(57)【要約】  本発明の目的は、アミノ酸を含むリファキシミン組成物に関し、この組成物は、水溶液中でリファキシミン溶解度を増大させることを特徴とする。アミノ酸を含むリファキシミン組成物は、アミノ酸及びリファキシミンが有効である疾患の治療に有用である。本発明は、リファキシミン又はその薬学的に許容可能な塩の一種と、１又は複数のアミノ酸（単数又は複数）とを、薬学的に許容可能な賦形剤とともに含む医薬組成物であって、アミノ酸（単数又は複数）とリファキシミンとのモル比が１：１〜１０：１、好ましくは１：１〜５：１である医薬組成物に関する。また、本発明は、（ａ）アミノ酸とリファキシミンとのモル比が請求項１に記載の１：１〜１０：１であるリファキシミンとアミノ酸との組成物を、体積比１：１〜１：１０（ｖ／ｖ）のエタノール／水によって形成された溶液に溶解する工程、（ｂ）前記工程（ａ）において得られた溶液を室温〜４０℃の温度で１〜１０日間蒸発させる工程を含む方法によって得られることを特徴とするリファキシミン結晶であって、得られた結晶が、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：１３．７（１）−１３．８（１）Å；ｂ：１９．７（１）−１９．９（１）Å；ｃ：１６．４（６）−１６．６（６）Å；β：９２．１（１）−９１．９（１）°に含まれる格子定数を有することを特徴とするリファキシミン結晶に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
リファキシミン又はその薬学的に許容可能な塩の一種と、１又は複数のアミノ酸（単数又は複数）とを、薬学的に許容可能な賦形剤とともに含む医薬組成物であって、アミノ酸（単数又は複数）とリファキシミンとのモル比が１：１〜１０：１、好ましくは１：１〜５：１である医薬組成物。
【請求項２】
リファキシミンが、結晶形、多形もしくは無定形、水和物もしくは溶媒和物の形態又はその混合物である請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
リファキシミンの結晶形が、
（ｉ）単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：
ａ：１３．７（１）−１３．８（１）Å；ｂ：１９．７（１）−１９．９（１）Å；ｃ：１６．４（６）−１６．６（６）Å；β：９２．１（１）−９１．９（１）°
に含まれる格子定数を有する結晶、
（ｉｉ）前記（ｉ）の特徴を有し、かつ各リファキシミン分子につき３又は４．５個の水分子を有する結晶、
（ｉｉｉ）単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：
ａ：１４．２（１）−１４．５（１）Å；ｂ：１９．７（１）−２０．１（１）Å；ｃ：１６．１（１）−１６．２（１）Å；β：１０８．７（１）−１１１．４（１）°
に含まれる格子定数を有する結晶、
（ｉｖ）前記（ｉｉｉ）の特徴を有し、かつ各リファキシミン分子につき０又は０．５又は１．５個の水分子を有する結晶、又は
（ｖ）リファキシミンα、β、γ、δ
から選択される請求項２記載の医薬組成物。
【請求項４】
リファキシミンが２０ｍｇ〜１２００ｍｇの投薬量である請求項１〜３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５】
アミノ酸（単数又は複数）が、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、複素環式アミノ酸、分岐鎖アミノ酸、環状アミノ酸、酸性アミノ酸、アミドアミノ酸又はそれらの混合物から選択される請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
組成物が少なくとも１つの芳香族又は複素環式アミノ酸を含む請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
アミノ酸（単数又は複数）が、セリン、ヒスチジン、トリプトファン、バリン、ロイシン又はイソロイシンから選択される請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項８】
アミノ酸（単数又は複数）が分岐鎖アミノ酸から選択される請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
リファキシミンと、リファキシミンに対してモル比１０：１でバリン、ロイシン又はイソロイシンとを含む請求項１〜３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
薬学的に許容可能な成分が、希釈剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、徐放性ポリマー又は生体接着性ポリマーを含む請求項１〜９のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１１】
組成物が、ヒト又は動物への投与に適した錠剤、カプセル剤、クリーム剤、懸濁剤、液剤、顆粒剤、軟膏剤又は坐剤の形態である請求項１〜１０のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１２】
組成物が、経口投与用の形態である請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１３】
腸感染、下痢、過敏性腸症候群、小腸における細菌増殖、クローン病、肝不全、肝性脳症、腸炎、線維筋肉痛の治療又は予防における使用のための請求項１〜１２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１４】
少なくとも１つのアミノ酸が、肝性脳症の治療における使用のための分岐鎖アミノ酸である請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】
以下の工程：
・リファキシミン及びアミノ酸を混合する工程、
・賦形剤を添加し、最終混合物をＶ型ミキサーで１０〜３０分間混合する工程、及び
・ローラーコンパクターで造粒する工程
を含む、請求項１〜１２のいずれかに記載の医薬組成物の調製方法。
【請求項１６】
リファキシミン及びアミノ酸を混合し、錠剤、顆粒剤、軟膏剤、クリーム剤、坐剤、液剤としての組成物を得るための賦形剤に添加する請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
４．５μｇ／ｍｌ〜６０μｇ／ｍｌのリファキシミン濃度を有する医薬組成物を得るためのアミノ酸の使用。
【請求項１８】
（ａ）アミノ酸とリファキシミンとのモル比が請求項１に記載の１：１〜１０：１であるリファキシミンとアミノ酸との組成物を、体積比１：１〜１：１０（ｖ／ｖ）のエタノール／水によって形成された溶液に溶解する工程、
（ｂ）前記工程（ａ）において得られた溶液を室温〜４０℃の温度で１〜１０日間蒸発させる工程
を含む方法によって得られることを特徴とするリファキシミン結晶であって、
得られた結晶が、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：
ａ：１３．７（１）−１３．８（１）Å；ｂ：１９．７（１）−１９．９（１）Å；ｃ：１６．４（６）−１６．６（６）Å；β：９２．１（１）−９１．９（１）°
に含まれる格子定数を有するリファキシミン結晶。
【請求項１９】
（ｉ）各リファキシミン分子につき３個の水分子、又は
（ｉｉ）各リファキシミン分子につき４．５個の水分子
を有することを特徴とする請求項１８記載のリファキシミン結晶。
【請求項２０】
脱水剤の存在下、請求項１８で得られた結晶の脱水プロセスによって得られることを特徴とするリファキシミン結晶であって、得られた結晶が、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：
ａ：１４．２（１）−１４．５（１）Å；ｂ：１９．７（１）−２０．１（１）Å；ｃ：１６．１（１）−１６．２（１）Å；β：１０８．７（１）−１１１．４（１）°
に含まれる格子定数を有するリファキシミン結晶。
【請求項２１】
（ｉ）各リファキシミン分子につき０個の水分子、又は
（ｉｉ）各リファキシミン分子につき０．５個の水分子、又は
（ｉｉｉ）各リファキシミン分子につき１．５個の水分子
を有することを特徴とする請求項２０記載のリファキシミン結晶。
【請求項２２】
（ａ）アミノ酸とリファキシミンとのモル比が請求項１に記載の１：１〜１０：１であるリファキシミンとアミノ酸との組成物を、体積比１：１〜１：１０（ｖ／ｖ）のエタノール／水によって形成された溶液に溶解する工程、
（ｂ）前記工程（ａ）において得られた溶液を室温〜４０℃の温度で１〜１０日間蒸発させる工程
を含むことを特徴とするリファキシミン結晶の製造方法であって、
得られた結晶が、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：
ａ：１３．７（１）−１３．８（１）Å；ｂ：１９．７（１）−１９．９（１）Å；ｃ：１６．４（６）−１６．６（６）Å；β：９２．１（１）−９１．９（１）°
に含まれる格子定数を特徴とする製造方法。
【請求項２３】
（ａ）アミノ酸とリファキシミンとのモル比が請求項１に記載の１：１〜１０：１であるリファキシミンとアミノ酸との組成物を、体積比１：１〜１：１０（ｖ／ｖ）のエタノール／水によって形成された溶液に溶解する工程、
（ｂ）前記工程（ａ）において得られた溶液を、脱水剤の存在下、室温〜４０℃の温度で１〜１０日間蒸発させる工程
を含むことを特徴とするリファキシミン結晶の製造方法であって、
得られた結晶が、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：
ａ：１４．２（１）−１４．５（１）Å；ｂ：１９．７（１）−２０．１（１）Å；ｃ：１６．１（１）−１６．２（１）Å；β：１０８．７（１）−１１１．４（１）°
に含まれる格子定数を有する製造方法。
【請求項２４】
単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：
ａ：１３．７（１）−１３．８（１）Å；ｂ：１９．７（１）−１９．９（１）Å；ｃ：１６．４（６）−１６．６（６）Å；β：９２．１（１）−９１．９（１）°
に含まれる格子定数を特徴とするリファキシミン結晶を得るための、モル比１：１〜１０：１のアミノ酸及びリファキシミンの使用。
【請求項２５】
単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：
ａ：１４．２（１）−１４．５（１）Å；ｂ：１９．７（１）−２０．１（１）Å；ｃ：１６．１（１）−１６．２（１）Å；β：１０８．７（１）−１１１．４（１）°
に含まれる格子定数を特徴とするリファキシミン結晶を得るための、モル比１：１〜１０：１のアミノ酸及びリファキシミンの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
