(57)【要約】本開示に記載されるものは、妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症および関連状態（子癇、ＨＥＬＬＰ（溶血、上昇した肝酵素、および低血小板数）症候群、左心室機能障害、および心不全が挙げられる）を予測および／またはモニターするための物質および方法である。より具体的には、妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症および関連状態の予測および／またはモニターにおける内因性タンパク質ガレクチン−３の使用が記載されている。さらに、記載されるものは、ガレクチン−３を阻害することによって、妊娠高血圧腎症および関連状態を予防および／または処置する方法である。
2015505368.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症または子癇のリスクを評価する方法であって、該方法が、該妊娠中または産後の女性由来の血液、血清、または血漿を含む試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、妊娠高血圧腎症または子癇のリスクを示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項２】
妊娠中または産後の女性における溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）のリスクを評価する方法であって、該方法が、該妊娠中または産後の女性由来の血液、血清、または血漿を含む試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、ＨＥＬＬＰのリスクを示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項３】
妊娠中または産後の女性における左心室機能障害のリスクを評価する方法であって、該方法が、該妊娠中または産後の女性由来の血液、血清、または血漿を含む試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、左心室機能障害のリスクを示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項４】
妊娠中または産後の女性における心不全のリスクを評価する方法であって、該方法が、該妊娠中または産後の女性由来の血液、血清、または血漿を含む試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、心不全のリスクを示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項５】
前記ガレクチン−３レベルが妊娠第１期の間に測定される、請求項１〜４のいずれか一項に記載される方法。
【請求項６】
前記ガレクチン−３レベルが妊娠第２期の間に測定される、請求項１〜４のいずれか一項に記載される方法。
【請求項７】
前記ガレクチン−３レベルが妊娠第３期の間に測定される、請求項１〜４のいずれか一項に記載される方法。
【請求項８】
前記ガレクチン−３レベルが過期に測定される、請求項１〜４のいずれか一項に記載される方法。
【請求項９】
前記ガレクチン−３レベルが産後に測定される、請求項１〜４のいずれか一項に記載される方法。
【請求項１０】
前記妊娠中または産後の女性由来のその後の試料におけるその後のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、ガレクチン−３レベルの変化を検出することをさらに含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
受胎前の前記女性由来の試料におけるガレクチン−３レベルを測定し、それによって、ガレクチン−３レベルの変化を検出することをさらに含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ガレクチン−３レベルの変化が、継時的なガレクチン−３レベルの増加である、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記妊娠中または産後の女性が、最小閾値より高いと決定されたガレクチン−３レベルを有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ガレクチン−３の変化が最小閾値より高い、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記最小閾値が６ｎｇ／ｍＬより高い、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記最小閾値が６〜１９ｎｇ／ｍＬの間である、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記最小閾値が１５〜２０ｎｇ／ｍＬの間である、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記最小閾値が２０〜２５ｎｇ／ｍＬの間である、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記最小閾値が２５〜３０ｎｇ／ｍＬの間である、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記最小閾値が３０ｎｇ／ｍＬより高い、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項２１】
前記測定されたガレクチン−３レベルがイムノアッセイによって決定される、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
抗ガレクチン−３療法のための、または抗ガレクチン−３療法で処置した妊娠中または産後の女性を評価する方法であって、該方法が、該妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、抗ガレクチン−３療法への応答性または抗ガレクチン−３療法に続く予後を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項２３】
前記抗ガレクチン−３療法が、少なくとも部分的に子癇；妊娠高血圧腎症；溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）；左心室機能障害；および／または心不全の症状を軽減するのに十分な量の化合物を投与することを含み、該化合物がガレクチン−３に結合する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記抗ガレクチン−３療法が、ガレクチン−３に結合することが可能な炭水化物を、前記妊娠中または産後の女性に投与することを含む、請求項２２または２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記炭水化物がペクチンまたはペクチン断片である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
個別の栄養アドバイスの候補として、妊娠中または産後の女性を同定する方法であって、該方法が、該妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、個別の栄養アドバイスの利益を得る可能性の増加を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項２７】
前記妊娠中または産後の女性由来のその後の試料におけるその後のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、ガレクチン−３レベルの変化を検出することをさらに含む、請求項２２〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ガレクチン−３レベルが６ｎｇ／ｍＬより高い、請求項２２〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ガレクチン−３レベルが３０ｎｇ／ｍＬより高い、請求項２２〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症または子癇の発症または進行をモニターする方法であって、該方法が、該妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、妊娠高血圧腎症または子癇の発症または進行を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項３１】
妊娠中または産後の女性における溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）の発症または進行をモニターする方法であって、該方法が、該妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、ＨＥＬＬＰの発症または進行を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項３２】
妊娠中または産後の女性における左心室機能障害の発症または進行をモニターする方法であって、該方法が、妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、左心室機能障害の発症または進行を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項３３】
妊娠中または産後の女性における心不全の発症または進行をモニターする方法であって、該方法が、該妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、心不全の発症または進行を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項３４】
前記妊娠中または産後の女性由来のその後の試料におけるその後のガレクチン−３レベルを測定し、それによって、ガレクチン−３レベルの変化を検出することをさらに含む、請求項３０〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記ガレクチン−３レベルの変化が、継時的なガレクチン−３レベルの増加である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記ガレクチン−３レベルが６ｎｇ／ｍＬより高い、請求項３０〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記ガレクチン−３レベルが３０ｎｇ／ｍＬより高い、請求項３０〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記ガレクチン−３レベルの変化が２ｎｇ／ｍＬより大きい、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項３９】
前記ガレクチン−３レベルの変化が１０ｎｇ／ｍＬより大きい、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項４０】
妊娠中の女性における子癇；妊娠高血圧腎症；溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）；左心室機能障害；および／または心不全を処置する方法であって、該方法が、該妊娠中の女性由来の血液、血清、または血漿試料におけるガレクチン−３レベルまたはガレクチン−３レベルの変化が、最小閾値を超える場合、該妊娠中の女性の胎児を出産させることを含む、方法。
【請求項４１】
前記妊娠中の女性の胎児を出産させることが、分娩を誘発することを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記妊娠中の女性の胎児を出産させることが、帝王切開を行うことを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
前記妊娠中の女性の胎児を出産させることが、オキシトシン、プロスタグランジン、およびミソプロストールからなる群から選択される化合物を投与することを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
前記プロスタグランジンがジノプロストンである、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記最小閾値が６ｎｇ／ｍＬより高い、請求項４０〜４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
前記最小閾値が３０ｎｇ／ｍＬより高い、請求項４０〜４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症を処置する方法であって、該方法が、ガレクチン−３の上昇した循環レベルを有すると同定された妊娠高血圧腎症の妊娠中または産後の女性におけるガレクチン−３を阻害し、少なくとも部分的に妊娠高血圧腎症の症状を軽減することを含む、方法。
【請求項４８】
前記症状が高血圧である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記妊娠中または産後の女性の安静時収縮期血圧および／または拡張期血圧が、少なくとも約５ｍｍＨｇ減少する、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記妊娠中または産後の女性の処置前の安静時血圧が、少なくとも約１４０／９０ｍｍＨｇである、請求項４８または４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記妊娠中または産後の女性の処置前の安静時血圧が、少なくとも約１６０／１１０ｍｍＨｇである、請求項４８または４９に記載の方法。
【請求項５２】
前記症状がタンパク尿である、請求項４７に記載の方法。
【請求項５３】
処置前の前記タンパク尿が、２４時間の回収期間で少なくとも約３００ｍｇのタンパク質である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
処置前の前記タンパク尿が、２４時間の回収期間で少なくとも約５ｇのタンパク質である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５５】
前記タンパク尿が、２４時間の回収期間で少なくとも約５０ｍｇ減少する、請求項５２〜５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
妊娠中または産後の女性における子癇を処置する方法であって、ガレクチン−３の上昇した循環レベルを有すると同定された子癇の妊娠中または産後の女性におけるガレクチン−３を阻害し、少なくとも部分的に痙攣を軽減することを含む、方法。
【請求項５７】
妊娠中または産後の女性における溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）を処置する方法であって、該方法が、ガレクチン−３の上昇した循環レベルを有すると同定された妊娠中または産後の女性におけるガレクチン−３を阻害し、少なくとも部分的に溶血、上昇した肝酵素、および低血小板数のうちの１つまたは複数を軽減することを含む、方法。
【請求項５８】
前記処置前の低血小板数が、約１００，０００／ｍｍ３未満の血小板数に相当する、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記処置前の低血小板数が、約５０，０００／ｍｍ３〜約１００，０００／ｍｍ３の間の血小板数に相当する、請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記処置前の低血小板数が、約５０，０００／ｍｍ３未満の血小板数に相当する、請求項５７に記載の方法。
【請求項６１】
前記上昇した肝酵素が、血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼおよび乳酸脱水素酵素である、請求項５７に記載の方法。
【請求項６２】
前記血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼが、約７０Ｕ／Ｌより高い処置前のレベルを有する、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記乳酸脱水素酵素が、約６００Ｕ／Ｌより高い処置前のレベルを有する、請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
前記溶血が、異常な末梢塗抹によって特徴づけられる、請求項５７に記載の方法。
【請求項６５】
前記溶血が、約６００Ｕ／Ｌよりも高い処置前の乳酸脱水素酵素レベルによって特徴づけられる、請求項５７に記載の方法。
【請求項６６】
前記溶血が、約１．２ｍｇ／ｄＬよりも高い処置前のビリルビンレベルによって特徴づけられる、請求項５７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年１月６日に出願された米国特許仮出願第６１／５８３，８８５号に対する優先権の利益を請求し、その全ての開示が、参照によって本開示に援用される。
【背景技術】
【０００２】
妊娠高血圧腎症およびその関連状態（例えば、子癇、ＨＥＬＬＰ症候群（溶血、上昇した肝酵素および低血小板数症候群）、左心室機能障害および心不全など）は、命を脅かす妊娠合併症である。米国において、これらの状態は、全ての妊娠中の女性の約５〜８％を苦しめる。妊娠高血圧腎症は、高血圧およびタンパク尿によって特徴づけられる。妊娠高血圧腎症を発症するほとんどの女性は、その後、上述の関連状態の１つを発症しない。しかしながら、場合によっては、妊娠高血圧腎症の女性は、てんかんまたは痙攣によって特徴づけられる子癇を発症し続け得る。妊娠高血圧腎症は、通常最初に現れるが、１つまたは複数の関連状態が妊娠高血圧腎症と同時に発症し得る。例えば、ＨＥＬＬＰの症状は、典型的に妊娠高血圧腎症の診断後に観察されるが、ＨＥＬＬＰの症状が、時々妊娠高血圧腎症の最初の指標であり得る。妊娠高血圧腎症および関連状態は、徐々に、または急に発症し得、妊娠中にいつでも発症し得、そして産後約６週間までの間持続し得る。
【０００３】
上述の状態の症状は、薬物（例えば、抗高血圧薬、副腎皮質ステロイドまたは抗痙攣薬）で処置され得；しかしながら、そのような処置は、その症状を軽減するだけで、症状の根本にある原因を処置しない。妊娠高血圧腎症およびその関連状態の現在唯一公知の治癒する方法は、胎児の出産である。女性の状態の重症度に依存して、分娩の早期誘発または帝王切開が必要であり得る。しかしながら、早期出産は、胎児の出産時体重および胎児の肺および他の器官の発達段階に依存して、胎児に死亡リスクを与える。
どの女性が妊娠高血圧腎症を獲得するか否かを予測する現在の方法は、年齢、肥満、および糖尿病、高血圧または腎疾患の既往歴のようなリスク因子、ならびに血管新生因子のようなバイオマーカーのアッセイに依存する（Ｓｃａｚｚｏｃｃｈｉｏ  （２０１１）  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｏｂｓｔｅｔ．  Ｇｙｎｅｃｏｌ．  ２３：６５−７１）。しかしながら、バイオマーカーのレベルの測定に基づいて妊娠高血圧腎症を予測しようと試みる現在の試験は、不十分な予測精度、および／または統計モデルを使用する複数の試験と組み合わせる必要性によって制限される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｓｃａｚｚｏｃｃｈｉｏ  （２０１１）  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｏｂｓｔｅｔ．  Ｇｙｎｅｃｏｌ．  ２３：６５−７１
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
ヒトタンパク質ガレクチン−３のレベルは、妊娠高血圧腎症および関連状態を予測および／またはモニターするために使用され得る。これらの状態としては、例えば、妊娠中または産後の女性における、子癇、ＨＥＬＬＰ（溶血、上昇した肝酵素および低血小板数）症候群、左心室機能障害、および／または心不全が挙げられ得る。妊娠中または産後の女性の体液（例えば、血液、血漿または血清）中のガレクチン−３の濃度または活性は、妊娠高血圧腎症および／または関連状態の発症（例えば、発症初期または進行など）のリスクを評価するために決定され得る。その上、妊娠中または産後の女性のガレクチン−３の血中濃度または活性は、処置の有効性を決定するために、妊娠高血圧腎症および／または関連状態の処置の間、モニターされ得る。さらに、ガレクチン−３の阻害は、妊娠高血圧腎症および／または関連状態を処置するために使用され得る。
【０００６】
一実施形態において、妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症または子癇リスクを評価する方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の血液、血清または血漿を含む試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、妊娠高血圧腎症または子癇リスクを示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。
【０００７】
別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）リスクを評価する方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の血液、血清または血漿を含む試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、ＨＥＬＬＰリスクを示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。
【０００８】
さらに別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における左心室機能障害リスクを評価する方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の血液、血清または血漿を含む試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、左心室機能障害リスクを示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。
【０００９】
さらに別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における心不全リスクを評価する方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の血液、血清または血漿を含む試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、心不全リスクを示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。
【００１０】
さらに別の実施形態において、抗ガレクチン−３療法のための、または抗ガレクチン−３療法で処置した妊娠中または産後の女性を評価する方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、抗ガレクチン−３療法への応答性または抗ガレクチン−３療法に続く予後を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。抗ガレクチン−３療法は、少なくとも部分的に子癇；妊娠高血圧腎症；溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）；左心室機能障害；および／または心不全の症状を軽減するのに十分な量の化合物を投与することを含んでもよく、上記化合物はガレクチン−３に結合する。特定の実施形態において、抗ガレクチン−３療法は、ガレクチン−３に結合することが可能な炭水化物を、妊娠中または産後の女性に投与することを含んでもよい。例えば、炭水化物はペクチンまたはペクチンの断片であってもよい。
【００１１】
さらに別の実施形態において、個別の栄養アドバイスの候補として、妊娠中または産後の女性を同定する方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、個別の栄養アドバイスの利益を得る可能性の増加を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。
【００１２】
さらに別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症または子癇の発症または進行をモニターする方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、妊娠高血圧腎症または子癇の発症または進行を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。
【００１３】
さらに別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）の発症または進行をモニターする方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、ＨＥＬＬＰの発症または進行を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。
【００１４】
さらに別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における左心室機能障害の発症または進行をモニターする方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、左心室機能障害の発症または進行を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。
【００１５】
さらに別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における心不全の発症または進行をモニターする方法が提供される。例えば、妊娠中または産後の女性由来の試料中のガレクチン−３レベルが測定され得、それによって、心不全の発症または進行を示すガレクチン−３レベルの存在または非存在を決定する。
【００１６】
さらに別の実施形態において、妊娠中の女性における子癇；妊娠高血圧腎症；溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）；左心室機能障害；および／または心不全を処置する方法が提供される。例えば、上記方法は、妊娠中の女性由来の血液、血清または血漿試料中のガレクチン−３レベルまたはガレクチン−３レベルの変化が、最小閾値を超えた場合、妊娠中の女性の胎児を出産することを含んでもよい。妊娠中の女性の胎児の出産としては、例えば、分娩の誘発、帝王切開の実行、および／またはオキシトシン、プロスタグランジンおよびミソプロストールからなる群から選択される化合物の投与を含んでもよい。ある場合には、プロスタグランジンは、ジノプロストンであってもよい。
【００１７】
さらに別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症を処置する法穂が提供される。例えば、ガレクチン−３の上昇した循環レベルを有すると同定された妊娠高血圧腎症の妊娠中または産後の女性におけるガレクチン−３は、阻害され得、少なくとも部分的に妊娠高血圧腎症の症状を軽減する。この症状は、例えば、高血圧であってもよい。いくつかの実施形態において、妊娠中または産後の女性の安静時収縮期血圧および／または拡張期血圧は、少なくとも約５ｍｍＨｇ減少してもよい。処置前の妊娠中または産後の女性の安静時血圧は、少なくとも約１４０／９０ｍｍＨｇまたは少なくとも約１６０／１１０ｍｍＨｇであってもよい。別の実施形態において、上記症状は、タンパク尿であってもよい。処置前のタンパク尿は、２４時間の回収期間で少なくとも約３００ｍｇのタンパク質、または２４時間の回収期間で少なくとも約５ｇのタンパク質であってもよい。ある場合には、タンパク尿は、２４時間の回収期間で少なくとも約５０ｍｇまで減少してもよい。
【００１８】
さらに別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における子癇を処置する方法が提供される。例えば、ガレクチン−３の上昇した循環レベルを有すると同定された子癇の妊娠中または産後の女性におけるガレクチン−３は、阻害され得、少なくとも部分的に痙攣を軽減する。
【００１９】
さらに別の実施形態において、妊娠中または産後の女性における溶血、上昇した肝酵素、低血小板（ＨＥＬＬＰ）を処置する方法が提供される。例えば、ガレクチン−３の上昇した循環レベルを有すると同定された妊娠中または産後の女性におけるガレクチン−３は、阻害され得、少なくとも部分的に溶血、上昇した肝酵素、および低血小板数のうちの１つまたは複数を軽減する。処置前の低血小板数は、例えば、約１００，０００／ｍｍ３未満、約５０，０００／ｍｍ３〜約１００，０００／ｍｍ３の間、または約５０，０００／ｍｍ３未満の血小板数に相当し得る。いくつかの実施形態において、上昇した肝酵素は、血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼおよび乳酸脱水素酵素であってもよい。血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼは、例えば、約７０Ｕ／Ｌより高い処置前のレベルまたは約６００Ｕ／Ｌよりも高い処置前のレベルを有してもよい。特定の実施形態において、溶血は、異常な末梢塗抹（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｓｍｅａｒ）によって特徴づけられてもよい。場合によっては、溶血は、約６００Ｕ／Ｌよりも高い処置前の乳酸脱水素酵素レベルによって特徴づけられてもよい。溶血は、いくつかの実施形態において、約１．２ｍｇ／ｄＬよりも高い処置前のビリルビンレベルによって特徴づけられてもよい。
【００２０】
妊娠中または産後の女性におけるガレクチン−３レベルは、妊娠第一期、妊娠第二期または妊娠第三期の間、測定され得る。場合によっては、ガレクチン−３レベルは、過期（ｐｏｓｔ−ｔｅｒｍ）または産後に測定されてもよい。いくつかの実施形態において、その後のガレクチン−３レベルが、妊娠中または産後の女性由来のその後の試料において測定され得、それによって、ガレクチン−３レベルの変化を検出する。ガレクチン−３レベルは、受胎前の女性由来の試料においても測定され得、それによって、ガレクチン−３レベルの変化を検出する。
【００２１】
ガレクチン−３レベルは継時的に変わり得る。例えば、ガレクチン−３レベルの変化は、継時的なガレクチン−３レベルの増加であってもよい。いくつかの実施形態において、妊娠中または産後の女性は、最小閾値より高いと決定されたガレクチン−３レベルを有してもよい。他の実施形態において、上記ガレクチン−３レベルの変化は、最小閾値より高くてもよい。例えば、上記最小閾値は、６ｎｇ／ｍｌより高いか、１０ｎｇ／ｍｌよりも高いか、６〜１９ｎｇ／ｍｌの間か、１０〜１５ｎｇ／ｍｌの間か、１５〜２０ｎｇ／ｍｌの間か、２０〜２５ｎｇ／ｍｌの間か、２５〜３０ｎｇ／ｍｌの間か、または３０ｎｇ／ｍｌよりも高くてもよい。測定されるガレクチン−３レベルは、例えば、イムノアッセイによって決定されてもよい。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】図１は、妊娠高血圧腎症を有する被験体グループおよび妊娠高血圧腎症を有さない被験体グループについてのガレクチン−３レベルの分布を表すプロットを示している。
【００２３】
