(57)【要約】本発明は、抜歯の前に、歯の周辺の歯根膜を破壊することができるコラゲナーゼなどの薬剤を含有する組成物を抜去される歯の周辺の組織と接触させることを含む、抜歯方法に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
その必要がある対象において抜歯する方法であって、
ａ）歯の周辺の歯根膜を破壊することができる有効量の薬剤を含有する組成物を前記歯の周辺の組織に適用することと、
ｂ）前記歯を抜去することと、
を含む、方法。
【請求項２】
前記薬剤が酵素であり、前記酵素が前記歯の周辺の歯根膜でペプチド結合を切断または加水分解することができる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
抜去することが前記歯の長軸に平行して抜去力を適用することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
抜去することが回転力を適用することがない、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
適用することが前記歯の周辺の歯根膜腔の少なくとも１つの部位で接触することを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
接触することが前記組成物を歯根膜内に注射することを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記歯を抜去することが前記組成物を適用してから１５分〜３時間以内に行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記薬剤がタンパク分解酵素である、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
前記酵素がディスパーゼ、コラゲナーゼ、プロテイナーゼＫ、ヒアルロニダーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
前記酵素がコラゲナーゼである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記コラゲナーゼがＩ型コラゲナーゼ、ＩＩ型コラゲナーゼ、ＩＩＩ型コラゲナーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物がＩ型コラゲナーゼ対ＩＩ型コラゲナーゼを１対１の質量比で含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記組成物が０．０１〜３ｍＬの有効容量を有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記組成物が鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、香味料およびそれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記薬剤がコラーゲンに対する抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記対象が出血障害を伴う、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記歯を抜去する前に、有効量の失活剤を前記歯の周辺の組織に適用することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記失活剤がエチレンジアミン四酢酸である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを設置することによって前記歯を取り換えることをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
ａ）有効量のコラゲナーゼを含有する組成物を前記歯の周辺の歯根膜の複数の部位に注射することと、
ｂ）前記組成物の注射から少なくとも１５分後に前記歯を抜去することと、
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
ａ）歯の周辺の歯根膜を破壊することができる有効量の薬剤を含有する組成物を前記歯の周辺の組織に適用することと、
ｂ）前記歯を抜去する前に、前記歯の周辺の組織に有効量の失活剤を適用することと；
ｃ）前記歯を抜去することと、
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記失活剤を適用することが前記組成物を適用してから１０分〜３時間以内に行われる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記失活剤がキレート剤であり、および前記薬剤がプロテアーゼである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記薬剤がディスパーゼ、コラゲナーゼ、プロテイナーゼＫ、ヒアルロニダーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される酵素である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
前記組成物が鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、および香味料からなる群から選択される薬剤をさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
前記歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを設置することをさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
前記薬剤がコラゲナーゼである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
歯を歯科インプラントと取り換える方法であって、
ａ）有効量のコラゲナーゼを含有する組成物を歯の周辺の歯根膜に適用することと；
ｂ）前記組成物を適用してから少なくとも１５分後に前記歯を抜去することと；
ｃ）前記歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを設置することと、
を含む、方法。
【請求項２９】
適用することに前記歯の周辺の歯根膜の複数の部位に前記組成物を注射することを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記組成物が鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、および香味料からなる群から選択される薬剤をさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記歯を抜去する前に、有効量の失活剤を前記歯の周辺の組織に適用することをさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３２】
前記失活剤を適用することが前記組成物を適用してから１０分〜３時間以内に行われる、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記失活剤がエチレンジアミン四酢酸である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
抜歯用キットであって、歯の周辺の組織中への有効量の薬剤を含有する組成物を含む第１の容器と；有効量の失活剤を含有する組成物を含む第２の容器と；前記キットの各構成成分の使用と使用する順番とを収載した取扱説明書とを備える抜歯用キット。
【請求項３５】
鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、香味料およびそれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤を含む容器をさらに備える、請求項３４に記載のキット。
【請求項３６】
前記歯を抜去するための歯科手段をさらに含む、請求項３４に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抜歯の前に、コラゲナーゼなどの歯の周辺の歯根膜を破壊することができる薬剤を含む組成物と抜去する歯の周辺の組織を接触させることを含む抜歯する方法に関する。本発明は、さらに、酵素による抜歯に続いて歯科インプラントと歯を取り換える方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
抜歯のための種々の歯科処置が当技術分野で知られている。一般に、これらの方法は、歯根膜を十分に破壊して支えている歯槽骨が適切に広がり、歯が十分にゆるみ、それによってすぐに除去することができるまで、歯科用エレベーターで歯を脱臼させることを含む。歯の除去は、通常、歯根先端および測方に断続的に力を付加することによって歯科鉗子で成し遂げる。歯に容易に近づけない（例えば、歯肉線下で歯が欠けている理由で）場合、抜去するために歯に到達するためには、外科的処置を必要とすることもあり、歯を覆っている軟組織を持ち上げて、周辺の顎骨組織の一部をドリルで除去することを必要とする。
【０００３】
そのような従来の歯科処置中および処置後、一般的に、出血、体液の滲出もしくは浸出、または他の形態の体液損失が生じる。加えて、骨組織はこの処置の間、除去されるか、または損傷を受ける。その結果、腫れおよび残存している出血が治癒期間中持続する。通常、抜歯処置中の周辺組織への損傷が大きいか否かにかかわらず、これらの副作用は明白である。
