(57)【要約】  水和レシチン担体小胞の組成物は、調製水中にレシチンおよびトリグリセリド源または脂肪酸を含む。開示の組成物は、食欲の管理、体重の減少、アルコール消費の影響の調節、および／または活性剤を小腸へ送達するのに使用できる。【選択図】図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
膜および水相を有する小胞であって、
レシチン；および
レシチンに分散したトリグリセリド源を含む小胞；ならびに
調製水：
を含む安定して均一な分散液、を含む組成物。
【請求項２】
レシチンは、約８０ｗ／ｗ％以下のホスファチジルコリン含量を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
小胞は、約５００ｎｍ以下の体積加重平均直径を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
トリグリセリド源は、不飽和脂肪酸：飽和脂肪酸の全体比が重量で少なくとも４：１である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
トリグリセリド源は、一価不飽和脂肪酸および三価不飽和脂肪酸の総量：二価不飽和脂肪酸の比が少なくとも１：１である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
トリグリセリド源は、当該トリグリセリド源における脂肪酸の総重量に対する平均オレイン酸含量が少なくとも４０重量％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
トリグリセリド源は、オリーブ油、および／またはカノーラ油、および／またはアーモンド油、および／またはアマニ油、および／またはそれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
トリグリセリド源は、レシチンおよびトリグリセリド源の総量に対し、多くとも５０重量％である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
トリグリセリド源は、コーン油およびオリーブ油の混合物である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
更に弱酸性バッファを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
弱酸性バッファは、弱酸性バッファ：レシチンのモル比が約０．１：１〜約５：１で存在する、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
弱酸性バッファ：レシチンのモル比が少なくとも５：１である、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１３】
小胞は、更に当該小胞中に分散された親油性薬剤を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
更に水溶性薬剤を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
トリグリセリド源は、１４個未満の炭素鎖長および／または飽和脂肪酸を含む、請求項１３または１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
水溶性薬剤は食欲抑制剤である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
食欲抑制剤は、可溶性繊維および／またはフィトケミカル、および／またはそれらの組み合わせである、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組成物をヒトまたは動物に投与することを含む、ヒトまたは動物の食欲を抑制するための方法。
【請求項１９】
膜および水相を有する小胞であって、
レシチン；および
レシチンに分散した少なくとも１つの脂肪酸を含む小胞；ならびに
調製水：
を含む安定して均一な分散液、を含む組成物。
【請求項２０】
少なくとも１つの脂肪酸は、オメガ３脂肪酸またはオメガ３脂肪酸の混合物である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
少なくとも１つの脂肪酸は、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）および／またはドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
更に活性剤を含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２３】
請求項２２に記載の組成物をヒトまたは動物に投与することを含む、活性剤をヒトまたは動物の小腸へ送達する方法。
【請求項２４】
請求項２２に記載の組成物をヒトまたは動物に投与することを含む、活性剤をヒトまたは動物の血流に送達する方法。
【請求項２５】
活性剤は、植物ステロールまたは少なくとも１つの親油性化合物である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
請求項１〜１７および１９〜２２のいずれか一項に記載の組成物をヒトまたは動物に投与することを含む、アルコールの消費によるヒトまたは動物の顔面紅潮および／または心拍数の増加を軽減する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照本願は、２０１２年２月１６日に出願された米国特許仮出願番号第６１／５９９，７８６号の優先権および利益を主張し、その全体を参照により本明細書に援用する。
【０００２】
本発明の実施形態は、レシチンおよびトリグリセリドまたは脂肪酸担体の組成物、ならびに健康を改善するためのそれらの組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
メタボリックシンドロームとは、心疾患および糖尿病や脳卒中などのその他の健康問題のリスクを上昇させる一群の危険因子のことを指す。危険因子には、高血圧、肥満、高コレステロール、およびインスリン抵抗性が含まれる。特に、人がメタボリックシンドロームを有しリスクは、その人の過体重または肥満および／または運動不足に密接に関連する。よって、肥満は、糖尿病、癌、高血圧、高コレステロール、および冠動脈疾患の有病率の増加に関連する。また、例えば、うつ病、不安症、薬物乱用、不眠症および慢性疼痛などの中枢神経が関与する共存症も、肥満の合併症となり得る。
【０００４】
健康および見た目の両方の理由により、体重を減らすおよび／または体重を減らした後に低体重を維持したいと望む人が多い。ほとんどの場合、体重のコントロールは、単純に、カロリー摂取（食事／飲料）とカロリー消費（運動）とのバランスに依存する。広く望まれる達成目標は、カロリー摂取の容易な減少である。
【発明の概要】
【０００５】
本発明のいくつかの実施形態では、組成物は、小胞および調製水を有する安定して均一な分散液を含み、膜および水相を有し、レシチンおよびそこに分散したトリグリセリド源および／または少なくとも１つの脂肪酸を含む。
【０００６】
本発明のいくつかの実施形態では、ヒトまたは動物の食欲を減少するための方法は、そのヒトまたは動物に当該組成物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、ヒトまたは動物の体重減少を補助するための方法は、そのヒトまたは動物に当該組成物を投与することを含む。
【０００７】
本発明のいくつかの実施形態では、ヒトまたは動物の循環系および血流を含む体内への薬剤の送達を増加するための方法は、そのヒトまたは動物に当該組成物を投与することを含む。
【０００８】
本発明のいくつかの実施形態では、アルコールの消費によるヒトまたは動物の顔面紅潮および心拍数の増加を軽減する方法は、そのヒトまたは動物に当該組成物を投与することを含む。
【０００９】
これらおよびその他の本発明の特徴および利点は、次に示す図面と共に下記の詳細な説明を参照することにより良く理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例１および２に示唆または記載のように、１４日毎に測定した１２人のボランティア全員の体重変化の平均パーセントを示すグラフである。
【００１１】
【図２】図２は、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例３に記載の、成人男性による継時的な（分）血中アルコール含量（ＢＡＣ）の割合を比較したグラフであり、アルコールの消費後であって、かつＦｏｒｍｕｌａ組成物（■）、水対照組成物（◇）、油脂対照組成物（○）、またはレトルト組成物（▲）の消費後のＢＡＣレベルを比較したものである。
【００１２】
【図３】図３は、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例４に記載の、成人男性による継時的な（分）ＢＡＣの割合を比較したグラフであり、アルコールの消費後であって、かつ水対照組成物（◇）、ＦＯＲＭＵＬＡ×２（■）、またはＦＯＲＭＵＬＡ×２：ＯＯ（○）の消費後のＢＡＣレベルを比較したものである。
【００１３】
【図４Ａ】図４Ａは、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例５に記載の、トリグリセリド源について全体の不飽和度に対する一価−および三価−不飽和度のパーセントを示すグラフである。
【００１４】
【図４Ｂ】図４Ｂは、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例５に記載の、トリグリセリド源について全体の不飽和脂肪酸：飽和脂肪酸の重量比（ｗ：ｗ）の関数として、一価−および三価−不飽和脂肪酸由来の不飽和度（ＯＤＤ）：二価不飽和酸由来の不飽和度（ＥＶＥＮ）の重量比（ｗ：ｗ）を示す不飽和度のプロファイルである。
【００１５】
【図５】図５は、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例６に記載の、「低クエン酸ｐＨ５．４」（□）、「低クエン酸ｐＨ４．２」（△）、または「高クエン酸ｐＨ４．２」（●）の組成物についての継時的なＢＡＣを示すグラフである。
