(57)【要約】  本発明は、過多月経症の治療、一般的には子宮出血疾患の治療における、一般式（１）：2015514789.tif 000007式（１）（式中、Ｒ６およびＲ７は、水素原子であるか、または一緒になってα−メチレン基として存在する）の１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンの子宮内使用、ならびに該使用のために式１の化合物を含む子宮内システムに関する。
2015514789.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
子宮の出血障害および出血の処置において使用するための、一般式（１）の１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン：
【化１】
2015514789.tif 000006
（式中、Ｒ６およびＲ７は、水素原子であるか、または一緒になってα−メチレン基を形成する）。
【請求項２】
過多月経症の処置において使用するための、１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン。
【請求項３】
過多月経症の処置において使用するための、１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン。
【請求項４】
１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、子宮内経路で投与されることを特徴とする、請求項２に記載の１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンの使用。
【請求項５】
１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、子宮内システムを用いて投与されることを特徴とする、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、１〜２００μｇの１日用量で投与されることを特徴とする、請求項４または請求項５に記載の使用。
【請求項７】
１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、１〜１００μｇの１日用量で投与されることを特徴とする、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、２〜５０μｇの１日用量で投与されることを特徴とする、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、子宮内経路で投与されることを特徴とする、請求項３に記載の１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンの使用。
【請求項１０】
１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、子宮内システムを用いて投与されることを特徴とする、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、２〜５００μｇの１日用量で投与されることを特徴とする、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、２〜２００μｇの１日用量で投与されることを特徴とする、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンが、５〜１００μｇの１日用量で投与されることを特徴とする、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
過多月経症の処置において使用するための、式（１）の１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンを含む、子宮内システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特許請求の範囲に記載した主題、つまり子宮出血障害の処置における１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン類の使用に関し、また前記適応症において使用するための一般式１：
【化１】
2015514789.tif 000003
（式中、Ｒ６およびＲ７は水素原子であるか、または一緒になってα−メチレン基を形成する）
の１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンを含有する子宮内システム（ＩＵＳ）に関する。
【０００２】
したがって、本発明は、子宮出血障害の処置のための１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン（化合物Ａ）または１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン（化合物Ｂ）：
