(57)【要約】  本発明は、新規の式１のプロテインキナーゼ阻害薬ファミリーおよびその製造方法およびその医薬組成物に関する。詳細には、本発明は、Ｔｅｃ、Ｓｒｃ、Ｂｔｋプロテインキナーゼファミリーのメンバーの阻害薬に関する。【選択図】なし  【化１】2015521987.tif 000073
2015521987.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１の化合物：
【化１】
2015521987.tif 000058
［式中、
Ｒは、以下の１）から５）：
１）水素、
２）アルキル、
３）ヘテロアルキル、
４）カルボシクリル、
５）ヘテロシクリル、
からなる群から選択され、この際、前記アルキル、ヘテロアルキル、カルボシクリル、およびヘテロシクリルは、さらに置換されていてよい。
Ｙは、
【化２】
2015521987.tif 000059
であり；
Ｅは、酸素から選択され、
Ｚは、
【化３】
2015521987.tif 000060
であり、この際、
Ｙ−Ｅ−Ｚ−Ｗは、
【化４】
2015521987.tif 000061
から選択され、
Ｘ１およびＸ２は、水素およびハロゲンから独立に選択され；
ｎは、０〜２の整数であり；
ｍは、０〜２の整数であり；
ｍ’は、０〜２の整数であり；
Ｗは、以下の１）から１２）：
１）ハロゲン、
２）アルキル、
３）アラルキル、
４）ヘテロアラルキル、
５）−ＯＲ３、
６）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、
７）−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、
８）−ＣＨ２Ｏ−Ｒ４、
９）−ＮＲ５Ｒ６、
１０）−ＮＲ２Ｃ（Ｏ）Ｒ４、
１１）−ＮＲ２Ｓ（Ｏ）ｎＲ４、および
１２）−ＮＲ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６
から独立に選択され；
この際、前記アルキル、アラルキル、およびヘテロアラルキルは、さらに置換されていてよく；
Ｒ２は、水素またはアルキルから選択され；
Ｒ３は、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、またはヘテロアラルキルから選択され；
Ｒ４は、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、またはヘテロアリールから選択され；
Ｒ５およびＲ６は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリールから独立に選択されるか、またはＲ５およびＲ６は、縮合して３員〜８員のヘテロシクリル環系を形成していてよい］。
【請求項２】
Ｗが−ＯＲ３から選択され、かつＲ３が、置換または非置換のアラルキル、および置換または非置換のヘテロアラルキルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒが、
【化５】
2015521987.tif 000062
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｚが、
【化６】
2015521987.tif 000063
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｗが、
【化７】
2015521987.tif 000064
からなる群から選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
以下の構造の化合物：
【化８】
2015521987.tif 000065
2015521987.tif 000066
2015521987.tif 000067
2015521987.tif 000068
2015521987.tif 000069
2015521987.tif 000070
【請求項７】
次のステップ：
【化９】
2015521987.tif 000071
を含む、式１の化合物の製法。
【請求項８】
次のステップ：
【化１０】
2015521987.tif 000072
を含む、式１の化合物の製法。
【請求項９】
請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、または塩の溶媒和物。
【請求項１０】
請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物と、少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項１１】
プロテインキナーゼ媒介性疾患または病態を患う対象を処置するための医薬組成物を製造するための、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項１２】
前記医薬組成物が、Ｔｅｃキナーゼファミリーメンバーに関連する疾患、障害、また病態を処置するために適している、請求項１１に記載の化合物の使用。
【請求項１３】
前記疾患、障害、または病態が、Ｓｒｃキナーゼファミリーメンバーに関連している、請求項１１に記載の化合物の使用。
【請求項１４】
前記疾患、障害、または病態が、Ｂｔｋキナーゼに関連している、請求項１１に記載の化合物の使用。
【請求項１５】
前記医薬組成物が、増殖性、炎症性、および自己免疫疾患を処置するために適している、請求項１１に記載の化合物の使用。
【請求項１６】
プロテインキナーゼ媒介性疾患または病態を患う対象を処置する方法であって、前記対象に、前記処置に有効な式１の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を投与することを含み、この際、前記疾患、障害、また病態が、ＴｅｃおよびＳｒｃキナーゼファミリーに関連している、方法。
【請求項１７】
関節炎または免疫過敏症を処置または防止するための医薬品を調製するための、請求項１から６のいずれか１項に記載の式１の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項１８】
自己免疫疾患を処置または防止するための医薬品を調製するための、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項１９】
炎症を処置するための医薬品を調製するための、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項２０】
炎症または細胞増殖によって特徴付けられる癌、障害、または病態を処置または防止するための医薬品を調製するための、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項２１】
標的キナーゼ機能を変調するための医薬品を調製するための、請求項１から６のいずれか１項に記載の式１の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項２２】
前記キナーゼが、ＴｅｃまたはＳｒｃキナーゼファミリーから選択される、請求項２１に記載の式１の化合物の使用。
【請求項２３】
前記プロテインキナーゼがＢｔｋキナーゼである、請求項２１および２２に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規のプロテインキナーゼ阻害薬ファミリーに関する。詳細には、本発明は、ＴｅｃおよびＳｒｃプロテインキナーゼファミリーのメンバー、より詳細にはＢｔｋの阻害薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
プロテインキナーゼは、真核細胞における大きな細胞内および膜貫通シグナル伝達タンパク質群である。これらの酵素は、ＡＴＰから標的タンパク質の特定アミノ酸残基への末端（ガンマ）リン酸基の移動を担っている。標的タンパク質中の特定チロシン、セリン、またはトレオニンアミノ酸残基のリン酸化によって、それらの活性は変調されて、細胞シグナル伝達および代謝の重大な変化につながり得る。プロテインキナーゼは、細胞膜、サイトソル、および核などの細胞器官において見出され得、代謝、細胞の成長および分裂、細胞シグナル伝達、免疫応答の変調、ならびにアポトーシスを包含する多数の細胞機能の媒介を担っている。受容体チロシンキナーゼは、細胞外の合図に応答して、細胞内シグナル伝達カスケードを活性化させるタンパク質チロシンキナーゼ活性を有する大きな細胞表面受容体ファミリーである（Ｐｌｏｗｍａｎら（１９９４）ＤＮ＆Ｐ、７（６）：３３４〜３３９）。
【０００３】
様々なプロテインキナーゼの異常な活性化または過剰発現は、良性および悪性増殖、過剰血管新生によって特徴付けられる複数の疾患および障害、さらには免疫系の不適切な活性化から生じる疾患の機構に関与している。したがって、選択されたキナーゼまたはキナーゼファミリーの阻害薬は、これらに限られないが、充実性腫瘍、血液悪性病変、関節炎、移植片対宿主疾患、紅斑性狼瘡、乾癬、大腸炎、回腸炎（ｉｌｌｅｉｔｉｓ）、多発性硬化症、ブドウ膜炎、冠状動脈脈管障害、全身性硬化症、アテローム硬化症、喘息、移植拒絶、アレルギー、皮膚筋炎、天疱瘡などを包含する癌、自己免疫疾患、および炎症性病態を処置する際に有用であると期待される。
【０００４】
疾患を変調するために標的化し得るキナーゼの例には、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）ファミリーのメンバーなどの受容体チロシンキナーゼ、ならびにキナーゼのＳｙｋ、ＳＲＣ、およびＴｅｃファミリーのメンバーなどの細胞内タンパク質が包含される。
【０００５】
Ｔｅｃキナーゼは、専らではないが主に、造血系起源の細胞において発現される非受容体型チロシンキナーゼである（Ｂｒａｄｓｈａｗ  ＪＭ．、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ．２０１０、２２：１１７５〜８４）。Ｔｅｃファミリーには、Ｔｅｃ、Ｂｒｕｔｏｎ型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）、誘導性Ｔ細胞キナーゼ（Ｉｔｋ）、静止リンパ球キナーゼ（ｒｅｓｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ｋｉｎａｓｅ：Ｒｌｋ／Ｔｘｋ）、および骨髄発現キナーゼ（Ｂｍｘ／Ｅｔｋ）が包含される。Ｂｔｋは、Ｂ細胞受容体シグナル伝達において重要なＴｅｃファミリーキナーゼである。Ｂｔｋは、Ｓｒｃファミリーキナーゼによって活性化され、ＰＬＣガンマをリン酸化するので、このことは、Ｂ細胞の機能および生存に対する作用につながる。加えて、Ｂｔｋは、マクロファージ、肥満細胞、および好中球による免疫複合体の認識に応答してのシグナル伝達において重要である。Ｂｔｋを阻害することはまた、リンパ腫細胞の生存において重要であり（Ｈｅｒｍａｎ，ＳＥＭ．Ｂｌｏｏｄ  ２０１１、１１７：６２８７〜６２８９）、Ｂｔｋの阻害がリンパ腫を処置する際に有用であり得ることを示唆している。したがって、Ｂｔｋおよび関連キナーゼの阻害薬は、抗炎症薬および抗癌薬として大いに重要である。
【０００６】
ｃＳＲＣは、Ｌｙｎ、Ｆｙｎ、Ｌｃｋ、Ｈｃｋ、Ｆｇｒ、Ｂｌｋ、Ｓｙｋ、Ｙｒｋ、およびＹｅｓを包含するチロシンキナーゼのＳＲＣファミリーの原型メンバーである。ｃＳＲＣは、癌に関係するシグナル伝達経路に深く関わっていて、ヒトの悪性病変において過剰発現されることが多い（Ｋｉｍ  ＬＣ、Ｓｏｎｇ  Ｌ、Ｈａｕｒａ  ＥＢ．Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２００９  ６（１０）：５８７〜９）。細胞接着、遊走、および骨リモデリングにおけるｃＳＲＣの役割によって、このキナーゼは骨転移の発生および進行に強く関与している。ｃＳＲＣは成長因子受容体チロシンキナーゼの下流でのシグナル伝達にも関係しており、また細胞周期進行を調節しているので、このことは、ｃＳＲＣの阻害が癌細胞の増殖に強い影響を有し得るであろうことを示唆している。加えて、ＳＲＣファミリーのメンバーの阻害は、免疫機能を変調するように設計された処置において有用であり得る。Ｌｃｋを包含するＳＲＣファミリーのメンバーは、サイトカインの放出、生存、および増殖をもたらす遺伝子調節事象につながるＴ細胞受容体シグナル伝達を調節する。このため、Ｌｃｋの阻害薬が、移植片拒絶反応およびＴ細胞媒介性自己免疫疾患における適用の可能性を持った免疫抑制薬として熱心に探し求められている（Ｍａｒｔｉｎら、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｔｈｅｒ  Ｐａｔ．２０１０、２０：１５７３〜９３）。
【０００７】
小分子阻害薬を使用してのキナーゼの阻害は成功裡に、ヒトの病態を処置する際に使用されるいくつかの認可治療薬につながった。本明細書において、本発明者らは、新規のキナーゼ阻害薬ファミリーを開示する。さらに、本発明者らは、化合物の置換における変更がキナーゼの選択性、ひいてはその薬剤の生物学的機能に影響を有し得ることを実証する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の概要
本発明は、新規のキナーゼ阻害薬ファミリーに関する。この群の化合物は、ＴｅｃおよびＳｒｃプロテインキナーゼファミリーのメンバー、より詳細にはＢｔｋに対して阻害活性を有することが見出されている。
【０００９】
本発明の一態様は、式１：
【化１】
2015521987.tif 000003
の化合物に関する
［式中、
Ｒは、以下の１）から５）：
１）水素、
２）アルキル、
３）ヘテロアルキル、
４）カルボシクリル、
５）ヘテロシクリル、
からなる群から選択され、この際、上記アルキル、ヘテロアルキル、カルボシクリル、およびヘテロシクリルは、さらに置換されていてよい。
Ｙは、
【化２】
2015521987.tif 000004
であり；