リファキシミン（ＩＮＮ；メルクインデックス第１３版（The Merck Index、XIII ed.）、8304（非特許文献１）参照）は、リファマイシン由来の半合成非アミノグリコシド剤である。より正確には、リファキシミンは、イタリア国特許第１１５４６５５号明細書（特許文献１）に記載されかつ特許請求されたピリド−イミダゾ−リファマイシンであり、一方、欧州特許第０１６１５３４号明細書（特許文献２）には、リファマイシンＯを出発物質としてリファキシミンを製造する方法が記載されている。
【０００２】
化学的観点から、リファキシミンは、（Ｓ−Ｓ，１６Ｚ，１８Ｅ，２０Ｓ，２１Ｓ，２２Ｒ，２３Ｒ，２４Ｒ，２５Ｓ，２６Ｓ，２７Ｓ，２８Ｅ）−５，６，２１，２３，２５−ペンタヒドロキシ−２７−メトキシ−２，４，１１，１６，２０，２２，２４，２６−オクタメチル−２，７−（エポキシペンタデカ−［１，１１，１３］トリエンイミノ）−ベンゾフロ［４，５−ｅ］−ピリド［１，２−α］−ベンズイミダゾール−１，１５（２Ｈ）ジオン，２５−アセテートであり、図１に示される。
【０００３】
【化１】
2015522010.tif 000002
【０００４】
リファキシミンはまた、現在、商標Ｎｏｒｍｉｘ（ノルミックス）（登録商標）、Ｒｉｆａｃｏｌ（リファコール）（登録商標）及びＸｉｆａｘａｎ（キシファクサン）（登録商標）で販売されている。
【０００５】
リファキシミンは、局所作用のために通常使用される抗生物質であり、グラム陽性細菌及びグラム陰性細菌並びに好気性生物及び嫌気性生物に対する広範囲の作用を有する。リファキシミンは、優れた安全性プロファイルを有し、非全身性吸収を特徴とする。
【０００６】
リファキシミンは、非腸管侵襲性（non-enteroinvasive）細菌によって生じた腸感染、旅行者下痢症、腸炎、赤痢、腸炎症（例えば、クローン病（ＣＤ）など）、潰瘍性直腸結腸炎、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、不全症（paucities）、小腸細菌過剰増殖（ＳＩＢＯ）、憩室症候群；腸感染に直接的に又は間接的に由来する症状（例えば、肝性脳症など）の治療に使用される。リファキシミンは、手術前及び手術後の腸感染予防にも使用できる。
【０００７】
米国特許第４，５５７，８６６号明細書（特許文献３）には、リファマイシンＯと４−メチル−２−アミノピリジンとの反応を含む、ピリド−イミダゾリファキシミンの新規合成方法が記載されている。
【０００８】
欧州特許第１５５７４２１Ｂ１号明細書（特許文献４）、欧州特許第１６７６８４７Ｂ１号明細書（特許文献５）、欧州特許第１６７６８４８Ｂ１号明細書（特許文献６）及び米国特許第７，０４５，６２０Ｂ２号明細書（特許文献７）には、リファキシミンα、リファキシミンβと称されるリファキシミン（ＩＮＮ）の多形、及びリファキシミンγと称される不十分な（乏しい）結晶形が記載されている。これらの形態は、粗リファキシミン（又はリファキシミン原料（raw rifaximin））をエチルアルコール中に加熱溶解し、次いで生成物に所定の温度で水を添加することにより一定時間かけて結晶化を引き起こすことによって得ることができる。結晶化に続いて、所定の含水量が得られるまで制御条件下で乾燥工程を実施すると、そのＸ線回折プロファイルは、前述のリファキシミン形について観察されたプロファイルに対応する。
【０００９】
これらの特許には、多形β又は多形γの脱水により多形αを得ること、多形αを出発物質として多形γを得ること、及び多形αの水和により多形βを調製することなど、ある多形から別の多形へ変形するための方法も記載されている。
【００１０】
米国特許第７，９０６，５４２Ｂ２号明細書（特許文献８）には、リファキシミンの多形α、β及びγを含む医薬組成物が記載されている。
【００１１】
欧州特許第１６８２５５６Ａ２号明細書（特許文献９）には、まったく異なるin vivo吸収及び溶解プロファイルを有することを特徴とするリファキシミンの多形α、β及びγが記載されている。
【００１２】
米国特許第７，９１５，２７５Ｂ２号明細書（特許文献１０）には、リファキシミンの多形α、β及びγを含む医薬組成物を腸感染の治療のために使用することが記載されている。
【００１３】
国際公開第２００８／１５５７２８号（特許文献１１）には、無定形リファキシミンを得るための方法が記載されており、この方法は、粗リファキシミンを無水エチルアルコール中に加熱溶解し、次いで冷却により沈殿させて無定形のリファキシミンを回収することによって行われる。
【００１４】
リファキシミンの無定形及びそれを得るための方法は、米国特許出願公開第２００９／３１２３５７号明細書（特許文献１２）及び米国特許出願公開第２００９／００８２５５８号明細書（特許文献１３）に記載されている。特に、米国特許出願公開第２００９／００８２５５８号明細書（特許文献１３）には、無定形リファキシミンが、リファキシミンの有機溶媒溶液に水を添加して沈殿させた後に得られることが記載されている。
【００１５】
国際公開第２００９／１０８７３０号（特許文献１４）には、リファキシミンの多形（ζ形、γ−１（ζ）形、α−乾燥形、η形、ι形、β−１形、β−２形、ε−乾燥形）、塩、水和物及び無定形リファキシミン、医薬組成物の調製におけるそれらの使用、並びにそれらの使用に関する治療的方法が記載されている。
【００１６】
国際公開第２０１１／１５３４４４号（特許文献１５）には、リファキシミンの多形κ及びθが記載されており、国際公開第２０１１／１５６８９７号（特許文献１６）には、ＡＰＯ−１及びＡＰＯ−２と称されるリファキシミンの多形が記載されている。
【００１７】
国際公開第２００６／０９４６６２号（特許文献１７）には、経口的及び局所的使用のための医薬剤形（pharmaceutical forms）の調製に有用なリファキシミンの多形δ及びεが記載されている。前記剤形は、粗リファキシミンをエチルアルコール中で加熱溶解すること、次いで所定の温度で所定の時間水を添加すること、次いで真空乾燥することを含む方法によって得られる。
【００１８】
ヴィスコミ（Viscomi）らは、CrystEngComm, 2008, 10, 1074-1081（非特許文献２）において、リファキシミンの多形の調製方法並びにそれらの化学的、物理学的及び生物学的特性を記載している。
【００１９】
バッチ  Ａ．（Bacchi A.）らは、New Journal of Chemistry (2008), 32; 10; 1725-1735（非特許文献３）において、リファキシミンの水／エタノール溶液を室温でゆっくり蒸発させることによって８．４％（ｗ／ｗ）に相当する含水重量を有するリファキシミンβ四水和物の結晶が得られることを記載している。
【００２０】
リファキシミンは実質的に水不溶性分子であり、水溶液中の溶解度を増大させるためには有機溶媒を添加することが必要である。有機溶媒は、医薬に使用するための物質の調製においてはほとんど許容できず、その使用には、最終製品中の残存溶媒の厳格な制御が必要とされる。
【００２１】
リファキシミンの水溶解度は、適切な多形又は無定形を選択することによって、制限された濃度範囲内で変更できる。例えば、国際公開第２００５／０４４８２３号（特許文献１８）には、リファキシミン多形αが実質的に不溶性であることが記載されている一方、国際公開第２０１１／１０７９７０号（特許文献１９）には、噴霧乾燥により得られた無定形のリファキシミンが水溶液中で３０分後に約４０μｇ／ｍｌの溶解度を有するが、この無定形は安定せず、時間が経つと溶解度が減少し、２時間後には約９μｇ／ｍｌとなることが記載されている。
【００２２】
ヴィスコミ（Viscomi）らによるCrystEngComm, 2008, 10, 1074-1081（非特許文献２）に記載されるように、固体リファキシミンが存在する懸濁剤中のリファキシミン溶解度は、より安定な結晶形への変形プロセスの可能性により時間によって変動し得る。特に、実質的に無定形のリファキシミン多形の場合においても、溶解度は、より安定な結晶形で得られる値と一致するまで、時間とともに減少することが記載されている。
【００２３】
リファキシミンは局所作用性の抗生物質でもあり、医薬組成物のin-situバイオアベイラビリティは、増大した有効かつ局所的なリファキシミン濃度（例えば、胃液及び腸液などの生理学的液中の濃度）を与え、リファキシミン濃度の増大がより高い治療効果を与えることができるすべての症状を治療するために有用である。
【００２４】
当該分野において、水溶液中でリファキシミンの溶解度が増大するリファキシミンの処方物が要望されており、その理由は、従来技術によって得られるものと比較して、時間的により高く安定にリファキシミン濃度を増大させるためである。
【００２５】
アミノ酸が有効であるすべての疾患の治療のために、リファキシミン医薬組成物にアミノ酸も含ませることも必要である。肝疾患及び衰弱性疾患（debilitated disease）の治療のために、リファキシミンの抗生物質的効果とアミノ酸の効果とを結びつける必要もある。
【００２６】
医薬製剤に（例えば、患者にとって困難であると認められる不透明な懸濁剤中の顆粒剤に代えて錠剤又は透明な液剤の形態で、又は膣又は直腸使用のための組成物において）直接的に使用され、室温でリファキシミン濃度が増大される組成物を得ることも必要である。好ましくは、室温で３μｇ／ｍｌより高いリファキシミン濃度を有する組成物が得られるべきである。
【００２７】
大容量の有機溶媒を添加することなく産業的な製剤（industrial preparations）中の溶液の容量を低減するために、リファキシミン溶液のリファキシミン濃度を増大させることも好都合である。
【００２８】
特に、いくつかの腸感染の治療において、腸内で高濃度のリファキシミンの放出を促進する有効な胃抵抗性組成物が有用である。
【００２９】
従来技術において、リファキシミンは、粉末、粗形態、多形又は無定形で得ることができる。
【００３０】
従来技術において利用可能なリファキシミン誘導体の結晶特性に関する情報は、粉末Ｘ線回折技術によって得られている。利用可能なディフラクトグラム（回折図）は、粉末を形成するいくつかの微結晶の寄与の結果である。このディフラクトグラムは、いくつかの因子（例えば、結晶子の大きさ及び形態並びにサンプル容器中の分布など）によって影響されるので、同一のサンプルを分析しても、しばしば広範であり非定値の強度を有する回折シグナルを示すことがある。従って、固定層に対する含水量並びに存在可能性のある溶媒和物及び／又は水和物の正確な割合を粉末Ｘ線回折によってただ一つに帰属させることは、かなり困難であることがある。
【００３１】
一般に、結晶の大きさ及びパターンは、有効成分の粉末のいくつかの特性に影響を及ぼし得る。例えば、キアン  Ｙ．Ｈ（Kiang Y.H）らは、Int. J. Pharm. 368 (2009, 76)（非特許文献４）において、圧縮性及び流動性が結晶形態に関連する特性の一部であること、並びにこれらの特性が固形状の最終組成物の調製に影響を及ぼすことを記載している。