【０００４】
Ｋｏｍａｔｓｕ（Ｊ．Ｂｉｏｍｅｃｈ．，４０：６３４〜６４４，２００７）は、歯−歯根膜骨側において歯根膜の応力緩和中のコラーゲン分子およびコラーゲン原線維の整列を開示している。
【０００５】
Ｋｏｍａｔｓｕら（Ｊ．Ｂｉｏｍｅｃｈ．  ４０：２７００〜２７０６，２００７；およびＪ．Ｄｅｎｔａｌ  Ｂｉｏｍｅｃｈ．，ｄｏｉ：１０．４０６／２０１０／５０２３１８）は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて、コラゲナーゼにより歯根膜コラーゲン線維で満たされているより広い領域が縮小し、コラーゲン線維の複屈折性の消失が減少し、および歯根膜検体中の歯根膜線維領域が縮小することを開示している。
【０００６】
疼痛、組織損傷および／または外傷を含む抜歯の有害な結果を最小限に抑える必要性と、処置時間の縮小および治癒期間の短縮とともに無歯領域を簡便に再構築できるようにする必要性への対応がまだなされていない。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は治療を必要とする対象に抜歯に付随するリスクを低下させる方法に関し、該方法は、歯の周辺の歯根膜を破壊することができるコラゲナーゼなどの有効量の薬剤を含む組成物の有効容量を前述の歯の歯根膜腔中に適用することと、それによって治療を必要とする対象において抜歯に付随するリスクおよび過剰な痛みを軽減することとを含む。
【０００８】
歯の周辺の歯根膜を切断することができる薬剤をその歯の周辺の組織中に局所適用することによって歯を抜去することは、一般的な方法を用いて抜歯するのに必要な力と比較して、使う必要のある力が著しく少ないという予期せぬ発見に本発明は一部、基づいている。さらに、本発明の方法は、出血の減少、歯槽変形の減少および歯槽骨への最小損傷などのその有利な特徴のために患者の抜群の快適さと、その結果による患者のコンプライアンスとを確実にする。
【０００９】
一実施形態において、本発明は治療を必要とする対象に抜歯する方法を提供し、該方法は、（ａ）歯の周辺の歯根膜を破壊することができる薬剤の有効量を含む組成物を前述の歯の周辺組織中に適用することと、（ｂ）前述の歯を抜去することとを含む。
【００１０】
別の実施形態において、薬剤は酵素であり、前述の酵素はコラーゲンペプチド結合を切断または加水分解することができる。さらに別の実施形態において、酵素はタンパク分解酵素である。さらに別の実施形態において、酵素はプロテアーゼである。さらに別の実施形態において、酵素は、コラーゲン中のペプチド結合を加水分解するか、さもなければ切断することができるタンパク分解酵素である。さらに別の実施形態において、酵素は、ディスパーゼ、コラゲナーゼ、プロテイナーゼＫ、ヒアルロニダーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。それぞれの実現性により、本発明の別々の実施形態を表す。
【００１１】
さらに別の実施形態において、組成物は、鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子および香味料からなる群から選択される薬剤をさらに含む。それぞれの実現性により、本発明の別々の実施形態を表す。
【００１２】
さらに別の実施形態において、抜歯は、前述の歯の長軸に平行して抜去力を付加することと、それによって歯の周辺組織の損傷、出血および骨喪失を最小限にすることとを含む。さらに別の実施形態において、抜歯は、回転力を付加することがない。
【００１３】
別の実施形態において、適用することには、歯の周辺の歯根膜腔で少なくとも１つの部位と接触することを含む。別の実施形態において、接触することとは、歯根膜内部に前述の組成物を注射することを含む。
【００１４】
別の実施形態において、前述の歯を抜去するステップは、前述の組成物を適用してから１５分から３時間以内に行われる。
【００１５】
さらに別の実施形態において、歯の周辺の歯根膜を破壊することができる薬剤は、コラゲナーゼである。
【００１６】
さらに別の実施形態において、歯の周辺の歯根膜を破壊することができる薬剤は、コラーゲンに対する抗体である。
【００１７】
さらに別の実施形態において、前述のコラゲナーゼは、Ｉ型コラゲナーゼ、ＩＩ型コラゲナーゼ、ＩＩＩ型コラゲナーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。それぞれの実現性により、本発明の別々の実施形態を表す。さらに別の実施形態において、前述の組成物は、Ｉ型コラゲナーゼ対ＩＩ型コラゲナーゼを１対１の質量比で含む。さらに別の実施形態において、前述の組成物は、０．０１〜３ｍＬの有効容量を有する。さらに別の実施形態において、前述の組成物は、０．１〜２ｍＬの有効容量を有する。
【００１８】
さらに別の実施形態において、治療を必要とする前述の対象は、出血障害を伴う対象である。
【００１９】
さらに別の実施形態において、方法は、前述の歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを配置することによって前述の歯を取り換えることをさらに含む。
【００２０】
さらに別の実施形態において、本発明は治療を必要とする対象において抜歯する方法を提供し、該方法は、（ａ）有効量のコラゲナーゼを含む組成物を歯の周辺の歯根膜の複数の部位に注射することと、（ｂ）前述の組成物の注射から少なくとも１５分後に前述の歯を抜去することとを含む。
【００２１】
さらに別の実施形態において、方法は、前述の歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを配置することをさらに含む。
【００２２】
さらに別の実施形態において、本発明は、歯を歯科インプラントと取り換える方法を提供し、該方法は、（ａ）有効量コラゲナーゼを含む組成物を歯の周辺の歯根膜に適用することと、（ｂ）前述の組成物を塗付してから少なくとも１５分後に前述の歯を抜去することと、（ｃ）前述の歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを配置することとを含む。
【００２３】
さらに別の実施形態において、適用することには、前述の歯の周辺の歯根膜の少なくとも１部位に前述の組成物を注射することを含む。さらに別の実施形態において、適用することには、前述の歯の周辺の歯根膜の複数の部位に前述の組成物を注射することを含む。さらに別の実施形態において、適用することには、前述の歯の周辺の歯根膜の２〜８の部位に前述の組成物を注射することを含む。
【００２４】
さらに別の実施形態において、方法は、前述の歯を抜去する前に、前述の歯の周辺の組織に有効量の失活剤を塗付することを含む。さらに別の実施形態において、前述の失活剤は、キレート剤である。
【００２５】
さらに別の実施形態において、前述の失活剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）とその誘導体である。さらに別の実施形態において、前述の失活剤は、ＥＤＴＡである。
【００２６】
さらに別の実施形態において、本発明は抜歯用のキットを提供し、該キットは前述の歯の周辺組織への有効量の薬剤を含有する組成物を含む第１の容器と、有効量の失活剤を含有する組成物を含む第２の容器と、該キットの各構成成分の使用と使用する順番とを収載した取扱説明書とを備える。
【００２７】
さらに別の実施形態において、キットは、鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、香味料およびその組み合わせからなる群から選択される薬剤を含む容器をさらに備える。
【００２８】
さらに別の実施形態において、キットは、前述の歯を抜去するための歯科手段をさらに含む。
【００２９】
さらに別の実施形態において、本発明は、治療を必要とする対象の歯の歯根膜をゆるめるための薬剤の使用を提供し、該使用は、歯の歯根膜を破壊することができる薬剤を前述の歯の周辺の前述の歯根膜に適用することと、それによって前述の歯をその歯槽に固定する歯根膜をゆるめることと含む。
【００３０】
さらに別の実施形態において、薬剤は、歯の周辺の歯根膜でのペプチド結合を切断または加水分解することができる酵素である。さらに別の実施形態において、前述の薬剤は、タンパク分解酵素である。さらに別の実施形態において、酵素は、ディスパーゼ、コラゲナーゼ、プロテイナーゼＫ、ヒアルロニダーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。さらに別の実施形態において、酵素はコラゲナーゼである。さらに別の実施形態において、前述のコラゲナーゼは、Ｉ型コラゲナーゼ、ＩＩ型コラゲナーゼ、ＩＩＩ型コラゲナーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。さらに別の実施形態において、前述の組成物は、Ｉ型コラゲナーゼ対ＩＩ型コラゲナーゼを１対１の質量比で含む。さらに別の実施形態において、前述の組成物は、０．０１〜３ｍＬの有効容量を有する。
【００３１】
さらに別の実施形態において、前述の組成物は、鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、香味料およびそれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤をさらに含む。
【００３２】
さらに別の実施形態において、歯の周辺の歯根膜を破壊することができる薬剤は、コラーゲンに対する抗体である。
【００３３】
さらに別の実施形態において、適用することには、歯の周辺の歯根膜腔の少なくとも１部位で接触することを含む。
【００３４】
さらに別の実施形態において、前述の対象は、出血障害を伴う。
【００３５】