Ｅは、酸素から選択され、
Ｚは、
【化３】
2015521987.tif 000005
から選択され；
Ｙ−Ｅ−Ｚ−Ｗは、
【化４】
2015521987.tif 000006
であり；
Ｘ１およびＸ２は、水素およびハロゲンから独立に選択され；
ｎは、０〜２の整数であり；
ｍは、０〜２の整数であり；
ｍ’は、０〜２の整数であり；
Ｗは、以下の１）から１１）：
１）アルキル、
２）アラルキル、
３）ヘテロアラルキル、
４）−ＯＲ３、
５）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、
６）−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６、
７）−ＣＨ２Ｏ−Ｒ４、
８）−ＮＲ５Ｒ６、
９）−ＮＲ２Ｃ（Ｏ）Ｒ４、
１０）−ＮＲ２Ｓ（Ｏ）ｎＲ４、
１１）−ＮＲ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６
から独立に選択され；
この際、上記アルキル、アラルキル、およびヘテロアラルキルは、さらに置換されていてよく；
Ｒ２は、水素またはアルキルから選択され；
Ｒ３は、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、またはヘテロアラルキルから選択され；
Ｒ４は、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、またはヘテロアリールから選択され；
Ｒ５およびＲ６は、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、カルボシクリル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリールから独立に選択されるか、またはＲ５およびＲ６は、縮合して３員〜８員のヘテロシクリル環系を形成していてよい］。
【００１０】
好ましい実施形態には、Ｗが−ＯＲ３から選択され、かつＲ３が置換もしくは非置換のアラルキル、または置換もしくは非置換のヘテロアラルキルから選択される式１の化合物が包含される。
【００１１】
より好ましい実施形態には、Ｗが、
【化５】
2015521987.tif 000007
からなる群から選択される式１の化合物が包含される。
【００１２】
なおより実施形態には、Ｙが、
【化６】
2015521987.tif 000008
からなる群から選択される式１の化合物が包含される。
【００１３】
好ましい実施形態には、Ｚが、
【化７】
2015521987.tif 000009
からなる群から選択される式１の化合物が包含される。
【００１４】
好ましい実施形態には、Ｒが、
【化８】
2015521987.tif 000010
からなる群から選択される式１の化合物が包含される。
【００１５】
より好ましい実施形態には、Ｗが、
【化９】
2015521987.tif 000011
からなる群から選択される式１の化合物が包含される。
【００１６】
より好ましい実施形態には、Ｚが、
【化１０】
2015521987.tif 000012
からなる群から選択される式１の化合物が包含される。
【００１７】
本発明の別の態様は、有効量の式１の化合物と、薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。
【００１８】
本発明の別の態様では、プロテインキナーゼの阻害薬としての、より詳細には、Ｂｔｋの阻害薬としての式１の化合物の使用を提供する。
【００１９】
本発明の別の態様は、キナーゼ機能を変調する方法を提供し、この方法は、細胞を、Ｂｔｋなどの所与の１種または複数のキナーゼの酵素活性を変調するのに十分な量の本発明の化合物と接触させて、キナーゼ機能を変調することを含む。
【００２０】
本発明の別の態様は、標的キナーゼ機能を変調する方法を提供し、この方法は、（ａ）細胞を、標的キナーゼ機能を変調するのに十分な量の本発明の化合物と接触させ、それによって（ｂ）標的キナーゼ活性およびシグナル伝達を変調することを含む。
【００２１】
本発明の別の態様はプローブを提供し、このプローブは、検出可能なラベルまたはアフィニティータグで標識した式１の化合物を含む。言い換えると、このプローブは、検出可能なラベルに共有結合した式１の化合物の残基を含む。このような検出可能なラベルには、これらだけに限定されないが、蛍光部分、化学発光部分、常磁性コントラスト剤、金属キレート、放射性同位体含有部分、またはビオチンが包含される。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
好ましい実施形態の詳細な説明
本発明は、新規のキナーゼ阻害薬に関する。これらの化合物は、チロシンキナーゼオーロラ、ＳＲＣ（より具体的にはＬｃｋ）、およびＴｅｃ（より具体的にはＢｔｋ）キナーゼファミリーのメンバーを包含するプロテインキナーゼの阻害薬としての活性を有することが見出されている。
【００２３】
本発明の化合物を、有効量の式１の化合物を薬学的に許容される希釈剤または担体と共に含む医薬組成物に製剤化することができる。例えば、この医薬組成物は、経口投与（例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤）、非経口投与（例えば、注射剤（静脈内、筋肉内、皮下））、点滴製剤、吸入、目薬、局所投与（例えば、軟膏剤）、または坐剤に適した従来の医薬品形態であってよい。選択する投与経路に関わらず、当該化合物は、当業者に公知の従来の方法によって薬学的に許容される剤形に製剤化することができる。
【００２４】
語句「薬学的に許容される」は、妥当な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー性応答、または他の問題もしくは合併症を伴うことなく、ヒトおよび動物の組織と接触させて使用するために適した、合理的な利益／リスク比に見合うリガンド、材料、組成物、および／または剤形を指すために本明細書では使用されている。
【００２５】
語句「薬学的に許容される担体」は、本明細書で使用する場合、薬学的に許容される材料、組成物、またはビヒクル、例えば、液体または固体の増量剤、希釈剤、賦形剤、溶媒、またはカプセル封入材を意味する。各担体は、有効成分を含めた製剤の他の成分と適合可能であるという意味において許容され、かつ患者にとって障害性でないか、または無害でなくてはならない。薬学的に許容される担体として役立ち得る材料のいくつかの例には、（１）糖、例えば、ラクトース、グルコース、およびスクロース；（２）デンプン、例えば、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、置換または非置換β−シクロデキストリン；（３）セルロースおよびその誘導体、例えば、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、および酢酸セルロース；（４）トラガカント末；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）賦形剤、例えば、カカオバターおよび坐剤ワックス；（９）油、例えば、ラッカセイ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリブ油、トウモロコシ油、およびダイズ油；（１０）グリコール、例えば、プロピレングリコール；（１１）ポリオール、例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール；（１２）エステル、例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；（１３）寒天；（１４）緩衝剤、例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質不含の水；（１７）等張性生理食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液、ならびに（２１）医薬製剤で使用される他の非毒性かつ適合可能な物質が包含される。
【００２６】
用語「薬学的に許容される塩」は、化合物（複数可）の比較的非毒性の無機酸および有機酸付加塩を指す。これらの塩は、化合物（複数可）の最終的な単離および精製中にその場で調製することができるか、または別に、精製した化合物（複数可）をその遊離塩基の形態で、適切な有機酸または無機酸と反応させ、かつそのようにして形成した塩を単離することによって調製することができる。代表的な塩には、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メタンスルホン酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリルスルホン酸塩、およびアミノ酸塩などが包含される（例えば、Ｂｅｒｇｅら（１９７７）、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．  ６６：１〜１９を参照されたい）。
【００２７】
他の場合には、本発明の化合物は、１個または複数の酸性官能基を含有することがあり、このため、薬学的に許容される塩基と共に薬学的に許容される塩を形成することができる。この場合の用語「薬学的に許容される塩」は、化合物（複数可）の比較的非毒性の無機塩基および有機塩基付加塩を指す。これらの塩も同じく、化合物（複数可）の最終的な単離および精製中にその場で調製することができるか、または別に、精製した化合物（複数可）をその遊離酸の形態で、適切な塩基、例えば、薬学的に許容される金属カチオンのヒドロキシド、カーボナート、もしくはバイカーボネートと、アンモニアと、または薬学的に許容される有機一級、二級、もしくは三級アミンと反応させることによって調製することができる。代表的なアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩には、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびアルミニウム塩などが包含される。塩基付加塩の形成に有用な代表的な有機アミンには、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどが包含される（例えば、前出のＢｅｒｇｅらの文献を参照されたい)。
【００２８】
本明細書で使用する場合、用語「アフィニティータグ」は、溶液からの共役体の抽出を可能にする、本発明の化合物またはタンパク質キナーゼドメインのいずれかに連結したリガンドまたは基を意味する。
【００２９】
用語「アルキル」は、置換または非置換飽和炭化水素基を指し、これには、ハロアルキル基、例えば、トリフルオロメチルおよび２，２，２−トリフルオロエチルなどを包含する直鎖アルキルおよび分岐鎖アルキル基が包含される。代表的なアルキル基には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、（シクロヘキシル）メチル、シクロプロピルメチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチルなどが包含される。用語「アルケニル」および「アルキニル」は、長さおよび考えられ得る置換においては上記のアルキルに類似しているが、少なくとも１個の二重または三重結合をそれぞれ含有する置換または非置換不飽和脂肪族基を指す。代表的なアルケニル基には、ビニル、プロペン−２−イル、クロチル、イソペンテン−２−イル、１，３−ブタジエン−２−イル）、２，４−ペンタジエニル、および１，４−ペンタジエン−３−イルが包含される。代表的なアルキニル基には、エチニル、１−および３−プロピニル、ならびに３−ブチニルが包含される。特定の好ましい実施形態では、アルキル置換基は、例えば、１〜６個の炭素原子を有する低級アルキル基である。同様に、アルケニルおよびアルキニルは好ましくは、例えば、２〜６個の炭素原子を有する低級アルケニルおよびアルキニル基を指す。本明細書で使用する場合、「アルキレン」は、空き原子価２（原子価１ではなく）を有するアルキル基、例えば、−（ＣＨ２）１〜１０−およびその置換変形物を指す。
【００３０】
用語「アルコキシ」は、酸素が結合しているアルキル基を指す。代表的なアルコキシ基には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが包含される。「エーテル」は、酸素によって共有結合している２個の炭化水素である。したがって、アルキルをエーテルにするアルキルの置換基はアルコキシであるか、またはアルコキシに類似する。
【００３１】
用語「アルコキシアルキル」は、アルコキシ基で置換されて、エーテルを形成しているアルキル基を指す。
【００３２】
用語「アミド（ａｍｉｄｅ）」および「アミド（ａｍｉｄｏ）」は、アミノ置換カルボニルと当分野では認知されていて、一般式：
【化１１】
2015521987.tif 000013
によって表され得る部分を包含する［式中、Ｒ９、Ｒ１０は上記で定義されたとおり］。アミドの好ましい実施形態には、不安定になり得るイミドは包含されないであろう。
【００３３】
用語「アミン」および「アミノ」は当分野で認知されており、非置換および置換アミンの両方ならびにその塩、例えば、一般式：
【化１２】
2015521987.tif 000014
