(57)【要約】アンドロゲン受容体（ＡＲ）は前立腺分化および前立腺癌（ＰＣ）進行のキードライバー(key driver)であり、アンドロゲン除去は進行ＰＣの処置に必要不可欠なものである。前立腺特異的膜抗原(prostate specific membrane antigen)（ＰＳＭＡ）はＰＣにおける他の重要なターゲットである。これまでの刊行物は、アンドロゲンレベルとＰＳＭＡ発現の間に一貫性のない関連をレポートしている。プロトタイプのヒトＰＣ細胞系のパネルを用いて、この関係を解明する。ＰＳＭＡは、ＡＲ陽性／ＰＳＭＡ陽性腺癌をＡＲ陰性バリアントから区別するバイオマーカーである。ＰＳＭＡはアンドロゲン活性の細胞表面バロメーターであり、免疫組織化学的および／またはインビボイメージングによって容易に同定できる。抗アンドロゲン療法は依然としてＰＣ処置に必要不可欠であると思われるので、それに関連するＰＳＭＡのアップレギュレーションおよびそれの他の特性によって、それはＰＣにおける説得力のあるターゲットとなる。【選択図】図５
2015508903.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者において前立腺癌を処置する方法であって、下記の工程を含む方法：
（ａ）患者の前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）発現をアッセイし；
（ｂ）そのアッセイから、患者のＰＳＭＡ発現が腺癌または非腺癌のいずれの前立腺癌を指示しているかを判定し；そして
（ｃ）患者に、
（ｉ）ＰＳＭＡ発現が腺癌を指示している場合には抗アンドロゲン療法；または
（ｉｉ）ＰＳＭＡ発現が非腺癌を指示している場合には化学療法剤による療法
を施す。
【請求項２】
ＰＳＭＡ発現をイメージングによりアッセイする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
イメージングを、ＰＳＭＡに特異的に結合できるいずれかの作用剤の使用により実施する、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
作用剤が、抗体、抗体誘導体、ＰＳＭＡリガンド、小分子ＰＳＭＡ結合剤、ＰＳＭＡ酵素阻害剤、ＰＳＭＡ結合ペプチド、またはＰＳＭＡ結合アプタマーである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
イメージングを、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）、ＰＥＴ／コンピューター断層撮影（ＣＴ）、ＰＥＴ／磁気共鳴（ＭＲ）、プラナーイメージング、ＳＰＥＣＴイメージング、光学イメージング、または色素イメージングにより行なう、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
非腺癌が、前立腺の小細胞癌、神経内分泌癌、または肉腫を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
患者において前立腺癌を処置する方法であって、下記の工程を含む方法：
（ａ）抗アンドロゲン活性を伴なう新たな前立腺癌療法を施す前に、患者の前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）レベルの第１測定値を求め；
（ｂ）新たな前立腺癌療法を施した後に、患者のＰＳＭＡレベルの第２測定値を求め；そして
（ｉ）第２測定値が第１測定値より大きければその療法を継続し、あるいは
（ｉｉ）第２測定値が第１測定値より小さいかまたは等しければその療法を中断する。
【請求項８】
第１測定値と第２測定値を求める時間間隔が約２〜４週間である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
さらに、新たな前立腺癌療法を施した後に患者のＰＳＭＡレベルの第３測定値を求めることを含み；そして
（ｉ）第３測定値が第１測定値より大きければその療法を継続し、あるいは
（ｉｉ）第３測定値が第１測定値より小さいかまたは等しければその療法を中断する、
請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
患者のＰＳＭＡレベルの第１測定値および／または第２測定値をイメージングによりアッセイする、請求項７〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
イメージングを、ＰＳＭＡに特異的に結合できるいずれかの作用剤の使用により実施する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
作用剤が、抗体、抗体誘導体、ＰＳＭＡリガンド、小分子ＰＳＭＡ結合剤、ＰＳＭＡ酵素阻害剤、ＰＳＭＡ結合ペプチド、またはＰＳＭＡ結合アプタマーである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
イメージングを、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）、ＰＥＴ／コンピューター断層撮影（ＣＴ）、ＰＥＴ／磁気共鳴（ＭＲ）、プラナーイメージング、ＳＰＥＣＴイメージング、光学イメージング、または色素イメージングにより行なう、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
患者において前立腺癌を処置する方法であって、下記の工程を含む方法：
（ａ）非去勢患者の前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）レベルの測定値を求め；そして
（ｂ）測定値が上昇しておらず、正常なアンドロゲン軸機能を指示していれば、前立腺癌ホルモン療法を患者に施し、あるいは測定値が上昇しており、異常なアンドロゲン軸機能を指示していれば、その患者のための別の処置法を探す。
【請求項１５】
非去勢患者のＰＳＭＡレベルの測定をイメージングによりアッセイする、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
