(57)【要約】  製剤、方法、及び、医薬希釈剤又は担体と組み合わせて、テトランドリンファミリーのメンバー、特にｄ−テトランドリンの遊離塩基製剤を用いる、疾患の治療におけるそれらの使用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬製剤であって、
下記構造式：
【化１】
2015531785.tif 000010
（式中、Ｒ１及びＲ１’は、限定されないが、ＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３又はＨを含む、同一又は異なる短鎖炭素ベースのリガンドであり、Ｒ２は、ＣＨ３又はＣ２Ｈ５であり、Ｒ３は、ＣＨ３又は水素である）
を有するテトランドリンファミリーの遊離塩基メンバーと医薬担体とを含む、医薬製剤。
【請求項２】
前記ファミリーがｄ−テトランドリンファミリーであり、化学構造がＣ−１’不斉炭素位において「Ｓ」異性体の立体配置を有する、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項３】
ｄ−テトランドリンを含む、請求項２に記載の医薬製剤。
【請求項４】
０．２０％〜０．３０％のカルボキシメチルセルロースを含有する溶液を更に含む、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項５】
アルファ化でんぷん担体を更に含む、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項６】
コロイド状二酸化ケイ素、ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウムを更に含む、請求項５に記載の医薬製剤。
【請求項７】
以下：
５０ｍｇのテトランドリン
３８４ｍｇのアルファ化でんぷんＮＦ（スターチ１５００）
４．４ｍｇのコロイド状二酸化ケイ素（Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ  Ｍ５）
０．４ｍｇのラウリル硫酸ナトリウムＮＦ
１ｍｇのステアリン酸マグネシウムＮＦ、
を更に含む、請求項５に記載の医薬製剤。
【請求項８】
以下：
２００ｍｇのテトランドリン
２５．２ｍｇのアルファ化でんぷん１５００ＮＦ
１．５ｍｇの二酸化ケイ素ＵＳＰ
０．２５ｍｇのラウリル硫酸ナトリウムＮＦ
１．２５ｍｇのステアリン酸マグネシウムＵＳＰ、
を更に含む、請求項５に記載の医薬製剤。
【請求項９】
病気を治療する方法であって、請求項１〜３及び６〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物を患者に投与することを含む、病気を治療する方法。
【請求項１０】
病気を治療する方法であって、かかる病気の治療に使用される基本薬と共に、請求項１〜３及び６〜８のいずれか一項に記載の医薬組成物を患者に投与することを含む、病気を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ビスベンジルイソキノリンアルカロイドのファミリーの医薬製剤に関する。この特定のファミリーを本明細書において「テトランドリンファミリー」と称する。
【背景技術】
【０００２】
テトランドリンファミリーのビスベンジルイソキノリンは、２つの窒素位を有し、したがって遊離塩基形態で又は一塩基酸塩若しくは二塩基酸塩として存在することができる。医薬成分の塩形態の溶解度が高いので、塩形態が医薬組成物の製剤化に使用される。したがって有効成分はより迅速に可溶化し、より速く血流に入る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明において、驚くべきことに、テトランドリンファミリーのメンバー、特にｄ−テトランドリンの遊離塩基製剤が、このファミリーの二塩基酸塩メンバーの製剤と実質的に同程度に迅速に血流に吸収されることが判明した。したがって、本発明は、
下記構造式：
【０００４】
【化１】
2015531785.tif 000002
【０００５】
