(57)【要約】本発明は、式(Ia)：2015522604.tif 000027の新規なジヒドロピリミジン-2(1H)-オン類およびジヒドロピリミジン-2(1H)-チオン類に関する。本発明は、医薬として、特にヨウ化ナトリウム共輸送体(NIS)の阻害剤ならびにNIS-発現細胞へのヨウ素の輸送および／または蓄積の減衰剤としての、該化合物の使用にも関する。本発明は、活性成分として式(Ia)の少なくとも一つの化合物を含む医薬組成物にも関する。【選択図】なし
2015522604.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式(Ia)：
【化１】
2015522604.tif 000026
（式中、
・X = OまたはS、
・Y = OまたはNH、
・R1は、任意に置換されたC1-C6シクロアルキル、フラン、チオフェン、ピロール、ピ
ラゾール、オキサジアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソ
チアゾール、および少なくとも一つのハロゲンで置換されたフェニルから選択され、
・R2、R3、R4およびR5は、同一または異なって、水素、任意に置換されたC1-C20の直鎖
状または分枝鎖状のアルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキ
ル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロア
リールアルキル基から選択される）
の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
Y = Oである、請求項1に記載の一般式(Ia)の化合物。
【請求項３】
R1がフランである、請求項1または請求項2に記載の一般式(Ia)の化合物。
【請求項４】
R2がC1-C6の直鎖状または分枝鎖状のアルキル、フェニル、-CH2-O-フェニル、ベンジル、チオフェンおよび-CH2-チオフェンから選択される、請求項1〜3のいずれかに記載の一般式(Ia)の化合物。
【請求項５】
R3が水素およびC1-C6の直鎖状または分枝鎖状のアルキルから選択され、好ましくはR3が水素またはメチル基である、請求項1〜4のいずれかに記載の一般式(Ia)の化合物。
【請求項６】
R4が水素およびC1-C6の直鎖状または分枝鎖状のアルキルから選択され、好ましくはR4が水素またはメチル基である、請求項1〜5のいずれかに記載の一般式(Ia)の化合物。
【請求項７】
R5が、ハロゲン、メチル、ヒドロキシ、シアノ、ニトロおよびC1-C7アルコキシ基から独立して選択される1以上の基で任意に置換されたベンジル基である、請求項1〜6のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
R5がメトキシベンジル基またはピペロニル基のようなベンゾジオキソリルメチル基である、請求項7に記載の一般式(Ia)の化合物。
【請求項９】
医薬として使用するための、請求項1〜8のいずれかに記載の一般式(Ia)の化合物。
【請求項１０】
ヨウ化ナトリウム共輸送体(NIS)の阻害のための、請求項9に記載の使用のための一般式(Ia)の化合物。
【請求項１１】
NIS発現細胞中へのヨウ素の輸送および／または蓄積を低減するための、請求項9に記載の使用のための一般式(Ia)の化合物。
【請求項１２】
機能的画像化によるNIS病理のインビボ診断のための、請求項9に記載の使用のための一般式(Ia)の化合物。
【請求項１３】
放射性ヨウ素種に曝露後の放射性ヨウ化物の除染のための、請求項9に記載の使用のための一般式(Ia)の化合物。
【請求項１４】
甲状腺障害、特にヨウ素の過負荷によって引き起こされる甲状腺機能亢進症、甲状腺中毒症、甲状腺炎および中毒性結節性甲状腺腫の予防および／または治療のための、請求項9に記載の使用のための一般式(Ia)の化合物。
【請求項１５】
癌、特に甲状腺癌および乳癌の予防および／または治療のための、請求項9に記載の使用のための一般式(Ia)の化合物。
【請求項１６】
自己免疫疾患、特に橋本病およびバセドー-グレーブス病の予防および／または治療のための、請求項9に記載の使用のための一般式(Ia)の化合物。
【請求項１７】
活性成分として請求項1〜8のいずれかで定義された式(Ia)の少なくとも一つの化合物、および少なくとも一つの医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式(Ia)の新規なジヒドロピリミジン-2(1H)-オン類およびジヒドロピリミジン-2(1H)-チオン類、ならびに医薬として、特にヨウ化ナトリウム共輸送体(symporter)(NIS)の阻害剤ならびにNIS-発現細胞へのヨウ素の輸送および／または蓄積の減衰剤としてのこれらの化合物の使用に関する。
本発明は、活性成分として式(Ia)の少なくとも一つの化合物を含む医薬組成物にも関する。
【背景技術】
【０００２】
血液から甲状腺へのヨウ化物の移行は、代謝調節および中枢神経系発達のような脊椎動物における多くの生命機序に重要である甲状腺ホルモンT3およびT4の生合成に必須の工程である(S. P. Porterfieldら, Endocr. Rev., 1993, 14, 94-106)。
この輸送は、甲状腺細胞の基底外側にある内在性膜糖タンパク質のヨウ化ナトリウム共輸送体(NIS)によって媒介される。NISは、甲状腺ホルモン生合成の第１工程である、活性なI-を甲状腺濾胞細胞へ輸送することを媒介する内在性細胞膜糖蛋白質である。
血流から甲状腺コロイドへのNIS媒介の甲状腺I-輸送は、側底膜へのNISの選択的標的によって可能となるベクトル工程である。
【０００３】
NISの分子的特徴は、1996年にラットおよびヒトの型をクローニングした後に行われた(G. Dai, Nature, 1996, 379, 458-460; P. A. Smanik, Biochem. Biophys. Res. Commun., 1996, 226, 339-345)。NISは、基本的に甲状腺濾胞上皮細胞、さらに唾液腺、胃粘膜および授乳の乳腺を含むいくつかの他の組織に発現される。NISは、放射性ヨウ化物を用いる甲状腺癌およびその転移の効果的な診断および治療処置のための基礎を提供する。臨床的に関連する話題は、先天性I-輸送欠陥に起因するNIS突然変異の解析および甲状腺癌におけるNISの役割を含む。NISは、種々の癌細胞を放射性核種での破壊を受けやすくするため、それらの細胞に形質導入されている。
【０００４】
ClO4-、SCN-、BF4-、PF6-、NO3-のような他の１価のアニオンもまた、NISによって輸送され得る(J. Wolff, Physiol. Rev., 1964, 44, 45-90; P. A. Jones, Toxicology in vitro, 1996, 10, 149-160)。それらは、ラット甲状腺由来細胞(FRTL5)において、それぞれ0.14、14、0.75、0.009および250 μMのIC50値でヨウ化物輸送の競合阻害を引き起こす(F. Waltzら, Anal. Biochem., 2010, 396, 91-95)。
【０００５】
徹底的な生化学的解析が、甲状腺ならびに甲状腺外の多くの疾患、例えば、癌（甲状腺、胸部・・・）(T. Kogaiら, Endocr. Relat. Cancer, 2006, 13, 797-826)、自己免疫疾患(橋本病およびバセドー-グレーブス病)、中毒性結節、甲状腺炎、多結節性甲状腺腫等(O. Dohanら, Endocr. Rev., 2003, 24, 48-77)におけるヨウ化物取り込みの機序を明らかにし、NISの重要な役割を明らかにした。
【０００６】
これらの甲状腺関連障害の罹患率は、西洋諸国で7％近くである。核事故の場合に、甲状腺によるヨウ化物の放射活性同位体の取り込みが大きな悩みの種である、なぜなら、この蓄積が癌の発生率の増加に直接的に関与するからである。この劇的な例が、世界保健機構(WHO)がその大惨事の直接的な結果として、その事故の後9,000人が癌で死亡するであろうと予測した1986年のチェルノブイリ事故である。
【０００７】
福島での最近の出来事は、原子炉崩壊の結果がいかに悲惨であり、したがって、放射能汚染を防止し、処理するための解決策を見出すことがいかに重要で緊急であるかを我々に思い出させた。
【０００８】
一つの解決策は、汚染が起こった後、放射性ヨウ化物の取り込みを妨害することができる、および／または最も良いのは化学的に改善できる、放射線防護小分子を開発することである。
【０００９】
一方、放射性ヨウ素を蓄積する甲状腺の能力は、甲状腺障害の診断および治療のための基礎を長く提供してきた(E. L. Mazzaferri, The thyroid: a fundamental and clinical text 7th ed.; Braverman, L. E.; Utiger R. D. Eds; Lippincott-Raven: Philadelphia, 1996; pp. 922-945)。
【００１０】
現在は、標的NIS遺伝子導入後に、131Iによって癌細胞を診断および破壊するために、この戦略を甲状腺外の組織に拡大適用することが提案されている(D. P. Carvalhoら, Arq. Bras. Endocrinol. Metabol., 2007, 51, 672-682; C. Spitzwegら, Clin. Endocrinol., 2002, 57, 559-574)。
【００１１】
この場合、NIS発現細胞において放射性ヨウ化物保持を増加させる化合物が、強くて特異的な毒性効果を確保するために非常に有用であろう(N. Lecat-Guilletら, ChemMedChem, 2008, 3, 1211-1216; T. Kogaiら, Endocr. Relat., Cancer, 2006, 13, 797-826)。
【００１２】
NIS機能に影響を及ぼす小分子は、甲状腺ならびに甲状腺外の多くの機能不全の研究および治療のための優れたツールである。
【００１３】
近年、ハイスループット・スクリーニングが、新しい強力なヨウ化物輸送遮断剤(ITB1〜ITB10, スキーム1)の発見をもたらした(N. Lecat-Guilletら, ChemBioChem, 2008, 9, 889-895)。これらの化合物は、ヒトNISを安定的に発現するヒト胚腎細胞(hNIS-HEK293)ならびにラット甲状腺由来の細胞株(FRTL5)において、同位体フラックス測定(isotopic flux measurement)を用いるヨウ化物輸送をナノ-およびマイクロモルの範囲の阻害濃度値(IC50)で迅速かつ完全に阻害することを示した。
【００１４】
この阻害は、アフリカツメガエルからのhNIS発現卵母細胞におけるヨウ化物誘導電流の測定によってさらに確認された(Lindenthalら, J. Endocrinol., 2009, 200, 357-365)。10 ITBs(ITB1-10)の中で、3,4-ジヒドロピリミジン-2(1H)-オン、化合物1(ITB9, スキーム1参照)が、最も有望なNIS阻害剤であることが示された。
【００１５】
化合物1のIC50値は、FRTL5細胞で0.4 μMであると報告された。さらなる解析は、化合物1が前もって負荷されたhNIS-HEK293細胞からのヨウ化物の迅速な流出を引き起こすことができ、200 μMまでの濃度で細胞毒性が見られなかったことを示した。強力なヨウ化物取り込み阻害剤としての化合物1の発見は、ジヒドロピリミジン-2(1H)-オン類が、低価格かつ大規模で容易に合成できる小さい多目的な構造であるので、特に魅力的である。
【００１６】
その後、さらなる小分子(ITB11, スキーム1)が、FRTL5細胞において、0.4 μMのIC50値を有するヨウ化物取り込み阻害剤として特定された(N. Lecat-Guilletら, ChemMedChem, 2008, 3, 1207-1209)。ITB11は、それがNIS基質BF4-と構造的な類似性を共有しているので、合理的設計から発見された。
【００１７】
【化１】
2015522604.tif 000003
【００１８】
本発明者らは、今、それらのIC50値を測定することにFRTL5細胞でのヨウ化物取り込みにおいて改善された効果を有する新しいクラスの3,4-ジヒドロピリミジン-2(1H)-オン類を驚くべきことに発見した。この新しいクラスの化合物は、化合物1と比較して強い活性増強を示す。
【００１９】
さらに、（甲状腺機能亢進症および甲状腺中毒症の場合における）非放射活性(cold)ヨウ素の過剰蓄積の逆効果に対する、ヨウ素の放射同位体での汚染を抑制するため、およびNISの機能的画像化での使用のための化合物は、現在、入手できていない。
【００２０】
本発明は、医薬として使用のための、次の一般式(I)：
【化２】
2015522604.tif 000004
の化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００２１】
ここで、
・X = OまたはS、
・Y = OまたはNHで、好ましくはY = O、
・R1、R2、R3、R4およびR5は、同一または異なって、水素、C1-C20の直鎖状もしくは分
枝鎖状のアルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリー
ル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールアル
キル基から選択され、それらの基は、例えばハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニト
ロ、カルボキシレート、カルボキシエステル、アミノ、C1-C12アルキルアミノ、C1-
C12アリールおよびC1-C12アルコキシ基から独立して選択される一つ以上の基で任意
に置換される、
但し、X = O, Y = Oであるとき、R1はフェニル基であり、R2はメチル基であり、R3およびR4は水素であり、R5は4-メトキシベンジル基以外である。
【００２２】
本発明の意味において：
-アルキル基は、(C1-C20)アルキル基、好ましくはメチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、sec-ブチル、tert-ブチルおよびイソブチル基のような(C1-C6)アルキル基の中から選択される；
【００２３】
-シクロアルキル基は、好ましくは3〜7個の環炭素の１価の環状炭化水素基を意味する。そのシクロアルキル基は、1以上の2重結合を有することができ、任意に置換され得る。「シクロアルキル」の用語は、例えばシクロプロピル、シクロヘキシル、シクロへキセニル等を含む：
【００２４】
-ヘテロアルキル基は、前記で定義されたアルキル基を意味し、該アルキル基のいずれかの炭素に対する1以上の水素原子が、N、O、P、B、S、Si、Sb、Al、Sn、As、SeおよびGeからなる群から選択されるヘテロ原子によって置き換えられている。その炭素原子とヘテロ原子との間の結合は、飽和または不飽和であってよい。好適なヘテロアルキル基は、シアノ、ベンゾイル、メトキシ、アセタミド、ボレート、スルホン、サルフェート、チアン、ホスフェート、ホスホネート等を含む；
【００２５】
-アルコキシ基は、(C1-C20)アルコキシ基、好ましくはメトキシ、エトキシ、n-プロピルオキシ、イソ-プロピルオキシ、n-ブチルオキシ、sec-ブチルオキシ、tert-ブチルオキシおよびイソブチルオキシ基のような(C1-C4)アルコキシ基の中から選択される；
【００２６】
-アリール基は、少なくとも一つの単純な芳香環から誘導されるあらゆる官能基または置換基を意味し；芳香環は、環のそれぞれの原子がp-軌道を含み、該p-軌道がそれら自身で重なり合った非局在化したπ系を有するあらゆる平面環状化合物に相当する。さらに具体的には、アリールの用語は、次の物に限定されないが、フェニル、ビフェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、アントラシル、ピレニルおよびそれらの置換された形態を含む；
【００２７】
-ヘテロアリール基は、少なくとも一つの前記で定義された芳香環から誘導され、P、S、OおよびNから選択される少なくとも一つのヘテロ原子を含むあらゆる官能基または置換基を意味する。
ヘテロアリールの用語は、次のものに限定されないが、フラン、ピリジン、ピロール、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、テトラゾール、ピリダゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、ベンゾフラン、イソベンゾフラン、インドール、イソインドール、ベンゾチオフェン、ベンゾ[c]チオフェン、ベンズイミダゾール、インダゾール、ベンズオキサゾール、ベンズイソオキサゾール、ベンゾチアゾール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プリンおよびアクリジンを含む。
本発明のアリールおよびヘテロアリール基は、好ましくは1〜12個の炭素原子、より好ましくは5または6個の炭素原子を含む；
【００２８】
-アリールアルキルは、その水素原子がアリールまたはヘテロアリール基で置き換えられた、前記で定義されたアルキル基から誘導されるあらゆる基を意味する。
【００２９】
本発明によれば、ハロゲン原子は、臭素、塩素、フッ素およびヨウ素の中から、好ましくは臭素、塩素およびフッ素の中から選択される。
【００３０】
好ましい態様によれば、R1は、C1-C6の直鎖状または分枝鎖状のアルキル、シクロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールアルキル基から選択され、それらは、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロおよびC1-C7アルコキシ基から独立して選択される1以上の基で任意に置換され、好ましくは、R1は、任意に置換されたC1-C6シクロアルキル、フラン、チオフェン、ピロール、ピラゾール、オキサジアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、および少なくとも一つのハロゲンで置換されたフェニルから選択され、好ましくはR1はフランである。
【００３１】
より具体的には、本発明は、医薬として使用のための、次の一般式(Ia)：
【化３】
2015522604.tif 000005
の化合物またはその医薬的に許容される塩に関し、ここで、
【００３２】
・X = OまたはS、
・Y = OまたはNH、
・R1は、任意に置換されたC1-C6シクロアルキル、フラン、チオフェン、ピロール、ピ
ラゾール、オキサジアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソ
チアゾール、および少なくとも一つのハロゲンで置換されたフェニルから選択され、
・R2、R3、R4およびR5は、同一または異なって、水素、任意に置換されたC1-C20の直鎖
状または分枝鎖状のアルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキ
ル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロア
リールアルキル基から選択される。
【００３３】
もう一つの好ましい態様によれば、R2は、C1-C6の直鎖状または分枝鎖状のアルキル、フェニル、-CH2-O-フェニル、ベンジル、チオフェンおよび-CH2-チオフェンから選択される。
【００３４】
もう一つの好ましい態様によれば、R3は、水素およびC1-C6の直鎖状または分枝鎖状のアルキルから選択され、好ましくは、R3は水素またはメチル基である。
【００３５】
もう一つの好ましい態様によれば、R4は、水素およびC1-C6の直鎖状または分枝鎖状のアルキルから選択され、好ましくはR4は水素またはメチル基である。
【００３６】
もう一つの好ましい態様によれば、R5は、ハロゲン、メチル、ヒドロキシ、シアノ、ニトロおよびC1-C7アルコキ基から独立して選択される1以上の基で任意に置換されたベンジル基であり、好ましくは、R5は、メトキシベンジルまたはピぺロニル基のようなベンゾジオキソリルメチル基である。
【００３７】
前記の式(I)または(Ia)の特定の化合物として、我々は次の化合物を挙げることができる：
-  4-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート：
【化４】
2015522604.tif 000006
【００３８】
-  4-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-1,3,6-トリメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート：
【化５】
2015522604.tif 000007
【００３９】
-  3-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート：
【化６】
2015522604.tif 000008
【００４０】
-  3-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-1,3,6-トリメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート：
【化７】
2015522604.tif 000009
【００４１】
-  ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルメチル 4-(フラン-2-イル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート：
【化８】
2015522604.tif 000010
【００４２】
-  ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルメチル 4-(フラン-2-イル)-1,3,6-トリメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート：
【化９】
2015522604.tif 000011
【００４３】
より具体的には、本発明は、
-ヨウ化ナトリウム共輸送体(NIS)の阻害、およびNIS-発現細胞へのヨウ素の輸送および／または蓄積の低減のための、
-機能的画像化によるNIS病理のインビボでの診断のための、
-放射活性ヨウ素種に曝露後のヒトまたは動物の放射性ヨウ化物の除染のための、
-甲状腺障害、より具体的には、ヨウ素の過負荷によって引き起こされる甲状腺機能亢進症、甲状腺中毒症、甲状腺炎および中毒性結節性甲状腺腫の予防および／または治療のための、
-癌、より具体的には、甲状腺癌および乳癌の予防および／または治療のための、
-自己免疫疾患、より具体的には、橋本病およびバセドー-グレーブス病の予防および／または治療のための
医薬として使用のための、式(I)および(Ia)の化合物に関する。
【００４４】
NISの機能的画像化は、体内でのNISの空間分布における変化を検出するか、または測定する方法である。このことを達成するために、式(I)または(Ia)の化合物は、類似の化学的および生物学的特性＋検出のための化学的タグを有するプローブに誘導化される必要がある。
化学的タグのために、陽電子放射形断層撮影(PET)における使用に対して、炭素-11、窒素-13、酸素-15およびフッ素-18；単一光子放射形コンピュータ断層撮影(SPECT)における使用に対して、テクネチウム-99mのような放射性同位体が一般的に用いられる。
【００４５】
本発明のもう一つの主題は、活性成分として式(I)または(Ia)の少なくとも一つの化合物、および医薬的に許容な少なくとも一つの賦形剤を含む医薬組成物である。
【００４６】
「医薬的に許容される賦形剤」の表現は、あらゆる希釈剤、アジュバントまたはビヒクル、例えば、保存剤、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌および抗真菌剤、等張化剤および吸収遅延剤等を意味する。
【００４７】
本発明の医薬組成物は、いずれかの好適な経路、例えば、経口、口腔、吸入、舌下、鼻腔、皮膚を通して、すなわち経皮または非経口（静脈内、筋肉内、皮下および冠状動脈内を含む）投与によって投与され得る。それゆえ、本発明の医薬組成物は、種々の形態、例えば、硬ゼラチンカプセル、カプセル、圧縮錠、経口的に服用される懸濁液、トローチもしくは注射液の形態、または投与方法に適したその他のあらゆる形態で提供される。
【００４８】
本発明による医薬組成物は、式(I)または(Ia)の化合物が、その意図する目的を達成するための有効量で投与されるものを含む。有効量の決定は、十分に当業者の能力の範囲内にある。
【００４９】
「治療的に有効な量」は、所望の効果の達成を生じる式(I)または(Ia)の化合物の量を意味する。式(I)または(Ia)の化合物の毒性および治療効力、すなわち、LD50(母集団の50％までの致死量)およびED50(母集団の50％の治療的有効量)は、細胞培養または実験動物における標準的な医薬的手段によって容易に決定することができる。
【００５０】
毒性作用と治療効果との間の用量比が治療指数であり、それはLD50とED50との間の比で表わされる。そのようなデータから得られるデータは、ヒトでの使用のための投薬量の範囲を策定するときに用いられ得る。
式(I)または(Ia)の化合物の投与量は、好ましくは、ほとんど毒性がないかまたは無毒性である、ED50を含む血中濃度の範囲内にある。その投与量は、用いられる投与形態および投与経路に依存するこの範囲内で変化し得る。
【００５１】
的確な製剤、投与経路および投与量は、患者の症状を考慮して、個々の医師によって選択され得る。投与量および投与間隔は、予防または治療効果を維持するために十分な式(I)または(Ia)の化合物の血漿レベルを提供するために、個別に調整され得る。
それゆえ、投与される医薬組成物の量は、治療される患者、その患者の体重、病気の重篤度および投与方法に依存するであろう。
【００５２】
ヒトおよびその他の哺乳動物への使用のために、式(I)または(Ia)の化合物は、単独で投与され得るが、好ましくは、それらは医薬的に許容される少なくとも一つの担体との混合物で投与され、その担体の種類は意図される投与経路および提示形態に依存するであろう。
【００５３】
したがって、本発明による使用のための医薬組成物は、式(I)または(Ia)の化合物を医薬的に用いられる製剤に加工するのを容易にする1以上の賦形剤および／または補助剤を含む、生理学的に許容される1以上の担体を用いて、慣用の方法で製剤化され得る。
