌ）を滴下した。これを、１５分間（ｆｏｒ  １５  ｍｉｎｕｔｅｓｓ）撹拌し、その後、−３０℃にて、７−（ジエトキシ−ホスホリル）−３，７−ジアザ−ビシクロ［４．１．０］ヘプタン−３−カルボン酸ベンジルエステル（７５０ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を滴下した。反応液を、２時間かけてＲＴまで昇温し、ＥｔＯＡｃおよびＨ２Ｏで希釈し、得られたエマルジョンを、セライトを介して濾過した。濾液を分液漏斗へ移した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。得られた黄色油状物質を、ＥｔＯＡｃで溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製し、目的化合物をゴム状物質として得、そしてそれを静置して固化した、３２１ｍｇ、３８．４％。
【０４２５】
ステップ９：（（３Ｒ，４Ｒ）−４−シクロプロピル−ピペリジン−３−イル）−ホスホルアミド酸ジエチルエステルの調製
（３Ｒ，４Ｒ）−４−シクロプロピル−３−（ジエトキシ−ホスホリルアミノ）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（３２１ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ２流下でパラジウム炭、１０％（２０ｍｇ）を加えた。その後、これに、真空引きを行い、窒素で３回充填し戻した後、最後に、真空引きを行い、水素雰囲気とした。反応混合物を水素下で５時間振盪した。反応液に、真空引きを行い、窒素で３回充填し戻した。混合物を、セライトパッドを介して濾過し、濾液を真空濃縮し、目的のアミン、（（３Ｒ，４Ｒ）−４−シクロプロピル−ピペリジン−３−イル）−ホスホルアミド酸ジエチルエステルを無色油状物質として得た、２３２ｍｇ。
【０４２６】
標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（３Ｒ，４Ｒ）−３−アミノ−４−シクロプロピル−ピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（９０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、（（３Ｒ，４Ｒ）−４−シクロプロピル−ピペリジン−３−イル）−ホスホルアミド酸ジエチルエステル（２３０ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）および１−ブタノール（５ｍＬ）を、封管に入れて合わせ、３１４０−ＥＳ−０８５において１６０℃で６０時間加熱した。反応混合物を真空濃縮し、残渣を、ＤＣＭ〜２５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製した。得られた物質を、ｐＨ４での分取ＨＰＬＣでさらに精製した。得られた物質を、ＤＣＭ／ＩＰＡ（３：１）に溶かし、飽和重炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を４０℃でｏ／ｎ真空乾燥させ、標題の目的化合物を黄金色粉末として得た、３．３ｍｇ、２．８４％。
【０４２７】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．０３分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５３４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．１６−０．０７（ｍ，１Ｈ），０．１５−０．２５（ｍ，２Ｈ），０．３０−０．４６（ｍ，３Ｈ），１．３１−１．４４（ｍ，１Ｈ），１．６４−１．７６（ｍ，１Ｈ），２．７１−２．８１（ｍ，１Ｈ），２．９２−３．０３（ｍ，１Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），７．２０−７．３８（ｍ，５Ｈ），７．６２（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｓ，１Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），９．６３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５６−１１．９４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）５個のプロトンは観測されなかった
【０４２８】
実施例６２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（２−フルオロ−４−ピロリジン−１−イルメチル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０４２９】
【化７３】
2015505555.tif 000094
【０４３０】
標題化合物を、スキーム４で概略を示したものと類似した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例４３に記載のとおりに、ステップ２において、３−ホルミルフェニルボロン酸の代わりに２−フルオロ−４−ホルミルボロン酸（１０９ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を用い、Ｋ２ＣＯ３の代わりに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２ｍＬ）を用い、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏの代わりにＭｅＣＮ（４ｍＬ）を用いて調製した。反応液をマイクロ波照射下で１３０℃で２時間加熱した。反応液を、ＤＣＭで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄し、水溶液をＤＣＭで再度抽出し、合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、褐色ゴム状物質を得た。この粗物質を、イソヘキサン〜９０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン-ＥｔＯＡｃ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的の鈴木反応生成物を黄色ガラス状物質として得た、１０８ｍｇ、５０％。
【０４３１】
ステップ３において、ジメチルアミン、２．０Ｍ  ＴＨＦ溶液の代わりにピロリジン９２５．２ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を用い、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリドの代わりに水素化シアノホウ素ナトリウム（１６．７ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を用いた。
トシル基の脱保護についての通常のプロトコールを行って、標題化合物を、白色粉末として単離した、１６．６ｍｇ、６８．１％。
【０４３２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．００分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６９−１．７５（ｍ，４Ｈ），２．４５−２．４９（ｍ，４Ｈ），３．６４（ｓ，２Ｈ），５．４５（ｓ，２Ｈ），７．２４−７．４０（ｍ，７Ｈ），７．５９−７．５５（ｍ，１Ｈ），７．８３（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．３７−８．３９（ｍ，１Ｈ），８．４０−８．４２（ｍ，１Ｈ），８．４６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），９．９３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０４３３】
実施例６３：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（３−ピロリジン−１−イル−フェニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０４３４】
【化７４】
2015505555.tif 000095
【０４３５】
標題化合物を、スキーム４で概略を示した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例４３に記載のとおりに、ステップ２において、３−ホルミルフェニルボロン酸の代わりに１−［３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル］ピロリジン（５９．６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。実施例４３、ステップ４として記載した後の脱保護により、標題化合物を褐色粉末として得た、５４．２ｍｇ、６２．４％。
【０４３６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．３３分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４６３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．９４−２．０２（ｍ，４Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），６．５２−６．５７（ｄｄ，１Ｈ），６．７７−６．８０（ｍ，１Ｈ），６．８７−６．９１（ｄ，１Ｈ）、７．２４−７．４１（ｍ，６Ｈ），７．８２（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４５−８．４８（ｍ，２Ｈ），８．５０−８．５２（ｄ，１Ｈ），９．９１（ｓ，１Ｈ），１１．４７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４個のプロトンは観測されなかった
【０４３７】
実施例６４：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０４３８】
【化７５】
2015505555.tif 000096
【０４３９】
標題化合物を、スキーム４で概略を示した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例４３に記載のとおりに、ステップ２において、３−ホルミルフェニルボロン酸の代わりに１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（４１．６ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を用い、炭酸ナトリウム水溶液、２Ｍ（０．１８ｍＬ、０．３６ｍｍｏｌ）を用い、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２の代わりにテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１０．５ｍｇ、９．１μＭｏｌ）を用い、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１０：１）の代わりに１，４−ジオキサン（２ｍＬ）を用い、マイクロ波照射下で１５０℃で２０分間加熱して調製した。実施例４３、ステップ４として記載した後の脱保護により、標題化合物を黄色粉末として得た、３２．６ｍｇ、５２．６％。
【０４４０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．０１分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝３９８［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ３．８８（ｓ，３Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２７−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．１２（ｓ，１Ｈ），８．２７−８．３０（ｄ，１Ｈ），８．４５−８．４８（ｍ，２Ｈ），９．８５（ｓ，１Ｈ），１１．４０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０４４１】
実施例６５：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４４２】
【化７６】
2015505555.tif 000097
【０４４３】
標題化合物を、実施例１に基づいて調製した。
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（７５ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、ピリジン−４−ボロン酸（３４．９ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４、２Ｍ水溶液（０．１９ｍＬ、０．３８ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１３．３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン（２ｍＬ）に加えて合わせ、十分に脱気した。反応混合物を、マイクロ波照射下で１２０℃で１時間加熱し、その後、それを、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液とＥｔＯＡｃとで分液した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃの別の一部で抽出した。合わせた有機相を、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去した。この粗物質を、ＤＣＭ、次いで、４％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、その後、７％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、目的生成物をベージュ色固体として得た、３０．９ｍｇ、４１．４％。
【０４４４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８０分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝３９５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２９−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．７８（ｍ，２Ｈ），７．８５（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．６３−８．８０（ｍ，４Ｈ），９．９６（ｓ，１Ｈ），１１．６７（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０４４５】
実施例６６：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ピリジン−３−イル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４４６】
【化７７】
2015505555.tif 000098
【０４４７】
標題化合物を、実施例１に基づいて、実施例６５と全く同じプロトコールを用い、ピリジン−４−ボロン酸の代わりにピリジン−３−ボロン酸（７５ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物をベージュ色固体として単離した、２４．８ｍｇ、３３．２％。
【０４４８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９３分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝３９５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．４９−７．５４（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），８．１１−８．１５（ｍ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．５５−８．６０（ｍ，３Ｈ），８．９４（ｄｄ，１Ｈ），９．９１（ｓ，１Ｈ），１１．５９（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）
【０４４９】
実施例６７：１−（３−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４５０】
【化７８】
2015505555.tif 000099
【０４５１】
標題化合物を、スキーム１で概略を示した経路によって、実施例１として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（３−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１２０．８ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を淡褐色固体として単離した、７３．６ｍｇ、３６．６％。
【０４５２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．３５分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４２６．３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ３．７５（ｓ，３Ｈ），５．３７（ｓ，２Ｈ），６．８３−６．９０（ｍ，３Ｈ），７．２９（ｔ，１Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｄ，１Ｈ），８．４４（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｄ，１Ｈ），９．８８（ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｓ，１Ｈ）
