(57)【要約】  本発明は、クエン酸トリエチルと、配列ＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２の１５アミノ酸からなるペプチドとを含み、Ｆがフェニルアラニンであり、Ａがアラニンであり、Ｋがリジンであり、Ｌがロイシンである抗菌性組成物、好ましくは、局所的な使用のための抗菌性組成物、特に、座瘡、化膿性汗腺炎または非化膿性汗腺炎、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓのコロニー生成を伴うアトピー性皮膚炎、膿痂疹、趾間感染、毛嚢炎、腫れ物、外傷後感染および熱傷した皮膚の感染の治療のための抗菌性組成物に関する。  【選択図】図７
2015525778.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クエン酸トリエチルと、配列ＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２の１５アミノ酸からなるペプチドとを含み、
Ｆがフェニルアラニンであり、Ａがアラニンであり、Ｋがリジンであり、Ｌがロイシンである、
抗菌性組成物。
【請求項２】
０．０５％〜９９．９％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％〜４５％（ｗ／ｗ）、さらになお好ましくは、２．５％〜１５％（ｗ／ｗ）の濃度のクエン酸トリエチルを含む、
請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
０．００２％〜０．５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．０１０％〜０．３５％（ｗ／ｗ）、さらになお好ましくは、０．０１０％〜０．１２５％（ｗ／ｗ）の濃度の前記ペプチドを含む、
請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
その塩およびエステルを含む必須脂肪酸、その塩およびエステルを含むサリチル酸、亜鉛およびその誘導体、アゼライン酸、オクタデセン二酸、抗生物質から選択される１つ以上の相乗剤をさらに含む、
請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
０．０１％〜５０％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％（ｗ／ｗ）〜１５％（ｗ／ｗ）の濃度の必須脂肪酸およびその塩およびエステルからなる群からなり、さらになお好ましくは、リノール酸、リノレン酸およびオレイン酸、またはこれらの組み合わせから選択される前記１つ以上の相乗剤を含む、
請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
０．２％（ｗ／ｗ）〜１５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％（ｗ／ｗ）〜２％（ｗ／ｗ）の濃度のサリチル酸およびその塩およびエステルからなる群からの前記１つ以上の相乗剤を含む、
請求項４または５に記載の組成物。
【請求項７】
０．２％（ｗ／ｗ）〜５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％（ｗ／ｗ）〜２％（ｗ／ｗ）の濃度の亜鉛およびその誘導体からなる群からの前記１つ以上の相乗剤、さらになお好ましくは、酸化亜鉛、硫酸亜鉛、亜鉛ピリチオン、マンデル酸亜鉛、酢酸亜鉛、グリコール酸亜鉛、サリチル酸亜鉛、乳酸亜鉛、ピルビン酸亜鉛、またはこれらの組み合わせからの前記１つ以上の相乗剤を含む、
請求項４〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
１％（ｗ／ｗ）〜６５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、２％（ｗ／ｗ）〜１５％（ｗ／ｗ）の濃度のアゼライン酸およびオクタデセン二酸からなる群からの前記１つ以上の相乗剤を含む、
請求項４〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
０．１％（ｗ／ｗ）〜５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％（ｗ／ｗ）〜２％（ｗ／ｗ）の濃度の構成物質からなる群からの前記１つ以上の相乗剤、さらになお好ましくは、オキサシリン、クロキサシリン（ｃｌｏｘａｃｉｃｉｌｌｉｎ）、ジクロキサシリン、ナフシリンおよびフルクロキサシリンを含むオキサシリン；アンピシリンおよびアモキシシリンを含むアミノペニシリン；カルベニシリンおよびチカルシリンを含むカルボキシペニシリン；メズロシリン、ピペラシリン、アズロシリンおよびアパルシリンを含むウレイドペニシリン；ベンジルペニシリン、サルファジミジン、スルファメラジン、ストレプトマイシン、スルファジアジン、クロルテトラサイクリン、クロラムフェニコール、ネオマイシン、オキシテトラサイクリン、ペニシリンＧプロカイン、エリスロマイシン、ベンザチンペニシリン、スピラマイシン、テトラサイクリン、チアンフェニコール、バンコマイシン、フェノキシメチルペニシリン、コリスチン、デメクロサイクリン、バージニアマイシン、メチシリン、メトロニダゾール、アンピシリン、スペクチノマイシン、スルファメトキサゾール、トリメトプリム、クロキサシリン、フシジン酸、フサファンギン、リメサイクリン、ゲンタマイシン、ドキシサイクリン（ｄｏｃｙｃｉｃｌｉｎｅ）、カルベニシリン、リファンピシン、クリンダマイシン、セファレキシン、セファゾリン、ピバンピシリン、チニダゾール、アモキシシリン、セフラジン、ミノサイクリン、プリスチナマイシン、ホスホマイシン、タランピシリン、トブラマイシン、バカンピシリン、チカルシリン、アミカシン、アズロシリン、セファドロキシル、セファマンドール、セフォキシチン、セフロキシム、メズロシリン、ピブメシリナム、セファクロル、セフメタゾール、セフォタキシム、セフスロジン、ピペラシリン、アモキシシリン／クラブラン酸（コアモキシクラブ）、セフォペラゾン（ｃｅｆｐｅｒａｚｏｎｅ）、セフォチアム、セフスロジン、ラタモキセフ、ネチルミシン、アパルシリン、セフトリアキソン、ミクロノマイシン、セフメノキシム、セフタジジム、セフチゾキシム、ノルフロキサシン、セフォニシド、セフォテタン、テモシリン、セフピラミド、イミペネム／シラスタチン、オフロキサシン、ムピロシン、アズトレオナム、セフォペラゾン／スルバクタム、チカルシリン／クラブラン酸、アンピシリン／スルバクタム、セフィキシム、ロキシスロマイシン、スルタミシリン、シプロフロキサシン、リファキシミン、アジスロマイシン、セファクロル、フロモキセフ、イセパマイシン（ｉｓｅｐａｍｙｃｉｎ）、ミデカマイシン、リファペンチン、テイコプラニン、セフポドキシム、エンロフロキサシン、ロメフロキサシン、アルベカシン、セフォジジム（ｃｅｆｏｚｉｄｉｍ）、クラリスロマイシン、セフジニル、セフェタメット、セフピロム、セフプロジル、セフチブテン（ｃｅｆｔｉｂｕｆｅｎ）、フレロキサシン、ロラカルベフ、ピペラシリン／タゾバクタム、ルフロキサシン、ブロジモプリム、ジリスロマイシン、レボフロキサシン、ナジフロキサシン、パニペネム／ベタミプロン、スパルフロキサシン、セフェピム、キヌプリスチン−ダルホプリスチン、リネゾリド、テリスロマイシン、ダプトマイシン、チゲシクリン、ドリペネム、テラバンシン、またはこれらの組み合わせから選択される前記１つ以上の相乗剤を含む、
請求項４〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
口腔粘膜および皮膚付属器を含む損傷した皮膚および粘膜または健康な皮膚および粘膜に局所的に使用するための、座瘡、化膿性汗腺炎または非化膿性汗腺炎、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓのコロニー生成を伴うアトピー性皮膚炎、膿痂疹、趾間感染、毛嚢炎、腫れ物、外傷後感染および熱傷した皮膚の感染の治療のための
請求項１〜９のいずれか一項に記載の抗菌性組成物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物と、
生理学的に許容され得る担体と
を含む、化粧品配合物および／または医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、局所的に使用するための抗菌性組成物、特に、細菌のコロニー生成を妨げることを意図し、損傷した皮膚および損傷していない皮膚、および口腔粘膜を含む粘膜に使用するのに適した上述の種類の組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトが罹患する細菌感染を妨げるために、静菌性または殺菌性の抗生物質の使用が知られており、これらの抗生物質の使用は、本質的に異なるだろう。
【０００３】
抗生物質は有益であるが、抗生物質は、一般的に、皮膚の細菌叢の不均衡、アレルギー反応の発生、有機体の種々の場所での毒性による影響、および他の物質（特に、他の薬物）と相互作用するときの過敏症を含む副作用を含むため、欠点と無縁ではない。
【０００４】
さらに、抗生物質の過剰使用により、病原体によって獲得可能な抗生物質への耐性が生じる場合があり、これにより抗生物質による治療が無効化し、それでも治療を成功させるには、長期間にわたって手段を続けなければならない。
【０００５】
いずれにせよ、抗生物質の乱用は、ヒトという生命体に重篤な結果をもたらすことがあり、最終的には死に至らしめる場合がある。
【０００６】
上述の欠点を克服するために、抗生物質に代わる手法、特に、例えば、座瘡のような疾患に罹患した皮膚および粘膜の治療のための手法が観察されてきており、ＵＳ  ２００７／０２０７１１２号文書に記載されているように、この手法は、ペプチドの抗菌活性を示した。
【０００７】
特に、上述の文書は、座瘡患者における細菌のコロニー生成が、ＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２の順序でフェニルアラニン（Ｆ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）およびロイシン（Ｌ）を含む１５アミノ酸配列からなるペプチドによって制御可能であることを記載する。
【０００８】
このペプチドは、「殺菌性／透過性増強タンパク質」であると定義され、一般的にＢＰＩと呼ばれる殺生物性タンパク質から誘導され、ＵＳ  ２００５／０１４８４９５号文書に記載されるように、自然免疫系の一部を形成する。
【０００９】
ＢＰＩは、殺生物活性を示すが、ＢＰＩは、主にグラム陰性菌に対して活性であることが知られている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
従って、本発明の背後にある技術的な課題は、従来技術を参照しつつ言及した欠点を克服することができる抗菌性組成物、特に、副作用またはその他の望ましくない効果を示さずに、高い有効性を有し、種々の皮膚疾患を治療するのに適した組成物を提供することである。
【００１１】
本発明によれば、抗菌性組成物、好ましくは、局所的に使用することを意図し、損傷した皮膚および損傷していない皮膚、口腔粘膜を含む粘膜、および皮膚付属器に使用するのに適しており、クエン酸トリエチルと、配列ＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２の１５アミノ酸からなるペプチドとを含み、Ｆがフェニルアラニンであり、Ａがアラニンであり、Ｋがリジンであり、Ｌがロイシンである抗菌性組成物によって、上述の問題が解決される。
【００１２】