【化２】
2015514789.tif 000004
の使用に関する。
【０００３】
本発明は、さらに過多月経症の処置のための物質（Ａ）または（Ｂ）の子宮内使用および前記使用のための子宮内システムに関する。
【０００４】
子宮出血障害とは、月経過多、重度の月経出血（ＨＭＢ）および過多月経症を意味する。子宮出血障害は、種々の兆候および様々な名称により知られている(Fraser et al. Seminars in Reproductive Medicine Vol 29, No 5  2011; 386-390 および Munro et al. Fertility and Sterility Vol. 95, No. 7, June 2011; 2204-2208)。これらの兆候は、子宮出血障害として同様に挙げられる。
【０００５】
子宮出血障害は筋腫（子宮筋腫）によってもしばしば引き起こされる。従って、本発明はさらに、筋腫自体および筋腫により引き起こされる出血障害を処置するための物質（Ａ）または（Ｂ）の子宮内使用に関する。
【０００６】
本発明に従って用い得るプロゲスチンの子宮内投与は、原則的にあらゆる子宮出血を軽減または防止することができる。従って、本発明はさらに、子宮出血を軽減または防止するための物質（Ａ）または（Ｂ）の子宮内使用に関する。
【背景技術】
【０００７】
本発明に従って用い得るプロゲスチン、即ち１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン（Ａ）または１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン（Ｂ）ならびにその製造は、ＷＯ２００８／０００５２１に記述されており、そこでは前者化合物（Ａ）は中間体としてのみ開示されている。
【０００８】
ＷＯ２００８／０００５２１において、記載された該化合物および開示された別の物質は、避妊用医薬製剤において、および月経前症候群の病状（例えば、頭痛、憂鬱感、水分貯留および乳房痛）の治療的処置において使用される。ＷＯ２００８／０００５２１は、経口および経皮投薬形態に加えて、非経口用油性注射溶液もまた開示している。しかし、ＷＯ２００８／０００５２１は、子宮内使用を記述していない。即ち該化合物は、子宮内システム（ＩＵＳ）において用いられておらず、子宮内出血障害、より具体的には過多月経症の処置においても用いられていない。
【０００９】
過多月経症は、月経障害に属し、重症かつ長期的な月経出血を示す。１回の月経周期当たり８０ｍｌを超える失血が、重度の月経出血と称される。
【００１０】
過多月経症は、婦人科診療において最も一般的な障害の一つである。
【００１１】
潜在的な原因は、ホルモンまたは炎症過程である。この症状は、閉経周辺期または後期再生産年齢の女性に多い。米国だけでも毎年６３００００件を超える子宮摘出手術が行なわれており、このうちの１２％が過多月経症を理由とするものである(National Inpatient Survey 2000)。
【００１２】
過剰出血の結果としての貧血および疲労は、生活の質を損ない、全婦人科受診の１２％の原因となっている。
【００１３】
侵襲性治療方法、例えば前記子宮摘出手術または子宮内膜アブレーション（熱による子宮内膜の破壊を伴う）に加えて、例えばナプロキセン、トラネキサム酸、ＭｉｒｅｎａＲのような薬剤あるいは経口避妊薬による治療もまた好適である(Recommendations of the Royal College of Obstetricians and Gynecologists)。
【００１４】
侵襲性治療方法は、これ以上子供を産むつもりのない女性や、子供を授かることを望まない女性にしか使用することが出来ないが、薬剤処置は、受胎能を損なわないという利点を有し、あるいは避妊薬を使用する場合には、薬剤摂取を停止した後に受胎能が回復するという利点を有する。
【００１５】
言及されるべき有望な新規治療形態は、ＭｉｒｅｎａＲである。これはレボノルゲストレル含有子宮内システム（ＩＵＳ）であり、５年までの期間にわたり、連続的に有効成分を放出する。該製品は、とりわけＥＰ０６５２７３８Ｂ１およびＥＰ０６５２７３７Ｂ１に記述されている。
【００１６】
出血に関するＭｉｒｅｎａＲの作用プロファイルは、子宮内膜の局所誘導性抑制に基づく。
【００１７】
ＭｉｒｅｎａＲが過多月経症およびＨＭＢの各治療において非常に有効な治療形態であり、従来の治療法よりも優れていることを実証する多くの証拠が存在する(Gemzell-Danielsson et al.; Acta Obstet Gynecol Scand. 2011 (11) 1177-88)。別の方法で同等の効果を達成するには、外科的方法（例えば、子宮内膜アブレーションまたは切除）によるほかない。
【００１８】
