(57)【要約】本出願は、Ｂｔｋを阻害する、一般式Ｉ（式中、全ての変数は、本明細書に記載のように定義される）に記載の化合物を開示する。本明細書に開示される化合物は、Ｂｔｋの活性を調節し、かつ過剰なＢｔｋ活性に関連する疾患を処理するために有用である。当該化合物は、さらに、関節リウマチのような異常なＢ細胞の増殖に関連する炎症性及び自己免疫性疾患を処置するために有用である。また、式Ｉの化合物と少なくとも１つの担体、希釈剤又は賦形剤とを含有する組成物も開示する。
2015531781.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化４５】
2015531781.tif 000054
［式中、
---は、単結合又は二重結合のいずれかであり；
Ｘは、ＣＨ、ＣＨ２又はＮのいずれかであり；
Ｒは、Ｈ、−Ｒ１、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３、−Ｒ１−Ｒ３、又は−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１は、アリール、ヘテロアリール、二環式ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルであり、その各々は、１つ又は複数の低級アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシ低級アルキル、低級アルコキシ、ハロ、ニトロ、アミノ、アミド、シアノ、オキソ又は低級ハロアルキルで場合により置換されており；
Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２’、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ、−Ｃ（Ｒ２’）２、−Ｏ、−Ｓ、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ２’、又は−Ｓ（＝Ｏ）２であり；
各Ｒ２’は、独立して、Ｈ又は低級アルキルであり；
Ｒ３は、Ｈ又はＲ４であり；
Ｒ４は、低級アルキル、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、アミノ、低級アルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ、アリール、アリールアルキル、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、アルキルシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アルキルヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、二環式シクロアルキル、二環式ヘテロシクロアルキル、スピロシクロアルキル、スピロヘテロシクロアルキル又は二環式スピロヘテロシクロアルキルであり、その各々は、１つ又は複数の低級アルキル、ハロ、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ、ヒドロキシ、ヒドロキシ低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルカノイル、ハロ、ニトロ、アミノ、アミド、アシル、シアノ、オキソ、スルホニル、低級アルキルスルホニル、グアニジノ、ヒドロキシルアミノ、カルボキシ、カルバモイル、カルバメート、ハロ低級アルコキシ、ヘテロシクロアルキル又はハロ低級アルキルで場合により置換されており、ここで、２つの低級アルキル基は、一緒になって、環を形成してよく；
Ｙ４は、Ｙ４ａ、Ｙ４ｂ、Ｙ４ｃ、又はＹ４ｄであり；
Ｙ４ａは、Ｈ又はハロゲンであり；
Ｙ４ｂは、低級アルキルであり、これは、低級ハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及び低級アルコキシからなる群より選択される１つ又は複数の置換基で場合により置換されており；
Ｙ４ｃは、低級シクロアルキルであり、これは、低級アルキル、低級ハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及び低級アルコキシからなる群より選択される１つ又は複数の置換基で場合により置換されており；そして
Ｙ４ｄは、アミノであり、これは、１つ又は複数の低級アルキル、アルコキシ低級アルキル又はヒドロキシ低級アルキルで場合により置換されている］
で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２】
---が、二重結合であり、そして、Ｘが、Ｎである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
---が、単結合であり、そして、Ｘが、ＣＨ２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｓ（＝Ｏ）２であり、
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、低級アルキルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（ＣＨ３）２であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、１つ又は複数の低級アルキルで場合により置換されている、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ又はヘテロシクロアルキルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、フェニル又はピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（＝Ｏ）であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、１つ又は複数の低級アルキルで場合により置換されている、モルホリン又はピペラジンである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｙ４が、tert−ブチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項８】
---が、二重結合であり、Ｘが、ＣＨであり、そして
Ｙ４が、
【化４６】
2015531781.tif 000055
［式中、Ｙ５及びＹ６は、独立して、Ｈ、低級アルキル又は低級ハロアルキルである］
である、請求項３に記載の化合物。
【請求項９】
Ｙ４が、
【化４７】
2015531781.tif 000056
［式中、Ｙ５は、Ｈ、ハロゲン、低級アルキル又は低級ハロアルキルである］
である、請求項２に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙ４が、
【化４８】
2015531781.tif 000057
［式中、Ｙ５及びＹ６は、独立して、Ｈ又は低級アルキルである］
である、請求項２に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジル又はピラゾロピラジンであり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、場合により置換されている低級アルキル、ヘテロシクロアルキル又はアルキルヘテロシクロアルキルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（ＣＨ３）２であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、１つ又は複数の低級アルキルで場合により置換されている、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ又はヘテロシクロアルキルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（＝Ｏ）であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、場合により置換されているヘテロシクロアルキル又は二環式スピロヘテロシクロアルキルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ４が、場合により置換されているモルホリン又はピペラジンである、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
以下：
２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
２−｛３−［５−（５−アゼチジン−１−イルメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−２−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
２−（２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル；
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（５−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−２−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−｛３−［５−（１’−エチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（モルホリン−４−カルボニル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
２−［２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル；
６−tert−ブチル−２−［２−ヒドロキシメチル−３−（５−｛５−［２−（３−ヒドロキシ−プロピルアミノ）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−オキセタン−３−イル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−［３−（５−｛５−［２−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−２−ヒドロキシメチル−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン；及び
２−（２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル
からなる群より選択される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
炎症性及び／又は自己免疫性病態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１７】
炎症性病態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１８】
関節リウマチを処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１９】
喘息を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項２０】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物を少なくとも１つの薬学的に許容しうる担体、賦形剤又は希釈剤と混合して含む、医薬組成物。
【請求項２１】
炎症性障害又は自己免疫性障害の処置のための医薬の製造における、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２２】
そのような障害が、関節リウマチ又は喘息である、請求項２１に記載の化合物の使用。
【請求項２３】
炎症性又は自己免疫性障害の処置のための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２４】
そのような障害が、関節リウマチ又は喘息である、請求項２３に記載の化合物の使用。
【請求項２５】
炎症性又は自己免疫性障害の処置において使用するための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
そのような障害が、関節リウマチ又は喘息である、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２７】
本明細書に記載される化合物、方法又は組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｂｔｋを阻害し、かつ異常なＢ細胞活性化によって引き起こされる自己免疫性及び炎症性疾患の処置に有用である、新規化合物の使用に関する。
【０００２】
プロテインキナーゼは、ヒトの酵素の最も大きなファミリーの１つを構成し、そして、リン酸基をタンパク質に付すことによって、多くの異なるシグナル伝達プロセスを調節する（T. Hunter, Cell 1987 50:823-829）。具体的には、チロシンキナーゼは、チロシン残基のフェノール部分でタンパク質をリン酸化する。チロシンキナーゼファミリーは、細胞の成長、移動及び分化を制御するメンバーを含む。異常なキナーゼ活性は、癌、自己免疫及び炎症性疾患を含む、様々なヒトの疾患に関与している。プロテインキナーゼは、細胞のシグナル伝達の重要な調節因子の１つであるので、これらは、小分子キナーゼ阻害剤で細胞機能を調節するためのターゲットを提供し、そのために良好な薬物設計ターゲットとなる。キナーゼ媒介疾患過程の処置に加えて、選択的かつ効果的なキナーゼ活性阻害剤もまた、細胞のシグナル伝達プロセスの調査及び治療上関心の高いその他の細胞ターゲットの同定に有用である。
【０００３】
Ｂ細胞が、自己免疫及び／又は炎症性疾患の病因において重要な役割を果たしているという確かな証拠がある。リツキサン（Rituxan）等のＢ細胞を枯渇させるタンパク質ベースの治療法は、関節リウマチ等の自己抗体によって生じる炎症性疾患に対して効果的である（Rastetter et al. Annu Rev Med 2004 55:477）。従って、Ｂ細胞活性化においてある役割を果たすプロテインキナーゼの阻害剤は、自己抗体産生等のＢ細胞媒介疾患病理に対する有用な治療法であるはずである。
【０００４】
Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）を介するシグナル伝達は、成熟した抗体産生細胞への増殖及び分化を含む、一定の範囲のＢ細胞応答を制御する。ＢＣＲは、Ｂ細胞活性に対する重要な調節点であり、そして、異常なシグナル伝達は、無秩序なＢ細胞の増殖及び病原性自己抗体の形成を引き起こし、多数の自己免疫及び／又は炎症性疾患を招く恐れがある。ブルトン型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）は、膜近位のＢＣＲのすぐ下流にある、非ＢＣＲ関連キナーゼである。Ｂｔｋの欠如は、ＢＣＲシグナル伝達を遮断することが知られており、従って、Ｂｔｋの阻害は、Ｂ細胞媒介疾患過程を遮断する有用な治療アプローチでありうる。
【０００５】
Ｂｔｋは、チロシンキナーゼのＴｅｃファミリーのメンバーであり、初期Ｂ細胞発生並びに成熟Ｂ細胞活性化及び生存の重要な調節因子であることが知られている（Khan et al. Immunity 1995 3:283; Ellmeier et al. J. Exp. Med. 2000 192:1611）。ヒトのＢｔｋの突然変異は、Ｘ連鎖無ガンマグロブリン血症（ＸＬＡ）状態を引き起こす（Rosen et al. New Eng. J. Med. 1995 333:431及びLindvall et al. Immunol. Rev. 2005 203:200に概説されている）。これらの患者は免疫不全状態であり、そして、Ｂ細胞の成熟障害、免疫グロブリン及び末梢Ｂ細胞レベルの減少、Ｔ細胞非依存性免疫応答の低下並びにＢＣＲ刺激後のカルシウム動員の減衰を示す。
【０００６】
自己免疫及び炎症性疾患にＢｔｋがある役割を果たしているという証拠が、Ｂｔｋ欠損マウスモデルによって提供された。全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の前臨床マウスモデルにおいて、Ｂｔｋ欠損マウスは、疾患進行の著しい改善を示す。さらに、Ｂｔｋ欠損マウスは、コラーゲン誘発関節炎に耐性を示す（Jansson and Holmdahl Clin. Exp. Immunol. 1993 94:459）。選択的Ｂｔｋ阻害剤は、マウスの関節炎モデルにおいて、用量依存的効果を示すことが実証された（Z. Pan et al., Chem. Med Chem. 2007 2:58-61）。
【０００７】
Ｂｔｋはまた、疾患過程に関与しうるＢ細胞以外の細胞によっても発現される。例えば、Ｂｔｋは、肥満細胞によって発現され、そして、Ｂｔｋ欠損骨髄由来の肥満細胞は、抗原誘発脱顆粒障害を示す（Iwaki et al. J. Biol. Chem. 2005 280:40261）。これは、Ｂｔｋがアレルギー及び喘息等の病的な肥満細胞応答を処置するために有用でありうることを示す。また、Ｂｔｋ活性が欠如したＸＬＡ患者由来の単球は、刺激後にＴＮＦα産生の低下を示す（Horwood et al. J Exp Med 197:1603, 2003）。従って、ＴＮＦα媒介炎症は、小分子Ｂｔｋ阻害剤によって調節されうる。また、Ｂｔｋは、アポトーシスにおいてある役割を果たすことが報告されており（Islam and Smith Immunol. Rev. 2000 178:49）、従って、Ｂｔｋ阻害剤は、ある種のＢ細胞リンパ腫及び白血病の処置に有用でありうる（Feldhahn et al. J. Exp. Med. 2005 201:1837）。
【０００８】
発明の概要
本出願は、本明細書において以下に記載される、式ＩのＢｔｋ阻害化合物、その使用方法を提供する。
【０００９】
本出願は、式Ｉ：
【化１】
2015531781.tif 000003
［式中、
---は、単結合又は二重結合のいずれかであり；
Ｘは、ＣＨ、ＣＨ２又はＮのいずれかであり；
Ｒは、Ｈ、−Ｒ１、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３、−Ｒ１−Ｒ３、又は−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１は、アリール、ヘテロアリール、二環式ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルであり、その各々は、１つ又は複数の低級アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシ低級アルキル、低級アルコキシ、ハロ、ニトロ、アミノ、アミド、シアノ、オキソ又は低級ハロアルキルで場合により置換されており；
Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２’、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ、−Ｃ（Ｒ２’）２、−Ｏ、−Ｓ、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ２’、又は−Ｓ（＝Ｏ）２であり；
各Ｒ２’は、独立して、Ｈ又は低級アルキルであり；
Ｒ３は、Ｈ又はＲ４であり；
Ｒ４は、低級アルキル、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、アミノ、低級アルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ、アリール、アリールアルキル、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、アルキルシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アルキルヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、二環式シクロアルキル、二環式ヘテロシクロアルキル、スピロシクロアルキル、スピロヘテロシクロアルキル又は二環式スピロヘテロシクロアルキルであり、その各々は、１つ又は複数の低級アルキル、ハロ、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ、ヒドロキシ、ヒドロキシ低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルカノイル、ハロ、ニトロ、アミノ、アミド、アシル、シアノ、オキソ、スルホニル、低級アルキルスルホニル、グアニジノ、ヒドロキシルアミノ、カルボキシ、カルバモイル、カルバメート、ハロ低級アルコキシ、ヘテロシクロアルキル又はハロ低級アルキルで場合により置換されており、ここで、２つの低級アルキル基は、一緒になって、環を形成してよく；
Ｙ４は、Ｙ４ａ、Ｙ４ｂ、Ｙ４ｃ、又はＹ４ｄであり；
Ｙ４ａは、Ｈ又はハロゲンであり；
Ｙ４ｂは、低級アルキルであり、これは、低級ハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及び低級アルコキシからなる群より選択される１つ又は複数の置換基で場合により置換されており；
Ｙ４ｃは、低級シクロアルキルであり、これは、低級アルキル、低級ハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及び低級アルコキシからなる群より選択される１つ又は複数の置換基で場合により置換されており；そして
Ｙ４ｄは、アミノであり、これは、１つ又は複数の低級アルキル、アルコキシ低級アルキル又はヒドロキシ低級アルキルで場合により置換されている］
で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩を提供する。
【００１０】
本出願は、炎症性及び／又は自己免疫性病態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１１】
本出願は、式Ｉの化合物を少なくとも１つの薬学的に許容しうる担体、賦形剤又は希釈剤と混合して含む医薬組成物を提供する。
【００１２】
発明の詳細な説明
定義
語句「ａ」又は「an」実体は、本明細書において使用される場合、その実体の１つ又は複数を指す；例えば、ある化合物は、１つ若しくは複数の化合物又は少なくとも１つの化合物を指す。従って、用語「ａ」（又は「an」）、「１つ又は複数」、及び「少なくとも１つ」は、本明細書において互換的に使用することができる。
【００１３】
語句「本明細書上記に定義されるような」は、発明の概要又は最も広い特許請求の範囲に与えられるような各基についての最も広い定義を指す。下記に与えられる全てのその他の実施態様において、各実施態様に存在することができ、かつ明確に定義されていない置換基は、発明の概要に与えられる最も広い定義を保持する。
【００１４】
本明細書において使用される場合、請求項における移行句であるか本文であるかを問わず、用語「含む（comprise(s)）」及び「含む（comprising）」は、オープンエンド（制限のない）の意味を有すると解釈されるべきである。すなわち、これらの用語は、語句「少なくとも〜を有する（having at least）」又は「少なくとも〜を含む（including at least）」と同義的に解釈されるべきである。方法に関連して使用する場合、用語「含む（comprising）」は、方法が少なくとも記載された工程を含むが、さらなる工程を含みうることを意味する。化合物又は組成物に関連して使用する場合、用語「含む（comprising）」は、化合物又は組成物が、少なくとも記載された特徴又は成分を有するが、さらなる特徴又は成分も含みうることを意味する。
【００１５】
本明細書において使用される場合、別段具体的に示さない限り、用語「又は」は、「及び／又は」の「包含的」意味で使用され、「いずれか／又は」の「排他的」意味では使用されない。
【００１６】
用語「独立して」は、本明細書において、同一の化合物内で、同じ又は異なる定義を有する変数の存在又は不在に関わらず、変数が、任意の一つの場合に適用されることを示すために使用される。従って、Ｒ”が２回出現し、それが「独立して炭素又は窒素」と定義される化合物においては、両方のＲ”が炭素であることも、両方のＲ”が窒素であることも、又は一方のＲ”が炭素であり、他方が窒素であることもありうる。
【００１７】
本発明中で使用され又は請求されている化合物を表し、そして記載している任意の部分又は式中に、任意の変数が１回より多く出現する場合、出現ごとのその定義は、すべての他の出現でのその定義とは独立している。同じく、置換基及び／又は変数の組合せは、そのような化合物が安定した化合物に至る場合に限り許容される。
【００１８】
結合の終端部の記号「＊」又は結合を貫いて描かれる「------」は、各々、官能基又は他の化学部分が、その一部である分子の残りに結合する点を指す。従って、例えば：
【化２】
2015531781.tif 000004
である。
【００１９】
環系中に引かれる結合（明確な頂点で連結されたものと対照をなす）は、結合が適切な環原子のいずれかに結合されうることを示す。
【００２０】
用語「場合による」又は「場合により」は、本明細書において使用される場合、続いて記載される事象又は状況が起こってもよいが起こる必要もなく、その記載は、その事象又は状況が起こる場合と起こらない場合とを含むことを意味する。例えば「場合により置換されている」は、場合により置換される部分が、水素原子又は置換基を組み込みうることを意味する。
