(57)【要約】  以下に記載するように、本発明は、ミツバチ寄生ダニであるミツバチトゲダニを制御するための方法および組成物を提供する。また、本発明は、ミツバチの巣におけるミツバチトゲダニによる寄生ダニ感染を処置または予防するのに有用な組成物を特徴とする。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ミツバチトゲダニ種寄生ダニを有効量のホップ誘導体を含む組成物と接触させ、それによりミツバチ寄生ダニを制御する工程を含む、ミツバチトゲダニ種のミツバチ寄生ダニの制御方法。
【請求項２】
前記ミツバチトゲダニ種のダニがミツバチと接触している間に前記ミツバチトゲダニ種のダニの前記接触が生じる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ミツバチの巣を有効量のホップ誘導体を含む組成物と接触させ、それによりミツバチの巣における寄生ダニ感染を処置または予防する工程を含む、ミツバチの巣のミツバチトゲダニ種寄生ダニ感染を処置または予防する方法。
【請求項４】
ミツバチのパッケージを有効量のホップ誘導体を含む組成物と接触させ、それにより前記ミツバチのパッケージにおける寄生ダニ感染を処置または予防する工程を含む、ミツバチのパッケージのミツバチトゲダニ種寄生ダニ感染を処置または予防する方法。
【請求項５】
前記ミツバチトゲダニ種寄生ダニは、T. clareaeまたはT. koenigerumダニである、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記ミツバチはミツバチ属種である、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記ミツバチ属種は、セイヨウミツバチ、オオミツバチまたはトウヨウミツバチである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記ホップ誘導体はベータ酸である、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記組成物は、少なくとも０．１％のベータ酸を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物はベータ酸樹脂を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物は、少なくとも３３．３％（重量％）のベータ酸樹脂を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記ベータ酸樹脂は、少なくとも約１５％のベータ酸カリウム塩および他のホップ抽出物を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ホップ誘導体はアルファ酸である、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記組成物は、少なくとも約１６％のホップベータ酸を含むストリップである、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記ストリップは、ホップベータ酸樹脂、ポリソルベート６０およびプロピレングリコールを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ストリップは、３０〜３５重量％のプロピレングリコール、３０〜３５重量％のモノオクタデカノアートおよび少なくとも約３０〜３５重量％のホップベータ酸樹脂を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記接触により前記ダニを死滅させるか撃退する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
ミツバチトゲダニ種を死滅させるか撃退する有効量のホップベータ酸、乳化剤および溶媒を含む液体組成物を含む、ミツバチトゲダニ種感染を処置または予防するためのストリップ
【請求項１９】
前記ベータ酸樹脂は約１６重量％のベータ酸を含む、請求項１８に記載のストリップ。
【請求項２０】
前記乳化剤はポリソルベート６０である、請求項１８に記載のストリップ。
【請求項２１】
前記溶媒はプロピレングリコールである、請求項１８に記載のストリップ。
【請求項２２】
前記ストリップは、膜、紙、プラスチック、ポリマーストリップ、段ボール紙、片面波形シート、両面波形シートまたは繊維を含む、請求項１８に記載のストリップ。
【請求項２３】
前記ストリップは、約１５〜２０％のホップベータ酸カリウム塩を含む、請求項２２に記載のストリップ。
【請求項２４】
前記片面波形シートは、片方の面に平らなシートを有し、その面に波形シートが貼り付けられている段ボール紙を含む、請求項２５に記載のストリップ。
【請求項２５】
前記波形シートは約２ｍｍの厚さである、請求項２４に記載のストリップ。
【請求項２６】
前記波形シートは、１インチ当たり５、６、７または８フルートを含む、請求項２４に記載のストリップ。
【請求項２７】
３０〜３５重量％のプロピレングリコール、３０〜３５重量％のモノオクタデカノアートおよび少なくとも約３０〜３５重量％のホップベータ酸樹脂を含む液体組成物を含む吸収性材料を含むストリップ。
【請求項２８】
請求項１８〜２７のいずれか１項に記載のストリップを含むミツバチの巣。
【請求項２９】
請求項２８に記載のミツバチの巣で生産されたミツバチ製品。
【請求項３０】
ミツバチおよびパッケージにおけるミツバチトゲダニ種感染を減少させるのに十分な量の単離されたホップ酸を含むパッケージ。
【請求項３１】
ミツバチの巣をミツバチトゲダニ種寄生ダニを死滅させるのに有効な量のホップ酸組成物と接触させた後に、前記ホップ酸組成物と接触させる前の前記ミツバチの巣におけるミツバチトゲダニ種寄生ダニ感染レベルよりも低いミツバチトゲダニ種寄生ダニ感染レベルを有するミツバチの巣。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１２年６月７日に出願された米国仮特許出願第６１／６５６，６２９号の利益を主張するものである。本出願の開示内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
ミツバチ（セイヨウミツバチ）は作物の有効な受粉のために必要であり、従って、世界の農業にとって重要である。ミツバチは、蜂蜜や蜜蝋などの経済的に重要な製品も生成する。ミツバチは、現在、米国、欧州および多くの他の国の至るところでミツバチコロニーを破滅的に破壊している外部寄生ダニであるミツバチヘギイタダニなどの複数の寄生虫および病原体に感染しやすい。ミツバチコロニーへの新しい脅威が差し迫っている。Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii（まとめて「ミツバチトゲダニ」）（ダニ目：トゲダニ科）は、発育中のミツバチの子および成虫のミツバチに影響を与える東洋のダニである。ミツバチトゲダニ感染により、異常なミツバチの子の発育やミツバチの子および成虫のミツバチの死が引き起こされる可能性がある。ミツバチトゲダニの自然宿主は、巨大な東洋のミツバチすなわちオオミツバチであるが、ミツバチトゲダニは、セイヨウミツバチ（学名：Apis mellifera）などの西洋のミツバチやヒマラヤオオミツバチ、トウヨウミツバチ（学名：Apis cerana）およびヒメミツバチなどの東洋のミツバチのコロニーに容易に寄生することができる。
【０００３】
受粉のために利用可能な強力なミツバチコロニーの供給を維持することは、農作物の持続的な生産のためには欠かせない。ミツバチヘギイタダニ感染が原因で、多くのミツバチコロニーが既に弱体化している。ミツバチトゲダニがこのような既に弱体化した集団に入り込むと、ミツバチコロニーの広範な崩壊が生じる可能性がある。ミツバチヘギイタダニおよびミツバチトゲダニ感染の現在の処置方法は有効ではないことが分かっている。さらに、そのような殺ダニ剤の使用により、ヒトによる消費を目的とした蜂蜜に有害な化学物質が入り込むことがある。ダニ感染を処置および予防するための新しい組成物および方法が緊急に必要とされている。そのような組成物は、ヒトの健康にリスクを生じさせない天然の成分のみを含むことが望ましい。
【発明の概要】
【０００４】
以下に記載するように、本発明は、ミツバチの巣におけるミツバチトゲダニ感染を減少させるための方法および組成物を特徴とする。
【０００５】
特定の実施形態では、本発明は、溶媒（例えば、プロピレングリコール）中に少なくとも約０．１％〜２０％（例えば、０．１、０．５、１．０、２、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０％）のホップベータ酸カリウム塩または少なくとも約３０〜３５％のベータ酸樹脂と、乳化剤（例えば、ポリソルベート）とを含む液体組成物を含むストリップを提供する。本ストリップを、等量のベータ酸樹脂、プロピレングリコールおよびポリソルベート６０を含む溶液または乳濁液で湿らせることが好ましい。一実施形態では、ベータ酸樹脂は、約１０〜２０％（例えば、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０％）のホップベータ酸カリウム塩を含む。好ましい一実施形態では、本ストリップは、約１６％のホップベータ酸カリウム塩を含む液体組成物を含む。
【０００６】