さらに別の実施形態において、この使用には、前述の歯を抜去する前に前述の歯の周辺の組織に有効量の失活剤を塗付することをさらに含む。さらに別の実施形態において、前述の失活剤は、エチレンジアミン四酢酸である。さらに別の実施形態において、この使用は、前述の組成物を適用してから１０分から３時間後に有効量の失活剤を塗付することを含む。
【００３６】
さらに別の実施形態において、本発明の使用および方法は、治療を必要とする対象において、抜歯に付随するリスクを減少させる。
【００３７】
さらに別の実施形態において、本発明の使用および方法は、治療を必要とする対象に歯科インプラントを直ちに設置することを可能にすることによって、抜歯した歯の修復を早める。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】ブタ下顎骨の歯隙領域から得た歯肉組織のスライスを示す。
【図２】ブタ下顎骨の歯隙領域から得た歯肉組織のスライス（Ａパネル）、同スライスのＰＢＳによる３時間インキュベーション後（パネルＢ）、同スライスのＰＢＳによる２４時間インキュベーション後（パネルＣ）、または同スライスのコラゲナーゼによる３時間インキュベーション後(パネルＤ）、同スライスのコラゲナーゼによる２４時間インキュベーション後(パネルＤ）を示す。
【図３】コラーゲン変性を視覚化するために用いた実験設定のイラスト（Ａ）および代表的なスライス（Ｂ）である。
【図４】インク注入後、光学顕微鏡下で観察した固定Ｈ＆Ｅ染色組織検体（Ａ）と、ＰＢＳ注入後、ピクロシリウスレッドで染色した組織検体（Ｂ）と、または偏光顕微鏡下で観察した異なる濃度のコラゲナーゼ（Ｃ〜Ｆ）とを示す。
【図５】注入後、骨歯槽中に包埋した歯を含む、固定し、脱石灰した下顎骨検体のスライスを示す。
【図６】歯根膜内注入を図解した図である。
【図７】抜歯に要する力の量を測定するための電子装置を示す図（Ａ）である。歯の歯冠（矢印）をつかむ歯科用電子装置を示すクローズアップ図である（Ｂ）。また、下顎骨を保持する４本の調節ねじを有する２軸移動手段を示す。
【００３９】
本発明の他の目的、特徴および利点は、以下の説明から明白になろう。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
本発明は、歯槽に歯を固定する歯根膜を酵素的または生化学的に切断することによって歯または欠けた歯根の断片を抜去する方法を提供する。別の実施形態において、本方法は、歯の周辺の歯根膜を破壊することができる薬剤を含有する組成物を歯根膜腔と接触させることを含む。一実施形態において、薬剤はコラゲナーゼであり、歯根膜はコラーゲンでできているため、コラゲナーゼはコラーゲン中のペプチド結合を壊す。したがって、本発明の方法による抜歯によって、抜歯処置中に頬側−舌側方向におよび近心−遠心側方向に回転圧の力および脱臼力を付加する必要が最小限になり、また、その必要さえなくなる結果がもたらされる。
【００４１】
本明細書で用いる場合、用語「歯」とは、健康な歯、損傷を受けた歯、患歯、欠けた歯根などの歯の断片を含むがこれらに限定されないことを理解すべきである。
【００４２】
本明細書で用いる場合、用語「歯根膜」とは、一般的にＰＤＬと略され、基本的に歯のセメント質をそれが位置する歯槽骨に付着させる一群の特殊化した結合組織線維を指す。各歯根膜は、幅が０．１５〜０．３８ｍｍである。大部分がＩ型コラーゲンとＩＩＩ型コラーゲンからなるＰＤＬ線維は、それらの部位によってグループに分けられ、例えば、歯槽頂線維、水平線維、斜線維、歯根尖周囲線維、および根間線維と名付けられている。
【００４３】
歯根膜は、歯周組織の一部であり、歯の支持構造である歯の結合系に属し、歯を周辺組織に結合させて、接触や圧力を知覚できるようにするのに役立つ。歯周組織は、セメント質、歯根膜、歯槽骨および歯肉からなる。これらのうち、セメント質のみが歯の一部である。歯根膜は、歯槽骨をセメント質に結合させている。歯槽骨は、歯根を取り囲んで支持体となり、一般的に歯槽、すなわち「槽」と呼ばれるものを作っている。骨の上にあるのは、歯肉または歯茎であり、口の中で容易に見ることができる。
【００４４】
セメント質は、歯槽骨に埋め込まれている歯根の象牙質を覆う組織である。歯根内は、根管、すなわち歯髄が入っている歯髄腔であり、髄室の頂部から各根管の底まで下方に伸びて、根尖孔を経て歯周組織に通じる。歯肉より上に露出する歯の部分は、歯冠である。冠を覆っているエナメル質は、高度にミネラル化した白っぽい物質である。エナメル質の下には象牙質がある。これは顕微鏡下で見ると多孔質の硬組織である。歯の中心に位置する髄室は、主に結合組織、神経回路網および血管からなる歯髄を収容する。
【００４５】
どんな歯でも、例えば外傷に起因して、または細菌代謝物による歯の硬組織の鉱質除去（う蝕）に起因して損傷を受けるもしくは腐食し得る。腐敗が続くと、細菌は多くの場合多孔性の象牙質を通って移動して、歯髄を感染させる。次に、感染に対する免疫応答が続き、血管を拡大させて、歯に入ってくる神経を圧迫することがある。その結果が歯髄の炎症（歯髄炎）である。
【００４６】
歯に影響を及ぼす可能性がある別の病的状態は、歯周（歯肉）疾患である。歯周疾患の主因は、プラークの蓄積、すなわち歯と歯茎の上に自然に形成される細菌の目に見えない粘着性の層に起因する感染症である。プラークは細菌を含み、これによって患者の免疫系を刺激する毒素が産生される。慢性感染症中に正常に機能しない宿主反応は、歯周組織の破壊の主要な問題であり、例えば、骨吸収およびマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）活性化を誘発するプロスタグランジンＥ２などの炎症性メディエーターの過剰産生に起因する。コラーゲン中のペプチド結合を壊すタンパク質分解酵素（コラゲナーゼ）、例えばＭＭＰ−１およびＭＭＰ−８などのＭＭＰの活性化は、歯周組織の破壊につながる。最終的に、歯はゆるみ、除去しなければならないこともあり得る。
【００４７】
口腔およびその解剖学的構造に影響を及ぼすこれらや他の状態が起こる場合、介入する種々の歯科処置が知られている。これらの処置は、通常、一般の歯科医師、歯内治療医、補綴専門医、顎顔面外科医および歯周治療専門医によって行われる。
【００４８】
歯の除去または抜歯のための主要な指標は、いずれの臨床的に利用可能である歯科補綴学的方法を用いても将来再建が可能でない程度まで歯冠が損傷を受ける、または腐食する場合である。歯周（歯肉）疾患の進行のために、抜歯も必要とされることがある。歯の除去または抜歯の別の一般的な理由は、歯の存在により密集または不正咬合を生じている場合、または別の歯（例えば、智歯）の萌出を防ぐ場合、または矯正処置（「ブレース」）に備える場合である。抜歯を示す別の状態は、非治療可能な根尖周囲膿瘍である。
【００４９】
時々、歯の頂部が歯肉縁下で欠けている場合、または歯根残部が歯槽中にある場合、または抜歯を選択された歯が歯茎より上に完全に萌出していない場合、抜歯対象の歯に到達するために、覆っている歯肉と骨組織の一部を最初に除去することが必要なこともある。
【００５０】
歯への損傷が回復不能である場合、歯の除去または抜歯が必要とされることが多い。単純な抜歯中、歯科医は最初に歯科用エレベーターで歯を持ち上げて、歯科鉗子で歯をつかんで、前後に歯を揺動させる。この揺動動作は、周辺の歯槽骨に固定させた歯を保持している歯根膜線維を壊すことによって歯槽骨から歯をゆるめる。次いで、歯を歯槽から引き離し、歯槽を開けた状態で残す。
【００５１】
歯を取り換える方法としては、抜歯即時インプラント埋入が挙げられる。歯科インプラントは、歯に似た修復物を支持するために歯科医学で用いられている、通常チタン製の「歯根」装置である。即時インプラト埋入の場合、抜歯窩の壁を維持して、インプラントの一次安定性を改善するために、非外傷性抜歯が重要である。
【００５２】
歯科医学分野で周知のように、抜歯中医師によって付加される圧力は、歯槽の基礎をなしている柔らかい歯茎および歯槽骨などの隣接組織を含むがこれに限定されない組織に対して、破壊的な外傷影響を及ぼす。場合によっては、抜歯中医師によって付加される圧力は、歯冠または歯根などの歯組成を破断させ、抜歯がさらに困難になり、全般の骨損失を増大させ、かつ術後治癒時間が長くなる。本発明は、非外傷性抜歯のプロセスを容易にし、それによって機械的な抜歯処置の有害影響を防ぐ、または少なくとも減少させる。
【００５３】
一実施形態において、本発明は、治療を必要とする対象において抜歯する方法を提供し、該方法はａ）歯の周辺の歯根膜を破壊することができる薬剤の有効量を含有する組成物を前述の歯の周辺組織中に適用することと、ｂ）前述の歯を抜去することとを含む。別の実施形態において、本発明の方法は、歯茎、骨および／または血管から選択される周辺組織への外傷を最小限にすることと、抜歯に付随する疼痛を最小限にすること、および機械的処置の継続時間を最小限にすることとを含むが、これらに限定されない多数の利点をもたらす。
【００５４】
一部の実施形態によれば、周辺組織とは、抜歯される組織の周辺の組織を指し、前述の組織は歯茎、骨および／または血管から選択される。
【００５５】
特定の実施形態によれば、機械的処置の継続時間は、予測可能、再現可能かつ効率的な方法で減少する。抜歯における継続時間の減少は、当業者が容易に決定できるように、使用される酵素の量および酵素にさらされる継続時間によって決定される。
【００５６】
特定の実施形態によれば、抜歯に付随する外傷は、歯茎などの隣接組織、内在する骨板、口腔内の血管または口腔および／または顔の他の組織において明らかである。
【００５７】
本発明の方法のさらなる利点としては、骨膜エレベーターによる歯肉線維の手動による切断を含む歯肉線維の手動による切断のステップを回避することと、歯根尖端が欠けるのを防止することとが挙げられる。
