(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）の新規なラウオルフィア（Ｒａｕｗｏｌｆｉａ）アルカロイド誘導体、ラウオルフィア（Ｒａｕｗｏｌｆｉａ）アルカロイド誘導体とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せ、および癌の処置のためおよび臨床免疫抑制を達成するための、ミトコンドリア阻害剤と組み合わせたラウオルフィア（Ｒａｕｗｏｌｆｉａ）アルカロイド誘導体の使用に関する。本発明は、式（Ｉ）の化合物に対する癌細胞の感受性を予測するための蛍光に基づく方法にも関する。
2015522048.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化６６】
2015522048.tif 000073
（式中：
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表し；
ただし、Ａ１がアルキルである場合、Ｒ２は、水素またはメトキシであってはならない）の化合物。
【請求項２】
Ａ１が、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはＣ１〜Ｃ４アルキルカルボニル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ５〜Ｃ１０アリールカルボニルおよびＣ５〜Ｃ１０ヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ａ１が、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルまたはＣ５〜Ｃ７ヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ａ２が、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ７ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ５〜Ｃ１０アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表す、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が水素を表す、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５がメチルを表す、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシまたはヒドロキシルを表す、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ６およびＲ９が両方とも水素を表し、
Ｒ７およびＲ８が、互いに独立して、水素またはメトキシを表す、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
場合により存在する置換基が、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロ置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル（特に、トリフルオロメチル）Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、シアノおよびカルボキシからなる群から選択される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２が、水素または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、メチルを表す、請求項１、２または４〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ａ１が、アリールおよびヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し；
Ａ２が、アルキル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０または１を表す、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ａ１が、アミノ、ハロゲン、トリフルオロメチルまたはメトキシで、場合により置換される、ピリジル、フェニルまたはナフチルを表し；
Ａ２が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表す、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｇが、−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１であり、
Ａ１が、アリールおよびヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが１である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ２ａが、Ｃ１〜Ｃ４アルキルカルボニル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニルおよびフェニルカルボニルから選択される、場合により置換される基を表す、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ２ａが、非置換であるかまたは基−ＮＲ１１Ｒ１０で置換されるＣ１〜Ｃ４アルキルカルボニル基を表し、ここで、
Ｒ１１が、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ１０が、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルカルボニルまたはフェニルカルボニルを表す、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１１が水素を表す、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
ｎが、０または１を表し、
Ａ１が、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルまたはＣ５〜Ｃ７ヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表す、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
ｎが０を表し、
Ａ１が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表す、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて、癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための、シロシンゴピンを除く、式（Ｉ）：
【化６７】
2015522048.tif 000074
（式中：
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表す）の化合物。
【請求項２０】
シロシンゴピンを除く、式（Ｉ）：
【化６８】
2015522048.tif 000075
（式中：
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表す）の化合物と組み合わせて、癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤。
【請求項２１】
前記ミトコンドリア阻害剤が、メトホルミン、ブホルミンまたはフェンホルミンを含む、請求項１９に記載の使用のための式（Ｉ）の化合物または請求項２０に記載の使用のためのミトコンドリア阻害剤。
【請求項２２】
前記ミトコンドリア阻害剤が、メトホルミンを含む、請求項２１に記載の使用のための、式（Ｉ）の化合物またはミトコンドリア阻害剤。
【請求項２３】
前記ミトコンドリア阻害剤が、ロテノン、ピエリシジンＡ、エピベルベリン、２−テノイルトリフルオロアセトン（ＴＴＦＡ）、アンチマイシンＡ、オリゴマイシン、カルボニルシアニド−ｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン（ＦＣＣＰ）、およびスタブジンから選択される、請求項１９に記載の使用のための式（Ｉ）の化合物または請求項２０に記載の使用のためのミトコンドリア阻害剤。
【請求項２４】
前記ミトコンドリア阻害剤が、オリゴマイシンを含む、請求項２３に記載の使用のための、式（Ｉ）の化合物またはミトコンドリア阻害剤。
【請求項２５】
式（Ｉ）の前記化合物および前記ミトコンドリア阻害剤の相対投与量（重量比）が、１対１０〜１対１０００である、請求項１９に記載の使用のための式（Ｉ）の化合物または請求項２０に記載の使用のためのミトコンドリア阻害剤。
【請求項２６】
式（Ｉ）の前記化合物および前記メトホルミンの相対投与量（重量比）が、１対１０〜１対２００である、請求項２２に記載の使用のための、式（Ｉ）の化合物またはメトホルミンを含むミトコンドリア阻害剤。
【請求項２７】
式（Ｉ）の前記化合物および前記オリゴマイシンの相対投与量（重量比）が、１０００対１〜１００００対１である、請求項２４に記載の使用のための、（Ｉ）の化合物またはオリゴマイシンを含むミトコンドリア阻害剤。
【請求項２８】
癌が、癌腫、肉腫、白血病、骨髄腫、リンパ腫、および神経系の癌から選択される、請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の癌の処置に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはミトコンドリア阻害剤。
【請求項２９】
請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の免疫抑制処置に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはミトコンドリア阻害剤。
【請求項３０】
請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の皮膚、神経系、結合組織、筋肉、神経系、造血系、骨および内蔵器官の自己免疫疾患の処置に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはミトコンドリア阻害剤。
【請求項３１】
式（Ｉ）の前記化合物が、前記ミトコンドリア阻害剤の投与の前または後に別々に投与される、請求項１９〜３０のいずれか一項に記載の使用のための、式（Ｉ）の化合物またはミトコンドリア阻害剤。
【請求項３２】
式（Ｉ）の前記化合物および前記ミトコンドリア阻害剤が、同時に投与される、請求項１９〜３０のいずれか一項に記載の使用のための、式（Ｉ）の化合物またはミトコンドリア阻害剤。
【請求項３３】
式（Ｉ）の前記化合物が、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物である、請求項１９〜３１のいずれか一項に記載の使用のための、式（Ｉ）の化合物またはミトコンドリア阻害剤。
【請求項３４】
シロシンゴピンを除く、式（Ｉ）：
【化６９】
2015522048.tif 000076
（式中：
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表す）の化合物；および
ミトコンドリア阻害剤
を含む医薬品。
【請求項３５】
式（Ｉ）の化合物を含む１つまたは２つ以上の投与単位と、ミトコンドリア阻害剤を含む１つまたは２つ以上の投与単位とを含む、請求項３４に記載の医薬品。
【請求項３６】
１つまたは２つ以上の投与単位を含む医薬品であって、前記投与単位のそれぞれが、式（Ｉ）の化合物およびミトコンドリア阻害剤の両方を含む医薬品。
【請求項３７】
ミトコンドリア阻害剤を含まず、シロシンゴピンを除く、式（Ｉ）：
【化７０】
2015522048.tif 000077
（式中：
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表す）の化合物と、
前記医薬品の使用説明書を提供するための手段とを含む医薬品であって、前記使用説明書が、ミトコンドリア阻害剤を含む薬剤と組み合わせて、前記医薬品を使用するための説明書を含む医薬品。
【請求項３８】
ミトコンドリア阻害剤および医薬品の使用説明書を提供するための手段を含む医薬品であって、前記使用説明書が、シロシンゴピンを除く、式（Ｉ）：
【化７１】
2015522048.tif 000078
（式中：
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表す）の化合物を含む薬剤と組み合わせて前記医薬品を使用するための説明書を含む医薬品。
【請求項３９】
前記式（Ｉ）の化合物を含まない、請求項３８に記載の医薬品。
【請求項４０】
医薬品の使用のための説明書を提供するための前記手段が、前記説明書が印刷された、前記医薬品のパッケージおよび／またはその添付文書を含む、請求項３７〜３９のいずれか一項に記載の医薬品。
【請求項４１】
前記ミトコンドリア阻害剤が、メトホルミン、ブホルミン、フェンホルミン、ロテノン、ピエリシジンＡ、エピベルベリン、２−テノイルトリフルオロアセトン（ＴＴＦＡ）、アンチマイシンＡ、カルボニルシアニド−ｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン（ＦＣＣＰ）、およびスタブジンから選択され、式（Ｉ）の前記化合物およびミトコンドリア阻害剤の相対量（重量比）が、１対１０〜１対１０００である、請求項３５〜４０のいずれか一項に記載の医薬品。
【請求項４２】
前記ミトコンドリア阻害剤がメトホルミンであり、式（Ｉ）の化合物およびメトホルミンの相対量（重量比）が、１対１０〜１対２００である、請求項４１に記載の医薬品。
【請求項４３】
前記ミトコンドリア阻害剤がオリゴマイシンであり、式（Ｉ）の化合物およびオリゴマイシンの相対量（重量比）が、１０００対１〜１００００対１である、請求項３４〜４０のいずれか一項に記載の医薬品。
【請求項４４】
癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための、請求項３５〜４２のいずれか一項に記載の医薬品。
【請求項４５】
式（Ｉ）の前記化合物が、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物である、請求項３４〜４４のいずれか一項に記載の医薬品。
【請求項４６】
癌性細胞が、シロシンゴピンを除く、式（Ｉ）：
【化７２】
2015522048.tif 000079
（式中：
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表す）の化合物での処置に反応するかどうかを決定するための方法であって、
（ａ）単細胞懸濁液を調製し、前記癌性細胞を適切な培地中で培養する工程、
（ｂ）前記癌性細胞を、式（Ｉ）の前記化合物でインキュベートする工程、
（ｃ）工程（ｂ）の前記癌性細胞を、正電荷を帯びた蛍光色素でインキュベートする工程、
（ｄ）励起蛍光強度を測定する工程、および
（ｅ）工程（ｄ）の前記測定された蛍光強度を、前記正電荷を帯びた蛍光色素単独でインキュベートされた前記癌性細胞の前記測定された蛍光強度と比較する工程を含み、
式（Ｉ）の前記化合物で予めインキュベートされた癌性細胞の蛍光強度の相対的増加が、前記癌性細胞が式（Ｉ）の前記化合物での処置に反応することを示す方法。
【請求項４７】
式（Ｉ）の前記化合物が、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて、癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための薬剤の製造のための、シロシンゴピンを除く、式（Ｉ）：
【化７３】
2015522048.tif 000080
（式中：
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表す）の化合物の使用。
【請求項４９】
式（Ｉ）の前記化合物が、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物である、請求項４８に記載の使用。
【請求項５０】
処置を必要とする、温血動物またはヒトの、癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置のための方法であって、前記疾患に対してまたは免疫抑制処置のために有効な量で、請求項４８または４９に記載の式（Ｉ）の化合物およびミトコンドリア阻害剤を組み合わせて、前記動物またはヒトに投与する工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ラウオルフィア（Ｒａｕｗｏｌｆｉａ）アルカロイド誘導体とミトコンドリア阻害剤との組合せ、式（Ｉ）の新規なラウオルフィア（Ｒａｕｗｏｌｆｉａ）アルカロイド誘導体ならびに癌の処置のためおよび臨床免疫抑制を達成するための、ラウオルフィア（Ｒａｕｗｏｌｆｉａ）アルカロイド誘導体とミトコンドリア阻害剤との前記組合せの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗癌治療は、手術、放射線治療および化学療法などの治療的介入の組合せを用いる。手術および放射線治療が、一般に、腫瘍増殖の主部位に局所的に限定される一方、化学療法は、腫瘍の再増殖を防ぐために、または離れた腫瘍病巣に対して適用される。化学療法剤は、放射線療法または手術が選択肢でない場合、疾患進行に対処するために、腫瘍増殖を減少させるのにも使用される。
【０００３】
免疫抑制剤は、自分の身体を標的とする病的免疫反応（自己免疫）またはアレルギーに見られるような過剰な免疫反応を抑制するのに臨床的に使用される。免疫抑制剤は、免疫系によって引き起こされる移植拒絶反応を処置するのにも使用される。免疫応答の基本を成すのは、抗原刺激の後のＴ細胞の活性化および増殖であり、その際、Ｔ細胞は、Ｂ細胞のためのヘルパー細胞、制御性細胞またはエフェクター細胞として働く。ラパマイシンまたはシクロスポリンＡなどの免疫抑制剤は、初期Ｔ細胞活性化／増殖を阻害することによって作用する。癌および免疫応答の両方が、細胞増殖に関与するため、いくつかの薬剤、例えば、ラパマイシンまたはその類似体が、免疫抑制のために当初は使用されたが、抗癌剤としての用途が後に発見された（Ｒｅｃｈｅｒら，Ｂｌｏｏｄ  ２００５，１０５：２５２７−３４）。
【０００４】
化学療法薬は、併用療法に最も有効に使用される。その理論的根拠は、薬剤耐性癌細胞を発生させる可能性を低下させるために、様々な機序を介して作用する薬剤を適用することである。併用療法は、特定の薬剤併用のために、副作用を最小限に抑えるために最適な併用投与量も可能にする。これは、標準的な化学療法剤が、ＤＮＡ複製、細胞分裂などの重要な細胞過程を標的とし、またはＤＮＡ損傷を誘発して一般的な細胞毒性効果を有するので重要である。最後に、２つの化合物の併用治療により、予想外の相乗効果が見出され、単一の化合物によって誘発されない効果が引き起こされ得る。近年、薬剤はまた、腫瘍量を減少させるためまたは長期生存を改善するために、ネオアジュバント設定（ｎｅｏａｄｊｕｖａｎｔ  ｓｅｔｔｉｎｇ）で、すなわち術前に使用される。
【０００５】
式（Ｉ）のラウオルフィア（Ｒａｕｗｏｌｆｉａ）アルカロイド誘導体は、降圧薬および抗精神病薬であるレセルピンの合成誘導体である（Ｊ．Ａ．Ｍ．Ａ．，Ｖｏｌ．１７０，Ｎｒ．１７，Ａｕｇ．２２，１９５９，ｐ．２０９２）。レセルピンおよびシロシンゴピンのようなその誘導体は、副作用がより少ないより良好な薬剤が開発されたため、現在はほとんど使用されていない。レセルピンは、カテコールアミン枯渇につながる小胞性モノアミン輸送体の阻害によって作用し、この作用機序は、降圧効果を有する全てのレセルピン誘導体に共通であるものと考えられる。
【０００６】