によって表され得る部分を指す［式中、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１０’はそれぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８を表すか、またはＲ９およびＲ１０は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、環構造中に４〜８個の原子を有する複素環を構成し；Ｒ８は、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、またはポリシクリルを表し；かつｍは０または１〜８の整数である］。好ましい実施形態では、Ｒ９またはＲ１０のうちの一方のみがカルボニルであってよく、例えば、Ｒ９、Ｒ１０、および窒素が一緒に、イミドを形成することはない。なおより好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０（および任意選択により、Ｒ１０’）はそれぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、または−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８を表す。ある種の実施形態では、アミノ基は塩基性であり、これは、プロトン化形態がｐＫａ≧７．００を有することを意味する。
【００３４】
用語「アラルキル」は、本明細書で使用する場合、アリール基で置換されたアルキル基、例えば、−（ＣＨ２）ｎ−Ａｒを指す。
【００３５】
用語「ヘテロアラルキル」は、本明細書で使用する場合、ヘテロアリール基で置換されたアルキル基、例えば、−（ＣＨ２）ｎ−Ｈｅｔを指す。
【００３６】
用語「アリール」には、本明細書で使用する場合、環の各原子が炭素である５員、６員、および７員の置換または非置換単環芳香族基が包含される。用語「アリール」には、２個以上の炭素が２個の隣接する環に共通し、これらの環の少なくとも１個が芳香族であり、例えば、他の環がシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリルであってよい２個以上の環を有する多環系も包含される。アリール基には、ベンゼン、ナフタレン、フェナントレン、フェノール、アニリン、アントラセン、およびフェナントレンが包含される。
【００３７】
用語「炭素環」および「カルボシクリル」は、本明細書で使用する場合、環の各原子が炭素である非芳香族の置換または非置換環を指す。用語「炭素環」および「カルボシクリル」には、２個以上の炭素が２個の隣接する環に共通し、これらの環の少なくとも１個が炭素環式であり、例えば、他の環がシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリルであってよい２個以上の環を有する多環系も包含される。代表的な炭素環基には、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−シクロヘキセニル、および３−シクロヘキセン−１−イル、シクロヘプチルが包含される。
【００３８】
用語「カルボニル」は当分野で認知されていて、一般式：
【化１３】
2015521987.tif 000015
によって表され得るような部分を包含する［式中、Ｘは結合であるか、または酸素もしくは硫黄を表し、Ｒ１１は、水素、アルキル、アルケニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８、または薬学的に許容される塩を表す］。Ｘが酸素であり、Ｒ１１が水素ではない場合、この式は「エステル」を表す。Ｘが酸素であり、Ｒ１１が水素である場合、この式は「カルボン酸」を表す。
【００３９】
用語「ヘテロアリール」には、置換または非置換芳香族５〜７員環構造、より好ましくは５〜６員環が包含され、その環構造は１〜４個のヘテロ原子を包含する。用語「ヘテロアリール」には、２個以上の炭素が２個の隣接する環に共通し、これらの環の少なくとも１個がヘテロ芳香族であり、例えば、他の環がシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリルであってよい２個以上の環を有する多環系も包含される。ヘテロアリール基には、例えば、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、イソオキサゾール、オキサゾール、チアゾール、トリアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、およびピリミジンなどが包含される。
【００４０】
用語「ヘテロ原子」は、本明細書で使用する場合、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、窒素、酸素、および硫黄である。
【００４１】
用語「ヘテロシクリル」または「複素環基」は、置換または非置換の非芳香族３〜１０員環構造、より好ましくは３〜７員環を指し、その環構造は１〜４個のヘテロ原子を包含する。用語「ヘテロシクリル」または「複素環基」には、２個以上の炭素が２個の隣接する環に共通し、これらの環の少なくとも１個が複素環式であり、例えば、他の環がシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリルであってよい２個以上の環を有する多環系も包含される。ヘテロシクリル基には、例えば、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、モルホリン、ラクトン、およびラクタムが包含される。
【００４２】
用語「炭化水素」は、本明細書で使用する場合、＝Ｏまたは＝Ｓ置換基を有さず、典型的には少なくとも１個の炭素−水素結合および主に炭素の主鎖を有するが、任意選択により、ヘテロ原子を包含してよい、炭素原子を介して結合している基を指す。したがって、メチル、エトキシエチル、２−ピリジル、およびトリフルオロメチルなどの基は本出願では、ヒドロカルビルであるとみなされるが、アセチル（結合炭素上に＝Ｏ置換基を有する）およびエトキシ（炭素ではなく酸素を介して結合）などの置換基はヒドロカルビルであるとみなされない。ヒドロカルビル基には、これらだけに限定されないが、アリール、ヘテロアリール、炭素環、複素環、アルキル、アルケニル、アルキニル、およびこれらの組み合わせが包含される。
【００４３】
用語「ポリシクリル」または「多環式」は、２個以上の炭素が２個の隣接する環に共通し、例えば、これらの環が「縮合環」である２個以上の環（例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリル）を指す。多環系の環はそれぞれ、置換されていても、非置換であってもよい。
【００４４】
本明細書で使用する場合、用語「プローブ」は、検出可能なラベルまたはアフィニティータグのいずれかで標識され、かつプロテインキナーゼドメインに共有結合し得るか、または非共有結合し得る本発明の化合物を意味する。例えば、このプローブが非共有結合する場合、このプローブを試験化合物で置き換え得る。例えば、このプローブが共有結合する場合、このプローブを使用して架橋付加物を形成することができ、この付加物を試験化合物によって定量化および阻害し得る。
【００４５】
用語「置換されている」は、主鎖の１個または複数の炭素上の水素に置き換わる置換基を有する部分を指す。「置換」または「〜で置換」には、そのような置換が、置換されている原子および置換基の許容原子価に従っていて、かつその置換によって安定した化合物、例えば、転位、環化、脱離などによる変換が自然に起きない化合物が生じるという暗黙の但し書きが含まれることを理解されたい。本明細書で使用する場合、「置換されている」には、有機化合物の全ての許容可能な置換基が包含されることが企図されている。広い態様では、この許容可能な置換基には、有機化合物の非環式および環式、分岐および非分岐、炭素環式および複素環式、芳香族および非芳香族置換基が包含される。この許容可能な置換基は、適切な有機化合物に関して１個または複数であってよく、かつ同一でも異なってもよい。本発明では、窒素などのヘテロ原子は、水素置換基および／またはヘテロ原子の原子価を満たす本明細書に記載の有機化合物の任意の許容可能な置換基を有し得る。置換基には、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミル、またはアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセタート、またはチオホルマートなど）、アルコキシル、ホスホリル、ホスファート、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分が包含され得る。炭化水素鎖上の置換されている部分はそれ自体も適宜置換され得ることは、当業者であれば理解するであろう。
【００４６】
本発明の化合物には、中間体および／または最終化合物中に存在する原子の全ての同位体も包含される。同位体には、同じ原子番号を有するが、ただし異なる質量数を有する原子が包含される。例えば、水素の同位体には重水素およびトリチウムが包含される。
【００４７】
一般合成法
次のセクションでは、本発明の化合物を調製する際に有用であり得る一般合成法（複数可）を記載する。
【００４８】
一般合成法Ａ：
【化１４】
2015521987.tif 000016
一般合成法Ｂ：
【化１５】
2015521987.tif 000017
実施例
【００４９】
実施例
次の合成法は、式Ｉの化合物を調製するために使用する化学作用を代表することを意図したものであって、限定的であることを意図したものではない。
【００５０】
中間体２−ｃの合成：
【化１６】
2015521987.tif 000018
【００５１】
ステップ１：中間体２−ｂ
シクロペンタノン（１２．７３ｇ、１５１．０ｍｍｏｌ）の無水ベンゼン（１５．２ｍｌ）中の溶液に、２−シアノ酢酸メチル（１５．０ｇ、１５１．０ｍｍｏｌ）、酢酸アンモニウム（１．５２ｇ、１９．６８ｍｍｏｌ）、および酢酸（３．０４ｍｌ）を加えた。反応混合物をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置中で１２時間還流加熱し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を真空中で除去した。水および酢酸エチルを残渣に加え、有機層を分離し、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体２−ｂを茶色のオイルとして得た。
【００５２】
ステップ２：中間体２−ｃ
窒素下で撹拌している中間体２−ｂ（２５．０ｇ、１５１．０ｍｍｏｌ）のメタノール中の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（３．２２ｇ、１．５１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＨ２でパージし、水素１ａｔｍ下で一晩撹拌し、セライトで濾過した。濾液を真空濃縮して、中間体２−ｃを黄色のオイルとして得た。
【００５３】
中間体３−ｄの合成：
【化１７】
2015521987.tif 000019
【００５４】
ステップ１：中間体３−ｂ
０℃に冷却したレソルシノール（１１．８３ｇ、１０７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍｌ）中の溶液に、イミダゾール（１５．３６ｇ、２２６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（１７．０ｇ、１１３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温にて一晩撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え；有機層を分離し、塩化アンモニウムの飽和水溶液およびブラインで３回洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体３−ｂを無色のオイルとして得た。
【００５５】
ステップ２：中間体３−ｃ
中間体３−ｂ（１．９４ｇ、８．６８ｍｍｏｌ）およびチアゾール−５−イルメタノール（１．０ｇ、８．６８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍｌ）中の溶液に、トリフェニルホスフィン（３．４２ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（２．５２ｍｌ、１３．０ｍｍｏｌ）を順次加え、次いで、反応物を室温にて一晩撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体３−ｃを黄色のオイルとして得た。
【００５６】
ステップ３：中間体３−ｄ
中間体３−ｃ（１．６ｇ、４．９８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍｌ）中の溶液に、ＴＢＡＦのＴＨＦ中の１．０Ｍ溶液（５．４７ｍｌ、５．４７ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて１時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。ジエチルエーテルを残渣に加えると；沈澱物が形成し、これを濾過によって収集して、中間体３−ｄを白色の固体として得た。
【００５７】
中間体４−ｄの合成：
【化１８】
2015521987.tif 000020
【００５８】
ステップ１：中間体４−ｂ
４−ヨードアニリン（１３．１４ｇ、６０．０ｍｍｏｌ）の１ＮのＨＣＩ（１５０ｍｌ）中の溶液に、亜硝酸ナトリウムの１．０Ｍ水溶液（６０．０ｍｌ、６０．０ｍｍｏｌ）を室温にて滴加し、混合物を１時間撹拌し、次いで、中間体２−ｃ（５．０ｇ、２９．９ｍｍｏｌ）のエタノール（４１．７ｍｌ）および水（５５６ｍｌ）中の氷冷溶液に滴加した。硫酸ナトリウムを少量ずつ加えることによって、ｐＨを７に維持した。混合物を０℃にて３時間、次いで、完了するまで室温にて撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄しＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体４−ｂをベージュ色のオイルとして得た。
【００５９】
ステップ２：中間体４−ｃ
