(57)【要約】  本発明は人間の表皮の皮膚組織の赤外線  (IR)  スペクトル検出の一手に  DNA  および  RNA  の核酸バンドの強度比すなわち  1055  cm−1  周りマルチプレットの存在、  表皮皮膚癌と前癌の予後、診断および予測のための指標。マルチプレットの検出は  一緒に約1071、1084/1085、1095  cm−1で  の  DNA  /  RNAトライアドピークのパターン化された外観を持つ、  さらに腫瘍の悪性腫瘍は、特定の種類の関係を示す、また悪性腫瘍の進行と悪性腫瘍の方の進行を示します。【特許請求の範囲】
【請求項１】
範囲にわたって単独及びDNA  /  RNAトライアドにおけるDNA配列のパターン化された外観との組み合わせで決定され、DNAおよびRNA分子の核酸に対応する、約1055  cm−1で多重のヒト上皮癌組織IRスペクトルバイオマーカーバンドに検出する方法診断に関連した約1071、  1084/1085、  1095  cm−1  における周波数帯域の、予後および良性、前悪性および悪性の皮膚腫瘍（病変）のフォローアップ、の構成、悪性腫瘍に向けた悪性腫瘍の進行および進行を指示することができる:
(i)    識別IRスペクトルバイオマーカーバンドは、良性、前記前悪性および悪性
皮膚腫瘍（病変）に関連するかもしれない800〜4000  cm−1  領域内の周波数
帯の範囲にわたって、前記
(ii)  に関連するかもしれないIRスペクトルバイオマーカーバンドは、前記識別
する良性、前悪性および  800〜4000  cm−1  領域における周波数帯の範囲に  
わたって悪性皮膚腫瘍（病変）
(a)  良性の皮膚病変
(b)  前悪性皮膚病変
(c)  悪性の皮膚病変
(iii)  その平均値を用いてIRスペクトルバイオマーカーバンドのレベルを決定
するステップに関連する前記の良性、前悪性および悪性皮膚腫瘍（病
変）など:
(a)    変動範囲内で、良性の皮膚病変のための具体的な
(b)    変動範囲内で、前悪性皮膚病変のための具体的な
(c)    変動範囲内で、悪性の皮膚病変のための具体的な
(iv)    IRスペクトルバイオマーカーバンドは、良性、前悪性および悪性皮膚腫
瘍（病変）として、前記に関連し、I1055/I1245、その強度比を用いて前記
レベルを決定する:
(a)    変動範囲内で、良性の皮膚病変のための具体的な
(b)    変動範囲内で、前悪性皮膚病変のための具体的な
(c)    変動範囲内で、悪性の皮膚病変のための具体的な
(v)    良性、前記前癌に関連するかもしれない  800−4000  cm−1  領域、DNA/RNAト
ライアドにおけるDNA配列すなわちパターン化外観における周波数帯域の
範囲にわたって約1071、1084の1085、1095  cm−1  の周波数帯域の範囲を特
定
(vi)  それらの平均値を用いてDNA/RNAのトライアドのDNA配列におけるIRスペク
トルバンドの前記レベルを決定することに関連する、前記の良性、前悪性
および悪性皮膚腫瘍（病変）など
(a)    良性の皮膚病変に特異的なDNA/RNAトライアドにおけるDNA配列
(b)    前悪性皮膚病変に特異的なDNA/RNAトライアド、（複数の）DNA配列
(c)    悪性皮膚病変に特異的なDNA  /  RNAトライアドにおけるDNA配列
(vii)  使用することの決定された平均値は、病変の評価のように、パターン認
識技術を用いて、前記ために、DNA  /  RNAトライアドにおけるDNA配列中
のバンドが登場前記と組み合わせて前記IRスペクトルバイオマーカーの
平均値を決定し、前記
(a)  良性の皮膚病変のための具体的な
(b)  前悪性皮膚病変のための具体的な
(c)  悪性の皮膚病変のための具体的な
【請求項２】
のセットは約1055  cm−1  でIRスペクトルバイオマーカーバンドを特徴とする
請求項1に記載の使用センチと1071、1084の1085、1095  cm−1  中に少なくとも3スペクトルバンドのDNA配列の外観はDNA/RNAトライアドは、1つまたは次の複数を含む、前記  前記悪性皮膚腫瘍の支援診断（病変）:
(i)  2つの核酸間の最も大きな違いは語っ内のすべてのバンドの同時出現で約
1055  cm−1  におけるIRスペクトルバイオマーカーバンドとのDNA/RNAトライ
アド、したがって、BCC、SCCとを参照して、悪性皮膚腫瘍（病変）の診断
を支援MM
(ii)  の右シフト位置が約1055  cm−1  のすべてのバンドの同時出現をする少なく
ともIR  スペクトルバイオマーカーバンドはDNA/RNAのトライアド、した
がって、BCC及びSCCを用いて、悪性皮膚腫瘍（病変）の診断を支援する前記
(iii)  の左シフト位置が約1055  cm−1のすべてのバンドの同時出現をする少なく
ともIRスペクトルバイオマーカーバンドはDNA/RNAのトライアド、従って
MMを参照して、悪性皮膚腫瘍（病変）の診断を支援する前記
【請求項３】
のセットは約1055  cm−1  でIR  スペクトルバイオマーカーバンドを特徴とする請求項1に記載の使用1084の1085  cm−1と1095  cm−1  中に少なくとも2  スペクトルバンドのDNA配列の外観はDNA/RNAトライアドは、1つ以上の支持体に下記の複数を含む、前記前記悪性皮膚腫瘍の診断（病変）:
(a)    2つの核酸間の有意差は様々な約1055  cm−1  におけるIR  スペクトルバイオ
マーカーバンドとは、1084の1084と1095  cm−1で2スペクトルバンドの同時
出現では、DNA/RNAのトライアド、こうしての診断を支援すると、前
BCC、SCCおよびMMを参照して、悪性皮膚腫瘍（病変）
(b)    2つの核酸間の有意差は様々な約1055  cm−1  におけるIRスペクトルバイオ
マーカーバンドは、1084の1085  cm−1と1095  cm−1  で2スペクトルバン
ドの同時出現では、DNA/RNAのトライアド、こうしての診断を支援する
と、前記  BCC、SCCおよびMMを参照して、悪性皮膚腫瘍（病変）
(c)  2スペクトルバンドの同時出現は、DNA/RNAトライアドは、このように、MM
を参照して、悪性の皮膚腫瘍（病変）の診断をサポートする、言ったで
1084  の1085  cm−1と1095  cm−1  で語ったとの左シフトした位置は、IR  スペ
クトルバイオマーカーバンドは約1055  cm−1で語った
【請求項４】
のセットがIRスペクトルバイオマーカーバンドはDNA/RNAトライアドにおけるDNA配列は、診断をサポートするために、以下の一つ以上を含むことを特徴とする内1084の1085  cm−1で約1055cm−1  1スペクトルバンドの出現とで、請求項1に記載の使用、の言った前悪性および悪性の皮膚腫瘍（病変）
(a)  DNA/RNAトライアドにおけるDNA配列は、従って、悪性皮膚腫瘍（の診断を
