(57)【要約】本明細書に記載する様々な態様の実施形態は、少なくとも１つの活性薬剤、例えば少なくとも１つの治療薬の眼への送達のための絹系組成物、およびその使用方法に関する。一部の実施形態において、絹系組成物は、眼の少なくとも一部分への少なくとも１つの治療薬の持続放出をもたらすことができる。したがって、一部の実施形態の絹系組成物は、眼病態、例えば加齢性黄斑変性の処置に使用することができる。絹マトリックスに封入された治療薬を含む眼への投与用の組成物であって、前記絹マトリックスに封入されたある量の治療薬が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより長い期間にわたって治療効果をもたらす、組成物。
2015508104.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
絹マトリックスに封入された治療薬を含む眼への投与用の組成物であって、前記絹マトリックスに封入されたある量の治療薬が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより長い期間にわたって治療効果をもたらす、組成物。
【請求項２】
前記治療効果が、眼病態の処置のための治療効果を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記眼病態の処置のための治療効果が、前記眼病態に随伴する少なくとも１つの症状を少なくとも約１０％低減すること含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１週間長い、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
前記期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１ヶ月、少なくとも約３ヶ月、または少なくとも約６ヶ月長い、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
前記治療薬が、タンパク質、ペプチド、抗原、免疫原、ワクチン、抗体またはその一部分、抗体様分子、酵素、核酸、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アプタマー、小分子、抗生物質、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
前記治療薬が、眼病態の処置のための薬剤である、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
前記治療薬が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、フルオシノロンアセトニド、ガンシクロビル、トリアムシノロンアセトニド、ホスカルネット、バンコマイシン、セフタジジム、アミカシン、アムホテリシンＢ、デキサメタゾン、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
前記治療薬が、血管新生阻害剤を含む、請求項１〜８のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
前記血管新生阻害剤が、ＶＥＧＦ阻害剤を含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボン酸アミド塩酸塩、アキシチニブ、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＶＥＧＦ−Ｒ１の阻害剤、アキシチニブ、Ｎ，２−ジメチル−６−（２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド、ＲＥＴ／ＰＴＣ発癌性キナーゼのチロシンキナーゼ阻害剤、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、パン−ＶＥＧＦ−Ｒ−キナーゼ阻害剤；プロテインキナーゼ阻害剤、マルチターゲット型ヒト表皮受容体（ＨＥＲ）１／２および血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）１／２受容体ファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、セジラニブ、ソラフェニブ、バタラニブ、グルファニド二ナトリウム、ＶＥＧＦＲ２選択的モノクローナル抗体、アンギオザイム、ｓｉＲＮＡ系ＶＥＧＦＲ１阻害剤、フマギリンおよびその類似体、前記ＶＥＧＦ受容体の可溶性外部ドメイン、サメ軟骨およびその誘導体、５−（（７−ベンジルオキシキナゾリン−４−イル）アミノ）−４−フルオロ−２−メチルフェノール塩酸塩、これらの任意の誘導体およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせである、請求項１０または１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記治療薬または前記ＶＥＧＦ阻害剤が、約０．０１ｍｇから約５０ｍｇの量で存在する、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
前記治療薬またはＶＥＧＦ阻害剤が、約１．５ｍｇから約１０ｍｇ、または約５ｍｇから約１０ｍｇの量で存在する、請求項１〜１３のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約０．１％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約０．５％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、請求項１〜１５のいずれかに記載の組成物。
【請求項１７】
前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約１％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、請求項１〜１６のいずれかに記載の組成物。
【請求項１８】
前記絹マトリックスが、生体適合性ポリマーをさらに含む、請求項１〜１７のいずれかに記載の組成物。
【請求項１９】
前記生体適合性ポリマーが、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリラクチド−コ−グリコリド（ＰＬＧＡ）、ポリエステル、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ホスファジン）、ポリ（ホスフェートエステル）、ポリカプロラクトン、ゼラチン、コラーゲン、セルロース、ヒアルロナン、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、トリブロックコポリマー、ポリリジンおよびこれらの任意の誘導体から成る群より選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記絹マトリックスが、ヒドロゲル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルム、凍結乾燥粉末、凍結乾燥ゲル、リザーバーインプラント、同種インプラント、チューブ、ゲル様またはゲル粒子、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項１〜１９のいずれかに記載の組成物。
【請求項２１】
前記絹マトリックスが、ヒドロゲルを含む、請求項１〜２０のいずれかに記載の組成物。
【請求項２２】
前記絹マトリックスが、マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を含む、請求項１〜２０のいずれかに記載の組成物。
【請求項２３】
前記治療薬を封入している前記マイクロ粒子、前記ナノ粒子、または前記ゲル様もしくはゲル粒子が、固体基材に埋め込まれる、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記固体基材が、錠剤、カプセル、マイクロチップ、ヒドロゲル、マット、フィルム、繊維、眼への送達デバイス、インプラント、チューブ、コーティング、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記固体基材が、ヒドロゲルを含む、請求項２３または２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記ヒドロゲルが、絹ヒドロゲルを含む、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
注射可能に適合される、請求項１〜２６のいずれかに記載の組成物。
【請求項２８】
注射器に予め充填される、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記注射器が、注射針にさらに取り付けられる、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記眼への投与が、水晶体、強膜、結膜、房水、毛様体筋、および硝子体液から成る群より選択される眼の少なくとも一部分への前記組成物の投与である、請求項１〜２９のいずれかに記載の組成物。
【請求項３１】
前記眼への投与が、硝子体内投与である、請求項１〜３０のいずれかに記載の組成物。
【請求項３２】
請求項１〜３１のいずれかに記載の組成物を含む眼への送達デバイス。
【請求項３３】
前記組成物が、前記眼への送達デバイスに予め充填される、請求項３２に記載の眼への送達デバイス。
【請求項３４】
注射針を有するかまたは有さない注射器である、請求項３２に記載の眼への送達デバイス。
【請求項３５】
前記注射針が、２５から３４ゲージ針である、請求項３４に記載の眼への送達デバイス。
【請求項３６】
前記注射針が、２７から３０ゲージ針である、請求項３４または３５に記載の眼への送達デバイス。
【請求項３７】
コンタクトレンズを含む、請求項３２に記載の眼への送達デバイス。
【請求項３８】
点眼器を含む、請求項３２に記載の眼への送達デバイス。
【請求項３９】
マイクロニードルを含む、請求項３２に記載の眼への送達デバイス。
【請求項４０】
前記マイクロニードルが、絹マイクロニードルである、請求項３９に記載の眼への送達デバイス。
【請求項４１】
インプラントである、請求項３２に記載の眼への送達デバイス。
【請求項４２】
請求項１〜３１のいずれかに記載の組成物を含む容器、または請求項３２〜４１のいずれかに記載の眼への送達デバイスを含む、キット。
【請求項４３】
少なくとも１本の注射器および１本の注射針をさらに含む、請求項４２に記載のキット。
【請求項４４】
前記注射針が、２５から３４ゲージ針である、請求項４３に記載のキット。
【請求項４５】
前記注射針が、２７から３０ゲージ針である、請求項４３または４４に記載のキット。
【請求項４６】
麻酔薬をさらに含む、請求項４２〜４５のいずれかに記載のキット。
【請求項４７】
消毒薬をさらに含む、請求項４２〜４６のいずれかに記載のキット。
【請求項４８】
前記眼への送達デバイスに前記組成物が予め充填される、請求項４２〜４７のいずれかに記載のキット。
【請求項４９】
前記眼への送達デバイスが、注射針を有するかまたは有さない注射器である、請求項４８に記載のキット。
【請求項５０】
眼の標的部位に治療薬を送達する方法であって、絹マトリックスに封入された治療薬を眼の標的部位に投与することを含み、前記絹マトリックスに封入されたある量の治療薬が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより長い期間にわたって治療効果をもたらす、方法。
【請求項５１】
被験体における眼病態を処置する方法であって、請求項１〜２９のいずれかに記載の組成物を被験体の眼の標的部位に投与し、それにより前記眼の前記標的部位への前記治療薬の持続放出で前記眼病態を処置することを含む、方法。
【請求項５２】
眼病態が、前記眼の後区の病態である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
眼病態が、加齢性黄斑変性、脈絡膜新生血管形成、糖尿病性黄斑浮腫、急性および慢性黄斑視神経網膜症、中心性漿液性脈絡網膜症、黄斑浮腫、急性多発性斑状色素上皮症、ベーチェット病、バードショット脈絡網膜炎、後部ブドウ膜炎、後部強膜炎、匍行性脈絡膜炎、網膜下線維症、ブドウ膜炎症候群、フォークト−小柳−原田症候群、網膜動脈閉塞性疾患、網膜中心静脈閉塞症、播種性血管内凝固障害、網膜分枝静脈閉塞症、高血圧性眼底変化、眼虚血症候群、網膜動脈微細動脈瘤、コーツ病、傍中心窩毛細血管拡張症、半側網膜静脈閉塞症、乳頭血管炎、頸動脈疾患（ＣＡＤ）、樹氷状血管炎、鎌状赤血球網膜症、網膜色素線条症、家族性滲出性硝子体網膜症、イールズ病、増殖性硝子体網膜症、糖尿病性網膜症、腫瘍に関連した網膜疾患、網膜色素上皮（ＲＰＥ）の先天性肥大、後部ブドウ膜黒色腫、脈絡膜血管腫、脈絡膜骨腫、脈絡膜転移、網膜および網膜色素上皮の混合性過誤腫、網膜芽細胞腫、眼底の血管増殖性腫瘍、網膜星状細胞腫、眼内リンパ系腫瘍、近視性網膜変性、急性網膜色素上皮炎、緑内障、眼内炎、サイトメガロウイルス網膜炎、網膜癌およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項５１または５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記眼病態が、加齢性黄斑変性である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記治療薬が、ＶＥＧＦ阻害剤を含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、またはこれらの組み合わせを含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
治療薬を、それを必要とする被験体の眼の標的部位に投与する方法であって、請求項１〜３１のいずれかに記載の組成物を被験体の眼の標的部位に、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少ない投与頻度で投与することを含む、方法。
【請求項５８】
前記投与頻度が、１／２倍低減される、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
眼に投与する治療薬の有効量を増加させる方法であって、絹マトリックスに封入された治療薬を眼の標的部位に投与することを含み、投与すると、前記標的部位からの前記治療薬の漏出が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときと比較して低減され、それにより、前記眼の前記標的部位に投与される前記治療薬の有効量が増加される、方法。
【請求項６０】
前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、前記眼の前区に投与される、請求項５０〜５９のいずれかに記載の方法。
【請求項６１】
前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、前記眼の後区に投与される、請求項５０〜６０のいずれかに記載の方法。
【請求項６２】
前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、水晶体、強膜、結膜、房水、毛様体筋、および硝子体液から成る群より選択される前記眼の少なくとも一部分に投与される、請求項５０〜６１のいずれかに記載の方法。
【請求項６３】
前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、前記眼の硝子体液に投与される、請求項５０〜６２のいずれかに記載の方法。
【請求項６４】
前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、注射によって前記眼に投与される、請求項５０〜６３のいずれかに記載の方法。
【請求項６５】
前記注射が、約２５から約３４のゲージを有する針で行われる、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記注射が、約２７から約３０のゲージを有する針で行われる、請求項６４または６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記投与が、月１回以下行われる、請求項５０〜６６のいずれかに記載の方法。
【請求項６８】
前記投与が、２ヶ月ごとに１回以下行われる、請求項５０〜６７のいずれかに記載の方法。
【請求項６９】
前記投与が、３ヶ月ごとに１回以下、４ヶ月ごとに１回以下、または６ヶ月ごとに１回以下行われる、請求項５０〜６８のいずれかに記載の方法。
【請求項７０】
前記治療薬が、タンパク質、ペプチド、抗原、免疫原、ワクチン、抗体またはその一部分、抗体様分子、酵素、核酸、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アプタマー、小分子、抗生物質、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項５０〜６９のいずれかに記載の方法。
【請求項７１】
前記治療薬が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、フルオシノロンアセトニド、ガンシクロビル、トリアムシノロンアセトニド、ホスカルネット、バンコマイシン、セフタジジム、アミカシン、アムホテリシンＢ、デキサメタゾン、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項５０〜７０のいずれかに記載の方法。
【請求項７２】
前記治療薬が、血管新生阻害剤を含む、請求項５０〜７１のいずれかに記載の方法。
【請求項７３】
前記血管新生阻害剤が、ＶＥＧＦ阻害剤を含む、請求項５０〜７２のいずれかに記載の方法。
【請求項７４】
前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボン酸アミド塩酸塩、アキシチニブ、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＶＥＧＦ−Ｒ１の阻害剤、アキシチニブ、Ｎ，２−ジメチル−６−（２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド、ＲＥＴ／ＰＴＣ発癌性キナーゼのチロシンキナーゼ阻害剤、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、パン−ＶＥＧＦ−Ｒ−キナーゼ阻害剤；プロテインキナーゼ阻害剤、マルチターゲット型ヒト表皮受容体（ＨＥＲ）１／２および血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）１／２受容体ファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、セジラニブ、ソラフェニブ、バタラニブ、グルファニド二ナトリウム、ＶＥＧＦＲ２選択的モノクローナル抗体、アンギオザイム、ｓｉＲＮＡ系ＶＥＧＦＲ１阻害剤、フマギリンおよびその類似体、ＶＥＧＦ受容体の可溶性外部ドメイン、サメ軟骨およびその誘導体、５−（（７−ベンジルオキシキナゾリン−４−イル）アミノ）−４−フルオロ−２−メチルフェノール塩酸塩、これらの任意の誘導体およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせを含む、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
前記治療薬または前記ＶＥＧＦ阻害剤が、約０．０１ｍｇから約５０ｍｇの量で存在する、請求項５０〜７５のいずれかに記載の方法。
【請求項７７】
前記治療薬または前記ＶＥＧＦ阻害剤が、約１．５ｍｇから約１０ｍｇ、または約５ｍｇから約１０ｍｇの量で存在する、請求項５０〜７６のいずれかに記載の方法。
【請求項７８】
前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約０．１％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、請求項５０〜７７のいずれかに記載の方法。
【請求項７９】
前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約０．５％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、請求項５０〜７８のいずれかに記載の方法。
【請求項８０】
前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約１％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、請求項５０〜７９のいずれかに記載の方法。
【請求項８１】
前記絹マトリックスが、生体適合性ポリマーをさらに含む、請求項５０〜８０のいずれかに記載の方法。
【請求項８２】
前記生体適合性ポリマーが、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリラクチド−コ−グリコリド（ＰＬＧＡ）、ポリエステル、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ホスファジン）、ポリ（ホスフェートエステル）、ポリカプロラクトン、ゼラチン、コラーゲン、セルロース、ヒアルロナン、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、トリブロックコポリマー、ポリリジンおよびこれらの任意の誘導体から成る群より選択される、請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
前記絹マトリックスが、ヒドロゲル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルム、凍結乾燥粉末、凍結乾燥ゲル、リザーバーインプラント、同種インプラント、チューブ、ゲル様またはゲル粒子、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項５０〜８２のいずれかに記載の方法。
【請求項８４】
前記絹マトリックスが、ヒドロゲルを含む、請求項５０〜８３のいずれかに記載の方法。
【請求項８５】
前記絹マトリックスが、マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を含む、請求項５０〜８４のいずれかに記載の方法。
【請求項８６】
前記治療薬を封入している前記マイクロ粒子、前記ナノ粒子、または前記ゲル様もしくはゲル粒子が、固体基材に埋め込まれている、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
前記固体基材が、錠剤、カプセル、マイクロチップ、ヒドロゲル、マット、フィルム、繊維、眼への送達デバイス、インプラント、チューブ、コーティング、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
前記固体基材が、ヒドロゲルを含む、請求項８６または８７に記載の方法。
【請求項８９】
前記ヒドロゲルが、絹ヒドロゲルを含む、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
前記絹マトリックスに最初に封入された前記治療薬の少なくとも約２０％を少なくとも約３ヶ月の期間にわたって放出されるような速度で、前記治療薬が前記絹マトリックスから放出される、請求項５０〜８９のいずれかに記載の方法。
【請求項９１】
前記絹マトリックスに最初に封入された前記治療薬の少なくとも約４０％が少なくとも約３ヶ月の期間にわたって放出されるような速度で、前記治療薬が前記絹マトリックスから放出される、請求項５０〜９０のいずれかに記載の方法。
【請求項９２】
前記絹マトリックスに最初に封入された前記治療薬の少なくとも約６０％が少なくとも約３ヶ月の期間にわたって放出されるような速度で、前記治療薬が前記絹マトリックスから放出される、請求項５０〜９１のいずれかに記載の方法。
【請求項９３】
前記治療薬が、前記絹マトリックスから約１ｎｇ／日から約１５ｍｇ／日の速度で放出される、請求項５０〜９２のいずれかに記載の方法。
【請求項９４】
前記治療薬が、前記絹マトリックスから約１μｇ／日から約１ｍｇ／日の速度で放出される、請求項５０〜９３のいずれかに記載の方法。
【請求項９５】
前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる治療効果が、眼病態の処置のための治療効果を含む、請求項５０〜９４のいずれかに記載の方法。
【請求項９６】
前記眼病態の処置のための治療効果が、前記眼病態に随伴する少なくとも１つの症状を少なくとも約１０％低減することを含む、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる前記治療効果の期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１週間長い、請求項５０〜９６のいずれかに記載の方法。
【請求項９８】
前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる前記治療効果の期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１ヶ月長い、請求項５０〜９７のいずれかに記載の方法。
【請求項９９】
前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる前記治療効果の期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約３ヶ月長い、請求項５０〜９８のいずれかに記載の方法。
【請求項１００】
前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる前記治療効果の期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約６ヶ月長い、請求項５０〜９９のいずれかに記載の方法。
【請求項１０１】
眼への投与のための制御放出絹系組成物を生成する方法であって、水蒸気と絹系マトリックスを接触させる工程を含み、前記絹系マトリックスが、その中に封入された少なくとも１つの治療薬を含む、方法。
【請求項１０２】
前記水蒸気と接触されることになる前記絹系マトリックスが、非架橋絹系マトリックスである、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
前記絹系マトリックスと前記水蒸気との接触が、絹フィブロインにおけるベータシート構造の形成を誘導する、請求項１０１または１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
前記絹系マトリックスと前記水蒸気との接触が、前記絹系マトリックスからの前記少なくとも１つの治療薬の放出動態を調節する、請求項１０１〜１０３のいずれかに記載の方法。
【請求項１０５】
前記少なくとも１つの治療薬が、タンパク質、ペプチド、抗原、免疫原、ワクチン、抗体またはその一部分、抗体様分子、酵素、核酸、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アプタマー、小分子、抗生物質、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項１０１〜１０４のいずれかに記載の方法。
【請求項１０６】
前記治療薬が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、フルオシノロンアセトニド、ガンシクロビル、トリアムシノロンアセトニド、ホスカルネット、バンコマイシン、セフタジジム、アミカシン、アムホテリシンＢ、デキサメタゾン、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項１０１〜１０５のいずれかに記載の方法。
【請求項１０７】
前記治療薬が、血管新生阻害剤を含む、請求項１０１〜１０６のいずれかに記載の方法。
【請求項１０８】
前記血管新生阻害剤が、ＶＥＧＦ阻害剤を含む、請求項１０７に記載の方法。
【請求項１０９】
前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボン酸アミド塩酸塩、アキシチニブ、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＶＥＧＦ−Ｒ１の阻害剤、アキシチニブ、Ｎ，２−ジメチル−６−（２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド、ＲＥＴ／ＰＴＣ発癌性キナーゼのチロシンキナーゼ阻害剤、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、パン−ＶＥＧＦ−Ｒ−キナーゼ阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤、マルチターゲット型ヒト表皮受容体（ＨＥＲ）１／２および血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）１／２受容体ファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、セジラニブ、ソラフェニブ、バタラニブ、グルファニド二ナトリウム、ＶＥＧＦＲ２選択的モノクローナル抗体、アンギオザイム、ｓｉＲＮＡ系ＶＥＧＦＲ１阻害剤、フマギリンおよびその類似体、ＶＥＧＦ受容体の可溶性外部ドメイン、サメ軟骨およびその誘導体、５−（（７−ベンジルオキシキナゾリン−４−イル）アミノ）−４−フルオロ−２−メチルフェノール塩酸塩、これらの任意の誘導体およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせを含む、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１１】
前記絹マトリックスが、ヒドロゲル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルム、凍結乾燥粉末、凍結乾燥ゲル、リザーバーインプラント、同種インプラント、チューブ、ゲル様またはゲル粒子、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、請求項１０１〜１１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１１２】
前記少なくとも１つの治療薬が、絹ヒドロゲルに封入される、請求項１０１〜１１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１１３】
前記少なくとも１つの治療薬が、前記絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様もしくはゲル粒子、またはこれらの任意の組み合わせに封入される、請求項１０１〜１１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１１４】
前記少なくとも１つの治療薬を封入している絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様またはゲル粒子が、ヒドロゲルにさらに埋め込まれる、請求項１１３に記載の方法。
【請求項１１５】
前記ヒドロゲルが、絹ヒドロゲルを含む、請求項１１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の引用
本願は、２０１２年２月２２日に出願した米国仮出願第６１／６０１，９２４号の米国特許法第１１９条（ｅ）項の下での利益を主張する。米国仮出願第６１／６０１，９２４号の内容は、その全体が本明細書に参考として援用される。
【０００２】
本明細書に記載する様々な態様の実施形態は、標的領域への少なくとも１つの活性薬剤、例えば治療薬の持続送達のための絹系組成物、ならびにそれらの使用方法に関する。一部の実施形態において、本明細書に記載する絹系組成物および方法は、例えば、眼疾患または障害、例えば加齢性黄斑変性を処置するための活性薬剤の眼への送達に用いることができる。
【背景技術】
【０００３】
中心視力の喪失を特徴とする変性疾患である加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）は、６０歳より高齢の人々の間で最も一般的な失明原因である。世界中でおおよそ１４００万人が、ＡＭＤの結果として盲目であるか、または重度の視覚障害を有する。ＡＭＤには２つの型がある：「萎縮（ｄｒｙ）」型は、色素分解とドルーゼンと呼ばれる小さい帯黄色の沈着物とを特徴とし；その一方で「滲出（ｗｅｔ）」型は、異常血管形成に起因する眼の後方における流体／血液の存在を特徴とする。母集団が高齢化するにつれて、この疾患の罹患者数は、より効率的かつ有効な治療法が開発されない限り、増え続けることになるであろう（Ｇｅｈｒｓら、Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３８（２００６）、４５０）。
【０００４】
現行の治療アプローチは時間がかかり、それ故、患者にとって不便である。例えば、ベルテポルフィン（ＶＩＳＵＤＹＮＥ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）での光線力学的治療法は、薬物を静脈内注入し、その後、眼におけるレーザー処置を用いてそのベルテポルフィンを活性化させる治療法であり、局所内皮への損傷および血管閉塞が生ずる結果となる。この治療法は、典型的に、（３ヶ月ごとに繰り返される）数回の処置を要し、および患者が処置後５日間、光への曝露を避けることを必要とする。同様に、抗血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）療法は、（例えば、６週間ごとにペガプタニブ（ＭＡＣＵＧＥＮ（登録商標）、Ｅｙｅｔｅｃｈ）で；毎月ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）で；毎月ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）で、または４週間ごとに投与する最初の３回分の後、８週間ごとにアフリベルセフト（ＥＹＬＥＡ（登録商標）（ＶＥＧＦ  Ｔｒａｐ−ＥＹＥ）、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）で）反復硝子体内注射を要する。眼科適応症における持続治療送達の他の選択肢としては、ポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸−コ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）系ポリマーシステムに基づく、強膜に固着して放出を制御するＳｕｒｍｏｄｉｃｓ  Ｉ−ＶＡＴＩＯＮ（商標）硝子体内インプラントシステムが挙げられる。しかし、ＰＬＧＡの加工には一般に有機溶媒および高温が使用され、ＰＬＧＡの加水分解副生成物は一般に酸であり、この酸が炎症および活性成分の分解の原因になり得る。それ故、より大きい患者快適性およびしたがってより大きい患者コンプライアンスを有する治療薬（単数または複数）、例えば抗血管新生薬（単数または複数）の持続送達をもたらすことができる眼への投与および／または治療的介入のための改善された医薬組成物が必要とされている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｇｅｈｒｓら、Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３８（２００６）、４５０
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本明細書において提供する様々な態様の実施形態は、１つ以上の治療薬の持続送達のための絹系組成物、送達デバイス、キットおよび方法、ならびにそれらの使用に関する。一部の実施形態の絹系組成物は、完全水系溶媒中で加工することができ、したがって、その中に充填される任意の治療薬（単数または複数）に関する生体適合性問題を提起し得る有機溶媒または任意の強い化学薬品の使用を回避することまたは最小限にすることができる。一般に、本明細書に記載する絹系組成物は、絹マトリックスに分散または封入された治療薬を含む。一部の実施形態において、絹系組成物、送達デバイスおよびキットは、眼への投与用に製剤化され、その後、少なくとも１つの治療薬の眼への送達および／または眼病態の処置のために使用することができる。