ミトコンドリアは、細胞のエネルギー生成系を含有し、それによって、代謝に由来する電子が、電子移動鎖（ＥＴＣ）の複合体Ｉ〜ＩＶを通過し、これが、複合体Ｉ、ＩＩＩおよびＩＶからのプロトンの放出およびアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）の形態の化学エネルギーの同時形成を伴う複合体Ｖを通るプロトンの還流をもたらす。酸素は、最終的な電子受容体として働き、Ｈ２Ｏへと還元される。この過程において重要なのはミトコンドリア内膜であり、これは、複合体から放出されるプロトンが、この膜を通って基質から膜間腔中へと通過し、１５０〜２００ｍＶの正の膜電位を生成するためである。ＴＭＲＭ（テトラメチルローダミンメチルエステル）などの色素が、この膜を通過し、ミトコンドリア基質中に蓄積し、それによって、蛍光信号の強度が、膜電位の強度に左右される。いくつかの十分に記載された薬剤が、ミトコンドリア機能を阻害し、ミトコンドリア毒性剤であるとみなされ得る。ＦＣＣＰ（カルボニルシアニド−ｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン）などのいわゆる脱共役剤は、ＡＴＰ合成からのプロトンの流れを脱共役し、それにより、膜電位の崩壊とともにＡＴＰ合成の低下が生じる。いくつかの十分に記載されたミトコンドリア阻害剤は、メトホルミン、ロテノン、エピベルベリン、ピエリシジンＡ（複合体Ｉの全ての阻害剤）、マロン酸ナトリウムおよびテノイルトリフルオロアセトン（複合体ＩＩの阻害剤）、アンチマイシンＡ（複合体ＩＩＩ阻害剤）、シアン化カリウムおよびアジ化ナトリウム（複合体ＩＶの阻害剤）、およびオリゴマイシン（複合体Ｖ阻害剤）を含むＥＴＣの様々な複合体を標的にする。ミトコンドリアは、祖先から受け継がれた貪食された細菌であるものと考えられる。ミトコンドリアは、ＥＴＣのいくつかの成分、ならびにミトコンドリアリボソームの成分をコードするＤＮＡゲノムを含有する。ヌクレオシド類似体の種類の特定のＨＩＶ阻害剤（例えば、スタブジン（Ｄ４Ｔ））などのミトコンドリアゲノムを標的にする薬剤が、ＥＴＣおよびミトコンドリアのエネルギー生成系を最終的に破壊するため、ミトコンドリアに対して毒性がある。
【０００７】
メトホルミンは、２型糖尿病に広く使用されているビグアニド薬である。メトホルミンは、毒性のために糖尿病の処置にもはや使用されていない２つのビグアニド、ブホルミンおよびフェンホルミンに関連している。２型糖尿病の処置におけるメトホルミンの主な臨床的利点は、高血糖を低下させるための肝臓でのグルコース新生の抑制および改善されたインスリン感受性であり；これらの効果は、ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）活性のメトホルミン依存性刺激によってもたらされるものと考えられる。この効果の基本を成すのは、メトホルミンおよび他のビグアニドが、ミトコンドリアの呼吸鎖（電子移動鎖）の複合体Ｉを阻害することである（Ｅｌ−Ｍｉｒら，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２０００，２７５：２２３−２２８）。無関係の抗糖尿病薬に対してメトホルミンを摂取した糖尿病患者のメタ分析により、メトホルミン摂取コホートの癌の発生率がより低かったことが示された（Ｅｖａｎｓら，ＢＭＪ  ２００５，３３０：１３０４−５；Ｂｏｗｋｅｒら，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ  ２００６，２９：２５４−８）。これにより、進行中の多くの研究および試験での、抗癌剤または予防薬としてのメトホルミンの使用に関する最近の研究が促進された。Ｇｏｎｚａｌｅｚ−Ａｎｇｕｌｏら，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２０１０，１６：１６９５−７００を参照されたい。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ここで、本明細書において後述される式（Ｉ）のラウオルフィア（Ｒａｕｗｏｌｆｉａ）アルカロイド誘導体が、ミトコンドリア阻害剤と併用されるとき、癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に有用であることが分かった。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
したがって、その最も広い態様において、本発明は、ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて、癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための、シロシンゴピンを除く、式（Ｉ）：
【化１】
2015522048.tif 000003
（式中：
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表す）の化合物およびさらに前記式（Ｉ）の化合物と組み合わせて、癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤に関する。
【００１０】
式（Ｉ）のいくつかの化合物、特に、前記式（式中、Ｒ２が、水素またはメトキシであり、Ａ１がアルキルである）の特定の化合物が既に知られている。
【００１１】
したがって、別の態様において、本発明は、上式（Ｉ）（式中、
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、またはヒドロキシルを表し；
Ｒ２が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、または基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを表し、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシルを表し；
Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表し、
ただし、Ａ１がアルキル基である場合、式（Ｉ）中のＲ２は、水素またはメトキシであってはならない）の化合物にも関する。
【００１２】
本明細書において別に定義されない場合、本出願において使用される際の「アルキル」という用語は、特に、例えば１〜１０個の炭素原子を有する、場合により置換される分枝鎖状または非分枝鎖状アルキル基、例えば、メチル、エチル、プロピル（ｎ−プロピルまたはイソプロピル）、ブチル（ｎ−ブチル、イソブチルまたは第三級ブチル）、ペンチル（ｎ−ペンチルおよびイソペンチルを含む）または分枝鎖状および非分枝鎖状ヘキシル、ヘプチルまたはオクチル残基を含む、好ましくは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、より好ましくは、Ｃ１〜Ｃ４アルキルを含む。Ｃ１〜Ｃ３アルキル、特に、メチルおよびエチルが最も好ましい。
【００１３】
本明細書において使用される際の「シクロアルキル」という用語は、好ましくは、１つ以上の環に配置され得る３〜１２個の環原子を有する、場合により置換されるシクロアルキル基、より好ましくは、例えばＣ３〜Ｃ７シクロアルキルのようなＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルを指す。シクロアルキル部分の好ましい具体例としては、場合により置換されるシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチル基が挙げられる。
【００１４】
本発明の趣旨では、「ヘテロシクリル」という用語は、１つ以上の環に配置され得る３〜１０個の環原子を有する非芳香環系を指し、ここで、炭素環原子のうちの１個、２個、３個または４個が、Ｎ、ＯまたはＳなどのヘテロ原子から選択されるヘテロ原子で置換される。限定はされないが、モルホリル、チオモルホリル、ピペラジル、ピペリジル、テトラヒドロフリル、ピロリジル、オキサゾリル、１Ｈ−ピラゾリル、１Ｈ−テトラゾリルなどを含む単環式Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル基が特に好ましい。ヘテロシクロアルキル基は、後述されるように場合により置換される。ヘテロシクロアルキル基は、１つ以上の不飽和結合、特に、例えば、２Ｈ−ピロール、４Ｈ−イミダゾール、４−Ｈ−ピラゾール、４Ｈ−オキサゾールもしくは４Ｈ−イソオキサゾールまたは２Ｈ−もしくは４Ｈ−ピランのような二重結合も含み得る。
【００１５】
本明細書において使用される際、「アリール」という用語は、６〜１４個、好ましくは、６〜１０個の環原子を有する炭素環式芳香族基を意味する。アリール基の例は、フェニル、ナフチルなどである。アリールの特に好ましい例は、フェニルである。上記のアリール基は、後述されるように、１つ、２つ、または３つの置換基、好ましくは、１つまたは２つの置換基で独立して置換され得る。
【００１６】
「ヘテロアリール」という用語は、５〜１４個、好ましくは、５〜１０個、より好ましくは、５または６個の環原子の単環式または二環式基を意味し、ここで、少なくとも１つの芳香環が、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１個、２個、または３個の環ヘテロ原子を含有し、残りの環原子がＣである。ヘテロアリール基の１個または２個の環炭素原子は、カルボニル基で場合により置換され得る。ヘテロアリールの好ましい例は、ピリジル、ピラジニル、ピリミジル、チオフェニル、オキサジアゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、１，８−ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、インドリジニル、フェナントリジニル、フェノチアジニルまたはフェノキサジニルなどである。上記のヘテロアリール基は、後述されるように、１つ、２つ、または３つの置換基、好ましくは、１つまたは２つの置換基で場合により置換され得る。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
上記のアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリール基の好ましい任意選択の置換基としては、ハロゲン、特に、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨード、ヒドロキシル、アルコキシ、特に、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、シアノおよびカルボキシなどが挙げられる。他の好ましい置換基としては、アルキル置換基、特に、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、およびハロアルキル置換基、特に、例えばトリフルオロメチルのようなハロＣ１〜Ｃ３アルキル置換基が挙げられる。
【００１８】
一方、式（Ｉ）の特に好ましい化合物は、式中、Ｇが：
−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２および−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２から選択される基を表し、ここで、
Ａ１が、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ａ２が、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０、１、２または３を表す化合物である。
【００１９】
前記化合物中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、好ましくは、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノである。より好ましくは、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４が水素であり；Ｒ２が、水素またはメトキシである。Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｒ２がメトキシであるこの実施形態の化合物が最も好ましい。前記化合物中のＲ５が、好ましくは、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、特に、メチルであり、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、好ましくは、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノおよびヒドロキシルから選択され、より好ましくは、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシおよびヒドロキシルから選択される。最も好ましくは、Ｒ６、およびＲ９が水素であり、Ｒ７およびＲ８が、独立して、水素またはメトキシである。
【００２０】
前記化合物中のＧが、好ましくは、基−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１であり、ここで、ｎが、０または１であり、Ａ１が、場合により置換されるアリール、ヘテロアリール、特に、ハロゲンまたはメトキシで場合により置換されるピリジルまたはフェニルであり；または
Ｇが、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）−Ａ２、−ＣＨ２ＯＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＮＨＣＯ２−Ａ２、−ＣＨ２ＣＯ２−Ａ２であり、
ここで、Ａ２が、場合により置換されるアルキル、−（ＣＨ２）ｎ−アリール、−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリール、特に、Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、ここで、ｎが、０または１である。
【００２１】
式（Ｉ）の特に好ましい化合物の別の群は、式中、Ｒ２が基−ＯＲ２ａを表し；Ｒ２ａが、水素、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し、任意選択の置換基が、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、シアノおよびカルボキシから選択される化合物である。
【００２２】
化合物の前記群において、好ましくは、Ｒ２ａが、Ｃ１〜Ｃ４アルキルカルボニル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニルおよびフェニルカルボニルから選択される、場合により置換される基、より好ましくは、非置換であるかまたは基−ＮＲ１１Ｒ１０で置換されるＣ１〜Ｃ４アルキルカルボニル基を表し、ここで、
Ｒ１１が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたは、より好ましくは、水素を表し、
Ｒ１０が、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルカルボニルまたはフェニルカルボニルを表す。
【００２３】
化合物の前記群において、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、好ましくは、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノまたはヒドロキシ、最も好ましくは、水素である。
【００２４】
前記化合物において、Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、好ましくは、メチルであり、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノおよびヒドロキシルから選択され、好ましくは、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、およびヒドロキシルから選択される。最も好ましくは、Ｒ６およびＲ９が水素であり、Ｒ７およびＲ８が、独立して、水素またはメトキシである。
【００２５】
本発明に係る化合物のさらなる好ましい特定の実施形態は：
−式（Ｉ）（式中、
Ａ１が、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表す）の化合物；
−式（Ｉ）（式中、
Ｒ２が基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表す）の化合物；
−式（Ｉ）（式中、
Ｒ２ａが、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ホルミルまたはＣ１〜Ｃ４アルキルカルボニル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ６〜Ｃ１０アリールカルボニルおよびＣ５〜Ｃ１０ヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ａ１が、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルまたはＣ５〜Ｃ７ヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し；
Ａ２が、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ７ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ６〜Ｃ１０アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表す）の化合物；
−式（Ｉ）（式中、
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が水素を表す）の化合物；
−式（Ｉ）（式中、
Ｒ５がメチルを表す）の化合物；
−式（Ｉ）（式中、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が、互いに独立して：
水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシまたはヒドロキシルを表す）の化合物；
−式（Ｉ）（式中、
Ｒ６およびＲ９が両方とも水素を表し、
Ｒ７およびＲ８が、互いに独立して、水素またはメトキシを表す）の化合物；および
−式（Ｉ）（式中、場合により存在する置換基が、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ３ジアルキルアミノ、シアノおよびカルボキシからなる群から選択される）の化合物、
−式（Ｉ）（式中、場合により存在する置換基が、Ｃ１〜Ｃ３アルキルおよびハロＣ１〜Ｃ３アルキル、特に、トリフルオロメチルからなる群から選択される）の化合物である。
【００２６】
−式（Ｉ）（式中、
−Ａ１が、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表し、
Ｒ２が、水素または、特に、基−ＯＲ２ａを表し；ここで、Ｒ２ａがメチルを表す）の化合物；
−式（Ｉ）（式中、
Ａ１が、アリールおよびヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し；
Ａ２が、アルキル、−（ＣＨ２）ｎ−アリールおよび−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールから選択される、場合により置換される基を表し、
ｎが、０または１を表す）の化合物、特に、
Ａ１が、ハロゲンまたはメトキシで、場合により置換されるピリジルまたはフェニルであり；
Ａ２がＣ１〜Ｃ４アルキルである場合も好ましい。
【００２７】
式（Ｉ）（式中、
Ｒ２が基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表す）の化合物、特に、
Ｒ２ａが、Ｃ１〜Ｃ４アルキルカルボニル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニルおよびフェニルカルボニルから選択される、場合により置換される基である場合がさらに好ましい。
【００２８】
これらの化合物の特定の実施形態は、式（Ｉ）（式中、
Ｒ２ａが、非置換であるかまたは基−ＮＲ１１Ｒ１０で置換されるＣ１〜Ｃ４アルキルカルボニル基であり、ここで、Ｒ１１が、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキル、特に、水素であり、