支援する、前記で1084の1085  cm−1  での1のスペクトル帯域の同時出現は、前
記とIR  スペクトルバイオマーカーバンドが約1055  cm−1  で述べた2つの核酸
間の有意  差の多種多様BCCを参照して、病変）
(b)  IR  スペクトルバイオマーカーバンドはDNA/RNAトライアドにおけるDNA配列
は、従って、悪性皮膚腫瘍（病変）の診断を支援する、前記で1084の1085
cm−1で1スペクトルバンドの同時出現約1055cm−1で述べた2つの核酸の間の最
も大きな違いSCCを参照して
(c)  の右シフト位置が約1055  cm−1  でIRスペクトルバイオマーカーバンド前記cm  
とで1084の1085  cm−1  での1のスペクトル帯域の同時出現は、DNA/RNAトライ
アドにおけるDNA配列は、このように参照して、悪性皮膚腫瘍（病変）の診
断を支援する前記BCCとSCC
(d)  の左シフト位置における1084の1085  cm−1  での1のスペクトル帯域の同時出現
は、DNA  /  RNAトライアドにおけるDNA配列は、したがって、ボーエンを参照
して、前悪性皮膚腫瘍（病変）の診断を支援する前記約1055  cm−1  とでIR  ス
ペクトルバイオマーカーバンド前記病気
(e)  2つの核酸の間の低い有意差は、DNA  /  RNAのトライアッド中のDNA配列、こ
のようにして、前悪性皮膚腫瘍（病変）の診断を支援すると述べ約  1055
cm−1で1084の1085  cm−1  での1のスペクトル帯域の同時出現とでIR  スペクト
ルバイオマーカーバンド前記ボーエン病への参照
【請求項５】
のセットが1071  cm−1、  1084の1085で  約1055  cm−1  2のスペクトル帯域の外観にIR  スペクトルバイオマーカーバンドを特徴とする請求項1に記載の使用は、DNA  /  RNAのトライアッド中のDNA配列は、1つまたは複数を含む、前記の診断をポートするために、以下の前記の良性皮膚腫瘍（病変）
(a)  DNA/RNAトライアド中のDNA配列は、このように良性の皮膚腫瘍（病変）の
診断を支援する、と述べにおいて1071  cm−1と1084の1085  cm−1で2スペクトル
バンドの同時出現が言ったとの左シフトした位置は、IR  スペクトルバイオ
マーカーバンドは約1055  cm−1  で語ったほくろを参照して
【請求項６】
請求項1−5の使用、トライアドにおけるDNA配列は、特定の種類の腫瘍（病
変）との関係を示すために、以下の一つ以上を含むことを特徴とするスペク
トル帯域の異なるパターン化された外観で、約1055cm−1で述べたに最も近いも
のを見つけるために:
(i)  以下のパターンのうちの1つ以上を含むBCC（基底細胞癌）:
(a)    のパターンは、IRスペクトルのバイオマーカーバンドは、DNA/RNAトライ
アドで約1084の1085cm−1で1バンドの外観を約1055  cm−1で語った、つまり:
・支配的な
・0.09  −  0.47  内マルチプレットの平均値の大規模な変化によって特徴づけられる
・0.59−0.96  内マルチプレット強度の大きい変化によって特徴づけられる
・多重線の右シフトを意味ピーク位置によって特徴づけ
・約1084/1085  cm−1  でのバンドの強度比の大きな変化によって特徴づけられ
る、0.16と0.45の間の範囲であった
(b)    のパターンIRバイオマーカーバンド1055  cm−1  についての1071、
1084/1085、1095  cm−1  でバンドのスペクトルは、つまり
・約0.43と0.95での高平準化平均値及びマルチプレットの強度比に対する特
性、それに応じて
・約0.48  における平均値で約1084の1085  cm−1  で一定支配的なピークを持つ
・DNA/RNAトライアド内のすべての3つのバンドの高平準化平均値についての
特性、
・マルチプレットの右シフトの平均ピーク位置によって特徴付けられる
(c)    のパターンIRバイオマーカーバンド1055  cm−1  についての1084/1085、1095
cm−1  でバンドのスペクトルは、つまり
・0.19  と  0.23、についてで、マルチプレットと約  1084/1085  cm−1  バンド
の平均値の媒体の平準化によって特徴付けられる
・約  1084/1085  cm−1  で約  1095  cm−1  バンドの低水平平均値と比較した支配
的なピークによって特徴付けられる
(ii)  SCC  （扁平上皮癌)、1  つのまたは複数、次のパターンで構成される:
(a)  のパターンIR  バイオマーカーバンド1055  cm−1  についてのバンド外観
1071cm−1と1084/1085  cm−1  と1095  cm−1  のスペクトルと述べた、つまり
・マルチプレットの右シフトの平均ピーク位置によって特徴付けられる
・0.30  についてでマルチプレットの高水平平均値によって特徴づけられる
・約  0.81  でマルチプレット高平準化強度比によって特徴づけられる
・約0.35と0.34でのDNA/RNAの三つ組で支配的である約1071cm−1、1095  cm−1  
・のバンドの高レベリング平均値によって特徴付けられ、それに応じて
(b)  のパターンは、IRスペクトルバイオマーカーバンドが約1084の1085  cm−1  と1095  cm−1で二つのバンドの出現と約1055  cm−1  で語った、つまり
・マルチプレットの右シフトの平均ピーク位置によって特徴付けられる
・約0.13及び0.77で、ローレベルの平均値と多重の強度比によって特徴付け
られる、それに応じて
・約1084/1085で支配的なバンドと、それに応じて、約0.16と0.14で、DNA/
RNAトライアド中2バンドのローレベルの平均値によって特徴づけられる
(c)    のパターンは、IR  スペクトルバイオマーカーバンドは、DNA/RNAトライ
アドで約1084の1085  cm−1で1バンドの外観を約1055  cm−1で語った、つまり
・マルチプレットの右シフトの平均ピーク位置によって特徴付けられる
・平均値の最も高いレベルを特徴とし、約0.66と1.00での多重線の強度比を
意味
・約1084/1085のバンドの平均値の最高レベルによって特徴づけ、それに応
じて約0.65で
(iii)  MM  (悪性黒色腫)、1  つのまたは複数、次のパターンで構成される:
(a)    のパターンは、IRスペクトルバイオマーカーバンドは、約1071  cm−1  と
1084の1085  cm−1  と  1095  cm−1  の  バンドの出現  と  約1055  cm−1  で語っ
た、つまり
・約1095  cm−1  で支配的なバンドと、それに応じて  約0.26、0.27、0.29と
0.30で、約1071  cm−1  と1084の1085  cm−1  と  1095  cm−1  での平均多重線の値