【０４５３】
実施例６８：１−（２−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４５４】
【化７９】
2015505555.tif 000100
【０４５５】
標題化合物を、スキーム１で概略を示した経路によって、実施例１として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに、実施例１７に記載した１−（−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸と同様に調製した１−（２−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１１４．５ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ステップ３において、生成物は、反応混合物をＨ２Ｏで希釈した後に沈殿した。それを、濾過によって分離し、Ｈ２ＯおよびＥｔ２Ｏでよく洗浄し、その後、４０℃で真空乾燥させ、標題化合物を淡橙色固体として得た、９３．１ｍｇ、４７．７％。
【０４５６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．２７分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４１４．３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．４７（ｓ，２Ｈ），７．２０−７．３２（ｍ，３Ｈ），７．４１（ｑ，１Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｄ，１Ｈ），８．４４（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｄ，１Ｈ），９．８９（ｓ，１Ｈ），１１．７０（ｓ，１Ｈ）
【０４５７】
実施例６９：１−（２−シアノ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４５８】
【化８０】
2015505555.tif 000101
【０４５９】
標題化合物を、スキーム１で概略を示した経路によって、実施例１として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに、実施例１７に記載した１−（−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸と同様に調製した１−（２−シアノ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１１８．２ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ステップ３において、通常の水系後処理の後に、粗物質を、Ｅｔ２Ｏにてトリチュレーションし、濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、４０℃で真空乾燥させ、標題化合物を固体として得た、５４．８ｍｇ、２７．７％。
【０４６０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．２０分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４２３．３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），（ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．６２（ｓ，２Ｈ），７．３６（ｄ，１Ｈ），７．５６（ｔｄ，１Ｈ），７．７３（ｔｄ，１Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），７．９１（ｄｄ，１Ｈ），８．１２（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｄ，１Ｈ），８．４８（ｄ，１Ｈ），８．５０（ｓ，１Ｈ），９．９３（ｓ，１Ｈ），１１．７１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０４６１】
実施例７０：１−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４６２】
【化８１】
2015505555.tif 000102
【０４６３】
標題化合物を、スキーム１で概略を示した経路によって、実施例１として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸カリウム（６１．２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ステップ３において、通常の水系後処理の後に、粗物質を、ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、残渣を、ｐＨ９での分取ＨＰＬＣによってさらに精製し、標題化合物を白色固体として得た、１５．４ｍｇ、１２．５％。
【０４６４】
１−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸カリウムの調製。
ステップ１：１−メタンスルホニル−１Ｈ−ピロール−２−カルバルデヒドの調製
水素化ナトリウム、６０％鉱油中分散液（４８４ｍｇ、１２．１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（６０ｍＬ）の懸濁液に、ピロールカルボキシアルデヒド（１．０ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を滴下し、混合物をＲＴで１５分間撹拌した。メタンスルホニルクロリド（１．６９ｇ、１４．７２ｍｍｏｌ）を滴下し、反応液をＲＴでさらに１時間撹拌した。反応液を、Ｈ２Ｏで希釈し、減圧下で濃縮した。残留水相をＤＣＭ（×５）で抽出し、その後、合わせた抽出物を、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、Ｈ２Ｏおよび飽和塩化ナトリウム水溶液で続けて洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、油状物質を得、そしてそれを、イソヘキサン〜３０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（勾配）で溶出する自動フラッシュクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去し、標題化合物を無色油状物質として得た、１．３ｇ、７１．４％。
【０４６５】
ステップ２：（１−メタンスルホニル−１Ｈ−ピロール−２−イル）−ＭｅＯＨの調製
０℃にて、１−メタンスルホニル−１Ｈ−ピロール−２−カルバルデヒド（１．３ｇ、７．５１ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１８０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（６３ｍｌ）の混合物に加えて撹拌した。水素化ホウ素ナトリウム（４２８ｍｇ、１１．３ｍｍｏｌ）を分けて加え、反応混合物を０℃で１．５時間撹拌しておいた。反応混合物を、ＤＣＭ（８０ｍＬ）で希釈し、シュウ酸、５％水溶液（２００ｍＬ）を滴下し、撹拌を０℃でさらに１５分間続けた後、反応混合物をＲＴまで昇温させた。有機層を、分離し、Ｈ２Ｏ（２×２５０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、標題化合物をピンク色結晶として得た、０．８６５ｇ、６５．８％。
【０４６６】
ステップ３：１−（１−メタンスルホニル−１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステルの調製
（１−メタンスルホニル−１Ｈ−ピロール−２−イル）−ＭｅＯＨ（８６５ｍｇ、４．９４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２７ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（１．２９ｍＬ、７．４１ｍｍｏｌ）を加え、０℃まで冷却した。メタンスルホニルクロリド（０．５７ｍＬ、７．４１ｍｍｏｌ）を滴下し、反応液を０℃で２０分間およびＲＴで３０分間撹拌した。反応混合物を、ＤＣＭで希釈し、氷冷Ｈ２Ｏ、冷１０％塩酸水溶液、続いて、飽和重炭酸水素ナトリウム水溶液で続けて洗浄した。有機相を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し（低温）、２−クロロメチル−１−メタンスルホニル−１Ｈ−ピロールをオレンジ色油状物質として得、その化合物は静置により重合し得るため、それをそのまま用いた。１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（７０３ｍｇ、５．０２ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２．７８ｇ、２０．１ｍｍｏｌ）のアセトン（１０ｍＬ）懸濁液に、２−クロロメチル−１−メタンスルホニル−１Ｈ−ピロール（１．０２ｇ、５．２７ｍｍｏｌ）のアセトン（１１ｍＬ）溶液を加えた。撹拌をＲＴで７０時間続け、その後、反応混合物を濾過し、濾過ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣を、ＥｔＯＡｃに溶かし、Ｈ２Ｏで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、減圧下で濃縮した。粗物質を、イソヘキサン〜ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン〜ＥｔＯＡｃ（勾配）で溶出する自動フラッシュクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、目的化合物を、オレンジ色油状物質として得、そしてそれを静置して固化した、４４２ｍｇ、２９．６％。生成物および不純物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、残渣をＳＣＸ−２イオン交換カラムによってさらに精製し、灰白色固体としてさらに３５９ｍｇ、２４．１％の標題化合物を得た。
【０４６７】
ステップ４：１−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸カリウムの調製
１−（１−メタンスルホニル−１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（８０１ｍｇ、２．６９ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ：ＴＨＦ（１：１、２０ｍＬ）混合物に溶解し、水酸化カリウム（３０１．８ｍｇ、５．３８ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（２ｍＬ）溶液を加えた。その後、反応混合物を、４時間還流し、冷却し、真空濃縮した。残渣をデシケーター内で６０℃で１８時間乾燥させ、標題化合物を固体として得た、８６０ｍｇ、９３．５％。それは、回収、および反応化学量論によって大部分は標題の目的化合物であり２当量のＫＯＨが存在すると推定され、それを、さらなる精製を行わずに用いた。
【０４６８】
ステップ５：標題化合物：１−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドの調製
５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミン（１０１．８ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）および１−（１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸カリウム（６１．２ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（４ｍＬ）に加えて撹拌し、トリエチルアミン（９７ｍｇ、０．１３ｍｌ、０．９６ｍｍｏｌ）、続いて、ＨＡＴＵ（１８３ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、ＲＴで７２時間撹拌しておき、ＥｔＯＡｃで希釈した。有機相を分離し、水相をＥｔＯＡｃのさらなる一部で抽出した。合わせた抽出物を、飽和塩化ナトリウム水溶液（×３）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動フラッシュクロマトグラフィー精製した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、残渣を、ｐＨ９での分取ＨＰＬＣでさらに精製し、標題化合物を白色固体として得た、１５．４ｍｇ、２２．３％。
【０４６９】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．０９分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝３８６．０［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．２８（ｓ，２Ｈ），６．００（ｍ，１Ｈ），６．１３（ｓ，１Ｈ），６．７５（ｍ，１Ｈ），７．８３（ｄ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．２７（ｄ，１Ｈ），８．４７（ｄ，１Ｈ），９．８８（ｓ，１Ｈ），１１．０３（ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｓ，１Ｈ）
【０４７０】
実施例７１：１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４７１】
【化８２】
2015505555.tif 000103
【０４７２】
標題化合物を、スキーム１で概略を示した経路によって、実施例１として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに、実施例１７に記載した、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（４５．７ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を褐色固体として単離した、２６．７ｍｇ、３４．２％。
【０４７３】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．２６分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４１６．３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．４０（ｓ，２Ｈ），７．１９−７．２３（ｍ，２Ｈ），７．３５−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｄ，１Ｈ），８．４５（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｄ，１Ｈ），９．８８（ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０４７４】
実施例７２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４７５】
【化８３】
2015505555.tif 000104
【０４７６】
標題化合物を、スキーム１で概略を示したものと類似した経路によって、実施例１として記載した方法論を用いて、ステップ１において、５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（１．０６ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ステップ２において、５−ブロモ−４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに５−メチル−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（１．４２ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）を用いて、実施例６、ステップ６の方法論を用いた。５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミンの代わりに５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミン（５０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を用いて、実施例１、ステップ３として記載したプロトコールを行って、標題化合物をクリーム色固体として単離した、２２．７ｍｇ、２０．２％。
【０４７７】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．０４分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝３３２．４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ２．３８（ｓ，３Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），７．２９−７．４０（ｍ，５Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ），７．９７−７．９８（ｍ，１Ｈ），８．０６−８．０８（ｍ，２Ｈ），８．４４（ｓ，１Ｈ），９．８０（ｓ，１Ｈ），１１．２５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０４７８】