Ｒ１０が、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルカルボニルまたはフェニルカルボニルである）の化合物である。
【００２９】
式（Ｉ）の化合物の別の好ましい実施形態は、式中、
Ｒ２が基−ＯＲ２ａを表し；
Ｒ２ａが、水素、ホルミルまたはアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールカルボニルおよびヘテロアリールカルボニルから選択される、場合により置換される基を表し、ｎが、０または１を表し、
Ｇが、基−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１（ここで、
Ａ１が、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルまたはＣ５〜Ｃ７ヘテロシクリルから選択される、場合により置換される基を表す）、特に、
基−ＯＣＯ２（ＣＨ２）ｎ−Ａ１（ここで、
ｎが０であり、Ａ１が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルである）を表す化合物である。
【００３０】
組み合わされた上記の化合物の好ましい実施形態の特徴の２つ以上を有する式（Ｉ）の化合物も特に好ましい。
【００３１】
本出願の趣旨では、「式（Ｉ）の化合物」という用語は、遊離塩基またはその任意の酸付加塩を指すことがさらに意図される。塩は、特に、式Ｉの化合物の薬学的に許容できる塩である。
【００３２】
このような塩は、例えば、好ましくは、有機または無機酸との酸付加塩として形成される。好適な無機酸は、例えば、塩酸などのハロゲン酸、硫酸、またはリン酸である。好適な有機酸は、例えば、カルボン酸、ホスホン酸、スルホン酸またはスルファミン酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、グルタミン酸またはアスパラギン酸などのアミノ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、シクロヘキサンカルボン酸、アダマンタンカルボン酸、安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、ケイ皮酸、メタン−またはエタン−スルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、１，５−ナフタレン−ジスルホン酸、２−、３−または４−メチルベンゼンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、Ｎ−メチル−、Ｎ−エチル−またはＮ−プロピル−スルファミン酸、またはアスコルビン酸などの他の有機プロトン酸である。
【００３３】
「式（Ｉ）の化合物」という用語は、これらの化合物の水和物および溶媒和物、好ましくは、薬学的に許容できる溶媒和物を指すことも本明細書において意図される。
【００３４】
本発明に係る式（Ｉ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物または水和物は、本明細書に記載されるように、公知の方法、または当業者に明らかなその変形例にしたがって調製可能であり、その後、必要に応じて、保護基の除去、薬学的に許容できる塩の形成または薬学的に許容できる溶媒和物または水和物の形成が続く。
【化２】
2015522048.tif 000004
【００３５】
式（Ｉ）（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ４が水素を表す）の化合物が、確立された方法によって、レセルピン（ＣＡＳ  ５０−５５−５）およびその公知の誘導体から調製され得る。
【００３６】
式（Ｉ）（式中、Ｒ２がメトキシでない）の化合物が、Ｇ．Ｖａｒｃｈｉら，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００５，６８，１６２９−１６３１に記載される中間体を用いて調製され得る。
【００３７】
式（Ｉ）（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ４が水素でない）の化合物が、例えば、スイス特許ＣＨ３６１８１１号明細書、スイス特許ＣＨ３６４５１１号明細書、Ｇ．Ｓｔｏｒｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００５，１２７，１６２５５−１６２６２；Ｓ．Ｈａｎｅｓｓｉａｎら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９７，６２，４６５−４７３；Ｓ．Ｆ．Ｍａｒｔｉｎら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８５，１０７，４０７２−４０７４；Ｓ．Ｆ．Ｍａｒｔｉｎら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８７，１０９，６１２４−６１３４に記載される方法によって、出発材料として適切に置換されたインドール誘導体を用いたレセルピン骨格の全合成によって調製され得る。
【００３８】
Ｒ５がメチルでない化合物が、Ｒ．Ａ．Ｌｕｃａｓら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９６０，８２，４９３−４９５；Ｍ．Ｆ．Ｂａｒｔｌｅｔｔ，Ｗ．Ｉ．Ｔａｙｌｏｒ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９５９，２０，２０−２２に記載される方法によって調製され得る。
【００３９】
より特定的に、式（Ｉ）の化合物は、標準的なエステル化条件を用いて、式（ＩＩ）
【化３】
2015522048.tif 000005
の化合物が、式（ＩＩＩ）
【化４】
2015522048.tif 000006
の酸またはその対応する酸塩化物と反応するプロセスによって得られ、式中、Ｘが、Ｇまたは公知の方法によってさらに修飾される官能基を表す。
【００４０】
Ｘが、基−（ＣＨ２）ｎ−Ｘ１を表し、Ｘ１が、ヒドロキシルまたはアミノを表す場合、式（Ｉ）の化合物は、公知の方法によって、式（ＩＶ）
【化５】
2015522048.tif 000007
の化合物が、酸、酸塩化物、カーボネート、クロロホルメートなどと反応するプロセスによって得られる。
【００４１】
式（Ｉ）（式中、Ｒ２が基−ＯＲ２ａを表す）の化合物が、Ｇ．Ｖａｒｃｈｉら，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００５，６８，１６２９−１６３１にしたがって調製され得る式（Ｖ）
【化６】
2015522048.tif 000008
の化合物が、公知の方法によって、式（ＶＩ）
【化７】
2015522048.tif 000009
のｔｅｒｔ−ブトキシカーボネートへと転化され、次に、それが、アルコキシドで処理されて、式（ＶＩＩ）
【化８】
2015522048.tif 000010
の化合物が得られ、ここで、遊離ヒドロキシル基が式（ＩＩ）の化合物について上述されるように修飾されて、式（ＶＩＩＩ）
【化９】
2015522048.tif 000011
の化合物が得られるプロセスによって得られる。
【００４２】
ｔｅｒｔ−ブトキシカーボネートは、酸での処理のような公知の方法によって開裂されて、式（ＩＸ）
【化１０】
2015522048.tif 000012
の化合物が得られる。
【００４３】
ｔｅｒｔ−ブトキシカーボネートの代わりに、他の公知のフェノール保護基もこのプロセスに使用され得る。
【００４４】
式（ＩＸ）の化合物が、公知の方法によってアルキル化剤またはアシル化剤と反応して、式（Ｉ）の化合物またはそれらの保護された前駆体が得られる。
【００４５】
上に既述されているように、本発明は、式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミン（および関連するビグアニド、特に、フェンホルミンおよびブホルミン）との組合せの使用、ならびに癌の処置、特に、癌腫、白血病、骨髄腫およびリンパ腫の処置のため、ならびに自己免疫、移植医学および皮膚疾患、特に、乾癬、神経系、特に、多発性硬化症、および造血系疾患、特に、貧血などの、免疫抑制が望ましい他の場合において免疫抑制を達成するために使用するための、式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）、特に、上記の式（Ｉ）の化合物の好ましい実施形態の１つと、ミトコンドリア阻害剤とを含む医薬品；癌の処置および免疫抑制の達成のための医薬組成物の調製のための、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミン（およびフェンホルミンおよびブホルミンのような関連するビグアニド）との組合せの使用、ならびに式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミン（およびフェンホルミンおよびブホルミンのような関連するビグアニド）との組合せ、または式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬組成物を用いた、癌の処置および免疫抑制の達成の方法にも関する。
【００４６】
本発明は、癌の処置、特に、癌腫、白血病、骨髄腫、およびリンパ腫の処置のため、および自己免疫などの免疫不全の処置のための、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せの使用、および式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬組成物の使用にさらに関する。
【００４７】
本発明において理解される際の「ミトコンドリア阻害剤」は、ミトコンドリア活性を低下させ、様々な程度のミトコンドリア毒性特性を示す化合物を含む。ミトコンドリア阻害剤は、ミトコンドリア中のＡＴＰ合成からのプロトンの流れを脱共役するいわゆる脱共役剤、およびミトコンドリア中の電子移動鎖（ＥＴＣ）の様々な複合体、例えば、電子移動鎖の複合体Ｉ、複合体ＩＩ、複合体ＩＩＩ、複合体ＩＶ、および複合体Ｖを標的にする阻害剤を含む。本発明に係るミトコンドリア阻害剤であるとみなされるさらなる化合物は、ミトコンドリアゲノムを標的にするミトコンドリア毒性化合物である。
【００４８】
多くの広く処方されている薬剤は、ミトコンドリア毒性による副作用を及ぼす。これらのミトコンドリア毒性薬剤も、本発明に係るミトコンドリア阻害剤とみなされる。このようなミトコンドリア毒性薬剤またはミトコンドリア阻害薬剤は、式（Ｉ）の化合物と併用される場合、式（Ｉ）の化合物との相乗効果を示し、抗癌剤になる。ミトコンドリア毒性薬剤は、非常に様々な臨床状態の処置に使用されている（Ｃｏｈｅｎら，Ｄｅｖ  Ｄｉｓａｂｉｌ  Ｒｅｓ  Ｒｅｖ  ２０１０，１６：１８９−１９９）。
【００４９】
本発明に係るミトコンドリア阻害剤は：
テトラサイクリン、イブプロフェン、アミオダロン、ピルプロフェン、タモキシフェン、バルプロエート、クロロキン、キニジン、クロルプロマジン、ケトコナゾール、シクロスポリンＡ、リファンピシン、およびグリブリン（ｇｌｙｂｕｒｉｎｅ）などの、ミトコンドリアの副作用のある肝疾患または胆嚢疾患に使用される薬剤；
アミタル、カプサイシン、ハロペリドール、リスペリドン、メトホルミン、ブホルミン、フェンホルミン、ブピバカイン、リドカイン、ハロタン、ダントロレン、フェニトイン、クロフィブラート、およびフェノフィブラートなどの、電子伝達系複合体Ｉの阻害剤；
シクロホスファミドおよびケトコナゾールなどの、電子伝達系複合体ＩＩの阻害剤；
アンチマイシンＡ、アセトアミノフェン、イソフルラン、およびセボフルランなどの、電子伝達系複合体ＩＩＩの阻害剤；
セファロリジン、セファゾリン、およびセファロチンなどの、電子伝達系複合体ＩＶの阻害剤；
オリゴマイシンなどの、電子伝達系複合体Ｖの阻害剤；
ＡＺＴ（イトブジジン（ｉｔｏｖｕｄｉｄｉｎｅ））、ｄ４Ｔ（スタブジン）、ｄｄＩ（ジダノシン（ｄｉｄａｎｏｓｉｎｅ））、およびｄｄＣ（ザルシタビン）などの、ミトコンドリアＤＮＡ合成の阻害剤；
ペンタミジン、インドメタシン、フルオキセチン、プロポフォール、アスピリン、ブビバカイン（ｂｕｂｉｖａｃａｉｎｅ）、トルカポン、およびジニトロフェノールなどの、酸化的リン酸化の脱共役剤；
ドキソルビシン、イソニアジド、ゲンタマイシン、およびフルオロキノロンなどの、酸化還元機構を介して酸素分子を超酸化物へと還元する薬剤；ならびに
インターフェロン−αおよびインターフェロン−γなどの、ミトコンドリア遺伝子転写の阻害剤を含む。
【００５０】
メトホルミンは、３−（ジアミノメチリデン）−１，１−ジメチルグアニジンである。
【化１１】
2015522048.tif 000013
【００５１】
考えられる他のビグアニドは、例えば、フェンホルミンまたはブホルミン、好ましくは、フェンホルミンである。
【００５２】
フェンホルミンは、１−（ジアミノメチリデン）−２−（２−フェニルエチル）グアニジンである。
【化１２】
2015522048.tif 000014
【００５３】
塩基性化合物とそれらの酸付加塩との間の密接な関係を考慮すると、メトホルミン、フェンホルミンおよび塩基性窒素原子を有する他のミトコンドリア阻害剤は、遊離塩基またはその任意の酸付加塩を意味する。
【００５４】
このような塩は、例えば、好ましくは、有機または無機酸との酸付加塩として形成される。好適な無機酸は、例えば、塩酸などのハロゲン酸、硫酸、またはリン酸である。好適な有機酸は、例えば、カルボン酸、ホスホン酸、スルホン酸またはスルファミン酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、グルタミン酸またはアスパラギン酸などのアミノ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、シクロヘキサンカルボン酸、アダマンタンカルボン酸、安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、ケイ皮酸、メタン−またはエタン−スルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、１，５−ナフタレン−ジスルホン酸、２−、３−または４−メチルベンゼンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、Ｎ−メチル−、Ｎ−エチル−またはＮ−プロピル−スルファミン酸、またはアスコルビン酸などの他の有機プロトン酸である。
【００５５】
本発明は、上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬品にも関する。
【００５６】
前記医薬品は、式（Ｉ）の化合物を含む１つまたは２つ以上の投与単位と、ミトコンドリア阻害剤を含む１つまたは２つ以上の投与単位とを含み得る。
【００５７】
本発明に係る医薬品は、投与単位のそれぞれが式（Ｉ）の化合物およびミトコンドリア阻害剤の両方を含む１つまたは２つ以上の投与単位も含み得る。
【００５８】
本発明の別の実施形態は、ミトコンドリア阻害剤を含まず、式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と、医薬品の使用説明書を提供するための手段とを含む医薬品であり、前記使用説明書は、ミトコンドリア阻害剤を含む薬剤と組み合わせて、医薬品を使用するための説明書を含む。
【００５９】
本発明のさらに別の実施形態は、ミトコンドリア阻害剤と、医薬品の使用説明書を提供するための手段とを含む医薬品であり、前記使用説明書は、シロシンゴピンを除く、式（Ｉ）の化合物を含む薬剤と組み合わせて医薬品を使用するための説明書を含む。この製品の特定の実施形態は、式（Ｉ）の化合物を含まない。
【００６０】
前記医薬品の使用のための説明書を提供するための手段は、特に、説明書が印刷された、医薬品のパッケージおよび／または添付文書を含む。
【００６１】
投与単位のそれぞれが式（Ｉ）の化合物およびミトコンドリア阻害剤の両方、すなわち、前記成分の多剤混合薬（ｆｉｘｅｄ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）を含む１つまたは２つ以上の投与単位を含む本発明に係る医薬品が好ましい。
【００６２】
これらの製品は、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬組成物を含み、例えば、経鼻投与、口腔投与、直腸投与または特に経口投与などの腸内投与用の、および静脈内投与、筋肉内投与または皮下投与などの非経口投与用の組成物である。この組成物は、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとを、単独でまたは、好ましくは、薬学的に許容できる担体と一緒に含み得る。
【００６３】
式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せの投与量は、処置される疾患ならびに種、その年齢、体重、および個々の病態、個々の薬物動態データ、および投与方法に応じて決まる。
【００６４】
医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの約１％〜約９５％の組合せ、好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との約２０％〜約９０％の組合せを含む単回投与形態、および好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との約５％〜約２０％の組合せを含む単回投与型でない形態を含む。単位剤形は、例えば、コーティング錠および素錠、アンプル、バイアル、坐薬、またはカプセル剤である。さらなる剤形は、例えば、軟膏、クリーム、ペースト、発泡体、チンキ剤、滴下剤、スプレー、および分散体である。例は、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との約０．０５ｇ〜約１．０ｇの組合せを含有するカプセル剤である。
【００６５】
本発明の医薬組成物は、それ自体公知の方法で、例えば、従来の混合、顆粒化、コーティング、溶解または凍結乾燥プロセスによって調製される。
【００６６】
式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せの溶液、およびさらに懸濁液または分散体、特に、等張性水溶液、分散体または懸濁液の使用が好ましく、これは、例えば、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せを、単独でまたは担体、例えばマンニトールと一緒に含む凍結乾燥された組成物の場合、使用前に作製され得る。医薬組成物は、滅菌されてもよく、および／または賦形剤、例えば、防腐剤、安定剤、湿潤剤および／または乳化剤、可溶化剤、浸透圧を調節するための塩および／または緩衝液を含んでいてもよく、それ自体公知の方法で、例えば、従来の溶解および凍結乾燥プロセスによって調製される。前記溶液または懸濁液は、粘度増加剤、典型的に、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルピロリドン、またはゼラチン、またはさらに可溶化剤、例えばＴｗｅｅｎ  ８０（登録商標）（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエレート）を含み得る。
【００６７】
油中懸濁液は、油成分として、注射用に一般的な植物油、合成油、または半合成油を含む。これに関して、酸成分として、８〜２２個、特に、１２〜２２個の炭素原子を有する長鎖脂肪酸を含有する液体脂肪酸エステルが特筆され得る。これらの脂肪酸エステルのアルコール成分は、最大で６個の炭素原子を有し、一価または多価、例えば、一価、二価または三価アルコール、特に、グリコールおよびグリセロールである。脂肪酸エステルの混合物として、綿実油、アーモンド油、オリーブ油、ヒマシ油、ゴマ油、大豆油および落花生油などの植物油が特に有用である。
【００６８】
注射用製剤の製造は、例えば、アンプルまたはバイアルへの充填、および容器の密封と同様に、通常、滅菌状態で行われる。
【００６９】