【００１６】
【図６Ａ】図６Ａは、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例７に記載の、前もって開示組成物の消費をせずにアルコールの消費をした場合の個人から得た心拍数のトレースを示す。
【００１７】
【図６Ｂ】図６Ｂは、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例７に記載の、前もって開示組成物の消費をしてからアルコールの消費をした場合の図６Ａと同じ個人から得た心拍数のトレースを示す。
【００１８】
【図７Ａ】図７Ａは、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例７に記載の、顔面紅潮を解析する画像解析ソフトウェアを使用して解析した画像領域を示す画像強度線を示す顔面の概略図である。
【００１９】
【図７Ｂ】図７Ｂは、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例７に記載の、図６Ａおよび６Ｂで検査した個人の顔面について図７Ａで示した画像線に沿って撮影した解析写真画像の画像強度プロファイルである。
【００２０】
【図８】図８は、本発明のいくつかの実施形態に係る実施例８に記載の、１．２ｇのＥＰＡ／ＤＨＡを有する開示の調合物（●；三点の移動平均を実線で示す）、および対照としてのオメガ３ゲルキャップ（△）の消費後の継時的な血漿中のエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の総増加量を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明の実施形態によれば、組成物は、水性媒体中に分散されたトリグリセリドとレシチンの混合物を含む。いくつかの実施形態では、レシチンは水和レシチン担体小胞を含む。本明細書で使用する場合、用語「トリグリセリド／レシチン組成物」および「トリグリセリド−レシチン混合物」は、互換的に使用され、トリグリセリドおよび／またはトリグリセリド加水分解物ならびに調製水を含む水和レシチン担体小胞、あるいは調製水による加水分解前のレシチンおよびトリグリセリドの均一な混合物を指す。
【００２２】
本発明のいくつかの実施形態では、ヒトまたは動物の食欲をコントロールすることには、トリグリセリド／レシチン組成物をヒトまたは動物に投与することを含む。食欲を低下させる方法により、ヒトまたは動物が通常の食事で消費する食物の量を減らし、間食を減少させることによって体重減少を容易にする。特定のユーザにとって、本発明の実施形態に係る組成物は、より良い自己イメージといった付加的な利点を提供し得る、そしてユーザのアルコール許容度を増加、またはユーザの栄養を改善し得る。本明細書で使用する場合、「ユーザ」は、開示の組成物を投与することにより体重を減少しまたは体重を管理しまたはアルコール許容度を増加する方法を実施するヒトまたは動物を指す。
【００２３】
本発明の実施形態は、ユーザに投与するため、そして組成物に使用するための中間組成物および最終組成物に関する。特定の組成物は、レシチンおよび食品用油脂、例えば、トリグリセリドおよびそれらの加水分解物、の均質な混合物を含み、これは２０１１年６月２３日出願され、全体の内容を参照により本明細書に援用する、レシチン担体小胞およびその作製方法と題する米国特許出願第１３／１３５，０５７号に記載の方法に従って調製できる。これらの組成物は満腹感に驚くべき効果を生じ、それによって体重減少または体重管理が容易になる。これらの組成物はまた、一緒に調合、同時に摂取、あるいは後に摂取した食物や飲料等の他の成分の取り込みの速度および／または程度を緩和する可能性も秘めている。ある実施形態の特定のトリグリセリド混合物は、食事の前に低量の脂肪を摂取すること（約２．５〜５．０グラム、すなわち、小さじ１／２〜１杯）を含む。これは、驚くべきことに、体重減少につながる満腹感および明らかなカロリー摂取の緩和を生じることが見出された。観察報告によると、この効果は、比較的すばやく始まり（例えば、組成物の消費から２０分以内）、数時間持続する。現象について特定の説明に縛られることはないが、本明細書に開示されるように、比較的少量のトリグリセリドをレシチンで予め乳化すると、小腸における脂肪の迅速かつ効率的な取り込みが促進され、それにより脂肪を大量に消費したという感覚、つまり満腹感がもたらされるとするのが妥当である。本開示は、「摂取」される特定の組成物を示すことがあるが、特定の実施形態では組成物は「投与」されることもあると理解される。本明細書で使用する場合、用語「摂取」とは、ヒトまたは動物による組成物の消費を指す。本明細書で使用する場合、用語「投与」とは、ヒトまたは動物が消費するために組成物を与えることを指す。
【００２４】
いくつかの実施形態では、レシチン−トリグリセリド混合物の濃縮分散液に加え、一定の容量の液体を消費することが満腹感を生み、それにより、追加カロリーの摂取を管理できるようになる。適切な容量は８オンスつまり約２５０ｍｌであるが、具体的に所望する効果に応じてより少ないまたはより多い容量でもよい。例えば、濃縮分散液を希釈して全体容積を所望するものにしてもよい。
【００２５】
別の実施形態では、トリグリセリド／レシチン組成物は、アルコールの血流中への取り込みをゆっくりするかまたは遅らせることにより、アルコールの代謝に有利なことがある。このメカニズムにより、血中アルコール含量（ＢＡＣ）の減少そしておそらくアルコールの初期分解物であるアセトアルデヒドの血中濃度の低下が可能になるので、アルコールの許容度の増加につながる場合がある。アルコールの許容度が増加すると、アルデヒドデヒドロゲナーゼのレベルが低くアルコールの消費により通常顔面が紅潮し心拍数が増加するユーザにとって非常に役立ち得る。
【００２６】
別の実施形態では、トリグリセリド／レシチン組成物は、追加的な脂肪酸を含み得る。「必須脂肪酸」であるアルファ−リノール酸およびリノール酸は、生物学的プロセスに必要であるもののヒトによる合成はできず、外部から消費する必要があるので望ましい。これらの必須脂肪酸は、多くの基本的な細胞機能に必要なオメガ３脂肪酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の生物学的合成に必要なので、ユーザへ複数の健康上の利益をもたらす。当業者によって認識されるように、用語「必須脂肪酸」とは、ある種の脂肪酸を指すのに使用する技術用語であり、記載の材料が本発明の実施形態の実施に必須または不可欠であることを意味するわけではない。いくつかの実施形態では、トリグリセリド−レシチン組成物は、少なくとも１つの脂肪酸を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの脂肪酸を含むトリグリセリド−レシチン組成物をユーザが消費すると、ユーザの血漿中に見られる脂肪酸の量の増加をもたらす。
【００２７】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示の組成物は、例えば、クエン酸（これは、風味剤でもある）またはリン酸といった、食品グレードの緩衝イオンを含んでもよい。一般的に飲料に使用され、本発明の組成物における使用に適し、酸味料として知られる多くの食用酸がある。酸味料の非限定的な例としては、クエン酸、リン酸、酢酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、及びこれらの組み合わせが挙げられる。ある状況では、他の製剤を限定（例えば、味および特定のｐＨにおけるバッファの容量を限定）すれば離液系列の緩衝イオンの減少または除去が可能な場合、酸味料の離液系列の緩衝イオンの含量を制限してもよい。いくつかの実施形態では、トリグリセリド／レシチン組成物は、ユーザの胃の低いｐＨから組成物を緩衝する目的でクエン酸を含む。
【００２８】
一般的な緩衝系には、カリウムおよびナトリウムの両方を含む許容可能な食品用の酸味料およびそれらの塩が含まれる。ある状況では、ナトリウム含量を低く保つためにナトリウム陽イオンではなくカリウムを使用し、離液系列イオンの含量を最小限に抑える。例えば、クエン酸塩、酒石酸塩または他のポリカルボン酸緩衝アニオンの典型的な最大濃度は２５ｍＭである（対応する酸とアニオンの合計濃度として表す）。他の例示的な実施形態では、酸及びアニオンの濃度が１０ｍＭ未満である。さらに別の実施形態では、酸及びアニオンの濃度が２．５ｍＭ未満である。またさらに別の実施形態では、多価アニオン緩衝種が実質的に存在しない。本明細書で使用する場合、用語「実質的に」とは、近似するという意味で使用し、程度を表すということではなく、測定および計算についての通常の不確実性による記載値固有の偏差を考慮するという意図である。いくつかの実施形態では、バッファ：レシチンの比率は、約０．１：１（モル：モル）以上である。別の実施形態では、バッファ：レシチンの比率は、約１：１以上である。別の実施形態では、バッファ：レシチンの比率は、約２．５：１である。さらに別の実施形態では、バッファ：レシチンの比率は、約５：１である。
【００２９】
別の実施形態では、開示のトリグリセリド−レシチン組成物は、安息香酸／安息香酸ナトリウムまたはソルビン酸カリウムなどの防腐剤を含有させることにより、ならびに／あるいは組成物の最終ｐＨを「酸食品」範囲、すなわちｐＨ４．５以下に調節することにより、微生物に曝されても安定となる。特定の例では、化学的及び／又は物理的分解に対し組成物を安定させるまたは組成物の官能特性を変化させる効果を有する、例えばポリソルベートなどの添加剤を使用してもよい。
【００３０】
本発明の特定の実施形態の組成物は、口当たりが良く、無炭酸または炭酸の風味飲料として愛飲できる。以下で説明する方法または米国特許出願第１３／１３５，０５７号（全体の内容を参照により本明細書に援用する）に記載の方法による調合および製造すると、本開示の組成物は、実質的に、コーン油などの植物性油に伴う典型的な味や不快な油っぽい口当たりを有しない。それらは消費者に受け入れられやすく、実質的に味および口当たりの問題で消費をためらう気にはさせないという利点がある。開示の組成物の受け入れやすく不快でない口当たりにより、開示の組成物のいずれかを日常的に消費する任意の体重管理計画をより良く遵守できるようになる。
【００３１】