本発明の他の特徴および利点は、詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【０００７】
定義
「ダニ」とは、クモ綱ダニ目を意味し、コダニおよびマダニを含む。例示的なダニとしては、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaiiが挙げられる。
【０００８】
「アルファ酸」は、フムロン、アドフムロン、コフムロンまたはそれらの類似体もしくは誘導体との構造的相同性を有するホップ（学名：Humulus lupulus）植物に由来する有機酸を意味する。フムロン、アドフムロンおよびコフムロンは、３つの最も豊富なアルファ酸類似体である。アルファ酸の他の例示的な誘導体としては、イソアルファ酸、ローイソアルファ酸、テトラヒドロイソアルファ酸およびヘキサヒドロイソアルファ酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０００９】
「ベータ酸」とは、ルプロン、アドルプロン、コルプロンまたはそれらの類似体もしくは誘導体との構造的相同性を有するホップ植物に由来する有機酸を意味する。ルプロン、アドルプロンおよびコルプロンは、３つの最も豊富なベータ酸類似体である。ベータ酸の他の例示的な誘導体としては、フルポン、ヘキサヒドロベータ酸およびヘキサヒドロフルポンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１０】
「生物学的機能」とは、生物のあらゆる生理活動または行動活動を意味する。例示的な生物学的機能としては、繁殖、呼吸、神経活動、移動運動が挙げられる。蜂蜜の生成は、ミツバチに特異的な生物学的機能である。
【００１１】
本開示では、「含む(comprise)」「含んでいる(comprising)」「含有している(containing)」および「有している(having)」などは、米国特許法に基づく意味を有することができ、「含む(include)」「含んでいる(including)」などを意味することができ、「本質的に〜からなっている(consisting essentially of)」または「本質的に〜からなる(consist essentially)」も同様に米国特許法に基づく意味を有し、この用語は非限定的であり、列挙されているその基本的もしくは新規な特性が列挙されていないものの存在によって変更されない限り列挙されていないものの存在を認めるが、先行技術の実施形態を除外するものである。
【００１２】
「接触させること」とは、組成物に接触させること、組成物に関連させることまたは組成物との近接性を有することを意味する。例えば、ホップ誘導体は、ミツバチの巣構造の内側もしくは外側のいずれかでミツバチの巣に接触してもよい。
【００１３】
「制御放出」とは、時間、日、週または月にわたって放出されることを意味する。
【００１４】
「寄生ダニを制御すること」とは、ダニの生存を阻害すること、あるいはダニ集団の成長を低下、減速または安定化させることを意味する。一実施形態では、本発明は、ミツバチ、ミツバチコロニーまたはミツバチの巣（例えば、ミツバチの巣箱）へのTropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii感染を減少させる。別の実施形態では、本発明は、ミツバチ、ミツバチコロニーまたはミツバチの巣（例えば、ミツバチの巣箱）へのTropilaelaps clareaeおよびTropilaelaps koenigerum感染を減少させる。他の実施形態では、本発明の組成物は、寄生ダニを死滅させるか撃退する。
【００１５】
「ミツバチの巣板」とは、ミツバチの子孫（「ミツバチの子」）を育て、かつ蜂蜜および花粉を貯蔵するのに使用される、蜜蝋でできた六角形の単房からなる部分を意味する。
【００１６】
「有効量の殺ダニ剤」とは、ダニの生物学的機能を破壊するのに有効な量を意味する。
【００１７】
「乳濁液」とは、少なくとも２種の不混和性液体を含む混合物を意味する。典型的には、その液体のうちの一方は、他方の液体中に小さな液滴として分散されている。乳濁液は、２つの相が何時間、何日間または何週間も安定に混合されたままである安定な乳濁液であることが好ましい。乳濁液は、添加乳化剤を含有していても含有していなくてもよい。
【００１８】
「ミツバチの巣」とは、ミツバチコロニーを含む人工の構造体を意味する。現代の箱型のミツバチの巣は典型的に、底板、覆い、および１つの箱を他の箱の上に積み上げた１つ以上の箱を含む。各箱は内部に、ミツバチの空間だけ離れた垂直位置に保持されるミツバチの巣板すなわち土台の一連の移動可能な枠を含む。
【００１９】
「ミツバチ」とは、ハチ目ミツバチ属の昆虫を意味する。「ミツバチ」という用語は、昆虫の成体形に限定されず、限定されるものではないが、卵、幼虫および蛹などの全てのミツバチの発育段階を包含する。例示的なミツバチ種としては、クロコミツバチ、トウヨウミツバチ、オオミツバチ、ヒメミツバチ、サバミツバチ、ヒマラヤオオミツバチおよびセイヨウミツバチが挙げられる。
【００２０】
「ミツバチコロニー」とは、ミツバチの集団を意味する。ミツバチコロニーは、野生に生じているものであっても、養蜂家によって管理されているものであってもよい。
【００２１】
「ミツバチ寄生ダニ」とは、ミツバチに寄生するかミツバチの巣に寄生するあらゆるダニを意味する。特定の実施形態では、上記ダニは、ヘギイタダニ科、トゲダニ科またはホコリダニ科の一員である。例示的なミツバチ寄生ダニとしては、Acarapis woodi、Acarapis dorsalis、Acarapis externus、Euvarroa sinhai、Euvarroa wongsirii、ミツバチトゲダニ（例えば、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii)、Proctolaelaps regalis、ミツバチヘギイタダニ（例えば、Varroa jacobsonii、Varroa rinderer）および気管ダニが挙げられる。
【００２２】
「ホップ誘導体」とは、ホップに天然に生じるあらゆる分子およびその化学的誘導体を意味する。ホップ誘導体（例えば、アルファ酸、ベータ酸）は、ホップから精製されたものであっても化学合成されたものであってもよい。
【００２３】
「感染」とは、害虫によるある部位のコロニー形成または生物の寄生虫感染を意味する。
【００２４】
「単離されたホップ酸」とは、その天然状態で天然に付随する１種以上の成分から分離された本発明のホップ酸を意味する。本発明の単離されたホップ酸は、例えば天然源からの抽出または化学合成によって得てもよい。純度は、任意の適当な方法、例えば、カラムクロマトグラフィー、分光測定、ポリアクリルアミドゲル電気泳動またはＨＰＬＣ分析によって測定することができる。
【００２５】
「殺ダニ剤」とは、ダニの生物学的機能を阻害する薬剤を意味する。例示的なダニとしては、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaiiが挙げられる。
【００２６】
「殺ダニ活性」とは、コダニまたは他のダニ類の成長、繁殖または生存を阻害するあらゆる活性を意味する。好ましい一実施形態では、本発明の組成物は、ミツバチの巣へのミツバチトゲダニ（例えば、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii）感染を減少させる。
【００２７】
「核コロニー(nucleus colony)」とは、少なくとも１匹の女王バチ、１匹以上のミツバチ、蜂蜜の枠、およびミツバチの子を含む枠を含む、出荷に適したパッケージを意味する。「ミツバチの子」とは、ミツバチの巣の中で発達する卵、胚、幼虫および蛹段階のうちの任意の１つ以上を指す。典型的には、核コロニーは、箱、木枠、または宅配業者もしくは郵便による出荷に適した他の容器に入れて包装される。
【００２８】
「包装されたミツバチ」とは、少なくとも１匹の女王バチおよび１匹以上のミツバチを含む出荷に適したパッケージを意味する。典型的には、包装されたミツバチは、交尾した女王バチおよび／または産卵中の女王バチおよび複数（例えば、１ポンド、２ポンド、３ポンドまたはそれ以上）のミツバチを含む。本パッケージは、宅配業者または郵便による出荷に適している。
【００２９】
「ダニ感染を予防すること」とは、ダニ感染がミツバチ属のコロニーにおいて確立される可能性を減らすことを意味する。
【００３０】
「ダニ感染を処置すること」とは、ミツバチ属コロニーにおけるダニ集団の成長を低下、安定化または減速させることを意味する。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】ホップベータ酸で処置した後の時間の関数としてのミツバチトゲダニの死滅率を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本発明は、ミツバチトゲダニ種（例えば、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii）を制御するための方法および組成物に関する。本発明は、一つには、ホップの天然に生じる成分がミツバチ寄生ダニ感染の予防または処置にとって有用であるという発見に基づいている。
【００３３】