【００５８】
別の実施形態において、本発明の方法は、治療を必要とする対象において、抜歯の前に歯茎および顎骨の部分を切断する必要性を最小限にすることによって抜歯に付随するリスクを減少させることに有益である。さらに、本発明の方法は、抜歯に伴う外傷を最小限にして、抜歯の前に本発明の方法において麻酔薬の投与量を減らすことを可能にする。さらに、本発明の方法は、抜歯のために無痛方法または痛みを減少させるプラットフォームを提供する。実際に、本発明の方法は、抜歯のために必要な機械的な圧力（力）が最小となる。
【００５９】
別の実施形態において、抜歯に付随するリスクとしては、とりわけ、出血、腫脹、疼痛、抜歯部位の感染（ドライソケット）、および口内の他の歯または組織（歯茎もしくは頬）への損傷が挙げられる。抜歯に付随するリスクとしては、さらに、顎骨骨折、ＴＭＪ（顎関節）の一時的もしくは永続的な損傷、口の一時的もしくは永続的なしびれ、および抜歯処置および／または麻酔による命にかかわる合併症が挙げられ得る。加えて、抜歯に付随するリスクとしては、長引く出血、紫斑、副鼻腔の露出と口腔−上顎洞の連通、神経損傷、上顎洞への歯もしくは歯の部分の変位、ドライソケット（歯槽骨炎）があり得る。
【００６０】
本発明の方法は、外傷手術に関連した心理的効果を減らすことにも効果的であることに留意されたい。加えて、本発明の方法は、全身性副作用を低下させて、個人病院での全身性易感染性患者を治療することを可能にし、および感染症および／または炎症を伴う歯に好適である。
【００６１】
本明細書で用いる場合、用語「抜歯」とは、通常、局所麻酔下で、口の中で目に見える歯で行われる単純な機械的抜歯であり、歯の目に見える部分を持ち上げおよび／またはつかむ器具の使用のみを必要とする抜歯、および例えば、歯肉線下で損傷しているか、または十分に萌出していないかのいずれかの理由で容易に到達することができない歯を除去する場合の手術を伴う抜歯が挙げられるがこれらに限定されない。
【００６２】
別の実施形態において、本発明の方法を利用する抜歯は、歯槽を覆う傷口の開いた生傷の治癒を促進させる結果をもたらす。別の実施形態において、本発明の方法を利用する抜歯は、柔軟な歯茎組織の充填を促進させる結果をもたらす。別の実施形態において、本発明の方法を利用する抜歯は、骨再形成により歯槽の閉鎖を促進させる結果をもたらす。
【００６３】
別の実施形態において、本発明は、治療を必要とする対象において前述の歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを配置する方法を提供する。別の実施形態において、治療を必要とする対象において歯科インプラントを配置する方法は、ａ）例えば、コラゲナーゼなどの歯の周りの歯根膜を切断することができる薬剤の有効量を含有する組成物を歯の周辺の歯根膜に適用するステップと、ｂ）前述の組成物を塗付してから少なくとも１５分後に前述の歯を抜去するステップと、ｃ）前述の歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを配置するステップとを含む。
【００６４】
歯科インプラントを配置する本発明の方法は、周辺の歯槽骨の骨板への損傷が最小であり、したがって配置（移植術）の成功の可能性を向上させる。さらに、本発明の方法は、いかなる支持骨増大術の必要もなく、歯科インプラント配置の実施可能性を向上させる。
【００６５】
いかなる機序または理論に束縛されるものではないが、本発明は、歯をその歯槽に固定する歯根膜をゆるめることによって、歯科医は、軽減した力および／または圧力を用いて抜歯処置を行うこととなるとの考えに基づく。本発明は、さらに、歯をその歯槽に固定する歯根膜をゆるめることによって、口腔内での組織断裂が最小限となる抜歯処置をもたらすとの考えに基づく。加えて、歯をその歯槽に固定する歯根膜（ＰＤＬ）をゆるめることによって、口腔内での出血が最小限となる抜歯処置をもたらし、および歯根膜が破損するまで歯を前後に重複して揺動させる。
【００６６】
コラゲナーゼはコラーゲンを消化する特異的な能力を有する酵素であるので、コラゲナーゼを含むまたはコラゲナーゼからなる組成物とＰＤＬを接触させることによってＰＤＬをゆるめることが達成されると思われる。コラゲナーゼは、精製後、クロストリジウムヒストリチカムによる発酵から得ることもできる。コラゲナーゼは、クロマトグラフィー技術によって精製することもできる。あるいは、コラゲナーゼは無菌化された凍結乾燥散剤として提供されてもよい。任意選択で、コラゲナーゼは１ｍＬあたり５０ＡＢＣ単位のミニマムアッセイを含む。
【００６７】
一実施形態によれば、歯の周辺の歯根膜を破壊することができる薬剤は酵素である。別の実施形態によれば、前述の酵素は、コラーゲンペプチド結合を切断または加水分解することができる。さらに別の実施形態によれば、酵素はタンパク分解酵素である。さらに別の実施形態によれば、酵素は、ディスパーゼ、コラゲナーゼ、プロテイナーゼＫ、ヒアルロニダーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。それぞれの実現性により、本発明の別々の実施形態を表す。
【００６８】
さらに別の実施形態によれば、組成物は、鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子および香味料からなる群から選択される薬剤をさらに含む。それぞれの実現性により、本発明の別々の実施形態を表す。
【００６９】
組成物は、薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤をさらに含むこともある。
【００７０】
さらに別の実施形態によれば、本発明の方法は、前述の歯を抜去する前、および歯の周辺の歯根膜を破壊することができる薬剤を塗付した後に、前述の歯の周辺組織中に有効量の失活剤を塗付することをさらに含む。さらに別の実施形態によれば、前述の失活剤はキレート剤である。
【００７１】
本明細書で用いる場合、用語「キレート剤」とは、金属酵素を失活させることができる天然薬剤または合成薬剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７２】
さらに別の実施形態によれば、前述の失活剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）またはその類似体もしくは誘導体である。さらに別の実施形態によれば、前述の失活剤はＥＤＴＡである。
【００７３】
本明細書で用いる場合、用語「その類似体もしくは誘導体」とは、好適な生物活性変異体ＥＤＴＡを含む。本発明の文脈において化学修飾とは、化学成分、基または部分による修飾が挙げられる。さらに、本明細書に記述のものなどの各特定の化合物は、本発明による同様の活性と、したがって有用性とを有する類似体もしくは誘導体のファミリー全体を生じ得る。同様に、本明細書に記述のものなどの単一化合物は、本発明による有用な化合物の大きなクラスの単一ファミリーの一員を表し得る。したがって、本発明は、本明細書に記述の化合物だけでなく、そのような化合物の類似体および誘導体、特に、当技術分野で一般的に知られている方法によって同一とみなし得る化合物、当業者にとって認識できる化合物を完全に包含する。
【００７４】
コラゲナーゼは、液体担体を含むために液体に溶かして、ＰＤＬ腔に適用する、しみこませる、または注射してもよい。適用した後、ＰＤＬ腔からコラゲナーゼ溶液の漏出の発現を最小限にするために、患者の頭部を数分間、例えば４〜１２０分間、固定して、実質的に動かないようにしてもよい。ＰＤＬ上でコラゲナーゼが作用するのに十分だが過剰にならない時間を可能にすることで、良好な臨床成果がもたらされる。
【００７５】
本発明のコラゲナーゼ組成物は、好ましくは精製された酵素の特定数の活性単位または特定質量のいずれかを混合することによって調製が可能である。コラゲナーゼは、その活性のためにしっかりと結合された亜鉛と、ゆるく結合されたカルシウムとを必要とするメタロプロテアーゼであり、および生理的条件下でコラーゲンの三重らせん領域を加水分解することによって消化することが知られている。一部の実施形態において、コラゲナーゼは、Ｉ型コラゲナーゼＡＵＸとＩ型コラゲナーゼＡＢＣおよびＩＩ型コラゲナーゼＡＵＸとＩＩ型コラゲナーゼＡＢＣと呼ばれる２つの微生物コラゲナーゼからなる。当然のことながら、用語「Ｉ型コラゲナーゼ」、「Ｉ型ＡＢＣ」、「Ｉ型ＡＵＸ」、「Ｉ型コラゲナーゼＡＵＸ」および「Ｉ型コラゲナーゼＡＢＣ」とは、同じものを意味し、かつ同義的に使用することができる。同様に、用語「ＩＩ型コラゲナーゼ」、「ＩＩ型ＡＢＣ」、「ＩＩ型ＡＵＸ」、「ＩＩ型コラゲナーゼＡＵＸ」および「ＩＩ型コラゲナーゼＡＢＣ」とは、同じ酵素を指し、同様に同義的に使用することができる。これらのコラゲナーゼは、細菌細胞によって分泌される。細菌細胞は、クロマトグラフィー法によってクロストリジウムヒストリチカム培養液上清から単離されて、精製される。両コラゲナーゼは、特別なプロテアーセであり、同じＥＣ番号（Ｅ．Ｃ３．４．２４．３）を共有する。
【００７６】
Ｉ型コラゲナーゼＡＵＸは、分子量１１５ｋＤａの約１０００個のアミノ酸からなる単一ポリペプチド鎖を有する。ＩＩ型コラゲナーゼＡＵＸも、分子量１１０ｋＤａの約１０００個のアミノ酸からなる単一ポリペプチド鎖を有する。Ｉ型コラゲナーゼＡＵＸとＩＩ型コラゲナーゼＡＵＸの領域には配列相同性があることが文献によって示されているが、２つのポリペプチドは、ウエスタンブロット解析によって示されるように免疫学的に交差反応性はないと考えられる。原薬（コラゲナーゼ濃縮物）は、Ｉ型コラゲナーゼＡＵＸ対ＩＩ型コラゲナーゼＡＵＸを約１対１の質量比で有する。コラゲナーゼ濃縮物は、１．５２８の消衰係数を有する。
【００７７】