とバンドの同様なレベルによって特徴づけ
(b)  のパターンは、IR  スペクトルバイオマーカーバンドが約1084の1085  cm−1
と1095  cm−1  で二つのバンドの出現と約1055  cm−1で語った、つまり
・多重線の左シフトした平均ピーク位置によって特徴づけられる
・ローレベルの平均値を特徴とし、多重線の強度比を意味し、それに応じて
約0.14で0.47約1095  cm−1  の  バンドのローレベルの平均値と比較して、約
0.27で約
・1084/1085  cm−1  の平均値で優勢なバンドによって特徴付け
(iv)  ボーエン病は、1  つのまたは複数、次のパターンで構成される:
(a)  約  1084/1085  DNA/RNA  トライアドので  1  つのバンドの外観を持つ約  1055
cm−1で当該のIR  スペクトル  バイオ  マーカー  バンドのパターン、つまり:
・マルチプレットの安定した左シフトの平均ピーク位置によって特徴付けら
れる
・約  1055  cm−1  で当該  IR  スペクトル  バイオ  マーカー  バンドの定数以外
の式によって特徴づけられる
・約1084/1085  cm−1  で多重線とバンドの平均値の低中レベルによって特徴
づけられる、それに応じて0.15から0.26と0.18から0.29の範囲であった
・多重線の平均強度比によって特徴づけは0.66と0.77の間の範囲であった
(v)  以下のパターンのうちの1つ以上を含むメラノサイト母斑:
(a)  のパターンは、IRスペクトルバイオマーカーバンドは、すなわち、DNA/RNA
三つ組で約1071  cm−1、1084の1085  cm−1  で2つのバンドの出現と約1055  cm−1  
で述べた、つまり
・支配的な
・約1084/1085  cm−1  での支配的なピークによって特徴付けられる
・低範囲の平均値と平均強度比約  1071  cm−1  と  1084/1085  cm−1  2  バンドと
一緒にマルチプレットの比較によって特徴づけられる
・マルチプレットの平均ピーク位置の小さな変化
(b)  のパターンは、約1055cm−1  におけるIR  スペクトルバンドは、バイオマー
カー、すなわち、DNA/RNA三つ組で約1084の1085cm−1  一つのバンド出
現と言わ、つまり:
・マルチプレットの  0.75  の  0.24  と平均輝度値の平均値によって特徴づけ
られる
・0.24の平均値を特徴とし、多重の0.75の強度値の平均
・約1084/1085  DNA/RNAトライアド内のバンドの0.27の平均値によって特徴
付けられる
・多重線のピーク位置のばらつきん
【請求項７】
一組のDNA  /  RNAトライアドにおけるDNA配列は、以下の比較のうちの1つ
以上によって悪性に向かって進行を示すために、前記スペクトル帯域の異
なるパターン化された外観を持つ約1055  cm−1  におけるIRスペクトルバイ
オマーカーバンドを特徴とする請求項1〜6の使用
(a)  前悪性および悪性の皮膚腫瘍（病変）、ボーエン病を参照して、その
場、すなわち表皮内癌、とSCCの間に健全な肌に、によって特徴づけられ
る:
・定数でない外観のマルチプレットの絶えざる出現対前癌皮膚腫瘍のマ
ルチプレットの対健康な表皮皮膚のマルチプレットのない外観
・1055  意味：  '0.0'  健康な表皮皮膚の  <  ボーエン病  '  0.21'  [範囲
0.15−0.26]  <  '0.36'  [範囲  0.13−0.66]  SCC  内
・I1055/I1245:  健康な表皮皮膚の  '  0.0'  <  '0.72'  [0.66−0.81]  ボーエン
病で  <  '0.86'  [範囲  0.77−1.00]  SCC  内
・マルチプレットのピーク位置を意味する:  ないピークの様子左シフト
・位置対健康な皮膚の約  1053  cm−1  [1052−1053]  約  1057cm−1  右シフト位
置に対するボーエン病で  SCC  内  [1054−1060]
・セットのSCCで3パターン対ボーエン病における一つのパターンは、IR
・スペクトルのバイオマーカーバンドは、DNA  /  RNAトライアド中のDNA
・配列とでスペクトル帯域の異なるパターン化された外観を持つ約1055  cm−1  で語った
(b)  良性および悪性皮膚腫瘍（病変）の間、健康な皮膚に対してほくろ及び
MMを参照すると、によって特徴づけられる:
・悪性皮膚腫瘍における多重項の一定の外観良性皮膚腫瘍における多重
項の非定数外観に対する健全な表皮における多重項のない外観まん、
'X'、
・1055  意味:  健康な表皮皮膚の  '  X'  <  '0.20'  [範囲  0.17  −  .24]  母
斑で  <  '0.20'  [範囲  0.14−0.26]  悪性黒色腫  （MM）  で
・マルチプレットのピーク位置を意味する:  ないピークの様子位置対健
康な皮膚の約  1054  cm−1  [1053−1055]  約  1052  cm−1  左シフト位置に対
する色素性母斑の悪性黒色腫  (MM)  で  [1043−1064]
・2  バンドの出現で約  1071  cm−1  と  1084/1085  cm−1  当該  IR  スペクトル
バイオマーカー  バンド約  2  異なる  1055  cm−1  でパターン化された外
観  2  スペクトル  バンドはでスペクトル  バンド  −  すべてで  3  スペク
トルバンドの約  1084/1085  cm−1  と  1095  cm−1  号線での  MM  −
DNA/RNA  トライアドで当該のDNA  シーケンスの  2  パターン対  DNA/RNA
トライアドで約1055  cm−1で当該  IR  スペクトル  バイオ  マーカーバン
ドの色素性母斑の支配的なパターン
(c)  良性、前悪性および悪性皮膚腫瘍（病変）の間に、ほくろを参照する
と、ボーエン病、BCC、SCCおよびMM健康な表皮に対して、によって特徴
づけられる:
・健康表皮におけるDNA/RNAトライアドのピークのユニークなパターン
化された外観は、として  '  1071  cm−1  >  1084/1085  cm−1  <  1095  cm−1  '
・約1084/1085  cm−1  でのバンドの平均値の低レベルに対して約1071  cm−1
および1095  cm−1  でのバンドの平均値の最高レベル、それに応じて
"0.50  >  0.30  <  0.50"  など
【請求項８】
検出工程は、赤外分光計及び/又は赤外顕微によって実行される、請求
項1に記載の方法。
【請求項９】
前記のような方法は、1（iv）は、特徴の強度比I1055  /  I1245、の計算は
約1055  cm−1  での多重線のIRスペクトルバイオマーカーバンドに対応
する、約1245  cm−1  のピークに計算される前記.