好ましい固体経口剤形に好適な担体は、特に、糖、例えば、ラクトース、サッカロース、マンニトールまたはソルビトール、セルロース調製物、および／またはリン酸カルシウム、例えば、リン酸三カルシウムまたはリン酸水素カルシウムなどの充填剤、およびさらにでんぷん、例えば、トウモロコシ、コムギ、コメまたはジャガイモでんぷん、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドンなどの結合剤、および／または、必要に応じて、上記のでんぷん、さらにカルボキシメチルでんぷん、架橋ポリビニルピロリドン、アルギン酸またはアルギン酸ナトリウムなどのその塩などの崩壊剤である。さらなる賦形剤は、特に、流れ調整剤および潤滑剤、例えば、ケイ酸、タルク、ステアリン酸またはステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸カルシウムなどのその塩、および／またはポリエチレングリコール、またはそれらの誘導体である。
【００７０】
錠剤の核には、特に、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタンを含み得る濃縮された糖溶液、または好適な有機溶媒または溶媒混合物中のコーティング溶液、または腸溶性コーティングの調製のための、フタル酸アセチルセルロースまたはフタル酸ヒドロキシプロピル−メチルセルロースなどの好適なセルロース調製物の溶液の使用によって、好適な、場合により腸溶性のコーティングが設けられ得る。染料または顔料が、例えば、同定の目的のために、または式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せの様々な投与量を示すために、錠剤または錠剤コーティングに加えられ得る。
【００７１】
経口投与用の医薬組成物は、ゼラチンからなる硬カプセル剤、およびさらにゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトールなどの可塑剤からなる軟質の密封カプセル剤も含む。硬カプセル剤は、例えば、コーンスターチなどの充填剤、結合剤、および／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの滑剤、および場合により安定剤と混合された、顆粒の形態の式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せを含有し得る。軟カプセル剤中で、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せが、脂肪油、パラフィン油または液体ポリエチレングリコールまたはエチレングリコールもしくはプロピレングリコールの脂肪酸エステルなどの好適な液体賦形剤に好ましくは溶解または懸濁され、それに、例えば、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルタイプの安定剤および洗浄剤も加えられ得る。
【００７２】
直腸投与に好適な医薬組成物は、例えば、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せ、および坐薬基剤からなる坐薬である。好適な坐薬基剤は、例えば、天然または合成トリグリセリド、パラフィン炭化水素、ポリエチレングリコールまたは高級アルカノールである。
【００７３】
非経口投与の場合、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せの水溶液、または粘度増加物質、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトールおよび／またはデキストラン、および、必要に応じて、安定剤を含有する水性注射用懸濁液が特に好適である。場合により、賦形剤と一緒に、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せはまた、凍結乾燥物の形態であり得、好適な溶媒の添加によって、非経口投与の前に溶液にされ得る。例えば、非経口投与に使用されるような溶液は、輸液としても用いられ得る。
【００７４】
好ましい防腐剤は、例えば、アスコルビン酸などの酸化防止剤、または、ソルビン酸もしくは安息香酸などの殺菌剤である。
【００７５】
ミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンと、式（Ｉ）の化合物との本発明に係る組合せ、および本発明に係るミトコンドリア阻害剤と式（Ｉ）の化合物とを含む医薬組成物は、癌腫、肉腫、神経膠腫、白血病、リンパ腫、例えば、上皮性新生物、扁平上皮新生物、基底細胞性新生物、移行上皮性乳頭腫および癌腫、腺腫および腺癌、付属器および皮膚付属器新生物、粘膜表皮性新生物、嚢胞性新生物、粘液性および漿液性新生物、腺管、小葉性および髄様新生物、腺房細胞新生物、複合上皮性新生物、分化性腺新生物（ｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄ  ｇｏｎａｄａｌ  ｎｅｏｐｌａｓｍ）、傍神経節腫およびグロムス腫瘍、母斑（ｎａｅｖｉ）および黒色腫、肉腫を含む軟部組織腫瘍、線維腫性新生物、粘液腫性新生物、脂肪腫性新生物、筋腫性新生物、複合混合間質性新生物（ｃｏｍｐｌｅｘ  ｍｉｘｅｄ  ａｎｄ  ｓｔｒｏｍａｌ  ｎｅｏｐｌａｓｍ）、線維上皮性新生物、滑膜様新生物（ｓｙｎｏｖｉａｌ  ｌｉｋｅ  ｎｅｏｐｌａｓｍ）、中皮新生物、胚細胞新生物、絨毛性新生物、中腎腫、血管腫瘍、リンパ管腫瘍、骨性および軟骨性新生物、巨細胞腫、混合型骨腫瘍（ｍｉｓｃｅｌｌａｎｅｏｕｓ  ｂｏｎｅ  ｔｕｍｏｒ）、神経膠腫、グリア芽腫、乏突起膠腫、神経上皮新生物（ｎｅｕｒｏｅｐｉｔｈｅｌｉｏｍａｔｏｕｓ  ｎｅｏｐｌａｓｍ）、髄膜腫、神経鞘腫、顆粒細胞腫および胞状軟部肉腫、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫、他のリンパ細網新生物、形質細胞腫、肥満細胞腫、免疫増殖性疾患、急性および慢性白血病を含む白血病、混合型骨髄増殖性疾患、リンパ増殖性疾患および骨髄異形成症候群を含む、様々な型の癌に対する治療効果を示す。
【００７６】
ミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンと、式（Ｉ）の化合物との本発明に係る組合せ、および本発明に係るミトコンドリア阻害剤と式（Ｉ）の化合物とを含む医薬組成物は、紅斑性狼瘡、強皮症、多発性筋炎／皮膚筋炎、混合性結合組織病、関節リウマチ、シェーグレン症候群、結節性多発動脈炎、ヴェーゲナー肉芽腫症などの膠原病；関節リウマチ、グッドパスチャー症候群、ウェゲナー肉芽腫、リウマチ性多発筋痛、ギラン・バレー症候群、多発性硬化症などの全身性自己免疫疾患；１型糖尿病、橋本甲状腺炎、グレーブス病、セリアック病、クローン病、潰瘍性大腸炎、アジソン病、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫性肝炎、および巨細胞性動脈炎などの限局性自己免疫疾患を含む、Ｔ細胞増殖の阻止に感受性のある免疫疾患に対する治療効果も示す。
【００７７】
本発明に係るミトコンドリア阻害剤と式（Ｉ）の化合物との組合せおよび本発明に係る式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとを含む医薬組成物は、多剤混合薬の形態で適用され得る。このような多剤混合薬は、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとを、１対１０〜１対１０００、好ましくは、１対１００〜１対２００（１対１３０の組合せなど）の相対量（重量比）で含有していてもよく、メトホルミンの最大推奨１日投与量は、２型糖尿病の処置におけるその使用の経験に基づく。あるいは、式（Ｉ）の化合物と、ミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンのいくつかとの間の共有結合が予測され得る。
【００７８】
あるいは、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せは、場合により、キットで一緒に提供される２つの異なる別個の医薬組成物で適用され得る。式（Ｉ）の化合物およびミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンの投与は、同時に投与され得、または式（Ｉ）の化合物は、ミトコンドリア阻害剤の前または後に別々に投与される。さらに、この化合物は、互いに独立して、妥当な期間内に与えられ得る。例えば、２型糖尿病の処置のための市販のメトホルミン含有薬剤のような、ミトコンドリア阻害剤を含有する別の認可された薬剤と組み合わせた式（Ｉ）の化合物を含有する別個の薬剤による癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置が、本発明の別の特定の実施形態である。
【００７９】
式（Ｉ）の化合物と、ミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとを含む医薬組成物は、他の化学療法剤とさらに併用され得る。可能な組合せのための治療剤は、特に、１つ以上の細胞増殖抑制性または細胞毒性化合物、例えば、化学療法剤またはイダルビシン、シタラビン、インターフェロン、ヒドロキシウレア、ブスルファンを含む群から選択されるいくつか、またはポリアミン生合成の阻害剤、ｍＴＯＲ経路の阻害剤、ｍＴＯＲ−複合体１またはｍＴＯＲ複合体２の阻害剤、プロテインキナーゼ、特に、セリン／トレオニンプロテインキナーゼの阻害剤（プロテインキナーゼＣなど）、またはチロシンプロテインキナーゼの阻害剤（上皮成長因子受容体チロシンキナーゼなど）、サイトカイン、ＴＧＦ−βまたはＩＦＮ−βなどの負の成長制御因子（ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｇｒｏｗｔｈ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒ）、アロマターゼ阻害剤、古典的な細胞増殖抑制剤、リン酸化タンパク質とＳＨ２ドメインの相互作用の阻害剤、Ｂｃｌ−２の阻害剤およびＢａｘ、Ｂｉｄ、Ｂａｄ、Ｂｉｍ、Ｎｉｐ３およびＢＨ３−ｏｎｌｙタンパク質などのＢｃｌ−２ファミリーメンバーの調節剤である。
【００８０】
式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せ、および式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬組成物は、放射線療法、免疫療法、外科的介入、またはこれらの組合せと組み合わせて、特に、癌の処置のために投与され得る。他の治療法に関連するアジュバント療法または手術と組み合わせたネオアジュバント療法のように、長期治療が同様に可能である。他の考えられる処置は、腫瘍退縮後の患者の状態を保つための療法、または例えばリスクがある患者における化学予防療法である。
【００８１】
本発明は、癌および自己免疫などの免疫不全の処置のための方法にさらに関し、この方法は、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せを、前記疾患に対して有効な量で、このような処置を必要とする温血動物に投与する工程を含む。式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せは、そのまままたは特に、医薬組成物の形態で、予防的にまたは治療的に、好ましくは、前記疾患に対して有効な量で、このような処置を必要とする温血動物、例えばヒトに投与され得る。約７０ｋｇの体重を有する個体の場合、投与される１日投与量は、約０．０５ｇ〜約３ｇ、好ましくは、約０．２５ｇ〜約１．５ｇの、本発明の組合せである。
【００８２】
本発明は、癌の処置、特に、上記の特定の癌の処置のための、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せの使用、および式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬組成物の使用にも関する。より特定的に、本発明は、癌腫、肉腫、白血病、骨髄腫、リンパ腫、および神経系の癌の処置のための、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せの使用および式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬組成物の使用に関する。さらに、本発明は、自己免疫、移植医学および免疫抑制が望ましい他の場合、特に、上で説明された、Ｔ細胞増殖の阻止に感受性のある免疫疾患、全身性自己免疫疾患、および限局性自己免疫疾患において免疫抑制を達成するための、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せの使用および式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬組成物の使用に関する。より特定的に、本発明は、皮膚、神経系、結合組織、筋肉、神経系、造血系、骨および内蔵器官（ｉｎｎｅｒ  ｏｒｇａｎ）の自己免疫疾患、特に、乾癬、多発性硬化症、および貧血などの自己免疫疾患の処置のための、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せの使用、および式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬組成物の使用に関する。
【００８３】
それぞれ使用されるべき、式（Ｉ）の化合物およびミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンの好ましい相対量、医薬組成物の投与量および種類は、癌または自己免疫疾患の型、疾患の重症度および進行、および処置される患者の具体的な病態に応じて決まり、処置を担当する医師によって相応に決定される必要がある。
【００８４】
本発明のさらなる特定の態様は、以下のものを含む：
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤、ここで、ミトコンドリア阻害剤は、メトホルミン、ブホルミンまたはフェンホルミン、特に、メトホルミンを含むかまたはそれらであり；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤、ここで、ミトコンドリア阻害剤は、ロテノン、ピエリシジンＡ、エピベルベリン、２−テノイルトリフルオロアセトン（ＴＴＦＡ）、アンチマイシンＡ、オリゴマイシン、カルボニルシアニド−ｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン（ＦＣＣＰ）、およびスタブジンから選択され；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤、ここで、ミトコンドリア阻害剤は、オリゴマイシンを含むかまたはオリゴマイシンであり；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤、ここで、式（Ｉ）の化合物およびミトコンドリア阻害剤の相対投与量（重量比）は、１対１０〜１対１０００、好ましくは、１対１０〜１対５００、例えば、１対１０〜１対２００であり；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤、ここで、ミトコンドリア阻害剤は、メトホルミンであり、式（Ｉ）の化合物およびメトホルミンの相対投与量（重量比）は、１対１０〜１対２００であり；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤、ここで、ミトコンドリア阻害剤は、オリゴマイシンであり、式（Ｉ）の化合物およびオリゴマイシンの相対投与量（重量比）は、１０００対１〜１００００対１であり；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤、ここで、癌は、癌腫、肉腫、白血病、骨髄腫、リンパ腫、および神経系の癌から選択され；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて皮膚、神経系、結合組織、筋肉、神経系、造血系、骨および内蔵器官の自己免疫疾患の処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤、ここで、式（Ｉ）の化合物は、ミトコンドリア阻害剤の投与の前または後に別々に投与され；
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）または上記の式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤、ここで、式（Ｉ）の化合物およびミトコンドリア阻害剤は、一緒にまたは同時に投与され；および
−ミトコンドリア阻害剤と組み合わせて癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための上記の式（Ｉ）の化合物（ただし、Ａ１がアルキルである場合、式（Ｉ）中のＲ２は、水素またはメトキシであってはならない）または上記の式（Ｉ）の化合物（ただし、Ａ１がアルキルである場合、式（Ｉ）中のＲ２は、水素またはメトキシであってはならない）と組み合わせて前記処置に使用するためのミトコンドリア阻害剤。
【００８５】
上に既述されている本発明に係る医薬品のさらなる特定の実施形態は、例えば、
−ミトコンドリア阻害剤は、メトホルミン、ブホルミン、フェンホルミン、ロテノン、ピエリシジンＡ、エピベルベリン、２−テノイルトリフルオロアセトン（ＴＴＦＡ）、アンチマイシンＡ、カルボニルシアニド−ｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン（ＦＣＣＰ）、およびスタブジンから選択され、式（Ｉ）の化合物およびミトコンドリア阻害剤の相対量（重量比）は、１対１０〜１対１０００、好ましくは、１対１０〜１対５００、例えば、１対１０〜１対２００であり；
−ミトコンドリア阻害剤は、メトホルミンであり、式（Ｉ）の化合物およびメトホルミンの相対量（重量比）は、１対１０〜１対２００であり；
−ミトコンドリア阻害剤は、オリゴマイシンであり、式（Ｉ）の化合物およびオリゴマイシンの相対量（重量比）は、１０００対１〜１００００対１であるこのような医薬品を含む。
【００８６】
本発明のさらなる態様は、癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための、本明細書に記載される医薬品である。
【００８７】
本発明は、上で説明された、癌または自己免疫疾患の処置のための医薬組成物の調製のための、式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せの使用、ならびにミトコンドリア阻害剤と組み合わせて、癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための薬剤の製造のための使用（シロシンゴピンを除く）、または（シロシンゴピンを除く）と組み合わせた癌もしくは自己免疫疾患の処置または免疫抑制処置に使用するための薬剤の製造のための、ミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンの使用にさらに関する。
【００８８】
特に、本発明は、癌または自己免疫疾患の処置のための方法を提供し、この方法は、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤、例えばメトホルミンとの組合せ、または式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤とを含む医薬組成物の組合せを、前記疾患に対して有効な量で、このような処置を必要とする温血動物に投与する工程と含む。ヒトの処置が特に好ましい。
【００８９】
本発明は、癌性細胞が式（Ｉ）の化合物による処置に反応するかどうかを決定するための方法であって、
（ａ）単細胞懸濁液を調製し、癌性細胞を好適な培地中で培養する工程と、
（ｂ）癌性細胞を、式（Ｉ）の化合物（シロシンゴピンを除く）でインキュベートする工程と、
（ｃ）工程（ｂ）の癌性細胞を、正電荷を帯びた蛍光色素でインキュベートする工程と、
（ｄ）励起蛍光強度を測定する工程と、
（ｅ）工程（ｄ）の測定された蛍光強度を、正電荷を帯びた蛍光色素単独でインキュベートされた癌性細胞の測定された蛍光強度と比較する工程とを含み、
式（Ｉ）の化合物で予めインキュベートされた癌性細胞の蛍光強度の相対的増加が、式（Ｉ）の化合物による処置に対する反応性を示す方法にさらに関する。
【００９０】