（式中、Ｒ１及びＲ１’は、限定されないが、ＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３又はＨを含む、同一又は異なる短鎖炭素ベースのリガンドであり、Ｒ２は、ＣＨ３又はＣ２Ｈ５であり、Ｒ３は、ＣＨ３又は水素である）を有するテトランドリンファミリーの遊離塩基メンバーと医薬担体とを含む医薬製剤、並びに癌及び他の疾患の処置におけるその製剤化及び使用の方法を含む。ファミリーが、化学構造がＣ−１’不斉炭素位において「Ｓ」異性体の立体配置を有するｄ−テトランドリンファミリーであり、最も好ましくはｄ−テトランドリンを含むことが好ましい。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
テトランドリンファミリーのメンバーは、癌及びマラリアを含む、様々な疾患及び症状における多剤耐性の処置に有効であることが判明している。米国特許第５，０２５，０２０号、同第５，３３２，７４７号、同第６，５２８，５１９号、同第６，９１１，４５４号、同第６，１２４，３１５号及び同第６，９６２，９２７号を参照されたい。したがってこれらの有効成分の好適な医薬送達系への製剤化は非常に重要である。
【０００７】
テトランドリンファミリーのメンバーは、下記構造式：
【０００８】
【化２】
2015531785.tif 000003
【０００９】
（式中、Ｒ１及びＲ１’は、限定されないが、ＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３又はＨを含む、同一又は異なる短鎖炭素ベースのリガンドであり、Ｒ２は、ＣＨ３又はＣ２Ｈ５であり、Ｒ３は、ＣＨ３又は水素である）を有し、該化学構造がＣ−１’不斉炭素位において「Ｓ」異性体の立体配置を有することが好ましい。
【００１０】
テトランドリンファミリーの好ましいメンバーには以下の代表例が含まれるが、これらは網羅的であると意図されるものではない：ｄ−テトランドリン、イソテトランドリン、ヘルナンデジン（hernandezine）、ベルバミン、ピクナミン（pycnamine）、フェアンチン（phaeanthine）、オバメギン（obamegine）、エチルファングキノリン（ethyl fangchinoline）及びファングキノリン（fangchinoline）。これらの例のすべてにおいて、Ｒ１及びＲ１’はメチル基を構成する。Ｒ２及びＲ３がメチル基又は水素のいずれかを構成することができ、かつ、Ｃ−１及びＣ−１’不斉炭素位における化合物の異性体の立体配置がＲ（レクタス（rectus））又はＳ（シニスター（sinister））のいずれかであるという点でこの群内で変動が起こる。Ｒ及びＳ立体配置についての規則は、Morrison及びBoyd、「Organic Chemistry」、第４版、Allyn及びBaconによる著作権1983年、138-141頁においてみることができる。さらに、ヘルナンデジンはＣ−５位にメトキシ基を含む。
【００１１】
請求されるテトランドリンファミリーの最も好ましいメンバーはｄ−テトランドリンである。ｄ−テトランドリンを抽出及び／又は精製する方法は、米国特許第６，２１８，５４１号明細書及び米国特許出願公開第２０１１／０１０５７５５号明細書に開示されている。
【００１２】
ラットにおける生物学的同等性研究を行って、遊離塩基と塩酸塩とから吸収される有効薬物成分（ｄ−テトランドリン）の速度及び程度を比較した。薬物成分を、ケンタッキー大学薬学及び製薬技術センター（University of Kentucky Center for Pharmaceutical Sciences and Technology）（ＣＰＳＴ）により製剤化してカプセルとし、等価な量のｄ−テトランドリンをラットに経口強制飼養によって投与した。ラットに投薬するのに適切な、投薬シリンジ、カプセル充填装置及びミニカプセル（サイズ９）はTorpac（Fairfield，NJ）から得た。
【００１３】
１つの時点（破壊的サンプリング（destructive sampling））あたり１匹のラットを使用してＨＰＬＣ分析のために可能な限り多くの血液量を得た。これはCBA Pharmaにて広範に用いられてきている現在のＵＶベースのＨＰＬＣアッセイによる分析に適応させるために必要であった。ＪＰＬＣ分析はCBA Pharmaの施設で、血漿ベースのアッセイにおいて豊富な経験を有する科学者が実施した。結果は評価及びモデリングを行う第２の科学者に提供した。
【００１４】