実施例７３：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４７９】
【化８４】
2015505555.tif 000105
【０４８０】
標題化合物を、スキーム１で概略を示したものと類似した経路によって、実施例１として、ステップ１およびステップ２に記載した方法論を用いて、ステップ１において、５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（４００ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。
【０４８１】
ステップ３：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドの調製
５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミン（３７．４ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（９５．１ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）およびアセトニトリル（５ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせた。１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（４９．６ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０９ｍＬ、０．５０ｍｍｏｌ）を加え、内容物を脱気した。その後、反応液をマイクロ波照射下で８０℃で１時間加熱した。反応液をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとで分液し、有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃのさらなる一部で抽出し、合わせた抽出物を、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、３０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン〜１００％ＥｔＯＡｃで溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純物質を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、目的化合物を褐色粉末として得た、２４ｍｇ、３０．６％。
【０４８２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．１９分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝３５２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２９−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．３５（ｓ，１Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），９．８９（ｓ，１Ｈ），１１．７０（ｓ，１Ｈ）
【０４８３】
実施例７４：１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４８４】
【化８５】
2015505555.tif 000106
【０４８５】
標題化合物を、スキーム１で概略を示したものと類似した経路によって、実施例７３として、ステップ１に記載した方法論を用いて調製した。
【０４８６】
ステップ２：５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミンの調製
５℃にて、５−クロロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（１．５ｇ、７．５９ｍｍｏｌ）の６Ｎ  ＨＣｌ（６０ｍＬ）混合物に、塩化スズ（ＩＩ）二水和物（８．５７ｇ、３８ｍｍｏｌ）を分けて加え、反応液をＲＴで２時間撹拌した。反応混合物を、冷却し、Ｈ２Ｏ（３００ｍＬ）で希釈し、その後、５０％ＮａＯＨ水溶液を注意深く加えることによりｐＨ８に塩基性化した。その後、混合物をＤＣＭ／ＩＰＡ（３：１、４×１５０ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、標題化合物を緑色固体として得た、１．２５ｇ、９８．２％。
【０４８７】
ステップ３：標題化合物：１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドの調製
５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミン（４０．０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を、Ｅｔ３Ｎ（０．０７ｍＬ、０．４８ｍｍｏｌ）および実施例１７において調製した１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５７．８ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）とともに、ＤＭＦ（３．０ｍＬ）に加えて撹拌した。ＨＡＴＵ（９１．３ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴで２時間撹拌した。反応混合物を、Ｈ２Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液（４×６０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去した。粗物質を、ＤＣＭ〜５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を淡褐色固体として得た、５８．７ｍｇ、６６．５％。
【０４８８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．２３分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝３７０．３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ５．４０（ｓ，２Ｈ），７．１９−７．２３（ｍ，２Ｈ），７．３５−７．３９（ｍ，２Ｈ），７．８５（ｄ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．２１（ｄ，１Ｈ），８．３３（ｄ，１Ｈ），８．４４（ｓ，１Ｈ），９．８８（ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０４８９】
実施例７５：１−（３−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド
【０４９０】
【化８６】
2015505555.tif 000107
【０４９１】
標題化合物を、スキーム１で概略を示したものと類似した経路によって、実施例７４として記載した方法論を用いて、ステップ３において、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（３−メトキシ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（７２．８ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ＥｔＯＡｃでのトリチュレーションを行って、標題化合物を白色固体として単離した、２４ｍｇ、２１．１％。
【０４９２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝２．４２分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝３８２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ３．７５（ｓ，３Ｈ），５．３８（ｓ，２Ｈ），６．８８（ｍ，３Ｈ），７．３０（ｔ，７．８３，１Ｈ），７．８７（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．３５（ｓ，１Ｈ），８．４４（ｓ，１Ｈ），９．８８（ｓ，１Ｈ），１１．７１（ｓ，１Ｈ）
【０４９３】
実施例７６：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０４９４】
【化８７】
2015505555.tif 000108
【０４９５】
標題化合物を、スキーム６で概略を示したものと類似した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例４３のステップ１の生成物である、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドから調製した。
【０４９６】
ステップ１：（Ｓ）−１−メチル−２−［３−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェノキシメチル］−ピロリジンの調製
０℃にて、４−３−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェノール（１５０ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−（−）−１−メチル−２−ピロリジンＭｅＯＨ（１１７．８ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２６８．２ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液に、ＤＩＡＤ（２０６．７ｍｇ、２ｍＬ、１．０２ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた溶液を室温で３６時間撹拌し、反応混合物を真空濃縮した。粗物質を、イソヘキサン〜５０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。標題化合物を白色固体として単離した、２２０ｍｇ、１００％。
【０４９７】
ステップ２：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（１１５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−１−メチル−２−［３−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェノキシメチル］−ピロリジン（９９．４ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（８６．６ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（４ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．４ｍＬ）を、マイクロ波バイアル／に入れて合わせた。混合物を、脱気し、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（７．６４ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を加え、反応液をマイクロ波照射下で１３０℃で１時間加熱した。反応混合物を、ＤＣＭで希釈し、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機相を、分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製した。これにより、２種の化合物、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［３−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドおよび１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［３−（１−メチル−ピペリジン−３−イルオキシ）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド、の混合物を褐色ガラス状物質として得た。これを、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶かし、マイクロ波バイアルへ移した。Ｋ２ＣＯ３（１００．９ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を加え、内容物をマイクロ波照射下で８０℃で３０分間加熱した。反応混合物を、４分の１の量となるまで真空濃縮し、Ｈ２Ｏで希釈した。静置により沈殿物が生じ、これを、濾別し、Ｈ２Ｏ、次いで、Ｅｔ２Ｏで洗浄した。粉末を、乾燥させ、ＤＣＭ〜１９％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物を白色粉末として得た、７ｍｇ、６．６％。同じカラムから、実施例７７（下記）、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（１−メチル−ピペリジン−３−イルオキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミドも、固体として単離した、８ｍｇ、７．６％。
【０４９８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．００分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５０７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６２−１．８１（ｍ，３Ｈ），１．９６−２．０８（ｍ，１Ｈ），２．９６−３．１２（ｍ，１Ｈ），３．９−４．１５（ｍ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），６．９３−６．９８（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．４２（ｍ，８Ｈ），７．８２−７．８５（ｍ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．５１−８．５７（ｍ，２Ｈ），９．９２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）５個のプロトンは観測されなかった
【０４９９】
実施例７７：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［３−（１−メチル−ピペリジン−３−イルオキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０５００】
【化８８】
2015505555.tif 000109
【０５０１】
標題化合物を、実施例７６、ステップ２に記載した粗反応混合物から固体として単離した、８ｍｇ、７．６％。
【０５０２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．００分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５０７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．３１−１．４２（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．６２（ｓ，１Ｈ），１．６７−１．７６（ｍ，１Ｈ），１．９５−２．１０（ｍ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．８６−２．９２（ｍ，１Ｈ），４．４６−４．５４（ｍ，１Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），６．９４−６．９８（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．４１（ｍ，８Ｈ），７．８２−７．８４（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．５１−８．５５（ｍ，２Ｈ），９．９１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．５０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）１個のプロトンは観測されなかった
【０５０３】
実施例７８：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［４−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０５０４】
【化８９】
2015505555.tif 000110
【０５０５】
標題化合物を、実施例４３のステップ１の生成物である、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドから調製した。
【０５０６】