上述したように、本発明の実施形態に係る組成物は、レシチンおよびレシチン中に分散したトリグリセリド源、ならびに調製水を含む。本発明の特定の実施形態では、レシチンおよび調製水は、多くとも約８０ｗ／ｗ％のホスファチジルコリン含量を有し得るレシチンおよび調製水を含む水和レシチン担体小胞（ＨＬＣＶ）組成物を形成する。調製水は、レシチンを水和してＨＬＣＶを形成する。いくつかの実施形態では、ＨＬＣＶは、その中に分散された少なくとも１つの活性成分を有してもよい。しかし、いくつかの実施形態では、ＨＬＣＶ組成物は、活性成分のＨＬＣＶ分散液の形成および調製水中における適切かつ確実な水和の助けとなり得るアルコールを含む。別の実施形態では、ＨＬＣＶ組成物は更に１つ以上の安定剤を含む。いくつかの実施形態では、活性成分は、均一な液状混合物中でアルコールによりまたはよらずにレシチンに可溶化される。本発明の他の実施形態は、ＨＬＣＶ組成物および均一な混合物を製造する方法に関する。
【００３２】
本発明の別の実施形態では、水和レシチン担体小胞（ＨＬＣＶ）組成物は、本質的に膜および水相を有する小胞、および調製水からなる。これらの実施形態では、用語「本質的に〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」とは、以下に定義される用語の意味の範囲内で、非小胞レシチン粒子及びレシチンベースの粒子（またはナノ粒子）が組成物から一般に存在しないことを指す。しかしながら、これらの実施形態は、上記および下記の実施形態と同じ小胞を含んでもよく、そして下記のいずれの方法によって製造してもよい。また、これらの実施形態は、下記の活性成分および／または他の成分（例えば、安定化剤、アルコール及び／又は油）のいずれかを更に含むこともある。実際、非小胞レシチンベースの物質（例えば、非小胞レシチン粒子およびナノ粒子、及び／又は非小胞レシチンで被覆されている活性成分のナノ結晶）が組成物中に一般に存在することを除き、これらの実施形態は、上記および下記の実施形態と同一の組成を有することもある（例えば、同じ材料および方法を用いる場合や、同じ活性成分を含む場合、そしてアルコール類、安定剤、油などの他の成分を含む場合もある）。
【００３３】
本開示によれば、活性成分を分散させるためのレシチンの使用は、摂取すべき化合物に有用であり、そして農業、園芸、栄養補助食品、医薬品（疾患の診断、治療および緩和用）、化粧品およびパーソナルケア製品、芳香剤および色剤、環境浄化剤、無機および複合材料、塗料およびインク、触媒、ならびに低コストの天然分散剤が望まれる他の分野を含むがこれらに限定されない他の多くの分野において有用である。本発明の全ての実施形態では、所与の用途、例えば、栄養製品の貯蔵寿命を改善するためにアスコルビン酸などの水溶性抗酸化剤を付加するといった用途での使用に適するように、水溶性物質を含む他の薬剤を、場合により、水和レシチンキャリア小胞の分散液に添加する可能性があることを見込んでいる。特定の添加剤の選択は、当業者にとって明白である。
【００３４】
本発明の実施形態は、費用効率の良い方法で、水不溶性および部分的に水不溶性の物質を可溶化するためにバルク食品または工業グレードのレシチンを使用するために提供され、食品、飲料及び栄養補助食品を含む消費製品、および効果的な商業化は原材料のコストに依存するため高ＰＣのレシチン（すなわち、８０ｗ／ｗ％超のホスファチジルコリンを有するレシチン）の使用が阻まれるような用途において幅広く使用するためのものである。
【００３５】
本明細書で使用する場合、レシチンとは、その全体を参照により本明細書中に援用するＪｏｉｎｔ  Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ／Ｕｎｉｔｅｄ  Ｎａｔｉｏｎｓ  Ｆｏｏｄ  Ｓａｆｅｔｙ  Ａｇｅｎｃｙ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ（ＪＥＣＦＡ）．（Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｎａｔｉｏｎｓ，  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  Ｐａｐｅｒ  ５２，“Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ”（ＦＮＰ  ５２），Ａｄｄｅｎｄｕｍ  ２（１９９３））で規定されるような、溶媒抽出油の水和によって動植物源から得られる複合混合物と定義する。この複合混合物には、主にホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、及びホスファチジルイノシトールを含めたアセトン不溶性ホスファチド、並びに少量のトリグリセリド、脂肪酸、及び炭水化物が含まれる。本明細書で使用する場合、小胞とは、膜を形成する脂質成分と水相を持つ組成物と定義する。いくつかの実施形態では、膜を形成する脂質成分はリン脂質二重層膜である。
【００３６】
本明細書で使用する場合、活性成分とは、小胞内に組み込むために選択される、及び組み込み可能なあらゆる化合物を指す。例えば、いくつかの実施形態では、活性成分は、以下で述べるような多くの両親媒性化合物を含め親油性であってもよい。親油性化合物は、水よりも、油脂、油、脂質、及び有機溶媒、例えばエタノール、メタノール、エチルエーテル、アセトン、クロロホルムや、ベンゼンなどに溶解される。親油性化合物は、それらの構造の範囲内で、親水性部分、例えばステロール内のヒドロキシル基や長鎖脂肪酸内のカルボン酸基などを含んでいてもよい。いくつかの実施形態では、親油性化合物は、小胞の膜を形成する脂質成分と共に組み込まれる。いくつかの実施形態では、親油性化合物は、約０〜約８の範囲のｌｏｇＰ値を有する。ここで、ｌｏｇＰ値が高いほど親油性が高いということである。ある他の実施形態では、親油性活性成分のｌｏｇＰ値範囲は、約２〜約７である。
【００３７】
本明細書で使用する場合、用語「親油性化合物」および「親油性活性成分」は、互換的に使用され、水に比べて、有機溶媒、脂肪、及び油に対してより大きい溶解性を有する化合物を指す。また、用語「親油性」は、多くの両親媒性化合物をも包含し、そして両親媒性化合物は疎水性領域と親水性領域の両方を持つ化合物を包含する。実際、分子は、例えばステロール内のヒドロキシル基や長鎖脂肪酸内のカルボン酸基などの水を好む（親水性）部分を含み得る。このことは、本発明の実施形態が提供する水性分散液形成のための組成物および方法に関する多くの（生物学的）活性種に当てはまる。そのような場合、それらの分子も両親媒性と記載されることがある。本発明の特定の実施形態の方法および組成物は、上記のように記載されることがあるもの、及び水和レシチン小胞二重層内に分散できるものを包含し、これらのいくつかの実施形態を実施例に示す。一般に、両親媒性分子は、それらの親水部分が極性表面と結合し、疎水性部分が二重層内部のリン脂質のアシル鎖に向けられている状態で、二重層の両方の部分に配置される。
【００３８】
本明細書で使用する場合、分散液とは、大量の水性溶液中に通常均一に分布したレシチンベース相のことを指す。さらに、本明細書で使用する場合、分散液は、目に見える相分離、例えば、小胞が沈殿又はクリーム分離（すなわち、凝集物それぞれが混合物の底に沈下するか若しくは上部に浮かび上がる）によって集合及び分離するとき、又は組み込まれた親油性材料が小胞と分離し目に見える集合体を形成するときなど、による明らかな物理的な不安定が見られないのであれば、安定である。すなわち、活性成分を含まないＨＬＣＶの安定した分散液中では、分散液中の実質的にすべての小胞が目に見える集塊なしに分布される。先に述べた小胞の安定性に加えて、活性成分を含む安定した組成物については、活性成分は小胞に適切に結合したままである。例えば、親油性化合物がＨＬＣＶ分散液に組み込まれるのであれば、親油性化合物の疎水領域は、リン脂質小胞膜の無極性領域に結合（接触）する。ＨＬＣＶ分散液に組み込まれている親水性部分を持つ親油性化合物を含む組成物については、親油性化合物の親水性領域は極性領域に結合し、そして、疎水性領域はリン脂質小胞膜の無極性領域に結合する。つまり、組み込まれた活性成分を有する安定したＨＬＣＶもまた、組成物中に存在する実質的にすべての活性成分が、小胞膜に組み込まれている／結合しているという意味である。その膜中に活性成分を有する小胞担体はまた、「補填された（ｌｏａｄｅｄ）」担体小胞とも呼ばれ、具体的には、活性成分が小胞のリン脂質膜中に組み込まれ、大量の水性溶液中での凝集又は分解に対し化合物が安定していることを指す。従って、リン脂質膜環境中に取り込まれているために水性媒体中に分散している活性成分は、他の環境（例えば、食物、飲料、胃腸又は消化管）内において安定している。
【００３９】
本明細書で使用する場合、調製水とは、１００ｐｐｍ未満の硬イオンを持つ、そしていくつかの実施形態では、６０ｐｐｍ未満の硬イオンを持つ水と定義される。硬イオンとは水の硬度をもたらすイオンのことであり、水で一般的に見られる遊離硬イオンは、カルシウム及びマグネシウムイオンである。調整水とは、遊離硬イオンのレベルが低い水のことを指し、水を処理しなくとも元々イオンレベルが低いか（すなわち、「軟」水）、または処理が必要であるかは問題ではない。硬度は、例えば、その全体の内容を参照により本明細書に援用する、ＡＳＴＭ法Ｄ１１２６「水の硬度に関する標準試験方法」に記載のものなどのＥＤＴＡ滴定法によって計測される。硬度を下げる処理にはキレート化を含んでいてもよい。天然の軟水（すなわち、硬イオンが約１００ｐｐｍ未満の硬度の水）は、本開示の目的に沿った調整水であると考えられる。いくつかの実施形態では、水には実質的に緩衝イオンが含まれておらず、別の実施形態では、水は、電気伝導度が１センチメートルあたり２０マイクロシーメンス未満となるように、蒸留、脱イオン化、逆浸透又は同様の技術により精製されている。緩衝イオンとは、ｐＨの変化に抵抗するもの、例えばリン酸、クエン酸、酢酸、及びトリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノイオンのことである。本発明の実施形態では、水質が最終分散液及びレシチン小胞の安定性に影響を与えることが認識されている。不安定な小胞、及び／又は（例え、安定していても）広いか若しくは偏ったサイズ分布を有する小胞の組成物は、濁った（混濁した）分散液になる可能性がある。従って、安定剤の添加又は存在が必要でなくても、安定剤がないと、ＨＬＣＶが白色化を起こす可能性は、水の純度に逆依存する、すなわち、水の純度が高いほど白色化の可能性が減少する。