【００２１】
「場合による結合」という語句は、結合が存在してもよいし又はしなくてもよく、そしてその記載は単結合、二重結合又は三重結合を含むことを意味する。置換基が「結合」又は「存在しない」ことが示される場合、置換基に結合される原子は、直接結合される。
【００２２】
用語「約」は本明細書において、およそ、ほぼ、おおまかに、あたり、を意味するために使用される。用語「約」が数値範囲との組み合わせで使用される場合、それは記載される数値の上及び下に境界を拡張することによってその範囲を修正する。概して、用語「約」は本明細書において、記載された数値の上及び下に２０％の変動で、数値を修正して使用される。
【００２３】
式Ｉの一定の化合物は、互変異性を示しうる。互変異性化合物は、２種以上の相互転換可能な種として存在できる。プロトン移動性（prototropic）互変異性体は、二つの原子間における共有結合した水素原子の移動から生じる。互変異性体は、一般的に、平衡状態で存在し、個々の互変異性体を単離しようとすると、通例、化学的及び物理的性質が化合物の混合物と一致した混合物を生成する。平衡の位置は、分子内の化学的特徴に依存する。例えば、アセトアルデヒド等の多くの脂肪族アルデヒド及びケトンでは、ケト型が優位を占める一方、フェノールでは、エノール型が優位を占める。一般的なプロトン移動性互変異性体は、ケト／エノール（−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ−⇔−Ｃ（−ＯＨ）＝ＣＨ−）、アミド／イミド酸（−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−⇔−Ｃ（−ＯＨ）＝Ｎ−）及びアミジン（−Ｃ（＝ＮＲ）−ＮＨ−⇔−Ｃ（−ＮＨＲ）＝Ｎ−）互変異性体を含む。後者二つはヘテロアリール及び複素環において特に一般的であり、本発明は本化合物のすべての互変異性型を包含する。
【００２４】
本明細書において用いられる技術及び科学用語は、特に定義されない限り、本発明が属する技術における当業者によって、一般に理解される意味を有する。当業者に知られた様々な方法論及び材料を、本明細書において引用する。薬理学の一般的原理を説明する標準的な参考文献は、Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York (2001) を含む。当業者に知られた任意の適切な材料及び／又は方法を、本発明を実施する際に用いることができる。しかしながら、好ましい材料及び方法は記載されている。以下の説明及び実施例で引用する材料、試薬等は、特に言及されない限り、商業的供給源より入手可能である。
【００２５】
本明細書に記載される定義は、例えば、「ヘテロアルキルアリール」、「ハロアルキルヘテロアリール」、「アリールアルキルヘテロシクリル」、「アルキルカルボニル」、「アルコキシアルキル」等の化学的に関連する組み合わせを形成するために加えられてもよい。用語「アルキル」が、「フェニルアルキル」又は「ヒドロキシアルキル」のように別の用語の後に接尾辞として使用される場合、これは、他の具体的に名前を挙げた基から選択される１〜２個の置換基により置換されている、上記で定義されたアルキル基を指すことが意図される。従って、例えば、「フェニルアルキル」は、１〜２個のフェニル置換基を有するアルキル基を指し、従って、ベンジル、フェニルエチル、及びビフェニルを含む。「アルキルアミノアルキル」は、１〜２個のアルキルアミノ置換基を有するアルキル基である。「ヒドロキシアルキル」は、２−ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシプロピル、１−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピル、２−ヒドロキシブチル、２，３−ジヒドロキシブチル、２−（ヒドロキシメチル）、３−ヒドロキシプロピル等を含む。従って、本明細書において使用される場合、用語「ヒドロキシアルキル」は、以下に定義されるヘテロアルキル基のサブセットを定義するために用いられる。用語−（ar）アルキルは、非置換アルキル又はアラルキル基を指す。用語（ヘテロ）アリール又は（het）アリールは、アリール又はヘテロアリール基を指す。
【００２６】
用語「スピロシクロアルキル」は、本明細書において使用される場合、例えば、スピロ［３．３］ヘプタンのようにスピロ環式シクロアルキル基を意味する。本明細書において使用されるように、用語スピロヘテロシクロアルキルは、例えば、２，６−ジアザスピロ〔３．３〕ヘプタンのようにスピロ環式のヘテロシクロアルキルを意味する。
【００２７】
用語「アシル」は、本明細書において使用される場合、式−Ｃ（＝Ｏ）Ｒで表される基を示し、式中、Ｒは、水素又は本明細書で定義された低級アルキルである。用語「アルキルカルボニル」は、本明細書において使用される場合、式Ｃ（＝Ｏ）Ｒで表される基を示し、式中、Ｒは、本明細書において定義されたアルキルである。用語Ｃ１−６アシルは、６個の炭素原子を含む基−Ｃ（＝Ｏ）Ｒである。用語「アリールカルボニル」は、本明細書において使用される場合、式Ｃ（＝Ｏ）Ｒ（式中、Ｒは、アリール基である）で表される基を意味し；本明細書において使用されるように、用語「ベンゾイル」は、「アリールカルボニル」基（ここでＲは、フェニルである）を意味する。
【００２８】
用語「エステル」は、本明細書において使用される場合、式‐Ｃ（＝Ｏ）ＯＲで表される基を示し、式中、Ｒは、本明細書において定義された低級アルキルである。
【００２９】
用語「アルキル」は、本明細書において使用される場合、１〜１０個の炭素原子を含む、非分岐又は分岐鎖の飽和一価の炭化水素残基を表す。用語「低級アルキル」は、１〜６個の炭素原子を含む、直鎖又は分岐鎖の炭化水素残基を表す。本明細書で使用される「Ｃ１−１０アルキル」は、１〜１０個の炭素からなるアルキルを指す。アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチル又はペンチル（を含む低級アルキル基）、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル及びオクチルを含むが、これらに限定されない。
【００３０】
用語「アルキル」が、「フェニルアルキル」又は「ヒドロキシアルキル」のように別の用語の後に接尾辞として使用される場合、これは、他の具体的に名前を挙げた基から選択される１〜２個の置換基により置換されている、上記で定義されたアルキル基を指すことが意図される。従って、例えば、「フェニルアルキル」は、基Ｒ’Ｒ”−（ここで、Ｒ’は、本明細書で定義された通りの、フェニル基であり、Ｒ”は、アルキレン基である）を表し、フェニルアルキル部分の結合点はアルキレン基上であると理解される。アリールアルキル基の例は、ベンジル、フェニルエチル、３−フェニルプロピルを含むが、これらに限定されない。用語「アリールアルキル」又は「アラルキル」は、Ｒ’がアリール基であることを除き、同様に解釈される。用語「（het）アリールアルキル」又は「（het）アラルキル」は、Ｒ’が、場合によりアリール又はヘテロアリール基であることを除き、同様に解釈される。
【００３１】
用語「ハロアルキル」又は「ハロ低級アルキル」又は「低級ハロアルキル」は、１〜６個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖の炭化水素残基を指し、ここで、１つ又は複数の炭素原子が１つ又は複数のハロゲン原子で置換されている。
【００３２】
用語「アルキレン」又は「アルキレニル」は、本明細書において使用される場合、特に示さない限り、１〜１０個の炭素原子の二価の飽和直鎖炭化水素基（例えば、（ＣＨ２）ｎ）、又は２〜１０個の炭素原子の分岐飽和二価の炭化水素基（例えば、−ＣＨＭｅ−又はＣＨ２ＣＨ（ｉ−Ｐｒ）ＣＨ２−）を表す。メチレンの場合を除いて、アルキレン基の開いた原子価は、同じ原子には結合しない。アルキレン基の例は、メチレン、エチレン、プロピレン、２−メチル−プロピレン、１，１−ジメチル−エチレン、ブチレン、２−エチルブチレンを含むが、これらに限定されない。
【００３３】
用語「アルコキシ」は、本明細書において使用される場合、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロピルオキシ、ｉ−プロピルオキシ、ｎ−ブチルオキシ、ｉ−ブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ（これらの異性体を含む）のような、−Ｏ−アルキル基（ここで、アルキルは、上記と同義である）を意味する。「低級アルコキシ」は、本明細書において使用される場合、前記と同義の「低級アルキル」基を有するアルコキシ基を表す。「Ｃ１−１０アルコキシ」は、本明細書において使用される場合、アルキルが、Ｃ１−１０である−Ｏ−アルキルを指す。
【００３４】
用語「ＰＣｙ３」は、３つの環状部で三置換されたホスフィンを指す。
【００３５】
用語「ハロアルコキシ」又は「ハロ低級アルコキシ」又は「低級ハロアルコキシ」は、低級アルコキシ基を指し、ここで、１つ又は複数の炭素原子は、１つ又は複数のハロゲン原子で置換されている。
【００３６】
用語「ヒドロキシアルキル」は、本明細書において使用される場合、異なる炭素原子上の１〜３個の水素原子が水酸基により置き換えられている、本明細書において定義された通りのアルキル基を表す。
【００３７】
用語「アルキルスルホニル」及び「アリールスルホニル」は、本明細書において使用される場合、式−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ（式中、Ｒは、それぞれアルキル又はアリールであり、そして、アルキル及びアリールは、本明細書に定義される通りである）で表される基を指す。用語「ヘテロアルキルスルホニル」は、本明細書において使用される場合、式−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ（式中、Ｒは、本明細書に定義される「ヘテロアルキル」である）で表される基を表す。
【００３８】
用語「アルキルスルホニルアミノ」及び「アリールスルホニルアミノ」は、本明細書において使用される場合、式−ＮＲ’Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ（式中、Ｒは、それぞれアルキル又はアリールであり、Ｒ’は、水素又はＣ１−３アルキルであり、そして、アルキル及びアリールは、本明細書に定義される通りである）で表される基を指す。
【００３９】
用語「シクロアルキル」は、本明細書において使用される場合、３〜８個の炭素原子を含有する飽和炭素環、すなわち、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチルを指す。「Ｃ３−７シクロアルキル」は、本明細書において使用される場合、炭素環において３〜７個の炭素からなるシクロアルキルを指す。
【００４０】
用語「カルボキシ−アルキル」は、本明細書において使用される場合、ヘテロアルキル基の結合点が１つの炭素原子を介するという理解の下、１つの水素原子が１つのカルボキシルで置き換えられているアルキル部分を指す。用語「カルボキシ」又は「カルボキシル」は、−ＣＯ２Ｈ部分を指す。
【００４１】
用語「ヘテロアリール」又は「複素芳香族」は、本明細書において使用される場合、ヘテロアリール基の結合点が芳香族環又は部分不飽和環上にあるという理解の下、１つ又は複数のＮ、Ｏ又はＳヘテロ原子を組み入れ、残りの環原子が炭素である、環あたり４〜８個の原子を含有する少なくとも１つの芳香族環又は部分不飽和環を有する、５〜１２個の環原子の単環式又は二環式の基を意味する。当業者にとって周知であるように、ヘテロアリール環は、それらの全てが炭素である対応物よりも芳香族性が小さい。従って、本発明の目的のためには、ヘテロアリール基はある程度の芳香族性があればよい。ヘテロアリール部分の例は、５〜６個の環原子及び１〜３個のヘテロ原子を有する単環式の芳香族複素環を含み、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、オキサジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、４，５−ジヒドロ−オキサゾリル、５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］オキサゾリル、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、トリアゾリン、チアジアゾール及びオキサジアキソリン（oxadiaxoline）（これらは、ヒドロキシ、シアノ、アルキル、アルコキシ、チオ、低級ハロアルコキシ、アルキルチオ、ハロ、低級ハロアルキル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル及びジアルキルアミノアルキル、ニトロ、アルコキシカルボニル及びカルバモイル、アルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アルキルカルボニルアミノ及びアリールカルボニルアミノから選択される１つ又は複数の、好ましくは、１つ又は２つの置換基で場合により置換されていてよい）を含むが、これらに限定されない。二環式部分の例は、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾフリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾール、ベンズイソオキサゾール、ベンゾチアゾール、ナフチリジニル、５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，６］ナフチリジニル及びベンズイソチアゾールを含むが、これらに限定されない。二環式部分は、いずれかの環上で場合により置換されていてよいが、その結合点はヘテロ原子を含有する環上にある。
【００４２】
用語「ヘテロシクリル」、「ヘテロシクロアルキル」又は「複素環」は、本明細書において使用される場合、１つ又は複数の環ヘテロ原子（Ｎ，Ｏ又はＳ（Ｏ）０−２から選択される）を組み入れ、環あたり３〜８個の原子の、１つ又は複数の環、好ましくは、１〜２つの環（スピロ環系を含む）からなる、一価の飽和環式基を表し、これらは、特に示さない限り、ヒドロキシ、オキソ、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、アルキルチオ、ハロ、低級ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、ニトロ、アルコキシカルボニル、アミノ、アルキルアミノ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルアミノスルホニル、アリールアミノスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、アルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ及びそのイオン形態から選択される１つ又は複数の、好ましくは、１つ又は２つの置換基で場合により独立して置換されていてよい。複素環基の例は、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ヘキサヒドロアゼピニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、イソオキサゾリジニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、キヌクリジニル及びイミダゾリニル及びそのイオン形態を含むが、これらに限定されない。例はまた、例えば、３，８−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン、２，５−ジアザ−ビシクロ［２．２．２］オクタン又はオクタヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン等の二環式であってもよい。
【００４３】
Ｂｔｋの阻害剤
本出願は、式Ｉ：
【化３】
2015531781.tif 000005
［式中、
---は、単結合又は二重結合のいずれかであり；
Ｘは、ＣＨ、ＣＨ２又はＮのいずれかであり；
Ｒは、Ｈ、−Ｒ１、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３、−Ｒ１−Ｒ３、又は−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１は、アリール、ヘテロアリール、二環式ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルであり、その各々は、１つ又は複数の低級アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシ低級アルキル、低級アルコキシ、ハロ、ニトロ、アミノ、アミド、シアノ、オキソ又は低級ハロアルキルで場合により置換されており；
Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２’、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ、−Ｃ（Ｒ２’）２、−Ｏ、−Ｓ、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ２’、又は−Ｓ（＝Ｏ）２であり；
各Ｒ２’は、独立して、Ｈ又は低級アルキルであり；
Ｒ３は、Ｈ又はＲ４であり；
Ｒ４は、低級アルキル、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、アミノ、低級アルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ、アリール、アリールアルキル、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、アルキルシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アルキルヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、二環式シクロアルキル、二環式ヘテロシクロアルキル、スピロシクロアルキル、スピロヘテロシクロアルキル又は二環式スピロヘテロシクロアルキルであり、その各々は、１つ又は複数の低級アルキル、ハロ、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ、ヒドロキシ、ヒドロキシ低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルカノイル、ハロ、ニトロ、アミノ、アミド、アシル、シアノ、オキソ、スルホニル、低級アルキルスルホニル、グアニジノ、ヒドロキシルアミノ、カルボキシ、カルバモイル、カルバメート、ハロ低級アルコキシ、ヘテロシクロアルキル又はハロ低級アルキルで場合により置換されており、ここで、２つの低級アルキル基は、一緒になって、環を形成してよく；
Ｙ４は、Ｙ４ａ、Ｙ４ｂ、Ｙ４ｃ、又はＹ４ｄであり；
Ｙ４ａは、Ｈ又はハロゲンであり；
Ｙ４ｂは、低級アルキルであり、これは、低級ハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及び低級アルコキシからなる群より選択される１つ又は複数の置換基で場合により置換されており；
Ｙ４ｃは、低級シクロアルキルであり、これは、低級アルキル、低級ハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及び低級アルコキシからなる群より選択される１つ又は複数の置換基で場合により置換されており；そして
Ｙ４ｄは、アミノであり、これは、１つ又は複数の低級アルキル、アルコキシ低級アルキル又はヒドロキシ低級アルキルで場合により置換されている］
で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩を提供する。
【００４４】
さらに、本明細書に開示される特定の残基Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ、Ｒ２’及びＹ４に関連する全ての実施態様は、本明細書に開示される別の残基Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ、Ｒ２’及びＹ４に関連する任意の他の実施態様と組み合わされてよいことを理解されたい。
【００４５】
本出願は、
---が、二重結合であり；そして
Ｘが、Ｎである、式Ｉの化合物を提供する。
【００４６】
本出願は、
---が、単結合であり；そして
Ｘが、ＣＨ２である、式Ｉの化合物を提供する。
【００４７】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｓ（＝Ｏ）２であり、
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、低級アルキルである、式Ｉの化合物を提供する。
【００４８】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（ＣＨ３）２であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、１つ又は複数の低級アルキルで場合により置換されている、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ又はヘテロシクロアルキルである、式Ｉの化合物を提供する。
【００４９】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、フェニル又はピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（＝Ｏ）であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、１つ又は複数の低級アルキルで場合により置換されている、モルホリン又はピペラジンである、式Ｉの化合物を提供する。
【００５０】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；そして
Ｙ４が、tert−ブチルである、式Ｉの化合物を提供する。
【００５１】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、ＣＨであり；そして
Ｙ４が、
【化４】
2015531781.tif 000006
［式中、Ｙ５及びＹ６は、独立して、Ｈ、低級アルキル又は低級ハロアルキルである］
である、式Ｉの化合物を提供する。
【００５２】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；そして
Ｙ４が、
【化５】
2015531781.tif 000007
［式中、Ｙ５は、Ｈ、ハロゲン、低級アルキル又は低級ハロアルキルである］
である、式Ｉの化合物を提供する。
【００５３】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；そして
Ｙ４が、
【化６】
2015531781.tif 000008
［式中、Ｙ５及びＹ６は、独立して、Ｈ又は低級アルキルである］
である、式Ｉの化合物を提供する。
【００５４】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；
Ｙ４が、tert−ブチルであり；
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジル又はピラゾロピラジンであり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、場合により置換されている低級アルキル、ヘテロシクロアルキル又はアルキルヘテロシクロアルキルである、式Ｉの化合物を提供する。
【００５５】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；
Ｙ４が、tert−ブチルであり；
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（ＣＨ３）２であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、１つ又は複数の低級アルキルで場合により置換されている、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ又はヘテロシクロアルキルである、式Ｉの化合物を提供する。
【００５６】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；
Ｙ４が、tert−ブチルであり；
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（＝Ｏ）であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、場合により置換されているヘテロシクロアルキル又は二環式スピロヘテロシクロアルキルである、式Ｉの化合物を提供する。
【００５７】
本出願は、
---が、二重結合であり；
Ｘが、Ｎであり；
Ｙ４が、tert−ブチルであり；
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（＝Ｏ）であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、場合により置換されているモルホリン又はピペラジンである、式Ｉの化合物を提供する。
【００５８】
本出願は、以下からなる群より選択される、式Ｉの化合物を提供する：
