(57)【要約】  本発明は、化学合成薬剤の製法、ならびに特にヘパリン五糖の新規な中間体およびその調製方法に関する。上記製法は、高い反応効率および簡単な反応工程を有している。反応中間体は、容易に精製され、工業生産に適している。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘパリン五糖の調製のための中間体として使用され得る、以下の式Ｉ：
【化１】
2015514098.tif 000019
を有している化合物であって、
複数の単糖単位の立体配置および各単糖の間をつなぐ結合の立体化学は、Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｄ−グルクロノシル−β−１，４−Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｌ−イドロノシル−α−１，４−Ｄ−グルコースであり、各置換基の定義づけは、以下の通りである：
Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得；
Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表しており；
Ｒ５は、水素イオンまたはアルカリ金属イオンを表している、化合物。
【請求項２】
Ｒが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ベンジルまたはシクロヘキシルから選択されることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒがメチルであり；Ｒ４がベンジルまたは置換されているベンジルであり；Ｒ５が水素イオンまたはナトリウムイオンであることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ヘパリン五糖の調製のための中間体として使用され得る、以下の式ＩＩ：
【化２】
2015514098.tif 000020
を有している化合物であって、
複数の単糖単位の立体配置および各単糖の間をつなぐ結合の立体化学は、Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｄ−グルクロノシル−β−１，４−Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｌ−イドロノシル−α−１，４−Ｄ−グルコースであり、各置換基の定義づけは、以下の通りである：
Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得；
Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表している、化合物。
【請求項５】
Ｒが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ベンジルまたはシクロヘキシルから選択されることを特徴とする請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒがメチルであり；Ｒ４がベンジルまたは置換されているベンジルであることを特徴とする請求項４に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の調製のための方法であって、
ａ）第１に、以下の式ＩＩＩ：
【化３】
2015514098.tif 000021
の完全に保護されている五糖化合物を、水酸化ナトリウムを用いて処理して、Ｒ５がナトリウムイオンである以下の式ＩＶ：
【化４】
2015514098.tif 000022
を有している化合物を得るために式ＩＩＩの化合物がエステル加水分解に供されること、代替的に、Ｒ５が水素イオンである式ＩＶを有している化合物を得るために、式ＩＩＩの化合物がエステル加水分解および続く酸による中和に供されること、
ここで、Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得；Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ２０のアルキル、置換されているアルキル、水素イオン、ナトリウムイオンを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得、同じ分子式におけるＲ１は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ２は、直鎖状もしくは分枝鎖状の脂肪族アシル、またはアリールアシルを表しており、同じ分子式におけるＲ２は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ３はアジド基を表しており；Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ５は、水素イオンまたはアルカリ金属イオンを表しており；