【００３２】
ヴィッパグンタ  Ｓ．Ｒ．（Vippagunta S.R.）らは、Adv. Drug. Del. Rev. 48 (2001), 3-26（非特許文献５）において、多形の相互変換、溶媒和プロセス、水和物形成及び結晶化度の変化に起因する各相の変化が薬物のバイオアベイラビリティを変化させることがあるので、様々な発達段階中の有効成分の結晶形の制御の関連性を記載している。
【００３３】
固体構造と薬理学的に有用な特性（例えば、バイオアベイラビリティなど）との相関性は、現在確認されている。実際に、薬物の商品化に対する認可を与えるために、保健機関は、有効成分の結晶構造を同定するための適切な分析技術、及び一貫した量の特定の多形を得るための最終製品の製造方法を要求する。
【００３４】
従って、高品質、純度及び適切な大きさを示す結晶の有用性（availability）は重要であり、かつ混合物中に存在するかもしれない単一の多形を決定するため、結晶中の分子パターンに関連する特性を決定するため、及び構造中の水又は他の溶媒分子の存在の可能性及び数を決定するためにその結晶を分析基準として用いるのに非常に有用である。
【００３５】
Ｘ線回折が単一の結晶に対して実施できるような大きさを有する結晶の有用性は、非常に関連があり、複雑な混合物中の前記多形の存在、及び多形の正確な含水量もまた、このような技術によって提供される情報のおかげで決定できる。
【００３６】
結晶構造のより良き知識は、また、再現可能な結晶性を有する化合物を得るために製造方法を修正することにも関連しており、従って、再現可能な医薬組成物の調製において結晶性に関連する特性が存在することを保証するのにも関連している。
【００３７】
特定の結晶状態における水分子の存在又は非存在が粉末ディフラクトグラムにおけるピーク位置に影響を及ぼし得ることは周知であり、リファキシミンの場合、このような位置を知ることにより、これらのディフラクトグラムをよりよく説明できる。
【００３８】
例えば、無定形化合物の定量的キャラクタリゼーションは困難である。なぜなら、特定のシグナルを与えるのではなく、ディフラクトグラムのベースラインの上昇を観察することによってのみ検出可能であるからである。従って、無定形が公知の結晶形と共に存在する場合、結晶パラメータが確立された結晶を利用して、混合物中の無定形物質の量を決定できる。
【００３９】
本発明の目的は、リファキシミンとアミノ酸との組み合わせに由来する組成物によって表され、この組成物において、アミノ酸及びリファキシミンのモル比は１：１〜１０：１であり、この組成物は、リファキシミン結晶を得ることを可能にし、医薬組成物の調製のための使用に適している。
【００４０】
本発明の目的は、リファキシミンとアミノ酸との組成物が水溶液中で可溶化され、次いで制御された乾燥プロセスを行ったときに得られるリファキシミン結晶によって表される。前記結晶は、分析基準（標準品）として有用である。本発明の目的はまた、最新技術と比較してより高いリファキシミン濃度を得るためのアミノ酸の使用である。
【００４１】
特に、アミノ酸の効果は、室温で３μｇ／ｍｌより高い水中リファキシミン濃度、及び３７℃で７μｇ／ｍｌより高い水中リファキシミン濃度を与えるほどである。
【００４２】
本発明はまた、有機溶媒を低い割合（パーセント）で含む水溶液中でのリファキシミン溶解度の増大において、アミノ酸が有機溶媒とともに相乗効果を有することを示す。
【００４３】
従って、本発明の目的であるアミノ酸の使用により、リファキシミンを有する組成物を調製でき、リファキシミン結晶を得ることができ、水溶液中のリファキシミン濃度を増大でき、及び医薬組成物を調製できる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００４４】
【特許文献１】イタリア国特許第１１５４６５５号明細書
【特許文献２】欧州特許第０１６１５３４号明細書
【特許文献３】米国特許第４，５５７，８６６号明細書
【特許文献４】欧州特許第１５５７４２１Ｂ１号明細書
【特許文献５】欧州特許第１６７６８４７Ｂ１号明細書
【特許文献６】欧州特許第１６７６８４８Ｂ１号明細書
【特許文献７】米国特許第７，０４５，６２０Ｂ２号明細書
【特許文献８】米国特許第７，９０６，５４２Ｂ２号明細書
【特許文献９】欧州特許第１６８２５５６Ａ２号明細書
【特許文献１０】米国特許第７，９１５，２７５Ｂ２号明細書
【特許文献１１】国際公開第２００８／１５５７２８号
【特許文献１２】米国特許出願公開第２００９／３１２３５７号明細書
【特許文献１３】米国特許出願公開第２００９／００８２５５８号明細書
【特許文献１４】国際公開第２００９／１０８７３０号
【特許文献１５】国際公開第２０１１／１５３４４４号
【特許文献１６】国際公開第２０１１／１５６８９７号
【特許文献１７】国際公開第２００６／０９４６６２号
【特許文献１８】国際公開第２００５／０４４８２３号
【特許文献１９】国際公開第２０１１／１０７９７０号
【非特許文献】
【００４５】
【非特許文献１】メルクインデックス第１３版（The Merck Index、XIII ed.）、8304
【非特許文献２】CrystEngComm, 2008, 10, 1074-1081
【非特許文献３】New Journal of Chemistry (2008), 32; 10; 1725-1735
【非特許文献４】Int. J. Pharm. 368 (2009, 76)
【非特許文献５】Adv. Drug. Del. Rev. 48 (2001), 3-26
【００４６】
（発明の概要）
本発明は、リファキシミン又はその薬学的に許容可能な塩の一種と、１又は複数のアミノ酸（単数又は複数）とを、薬学的に許容可能な賦形剤とともに含み、アミノ酸（単数又は複数）とリファキシミンとのモル比が１：１〜１０：１、好ましくは１：１〜５：１である医薬組成物に関し、この医薬組成物は、水溶液中でリファキシミン溶解度を増大する。
【００４７】
本発明は、さらに、以下の工程：
・リファキシミン及びアミノ酸を混合する工程、
・賦形剤を添加し、最終混合物をＶ型ミキサーで１０〜３０分間混合する工程、及び
・ローラーコンパクターで造粒する工程
を含む、前記医薬組成物の調製方法に関する。
【００４８】
本発明は、さらに、４．５μｇ／ｍｌ〜６０μｇ／ｍｌのリファキシミン濃度を有する医薬組成物を得るためのアミノ酸の使用に関する。
【００４９】
本発明は、さらに、リファキシミン結晶に関し、この結晶は、
（ａ）アミノ酸とリファキシミンとのモル比が請求項１に記載の１：１〜１０：１であるリファキシミンとアミノ酸との組成物を、体積比１：１〜１：１０（ｖ／ｖ）のエタノール／水によって形成された溶液に溶解する工程、
（ｂ）前記工程（ａ）において得られた溶液を室温〜４０℃の温度で１〜１０日間蒸発させる工程
を含む方法によって得られることを特徴とし、得られた結晶は、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：ａ：１３．７（１）−１３．８（１）Å；ｂ：１９．７（１）−１９．９（１）Å；ｃ：１６．４（６）−１６．６（６）Å；β：９２．１（１）−９１．９（１）°に含まれる格子定数を有する。
【００５０】
本発明は、さらに、リファキシミン結晶の製造方法に関し、この方法は、
（ａ）アミノ酸とリファキシミンとのモル比が請求項１に記載の１：１〜１０：１であるリファキシミンとアミノ酸との組成物を、体積比１：１〜１：１０（ｖ／ｖ）のエタノール／水によって形成された溶液に溶解する工程、
（ｂ）前記工程（ａ）において得られた溶液を室温〜４０℃の温度で１〜１０日間蒸発させる工程
を含むことを特徴とし、得られた結晶は、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：ａ：１３．７（１）−１３．８（１）Å；ｂ：１９．７（１）−１９．９（１）Å；ｃ：１６．４（６）−１６．６（６）Å；β：９２．１（１）−９１．９（１）°に含まれる格子定数を特徴とする。
【００５１】
本発明は、さらに、リファキシミン結晶の製造方法に関し、この方法は、
（ａ）アミノ酸とリファキシミンとのモル比が請求項１に記載の１：１〜１０：１であるリファキシミンとアミノ酸との組成物を、体積比１：１〜１：１０（ｖ／ｖ）のエタノール／水によって形成された溶液に溶解する工程、
（ｂ）前記工程（ａ）において得られた溶液を、脱水剤の存在下、室温〜４０℃の温度で１〜１０日間蒸発させる工程
を含むことを特徴とし、得られた結晶は、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：ａ：１４．２（１）−１４．５（１）Å；ｂ：１９．７（１）−２０．１（１）Å；ｃ：１６．１（１）−１６．２（１）Å；β：１０８．７（１）−１１１．４（１）°に含まれる格子定数を有する。
【００５２】
本発明は、さらに、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：ａ：１３．７（１）−１３．８（１）Å；ｂ：１９．７（１）−１９．９（１）Å；ｃ：１６．４（６）−１６．６（６）Å；β：９２．１（１）−９１．９（１）°に含まれる格子定数を特徴とするリファキシミン結晶を得るためのモル比１：１〜１０：１のアミノ酸及びリファキシミンの使用に関する。
【００５３】
本発明は、さらに、単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：ａ：１４．２（１）−１４．５（１）Å；ｂ：１９．７（１）−２０．１（１）Å；ｃ：１６．１（１）−１６．２（１）Å；β：１０８．７（１）−１１１．４（１）°に含まれる格子定数を特徴とするリファキシミン結晶を得るためのモル比１：１〜１０：１のアミノ酸及びリファキシミンの使用に関する。
【００５４】
本発明による医薬組成物におけるリファキシミンの結晶形は、
（ｉ）単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：ａ：１３．７（１）−１３．８（１）Å；ｂ：１９．７（１）−１９．９（１）Å；ｃ：１６．４（６）−１６．６（６）Å；β：９２．１（１）−９１．９（１）°に含まれる格子定数を有する結晶、
（ｉｉ）前記（ｉ）の特徴を有し、かつ各リファキシミン分子につき３又は４．５個の水分子を有する結晶、
（ｉｉｉ）単斜晶系空間群Ｐ２１及び以下の範囲：ａ：１４．２（１）−１４．５（１）Å；ｂ：１９．７（１）−２０．１（１）Å；ｃ：１６．１（１）−１６．２（１）Å；β：１０８．７（１）−１１１．４（１）°に含まれる格子定数を有する結晶、
（ｉｖ）前記（ｉｉｉ）の特徴を有し、かつ各リファキシミン分子につき０又は０．５又は１．５個の水分子を有する結晶、又は
（ｖ）リファキシミンα、β、γ、δ
から選択されてもよい。
【００５５】
本発明の組成物は、水和物、溶媒和物、多形、無定形もしくは結晶形またはそれらの混合物の形態でリファキシミンを含む。
【００５６】
これらの組成物は、リファキシミン治療に影響されやすい炎症性及び感染性疾患を治療及び予防するために有用である。