本発明は、ミツバチ、ミツバチコロニーまたはミツバチの巣におけるミツバチトゲダニ種（例えば、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii）感染を減少させるための殺ダニ剤送達装置を提供する。一実施形態では、本装置は、ホップ酸（例えば、アルファ酸、ベータ酸）を含むストリップである。一実施形態では、本ストリップは、溶媒（例えば、プロピレングリコール）中に少なくとも約０．１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％のホップベータ酸カリウム塩と、乳化剤（例えば、ポリソルベート）とを含む液体組成物を含む。別の実施形態では、ミツバチトゲダニ種を死滅させるか撃退する有効量のホップベータ酸、乳化剤および溶媒を含む液体組成物を含む本ストリップは、ミツバチトゲダニ種感染を処置または予防する。本ストリップを、プロピレングリコールもしくは別の溶媒に分散させた等量のベータ酸樹脂と、ポリソルベート６０もしくは別の乳化剤とを含む溶液または安定な乳濁液で湿らせることが好ましい。湿らせたストリップをミツバチの巣の中に吊るすか、それ以外の方法でミツバチの巣の中に置いて、寄生ダニに感染したミツバチと接触させる。ベータ酸は、接触により寄生ダニを死滅させ、ミツバチは、ホップベータ酸をミツバチの巣全体に分散させる。理論に縛られたくはないが、ミツバチは、毛づくろいおよび体と体との接触の過程において、ベータ酸をミツバチの巣全体に分散させる。以下に詳細に報告するように、ホップベータ酸は、ミツバチの巣における寄生ダニ集団の減少において有効であった。
【００３４】
ミツバチ属
ミツバチは、卵、幼虫、蛹および成虫の４つのライフステージを経験する昆虫である。成虫のミツバチは、女王バチ、働きバチまたは雄バチの３つの階級のうちの１つに属する。女王バチは、繁殖を行うことができ、かつ全産卵の責任を担うコロニー内の唯一の雌である。働きバチは、蜂蜜を集め、女王バチの子孫すなわち「ミツバチの子」の世話をする、繁殖能力のない雌である。雄バチは、女王バチと交尾する雄のミツバチである。卵から成虫のミツバチまでのライフサイクルは、働きバチでは２１日、雄バチでは２４日間である。女王バチは、ミツバチの巣板の１つの単房に各卵を産む。卵は一般に、４日目に幼虫に孵化し、幼虫はその単房内でその発育を続ける。９日目に、発育中の幼虫がいる単房を蝋で蓋をし、幼虫は、蛹へと変態する。２１日目に、新しい成虫の働きバチが現れる。
【００３５】
ダニ類
ダニ類は、各種植物およびミツバチなどの動物に対して寄生虫として働く小型の寄生性クモ綱である。ミツバチを餌食とする寄生ダニとしては、東洋のミツバチダニであるミツバチトゲダニ種（例えば、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii）が挙げられる。ミツバチトゲダニは、アジア自生であり、元の宿主である巨大なミツバチすなわちオオミツバチから西洋のミツバチであるセイヨウミツバチ（学名：Apis mellifera）に拡散した。ミツバチトゲダニ属のダニ（ダニ目トゲダニ科）は、発育中のミツバチの子および成虫のミツバチの両方に影響を与える寄生ダニである。ミツバチトゲダニは、ミツバチヘギイタダニよりも増殖率が高い。ミツバチトゲダニは、生殖周期の間に、より速い発育時間と、より短い便乗段階（非生殖移動段階、成虫のミツバチに対して費やされる時間）とを有する。従って、両方の種類のダニが同じコロニーに存在している場合、ミツバチトゲダニ集団は、ミツバチヘギイタダニよりも著しく早く増加する。
【００３６】
成虫のミツバチトゲダニは、幼虫がいる巣室（密閉された育房内で繁殖が行われる）に進入する。典型的には、雌のダニは、ミツバチの老熟幼虫の上に卵を産む。これらのダニは、孵化すると、蛹（すなわち発育中のミツバチ）の血リンパ（血液）を餌にする。この摂餌により、成虫のミツバチは弱まって変形する。
【００３７】
ミツバチトゲダニ種とミツバチヘギイタダニ種とを区別するのは比較的容易である。ミツバチヘギイタダニは、より大きく、カニのような形状をしており、長さよりも幅が広く、かつ比較的ゆっくりと移動する。ミツバチトゲダニの体は、細長く、速く走るダニであり、ミツバチの子の巣板を横切って素早く移動する。ミツバチヘギイタダニとは異なり、ミツバチトゲダニの口器は、ミツバチの体壁膜に穴を開けることができないため、ミツバチトゲダニは、成虫のミツバチを餌にすることができない。
【００３８】
アカリンダニ(Tracheal mite)は、ミツバチの呼吸気管に住みつく、顕微鏡でしか見えない程の小さなダニである。ミツバチヘギイタダニは、ミツバチの血リンパを餌とし、野生および養蜂ミツバチコロニーに寄生する外部寄生虫である。ミツバチヘギイタダニの繁殖は、育房が蓋で塞がれる直前に成虫の雌ダニが育房に入ったときに始まる。働きバチの子よりも大きな単房で育てられる雄バチの子は、優先的にダニ感染の標的にされる。雌ダニは、その卵を産みつける前に幼虫の血リンパを餌にする。ミツバチヘギイタダニの卵は、密閉された単房の下で孵化し、発育中のダニは、ミツバチの蛹を餌にする。雌のミツバチヘギイタダニが産んだ最初の卵は発達して雄になる。次の卵は発達して雌になり、その兄弟と交尾する。交尾した雌ダニはその母親と共に、ミツバチが現れたときに蓋で塞がれた単房から解放される。雌ダニは典型的に、腹部間または胴体領域間で成虫のミツバチに付着し、ミツバチの血リンパを餌にする。成虫のミツバチは、中間宿主および新しい感染部位への輸送手段として仕える。
【００３９】
望ましくは、ダニの制御に使用される殺ダニ剤は、ｉ）ダニの生存に必要な生理学的機能を破壊しなければならない、ｉｉ）成虫のミツバチの死滅を引き起こしてはならない、ｉｉｉ）ヒトの養蜂家またはヒトによる消費を目的とした蜂蜜に対して有害作用を有していてはならない、そして、ｉｖ）ミツバチの巣に送達できるものでなければならないという４つの必要性に対処するものでなければならない。
【００４０】
ダニの制御
ミツバチ寄生ダニ感染を制御するために使用される製品は、ミツバチの巣におけるミツバチトゲダニ種（例えば、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii）のダニ集団の成長を低下、安定化または減速させるか、ミツバチトゲダニ種（例えば、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii）のダニの成長、生存、繁殖または他の生物学的機能を阻害する。殺ダニ剤は上記ダニを死滅させるものであることが好ましい。寄生ダニ感染を測定する方法が当該技術分野で知られている。複数のパラメータは、ミツバチコロニー内に存在する感染レベルを示すことができ、感染したミツバチの巣から得たミツバチの試料中に存在するダニの数をミツバチの巣に存在する感染レベルの１つの尺度として使用することができ、活発な感染を有するミツバチの巣で育てられたミツバチは、感染を有しないミツバチの巣で育てられたミツバチよりも平均的に小さく、従って、ミツバチの大きさまたは重量は、感染の別の尺度として使用することができ、感染したミツバチの巣で生成された蜂蜜の量は、健康なミツバチの巣で生成されたものよりも少なくなることがあり、従って、蜂蜜の生成量は、感染レベルのさらに別の尺度として機能することができ、最終的に、深刻な感染により、コロニーは完全に失われる。従って、コロニーの損失は、ミツバチの巣に存在する感染レベルの尺度になり得る。
【００４１】
一例では、雄バチの子の試料採取を行うことができる。蓋で塞がれた雄バチの子をミツバチの巣から取り出し、白色の蛹に対して容易に可視化されるダニについて調べる。この方法では、ダニに感染したミツバチの子の割合を測定する。粘着板上への自然なダニの落下は、ダニを監視するために使用される最も一般的な方法である。通常、ミツバチが粘着板に近づけないように金網篩を上に備えた粘着性の板またはワセリンで被覆された板をミツバチの巣の床に置き、その板を一定の期間にわたって適所に置いたままにする。１〜３日後にその板を取り出し、養蜂家が粘着板上のダニの数を数える。２４時間のダニの落下数は、ミツバチの巣の感染レベルの尺度を提供する。あるいは、その板を２、３日またはそれ以上の日数にわたって適所に置いたままにして、１日のダニの平均落下数を測定する。
【００４２】
粉砂糖による試料採取は、ダニ集団を監視する第３の一般的な方法である。この方法では、約３００匹の生きている内勤バチ(nurse bee)（１／２カップのミツバチ）の試料を広口瓶ですくい上げて、粉砂糖と共に約１分間優しく振盪する。粉砂糖によりダニがミツバチから剥がれ落ち、ダニを明るい色の皿の中に放り出して計数する。１匹のミツバチ当たりのダニまたは１／２カップの試料当たりのダニの数は、感染レベルの尺度を提供する。
【００４３】
あるいは、試料採取されたミツバチを、アルコールまたは石鹸水による洗浄で死滅させ、その試料を二重ストレーナに通して注ぐ。粗いメッシュは、ミツバチを捕えるがダニを通すことができ、第２のより細かい篩は、ダニを捕え、液体を流し出すことができる。次いで、試料中に存在するダニを計数する。
【００４４】
一実施形態では、本発明の殺ダニ剤は、ミツバチの巣における感染レベルを少なくとも１０％、２５％、５０％、７５％またはさらには１００％も低下させる。別の実施形態では、本発明の殺ダニ剤は、少なくとも５０％、６０％または７０％のダニ致死率を誘発する。好ましくは、本殺ダニ剤は、７５％、８０％、９０％、さらには９５％または１００％のダニ致死率を誘発する。スクリーニング方法を使用して、成虫のミツバチに対する致死作用を最小に抑えると共に、ダニに致死的な（例えば、少なくとも７０％のダニ致死率を誘発する）ホップ誘導体の濃度を特定する。