０℃に冷却した中間体４−ｂ（７．０ｇ、１７．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１７６ｍｌ）中の溶液に、１０ＮのＮａＯＨ水溶液（４４．１ｍｌ、４４１．０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて一晩撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、１０％クエン酸、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体４−ｃを黄色の固体として得た。
【００６０】
ステップ３：中間体４−ｄ
中間体４−ｃ（２．１ｇ、６．１９ｍｍｏｌ）およびブロモアセトニトリル（４７４μｌ、６．８１ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブタノール（３１．０ｍｌ）中の溶液に、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのｔｅｒｔ−ブタノール中の１．０Ｍ溶液（６．１９ｍｌ、６．１９ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応物を室温にて２時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体４−ｄを黄色の固体として得た。
【００６１】
化合物１の合成：
【化１９】
2015521987.tif 000021
【００６２】
ステップ１：中間体２−ｌ
中間体３−ｄ（１２５ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）および中間体４−ｄ（２００ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン中の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（３７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（３９３ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（Ｉ）（２３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を順次加えた。反応物を還流で一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。水および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体５−ａを茶色の固体として得た。
【００６３】
ステップ１１：化合物
中間体５−ａ（１５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３．０ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（２６５ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃にて３時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物１・２ＨＣｌを白色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝４８５．２
【００６４】
中間体６−ｃの合成：
【化２０】
2015521987.tif 000022
【００６５】
ステップ１：中間体６−ｂ
中間体６−ａ（５．０５ｇ、５０．５ｍｍｏｌ）の無水ベンゼン（５．０ｍｌ）中の溶液に、２−シアノ酢酸メチル（５．０ｇ、５０．５ｍｍｏｌ）、酢酸アンモニウム（５０６ｍｇ、６．５６ｍｍｏｌ）、および酢酸（１．０ｍｌ）を加えた。反応混合物を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置を使用して、１２時間還流に加熱し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を真空中で除去した。水および酢酸エチルを残渣に加え、有機層を分離し、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体６−ｂを茶色のオイルとして得た。
【００６６】
ステップ２：中間体６−ｃ
中間体６−ｂ（９．０ｇ、４９．７ｍｍｏｌ）のメタノール中の溶液に、窒素下で、１０％Ｐｄ／Ｃ（１．０６ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＨ２でパージし、水素１ａｔｍ下で一晩撹拌した。次いで、反応物をセライトで濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、中間体６−ｃを黄色のオイルとして得た。
【００６７】
中間体７−ｄの合成：
【化２１】
2015521987.tif 000023
【００６８】
ステップ１：中間体７−ｂ
クロロ酢酸エチル（５０．０ｇ、０．４１ｍｏｌ）およびギ酸エチル（３０．２ｇ、０．４１ｍｏｌ）を無水トルエン（５００ｍＬ）に溶かし、０℃に冷却した。ナトリウムエトキシド（３５．１ｇ、０．４９ｍｏｌ）を少量ずつ加えた。反応混合物を０℃にて５時間、次いで、室温にて一晩撹拌した。反応混合物を水（２５０ｍＬ）でクエンチし、ジエチルエーテルで２回洗浄した。水性層を０℃に冷却し、１ＮのＨＣｌ水溶液を使用して、ｐＨ４〜５に酸性化した。水性層をジエチルエーテルで２回抽出し、合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体７−ｂをベージュ色のオイルとして得た。
【００６９】
ステップ２：中間体７−ｃ
エチル２−クロロ−３−オキソプロパノアート、７−ｂ（３４．７ｇ、２３０ｍｍｏｌ）のトルエン（２５０ｍｌ）中の溶液に、チオアセトアミド（２６．０ｇ、３４６．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を９０℃にて一晩撹拌し、次いで、室温に冷却し、水（３００ｍＬ）で希釈し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でｐＨ＝７に中和した。酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体７−ｃをベージュ色のオイルとして得た。
【００７０】
ステップ３：中間体７−ｄ
０℃に冷却した中間体７−ｃ（２２．２ｇ、１３０．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４３０ｍｌ）中の溶液に、ＬｉＡｌＨ４のＴＨＦ中の１．０Ｍ溶液（９１．０ｍｌ、９１．０ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温にゆっくり加温し、２時間撹拌した。水（３．５ｍｌ）を徐々に加え、続いて、１５％  ＮａＯＨ３．５ｍｌ（３．５ｍｌ）および水（１０．５ｍｌ）を加え、混合物を１時間撹拌した。反応物をセライトで濾過し、濾液を収集した。揮発性物質を真空中で除去して、中間体７−ｄを黄色のオイルとして得た。
【００７１】
中間体８−ｅの合成：
【化２２】
2015521987.tif 000024
【００７２】
ステップ１：中間体８−ｂ
０℃に冷却した１−フルオロ−３，５−ジメトキシベンゼン（１２．５ｇ、８０．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８０ｍｌ）中の溶液に、ＢＢｒ３のジクロロメタン中の１．０Ｍ溶液（２００ｍｌ、２００ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴加した。反応物を０℃にて１時間撹拌し、次いで、室温にゆっくり加温し、１８時間撹拌した。反応物を０℃に冷却し、ＭｅＯＨおよび水をゆっくり加えることによってクエンチした。室温にて１時間撹拌した後に、混合物を濾過し、揮発性物質を真空中で除去した。固体を酢酸エチルで２回洗浄し；濾液を真空濃縮して、中間体８−ｂをオレンジ色の固体として得た。
【００７３】
ステップ２：中間体８−ｃ
０℃に冷却した中間体８−ｂ（１０．２５ｇ、８０．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍｌ）中の溶液に、イミダゾール（５．９９ｇ、８８．０ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（１３．２７ｇ、８８．０ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応物を室温にて一晩撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え；有機層を分離し、塩化アンモニウムの飽和水溶液およびブラインで３回洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体８−ｃを黄色のオイルとして得た。
【００７４】
ステップ３：中間体８−ｄ
中間体８−ｃ（１．０ｇ、１０５．０ｍｍｏｌ）および中間体７−ｄ（３５２ｍｇ、２．７３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍｌ）中の溶液に、トリフェニルホスフィン（１．０７ｇ、４．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（７９６μｌ、４．１ｍｍｏｌ）を室温にて順次加えた。次いで、反応物を室温にて１時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体８−ｄを黄色のオイルとして得た。
【００７５】
ステップ４：中間体８−ｅ
中間体８−ｄ（７５０ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍｌ）中の溶液に、ＴＢＡＦのＴＨＦ中の１．０Ｍ溶液（１．７２ｍｌ、１．７２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて１時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。ジエチルエーテルを残渣に加えると；沈澱物が形成し、これを濾過によって収集して、中間体８−ｅを白色の固体として得た。
【００７６】
中間体９−ｄの合成：
【化２３】
2015521987.tif 000025
【００７７】
ステップ１：中間体９−ｂ
４−ブロモアニリン（８．４３ｇ、４９．０ｍｍｏｌ）の１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（１２３ｍｌ）中の溶液に、１．０Ｍ亜硝酸ナトリウム水溶液（４９．０ｍｌｇ、４９．０ｍｍｏｌ）を室温にて加えた。混合物を１時間撹拌し、次いで、中間体６−ｃ（４．５ｇ、２４．５６ｍｍｏｌ）のエタノール（３４．３０ｍｌ）および水（４５７ｍＬ）中の氷冷溶液に滴加した。酢酸ナトリウムを少量ずつ加えることによって、ｐＨを７に維持した。混合物を０℃にて３時間、次いで、完了するまで室温にて撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体９−ｂをベージュ色のオイルとして得た。
【００７８】
ステップ２：中間体９−ｃ
０℃に冷却した中間体９−ｂ（１０．０ｇ、２７．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２７３ｍｌ）中の溶液に、１０Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（６８．３ｍｌ、６８３．０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて２時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、１０％クエン酸、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体９−ｃを黄色の固体として得た。
【００７９】
ステップ３：中間体９−ｄ
０℃に冷却した中間体９−ｃ（４．０ｇ、１２．９８ｍｍｏｌ）およびブロモアセトニトリル（９９５μｌ、１４．２８ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブタノール（６４．９ｍｌ）中の溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのｔｅｒｔ−ブタノール中の１．０Ｍ溶液（２７．３ｍｌ、２７．３ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて２時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体９−ｄをベージュ色の固体として得た。
【００８０】
化合物３の合成：
【化２４】
2015521987.tif 000026
【００８１】
ステップ１：中間体１０−ａ
中間体８−ｅ（１３８ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）および中間体９−ｄ（２００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン中の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（３６ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（３７５ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（Ｉ）（２２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を順次加えた。反応物を還流で一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。水および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体１０−ａを茶色の固体として得た。