予測できないことだが、本発明の組成物は、相乗的な活性を示し、特に、高い殺微生物活性を示し、グラム陽性菌およびグラム陰性菌、好気性菌および嫌気性菌（非限定的な例としてＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓを含む）の両方による細菌のコロニー生成を阻害する高い能力を示し、同時に、グラム陽性菌およびグラム陰性菌、好気性菌および嫌気性菌によって放出される酵素によって誘発される皮膚トリグリセリド分子の分解を阻害することができ、それによって、トリグリセリドの加水分解から生じる遊離脂肪酸によって決定される炎症プロセスの発生を制御することができる。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
従って、本発明によれば、本発明の組成物は、皮膚、粘膜および皮膚付属器の細菌感染を妨げるのに適しており、皮膚感染が皮膚の検出可能な病変を引き起こすか、または引き起こす原因となる病状、例えば、座瘡、化膿性汗腺炎または非化膿性汗腺炎、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓのコロニー生成を伴うアトピー性皮膚炎、膿痂疹、趾間感染、毛嚢炎、腫れ物、外傷後感染および熱傷した皮膚の感染の治療に適している。
【００１４】
好ましくは、本発明の組成物は、０．０５％〜９９．９％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％〜４５％（ｗ／ｗ）、さらになお好ましくは、２．５％〜１５％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度のクエン酸トリエチルを含む。
【００１５】
好ましくは、本発明の組成物は、０．００２％〜０．５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．０１０％〜０．３５％（ｗ／ｗ）、さらになお好ましくは、０．０１０％〜０．１２５％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度の前記ペプチドを含む。
【００１６】
本発明のさらなる実施形態によれば、本発明の組成物は、その塩およびエステルを含む必須脂肪酸、その塩およびエステルを含むサリチル酸、亜鉛およびその誘導体、アゼライン酸、オクタデセン二酸、抗生物質から選択される１つ以上の相乗剤をさらに含んでいてもよい。
【００１７】
好ましくは、必須脂肪酸およびその塩およびエステルからなる群に属する１つ以上の相乗剤は、本発明の組成物中に、０．０１％〜５０％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％（ｗ／ｗ）〜１５％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度で含まれ、有利には、リノール酸、リノレン酸およびオレイン酸がさらに好ましい。
【００１８】
好ましくは、サリチル酸およびその塩およびエステルからなる群に属する１つ以上の相乗剤は、本発明の組成物中に、０．２％（ｗ／ｗ）〜１５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％（ｗ／ｗ）〜２％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度で含まれる。
【００１９】
好ましくは、亜鉛およびその誘導体からなる群に属する１つ以上の相乗剤は、本発明の組成物中に、０．２％（ｗ／ｗ）〜５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％（ｗ／ｗ）〜２％（ｗ／ｗ）の濃度で含まれ、有利には、酸化亜鉛、硫酸亜鉛、亜鉛ピリチオン、マンデル酸亜鉛、酢酸亜鉛、グリコール酸亜鉛、サリチル酸亜鉛、乳酸亜鉛、ピルビン酸亜鉛がさらに好ましい。
【００２０】
好ましくは、アゼライン酸およびオクタデセン二酸からなる群に属する１つ以上の相乗剤は、本発明の組成物中に、１％（ｗ／ｗ）〜６５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、２％（ｗ／ｗ）〜１５％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度で含まれる。
【００２１】
好ましくは、抗生物質からなる群に属する１つ以上の相乗剤は、本発明の組成物中に、０．１％（ｗ／ｗ）〜５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％（ｗ／ｗ）〜２％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度で含まれ、有利には、オキサシリン、クロキサシリン（ｃｌｏｘａｃｉｃｉｌｌｉｎ）、ジクロキサシリン、ナフシリンおよびフルクロキサシリン；アンピシリンおよびアモキシシリンを含むアミノペニシリン；カルベニシリンおよびチカルシリンを含むカルボキシペニシリン；メズロシリン、ピペラシリン、アズロシリンおよびアパルシリンを含むウレイドペニシリン；ベンジルペニシリン、サルファジミジン、スルファメラジン、ストレプトマイシン、スルファジアジン、クロルテトラサイクリン、クロラムフェニコール、ネオマイシン、オキシテトラサイクリン、ペニシリンＧプロカイン、エリスロマイシン、ベンザチンペニシリン、スピラマイシン、テトラサイクリン、チアンフェニコール、バンコマイシン、フェノキシメチルペニシリン、コリスチン、デメクロサイクリン、バージニアマイシン、メチシリン、メトロニダゾール、アンピシリン、スペクチノマイシン、スルファメトキサゾール、トリメトプリム、クロキサシリン、フシジン酸、フサファンギン、リメサイクリン、ゲンタマイシン、ドキシサイクリン（ｄｏｃｙｃｉｃｌｉｎｅ）、カルベニシリン、リファンピシン、クリンダマイシン、セファレキシン、セファゾリン、ピバンピシリン、チニダゾール、