【００４５】
あるいは、本発明の殺ダニ剤は、ダニの繁殖を阻害する。好ましくは、本殺ダニ剤は、ダニの繁殖を少なくとも２５％、５０％、７５％または１００％低下させる。別の手法では、本殺ダニ剤は、ダニの移動運動に必要な生物学的機能を破壊し、そのような処置により、ダニを捕え、溺死させ、ある領域から分離するか他の方法で除去することができる。本発明は、包装されたミツバチおよび核コロニーにおけるダニの制御をさらに提供する。包装されたミツバチおよび核コロニーは典型的に、交尾した女王バチおよび複数（例えば、１、２、３、４、５ポンド）のミツバチを含む。包装されたミツバチおよび核コロニーは典型的に、１つ以上のミツバチの巣の開始、拡張または置き換えに使用するために、最終使用者（例えば、養蜂家）に出荷される。多くのミツバチコロニーはミツバチ寄生ダニに感染しているため、包装されたミツバチおよび核コロニーの出荷により、感染を拡大または増加させる可能性がある。包装されたミツバチおよび核コロニーを本発明の組成物で処置することで、パッケージすなわち核におけるダニ感染を低下させるか、さらには排除することもできる。一実施形態では、本パッケージまたは核は、本発明のストリップを含む。別の実施形態では、本パッケージまたは容器の一部に、単離されたホップ酸またはホップ酸誘導体（例えば、ホップベータ酸）を含む組成物を含浸させる。
【００４６】
殺ダニ剤のスクリーニング
ダニ感染を制御するために現在使用されている市販製品は、高濃度で投与した場合、成虫のミツバチを死に至らしめることがあり、ヒトの養蜂家に対して有害作用を有することがあり、ヒトによる消費を目的とした蜂蜜を汚染することがある。従来の殺ダニ剤としては、タウフルバリナート（Ｔａｕ−Ｆｌｕｖａｌｉｎａｔｅ）（選択的接触および消化中毒剤として使用される合成のピレスロイド化合物）および、シラミ、マダニおよびコダニを制御するために動物に使用されるクマホス（全身性有機リン酸エステル）が挙げられる。従来の殺ダニ剤とは対照的に、本発明の組成物は、ホップに由来する安全な天然の生成物を含有する。ホップは、ビールの風味付けのために何世紀もの間使用されてきた。従って、ホップ誘導体を含む製剤は一般に安全である。本発明の殺ダニ組成物は、ヒトの養蜂家またはヒトによる消費を目的とした蜂蜜に悪影響を与えない。
【００４７】
本発明の殺ダニ剤は、ミツバチのライフステージのいずれかの間にミツバチに対して有害作用がほとんどないか全くないが、ダニの生物学的機能を奪うか破壊するのに有効な濃度のホップ誘導体を含む。本明細書に報告するように、４％の濃度で送達したベータ酸すなわちホップ誘導体は、成虫のミツバチにおける致死率を０％にすると共に、曝露されたダニの８７％を４時間後に死滅させた。１つの手法では、ダニを様々な濃度のホップ誘導体に曝露して曝露されたダニの５０％〜１００％を死滅させるそれらの濃度を特定する。次いで、成虫のミツバチを殺ダニ活性を有する濃度のホップ誘導体に曝露して、ミツバチの生存に対して最小の影響を有する濃度を特定する。殺ダニ組成物への曝露後に、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または１００％の成虫のミツバチが生存することが好ましい。同様の手法では、ホップ誘導体のダニおよびミツバチの繁殖に対する効果を評価する。スクリーニングアッセイを使用して、雌ダニの産卵数を減少させるか、孵化する卵の数を減少させるか、または繁殖可能な成熟期まで成長するダニの数を減少させる殺ダニ剤の濃度を決定する。その減少は、少なくとも２５％、５０％、７５％、８５％、９５％または１００％であることが好ましい。
【００４８】
ホップ誘導体
ホップ誘導体は、ホップ植物中に天然に生じるか化学的に誘導された（自然な生合成過程（例えば、生きている生物（例えば、哺乳類、植物、細菌）の代謝）またはヒトの介入（例えば、化学合成）を用いた合成過程による）化合物である。本発明の組成物は、ホップから誘導された１種以上の化合物を含む。特に興味深いのはホップ酸である。ホップは、２種類の主な有機酸クラスすなわちアルファ酸およびベータ酸を含有する。ホップ酸は、ビールの製造で使用されるホップの苦味酸成分である。アルファ酸には３つの主な類似体すなわちフムロン、コフムロンおよびアドフムロンが存在し、ベータ酸には３つの主な類似体すなわちルプロン、コルプロンおよびアドルプロンが存在する。アルファ酸およびベータ酸中に存在する類似体の割合は、品種に依存している。従って、ホップ誘導体およびホップ製品は典型的に、これらの類似体のうちの１つまたは混合物を含有する。存在する類似体の割合は、誘導体または製品を生成するために使用されるホップの品種に依存している。アルファ酸およびベータ酸は、天然のホップからの精製および従来の方法に係る化学合成によっても調製することができる。例示的なホップ誘導体としては、ベータ酸、ヘキサヒドロベータ酸、ローイソアルファ酸、イソアルファ酸、テトラヒドロイソアルファ酸およびヘキサヒドロイソアルファ酸が挙げられる。ホップ誘導体を含む組成物は商業的にも入手可能である。John I. Haas社のホップ誘導体含有製品としては、Ｒｅｄｉｈｏｐ（登録商標）、Ｉｓｏｈｏｐ（登録商標）、Tetrahop Gold（登録商標）、Hexahop Gold（登録商標）、ＭｇＲＩＡＡおよびＭｇＢｅｔａが挙げられる。これらの製品中の有効成分はそれぞれ、ベータ酸、ローイソアルファ酸（ＲＩＡＡ）、イソアルファ酸（ＩＡＡ）、テトラヒドロイソアルファ酸（ＴＨＩＡＡ）、ヘキサヒドロイソアルファ酸（ＨＨＩＡＡ）、ローイソアルファ酸のマグネシウム塩（ＭｇＲＩＡＡ）およびベータ酸のマグネシウム塩（ＭｇＢｅｔａ）である。便宜上、これらの製品の情報を表１にも列挙する。これらの製品および／またはホップ誘導体は典型的に、本発明の方法で使用するために所望の濃度まで希釈される。
【００４９】
植物（例えば、ホップ）から化合物を精製するために、植物抽出物を使用することが多い。抽出物は、乾燥後に乾燥材料を切断または粉砕して調製することができる。「抽出物」という用語は、ホップなどの植物の基本的成分の濃縮された調製物を指す。典型的には、抽出物は植物を乾燥および粉末化して調製される。任意に、植物、乾燥した植物または粉末化した植物を溶液中で沸騰させてもよい。抽出物は液体状態で使用してもよく、また他の液体または固体のハーブ抽出物と混合してもよい。あるいは、液体状態から固体の抽出物をさらに沈殿させることにより、抽出物を得てもよい。次いで、溶媒、典型的にはエタノール／水混合物、メタノール、ブタノール、イソブチルアルコール、アセトン、ヘキサン、石油エーテルまたは他の有機溶媒を適当に選択して、浸漬抽出法、浸出抽出法、再浸出抽出法、向流抽出法、ターボ抽出法または超臨界二酸化炭素（温度／圧力）抽出法によって、抽出過程を行ってもよい。次いで、抽出物をさらに蒸発させ、そのように濃縮して、空気乾燥、噴霧乾燥、真空オーブン乾燥、流動床乾燥または凍結乾燥により抽出物製品を得てもよい。
【００５０】
粗製抽出物を、本明細書に記載されているように殺ダニ活性について試験する。観察される効果に寄与する化学成分を単離するためには、殺ダニ活性を有する有益で主要な抽出物のさらなる分別が必要である。従って、抽出、分別および精製過程の目標は、ダニの生物学的機能を破壊する粗製抽出物中の化学物質の慎重な特性評価および同定である。そのような不均質な抽出物の分別および精製方法は当該技術分野で知られている。所望であれば、当該技術分野で知られている方法に従って、殺ダニ剤として有用であることが分かっている化合物を化学修飾する。
【００５１】
候補化合物の化学合成のために、数多くの方法が利用可能である。そのような化合物は、当業者に知られている標準的な合成技術および方法論を用いて、容易に入手可能な出発物質から合成することができる。本明細書に記載されている方法によって同定される化合物を合成するのに有用な合成化学変換および保護基方法論(保護および脱保護)は、当該技術分野で知られており、例えば、R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989)、T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd ed., John Wiley and Sons (1991)、L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994)、L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)、およびM. Verzele and D. De Keukeleire, Chemistry and Analysis of Hop and Beer Bitter Acids, Elsevier: Amsterdam (1991)に記載されているものが挙げられる。化学合成したアルファ酸およびベータ酸を反応混合物から分離して、カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィーまたは再結晶化などの方法でさらに精製することができる。当業者には理解されるように、本明細書中の化合物を合成するさらなる方法は、当業者には明らかであろう。さらに、様々な合成工程を別の順序または順番で行なって所望の化合物を得てもよい。
【００５２】