【請求項１０】
請求項1−7のいずれかに記載の方法において、前記表皮の健康な皮膚組
織、ならびに良性、前悪性および悪性の癌性組織が、ヒト組織であ
り、それはまた、動物組織にも適用可能である  ことを特徴とする。
【請求項１１】
ボーエン病、悪性黒色腫、扁平上皮癌、基底細胞癌、すなわち、色素
細胞性母斑からなる、既知の良性、前悪性および悪性皮膚腫瘍（病
変）の群から選択される、請求項1−7に記載の方法他の良性、前悪性お
よび悪性の皮膚腫瘍に適用できる。
【請求項１２】
良性、前悪性および悪性腫瘍（病変）皮膚組織からのものであること
を特徴とする請求項1−7に記載の方法であって、それはまた、他の器官
からの組織にも適用可能である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
一般に,  この発明は  1055  cm−1  のまわりでマルチプレットのIR  （赤外線）  スペクトル割り当てを通して生検から人間の皮膚の表皮癌組織における分子癌バイオ  マーカーの同定の分野に関係します。具体的には、扁平上皮癌（SCC）、基底細胞癌（BCC）、及び悪性黒色腫(MM）のための診断的検出法、IR分光法、ヒト表皮におけるDNA  /  RNA比のピークの存在を同定するために、必要とする。皮膚癌のバイオマーカーバンドの特異性および感受性は、患者における治療の予後予測の決定に向けて、皮膚癌のタイプおよびその進行と相関している。ヒト皮膚表皮癌組織中の分子癌バイオマーカーの定性的および定量的評価すべて一緒に表皮皮膚癌と前癌の予後、診断および予測を示している。マルチプレットの検出は  一緒に約1071、1084/1085、1095  cm−1で  の  DNA  /  RNAトライアドピークのパターン化された外観を持つ、  さらに腫瘍の悪性腫瘍は、特定の種類の関係を示す、また悪性腫瘍の進行と悪性腫瘍の方の進行を示します。
【０００２】
皮膚組織の代表組織として使用されることもありますが、バイオマーカーの検出方法皮膚表皮組織測定に限定されません  他の組織に悪用される可能性があり、その巧みな人には明らかにされます。
【背景技術】
【０００３】
表皮癌の臨床診断の特異性および感度は約40％から80％に変化する。診断の精度と大きく異なりますトレーニングの長さ、臨床医の経験：  訓練を受けた皮膚科医の  80%、上級  registars  62%、registars  の  56  ％、非皮膚科医の約  40%  とされます。だから、基底細胞癌  (BCC)、皮膚の最も一般的な癌の臨床の診断精度は  65%  で皮膚科医の練習のためです。そこで、皮膚の最も一般的な癌の臨床診断の精度は、基底細胞癌（BCC）は皮膚科を実施するためのわずか65％である。表皮の中央部分に由来する他の皮膚癌は、扁平上皮癌（SCC）は、容易に、典型的な臨床例において診断される、死は患者の約75％で、その結果と、誤診や急速な転移性につながる、性器と唇上にあるときには、時には難しい診断することがあります。ボーエン病  (表皮上皮内癌)  やその他多くの前癌皮膚病は、しばしば診断が困難な皮膚科クリニックで他の多くの皮膚病変はそれらを模倣するため。悪性黒色腫（MM）の臨床診断は、多くの場合、不必要な生検の80％までになり、良性色素性病変と混同することができる。重要なことは、MMと診断された患者は、自分たちの生活の残りのために監視され、局所再発、転移、新鮮な悪性病変のために検討すべきである。
【０００４】
ダーモスコピーは、形態学的パターン認識を確立するための多数の機能に基づいて、上皮皮膚癌および前癌の診断精度を向上することが報告されている。それにもかかわらず、これらのパターンの認識は皮膚科で長いトレーニングを必要とし、多数の症例のさらに解釈は専門家の間で大きく変化。
【０００５】
共焦点顕微鏡は、標準的な組織学との相関と併せて病理関連のパターンの細胞の形態学的認識に基づいて、再度、表皮中のケラチノサイトの細胞画像の解釈に基づいて、表皮皮膚癌と前癌の診断に有用かもしれない。この技術は、表皮癌および前癌状態の診断の精度が向上するが、特定の皮膚病変のための制限が記載されている。
【０００６】
形態学的パターン認識による検から癌組織の病理組織学的従来の識別は、皮膚腫瘍の臨床診断のためのゴールドスタンダードのまま、病理組織学的評価の主な欠点にもかかわらず病理医間の診断の遅れと解釈上のバリエーションがある。
【０００７】
偽陰性結果を低減するために、増加要件は、短い時間枠で「ケースを決定することは困難」の診断の可能性を改善するための新たな、無料の診断技術のために感じてきた。このように、リアルタイムのプライマリおよび皮膚腫瘍の臨床診断を補完するためにフォローアップスクリーニングに適用することができる新規、迅速、非侵襲性の診断技術のための臨床皮膚科学において緊急の必要性今日あり、理想的に、人間の解釈を置き換える。
【０００８】
赤外線（IR）顕微解剖は、いかなる場所で生検からの未染色組織の分光評価のためのツールです。外部対照的誘導剤を必要とせず、それらの固有の特性および化学組成に基づいて、細胞成分の容易な視覚化を可能にするこの技術は、サンプル特異的な分子情報を提供する、  核酸、タンパク質、脂質、水の分子のための固有のスペクトルフィンガープリントは、このように疾患の診断マーカーを得るために、潜在的な経路を提供する。
【０００９】
癌組織の分光分析は、種々のヒト癌からの試料中の生化学的変動に対する感受性に起因した診断技術であることが注目されている。
【００１０】
皮膚組織のIR吸収スペクトルは、臨床的に有用なバイオマーカーの開発のためのすべての特性に適合します。それらの中で彼らの一貫性が約60であるため、タンパク質、細胞中で最も豊富な種は、皮膚を含む細胞および組織の観測スペクトルで支配している。良性、前悪性および悪性の皮膚癌からIRスペクトル中の核酸は、常にタンパク質の存在下で観察された。彼らは、その構造内のタンパク質の同一性および構造を決定する遺伝情報を運ぶための核酸DNAおよびRNAは、特に重要である。中赤外吸光度スペクトルは、細胞全体のプロテオミクスを表現するための最も豊富な情報と簡潔な方法の一つである、なぜなら核酸のコンフォメーションへの高い感度およびそのコンフォメーションの遷移、塩基組成の同定は、塩基対形成相互作用および塩基スタッキング効果などの影響に対する感度の。これは、個々のヌクレオチドに関連する情報を提供することを、他の振動分光法、ラマン分光法上のIR分光法の方が有利になる。
【００１１】
最近の報告は、高感度で、潜在的に強力な分析方法としてFT（フーリエ変換）IR分光法を実証し、結果に基づいて、一般的に、特にヒトの皮膚腫瘍、皮膚癌発症を特徴づけるために、培養前に現れた形態学的変化、癌細胞における生物学的活性のスペクトルの変化を同定するため、良性、前悪性および悪性の皮膚病変からのIRスペクトルで発現された核酸およびタンパク質についての分子内および分子間相互作用の分析に基づく。
【００１２】