ｂ）第２に、式Ｉの化合物を得るために、還元剤を用いて式ＩＶの化合物を処理すること、すなわちＲ３基がアミノ基に還元されることを包含していることを特徴とする方法。
【請求項８】
式ＩＩＩの化合物におけるＲ２が、アセチル、４−オキソバレリルおよびベンゾイルから選択され、上記酸が好ましくは塩化水素酸であることを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
式ＩＶの化合物が、分離および精製の後に還元に供され得るか、代替的に式ＩＶの化合物が、分離および精製なしのワンポット反応処理に供され得る、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の調製のための方法であって、
ａ）第１に、以下の式ＩＩＩ：
【化５】
2015514098.tif 000023
の完全に保護されている五糖化合物を、以下の式Ｖ：
【化６】
2015514098.tif 000024
の化合物を得るために還元剤を用いて処理する、すなわちＲ３基をアミノ基に還元すること、
ここで、Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得；Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ２０のアルキル、置換されているアルキル、水素イオン、ナトリウムイオンを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得、同じ分子式におけるＲ１は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ２は、直鎖状もしくは分枝鎖状の脂肪族アシル、またはアリールアシルを表しており、同じ分子式におけるＲ２は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表しており；
ｂ）第２に、水酸化ナトリウムを用いて式Ｖの化合物を処理して、Ｒ５がナトリウムイオンである式Ｉの化合物を得るために式Ｖの化合物がエステル加水分解に供されること、代替的に、Ｒ５が水素イオンである式Ｉの化合物を得るために式Ｖの化合物がエステル加水分解および続く酸による中和に供されることを包含していることを特徴とする、方法。
【請求項１１】
式ＶにおけるＲ２が、アセチル、４−オキソバレリルおよびベンゾイルから選択され、上記酸が好ましくは塩化水素酸であることを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
上記還元剤が、トリメチルホスフィン、トリエチルホスフィン、トリブチルホスフィン、トリフェニルホスフィンまたは硫化水素から選択されることを特徴とする請求項７〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
請求項４に記載の式ＩＩの化合物の調製のための方法であって、
請求項１に記載の式Ｉの化合物を、硫酸化試薬を用いて処理すること；および式ＩＩの化合物を得るために、得られた未精製の生成物を、ナトリウムイオン交換樹脂を用いて処理すること；硫酸化反応は、１ステップまたは複数ステップにおいて実施され得ることを特徴とする方法。
【請求項１４】
上記硫酸化試薬が、三酸化硫黄−ピリジン錯体、三酸化硫黄−トリメチルアミン錯体、三酸化硫黄−トリエチルアミン錯体、または気体の三酸化硫黄から選択されることを特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
式ＶＩのヘパリン五糖化合物の調製のための方法であって、
水酸化パラジウムまたはパラジウムカーボンの触媒を用いて水素条件下において、請求項４に記載の式ＩＩの化合物を処理して、式ＶＩ：
【化７】
2015514098.tif 000025
のヘパリン五糖化合物を得るために式ＩＩの化合物のＲ４基のすべてを除去することを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の、ヘパリン五糖の調製における、使用。
【請求項１７】
請求項４に記載の式ＩＩの化合物の、ヘパリン五糖の調製における、使用。
【請求項１８】
上記ヘパリン五糖がフォンダパリヌクスナトリウムであることを特徴とする請求項１６または１７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔発明の分野〕
本発明は、化学合成の分野に関し、特に、完全に保護されているヘパリン五糖前駆体をヘパリン五糖に変換するための調製方法に関する。
【０００２】
〔発明の背景〕