【０００７】
詳細には、本発明者らは、眼の少なくとも一部分への抗血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）治療薬（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）の３ヶ月より長い持続放出のためのかかる絹系組成物の使用を実証した。より重要なこととして、本発明者らは驚くべきことに、かかる絹系組成物が、標的部位（例えば、眼の硝子体液）に送達されたある量の抗ＶＥＧＦ治療薬（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）を、現行の標準的非絹溶液組成物によって送達される同量の治療薬と比較した場合よりも少なくとも約１ヶ月長い間、治療有効レベル以上で維持することができることを発見した。したがって、絹マトリックスに分散または封入された抗ＶＥＧＦ治療薬（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）は、現行の標準的非絹溶液組成物において送達される同量の治療薬と比較した場合よりも少なくとも約１ヶ月長い期間にわたって被験体にて治療効果を延長することができ、それ故、かかる抗ＶＥＧＦ治療薬で現在処置されている患者に対する投薬頻度を有意に低減させることができる。
【０００８】
本明細書において提供する１つの態様は、絹マトリックスに分散または封入された治療薬を含む眼への投与用の組成物であって、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬が、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより長い期間にわたって治療効果をもたらすことができる、組成物に関する。一部の実施形態において、治療効果を、眼病態の処置、例えば、その眼病態に随伴する少なくとも１つの症状を少なくとも約１０％低減することと関連付けることができる。
【０００９】
一部の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１週間長い期間にわたって治療効果をもたらすことができる。
【００１０】
一部の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、または少なくとも約６ヶ月長い期間にわたって治療効果をもたらすことができる。
【００１１】
一般に、任意の治療薬を絹マトリックスに封入または分散させることができる。絹マトリックスに封入または分散させることができる治療薬の例示的タイプとしては、タンパク質、ペプチド、抗原、免疫原、ワクチン、抗体またはその一部分、抗体様分子、酵素、核酸、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アプタマー、小分子、抗生物質、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。
【００１２】
一部の実施形態において、治療薬は、眼病態の処置用の薬剤、例えば、限定ではないが、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、フルオシノロンアセトニド、ガンシクロビル、トリアムシノロンアセトニド、ホスカルネット、バンコマイシン、セフタジジム、アミカシン、アムホテリシンＢ、デキサメタゾン、およびこれらの任意の組み合わせであり得る。
【００１３】
１つの実施形態において、治療薬、例えば、血管新生により誘導される病態、例えば眼におけるかかる病態の処置のための治療薬は、血管新生阻害剤、例えば、ＶＥＧＦ阻害剤であり得る。ＶＥＧＦ阻害剤の非限定的な例としては、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボン酸アミド塩酸塩、アキシチニブ、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＶＥＧＦ−Ｒ１の阻害剤、アキシチニブ、Ｎ，２−ジメチル−６−（２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド、ＲＥＴ／ＰＴＣ発癌性キナーゼのチロシンキナーゼ阻害剤、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、パン−ＶＥＧＦ−Ｒ−キナーゼ阻害剤；プロテインキナーゼ阻害剤、マルチターゲット型ヒト表皮受容体（ＨＥＲ）１／２および血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）１／２受容体ファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、セジラニブ、ソラフェニブ、バタラニブ、グルファニド二ナトリウム（ｇｌｕｆａｎｉｄｅ  ｄｉｓｏｄｉｕｍ）、ＶＥＧＦＲ２選択的モノクローナル抗体、アンギオザイム（ａｎｇｉｏｚｙｍｅ）、ｓｉＲＮＡ系ＶＥＧＦＲ１阻害剤、フマギリンおよびその類似体、ＶＥＧＦ受容体の可溶性外部ドメイン、サメ軟骨およびその誘導体、５−（（７−ベンジルオキシキナゾリン−４−イル）アミノ）−４−フルオロ−２−メチルフェノール塩酸塩、これらの任意の誘導体およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができる。
【００１４】
１つの実施形態において、ＶＥＧＦ阻害剤、例えば、血管新生により誘導される病態、例えば眼におけるかかる病態の処置のためのＶＥＧＦ阻害剤としては、ベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせを挙げることができる。
【００１５】
絹マトリックスに分散または封入された治療薬またはＶＥＧＦ阻害剤の量は、多数の因子、例えば、治療薬またはＶＥＧＦ阻害剤の望ましい放出プロファイル、特性および／または作用強度、処置されることになる病態の重症度、ならびに投与スケジュールに依存して、ナノグラムからミリグラムの範囲であり得る。一部の実施形態において、治療薬、例えばＶＥＧＦ阻害剤は、絹マトリックス中に約１ｎｇから約１００ｍｇ、約０．０１ｍｇから約５０ｍｇ、または約５ｍｇから約１０ｍｇの量で存在することができる。
【００１６】
一部の実施形態において、治療薬、例えば、ＶＥＧＦ阻害剤は、投与時に眼の少なくとも一部分に送達されたその治療有効量を、１ヶ月より長い、２ヵ月より長い、３ヶ月より長い、６ヵ月以上長い期間にわたって維持するのに十分な量で、存在することができる。したがって、一部の実施形態において、組成物は、少なくとも毎月、少なくとも２ヵ月ごと、少なくとも３ヶ月ごと、少なくとも６ヶ月以上ごとの投与用に製剤化される。絹マトリックスに分散または封入された治療薬、例えば、ＶＥＧＦ阻害剤のかかる量は、本質的に同じ治療効果を生じさせるために要する非絹マトリックスに分散または封入された治療薬またはＶＥＧＦ阻害剤の量より一般に少なく、例えば、少なくとも約１０％少なくてもよい。
【００１７】
１つの実施形態において、組成物は、絹マトリックスに封入されたベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせを含み、絹マトリックスに封入された約０．５ｍｇから約１．５ｍｇ（例えば、約１．２５ｍｇ）のベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせは、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月以上の間、治療効果をもたらす。
【００１８】
１つの実施形態において、組成物は、絹マトリックスに封入されたベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせを含み、絹マトリックスに封入された約１．５ｍｇから約１０ｍｇのベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせは、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２４ヶ月以上の間、治療効果をもたらすことができる。一部の実施形態において、絹マトリックスに封入された約３ｍｇから約１０ｍｇ（例えば、約５ｍｇ）のベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせは、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２４ヶ月以上の間、治療効果をもたらすことができる。
【００１９】
絹マトリックスの所望の状態または構成、例えばヒドロゲル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルム、凍結乾燥粉末、凍結乾燥ゲル、リザーバーインプラント（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ  ｉｍｐｌａｎｔ）、同種インプラント、ゲル様またはゲル粒子、およびこれらの任意の組み合わせに依存して、異なる濃度の絹フィブロインを、本明細書に記載する組成物の絹マトリックスに含めることができる。一部の実施形態において、絹マトリックスは、約０．１％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）、約０．５％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）、または約１％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で絹フィブロインを含むことができる。一部の実施形態では、絹フィブロインを含む絹マトリックスを、約０．１％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）、約０．５％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）、または約１％（ｗ／ｖ）から約８％（ｗ／ｖ）の濃度で絹フィブロインを含有する絹溶液から生成することができる。
【００２０】
１つの実施形態では、絹フィブロインを含む絹マトリックス、例えばヒドロゲルを、約１％（ｗ／ｖ）、約２％（ｗ／ｖ）、約４％（ｗ／ｖ）、約６％（ｗ／ｖ）、約８％（ｗ／ｖ）、約１０％（ｗ／ｖ）、約１２％（ｗ／ｖ）、約１５％（ｗ／ｖ）、約２０％（ｗ／ｖ）、約２５％（ｗ／ｖ）または約３０％（ｗ／ｖ）以上の絹フィブロイン濃度で絹フィブロインを含有する絹溶液から生成することができる。より高濃度、例えば、少なくとも約８％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１２％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１５％（ｗ／ｖ）、少なくとも約２０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約２５％（ｗ／ｖ）、少なくとも約３０％（ｗ／ｖ）以上の絹フィブロインを使用する一部の実施形態では、絹ヒドロゲルをゲル様またはゲル粒子に小さくすることができる。ゲル様またはゲル粒子は、０．０１μｍから約１０００μｍの範囲のサイズを有することができる。
【００２１】
１つの実施形態では、絹フィブロインを含む絹マトリックス、例えばマイクロ粒子またはナノ粒子を、約１％（ｗ／ｖ）、約２％（ｗ／ｖ）、約４％（ｗ／ｖ）、約６％（ｗ／ｖ）、約８％（ｗ／ｖ）、約１０％（ｗ／ｖ）、約１２％（ｗ／ｖ）、約１５％（ｗ／ｖ）、約２０％（ｗ／ｖ）、約２５％（ｗ／ｖ）または約３０％（ｗ／ｖ）以上の絹フィブロイン濃度で絹フィブロインを含有する絹溶液から生成することができる。
【００２２】
１つの実施形態では、約１％（ｗ／ｖ）、約２％（ｗ／ｖ）、約４％（ｗ／ｖ）、約６％（ｗ／ｖ）、約８％（ｗ／ｖ）、約１０％（ｗ／ｖ）、約１２％（ｗ／ｖ）、約１５％（ｗ／ｖ）、約２０％（ｗ／ｖ）、約２５％（ｗ／ｖ）または約３０％（ｗ／ｖ）以上の絹フィブロイン濃度で絹フィブロインを含有する絹溶液から生成された、絹マイクロ粒子、ナノ粒子またはゲル様もしくはゲル粒子を、固体基材および／または生物材料（例えば、生体適合性材料）にさらに埋め込むことができる。固体基材の非限定的な例としては、錠剤、カプセル、マイクロチップ、ヒドロゲル、マット、フィルム、繊維、眼への送達デバイス、インプラント、コーティング、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができる。一部の実施形態では、絹マイクロ粒子、ナノ粒子またはゲル様もしくはゲル粒子を、絹フィブロインを含む固体マトリックス、例えば、絹ヒドロゲルなどの絹マトリックス（約０．２５％（ｗ／ｖ）から約２％（ｗ／ｖ）もしくは約０．５％（ｗ／ｖ）から約１％（ｗ／ｖ）の絹濃度を有するもの）、生体適合性ポリマー、またはこれらの組み合わせに、さらに埋め込むことができる。一部の実施形態では、絹マイクロ粒子、ナノ粒子またはゲル様もしくはゲル粒子を封入する固体基材および／または生物材料に、絹マイクロ粒子、ナノ粒子またはゲル様もしくはゲル粒子に封入された治療薬と同じかまたは異なる少なくとも１つの治療薬を充填することができる。
【００２３】
一部の実施形態において、絹マトリックスは、生体適合性ポリマーをさらに含むことができる。絹マトリックスは、生体適合性ポリマーとブレンドされている絹（例えば、絹フィブロインを含むもの）、または生体適合性ポリマーにコンジュゲートされている絹を含有することができる。例示的生体適合性ポリマーとしては、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリラクチド−コ−グリコリド（ＰＬＧＡ）、ポリエステル、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ホスファジン）、ポリ（ホスフェートエステル）、ポリカプロラクトン、ゼラチン、コラーゲン、セルロース、ヒアルロナン、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、トリブロックコポリマー、ポリリジンおよびこれらの任意の誘導体が挙げられるが、それらに限定されない。
【００２４】
本明細書に記載する眼への投与用の組成物は、眼の中の様々な標的投与部位、例えば限定されないが、水晶体、強膜、結膜、房水、毛様体筋、および硝子体液用に製剤化することができる。一部の実施形態では、組成物を注射可能な組成物に、例えば硝子体内投与用に製剤化することができる。
【００２５】
本明細書に記載する組成物の異なる実施形態を用いて、眼に少なくとも１つの治療薬を送達することおよび／または眼病態を処置することができる。したがって、本明細書において提供するもう１つの態様は、眼に治療薬を送達する方法であって、絹マトリックスに分散または封入された治療薬を眼の標的部位に投与することを含み、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬が、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより長い期間にわたって治療効果をもたらすことができる方法に関する。
【００２６】
本明細書に記載するさらなる態様は、被験体における眼病態を処置する方法であって、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を被験体の眼の標的部位に投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態において、組成物は、眼の標的部位（例えば、標的部位の極めて近くの領域を含む）への治療薬の持続放出をもたらし、それによって被験体における眼病態を処置することができる。
【００２７】
眼病態は、眼の任意の部分に関連した任意の疾患または障害であり得る。一部の実施形態において、眼病態としては、眼の後区の病態を挙げることができる。例えば、眼病態には、加齢性黄斑変性、脈絡膜新生血管形成、糖尿病性黄斑浮腫、急性および慢性黄斑視神経網膜症、中心性漿液性脈絡網膜症、黄斑浮腫、急性多発性小板状色素上皮症、ベーチェット病、散弾状網脈絡膜症、後部ブドウ膜炎、後部強膜炎、匍行性脈絡膜炎（ｓｅｒｐｉｇｎｏｕｓ  ｃｈｏｒｏｉｄｉｔｉｓ）、網膜下線維症、ブドウ膜炎症候群、フォークト−小柳−原田症候群、網膜動脈閉塞性疾患、網膜中心静脈閉塞症、播種性血管内凝固障害、網膜分枝静脈閉塞症、高血圧性眼底変化、眼虚血症候群、網膜動脈微細動脈瘤、コーツ病（Ｃｏａｔ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、傍中心窩毛細血管拡張症、半側網膜静脈閉塞症、乳頭血管炎、頸動脈疾患（ＣＡＤ）、樹氷状血管炎、鎌状赤血球網膜症、網膜色素線条症、家族性滲出性硝子体網膜症、イールズ病、増殖性硝子体網膜症、糖尿病性網膜症、腫瘍に関連した網膜疾患、網膜色素上皮（ＲＰＥ）の先天性肥大、後部ブドウ膜黒色腫、脈絡膜血管腫、脈絡膜骨腫、脈絡膜転移、網膜および網膜色素上皮の混合性過誤腫、網膜芽細胞腫、眼底の血管増殖性腫瘍、網膜星状細胞腫、眼内リンパ系腫瘍、近視性網膜変性、急性網膜色素上皮炎、緑内障、眼内炎、サイトメガロウイルス網膜炎、網膜癌およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。
【００２８】
１つの実施形態において、処置されることになる眼病態は、加齢性黄斑変性であり得る。かかる実施形態において、絹マトリックスに分散または封入された治療薬としては、血管新生阻害剤、例えばＶＥＧＦ阻害剤を挙げることができる。例示的ＶＥＧＦ阻害剤は、ベバシズマブ、ラニビズマブ、またはこれらの組み合わせを含み得る。
【００２９】
眼の標的部位に投与する治療薬の有効量を増加させる方法も本明細書において提供する。一部の実施形態において、本方法は、絹マトリックスに分散または封入された治療薬を眼の標的部位に投与することを含み、絹マトリックスは、投与されると標的投与部位からの治療薬の漏出を低減させるように製剤化され、それにより、眼に投与される治療薬の有効量は増加される。一部の実施形態では、標的投与部位からの治療薬の漏出を、少なくとも約５％以上（例えば、少なくとも約１０％以上、少なくとも約２０％以上を含む）低減させることができる。
【００３０】
本明細書に記載する様々な態様において、絹マトリックスに分散または封入された治療薬は、意外にも、同じ量の治療薬が絹マトリックスなしで分散または封入されたときより長い期間にわたって治療効果をもたらす。それ故、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を被験体に投与する場合、組成物の投与頻度は、絹マトリックスなしで同じ量の治療薬が投与される被験体と比較して、低減され得る。したがって、本明細書において提供するさらにもう１つの態様は、治療薬を、それを必要とする被験体の眼の標的部位に投与する方法であって、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を被験体の眼の標的部位に、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときの投与頻度より少ない投与頻度で投与することを含む方法に関する。一部の実施形態では、投与頻度を１／２倍低減させることができる。
【００３１】
一部の実施形態において、本明細書に記載する方法の任意の態様によって生ずる治療効果は、眼病態の処置、例えば、眼病態に随伴する少なくとも１つの症状を少なくとも約１０％低減することと関連付けることができる。一部の実施形態において、本明細書に記載する方法の任意の態様によって生ずる治療効果は、絹マトリックスなしで投与される同じ量の治療薬によって生ずる治療効果の継続期間より少なくとも約１週間長い期間、持続することができる。一部の実施形態において、本明細書に記載する方法の任意の態様によって生ずる治療効果は、絹マトリックスなしで投与される同じ量の治療薬によって生ずる治療効果の継続期間より少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月または少なくとも約６ヶ月長い期間、持続することができる。
【００３２】
本明細書に記載する方法の任意の態様では、本明細書に記載する絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬または組成物を、眼の任意の部分、例えば眼の前区または眼の後区に投与することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載する絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬または組成物を、水晶体、強膜、結膜、房水、毛様体筋、および硝子体液から成る群より選択される眼の少なくとも一部分に投与することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載する絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬または組成物を、眼の硝子体液に投与することができる。
【００３３】
本明細書に記載する方法の任意の態様では、本明細書に記載する絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬または組成物を、当該技術分野において公知の任意の方法、例えば注射または体内移植によって眼に投与することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載する絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬または組成物を、眼の標的部位に注射、例えば硝子体内注射によって投与することができる。注射を、眼への注射に適する注射針、例えば、約２５から約３４、または約２７から約３０のゲージを有する注射針で行うことができる。
【００３４】
本明細書に記載する方法の任意の態様の一部の実施形態では、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物の例えば眼の標的部位への投与を、月１回以下、２ヶ月ごとに１回以下、３ヶ月ごとに１回以下、４ヶ月ごとに１回以下、５ヶ月ごとに１回以下もしくは６ヶ月ごとに１回以下（ｎｏ  ｍｏｒｅ  ｏｎｃｅ）、またはそれより低い頻度で行うことができる。
【００３５】
本明細書に記載する方法の任意の態様では、絹マトリックスに分散または封入された治療薬は、眼病態の処置に使用される任意のタイプの薬剤、例えば、限定されないが、タンパク質、ペプチド、抗原、免疫原、ワクチン、抗体またはその一部分、抗体様分子、酵素、核酸、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アプタマー、小分子、抗生物質、およびこれらの任意の組み合わせであり得る。例示的治療薬としては、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、フルオシノロンアセトニド、ガンシクロビル、トリアムシノロンアセトニド、ホスカルネット、バンコマイシン、セフタジジム、アミカシン、アムホテリシンＢ、デキサメタゾン、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。
【００３６】
本明細書に記載する方法の任意の態様の一部の実施形態において、治療薬としては、血管新生阻害剤、例えば、本明細書に記載するＶＥＧＦ阻害剤を挙げることができる。ある特定の実施形態において、ＶＥＧＦ阻害剤としては、ベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせを挙げることができる。本明細書に記載する方法のこれらの特定の実施形態を、加齢性黄斑変性の処置に使用することができる。
【００３７】
本明細書に記載する方法の任意の態様において、絹マトリクスに分散または封入された治療薬の量は、治療薬の望ましい投与スケジュールおよび／または放出プロファイルによって様々であり得る。例えば、治療薬は、投与時に眼の少なくとも一部分に送達されたその治療有効量を、例えば２ヶ月より長い、３ヶ月より長い、４ヶ月より長い、５ヶ月より長い、６ヶ月以上長い期間を含めて、１ヶ月より長い期間にわたって維持するのに十分な量で絹マトリックス中に存在することができる。一般に、標的部位への治療薬の持続放出が長いほど、実施を必要とする投与の頻度は低い。一部の実施形態において、治療薬またはＶＥＧＦ阻害剤は、約０．０１ｍｇから約５０ｍｇ、または約５ｍｇから約１０ｍｇの量で絹マトリックス中に存在することができる。
【００３８】
異なる投与方法、例えば注射もしくは体内移植、および／または投与部位に依存して、本明細書に記載する方法の異なる態様において異なる種類の絹マトリックスを使用することができる。例えば、絹マトリックスは、ヒドロゲル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルム、凍結乾燥粉末、凍結乾燥ゲル、リザーバーインプラント、同種インプラント、ゲル様もしくはゲル粒子、またはこれらの任意の組み合わせの形態であり得る。一部の実施形態において、絹マトリックスは、非侵襲的方法、例えば注射によって投与することができる、ヒドロゲル、マイクロ粒子またはナノ粒子、ゲル様もしくはゲル粒子またはこれらの任意の組み合わせであり得る。
【００３９】
一部の実施形態では、絹マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を、生物材料および／または固体基材、例えば、限定されるものではないが、錠剤、カプセル、マイクロチップ、ヒドロゲル、マット、フィルム、繊維、眼への送達デバイス、インプラント、コーティングおよびこれらの任意の組み合わせに、さらに埋め込むことができる。一部の実施形態では、絹マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を、固体基材および／または生物材料、例えば、絹ヒドロゲルまたは生体適合性ポリマーなどの絹マトリックスにさらに埋め込んで、例えば、治療薬の放出プロファイルを延長することができる。一部の実施形態において、絹マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子は、少なくとも１つの治療薬を高濃度／充填量で含むことができ、固体基材および／または生物材料にさらに埋め込むことができる。
【００４０】
異なる濃度の絹フィブロインを使用して、本明細書に記載する任意の実施形態において使用する異なる種類の絹マトリックスを実現することができる。一部の実施形態において、本明細書に記載する方法の一部の実施形態において使用する絹マトリックスは、約０．１％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）、約０．５％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）、または約１％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で絹フィブロインを含むことができる。一部の実施形態では、本明細書に記載する方法の一部の実施形態において使用する絹マトリックスを、約０．１％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）、約０．５％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）、または約１％（ｗ／ｖ）から約８％（ｗ／ｖ）の濃度で絹フィブロインを含有する絹溶液から生成することができる。
【００４１】
１つの実施形態では、方法において使用する絹マトリックス、例えばヒドロゲルは、約１％（ｗ／ｖ）、約２％（ｗ／ｖ）、約４％（ｗ／ｖ）、約６％（ｗ／ｖ）、約８％（ｗ／ｖ）、約１０％（ｗ／ｖ）、約１２％（ｗ／ｖ）、約１５％（ｗ／ｖ）、約２０％（ｗ／ｖ）、約２５％（ｗ／ｖ）または約３０％（ｗ／ｖ）以上の絹フィブロイン濃度で絹フィブロインを含有する絹溶液から生成される絹フィブロインを含むことができる。より高濃度、例えば、少なくとも約８％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１２％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１５％（ｗ／ｖ）、少なくとも約２０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約２５％（ｗ／ｖ）、少なくとも約３０％（ｗ／ｖ）以上の絹フィブロインを使用する一部の実施形態では、絹ヒドロゲルをゲル様またはゲル粒子に小さくすることができる。ゲル様またはゲル粒子は、０．０１μｍから約１０００μｍの範囲のサイズを有することができる。
【００４２】
１つの実施形態では、方法において使用する絹マトリックス、例えばマイクロ粒子またはナノ粒子は、約４％（ｗ／ｖ）、約６％（ｗ／ｖ）、約８％（ｗ／ｖ）、約１０％（ｗ／ｖ）、約１２％（ｗ／ｖ）、約１５％（ｗ／ｖ）、約２０％（ｗ／ｖ）、約２５％（ｗ／ｖ）または約３０％（ｗ／ｖ）以上の絹フィブロイン濃度で絹フィブロインを含有する絹溶液から生成された絹フィブロインを含むことができる。
【００４３】
１つの実施形態では、約４％（ｗ／ｖ）、約６％（ｗ／ｖ）、約８％（ｗ／ｖ）、約１０％（ｗ／ｖ）、約１２％（ｗ／ｖ）、約１５％（ｗ／ｖ）、約２０％（ｗ／ｖ）、約２５％（ｗ／ｖ）または約３０％（ｗ／ｖ）以上の絹フィブロイン濃度で絹フィブロインを含有する絹溶液から生成された、絹マイクロ粒子、ナノ粒子またはゲル様もしくはゲル粒子を、生物材料、例えば、絹ヒドロゲルなどの絹マトリックス（約０．２５％（ｗ／ｖ）から約２％（ｗ／ｖ）もしくは約０．５％（ｗ／ｖ）から約１％（ｗ／ｖ）の絹濃度を有するもの）、生体適合性ポリマー、またはこれらの組み合わせに、さらに埋め込むことができる。一部の実施形態では、絹マイクロ粒子、ナノ粒子またはゲル様もしくはゲル粒子を封入する固体基材および／または生物材料、例えば絹マトリックスに、絹マイクロ粒子、ナノ粒子またはゲル様もしくはゲル粒子に封入された治療薬と同じであるかまたは異なる治療薬を充填することができる。
【００４４】
本明細書に記載する方法の任意の態様の一部の実施形態において、絹マトリックスは、前述の生体適合性ポリマーをさらに含むことができる。絹マトリックスは、生体適合性ポリマーとブレンドされている絹（例えば、絹フィブロインを含むもの）、または生体適合性ポリマーにコンジュゲートされている絹を含有することができる。
【００４５】
投与されると、絹マトリックスから任意の速度で治療薬を放出することができ、例えば絹マトリックスの濃度および／または材料状態を変えることによって速度を調整することができる。一部の実施形態では、絹マトリックスに最初に封入された治療薬の例えば少なくとも約４０％または少なくとも約６０％を含めて、少なくとも約２０％を少なくとも約３ヶ月以上の期間にわたって放出することができるような速度で、治療薬を絹マトリックスから放出することができる。他の実施形態では、治療薬を絹マトリックスから約１ｎｇ／日から約１５ｍｇ／日、または約１μｇ／日から約１ｍｇ／日の速度で放出することができる。
【００４６】
例えば本明細書に記載する任意の実施形態の組成物の投与および／本明細書に記載する任意の実施形態の方法を助長するための眼への送達デバイスおよびキットも、本明細書において提供する。一部の実施形態において、眼への送達デバイスは、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を含むことができる。眼への送達デバイスは、任意の形態で存在することができ、例えば、一部の実施形態において、デバイスは、例えば約２５から約３４または約２７から約３０のゲージを有する注射針を有する注射器を含むことができる。本明細書に記載する組成物の投与のためにおよび／または本明細書に記載する方法において使用することができる眼への送達デバイスの他の例としては、コンタクトレンズ、点眼器、マイクロニードル（例えば、絹マイクロニードル）、インプラント、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。
【００４７】
本明細書において提供するキットは、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を含む少なくとも１つの容器、および／または本明細書に記載する任意の実施形態による少なくとも１つの眼への送達デバイスを一般に含むことができる。一部の実施形態では、組成物を、キットに備えられる少なくとも１つの眼への送達デバイスに予め充填することができる。例えば、１つの実施形態では、本明細書に記載する組成物を注射器に予め充填することができ、該注射器に場合により注射針を取り付けることができる。例えば、組成物が送達デバイスに備えられていないか、または予め充填もされていない一部の実施形態では、キットは、例えば、注射器および注射針をさらに含むことができる。一部の実施形態において、キットは、麻酔薬、例えば、眼への投与中に一般に用いられる麻酔薬をさらに含むことができる。一部の実施形態において、キットは、例えば投与部位を滅菌するために、消毒薬をさらに含むことができる。一部の実施形態において、キットは、投与部位に消毒薬を塗布するための１つ以上のスワブをさらに含むことができる。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】図１は、陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（約２％絹））、陽性対照（すなわち、溶解状態の約２．５％ベバシズマブ）、「低用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約２．５％ベバシズマブ、この図中では「低用量ゲル」と呼ぶ）または「高用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約１０％ベバシズマブ、この図中では「高用量ゲル」と呼ぶ）の注射後９０日の期間にわたってのウサギ体重のグラフである。
【図２】図２は、陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（約２％絹））、陽性対照（すなわち、溶解状態の約２．５％ベバシズマブ）、「低用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約２．５％ベバシズマブ、この図中では「低用量ゲル」と呼ぶ）または「高用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約１０％ベバシズマブ、この図中では「高用量ゲル」と呼ぶ）の注射後９０日の期間にわたってウサギから採集した硝子体液において検出されたベバシズマブ濃度を図示するものである。点線は、陽性対照処置に付したウサギにおけるベバシズマブの推定第０日および第３０日濃度を表す。陽性対照処置は、患者に月１回投与される現行処置を模倣するために用いる。月に１回の注射という現行投薬頻度に基づき、ベバシズマブの代表治療範囲を決定することができる。
【図３】図３は、陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（約２％絹））、陽性対照（すなわち、約２．５％ベバシズマブ溶液）、「低用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約２．５％ベバシズマブ、この図中では「低用量ゲル」と呼ぶ）または「高用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約１０％ベバシズマブ、この図中では「高用量ゲル」と呼ぶ）の注射後９０日の期間にわたってウサギから採集した房水において検出されたベバシズマブ濃度を図示するものである。点線は、陽性対照処置に付したウサギにおけるベバシズマブの推定第０日および第３０日濃度を表す。陽性対照処置は、患者に月１回投与される現行処置を模倣するために用いる。月に１回の注射という現行投薬頻度に基づき、ベバシズマブの代表治療範囲を決定することができる。
