(57)【要約】  本発明は、１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｄ］ピリミジン環系を有するＰＩ３Ｋデルタタンパク質キナーゼの選択的阻害剤、それを調製する方法、それを含有する医薬組成物、及びキナーゼが介在する疾患又は障害をそれによって治療する又は予防する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン及び薬学上許容可能なその塩から選択される化合物。
【請求項２】
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン及び薬学上許容可能なその塩から選択される化合物。
【請求項３】
化合物が実質的に（Ｒ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン及び薬学上許容可能なその塩を含まない請求項２の化合物。
【請求項４】
化合物が（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  ４−メチルベンゼンスルホン酸塩である請求項２の化合物。
【請求項５】
化合物が、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  硫酸塩；
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  塩酸塩；
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  ベンゼンスルホン酸塩；
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  マレイン酸塩；及び 
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  カンファースルホン酸塩から選択される請求項２の化合物。
【請求項６】
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン、
（Ｒ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン、
及び薬学上許容可能なその塩から選択される化合物。
【請求項７】
化合物が、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン又は薬学上許容可能なその塩である請求項６の化合物。
【請求項８】
化合物が実質的に（Ｒ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン及び薬学上許容可能なその塩を含まない請求項７の化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項の化合物と少なくとも１つの薬学上許容可能なキャリアを含む医薬組成物。
【請求項１０】
細胞に存在するＰＩ３δキナーゼの触媒活性を阻害する方法であって、有効量の請求項１〜８のいずれか１項の化合物に細胞を接触させることを含む方法。
【請求項１１】
阻害が、癌、骨障害、炎症性疾患、免疫疾患、神経系疾患、代謝性疾患、呼吸器疾患、血栓症又は心疾患である疾患又は障害を患っている対象にて生じる請求項１０の方法。
【請求項１２】
ＰＩ３δキナーゼの触媒活性を阻害することから利益が得られる疾患、障害又は状態の治療のための薬物の製造における請求項１〜８のいずれか１項の化合物の使用。
【請求項１３】
ＰＩ３Ｋに関連する疾患又は障害を治療する方法であって、それを必要とする対象に有効量の請求項１〜８のいずれか１項の化合物を投与する工程を含む方法。
【請求項１４】
それを必要とする対象に少なくとも１つの他の抗癌剤、抗炎症剤、免疫抑制剤、ステロイド性抗炎症剤、非ステロイド性抗炎症剤、抗ヒスタミン剤、鎮痛剤又はそれらの混合物を同時に又は順次投与する工程をさらに含む請求項１３の方法。
【請求項１５】
ＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態が、免疫系に関連する疾患、炎症が関与する疾患又は障害、癌又は他の増殖性疾患、肝臓の疾患又は障害、又は腎臓の疾患又は障害である請求項１３の方法。
【請求項１６】
ＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態が、炎症、糸球体腎炎、ブドウ膜炎、肝臓の疾患又は障害、腎臓の疾患又は障害、慢性閉塞性肺疾患、関節リウマチ、炎症性大腸疾患、血管炎、皮膚炎、変形性関節症、炎症性筋疾患、アレルギー性鼻炎、膣炎、間質性膀胱炎、強皮症、骨粗鬆症、湿疹、同種又は異種の移植、移植片拒絶、移植片対宿主病、エリテマトーデス、肺線維症、皮膚筋炎、甲状腺炎、重症筋無力症、自己免疫性溶血性貧血、嚢胞性線維症、慢性再発性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、アレルギー性結膜炎、肝炎、アトピー性皮膚炎、喘息、シェーグレン症候群、臓器移植拒絶、多発性硬化症、ギラン・バレー症候群、自己免疫性ブドウ膜炎、自己免疫性溶血性貧血、悪性貧血、自己免疫性溶血小板減少症、側頭動脈炎、抗リン脂質症候群、ウエゲナー肉芽腫のような血管炎、ベーチェット病、乾癬、疱疹状皮膚炎、尋常性天疱瘡、白斑、クローン病、大腸炎、潰瘍性大腸炎、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫性肝炎、Ｉ型又は免疫介在性の糖尿病、グレーブス病、ハシモト甲状腺炎、自己免疫性の卵巣炎及び精巣炎、副腎の自己免疫性疾患、全身性エリテマトーデス、多発性筋炎、皮膚筋炎、強直性脊椎炎、移植拒絶、皮膚移植拒絶、関節炎、高い骨再吸収に関連する骨疾患、回腸炎、バレット症候群、成人呼吸窮迫症候群、慢性閉塞性気道疾患、角膜ジストロフィ、トラコーマ、回旋糸状虫症、交感性眼炎、眼内炎、歯肉炎、歯周炎、結核、ハンセン病；尿毒症合併症、腎炎；強皮症、乾癬、神経系の慢性脱髄疾患、ＡＩＤＳ関連の神経変性、アルツハイマー病、感染性髄膜炎、脳脊髄炎、パーキンソン病、ハンチントン病、筋委縮性側索硬化症、ウイルス性又は自己免疫性の脳炎、自己免疫疾病、免疫複合体血管炎、全身性エリテマトーデス、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）；心筋症、虚血性心疾患、高コレステロール血症、アテローム性硬化症、子癇前症；慢性肝不全、脳及び脊髄の外傷及び癌から選択される請求項１３の方法。
【請求項１７】
ＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態が、リンパ系列の造血腫瘍、白血病、急性リンパ性白血病、急性リンパ芽性白血病、Ｂ−細胞リンパ腫、Ｔ−細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ヘアリー細胞リンパ腫及びバーキットリンパ腫；骨髄系列の造血腫瘍、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、前骨髄性白血病；膀胱の癌腫、乳腺の癌腫、結腸の癌腫、腎臓の癌腫、肝臓の癌腫、肺の癌腫、小細胞肺癌、食道癌、胆嚢癌、卵巣癌、膵臓癌、胃癌、子宮頸癌、甲状腺癌、前立腺癌、皮膚癌、扁平上皮癌；間葉細胞起源の腫瘍、線維肉腫、横紋筋肉腫；中枢神経系及び末梢神経系の腫瘍、星状細胞腫、神経芽腫、神経膠腫、神経鞘腫；黒色腫、精上皮腫、奇形癌腫、骨肉腫、色素異形成癌、角化棘細胞腫、濾胞性甲状腺癌及びカポジ肉腫から選択される請求項１３の方法。
【請求項１８】
ＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態が、慢性閉塞性肺疾患、喘息、関節リウマチ、慢性気管支炎、アトピー性皮膚炎、多発性硬化症、炎症性大腸疾患、アレルギー性鼻炎、全身性エリテマトーデス及び潰瘍性大腸炎から選択される請求項１３の方法。
【請求項１９】
ＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態が、リンパ系列の造血腫瘍、白血病、急性リンパ性白血病、急性リンパ芽性白血病、Ｂ−細胞リンパ腫、Ｔ−細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞リンパ腫及びバーキットリンパ腫、骨髄系列の造血腫瘍、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、前骨髄性白血病、又はくすぶり型骨髄腫、非分泌性骨髄腫、骨硬化性骨髄腫を含む多発性骨髄腫、形質細胞白血病、孤立性形質細胞腫及び髄外性形質細胞腫から選択される請求項１３の方法。
【請求項２０】
ＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態が、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、緩慢型非ホジキンリンパ腫（Ｉ−ＮＨＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、濾胞性リンパ腫、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症（ＷＭ）、Ｔ−細胞リンパ腫、Ｂ−細胞リンパ腫、及びびまん性大細胞型Ｂ−細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）から選択される請求項１３の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、そのそれぞれが全体として参照によって本明細書に組み入れられる２０１２年７月４日に出願されたインド特許出願２６９２／ＣＨＥ／２０１２及び２０１２年７月４日に出願された同２６９３／ＣＨＥ／２０１２、並びに２０１２年８月２１に出願された米国特許仮出願番号６１／６９１，５６１及び２０１２年８月２１に出願された同６１／６９１，５８６の利益を主張する。
【０００２】
本発明はＰＩ３Ｋデルタタンパク質キナーゼの選択的阻害剤、それを調製する方法、それを含有する組成物及びキナーゼが介在する疾患又は障害をそれによって治療する及び／又は予防する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ホスファチジルイノシトール（本明細書では「ＰＩ」と略記される）は細胞膜で見いだされるリン脂質のメンバーの１つである。近年、ＰＩは細胞内シグナル伝達で重要な役割を担っていることが明らかになっている。３’リン酸化されたホスホイノシチドを介した細胞のシグナル伝達は、種々の細胞過程、たとえば、悪性の形質転換、増殖因子のシグナル伝達、炎症及び免疫に関与している（Ｒａｍｅｈ ｅｔ ａｌ. （１９９９） Ｊ. Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ, ２７４：８３４７−８３５０）。これらのリン酸化シグナル伝達生成物を生成するのに関与する酵素、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３キナーゼ又はＰＩ３Ｋとも呼ばれる）は、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）及びイノシトール環の３’ヒドロキシルでリン酸化されたその誘導体をリン酸化するウイルス癌遺伝子及び増殖因子受容体チロシンキナーゼに関連する活性として元々特定された（Ｐａｎａｙｏｔｏｕ ｅｔ ａｌ. （１９９２） Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２：３５８−６０）。
【０００４】
ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）は、ホスホイノシチドセカンドメッセンジャー分子を生成することによってあらゆる細胞種で多様な生物機能を調節する酵素のファミリーである。これらのホスホイノシチドセカンドメッセンジャーの活性はそのリン酸化状態によって決定されるので、これらの脂質を修飾するように作用するキナーゼ及びホスファターゼは細胞内シグナル伝達事象の正確な遂行の中心である。ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）は、イノシトール環の３’ヒドロキシル残基にて脂質をリン酸化して（Ｗｈｉｔｍａｎ ｅｔ ａｌ. （１９８８） Ｎａｔｕｒｅ, ３３２：６６４）、たとえば、Ａｋｔ及びホスホイノシチド依存性キナーゼ１（ＰＤＫ１）のような脂質結合ドメイン（プレクストリン相同（ＰＨ）領域を含む）を持つキナーゼを動員するセカンドメッセンジャーとして作用するリン酸化されたリン脂質（ＰＩＰ３）を生成する。Ａｋｔの膜ＰＩＰ３への結合はＡｋｔの原形質膜への移行を生じ、ＡｋｔをＰＤＫ１と接触させ、それはＡｋｔの活性化に関与する。腫瘍抑制因子ホスファターゼＰＴＥＮはＰＩＰ３を脱リン酸化するので、Ａｋｔ活性化の負の調節因子として作用する。ＰＩ３−キナーゼＡｋｔ及びＰＤＫ１は、細胞周期の調節、増殖、生き残り、アポトーシス及び運動性を含む多数の細胞過程の調節で重要であり、たとえば、癌、糖尿病及び免疫炎症のような疾患の分子メカニズムの重要な構成成分である（Ｖｉｖａｎｃｏ ｅｔ ａｌ. （２００２） Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ. Ｃａｎｃｅｒ ２：４８９； Ｐｈｉｌｌｉｐｓ ｅｔ ａｌ. （１９９８） Ｃａｎｃｅｒ ８３：４１）。
【０００５】
ＰＩ３ＫのクラスＩファミリーのメンバーは調節サブユニットと触媒サブユニットの二量体である。クラスＩファミリーは、１１０ｋＤａの触媒サブユニットα、β、γ及びδによって決定される４つのアイソフォームから成る（Ｅｎｇｅｌｍａｎ、ＪＡ，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｇｅｎｅｔ  ２００６；７：６０６−１９；Ｃａｒｎｅｒｏ、Ａ，Ｃｕｒｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ２００８；８：１８７−９８；Ｖａｎｈａｅｓｅｂｒｏｅｃｋ、Ｂ，  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｃｉ  ２００５；３０：１９４−２０４）。クラスＩは２つのサブクラス：ｐ１１０α、β及びδと調節サブユニット（ｐ８５、ｐ５５又はｐ５０）の組み合わせによるＩａ、並びにｐ１１０γ及びｐ１０１調節サブユニットによって形成されるＩｂにさらに分けることができる。
【０００６】
クラスＩａのＰＩ３Ｋ酵素が多種多様なヒトの癌における腫瘍形成に直接的に又は間接的に寄与することを示すかなりの証拠がある（Ｖｉｖａｎｃｏ ＡＮＤ Ｓａｗｙｅｒｓ, Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ, ２００２, ２, ４８９−５０１； Ｍａｒｏｎｅ ｅｔ ａｌ., Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ １７８４ （２００８） １５９−１８５）。特に、ｐ１１０デルタアイソフォームは、Ｂ細胞受容体、Ｔ細胞受容体からのシグナル伝達、肥満細胞及び単球／マクロファージのＦｃＲシグナル伝達を含む免疫炎症性疾患、及び破骨細胞機能／ＲＡＮＫＬシグナル伝達に関連する生物機能に関与している（Ｄｅａｎｅ Ｊ ＡＮＤ Ｆｒｕｍａｎ Ｄ ａ （２００４） Ａｎｎｕ Ｒｅｖ. Ｉｍｍｕｎｏｌ. ２００４. ２２：５６３−９８； Ｊａｎａｓ ｅｔ ａｌ., Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ, ２００８, １８０： ７３９−７４６； Ｍａｒｏｎｅ Ｒ ｅｔ ａｌ., Ｂｉｏｃｈｉｍ. Ｂｉｏｐｈｙ. Ａｃｔａ ２００７, １７８４：１５９−１８５）。ＰＩ３Ｋデルタ遺伝子の欠失又はＰＩ３Ｋデルタの触媒上不活性の変異体の導入はＢ細胞の増殖及びシグナル伝達のほぼ完全な除去、同様にＴ細胞を介したシグナル伝達の損傷を生じる。
【０００７】
キナーゼが介在する事象に関連する疾患及び障害を治療するためにキナーゼ、特にＰＩ３Ｋの伝達を調節する及び／又は調整するための小分子キナーゼ調節剤に対する満たされない且つ緊急のニーズが依然として存在する。
【０００８】
国際公開ＷＯ２０１１／０５５２１５及び米国特許公開番号２０１１／０１１８２５７はＰＩ３Ｋキナーゼ調節剤として特定の２,３−２置換−４Ｈ−クロメン−４−オンを開示しており、あらゆる目的でその全体が参照によって本明細書に組み入れられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開ＷＯ２０１１／０５５２１５