２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
２−｛３−［５−（５−アゼチジン−１−イルメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−２−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
２−（２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル；
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（５−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−２−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−｛３−［５−（１’−エチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（モルホリン−４−カルボニル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
２−［２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル；
６−tert−ブチル−２−［２−ヒドロキシメチル−３−（５−｛５−［２−（３−ヒドロキシ−プロピルアミノ）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−オキセタン−３−イル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−［３−（５−｛５−［２−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−２−ヒドロキシメチル−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン；及び
２−（２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル。
【００５９】
本出願は、炎症性又は自己免疫性病態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００６０】
本出願は、関節リウマチを処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００６１】
本出願は、喘息を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００６２】
本出願は、式Ｉの化合物を含む、医薬組成物を提供する。
【００６３】
本出願は、式Ｉの化合物を少なくとも１つの薬学的に許容しうる担体、賦形剤又は希釈剤と混合して含む、医薬組成物を提供する。
【００６４】
本出願は、炎症性障害の処置のための医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００６５】
本出願は、自己免疫性障害の処置のための医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００６６】
本出願は、関節リウマチの処置のための医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００６７】
本出願は、喘息の処置のための医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００６８】
本出願は、炎症性又は自己免疫性障害の処置のための、上述される化合物の使用を提供する。
【００６９】
本出願は、関節リウマチの処置のための、上述される化合物の使用を提供する。
【００７０】
本出願は、喘息の処置のための、上述される化合物の使用を提供する。
【００７１】
本出願は、炎症性又は自己免疫性病態障害の処置において使用するための、上述される化合物を提供する。
【００７２】
本出願は、関節リウマチの処置において使用するための、上述される化合物を提供する。
【００７３】
本出願は、喘息の処置において使用するための、上述される化合物を提供する。
【００７４】
本出願は、本明細書において記載される化合物、方法又は組成物を提供する。
【００７５】
本出願は、炎症性又は自己免疫性障害を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉ’のＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００７６】
本出願は、関節炎を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉ’のＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００７７】
本出願は、喘息を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉ’のＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００７８】
本出願は、Ｂ細胞の増殖を阻害する方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉ’のＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００７９】
本出願は、式Ｉ’のいずれか１つのＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む、Ｂｔｋ活性を阻害するための方法を提供し、当該方法において、Ｂｔｋ阻害化合物は、Ｂｔｋ活性のインビトロ生化学アッセイにおいて、５０マイクロモル以下のＩＣ５０を示す。
【００８０】
上記方法の１つの変形において、Ｂｔｋ阻害化合物は、Ｂｔｋ活性のインビトロ生化学アッセイにおいて、１００ナノモル以下のＩＣ５０を示す。
【００８１】
上記方法の別の変形において、当該化合物は、Ｂｔｋ活性のインビトロ生化学アッセイにおいて、１０ナノモル以下のＩＣ５０を示す。
【００８２】
本出願は、炎症性病態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の抗炎症性化合物を式ＩのＢｔｋ阻害化合物と組み合わせて同時投与することを含む方法を提供する。
【００８３】
本出願は、関節炎を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の抗炎症性化合物を式ＩのＢｔｋ阻害化合物と組み合わせて同時投与することを含む方法を提供する。
【００８４】
本出願は、リンパ腫又はＢＣＲ−ＡＢＬ１＋白血病細胞を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式ＩのＢｔｋ阻害化合物を投与することによる方法を提供する。
【００８５】
本出願は、式’のＢｔｋ阻害化合物を少なくとも１つの薬学的に許容しうる担体、賦形剤又は希釈剤と混合して含む、医薬組成物を提供する。
【００８６】
本出願は、炎症性障害の処置のための医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００８７】
本出願は、自己免疫性障害の処置のための医薬の製造における、式Ｉ’の化合物の使用を提供する。
【００８８】
本出願は、本明細書に記載されるような化合物、方法又は組成物を提供する。
【００８９】
化合物及び調製
本発明に包含され、本発明の範囲内である代表的な化合物の例を、以下の表で提供する。下記の実施例及び調製例は、当業者が本発明をより明確に理解し、実施することを可能とするために提供される。これらは、本発明の範囲を制限するものではなく、本発明の例示的及び代表的なものとしてのみ考えられるべきである。
【００９０】
一般に、本出願に使用される命名法は、IUPAC系統的命名法の生成のためのBeilstein InstituteコンピュータシステムであるAUTONOMTM v.4.0に基づく。図示された構造とその構造に与えられた名称との相違がある場合、図示された構造がより重視される。加えて、構造又は構造の一部の立体化学が、例えば太字又は破線によって示されていない場合、その構造又は構造の一部は、その立体異性体の全てを包含するものと解釈されるべきである。
【００９１】
表Ｉに、一般式Ｉに従うピリダジノン化合物の例を示す。
【００９２】
【表１】
2015531781.tif 000009
2015531781.tif 000010
2015531781.tif 000011
2015531781.tif 000012
2015531781.tif 000013
2015531781.tif 000014
【００９３】
一般合成スキーム
本出願は、式ＩＩ（式中、Ｙ１は、ボロン酸又はボロン酸ピナコールである）で表される化合物の調製プロセスを提供し、当該プロセスは、以下の工程を含む：
【化７】
2015531781.tif 000015
式Ｉで表される化合物を、ビス（ピナコラト）ジボロン、パラジウム触媒、塩基及びホスフィンの存在下で、約４０℃〜１５０℃に加熱する工程。
【００９４】
本出願は、ホスフィンが、ＰＣｙ３、アルキルモノ−ホスフィン化合物、アリールモノ−ホスフィン化合物、アルキルジホスフィン化合物又はアリールジ−ホスフィン化合物である、上記プロセスを提供する。
【００９５】
本出願は、塩基が、炭酸カリウム、炭酸セシウム、リン酸カリウム及び酢酸カリウムを含む無機塩基、又はジシクロヘキシルアミン及びトリエチルアミンを含むアミン塩基である、上記プロセスを提供する。
【００９６】
本出願は、パラジウム触媒が、酢酸パラジウム（ＩＩ）又はビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）等である、上記プロセスを提供する。
【００９７】
本出願は、式ＩＶの化合物の調製プロセスを提供し、当該プロセスは、以下の工程を含む：
【化８】
2015531781.tif 000016
ａ）式ＩＩ（式中、Ｙ１は、ボロン酸又はボロン酸ピナコール又はその２つの混合物である）で表される化合物を、式ＩＩＩで表される化合物、パラジウム触媒、塩基及びホスフィンの存在下で、約４０℃〜１５０℃に加熱する工程；及び
ｂ）工程ａ）の生成物を、メタノール等の溶媒中、およそ室温〜約４０℃の温度で、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウム又は炭酸カリウム又は炭酸セシウム等の塩基で処理する工程。
【００９８】
本出願は、ホスフィンが、ＰＣｙ３、アルキルモノ−ホスフィン化合物、アリールモノ−ホスフィン化合物、アルキルジホスフィン化合物又はアリールジ−ホスフィン化合物である、上記プロセスを提供する。
【００９９】
本出願は、塩基が、炭酸カリウム、炭酸セシウム、リン酸カリウム及び酢酸カリウムを含む無機塩基、又はジシクロヘキシルアミン及びトリエチルアミンを含むアミン塩基である、上記プロセスを提供する。
【０１００】
本出願は、パラジウム触媒が、酢酸パラジウム（ＩＩ）又はビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）等である、上記プロセスを提供する。
【０１０１】
本出願は、式ＩＶで表される化合物の調製プロセスを提供し、当該プロセスは、以下の工程を含む：
【化９】
2015531781.tif 000017
ａ）式Ｉで表される化合物を、ビス（ピナコラト）ジボロン、パラジウム触媒、塩基及びホスフィンの存在下で、約４０℃〜１５０℃に加熱する工程；
ｂ）工程ａ）の生成物を単離することなく、式ＶＩＩで表される化合物、パラジウム触媒、塩基及びホスフィンの存在下で、式ＩＩＩで表される化合物と共に、約４０℃〜１５０℃に加熱する工程；及び
ｃ）工程ｂ）の生成物を、メタノール等の溶媒中、およそ室温〜約４０℃の温度で、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウム又は炭酸カリウム又は炭酸セシウム等の塩基で処理する工程。
【０１０２】
本出願は、式ＩＶで表される化合物の調製プロセスを提供し、当該プロセスは、以下の工程を含む：
【化１０】
2015531781.tif 000018
ａ）式ＩＩ（式中、Ｙ１は、ボロン酸又はボロン酸ピナコール又はその２つの混合物である）で表される化合物を、式Ｖで表される化合物、パラジウム触媒、塩基及びホスフィンの存在下で、約４０℃〜１５０℃に加熱する工程；及び
ｂ）工程ａ）の生成物を、メタノール又はメタノールと水の混合物等の溶媒中、室温付近の温度で、水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤で処理する工程。
【０１０３】
本出願は、ホスフィンが、ＰＣｙ３、アルキルモノ−ホスフィン化合物、アリールモノ−ホスフィン化合物、アルキルジホスフィン化合物又はアリールジ−ホスフィン化合物である、上記プロセスを提供する。
【０１０４】
本出願は、塩基が、炭酸カリウム、炭酸セシウム、リン酸カリウム及び酢酸カリウムを含む無機塩基、又はジシクロヘキシルアミン及びトリエチルアミンを含むアミン塩基である、上記プロセスを提供する。
【０１０５】
本出願は、パラジウム触媒が、酢酸パラジウム（ＩＩ）又はビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）等である、上記プロセスを提供する。
【０１０６】
本出願は、式ＶＩＩで表される化合物の調製プロセスを提供し、当該プロセスは、以下の工程を含む：
【化１１】
2015531781.tif 000019
ａ）式ＩＩ（式中、Ｙ１は、ボロン酸又はボロン酸ピナコール又はその２つの混合物である）で表される化合物を、式ＶＩで表される化合物、パラジウム触媒、塩基及びホスフィンの存在下で、約４０℃〜１５０℃に加熱する工程；及び
ｂ）工程ａ）の生成物を、メタノール又はメタノールと水の混合物等の溶媒中、室温付近の温度で、水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤で処理する工程。
【０１０７】
本出願は、ホスフィンが、ＰＣｙ３、アルキルモノ−ホスフィン化合物、アリールモノ−ホスフィン化合物、アルキルジホスフィン化合物又はアリールジ−ホスフィン化合物である、上記プロセスを提供する。
【０１０８】
本出願は、塩基が、炭酸カリウム、炭酸セシウム、リン酸カリウム及び酢酸カリウムを含む無機塩基、又はジシクロヘキシルアミン及びトリエチルアミンを含むアミン塩基である、上記プロセスを提供する。
【０１０９】
本出願は、パラジウム触媒が、酢酸パラジウム（ＩＩ）又はビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）等である、上記プロセスを提供する。
【０１１０】
本出願は、式ＶＩＩＩ（式中、Ｙ１は、ボロン酸又はボロン酸ピナコールである）で表される化合物の調製プロセスを提供し、当該プロセスは、以下の工程を含む：
【化１２】
2015531781.tif 000020
式Ｖで表される化合物を、ビス（ピナコラト）ジボロン、パラジウム触媒、塩基及びホスフィンの存在下で加熱する工程。
【０１１１】
本出願は、ホスフィンが、ＰＣｙ３、アルキルモノ−ホスフィン化合物、アリールモノ−ホスフィン化合物、アルキルジホスフィン化合物又はアリールジ−ホスフィン化合物である、上記プロセスを提供する。
【０１１２】
本出願は、塩基が、炭酸カリウム、炭酸セシウム、リン酸カリウム及び酢酸カリウムを含む無機塩基、又はジシクロヘキシルアミン及びトリエチルアミンを含むアミン塩基である、上記プロセスを提供する。
【０１１３】
本出願は、パラジウム触媒が、酢酸パラジウム（ＩＩ）又はビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）等である、上記プロセスを提供する。
【０１１４】
本出願は、式ＩＶで表される化合物の調製プロセスを提供し、当該プロセスは、以下の工程を含む：
【化１３】
2015531781.tif 000021
ａ）式ＶＩＩＩ（式中、Ｙ１は、ボロン酸又はボロン酸ピナコール又はその２つの混合物である）で表される化合物を、式Ｉで表される化合物、パラジウム触媒、塩基及びホスフィンの存在下で、約４０℃〜１５０℃に加熱する工程；及び
ｂ）工程ａ）の生成物を、メタノール又はメタノールと水の混合物等の溶媒中、室温付近の温度で、水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤で処理する工程。
【０１１５】
本出願は、ホスフィンが、ＰＣｙ３、アルキルモノ−ホスフィン化合物、アリールモノ−ホスフィン化合物、アルキルジホスフィン化合物又はアリールジ−ホスフィン化合物である、上記プロセスを提供する。
【０１１６】
本出願は、塩基が、炭酸カリウム、炭酸セシウム、リン酸カリウム及び酢酸カリウムを含む無機塩基、又はジシクロヘキシルアミン及びトリエチルアミンを含むアミン塩基である、上記プロセスを提供する。
【０１１７】
本出願は、パラジウム触媒が、酢酸パラジウム（ＩＩ）又はビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）等である、上記プロセスを提供する。
【０１１８】
医薬組成物及び投与
本発明の化合物は、多種多様な経口投与用の剤形及び担体で処方してよい。経口投与は、錠剤、コート錠、糖衣錠、硬及び軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤、シロップ剤又は懸濁剤の形態でありうる。本発明の化合物は、その他の投与経路の中でも、連続的（点滴）局所非経口、筋肉内、静脈内、皮下、経皮（浸透促進剤を含みうる）、口腔内、鼻腔内、吸入及び坐剤投与を含む他の投与経路によって投与されるときに効果的である。好ましい投与方法は、一般的に、苦痛の程度及び有効成分に対する患者の反応に従って調整されうる簡便な一日用量レジメンを使用する経口である。
【０１１９】
本発明の化合物（１つ又は複数）並びにそれらの薬学的に使用可能な塩は、１つ又は複数の従来の賦形剤、担体又は希釈剤と一緒に、医薬組成物及び単位用量の形態にしてよい。医薬組成物及び単位投薬形態は、慣用の成分を慣用の割合で、追加の活性化合物若しくは成分と共に又は無しで含むことができ、単位投薬形態は、使用される１日用量の意図される範囲に釣り合う活性成分のあらゆる適切な有効量を含むことができる。医薬組成物は、錠剤若しくは充填カプセル剤、半固形剤、粉末剤、持続性放出製剤のような固形剤として、又は液剤、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤若しくは経口用の充填カプセル剤のような液剤として；又は直腸内若しくは膣内投与用の坐剤の形態；又は非経口的使用の注射用滅菌液剤の形態で使用することができる。典型的な製剤は、約５％〜約９５％の活性化合物（１つ又は複数）（w/w）を含有する。用語「製剤」又は「剤形」は、活性化合物の固体製剤と液体製剤の両方を含むことを意図し、当業者であれば、ターゲット臓器又は組織及び所望の用量及び薬物動態パラメーターに応じて、有効成分が異なる製剤として存在しうることが理解されよう。
【０１２０】
用語「賦形剤」は、本明細書において使用される場合、一般的に安全で無毒であり、生物学的にもその他の面でも望ましくないことはない、医薬組成物の調製において有用である化合物を指し、そして、獣医的使用並びにヒトへの薬学的使用に許容しうる賦形剤を含む。本発明の化合物は、単独で投与することができるが、一般的に、意図される投与経路及び標準的な薬務に関して選択される１つ又は複数の適切な薬学的賦形剤、希釈剤又は担体との混合物で投与される。
【０１２１】
「薬学的に許容しうる」は、それが、一般的に安全であり、無毒であり、生物学的にもその他の面でも望ましくないことはない、医薬組成物の調製において有用であることを意味し、獣医、並びにヒトの薬学的使用に許容可能であることを含む。
【０１２２】
有効成分の「薬学的に許容しうる塩」形態は、また、最初に、非塩形態において存在しなかった望ましい薬物動態特性を有効成分に付与することができ、そして、体内でのその治療活性に関して、有効成分の薬力学に正の影響をさらに与えうる。化合物の「薬学的に許容しうる塩」という語句は、薬学的に許容しうるものであって、親化合物の所望の薬理学的活性を有する塩を意味する。そのような塩は、（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸と形成される酸付加塩；又は酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、４−メチルビシクロ［２．２．２］−オクタ−２−エン−１−カルボン酸、グルコヘプトン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三級ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸等の有機酸と形成される酸付加塩；あるいは（２）親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えばアルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン若しくはアルミニウムイオンと置き換わっているか；又はエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ−メチルグルカミン等の有機塩基と配位結合しているかのいずれかの場合に形成される塩を含む。
【０１２３】
固体形態の製剤は、粉末剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、坐剤、及び分散性顆粒剤を含む。固体担体は、希釈剤、着香剤、可溶化剤、潤滑剤、懸濁剤、結合剤、防腐剤、錠剤崩解剤又はカプセル化材料としても作用することができる１つ又は複数の物質であってよい。粉末剤では、担体は、一般に、微粉化した活性成分との混合物である微粉化固体である。錠剤では、活性成分は、一般的に、必要な結合能力を有する担体と適切な割合で混合され、所望の形状及び大きさに成形される。適切な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、乳糖、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ロウ、ココアバター等を含むが、これらに限定されない。固体形態の製剤は、活性成分に加えて、着色剤、着香剤、安定剤、緩衝剤、人工及び天然甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤等を含有してもよい。
【０１２４】
液体製剤は、また、経口投与に適しており、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、水性液剤、水性懸濁剤を含む液体製剤を含む。これらは、使用直前に液体形態の製剤に変換することを意図する固体形態の製剤を含む。乳剤は、溶液中、例えば、プロピレングリコール水溶液中に調製してもよく、又はレシチン、ソルビタンモノオレート若しくはアラビアゴム等の乳化剤を含有してもよい。水性液剤は、活性成分を水に溶解し、適切な着色剤、着香剤、安定剤及び増粘剤を加えることにより調製できる。水性懸濁剤は、微粉化した活性成分を、天然又は合成ガム、樹脂、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース及び他の周知の懸濁剤のような粘性材料と共に水に分散することにより調製できる。
【０１２５】
本発明の化合物は、非経口投与（例えば、注射、例としてはボーラス注射（bolus injection）又は連続注入による）のために処方することができ、アンプル剤、充填済注射器（pre-filled syringes）、小容量注入液又は多用量容器の単位用量形態で、防腐剤を添加して存在できる。組成物は、油性又は水性ビヒクル中の懸濁剤、液剤又は乳剤、例えば水性ポリエチレングリコールの液剤のような形態をとることができる。油性又は非水性の担体、希釈剤、溶媒又はビヒクルの例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（例えば、オリーブ油）及び注射用有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）を含み、防腐剤、湿潤剤、乳化剤又は懸濁剤、安定剤及び／又は分散助剤のような調合剤を含有してよい。あるいはまた、活性成分は、滅菌固体の無菌分離によるか、又は適切なビヒクル、例えば滅菌した発熱物質を含まない水を用いて、使用前の構成用溶液から凍結乾燥することにより得られる粉末形態であってよい。
【０１２６】
本発明の化合物は、軟膏剤、クリーム剤若しくはローション剤として又は経皮パッチ剤として表皮に局所投与するために処方することができる。例えば、軟膏剤及びクリーム剤は、適切な増粘剤及び／又はゲル化剤を加え、水性又は油性基剤を用いて処方することができる。ローション剤は、水性又は油性基剤を用いて処方することができ、また一般的に、１つ又は複数の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤又は着色剤も含有する。口腔内の局所投与に適切な製剤は、風味付けした基剤、通常、ショ糖及びアカシア又はトラガカント中に活性剤を含むトローチ剤；ゼラチン及びグリセリン又はショ糖及びアカシアのような不活性基剤中に活性成分を含むパステル剤；及び適切な液体担体中に活性成分を含む洗口剤を含む。
【０１２７】
本発明の化合物は坐剤として投与するために処方することができる。脂肪酸グリセリド又はココアバターの混合物のような低融点ロウを、最初に溶融して、活性成分を例えば撹拌により均質に分散する。次に均質溶融混合物を、都合のよい大きさの成形型に注ぎ、冷却させ、凝固させる。