【図４】図４は、陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（約２％絹））、陽性対照（すなわち、約２．５％ベバシズマブ溶液）、「低用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約２．５％ベバシズマブ、この図中では「低用量ゲル」と呼ぶ）または「高用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約１０％ベバシズマブ、この図中では「高用量ゲル」と呼ぶ）の注射後９０日の期間にわたってウサギから採集した血漿において検出されたベバシズマブ濃度を図示するものである。
【図５Ａ】図５Ａ〜５Ｂは、異なる製剤を注射したウサギについて第９０日に撮影した代表的な最終眼底写真である。図５Ａは、陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（約２％絹））または陽性対照（すなわち、約２．５％ベバシズマブ溶液）を注射したウサギについて第９０日に撮影した代表的な最終眼底写真を図示するものである。詳細には、対照（左）眼および被験（右）眼の写真を提供し、陰性ビヒクル対照についての挿入画は、残存ヒドロゲル物品の画像である。図５Ｂは、「低用量」ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約２．５％ベバシズマブ、この図中では「低用量ゲル」と呼ぶ）または「高用量」ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約１０％ベバシズマブ、この図中では「高用量ゲル」と呼ぶ）を注射したウサギについて第９０日に撮影した代表的な最終眼底写真を図示するものである。詳細には、対照（左）眼および被験（右）眼の写真を提供し、「高用量」ヒドロゲルについての挿入図は、残存ヒドロゲル物品の画像である。場合によっては、「低用量」ヒドロゲル物品が視神経円板を遮断している。図５Ａ〜５Ｂは、陰性および陽性対照と比較して、ベバシズマブを充填した絹ヒドロゲルで処置したウサギにおける処置後第９０日の時点での低減された網膜血管成長を示す。
【図５Ｂ】図５Ａ〜５Ｂは、異なる製剤を注射したウサギについて第９０日に撮影した代表的な最終眼底写真である。図５Ａは、陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（約２％絹））または陽性対照（すなわち、約２．５％ベバシズマブ溶液）を注射したウサギについて第９０日に撮影した代表的な最終眼底写真を図示するものである。詳細には、対照（左）眼および被験（右）眼の写真を提供し、陰性ビヒクル対照についての挿入画は、残存ヒドロゲル物品の画像である。図５Ｂは、「低用量」ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約２．５％ベバシズマブ、この図中では「低用量ゲル」と呼ぶ）または「高用量」ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約１０％ベバシズマブ、この図中では「高用量ゲル」と呼ぶ）を注射したウサギについて第９０日に撮影した代表的な最終眼底写真を図示するものである。詳細には、対照（左）眼および被験（右）眼の写真を提供し、「高用量」ヒドロゲルについての挿入図は、残存ヒドロゲル物品の画像である。場合によっては、「低用量」ヒドロゲル物品が視神経円板を遮断している。図５Ａ〜５Ｂは、陰性および陽性対照と比較して、ベバシズマブを充填した絹ヒドロゲルで処置したウサギにおける処置後第９０日の時点での低減された網膜血管成長を示す。
【図６】図６は、陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（約２％絹））、陽性対照（すなわち、約２．５％ベバシズマブ溶液）、「低用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約２．５％ベバシズマブ、この図中では「低用量ゲル」と呼ぶ）または「高用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約１０％ベバシズマブ、この図中では「高用量ゲル」と呼ぶ）の注射後９０日の期間にわたってウサギの眼科検査中に目視で採点した、種々の製剤の分解を例証するグラフである。
【図７】図７は、陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（約２％絹））、陽性対照（すなわち、約２．５％ベバシズマブ溶液）、「低用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約２．５％ベバシズマブ、この図中では「低用量ゲル」と呼ぶ）または「高用量」絹ヒドロゲル（すなわち、約２％絹／約１０％ベバシズマブ、この図中では「高用量ゲル」と呼ぶ）の（約０．０２％アジ化ナトリウムを有する）ＰＢＳ中での注射後９０日の期間にわたってのｉｎ  ｖｉｔｒｏベバシズマブ濃度を図示するグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
より大きい患者快適性およびしたがってより大きい患者コンプライアンスを有する治療薬（単数または複数）、例えば抗血管新生薬（単数または複数）の持続送達をもたらすことができる眼への投与および／または治療的介入のための改善された医薬組成物が必要とされている。本明細書に記載する様々な態様の実施形態は、眼の少なくとも一部分への治療薬の持続送達のため、および／または眼病態、例えば、加齢性黄斑変性などの血管新生により誘導される眼疾患または障害の処置のための組成物、眼への送達デバイス、キットおよび方法に関する。本明細書に記載する組成物は、絹マトリックス、例えば、限定されるものではないがヒドロゲルに分散または封入された治療薬、例えば、ＶＥＧＦ阻害剤をはじめとする血管新生阻害剤を一般に含む。
【００５０】
本発明者らは、一部の実施形態において、絹マトリックス、例えば絹ヒドロゲルに分散または封入された治療薬、例えばＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）などのＶＥＧＦ阻害剤を、少なくとも約３ヶ月以上の持続放出用に製剤化することができる。本明細書に記載する新規の絹系組成物は、一部の実施形態では、ある量の治療薬、例えばＶＥＧＦ阻害剤の安全な投与を可能とし、該量は、現行の非絹投与を用いる１用量での投与に許容される同じ治療薬の量より少なくとも約３０％以上高いものである（約４倍高い場合を含む）。さらに驚くべきことに、一部の実施形態では、絹系組成物が、現行の非絹組成物の１投薬量に含有される量と同じ量の治療薬（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）などのＶＥＧＦ阻害剤）を含有するときでさえ、絹系組成物は、現行の非絹組成物での投与と比較して長い期間、例えば、少なくとも約１週間長い、またはさらには少なくとも約１ヶ月長い間、少なくとも治療有効量以上のレベルでの治療薬の持続放出をもたらすことができる。一部の実施形態において、絹系組成物は、現行の非絹組成物での投与と比較して長い期間、例えば、少なくとも約１週間長い、またはさらには少なくとも約１ヶ月も長い間、治療効果をもたらすことができる。したがって、本明細書に記載する組成物の一部の実施形態を用いて、抗ＶＥＧＦ剤で現在処置されている患者についての投薬頻度を低減させることができる。さらに、一部の実施形態において、治療薬を封入する絹マトリックスは、投与されると、時間をかけて、例えば約３ヶ月以上後に、ｉｎ  ｖｉｖｏで生体適合性アミノ酸に分解することができる。それ故、絹系組成物は、新たな投与の前に以前に投与した絹マトリックスを抜き取ることを懸念せずに、必要に応じて、繰り返し投与することができる。
【００５１】
１つの態様において、本明細書に記載することは、絹マトリックスに分散または封入された治療薬を含む眼への投与用の組成物であって、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬が、本質的に同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより長い期間にわたって治療効果をもたらすことができる組成物に関する。
【００５２】
一部の実施形態では、治療効果を、眼病態、例えば、血管新生により誘導される眼病態、例えば加齢性黄斑変性の処置と関連付けることができる。一部の実施形態では、眼病態に随伴する少なくとも１つの症状の低減であって、対照基準値、例えば、治療薬を投与しないとき、または同じ治療薬を絹マトリックスなしで投与したときと比較して少なくとも約１０％以上の低減を検出することによって、治療効果を判定することができる。本明細書において用いる場合、用語「治療効果」は、以下でさらに詳細に論ずる。
【００５３】
一部の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより長い任意の期間、治療効果をもたらすことができる。一部の実施形態において、該期間は、数日、数週間から数ヶ月の範囲であり得る。例えば、一部の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１日、少なくとも約２日、少なくとも約３日、少なくとも約４日、少なくとも約５日、少なくとも約６日、または少なくとも約７日以上長い期間、治療効果をもたらすことができる。他の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月以上長い期間、治療効果をもたらすことができる。
【００５４】
一部の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１ヶ月長い間、治療効果をもたらすことができる。一部の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約３ヶ月長い間、治療効果をもたらすことができる。一部の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約６ヶ月長い間、治療効果をもたらすことができる。一部の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１２ヶ月長い間、治療効果をもたらすことができる。
【００５５】
本明細書において用いる場合、「治療薬を絹マトリックスなしで投与する」という句は、一般に、非絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬、または非絹マトリックスと併用で投与される治療薬を指す。絹マトリックスなしでの治療薬を、本明細書に記載する組成物を投与するために用いるものと同じ方法またはそれとは異なる方法を用いて、投与することができる。絹マトリックスなしで投与される治療薬を、本明細書に記載する組成物が製剤化される形式または状態と同じかまたはそれとは異なる形式または状態に、製剤化することができる。一部の実施形態において、非絹マトリックスは、本質的に絹を含まないか、または絹フィブロインを含まない溶液、例えば緩衝溶液の形態であり得る。一部の実施形態において、非絹マトリックスは、本質的に絹を含まないか、または絹フィブロインを含まないゲル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルムまたはインプラントの形態であり得る。一部の実施形態において、非絹マトリックスは、生体適合性非絹ポリマー、例えば、ポリラクチド−コ−グリコリド（ＰＬＧＡ）を含むことができる。
【００５６】
一部の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、本質的に同じ量の治療薬を非絹緩衝溶液で投与したときより、例えば、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約１２ヶ月以上長い間を含めて、少なくとも約１週間長い間、治療効果をもたらすことができる。
【００５７】
絹マトリックス中の治療薬の量
一般に、任意の量の治療薬を絹マトリックスに、その治療薬の望ましい放出プロファイル（例えば、放出速度および／または継続期間）、特性（例えば、半減期および／または分子サイズ）および／または作用強度、処置されることになる被験体の眼病態の重症度、望ましい投与スケジュール、絹マトリックスの充填能力、処置されることになる被験体の健康状態ならびにこれらの組み合わせを含むが、それらに限定されない多数の因子に依存して、分散または封入させることができる。例えば、一部の実施形態において、治療薬は、絹マトリックス中に、約１ｎｇから約１００ｍｇ、約５００ｎｇから約９０ｍｇ、約１μｇから約７５ｍｇ、約０．０１ｍｇから約５０ｍｇ、約０．１ｍｇから約５０ｍｇ、約１ｍｇから約４０ｍｇ、約５ｍｇから約２５ｍｇの量で存在することができる。一部の実施形態において、治療薬は、絹マトリックス中に、全絹マトリックス体積（すなわち、絹マトリックスと治療薬の合計体積）の約０．０１％（ｗ／ｖ）から約９０％（ｗ／ｖ）の量、例えば、全絹マトリックス体積の約０．０５％（ｗ／ｖ）から約７５％（ｗ／ｖ）、約０．１％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）、約１％（ｗ／ｖ）から約４０％（ｗ／ｖ）、約５％（ｗ／ｖ）から約２５％（ｗ／ｖ）、または約７．５％（ｗ／ｖ）から約２０％（ｗ／ｖ）を含む量で存在することができる。一部の実施形態において、治療薬は、絹マトリックス中に、全絹マトリックス体積の約０．５％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）の量で存在することができる。一部の実施形態において、治療薬は、絹マトリックス中に、全絹マトリックス体積の約３％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）の量で存在することができる。１つの実施形態において、治療薬（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）またはＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）などの抗ＶＥＧＦ阻害剤）は、絹マトリックス中に、全絹マトリックス体積の約０．１％（ｗ／ｖ）から約２０％（ｗ／ｖ）、または約０．５％（ｗ／ｖ）から約１０％（ｗ／ｖ）、または約０．５％（ｗ／ｖ）から約３％（ｗ／ｖ）の量で存在することができる。１つの実施形態において、治療薬（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）またはＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）などの抗ＶＥＧＦ阻害剤）は、絹マトリックス中に、全絹マトリックス体積の約３％（ｗ／ｖ）から約２０％（ｗ／ｖ）の量で存在することができる。１つの実施形態において、治療薬（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）またはＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）などの抗ＶＥＧＦ阻害剤）は、絹マトリックス中に、全絹マトリックス体積の約５％（ｗ／ｖ）から約１０％（ｗ／ｖ）の量で存在することができる。
【００５８】
理論により拘束されることを望まないが、処置されることになる（例えば、眼の中の）標的部位に対する治療効果の継続期間は、一般に、その標的部位に送達された治療薬量を治療有効量で維持することができる長さと相関する。それ故、一部の実施形態において、眼への投与用の組成物は、絹マトリックスに分散または封入された治療薬であって、投与時の絹マトリックスから眼の標的部位またはその近接への治療薬の放出を、ある特定の期間にわたって、例えば１ヶ月より長くにわたって、治療有効量で維持するのに十分な量で存在する治療薬を含む。
【００５９】
本明細書において用いる場合、用語「治療有効量」は、被験体内の細胞の少なくともサブ集団において任意の医学的処置に適用できる妥当な損益比で、有益または所望の臨床結果を生じさせるために有効である治療薬の量を指す。例えば、標的部位またはその近接、例えば、眼の少なくとも一部分（例えば、硝子体液）および／または眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、本明細書に定義されるように統計学的に有意な測定可能治療効果を、直接または間接的に生じさせるのに十分である。単に例として、処置されることになる眼病態が、血管新生により誘導される眼疾患または障害（例えば、加齢性黄斑変性）であるとき、眼の少なくとも一部分（例えば、硝子体液）および／または眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、その血管新生により誘導される眼疾患または障害（例えば、加齢性黄斑変性）に随伴する少なくとも１つの症状またはマーカーを、治療薬不在と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％以上（しかし１００％を含まない）低減させるのに十分である。一部の実施形態において、眼の少なくとも一部分（例えば、硝子体液）および／または眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、血管新生により誘導される眼疾患または障害（例えば、加齢性黄斑変性）に随伴する少なくとも１つの症状またはマーカーを、治療薬不在と比較して、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％以上（しかし１００％を含まない）低減させるのに十分である。一部の実施形態において、眼の少なくとも一部分（例えば、硝子体液）および／または眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、血管新生により誘導される眼疾患または障害（例えば、加齢性黄斑変性）に随伴する少なくとも１つの症状またはマーカーを、治療薬不在と比較して、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％以上（しかし１００％を含まない）低減させるのに十分である。一部の実施形態において、眼の少なくとも一部分（例えば、硝子体液）および／または眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、血管新生により誘導される眼疾患または障害（例えば、加齢性黄斑変性）に随伴する少なくとも１つの症状またはマーカーを、治療薬不在と比較して、１００％低減させるのに十分である。
【００６０】
本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物および／または方法で処置することができる、血管新生により誘導される眼疾患または障害（例えば、加齢性黄斑変性）の例示的症状としては、眼の網膜内の異常血管の増殖、および視力低下を挙げることができるが、これらに限定されない。加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）が処置されることになる一部の実施形態において、ＡＭＤと診断された眼の硝子体液および／またはその眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、治療薬不在と比較して少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％以上（しかし１００％を含まない）、網膜内の異常血管の退縮を誘導および／または該血管の増殖を阻害するのに十分である。一部の実施形態において、ＡＭＤと診断された眼の硝子体液および／またはその眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、治療薬不在と比較して少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％以上（しかし１００％を含まない）、網膜内の異常血管の退縮を誘導および／または該血管の増殖を阻害するのに十分である。一部の実施形態において、ＡＭＤと診断された眼の硝子体液および／またはその眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、治療薬不在と比較して少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％以上（しかし１００％を含まない）、網膜内の異常血管の退縮を誘導および／または該血管の増殖を阻害するのに十分である。１つの実施形態において、ＡＭＤと診断された眼の硝子体液および／またはその眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、治療薬不在と比較して１００％、網膜内の異常血管の退縮を誘導および／または該血管の増殖を阻害するのに十分である。
【００６１】
加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）が処置されることになる一部の実施形態において、ＡＭＤと診断された眼の硝子体液および／またはその眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、治療薬不在と比較して少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％以上（しかし１００％を含まない）、視力を向上させる（例えば、限定されるものではないが、中心視力のかすみ低減、視覚的歪みおよび／または幻覚低減）のに十分である。一部の実施形態において、ＡＭＤと診断された眼の硝子体液および／またはその眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、治療薬不在と比較して少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％以上（しかし１００％を含まない）、視力を向上させる（例えば、限定されるものではないが、中心視力のかすみ低減、視覚的歪みおよび／または幻覚低減）のに十分である。一部の実施形態において、ＡＭＤと診断された眼の硝子体液および／またはその眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、治療薬不在と比較して少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％以上（しかし１００％を含まない）、視力を向上させる（例えば、限定されるものではないが、中心視力のかすみ低減、視覚的歪みおよび／または幻覚低減）のに十分である。１つの実施形態において、ＡＭＤと診断された眼の硝子体液および／またはその眼細胞（例えば、網膜細胞）に送達される治療有効量は、治療薬不在と比較して１００％視力を向上させる（例えば、限定されるものではないが、中心視力のかすみ低減、視覚的歪みおよび／または幻覚低減）のに十分である。
【００６２】
治療有効量の決定は、十分に当業者の能力の範囲内である。一般に、治療有効量は、例えば、被験体の病歴、年齢、状態、性別、ならびに被験体の医学的状態の重症度およびタイプ、および／または他の医薬活性薬剤の投与によっても変わり得る。さらに、治療有効量は、当業者には認識されるように、処置される具体的な疾患、投与経路、選択される賦形剤、ならびに併用療法、例えばレーザー凝固および／または外科手術、の可能性に依存して変わり得る。一部の実施形態において、治療有効量は、ＥＤ５０とＬＤ５０（治療薬を摂取している被験体の約５０％が死ぬ、治療薬の用量）の間の範囲であり得る。一部の実施形態において、治療有効量は、ＥＤ５０（治療薬を摂取している被験体の少なくとも約５０％において治療効果が検出される、治療薬の用量）とＴＤ５０（症例の約５０％において毒性が発生する用量）の間の範囲であり得る。代替実施形態において、治療有効量は、非絹マトリックスで投与される同じ治療薬の現行の投薬レジメンに基づいて決定される量であり得る。例えば、治療有効量の上限は、非絹マトリックス中の治療薬の現行投薬量での投与日に、眼の少なくとも一部分、例えば硝子体液に送達される治療薬の濃度または量によって決めることができ；その一方で、治療有効量の下限は、非絹マトリックス中の治療薬の新たな投薬量が必要とされる日に、眼の少なくとも一部分、例えば硝子体液に送達される治療薬の濃度または量によって決めることができる。
【００６３】
本明細書において用いる場合、用語「維持する」は、眼の標的部位に送達される治療薬の濃度または量を少なくとも治療有効量以上である特定の期間にわたって持続させることに関して用いる。一部の実施形態において、本明細書において用いる場合、用語「維持する」は、治療薬の濃度または量をある特定の期間にわたって本質的に一定の値で保つことを指し得る。一部の実施形態において、本明細書において用いる場合、用語「維持する」は、治療薬の濃度または量をある特定の期間にわたってある範囲内に保つことを指し得る。例えば、眼の標的部位に送達される治療薬の濃度または量を、ある特定の期間にわたって、約ＥＤ５０と約ＬＤ５０の間、または約ＥＤ５０と約ＴＤ５０の間の範囲内で維持することができる。かかる実施形態において、眼の標的部位に送達される治療薬の濃度または量は、時間に伴って変わり得るが、ある特定の期間の少なくとも９０％（例えば、ある特定の期間の少なくとも約９５％、約９８％、約９９％、１００％を含めて１００％まで）について、治療有効量範囲内に保たれる。
【００６４】
一部の実施形態において、治療薬は、投与時の絹マトリックスから眼の標的部位またはその近接への治療薬の放出または送達を、ある特定の期間にわったって、例えば、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約１２ヶ月以上を含めて、１ヶ月より長い期間にわたって治療有効量で維持するのに十分な量で存在する。絹マトリックスに分散または封入された治療薬のかかる量は、一般に、本質的に同じ治療効果を生じさせるために要する処置レジメンの現行（すなわち、絹マトリックスなしの）投薬量中に存在する治療薬の量より少なく、例えば、少なくとも約１０％少なくあり得る。実際、本発明者らは、絹マトリックスに封入された治療薬によって、その治療薬についての治療効果の継続期間を増加させることができることを発見した。別の言い方をすれば、本発明者らは、絹マトリックスへの治療薬の封入によってその治療効力を増加させ得ること、すなわち、特定の適応症、例えば、血管新生により誘導される眼病態（例えば、加齢性黄斑変性）などの眼病態、のために投与される典型的な１投薬量中に存在する量と比較して、絹マトリックスに封入された少ない量の治療薬が、本質的に同じ治療効果を達成できることを発見した。したがって、絹マトリックスは、治療薬を、その治療薬の１投薬量について慣例的に推奨されている量より少ない量だが本質的に同じ治療効果を達成する量で含むことができる。例えば、治療薬の慣例的に推奨されている投薬量が、Ｘ量である場合には、絹マトリックスは、約０．９Ｘ、約０．８Ｘ、約０．７Ｘ、約０．６Ｘ、約０．５Ｘ、約０．４Ｘ、約０．３Ｘ、約０．２Ｘ、約０．１Ｘ以下の量の治療薬を含むことができる。理論により拘束されることを望まないが、これは、絹マトリックス中の治療薬のより低い投薬量を投与することで、より多い投薬量を絹マトリックスなしで投与したときと同様である治療効果を得ることを可能にすることができる。治療薬の低投薬量投与は、もしあれば治療薬の副作用を低減させることができ、および／またはある期間の投与後の治療薬に対する被験体の耐性の可能性を低減させることができる。
【００６５】
一部の実施形態において、絹マトリクスに分散または封入された治療薬の量は、特定の適応症、例えば、血管新生により誘導される眼病態（例えば、加齢性黄斑変性）などの眼病態、のために投与される同じ治療薬の１投薬量について一般に推奨される量より多くあり得る。単なる例として、約０．５ｍｇから約１．２５ｍｇのベバシズマブが、一般に、被験体の眼に、例えば加齢性黄斑変性の処置のために、溶液として硝子体内投与されている。溶解状態の治療薬（例えば、ベバシズマブ）の投与では、一般に、制御および持続放出が可能でない。それ故、溶解状態の治療薬の放出速度は、一般に、絹マトリックスに充填された同じ量の治療薬の放出速度より高度な初期バーストおよび／または全般的に速い放出動態を生じさせ得る。溶液送達で観察されるそのようなより高度な初期バーストのため、被験体の眼に投与される現行の単回投薬量は、例えば初期バースト濃度が毒性レベルを超えないことを確実にするために、一般に、限定量のベバシズマブを溶解状態で含有する。そのため、（例えば、加齢性黄斑変性の処置のための）処置レジメンの現行投薬量は、治療効果を維持するために、少なくとも１ヶ月に１回の溶解状態のベバシズマブの投与を要する。このために、本発明者らは、一部の実施形態において、絹マトリックスへのベバシズマブの封入が治療効果を少なくとも１ヶ月延長することができることを実証したばかりでなく、絹マトリックスが、デポーとして作用できるので、絹マトリックスに充填される治療薬の全量が同じ治療薬の１投薬量について一般に推奨される量より多くあることができ（例えば、現行の溶液投与での１．２５ｍｇベバシズマブと比較して絹マトリックスでは５ｍｇベバシズマブ）、それ故、より長い治療効果をより低い投与頻度でもたらすことができることも証明した。したがって、治療薬の推奨投薬量が、Ｘ量である場合には、絹マトリックスは、約１．２５Ｘ、約１．５Ｘ、約１．７５Ｘ、約２Ｘ、約２．５Ｘ、約３Ｘ、約４Ｘ、約５Ｘ、約６Ｘ、約７Ｘ、約８Ｘ、約９Ｘ、約１０Ｘ以上の量の治療薬を封入することができる。理論により拘束されることを望まないが、これらの実施形態において、眼の標的部位に投与される絹マトリックスに封入された治療薬は、絹マトリックスなしでの治療薬の多回投与で得られる同様の治療効果をもたらすことができる。
【００６６】
治療薬を絹マトリックスに高濃度で充填する一部の実施形態では、治療薬を、先ず、絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様もしくはゲル粒子、またはこれらの任意の組み合わせに封入することができ、その後、さらに本明細書に記載する固体基材および／または生物材料に埋め込む。１つの実施形態において、治療薬を封入する絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様および／またはゲル粒子を、例えば絹ヒドロゲルを含むヒドロゲルにさらに埋め込むことができる。
【００６７】
一部の実施形態において、絹マトリックスに封入された治療薬の量は、治療薬の１投薬量について一般に推奨されている量と、本質的に同じであり得るが、より長い治療効果をもたらすことができる。例えば、治療薬の一般推奨投薬量がＸ量である場合には、絹系組成物は、約Ｘ量の治療薬を含むことができる。理論により拘束されることを望まないが、これらの実施形態において、絹マトリックスに封入された治療薬は、既存処置レジメンより少ない治療薬投与を可能にすることができる。絹系組成物は、絹マトリックスなしの治療薬より長期間にわたって治療効果をもたらすことができるからである。
【００６８】
本明細書において用いる場合、用語「持続送達」は、投与後ある期間にわたっての治療薬のｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏでの継続的送達を指す。例えば、持続放出は、少なくとも約３日間、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月以上の期間にわたって生ずることができる。一部の実施形態において、持続放出は、１ヶ月以上の期間にわたって生ずることができる。一部の実施形態において、持続放出は、少なくとも約３ヶ月以上の期間にわたって生ずることができる。一部の実施形態において、持続放出は、少なくとも約６ヶ月以上の期間にわたって生ずることができる。一部の実施形態において、持続放出は、少なくとも約９ヶ月以上の期間にわたって生ずることができる。一部の実施形態において、持続放出は、少なくとも約１２ヶ月以上の期間にわたって生ずることができる。
【００６９】
治療薬のｉｎ  ｖｉｖｏでの持続送達を、例えば、治療薬の継続治療効果（例えば、眼病態、例えば加齢性黄斑変性に随伴する少なくとも１つの症状の低減）によって継時的に実証することができる。あるいは、治療薬の持続送達を、ｉｎ  ｖｉｖｏでの治療薬の存在またはレベルを継時的に検出することによって実証することができる。単なる例として、硝子体内投与時の治療薬の持続送達を、被験体の房水、硝子体液および／または血清中に存在する治療薬の量を測定することによって検出することができる。治療薬の放出速度および／または放出プロファイルを、多数の因子、例えば、絹マトリックス組成および／もしくは濃度、絹マトリックスの多孔性（例えば、孔径および／もしくは多孔度）、絹マトリックスに充填される治療薬の量および／もしくは分子サイズ、絹マトリックス中のβシート構造の含有量、ならびに／または治療薬と絹マトリックスの相互作用（例えば、治療薬の絹マトリックスに対する結合親和性）、ならびにこれらに任意の組み合わせによって、調整することができる。例えば、治療薬が絹マトリックスとのより高い親和性を有する場合、放出速度は、絹マトリックスとのより低い親和性を有するものより通常は遅い。加えて、絹マトリックスがより大きい細孔を有するとき、封入された治療薬は、一般に、より小さい細孔を有する絹マトリックスからよりも、より大きい細孔を有する絹マトリックスから速く放出される。
【００７０】
一部の実施形態では、治療薬を、先ず、絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様もしくはゲル粒子、またはこれらの任意の組み合わせに封入することができ、その後、例えば、眼の標的部位への治療薬の放出を制御するために、本明細書に記載する固体基材および／または生物材料にさらに埋め込む。１つの実施形態では、治療薬を封入する絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様および／またはゲル粒子を、例えば絹ヒドロゲルを含むヒドロゲルにさらに埋め込むことができる。
【００７１】
一部の実施形態では、高濃度／充填量の治療薬を絹マトリックスに封入して、例えば、持続放出を促進することができる。例えば、一部の実施形態では、高濃度／充填量の治療薬を、先ず、絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様もしくはゲル粒子、またはこれらの任意の組み合わせに封入することができ、その後、本明細書に記載する固体基材および／または生物材料にさらに埋め込む。１つの実施形態では、高濃度／充填量の治療薬を封入する絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様および／またはゲル粒子を、例えば絹ヒドロゲルを含むヒドロゲルにさらに埋め込むことができる。
【００７２】
一部の実施形態では、治療薬を、投与時に眼の標的部位（例えば、硝子体液）への治療有効量範囲内の治療薬の持続放出をもたらすのに十分な量で、絹マトリックスに充填することができる。一部の実施形態では、治療薬を、その治療薬の放出速度をある期間にわたって約０．０１ｎｇ／日から約１０００ｍｇ／日、少なくとも約０．１ｎｇ／日から約５００ｍｇ／日、または約１ｎｇ／日から約２５０ｍｇ／日で維持するのに十分な量で、絹マトリックスに充填することができる。
【００７３】
一部の実施形態では、絹マトリックスに封入または分散された治療薬または本明細書に記載する組成物を投与すると、標的部位に送達された治療薬の量の初期スパイクがあってもよく、その後、絹マトリックスからの治療薬の放出速度は、ある期間にわたって減少し続け得る。それ故、治療薬は、最初はｍｇ／日の高い速度で放出され得、そしてその後、より遅い速度で、例えばμｇ／日またはｎｇ／日で放出され得る。したがって、一部の実施形態では、投与すると、例えば、投与の少なくとも約１日（例えば、投与の少なくとも約２日、少なくとも約３日、少なくとも約４日、少なくとも約５日、少なくとも約６日、少なくとも約７日、少なくとも約２週間以上後を含む）に、約０．０１ｍｇ／日から約１０００ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日から約５００ｍｇ／日、または約１ｍｇ／日から約２５０ｍｇ／日の初期放出速度を生じさせることができる量で、治療薬を絹マトリックスに充填することができる。一部の実施形態では、投与すると、例えば投与の少なくとも約１週間後（例えば、投与の少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１２ヶ月以上後を含む）に、約０．０１ｎｇ／日から約１０μｇ／日、約０．１ｎｇ／日から約１μｇ／日、約１ｎｇ／日から約５００ｎｇ／日、約５ｎｇ／日から約２５０ｎｇ／日、または約１０ｎｇ／日から約２００ｎｇ／日の放出速度を生じさせることができる量で、治療薬を絹マトリックスに充填することができる。一部の実施形態では、かかる期間中に治療薬をより低速ででも、例えばｐｇ／日レベルででも放出させることができる。