本発明の化合物は、１つ以上の不斉中心を含んでいてもよく、故に、ラセミ体およびラセミ混合物、単一の鏡像異性体、個々のジアステレオマーおよびジアステレオマー混合物として生じ得る。これらの化合物の全てのそのような異性体は、明示的に本発明に含まれる。また、本発明の化合物は、複数の互変異性型で表されている場合があり、そのような場合、本発明は、本明細書に記載されている化合物の全ての互変異性型を明示的に含む。そのような化合物の全てのそのような異性体は、明示的に本発明に含まれる。本明細書に記載されている化合物の全ての結晶形は、明示的に本発明に含まれる。本明細書に使用されているように、本明細書に記載されている式の化合物などの本発明の化合物は、誘導体を含むように定義される。誘導体としては、所望の特性を高めるために適当な官能基を付加することにより修飾された本発明の化合物が挙げられる。
【００５３】
本発明の化合物の許容される塩としては、許容される無機および有機の酸および塩基から誘導されたものが挙げられる。好適な酸塩の例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、パルモ酸塩（ｐａｌｍｏａｔｅ）、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩およびウンデカン酸塩が挙げられる。本発明の化合物およびその許容される酸付加塩を得る際に中間体として有用な塩の調製でシュウ酸などの他の酸を用いてもよい。適当な塩基から誘導された塩としては、アルカリ金属（例えばナトリウム）塩、アルカリ土類金属（例えばマグネシウム）塩、アンモニウム塩およびＮ−（アルキル）４＋塩が挙げられる。本発明は、本明細書に開示されている化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化も想定している。水溶性もしくは油溶性または分散性の生成物もそのような四級化によって得てもよい。
【００５４】
特に、少なくとも１年の貯蔵後に、本発明の組成物は、施用時に存在していたホップ酸の少なくとも約９５％〜１００％を保持していることが分かった。
【００５５】
水溶性ホップ酸アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩）および水不溶性ホップ酸アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩、マグネシウム塩）は、典型的に約０．１％〜約９５％の範囲のレベルで希釈剤または担体中に存在する。本明細書中の方法は、所望または規定の殺ダニ効果を達成するために、有効量の化合物または化合物組成物の投与を想定している。好ましくは、そのような量の有効成分（例えば、ホップ酸アルカリ金属塩、ホップ酸アルカリ土類金属塩またはそれらの組み合わせ）を、担体材料（例えば、マルトデキストリン、クラスターデキストリン、コーンスターチ、コーンシロップ固形物、グルコース、シクロデキストリン、アラビアゴム、カラギナン（ｃａｌａｇｉｎａｎ）、イヌリン、部分的に水素化された大豆油、セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ロジン、ヒプロメロースと組み合わせて、送達に適した粉末を形成する。いくつかの用途では、溶液またはスラリーを形成するために、希釈剤（例えば、スクロースもしくはグルコース溶液、水、液汁、他の水溶液、水混和性溶媒（エタノール、クレモフォール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）またはグリセリンおよび他の溶媒））を用いて、本発明の殺ダニ剤を液体として製剤化する。
【００５６】
典型的な殺ダニ製剤は、約１％〜約９５％のホップ酸を含有し、ここでは、範囲の下限は５〜９４の任意の整数であり、範囲の上限は６〜９５の任意の整数であり、ホップ酸は、殺ダニ活性を有する製品の製造方法で使用するのに適した担体（例えば、マルトデキストリン、クラスターデキストリン、コーンスターチ、コーンシロップ固形物、グルコース、シクロデキストリン、アラビアゴム、カラギナン、イヌリン、ロジン、部分的に水素化された大豆油、セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒプロメロース）に入れて提供される。非水性殺ダニ組成物が望ましい場合、本発明の殺ダニ剤を、ロジンまたは部分的に水素化された大豆油と共に製剤化することが好ましい。例えば水性スラリー中の活性な殺ダニ組成物の徐放のために、そのような組成物を使用してもよい。さらに他の実施形態では、本発明の殺ダニ組成物をセルロース粉末中に分散させる。上記実施形態のそれぞれにおいて、ホップ酸アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩、マグネシウム塩）または他のホップ酸塩を、マルトデキストリン、クラスターデキストリン、コーンスターチ、コーンシロップ固形物、グルコース、シクロデキストリン、アラビアゴム、カラギナン、イヌリン、ロジン、部分的に水素化された大豆油、セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースおよびヒプロメロースのうちの任意の１種以上と共に、水、エタノールまたは別の希釈剤に分散または溶解する。次いで、本組成物を任意に噴霧乾燥して、１ｍｍ未満の大きさの粒子の形成を促進する。粒子が少なくとも約１μｍ、５μｍ、１０μｍ、２５μｍ、５０μｍ、７５μｍ、１００μｍ、１５０μｍ、２００μｍ、５００μｍ、１ｍｍ、２ｍｍまたは５ｍｍの大きさになるように、噴霧乾燥に使用される条件を調整することが好ましい。ホップ酸：担体の比は、約１：２〜１：１００の範囲である。好ましい比としては、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：２０、１：３０、１：５０、１：７５および１：１００が挙げられる。あるいは、本発明の組成物は、希釈剤または担体中に少なくとも約１％、１０％、２０％、３０％、５０％、６０％、７５％、８０％、９０％または９５％のホップ酸アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩）またはホップ酸アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩、マグネシウム塩）を含む。ホップ酸の全てが金属の形態である必要はない。本組成物中に存在する５％〜１００％の範囲のホップ酸は、任意の所与の時間において金属の形態であり、９５％〜０％は遊離酸として存在する。様々な実施形態では、本発明の組成物はホップ酸を含有し、ここでは、９０％が金属の形態で存在しかつ１０％が酸の形態で存在し、５０％が金属の形態で存在しかつ５０％が酸の形態で存在し、１０％が金属の形態で存在しかつ９０％が酸の形態で存在する。
【００５７】
好ましい実施形態では、本製剤は、担体または希釈剤中に１〜９５％（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２５％、７５％、８０％、９０％、９５％）のホップ酸を含む。あるいは、そのような製剤は、約２０％〜約８０％のホップ酸を含有する。アルファ酸またはベータ酸を含有する組成物は、通常の方法で製造される。製品に添加するのに適したホップ酸は、それらの調製中、調製後であって貯蔵前、あるいは業者または消費者へのそれらの販売前の任意の時点で製品に投与するのに適した通常の錠剤、カプセル、固体、液体、乳濁液、スラリー、細顆粒または粉末として製剤化することができる。上に列挙した量よりも少ない量または多い量が必要になることもある。本明細書に詳述されている組成物は、ダニの成長または生存を阻害するのに有効な量で、本明細書に詳述されている式の化合物ならびにさらなる殺ダニ剤（存在する場合）を含む。ダニの阻害が望まれる実質的にあらゆる用途で本発明の殺ダニ組成物を使用してもよい。例えば、本発明の組成物を使用して、ダニの成長、増殖または生存を防止、低下、阻害、減速または安定化させる。
【００５８】
ミツバチに悪影響を与えることなくダニを有効に死滅させるために、本明細書に列挙されているものよりも少ない量または多い量が必要となることもある。具体的な投与量および処置計画は、本明細書に記載されているように経験に基づいて決定する。本発明の組成物は、ダニ感染の確立を防止するため、確立されたダニ感染を処置するため、およびダニ感染に対して以前に処置したミツバチの巣の健康を維持するためにも有用である。
【００５９】
製剤
ホップ誘導体は、複数の好都合な製剤としてミツバチまたはミツバチの巣に与えることができる。一般に、処置用または予防用薬剤をミツバチの巣の中に分散させるための戦略は、ｉ）当該薬剤を餌源（例えば、液体または固体の餌）の中に与えること、ｉｉ）当該薬剤を、本組成物をコロニーから除去するように設計された衛生行動を誘発する組成物（ミツバチによって引き裂かれるように設計された小包）の中に与えること、またはｉｉｉ）当該薬剤を、ミツバチによりコロニー全体に分散される形態（例えば、ミツバチの巣の入り口に設けられた追跡粉末(tracking powder)）の中に与えることに依存している。本発明の製剤は、育房またはミツバチの巣において成虫のミツバチの体に付着したダニを標的とするように使用する。本発明の組成物は、ミツバチの巣の中で少なくとも４１日間活性であることが望ましい。これにより、典型的には２１〜３０日の間に完了するダニのライフサイクル全体にわたって本殺ダニ剤を存在させることができる。活性が維持される期間がより短い場合（例えば、７日間、１４日間、２１日間または３０日間）、本発明の組成物の繰り返しの投与が望まれたり必要とされたりすることがある。より長い期間（例えば、２ヵ月、３ヶ月、６ヶ月、９ヶ月または１２ヶ月間）活性である組成物も想定される。ダニ感染の長期間の処置または予防のために、そのような組成物を使用してもよい。