本発明による医薬組成物で用いることができる賦形剤および補助剤の中に、抗凝集剤、保存剤、着色剤、ビタミン、無機塩、味覚修飾剤、滑沢剤、コーティング剤、単離剤、安定化剤、湿潤剤、凝固防止剤、分散剤、乳化剤、芳香剤、浸透剤、可溶化剤等、それらの混合物および医薬産業で通常用いられる一般的なあらゆる賦形剤を挙げることができる。
【００５４】
例えば、医薬組成物が経口的に投与されるとき、その担体は、１個または数個の担体、例えば、タルク、乳糖、デンプンまたは加工デンプン、セルロースまたはセルロース誘導体、ポリエチレングリコール、アクリル酸ポリマー、ゼラチン、ステアリン酸マグネシウム、天然または合成起源の動物性または植物性脂肪、パラフィン誘導体、グリコール等を含み得る。
【００５５】
医薬組成物の製剤および投与についての一般情報に関して、間違いなく、書物「Remington's Pharmaceutical Sciences」の最新版が参照され得る。当然、当業者は、任意に用いられる賦形剤および／または補助剤が、本発明の医薬組成物に付随した固有特性に適合することに注意するであろう。
【００５６】
これらの医薬組成物は、慣用の方法、すなわち慣用の混合、溶解、造粒、糖衣錠作製(dragee-making)、乳化、カプセル化、封入または凍結乾燥の工程によって製剤化され得る。適当な製剤化は、選択される投与経路に依存する。
【００５７】
本発明は、一般式(I)の化合物自体も表し、該化合物は、次の一般式(I)：
【化１０】
2015522604.tif 000012
またはその医薬的に許容される塩に相当する。
【００５８】
ここで、
・X = OまたはS、
・Y = OまたはNH、
・R1、R2、R3、R4およびR5は、同一または異なって、水素、C1-C20の直鎖状または分枝
鎖状のアルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリー
ル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールアル
キル基から選択され、それらの基は、例えば、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニト
ロ、カルボキシレート、カルボキシエステル、アミノ、C1-C12アルキルアミノ、C1-
C12アリールおよびC1-C12アルコキシ基から独立して選択される１以上の基で任意に
置換される、
【００５９】
但し、
-X = O、Y = Oのとき、R1はフェニル基であり、R2はメチル基であり、R3およびR4
は水素であり、R5は水素、ベンジル基、ピぺロニル基、エチル基、フラン-2-イル
メチル基もしくは4-メトキシベンジル基以外であるか、または
-X = S、Y = Oのとき、R1はフェニル基であり、R2はメチル基であり、R3およびR4
は水素であり、R5は水素もしくはプロペン-2-イル基以外である。
【００６０】
より具体的には、本発明は、次の一般式(Ia)：
【化１１】
2015522604.tif 000013
の化合物またはその医薬的に許容される塩に関する。
【００６１】
ここで、
・X = OまたはS、
・Y = OまたはNH、
・R1は、任意に置換されたC1-C6シクロアルキル、フラン、チオフェン、ピロール、ピ
ラゾール、オキサジアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソ
チアゾール、および少なくとも一つのハロゲンで置換されたフェニルであり、
・R2、R3、R4およびR5は、同一または異なって、水素、任意に置換されたC1-C20の直鎖
状または分枝鎖状のアルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキ
ル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロア
リールアルキル基から選択され、
好ましいR1、 R2、R3、R4およびR5は前記で定義された通りである。
【００６２】
前記の規定に加えて、本発明は、以下の記載から明らかになるであろう他の規定も含み、式(I)および(Ia)の化合物の構造的変形物のFRTL5細胞におけるヨウ化物取り込みの効果をそのような化合物のIC50値を測定することによって評価する例にも言及する。
【実施例】
【００６３】
I- 合成方法
ほとんどの対象の3,4-ジヒドロキシピリミジン-2(1H)-オン(DHPM) 5-カルボキシエステル(21-51および53-62)は、3成分環形成ビギネリ反応(P. Bignelli, Gazz. Chim. Ital., 1893, 23, 360-416; C. O. Kappe, Acc. Chem. Res., 2000, 33, 879-888)を用いる一般スキーム2により製造された。この反応は、酸触媒を用いるアルデヒド、β-ケトエステルおよびウレアもしくはチオウレアの縮合を含む。
【００６４】
【化１２】
2015522604.tif 000014
【００６５】
試薬と条件：(a) AcOK、マイクロウエーブ、120℃、30分間、26-97%; (b) DCC、DMAP、DCM、室温、14時間、次いで、4-メトキシベンジルアルコール、マイクロウエーブ、トルエン、100℃、30分、50-75% (2工程); (c) 方法 A: Yb(OTf)3、無溶媒、100℃、45分間 - 方法 B: Zn(OTf)2、MeCN、還流、2-16時間 - 方法 C: HCl、MeOH、40℃、1-3日間
【００６６】
対象の化合物を製造するために用いられたβ-ケトエステルは、商業的供給源から得られたか、または文献で知られている方法によって製造された。
エステルR5の位置で差異を有するアセトアセテート2-8は、酢酸カリウムの存在下、2,2,6-トリメチル-4H-1,3-ジオキシン-4オンと種々のR5OHから製造された(スキーム2)(V. Sridharanら, Synthesis, 2010, 6, 1053-1057)。
R2の位置で差異を有するβ-ケトエステル9-18に関しては、2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-4,6-ジオン(メルドラム酸)を種々のカルボン酸(R2CO2H)でアセチル化し、得られる中間体を4-メトキシベンジルアルコールで処理した(Y. Oikawaら, J. Org. Chem., 1978, 43, 2087-2088)。
【００６７】
最終の環形成反応のために、3つの異なるビギネリ反応の条件：Yb(OTf)3／無溶媒(方法 A)(Y. Ma, J. Org. Chem., 2000, 65, 3864-3868)、MeCN中Zn(OTf)2(方法 B)またはH2O/MeOH中HCl(方法 C)を用いた。
モノメチルウレアでのビギネリ反応は、N-1 メチル DHPMs(50、53、56、60)を選択的に与えた。このことは、1H、13C NMRによって確認され、他の報告(O. Kappe, Tetrahedron, 1993, 49, 6937-6963)と一致した。
合成されたいくつかのDHPMsはまた、さらなる対象の化合物の製造のための出発物質としても役に立った(スキーム 3)。カルボキシベンジルエステル32は、水素化分解条件(H2、Pd/C)下、カルボン酸19を与えた(B. Desaiら, Tetahedron, 2006, 62, 4651-4664)。
【００６８】
カルボキシアミド誘導体63は、カップリング剤としてのEDCI (1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド)またはHBTU (O-ベンゾトリアゾール-N,N,N',N'-テトラメチル-ウロニウム-ヘキサフルオロ-ホスフェート)の存在下、化合物19を4-ピペロニルアミンと反応させることによって得られた。
3,4-ジヒドロピリミジン-2(1H)-チオン52は、中間体のカルボン酸20を得るために、テトラヒドロフラン中、アリルエステル39をPd(PPh3)4およびジエチルアミンで処理する(B. Desaiら, Tetrahedron, 2006, 62, 4651-4664)ことによる2段階の連続で製造された。続いて、この中間体を、EDCI/DMAP条件下、4-メトキシベンジルアルコールと反応させ、DHPM 52を得た。
【００６９】
【化１３】
2015522604.tif 000015
【００７０】
試薬および条件: (a): H2、Pd/C、MeOH、室温、3.5時間、79%; (b): 4-ピペロニルアミン、HBTU、EDCI、DIEA、DMA、マイクロウエーブ、80℃、30分間、36%; (c): Pd(PPh3)4、DEA、THF、室温、4時間、35%; (d): 4-メトキシベンジルアルコール、EDCI、DMAP、DMA、80℃、5時間、18%
【００７１】
化合物の同定は、MS、1H、13CのNMR、ならびに19F NMR(適切な場合)によって確認された。試験された全ての化合物の純度は、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)システムを用いて95％を超えることが分かった。
【００７２】
II- 化学合成のための手順
II- 1) 化学合成および特徴付けのための一般的方法
試薬と溶媒は、Sigma-Aldrichから入手し、さらに精製しなかった。マイクロウエーブ補助反応は、エクスプローラーモジュールを備えたDiscover SPシステム(CEM)で行われた。
フラッシュクロマトグラフィーは、順相Redisep (Teledyne Isco)またはSNAP (Biotage)カートリッジを用いて、CombiFlash Rfシステム(Teledyne Isco)で行われた。
HPLC-MS分析は、2成分勾配溶媒配送システム(LC-20AB, Shimadzu)、SIL-20Aオートサンプラー(Shimadzu)およびフォトダイオードアレイ検出器(SPD-20A, Shimadzu)を備えたシステムで行われた。
【００７３】
このシステムは、陽と陰の両方のモードで作動するエレクトロスプレイイオン化Micromass-ZQスペクトロメータ(Waters)と連結された。アセトニトリル／水 = 30/70 (1 mL／分)で平衡化された250×4.6 mm (5 μm) Zorbax SB-C18 (Agilent)に各化合物(8-15 μg)が加えられた。試料はアセトニトリルを45%に増加する(10分)、次いで85%に増加する(25〜30分)ことによって溶出された。
1H、13Cおよび19F NMRスペクトルが、400 MHz (1H)、100 MHz (13C)および160 MHz (19F)で作動するBruker Avance DPX 400スペクトロメータで記録された。ケミカルシフト(δ)はppmで表わされた。融点(B-540, Buchi)は補正されていない。
【００７４】
II- 2) 中間体2-8に関する一般的合成手順とデータ分析
一般的合成手順：マイクロウエーブバイアル中で、2,2,6-トリメチル-4H-1,3-ジオキシン-4-オン(1.0 mL, 7.7 mmol)とアルコール(5.9 mmol)を酢酸カリウム(241 mg, 2.9 mmol)と一緒に混合した。その混合物を130℃で20分間、マイクロウエーブ処理した。シリカゲルでのクロマトグラフィー(cHex/AcOEt)により2-8を得た。
【００７５】
4-メトキシベンジル 3-オキソブタノエート(2), 黄色の液体 (73%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.16 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 5.06 (s, 2H), 6.93 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 8.0 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 30.5, 50.0, 55.5, 66.3, 114.2, 128.1, 130.5, 159.6, 167.7, 202.2.
【００７６】
2-クロロベンジル 3-オキソブタノエート(3), 淡黄色の液体 (79%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.19 (s, 3H), 3.71 (s, 2H), 5.21 (s, 2H), 7.35-7.41 (m, 2H), 7.49-7.55 (m, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 30.5, 49.9, 63.9, 127.8, 129.8, 130.6, 130.8, 133.1, 133.6, 167.4, 201.9.
【００７７】
4-クロロベンジル 3-オキソブタノエート(4), 淡黄色の液体 (81%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.18 (s, 3H), 3.69 (s, 2H), 5.13 (s, 2H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 30.6, 49.9, 65.6, 128.9, 130.3, 133.2, 135.3, 167.6, 202.0.