【００４０】
水和レシチン担体小胞（ＨＬＣＶ）
本発明の実施形態は、１つ以上の活性成分が組み込まれた水和レシチン担体小胞に関する。ＨＬＣＶは、低いＰＣ含量を有するレシチンと調整水を使用することで調製される。いくつかの実施形態では、ＨＬＣＶは、その中にトリグリセリド源が組み込まれたレシチンを使用することで調製される。
【００４１】
低いＰＣ含量を有するレシチン
ＨＬＣＶを作製するのに使用されるレシチンは、低いＰＣ含量を有する。本明細書で使用する場合、低いＰＣ含量を有するレシチンとは、非脱油（未精製）レシチン〜約８０ｗ／ｗ％以下のホスファチジルコリン含量を有するレシチンという範囲のレシチンを意味する。実際、いくつかの実施形態では、レシチンは、８０ｗ／ｗ％に満たないＰＣ含量を有する。例えば、ＨＬＣＶ分散液は、米国食品医薬品局により安全食品認定（Ｇｅｎｅｒａｌｌｙ  Ｒｅｇａｒｄｅｄ  Ａｓ  Ｓａｆｅ）（ＧＲＡＳ）されたリストにあるものを含めた消費向けに許容され得る既知の食品グレードの原料から調製できる。従って、本発明の実施形態には、ホスファチジルコリン含量が約２０〜約８０ｗ／ｗ％の食品グレードのレシチンがある。別の実施形態では、レシチンは、約２０〜約７０ｗ／ｗ％のホスファチジルコリン含有量を有する。別の実施形態では、レシチンは、約２０〜約６０ｗ／ｗ％のホスファチジルコリン含有量を有する。別の実施形態では、レシチンは、約２０〜約５０ｗ／ｗ％のホスファチジルコリン含有量を有する。別の実施形態では、レシチンは、約２０〜約４０ｗ／ｗ％のホスファチジルコリン含有量を有する。別の実施形態では、レシチンは、約２０〜約３０ｗ／ｗ％のホスファチジルコリン含有量を有する。いくつかの実施形態では、ホスファチジルコリン含有量が約２０〜約２５ｗ／ｗ％の非脱油レシチンが使用される。
【００４２】
活性成分
親油性活性成分の非限定的な例として、嗅覚物質、例えば天然及び合成の香料や精油など（これらは、下記で詳述する）；香味化合物及び味覚修飾物質、例えばリンゴ、オレンジ、及びレモンの天然エキスや精油など（キャリアオイル含有のかかる化合物の組み合わせも含む）；着色剤、例えばポルフィリンベースの大員環など；オリーブ油、アマニ油、アーモンド油、カノーラ油、及びコーン油を含む植物油；ビタミン類、例えばビタミンＡ、Ｄ、Ｅ、及びＫ及びそれらの薬理活性代謝物、塩、及び化合物、例えば、ビタミンＤ、ビタミンＥアセテート、及びビタミンＡパルミテートなど；フィトケミカル、例えば植物ステロールや、精油、例えばβ−シトステロール、イソフラボン、クルクミノイド、及びポリフェノール化合物など；油溶性酸及びアルコール、例えばラクチル酸、および脂肪酸を有するトリグリセリド、ならびに必須脂肪酸そのもの、例えばリノール酸やリノレン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）（２０：５ｎ−３）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）（２２：６ｎ−３）、およびそれらの天然源、例えばツキミソウ油、ベニバナ油、魚油など；薬物、例えばシクロスポリンＡ、プロポフォール、油溶性プロテアーゼ阻害剤、抗レトロウイルス薬、抗生物質及び他の薬物クラスの親油性メンバーなど；カロテノイド、例えばβ−カロテンやリコペンなど；ステロイドホルモン、例えばエストロゲン、エストラジオール、コルチゾンなど；フラボノイド、例えばレスベラトールなど；タンパク質、酵素、補酵素、ならびに他の多くの親油性生活性化合物、が挙げられる。しかしながら、化合物が、食物、飲料、薬、及び栄養補助食品の特定のクラスの親油性成分に限定されないことは、当業者にとって明らかである。
【００４３】
本明細書で使用する場合、精油とは、植物由来の揮発性芳香化合物を含む濃縮された疎水性の液体のことである。精油は、特徴的な香りを運ぶという範囲を超えて共通の特定の化学特性を有する群とは限らない。それらは、嗅覚物質や着香料としてその利用について周知であり、伝統医療中に幅広い有用性が見られる（世界保健機構による定義だと、伝統医療とは、健康の維持管理ならびに身体的及び精神的な病気の予防、診断、改善又は治療に使用される様々な文化に特有の理論、信念、及び経験に基づく知識、技能、及び実施のことを指す）。
【００４４】
アルコール
いくつかの実施形態では、ＨＬＣＶ組成物はアルコールを含む。いくつかの実施形態では、アルコールは、ＨＬＣＶを形成するレシチンを水和するための調整水に添加される。別の実施形態では、活性成分がレシチン組成物中に容易に可溶化されない場合に、アルコールを添加することで、活性成分が均一に液状混合物中へより良く可溶化できることがある。本発明の実施形態によれば、アルコールは短鎖アルコールである。短鎖アルコールの例として、メタノール、エタノール、プロパノールの異性体、及びブタノールの異性体が挙げられる。活性成分の可溶化を容易にするのに必要なアルコールの量は、アルコールの種類および特定の活性成分に依存するため、当業者により経験的に決定し得る。
【００４５】
いくつかの実施形態では、均一な液状混合物を形成するためレシチン中への活性成分の溶解を助けるために加えるアルコールは、レシチンと活性成分の総重量に対し約５〜約５０重量％のアルコールの範囲で設けられる。レシチン及び活性成分の組成物へのアルコールの添加は、本明細書中に述べるように、加熱や油の添加が伴うことも伴わないこともある。
【００４６】
いくつかの実施形態では、アルコールはレシチンを水和するための調整水に添加する。いくつかの実施形態では、添加アルコールは、脂肪族短鎖アルコール（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、又はブタノール）である。アルコールの量は様々であり、活性成分の特性に依存する。例えば、レシチンを水和するために、最大で合計４０％ｖ／ｖのアルコールがＨＬＣＶ組成物中に存在することもある。
【００４７】
いくつかの実施形態では、分散液は、標準的な工業的方法によって、例えば、粉末、顆粒又はケーキの形態に乾燥させてもよい。
【００４８】
安定剤
本発明別の実施形態では、ＨＬＣＶ組成物は、さらに、少なくとも１つの安定剤を含む。安定剤の非限定的な例として、ポリソルベート（ポリオキシエチレンソルビタンモノエステル）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（ＰＡＥ）などが挙げられる。安定剤の添加は、任意であり、一般に、ＨＬＣＶ内に分散させる活性成分の特性に依存する。いくつかの用途では、ポリソルベート又はＰＡＥの添加により安定性が高まることがある。そのため、ポリソルベート又はＰＡＥの必要性は、当業者によって経験的に決定され得る。
【００４９】
本明細書で使用する場合、ポリソルベートという用語には、脂肪酸を用いてモノエステル化されたポリオキシエチレン誘導体化ソルビタン（ソルビトールの誘導体）から得られた油状液体である乳化剤群が含まれる。ＰＡＥ群の分子は、ＨＬＣＶの摂取を伴わない用途での使用に好適である。摂取を伴わない用途では、ポリソルベートを含む及び／又は用いる本明細書中に記載の方法および組成物において、好適なＰＡＥをポリソルベートの代わりにしてもよいことは、当業者にとって容易に明らかである。
【００５０】
本発明の実施形態のポリソルベート含有ＨＬＣＶには、検出できるような苦味がなく、水、多くのジュース、及びその他の飲料への希釈、低温殺菌、及び保管に対して安定であり、これは透明度が維持されることによって実証される。以下のポリソルベートが、使用可能で非限定的な例である：ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン（２０）モノパルミテート、及びモノステアレート。いくつかの実施形態では、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート（すなわち、ポリソルベート８０）、又はポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレートが使用される。ポリソルベートの有効量は、既知の方法を使用して決定できる。いくつかの実施形態では、例えば、ポリソルベートは、ポリソルベート：レシチンが約１：３〜約１：２０のモル比にて使用される。別の実施形態では、ポリソルベートは、約１：５〜１：１０のモル比にて使用される。別の実施形態では、ポリソルベートは、約１：７〜１：９のモル比にて使用される。モル比を決定する目的で、レシチンの分子量は８００であると仮定する。
【００５１】
ＨＬＣＶの調製方法
本発明の実施形態は、水和レシチン担体小胞（ＨＬＣＶ）の調製方法に関する。いくつかの実施形態では、そこに補填されている少なくとも１つの活性成分を含むＨＬＣＶは、有機溶媒、アルコール又はその他のもののいずれも使用せずに調製する。しかし、いくつかの実施形態では、ＨＬＣＶの作製を容易にするためにアルコールを使用できるが、他の又は追加の有機溶媒は必要としないかあるいは使用しない。本発明のいくつかの実施形態では、ＨＬＣＶ組成物を形成する方法には、調整水中で低いＰＣ含量を有するレシチンを水和および処理し、それに続いて少なくとも１つの活性成分を添加することが含まれる。本発明の別の実施形態では、活性成分は、最小量の水と一緒に、低いＰＣ含量のレシチン及びアルコールと混合されて、（小胞の形成なしに）均一な液相を形成し、それに続いて分散小胞を形成する水和および処理がなされる。他の態様では、その中に活性成分が分散したＨＬＣＶ組成物の形成方法には、調整水中で高いＰＣ含量（すなわち、８０ｗ／ｗ％超のホスファチジルコリン）を有するレシチンを使用することが含まれる。
【００５２】
レシチンの水和
いくつかの実施形態では、低いホスファチジルコリン含量を有するレシチンは、調整水にさらすことで水和されて、調整水中に分散された水和レシチン担体小胞が形成される。本発明のいくつかの実施形態では、レシチンは、加工工程（例えば、均一化、超音波処理、マイクロ流動化、高剪断混合など）を実施するのに十分な調整水を用いて水和される。実際、ＨＬＣＶ分散液は、任意の乾燥又は更なる配合工程の前に、少なくともレシチンと同重量の調整水を含む（すなわち、調整水：レシチンの比が少なくとも１：１）。いくつかの実施形態では、例えば、レシチンは、（重量で）３部の水に対し１部のレシチンを用いて水和してもよい。別の実施形態では、レシチンは、重量で１部のレシチンに対し４部の水、または１部のレシチンに対し５部の水を用いて水和してもよい。別の実施形態では、レシチンは、１部のレシチンに対し５部を超える水を用いて水和してもよい。これらの実施形態では、調整水およびレシチンの相対量は、レシチン単独と比較したものである。