【００５７】
本発明の組成物は１又は複数のアミノ酸を含み、アミノ酸は、脂肪族アミノ酸、芳香族アミノ酸、塩基性アミノ酸、分岐鎖アミノ酸、環状アミノ酸、酸性アミノ酸もしくはアミドアミノ酸又はそれらの混合物である。
【００５８】
特に、本発明の組成物は、１又は複数の芳香族又は複素環式アミノ酸を含む。
【００５９】
特定の一態様において、組成物は、１又は複数の芳香族もしくは複素環式アミノ酸及び分岐鎖アミノ酸の混合物を含む。
【００６０】
本発明の医薬組成物は、２０ｍｇ〜１２００ｍｇの投与形態でリファキシミンをアミノ酸とモル比１：１〜１０：１、好ましくは１：１〜５：１で含み、これらの医薬組成物は、１日あたり２０〜３０００ｍｇの投薬量範囲で投与できる。
【００６１】
本発明の医薬組成物は、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、クリーム剤、軟膏剤、坐剤、懸濁剤又は液剤の形態であってもよい。これらの医薬組成物は、ヒト用又は動物用である。
【００６２】
本発明の医薬組成物は、アミノ酸及びリファキシミンを均一に混合した粉末の形態、又は「集塊（又は凝集体（conglomerate））」の形態で含んでもよい。用語「集塊」は、リファキシミンとアミノ酸とが付着凝集した塊の形成を引き起こすリファキシミン結晶及びアミノ酸を示す。
【００６３】
集塊は、モル比１：１〜１０：１、好ましくは１：１〜５：１のアミノ酸及びリファキシミンを、体積比５％〜２５％で有機溶媒（好ましくは、アルコール）の存在下、大気温度（ambient temperature）〜沸点の温度で水溶液中に可溶化させ、溶媒を蒸発させる場合に得られる。
【００６４】
本発明の別の態様は、リファキシミン集塊と許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物であり、これらの医薬組成物は、従来技術に対してリファキシミン溶解度が増大していることを特徴とする。
【００６５】
本発明の別の態様は、リファキシミン結晶を含むことを特徴とするリファキシミンの集塊である。
【００６６】
集塊によって得られたリファキシミン結晶は、結晶形態、特に単結晶形態であり、規定の結晶パラメータ及び含水量を特徴とする。
【００６７】
本発明の別の態様は、アミノ酸とリファキシミンとを含む医薬組成物の調製方法であり、この方法において、アミノ酸のモル比は、錠剤、顆粒剤、軟膏剤、クリーム剤、坐剤などの固形剤、液剤の調製のために１：１〜１０：１である。
【００６８】
別の態様は、リファキシミン及びアミノ酸が有効である感染及び疾患の治療のため又は予防におけるアミノ酸及びリファキシミン医薬組成物である。
【００６９】
本発明の特定の態様は、リファキシミンとアミノ酸とを含む組成物を投与することにより旅行者下痢症、肝性脳症、感染性下痢、憩室疾患，結腸手術前後の抗菌的予防、過敏性腸症候群、クローン病、クロストリジウム・ディフィシル（Clostridium difficile）関連下痢、小腸細菌過剰増殖（small intestinal overgrowth）、旅行者下痢症予防、赤痢、回腸嚢炎、消化性潰瘍疾患、外科的予防及び胃性消化不良を治療するための、アミノ酸とリファキシミンとを含む組成物である。
【００７０】
別の態様は、肝性脳症及び肝硬変疾患合併症のような肝疾患の治療において有益な分岐鎖アミノ酸を少なくとも含むアミノ酸−リファキシミン医薬組成物である。
【００７１】
本発明の医薬組成物の目的は、リファキシミンの局所濃度を増大させ、かつリファキシミンの抗生物質的効果と、患者に有益な効果を与えるアミノ酸の精力的かつ滋養的効果を兼ね備える。
【００７２】
別の態様は、少量の有機溶媒の存在下においてもリファキシミン溶解度を増大させるためのアミノ酸の使用である。
【発明を実施するための形態】
【００７３】
（発明の詳細な説明）
本発明の目的は、アミノ酸とリファキシミンとを含み、アミノ酸とリファキシミンとのモル比が、それぞれ１：１〜１０：１、好ましくは１：１〜５：１であるリファキシミン組成物によって示される。
【００７４】
組成物は、固体状又は水溶液であってもよい。
【００７５】
リファキシミンとアミノ酸とを含み、アミノ酸がリファキシミンに対して１：１〜１０：１、好ましくは１：１〜５：１のモル比である医薬組成物は、水溶液中におけるリファキシミン溶解度が、アミノ酸を含まない溶液に対して、選択したアミノ酸により室温で１．５〜２０倍、３７℃で１．１〜１０倍増大している。
【００７６】
アミノ酸の存在下でのリファキシミン溶解度の増大は、組成物がリファキシミンを粗リファキシミン、無定形リファキシミン、リファキシミン多形又はそれらの混合物の形態で含む場合に観察される。
【００７７】
アミノ酸が有機溶媒を低体積割合（特に１％〜２５％（ｖ／ｖ））で含む溶液中にある場合、リファキシミン溶解度の増大に対するアミノ酸と有機溶媒との相乗効果が観察され、その溶解度は、アミノ酸を含まない有機溶液に対して千倍まで増大し、溶液中で３０ｍｇ／ｍｌより高い濃度に到達する。
【００７８】
アミノ酸と有機溶媒との相乗効果の特性は、リファキシミンの水溶解度を増大させ、医薬組成物の製造方法にも有利である。なぜなら、有機溶媒を回避又は低減できるからである。小容量の有機溶媒の存在下でアミノ酸によって相乗効果が与えられるため、別々の溶液に比べて、より高い濃度のリファキシミン溶液を得ることができ、高いリファキシミン濃度の溶液により、集塊を得ることができる。
【００７９】
本発明のリファキシミン組成物に含まれるアミノ酸は、グリシン、アラニンなどの脂肪族アミノ酸；バリン、ロイシン、イソロイシンなどの分岐鎖アミノ酸；システイン、トレオニン、メチオニンなどのヒドロキシル基又は硫黄原子含有アミノ酸；プロリンなどの環状アミノ酸；フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファンなどの芳香族アミノ酸；ヒスチジン、リジン、アルギニンなどの塩基性アミノ酸；アスパラギン酸及びグルタミン酸などの酸性アミノ酸；及びアスパラギン及びグルタミンなどのアミドアミノ酸であってもよい。
【００８０】
異なるアミノ酸の使用により、異なる有効リファキシミン濃度がもたらされ、様々な型の疾患に対してリファキシミン溶解度を調節できる。
【００８１】
芳香族アミノ酸又は複素環含有アミノ酸によって、より高いリファキシミン溶解度が得られることが見出されている。
【００８２】
特に、トリプトファン及びヒスチジンは、より高いリファキシミン可溶化を示すことが見出されている。
【００８３】
本発明の組成物は、水和物、溶媒和物、多形、無定形又はそれらの混合物の形態のリファキシミンとアミノ酸とを含み、アミノ酸及びリファキシミンは、モル比が好ましくは１：１〜１０：１、より好ましくは１：１〜５：１であり、固体又は液体状の医薬組成物の調製のための薬学的に許容可能な賦形剤とともに使用できる。
【００８４】
ヒト及び動物において、アミノ酸は代謝中間体として重要な役割を有し、アミノ酸が食物から人体に取り込まれると、アミノ酸はいずれもタンパク質又は他の生体分子を合成するために用いられ、エネルギー源として尿素及び二酸化炭素まで酸化される。
【００８５】
アミノ酸は精力的かつ滋養的効果も有するので、関連する衰弱性疾患を伴うすべての症状の治療のためのリファキシミン含有医薬組成物におけるアミノ酸の使用は、患者に有益な効果をもたらす。
【００８６】
アミノ酸の混合物を含む組成物は本発明において記載され、特に、芳香族アミノ酸及び分岐鎖アミノ酸（ロイシン、イソロイシン及びバリンなど）を含む組成物は、リファキシミンの溶解度の増大に有用であり、肝性脳症の治療において有益である。これらの組成物は、従来技術に対して、リファキシミンをより高い濃度で利用可能にし、特に肝性脳症の治療において有利であるという効果を有する。
【００８７】
本発明の目的であるリファキシミン及びアミノ酸の組成物は、さらに、より多量のリファキシミンを可溶にする効果を有し、作用部位において有効なリファキシミンの濃度を高めるので、投与された薬物の効果及び／又は総量をより高めることができる。特に、胃抵抗性及び／又は徐放性組成物のリファキシミンへのアミノ酸の添加は、感染が局在化される腸管において、より高い濃度でのリファキシミン放出を可能にする。
【００８８】
本発明の組成物は、さらに、リファキシミン及びアミノ酸を、リファキシミンとアミノ酸との集塊の形態で含むことができる。用語「集塊」は、リファキシミンとアミノ酸との水溶液を乾燥することによって得られた固体物質を意味する。
【００８９】
医薬組成物に含まれるアミノ酸とリファキシミンとの集塊は、リファキシミンに対して１：１〜１０：１の割合の水溶液を蒸発乾燥することによって得ることができる。これらの集塊は、所望の形状を調製するための薬学的賦形剤に添加することができ、また、純粋な結晶の形態であることを特徴とする単一のリファキシミン結晶を提供する。
【００９０】
そのようにして得られたリファキシミン結晶は、分析基準（標準品）として有用である。
【００９１】
アミノ酸−リファキシミン組成物はまた、リファキシミンの集塊と許容可能な薬学的賦形剤とを含むことができ、これらの調製は、集塊を得る工程及び集塊と薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物を調製する工程を含む。
【００９２】
リファキシミン及びアミノ酸、又はリファキシミンとアミノ酸との集塊は、必要に応じて徐放剤でコーティングされた顆粒剤に含むことができ、この顆粒剤は顆粒外賦形剤（付加的な賦形剤、extragranular excipient）とともに、医薬品のために使用できる。用語「許容可能な成分」としては、ヒト又は動物への使用に関与する液体又は固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒又はカプセル材料などの薬学的に許容可能な材料、組成物又は媒体（vehicle）が挙げられる。
【００９３】
胃抵抗性又は徐放性を与えるための希釈剤、崩壊剤、滑沢剤、ポリマーは、医薬組成物の調製において有用な賦形剤に含まれる。
【００９４】
医薬組成物の調製において有用な希釈剤は、セルロース、微結晶セルロース、リン酸カルシウム、デンプン、カオリン、無水硫酸カルシウム、炭酸カルシウム、ラクトース、サッカロース、グルコース、ソルビトール、マンニトールを含む群から選択される。
【００９５】
医薬組成物の調製において有用な結合剤は、セルロース、セルロース誘導体、カルボキシメチルセルロース、微結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、デンプン、ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプン、部分アルファー化デンプン、ガム（gums）、合成ガム、天然ガム、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ポリオール、プロピレングリコール、アルギン酸塩、糖又はそれらの混合物を含む群から選択される。