【００７８】
4-フルオロベンジル 3-オキソブタノエート(5), 黄色の液体 (54%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.17 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 5.12 (s, 2H), 7.19-7.24 (m, 2H), 7.43 (dd, J = 5.6, 8.4 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 30.5, 49.9, 65.7, 115.7 (d, J = 21.3 Hz), 130.8 (d, J = 8.3 Hz), 132.5 (d, J = 3.0 Hz), 162.3 (d, J = 242.4 Hz), 167.6, 202.0. 19F NMR (160 MHz, CFCl3) : -114.0
【００７９】
2-メチルベンジル 3-オキソブタノエート(6), 淡黄色の液体 (86%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.17 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 5.13 (s, 2H), 7.19-7.26 (m, 3H), 7.33 (d, J = 7.2 Hz, 1H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 18.8, 30.6, 49.9, 65.1, 126.3, 128.9, 129.6, 130.6, 134.1, 137.2, 167.6, 202.1.
【００８０】
3-メトキシベンジル 3-オキソブタノエート(7), 黄色の液体 (87%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.24 (s, 3H), 3.49 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 5.14 (s, 2H), 6.84-6.92 (m, 3H), 6.90 (m, 1H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 30.4, 50.2, 55.5, 67.2, 113.9, 114.2, 120.6, 129.9, 137.0, 160.0, 167.1, 200.5.
【００８１】
ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルメチル 3-オキソブタノエート(8), 黄色の液体 (91%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.24 (s, 3H), 3.48 (s, 2H), 5.07 (s, 2H), 5.97 (s, 2H), 6.77-6.85 (m, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 30.5, 50.0, 66.4, 101.5, 108.5, 109.3, 122.6, 129.9, 147.6, 147.7, 167.6, 202.0. 
【００８２】
II- 3) 中間体9-18に関する一般的合成手順およびデータ分析
一般的合成手順：乾燥CH2Cl2 (10 mL)中のメルドラム酸(1.0 mmol)、カルボン酸(1.0 mmol)およびDCC(1.1 mmol)の撹拌溶液に、アルゴン雰囲気下でDMAP (1.1 mmol)を加えた。室温で一晩撹拌後、DCUを濾別し、濾液を減圧下に濃縮した。残渣を20 mLの酢酸エチルに溶解し、10 mLの1M HCl水溶液、5 mLの水および5 mLの食塩水で洗浄した。次いで、有機層をMgSO4で乾燥し、真空下に濃縮した。残渣を5 mLのトルエン中に再懸濁させ、4-メトキシベンジルアルコール(1.2 mmol)を加えた。その混合物を100℃で30分間、マイクロウエーブ処理した。溶媒の蒸発および続くシリカゲルでのクロマトグラフィー(cHex/AcOEt)により標記化合物9-18を得た。
【００８３】
4-メトキシベンジル 3-オキソペンタノエート(9), 無色の液体 (72%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.08 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.55 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 5.13 (s, 2H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.8 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 7.5, 36.3, 49.0, 55.3, 67.0, 114.0, 127.4, 130.2, 159.8, 167.2, 203.2.
【００８４】
4-メトキシベンジル 5-メチル-3-オキソヘキサノエート(10), 黄色の液体 (66%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.91 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 2.12-2.17 (m, 1H), 2.39 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 3.45 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 5.13 (s, 2H), 6.91 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.8 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 22.4, 24.3, 49.7, 51.8, 55.3, 66.9, 114.0, 127.4, 130.3, 159.8, 167.1, 202.3.
【００８５】
4-メトキシベンジル 3-オキソオクタノエート(11), 黄色の液体 (70%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.24-1.30 (m, 4H), 1.56-1.60 (m, 2H), 2.50 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.47 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 5.13 (s, 2H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 13.9, 22.4, 23.1, 31.1, 43.0, 49.3, 55.3, 66.9, 114.0, 127.4, 130.3, 159.8, 167.2, 202.8.
【００８６】
4-メトキシベンジル 3-シクロヘキシル-3-オキソプロパノエート(12), 黄色の液体 (65%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.20-1.30 (m, 5H), 1.66-1.69 (m, 1H), 1.77-1.84 (m, 4H), 2.37-2.44 (m, 1H), 3.52 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 5.13 (s, 2H), 6.91 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 25.5, 25.7, 28.2, 47.4, 50.8, 55.3, 66.9, 114.0, 127.5, 130.3, 159.7, 167.4, 205.8.
【００８７】
4-メトキシベンジル 3-オキソ-3-フェニルプロパノエート(13), 互変異性体の混合物, 黄色の液体 (51%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.82 (s, 3H), 3.84 (s, 0.84H), 4.04 (s, 2H), 5.16 (s, 2H), 5.21 (s, 0.52H), 5.73 (s, 0.24H), 6.88 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.94 (d, J = 8.8 Hz, 0.55H), 7.28 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.37-7.45 (m, 1.32H), 7.47-7.50 (m, 2H), 7.59-7.63 (m, 1H), 7.78-7.80 (m, 0.52H), 7.93 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 12.6 (s, 0.24H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 46.0, 55.3, 67.1, 113.9, 128.5, 128.6, 128.8, 130.2, 133.7, 135.9, 159.7, 167.4, 192.4.
【００８８】
4-メトキシベンジル 3-オキソ-4-フェニルブタノエート(14), 黄色の液体 (66%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.49 (s, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 5.11 (s, 2H), 6.91 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.30-7.34 (m, 5H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 48.3, 50.0, 55.3, 67.0, 114.0, 127.3, 127.4, 128.6, 128.9, 130.3, 133.1, 159.8, 167.0, 200.3.
【００８９】
4-メトキシベンジル 3-オキソ-4-フェノキシブタノエート(15), 無色の液体 (75%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.69 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 4.62 (s, 2H), 5.14 (s, 2H), 6.84-6.88 (m, 4H), 7.03 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.27-7.33 (m, 4H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 46.2, 55.3, 67.2, 72.4, 114.0, 114.5, 122.0, 127.2, 129.7, 130.3, 157.3, 159.8, 166.7, 200.5.
【００９０】
4-メトキシベンジル 4-ベンズアミド-3-オキソブタノエート(16), 黄色の液体 (50%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.73 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.20 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 5.06 (s, 2H), 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.47-7.51 (m, 3H), 7.87 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 8.86 (t, J = 5.6 Hz, 1H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 46.6, 49.3, 55.3, 66.2, 114.0, 127.5, 127.8, 128.6, 130.2, 131.7, 133.8, 159.4, 166.7, 167.1, 200.2.
【００９１】
4-メトキシベンジル 3-オキソ-3-(チオフェン-2-イル)プロパノエート(17), 黄色の液体 (60%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.83 (s, 3H), 3.97 (s, 2H), 5.15 (s, 2H), 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.14 (t, J = 4.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.71 (m, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 46.5, 55.3, 67.2, 113.9, 127.4, 128.3, 130.2, 133.2, 134.9, 143.2, 159.7, 166.9, 184.7.
【００９２】
4-メトキシベンジル 3-オキソ-4-(チオフェン-2-イル)ブタノエート(18), 黄色の液体 (62%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.54 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 4.02 (s, 2H), 5.12 (s, 2H), 6.88-6.93 (m, 3H), 6.98-7.00 (m, 1H), 7.25 (dd, J = 1.2, 5.2 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 43.6, 47.9, 55.3, 67.1, 114.0, 125.6, 127.2, 127.3, 127.4, 130.2, 134.1, 159.8, 166.9, 199.0.
【００９３】
II- 4) ビギネリ反応よるDHPM化合物の合成に関する一般的手順(化合物21-51および53-62)
方法 A：β-ケトエステル(0.50 mmol)、アルデヒド(0.60 mmol)、ウレア(0.75 mmol)およびYb(OTf)3 (5 mol%)を100℃で45分間加熱した。反応混合物を室温まで放冷した。次いで、エタノール(2.5 mL)を加え、得られる混合物を0-4℃で3日間放置した。 ほとんどの場合、形成された沈殿を濾過によって集めた。固体が純度基準＞95% (LC-MS)を満たさなかったときは、それをさらにクロマトグラフィー(SiO2)にかけた。いくつかの場合、沈殿が形成されなかった。そのときは、溶媒と揮発性物質を減圧下に蒸発させ、得られる残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製し、標記化合物を得た。
【００９４】
方法 B：β-ケトエステル(0.50 mmol)、アルデヒド(0.60 mmol)、ウレア(0.75 mmol)およびZn(OTf)2 (10 mol%)をアセトニトリル中に溶解させ、2-16時間還流した。反応混合物を室温まで放冷した。溶媒を減圧下に蒸発させ、残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーにかけるか、または分取HPLCにより精製し、標記化合物を得た。
【００９５】
方法 C：β-ケトエステル(1.0当量)、アルデヒド(1.0当量)、ウレア(2.0 当量)を、MeOH／濃HCl = 1/1中、1 mol/L (対アルデヒド)の最終濃度で溶解させた。混合物を40℃で1-3日間撹拌した。混合物を室温まで放冷した。形成された固体を濾取し、水および／またはエタノールで洗浄し、標記化合物を得た。
【００９６】
4-メトキシベンジル 6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(1)の製造：N. Lecat-Guilletら, ChemBioChem, 2008, 9, 889-895の公表文献中の化合物ITB-9に相当する化合物1を、方法Aを用いて、 4-メトキシベンジル アセトアセテート2(111 mg)、ベンズアルデヒド(51 μL)およびウレア(45 mg)から製造した。濾過により単離し、白色の固体として1を得た(55%)。mp : 162-164℃. TLC: Rf = 0.24 (cHex/EtOAc = 1/1).
【００９７】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.25 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.95 (s, 2H), 5.13 (s, 1H), 6.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.15-7.20 (m, 2H), 7.24-7.30 (m, 3H), 7.74 (s, 1H), 9.24 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 54.3, 55.5, 65.1, 99.4, 114.1, 126.7, 127.8, 128.8, 128.9, 130.0, 145.1, 149.4, 152.5, 159.4, 165.6. HPLC : tR = 14.9分. MS : m/z 353 ([M + H]+). HRMS-ESI-TOF (陰イオン): m/z C20H19N2O4での計算値 351.1345 ([M - H]-), 実測値 351.1361.
【００９８】
4-メトキシベンジル 4-(3-ブロモフェニル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(21)：方法A, mp : 164-166℃, 白色の粉末 (61%), TLC : Rf = 0.23 (cHex/AcOEt 1:1)
【００９９】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.26 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.92 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.99 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 6.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 7.6 Hz, 2 H), 7.26-7.31 (m, 2H), 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 9.32 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 54.0, 55.5, 65.3, 98.7, 114.2, 122.0, 125.7, 128.7, 129.6, 130.0, 130.6, 131.3, 147.8, 150.0, 152.2, 159.4, 165.4. HPLC : tR = 17.3分. MS : m/z 431 ([M + H]+).
【０１００】
4-メトキシベンジル 4-(3-クロロフェニル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(22)：方法A, mp : 180-181℃, 白色の粉末 (56%), TLC : Rf =  0.26 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１０１】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.26 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.92 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.12-7.15 (m, 4H), 7.32-7.35 (m, 2H), 7.78 (bs, 1H), 9.30 (bs, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 54.0, 55.5, 65.3, 98.7, 114.1, 125.3, 126.7, 127.7, 128.7, 130.1, 131.0, 133.4, 147.5, 150.0, 152.3, 159.4, 165.4. HPLC : tR = 16.9分. MS : m/z 387 ([M + H]+).