【００７４】
別の言い方をすると、治療薬を、絹マトリックスから、絹マトリックスに最初に封入された治療薬の例えば少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％以上を含めて、少なくとも約２０％が、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、約１２ヶ月以上の期間にわたって放出させることができるような速度で、放出させることができる。
【００７５】
少なくとも１つの治療薬を絹マトリックスに分散または封入することができる。一部の実施形態では、少なくとも２つ以上の治療薬を絹マトリックスに分散または封入することができる。治療薬は、封入および／または分散に用いるための特定の方法に適する任意の形態で存在することができる。例えば、治療薬は、固体、液体またはゲルの形態であり得る。一部の実施形態において、治療薬は、粉末またはペレットの形態であり得る。一部の実施形態では、治療薬を、絹マトリックスを形成する前に絹溶液または絹マトリックスに分散または封入することができる。一部の実施形態では、治療薬を、絹マトリックスを形成した後に絹溶液または絹マトリックスに分散または封入することができる。例えば、治療薬を、例えば、米国特許仮出願第６１／５４５，７８６号明細書、国際公開第２０１１／１０９６９１号パンフレットおよび米国特許第８，１７８，６５６号明細書に記載されているように、例えば絹フィブロイン溶液の前充填もしくは後充填により、絹マトリックス内に均質にもしくは不均質に分散させることができるか、または、例えば米国特許出願公開第２００７／０２１２７３０号明細書に記載されているカルボジイミド媒介修飾方法を用いて、勾配で分散させることができる。一部の実施形態では、治療薬を絹マトリックスの表面に、例えばジアゾニウムカップリング反応（例えば、米国特許出願公開第２００９／０２３２９６３号明細書を参照されたい）および／またはアビジン−ビオチン相互作用（例えば、国際公開第２０１１／０１１３４７号パンフレットを参照されたい）によって、コーティングすることができる。一部の実施形態では、例えば、所望の材料状態、例えばヒドロゲルまたはマイクロ球体またはナノ球体に加工する前に治療薬を絹溶液にブレンドすることによって、治療薬を絹マトリックスに封入することができる。例えば、米国特許第８，１８７，６１６号明細書、ならびに米国特許出願公開第２００８／００８５２７２号、同第２０１０／００２８４５１号、同第２０１２／００５２１２４号、同第２０１２／００７０４２７号および同第２０１２／０１８７５９１号明細書を参照されたい（これらの内容は参照により本明細書に援用されている）。一部の実施形態において、治療薬は、例えばその治療薬を含む融合タンパク質を生成するように絹を遺伝子操作することにより、絹タンパク質との融合タンパク質の形態で存在することができる。
【００７６】
一部の実施形態では、治療薬を、絹マトリックスを形成した後にその絹マトリックスに分散または封入することができ、例えば、その形成された絹マトリックスを治療薬溶液に入れ、治療薬を絹マトリックスにある期間にわたって分散させることにより、例えば、米国特許仮出願第６１／５４５，７８６号明細書および国際公開第２０１１／１０９６９１号パンフレット（これらの内容は参照により本明細書に援用されている）に記載されているような、絹フィブロイン溶液の後充填により、治療薬を絹マトリックスに分散させることによってできる。一部の実施形態では、治療薬を充填する前に、絹マトリックスを場合により水和し得る。例えば、絹マトリックスを脱イオン水中で、完全に水和するまでインキュベートし得る。
【００７７】
絹マトリックスまたは絹系組成物
本明細書において用いる場合、「絹マトリックス」または「絹系組成物」という句は、一般に、絹を含むマトリックスまたは組成物を指す。一部の実施形態において、絹は、セリシンを除外し得る。一部の実施形態において、絹は、絹フィブロイン、絹セリシンまたはこれらの組み合わせを含み得る。「絹マトリックス」または「絹系組成物」という句は、絹（または絹フィブロイン）が全絹マトリックス組成物の少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、１００％を含めて１００％まで、または約３０％から約１００％の任意の百分率を含む、全絹マトリックス組成物の少なくとも約３０％を構成するマトリックスまたは組成物を指す。ある特定の実施形態において、絹マトリックスは、実質的に絹または絹フィブロインからなり得る。様々な実施形態において、絹マトリックスは、少なくとも１つの治療薬を含む絹または絹フィブロインから実質的になり得る。
【００７８】
本明細書において用いる場合、用語「絹フィブロイン」は、蚕フィブロインおよび昆虫またはクモの絹タンパク質を含む。例えば、Ｌｕｃａｓら、１３  Ａｄｖ．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｈｅｍ．１０７（１９５８）を参照されたい。任意のタイプの絹フィブロインを、本明細書に記載する様々な態様の異なる実施形態において使用することができる。蚕、例えばＢｏｍｂｙｘ  ｍｏｒｉによって生産される絹フィブロインは、最も一般的であり、地球に優しい再生可能資源の代表である。例えば、絹フィブロイン繊維において使用される絹フィブロインは、Ｂ．ｍｏｒｉの繭からセリシンを抽出することによって得ることができる。有機生産の蚕繭も市販されている。しかし、使用することができる多くの異なる絹があり、それらには、クモの絹（例えば、Ｎｅｐｈｉｌａ  ｃｌａｖｉｐｅｓから得られるもの）、トランスジェニック絹、遺伝子工学絹、例えば細菌、酵母、哺乳動物細胞、トランスジェニック動物またはトランスジェニック植物由来の絹（例えば、国際公開第９７／０８３１５号パンフレット；米国特許第５，２４５，０１２号明細書を参照されたい）、およびこれらのバリアントが挙げられる。一部の実施形態において、絹フィブロインは、クモ、他の蚕、蜂、および生物工学によるそのバリアントなどの他の供給源に由来し得る。一部の実施形態では、絹フィブロインを蚕またはトランスジェニック蚕の分泌物から抽出することができる（例えば、国際公開第２００７／０９８９５１号パンフレットを参照されたい）。
【００７９】
絹フィブロイン溶液は、当業者に公知の任意の従来の方法によって調製することができる。例えば、１つの実施形態では、Ｂ．ｍｏｒｉ繭を約１０分から約６０分（例えば３０分）間、水溶液中で煮沸する。１つの実施形態において、水溶液は、約０．０２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３を含み得る。それらの繭を例えば水ですすいで、セリシンタンパク質を抽出し、抽出された絹を塩水溶液に溶解する。このために有用な塩としては、臭化リチウム、チオシアン酸リチウム、硝酸カルシウム、または絹を可溶化することができる他の化学物質が挙げられる。一部の実施形態では、抽出された絹を約８Ｍ〜１２Ｍ  ＬｉＢｒ溶液に溶解する。結果として、例えば透析を用いて、その塩を除去する。
【００８０】
必要に応じて、その後、例えば、吸湿性ポリマー、例えばＰＥＧ、ポリエチレンオキシド、アミロースまたはセリシンに対する透析を用いて、溶液を濃縮することができる。一部の実施形態において、ＰＥＧは、８，０００〜１０，０００ｇ／ｍｏｌの分子量のものであり、１０％〜５０％の濃度を有する。スライド−Ａ−ライザー透析カセット（Ｐｉｅｒｃｅ、ＭＷ  ＣＯ  ３５００）を使用することができる。しかし、任意の透析システムを使用してよい。約１０％〜約３０％の絹水溶液の最終濃度をもたらすために十分な時間、透析を行うことができる。ほとんどの場合に、２〜２４時間の透析で十分である。例えば、国際公開第２００５／０１２６０６号パンフレットを参照されたい（この内容は参照により本明細書に援用されている）。
【００８１】
あるいは、有機溶媒を使用して絹フィブロイン溶液を生成することができる。かかる方法は、例えば、Ｌｉ，Ｍ．ら、Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｏｌｙ  Ｓｃｉ．２００１、７９、２１９２−２１９９；Ｍｉｎ，Ｓ．ら、Ｓｅｎ’Ｉ  Ｇａｋｋａｉｓｈｉ  １９９７、５４、８５−９２；Ｎａｚａｒｏｖ，Ｒ．ら、Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２００４  Ｍａｙ−Ｊｕｎ；５（３）：７１８−２６に記載されている。例えば、絹溶液を生成するために使用することができる例示的有機溶媒としては、ヘキサフルオロイソプロパノールが挙げられるが、それに限定されない。例えば、国際公開第２００４／０００９１５号パンフレットを参照されたい（この内容は参照により本明細書に援用されている）。
【００８２】
絹マトリックスの所望の機械的特性、および／または絹マトリックスからの治療薬の放出プロファイルに依存して、異なる材料状態または形態の絹マトリックスを生成することができる。例えば、絹マトリックスをヒドロゲル、マイクロニードル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルム、凍結乾燥粉末、凍結乾燥ゲル、リザーバーインプラント、同種インプラント、チューブ、ゲル様またはゲル粒子、およびこれらの任意の組み合わせの形態で生成することができる。したがって、異なる濃度の絹フィブロインを絹マトリックスに含めて、異なる材料状態または形態を得ることができる。異なる形態の絹マトリックスおよびそれらの製造方法に関するさらなる情報は、例えば、米国特許第８，１８７，６１６号明細書、国際公開第２００５／０１２６０６号パンフレット、米国特許出願第１２／６７２，５２１号、同第１２／４４２，５９５号、同第１３／３２０，０３６号、同第１３／２５４，６２９号、同第１２／４４２，５９５号、同第１２／９７４，７９６号、同第１３／３８２，９６７号および同第１３／４９６，２２７号明細書、ＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５０５６５号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２７１５３号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０５６８５６号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０６４１３９号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０６４３７２号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０６４４７１号パンフレットならびに米国特許仮出願第６１／６２１，２０９号、同第６１／６２３，９７０号、同第６１／６１３，１８５号明細書において見つけることができ、これらの内容は参照により本明細書に援用されている。一部の実施形態では、絹フィブロインを約０．１％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）、約０．５％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）、約１％（ｗ／ｖ）から約８％（ｗ／ｖ）または約１．５％（ｗ／ｖ）から約５％（ｗ／ｖ）の濃度で含有する絹溶液から、絹フィブロインを含む絹マトリックスを生成することができる。一部の実施形態では、絹フィブロインを約５％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）、約１０％（ｗ／ｖ）から約２５％（ｗ／ｖ）または約１５％（ｗ／ｖ）から約２０％（ｗ／ｖ）の濃度で含有する絹溶液から、絹フィブロインを含む絹マトリックスを生成することができる。
【００８３】
一部の実施形態において、治療薬を封入する絹マトリックスは、ヒドロゲルの形態であり得る。絹ヒドロゲルまたは絹フィブロインヒドロゲルの様々な生成方法が当該技術分野において公知である。一部の実施形態では、治療薬および絹または絹フィブロインを約０．２５％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）、約０．５％（ｗ／ｖ）から約２０％（ｗ／ｖ）または約１％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で含有する絹溶液を音波処理することによって、絹ヒドロゲルを生成することができる。一部の実施形態において、絹溶液は、治療薬および絹または絹フィブロインを、注射用の粘稠すぎない濃度、例えば、約０．５％（ｗ／ｖ）から約１０％（ｗ／ｖ）の絹濃度で含有し得る。１つの実施形態において、絹ヒドロゲルは、絹フィブロインを約１％（ｗ／ｖ）から約１０％（ｗ／ｖ）、または約１．５％（ｗ／ｖ）から約３％（ｗ／ｖ）の濃度で含み得る。１つの実施形態において、絹ヒドロゲルは、絹フィブロインを約２％（ｗ／ｖ）絹フィブロイン濃度で含み得る。音波処理を用いる絹フィブロインゲル化方法については、例えば米国特許出願公開第２０１０／０１７８３０４号明細書および国際公開第２００８／１５０８６１号パンフレットを参照されたい（これらの内容は参照により本明細書に援用されている）。
【００８４】
代替実施形態では、治療薬および絹を約０．２５％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で含む絹溶液に剪断応力を印加することにより、絹ヒドロゲルを生成することができる。封入および送達のためにボルテックス誘導絹フィブロインゲル化を生じさせる方法については、例えば国際公開第２０１１／００５３８１号パンフレットを参照されたい（この内容は、参照により本明細書に援用されている）。注射可能な絹フィブロイン粒子に剪断応力を印加する方法の例については、例えばＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０６４３７２号パンフレットを参照されたい（この内容は参照により本明細書に援用されている）。
【００８５】
他の実施形態では、治療薬、絹または絹フィブロインを約０．２５％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で含む絹溶液のｐＨを調節することにより、絹ヒドロゲルを生成することができる。絹溶液のｐＨは、絹溶液を電場に付すこと、および／または絹溶液のｐＨを酸で低下させることによって、変えることができる。ｐＨ誘導絹ゲルの生成方法に関する詳細については、例えば米国特許出願公開第２０１１／０１７１２３９号明細書を参照されたい（この内容は参照により本明細書に援用されている）。
【００８６】
絹ヒドロゲルが、高い絹濃度、例えば、小ゲージ針（例えば、約２７〜約３０Ｇ）による注射には高すぎる濃度、例えば、少なくとも約８％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約１５％（ｗ／ｖ）、少なくとも約２０％（ｗ／ｖ）、少なくとも約３０％（ｗ／ｖ）以上の絹または絹フィブロイン濃度を有し得る一部の実施形態では、絹ヒドロゲルを任意の形状、例えば球形、ロッド、楕円形、円柱形、カプセルまたは円板、のゲル様またはゲル粒子に小さくすることができる。当該技術分野における任意の公知の方法、例えば、摩砕、切断および／または破砕によって、絹ヒドロゲルをゲル様またはゲル粒子に小さくすることができる。一部の実施形態において、ゲル様またはゲル粒子は、注射に適する任意のサイズ、例えば、約０．５μｍから約２ｍｍ、約１μｍから約１ｍｍ、約１０μｍから約０．５ｍｍ、または約５０μｍから約０．１ｍｍのサイズのものであり得る。一部の実施形態において、ゲル様またはゲル粒子は、約０．０１μｍから約１０００μｍ、約０．０５μｍから約５００μｍ、約０．１μｍから約２５０μｍ、約０．２５μｍから約２００μｍ、または約０．５μｍから約１００μｍの範囲のサイズを有することができる。
【００８７】
他の実施形態において、治療薬を封入する絹マトリックスは、マイクロ粒子またはナノ粒子の形態であり得る。本明細書に記載するマイクロ粒子またはナノ粒子は、任意の形状、例えば球形、ロッド、楕円形、円柱形、カプセルまたは円板、のものであり得る。絹マイクロ粒子およびナノ粒子の生成方法の例については、例えば米国特許出願第１２／４４２，５９５号、同第１３／４９６，２２７号および同第１３／５８２，９０３号明細書、米国特許仮出願第６１／６２３，９７０号明細書を参照されたい（これらの内容は、参照により本明細書に援用されている）。本明細書において用いる場合、用語「マイクロ粒子」は、約０．０１μｍから約１００μｍ、約０．０５μｍから約５０μｍ、約０．１μｍから約５０μｍ、約０．２５μｍから約２５μｍ、または約０．５μｍから約１５μｍの粒径を有する粒子を指す。１つの実施形態において、マイクロ粒子は、約０．５μｍから約１５μｍの粒径を有する。本明細書において用いる場合、用語「ナノ粒子」は、約０．５ｎｍから約５００ｎｍ、約１ｎｍから約４００ｎｍ、約１０ｎｍから約２００ｎｍ、約２５ｎｍから約１５０ｎｍ、または約５０ｎｍから約１００ｎｍの粒径を有する粒子を指す。マイクロ粒子またはナノ粒子が、示した「サイズ」付近の粒径分布を、通常呈示することは、当業者には理解されたい。別段の言明がない限り、本明細書において用いる場合、用語「サイズ」は、マイクロ粒子またはナノ粒子のサイズ分布の最頻値、すなわち、サイズ分布の中で最も高頻度に現れる値を指す。マイクロ粒子またはナノ粒子サイズを測定する方法は、例えば、動的光散乱（例えば、光相関分光法、レーザー回折、低角レーザー光散乱（ＬＡＬＬＳ）および中角レーザー光散乱（ＭＡＬＬＳ））、光オブスキュレーション法（例えば、コールター分析法）、または他の技法（例えば、レオロジー、および光学もしくは電子顕微鏡法）により、当業者に公知である。
【００８８】
絹マイクロ粒子またはナノ粒子の様々な生成方法が、当該技術分野において公知である。一部の実施形態では、絹マイクロ粒子またはナノ粒子を、例えば、絹マイクロ粒子および／またはナノ粒子を生じさせるポリビニルアルコール（ＰＶＡ）法について国際公開第２０１１／０４１３９５号パンフレット（この内容は、参照により本明細書に援用されている）に記載されているようなＰＶＡ相分離法によって生成することができる。例えば、米国特許出願公開第２０１０／００２８４５１号明細書および国際公開第２００８／１１８１３３号パンフレット（絹マイクロ球体またはナノ球体を作製するためのテンプレートとして脂質を使用する）、米国特許出願第１３／５８２，９０３号明細書（正電荷および負電荷を有する絹フィブロインを使用して、アイオノマー組成物、例えば粒子を形成する）およびＷｅｎｋら、Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２００８；１３２：２６−３４（噴霧法を用いて絹マイクロ球体またはナノ球体を生成する）に記載されている、絹マイクロ粒子またはナノ粒子の他の生成方法は、参照により本明細書に援用されており、治療薬を封入する絹マイクロ粒子またはナノ粒子を作製する目的でそれらの方法を用いることができる。
【００８９】
一部の実施形態では、絹マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を固体基材および／または生物材料にさらに埋め込んで、例えば、ある期間にわたって標的部位への治療薬の放出を延長および／または局在化することができる。絹マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を埋め込むことができる固体基材の例としては、錠剤、カプセル、マイクロチップ、ヒドロゲル、マット、フィルム、繊維、眼への送達デバイス、インプラント、コーティング、およびこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。絹ヒドロゲルへのマイクロ粒子の例示的組み込み方法については、例えば米国特許出願第１３／２５４，６２９号明細書を参照されたい（この内容は、参照により本明細書に援用されている）。一部の実施形態では、絹マイクロ粒子を、例えば米国特許出願第１１／４０７，３７３号明細書（この内容は参照により本明細書に援用されている）に記載されているような当該技術分野において公知のコンジュゲーション法、例えば共有結合により、絹ヒドロゲルに組み込むことができる。
【００９０】
一部の実施形態では、絹マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を生物材料またはバイオポリマー、例えば生体適合性ヒドロゲルにさらに埋め込むことができる。一部の実施形態において、バイオポリマーは、例えば治療薬が充填された絹マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を封入するために使用される、絹ヒドロゲルを含み得る。例えば、抗生物質送達のための絹フィブロイン足場の生成方法については、国際公開第２０１０／１４１１３３号パンフレットを参照されたい。
【００９１】
様々な実施形態において、任意の形態の絹マトリックスを凍結乾燥または冷凍乾燥させることができる。一部の実施形態において、凍結乾燥または冷凍乾燥プロセスは、例えば、米国特許第７，８４２，７８０号および同第８，３６１，６１７号明細書（これらの内容は参照により本明細書に援用されている）に記載されているように、絹マトリックス内の細孔情報を誘導することができる。
【００９２】
場合により、絹マトリックス中の絹フィブロインの高次構造を絹マトリックスの形成後に変えることができる。理論により拘束されることを望まないが、誘導高次構造変化は、絹マトリックス中の絹フィブロインの結晶化度、例えば、絹ＩＩ  βシート結晶化度を変えることができる。これは、絹マトリックスからの治療薬の放出速度を変えることができる。高次構造変化を当該技術分野において公知の任意の方法によって誘導することができ、それらの方法としては、制御低速乾燥（Ｌｕら、１０  Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １０３２（２００９））、水なまし（Ｊｉｎら、Ｗａｔｅｒ−Ｓｔａｂｌｅ  Ｓｉｌｋ  Ｆｉｌｍｓ  ｗｉｔｈ  Ｒｅｄｕｃｅｄ  β−Ｓｈｅｅｔ  Ｃｏｎｔｅｎｔ、１５  Ａｄｖ．Ｆｕｎｃｔ．Ｍａｔｓ．１２４１（２００５）；Ｈｕら、Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｉｌｋ  Ｍａｔｅｒｉａｌ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｂｙ  Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ−Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｗａｔｅｒ  Ｖａｐｏｒ  Ａｎｎｅａｌｉｎｇ、１２  Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １６８６（２０１１））、延伸（ＤｅｍｕｒａおよびＡｓａｋｕｒａ、Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｏｘｉｄａｓｅ  ｗｉｔｈ  Ｂｏｍｂｙｘ  ｍｏｒｉ  ｓｉｌｋ  ｆｉｂｒｏｉｎ  ｂｙ  ｏｎｌｙ  ｓｔｒｅｔｃｈｉｎｇ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｓｅｎｓｏｒ、３３  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ＆  Ｂｉｏｅｎｇｉｎ．５９８（１９８９））、圧縮、ならびにメタノール（Ｈｏｆｍａｎｎら、Ｓｉｌｋ  ｆｉｂｒｏｉｎ  ａｓ  ａｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｐｏｌｙｍｅｒ  ｆｏｒ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ、１１１  Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ．２１９（２００６））、エタノール（Ｍｉｙａｉｒｉら、Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｂ−ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ  ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  ｉｎ  ｓｅｒｉｃｉｎ  ｍｅｍｂｒａｎｅ、５６  Ｊ．Ｆｅｒｍｅｎ．Ｔｅｃｈ．３０３（１９７８））、グルタルアルデヒド（Ａｃｈａｒｙａら、Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｓｉｌｋ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｂａｓｅｄ  ｍａｔｒｉｘ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｔｏ  Ｌ−ＤＯＰＡ、３  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｊ．２２６（２００８））および１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（Ｂａｙｒａｋｔａｒら、Ｓｉｌｋ  ｆｉｂｒｏｉｎ  ａｓ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｃｏａｔｉｎｇ  ｍａｔｅｒｉａｌ  ｆｏｒ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  ｔｈｅｏｐｈｙｌｌｉｎｅ、６０  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｐｈａｒｍ．３７３（２００５））を含む、溶剤浸漬；ｐＨ調整、例えば、ｐＨ滴定および／または絹マトリックスの電場への曝露（例えば、米国特許出願公開第２０１１／０１７１２３９号明細書（この内容は、参照により本明細書に援用されている）を参照されたい）、熱処理、剪断応力（例えば、国際公開第２０１１／００５３８１号パンフレット（この内容は参照により本明細書に援用されている）を参照されたい）、超音波、例えば、音波処理（例えば、米国特許出願公開第２０１０／���１７８３０４号明細書および国際公開第２００８／１５０８６１号パンフレット（これらの内容は参照により本明細書に援用されている）を参照されたい）、ならびにこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。一部の実施形態において、絹マトリックスは、少なくとも約５％の絹ＩＩ  βシート結晶化度含量、例えば、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、しかし１００％でない（すなわち、すべての絹が絹ＩＩ  βシート高次構造で存在する場合はない）、絹ＩＩ  βシート結晶化度含量を含むことができる。一部の実施形態において、絹マトリックス中の絹は、完全に絹ＩＩ  βシート高次構造で存在する。
【００９３】
一部の実施形態では、絹マトリックス中の絹フィブロインの高次構造を、例えば水なましによって、変えることができる。例えば、少なくとも１つの治療薬を含む非架橋絹マトリックスを水なましに付して、例えば絹フィブロイン内でのβシート形成を誘導することができる。
【００９４】
様々な実施形態において、絹フィブロインを異なる用途のために、および／または所望の機械的もしくは化学的特性のために（例えば、絹フィブロインマトリックス中の治療薬の勾配の形成を助長するために）修飾することができる。当業者は、例えば、絹フィブロインの側基、絹フィブロインの所望の反応性および／または絹フィブロインに対する所望の電荷密度に依存して、適切な方法を選択して絹フィブロインを修飾することができる。１つの実施形態において、絹フィブロインの修飾には、アミノ酸側鎖化学、例えば、共有結合による化学修飾、または電荷−電荷相互作用による修飾を用い得る。例示的化学修飾方法としては、カルボジイミドカップリング反応（例えば、米国特許出願公開第２００７／０２１２７３０号明細書を参照されたい）、ジアゾニウムカップリング反応（米国特許出願公開第２００９／０２３２９６３号明細書を参照されたい）、アビジン−ビオチン相互作用（例えば、国際公開第２０１１／０１１３４７号パンフレットを参照されたい）、およびＰＥＧポリマーの化学的活性または活性化誘導体でのＰＥＧ化（例えば、国際公開第２０１０／０５７１４２号パンフレットを参照されたい）が挙げられるが、それらに限定されない。絹フィブロインを遺伝子修飾によって修飾して、絹タンパク質の機能性を変えることもできる（例えば、国際公開第２０１１／００６１３３号パンフレットを参照されたい）。例えば、絹フィブロインを遺伝子修飾することができ、そうすることで、有機−無機複合材を形成するために使用することができる、繊維状タンパク質ドメインと鉱化ドメインを含む融合タンパク質を含めることなど、絹のさらなる修飾を提供することができる。例えば、国際公開第２００６／０７６７１１号パンフレットを参照されたい。一部の実施形態では、絹フィブロインを遺伝子修飾して、タンパク質、例えば治療用タンパク質と融合させることができる。加えて、絹フィブロインマトリックスを、例えば、マトリックスの可撓性および／または溶解度に影響を及ぼす化学物質、例えばグリセロールと併用することができる。例えば、国際公開第２０１０／０４２７９８号パンフレットＭｏｄｉｆｉｅｄ  Ｓｉｌｋ  ｆｉｌｍｓ  Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｇｌｙｃｅｒｏｌを参照されたい。
【００９５】
一部の実施形態において、絹マトリックスの少なくとも一部分は、さらに少なくとも２つの生体適合性ポリマー、少なくとも３つの生体適合性ポリマーまたはそれより多くのものを含めて、少なくとも１つの生体適合性ポリマーを含むことができる。例えば、絹マトリックスは、１つ以上の生体適合性ポリマーを、全絹マトリックスの約０．５重量％から約７０重量％、約５重量％から約６０重量％、約１０重量％から約５０重量％、約１５重量％から約４５重量％、または約２０重量％から約４０重量％の合計量で含むことができる。一部の実施形態では、生体適合性ポリマー（単数または複数）を、絹マトリックスの大部分と均質または不均質に一体化させることができる。他の実施形態では、生体適合性ポリマー（単数または複数）を絹マトリックスの表面にコーティングすることができる。いずれの実施形態においても、生体適合性ポリマー（単数または複数）を絹マトリックス中の絹に共有結合または非共有結合により連結させることができる。一部の実施形態では、生体適合性ポリマー（単数または複数）を絹マトリックス中の絹とブレンドすることができる。例示的生体適合性ポリマーとしては、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリラクチド−コ−グリコリド（ＰＬＧＡ）、ポリエステル、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ホスファジン）、ポリ（ホスフェートエステル）、ポリカプロラクトン、ゼラチン、コラーゲン、フィブロネクチン、ケラチン、ポリアスパラギン酸、アルジネート、セルロース、キトサン、キチン、ヒアルロン酸、ペクチン、ポリヒドロキシアルカノエート、デキストラン、およびポリ無水物、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、トリブロックコポリマー、ポリリジン、これらの任意の誘導体およびこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、それらに限定されない。
【００９６】
本明細書に記載する組成物の一部の実施形態での使用に適する他の添加剤としては、生物活性化合物または医薬活性化合物が挙げられる。生物活性化合物の例としては、細胞接着媒介因子、例えば、コラーゲン、エラスチン、フィブロネクチン、ビトロネクチン、ラミニン、プロテオグリカン、もしくは公知インテグリン結合ドメイン、例えば「ＲＧＤ」インテグリン結合配列を含有するペプチド、または細胞接着に影響を及ぼすことが公知であるこれらの改変物（Ｓｃｈａｆｆｎｅｒ  Ｐ  ＆  Ｄａｒｄ  ２００３  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．Ｊａｎ；６０（１）：１１９−３２；Ｈｅｒｓｅｌ  Ｕ．ら、２００３  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ．Ｎｏｖ；２４（２４）：４３８５−４１５）；生物活性リガンド；ならびに特定の種類の細胞または組織内部成長を高めるかまたは排除する物質が挙げられるが、それらに限定されない。増殖または分化を高める添加剤の他の例には、骨形態形成タンパク質（ＢＭＰ）などの骨誘導物質；サイトカイン、上皮成長因子（ＥＧＦ）などの成長因子、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−ＩおよびＩＩ）ＴＧＦ−β１が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書において用いる場合、用語添加剤はまた、抗体、ＤＮＡ、ＲＮＡ、修飾ＲＮＡ／タンパク質複合材、グリコーゲンまたは他の糖、およびアルコールも包含する。
【００９７】
加えて、本明細書に記載する絹マトリックス（例えば、絹マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子）および／または組成物はまた、標的指向性リガンドも含むことができる。本明細書において用いる場合、用語「標的指向性リガンド」は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよび／またはｉｎ  ｖｉｖｏで絹マトリックスまたは組成物の組織および／または受容体への標的指向化を促進することができる任意の材料または物質を指す。標的指向性リガンドは、合成、半合成、または天然起源であり得る。標的指向性リガンドとすることができる材料または物質としては、例えば、タンパク質（抗体、抗体断片、ホルモン、ホルモン類似体、糖タンパク質およびレクチンを含む）、ペプチド、ポリペプチド、アミノ酸、糖、糖類（単糖類および多糖類を含む）、炭水化物、ビタミン、ステロイド、ステロイド類似体、ホルモン、補因子、および遺伝物質（ヌクレオシド、ヌクレオチド、ヌクレオチド酸構築物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、アプタマーおよびポリヌクレオチドを含む）が挙げられる。本明細書に記載する組成物の一部の実施形態に使用することができる他の標的指向性リガンドとしては、細胞接着分子（ＣＡＭ）を挙げることができ、細胞接着分子には、例えば、サイトカイン、インテグリン、カドヘリン、免疫グロブリンおよびセレクチンなどがある。絹マトリックスまたは絹系組成物（例えば、絹マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子）はまた、前駆体標的指向性リガンドも包含し得る。標的指向性リガンドに対する前駆体は、標的指向性リガンドに転化され得る任意の材料または物質を指す。かかる転化には、例えば、標的指向性リガンドへの前駆体の固着を含み得る。例示的標的指向性前駆体部分としては、マレイミド基、オルト−ピリジルジスルフィドなどのジスルフィド基、ビニルスルホン基、およびアジド基が挙げられる。標的指向性リガンドを絹マトリックスまたは絹系組成物に共有結合（例えば、架橋）、または非共有結合により連結させることができる。例えば、標的指向性リガンドを、絹マトリックスを作製するために使用される絹フィブロイン二共有結合により連結させることができる。
【００９８】