ステップ１：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４−ヒドロキシ−フェニル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（１．０ｇ、１．８２ｍｍｏｌ）、４−ヒドロキシフェニルボロン酸（０．３ｇ、２．１８ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（０．７５ｇ、５．４５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１４ｍＬ：１．４ｍＬ）に加えて合わせ、十分に脱気した。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．０６７ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、再び脱気した後、マイクロ波照射下で１２０℃で１時間加熱した。４−ヒドロキシフェニルボロン酸（０．１５ｇ、１．０９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、再び脱気した後、マイクロ波照射下で１２０℃で２時間および１４０℃で１時間加熱した。反応液を、飽和重炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去した。粗物質を、ＤＣＭ〜５０％ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ（勾配）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製した。生成物を含有することが分かった画分を合わせ、溶媒を真空除去した。残渣を、最小量のエタノールを用いてトリチュレーションし、目的化合物を白色固体として得た、０．３３ｇ、３２．６％。
【０５０７】
ステップ２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［４−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−ブロモ−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（１００ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を、Ｋ２ＣＯ３（７３．６ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）とともに、ＤＭＦ（４ｍＬ）に加えて撹拌した。これに、（３−クロロ−プロピル）−ジメチルアミン塩酸塩（３６．５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を加え、その後、反応液を５０℃で１６時間加熱した。その後、反応液を、冷却し、真空濃縮し、残渣を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）とで分液した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃの別の一部（４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。粗物質を、ＤＣＭ、次いで、１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、最後に、６％アンモニア、７Ｎ  ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ溶液で溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を黄色固体として得た、６７ｍｇ、５８．２％。
【０５０８】
ステップ３：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［４−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−フェニル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［４−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−フェニル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（６７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（７１．４ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（２ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、１００℃で３０分間加熱した。混合物を真空濃縮し、粗物質を、ｐＨ９にて、次いで、ｐＨ４にて、分取ＨＰＬＣにより精製し、標題化合物を淡橙色固体として得た、０．８ｍｇ、１．６％。
【０５０９】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．９８分（２５４ｎｍ），ｍ／ｚ＝４９５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ／ネガティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．８７（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｓ，６Ｈ），２．３７（ｔ，２Ｈ），４．０４（ｔ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．０４（ｍ，２Ｈ），７．２７−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．６２（ｍ，２Ｈ），７．８０（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．４３−８．５０（ｍ，３Ｈ），９．９２（ｓ，１Ｈ），１１．４５（ｄ，１Ｈ）
【０５１０】
実施例７９：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［１−（２−ジエチルアミノ−エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０５１１】
【化９０】
2015505555.tif 000111
【０５１２】
標題化合物を、スキーム６で概略を示した経路によって調製した。
標題化合物を、実施例６０のステップ１の生成物である、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドから調製した。
【０５１３】
ステップ１：［２−（４−ブロモ−ピラゾール−１−イル）−エチル］−ジエチル−アミンの調製
４−ブロモピラゾール（０．２５ｇ、１．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（１．６６ｇ、５．１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１０分間撹拌した。２−ブロモ−Ｎ，Ｎ−ジエチルエチルアミン臭化水素酸塩（０．５７７ｇ、２．２１ｍｍｏｌ）を加え、反応液を７０℃で１８時間加熱した。反応液を、Ｈ２Ｏで希釈し、ＤＣＭ／ＩＰＡ（４：１）（×２）で抽出した。有機相を、合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液（×４）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮し、標題化合物を淡黄色油状物質として得た、２７５ｍｇ、６５．７％。
【０５１４】
ステップ２：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−［１−（２−ジエチルアミノ−エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（９０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、［２−（４−ブロモ−ピラゾール−１−イル）−エチル］−ジエチル−アミン（７４．２ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３）６２．５ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）ＴＨＦ（４ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．４ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、脱気した。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５．５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を加え、内容物を再び脱気した後、マイクロ波照射下で１３０℃で１時間加熱した。混合物を脱気し、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５．５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）のさらなる一部を加え、脱気した後、１３０℃で３０分間加熱した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、有機相を分離した。水溶液をＤＣＭの別の一部で抽出し、合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。粗物質を、ＤＣＭ〜１５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製し、標題化合物を得た、２４ｍｇ、２５．１％。
【０５１５】
ステップ３：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［１−（２−ジエチルアミノ−エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（９０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、［２−（４−ブロモ−ピラゾール−１−イル）−エチル］−ジエチル−アミン（２４ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１０４．１ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（３ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、８０℃で３０分間加熱した。反応混合物を、４分の１の量となるまで真空濃縮し、Ｈ２Ｏで希釈した。２時間静置した後、固体を、濾過によって分離し、Ｈ２Ｏ、次いで、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、真空乾燥させ、標題化合物を灰色粉末として得た、７ｍｇ、３８．２％。
【０５１６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．９２分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８３［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．９０−０．９５（ｔ，６Ｈ），２．７９−２．８４（ｔ，２Ｈ），４．１４−４．１９（ｔ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），７．８５（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．１６（ｓ，１Ｈ），８．２７−８．３０（ｍ，１Ｈ），８．４５−８．４９（ｍ，２Ｈ），９．８６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．３９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４個のプロトンは観測されなかった
【０５１７】
実施例８０：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸｛５−［１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル｝−アミド
【０５１８】
【化９１】
2015505555.tif 000112
【０５１９】
標題化合物を、スキーム６で概略を示した経路によって、実施例７９として記載した方法論を用いて、ステップ１において、２−ブロモ−Ｎ，Ｎ−ジエチルエチルアミン臭化水素酸塩の代わりに１−（２−クロロ−エチル）−ピロリジン塩酸塩（３７６．１ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を暗黒色粉末として単離した、１０ｍｇ、１３．８％。
【０５２０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．１５分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．６３−１．６９（ｍ，４Ｈ），２．８３−２．８８（ｔ，２Ｈ），４．２１−４．２６（ｔ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），７．２８−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），７．８４−７．８６（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｓ，１Ｈ）８．２８−８．３１（ｍ，１Ｈ），８．４５−８．４９（ｍ，２Ｈ），９．８７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．４０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４個のプロトンは観測されなかった
【０５２１】
実施例８１：１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５２２】
【化９２】
2015505555.tif 000113
【０５２３】
標題化合物を、スキーム２で概略を示したものと類似した経路によって調製した。
それを、実施例３１のステップ７の生成物である、４−フルオロ−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミンから調製した。
【０５２４】
ステップ１：１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の調製
窒素雰囲気下にて、１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチル（１．８９ｇ、１４．１７ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１０．４３ｇ、３２ｍｍｏｌ）のアセトン（５０ｍＬ）懸濁液に、４−ブロモメチルピリジン塩酸塩（３．５８ｇ、１４．１７ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液をＲＴで１８時間撹拌した。反応液を、Ｈ２Ｏで希釈し、その後、ＥｔＯＡｃ（×２）で抽出した。合わせた抽出物を、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に加えて撹拌し、水酸化ナトリウム（０．８９６ｇ、２２．４ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（１５ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物を３時間加熱還流し、その後、ＲＴまで冷却した。溶媒を真空除去し、残渣を少量のＨ２Ｏで希釈した。塩酸水溶液、１．０Ｍを注意深く加えることにより混合物のｐＨを４に調整した。１０分間撹拌した後、固体を、濾過によって分離し、Ｈ２Ｏでよく洗浄し、真空乾燥させ、標題の目的化合物を固体として得た、０．４４９ｇ。濾液をＥｔＯＡｃ（×６）で抽出し、合わせた抽出物を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物をさらに得た、０．７３６ｇ。これにより合計１．１８５ｇ、７８％を得た。
【０５２５】
ステップ２：１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドの調製
４−フルオロ−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミン（９７ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に加えて撹拌した。Ｅｔ３Ｎ  １０９ｍｇ、１５０ｕＬ、１．０８ｍｍｏｌ）および１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１１９．７ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を加え、続いて、ＨＡＴＵ（２２４．３ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を、ＲＴで１８時間撹拌し、その後、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した。溶液をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）および１０％ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃでトリチュレーションし、標題化合物を淡褐色固体として得た、１２５ｍｇ、６３．７％。
【０５２６】
ステップ３：標題化合物：１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５−クロロ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（１２５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３４１．７ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）およびｎＢｕＯＨ（５ｍＬ）を、マイクロ波バイアルに入れて合わせ、マイクロ波照射下で１６０℃で６時間加熱した。溶媒を真空除去し、残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶かした。ＴＦＡ（３ｍＬ）を加え、反応混合物をＲＴで１８時間撹拌した。反応液を、真空濃縮し、ＤＣＭに溶かした後に、ＳＣＸ−２イオン交換カラムへ注いだ。カラムをＤＣＭ、ＭｅＯＨで洗浄し、ＤＣＭを用いてアンモニア  ７Ｎ  ＭｅＯＨ溶液を０．５Ｎに希釈したもので対象となる化合物を溶出した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮した。物質を、ＤＣＭ〜５％アンモニア  ７Ｎ  ＭｅＯＨ溶液／５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶出する自動カラムクロマトグラフィーでさらに精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を淡橙色固体として得た、２２ｍｇ、１４％。