【０１０２】
4-メトキシベンジル 4-(2-フルオロフェニル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(23)：方法A, mp : 181-183℃, 白色の粉末 (58%), TLC : Rf = 0.32 (cHex/AcOEt 4:6)
【０１０３】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.27 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 4.89 (s, 2H), 5.43 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.10-7.14 (m, 2H), 7.18-7.22 (m, 1H), 7.28-7.33 (m, 1H), 7.71 (s, 1H), 9.30 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 17.8, 48.6, 55.0, 64.6, 97.0, 113.6, 115.5 (d, J = 21.8 Hz), 124.5 (d, J = 3.2 Hz), 128.3, 128.8 (d, J = 3.9 Hz), 129.3, 129.4, 131.3 (d, J = 13.7 Hz), 149.6, 151.5, 158.8, 159.4 (d, J = 245.5 Hz), 164.8. 19F NMR (160 MHz, CFCl3) : -119.0. HPLC : tR = 15.5分. MS : m/z 371 ([M + H]+).
【０１０４】
4-メトキシベンジル 4-(3-フルオロフェニル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(24)：方法A, mp : 173-174℃, 白色の粉末 (49%), TLC : Rf = 0.29 (cHex/AcOEt 4:6)
【０１０５】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.26 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.93 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.99 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.15 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.92 (m, 1H), 7.03-7.11 (m, 2H), 7.14 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.33-7.36 (m, 1H), 7.80 (s, 1H), 9.31 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 53.9, 55.5, 65.2, 98.8, 113.4 (d, J = 21.3 Hz), 114.1, 114.5 (d, J = 20.9 Hz), 122.6 (d, J = 2.3 Hz), 128.7, 130.1, 131.0 (d, J = 8.0 Hz), 147.9 (d, J = 5.9 Hz), 150.0, 152.4, 159.4, 162.5 (d, J = 242.6 Hz), 165.5. 19F NMR (160 MHz, CFCl3) : -113.1. HPLC : tR = 15.0分. MS : m/z 371 ([M + H]+).
【０１０６】
4-メトキシベンジル 4-(4-フルオロフェニル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(25)：方法A, mp : 172-175℃, 白色の粉末 (87%), TLC : Rf = 0.27 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１０７】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.25 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.93 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.98 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.09-7.14 (m, 4H), 7.18-7.22 (m, 2H), 7.76 (s, 1H), 9.28 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 53.7, 55.5, 65.2, 99.2, 114.1, 115.1 (d, J = 21.2 Hz), 115.7, 128.3 (d, J = 8.4 Hz), 128.8, 130.0, 140.9 (d, J = 3.0 Hz), 149.6, 152.3, 159.4, 161.3 (d, J = 241.2 Hz), 165.5. 19F NMR (160 MHz, CFCl3) : -115.4. HPLC : tR = 15.4分. MS : m/z 371 ([M + H]+).
【０１０８】
4-メトキシベンジル 4-シクロプロピル-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(26)：方法A, mp : 158-160℃, 白色の粉末 (68%), TLC : Rf = 0.36 (DCM/MeOH 95:5)
【０１０９】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 0.12-0.28 (m, 4H), 0.89-0.94 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 3.63-3.66 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 4.99 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.04 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.30-7.32 (m, 3H), 9.04 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 1.71, 2.42, 18.2, 53.1, 55.5, 65.2, 99.7, 114.2, 128.9, 130.4, 149.1, 153.4, 159.5, 166.0. HPLC : tR = 13.2分. MS : m/z 317 ([M + H]+).
【０１１０】
4-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(27)の製造：化合物27を、方法Aを用いて、4-メトキシベンジル アセトアセテート2(111 mg)、フラン-2-カルボキシアルデヒド(50 μL)およびウレア(45 mg)から製造した。シリカゲルでのクロマトグラフィー(cHex/EtOAc = 100/0〜60/40)により単離し、黄土色の粉末として27を得た(40%)。mp : 158-159℃. TLC: Rf = 0.26.
【０１１１】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.23 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.99 (s, 2H), 5.20 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.35 (dd, J = 2.0, 3.2 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 9.29 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.2, 48.1, 55.5, 65.2, 96.9, 105.8, 110.8, 114.2, 128.9, 129.9, 142.6, 150.4, 152.8, 156.3, 159.4, 165.5. HPLC : tR = 13.1分. MS : m/z 343 ([M + H]+). HRMS-ESI-TOF (陰イオン): m/z C18H17N2O5に対する計算値341.1137 ([M - H]-), 実測値 341.1141.
【０１１２】
4-メトキシベンジル 4-(フラン-3-イル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(28)：方法A, mp : 157-159℃, ベージュ色の固体 (72%), TLC : Rf = 0.47 (cHex/AcOEt 35:65)
【０１１３】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.21 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 5.03 (s, 2H), 5.08 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 6.90 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.25 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 9.22 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.2, 46.3, 55.5, 65.2, 99.1, 109.5, 114.2, 128.9, 129.4, 130.1, 139.0, 144.0, 149.6, 153.1, 159.4, 165.5. HPLC : tR = 14.3分. MS : m/z 343 ([M + H]+).
【０１１４】
4-メトキシベンジル 6-メチル-2-オキソ-4-(5-メチルフラン-2-イル)-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(29)：方法A, mp : 157-159℃, 黄土色の粉末 (52%), TLC : Rf = 0.29 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１１５】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.20 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.97 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.01 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 5.88 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 5.94 (m, 1H), 6.89 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.72 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 9.24 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 13.8, 18.2, 48.2, 55.5, 65.1, 97.1, 106.5, 106.8, 114.2, 129.0, 129.9, 150.2, 151.1, 152.7, 154.7, 159.4, 165.3. HPLC : tR = 12.9分. MS : m/z 357 ([M + H]+).
【０１１６】
4-メトキシベンジル 4-(チオフェン-2-イル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(30)：方法A, mp : 152-154℃, 黄土色の粉末 (59%), TLC : Rf = 0.32 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１１７】
1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2.23 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 5.02 (s, 2H), 5.40 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 6.91-6.94 (m, 1H), 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 9.35 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.2, 49.7, 55.5, 65.3, 99.9, 114.2, 124.0, 125.1, 127.1, 128.8, 130.0, 149.2, 149.7, 152.6, 159.4, 165.3. HPLC : tR = 14.6分. MS : m/z 359 ([M + H]+).
【０１１８】
4-メトキシベンジル 6-メチル-2-オキソ-4-(チオフェン-3-イル)-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(31)：方法A, mp : 156-158℃, 黄土色の粉末 (70%), TLC : Rf = 0.26 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１１９】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.22 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.99 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.95 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.45 (dd, J = 2.8, 4.8 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 9.23 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.2, 49.8, 55.5, 65.2, 99.6, 114.2, 121.3, 126.6, 127.1, 128.9, 130.0, 146.1, 149.5, 153.0, 159.4, 165.6. HPLC : tR = 14.3分. MS : m/z 359 ([M + H]+).
【０１２０】
ベンジル 6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(32)：方法C, mp : 174-175℃, 白色の固体 (88%), TLC : Rf = 0.35 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１２１】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.27 (s, 3H), 5.00 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.14-7.32 (m, 10H), 7.77 (s, 1H), 9.28 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 54.4, 65.3, 99.2, 126.7, 127.8, 128.0, 128.2, 128.7, 128.9, 137.0, 145.1, 149.7, 152.4, 165.5. HPLC : tR = 15.2分. MS : m/z 323 ([M + H]+).
【０１２２】
2-クロロベンジル 6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(33)：方法A, mp : 193-195℃, 白色の粉末 (73%), TLC : Rf = 0.64 (cHex/AcOEt 25:75)
【０１２３】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.27 (s, 3H), 5.05-5.17 (m, 3H), 7.10-7.13 (m, 1H), 7.19-7.31 (m, 7H), 7.45 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 9.32 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 54.4, 62.7, 98.9, 126.7, 127.6, 127.8, 128.9, 129.7, 130.2, 130.3, 132.8, 134.3, 145.0, 150.2, 152.4, 165.3. HPLC : tR = 17.7分. MS : m/z 357 ([M + H]+).
【０１２４】
4-クロロベンジル 6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(34)：方法A, mp : 216-217℃, 白色の粉末 (58%), TLC : Rf = 0.49 (cHex/AcOEt 25:75)
【０１２５】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.27 (s, 3H), 4.97 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.02 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.17 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.14-7.35 (m, 9H), 7.78 (s, 1H), 9.30 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 54.4, 64.4, 99.0, 126.8, 127.8, 128.7, 128.9, 129.9, 132.7, 136.0, 145.1, 150.0, 152.3, 165.4. HPLC : tR = 17.4分. MS : m/z 357 ([M + H]+).
【０１２６】
4-フルオロベンジル 6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(35): 方法A, mp : 196-197℃, 白色の粉末 (66%), TLC : Rf = 0.60 (cHex/AcOEt 25:75)
【０１２７】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.27 (s, 3H), 4.97 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.04 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.09-7.32 (m, 9H), 7.75 (s, 1H), 9.27 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 54.4, 64.6, 99.1, 115.5 (d, J = 21.2 Hz), 126.7, 127.8, 128.9, 130.3 (d, J = 8.3 Hz), 133.2 (d, J = 3.0 Hz), 145.1, 149.8, 152.4, 162.1 (d, J = 242.3 Hz), 165.5. 19F NMR (160 MHz, CFCl3) : -114.5. HPLC : tR = 15.6分. MS : m/z 341 ([M + H]+).
【０１２８】
2-メチルベンジル 6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(36): 方法A, mp : 157-159℃, 白色の粉末 (54%), TLC : Rf = 0.69 (cHex/AcOEt 25:75)
【０１２９】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.12 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 4.99 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.14 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.06-7.26 (m, 9H), 7.73 (s, 1H), 9.25 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.2, 18.7, 54.3, 63.7, 99.1, 126.1, 126.7, 127.8, 128.4, 128.9, 129.0, 130.4, 134.8, 136.7, 145.0, 149.8, 152.4, 165.5. HPLC : tR = 16.8分. MS : m/z 337 ([M + H]+).
【０１３０】
3-メトキシベンジル 6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(37): 方法A, mp : 73-75℃, 白色の粉末 (63%), TLC : Rf = 0.35 (cHex/AcOEt 1:1).
【０１３１】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.28 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 5.00 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 5.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.84 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18-7.30 (m, 6H), 7.77 (s, 1H), 9.28 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 54.3, 55.4, 65.2, 99.1, 113.4, 113.7, 120.0, 126.7, 127.8, 128.9, 129.9, 138.5, 145.0, 149.8, 152.5, 159.6, 165.5. HPLC : tR = 15.1分. MS : m/z 394 ([M + H + CH3CN]+).
【０１３２】
ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルメチル 6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(38): 方法A, mp : 186-187℃, 白色の粉末 (59%), TLC : Rf = 0.54 (cHex/AcOEt 25:75)
【０１３３】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.26 (s, 3H), 4.89 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.94 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.00 (s, 2H), 6.68-6.71 (m, 2H), 6.82 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.24-7.28 (m, 3H), 7.74 (s, 1H), 9.24 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.3, 54.3, 65.3, 99.3, 101.4, 108.4, 108.9, 122.1, 126.7, 127.8, 128.8, 130.6, 145.1, 147.3, 147.6, 149.6, 152.5, 165.5. HPLC : tR = 14.4分. MS : m/z 367 ([M + H]+).