【００６０】
乳濁液
本発明の殺ダニ剤を乳濁液または溶液として提供することもできる。乳濁液製剤は、油中水型（ｗ／ｏ）または水中油型（ｏ／ｗ）として存在していてもよい。液滴直径は、ナノメートル規模（コロイド分散系）から数百ミクロンの範囲で異なってもよい。通常、各種界面活性剤および増粘剤を本製剤に組み込んで、液滴直径を変更し、乳濁液を安定化させ、かつ放出を変更する。一実施形態では、ホップベータ酸（例えば、ホップベータ酸樹脂、ホップベータ酸カリウム塩）を溶媒（例えば、プロピレングリコール）に分散させて乳濁液を形成する。所望であれば、乳化剤（例えば、ポリソルベート６０、レシチン）を用いて乳濁液を安定化させる。乳化剤は当該技術分野で知られており、本明細書に記載されている。ミツバチ寄生ダニ感染を処置する際に使用される好ましい製品の１つはＨｏｐＧｕａｒｄ（登録商標）である。ＨｏｐＧｕａｒｄは、３３．３％のホップベータ酸樹脂のカリウム塩、３３．３％のプロピレングリコールおよび３３．３％のポリソルベート６０を含む液体の溶液または乳濁液である。好ましくは、ホップベータ酸を、乳化剤として添加されたポリソルベート６０を含むプロピレングリコール溶媒中に分散させる。次いで、乳濁液を含む生分解性ストリップをミツバチの巣に運ぶ。例えば、本ストリップをホップベータ酸樹脂、プロピレングリコールおよびポリソルベート６０に接触させて湿らせる。
【００６１】
粉末状製剤
現在の殺ダニ剤は、幅が約１インチ、長さが９インチ、厚さが１／４インチのプラスチック製の非生分解性ストリップに付着させてミツバチの巣の中に入れる。ホップ誘導体の送達のために同様の手段を使用することができる。他のストリップ組成物としては、膜、紙、プラスチックおよびポリマーストリップが挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、ホップ誘導体を含む組成物は、粉末状製剤として提供される。基板材料をホップ酸の粉末状製剤で被覆し、次いで、その被覆物を粉砂糖などのミツバチにとって魅力的な物質の相で覆う。このストリップをミツバチの巣の中に置き、そこで成虫のミツバチが粉砂糖を噛み砕き、粉末状のホップ酸が露出される。粉末状のホップ酸は、成虫のミツバチの体に付着し、それにより成虫のミツバチの体表に存在するダニに接触して、ダニを死滅させる。あるいは、ホップ酸がミツバチによって消費され、その血リンパに入り、次いで血リンパがダニによって消費され、それによりダニを死滅させる。
【００６２】
別の手法では、粉末状混合物を「ティーバッグ」に似た半透性小袋に入れて、ミツバチの巣に運ぶ。ミツバチは、ミツバチの巣からこの異物を除去するために、この小袋を引き裂き、それにより粉末が放出される。粉末状のホップ酸が成虫のミツバチの体に付着し、ミツバチの巣全体に分散され、それによりミツバチの体表に存在するダニを死滅させ（またはそれ以外の方法でダニの増殖または生存を妨害し）、ダニ感染を阻害する。
【００６３】
カプセル剤
１つの手法では、ホップ誘導体は、カプセル剤（液体または粉末）として提供される。液体または粉末形態のホップ誘導体を、ミツバチの巣の中でゆっくりと分解する被覆物でカプセル化することが好ましい。この被覆物により、ホップ誘導体の長期放出が得られる。２〜６週間（例えば、２、３、４、５、６週間）の間に本組成物を放出させることが好ましい。カプセル材料への使用に適した具体的な材料としては、シリカ、真珠岩、タルク、粘土、葉蝋石、珪藻土、ゼラチンおよびゲルなどの多孔性粒子もしくは基材、ポリマー（例えば、ポリ尿素、ポリウレタン、ポリアミド、ポリエステルなど）、ポリマー粒子またはセルロースが挙げられるが、これらに限定されない。これらとしては、例えば、上に明記されているホップ誘導体または他の化合物を壁から放出する中空繊維、中空管または管、管の開口部から本化合物を放出する毛管、ポリマーマトリックスから本化合物を放出する異なる形状の、例えば、ストリップ、ブロック、錠剤、円盤状のポリマーブロック、不透過性容器内に本化合物を保持し、かつ測定透過膜からそれを放出する膜システムおよびそれらの組み合わせが挙げられる。そのような組成物の分配の例は、ポリマー積層体、ポリ塩化ビニルペレットおよびマイクロキャピラリーである。養蜂での使用に適したカプセル化法は、例えば、Rieth et al., Journal of Apiculture Research 25(2):78-84 (1986)に記載されている。
【００６４】
カプセル化法は典型的に、化学的または機械的なのものに分類される。カプセル化のための化学的方法の例としては、複合コアセルベーション、ポリマー―ポリマー不相容性(polymer-polymer incompatibility)、液体媒体中での界面重合、原位置重合、液中乾燥、液体媒体中での熱およびイオンゲル化、液体媒体中での脱溶媒和、澱粉系化学的方法、シクロデキストリン包接およびリポソームの形成が挙げられるが、これらに限定されない。カプセル化のための機械的方法の例としては、噴霧乾燥、噴霧冷却、流動床、静電堆積、遠心押出、回転盤もしくは回転懸濁液分離、環状噴流カプセル化、液気もしくは固気界面での重合、溶媒蒸発、溶剤抽出浴内への圧力押出もしくは噴霧が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６５】
マイクロカプセルも殺ダニ剤の長期放出に適している。マイクロカプセルは、被覆物すなわちシェルによって囲まれたコア材料すなわち有効成分を含有する小さな粒子である。マイクロカプセルの大きさは典型的に、１〜１０００ミクロンの範囲で異なり、１ミクロン未満のカプセルはナノカプセルに分類され、１０００ミクロンを超えるカプセルはマクロカプセルに分類される。コア負荷量は通常、０．１〜９８重量％の範囲で異なる。マイクロカプセルは、様々な構造（連続コアシェル、多核または一体構造）を有することができ、かつ不規則または幾何学的な形状を有することができる。
【００６６】
別の手法では、ホップ誘導体は、油系送達システムとして提供される。油とホップ誘導体の混合物を固体基材上に堆積させ、ホップ誘導体を含むこの基材をミツバチの巣の中に置き、次いでそこでダニに接触させてダニを死滅させる。油放出基材は、植物油および／または鉱油を含む。一実施形態では、基材は、本組成物を水の中に容易に分散可能にする界面活性剤も含有する。そのような界面活性剤としては、湿潤剤、乳化剤、分散剤などが挙げられる。
【００６７】
あるいは、本発明の殺ダニ剤は、固形錠剤として製剤化してもよく、油、タンパク質／炭水化物材料（好ましくは植物系）、甘味料およびミツバチにおける寄生虫感染の予防または処置に有用な有効成分を含む（好ましくは、本質的にそれらからなる）。そのような組成物の製造方法は当該技術分野で知られており、例えば、米国特許出願公開第２００６０００８４９２号に記載されている。一実施形態では、本発明は固形錠剤を提供し、油、タンパク質／炭水化物材料（好ましくは、植物系）、甘味料、ダニ感染の予防または処置に有用な有効成分（例えば、ホップアルファおよび／またはベータ酸またはそれらの組み合わせもしくは誘導体）を含む（好ましくは、本質的にそれらからなる）。錠剤は典型的に、約４〜４０重量％（例えば、５重量％、１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％）の油（例えば、トウモロコシ油、ヒマワリ油、落花生油、オリーブ油、ブドウ種子油、キリ油、カブ油、大豆油、綿実油、クルミ油、椰子油、ヒマシ油、アースアーモンド油、ヘーゼルナッツ油、アボカド油、胡麻油、ハズ油、カカオ脂、亜麻仁油、ナタネ油およびカノーラ油などの植物油およびそれらの水素化誘導体、石油由来の油（例えば、パラフィンおよびワセリン）および他の水不混和性炭化水素（例えば、パラフィン））を含有する。錠剤は、約５〜４０重量％（例えば、５重量％、１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％）の植物系タンパク質／炭水化物材料をさらに含有する。上記材料は、炭水化物部分（例えば、小麦、ライ麦、大麦、カラス麦、トウモロコシ、米、粟、モロコシ、粒餌、蕎麦、アルファルファ、ムラサキウマゴヤシ（ｍｉｅｌｇａ）、トウモロコシ粉、大豆粉、穀粉、小麦シャープス、小麦ふすま、トウモロコシグルテンミール、藻類粉、乾燥酵母、豆、米などの穀物に由来するもの）とタンパク質部分の両方を含有する。当該材料を構成している各部分の相対的割合は異なってもよいが、当該材料は、炭水化物およびタンパク質の少なくとも一部を含むものでなければならない。
【００６８】
錠剤は、約１０〜７５重量％（１０、１５、２０、２５、５０、７５重量％）の甘味料も含有する。本明細書に使用されている「甘味料」という用語は一般に、天然および人工の甘味料の両方を指す。好ましくは、甘味料は、グルコース、フラクトース、スクロース、ガラクトース、ラクトースおよび反転糖(reversed sugar)などの糖である。糖は、グラニュー糖（白糖）、黒糖、粉砂糖(confectioner's sugar)、微糖(impalpable sugar)、粉砂糖(icing sugar)およびそれらの組み合わせからなる群から選択されることが好ましい。また、グリセリンなどのアルコール類および澱粉などの複合糖質を「甘味料」成分として使用してもよい。甘味料は主に昆虫の誘引剤として使用されるが、特に甘味料が糖である場合、甘味料は、錠剤に粒状構造を与えるのにも役立つ。先に述べたように、この粒状構造により、十分な力が加わると、錠剤は徐々に粉々に砕けることができる。