ＭｉｒｅｎａＲは、過多月経症の治療において既に非常に高い基準を達成しているが、ＭｉｒｅｎａＲのプロファイルがすべての症例において最適というわけではない。例えば、Ｊ．Ｂ．ＤｕｂｕｉｓｓｏｎおよびＥ．Ｍｕｇｎｉｅｒは、ある試験において、１００人中約２人の女性が、副作用のために１年後にＭｉｒｅｎａの使用を中止することを報告している(J.B. Dubuisson, E Mugnier; Contraception 2002; 66: 121-128)。一般に報告される副作用は、一過的な症候、例えば、気分変動、胸痛、水分貯留または皮膚の問題（ざ瘡）である（M. Ronnerdag & V. Odlind; Acta Obstet Gynecol Scand 1999; 78: 716-721）。
【００１９】
これらの全身性副作用は、レボノルゲストレル（ＭｉｒｅｎａＲの有効成分）の全身的安定性が比較的高く、そのため有効成分の平均血漿レベルが約２０６ｐｇ／ｍｌとなることに起因すると考えられる(Fachinformation Mirena March 2011-DE/9を参照されたい)。
【００２０】
何人かの女性について報告されたＭｉｒｅｎａＲの他の望ましくない作用は、卵巣の嚢胞に関するものである(Product Monograph-Mirena. 8th ed. Finland: Schering AG and Leiras Oy, Aug. 2009)。
【００２１】
さらに、出血量を減らすという点に関して、ＭｉｒｅｎａＲの効果は２〜３ヶ月後になっても最大に達せず、従ってその期間を経ても出血量が半分または月経周期当たり８０ｍｌ未満に減少するに至らないということが、様々な研究により示されている。
【００２２】
従って、月経過多（ＨＭＢ）への適用に関して、効果が最大（つまり、プラトー）に達するまでに６か月までもの期間を要し得る。これについての文献が、Ian S. FraserによってContraceptionに発表されている(I.S. Fraser; Contraception 82, 2010; 396-403 (Review Article))。
【００２３】
さらに、上記点に関する改善、即ちレボノルゲストレル（ＬＮＧ）投与量の増加による開始期間の短縮は、より高いＬＮＧ血漿レベルが黄体ホルモン媒介性副作用を増加させると考えられることから、不可能である。
【００２４】
即ち結論として、利用できる薬物療法は、無月経の誘導（ＭｉｒｅｎａＲ）、ホルモンの調節（経口避妊薬）、線維素溶解の阻害（トラネキサム酸）ならびに炎症の阻害（非ステロイド抗炎症剤）に基づくものであると言える。子宮摘出および子宮内膜アブレーション以外には、ＭｉｒｅｎａＲが現在最も有効なＨＭＢの治療方法である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２５】
従って、過多月経症の処置に有用な他の黄体ホルモンであって、子宮内長期投与に好適であるように十分有効であるものを見出す必要がある。
【００２６】
また、そのような化合物は、迅速に効果を示すもの、即ち、使用期間が比較的短くても、レボノルゲストレルを含有するＭｉｒｅｎａＲよりも速く処置効果を発揮するものであるべきである。
【００２７】
さらに、用いられる物質は、いずれのアンドロゲン作用も有するべきではない。
【課題を解決するための手段】
【００２８】
前記目的は、式（１）：
【化３】
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（式中、Ｒ６およびＲ７は、水素原子であるか、あるいは一緒になってα−メチレン基を形成する）
の化合物を使用、好ましくは子宮内に使用することにより達成されることが判った。
【発明の効果】
【００２９】
驚くべきことに、１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンまたは１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンをラットに用いた場合、局所（子宮）作用と全身性（末梢組織）作用との間に、効果の程度の差があることを示すことができた。つまり、末梢作用、即ち黄体ホルモン誘導性の副作用が軽減された。
【００３０】
この効果は、子宮における局所作用（重量増加、実施例１；図１／４を参照されたい）と全身性作用（例えば、卵巣切除ラットにおけるＬＨレベルの低下；図２／４）を比較することにより実証された。
【００３１】
本物質はまた、ＬＮＧと比較して、局所作用を増大した。これは、遺伝子発現実験における対応するマーカー遺伝子の強力な誘導により示されるとおりである。即ち、子宮に対する黄体ホルモンの抗エストロゲン作用は、とりわけＩＧＦＢＰ−１により媒介される。図３／４は、ＩＵＳからの放出速度がレボノルゲストレルの約７分の１であっても、化合物Ａにより、ＩＧＦＢＰ−１遺伝子発現が誘導されることを示す。
【００３２】