実用的な目的のため、癌性細胞は、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せで処置される可能性のある患者から単離された細胞である。このような癌性細胞を培養するのに好適な培地は、当該技術分野において周知であり、例えば、イスコブ変法ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）またはＲＰＭＩ  １６４０培地を含む。試験の前に、生体外腫瘍材料に由来する単細胞懸濁液が調製される必要がある。さらに、好適な標準化された市販の方法が利用可能であり、この方法では、物理的破壊および酵素消化工程が組み合わされている（例えば、ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｍｉｌｔｅｎｙｉｂｉｏｔｅｃ．ｃｏｍ／ｄｏｗｎｌｏａｄｓ／６７６０／６７６４／３０５０１／ＰＤＦ１．ｐｄｆ）による方法またはＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ．ｃｏｍ／ｅｔｃ／ｍｅｄｉａｌｉｂ／ｅｎ／ｆｉｌｅｌｉｂｒａｒｙ／ｐｄｆ．Ｐａｒ．１８４９２．Ｆｉｌｅ．ｄａｔ／Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ＿Ｃｅｌｌｓ＿Ｙ１４４７７＿Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ．ｐｄｆ）による方法を参照）。試験のために、癌性細胞を、様々な濃度の式（Ｉ）の化合物（例えば、０．１μＭおよび１０μＭ）で、２〜８時間にわたって予めインキュベートすることが望ましい。好適な正電荷を帯びた蛍光色素は、ＴＭＲＭ（テトラメチルローダミンメチルエステル過塩素酸塩）である。考えられる他の正電荷を帯びた蛍光色素は、ローダミンＴＭＲＥ（テトラメチルローダミンエチルエステル過塩素酸塩）、ローダミン１２３（ローダミンメチルエステルクロリド）、ローダミンＢ（テトラエチルローダミン塩酸塩）、ＭｉｔｏＴｒａｃｋｅｒ  Ｒｅｄ  ＣＭＸＲｏｓ（登録商標）（ＣＡＳ  ｄｅｓｉｇｎａｔｉｏｎ  １Ｈ，５Ｈ，１１Ｈ，１５Ｈ−キサンテノ［２，３，４−ｉｊ：５，６，７−ｉ’ｊ’］ジキノリジン−１８−イウム、９−［４−（クロロメチル）フェニル］−２，３，６，７，１２，１３，１６，１７−オクタヒドロ−，クロリド）、およびカルボシアニンＪＣ−１（５，５’，６，６’−テトラクロロ−１，１’，３，３’−テトラエチルベンズイミダゾロカルボシアニンヨウ化物）およびＤｉＯＣ６（３）（３，３’−ジヘキシルベンゾオキサゾロカルボシアニンヨウ化物）である。
【００９１】
好ましい蛍光色素ＴＭＲＭ（テトラメチルローダミンメチルエステル）による染色は、好ましくは、供給元であるＳｅｒｏｔｅｃによって示されるような標準的な方法にしたがって行われる。蛍光は、好ましくは、標準的な市販のフローサイトメーターにおいて、４８８ｎｍでの励起の後、５７５ｎｍで測定される。
【００９２】
癌性細胞が、式（Ｉ）の化合物に対する反応性を示す場合、対応する患者は、おそらく、式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せによって有効に処置される。癌性細胞が、ＴＭＲＭを用いた対応する蛍光試験において式（Ｉ）の化合物に反応しない場合、患者が式（Ｉ）の化合物とミトコンドリア阻害剤との組合せで有効に処置され得る可能性は低い。
【実施例】
【００９３】
本発明の特定の実施形態が、以下の実施例に記載され、これらの実施例は、本発明をより詳細に例示するのに役立つ。
【００９４】
一般的な注釈：
全ての試薬および溶媒は、商業的品質を有し、特に断りのない限り、さらに精製せずに使用され；
反応は、アルゴンまたは窒素雰囲気下で、十分に乾燥したガラス製品中で、無水溶媒を用いて慣例的に行われ；
蒸発が、減圧下での回転蒸発によって行われ、後処理（ｗｏｒｋ−ｕｐ）手順が、ろ過による残留固体の除去の後に行われ；
全ての温度が、℃で示され；特に断りのない限り、操作が、典型的に１５〜３０℃の範囲の室温で行われ；
カラムクロマトグラフィー（フラッシュ手順による）が、化合物を精製するのに使用され、特に記載しない限り、Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０（７０〜２３０メッシュＡＳＴＭ）を用いて行われ；
一般に、一連の反応の後、ＴＬＣ、ＨＰＬＣ、またはＬＣ／ＭＳが続き、反応時間は、あくまでも例示のために示され；収率は、あくまでも例示のために示され、必ずしも達成可能な最大値であるとは限らず；
本発明の最終生成物の構造が、一般に、ＮＭＲおよび質量スペクトル技術によって確認される。プロトンＮＭＲスペクトルが、Ｂｒｕｃｋｅｒ  ４００ＭＨｚ分光計またはＶａｒｉａｎ  Ｍｅｒｃｕｒｙ  Ｐｌｕｓ  ４００ＭＨｚ分光計において記録される。化学シフト（δ）が、Ｍｅ４Ｓｉまたは内部標準としての溶媒ピークに対してｐｐｍで報告され、Ｊ値が、ヘルツ（Ｈｚ）単位である。各ピークは、幅広の一重項（ｂｒ）、一重項（ｓ）、二重項（ｄ）、三重項（ｔ）、二重項の二重項（ｄｄ）、二重項の三重項（ｔｄ）または多重項（ｍ）として示される。質量スペクトルが、ポジティブＥＳＩモードでｑ−Ｔｏｆ  Ｕｌｔｉｍａ（Ｗａｔｅｒｓ  ＡＧ）質量分析計またはＡｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ  ＭＳ分光計を用いて生成され；
各中間体が、次の段階に必要とされる標準になるまで精製され、割り当てられた構造が正しいことを確認するのに十分に詳細に特徴付けられ；
非キラル相における分析および分取ＨＰＬＣが、ＲＰ−Ｃ１８ベースのカラムを用いて行われ；
以下の略語が使用され得る：
アセトン−ｄ６：重水素化アセトン
ＣＤＣｌ３：重水素化クロロホルム
ＣＤ３ＯＤ：重水素化メタノール
ＤＣＣ：Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＡＰ：４−（ジメチルアミノ）ピリジン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ−ｄ６：重水素化ジメチルスルホキシド
Ｄ２Ｏ：重水
ＥＬＳＤ：蒸発光散乱検出
ＨＰＬＣ：高性能液体クロマトグラフィー
Ｊ：結合定数
ＬＣ／ＭＳ：質量分析と組み合わせた液体クロマトグラフィー
Ｍｅ４Ｓｉ：テトラメチルシラン
ＭＳ：質量分析
ＮＭＲ：核磁気共鳴
４−ＰＰＹ：４−ピロリジノピリジン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
【００９５】
実施例１：
（ａ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ホルミルフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製：
【化１３】
2015522048.tif 000015
窒素雰囲気下で、５００ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−ヒドロキシ−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２９０１−６６−８）（１．２１ｍｍｏｌ、１．０当量）、５４３ｍｇの４−ホルミル安息香酸（３．６２ｍｍｏｌ、３．０当量）、７４７ｍｇのＤＣＣ（３．６２ｍｍｏｌ、３．０当量）および５４ｍｇの４−ＰＰＹ（０．３６ｍｍｏｌ、０．３当量）を、５０ｍＬのＤＣＭに溶解させた。１５℃で２０時間撹拌した後、反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤：酢酸エチル／石油エーテル＝４／１ｖ／ｖ−酢酸エチル／石油エーテル／アセトン＝４／１／１ｖ／ｖ／ｖ）によって残渣を精製したところ、５００ｍｇの所望の生成物が淡黄色の固体として得られた。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：５４７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
【００９６】
（ｂ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製：
【化１４】
2015522048.tif 000016
Ｎ２雰囲気下で、４８０ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ホルミルフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．８８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、１５ｍＬのＴＨＦおよび３０ｍＬのエタノールに溶解させた。次に、１４３ｍｇのＮａＢＨ４（３．７８ｍｍｏｌ、４．３当量）を０℃で加えた。０〜５℃で２時間撹拌した後、反応混合物をろ過し、分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．１％のギ酸を含む水およびアセトニトリル；勾配）によってろ液を直接精製したところ、３８０ｍｇの所望の生成物が白色の固体（ギ酸塩）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５２（ｓ，１Ｈ）、８．０３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．５０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．４ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．４０（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．９５（ｍ，１Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、４．３５（ｍ，１Ｈ）、３．８９（ｄｄ，Ｊ１≒，Ｊ２＝１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４０（ｓ，３Ｈ）、３．１０〜１．７５（ｍ，１３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：５４９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【００９７】
（ｃ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−（｛４−［（アセチルオキシ）メチル］フェニル｝カルボニルオキシ）−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化１５】
2015522048.tif 000017
Ｎ２雰囲気下で、１００ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．１８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、６ｍＬのピリジンに溶解させた。次に、３ｍｇの４−ＰＰＹ（０．０２ｍｍｏｌ、０．１１当量）および１８６ｍｇの無水酢酸（１．８２ｍｍｏｌ、１０当量）を加えた。１５℃で２０時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．１％のギ酸を含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、６４ｍｇの所望の生成物がオフホワイトの固体（ギ酸塩）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５４（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．５５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝８．４ＨｚおよびＪ２＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．１９（ｓ，２Ｈ）、４．９７（ｍ，１Ｈ）、４．３５（ｓ，１Ｈ）、３．８９（ｄｄ，Ｊ１＝９．６ＨｚおよびＪ２＝１０．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４０（ｓ，３Ｈ）、３．１０〜１．７５（ｍ，１３Ｈ）、２．１２（ｓ，３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：５９１．１［Ｍ＋Ｈ］＋
【００９８】
実施例２：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−｛［（エトキシカルボニル）オキシ］メチル｝フェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化１６】
2015522048.tif 000018
Ｎ２雰囲気下で、１００ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．１８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、６ｍＬのピリジンに溶解させた。次に、３９６ｍｇのクロロギ酸エチル（３．６５ｍｍｏｌ、２０当量）を０℃で滴下して加えた。この温度で３０分間撹拌した後、反応混合物を４ｍＬのメタノールで希釈し、減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．１％のギ酸を含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、９０ｍｇの所望の生成物がオフホワイトの固体（ギ酸塩）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．６０（ｂｒ，１Ｈ）、８．０８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．５６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｓ，１Ｈ）、６．６３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．２５（ｓ，２Ｈ）、４．９７（ｍ，１Ｈ）、４．４０（ｍ，１Ｈ）、４．１８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．８９（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝１０．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４０（ｓ，３Ｈ）、３．２０〜１．７５（ｍ）、１．２４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：６２１．２［Ｍ＋Ｈ］＋
【００９９】
実施例３：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）フェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化１７】
2015522048.tif 000019
Ｎ２雰囲気下で、１００ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−ヒドロキシ−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２９０１−６６−８）（０．２４ｍｍｏｌ、１．０当量）、１８２ｍｇのＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−アミノメチル−安息香酸（０．７２ｍｍｏｌ、３．０当量）、１４９ｍｇのＤＣＣ（０．７２ｍｍｏｌ、３．０当量）および１１ｍｇの４−ＰＰＹ（０．０７ｍｍｏｌ、０．３当量）を、１０ｍＬのＤＣＭに溶解させた。１５℃で１７時間撹拌した後、反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０５％のアンモニアを含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、１４０ｍｇの所望の生成物がオフホワイトの固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５４（ｓ，１Ｈ）、８．０２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．５３（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝８．４Ｈｚ、Ｊ２＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．９６（ｍ，１Ｈ）、４．３５（ｍ，１Ｈ）、４．２２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．８９（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝１０．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．３９（ｓ，３Ｈ）、３．１０〜１．７５（ｍ，１３Ｈ）、１．４０（ｓ，９Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：６４８．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１００】
実施例４：
（ａ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製：
【化１８】
2015522048.tif 000020
Ｎ２雰囲気下で、８００ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）フェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．９８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、１０ｍＬのＤＣＭに溶解させた。次に、酢酸エチル中の４０ｍＬの２Ｍの塩酸塩溶液（８０ｍｍｏｌ、８１．６当量）を加えた。１５℃で２時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０５％のアンモニアを含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、３８０ｍｇの所望の生成物が白色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５３（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．５２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．９５（ｍ，１Ｈ）、４．３５（ｍ，１Ｈ）、３．８８（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．８１（ｓ，２Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４０（ｓ，３Ｈ）、３．１０〜１．７５（ｍ，１３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：５４８．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１０１】
（ｂ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−｛［（エトキシカルボニル）アミノ］メチル｝フェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化１９】
2015522048.tif 000021