ヘパリンは、Johns Hopkins UniversityのJay McLeanによって、１９１６年に動物の肝臓から初めて単離され、抗凝固における活性成分であると同定され（a: Chem. Ind. 1991, 2, 45-50; b: Bull. Johns Hopkins Hosp. 1928, 42, 199）、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）ファミリーのなかで最も複雑な構造を有している。ヘパリンは、６０年近くにわたって、抗血栓症および心臓血管疾患の臨床処置に使用されている。その物理的作用のなかでも、抗凝固における作用は、最も集中的に研究され、かつ明らかにされており、それまでの臨床的な抗凝固剤に代わるものとして、１９９０年代以降、低分子ヘパリン（ＬＭＷＨ）の一般的な抗凝固剤としての使用を促している（Blood, 1992, 79, 1-17）。血液凝固は、血漿における一連の凝固因子の連続して起こる活性化の結果である。最終的に、不活性なトロンビンが活性なトロンビンに変換され、可溶性のフィブリノゲンが部分的に加水分解され、かつ不溶性のフィブリンが放出され、血液の凝固をもたらす。アンチトロンビンIII（ＡＴIII）は、血液凝固におけるセリンプロテアーゼ（特にトロンビンIIａおよびＸａ）の阻害剤である。アンチトロンビンIIIはトロンビンと緩やかに反応するが、反応速度は、ヘパリン存在下において数千倍まで上昇し、血液凝固が、効率的に阻害され得る。天然のヘパリンは、動物の内臓から主に抽出され、種々の活性な多糖からなる複雑な混合物であり、したがって、その有効量は、使用中に実質的に制御され得ず、危険な副作用（例えば、出血、血小板減少など）を生じ得る。一方、ヘパリン分子は、血漿タンパク質と非特異的に結合し、より複雑な合併症をもたらし得る。１９８０年代の終わりに、低分子ヘパリン（ＬＭＷＨ）の出現は、抗血栓症の治療効果を向上させている。低分子ヘパリンは、化学分解、酵素分解およびガンマ線分解によって、未処理のヘパリンから得られる。問題は、ヘパリンおよび低分子ヘパリンが、動物由来のために、種々の種によるウイルスの交差感染の危険性を有しており、使用を非常に危険にしていることである。種々の種によるウイルスのそのような交差感染を回避するためのもっとも有効な手段は、ヘパリンの化学合成である。
【０００３】
メチルＯ−（２−デオキシ−６−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−デオキシ−３，６−ジ−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−Ｏ−スルホ−α−Ｌ−イドピラヌロノシル）−（１→４）−２−デオキシ−６−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシドの１０ナトリウム塩という化学名を有している、フォンダパリヌクスナトリウムは、ヘパリン五糖の一員であり、２００１年に抗凝固剤として市販された。その化学構造は、以下の通り式１０：
【０００４】
【化１】
2015514098.tif 000002
【０００５】
に示される。
【０００６】
１９８０年代中ごろに、Sinay et al.（Carbohydr. Res. 1984, 132, C5-C9, Carbohydr. Res. 1986, 147, 221-236）およびBoeckel et al.（J. Carbohydr. Chem. 1985, 4, 293-321.）は、メチルキャップ無しの抗凝固剤である五糖の全合成を実現した。完全に保護されている五糖は、以下の式１〜５によって表される反応スキームを経て、最終生成物の五糖に変換される。反応ステップは、１．エステル基の鹸化、２．ヒドロキシル基の硫酸化、３．アジドまたはカルボキシルベンジルによって保護されているアミノ基の、保護されていないアミノ基へのＰｄ／Ｃを用いた水素化還元、およびヒドロキシル基に対するベンジル保護基の続く脱保護、ならびに４．アミノ基の選択的な硫酸化を包含している。
【０００７】
【化２】
2015514098.tif 000003
【０００８】
五糖の上述した変換において、アミノ基へのアジド基の還元は、非常に迅速であり、五糖のヘミアセタール互変異性体の還元性末端アルデヒド基との副反応を連続的に起こす傾向にあり、安定な二量体または三量体を生成し、極度に低い反応効率をもたらす。
【０００９】
上記問題を解決する過程において、合成手順における還元の間の二量体および三量体の形成の問題は、メチルキャップ付きの五糖を用いることによって回避され得、水素化還元が、以下のスキーム６〜１０に示されているような反応スキームによって、ほぼ定量的な収率をともなって実施され得ることが、見出されている（Carbohydr. Res. 1987. 167, 67-75）。その合成スキームは、キャップされていない五糖を原材料として用いる合成スキームと実質的に同じであり、生成物であるフォンダパリヌクスナトリウムを得るために、以下の４ステップを包含している。１．硫酸化に供される保護されていない５つのヒドロキシル基を生じさせる、完全に保護されている五糖のエステル基の鹸化、２．上記ヒドロキシル基の硫酸化、３．アジド保護されているアミノ基またはベンジルカルボニル保護されているアミノ基の、保護されていないアミノ基へのＰｄ／Ｃを用いた水素化還元、およびヒドロキシル基の続く脱保護、ならびに４．アミノ基の選択的な硫酸化。