一部の実施形態において、絹マトリックス、例えば、マイクロ粒子、ナノ粒子、ゲル様もしくはゲル粒子またはインプラントは、多孔質であり得、ここで絹マトリックスは、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％以上の多孔度を有することができる。多孔度が高すぎると、機械的特性はより低いが、しかし治療薬の放出がより速い絹マトリックスを生じさせ得る。しかしながら、多孔度が低すぎると、治療薬の放出を減少させ得る。したがって、当業者は、多数の因子、例えば、限定されるものではないが、治療薬の所望の放出速度、分子サイズおよび／もしくは拡散係数、ならびに／または絹マトリックス中の絹フィブロインの濃度および／もしくは量に基づき、多孔度を調整することができる。本明細書において用いる場合、用語「多孔度」は、材料、例えば絹フィブロインなどのマトリックスにおける空隙の尺度であり、０％から１００％の百分率（すなわち０と１の間）のような、全体積に対する空隙の体積の比率である。マトリックス多孔度の判定は、例えば、水銀ポロシメトリーおよび気体吸着、例えば窒素吸着などの標準的技法を用いて当業者に周知である。
【００９９】
多孔質絹マトリックスは、任意の孔径を有することができる。一部の実施形態において、絹マトリックスの細孔は、約５０ｎｍから約１０００μｍ、約２５０ｎｍから約５００μｍ、約５００ｎｍから約２５０μｍ、約１μｍから約２００μｍ、約１０μｍから約１５０μｍ、または約５０μｍから約１００μｍの範囲のサイズ分布を有することができる。本明細書において用いる場合、用語「孔径」は、細孔の断面の直径または有孔直径を指す。用語「孔径」はまた、複数の細孔の測定値の基づく、細孔の断面の平均直径または平均有効直径を指し得る。円形でない断面の有効直径は、非円形断面と同じ断面積を有する円形断面の直径に等しい。一部の実施形態において、絹フィブロインは、絹フィブロイン足場が水和されたとき膨潤可能であり得る。細孔のサイズは、絹フィブロイン中の含水量に依存して変化し得る。細孔は、水などの流体、または空気で満たされ得る。
【０１００】
絹マトリックス中に細孔を形成する方法は、当該技術分野において公知であり、例えば、ポロゲン浸出法、冷凍乾燥法、および／または気体発生法である。かかる方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１０／０２７９１１２号、同第２０１０／０２７９１１２号および米国特許第７８４２７８０号明細書に記載されており、これらの内容は参照により本明細書に援用されている。
【０１０１】
したがって、絹マトリックスからの治療薬の任意の望ましい放出速度または放出プロファイルを、絹加工法、例えば、絹マトリックス中の絹の濃度、絹マトリックス中の絹フィブロイン構造および／またはβシート高次構造の量、絹マトリックスの多孔度および／または孔径、ならびにこれらの任意の組み合わせを変えることにより、少なくとも部分的に調整することができる。
【０１０２】
加えて、絹マトリックスは、ある特定の条件下、例えばｉｎ  ｖｉｖｏ生理条件下での治療薬の生物活性を安定させることができる。例えば、活性薬剤の組成および活性薬剤の安定化方法に関するさらなる詳細については、国際公開第２０１２／１４５７３９号パンフレットを参照されたい（この内容は、参照により本明細書に援用されている）。したがって、一部の実施形態において、絹マトリックスへの治療薬の封入は、治療薬のｉｎ  ｖｉｖｏ半減期を増加させることができる。例えば、絹マトリックスに分散または封入された治療薬のｉｎ  ｖｉｖｏ半減期を、非絹マトリックス中に存在する治療薬に対して少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約９０％、少なくとも約１倍、少なくとも約１．５倍増加させることができる。理論により拘束されることを望まないが、絹マトリックスに分散または封入された治療薬のｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の増加によって、より長い治療効果を得ることができる。別の言い方をすると、絹マトリックスに分散または封入された治療薬のｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の増加は、より少量の治療薬の充填で同じ治療効果の継続期間を可能とする。
【０１０３】
例示的治療薬
一般に、任意の治療薬を絹マトリックスに封入することができる。本明細書において用いる場合、用語「治療薬」は、一般に、診断、治療、予防、医学的または獣医学的目的で生物に投与される分子、分子群、複合体または物質を意味する。本明細書において用いる場合、用語「治療薬」は、「薬物」または「ワクチン」を含む。この用語は、臨床的および獣医学的スクリーニング、予防、予防法、治癒、ウェルネス、検出、イメージング、診断、治療、外科手術、モニタリング、化粧品、補綴、法医学などにおいて有用な調製物を含む、外部または内部投与される局部、限局および全身性ヒトおよび動物用医薬、処置剤、治療剤、機能性食品、薬用化粧品、生物学的製剤、デバイス、診断薬および避妊薬を含む。この用語はまた、細胞受容体、膜受容体、ホルモン受容体、治療用受容体、微生物、ウイルスまたは選択された標的（植物、動物および／もしくはヒトを含むもの、または植物、動物および／もしくはヒトと接触させることが可能なもの）を認識することが可能な選択された分子または選択された核酸配列を含む、農業医薬用（ａｇｒｉｃｅｕｔｉｃａｌ）、職場用、軍事用、工業用および環境用治療薬または治療剤に関して用いることができる。この用語はまた、具体的には、生物活性効果を生じさせる核酸、例えば、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、リボ核酸（ＲＮＡ）またはこれらの混合物もしくは組み合わせ（例えば、ＤＮＡナノプレックスを含む）を含む核酸、および該核酸を含む化合物も含むことができる。
【０１０４】
用語「治療薬」はまた、治療薬が適用される生物システムにおいて局所または全身性生物学的、生理学的または治療効果をもたらすことが可能である薬剤も含む。例えば、治療薬は、他の機能の中でも、感染症または炎症を制御するように作用することができ、細胞成長および組織再生を高めることができ、腫瘍成長を制御することができ、鎮痛薬として作用することができ、抗細胞接着を促進することができ、および骨成長を高めることができる。一部の実施形態において、治療薬は、異常血管の増殖を阻害および／または異常血管の退縮を誘導するように作用することができる。他の適した治療薬としては、抗ウイルス薬、ホルモン、抗体または治療用タンパク質を挙げることができる。他の治療薬としては、プロドラッグが挙げられ、プロドラッグは、投与時には生物活性でないが、被験体に投与すると代謝または何らかの他の機序によって生物活性薬剤に転化される薬剤である。加えて、絹系組成物は、２つ以上の治療薬の組み合わせを含有することができる。
【０１０５】
一部の実施形態において、絹マトリックスに封入または分散することができる治療薬の種々のタイプとしては、タンパク質、ペプチド、抗原、免疫原、ワクチン、抗体またはその一部分、抗体様分子、酵素、核酸、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アプタマー、小分子、抗生物質、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。
【０１０６】
例示的治療薬としては、Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第１３版、編集Ｔ．Ｒ．Ｈａｒｒｉｓｏｎら、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｎ．Ｙ．、ＮＹ；Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、第５０版、１９９７、Ｏｒａｄｅｌｌ  Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏ．；Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第８版、Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ、１９９０；米国薬局方、国民医薬品集、ＵＳＰ  ＸＩＩ  ＮＦ  ＸＶＩＩ、１９９０の中で見つけられるものが挙げられるが、それらに限定されず、これらの全ての全部の内容が参照により本明細書に援用されている。
【０１０７】
一部の実施形態において、眼への投与のための絹マトリックスに分散または封入することができる治療薬の例としては、抗炎症薬、抗感染薬（抗菌薬、抗真菌薬、抗ウイルス薬、抗原虫薬を含む）、抗アレルギー薬、抗増殖薬、抗血管新生薬、抗酸化物質、神経保護薬、細胞受容体作動薬、細胞受容体拮抗薬、免疫修飾薬、免疫抑制薬、眼内圧（ＩＯＰ）低下薬（抗緑内障）、βアドレナリン受容体作動薬、α２アドレナリン受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害剤、コリン作動薬、プロスタグランジンおよびプロスタグランジン受容体作動薬、ＡＭＰＡ受容体拮抗薬、ＮＭＤＡ拮抗薬、アンジオテンシン受容体拮抗薬、ソマトスタチン作動薬、肥満細胞脱顆粒阻害剤、α２アドレナリン受容体拮抗薬、トロンボキサンＡ２模倣薬、プロテインキナーゼ阻害剤、プロスタグランジンＦ誘導体、プロスタグランジン−２α拮抗薬およびムスカリン性薬剤を挙げることができるが、これらに限定されない。
【０１０８】
一部の実施形態において、眼への投与のための絹マトリックスに分散または封入することができる治療薬としては、後区疾患または障害を含む（しかしこれに限定されない）眼病態の処置のための薬剤を挙げることができるが、これに限定されない。加えて、下で述べる任意の眼病態の処置のための任意の薬剤を、眼への投与のために絹マトリックスに分散もしくは封入することができ、および／または本明細書に記載する方法において使用することができる。眼病態の処置のための治療薬の例としては、限定ではないが、ベバシズマブ（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、アフリベルセプト（ＥＹＬＥＡ（商標）、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ペガプタニブ（ＭＡＣＵＧＥＮ（登録商標）、Ｅｙｅｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、チボザニブ（例えば、ＡＶ−９５１、ＡＶＥＯ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ベルテポルフィン（ＶＩＳＵＤＹＮＥ（登録商標））、フルオシノロンアセトニド（ＲＥＴＩＳＥＲＴ（登録商標）、Ｂａｕｓｃｈ  ＆  Ｌｏｍｂ  Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ）、ガンシクロビル（例えば、ＶＩＴＲＡＳＥＲＴ（登録商標）、Ｂａｕｓｃｈ  ＆  Ｌｏｍｂ  Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ）、トリアムシノロンアセトニド（例えば、硝子体内用ＴＲＩＶＡＲＩＳ（登録商標）またはＫＥＮＡＬＯＧ（登録商標））、ホスカルネット（例えば、ＦＯＳＣＡＶＩＲ（登録商標））、ダピプラゾール（例えば、ＲＥＶ−ＥＹＥＳ（登録商標））、バンコマイシン、セフタジジム、アミカシン、アムホテリシンＢ、デキサメタゾン、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができる。
【０１０９】
一部の実施形態において、眼への投与のための絹マトリックスに分散または封入することができる治療薬としては、緑内障の処置のための薬剤、例えば、限定ではないが、トラボプロスト、ドルゾラミド、チモロール、ビマトプロスト、ラタノプロスト、ブリモニジン、レボブノロール、レボベタキソロール、ベタキソロール、カルバコール、エピネフリン、ピロカルピン、フィゾスチグミン、臭化デメカリウム、アプラクロニド（ａｐｒａｃｌｏｎｉｄｅ）、ピロカルピン、アセチルコリン、カルテオロール、メチプラノロール、ヨウ化エコチオパート、ジピベフリン、ウノプロストン、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができる。
【０１１０】
一部の実施形態において、眼への投与のための絹マトリックスに分散または封入することができる治療薬としては、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）網膜炎の処置のための薬剤、例えば、限定ではないが、バルガンシクロビル、ガンシクロビル、ホスカルネット、シドフォビル、ホミビルセン、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができる。
【０１１１】
一部の実施形態において、眼への投与のための絹マトリックスに分散または封入することができる治療薬としては、例えば加齢性黄斑変性を含む黄斑変性の処置のための薬剤を挙げることができる。かかる治療薬の例としては、ベバシズマブ（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）；ラニビズマブ（例えば、ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）；アフリベルセプト（例えば、ＥＹＬＥＡ（商標）；Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ニューヨーク州タリータウン）；ペガプタニブ（例えば、ＭＡＣＵＧＥＮ（登録商標）；Ｅｙｅｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）；チボザニブ（例えば、ＡＶ−９５１、ＡＶＥＯ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、マサチューセッツ州ケンブリッジ）；ベルテポルフィン（例えば、ＶＩＳＵＤＹＮＥ（登録商標）；Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ、スイス国バーゼル）、および当該技術分野において公知の任意の抗血管新生薬を挙げることができるが、これらに限定されない。
【０１１２】
抗血管新生薬の例としては、ＶＥＧＦ阻害剤を挙げることができるが、これに限定されない。ＶＥＧＦ阻害剤の非限定的な例としては、ベバシズマブ（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）；ラニビズマブ（例えば、ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）；アフリベルセプト（例えば、ＥＹＬＥＡ（商標）；Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ニューヨーク州タリータウン）；ペガプタニブ（例えば、ＭＡＣＵＧＥＮ（登録商標）；Ｅｙｅｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）；チボザニブ（例えば、ＡＶ−９５１、ＡＶＥＯ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、マサチューセッツ州ケンブリッジ）；ベルテポルフィン（例えば、ＶＩＳＵＤＹＮＥ（登録商標）；Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ、スイス国バーゼル）；３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボン酸アミド塩酸塩（例えば、ＣＰ−５４７，６３２；Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．、ニューヨーク州ニューヨーク）；アキシチニブ（例えば、ＡＧ１３７３６；Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．、ニューヨーク州ニューヨーク）；Ｎ，２−ジメチル−６−（２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド（例えば、ＡＧ２８２６２；Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．、ニューヨーク州ニューヨーク）；Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン（例えば、ＺＤ−６４７４、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＶＥＧＦ−Ｒ１の阻害剤（例えば、ＺＤ−４１９０；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＲＥＴ／ＰＴＣ発癌性キナーゼのチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ＳＵ５４１６、ＳＵ１１２４８およびＳＵ６６６８；かつてはＳｕｇｅｎ  Ｉｎｃ．、今はＰｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．、ニューヨーク州ニューヨーク）；パン−ＶＥＧＦ−Ｒ−キナーゼ阻害剤（例えば、ＣＥＰ−７０５５；Ｃｅｐｈａｌｏｎ  Ｉｎｃ．、ペンシルバニア州フレーザー）；プロテインキナーゼ阻害剤（例えば、ＰＫＣ４１２；Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ、スイス国バーゼル）；マルチターゲット型ヒト表皮受容体（ＨＥＲ）１／２および血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）１／２受容体ファミリーチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ＡＥＥ７８８；Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ、スイス国バーゼル）；セジラニブ（例えば、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ソラフェニブ（例えば、ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、ＢＡＹ  ４３−９００６；Ｂａｙｅｒ  ＡＧ、ドイツ国バーメン；およびＯｎｙｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）；バタラニブ（例えば、ＰＴＫ−７８７、ＺＫ−２２２５８４；Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ、スイス国バーゼル；およびＢａｙｅｒ  Ｓｃｈｅｒｉｎｇ、ドイツ国ベルリン−ウェディング）；抗ＶＥＧＦ  ＲＮＡアプタマー（例えば、ＥＹＥ−００１；Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．、ニューヨーク州ニューヨーク；Ｇｉｌｅａｄ、カリフォルニア州フォスターシティー；およびＥｙｅｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．）、グルファニド二ナトリウム（例えば、ＩＭ８６２；ワシントン州カークランドのＣｙｔｒａｎ  Ｉｎｃ．）；ＶＥＧＦＲ２選択的モノクローナル抗体（例えば、ＤＣ１０１；ＩｍＣｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．、ニュージャージー州イーストブリッジウォーター）；アンギオザイム、ｓｉＲＮＡ系ＶＥＧＦＲ１阻害剤、フマギリンおよびその類似体（例えば、ＣＡＰＬＯＳＴＡＴＩＮ（商標））、ＶＥＧＦ受容体の可溶性外部ドメイン、サメ軟骨およびその誘導体（例えば、ＮＥＯＶＡＳＴＡＴ（商標）；ＡＥｔｅｒｎａ  Ｚｅｎｔａｒｉｓ  Ｉｎｃ．、カナダ国ケベックシティー）；５−（（７−ベンジルオキシキナゾリン−４−イル）アミノ）−４−フルオロ−２−メチルフェノール塩酸塩（例えば、ＺＭ３２３８８１；ＣａｌＢｉｏｃｈｅｍから供給されている）、これらの任意の誘導体およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができる。
【０１１３】
１つの実施形態において、例えば、加齢性黄斑変性などの血管新生により誘導される眼の疾患または障害の処置のための絹マトリックスに分散または封入することができるＶＥＧＦ阻害剤は、ベバシズマブ（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）；ラニビズマブ（例えば、ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）、またはこれらの組み合わせを含み得る。
【０１１４】
一部の実施形態において、眼への投与のための絹マトリックスに分散または封入することができる治療薬は、例えば、外科手術後の炎症によって引き起こされるかまたは損傷に起因する眼における炎症の処置のための薬剤を含み得る。かかる治療薬の例としては、ネパフェナク、ケトロラック、シクロスポリン、ブロムフェナク、フルルビプロフェン、スプロフェン、ジクロフェナク、デキサメタゾン、フルオシノロン、フルオロメトロン、ジフルプレドナート、プレドニゾロン、ロテプレドノール、メドリゾン、リメキソロン、トリアムシノロン、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。
【０１１５】
一部の実施形態において、眼への投与のための絹マトリックスに分散または封入することができる治療薬は、眼科細菌感染症の処置のための薬剤、例えば、限定ではないが、バシトラシン、ポリミキシン、レボフロキサシン、ネオマイシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、トブラマイシン、モキシフロキサシン、アジスロマイシン、トリメトプリム、ガチフロキサシン、ベシフロキサシン、クロラムフェニコール、エリスロマイシン、ゲンタマイシン、グラミシジン、イドクスウリジン、ナタマイシン、ノルフロキサシン、オキシテトラサイクリン、フェニルエフリン、硝酸銀、スルファセタミドナトリウム、スルフィソキサゾール、トリフルリジン、ビダラビン、およびこれらの任意の組み合わせを含み得る。
【０１１６】
眼への投与のための組成物
本明細書に記載する眼への投与のための組成物を、眼の中の様々な投与標的部位、例えば、限定されるものではないが、水晶体、強膜、結膜、房水、毛様体筋、および硝子体液用に製剤化することができる。一部の実施形態では、例えば硝子体内投与のために、組成物を注射可能な組成物に製剤化することができる。
【０１１７】
一部の実施形態では、本明細書に記載する組成物を、１つ以上の水溶性または眼科的に許容され得る担体または賦形剤を含むように製剤化することができる。例示的水溶性または眼科的に許容され得る担体または賦形剤としては、一般に、糖、糖類、多糖類、界面活性剤、緩衝溶液、粘性剤、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができる。賦形剤の非限定的な例は、２−（ヒドロキシメチル）−６−［３，４，５−トリヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロピラン−２−イル］オキシ−テトラヒドロピラン−３，４，５−トリオール、「トレハロース」である。一部の実施形態において、本明細書に記載する組成物は、出発組成物中のトレハロースの重量に基づき、約１重量％から約５０重量％のトレハロース、または約５重量％から約３５重量％のトレハロースを含むことができる。
【０１１８】
一部の実施形態において、賦形剤は、１つ以上の界面活性剤を含み得、、例えば、限定ではないが、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、およびこれらの組み合わせが挙げられる。例えば、組成物は、出発組成物中のポリソルベート２０の重量に基づき、約０．０１重量％から約５重量％のポリソルベート２０、または約０．０５重量％から約０．２５重量％を含むことができる。
【０１１９】
一部の実施形態において、賦形剤は、１つ以上の粘性剤を含み得、例えば、限定ではないが、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒアルロン酸などが挙げられる。
【０１２０】
一部の実施形態において、粘度調節成分は、組成物の粘度の調節に有効な量で存在することができる。一部の実施形態において、水の粘度（１センチポワズ）を超える値に組成物の粘度を増加させることで、眼の後区への組成物のより有効な配置、例えば注射が可能である。他の実施形態において、粘度調節成分としては、剪断減粘性成分を挙げることができ、これは、組成物中に存在すると、組成物が狭い空間、例えば２７ゲージ針を通過して眼の後区に注射されるので、高剪断条件下での組成物の粘度を低下させることができるが、組成物は、注射針を通過した後、注射前の粘度を回復することができる。
【０１２１】
任意の適する粘度調節成分、例えば、眼科的に許容され得る粘度調節成分を、本明細書に記載する組成物の一部の実施形態において用いることができる。粘度調節成分の例としては、ヒアルロン酸（例えば、高分子ヒアルロン酸）、カルボマー、ポリアクリル酸、セルロース系誘導体、ポリカルボフィル、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、デキストリン、多糖類、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリ酢酸ビニル、それらの誘導体ならびにそれらの混合物およびコポリマーを挙げることができるが、それらに限定されない。組成物において用いられる粘度調節成分の具体的な量は、例えば、限定ではないが、用いられる具体的な粘度調節成分、用いられる粘度調節成分の分子量、組成物に望まれる粘度、組成物の剪断減粘性、生体適合性および／または生体分解性を含む、多数の因子に依存し得る。一部の実施形態において、粘度調節成分は、組成物の約０．５％または約１．０％から約５％または約１０％または約２０％（ｗ／ｖ）の範囲の量で存在することができる。
【０１２２】
一部の実施形態において、組成物は、少なくとも１つの緩衝成分を、組成物のｐＨを制御および／または維持するのに有効な量で含むことができる。一部の実施形態において、用いられる緩衝成分の量は、組成物のｐＨを約６から約８、または約７から約７．５の範囲で維持するのに十分であり得る。緩衝成分は、眼科技術分野において公知であるものから選択することができる。かかる緩衝成分の例としては、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液およびこれらの混合物が挙げられるが、それらに限定されない。一部の実施形態において、緩衝成分は、リン酸緩衝液を含み得る。
【０１２３】
一部の実施形態において、組成物は、少なくとも１つの張性成分を、組成物の張性または重量オスモル濃度を制御するのに有効な量で含むことができる。一部の実施形態において、用いられる張性成分の量は、本明細書に記載する組成物に約２００から約４００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、または約２５０から約３５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの範囲の重量オスモル濃度をそれぞれもたらすのに十分であり得る。１つの実施形態では、組成物の張性および／または重量オスモル濃度を、硝子体液と実質的に等張性になるように調整する。張性成分は、眼科技術分野において公知であるものから選択することができる。適する張性成分としては、塩、例えば塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトールおよび他の糖アルコール、ならびに他の適する眼科的に許容され得る（ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｙ）張性成分、およびこれらの混合物を挙げることができるが、それらに限定されない。
【０１２４】
本明細書に記載する組成物を、従来の滅菌プロセス、例えば、放射線ベースの滅菌（すなわち、ガンマ線）、化学ベースの滅菌（エチレンオキシド）、オートクレーブ処理、または他の適切な手順を用いて滅菌することができる。一部の実施形態において、滅菌プロセスは、約５２℃から約５５℃の温度で８時間以下の時間、エチレンオキシドを用いて行うことができる。滅菌後、組成物を保管および／または輸送のために適切な滅菌防湿パッケージに包装することができる。
【０１２５】
本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を使用する方法（例えば、処置方法を含む）
本明細書に記載する異なる実施形態の組成物、眼への送達デバイスおよび／またはキットを眼への治療薬の送達のために使用して、例えば、眼病態、例えば、加齢性黄斑変性などの血管新生により誘導される眼疾患または障害を処置することができる。したがって、本明細書において提供するもう１つの態様は、被験体の眼への治療薬の送達方法に関する。本方法は、絹マトリックスに分散または封入された治療薬を眼の標的部位に投与することを含み、絹マトリックスに分散または封入されたある量の治療薬は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより長い期間にわたって治療効果をもたらすことができる。
【０１２６】
本発明者らは、絹マトリックスに分散または封入された治療薬が、絹マトリックスなしで投与される同じ治療薬と比較して、眼の標的投与部位からの治療薬漏出の可能性を低減させることができることを実証した。したがって、本明細書において眼の標的部位に投与される治療薬の有効量を増加させる方法をさらに提供する。かかる方法は、絹マトリックスに分散または封入された治療薬を被験体の眼の標的部位に投与することを含み、絹マトリックスを、標的投与部位からの治療薬の漏出を低減させるように製剤化し、それにより、眼の標的部位および／またはその近接に送達される治療薬の実際の量は増加される。かくして、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物および／または方法を使用して眼の標的部位に送達される治療薬の有効量および／または実際の量を、絹マトリックスなしで投与される同じ治療薬と比較して少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％以上、増加させることができる。
【０１２７】
本明細書において用いる場合、用語「有効量」は、所望の効果を生じさせるように眼の標的部位の少なくとも１つの細胞に送達される治療薬の実際の量を指す。例えば、治療薬が、投与時に注射針を抜き取った後、注射針からまたは注射部位から漏出し得る場合、所望の効果のために眼の標的部位の少なくとも１つの細胞に送達することができる治療薬の実際の量は、最初の所定投与量より少なくとも約１％少なくなり得、例えば、最初の所定の投与量より、少なくとも約２％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％以上少なくなり得る。
【０１２８】
本明細書において用いる場合、用語「投与する」または「投与すること」は、所望の効果を生じさせるように所望の部位に組成物を少なくとも部分的に局在化させる結果となる方法または経路による、組成物の被験体への配置を指す。本明細書に記載する方法に適する投与経路は、局所投与と全身投与の両方を含み得る。一般に、局所投与は、被験体の全身と比較して特定の位置に治療薬の大部分が送達される結果となり、これに対して、全身投与は、治療薬が被験体の本質的に全身へ送達される結果となる。特定の実施形態において、本明細書に記載する組成物または絹マトリックスに封入された治療薬の投与は、被験体の眼の標的部位または被験体の眼の少なくとも一部分、例えば、限定されるものではないが、水晶体、強膜、結膜、房水、毛様体筋、硝子体液またはこれらの任意の組み合わせへの組成物または絹マトリックスに封入された治療薬の配置を包含し得る。１つの実施形態において、本明細書に記載する組成物または絹マトリックスに封入された治療薬の投与は、被験体の眼の硝子体液への組成物または絹マトリックスに封入された治療薬の配置を包含し得る。１つの実施形態では、眼（例えば、眼の硝子体液）への本明細書に記載する組成物または絹マトリックスに封入された治療薬の投与を注射によって行うことができる。
【０１２９】
処置方法：前に述べたように、本発明者らは、絹マトリックスに分散または封入された治療薬が、意外にも、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときの治療効果の継続期間より長い期間にわたって、例えば、少なくとも１週間長く、または少なくとも１ヶ月長く治療効果をもたらすことができることを発見した。それ故、本明細書に記載する組成物の１つ以上の実施形態を被験体に投与すると、本明細書に記載する組成物の被験体への投与頻度を、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで被験体に投与するのと比較して、低減させることができる。
【０１３０】
したがって、本明細書において提供するさらにもう１つの態様は、治療薬を、それを必要とする被験体の眼の標的部位に投与する方法であって、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を被験体の眼の標的部分に、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与するときの投与頻度より少ない頻度で投与することを含む方法に関する。一部の実施形態では、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を使用する投与の頻度（Ｆ）をＦ＝（Ｙ２−Ｙ１）／Ｙ２（式中、Ｙ１は、特定の適応症について推奨されている絹マトリックスなしでの現行投薬量の治療薬によって生ずる治療効果の継続期間であり、Ｙ２は、本明細書に記載する絹マトリックス中に存在する同じ量の治療薬によって生ずる治療効果の継続期間である）倍低減させることができる。例えば、ＡＭＤの処置のための現行の推奨投薬量の治療薬、例えば、非絹溶液中のＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）によって生ずる治療効果の継続期間は、約１ヶ月であるが、同じ量の治療薬、例えばＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）を絹マトリックス中で投与した場合、治療効果の継続期間を約２ヶ月に延長することができる。したがって、投薬頻度を（２−１）／２＝１／２倍低減させることができる。すなわち、現行の投与プロトコルでの月１回のＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）の投与を受ける代わりに、本明細書に記載する方法および／または組成物によって投与頻度が２ヶ月ごとに約１回（すなわち、１注射／月＊（１−Ｆ））に低減され得る。同様に、投与頻度を２／３（例えば、Ｙ２＝３ヶ月、およびＹ１＝１ヶ月）倍低減させる場合、本明細書に記載する方法および／または組成物によって投与頻度は３ヶ月ごとに約１回に低減され得る。
【０１３１】
一部の実施形態では、治療薬の投与頻度を少なくとも約１／５、少なくとも約１／４、少なくとも約１／３、少なくとも約１／２倍以上低減させることができる。一部の実施形態では、ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）の投与頻度を少なくとも約１／５、少なくとも約１／４、少なくとも約１／３、少なくとも約１／２倍以上低減させることができる。
【０１３２】
さらなる態様では、被験体における眼病態を処置する方法であって、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を被験体の眼の標的部位に投与することを含む方法を、明細書において提供する。一部の実施形態において、組成物は、眼の標的部位および／またはその近接への治療薬の持続放出をもたらし、それによって被験体における眼病態を処置することができる。
【０１３３】