イメージングを、ＰＳＭＡに特異的に結合できるいずれかの作用剤の使用により実施する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
作用剤が、抗体、抗体誘導体、ＰＳＭＡリガンド、小分子ＰＳＭＡ結合剤、ＰＳＭＡ酵素阻害剤、ＰＳＭＡ結合ペプチド、またはＰＳＭＡ結合アプタマーである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
イメージングを、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）、ＰＥＴ／コンピューター断層撮影（ＣＴ）、ＰＥＴ／磁気共鳴（ＭＲ）、プラナーイメージング、ＳＰＥＣＴイメージング、光学イメージング、または色素イメージングにより行なう、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
患者において前立腺癌を処置する方法であって、下記の工程を含む方法：
（ａ）患者に抗アンドロゲン前立腺癌療法を施し；そして
（ｂ）抗アンドロゲン前立腺癌療法に続いて患者に抗ＰＳＭＡ前立腺癌療法を施し、それにより、結果として、ＰＳＭＡ密度上昇とそれに対するＰＳＭＡターゲティッド薬剤の作用との相乗効果を生じさせる。
【請求項２０】
抗アンドロゲン前立腺癌療法の実施と抗ＰＳＭＡ前立腺癌療法の実施との時間間隔が約２〜４週間である、請求項１９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
[0001]  アンドロゲン受容体（ＡＲ）は前立腺上皮分化および前立腺癌（ＰＣ）進行のキードライバー(key driver)であり、アンドロゲン除去(androgen ablation)は進行ＰＣの処置に必要不可欠なものである。最近、内分泌およびイントラクライン(intracrine)アンドロゲンの合成およびシグナル伝達を実質的に完全に抑制できる、より有効な抗アンドロゲン薬が臨床効果を証明した(Morris et al., JCO 2010; 28(9): 1496-1501;およびScher et al. Lancet 2010; 375:1437-46)。しかし、多くの患者がこれらの療法剤に対してデノボ抵抗性または獲得抵抗性を発現し、さらに他の療法ターゲットおよび療法剤の開発が依然として求められていることが示唆される。しかも、現在、アンドロゲン作用を測定するために用いられている唯一のバイオマーカーは血清中の前立腺特異的抗原(prostate specific antigen)（ＰＳＡ）である；アンドロゲン軸活性(androgen axis activity)を細胞レベルにおいて、または病変のレベルにおいてインビボで測定する方法はない。
【０００２】
[0002]  前立腺特異的膜抗原(prostate specific membrane antigen)（ＰＳＭＡ）は、ＰＣにおいて関心がもたれる別の分子である。ＰＳＭＡはそれを魅力的な価値あるターゲットにする多数の特徴をもつ：（１）それの発現は前立腺上皮に高特異的である；（２）それはＰＣにおいて有意にアップレギュレートされる(Israeli et al., Can Res 1994; 54:1807-11; Wright et al., Urol Oncol 1995; 1:118-28; Troyer et al., Int J Can 1995; 62: 552-58;およびSokoloff et al., The Prostate 2000; 4: 3150-57)；（３）それは実質的にすべてのＰＣにより発現する(Wright et al., Urol Oncol 1995; 1:118-28; Sweat et al., Urol 1998; 52: 637-40; Bostwick et al., Cancer 1998; 82: 2256-61; Mannweiler et al., Pathol Oncol Res 2009; 15: 167-72; Kusumi et al., Pathol Int 2008; 58: 687-94; Ananias et al., Prostate 2009; 69: 1101-8)；（４）それの発現は腫瘍のグレードおよび臨床攻撃性に応じて直接的に増大する(Wright et al., Urol Oncol 1995; 1:118-28)；ならびに（５）それはインターナリゼーション作用をもつ細胞表面受容体として機能する。これまでの刊行物は、アンドロゲンレベルとＰＳＭＡ発現の関連性を示すことに関して広範囲にわたっている。一方では、Israeli (Israeli et al., Can Res 1994; 54:1807-11)はＬＮＣａＰ細胞系においてアンドロゲンの存在下でのＰＳＭＡダウンレギュレーションを指摘し、Wright (Wright et al., Urology 1996; 48:326-334)は５５％（２０中１１）の原発性ＰＣがより高いレベルのＰＳＭＡをホルモン療法後に発現したことを見出した。他方で、Changは、３か月間のネオアジュバント(neo-adjuvant)アンドロゲン除去処置を受けている患者からの前立腺切除検体をその処置を受けなかった患者のものと対比してＰＳＭＡ発現の増大がないことをレポートした(Chang et al., Cancer 2000; 88: 407-415)。Kusumiは、ホルモン療法によってＰＳＭＡ発現が低下したことをレポートし、矛盾する文献を指摘して、さらなる試験が必要であることを示唆した(Kusumi et al., Pathol Int 2008; 58: 687-94)。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Morris et al., JCO 2010; 28(9): 1496-1501
【非特許文献２】Scher et al. Lancet 2010; 375:1437-46
【非特許文献３】Israeli et al., Can Res 1994; 54:1807-11
【非特許文献４】Wright et al., Urol Oncol 1995; 1:118-28
【非特許文献５】Troyer et al., Int J Can 1995; 62: 552-58