【００５３】
別の実施形態では、レシチンは、少なくとも１つの活性成分の存在下で水和される。これらの実施形態では、レシチン：活性成分の比は、重量で少なくとも１：１であり、そして一般に最大約５：１であり得る。しかしながら、当業者に明白な商業的又は実用的な制約を課される場合を除きこの比について特定の上限は存在しない。これらの実施形態では、調整水に対し、重量で約３：１〜約５：１の範囲のレシチンと活性成分との総量の比で調整水が設けられる。これは、活性成分をレシチンに対し最大約１：１の比で設ける場合に必要である。例えば、レシチンと活性成分との総量（レシチン＋活性成分）が２００〜２５０ｍｇであるとき、調整水の量は１ｍｌ（１０００ｍｇ）になり得る。レシチンまたはレシチンと活性成分との合計に対する調整水の量は、一般に、その組成物について所望する最終的な用途のための任意の更なる製造又は製作工程に対する所望のＨＬＣＶ組成物および活性成分の濃度のみによって制限されることが、当業者には明らかである。
【００５４】
ＨＬＣＶ内への活性成分の補填
いくつかの実施形態では、ＨＬＣＶ組成物を調製して分散小胞を形成してから少なくとも１つの活性成分を補填する（すなわち、レシチンを水和してから処理する）。ＨＬＣＶを形成してから活性成分を補填するこれらの方法は、活性成分が水和レシチン小胞組成物中に容易に可溶化できるように活性成分が液体である（例えば、調整水の沸点又は調整水とアルコールの混合物の沸点未満の温度にて液体である）場合に、最も効果的である。処理後に（すなわち、前もって形成した小胞に）活性成分を加えるこれらの方法は、精油、親油性香料化合物、及び親油性成分を有する香料複合混合物のような成分に特に好適である。この方法は、添加前にＵＶを形成するために（例えば、均一化又は高剪断混合によって）処理されたＨＬＣＶに最も効果的である。従って、活性成分を水和レシチン組成物中に組み込む場合、活性成分は「前もって形成された」レシチン小胞に加えてもよい。先に述べたように、活性成分を溶解するのに、アルコールの添加、加熱、又はそれらの任意の組み合わせが必要な場合もある。溶解性が低い活性成分は、少量で加えられるのであれば、時間をかけてゆっくりと小胞組成物に組み込まれるであろうことは、当業者にとって明らかである。分散ＨＬＣＶ内への組み込みの程度は、活性成分の水相中への溶解速度および時間の両方に依存することもまた、当業者に知られている。アルコールや加熱の助けなしに、約４．５未満のｌｏｇ  Ｋｏｗ（すなわち、オクタノール：水の分配係数）を有する活性成分は、妥当な時間以内には組み込まれにくいだろう。しかしながら、４．５以上のｌｏｇ  Ｋｏｗを有する活性成分は、速く組み込むことができる。加熱及び／又はアルコールによって促進した場合も含めて、そのような活性成分の溶解性は、当業者によって経験的に決定できる。
【００５５】
安定剤を、処理前又は処理後のレシチン組成物に加えてもよい。いくつかの実施形態では、安定剤は、処理後のＨＬＣＶ組成物に添加する。別の実施形態では、レシチンと安定剤の混合物を、処理前に調整水中で水和する。
【００５６】
ＨＬＣＶへの活性成分の添加に続いて、混合物を、高剪断混合又は均一化によって処理し、その中に活性成分が組み込まれたＨＬＣＶの分散組成物を形成する。
【００５７】
透明度
いくつかの実施形態では、レシチン担体分散液のサイズ分布は、分散液が本質的に光学的に透き通る（すなわち、透明な）ように操作してもよい。本発明の実施形態を説明する目的のため、本明細書中では、サブミクロン（＜１μｍ）の範囲および構造の分散粒子の平均直径を、一般に、サイズの単峰型分布についての体積加重平均直径として定義する。小胞の体積加重平均直径は、任意の既知の技術で測定できる。例えば、体積加重平均直径は、電子顕微鏡又は動的光散乱を使用して測定される。平均小胞サイズを測定してから、小胞のサイズを、超音波処理、マイクロ流動化、及び高圧均一化を含むがこれらのみに限定されない当該技術分野で周知の標準的な方法を使用することで小さくできる。
【００５８】
いくつかの実施形態では、その中に活性成分を有し、且つ、本発明の実施形態の方法で調製されたレシチン担体小胞は、分散液中で透き通った（透明な）ままである。透き通った（ｃｌａｒｉｔｙ）とは、半透明（ｔｒａｎｓｌｕｃｅｎｃｙ）よりも透明（ｔｒａｎｓｐａｒｅｎｃｙ）であることを指す。この透明度は、粒子の平均直径が約０．１２μｍ以下、好ましくは０．１０μｍ未満、より好ましくは０．０８μｍ未満である分散液を作成することによって達成される。さらに、曇りを引き起こす大きい直径の少数の粒子がサイズの分布中に含まれるため、白色化として現れることもある。本発明の特定の実施形態を説明する目的のために、こうした大きい粒子の存在は、曇り又はかすみの程度によって定量でき、これを以下、混濁度と呼ぶ。透明な分散液は低い混濁度を有する。そのような混濁度の定量化は、例えば、比濁度計を使用することで実施できる。分散液の混濁度は、既知の標準混濁度に対する程度で表し得る。極微小な粒子の光の散乱によって引き起こされた混濁度は、それらの直径が光の波長より著しく小さいものであっても、粒径および波長の両方を含めた多変数の複雑な関数となる。一般に、より大きい粒子、すなわち、混濁（白色化、曇り、かすみ）を引き起こす粒子の存在は、より長い波長の散乱によって明らかになる。この光の散乱が、水性分散液について観察される混濁（すなわち、透明性の欠如）をもたらす。相対混濁度の定量的な尺度は、従来のＵＶ／可視光スペクトロメーターを使用することで計測される８００、８６０、及び／又は９００ｎｍでの相対吸光度である。よって、分散液が不安定なことに起因する混濁度は、所望の範囲内の分光光度法によって容易に定量される。
【００５９】
分散した活性成分の有無にかかわらずＨＬＣＶ組成物は、透明であるか又はほとんど透明であるのが望ましいが、透明度は本発明のどの実施形態の要件でもない。例えば、組成物を食品に加える意図ならば、溶液中でのその透明性は通常関係しないため、小胞サイズを小さくする必要がないこともある。しかしながら、組成物を透明又は半透明な飲料に加える意図ならば、例えば、曇り又は混濁度を消費者の期待を満たすように調整するのが望ましい。
【００６０】
均一な液状混合物
いくつかの実施形態では、活性成分は、水和前にレシチンに加える。これらの実施形態では、活性成分は、室温にてレシチンベースの混合物中に溶解されてもよく、これは、アルコールを含んでいてもよく、且つ、最小量の調整水及び／又は油を含んでいてもよい。いくつかの実施形態では、均一な液状混合物中のレシチンの重量は、その均一な液状混合物中の他のいかなる成分単体の重量よりも多い。すなわち、レシチンの量は他のすべての成分の合計よりは多くないこともあるが、他のいかなる成分単体よりも多くなるように設けられる。このように、レシチンは、均一な液状混合物の溶媒として使用してもよい。いくつかの活性成分は、加熱によってより容易に可溶化し得る。従って、いくつかの実施形態では、活性成分は、レシチンと混合してもよく、そしてアルコール、最小量のアルコール、油を含んでもよく、そして加温しながら混合してもよい。加熱温度は、例えば約６０℃〜約８０℃の範囲で選択される。所望の温度は、組成物の活性成分および他の成分の特性を考慮して当業者によって決定し得る。例えば、加熱温度は、組成物の様々な成分によって決まる組成物の沸点を超えてはならない。当業者によって理解されるとおり、加熱温度は、最も低い沸点を持つ組成物の成分の沸点を超えてはならない。例えば、アルコールがレシチン組成物中に存在している場合、所望の最高加熱温度は（一般に、最も低い沸点を有する成分である）アルコールの沸点を超えてはならない。いくつかの実施形態では、レシチン及び少なくとも１つの活性成分を、小胞を形成する前に、均一な液状混合物中にまず溶解する。
【００６１】
例として、植物フィトステロールは１００℃を超える融解温度を有する（例えば、β−シトステロールは１３６〜１４０℃のＴmpを有する）ので、植物フィトステロールは小胞が形成された後では、効率的にＨＬＣＶ組成物中に組み込まれない。従って、本発明のいくつかの実施形態では、最初にレシチンと一緒に活性成分を溶解して、単一相の均一な液状混合物を形成することによって、その中に分散した少なくとも１つの活性成分を有する組成物を調製する。いくつかの実施形態では、アルコールは、レシチン中に活性成分を可溶化するのを補助するために加える。いくつかの実施形態では、（レシチンに対する重量で）最大約５０％のアルコールをレシチンと活性成分の混合物に加える。上述のように、いくつかの実施形態では、最小量の調整水を、レシチンとアルコールの混合物における活性成分の可溶化を補助するために加えてもよい。例えば、レシチンの重量に対し１０重量％（ｗ／ｗ）以下の調整水を加えてもよい。過剰の水が単一相の形成を妨げることは、当業者にとって明らかである。レシチンとの均一な液状混合物の形成をさらに促進するために、活性成分を（必要であれば、加熱しながら）まず油中に溶解してもよい。
【００６２】
いくつかの実施形態では、レシチンにおける可溶化を容易にするために、活性成分をまず油中に溶解して、均一な液状混合物を形成してもよい。例えば、活性成分を、まず天然油などの無極性の疎水性担体物質中に溶解し、次いでＨＬＣＶ組成物と混合してもよい。また、油への活性成分の溶解は、加熱、及び／又はアルコールの添加と組み合わせてもよい。油の例としては、植物、例えばダイズ、コーン、オリーブ、ヒマワリ、カノーラ、オリーブから抽出されたトリグリセリド種子油が挙げられる。油にはまた、魚油又はオキアミ油などの動物油、及び精油も含まれる。精油には、これだけに限定されないが：シトロネラ、クローブの葉、ユーカリ、グレープフルーツ、レモン、ライム、ハッカ／ミント、オレンジ、オレガノ、ペパーミント、スペアミント、ハッカク、タンゼリン、ティーツリー、タイム及びウインターグリーンの油が挙げられ、そして実施形態には、これらの油の一次化学成分、例えばチモール、カルバクロール、リモネン、メントール、カルボン、サリチル酸メチル、シネオール、シトラナール、ピネン、及びテルピネン−４−オールの使用も含む。