【０１２８】
本発明の化合物は膣内投与用に処方することができる。活性成分に加えて、当該技術分野で適切であることが既知である担体を含有するペッサリー剤、タンポン剤、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤又はスプレー剤。
【０１２９】
本発明の化合物は鼻腔内投与用に処方することができる。液剤又は懸濁剤を、慣用の方法、例えば、滴瓶、ピペット又はスプレーを用いて直接鼻腔に適用する。製剤は単回投与又は多回投与形態で提供することができる。滴瓶又はピペットの後者の場合、液剤又は懸濁剤の適切で所定の容量を患者が投与することで、それを達成することができる。スプレーの場合、例えば計量噴霧スプレーポンプを用いてこれを達成することができる。
【０１３０】
本発明の化合物は、特に、鼻腔内投与を含む、気道へのエアロゾル投与用に処方することができる。化合物は、一般的に、例えば５ミクロン以下程度の小さい粒径を有する。そのような粒径は、当該技術分野で既知の方法、例えば微粒子化により得ることができる。活性成分は、クロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン若しくはジクロロテトラフルオロエタン、又は二酸化炭素、又は他の適切なガスのような、適切な噴射剤を用いた加圧パックで提供される。エアロゾルはまた、レシチンのような界面活性剤を都合よく含有することができる。薬剤の用量は、計量弁により制御されうる。あるいはまた、活性成分は、乾燥粉末の形態で、例えば、乳糖、デンプン、デンプン誘導体、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース及びポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）のような適切な粉末基剤中の化合物の粉末混合物で提供されうる。粉末担体は、鼻腔内でゲルを形成する。粉末組成物は、例えばゼラチンのカプセル又はカートリッジ、又はブリスターパックのような単位用量形態で提供されてよく、これから粉末剤が吸入器により投与される。
【０１３１】
所望であれば、製剤は、活性成分の持続的又は制御的放出投与に適合する腸溶性コーティングを用いて調製できる。例えば本発明の化合物は、経皮又は皮下薬剤送達装置用に処方できる。これらの送達系は、化合物の持続放出が必要であり、患者の処置レジメンに対する応諾が重要である場合に有利である。経皮送達系における化合物は、多くの場合、皮膚貼着固体支持体に付着されている。目的の化合物は、また、浸透向上剤、例えばアゾン（１−ドデシルアザ−シクロヘプタン−２−オン）と組み合わせることができる。持続的放出送達系は、手術又は注入により皮下層に皮下的に挿入される。皮下インプラントは、脂溶性膜、例えばシリコーンゴム又は生分解性ポリマー、例えばポリ乳酸中に化合物を包み込む。適切な製剤は、薬学的担体、希釈剤及び賦形剤と共に、Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, edited by E. W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvaniaに記載されている。熟練の製剤科学者であれば、本発明の組成物を不安定にすることなく又はそれらの治療活性を損なうことなく、特定の投与経路のための多くの製剤を提供するために、本明細書の教示の範囲内で製剤を改変することができる。
【０１３２】
水又はその他のビヒクルにより可溶性にするための本化合物の改変は、例えば、小さな改変（塩形成、エステル化等）によって容易に達成することができ、これらは十分に当該分野における通常の技能の範囲内である。また、患者に最大の有益な効果を与えるように本化合物の薬物動態を管理するために、特定の化合物の投与経路及び用量レジメンを改変することも十分に当該分野における通常の技能の範囲内である。
【０１３３】
用語「治療有効量」は、本明細書において使用される場合、個体の疾患の症状を軽減するのに必要な量を意味する。用量は、各特定の症例において、個々の要件に対して調整される。その用量は、多くの要因、例えば、処置される疾患の重症度、患者の年齢及び総体的な健康状態、患者の処置に用いられているその他の医薬、投与経路及び形態、並びに担当医の選好及び経験等に応じて、広い範囲内で変更することができる。経口投与の場合、単剤療法及び／又は併用療法では、一日あたり約０．０１〜約１０００mg/kg体重の一日用量が適切であろう。好ましい一日用量は、一日当たり約０．１〜約５００mg/kg体重、より好ましくは、０．１〜約１００mg/kg体重、最も好ましくは、１．０〜約１０mg/kg体重である。従って、７０kgの人への投与では、用量範囲は、一日当たり約７mg〜０．７gであろう。一日用量は、単回用量又は分割用量（典型的には、１〜５回の用量／日）で投与することができる。一般的に、処置は、化合物の最適用量より少ない用量から開始する。その後、個々の患者に最適な効果が得られるまで、用量を少量ずつ増やしていく。本明細書に記載される疾患を処置する当業者であれば、必要以上の実験を実施することなく、個人の知識、経験及び本出願の開示を頼りに所与の疾患及び患者について本発明の化合物の治療有効量を確定することができるであろう。
【０１３４】
医薬製剤は、好ましくは単位用量形態である。そのような形態では、製剤は、活性成分の適切な量を含有する単位用量に細分化されている。単位用量形態は、パッケージ製剤であることができ、そのパッケージは、パケット錠剤、カプセル剤及びバイアル又はアンプル中の粉末剤のような製剤の別個の分量を含有する。また、単位容量形態は、それ自体カプセル剤、錠剤、カシェ剤又はトローチ剤であることができるか、又はパッケージ形態における適切な数のこれらのうちのいずれかであることができる。
【０１３５】
適応症及び処置の方法
【化１４】
2015531781.tif 000022
【０１３６】
一般式Ｉの化合物は、ブルトン型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）を阻害する。上流のキナーゼによるＢｔｋの活性化は、ホスホリパーゼ−Ｃγの活性化をもたらし、これが前炎症性メディエーターの放出を刺激する。１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル側鎖を含有する一般式Ｉの化合物は、他の側鎖を有する類似体と比較して予想外に増強された阻害活性を示す。フェニル環上のヒドロキシメチルの置換は、さらに、その位置に別の置換を有する類似体と比較して予想外に増加した効能を提供する。式Ｉの化合物は、関節炎並びに他の抗炎症性及び自己免疫性疾患の処置において有用である。従って、式Ｉの化合物は、関節炎の処置に有用である。式Ｉの化合物は、細胞中のＢｔｋを阻害すること及びＢ細胞発生を調節することに有用である。本発明は、式Ｉの化合物を薬学的に許容しうる担体、賦形剤又は希釈剤と混合して含有する医薬組成物をさらに含む。
【０１３７】
本明細書に記載される化合物は、キナーゼ阻害剤、特に、Ｂｔｋ阻害剤である。これらの阻害剤は、哺乳動物において、キナーゼ阻害に応答する１つ又は複数の疾患（Ｂｔｋ阻害及び／又はＢ細胞増殖の阻害に応答する疾患を含む）を処置するために有用でありうる。いかなる特定の理論に束縛されることを望むものではないが、本発明の化合物とＢｔｋの相互作用がＢｔｋ活性の阻害をもたらし、これらの化合物の薬学的有用性をもたらすと考えられる。従って、本発明は、Ｂｔｋ活性の阻害及び／又はＢ細胞増殖の阻害に応答する疾患を有する哺乳動物（例えば、ヒト）を処置する方法であって、そのような疾患を有する哺乳動物に、有効量の本明細書に与えられる少なくとも１つの化学実体を投与することを含む方法を含む。有効濃度は、実験的に、例えば、化合物の血中濃度をアッセイすることによって、又は理論的にバイオアベイラビリティを計算することによって確認することができる。Ｂｔｋの他に影響を受けうるその他のキナーゼは、その他のチロシンキナーゼ及びセリン／トレオニンキナーゼを含むが、これらに限定されない。
【０１３８】
キナーゼは、増殖、分化及び死（アポトーシス）等の基本的な細胞プロセスを制御するシグナル伝達経路において顕著な役割を果たす。異常なキナーゼ活性は、多発性癌、自己免疫及び／又は炎症性疾患並びに急性炎症反応を含む、広範な疾患に関与している。重要な細胞のシグナル伝達経路におけるキナーゼのこの多面的な役割は、キナーゼ及びシグナル伝達経路をターゲットとする新規薬物を同定する重要な機会を提供する。
【０１３９】
１つの実施態様は、Ｂｔｋ活性及び／又はＢ細胞の増殖の阻害に応答する、自己免疫及び／若しくは炎症性疾患又は急性炎症反応を有する患者を処置する方法を含む。
【０１４０】
本発明の化合物及び組成物を使用して影響を及ぼしうる自己免疫及び／又は炎症性疾患は、乾癬、アレルギー、クローン病、過敏性腸症候群、シェーグレン病、組織移植片拒絶反応及び移植臓器の超急性拒絶反応、喘息、全身性エリテマトーデス（及び関連する糸球体腎炎）、皮膚筋炎、多発性硬化症、強皮症、血管炎（ＡＮＣＡ関連及びその他の血管炎）、自己免疫性の溶血及び血小板減少状態、グッドパスチャー症候群（並びに関連する糸球体腎炎及び肺出血）、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、慢性特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、アジソン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、糖尿病、敗血性ショック並びに重症筋無力症を含むが、これらに限定されない。
【０１４１】
本明細書に提供される少なくとも１つの化学実体が抗炎症剤と組み合わせて投与される処置法は本明細書に含まれる。抗炎症剤は、ＮＳＡＩＤ、非特異的及びＣＯＸ−２特異的シクロオキシゲナーゼ酵素阻害剤、金化合物、コルチコステロイド、メトトレキサート、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦ）受容体拮抗剤、免疫抑制剤及びメトトレキサートを含むが、これらに限定されない。
【０１４２】
ＮＳＡＩＤの例は、イブプロフェン、フルルビプロフェン、ナプロキセン及びナプロキセンナトリウム、ジクロフェナク、ジクロフェナクナトリウムとミソプロストールの組み合わせ、スリンダク、オキサプロジン、ジフルニサル、ピロキシカム、インドメタシン、エトドラク、フェノプロフェンカルシウム、ケトプロフェン、ナトリウムナブメトン、スルファサラジン、トルメチンナトリウム並びにヒドロキシクロロキンを含むが、こららに限定されない。ＮＳＡＩＤの例は、また、セレコキシブ、バルデコキシブ、ルミラコキシブ及び／又はエトリコキシブ等のＣＯＸ−２特異的阻害剤を含む。
【０１４３】
いくつかの実施態様において、抗炎症剤は、サリチル酸塩である。サリチル酸塩は、アセチルサリチル酸（すなわち、アスピリン）、サリチル酸ナトリウム並びにサリチル酸コリン及びマグネシウムを含むが、これらに限定されない。
【０１４４】
抗炎症剤は、また、コルチコステロイドでありうる。例えば、コルチコステロイドは、コルチゾン、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム又はプレドニゾンでありうる。
【０１４５】
追加の実施態様において、抗炎症剤は、金チオリンゴ酸ナトリウム又はオウラノフィン等の金化合物である。
【０１４６】
本発明は、また、抗炎症剤が、代謝阻害剤、例えば、ジヒドロ葉酸レダクターゼ阻害剤（メトトレキサート等）、又はジヒドロオロット酸デヒドロゲナーゼ阻害剤（レフルノミド等）である実施態様を含む。
【０１４７】
本発明の他の実施態様は、少なくとも１つの抗炎症性化合物が、抗Ｃ５モノクローナル抗体（エクリズマブ又はパキセリズマブ等）、ＴＮＦ拮抗剤（エンタネルセプト（entanercept）等）又は抗ＴＮＦαモノクローナル抗体であるインフリキシマブである組み合わせに関する。
【０１４８】
本発明のさらに他の実施態様は、少なくとも１つの活性剤が、メトトレキサート、レフルノミド、シクロスポリン、タクロリムス、アザチオプリン及びミコフェノール酸モフェチルから選択される免疫抑制化合物等の免疫抑制化合物である組み合わせに関する。
【０１４９】
ＢＴＫを発現するＢ細胞及びＢ細胞前駆体は、Ｂ細胞リンパ腫、リンパ腫（ホジキン及び非ホジキンリンパ腫を含む）、ヘアリー細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、慢性及び急性骨髄性白血病並びに慢性及び急性リンパ性白血病を非限定的に含む、Ｂ細胞の悪性腫瘍の病理に関与している。
【０１５０】
ＢＴＫは、Ｂリンパ球系細胞のＦａｓ／ＡＰＯ−１（ＣＤ−９５）死誘導シグナル伝達複合体（ＤＩＳＣ）の阻害剤であることが知られている。白血病／リンパ腫細胞の運命は、ＤＩＳＣにより活性化されるカスパーゼの反対のアポトーシス促進効果とＢＴＫ及び／又はその基質が関わる上流の抗アポトーシス調節メカニズムとの間のバランスに依存しうる（Vassilev et al., J. Biol. Chem. 1998, 274, 1646-1656）。
【０１５１】
また、ＢＴＫ阻害剤が、化学療法増感剤として有用であり、従って、その他の化学療法薬、特に、アポトーシスを誘導する薬物との組み合わせで有用であることが発見された。化学療法増感性のＢＴＫ阻害剤と組み合わせて使用することができるその他の化学療法薬の例は、トポイソメラーゼＩ阻害剤（カンプトテシン又はトポテカン）、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えば、ダウノマイシン及びエトポシド）、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、メルファラン及びＢＣＮＵ）、チューブリン作用剤（例えば、タキソール及びビンブラスチン）並びに生物学的薬剤（例えば、抗ＣＤ２０抗体等の抗体、ＩＤＥＣ８、免疫毒素及びサイトカイン）を含む。
【０１５２】
Ｂｔｋ活性は、また、第９及び第２２染色体の一部の転座から生じるｂｃｒ−ａｂｌ融合遺伝子を発現するいくつかの白血病と関連している。この異常は、通常、慢性骨髄性白血病に認められる。Ｂｔｋは、ｂｃｒ−ａｂｌキナーゼによって構成的にリン酸化され、これが下流の生存シグナルを開始して、ｂｃｒ−ａｂｌ細胞におけるアポトーシスを回避する（N. Feldhahn et al. J. Exp. Med. 2005 201(11):1837-1852）。
【０１５３】
処置の方法
本出願は、炎症性及び／又は自己免疫状態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０１５４】
本出願は、炎症状態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０１５５】
本出願は、関節リウマチを処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０１５６】
本出願は、喘息を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０１５７】
本出願は、炎症性及び／又は自己免疫状態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式ＩのＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０１５８】
本出願は、関節炎を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式ＩのＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０１５９】
本出願は、喘息を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式ＩのＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０１６０】
本出願は、Ｂ細胞の増殖を阻害する方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式ＩのＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０１６１】
本出願は、式Ｉのいずれか１つのＢｔｋ阻害化合物を投与することを含む、Ｂｔｋ活性を阻害するための方法を提供し、当該方法において、Ｂｔｋ阻害化合物は、Ｂｔｋ活性のインビトロ生化学アッセイにおいて、５０マイクロモル以下のＩＣ５０を示す。
【０１６２】
上記方法の１つの変形において、Ｂｔｋ阻害化合物は、Ｂｔｋ活性のインビトロ生化学アッセイにおいて、１００ナノモル以下のＩＣ５０を示す。
【０１６３】
上記方法の別の変形において、当該化合物は、Ｂｔｋ活性のインビトロ生化学アッセイにおいて、１０ナノモル以下のＩＣ５０を示す。
【０１６４】
本出願は、炎症性病態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の抗炎症性化合物を式ＩのＢｔｋ阻害化合物と組み合わせて同時投与することを含む方法を提供する。
【０１６５】
本出願は、関節炎を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の抗炎症性化合物を式ＩのＢｔｋ阻害化合物と組み合わせて同時投与することを含む方法を提供する。
【０１６６】
本出願は、リンパ腫又はＢＣＲ−ＡＢＬ１＋白血病細胞を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式ＩのＢｔｋ阻害化合物を投与することによる方法を提供する。
【０１６７】
実施例
略語
一般的に使用される略語としては、以下が挙げられる：アセチル（Ａｃ）、アゾ−ビス−イソブチリルニトリル（ＡＩＢＮ）、気圧（Ａｔｍ）、９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナン（９−ＢＢＮ又はＢＢＮ）、２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル（ＢＩＮＡＰ）、tert−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ピロ炭酸ジ−tert−ブチル又はｂｏｃ無水物（ＢＯＣ２Ｏ）、ベンジル（Ｂｎ）、ブチル（Ｂｕ）、ＣＡＳ登録番号（Chemical Abstracts Registration Number）（ＣＡＳＲＮ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺ又はＺ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）、三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ）、ジベンジリデンアセトン（ｄｂａ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン（ＤＤＱ）、ジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）、ジ−イソ−プロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）、水素化ジ−イソ−ブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ又はＤＩＢＡＬ−Ｈ）、ジ−イソ−プロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）エタン（ｄｐｐｅ）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（ｄｐｐｆ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン（ＥＥＤＱ）、エチル（Ｅｔ）、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、２−エトキシ−２Ｈ−キノリン−１−カルボン酸エチルエステル（ＥＥＤＱ）、ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）、エチルイソプロピルエーテル（ＥｔＯｉＰｒ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ、Ｎ，Ｎ’Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート酢酸（ＨＡＴＵ）、酢酸（ＨＯＡｃ）、１−Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、イソ−プロパノール（ＩＰＡ）、塩化イソプロピルマグネシウム（ｉＰｒＭｇＣｌ）、ヘキサメチルジシラザン（ＨＭＤＳ）、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣＭＳ）、リチウムヘキサメチルジシラザン（ＬｉＨＭＤＳ）、メタ−クロロペルオキシ安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、融点（ｍｐ）、ＭｅＳＯ２−（メシル又はＭｓ）、メチル（Ｍｅ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、ｍ−クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）、質量スペクトル（ｍｓ）、メチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、メチルテトラヒドロフラン（ＭｅＴＨＦ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）、ｎ−ブチルリチウム（ｎＢｕＬｉ）、Ｎ−カルボキシ無水物（ＮＣＡ）、Ｎ−クロロスクシンイミド（ＮＣＳ）、Ｎ−メチルモル��リン（ＮＭＭ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、クロロクロム酸ピリジニウム（ＰＣＣ）、ジクロロ−（（ビス−ジフェニルホスフィノ）フェロセニル）パラジウム（ＩＩ）（Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（Ｐｄ（ＯＡｃ）２）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（Ｐｄ２（ｄｂａ）３）、重クロム酸ピリジニウム（ＰＤＣ）、フェニル（Ｐｈ）、プロピル（Ｐｒ）、イソ−プロピル（ｉ−Ｐｒ）、ポンド／平方インチ（ｐｓｉ）、ピリジン（ｐｙｒ）、１，２，３，４，５−ペンタフェニル−１’−（ジ−tert−ブチルホスフィノ）フェロセン（Ｑ−Ｐｈｏｓ）、室温（周囲温度、ｒｔ又はＲＴ）、sec−ブチルリチウム（ｓＢｕＬｉ）、tert−ブチルジメチルシリル又はｔ−ＢｕＭｅ２Ｓｉ（ＴＢＤＭＳ）、フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）、トリエチルアミン（ＴＥＡ又はＥｔ３Ｎ）、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）、トリメチルシリルエトキシメチル（ＳＥＭ）、トリフラート又はＣＦ３ＳＯ２−（Ｔｆ）、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、１，１’−ビス−２，２，６，６−テトラメチルヘプタン−２，６−ジオン（ＴＭＨＤ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トリメチルシリル又はＭｅ３Ｓｉ（ＴＭＳ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（ＴｓＯＨ又はｐＴｓＯＨ）、４−Ｍｅ−Ｃ６Ｈ４ＳＯ２−又はトシル（Ｔｓ）及びＮ−ウレタン−Ｎ−カルボキシ無水物（ＵＮＣＡ）。接頭語ノルマル（ｎ）、イソ（ｉ−）、第二級（sec−）、第三級（tert−）及びネオを含む従来の命名法は、アルキル部分と共に使用される場合それらの慣用の意味を有する（J. Rigaudy and D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979Pergamon Press, Oxford.）。
【０１６８】
一般条件
本発明の化合物は、市販の出発物質から開始して、当業者に公知の一般的な合成技術及び手順を利用することによって調製することができる。以下の概説は、そのような化合物の調製に適した反応スキームである。さらなる例示は、特定の実施例に見いだすことができる。
【０１６９】
調製例
【化１５】
2015531781.tif 000023
６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン
１Ｌの丸底フラスコ中、４−tert−ブチルベンゾイルクロリド（９７．２ｇ、９０ml、４９４mmol、Ｅｑ：１．００）をＣＨ２Ｃｌ２（３７５ml）と混ぜ合わせて無色の溶液を得た。０℃まで冷却した。温度を１０℃未満に維持して、２−メチルプロパン−２−アミン（７９．５ｇ、１１４ml、１．０９mol、Ｅｑ：２．２）を滴下漏斗から滴下した。添加漏斗の側面をさらなるＣＨ２Ｃｌ２ですすいだ。反応物を３時間かけて２５℃まで温めた。固体がほとんど溶解するまで、４Ｎ  ＮａＯＨ（約３００mL）をゆっくり加えた。層を分離した。水層を４×ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層（全部で２．５Ｌ）をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、約２５０mLまで濃縮した。大量の沈殿物が生じた。フラスコを氷浴中で冷却した。得られた白色の固体を濾過し、３×ＣＨ２Ｃｌ２及び１×ＥｔＯＡｃで洗浄して、白色の固体を針状物（７２ｇ）として得て、これを真空ポンプで乾燥させた。合わせた濾液及び洗浄物を１００mLまで再度濃縮した。さらなる結晶が生じ、冷却して、濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄して、第二の収穫物である白色の固体（３１．６ｇ）を得た。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.33 (s, 9 H) 1.47 (s, 9 H) 5.91 (br. s., 1 H) 7.43 (d, J=8.31 Hz, 2 H) 7.66 (d, J=8.31 Hz, 2 H)。