ラットのｄ−テトランドリン薬物動態（ＰＫ）についての情報が制限されているので、研究を段階的に行った。適切なアッセイ感度に必要な用量を同定するための予備試験（preliminary study）（パイロット）をまず、およそ２５ｍｇ／ｋｇ及びおよそ１２０ｍｇ／ｋｇのカプセル中の投与用量を用いて行った。１つの製剤（酸又は塩基）あたり１つの用量レベルにつき４匹の動物に薬物を投与した。スプラーグドーリーラットをこれらの研究のために用い、実験の少なくとも１週間前にHarlan Laboratoriesから得て動物を輸送ストレスから回復させ、順化させた。動物は実験の時点で２００ｇ〜２５０ｇの体重であった。動物を薬物投与の１時間後に安楽死させ、血液を、ＥＤＴＡを含有するチューブに心穿刺によって採取し、迅速に遠心分離して血漿を分離した。典型的には、２連のサンプル分析に十分な血漿を得た。血漿を、−８０℃で貯蔵した後、ドライアイスを含有するスタイロフォーム容器中でCBA Pharmaの施設へと運んだ。これらの実験の結果は、１体重単位あたりより多くの投与量が必要であろうということを示した。
【００１５】
しかしながら、より多い用量を投薬するために必要とされる複数のカプセルは最初のパイロット研究において観察された薬物動態の変動に寄与していた。したがって引き続く研究において、より若齢でより小さい動物におよそ１５０ｍｇ／ｋｇの用量を投与し、血液サンプルを薬物投与の２時間後に得た。これらのより小さい動物は錠剤のサイズのために投薬するのがより困難であった。「酸」群からの３匹の動物と「塩基」群からの２匹の動物を、いくらかの組織損傷が強制飼養投薬の際にこれらの動物に起こっているという技術者の判断に基づいて除外した。これらのより若齢の動物（各５０グラム〜６０グラム）からはより少ない血液量しか得られなかったが、１つのサンプルあたり２匹の動物から血漿をプールした後、ＨＰＬＣ分析のために適切な血漿量を得た。表１にみられるように、濃度は２つの製剤の間で同程度であった。表中の各バーの下の値はプールしたサンプルから得た実データを示す。この分析について、品質コントロールサンプルは許容可能な基準値範囲内であった。観察された変動は薬物が吸収後に排除／分配されて２時間後に観察されたレベルよりも低いレベルとなったであろうという事実に起因すると考えられる。
【００１６】
【表１】
2015531785.tif 000004
表１：カプセル（およそｌ５０ｍｇ／ｍＬ）の投与後の若年ラットにおける血漿濃度。
【００１７】
この第２のパイロット研究は、サンプルを２４時間測定するためにはより多い用量が必要とされるであろうということを示していた。したがって３匹の動物に液体又は懸濁液中の酸及び塩基の製剤の各２００ｍｇ／ｋｇをそれぞれ投与して、投薬及び／又は変動が改善するかどうかを決定した。塩基は水中に溶解しなかったので懸濁液中で用いた。溶液及び懸濁液を、投薬の際の流動性を促進するために０．２５％のカルボキシメチルセルロースを有する水中に調製した。サンプルをカプセルの投与の３０分後、１時間後、２時間後、５時間後及び２４時間後に採取した。
【００１８】
表２は、カプセル、及び液体／懸濁液の製剤を与えられた動物から得たデータを列挙する。投薬調製物の間で統計的な差は観察されなかった（スチューデントの１検定、両側検定、ｐ＞０．０５）。同様に、ｄ−テトランドリン製剤とｄ−テトランドリン−２ＨＣｌ製剤との間で統計的な差は観察されなかった（スチューデントの１検定、両側検定、ｐ＞０．０５）。用量正規化濃度を用いる薬物動態プロファイルもまた表３に示す。
【００１９】
【表２】
2015531785.tif 000005
【００２０】
表３：ラットにおける２４時間にわたる用量正規化血漿ｄ−テトランドリン濃度。動物に経口強制飼養によりカプセル中およそ２３０ｍｇ／ｋｇを投与した。
【表３】
2015531785.tif 000006
【００２１】
いくつかの場合では、非常に高い妨害ピークに起因して血漿濃度を決定することができなかった。したがってこれらの研究の結果を受けて、１つの本試験（final study）を液体／懸濁液の製剤及びおよそ１５０ｍｇ／ｍ２へと換算されるであろう１００ｍｇ／ｋｇの用量を用いて実施した。平均ヒト体表面積が１．７ｍ２であることに基づくと、これらの用量はヒトにおいておよそ３５０ｍｇ及びおよそ９０ｍｇの均一（flat）用量へと換算されるであろう。
【００２２】