【００６３】
均一な液状混合物は、その後、調整水中で混合されながら水和されて、小胞を形成する。いくつかの実施形態では、短鎖アルコールを調整水中に加える、すなわち、短鎖アルコールがレシチン含有混合物中に十分な量でまだ存在していない場合である。十分な量の短鎖アルコールとは、アルコールの最終レシチン水和溶液濃度が少なくとも約５ｖ／ｖ％、且つ、約４０ｖ／ｖ％以下をもたらす量のアルコールのことである。いくつかの実施形態では、アルコールの最終レシチン水和溶液濃度は、約２０％ｖ／ｖ〜約３０％ｖ／ｖである。レシチンの水和は、レシチンを含む均一な液状混合物が流動状態を維持する温度にて実施される。
【００６４】
水和によるＨＬＣＶの形成の後に、ＨＬＣＶは均一化又は高剪断混合によって処理して、ＨＬＣＶ組成物中に活性成分が組み込まれた分散液を形成する。
【００６５】
高いＰＣ含量を有するレシチン由来のＨＬＣＶ
本発明の更なる実施形態では、ＨＬＣＶ組成物の製造方法は、高いＰＣ含量を有するレシチン（すなわち、８０％ｗ／ｗ超のホスファチジルコリン含量を有するレシチン）を使用する。この方法では、高いＰＣ含量のレシチン（又は代わりに、実質的に純粋なホスファチジルコリン）が、低いＰＣ含有量のレシチン中への活性成分の可溶化することに関して本明細書中に開示された方法の１つに従って活性成分と混合する。また、水和及び処理後の活性成分の添加に関して、又は水和及び処理前に均一な液状混合物を形成することによる、本明細書中に記載した方法、並びに中間組成物もまた、高いＰＣ含量のレシチンを使用したＨＬＣＶの調製に適用可能である。そのようなＨＬＣＶは医薬用途における使用に好適である。実際、これらの実施形態において、レシチンは、医薬用途に許容され得るような高いＰＣ含量を有する。例えば、これらの実施形態において、ＨＬＣＶは、吸入又は注射可能な製品用に重量で９０ｗ／ｗ％以上のＰＣを有する。
【００６６】
生体内における調合物の所望の性能に必要なら、他の精製リン脂質を加えてもよい。いくつかの実施形態では、非経口用のプロポフォールの医薬的に許容される調合物は、調整水中でホスファチジルコリンおよびホスファチジルグリセロールのアルコール混合物を水和し、続いて高圧ホモジナイザを用いて均一化し、次いで、プロポフォールとインキュベーションすることによって製造できる。
【００６７】
場合により、例えばポリソルベートなどの医薬的に許容される安定剤を、水和中又は処理後に加えてもよい。レシチン用に本明細書中に開示する有機溶媒を含まない加工法は、医薬的に許容されるホスファチジルコリン用としても適用可能である。レシチンおよび他の成分の均一な液状混合物を基礎とした代替法を、低いＰＣ含量のレシチンの実施形態に関して記載したものに相当するホスファチジルコリン−アルコール混合物中に可溶なそれらの医薬的活性成分を用い、均一な液状混合物を作り出すのに必要なら最小量の調整水（リン脂質に対して最大１０％ｗ／ｗ）を添加して、使用してもよい。本明細書中に記載したように、活性成分は、まず、必要であれば加熱しながら、例えば脂肪酸のトリグリセリドエステルなどの医薬的に許容される油中に溶解してもよい（ここで、脂肪酸は同一組成であっても混合物であってもよい）。
【００６８】
更なる処理、精製
ＨＬＣＶの形成に続いて、組成物を、さらに所望のように処理する。例えば、小胞サイズを小さくするために、分散液に高剪断混合又は高圧均一化を施す。サイズ低減に必要なエネルギーは、アルコールが存在すると、アルコールの不存在下で同じ成分に施す対応するサイズ低減処理（実現できる場合）と比較して、低くなる。低エネルギー処理は、商業的に利点があり、処理のエネルギーコストが低くなりそして幅広い処理装置が使用できるようになる。例えば、アルコールの存在下では、ある量のエネルギー入力によって、より大きなサイズ低減が達成されるので、光学的に透明な外観のＨＬＣＶの製造は可能だが、アルコールの不存在下ではそのような光学的透明性は達成できない場合が生ずる。
【００６９】
本明細書中に開示されるＨＬＣＶ組成物は、例えば、噴霧乾燥又は凍結乾燥などのいずれかの標準的な工業的乾燥方法によって、固体、例えば粉末、フレーク若しくはケーキなどの固体に乾燥でき、その代わりに、またはそれに続いてペースト又はクリーム中へ組み込むことができる。追加的な更なる加工工程には、組成物のｐＨ調整、保存料若しくは抗微生物剤の添加、又は組成物の味を良くするための香味料の添加、を含み得る。
【００７０】
いくつかの実施形態では、水和トリグリセリド−レシチン分散液に異なる組成物を封入し、これらの組成物のいくつかが上で例示した組成物であると、即時的な遅延化作用または他の望ましい特性の組合せを得るのに有利なことがある。
【００７１】
上記のすべての組成物および混合物は、例えばタンパク質、ペプチド、炭水化物、繊維、栄養補助食品、薬剤または他の活性剤などの他の物質の有無にかかわらず製造できる。
【００７２】
用途
本発明の実施形態に係るＨＬＣＶ分散液は、非分散性の活性成分を本質的に含まない（すなわち、活性成分は、ＨＬＣＶ組成物中にいったん分散されると、実質的に分散されたままであり分散液からほとんど沈殿しない）。いくつかの実施形態では、レシチン小胞組成物は、界面活性剤（例えばレシチンなど）によって安定化された二重層ではない固体ナノ粒子のナノ乳濁液や分散液とは異なる。
【００７３】
本発明の特定の実施形態の組成物、中間溶液、及び製造方法は、比較的安価な食品グレードのレシチン、具体的には、約８０重量％未満のＰＣ含量を有するレシチンを用いた水不溶性物質の水系分散液を提供する。
【００７４】
いずれの用途にも限定されないが、本発明の特定の実施形態に係るＨＬＣＶは、飲料又は栄養補助食品に使用され得る油溶性活性成分の実質的に透明な水性分散液を製造するのに使用できる、というのは、当該分散液が、水、ジュース、及び他の飲料中での希釈、低温殺菌、及び保管に対し物理的に安定しているからである。油溶性成分として、抗酸化剤（例えば、ビタミンＥ）を挙げることができる。分散液は、所望の用途による必要性に応じて、濃縮、粉末に乾燥、および再水和してもよい。本発明の実施形態の組成物及び方法はまた、食品グレードの材料、例えば米国食品医薬品局により安全食品認定された用途における材料の使用をも開示する。
【００７５】
本発明の特定の実施形態のＨＬＣＶ組成物は、食品及び飲料業界で広く用いられる従来の装置を用いて処理できる。水和レシチン担体小胞の成分は比較的安価である。加えて、担体へ食物／飲料／栄養補助食品成分を補填すると、関連消費材および他の製品への用途に費用効率の良い調合物をもたらすレベルに高めることができる。
【００７６】
本発明の実施形態のＨＬＣＶ分散液は、効率的に真溶液として作用するので、経口消費又は他の形で口腔内に入る製品となり得るか、あるいはそういった製品の製造に利用され得る。本発明の実施形態のいくつかの組成物に特有の利点は、最終製品に使用されるほど本質的に光学的な透明性を有し、保存、何種類かのジュースや他の飲料への添加、及び低温殺菌における高温暴露によってもその透明性を維持する水性分散液を提供するということである。いくつかの実施形態では、レシチンベースのマトリックスにより、水不溶性物質の高い化学的安定性、例えば、酸化に対する耐性がもたらされ、且つ、これらの物質の望ましくない臭気と味、及び悪い食感を抑えることができる。特定の油脂、例えばホスファチジルコリン、そして特にオキアミなどの海洋生物由来の油脂は、それ自体が最適な食物又は栄養補助食品成分であると考えられる。本明細書中に記載したＨＬＣＶ、中間体、及び調製方法では、これらの油脂を任意に使用できることは明らかである。
【００７７】
特定のトリグリセリドの混合物、およびそれらとタンパク質、加水分解タンパク質、ペプチド、酵素、炭水化物、人工甘味料などを含む他の添加剤との組み合わせは、特定の医学的状態に特に有益である。これらの組成物は、所望の健康上の利益を達成するために、他の栄養補助食品を用いて強化できる。満腹感に関し、本発明の組成物は、満腹感を生じさせることが知られている他の薬剤と組み合わせて、例えば、部分的に加水分解したグアーガムを比較的少量の調合量で組み込むことにより、驚くべき相乗効果を生み出すことがある。体重管理という目標のためには、スクロース、高フルクトースコーンシロップ、または他の天然甘味料ではなく、低カロリーの人工甘味料を含む組成物が好ましい。同様に、かかる用途には、所望の満腹効果を保持しながら、トリグリセリドの総量を最小にすることによって、組成物自体の油脂によるカロリーを最小にすることが望ましい。特定の場合、例えば、解剖学的、生理学的または消化耐性の問題により栄養摂取が不足している人の栄養摂取を改善するために、特に、トリグリセリドおよび他の成分の含量が高いことが望ましい場合もある。
【００７８】
本発明の特定の実施形態のトリグリセリド−レシチン組成物は、天然油など広範囲のトリグリセリドから調製できるが、アシル鎖プロファイル（すなわち、飽和脂肪酸に対する一価不飽和脂肪酸、二価不飽和脂肪酸および多価不飽和脂肪酸の含量）によって定義されるトリグリセリドの平均組成は、不飽和：飽和脂肪酸の全体比が少なくとも４：１であることを含む。いくつかの実施形態では、開示された組成物のトリグリセリド中、（一価不飽和）オレイン酸及び（三価不飽和）α−リノレン脂肪酸：（二価不飽和）脂肪酸は、少なくとも１：１である。いくつかの実施形態では、トリグリセリド−レシチン組成物中のトリグリセリドの平均オレイン酸含量は、全脂肪酸中少なくとも４０重量％である。例としては、オリーブ油やカノーラ油を有するコーン油の混合物が挙げられる。
【００７９】
Ｃ１４（長さが１４個の炭素）よりも短い脂肪酸鎖および完全飽和炭素鎖は心臓血管の健康上有害な可能性があると考えられているので、心血管リスクがあるユーザには、満腹感を感じさせることができるか否かに関係なく、これらを含まないトリグリセリド−レシチン組成物が望ましい。別の用途では、これらの特定の短鎖及び／又は完全飽和アシル鎖が存在することが有利なこともある。
【００８０】
いくつかの実施形態では、トリグリセリド−レシチン組成物は、オレイン酸および／またはリノール酸の代わりに共益リノール酸を有する。
【００８１】