【０１７０】
この反応を２×２６ｇのバッチで実行し、精密検査のために合わせた。各バッチについて、２Ｌの三口フラスコに、機械式撹拌機、バブラーに接続された添加漏斗及び窒素注入口を取り付けた。系を乾燥オーブン中で加熱し、Ｎ２流下で冷却した。Ｎ，４−ジ−tert−ブチルベンズアミド（２６．２ｇ、１１２mmol、Ｅｑ：１．００）をＴＨＦ（１．０１Ｌ）と混ぜ合わせて無色の溶液を得た。反応混合物を−７８℃まで冷却した。シクロヘキサン中のsec−ブチルリチウム（１．４Ｍの１７６ml、２４７mmol、Ｅｑ：２．２）をＮ２流下でゆっくり滴下した。黄色の溶液が生じた。反応混合物を１時間かけて−１５℃まで温めた。黄色の懸濁液が生じた。反応混合物を−７８℃まで再び冷却した。脱水ＤＭＦ（１６．４ｇ、１７．４ml、２２５mmol、Ｅｑ：２）を滴下した。反応物を０℃まで温めた。ＬＣＭＳは、反応が完了したことを示した。
【０１７１】
１５０mLの飽和ＮＨ４Ｃｌを０℃でゆっくり加えた。反応混合物を周囲温度で静置し、次に、４Ｌのエルレンマイアーフラスコに移して、水及びＥｔＯＡｃで洗浄した。２つのバッチを合わせ、次に、同じ４Ｌのエルレンマイアーフラスコに移した。
【０１７２】
２つの反応混合物の総容量は３Ｌを少し超えていた。反応混合物を、２Ｌの丸底フラスコ中、ロータリーエバポレーター（rotoevaporator）で５０℃にて、突沸しないように少しずつ慎重に濃縮した。その容量を約２００〜３００mLまで減少させた。
【０１７３】
多くの固体沈殿物が見られた。ＬＣＭＳは、液体部分に生成物が存在しないことを示した。白色の固体を濾過によって大きい焼結ガラス漏斗に回収した。塊を漏斗中の水に懸濁し、乳棒で微粉末に粉砕して、濾過した。固体を水で５回洗浄し、次に、真空オーブン中５０℃で２日間乾燥させて、５９．６ｇの２，５−ジ−tert−ブチル−３−ヒドロキシイソインドリン−１−オンをオフホワイトの固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲを行って、次の工程にそのまま進めた。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.27 (s, 9 H) 7.53 (s, 9 H) 8.26 (d, J=11.71 Hz, 1 H) 11.90 (d, J=11.71 Hz, 1 H) 13.40 - 13.46 (m, 1 H) 13.47 (s, 1 H) 13.51 - 13.58 (m, 1 H)。
【０１７４】
添加漏斗、空冷コンデンサー及び窒素注入口を備えた２Ｌの三口フラスコ中、２，５−ジ−tert−ブチル−３−ヒドロキシイソインドリン−１−オン（５９．６ｇ、２２８mmol、Ｅｑ：１．００）を酢酸（８６８ml）と混ぜ合わせて明黄色の溶液を得た。反応物を９０℃まで加熱した。ヒドラジン一水和物（１４．８ｇ、１４．４ml、２９６mmol、Ｅｑ：１．３）を滴下した。反応混合物を９０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を３００mLのＨ２Ｏで希釈して、２５℃までゆっくり放冷した。ＬＣＭＳは、反応が完了し、所望の生成物へときれいに変換されたことを示した。反応物を少なくした容量（約５０〜１００mL）まで濃縮した。静置すると溶液から無色の固体が生じた。固体を濾過によって回収して、水で数回、１×エーテル及び２×エーテル／ヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン（３７ｇ、収率８２％）を白色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.44 (s, 9 H) 7.66 - 7.73 (m, 1 H) 7.84 - 7.91 (m, 1 H) 8.18 (d, J=0.51 Hz, 1 H) 8.33 - 8.42 (m, 1 H)。
【０１７５】
【化１６】
2015531781.tif 000024
２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−クロロ−ベンズアルデヒド
Ｎ２注入口及びバブラー排出口及び機械式撹拌機を取り付けた５００mLの三口フラスコ中、６−tert−ブチルフタラジン−１（２Ｈ）−オン（６．４６ｇ、３１．９mmol、Ｅｑ：１．００）、２−クロロ−６−フルオロベンズアルデヒド（７．６ｇ、４７．９mmol、Ｅｑ：１．５）及び炭酸カリウム（８．８３ｇ、６３．９mmol、Ｅｑ：２）（微粉末）をＤＭＡ（７０ml）と混ぜ合わせて、黄色の懸濁液を得た。テトラエチルアンモニウムクロリド（６８８mg、４．１５mmol、Ｅｑ：０．１３）を加え、反応混合物を激しく撹拌しながら６８℃（浴温度）で温めた。反応混合物が溶液になった後、この溶液をこの温度で１時間撹拌した。反応物を７５℃（浴温度）で一晩温め続けた。追加の２−クロロ−６−フルオロベンズアルデヒド（５ｇ、３１．９mmol、Ｅｑ：１．００）を加え、反応混合物を７５℃（浴温度）で３日間温めた。反応混合物を３００mLのＨ２Ｏに注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２（５×３００mL）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。大量のＤＭＡが残留した。反応混合物を５００mLのＨ２Ｏに注ぎ、ジエチルエーテル（５×３００mL）で抽出した。エーテル層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空下で濃縮した。容量が約１５０mLになったとき、大量の白色の結晶性物質が生じた。生成物を濾過によって単離して、純粋な生成物（５．４ｇ）を得た。濾液を真空下で濃縮し、残渣を、ＳＦ２５−１６０ｇカラムを用いたAnalogix精製システム（５〜２５％（３：１  ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ）／ヘキサンで溶出する）を使用して精製して、追加の所望の生成物４．７５ｇを得た。２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−クロロ−ベンズアルデヒドの総収量は、１０．１ｇ（９３％）であった。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.27 (s, 9 H) 13.30 (d, J=7.55 Hz, 1 H) 13.34 - 13.51 (m, 2 H) 13.56 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 13.71 (dd, J=8.50, 1.70 Hz, 1 H) 14.12 (s, 1 H) 14.21 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 16.20 (s, 1 H)。LC/MS 観測値 [M+H]+340.8; [M+Na]+ 362.9。
【０１７６】
【化１７】
2015531781.tif 000025
６−tert−ブチル−２−（３−クロロ−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン
ＣＨ２Ｃｌ２（３５０ml）及びメタノール（３５０ml）中の２−（６−tert−ブチル−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−６−クロロベンズアルデヒド（６１ｇ、１７９mmol、Ｅｑ：１．００）の溶液に、０℃及び窒素流下で、激しく撹拌しながら、水素化ホウ素ナトリウム（７．４５ｇ、１９７mmol、Ｅｑ：１．１）を１ｇあたり２０分間かけて加えた。反応混合物を周囲温度まで温め、この温度で１時間撹拌した。水（１００mL）、続いて、ＣＨ２Ｃｌ２とさらなる水を滴下し、層を分離した。水相をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。合わせた有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過した後、黄色の液体を濃縮して、黄緑色の固体を得た。この固体をエーテル／酢酸エチル（６：１）で粉砕し、同じ溶媒で数回洗浄して、淡い黄緑色の固体を得た。この固体を、１％メタノールを含有するジクロロメタン中でスラリーにした。得られた白色の固体を濾過によって回収し、ジクロロメタン、次に、ジクロロメタン／エーテルで洗浄して、６−tert−ブチル−２−（３−クロロ−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オンを白色の固体として得た（２８．３ｇ）。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.45 (s, 9 H) 4.58 (br. s., 2 H) 7.31 (dd, J=7.93, 1.51 Hz, 1 H) 7.43 (t, J=7.93 Hz, 1 H) 7.57 (dd, J=8.12, 1.32 Hz, 1 H) 7.77 (d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.93 (dd, J=8.69, 1.89 Hz, 1 H) 8.33 (s, 1 H) 8.44 (d, J=8.69 Hz, 1 H)。LC/MS 観測値 [M+H]+343.0。
【０１７７】
【化１８】
2015531781.tif 000026
酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−クロロ−ベンジルエステル
ジクロロメタン（２５０ml）中の６−tert−ブチル−２−（３−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル）フタラジン−１（２Ｈ）−オン（２８．３ｇ、８２．６mmol、Ｅｑ：１．００）の溶液に、トリエチルアミン（１０．９ｇ、１０．１ml、１０７mmol、Ｅｑ：１．３）、無水酢酸（１１．０ｇ、１５．１ml、１０７mmol、Ｅｑ：１．３）及びＤＭＡＰ（２５２mg、２．０６mmol、Ｅｑ：０．０２５）を加え、溶液を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を３００mLのＨ２Ｏに注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２５０mL）で抽出した。
【０１７８】
有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して半固体を得た。半固体を３００mLの酢酸イソプロピル中に溶解し、濃縮して、わずかに黄色の固体を得た。この固体を冷却しながら１５０mLの酢酸イソプロピルで粉砕し、続いて、濾過し、３０mLの冷酢酸イソプロピル、次に、５０mLのヘキサン：酢酸イソプロピル（２：１）で１回洗浄して、酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−クロロ−ベンジルエステル（２３．９ｇ）を白色の綿毛状の固体として得た。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.44 (s, 9 H) 1.91 (s, 3 H) 5.18 (s, 2 H) 7.31 - 7.38 (m, 1 H) 7.45 (t, J=7.93 Hz, 1 H) 7.51 - 7.59 (m, 1 H) 7.73 (d, J=1.89 Hz, 1 H) 7.89 (dd, J=8.69, 1.89 Hz, 1 H) 8.25 (s, 1 H) 8.40 (d, J=8.69 Hz, 1 H)。LC/MS 観測値 [M+H]+385.0。
【０１７９】
【化１９】
2015531781.tif 000027
酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル
１Ｌの丸底フラスコに、２−（６−tert−ブチル−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−６−クロロベンジルアセテート（１６．４ｇ、４２．６mmol、Ｅｑ：１．００）及びビス（ピナコラト）ジボロン（２０．６ｇ、８１．０mmol、Ｅｑ：１．９）を加えた。その物質をメチルＴＨＦ（３００ml）中に溶解し、５分間撹拌した。混合物を排気し、アルゴンを３回再充填した後、酢酸カリウム（１０．５ｇ、１０７mmol、Ｅｑ：２．５）を湿気が入らないように素早く加えた。酢酸パラジウム（ＩＩ）（２３９mg、１．０７mmol、Ｅｑ：０．０２５）を加えた。Ｘ−ＰＨＯＳ（１．０２ｇ、２．１３mmol、Ｅｑ：．０５）を加えた。混合物を排気し、アルゴンを３回再充填した。橙色−黄色の混合物を６８℃（浴温度）に１時間加熱した。１時間後に所望の生成物が微量に生成しただけであった。反応温度を７０℃に調整した。反応の進行をＬＣＭＳによって注意深く監視した。反応物をこの温度でさらに９時間撹拌した後、少量の出発物質、微量の脱Ｃｌ副生成物と大部分の生成物をＬＣＭＳ分析によって確認することができ、反応物は淡い琥珀色のままであった。反応物を７０℃でさらに１時間撹拌し、反応を完了させた。色は褐色に変わった。反応物を周囲温度まで放冷した。反応混合物を４００mlのＨ２Ｏに注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×２５０ml）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過して、真空下で濃縮した。残渣を、ＳＦ２５−６００ｇカラムを用いたAnalogix精製システム（１００％ヘキサンで１５分間、次に、０〜２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出する）を使用して精製した。クロマトグラフィーによって単離した生成物ピークの中央部を取り出して濃縮し、１８ｇの＞９５％純粋な酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステルを黄色の泡状物として得た。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.34 (s, 12 H) 1.44 (s, 9 H) 1.87 (s, 3 H) 5.30 (br. s., 2 H) 7.39 - 7.57 (m, 2 H) 7.72 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 7.87 (dd, J=8.50, 1.70 Hz, 1 H) 7.97 (dd, J=6.42, 2.64 Hz, 1 H) 8.24 (s, 1 H) 8.40 (d, J=8.31 Hz, 1 H)。LC/MS 主要ＬＣピークについての観測値 [M+H]+477。この物質を数回調製し、所望の生成物の純度が約５０％〜約９５％まで変化したことに留意されたい。
【０１８０】
【化２０】
2015531781.tif 000028
６−フルオロ−２Ｈ−フタラジン−１−オン
Ｎ，Ｎ−ジエチル−４−フルオロ−２−ホルミル−ベンズアミド（２．９４ｇ、１３．２mmol）、ヒドラジン一水和物（Sigma-Aldrich；７２５mg、１４．５mmol）とＥｔＯＨ（１５mL）の混合物を、大容量のマイクロ波管中、５０℃で４５分間加熱した。氷ＡｃＯＨ（２mL）を加え、混合物をBiotage Initiatorマイクロ波中１５０℃で２時間加熱した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（７５mL）及びＥｔＯＡｃ（７０mL）を加えた。有機層を５％ＮａＨＣＯ３水溶液、次に、５０％ブライン水で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２×６０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、６−フルオロ−２Ｈ−フタラジン−１−オン（２．１４ｇ、９９％）を明黄色の粉状物として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 165。
【０１８１】
【化２１】
2015531781.tif 000029
２−メチル−２−（１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−プロピオニトリル
カリウムビス（トリメチルシリル）アミド（ＴＨＦ中０．９１Ｍ、Alfa-Aesar；４６．６mL、４２．４mmol）を、ＴＨＦ（２０mL）中の６−フルオロ−２Ｈ−フタラジン−１−オン（１．１６ｇ、７．１mmol）の溶液に加えた。混合物を油浴中７０℃で一晩加熱した。水（１２５mL）及びＥｔＯＡｃ（１００mL）を加えた。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×７０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて、黄色の固体（１．５２ｇ）を得た。この物質を温ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンで粉砕し、続いて、濾過することによって精製して、２−メチル−２−（１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−プロピオニトリル（１．１２ｇ、７４％）を明黄色の粉状物として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 214。
【０１８２】
【化２２】
2015531781.tif 000030
２−［２−（３−ブロモ−２−ホルミル−フェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル
２−メチル−２−（１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−プロピオニトリル（１．１２ｇ、５．２３mmol）、２，６−ジブロモベンズアルデヒド（２．２１ｇ、８．３７mmol）、ＮａＨＣＯ３（８７９mg、１０．５mmol）、ヨウ化銅（Ｉ）（９９６mg、５．２３mmol）及びＤＭＳＯ（３５．３mL）の混合物を約１１０℃で２時間加熱した。混合物を室温まで冷ました。ＣＨ２Ｃｌ２（４０mL）及び水（４０mL）を加えた。混合物をセライトに通して濾過し、セライトをＣＨ２Ｃｌ２及び少量のＭｅＯＨで十分に洗浄した。濾液中の層を分離し、有機層を５０％ブライン水で洗浄した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（２×４０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過して、真空下で濃縮した。残渣を、ＳＦ２５−６０ｇシリカカラムを用いたAnalogix精製システム（０〜５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）を使用して精製して、２−［２−（３−ブロモ−２−ホルミル−フェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル（１．８９mg、８２％）を明黄色の固体として約９０％の純度で得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 396/398。
【０１８３】
実施例１
【化２３】
2015531781.tif 000031
２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン
酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル（中間体５；１７７mg、３７１μmol）、４−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−クロロ−２−メチル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、Ｉ−１３の調製、工程２に記載されるように調製することができる；９０mg、２４７μmol）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル（１８mg、３７μmol）、第三リン酸カリウム（１４４mg、０．６８mmol）、水（３３２μL）とｎ−ブタノール（１．４mL）の混合物を排気によって脱気して、アルゴンを再充填した。
【０１８４】
ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（１０mg、１７μmol）を加え、混合物を前のように脱気した。混合物を１１０℃で２．５時間加熱した。水（３５mL）及びＥｔＯＡｃ（３５mL）を加え、混合物を分液漏斗中で振盪した。有機層を回収し、ブライン（３５mL）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２×３０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ、２４ｇカラムを用いたAnalogix精製システム（１〜２０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）を使用して精製して、酢酸２−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−６−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−ベンジルエステルと２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オンの混合物（１１２mg）を粘性の明黄色の油状物として得た。ジオキサン（５７２μL）及び２Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（９８０μL、１．９６mmol）を加え、混合物をアルゴン下５０℃で２時間加熱した。水（２５mL）及びＥｔＯＡｃ（５０mL）を加え、混合物を分液漏斗中で振盪した。有機層を回収し、ブライン（５０mL）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（２×４０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ、１２ｇカラムを用いたAnalogix精製システム（１〜１５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）を使用して精製して、２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン（８１mg、５２％）を明黄色の固体として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 636.0。
【０１８５】
実施例２
【化２４】
2015531781.tif 000032
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン
マイクロ波バイアル中の酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル（実施例５に記載されるように調製することができる；約７５％純粋；２１４mg、約０．３４mmol）、６−クロロ−２−メチル−４−（５−（１−メチルピぺリジン−４−イル）ピリジン−２−イルアミノ）ピリダジン−３（２Ｈ）−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、実施例５６の中間体に記載されるように調製することができる；１００mg、０．３mmol）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（Aldrich；８．６mg、１５μmol）、ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；１４．３mg、３０μmol）と第三リン酸カリウム（１５９mg、０．７５mmol）の混合物をパージし、ｎ−ブタノール（２．４mL）と水（６００μL）の脱気した混合物を加えた。混合物を砂浴中１１５℃で一晩加熱した。混合物をセライトに通して濾過して、濃縮し、クロマトグラフィー（０〜２５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製して、黄色の油状物（１５０mg）を得た。ＭｅＯＨ（２．３mL）及び炭酸カリウム（９６mg、０．７mmol）を加え、混合物を４５℃で１時間加熱した。溶解度を向上さるためにＣＨ２Ｃｌ２を加え、混合物を４５℃で再度加熱した。混合物を室温まで冷まし、水を滴下した。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、次に、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機抽出物を濃縮し、残渣を酢酸イソプロピルで粉砕した。固体を濾別して、エーテルで洗浄し、真空オーブンで数時間乾燥させて、６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン（１００mg、５５％）をオフホワイトの結晶として得た。ＮＭＲは、少量の酢酸イソプロピルの存在を示した。LC/MS 観測値 [M+H]+ 606.1。