【００１０】
【化３】
2015514098.tif 000004
【００１１】
また、国際公開第２００３０２２８６０号および国際公開第２０１００４０８８０号は、類似の方法を採用している。
【００１２】
生物活性についての試験は、還元末端のメチル保護が、ヘパリン五糖の生物活性に影響を有しておらず、したがって、メチルキャップを用いた保護方法が、ヘパリンオリゴマー分子の合成にとっての定法に適していることを明らかにしている。
【００１３】
従来技術に係る方法は、ベンジル保護されているヒドロキシルおよびアジド（すなわちベンゾキシルカルボニル保護されているアミノ）の、保護されていないヒドロキシおよびアミノへの水素化による同時の変換を必要とし、ここで、中間体は、安定性に乏しく、精製が困難である。さらに、最終ステップは、保護されていない６つのヒドロキシルおよび保護されていない３つのアミノのうち、３つのすべてのアミノ基の選択的な硫酸化を必要とする。反応の収率は、反応の低い選択性に起因して非常に低く、最終生成物は、精製が困難である。
【００１４】
本発明に係る方法は、完全に保護されている五糖のエステル基を除去した後にまず、保護されていないアミノ基にアジド基を還元するための非常に効率的な還元処理を採用している。未精製の中間体は、高い純度を有しており、精製せずに次のステップに使用され得る。保護されていないヒドロキシル基および保護されていないアミノ基のすべてが、続いて硫酸化される。それは、高い効率を有しており、残りのベンジル基は、そのような中間体の精製を容易にする。最後に、すべてのベンジル基は、最終生成物を得るために水素化によって除去される。
【００１５】
〔発明の説明〕
本発明は、完全に保護されているヘパリン五糖をヘパリン五糖に変換する方法、および新規中間体を提供する。
【００１６】
本発明の１つの目的は、ヘパリン五糖の調製のための中間体として使用され得る以下の式Ｉ：
【００１７】
【化４】
2015514098.tif 000005
【００１８】
を有している化合物を提供することである。ここで、複数の単糖単位の立体配置および各単糖の間をつなぐ結合の立体化学は、Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｄ−グルクロノシル−β−１，４−Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｌ−イドロノシル−α−１，４−Ｄ−グルコースであり、各置換基の定義づけは、以下の通りである。
【００１９】
Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、シクロヘキシルなど）であり得、置換されているアルキルは、ベンジル、アリル、メトキシメチル、または２−メトキシエチルなどであり得、好ましくはＲはメチルである。
【００２０】
Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、置換されているベンジルは、ｐ−メトキシベンジル、トリフェニルメチルなどであり得、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表している。
【００２１】
Ｒ５は、水素イオンまたはアルカリ金属イオンを表しており、好ましくはアルカリ金属イオンはナトリウムイオンである。
【００２２】
本発明の他の目的は、ヘパリン五糖の調製ための中間体として使用され得る、以下の構造ＩＩ：
【００２３】
【化５】
2015514098.tif 000006
【００２４】
によって表される化合物を提供することである。ここで、複数の単糖単位の立体配置および各単糖の間をつなぐ結合の立体化学は、Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｄ−グルクロノシル−β−１，４−Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｌ−イドロノシル−α−１，４−Ｄ−グルコースであり、各置換基の定義づけは、以下の通りである。
【００２５】
Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、シクロヘキシルなど）であり得、置換されているアルキルは、ベンジル、アリル、メトキシメチル、または２−メトキシエチルなどであり得、好ましくはＲはメチルである。
【００２６】
Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、置換されているベンジルは、ｐ−メトキシベンジル、トリフェニルメチルなどであり得、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表している。
【００２７】
本発明の式ＩＩの化合物は、ナトリウム塩のほかに、薬学的に許容可能な任意の他の塩（例えば、カリウム塩、カルシウム塩など）であり得る。
【００２８】