によりこれらの方法論の利点には、本発明の目的は、決定し、一貫して有意なスペクトルパラメータ（バイオマーカー）を検証することで、これは明らかに予後、診断および上皮皮膚癌および前癌の予測に有用なヒト皮膚組織における（健康不変）正常および癌細胞を識別することができる。
【００１３】
検証と人間の皮膚組織からのIRスペクトルにおける皮膚癌バイオマーカーバンドの検証は、個別化医療の分野を支援する、最も効果的なそれぞれの患者における治療と薬物の最も効果的な投与量のさえ判定の判定に関する更なる影響を与える可能性があります。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明は、約  1055cm−1  で多重を検出するためのFTIR顕微を使用する方法を提示し、その存在および表皮中での発現を増加した皮膚組織診断の指標であり、表皮癌および前癌のフォローアップ。本発明の方法は、生検、癌、皮膚組織サンプルのIRスペクトルにおいて、核酸は、DNAおよびRNAの2つのバンドの強度の比の同定に基づく。より具体的には、バイオマーカーの設けられた検出方法は、通常の表皮組織では検出されない、上皮癌、皮膚組織におけるから約1055cm−1で識別された多重の定性的および定量的分析のための迅速かつ試薬を含まない方法である。
【００１５】
一緒にDNA  /  RNAトライアドピーク(約1071で、1085/1084、1095  cm−1)のパターン化された外観を有する多重線の検出は、さらにまた、悪性腫瘍に向かって悪性および進行の進行を示す、腫瘍および悪性腫瘍の特定の種類の関係を示している
【課題を解決するための手段】
【００１６】
この方法は、手動で実行し、次のステップで構成することができます:
【００１７】
・理想的に全体の病理エリアから、試料上の表皮に病理組織学的に証明された病理学のサイトの多数からのFTIRスペクトルを得る
・おそらく、個々の各サンプル内の病理学的部位とのスペクトルの比較のために、不変の、健康な表皮を通じて制御測定値を得る
・ピーク（1650cm−1）アミド  I、スペクトルの各々を正規化する
・サンプルの平均を得るためにすべての上皮測定値を平均
・特定できる場合は、間の核酸の特定の領域における約1055cm−1での多重線の割り当て900および1300cm−1
【００１８】
上記の方法では、確立された組織病理学的診断と生検組織サンプルは、以下の工程により顕微FTIRを使用して、測定のために用意されている:
【００１９】
・厳密にシーケンシャル2サンプルカットは6マイクロメートルの厚さを有する
・病理組織学的評価のためのエオシンと  hematoxilin  カット  1  サンプルを染色
・FTIRスペクトルの収集のためのCaF2のスライドガラス上にカット風乾1サンプル
本発明の全ての上記および他の特徴および利点をさらに説明する。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明の方法をより詳細に説明する。
JEOL株式会社（東京、日本）、モデルIR−MAU200によるFTIR顕微は、皮膚組織サンプルからのIRスペクトルの取得のために使用されてきた。各測定の前に、キャリブレーションは、製造業者によって装置に備えられたサンプルを用いて行い、FTIR顕微の適切な動作条件を確認した。
【００２１】
光学顕微鏡により観察し、対応するスライドを病理に関連する組織構造の同定のためのヘマトキシリン及びエオシンで染色したままFTIR顕微測定に使用される組織サンプルは、乾燥状態であった。
【００２２】
最初に、バックグラウンドスペクトルを収集した。測定部位は、可視光を用いて選択した後、顕微鏡は、IRモードに変更した。共付加スキャン数は、高い信号対雑音比を達成するために127に増加した。測定に使用される開口部の大きさは25×25マイクロメートルであった。  4  cm−1の分解能で測定されたスペクトルは、800〜4000  cm−1の間の波数範囲をカバーした。
【００２３】
すべて実測FTIRスペクトルに適用されるスペクトル前処理方法が含まれている:
・必要に応じて、高周波器械ノイズを低減するために、除去および平滑スパイク
・ベースライン補正、スペクトル間の相違を解消するために起因するベースラインの変化に
・ペプチド基の分子配座および水素結合のわずかな変化に対する高い感度のために1650  cm−1にアミド  I  正規化
・900−1700  cm−1領域でのピークの割り当てを選ぶ
【００２４】
本発明の方法は、表皮癌組織1055cm−1の周りに多重に、核酸、DNA及びRNAのための2つのバンドの強度の比率を検出するために、以下のステップが含まれ:
・周りの1055cm−1での多重線の割り当て
・周りの1055cm−1で割り当てられた多重線の平均値の計算
・強度比の算出  I1055  /  I1245
【００２５】
以下の例で使用されるデータは、皮膚科の生検病理組織学的に確認されたアーカイブからの組織標本から派生徳島大学、徳島県。
併せて、皮膚癌組織サンプルで用いたデータは、24の被験者から抽出した。
【００２６】
データベースが4健常者における正常表皮から21測定されたスペクトルのデータベースと比較して、BCC患者6例、SCCとの4人の患者およびMM患者3名を含む表皮皮膚癌を持つ13人の患者からの87のスペクトルを測定した。
【００２７】
例もボーエン病、前癌皮膚病、およびメラノサイト母斑、良性の複合型と4人の患者からの80のスペクトルを測定したデータベースを用いて3人の患者からの80のスペクトルを測定したデータベースが使用された。
【００２８】
例
表1−7は、BCC、SCC、MM、ボーエン病やほくろの患者から採用データの要約である。
【００２９】
検出は、多重線で表皮皮膚癌の
皮膚癌のバイオマーカー、約1055cm−1のピークのレベルで表さ多重線は、すべての測定された表皮癌において有意であった  −  BCC、SCC及びMM、正常な皮膚組織の表皮におけるこのピークのない外観がなかったからである。約1055cm−1でのピークの平均強度は、BCCで0.09から0.47に変化した、  SCCで0.13から0.66、  0.14からMM患者で0.26に、従って、それらの変動は範囲内のような低、中、高が異なる。
【００３０】
例1
基底細胞癌（BCC）
表1は、ばらつきが約1055cm−1における多重の平均値の分析によって、バイオマーカーバンドのIRスペクトル検出を要約バリエーション強度比（I1055  /I1245）を意味し、約1055cm−1にピーク位置を意味するBCCと6人の患者の変化。
【００３１】
2015521024.tif 000002
【００３２】
BCC  6人の患者からの提示52スペクトルにおける強度比  I1055  /I1245  によるバイオマーカーのバンドの強度は0.59と0.96の間で変化しています。
【００３３】
多重線の右シフト平均ピーク位置は、バイオマーカーの強度のレベルとは独立して4人の患者において観察されている。それにもかかわらず、バイオマーカーの平均ピーク位置のための右シフトばらつきがBCCを持つすべての患者で見られている。