本明細書で述べるように、組成物全体を胃の中での活性が失うほどに不安定化することのないレベルで、トリグリセリドの加水分解物を本発明の特定の実施形態の組成物に組み込むこともできる。このような加水分解物には、遊離脂肪酸およびモノ−およびジ−アシルグリセリドが挙げられる。しかしながら、完全飽和およびトランス不飽和脂肪酸、遊離またはグリセリドアシル鎖は、いくつかの例では、シス−モノ不飽和、および１４〜１８個の鎖長を有する多価不飽和脂肪酸ほど望ましくはない。
【００８２】
活性物質を開示されたトリグリセリド−レシチン混合物中へ取り込むことは、治療効果が望まれる場合を含む意図でもある。例えば、脂溶性ビタミン（例えば、ビタミンＡ、Ｄ、Ｅ、Ｋ等）、必須脂肪酸（例えば、ＥＰＡ及びＤＨＡ等）、エステルまたはトリグリセリド、および親油性薬剤物質は、本発明の実施形態のレシチン：トリグリセリド混合物に含めるのに適している。この後者の分類には、従来、それぞれ、親水性カウンターイオンまたは非活性官能基を用い塩又は誘導体を形成することによって溶解性および生体利用性が達成されてきたような薬剤の水不溶性活性部分が含まれる。同様に、水溶性物質は、同時送達するための組成物の水相中に溶解できる。特定のトリグリセリド組成物は、特定の脂溶性活性成分の取り込みを強化する。
【００８３】
活性に基づいた特定の理論に束縛されることなく、本発明の組成物は、十二指腸内における膵臓の酵素による迅速かつ高効率なトリグリセリドの酵素加水分解を可能にすると考えられている。本発明の組成物は、リン脂質マトリックス内に均一に分散されたトリグリセリドエステル結合を提示するのに寄与する。この提示は、リン脂質水界面で、そしておそらくは胆嚢からの内因性胆汁酸塩により引き起こされ、これにより、通常、重炭酸塩、リン脂質、および胆汁酸塩によりもたらされる環境を模倣している可能性がある。
血流中への活性成分の輸送は正常な仕組みメカニズムによって起こり、ＨＬＣＶ内に調合されない同一の分子よりも迅速かつ／または広範な生体利用性をもたらす。
【００８４】
トリグリセリド脂肪については、十二指腸酵素加水分解により遊離脂肪酸およびモノアシルグリセロールが生成され、これらが小腸（腸）を覆う細胞により取り込まれる。中鎖及び長鎖脂肪酸については、これらの分子は、ミセルおよびリポソームより取り込まれ、その後、間質液およびリンパ液を介し血流へ送達するためのカイロミクロンとして細胞内で再パッケージ化される。脂肪消費の指標として認識される加水分解生成物が、フィードバックループの一部として、生化学的因子の放出を引き起こす。例えば、幽門括約筋の閉鎖、並びに食べたいという衝動を抑制する脳の反応といった生理学的応答を引き起こすホルモンであるコレシストキニンが放出される。幽門括約筋が閉まると、胃は、特に更なる食品または飲料を摂取した場合に、満腹感をより感じやすくなる。食物摂取の制御ループには多くの他の生化学的因子が関与しており、本発明の組成物はこれらの一部または全てと相互作用する可能性がある。
【００８５】
親油性活性剤は、加水分解により短鎖および／または飽和脂肪酸ならびにモノアシルグリセロールを生成するトリグリセリドを用いて調合してもよい。これらのトリグリセリド加水分解物は、しばしば、リポソームおよびミセルの分子集合体ではなく、個別の分子の拡散を伴う代替機構によって取り込まれる。このようにして、門脈を介して起こる血流への流入後に直接肝臓へ輸送される。言い換えれば、これらの加水分解物の水溶解度が高いほど、超分子集合体に結合させて分散したままにさせる必要がないことを意味する。つまり、トリグリセリド加水分解物は、腸細胞表面に個々の分子として拡散可能であり、その後、門脈に流入して肝臓に直接供給されるという異なる方法で処理される（すなわちカイロミクロン再集合／再パッケージ化を経由した処理はされない）。短鎖および／または飽和油脂を有する親油性活性剤の共調合物は、特に、水溶性が高いものに対し、それらの生体利用効率を向上させるための代替的な方法を提供する。トリグリセリド、レシチン及び有効な活性剤の特定の組み合わせは、容易に当業者によって決定することができる。短鎖／飽和油脂から製造したＨＬＣＶの水性区画内へ水溶性薬剤を取り込むことで、これらの薬剤を送達する方法が提供され、胃の厳しい環境から保護され、高度に分散された形で十二指腸へ容易に放出され、ＨＬＣＶ内に捕捉されていない活性剤と比べてより良い生体利用効率が生じる。本発明の実施形態によれば、水溶性薬剤には、既知の食欲抑制剤が含まれる。既知の水溶性食欲抑制剤の非限定的な例として、可溶性繊維およびフィトケミカルが挙げられる。
【００８６】
以下の実施例は、例示目的で示しているに過ぎず、本願の範囲又は内容を限定するものではない。
【実施例】
【００８７】
実施例１．香り付けしたトリグリセリド−レシチン組成物
３００ｍＬのコーン油、３００ｍＬのオリーブ油、８００ｇのレシチンの組成物を、７５ｍＬの９５％（ｖ／ｖ）エタノールおよび２．５ｍＬのレモン油と共に、６リットル（Ｌ）の調製水内で、米国特許出願第１３／１３５，０５７号で概説される方法に従い調製し、約６０℃で均一化し、約６５０ｂａｒの圧力をかけた。得られた８Ｌのトリグリセリドの分散液のうち４Ｌの分量を、１０５ｇ／Ｌのクエン酸、８７．５ｇ／Ｌのクエン酸ナトリウム、１７５ｇ／Ｌのスクロース、１．７５ｇ／Ｌの安息香酸ナトリウムおよび３５ｇ／Ｌの部分加水分解グアーガムを含む２Ｌの酸味料液と混合した。この混合物に、１１．５Ｌの精製水、１０ｍＬのレモンエキス、４ｍＬのイチゴ香料、および７ｍＬの２５％（ｗ／ｖ）のスクラロース溶液を加えた。最終ｐＨは４．５未満であった。分散液の体積加重平均直径は、調節した標準的な動的光散乱法による測定によれば、約０．１５ミクロンであった。トリグリセリド組成物の最終希釈物の２５０ｍｌを消費すると、胃の満腹感および食欲減退感が誘発された。レシチンを含まない砂糖水で振盪した２５０ｍｌ当たり同量のトリグリセリドを含む対照製剤は、同様の効果を誘発しなかった。
【００８８】
実施例２．トリグリセリド組成物による満腹感および体重減少についての研究
１４〜７２歳、初期体重が６１ｋｇ〜１３０ｋｇ、ＢＭＩ指数（体脂肪の尺度）が２３．０〜３４．９、そして体表面積が１．７３〜２．３９平方メートルの７名の男性および５名の女性からなる１２名のボランティア群に、実施例１で概説する方法で調製したトリグリセリド調合物を毎日１回分または２回分で割り当てた。参加者は、夕食の約６０分前に（１日２回の群は昼食の約１時間前も）１回分の調合物を消費するように指示された。参加者は、毎日朝の体重およびそれぞれの対応する食事の直前に抑制剤を飲む前に感じた空腹感を記録した。「全く空腹でない」（左）および「非常に空腹」（右）と書かれた両極端のレベルを示す１００ｍｍの長さの水平な直線である標準的な視覚的アナログスケールを使用し、そのスケールに縦印をつけることで、空腹感のレベルを記録した。左端（「全く空腹でない」）に対する印の位置を測定することで、食欲を定量化した。このスケールでは、空腹感の感じ方について参加者間の違いは不明であったが、ある参加者についての食欲値の変化が食欲の変化を示すものと推定された。１４日間の調合物の消費による結果を図１（計量開始時に対する割合としての体重変化の平均）および表１に示す。
【００８９】
【表１】
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【００９０】
実施例３．アルコールの取り込みの阻害
脂肪を消費すると、ある１成分が胃の下端にある弁である幽門括約筋を閉じるというフィードバックループを活性化することは良く確立されている。ビールなどのアルコール飲料を消費したときにこの弁が閉じている場合、血流中へのアルコールの取り込みが抑制される。これとは対照的に、胃が空の状態でアルコールを摂取すると、速やかに吸収され「頭に直接来る」。これらの効果は、胃から血流へのアルコールの拡散が遅いのに対し、（幽門括約筋の直下にある）十二指腸内でのアルコールの取り込みは素早く起こることによるものである。多くの場合、飲料中のアルコールの２０％は胃を介し、８０％は小腸を介して吸収される。従って、本発明の実施形態に係る組成物について、脂肪摂取によるフィードバックループへの相対的な影響は、飲酒装置を用いて取得可能な血中アルコール含量（ＢＡＣ）測定値を用いて評価できる。この研究の結果を図２に示す。ある組成物の消費するまたはしない場合のＢＡＣにより、フィードバックループ活性化の相対的な程度が示される。
【００９１】
携帯血中アルコール含量（ＢＡＣ）測定器を使用した呼気分析により、成人男性についてのＢＡＣを決定した。レベルは、アルコール飲料の消費前、および消費後９０分後までの期間で測定した。「水」対照では、呼気分析を、２５０ｍｌの水を２分未満の時間にわたり消費してから１５分後に行った。その後、１または２単位のアルコール（１単位は、アルコール度数が４．５体積％のビールだと１２オンス／３００ｍｌ）を１５分超の間隔で消費し、端点をｔ＝０とした。口腔内の残留アルコールによるいかなる干渉も最小限にするために、ＢＡＣ測定は、口を水ですすぎ５分経ってから行った。試験実験用として、試験品（「調合物（Ｆｏｒｍｕｌａ）」）を、アルコール飲料の消費の開始１５分前から始めて２分未満の期間にわたって消費した。図２は、２単位のアルコールの消費の結果を示す。対照のデータは２回の測定の平均値を表す。ＦＯＲＭＵＬＡは、ＨＬＣＶ中に１．２５ｇのコーン油、１．２５ｇのカノーラ油および３．７５ｇのレシチンを含み実施例１に記載した方法によって調製した２５０ｍｌのトリグリセリド調合物である。データは、重複試験の平均である。さらに、「油脂」対照も測定した。この「油脂」対照は、試験ＦＯＲＭＵＬＡにおけるものと同じだがレシチンを含まない成分の振とう混合物を含み、アルコール飲料の前に消費された。この脂質（「油脂」）対照では、トリグリセリドの量を増加してレシチンを含まない分の脂肪含量の不足分を補った。この場合、アルコールの取り込みは、「油脂」対照では軽減されなかった。トリグリセリド−レシチン組成物により、ＢＡＣピークおよび曲線下面積の減少に加え、２杯目の１２オンスのビールの消費時には、胃の膨満感が誘発されかなりの不快感が起こった（トリグリセリドを消費しない場合、不快感は感じられない）。また、図２は、アルコールの取り込みを調製する能力について、本発明の調合物をオートクレーブすることによる影響を測るための「レトルト」対照をも示す。オートクレーブした材料のＢＡＣプロファイルは、対照試験のものと酷似していた。この結果は、オートクレーブによる極端な条件により起こった水和レシチン担体小胞の化学的及び物理的構造の変化により、これらの摂取後の生理学的なプロセスが変化したことを示すと推定される。