アモキシシリン、セフラジン、ミノサイクリン、プリスチナマイシン、ホスホマイシン、タランピシリン、トブラマイシン、バカンピシリン、チカルシリン、アミカシン、アズロシリン、セファドロキシル、セファマンドール、セフォキシチン、セフロキシム、メズロシリン、ピブメシリナム、セファクロル、セフメタゾール、セフォタキシム、セフスロジン、ピペラシリン、アモキシシリン／クラブラン酸（コアモキシクラブ）、セフォペラゾン（ｃｅｆｐｅｒａｚｏｎｅ）、セフォチアム、セフスロジン、ラタモキセフ、ネチルミシン、アパルシリン、セフトリアキソン、ミクロノマイシン、セフメノキシム、セフタジジム、セフチゾキシム、ノルフロキサシン、セフォニシド、セフォテタン、テモシリン、セフピラミド、イミペネム／シラスタチン、オフロキサシン、ムピロシン、アズトレオナム、セフォペラゾン／スルバクタム、チカルシリン／クラブラン酸、アンピシリン／スルバクタム、セフィキシム、ロキシスロマイシン、スルタミシリン、シプロフロキサシン、リファキシミン、アジスロマイシン、セファクロル、フロモキセフ、イセパマイシン（ｉｓｅｐａｍｙｃｉｎ）、ミデカマイシン、リファペンチン、テイコプラニン、セフポドキシム、エンロフロキサシン、ロメフロキサシン、アルベカシン、セフォジジム（ｃｅｆｏｚｉｄｉｍ）、クラリスロマイシン、セフジニル、セフェタメット、セフピロム、セフプロジル、セフチブテン（ｃｅｆｔｉｂｕｆｅｎ）、フレロキサシン、ロラカルベフ、ピペラシリン／タゾバクタム、ルフロキサシン、ブロジモプリム、ジリスロマイシン、レボフロキサシン、ナジフロキサシン、パニペネム／ベタミプロン、スパルフロキサシン、セフェピム、キヌプリスチン−ダルホプリスチン、リネゾリド、テリスロマイシン、ダプトマイシン、チゲシクリン、ドリペネム、テラバンシンがさらに好ましい。
【００２２】
さらなる態様によれば、本発明は、上述の組成物と、生理学的に許容され得るビヒクルまたは担体とを含む、特に、皮膚病の治療のための、好ましくは、局所的に使用するための化粧品配合物および／または医薬製剤を提供する。
【００２３】
有利には、上の配合物は、油中水エマルション、水中油エマルション、単相ゲル、サブミセル単相ゲル（ｓｕｂ−ｍｉｃｅｌｌａｒ  ｍｏｎｏｐｈａｓｉｃ  ｇｅｌ）、水性単相溶液、アルコール性単相溶液、クリーム、ミルク、ポマード、軟膏の形態であってもよく、これらを湿らせた布、スプレーなどによって送達可能である。
【００２４】
実質的には、驚くべきことに、上に記載した実施形態で教示されるような本発明の組成物、従って上述の配合物も同様に、特徴とする活性原理（すなわち、クエン酸トリエチルおよび配列ＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２の上述のペプチド）が合わせて存在することによって、細菌の成長を制御する高い能力を示すとともに、複数のグラム陽性菌およびグラム陰性菌、好気性菌および嫌気性菌に対して高い殺生物活性および殺微生物活性を示し、同時に、特に質的および量的な改変に対する皮膚脂質を保護する高い能力を示し、この能力は、本質的に、細菌リパーゼによって誘発される（すなわち、グラム陽性菌およびグラム陰性菌、好気性菌および嫌気性菌といった細菌自身によって放出される酵素によって誘発される）皮膚トリグリセリド分子の加水分解を阻害する能力の結果であると考えられる。
【００２５】
本発明の組成物が上述のような１つ以上の相乗剤を含む場合、特に、皮膚の特定の治療に非常に有益である。
【００２６】
この観点で、上述の抗生物質の群に属する１つ以上の相乗剤を含む本発明の組成物が、有利には、細菌耐性事象の発生を制御することができ、この群に属する相乗剤が存在しない状態では、本発明の組成物は、耐性菌（すなわち、獲得した抗生物質耐性）の発生を生じないという利点を有することを強調すべきである。
【００２７】
本発明のさらなる特徴および利点は、添付の図面の助けを借りつつ、非限定的な実施例によって示されるある種の好ましいが排他的ではない実施形態の以下の詳細な記載の試験からさらに明らかになるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、本発明の組成物を用いて治療する前に中程度の尋常性座瘡および炎症性座瘡を患う被検体の皮膚部分、特に背領域の写真である。
【図２】図２は、本発明の組成物を用いて１２週間治療した後の図１の皮膚部分の写真である。
【図３Ａ】図３Ａおよび３Ｂは、４種類のサンプルをそれぞれ示す写真であり、３つは、クエン酸トリエチルおよびペプチドＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２を含む本発明の組成物を異なる濃度で含み、試験微生物Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅ  ＡＴＣＣ  １１８２７を含む培養ブロスを含む水溶液を含有し、４番目のサンプルは、上述の培養ブロスのみからなるポジティブコントロールである。
【図３Ｂ】図３Ａおよび３Ｂは、４種類のサンプルをそれぞれ示す写真であり、３つは、クエン酸トリエチルおよびペプチドＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２を含む本発明の組成物を異なる濃度で含み、試験微生物Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅ  ＡＴＣＣ  １１８２７を含む培養ブロスを含む水溶液を含有し、４番目のサンプルは、上述の培養ブロスのみからなるポジティブコントロールである。
【図４】図４は、４種類のサンプルを示す写真であり、３つは、クエン酸トリエチルおよびペプチドＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２を含む本発明の組成物を異なる濃度で含み、試験微生物Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ６５３８を含む培養ブロスを含む水溶液を含有し、４番目のサンプルは、上述の培養ブロスのみからなるポジティブコントロールである。