比較トランスアクチベーション試験において更に実証されるように（実施例２を参照されたい）、本発明に従って用いられる物質のアンドロゲン作用は、ＬＮＧと比較して少なくとも１０分の１である。この特性により、局所作用と全身性作用との顕著な分離（dissociation）と相俟って、レボノルゲストレルと比べて非常に高用量で子宮に局所使用した場合でも、たとえＭｉｒｅｎａＲを用いた場合のレボノルゲストレルに匹敵する全身濃度が存在したとしても、全身性アンドロゲン作用（例えば、ざ瘡）は無いことが期待される。
【００３３】
従って、本化合物は、過多月経症のような子宮出血障害の処置に使用されるのに極めて好適である。ＩＵＳにより子宮内投与することが本発明において好ましい。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
原文になし
【発明を実施するための形態】
【００３５】
利用できる子宮内システムは、例えばＭｉｒｅｎａＲに用いられているようなポリマーシステムである。
【００３６】
当業者は、ＩＵＳの製造に精通しており、これは例えばＥＰ０６５２７３８Ｂ１に記述されるように実施される。
【００３７】
従って、有効成分（Ａ）あるいは（Ｂ）はまず、高分子支持体材料を用いて、中心ロッド（コア）に製造される。有効成分は、高分子支持体材料（例えば、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ））と、どのような比率で混合してもよい。
【００３８】
成形プロセス後（即ち、加硫後）に、このように製造されたコアは通常、第２工程にて、長期間にわたる均一な投薬を確実なものとするポリマーベースの膜により覆われる。所望の放出速度は、ポリマーの選択および膜厚により制御することができる。
【００３９】
膜のための好適なポリマーは、基本的には、コア（中心ロッド）用のものと同じポリマーである。例えば、所望によりフッ素化されていてもよいポリジメチルシロキサン、または異なるポリマーの混合物が挙げられる。膜厚は、約０.５ｍｍが好ましい。
【００４０】
膜を適用するにはまず、所望のポリマーから製造したチューブ状物（膜）を溶剤中で膨張させ、その後、有効成分含有コアを、膨張させたチューブ状物に押し込む。その後、チューブ状物末端からの有効成分の「漏出」（使用中に「バースト効果」を生じる可能性がある）を回避するために、チューブ状物の末端をストッパー、好ましくはチューブ状物／膜と同じ材料からなるストッパーにより封止するのが好ましい。ストッパーの代わりにシリコーンを用いてチューブ状物を接着してもよい。
【００４１】
特定の有効成分（Ａ）または（Ｂ）を１〜５００μｇの範囲の１日量で放出するロッドを、本発明に従って用いることができる。
【００４２】
有効成分（Ａ）の放出速度は、有効成分（Ｂ）の半分となるように選択してもよい。これは前者の方が効力が高いためである。
【００４３】
従って、有効成分（Ａ）の用量範囲は、好ましくは１〜２００μｇ／日、特に好ましくは１〜１００μｇ／日、とりわけ２〜５０μｇ／日である。有効成分（Ｂ）の用量範囲は、好ましくは２〜５００μｇ／日、特に好ましくは２〜２００μｇ／日、とりわけ５〜１００μｇ／日である。
【００４４】
以下の実施例は、本発明を説明するためのものである。
【００４５】
本発明に従って用いることができるプロゲスチン、すなわち１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン（化合物Ａ）または１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン（化合物Ｂ）は、ＷＯ２００８／０００５２１（化合物Ａ：実施例１４ｆ；化合物Ｂ：実施例２）に記載されるように製造される。
【００４６】
以下に記載するラット実験に使用した有効成分含有ロッドの製造は、例えば、ヒトに使用可能なＩＵＳについて記述された有効成分リザーバーの製造と同様の方法で行った（例えば、ＥＰ０６５２７３８Ｂ１を参照されたい）。ロッドを製造するために使用できるポリマーは、ポリシロキサン類および修飾ポリシロキサンポリマー類である（例えば、ＥＰ０６５２７３８Ｂ１、ＷＯ００／２９４６４およびＷＯ００／００５５０を参照されたい）。
【００４７】
具体的には、ポリエチレンオキシド−ブロック−ポリジメチルシロキサン共重合体（ＰＥＯ−ｂ−ＰＤＭＳ）、ポリジメチルシロキサンおよび１０重量％の有効成分（この場合には、特定のプロゲスチンＡまたはＢ）の混合物を、Ｐｔ（０）−ジビニルテトラメチルジシロキサン触媒を使用して加硫することにより、活性成分含有コアをまず製造した。
【００４８】
ＰＥＯ−ｂ−ＰＤＭＳではなくポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）を用いることも可能であり、この場合は、加硫触媒としてビス（２,４−ジクロロベンゾイル）ペルオキシドを使用した。
【００４９】