Ｎ２雰囲気下で、１００ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（アミノメチル）フェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．１８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、６ｍＬのピリジンに溶解させた。次に、９９ｍｇのクロロギ酸エチル（１．８３ｍｍｏｌ、５．０当量）を加えた。１５℃で１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０５％のギ酸を含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、６２ｍｇの所望の生成物が黄色の固体（ギ酸塩）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５４（ｓ，１Ｈ）、８．０２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．７７（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝８．８Ｈｚ、Ｊ２＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．９５（ｍ，１Ｈ）、４．３７（ｓ，１Ｈ）、４．２８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ、２Ｈ）、４．０３（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．９０（ｍ，１Ｈ）、３．７８（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４０（ｓ，３Ｈ）、３．１０〜１．７５（ｍ，１３Ｈ）、１．１９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：６２０．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１０２】
実施例５：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（２−エトキシ−２−オキソエチル）フェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化２０】
2015522048.tif 000022
２０ｍＬのＤＣＭ中の２００ｍｇの（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−ヒドロキシ−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２９０１−６６−８）（０．４８ｍｍｏｌ、１．０当量）、２００ｍｇの４−カルボキシ−ベンゼン酢酸エチルエステル（ＣＡＳ  ５７２６９−６５−５）（０．９７ｍｍｏｌ、２．０当量）、１８ｍｇのＤＭＡＰ（０．１４ｍｍｏｌ、０．３当量）および１４９ｍｇのＤＣＣ（０．７２ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液を、室温で１６時間撹拌した。次に、反応混合物を２０ｍＬの水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で蒸発させた。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．１％のＴＦＡを含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、９７ｍｇの所望の生成物が淡黄色の固体（ＴＦＡ塩）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ  ｐｐｍ：８．００（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．３７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．９１（ｓ，１Ｈ）、６．７１（ｄｄ，Ｊ１＝８．４Ｈｚ、Ｊ２＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．０７（ｍ，１Ｈ）、４．９４（ｍ，１Ｈ）、４．０９（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．８９（ｍ，１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．７１（ｓ，２Ｈ）、３．３９（ｓ，３Ｈ）、３．６２〜１．８９（ｍ，１４Ｈ）、１．１８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：６０５．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１０３】
実施例６：
（ａ）４−ニトロフェニル［ピリジン−４−イル］メチル］カーボネートの調製：
【化２１】
2015522048.tif 000023
５ｍＬのＤＣＭ中の３０ｍｇの４−ヒドロキシメチルピリジン（０．２７ｍｍｏｌ、１．０当量）および６７ｍｇのクロロギ酸４−ニトロフェニル（０．３３ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液に、５６ｍｇのトリエチルアミン（０．５５ｍｍｏｌ、２当量）を０℃で加えた。２０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤：石油エーテル／酢酸エチル＝１／２ｖ／ｖ）によって残渣を精製したところ、３５ｍｇの所望の生成物が白色の固体として得られた。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：２７５．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１０４】
（ｂ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（３，５−ジメトキシ−４−｛［（ピリジン−４−イルメトキシ）カルボニル］オキシ｝フェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化２２】
2015522048.tif 000024
５ｍＬのＤＭＦ中の３０ｍｇの４−ニトロフェニル［ピリジン−４−イル］メチル］カーボネート（ＣＡＳ  ３２９１９−２４−７）（０．１１ｍｍｏｌ、１．０当量）および６５ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２１４３２−７４−６）（０．１１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、１７ｍｇのＫ２ＣＯ３（０．１２ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。２０℃で２０時間撹拌した後、反応混合物を５０ｍＬの酢酸エチルで希釈し、２０ｍＬの水で３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０２％のアンモニアを含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、３０ｍｇの所望の生成物が白色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５５（ｓ，１Ｈ）、８．６５（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．４４（ｓ，２Ｈ）、７．４１（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．３８（ｓ，２Ｈ）、４．９９〜４．９７（ｍ，１Ｈ）、４．３６（ｍ，１Ｈ）、３．９７（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．９５（ｓ，６Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．０６〜１．８１（ｍ，１３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７３０．３［Ｍ＋Ｈ］＋、３６５．９［Ｍ＋２Ｈ］２＋
【０１０５】
実施例７：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（３，５−ジメトキシ−４−｛［（ピリジン−３−イルメトキシ）カルボニル］オキシ｝フェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化２３】
2015522048.tif 000025
実施例６にしたがって、４−ニトロフェニル［ピリジン−３−イル］メチル］カーボネート（ＣＡＳ  ３２９３９−３２−５）およびメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２１４３２−７４−６）から生成物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５５（ｓ，１Ｈ）、８．６７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．６２（ｄｄ，Ｊ１＝１．６ＨｚおよびＪ２＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．９０〜７．８６（ｍ，１Ｈ）、７．５２〜７．４８（ｍ，１Ｈ）、７．４２（ｓ，２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．４ＨｚおよびＪ２＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．３６（ｓ，２Ｈ）、５．００〜４．８０（ｍ，１Ｈ）、４．４０〜４．２０（ｍ，１Ｈ）、４．０３〜３．９４（ｍ，１Ｈ）、３．８７（ｓ，６Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．０６〜１．６１（ｍ，１３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７３０．２［Ｍ＋Ｈ］＋、３６５．８［Ｍ＋２Ｈ］２＋
【０１０６】
実施例８：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（｛［（３，５−ジメトキシフェニル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）−３，５−ジメトキシフェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化２４】
2015522048.tif 000026
実施例６にしたがって、４−ニトロフェニル−（３，５−ジメトキシベンジル）カーボネート（ＣＡＳ  ６４５３−６２−９）およびメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２１４３２−７４−６）から生成物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５６（ｓ，１Ｈ）、７．４３（ｓ，２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．４ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．５９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、２Ｈ）、６．５３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．２４（ｓ，２Ｈ）、４．９９〜４．９６（ｍ，１Ｈ）、４．３６（ｍ，１Ｈ）、４．００〜３．９４（ｍ，１Ｈ）、３．８９（ｓ，６Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．８１（ｓ，６Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．０５〜１．８０（ｍ，１３Ｈ）
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７８９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１０７】
実施例９：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（｛［（４−クロロフェニル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）−３，５−ジメトキシフェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化２５】
2015522048.tif 000027
実施例６にしたがって、４−ニトロフェニル−（４−クロロベンジル）カーボネート（ＣＡＳ  ９７５３４−８８−８）およびメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２１４３２−７４−６）から生成物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５４（ｓ，１Ｈ）、７．５３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．４７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．４２（ｓ，２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．３１（ｓ，２Ｈ）、５．００〜４．８０（ｍ，１Ｈ）、４．３７（ｍ，１Ｈ）、４．００〜３．９４（ｍ，１Ｈ）、３．８９（ｓ，６Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．０６〜１．８０（ｍ，１３Ｈ）
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７６３．２［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１０８】
実施例１０：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）−３，５−ジメトキシフェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化２６】
2015522048.tif 000028
実施例６にしたがって、４−ニトロフェニル−（３，５−ジクロロベンジル）カーボネート（４−ニトロフェニル［ピリジン−４−イル］メチル］カーボネートの調製にしたがって調製される）およびメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２１４３２−７４−６）から生成物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５４（ｓ，１Ｈ）、７．６７（ｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．４４（ｓ，２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．３４（ｓ，２Ｈ）、５．００〜４．９０（ｍ，１Ｈ）、４．３６（ｍ，１Ｈ）、４．００〜３．９４（ｍ，１Ｈ）、３．９０（ｓ，６Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４３（ｓ，３Ｈ）、３．０６〜１．８０（ｍ，１３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７９７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１０９】
実施例１１：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［３，５−ジメトキシ−４−（｛［（４−メトキシフェニル）メトキシ］カルボニル｝オキシ）フェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化２７】
2015522048.tif 000029
実施例６にしたがって、４−ニトロフェニル−（４−メトキシベンジル）カーボネート（ＣＡＳ  ２５５０６−３７−０）およびメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２１４３２−７４−６）から生成物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５４（ｓ，１Ｈ）、７．４２（ｓ，２Ｈ）、７．３９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．２２（ｓ，２Ｈ）、４．９９〜４．９３（ｍ，１Ｈ）、４．３６（ｍ，１Ｈ）、３．９８〜３．９６９ｍ、１Ｈ）、３．８８（ｓ，６Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．０５〜１．８０（ｍ，１３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７５９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１０】
実施例１２：
（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ，１８Ｓ，２０Ｒ，２３Ｒ）−２３−メトキシ−２２−オキソ−２１−オキサ−６，１６−ジアザヘキサシクロ［１８．２．１．０２，１８．０４，１６．０５，１３．０７，１２］トリコサ−５（１３），７，９，１１−テトラエン−９−イルカーボネートの調製：
【化２８】
2015522048.tif 000030
１０ｍＬのＤＭＦ中の１．００ｇ（２．７１ｍｍｏｌ、１．０当量）の（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ，１８Ｓ，２０Ｒ，２３Ｒ）−９−ヒドロキシ−２３−メトキシ−２１−オキサ−６，１６−ジアザヘキサシクロ［１８．２．１．０２，１８．０４，１６．０５，１３．０７，１２］トリコサ−５（１３），７，９，１１−テトラエン−２２−オン（ＣＡＳ  ８６６４１２−７４−０）（Ｇ．Ｖａｒｃｈｉ，Ａ．Ｂａｔｔａｇｌｉａ，Ｃ．Ｓａｍｏｒｉ，Ｅ．Ｂａｌｄｅｌｌｉ，Ｂ．Ｄａｎｉｅｌｉ，Ｇ．Ｆｏｎｔａｎａ，Ａ．Ｇｕｅｒｒｉｎｉ  ａｎｄ  Ｅ．Ｂｏｍｂａｒｄｅｌｌｉ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２００５，６８，１６２９−１６３１にしたがって調製される）の溶液に、６７ｍｇのＤＭＡＰ（０．５４ｍｍｏｌ、０．２当量）および７１１ｍｇの二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（３．２６ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。３５℃で１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を２ｍＬのメタノールで洗浄し、減圧下で乾燥させたところ、１．００ｇの所望の生成物が白色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．９４（ｓ，１Ｈ）、７．３３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．８１〜４．７８（ｍ，１Ｈ）、４．１６〜４．１３（ｍ，１Ｈ）、３．５２〜３．４８（ｍ，１Ｈ）、３．４０〜１．５０（ｍ，２５Ｈ）
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：４６９［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１１】
（ｂ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］オキシ｝−１７−ヒドロキシ−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製：
【化２９】
2015522048.tif 000031