【０５２７】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．３５分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４４７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１８（ｍ，１Ｈ），１．４４−１．７６（ｍ，５Ｈ），２．８５（ｍ，２Ｈ），３．０３（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｄ，１Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），７．１６（ｍ，２Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｍ，２Ｈ），８．５５（ｍ，２Ｈ），８．６３（ｓ，１Ｈ），９．７６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５２８】
実施例８２：１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５２９】
【化９３】
2015505555.tif 000114
【０５３０】
標題化合物を、スキーム２で概略を示したものと類似した経路によって、実施例８１として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１１９．７ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を灰白色固体として単離した、４８ｍｇ、２６．６％。
【０５３１】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．５０分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４４７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．２（ｍ，１Ｈ），１．４１−１．７５（ｍ，５Ｈ），２．８５（ｍ，２Ｈ），３．０３（ｔ，２Ｈ），３．２１（ｄ，１Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），５．４７（ｓ，２Ｈ），７．４０（ｄｄ，１Ｈ），７．６７−７．７２（ｍ，２Ｈ），８．０４（ｍ，２Ｈ），８．５２−８．６２（ｍ，３Ｈ），９．７４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５３２】
実施例８３：１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５３３】
【化９４】
2015505555.tif 000115
【０５３４】
標題化合物を、スキーム２で概略を示したものと類似した経路によって、実施例８１として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（１１９．７ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を灰白色固体として単離した、５６ｍｇ、３４％。
【０５３５】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．６０分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４４７［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．２（ｍ，１Ｈ），１．４８−１．７７（ｍ，５Ｈ），２．８６（ｍ，２Ｈ），３．０５（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｄ，１Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），５．５２（ｓ，２Ｈ），７．１４（ｄ，１Ｈ），７．３３（ｄｄ，１Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｔ，１Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），８．５６（ｍ，２Ｈ），９．７８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５３６】
実施例８４：１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド（ａｍｉｄ）
【０５３７】
【化９５】
2015505555.tif 000116
【０５３８】
標題化合物を、スキーム２で概略を示したものと類似した経路によって、実施例２４として記載した方法論を用いて、ステップ６において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（３４４．５ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ステップ７に記載した通常の後処理の後に、粗物質を、ＤＣＭに溶かし、ＳＣＸ−２イオン交換カラムへ注いだ。カラムをＤＣＭ、ＭｅＯＨで洗浄し、ＤＣＭを用いてアンモニア  ７Ｎ  ＭｅＯＨ溶液を０．５Ｎに希釈したもので対象となる化合物を溶出した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮した。残渣を、２％Ｅｔ３ＮのＤＣＭ溶液〜２０％ＭｅＯＨ／２％Ｅｔ３ＮのＤＣＭ溶液（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーでさらに精製した。純物質を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を淡黄色固体として得た、５２ｍｇ、２１．４％。
【０５３９】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．５９分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４５１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１９（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｍ，１Ｈ），１．６９（ｍ，２Ｈ），２．９２（ｍ，２Ｈ），３．１２（ｍ，２Ｈ），５．４８（ｓ，２Ｈ），７．４０（ｄｄ，１Ｈ），７．６７−（ｄｔ，１Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．５２−８．５８（ｍ，３Ｈ），９．７３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０５４０】
実施例８５：１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５４１】
【化９６】
2015505555.tif 000117
【０５４２】
標題化合物を、スキーム２で概略を示したものと類似した経路によって、実施例２４として記載した方法論を用いて、ステップ６において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（３４４．５ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を用いて調製した。ステップ７に記載した通常の後処理の後に、粗物質を、ＤＣＭに溶かし、ＳＣＸ−２イオン交換カラムへ注いだ。カラムをＤＣＭ、ＭｅＯＨで洗浄し、ＤＣＭを用いてアンモニア  ７Ｎ  ＭｅＯＨ溶液を０．５Ｎに希釈したもので対象となる化合物を溶出した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮した。残渣を、ＤＣＭ〜１２％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーでさらに精製した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮した。残渣を、ｐＨ４での分取ＨＰＬＣでさらに精製した。純物質を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、目的化合物および１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［５−クロロ−４−（（Ｒ）−３−ホルミルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの混合物を得た。この物質を最小量のＭｅＯＨに加えて撹拌し、その後、塩酸、４Ｍ  １，４−ジオキサン溶液（２ｍＬ）を加えた。反応液をＲＴで１８時間（ｆｏｒ  １８  ｈｏｕｒｓｓ）撹拌し、溶媒を真空除去した。残渣を、ＤＣＭに溶かし、５％アンモニア水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を、２％Ｅｔ３ＮのＤＣＭ溶液〜２０％ＭｅＯＨ／２％Ｅｔ３ＮのＤＣＭ溶液（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーでさらに精製した。純物質を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を淡黄色固体として得た、５２ｍｇ、１３．２％。
【０５４３】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．５２分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４５１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１９（ｍ，２Ｈ），１．４８（ｍ，１Ｈ），１．６９（ｍ，２Ｈ），２．２５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），２．９２（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｍ，２Ｈ），５．５０（ｓ，２Ｈ），７．１５（ｍ，２Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｍ，２Ｈ），８．５７（ｍ，３Ｈ），９．７４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．７１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５４４】
実施例８６：１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５４５】
【化９７】
2015505555.tif 000118
【０５４６】
標題化合物を、スキーム２で概略を示したものと類似した経路によって、実施例８５として記載した方法論を用いて、ステップ６において、１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（３４４．５ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を淡黄色固体として単離した、３０ｍｇ、１２．３％。
【０５４７】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．６９分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４５１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．２０（ｍ，２Ｈ），１．５０（ｍ，１Ｈ），１．７２（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），２．９２（ｍ，２Ｈ），３．１５（ｍ，２Ｈ），５．５２（ｓ，２Ｈ），７．１３（ｄ，１Ｈ），７．３７（ｄｄ，１Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｍ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．５６（ｍ，２Ｈ），９．７９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５４８】
実施例８７：１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５４９】
【化９８】
2015505555.tif 000119
【０５５０】
標題化合物を、スキーム２で概略を示したものと類似した経路によって調製した。
それを、実施例６のステップ２の生成物である、４−フルオロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンから調製した。
【０５５１】
ステップ１：４−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
−７８℃にて、４−フルオロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２．０５ｇ、７．０１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７５ｍＬ）溶液に、ｓｅｃ−ブチルリチウム、１．４Ｍシクロヘキサン溶液（８．７６ｍＬ、１２．２６ｍｍｏｌ）を滴下した。反応液を−７８℃で３０分間撹拌し、その後、ヨウ化メチル（２．４９ｇ、１．０９ｍＬ、１７．５２ｍｍｏｌ）を滴下し、反応液を−７８℃でさらに４５分間撹拌した。反応液を、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）を加えることによりクエンチし、反応液をＲＴに到達させた。混合物をＥｔＯＡｃ（×３）で抽出し、合わせた抽出物を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣をＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶かし、ＲＴにて、テトラブチルアンモニウムフルオリド、１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液（７．０１ｍＬ、７．０１ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を、ＲＴで３０分間撹拌し、その後、Ｈ２ＯとＥｔＯＡｃとで分液した。有機層を分離し、水層をより多くの量のＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を、ＤＣＭ／イソヘキサン（１：１）に加えて撹拌し、濾過し、ＤＣＭ／イソヘキサン（１：１）で洗浄した後、真空乾燥させた。これにより標題化合物を白色粉末として得た、０．５６１ｇ、５３．３％。
【０５５２】
ステップ２：４−フルオロ−５−メチル−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
標題化合物を、実施例６として記載した方法論を用いて、ステップ５において、５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに４−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（６００ｍｇ、４ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を淡黄色粉末として単離した、６０９ｍｇ、７８．１％。
【０５５３】
ステップ３：４−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミンの調製
標題化合物を、実施例６として記載した方法論を用いて、ステップ６において、５−ブロモ−４−フルオロ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに４−フルオロ−５−メチル−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２７７ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を褐色粉末として単離した、２３０ｍｇ、９８．１％。
【０５５４】
ステップ４：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（４−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミドの調製
４−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルアミン（２３０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を、ＤＩＰＥＡ（０．４６２ｍＬ、２．７９ｍｍｏｌ）および１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（２７０ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）とともにＤＭＦ（５ｍＬ）に加えて撹拌した。ＨＡＴＵ（５８２ｍｇ、１５３ｍｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴで２時間撹拌した。反応混合物を、Ｈ２Ｏで希釈し、ＤＣＭ／ＩＰＡ（４：１）（×２）で抽出した。合わせた抽出物を、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空除去し、黒色残渣を得た。これを、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１）でトリチュレーションし、濾過し、イソヘキサンで洗浄した後、４０℃で真空乾燥させた。これにより標題化合物を褐色粉末として得た、１９８ｍｇ、４０．６％。