本明細書において用いる場合、用語「治療効果」は、処置の成果であって、その結果が望ましく有益であると判断される成果を指す。一部の実施形態において、治療効果は、眼病態の処置と関連付けられる。疾患の処置に関して本明細書において用いる場合、用語「処置」および「処置すること」は、疾患の進行を予防すること、または障害の経過を変えること（例えば、限定されるものではないが、障害の進行を遅くすること）、または障害の症状を逆転させること、または被験体における１つ以上の症状および／もしくは１つ以上の生化学マーカーを低減させること、１つ以上の症状の悪化もしくは進行を予防すること、回復を促進すること、または予後を向上させることを意味する。例えば、血管新生により誘導される眼病態、例えば加齢性黄斑変性などの眼病態の処置の場合、治療的処置は、本明細書に記載する組成物の投与後の異常血管の退縮および／または視力の向上を指す。もう１つの実施形態において、治療的処置は、血管新生により誘導される眼病態、例えば加齢性黄斑変性などの眼病態に随伴する少なくとも１つの症状の軽減を指す。測定可能な減少としては、処置後の測定可能な症状の何らかの統計学的に有意な減退、例えば、異常血管の成長低減および／または視力向上が挙げられる。１つの実施形態では、血管新生により誘導される眼病態、例えば加齢性黄斑変性などの眼病態の少なくとも１つの症状を少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％軽減する。もう１つの実施形態では、少なくとも１つの症状を、対照（例えば、本明細書に記載する組成物の不在下）と比較して５０％より大きく、例えば、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％以上（しかし１００％を含まない）軽減する。１つの実施形態では、少なくとも１つの症状を、対照（例えば、本明細書に記載する組成物の不在下）と比較して少なくとも約８０％、少なくとも約９０％以上（しかし１００％を含まない）軽減する。したがって、一部の実施形態では、対照（例えば、本明細書に記載する組成物の不在下）と比較して少なくとも１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％（しかし１００％を含まない）の眼病態に随伴する少なくとも１つの症状の低減、例えば、視力向上または異常血管の退縮によって、治療効果を判定することができる。もう１つの実施形態では、少なくとも１つの症状を、対照（例えば、本明細書に記載する組成物の不在下）と比較して５０％より大きく、例えば、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％（しかし１００％を含まない）軽減する。１つの実施形態では、少なくとも１つの症状を、対照（例えば、本明細書に記載する組成物の不在下）と比較して少なくとも約８０％、少なくとも約９０％以上（しかし１００％を含まない）軽減する。一部の実施形態において、本明細書に記載する方法の任意の態様によって生ずる治療効果は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１週間長い期間にわたって持続することができる。一部の実施形態において、例えば、少なくとも約１０％の眼病態に随伴する少なくとも１つの症状の低減、例えば、視力向上または異常血管の退縮によって判定される、本明細書に記載する方法の任意の態様によって生ずる治療効果は、同じ量の治療薬を絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１２ヶ月以上長い期間にわたって持続することができる。
【０１３４】
１つの実施形態において、処置されることになる眼病態は、加齢性黄斑変性であり得る。かかる実施形態において、絹マトリックスに分散または封入された治療薬は、血管新生阻害剤、例えば、ＶＥＧＦ阻害剤を含み得る。例示的ＶＥＧＦ阻害剤としては、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができる。一部の実施形態では、被験体における加齢性黄斑変性を処置する方法を提供し、本方法は、絹マトリックスに分散または封入されたベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせを含む組成物を被験体の眼の標的部位（例えば、眼の硝子体液）に投与することを含む。かかる実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせの量は、非絹溶液製剤中の現行の推奨投薬量、例えば、ＡＭＤの処置については約０．５ｍｇから約１．５ｍｇ（例えば、約１．２５ｍｇ）と実質的に同じ量であり得るが、絹系組成物は、推奨投薬量の既存の非絹溶液製剤によってもたらされるものより少なくとも約１週間、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月長い期間にわたって治療効果をもたらすことができる。もう１つの実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせの量は、ＡＭＤの処置について（非絹溶液製剤での）現行の推奨投薬量において許容されるものより多い（例えば、少なくとも約１０％多い、少なくとも約２０％多い、少なくとも約３０％多い、少なくとも約４０％多い、少なくとも約５０％多い、少なくとも約６０％多い、少なくとも約７０％多い、少なくとも約８０％多い、少なくとも約９０％多い、少なくとも約１倍多い、少なくとも約２倍多い、少なくとも約３倍多い、少なくとも約４倍多い、少なくとも約５倍多い、少なくとも約６倍多い、少なくとも約７倍多い、少なくとも約８倍多い、少なくとも約９倍多い、または少なくとも約１０倍多い）量であり得る。この実施形態は、推奨投薬量の既存の非絹溶液製剤によってもたらされるものより少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１２ヶ月長い期間にわたって治療効果をもたらすことができる。代替実施形態において、絹マトリックスに分散または封入されたベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせの量は、ＡＭＤの処置について（非絹溶液製剤での）現行の推奨投薬量より少ない（例えば、少なくとも約５％少ない、少なくとも約１０％少ない、少なくとも約２０％少ない、少なくとも約３０％少ない、少なくとも約４０％少ない、または少なくとも約５０％少ない）量であり得る。かかる実施形態は、推奨投薬量の既存の非絹溶液製剤によってもたらされるものと実質的に同じ期間にわたって、またはさらにそれより長い期間にわたって、例えば、少なくとも約１週間長く（例えば、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月長くを含む）治療効果をもたらすことができる。
【０１３５】
組成物の異なる実施形態によって生ずる治療効果の継続期間に依存して、被験体の眼への組成物の投与頻度は変わり得る。一般に、標的部位への治療薬の持続放出が長いほど、実施を必要とする投与の頻度は低い。一部の実施形態では、組成物を被験体の眼の標的部位に少なくとも毎月、少なくとも２ヶ月ごとに、少なくとも３ヶ月ごとに、少なくとも４ヶ月ごとに、少なくとも５ヶ月ごとに、少なくとも６ヶ月ごとに、少なくとも７ヶ月ごとに、少なくとも８ヶ月ごとに、少なくとも９ヶ月ごとに、少なくとも１０ヶ月ごとに、少なくとも１１ヶ月ごとに、少なくとも１２ヶ月ごとに、またはより低頻度で投与することができる。別の言い方をすると、本明細書に記載する方法の任意の態様の一部の実施形態では、月１回以下、２ヶ月ごとに１回以下、３ヶ月ごとに１回以下、４ヶ月ごとに１回以下、５ヶ月ごとに１回以下、もしくは６ヶ月ごとに１回以下、またはより低頻度で投与を行うことができる。
【０１３６】
本明細書に記載する方法の任意の態様では、本明細書に記載する組成物または絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬を、眼の任意の部分、例えば、眼の前区、または眼の後区に投与することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載する組成物または絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬を、水晶体、強膜、結膜、房水、毛様体筋、および硝子体液から成る群より選択される眼の少なくとも一部分に投与することができる。１つの実施形態では、本明細書に記載する組成物または絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬を、眼の硝子体液に投与することができる。
【０１３７】
本明細書に記載する方法の任意の態様では、本明細書に記載する組成物または絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬を、当該技術分野において公知の任意の方法、例えば、注射、局部的（例えば、点眼器を使用するか、または送達デバイスとしてのコンタクトレンズを使用する）、体内移植によって、眼に投与することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載する組成物または絹マトリックスに分散もしくは封入された治療薬を、注射、例えば硝子体内注射によって眼に投与することができる。１つの実施形態では、例えば、絹ヒドロゲル、マイクロ粒子もしくはナノ粒子、ゲル様もしくはゲル粒子またはこれらの任意の組み合わせに分散または封入された治療薬を、非侵襲的方法、例えば注射によって投与することができる。その注射を、眼への注射に適する注射針、例えば、約２５から約３４、または約２７から約３０のゲージを有する注射針で行うことができる。当該技術分野において公知の他の眼への送達デバイス、例えば硝子体内注射デバイス、例えば、限定されるものではないが、米国特許出願公開第２０１０／０１５２６４６号、同第２０１０／０１０００５４号、同第２０１０／０３０５５１４号、同第２００６／０２５９００８号および米国特許第７６７８０７８号明細書（これらの内容は参照により本明細書に援用されている）に記載されているものもまた、本明細書に記載する組成物の投与に使用することもできる。
【０１３８】
眼病態、例えば、加齢性黄斑変性などの血管新生により誘導される眼病態の診断および／またはモニタリングは、当業者には公知である。単なる例として、加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）を検出するために、眼科医療従事者は、視力検査、散瞳検査および／または眼圧測定を含む、眼の検査を行うことができる。視力検査は、被験体が様々な距離でいかによく見ることができるかを測定するための視力検査表テストである。散瞳検査では、眼科医療従事者は、点眼剤を使用して被験体の瞳孔を散大、すなわち拡大させることができ、その後、特殊拡大鏡を使用して被験体の網膜および視神経をＡＭＤおよび他の眼の問題の徴候について検査することができる。眼圧測定は、眼の内部の圧力を測定する測定法である。
【０１３９】
場合によっては、眼科医療従事者は、アムスラー格子（チェッカーボードに似ている模様）を見るように被験体に頼むことができる。被験体は、片眼を覆い、その格子の中央の黒い点を凝視する。その点を凝視しながら、被験体が、その模様の中の直線が波打って見えることまたは線の一部が見えないことに気付いたら、それは、被験体がＡＭＤを有することまたはＡＭＤを有する危険性があることを示すものであり得る。
【０１４０】
眼科医療従事者はまた、眼底写真撮影および血管造影、光干渉断層撮影、ならびに／または超音波検査および超音波生体顕微鏡検査を利用して、ＡＭＤもしくは他の眼病態の診断および／または処置の進行のモニタリングを助長することができる。
【０１４１】
患者の網膜および黄斑の外観の任意の変化を継時的に検査するために、デジタル眼底写真撮影を用いて、任意の異常を写真撮影することができる。血管造影図は、眼科医療従事者が、被験体の眼球後方における血管ならびに関連した異常、例えばＡＭＤにおける視力喪失の最も一般的な原因である異常新生血管成長（新生血管形成）をより明瞭に見ることを可能にするタイプの写真である。例えば、血管造影図は、フルオレセインと呼ばれる食用色素を一般には患者の腕または手の末梢静脈へ注射した後に、黄斑および網膜の写真を撮ることによって行うことができる。色素は、眼を含む血管を通って循環することができ、数日にわたって尿により身体から排泄され得る。場合によっては、インドシアニングリーン（ＩＣＧ）血管造影により標準的なフルオレセイン血管造影（ＦＡ）が補足され得る。
【０１４２】
光干渉断層撮影（ＯＣＴ）は、患者の眼の構造の詳細な検査を可能にする、コンピューター断層撮影（「ＣＡＴ」または「ＣＴスキャン」）によって生成される画像に似た、患者の眼球前方または後方の断面画像を生成するために、眼科医療従事者によって一般に用いられる。ＯＣＴイメージングは、一般に、網膜の写真を有する経験に似た、迅速な非侵襲的試験であり、したがって、臨床の場で行うことができる。ＯＣＴを新生血管ＡＭＤの継時的診断およびモニタリングに用いることができる。処置の進行を追跡するために、眼科医療従事者は、処置中に反復測定を行うことができる。
【０１４３】
眼科超音波は、一般に非侵襲的試験であり、および一般に、腫瘍を含む眼の病状を診断するために、特に内部構造の可視化が媒体混濁のため不良であるとき、使用される。眼科超音波および超音波生体顕微鏡検査（ＵＢＭ）は、従来の超音波（３００から６００マイクロメートル）と比較して非常に高い分解能（２から６０マイクロメートル）を有し、それにより、眼科従事者があたかも低倍率の顕微鏡によって病理組織標本を見ているかのように前眼部構造の研究を可能にする。
【０１４４】
処置のための被験体の選択
一部の実施形態では、本明細書に記載する組成物、眼への送達デバイスもしくはキットを投与する前に、または本明細書に記載する方法を用いる前に、被験体を処置のために選択する。一部の実施形態において、被験体は、本明細書に記載する組成物、眼への送達デバイスもしくはキットを投与する前に、または本明細書に記載する方法を用いる前に、眼病態を有する、または有する危険性があると診断され得る。
【０１４５】
一部の実施形態において、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物、眼への送達デバイス、キットおよび／または方法での処置のために選択される被験体は、投与前に、眼病態に随伴する１つ以上の症状を有すると判定され得る。眼病態に随伴する症状の例としては、例えば、限定されるものではないが、ドルーゼンの存在；色素変調；滲出変化（例えば、眼の出血、硬性白斑、網膜下／ＲＰＥ下／網膜内液）；視力大幅低下（例えば、２０／２０から２０／８０などの２レベル以上）；優先的超高感度視野測定変化（ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｈｙｐｅｒａｃｕｉｔｙ  ｐｅｒｉｍｅｔｒｙ  ｃｈａｎｇｅｓ）；霧視；中心暗転（例えば、視野の影または欠けた領域）；変視症の形態の乱視、例えば、直線の格子が波打ったように見え、その格子の複数の部分が空白に見えることがある乱視；色識別困難（特に、暗い色どうしおよび明るい色どうしの識別困難）；明るい光への曝露後の遅い視機能回復；コントラスト感度低下によるぼやけ；ならびにこれらの任意の組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。
【０１４６】
一部の実施形態において、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物、眼への送達デバイス、キットおよび／または方法での処置のために選択される被験体は、投与前に、加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）を有する、または有する危険性があると診断され得る。
【０１４７】
一部の実施形態では、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物、眼への送達デバイス、キットおよび／または方法での処置のために選択される被験体は、投与前に、異常成長血管の増殖および／または眼内圧の増加を有する、または有する危険性があると診断され得る。
【０１４８】
一部の実施形態では、本明細書に記載する方法のために選択される被験体は、本明細書に記載する眼病態（例えば、限定されないが、ＡＭＤ）から前もって回復し得、眼病態の再発があると診断され得る。
【０１４９】
他の実施形態において、本明細書に記載する方法のために選択される被験体は、眼病態についての少なくとも１つの他の処置を受けたことがあり得るか、または受けている。例えば、加齢性黄斑変性と診断され、絹マトリックスなしで抗ＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）および／またはＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標））の投与を受けている被験体を、本明細書に記載する方法のために選択することができる。他の処置としては、例えば異常血管を破壊するためのレーザー療法、および／またはベルテポルフィンが身体全体を移動して、眼の新生血管を含む新生血管の表面に優先的に結合するように、末梢静脈にベルテポルフィンを注射する光線力学的治療法を挙げることができる。その後、ベルテポルフィンは、光活性化されて新生血管を破壊することができる。
【０１５０】
本明細書において用いる場合、「被験体」は、ヒトまたは動物を意味することができる。被験体の例としては、霊長類（例えば、ヒトおよびサル）が挙げられる。通常、動物は脊椎動物、例えば、霊長類、げっ歯動物、家畜または狩猟動物である。霊長類としては、チンパンジー、カニクイザル、クモザル、およびマカク、例えばアカゲザルが挙げられる。げっ歯動物としては、マウス、ラット、マーモット、ケナガイタチ、ウサギおよびハムスターが挙げられる。家畜および狩猟動物としては、ウシ、ウマ、ブタ、シカ、バイソン、水牛、ネコ科の種、例えば家猫、およびイヌ科の種、例えばイヌ、キツネ、オオカミが挙げられる。患者または被験体は、上述、例えば、上記のすべての任意のサブセットを含むか、または、１つ以上の群または種、例えばヒト、霊長類もしくはげっ歯動物を含む。本明細書に記載する態様のある特定の実施形態において、被験体は、哺乳動物、例えば霊長類、例えばヒトである。用語「患者」および「被験体」を本明細書では交換可能に用いている。被験体は、雄であってもよいし、または雌であってもよい。一部の実施形態において、被験体は、乳児を含めて、いずれの年齢のものであり得る。
【０１５１】
１つの実施形態において、被験体は、哺乳動物である。哺乳動物は、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、ラット、イヌ、ウサギ、ネコ、ウマまたはウシであり得るが、これらの例に限定されない。ヒト以外の哺乳動物を、眼病態の処置の動物モデルを代表する被験体として有利に使用することができる。加えて、本明細書に記載する方法および組成物を、家畜化動物および／またはペットに用いることができる。
【０１５２】
「眼病態」とは、一般に、眼または眼の少なくとも一部分もしくは領域に影響を与え得るか、または関与し得る疾患、アリメント（ａｌｉｍｅｎｔ）または病態、例えば網膜疾患を意味する。眼は、眼球ならびに（眼球を構成する）組織および流体、眼周囲の筋肉（例えば、斜筋および直筋）、ならびに眼球内または眼球近くにある視神経の部分を含む。眼病態は、眼の任意の部分に関連した任意の疾患または障害であり得る。例えば、眼病態には、加齢性黄斑変性、脈絡膜新生血管形成、糖尿病性黄斑浮腫、急性および慢性黄斑視神経網膜症、中心性漿液性脈絡網膜症、黄斑浮腫、急性多発性小板状色素上皮症、ベーチェット病、散弾状網脈絡膜症、後部ブドウ膜炎、後部強膜炎、匍行性脈絡膜炎、網膜下線維症、ブドウ膜炎症候群、フォークト−小柳−原田症候群、網膜動脈閉塞性疾患、網膜中心静脈閉塞症、播種性血管内凝固障害、網膜分枝静脈閉塞症、高血圧性眼底変化、眼虚血症候群、網膜動脈微細動脈瘤、コーツ病、傍中心窩毛細血管拡張症、半側網膜静脈閉塞症、乳頭血管炎、頸動脈疾患（ＣＡＤ）、樹氷状血管炎、鎌状赤血球網膜症、網膜色素線条症、家族性滲出性硝子体網膜症、イールズ病、増殖性硝子体網膜症、糖尿病性網膜症、腫瘍に関連した網膜疾患、網膜色素上皮（ＲＰＥ）の先天性肥大、後部ブドウ膜黒色腫、脈絡膜血管腫、脈絡膜骨腫、脈絡膜転移、網膜および網膜色素上皮の混合性過誤腫、網膜芽細胞腫、眼底の血管増殖性腫瘍、網膜星状細胞腫、眼内リンパ系腫瘍、近視性網膜変性、急性網膜色素上皮炎、緑内障、眼内炎、サイトメガロウイルス網膜炎、網膜癌およびこれらの任意の組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。
【０１５３】
一部の実施形態において、眼病態は、眼の後区、例えば脈絡膜または強膜（水晶体嚢の後壁を通る面より後ろの位置で）、硝子体液、硝子体眼房、網膜、視神経（視神経円板を含む）、ならびに後眼領域もしくは部位に血管を形成するかまたは後眼領域もしくは部位を神経支配する血管および神経に関与する、後眼部病態を含み得る。後眼部病態の例としては、黄斑変性（例えば、非滲出性加齢性黄斑変性および滲出性加齢性黄斑変性）；黄斑円孔；後眼組織への光、放射線または熱損傷；脈絡膜新生血管形成；急性黄斑視神経網膜症；黄斑浮腫（例えば、類嚢胞黄斑浮腫および糖尿病性黄斑浮腫）；ベーチェット病、網膜障害、糖尿病性網膜症（増殖性糖尿病性網膜症を含む）；網膜動脈閉塞性疾患；網膜中心静脈閉塞症；ブドウ膜炎性網膜疾患；網膜剥離；後眼部位に影響する眼外傷；眼のレーザー処置に起因または眼のレーザー処置による影響を受ける後眼部病態；光線力学的治療に起因または光線力学的治療による影響を受ける後眼部病態；光凝固；放射線網膜症；網膜上膜障害；網膜分枝静脈閉塞症；前部虚血性視神経障害；非網膜症（ｎｏｎ−ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ）糖尿病性網膜機能不全、色素性網膜炎および緑内障を挙げることができるが、それらに限定されない。緑内障は、治療目標が網膜細胞または網膜神経節細胞の損傷または喪失に起因する視力喪失の予防または視力喪失の発生低減（すなわち、神経保護）であるため、後眼部病態と考えることができる。一部の実施形態において、処置されることとなる眼病態は、加齢性黄斑変性である。
【０１５４】
他の実施形態において、眼病態は、眼の前区、例えば、眼周囲の筋肉、瞼、または水晶体嚢もしくは毛様体筋の後壁より前に位置する眼球組織もしくは液に関与する前眼部病態を含み得る。したがって、前眼部病態は、主として、結膜、角膜、結膜、前眼房、虹彩、後眼房（虹彩の後ろだが、水晶体嚢の後壁の前）、水晶体または水晶体嚢、ならびに前眼領域もしくは部位に血管を形成するかまたは前眼領域もしくは部位を神経支配する血管および神経に影響を与えるかまたは関与し得る。前眼部病態の例としては、無水晶体症；偽水晶体症；乱視；眼瞼痙攣；白内障；結膜疾患；結膜炎；角膜疾患；角膜潰瘍；ドライアイ症候群；眼瞼疾患；涙器疾患；涙道閉塞；近視；老眼；遠視；瞳孔障害；屈折障害および斜視を挙げることができるが、これらに限定されない。緑内障処置の臨床的目標は、眼の前眼房での高い水液圧を低下させる（すなわち、眼内圧を低下させる）ことであるため、緑内障も前眼部病態と考えることができる。
【０１５５】
眼への送達デバイスおよびキット
例えば本明細書に記載する任意の実施形態の組成物の投与および／方法を助長するための眼への送達デバイスおよびキットも、本明細書において提供する。一部の実施形態において、眼への送達デバイスは、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を含むことができる。一部の実施形態では、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を眼への送達デバイスに予め充填することができる。眼への送達デバイスは、任意の形態で存在することができ、例えば、一部の実施形態では、デバイスは、注射針を有する注射器であり得、注射針は、例えば、約２５から約３４または約２７から約３０のゲージを有する。本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物の投与に使用することができる、および／または本明細書に記載する１つ以上の実施形態の方法において使用することができる眼への送達デバイスの他の例としては、コンタクトレンズ、点眼器、マイクロニードル（例えば、絹マイクロニードル）、インプラントおよびこれらの任意の組み合わせを挙げることができるが、それらに限定されない。本明細書に記載する一部の実施形態の組成物を送達するために使用することができる、および／または本明細書に記載する方法において使用することができるさらなる眼への送達デバイスとしては、米国特許出願公開第２０１０／０１５２６４６号、同第２０１０／０１０００５４号、同第２０１０／０３０５５１４号、同第２００６／０２５９００８号、同第２００６／０２０４５４８号および米国特許第７６７８０７８号明細書（これらの内容は参照により本明細書に援用されている）に記載されているものを挙げることができるが、これらに限定されない。
【０１５６】
１つの実施形態では、絹マトリックスに分散または封入された治療薬を含む１つ以上の実施形態の組成物を、注射針に場合により取り付けられている注射器に、予め充填することができる。抗ＶＥＧＦ阻害剤、例えばベバシズマブが、注射のために注射器に充填する前に現場での医師による溶液での再構成を要する現行の実施とは対照的に、絹マトリックスに分散または封入された治療薬は、例えば室温であっても、その生物活性を維持することができ、それ故「市販品」用に、注射針に場合により取り付けられている注射器に予め充填することができる。
【０１５７】
眼への送達デバイスの任意の実施形態において、絹マトリックスに分散または封入された治療薬は、その治療薬の所望の投与スケジュールおよび／または放出プロファイルによって様々であり得る。例えば、治療薬は、投与時に眼の少なくとも一部分に送達された治療有効量の治療薬を、例えば２ヶ月より長い、３ヶ月より長い、４ヶ月より長い、５ヶ月より長い、６ヶ月より長い、９ヶ月より長い、１２ヶ月以上長い期間を含めて、１ヶ月より長い期間にわたって維持するのに十分な量で、絹マトリックス中に存在することができる。一般に、標的部位への治療薬の持続放出が長いほど、実施を必要とする投与の頻度は低い。一部の実施形態において、治療薬またはＶＥＧＦ阻害剤は、約０．０１ｍｇから約５０ｍｇ、または約５ｍｇから約１０ｍｇの量で、絹マトリックス中に存在することができる。本明細書に記載する組成物の任意の実施形態において記載されるように、絹マトリックスに封入または分散された治療薬の量または投薬量は、本明細書に記載する任意の実施形態の眼への送達デバイスに適用可能であり得る。
【０１５８】
１つの実施形態において、眼への送達デバイスは、絹マトリックスに封入されたＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ、ラニビズマブ、またはこれらの組み合わせ）を含み、絹マトリックスに封入された約０．５ｍｇから約１．５ｍｇ（例えば、約１．２５ｍｇ）のＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ、ラニビズマブ、またはこれらの組み合わせ）は、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月以上の間、治療効果をもたらす。
【０１５９】
１つの実施形態において、眼への送達デバイスは、絹マトリックスに封入されたＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ、ラニビズマブ、またはこれらの組み合わせ）を含み、絹マトリックスに封入された約１．５ｍｇから約１０ｍｇのＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ、ラニビズマブ、またはこれらの組み合わせ）は、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２４ヶ月以上の間、治療効果をもたらす。１つの実施形態において、絹マトリックスに封入された約３ｍｇから約１０ｍｇ（例えば、約５ｍｇ）のＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ、ラニビズマブ、またはこれらの組み合わせ）は、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２４ヶ月以上の間、治療効果をもたらすことができる。
【０１６０】
本明細書において提供するキットは、一般に、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を含む少なくとも１つの容器、および／または本明細書に記載する１つ以上の実施形態による少なくとも１つの眼への送達デバイスを含むことができる。一部の実施形態では、本明細書に記載する組成物を、本明細書に記載する少なくとも１つの眼への送達デバイスに予め充填することができる。例えば、１つの実施形態では、本明細書に記載する１つ以上の実施形態の組成物を注射器に予め充填することができる。一部の実施形態では、予め充填された注射器をさらに注射針に予め取り付けることができる。他の実施形態では、予め充填された注射器を、使用時にその予め充填された注射器に取り付けら得る注射針から外すことができる。一部の実施形態において、例えば、組成物が眼への送達デバイスに提供されても、予め充填されてもいない場合、キットは、例えば使用前に充填するための注射器および注射針をさらに含むことができる。一部の実施形態において、キットは、麻酔薬、例えば眼への投与中に一般に使用される麻酔薬をさらに含むことができる。一部の実施形態において、キットは、例えば標的投与部位を滅菌するために消毒薬をさらに含む（ｃａｎ  ｆｕｒｔｈｅｒ  ａｎ  ａｎｔｉｓｅｐｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）ことができる。一部の実施形態において、キットは、例えば投与前、投与中および／または投与後に、標的投与部位に消毒薬を塗布するための１つ以上のスワブをさらに含むことができる。
【０１６１】
限定ではないが、本明細書に記載する持続送達方法は、比較的高頻度の投与を要する医薬活性薬剤（または治療薬）の被験体または被験体の標的部位（例えば、任意の組織または器官、創傷、感染部位）への投与に適用可能であり得る。例えば、３ヶ月ごとに少なくとも１回、２ヶ月ごとに少なくとも１回、１週間ごとに少なくとも１回、少なくとも１日１回、ある期間、例えば少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも１年、少なくとも２年以上の期間にわたって投与を要する医薬活性薬剤を、持続放出製剤用の本明細書に記載する絹マトリックスに分散または封入することができる。
【０１６２】
本明細書中に記載される種々の態様の実施形態は、以下の番号の段落によって例示され得る：
段落１。絹マトリックスに封入された治療薬を含む眼への投与用の組成物であって、前記絹マトリックスに封入されたある量の治療薬が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより長い期間にわたって治療効果をもたらす、組成物。
段落２。前記治療効果が、眼病態の処置のための治療効果を含む、段落１に記載の組成物。
段落３。前記眼病態の処置のための治療効果が、前記眼病態に随伴する少なくとも１つの症状を少なくとも約１０％低減すること含む、段落２に記載の組成物。
段落４。前記期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１週間長い、段落１〜３のいずれかに記載の組成物。
段落５。前記期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１ヶ月、少なくとも約３ヶ月、または少なくとも約６ヶ月長い、段落１〜４のいずれかに記載の組成物。
段落６。前記治療薬が、タンパク質、ペプチド、抗原、免疫原、ワクチン、抗体またはその一部分、抗体様分子、酵素、核酸、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アプタマー、小分子、抗生物質、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落１〜５のいずれかに記載の組成物。
段落７。前記治療薬が、眼病態の処置のための薬剤である、段落１〜６のいずれかに記載の組成物。
段落８。前記治療薬が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、フルオシノロンアセトニド、ガンシクロビル、トリアムシノロンアセトニド、ホスカルネット、バンコマイシン、セフタジジム、アミカシン、アムホテリシンＢ、デキサメタゾン、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落１〜７のいずれかに記載の組成物。
段落９。前記治療薬が、血管新生阻害剤を含む、段落１〜８のいずれかに記載の組成物。
段落１０。前記血管新生阻害剤が、ＶＥＧＦ阻害剤を含む、段落９に記載の組成物。
段落１１。前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボン酸アミド塩酸塩、アキシチニブ、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＶＥＧＦ−Ｒ１の阻害剤、アキシチニブ、Ｎ，２−ジメチル−６−（２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド、ＲＥＴ／ＰＴＣ発癌性キナーゼのチロシンキナーゼ阻害剤、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、パン−ＶＥＧＦ−Ｒ−キナーゼ阻害剤；プロテインキナーゼ阻害剤、マルチターゲット型ヒト表皮受容体（ＨＥＲ）１／２および血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）１／２受容体ファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、セジラニブ、ソラフェニブ、バタラニブ、グルファニド二ナトリウム、ＶＥＧＦＲ２選択的モノクローナル抗体、アンギオザイム、ｓｉＲＮＡ系ＶＥＧＦＲ１阻害剤、フマギリンおよびその類似体、前記ＶＥＧＦ受容体の可溶性外部ドメイン、サメ軟骨およびその誘導体、５−（（７−ベンジルオキシキナゾリン−４−イル）アミノ）−４−フルオロ−２−メチルフェノール塩酸塩、これらの任意の誘導体およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落１０に記載の組成物。
段落１２。前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせである、段落１０または１１に記載の組成物。
段落１３。前記治療薬または前記ＶＥＧＦ阻害剤が、約０．０１ｍｇから約５０ｍｇの量で存在する、段落１〜１２のいずれかに記載の組成物。
段落１４。前記治療薬またはＶＥＧＦ阻害剤が、約１．５ｍｇから約１０ｍｇ、または約５ｍｇから約１０ｍｇの量で存在する、段落１〜１３のいずれかに記載の組成物。
段落１５。前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約０．１％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、段落１〜１４のいずれかに記載の組成物。
段落１６。前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約０．５％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、段落１〜１５のいずれかに記載の組成物。
段落１７。前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約１％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、段落１〜１６のいずれかに記載の組成物。
段落１８。前記絹マトリックスが、生体適合性ポリマーをさらに含む、段落１〜１７のいずれかに記載の組成物。
段落１９。前記生体適合性ポリマーが、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリラクチド−コ−グリコリド（ＰＬＧＡ）、ポリエステル、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ホスファジン）、ポリ（ホスフェートエステル）、ポリカプロラクトン、ゼラチン、コラーゲン、セルロース、ヒアルロナン、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、トリブロックコポリマー、ポリリジンおよびこれらの任意の誘導体から成る群より選択される、段落１８に記載の組成物。