有効成分含有コアを製造するために、対応するノズルヘッドを備えた垂直ピストンユニットを使用した。ノズルヘッドの寸法は、有効成分含有コアの外径を約１ｍｍとするような寸法であった。
【００５０】
このように製造した有効成分含有コアを、その後、ＰＤＭＳ、ポリトリフルオロプロピルメチルシロキサン（ＰＴＦＰＭＳ）またはＰＴＦＰＭＳ／ＰＤＭＳ混合エラストマー（７５％ＰＴＦＰＭＳ、２５％ＰＤＭＳ）からなる膜で覆った。この膜材の内径は、〜１ｍｍであり、外径は〜１.５ｍｍであった。
【００５１】
被覆を行うのに、コアの挿入後に小さなストッパーで膜の末端を封止できるように、コアよりも膜が若干長くなるようにして（各端において約１ｍｍ）、コアおよび膜を長さ１０〜１５ｍｍに切断した。コアを膜に挿入できるように、まず膜をシクロヘキサンまたはアセトン−ヘキサン混合物中で膨張させた。次いで、有効成分含有コアを、膨張した膜に押し込んだ。最後に、そのチューブ状物の末端を、シリコーンを用いて接着するか、またはＰＴＦＰＭＳから製造した小さなストッパーにより封止した。
【実施例】
【００５２】
実施例１
プロゲスチンの局所子宮作用を全身性の副作用と比較して（作用の分離）、ラットを使用する試験に基づいて調べた。卵巣切除ラットの子宮は、プロゲスチン含有ＩＵＳ（ロッド）の移植に反応して、脱落膜化および重量増加を示す。局所プロゲスチン作用は、遺伝子発現の変化に基づいても決定した。
【００５３】
局所投与プロゲスチンの全身性作用を検出するために、黄体形成ホルモン（ＬＨ）の血清レベルを用いる。卵巣切除ラットの血清ＬＨの基礎レベルは、インタクトな対照動物のＬＨレベルと比較して高い。子宮投与プロゲスチンの望ましくない全身性作用を、ＬＨレベルの低下により検出できる。
【００５４】
方法：
卵巣切除雌ラットに、エストラジオール（Ｅ２）を３日間投与した（０.２μｇ／日／動物、皮下投与）。４日目に、ＩＵＳ（ロッド）を、各動物の右子宮角に移植した。左子宮角は、内部比較のために無処置とした。プロゲスチンに対する子宮の反応性を確保する（プロゲステロン受容体発現を維持する）ために、Ｅ２の投与を０.１μｇ／動物の１日用量で継続した。ＬＨレベル測定のために４、１０および１７日目に採血した。
【００５５】
遺伝子発現解析の実施：
子宮組織を、Precellys24 ホモジナイザー(Peqlab, Erlangen(Germany)；２.８ｍｍのセラミックビーズ；#91-PCS-CK28, 2x6000rpm)を使用して、ＲＬＴ溶解バッファー(Qiagen, Hilden, Germany;#79216)（８００μｌ）中でホモジナイズした。得られたホモジネート（４００μｌ）を、自動サンプル調製用のQIAsymphony SPロボット上でQIAsymphony RNAキット(Qiagen, #931636)を使用して、全ＲＮＡを単離するために使用した。１μｇ〜４μｇの全ＲＮＡの逆転写を、ランダムヘキサマー法に従い、SuperScript III第１鎖合成システム(Invitrogen, Carlsbad, USA; #18080-051)を使用して行なった。
【００５６】
遺伝子発現解析を、TaqManプローブ(Applied Biosystems;IGFBP-1 Rn00565713_m1, Cyp26a1 Rn00590308_m1, PPIA Rn00690933_m1)およびFast Blue qPCR MasterMix Plus(Eurogentec, Liege, Belgium;#RT-QP2X-03+FB)を使用して、SDS7900HT Real.time PCRシステム(Applied Biosystems, Carlsbad, USA)で、１反応当たり５０〜２００ｎｇのｃＤＮＡを用いて行なった。相対定量のために、シクロフィリンＡ（ＰＰＩＡ）を、内在性コントロールとして用いた。相対発現レベルを、比較デルタ・デルタＣＴ法に従って計算した。
【００５７】
結果：
１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン（化合物Ａ）および１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ビス−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン（化合物Ｂ）は、ＩＵＳ装着子宮角の重量増加として、用量依存的な局所作用を示した（図１／４）。
【００５８】
試験した投与量範囲において（化合物Ａについては：０.６〜１０μｇ／動物／日、および化合物Ｂについては：１〜４５μｇ／動物／日）、驚くべきことに、１０μｇ／動物／日の用量の化合物Ａを除き、両プロゲスチンとも、ＬＨの低下を示さず、即ち全身性副作用を示さなかった（図２／４）。
【００５９】