【０５５５】
ステップ５：標題化合物：１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（４−フルオロ−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−アミド（１９８ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（４３０ｍｇ、２．２６ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−ピペリジン−３−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５６５．９ｍｇ、２．８３ｍｍｏｌ）およびＮＭＰ（６ｍＬ）を封管に入れて１６０℃で７時間加熱した。混合物を、ＤＣＭ〜４５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮した。未精製のままのこの物質を最小量のＤＣＭに溶かし、Ｅｔ３Ｎ（２１７．８ｍｇ、０．３ｍＬ、２．１５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＲＴで撹拌し、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１５０ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）、続いて、ＤＭＡＰ（５ｍｇ）を加えた。これを、１時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。この粗物質を、ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製した。より速く流出するモノｂｏｃ生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮した。残渣を、塩酸、１．２５Ｍ  ＭｅＯＨ溶液（２ｍＬ）に溶かし、マイクロ波照射下で８０℃で３０分間加熱した。溶媒を真空除去し、残渣を、最小量のＭｅＯＨに溶かし、ＳＣＸ−２イオン交換カートリッジへ添加した。これを、ＭｅＯＨで洗浄し、目的化合物を、４：１  ＤＣＭ／７Ｎ  ＮＨ３・ＭｅＯＨ溶液で溶出し、真空濃縮した。残渣にアセトニトリルを加え、１０分間の音波処理後に微細な沈殿物が生じた。これを遠心機でペレット化し、液体をデカンテーションにより除去した後、固体を、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、濾過し、標題化合物をベージュ色粉末として得た、４．１ｍｇ、１．７％。
【０５５６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．４１分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４３１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１１−１．２２（ｍ，１Ｈ），１．４３−１．５４（ｍ，１Ｈ）１．６４−１．７７（ｍ，２Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），２．７８−２．８５（ｍ，１Ｈ），２．８５−２．９３（ｍ，１Ｈ），３．００−３．０５（ｍ，２Ｈ），３．１７−３．２４（ｍ，１Ｈ），５．５１（ｓ，２Ｈ），７．１３−７．１６（ｍ，２Ｈ），７．６８（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），８．５４−８．５７（ｍ，２Ｈ），８．５９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），９．７８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０５５７】
実施例８８：１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５５８】
【化９９】
2015505555.tif 000120
【０５５９】
標題化合物を、実施例８７として記載した方法論を用いて、ステップ４において、１−ピリジン−４−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（４０６ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それをベージュ色粉末として単離した、０．８８ｍｇ、０．６３％。
【０５６０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．６５分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４３１［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１１−１．２３（ｍ，１Ｈ），１．４０−１．５２（ｍ，１Ｈ）１．６３−１．７７（ｍ，２Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），２．７７−２．８５（ｍ，１Ｈ），２．８５−２．９４（ｍ，１Ｈ），２．９９−３．０６（ｍ，２Ｈ），３．１６−３．２５（ｍ，１Ｈ），５．４７（ｓ，２Ｈ），７．３８−７．４４（ｍ，１Ｈ），７．６５−７．７０（ｍ，２Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ），８．０３（ｓ，１Ｈ），８．５１−８．６２（ｍ，３Ｈ）、９．７６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０５６１】
実施例８９：１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５６２】
【化１００】
2015505555.tif 000121
【０５６３】
標題化合物を、スキーム７で概略を示した経路によって調製した。
それを、実施例３２のステップ５の生成物である、［（Ｒ）−１−（３−アミノ−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから作製した。
【０５６４】
ステップ１：［（Ｒ）−１−（３−｛［１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル］−アミノ｝−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
［（Ｒ）−１−（３−アミノ−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（９２ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（６１．６ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（６９．６μＬ、０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液に、ＨＡＴＵ（９５．１ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１８時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）に溶かした。それを、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、３０％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン〜ＥｔＯＡｃ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を褐色固体として得た、８２ｍｇ、５７．２％。
【０５６５】
ステップ２：標題化合物：１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
ＲＴにて、（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８１ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。反応混合物をＲＴでさらに２時間撹拌し、その後、真空濃縮した。残渣を、ＤＣＭに溶かし、５％アンモニア水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、ＤＣＭ〜２０％ＭｅＯＨ（５％７Ｎ  ＮＨ３・ＭｅＯＨ溶液を含有する）（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を白色固体として得た、３４ｍｇ、５１％。
【０５６６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８１分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４６４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１８（ｍ，１Ｈ），１．４５−１．７１（ｍ，５Ｈ），２．８５（ｍ，２Ｈ），３．０３（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｄ，１Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），７．２１（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｍ，２Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），８．０１（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｓ，１Ｈ），９．７３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５６７】
実施例９０：１−（３−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５６８】
【化１０１】
2015505555.tif 000122
【０５６９】
標題化合物を、スキーム７で概略を示した経路によって、実施例８９として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（３−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（７９ｍｇ、０．３６５ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を白色固体として単離した、５９ｍｇ、６４．７％。
【０５７０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８６分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４６０［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１９（ｍ，１Ｈ），１．４４−１．７５（ｍ，５Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），２．８５（ｍ，２Ｈ），３．０３（ｔ，２Ｈ），３．２１（ｄ，１Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），５．３６（ｓ，２Ｈ），７．０７−７．１４（ｍ，３Ｈ），７．２６（ｔ，１Ｈ），７．７３（ｓ，１Ｈ），８．００（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｓ，１Ｈ），９．７４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５７１】
実施例９１：１−（３−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５７２】
【化１０２】
2015505555.tif 000123
【０５７３】
標題化合物を、スキーム７で概略を示した経路によって、実施例８９として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（３−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（８０．４ｍｇ、０．３６５ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を白色固体として単離した、４７ｍｇ、５９．５％。
【０５７４】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８１分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４６４［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．２１（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｍ，１Ｈ），１．６６−２．１３（ｍ，４Ｈ），２．８６（ｍ，２Ｈ），３．０３（ｔ，２Ｈ），３．２１（ｄ，１Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），５．４４（ｓ，２Ｈ），７．０７−７．１９（ｍ，３Ｈ），７．４２（ｍ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），８．６０（ｓ，１Ｈ），９．７３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５７５】
実施例９２：１−（２−クロロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５７６】
【化１０３】
2015505555.tif 000124
【０５７７】
標題化合物を、スキーム７で概略を示した経路によって、実施例８９として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（２−クロロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（８６．５ｍｇ、０．３６５ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を白色固体として単離した、５５ｍｇ、５３．６％。
【０５７８】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８６分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８０［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１７（ｍ，１Ｈ），１．４４−１．７２（ｍ，５Ｈ），２．８４（ｍ，２Ｈ），３．０４（ｔ，２Ｈ），３．２０（ｄ，１Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），５．５２（ｓ，２Ｈ），７．１５（ｍ，１Ｈ），７．３８（ｍ，２Ｈ），７．５２（ｍ，１Ｈ），７．７３（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｓ，１Ｈ），９．７５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５７９】
実施例９３：１−（２−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−メトキシ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５８０】
【化１０４】
2015505555.tif 000125
【０５８１】
標題化合物を、スキーム７で概略を示した経路によって、実施例８９として記載した方法論を用いて、ステップ１において、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−（２−メチル−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（７９ｍｇ、０．３６５ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を白色固体として単離した、５２ｍｇ、５４．１％。
【０５８２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝１．８６分（２７０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４６０［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間３．７５分（短時間ポジティブ），ＨＰ１１００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ１．１７（ｍ，１Ｈ），１．４２−１．７４（ｍ，５Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），２．８３（ｍ，２Ｈ），３．０２（ｔ，２Ｈ），３．２１（ｄ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．０７（ｄ，１Ｈ），７．２４（ｍ，３Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），８．０１（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），８．４１（ｓ，１Ｈ），９．７１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．２１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）
【０５８３】