【００６９】
有効成分の送達を支援するため、または錠剤に適当な構造を与えるために、各種賦形剤および結合剤を任意に使用することができる。好ましい賦形剤および結合剤としては、無水ラクトース、微結晶性セルロース、コーンスターチ、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびそれらの混合物が挙げられる。
【００７０】
本発明に係る錠剤は、全ての成分を一緒に混合した後、混合物を圧縮して特定の用途のための所望の形状および大きさの錠剤にして製造する。錠剤は、約２〜５インチの直径および約０．５〜２インチの厚さを有する円板状であることが好ましい。手動または自動の圧縮装置により圧縮を達成してもよい。混合物に加えられる圧力は、錠剤を自己持続体(self-sustaining body)に形成するのに十分なものでなければならない。
【００７１】
有効成分を本発明に係る昆虫に送達する方法は、先に述べた有効成分を含有する固形錠剤を用意する工程と、錠剤を昆虫がそれに直接接触し得る位置に置く工程とを含む。一般に、製造されたミツバチの巣にコロニーが形成されたミツバチを処置する際には、錠剤をミツバチの巣の中に置くことが好ましい。
【００７２】
錠剤をミツバチの巣の中に置いた後の次の数週間にわたって、ミツバチが錠剤を噛み砕き、有効成分が他のミツバチに曝露される。錠剤のくずが、蜂蜜用巣箱からミツバチの子箱全体に剥がれ落ちる。錠剤全体が約３０〜４５日で崩壊することが好ましい。
【００７３】
本発明の殺ダニ剤は、ミツバチにとって魅力的であり、かつ摂餌行動を誘発するシロップの形態で送達することもできる。本発明で使用されるシロップは、糖および水を含むことが好ましい。５０％ｗ／ｖのスクロース溶液が特に好ましい。ホップ酸を５０％のスクロース水溶液を含む糖シロップ中に分散させて、液体組成物を形成する。本組成物を、ミツバチ用の飼料添加物として使用し、ミツバチの巣の中または近くの好適な位置に置くことができる。
【００７４】
本発明の殺ダニ剤は、ミツバチの衛生行動を誘発するのに適した小包に入れて送達することもできる。ホップ酸および糖の微粉末をミツバチが切り裂くことができる多孔性材料に封入して、そのような小包を用意する。多孔性材料は、パラフィン紙または濾紙でできていることが好ましい。好適な濾紙としては、アバカ繊維、木材パルプおよびセルロースレーヨン繊維を含むものが挙げられる。所望であれば、コポリマーと混合したポリエチレン、コポリマーと混合したポリプロピレン、または１００％ポリプロピレンで紙を被覆する。
【００７５】
他の実施形態では、殺ダニ剤を散粉組成物または粉末として調製する。典型的に、糖を微粉末に粉砕し、それを粉末ホップ酸の中に混合して、散粉組成物を調製する。あるいは、マルトデキストリンに関して実施例３に記載されているように散粉組成物を調製し、噴霧乾燥によって粉末を得る。当業者は、ミツバチへの送達を容易にする大きさの粒子または顆粒を達成するために、噴霧乾燥工程で使用される条件を調整する。粉末は、ミツバチおよびその身体部分（例えば、関節、溝、剛毛）全てを被覆する微粒子を含むことが望ましい。散粉組成物は、ミツバチの枠の上部、ミツバチの巣内のミツバチの巣板、またはミツバチの巣の内面に直接散布することができ、あるいはミツバチの群れに直接散布してもよい。
【００７６】
あるいは、ホップ酸を任意の好適な液体中に分散させて形成される液体スプレー組成物として、本殺ダニ剤を調製する。ホップ酸を水中に分散させることが好ましい。所望であれば、当該スプレー組成物は、噴霧装置を詰まらせることなくスプレーを効率的に分散させることができる界面活性剤も含む。本組成物を使用して、ミツバチの巣の中またはミツバチの巣板を噴霧したり、それを使用してミツバチの群れに直接噴霧したりすることができる。
【００７７】
別の手法では、本発明の殺ダニ剤は、蒸気の形態で送達される。そのような蒸気をミツバチの巣に送達する方法については、例えば、米国特許出願公開第２００２０１５１２４９号に記載されている。
【００７８】
殺ダニ剤の送達
害虫駆除剤をミツバチまたはミツバチの巣に送達する装置が当該技術分野で知られている。そのような送達装置としては、ストリップ、制御放出ストリップ、錠剤、貯蔵容器、ポリマーディスク(polymer disc)、トレイおよび蒸発装置が挙げられる。所望であれば、本送達装置を生分解型として提供する。好ましい一実施形態では、本発明は、ホップベータ酸を含む生分解性ストリップを提供する。好ましくは、ストリップを約１６％のホップベータ酸カリウム塩を含む液体組成物で湿らせる。一実施形態では、本液体組成物は、等量の（すなわち３３．３％）のホップベータ酸樹脂、プロピレングリコールおよびポリソルベート６０を含む乳濁液である。ホップベータ酸を含む湿らせたストリップをミツバチの巣箱の枠に吊り下げる。一実施形態では、１、２、３、５、７、１０日間処置を行う。別の実施形態では、２、３、４、５、６、８、１０または１２週間処置を行う。所望であれば、乾き切った後にストリップを交換する。当該処置を必要に応じて繰り返す。典型的には、１０個の枠当たり２本のストリップを使用するが、それよりも大きい、または小さい数を使用してもよい。一実施形態では、使用されるストリップは、長さが約１７インチ、幅が１＋１／４インチである。特定の実施形態では、本ストリップは、液体を容易に吸収する繊維を含む生分解性ストリップである。例えば、本ストリップは、紙、段ボール紙、チップボードまたは他の同様の材料でできている。本ストリップを液体ホップベータ酸組成物（例えば、３３．３％のホップベータ酸樹脂、３３．３％のプロピレングリコール、３３．３％のポリソルベート６０）で湿らせ、耐湿性の箔小包に入れて最終使用者（例えば、養蜂家）に船で送るか他の方法で送る。一実施形態では、本ストリップは、幅が約１〜２インチ（例えば、１、１．２５、１．５、１．７５、２．０インチ）、長さが１〜２フィート（例えば、１２、１６、１８、２０、２４インチ）である。
【００７９】
別の実施形態では，本発明は、ミツバチの巣におけるダニ感染の処置または予防において使用されるホップベータ酸を含む液体組成物を含む波形ストリップを提供する。一実施形態では、波形ストリップは、等量のベータ酸樹脂、溶媒（例えば、プロピレングリコール）および乳化剤（例えば、ポリソルベート）を含む。一実施形態では、ベータ酸樹脂は、少なくとも約１５％のベータ酸カリウム塩および他の抽出物を含む。波形ストリップを、プロピレングリコールまたは別の溶媒に分散させた等量のベータ酸樹脂とポリソルベート６０または別の乳化剤とを含む溶液または安定な乳濁液で、少なくとも約２４時間または所望の飽和点に到達するまで湿らせることが好ましい。湿らせた波形ストリップを養蜂所に配達するために包装する。湿らせた波形ストリップをミツバチの巣の中に吊るし、それらを寄生ダニに感染しているミツバチに接触させる。ベータ酸は、接触により寄生ダニを死滅させ、ミツバチは、ミツバチの巣全体にホップベータ酸を分散させる。
【００８０】
別の実施形態では、本発明は、ミツバチトゲダニ種を死滅させるか撃退する有効量のホップベータ酸、乳化剤および溶媒を含む液体組成物を含む、ミツバチトゲダニ種感染を処置または予防するための波形ストリップを提供する。一実施形態では、波形ストリップは、等量のベータ酸樹脂、溶媒（例えば、プロピレングリコール）および乳化剤（例えば、ポリソルベート）を含む。一実施形態では、ベータ酸樹脂は、少なくとも約１５％のベータ酸カリウム塩および他の抽出物を含む。波形ストリップを、プロピレングリコールまたは別の溶媒に分散させた等量のベータ酸樹脂とポリソルベート６０または別の乳化剤とを含む溶液または安定な乳濁液で、少なくとも約２４時間または所望の飽和点に到達するまで湿らせることが好ましい。湿らせた波形ストリップを養蜂所に配達するために包装する。湿らせた波形ストリップをミツバチの巣の中に吊るし、それらを寄生ダニに感染しているミツバチに接触させる。ベータ酸は、接触により寄生ダニを死滅させ、ミツバチは、ミツバチの巣全体にホップベータ酸を分散させる。
【００８１】
本発明の方法で使用される波形シートは、片面のシート（すなわち、片方の面に平らなシートを有し、その面に波形シートが貼り付けられている段ボール紙）であることが好ましい。本発明の方法で有用な波形段ボール紙は、約１〜２ｍｍの厚さであることが好ましく、１インチ当たり約５、６、７または８フルートを含むことが好ましい。他の実施形態では、本発明の波形ストリップは、約１ｍｍ、２ｍｍ、３ｍｍ、４ｍｍ、５ｍｍ、６ｍｍ、７ｍｍ、８ｍｍ、９ｍｍ、１０ｍｍ、１５ｍｍ、２０ｍｍ、３０ｍｍ、４０ｍｍの厚さである。片面および両面のハチの巣状の段ボール紙を使用してもよい。
【００８２】
他の実施形態では、波形シートは以下の仕様を有し、本発明の方法で有用である。
【表１】
2015525219.tif 000003
【００８３】
本発明の方法で有用な波形シートは、片面または両面であってもよく、紙ベース材料、木部繊維を含む加工木材製品、プラスチック、ポリマーまたは当該技術分野で知られている任意の他の材料で作られている。
【００８４】