【０１３４】
アリル 6-メチル-4-フェニル-2-チオキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(39): 方法C, mp : 147-149℃, 黄色の固体 (52%), TLC : Rf = 0.82 (cHex/AcOEt 4:6)
【０１３５】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.32 (s, 3H), 4.47-4.57 (m, 2H), 5.07-5.10 (m, 1H), 5.11-5.13 (m, 1H), 5.20 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.80-5.87 (m, 1H), 7.22-7.37 (m, 5H), 9.69 (s, 1H), 10.40 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 17.2, 53.9, 64.0, 100.2, 117.2, 126.4, 127.7, 128.6, 132.7, 143.3, 145.7, 164.7, 174.2. MS m/z 289 ([M + H]+).
【０１３６】
4-メトキシベンジル 6-エチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(40): 方法A, mp : 62-65℃, 白色の粉末 (66%), TLC : Rf = 0.26 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１３７】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.09 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 2.56-2.62 (m, 1H), 2.68-2.74 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 4.96 (s, 2H), 5.12 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.17-7.30 (m, 5H), 7.72 (s, 1H), 9.23 (s, 1H). 13C NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.5, 24.5, 54.3, 55.5, 65.2, 98.5, 114.1, 126.7, 127.7, 128.7, 128.9, 130.0, 145.1, 152.7, 154.9, 159.4, 165.2. HPLC : tR = 16.4分. MS : m/z 367 ([M + H]+).
【０１３８】
4-メトキシベンジル 2-オキソ-6-イソブチル-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(41): 方法A, mp : 190-192℃, 白色の粉末 (23%), TLC : Rf = 0.34 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１３９】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 0.81 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 2.4 Hz, 3H), 1.87-1.93 (m, 1H), 2.47-2.60 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 4.93 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.97 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.16-7.28 (m, 7H), 7.73 (s, 1H), 9.14 (s, 1H). 13C NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 22.3, 22.5, 28.3, 39.1, 54.4, 55.5, 65.4, 100.1, 114.1, 126.6, 127.7, 128.6, 128.8, 130.3, 145.2, 152.4, 152.7, 159.5, 165.5. HPLC : tR = 19.4分. MS : m/z 423 ([M + H]+).
【０１４０】
4-メトキシベンジル 2-オキソ-6-ペンチル-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(42): 方法A, mp : 54-56℃, 白色の粉末 (77%), TLC : Rf = 0.55 (cHex/AcOEt 4:6)
【０１４１】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 0.82 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.10-1.25 (m, 4H), 1.44-1.48 (m, 2H), 2.52-2.55 (m, 2H), 3.74 (s, 3H) , 4.93 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.97 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.15-7.18 (m, 4H), 7.24-7.32 (m, 3H), 7.72 (s, 1H), 9.19 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 14.3, 22.3, 31.1, 31.5, 54.3, 55.5, 65.4, 99.2, 114.1, 126.6, 127.8, 128.6, 128.9, 130.2, 145.0, 152.8, 153.5, 159.4, 165.5. HPLC : tR = 21.5分. MS : m/z 450 ([M + H + CH3CN]+).
【０１４２】
4-メトキシベンジル 6-シクロヘキシル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(43): 方法A, mp : 98-101℃, 白色の粉末 (54%), TLC : Rf = 0.42 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１４３】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.15-1.24 (m, 4H), 1.49-1.71 (m, 7H), 3.74 (s, 3H), 5.12 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.12-7.16 (m, 4H), 7.22-7.30 (m, 3H), 7.71 (s, 1H), 8.83 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 25.3, 26.2, 26.4, 28.7, 29.0, 38.1, 54.2, 55.5, 65.4, 98.5, 114.1, 126.6, 127.8, 128.6, 128.9, 130.1, 144.9, 152.9, 156.6, 159.4, 165.7. HPLC : tR = 21.7分. MS : m/z 462 ([M + H + CH3CN]+).
【０１４４】
4-メトキシベンジル 4,6-ジフェニル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(44): 方法A, mp : 82-84℃, 白色の粉末 (44%), TLC : Rf = 0.33 (cHex/AcOEt 4:6)
【０１４５】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.72 (s, 3H), 4.70 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.75 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.23 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.29-7.31 (m, 3H), 7.33-7.37 (m, 7H), 7.88 (s, 1H), 9.33 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 54.6, 55.5, 65.2, 100.4, 113.9, 126.7, 127.9, 128.2, 128.3, 128.8, 129.0, 129.4, 129.7, 135.3, 144.7, 149.9, 152.5, 159.2, 165.3. HPLC : tR = 17.8分. MS : m/z 456 ([M + H + CH3CN]+).
【０１４６】
4-メトキシベンジル 6-ベンジル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(45): 方法A, mp : 140-142℃, 白色の粉末 (64%), TLC : Rf = 0.23 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１４７】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.74 (s, 3H), 3.92 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 4.19 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.96 (s, 2H), 5.18 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.09 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.16-7.19 (m, 2H), 7.21-7.31 (m, 8H), 7.78 (s, 1H), 9.36 (s, 1H). 13C NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 35.8, 54.3, 55.5, 65.4, 100.3, 114.1, 126.7, 126.9, 127.8, 128.5, 128.7, 128.8, 128.9, 130.1, 138.1, 144.9, 150.9, 152.6, 159.4, 165.4. HPLC : tR = 19.8分. MS : m/z 429 ([M + H]+).
【０１４８】
4-メトキシベンジル 2-オキソ-6-フェノキシメチル-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(46): 方法A, mp : 171-173℃, 白色の粉末 (23%), TLC : Rf = 0.27 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１４９】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.73 (s, 3H), 4.96-5.23 (m, 5H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.90-6.95 (m, 3H), 7.12 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.21-7.29 (m, 7H), 7.86 (s, 1H), 9.23 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 54.4, 55.5, 64.0, 65.8, 101.5, 114.1, 115.1, 121.6, 126.8, 128.0, 128.3, 129.0, 129.9, 130.2, 144.3, 146.6, 152.3, 158.2, 159.4, 165.0. HPLC : tR = 21.1分. MS : m/z 486 ([M + H + CH3CN]+).
【０１５０】
4-メトキシベンジル 2-オキソ-6-(ベンズアミドメチル)-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(47): 方法A, mp : 213-216℃, 白色の粉末 (42%), TLC : Rf = 0.15 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１５１】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.73 (s, 3H), 4.54 (dd, J = 5.6, 15.6 Hz, 1H), 4.77 (dd, J = 5.6, 15.6 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 5.18 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.22-7.30 (m, 5H), 7.48-7.57 (m, 3H), 7.82 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.69 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.82 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 31.2, 54.5, 55.5, 65.5, 100.1, 114.1, 126.8, 127.9, 128.6, 128.8, 128.9, 130.0, 132.0, 134.1, 144.6, 149.2, 152.2, 159.4, 165.2. HPLC : tR = 17.2分. MS : m/z 472 ([M + H]+).
【０１５２】
4-メトキシベンジル 2-オキソ-4-フェニル-6-(チオフェン-2-イル)-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(48): 方法A, mp : 78-80℃, 黄色の粉末 (10%), TLC : Rf = 0.20 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１５３】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.73 (s, 3H), 4.80 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.85 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.95 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.05-7.07 (m, 1H), 7.23-7.25 (m, 1H), 7.29-7.38 (m, 5H), 7.67 (dd, J = 0.8, 5.2 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 9.38 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 54.6, 55.5, 65.5, 102.4, 114.0, 126.6, 127.3, 128.0, 128.2, 128.7, 129.0, 129.8, 129.9, 134.7, 142.0, 144.2, 152.5, 159.3, 165.3. HPLC : tR = 17.3分. MS : m/z 421 ([M + H]+).
【０１５４】
4-メトキシベンジル 2-オキソ-4-フェニル-6-(チオフェン-2-イルメチル)-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(49): 方法A, mp : 140-142℃, 白色の粉末 (14%), TLC : Rf = 0.30 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１５５】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.74 (s, 3H), 4.12 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 5.16 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.93 (dd, J = 3.6, 5.2 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.11-7.17 (m, 4H), 7.24-7.27 (m, 3H), 7.34 (dd, J = 0.8, 5.2 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 9.44 (s, 1H). 13C NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 30.8, 54.3, 55.5, 65.5, 99.6, 114.1, 125.3, 126.7, 126.7, 126.9, 127.9, 128.5, 128.9, 130.1, 139.9, 144.7, 150.5, 152.5, 159.4, 165.2. HPLC : tR = 19.1分. MS : m/z 476 ([M + H + CH3CN]+).
【０１５６】
4-メトキシベンジル 1,6-ジメチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(50): 方法B, フラッシュクロマトグラフィーで精製 (SiO2, cHex/AcOEt), mp : 134-136℃, 黄色の固体 (71%), TLC : Rf = 0.43 (cHex/AcOEt 4:6)
【０１５７】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.50 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 5.00 (s, 2H), 5.14 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.15-7.17 (m, 4H), 7.24-7.30 (m, 3H), 7.96 (d, J = 4.0 Hz, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 16.5, 30.2, 52.7, 55.5, 65.5, 102.6, 114.2, 126.5, 127.8, 128.7, 128.9, 130.1, 144.3, 146.6, 151.6, 159.4, 165.8. HPLC : tR = 17.6分. MS : m/z 367 ([M + H]+).
【０１５８】
4-メトキシベンジル 1,3,6-トリメチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(51): 方法B, フラッシュクロマトグラフィーで精製 (SiO2, cHex/AcOEt), 黄色の液体 (35%)
【０１５９】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.51 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 3.28 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 5.04 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.23 (s, 1H), 6.88 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.14-7.27 (m, 7H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 16.7, 31.0, 34.4, 55.3, 60.8, 65.9, 103.3, 113.8, 126.7, 127.8, 128.2, 128.6, 130.1, 140.8, 149.7, 153.7, 159.5, 165.8. HPLC : tR = 20.8分. MS : m/z 381 ([M + H]+).
【０１６０】
4-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-1,6-ジメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(53): 方法B, 黄色の固体 (49 %), mp : 112-113℃. TLC : Rf = 0.28 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１６１】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.49 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 5.03 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 5.41 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.15-6.19 (m, 1H), 6.32 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.24 (d, J = 0.8 Hz, 1H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 16.6, 30.4, 47.6, 55.3, 65.9, 101.3, 105.8, 110.2, 113.9, 128.3, 129.8, 142.3, 151.4, 154.5, 155.0, 159.5, 165.6. HPLC : tR = 16.1分. MS m/z 357 ([M + H]+).
【０１６２】
4-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-1,3,6-トリメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(54)の製造：化合物54を、方法Bを用いて、4-メトキシベンジル 3-オキソブタノエート 2(111 mg)、フラン-2-カルボキシアルデヒド(50 μL)およびN,N'-ジメチルウレア(66 mg)から製造した。シリカゲルでのクロマトグラフィー(cHex/EtOAc = 100/0〜70/30)により単離し、黄色の油状物として54を得た(46%)。TLC: Rf = 0.28 (cHex/EtOAc = 1/1).
【０１６３】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.48 (s, 3H), 2.96 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 5.02 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.08 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.28 (s, 1H), 6.00 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.22-6.23 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.26 (s, J = 0.8 Hz, 1H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 16.7, 31.3, 34.9, 54.5, 55.4, 66.0, 100.5, 107.0, 110.2, 114.0, 128.5, 129.9, 142.5, 151.5, 153.3, 154.1, 159.6, 165.6. HPLC : tR = 19.1 min. MS : m/z 371 ([M + H]+). HRMS : 計算値 371.1607 実測値 371.1592 ([M + H]+).