【図５】図５は、最低濃度の本発明の組成物で、図４のサンプルの移植片を接種したプレート中で試験微生物が成長しないことを示す写真である。
【図６】図６は、図４のポジティブコントロールサンプルの移植片を接種したプレート中で試験微生物が増殖することを示す写真である。
【図７】図７は、本発明の組成物を用いた治療全体で、時間の関数として、特に、本発明の組成物で治療する前（基底状態）および異なる時間間隔での皮膚サンプルの目に見える病変の数を示すそれぞれ炎症性座瘡および尋常性座瘡のグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明の組成物は、クエン酸トリエチルと、配列ＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２の１５アミノ酸からなるペプチドとを含み、Ｆがフェニルアラニンであり、Ａがアラニンであり、Ｋがリジンであり、Ｌがロイシンである。
【００３０】
クエン酸トリエチルは、ＥＩＮＥＣＳ名がトリエチル−２−ヒドロキシプロパン−１，２，３−トリカルボキシレート、ＣＡＳ番号２０１−０７０−７、分子式Ｃ１２Ｈ２０Ｏ７および分子量２７６．２９を有するクエン酸エチルエステルであり、濃度４．５％までは水溶性であり、脂溶性でもある油状化合物である。
【００３１】
ペプチドＦＡＫＡＬＫＡＬＬＫＡＬＫＡＬ−ＮＨ２（本明細書で以下、単純化のためにペプチドとも呼ぶ）は、抗菌活性があることが知られており、特に、本明細書に参考として組み込まれるＵＳ  ２００７／０２０７１１２号文書に記載されているように、座瘡患者の細菌コロニー生成を制御するのに有効であることが知られている。
【００３２】
このペプチドは、「殺菌性／透過性増強タンパク質」であると定義され、一般的にＢＰＩと呼ばれる殺生物性タンパク質から誘導され、本明細書に参考として組み込まれるＵＳ  ２００５／０１４８４９５号文書に記載されるような自然免疫系の一部を形成する。
【００３３】
活性成分としてクエン酸トリエチルとペプチドとを含む本発明の組成物は、驚くべきことに、また、予想できないことだが、高い相乗活性を示し、特に、顕著な殺微生物活性と、グラム陽性菌およびグラム陰性菌、好気性菌および嫌気性菌の両方の細菌コロニー生成を阻害する高い能力を示し、同時に、グラム陽性菌およびグラム陰性菌、好気性菌および嫌気性菌によって放出される酵素によって誘発される皮膚トリグリセリド分子の分解を阻害可能であることを示した。
【００３４】
本発明の組成物に感受性であることがわかっている細菌には、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓがある。
【００３５】
従って、本発明によれば、本発明の組成物は、皮膚、粘膜および皮膚付属器の細菌感染を妨げるのに適しており、皮膚感染が皮膚の検出可能な病変を引き起こすか、または引き起こす原因となる病状、例えば、座瘡、化膿性汗腺炎または非化膿性汗腺炎、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓのコロニー生成を伴うアトピー性皮膚炎、膿痂疹、趾間感染、毛嚢炎、腫れ物、外傷後感染および熱傷した皮膚の感染の治療に適している。
【００３６】
上述によれば、本発明の組成物は、化粧品および／または医薬製剤、好ましくは、皮膚治療において局所的に使用することを意図した化粧品および／または医薬製剤を製造するために、生理学的に許容され得るビヒクルまたは担体との組み合わせに使用するのに特に適しており、具体的には、化粧品的および／または医薬的に許容され得るビヒクルまたは担体との組み合わせに使用するのに特に適していることが示されている。
【００３７】
本発明の組成物は、０．０５％〜９９．９％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．５％〜４５％（ｗ／ｗ）、さらになお好ましくは、２．５％〜１５％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度のクエン酸トリエチルを含む。
【００３８】
本発明の組成物は、０．００２％〜０．５％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、０．０１０％〜０．３５％（ｗ／ｗ）、さらになお好ましくは、０．０１０％〜０．１２５％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度のペプチドを含む。
【００３９】
本発明の組成物は、さらに、すでに示したようなその塩およびエステルを含む必須脂肪酸、その塩およびエステルを含むサリチル酸、亜鉛およびその誘導体、アゼライン酸、オクタデセン二酸および抗生物質から選択される１つ以上の相乗剤をさらに含んでいてもよい。
【００４０】
本発明の組成物の抗菌特性は、以下の実施例および実験的な試験においてさらに示され、添付の図面を参照して記載される。
【００４１】
（実験的な試験）
実験的な試験の目的は、クエン酸トリエチルとペプチドとを含む組成物（本発明の組成物）の抗菌活性を決定し、それにより実証することであった。
【００４２】
（方法の記述）
試験微生物を接種した培養ブロスを含有する一連のサンプル管（以下、サンプルとも呼ぶ）を調製し、それぞれの下げた濃度で評価すべき本発明の組成物の水溶液を加え、ポジティブサンプルは、上述の培養ブロスのみを含有している。
【００４３】
（抗菌活性の評価）
試験微生物の培養物を、選択した特定の試験微生物に最適な温度および成長条件で、微生物を成長させるのに十分な時間インキュベートした。
【００４４】
次いで、成長の指標として濁度を視覚観察することによって、効果的な微生物集合の成長を示すサンプルを特定した。