１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンおよび１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ビス−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンのそれぞれの薬物動態プロファイルは、全ての生体外代謝試験（肝臓）および生体内試験した全ての動物種において、非常に高い分解速度を示した。
【００６０】
ラットにおいてＩＵＳ（ロッド）により局所投与した場合、化合物Ａは、関連マーカー遺伝子の遺伝子発現の誘導において、同じ放出速度のレボノルゲストレルよりも４〜７倍の高い効果を示した（図３／４）。このより高い局所効果は、全身性副作用を起こさずに子宮に対しより迅速かつ強力な局所黄体ホルモン作用を達成するという可能性を更に支持する。
【００６１】
従って、これらのプロゲスチンを、女性においてレボノルゲストレルについて報告されている副作用を起こさないように、投薬して局所効果を得ることができる。
【００６２】
非常に高い分解速度は、ヒトの生体外（肝臓）においても見られた。肝臓における迅速な生体外分解はまた、迅速な生体内分解を示唆し、従って、ＩＵＳによる投与後の１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンおよび１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンへの全身的暴露は非常に少ないと見積もられる。予想される物質レベル（Ｃｓｓ＝定常状態での濃度）は、ＩＵＳからの放出速度から、クリアランスで除することにより計算される。ＭｉｒｅｎａＲの用量に対応する、女性１人当たり２０μｇ／日の用量では、１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンおよび１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オンへの全身的暴露（負荷）はＭｉｒｅｎａＲと比較して３０分の１よりも少ないと計算される。
【００６３】
実施例２
ヒトのアンドロゲンレセプターに対する作用を、トランスアクチベーション分析により試験した。このために、様々な濃度の試験物質を、ヒトのアンドロゲンレセプターを安定して発現する細胞に作用させ、アンドロゲンレセプターの活性化をレポーター遺伝子により検出することができる。
【００６４】
方法：
トランスアクチベーション試験のために、ｈＡＲおよびＭＴＶ−ｌｕｃレポーター遺伝子で安定にトランスフェクトされたＰＣ３（ヒト前立腺癌）細胞を使用した。使用した培養培地は、Ｌ−グルタミン ２００ｍＭ(#25030-024 Gibco-BRL)、１００Ｕ／１００μｇ／ｍｌペニシリン／ストレプトマイシン(Gibco ＃15140-122)、１０％の子ウシ血清（ＦＣＳ）を含むＲＰＭＩ培地（Ｌ−グルタミン不含；フェノールレッド不含）#E15-49 PAAであった。細胞を３７℃および５％ＣＯ２で培養した。試験培地は、１０％ＦＣＳを５％活性炭処理ＦＣＳ（ＣＣＳ）に置き替えたことを除いては、培養培地と同じであった。細胞を、２ｘ１０４細胞／ウェル／試験培地２００μｌで９６ウェルプレート（Packardの"CulturPlate" #6005180)のウェルに播種した。該細胞を、様々な濃度の試験物質と共にインキュベートして、基質（８０μｌ）を、Perkin Elmerの"steadylite HTS Reporter Gene Assay System"を使用して測定した。
【００６５】
結果：
試験結果は、化合物Ａ（１８−メチル−１５β,１６β−メチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン）および化合物Ｂ（１８−メチル−６α,７α,１５β,１６β−ジメチレン−１９−ノル−２０−スピロキサ−４−エン−３−オン）が、レボノルゲストレルよりも、ｈＡＲトランスアクチベーションにおいて１０倍以上高いＥＣ５０を有すること示す。ＥＣ５０値は、化合物Ａでは６.９ｎＭ、化合物Ｂでは５６ｎＭであるが、レボノルゲストレルではわずか０.５ｎＭであった。このようにレボノルゲストレルと比較して１０倍以上差があることは、本化合物を使用した場合に、ＭｉｒｅｎａＲによるレボノルゲストレルのような全身的有効成分レベルが子宮内での局所使用によりもたらされるとしても、全身性のアンドロゲン作用は起こらないと考えられることを意味する。
【００６６】
実施例３
放出される有効成分（Ａ）または（Ｂ）の量を、逆相液体クロマトグラフィーにより、１％濃度の２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（２−ＨＰＢＣＤ）溶液におけるＵＶ検出によって決定した。
ＰＴＦＰＭＳ膜により覆われたロッドに対して決定した生体外放出速度を、図４／４に示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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