実施例９４：１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５８４】
【化１０５】
2015505555.tif 000126
【０５８５】
標題化合物を、スキーム８で概略を示した経路によって調製した。
【０５８６】
ステップ１：４−クロロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
標題化合物を、実施例６、ステップ１に記載のとおりに、４−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに４−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（５ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを無色油状物質として単離した、８．２７ｇ、８１．７％。
【０５８７】
ステップ２：４−クロロ−５−ヨード−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
−７８℃にて、４−クロロ−１−トリイソプロピルシラニル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（３．９１ｇ、１２．７７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に、ｓｅｃ−ブチルリチウム、１．４Ｍシクロヘキサン溶液（１５．８２ｍＬ、２２．１５ｍｍｏｌ）を滴下した。反応液を−７８℃で３０分間撹拌し、その後、ヨウ素（８．０３ｇ、３１．６４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液を滴下し、反応液を−７８℃でさらに４５分間撹拌した。反応液を、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）を加えることによりクエンチし、反応液をＲＴに到達させた。混合物をイソヘキサン（２×７５ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物を、飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（×２）および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。溶液を、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、無色油状物質となるまで濃縮した。これをＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶かし、ＲＴにて、テトラブチルアンモニウムフルオリド、１．０Ｍ  ＴＨＦ溶液（１２．７ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を、ＲＴで３０分間撹拌し、その後、Ｈ２ＯとＥｔＯＡｃとで分液した。有機層を分離し、水層をより多くの量のＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣を、ＤＣＭに加えて撹拌し、濾過し、ＤＣＭで洗浄した後、真空乾燥させた。これにより標題化合物を白色固体として得た、２．７２ｇ、７７．３％。
【０５８８】
ステップ３：１−ベンゼンスルホニル−４−クロロ−５−ヨード−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
０℃にて、４−クロロ−５−ヨード−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２．７２ｇ、１０．７４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム、６０％鉱油中分散液（０．５０８ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）を分けて加えた。反応液を、さらに１５分間撹拌し、その後、ベンゼンスルホニルクロリド（１．９ｇ、１．３７ｍＬ、１０．７４ｍｍｏｌ）を加え、反応液をＲＴで２時間撹拌した。反応混合物を、Ｈ２Ｏで希釈し、１５分間撹拌した後に、沈殿物を、濾別し、Ｈ２ＯおよびＥｔ２Ｏで洗浄した。これにより、真空乾燥の後に、標題化合物を白色粉末として得た、３．４７ｇ、８４．８％。
【０５８９】
ステップ４：１−ベンゼンスルホニル−４−クロロ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
１−ベンゼンスルホニル−４−クロロ−５−ヨード−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（１．４３ｇ、３．４２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、ヨウ化銅（Ｉ）（０．７８ｇ、４．１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、脱気し、２，２−ジフルオロ−２−（フルオロスルホニル）酢酸メチル（２．３ｇ、１１．９６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を再び脱気した後、１００℃で２．５時間加熱した。反応液を、ＲＴまで冷却し、ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で希釈した。沈殿物を、セライトプラグを介して濾過することにより分離した。濾液を、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。粗物質を、イソヘキサン〜２５％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーで精製した。純生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を白色固体として得た、０．４６ｇ、３７．５％。純生成物およびわずかな不純物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮した。残渣をＥｔ２Ｏでトリチュレーションし、標題化合物を白色粉末として得た、０．２６ｇ、２１．３％。これにより、全体で、収量０．７２ｇ、収率５８．８％を得た。
【０５９０】
ステップ５：４−クロロ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
１−ベンゼンスルホニル−４−クロロ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（１．５ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に加えて撹拌し、ＬｉＯＨ一水和物（５２０ｍｇ、１２．４７ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（６ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物をＲＴで６４時間撹拌し、その後、飽和硫酸水素カリウム水溶液を加えることによりｐＨを７に調整した。これをＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物を淡黄色粉末として得た、０．８４ｇ、９１．８％。
【０５９１】
ステップ６：４−クロロ−３−ニトロ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの調製
標題化合物を、実施例６、ステップ５として記載した方法論によって、５−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに４−クロロ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（８４２ｍｇ、３．８２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを淡黄色粉末として単離した、０．７８ｇ、７６．９％。
【０５９２】
ステップ７：［（Ｒ）−１−（３−ニトロ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
標題化合物を、実施例８９、ステップ１として記載した方法論によって、４−フルオロ−５−メトキシ−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンの代わりに４−クロロ−３−ニトロ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを黄色ガラス状物質として単離した、１７９ｍｇ、５５．４％。
【０５９３】
ステップ８：［（Ｒ）−１−（３−アミノ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
標題化合物を、実施例３１、ステップ８として記載した方法論によって、２，２−ジメチル−プロピオン酸４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−３−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの代わりに［（Ｒ）−１−（３−ニトロ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１７９ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を用いて調製した。それを緑色ゴム状物質として単離した、１４９ｍｇ、８８．９％。
【０５９４】
ステップ９：［（Ｒ）−１−（３−｛［１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル］−アミノ｝−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（合成は実施例１７に記載した）をＤＣＭ（２ｍＬ）に加えて懸濁液として撹拌し、ＲＴにて、塩化オキサリル、２．０Ｍ  ＤＣＭ溶液（０．１７ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）、続いて、ＤＭＦ  １滴を滴下した。反応液をさらに１５分間撹拌し、後の溶液を真空濃縮した。残渣を、ＤＣＭ（１ｍＬ）に溶かし、［（Ｒ）−１−（３−アミノ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６２．３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）のＥｔ３Ｎ（９０ｍｇ、０．１２ｍＬ、０．８５ｍｍｏｌ）含有ＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に滴下した。さらに１時間撹拌した後、反応液を、ＤＣＭで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機相を、分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶かし、５０％ｗ／ｖ  ＮａＯＨ（１ｍＬ）を加えた後、混合物をＲＴで１８時間撹拌した。溶媒を真空除去し、残渣をＤＣＭに溶かした。それを、Ｈ２Ｏ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。粗物質を、２５％ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン〜ＥｔＯＡｃ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含有する画分を、合わせ、真空濃縮し、標題化合物を黄色ガラス状物質として得た、５２ｍｇ、３０．６％。
【０５９５】
ステップ１０：標題化合物：１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
［（Ｒ）−１−（３−｛［１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル］−アミノ｝−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を塩酸、１．２５Ｍ  ＭｅＯＨ溶液（２ｍＬ）に溶かし、マイクロ波照射下で８０℃で３０分間加熱した。溶媒を真空除去し、残渣を、最小量のＭｅＯＨに溶かし、ＳＣＸ−２イオン交換カートリッジへ添加した。これを、ＭｅＯＨで洗浄し、目的化合物を、４：１  ＤＣＭ／７Ｎ  ＮＨ３・ＭｅＯＨ溶液で溶出し、真空濃縮した。粗物質を、ＤＣＭ〜１５％ＭｅＯＨ（５％７Ｎ  ＮＨ３・ＭｅＯＨ溶液を含有する）／ＤＣＭ（勾配）で溶出する自動カラムクロマトグラフィーによってさらに精製した。生成物を含有することが分かった画分を合わせ、真空濃縮した。残渣を、デイチルエーテル（ｄｅｉｔｈｙｌ  ｅｔｈｅｒ）でトリチュレーションし、標題化合物をクリーム色粉末として得た、４．５ｍｇ、１０．８％。
【０５９６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．９３分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝５０２．２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．８２−０．９３（ｍ，１Ｈ），１．３８−１．５０（ｍ，１Ｈ），１．５４−１．６５（ｍ，２Ｈ），２．７０−２．８１（ｍ，２Ｈ），２．８０−３．００（ｍ，２Ｈ），３．１−３．０９（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．１６−７．２４（ｍ，２Ｈ），７．２８−７．３６（ｍ，２Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｓ，１Ｈ），８．４５−８．４８（ｍ，２Ｈ），９．６２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６０−１２．６０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０５９７】
実施例９５：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０５９８】
【化１０６】
2015505555.tif 000127
【０５９９】
標題化合物を、実施例９４として、ステップ１〜８に記載した方法論によって調製した。
【０６００】
ステップ９：（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
これを、実施例３１、ステップ９として記載した方法論を用いて、２，２−ジメチル−プロピオン酸３−アミノ−４−（（Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルエステルの代わりに［（Ｒ）−１−（３−アミノ−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を用い、Ｅｔ３Ｎの代わりにＤＩＰＥＡ（４０ｍｇ、５０ｕＬ、０．３ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物を濃黄色ガラス状物質として単離した、６３ｍｇ、７１．９％。
【０６０１】
ステップ１０：標題化合物：１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミドの調製
これを、実施例９４、ステップ１０として記載した方法論を用いて、［（Ｒ）−１−（３−｛［１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル］−アミノ｝−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ピペリジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりに（（Ｒ）−１−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボニル）−アミノ］−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル｝−ピペリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を用いて調製した。通常の後処理の後に、残渣を、最小量のＭｅＯＨに溶かし、ＳＣＸ−２イオン交換カートリッジへ添加した。これを、ＭｅＯＨで洗浄し、目的化合物を、４：１  ＤＣＭ／７Ｎ  ＮＨ３・ＭｅＯＨ溶液で溶出し、真空濃縮した。物質を、Ｅｔ２Ｏ、次いで、ＭｅＣＮでトリチュレーションすることによりさらに精製した。これにより標題化合物をベージュ色粉末として得た、４．３ｍｇ、８．２％。
【０６０２】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．９１分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８４．２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．９０−１．００（ｍ，１Ｈ），１．４０−１．５１（ｍ，１Ｈ），１．５４−１．６８（ｍ，２Ｈ），２．８０−３．００（ｍ，４Ｈ），３．０７−３．１３（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），７．２０−７．４０（ｍ，５Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．４５−８．５０（ｍ，２Ｈ），９．６５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．００−１３．００（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０６０３】
実施例９６：１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０６０４】
【化１０７】
2015505555.tif 000128
【０６０５】