このように、本発明のコラゲナーゼ組成物は、１または複数のコラゲナーゼ型、例えば、Ｉ型コラゲナーゼ、ＩＩ型コラゲナーゼ、ＩＩＩ型コラゲナーゼまたはそれらの組み合わせを含み得る。コラゲナーゼ組成物は、すべての型のコラゲナーゼに対して広範な特異性をさらに含み得る。他の選択肢の中で、コラゲナーゼ組成物は、Ｉ型コラゲナーゼ対ＩＩ型コラゲナーゼを１対１の質量比で、Ｉ型コラゲナーゼ対ＩＩ型コラゲナーゼを１．５〜１０対１の質量比で、Ｉ型コラゲナーゼ対ＩＩ型コラゲナーゼを１対１．５〜１０の質量比で、Ｉ型コラゲナーゼ対ＩＩ型コラゲナーゼを１対２の質量比で含むことができる。一部の実施形態において、いくつかのコラゲナーゼ型を組み合わせることで、異なるコラゲナーゼによって提供される相乗活性が向上し、優れた治療効果がもたらされる。
【００７８】
別の実施形態において、本発明のコラゲナーゼは、コラーゲンに対して相乗活性を有するＩ型コラゲナーゼとＩＩ型コラゲナーゼの組み合わせである。別の実施形態において、コラゲナーゼ活性は、合成ペプチドまたはコラーゲン基質のいずれかを加水分解する酵素の能力によって測定される。本明細書で開示されるもの以外の酵素アッセイを用いて、機能的に同等の酵素組成物を明らかにし、調製することができることを当業者は認識するであろう。
【００７９】
別の実施形態において、医薬製剤は、１または複数の薬学的に許容される担体または賦形剤とともに調製された本発明のコラゲナーゼ組成物の治療有効量を含む。
【００８０】
本明細書で用いる場合、用語「薬学的に許容される担体または賦形剤」とは、非毒性の不活性固体、半固体もしくは液体の充填剤、希釈剤、封入材料または任意のタイプの製剤補助剤を意味する。薬学的に許容される担体として役立つことができる材料の一部の例としては、ラクトース、グルコースおよびショ糖などの糖類；トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなどのデンプン類；カルボキシルメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースとその誘導体；トラガント末；モルト；ゼラチン；タルク；プロピレングリコールなどのグリコール；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエチル；寒天；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；発熱性物質非含有水；等張食塩水；リンゲル液；エチルアルコールおよび燐酸緩衝液；ならびにラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなど適合する他の非毒性潤滑剤であり、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、芳香剤、防腐剤および抗酸化剤も配合者の判断により組成物中に含むことができる。
【００８１】
本発明の医薬組成物は、局所的に、皮下に、歯根膜内に、歯肉内に、または埋め込まれたリザーバーを介して投与することができる。組成物は、ＰＤＬ腔に直接滴下注入によって注入されるまたは適用することができる。本明細書で用いる場合、用語「局所性投与」および「局所投与」は同義であり、上述した直接適用のいずれかを含み得る。
【００８２】
注射用製剤、例えば、無菌の注射用水性懸濁剤または油性懸濁剤は、好適な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いる既知の技術によって調製することができる。また、無菌注射用製剤は、薬学的に許容される非毒性希釈剤または溶媒に溶解した無菌注射剤、懸濁剤または乳剤であり得る。使用することができる許容される賦形剤および溶媒には、水、リンゲル液、注射用水（Ｕ．Ｓ．Ｐ）および等張食塩液がある。加えて、無菌不揮発性油は、溶媒または懸濁媒として従来通り用いられる。この目的で、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含みいかなる無刺激の不揮発性油でも使用され得る。加えて、オレイン酸などの脂肪酸は注射用製剤に使用される。
【００８３】
別の実施形態において、コラゲナーゼは、コラゲナーゼに対する不活性を含み、薬学的に許容される液体担体またはゲル担体に添加する。別の実施形態において、液体担体は緩衝液である。別の実施形態において、液体担体は等張液である。別の実施形態において、液体担体は、生理食塩水である。別の実施形態において、液体担体は水性ＮａＣｌ／ＣａＣｌ２緩衝液である。別の実施形態において、液体担体はデキストラン溶液である。別の実施形態において、コラゲナーゼはheptastich溶液に溶解して適用される。
【００８４】
注射製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通して濾過することによって、または使用の前に滅菌水もしくは他の無菌の注射用媒質に溶解または分散することができる無菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことによって無菌化され得る。無菌液剤は、後に使用のために凍結乾燥してもよい。
【００８５】
本発明のコラゲナーゼの投与のための剤形としては、ゲル剤、液剤またはスプレー剤が挙げられる。コラゲナーゼは、必要に応じて、薬学的に許容される担体および任意の必要な防腐剤または緩衝剤と無菌条件下で混合されてもよい。一部の実施形態において、ゲル剤は、本発明のコラゲナーゼに加えて、動物性脂肪と植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛またはそれらの混合物などの賦形剤を含む。一部の実施形態において、スプレー剤は、本発明の化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉体またはこれらの物質の混合物などの賦形剤を含む。一部の実施形態において、スプレー剤は、クロロフルオロ炭化水素などの通例の高圧ガスをさらに含む。
【００８６】
別の実施形態において、本発明のコラゲナーゼは、ラクトースで調製された凍結乾燥注射用組成物である。一実施形態において、注射用コラゲナーゼの１ミリグラムに対して、１〜４ｍｇのラクトースで調製される。別の実施形態において、注射用コラゲナーゼ１ミリグラムに対して、合成基質ｐｚＧＰＧＧＰＡを用いる効力検定法で測定された約１０００〜３０００ＳＲＣ単位および１００００〜５１０００単位である。
【００８７】
別の実施形態において、本発明のコラゲナーゼ組成物は、約６．０〜８．０のｐＨレベルで、スクロース、トリスで調製された凍結乾燥注射用組成物である。
【００８８】
別の実施形態において、本発明のコラゲナーゼ組成物は、歯根膜内注射によって投与される。別の実施形態において、本発明のコラゲナーゼ組成物は、ＰＤＬ腔中にコンピュータ制御型注射剤送達系によって投与される。別の実施形態において、コラゲナーゼ組成物は、歯肉縁下帯上に浸され、それによってＰＤＬ腔に投与される。
【００８９】
別の実施形態において、本発明のコラゲナーゼ組成物は、抗生物質、抗炎症薬、消毒薬、麻酔薬またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む。
【００９０】
別の実施形態において、本明細書で用いる場合、本発明の化合物の「治療有効量」および「有効量」という用語は、同義であり、所定の歯に固定するＰＤＬにゆるみをもたらす化合物の量をいう。一般的に、本発明の組成物の異なる量および／または濃度は、異なる歯（すなわち臼歯対切歯）に適用される。したがって、治療効果は、抜歯する特定の歯に応じて、および当業者によって評価されるように年齢（小児、成人など）および歯の状態に応じて異なる量および／または濃度で達成される。
【００９１】
しかし、当然のことながら、本発明の組成物の総投与量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定される。いかなる特定の患者のための特定の治療上有効な服用レベルでも、治療される障害および障害の重症度；使用される特定の化合物の活性；使用される特定の組成物：患者の年齢、体重、全身の健康状態、性別と食生活；使用される特定の化合物の投与時間、投与経路および排出速度；治療継続期間；使用される特定の化合物と組み合わせて、または同時に用いられる薬物を含む種々の因子、ならびに医療分野で周知の同様の因子に依存する。別の実施形態において、コラゲナーゼの量および濃度は、ＰＤＬをゆるめるのに効果的である。別の実施形態において、本明細書で用いる場合、用語「ゆるめる」とは、軟化させる、弛緩させる、または破裂させることを含む。別の実施形態において、本発明の方法は、歯と歯茎をぴったり合う状態で保持しているＰＤＬによって及ぼされる緊張を減少させる。
【００９２】
一部の実施形態において、コラゲナーゼの有効量および濃度は、担体１ｍＬ当たり少なくとも１，０００ＡＢＣ単位、担体１ｍＬ当たり少なくとも２，０００ＡＢＣ単位、担体１ｍＬ当たり少なくとも３，０００ＡＢＣ単位、担体１ｍＬ当たり２，０００〜約８，０００ＡＢＣ単位の範囲内、担体１ｍＬ当たり約３，０００〜約２５，０００ＡＢＣ単位の範囲内である。通常は、コラゲナーゼの量が低いほど、濃度を上げなければならない。したがって、２，０００ＡＢＣ単位を用いることが望ましい特定の状況の場合、８，０００〜２０，０００単位／ｍＬの濃度が望ましい。
【００９３】
