(57)【要約】  骨格中にボロン酸官能性を有するユニークなリファゲインメロテルペノイド足場をもった化合物[式1]を、抗癌剤としてのこれらの化合物の薬理学的可能性と共に記載する。調製とホスホイノシチド-3-キナーゼ(PI3K-アルファ及びベータ)の活性を阻害する方法を示している。特に、本発明は、PI3Kイソ型を阻害する方法であって、化合物がユニークなボロン酸官能性を有するリファゲイン足場に基づく新規な構造である、前記方法を記載している。その方法及び使用を本発明の中で記載する。特許請求の範囲に記載されているマーカッシュ形式は、[式1]である。Yは、O、NH、NR、Sであることができ; 代表的な化合物は[化合物A、B、C、D]である。2015514701.tif 0000462015514701.tif 000047【選択図】なし
2015514701.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式1
【化１】
2015514701.tif 000038
(式中、
a)「Y」= O、S、NH又はNR、ここで、R= アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分、脂環式環又は芳香族系;
b) n = 0又は1;
ciii) R1、R2及びR3は、独立して、H、OH、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiRR'R''、OCF3、CF3及びRからなる群より選ばれ、
R、R'、R''は、独立して、アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、
前記脂環式環は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル環からなる群より選ばれ、且つ前記脂環式環は、異なる位置で異なる置換を有し、
前記アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル及びイソブチルからなる群より選ばれ、且つ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
diii) R4 = H又はOR又はSR又はSO2R又はOSO3R又はSiRR'R''又はNH2又はNHR又はNRR'又はアルキル置換基又は任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R'、CN、SiRR'R''又はRで置換されていてもよい直鎖若しくは分枝鎖の、飽和若しくは不飽和のアルキル基である1〜10個の炭素鎖、
ここで、R、R'、R''は、独立して、種々の鎖長をもつ異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、脂環式環は異なる置換及び種々の鎖長を有し、
前記アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルからなる群より選ばれ、且つ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
前記アルキル置換基は、メチル、エチル、プロピル及び高級同族体からなる群より選ばれ、
前記高級同族体は、直鎖、分枝鎖又は脂環式置換基であり、
前記脂環式置換基は、シクロペンタン、シクロヘキサン、より大きい員環、縮合環及びアリール/ヘテロアリール置換アルキル基からなる群より選ばれ、
前記アリール/ヘテロアリール置換アルキル基は、ベンジル基又は更にシンナミル、クロチル及びプレニル置換基からなる群より選ばれる不飽和アルキル基であり;
e) R5、R6及びR7は、独立して、H、直鎖又は分枝鎖の、飽和又は任意の位置で不飽和の1〜10個の炭素鎖、及びアルキル基からなる群より選ばれ、ここで、前記アルキル基は、任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR'、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiR'R'R''及びRで置換されていてもよく、
R、R'、R''は、独立して、異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれる)
の化合物、及びその医薬的に許容され得る塩。
【請求項２】
一般式1の化合物が、下記の構造式:
【化２】
2015514701.tif 000039
【化３】
2015514701.tif 000040
【化４】
2015514701.tif 000041
を含む式A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L、M、N、O、P、Q、R、S、T、U、V、W、X、Y、Z、AA、AB、AC、AD、AE、AF、AG、AH、AI、AJ、AK、AL、AM、AN、AO、AP、AQ、AR、AS、AT、AU、AV、AW、AX、AY及びAZの化合物によって表される、請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
癌治療においてPI3K-α又はβイソ型の特異的阻害剤として有効である、請求項1に記載の化合物。
【請求項４】
一般式1
【化５】
2015514701.tif 000042
(式中、
a)「Y」= O、S、NH又はNR、ここで、R= アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分、脂環式環又は芳香族系;
b) n = 0又は1;
civ) R1、R2及びR3は、独立して、H、OH、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiRR'R''、OCF3、CF3及びRからなる群より選ばれ、
R、R'、R''は、独立して、アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、
前記脂環式環は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル環からなる群より選ばれ、且つ前記脂環式環は、異なる位置で異なる置換を有し、
前記アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル及びイソブチルからなる群より選ばれ、且つ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
div) R4 = H又はOR又はSR又はSO2R又はOSO3R又はSiRR'R''又はNH2又はNHR又はNRR'又はアルキル置換基又は任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R'、CN、SiRR'R''又はRで置換されていてもよい直鎖若しくは分枝鎖の、飽和若しくは不飽和のアルキル基である1〜10個の炭素鎖、
ここで、R、R'、R''は、独立して、種々の鎖長をもつ異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、脂環式環は異なる置換及び種々の鎖長を有し、
前記アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルからなる群より選ばれ、且つ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
前記アルキル置換基は、メチル、エチル、プロピル及び高級同族体からなる群より選ばれ、
前記高級同族体は、直鎖、分枝鎖又は脂環式置換基であり、
前記脂環式置換基は、シクロペンタン、シクロヘキサン、より大きい員環、縮合環及びアリール/ヘテロアリール置換アルキル基からなる群より選ばれ、
前記アリール/ヘテロアリール置換アルキル基は、ベンジル基又は更にシンナミル、クロチル及びプレニル置換基からなる群より選ばれる不飽和アルキル基であり;
e) R5、R6及びR7は、独立して、H、直鎖又は分枝鎖の、飽和又は任意の位置で不飽和の1〜10個の炭素鎖、及びアルキル基からなる群より選ばれ、ここで、前記アルキル基は、任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR'、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiR'R'R''及びRで置換されていてもよく、
R、R'、R''は、独立して、異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれる)
の化合物及びその医薬的に許容され得る塩の調製方法であって、下記工程:
iv) 塩基の存在下、エーテル溶媒中で化合物9とn-ブチルリチウム又はカリウム-tert-ブトキシドとを反応させる工程;
【化６】
2015514701.tif 000043
化合物9
v) 工程(i)で得られた上記の混合物にトリエチルボレート又はトリメチルボレートを添加し且つ撹拌する工程;
vi) 工程(ii)の反応を塩化アンモニウム飽和溶液で抑えた後、水不混和性溶媒で抽出して、一般式10の化合物を得る工程
【化７】
2015514701.tif 000044
一般式10
iv) エーテル溶媒中で化合物10とBI3又はDMS又はAlCl3/チオ尿素とを1:1〜3:4モルの範囲にある割合で反応させる工程;
v) 工程(iv)の反応をハイポ溶液の添加によって抑えた後、水不混和性溶媒で抽出して、一般式1の化合物を得る工程、
を含む、前記方法。
【請求項５】
工程(i)及び(v)に用いられる前記エーテル溶媒が、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル及びジイソプロピルエーテルからなる群より選ばれる、請求項4に記載の方法。
【請求項６】
工程(i)における前記塩基が、テトラメチルエチレンジアミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン及びジイソプロピルエチルアミンからなる群より選ばれる、請求項4に記載の方法。
【請求項７】
工程(i)における反応が、-78oC〜35oCの範囲にある温度で5〜10分の範囲の時間行われる、請求項4に記載の方法。
【請求項８】
工程(ii)における反応が、0〜5oCの範囲にある温度で1〜2時間の範囲の時間行われる、請求項4に記載の方法。
【請求項９】
工程(iii)及び(v)における前記水不混和性溶媒が、酢酸エチル、ジクロロメタン、エーテル又はクロロホルムからなる群より選ばれる、請求項4に記載の方法。
【請求項１０】
工程(iv)における反応が、-78oC〜35oCの範囲にある温度で1〜3時間の範囲の時間行われる、請求項4に記載の方法。
【請求項１１】
工程(v)において得られる前記一般式1の化合物が、医薬的に許容され得る塩に変換される、請求項4に記載の方法。
【請求項１２】
前記一般式1の化合物が、前記一般式1の化合物と塩基とを比1:1の割合で混合する工程であって、前記塩基が水中の水酸化ナトリウム、水酸化カリウム及び水酸化アンモニウムからなる群より選ばれる、前記工程、前記反応混合物を1〜2時間撹拌した後、乾燥して、前記一般式1の化合物の医薬的に許容され得る塩を得る工程を含む方法によって医薬的に許容され得る塩に変換される、請求項11に記載の方法。
【請求項１３】
任意に医薬的に許容され得る担体、塩、賦形剤又は希釈剤と共に、前記式1の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１４】
前記医薬的に許容され得る担体が、水、緩衝食塩水、グリコール、グリセロール、オリーブ油及びリポソームからなる群より選ばれる、請求項13に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
一般式1
【化８】
2015514701.tif 000045
(式中、
a)「Y」= O、S、NH又はNR、ここで、R= アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分、脂環式環又は芳香族系;
b) n = 0又は1;
cv) R1、R2及びR3は、独立して、H、OH、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiRR'R''、OCF3、CF3及びRからなる群より選ばれ、
R、R'、R''は、独立して、アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、
前記脂環式環は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル環からなる群より選ばれ、且つ前記脂環式環は、異なる位置で異なる置換を有し、
前記アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル及びイソブチルからなる群より選ばれ、且つ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
dv) R4 = H又はOR又はSR又はSO2R又はOSO3R又はSiRR'R''又はNH2又はNHR又はNRR'又はアルキル置換基又は任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R'、CN、SiRR'R''又はRで置換されていてもよい直鎖若しくは分枝鎖の、飽和若しくは不飽和のアルキル基である1〜10個の炭素鎖、
ここで、R、R'、R''は、独立して、種々の鎖長をもつ異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、脂環式環は異なる置換及び種々の鎖長を有し、
前記アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルからなる群より選ばれ、且つ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
前記アルキル置換基は、メチル、エチル、プロピル及び高級同族体からなる群より選ばれ、
前記高級同族体は、直鎖、分枝鎖又は脂環式置換基であり、
前記脂環式置換基は、シクロペンタン、シクロヘキサン、より大きい員環、縮合環及びアリール/ヘテロアリール置換アルキル基からなる群より選ばれ、
前記アリール/ヘテロアリール置換アルキル基は、ベンジル基又は更にシンナミル、クロチル及びプレニル置換基からなる群より選ばれる不飽和アルキル基であり;
e) R5、R6及びR7は、独立して、H、直鎖又は分枝鎖の、飽和又は任意の位置で不飽和の1〜10個の炭素鎖、及びアルキル基からなる群より選ばれ、ここで、前記アルキル基は、任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR'、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiR'R'R''及びRで置換されていてもよく、
R、R'、R''は、独立して、異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれる)
の化合物を用いるヒト癌細胞系におけるPI3K-α又はβイソ型の特異的阻害による癌の治療方法であって、
前記一般式1の化合物と肺細胞系(A549)、白血病細胞系(THP1)、前立腺細胞系(PC-3)及び結腸細胞系(caco-2、colo205、HCT-115)からなる群より選ばれるヒト癌細胞系とを混合する工程、及び前記ヒト癌細胞系におけるPI3K-α又はβイソ型を特異的に阻害する工程、