【００４５】
詳細には、細菌の成長を阻害するのに十分な濃度で本発明の組成物を含有するサンプルは、透明なままであった。
【００４６】
サンプルの性質自体が、サンプルを視覚的に読み取るのを妨害する場合、または細菌の成長が存在しないことが、微生物静菌活性または殺微生物活性のいずれによって引き起こされるかを決定することが望ましい場合には、確認に適した寒天培地で移植を行った。
【００４７】
（アッセイ濃度）
培地から直接得られる培養ブロスと、４．５ｗ／ｗ％のクエン酸トリエチル、０．００２５ｗ／ｗ％のペプチドおよび１００ｗ／ｗ％にするのに十分な量の水を含む水溶液とを、下げた濃度で含む（特に、培養ブロス１００ミリリットルあたり、上述の溶液を５０．００グラム、２５．００グラムおよび１２．５０グラム含む）サンプルを調製した。
【００４８】
（試験微生物株）
試験に使用した微生物株は、以下のとおりであった。
１．４×１０６ｃｆｕ／培地ｍｌの濃度のＰｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ  ＡＴＣＣ  １１８２７
３．５×１０３ｃｆｕ／培地ｍｌの濃度のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  ６５３８
【００４９】
（試験培養条件）
Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ培養物の場合、液体媒体である液体チオグリコール酸培地を嫌気性条件下、３７℃±１℃の温度で使用した。
【００５０】
この液体培地中での成長の確認として使用する移植片の場合、液体チオグリコール酸培地を嫌気性条件下、３７℃±１℃の温度で使用した。
【００５１】
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓ培養物の場合、トリプチックソイブロス培地を好気性条件下、３７℃±１℃で２４時間インキュベートして使用した。
【００５２】
この寒天培地での成長の確認として使用する移植片の場合、トリプチックソイ寒天培地を使用し、ペトリ皿を好気性条件下、３７℃±１℃でインキュベートして使用した。
【００５３】
（培養ブロスで希釈すべき活性成分を含有する溶液１グラム中に嫌気性菌が存在しないことの評価）
活性成分を含有する上述の溶液１グラム中に嫌気性菌が存在しないことは、液体チオグリコール酸培地に接種し、嫌気性条件下、３７℃±１℃で７２時間インキュベートすることによって確認した。
【００５４】
さらに、上述のような活性成分を含有する同じ溶液１グラム中に中温性嫌気性細菌が存在しないことは、トリプチックソイブロスに接種し、３７℃±１℃で４８時間インキュベートすることによって確認した。
【００５５】
（ポジティブコントロール）
培地の肥沃度および微生物の生存能力。上に示した両方の微生物株について、上述の実験で使用したのと同じ培養条件下、培地および微生物を両方とも用いたが、本発明の組成物を含む水溶液が存在しない状態で試験を行った。
【００５６】
（培地の滅菌および無菌状態の確認）
インキュベートに使用する両方の培地について、本発明の組成物を含む水溶液と、微生物を両方とも含まない状態で、上述の実験に使用する条件下で試験を行った。
【００５７】
（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓの試験結果）
結果は、２サンプルを１個として視覚観察から得た。
【００５８】
上で調製したような上述のサンプル（サンプル管）の微生物の成長を視覚的に読み取ることによって結果を得て、約７２時間インキュベートした後の培地の濁度に基づいて評価した。
【００５９】
上述のように２サンプルを１個として評価した結果を図３Ａおよび３Ｂの例に示し、ここで、Ａ、ＢおよびＣＡ１、Ｂ１およびＣ１は、それぞれ、上に報告したそれぞれの下げた濃度（５０、２５および１２．５ｗ／ｗ％）の上述のサンプルを示す。
【００６０】
上述の図面から、濃度はさまざまではあるが、本発明の組成物に基づく水溶液を含むすべてのサンプルが、それぞれ４番目のサンプルＤおよびＤ１であらわされるポジティブコントロール（陽性の成長がＰｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅを含む液体チオグリコール酸培地を含有する両サンプル管で観察された）と比較して、透き通って透明であったことを注記することができる。
【００６１】
この読み取りから得られる結果は、約７２時間インキュベートした後の液体培地において、その後に移植を行うことによって確認した。
【００６２】
表１は、それぞれの小数点第２位に丸めたサンプル濃度について、その同じ濃度での移植片の結果を示す。
【表１】
2015525778.tif 000003
【００６３】
（培地の滅菌および無菌状態の確認）
成長せず。
【００６４】
（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓの試験結果）
視覚観察の結果。
この結果は、上で調製したような上述のサンプル（サンプル管）の微生物の成長の視覚的な読み取りに関し、約２４時間インキュベートした後の培地の濁度に基づいて評価した。
【００６５】
この結果を図４の例に示し、ここで、Ａ２、Ｂ２およびＣ２は、陽性成長を示したＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓを含むトリプチックソイブロス培地を含有するポジティブコントロールサンプル（Ｄ２として示される）と比較して、下げた濃度で上述のサンプルが透き通って透明であったことを示す。
【００６６】
この読み取りから得られる結果は、約２４時間インキュベートした後の固体培地において、その後に移植を行うことによって確認した。
【００６７】