【図２】図２は、妊娠高血圧腎症の被験体および妊娠高血圧腎症ではない被験体の判別のための受信者操作特性曲線を表すプロットを示している。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
他の態様、実施形態および特徴は、添付の図面と併せて考慮すると、以下の詳細な説明により明らかになる。
本発明の詳細な説明
【００２５】
出願人らは、妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症および関連状態を予測および／またはモニターする方法を発明した。出願人らは、妊娠中または産後の女性における循環するガレクチン−３レベルの測定が、妊娠高血圧腎症および／または関連状態（例えば、子癇、ＨＥＬＬＰ（すなわち、溶血、上昇した肝酵素および低血小板数症候群）、左心室機能障害および心不全など）を発症するリスクがあるこれらの女性を同定するために使用され得ることを発見した。リスクがある妊娠中または産後の女性は、例えば、深刻な合併症が生じる前に治療介入を可能とするために、妊娠高血圧腎症の発症について積極的にモニターされ得る。さらに、妊娠中または産後の女性の予防的処置が、妊娠高血圧腎症および／または関連状態の発症を遅らせるか、または阻害するために開始され得る。出願人らは、さらに妊娠高血圧腎症および／または関連状態を有するか、またはそのリスクがある妊娠中または産後の女性におけるガレクチン−３の測定が、状態の発症もしくは進行および／または処置過程の継続的な妥当性の、継続的な指標を提供することを発見した。
【００２６】
本明細書中で使用される場合、「妊娠高血圧腎症」とは、妊娠または妊娠してすぐの影響に起因するタンパク尿もしくは浮腫、または両方、糸球体機能障害、脳浮腫、肝性浮腫（ｌｉｖｅｒ  ｅｄｅｍａ）あるいは凝固異常を伴う高血圧によって特徴づけられる障害をいう。妊娠高血圧腎症は、一般的に、妊娠２０週目の後に生じる。妊娠高血圧腎症は、一般的に、以下の症状のいくつかの組み合わせで定義される：（１）妊娠２０週間後に少なくとも１４０／９０ｍｍＨｇの血圧（一般的に４〜１６８時間に別々に２回測定される）、（２）タンパク尿の新たな発症（尿検査における尿試験紙（ｄｉｐｓｔｉｋ）によって少なくとも１＋、２４時間の尿の回収期間において少なくとも０．３ｇのタンパク質、０．３よりも高いタンパク質／クレアチニン比を有する１回のランダムの尿試料）、および（３）産後１２週間までに高血圧およびタンパク尿の解決。重篤な妊娠高血圧腎症は、一般的に、（１）少なくとも１６０／１１０ｍｍＨｇの血圧（一般的に４〜６時間に別々に２回測定される）、または（２）２４時間の尿の回収における５ｇまたはそれより多くの測定値、あるいは尿試験紙による少なくとも３＋のタンパク質を含む２回のランダムの尿試料で特徴づけられるタンパク尿で定義される。重篤な妊娠高血圧腎症の他の要素としては、米国の人口統計による１０パーセンタイル未満の子宮内発育遅延（ＩＵＧＲ）、持続性神経症状（頭痛、視覚障害）、心窩部痛、乏尿（５００ｍＬ／２４時間未満）、１．０ｍｇ／ｄＬより高い血清クレアチニン、上昇した肝酵素（通常の２倍より高い）、および血小板減少症（＜１００，０００個／μＬ）が挙げられ得る。妊娠高血圧腎症において、高血圧およびタンパク尿は、一般的に、互いに７日以内に生じる。
【００２７】
時々、妊娠高血圧腎症は、痙攣またはてんかんの発症につながり得る。この症候群の重症型が、「子癇」といわれる。また、妊娠高血圧腎症および子癇としては、肝臓（例えば、肝細胞障害、門脈周囲の壊死）、中枢神経系（例えば、脳浮腫および脳出血）、心臓（例えば、左心室機能障害（ＬＶＤ）または心不全）、および腎臓（例えば、腎臓機能障害、糸球体内皮症（ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓｉｓ）、または肥大化）のようないくつかの器官または組織に対する機能障害または損傷が挙げられ得る。
【００２８】
溶血、上昇した肝酵素、低血小板症候群（「ＨＥＬＬＰ」症候群といわれる）は、妊娠または妊娠してすぐの影響に起因して発症し得る。ＨＥＬＬＰは、血小板減少症（すなわち、１００，０００個／ｍｍ３未満）、増加した乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）（すなわち、６００Ｕ／Ｌより高い）および増加したアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）（すなわち、７０Ｕ／Ｌより高い）の兆候によって特徴づけられる。血小板減少症は、軽度（１００，０００個／ｍｍ３未満）、中程度（５０，０００個／ｍｍ３〜１００、０００個／ｍｍ３の間）、または重度（５０，０００個／ｍｍ３未満）であってもよい。溶血は、１．２ｍｇ／ｄＬより高いビリルビンレベル、６００Ｕ／Ｌより高いＬＤＨ、７０Ｕ／Ｌより高いＡＳＴ、および／または異常な末梢塗抹によって特徴づけられる。高血圧、タンパク尿、ＨＥＬＬＰ症候群および子癇は、同時に生じ得るか、一度に１つの症状のみが生じ得る。
【００２９】
用語「心不全」、「ＨＦ」、「うっ血性心不全」または「ＣＨＦ］とは、本明細書中で使用される場合、血液で満たすか、または血液を拍出する心室の能力を損なう複合性臨床症候群をいう。構造的または機能的ないずれの心疾患は、ＨＦを引き起こし得、大多数のＨＦ患者は、損なわれた左心室（ＬＶ）心筋機能（すなわち、左心室機能障害（ＬＶＤ））を有する。心筋症もまた、ＨＦにつながり得る。ＨＦの症状としては、呼吸困難（息切れ）、疲労および体液貯留が挙げられる。米国心臓協会（ＡＨＡ）は、ＨＦの進行または発症における４つの段階を同定した。段階ＡおよびＢにおける患者は、明らかなリスク因子を示すが、まだＨＦを発症しなかった。段階ＣおよびＤにおける患者は、現在ＨＦの症状を示すか、または過去にＨＦの症状を示した。例えば、段階Ａの患者は、冠動脈疾患、高血圧または糖尿病のようなリスク因子を有する、損なわれた左心室（ＬＶ）の機能を示さない患者である。段階Ｂの患者は無症状だが、損なわれたＬＶ機能、肥大化、または幾何学的な心室の歪み（ｇｅｏｍｅｔｒｉｃ  ｃｈａｍｂｅｒ  ｄｉｓｔｏｒｔｉｏｎ）のような心臓の構造的異常またはリモデリングを有する。段階Ｃの患者は心臓の異常を有し、症状を示す。段階Ｄの患者は、最大の医学的処置にも関わらず症状を示す難治性のＨＦを有する。この患者は、典型的に、反復的に入院するか、特殊な治療介入なしで退院することができない。
【００３０】
ガレクチン−３（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＮＣ＿００００１４．７（遺伝子）およびＮＰ＿００２２９７．２（タンパク質））は、１５の哺乳類ベータガラクトシド結合レクチンまたは「ガレクチン」のうちの１つであり、それらのガラクトース特異的結合によって特徴づけられる。ガレクチン−３は、文献において、ＬＧＡＬＳ３、ＭＡＣ−２抗原、糖結合タンパク質（ＣＢＰ）−３５、ラミニン結合タンパク質、ガラクトース特異的レクチン３、ｍＬ−３４、Ｌ−２９、ｈＬ−３１、イプシロンＢＰ、およびＩｇＥ結合タンパク質と様々な方法で呼ばれる。ガレクチン−３は、カルボキシル末端の糖認識ドメイン（ＣＲＤ）およびアミノ末端のタンデムリピートで構成される（Ｌｉｕ，  Ｆ．  −Ｔ．  （２０００）  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｇａｌｅｃｔｉｎ−３  ｉｎ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．  Ｉｎ  Ｌｅｃｔｉｎｓ  ａｎｄ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．  Ｍ．  Ｃａｒｏｎ  ａｎｄ  Ｄ．  Ｓｅｖｅ，  ｅｄｓ．  Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，  Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，  Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ，  ｐ．  ５１；  Ｌｉｕ，  Ｆ．−Ｔ．  ｅｔ  ａｌ．  （１９９５）  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．  １４７：１０１６）。ガレクチン−３は、通常、多くの器官の上皮および様々な炎症細胞に分布し、この細胞としては、マクロファージならびに樹状細胞およびクッパ−細胞が挙げられる（Ｆｌｏｔｔｅ，  Ｔ．Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．  （１９８３）  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．  １１１：１１２）。また、ガレクチン−３は、胎盤、例えば栄養膜組織においても検出されている（ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｂｒｕｌｅ，  Ｆ．Ａ．  ｅｔ  ａｌ．  （１９９４）  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．  ２０１：３８８）。
ガレクチン−３の検出
【００３１】
本明細書に記載されているものは、ガレクチン−３レベルを測定することによって、妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症および関連状態（例えば、子癇、ＨＥＬＬＰ、左心室機能障害、およびＨＦ）の発症のリスクをモニターおよび／または予測する方法である。定量化を含むか、または含まない目的のタンパク質を検出する多くの方法は、周知であり、よく使用され得る。そのようなアッセイの例は以下に記載され、例えば、イムノアッセイ、クロマトグラフ法、および質量分析が挙げられ得る。そのようなアッセイは、特に血液、血漿および血清を含む任意の生物学的試料において行われ得る。したがって、多重アッセイは、ガレクチン−３を検出するために使用され得、試料は、１つまたは複数のソース（ｓｏｕｒｃｅ）から分析され得る。
【００３２】
いくつかの実施形態において、ガレクチン−３の濃度は、ガレクチン−３のＮ末端部分に特異的に結合する結合成分（ｂｉｎｄｉｎｇ  ｍｏｉｅｔｙ）のペアを使用して、体液試料において定量化され得る。「結合成分」とは、ポリペプチドまたはペプチドと選択的または優先的に結合または相互作用する分子をいう。結合成分の例としては、抗体のようなタンパク質、ガレクチン結合タンパク質（ＧＢＰ）相互作用融合タンパク質（ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｆｕｓｉｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ）、ペプチドアプタマー、アビマー（ａｖｉｍｅｒ）、Ｆａｂ、ｓＦｖ、ＡｄｎｅｃｔｉｎｓおよびＡｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）リガンド；ＤＮＡおよびＲＮＡのような核酸（ヌクレオチドアプタマーを含む）、および膜脂質のような脂質が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３３】
特定の実施形態において、妊娠高血圧腎症および／または関連状態の診断のための血清のような臨床試料におけるガレクチン−３の濃度の検出が行われ得る。ガレクチン−３の検出において使用される試験試料は、任意の体液試料または組織試料であり得、試料としては、全血、血清、血漿、尿、羊水、または胎盤生検が挙げられ、あまり好ましくはないが、胃液、胆汁、唾液、汗、髄液、便、リンパ液、または筋生検が挙げられるが、これらに限定されない。好ましい実施形態において、上記試料は血液試料である。別の実施形態において、上記試料は血漿試料である。血清試料もまた使用され得る。さらに、上記体液は、加工され得るか（例えば、血清）、加工され得ないかのいずれかである。被験体由来の体液を得る方法は、当業者に公知である。
【００３４】
いくつかの実施形態において、ガレクチン−３は、「サンドイッチ」アッセイを使用して、検出され、定量化され得る。この実施形態において、ガレクチン−３のＮ末端上の非重複部位（ｎｏｎ−ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ  ｓｉｔｅ）（「エピトープ」）に特異的に結合するモノクローナル抗体のような２つの分子（「結合成分」）が使用される。典型的には、１つの結合成分は、それがガレクチン−３に結合し、捕捉する固体表面上に固定化される。第１の結合成分とは、それゆえ、本明細書中において捕捉結合成分ともいわれる。ガレクチン−３複合体への第２の結合成分の結合が、ガレクチン−３が捕捉されたことを示すように、第２の結合成分は、例えば、フルオロフォア、酵素、または着色粒子で、検出可能な程度に標識される。シグナルの強度は、試料中のガレクチン−３の濃度に比例する。この第２の結合成分は、それゆえ、本明細書において検出結合成分または標識結合成分ともいう。結合成分は、ガレクチン−３のＮ末端部分に特異的に結合さえすれば、いずれの型の分子であり得る。好ましい実施形態において、使用される結合成分は、モノクローナル抗ガレクチン−３抗体（すなわち、ガレクチン−３のＮ末端の１１３個のアミノ酸の分離部分に対して生成されたモノクローナル、あるいはガレクチン−３のＮ末端の１１３のアミノ酸の分離部分に結合するように選択されたモノクローナル）である。
【００３５】
そのようなアッセイの手順は、二部位イムノメトリック（ｔｗｏ−ｓｉｔｅ  ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｒｉｃ）アッセイ法、「サンドイッチ」法または（抗体が結合剤である場合）「サンドイッチムノアッセイ」といわれ得る。当該分野において公知であるように、捕捉抗体および検出抗体は、試験試料と同時または逐次的に接触させられ得る。逐次的な方法は時々、「フォワード（ｆｏｒｗａｒｄ）」法といわれ、この方法は、捕捉抗体を試料と共にインキュベートし、その後所定の時間に標識された検出抗体を加えることによって達成され得る。あるいは、標識された検出抗体が、初めに試料とインキュベートされ得、その後、試料は、捕捉抗体に曝露されうる（時々、「リバース（ｒｅｖｅｒｓｅ）」法といわれる）。任意の必要なインキュベーション（短期間であってもよい）の後、標識が検出され、測定もされ得る。そのようなアッセイは、当業者に公知の多くの特定のフォーマットにおいて実施され得、様々な高スループット臨床的ラボ分析装置の使用を通しての実施、あるいは介護用または家庭用試験装置の時点での実施を含む。
【００３６】
一実施形態において、側方流動装置は、サンドイッチフォーマットにおいて使用され得、ここで、生物学的試料における、感受性レベルのベースラインを超えるガレクチン−３の存在が、側方流動アッセイにおける捕捉ゾーン（ｃａｐｔｕｒｅ  ｚｏｎｅ）の上流または捕捉ゾーンでのサンドイッチ相互作用の形成を可能とする。例えば、米国特許第６，４８５，９８２号を参照されたい。上記捕捉ゾーンは、本明細書中で使用される場合、ガレクチン−３を捕捉するのに適している抗体分子、またはビオチン化した複合体の捕捉のための固定化されたアビジンなどのような捕捉結合成分を含有してもよい。例えば、米国特許第６，３１９，６７６号を参照されたい。また、この装置は、捕捉ゾーンにおける捕捉に適した発光標識を組み入れてもよく、ガレクチン３の濃度が、捕捉部位でのシグナルの強度に比例する。適切な標識としては、ポリスチレンマイクロスフェア上に固定化された蛍光標識が挙げられる。着色粒子も使用され得る。
【００３７】