を含む、前記方法。
【請求項１６】
一般式1の化合物の投薬量が、20mg/kg〜100mg/kgの範囲にある、請求項15に記載の方法。
【請求項１７】
代表的な化合物Aが、結腸癌細胞系及び乳癌細胞系に対する生体外活性のために用いられる場合、2.4μM〜2.6μMの範囲にあるGI50濃度を有する、請求項15に記載の方法。
【請求項１８】
代表的な化合物Aが、10μMの濃度でヒト癌細胞系において74%より大きい最適発育阻止を示す、請求項15に記載の方法。
【請求項１９】
結腸癌細胞系に対する生体外活性のために用いられる場合に代表的な化合物Eが、sub-G1/G0集団を増大し、且つ、G1/G0集団における濃度依存性増殖停止及び結腸癌細胞系における後期アポトーシスを示す、請求項15に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ボロン酸をもったリファゲイン(liphagane)化合物に関する。本発明は、特に、ボロン酸をもったメロテルペノイドリファゲイン足場(scaffold)ベースの化合物に関する。化合物は設計され、合成されており、PI3K経路を阻害することによる抗癌活性に対するこれらの生物学的評価結果が本発明において示される。この研究のための発明の分野は、抗癌活性に対するメロテルペノイドリファゲイン足場に基づく新規なPI3K-α/β阻害剤の開発と関係し且つこれを包含するものである。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
PI3Kは、ホスファチジルイノシトール(PtdIn)のイノシトール環の3位のヒドロキシル基をリン酸化することができる関連した細胞内シグナル伝達物質のファミリーである。PI3Kは、ホスファチジルイノシトール-3-キナーゼとしても知られる。カロリー制限において、癌遺伝子PIK3と腫瘍抑制(PTEN)遺伝子によって経路は、インスリン及びIGF1に対する癌腫瘍の非感受性に関係している。3-キナーゼ(PI3K)シグナル伝達経路は、ある種の治療薬の発見と開発のために新たに確認された方策である。PI3Kの種々のサブタイプの中でも、クラスIA PI3K-アルファは、その頻繁な突然変異及び種々のヒト癌における増幅による癌の治療のための有望な薬剤標的としてますます注目されている。正常な増殖細胞と腫瘍細胞を区別しない細胞毒性薬と対照的に、標的治療は主に癌細胞においてこれらの作用を与える。腫瘍の惹起及び維持は、特定の座における遺伝子変化に起因する。生じるこれらの変化における遺伝子の識別が癌治療の新規な機会を開いた。PI3K(ホスホイノシチド3-キナーゼ)経路はヒト癌においてしばしば過度に活性であり、種々の遺伝子変化がこれを引き起こすことがわかった。全ての場合において、PI3K阻害は、癌治療のために最も有望な標的治療のうちの1つであると考えられる。
炎症及び癌のその広範囲にわたる活性化のため、ホスホイノシチド3-キナーゼ(PI3K)経路の阻害剤の治療的可能性の増大する評価が適切な薬理学的プロファイルを有する化合物での強い関心を刺激した。これらは、主にPI3K自体を目指している。しかしながら、クラスＩ PI3Kが正常な生理学的過程の範囲に不可欠であるので、広域スペクトルPI3K阻害は充分に許容されることができない。
近年、抗癌治療や抗炎症治療として用いるためにイソ型選択性が強化された化合物の開発に特に焦点を絞って、PI3K阻害剤の新規な生成を記載している特許が現れ始めた。しかしながら、成功した方法でこの酵素ファミリーを薬理学的に標的にするための努力には課題が依然として残っている。
【０００３】
ホスホイノシチド3-キナーゼ-α(PI3K-α/β)阻害剤の選択のための論理的根拠: - 細胞レベルで、ホスホイノシチド-3-キナーゼシグナル伝達は、細胞周期の進行、細胞増殖、生存及び移動並びに細胞内小胞輸送を含めて多くのプロセスに関与している。PI3Kは、構造及び基質特異性に従って3つのサブファミリーに分類され得る脂質キナーゼのファミリー、すなわち、クラスＩ、クラスII及びクラスIIIを表している。脂質キナーゼの中で最も広範囲に研究されいるクラスＩ PI3Kは、ヘテロ二量体タンパク質である; 各々がより小さい調節ドメイン及びより大きい110kDaの触媒ドメインを含有し、p110α、p110β、p110γ、及びp110δとして区別される4つのイソ型で生じる。しかし、文献においてナノグラム範囲でIC50値を有するPI3-キナーゼを阻害する天然産物ベースの低分子が報告されている(すなわち、ペニシリウム・ウォルトマンニ(Penicillium wortmanni)から分離されたウォルトマンニン(Wortmannin)、LY294002 フラボノイドクエルセチンの合成類縁体等)が、これらの分子は、効力が低く、イソ型又はキナーゼ選択性が不充分であり、安定性が制限され、且つ薬理学的特性及び薬物速度論的特性が容認できないことから市場に到達しなかった。しかしながら、イソ型選択性及び有望な薬剤様の特性を有するPI3キナーゼ阻害剤は、現在、癌及び他の疾患適応症の治療に有望であることが明らかになり始めた。癌において、クラス1A PI3キナーゼp110及びp110βの阻害が標的に最も適切であると思われることを証拠が示している。近年では、2006年に、Andersenらが海洋資源からの天然産物が分子多様性のおびただしい貯蔵所として明らかになったことを考慮してヒトPI3K-アルファに対して海洋無脊椎動物を選抜し且つ薬剤発見のリード構造の豊かな供給源として相当な将来性を保つ共同研究的プログラムの下で海綿動物Aka coralliphagaからの潜在的イソ型選択的PI3K-アルファ阻害剤を報告した。リファガール(Liphagal)(Joshua J.Day, Ryan M.McFadden; The catalytic enantioselective total synthesis of (+)-Liphagal; Angew.Chem.Int.Ed.2011, 50, 6814 -6818; Enrique Alvarez-Manzaneda, RachidChahboun; Enantioselectivetotal synthesis of the selective PI3-kinase inhibitor Liphagal;Org.Lett., 2010, 12 (20), pp 4450-4453.; Jonathan H.George, Jack E.Baldwin; Enantiospecificbiosynthetically inspired formal total synthesis of (+)-Liphagal,Org.Lett., 2010, 12 (10), pp 2394-2397.; Alban R.Pereira, Wendy K.Strangman, Synthesis of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) inhibitory analogues of the sponge meroterpenoid Liphagal; J.Med.Chem., 2010, 53 (24), pp 8523-8533.; Dima A.Sabbah, Jonathan L.Vennerstrom; Docking studies on isoform-specific inhibition of phosphoinositide-3-kinases;J.Chem.Inf.Model., 2010, 50 (10), pp 1887-1898.; Ram Vishwakarma and Sanjay Kumar; Efficient Synthesis of key intermediate toward Liphagal synthesis; Synthetic Communications; 2010, 41(2), pp 177-183.;Frederic Marion, David E.Williams,Liphagal, a selective inhibitor of PI3 kinase-α isolated from the sponge Aka coralliphaga: Structure elucidation and biomimetic synthesis;Org.Lett., 2006, 8 (2), pp 321-324.;Goverdhan Mehta, Nachiket S.Likhite, C.S.Ananda Kumar A concise synthesis of the bioactive meroterpenoid natural product (±)-liphagal, a potent PI3K inhibitor., Tet.Lett, 2009, vol.50, no.37, pp 321-324.)は、PI3K-γよりPI3K-αに対して〜10倍強力であった。我々は、リード分子の発見のために多様性指向合成手法に従ってこの分子についての合理的変性によってリファガールのホウ素含有類縁体を合成した。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的
本発明の主な目的は、ボロン酸をもったリファゲイン化合物を提供することである。
本発明の他の目的は、ボロン酸官能基含有リファゲイン化合物の調製方法を提供する。
本発明の更に他の目的は、本発明の明細書の特許請求の範囲に記載の合成経路によって工程A6からA7へ及びA7からAへの調製方法を提供することである。
本発明のなお他の目的は、抗癌剤としてボロン酸ベースのリファガール化合物の生物活性を評価することである。
本発明の更に他の目的は、酵素特異性に対して研究した場合にアルファ又はベータ特異的としてのPI3K阻害に対するこれらの化合物のイソ型選択性を確認することである。
本発明の更に他の目的は、アネキシン-V又は免疫蛍光分析及び細胞周期分析によってリファガールボロン酸をもった化合物の作用機序及び発育阻止を探索することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
発明の概要:
従って、本発明は、一般式1
【化１】
2015514701.tif 000003
(式中、
a)「Y」= O、S、NH又はNR、ここで、R= アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分、脂環式環又は芳香族系;
b)  n = 0又は1;
c) R1、R2及びR3は、独立して、H、OH、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiRR'R''、OCF3、CF3及びRからなる群より選ばれ、
ここで、R、R'、R''は、独立して、アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、
ここで、脂環式環は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル環からなる群より選ばれ、且つ脂環式環は、異なる位置で異なる置換基を有し、
アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル及びイソブチルからなる群より選ばれ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
d) R4 = H又はOR又はSR又はSO2R又はOSO3R又はSiRR'R''又はNH2又はNHR又はNRR'又はアルキル置換基又は任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R'、CN、SiRR'R''又はRで置換されていてもよい直鎖若しくは分枝鎖の、飽和若しくは不飽和のアルキル基である1〜10個の炭素鎖、
ここで、R、R'、R''は、独立して、種々の鎖長をもつ異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、脂環式環は異なる置換及び種々の鎖長を有し、
ここで、アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルからなる群より選ばれ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
ここで、アルキル置換基は、メチル、エチル、プロピル及び高級同族体からなる群より選ばれ、
ここで、高級同族体は、直鎖、分枝鎖又は脂環式置換基であり、
ここで、脂環式置換基は、シクロペンタン、シクロヘキサン、より大きい員環、縮合環及びアリール/ヘテロアリール置換アルキル基からなる群より選ばれ、
ここで、アリール/ヘテロアリール置換アルキル基は、ベンジル基又は更にシンナミル、クロチル及びプレニル置換基からなる群より選ばれる不飽和アルキル基であり;
e)  R5、R6及びR7は、独立して、H、直鎖又は分枝鎖の、飽和又は任意の位置で不飽和の1〜10個の炭素鎖、及びアルキル基からなる群より選ばれ、ここで、アルキル基は、任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR'、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiR'R'R''及びRで置換されていてもよく、
ここで、R、R'、R''は、独立して、異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれる)
の化合物、又はその医薬的に許容され得る塩を提供する。
【０００６】
本発明の他の実施態様において、一般式1の化合物は、下記の構造式:
【化２】
2015514701.tif 000004
【化３】
2015514701.tif 000005
【化４】
2015514701.tif 000006
を含む式A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L、M、N、O、P、Q、R、S、T、U、V、W、X、Y、Z、AA、AB、AC、AD、AE、AF、AG、AH、AI、AJ、AK、AL、AM、AN、AO、AP、AQ、AR、AS、AT、AU、AV、AW、AX、AY又はAZの化合物によって表される。
本発明の他の実施態様において、化合物は、癌治療においてPI3K-α又はβイソ型の特異的阻害剤として有効である。
【０００７】
本発明の更に他の実施態様は、一般式1
【化５】
2015514701.tif 000007
(式中、
a)「Y」= O、S、NH又はNR、ここで、R= アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分、脂環式環又は芳香族系;
b) n = 0又は1;
ci) R1、R2及びR3は、独立して、H、OH、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiRR'R''、OCF3、CF3及びRからなる群より選ばれ、
ここで、R、R'、R''は、独立して、アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、
ここで、脂環式環は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル環からなる群より選ばれ、且つ脂環式は、異なる位置で異なる置換基を有し、
アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル及びイソブチルからなる群より選ばれ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
di) R4 = H又はOR又はSR又はSO2R又はOSO3R又はSiRR'R''又はNH2又はNHR又はNRR'又はアルキル置換基又は任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R'、CN、SiRR'R''又はRで置換されていてもよい直鎖若しくは分枝鎖の、飽和若しくは不飽和のアルキル基である1〜10個の炭素鎖、
ここで、R、R'、R''は、独立して、種々の鎖長をもつ異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、脂環式環は異なる置換及び種々の鎖長を有し、
ここで、アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルからなる群より選ばれ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
ここで、アルキル置換基は、メチル、エチル、プロピル及び高級同族体からなる群より選ばれ、
ここで、高級同族体は、直鎖、分枝鎖又は脂環式置換基であり、
ここで、脂環式置換基は、シクロペンタン、シクロヘキサン、より大きい員環、縮合環及びアリール/ヘテロアリール置換アルキル基からなる群より選ばれ、
ここで、アリール/ヘテロアリール置換アルキル基は、ベンジル基又は更にシンナミル、クロチル及びプレニル置換基からなる群より選ばれる不飽和アルキル基であり;
e) R5、R6及びR7は、独立して、H、直鎖又は分枝鎖の、飽和又は任意の位置で不飽和の1〜10個の炭素鎖、及びアルキル基からなる群より選ばれ、ここで、アルキル基は、任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR'、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiR'R'R''及びRで置換されていてもよく、
ここで、R、R'、R''は、独立して、異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれる)
の化合物又はその医薬的に許容され得る塩の調製方法であって、下記工程:
i) 塩基の存在下、エーテル溶媒中で化合物9とn-ブチルリチウム又はカリウム-tert-ブトキシドとを反応させる工程;
【化６】
2015514701.tif 000008
化合物9
ii) 工程(i)で得られた上記の混合物にトリエチルボレート又はトリメチルボレートを添加し且つ撹拌する工程;
iii) 工程(ii)の反応を塩化アンモニウム飽和溶液で抑えた後、水不混和性溶媒で抽出して、一般式10の化合物を得る工程
【化７】
2015514701.tif 000009
一般式10
iv) エーテル溶媒中で化合物10とBI3又はDMS又はAlCl3/チオ尿素とを1:1〜3:4モルの範囲にある割合で反応させる工程;
v) 工程(iv)の反応をハイポ溶液の添加によって抑えた後、水不混和性溶媒で抽出して、一般式1の化合物を得る工程
を含む、前記方法を提供する。
【０００８】
本発明の更に他の実施態様において、工程(i)及び(v)に用いられるエーテル溶媒は、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル及びジイソプロピルエーテルからなる群より選ばれる。
本発明の更に他の実施態様において、工程(i)における塩基は、テトラメチルエチレンジアミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン及びジイソプロピルエチルアミンからなる群より選ばれる。
本発明の更に他の実施態様において、工程(i)における反応は、-78oC〜35oCの範囲にある温度で5〜10分の間にある時間行われる。
本発明の更に他の実施態様において、工程(ii)における反応は、0〜5oCの範囲にある温度で1〜2時間の間にある時間行われる。
本発明の更に他の実施態様において、工程(iii)及び(v)における水不混和性溶媒は、酢酸エチル、ジクロロメタン、エーテル又はクロロホルムからなる群より選ばれる。
本発明のなお他の実施態様においては、工程(iv)における反応は、-78oC〜35oCの間にある温度で1〜3時間の間にある時間行われる、
【０００９】
本発明のなお他の実施態様においては、工程(v)において得られた一般式1の化合物は、医薬的に許容され得る塩に変換される。
本発明のなお他の実施態様においては、一般式1の化合物は、一般式1の化合物と塩基とを比1:1の割合で混合する工程であって、塩基が水中の水酸化ナトリウム、水酸化カリウム及び水酸化アンモニウムからなる群より選ばれる、前記工程、反応混合物を1〜2時間撹拌した後、乾燥して、一般式1の化合物の医薬的に許容され得る塩を得る工程を含む方法によって医薬的に許容され得る塩に変換される。
【００１０】
本発明の更に他の実施態様は、任意に医薬的に許容され得る担体、塩、賦形剤又は希釈剤と共に、有効な量の式1の化合物を含む、医薬組成物を提供する。
本発明のなお他の実施態様においては、医薬的に許容され得る担体は、水、緩衝食塩水、グリコール、グリセロール、オリーブ油及びリポソームからなる群より選ばれる。
【００１１】
本発明のなお他の実施態様は、一般式1
【化８】
2015514701.tif 000010
(式中、
a)「Y」= O、S、NH又はNR、ここで、R= アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分、脂環式環又は芳香族系;
b) n = 0又は1;
cii) R1、R2及びR3は、独立して、H、OH、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiRR'R''、OCF3、CF3及びRからなる群より選ばれ、
ここで、R、R'、R''は、独立して、アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、
ここで、脂環式環は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル環からなる群より選ばれ、且つ脂環式環は、異なる位置で異なる置換基を有し、
アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル及びイソブチルからなる群より選ばれ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
dii) R4 = H又はOR又はSR又はSO2R又はOSO3R又はSiRR'R''又はNH2又はNHR又はNRR'又はアルキル置換基又は任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R'、CN、SiRR'R''又はRで置換されていてもよい直鎖若しくは分枝鎖の、飽和若しくは不飽和のアルキル基である1〜10個の炭素鎖、
ここで、R、R'、R''は、独立して、種々の鎖長をもつ異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれ、脂環式環は異なる置換及び種々の鎖長を有し、
ここで、アルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルからなる群より選ばれ、
アリール部分又はヘテロアリール部分は、ハロ、異なる鎖長を有するアルキル、ニトロ、アミノ、及びスルホニル置換からなる群より選ばれる置換を有し;
ここで、アルキル置換基は、メチル、エチル、プロピル及び高級同族体からなる群より選ばれ、
ここで、高級同族体は、直鎖、分枝鎖又は脂環式置換基であり、
ここで、脂環式置換基は、シクロペンタン、シクロヘキサン、より大きい員環、縮合環及びアリール/ヘテロアリール置換アルキル基からなる群より選ばれ、
ここで、アリール/ヘテロアリール置換アルキル基は、ベンジル基又は更にシンナミル、クロチル及びプレニル置換基からなる群より選ばれる不飽和アルキル基であり;
e) R5、R6及びR7は、独立して、H、直鎖又は分枝鎖の、飽和又は任意の位置で不飽和の1〜10個の炭素鎖、及びアルキル基からなる群より選ばれ、ここで、アルキル基は、任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR'、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiR'R'R''及びRで置換されていてもよく、
ここで、R、R'、R''は、独立して、異なる置換を有するアルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分及び脂環式環からなる群より選ばれる)
の化合物を用いるヒト癌細胞系におけるPI3K-α又はβイソ型の特異的阻害による癌の治療方法であって、
一般式1の化合物と肺細胞系(A549)、白血病細胞系(THP1)、前立腺細胞系(PC-3)及び結腸細胞系(caco-2、colo205、HCT-115)からなる群より選ばれるヒト癌細胞系とを混合する工程、及びヒト癌細胞系におけるPI3K-α又はβイソ型を特異的に阻害する工程
を含む、前記方法を提供する。
【００１２】
本発明の他の実施態様において、一般式1の化合物の投薬量は、20mg/kg〜100mg/kgの範囲にある。
本発明の他の実施態様において、代表的な化合物Aは、結腸癌細胞系及び乳癌細胞系に対する生体外活性のために用いられる場合、2.4μM〜2.6μMの範囲にあるGI50濃度を有する。
本発明の他の実施態様において、代表的な化合物Aは、10μMの濃度でヒト癌細胞系において74%より大きい最適発育阻止を示す。
本発明の他の実施態様において、結腸癌細胞系に対する生体外活性のために用いられる場合の代表的な化合物Eは、sub-G1/G0集団を増大し、且つ、G1/G0集団における濃度依存性増殖停止及び結腸癌細胞系における後期アポトーシスを示す。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図1は、いくつかの代表的なボロン酸をもったリファゲイン化合物の生体外細胞系ベースの抗癌活性を示す。図１は、ボロン酸をもったリファゲイン足場の一般構造を示す。
【図２】図2は、化合物Aの結合実験を示す。図2は、化合物AとPI3K-αの触媒ドメインとの構造的結合(コンピューターによる)実験の結果である。
【図３】図3は、化合物Eの結合実験を示す。図3は、化合物EとPI3K-αの触媒ドメインとの構造的結合(コンピューターによる)実験の結果である。
【図４】図4は、リファガールの結合実験を示す。
【図５】図5は、化合物AZの結合実験を示す。
【図６】図6は、一般式1のボロン酸含有化合物(化合物11)の合成のための一般スキームを示す。
【図７】図7は、化合物Aの合成のための典型的なスキームを示す。
【図８】図8は、化合物AZの合成のための典型的なスキームを示す。
【図９】図9は、caco-2細胞系についてのMTT分析による化合物AのIC50結果を示す。
【図１０】図10は、酵素ベースの分析(PI3K-α及びβ)による化合物AのIC50結果を示す。
【図１１】図11は、酵素ベースの分析(PI3K-α及びβ)による化合物AのIC50結果を示す。グラフは、化合物-AZに関するPI3K-αイソ型のIC50値を示す。表2は、化合物AZに関するPI3Kイソ型のIC50値を示す。
【図１２】図12は、化合物Aの細胞周期分析を示す。
【図１３】図13は、化合物Eに関するアポトーシス細胞集団における濃度依存性増大を示す。
【図１４】図14は、Phospho-Akt(Ser473)ウサギポリクローナルIgG(テキサスレッドで標識した)を用いたCACO-2細胞の免疫蛍光顕微鏡分析を示す。A-未処理細胞、B及びC-pAKTの阻害を示す、リファガール及び化合物E、それぞれ4μM及び3μM、で24時間処理した細胞。核は、DAPIで青色に着色した。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
略語:
ACN: アセトニトリル
Ac: アセチル
CDCl3:  重水素化クロロホルム
CHCl3: クロロホルム
13CNMR: 炭素核磁気共鳴
DCM又はCH2Cl2: ジクロロメタン
DIPEA: ジイソプロピルエチルアミン
DMF: ジメチルホルムアミド
DMSO: ジメチルスルホキシド
EtOAc: 酢酸エチル
h又はhr: 時間
1HNMR: プロトン核磁気共鳴
IC50: 50%阻害濃度
IR: 赤外線
J: 結合定数(Hz)
MeOH: メタノール
MHz: メガヘルツ
mg: ミリグラム
μg: マイクログラム
μL: マイクロリットル
Mmol: ミリモル
MTT: ミトコンドリア膜電位
m/z: 質量電荷比
PI3-K: ホスファチジルイノシトール-3-キナーゼ
TEA: トリエチルアミン
TFA: トリフルオロ酢酸
THF: テトラヒドロフラン
TLC: 薄層クロマトグラフィ
TMA: トリメチルアミン
TMEDA: テトラメチルエチレンジアミン
【００１５】
発明の詳細な説明
本発明の実施態様において、式1は、フェニル環の6位にボロン酸官能性を有するメロテルペノイドベースのリファゲイン足場の異なる化合物を表し、ここで、R1〜R3は、独立して、H、OH、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiRR'R''、OCF3、CF3及びRより選ばれる。ここで、R、R'、R''は、異なる置換を有するアルキル、アリール、ヘテロアリール又は任意の脂環式環であってもよい。
更に他の実施態様において、「Y」は、O、S、NH又はNRであり、ここで、Rは、アルキル部分、アリール部分、ヘテロアリール部分又は任意の脂環式又は芳香族系で置換されていてもよい。
本発明の実施態様において、n及びn1は、0、1及び2より選ばれた炭素鎖長である。
他の実施態様において、R4は、H又はOR又はSR又はSO2R又はOSO3R又はSiRR'R''又はNH2又はNHR又はNRR'又はアルキル置換基又は任意にOH、H、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R'、CN、SiRR'R''又はRで置換されていてもよい直鎖若しくは分枝鎖の、飽和若しくは不飽和のアルキル基である1〜10個の炭素鎖である。ここで、R、R'、R''は、種々の鎖長をもつ置換を有するアルキル、アリール、ヘテロアリール又は脂環式環である。
【００１６】
実施態様において、置換基R4は、また、水素、アルキル置換基、すなわち、メチル、エチル、プロピル、及び脂環式環、例えばシクロペンタン、シクロヘキサン、又はより大きい員環、縮合環、ベンジル基若しくは不飽和アルキル基、例えばシンナミル、クロチル又はプレニル置換基、を含んでよいその高級同族体を含むアリール/ヘテロアリール置換アルキル基、を含む直鎖又は分枝鎖の高級同族体、からなる群より選ばれる。