【００８２】
ステップ１３：化合物３
中間体１０−ａ（２９１ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６．０ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（４７９ｍｇ、４．６０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃にて３時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物３・２ＨＣｌを白色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５３３．１
【００８３】
中間体１１−ｄの合成：
【化２５】
2015521987.tif 000027
【００８４】
ステップ１：中間体１１−ｂ
３，５−ジフルオロフェノール（１５．０ｇ、１１５ｍｍｏｌ）のアセトン（２００ｍｌ）中の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（２３．９０ｇ、１７３ｍｍｏｌ）およびクロロメチルメチルエーテル（１５．８５ｇ、１２７ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応物を室温にて一晩撹拌し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、中間体１１−ｂを無色のオイルとして得た。
【００８５】
ステップ２：中間体１１−ｃ
（１−メチル−ｌＨ−イミダゾール−５−イル）メタノール（３．１ｇ、２７．６ｍｍｏｌ）および中間体１１−ｂ（４．０１ｇ、２３．０４ｍｍｏｌ）のトルエン（２５．０ｍｌ）およびＤＭＰＵ（２５．０ｍｌ）中の溶液に、ナトリウム２−メチルプロパン−２−オラート（４．４３ｇ、４６．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を８０℃にて一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。塩化アンモニウム飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、塩化アンモニウムの飽和水溶液およびブラインで２回洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体１１−ｃをベージュ色のオイルとして得た。
【００８６】
ステップ３：中間体１１−ｄ
中間体１１−ｃ（３．２ｇ、１２．０２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２５．０ｍｌ）中の溶液に、１，４−ジオキサン中の４Ｎ  ＨＣｌ（１０．９５ｍｌ、３６１．０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて一晩撹拌した。揮発性物質を真空除去した。ジエチルエーテルを残渣に加えると；沈澱物が形成し、これを濾過によって収集して、中間体１１−ｄ−ＨＣｌを白色の固体として得た。
【００８７】
化合物４の合成：
【化２６】
2015521987.tif 000028
【００８８】
ステップ１：中間体１２−ａ
中間体１１−ｄ（１２０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）および中間体９−ｄ（１８７ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン中の溶液に、Ｎ，Ｎ−  ジメチルグリシン（１６７ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（５２８ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（Ｉ）（１０３ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を順次加えた。反応物を還流で一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。酢酸エチルを加え、反応物をセライトで濾過した。水を濾液に加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体１２−ａを茶色の固体として得た。
【００８９】
ステップ２：化合物４
中間体１２−ａ（２５０ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６．０ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（４２６ｍｇ、４．０９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃にて３時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物４・２ＨＣｌを白色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５１６．２
【００９０】
中間体１３−ｃの合成：
【化２７】
2015521987.tif 000029
【００９１】
ステップ１：中間体１３−ｂ
中間体８−ｃ（１．４３ｇ、５．８９ｍｍｏｌ）および（２−メチルオキサゾール−５−イル）メタノール（１．０ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍｌ）中の溶液に、トリフェニルホスフィン（２．３２ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（１．７２ｍｌ、８．８４ｍｍｏｌ）を室温にて順次加えた。次いで、反応物を室温にて１時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体１３−ｂを黄色のオイルとして得た。
【００９２】
ステップ２：中間体１３−ｃ
中間体１３−ｂ（１．１０ｇ、３．２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３２ｍｌ）中の溶液に、ＴＢＡＦのＴＨＦ中の１．０Ｍ溶液（３．５９ｍｌ、３．５９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて１時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体１３−ｃを白色の固体として得た。
【００９３】
化合物５の合成：
【化２８】
2015521987.tif 000030
【００９４】
ステップ１：中間体１４−ａ
中間体１３−ｃ（１２９ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）および中間体９−ｄ（２００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン中の溶液に、Ｎ，Ｎ  ジメチルグリシン（３６ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（３７５ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（Ｉ）（２２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を順次加えた。反応物を一晩還流で撹拌し、次いで、室温に冷却した。酢酸エチルを加え、反応物をセライトで濾過した。水を濾液に加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体１４−ａを茶色の固体として得た。
【００９５】
ステップ２：化合物５
中間体１４−ａ（３８４ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（７．８ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（６５３ｍｇ、６．２８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃にて３時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物５・２ＨＣｌを白色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５１７．２
【００９６】
中間体１５−ｂの合成：
【化２９】
2015521987.tif 000031
【００９７】
１−ブロモ−３−フルオロ−５−ヨードベンゼン１５−ａ（７．５２ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１２．５０ｍｌ）中の溶液に、（２−メチルチアゾール−５−イル）メタノール８−ｅ（３．５５ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）、１，１０−フェナントロリン（９０１ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（４７６ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（１１．４０ｇ、３５．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１１０℃にて２日間撹拌し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。塩化アンモニウムの飽和水溶液を濾液に加え、有機層を分離し、水性相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体１５−ｂをベージュ色のオイルとして得た。
【００９８】
中間体１６−ｂの合成：
【化３０】
2015521987.tif 000032
【００９９】
１−ブロモ−３−フルオロ−５−ヨードベンゼン１５−ａ（５．０ｇ、１６．６２ｍｍｏｌ）のトルエン（８．３ｍｌ）中の溶液に、（６−メチルピリジン−３−イル）メタノール１６−ａ（２．２５ｇ、１８．２８ｍｍｏｌ）、１，１０−フェナントロリン（５９９ｍｇ、３．３２ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（３１６ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（７．５８ｇ、２３．２６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１１０℃にて２日間撹拌し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。塩化アンモニウムの飽和水溶液を濾液に加え、有機層を分離し、水性相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体１６−ｂをベージュ色の固体として得た。
【０１００】
中間体１７−ｂの合成：
【化３１】
2015521987.tif 000033
【０１０１】
１−ブロモ−３−フルオロ−５−ヨードベンゼン１５−ａ（５．０ｇ、１６．６２ｍｍｏｌ）のトルエン（８．３ｍｌ）中の溶液に、（２−メチルピリミジン−５−イル）メタノール（２．２６ｇ、１８．２８ｍｍｏｌ）、１，１０−フェナントロリン（５９９ｍｇ、３．３２ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（３１６ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（７．５８ｇ、２３．２６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１１０℃で２日間撹拌し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。塩化アンモニウムの飽和水溶液を濾液に加え、有機層を分離し、水性相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体１７−ｂをベージュ色の固体として得た。
【０１０２】
中間体１８−ｂの合成：
【化３２】
2015521987.tif 000034
【０１０３】
２−シアノ酢酸エチル１８−ａ（１１．４２ｇ、１０１．０ｍｍｏｌ）のアセトン（１５３．０ｍｌ）中の溶液に、炭酸カリウム（２０．９４ｇ、１５２．０ｍｍｏｌ）および２−ヨードプロパン（２９．２ｇ、１７２．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２日間還流加熱し、室温に冷却し、酢酸エチル／ヘキサンの１：１混合物中で希釈した。水を加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体１８−ｂを無色のオイルとして得た。
【０１０４】
中間体１９−ｅの合成：
【化３３】
2015521987.tif 000035
【０１０５】
ステップ１：中間体１９−ｂ
４−（ベンジルオキシ）アニリンヒドロクロリド１９−ａ（１４．３ｇ、６０．８ｍｍｏｌ）の１Ｎ  ＨＣｌ（５１．４ｍｌ）中の溶液に、亜硝酸ナトリウムの１．０Ｍ水溶液（７６．０ｍｌ、７６．０ｍｍｏｌ）を室温にて滴加し、混合物を１時間撹拌し、濾過し、次いで、中間体６−ｃ（１０．０ｇ、５０．７ｍｍｏｌ）のエタノール（１３．７ｍｌ）および水（１８８．０ｍＬ）中の氷冷溶液に滴加した。酢酸カリウムを少量ずつ加えることによって、ｐＨを７に維持した。混合物を０℃にて３時間、および室温にて一晩撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体１９−ｂをベージュ色のオイルとして得た。