【非特許文献６】Sokoloff et al., The Prostate 2000; 4: 3150-57
【非特許文献７】Sweat et al., Urol 1998; 52: 637-40
【非特許文献８】Bostwick et al., Cancer 1998; 82: 2256-61
【非特許文献９】Mannweiler et al., Pathol Oncol Res 2009; 15: 167-72
【非特許文献１０】Kusumi et al., Pathol Int 2008; 58: 687-94
【非特許文献１１】Ananias et al., Prostate 2009; 69: 1101-8
【非特許文献１２】Wright et al., Urology 1996; 48:326-334
【非特許文献１３】Chang et al., Cancer 2000; 88: 407-415
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
[0003]  アンドロゲン阻害はほぼ確実にいずれかのＰＣ療法の臨床要素であり続けるであろうということに加えて、アンドロゲン活性とＰＳＭＡ発現の間におそらく関係があるというこれまでの所見からみて、この関係を解明することが求められていた。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
[0004]  プロトタイプのヒトＰＣ細胞系のパネルを調べると、ＰＳＭＡ発現はＡＲ陽性の細胞系と常にコタイプであり(co-typed)、それらのうちあるものはＰＳＡをも発現していた。２つのプロトタイプＡＲ陰性細胞系であるＰＣ３およびＤＵ１４５は、ＰＳＭＡ陰性かつＰＳＡ陰性であった。この細胞系のパネルにおいて、ＰＳＭＡはＡＲ発現と緊密に、かつＰＳＡより忠実に連携していた。これは、古典的な前立腺腺癌はＡＲ＋、ＰＳＭＡ＋、ＰＳＡ＋／−の表現型をもち、これに対し三重陰性（ＡＲ−、ＰＳＭＡ−、ＰＳＡ−）表現型は小細胞型または他のバリアントの特徴であることを示唆する(Tai et al., Prostate 2011; 71:1668-1679;およびBeltran et al., Cancer Discovery 2011; 1:487-495)。このインビトロ所見は、約９５％のＰＣ症例によるＰＳＭＡ発現をレポートしている多数の刊行物と一致し(Wright et al., Urol Oncol 1995; 1:118-28.; Sweat et al., Urol 1998; 52: 637-40; Bostwick et al., Cancer 1998; 82: 2256-61; Mannweiler et al., Pathol Oncol Res 2009; 15: 167-72; Kusumi et al., Pathol Int 2008; 58: 687-94;およびAnanias et al., Prostate 2009; 69: 1101-8)、これは既知のとおり小細胞バリアントと比較して腺癌が優勢であることを反映する。したがってＰＳＭＡは、ＡＲ陽性／ＰＳＭＡ陽性腺癌を同定してＡＲ陰性バリアントから区別するために、免疫組織化学、循環腫瘍細胞(circulating tumor cell)（ＣＴＣ）分析、および／またはインビボイメージングによって容易に同定できるバイオマーカーである。
【０００６】
[0005]  ＡＲ陽性系からアンドロゲン排除(androgen withdrawal)すると、すべての場合、生理的濃度のＤＨＴにおけるＰＳＭＡレベルと比較してＰＳＭＡ発現が１０倍も増大することが見出された。同様に、ＡＲ遺伝子のサイレンシングはすべての場合にＰＳＭＡ発現を増大させ、これに対しトランスフェクションによりＡＲ発現を増大させるとＰＳＭＡ発現が低下した。これらの所見は、ＰＳＭＡに対するアンドロゲン排除の作用はＡＲにより仲介され、ＰＳＭＡはＡＲにより調節（抑制）される遺伝子であることを示唆する。リガンドデッド(liganded)ＡＲは、既知のとおりＰＳＭＡ遺伝子の調節配列に結合することにより、ＰＳＭＡ発現を抑制すると思われる(Noss et al., Gene 2002; 285(1-2):247-256; Watt et al., Genomics 2001; 73:243-54;およびEvans et al., PNAS 2011; 108:9578-9582)。ＡＲ活性が病態生理学的または薬理学的な理由のため低下すれば、ＰＳＭＡ遺伝子は抑制解除される。しかしながら、アンドロゲンレベルの変化に関連するＰＳＭＡ発現の指向性変化は異なる細胞系間で等しかったけれども等しい濃度のＤＨＴ下ですら種々の細胞系が広範に異なるレベルのＰＳＭＡを発現した。これは、ＰＳＭＡ発現が純粋にアンドロゲンレベルに基づく一次化学量論的事象ではなく他の要因が関与していることを示唆する。それにもかかわらず、ＰＳＭＡはＡＲ遺伝子調節を調べる際の補助となる有用な細胞バイオマーカーである。静的なＰＳＭＡレベルの読みは、療法介入前と後の読みの比較より情報が少ないであろう。重要なことに、本発明者らの所見は、ピークＰＳＭＡ発現までの時間が完全なホルモン排除後ほぼ２週間であることを指摘する。これより短い評価間隔の採用は、実際のホルモンの影響を過小評価する原因となる可能性がある。療法介入自体の性質がピーク発現までの時間に影響を及ぼす可能性があり、介入の各形態について判定すべきである。
【０００７】
[0006]  ＰＳＡおよびＰＳＭＡは、両方ともアンドロゲン活性のバイオマーカーである；ただし、前者はアンドロゲンによって刺激され、一方、後者は抑制される。さらに、ＰＳＡは血漿または血清中でサンプリングでき、全病変の平均出力を表わすが、ＰＳＭＡ発現の絶対レベルおよび変化は個々の細胞または病変のレベルでのアンドロゲン活性の薬力学的バイオマーカーとして使用できる。たとえば、ＰＳＭＡターゲティッド薬剤を用いる捕獲ＣＴＣのエクスビボ分析またはインビボ患者イメージングは、アンドロゲン活性抑制の指標となるＰＳＭＡアップレギュレーション(Evans et al., PNAS 2011; 108:9578-9582)またはその逆を同定できる。ＰＳＭＡの欠如は、特に低ＰＳＡ／ＰＳＡ非存在を伴なってみられた場合には非腺癌バリアントを示唆し、ホルモン操作から離れてより適切な方法へ療法を方向づけるであろう。８９ジルコニウム−Ｊ５９１、すなわちインビボＰＳＭＡレベルを定量レポートできるＰＳＭＡターゲティッド免疫ＰＥＴ剤を用いる臨床試験は、これらの所見を確証するであろう(Holland et al., J Nucl Med 2010; 51: 1293-1300)。