【特許文献２】米国特許公開番号２０１１／０１１８２５７
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｒａｍｅｈ ｅｔ ａｌ. （１９９９） Ｊ. Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ, ２７４：８３４７−８３５０
【非特許文献２】Ｐａｎａｙｏｔｏｕ ｅｔ ａｌ. （１９９２） Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ２：３５８−６０
【非特許文献３】Ｗｈｉｔｍａｎ ｅｔ ａｌ. （１９８８） Ｎａｔｕｒｅ, ３３２：６６４
【非特許文献４】Ｖｉｖａｎｃｏ ｅｔ ａｌ. （２００２） Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ. Ｃａｎｃｅｒ ２：４８９
【非特許文献５】Ｐｈｉｌｌｉｐｓ ｅｔ ａｌ. （１９９８） Ｃａｎｃｅｒ ８３：４１
【非特許文献６】Ｅｎｇｅｌｍａｎ、ＪＡ，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｇｅｎｅｔ  ２００６；７：６０６−１９
【非特許文献７】Ｃａｒｎｅｒｏ、Ａ，Ｃｕｒｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ２００８；８：１８７−９８
【非特許文献８】Ｖａｎｈａｅｓｅｂｒｏｅｃｋ、Ｂ，  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｃｉ  ２００５；３０：１９４−２０４
【非特許文献９】Ｖｉｖａｎｃｏ ＡＮＤ Ｓａｗｙｅｒｓ, Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ, ２００２, ２, ４８９−５０１
【非特許文献１０】Ｍａｒｏｎｅ ｅｔ ａｌ., Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ １７８４ （２００８） １５９−１８５
【非特許文献１１】Ｄｅａｎｅ Ｊ ＡＮＤ Ｆｒｕｍａｎ Ｄ ａ （２００４） Ａｎｎｕ Ｒｅｖ. Ｉｍｍｕｎｏｌ. ２００４. ２２：５６３−９８
【非特許文献１２】Ｊａｎａｓ ｅｔ ａｌ., Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ, ２００８, １８０： ７３９−７４６
【非特許文献１３】Ｍａｒｏｎｅ Ｒ ｅｔ ａｌ., Ｂｉｏｃｈｉｍ. Ｂｉｏｐｈｙ. Ａｃｔａ ２００７, １７８４：１５９−１８５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明はＰＩ３Ｋデルタタンパク質キナーゼの選択的阻害剤を指向する。これらの化合物は、ＰＩ３Ｋが関連する疾患、障害又は状態、たとえば、癌のような増殖性疾患を治療するための医薬組成物での使用に好適である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
一実施形態では、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤は、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（化合物Ａ１）又は薬学上許容可能なその塩である。別の実施形態では、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤は、（Ｒ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（化合物Ａ２）又は薬学上許容可能なその塩である。
【００１３】
さらに別の実施形態では、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤は、２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（化合物Ｂ）又は薬学上許容可能なその塩である。本発明は、その立体異性体、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（化合物Ｂ１）、（Ｒ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（化合物Ｂ２）及び薬学上許容可能なその塩と同様にラセミ形態で化合物Ｂ及び薬学上許容可能なその塩も含む。
【００１４】
一実施形態では、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤は、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン４−メチルベンゼンスルホン酸塩である。別の実施形態では、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤は、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン硫酸塩である。別の実施形態では、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤は、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン塩酸塩である。別の実施形態では、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤は、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オンベンゼンスルホン酸塩である。別の実施形態では、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤は、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オンマレイン酸塩である。別の実施形態では、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤は、（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オンカンファースルホン酸塩である。
【００１５】
化合物Ａ１、Ａ２、Ｂ、Ｂ１及びＢ２の化学構造を以下に示す。
【化１】
2015522009.tif 000002
【００１６】
好ましい一実施形態では、本発明は化合物（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（化合物Ａ１）又は薬学上許容可能なその塩に関する。
【００１７】
別の好ましい実施形態では、本発明は化合物（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（化合物Ｂ１）又は薬学上許容可能なその塩に関する。
【００１８】
本発明はこれらの化合物のプロドラッグも包含する。
【００１９】
本発明はさらに、薬学上許容可能なキャリアと一緒に本発明の１以上の化合物（たとえば、化合物Ａ１、Ａ２、Ｂ、Ｂ１、Ｂ２、薬学上許容可能なその塩、その混合物）を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物はさらに、たとえば他の活性剤（たとえば、抗癌剤及び以下で議論するような活性剤）のような１以上の追加の有効成分を含み得る。一実施形態では、医薬組成物は治療上有効な量の本発明の１以上の化合物を含む。
【００２０】
本発明はさらに薬学上許容可能なキャリアと一緒に化合物Ａ１を含む医薬組成物を提供する。
【００２１】
本発明はさらに薬学上許容可能なキャリアと一緒に化合物Ｂを含む医薬組成物を提供する。
【００２２】
本発明はさらに薬学上許容可能なキャリアと一緒に化合物Ｂ１を含む医薬組成物を提供する。
【００２３】
一実施形態では、本発明は、化合物Ａ１又は薬学上許容可能なその塩を含む医薬組成物を提供し、その際、化合物Ａ１は化合物Ａ２を上回って存在する。
【００２４】
さらなる実施形態では、化合物Ａ１は化合物Ａ２を実質的に含まない。
【００２５】
さらなる実施形態では、化合物Ａ１は化合物Ａ２を上回って存在し、少なくとも約6０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％のエナンチオマー過剰（ｅ．ｅ．）を有する。
【００２６】
別の実施形態では、本発明は化合物Ｂ１又は薬学上許容可能なその塩を含む医薬組成物を提供し、その際、化合物Ｂ１は化合物Ｂ２を上回って存在する。
【００２７】
さらなる実施形態では、化合物Ｂ１は化合物Ｂ２を実質的に含まない。
【００２８】
さらなる実施形態では、化合物Ｂ１は化合物Ｂ２を上回って存在し、少なくとも約6０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％のエナンチオマー過剰（ｅ．ｅ．）を有する。
【００２９】
別の実施形態は、化合物Ｂ又は化合物Ｂ１の４−メチルベンゼンスルホン酸塩（ＰＴＳＡ）、硫酸塩（ＳＡ）、塩酸塩（ＨＣｌ）、ベンゼンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はカンファースルホン酸塩を調製する方法である。方法は、化合物Ｂ、Ｂ１又はその塩（所望の塩以外）を化合物Ｂ又は化合物Ｂ１の４−メチルベンゼンスルホン酸塩、硫酸塩、塩酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はカンファースルホン酸塩に変換することを含む。
【００３０】
別の実施形態では、ＰＩ３Ｋが関連する疾患、障害又は状態、たとえば、癌のような増殖性疾患を治療するための組成物での使用に好適な化合物Ｂ又は化合物Ｂ１の４−メチルベンゼンスルホン酸塩、硫酸塩、塩酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はカンファースルホン酸塩である。
【００３１】
本発明はさらに、薬学上許容可能なキャリアと一緒に本発明の化合物Ｂの４−メチルベンゼンスルホン酸塩、硫酸塩、塩酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はカンファースルホン酸塩を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物はさらに、たとえば他の活性剤（たとえば、抗癌剤及び以下で議論するような活性剤）のような１以上の追加の有効成分を含み得る。一実施形態では、医薬組成物は治療上有効な量の本発明の１以上の化合物を含む。
【００３２】
本発明はさらに、薬学上許容可能なキャリアと一緒に化合物Ｂの４−メチルベンゼンスルホン酸塩、硫酸塩、塩酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はカンファースルホン酸塩を含む医薬組成物を提供する。
【００３３】
一実施形態では、化合物Ｂ又は化合物Ｂ１のＰＴＳＡ塩は少なくとも約6０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％のエナンチオマー過剰（ｅ．ｅ．）を有する。
【００３４】
一実施形態では、化合物Ｂ又は化合物Ｂ１のＳＡ塩は少なくとも約6０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％のエナンチオマー過剰（ｅ．ｅ．）を有する。
【００３５】
一実施形態では、化合物Ｂ又は化合物Ｂ１のＨＣｌ塩は少なくとも約6０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％のエナンチオマー過剰（ｅ．ｅ．）を有する。
【００３６】
一実施形態では、化合物Ｂ又は化合物Ｂ１のベンゼンスルホン酸塩は少なくとも約6０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％のエナンチオマー過剰（ｅ．ｅ．）を有する。
【００３７】
一実施形態では、化合物Ｂ又は化合物Ｂ１のマレイン酸塩は少なくとも約6０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％のエナンチオマー過剰（ｅ．ｅ．）を有する。
【００３８】
一実施形態では、化合物Ｂ又は化合物Ｂ１のカンファースルホン酸塩は少なくとも約6０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％のエナンチオマー過剰（ｅ．ｅ．）を有する。
【００３９】
別の実施形態は、有効量のＰＴＳＡ塩としての本発明の化合物Ｂ又は化合物Ｂ１を患者に投与することによって患者にてＰＩ３Ｋデルタを阻害する方法である。
【００４０】
別の実施形態は、有効量の本発明の少なくとも１つの化合物を患者に投与することによって患者にてＰＩ３Ｋデルタを阻害する方法である。
【００４１】
さらに別の実施形態は、有効量の本発明の少なくとも１つの化合物を患者に投与することによって、患者にてＰＩ３Ｋタンパク質キナーゼが介在する疾患、障害又は状態（たとえば、癌又は他の増殖性の疾患又は障害）を治療する、予防する及び／又は抑制する方法である。
【００４２】
さらに別の実施形態は、有効量の本発明の少なくとも１つの化合物を患者に投与することによって、患者にてＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態を治療する方法である。一実施形態では、投与される化合物の量は、ＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態をＰＩ３Ｋデルタの阻害によって治療するのに十分である。
【００４３】
本発明のさらに別の実施形態は、そのような治療を必要とする患者に有効量の本発明の少なくとも１つの化合物を投与することによって増殖性疾患を治療する方法である。一実施形態では、投与される化合物の量は、増殖性疾患をＰＩ３Ｋデルタの阻害によって治療するのに十分である。
【００４４】
本発明のさらに別の実施形態は、少なくとも１つの他の抗癌剤との併用で（同時に又は順次）、そのような治療を必要とする患者に有効量の本発明の少なくとも１つの化合物を投与することによって増殖性疾患を治療する方法である。一実施形態では、投与される化合物の量は、増殖性疾患をＰＩ３Ｋデルタの阻害によって治療する（又は治療を円滑にする）のに十分である。
【００４５】
さらに別の実施形態は、任意で少なくとも１つの薬学上許容可能な賦形剤と混合された化合物Ａ１、Ｂ又はＢ１又は薬学上許容可能なその塩を含む医薬組成物を患者に投与することを含む、患者にてＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態を治療する方法である。特定の実施形態では、組成物は、ＰＩ３Ｋに関連する疾患、障害又は状態を治療するための化合物Ａ１、Ｂ又はＢ１又は薬学上許容可能なその塩の前述の実施形態のいずれかの、治療上有効な量の化合物を含む。
【００４６】
特定の実施形態は、任意で少なくとも１つの薬学上許容可能な賦形剤と混合された化合物Ａ１、Ｂ又はＢ１又は薬学上許容可能なその塩を含む医薬組成物を患者に投与することを含む、患者にて癌を治療する方法を提供する。特定の実施形態では、組成物は、患者にて癌を治療するための化合物Ａ１、Ｂ又はＢ１又は薬学上許容可能なその塩の前述の実施形態のいずれかの、治療上有効な量の化合物を含む。
【００４７】
本発明の化合物は、以下：
・膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎臓癌、肝臓癌、肺癌（小細胞肺癌を含む）、食道癌、胆嚢癌、子宮癌、卵巣癌、精巣癌、喉頭癌、口腔癌、消化器癌（たとえば、食道、胃、膵臓）脳腫瘍、子宮頸癌、甲状腺癌、前立腺癌、血液癌及び皮膚癌（有棘細胞癌を含む）を含む癌腫；
・白血病、急性リンパ性白血病、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ヘアリー細胞リンパ腫、及びバーキットリンパ腫を含むリンパ系列の造血系腫瘍；
・急性及び慢性の骨髄性白血病、骨髄異形成症候群及び前骨髄球性白血病を含む骨髄系列の造血系腫瘍；
・線維肉腫及び横紋筋肉腫を含む間葉細胞起源の腫瘍；
・星状細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫及び神経鞘腫を含む中枢神経系及び末梢神経系の腫瘍；並びに