図６および図７の例は、細菌の成長が観察されたポジティブコントロールを用いた移植片と比較して、それぞれサンプルの最も低いアッセイ濃度（１２．５０％）のサンプルで移植片を接種したトリプチックソイ寒天プレート中で細菌の成長がないことを示し、強調する。
【００６８】
表２は、それぞれの小数点第２位に丸めたサンプル濃度について、その同じアッセイ濃度で得られた移植片の最終的な結果を示す。
【表２】
2015525778.tif 000004
【００６９】
（培地の滅菌および無菌状態の確認）
成長せず。
【００７０】
上述のことから、本発明の組成物、具体的には、クエン酸トリエチル（４．５ｗ／ｗ％）およびペプチド（０．０２５ｗ／ｗ％）からなる組成物は、アッセイした両方の有機体に対する優れた抗菌活性を示したことを述べることができる。
【００７１】
実際に、アッセイしたサンプルは、いずれも、それぞれの濃度で微生物を成長させなかったことを指摘しなければならない。
【００７２】
さらに、上に記載したのと同じ方法に従って、クエン酸トリエチルに基づく組成物（すなわち、１００ｗ／ｗ％までの適した量の水中に４．５ｗ／ｗ％の濃度でクエン酸トリエチルのみを含み、ペプチドを含まない）は、本発明の組成物を用いた生存菌の合計阻害率と比較して、非常に穏やかな殺微生物活性を示した（細菌集合の２５％が生存）ことを強調しなければならない。
【００７３】
（胸および腰に局在化した尋常性座瘡および炎症性座瘡を、以下のようにして得られた本発明の組成物を含む水中油エマルションを使用して治療する有効性および忍容性の評価）
番号        記載                        重量％
（Ａ相）
０１        セテアリルグルコシド        ４．２％
０２        ブチル化ヒドロキシトルエン  ０．０１％
０３        リノール酸エチル            ３．０％
０４        サリチル酸                  ０．５％
０５        クエン酸トリエチル          ９％
（Ｂ相）
０６        ペプチド                    ０．００２５％
０７        脱塩水                      ５．０％
（Ｃ相）
０８        プロピレングリコール        １．５％
０９        フェノキシエタノール        ０．８％
１０        メチルパラベンナトリウム塩  ０．２５％
１１        乳酸亜鉛                    １．２５％
１２        水                          １００％にするのに適した量
【００７４】
（調製方法）
（工程Ａ）：０１＋０２＋０３＋０４＋０５を混合し、７５℃まで加熱する。
（工程Ｂ）：０６を０７に溶解する。
（工程Ｃ）：１０＋１１を１２に溶解し、０８＋０９と、得られた溶液とを混合し、７５℃まで加熱する。
【００７５】
温度７５℃で、（Ａ相）と（Ｃ相）とを合わせる。脱気しつつ攪拌し、温度３５℃に達したら、（Ｂ相）を加える。
【００７６】
背中および首に局在化した炎症性座瘡および尋常性座瘡の治療において、上述のような本発明の組成物を含むエマルションの有効性および忍容性を試験した。
【００７７】
患者の登録：背中および／または首に中程度の座瘡を患う１３〜２２歳の１２人の患者。
試験の設計：非盲検試験。
エマルション（ローション）の塗布：１日に２回を１２週間。
経過観察：４、８および１２週間
評価：参照領域の病変を計測。写真による評価。
治療から１２週間後の患者：１２
観察者による結果：このエマルションは、有効であった。
患者による結果：このエマルションは、有効であった。
治療後の患者による評価：良好、患者は満足していた。
忍容性：優れている
観察された副作用：なし
【００７８】
図７の例は、上述の試験データをグラフで示し、一方、図１および２の例は、それぞれ上述の治療前および治療後の１２人の登録した患者の１人の皮膚サンプルを示す。
【００７９】
本発明の組成物を含む化粧品配合物および／または医薬調製物または医薬製剤のさらなる例を、その調製および使用と共に以下に与える。
【００８０】
（調製例１−座瘡を治療するための含水アルコール性単相溶液）
番号        記載                        重量％
０１        クエン酸トリエチル          １０％
０２        ペプチド                    ０．０１％
０３        エチルアルコール            ４５．０％
０４        水                          １００％にするのに適した量
【００８１】
調製方法：０２を０３に溶解し、得られた溶液に０１を加え、攪拌しつつ、０４を用いて体積を１００にする。
【００８２】
（調製例２−座瘡を治療するための単相ゲル）
番号        記載                        重量％
０１        クエン酸トリエチル          ４．５％
０２        ペプチド                    ０．００２５％
０３        Ｃａｒｂｏｍｅｒ            １．０％
０４        水酸化ナトリウム            ｐＨ６にするのに適した量
０５        脱塩水                      １００％にするのに適した量
【００８３】
調製方法：０１と０５とを混合し、得られた溶液に０２を溶解し、得られた溶液に０３を分散させ、０４を用いて中和する。すべての操作を攪拌しつつ行う。
【００８４】
（調製例３−アトピー性皮膚炎を治療するための水中油エマルション）
番号        記載                        重量％
（Ａ相）
０１        Ｓｔｅａｒｅｔｈ  ２        ３．０％
０２        Ｓｔｅａｒｅｔｈ  ２１             ２．０％