本発明の方法において使用され得る他のアッセイフォーマットとしては、フロースルー（ｆｌｏｗ−ｔｈｒｏｕｇｈ）装置が挙げられるが、これに限定されない。例えば、米国特許第４，６３２，９０１を参照されたい。フロースルーアッセイにおいて、１つの結合成分（例えば、抗体）が、膜表面上の規定の領域に固定化される。この膜は、その後、装置を通して試料容積（ｓａｍｐｌｅ  ｖｏｌｕｍｅ）をくみ出すリザーバーとして機能する吸収層上に覆われる。固定化に続き、膜上の残っているタンパク質結合部位がブロックされ、非特異的な相互作用を最小化する。作業中（ｉｎ  ｏｐｅｒａｔｉｏｎ）、生物学的試料が膜に加えられ、そして浸透し、試料中の抗体に特異的である任意の分析物が固定化された抗体に結合することを可能とする。第２の段階において、標識された第２の抗体は、加えられ得るか、または放出され得、この抗体が、捕捉されたマーカーと反応し、サンドイッチを完成する。あるいは、第２の抗体は試料と共に混合され得、一段階で加えられ得る。ガレクチン−３が存在する場合、膜表面上に着色スポット（ｃｏｌｏｒｅｄ  ｓｐｏｔ）が生じる。
【００３８】
最も一般的な酵素イムノアッセイは、「酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）」である。ＥＬＩＳＡは、抗体の標識（例えば、酵素結合）体を使用して、抗原の濃度を検出および測定する技術である。様々な形態のＥＬＩＳＡがあり、それは当業者に周知である。ＥＬＩＳＡについての当該分野で公知の標準技術は、「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｉａｇｎｏｓｉｓ」，  ２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｒｏｓｅ  ａｎｄ  Ｂｉｇａｚｚｉ，  Ｅｄｓ．  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９８０；  Ｃａｍｐｂｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ  ．，  「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」，  Ｗ．  Ａ．  Ｂｅｎｊａｍｉｎ，  Ｉｎｃ．，  １９６４；およびＯｅｌｌｅｒｉｃｈ，  Ｍ．  （１９８４），  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｃｈｅｍ．  Ｃｌｉｎ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ２２：８９５−９０４に記載されている。
【００３９】
「サンドイッチＥＬＩＳＡ」において、抗体（例えば、抗ガレクチン−３）は、固相（すなわち、マイクロタイタープレート）に結合し、抗原（例えば、ガレクチン−３）を含有する生物学的試料に曝露される。固相は、その後、非結合の抗原を取り除くために洗われる。標識された抗体（例えば、酵素結合）は、その後、結合した抗原に結合し、抗体−抗原−抗体サンドイッチを形成する。抗体に結合し得る酵素の例としては、アルカリホスファターゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ルシフェラーゼ、ウレアーゼ、およびβ−ガラクトシダーゼがある。酵素結合抗体は基質と反応し、測定され得る着色した反応物を生成する。この測定は、例えば測定をガレクチン−３標準曲線と比較することによって、試料中に存在するガレクチン−３の濃度を導くために使用され得る。被験体（例えば、妊娠中または産後の女性）由来の試料中のガレクチン−３濃度（例えば、血中濃度）は、閾値の上または下、あるいは標的の範囲内であることが決定され得る。上記閾値は、例えば、約０〜１５ｎｇ／ｍＬ；約０〜２０ｎｇ／ｍＬ；約６〜１９ｎｇ／ｍＬ；約６〜１２ｎｇ／ｍＬ；約７〜１２ｎｇ／ｍＬ；約８〜１２ｎｇ／ｍＬ；約９〜１２ｎｇ／ｍＬ；約１０〜１２ｎｇ／ｍＬ；約５〜１０ｎｇ／ｍＬ；約１０〜１５ｎｇ／ｍＬ；約１５〜２０ｎｇ／ｍＬ；約２０〜２５ｎｇ／ｍＬ；約２５〜３０ｎｇ／ｍＬ；約３０〜３５ｎｇ／ｍＬ、または約３５〜４０ｎｇ／ｍＬの範囲内であってもよい。ある場合には、最小閾値は、６ｎｇ／ｍＬより上、７ｎｇ／ｍＬより上、８ｎｇ／ｍＬより上、９ｎｇ／ｍＬより上、１０ｎｇ／ｍＬより上、１１ｎｇ／ｍＬより上、１２ｎｇ／ｍＬより上、１３ｎｇ／ｍＬより上、１４ｎｇ／ｍＬより上、１５ｎｇ／ｍＬより上、１６ｎｇ／ｍＬより上、１７ｎｇ／ｍＬより上、１８ｎｇ／ｍＬより上、１９ｎｇ／ｍＬより上、２０ｎｇ／ｍＬより上、または３０ｎｇ／ｍＬより上であってもよい。場合によっては、ガレクチン−３の血中濃度は、最大閾値よりも下であることが決定されてもよい。例えば、最大閾値は、約７０ｎｇ／ｍＬより下、約６０ｎｇ／ｍＬより下、または約４０ｎｇ／ｍＬより下であってもよい。最大閾値は、約３０〜約４０ｎｇ／ｍＬの間、約２５〜約３０ｎｇ／ｍＬの間、約２０〜約２５ｎｇ／ｍＬの間、または約１５〜約２０ｎｇ／ｍＬの間であってもよい。
【００４０】
また、キットおよび方法での使用に適した本明細書に記載された任意のイムノアッセイは、抗体の代わりに任意の結合成分を使用し得る。
結合成分
【００４１】
本発明の好ましい実施形態において、抗ガレクチン−３抗体、好ましくは、モノクローナル抗体が、結合成分として使用される。しかしながら、以下に記載される結合成分は、ガレクチン−３阻害剤としても投与され得ることも理解されるべきある。
【００４２】
本発明の好ましい実施形態において、モノクローナル抗体が使用される。モノクローナル抗体とは、真核生物、原核生物、またはファージのクローンのいずれかを含む単一クローンに由来する抗体をいう。上記モノクローナル抗体は、２つのタンパク質、すなわち重鎖および軽鎖を含んでもよく、またはこれらから構成されてもよい。上記モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ、組換え体、およびファージディスプレイの技術、またはこれらの組み合わせの使用を含む、当該分野において公知である多種多様の技術のうち１つを使用して調製され得る。
【００４３】
抗ガレクチン−３モノクローナル抗体は、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）、  Ｎａｔｕｒｅ．  ２５６：４９５に記載されている方法のような将来性のあるハイブリドーマ法（ｓｅｍｉｎａｌ  ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  ｍｅｔｈｏｄ）を含む任意の公知の方法論を使用して調製され得る。ハイブリドーマ法において、マウス、ハムスター、または他の適切な宿主動物は、免疫剤で免疫され、免疫剤に特異的に結合する抗体を産生するリンパ細胞、またはこの抗体を産生することが可能なリンパ細胞を誘発する。あるいは、上記リンパ細胞は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで免疫されてもよい。
【００４４】
免疫剤は、典型的に、少なくともガレクチン−３ポリペプチドまたはその融合タンパク質の一部を含む。例えば、ガレクチン−３のＮ末端の任意のエピトープを含む合成ポリペプチドまたは組換えポリペプチドが、免疫剤として使用されてもよい。例示的なＮ末端のエピトープとしては、ＭＡＤＮＦＳＬＨＤＡＬＳ（配列番号：１）、ＭＡＤＮＦＳＬＨＤＡＬＳＧＳ（配列番号：２）、ＧＮＰＮＰＱＧＷＰＧＡ（配列番号：３）、ＷＧＮＱＰＡＧＡＧＧ（配列番号：４）、ＹＰＧＱＡＰＰＧＡＹＰＧＱＡＰＰＧＡ（配列番号：５）、ＹＰＧＡＰＧＡＹＰＧＡＰＡＰＧＶ（配列番号：６）、ＹＰＧＡＰＡＰＧＶＹＰＧＰＰＳＧＰＧＡ（配列番号：７）、ＹＰＳＳＧＱＰＳＡＴＧＡ（配列番号：８）が挙げられるが、これらに限定されない。融合タンパク質は、ポリペプチドを担体タンパク質（例えば、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ、ＥＭＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆ．）ＢＳＡ（ＥＭＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆ．）、またはオバルブミン（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌ．））に融合させることで産生され得る。上記免疫剤は、様々な標準方法のいずれかに従って、アジュバントと共に、またはアジュバントなしで、哺乳動物に投与されてもよい。上記免疫剤は、１回だけ投与されてもよいが、好ましくは、標準の追加免疫計画（ｓｔａｎｄａｒｄ  ｂｏｏｓｔｉｎｇ  ｓｃｈｅｄｕｌｅ）に従って、１回より多く投与される。
【００４５】
一般的に、ヒト由来の細胞が望ましい場合、末梢血リンパ球（ＰＢＬ）が使用されるか、非ヒト哺乳動物のソースが望ましい場合、脾臓細胞またはリンパ節細胞が使用されるかのいずれかである。リンパ球は、その後、ポリエチレングリコールのような適切な融合剤（ｆｕｓｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）を使用して不死化細胞株と融合させて、ハイブリドーマ細胞の集団を形成し、この細胞集団は、ガレクチン−３のＮ末端部上のエピトープに対して適切な特異性および親和性を有する種についてスクリーンされる（Ｇｏｄｉｎｇ、  （１９８６）  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  ｐｐ．  ５９−１０３）。不死化細胞株は、通常、哺乳類細胞、特にげっ歯類、ウシおよびヒト由来の骨髄腫細胞に形質転換される。通常、ラットまたはマウスの骨髄腫細胞株が使用される。ハイブリドーマ細胞は、融合されなかった不死化細胞の増殖または生存を阻害する１つまたは複数の物質を、好ましくは含有する適切な培養培地中で培養され得る。例えば、親細胞が、酵素のヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠いている場合、ハイブリドーマのための培養液は、典型的にヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジン（「ＨＡＴ培地」）を含み、これらの物質は、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を防ぐ。
【００４６】
好ましい不死化細胞株は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞（ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ  ｃｅｌｌ）による抗体の安定的な高いレベルの発現を補助し、そしてＨＡＴ培地のような培地に感受性がある細胞株である。より好ましい不死化細胞は、例えば、Ｓａｌｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒ，  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、およびＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，  Ｍａｎａｓｓａｓ，  Ｖｉｒｇｉｎｉａから入手し得るマウス骨髄腫細胞株である。ヒト骨髄腫細胞株およびマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生について記載されている（Ｋｏｚｂｏｒ，  Ｊ．  （１９８４）  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  １３３：３００１；  Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，  Ｉｎｃ．，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  （１９８７）  ｐｐ．  ５１−６３）。
【００４７】
その後、ハイブリドーマ細胞が培養される培養培地は、例えば、標識されたガレクチン−３のＮ末端ポリペプチドでのスクリーニングによって、ガレクチン−３のＮ末端に対するモノクローナル抗体の存在についてアッセイされ得る。好ましくは、ハイブリドーマ細胞によって産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降法、あるいはラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）または酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）のようなｉｎ  ｖｉｔｒｏの結合アッセイによって決定される。そのような技術およびアッセイは当該分野において公知である。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、ＭｕｎｓｏｎおよびＰｏｌｌａｒｄ  （１９８０），  Ａｎａｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，  １０７：２２０のスキャッチャード分析によって決定され得る。結合特異性を決定する様々な分析プロトコルが、キットとして市販されているか、またはサービスとして商業的に利用可能である。
【００４８】
また、モノクローナル抗体は、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているような組換えＤＮＡ法によっても産生され得る。適したモノクローナル抗体をコードするＤＮＡは単離され、従来の手順を使用して（例えば、マウス抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することが可能なオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）配列決定され得る。ハイブリドーマ細胞は、そのようなＤＮＡの好ましいソースとして機能する。一度単離されると、上記ＤＮＡは発現ベクターに配置され得、その後、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）細胞、または他に免疫グロブリンタンパク質を産生しない骨髄腫細胞のような宿主細胞にトランスフェクトされ、組換え宿主細胞においてモノクローナル抗体の合成を得る。上記ＤＮＡはまた、例えば、相同のマウスの配列の代わりに、ヒト重鎖および軽鎖の定常部ドメインのコード配列を用いることによって（米国特許第４，８１６，５６７号；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９８４）  Ｐｒｏｃ．  ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ，  ８１：６８５１）、あるいは免疫グロブリンコード配列全てまたは非免疫グロブリンポリペプチドのコード配列の一部に共有結合的に連結することによって改変され得る。このような非免疫グロブリンポリペプチドは、キメラ二価抗体（ｃｈｉｍｅｒｉｃ  ｂｉｖａｌｅｎｔ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）を生成するために、本発明の抗体の定常部ドメインの代わりに用いられて、または本発明の抗体の単一の抗原結合部位の可変部ドメインの代わりに用いられてもよい。
【００４９】
上記抗体は一価抗体（ｍｏｎｏｖａｌｅｎｔ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）であってもよい。一価抗体を調製する方法は当該分野において周知である。例えば、１つの方法は、免疫グロブリンの軽鎖および改変された重鎖の組換え発現に関する。この重鎖は、重鎖の架橋を防ぐために、一般的にＦｃ領域における任意の点で切断される。あるいは、関連するシステイン残基は、別のアミノ酸残基で置換されるか、または架橋を防ぐために除去される。
【００５０】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法もまた、一価抗体の調製に適している。抗体の断片、特にＦａｂ断片を産生するための抗体の切断は、当該分野において公知である慣例的な技術を使用して達成され得る。
【００５１】