・黒色腫、精上皮腫、奇形癌、骨肉腫、色素異形成癌、角化棘細胞腫、嚢胞性甲状腺癌及びカポジ肉腫を含むその他の腫瘍
を含むが、これらに限定されない種々の癌の治療に有用である。
【００４８】
アポトーシスの調節剤としての本発明の化合物は、癌（上記本明細書で言及されたそれらの種類を含むが、これらに限定されない）の治療、予防及び抑制に有用である。
【００４９】
本発明の化合物は癌の化学的予防に有用である。化学的予防には、変異原性事象の開始を阻止することによって侵襲性の癌の発生を抑えること、すでに損傷を負っている前癌細胞の進行を阻止すること、又は腫瘍の再発を阻害することが関与する。化合物はまた腫瘍の血管形成及び転移を阻害するのにも有用である。本発明の一実施形態は、有効量の１以上の本発明の化合物を投与することによって患者にて腫瘍の血管形成及び転移を阻害する方法である。
【００５０】
本発明の別の実施形態は、免疫系に関連する疾患（たとえば、自己免疫疾患）、炎症が関与する疾患又は障害（たとえば、喘息、慢性閉塞性肺疾患、関節リウマチ、炎症性大腸疾患、糸球体腎炎、神経炎症性疾患、多発性硬化症、ブドウ膜炎及び免疫系の障害）、癌又は他の増殖性疾患、肝臓の疾患若しくは障害、又は腎臓の疾患若しくは障害を治療する方法である。方法は、治療上有効な量の１以上の本発明の化合物を投与することを含む。
【００５１】
本発明の化合物によって治療することができる免疫性障害の例には、乾癬、関節リウマチ、血管炎、炎症性大腸疾患、皮膚炎、変形性関節症、喘息、炎症性筋肉疾患、アレルギー性鼻炎、膣炎、間質性膀胱炎、強皮症、骨粗鬆症、湿疹、同種又は異種の移植（臓器、骨髄、幹細胞及び他の細胞及び組織）の移植片拒絶、移植片対宿主病、全身性エリテマトーデス、炎症性疾患、Ｉ型糖尿病、肺線維症（ＩＰＦ）（又は特発性線維化性肺胞炎（ＣＦＡ）又は特発性線維化性間質肺炎）、肺線維症、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、甲状腺炎（たとえば、橋本病及び自己免疫性甲状腺炎）、重症筋無力症、自己免疫性溶血性貧血、多発性硬化症、嚢胞性線維症、慢性再発性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、アレルギー性結膜炎及びアトピー性皮膚炎が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５２】
さらに別の実施形態は、治療上有効な量の本発明の化合物を投与することによって患者にて白血病を治療する方法である。たとえば、本発明の化合物は、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）及び緩慢性非ホジキンリンパ腫（Ｉ−ＮＨＬ）を治療するのに有効である。
【００５３】
前述の治療方法では、本発明の化合物と共に１以上の追加の活性剤を投与することができる。たとえば、本発明の化合物は、たとえば、化学療法、放射線療法、生物療法、骨髄移植、幹細胞移植、又は他の抗癌療法、又は、たとえば、たとえば、フルダラビン、シスプラチン、クロラムブシル、ベンダムスチン又はドキソルビシンのようなＤＮＡ相互作用剤；たとえば、サイクロホスファミドのようなアルキル化剤；たとえば、エトポシドのようなトポイソメラーゼＩＩ阻害剤；たとえば、ＣＰＴ−１１又はトポテカンのようなトポイソメラーゼＩ阻害剤；たとえば、パクリタキセル、ドセタキセル又は天然に存在する又は合成のエポチロン（たとえば、イキサベピロン）のようなチューブリン相互作用剤；たとえば、タモキシフェンのようなホルモン剤；たとえば、５−フルオロウラシルのようなチミジル酸合成酵素阻害剤；たとえば、メソトレキセートのような代謝拮抗剤；たとえば、イレッサ及びＯＳＩ−７７４のような他のチロシンキナーゼ阻害剤；血管形成阻害剤；ＥＧＦ阻害剤；ＶＥＧＦ阻害剤；ＣＤＫ阻害剤；ＳＲＣ阻害剤；ｃ−Ｋｉｔ阻害剤；Ｈｅｒ１／２阻害剤及び成長ホルモン受容体に向けられたモノクローナル抗体、たとえば、エルビタックス（ＥＧＦ）及びヘルセプチン（Ｈｅｒ２）；ＣＤ２０モノクローナル抗体、たとえば、リツキシマブ、ウブリツキシマブ（ＴＧＲ−１１０１）、オファツムマブ（ＨｕＭａｘ；イントラセル）、オクレリズマブ、ベルツズマブ、ＧＡ１０１（オビヌツズマブ）、ＡＭＥ−１３３ｖ（ＬＹ２４６９２９８、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）、オカラツズマブ（Ｍｅｎｔｒｉｋ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）、ＰＲＯ１３１９２１、トシツモマブ、ｈＡ２０（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ社）、イブリツモマブ−チウキセタン、ＢＬＸ−３０１（Ｂｉｏｌｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、レディタックス（Ｄｒ．Ｒｅｄｄｙ’ｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、及びＰＲＯ７０７６９（ＷＯ２００４／０５６３１２に記載された）；他のＢ細胞標的化モノクローナル抗体、たとえば、ベリムマブ、アタシセプト又は融合タンパク質、たとえば、ブリシミモド及びＢＲ３−Ｆｃ；他のモノクローナル抗体、たとえば、アレムツズマブ；ＣＨＯＰ（サイクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾロン）；Ｒ−ＣＨＯＰ（リツキシマブ−ＣＨＯＰ）；超ＣＶ  ＡＤ（超分画化サイクロホスファミド、ビンクリスチン、ドキソルビシン、デキサメタゾン、メソトレキセート、シタラビン）；Ｒ−超ＣＶ  ＡＤ（リツキシマブ−超ＣＶ  ＡＤ）；ＦＣＭ（フルダラビン、サイクロホスファミド、ミトキサントロン）；Ｒ−ＦＣＭ  （リツキシマブ、フルダラビン、サイクロホスファミド、ミトキサントロン）；ボルテゾミブ及びリツキシマブ；テムシロリムス及びリツキシマブ；テムシロリムス及びベルケード（登録商標）；ヨウ素−１３１トシツモマブ（ベクサー（登録商標））及びＣＨＯＰ−ＣＶＰ（サイクロホスファミド、ビンクリスチン、プレドニゾロン）；Ｒ−ＣＶＰ（リツキシマブ−ＣＶＰ）；ＩＣＥ（イフォスファミド、カルボプラチン、エトポシド）；Ｒ−ＩＣＥ（リツキシマブ−ＩＣＥ）；ＦＣＲ（フルダラビン、サイクロホスファミド、リツキシマブ）；ＦＲ（フルダラビン、リツキシマブ）；及びＤ．Ｔ．ＰＡＣＥ（デキサメタゾン、タリドミド、シスプラチン、アドリアマイシン、サイクロホスファミド、エトポシド）；及び他のタンパク質キナーゼ調節剤のような、しかし、これらに限定されない１以上の細胞増殖抑制剤、細胞傷害剤又は抗癌剤又は標的化療法の単独又は併用のような既知の抗癌治療による併用（一緒に又は順次投与される）に有用である。
【００５４】
本発明の化合物はまた、１以上のステロイド性抗炎症剤、非ステロイド性抗炎症剤、（ＮＳＡＩＤ）又は免疫選択性の抗炎症性誘導体（ＩｍＳＡＩＤ）による併用（一緒に又は順次投与される）にも有用である。
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１】アッセイ６ａに従って測定した原発性多発性骨髄腫患者の細胞における化合物Ｂ１又は対照で処理した後のアポトーシスを受けた細胞の比率を示す棒グラフである。
【図２Ａ】アッセイ８によって測定した、ＣＬＬ細胞における細胞傷害性の観察された誘導（Ａ）を示す棒グラフである。
【図２Ｂ】アッセイ８によって測定した、アポトーシス（Ｂ）を示す棒グラフである。
【図２Ｃ】アッセイ８によって測定した、ｐＡｋｔの相当する阻害（Ｃ）を示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００５６】
本明細書で使用されるとき、指示されない限り、以下の定義が適用されるべきである。
【００５７】
本明細書で記載される特定の化合物は１以上の不斉中心を含有するので、絶対的な立体化学という点で（Ｒ）−又は（Ｓ）−として定義することができるエナンチオマー、ジアステレオマー及び他の立体異性体の形態を生じることができる。本化学実体、医薬組成物及び方法は、ラセミ混合物、光学的に純粋な形態及び中間体混合物を含むそのような考えられる異性体すべてを包含することとする。たとえば、中間体混合物は、約１０：９０、１３：８７、１７：８３、２０：８０、又は２２：７８の比で異性体の混合物を含み得る。光学的に活性のある（Ｒ）−及び（Ｓ）−異性体は、キラルシントン又はキラル試薬を用いて調製することができ、既知の技法を用いて分割することができる。
【００５８】
用語「プロドラッグ」は、正常な代謝過程によって体内で活性形態に変換される化合物の不活性前駆体である化合物を指す。プロドラッグの設計は一般に、Ｈａｒｄｍａら、（編），Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，第９版、１１−１６ページ（１９９６）で議論されている。十分な議論はＨｉｇｕｃｈｉら、Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，第１４巻，ＡＳＣＤ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ，ａｎｄ  ｉｎ  Ｒｏｃｈｅ（編），Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ（１９８７）にて提供されている。説明するように、プロドラッグは、たとえば、エステル結合又はアミド結合の加水分解を介して薬学上活性のある形態に変換することができ、それによって、得られた生成物上の官能基を導入する又は露出することができる。プロドラッグは、内在性の化合物と反応して、化合物の薬学特性をさらに高める、たとえば、循環半減期を増やす水溶性の抱合体を形成するように設計することができる。或いは、プロドラッグは、たとえば、グルクロン酸、硫酸塩、グルタチオン、アミノ酸又は酢酸塩による官能基の共有結合修飾を受けるように設計することができる。得られた抱合体を不活化し、尿に排泄することができ、又は親化合物よりも強力にすることができる。高分子量の抱合体を胆汁に排泄し、酵素切断に供し、循環に戻すことができ、それによって、元々投与された化合物の生物学的半減期を有効に延ばすことができる。化合物Ａ１、Ｂ、Ｂ１及びＢ２のプロドラッグは本発明の範囲内で変換されるように意図される。
【００５９】
さらに、本発明はまた、１以上の放射性を濃縮した原子の存在、たとえば、重水素若しくはトリチウムによる水素の置換又は１３Ｃ若しくは１４Ｃを濃縮した炭素による炭素の置換でのみ異なる化合物も包含する。
【００６０】
本発明の化合物はまた、そのような化合物を構成する１以上の原子にて非天然の比率の原子同位体も含有し得る。たとえば、化合物は、たとえば、トリチウム（３Ｈ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）又は炭素−１４（１４Ｃ）のような放射性同位体によって放射性標識され得る。本発明の化合物の同位体の変異はすべて、放射性であろうとなかろうと、本発明の範囲の中に包含される。
【００６１】
本発明の一部を形成する薬学上許容可能な塩には、たとえば、Ｌｉ、Ｎａ、Ｋ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｚｎ、及びＭｎのような無機塩基に由来する塩；Ｎ，Ｎ’−ジアセチルエチレンジアミン、グルカミン、トリエチルアミン、コリン、水酸化物、ジシクロヘキシルアミン、メトフォルミン、ベンジルアミン、トリアルキルアミン、及びチアミンのような有機塩基の塩；アルキルフェニルアミン、グリシノール、及びフェニルグリシノールのようなキラル塩基の塩；グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ノルロイシン、チロシン、シスチン、システイン、メチオニン、プロリン、ヒドロキシプロリン、ヒスチジン、オミチン、リジン、アルギニン、及びセリンのような天然のアミノ酸の塩；ＭｅＩ及び（Ｍｅ）２ＳＯ４のようなアルキルハロゲン化合物、アルキル硫酸塩との本発明の化合物の四級アンモニウム塩；Ｄ−異性体又は置換アミノ酸のような非天然のアミノ酸の塩；グアニジンの塩；並びに置換グアニジンの塩で、置換基がニトロ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アンモニウム又置換されたアンモニウム塩及びアルミニウム塩から選択される塩を包含する。塩は、適宜、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、過塩素酸塩、ホウ酸塩、水素ハロゲン化合物、酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、パモ酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスコルビン酸塩、グリセロリン酸塩、及びケトグルタール酸塩である酸付加塩を包含し得る。一実施形態では、塩は４−メチルベンゼンスルホン酸塩である。別の実施形態では、塩は硫酸塩である。さらに別の実施形態では、塩はマレイン酸塩である。さらに別の実施形態では、塩はカンファースルホン酸塩である。
【００６２】
分子量のような物性又は化学式のような化学的特性について本明細書で範囲が使用される場合、範囲の組み合わせ及び副組み合わせ及びその中の特定の実施形態すべてが包含されるように意図される。用語「約」は、数の又は数的な範囲を指す場合、言及される数の又は数的な範囲は、実験的な変動の範囲内（又は統計的な実験誤差の範囲内）にある近似であるので、数の又は数的な範囲は、たとえば、言及される数の又は数的な範囲の１％〜１５％の間で変わり得ることを意味する。
【００６３】
用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」（及び「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」若しくは「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」又は「ｈａｖｉｎｇ（有する）」若しくは「ｉｎｃｌｕｄｎｇ（含有する）」のような関連する用語）は、それらの実施形態、たとえば、記載される特徴から「成る」又は「本質的に成る」事項の組成、組成物、方法又は工程等の実施形態を含むが、これらに限定されない。
【００６４】
以下の略語及び用語は全体を通して指示された意味を有する：ＰＩ３−Ｋ＝ホスホイノシチド３−キナーゼ；ＰＩ＝ホスファチジルイノシトール；ＤＮＡ−ＰＫ＝デオキシリボース核酸依存性タンパク質キナーゼ；ＰＴＥＮ＝染色体Ｔｅｎ上で欠失したホスファターゼとテンシンのホモログ；ＡＩＤＳ＝後天性免疫不全症候群；ＨＩＶ＝ヒト免疫不全ウイルス；及びＭｅＩ＝ヨウ化メチル
【００６５】
本明細書で使用される略語は、指示されない限り、化学技術及び生物学技術の範囲内でその従来の意味を有する。
【００６６】
用語「細胞増殖」は、分裂の結果、細胞数が変化している現象を指す。この用語は、増殖シグナルに一致して細胞の形態が変化している（たとえば、サイズが大きくなる）細胞の成長も包含する。
【００６７】
用語「と併用で投与される共投与」及びその文法的同等物は、本明細書で使用されるとき、双方の剤及び／又はその代謝産物が同時に動物に存在するように２以上の剤を動物に投与することを包含する。共投与には、別々の組成物での同時の投与、別々の組成物での異なる時間での投与、又は双方の剤が存在する組成物の投与が含まれる。
【００６８】
用語「有効量」又は「治療上有効な量」は疾患の治療を含むが、これらに限定されない意図する適用を達成するのに十分である本明細書で記載される化合物のその量を指す。治療上有効な量は、意図される適用（試験管内（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）又は生体内（ｉｎ  ｖｉｖｏ））、又は治療される対象及び状態、たとえば、対象の体重及び年齢、疾患の重症度、投与の方法等に応じて変化しうるが、それは当業者が容易に決定することができる。その用語はまた、標的細胞における特定の応答、たとえば、血小板接着及び／又は細胞移動の低下を誘導する用量にも適用される。特定の用量は、選択される特定の化合物、従うべき投与計画、他の化合物との併用で投与されるか否か、投与のタイミング、投与される組織、及びそれが運ばれる物理的な送達系に応じて変化するであろう。
【００６９】