【００３４】
例  2  
扁平上皮癌（SCC）
表1は、ばらつきが約1055cm−1で多重の平均値の分析によって、バイオマーカーバンドのIRスペクトル検出を要約バリエーション強度比（I1055/I1245）を意味し、約1055cm−1にピーク位置を意味するSCCとの4人の患者の変化。
【００３５】
2015521024.tif 000003
【００３６】
SCCとの4人の患者から提示20スペクトルにおける強度比I1055/I1245によるバイオマーカーのバンドの強度は0.77と1.00の間でSCCかつ多様でわずか3人の患者に提示されている。
【００３７】
約1055cm−1での多重線の平均ピーク位置のための右シフトバリエーションは、SCCとの3人の患者で見られてきたが、右シフト平均ピーク位置が異なる強度レベルのSCCで2人の患者で検出されている。
【００３８】
例  3  
悪性黒色腫（MM）
表3は、ばらつきが約1055cm−1で多重の平均値の分析によって、バイオマーカーバンドのIRスペクトル検出を要約バリエーション強度比（I1055/I1245）を意味し、約1055cm−1にピーク位置を意味するMMと3人の患者の変化。
【００３９】
2015521024.tif 000004
【００４０】
11のスペクトルにI1055/I1245は0.47と0.69の間で変化した強度比によりMMを有する2人の患者のバイオマーカーバンドの強度の表皮で得られた。
【００４１】
左シフトしたMMと2人の患者で検出可能な多重線の平均ピーク位置を、1043cm−1と1064cm−1間で大きな変動を示したている。
【００４２】
例  4  
HEALTHY表皮対MM対SCC対BCC
表4は、ばらつきが約1055cm−1で多重の平均値の分析によって、バイオマーカーバンドのIRスペクトル検出を要約バリエーション強度比（I1055/I1245）を意味し、約1055cm−1にピーク位置を意味する表皮皮膚癌（BCC、SCC、MM）対健常者を持つすべての測定された患者の変化。
【００４３】
2015521024.tif 000005
【００４４】
約1055cm−1におけるバイオマーカーバンドの有意な平均値は、健康な表皮のないピークの外観と比較して、SCCのためにBCC用のMM  0.20、0.30および0.36のように計算されている。
【００４５】
強度比I1055  /I1245によるバイオマーカーのバンドの強度は、SCCのためにBCC用の0.83と0.86、互いに類似して、MMのための0.58だった。
【００４６】
バイオマーカーバンドの右シフト平均ピーク位置は1057cm−1と1058cm−1でそれに応じて、BCC患者6例中とSCCとの3人の患者で同様であった。主としてvariated左にシフトMMとの2人の患者におけるバイオマーカーバンドのピーク位置は1052cm−1で検出されたことを意味。
【００４７】
表皮前癌における多重線の検出の
前癌性皮膚病、ボーエン病、上皮内癌と呼ばれる、皮膚癌の最も初期の形態である。未治療の症例が浸潤癌へと進行することが報告されている。
【００４８】
例  1  
ボーエン病
表1は、ばらつきが約1055cm−1で多重の平均値の分析によって、バイオマーカーバンドのIRスペクトル検出を要約バリエーション強度比（I1055  /  I1245）を意味し、約1055cm−1にピーク位置を意味するボーエン病との3人の患者の変化。
【００４９】
2015521024.tif 000006
【００５０】
ボーエン病との3人の患者に70スペクトルを測定した表皮では、2人の患者ではわずか13スペクトルは、選択的に、バイオマーカーバンドの出現、約1055cm−1で多重線を検出しました。
【００５１】
そこで、病理組織学的に証明されたボーエン病のある患者において、平均3  IRスペクトルに基づいて算出バイオマーカーバンドの値は、0.13と0.16の間の小さな変動で、0.15であった。
【００５２】
強度比I1055  /I1245によるバイオマーカーのバンドの強度は0.63と0.69の間で変化する、0.66だった。  1053cm−1で左位置付け平均ピークは1051  cm−1と1056  cm−1の間で変化しています。
【００５３】
ボーエン病と他の病理組織学的に証明された患者では、10  IRスペクトルに基づいて算出バイオマーカーバンドの平均値0.22と0.29の間の範囲が0.26であった。強度比  I1055  /I1245  によるバイオマーカーのバンドの強度は0.63と1.00の間で変化する、0.77だった。他の測定された患者と同様に、1052  cm−1で左位置付け平均ピークは1050  cm−1と1057  cm−1  の間で変化しています。
【００５４】
例2
ボーエン病対SCC対HEALTHY表皮
表2は、ばらつきが約1055cm−1で多重の平均値の分析によって、バイオマーカーバンドのIRスペクトル検出を要約バリエーション強度比（I1055  /I1245）を意味し、約1055  cm−1にピーク位置を意味するSCC、健常者対ボーエン病のすべての測定の患者の変化。
【００５５】
2015521024.tif 000007
【００５６】
検出されたバイオマーカーバンドは、SCCと比較して（すべてのスペクトルには2人の患者で測定された、（3人の患者の70のスペクトルのうちわずか2人の患者の13スペクトルにおいて）ボーエン病の患者で測定されたIRスペクトルにおける外観で一定と顕著ではなかったSCCとの3人の患者）の間で。SCCのためのバイオマーカーのボーエン病のためのバイオマーカーの平均値は0.15と0.26の間で変動0.21だったが、平均値は0.13と0.66の間で変動0.36だった。
【００５７】
強度比I1055  /I1245  によるバイオマーカーバンドの強度は、ボーエン病に低かった0.77の間で変動して、0.86のように、バイオマーカーの計算された平均強度SCCと比較して、0.66と0.81の間で変動が0.72として計算平均1.00。
【００５８】
これは、SCC患者における  1057  cm−1  における平均ピークの右シフト位置と比較して、ボーエン病患者  1053  cm−1  における平均ピークの左シフトした位置の明白な検出である。
【００５９】
色素性母斑のマルチプレットの検出
病理組織学的に、母斑細胞（メラノサイト）は、通常、表皮の基底層に局在している。その増殖は表皮表皮と真皮内（接合部母斑）、（化合物母斑）にのみ真皮（皮内母斑）に表示されることがあります。母斑のすべての種類は、良性母斑（nevocellular、melanocellular）メラノサイトである。
【００６０】
そのため、4人の患者における良性メラノサイト母斑のIRスペクトルの比較表皮獲得のために化合物母斑の病理組織学的に確認されたサンプルが使用された。
【００６１】
例1
表1は、ばらつきが約1055センチメートルにおける多重の平均値の分析によって、バイオマーカーバンドのIRスペクトル検出をまとめた強度比（I1055  /  I1245）を意味し、良性の4人の患者の変化に約1055センチメートルのピーク位置を意味するメラノサイト母斑、化合物母斑タイプ。