本発明の更に他の実施態様において、R5、R6及びR7は、H又は直鎖若しくは分枝鎖の、飽和若しくは任意の位置で不飽和の1〜10個の炭素鎖、任意にOH、H、OH、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR'、NR'、NR'R''、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiRR'R''及びRで置換されていてもよいアルキル基である。ここで、R、R'、R''は、異なる置換を有するアルキル、アリール、ヘテロアリール又は任意の脂環式環であってもよい。
本発明の実施態様において、Rは、独立して、H又は直鎖又は分枝鎖の飽和又は不飽和のアルキル基が必要によりOH、H、OH、=O、=S、OR、COR、CHO、CO2R、OCOR、NH2、NHR、NRR'、NO2、F、Cl、Br、I、OSO3H、SO2R、CN、SiRR'R''及びRで置換されていてもよい1〜10個の炭素鎖より選ばれる。ここで、R、R'、R''は、異なる置換を有するアルキル、アリール、ヘテロアリール又は任意の脂環式環であってもよい。
ここで、更に、種々の位置の置換基Rは、また、水素、アルキル置換基、すなわち、メチル、エチル、プロピル、及び脂環式環、例えばシクロペンタン、シクロヘキサン、又はより大きい員環、縮合環、ベンジル基若しくは不飽和アルキル基、例えばシンナミル、クロチル又はプレニル置換基、を含んでよいその高級同族体を含むアリール/ヘテロアリール置換アルキル基、を含む直鎖又は分枝鎖の高級同族体、からなる群より選ばれる。
【００１７】
本発明の実施態様において、リファガール及びそのボロン酸ベースの化合物のインシリコバイオインフォルマティクス研究のために用いられた常法は以下に述べた通りである: すべてのコンピュータによる研究を、Schrodinger suite 2010分子モデリングソフトウェアにおいて行った。すべての分子の2D構造をマエストロウィンドウズに組み入れた。次に、すべての分子をそれぞれの3D構造変換し、種々の配座異性体、互変異性体及びイオン化状態はLigprepとConfgenのモジュールを用いた。次に、分子を、OPLS_2005力場を用いて最小化した。蛋白質構造データバンク(PDB)に報告されたPI3Kαの3D結晶構造をドッキングスタディ(PDB ID: 3HHM)のための受容体として用いた。タンパク質をPDBからダウンロードし、タンパク質調製ウィザードを用いてドッキングのために調製した。水素をタンパク質に添加し、ミッシングループを組み入れた。結合長及び結合次数修正もまた、ドッキングスタディのタンパク質を調製するために行った。活性部位グリッドを、受容体グリッド生成モジュールを用いて受容体のすでに共結晶化したリガンドに基づいて生成した。リガンドを、グライドモジュールを用いてこのグリッドによって受容体にドッキングさせ、これらのリガンドの結合モードを見つけ出すために可撓性ドッキングをすべての配座異性体に対して行った。グライドのエクストラプレシション(XP)スコア機能をこれらのスタディを行うために用いた。
本発明の更に他の実施態様において、リファガール及びそのボロン酸ベースの化合物のインシリコ研究で得られた結果は以下の通りである: ドッキングスタディに基づき、リファガールのボロン酸類縁体がリファガールよりPI3Kαに良好な親和性で結合することがわかった。相互作用研究から、ボロン酸(OH)はVal851及びGln859との強いH-結合相互作用に関係しているが、リファガールはGln859とのみ1つの場所でH-結合相互作用に関係していることが示される。また、ボロン酸ベースの化合物のドックスコアは約-10であり、リファガールは約-8.5であり、これはPI3Kαに対してボロン酸類縁体のより強い親和性を示している。
【実施例】
【００１８】
実施例:
具体的に説明するためのものであり本発明の範囲を限定するように解釈すべきでない以下の実施例によって本発明を記載する。
材料及び方法:
化学:
一般: 溶媒を標準手順に従って精製し、利用可能な最高純度の試薬を用いた。特に言及されない限り、すべての反応をアルゴン/窒素雰囲気下火炎乾燥ガラス装置内で行った。CH2Cl2、Et2O、THF、CH3OH、CH3CN、DMF、ピリジン、Et3Nのような無水溶媒を、標準法を用いて新たに乾燥した。NMR測定(1H及び13C)を、パルスフィールド勾配プローブを備えた400又は500MHzスペクトロメータ(Bruker)により記録し、トリメチルシラン(TMS)又は重水素化溶媒の残留共鳴を内部標準として用いた。化学シフトを(δ)100万分の1で表し、結合定数Jをヘルツで表す。質量スペクトルを、アセトニトリル: 0.01% TFAを含有する水中の基質として2,5-ジヒドロキシ安息香酸/α-シアノ-4-ヒドロキシ安息香酸/シナピン酸(Sigma-Aldrich)を用いてESI MS又はMALDI-TOF/TOF MS/MS-MS分光光度計により記録した。旋光度をPerkinElmer-241デジタル偏光計により測定した。分析用TLCをMerck 60 F254プレートにより行い、化合物を顕色剤としてMeOH中のホスホモリブデン酸又は20% H2SO4による噴霧及び炭化によって視覚化した。分取用TLCを、Merckから購入したプレコートシリカゲル60 F254プレート(20×20cm)により行った。シリカカラムクロマトグラフィを、Merckから購入したシリカゲル(100〜200メッシュ)又はフラッシュシリカゲル(230〜400のメッシュ)で行った。
【００１９】
実施例1:化合物Aの合成:
工程1〜6として(参考文献: Mehta, G.; Likhite, N.S.; Ananda Kumar, C.S.Tet.Lett.2009, 50, 5260.)
化合物Aの合成に含まれる工程を下記の通り記載する。
工程1: 2-ヒドロキシ、4,5-ジメトキシベンズアルデヒド(A1)の合成: 0oCにおけるCH2Cl2(125ml)中の3,4,5-トリメトキシベンズアルデヒド(5g、25.5ミリモル)の水溶液にBBr3(6.39g、25.5mmolを添加した。得られた暗色混合物を0oCで10時間撹拌し、TLCよって反応の完了を調べた後に、H2O(100mL)を添加し、混合物を10分間撹拌し、水相をCH2Cl2によって抽出した。有機相をNa2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させた。得られた残留物をシリカゲル(CH2Cl2)によって精製し、2-ヒドロキシ4,5ジメトキシベンズアルデヒドA1(4.3g)を87%収率で得、黄色固形物を分離した: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ11.33 (s, 1H), 9.63 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.81 (s, 3H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 225.06; 元素分析 C9H10O4に対する計算値; C: 59.34, H: 5.53, O: 35.13; 実測値 C: 59.14, H: 5.13, O: 34.90.
【００２０】
工程2: 1-(5,6ジメトキシベンゾフラン-2-イル)エタノン(A2)の合成: ブタン-2-オン(15ml)中の2-ヒドロキシ4,5-ジメトキシベンズアルデヒド(2g、10.98ミリモル)の溶液にK2CO3(6.07g、43.95mmol)を添加し、次に0oCで10分間撹拌し、ブロモアセトン(2.24g、16.47mmol)を添加し、90oCで4時間還流した。反応の完了の後、ブタン-2-オン留去し、水を添加し、酢酸エチルによって2回抽出した。EtOAc相をNa2SO4で乾燥し、残留物をシリカゲル(3:7 EtOAc/ヘキサン)によりクロマトグラフィ処理して、ケトンA2(1.69g)を70%収率で得、淡黄色固形物を分離した: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.29 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 2.30 (s, 3H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 243.07; 元素分析 C12H12O4に対する計算値; C: 65.45, H: 5.49.実測値 C: 65.20, H: 5.25.
【００２１】
工程3: 1-(5,6-ジメトキシベンゾフラン-2-イル)-5,9-ジメチルデカ-4,8-ジエン-1-オン(A3)の合成: 無水トルエン中の1-(5,6ジメトキシベンゾフラン-2-イル)エタノンA2(1g、4.545mmol)の溶液にtBuOK(0.51g、4.545mmol)をアルゴン雰囲気下に0oCで添加し、次に、同じ温度で15分間撹拌し、この反応混合物にゲラニルブロミドを滴下した。得られた懸濁液を同じ温度で2時間撹拌し、反応混合物に50mlの水を添加し、層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させた。シリカゲル(5% EtOAc/ヘキサン)により残留物をクロマトグラフィ処理して、ケトンA3(1.69g)を70%収率で得、淡黄色液体を分離した: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.425 (s, 1H), 7.365 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 5.12-5.16 (m, 1H), 5.08-5.04 (m, 1H), 3.96 (s, 3H),3.93 (s, 3H),2.97-2.89 (t, 2H), 2.50-2.40 (m, 2H), 2.17-2.00 (m, 4H), 1.66 (s, 3H), 1.63 (s, 3H), 1.64 (s, 3H), 1.58 (s, 3H), ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 379.2; 元素分析. C22H28O4に対する計算値; C: 74.13, H: 7.92.; 実測値 C: 74.0, H: 5.25.
【００２２】
工程4: 5,6-ジメトキシ-2-((E)-6,10-ジメチルウンデカ-1,5,9-トリエン-2-イル)ベンゾフラン(A4)の合成: トリフェニルホス-フェネメチルヨーダイド(ウィッティヒ塩、2.247g 5.6mmol)を乾燥RBF中に入れ、氷-塩混合物で保ち、これに乾燥THF(6mL)を添加し、得られた混合物にnBuLi(ヘキサン中2.5モル 3.370、8.4mmol)を反応混合物が黄色懸濁液に変わるまで滴下した。反応混合物にTHF中のケトン(1g、2.8mmol)の水溶液を滴下した。得られた懸濁液を2時間撹拌した。反応の完了後、10%塩化アンモニウム溶液30mlを添加し、EtOAcによって抽出した。シリカゲル(3% EtOAc/ヘキサン)により残留物をクロマトグラフィ処理して、化合物A4(0.79g)を80%収率で得、無色の液体を分離した: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ  6.95 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 5.86 (s, 1H),5.31-5.30 (d, 1H),5.20-5.18 (d, 2H), 5.11-5.08 (t, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 2.46-2.43 (t, 2H), 2.32-2.28 (q, 2H), 2.08-2.04 (q, 2H),2.01- 1.98 (t, 2H), 1.68 (s, 3H), 1.59 (s, 3H), 1.56 (s, 3H), ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 377.22; 元素分析. C23H30O3に対する計算値; C: 77.93, H: 8.53; 実測値 C: 77.55, H: 8.35.
【００２３】
工程5: 5,6-ジメトキシ-2-((E)-1,6,10-トリメチルウンデカ-5,9-ジエン-2-イル)ベンゾフラン(A5)の合成: MeOH中の化合物A4(0.7g 1.9mmol)の溶液に10モル% Pd/Cを添加し、40psi(2.8 bar)圧力で0.5時間振盪した。反応を完了した後(TLCによって調べた)、反応混合物をろ過し、メタノールを完全に蒸発させた。シリカゲル(3% EtOAc/ヘキサン)により残留物をクロマトグラフィ処理して、化合物A5(0.633g)を90%収率で得、無色の液体を分離した: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.04 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.294 (s, 1H), 5.15-5.12 (m, 4H), 3.940 (s, 6H), 2.94-2.91 (m, 1H), 2.10-1.98(m, 4H), 1.87-1.82(m, 2H), 1.74 (s, 3H), 1.634 (s, 3H), 1.59 (s, 3H), 1.34-1.32 (d, 3H), ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 356.24; 元素分析. C23H32O3に対する計算値; C: 77.49, H: 9.05; 実測値 C: 77.49, H: 9.05.
【００２４】
工程6: 化合物(A6)の合成: -85oCにおける2-ニトロプロパン(25mL)中のベンゾフランA5(0.6g、1.6mmol)の溶液にクロロスルホン酸(0.977g、8.42mmol)を添加した。得られた混合物を-78oCで30分間撹拌した。次に、NaHCO3水溶液を添加し、水相をEtOAcで抽出した。EtOAc相をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、減圧下で蒸発させた。シリカゲル(3% EtOAc/ヘキサン)により残留物をクロマトグラフィ処理して、化合物A6(0.3g)を50%収率で得、ラセミ混合物を有する無色の液体を分離した。1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ 7.13 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 3.89(s, 3H), 3.88 (s, 3H), 2.56 (br d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.15 (m, 1H), 1.82 (m, 1H),1.71 (qt, J = 13.7, 3.5 Hz, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.64 - 1.41 (m, 8H), 1.40 (d, J = 7.2 Hz,3H), 1.36 (s, 3H), 1.25 (ddd, J = 13.3, 13.3, 3.5 Hz, 1H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).質量分析: ESI [M + Na]+: 356.24; 元素分析. C23H32O3に対する計算値; C: 77.49, H: 9.05; 実測値 C: 77.49, H: 9.05.