抗体はまた、ファージディスプレイライブラリーを使用して産生される（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ  （１９９１），  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：３８１；  Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９１），  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．，  ２２２：５８１）。ＣｏｌｅらおよびＢｏｅｒｎｅｒらの技術もまた、モノクローナル抗体の調製に利用可能である（Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８５），  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  Ａｌａｎ  Ｒ．  Ｌｉｓｓ，  ｐ．  ７７、およびＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９１），  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  １４７（１）：８６−９５）。同様に、抗体は、遺伝子導入動物（例えば、内在性免疫グロブリン遺伝子が部分的または完全に不活性化されるマウス）への免疫グロブリン遺伝子座（ｌｏｃｉ）の導入によって産生され得る。
【００５２】
また、上記抗体は、上述の公知の選択方法および／または変異原性（ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ）方法を使用して親和性成熟し得る。親和性成熟した好ましい抗体は、成熟した抗体が調製される開始の抗体よりも、５倍、より好ましくは１０倍、さらに好ましくは２０または３０倍高い親和性を有する。特に好ましい実施形態において、ガレクチン−３を検出するために使用される抗体は、モノクローナル抗体、例えば、Ｍ３／３８、９Ｈ３．２、および８７Ｂ５である。Ｍ３／３８は、ガレクチン−３のＮ末端上の直線状エピトープ（ＹＰＧＱＡＰＰＧＡＹＰＧＱＡＰＰＧＡ（配列番号：５））を検出する。Ｍ３／３８は、ラットハイブリドーマＭ３／３８．１．２．８ＨＬ．２の上清から調製され、このクローンは、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  ＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎにおいてＡＴＣＣ（登録商標）番号ＴＩＢ−１６６で見つかり得る。９Ｈ３．２は、ガレクチン−３の最もＮ末端側（ｅｘｔｒｅｍｅ  Ｎ−ｔｅｒｍｉｎｕｓ）の直線状エピトープ（ＭＡＤＮＦＳＬＨＤＡＬＳＧＳ（配列番号：２））を検出する。９Ｈ３．２は、プロテインＡを使用して精製される親和性のマウスモノクローナルＩｇＧである。９Ｈ３．２は、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、２９０  Ｃｏｎｃｏｒｄ  Ｒｏａｄ、  Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、  ＭＡ  ０１８２１、  ＵＳＡ）、カタログ番号：ＭＡＢ４０３３より入手可能である。８７Ｂ５は、ＧＮＰＮＰＱＧＷＰＧＡ（配列番号：３）およびＹＰＧＡＰＡＰＧＶＹＰＧＰＰＳＧＰＧＡＹＰＳＳＧＱＰＳＡＴＧＡ（配列番号：９）のタンパク質を含む非直線状エピトープを検出する。８７Ｂ５は、マウス−マウスハイブリドーマ（Ｘ６３−Ａｇ８．６５３×ＢＡＬＢ／ｃマウス脾臓細胞）のクローン８７Ｂ５から調製され、これは、プロテインＡを使用して精製された親和性であったＩｇＧ２ａである。８７５Ｂは、Ｉｍｍｕｎｏ−Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ＩＢＬ、  ８２０１  Ｃｅｔｒａｌ  Ａｖｅ  ＮＥ、  Ｓｕｉｔｅ  Ｐ、  Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、  ＭＮ  ５５４３２  ＵＳＡ）から入手可能である。
【００５３】
ここで、好ましい実施形態において、捕捉結合成分は、抗ガレクチン−３モノクローナル抗体であり、Ｍ３／３８および標識された検出結合成分は、第２の抗ガレクチン−３モノクローナル抗体、８７Ｂ５である。これらの抗体のために与えられた名称は限定されない。別の実施形態において、捕捉抗体は９Ｈ３．２であり、標識された検出結合成分はＭ３／３８である。上述のエピトープを認識する他の抗体もまた使用され得る。
【００５４】
他の結合成分は、本発明の方法およびキットと共に使用され得る。結合成分の例としては、タンパク質、ペプチドアプタマー、アビマー、ＡｄｎｅｃｔｉｎｓおよびＡｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）リガンド；ＤＮＡおよびＲＮＡ（ヌクレオチドアプタマーを含む）のような核酸、および膜脂質のような脂質が挙げられるが、これらに限定されない。
ガレクチン−３の別の形態
【００５５】
ガレクチン−３は、検出可能な程度に異なる質量によって特徴づけられる複数の異なる形態において試料中に存在し得る。これらの形態は、翻訳前修飾、翻訳後修飾または両方に起因し得る。翻訳前修飾の形態としては、対立遺伝子変異体、スプライスバリアント、およびＲＮＡ編集型が挙げられる。翻訳後に修飾される形態としては、特に、タンパク質切断（例えば、親タンパク質（ｐａｒｅｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ）の断片）複合体形成、糖鎖修飾、リン酸化、脂質化（ｌｉｐｉｄａｔｉｏｎ）、酸化、メチル化、シスチン化（ｃｙｓｔｉｎｙｌａｔｉｏｎ）、スルホン化およびアセチル化に起因する形態が挙げられる。ガレクチン−３の修飾された形態は、それらが、関連するＮ末端のエピトープを保持する間、本発明の方法に従って検出され得る。
診断および予後の使用
【００５６】
ガレクチン−３のアッセイは、妊娠高血圧腎症および／または関連状態（例えば、高血圧、タンパク尿、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、ＨＦなど）を発症するおそれがあるか、または妊娠高血圧腎症および／または関連状態を有する妊娠中または産後の女性を同定するために使用され得る。別の実施形態において、ガレクチン−３は、妊娠中または産後の女性における妊娠高血圧腎症および／または関連状態の存在、段階、または重症度を検出する診断マーカー、あるいは試料中のガレクチン−３の濃度を測定して、この結果を、ガレクチン−３の濃度を妊娠高血圧腎症および／または関連状態の重症度または段階と相関付けるデータと比較することによって女性の診断を予測する診断マーカーとして使用されてもよい。本明細書中に記載されている診断の方法および／または予後を予測する方法は、当該分野において一般に使用される他の診断の方法および／または予後を予測する方法（例えば、身体検査（例えば、浮腫および／または体重増加を評価するために）、尿検査（例えば、タンパク尿をスクリーンするために）、血液検査、全血球数、血小板数、血液凝固因子、ビリルビン、クレアチニン、ヘマトクリット、尿酸、血清電解質、グリコヘモグロビンおよび血中脂質、腎臓および肝臓の機能（例えば、ＡＤＨおよび／またはＬＳＴレベル）の試験、甲状腺機能の試験、胸部Ｘ線写真、１２誘導心電図、ＢＮＰのようなバイオマーカーについての血液検査、ドップラー分析での心エコー図、ラジオアイソトープ心室造影、核磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）など）と組み合わせられ得る。
【００５７】
多重マーカー分析（ｍｕｌｔｉｍａｒｋｅｒ  ａｎａｌｙｓｉｓ）は、診断およびモニタリングの正確さを向上するために使用され得る。例えば、血管新生因子（例えば、可溶性ＦＭＳ様チロシンキナーゼ（ｓＦＬＴ−１）および可溶性エンドグリン）、胎盤タンパク質１３（ｐｌａｃｅｎｔａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ  １３）（ＰＰ−１３）、妊娠関連血漿タンパク質Ａ（ＰＡＰＰ−Ａ）、インスリン抵抗性、アポリポタンパク質Ｅ（ａｐｏＥ）、インヒビンＡ、およびアクチビンＡの異常な血中濃度レベルは、妊娠高血圧腎症の発症および／または診断に関連付けられ得る。別の例において、ガレクチン−３（Ｇａｌ−３）および脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）の血中濃度は、心不全を診断し、かつ心不全の長期転帰を予測するために使用され得る（ｖａｎ  Ｋｉｍｍｅｎａｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｏｌｌ．  Ｃａｒｄｉｏｌ．，  ４８：１２１７−２４  （２００６）；  Ｓｈａｒｍａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，  １１０：３１２１−２８  （２００４）；  Ｌｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｕｒ．  Ｈｅａｒｔ  Ｊ．，  ２８：１４１，  Ａｂｓｔｒａｃｔ  １０３５  （２００７））。ＢＮＰおよびその切断等価物のアミノ末端ｐｒｏＢＮＰ（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）は、心腔の高い充満圧および心筋線維の伸びの結果として、心不全の間の心筋および血液において高められる。心不全を診断するために使用され得る他の第２のマーカーとしては、スフィンゴ脂質、スフィンゴシン、スフィンゴシン−１−リン酸、ジヒドロスフィンゴシンおよびスフィンゴシルホスフォリルコリンのような非ポリペプチド心臓マーカーが挙げられ得る（米国特許第６，５３４，３２２号を参照されたい）。上述のマーカーのレベルを測定する場合、年齢および性別による補正は、診断の正確さを向上するために組み込まれてもよい。
【００５８】
いくつかの実施形態において、妊娠中または産後の女性は、閾値レベルの上または下のガレクチン−３レベルについて評価され得る。あるいは、妊娠中または産後の女性は、例えばイムノアッセイを使用して、体液から定量化されたガレクチン−３レベルまたは活性における継時変化（例えば増加）についてモニターされ得る。特定の実施形態において、妊娠中または産後の女性は、例えば、週に１回、２週に１回（すなわち、１週間おきに）、月に１回、またはトリメスター（ｔｒｉｍｅｓｔｅｒ）までに、継時的に自分のガレクチン−３レベルまたは活性をモニターしてもよい。一実施形態において、開始ガレクチン−３レベルまたは活性は、ベースラインレベルまたは活性を確立するために決定され得、ガレクチン−３レベルまたは活性は、その後、レベルまたは活性の増加についてスクリーンするためにモニターされ得る。例えば、開始ガレクチン−３レベルまたは活性は、妊娠第1期の間に決定され得、ガレクチン−３レベルまたは活性は、その後、週に１回、２週に１回、または月に１回の頻度、あるいは妊娠第２期および／または第３期の間モニターされ得る。上記女性は産後にもモニターされ得る。その後の試料におけるガレクチン−３レベルの変化は、最小閾値より大きくてもよい。例えば、その後の試料におけるガレクチン−３レベルの変化は、約２ｎｇ／ｍＬより大きいか、約５ｎｇ／ｍＬより大きいか、約１０ｎｇ／ｍＬより大きいか、約１５ｎｇ／ｍＬより大きいか、約２０ｎｇ／ｍＬより大きいか、約２５ｎｇ／ｍＬより大きいか、約３０ｎｇ／ｍＬより大きくてもよい。いくつかの実施形態において、その後の試料におけるガレクチン−３レベルの変化は、約２ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬの間、約２ｎｇ／ｍＬ〜約５ｎｇ／ｍＬの間、約５ｎｇ／ｍＬ〜約１０ｎｇ／ｍＬの間、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約１５ｎｇ／ｍＬの間、約１５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの間、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約２５ｎｇ／ｍＬの間、約２５ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬの間、または約３０ｎｇ／ｍＬ〜約３５ｎｇ／ｍＬの間であってもよい。
【００５９】
妊娠高血圧腎症および／または関連状態を発症するリスクがある妊娠中または産後の女性、または妊娠高血圧腎症および／または関連状態を有する妊娠中または産後の女性は、妊娠中または産後の女性におけるガレクチン−３レベルによって同定され得る。例えば、妊娠高血圧腎症および／または関連状態を発症するリスクがある妊娠中または産後の女性、または妊娠高血圧腎症および／または関連状態を有する妊娠中または産後の女性は、妊娠中または産後の女性が、健常な非妊娠女性あるいは被験体の妊娠時に妊娠高血圧腎症または関連状態を発症しなかった女性と比較してガレクチン−３の上昇した循環レベルを有しているということに基づいて同定され得る。被験体におけるガレクチン−３レベルを検出する方法およびキットは、２００９年１０月２９日に出願されたＭｕｎｔｅｎｄａｍらによる米国特許出願第１２／６０８，８２１号に開示されており、本明細書中により詳細に記載されている。
【００６０】
本明細書中に開示されている方法の恩恵を受け得る妊娠中または産後の女性は、ガレクチン−３の循環レベルが、少なくとも約６ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約７ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約８ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約９ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１１ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１２ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１３ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１４ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１５ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１６ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１７ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１８ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１９ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約２０ｎｇ／ｍＬ、または少なくとも約３０ｎｇ／ｍＬであるということに基づいて同定され得る。いくつかの実施形態において、上記女性は、ガレクチン−３の循環レベルが、例えば、約６ｎｇ／ｍＬ〜約１９ｎｇ／ｍＬの間、約１５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの間、約２０ｎｇ／ｍＬ〜約２５ｎｇ／ｍＬの間、約２５ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬの間、または約３０ｎｇ／ｍＬ〜約３５ｎｇ／ｍＬの間であるということに基づいて同定され得る。いくつかの実施形態において、上記女性は、ガレクチン−３の循環レベルが、標準レベルと比較して少なくとも約１０％上昇するか、標準レベルと比較して少なくとも約２０％上昇するか、または標準レベルと比較して少なくとも約５０％上昇するということに基づいて同定され得る。
【００６１】