本明細書で使用されるとき、用語「治療」及び「治療すること」は、治療利益及び／又は予防利益を含むが、これらに限定されない有益な又は所望の成績を得るためのアプローチを指す。治療利益によって、治療される根底にある障害の根絶又は改善を意味する。また、治療利益は、患者が根底にある障害に依然として冒されているにもかかわらず、患者にて改善が認められるような、根底にある障害に関連する生理的な症状の１以上の根絶又は改善によって達成される。予防利益については、特定の疾患を発生するリスクのある患者、又はこの疾患の診断が行われ得ないにもかかわらず、疾患の生理的な症状の１以上を報告する患者に組成物が投与され得る。
【００７０】
「治療効果」はその用語が本明細書で使用されるとき、上述のような治療利益及び／又は予防利益を包含する。予防効果には、疾患又は状態の出現を遅らせる又は排除すること、疾患又は状態の症状の発症を遅らせる又は排除すること、疾患又は状態の進行を遅くする、停止する又は反転することが含まれる。
【００７１】
用語「対象」又は「患者」は、哺乳類、たとえば、ヒトのような動物を指す。本明細書で記載される方法はヒトの治療及び獣医の適用にて有用であることができる。一部の実施形態では、患者は哺乳類であり、一部の実施形態では、患者はヒトである。獣医目的では、用語「対象」及び「患者」には、ウシ、ヒツジ、ブタ及びヤギを含む家畜；イヌ及びネコのような愛玩動物；外来動物及び／又は動物園動物；マウス、ラット、ウサギ、モルモット及びハムスターを含む実験動物；並びにニワトリ、七面鳥、アヒル及びガチョウのような鳥類が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７２】
「放射線療法」は、施術者に既知の方法及び組成物を用いて、たとえば、α粒子放射の放射線核種（たとえば、アクチニウム及びトリウム放射線核種）、低線形エネルギー移動（ＬＥＴ）放射線放射体（すなわち、β放射体）、変換電子放射体（たとえば、ストロンチウム−８９及びサマリウム−１５３−ＥＤＴＭＰ）又は、限定しないでＸ線、γ線及び中性子を含む高エネルギー放射線に患者をさらすことを指す。
【００７３】
「シグナル伝達」は、刺激性又は阻害性のシグナルが細胞に又は細胞の中に伝達されて細胞内応答を引き出す過程である。シグナル伝達経路の調節因子は同じ特定のシグナル伝達経路にマッピングされる１以上の細胞性タンパク質の活性を調節する化合物を指す。調節因子は、シグナル伝達分子の活性を増強し得る（アゴニスト）又は抑制し得る（アンタゴニスト）。
【００７４】
用語「選択的阻害」又は「選択的に阻害する」は、生物学的に活性のある剤に適用されるとき、標的との直接的な又は間接的な相互作用を介して、的外れのシグナル伝達活性に比べて標的のシグナル伝達活性を選択的に低下させる剤の能力を指す。
【００７５】
本明細書で使用されるとき、用語「ＰＩ３キナーゼδ選択的阻害剤」は一般に、ＰＩ３Ｋファミリーの他のアイソザイム（α、β、及びγ）よりも効果的にＰＩ３キナーゼδアイソザイムの活性を阻害する化合物を指す。たとえば、ＰＩ３キナーゼδ選択的阻害剤は、他の種のＰＩ３キナーゼ（すなわち、α、β、及びγ）の残りに応答した阻害剤の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）よりも少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍低い、δ型のＰＩ３キナーゼに応答した５０％阻害濃度を示す化合物を指し得る。
【００７６】
ＰＩ３キナーゼδの阻害は、種々の状態、たとえば、自己免疫疾患、アレルギー性疾患及び関節炎疾患を含むが、これらに限定されない炎症反応を特徴とする状態の治療にて治療利益がある。重要なことに、ＰＩ３キナーゼδ機能の阻害は、生存性及び生殖能力のような生物学的機能に影響を及ぼすとは思われない。
【００７７】
「炎症反応」は本明細書で使用されるとき、発赤、発熱、腫脹、及び疼痛を特徴とし（すなわち、炎症）、通常、組織の損傷又は破壊が関与する。炎症反応は普通、組織の損傷又は破壊によって引き出される局在する保護的な応答であり、それは、損傷物質及び損傷された組織の双方を破壊し、希釈し、壁で守る（隔離する）ように作用する。炎症反応は、白血球及び／又は白血球（たとえば、好中球）のケモカインの流入と顕著に関連する。炎症反応は、病原生物及びウイルスによる感染、外傷又は心筋梗塞若しくは卒中の後の再潅流のような非感染性の手段、外来抗原に対する免疫応答、及び自己免疫疾患から生じ得る。本発明に係る方法及び化合物によって治療し易い炎症反応には、特異的な防御系の反応に関連する状態と同様に非特異的な防御系の反応に関連する状態が含まれる。
【００７８】
本発明の治療方法には、炎症性細胞の活性化に関連する状態を治療する方法が含まれる。「炎症性細胞の活性化」は、増殖性の細胞応答の刺激（サイトカイン、抗原又は自己抗体を含むが、これらに限定されない）、可溶性メディエータ（サイトカイン、酸素ラジカル、酵素、プロスタノイド、又は血管作動性アミンを含むが、これらに限定されない）の産生、又は炎症性細胞（単球、マクロファージ、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、顆粒球（好中球、好塩基球及び好酸球を含む多形核白血球）、肥満細胞、樹状細胞、ランゲルハンス細胞及び内皮細胞を含むが、これらに限定されない）における新しい又は多数のメディエータ（主要組織適合性抗原又は接着分子を含むが、これらに限定されない）の細胞表面の発現による誘導を指す。これらの細胞におけるこれらの表現型の１つ又は組み合わせの活性化は炎症状態の開始、永続化又は悪化に寄与することができることは当業者によって十分に理解されるであろう。
【００７９】
「自己免疫疾患」は本明細書で使用されるとき、組織の損傷が生体自体の構成成分に対する液性又は細胞性の応答に関連する障害の任意の群を指す。
【００８０】
「移植の拒絶」は本明細書で使用されるとき、移植された組織（移植された及び周りの組織の機能の喪失、疼痛、腫脹、白血球増加及び血小板減少症を特徴とする臓器又は細胞（たとえば、骨髄）を含む）に向けられた免疫応答を指す。
【００８１】
「アレルギー性疾患」は本明細書で使用されるとき、アレルギーから生じる症状、組織の損傷、又は組織機能の喪失を指す。
【００８２】
「関節炎疾患」は本明細書で使用されるとき、種々の病因に起因する関節の炎症性病変を特徴とする疾患を指す。
【００８３】
「皮膚炎」は本明細書で使用されるとき、種々の病因に起因する皮膚の炎症を特徴とする皮膚の疾患の大きなファミリーのいずれかを指す。
【００８４】
本発明の化合物は、双方とも参照によって本明細書に組み入れられる国際公開番号ＷＯ２０１１／０５５２１５及び２０１３年３月３日に出願されたＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＩＢ２０１３／０５３５４４に記載された方法によって調製することができる。化合物Ａは国際公開番号ＷＯ２０１１／０５５２１５の実施例１５８に記載されたように調製することができる。
【００８５】
［医薬組成物］
本発明は、１以上の本発明の化合物及び１以上の薬学上許容可能なキャリア又は賦形剤を含む医薬組成物を提供する。一実施形態では、医薬組成物は治療上有効な量の本発明の化合物を含む。医薬組成物は、本明細書で記載されるような１以上の追加の有効成分を含み得る。
【００８６】
医薬キャリア及び／又は医薬賦形剤は、希釈剤、充填剤、塩、崩壊剤、結合剤、潤滑剤、流動促進剤、湿潤剤、制御放出マトリクス、着色剤、香味剤、緩衝液、安定剤、可溶化剤及びそれらの組み合わせから選択され得る。
【００８７】
本発明の医薬組成物は単独で又は１以上の他の活性剤との併用で投与することができる。所望であれば、主題の化合物及び他の剤は１つの製剤に混ぜ込み得るし、又は双方の成分は別々の製剤に製剤化し、別々に又は同時に併用してそれらを使用し得る。
【００８８】
本発明の化合物及び医薬組成物は、作用部位に化合物を送達するのを可能にする任意の経路によって、たとえば、経口で、局所に（たとえば、経皮で）、十二指腸内に、非経口で（静脈内、動脈内、筋肉内、血管内、腹腔内に、又は注入若しくは点滴によってを含む）、皮内に、乳腺内に、クモ膜下に、眼内に、眼球後方に、肺内に（たとえば、噴霧化薬剤）又は皮下に（長期放出用に投与されるデポー、たとえば、脾膜、脳、又は角膜に埋め込まれたデポーを含む）投与することができる。
【００８９】
組成物は、固体、半固体、液体又は気体の形態で投与することができ、又はたとえば、凍結乾燥形態のような乾燥粉末の形態であり得る。医薬組成物は、たとえば、カプセル、サシェ、カシェ、ゼラチン、紙、錠剤、座薬、ペレット、丸薬、トローチ、及びのど飴のような固形剤形を含む送達に好都合な形態に包装することができる。包装の種類は一般に投与の所望の経路に左右されるであろう。経皮製剤であるような埋め込み可能な徐放性製剤も熟考される。
【００９０】
投与される化合物の量は、治療される哺乳類、障害又は状態の重症度、投与の速度、化合物の性質及び主治医の裁量に依存する。しかしながら、有効な投与量は、１日当たり体重ｋｇ当たり約０．００１〜約１００ｍｇ、好ましくは約１〜約３５ｍｇ／ｋｇの範囲であり、単回投与又は分割投与である。７０ｋｇのヒトについては、これは約０．０５〜７ｇ／日、好ましくは約０．０５〜約２．５ｇ／日である。有効量の本発明の化合物を単回投与又は複数回投与（たとえば、１日２回又は３回）で投与し得る。
【００９１】
本発明の化合物は、抗癌剤（たとえば、化学療法剤）、治療抗体及び放射線治療の１以上と併用して使用され得る。
【００９２】
本発明の化合物は、たとえば、脳脊髄炎、喘息及び本明細書で記載されるような他の疾患のような炎症状態の症状を緩和するように作用する他の剤を併せて製剤化し、投与し得る。これらの剤には、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）が挙げられる。
【００９３】
種々の医薬組成物の調製は当該技術で既知である。たとえば、すべてその全体が参照によって本明細書に組み入れられるＡｎｄｅｒｓｏｎ，Ｐｈｉｌｉｐ、Ｏ．；Ｋｎｏｂｅｎ，Ｊａｍｅｓ、Ｅ．；Ｔｒｏｕｔｍａｎ，Ｗｉｌｌｉａｍ、Ｇ，編、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄａｔａ，第１０版，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，２００２；Ｐｒａｔｔ及びＴａｙｌｏｒ編、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ａｃｔｉｏｎ，第３版，Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ  Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９０；Ｋａｔｚｕｎｇ編、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，第９版，ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，２００３；Ｇｏｏｄｍａｎ及びＧｉｌｍａｎ編、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，第１０版，ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，２００１；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第２０版，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ．，２０００；Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ，Ｔｈｅ  Ｅｘｔｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ，第３２版（Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｌｏｎｄｏｎ，１９９９）を参照のこと。
【００９４】
有効量の本発明の化合物は、直腸、頬内、鼻内及び経皮の経路、動脈内注射による、静脈内、腹腔内、非経口、筋肉内、皮下、経口、局所又は吸入としてを含む、類似の有用性を有する剤の許容された投与方式のいずれかによって単回投与又は複数回投与で投与され得る。
【００９５】
一実施形態では、化合物Ａ１又は薬学上許容可能なその塩を選択した用量で投与して約２０〜５，０００ｎｇ／ｍＬの血中の化合物濃度を生じ、投与の後、約６〜２４時間の間そのような濃度を維持する。別の特定の実施形態では、用量サイズ及び回数は約５０〜２，５００ｎｇ／ｍＬである血中の化合物濃度を達成し、投与の時間から約６〜２４時間の間その濃度を維持するように選択される。一部の実施形態では、用量サイズ及び回数は投与後、約１００〜１，５００ｎｇ／ｍＬの間である血中の化合物濃度を達成するように選択される。一部の実施形態では、用量サイズ及び回数は、投与の時間から約６〜２４時間にわたって約１００〜７５０ｎｇ／ｍＬの間である血中の化合物濃度を達成するように選択される。さらなる実施形態では、用量サイズ及び回数は、少なくとも約３００ｎｇ／ｍＬであり、約１０，０００ｎｇ／ｍＬを超えない化合物Ａ１のＣｍａｘ血漿レベルを達成するように選択される。
【００９６】
一実施形態では、化合物Ｂ１又は薬学上許容可能なその塩を選択した用量で投与して約２０〜５，０００ｎｇ／ｍＬの血中の化合物濃度を生じ、投与の後、約６〜２４時間の間そのような濃度を維持する。別の特定の実施形態では、用量サイズ及び回数は約５０〜２，５００ｎｇ／ｍＬである血中の化合物濃度を達成し、投与の時間から約６〜２４時間の間その濃度を維持するように選択される。一部の実施形態では、用量サイズ及び回数は投与後、約１００〜１，５００ｎｇ／ｍＬの間である血中の化合物濃度を達成するように選択される。一部の実施形態では、用量サイズ及び回数は、投与の時間から約６〜２４時間にわたって約１００〜７５０ｎｇ／ｍＬの間である血中の化合物濃度を達成するように選択される。さらなる実施形態では、用量サイズ及び回数は、少なくとも約３００ｎｇ／ｍＬであり、約１０，０００ｎｇ／ｍＬを超えない化合物Ｂ１のＣｍａｘ血漿レベルを達成するように選択される。
【００９７】
［治療の方法］
本発明は、本発明の化合物又は医薬組成物を用いて、ＰＩ３キナーゼの１以上の種類の機能不全に関連する疾患含むが、これらに限定されない疾患状態を治療する方法を提供する。ＰＩ３δキナーゼ活性が介在する状態及び障害の詳細な記載は、すべてあらゆる目的でその全体が参照によって本明細書に組み入れられるＷＯ２００１／８１３４６、ＵＳ２００５／０４３２３９、ＷＯ２０１０／１２３９３１、ＷＯ２０１０／１１１４３２及びＷＯ２０１０／０５７０４８にて述べられている。
【００９８】
本明細書で提供される治療方法は、治療上有効な量の本発明の化合物を対象に投与することを含む。一実施形態では、本発明は、哺乳類にて自己免疫疾患を含む炎症性障害を治療する方法を提供する。方法は、治療上有効な量の本発明の化合物を哺乳類に投与することを含む。
【００９９】
本明細書で提供される化合物で治療可能な障害、疾患又は状態には、
・全身性アナフィラキシー及び過敏性障害、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、薬物アレルギー、虫刺されアレルギー、食物アレルギー、（セリアック病等を含む）、アナフィラキシー、血清病、薬物反応、昆虫毒アレルギー、過敏症肺炎、皮膚脈管炎、多形性紅斑、スティーブンス・ジョンソン症候群、アトピー性角結膜炎、性病角結膜炎、巨大乳頭結膜炎、及び肥満細胞症を含む炎症性及びアレルギー性疾患；
・クローン病、潰瘍性大腸炎、回腸炎、腸炎及び壊死性腸炎を含む炎症性大腸疾患；
・血管炎及びベーチェット症候群；
・乾癬並びに、皮膚炎、湿疹、アレルギー性接触皮膚炎、ヒトのパピローマウイルス、ＨＩＶ又はＲＬＶ感染を含むウイルス性皮膚病態、細菌、真菌及び他の寄生虫の皮膚病態、及び皮膚エリテマトーデスを含む炎症性の皮膚病；
・アレルギー性喘息、運動誘発性喘息、アレルギー性鼻炎、中耳炎、過敏性肺疾患、慢性閉塞性肺疾患及び他の呼吸器の問題を含む喘息及び呼吸器アレルギー性疾患；
・エリテマトーデス、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、多発性硬化症、多発性関節炎、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、関節リウマチ、乾癬性関節炎、痛風性関節炎、脊椎炎、反応性関節炎、慢性又は急性の糸球体腎炎、ルーパス腎炎、ライター症候群、タカヤス関節炎、側頭動脈炎（「巨細胞性動脈炎」としても知られる）、自己免疫性肺炎症、自己免疫性甲状腺炎、自己免疫性炎症性眼疾患、白斑、及び外陰部痛を含むが、これらに限定されない自己免疫疾患及び炎症性状態。他の障害には骨再吸収障害及び血栓症が含まれる；