【０００８】
[0007]  最後に、前立腺腺癌におけるＡＲの偏性発現、ＡＲ発現とＰＳＭＡ発現の緊密な連携、ＰＣにおける抗アンドロゲン療法の中心的役割は、ＰＳＭＡ発現を増大させる抗アンドロゲン療法の効果と合わせて、ＡＲとＰＳＭＡを説得力ある協調ターゲット組合わせにする。このパラダイムをＰＳＭＡターゲティッド抗体療法試験に組み入れることができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】[0008]  図１：細胞系によるＰＳＭＡとＡＲの共発現。８種類の細胞系をウェスタンブロット法によりＰＳＭＡおよびＡＲの発現について評価した。これらの細胞系のうち６種類はＡＲ＋／ＰＳＭＡ＋であった；１細胞系（ＰＣ３）はＡＲ−／ＰＳＭＡ−であった。１細胞系（ＰＣ３−ＰＳＭＡ）はＰＳＭＡをトランスフェクションしたＰＣ３系であり(Stephan, M.T. et al, Nat Med 2007, 13:1440-1449)、ＡＲ−／ＰＳＭＡ＋であった。ＤＵ１４５（示していない）もＡＲ−／ＰＳＭＡ−であった。
【図２Ａ】[0009]  図２：アンドロゲン軸活性はＰＳＭＡ発現を調節する。チャコール−ストリップしたＦＣＳ(charcoal-stripped FCS)（ＣＳ−ＦＣＳ）の作用。ＬＡＰＣ−４  ＰＣ細胞系（野生型ＡＲ）について、ウェスタンブロットは、チャコール−ストリップしたＦＣＳ培地で増殖させた場合にＦＣＳプラス生理的レベルのＤＨＴを補充した培地に対比してＰＳＭＡが５．７倍アップレギュレートされたことを示す（図２Ａ）。同様に、ＬＮＣａＰおよびＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ（両方とも変異ＡＲをもつ）細胞系の増殖培地のチャコール−ストリッピングは７〜８倍のＰＳＭＡアップレギュレーションをもたらし、それは２週目にピークに達した（図２Ｂおよび２Ｃ）。図２Ｂは、ＰＳＭＡアップレギュレーションのレベルが２週目に対比して１週目では最小であることを示す。培地のステロイド濃度に対するＰＳＭＡ発現の用量応答を図２Ｄに示す。ＦＡＣＳ平均蛍光強度(mean fluorescence intensity)（ＭＦＩ）により測定して、ＰＳＭＡ発現は増殖培地中のステロイド濃度の低下に対してほぼ直線的に増大する。
【図２Ｂ】[0009]  図２：アンドロゲン軸活性はＰＳＭＡ発現を調節する。チャコール−ストリップしたＦＣＳ(charcoal-stripped FCS)（ＣＳ−ＦＣＳ）の作用。ＬＡＰＣ−４  ＰＣ細胞系（野生型ＡＲ）について、ウェスタンブロットは、チャコール−ストリップしたＦＣＳ培地で増殖させた場合にＦＣＳプラス生理的レベルのＤＨＴを補充した培地に対比してＰＳＭＡが５．７倍アップレギュレートされたことを示す（図２Ａ）。同様に、ＬＮＣａＰおよびＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ（両方とも変異ＡＲをもつ）細胞系の増殖培地のチャコール−ストリッピングは７〜８倍のＰＳＭＡアップレギュレーションをもたらし、それは２週目にピークに達した（図２Ｂおよび２Ｃ）。図２Ｂは、ＰＳＭＡアップレギュレーションのレベルが２週目に対比して１週目では最小であることを示す。培地のステロイド濃度に対するＰＳＭＡ発現の用量応答を図２Ｄに示す。ＦＡＣＳ平均蛍光強度(mean fluorescence intensity)（ＭＦＩ）により測定して、ＰＳＭＡ発現は増殖培地中のステロイド濃度の低下に対してほぼ直線的に増大する。
【図２Ｃ】[0009]  図２：アンドロゲン軸活性はＰＳＭＡ発現を調節する。チャコール−ストリップしたＦＣＳ(charcoal-stripped FCS)（ＣＳ−ＦＣＳ）の作用。ＬＡＰＣ−４  ＰＣ細胞系（野生型ＡＲ）について、ウェスタンブロットは、チャコール−ストリップしたＦＣＳ培地で増殖させた場合にＦＣＳプラス生理的レベルのＤＨＴを補充した培地に対比してＰＳＭＡが５．７倍アップレギュレートされたことを示す（図２Ａ）。同様に、ＬＮＣａＰおよびＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ（両方とも変異ＡＲをもつ）細胞系の増殖培地のチャコール−ストリッピングは７〜８倍のＰＳＭＡアップレギュレーションをもたらし、それは２週目にピークに達した（図２Ｂおよび２Ｃ）。図２Ｂは、ＰＳＭＡアップレギュレーションのレベルが２週目に対比して１週目では最小であることを示す。培地のステロイド濃度に対するＰＳＭＡ発現の用量応答を図２Ｄに示す。ＦＡＣＳ平均蛍光強度(mean fluorescence intensity)（ＭＦＩ）により測定して、ＰＳＭＡ発現は増殖培地中のステロイド濃度の低下に対してほぼ直線的に増大する。
【図２Ｄ】[0009]  図２：アンドロゲン軸活性はＰＳＭＡ発現を調節する。チャコール−ストリップしたＦＣＳ(charcoal-stripped FCS)（ＣＳ−ＦＣＳ）の作用。ＬＡＰＣ−４  ＰＣ細胞系（野生型ＡＲ）について、ウェスタンブロットは、チャコール−ストリップしたＦＣＳ培地で増殖させた場合にＦＣＳプラス生理的レベルのＤＨＴを補充した培地に対比してＰＳＭＡが５．７倍アップレギュレートされたことを示す（図２Ａ）。同様に、ＬＮＣａＰおよびＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ（両方とも変異ＡＲをもつ）細胞系の増殖培地のチャコール−ストリッピングは７〜８倍のＰＳＭＡアップレギュレーションをもたらし、それは２週目にピークに達した（図２Ｂおよび２Ｃ）。図２Ｂは、ＰＳＭＡアップレギュレーションのレベルが２週目に対比して１週目では最小であることを示す。培地のステロイド濃度に対するＰＳＭＡ発現の用量応答を図２Ｄに示す。ＦＡＣＳ平均蛍光強度(mean fluorescence intensity)（ＭＦＩ）により測定して、ＰＳＭＡ発現は増殖培地中のステロイド濃度の低下に対してほぼ直線的に増大する。