別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約１ｍＬを超えない。別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約０．８ｍＬを超えない。別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約０．５ｍＬを超えない。別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約０．４ｍＬを超えない。別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約０．１ｍＬを超えない。別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約０．０５ｍＬを超えない。別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約０．０１ｍＬを超えない。別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約０．００５ｍＬを超えない。別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約０．００１ｍＬを超えない。別の実施形態において、適用／注射される組成物の総量は、約０．０００５ｍＬを超えない。
【００９４】
別の実施形態において、歯のＰＤＬ腔当たりのコラゲナーゼ組成物の総投与量（例えば、注射による）は、複数の部位と部分において、少なくとも２カ所の部位と部分において、少なくとも３カ所の部位と部分において、または少なくとも４カ所の部位と部分において適用される。さらに別の実施形態において、歯のＰＤＬ腔当たりのコラゲナーゼ組成物の総投与量は、抜歯することになる歯の周りの異なる部位で適用される。別の実施形態において、少なくとも８カ所の部分または部位が適用（例えば注射による）の対象になる。
【００９５】
別の実施形態において、抜歯することになる歯の周りの異なる部位は、互いに近接している（互いに離れている距離は２ｍｍ未満）。別の実施形態において、組成物は注射によって適用される。この場合、少容量のＰＤＬ腔内でコラゲナーゼを確実に良好に分布するためには、注射シリンジの針はＰＤＬ腔に対して急角度で挿入せず、むしろ垂直に挿入にする。
【００９６】
別の実施形態において、治療を必要とする対象は、ヒトである。別の実施形態において、対象はペット、哺乳動物または家畜である。
【００９７】
別の実施形態において、治療を必要とする対象は、抜歯を必要とする対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、う蝕によってひどい損傷を受けた少なくとも１つの歯を有する対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、歯周疾患を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、歯内治療学的にも、または手術によっても維持することができず、かつ広範な炎症（例えば、上顎洞または軟組織の炎症）または嚢胞を引き起こしている根尖性歯周病を有する少なくとも１つの歯を有する対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、外傷（歯周領域での多発骨折、縦骨折および広範囲な骨欠損）によって損傷を受けた少なくとも１つの歯を有する対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、叢生または妨げられた萌出（乳歯および永久歯は、歯科矯正上の理由から抜歯しなければならない）を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、正常咬合（挺出歯またはかなりの傾斜歯、特に以前の接触による）を維持するために、歯科補綴学的処置による治療を受ける。
【００９８】
別の実施形態において、治療を必要とする対象は、癌を伴う対象、腫瘍手術中の対象であり、少なくとも１つの歯が腫瘍領域内に位置する。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、病巣修復（神経痛の場合は、抜歯は臨床および放射線医学の所見なしで行われることが多い）を受けている対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、三叉神経痛（顔面痛）を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、病巣感染（医師は基礎疾患によって決定する）を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、心内膜炎を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、急性リウマチ熱を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、急性糸球体腎炎を伴う対象である。
【００９９】
別の実施形態において、治療を必要とする対象は、急性歯痛を患っている対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、全身的疾患（複数可）の初期および重症の炎症性合併症を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、急性感染症（膿瘍）を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、智歯抜歯の対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、矯正療法の完了前の智歯抜歯の対象である。
【０１００】
別の実施形態において、治療を必要とする対象は、出血障害を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、糖尿病を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、心疾患を伴う対象である。別の実施形態において、治療を必要とする対象は、免疫系に影響を及ぼす疾患を伴う対象である。
【０１０１】
一実施形態によれば、本発明は抜歯用のキットを提供し、該キットは前述の歯の周りの組織への有効量の薬剤を含有する組成物を含む第１の容器を含む。さらに別の実施形態によれば、該キットは、鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、香味料およびそれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤を含有するさらなる組成物をさらに含む。さらに別の実施形態によれば、該キットは、有効量の失活剤を含有する組成物をさらに含む。さらに別の実施形態によれば、該キットは、前述の歯を抜去するための歯科手段をさらに含む。さらに別の実施形態によれば、該キットは、キットの各構成成分の使用と使用する順番とを収載した取扱説明書をさらに備える。さらに別の実施形態によれば、取扱説明書は、本発明の方法によるキットの使用を記述する。
【０１０２】
さらに別の実施形態によれば、取扱説明書は、本発明の方法によるキットの使用を以下の通り記述する：（ａ）歯の周辺の歯根膜を破壊することができる有効量の薬剤を含有する組成物を抜歯する歯の周辺の組織中に適用し、および適用する前に、任意選択で、鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、香味料およびそれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤を含有する前述のさらなる組成物と前述の組成物とを混合する；（ｂ）任意選択で、前述の歯を抜去する前に、（ａ）から１５分〜３時間遅らせる；（ｃ）任意選択で、または代わりに、前述の歯を抜去する前に、前述の歯の周辺の組織中に失活剤の組成物を塗付する；および（ｄ）前述の歯を抜歯する。
【０１０３】
以下の実施例は、本発明のいくつかの実施形態をより十分に説明するために示す。しかし、これらの実施例は、本発明の広い範囲を限定するものとして決して解釈されてはならない。当業者は、本発明の範囲から逸脱することなく、本明細書に開示される原理の多くの変更および修正を容易に案出することができる。
【実施例】
【０１０４】
実施例１
コラゲナーゼによる歯肉組織のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの断片化
Ａ．ミリメートル格子を使用する寸法測定
歯肉組織は種々の大きさで容易に入手することができ、ＰＤＬと共通する多くの特性を有するので、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験の目的で歯肉組織を選択する。ＰＤＬは薄すぎてこの種の実験には脆弱である。
【０１０５】
動物の犠牲から数分以内に歯肉組織のバンド（２０×３×０．３ｍｍ３）をブタ下顎骨の歯隙領域から得た。このバンドを約５×３×０．３ｍｍ３の４つの検体に同程度にスライスした（図１および図２Ａ）。
【０１０６】
2つの検体は５４５０単位／ｍＬのコラゲナーゼＣＬＰＳＡ溶液（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＮＪ，  ＵＳＡ；図２Ｄおよび２Ｅ）を含むリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）０．５ｍＬ中で調整し、２つの試料はＰＢＳ０．５ｍＬ中で調整して（図２Ｂおよび２Ｃ）、対照として用いた。４つのすべての検体は、３７℃の水槽中、異なる時間間隔での穏やかな撹拌下でインキュベートした。
【０１０７】
ＰＢＳまたはコラゲナーゼによる３時間または２４時間インキュベーション後に、検体をミリメートル格子上に置くことによって、各検体の総量を測定し、組織分解の程度を測定した。
【０１０８】