他の実施形態において、本明細書中に開示されている方法の恩恵を受け得る妊娠中または産後の女性は、ガレクチン−３レベルの上昇が、ガレクチン−３レベルの第１の決定とガレクチン−３レベルの第２の決定との間に生じるということに基づいて同定され得る。例えば、ガレクチン−３レベルの上昇は、少なくとも約２ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約５ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１５ｎｇ／ｍＬ、または少なくとも約２０ｎｇ／ｍＬであり得る。場合によっては、上記女性は、ガレクチン−３レベルの絶対的増加が、ガレクチン−３レベルの第１および第２の決定が行われた時間に依存しない閾値レベルを超えるということに基づいて同定され得る。他の場合では、上記女性は、ガレクチン−３レベルの増加率が閾値を超えるということに基づいて同定され得る。例えば、ガレクチン−３レベルは、約０．５ｎｇ／ｍＬ／週、約１．０ｎｇ／ｍＬ／週、約１．５ｎｇ／ｍＬ／週、約２ｎｇ／ｍＬ／週、約２．５ｎｇ／ｍＬ／週、約３．５ｎｇ／ｍＬ／週、約４ｎｇ／ｍＬ／週、約４．５ｎｇ／ｍＬ／週、約５ｎｇ／ｍＬ／週、約５．５ｎｇ／ｍＬ／週、約６ｎｇ／ｍＬ／週、約６．５ｎｇ／ｍＬ／週、約７ｎｇ／ｍＬ／週、または約７．５ｎｇ／ｍＬ／週の割合で増加し得る。
処置の方法
【００６２】
他の態様において、妊娠高血圧腎症および／または関連状態（例えば、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、ＨＦ、またはこれらの組み合わせ）を有する妊娠中または産後の女性、または妊娠高血圧腎症および／または関連状態を発症するリスクがある妊娠中または産後の女性を処置する方法が考慮される。いくつかの実施形態において、ガレクチン−３に結合することが可能な化合物を含む組成物は、被験体に投与され得、妊娠高血圧腎症、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、ＨＦ、またはこれらの組み合わせの症状を少なくとも部分的に軽減し得る。妊娠中または産後の女性は、上述の方法に従った処置のために同定され得る。
【００６３】
例えば、ある場合には、高血圧は、少なくとも部分的に軽減され得る。収縮期血圧および／または拡張期血圧は、少なくとも約５ｍｍＨｇ、いくつかの実施形態においては、少なくとも約１０ｍｍＨｇ、いくつかの実施形態においては、少なくとも約１５ｍｍＨｇ、いくつかの実施形態においては、少なくとも約２０ｍｍＨｇ、いくつかの実施形態においては、少なくとも約２５ｍｍＨｇ、いくつかの実施形態においては、少なくとも約３０ｍｍＨｇ、およびいくつかの実施形態においては、少なくとも約４０ｍｍＨｇ減少し得る。処置の結果として、上記女性の血圧は、約１６０／１１０ｍｍＨｇ未満、約１４０／９０ｍｍＨｇ未満、または約１２０／８０ｍｍＨｇ未満であり得る。
【００６４】
タンパク尿は、ある場合には、２４時間の回収期間で少なくとも約５０ｍｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約１００ｍｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約１５０ｍｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約２００ｍｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約３００ｍｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約４００ｍｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約５００ｍｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約７５０ｍｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約１ｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約１．５ｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約２ｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約３ｇ、いくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約４ｇ、またはいくつかの実施形態において、２４時間の回収期間で少なくとも約５ｇ減少し得る。
【００６５】
子癇の女性は、ガレクチン−３の阻害の結果として痙攣が軽減され得る。例えば、子癇の女性は、少なくとも約１週間、少なくとも約１か月、少なくとも約１回のトリメスター、少なくとも約２回のトリメスター、妊娠期間、および産後の期間を通して痙攣が軽減され得る。
【００６６】
低血小板数（すなわち、血小板減少症）は、ガレクチン−３を阻害することによって、少なくとも部分的に軽減され得る。ある場合には、血小板数は、約１０，０００個／ｍｍ３、いくつかの実施形態においては、約２０，０００個／ｍｍ３、いくつかの実施形態においては、約５０，０００個／ｍｍ３、いくつかの実施形態においては、約７５，０００個／ｍｍ３、いくつかの実施形態においては、約１００，０００個／ｍｍ３、いくつかの実施形態においては、約１５０，０００個／ｍｍ３、およびいくつかの実施形態においては、約２００，０００個／ｍｍ３増加し得る。処置の結果として、妊娠中または産後の女性は、１５０，０００〜４５０，０００個／ｍｍ３の間の血小板数を有し得る。
【００６７】
高い肝酵素は、ガレクチン−３を阻害することによって、少なくとも部分的に減少し得る。例えば、ＡＳＴレベルは約７０Ｕ／Ｌ未満まで減少し得、および／またはＬＤＨレベルは約６００Ｕ／Ｌ未満まで減少し得る。
【００６８】
いくつかの実施形態において、ガレクチン−３の阻害は、妊娠高血圧腎症および／または関連状態の発症を遅らせ得るか、または予防し得る。例えば、ある場合には、妊娠高血圧腎症および／または関連状態は、少なくとも約１か月、少なくとも約１回のトリメスター、または少なくとも約２回のトリメスター遅らせ得る。
【００６９】
例えば、特定の実施形態において、心線維症（ｃａｒｄｉａｃ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ）は、少なくとも部分的に阻害され得る。別の実施形態において、短縮率は、少なくとも部分的に減少しないようにされ得るか、または増加し得る。いくつかの実施形態において、左心室駆出率は、少なくとも部分的に減少しないようにされ得るか、または増加し得る。他の実施形態において、右心室拡張末期圧（ＲＶＥＤＰ）は、少なくとも部分的に増加しないようにされ得るか、または減少し得る。さらに別の実施形態において、左心室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）は、少なくとも部分的に増加しないようにされ得るか、または減少し得る。いくつかの実施形態において、左心室拡張末期容積は、少なくとも部分的に減少しないようにされ得るか、または増加し得る。他の実施形態において、左心室収縮末期容積は、少なくとも部分的に減少しないようにされ得るか、または増加し得る。
【００７０】
さらに別の実施形態において、左心室緩和定数（Ｔａｕ）は、増加しないようにされ得るか、または減少し得る。別の実施形態において、心臓のリモデリングが阻害され得る。いくつかの実施形態において、症状を軽減することは、症状の発生頻度の減少を指し得る。他の実施形態において、症状を軽減することは、症状の発症を遅らせることを指し得る。例えば、心線維症は長年にわたって生じ得、ガレクチン−３に結合することが可能な化合物で被験体を処置することによって、心線維症の進行を遅らせ得る。
【００７１】
いくつかの実施形態において、短縮率、および／または左心室駆出率、および／または左心室拡張末期容積、および／または左心室収縮末期容積は、少なくとも約５％または少なくとも約１０％増加し得る。いくつかの実施形態において、ＬＶＥＤＰおよび／またはＲＶＥＤＰは、少なくとも約１ｍｍＨｇ、少なくとも約２ｍｍＨｇ、少なくとも約３ｍｍＨｇ、少なくとも約４ｍｍＨｇ、または少なくとも約５ｍｍＨｇ減少し得る。特定の実施形態において、Ｔａｕは、約１ミリ秒、約２ミリ秒、約３ミリ秒、約４ミリ秒、または約５ミリ秒減少し得る。
【００７２】
ある場合には、妊娠中または産後の女性が、ガレクチン−３に結合することが可能な化合物で処置された場合、妊娠高血圧腎症、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、および／またはＨＦの症状の進行速度は、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％遅れ得る。
【００７３】
場合によっては、ガレクチン−３に結合することが可能な化合物は、妊娠中または産後の女性が妊娠高血圧腎症、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、および／またはＨＦを発症するリスクを減少させ得る。いくつかの実施形態において、上記リスクは、罹患した未処置の妊娠中または産後の女性と比較して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％減少し得る。いくつかの実施形態において、妊娠中または産後の女性を治療することによって、妊娠中または産後の女性が妊娠高血圧腎症、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、および／またはＨＦを発症するリスクを、通常のリスクまで減少させ得る。
【００７４】
いくつかの実施形態において、被験体（例えば、妊娠中または産後の女性）におけるガレクチン−３の活性が決定され得る。例えば、被験体におけるガレクチン−３の活性は、治療レジメンの一部として決定され得る。例えば、ガレクチン−３に結合することが可能な化合物を含む組成物は、被験体（例えば、妊娠中または産後の女性）に投与され得、被験体におけるガレクチン−３の活性が決定され得る。そのようなレジメンは、例えば、上記組成物の適切な用量、上記組成物の薬物動態、上記組成物の有効性などのような特性を決定するのに有利であり得る。ガレクチン−３の活性は、本明細書中に記載された任意の方法または当業者に公知の方法によって決定され得る。いくつかの実施形態において、ガレクチン−３の活性を決定することは、上記化合物と結合した生物学的試料におけるガレクチン−３の割合（ｆｒａｃｔｉｏｎ）を決定することを含み得る。例えば、抗体アッセイが使用され得、抗体は非結合のガレクチン−３と結合するが、阻害剤と結合するガレクチン−３と結合しない。
【００７５】
一態様において、妊娠中または産後の女性は、妊娠高血圧腎症および／または関連状態を治療または予防するための個別の栄養アドバイスが与えられ得る。この個別の栄養アドバイスとしては、例えば、食品、サプリメント、またはｉｎ  ｖｉｖｏでのガレクチン−３の活性を減少させる摂取可能な他の物の同定が挙げられ得る。例えば、上記女性は、ペクチンを天然に含有する食品、または改質シトラスペクチンのようなペクチンを含有するサプリメントを摂取するようアドバイスされ得る。一実施形態において、コンピュータは、妊娠中または産後の女性の健康、ガレクチン−３レベル、食事、身元、および／または健康保険に関する少なくとも２つの指標を受信し、これらの指標に応答して、ｉｎ  ｖｉｖｏでのガレクチン−３の活性に影響するのに有効な１つまたは複数の食事の選択肢を示すデータを送信するようにプログラムされている。
【００７６】
特定の実施形態において、ガレクチン−３レベルおよび／または他のバイオマーカー（例えばＢＮＰ）は、ガレクチン−３阻害剤を服用している妊娠中または産後の女性において測定され得、患者において測定された以前のガレクチン−３の濃度と比較され得る。ある場合には、妊娠中または産後の女性における１つまたは複数の以前のガレクチン−３の濃度と比較したガレクチン−３の濃度の増加または減少は、妊娠中または産後の女性が、ガレクチン−３阻害剤治療に対して反応するか、または反応しないという指標であってもよい。マーカーレベルは、継時的に、例えば、１週間毎、２週間毎、１か月毎、またはトリメスターの間隔で妊娠中または産後の女性から得られる試料においてモニターされ得る。
【００７７】
妊娠中の女性における妊娠高血圧腎症および／または関連状態（例えば、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、および／またはＨＦ）は、女性の胎児を出産することによって一般的に治癒するが、場合によっては、１つまたは複数のこれらの状態は継続し得るか、または産後の最初に現れ得る。いくつかの実施形態において、妊娠高血圧腎症および／または関連状態の処置として、または予防のために女性の胎児を出産してもよい。例えば、最小閾値を超えるか、またはある期間にわたって最小の量または割合で増加する妊娠中の女性由来の体液中のガレクチン−３レベルは、その女性が胎児の早期出産の候補であることを示し得る。
【００７８】
いくつかの実施形態において、女性の胎児の出産は、帝王切開または分娩の誘発によって行われてもよい。分娩の誘発は、任意の適した技術を使用して達成され得る。例えば、分娩誘発化合物は、妊娠中の女性に投与され得る。そのような化合物としては、オキシトシン、プロスタグランジン（例えば、ジノプロストン）、ミソプロストール（ｍｉｓｏｐｒｏｓｔａｌ）、これらの類縁体および誘導体、ならびに薬学的に許容され得るこれらの塩およびプロドラッグが挙げられる。別の実施形態において、物理的方法は分娩を誘発するために使用されてもよい。例えば、子宮頚部の成熟は、機械的に（例えば、バルーンカテーテルを使用することによって）誘発されてもよく、分娩の誘発につながり得る。他の例において、妊娠中の女性の羊膜を除去または掃除すること（ｓｗｅｅｐｉｎｇ）、または妊娠中の女性における人工破水を行うことは、分娩を誘発するために使用されてもよい。
組成物
【００７９】
いくつかの実施形態において、抗ガレクチン−３療法は、ガレクチン−３と結合（例えば阻害）することが可能な化合物を投与することを含んでもよい。任意の適した化合物が使用されてもよい。例えば、特定の実施形態において、上記化合物は、炭水化物、タンパク質（例えば、抗体または抗体断片）、核酸（例えば、アプタマー）、または小分子であってもよい。
【００８０】
いくつかの実施形態において、上記化合物は炭水化物であってもよい。例えば、上記化合物は、多糖、二糖、単糖、ペクチン、天然起源の炭水化物、合成炭水化物などであってもよい。ペクチンは、陸上植物の細胞壁において見られる多糖である。いくつかの実施形態において、ペクチンは、全長ペクチン、例えば、断片化に供されていないペクチンであってもよい。他の実施形態において、上記ペクチンは、ペクチン断片であってもよい。ある場合には、ペクチンは直鎖状であってもよい。他の場合では、ペクチンは分岐状であってもよい。場合によっては、上記ペクチンは、ホモガラクツロナン、置換ガラクツロナン、またはラムノガラクツロナンであってもよい。いくつかの実施形態において、ペクチンは、ガラクトース、キシロース、アピオース、グルコース、アラビノース、ラムノース、ウロン酸（例えば、ガラクツロン酸）および／またはマンノース残基を含んでもよい。いくつかの実施形態において、ペクチンは化学種の混合物であってもよい。例えば、ペクチンは多糖鎖の分子量分布を含んでもよい。ある場合には、ペクチンは、異なる化学組成の２つまたはそれより多くの多糖を含んでもよい。
【００８１】