０３        ＰＰＧ−１５ステアリルエーテル     ８．０％
０４        ブチル化ヒドロキシトルエン  ０．０１％
０５        クエン酸トリエチル          １０．０％
０６        Ｃｅｒａｍｉｄｅ  ＩＶ             ０．００５％
（Ｂ相）
０７        ペプチド                    ０．００２５％
０８        脱塩水                      ５．０％
（Ｃ相）
０９        プロピレングリコール        １．５％
１０        フェノキシエタノール        ０．８％
１１        メチルパラベンナトリウム塩  ０．２５％
１２        水                          １００％にするのに適した量
【００８５】
調製方法：（工程Ａ）：０１＋０２＋０３＋０４＋０５＋０６を混合し、＋７５℃まで加熱する。
（工程Ｂ）：０７を０８に溶解する。
（工程Ｃ）：１１を１２に溶解し、１０＋０９と、得られた溶液とを混合し、７５℃まで加熱する。
【００８６】
温度７５℃で、（Ａ相）と（Ｃ相）とを合わせる。脱気しつつ攪拌し、温度３５℃に達したら、（Ｂ相）を加える。
【００８７】
（調製例４−化膿性汗腺炎を治療するためのアルコール性溶液）
番号        記載                        重量％
０１        クエン酸トリエチル          ４０．０％
０２        ペプチド                    ０．０１％
０３        エチルアルコール            １００％にするのに適した量
【００８８】
調製方法：０２を０３に溶解し、０１と、得られた溶液とを混合する。
【００８９】
（調製例５−抗菌性溶液）
番号        記載                        重量％
０１        クエン酸トリエチル          ４．５％
０２        ペプチド                    ０．００２５％
０３        脱塩水                      １００．０％にするのに適した量
【００９０】
調製方法：０２を０３に溶解し、０１と、得られた溶液とを混合する。
【００９１】
（調製例６−抗菌性および抗座瘡性の溶液）
番号        記載                        重量％
０１        クエン酸トリエチル          ４．５％
０２        ペプチド                    ０．００２５％
０３        クリンダマイシン            １％
０４        エチルアルコール            １００．０％にするのに適した量
【００９２】
調製方法：０２＋０３を０４に溶解し、０１と、得られた溶液とを混合する。
【００９３】
（調製例７−抗菌性および抗座瘡性の溶液）
番号        記載                        重量％
０１        クエン酸トリエチル          ４．５％
０２        ペプチド                    ０．００２５％
０３        エリスロマイシン            １．５％
０４        エチルアルコール            １００．０％にするのに適した量
【００９４】
調製方法：０２＋０３を０４に溶解し；０１と、得られた溶液とを混合する。
【００９５】
本発明の利点は、上述の記載全体からすでに明確であろうが、上述のようなクエン酸トリエチルとペプチドとを活性成分として含み、好気性細菌および嫌気性細菌、グラム陽性菌およびグラム陰性菌の両方に対して高い有効性を示し、同時に、細菌リパーゼによって誘発される皮膚トリグリセリド分子の加水分解を阻害する能力に起因して、定性的および定量的な改変が起こらないように皮膚脂質を保護することができる抗菌性組成物を提供することを指摘することによってまとめてもよい。
【００９６】
従って、有利には、本発明の組成物は、有効な殺細菌作用および殺微生物作用と、皮膚および粘膜に対する効果的な保護活性をあわせもち、それによって、その天然の特徴を確実に管理することができる。
【００９７】
ここでも再び、本発明の組成物は、副作用または他の望ましくない影響がないことがわかり、優れた忍容性を示した。
【００９８】
従って、本発明の組成物は、有利には、皮膚、粘膜および皮膚付属器の細菌感染を治療するのに適しており、皮膚感染が皮膚の検出可能な病変を引き起こすか、または引き起こす原因となる病状、例えば、座瘡、化膿性汗腺炎または非化膿性汗腺炎、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓのコロニー生成を伴うアトピー性皮膚炎、膿痂疹、趾間感染、毛嚢炎、腫れ物、外傷後感染および熱傷した皮膚の感染の治療に適している。
【００９９】
当業者は、示し、図示した実施形態において、予測できない具体的な要求を満足するために、本発明に対する種々の変更を行ってもよく、一方で、この変更は、以下の特許請求の範囲に定義されるような本発明の保護範囲にすべて含まれる。
【図１】
2015525778.tif 000005
【図２】
2015525778.tif 000006
【図３Ａ】
2015525778.tif 000007
【図３Ｂ】
2015525778.tif 000008
【図４】
2015525778.tif 000009
【図５】
2015525778.tif 000010
【図６】
2015525778.tif 000011
【図７】
2015525778.tif 000012
【配列表】
2015525778000001.app
【国際調査報告】
2015525778.tif 000013
2015525778.tif 000014
2015525778.tif 000015