【０１８６】
実施例３
【化２５】
2015531781.tif 000033
２−｛３−［５−（５−アゼチジン−１−イルメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン
マイクロ波バイアル中の酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル（実施例５に記載されるように調製することができる；約７５％純粋；２０６mg、約０．３２mmol）、４−（５−（アゼチジン−１−イルメチル）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）−６−クロロ−２−メチルピリダジン−３（２Ｈ）−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、実施例５８の中間体に記載されるように調製することができる；８９mg、０．２９mmol）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（Aldrich；８．３mg、１４μmol）、ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；１３．７mg、２９μmol）と第三リン酸カリウム（１８４mg、０．８７mmol）の混合物を窒素でパージし、ｎ−ブタノール（２．３mL）と水（５７６μL）の脱気した混合物を加えた。混合物を砂浴中１１５℃で一晩加熱した。混合物を蒸発させ、クロマトグラフィー（０〜２５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製して、黄色の油状物（１５０mg）を得た。ＭｅＯＨ（２．４mL）及び炭酸カリウム（８３mg、０．６mmol）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。水を滴下し、得られた混合物を室温で１時間撹拌した。固体を濾別し、真空オーブンで一晩乾燥させて、２−｛３−［５−（５−アゼチジン−１−イルメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン（７２mg、４３％）をオフホワイトの結晶性固体として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 581.4。
【０１８７】
実施例４
【化２６】
2015531781.tif 000034
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−２−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン
マイクロ波バイアル中の酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル（上記のように調製することができる；約７５％純粋；１７２mg、約０．２７mmol）、（Ｓ）−６−クロロ−２−メチル−４−（５−（１−メチルピロリジン−２−イル）ピリジン−２−イルアミノ）ピリダジン−３（２Ｈ）−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、実施例１８、工程３に記載されるように調製することができる；７７mg、０．２４mmol）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（Aldrich；６．９mg、１２μmol）、ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；１４．３mg、３０μmol）と第三リン酸カリウム（１５３mg、０．７２mmol）の混合物をパージし、ｎ−ブタノール（２．４mL）と水（６００μL）の脱気した混合物を加えた。混合物を砂浴中１１５℃で２．５時間加熱した。混合物をセライトに通して濾過して、濃縮し、クロマトグラフィー（０〜２５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製して、生成物の混合物１００mgを得た。ＭｅＯＨ（１．５８mL）、続いて、ＣＨ２Ｃｌ２を加え、固体を溶解した。炭酸カリウム（６５．４mg、０．４７mmol）を加え、混合物を４４℃で１．５時間加熱した。水を滴下し、混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を濾過して、固体を水及びＥｔ２Ｏで洗浄し、真空下で週末にかけて乾燥させて、６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−２−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン（８５mg、９１％）をオフホワイトの結晶性固体として得た。[M+H]+592.5。
【０１８８】
【化２７】
2015531781.tif 000035
酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−ベンジルエステル
６−クロロ−２−メチル−４−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、実施例３２、工程４に記載されるように調製することができる；１５０mg、４６９μmol）、ビス（ピナコラト）ジボロン（１５５mg、６１０μmol）、酢酸カリウム（１３８mg、１．４１mmol）とジオキサン（７mL）の混合物をアルゴン下で脱気した。ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；３３．５mg、７０．４μmol）及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（５．３mg、２３．５μmol）を加え、反応混合物を、アルゴン下、１００℃（外部温度）で３０分間撹拌した。加熱浴からフラスコを持ち上げ、２−（６−tert−ブチル−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−６−クロロベンジルアセテート（実施例４；１９９mg、５１６μmol）、炭酸カリウム（１９４mg、１．４１mmol）、トリシクロヘキシルホスフィン（１３．２mg、４６．９μmol）及びビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（１３．５mg、２３．５μmol）、及び水（１．５ml）を加えた。反応混合物をアルゴンでフラッシュし、激しく撹拌しながら８０℃で７時間加熱した。反応混合物を室温まで冷まし、水及びＥｔＯＡｃに注いだ。ＥｔＯＡｃ層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を、１２Ｇカラムを用いたAnalogixシステム（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ（８９：９：２→６６：２７：７）で溶出する）を使用して精製して、酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−ベンジルエステル（７８mg、２６％）を得た。LC/MS 観測値[M+H]+ 634。
【０１８９】
実施例５
【化２８】
2015531781.tif 000036
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン
酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−ベンジルエステル（７８mg、０．１２４mmol）、Ｋ２ＣＯ３（３４．２mg、０．２４７mmol）とＭｅＯＨ（１０mL）の混合物を４０℃で７５分間撹拌し、次に、室温まで冷ました。水及びＣＨ２Ｃｌ２を加え、水層をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をＥｔ２Ｏで粉砕し、得られた固体を真空下で一晩乾燥させて、６−tert−ツチル（tutyl）−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン（５７mg、７９％）を黄色の固体として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 592。
【０１９０】
【化２９】
2015531781.tif 000037
２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−｛１−メチル−５−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−ベンズアルデヒド
６−クロロ−２−メチル−４−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（Berthel, S. J.等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、実施例３３、工程１に記載されるように調製することができる；１５０mg、４６９μmol）、ビス（ピナコラト）ジボロン（１５５mg、６１０μmol）、酢酸カリウム（１３８mg、１．４１mmol）とジオキサン（７mL）の混合物をアルゴン下で脱気した。ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；３３．５mg、７０．４μmol）及び酢酸パラジウム（ＩＩ）（５．３mg、２３．５μmol）を加え、反応混合物を、アルゴン下、１００℃（外部温度）で３０分間撹拌した。加熱浴からフラスコを持ち上げ、２−（６−tert−ブチル−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−６−クロロベンズアルデヒド（実施例２；１６０mg、４６９μmol）、炭酸カリウム（１９４mg、１．４１mmol）、トリシクロヘキシルホスフィン（１３．２mg、４６．９μmol）及びビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（１３．５mg、２３．５μmol）、及び水（１．５ml）を加えた。反応混合物をアルゴンでフラッシュし、激しく撹拌しながら８０℃で１時間加熱した。反応混合物を室温まで冷まし、水及びＥｔＯＡｃに注いだ。ＥｔＯＡｃ層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を、Supelco 24Gカラムを用いたAnalogixシステム（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ（７７：１８：５）で溶出する）を使用して精製して、酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−｛１−メチル−５−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−ベンジルエステル（１６mg、６％）を得た。LC/MS 観測値[M+H]+ 633.9。
【０１９１】
実施例６
【化３０】
2015531781.tif 000038
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オンの調製
酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−｛１−メチル−５−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−ベンジルエステル（１６mg、２７μmol）、水素化ホウ素ナトリウム（１．６４mg、４３．４μmol）とメタノール（１mL）の混合物を窒素下で３０分間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、混合物を５分間撹拌し、次に、ＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ（８９：９：２→６６：２７：７）で溶出する）によって精製して、生成物を真空オーブンにて５０℃で一晩乾燥させて、６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン（１１．８mg、７４％）を明黄色の固体として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 592。
【０１９２】
【化３１】
2015531781.tif 000039
２−（２−｛２−ホルミル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル
溶液Ａを以下のように調製した：６−クロロ−２−メチル−４−（５−（１−メチルピぺリジン−４−イル）ピリジン−２−イルアミノ）ピリダジン−３（２Ｈ）−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、Ｉ−６７の調製、工程２に記載されるように製造することができる；１２５mg、０．３７４mmol）、ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；２７mg、５６μmol）、酢酸カリウム（１１０mg、１．１mmol）、ビス（ピナコラト）ジボロン（１２４mg、０．４９mmol）とジオキサン（４．４mL）の混合物を減圧下で真空脱気し、アルゴン雰囲気下に置いた。酢酸パラジウム（ＩＩ）（９．２５mg、４１．２μmol）を室温で加え、真空脱気サイクルを繰り返した。反応混合物を、アルゴン下、１００℃（外部温度）で１６分間撹拌した。反応混合物を周囲温度まで冷まし、アルゴン圧を使用してセライトプラグに通して濾過し（追加の２．５mLのジオキサンでセライトを洗浄する）、溶液Ａを得た。
【０１９３】
溶液Ｂを以下のように調製した：２−（２−（３−ブロモ−２−ホルミルフェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロフタラジン−６−イル）−２−メチルプロパンニトリル（実施例８；１５８mg、３９９μmol）、トリシクロヘキシルホスフィン（３４．２mg、１２２μmol）、Ｋ２ＣＯ３（２７６mg、２mmol）、ｎ−ＢｕＯＨ（４８６μL）、水（１．５２mL）とジオキサン（２．０３mL）の混合物を脱気した。ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３４．４mg、５９．８μmol）を室温で加えた。混合物を再度真空脱気し、次に、１１０℃に設定した加熱浴中で加熱した。
【０１９４】
溶液Ａを溶液Ｂに加え、得られた混合物を１１０℃で３５分間撹拌した。加熱を止め、反応混合物を一晩撹拌した。反応混合物をセライトに通して濾過し、セライトをＥｔＯＡｃで洗浄した。ＥｔＯＡｃ（３０mL）及び水（３０mL）を濾液に加え、濾液を分液漏斗中で振盪した。ＥｔＯＡｃ相を回収した。水層をＥｔＯＡｃ（２×２０mL）で逆抽出し、合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を、ＳＦ１５−２４ｇカラムを用いたAnalogixシステムを使用したクロマトグラフィー（３〜１８％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製して、２−（２−｛２−ホルミル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル（１７８mg、７３％）を灰色の粉状物として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 615。
【０１９５】
実施例７
２−（２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル
【化３２】
2015531781.tif 000040
２−（２−｛２−ホルミル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル（実施例１７；１７８mg、０．２９mmol）の混合物をＭｅＯＨ（４mL）及びＣＨ２Ｃｌ２（２．３mL）中に溶解し、０℃まで冷却した。水（０．５mL）中のＮａＢＨ４（５５mg、１．５mmol）の溶液を滴下し、混合物を１０分間撹拌した。次に、追加の水（０．５mL）中のＮａＢＨ４（５５mg、１．５mmol）を加え、混合物をさらに１０分間撹拌した。水（６０mL）及びＣＨ２Ｃｌ２（６０mL）を加え、その物質を分液漏斗中で振盪した。有機層を回収し、５０％希釈ブライン溶液で洗浄し、水相をＣＨ２Ｃｌ２（２×４０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を、ＳＦ１５−１２Ｇシリカカラムを用いたAnalogix精製システム（３〜１４％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）を使用して精製して、明黄色の固体（１３８mg）を得た。これをＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンから再結晶化して、２−（２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル（１０９mg、６１％）を白色の結晶として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 617。
【０１９６】
実施例８
【化３３】
2015531781.tif 000041
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（５−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−２−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン
ｎ−ＢｕＯＨ（４mL）と水（１mL）の脱気した混合物を、マイクロ波バイアル中の酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル（実施例５に記載されるように調製することができる；約７５％純粋；３６４mg、約０．５７mmol）、６−クロロ−２−メチル−４−（５−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−２−イルアミノ）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、実施例５９の調製の中間体に記載されるように調製することができる；１５０mg、０．５１mmol）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（Aldrich；１４．６mg、２５μmol）、ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；２４．３mg、５１μmol）と第三リン酸カリウム（３２４mg、１．５mmol）の混合物に加えた。バイアルに蓋をし、混合物を砂浴中１１５℃で２．５時間加熱した。混合物をセライトに通して濾過し、蒸発させ、クロマトグラフィー（０〜２５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製して、１７５mgの生成物の混合物を得た。ＭｅＯＨ（２．９mL）及び炭酸カリウム（１１９mg、０．８６mmol）を加え、混合物を４０℃で１時間撹拌した。水を滴下し、得られた混合物を室温で１時間撹拌した。水を滴下し、混合物を室温で１時間撹拌した。得られた固体を濾別し、真空オーブンで一晩乾燥させて、６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（５−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−２−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン（１４７mg、５１％）を白色の結晶性固体として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 567.0。
【０１９７】
実施例９
【化３４】
2015531781.tif 000042
６−tert−ブチル−２−｛３−［５−（１’−エチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン
６−クロロ−４−（１’−エチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−２−メチル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、実施例６９の中間体に記載されるように製造することができる；１３３mg、０．３８mmol）、２−（６−tert−ブチル−１−オキソフタラジン−２（１Ｈ）−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンジルアセテート（実施例５に記載されるように調製することができる；約７５％純粋；２４２mg、３８１μmol）及び第三リン酸カリウム（２０２mg、９５３μmol）、水（１．２５mL）及びｎＢｕＯＨ（５mL）の混合物にアルゴンを５分間バブリングした。ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；１８．２mg、３８μmol）及びビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（Strem Chemicals；１１．０mg、１９．１μmol）を加えた。管を密閉し、反応混合物を１１５℃で６時間加熱した。反応混合物を水（１００mL）に注ぎ、混合物をＥｔＯＡｃ（３×７５mL）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をクロマトグラフィー（０〜６％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、次に、ＮＨ４ＯＨ／ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（４：１４：８２）で溶出する）によって精製し、次に、ＥｔＯＡｃ／Ｅｔ２Ｏで粉砕して、６−tert−ブチル−２−｛３−［５−（１’−エチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン（３２mg、１３％）をオフホワイトの固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲは、＜３％の不純物の酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−［５−（１’−エチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−ベンジルエステルの存在を示した。LC/MS 観測値 [M+H]+ 620.1。
【０１９８】
実施例１０
【化３５】
2015531781.tif 000043
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（モルホリン−４−カルボニル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン
ｎ−ＢｕＯＨ（２．２９mL）と水（０．５７mL）の脱気した混合物を、マイクロ波バイアル中の酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル（実施例５に記載されるように調製することができる；約７５％純粋；２０４mg、約０．３２mmol）、６−クロロ−２−メチル−４−［５−（モルホリン−４−カルボニル）−ピリジン−２−イルアミノ］−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、Ｉ−２の調製に記載されるように調製することができる；１００mg、０．２９mmol）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（８．２mg、１４．３μmol）、ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；１３．６mg、２８．６μmol）と第三リン酸カリウム（１５２mg、０．７２mmol）の混合物に加えた。混合物を砂浴中１１５℃で一晩加熱した。混合物をセライトに通して濾過し、蒸発させ、クロマトグラフィー（０〜２０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製して固体を得た。メタノールを加えて、混合物を濾過し、真空オーブンで週末にかけて乾燥させて、６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（モルホリン−４−カルボニル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン（４６mg、２６％）を白色の粉状物として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 622.4。
【０１９９】
【化３６】
2015531781.tif 000044