本発明のさらなる目的は、以下のステップａ）およびｂ）を包含している、上述した式Ｉの化合物の調製のための方法を提供することである。
ａ）第１に、以下の式ＩＩＩ：
【００２９】
【化６】
2015514098.tif 000007
【００３０】
の完全に保護されている五糖化合物を、水酸化ナトリウムを用いて処理して、Ｒ５がナトリウムイオンである以下の式ＩＶ：
【００３１】
【化７】
2015514098.tif 000008
【００３２】
を有している化合物を得るために式ＩＩＩの化合物がエステル加水分解に供されること、代替的に、Ｒ５が水素イオンである式ＩＶを有している化合物を得るために、式ＩＩＩの化合物がエステル加水分解および続く酸による中和に供されること。
ｂ）第２に、式Ｉの化合物を得るために、還元剤を用いて式ＩＶの化合物を処理する、すなわちＲ３基がアミノ基に還元されること。
【００３３】
上記ａ）において、Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得、置換されているアルキルは、ベンジル、アリル、メトキシメチルまたは２−メトキシエチルなどであり得；Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ２０のアルキル、置換されているアルキル、水素イオン、ナトリウムイオンを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得、置換されているアルキルは、ベンジル、アリル、メトキシメチルまたは２−メトキシエチルなどであり得、同じ分子式におけるＲ１は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ２は、直鎖状もしくは分枝鎖状の脂肪族アシル、またはアリールアシル（例えば、アセチル、４−オキソバレリル、ベンゾイルなど）を表しており、同じ分子式におけるＲ２は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ３はアジド基を表しており；Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、置換されているベンジルは、ｐ−メトキシベンジル、トリフェニルメチルなどであり得、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ５は、水素イオンまたはアルカリ金属イオンから選択され；好ましくは上記酸は塩化水素酸である。
【００３４】
式Ｉの化合物を調製するための式ＶＩの化合物は、分離および精製の後に、還元に供され得るか、代替的に、分離および精製なしにワンポット反応処理に供され得る。
【００３５】
本発明の他の目的は、以下のステップａ）およびｂ）を包含している、上述した式Ｉの化合物の調製のための代替的な方法を提供することである。
ａ）第１に、式ＩＩＩの完全に保護されている五糖化合物を、以下の式Ｖ：
【００３６】
【化８】
2015514098.tif 000009
【００３７】
の化合物を得るために還元剤を用いて処理する（すなわちＲ３基をアミノ基に還元する）こと。
ｂ）第２に、水酸化ナトリウムを用いて式Ｖの化合物を処理して、Ｒ５がナトリウムイオンである式Ｉの化合物を得るために式Ｖの化合物がエステル加水分解に供されること、代替的に、Ｒ５が水素イオンである式Ｉの化合物を得るために式Ｖの化合物がエステル加水分解および続く酸による中和に供されること。
【００３８】
上記ａ）において、Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得、置換されているアルキルは、ベンジル、アリル、メトキシメチルまたは２−メトキシエチルなどであり得；Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ２０のアルキル、置換されているアルキル、水素イオン、ナトリウムイオンを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得、置換されているアルキルは、ベンジル、アリル、メトキシメチルまたは２−メトキシエチルなどであり得、同じ分子式におけるＲ１は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ２は、直鎖状もしくは分枝鎖状の脂肪族アシル、またはアリールアシル（例えば、アセチル、４−オキソバレリル、ベンゾイルなど）を表しており、同じ分子式におけるＲ２は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、置換されているベンジルは、ｐ−メトキシベンジル、トリフェニルメチルなどであり得、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表している。
【００３９】
上述した方法に採用される還元剤は、トリメチルホスフィン、トリエチルホスフィン、トリブチルホスフィン、トリフェニルホスフィン、または硫化水素から選択され得る。使用される上記酸は、好ましくは塩化水素酸である。