【０１０６】
ステップ２：中間体１９−ｃ
０℃に冷却した中間体１９−ｂ（２０．３ｇ、４９．８ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン／水（２４９．０ｍｌ）の１：１混合物中の溶液に、ＮａＯＨ  １０Ｎ（１００．０ｍｌ、９９６．０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて１時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体１９−ｃを黄色の固体として得た。
【０１０７】
ステップ３：中間体１９−ｄ
中間体１９−ｃ（６．５ｇ、１９．４ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブタノール（９７．０ｍｌ）中の溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのｔｅｒｔ−ブタノール中の１．０Ｍ溶液（４０．７ｍｌ、４０．７ｍｍｏｌ）を加えた。１５分間撹拌した後に、ブロモアセトニトリル（３．３７ｍｌ、４８．４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて３時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、水性相を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体１９−ｄをベージュ色の泡として得た。
【０１０８】
ステップ４：中間体１９−ｅ
中間体１９−ｄ（６．５ｇ、１７．３６ｍｍｏｌ）の酢酸エチル中の溶液に、窒素下で撹拌しながら、１０％Ｐｄ／Ｃ（３．６９ｇ、１．７３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＨ２でパージし、水素１ａｔｍ下で１時間撹拌した。次いで、反応物をセライトで濾過し、濾液を真空濃縮した。揮発性物質を減圧下で除去して、中間体１９−ｅを黄色の固体として得た。
【０１０９】
中間体２０−ｄの合成：
【化３４】
2015521987.tif 000036
【０１１０】
ステップ１：中間体２０−ａ
４−（ベンジルオキシ）アニリンヒドロクロリド１９−ａ（１０．０ｇ、４２．４ｍｍｏｌ）の１Ｎ  ＨＣｌ（６０．６ｍｌ）中の溶液に、亜硝酸ナトリウムの１．０Ｍ水溶液（４１．９ｍｌ、４１．９ｍｍｏｌ）を室温にて滴加し、混合物を１時間撹拌し、濾過し、次いで、中間体２−ｃ（５．０ｇ、２９．９ｍｍｏｌ）のエタノール（１６．２ｍｌ）および水（２２２．０ｍＬ）中の氷冷溶液に滴加した。酢酸カリウムを少量ずつ加えることによって、ｐＨを７に維持した。混合物を０℃にて３時間、および室温にて１時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体２０−ａをベージュ色のオイルとして得た。
【０１１１】
ステップ２：中間体２０−ｂ
０℃に冷却した中間体２０−ａ（１０．０ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン／水の１：１混合物（２６５．０ｍｌ）中の溶液に、ＮａＯＨ  １０Ｎ（５３．０ｍｌ、５３０．３ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて１時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２０−ｂを黄色の固体として得た。
【０１１２】
ステップ３：中間体２０−ｃ
中間体２０−ｂ（８．３ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）およびブロモアセトニトリル（４．３３ｍｌ、６２．１ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブタノール（１４１．０ｍｌ）中の溶液に、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのｔｅｒｔ−ブタノール中の１．０Ｍ溶液（５６．４ｍｌ、５６．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、２時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２０−ｃをベージュ色の泡として得た。
【０１１３】
ステップ４：中間体２０−ｄ
窒素下で撹拌している中間体２０−ｃ（３．７２ｇ、１０．３８ｍｍｏｌ）の酢酸エチル中の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（２．２０ｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＨ２でパージし、水素１ａｔｍ下で１時間撹拌した。次いで、反応物をセライトで濾過し、濾液を真空濃縮した。揮発性物質を減圧下で除去して、中間体２０−ｄを黄色の固体として得た。
【０１１４】
中間体２１−ｄの合成：
【化３５】
2015521987.tif 000037
【０１１５】
ステップ１：中間体２１−ａ
４−（ベンジルオキシ）アニリンヒドロクロリド１９−ａ（２０．０ｇ、８５．０ｍｍｏｌ）の１Ｎ  ＨＣＩ（７１．８ｍｌ）中の溶液に、亜硝酸ナトリウムの１．０Ｍ水溶液（９９．０ｍｌ、９９．０ｍｍｏｌ）を室温にて滴加し、混合物を１時間撹拌し、濾過し、次いで、中間体１８−ｂ（１０．０ｇ、７０．８ｍｍｏｌ）のエタノール（１９．１ｍｌ）および水（２６３．０ｍＬ）中の氷冷溶液に滴加した。酢酸ナトリウムを少量ずつ加えることによって、ｐＨを７に維持した。混合物を０℃にて３時間、および室温にて一晩撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体２１−ａをベージュ色のオイルとして得た。
【０１１６】
ステップ２：中間体２１−ｂ
０℃に冷却した中間体２１−ａ（２４．０ｇ、６８．３ｍｍｏｌ）の、１，４−ジオキサン／水の１：１混合物（３４１．０ｍｌ）中の溶液に、ＮａＯＨ  １０Ｎ（１３７．０ｍｌ、１３６６．０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて１時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体２１−ｂを黄色の固体として得た。
【０１１７】
ステップ３：中間体２１−ｃ
中間体２１−ｂ（８．２８ｇ、２８．２ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブタノール（１４１．０ｍｌ）中の氷冷溶液に、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのｔｅｒｔ−ブタノール中の１．０Ｍ溶液（５６．４ｍｌ、５６．４ｍｍｏｌ）を加えた。１５分間撹拌した後に、ブロモアセトニトリル（４．３３ｍｌ、６２．１ｍｍｏｌ）を加え；反応物を室温にゆっくり加温し、２時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２１−ｃを黄色の固体として得た。
【０１１８】
ステップ４：中間体２１−ｄ
窒素下で撹拌している中間体２１−ｃ（５．８４ｇ、１７．５７ｍｍｏｌ）の酢酸エチル中の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（１．８７ｇ、０．８７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＨ２でパージし、水素１ａｔｍ下で１時間撹拌した。次いで、反応物をセライトで濾過し、濾液を真空濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２１−ｄを黄色の固体として得た。
【０１１９】
化合物１４の合成：
【化３６】
2015521987.tif 000038
【０１２０】
ステップ１：中間体２２−ａ
中間体１９−ｅ（３７５．０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．７ｍｌ）中の溶液に、中間体１６−ｂ（３９１ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（２７２ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１６６ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（１．７２ｇ、５．２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて一晩加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２２−ａをベージュ色の泡として得た。
【０１２１】
ステップ２：化合物１４
中間体２２−ａ（２７５ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）のメタノール（５．５ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（４０１ｍｇ、３．８５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を還流で一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物１４・２ＨＣｌを白色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５２７．２
【０１２２】
化合物１５の合成：
【化３７】
2015521987.tif 000039
【０１２３】
ステップ１：中間体２３−ａ
中間体１９−ｅ（３７５ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．７ｍｌ）中の溶液に、中間体１７−ｂ（３９２ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（２７２ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１６６ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（１．７２ｇ、５．２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて一晩加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２３−ａをベージュ色の泡として得た。
【０１２４】
ステップ２：化合物１５
中間体２３−ａ（２６０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）のメタノール（５．２ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（５４１ｍｇ、５．１９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を還流で一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物１５・２ＨＣｌを白色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５２８．１
【０１２５】
化合物７の合成：
【化３８】
2015521987.tif 000040
【０１２６】
ステップ２：中間体２４−ａ
中間体２０−ｄ（５３３．０ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．０ｍｌ）中の溶液に、中間体１５−ｂ（６００ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（４１０ｍｇ、３．９７ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（２５０ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（２．５９ｇ、７．９４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて一晩加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２４−ａをベージュ色のオイルとして得た。
【０１２７】
ステップ２：化合物７
中間体２４−ａ（４７０．０ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）のエタノール（９．６０ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（８００ｍｇ、７．６８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃にて３時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物７・２ＨＣｌを黄色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５１７．１
【０１２８】
化合物６の合成：
【化３９】
2015521987.tif 000041
【０１２９】
ステップ１：中間体２５−ａ