【００９６】
医薬組成物の調製において有用な崩壊剤は、カルボキシメチルセルロースナトリウム（カロメロースナトリウムとも称される）、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカロメロースナトリウムとも称される）、ポリビニルピロリドン（ポビドンとも称される）、架橋ポリビニルピロリドン（クロスポビドンとも称される）、デンプン、アルファー化デンプン、シリカを含む群から選択され、滑沢剤は、ステアリン酸マグネシウム又はカルシウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、硬化植物油、鉱物油、ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリド、安息香酸ナトリウムを含む群から選択される。
【００９７】
医薬組成物を含む製剤において有用な滑沢剤は、シリカ、ステアリン酸マグネシウム又はカルシウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、硬化植物油、鉱物油、ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリド、ジベヘン酸グリセリン、ステアリン酸グリセロールを含む群から選択される。
【００９８】
徐放性を得るために適したポリマーは、合成又は天然起源であってもよい。医薬組成物の調製に適したポリマーは、メタクリル酸−アクリル酸エチル（１：１）コポリマー、メタクリル酸とアクリル酸エステル又はメタクリル酸エステルとのコポリマー［メタクリル酸−アクリル酸エチル（１：１）コポリマー及びメタクリル酸−メタクリル酸メチル（１：２）コポリマーなど］などのアクリル酸のコポリマー、ポリビニルアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート及びセルロースアセテートフタレート、市販品［例えば、商標Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ（コリコート）（登録商標）、商標Ｅｕｄｒａｇｉｔ（オイドラギット）（登録商標）、商標Ａｑｕａｔｅｒｉｃ（アクアテリック）（登録商標）、商標Ａｑｏａｔ（アコート）（登録商標）］、商標Ａｑｕａｇｏｌｄ（アクアゴールド）（登録商標）（シェラック２５％）で市販されている天然ポリマー様シェラック及びエチルセルロースを含む群から選択される。
【００９９】
医薬組成物は、腸粘膜に接着するために生体接着性又は粘膜接着性も有していてもよい。
【０１００】
生体接着性を与えることができるポリマー、オリゴマー又はそれらの混合物の例は、ペクチン、ゼイン、カゼイン、ゼラチン、アルブミン、コラーゲン、キトサン、オリゴ糖及び多糖（例えば、セルロース、デキストラン、タマリンド種子由来の多糖など）、キサンタンガム、アラビアガム、ヒアルロン酸、アルギン酸、アルギン酸ナトリウムを含む群から選択される。
【０１０１】
生体接着性ポリマーが合成ポリマーである場合、ポリマーは、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキレンテレフタレート、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリビニルピロリドン、ポリシロキサン、ポリウレタン、ポリスチレン、アクリル酸とメタクリル酸エステルとのポリマー、メタクリル酸−アクリル酸エチルのコポリマー、ポリラクチド、ポリバルビツール酸、ポリ無水物、ポリオルソエステル及びそれらの混合物の中から選択される。
【０１０２】
さらに有用なポリマーは、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、セルロースアセテート、セルロースプロピオネート、セルロースアセテートブチレート、セルロースアセテートフタレート、カルボキシメチルセルロース、セルローストリアセテート、セルロース硫酸ナトリウム塩、ポリメタクリル酸メチル、ポリアクリル酸イソブチル、ポリアクリル酸オクタデシル、ポリプロピレン、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレンテレフタレート、ポリビニルアセテート、ポリビニルクロリド、ポリスチレン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルフェノール及びそれらの混合物である。
【０１０３】
生体接着性を得ることにおいて有用なポリマーの別の群は、少なくとも１つの結合した疎水性基を含む分岐基を有するポリマーであり、疎水性基は一般に非極性基である。前記疎水性基の例としては、アルキル、アルケニル及びアルキル基が挙げられる。好ましくは、疎水性基は、ポリマーの生体接着性を増大させるために選択される。他のポリマーは、カルボン酸、スルホン酸及びホスホン酸、中性かつ正電荷を有するアミン、アミド及びイミンなどの少なくとも１つの親水性基を含む疎水性分岐基によって特徴付けられ、親水性基は、ポリマーの生体接着性を増大させるものである。
【０１０４】
リファキシミンとアミノ酸とを含む医薬組成物は、必要に応じて、甘味剤、着色剤、酸化防止剤、緩衝剤及び矯味剤も含んでいてもよい。
【０１０５】
医薬組成物の調製において有用な甘味剤（Edulcorating/sweetening agents）は、アセスルファムカリウム、ソルビトール、マンニトール、イソマルト、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、アスパルテーム、シクラミン酸、シクラミン酸塩、ラクトース、スクラロース、サッカリン及びサッカリン塩を含む群から選択される。
【０１０６】
アミノ酸−リファキシミン組成物が医薬としてヒト及び動物に投与される場合、それ自体で与えることができ、又は、例えば、０．１〜９０％の有効成分と薬学的に許容可能な担体とを組み合わせて含んでいてもよい医薬組成物として与えることもできる。
【０１０７】
リファキシミンとアミノ酸とを薬学的に許容可能な賦形剤とともに含む医薬組成物は、ヒト及び動物への投与のためにリファキシミンの顆粒剤、錠剤、カプセル剤、クリーム剤、軟膏剤、坐剤、懸濁剤又は液剤の形態であってもよい。
【０１０８】
リファキシミンとアミノ酸とを２０〜１２００ｍｇ、好ましくは１００〜６００ｍｇの量で含む医薬組成物は、旅行者下痢症、肝不全、肝性脳症、感染性下痢、憩室疾患、結腸手術前後の抗菌的予防、過敏性腸症候群、クローン病、クロストリジウム・ディフィシル関連下痢、小腸細菌過剰増殖、旅行者下痢症予防、赤痢、回腸嚢炎、消化性潰瘍疾患、外科的予防、胃性消化不良腸炎、線維筋肉痛及び膣感染の予防及び治療において有用である。
【０１０９】
医薬組成物中の有効成分の投与において実際の投薬量レベル及び期間（time course）は、被験体に毒性を有することなく、個々の被験体、組成物及び投与の様式において所望の治療的応答を達成するのに有効な有効成分の量を得るように変化させてもよい。典型的な用量範囲は、１日につき２０〜３０００ｍｇである。別の用量としては、例えば、６００ｍｇ／日、１１００ｍｇ／日及び１６５０ｍｇ／日が挙げられる。別の典型的な用量としては、例えば、１０００ｍｇ／日、１５００ｍｇ／日、５００ｍｇ〜約１８００ｍｇ／日又は任意の中間の値が挙げられる。
【０１１０】
アミノ酸投薬量は、リファキシミンに対してモル比で１〜１０、好ましくは１〜５であり、分岐鎖アミノ酸が組成物中に含まれる場合、アミノ酸投薬量は、リファキシミンに対してモル比で１〜１０である。
【０１１１】
本発明の医薬組成物は、造粒、直接圧縮（打錠）、二重圧縮（打錠）などの当該分野における種々の方法によって形成できる。好ましい実施形態において、アミノ酸がリファキシミンに対してモル比で１０：１〜５：１である本発明の医薬組成物を作製するための方法は、均質な混合物を得るためにリファキシミンとアミノ酸とを混合する工程、及び経口投与用（例えば、錠剤、粉剤、顆粒剤、パスタ剤、カプセル剤など）、非経口投与用（例えば、滅菌液又は懸濁液などの皮下、筋肉内又は静脈内注射による）、局所適用用（例えば、皮膚に適用されるクリーム剤、軟膏剤又はスプレーとして）、膣内又は直腸内用（例えば、ペッサリー、クリーム剤又は泡剤として）、又はエアゾール用の固形状又は液体状製剤のための賦形剤を添加する工程を含む。
【０１１２】
リファキシミンとアミノ酸との集塊は、リファキシミンの変形（結晶転換）なしにリファキシミンを保管でき、また、単結晶を得るためにも有用である。
【０１１３】
集塊でのリファキシミン結晶の調製は、リファキシミンとアミノ酸とを水溶液中で混合する第１工程、室温又は室温〜１００℃の温度で溶媒を完全に蒸発させる第２工程、及び大気圧又は真空下、脱水剤の存在下又は非存在下で乾燥する最終工程を含む。分析された結晶は、高純度であることを特徴とし、これらの結晶の大きさは、単結晶Ｘ線回折による構造キャラクタリゼーションに適している。結晶は平行六面体又は立方体であり、これらの結晶の大きさは、０．１〜０．３ｍｍ×０．１〜０．３ｍｍ×０．１〜０．３ｍｍである。
【０１１４】
リファキシミンとアミノ酸との組成物により、リファキシミン結晶を得ることができる。これらの結晶は、アミノ酸とリファキシミンとがモル比で１：１〜１０：１、好ましくは１：１〜５：１であるリファキシミンとアミノ酸との組成物を、水／アルコールの体積比１：１〜１０：１（ｖ／ｖ）、好ましくは５：１（ｖ／ｖ）のアルコール含有水溶液中に溶解し、溶液中のリファキシミン濃度が１５ｍｇ／ｍｌより高い場合に得られる。
【０１１５】
リファキシミン結晶は、リファキシミンとアミノ酸との前述の溶液を室温又は室温〜１００℃の温度で低蒸発させる工程、次いで可能であれば脱水剤の存在下で乾燥させる工程を含むプロセスによって得られる。分析された結晶は、高純度及び単結晶Ｘ線回折による分析に十分な大きさであることを特徴とする。
【０１１６】
前記結晶は、組成物中に含まれるリファキシミンが、単一のアミノ酸又はそれらの混合物の存在下で、粗リファキシミン、無定形リファキシミン、純粋なリファキシミン多形又はそれらの混合物である場合に得られる。
【０１１７】
リファキシミン結晶はＸ線回折技術を用いて特徴付けられており、この技術によって、格子定数及び構造細部（原子座標、連結性、距離及び結合角）を得ることができた。
【０１１８】
このように得られたリファキシミン結晶は、Ｘ線回折によって分析され、表１に示される範囲に含まれる格子定数ａ、ｂ、ｃ並びにα、β及びγを有することを特徴とする。
【０１１９】
【表１】
2015522010.tif 000003
【０１２０】
特に、リファキシミン結晶は、以下の格子定数によって特徴付けられることが見出されている：
・結晶１：ａ：１３．７９６０（８）Å；ｂ：１９．９４４（４）Å；ｃ：１６．６０７（６）Å；β：９２．１８０（１）°；α及びγ：９０°；
・結晶２：ａ：１３．７５３（８）Å；ｂ：１９．７４９（４）Å；ｃ：１６．３７８（６）Å；β：９１．９７２（１）°；α及びγ：９０°。