【図３Ａ】[0010]  図３および４：ＰＳＭＡ発現はＡＲレベルと逆相関する。ＡＲを過剰発現させるためにＡＲ遺伝子をＬＮＣａＰにトランスフェクションすると（すなわち、ＬＮＣａＰ−ＡＲ）、ＰＳＭＡの約８０％ダウンレギュレーションが生じる（図３Ａ）。逆に、ＡＲをｓｉＲＮＡでサイレンシングすると、ＰＳＭＡの用量依存性アップレギュレーションが４種類すべての被験細胞系（ＬＮＣａＰ、ＣＷＲ２２Ｒｖ１、ＭＤＡ−Ｐｃａ−２ｂおよびＬＡＰＣ−４）において生じる（図３Ｂおよび３Ｃ、ならびに図４Ａ〜４Ｃ）。非処理（対照）と非ターゲティッドｓｉＲＮＡは重ね合わせることができた。ＡＲ  ｓｉＲＮＡは、効果的なＡＲのダウンレギュレーションおよびＰＳＭＡのアップレギュレーションをすべての細胞系において示した：ＬＮＣａＰ（図４Ａ）、ＭＤＡ−ＰＣａ−２Ｂ（図４Ｂ）およびＬＡＰＣ−４（図４Ｃ）。ＡＲをサイレンシングすると、予想どおりＰＳＡ分泌の有意の低下を生じた（データを示していない）。
【図３Ｂ】[0010]  図３および４：ＰＳＭＡ発現はＡＲレベルと逆相関する。ＡＲを過剰発現させるためにＡＲ遺伝子をＬＮＣａＰにトランスフェクションすると（すなわち、ＬＮＣａＰ−ＡＲ）、ＰＳＭＡの約８０％ダウンレギュレーションが生じる（図３Ａ）。逆に、ＡＲをｓｉＲＮＡでサイレンシングすると、ＰＳＭＡの用量依存性アップレギュレーションが４種類すべての被験細胞系（ＬＮＣａＰ、ＣＷＲ２２Ｒｖ１、ＭＤＡ−Ｐｃａ−２ｂおよびＬＡＰＣ−４）において生じる（図３Ｂおよび３Ｃ、ならびに図４Ａ〜４Ｃ）。非処理（対照）と非ターゲティッドｓｉＲＮＡは重ね合わせることができた。ＡＲ  ｓｉＲＮＡは、効果的なＡＲのダウンレギュレーションおよびＰＳＭＡのアップレギュレーションをすべての細胞系において示した：ＬＮＣａＰ（図４Ａ）、ＭＤＡ−ＰＣａ−２Ｂ（図４Ｂ）およびＬＡＰＣ−４（図４Ｃ）。ＡＲをサイレンシングすると、予想どおりＰＳＡ分泌の有意の低下を生じた（データを示していない）。
【図３Ｃ】[0010]  図３および４：ＰＳＭＡ発現はＡＲレベルと逆相関する。ＡＲを過剰発現させるためにＡＲ遺伝子をＬＮＣａＰにトランスフェクションすると（すなわち、ＬＮＣａＰ−ＡＲ）、ＰＳＭＡの約８０％ダウンレギュレーションが生じる（図３Ａ）。逆に、ＡＲをｓｉＲＮＡでサイレンシングすると、ＰＳＭＡの用量依存性アップレギュレーションが４種類すべての被験細胞系（ＬＮＣａＰ、ＣＷＲ２２Ｒｖ１、ＭＤＡ−Ｐｃａ−２ｂおよびＬＡＰＣ−４）において生じる（図３Ｂおよび３Ｃ、ならびに図４Ａ〜４Ｃ）。非処理（対照）と非ターゲティッドｓｉＲＮＡは重ね合わせることができた。ＡＲ  ｓｉＲＮＡは、効果的なＡＲのダウンレギュレーションおよびＰＳＭＡのアップレギュレーションをすべての細胞系において示した：ＬＮＣａＰ（図４Ａ）、ＭＤＡ−ＰＣａ−２Ｂ（図４Ｂ）およびＬＡＰＣ−４（図４Ｃ）。ＡＲをサイレンシングすると、予想どおりＰＳＡ分泌の有意の低下を生じた（データを示していない）。
【図４】[0010]  図３および４：ＰＳＭＡ発現はＡＲレベルと逆相関する。ＡＲを過剰発現させるためにＡＲ遺伝子をＬＮＣａＰにトランスフェクションすると（すなわち、ＬＮＣａＰ−ＡＲ）、ＰＳＭＡの約８０％ダウンレギュレーションが生じる（図３Ａ）。逆に、ＡＲをｓｉＲＮＡでサイレンシングすると、ＰＳＭＡの用量依存性アップレギュレーションが４種類すべての被験細胞系（ＬＮＣａＰ、ＣＷＲ２２Ｒｖ１、ＭＤＡ−Ｐｃａ−２ｂおよびＬＡＰＣ−４）において生じる（図３Ｂおよび３Ｃ、ならびに図４Ａ〜４Ｃ）。非処理（対照）と非ターゲティッドｓｉＲＮＡは重ね合わせることができた。ＡＲ  ｓｉＲＮＡは、効果的なＡＲのダウンレギュレーションおよびＰＳＭＡのアップレギュレーションをすべての細胞系において示した：ＬＮＣａＰ（図４Ａ）、ＭＤＡ−ＰＣａ−２Ｂ（図４Ｂ）およびＬＡＰＣ−４（図４Ｃ）。ＡＲをサイレンシングすると、予想どおりＰＳＡ分泌の有意の低下を生じた（データを示していない）。
【図５】[0011]  図５：去勢前と後のＰＳＭＡ発現の免疫組織化学的評価。無傷の富アンドロゲン(androgen-replete)ｎｕ／ｎｕマウスにおいて増殖しているＣＷＲ２２Ｒｖ１異種移植体は、低いＰＳＭＡ発現レベルを示し（図５ａ）、これはインビトロ所見（参照：図１，列５）と一致した。外科的去勢後に、ＰＳＭＡ発現レベルはインビトロ所見と一致して観察１、２および４週目に徐々に上昇した（それぞれ、図５ｂ〜ｄ）。同様に、免疫組織化学により、５−α  レダクターゼ療法で処置した患者の良性前立腺切除片において非処置患者と対比してＰＳＭＡ発現の有意の増大が明らかになる（データを示していない）。
【００１０】
実施例
８種類の細胞系によるＰＳＭＡおよびＡＲの発現
[0012]  ウェスタンブロット法のために、等量の細胞溶解物を各列に装填した。ＰＳＭＡをモノクローナル抗体（ｍＡｂ）Ｊ５９１により検出した；ＡＲをｍＡｂ  抗ＡＲ（ＡＲ４４１）により検出した。ＧＡＰＤＨを装填対照として用いた。６種類の細胞系（ＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ、ＬＮＣａＰ、ＬＮＣａＰ−ＡＲ、ＶＣＡＰ、ＣＷＲ２２Ｒｖ１およびＬＡＰＣ−４）はＡＲとＰＳＭＡの両方を発現した。ＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂは、この曝露でかろうじて見えるだけの比較的低いレベルのＡＲを発現する。ＣＷＲ２２Ｒｖ１は、エキソン３の重複のため、それよりわずかに大きいＡＲタンパク質（１１０ＫＤの代わりに１１４ＫＤ）を発現する。ＰＣ３、および他の細胞系ＤＵ１４５（別のゲル，示していない）はＡＲ−／ＰＳＭＡ−であった。ＰＣ３−ＰＳＭＡは、ＰＳＭＡを安定トランスフェクションしたＰＣ３系である。
【００１１】