６０ｍＬのメタノール中の５５０ｍｇのｔｅｒｔ−ブチル（１Ｓ，２Ｓ，４Ｒ，１８Ｓ，２０Ｒ，２３Ｒ）−２３−メトキシ−２２−オキソ−２１−オキサ−６，１６−ジアザヘキサシクロ［１８．２．１．０２，１８．０４，１６．０５，１３．０７，１２］トリコサ−５（１３），７，９，１１−テトラエン−９−イルカーボネート（１．１７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、３２ｍｇのナトリウムメトキシド（０．５９ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。６５℃で１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を３０ｍＬのＤＣＭに溶解させ、１０ｍＬの水で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮したところ、５２０ｍｇの所望の粗生成物が淡黄色の固体として得られ、それを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．８０（ｓ，１Ｈ）、７．３３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ１＝２．４ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．８５〜４．８３（ｍ，１Ｈ）、４．３７〜４．３４（ｍ，１Ｈ）、３．７５（ｓ，３Ｈ）、３．４７（ｓ，３Ｈ）、３．３８〜１．５０（ｍ，２３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：５０１［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１２】
（ｃ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］オキシ｝−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化３０】
2015522048.tif 000032
４５０ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］オキシ｝−１７−ヒドロキシ−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．９０ｍｍｏｌ、１．０当量）、２９２ｍｇの４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシ−安息香酸（ＣＡＳ  １８７８０−６７−１）（１．０８ｍｍｏｌ、１．２当量）、２７８ｍｇのＤＣＣ（１．３５ｍｍｏｌ、１．５当量）、２２ｍｇのＤＭＡＰ（０．１８ｍｍｏｌ、０．２当量）および１０ｍＬのＤＣＭを含有する混合物を、室温で２０時間撹拌した。次に、反応混合物を減圧下で濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／メタノール＝１５０／１〜１００／１、ｖ／ｖ）によって残渣を精製した。得られた粗生成物を、分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０２％のアンモニアを含む水およびアセトニトリル；勾配）によってさらに精製したところ、１８０ｍｇの所望の生成物が白色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．８７（ｓ，１Ｈ）、７．４２（ｓ，２Ｈ）、７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．０８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．００〜４．９５（ｍ，１Ｈ）、４．４０（ｍ，１Ｈ）、４．２６（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．０１〜３．９５（ｍ，１Ｈ）、３．９０（ｓ，６Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．０８〜１．８３（ｍ，１３Ｈ）、１．５０（ｓ，９Ｈ）、１．３５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７５３．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１３】
実施例１３：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−６−ヒドロキシ−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化３１】
2015522048.tif 000033
３００ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］オキシ｝−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）を、１０ｍＬのアセトニトリルに溶解させた。次に、１．０ｍＬの濃塩酸水溶液を加えた。３５℃で１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で蒸発させた。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０２％のアンモニアを含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、１００ｍｇの所望の生成物が白色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．３６（ｓ，１Ｈ）、８．７９（ｓ，１Ｈ）、７．４２（ｓ，２Ｈ）、７．１２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．６８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．４７（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．９８〜４．９６（ｍ，１Ｈ）、４．３５（ｍ，１Ｈ）、４．２６（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．９６（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝１０．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．９０（ｓ，６Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．０４〜１．７６（ｍ，１３Ｈ）、１．３０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：５６３．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１４】
実施例１４：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−（アセチルオキシ）−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化３２】
2015522048.tif 000034
６０ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−６−ヒドロキシ−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．０９ｍｍｏｌ、１．０当量）および６ｍｇのＤＭＡＰ（０．０５ｍｍｏｌ、０．５当量）を、５ｍＬのＤＣＭに溶解させた。次に、１４ｍｇの無水酢酸（０．１４ｍｍｏｌ、１．５当量）を加えた。１５℃で１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０２％のアンモニアを含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、５０ｍｇの所望の生成物が白色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．８７（ｓ，１Ｈ）、７．４２（ｓ，２Ｈ）、７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．０３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．７１（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．００〜４．９３（ｍ，１Ｈ）、４．４０（ｍ，１Ｈ）、４．２６（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．００〜３．９５（ｍ，１Ｈ）、３．９０（ｓ，６Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．０８〜１．７７（ｍ，１６Ｈ）、１．３０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：６９５．２［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１５】
実施例１５：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−（ベンゾイルオキシ）−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化３３】
2015522048.tif 000035
１００ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−６−ヒドロキシ−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．１５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、２ｍＬのピリジンに溶解させた。次に、１７８ｕＬの塩化ベンゾイル（１．５３ｍｍｏｌ、１０当量）および１０ｍｇのＤＭＡＰ（０．０８ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。４６℃で３時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／メタノール＝１００／１〜４０／１、ｖ／ｖ）によって残渣を精製した。得られた生成物を、分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０２％のアンモニアを含む水およびアセトニトリル；勾配）によってさらに精製したところ、４５ｍｇの所望の生成物が白色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．９４（ｓ，１Ｈ）、８．１７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．７６（ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．６３（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．４３〜７．３９（ｍ，３Ｈ）、７．１９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．００〜４．８０（ｍ，１Ｈ）、４．４２（ｍ，１Ｈ、Ｈ−３）、４．２６（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．００〜３．９５（ｍ，１Ｈ）、３．９０（ｓ，６Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．０９〜１．７７（ｍ，１３Ｈ）、１．３０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ、Ｈ−ｄ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７５７．２［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１６】
実施例１６：
（ａ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−［（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ｝アセチル）オキシ］−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製：
【化３４】
2015522048.tif 000036
２０ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−６−ヒドロキシ−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．０３ｍｍｏｌ、１０．０当量）および１１ｍｇのＮ−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−グリシン（０．０６ｍｍｏｌ、２．０当量）を、２ｍＬのＤＣＭに溶解させた。次に、２滴のＤＭＦ、２６ｍｇのＤＣＣ（０．１２ｍｍｏｌ、４．０当量）および２ｍｇのＤＭＡＰ（０．０２ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。室温で１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で蒸発させた。分取ＴＬＣ（溶離剤：ＤＣＭ／メタノール＝１５／１、ｖ／ｖ）によって残渣を精製したところ、１５ｍｇの所望の生成物が白色の固体として得られた。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：８１０．５［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１７】
（ｂ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−［（２−アミノアセチル）オキシ］−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化３５】
2015522048.tif 000037
２４０ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−［（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ｝アセチル）オキシ］−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．３０ｍｍｏｌ、１．０当量）を、酢酸エチル中の塩酸塩の３ｍＬの飽和溶液に溶解させた。１５℃で１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で蒸発させた。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．１％のＴＦＡを含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、１３５ｍｇの所望の生成物がオフホワイトの固体（ＴＦＡ塩）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ  ｐｐｍ：１１．４４（ｓ，１Ｈ）、７．５６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０（ｓ，２Ｈ）、７．２２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．１７〜５．００（ｍ，１Ｈ）、４．９８〜４．９４（ｍ，１Ｈ）、４．２５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．１１（ｓ，２Ｈ）、３．９６（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．８８（ｓ，６Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．６４〜１．９７（ｍ，１６Ｈ）、１．３０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７１０．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１８】
実施例１７：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−［（２−アセトアミドアセチル）オキシ］−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化３６】
2015522048.tif 000038
５ｍＬのＤＣＭ中の１７５ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−［（２−アミノアセチル）オキシ］−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）および９０ｍｇのＤＭＡＰ（０．７４ｍｍｏｌ、３．０当量）の溶液に、５０ｍｇの無水酢酸（０．４９ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。１５℃で１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／メタノール＝３０／１〜１５／１、ｖ／ｖ）によって残渣を精製した。得られた生成物を、分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．１％のＴＦＡを含む水およびアセトニトリル；勾配）によってさらに精製したところ、１００ｍｇの所望の生成物が白色の固体（ＴＦＡ塩）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ  ｐｐｍ：１１．３７（ｓ，１Ｈ）、７．５１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０（ｓ，２Ｈ）、７．１４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｍ，１Ｈ）、５．００〜４．９３（ｍ，１Ｈ）、４．２５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．１０（ｓ，２Ｈ）、３．９８〜３．９５（ｍ，１Ｈ）、３．８８（ｓ，６Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、３．６２〜１．８５（ｍ，１９Ｈ）、１．３０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７５２．５［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１９】
実施例１８：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−６−｛［２−（フェニルホルムアミド）アセチル］オキシ｝−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化３７】
2015522048.tif 000039