中間体２０−ｄ（２００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．０ｍｌ）中の溶液に、中間体１６−ｂ（２２１ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（２３１ｍｇ、３．２３ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１４２ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（９７１ｍｇ、２．９８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて一晩加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２５−ａをベージュ色の泡として得た。
【０１３０】
ステップ２：化合物６
中間体２５−ａ（３６０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）のエタノール（７．４５ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（６２０ｍｇ、５．９６ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃にて３時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物６・２ＨＣｌを黄色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５１１．２
【０１３１】
化合物８の合成：
【化４０】
2015521987.tif 000042
【０１３２】
ステップ１：中間体２６−ａ
中間体２０−ｄ（５４２ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２．７０ｍｌ）中の溶液に、中間体１７−ｂ（６００ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（４１６ｍｇ、４．０４ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（２５４ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（１．９７ｇ、６．０６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて一晩加熱し、次いで室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２６−ａをベージュ色の泡として得た。
【０１３３】
ステップ２：化合物８
中間体２６−ａ（４２０ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）のエタノール（８．６ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（７２２ｍｇ、６．９３ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃にて３時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物８・２ＨＣｌを黄色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５１２．１
【０１３４】
化合物９の合成：
【化４１】
2015521987.tif 000043
【０１３５】
ステップ１：中間体２７−ａ
中間体２１−ｄ（２．３０ｇ、９．４９ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１２．７ｍｌ）中の溶液に、中間体１５−ｂ（２．８７ｇ、９．４９ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（１．９５ｇ、１９．０ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１．１９ｇ、６．２７ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（１２．３７ｇ、３８．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて一晩加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２７−ａをベージュ色のオイルとして得た。
【０１３６】
ステップ２：化合物９
中間体２７−ａ（１．６５ｇ、３．５６ｍｍｏｌ）のエタノール（７．２ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（７４１ｍｇ、６．９３ｍｍｏｌ）を加え、反応物を８０℃にて一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。水および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、化合物９を白色の固体として得た。化合物９をメタノールに溶かし、溶液をＭｅＯＨ中の１Ｎ  ＨＣｌで酸性化し、形成した沈殿物を濾過によって収集して、化合物９・２ＨＣｌを白色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝４９１．１
【０１３７】
化合物１１の合成
【化４２】
2015521987.tif 000044
【０１３８】
ステップ１：中間体２８−ａ
中間体２１−ｄ（４９１ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２．７ｍｌ）中の溶液に、中間体１６−ｂ（６００ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（４１８ｍｇ、４．０５ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（２５５ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（２．６４ｇ、８．１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて一晩加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２８−ａをベージュ色の泡として得た。
【０１３９】
ステップ２：化合物１１
中間体２８−ａ（５１０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）のメタノール（１１．１ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（１．１６ｇ、１１．１５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を還流で一晩撹拌し、揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物１１・２ＨＣｌを白色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝４８５．２
【０１４０】
化合物１０の合成：
【化４３】
2015521987.tif 000045
【０１４１】
ステップ１：中間体２９−ａ
中間体２１−ｄ（２．０ｇ、８．２６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１１．０ｍｌ）中の溶液に、中間体１７−ｂ（２．４５ｇ、８．２６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（１．７ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１．０ｇ、５．４５ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（１０．７６ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて一晩加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体２９−ａをベージュ色の泡として得た。
【０１４２】
ステップ２：化合物１０
中間体２９−ａ（１．５ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）のメタノール（３２．７ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（３．４１ｇ、３２．７ｍｍｏｌ）を加え、反応物を還流で一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。水および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。揮発性物質を減圧下で除去した。メタノールを残渣に加えると；沈殿物が形成し、これを濾過によって収集して、化合物１０を白色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝４８６．２
【０１４３】
中間体３０−ａの合成：
【化４４】
2015521987.tif 000046
【０１４４】
１−ブロモ−３−フルオロ−５−ヨードベンゼン１５−ａ（５．０ｇ、１６．６２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（８．３ｍｌ）中の溶液に、ベンジルアルコール３０−ａ（１．７９ｇ、１６．６２ｍｍｏｌ）、１，１０−フェナントロリン（５９９ｍｇ、３．３２ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（３１６ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（７．５８ｇ、２３．２６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１１０℃にて２日間撹拌し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。塩化アンモニウムの飽和水溶液を濾液に加え、有機層を分離し、水性相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体３０−ａをベージュ色のオイルとして得た。
【０１４５】
化合物１２の合成：
【化４５】
2015521987.tif 000047
【０１４６】
ステップ１：中間体３１−ａ
中間体２１−ｄ（３７０ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１１．０ｍｌ）中の溶液に、中間体３０−ａ（４２９ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（３１５ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１９２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（１．９９ｇ、６．１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて一晩加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体３１−ａをベージュ色の泡として得た。
【０１４７】
ステップ２：化合物１２
中間体３１−ａ（１３０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）のメタノール（０．５ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（３０６ｍｇ、２．９４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を還流で一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物１２・ＨＣｌを黄色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝４７０．１
【０１４８】
中間体３２−ｅの合成：
【化４６】
2015521987.tif 000048
【０１４９】
ステップ１：中間体３２−ｂ
４−（ベンジルオキシ）−２−フルオロアニリン３２−ａ（１２．０ｇ、４７．３ｍｍｏｌ）の１Ｎ  ＨＣｌ（３９．９ｍｌ）中の溶液に、亜硝酸ナトリウムの１．０Ｍ水溶液（５５．２ｍｌ、５５．２ｍｍｏｌ）を室温にて滴加し、混合物を１時間撹拌し、濾過し、次いで、中間体１８−ｂ（５．５６ｇ、３９．４ｍｍｏｌ）のエタノール（１０．６ｍｌ）および水（１４６．０ｍＬ）中の氷冷溶液に滴加した。酢酸ナトリウムを少量ずつ加えることによって、ｐＨを７に維持した。混合物を０℃にて３時間、および室温にて一晩撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体３２−ｂをベージュ色のオイルとして得た。
【０１５０】
ステップ２：中間体３２−ｃ
０℃に冷却した中間体３２−ｂ（１５．０ｇ、４０．６ｍｍｏｌ）の、１，４−ジオキサン／水の１：１混合物（２０３．０ｍｌ）中の溶液に、ＮａＯＨ  １０Ｎ（８１．０ｍｌ、８１２．０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて１時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体３２−ｃをベージュ色のオイルとして得た。
【０１５１】
ステップ３：中間体３２−ｄ
中間体３２−ｃ（５．５ｇ、１７．６ｍｍｏｌ）のｔＢｕＯＨ（８０ｍｌ）中の溶液を室温にて、ｔＢｕＯＫのｔＢｕＯＨ中の１．０Ｍ溶液（３７．１ｍｌ、３７．１ｍｍｏｌ）に加えた。反応物を室温にて１５分間撹拌し、ブロモアセトニトリル（３．０８ｍｌ、４４．２ｍｍｏｌ）を滴加した。添加が完了した後に、反応物をさらに３時間撹拌した。塩化アンモニウムの飽和水溶液および酢酸エチルを加え、有機層を分離し、有機相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体３２−ｄをベージュ色のオイルとして得た。