包装されたミツバチの処置のために、ホップベータ酸を含むストリップを出荷中にミツバチのパッケージの中に吊るす。
【００８５】
特に、本発明の組成物を寄生ダニ、ミツバチまたはミツバチの巣に送達するのに適した装置については、例えば、米国特許出願公開第２００７００５９３３３号、第２００７００２６７６５号、第２００６０１４１９０４号、第２００６０００９１２２号、第２００６０００８４９２号、第２００５００９５９５４号、第２００５００９０５６０号、第２００５００４８０９３号、第２００４０２２９５４２号、第２００４００７７２９１号、第２００３０１９０８６０号、第２００３００４４４４３号、第２００３００２７４９０号、第２００２０１８２９７７号、第２００２０１５１２４９号、第２００２００９４７５６号、第２００１００１４３４６号および第２００２０１５１２４９号に記載されている。制御放出のための分配投与手段および好適な組成物については、米国特許第６，８４３，９８５号、第５，７５０，１２９号、第４，７７５，５３４号、第５，８４９，３１７号、第５，３４８，５１１号、第６，０３７，３７４号、第７，１３７，８６４号、第６，８３７，７７０号、第６，８２０，７７３号、第６，７０２，６４５号、第６，６４６，０１４号、第６，６２０，０２５号、第６，５９５，８２８号、第６，５８５，５５７号、第６，４７５，０６１号、第６，４６８，１２９号、第６，２７７，３７１号、第６，２２１，３７５号、第６，２０４，２８３号、第６，０９６，３５０号、第６，０３７，３７４号、第６，０１０，３９０号、第５，３１２，６２２号、第５，２３０，８９４号、第５，２２７，１６２号、第５，１３５，７５８号、第５，０７０，０９１号、第５，０６９，６５１号、第５，０２３，３５９号、第４，８７６，２６５号、第４，８６７，７３１号、第４，８３７，２１６号、第４，６８２，３８０号および第４，２９９，８１６号に記載されており、これらの開示内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００８６】
キット
本発明は、ミツバチトゲダニ種（例えば、Tropilaelaps clareae、Tropilaelaps koenigerum、Tropilaelaps mercedesaeおよびTropilaelaps thaii）感染の処置または予防のためのキットを提供する。一実施形態では、本キットは、感染部位（例えば、ミツバチの巣）への送達に適した形態で有効量のホップ誘導体を含有する組成物を含む。いくつかの実施形態では、本キットは、殺ダニ剤を含む容器を含み、そのような容器は、箱、アンプル、瓶、バイアル、管、袋、小袋、ブリスター包装または当該技術分野で知られている他の好適な容器形態であってもよい。そのような容器は、殺ダニ剤を保持するのに適したプラスチック、ガラス、ラミネート紙、金属箔または他の材料でできていてもよい。
【００８７】
特定の実施形態では、本発明は、ホップベータ酸で湿らせるか、それに浸漬するか他の方法で含浸させた波形のストリップ（例えば、紙、段ボール紙、チップボードまたは他の同様の材料あるいは当該技術分野で知られている任意の他の吸収材料）を特徴とするキットを提供する。例えば、本ストリップは、単独または他のホップ誘導体と組み合わせた約１５〜２０％（例えば、１５、１６、１７、１８、１９、２０％）のホップベータ酸（例えば、ＨｏｐＧｕａｒｄ（登録商標））を含む。一実施形態では、本ストリップは、寄生ダニ感染を処置または予防するための制御放出組成物を含み、上記組成物は、ミツバチ寄生ダニへの送達に適した形態で有効量のホップ誘導体を含む。本ストリップは、生分解型であることが好ましい。一実施形態では、本ストリップをホップ酸組成物に予め浸漬した後、本ストリップを湿った状態に維持するための箔、プラスチックまたは同様の材料で包装する。所望であれば、本発明の殺ダニ剤を、それを感染部位に投与するための説明書と共に提供する。説明書は一般に、ダニ感染の処置または予防のための本組成物の使用に関する情報を含む。他の実施形態では、説明書は、本殺ダニ剤に関する説明、ダニ感染の処置または予防のための投与計画および投与方法、使用上の注意、警告、調査研究に関する記載および／または参考のうちの少なくとも１つを含む。説明書は、容器（存在する場合）の上に直接印刷されているか、容器に貼り付けられたラベルとして、あるいは容器の中に入れるか容器と共に提供される別個のシート、パンフレット、カードまたは折り畳み印刷物として存在してもよい。
実施例
【００８８】
実施例１：ホップベータ酸は、以下の表および図１に示すように、ミツバチトゲダニを制御するのに有効である。
ベータ画分を使用して１０％のベータ酸水溶液を調製した。「ベータ画分」という用語は、ホップ抽出物を苛性水で洗浄してアルファ酸の大部分を除去した際に得られた、ホップ抽出物の油状、蝋状および樹脂状の部分を指す。ベータ画分は、主としてベータ酸、樹脂、油および蝋を含有する。これはベータ酸油とも呼ばれる。ベータ画分は、そのまま使用しても、ＨＰＬＣ分析によるベータ酸に対するアルファ酸の比が０．０５以下になるようにベータ画分中のアルファ酸濃度を低下させるために苛性水で洗浄してもよい。連続混合しながらベータ画分の温度を６０℃まで上昇させ、ＫＯＨの形態の腐食剤を添加して、ｐＨを１０〜１１にした。最初に、ＨＰＬＣ分析によりベータ画分中のベータ酸含有量を決定し、水相のベータ酸濃度が１０％〜５０％になるように、ある体積の６０℃の水を混合しながら添加した。必要であれば、溶液のｐＨを６０℃でｐＨ１０〜１１に調製した。ｐＨ調整のために添加したＫＯＨの体積を、水の計算した体積から引かなければならなかった。また、５５〜７０℃の温度範囲は許容可能であるが、６０℃が最適であった。混合を停止し、混合物を少なくとも４５分間放置し、その間に、この溶液の温度を６０℃に維持した。次いで、水性のベータ酸相を樹脂相から分離した。水性のベータ酸相を、温度を６０℃に維持し、かつｐＨを１０〜１１に維持しながら、ＨＰＬＣで測定した場合に１０％のベータ酸濃度まで希釈した。水相を１〜１３℃に冷却し（混合は任意である）、少なくとも２時間放置した。次いで、この溶液を、容器を傾けて上清を移すか濾過した。
【００８９】
１０％のベータ酸（上記のとおり調製したか、市販の１０％ベータ酸であるBetastab 10A（登録商標）を直接用いる）を希釈して、１重量％、２．５重量％、５重量％、７．５重量％および１０重量％のベータ酸溶液を生成した。これらのホップベータ酸溶液（１％、２．５％、５％、７．５％および１０％ｗ／ｗ）および未処理対照を、ミツバチトゲダニに対する効果について試験した。１ｍＬの各試験溶液を別個のペトリ皿の中の濾紙の上に置き、各試験溶液を３回試験した。次いで、５匹のミツバチトゲダニを、処理済みの各濾紙の上に置いた。ミツバチトゲダニの死滅率を２４時間監視した。
【００９０】
表１、表２および図１は、ミツバチトゲダニの死滅率に対するホップベータ酸処置の効果を示し、それぞれが、ミツバチトゲダニの絶対死滅率の明らかな増加ならびにホップベータ酸濃度の増加に伴うミツバチトゲダニの死滅率の増加を示している。１０％ｗ／ｗのホップベータ酸最高濃度で試験すると、２４時間の時点で１００％の死滅率に近づいた（すなわち９４％）未処理対照と比較して、３時間でミツバチトゲダニの１００％の死滅率が生じた。最も低い１％ｗ／ｗのホップベータ酸濃度でさえ、１３時間の時点でミツバチトゲダニの１００％の死滅率が生じ、これは未処理対照で観察された死滅率の２倍を超えている。
【００９１】
本発明の化合物は、本質的に上に記載した方法および一般的なスキームで調製する。本明細書中の可変部分に関する任意の定義における化学基の列挙の記載は、列挙されている基の任意の単一の基または組み合わせとしてのその可変部分の定義を含む。本明細書中の可変部分に関する実施形態の記載は、任意の単一の実施形態として、あるいは任意の他の実施形態またはその部分との組み合わせたその実施形態を含む。別の実施形態は、本明細書中のスキームおよび実施例に例示されている方法を含む本明細書に詳述されている方法によって調製された本明細書中の式のいずれかの化合物である。本発明の別の態様は、本明細書に詳述されている殺ダニ剤として使用される本明細書中のいずれかの式の化合物である。本発明の別の態様は、本明細書に詳述されている殺ダニ組成物の製造において使用される本明細書中のいずれかの式の化合物である。
【表２】
2015525219.tif 000004
【表３】
2015525219.tif 000005
【００９２】
他の実施形態
上記記載から、様々な使用および状況に適応させるために本明細書に記載されている本発明を変形および修正し得ることは明らかであろう。そのような実施形態も以下の特許請求の範囲に含まれる。
【００９３】
本明細書中の可変部分に関する任意の定義内の要素の列挙の記載は、任意の単一の要素または列挙されている要素の組み合わせ（または部分的組み合わせ）として、その可変部分の定義を含む。本明細書中の実施形態の記載は、任意の単一の実施形態として、あるいは任意の他の実施形態またはその一部と組み合わせたその実施形態を含む。
【００９４】
本明細書で言及した全ての特許および特許出願は、各独立の特許および特許出願が参照により組み込まれることが具体的かつ個々に示されているかのように同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
2015525219.tif 000006
【国際調査報告】
2015525219.tif 000007
2015525219.tif 000008