【０１２１】
格子定数及び構造的細部を知ることで、理論的なディフラクトグラムを計算でき、そして粉末から得られた実験値と比較できる。この比較により、表１に記載された結晶並びに結晶１及び結晶２がリファキシミンβ結晶であることがわかる。結晶１は、各リファキシミン分子につき化学量論的にわずか３個の水分子を含んでおり、リファキシミンβ３．０と称され（下付き文字は、各リファキシミン分子あたりの水分子の数を示す）；結晶２は、各リファキシミン分子につき化学量論的にわずか４．５個の水分子を含んでおり、リファキシミンβ４．５と称される。
【０１２２】
他のリファキシミン結晶は、リファキシミンとアミノ酸とを含む溶液の制御された乾燥、又は結晶リファキシミンβの直接乾燥（Ｐ２Ｏ５）によって得られており、これらの結晶の大きさは、単結晶Ｘ線回折によって分析されるのに十分な大きさである。
【０１２３】
このようにして得られたリファキシミン結晶は、Ｘ線回折によって分析され、表２に示される範囲に含まれる格子定数ａ、ｂ、ｃ並びにα、β及びγを有することを特徴とする。
【０１２４】
【表２】
2015522010.tif 000004
【０１２５】
特に、リファキシミン結晶は、以下の格子定数によって特徴付けられることが見出されている：
・結晶３：ａ：１４．２３２（４）Å；ｂ：１９．８２２（４）Å；ｃ：１６．１６４（４）Å；β：１０８．７４（３）°；α及びγ：９０°；
・結晶４：ａ：１４．５７９（４）Å；ｂ：２０．２３２（４）Å；ｃ：１６．３２９（４）Å；β：１１１．２１（３）°；α及びγ：９０°；
・結晶５：ａ：１４．４９２（４）Å；ｂ：２０．０９８（４）Å；ｃ：１６．２１５（４）Å；β：１１１．２１（３）；α及びγ：９０°。
【０１２６】
格子定数及び構造的細部を知ることで、理論的なディフラクトグラムを計算でき、そして粉末から得られた実験値と比較できる。この比較により、先に表２に記載された結晶並びに結晶３、結晶４及び結晶５がリファキシミンα結晶であることがわかる。
【０１２７】
特に、結晶３は、水分子を含んでおらず、α０と称され；結晶４は、各リファキシミン分子につき化学量論的にわずか０．５個の水分子を含んでおり、リファキシミンα０．５と称され；結晶５は、各リファキシミン分子につき化学量論的にわずか１．５個の水分子を含んでおり、リファキシミンα１．５と称される。
【０１２８】
リファキシミン単結晶は、リファキシミンとアミノ酸とを水溶液中で混合する場合に得られ、リファキシミンは、粗リファキシミン、無定形リファキシミン、リファキシミン多形又はそれらの混合物であってもよい。
【０１２９】
リファキシミン結晶はＸ線回折技術を用いて特徴付けられており、この技術によって、格子定数及び構造細部（原子座標、連結性、距離及び結合角）を得ることができる。
【０１３０】
格子定数及び構造細部に基づいて、理論的なディフラクトグラムを計算でき、そして粉末から得られた実験値と比較できる。
【０１３１】
リファキシミンとアミノ酸との集塊によって得られたリファキシミン結晶は、リファキシミンβの結晶であり、特に、各リファキシミン分子につき３個の水分子を有するβ形結晶（リファキシミンβ３．０と称される）、各リファキシミン分子につき４．５個の水分子を有するβ形結晶（リファキシミンβ４．５と称される）が得られている。
【０１３２】
他のリファキシミン結晶は、リファキシミンとアミノ酸とを含む溶液の制御された乾燥又はリファキシミンβの結晶の直接乾燥（Ｐ２Ｏ５）によって得られており、これらの結晶の大きさは、単結晶Ｘ線回折によって分析されるのに十分な大きさである。
【０１３３】
格子定数及び構造細部に基づいて、理論的なディフラクトグラムを計算でき、そして粉末から得られた実験値と比較できる。
【０１３４】
得られた結晶は、リファキシミンαであり、特に、水分子を含んでいない結晶（α０と称される）、各リファキシミン分子につき０．５個の水分子を有する結晶（α０．５と称される）、各リファキシミン分子につき１．５個の水分子を有する結晶（α１．５と称される）が得られている。
【０１３５】
リファキシミンβ４．５、β３、α１．５及びα０．５の結晶構造は、各ダイマー単位（dimer unit）につき少なくとも１個の水分子を含むことを特徴とし、この水分子は、１４位のアミド窒素との水素結合により相互作用することによって特徴付けられる。この水分子は、リファキシミン構造のわな鎖（ansa chain）に侵入する。
【０１３６】
文献に記載された微結晶粉末において、回折プロファイルは、粉末を構成する単結晶子の回折プロファイルの重ね合わせ（superimposition）によって与えられ、これらプロファイルは各々、起こり得る様々な結晶化水含有量によって特徴付けられている。従って、構造パラメータを知ることにより異なる結晶化水（結晶水）の含有量に対応するリファキシミンディフラクトグラムを計算できるという事実によって、単結晶Ｘ線回折による構造分析に適した大きさと得られたリファキシミン結晶との関連性が与えられる。
【０１３７】
従って、リファキシミン単結晶は、たとえ複雑な混合物であったとしても、リファキシミン混合物の定量的及び定性的決定のための結晶分析における分析基準（標準品）として使用でき、異なる含水量並びに表１及び２に示す範囲内の格子定数によって特徴付けられた結晶は、可変的な比率で存在する。
【０１３８】
リファキシミン結晶内の水分子の数及び位置は、単位格子のパラメータ及びＸ線ディフラクトグラムにおけるピークの位置に影響を及ぼす。得られた結晶により、たとえ複雑な混合物中にあっても、多形の存在を決定することができる。
【０１３９】
実施例２、４、６及び８に記載されるリファキシミン結晶を特徴付けるパラメータは、実験室において、ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３Å）を用いるＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ製Ｘ’ｃａｌｉｂｕｒ回折計によって、又はトリエステ（Trieste）にあるＥｌｅｔｔｒａ  ＳｙｎｃｈｒｏｔｒｏｎでのＸＲＤ１線によって得られている。
【０１４０】
リファキシミン単結晶は、複雑なリファキシミン混合物中、製造バッチ中及びリファキシミンを含む最終的な医薬組成物中のこのような多形の存在を定量的及び定性的に決定することにおいて有用であり、粉末混合物中の無定形の量を決定することにおいても有用であり得る。
【０１４１】
アミノ酸の使用はまた、リファキシミン医薬組成物を調製するための工業的方法においても有利であり、水溶液中の溶解度の増大により、使用される有機溶媒を回避又はその容量を低減する。有機溶媒の回避又は低減は、非常に重要である。なぜなら、製品がヒト又は動物に施される場合、保健機関は残存有機溶媒の厳格な制御を求めるからである。
【０１４２】
また、有機溶媒の低減によって、工業プロセスはより安全になる。なぜなら、有機溶媒が少量であるほど溶液の引火を低減するからである。
【０１４３】
本発明の他の関連する態様は、リファキシミン結晶を得ることを可能にする組成物を得るため、及び溶媒のうち水を含む溶液又は液剤中のリファキシミンの安定性を増大させるためのアミノ酸の使用によって示される。アミノ酸が存在するリファキシミン組成物において、アミノ酸は純粋であるか又は混合物であり、リファキシミンに対するモル比が１：１〜１０：１、好ましくは１：１〜５：１であり、このようなリファキシミン組成物は、選択されたアミノ酸により、水溶液中でのリファキシミンの安定性を室温で１．５〜２０倍、３７℃で１．１〜１０倍増大させる。
【０１４４】
アミノ酸存在下でのリファキシミン溶解度の増大は、単一のアミノ酸又はそれらの混合物の存在下において、粗リファキシミン、無定形リファキシミン、リファキシミンの純粋な多形又はそれらの混合物で観察される。
【０１４５】
アミノ酸は、低割合の有機溶媒存在下、特に、有機溶媒が２０％（ｖ／ｖ）以下の割合である場合、水溶液中でのリファキシミン溶解度に対して相乗効果を有することも観察されている。
【０１４６】
実施例１１に示されるように、エタノール／水の１：４（ｖ／ｖ）溶液中のリファキシミンは、４８μｇ／ｍｌの溶解度を有する。アミノ酸がリファキシミンに対するモル比１：３〜１：５でこの溶液に添加される場合、実施例２、４、６、８及び１０に示されるように、リファキシミンはほぼ千倍高い濃度で可溶化されるので、溶液中３０ｍｇ／ｍｌより高い濃度に到達する。
【０１４７】
結晶性リファキシミンの製造方法において低エタノール含量の水／エタノール溶液を使用する可能性は、プロセスの安全性の観点から有利である。実際に、前記溶液は、より高い引火性の点を有する。これは、「引火点」とも称され、液体が室内圧力で、空気とともにぱっと燃え上がり得るか又は爆発し得る混合物を形成するような量で蒸気を生成する最小温度として規定される。従って、引火点が高いほど、プロセスはより安全になる。
【０１４８】
２０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液の場合、実施例２にあるように、引火点は３６℃であり、一方、リファキシミン結晶化のための公知技術で記載されるような７０％エタノール溶液では、引火点は２１℃に低下する。
【０１４９】
また、他の利点は、低エタノール含量を有するこれらの溶液において、リファキシミンの結晶化をアミノ酸の結晶化に結びつけることができ、それにより、単一の工程で双方の結晶化及び固体状態のこれらの混合物が得られるという事実によって示される。
【０１５０】
異なるアミノ酸を用いると、有効リファキシミン濃度が異なるので、リファキシミン溶解度の調節が可能である。
【０１５１】
本発明の実施例には、懸濁剤を用意するための顆粒剤及び／又は錠剤の形態で、リファキシミンに対して異なるモル比で異なるアミノ酸を含む固体組成物の調製が記載されている。特に、リファキシミンと、リファキシミンに対して１０〜１のモル比でトリプトファン、セリン及びヒスチジンとを含む固体組成物の調製が記載されている。
【０１５２】
懸濁剤を用意するための顆粒剤又は錠剤製剤の形態の組成物が記載されており、前記顆粒剤は、徐放剤を含むか又は徐放剤でコーティングされていてもよい。
【０１５３】
組成物は、成分を混合することによって調製された錠剤の形態であってもよく、この錠剤は、コーティングフィルム又は徐放性を与えるためのフィルムでコーティングされていてもよい。
【０１５４】
本発明の実施例は、アミノ酸が組成物中に含まれている場合のリファキシミン溶解度の増大、及び少量の有機溶媒存在下でのリファキシミン可溶化におけるアミノ酸の相乗効果も実証する。
【０１５５】
実施例はまた、リファキシミン溶解度の増大におけるアミノ酸の効果が、絶食（fastly）及び食餌（feedly）条件における被験体中のリファキシミン組成物の溶解度よりも高いことを実証する。
【０１５６】
実施例１には、リファキシミンとアミノ酸との固体組成物の調製が記載されており、この調製において、異なるアミノ酸（トリプトファン、セリン及びヒスチジンなど）が、無定形又は多形αのリファキシミンに対してモル比１〜５で混合されている。