３時間インキュベーション後、コラゲナーゼによりインキュベートした検体の量は６０％を超えて、５×３×０．１ｍｍ３まで減少した（図２Ｄ）が、コラゲナーゼによる２４時間インキュベーション後、スライスは測定不能な検体まで断片化した（図２Ｅ）ことが結果からわかる。対照検体の量は、最初の検体（図２Ａ）と比較して、ＰＢＳによる３時間または２４時間インキュベーション後（それぞれ図２Ｂおよび２Ｃ）、変化がなかった。
Ｂ．コラーゲン変性の病理組織学的試験
【０１０９】
コラーゲン変性は、ヘマトキシリン−エオジン（Ｈ＆Ｅ）染色を用いて観察することができるが、ピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）染色での偏光顕微鏡下においてより良好に可視化される。この目的で、口腔の咀嚼粘膜を含む硬口蓋からパンチ生検を採取した。図３Ａに示すように、２，５００、５，０００、７，５００または１０，０００単位／ｍＬのコラゲナーゼＣＬＰＳＡ溶液（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＮＪ，ＵＳＡ）を含有する５０μＬの量を組織の中央の口蓋ひだの隆線の真下に注入した。
【０１１０】
図３Ｂの白の水平破線の両側の星印で示すように、注入の領域を示すために、固定化の前にパンチ生検の両側にコラーゲン／ＰＢＳ／インク注入の部位と平行にインディアンインクを注入した。コラーゲン変性の領域を評価するために、各スライスに、隆線と平行な水平線によって（図３Ｂ−白の破線：表１−水平隆線）、および水平線と交差して隆線と直角をなす垂直線（図３Ｂ−黒色の線；表１−垂直隆線）で印を付けた。
【０１１１】
対照群は非処置（非注入）試料およびＰＢＳを注入した検体からなった（図４Ａおよび４Ｂ）。これらの群は、処置群の条件と同様の条件下でインキュベートした。パンチ組織検体は、ホルマリンによる固定の前に、３７℃で０、２、５、１２および２４時間ＰＢＳ中でインキュベートした。
【０１１２】
固定後、組織を整えて、パラフィンに包埋して、注入部位（インクで印を付けた）のレベルで長軸方向に切片化し、次いでヘマトキシリン＆エオシン、マッソントリクローム（ＭＴ）およびピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）で染色して、病理組織学試験に回した。処置前後の各スライスの大きさ（ｍｍ単位で）は、垂直線（表１−隆線垂直方向）に沿って、および水平線（表１−隆線水平方向）に沿って評価した。代表的な検体は、以下の通りに図４に示す：（Ａ）試料番号５６−インクのみを注入した対照、ヘマトキシリン＆エオシン染色；（Ｂ）試料番号３１− ＰＢＳを注入した対照、ピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）で染色、偏光顕微鏡下で観察した；（Ｃ）試料番号３３−コラゲナーゼ２，５００単位／ｍＬを注入、ピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）で染色、偏光顕微鏡下で観察した；（Ｄ）試料番号３５−コラゲナーゼ５，０００単位／ｍＬを注入、ピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）で染色、偏光顕微鏡下で観察した；（Ｅ）試料番号３７−コラゲナーゼ７，５００単位／ｍＬを注入、ピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）で染色、偏光顕微鏡下で観察した；および（Ｆ） 試料番号３９−コラゲナーゼ１０，０００単位／ｍＬを注入、ピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）で染色、偏光顕微鏡下で観察した。
【０１１３】
処置から２時間および５時間後の組織構造をそれぞれ表１および２にまとめる。
【０１１４】
病理検査では、対照群と比較して、処置検体のすべてにおいて用量依存的様式で大きなコラーゲン溶解が認められた。図４に示し、さらに表１および２に記載するように、歯肉組織変性の領域は、薄いコラーゲン線維束を淡い染色で、脂肪組織細胞膜を淡い染色で、および小動脈壁の過好酸球増加と粒状度によって示した。変性の最も大きな領域は、７，５００単位／ｍＬのコラーゲンで処置した試料で観察された(図４Ｅ）。対照試料（それぞれ図４Ａおよび４Ｂ）は、正常範囲内であった。
【０１１５】
【表１】
2015521169.tif 000002
【０１１６】
【表２】
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【０１１７】
実施例２
歯根膜内注射量のｅｘ−ｖｉｖｏでの評価
特定の切片で処置する歯の長さおよび歯根膜の幅に関する実験の所見に基づいて評価を行った。このデータを用いて、ＰＤＬの推定量を算出した。次いで、この推定量を臨床的に再評価した。
【０１１８】
インディアンインクを下顎骨の第３切歯および第１小臼歯のＰＤＬの６ポイントに注入した。色素の漏れが生じた注入量によってエンドポイントを決定した。６箇所の注入ポイントの各々で最適量を２０μＬとして決定した。
【０１１９】
実施例３
コラゲナーゼ注入後のＰＤＬの断片化
歯肉構造ではなく、ＰＤＬ構造を評価するために、下顎骨の両側の第３切歯と第１小臼歯およびこれらの周辺の組織を異なる濃度（２，５００、５，０００、７，５００または１０，０００単位／ｍＬ）で酵素注入（６ポイントで２０μＬ）を行った。注入から２時間後、下顎骨を切断して、関連する歯の周りを整え、骨槽に埋まった歯を残し、次いでホルマリンで固定した。検体を５〜６日間脱灰し、次いで整えて（図５）、パラフィンに包埋して、歯の長軸にそって切片化した。
【０１２０】
歯根の異なる切片でのＰＤＬコラーゲン線維束の分解および周辺組織の構造の完全性（固有歯槽）を検査するために、切片をヘマトキシリン＆エオシンおよびピクロシリウスレッドで染色して、病理組織学試験に回した。ＰＢＳを注入した、または注入しなかった検体を対照として用いた。
【０１２１】
コラゲナーゼ処置後にＰＤＬの断片化を観察した。
【０１２２】
実施例４
Eｘ  ｖｉｖｏでの抜歯
動物を犠牲にしてから４時間後に下顎骨両側の第３切歯および第１小臼歯を採取して、例えば図６に示すように、異なる濃度（２，５００、５，０００、７，５００または１０，０００単位／ｍＬ）で歯根膜内酵素注入（６ポイントで２０μＬ）を行った。注入から２時間後、回転力を付加することなく、歯の長軸に沿って標準抜歯鉗子を使用して歯を抜去した。抜去の容易さを対照（非注入群およびＰＢＳ注入群）歯と比較して、決定した。
【０１２３】
付加力をｋｇｆ単位で測定する抜歯用電子装置を用いて、抜去で必要とする力の量を測定した（図７Ａ〜７Ｂ）．この装置を使用して、ネジで締めた抜歯鉗子で歯の頂部をしっかりと保持した。下顎骨は、４本の調整ネジで下顎骨を保持することができる２つの軸手段で別々に保持した。下顎骨は、歯根の長軸に沿って力を付加することによって抜去できるよう、すなわち骨／歯槽から上方向に歯を引き離すように配置した。
【０１２４】
コラゲナーゼ溶液（1０，０００単位／ｍＬ）を注入した手操作による抜歯は、著しく容易であり、すなわち、非処置の歯を抜去するために必要とした力よりも、必要とする力は著しく少なかった。さらに、処置歯を一塊として抜去したが、非処置歯は抜去中いくつかの歯冠が壊れた。
【０１２５】
実施例５
Iｎ  ｖｉｖｏでの抜歯
６月齢の飼育ブタに対して麻酔をかける。有効量のコラゲナーゼを含有する組成物の一連の歯根膜内注射を歯の周りの６部位に投与する。コラゲナーゼ歯根膜内注射から約３０分後に、部位をＥＤＴＡで洗浄する。
【０１２６】
歯の長軸に沿って力を使い、回転力を使うことなく、歯を骨槽から上向きに引き離すことによって歯を抜去する。抜去は抜歯鉗子またはエレベーターを使用して行う。抜去する歯に向かって凹面側で、エレベーターを近心または遠心のＰＤＬ腔中に挿入する。顔面に向かって歯を動かすようにエレベーターを回転させる。
【０１２７】
歯を適切に持ち上げてから、歯を脱臼させて抜去する。
【０１２８】
抜去で必要とした力の量は、抜歯装置を用いて評価する。結果を非処置歯の抜去で必要とした力と比較する。
【０１２９】
実施例６
歯槽の保存
歯を取り換える場合、骨および付随する軟組織は重要な検討事項である。インプラントを配置する場合、取り付け具用に十分な骨が必要であり、歯肉組織を正しく処置することは審美的に好ましい結果をもたらすために不可欠である。骨損失が激しい場合、取り外し可能な義歯（ＲＤＰ）を考慮する必要がある。
【０１３０】
本発明の非外傷性抜歯方法を適用すると、切歯抜去部位の治癒継続期間が少なくとも５０％縮小する。さらに、抜歯後最初の６ヵ月以内では歯槽隆線の高さおよび幅に明白な減少が見られない。隣接した近心および遠位の歯の表面に付随する骨は、その骨の元の横寸法である。このように、歯槽の保存は得られる。したがって、ＰＤＬ腔をコラゲナーゼで処置することによって、歯槽保存を向上させ、それによって歯科インプラントを効率よく移植する機会が上昇する。
【０１３１】
前述の特定の実施形態の説明は、本発明の要領を十分に明らかにしているので、現在の知識を応用することによって種々の用途を目的として過度の実験を実施することなく、および上位概念から逸脱することなくそのような特定の実施形態を容易に修正および／または適合させることができる。したがって、そのような適合および修正は、開示される実施形態の均等物の意味および範囲内で理解されなければならず、かつ理解されることを意図する。本明細書で使用する語法または用語は、説明を目的としており、限定するものではないことを理解すべきである。種々の開示した機能を実施する手段、材料およびステップは、本発明を逸脱することなく種々の代替形態を取り得る。
【図１】