２−［２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ホルミル−フェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル
溶液Ａを以下のように調製した：４−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−クロロ−２−メチル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、Ｉ−１３の調製、工程２に記載されるように調製することができる；１５０mg、０．４１mmol）、ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；２９．５mg、６２μmol）、酢酸カリウム（１２１mg、１．２mmol）、ビス（ピナコラト）ジボロン（Matrix Scientific；１３６mg、０．５４mmol）とジオキサン（５．３mL）の混合物を減圧下で真空脱気し、アルゴン雰囲気下に置いた。酢酸パラジウム（ＩＩ）（１０．２mg、４５μmol）を室温で加え、真空脱気サイクルを繰り返した。反応混合物を、アルゴン下、１００℃（油浴温度）で１６分間撹拌した。アルゴン圧を使用して、反応混合物をセライトプラグに通して濾過し（追加の２．５mLのジオキサンでセライトを洗浄する）、溶液Ａを得た。
【０２００】
溶液Ｂを以下のように調製した：２−（２−（３−ブロモ−２−ホルミルフェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロフタラジン−６−イル）−２−メチルプロパンニトリル（実施例８；１５６mg、３９４μmol），トリシクロヘキシルホスフィン（３３．８mg、１２０μmol）、Ｋ２ＣＯ３（２７６mg、２mmol）、ｎ−ＢｕＯＨ（４８０μL）、水（１．５mL）とジオキサン（２mL）の混合物を脱気した。ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３４mg、５９μmol）を室温で加えた。混合物を再度真空脱気し、次に、１１０℃に設定した油浴中で加熱した。
【０２０１】
溶液Ａを溶液Ｂに加え、得られた混合物を１１０℃で６０分間撹拌した。反応混合物を室温まで冷まし、セライトに通して濾過した。セライトをＥｔＯＡｃで洗浄した。ＥｔＯＡｃ（３０mL）及び水（３０mL）を濾液に加え、ＥｔＯＡｃ相を回収した。水層をＥｔＯＡｃ（２×２０mL）で逆抽出し、合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を、ＳＦ１５−１２ｇカラムを用いたAnalogixシステムを使用したクロマトグラフィー（３〜１８％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製して、２−［２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ホルミル−フェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル（２０１mg、７９％）を明褐色の粉状物として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 645.0。
【０２０２】
実施例１１
【化３７】
2015531781.tif 000045
２−［２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル
ＭｅＯＨ（４．５mL）及びＣＨ２Ｃｌ２（２．３mL）中の２−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−６−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−ベンズアルデヒド（２０１mg、０．３１mmol）の混合物に、水（０．５mL）中のＮａＢＨ４（５９mg、１．６mmol）の溶液を滴下によって加え、得られた混合物を０℃で１０分間撹拌した。水（０．５mL）中のＮａＢＨ４（５９mg、１．６mmol）の溶液を加え、混合物をさらに１０分間撹拌した。水（６０mL）及びＣＨ２Ｃｌ２（６０mL）を加え、層を分離した。有機層を５０％ブライン水（６０mL）で洗浄し、合わせた水溶液をＣＨ２Ｃｌ２（２×４０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を、ＳＦ１５−１２Ｇカラムを用いたAnalogix精製システム（２〜１４％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）を使用して精製し、続いて、ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンから再結晶化して、２−［２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル（１４５mg、７２％）を白色の結晶として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 647.1。
【０２０３】
【化３８】
2015531781.tif 000046
酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（５−｛５−［２−（３−ヒドロキシ−プロピルアミノ）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−ベンジルエステル
４−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−クロロ−２−メチル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、Ｉ−１３の調製、工程２に記載されるように調製することができる；１．５０ｇ、４．１２mmol）、酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル（ＥＬＮ００３９８７−１４９；８３％純粋；２．９５ｇ、５．１４mmol）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（Strem Chemicals；１１９mg、０．２１mmol）、ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；１９７mg、０．４１mmol）及び第三リン酸カリウム（２．１９ｇ、１０．３mmol）、ｎＢｕＯＨ（３３mL）及び水（８．２５mL）の混合物をアルゴンでフラッシュし、次に、１００℃で一晩加熱した。混合物をセライトに通して濾過し、濃縮した。残渣を、Analogix精製システム（ＣＨ２Ｃｌ２〜ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ（８２：１４：４）で溶出する）を使用して精製した。精製システムのポンプは、精製の間に起動しなくなった。溶出剤としてＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ（８２：１４：４→５５：３６：９））を使用した異なるAnalogix精製システムを使用して、生成物をカラムから溶出した。生成物をＥｔ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ（２：１）中でスラリー化／溶解して、混合物を４８時間静置した。固体を濾過して、酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（５−｛５−［２−（３−ヒドロキシ−プロピルアミノ）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−ベンジルエステル（５２５mg、１９％）を明黄色の固体として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 696.0。
【０２０４】
実施例１２
【化３９】
2015531781.tif 000047
６−tert−ブチル−２−［２−ヒドロキシメチル−３−（５−｛５−［２−（３−ヒドロキシ−プロピルアミノ）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン
酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（５−｛５−［２−（３−ヒドロキシ−プロピルアミノ）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−ベンジルエステル（実施例２４；２９５mg、０．４２mmol）、Ｋ２ＣＯ３（１１７mg、０．８５mmol）とＭｅＯＨ（３０mL）の混合物を４０℃で７５分間撹拌し、次に、室温まで冷ました。水及びＣＨ２Ｃｌ２を加え、水層をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を、１２ｇのSilicycleカラムを使用したクロマトグラフィー（１〜１５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製した。生成物が均質な試料を蒸発させ、残渣を真空下５０℃で乾燥させて、６−tert−ブチル−２−［２−ヒドロキシメチル−３−（５−｛５−［２−（３−ヒドロキシ−プロピルアミノ）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン（１１９mg、４３％）を明黄色の泡状物として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 654.2。
【０２０５】
実施例１３
【化４０】
2015531781.tif 000048
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−オキセタン−３−イル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン
６−クロロ−２−メチル−４−（１’−オキセタン−３−イル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、実施例８０、工程１に記載されるように調製することができる；２１３mg、５６７μmol）、酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル（実施例５に記載されるように調製することができる；約７５％純粋；６４８mg、約１．０mmol）及び第三リン酸カリウム（３０１mg、１．４２mmol）、水（１．２５mL）及びｎＢｕＯＨ（５mL）の混合物にアルゴンを５分間バブリングした。ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；２７mg、５７μmol）及びビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（Strem Chemicals；１６．３mg、２８μmol）を加えた。管を密閉し、反応混合物を１１５℃で４時間加熱した。反応混合物を水（１００mL）に注ぎ、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５×７５mL）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をクロマトグラフィー（０〜４％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製して、アルコールと酢酸エステルの生成物の混合物（３７４mg）を得た。ＴＨＦ（１２mL）及び１Ｎ  ＮａＯＨ（２mL）を加え、混合物を６０℃で一晩加熱した。混合物を水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで３回、ＣＨ２Ｃｌ２で１回抽出した。有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をクロマトグラフィー（１〜５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製してガラス状物を得た。ＥｔＯＡｃ（４mL）及びＥｔ２Ｏ（３０mL）を加え、白色の沈殿物を濾別し、エーテルで洗浄して、６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−オキセタン−３−イル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン（２４６mg、６７％）を白色の粉状物として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 648.1。
【０２０６】
【化４１】
2015531781.tif 000049
６−クロロ−４−｛５−［２−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−２−メチル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン
２−［６−（６−クロロ−２−メチル−３−オキソ−２，３−ジヒドロ−ピリダジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イルオキシ］−２−メチル−プロピオンアルデヒド（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、Ｉ−１３の調製、工程１に記載されるように調製することができる；６６５mg、２．０６mmol）、３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩（３４７mg、２．６８mmol）及び１，２−ジクロロエタン（７０mL）の混合物を室温で１時間撹拌した。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（６５５mg、３．０９mmol）を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加え、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５×２０mL）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をクロマトグラフィー（３０〜５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、６−クロロ−４−｛５−［２−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−２−メチル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（５６６mg、６９％）を白色の粉状物として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 400.0。
【０２０７】
実施例１４
【化４２】
2015531781.tif 000050
６−tert−ブチル−２−［３−（５−｛５−［２−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−２−ヒドロキシメチル−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン
６−クロロ−４−｛５−［２−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−２−メチル−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（実施例２７；１２０mg、０．３mmol）、酢酸２−（６−tert−ブチル−１−オキソ−１Ｈ−フタラジン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ベンジルエステル（実施例５に記載されるように調製することができる；３１０mg、０．３９mmol）、第三リン酸カリウム（１４０mg、０．６６mmol）、ｎＢｕＯＨ（４mL）と水（１mL）の混合物を排気によって脱気し、アルゴンを再充填した。ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicalsから入手可能；２１．５mg、４５μmol）及びビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（Strem Chemicalsから入手可能；１２．１mg、２１μmol）を加えた。混合物を再度脱気し、次に、１１５℃で３時間加熱した。水（３５mL）及びＥｔＯＡｃ（３５mL）を加えた。ＥｔＯＡｃ層をブライン（３５mL）で洗浄し、ブライン層をＥｔＯＡｃ（２×３０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣をクロマトグラフィー（５０〜７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、６−tert−ブチル−２−［３−（５−｛５−［２−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−２−ヒドロキシメチル−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン（１３０mg、６５％）を白色の固体として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 672.0。
【０２０８】
【化４３】
2015531781.tif 000051
２−（２−｛２−ホルミル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル
６−クロロ−２−メチル−４−（５−（１−メチルピぺリジン−４−イル）ピリジン−２−イルアミノ）ピリダジン−３（２Ｈ）−オン（Berthel, S. J 等の米国特許出願公開第２０１２００４０９４９号、Ｉ−６７の調製、工程２に記載されるように製造することができる；１４０mg、０．４２mmol）、ＸＰｈｏｓ（２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル、Strem Chemicals；３０mg、６３μmol）、酢酸カリウム（１２３mg、１．２６mmol）、ビス（ピナコラト）ジボロン（Matrix Scientific；１３８mg、０．５５mmol）とジオキサン（７mL）の混合物を排気によって脱気し、続いて、アルゴンを再充填した。酢酸パラジウム（ＩＩ）（１０．４mg、４６μmol）を加え、混合物を再度脱気した。混合物を、アルゴン下、１００℃で１６分間加熱した。アルゴン圧を使用して、反応混合物をセライトプラグに通して濾過し（追加の２．５mLのジオキサンでセライトを洗浄する）、溶液Ａを得た。
【０２０９】
溶液Ｂを以下のように調製した：２−［２−（３−ブロモ−２−ホルミル−フェニル）−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル（Berthel, S. J.等の米国特許出願公開第２０１００２２２３２５、実施例１５３に記載されるように調製することができる；１６６mg、０．４２mmol）、トリシクロヘキシルホスフィン（３６mg、１２８μmol）、Ｋ２ＣＯ３（２９０mg、２．１mmol）、ｎ−ＢｕＯＨ（５３４μL）、水（２．１mL）とジオキサン（２．２２mL）の混合物を脱気した。ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（３６．１mg、６３μmol）を室温で加えた。混合物を再度真空脱気し、次に、１１０℃に設定した加熱浴中で加熱した。
【０２１０】
溶液Ａを溶液Ｂに加え、得られた混合物を１１０℃で６０分間撹拌した。加熱を止め、反応混合物を一晩撹拌した。反応混合物をセライトに通して濾過し、セライトをＥｔＯＡｃで洗浄した。ＥｔＯＡｃ（３０mL）及び水（３０mL）を濾液に加え、ＥｔＯＡｃ相を回収した。水層をＥｔＯＡｃ（２×２０mL）で逆抽出し、合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を、ＳＦ２５−２４ｇカラムを用いたAnalogixシステムを使用したクロマトグラフィー（２〜１３％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）によって精製して、２−（２−｛２−ホルミル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル（１５８mg、６１％）を明褐色の半固体として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 616.0。
【０２１１】
実施例１５
【化４４】
2015531781.tif 000052
２−（２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル
水（０．７５mL）中のＮａＢＨ４（４９mg、１．３mmol）の溶液を、２−（２−｛２−ホルミル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル（１５８mg、０．２６mmol）、ＣＨ２Ｃｌ２（２mL）及びＭｅＯＨ（２mL）の冷却（約０℃）混合物に加えた。混合物を１０分間撹拌した。水（０．７５mL）中のＮａＢＨ４（４９mg、１．３mmol）の溶液を加え、混合物を１０分間撹拌した。水（０．７５mL）中のＮａＢＨ４（６６mg、１．７mmol）の溶液を加え、混合物を５分間撹拌した。上の水層を除去し、ＭｅＯＨ（１mL）を加えた。２つの追加の水（０．７５mL）中のＮａＢＨ４（６６mg、１．７mL）を１０分間隔で加え、反応混合物を１０分間撹拌した。水（６０mL）及びＣＨ２Ｃｌ２（５０mL）を加えた。混合物を分液漏斗中で振盪し、有機層を分離した。有機層を５０％ブライン水（５０mL）で洗浄し、合わせた水相をＣＨ２Ｃｌ２（２×４０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を、ＳＦ１５−１２Ｇカラムを用いたAnalogix精製システム（１〜１６％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出する）を使用して精製して、オフホワイトの固体（１０１mg）を得た。これをＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンから再結晶化して、２−（２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル（８１mg、９２％）をオフホワイトの粉状物として得た。LC/MS 観測値 [M+H]+ 618.2。
【０２１２】
生物学的実施例
ブルトン型チロシンキナーゼ（Ｂｔｋ）阻害アッセイ
本アッセイは、濾過による放射性３３Ｐリン酸化生成物の捕獲である。Ｂｔｋ、ビオチン化ＳＨ２ペプチド基質（Ｓｒｃ相同）及びＡＴＰの相互作用は、ペプチド基質のリン酸化反応を引き起こす。ビオチン化生成物は、結合したストレプトアビジンセファロースビーズである。全ての結合した放射性標識生成物をシンチレーションカウンターによって検出する。
【０２１３】
アッセイするプレートは、９６ウェルポリプロピレン（Greiner）及び９６ウェルの１．２μm親水性ＰＶＤＦフィルタープレート（Millipore）である。ここに報告する濃度は、最終アッセイ濃度である：ＤＭＳＯ中１０〜１００μMの化合物（Burdick and Jackson）、５〜１０nM Ｂｔｋ酵素（Ｈｉｓタグ化、完全長）、３０μMペプチド基質（ビオチン−Ａｃａ−ＡＡＡＥＥＩＹＧＥＩ−ＮＨ２）、１００μM ＡＴＰ（Sigma）、８mMイミダゾール（Sigma、ｐＨ７．２）、８mMグリセロール−２−ホスフェート（Sigma）、２００μM ＥＧＴＡ（Roche Diagnostics）、１mM ＭｎＣｌ２（Sigma）、２０mM ＭｇＣｌ２（Sigma）、０．１mg/ml ＢＳＡ（Sigma）、２mM ＤＴＴ（Sigma）、１μＣｉ ３３Ｐ  ＡＴＰ（Amersham）、２０％ストレプトアビジンセファロースビーズ（Amersham）、５０mM ＥＤＴＡ（Gibco）、２Ｍ ＮａＣｌ（Gibco）、２Ｍ ＮａＣｌ  ｗ／１％リン酸（Gibco）、microscint-20（Perkin Elmer）。
【０２１４】
ＩＣ５０の決定は、標準的な９６ウェルプレートアッセイテンプレートから得られるデータを利用して、化合物あたり１０個のデータ点から算出する。１種の対照化合物及び７種の未知阻害剤を各プレートで試験し、各プレートを２回実行した。典型的には、化合物を１００μMから開始して３nMで終了する半対数（half-log）系列で希釈した。対照化合物は、スタウロスポリンとした。バックグラウンドをペプチド基質の不在下でカウントした。総活性をペプチド基質の存在下で決定した。以下のプロトコルを使用してＢｔｋ阻害を決定した。
【０２１５】
１）試料調製：試験化合物を、アッセイ緩衝液（イミダゾール、グリセロール−２−ホスフェート、ＥＧＴＡ、ＭｎＣｌ２、ＭｇＣｌ２、ＢＳＡ）中、半対数増分で希釈した。
２）ビーズ調製
ａ．）５００ｇで遠心分離することによってビーズをすすぐ。
ｂ．）ＰＢＳ及びＥＤＴＡを用いてビーズを再構成して、２０％のビーズスラリーを作製する。
３）基質を含有しない反応混合物（アッセイ緩衝液、ＤＴＴ、ＡＴＰ、３３Ｐ ＡＴＰ）及び基質を含有する混合物（アッセイ緩衝液、ＤＴＴ、ＡＴＰ、３３Ｐ ＡＴＰ、ペプチド基質）を３０℃で１５分間プレインキュベートする。
４）アッセイを開始するために、酵素緩衝液（イミダゾール、グリセロール−２−ホスフェート、ＢＳＡ）中のＢｔｋ１０μL及び試験化合物１０μLをＲＴで１０分間プレインキュベートする。