【００９２】
実施例４．アルコールの取り込みを阻害するための代替調合物
図３は、１単位のアルコールを消費した場合の同様の研究結果を示す。試験調合物は、レシチントリグリセリド混合物の量を２倍にする以外は実施例３に記載の通り調製した（ＦＯＲＭＵＬＡ×２；黒四角を通る点鎖線）。代替試験調合物は、カノーラ油の代わりにオリーブ油を用い、油脂の量を２倍にして調製した（ＦＯＲＭＵＬＡ×２：ＯＯ；白丸を通る一点鎖線）。Ａｖｇ  Ｃｏｎｔｒｏｌとは、実施例３で実施した水対照のことである。ＬＯＤ／ＬＯＱとは、ＢＡＣアッセイにおいて、定量レベル（ＬＯＱ）を超えた検出レベル（ＬＯＤ）（ｌｅｖｅｌ  ｏｆ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  （ＬＯＤ）ｏｖｅｒ  ｔｈｅ  ｌｅｖｅｌ  ｏｆ  ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ）のことを示す。２単位のアルコールを用いた実施例と比較して、トリグリセリド調製物を用いた場合の胃の不快感は少なかったが膨満感は感知された。図３に示す結果（重複実験の平均）は、試験調合物により血中アルコールレベルが低下したことを示す。オリーブ油の調合物では、取り込み速度が本質的に減速し、血流中のアルコールの代謝の速度に沿っており、ＢＡＣはＢＡＣアッセイ検出限界または近接したままで、より良い効果が見られた。使用した飲酒測定器は、いずれのＢＡＣでも０．００８％またはそれ以下というほぼゼロという一定した値を示した。これらの数字は０．００８％が検出／定量限界であるのでこのような「ゼロ」という結果を示したが、実際のＢＡＣは、これより低い可能性もある。レシチンとトリグリセリド（及び各成分）のさまざまな組み合わせについて、ＢＡＣを調節する能力を試験した。その結果を下記の表２にまとめる。実施例４では、緩衝の効果を考慮し、１対１の比較で（すべてのトリグリセリド成分について平均した）一価−および三価−不飽和度がより高い調合物についてのピークＢＡＣレベルは、対照と比較して、遅延および／または低減していることが示された。
【００９３】
【表２】
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【００９４】
実施例５．脂肪摂取シグナル伝達を強化するための屈曲鎖（Ｂｅｎｔ  Ｃｈａｉｎ）アシル基
作用機序についての特定の理論に束縛されるものではないが、オレイン酸およびα−リノレン酸のような「屈曲鎖」アシル基の存在により、本発明の実施形態の脂質二重層構造において十分な障害を生じさせるようにして酵素による加水分解が特に容易になるようにする、および／または腸細胞による取り込みにおけるシグナル伝達を強化させることが提案されている。カノーラ油及びオリーブ油は、それらの組成に基づき、アマニ油及びアーモンド油のように好適なトリグリセリドの例である。これらの油は、図４Ａおよび４Ｂに示す不飽和プロファイルを有し、これらは他の一般的な食物脂肪とは一線を画している。これらの図の「その他」とは、コーン、落花生、ゴマ、クルミ、大豆、ヒマワリ、ブドウ、および紅花油を指す。図４ＢにおけるＯＤＤ：ＥＶＥＮ比とは、一価−および三価−不飽和脂肪酸由来の不飽和度：二価不飽和酸由来の不飽和度の比率のことである。共益結合でない限り、二価不飽和脂肪酸は、一価−および三価−不飽和アシル基のような同等の膜障害性をもたらさないことに留意すべきである。ＢＡＣを調製するものの、Ｃ１８：２リノール酸が豊富なコーン油のほうがオリーブ油とコーン油の混合物よりもＢＡＣピーク低減の効果は低い（Ｃ１８：２リノール酸は、１８個の炭素鎖および２個のシス二重結合を有する）。本発明のいくつかの実施形態における例示的なトリグリセリド混合物は、不飽和度が高く、および／またはそれらの不飽和脂肪酸における一価−および三価−不飽和酸の割合が高い。魚および藻油は一般的な食物油脂ではなく、多価不飽和脂肪酸であるＥＰＡおよびＤＨＡ（それぞれ５個および６個の二重結合を有する）の含量が高く、それらが組み込まれたリン脂質二重層中では有意な二重層障害が生じることに留意されたい。
【００９５】
実施例６．レシチン組成物のｐＨ
胃酸への暴露時に分散状態を維持するために、本発明の実施形態に係る組成物は、好ましくは、それらの構成レシチンの帯電リン脂質のｐＫ（例えば、２．５〜３．０のｐＫ）より高いｐＨで維持する必要がある。ヒトの胃中に存在する胃液の量や酸性度は非常に様々である。しかしながら、生理学的に許容される適切な食品酸味料（例えば、香味プロファイルおよびｐＨ調整のために加えるもの）の使用により、胃のｐＨを許容範囲内に維持するのに十分な緩衝能を付与できる。この緩衝能を付与できるような、既知の適切な酸味料、およびそれらの濃度および開始ｐＨがいくつか存在する。図５は、各２５０ｍｌ中に２．５ｇの混合トリグリセリドおよび３．７５ｇの大豆レシチンを有し、実施例４に記載のように調製した調合物のＢＡＣプロファイルを示す。上側の曲線は、ｐＨ５．４または４．２における２ｇのクエン酸を含有する試料についてのものである。ｐＨ５．４のデータは、１：１コーン油：カノーラ油および１：１コーン油：オリーブ油のトリグリセリド組成を有する試料についての結果の平均である。他の全てのデータは、１：１コーン油：オリーブ油のトリグリセリド混合物試料の二重測定の結果の平均であり、図３の対照研究のレベルを下回るＢＡＣレベルの低下を示したが、試験調合物のデータほどは低くなかった。下側の曲線により、他の全ての成分の比率を一定に維持しクエン酸含量（〜４ｇ）を倍にした場合、許容できないほど低いｐＨに対するＨＬＣＶの曝露が回避されるレベルとなる効果が実証され、より大きなＢＡＣの減少が観察された。
【００９６】
実施例７．アルコールフラッシング症候群の低減
また、アルコール取り込みの阻害は、アルコールフラッシング症候群感受性の個体において観察することによってもモニター可能である。アジア系によく見られる特定の遺伝子変異を有する者は、アルデヒドデヒドロゲナーゼ酵素のレベルが低い。このように、彼らの血流に入るアルコールは、アセトアルデヒドに代謝され、効率的に分解されずに、結果的に有毒なレベルまで蓄積する。その毒性はほぼ明確に皮膚の紅潮や心拍数の増加として現れる。アルコールフラッシング症候群有することが分かっている成人のアジア人女性について、データをＵＳＢケーブルによりコンピュータにダウンロードし、コンピュータで表示およびプリントアウト可能な指先パルスオキシメータ（Ｆａｃｅｌａｋｅ  ＣＭＳ５０Ｄ  ＋）を用いて心拍数をモニターし、デジタル写真およびその画像解析用いて顔の外観をモニターした。対照試験では、グラス半分（７５ｍｌ）の白ワイン（１３体積％のアルコール）を、１５分間隔で２５ｍｌずつ３回に分けて消費して、その後１時間モニタリングを継続した。第１回目のアルコールの消費から３０分以内に頻脈（心拍数上昇）および深赤色の顔面紅潮の両方が明らかであった。検査試験では、この手順を実施例３のトリグリセリド調合物を消費して約２０分後から繰り返した。図６は、対照および検査試験から得た心拍数のトレースを示す。この感受性を有する者ではアルコール誘発性の心拍数上昇が、明らかに見られるが、トリグリセリド調合物をワインの前に消費した試験の場合、この頻脈が効果的に消失していた。また、フラッシュなしでフルフェイスの写真を撮り、グレースケールにしたＪＰＥＧ画像として保存し、米国国立衛生研究所の医療画像解析ソフトウェアに基づくパブリックドメインのＪａｖａ画像処理プログラムを用いて、強度について分析した。画像強度プロファイルを、被検者の毛髪から鼻の先端を横切り毛髪に至る水平線に沿って左から右に得た（図７Ａの線）。毛髪は、プロファイルの各端において低い強度の領域を示し、被験者の鼻の先端（画像中で非常に反射する）は、高い強度のマーカーとなる。視野内のカメラからの距離および位置のばらつきを調整するために、プロファイルの水平スケールは線形スケーリングにより同じ幅に標準化し、鼻のいずれかの側の小鼻の縁に影を整列させる画像合わせを（すなわち左または右シフト）した。図７Ｂに示すように、アルコールの消費の前（ＣＯＮＴＲＯＬ）および本発明の調合物を予めを消費してからアルコールを消費した場合（ＦＯＲＭＵＬＡ）に対応する画像は本質的に重複する。アルコールを消費した場合（ＡＬＣＯＨＯＬ）、皮膚の色が明るい肌色から暗赤色の外観に変化する顔面紅潮が、プロファイルでの頬に対応する２箇所における強度の有意な減少として見られる。
【００９７】
実施例８．薬物動態（ＰＫ）−生体利用効率
一晩絶食の後、男性のボランティアは、実施例１に記載のように６ｇのレシチンに対し４ｇの１８：１２魚油トリグリセリド（１８％のＥＰＡ及び１２％のＤＨＡ）となるように調合したＥＰＡ＋ＤＨＡ調合物を１．２ｇ消費した。続けて、ＥＰＡおよびＤＨＡオメガ３脂肪酸の血漿レベルの上昇を、１５〜３０分間隔でモニターした。血漿抽出、トリグリセリド酸加水分解、ペンタフルオロベンジルブロミド（ＰＦＢＢｒ）による誘導体化、そしてさらなる抽出の後に、脂肪酸をガスクロマトグラフィー質量分析（ＧＣＭＳ）により分析した。内部遊離脂肪酸標準をアッセイに使用した。三点の移動平均を実線で示した血漿レベルを図８に示す。比較のため、図８に、低脂肪食と共に摂取したオメガ３のゲルキャップ製品（４ｇの総トリグリセリド量、３．１ｇのＤＨＡ＋ＥＰＡ；Ｌｏｖａｚａ）製剤のデータも示す。２．５倍低い用量でも、トリグリセリドレシチン調合物は、ゲルキャップよりも顕著に高いオメガ３血漿レベルの上昇をもたらした。（対照のオメガ３ゲルキャップは、２０１１年３月カタールのドーハにおけるＤＡＬＭ  ＸＶＩＩ国際シンポジウムのポスター発表でＤａｖｉｄｓｏｎらにより、開示されたものである。）
【００９８】
本発明を、特定の代表的な実施形態を参照することで例示及び説明したが、当業者は、以下の請求項で規定する本発明の精神および範囲から逸脱することなく、上述の実施形態に対し様々な改変及び変更が可能であることを理解する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
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【国際調査報告】
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