段落２０。前記絹マトリックスが、ヒドロゲル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルム、凍結乾燥粉末、凍結乾燥ゲル、リザーバーインプラント、同種インプラント、チューブ、ゲル様またはゲル粒子、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落１〜１９のいずれかに記載の組成物。
段落２１。前記絹マトリックスが、ヒドロゲルを含む、段落１〜２０のいずれかに記載の組成物。
段落２２。前記絹マトリックスが、マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を含む、段落１〜２０のいずれかに記載の組成物。
段落２３。前記治療薬を封入している前記マイクロ粒子、前記ナノ粒子、または前記ゲル様もしくはゲル粒子が、固体基材に埋め込まれる、段落２２に記載の組成物。
段落２４。前記固体基材が、錠剤、カプセル、マイクロチップ、ヒドロゲル、マット、フィルム、繊維、眼への送達デバイス、インプラント、チューブ、コーティング、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落２３に記載の組成物。
段落２５。前記固体基材が、ヒドロゲルを含む、段落２３または２４に記載の組成物。
段落２６。前記ヒドロゲルが、絹ヒドロゲルを含む、段落２５に記載の組成物。
段落２７。注射可能に適合される、段落１〜２６のいずれかに記載の組成物。
段落２８。注射器に予め充填される、段落２７に記載の組成物。
段落２９。前記注射器が、注射針にさらに取り付けられる、段落２８に記載の組成物。
段落３０。前記眼への投与が、水晶体、強膜、結膜、房水、毛様体筋、および硝子体液から成る群より選択される眼の少なくとも一部分への前記組成物の投与である、段落１〜２９のいずれかに記載の組成物。
段落３１。前記眼への投与が、硝子体内投与である、段落１〜３０のいずれかに記載の組成物。
段落３２。段落１〜３１のいずれかに記載の組成物を含む眼への送達デバイス。
段落３３。前記組成物が、前記眼への送達デバイスに予め充填される、段落３２に記載の眼への送達デバイス。
段落３４。注射針を有するかまたは有さない注射器である、段落３２に記載の眼への送達デバイス。
段落３５。前記注射針が、２５から３４ゲージ針である、段落３４に記載の眼への送達デバイス。
段落３６。前記注射針が、２７から３０ゲージ針である、段落３４または３５に記載の眼への送達デバイス。
段落３７。コンタクトレンズを含む、段落３２に記載の眼への送達デバイス。
段落３８。点眼器を含む、段落３２に記載の眼への送達デバイス。
段落３９。マイクロニードルを含む、段落３２に記載の眼への送達デバイス。
段落４０。前記マイクロニードルが、絹マイクロニードルである、段落３９に記載の眼への送達デバイス。
段落４１。インプラントである、段落３２に記載の眼への送達デバイス。
段落４２。段落１〜３１のいずれかに記載の組成物を含む容器、または段落３２〜４１のいずれかに記載の眼への送達デバイスを含む、キット。
段落４３。少なくとも１本の注射器および１本の注射針をさらに含む、段落４２に記載のキット。
段落４４。前記注射針が、２５から３４ゲージ針である、段落４３に記載のキット。
段落４５。前記注射針が、２７から３０ゲージ針である、段落４３または４４に記載のキット。
段落４６。麻酔薬をさらに含む、段落４２〜４５のいずれかに記載のキット。
段落４７。消毒薬をさらに含む、段落４２〜４６のいずれかに記載のキット。
段落４８。前記眼への送達デバイスに前記組成物が予め充填される、段落４２〜４７のいずれかに記載のキット。
段落４９。前記眼への送達デバイスが、注射針を有するかまたは有さない注射器である、段落４８に記載のキット。
段落５０。眼の標的部位に治療薬を送達する方法であって、絹マトリックスに封入された治療薬を眼の標的部位に投与することを含み、前記絹マトリックスに封入されたある量の治療薬が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより長い期間にわたって治療効果をもたらす、方法。
段落５１。被験体における眼病態を処置する方法であって、段落１〜２９のいずれかに記載の組成物を被験体の眼の標的部位に投与し、それにより前記眼の前記標的部位への前記治療薬の持続放出で前記眼病態を処置することを含む、方法。
段落５２。眼病態が、前記眼の後区の病態である、段落５１に記載の方法。
段落５３。眼病態が、加齢性黄斑変性、脈絡膜新生血管形成、糖尿病性黄斑浮腫、急性および慢性黄斑視神経網膜症、中心性漿液性脈絡網膜症、黄斑浮腫、急性多発性斑状色素上皮症、ベーチェット病、バードショット脈絡網膜炎、後部ブドウ膜炎、後部強膜炎、匍行性脈絡膜炎、網膜下線維症、ブドウ膜炎症候群、フォークト−小柳−原田症候群、網膜動脈閉塞性疾患、網膜中心静脈閉塞症、播種性血管内凝固障害、網膜分枝静脈閉塞症、高血圧性眼底変化、眼虚血症候群、網膜動脈微細動脈瘤、コーツ病、傍中心窩毛細血管拡張症、半側網膜静脈閉塞症、乳頭血管炎、頸動脈疾患（ＣＡＤ）、樹氷状血管炎、鎌状赤血球網膜症、網膜色素線条症、家族性滲出性硝子体網膜症、イールズ病、増殖性硝子体網膜症、糖尿病性網膜症、腫瘍に関連した網膜疾患、網膜色素上皮（ＲＰＥ）の先天性肥大、後部ブドウ膜黒色腫、脈絡膜血管腫、脈絡膜骨腫、脈絡膜転移、網膜および網膜色素上皮の混合性過誤腫、網膜芽細胞腫、眼底の血管増殖性腫瘍、網膜星状細胞腫、眼内リンパ系腫瘍、近視性網膜変性、急性網膜色素上皮炎、緑内障、眼内炎、サイトメガロウイルス網膜炎、網膜癌およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落５１または５２に記載の方法。
段落５４。前記眼病態が、加齢性黄斑変性である、段落５３に記載の方法。
段落５５。前記治療薬が、ＶＥＧＦ阻害剤を含む、段落５３に記載の方法。
段落５６。前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、またはこれらの組み合わせを含む、段落５５に記載の方法。
段落５７。治療薬を、それを必要とする被験体の眼の標的部位に投与する方法であって、段落１〜３１のいずれかに記載の組成物を被験体の眼の標的部位に、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少ない投与頻度で投与することを含む、方法。
段落５８。前記投与頻度が、１／２倍低減される、段落５７に記載の方法。
段落５９。眼に投与する治療薬の有効量を増加させる方法であって、絹マトリックスに封入された治療薬を眼の標的部位に投与することを含み、投与すると、前記標的部位からの前記治療薬の漏出が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときと比較して低減され、それにより、前記眼の前記標的部位に投与される前記治療薬の有効量が増加される、方法。
段落６０。前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、前記眼の前区に投与される、段落５０〜５９のいずれかに記載の方法。
段落６１。前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、前記眼の後区に投与される、段落５０〜６０のいずれかに記載の方法。
段落６２。前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、水晶体、強膜、結膜、房水、毛様体筋、および硝子体液から成る群より選択される前記眼の少なくとも一部分に投与される、段落５０〜６１のいずれかに記載の方法。
段落６３。前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、前記眼の硝子体液に投与される、段落５０〜６２のいずれかに記載の方法。
段落６４。前記組成物または絹マトリックスに封入された前記治療薬が、注射によって前記眼に投与される、段落５０〜６３のいずれかに記載の方法。
段落６５。前記注射が、約２５から約３４のゲージを有する針で行われる、段落６４に記載の方法。
段落６６。前記注射が、約２７から約３０のゲージを有する針で行われる、段落６４または６５に記載の方法。
段落６７。前記投与が、月１回以下行われる、段落５０〜６６のいずれかに記載の方法。
段落６８。前記投与が、２ヶ月ごとに１回以下行われる、段落５０〜６７のいずれかに記載の方法。
段落６９。前記投与が、３ヶ月ごとに１回以下、４ヶ月ごとに１回以下、または６ヶ月ごとに１回以下行われる、段落５０〜６８のいずれかに記載の方法。
段落７０。前記治療薬が、タンパク質、ペプチド、抗原、免疫原、ワクチン、抗体またはその一部分、抗体様分子、酵素、核酸、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アプタマー、小分子、抗生物質、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落５０〜６９のいずれかに記載の方法。
段落７１。前記治療薬が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、フルオシノロンアセトニド、ガンシクロビル、トリアムシノロンアセトニド、ホスカルネット、バンコマイシン、セフタジジム、アミカシン、アムホテリシンＢ、デキサメタゾン、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落５０〜７０のいずれかに記載の方法。
段落７２。前記治療薬が、血管新生阻害剤を含む、段落５０〜７１のいずれかに記載の方法。
段落７３。前記血管新生阻害剤が、ＶＥＧＦ阻害剤を含む、段落５０〜７２のいずれかに記載の方法。
段落７４。前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボン酸アミド塩酸塩、アキシチニブ、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＶＥＧＦ−Ｒ１の阻害剤、アキシチニブ、Ｎ，２−ジメチル−６−（２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド、ＲＥＴ／ＰＴＣ発癌性キナーゼのチロシンキナーゼ阻害剤、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、パン−ＶＥＧＦ−Ｒ−キナーゼ阻害剤；プロテインキナーゼ阻害剤、マルチターゲット型ヒト表皮受容体（ＨＥＲ）１／２および血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）１／２受容体ファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、セジラニブ、ソラフェニブ、バタラニブ、グルファニド二ナトリウム、ＶＥＧＦＲ２選択的モノクローナル抗体、アンギオザイム、ｓｉＲＮＡ系ＶＥＧＦＲ１阻害剤、フマギリンおよびその類似体、ＶＥＧＦ受容体の可溶性外部ドメイン、サメ軟骨およびその誘導体、５−（（７−ベンジルオキシキナゾリン−４−イル）アミノ）−４−フルオロ−２−メチルフェノール塩酸塩、これらの任意の誘導体およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落７３に記載の方法。
段落７５。前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせを含む、段落７４に記載の方法。
段落７６。前記治療薬または前記ＶＥＧＦ阻害剤が、約０．０１ｍｇから約５０ｍｇの量で存在する、段落５０〜７５のいずれかに記載の方法。
段落７７。前記治療薬または前記ＶＥＧＦ阻害剤が、約１．５ｍｇから約１０ｍｇ、または約５ｍｇから約１０ｍｇの量で存在する、段落５０〜７６のいずれかに記載の方法。
段落７８。前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約０．１％（ｗ／ｖ）から約５０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、段落５０〜７７のいずれかに記載の方法。
段落７９。前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約０．５％（ｗ／ｖ）から約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、段落５０〜７８のいずれかに記載の方法。
段落８０。前記絹マトリックスが、絹フィブロインを約１％（ｗ／ｖ）から約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で含む、段落５０〜７９のいずれかに記載の方法。
段落８１。前記絹マトリックスが、生体適合性ポリマーをさらに含む、段落５０〜８０のいずれかに記載の方法。
段落８２。前記生体適合性ポリマーが、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリラクチド−コ−グリコリド（ＰＬＧＡ）、ポリエステル、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ホスファジン）、ポリ（ホスフェートエステル）、ポリカプロラクトン、ゼラチン、コラーゲン、セルロース、ヒアルロナン、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、トリブロックコポリマー、ポリリジンおよびこれらの任意の誘導体から成る群より選択される、段落８１に記載の方法。
段落８３。前記絹マトリックスが、ヒドロゲル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルム、凍結乾燥粉末、凍結乾燥ゲル、リザーバーインプラント、同種インプラント、チューブ、ゲル様またはゲル粒子、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落５０〜８２のいずれかに記載の方法。
段落８４。前記絹マトリックスが、ヒドロゲルを含む、段落５０〜８３のいずれかに記載の方法。
段落８５。前記絹マトリックスが、マイクロ粒子、ナノ粒子、またはゲル様もしくはゲル粒子を含む、段落５０〜８４のいずれかに記載の方法。
段落８６。前記治療薬を封入している前記マイクロ粒子、前記ナノ粒子、または前記ゲル様もしくはゲル粒子が、固体基材に埋め込まれている、段落８５に記載の方法。
段落８７。前記固体基材が、錠剤、カプセル、マイクロチップ、ヒドロゲル、マット、フィルム、繊維、眼への送達デバイス、インプラント、チューブ、コーティング、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落８６に記載の方法。
段落８８。前記固体基材が、ヒドロゲルを含む、段落８６または８７に記載の方法。
段落８９。前記ヒドロゲルが、絹ヒドロゲルを含む、段落８８に記載の方法。
段落９０。前記絹マトリックスに最初に封入された前記治療薬の少なくとも約２０％を少なくとも約３ヶ月の期間にわたって放出されるような速度で、前記治療薬が前記絹マトリックスから放出される、段落５０〜８９のいずれかに記載の方法。
段落９１。前記絹マトリックスに最初に封入された前記治療薬の少なくとも約４０％が少なくとも約３ヶ月の期間にわたって放出されるような速度で、前記治療薬が前記絹マトリックスから放出される、段落５０〜９０のいずれかに記載の方法。
段落９２。前記絹マトリックスに最初に封入された前記治療薬の少なくとも約６０％が少なくとも約３ヶ月の期間にわたって放出されるような速度で、前記治療薬が前記絹マトリックスから放出される、段落５０〜９１のいずれかに記載の方法。
段落９３。前記治療薬が、前記絹マトリックスから約１ｎｇ／日から約１５ｍｇ／日の速度で放出される、段落５０〜９２のいずれかに記載の方法。
段落９４。前記治療薬が、前記絹マトリックスから約１μｇ／日から約１ｍｇ／日の速度で放出される、段落５０〜９３のいずれかに記載の方法。
段落９５。前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる治療効果が、眼病態の処置のための治療効果を含む、段落５０〜９４のいずれかに記載の方法。
段落９６。前記眼病態の処置のための治療効果が、前記眼病態に随伴する少なくとも１つの症状を少なくとも約１０％低減することを含む、段落９５に記載の方法。
段落９７。前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる前記治療効果の期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１週間長い、段落５０〜９６のいずれかに記載の方法。
段落９８。前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる前記治療効果の期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約１ヶ月長い、段落５０〜９７のいずれかに記載の方法。
段落９９。前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる前記治療効果の期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約３ヶ月長い、段落５０〜９８のいずれかに記載の方法。
段落１００。前記絹マトリックスに封入された前記量の前記治療薬によってもたらされる前記治療効果の期間が、同じ量の前記治療薬を前記絹マトリックスなしで投与したときより少なくとも約６ヶ月長い、段落５０〜９９のいずれかに記載の方法。
段落１０１。眼への投与のための制御放出絹系組成物を生成する方法であって、水蒸気と絹系マトリックスを接触させる工程を含み、前記絹系マトリックスが、その中に封入された少なくとも１つの治療薬を含む、方法。
段落１０２。前記水蒸気と接触されることになる前記絹系マトリックスが、非架橋絹系マトリックスである、段落１０１に記載の方法。
段落１０３。前記絹系マトリックスと前記水蒸気との接触が、絹フィブロインにおけるベータシート構造の形成を誘導する、段落１０１または１０２に記載の方法。
段落１０４。前記絹系マトリックスと前記水蒸気との接触が、前記絹系マトリックスからの前記少なくとも１つの治療薬の放出動態を調節する、段落１０１〜１０３のいずれかに記載の方法。
段落１０５。前記少なくとも１つの治療薬が、タンパク質、ペプチド、抗原、免疫原、ワクチン、抗体またはその一部分、抗体様分子、酵素、核酸、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アプタマー、小分子、抗生物質、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落１０１〜１０４のいずれかに記載の方法。
段落１０６。前記治療薬が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、フルオシノロンアセトニド、ガンシクロビル、トリアムシノロンアセトニド、ホスカルネット、バンコマイシン、セフタジジム、アミカシン、アムホテリシンＢ、デキサメタゾン、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落１０１〜１０５のいずれかに記載の方法。
段落１０７。前記治療薬が、血管新生阻害剤を含む、段落１０１〜１０６のいずれかに記載の方法。
段落１０８。前記血管新生阻害剤が、ＶＥＧＦ阻害剤を含む、段落１０７に記載の方法。
段落１０９。前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、チボザニブ、３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボン酸アミド塩酸塩、アキシチニブ、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＶＥＧＦ−Ｒ１の阻害剤、アキシチニブ、Ｎ，２−ジメチル−６−（２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド、ＲＥＴ／ＰＴＣ発癌性キナーゼのチロシンキナーゼ阻害剤、Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、パン−ＶＥＧＦ−Ｒ−キナーゼ阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤、マルチターゲット型ヒト表皮受容体（ＨＥＲ）１／２および血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）１／２受容体ファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、セジラニブ、ソラフェニブ、バタラニブ、グルファニド二ナトリウム、ＶＥＧＦＲ２選択的モノクローナル抗体、アンギオザイム、ｓｉＲＮＡ系ＶＥＧＦＲ１阻害剤、フマギリンおよびその類似体、ＶＥＧＦ受容体の可溶性外部ドメイン、サメ軟骨およびその誘導体、５−（（７−ベンジルオキシキナゾリン−４−イル）アミノ）−４−フルオロ−２−メチルフェノール塩酸塩、これらの任意の誘導体およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落１０８に記載の方法。
段落１１０。前記ＶＥＧＦ阻害剤が、ベバシズマブ、ラニビズマブまたはこれらの組み合わせを含む、段落１０８に記載の方法。
段落１１１。前記絹マトリックスが、ヒドロゲル、マイクロ粒子、ナノ粒子、繊維、フィルム、凍結乾燥粉末、凍結乾燥ゲル、リザーバーインプラント、同種インプラント、チューブ、ゲル様またはゲル粒子、およびこれらの任意の組み合わせから成る群より選択される、段落１０１〜１１０のいずれかに記載の方法。
段落１１２。前記少なくとも１つの治療薬が、絹ヒドロゲルに封入される、段落１０１〜１１１のいずれかに記載の方法。
段落１１３。前記少なくとも１つの治療薬が、前記絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様もしくはゲル粒子、またはこれらの任意の組み合わせに封入される、段落１０１〜１１２のいずれかに記載の方法。
段落１１４。前記少なくとも１つの治療薬を封入している絹マイクロ粒子、絹ナノ粒子、ゲル様またはゲル粒子が、ヒドロゲルにさらに埋め込まれる、段落１１３に記載の方法。
段落１１５。前記ヒドロゲルが、絹ヒドロゲルを含む、段落１１４に記載の方法。
【０１６３】
一部の選択した定義
別段の言明が無い限り、または文脈から暗に示されるものがない限り、以下の用語および句は、下に与える意味を含む。別段の明示的言明がない限り、または文脈から明白でない限り、下の用語および句は、その用語または句が関係する技術分野において得た意味を除外しない。これらの定義は、特定の実施形態の説明を助けるために与えるものであり、特許請求の範囲に記載の発明を限定することを意図したものではない。なぜなら、本発明の範囲は、特許請求の範囲によってのみ限定されるからである。さらに、文脈による別段の要求がない限り、単数形の用語は、複数を含み、複数形の用語は、単数形を含むものとする。
【０１６４】
本明細書において用いる場合、用語「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」は、本発明の本質である組成物、方法およびそれらのそれぞれの成分（単数または複数）に関して用いるが、本質的であろうとなかろうと、明記されていない要素を含む余地がある。
【０１６５】
単数形の用語「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、文脈による別段の明確な指示がない限り、複数の指示対象を含む。同様に、「または」という語は、文脈による別段の明確な指示がない限り、「および」を含むことを意図したものである。
【０１６６】
操作例におけるもの以外、または別段の指示のある場合以外、本明細書において用いる成分または反応条件の量を表すすべての数字は、すべての場合、用語「約」によって修飾されていると解するべきである。百分率に関連して用いるとき、用語「約」は、言及されている値の平均±５％を意味し得る。例えば、約１００は、９５から１０５を意味する。
【０１６７】
本明細書に記載するものと同様または等価の方法および材料を本開示の実施または試験の際に用いることができるが、適する方法および材料を以下に記載する。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」という意味である。略語「例えば（ｅ．ｇ．）」は、ラテン語の例えば（ｅｘｅｍｐｌｉ  ｇｒａｔｉａ）に由来し、本明細書では非限定的な例を示すために用いている。したがって、略語「例えば（ｅ．ｇ．）」は、用語「例えば（ｆｏｒ  ｅｘａｍｐｌｅ）」と同義である。
【０１６８】
本明細書において用いる場合、用語「タンパク質」および「ペプチド」は、隣接する残基のα−アミノ基とカルボキシ基間のペプチド結合によって他のものに接続されている一連のアミノ酸残基を示すために本明細書では交換可能に用いている。本明細書において交換可能に用いている用語「タンパク質」および「ペプチド」は、そのサイズまたは機能にかかわらず、修飾アミノ酸（例えば、リン酸化されたもの、糖化されたものなど）およびアミノ酸アナログを含む、タンパク質アミノ酸のポリマーを指す。「タンパク質」は、比較的大きなポリペプチドに関して用いられることが多く、「ペプチド」は、小さいポリペプチドに関して用いられることが多いが、当該技術分野におけるこれらの用語の使用法は、部分的に重なっており、様々である。本明細書において用いる場合、用語「ペプチド」は、別段の記載がない限り、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、およびタンパク質の断片を指す。遺伝子産物およびその断片を指すときには、用語「タンパク質」および「ペプチド」を本明細書では交換可能に用いている。したがって、例示的ペプチドまたはタンパク質には、遺伝子産物、天然起源のタンパク質、ホモログ、オルソログ、パラログ、断片および他の等価物、前述のバリアント、断片およびアナログが含まれる。
【０１６９】
本明細書において用いる場合、用語「核酸」は、ポリヌクレオチド、例えばデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）および、適切な場合には、リボ核酸（ＲＮＡ）、それらの一本鎖または二本鎖いずれかの形態のポリマーを指す。特別な限定がない限り、この用語は、参照核酸と同様の結合特性を有し、かつ天然起源のヌクレオチドと同様の様式で代謝される、天然ヌクレオチドの公知アナログを含有する核酸を包含する。別段の指示がない限り、特定の核酸配列はまた、その保存修飾変異体（例えば、縮重コドン置換）および相補配列、ならびに明確に示されている配列も暗に包含する。具体的には、１つ以上の選択された（またはすべての）コドンの第三の位置が混合塩基および／またはデオキシイノシン残基で置換されている配列を生成することにより、縮重コドン置換を達成することができる（Ｂａｔｚｅｒら、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．１９：５０８１（１９９１）；Ｏｈｔｓｕｋａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２６０５−２６０８（１９８５）、およびＲｏｓｓｏｌｉｎｉら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ  ８：９１−９８（１９９４））。用語「核酸」は、ヌクレオチドアナログから作製されたＲＮＡまたはＤＮＡいずれかの誘導体、バリアントおよびアナログ、ならびに一本鎖（センスまたはアンチセンス）および二本鎖ポリヌクレオチドを等価物として含む。
【０１７０】
また本明細書では「低分子干渉ＲＮＡ」ともいう用語「短鎖干渉ＲＮＡ」（ｓｉＲＮＡ）は、標的遺伝子の発現を例えばＲＮＡｉによって阻害するように機能する作用因子と定義する。ｓｉＲＮＡを化学合成することができ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ転写によって産生することができ、または宿主細胞内で産生することができる。ｓｉＲＮＡ分子を二本鎖ＲＮＡの切断によって生成することもでき、この場合、一方の鎖は、不活性化されるメッセージと同一である。用語「ｓｉＲＮＡ」は、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）経路を誘導する小分子阻害性ＲＮＡデュプレックスを指す。これらの分子は、長さが様々であり得（一般には１８〜３０塩基対）、アンチセンス鎖内のそれらの標的ｍＲＮＡに対する様々な相補度を有する。すべてではないが一部のｓｉＲＮＡは、センス６０鎖および／またはアンチセンス鎖の５’または３’末端に非対合オーバーハング塩基を有する。用語「ｓｉＲＮＡ」は、２本の別々の鎖のデュプレックス、およびデュプレックス領域を含むヘアピン構造を形成することができる一本鎖も含む。
【０１７１】
本明細書において用いる場合、用語「ｓｈＲＮＡ」は短鎖ヘアピンＲＮＡであって、ＲＮＡｉおよび／またはｓｉＲＮＡ種のように機能するが、ｓｈＲＮＡ種が安定性向上のために二本鎖ヘアピン様構造である点が異なるものを指す。本明細書において用いる場合、用語「ＲＮＡｉ」は、干渉ＲＮＡを指し、すなわちＲＮＡ干渉分子は、核酸分子もしくはそれらの類似体、例えば、遺伝子発現を阻害するＲＮＡ系分子である。ＲＮＡｉは、選択的転写後遺伝子サイレンシングの手段を指す。ＲＮＡｉは、特異的ｍＲＮＡの破壊をもたらし得、すなわちｍＲＮＡなどのＲＮＡのプロセッシングもしくは翻訳を防止する。
【０１７２】
本明細書において用いる場合、用語「酵素」は、他の物質の化学反応を、その反応の完了時にその物質が破壊されているかまたは実質的に変えられていることなく触媒するタンパク質分子を指す。この用語は、天然起源の酵素および生物工学で作られた酵素またはそれらの混合物を含むことができる。酵素ファミリーの例としては、キナーゼ、デヒドロゲナーゼ、オキシドレダクターゼ、ＧＴＰアーゼ、カルボキシルトランスフェラーゼ、アシルトランスフェラーゼ、デカルボキシラーゼ、トランスアミナーゼ、ラセマーゼ、メチルトランスフェラーゼ、ホルミルトランスフェラーゼ、およびα−ケトデカルボキシラーゼが挙げられる。
【０１７３】
本明細書において用いる場合、用語「ワクチン」は、被験体の体内に導入されたときに免疫系の活性化を生じさせること、抗体形成、ならびに／またはＴ細胞および／もしくはＢ細胞応答を生じさせることによって特定の疾患に対して免疫を生じさせる、死滅した生物、生きている弱毒化された生物、サブユニット抗原、トキソイド抗原、コンジュゲート抗原または他のタイプの抗原性分子を指す。一般に、微生物に対するワクチンは、ウイルス、細菌、寄生虫、マイコプラズマまたは他の感染因子の少なくとも一部に向けたものである。
【０１７４】
本明細書において用いる場合、用語「アプタマー」は、選択された非オリゴヌクレオチド分子または分子群を特異的に認識することが可能な、一本鎖、部分一本鎖、部分二本鎖または二本鎖ヌクレオチド配列を意味する。一部の実施形態において、アプタマーは、ワトソン−クリック塩基対合またはトリプレックス形成以外の機序によって非オリゴヌクレオチド分子または分子群を認識する。アプタマーは、限定ではないが、ヌクレオチド、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、ヌクレオチドアナログ、修飾ヌクレオチド、ならびに主鎖修飾、分岐点および非ヌクレオチド残基、基もしくは架橋を含むヌクレオチドを含む、定義された配列セグメントおよび配列を含むことができる。分子への結合についてアプタマーを選択する方法は、当該技術分野において広く知られており、当業者には容易に利用できる。
【０１７５】
本明細書において用いる場合、用語「抗体」（単数または複数）は、インタクト免疫グロブリンを指すか、またはＦｃ（結晶化可能断片）領域もしくはＦｃ領域のＦｃＲｎ結合断片を有するモノクローナルもしくはポリクローナル抗原結合断片を指す。用語「抗体」はまた、抗体の断片などの「抗体様分子」、例えば抗原結合断片も含む。抗原結合断片は、組換えＤＮＡ法によって、またはインタクト抗体の酵素的もしくは化学的切断によって生成することができる。「抗原結合断片」は、特にＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｄＡｂ、および相補性決定領域（ＣＤＲ）断片、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、シングルドメイン抗体、キメラ抗体、ダイアボディ、およびポリペプチドであって、そのポリペプチドに特異的抗原結合を付与するのに十分である免疫グロブリンの少なくとも一部分を含有するポリペプチドを含む。線状抗体もまた、本明細書に記載する目的のために含まれる。用語Ｆａｂ、Ｆｃ、ｐＦｃ’、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖは、標準的な免疫学的意味で用いている（Ｋｌｅｉｎ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．、１９８２）；Ｃｌａｒｋ，Ｗ．Ｒ．（１９８６）Ｔｈｅ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）；およびＲｏｉｔｔ，Ｉ．（１９９１）Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第７版、（Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｏｘｆｏｒｄ））。様々な抗原に対して特異的な抗体または抗原結合断片は、供給業者、例えば、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ｅ−ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓおよびＭｉｌｔｅｎｙｉから市販されており、または当業者に公知の方法によってこれらの細胞表面マーカーに対して産生させることができる。
【０１７６】
本明細書において用いる場合、用語「相補性決定領域」（ＣＤＲ；すなわち、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３）は、存在が抗原結合のために必要である抗体可変ドメインのアミノ酸残基を指す。各可変ドメインは、典型的には、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として識別される３つのＣＤＲ領域を有する。各相補性決定領域は、Ｋａｂａｔにより定義されたような「相補性決定領域」からのアミノ酸残基（すなわち、軽鎖可変ドメインにおける約２４−３４（Ｌ１）、５０−５６（Ｌ２）および８９−９７（Ｌ３）残基ならびに重鎖可変ドメインにおける約３１−３５（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）および９５−１０２（Ｈ３）残基；Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９９１））および／または「超可変ループ」からのそれらの残基（すなわち、軽鎖可変ドメインにおける約２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）および９１−９６（Ｌ３）残基ならびに重鎖可変ドメインにおける約２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）および９６−１０１（Ｈ３）残基；ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））を含むことができる。場合によっては、相補性決定領域は、Ｋａｂａｔに従って定義されたＣＤＲ領域と超可変ループ両方からのアミノ酸を含み得る。
【０１７７】
「線状抗体」という表現は、Ｚａｐａｔａら、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．、８（１０）：１０５７−１０６２（１９９５）に記載されている抗体を指す。簡単に言うと、これらの抗体は、相補的軽鎖ポリペプチドと一緒に１対の抗原結合領域を形成する、１対のタンデムＦｄセグメント（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含む。線状抗体は、二重特異性、または単一特異性であり得る。
【０１７８】