【００２５】
工程7: 化合物(A7)の合成: 本出願において、化合物A7は、化合物Eと同じ意味で呼ばれている。
0oCにおけるTHF(1.5mL)中のベンゾフランA6(0.1g、.281mmol)の溶液にnBuLi(2.5M/ヘキサン)を添加した。この温度で20分間撹拌した後、トリエチルボレートを添加した。混合物を室温で1hr撹拌した。NH4Cl水溶液を添加し、水相をEtOAcで抽出し、Na2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させた。シリカゲル(8% EtOAc/ヘキサン)により残留物をクロマトグラフィ処理して、化合物A7(0.05g)を50%白色固形物ラセミ混合物で得た。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.83 (s, 1H),  3.94 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 2.56-2.49 (m, 1H), 1.56-1.52 (m, 4H), 1.48 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (d, 3H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 400.24; 元素分析. C23H33BO5に対する計算値; C: 69.01, H: 8.31, B: 2.70; 実測値 C: 69.10, H: 8.20, B: 2.50.
【００２６】
工程8: 化合物Aの合成: DCM中の化合物A7の溶液を含有する丸底フラスコにDCM中のBI3の溶液を-78oCで徐々に滴下した。この混合物を同じ温度で30分間撹拌し、室温にゆっくりと上げた、反応の進行をTLCによって監視した。反応混合物を、チオ硫酸カリウム溶液を用いて中和し、DCM溶液で抽出し、有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空中で濃縮した。粗生成物を溶離剤としてヘキサン/EtOAcを用いたカラムクロマトグラフィによって精製した。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.83 (s, 1H), 2.56-2.49 (m, 1H), 1.56-1.52 (m, 4H), 1.48 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (d, 3H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 372.211; 元素分析. C21H29BO5に対する計算値; C: 67.75, H: 7.85, B: 2.90; 実測値 C: 67.65, H: 7.61, B: 2.30.
化合物Aの調製に記載されているように、式1で開示されたすべての化合物を、R1、R2、R3及びR4の位置に異なる置換を含有する同様の方法を使用することによって調製する。反応条件の詳細を下記に示した表に記載する。
【００２７】
【表１】
2015514701.tif 000011
2015514701.tif 000012
2015514701.tif 000013
2015514701.tif 000014
2015514701.tif 000015
2015514701.tif 000016
2015514701.tif 000017
2015514701.tif 000018
2015514701.tif 000019
2015514701.tif 000020
2015514701.tif 000021
2015514701.tif 000022
2015514701.tif 000023
2015514701.tif 000024
2015514701.tif 000025
2015514701.tif 000026
2015514701.tif 000027
2015514701.tif 000028
2015514701.tif 000029
2015514701.tif 000030
2015514701.tif 000031
2015514701.tif 000032
2015514701.tif 000033
2015514701.tif 000034
2015514701.tif 000035
2015514701.tif 000036
【００２８】
化合物B: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.91 (s, 1H), 3.18 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (q, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.42 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (q, 2H),1.34 (d,3H),1.12 (s, 6H), ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 531.186; 元素分析. C23H27BF6O7に対する計算値; C: 54,35, H: 5.31, B: 2.10, F: 22.44 ; 実測値 C:54.33, H: 5.34, B: 2.11, F: 22.41.
化合物C: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.60 (s, 1H), 3.18 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.66 (q, 2H), 1.49 (m, 2H) 1.44 (s, 3H),1.48 (t, 2H), 1.36 (m, 2H), 1.34 (d, 3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 499.215; 元素分析. C23H27BF6O3に対する計算値; C: 58.01, H: 5.31, F: 23.97, B: 2.27; 実測値 C: 58.06, H: 5.34, F: 23.99, B: 2.25.
化合物D: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.20 (s, 1H), 3.17 (m,1H), 2.35 (s, 6H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.38(m, 2H) 1.34 (d, 3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+ : 391.215; 元素分析. C23H33BO3に対する計算値; C: 75.1, H: 9.03,.B: 2.94 ; 実測値 C: 75.16, H: 9.06, B: 2.89.
化合物E: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.9 (s, 1H), 3.73 (s, 6H), 3.17 (m,1H), 1.82 (t, 2H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H),1.43 (s, 3H), 1.37 (t, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+ : 423.25; 元素分析. C23H33BO5に対する計算値; C: 69.01, H: 8.32, B: 2.74 ; 実測値 C:69.05, H:8.33, B:2.77.
【００２９】
化合物F: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.1 (s, 1H), 3.17 (m, 1H), 2.59 (q, 4H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.24 (t, 6H), 1.11(s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 419.29; 元素分析. C25H37BO3に対する計算値; C: 75.75, H: 9.42, B: 2.65; 実測値 C: 75.72, H: 9.44, B: 2.66.
化合物G: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.9 (s, 1H), 5.90 (s, 2H), 3.17 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71(m, 2H), 1.49 (m, 2H),1.44 (s, 3H), 1.42 (t, 2H),1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 407.21; 元素分析. C22H29BO5に対する計算値; C: 68.76, H: 7.63, B: 2.85; 実測値 C: 68.77, H: 7.65, B: 2.84.
化合物H: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.67 (s, 1H), 4.2 (bs, 2H).3.7 (t, 4H), 3.17(m, 1H) 2.9 (t, 4H), 1.86 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 463.28 元素分析. C25H37BN2O4に対する計算値; C: 68.16, H: 8.43, B: 2.44, N: 6.46 ; 実測値 C: 68.16, H: 8.44, B: 2.41.
化合物I: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.4 (s, 1H), 4.15 (bs, 4H).3.17 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71(m, 2H), 1.49(m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 463.28 元素分析. C21H31BN2O3に対する計算値; C: 68.14, H: 8.44, B: 2.94, N: 7.56; 実測値 C: 68.14, H: 8.42, N: 7.55.
【００３０】
化合物J: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.8 (s, 1H), 8.01 (bs, 2H), 3.17 (m, 1H), 2.06 (s, 6H), 1.85 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 477.28 元素分析. C25H35BN2O5に対する計算値; C: 66.04, H: 7.74, B: 2.38, N: 6.17; 実測値 C: 66.02, H: 7.74, B: 2.36, N: 6.16.
化合物K: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.4 (s, 1H), 4.02 (bs, 2H), 3.17 (m, 1H), 2.78 (d, 6H), 1.85 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 421.27 元素分析. C23H35BN2O3に対する計算値; C: 69.50, H: 8.83, B: 2.75, N:7.05; 実測値 C: 69.51, H: 8.82, B: 2.77, N: 7.04.
化合物L: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.56 (s, 1H), 8.03(s, 1H), 5.07 (bs, 1H), 3.17 (m, 1H),  1.85 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 403.23 元素分析. C22H29BN2O3に対する計算値; C: 69.47, H: 7.66, B: 2.83, N: 7.35; 実測値 C: 69.47, H: 7.65, B: 2.82, N: 7.33.
化合物M: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.8 (s, 1H), 5.2 (bs, 2H),  3.17(m, 1H), 1.85 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 553.16 元素分析. C21H31BN2O9S2に対する計算値; C: 47.55, H: 5.88, B: 2.05, N: 5.24, S: 12.09 ; 実測値 C: 47.54, H: 5.89, B: 2.04, N: 5.24, S: 12.08.
【００３１】
化合物N: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.3 (s, 1H),  3.17 (m, 1H), 1.85 (t, 2H), 1.78 (t,  1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 555.12 元素分析. C21H29BO11S2に対する計算値; C: 47.45, H: 5.46, B: 2.05, S: 12.09 ; 実測値 C: 47.44, H: 5.45, B: 2.06, S: 12.1.
化合物O: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.8 (s, 1H),  3.17(m, 1H), 1.85 (t, 2H), 1.78 (t,  1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 658.96 元素分析. C21H27BCl6O5Si2に対する計算値; C: 39.45, H: 4.25, B: 1.66,  Si: 8.79, Cl: 33.29 ; 実測値 C: 39.44, H: 4.25, B: 1.68, Si: 8.78, Cl: 33.30.
化合物P: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.9 (s, 1H), 5.89 (m, 2H), 5.24 (m, 2H), 5.23 (m, 2H) 4.65 (d, 4H), 3.17 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.37 (t, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+:475.27; 元素分析. C27H37BO5に対する計算値; C: 71.69, H: 8.29, B: 2.34; 実測値 C: 71.68, H: 8.28, B: 2.33.
化合物Q: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.2 (s, 1H), 3.18 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.78(t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H) 1.44 (s, 3H),1.48 (t, 2H), 1.36 (m, 2H), 1.34 (d, 3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 453.19; 元素分析. C21H27BN2O7に対する計算値; C: 58.69, H: 6.31, N: 6.55.B: 2.57; 実測値 C: 58.69, H: 6.33, N: 6.54, B: 2.56.
【００３２】
化合物R: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ8.1 (s, 1H), 3.18 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.78(t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H) 1.44 (s, 3H), 1.48 (t, 2H), 1.36 (m, 2H), 1.34 (d, 3H) 1.11(s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 313.21; 元素分析. C23H27BN2O3に対する計算値; C: 70.78 H: 6.92, N: 7.18.B: 2.77; 実測値 C: 70.77, H: 6.92, N: 7.16, B: 2.78.
化合物S: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.4 (s, 1H), 3.18 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.78(t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H) 1.44 (s, 3H), 1.48 (t, 2H), 1.36 (m, 2H), 1.34 (d, 3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 399.21; 元素分析. C21H27BF2O3に対する計算値; C: 67.64 H: 7.23, F: 10.12.B: 2.83; 実測値 C: 67.65, H: 7.22, F: 10.12, B: 2.84.
化合物T: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.2 (s, 1H), 3.18 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H) 1.44 (s, 3H), 1.48 (t, 2H), 1.36 (m, 2H), 1.34 (d, 3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 431.143; 元素分析. C21H27BCl2O3に対する計算値; C: 61.64 H: 6.56, Cl: 17.33.B: 2.65; 実測値 C: 61.66, H: 6.56, Cl: 17.32, B: 2.64.
化合物U: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.59 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 8.03 (s, 1H), 3.18 (m,  1H), 1.78 (t, 1H), 1.75 (t, 2H), 1.64 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 394.226; 元素分析. C21H30BNO4に対する計算値; C: 67.95,  H: 8.14, N: 3.77, B: 2.91; 実測値 C: 67.98, H: 8.15, N: 3.76, B: 2.91.
【００３３】
化合物V: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) 6.89 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 8.03 (s, 1H), 2.94 (m, 1H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 401.188 元素分析. C21H29BO4Sに対する計算値;  C: 64.95,  H: 7.65, S: 8.24,  B: 2.73; 実測値 C: 64.96, H: 7.66, S: 8.23, B: 2.72.
化合物W: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.54 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 3.34 (s, 2H), 2.34 (m, 1H), 1.53 (t, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.43 (t, 1H) 1.41 (m, 2H), 1.38 (m, 2H), 1.26 (s, 3H) 1.17 (d, 3H) 1.12 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 393.236; 元素分析. C22H31BO4に対する計算値; C: 71.36, H: 8.44, B: 2.92; 実測値 C: 71.36, H: 8.43, B: 2.93.
化合物X: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.59 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 3.62 (s, 3H),  2.95 (m, 1H), 1.78 (t, 1H), 1.75 (t, 2H), 1.64 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 408.242; 元素分析. C22H32BNO4に対する計算値; C: 68.59,  H: 8.34, N: 3.65, B: 2.81 ; 実測値 C: 68.58, H: 8.35, N: 3.65, B: 2.83.
化合物Y: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.7 (s, 1H), 3.73 (s, 6H).3.62 (s, 3H), 2.94 (m, 1H), 1.78 (t, 1H), 1.75 (t, 2H), 1.64 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34(d, 3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 436.27; 元素分析. C24H36BNO4に対する計算値; C: 69.73,  H: 8.76, N: 3.38, B: 2.64; 実測値 C: 69.75, H: 8.77, N: 3.38, B: 2.65.
【００３４】
化合物Z: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.9 (s, 1H), 2.98 (m, 1H), 2.21 (m, 1H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H), 1.01 (d, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 423.242; 元素分析. C23H33BO5に対する計算値;C: 69.24,  H: 8.31, B: 2.70 ; 実測値 C: 69.26, H: 8.35, B: 2.72.