５）基質を含有又は不含有の反応混合物３０μLをＢｔｋ及び化合物に加える。
６）全アッセイ混合物５０μLを３０℃で３０分間インキュベートする。
７）アッセイ液４０μLをフィルタープレート中のビーズスラリー１５０μLに移して、反応を停止する。
８）３０分後、以下の工程でフィルタープレートを洗浄する：
ａ．ＮａＣｌ  ３×２５０μL
ｂ．ＮａＣｌ（１％リン酸を含有する）  ３×２５０μL
ｃ．Ｈ２Ｏ  １×２５０μL
９）プレートを６５℃で１時間又はＲＴで一晩乾燥させる。
１０）microscint-20 ５０μLを加えて、シンチレーションカウンターで３３Ｐ（cpm）をカウントする。
生データ（cpm）から活性率を算出する：
活性率＝（試料−ｂｋｇ）／（総活性−ｂｋｇ）×１００
ワンサイト用量応答シグモイドモデルを使用して、活性率からＩＣ５０を算出する：
ｙ＝Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（ｘ／Ｃ）Ｄ））））
ｘ＝化合物濃度、ｙ＝活性％、Ａ＝最小、Ｂ＝最大、Ｃ＝ＩＣ５０、Ｄ＝１（ヒルの傾き）
【０２１６】
ＣＤ６９発現により測定される全血中のＢ細胞活性化の阻害
ヒト血液中のＢ細胞のＢ細胞受容体媒介活性化を抑制するＢｔｋ阻害剤の能力を試験する手順は以下の通りである：
【０２１７】
ヒト全血（ＨＷＢ）は、以下の制限のある健康なボランティアから得る：２４時間薬物不使用の非喫煙者。血液を静脈穿刺によってヘパリンナトリウムで抗凝固処理したバキュテイナー（Vacutainer）管に採取する。試験化合物を、ＰＢＳ（２０×）で所望の開始薬物濃度の１０倍に希釈し、続いて、ＰＢＳ中の１０％ＤＭＳＯで３倍系列希釈して、９点の用量応答曲線を作成する。各化合物希釈物５．５μlを、２mlの９６ウェルＶ底プレート（Analytical Sales and Services, #59623-23）に２連で加え；ＰＢＳ中の１０％ＤＭＳＯ５．５μlを対照ウェル及び非刺激ウェルに加える。ＨＷＢ（１００μl）を各ウェルに加え、混合した後、プレートを３７℃、５％ＣＯ２、湿度１００％で３０分間インキュベートする。ヤギＦ（ａｂ’）２抗ヒトＩｇＭ（Southern Biotech, #2022-14）（５００μg/ml溶液１０μl、最終濃度５０μg/ml）を各ウェル（非刺激ウェルを除く）に混合しながら加え、プレートをさらに２０時間インキュベートする。
【０２１８】
２０時間のインキュベートの最後に、試料を、蛍光プローブ標識抗体（１５μlのＰＥマウス抗ヒトＣＤ２０、BD Pharmingen, #555623、及び／又は２０ulのＡＰＣマウス抗ヒトＣＤ６９、BD Pharmingen #555533）と、３７℃、５％ＣＯ２、湿度１００％で３０分間インキュベートする。誘導対照、補正調整用の未染色及び単一染色、並びに初期電圧設定を含める。次に、試料を1×Pharmingen Lyse Buffer（BD Pharmingen # 555899）１mlで溶解し、プレートを１８００rpmで５分間遠心分離する。上清を吸引により除去し、残ったペレットをさらなる１×Pharmingen Lyse Buffer（１ml）で再度溶解して、プレートを前回と同様に遠心沈殿する。上清を吸引し、残ったペレットをＦＡＣｓ緩衝液（ＰＢＳ＋１％ＦＢＳ）中で洗浄する。最終スピンの後、上清を除去し、ペレットをＦＡＣｓ緩衝液１８０μl中に再懸濁する。BD LSR IIフローサイトメーターのＨＴＳ９６ウェルシステムで実行するのに適した９６ウェルプレートに試料を移す。
【０２１９】
使用する蛍光体に対して適切な励起波長及び発光波長を使用して、データを取得し、Cell Quest Softwareを使用して陽性細胞のパーセント値を得る。結果は、最初にＦＡＣＳ解析ソフトウェア（Flow Jo）によって解析する。試験化合物のＩＣ５０は、ＣＤ６９陽性細胞（抗ＩｇＭによる刺激後にＣＤ２０陽性でもある）のパーセントを５０％減少させる濃度（非刺激バックグラウンドの８個のウェルの平均を減算した後の８個の対照ウェルの平均）として定義する。ＩＣ５０値は、XLfitソフトウェアバージョン３、式２０１を使用して算出する。
【０２２０】
このアッセイについての代表化合物のデータを、下記の表ＩＩに列挙する。
【０２２１】
【表２】
2015531781.tif 000053
Ｂ細胞活性化の阻害−Ramos細胞におけるＢ細胞ＦＬＩＰＲアッセイ
【０２２２】
本発明の化合物によるＢ細胞活性化の阻害は、抗ＩｇＭ刺激Ｂ細胞応答に及ぼす試験化合物の効果を決定することによって実証される。
【０２２３】
Ｂ細胞ＦＬＩＰＲアッセイは、抗ＩｇＭ抗体による刺激からの細胞内カルシウム増加に対する潜在的阻害剤の効果を決定する細胞ベースの機能的方法である。Ramos細胞（ヒトバーキットリンパ腫細胞株、ATCC-No. CRL-1596）を増殖培地（後述する）中で培養した。アッセイの前日に、Ramos細胞を新しい増殖培地（上記と同じ）中に再懸濁し、組織培養フラスコ中で、濃度を０．５×１０６／mLに設定した。アッセイ当日、細胞をカウントし、組織培養フラスコ中、１μM ＦＬＵＯ−３ＡＭ（TefLabs Cat-No. 0116、無水ＤＭＳＯ及び１０％プルロニック酸（Pluronic acid）中に調製）を補充した増殖培地中で、濃度を１×１０６／mLに設定し、３７℃（４％ＣＯ２）で１時間インキュベートした。細胞外色素を除去するために、細胞を遠心分離（５分間、１０００rpm）によって回収して、ＦＬＩＰＲ緩衝液（後述する）中に１×１０６細胞／mLで再懸濁し、次に、９６ウェルポリ−Ｄ−リシン被覆黒色／透明プレート（BD Cat-No. 356692）に１×１０５細胞／ウェルで分注した。試験化合物を、１００μM〜０．０３μM（７種の濃度、詳細は下記）の範囲の様々な濃度で加え、細胞をＲＴで３０分間インキュベートした。１０μg/mLの抗ＩｇＭ（Southern Biotech, Cat-No. 2020-01）を加えることによって、Ramos細胞のＣａ２＋シグナル伝達を刺激して、ＦＬＩＰＲ（Molecular Devices、アルゴンレーザーを備えたＣＣＤカメラを使用して、４８０nM励起における９６ウェルプレートの画像を取得する）で測定した。
【０２２４】
培地／緩衝液：
増殖培地：Ｌ−グルタミン（Invitrogen, Cat-No. 61870-010）、１０％ウシ胎仔血清（FBS, Summit Biotechnology Cat-No. FP-100-05）；１mM ピルビン酸ナトリウム（Invitrogen Cat. No. 11360-070）を用いたＲＰＭＩ １６４０培地。
ＦＬＩＰＲ緩衝液：ＨＢＳＳ（Invitrogen, Cat-No. 141175-079）、２mM ＣａＣｌ２（Sigma Cat-No. C-4901）、ＨＥＰＥＳ（Invitrogen, Cat-No. 15630-080）、２．５mM プロベネシド（Sigma, Cat-No. P-8761）、０．１％ＢＳＡ（Sigma, Cat-No.A-7906）、１１mM グルコース（Sigma, Cat-No.G-7528）。
【０２２５】
化合物希釈の詳細：
１００μMの最も高い最終アッセイ濃度を達成するために、１０mMの化合物ストック溶液（ＤＭＳＯ中に作製）２４μLをＦＬＩＰＲ緩衝液５７６μLに直接加える。試験化合物をＦＬＩＰＲ緩衝液中で希釈し（Biomek 2000ロボットピペッターを使用して）、以下の希釈スキームを得る：ビヒクル、１．００×１０−４Ｍ、１．００×１０−５、３．１６×１０−６、１．００×１０−６、３．１６×１０−７、１．００×１０−７、３．１６×１０−８。
【０２２６】
アッセイ及び解析：
カルシウムの細胞内増加は、最大−最小統計値（Molecular DevicesのＦＬＩＰＲ対照及び統計値エクスポートソフトウェアを使用し、刺激抗体を加えることによって生じるピークから休止ベースラインを減算する）を使用して報告した。ＩＣ５０は、非線形曲線当てはめ（GraphPad Prism software）を使用して決定した。
【０２２７】
マウスのコラーゲン誘発関節炎（ｍＣＩＡ）
０日目に、マウスの尾の付け根又は背中の数か所に、完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）中のＩＩ型コラーゲンのエマルションを注射（i.d.）する。コラーゲン免疫後、動物は、２１〜３５日目頃に関節炎を発症する。関節炎の発症を、不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）中のコラーゲンの全身投与（i.d.）によって２１日目に同期（追加免疫）する。追加免疫に対するシグナルである軽度関節炎（採点１又は２；下記の採点の説明を参照）の発症について、２０日目以降毎日動物を調べる。追加免疫後、マウスを採点し、候補治療薬剤を所定の期間（典型的には、２〜３週間）及び毎日（ＱＤ）又は１日２回（ＢＩＤ）の投薬頻度で投薬する。
【０２２８】
ラットのコラーゲン誘発関節炎（ｒＣＩＡ）
０日目に、ラットの背中の数か所に、不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）中のウシＩＩ型コラーゲンのエマルションを皮内注射（i.d.）によって注射する。コラーゲンエマルションの追加免疫注射（i.d.）を、７日目頃に、尾の付け根又は背中の別の部位に行う。関節炎は、一般に、最初のコラーゲン注射の１２〜１４日後に観察される。１４日目以降、後述（関節炎の評価）のように関節炎の発症について動物を評価することができる。候補治療薬剤を、２回目の抗原刺激の時点から開始し、所定の期間（典型的には、２〜３週間）及び毎日（ＱＤ）又は１日２回（ＢＩＤ）の投薬頻度で、動物に予防的に投薬する。
【０２２９】
関節炎の評価：
両方のモデルにおいて、後述する基準に従って４本の脚を評価することを含む採点システムを使用して、脚及び肢関節の炎症の発症を定量する：
採点：１＝脚又は１本の指の腫脹及び／又は発赤
２＝２つ以上の関節の腫脹
３＝２つ超の関節が関係する脚の全体的な腫脹
４＝脚及び指全体の重度の関節炎。
【０２３０】
評価は、ベースライン測定については０日目に行い、最初の兆候又は腫脹で再び評価を開始し、１週間に最大３回、実験の最後まで行う。個々の脚の４個の採点（動物あたり最大１６の採点を与える）を足すことによって、各マウスの関節炎指標を得る。
【０２３１】
ラットのインビボ喘息モデル
雄のBrown-Norwayラットを、ミョウバン０．２ml中のＯＡ（オボアルブミン）１００μgで週に１回３週間にわたって（０、７及び１４日目）腹腔内投与によって感作する。２１日目（最後の感作の１週間後）に、ラットにビヒクル又は化合物製剤のいずれかを皮下に投与（q.d.）して、０．５時間後、ＯＡエアロゾル抗原刺激（１％ＯＡで４５分間）を行い、抗原刺激の４時間後又は２４時間後に終了する。屠殺時に、血清検査及びＰＫ用に全ての動物からそれぞれ血清及び血漿を採取する。気管カニューレを挿入し、肺をＰＢＳで３回洗浄する。ＢＡＬ液の総白血球数及び白血球分画を分析する。細胞アリコート（２０〜１００μl）中の総白血球数を、コールターカウンター（Coulter Counter）によって決定する。白血球分画については、５０〜２００μlの試料をサイトスピン（Cytospin）内で遠心分離し、スライドをDiff-Quikで染色する。光学顕微鏡下で標準的な形態学的基準を使用して、単球、好酸球、好中球及びリンパ球の比率をカウントし、これをパーセントで表す。代表的なＢｔｋ阻害剤は、対照レベルと比較して、ＯＡ感作及び抗原刺激したラットのＢＡＬ中の総白血球数の低下を示す。
【０２３２】
前述の発明は、明確化及び理解を目的として、説明及び例によっていくらか詳しく記載されている。当業者にとって、添付の特許請求の範囲内で変更及び変形を実施できることは明らかであろう。従って、上記の記載は、例示的であって、限定的ではないことを意図したものであることを理解されたい。従って、本発明の範囲は、上記の記載に関して決定されるべきではなく、下記に添付される特許請求の範囲に関して、そのような特許請求の範囲が権利を与えられる同等の全範囲に沿って決定されるべきである。
【０２３３】
本出願に引用される特許、特許出願及び刊行物は全て、個々の特許、特許出願又は刊行物が各々個別に示されたかのように同程度に、全ての目的についてその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【手続補正書】
【提出日】平成26年7月9日(2014.7.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化４５】
2015531781.tif 000058
［式中、
---は、二重結合であり；
Ｘは、Ｎであり；
Ｒは、Ｈ、−Ｒ１、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３、−Ｒ１−Ｒ３、又は−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１は、アリール、ヘテロアリール、二環式ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルであり、その各々は、１つ又は複数の低級アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシ低級アルキル、低級アルコキシ、ハロ、ニトロ、アミノ、アミド、シアノ、オキソ又は低級ハロアルキルで場合により置換されており；
Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２’、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ、−Ｃ（Ｒ２’）２、−Ｏ、−Ｓ、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ２’、又は−Ｓ（＝Ｏ）２であり；
各Ｒ２’は、独立して、Ｈ又は低級アルキルであり；
Ｒ３は、Ｈ又はＲ４であり；
Ｒ４は、低級アルキル、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、アミノ、低級アルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ、アリール、アリールアルキル、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル、アルキルシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アルキルヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、二環式シクロアルキル、二環式ヘテロシクロアルキル、スピロシクロアルキル、スピロヘテロシクロアルキル又は二環式スピロヘテロシクロアルキルであり、その各々は、１つ又は複数の低級アルキル、ハロ、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ、ヒドロキシ、ヒドロキシ低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルカノイル、ハロ、ニトロ、アミノ、アミド、アシル、シアノ、オキソ、スルホニル、低級アルキルスルホニル、グアニジノ、ヒドロキシルアミノ、カルボキシ、カルバモイル、カルバメート、ハロ低級アルコキシ、ヘテロシクロアルキル又はハロ低級アルキルで場合により置換されており、ここで、２つの低級アルキル基は、一緒になって、環を形成してよく；
Ｙ４は、Ｙ４ａ、Ｙ４ｂ、Ｙ４ｃ、又はＹ４ｄであり；
Ｙ４ａは、Ｈ又はハロゲンであり；
Ｙ４ｂは、低級アルキルであり、これは、低級ハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及び低級アルコキシからなる群より選択される１つ又は複数の置換基で場合により置換されており；
Ｙ４ｃは、低級シクロアルキルであり、これは、低級アルキル、低級ハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ及び低級アルコキシからなる群より選択される１つ又は複数の置換基で場合により置換されており；そして
Ｙ４ｄは、アミノであり、これは、１つ又は複数の低級アルキル、アルコキシ低級アルキル又はヒドロキシ低級アルキルで場合により置換されている］
で表される化合物又はその薬学的に許容しうる塩。
【請求項２】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｓ（＝Ｏ）２であり、
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、低級アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（ＣＨ３）２であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、１つ又は複数の低級アルキルで場合により置換されている、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ又はヘテロシクロアルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、フェニル又はピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（＝Ｏ）であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、１つ又は複数の低級アルキルで場合により置換されている、モルホリン又はピペラジンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙ４が、tert−ブチルである、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
Ｙ４が、
【化４７】
2015531781.tif 000059
［式中、Ｙ５は、Ｈ、ハロゲン、低級アルキル又は低級ハロアルキルである］
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｙ４が、
【化４８】
2015531781.tif 000060
［式中、Ｙ５及びＹ６は、独立して、Ｈ又は低級アルキルである］
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジル又はピラゾロピラジンであり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、場合により置換されている低級アルキル、ヘテロシクロアルキル又はアルキルヘテロシクロアルキルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（ＣＨ３）２であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、１つ又は複数の低級アルキルで場合により置換されている、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ又はヘテロシクロアルキルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒが、−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３であり；
Ｒ１が、ピリジルであり；
Ｒ２が、−Ｃ（＝Ｏ）であり；
Ｒ３が、Ｒ４であり；そして
Ｒ４が、場合により置換されているヘテロシクロアルキル又は二環式スピロヘテロシクロアルキルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ４が、場合により置換されているモルホリン又はピペラジンである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
以下：
２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
２−｛３−［５−（５−アゼチジン−１−イルメチル−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−６−tert−ブチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−２−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｓ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（（Ｒ）−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
２−（２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−メチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル）−２−メチル−プロピオニトリル；
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（５−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−２−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−｛３−［５−（１’−エチル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−２−ヒドロキシメチル−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−（２−ヒドロキシメチル−３−｛１−メチル−５−［５−（モルホリン−４−カルボニル）−ピリジン−２−イルアミノ］−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−フェニル）−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
２−［２−（３−｛５−［５−（２−アゼチジン−１−イル−１，１−ジメチル−エトキシ）−ピリジン−２−イルアミノ］−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル｝−２−ヒドロキシメチル−フェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロ−フタラジン−６−イル］−２−メチル−プロピオニトリル；
６−tert−ブチル−２−［２−ヒドロキシメチル−３−（５−｛５−［２−（３−ヒドロキシ−プロピルアミノ）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン；
６−tert−ブチル−２−｛２−ヒドロキシメチル−３−［１−メチル−５−（１’−オキセタン−３−イル−１’，２’，３’，４’，５’，６’−ヘキサヒドロ−［３，４’］ビピリジニル−６−イルアミノ）−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル］−フェニル｝−２Ｈ−フタラジン−１−オン；及び
６−tert−ブチル−２−［３−（５−｛５−［２−（３，３−ジフルオロ−アゼチジン−１−イル）−１，１−ジメチル−エトキシ］−ピリジン−２−イルアミノ｝−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イル）−２−ヒドロキシメチル−フェニル］−２Ｈ−フタラジン−１−オン
からなる群より選択される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
炎症性及び／又は自己免疫性病態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１４】
炎症性病態を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１５】
関節リウマチを処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１６】
喘息を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１７】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を少なくとも１つの薬学的に許容しうる担体、賦形剤又は希釈剤と混合して含む、医薬組成物。
【請求項１８】
炎症性障害又は自己免疫性障害の処置のための医薬の製造における、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１９】
そのような障害が、関節リウマチ又は喘息である、請求項１８に記載の化合物の使用。
【請求項２０】
炎症性又は自己免疫性障害の処置のための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２１】
そのような障害が、関節リウマチ又は喘息である、請求項２０に記載の化合物の使用。
【請求項２２】
炎症性又は自己免疫性障害の処置において使用するための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
そのような障害が、関節リウマチ又は喘息である、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２４】
本明細書に記載される化合物、方法又は組成物。
【国際調査報告】
2015531781.tif 000061
2015531781.tif 000062
2015531781.tif 000063
2015531781.tif 000064
2015531781.tif 000065
2015531781.tif 000066