・乳腺、皮膚、前立腺、子宮頚部、子宮、卵巣、精巣、膀胱、肺、肝臓、喉頭、口腔、結腸、及び消化器（たとえば、食道、胃、膵臓）、脳、甲状腺、血液及びリンパ系の癌；並びに
・喘息、慢性気管支炎、アレルギー性鼻炎、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、慢性杯炎症性疾患（たとえば、慢性閉塞性肺疾患）、珪肺、肺サルコイドーシス、胸膜炎、肺胞炎、血管炎、肺炎、気管支拡張症、遺伝性肺気腫及び肺酸素毒性を含む肺又は呼吸器の状態
が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１００】
特定の実施形態では、本明細書で提供される方法で治療可能な癌（単数）又は癌（複数）には、
・急性白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、たとえば、骨髄芽球、前骨髄性、骨髄単球性、単球性、赤白血病及び骨髄異形成症候群又はその症状（たとえば、貧血、血小板減少症、好中球減少症、二系統血球減少症、又は汎血球減少症）、不応性貧血（ＲＡ）、環状鉄芽球を伴うＲＡ（ＲＡＲＳ）、過剰な芽球を伴うＲＡ（ＲＡＥＢ）、形質転換のＲＡＥＢ（ＲＡＥＢ−Ｔ）、前白血病及び慢性骨髄単球性白血病を含むが、これらに限定されない白血病；
・慢性骨髄性（顆粒球）白血病、慢性リンパ性白血病、及びヘアリー細胞白血病を含むが、これらに限定されない慢性白血病；
・真性多血症；
・ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫を含むが、これらに限定されないリンパ腫；
・くすぶり型多発性骨髄腫、非分泌型骨髄腫、骨硬化性骨髄腫、形質細胞白血病、孤立性形質細胞腫及び髄外形質細胞腫を含むが、これらに限定されない多発性骨髄腫；
・ヴァルデンストレームマクログロブリン血症；
・意義不明の単クローン性高ガンマグロブリン血症；
・良性の単クローン性高ガンマグロブリン血症；
・重鎖疾患；
・骨の肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性巨大細胞腫瘍、骨の線維肉腫、脊索腫、骨膜肉腫、軟組織肉腫、血管肉腫（血管肉腫）、線維肉腫、カポジ肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンパ管肉腫、転移癌、神経鞘腫、横紋筋肉腫及び滑膜肉腫を含むが、これらに限定されない骨及び結合組織の肉腫；
・神経膠腫、星状細胞腫、脳幹神経膠腫、上衣細胞腫、乏突起膠腫、非グリア腫瘍、聴神経鞘腫、頭蓋咽頭腫、髄芽細胞腫、髄膜腫、松果体細胞腫、松果体芽細胞腫、及び原発性脳リンパ腫を含むが、これらに限定されない脳腫瘍；
・腺癌、小葉（小細胞）癌腫、腺管内癌腫、髄質乳癌、粘液性乳癌、管状乳癌、乳頭乳癌、原発性癌、パジェット病、及び炎症性乳癌を含むが、これらに限定されない乳癌；
・褐色細胞腫及び副腎皮質癌腫を含むが、これらに限定されない副腎癌；
・乳頭性又は濾胞性の甲状腺癌、髄質甲状腺癌、及び未分化甲状腺癌を含むが、これらに限定されない甲状腺癌；
・膵島細胞腫、ガストリン産生腫瘍、グルカゴン産生腫瘍、ＶＩＰ産生腫瘍、ソマトスタチン分泌腫瘍、及びカルチノイド又は島細胞の腫瘍を含むが、これらに限定されない膵臓癌；
・クッシング病、プロラクチン分泌腫瘍、末端肥大症、及び尿崩症を含むが、これらに限定されない下垂体癌；
・虹彩黒色腫、脈絡膜黒色腫、及び睫毛黒色腫のような眼の黒色腫、及び網膜芽腫を含むが、これらに限定されない眼の癌；
・扁平上皮癌、腺癌及び黒色腫を含むが、これらに限定されない膣の癌；
・扁平上皮癌、黒色腫、腺癌、基底細胞癌、肉腫及びパジェット病を含むが、これらに限定されない外陰部の癌；
・扁平上皮癌及び腺癌を含むが、これらに限定されない子宮頚癌；
・子宮内膜癌腫及び子宮肉腫を含むが、これらに限定されない子宮癌；
・卵巣上皮癌腫、境界線腫瘍、生殖細胞腫瘍及び間質腫瘍を含むが、これらに限定されない卵巣癌；
・扁平上皮癌、腺癌、腺様嚢胞癌腫、粘膜表皮癌腫、腺扁平上皮癌、肉腫、黒色腫、形質細胞腫、イボ状癌腫、及び燕麦細胞（小細胞）癌腫を含むが、これらに限定されない食道癌；
・腺癌、菌状肉芽腫（ポリープ状）、潰瘍性の、表層に広がった、びまん性に広がった、悪性リンパ腫、脂肪肉腫、線維肉腫及び癌肉腫を含むが、これらに限定されない胃癌；
・結腸癌；
・直腸癌；
・肝細胞癌腫及び肝芽腫を含むが、これらに限定されない肝臓癌；
・腺癌を含むが、これらに限定されない胆嚢癌；
・乳頭性、結節性及びびまん性を含むが、これらに限定されない胆管癌；
・非小細胞肺癌、扁平上皮癌（類表皮癌）、腺癌、大細胞癌腫及び小細胞肺癌を含むが、これらに限定されない肺癌；
・生殖細胞腫瘍、精上皮腫、未分化、古典的（典型的）、精母細胞性、非精上皮腫、胚性癌腫、奇形腫、癌腫及び絨毛腫（卵黄嚢腫瘍）を含むが、これらに限定されない精巣癌；
・腺癌、平滑筋肉腫及び横紋筋肉腫を含むが、これらに限定されない前立腺癌；
・陰茎癌
・扁平上皮癌を含むが、これらに限定されない口腔癌；
・基底癌；
・腺癌、編膜表皮癌腫及び腺様嚢胞性癌腫を含むが、これらに限定されない唾液腺癌；
・扁平上皮癌及びいぼ状を含むが、これらに限定されない咽頭癌；
・基底細胞癌、有棘細胞癌及び黒色腫、表層に広がる黒色腫、結節性の黒色腫、黒子悪性黒色腫、及び末端性黒子性黒色腫を含むが、これらに限定されない皮膚癌；
・腎細胞癌、腺癌を含むが、これらに限定されない腎臓癌；
・副腎腫、線維肉腫及び移行細胞癌（腎盂及び／又は尿管）；
・ウィルムス腫瘍；
・移行細胞癌腫、扁平上皮癌、腺癌及び癌肉腫を含むが、これらに限定されない膀胱癌；
並びに
粘液肉腫、造骨肉腫、内皮肉腫、リンパ管内皮肉腫、中皮腫、滑膜腫、血管芽細胞腫、上皮癌腫、嚢胞腺癌、気管支癌腫、汗腺癌腫、皮脂腺癌腫、乳頭癌腫及び乳頭腺癌を含むが、これらに限定されない他の癌
が挙げられるが、これらに限定されない。
Ｆｉｓｈｍａｎら、１９８５，Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，第２版，Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｃｏ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ及びＭｕｒｐｈｙら、１９９７，Ｉｎｆｏｒｍｅｄ  Ｄｅｃｉｓｉｏｎｓ：Ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ａｎｄ  Ｒｅｃｏｖｅｒｙ，Ｖｉｋｉｎｇ  Ｐｅｎｇｕｉｎ，Ｐｅｎｇｕｉｎ  Ｂｏｏｋｓ  Ｕ．Ｓ．Ａ．，Ｉｎｃ．，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａを参照のこと。
【０１０１】
本発明の治療方法はヒトの医学及び獣医学の分野で有用であることが十分に理解されるであろう。従って、治療される個体は哺乳類、好ましくはヒト又は他の動物であってもよい。獣医目的では、個体には、ウシ、ヒツジ、ブタ及びヤギを含む家畜；イヌ及びネコのような愛玩動物；外来動物及び動物園動物；マウス、ラット、ウサギ、モルモット及びハムスターを含む実験動物；並びにニワトリ、七面鳥、アヒル及びガチョウのような鳥類が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０２】
本発明はまた、治療上有効な量の本発明の化合物又は薬学上許容可能なその塩を前記哺乳類に投与することを含む、対象にて過剰増殖性疾病を治療する方法に関する。一部の実施形態では、前記方法は、たとえば、急性骨髄性白血病、胸腺癌、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、皮膚癌、眼の癌、網膜芽腫、眼内黒色腫、口腔癌及び口腔咽頭癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、頭部の癌、頚部の癌、腎臓癌、肝臓癌、卵巣癌、前立腺癌、直腸結腸癌、食道癌、精巣癌、婦人科の癌、甲状腺癌、ＣＮＳ、ＰＮＳ、ＡＩＤＳに関連した癌（たとえば、リンパ腫及びカポジ肉腫）又はウイルス誘導性の癌のような癌の治療に関する。一部の実施形態では、前記方法は、たとえば、皮膚の良性過形成（たとえば、乾癬）、再狭窄又は前立腺（たとえば、良性の前立腺肥大（ＢＰＨ））のような非癌性の過剰増殖性疾病の治療に関する。
【実施例】
【０１０３】
以下に提供される実施例及び調製は本発明の化合物を調製する方法をさらに説明し、例示する。本発明の範囲は、以下の実施例及び調製の範囲によって決して限定されないことが理解されるべきである。以下の実施例では、単一のキラル中心を持つ分子は、言及されない限り、ラセミ混合物として存在する。当業者に既知の方法によって単一のエナンチオマーが得られ得る。
【０１０４】
言及しない限り、後処理は、括弧内で示される水性相と有機相の間での反応混合物の分布、分離及び有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を蒸発させて残留物を得ることを指す。述べられない限り、精製は、静止相としてのシリカゲル及び移動相としての石油エーテル（沸点６０〜８０℃）と酢酸エチルの混合物又は好適な極性のジクロロメタンとメタノールの混合物を用いたカラムクロマトグラフィを意味する。ＲＴは常温（２５〜２８℃）を指す。
【０１０５】
【化２】
2015522009.tif 000003
【０１０６】
中間体１：６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−２−（１−ヒドロキシエチル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
２−（１−ブロモエチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（１５．０ｇ，４０．８４ミリモル）のＤＭＳＯ（１５０ｍｌ）溶液に、ｎ−ブタノール（７．５ｍｌ）を加え、１２０℃で３時間加熱した。反応混合物をＲＴに冷却し、水で反応を止め、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（７．９０ｇ、６４％）。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：７．８５（ｄｄ，Ｊ＝８．１，３Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄｄ，Ｊ＝９．２，４．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４７−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．１５−６．９８（ｍ，３Ｈ），４．７４（五重線，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），２．２３（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），１．５４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）
【０１０７】
【化３】
2015522009.tif 000004
【０１０８】
中間体２：２−アセチル−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
ＤＭＳＯ（５．６０ｍｌ，７９．１４ミリモル）を−７８℃に冷却したジクロロメタン（４０ｍｌ）に加え、その後、塩化オキサリル（３．４０ｍｌ，３９．５７ミリモル）を加えた。１０分後、ジクロロメタン（５４ｍｌ）中の中間体１（６．００ｇ，１９．７８ミリモル）を一滴ずつ加え、２０分間撹拌した。トリエチルアミン（１２ｍｌ）を加え、１時間撹拌した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して黄色の固形物として表題の化合物を得（４．２ｇ、７１％）、次の工程でそのまま使用した。
【０１０９】
【化４】
2015522009.tif 000005
【０１１０】
中間体３：（Ｓ）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−２−（１−ヒドロキシエチル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
中間体２（２．００ｇ，６．６６ミリモル）にＲ−アルパインボラン（ＴＨＦ中０．５Ｍ，２０ｍｌ）を加え、６０℃に２０時間加熱した。２ＮのＨＣｌ水溶液で反応混合物の反応を止め、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（１．５１ｇ、７５％）。キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように速く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：８．７８分）エナンチオマー過剰：９４．２％。
【０１１１】
【化５】
2015522009.tif 000006
【０１１２】
中間体４：（Ｒ）−１−（６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−２−イル）エチル  ４−クロロ安息香酸塩
中間体３（１．４５ｇ，４．７８ミリモル）のＴＨＦ（１５ｍｌ）溶液に、４−クロロ安息香酸（０．７４８ｇ，４．７８ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（１．８８ｇ，７．１７ミリモル）を加え、４５℃に加熱し、その後ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（１．４ｍｌ，７．１７ミリモル）を加えた。１時間後、反応混合物を濃縮し、酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって残留物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得（１．８１ｇ、８６％）、精製することなく次の工程で使用した。
【０１１３】
＜方法Ａ＞
【０１１４】
【化６】
2015522009.tif 000007
【０１１５】
中間体５：（Ｒ）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−２−（１−ヒドロキシエチル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
メタノール（１７ｍｌ）中の中間体４（１．７５ｇ，３．９６ミリモル）を１０℃に冷却し、炭酸カリウム（０．２７３ｇ，１．９８ミリモル）を加えて３０分間撹拌した。反応混合物を濃縮し、２ＮのＨＣｌ溶液で酸性化し、酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（１．０５ｇ、８７％）。キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように遅く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１１．１２分）エナンチオマー過剰：９３．６％。
【０１１６】
＜方法Ｂ＞
工程１：（Ｒ）−２−（１−（ベンジルオキシ）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
ジクロロメタン中の１−（５−ｆフルオロ−２−ヒドロキシフェニル）−２−（３−フルオロフェニル）エタノン（１１．００ｇ，４４．３１ミリモル）に、ＨＡＴＵ（３３．７ｇ，８８．６３ミリモル）及びＲ−（＋）２−ベンジルオキシプロピオン酸（９．５８ｇ，５３．１７ミリモル）を加え、１０分間撹拌した。トリエチルアミン（６６．７ｍｌ，０．４７ｍｏｌ）を一滴ずつ加え、ＲＴで２４時間撹拌した。反応混合物の反応を水で止め、ジクロロメタンで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して黄色の固形物として表題の化合物を得た（１０．５ｇ、６０％）。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：７．８５（ｄｄ，Ｊ＝８．１，３Ｈｚ，１Ｈ），７．５８（ｄｄ，Ｊ＝９．１，４．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４７−７．３９（ｍ，１Ｈ），７．３９−７．３４（ｍ，１Ｈ），７．２８−７．２０（ｍ，３Ｈ），７．２０−７．１４（ｍ，２Ｈ），７．１６−７．０７（ｍ，１Ｈ），６．９９−６．８９（ｍ，２Ｈ），４．５０−４．３１（ｍ，３Ｈ），１．５６（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）