場合によっては、ペクチンはラムノガラクツロナンペクチンであってもよい。例えば、ラムノガラクツロナンは、ラムノガラクツロナンＩペクチンまたはラムノガラクツロナンＩＩペクチンであってもよい。ラムノガラクツロナンＩペクチンは、いくつかの実施形態において、繰り返しのガラクツロン酸−ラムノース二糖（例えば、α−Ｄ−ガラクツロン酸−（１，２）−α−Ｌ−ラムノース）の骨格を有してもよい。場合によっては、ラムノガラクツロナンＩＩは、本質的にすべてガラクツロン酸残基（例えば、Ｄ−ガラクツロン酸）である骨格を有してもよい。いくつかの実施形態において、少なくともいくつかの骨格残基は、多糖残基のペンダント側基（ｐｅｎｄａｎｔ  ｓｉｄｅ  ｇｒｏｕｐ）で置換されてもよい。いくつかの実施形態において、側基は、キシロース、アピオース、グルコース、アラビノース、またはマンノースを含んでもよい。
【００８２】
いくつかの実施形態において、ペクチンは天然源から得られ得る。例えば、ある場合には、ペクチンは植物源から得られ得る。植物源の制限されない例としては、果物（例えば、リンゴ、グアバ、マルメロ（ｑｕｉｎｃｅ）、西洋ナシ、プラム、グースベリー、オレンジ、レモン、グレープフルーツ、ほかの柑橘系果実、サクランボ、ブドウ、イチゴなど）および野菜（例えば、甜菜、ジャガイモ、およびニンジン）が挙げられるが、任意の適したソースが利用されてもよい。いくつかの実施形態において、ペクチンは柑橘系の皮から得られ得る。他の実施形態において、ペクチンはリンゴの絞りかすから得られ得る。いくつかの実施形態において、ペクチンは、スワロールート（ｓｗａｌｌｏｗ  ｒｏｏｔ）のペクチン多糖、Ｈｅｍｉｄｅｓｍｕｓペクチン多糖、ブラッククミンペクチン多糖、Ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓペクチン多糖、シトラスペクチン酸糖、または改質スワロールートペクチン多糖であってもよい。
【００８３】
上述したようにガレクチン−３阻害剤は、単糖、二糖、三糖、多糖、あるいはその類縁体または誘導体のような炭水化物であってもよい。任意の適した炭水化物が使用されてもよい。いくつかの実施形態において、ガレクチン−３阻害剤はガラクトースを含んでもよい。いくつかの実施形態において、ガレクチン−３阻害剤は、グルコース、ガラクトース、フコース、アラビノース、アラビトール、アロース、アルトロース、グロース、ガラクトサミン、ハメロース（ｈａｍｍｅｌｏｓｅ）、リキソース、マンノース、マンニトール、マンノサミン、リボース、ラムノース、トレオース、タロース、キシロース、これらのウロン酸、およびこれらの組み合わせを含んでもよい。炭水化物の制限されない例としては、ラクトース；ＬａｃＮＡｃ；Ｇａｌ−β−ｌ，４−ＧｌｃＮＡｃ−β−ｌ，３−Ｇａｌ−βｌ，４−Ｇｌｃ；Ｇａｌ−β−ｌ，３−ＧｌｃＮＡｃ−β−ｌ，３−Ｇａｌ−β−ｌ，４−Ｇｌｃ；Ｇａｌ−β−ｌ，４−ＧｌｃＮＡｃ−β−ｌ，３−Ｇａｌ；Ｇａｌ−β−ｌ，４−ＧｌｃＮＡｃ−β−ｌ，２−（Ｇａｌ−β−１，４−ＧｌｃＮＡｃ−β−１，６）−Ｍａｎ；Μｅ−β−ＬａｃＮＡｃ；Ｇａｌ−β−１，４−ＧｌｃＮＡｃ−β−１，２−（Ｇａｌ−β−１，４−ＧｌｃＮＡｃ−β−１，４）−Ｍａｎ−α−１，３）−（Ｇａｌ−β−１，４−ＧｌｃＮＡｃ−β−１，２−（Ｇａｌ−β−１，４−ＧｌｃＮＡｃ−β−１，６）−Ｍａｎ−α−１，６）−Ｍａｎ；Ｇａｌ−β−１，４−Ｆｒｕ；Ｇａｌ−β−ｌ，４−ＭａｎＮＡｃ；Ｇａｌ−α−ｌ，６−Ｇａｌ；Μｅ−β−Ｇａｌ；ＧｌｃＮＡｃ−β−ｌ，３−Ｇａｌ；ＧｌｃＮＡｃ−β−ｌ，４−ＧｌｃＮＡｃ；Ｇｌｃ−β−ｌ，４−Ｇｌｃ；およびＧｌｃＮＡｃが挙げられ、ここでＧａｌはガラクトシル、Ｇｌｃはグルコシル、Ｍａｎはマンノシル、Ｆｒｕはフルクトシル、ＮＡｃはＮ−アセチル、およびＭｅはメチルである。
【００８４】
いくつかの実施形態において、摂取可能な組成物は、ガレクチン−３を阻害することが可能な化合物を含んでもよい。例えば、上記摂取可能な組成物は食品であってもよい。場合によっては、上記食品はペクチンを含有してもよい。例えば、上記食品は、焼いた食品、飲料、生の果物および／または野菜ならびに／あるいは調理された果物および／または野菜の混合物などのような果実製品および／または野菜製品であってもよい。特定の実施形態において、食品は、ガレクチン−３に結合することが可能な化合物で強化されてもよい。場合によっては、上記食品は、妊娠中または産後の女性に対する治療（例えば、抗高血圧、抗タンパク尿、抗溶血、肝保護、肝治療、抗血小板減少症、心臓治療、および／または心臓保護）効果を有するのに十分である量の、ガレクチン−３に結合する能力がある化合物で強化されてもよい。このようなアプローチは、ガレクチン−３阻害剤の治療的に関連しない量を有するか、または本質的にガレクチン−３阻害剤の量を有さない食品を改善することに特に有利であり得る。
【００８５】
ガレクチン−３のさらなる阻害剤としては、アンチセンス核酸および核酸アプタマーのような核酸が挙げられる。アンチセンス核酸とは、特定のＤＮＡ配列またはＲＮＡ配列に結合し、ガレクチン−３の発現を阻害することが可能なポリヌクレオチドまたはペプチド核酸をいう。いくつかの実施形態において、アンチセンス核酸は、細胞におけるガレクチン−３をコードしている遺伝子の領域を標的にし得る。
【００８６】
いくつかの実施形態において、ガレクチン−３抗体は、ガレクチン−３の阻害剤として使用されてもよい。場合によっては、上記抗体は、ガレクチン−３に存在するエピトープに選択的であってもよい。
【００８７】
被験体におけるガレクチン−３を阻害するための組成物のさらなる記載は、２０１１年５月２５日に出願されたＭｕｎｔｅｎｄａｍによる米国特許仮出願第６１／４９０，０４９号に開示されている。
【００８８】
いくつかの実施形態において、組成物は複数の活性剤を含んでもよい。例えば、組成物は、ガレクチン−３に結合することが可能な化合物である第１の活性剤および第２の活性剤（例えば、活性医薬成分）を含んでもよい。いくつかの実施形態において、ガレクチン−３に結合することが可能な化合物は、妊娠高血圧腎症、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、ＨＦ、これらの組み合わせ、および／またはこれらの症状（例えば、高血圧、タンパク尿、痙攣、てんかん）の処置に適した活性剤（例えば、活性医薬成分）と組み合わせられてもよい。活性剤の制限されない例としては、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、抗血小板薬、アンジオテンシンＩＩ受容体ブロッカー、βブロッカー、カルシウムチャネルブロッカー、利尿薬、血管拡張薬、ジギタリス製剤、スタチン、抗痙攣薬（例えば、硫酸マグネシウムのようなマグネシウム塩）、およびステロイド（例えば、副腎皮質ステロイド）が挙げられる。
【００８９】
いくつかの実施形態において、ガレクチン−３阻害剤は、約１ｍｇ／ｍＬ未満、約５００μｇ／ｍＬ未満、約２００μｇ／ｍＬ未満、約１００μｇ／ｍＬ未満、約５０μｇ／ｍＬ未満、約２０μｇ／ｍＬ未満、約１０μｇ／ｍＬ未満、約５μｇ／ｍＬ未満、または約１μｇ／ｍＬ未満の最小阻害濃度を有してもよい。場合によっては、ガレクチン−３阻害剤は、約１μｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬとの間、約１μｇ／ｍＬ〜約５００μｇ／ｍＬとの間、約１μｇ／ｍＬ〜約１００μｇ／ｍＬとの間、約５μｇ／ｍＬ〜約５００μｇ／ｍＬとの間、約５μｇ／ｍＬ〜約１００μｇ／ｍＬとの間、約１μｇ／ｍＬ〜約５０μｇ／ｍＬとの間、または約１μｇ／ｍＬ〜約１０μｇ／ｍＬとの間の最小阻害濃度を有してもよい。阻害剤は、例えば、ガレクチン−３結合特性を有していると考えられる化合物をスクリーニングすることによって同定され得る。例えば、ガレクチン−３を含むクロマトグラフィ樹脂を使用するアフィニティクロマトグラフィは、ガレクチン−３結合活性を示す化合物を捕捉するために使用されてもよい。その後、液体クロマトグラフィおよび質量分析がアフィニティクロマトグラフィ段階の間に捕捉された化合物を同定するために使用されてもよい。当業者は、ガレクチン−３結合特性を有していると考えられる化合物をスクリーンするための他の方法およびアッセイを容易に思いつく。
【００９０】
いくつかの実施形態において、ガレクチン−３への化合物の結合は、ガレクチン−３の活性を阻害し得る。例えば、ガレクチン−３への化合物の結合は、ガレクチン−３と生物学的な標的との間、例えば、ガレクチン−３と受容体のような別のタンパク質との間のタンパク質−タンパク質相互作用を阻害し得る。上述したように、ガレクチン−３は、細胞−細胞接着、細胞−マトリックス相互作用、食作用、細胞周期、アポトーシス、血管新生、およびｍＲＮＡスプライシングを含む様々な細胞プロセスにおいて役割を果たすことが示されている。場合によっては、ガレクチン−３の阻害は、１つまたは複数のこれらのプロセスを阻害し得る。しかしながら、ガレクチン−３の阻害は、炎症、線維症、繊維芽細胞の活性化、器官のリモデリングなどを同様に含む他のプロセスを阻害し得ることを理解される必要がある。ガレクチン−３は、細胞内作用および細胞外作用両方を通して機能することが示されているので、ガレクチン−３への化合物の結合は、細胞内作用、細胞外作用、または細胞内作用および細胞外作用の両方を阻害し得る。
【００９１】
一態様において、ガレクチン−３の阻害が、妊娠高血圧腎症または関連状態を処置するために使用されてもよい。いくつかの実施形態において、ガレクチン−３の阻害は、妊娠高血圧腎症、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、ＨＦ、またはこれらの組み合わせを処置するために使用されてもよい。この列挙は、決して制限することを意味されるのではなく他の疾患および状態が、妊娠中または産後の女性において同様に処置され得る。いくつかの実施形態において、ガレクチン−３の阻害は、妊娠高血圧腎症、子癇、ＨＥＬＬＰ、ＬＶＤ、ＨＦ、またはこれらの組み合わせを発症するリスクを減少させるために使用されてもよい。
【００９２】
場合によっては、ガレクチン−３に結合することが可能な化合物は、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％ガレクチン−３の活性を阻害し得る。
【００９３】
いくつかの実施形態において、ガレクチン−３と結合することが可能な化合物は、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％ガレクチン−３の発現レベルを減少させ得る。
医薬製剤
【００９４】
開示されている組成物は、最適な医薬有効性を提供する投与量において、そのような処置を必要としている患者（例えば、妊娠中または産後の女性）に投与されてもよい。いずれかの特定の応用における使用に必要とされる用量は、選択される特定の化合物または組成物だけでなく、投与ルート、治療されている状態の性質、患者の年齢および状態、その後患者が従う併用薬物または特別食、ならびに当業者が認識する他の因子によって、患者ごとに異なり、最終的には適切な用量は担当医師の裁量によることが理解されている。上述した臨床状態および疾患を処置するために、化合物は、従来の無毒性の薬学的に許容され得る担体、アジュバント、およびビヒクルを含有する投与ユニット製剤（ｄｏｓａｇｅ  ｕｎｉｔ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）において、経口的に、皮下に、局所的に、非経口的に、経膣的に、吸入スプレーにより、または直腸内に投与されてもよい。非経口的投与としては、皮下注射、静脈内注射または筋肉注射、あるいは注入技術が挙げられ得る。
【００９５】
処置は、望む限りの長い期間または望む限りの短い期間続けられ得る。上記組成物は、例えば、１日当たり１〜４回またはそれより多くの回数のレジメンで投与されてもよい。適切な処置期間は、例えば、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約１か月、少なくとも約６か月、少なくとも約１年、または無期限であり得る。望ましい結果（例えば症状の部分的な軽減または完全な軽減）が達成された場合、処置期間は終わり得る。
【００９６】
別の態様において、薬学的に許容され得る担体と一緒に製剤化される、本明細書中に開示されるようなガレクチン−３に結合することが可能な化合物を含む薬学的組成物が提供される。特に、本開示は、１つまたは複数の薬学的に許容され得る担体と一緒に製剤化される、本明細書中に開示されるようなガレクチン−３に結合することが可能な化合物を含む薬学的組成物を提供する。これらの製剤としては、経口投与、直腸内投与、局所投与、頬側投与、非経口投与（例えば、皮下投与、筋肉内投与、皮内投与、または静脈内投与）、直腸内投与、膣内投与、またはエアロゾル投与に適した製剤が挙げられるが、任意の所定の場合における投与の最も適した形態は、処置されている状態の程度および重症度ならびに使用されている特定の化合物の性質に依存する。例えば、開示されている組成物は、単位用量として製剤化されてもよいし、および／あるいは経口投与または皮下投与のために製剤化されてもよい。
【００９７】
例示的な薬学的組成物は、例えば、固体形態、半固体形態、または液体形態における薬学的な調製物の形態において使用されてもよく、それは、外部、腸内、または非経口での適用に適した有機または無機の担体または賦形剤との混合物において、１つまたは複数の化合物を活性成分として含有する。上記活性成分は、例えば、錠剤、ペレット、カプセル、坐薬、溶液、エマルション、懸濁液、および使用に適した任意の他の形態のための、通常の無毒性の薬学的に許容され得る担体とともに配合されてもよい。目的の活性化合物は、疾患の過程または状態への望ましい影響を生み出すのに十分な量で薬学的組成物中に含まれる。
【００９８】
錠剤のような固体組成物を調製するために、主要な活性成分は、薬学的な担体、例えば、コーンスターチ、ラクトース、スクロース、ソルビトール、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、またはガムのような従来の錠剤化成分、および他の薬学的な希釈剤、例えば水と混合され得、化合物の均一の混合物を含有する固体の製剤前組成物（ｐｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）または無毒性の薬学的に許容され得るその塩を形成する。これらの製剤前組成物を均一という場合、活性成分が組成物中に均等に分散されているため、組成物が、錠剤、丸剤およびカプセルのような同等に有効な単位剤形へと容易に細分化され得るということを意味する。
【００９９】
経口投与のための固体剤形（カプセル、錠剤、丸剤、糖衣錠、粉末、顆粒など）において、対象の組成物は、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムのような１つまたは複数の薬学的に許容され得る担体、および／または次のいずれか：（１）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸のような充填剤またはエクステンダー（ｅｘｔｅｎｄｅｒ）；（２）例えば、カルボキシルメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアラビアゴム（ａｃａｃｉａ）のような結合剤；（３）グリセロールのような保湿剤；（４）寒天、炭酸カルシウム、イモまたはタピオカのデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸、および炭酸ナトリウムのような崩壊剤；（５）パラフィンのような溶液化遅延剤（ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｒｅｔａｒｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）；（６）四級アンモニウム化合物のような吸着促進剤；（７）例えば、アセチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートのような湿潤剤；（８）カオリンおよびベントナイト粘土のような吸収剤；（９）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびこれらの混合物のような滑沢剤；および（１０）着色剤と混合される。また、カプセル、錠剤および丸剤の場合において、上記組成物は緩衝剤を含んでもよい。さらに、同様の型の固体の組成物は、ラクトースまたは乳糖のような賦形剤ならびに高分子量のポリエチレングリコールなどを使用する軟ゼラチンカプセルおよび硬ゼラチンカプセル中に、充填剤として用いられてもよい。