１７５ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−６−［（２−アミノアセチル）オキシ］−１７−（｛４−［（エトキシカルボニル）オキシ］−３，５−ジメトキシフェニル｝カルボニルオキシ）−１８−メトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（０．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、５ｍＬのＴＨＦに溶解させた。次に、０．３５ｍＬのトリエチルアミン（２．４６ｍｍｏｌ、１０．０当量）および０．３ｍＬの塩化ベンゾイル（２．４６ｍｍｏｌ、１０．０当量）を加えた。１５℃で１時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／メタノール＝３０／１〜１５／１、ｖ／ｖ）によって残渣を精製した。得られた生成物を、分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．１％のＴＦＡを含む水およびアセトニトリル；勾配）によってさらに精製したところ、１００ｍｇの所望の生成物が白色の固体（ＴＦＡ塩）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１１．３８（ｓ，１Ｈ）、７．９１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．５９（ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．６１〜７．５０（ｍ，３Ｈ）、７．４１（ｓ，２Ｈ）、７．１７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．８５（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．１６（ｍ，１Ｈ）、４．９８〜４．９５（ｍ，１Ｈ）、４．３１（ｓ，２Ｈ）、４．２５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．９６（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝１０．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８８（ｓ，６Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．６２〜１．９６（ｍ，１６Ｈ）１．３０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）。
ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：８１４．６［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２０】
実施例１９：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−｛［４−（ブタノイルオキシ）−３，５−ジメトキシフェニル］カルボニルオキシ｝−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化３８】
2015522048.tif 000040
０．１３ｍＬの塩化ブチリル（１．２６ｍｍｏｌ、５．０当量）を、２ｍＬのピリジン中の１５０ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２１４３２−７４−６）（０．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に０℃で滴下して加えた。１５℃で２時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮した。ＤＣＭ／メタノール＝１／２０で溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって残渣を精製した。得られた粗生成物を、分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０２％のアンモニアを含む水およびアセトニトリル；勾配）によってさらに精製したところ、２６ｍｇの所望の生成物が固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５５（ｓ，１Ｈ）、７．４１（ｓ，２Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｓ，１Ｈ）、６．６３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．９７（ｍ，１Ｈ）、４．３８（ｍ，１Ｈ）、３．９７（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．８７（ｓ，６Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４３（ｓ，３Ｈ）、３．０６〜１．６６（ｍ，１７Ｈ）、１．０３〜１．０１（ｍ，３Ｈ）。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：６６５．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２１】
実施例２０：
メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−（｛３，５−ジメトキシ−４−［（２−フェニルアセチル）オキシ］フェニル｝カルボニルオキシ）−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化３９】
2015522048.tif 000041
１００ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２１４３２−７４−６）（０．１７ｍｍｏｌ、１．０当量）、２８ｍｇのフェニル酢酸（０．２ｍｍｏｌ、１．２当量）、６０ｍｇの１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．３４ｍｍｏｌ、２．０当量）、１０ｍｇのＤＭＡＰ（０．０８ｍｍｏｌ、０．５当量）および３ｍＬのＤＣＭを含有する混合物を、２５℃で１６時間撹拌した。次に、反応混合物を減圧下で濃縮した。分取ＨＰＬＣ（溶離剤：０．０２％のアンモニアを含む水およびアセトニトリル；勾配）によって残渣を精製したところ、４０ｍｇの所望の生成物が黄色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６＋Ｄ２Ｏ）δ  ｐｐｍ：１０．６０（ｂｒ，１Ｈ）、７．３８〜７．３１（ｍ，７Ｈ）、７．２５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８５（ｓ，１Ｈ）、６．６３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．９３（ｍ，１Ｈ）、４．４８〜４．４３（ｍ，１Ｈ）、３．９８〜１．８２（ｍ，３０Ｈ）
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７１３．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２２】
実施例２１：
（ａ）４−ベンジルオキシカルボニルオキシ−３，５−ジメトキシ−安息香酸の調製：
【化４０】
2015522048.tif 000042
４０１ｍｇのクロロギ酸ベンジル（２．３５ｍｍｏｌ、１．２当量）を、１０ｍＬのピリジン中の４００ｍｇの４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシ−安息香酸（１．９６ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。次に、それを減圧下で濃縮し、残渣を水で希釈し、混合物を、１Ｎの塩酸を用いてｐＨ４になるまで酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機相を、１Ｎの塩酸および塩水で続いて洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。ＭＣＩゲルクロマトグラフィー（溶離剤：水／アセトニトリル／ＴＦＡ  ４／１／０．１〜１／２／０．１；ｖ／ｖ／ｖ）によって残渣を精製した。減圧下でアセトニトリルを蒸発させた後、水相を酢酸エチルで抽出し、有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮したところ、１５４ｍｇの所望の生成物が固体として得られた。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：３３３．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２３】
（ｂ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］オキシ｝−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化４１】
2015522048.tif 000043
１５０ｍｇの４−ベンジルオキシカルボニルオキシ−３，５−ジメトキシ−安息香酸（０．４５ｍｍｏｌ、１当量）、１１３ｍｇのＤＭＡＰ（０．９ｍｍｏｌ、２当量）および８９ｍｇの塩化ベンゼンスルホニル（０．５ｍｍｏｌ、１．１当量）を、ＤＣＭ中の１８７ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−ヒドロキシ−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２９０１−６６−８）（０．４５ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、水、５％のクエン酸水溶液、５％の炭酸水素ナトリウム水溶液および塩水で続いて洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＤＣＭと、酢酸エチルと、ジイソプロピルエーテルとの混合物で処理し、形成された沈殿物を分取ＨＰＬＣによってさらに精製したところ、１０８ｍｇの所望の生成物が淡黄色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５５（ｓ，１Ｈ）、７．４６〜７．４０（ｍ，７Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．３１（ｓ，２Ｈ）、４．９９〜４．９２（ｍ，１Ｈ）、４．３６（ｍ，１Ｈ）、３．９７（ｄｄ，Ｊ１≒Ｊ２＝１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．８８（ｓ，６Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．１０〜１．７５（ｍ，１３Ｈ）。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７２９．６［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２４】
実施例２２：
（ａ）３，５−ジメトキシ−４−フェニルオキシカルボニルオキシ安息香酸の調製：
【化４２】
2015522048.tif 000044
３７９ｍｇのクロロギ酸フェニル（２．３５ｍｍｏｌ、１．２当量）を、１０ｍＬのピリジン中の４００ｍｇの４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシ−安息香酸（１．９６ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に加える。反応混合物を室温で３時間撹拌した。次に、それを減圧下で濃縮し、残渣を水で希釈し、混合物を、１Ｎの塩酸を用いてｐＨ４になるまで酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機相を、１Ｎの塩酸および塩水で続いて洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。ＭＣＩゲルクロマトグラフィー（溶離剤：水／アセトニトリル／ＴＦＡ  ４／１／０．１〜１／２／０．１；ｖ／ｖ／ｖ）によって残渣を精製した。減圧下でアセトニトリルを蒸発させた後、水相を酢酸エチルで抽出し、有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮したところ、１３３ｍｇの所望の生成物が固体として得られた。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：３１９．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２５】
（ｂ）メチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−（｛３，５−ジメトキシ−４−［（フェノキシカルボニル）オキシ］フェニル｝カルボニルオキシ）−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレートの調製
【化４３】
2015522048.tif 000045
１００ｍｇの３，５−ジメトキシ−４−フェニルオキシカルボニルオキシ安息香酸（０．３１ｍｍｏｌ、１当量）、７８ｍｇのＤＭＡＰ（０．６３ｍｍｏｌ、２当量）および６２ｍｇの塩化ベンゼンスルホニル（０．３５ｍｍｏｌ、１．１当量）を、ＤＣＭ中の１３０ｍｇのメチル（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−ヒドロキシ−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２９０１−６６−８）（０．３１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、水、５％のクエン酸水溶液、５％の炭酸水素ナトリウム水溶液および塩水で続いて洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、ＤＣＭとジイソプロピルエーテルとの混合物で処理し、形成された沈殿物をろ過し、減圧下で乾燥させたところ、２６ｍｇの所望の生成物が淡褐色の固体として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ：１０．５５（ｓ，１Ｈ）、７．５３〜７．３１（ｍ，７Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ、１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，Ｊ１＝２．０ＨｚおよびＪ２＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．０１〜４．９２（ｍ，１Ｈ）、４．３６（ｍ，１Ｈ）、４．００〜３．９５（ｍ，１Ｈ）、３．９７（ｓ，６Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．４３（ｓ，３Ｈ）、３．１０〜１．７５（ｍ，１３Ｈ）。
ＬＣ−ＭＳ  ｍ／ｚ（＋ＥＳＩ）：７１５．４［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１２６】
実施例２３〜２９：
以下の化合物を、実施例２０について記載される合成方法にしたがって調製した。
【０１２７】
実施例２３：
【化４４】
2015522048.tif 000046
【０１２８】
実施例２４：
【化４５】
2015522048.tif 000047
【０１２９】
実施例２５：
【化４６】
2015522048.tif 000048
【０１３０】
実施例２６：
【化４７】
2015522048.tif 000049
【０１３１】
実施例２７：
【化４８】
2015522048.tif 000050
【０１３２】
実施例２８：
【化４９】
2015522048.tif 000051
【０１３３】
実施例２９：
【化５０】
2015522048.tif 000052
【０１３４】
実施例３３〜４４：
以下の化合物を、実施例６について記載される合成方法にしたがって、（１Ｒ，１５Ｓ，１７Ｒ，１８Ｒ，１９Ｓ，２０Ｓ）−１７−［（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）カルボニルオキシ］−６，１８−ジメトキシ−３，１３−ジアザペンタシクロ［１１．８．０．０２，１０．０４，９．０１５，２０］ヘニコサ−２（１０），４，６，８−テトラエン−１９−カルボキシレート（ＣＡＳ  ２１４３２−７４−６）から対応する４−ニトロフェニルカーボネートを介して調製した：実施例４２を、３−［［（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリル］オキシ］−ベンゼンメタノール（ＣＡＳ  ９６０１３−７７−３）の使用およびＤＭＦ中の炭酸カリウムを用いたシリルエーテルの最終的な開裂によって調製した。実施例４４を、３−ニトロ−ベンゼンメタノール（ＣＡＳ  ６１９−２５−０）の使用およびニトロ基の最終的なＦｅ／ＦｅＳＯ４を介した還元によって調製した。
【０１３５】
実施例３０：
【化５１】
2015522048.tif 000053
【０１３６】
実施例３１：
【化５２】
2015522048.tif 000054
【０１３７】
実施例３２：
【化５３】
2015522048.tif 000055
【０１３８】
実施例３３：
【化５４】
2015522048.tif 000056
【０１３９】
実施例３４：
【化５５】
2015522048.tif 000057
【０１４０】
実施例３５：
【化５６】
2015522048.tif 000058
【０１４１】
実施例３６：
【化５７】
2015522048.tif 000059
【０１４２】
実施例３７：
【化５８】
2015522048.tif 000060
【０１４３】
実施例３８：
【化５９】
2015522048.tif 000061
【０１４４】
実施例３９：
【化６０】
2015522048.tif 000062
【０１４５】
実施例４０：
【化６１】
2015522048.tif 000063
【０１４６】
実施例４１：
【化６２】
2015522048.tif 000064
【０１４７】
実施例４２：
【化６３】
2015522048.tif 000065
【０１４８】
実施例４３：
【化６４】
2015522048.tif 000066
【０１４９】
実施例４４：
【化６５】
2015522048.tif 000067
【０１５０】
分析データ：
【０１５１】
【表１】
2015522048.tif 000068
2015522048.tif 000069
2015522048.tif 000070
2015522048.tif 000071
【０１５２】
生物学的活性アッセイ
式（Ｉ）の化合物、メトホルミンおよびそれらの組合せのインビトロ抗増殖活性を、ＨＬ６０腫瘍細胞およびマウス肥満細胞株６．５におけるＡｌａｍａｒＢｌｕｅ変換細胞増殖アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で試験した（Ｃｏｌｏｍｂｉら，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２０１１，３０：１５５１−６５）。細胞を、９６ウェルマイクロタイタープレート中に播種し（播種細胞密度は、１５０ｕＬのイスコブ培地中のウェル当たり７，０００個の細胞である）、試験化合物を加えた（式（Ｉ）の化合物を、ＤＭＳＯ中の１０ｍＭのストック溶液から加え、メトホルミンを、培養培地中の新たに調製された１Ｍの溶液から加えた）。プレートを３７°で３日間、５％のＣＯ２でインキュベートし、増殖をＡｌａｍａｒＢｌｕｅ染色によって測定した（０．１体積％を培地に加え、さらに４〜５時間インキュベートした）。ＡｌａｍａｒＢｌｕｅの変換は、生細胞の数に比例し、蛍光プレートリーダーを用いて読み取られる（Ｅｘ／Ｅｍ  ５３５／５９５ｎｍ）。増殖を非処置の対照に対して標準化した。
【０１５３】
同じアッセイ条件が、それぞれ適切な濃度で使用される、ロテノン、ピエリシジンＡ、エピベルベリン、２−テノイルトリフルオロアセトン（ＴＴＦＡ）、マロン酸ナトリウム、アンチマイシンＡ、ＫＣＮ、アジ化ナトリウム、オリゴマイシン、カルボニルシアニド−ｐ−トリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン（ＦＣＣＰ）またはスタブジンのようなミトコンドリア機能の他の阻害剤と組み合わせた、式（Ｉ）の化合物の抗増殖活性を試験するのに使用され得る。
【０１５４】
結果：
４ｍＭのメトホルミンおよび１０μＭ以下の濃度の式（Ｉ）の全ての例示される化合物は、それ自体でそれほど抗増殖活性を示さない。１０μＭ以下の濃度の式（Ｉ）の例示される化合物が、４ｍＭのメトホルミンと併用されるとき、強力な抗増殖活性が観察される。本出願の実施例６〜１０、１２〜１８、２０〜２１、３１〜３６、３８の化合物は、例えば、５μＭ以下濃度で、４ｍＭのメトホルミンと組み合わせて抗増殖活性を示す。以下の表は、４ｍＭのメトホルミンと併用されるとき、記載されるアッセイにおける細胞の増殖を約５０％阻害する前記化合物の濃度（マイクロモル単位）を列挙している。
【０１５５】
【表２】
2015522048.tif 000072
【国際調査報告】
2015522048.tif 000081
2015522048.tif 000082
2015522048.tif 000083