【０１１７】
工程２：ジクロロメタン（１１０ｍｌ）中の（Ｒ）−２−（１−（ベンジルオキシ）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（１０．５ｇ，２６．６９ミリモル）を０℃に冷却し、塩化アルミニウム（５．３５ｇ，４０．０３ミリモル）を少しずつ加え、ＲＴで６時間撹拌した。反応混合物の反応を２ＮのＨＣｌ溶液で止め、ジクロロメタンで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して黄色の固形物として所望の中間体を得た（６．１ｇ、７６％）。キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように遅く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１１．１２分）エナンチオマー過剰：９７．７％。
【０１１８】
【化７】
2015522009.tif 000008
【０１１９】
中間体６：（Ｒ）−２−（１−（ベンジルオキシ）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
ジクロロメタン（７５ｍｌ）中の２−（３−フルオロフェニルｌ）−１−（２−ヒドロキシフェニル）エタノン（１０．０ｇ，４３．４３ミリモル）に、ＨＡＴＵ（３３．０ｇ，８６．８６ミリモル）及びＲ−（＋）２−ベンジルオキシプロピオン酸（９．３９ｇ，５２．１２ミリモル）を加え、１０分間撹拌した。トリエチルアミン（６５．４ｍｌ，０．４６９モル）を一滴ずつ加え、ＲＴで２４時間撹拌した。反応混合物の反応を水で止め、ジクロロメタンで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（９．０ｇ、５５％）。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：８．２３（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７４−７．７０（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．４３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２９−７．１５（ｍ，５Ｈ），７．０９（ｄｔ，Ｊ＝８．６，１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．００−６．９０（ｍ，２Ｈ），４．５１−４．３５（ｍ，３Ｈ），１．５７（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）
【０１２０】
【化８】
2015522009.tif 000009
【０１２１】
中間体７：（Ｒ）−３−（３−フルオロフェニル）−２−（１−ヒドロキシエチル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
ジクロロメタン（５０ｍｌ）中の中間体６（５．０ｇ，１３．３５ミリモル）を−７８℃に冷却し、三臭化ホウ素（ジクロロメタン中で１Ｍ，３６．５ｍｌ，０．１４５ミリモル）を一滴ずつ加え、１時間撹拌した。反応混合物の反応を２ＮのＨＣｌ溶液で止め、ジクロロメタンで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として中間体ＩＩを得た（３．０５ｇ、８０％）。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：８．２４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｍ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｍ，２Ｈ），７．１３−７．０１（ｍ，３Ｈ），４．７１（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），１．５６（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）．Ｍａｓｓ：２８４．９（Ｍ＋）．純度：９９．７３％．［α］２５Ｄ−０．６０５（ｃ＝１，ＣＨＣｌ３）。キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように遅く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１０．１９分）エナンチオマー過剰：９５．２％。
【０１２２】
【化９】
2015522009.tif 000010
【０１２３】
中間体７ａ及び７ｂ：（Ｓ）−２−（１−ブロモエチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン及び（Ｒ）−２−（１−ブロモエチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
２つのエナンチオマーとして純粋な異性体は、ＣＯ２：ＭｅＯＨを用いて２−（１−ブロモエチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（１０ｇ）から分取用ＳＦＣ条件によって分離し、移動相として水（１０ｍＭ重炭酸アンモニウム）：アセトニトリル（勾配：１．２分で５％−９５％アセトニトリル）を用いたＸＢｒｉｄｇｅＣ１８カラム（５０×４．６ｍｍ；３．５μｍ）にて２．０ｍｌ／分の流速で分析した。
【０１２４】
中間体７ａ：白っぽい固形物（３．８０ｇ）、ｅ．ｅ．１００％、Ｒｔ＝１．７９分、質量：３４８．９（Ｍ＋＋１）。
【０１２５】
中間体７ｂ：白っぽい固形物（３．８０ｇ）、ｅ．ｅ．１００％、Ｒｔ＝１．７９分、質量：３４８．９（Ｍ＋＋１）。
【０１２６】
【化１０】
2015522009.tif 000011
【０１２７】
中間体８：３−（３−フルオロフェニル）−２−（１−ヒドロキシエチル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
２−（１−ブロモエチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（３０ｇ，８６．５１ミリモル）のＤＭＳＯ（３００ｍｌ）溶液にｎ−ブタノール（１５ｍｌ）を加え、１２０℃に３時間加熱した。反応混合物をＲＴに冷却し、水で反応を止め、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得（１６ｇ、６４％）、そのまま次の工程で使用した。
【０１２８】
【化１１】
2015522009.tif 000012
【０１２９】
中間体９：２−アセチル−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
ＤＭＳＯ（１６．０ｍｌ，２２７ミリモル）を−７８℃に冷却したジクロロメタン（２００ｍｌ）に加え、その後、塩化オキサリル（９．８０ｍｌ，１１３．５ミリモル）を加えた。１０分後、ジクロロメタン（５４ｍｌ）中の中間体８（１６．２ｇ，５６．７９ミリモル）を一滴ずつ加え、２０分間撹拌した。トリエチルアミン（３２ｍｌ）を加え、１時間撹拌した。反応混合物の反応を水で止め、ジクロロメタンで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して黄色の固形物として表題の化合物を得た（８．２ｇ、５１％）。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：８．２６（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７９（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄｔ，Ｊ＝８．０，０．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｍ，１Ｈ），７．１５（ｍ，１Ｈ），７．０１（ｍ，２Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ）
【０１３０】
【化１２】
2015522009.tif 000013
【０１３１】
中間体１０：（Ｓ）−３−（３−フルオロフェニル）−２−（１−ヒドロキシエチル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
ＴＨＦ（２ｍｌ）中の中間体８（１．００ｇ，３．５３ミリモル）に、Ｒ−アルパインボラン（ＴＨＦ中０．５Ｍ，１０ｍｌ）を加え、６０℃に２０時間加熱した。２ＮのＨＣｌ水溶液で反応混合物の反応を止め、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（０．４００ｇ、４０％）。キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように速く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：８．７１分）エナンチオマー過剰：９４．８％。
【０１３２】
中間体１１
中間体１１：４−ブロモ−２−フルオロ−１−イソプロポキシベンゼン
４−ブロモ−２−フルオロフェノール（１０ｇ，５２．３５ミリモル）のＴＨＦ（１００ｍｌ）溶液に、イソプロピルアルコール（４．８ｍｌ，６２．６２ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（２０．６ｇ，７８．５２ミリモル）を加え、４５℃に加熱し、その後、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（１５．４ｍｌ，７８.５２ミリモル）を加えた。混合物を１時間還流し、濃縮し、残留物を酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって精製して無色の液体として表題の化合物を得（１３．１ｇ、９９％）、精製することなく次の工程で使用した。
【０１３３】
中間体１２
中間体１２：２−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン
酢酸カリウム（１０．５２ｇ，１０７．２ミリモル）とビス（ピナコラト）ジボロン（１５ｇ，５８．９６ミリモル）を中間体１１（１０．５２ｇ，１０７．２ミリモル）のジオキサン（１２５ｍｌ）溶液に加え、溶液を３０分間脱気した。窒素雰囲気下でビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）．ＣＨ２Ｃｌ２（４．４ｇ，５．３６ミリモル）を加え、８０℃に加熱した。１２時間後、セライトを介して反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物を酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって精製して黄色の油として表題の化合物を得（１３．９ｇ、９９％）、精製することなく次の工程で使用した。
【０１３４】
中間体１３
中間体１３：３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−アミン
３−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−アミン（１１．０ｇ，４２．１４ミリモル）のＤＭＦ（１１０ｍｌ）、エタノール（５５ｍｌ）及び水（５５ｍｌ）溶液に中間体１２（２３．４ｇ，８４．２８ミリモル）及び炭酸ナトリウム（１３．３ｇ，１２６．４２ミリモル）を加え、３０分間脱気した。窒素雰囲気下でテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２．４ｇ，２．１０ミリモル）を加え、８０℃に加熱した。１２時間後、セライトを介して反応混合物を濾過し、濃縮し、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗生成物をジエチルエーテルで粉砕し、濾過し、真空下で乾燥させて淡褐色の固形物として表題の化合物を得（３．２ｇ、２６％収率）、そのまま次の工程で使用した。
【０１３５】
［実施例Ａ］
２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
【０１３６】
表題の化合物は、国際公開番号ＷＯ２０１１／０５５２１５の実施例１５８に記載されたように調製する。
【０１３７】
＜実施例Ａ１＞
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
【０１３８】
中間体１３（３．３５ｇ，１１．６０ミリモル）のＴＨＦ（２．０ｍｌ）溶液に、中間体７（３．００ｇ，１０．５５ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（５．５７ｇ，１５．８２ミリモル）を加え、ＲＴで５分間撹拌した。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（３．２ｍｌ，１５．８２ミリモル）を加え、４５℃に加熱した。２時間後、反応混合物の反応を水で止め、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（２．７９ｇ、４８％）。ＭＰ：２００〜２０３℃、質量：５５４．３（Ｍ＋＋１）。キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように速く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１２．６３分）エナンチオマー過剰：９４．０％
【０１３９】
＜実施例Ａ２＞
方法１
（Ｒ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
【０１４０】
中間体１３（０．０３９ｇ，０．１４３ミリモル）にエタノール中の水酸化セシウム（０．０１３ｇ，０．０７４ミリモル）を加え、３０分間還流した。溶媒を濃縮し、残留物をＤＭＦ（０．５ｍｌ）に溶解した。中間体７ａ（０．０５０ｇ，０．１４３ミリモル）を加え。室温で４時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。メタノール：ジクロロメタンによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（０．０２５ｇ、２３１％）。ＭＰ：２０５〜２０７℃、質量：５５４．３（Ｍ＋＋１）。キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように遅く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１４．７７分）エナンチオマー過剰：７４．０％
【０１４１】
方法２
（Ｒ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
【０１４２】
中間体１３（０．１４３ｇ，０．５２７ミリモル）のＴＨＦ（７．５ｍｌ）溶液に、中間体１０（０．１５０ｇ，０．５２７ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（０．２００ｇ，０．７９１ミリモル）を加え、ＲＴで５分間撹拌した。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．１５ｍｌ，０．７９１ミリモル）を加え、４５℃に加熱した。３時間後、反応混合物の反応を水で止め、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（０．０３５ｇ、１２％）。ＭＰ：２０４〜２０６℃、質量：５５４．３（Ｍ＋＋１）。キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように遅く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１４．７７分）エナンチオマー過剰：９８．８％