【００６２】
2015521024.tif 000008
【００６３】
約1055  cm−1でのバイオマーカーバンドは、メラノサイト母斑、複合型母斑ではなく、常に、すべての測定された患者において検出されている。すべての10測定されたスペクトルでは、患者1において12測定されたスペクトルのうち5にほくろを持つ4人の患者で完全に得られた48のスペクトルのうち26のスペクトルで検出されている8測定された患者3におけるスペクトル、および患者4で18測定されたスペクトルのうち、9スペクトル中。
【００６４】
検出されたバイオマーカーの平均値は、ほくろと4の患者で0.17と0.24の間で変化させてきた。
【００６５】
強度バンド比  I1055  /  I1245  によって検出されたバイオマーカーバンドの平均強度は、色素細胞性母斑の患者のうち、0.59  から  0.75  の  範囲内であった。
【００６６】
母斑病変の患者では、バイオマーカーの平均ピークの位置1053と1055  cm−1を確認、左右にシフトした位置とされています。
【００６７】
例2
MM対MN対HEALTHY表皮
表2は、ばらつきが約1055cm−1における多重の平均値の分析によって、バイオマーカーのIRスペクトル検出を要約バリエーション強度比（I1055  /I1245）を意味し、すべての測定された患者の変化に約1055cm−1のピーク位置を意味するMMと、ほくろ（MN）（良性化合物母斑）対健常者。
【００６８】
2015521024.tif 000009
【００６９】
検出されたバイオマーカーバンドは、（唯一の完全に外26スペクトルでは4人の患者に48スペクトルを測定した）メラノサイト母斑の患者で測定したIRスペクトルの外観で一定と顕著ではなかったのSCCと比較して、（すべてのスペクトル中のうち、2人の患者で測定MM患者3名）。
【００７０】
ほくろのためのバイオマーカーの平均値は、0.17と0.24の間で変動0.20であった同様の0.14と0.26の間で変化して、MMのために0.20の値を意味する。
【００７１】
強度比I1055  /I1245  によるバイオマーカーバンドの強度は、メラノサイト母斑およびMMを有する患者で同様であった。
【００７２】
MMの患者でほくろを有する患者で  1052  cm−1  に  1053  cm−1で平均ピークの類似の左シフトした位置が検出されたが、1053  cm−1と1055  cm−1  間  variated  ほくろの患者でピークを意味する唯一の違いと、しかし、MMの患者ではピークは  1043  cm−1  と  1064  cm−1の間に大きな変化があったことを意味する。
【００７３】
腫瘍の検出(1055cm−1)多重線のDNA/RNAトライアドピーク(1071、1084、1095cm−1)パターンに関連する
【００７４】
約1055で、良性、前悪性および悪性皮膚癌組織からのIR吸収スペクトル多重にセンチは常に皮膚腫瘍の病理型に関連する異なる形状及び強度で約1071、1084、  1095  cm−1  における  DNA/  RNAトライアドピークに制限される。
【００７５】
また、多重の活性は、[PCT  /  EE2013  /  000001]別の表皮癌患者におけるDNA/RNAトライアッドのピークの中で最も顕著なピークの活性と相互作用することが報告されている。
【００７６】
例1
基底細胞癌（BCC）
表1は、表皮から約  1055  cm−1  バイオマーカーの平均値を検出しまとめたとBCCと6人の患者では約  1071、1084/1085、1095  cm−1  でのDNA/RNAトライアドのピークの値を意味する。
【００７７】
2015521024.tif 000010
【００７８】
BCCを持つすべての患者は約  1055  cm−1で、バイオマーカーバンドを検出した中で、明らかに約1071、1084/1085、1095  cm−1  でのDNA/RNAトライアドピークの出現と結ばれている。
【００７９】
表1に表示される結果は3パターンを識別:
・1055  cm−1  と  1084/1085  cm−1（4人の患者で）
・1055  cm−1  と  1071、1084/1085、1095  cm−1（1人の患者で）
・1055  cm−1  と  1084/1085  cm−1  の  1095  cm−1（1人の患者で）
【００８０】
例2
扁平上皮癌（SCC）
表2は、表皮の約1055  cm−1  でのバイオマーカーの平均値を検出しまとめたとSCCとの4人の患者に  約  1071、1084/1085、  1095  cm−1  で  DNA/RNAトライアドのピークの値を意味する。
【００８１】
2015521024.tif 000011
【００８２】
SCCを持つすべての患者では明らかに約1071、1084/1085  と1095  cm−1でのDNA/RNAトライアドピークの出現と結ばれている約1055cm−1でバイオマーカーのバンドが検出された。
【００８３】
表2に表示される結果は3パターンを識別:
・1055  cm−1  と  1084/1085  cm−1（1人の患者で）
・1055  cm−1  と  1071、1084/1085、1095  cm−1（2人の患者で）
・1055  cm−1  と  1084/1085  cm−1  の  1095  cm−1（1人の患者で）
【００８４】
例3     
悪性黒色腫（MM）
表3は、表皮の約1055  cm−1  でのバイオマーカーの平均値を検出しまとめたとMMとの3人の患者に  約  1071、1084/1085、  1095  cm−1  で  DNA/RNAトライアドのピークの値を意味する。
【００８５】
2015521024.tif 000012
【００８６】
MMを持つすべての患者では明らかに約1071、1084/1085  と1095  cm−1でのDNA/RNAトライアドピークの出現と結ばれている約1055cm−1でバイオマーカーのバンドが検出された。
【００８７】
表3に表示される結果は3パターンを識別:
・1055  cm−1  と  1071、1084/1085、1095  cm−1（1人の患者で）
・1055  cm−1  と  1084/1085  cm−1（1人の患者で）
・検出された1084/1085  cm−1と1055  cm−1  は検出しない（1人の患者で）
【００８８】
例4
ボーエン病
表4は、表皮の約1055  cm−1  でのバイオマーカーの平均値を検出しまとめたとボーエン病との3人の患者に  約  1071、1084/1085、1095  cm−1  で  DNA/RNAトライアドのピークの値を意味する。
【００８９】
2015521024.tif 000013
【００９０】
ボーエン病を持つすべての患者では明らかに約1071、1084/1085  と1095  cm−1でのDNA/RNAトライアドピークの出現と結ばれている約1055cm−1でバイオマーカーのバンドが検出された。