【０１５７】
実施例２には、エタノール／水の１：４（ｖ／ｖ）溶液中への実施例１の組成物Ａの可溶化を含むプロセスによるリファキシミン結晶の調製が記載されており、この調製において、リファキシミンは、４０ｍｇ／ｍｌに相当する溶液中濃度に達する。固形物（solid mass）は、集塊、リファキシミンとアミノ酸との区別可能かつ分離可能な結晶の集合体として規定でき、溶液のゆっくりとした蒸発によって得られる。
【０１５８】
実施例３には、慣用の供給元又はシンクロトロンからのＸ線回折による、実施例２から得られたリファキシミン結晶の構造キャラクタリゼーションが記載されている。構造解析によって、分析された結晶が、３個及び４．５個の水分子を有することを特徴とするリファキシミンβの結晶であることを立証できる。
【０１５９】
実施例４及び５には、エタノール／水の１：４（ｖ／ｖ）溶液中への実施例１の組成物Ｂの可溶化によって得られたリファキシミン結晶の調製及びキャラクタリゼーションが記載されており、この調製において、リファキシミンは、４０ｍｇ／ｍｌに相当する濃度に達する。
【０１６０】
実施例６及び７には、実施例１の組成物Ｃから得られたリファキシミン結晶の調製及びキャラクタリゼーションが記載されている。
【０１６１】
実施例８及び９には、実施例１の組成物Ｄから得られたリファキシミン結晶の調製及びキャラクタリゼーションが記載されている。
【０１６２】
実施例１０には、実施例２において得られたリファキシミン結晶を脱水剤の存在下で変形することによって得られたリファキシミンα結晶の調製が記載されている。同様の結果は、実施例２、４、６及び８に従って得られたリファキシミンとアミノ酸との結晶を含む固形物を脱水剤の存在下又は真空下及び室温〜４０℃の温度で乾燥することによって得ることができる。
【０１６３】
比較的な実施例１１には、アミノ酸の非存在下で、エタノール／水の１：４溶液中のリファキシミンが、４８μｇ／ｍｌの最大濃度に達することが実証されている。
【０１６４】
実施例１２は、様々な温度で、アミノ酸を含むか又は含まない水溶液中のリファキシミン溶解度の比較を示す。水溶液中のリファキシミン溶解度は、室温で約３μｇ／ｍｌであり、３７℃で約７μｇ／ｍｌであることがわかる。一方、アミノ酸の存在下では、リファキシミン溶解度は、両者の場合とも３０μｇ／ｍｌよりも高い。この結果により、リファキシミンがより有効な医薬組成物の調製が可能になる。
【０１６５】
実施例１３には、実施例２に従って調製された、アミノ酸とリファキシミン結晶との集塊として規定される固形物の溶解度が記載されており、この溶解度は、ｐＨ６．８の緩衝液中で約３０μｇ／ｍｌに相当するリファキシミン濃度に達する。
【０１６６】
これらの実施例は、本発明の目的の組成物が、アミノ酸が存在しない例と比較した場合に、適切な水中リファキシミン濃度をもたらすことを実証する。
【０１６７】
実施例１４及び１５は、比較として実施されている。これらの実施例は、有機溶媒及びアミノ酸の非存在下において、室温及び３７℃での水中及び緩衝液中のリファキシミン溶解度を測定する。
【０１６８】
実施例１４には、水中及びｐＨ４、ｐＨ７及びｐＨ１０の緩衝液中のリファキシミン溶解度が記載されており、リファキシミンが、特に生理学的水に類似のｐＨ値において、実質的に水に不溶であることを実証する。
【０１６９】
実施例１５には、リファキシミン胃抵抗性顆粒剤を含む被覆錠剤及び錠剤を、食餌前及び食餌後の腸液を模倣した溶液（空腹時人工腸液（ＦａＳＳＩＦ）及び食餌人工腸液（ＦｅＳＳＩＦ））に溶解する試験によって得られたリファキシミン溶解度が記載されている。
【０１７０】
被覆リファキシミン錠剤（Ｎｏｒｍｉｘ（登録商標））は、ＦａＳＳＩＦ溶液中で３６０分後に約８μｇ／ｍｌのリファキシミン溶解度値を示す一方、ＦｅＳＳＩＦ溶液中でのリファキシミン濃度は３６０分後に約１１μｇ／ｍｌである。
【０１７１】
胃抵抗性リファキシミン顆粒剤を含む錠剤は、ＦａＳＳＩＦ溶液中で３６０分後に約１３μｇ／ｍｌのリファキシミン溶解度を示す一方、ＦｅＳＳＩＦ溶液中でのリファキシミン濃度は３６０分後に約２０μｇ／ｍｌである。
【０１７２】
本発明の実施例は、アミノ酸がリファキシミン溶解度の増大に及ぼす効果が、胃液によって与えられる効果に勝るので、胃抵抗性及び非胃抵抗性組成物へのアミノ酸の添加により、特に食餌後において、より高いリファキシミン濃度を得ることができることを示す。
【実施例】
【０１７３】
（実施例１）
リファキシミンとアミノ酸とを含む固体組成物の調製
２００ｍｇに相当するリファキシミン量を、表３に示されるアミノ酸（ＡＡ）のそれぞれの量とともにＶ型ミキサー中で混合する。
【０１７４】
【表３】
2015522010.tif 000005
【０１７５】
得られた混合物は、リファキシミン又はアミノ酸単独を保持するために必要なものに比べて、特にさらに注意することなく室温で保持できる。
【０１７６】
（実施例２）
実施例１の組成物Ａを出発物質とするリファキシミンβの結晶の調製
体積比１：４（ｖ／ｖ）のエタノール／水の溶液５ｍｌを、実施例１の組成物Ａに添加した。次いで、この溶液を完全に溶解するまで１００℃で加熱し、そして完全に溶媒を蒸発させるために室温で４日間放置した。リファキシミン結晶とトリプトファン結晶とが同時に存在することを特徴とするリファキシミン集塊の形成が観察された。
【０１７７】
（実施例３）
実施例２で得られたリファキシミンβ３．０及びβ４．５の結晶の分析
実施例２で得られたリファキシミン結晶をアミノ酸から分離し、以下を用いるＸ線回折によって測定した：
（ａ）ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３Å）を用いるＣＣＤ領域検出器とグラファイト単色光器とを備えたＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ製Ｘ’ｃａｌｉｂｕｒ回折計；データは室温で収集した。構造は、ＷｉｎＧＸパッケージ（Ｆａｒｒｕｇｉａ，１９９９）で実行されたＳＨＥＬＸ９７プログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，２００８）を用いる直接方法によって解明した；
（ｂ）冷却システムＭＡＲＳＣＨ  ３００を用いる室温及び２９５ＫにおけるＸＲＤ１ビーム・ラインでのｓｙｎｃｈｒｏｔｒｏｎ  ＥＬＥＴＴＲＡ（トリエステ）。
【０１７８】
構造は、ＷｉｎＧＸパッケージ（Ｆａｒｒｕｇｉａ，１９９９）で実行されたＳＨＥＬＸ９７プログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，２００８）を用いて解明した。表４は、分析されたリファキシミン結晶に関する結晶パラメータを示す。
【０１７９】
【表４】
2015522010.tif 000006
【０１８０】
格子定数及び構造細部を知ることで、これらの結晶がリファキシミンβ３．０及びリファキシミンβ４．５と称されるリファキシミンβの結晶であると決定することができる。
【０１８１】
（実施例４）
実施例１の組成物Ｂを出発物質とするリファキシミン結晶の調製
体積比１：４（ｖ／ｖ）のエタノール／水の溶液５ｍｌを、実施例１の組成物Ｂに添加した。次いで、この溶液を完全に溶解するまで１００℃で加熱し、そして完全に溶媒を蒸発させるために室温で４日間放置した。リファキシミン結晶及びセリン結晶の形成が観察された。
【０１８２】
（実施例５）
実施例４で得られたリファキシミン結晶の分析
実施例４で得られたリファキシミン結晶をアミノ酸結晶から分離し、次いで、それらのうちの１つについて、ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３Å）を用いるＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ製Ｘ’ｃａｌｉｂｕｒ回折計によって、格子定数を室温で決定した。表５は、分析されたリファキシミン結晶に関する結晶パラメータを示す。
【０１８３】
【表５】
2015522010.tif 000007
【０１８４】
格子定数を知ることで、この結晶がリファキシミンβの結晶であると決定することができる。
【０１８５】
（実施例６）
実施例１の組成物Ｃを出発物質とするリファキシミン結晶の調製
体積比１：４（ｖ／ｖ）のエタノール／水の溶液５ｍｌを、実施例１の組成物Ｃに添加した。次いで、この溶液を完全に溶解するまで１００℃で加熱し、そして自然蒸発のために室温で４日間放置した。リファキシミン結晶及びヒスチジン結晶の形成が観察された。
【０１８６】
（実施例７）
実施例６で得られたリファキシミン結晶の分析
実施例６で得られたリファキシミン結晶をアミノ酸結晶から分離し、次いで、それらのうちの１つについて、ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３Å）を用いるＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ製Ｘ’ｃａｌｉｂｕｒ回折計によって、格子定数を室温で決定した。表６は、分析されたリファキシミン結晶に関する結晶パラメータを示す。
【０１８７】
【表６】
2015522010.tif 000008
【０１８８】
格子定数を知ることで、分析された結晶がリファキシミンβの結晶であると決定することができる。
【０１８９】
（実施例８）
実施例１の組成物Ｄを出発物質とするリファキシミン結晶の調製
体積比１：４（ｖ／ｖ）のエタノール／水の溶液５ｍｌを、実施例１の組成物Ｄに添加した。次いで、この溶液を完全に溶解するまで１００℃で加熱し、そして自然蒸発のために室温で４日間放置した。リファキシミン結晶及びヒスチジン結晶の形成が観察された。
【０１９０】
（実施例９）
実施例８で得られたリファキシミン結晶の分析
実施例８で得られたリファキシミン結晶をアミノ酸結晶から分離し、次いで、それらのうちの１つについて、ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３Å）を用いるＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ製Ｘ’ｃａｌｉｂｕｒ回折計によって、格子定数を室温で決定した。
【０１９１】
表７は、分析されたリファキシミン結晶に関する結晶パラメータを示す。
【０１９２】
【表７】
2015522010.tif 000009
【０１９３】
格子定数を知ることで、分析された結晶がリファキシミンβの結晶であると決定することができる。
【０１９４】
（実施例１０）
リファキシミンα０、α０．５及びα１．５の結晶の調製
実施例２で得られたリファキシミン結晶を、Ｐ２Ｏ５の存在下、室温及び室内圧力で２４時間乾燥機に入れた。
【０１９５】
リファキシミン結晶を、以下を用いるＸ線回折によって分析した：