３つのスパイクサンプル（spiked samples）もまた、最後のサンプルのバッチに含めた。これらの「品質コントロール」サンプル濃度は、濃度を選択する範囲を与えられた技術者のみが知っていた。これらのサンプルは、ＨＰＬＣ分析が完了した後、結果がケンタッキー大学へと送られるまでは「品質コントロール」サンプルであると認定しなかった。
【００２３】
１つの時点あたり６匹の動物を最終的実験において用いた。サンプリング時間は、１００ｍｇ／ｋｇ用量については１時間後、２時間後、５時間後、２４時間後及び４８時間後であり、２５ｍｇ／ｋｇ群については５時間後、１２時間後及び２４時間後であった。すべての動物及び手順は上記の通りとした。液体及び懸濁液の製剤を無菌条件下にてＣＰＳＴで調製し、経口強制飼養によって投与した。終了時に、いずれの動物でも合併症は観察されなかった。動物は１ｍｌ／２００ｇの用量容積を受けた。スパイク品質コントロールサンプルは期待値の許容可能な限界内であった（１１５対ｌ５０ｎｇ／ｍＬ（１０３．４％）、１７６．６対２００ｎｇ／ｍＬ（８８．３％）、及び２９９．４対３００（９９．８％））。表４に示すように、ｄ−テトランドリン血漿濃度は４８時間のＨＰＬＣアッセイの定量限界を良好に上回った。しかしながら、結果は各時点の各製剤内で高度に可変性であった。
【００２４】
【表４】
2015531785.tif 000007
表４：１００ｍｇ／ｋｇの用量のｄ−テトランドリン又はｄ−テトランドリン−２ＨＣｌの後のラットにおけるｄ−テトランドリン血漿濃度。
【００２５】
同様に、血漿濃度は２５ｍｇ／ｋｇの用量を受けたラットにおいて２４時間後においてさえも定量限界を上回った。ここでもまた、データは各製剤内で可変性であった。５時間後、１２時間後及び２４時間後に測定した血漿濃度を表５に示す。
【００２６】
【表５】
2015531785.tif 000008
表５：２５ｍｇ／ｋｇの用量のｄ−テトランドリン又はｄ−テトランドリン−２ＨＣｌの後のラットにおけるｄ−テトランドリン血漿濃度。
【００２７】
２つの製剤の生物学的同等性を時間濃度曲線下面積の推定値を用いて１００ｍｇ／ｋｇの用量レベルで評価した。Bailer１の方法を用いて各製剤についてのＡＵＣを推定し、統計比較のための誤差の大きさを得た。製剤内の２５ｍｇ／ｋｇ用量から１００ｍｇ／ｋｇ用量へのＡＵＣの相対的上昇を、単純線形台形法により得たＡＵＣ推定値を用いて比較した。
【００２８】
１Bailer, A. J., Testing for the equality of area under the curves when using destructive measurement techniques. Pharmacokinet Biopharm, 1988. 16(3): P. 303-9。
【００２９】
Bailerの方法を用いて得たＡＵＣ推定値（表６）に基づくと、酸製剤及び塩基製剤の間で統計的な差又は別の有意差はみられなかった。
【００３０】
【表６】
2015531785.tif 000009
【００３１】
ヒトにおける投与量レベルは場合に応じて変動するであろう。しかしながら、テトランドリンファミリーのメンバーの薬物は、処置される疾患の処置のための基本薬（principle drug）での処置の過程で、約４日間〜約１４日間にわたり、約５０ｍｇ／ｍ２／日〜約１０００ｍｇ／ｍ２／日、より好ましくは２５０ｍｇ／ｍ２／日〜７００ｍｇ／ｍ２／日、最も好ましくは約５００ｍｇ／ｍ２／日にて典型的には投与されるであろうことが予測される。テトランドリンファミリーのメンバーの基本薬に対する比もまた約０．０４〜約１７０、より典型的には約１〜１００の範囲内で患者に応じて変動するであろう。
【００３２】
好ましい製剤は、ｄ−テトランドリンファミリーの遊離塩基メンバーを好適な医薬担体と組み合わせて含む。医薬担体は液体組成物又は固体組成物とすることができる。液体担体は可能であれば、０．２０％〜０．３０％、好ましくは０．２５％のカルボキシメチルセルロース等の更なる成分とともに水を含むのが好ましい。使用される固体担体又は希釈剤は、アルファ化でんぷんであるのが好ましい。それはまた、コロイド状二酸化ケイ素、ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウム等のその他の成分とともに製剤化することもできる。