化合物AA: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.3 (s, 1H), 3.18, (m, 1H), 2.08 (s, 6H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s,3H), 1.36 (m, 2H), 1.34 (d,  3H) 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 479.236; 元素分析. C25H33BO7に対する計算値; C: 65.76  H: 7.29, B: 2.37; 実測値 C: 65.77, H: 7.30, B: 2.38.
化合物AB: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.1 (s, 1H), 8.01 (bs, 2H), 10.1 (bs, 1H), 2.94 (m,  1H), 2.06 (s, 6H), 1.85 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.61 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 476.28 元素分析. C25H36BN3O4に対する計算値; C: 66.24, H: 8.04, B: 2.38, N:9.17; 実測値 C: 66.25, H: 8.02, B: 2.39, N: 9.16.
化合物AC: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.66 (s, 1H), 3.17 (m, 1H), 2.83 (s, 12H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.46 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 449.302 元素分析. C25H39BN2O3に対する計算値; C: 70.42, H: 9.22, B: 2.54, N: 6.52; 実測値 C: 70.43, H: 9.21, B:2.55, N: 6.53.
【００３５】
化合物AD: : 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.85 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 2.75 (t, 3H), 1.83 (t, 2H) 1.78 (t, 1H), 1.56 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 395.201; 元素分析. C20H25BO6に対する計算値; C: 64.55,  H: 6.83, B: 2.91; 実測値 C: 64.54, H: 6.84, B: 2.92.
化合物AE: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 4.33 (t, 1H), 1.89 (m, 2H) 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, C21H26BF3O6 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 465.51; 元素分析.に対する計算値; C: 57.05,  H: 5.91, B: 2.39, F: 12.89; 実測値 C: 57.06, H: 5.92, B: 2.40, F: 12.88.
化合物AF: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H), 9.1 (s, 2H), 3.83 (t, 1H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 449.184; 元素分析. C21H26BF3O5に対する計算値; C: 59.18,  H: 6.15, B: 2.59, F: 13.35; 実測値 C: 59.16, H: 6.16, B: 2.58, F: 13.35.
化合物AG: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 4.13 (m, 1H), 2.61 (bs, 2H), 1.93 (m, 2H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 396.206; 元素分析. C20H28BNO5に対する計算値; C: 64.36  H: 7.56, B:2.9.N: 3.75; 実測値 C: 64.34, H:7.54, B: 2.89, N: 3.77.
【００３６】
化合物AH: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 4.76 (m, 1H), 3.5 (bs, 1H), 1.87 (m, 2H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H),1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 397.20; 元素分析. C20H27BO6に対する計算値; C: 64.26  H: 7.26, B: 2.89; 実測値 C: 64.25, H:7.24, B: 2.88.
化合物AI: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 5.43 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 1.93 (m, 2H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 439.210; 元素分析. C22H29BO7に対する計算値; C: 63.26  H: 7.02,  B: 2.62; 実測値 C: 63.26, H: 7.04, B: 2.63.
化合物AJ: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 8.10 (bs, 1H), 5.13 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.97 (m, 2H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 438.214; 元素分析. C22H30BNO6に対する計算値; C: 63.64  H: 7.28, O: 23.26,  B: 2.60, N: 3.35; 実測値 C: 63.65, H: 7.30, N: 3.34.
化合物AK: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 4.13 (m, 1H), 3.05 (m, 1H), 2.45 (d, 3H), 1.83 (m, 2H), 1.82 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 410.21; 元素分析. C21H30BNO5に対する計算値; C: 65.15  H: 7.84, B: 2.76, N: 3.96; 実測値 C: 65.14, H: 7.85, B: 2.76, N: 3.95.
【００３７】
化合物AL: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 4.13 (m, 1H), 3.05 (m, 1H), 2.25 (d, 6H), 1.82 (t, 2H), 1.80 (m, 2H) 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 424.235; 元素分析. C22H32BNO5に対する計算値; C: 65.85  H: 8.05, B: 2.68, N:3.49; 実測値 C:65.82, H:8.02, B: 2.67, N: 3.51.
化合物AM: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1(s, 2H), 6.47 (d, 1H), 5.03 (t, 1H), 4.18 (dd, 1H), 4.04 (dd, 1H), 2.05 (m, 2H, 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 423.26; 元素分析. C22H29BO6に対する計算値; C: 66.21  H: 7.35, B: 2.69; 実測値 C:66.23, H: 7.36, B: 2.68.
化合物AN: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 4.13 (t, 1H), 2.24 (d, 4H), 1.82 (t, 2H), 1.80 (m, 2H) 1.78 (t, 1H), 1.50 (m, 6H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+:464.235; 元素分析. C25H36BNO5に対する計算値; C: 68.05  H: 8.25, B:2.48, N:3.19 ; 実測値 C: 68.10, H: 8.22, B: 2.47, N: 3.21.
化合物AO: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 4.13 (t, 1H), 3.65 (t, 4H) 2.34 (d, 4H), 1.82 (t, 2H), 1.80 (m, 2H) 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 466.35; 元素分析. C24H34BNO6に対する計算値; C: 65.08  H: 7.69, B:2.24, N:3.17; 実測値 C:65.09 H:7.71, B:2.25, N:3.18.
【００３８】
化合物AP: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 4.13 (t, 1H), 2.4 (q, 4H), 1.82 (t, 2H), 1.80 (m,2H) 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H), 1.05 (t, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 452.28; 元素分析. C24H36BNO5に対する計算値; C: 67.18  H: 8.49,  B:2.51, N:3.28; 実測値 C:67.19, H:8.47, B:2.53, N:3.27.
化合物AQ: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.76 (s, 1H), 9.1 (s, 2H) 3.89 (t, 1H), 2.08 (m, 2H) 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 409.34; 元素分析. C21H27BO6に対する計算値; C: 65.37,  H: 7.08, B:2.91; 実測値 C:65.36, H:7.09, B:2.92.
化合物AR: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H), 9.1(s, 2H) 2.93 (m, 1H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H)  1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H), 0.59 (m, 1H), 0.34 (m, 4H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 409.34; 元素分析. C21H27BO6に対する計算値; C: 65.37,  H: 7.08,  B:2.91; 実測値 C;65.34, H:7.09, B:2.92.
化合物AS: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.3-7.5 (m,5H), 6.83 (s, 1H), 6.59 (d, 1H) 9.1 (s, 2H) 2.8 (m,1H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H)  1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 484.23; 元素分析. C27H32BNO5に対する計算値; C: 70.81,  H: 6.72, B:2.31, N 3.04; 実測値 C:70.84, H:6.73, B:2.32, N:3.06.
【００３９】
化合物AT: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.05 (dd, 2H), 6.83 (s, 1H), 6.59 (t, 1H), 6.43 (d, 2H) 9.1 (s, 2H), 3.48 (t, 2H), 3.28 (m, 1H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.71 (m, 2H)  1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 486.253; 元素分析. C27H34BNO5に対する計算値; C: 70.01,  H: 7.43, B:2.32, N 3.04; 実測値 C: 70.06, H: 7.44, B: 2.35, N: 3.06.
化合物AU: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H), 9.1 (s, 2H), 5.62 (d, 1H), 4.98 (d, 1H), 2.23 (t, 2H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H),1.71 (m, 2H) , 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.41 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 393.17; 元素分析. C21H27BO5に対する計算値 C: 68.17,  H: 7.38,  B: 2.91; 実測値 C: 68.16, H: 7.35, B: 2.94.
化合物AV: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H), 9.1 (s,2H), 10.05 (bs, 1H), 2.73 (m, 1H), 1.73 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.63 (m, 2H)  1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H), 0.59 (m, 1H), 0.34 (m, 4H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 420.24; 元素分析. C23H32BNO4に対する計算値; C: 69.57,  H: 8.18, B: 2.71, N:3.56; 実測値 C:69.55, H:8.13, B:2.71, N:3.58.
化合物AW: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H), 9.1 (s, 2H), 2.74 (m, 1H), 1.73 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.63 (m, 2H)  1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H), 0.59 (m, 1H), 0.34 (m, 4H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 437.02; 元素分析. C23H31BO4Sに対する計算値; C: 66.57,  H: 7.58, B:2.61, S: 7.78; 実測値 C: 66.55, H:7.59, B: 2.62, S:7.77.
化合物AX: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ6.83 (s, 1H),  9.1 (s, 2H), 10.1 (bs, 1H), 3.53 (t, 1H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.64 (m, 2H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H),1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 448.194; 元素分析. C21H27BF3O4Nに対する計算値; C: 59.38,  H: 6.45, B:2.59, F:13.40, N:3.29 ; 実測値 C:59.34, H:6.43, B:2.58, F:13.41, N:3.28.
化合物AY: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ7.95 (d, 2H), 7.47 (t, 1H), 7.37 (dd, 2H),  6.83 (s, 1H), 9.1 (bs, 2H),  5.48 (t, 1H),  2.16 (m, 2H), 1.83 (t, 2H), 1.78 (t, 1H), 1.49 (m, 2H), 1.48 (t, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.38 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.質量分析: ESI [M + Na]+: 501.218; 元素分析. C27H31BO7に対する計算値; C: 67.71,  H: 6.59, B:2.26; 実測値 C:67.74, H:6.58, B:2.26.
【００４０】
化合物AZ: 工程1〜工程7についての参考文献: (Pereira A.R.; Strangman, W.K.; Marion, F.; Feldberg, L.; Roll, D.; Mallon, R.; Hollander, I.; Andersen, R.J.J.Med.Chem.2010, 53, 8523)
工程1: 化合物13(2-ヒドロキシ-4,5-ジメトキシベンズアルデヒド)の合成: 0oCにおけるCH2Cl2(125ml)中の3,4,5-トリメトキシベンズアルデヒド(5g、25.510mmol)の溶液にBBr3(6.39g、25.510mmol)を添加した。得られた暗色混合物を室温で9h間撹拌した。水(100mL)を充填し、混合物を10分間撹拌し、水相を、CH2Cl2によって抽出した。有機相をNa2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させた。得られた残留物を溶離剤としてプレーンのジクロロメタンを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、2-ヒドロキシ-4,5-ジメトキシベンズアルデヒド13(4.3g、87%)を得、黄色固形物として分離した。Mp 105-107oC; 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 11.40 (br.s, 1H), 9.70 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.88 (s, 3H) ppm.13C NMR (CDCl3, 125 MHz): 194.0, 159.3, 157.3, 142.9, 113.3, 112.9, 100.1, 56.4, 56.3.HRMS (ESI) m/z: [M + H]+ C9H10O4+H+に対する計算値183.0657; 実測値 183.0653.
【００４１】
工程2: 化合物13(4,5-ジメトキシ-2-(メトキシメトキシ)ベンズアルデヒド)の合成: 窒素下の無水CH2Cl2中の5(1g、5.49mmol)の溶液を0oCに冷却し、これにジイソプロピルエチルアミン(DIPEA)(1.77g、13.736mmol)及びMOMCl(0.66g、8.241mmol)を添加した。反応混合物を室温で1時間撹拌した。反応の完了後、水を添加し、ジクロロメタンで抽出した。有機抽出液を食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させ、無色の液体として得られた生成物14(2.15g、98%)を精製せずに更に反応に用いた。1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 10.34 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 5.26 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.54 (s, 3H) ppm.13C NMR (CDCl3, 125 MHz): 188.0, 156.4, 155.5, 144.4, 118.1, 108.2, 99.9, 95.4, 56.4, 56.2, 56.1.HRMS (ESI) m/z: [M + H]+ C11H14O5+H+に対する計算値227.0919; 実測値 227.0897
【００４２】
工程3: 化合物15(4,5-ジメトキシ-2-(メトキシメトキシ)フェニルメタノール)の合成: MeOH中の化合物14(1g、4.423mmol)及び水酸化ナトリウム(0.177g、4.423mmol)の溶液を丸底フラスコに入れ、これにNaBH4(0.25g、6.635mmol)を添加した。反応混合物を室温で30分間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、MeOHを除去し、水を添加し、酢酸エチルで抽出し、食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させ、無色の液体15(0.99g、98%)を得、得られた生成物を精製せずに更に反応に用いた。1H NMR (200 MHz, CDCl3): δ 6.86 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.16 (s, 2H), 4.65- 4.62 (d, J = 5.29 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.52 (s, 3H) ppm.13C NMR (CDCl3, 100 MHz): 149.15, 149.0, 144.1, 122.1, 112.56, 101.3, 96.0, 60.7, 56.3, 56.1, 55.9.HRMS (ESI) m/z: [M + Na]+ C11H16O5+Na+に対する計算値 251.0896; 実測値 251.0874
【００４３】
工程4: 化合物16(2-ヒドロキシ-4,5-ジメトキシベンジル)トリフェニルホスホニウム臭化水素塩)の合成: アセトニトリル中の化合物15(1g、4.384mmol)の溶液を取り、これにPPh3HBr(1.8g、5.260mmol)を室温で添加し、約2h還流した。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去し、エーテルで洗浄し、白色のアモルファス固形物として化合物16(1.69g、90%)を得た。Mp 240-242 oC; 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 8.62 (br.s, 1H,), 7.75-7.71 (m, 3H), 7.60-7.52 (m, 12H), 7.03 (s, 1H), 6.44-6.43 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 4.48-4.45 (d, J = 12 Hz, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.48 (s, 3H) ppm.13CNMR (CDCl3, 125 MHz): 134.7, 134.7, 134.3, 130.0, 129.9, 113.9, 113.90, 101.9, 101.9, 56.3, 55.9, 25.3, 24.8.HRMS (ESI) m/z: [M]+ C27H26O3Pに対する計算値429.1620 (-HBr); 実測値 429.1615 (-HBr).