[0013]  ヒト前立腺癌細胞系ＬＮＣａＰ、ＣＷＲ２２Ｒｖ１、ＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂおよびＬＡＰＣ−４をAmerican Type Culture Collection (バージニア州マナッサス)から購入した。ＬＮＣａＰ／ＡＲおよびＰＣ３−ＰＳＭＡは、それぞれCharles SawyersおよびMichel Sadelain（ＭＳＫＣＣ，ニューヨーク）からの贈与であった。ＬＮＣａＰ、ＬＮＣａＰ／ＡＲ、およびＣＷＲ２２Ｒｖ１細胞を、下記を補充したＲＰＭＩ１６４０培地中に維持した：２ｍＭのＬ−グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，カリフォルニア州カールズバッド）、１％のペニシリン−ストレプトマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、および１０％の熱不活性化したウシ胎仔血清（ＦＣＳ）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）。ＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ細胞を、下記を含有するＦ１２Ｋ培地で増殖させた：２ｍＭのＬ−グルタミン、１％のペニシリン−ストレプトマイシン、２０％の熱不活性化ＦＣＳ、２５ｎｇ／ｍＬのコレラ毒素（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，ミズーリ州セントルイス）、１０ｎｇ／ｍＬの上皮増殖因子（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，カリフォルニア州サンノゼ）、５μＭのホスホエタノールアミン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、１００ｐｇ／ｍＬのヒドロコルチゾン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、４５ｎＭの亜セレン酸（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、および５μｇ／ｍＬのインスリン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）。ＬＡＰＣ−４細胞を、下記を補充したＩＭＤＭ培地中に維持した：２ｍＭのＬ−グルタミン、１％のペニシリン−ストレプトマイシン、および５％の熱不活性化ＦＣＳ。すべての細胞系を３７℃で５％  ＣＯ２雰囲気に保持した。５α−ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）をＷａｋｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ＵＳＡ（バージニア州リッチモンド）から購入した。
【００１２】
[0014]  ｍＡｂ  抗ＰＳＭＡ  Ｊ５９１を作製した(Liu et al., Cancer Res 1997; 57: 3629-34)。他の抗体（Ａｂ）試薬には下記のものが含まれていた：ｍＡｂ  抗ＡＲ（ＡＲ４４１）、ウサギ抗ヒトＡＲおよびヤギ  ポリクローナル抗ＧＡＰＤＨ（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，カリフォルニア州サンタクルーズ）、ならびにｍＡｂ  抗ＰＳＡ（Ｄａｋｏ，デンマーク、グロストルプ）。マウスｍＡｂ  抗ヒト  ベータ−アクチンをＴｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（イリノイ州ロックフォード）から購入した。
【００１３】
[0015]  ウェスタンブロット法を実施するために、１ｍＭのフッ化フェニルメチルスルホニル（ＥＭＤ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，ニュージャージー州ギブスタウン）を含有するＣｅｌｌ  Ｌｙｓｉｓ  Ｂｕｆｆｅｒ（細胞溶解緩衝液）（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，マサチュセッツ州ダンバース）で細胞を溶解した。等量のタンパク質を各ウェル内で１０％  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌゲル（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，カリフォルニア州ハーキュリーズ）上に付与した。タンパク質をＩｍｍｏｂｉｌｏｎ−Ｐメンブレン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，マサチュセッツ州ビレリカ）上へ転写し、その後、フィルターを下記の試薬で探査した：ネズミ抗ＰＳＭＡ  ｍＡｂ  Ｊ５９１、ネズミｍＡｂ  抗ＡＲ（ＡＲ４４１）、ウサギ抗ヒトＡＲ、ネズミｍＡｂ  抗ヒト  ベータ−アクチン、および／またはヤギ  ポリクローナル抗ＧＡＰＤＨ。定量ウェスタンブロット法のために、Ｌｉ−ｃｏｒ  Ｏｄｙｓｓｅｙ赤外イメージングシステム（ネブラスカ州リンカーン）を用いた。このシステムで、２つの異なる種（マウスおよびウサギ）に由来する２種類の異なる抗体を用い、続いてＩＲＤｙｅ標識した２種類の二次抗体で検出することにより、同じ分子量の２種類の異なるタンパク質（たとえば、ＰＳＭＡおよびＡＲ）を同じブロット上で同時に検出し、定量することができる。抗ベータ−アクチンを装填基準として用いる。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ−ＦＬ  ＰＶＤＦメンブレンをLicorの推奨に従って用いた。ＭｕＪ５９１  抗ＰＳＭＡ  １ｕｇ／ｍｌ、ウサギ抗ヒトＡＲ  １：５００、およびマウス  抗ヒト  ベータ−アクチン１：１０，０００を粉乳／ＰＢＳＴ中で混和し、メンブレンと同時に１時間インキュベートした。洗浄後、ＩＲＤｙｅ  ８００ＣＷ−ヤギ抗マウス二次抗体（１：１０，０００）およびＩＲＤｙｅ  ６８０ＬＴ−ヤギ抗ウサギ二次抗体（１：２０，０００）を５％粉乳／ＰＢＳＴ中で混和し、メンブレンと同時にインキュベートした。洗浄後、メンブレンをスキャンし、バンドをＯｄｙｓｓｅｙ赤外イメージングシステムで定量した。
【００１４】
アンドロゲン排除はＰＳＭＡ発現をアップレギュレートする