【０１６４】
3-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(55)の製造：化合物55を、方法Bを用いて、3-メトキシベンジル 3-オキソブタノエート 7(111 mg)、フラン-2-カルボキシアルデヒド(50 μL)およびウレア(45 mg)から製造した。シリカゲルでのクロマトグラフィー(cHex/EtOAc = 100/0〜50/50)により単離し、橙色の固体として55を得た(70%)。mp : 165-166℃. TLC: Rf = 0.35 (cHex/EtOAc = 4/6).
【０１６５】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.38 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 5.07 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.52 (m, 2H), 6.09 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.25-6.27 (m, 1H), 6.78-6.85 (s, 3H), 7.21-7.32 (m, 3H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 19.1, 49.1, 55.4, 66.1, 89.1, 106.4, 110.5, 113.5, 113.7, 120.3, 129.8, 137.8, 142.7, 154.7, 157.1, 159.9, 171.8. HPLC : tR = 13.4分. MS : m/z 343 ([M + H]+). HRMS: 計算値 341.1137 実測値 341.1140 ([M - H]-).
【０１６６】
3-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-1,6-ジメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(56): 方法B, 黄色の固体 (51 %), mp : 155-156℃. TLC : Rf = 0.27 (cHex/AcOEt 1:1)
【０１６７】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.51 (s, 3H), 3.18 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 5.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.45 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.01-6.02 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.20-6.22 (m, 1H), 6.77-6.82 (m, 3H), 7.19-7.23 (m, 1H), 7.26 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 16.7, 30.5, 47.6, 55.3, 66.0, 101.2, 105.9, 110.3, 113.4, 113.7, 120.2, 129.6, 137.8, 142.4, 151.8, 154.5, 154.9, 159.8, 165.5. HPLC : tR = 16.3分. MS m/z 357 ([M + H]+).
【０１６８】
3-メトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-1,3,6-トリメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(57)の製造：化合物57を、方法Bを用いて、3-メトキシベンジル 3-オキソブタノエート 7(111 mg)、フラン-2-カルボキシアルデヒド(50 μL)およびN,N'-ジメチルウレア(66 mg)から製造した。シリカゲルでのクロマトグラフィー(cHex/EtOAc = 100/0〜70/30)により単離し、黄色の油状物として57を得た(43%)。TLC: Rf = 0.31 (cHex/EtOAc = 6/4).
【０１６９】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.50 (s, 3H), 2.97 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 5.05 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 6.03 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.21-6.23 (m, 1H), 6.79-6.82 (m, 3H), 7.20-7.24 (m, 1H), 7.27 (s, J = 0.8 Hz, 1H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 16.7, 31.3, 34.9, 54.4, 55.3, 66.0, 100.3, 107.0, 110.2, 113.4, 113.7, 120.2, 129.7, 137.9, 142.5, 151.8, 153.3, 154.1, 159.9, 165.4. HPLC : tR = 19.3分. MS : m/z 371 ([M + H]+). HRMS : 計算値 371.1607 実測値 371.1595 ([M + H]+).
【０１７０】
3,4-ジメトキシベンジル 4-(フラン-2-イル)-1,3,6-トリメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(58): 方法B, 白色の固体 (44 %), mp : 122-124℃. TLC : Rf = 0.28 (cHex/AcOEt 6:4)
【０１７１】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.50 (s, 3H), 2.98 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 5.11 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 6.04 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.21-6.22 (m, 1H), 6.77-6.78 (m, 3H), 7.26 (s, J = 0.8 Hz, 1H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 16.7, 30.4, 34.9, 54.5, 55.9, 56.1, 61.6, 100.7, 107.0, 110.2, 111.6, 113.7, 115.4, 125.8, 142.5, 151.5, 151.7, 153.3, 153.6, 154.2, 165.6. HPLC : tR = 19.5分. MS m/z 401 ([M + H]+).
【０１７２】
ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルメチル 4-(フラン-2-イル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(59)の製造：化合物59を、方法Bを用いて、3,4-(メチレンジオキシ)ベンジル 3-オキソブタノエート 8(118 mg)、フラン-2-カルボキシアルデヒド(50 μL)およびウレア(45 mg)から製造した。シリカゲルでのクロマトグラフィー(cHex/EtOAc = 100/0〜50/50)により単離し、白色の固体として59を得た(45%)。mp : 169-171℃. TLC: Rf = 0.33 (cHex/EtOAc = 4/6).
【０１７３】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.24 (s, 3H), 4.95 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.99 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.21 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.00 (s, 2H), 6.05 (d, J = 3.2Hz, 1H), 6.34-6.35 (m, 1H), 6.76 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.86 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 9.30 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.2, 48.1, 65.3, 96.8, 101.4, 105.8, 108.5, 108.8, 110.8, 122.0, 130.7, 142.6, 147.3, 147.7, 150.5, 152.7, 156.3, 165.2. HPLC : tR = 12.7分. MS : m/z 357 ([M + H]+). HRMS: 計算値 355.0930 実測値 355.0930 ([M - H]-).
【０１７４】
ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルメチル 4-(フラン-2-イル)-1,6-ジメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(60): 方法B, 黄色の固体 (30 %), mp : 141-143℃. TLC : Rf = 0.42 (cHex/AcOEt 4:6)
【０１７５】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.49 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 5.00 (s, 2H), 5.21 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.01 (s, 2H), 6.05 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.34-6.35 (m, 1H), 6.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.87 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 4.0 Hz, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 16.5, 30.3, 46.9, 65.6, 100.2, 101.5, 105.9, 108.5, 108.9, 110.8, 122.1, 130.5, 142.7, 147.4, 147.7, 152.7, 153.6, 155.9, 165.4. HPLC : tR = 15.7分. MS m/z 371 ([M + H]+).
【０１７６】
ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルメチル 4-(フラン-2-イル)-1,3,6-トリメチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(61)の製造：化合物61を、方法Bを用いて、3,4-(メチレンジオキシ)ベンジル 3-オキソブタノエート 8(118 mg)、フラン-2-カルボキシアルデヒド(50 μL)およびN,N'-ジメチルウレア(66 mg)から製造した。シリカゲルでのクロマトグラフィー(cHex/EtOAc = 100/0〜70/30)により単離し、褐色の油状物として61を得た(70%)。TLC: Rf = 0.28 (cHex/EtOAc = 1/1).
【０１７７】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.51 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 3.23 (s, 3H), 5.00 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.08 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 5.94 (s, 2H), 6.05 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.25-6.26 (m, 1H), 6.74-6.75 (m, 3H), 7.30 (d, J = 0.8 Hz, 1H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 16.5, 31.1, 34.7, 54.2, 65.9, 100.2, 101.1, 106.8, 108.1, 108.7, 110.1, 121.8, 130.0, 142.3, 147.4, 147.7, 151.5, 153.1, 153.9, 165.3. HPLC: tR = 18.5分. MS: m/z 385 ([M + H]+). HRMS: 計算値 385.1400 実測値 385.1386 ([M + H]+).
【０１７８】
ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルメチル 4-(フラン-3-イル)-6-メチル-2-オキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(62):  方法B, 白色の固体 (63 %), mp : 172-173℃. TLC : Rf = 0.30 (cHex/AcOEt 4:6)
【０１７９】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.21 (s, 3H), 5.00 (s, 2H), 5.10 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.00 (s, 2H), 6.30 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.82-6.88 (m, 3H), 7.31 (s, 1H), 7.54 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 9.22 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.2, 46.3, 65.3, 99.0, 101.4, 108.5, 109.0, 109.5, 122.2, 129.4, 130.7, 139.0, 144.0, 147.4, 147.7, 149.8, 153.1, 165.4. HPLC : tR = 12.5分. MS m/z 357 ([M + H]+).
【０１８０】
II- 5) 化合物19、20、52、63に関する合成法およびデータ分析
6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボン酸(19)の製造：メタノール(60 mL)中の32(21.4 mmol)の溶液に、水素雰囲気下、Pd/C 10% (0.1当量, 2.14 mmol)を加えた。次いで、その混合物を室温で3.5時間撹拌した。過剰の溶媒を真空下で除き、残渣を0.5M KOH (100 mL)中に懸濁させた。室温で3時間激しく撹拌した後、その懸濁液をセライトで濾過した。濾液をHCl 37% (〜15 mL)でpH 1-2に酸性化し、得られる沈殿を濾取し、風乾し、白色の固体として19を得た(79%)。mp : 232-233℃. TLC: Rf = 0.35 (cHex/EtOAc = 1/1).
【０１８１】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.24 (s, 3H), 5.11 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.24-7.34 (m, 5H), 7.68 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 11.89 (bs, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 18.2, 54.4, 100.3, 126.7, 127.6, 128.8, 145.3, 148.2, 152.8, 167.6. HPLC : tR = 3.9分. MS : m/z 233 ([M + H]+).
【０１８２】
N-(ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルメチル) 6-メチル-2-オキソ-4-フェニル-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシアミド(63)の製造：10 mLのマイクロウエーブバイアル中で、カルボン酸 19(200 mg)、ピペロニルアミン(107 μL)、EDCI(247 mg)およびHBTU(213 mg)をジメチルアセトアミド(2 mL)中に溶解させた。ジイソプロピルエチルアミン(233 μL)を加え、その混合物を80℃で30分間、マイクロウエーブ処理した。過剰の溶媒を真空下で除去し、残渣を酢酸エチル(20 mL)中に溶解させた。有機溶液を1.0 M HCl(2×5 mL)および飽和NaCl(5 mL)で洗浄した。有機層を合わせ、乾燥(Na2SO4)し、真空下に濃縮した。得られる粗残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー(DCM/MeOH = 100/0〜90/10)により精製し、褐色の固体として63を得た(36%)。mp : 235-237℃. TLC: Rf = 0.15 (cHex/EtOAc = 4/6).
【０１８３】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.00 (s, 3H), 4.13 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 5.29 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.95 (s, 2H), 6.49 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.73 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.21-7.30 (m, 5H), 7.49 (s, 1H), 8.05 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 17.4, 42.3, 55.4, 101.1, 105.2, 108.1, 108.2, 120.6, 126.8, 127.7, 128.8, 134.1, 144.7, 146.2, 147.5, 149.8, 153.1, 166.7. HPLC : tR = 7.5分. MS : m/z 366 ([M + H]+).
【０１８４】
6-メチル-4-フェニル-2-チオキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボン酸(20)の製造：アルゴン下、無水テトラヒドロフラン(5.5 mL)中の39(2.4 mmol)の溶液に、ジエチルアミン(24.3 mmol)およびテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0.24 mmol)を加えた。この反応混合物を室温で4時間撹拌した。過剰の溶媒を真空下で除去した。残渣に0.5M KOH(20 mL)を加え、得られる懸濁液をセライトで濾過した。濾液をHCl 37%でpH 1-2に酸性化し、得られる沈殿を濾取し、風乾し、黄色の粉末として20を得た(35%)。
【０１８５】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.28 (s, 3H), 5.15 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.22-7.37 (m, 5H), 9.60 (s, 1H), 10.26 (s, 1H), 12.25 (bs, 1H). MS : m/z 249 ([M + H]+).