【０１４３】
［実施例Ｂ］
２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
【０１４４】
中間体１３（０．０８０ｇ，０．２９３ミリモル）のＤＭＦ（２ｍｌ）溶液に、炭酸カルシウム（０．０８１ｇ，０．５８７ミリモル）を加え、ＲＴで１０分間撹拌した。この混合物に中間体２−（１−ブロモエチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（０．２１５ｇ，０．５８７ミリモル）を加え、１２時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。メタノール：ジクロロメタンによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して浅黄色の固形物として表題の化合物を得た（０．０４５ｇ、２７０％）。ＭＰ：１７５〜１７７℃。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＤＭＳＯ−Ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ８．２０（ｓ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，Ｊ＝８．１，３．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４８−７．３３（ｍ，５Ｈ），７．１４（ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｍ，２Ｈ），６．９０（ｍ，１Ｈ），６．１０（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），４．６４（五重線，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），１．９９（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．４２（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，６Ｈ）
【０１４５】
＜実施例Ｂ１＞
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
【０１４６】
中間体１３（０．１３４ｇ，０．４９４ミリモル）のＴＨＦ（２．０ｍｌ）溶液に、中間体５（０．１５０ｇ，０．４９４ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（０．１９４ｇ，０．７４１ｍｍｌ）を加え、ＲＴで５分間撹拌した。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．１５ｍｌ，０．７４９ミリモル）を加え、４５℃に加熱した。２時間後、反応混合物の反応を水で止め、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（０．０４９ｇ、２０％）。ＭＰ：１３９〜１４２℃、質量：５７１．７（Ｍ＋）。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：８．２４（ｓ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，Ｊ＝８．２，３．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５０−７．２９（ｍ，５Ｈ），７．１４（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｍ，２Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．１１（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），５．４０（ｓ，２Ｈ），４．６６（五重線，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），２．００（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．４２（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，６Ｈ）．キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように速く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１０．６４分）エナンチオマー過剰：８９．８％
【０１４７】
＜実施例Ｂ２＞
（Ｒ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン
【０１４８】
中間体１３（０．２８４ｇ，０．９８９ミリモル）のＴＨＦ（５．０ｍｌ）溶液に、中間体３（０．２５０ｇ，０．８２４ミリモル）及びトリス（４−メトキシ）フェニルホスフィン（０．４３５ｇ，１．２３ｍｍｌ）を加え、ＲＴで５分間撹拌した。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．２５ｍｌ，１．２３ミリモル）を加え、室温で撹拌した。１２時間後、反応混合物の反応を水で止め、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：石油エーテルによるカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して白っぽい固形物として表題の化合物を得た（０．１０５ｇ、２２％）。ＭＰ：１４５〜１４８℃、質量：５７１．７（Ｍ＋）。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：８．２３（ｓ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，Ｊ＝８．１，３．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５０−７．２９（ｍ，５Ｈ），７．１４（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｍ，２Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．１０（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），４．６４（五重線，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），１．９９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．４２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ）．キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように遅く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１４．８３分）エナンチオマー過剰：９５．４％
【０１４９】
＜化合物Ｂ１の４−メチルベンゼンスルホン酸塩＞
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  ４−メチルベンゼンスルホン酸塩
【０１５０】
【化１３】
2015522009.tif 000014
【０１５１】
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  ４−メチルベンゼンスルホン酸塩
イソプロパノール（６００ｍｌ）中の（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（２２．７ｇ，３９．６９ミリモル）に、ｐ−トルエンスルホン酸（８．３０ｇ，４３．６６ミリモル）を加え、１時間還流した。反応混合物を濃縮し、石油エーテルで共蒸留し、乾燥させた。残留物に水（３００ｍｌ）を加え、３０分間撹拌した。固形物を濾別し、石油エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて白っぽい固形物として表題の化合物を得た（２８．２ｇ、９５％）。ＭＰ：１３８〜１４１℃。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：８．１１（ｓ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，Ｊ＝８．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５１（ｄｄ，Ｊ＝９．３，４．３Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｄｄ，Ｊ＝７．５，３．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４２−７．３１（ｍ，３Ｈ），７．２９（ｍ，２Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．１６（ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄｔ，Ｊ＝８．５，２．５Ｈｚ，１Ｈ），６．９７（ｂｒｓ，１Ｈ），６．８８（ｂｒｓ，１Ｈ），６．１１（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６７（五重線，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），２．０３（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．４３（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ）．質量：５７２．４（Ｍ＋＋１−ＰＴＳＡ）．キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように速く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１２．３５分）エナンチオマー過剰：９３．４％
【０１５２】
＜化合物Ｂ１の硫酸塩＞
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  硫酸塩
【０１５３】
【化１４】
2015522009.tif 000015
【０１５４】
（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン  硫酸塩
イソプロパノール（６００ｍｌ）中の（Ｓ）−２−（１−（４−アミノ−３−（３−フルオロ−４−イソプロポキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）エチル）−６−フルオロ−３−（３−フルオロフェニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン（１５．０ｇ，２６．２４ミリモル）を０℃に冷却した。これに硫酸（２．８３ｇ，２８．８６ミリモル）を加え、室温で２４時間撹拌した。反応物を濾別し、石油エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させた。固形物に水（１５０ｍｌ）を加え、３０分間撹拌した。固形物を濾別し、石油エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて白っぽい固形物として表題の化合物を得た（１３．５ｇ、７６％）。ＭＰ：１２５〜１２７℃。１Ｈ−ＮＭＲ（δｐｐｍ，ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：８．１１（ｓ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，Ｊ＝８．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄｄ，Ｊ＝９．２，４．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４５−７．３１（ｍ，３Ｈ），７．２９（ｍ，１Ｈ），７．１５（ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄｔ，Ｊ＝８．５，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｂｒｓ，１Ｈ），６．８８（ｂｒｓ，１Ｈ），６．０９（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），４．６７６（五重線，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），２．０１（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．４２（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，６Ｈ）．質量：５７２．２（Ｍ＋＋１−Ｈ２ＳＯ４）．キラルパックＡＤ−Ｈカラム上でのＨＰＬＣによって測定したように速く溶出する異性体で濃縮した（保持時間：１２．０８分）エナンチオマー過剰：８９．６％
【０１５５】
化合物Ｂ１の種々の他の酸付加塩は表１で提供されるように調製した。
【０１５６】
【表１】
2015522009.tif 000016
【０１５７】
［代謝安定性］
マウス、ラット及びヒトの肝臓ミクロソームを用いて代謝安定性試験を実施した。マウス、ラット及びヒトの肝臓ミクロソーム（すべて米国ＢＤ  Ｇｅｎｔｅｓｔから）による試験のプロトコールを以下に提供する。手短には、リン酸緩衝液（ｐＨ約７．４）にて２ｍＭのＮＡＤＰＨ（補因子）と共に０．４ｍｇのタンパク質を３７℃で１５分間予備インキュベートし、次いで１μＭの試験項目を加え、３つ組にてさらに６０分間インキュベートした。内部標準を含有するメタノールで反応の混合を終了させ、さらに遠心して上清にに残っている試験項目をＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。０分で終了させた類似の試料と比較して残っている親化合物の比率を算出した。結果を以下の表に提供する。
【０１５８】
驚くべきことに以下のデータは、本発明の化合物Ａ１がそのエナンチオマーＡ２及びラセミ化合物Ａよりも、ヒトの肝臓ミクロソームにて有意に大きな代謝安定性を有することを示している。たとえば、実施例Ａ１の化合物は、実施例Ａ２の化合物よりもヒトの肝臓ミクロソームにてほぼ５倍大きな代謝安定性を有する。その高い代謝安定性のために、現在請求されている化合物は優れた薬物動態特性を有する。
【０１５９】
【表２】
2015522009.tif 000017
【０１６０】
同様に、驚くべきことに以下のデータは、本発明の化合物Ｂ１がそのエナンチオマーＢ２及びラセミ化合物Ｂよりも、ヒトの肝臓ミクロソームにて有意に大きな代謝安定性を有することを示している。たとえば、実施例Ｂ１の化合物は、実施例Ｂ２の化合物よりもヒトの肝臓ミクロソームにてほぼ３倍大きな代謝安定性を有する。その高い代謝安定性のために、現在請求されている化合物は優れた薬物動態特性を有する。
【０１６１】
【表３】
2015522009.tif 000018
【０１６２】
［薬物動態］
化合物Ｂ１（塩基を含まない）及びそのＰＴＳＡ塩の経口による生体利用効率をラットにて評価した。ラットにおける薬物動態試験のプロトコールを以下に提供する。
【０１６３】
動物はすべて投与の前一晩（１２時間）絶食させ、試験項目の投与の４時間後まで継続した。試験項目の製剤は１％Ｔｗｅｅｎ８０及び９９％培地（０．５％メチルセルロース、４０００ｃＰｓ、ｐＨ２．２）にて調製した。血液試料（各動物から１５０μｌ）を眼窩静脈叢から採取し、抗凝固剤としてＥＤＴＡ二ナトリウムを含有する微量遠心管に入れた。血液試料を直ちに１０００ｇの速度で４℃にて１０分間遠心し、分離した血漿試料を分析まで−８０℃未満で凍結した。製剤すべてにおける試験項目の濃度はＨＰＬＣで分析した。試料すべてにおける試験項目の血漿濃度はＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。薬物動態パラメータ、すなわち、Ｃｍａｘ、ＡＵＣ０−ｔ、Ｔｍａｘ及びｔ１／２はＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウエアを用いて概算した。