[0016]  野生型ＡＲを発現するＬＡＰＣ−４を生理的ＤＨＴレベル（１０〜２０ｎＭ）で増殖させたものは、低レベルのＰＳＭＡを発現する（列１および２）（図２Ａ）。ごく低いレベルのアンドロゲンを含有する標準的５％  ＦＣＳ中で増殖させると、ＰＳＭＡ発現は３．６倍増大する（列３）。ＦＣＳからすべてのステロイドをチャコール−ストリップすると、ＰＳＭＡレベルはさらに、生理的ＤＨＴレベルでみられたものの５．７倍上昇する（列４）。ＦＡＣＳ分析は、ＬＮＣａＰおよびＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ（両方とも変異ＡＲを含む）が標準ＦＣＳ補充培地中で上昇したベースラインＰＳＭＡレベルを伴なうことを証明する（図２Ｂおよび２Ｃ）。チャコール−ストリップしたＦＣＳの使用は、さらにＰＳＭＡを７〜９倍アップレギュレートし、２週目にピークに達する。これより少ない３週目の細胞数は、ステロイド欠乏(starvation)による細胞損失を反映する。種々のアンドロゲンレベルで２週間増殖させたＬＮＣａＰ細胞によるＰＳＭＡ発現の用量応答性（図２Ｄ）。漸進的なステロイド剥奪(deprivation)は漸進的に５．４倍のＰＳＭＡ増加を生じる。
【００１５】
ＰＳＭＡ発現レベルはＡＲレベルに逆相関する
[0017]  ＡＲをＬＮＣａＰにトランスフェクションすると（ＬＮＣａＰ−ＡＲ）、ＦＡＣＳにより測定したＰＳＭＡ発現が約８０％ダウンレギュレートされる（図３Ａ）。逆に、ＡＲ−ｓｉＲＮＡ処理は、ＬＮＣａＰおよびＣＷＲ２２Ｒｖ１において４８時間目に（図３Ｂ）、ＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ細胞およびＬＡＰＣ−４細胞において４日目に（図３Ｃ）、ＡＲをサイレンシングし、ＰＳＭＡ発現をアップレギュレートする。
【００１６】
ＡＲのサイレンシングはＰＳＭＡをアップレギュレートする
[0018]  ＡＲ−ｓｉＲＮＡ（青色の線）、非ターゲティッドｓｉＲＮＡ（赤色の線）で処理したＬＮＣａＰ細胞（図４Ａ）、ＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂ細胞（図４Ｂ）、およびＬＡＰＣ−４細胞（図４Ｃ）、ならびに非処理対照（緑色の線）のＦＡＣＳ分析を実施した。灰色のヒストグラムは二次抗体単独の陰性対照である。すべての場合、ＡＲ−ｓｉＲＮＡはＡＲをサイレンシングし、ＰＳＭＡをアップレギュレートした；非ターゲティッドｓｉＲＮＡ対照はＡＲまたはＰＳＭＡのいずれの発現にも影響を与えなかった。
【００１７】
[0019]  ＡＲに特異的な低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）デュプレックスおよび非ターゲティングｓｉＲＮＡ（ＮＴ−ｓｉＲＮＡ）をＤｈａｒｍａｃｏｎ（コロラド州ラファイエット）から購入した。ＡＲ特異的ｓｉＲＮＡ（ＡＲ−ｓｉＲＮＡ）配列は、ヒトＡＲ部位５’−ＧＡＣＵＣＡＧＣＵＧＣＣＣＣＡＵＣＣＡ−３’に対応する。ＮＴ−ｓｉＲＮＡ（５’−ＣＣＵＡＣＧＣＣＡＣＣＡＡＵＵＵＣＧＵ−３’）をｓｉＲＮＡ実験の対照として用いた。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ＲＮＡｉＭＡＸ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を製造業者の指示に従って用いて種々の用量のＮＴ−ｓｉＲＮＡまたはＡＲ−ｓｉＲＮＡでトランスフェクションした懸濁細胞を一夜インキュベートした後、培地を新鮮な培地と交換し、指示した時間、細胞をインキュベートした。
【００１８】
[0020]  ＬＮＣａＰ、ＭＤＡ−ＰＣａ−２ｂおよびＬＡＰＣ−４細胞を６ウェルプレートに播種し（１×１０5／ウェル）、一夜増殖させ、トリプシン処理後に採集した。直ちに、２％パラホルムアルデヒドを含有するＰＢＳで３０分間固定した後、細胞をネズミ抗ＡＲまたは抗ＰＳＭＡ  ｍＡｂと共に、１％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）および０．１％のサポニン（Ｓｉｇｍａ）を含有するリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）中で１時間インキュベートし、次いで細胞をフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）コンジュゲートしたヒツジ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ，Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，ペンシルベニア州ウェストグローブ）抗体で１時間処理した。１％のＢＳＡ＋０．１％のサポニンを含有するＰＢＳで洗浄した後、細胞を蛍光活性化セルソーティング分析（ＦＡＣＳ）（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，ニュージュージー州フランクリンレイクス）した。
【００１９】
去勢前と後のＰＳＭＡ発現の免疫組織化学的評価
[0021]  去勢前と後のＰＳＭＡ発現の免疫組織化学的評価。去勢前のＣＷＲ２２Ｒｖ１異種移植体のベースラインＰＳＭＡ発現（図５Ａ）。去勢後１週目（図５Ｂ）、２週目（図５Ｃ）および４週目（図５Ｄ）のＰＳＭＡ発現。
【００２０】
[0022]  ＣＷＲ２２Ｒｖ１異種移植体をヌードマウスから摘出した。腫瘍を液体窒素中で予冷し、ＯＣＴコンパウンド（Ｓａｋｕｒａ  Ｆｉｎｅｔｅｋ  Ｕ．Ｓ．Ａ．，  ｉｎｃ．，カリフォルニア州トランス）中でドライアイス上において瞬間凍結し、−８０℃に貯蔵した。クリオスタット組織切片を冷アセトン（４℃）中で１０分間固定した。切片をＰＢＳ中で洗浄した。ペルオキシダーゼブロック剤（０．０３％  Ｈ２Ｏ２）を５分間インキュベートした。ＰＢＳ中で洗浄した後、ヒト化Ｊ５９１（１０ｕｇ／ｍｌ）を切片上で室温において１時間インキュベートした。抗体結合を、ウサギ  抗ヒトＩｇ−ペルオキシダーゼ（Ｄａｋｏ，カリフォルニア州カーピンテリア）二次抗体および色素原としてのジアミノベンジジン（ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏ．，ミズーリ州セントルイス）を用いて検出した。切片を１０％ヘマトキシリンで対比染色した。希釈剤（１％ウシ血清アルブミン）を陰性対照として用いた。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