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【図２Ａ−２Ｅ】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図４Ｅ】
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【図４Ｆ】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【手続補正書】
【提出日】平成26年11月5日(2014.11.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０１】
一実施形態によれば、本発明は抜歯用のキットを提供し、該キットは前述の歯の周りの組織への、歯の周辺の歯根膜を破壊することができる有効量の薬剤を含有する組成物を含む第１の容器を含む。さらに別の実施形態によれば、該キットは、鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、香味料およびそれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤を含有するさらなる組成物をさらに含む。さらに別の実施形態によれば、該キットは、有効量の失活剤を含有する組成物をさらに含む。さらに別の実施形態によれば、該キットは、前述の歯を抜去するための歯科手段をさらに含む。さらに別の実施形態によれば、該キットは、キットの各構成成分の使用と使用する順番とを収載した取扱説明書をさらに備える。さらに別の実施形態によれば、取扱説明書は、本発明の方法によるキットの使用を記述する。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
その必要がある対象において抜歯する方法であって、
ａ）歯の周辺の歯根膜を破壊することができる有効量の薬剤を含有する組成物を前記歯の周辺の組織に適用することと、
ｂ）前記歯を抜去することと、
を含む、方法。
【請求項２】
前記薬剤が酵素であり、前記酵素が前記歯の周辺の歯根膜でペプチド結合を切断または加水分解することができる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
抜去することが前記歯の長軸に平行して抜去力を適用することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
抜去することが回転力を適用することがない、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
適用することが前記歯の周辺の歯根膜腔の少なくとも１つの部位で接触することを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
接触することが前記組成物を歯根膜内に注射することを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記歯を抜去することが前記組成物を適用してから１５分〜３時間以内に行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記薬剤がタンパク分解酵素である、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
前記酵素がディスパーゼ、コラゲナーゼ、プロテイナーゼＫ、ヒアルロニダーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項１０】
前記酵素がコラゲナーゼである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記コラゲナーゼがＩ型コラゲナーゼ、ＩＩ型コラゲナーゼ、ＩＩＩ型コラゲナーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物がＩ型コラゲナーゼ対ＩＩ型コラゲナーゼを１対１の質量比で含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記組成物が０．０１〜３ｍＬの有効容量を有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記組成物が鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、香味料およびそれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記薬剤がコラーゲンに対する抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記対象が出血障害を伴う、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記歯を抜去する前に、有効量の失活剤を前記歯の周辺の組織に適用することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記失活剤がエチレンジアミン四酢酸である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを設置することによって前記歯を取り換えることをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
ａ）有効量のコラゲナーゼを含有する組成物を前記歯の周辺の歯根膜の複数の部位に注射することと、
ｂ）前記組成物の注射から少なくとも１５分後に前記歯を抜去することと、
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
ａ）歯の周辺の歯根膜を破壊することができる有効量の薬剤を含有する組成物を前記歯の周辺の組織に適用することと、
ｂ）前記歯を抜去する前に、前記歯の周辺の組織に有効量の失活剤を適用することと；
ｃ）前記歯を抜去することと、
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記失活剤を適用することが前記組成物を適用してから１０分〜３時間以内に行われる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記失活剤がキレート剤であり、および前記薬剤がプロテアーゼである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記薬剤がディスパーゼ、コラゲナーゼ、プロテイナーゼＫ、ヒアルロニダーゼおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される酵素である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
前記組成物が鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、および香味料からなる群から選択される薬剤をさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
前記歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを設置することをさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
前記薬剤がコラゲナーゼである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
歯を歯科インプラントと取り換える方法であって、
ａ）有効量のコラゲナーゼを含有する組成物を歯の周辺の歯根膜に適用することと；
ｂ）前記組成物を適用してから少なくとも１５分後に前記歯を抜去することと；
ｃ）前記歯を抜去した後に得られた窩に歯科インプラントを設置することと、
を含む、方法。
【請求項２９】
適用することに前記歯の周辺の歯根膜の複数の部位に前記組成物を注射することを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記組成物が鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、および香味料からなる群から選択される薬剤をさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記歯を抜去する前に、有効量の失活剤を前記歯の周辺の組織に適用することをさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３２】
前記失活剤を適用することが前記組成物を適用してから１０分〜３時間以内に行われる、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記失活剤がエチレンジアミン四酢酸である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
抜歯用キットであって、歯の周辺の組織中への、前記歯の周辺の歯根膜を破壊することができる有効量の薬剤を含有する組成物を含む第１の容器と；有効量の失活剤を含有する組成物を含む第２の容器と；前記キットの各構成成分の使用と使用する順番とを収載した取扱説明書とを備える抜歯用キット。
【請求項３５】
鎮痛剤、麻酔薬、抗生物質、麻薬性鎮痛剤、ビタミン剤、成長因子、香味料およびそれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤を含む容器をさらに備える、請求項３４に記載のキット。
【請求項３６】
前記歯を抜去するための歯科手段をさらに含む、請求項３４に記載のキット。
【国際調査報告】
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