【００４４】
工程5: 化合物18出発材料3-(2,6,6-トリメチルシクロヘキサ-1-エニル)プロパン酸の合成: 17g(425.001mmol)のNaOHを水に溶解して、マグネチックスターラの付いた250mlの三角フラスコ中で70mlの溶液を作った。次に、アルカリ溶液を氷浴中で冷却し、この溶液に17g(106.25mmol)の臭素を添加し、1h撹拌した後、この溶液に10mlのジオキサン中の4.5g(23.19mmol)のジヒドロ-β-イオノン17を添加し、撹拌を室温で4h続けた。過剰の次亜臭素酸塩を10%重亜硫酸ナトリウムで中和し、溶液をジエチルエーテルで抽出して、残りの不純物を除去した。通常の条件下でアルカリ性溶液を濃塩酸で酸性化し、処理して、18(4.1g、90.1%)を無色の液体として得た。1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 2.44-2.39 (m, 2H), 2.37-2.31 (m, 2H), 1.93-1.89 (t, J = 8Hz, 2H), 1.61 (s, 3H), 1.58-1.54 (s, 2H), 1.44-1.41 (m, 2H), 1.00 (s, 6H).13CNMR (CDCl3, 100 MHz): 180.3, 135.4, 128.5, 39.7, 34.9, 34.7 (複数のマージピーク), 28.4, 23.5, 19.6, 19.4.HRMS (ESI) m/z: [M + H]+ C12H20O2+H+に対する計算値 197.1541; 実測値 197.1530.
【００４５】
工程6: 化合物19(5,6-ジメトキシ-2-(2-(2,6,6-トリメチルシクロヘキサ-1-エニル)エチル)ベンゾフラン)の合成: 中間体16(2g、4.651mmol)を丸底フラスコ中のジヒドロ-β-イオニックアシッド18(0.91g、4.65mmol)とともに乾燥DCMに乾燥状態で入れ、0oCに冷却した。これにDCC(2.87g、13.953mmol)及びDMAP(0.56g、4.651mmol)を添加し、室温で18h撹拌した。DCMを減圧下で蒸発させ、粗反応混合物をTHFに溶解し、これにトリエチルアミンを添加し、3h還流した。THFを減圧下で蒸発させ、カラムクロマトグラフィ5%酢酸エチル:ヘキサンによって精製して、19(1.42g、93%)を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.93 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.20 (d, J = 0.6 Hz, 1H), 3.81 (d, 6H), 2.70-2.66 (m, 2H), 2.34-2.30 (m, 2H), 1.87-1.85 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.54-1.44 (m, 2H), 1.51-1.49 (m, 2H), 0.96 (s, 6H).13CNMR (CDCl3, 100 MHz): 158.8, 149.1, 146.9, 146.1, 136.2, 128.1, 102.7, 101.0, 95.3, 56.4, 56.2, 39.7 (複数のマージピーク), 35.0, 32.7, 29.3, 28.5, 27.2, 19.8, 19.4 (マージピーク). HRMS (ESI) m/z: [M + H]+ C21H28O3+H+に対する計算値 329.2117; 実測値 329.2099.
【００４６】
工程7: 化合物20の合成: 化合物19(1g、3.049mmol)の溶液を2-ニトロプロパン中で調製し、78oCに冷却し、これにクロロスルホン酸(1.06g、9.146mmol)を不活性雰囲気下で添加した。反応混合物を30分間撹拌した。次に、NaHCO3で急冷し、酢酸エチルによって抽出した。有機層をNa2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させ、5%酢酸エチル:ヘキサンを用いてカラムクロマトグラフィによって精製して、20(0.9g、90%収率)を無色の油状物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.00 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 2.79-2.74 (m, 1H), 2.72-2.65 (m, 1H), 2.42 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.06-1.91 (m, 2H), 1.87-1.76 (m, 2H), 1.50-1.63 (m, 2H), 1.45-1.39 (m, 2H), 1.31 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).13CNMR (CDCl3, 125 MHz): 151.2, 149.2, 146.4, 145.4, 124.3, 118.8, 102.4, 95.5, 56.6, 56.2, 52.6, 41.8, 37.6, 35.9, 33.5, 33.1, 24.9, 21.8, 21.3 (マージピーク), 18.8.HRMS (ESI) m/z: [M + H]+ C21H28O3+H+に対する計算値 329.2117; 実測値 329.2105, [M + Na]+ C21H28O3+Na+に対する計算値 351.1936; 実測値 351.1931
【００４７】
工程8: 化合物21の合成: 化合物20(1g、3.048mmol)の溶液を乾燥THF中で調製し、乾燥状態下で0oCに冷却した。これにn-BuLi(0.195g、3.048mmol)を添加し、反応混合物を、20分間撹拌を続け、これにトリエチルボレート(0.45g、3.048mmol)を添加し、室温で更に1h撹拌し続けた。塩化アンモニウム溶液で急冷し、酢酸エチルによって抽出した。減圧下で濃縮し、6%酢酸エチル:ヘキサンを用いたカラムクロマトグラフィによって精製して、21(1.043g、92%)を無色の液体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.18 (s, 1H), 6.83 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 2.80-2.73 (m, 2H), 2.42 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.03 (m, 2H, マージ信号), 1.89-1.76 (m, 2H), 1.73-1.66 (m, 2H), 1.45-1.40 (m, 2H), 1.32 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H).13C NMR (CDCl3, 100 MHz) 153.0, 152.9, 151.0, 148.4, 124.3, 122.4, 107.1, 61.9, 56.7, 52.7, 41.8, 36.1, 33.5, 33.2 (マージピーク), 25.1, 21.9, 21.4, 18.9, 18.8.HRMS (ESI) m/z: [M + H]+ C21H29BO5+H+に対する計算値 372.2217; 実測値 372.2231.
【００４８】
工程9: 化合物22の合成: (0.5g、4.301mmol)の乾燥塩化アルミニウムに5mlのジクロロメタンを注入し、次に(0.245g、3.225mmol)の結晶のチオ尿素を少しずつ添加し、20分間撹拌した。反応混合物は透明な油性溶液になる。次に、ジクロロメタンに溶解した化合物21(0.1g、0.268mmol)を5分間かけてこれに添加し、室温で2h撹拌した。氷で急冷することによって過剰のAlCl3を除去し、ジクロロメタンによって抽出し、次に、15%酢酸エチル:ヘキサンを用いたカラムクロマトグラフィによって精製して、22(0.077g、85%収率)を無色の液体として得た。1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.10 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.48 (br.s, 1H), 3.94 (s, 2H), 2.80-2.71 (m, 2H), 2.39 (d, J = 10 Hz, 1H), 2.20-2.03 (m, 2H), 1.80-1.70 (m, 2H), 1.54-1.51 (m, 2H), 1.44-1.37 (m, 2H), 1.30 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).13C NMR (CDCl3, 125 MHz): 153.4, 151.1, 147.9, 142.9, 124.3, 118.1, 114.1, 105.1, 52.6, 41.8, 37.7, 36.0, 33.5, 29.5, 25.0, 21.9, 21.4, 18.9, 18.8; HRMS (ESI) m/z: [M+]: C19H25BO5に対する計算値 344.1795; 実測値 344.1761.
【００４９】
生物学:
1. 細胞毒性分析:
MTT分析(MTT Assay(Legrier ME, Yang CP, Yan HG et al.Targeting protein translation in human non small lung cancer via combined MEK and mammalian target of rapamycin suppression.Cancer Res 67:11300-8(2007).)は、正常細胞系又は癌細胞系の生体外発育に対して広範囲にわたる化合物の作用を測定するのに有効である。分析を96ウェルの平底ポリスチレンマイクロタイタープレートにおいて準備した。1ウェル当たり3〜5000細胞を適切な発育培地に浮遊させ、細胞を繰り返しのウェルに添加した(3回繰り返しが好ましい)。プレートにおいて必要数のウェルに細胞を添加した後に薬剤又は検査薬を添加することが好ましい。細胞をプレートに添加した後、これを一晩インキュベートするためにインキュベータに載置し、試験すべき薬剤を調製した。一晩インキュベートした後、薬剤又は試験化合物を所定の濃度で繰り返しのウェルの各セットに添加し、CO2インキュベータ内で48時間インキュベートした。これらの化合物のほとんどを最終の添加のためのジメチルスルホキシド(DMSO)に溶解した。48時間インキュベートした後、MTT貯蔵液(2.5μg/ml)を等容積の組織培養液で希釈し、20μlのこの溶液を直接各ウェルに多重チャネルピペットで添加した。付着性細胞法と同様に、プレートを少なくとも4hインキュベータに戻す。4hrインキュベートした後、プレートを周囲温度において10分間1000gで遠心分離し、プレートの反転及び過剰な培養液のブロッティングを続ける。150μlのワーキングDMSOを添加して、MTTホルマザン産物を可溶化する。可視スペクトル全体の調整可能な波長を有する標準マイクロプレートリーダを用いた。次に、検査薬の個々の濃度に対応して3回繰り返しの各組に対して得られた570nmのOD値を表計算プログラムに移した。
結果: MTTに基づく細胞毒性分析を、試験材料として化合物A及び化合物Eを用いた癌細胞系のパネルで行った。細胞増殖に対して及び相対的なIC50値で化合物A及び化合物Eの作用を定量するために、MCF-7、caco-2及びHCT-115を、示された濃度(0.01、0.1、1、10μM)の化合物A及び化合物Eで48h処理した。本実験において、化合物A及び化合物Eは、細胞増殖の濃度依存的阻害を生じた。MTTベースの細胞増殖の阻害から、乳房(MCF-7)及び結腸(caco-2)細胞系において2.6μM及び2.4μMの計算された細胞ベースのIC50値が化合物Aについて認められ、化合物Eについては結腸(caco-2、HCT-115)及び乳房(MCF-7)において5.6、3.7及び3.1μMが算出された(図3)。これらの結果から化合物A及び化合物Eが共に相対的なIC50値によって反映されるように結腸細胞増殖に対して、それ故一般に結腸癌に対してより多くの有効性を表すことが示された。
【００５０】
2. PI3K阻害分析:
PI3K阻害分析(PI3K Assay (Emmanuelle M, Huang Y, Yan HG et al.Targeting Protein Translation in Human Non-Small Cell Lung Cancer via Combined MEK and Mammalian Target of Rapamycin Suppression.Cancer Res 67:(23).(2007).)をPI3キナーゼ活性/阻害剤分析キットによって行い、PI3キナーゼ反応を阻害剤反応に対してグルタチオンコートストリップ/プレートに設定した。キナーゼ及び阻害剤を10分間プレインキュベートした後、PIP2基質を添加した。5μLの5×キナーゼ反応緩衝液を各ウェルに添加し、続いて5μL/ウェルのPIP2基質を添加した。次に、25μL/ウェルの最終容積を調製するように蒸留H2Oを各ウェルに添加した。室温で1時間インキュベートし、続いてウェルを200μLの1×TBST/ウェルで3回、次に200μLの1×TBS/ウェルで2回洗浄した。次に、100μLの基質TMB/ウェルを添加し、次に発色現像のために5〜20分間暗所に保持した。しかしながら、現像過度を避けるために青色の出現を監視した。ウェル当たり100μLの停止液を用いて、反応を停止した。450nmで表示を記録した。