【０１５２】
ステップ４：中間体３２−ｅ
窒素下で撹拌している中間体３２−ｄ（１．０ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）の酢酸エチル中の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（６０７ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＨ２でパージし、水素１ａｔｍ下で３時間撹拌した。次いで、反応物をセライトで濾過し、濾液を真空濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体３２−ｅを黄色の固体として得た。
【０１５３】
化合物１６の合成：
【化４７】
2015521987.tif 000049
【０１５４】
ステップ１：中間体３３−ａ
中間体３２−ｅ（２００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．０ｍｌ）中の溶液に、中間体１５−ｂ（２５５ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（１５８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（９７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（１．０ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて２日間加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体３３−ａをベージュ色の泡として得た。
【０１５５】
ステップ２：化合物１６
中間体３３−ａ（７０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（１０．０ｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（１５１ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を１００℃にて一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物１６・２ＨＣｌを黄色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５０９．１
【０１５６】
化合物１７の合成：
【化４８】
2015521987.tif 000050
【０１５７】
ステップ１：中間体３４−ａ
中間体３２−ｅ（２００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．０ｍｌ）中の溶液に、中間体１７−ｂ（２５１ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（１５８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（９７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（１．０ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を密封管内で１１０℃にて２日間加熱し、次いで、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。揮発性物質を減圧下で除去した。シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、中間体３４−ａをベージュ色の泡として得た。
【０１５８】
ステップ２：化合物１７
中間体３４−ａ（３５ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（１０．０ｍｌｍｌ）中の溶液に、酢酸ホルムアミジン（７６ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）を加え、反応物を還流で一晩撹拌し、次いで、室温に冷却した。揮発性物質を減圧下で除去した。０．１％ＨＣｌ水溶液／メタノール勾配で溶離する逆相クロマトグラフィーによって精製して、化合物１７・２ＨＣｌを黄色の固体として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ＋Ｈ＝５０４．１
【表１】
2015521987.tif 000051
2015521987.tif 000052
2015521987.tif 000053
2015521987.tif 000054
2015521987.tif 000055
【０１５９】
キナーゼ結合
Ｂｔｋキナーゼ阻害アッセイ
蛍光偏光に基づくキナーゼアッセイを、ヒスチジンでタグ付けした組み換えヒト全長ブルトン型無ガンマグロブリン血症チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）およびＭｉｌｌｉｐｏｒｅ社が供給するＫｉｎＥＡＳＥ（商標）ＦＰフルオレセイングリーンアッセイの修正プロトコルを用いて３８４ウェルプレートフォーマットで行った。キナーゼ反応を室温にて６０分間にわたって２５０μＭの基質、１０μＭのＡＴＰが存在する状態で、様々な試験物濃度で行った。反応をＥＤＴＡ／キナーゼ検出試薬で停止させ、偏光をＴｅｃａｎ５００装置で測定した。得られた用量反応曲線から、非線形フィット曲線を使用するＧｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍｓ（登録商標）を使用してＩＣ５０を計算した。各酵素についてのＡＴＰのＫｍは実験的に決定し、Ｋｉ値はＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を用いて計算した（Ｃｈｅｎｇ  Ｙ，  Ｐｒｕｓｏｆｆ  ＷＨ．  （１９７３）「Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｈｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｃｏｎｓｔａｎｔ  （Ｋｌ）  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｗｈｉｃｈ  ｃａｕｓｅｓ  ５０  ｐｅｒ  ｃｅｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  （Ｉ５０）  ｏｆ  ａｎ  ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  ｒｅａｃｔｉｏｎ」、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ２２（２３）：３０９９〜１０８を参照されたい）。
【０１６０】
ｋｉ値を表２に報告する。
【表２】
2015521987.tif 000056
【０１６１】
脾細胞増殖アッセイ
脾細胞を、６週齢のオスのＣＤ１マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社）から得た。マウスの脾臓をＰＢＳ中で手作業で潰し、７０μｍの細胞ストレーナを使用して濾過し、続いて、塩化アンモニウムで赤血球を溶解させた。細胞を洗浄し、脾細胞培地（１０％の熱不活化ＦＢＳ、０．５Ｘ非必須アミノ酸、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、５０ｕＭのβ−メルカプトエタノールを補充したＨｙＣｌｏｎｅ  ＲＰＭＩ）に再懸濁させ、３７℃、５％のＣＯ２にて２時間インキュベートして接着細胞を除去した。浮遊細胞を９６ウェルプレートに１ウェルあたり５００００個の細胞で播種し、３７℃、５％のＣＯ２にて１時間インキュベートした。脾細胞を三連で式１の化合物の１００００ｎＭ曲線で１時間予備処理し、続いて、２．５ｕｇ／ｍｌの抗ＩｇＭＦ（ａｂ’）２（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ社）でＢ細胞増殖を７２時間刺激した。細胞増殖を、Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ発光アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）によって測定した。ＥＣ５０値（ビヒクルで処理した対照と比較した場合の、化合物が存在する状態での５０％増殖）を、Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して用量反応化合物曲線から計算した。
【０１６２】
ＥＣ５０値を表３に報告する。
【表３】
2015521987.tif 000057
【０１６３】
方法：マウスアルツス
Ｂｒａｓｅｌｍａｎｎ  Ｓ、Ｔａｙｌｏｒ  Ｖ、Ｚｈａｏ  Ｈ、Ｗａｎｇ  Ｓ、Ｓｙｌｖａｉｎ  Ｃ、Ｂａｌｕｏｍ  Ｍ、Ｑｕ  Ｋ、Ｈｅｒｌａａｒ  Ｅ、Ｌａｕ  Ａ、Ｙｏｕｎｇ  Ｃ、Ｗｏｎｇ  ＢＲ、Ｌｏｖｅｌｌ  Ｓ、Ｓｕｎ  Ｔ、Ｐａｒｋ  Ｇ、Ａｒｇａｄｅ  Ａ、Ｊｕｒｃｅｖｉｃ  Ｓ、Ｐｉｎｅ  Ｐ、Ｓｉｎｇｈ  Ｒ、Ｇｒｏｓｓｂａｒｄ  ＥＢ、Ｐａｙａｎ  ＤＧ、Ｍａｓｕｄａ  ＥＳ：  Ｒ４０６  ａｎ  ｏｒａｌｌｙ  ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｓｐｌｅｅｎ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｂｌｏｃｋｓ  ｆｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ａｎｄ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｉｍｍｕｎｅ−ｃｏｍｐｌｅｘ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ、２００６、３１９  ：９９８〜１００８において報告されているとおりに、マウスアルツス研究を行った。
【０１６４】
まとめると、メスのＢａｌｂ／ｃマウス（到着時６〜７週齢）を動物用施設に少なくとも４日間慣らした。実験日に、動物を化合物またはビヒクルのみで強制経口投与（ＰＯ）によって予備処理した（ｔ＝−１時間）。ｔ＝０目に、動物に、ニワトリオボアルブミンおよびエバンスブルー（それぞれ１０ｍｇ／ｍＬ）を含有する生理食塩水を静脈内注射した（ＩＶ；０．１ｍＬ／マウス）。１０分後（ｔ＝１０分）に、動物にイソフルランで麻酔を掛け、背面を剃毛し、次いで、ウサギ抗−ニワトリオボアルブミン抗体を、動物の右側の一部位に皮内注射した（３０μＬ中に２５μｇ）。次いで、同量のアイソタイプ対照抗体を左側に注射した。
【０１６５】
次いで、動物をそのホームケージに戻し、４時間後に、皮膚パンチ（８ｍｍ）を各注射部位から収集した。その試料をホルムアミド１ｍＬ中に８０℃にて一晩入れた（ガラス管内に、ホルムアミド１ｍＬあたり皮膚生検１つ）。次いで、ホルムアミド溶液中のエバンスブルーの量を分光測光法（６３０ｎｍ）によって、真皮への血清管外遊出の尺度として評価した。
【０１６６】
３０ｍｇ／ｋｇにて強制経口投与によって投与した場合に、化合物１４、１５、２４、４６、５０、５４、５８、５９、６２、７１、７８、７９、８２、８５、９０、１００、１０２、１０３、１０６、１０７、１０８、１１７、および１２５は有効性を実証した。
【０１６７】
Ｔｒｅｎｔｈａｍ  ＤＥ，  Ｔｏｗｎｅｓ  ＡＳ，  Ｋａｎｇ  ＡＨ．  Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ  ｔｏ  Ｔｙｐｅ  ＩＩ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ  ：  Ａｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １９７７；  ８５７〜８６８およびＢｅｎｄｅｌｅ  ＡＭ．  Ａｎｉｍａｌ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．  Ｊ  Ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌ  Ｉｎｔｅｒａｃｔ  ２００１；  ３７７〜３８５に記載されている方法を使用して、マウスＣＩＡモデルを行った。
【０１６８】
まとめると、オスのＢ１０Ｒ１１１マウス（到着時７〜９週齢）を動物用施設に少なくとも４日間慣らした。実験０日目に、マウスにイソフルランで麻酔を掛け、背面を剃毛した。追加の結核菌（ＴＢ）Ｈ３７Ｒａを補充したフロインド完全アジュバント（ＣＦＡ）中で乳化させたコラーゲンを、尾の付け根に皮内注射した（０．１５ｍＬ／動物；ＣＦＡ中２ｍｇ／ｍＬのコラーゲンおよび２．５ｍｇ／ｍＬのＴＢ）。このＣＦＡ処理を１５日目に繰り返した。
【０１６９】
１５日目から研究の終了時まで、動物を関節炎の徴候について毎日スコアリングした。疾患の初日（ＲＡ１日目）に、動物を研究に組み入れ、関節炎のスコアに基づく均合設計を使用して組み分けした。組み入れたら、動物の体重を測定し、強制経口投与（ＰＯ、ＢＩＤ）によって１日２回投薬した。次いで、組み入れた動物を週に２回、ＲＡ１、５、８、および１２日目にスコアリングした。研究の終了時（ＲＡ１２日目）に、動物の体重を測定し、スコアリングした。３０ｍｇ／ｋｇ（ＢＩＤ）にて強制経口投与した場合に、化合物９および１０は有効性を実証した。
【国際調査報告】
2015521987.tif 000074
2015521987.tif 000075