【０１８６】
4-メトキシベンジル 6-メチル-4-フェニル-2-チオキソ-1,2,3,4-テトラヒドロピリミジン-5-カルボキシレート(52)の製造：無水ジメチルアセトアミド(6.0 mL)中の 20(0.83 mmol)、4-メトキシベンジルアルコール(1.67 mmol)、EDCI(1.25 mmol)およびDMAP(0.83 mmol)の溶液を、アルゴン下、80℃で5時間加熱した。反応混合物を真空下で濃縮し、続く分取HPLC(19×150 mm-5 μm, XBridge C18)精製により、白色の固体として52を得た(18%)。mp : 174-175℃. TLC: Rf = 0.77 (cHex/EtOAc = 4/6).
【０１８７】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.29 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 4.95 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.15-7.17 (m, 2H), 7.28-7.32 (m, 3H), 9.66 (s, 1H), 10.37 (s, 1H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 17.6, 54.4, 55.5, 65.5, 100.8, 114.1, 126.8, 128.2, 128.5, 129.0, 130.1, 143.7, 146.0, 159.4, 165.4, 174.6. HPLC : tR = 18.4分. MS : m/z 369 ([M + H]+).
【０１８８】
III- 生物学的結果
合成された化合物のいくつかを、FRTL5細胞におけるヨウ化物の取り込みを阻害する能力について評価した。IC50値を、少なくとも2つの独立した実験で測定した。分析の対照として、過塩素酸ナトリウムを用いた(IC50 = 0.1 μM)。N. Lecat-Guilletら, ChemBioChem, 2008, 9, 889-895の公表文献で評価された化合物1(化合物ITB-9)を、参照化合物とした。
【０１８９】
III- 1) 生物学的評価に関する手順
合成された化合物の生物学的評価：
F. Waltzら, Anal. Biochem., 2012, 396, 91-95に記載された非放射性のヒ素／セリウムアッセイを用い、FRTL5細胞で、それぞれの化合物の生物学的活性を測定した。化合物の効力を、ヨウ化物の取り込みの50％阻害を達成するために必要な化合物の濃度であるIC50として表した。簡単に言えば、70-90％コンフルエンス(confluence)でFRTL5細胞に、化合物(200 μM、10 μM、0.5 μM、25 nM、1.2 nM、60 pM、30 pMおよび0.15 pM 最終)、続いてNaI(10μM 最終)を加えた。20 ± 1℃で1時間インキュベーション後、上清を除き、直ちに、その細胞を、改変As/Ce Sandell-Kolthoff反応を用いるヨウ化物の含量に対してアッセイした。アッセイコントロールとして、それぞれのマイクロプレートでNaClO4を試験した。全ての化合物のIC50値を、それぞれ少なくとも3回測定した。
【０１９０】
化学品と溶液
取込み緩衝液は、HEPES(10 mM 最終)が補充されたHankの平衡塩溶液で構成された。特に明記しない限り、全ての化学品はSigma-Aldrichから入手した。硫酸アンモニウムセリウム(IV)の母溶液(42 mM)：硫酸アンモニウムセリウム(IV)水和物(12.53 g, CAS 10378-47-9)を水(200 mL)中に溶解させた。次いで、氷浴で冷却した溶液に濃H2SO4(50 mL)を加えた。冷却後、この溶液を水で500 mLに希釈した。この溶液を4℃で6か月までの間、活性の損失なしに暗所に保存した。最良の結果を出すには、この溶液を、最初の使用前に1週間4℃で放置した。この溶液を使用前に水で4倍に希釈した。
【０１９１】
亜ヒ酸ナトリウム(III)の母溶液(96 mM)：酸化ヒ素(III)(4.75 g, CAS 1327-53-3)およびNaCl(24 g)を2 M NaOH(50 mL)中に溶解させた。次いで、その混合物を水で500 mLに希釈し、不溶性物質を除くために遠心分離した。この溶液を室温で6か月までの間、活性の損失なしに暗所に保存した。この溶液を使用前に水で4倍に希釈した。
【０１９２】
ヨウ化物標準(S1〜S7)：100 mLのメスフラスコ中で、29.98 mgのNaIを水に溶解させ、2 mMの保存溶液を作った。この保存溶液を100 mLのメスフラスコ中で100倍に希釈した。水中での100、200、300、400、500、600、700 nMのNaI標準を製造するために、この最後の溶液を用いた。これらの溶液を、室温で2か月までの間、暗所で保存した。
【０１９３】
試験化合物の保存溶液を、DMSO(20 mM)中で製造し、NaClO4 の保存溶液を水(20 mM)中で製造した。これらの保存溶液を4℃で2か月までの間保存した。試料希釈：アッセイのその日、娘プレート(透明な平底96-ウエル ポリスチレンマイクロプレート, Costar 9017)を20 mMの保存溶液から製造した。NaClO4(カラム2)およびDHPM試料(カラム4〜11)を取込み緩衝液中で10×最終濃度に希釈した。
【０１９４】
細胞培養：
FRTL5細胞をF. S. Ambesi-Impiombatoら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1980, 77, 3455-3459に記載されているように培養した。簡単に言えば、5% 加熱不活性化したウシ胎仔血清(Invitrogen)、2 mM L-グルタミン、100 U/mL ペニシリン、0.1 mg/mL ストレプトマイシン、10 μg/mL インスリン、10 nM ヒドロコルチゾン、10 ng/mL Gly-His-Lys アセテート、1 mU/mL TSH、5 μg/mL トランスフェリンが補充されたCoonの改変F12培地中、37℃、5% CO2でFRTL5細胞を培養した。ヨウ化物の取込みアッセイのために、250,000 細胞/mLの濃度を有するFRTL5細胞の200 μLを、Multidrop 384 (ThermoFisher Scientific)を用いて、透明な丸底96-ウエル ポリスチレンマイクロプレート(Costar 3628)中のそれぞれのウエルに分配し、コンフルエンスが80-90%に達する(3-4 日)までさらに培養した。
【０１９５】
ヨウ化物取り込み：
96-ニードル ヘッド プレート ウォッシャーPW 384 (Tecan)を用いて、連続的吸引／分配(dispense)サイクル(600 μL)により、80-90%のコンフルエンスでのFRTL5単層細胞の培地を取込み緩衝液(20℃)と交換した。サイクルの最後に、各ウエルに80 μLの新鮮な緩衝液が残るよう、96-ニードル ヘッドを垂直の位置に配置した。96-チップ ヘッド ピペッターLiquidator 96 (Mettler Toledo)を用いて、アッセイ プレートに、娘プレートからの試料(各10 μL)を一度に移した。その直後に、Liquidator 96を用いて、アッセイ プレートの各ウエルに100 μMの NaI溶液の10 μLを加えた。そのアッセイ プレートを20 ± 1℃で60分間、暗所に放置した。次いで、そのアッセイ プレートを、PW 384プレート ウォッシャーを用いて冷(4℃)取込み緩衝液で洗浄し、吸収紙の上にアッセイ プレートを反転させることによって直ちに残存上清を廃棄した。
【０１９６】
As/Ceによるヨウ化物の測定：
ヨウ化ナトリウム標準(S1〜S7)および水(S0)を、アッセイ プレートの第1および最後のカラムに重複して(各100 μL)分配した。Multidrop 384で、カラムに水(100 μL)を加えた。Multidrop 384を用いて、硫酸アンモニウムセリウム(IV)溶液(10.5 mM)の100 μL、続いて亜ヒ酸ナトリウム(III)溶液(24 mM)の100 μLをカラムに分配した。そのアッセイ プレートを20 ± 1℃で30分間放置した。SpectraMax Plus 384 (Molecular Devices)で、直ちに420 nmの吸光度(Abs420)を記録した。ヨウ化物標準濃度(S0〜S7)に対する平均Abs420 (n = 2)の対数変換をプロットすることによって、各プレートについての検量線を作成した。試料中のヨウ化物の濃度を、検量線の線形回帰後に決定した。IC50決定に対して、Visual Basic for Excel (Microsoft)で開発された「社内」のアプリケーションを用いた4パラメータのシグモイドHill式に非線形回帰(最小二乗)によって実験データを適合させた。
【０１９７】
細胞の生存
細胞の生存をMTT-ベース アッセイ(T. Mosmann, J. Immunol. Methods, 1983, 65, 55-63)によって試験した。簡単に言うと、〜50% コンフルエンスでのFRTL5細胞に化合物(1 μM)を加えた。細胞の生存をMTT(1.2 mg/mL)の添加前の24時間終点で測定した。37℃で3時間のインキュベーション後、96-ウエル プレート リーダー(Spectramax plus 384, Molecular Devices)を用いて、570 nmでの吸光度を測定した。Ouabainを8つの異なる濃度(2 μM-1 mM)でアッセイ コントロールとして試験した。
【０１９８】
III- 2) 結果
表１：FRTL5細胞におけるヨウ化物の取り込みに対する阻害活性(IC50) 
【化１４】
2015522604.tif 000016
【０１９９】
【表１】
2015522604.tif 000017
【０２００】
IC50値は、独立した3回または4回の実験から平均化した。2倍の標準偏差は許容可能と判断された。矢印の先はR1のDHPM環のC-4への結合点を示す。
【０２０１】
表２：FRTL5細胞におけるヨウ化物の取り込みに対する阻害活性(IC50) 
【化１５】
2015522604.tif 000018
【０２０２】
【表２】
2015522604.tif 000019
【０２０３】
IC50値は、独立した3回または4回の実験から平均化した。2倍の標準偏差は許容可能と判断された。矢印の先はR5のY(OまたはNH)ヘテロ原子への結合点を示す。
【０２０４】
表３：FRTL5細胞におけるヨウ化物の取り込みに対する阻害活性(IC50)
【化１６】
2015522604.tif 000020
【表３】
2015522604.tif 000021
【０２０５】
IC50値は、独立した3回または4回の実験から平均化した。2倍の標準偏差は許容可能と判断された。矢印の先はR2のDHPM環のC-6への結合点を示す。
【０２０６】
表４：FRTL5細胞におけるヨウ化物の取り込みに対する阻害活性(IC50)
【化１７】
2015522604.tif 000022
【０２０７】
【表４】
2015522604.tif 000023
【０２０８】
IC50値は、独立した3回または4回の実験から平均化した。2倍の標準偏差は許容可能と判断された。矢印の先はR3のDHPM環のN-1およびR4のDHPM環のN-3への結合点を示す。
【０２０９】
表５：FRTL5細胞におけるヨウ化物の取り込みに対する阻害活性(IC50)
【化１８】
2015522604.tif 000024
【０２１０】
【表５】
2015522604.tif 000025
【０２１１】
IC50値は、独立した3回または4回の実験から平均化した。2倍の標準偏差は許容可能と判断された。矢印の先はR5のY(OまたはNH)ヘテロ原子、R1のDHPM環のC-4、R3のDHPM環のN-1およびR4のDHPM環のN-3への結合点を示す。
【０２１２】
FRTL5細胞の生存も、一般的なMTTアッセイを用いて、1 μMでの前記の化合物の存在下で試験した。DHPMsのいずれも、この濃度で細胞増殖に影響を与えなかった。
【国際調査報告】
2015522604.tif 000028
2015522604.tif 000029
2015522604.tif 000030
2015522604.tif 000031
2015522604.tif 000032
2015522604.tif 000033
2015522604.tif 000034
2015522604.tif 000035
2015522604.tif 000036
2015522604.tif 000037