【０１６４】
実施例Ｂ１の化合物のＰＴＳＡ塩は、塩基を含まない化合物Ｂ１の約２倍のＣｍａｘ及びほぼ３倍の曲線下面積（ＡＵＣ）を示した。
【０１６５】
同様に、化合物Ｂ１（塩基を含まない）及びそのＰＴＳＡ塩の経口による生体利用効率をイヌにて評価した。実施例Ｂ１の化合物のＰＴＳＡ塩は、塩基を含まない化合物Ｂ１の約２倍超えるＣｍａｘ及び約４倍の曲線下面積（ＡＵＣ）を示した。
【０１６６】
［生物学的アッセイ］
＜アッセイ１：ＰＩ３Ｋ酵素活性の蛍光測定＞
均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）アッセイは、α、β、γ又はδのようなＰＩ３Ｋアイソフォームによるホスファチジルイノシトール４,５−ビホスフェート（ＰＩＰ２）のリン酸化の結果形成される３,４,５−トリホスフェート（ＰＩＰ３）の検出を可能にする。
【０１６７】
改変を伴うＰＩ３ＫヒトＨＴＲＦ（商標）アッセイキット（マサチューセッツ州、ビレリカのＭｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて、α、β、γ又はδのＰＩ３Ｋアイソフォームの活性を測定した。インキュベートはすべて室温で行った。手短には、酵素と共に又は酵素を含まずに１４．５μｌの１×反応緩衝液／ＰＩＰ２（１０ｍＭのＭｇＣｌ２，５ｍＭのＤＴＴ，１．３８μＭのＰＩＰ２）ミックスを含有する３８４穴の黒色プレート（ノースカロライナ州、モンローのＧｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ）の各ウェルに０．５μｌの４０×阻害剤（１００％ＤＭＳＯ中）又は１００％ＤＭＳＯを加え、１０分間インキュベートした。当初のインキュベートの後、５μｌ／ウェルの４００μＭのＡＴＰを加え、さらに３０分間インキュベートした。５μｌ／ウェルの停止溶液（マサチューセッツ州、ビレリカのＭｉｌｌｉｐｏｒｅ）を加えることによって反応を終了した。次いで５μｌの検出ミックス（マサチューセッツ州、ビレリカのＭｉｌｌｉｐｏｒｅ）を各ウェルに加え、暗所で６〜１８時間インキュベートした。３３７ｎｍの励起波長及び６６５と６２０ｎｍの放射波長にて４００μ秒の積分時間でマイクロプレートリーダー（ドイツ、ＢＭＧ  Ｌａｂｔｅｃｈ）によりＨＲＴＦ比を測定した。
【０１６８】
結果を以下に示す。
【０１６９】
【表４】
2015522009.tif 000019
【０１７０】
【表５】
2015522009.tif 000020
【０１７１】
【表６】
2015522009.tif 000021
【０１７２】
【表７】
2015522009.tif 000022
【０１７３】
＜アッセイ２：白血病細胞株における試験管内の細胞増殖アッセイ＞
１０％ＦＢＳを補完した培地を用いて増殖阻害アッセイを実施した。９６穴プレートに５０００〜２０，０００個／ウェルの濃度で細胞を播いた。２４時間後、０．０１〜１００００ｎＭの範囲での濃度で試験化合物を加えた。０時間（試験化合物の添加前）及び試験化合物の添加の４８時間後に臭化３−［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウム（ＭＴＴ）色素減少試験を用いて増殖を評価した。Ｆｌｕｏｓｔａｒ  Ｏｐｔｉｍａ（ドイツ、ＢＭＧ  Ｌａｂｔｅｃｈ）にて４５０ｎｍの波長で吸光度を読み取った。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いてデータを解析し、それに応じて、対照と比較した試験化合物による阻害比率を算出した。
【０１７４】
結果：細胞の生存率には用量にやや依存した低下が認められた一方で、化合物は７２時間のインキュベート時間にわたって明らかな細胞傷害性を示さなかった。
【０１７５】
＜アッセイ３：白血病細胞株におけるＡＫＴのリン酸化の阻害＞
白血病細胞株におけるＡＫＴリン酸化の阻害：ＴＨＰ−１、ＨＬ−６０、ＭＯＬＴ−４、ＲＰＭＩ−８２２６又はＤＬＢＣＬ細胞を所望の濃度の化合物と共に４８時間インキュベートした。細胞を溶解し、ウエスタンブロットによってｐＡＫＴを決定した。ＩｍａｇｅＪ用いてバンドを定量し、アクチンに対して基準化した。
【０１７６】
結果：１μＭで調べた場合、化合物Ａ１及び化合物Ｂ１は５０〜９０％の阻害を示した。
【０１７７】
＜アッセイ４：ヒト全血由来の好塩基球におけるＰＩ３Ｋδのシグナル伝達の阻害＞
抗ＦｃεＲ１が誘導するＣＤ６３の発現の変化によって現れるＰＩ３Ｋδのシグナル伝達は、Ｆｌｏｗ２ＣＡＳＴ（登録商標）キット（スイス、Ｂｕｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を用いて決定される有用な薬物動態マーカーである。手短には、それには以下の工程が関与する：
・静脈穿刺管を数回反転することによって凝固を阻止した血液試料を混合する。
・フローサイトメトリー測定に好適な新しい及び発熱物質を含まない３．５ｍｌのポリプロピレン管又はポリスチレン管を用意する。
・各管に４９μｌの患者の全血を加える。
・割り当てた管に１μｌの１０％ＤＭＳＯ（背景）又は化合物（１０％ＤＭＳＯ）を加え、穏やかに混合する。室温で１５分間インキュベートする。
・各管に５０μｌの刺激緩衝液（背景）又は抗ＦｃεＲ１Ａｂをピペットで入れる。
・各管に１００μｌの刺激緩衝液を加える。
・穏やかに混合する。各管に２０μｌの染色試薬（ＦＩＴＣ−ＣＤ６３とＰＥ−ＣＣＲ３の１：１ミックス）を加える。
・穏やかに混合する。管を覆い、水槽で３７℃にて１５分間インキュベートする（十分な熱移動ではないためにインキュベータの使用は約１０分長いインキュベート時間を要する）。
・各管に２ｍｌの事前に温めた（１８〜２８℃）溶解試薬を加え、穏やかに混合する。
・１８〜２８℃にて５〜１０分間インキュベートする。
・管を５００×ｇにて５分間遠心する。
・ブロット紙用いて上清を捨てる。
・３００〜８００μｌの洗浄緩衝液で細胞ペレットを再浮遊させる。
・同一日に穏やかにボルテックスし、フローサイトメータにてデータを取得する。
・ゲートをかけた好塩基球集団の中でＣＤ６３陽性細胞の比率を様々な治療群にて決定し、溶媒対照に対して基準化すべきである。
【０１７８】
結果：化合物Ａ１及び化合物Ｂ１はそれぞれ≦１００ｎＭのＥＤ５０にてヒト全血の好塩基球において抗ＦｃεＲ１が介在するＣＤ６３の発現を阻害した。
【０１７９】
アッセイ４ａ：ＰＩ３Ｋδ、α、β又はγアイソフォームの阻害に向けた細胞に基づく化合物の特異性
ＰＩ３Ｋδに向けた化合物の特異性をＩｇＭ誘導のＢ細胞増殖アッセイにて測定した。健常対象の血液から単離したＢ細胞を９６穴組織培養プレートに播き、所望の濃度の化合物と共に３０分間インキュベートした。５μｇ／ｍｌの精製したヤギ抗ヒトＩｇＭによって細胞を刺激した。臭化３−［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウム（ＭＴＴ）色素減少試験を用いて増殖を評価した。ＰＩ３Ｋα、β又はγアイソフォームに対する選択性については、ＮＩＨ−３Ｔ３又はＲＡＷマクロファージを６穴組織培養プレートに播き、一晩インキュベートした。翌日、完全培地を無血清培地で置き換え、所望の濃度の化合物を加えた。１５分後、２０ｎｇ／ｍｌのＰＤＧＦ、５μＭのＬＰＡ又は５０ｎｇ／ｍｌのｃ５ａを加え、さらに１０分間インキュベートした。細胞を溶解し、ウエスタンブロットによってＡＫＴのリン酸化を測定した。バンドの強度はＩｍａｇｅＪ１．４２ｑ（米国、ＮＩＨ）を用いて決定し、アクチン（負荷対照）に対して基準化した。
【０１８０】
【表８】
2015522009.tif 000023
【０１８１】
＜アッセイ５：白血病細胞株におけるアポトーシスの阻害＞
白血病細胞におけるアポトーシスは、以下で概説するように、原位置カスパーゼ３キット（米国、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて測定した。
・６穴プレートに１×１０６個／ウェルの密度で白血病細胞を播く。
・所望の濃度での試験化合物／ＤＭＳＯを加える。
・５％ＣＯ２インキュベータにて３７℃で２４時間、プレートをインキュベートする。
・２ｍｌの遠心管に細胞を回収する。
・１．６μｌの新しく調製した５×ＦＬＩＣＡ試薬を加え、管を軽くはじくことによって細胞を混合する。
・５％ＣＯ２のもとで３７℃にて１時間、管をインキュベートする。
・各管に２ｍｌの１×洗浄緩衝液を加え、混合する。
・室温にて＜４００×ｇで５分間、細胞を遠心する。
・慎重に上清を取り除き、捨て、細胞ペレットを穏やかにボルテックスして細胞と細胞の塊を壊す。
・３００μｌの1×洗浄緩衝液に細胞ペレットを再浮遊させる。
・黒色マイクロタイタープレートの２つのウェルのそれぞれに１００μｌの各細胞浮遊液を入れる。泡を創るのを避ける。
・４９０ｎｍの励起波長と５２０ｎｍの放射波長を用いて各マイクロウェルの吸光度を読み取る。
・対照のブランクと比べた蛍光の上昇によって現れるカスパーゼ３活性の上昇比率を算出すべきである。
【０１８２】
結果：化合物Ａ１及び化合物Ｂ１は調べた細胞株にて用量依存性にカスパーゼ３の活性を誘導した。
【０１８３】
＜アッセイ６：ヒトの初代白血病細胞における抗癌活性のスクリーニング＞
【０１８４】
６−Ｉ：アネキシンＶ及び７−ＡＡＤ染色を用いた化合物処理の際のＡＭＬ患者の骨髄白血病細胞におけるアポトーシス誘導のフローサイトメトリー解析
Ｆｉｃｏｌｌ法によって単核細胞を抽出し、プレートに播いた。フローサイトメトリーで解析する前に、細胞を種々の化合物で４８時間処理した。ＰＢＳで洗浄した後、１×１０５個の細胞をアネキシンＶ及び７−ＡＡＤによって染色した。アネキシンＶの陽性染色は、早期及び後期のアポトーシス細胞を含むアポトーシス細胞全体を測定する。アネキシンＶ陽性の細胞について７−ＡＤＤ陰性のシグナルは初期アポトーシス細胞を反映する。
【０１８５】
６−ＩＩ：ｐＡＫＴのＥＬＩＳＡキットを用いたＡＭＬ患者の骨髄試料のｐＡＫＴの解析
Ｆｉｃｏｌｌ法によって単核細胞を抽出し、プレートに播いた。細胞を種々の化合物で４８時間処理した後、製品プロトコールに従ってｐＡＫＴのＥＬＩＳＡキットによって細胞を解析した。手短には、１×１０６個の細胞をＥＬＩＳＡキットのウェルに移し、１０μｌの５×細胞溶解ミックス（ホスホ−ＡＫＴ  １／２／３（Ｓｅｒ４７３）ＩｎｓｔａｎｔＯｎｅ（商標）ＥＬＩＳＡキット，ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，８５−８６０４２）によって溶解した。次いでマイクロプレート振盪器（約３００ｒｐｍ）上で室温にて１時間、５０μｌの抗体カクテルと共に細胞をインキュベートした。検出試薬とのインキュベートの後、４５０ｎｍに設定したＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ  Ｐｌｕｓマイクロプレート分光光度計を用いて結果を測定した。
【０１８６】
６−ＩＩＩ：ＭＴＳアッセイを用いたＡＭＬ患者の骨髄試料の細胞増殖解析
Ｆｉｃｏｌｌ法によって単核細胞を抽出し、プレートに播いた。細胞を種々の化合物で４８時間又は７２時間処理した後、製品プロトコールに従ってＭＴＳアッセイによって解析した。手短には、１００μｌの細胞浮遊液を含有する各ウェルに２０μｌのＭＴＳ溶液を加え、その後、５％ＣＯ２の存在下で３７℃９５％湿度にて４時間インキュベートした。ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ  Ｐｌｕｓマイクロプレート分光光度計を用いて４９０ｎｍの吸光度（Ａ４９０）を読み取った。
【０１８７】
結果：化合物Ａ１及び化合物Ｂ１による処理は、アポトーシス細胞の数の増加と共に、増殖及びＡＫＴリン酸化の低下を用量依存性で生じた。
【０１８８】
【表９】
2015522009.tif 000024
【０１８９】
＜アッセイ６ａ：ヒト多発性骨髄腫細胞における抗癌活性のスクリーニング＞
ステージＩＩのＩｇＧκ及びステージＩＩＩのＩｇＧλ拘束性の疾患であると新しく診断された２人の患者から試料を採取した。このスクリーニングは、ＭＴＴアッセイで決定された用量及び時間を用いてアポトーシスを誘導することによって行った。１〜５×１０５個の細胞を遠心によって回収した。５００μｌの１×結合緩衝液に細胞を再浮遊させた。５μｌのアネキシンＶ／ＦＩＴＣ及び５μｌのヨウ化プロピジウムを加えた。暗所にて室温で細胞を５分間インキュベートした。
【０１９０】
フローサイトメトリーによる定量：ＦＩＴＣシグナル検出器（普通、ＦＬ１）及びフィコエリスリン放射シグナル検出器（普通、ＦＬ２）を用いたＰＩ染色を用いたフローサイトメトリー（Ｅｘ＝４８８ｎｍ、Ｅｍ＝５３０ｎｍ）によってアネキシンＶ／ＦＩＴＣの結合を解析した。結果を以下及び図１に示す。
【０１９１】
【表１０】
2015522009.tif 000025
【０１９２】
＜アッセイ７：種々の白血病細胞株における抗癌活性のスクリーニング＞
種々の適応を代表する不死化白血病細胞の増殖をＭＴＴ（臭化３−［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウム）アッセイによって測定した。その倍化時間に基づいて様々な時間（７２〜９６時間）、化合物Ｂ１と共に細胞をインキュベートした。
【０１９３】
【表１１】
2015522009.tif 000026
【０１９４】
結果：全体的に見て、Ｂ細胞株、Ｔ細胞株、及び単球株の大半についての５０％増殖阻害は、０．５〜７．５μＭの濃度での化合物Ｂ１で達成された。データは、細胞種に基づく種々の可能性にもかかわらず白血病細胞の増殖を阻害する化合物Ｂ１の能力を実証した。
【０１９５】
＜アッセイ８：ヒトのＣＬＬ細胞における抗癌活性のスクリーニング＞
連続希釈の試験化合物（化合物Ｂ１）と共に初代ＣＬＬ細胞を４８時間インキュベートし、フローサイトメトリーによって測定される活性化カスパーゼ３及び７−ＡＡＤによってアポトーシスについて調べた。７２時間のインキュベートの後、比色ＭＴＳ試薬を用いて細胞傷害性について細胞を評価した。試験化合物との１時間のインキュベートの後、及び抗ＩｇＭ又は抗ＩｇＤとの１０分間のインキュベートの後、フローサイトメトリーによってリン酸化Ａｋｔ（Ｓ４７３）を測定した。Ａｋｔのリン酸化は中央値蛍光強度（ＭＦＩ）によって定量した。実験に使用した７人のＣＬＬ患者試料のうち、５つは変異したＩＧＨＶを有し、５つは蛍光原位置ハイブリッド形成によって測定された１３ｑ欠失又は正常な細胞遺伝学を有し、３つはＺＡＰ−７０陰性であり、７つはＣＤ３８陰性だった。ＩｇＭ発現は１３％〜９０％の間に及んだが、ＩｇＤ発現は均一に上昇した。試験化合物は、０．１〜２５．６μＭの間の濃度にて用量依存性にアポトーシス（カスパーゼ３＋／７−ＡＡＤ＋）及び細胞傷害性を十分に誘導した。抗表面免疫グロブリンとのインキュベートは培地のみに比べてＡｋｔのリン酸化を有意に誘導した一方で、試験化合物の添加はこの効果を取り消し、Ａｋｔのリン酸化をベースラインに戻した。
【０１９６】
結果：試験化合物は、ｐＡＫＴの阻害を介してＣＬＬ細胞にて細胞傷害性及びアポトーシスを誘導する。結果を図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃに示す。
【０１９７】
特定の実施形態を参照して本明細書の本発明を記載してきたが、これらの実施形態は、本発明の原理及び応用を説明するのに単に役立つにすぎないことが理解されるべきである。従って、説明に役立つ実施形態に対して多数の改変が為されてもよく、上記で記載されたような本発明の精神と範囲から逸脱することなく他の配置が考案されてもよいことが理解されるべきである。添付の特許請求の範囲は本発明の範囲を定義し、それによってこれらの本発明の範囲の範囲内での方法及び構造及びそれらの同等物が網羅されることが意図される。
【０１９８】
本出願にて引用された出版物、特許及び特許出願はすべて、個々の出版物、特許及び特許出願が具体的に且つ個々に参照によって本明細書に組み入れられるように指示されるような同じ程度に参照によって本明細書に組み入れられる。
【図１】
2015522009.tif 000027
【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【国際調査報告】
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