【００３３】
例示的なカプセル製剤は以下のものを含む：
５０ｍｇのテトランドリン
３８４ｍｇのアルファ化でんぷんＮＦ（スターチ１５００）
４．４ｍｇのコロイド状二酸化ケイ素（Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ  Ｍ５）
０．４ｍｇのラウリル硫酸ナトリウムＮＦ
１ｍｇのステアリン酸マグネシウムＮＦ、又は、
２００ｍｇのテトランドリン
２５．２ｍｇのアルファ化でんぷん１５００ＮＦ
１．５ｍｇの二酸化ケイ素ＵＳＰ
０．２５ｍｇのラウリル硫酸ナトリウムＮＦ
１．２５ｍｇのステアリン酸マグネシウムＵＳＰ。
【００３４】
２００ｍｇのカプセル製剤が最も好ましい。約５００ｍｇ／ｍ２／日の最も好ましい用量は６フィートの身長で１９０ポンドの患者について１日あたりおよそ１０００ｍｇである。かかる患者は、１日の間に５カプセル、例えば、朝に３カプセル、及び夕方に２カプセル、又は１日にわたって間隔をあけて１回１カプセルを摂取することにより投与必要量を満たすことができる。体重が１２５ポンドで身長が５フィート６インチの女性であれば、１日の間に４つの２００ｍｇカプセルが必要であろう。
【００３５】
テトランドリンファミリーのメンバーをその疾患の処置のための基本薬と共に用いて処置されてきた、様々な疾患、及び使用される基本薬は、米国特許第５，０２５，０２０号、同第５，３３２，７４７号、同第６，５２８，５１９号、同第６，９１１，４５４号、同第６，１２４，３１５号、及び同第６，９６２，９２７号に開示されている。
【００３６】
もちろん、上記は、本発明のいくつかの実施形態を開示するものであり、添付の特許請求の範囲に示される本発明の範囲及びその均等の範囲から逸脱することなく、様々な変更及び変化をなすことが可能であることが理解される。
【手続補正書】
【提出日】平成27年6月3日(2015.6.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬製剤であって、
下記構造式：
【化１】
2015531785.tif 000011
（式中、Ｒ１及びＲ１’は、限定されないが、ＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３又はＨを含む、同一又は異なる短鎖炭素ベースのリガンドであり、Ｒ２は、ＣＨ３又はＣ２Ｈ５であり、Ｒ３は、ＣＨ３又は水素である）
を有するテトランドリンファミリーの遊離塩基メンバーと医薬担体とを含む、医薬製剤。
【請求項２】
前記テトランドリンファミリーが、化学構造がＣ−１’不斉炭素位において「Ｓ」異性体の立体配置を有する、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項３】
ｄ−テトランドリンを含む、請求項２に記載の医薬製剤。
【請求項４】
前記医薬担体が、０．２０％〜０．３０％のカルボキシメチルセルロースを含有する溶液を含む、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項５】
前記医薬担体が、アルファ化でんぷん担体を含む、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項６】
コロイド状二酸化ケイ素、ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウムを更に含む、請求項５に記載の医薬製剤。
【請求項７】
以下：
５０ｍｇのテトランドリン
３８４ｍｇのアルファ化でんぷんＮＦ（スターチ１５００）
４．４ｍｇのコロイド状二酸化ケイ素（Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ  Ｍ５）
０．４ｍｇのラウリル硫酸ナトリウムＮＦ
１ｍｇのステアリン酸マグネシウムＮＦ、
を含む、請求項５に記載の医薬製剤。
【請求項８】
以下：
２００ｍｇのテトランドリン
２５．２ｍｇのアルファ化でんぷん１５００ＮＦ
１．５ｍｇの二酸化ケイ素ＵＳＰ
０．２５ｍｇのラウリル硫酸ナトリウムＮＦ
１．２５ｍｇのステアリン酸マグネシウムＵＳＰ、
を含む、請求項５に記載の医薬製剤。
【国際調査報告】
2015531785.tif 000012
2015531785.tif 000013