【００９１】
表4に表示される結果は2パターンを識別:
・1055  cm−1  と  1084/1085  cm−1（2人の患者で）
・検出された1084/1085  cm−1と1055  cm−1  は検出しない（1人の患者で）
【００９２】
例5
MELANOCYTIC  NEVUS  (MN)
表5は、表皮の約1055  cm−1  でのバイオマーカーの平均値を検出しまとめたとボーエン病との  4人の患者に  約  1071、1084/1085、1095  cm−1  で  DNA/RNAトライアドのピークの値を意味する。
【００９３】
2015521024.tif 000014
【００９４】
MNを持つすべての患者では明らかに約1071、1084/1085  と1095  cm−1でのDNA/RNAトライアドピークの出現と結ばれている約1055cm−1でバイオマーカーのバンドが検出された。
【００９５】
表5に表示される結果は2パターンを識別:
・1055  cm−1  と  1084/1085  cm−1（1人の患者で）
・1055  cm−1  と  1071、1084/1085  cm−1（3人の患者で）
【００９６】
例6
BCC対SCC対MM対MN対BD対HEALTHY表皮
表6は、表皮ボーエン病で3人の患者では、4人の健康な被験者では、メラノサイト母斑との4人の患者では、MMと3人の患者において、SCCとの4人の患者とBCCと6人の患者に約1071、  1084/1085、1095  cm−1  で  DNA/RNAトライアドのピークの値を意味する。
【００９７】
2015521024.tif 000015
【００９８】
表6に表示される結果は、表皮（BCC、SCC、MM、ボーエン病、melanocellular母斑）内のすべての測定された病理で約1055  cm−1でのバイオマーカーのバンドを検出したが、健康で、非病理学的表皮におけるバイオマーカーのバンドの検出なしと。
【００９９】
SCCのための0.36で、BCCのための0.29で、MMのための0.20での平均0.21で良性のために約1055  cm−1で検出されたバイオマーカーのバンドの値が、0.21で前悪性および悪性の皮膚腫瘍は重要です。
【０１００】
しかし、BCCで6人の患者とSCCとの2人の患者中のバイオマーカーの一人で、平均値は、MMを持つ2人の患者、MNとの4人の患者及びボーエン病との3人の患者におけるバイオマーカーの平均値よりもはるかに高くなっています。
【０１０１】
重要なことは、表皮の良性（つまりほくろ患者で観察されていない、強く約1071、1084/1085、  1095  cm−1でのDNA/RNAトライアド内のすべてのピークの出現と結ばれているのMMとの2人の患者中のバイオマーカーバンドを検出した化合物母斑）及びボーエン病（前がん皮膚病）。DNA/RNAの三つ組内のすべてのピークの出現と一緒にバイオマーカーバンド検出の同じパターンがSCCとBCCの患者において観察される。
【０１０２】
だから、約1055cm−1でのバイオマーカーバンドのほくろ（良性化合物母斑）検出と測定された表皮の患者では約1071cm−1  と1084/1085cm−1でDNA/RNAトライアドにおける2つのピークの出現と結びついているが、決して約1095cm−1で。
【０１０３】
ボーエン病の  2  症例において  0.20で検出されたマーカー  バンドの平均値で約  1084/1085cm−1  DNA/RNA  トライアドの  1つのピークの出現と関連付けられています。
【０１０４】
特許請求される本発明の方法は:
1.  分子バイオマーカーバンドが病的表皮からIRスペクトルにおいて、良性、前
悪性および悪性皮膚腫瘍の皮膚癌性組織に関連したサンプルで提示されてい
るかどうかを検出する方法:
700−4000  cm−1  域（約1650  cm−1で）アミドI  のIRスペクトルの正規化
スペクトル間の相違を解消するために、指紋領域におけるベースライン補  正
約1071、1084/1085および1095cm−1で一緒のDNA/RNAトライアドで検出され
たすべてのピークの帰属と周りに1055cm−1での多重線のピークの割り当て
右シフトまたは左シフトのバリエーションの追加の決定と周りの1055cm−1での多重線のシフトされた左または右シフト平均ピーク位置の決定
周りに1055  cm−1で割り当てられた多重線の平均値の計算
割り当てられた約1071cm−1でDNA  /  RNAトライアッドのピーク、および/または1084/1085cm−1、および/または1095  cm−1の平均値の計算（複数）
IRスペクトルは、約1245  cm−1  のピークは、ホスホ振動（DNA）の組み合わせの既知のピークであり、強度比、I1055/I1245、及びアミドIII  の計算
【０１０５】
2.        請求項1に記載の方法であって、前記個体がヒト対象である。
【０１０６】
3.  腫瘍及び悪性パターン特定の種類に関係の追加の認識とバイオマーカーバン
ドの表皮検出の請求項1に記載の方法:
(i)  したがって、BCC、SCC、MMの診断を支援するDNA/RNAトライアドピークで約
1084/1085cm−1のピークの強い外観を持つ約1055cm−1  のピークの検出、ボー
エン病とほくろ
(ii)  したがって、BCC、SCC、MMの診断を支援するDNA  /  RNAトライアドピークで
約1084の1085cm−1の強い外観を持つ約1055cm−1のピークの検出、ボーエン病
とほくろ
(iii)したがって、良性のほくろの診断を支援する強力な約1071cm−1でのDNA/RNA
トライアドピークにおける2つのピークの外観と1084の1085cm−1と約
1055cm−1のピークの検出、複合型
【０１０７】
4.  請求項1−3に記載の方法であって、さらに認識:
(i)    （1055cm−1以下に）バイオマーカーバンドの左シフト位置、したがって
支持良性メラニン細胞性母斑（複合型）の診断、ボーエン病およびMM
(ii)    したがって、SCCとBCCの診断を支援するバイオマーカーバンド
（1055cm−1よりも高い）の右シフトの位置
(iii)    表皮皮膚癌と前癌の予後、診断および予測のための指標とこうして検出
されたバイオマーカーのバンドのために、低、中、高の値および強度が
(iv)    したがって、腫瘍および悪性腫瘍の特定の種類を示す表皮測定IRスペク
トルにおけるバイオマーカーバンドの一定または非一定のスペクトル外観
(v)      したがって、腫瘍および悪性腫瘍の特定の種類を示す表皮測定IRスペク
トルにおけるバイオマーカーバンドの一定または非一定のスペクトル外観
【０１０８】
5.  請求項1−4に記載の方法であって、さらに認識:
(i)    悪性腫瘍の進行
(ii)  悪性腫瘍に向かって進行
【国際調査報告】
2015521024.tif 000016
2015521024.tif 000017