標題化合物を、実施例９４として記載した方法論によって、ステップ９において、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−ピリジン−３−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５７．５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物をベージュ色粉末として単離した、１１．７ｍｇ、２８．２％。
【０６０６】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．７８分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８５［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．８３−０．９３（ｍ，１Ｈ），１．３８−１．５１（ｍ，１Ｈ），１．５４−１．６４（ｍ，２Ｈ），２．７１−２．８２（ｍ，２Ｈ），２．８４−３．００（ｍ，２Ｈ），３．０２−３．１０（ｍ，１Ｈ），５．４８（ｓ，２Ｈ），７．３８−７．４３（ｍ，１Ｈ），７．６３−７．７２（ｍ，２Ｈ），８．１０，（ｓ，１Ｈ），８．４５（ｓ，１Ｈ），８．５０−８．５５（ｍ，３Ｈ），９．６５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６０−１２．６０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０６０７】
実施例９７：１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸［４−（（Ｒ）−３−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル］−アミド
【０６０８】
【化１０８】
2015505555.tif 000129
【０６０９】
標題化合物を、実施例９４として記載した方法論によって、ステップ９において、１−（４−フルオロ−ベンジル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸の代わりに１−ピリジン−２−イルメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸（５７．５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を用いて調製した。標題化合物をベージュ色粉末として単離した、１５．１ｍｇ、４３．４％。
【０６１０】
ＬＣ／ＭＳ：ＲＴ＝０．８２分（２３０ｎｍ），ｍ／ｚ＝４８５．２［Ｍ＋Ｈ］．合計分析時間１．９分（超短時間ポジティブ），ＨＰ１２００．
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６  ＤＭＳＯ）：δ０．８８−０．９９（ｍ，１Ｈ），１．４２−１．５４（ｍ，１Ｈ），１．５７−１．６９（ｍ，２Ｈ），２．７３−２．８４（ｍ，２Ｈ），２．８４−３．００（ｍ，２Ｈ），３．０４−３．１１（ｍ，１Ｈ），５．５３（ｓ，２Ｈ），７．１０（ｄ，１Ｈ），７．３１−７．３７（ｍ，１Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｍ，１Ｈ），８．０７，（ｓ，１Ｈ），８．４５−８．５７（ｍ，３Ｈ），９．６８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１１．６０−１２．６０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）２個のプロトンは観測されなかった
【０６１１】
一般手順
市販の供給源から入手したすべての試薬は、さらなる精製を行わずに使用した。無水溶媒は、市販の供給源から入手し、さらなる乾燥を行わずに使用した。フラッシュクロマトグラフィーは、プレパックドシリカ−ゲルカートリッジ（Ｉｓｏｌｕｔｅ  Ｆｌａｓｈ  Ｓｉ  ＩＩ、５６Å、Ｂｉｏｔａｇｅ）を用いて実施した。自動フラッシュクロマトグラフィーは、プレパックドシリカゲルカートリッジ（ＳｉｌａＳｅｐ（商標）Ｆｌａｓｈ、６０Å、Ｓｉｌｉｃｙｃｌｅ）を用いてＴｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ  ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）Ｒｆ精製システムで実施した。イオン交換クロマトグラフィーは、ｉｓｏｌｕｔｅ  ＳＣＸ−２、ＳＰＥカラム、Ｂｉｏｔａｇｅを使用して実施した。薄層クロマトグラフィーは、シリカ６０（Ｍａｃｈｅｒｙ−Ｎａｇｅｌ）でコーティングした５×１０ｃｍプレートを用いて実施した。マイクロ波加熱は、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  Ｅｉｇｈｔ（商標）２．０機器、ＣＥＭ  ｅｘｐｌｏｒｅｒ  ２４またはＣＥＭ  ｅｘｐｌｏｒｅｒ  ４８を用いて実施した。
【０６１２】
本発明の化合物は、Ａｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ１２００  Ｒａｐｉｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ質量検出器６１４０マルチモードソースＭ／ｚレンジ１５０〜１０００ａｍｕまたはＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ１１００質量検出器１９４６Ｄ  ＥＳＩソースＭ／ｚレンジ１５０〜１０００ａｍｕのいずれかでの高性能液体クロマトグラフィー質量分析法（ＨＰＬＣ−ＭＳ）によって特性決定した。以下に列挙される条件および方法は、両機器について同一である。
【０６１３】
７．５分実施用のカラム：ＧｅｍｉｎｉＮＸ、５μｍ、Ｃ１８、３０×２．１ｍｍ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）またはＺｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ、３．５μｍ、Ｃ１８、３０×２．１ｍｍ（Ａｇｉｌｅｎｔ）。
温度：３５℃。
３．７５分実施用のカラム：ＧｅｍｉｎｉＮＸ、５μｍ、Ｃ１８、３０×２．１ｍｍ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）またはＺｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ、３．５μｍ、Ｃ１８、３０×２．１ｍｍ（Ａｇｉｌｅｎｔ）。
温度：３５℃。
１．９分実施用のカラム：Ｋｉｎｅｔｅｘ、２．５μｍ、Ｃ１８、５０×２．１ｍｍ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）またはＡｃｃｕｃｏｒｅ、２．６μｍ、Ｃ１８、５０×２．１ｍｍ。
温度：５５℃。
移動相：Ａ−ｐＨ約３．５の、Ｈ２Ｏ＋１０ｍｍｏｌ／ギ酸アンモニウム＋０．０８％（ｖ／ｖ）ギ酸。
Ｂ−９５％アセトニトリル＋５％  Ａ＋０．０８％（ｖ／ｖ）ギ酸。
注入容量：１μＬ
【０６１４】
「短時間」法勾配表、ポジティブ（ｐｏｓ）またはポジティブおよびネガティブ（ｐｏｓ／ｎｅｇ）イオン化のいずれか
【０６１５】
【表１】
2015505555.tif 000130
【０６１６】
「超短時間」法勾配表、ポジティブ（ｐｏｓ）またはポジティブおよびネガティブ（ｐｏｓ／ｎｅｇ）イオン化のいずれか
【０６１７】
【表２】
2015505555.tif 000131
【０６１８】
「長時間」法勾配表、ポジティブ（ｐｏｓ）またはポジティブおよびネガティブ（ｐｏｓ／ｎｅｇ）イオン化のいずれか
【０６１９】
【表３】
2015505555.tif 000132
【０６２０】
検出：２３０、２５４および２７０ｎｍでのＵＶ検出
本発明の化合物はまた、核磁気共鳴（ＮＭＲ）によって特性決定した。分析は、Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ４００分光計を用いて実施し、プロトンＮＭＲスペクトルは、４００ＭＨｚで測定した。スペクトル参照は、溶媒の既知化学シフトとした。プロトンＮＭＲデータは、以下のとおりに報告される：ｐｐｍでの化学シフト（δ）と、それに続く多重度、これでは、ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線、ｄｄ＝二重線の二重線、ｄｔ＝三重線の二重線、ｄｍ＝多重線の二重線、ｄｄｄ＝二重線の二重線の二重線、ｔｄ＝二重線の三重線、ｑｄ＝二重線の四重線およびｂｒ＝ブロード、最後に、積分値。
【０６２１】
本発明のいくつかの化合物は、分取ＨＰＬＣによって精製した。これらは、２０ｃｍ３分−１の流速で実施するＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ製Ｇｅｍｉｎｉ−ＮＸ（登録商標）５μｍ、Ｃ１８、１００ｍｍ×２１ｍｍ内径Ａｘｉａカラムを用い、ＵＶダイオードアレイ検出（２１０〜４００ｎｍ）および質量によって指向される収集を用いるＨ２Ｏｓ  ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘ  ＭＳ自動精製システムで実施した。各化合物のために使用した勾配は、上記の表中に示される。
【０６２２】
ｐＨ４で：溶媒Ａ＝ＨＰＬＣグレードＨ２Ｏ＋０．０８％  ｖ／ｖギ酸中の１０ｍＭギ酸アンモニウム。溶媒Ｂ＝９５％  ｖ／ｖ  ＨＰＬＣグレードアセトニトリル＋５％  ｖ／ｖ  溶媒Ａ＋０．０８％  ｖ／ｖギ酸。
ｐＨ９で：溶媒Ａ＝ＨＰＬＣグレードＨ２Ｏ＋０．０８％  ｖ／ｖ  アンモニア溶液中の１０ｍＭギ酸アンモニウム。溶媒Ｂ＝９５％  ｖ／ｖ  ＨＰＬＣグレードＭｅＯＨ＋５％  ｖ／ｖ  溶媒Ａ＋０．０８％  ｖ／ｖ  アンモニア溶液。
【０６２３】
質量分光計は、１５０〜１０００の分子量スキャン範囲を有する、ポジティブおよびネガティブイオンエレクトロスプレーイオン化モードで操作するＨ２Ｏｓ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ２０００分光計であった。
【０６２４】
ＩＵＰＡＣ化学名は、ＡｕｔｏＮｏｍ  Ｓｔａｎｄａｒｄを使用して作成した。
【０６２５】
アッセイプロトコール
ＣＨＫ１酵素アッセイ
ＣＨＫ１キナーゼ活性のアッセイは、アミノ酸配列、ＫＫＫＶＳＲＳＧＬＹＲＳＰＳＭＰＥＮＬＮＲＰＲを有する合成ペプチドＣｈｋｔｉｄｅのリン酸化をモニタリングすることによって実施した。阻害剤およびＣＨＫ１酵素を含有するアッセイ混合物を、マイクロタイタープレート中で５０μｌの最終容量に一緒に混合し、３０℃で４０分間インキュベートした。
【０６２６】
アッセイ混合物は、０．０２ｍＭの非標識ＡＴＰ、０．５μＣｉの３３Ｐ−g−ＡＴＰ、１５μＭのＣｈｋｔｉｄｅ、０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、５０ｍＭのＨｅｐｅｓ−ＮａＯＨ  ｐＨ７．５および５ｎＭのＣＨＫ−１（１−２８９）−８ＨＩＳ（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）酵素を含有していた。反応は、５０ｍＭ  リン酸５０μＬを添加することによって停止した。９０μＬの混合物を、予め湿潤させた９６ウェルマルチスクリーンＭＡＰＨＮＯＢ濾過プレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に移し、真空マニホールドで濾過した。フィルタープレートは、５０ｍＭリン酸１００μｌを３回連続添加し、次いで、５０μＬ  ＭｅＯＨを添加して洗浄した。濾過プレートは、６５℃で１０分間乾燥させ、シンチラントを添加し、シンチレーションカウンター（Ｔｒｉｌｕｘ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）でリン酸化ペプチドを定量化した。
【０６２７】
ＣＨＫ−１酵素アッセイ（ＴＲ−ＦＲＥＴ）
ＣＨＫ活性はまた、ＬａｎｔｈａＳｃｒｅｅｎ  ＴＲ−ＦＲＥＴ技術（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、エズリン／ラディキシン／モエシン（ＥＲＭ）（アミノ酸配列ＧＡＧＲＬＧＲＤＫＹＫＴＬＲＱＩＲＱ）に基づいて合成フルオレセイン標識ペプチドのリン酸化をモニタリングすることによって評価した。阻害剤およびＣＨＫ−１酵素を含有するアッセイ混合物を、マイクロタイタープレート中で、２０mｌの最終容量に一緒に混合し、３０℃で８０分間インキュベートした。
【０６２８】
アッセイ混合物は、５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＧＴＡ、０．０１％  Ｂｒｉｊ−３５、２００μＭ  ＡＴＰ、４００ｎＭフルオレセイン標識ＥＲＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）および１ｎＭ  全長ＨＩＳ標識ＣＨＫ−１（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を含有していた。反応は、２０ｍＭ  ＥＤＴＡおよび１ｎＭテルビウム標識抗ｐＥＲＭ抗体（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を含有するＴＲ−ＦＲＥＴ希釈バッファー（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）２０mＬを添加することによって停止した。クエンチされた反応物を、振盪しながら室温で３０分間インキュベートし、抗体をリン酸化ＥＲＭと結合させ、次いで、ドナーフルオロフォア（テルビウム）およびアクセプターフルオロフォア（フルオレセイン）からの蛍光を、それぞれ、４９５ｎｍおよび５２０ｎｍでＳｙｎｅｒｇｙ２  Ｍｕｌｔｉ−Ｍｏｄｅ  Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ  （ＢｉｏＴｅｋ）を使用して測定した。ＴＲ−ＦＲＥＴ比は、５２０ｎｍ／４９５ｎｍとして算出した。
【０６２９】
ＣＨＫ−１結合実験（ＴＲ−ＦＲＥＴ）
化合物は、ＬａｎｔｈａＳｃｒｅｅｎ  ＴＲ−ＦＲＥＴ技術（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を使用してＣＨＫ−１結合について評価した。阻害剤、５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＧＴＡ、０．０１％  Ｂｒｉｊ−３５、２ｎＭビオチン標識抗ＨＩＳタグ抗体（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、２ｎＭユウロピウム標識ストレプトアビジン（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、１００ｎＭ  ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ標識Ｔｒａｃｅｒ２３６（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）および１０ｎＭまたは３０ｎＭ  ＣＨＫ−１（１−２８９）−８ＨＩＳ（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）酵素のいずれかを含有するアッセイ混合物を、マイクロタイタープレート中、２３℃で１２０分間インキュベートした。１５μＬの最終容量を使用した。
【０６３０】
ドナーフルオロフォア（ユウロピウム）およびアクセプターフルオロフォア（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ）からの蛍光を、それぞれ、６２０ｎｍおよび６６５ｎｍ  でＳｙｎｅｒｇｙ２  Ｍｕｌｔｉ−Ｍｏｄｅ  Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ（ＢｉｏＴｅｋ）を使用して測定した。ＴＲ−ＦＲＥＴ比は、６６５ｎｍ／６２０ｎｍとして算出した。
【０６３１】
本特許において例示したすべての化合物は、上記のアッセイのうち１種、２種または３種すべてで試験され、１μＭ未満のＩＣ５０を有するとわかった。実施例１〜９７の大部分は、０．１μＭ未満のＩＣ５０を有するとわかった。
【０６３２】
ＣＨＫ１細胞アッセイ−ゲムシタビンＥＣ５０アッセイ
ＨＴ２９細胞は、ＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓｕｓ、ＶＡ、ＵＳ）から購入し、加湿インキュベーター中、３７℃、５％  ＣＯ２で、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）およびペニシリン／ストレプトマイシンを補給したダルベッコの改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で培養した。９６ウェルプレートのウェルあたり５×１０３個のＨＴ２９細胞を播種し、一晩インキュベートさせた。ＤＭＥＭ／１０％  ＦＣＳおよび１５ｎＭゲムシタビンで調製した、化合物の３倍希釈物を細胞に添加し、３７℃で７２時間インキュベートした。次いで、１０％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）を用いて細胞を固定し、スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）を用いて染色し、吸光度は５４０ｎｍで決定した。曲線は、モデル２０５（フィット＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／ｘ）＾Ｄ）））））を用いるＸＬＦｉｔ  ４（Ｅｘｃｅｌ）を使用して解析した。ＥＣ５０は、ゲムシタビンの所与の濃度で、増殖を５０％を阻害した化合物の濃度として決定した。
【０６３３】
本特許において例示したすべての化合物は、１５ｎＭのゲムシタビンの存在下での上記のアッセイで試験され、１μＭ未満のＥＣ５０を有するとわかった。実施例１〜９７の大部分は、０．１μＭ未満のＥＣ５０を有するとわかった。
【国際調査報告】
2015505555.tif 000136
2015505555.tif 000137
2015505555.tif 000138
2015505555.tif 000139