（ａ）ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３Å）を用いるＣＣＤ領域検出器とグラファイト単色光器とを備えたＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ製Ｘ’ｃａｌｉｂｕｒ回折計；データは室温で収集した。構造は、ＷｉｎＧＸパッケージ（Ｆａｒｒｕｇｉａ，１９９９）で実行されたＳＨＥＬＸ９７プログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，２００８）を用いる直接方法によって解明した；
（ｂ）冷却システムＭＡＲＳＣＨ  ３００を用いる室温並びに１００Ｋ及び２９５ＫにおけるＸＲＤ１ビーム・ラインでのｓｙｎｃｈｒｏｔｒｏｎ  ＥＬＥＴＴＲＡ（トリエステ）。
【０１９６】
構造は、ＷｉｎＧＸパッケージ（Ｆａｒｒｕｇｉａ，１９９９）で実行されたＳＨＥＬＸ９７プログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，２００８）を用いて解明した。
【０１９７】
表８は、分析されたリファキシミン結晶に関する結晶パラメータを示す。
【０１９８】
これらの結晶は、リファキシミンαの結晶であり、かつ正確な水のモル比率を有することを特徴とする。
【０１９９】
【表８】
2015522010.tif 000010
【０２００】
実施例４、６及び８で得られたリファキシミン結晶を出発物質として同じ条件下で乾燥することにより、類似の結果が得られた。
【０２０１】
（実施例１１）
エタノール−水溶液中のリファキシミン溶解度の測定
２００ｍｇに相当するリファキシミン量を、１：４（ｖ／ｖ）のエタノール／水の溶液１０ｍｌに溶解し、２日間、攪拌しながら室温で置いた。
【０２０２】
リファキシミン校正曲線を用いる波長２７６ｎｍでの分光測光学的方法によって、リファキシミン溶解度は４８μｇ／ｍｌであると決定した。
【０２０３】
（実施例１２）
アミノ酸存在下での水溶液中のリファキシミン溶解度の測定
この実施例には、アミノ酸の存在下及び非存在下での水溶液中のリファキシミン溶解度の測定が記載される。
【０２０４】
特に、試験を表９に要約する。
・実験１は、リファキシミン２０ｍｇをｐＨ６．８のリン酸緩衝液（Ｐ．Ｂ．）中に室温で２時間入れることによって得られた溶解度の測定を記載する；
・実験２、３及び４は、リファキシミン２００ｍｇとトリプトファン、セリン及びヒスチジン１９５ｍｇ（それぞれ、リファキシミン：アミノ酸のモル比１：４、１：７．５及び１：５に相当する）とを水中に入れ、室温で２４時間、攪拌下で保持することによって得られた水中でのリファキシミンの溶解度を記載する；
・実験５〜１４は、リファキシミン２０ｇを、表９に示されるモル比で様々なアミノ酸を含むｐＨ６．８のリン酸緩衝液５００ｍｌ中に入れ、容器内で３７℃で２４時間、攪拌下で保持することによって得られた溶解度を記載する。
【０２０５】
リファキシミン溶液を濾過し、リファキシミン濃度を波長３６４ｎｍでの校正曲線分光測光法によって決定する。
【０２０６】
表９には、水中又はリン酸緩衝液中のリファキシミン単独の各参照溶液（実験１及び１４）と比較した場合の、異なるアミノ酸を含む溶液中のリファキシミン濃度の増大に関する値も示す。
【０２０７】
【表９】
2015522010.tif 000011
【０２０８】
（実施例１３）
実施例２で得られたリファキシミンとトリプトファンとの集塊の水中における溶解度の測定
実施例２で得られたリファキシミンとトリプトファンとの集塊の溶解度を、この固体６５３ｍｇを室温でｐＨ６．８のリン酸緩衝液５ｍｌ中に入れ、この溶液を２４時間攪拌下に放置することによって測定した。
【０２０９】
波長３６４ｎｍでの分光測光学的方法によって、溶液中のリファキシミン濃度は２８μｇ／ｍｌであると決定した。
【０２１０】
（実施例１４）
様々なｐＨでの水中及び緩衝液中のリファキシミン溶解度の測定（比較的な実施例）
表１０に示される各リファキシミン量を、それぞれ５０ｍｌの水、ｐＨ４のリン酸緩衝液、ｐＨ７のリン酸緩衝液及びｐＨ１０のホウ酸緩衝液中に入れることによって、リファキシミン溶解度値を測定した。
【０２１１】
窒素雰囲気中３０℃の恒温で保管した懸濁液を、２４時間攪拌下に保持した。
【０２１２】
溶液中のリファキシミン濃度の決定は、European Pharmacopeia Ed. 7.1, 04/2011、段落2362、第3459頁に記載の条件下でのクロマトグラフ法によって実施し、得られた結果を表１０に示した。
【０２１３】
【表１０】
2015522010.tif 000012
【０２１４】
（実施例１５）
胃抵抗性微粒子を含むコーティング錠及び錠剤におけるリファキシミン溶解プロファイルの決定（比較的な実施例）
リファキシミン２００ｍｇを含む市販のコーティング錠Ｎｏｒｍｉｘ（登録商標）及び胃抵抗性微粒子中にリファキシミン４００ｍｇを含む錠剤についての溶解プロファイルは、European Pharmacopoeia, Ed. 7.1、段落2.9.3、第256-263頁に記載の条件下で測定し、リファキシミンの定量的測定は、European Pharmacopoeia, Ed. 7.1, 04/2011、段落2362、第3459頁に記載の条件下で得た。
【０２１５】
Ｎｏｒｍｉｘ（登録商標）錠及び胃抵抗性微粒子でのリファキシミン錠剤の溶解プロファイルを、ｐＨ５の溶液、ｐＨ６．５の溶液、ＦａＳＳＩＦ溶液及びＦｅＳＳＩＦ溶液において測定した。
【０２１６】
ＦａＳＳＩＦ溶液は、タウロコール酸ナトリウム３ｍＭ、レシチン０．７５ｍＭ、ＮａＨ２ＰＯ４  ６５ｍＭ、ＮａＣｌ  ８５ｍＭを含み、純水を加えて１リットルにし、ｐＨは６．５である。
【０２１７】
ＦｅＳＳＩＦ溶液は、タウロコール酸ナトリウム１５ｍＭ、レシチン３．７５ｍＭ、氷酢酸１４４．０５ｍＭ、ＮａＣｌ  ２０３．１８ｍＭを含み、純水を加えて１リットルにし、ｐＨは５である。
【０２１８】
表１１に示される溶解プロファイルは、３６０分、緩衝液ｐＨ５、緩衝液ｐＨ６．５、ＦａＳＳＩＦ溶液及びＦｅＳＳＩＦ溶液において、Ｎｏｒｍｉｘ（登録商標）錠及び胃抵抗性微粒子におけるリファキシミン錠剤の２つを用いて測定した。
【０２１９】
Ｎｏｒｍｉｘ（登録商標）錠及び胃抵抗性微粒子におけるリファキシミン錠剤の２つの溶解プロファイルを、表１１に示す。
【０２２０】
【表１１】
2015522010.tif 000013
【０２２１】
（実施例１６）
リファキシミンとアミノ酸とを含む顆粒剤の調製
リファキシミン２００ｇ、アミノ酸、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒュームドシリカ及びタルクを、１６ｒｐｍの速度で１５分間、Ｖ型ミキサー中で混合した。固体混合物をローラーコンパクターに入れ、１００ｂａｒまで圧力を加えた。
【０２２２】
顆粒剤の組成を表１２に示す。
【０２２３】
【表１２】
2015522010.tif 000014
【０２２４】
このようにして得られた顆粒剤は、コーティングフィルム又は胃抵抗性フィルムでコーティングでき、懸濁剤又は錠剤製剤のために使用できる。
【０２２５】
（実施例１７）
リファキシミンとアミノ酸とを含む顆粒剤の調製
リファキシミン２００ｇ、アミノ酸、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒュームドシリカ及びタルクを、１６ｒｐｍの速度で１５分間、Ｖ型ミキサー中で混合した。固体混合物をローラーコンパクターに入れ、１００ｂａｒまで圧力を加えた。
【０２２６】
顆粒剤の組成を表１３に示す。
【０２２７】
【表１３】
2015522010.tif 000015
【０２２８】
このようにして得られた顆粒剤は、コーティングフィルム又は胃抵抗性フィルムでコーティングでき、懸濁剤又は錠剤製剤のために使用できる。
【０２２９】
（実施例１８）
アミノ酸とリファキシミンとの顆粒剤を含む包（サシェ（Sachets））の調製
実施例１６のように得られた顆粒剤を賦形剤に添加し、得られた固体混合物を分包した。１包あたりの組成を表１４に示す。
【０２３０】
【表１４】
2015522010.tif 000016
【０２３１】
（実施例１９）
リファキシミンとアミノ酸とを含む錠剤の調製
実施例１７のように調製されたリファキシミン顆粒剤を賦形剤と混合し、すべての成分をＶ型バインダー中で混合して、得られた混合物を打錠機で圧縮した。錠剤をフィルムコーティングでコーティングした。
【０２３２】
１錠あたりの組成を表１５に示す。
【０２３３】
【表１５】
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【０２３４】
賦形剤を篩にかけ、次いでリファキシミン顆粒と混合した。得られた混合物を、楕円形のロータリー式打錠機を用いて圧縮し、錠剤を得た。
【０２３５】
外観を改善しかつ風味遮蔽特性を達成するために、錠剤を慣用のパン装置を用いてコーティングした。
【０２３６】
錠剤は、胃抵抗性フィルムコーティングでもコーティングできる。
【０２３７】
（実施例２０）
リファキシミンとアミノ酸との集塊の調製
集塊Ａ：リファキシミン−トリプトファン１：４。エタノール／水の１：４（ｖ／ｖ）溶液５ｍｌを、実施例１の組成物Ａに添加した。次いで、この溶液を完全に溶解するまで１００℃で加熱し、そして完全に溶媒を蒸発させるために室温で４日間放置した。リファキシミン結晶とトリプトファン結晶とが同時に存在することを特徴とするリファキシミン集塊を得た。
【０２３８】
集塊Ｂ：リファキシミン−セリン１：３。エタノール／水の１：４（ｖ／ｖ）溶液５ｍｌを、実施例１の組成物Ｂに添加した。次いで、この溶液を完全に溶解するまで１００℃で加熱し、そして完全に溶媒を蒸発させるために室温で４日間放置した。リファキシミン集塊は、リファキシミン結晶とセリン結晶とが存在することを特徴としていた。
【０２３９】
集塊Ｃ：リファキシミン−ヒスチジン４：１。エタノール／水の１：４（ｖ／ｖ）溶液５ｍｌを、実施例１の組成物Ｃに添加した。次いで、この溶液を完全に溶解するまで１００℃で加熱し、そして自然蒸発のために室温で４日間放置した。リファキシミン結晶とヒスチジン結晶とが存在することを特徴とするリファキシミン集塊を得た。
【０２４０】
集塊Ｄ：リファキシミン−ヒスチジン４：１。エタノール／水の１：４（ｖ／ｖ）溶液５ｍｌを、実施例１の組成物Ｄに添加した。次いで、この溶液を完全に溶解するまで１００℃で加熱し、そして自然蒸発のために室温で４日間放置した。リファキシミン結晶とヒスチジン結晶とが存在することを特徴とするリファキシミン集塊を得た。
【０２４１】
（実施例２１）
リファキシミン集塊の水溶解度の測定
実施例２０に従って得られた集塊Ａの溶解度は、この固体６５３ｍｇを、室温でｐＨ６．８のリン酸緩衝液５ｍｌに入れ、この溶液を２４時間攪拌下に放置することによって測定した。
【０２４２】
溶液中のリファキシミン濃度は、波長３６４ｎｍで分光測光学的方法によって決定した。リファキシミン濃度は２８μｇ／ｍｌであった。
【国際調査報告】
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