「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片という表現は、本明細書において用いる場合、抗体のＶＨおよびＶＬドメインを含む抗体断片であって、これらのドメインが単一ポリペプチド鎖内に存在する抗体断片を意味することを意図したものである。好ましくは、Ｆｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインの間にポリペプチドリンカーをさらに含み、それにより、ｓｃＦｖによる抗原結合のための望ましい構造の形成が可能になる。（Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、第１１３巻、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２６９−３１５頁（１９９４））。
【０１７９】
本明細書において用いる場合、用語「ダイアボディ」は、２つの抗原結合部位を有する小さい抗体断片であって、同じポリペプチド鎖内に軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）（ＶＨ−ＶＬ）を含む断片を指す。短すぎて同じ鎖上の２つのドメイン間の対合ができないリンカーを使用することにより、ドメインを別の鎖の相補ドメインと対合するようにさせ、２つの抗原結合部位を作る。（欧州特許第４０４，０９７号明細書；国際公開第９３／１１１６１号パンフレット；Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｄ．ＵＳＡ，Ｐ０：６４４４−６４４８（１９９３））。
【０１８０】
本明細書において用いる場合、用語「小分子」は、ペプチド、ペプチド模倣物、アミノ酸、アミノ酸アナログ、ポリヌクレオチド、ポリヌクレオチドアナログ、アプタマー、ヌクレオチド、ヌクレオチドアナログ、１モルあたり約１０，０００グラム未満の分子量を有する有機または無機化合物（すなわち、ヘテロ有機化合物および有機金属化合物を含む）、１モルあたり約５，０００グラム未満の分子量を有する有機または無機化合物、１モルあたり約１，０００グラム未満の分子量を有する有機または無機化合物、１モルあたり約５００グラム未満の分子量を有する有機または無機化合物、ならびにかかる化合物の塩、エステルおよび他の医薬的に許容され得る形態を含む（しかしこれらに限定されない）、天然または合成分子を指す。
【０１８１】
用語「抗生物質」は、微生物の生存率を低下または微生物の成長もしくは再生を阻害する化合物または組成物を記述するために本明細書では用いている。本開示において用いる場合、抗生物質は、抗菌剤、静菌剤または殺菌剤を含むことをさらに意図したものである。例示的抗生物質としては、ペニシリン、セファロスポリン、ペネム、カルバペネム、モノバクタム、アミノグリコシド、スルホンアミド、マクロライド、テトラサイクリン、リンコシド、キノロン、クロラムフェニコール、バンコマイシン、メトロニダゾール、リファンピン、イソニアジド、スペクチノマイシン、トリメトプリム、スルファメトキサゾールなどが挙げられるが、それらに限定されない。
【０１８２】
本明細書において用いる場合、用語「抗原」は、選択的結合剤、例えば抗体によって結合されることが可能であり、加えてその抗原のエピトープに結合することが可能な抗体の産生を惹起する動物において使用されることが可能な、分子または分子の一部分を指す。抗原は、１つ以上のエピトープを有し得る。用語「抗原」はまた、抗体またはＭＨＣ分子によって提示される場合にはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）により結合されることが可能な分子を指すこともある。用語「抗原」は、本明細書において用いる場合、Ｔ細胞エピトープも包含する。加えて、抗原は、免疫系によって認識されることが可能であり、ならびに／またはＢおよび／もしくはＴリンパ球の活性化につながる体液免疫応答および／もしくは細胞免疫応答を誘導することが可能である。しかし、これは少なくともある特定の場合、抗原がＴｈ細胞エピトープを含有するか、またはＴｈ細胞エピトープに連結しており、およびアジュバントに供給されることを必要とし得る。抗原は、１つ以上のエピトープ（ＢおよびＴエピトープ）を有し得る。上で言及した特異的反応は、抗原がその対応する抗体またはＴＣＲと、典型的には高選択的様式で、好ましくは反応することになり、他の抗原によって誘発され得る数多くの他の抗体またはＴＣＲとは反応することにならないことを示すことを意図したものである。本明細書において用いる場合、抗原はまた、幾つかの個々の抗原の混合物もあり得る。
【０１８３】
用語「免疫原」は、生物において免疫応答を惹起することが可能な任意の物質、例えばワクチンを指す。「免疫原」は、被験体に投与すると、それ自体に対して免疫応答を誘導することが可能である。免疫応答に関して本明細書において用いる場合、用語「免疫（学的）」は、レシピエント被験体における免疫原に対して向けられた体液（抗体媒介）および／または細胞（抗原特異的Ｔ細胞もしくはそれらの分泌産物によって媒介される）応答の発生を指す。かかる応答は、免疫原もしくは免疫原ペプチドの被験体への投与によって誘導される能動的応答、または抗体もしくは免疫原に向けられる初回抗原刺激を受けたＴ細胞の投与によって誘導される受動的応答であり得る。細胞免疫応答は、クラスＩまたはクラスＩＩ  ＭＨＣ分子に関連してポリペプチドエピトープの提示により惹起されて、抗原特異的ＣＤ４＋Ｔヘルパー細胞および／またはＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞を活性化する。かかる応答はまた、単球、マクロファージ、ＮＫ細胞、好塩基球、樹状細胞、星状細胞、小神経膠細胞、好酸球または他の先天性免疫成分の活性化にも関与し得る。
【０１８４】
用語「減少する」、「低減された」、「低減」、「減少」はすべて、一般に、統計的に有意な量の減少を意味するように本明細書では用いている。しかし、誤解を避けるために、「低減された」、「低減」または「減少」は、参照レベルと比較して少なくとも１０％減少、例えば参照レベルと比較して少なくとも約２０％、もしくは少なくとも約３０％、もしくは少なくとも約４０％、もしくは少なくとも約５０％、もしくは少なくとも約６０％、もしくは少なくとも約７０％、もしくは少なくとも約８０％、もしくは少なくとも約９０％、もしくは１００％を含めて１００％まで（例えば、参照試料と比較して不在レベル）の減少、または１０〜１００％の間の任意の減少を意味する。
【０１８５】
用語「増加した」および「増加」はすべて、一般に、統計的に有意な量の増加を意味するように本明細書では用いている；誤解を避けるために、用語「増加した」および「増加」は、参照レベルと比較して少なくとも１０％増加、例えば参照レベルと比較して少なくとも約２０％、もしくは少なくとも約３０％、もしくは少なくとも約４０％、もしくは少なくとも約５０％、もしくは少なくとも約６０％、もしくは少なくとも約７０％、もしくは少なくとも約８０％、もしくは少なくとも約９０％、もしくは１００％を含めて１００％までの増加、または１０〜１００％の間の任意の増加、あるいは参照レベルと比較して少なくとも約２倍、もしくは少なくとも約３倍、もしくは少なくとも約４倍、もしくは少なくとも約５倍、もしくは少なくとも約１０倍増加、または２倍から１０倍もしくはそれより大きい増加を意味する。
【０１８６】
用語「統計学的に有意な」または「有意に」は、統計学的有意性を指し、一般に、参照レベルから少なくとも２標準偏差（２ＳＤ）隔たっていることを意味する。この用語は、差があるという統計学的証拠を指す。それは、帰無仮説が実際に真であるとき帰無仮説を拒絶する決定を下す確率と定義される。
【０１８７】
本明細書において交換可能に用いる場合、用語「本質的に」および「実質的に」は、少なくとも約６０％、もしくは好ましくは少なくとも約７０％もしくは少なくとも約８０％、もしくは少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％もしくは少なくとも約９９％以上、または７０％から１００％の任意の整数の割合を意味する。一部の実施形態において、用語「本質的に」は、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％以上、または９０％から１００％の任意の整数の割合を意味する。一部の実施形態において、用語「本質的に」は、１００％を含むことができる。
【０１８８】
好ましい実施形態を本明細書において描写し、かつ詳細に説明してきたが、本発明の精神を逸脱することなく様々な修飾、付加、置換などを行うことができること、したがって、これらは以下の特許請求の範囲にて定義するとおりの本発明の範囲内であると考えられることは、関連技術分野の当業者には明らかであるだろう。さらに、既に指示されていない限り、本明細書に記載され例証されている様々な実施形態のいずれか１つをさらに修飾して、本明細書に開示されている他の実施形態のいずれかに示されている特徴を組み込むことは、当業者には理解されたい。
【０１８９】
本開示を以下の実施例によってさらに例証するが、以下の実施例を限定と解釈すべきではない。これらの実施例は例証となるものにすぎず、本明細書に記載するいずれの態様をいかなる様式でも限定することを意図したものではない。以下の実施例は、いかなる点においても本発明を限定しない。
【実施例】
【０１９０】
以下の実施例１〜３において用いる材料および方法の例
無菌・低エンドトキシン絹フィブロイン水溶液の調製。無菌操作を用いて、絹フィブロイン水溶液（６〜８％（ｗ／ｖ））を練絹繊維（Ｓｕｈａｏ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｃｏ．（中国、蘇州）から購入）から調製した。簡単に言うと、練絹繊維をガラス器具の中のエンドトキシンフリーの７０％エタノールに浸漬し、そのエタノール溶液を２時間ごとに取り換えながら６時間、音波処理した。層流フードの中で一晩乾燥させた後、絹繊維を９．３Ｍ臭化リチウムに溶解し、４８時間、脱イオン水に対して透析した。得られた絹溶液を、必要に応じて、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）に対する透析によって濃縮して、２０〜３０％（ｗ／ｖ）絹フィブロイン溶液を生成した。すべての絹フィブロイン溶液を、ヒドロゲル製剤を作製に使用するまで、４℃で保管した。
【０１９１】
濃縮ベバシズマブの調製。無菌操作を用いて、２５ｍｇ／ｍＬ（２．５％（ｗ／ｖ））ベバシズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈから商用名ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）で入手可能）を２０〜２５％（ｗ／ｖ）ベバシズマブまで濃縮した。簡単に言うと、ＡＭＩＣＯＮ（登録商標）Ｕｌｔｒａ−１５遠心フィルターユニット（１０，０００ＭＷＣＯ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を、そのフィルターに７０％エタノールを添加し、部分的にスピンダウンしてそのフィルターを滅菌し、その後一晩インキュベートすることによって滅菌した。過剰なエタノールをフィルターの上面からピペットで除去し、その後、発熱性物質を除去した水を添加してすすいだ。水をスピンダウンしてフィルターをすすぎ、新たな水で５回繰り返してすべての微量エタノールを除去した。その後、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）溶液（２．５％）を滅菌フィルターの上面に添加し、所望のベバシズマブ濃度（２０％から２５％（ｗ／ｖ））に達するまで遠心分離した。
【０１９２】
ベバシズマブ充填絹ヒドロゲル製剤の調製。絹（０．５から２５％（ｗ／ｖ））とベバシズマブ（２．５から２５％（ｗ／ｖ））溶液を、ヒドロゲル製剤中の絹およびベバシズマブの所望の最終濃度を達成するように混合することによって、ベバシズマブ充填絹ヒドロゲル製剤を調製した。例えば、等体積の無菌４％絹と濃縮ベバシズマブ（５％）を、それぞれ２％および２．５％の最終濃度を達成するように混合することにより、「低用量」ヒドロゲルを調製した。同様に、等体積の無菌４％絹と濃縮ベバシズマブ（２０％）を、それぞれ２％および１０％の最終濃度を達成するように混合することにより、「高用量」ヒドロゲルを調製した。ゲル化を誘導するために、デジタルソニファイアー（Ｂｒａｎｓｏｎ）を使用して無菌条件下で混合溶液を音波処理した。音波処理後、１６Ｇ〜１８Ｇ針を使用して１ｍＬ注射器の中に取り、その注射器から空気を抜き、その針を注射に適する２７Ｇ〜３０Ｇ針と交換することによって、得られた溶液を注射用に準備した。注射器を一晩、３７℃でインキュベートし、その後、注射前の保管のために４℃に切り替えた。各製剤の試料を、滅菌およびエンドトキシンフリーについて、それぞれＵＳＰ＜７１＞およびＵＳＰ＜８５＞ガイドラインに従って試験した。
【０１９３】
ベバシズマブ充填絹ヒドロゲル製剤の眼薬物動態評価。ベバシズマブ充填絹ヒドロゲルの薬物動態特性を、ダッチベルテッド種ウサギにおいて硝子体内注射後９０日間にわたって評価した。血液、房水および硝子体液中のベバシズマブのレベルをその９０日間にわたって異なる時点で評価した。並行ｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究を行って、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）溶液中での放出動態を９０日にわたって判定した。簡単に言うと、０．０２％（ｗ／ｖ）アジ化ナトリウムを含む４ｍＬのＰＢＳにベバシズマブ充填絹ヒドロゲルを注入（５０μＬ／注入）し、放出培地をおおよそ３〜４日ごとに試料採取し（３．６ｍＬ／試料）、交換した。
【０１９４】
ベバシズマブレベルの分析。記載のトランケート型組換えヒトＶＥＧＦとは対照的に組換えヒト血管内皮増殖因子１６５（ＶＥＧＦ１６５）を使用するという変更を加えて、Ｈｓｅｉら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１９：１７５３（２００２）に記載されているように、酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）をｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ試料におけるベバシズマブ濃度の判定に用いた。簡単に言うと、ＶＥＧＦ１６５をベバシズマブ用捕捉ペプチドとして使用し、サンドイッチアッセイでの検出のためにホースラディッシュペルオキシダーゼにコンジュゲートさせたヒトＩｇＧに対するヤギ抗体を使用した。このＥＬＩＳＡアッセイの検出限界は、血漿、房水および硝子体液についてはおおよそ１ｎｇ／ｍＬであり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＰＢＳ試料についてはおおよそ０．１ｎｇ／ｍＬであった。初期ｉｎ  ｖｉｔｒｏ時点については、放出培地中の高濃度のベバシズマブにより、ＥＬＩＳＡアッセイが、その比較的低い検出限界のため適用不能になり得た。したがって、溶媒としてＰＢＳを使用し、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｂｉｏ  ＳＥＣ−３カラム（４．６ｍｍ×３００ｍｍ、３μｍ粒径、３００Å孔径）を使用して、ゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）法を利用した。０．４ｍＬ／分から０．５ｍＬ／分の溶媒流量を用い、注入容量は５μＬ／試料であった。試料検出は、２８０ｎｍでの多波長検出器によるものであった。ＧＰＣ法の検出限界は、おおよそ１μｇ／ｍＬ（０．４ｍＬ／分の流量について、保持時間約８．０分）であった。
【実施例１】
【０１９５】
ベバシズマブ充填絹ヒドロゲル製剤のｉｎ  ｖｉｖｏ薬物動態評価
【０１９６】
ｉｎ  ｖｉｖｏ研究には、ダッチベルテッド種ウサギにおけるベバシズマブ充填絹ヒドロゲルの硝子体内注射、その後、９０日間にわたっての血液、房水および硝子体液の試料採取ならびに最終屠殺時に撮影する眼底写真を要した。簡単に言うと、ウサギ（処置あたりｎ＝９）の一方の眼（右）に、５０μＬの４つの被験製剤：（ｉ）陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（２％絹））、（ｉｉ）陽性対照（すなわち、２．５％ベバシズマブ溶液（１．２５ｍｇベバシズマブ））、（ｉｉｉ）「低用量」絹ヒドロゲル（すなわち、２％絹ヒドロゲル中の２．５％（ｗ／ｖ）ベバシズマブ（１．２５ｍｇベバシズマブ））、および（ｉｖ）「高用量」絹ヒドロゲル（すなわち、２％絹ヒドロゲル中の１０％（ｗ／ｖ）ベバシズマブ（５ｍｇベバシズマブ））のうちの１つを注射した。一方の眼（右）を被験製剤の評価に使用した一方で、他方の眼（左）を対照（すなわち、一切注射なし）として使用した。陽性対照は、５０μＬの２．５％ベバシズマブ溶液（１．２５ｍｇベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ））の月１回の注射という現行利用投薬レジメンに基づく。眼科検査を定期的に行って、継時的にウサギの眼の健康全般を評定するとともにヒドロゲルの任意の分解をモニターした。
【０１９７】
ダッチベルテッド種ウサギにおけるベバシズマブ充填絹ヒドロゲルの９０日の眼の評価について、例示的投薬設計を表１に示す。
【表１】
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【０１９８】
被験製剤の注射の際、陽性溶液対照と比較して絹ヒドロゲル製剤でのほうが注射部位からの漏出が少ないことが判明した。したがって、絹ヒドロゲル製剤は、一部の実施形態では栓として作用して、溶液注射と比較してより一貫性がありかつより高度に有効な投薬をもたらすことができる。
【０１９９】
ウサギの体重を９０日間にわたって毎週モニターした。図１に示すように、ウサギは、９０日の間に体重を増やし続けた。これは、手順に対するか、または絹ヒドロゲル製剤に対する著しい有害反応がなかったことを示した。
【０２００】
ベバシズマブの薬物動態を、注射後９０日間にわたってウサギから採取した血漿、房水および硝子体液に基づいて判定した。詳細には、投薬前、および投薬後第２、４、８日に、その後、第９０日まで週１回、ウサギから血液を採取して、分析用の血漿を得た。加えて、眼の健康全般に依存して、投薬後第８、３０、５９および９０日にウサギから房水を採取した。加えて、投薬後第８、３０および９０日での屠殺時にウサギから硝子体液を採取した（１処置につきｎ＝３ウサギを各時点で屠殺した）。
【０２０１】
ダッチベルテッド種ウサギにおけるベバシズマブ充填絹ヒドロゲルの９０日の眼の評価について、例示的試料採取スケジュールを表２に示す。
【表２】
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【０２０２】
血漿、房水および硝子体液から採取した試料を、ＥＬＩＳＡ法を用いて分析した。硝子体液と房水の両方に関して、「低用量」絹ヒドロゲルと「高用量」絹ヒドロゲル製剤の両方についての９０日の時点でベバシズマブの濃度は、単に３０日後の陽性対照中に存在するベバシズマブの濃度（すなわち、硝子体液中約１〜３μｇ／ｍＬ；それぞれ図２および３を参照されたい）とほぼ等価であった。さらに、陽性対照についてのベバシズマブ濃度は、第９０日での定量レベルより低かった。したがって、「低用量」および「高用量」絹ヒドロゲル製剤は、陽性対照より少なくとも３倍長い間ベバシズマブの治療レベルを提供した。
【０２０３】
異なる被験製剤中の異なる試料採取部位を比較すると、硝子体液濃度と房水濃度間の比はおおよそ２０倍であり、それ故、その比を予測指標として、例えば房水中の対応する濃度を代わりに測定することにより硝子体液に送達される治療薬の濃度を決定するために使用することができる。
【０２０４】
硝子体液および房水とは異なり、「低用量」絹ヒドロゲル製剤の血漿中のベバシズマブの濃度は、３０日後に定量レベルより下であった（図２および３と比較して図４を参照されたい）。この発見は、陽性対照に相対して、一部の実施形態のヒドロゲル製剤はベバシズマブの全身曝露を制限し得ることを示す。
【０２０５】
ウサギの各群の最終屠殺時に、対照（すなわち、注射なし）または被験製剤（陰性対照、陽性対照、「低用量」ゲルおよび「高用量」ゲル）に関連した任意の異常について網膜、視神経円板および視神経を９０日間にわたって評価するために、一連の眼底写真を撮影した。９０日間にわたって撮影した眼底写真に基づき、ウサギの処置に関連した異常は、網膜、視神経円板、または視神経で検出されなかった（図５Ａ〜５Ｂを参照されたい）。加えて、絹ヒドロゲルの分解を９０日間にわたって目視評価した。投薬後第８日まで、絹ヒドロゲルの分解は、ほとんどまたはまったく検出されなかった（例えば、原絹ヒドロゲルサイズの少なくとも２／３以上が残存した）。より後の時点で（例えば、投薬後第３０日以降に）生体内分解が検出されたが、残存絹ヒドロゲルは、投薬後第９０日でさえなお原絹ヒドロゲルサイズの１／３より大きかった（例えば、原絹ヒドロゲルサイズの１／３から２／３の間）（図６を参照されたい）。より後の時点（例えば、投薬後第３０日）でのほうが硝子体液からの絹ヒドロゲルの抽出が難しいので、屠殺時にこの目視評価をさらに確認した。
【実施例２】
【０２０６】
ベバシズマブ充填絹ヒドロゲル製剤のｉｎ  ｖｉｔｒｏ薬物動態評価
【０２０７】
動物研究と並行して、ウサギに注射するために使用した同じ被験製剤を使用してｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出研究を行った。すなわち、５０μＬの４つの被験製剤：（ｉ）陰性ビヒクル対照（すなわち、治療薬なしの絹ヒドロゲル（２％絹））、（ｉｉ）陽性対照（すなわち、２．５％ベバシズマブ溶液（１．２５ｍｇベバシズマブ））、（ｉｉｉ）「低用量」絹ヒドロゲル（すなわち、２％絹ヒドロゲル中の２．５％（ｗ／ｖ）ベバシズマブ（１．２５ｍｇベバシズマブ））、および（ｉｖ）「高用量」絹ヒドロゲル（すなわち、２％絹ヒドロゲル中の１０％（ｗ／ｖ）ベバシズマブ（５ｍｇベバシズマブ））のうちの１つを、０．０２％（ｗ／ｖ）アジ化ナトリウムを含む４ｍＬのＰＢＳに注入し、おおよそ３〜４日ごとに放出培地を試料採取し（３．６ｍＬ／試料）、交換した。９１日の間、上で説明したように試料を採取して分析した。ウサギ研究における硝子体液試料と同様に、陽性対照、「低用量」絹ヒドロゲルおよび「高用量」絹ヒドロゲルにおいて初期バーストが検出されたが、持続放出は、絹ヒドロゲル製剤でしか達成されなかった（図７を参照されたい）。陽性対照は、３０日の放出後、検出限界より下であったのに対して、「低用量」ヒドロゲルと「高用量」ヒドロゲルの両方が、第９１日においてそれぞれおおよそ１０ｎｇ／ｍＬおよび１００ｎｇ／ｍＬのベバシズマブ濃度を呈示した（図７を参照されたい）。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験を第９１日に停止したが、「低用量」絹ヒドロゲルと「高用量」絹ヒドロゲルは両方とも、それらの初期ベバシズマブ充填量のそれぞれおおよそ４０％および６２％しか放出していなかった。したがって、これら両方の絹ヒドロゲル製剤を用いて３ヶ月より長い間、持続放出を達成することができる。
【０２０８】
「低用量」および「高用量」絹ヒドロゲルに関して、第９０日の時点での硝子体液中のベバシズマブの濃度は、陽性溶液対照についての１ヶ月でのレベル（約２μｇ／ｍＬ）と等価であった。特定の実施形態では、少なくとも３ヶ月以上にわたる持続放出のために絹ヒドロゲルを使用して抗ＶＥＧＦ剤、例えばベバシズマブを封入することができる。ラニビズマブ（ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、アフリベルセプト（ＶＥＧＦ−Ｔｒａｐ、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）およびペガプタニブ（ＭＡＣＵＧＥＮ（登録商標）、Ｅｙｅｔｅｃｈ）を含むがこれらに限定されないベバシズマブ以外の他の抗ＶＥＧＦ治療薬もまた、本明細書に記載する一部の実施形態の絹ヒドロゲル組成物および／または方法に使用することができる。本明細書に記載する一部の実施形態の組成物および／または方法は、抗体、ペプチド、小分子および／またはＲＮＡｉ治療薬への広い利用性を有することができ、それ故、加齢性黄斑変性などの眼疾患または眼障害を超えて広範な疾患の処置に使用することができる。これらの実施形態では、異なる組成パラメーター、例えば、低分子量絹、異なる絹濃度、および／または異なる絹対薬物比を、異なる疾患または障害の異なる治療および／または処置に適する放出動態に調整することができる。
【実施例３】
【０２０９】
例示的代替実施形態
【０２１０】
抗ＶＥＧＦ剤充填絹ヒドロゲル：異なる絹濃度／分子量のゲル、添加剤（例えば、ＰＥＧ、ＢＳＡ、Ｔｗｅｅｎ−２０）を含有するゲル、および凍結乾燥ゲルを含む、ある範囲の抗ＶＥＧＦ剤充填絹ヒドロゲル製剤（例えば、ベバシズマブ充填絹ヒドロゲル製剤）を評定した。絹ゲル濃度は、０．５から４％（ｗ／ｖ）の範囲であり、抗ＶＥＧＦ剤（例えばベバシズマブ）濃度は、０．４から１６．７％（ｗ／ｖ）の範囲であった。異なる絹および薬物溶液（例えば、ベバシズマブ溶液）を様々な濃度および比率で混合した後、音波処理してゲル化を誘導することにより、薬物充填絹ヒドロゲルを生成した。一部の実施形態では、絹ゲル中の抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ）のより低い充填濃度（＜１％）によって、ゲル製剤中の絹の濃度に依存して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで充填薬物の不完全な放出（例えば、４％絹／０．４％ベバシズマブゲルから２３％放出）が生ずる結果となり得た。代替実施形態では、２％絹ゲル中のより高い充填濃度（≧１０％）によって、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでより大きい全放出が生じて、最初の１０日にわたって７０〜８０％が放出され、および継時的により長い持続放出（第３０日から第６０日まで≧約１００ｎｇ／日）が生ずる結果となり得た。９０日に近づくと、放出速度はｎｇ／日レベルに降下した。製剤条件に依存して、初期バースト放出は、３から６３％の範囲であり、おおよそ３０日のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出での放出速度は、０から８０ｎｇ／日の範囲であった。
【０２１１】
抗ＶＥＧＦ剤充填絹マイクロ／ナノ球体：異なる絹マイクロ／ナノ球体を当該技術分野において公知の任意の方法によって生成することができる。１つの実施形態では、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）相分離を用いて、抗ＶＥＧＦ剤充填絹マイクロ／ナノ球体を生成した。簡単に言うと、（ａ）絹水溶液をＰＶＡ水溶液と混合する工程；（ｂ）溶液混合物を乾燥させて、例えばフィルムを形成する工程；（ｃ）乾燥固体状態の絹／ＰＶＡブレンドを水に溶解する工程；および（ｄ）例えば遠心分離により残留ＰＶＡを除去することによりＰＶＡの少なくとも一部分を除去する工程によって、抗ＶＥＧＦ剤充填絹マイクロ／ナノ球体を生成することができる。絹マイクロ球体の生成のためのＰＶＡ相分離方法のさらなる詳細については、例えば国際公開第２０１１／０４１３９５号パンフレットを参照されたい（この内容は参照により本明細書に援用されている）。抗ＶＥＧＦ剤の前充填（球体形成前の絹と抗ＶＥＧＦ剤、例えばベバシズマブの混合）から抗ＶＥＧＦ剤の後充填（形成後の抗ＶＥＧＦ剤、例えばベバシズマブの球体への充填）まで、異なる抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ）充填条件を利用した。例えば、球体を所望の体積の抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ）溶液（約０．１から約２５％）に懸濁させ、その後、直接凍結乾燥させて最終充填とすることによって、球体を後充填した。一部の実施形態では、球体を抗ＶＥＧＦ溶液中で（例えば、約０．５〜約２時間）インキュベートした後、抗ＶＥＧＦ溶液および球体を、例えば遠心濾過ユニットを使用して濃縮し、再び（例えば、約０．５〜約２時間）インキュベートし、記載したとおりこのプロセスを反復した後、凍結乾燥させて最終球体製剤を生じさせることによって、球体を後充填した。前充填法と後充填法を併用して、球体を調製することもできる。単なる例として、例えばストックベバシズマブ（２５ｍｇ／ｍＬ）または濃縮ベバシズマブ（約２００ｍｇ／ｍＬ）のいずれかを使用して、０．０１４ｍｇベバシズマブ／ｍｇ絹から０．５５３ｍｇベバシズマブ／ｍｇ絹の範囲の最終充填量で、ベバシズマブ充填を行った。球体製剤は、一般に、３〜４日以内に薬物の６０〜１００％を放出する、バースト放出動態を呈示した。絹／ＰＶＡブレンド比は、約１／６から約１／２の範囲であり得た。１つの実施形態において、絹／ＰＶＡブレンド比は、典型的に約１／４であり、成分濃度は、典型的に、約５％絹および約５％ＰＶＡであった。絹／ＰＶＡブレンド比を１／２まで増加させると、絹マイクロ球体のあまり均質でないサイズ分布が生ずる結果となり得るが、かかる絹／ＰＶＡブレンド比は、薬物放出動態に対して有意な影響を及ぼさなかった。バースト放出動態を、例えば絹溶液のＰＶＡ溶液に対する比を変えることによって調整することができる。一部の実施形態では、濃縮抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ）を使用して、前、後および前／後充填絹球体を製剤化した。これらの実施形態において、ベバシズマブ充填絹球体は、最初の３日間におおよそ１．４ｍｇ／日／１０ｍｇの球体のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出および１０〜１４日間に（３〜５μｇ／日）の濃度と３〜４週までに全放出を呈示した。抗ＶＥＧＦ剤の製剤条件およ��／または分子サイズに依存して、例えばベバシズマブの初期バースト放出は６〜１００％の範囲であり、放出速度は、おおよそ３０日のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出期間にわたって、約０から約１０００μｇ／日、または約０から約１００μｇ／日、または約０から約４００ｎｇ／日の範囲であった。
【０２１２】
絹ゲル中の抗ＶＥＧＦ剤充填絹マイクロ／ナノ球体：抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ）を充填したＰＶＡナノ球体を絹ヒドロゲルに混入した。絹足場に埋め込まれた抗生物質充填絹マイクロ球体の生成に関するさらなる詳細については、例えば国際公開第２０１０／１４１１３３号パンフレット（この内容は参照により本明細書に援用されている）を参照されたい。ナノ球体製剤は、ベバシズマブが前、後、および前／後充填されたものを含んだが、絹ヒドロゲルは、例えば１または０．５％絹のいずれかであり、それぞれ２％または２．３％抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ）が充填されていた。ベバシズマブ充填マイクロ球体を、絹（例えば、約６〜約８％）およびベバシズマブ（例えば、約２．５％）から、おおよそ１／４（ｗ／ｗ）ベバシズマブ／絹比で調製した後、絹ヒドロゲル（例えば、約１または約０．５％絹）に埋め込んだ。理論により拘束されることを望まないが、一般に、高濃度絹ゲルのほうが（例えば、１％対０．５％絹）全放出率を低減させた（例えば、第３２日にて、約５０〜８０％（１％絹）対約６０〜１００％（０．５％絹））が、例えば、マイクロ球体形成前に抗ＶＥＧＦ剤を絹溶液に混入し、マイクロ球体形成後に形成されたマクロ粒子に抗ＶＥＧＦ剤をさらに充填することによる、より大量の抗ＶＥＧＦ剤（例えば、ベバシズマブ）が充填された絹マイクロ球体（本明細書では「前／後充填球体」と命名する）の添加によって全放出が増進された。一部の実施形態において、ベバシズマブ充填絹ヒドロゲル中のベバシズマブ充填マイクロ球体（例えば、２．５％ベバシズマブと、１／４の比率でＰＶＡとブレンドされた６〜８％絹とから調製された、約５％ベバシズマブ／絹および５％ＰＶＡの成分濃度を有する、おおよそ１／４比（ｗ／ｗ）ベバシズマブ／絹）（例えば、１％絹ヒドロゲル中の約１％ベバシズマブ）は、最初の７日間におおよそ２００〜４５０μｇ／日／１００μＬのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出、１４日までの間に１０〜２０μｇ／日の濃度を呈示し、および１％絹／３％ベバシズマブ製剤（ベバシズマブ充填ゲル＋前／後充填球体）については１ヶ月までに全放出を呈示した。抗ＶＥＧＦ剤の製剤条件および／または分子サイズに依存して、例えばベバシズマブの初期バースト放出は２１〜５０％の範囲であり、放出速度は、おおよそ３０日のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出期間にわたって、約０から約１０００μｇ／日、または約０から約１００μｇ／日、または約０から約１００ｎｇ／日の範囲であった。
【０２１３】
治療薬充填ゲルまたはゲル様粒子：一部の実施形態では、治療薬充填ゲルまたはゲル様粒子を絹ヒドロゲルから生成することができる。絹ヒドロゲルを当該技術分野において公知の任意の方法によって生成することができる。１つの実施形態では、絹ヒドロゲルを調製するために、おおよそ８重量％からおおよそ３０重量％の絹濃度で絹フィブロインの再生水溶液を、治療薬を含有する水溶液または水性分散液と混合して、０．１から１０００の間の絹対治療薬質量比を得た。絹−治療薬混合物を、絹−薬物溶液濃度および溶液体積に依存する音波処理力および継続期間でＢｒａｎｓｏｎ  Ｓｏｎｉｆｉｅｒ（Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ  Ｃｏｒｐ．、コネチカット州ダンベリー）を使用して音波処理した。例えば、Ｘ．，Ｗａｎｇ、Ｊ．，Ｋｌｕｇｅ、Ｇ．，Ｌｅｉｓｋ、Ｄ．Ｌ．，Ｋａｐｌａｎ．Ｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｓｉｌｋ  ｇｅｌａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｃｅｌｌ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ、２００８；２９：１０５４−１０６４および国際公開第２００８／１５０８６１号パンフレットにおける、絹ヒドロゲル調製に関するさらなる詳細を参照されたい。音波処理済み絹−薬物溶液（またはゾル）をヒドロゲル化が完了するまで所望の継続期間（数時間から数週間）３７℃でインキュベートした。
【０２１４】
当該技術分野において公知の任意の方法、例えば切断または破砕を用いて、音波処理済み絹−治療薬ヒドロゲルをマイクロメートルサイズのヒドロゲル粒子、またはマイクロゲルに調製した。１つの実施形態では、所望の孔径を有する目盛付きの一連の金属ふるい（ステンレス鋼不織ワイヤークロス、ＭｃＭａｓｔｅｒ−Ｃａｒｒ、３０μｍから数ミリメートルの範囲の孔径）を使用して、音波処理済み絹−治療薬ヒドロゲルをマイクロメートルサイズのヒドロゲル粒子に調製した。スパチュラを使用して、ヒドロゲルをこの一連の金属ふるいに押し通してプラスチックペトリ皿へ入れ、マイクロゲルを形成した。必要に応じて、ヒドロゲルを、所望のマイクロゲルサイズ分布が得られるまで、より細かいメッシュサイズを有する金属ふるいに繰り返し押し通した。
【０２１５】
本明細書および実施例において特定したすべての特許および他の出版物は、あらゆる目的のために参照により本明細書に明確に援用されている。これらの出版物は、本願の出願日より前のそれらの開示について単に提供したものである。この点に関して、先行発明のためまたは任意の他の理由でかかる開示に先行する権利が本発明者らにはないと認めるものと解釈すべきものは何もない。これらの文書の日付についての言明または内容についての表示はすべて、本出願人に入手可能な情報に基づくものであり、これらの文書の日付または内容の正確さについてのいかなる承認を構成するものではない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図６】
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【図７】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【国際調査報告】
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