【０１００】
錠剤は、必要に応じて１つまたは複数の副成分を含めて、圧縮または成形によって作製されてもよい。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、表面活性剤または分散剤を使用して、調製されてもよい。成形錠剤は、適した機械において、不活性液体希釈剤で湿らせた対象の組成物の混合物を成形することによって作製されてもよい。錠剤ならびに糖衣錠、カプセル、丸剤および顆粒のような他の固体剤形は、必要に応じて、刻み目をつけ（ｓｃｏｒｅ）られてもよいし、または腸溶コーティングおよび医薬製剤分野において周知である他のコーティングのようなコーティングおよびシェルを用いて調製されてもよい。
【０１０１】
吸入またはガス注入のための組成物としては、薬学的に許容され得る水性溶媒または有機溶媒、あるいはこれらの混合物における溶液および懸濁液、ならびに粉末が挙げられる。経口投与のための液体剤形としては、薬学的に許容され得るエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤が挙げられる。対象の組成物に加えて、上記液体剤形は、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールならびにソルビタン、シクロデキストリンおよびこれらの組み合わせの脂肪酸エステルなどの、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤のような当該分野で一般的に使用されている不活性希釈剤を含有してもよい。
【０１０２】
対象の組成物に加え、懸濁液は、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化（ｍｅｔａｈｙｄｒｏｘｉｄｅ）アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガント、ならびにこれらの混合物のような懸濁剤を含有してもよい。
【０１０３】
直腸内投与または膣内投与のための製剤は、坐薬として提示されてもよく、それは、例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、坐薬ワックスまたはサリチレートを含む１つまたは複数の適した非刺激性の賦形剤または担体と、対象の組成物とを混合することによって調製されてもよく、そして、室温で固体であるが、体温で液体であり、それゆえ体腔で溶解して活性剤を放出する。
【０１０４】
対象の組成物の経皮投与のための剤形としては、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ジェル、溶液、パッチおよび吸入剤が挙げられる。活性成分は、薬学的に許容され得る担体と無菌条件下で混合されてもよく、そして必要とされ得る任意の防腐剤、バッファー、または噴霧剤と無菌条件下で混合されてもよい。
【０１０５】
軟膏、ペースト、クリームおよびジェルは、対象の組成物に加えて、動物性脂および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはこれらの混合物のような賦形剤を含有してもよい。
【０１０６】
粉末およびスプレーは、対象の組成物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミドの粉末、またはこれらの物質の混合物のような賦形剤を含有してもよい。スプレーは、クロロフルオロヒドロカーボンならびにブタンおよびプロパンなどの揮発性非置換ヒドロカーボンのような慣習的な噴霧剤をさらに含有してもよい。
【０１０７】
組成物および化合物は、代わりにエアロゾルで投与されてもよい。これは、化合物を含有する水性のエアロゾル、リポソーム調製物または固体粒子を調製することによって達成される。非水性（例えば、フルオロカーボン噴霧剤）懸濁液が使用され得る。音波ネブライザーは、それらが薬剤を剪断にさらす（これは、対象の組成物中に含有される化合物の分解を生じさせ得る）ことを最小化するため、使用され得る。通常は、水性エアロゾルは、対象の組成物の水性溶液または水性懸濁液を、従来の薬学的に許容され得る担体および安定剤と一緒に製剤化することによって作製される。上記担体および安定剤は、特定の対象の組成物の要件によって異なるが、上記担体および安定剤としては、典型的に、非イオン性界面活性剤（Ｔｗｅｅｎｓ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、またはポリエチレングルコール）、血清アルブミンのような無害のタンパク質、ソルビタンエステル、オレイン酸、レシチン、グリシンのようなアミノ酸、バッファー、塩、糖、または糖アルコールが挙げられる。エアロゾルは、一般的に、等張液から調製される。
【０１０８】
非経口投与のための薬学的組成物は、１つまたは複数の薬学的に許容され得る無菌で等張の水溶液または非水性溶液、分散系、懸濁液またはエマルション、あるいは使用する直前に無菌の注射可能な溶液または分散系に再構成され得る無菌粉末と組み合わせて対象の組成物を含み、抗酸化剤、バッファー、静菌薬、目的のレシピエントの血液を用いて製剤を等張にする溶質、あるいは懸濁剤または増粘剤を含有してもよい。
【０１０９】
薬学的組成物において用いられ得る適切な水性担体および非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、および適切なこれらの混合物、オリーブ油のような植物性油、ならびにオレイン酸エチルおよびシクロデキストリンのような注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティング物質の使用、分散の場合における要求される粒子サイズの維持、および界面活性剤の使用によって維持され得る。
【０１１０】
別の態様において、ガレクチン−３と結合することが可能な化合物、腸溶性物質；および薬学的に許容され得るその担体またはその賦形剤を含む、開示されている薬学的組成物を含む経腸医薬製剤が提供される。腸溶性物質とは、胃の酸性環境において実質的に不溶性であるポリマーであり、腸内において特定のｐＨで大部分が可溶性であるポリマーをいう。小腸は、胃と大腸との間の消化管（腸）の一部であり、小腸としては、十二指腸、空腸、および回腸が挙げられる。十二指腸のｐＨは約５．５、空腸のｐＨは約６．５、そして遠位の回腸のｐＨは約７．５である。したがって、腸溶性物質は、例えば、約５．０、約５．２、約５．４、約５．６、約５．８、約６．０、約６．２、約６．４、約６．６、約６．８、約７．０、約７．２、約７．４、約７．６、約７．８、約８．０、約８．２、約８．４、約８．６、約８．８、約９．０、約９．２、約９．４、約９．６、約９．８、または約１０．０のｐＨまで可溶性ではない。例示的な腸溶性物質としては、セルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）、ポリビニルアセテートフタレート（ＰＶＡＰ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）、セルロースアセテートトリメリテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースサクシネート、セルロースアセテートサクシネート、セルロースアセテートヘキサヒドロフタレート、セルロースプロピオネートフタレート、セルロースアセテートマレート、セルロースアセテートブチレート、セルロースアセテートプロピオネート、メチルメタクリル酸およびメチルメタクリレートの共重合体、メチルアクリレート、メチルメタクリレートおよびメタクリル酸の共重合体、メチルビニルエーテルおよび無水マレイン酸の共重合体（Ｇａｎｔｒｅｚ  ＥＳシリーズ）、エチルメタクリレート（ｍｅｔｈｙａｃｒｙｌａｔｅ）−メチルメタクリレート−クロロトリメチルアンモニウムエチルアクリレート共重合体、ゼイン、セラックおよびコパールコロホリウム（ｃｏｐａｌ  ｃｏｌｌｏｐｈｏｒｉｕｍ）のような天然の樹脂、ならびにいくつかの市販されている腸溶性分散系（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ３０Ｄ５５、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＦＳ３０Ｄ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００、Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ  ＥＭＭ３０Ｄ、Ｅｓｔａｃｒｙｌ  ３０Ｄ、Ｃｏａｔｅｒｉｃ、  およびＡｑｕａｔｅｒｉｃ）が挙げられる。上述の各物質の溶解度は、公知であるか、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて容易に決定されるかのいずれかである。前述のものは、考えられる物質の列挙であるが、本開示の利益を得た当業者であれば、それが網羅的ではなく、使用され得る他の腸溶性物質が存在することを認識する。
【０１１１】
有利なことに、それぞれ同じまたは異なるモノマーを含む１つまたは複数の組成物を含有するキットが提供される。このようなキットは、上に記載したような適切な剤形および疾患または状態を処置するためのそのような剤形を使用する方法を記載している説明書を含む。この説明書は、当業者に公知である投与形態に従った剤形を投与する消費者または医療関係者に向けたものである。そのようなキットは、有利なことに、単一または複数のキットの単位で包装され、販売され得る。そのようなキットの例は、いわゆるブリスター包装である。ブリスター包装は、包装産業において周知であり、医薬単位剤形（錠剤、カプセルなど）の包装に広く使用されている。ブリスター包装は、一般的に、好ましい透明なプラスチック材料のホイルで覆われている比較的かたいシートからなる。包装過程の間、へこみがプラスチックホイルにおいて形成される。このへこみは、包装される錠剤またはカプセルのサイズおよび形状を有している。次に、錠剤またはカプセルはへこみに入れられ、比較的かたい材料のシートが、へこみが形成される方向と逆のホイルの面で、プラスチックホイルに対して密封される。結果として、錠剤またはカプセルは、プラスチックホイルとシートとの間のへこみに密封される。好ましくは、シートの強度は、錠剤またはカプセルが、へこみに手で圧力を加えることによってブリスター包装から取り除かれ得、それによって、へこみの位置でシートに開口部が形成されるような強度である。その後、錠剤またはカプセルは、上記開口部を介して取り除かれ得る。
【０１１２】
例えば、数字が指定された錠剤またはカプセルを摂取する必要があるレジメンの日数に一致する、錠剤またはカプセルのそばの数字の形式で、キットにおいて記憶の補助を提供するのが望ましい。このような記憶の補助の別の例は、カードに印刷されたカレンダーであり、例えば、次の通り「第１週、月曜日、火曜日、など、第２週、月曜日、火曜日など」である。記憶の補助の他の変化は容易に明らかになる。「１日用量」は、所定日に服用される単一の錠剤またはカプセルあるいはいくつかの丸剤またはカプセルであり得る。また、第１の化合物の１日用量は、単一の錠剤またはカプセルからなり得、他方で第２の化合物の１用日量は、いくつかの錠剤またはカプセルからなり、逆もまた同じである。記憶の補助はこれを反映する必要がある。
【実施例】
【０１１３】
本発明は、さらに以下の実施例によって例示される。実施例は、単に例示的な目的のために提供され、決して本開示の範囲または内容を制限すると解釈されない。
実施例１．妊娠高血圧腎症と血漿ガレクチン−３レベルとの関連性
方法
研究対象集団
【０１１４】
臨床研究は以下のように行った。母体の静脈血の血漿を、妊娠高血圧腎症と診断された６５人の妊娠中の女性から採取した。母体の静脈血試料もまた、血液採取時に妊娠高血圧腎症と診断されなかった１３１人の妊娠中の女性から採取した：これらの被験体は、本明細書中では「対照被験体」という。妊娠高血圧腎症と診断された６５人の妊娠中の女性のそれぞれに対して、１人または２人のいずれかの対照被験体を採用し、対照被験体は、母体年齢（最も近い年と対応させる）および妊娠期間（最も近い月と対応させる）のパラメータに基づいて、それぞれの妊娠高血圧腎症の患者とマッチングさせた。
生化学的かつ臨床的測定
【０１１５】
各血漿試料におけるガレクチン−３タンパク質の濃度を、製品の使用説明書に従って、市販のアッセイ（ＢＧ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｉｎｃ．，  Ｗａｌｔｈａｍ  ＭＡ）を使用して決定した。
結果
【０１１６】
図１は、妊娠高血圧腎症と診断された６５人の妊娠中の女性および妊娠高血圧腎症と診断されなかった１３１人の妊娠中の女性における血漿ガレクチン−３レベルの分布を示している。各データの点は１人の被験体を表している。「妊娠高血圧腎症」群における４６．０ｎｇ／ｍＬの１つの値は示していない。各群におけるデータの点の間にある水平線は中央値を意味する。
【０１１７】
妊娠中の女性の２つの群におけるガレクチン−３の分布は、下の表１において特徴づけられている。
【表１】
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【０１１８】
妊娠高血圧腎症と診断された女性の群と対照被験体の群との間の、ガレクチン−３レベルの分布の統計学的な比較を、基本的な線形回帰を使用して行った。この分析では、＋２．５０５の（妊娠高血圧腎症と診断された女性を対照被験体と比較する）係数が得られ、関連するＰ値は０．００００３５４であった。さらに、母体年齢および妊娠期間に基づいた対照のマッチングで構成される線形混合統計モデルを評価した。この分析では、＋２．５１の（妊娠高血圧腎症と診断された女性を対照被験体と比較する）係数が得られ、関連するＰ値は０．０００１未満であった。
【０１１９】
さらに、受信者操作特性曲線を、ガレクチン−３レベルを予測変数として使用して構成した。図２は、この研究についての受信者操作特性曲線を示している。受信者操作特性曲線の下の面積は０．６６４であることが分かり、９５％信頼区間は０．５８４〜０．７４４であった。受信者操作特性曲線の下の面積と（識別能（ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎ）を示さない）０．５の値との間の差は、０．１６４であり、９５％信頼区間は０．０８４〜０．２４４であった。受信者操作特性曲線の下の面積と０．５の値との間の差について観察されるｚ値は、４．０１４であり、関連する臨界ｚ値は、１．９６０であり、０．０５のα値で０．０００１未満の両側のｐ値と一致した。
【０１２０】
そのため、妊娠高血圧腎症と診断された妊娠中の女性の血清中のガレクチン−３レベルが、妊娠高血圧腎症と診断されなかった妊娠中の女性におけるレベルよりも高いということが決定される。
参照による援用
【０１２１】
本明細書中で言及された特許文献および科学文献のそれぞれの全開示は、全ての目的について参照によって援用される。
均等物
【０１２２】
本発明は、他の特定の形態において、その精神または本質的な特徴から逸脱することなく具体化され得る。前述の実施形態は、それゆえ、本明細書中に記載される本発明を制限するよりもむしろ、実例であることがあらゆる点で考慮されるべきである。したがって、本発明の範囲は、上の記載よりもむしろ、添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の均等物の意味および範囲に属するすべての変化は、その中に含まれることを意味する。
【図１】
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【図２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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