結果: 薬剤のIC50値は、生物学的又は生化学的な機能を阻害する際の化合物の有効性を測定する。薬剤分子は、IC50値に基づいて低活性、活性又は高活性として分類され得る。酵素ベースのIC50値の測定は、更なる実験的目的で薬剤候補を絞り込むために薬剤活性の早期分析及び評価を援助する。本実験に用いられるリファガール、化合物A及び化合物Eは、種々の濃度、すなわちそれぞれ20、40、80、160、320及び640 nMによる用量依存的パターンでPI3Kα酵素活性を阻害した。更に、PI3Kαに対してリファガール、化合物A及び化合物Eの108、140及び102nMのIC50が認められ、PI3Kβに対して化合物Aの100nMも定量された(図4及び図5)。この方法は、由来特異的癌薬剤発見プロセスを強化するだけでなく、関係した時間及び供給源も節約する。
【００５１】
表2: PI3Kイソ型に対する化合物-AZのIC50値を示す
2015514701.tif 000037
【００５２】
3. 細胞周期分析:
複製状態の細胞の集団の分析(細胞周期(Waxman DJ, Schwartz PS, Harnessing apoptosis for improved anti-cancer gene therapy, Cancer Res.63:8563-8572(2003).)は、浮遊液中の細胞の核を蛍光標識し、次に集団における各細胞の蛍光特性を分析することによって達成され得る。実験をcaco-2、結腸ヒト癌細胞系を用いて行った。細胞を6ウェルプレートに3×105細胞/ml/ウェルの濃度でシードした。プレートをCO2インキュベータ内で一晩インキュベートした。一晩インキュベートした後、試験試料を望ましい濃度で添加し、負及び正の対照のためにウェルをとっておき、24hrインキュベートした。24hrインキュベートした後、各ウェルからの試験試料と共に細胞をトリプシン処理し、マイクロピペットを用いて抽出し、15mlの遠心管に別々に移した。遠心管を3000rpmで5分間遠心分離した。上清を捨て、ペレットを1mlのフィルタ処理PBSに再浮遊させ、2000rpmで5分間遠心分離した。5分後、上清を捨て、ペレットを70%エタノールに浮遊させた。細胞を4oCで少なくとも1時間固定した(細胞を70%エタノールに20oCで数週間貯蔵した後、PI染色及びフローサイトメトリー分析した)。細胞をまた2000rpmで5分間遠心分離し、2000rpmで5分間遠心分離することによってろ過したPBSで2回洗浄した。上清を捨て、すべての上清が薄葉紙に排出されるまで遠心管を薄葉紙の上に逆さの位置で置いた。1mlの細胞周期試薬(CCR)を各獲得チューブに暗所で添加した。フローサイトメーター(BD Biosciences)により表示を読み取った。
結果: 細胞周期は、細胞の生活環である。細胞周期、すなわちG1(Gap1)、S、G2(Gap2)、及びM(細胞分裂)の各段階は、これらの各々の中で生じるユニークなイベントを有する。最も普及しているフローサイトメトリー適用の2つは、細胞DNA含有量の測定及び細胞残存の基本的なプロセスである細胞周期の分析である。本実験において、細胞周期相分布によるDNA含有量に対する化合物Eの作用を、結腸(caco-2)細胞系を用いることによって評価した。相対的な細胞DNA含有量を定量することに加えて、フローサイトメトリーは、また、細胞周期の種々の相の間の細胞分布の識別を可能にする。異なる濃度の化合物Eにさらされた細胞(2×106/ml/6-ウェルプレート)をヨウ化プロピジウム(PI)で染色して、DNA蛍光及び細胞周期相分布を定量した。1、5、7及び9μMで24h化合物E処理したsub-G0細胞のパーセントは、それぞれ62.5%、64.3%、65.6%及び70.2%であることがわかった。同様の条件下、リファガール処理した培養物は、sub-G0相において64.9%の細胞を示した。更に、G2/M相の細胞周期も影響されず、化合物E処理が有糸分裂ブロックを生成せず、細胞周期の遅れを引き起こさないことを示した。全体として、濃度の増大による各処理は、24h処理後にsub-G0の増大につながった。従って、化合物Eが濃度依存的な方法で早期の細胞周期阻止を誘導したことは明らかである(図6)。
【００５３】
4. アネキシン-Vアポトーシス分析:
細胞死状況をアネキシン-V(アネキシン-Vアポトーシス分析(Yunqing Li, FadilaGuessous,SherwinKwon,Manish Kumar.PTEN Has Tumor-Promoting Properties in the Setting of Gain-of-Function p53 Mutations ,2008Cancer Res; 68: (6)(2008).)フローサイトメトリーを用いて分析した。caco-2結腸ヒト癌細胞系を用いて実験を行った。細胞を2×105細胞/ml/ウェルの濃度で6ウェルプレートにシードした。プレートをCO2インキュベータ内で一晩インキュベートした。一晩インキュベートした後、試験試料を望ましい濃度で添加し、負及び正の対照のためにウェルをとっておき、48hrインキュベートした。48hrインキュベートした後、細胞をトリプシン処理し、15mlの遠心管に別々に移した。遠心管を3000rpmで5分間遠心分離した。上清を捨て、ペレットを1mlのフィルタ処理PBSに再浮遊させ、2000rpmで5分間遠心分離した。5分後、上清を捨て、ペレットを400mlの1×結合緩衝液に再浮遊させて、細胞浮遊液を作った。この浮遊液から、100μlの細胞をファルコンチューブに移し、次に10μlのヨウ化プロピジウム(PI)及び 5μlのアネキシン-V抗体を添加し、暗所で30分間インキュベートした。暗所で30分インキュベートした後、アポトーシスをフローサイトメトリー(BD Biosciences)によって分析した。
結果: 本実験において、1、5、7及び9μMによる48h化合物E処理後期アポトーシス細胞のパーセントが、それぞれ36.3%、34.8%、38.5%及び56.8%であることがわかった。同じ条件下で、リファガール処理培養物は42.7%の細胞の後期アポトーシス相を示し、早期アポトーシス相において逆転が見られ、細胞集団が早期アポトーシス相において21.9%、23.4%、21.4%及び14.7%に減少した。更に、壊死相においては細胞集団すらなく、化合物Eの処理が早期アポトーシス及び壊死を生じないことを示した。全体として、後期アポトーシス細胞集団において濃度依存的な正味の増加があった(図7)。
【００５４】
材料及び方法:
免疫蛍光顕微鏡分析に対して、実験の1日前に、4×104 CACO-2細胞/mlを6ウェルプレート中の18mmのカバーガラスにシードした。細胞を一晩血清飢餓処理し、リファガールと化合物E、それぞれ4μM及び3μMで24時間処理した。処理後、細胞をPBSで洗浄し、-20℃で5分間無水メタノールに固定した19。固定した細胞をPBS中の10%ヤギ血清で室温において20分間阻止して、二次抗体の非特異性結合を脱離した。細胞をポリクローナルウサギpAKT(セリン473)一次抗体(1:100 0.5% BSA/PBS; Santa Cruz Biotechnology)と湿室内で25℃において1hインキュベートし、次に洗浄し、二次抗体とインキュベートした。細胞を洗浄し、25℃でテキサスレッド結合ヤギ抗ウサギ抗体(1:500 0.5% BSA/PBS; Santa Cruz Biotechnology)と45分間インキュベートした。カバーガラスを4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール含有ProLong Gold褪色防止用封入剤(Invitrogen)とガラススライドに載置し、オリンパス60×油浸対物レンズ下で蛍光顕微鏡(Olympus、IX81)によって可視化した。負の対照を用いて、細胞と一次抗体とをインキュベートすることを省略した。
結果: Aktのリン酸化(活性化)は細胞のアポトーシスからの保護に関連する20 (K.Nicholson, N.Anderson.2002.The protein kinase B/Akt signaling pathway in human malignancy.Cell signal 14: 381-395)。本実験において、CACO-2細胞をリファガール及び化合物E、それぞれ4μM及び3μMで24hr処理すると、pAkt(Ser 473)を阻害させることが認められた。Aktの阻害は、結果としてアポトーシスにつながる。未処理細胞は、細胞質のpAKTを示した(図8)。
【００５５】
本発明の利点
ボロン酸官能性を導入する利点: 66nMのIC50及びPI3K-αに対する選択性を有するリファガールの合成類縁体についての最近の報告(Alban R.Pereira, Wendy K.Strangman, Synthesis of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) inhibitory analogues of the sponge meroterpenoid Liphagal; J.Med.Chem., 2010, 53 (24), pp 8523-8533.)は、この類縁体がより大きな化学構造安定性をもち且つこの骨格を前臨床リード候補に開発する機会を与えることを示唆している。イソ型選択的PI3K阻害剤を開発する際の我々の進行中のプログラムの一部として、この改善した構造に基づく化合物の調製についてプログラムに着手することは興味深いことであり、この分子によって示された生物活性の証拠に影響を及ぼすことを我々に見い出させた。この方向で、我々は努力を開始するとともにアルデヒド官能性をボロン酸に置き換える計画を立てた。更に、ナノモル効力を達成するためにリファガールの芳香環の14-ホルミル-15,16-ジヒドロキシ置換パターンを必要とする。また、C-14ホルミル基の欠如がリファゲイン複素環系を不安定化するようであり、空気酸化及び環B縮小を含む骨格転位により影響されやすくなることも証明される。この証拠は、6員に縮小したB環を有するC-8デスメチル類縁体が最終的に活性の役割を果たすにちがいないことを示唆しており、我々の想定を支持している。それ故、C-14のホルミルの代わりに、我々は、この場所にボロン酸を有するホルミル官能性のない縮小したB環類縁体を設計し、この類縁体が構造により剛性を与えると考えた。また、アルデヒドの代わりにボロン酸を用いると、付随する欠点が回避され得る。更に、ホウ素は、生物模倣炭素に対する能力を有し、活性部位のセリン又はヒスチジン残基との共有結合付加物を形成する((a) Adams, J.A.; Behnke, M.; Chen, S.; Cruichshank, A.A.; Dick, L.R.; Grenier, L.; Klunder, J.M.; Ma, Y.T.; Plamondon, L.; Stein, R.L.Bioorg.Med.Chem.Lett.1998, 98, 333.(b) Paramore, A.; Frantz, S.Nat.Rev.Drug Discovery 2003, 2, 611)
ホウ素の役割を念頭に置き、リファガールのボロン酸をもった化合物の重要性を潜在的PI3K阻害剤として可視化する。このボロン酸をもったリファガール化合物PI3Kのコンピュータによるインシリコドッキングからの証拠は、鍵となるアミノ酸との優れたH-結合相互作用を示したが、これらは-8.08のドッキングスコアが1及び2.12を超えて改善されたPI3K-αのp110α活性部位における阻害相互作用に関係している鍵となるアミノ酸として以前に報告されている。PI3K阻害剤としてのボロン酸の生物学的可能性を調べたが、化合物の1つ、すなわち化合物-AZに対してPI3K-αイソ型選択性及び優れた阻害活性(IC50 23nM)を示した。
【図１】
2015514701.tif 000048
【図２】
2015514701.tif 000049
【図４】
2015514701.tif 000050
【図５】
2015514701.tif 000051
【図６】
2015514701.tif 000052
【図７】
2015514701.tif 000053
【図８】
2015514701.tif 000054
【図１１】
2015514701.tif 000055
【図３】
2015514701.tif 000056
【図９】
2015514701.tif 000057
【図１０】
2015514701.tif 000058
【図１２】
2015514701.tif 000059
【図１３】
2015514701.tif 000060
【図１４】
2015514701.tif 000061
【国際調査報告】
2015514701.tif 000062
2015514701.tif 000063