[0023]  この技術の１観点は、患者において前立腺癌を処置する方法であって、下記の工程を含む方法である：（ａ）患者の前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）発現をアッセイし；（ｂ）そのアッセイから、患者のＰＳＭＡ発現が腺癌または非腺癌のいずれの前立腺癌を指示しているかを判定し；そして（ｃ）患者に、（ｉ）ＰＳＭＡ発現が腺癌を指示している場合には抗アンドロゲン療法；または（ｉｉ）ＰＳＭＡ発現が非腺癌を指示している場合には化学療法剤による療法(chemotherapeutic therapy)を施す。関連する観点において、ＰＳＭＡ発現をイメージングによりアッセイする。他の観点において、イメージングを、ＰＳＭＡに特異的に結合できるいずれかの作用剤の使用により実施する。関連する観点において、作用剤は、抗体、抗体誘導体、ＰＳＭＡリガンド、小分子ＰＳＭＡ結合剤、ＰＳＭＡ酵素阻害剤、ＰＳＭＡ結合ペプチド、またはＰＳＭＡ結合アプタマーである。この技術のさらに他の観点において、イメージングを、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）、ＰＥＴ／コンピューター断層撮影（ＣＴ）、ＰＥＴ／磁気共鳴（ＭＲ）、プラナーイメージング、ＳＰＥＣＴイメージング、光学イメージング、または色素イメージングにより行なう。この技術の１観点において、非腺癌は、前立腺の小細胞癌、神経内分泌癌、または肉腫を含む。
【００２２】
[0024]  この技術の他の観点は、患者において前立腺癌を処置する方法であって、下記の工程を含む方法である：（ａ）抗アンドロゲン活性を伴なう新たな前立腺癌療法を施す前に、患者の前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）レベルの第１測定値を求め；（ｂ）新たな前立腺癌療法を施した後に、患者のＰＳＭＡレベルの第２測定値を求め；そして（ｉ）第２測定値が第１測定値より大きければその療法を継続し、あるいは（ｉｉ）第２測定値が第１測定値より小さいかまたは等しければその療法を中断する。関連する観点において、第１測定値と第２測定値を求める時間間隔は約２〜４週間である。他の観点において、本方法はさらに、新たな前立腺癌療法を施した後に患者のＰＳＭＡレベルの第３測定値を求めることを含み；そして（ｉ）第３測定値が第１測定値より大きければその療法を継続し、あるいは（ｉｉ）第３測定値が第１測定値より小さいかまたは等しければその療法を中断する。この技術の関連する観点において、患者のＰＳＭＡレベルの第１測定値および／または第２測定値をイメージングによりアッセイする。１観点において、イメージングを、ＰＳＭＡに特異的に結合できるいずれかの作用剤の使用により実施する。他の観点において、作用剤は、抗体、抗体誘導体、ＰＳＭＡリガンド、小分子ＰＳＭＡ結合剤、ＰＳＭＡ酵素阻害剤、ＰＳＭＡ結合ペプチド、またはＰＳＭＡ結合アプタマーである。この技術の１観点において、イメージングを、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）、ＰＥＴ／コンピューター断層撮影（ＣＴ）、ＰＥＴ／磁気共鳴（ＭＲ）、プラナーイメージング、ＳＰＥＣＴイメージング、光学イメージング、または色素イメージングにより行なう。
【００２３】
[0025]  この技術のさらに他の観点は、患者において前立腺癌を処置する方法であって、下記の工程を含む方法である：（ａ）非去勢患者の前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）レベルの測定値を求め；そして（ｂ）測定値が上昇しておらず、正常なアンドロゲン軸(axis)機能を指示していれば、前立腺癌ホルモン療法を患者に施し、あるいは測定値が上昇しており、異常なアンドロゲン軸機能を指示していれば、その患者のための別の処置法を探す。１観点において、非去勢患者のＰＳＭＡレベルの測定をイメージングによりアッセイする。他の観点において、イメージングを、ＰＳＭＡに特異的に結合できるいずれかの作用剤の使用により実施する。さらに他の観点において、作用剤は、抗体、抗体誘導体、ＰＳＭＡリガンド、小分子ＰＳＭＡ結合剤、ＰＳＭＡ酵素阻害剤、ＰＳＭＡ結合ペプチド、またはＰＳＭＡ結合アプタマーである。１観点において、イメージングを、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）、ＰＥＴ／コンピューター断層撮影（ＣＴ）、ＰＥＴ／磁気共鳴（ＭＲ）、プラナーイメージング、ＳＰＥＣＴイメージング、光学イメージング、または色素イメージングにより行なう。
【００２４】
[0026]  この技術の他の１観点は、患者において前立腺癌を処置する方法であって、下記の工程を含む方法である：（ａ）患者に抗アンドロゲン前立腺癌療法を施し；そして（ｂ）抗アンドロゲン前立腺癌療法に続いて患者に抗ＰＳＭＡ前立腺癌療法を施し、それにより、結果として、ＰＳＭＡ密度上昇とそれに対するＰＳＭＡターゲティッド薬剤の作用との相乗効果を生じさせる。関連する観点において、抗アンドロゲン前立腺癌療法の実施と抗ＰＳＭＡ前立腺癌療法の実施との時間間隔が約２〜４週間である。
【００２５】
[0027]  本発明を特定の態様を参照して開示したが、特許請求の範囲に定めるように、本発明の領域および範囲から逸脱することなく記載した態様に対する多数の改変、変更および変化が可能である。したがって、本発明は記載した態様に限定されるのではなく、特許請求の範囲の言語により定められる全範囲およびその均等物を含むものとする。
【図１】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図５】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図４】
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【国際調査報告】
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