【００４０】
また、本発明は、式ＩＩの化合物の調製のための方法を提供する。当該方法は、式Ｉの化合物を、硫酸化試薬を用いて処理すること；および式ＩＩの化合物を得るために、得られた未精製の生成物を、ナトリウムイオン交換樹脂を用いて処理することを包含している。ここで、硫酸化反応は、１ステップまたは複数ステップにおいて実施され得る。硫酸化反応の上記１ステップは、硫酸化試薬、ピリジンおよびトリエチルアミンの存在下において実施される。また、上記硫酸化反応は、段階的に実施され得る（すなわち、ある温度条件下において硫酸化試薬をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドと反応させて、ヒドロキシル基の大部分を硫酸化させ、それから少量の硫酸化試薬／ピリジン／トリエチルアミンと反応させて、アミノ基および少量の未反応のヒドロキシル基を硫酸化させる）。好ましくは、上記温度は５０℃である。上記硫酸化試薬は、三酸化硫黄−ピリジン錯体、三酸化硫黄−トリメチルアミン錯体、三酸化硫黄−トリエチルアミン錯体、または気体の三酸化硫黄から選択される。
【００４１】
また、本発明は、ヘパリン五糖の調製のための方法を提供する。当該方法は、触媒（例えば、水酸化パラジウム、パラジウムカーボンなど）を用いて水素条件下において式ＩＩの化合物を処理して、ヘパリン五糖化合物を得るために式ＩＩの化合物のＲ４基のすべてを除去することを包含している。
【００４２】
本発明に係るヘパリン五糖の調製のための特定の方法は、以下のステップを包含している。
１．式ＩＶの化合物を得るために、水酸化ナトリウムの存在下において式ＩＩＩの化合物をエステル加水分解に供すること；
２．式Ｉの化合物を得るために、式ＩＶの化合物のＲ３基をアミノ基に還元すること；
３．式ＩＩの化合物を得るために、ステップ１およびステップ２において生成された保護されていないヒドロキシル基およびアミノ基を硫酸化に供すること；ならびに
４．Ｒ４基を除去するため、および式ＶＩのヘパリン五糖を得るために、式ＩＩの化合物を接触水素化に供すること。
【００４３】
変換過程は以下の通りである。
【００４４】
【化９】
2015514098.tif 000010
【００４５】
また、本発明に係るヘパリン五糖の調製のための特定の方法は、以下のステップを包含している。
１．式Ｖの化合物を得るために、式ＩＩＩの化合物をアミノ基に還元すること；
２．式Ｉの化合物を得るために、式Ｖの化合物の分離および精製なしに、水酸化ナトリウムの存在下において式Ｖの化合物をエステル加水分解に供すること；
３．式ＩＩの化合物を得るために、ステップ１およびステップ２において生成された保護されていないヒドロキシル基およびアミノ基を硫酸化に供すること；ならびに
４．Ｒ４基を除去するため、および式ＶＩの化合物を得るために、式ＩＩの化合物を接触水素化に供すること。
【００４６】
変換過程は以下の通りである。
【００４７】
【化１０】
2015514098.tif 000011
【００４８】
本発明に係る方法は、以下の利点および有益な作用を有している。
１．本発明は、保護されていないアミノ基にアジド基を還元するための非常に効率的な還元処理を採用して、未精製の中間体が、より高い純度を有しており、精製なしに次のステップに適用され得、操作を単純化している。
２．本発明に係る硫酸化は、保護されていないヒドロキシル基およびアミノ基のすべてを、より高い効率を有して完全に硫酸化し得る。特に、段階的な硫酸化は、使用される硫酸化試薬を減少させ得、より良好な結果を有して後処理を単純化し得る。
３．本発明に係るベンジル保護法（すなわち、より後段までベンジルを保持すること）は、一連の中間体のより容易な精製を可能にし、工業生産に適している。
４．本発明に係る最終ステップ（例えば、接触水素化を介して保護ベンジルを除去すること）は、最終生成物の容易な精製を可能にし、工業生産に適している。
【００４９】
〔図面の説明〕
図１は、実施例５にしたがって調製された式ＩＩ−１の化合物の１Ｈ ＮＭＲである。
【００５０】
図２は、実施例５にしたがって調製された式ＩＩ−１の化合物のＨＳＱＣ ＮＭＲである。
【００５１】
図３は、実施例７にしたがって調製されたフォンダパリヌクスナトリウムの１Ｈ ＮＭＲである。
【００５２】
〔実施例〕
実施例１：メチルＯ−（２−アジド−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラヌロノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−アジド−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−イドピラヌロノシル）−（１→４）−２−アジド−３−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（ＩＶ−１）の調製
【００５３】
【化１１】
2015514098.tif 000012
【００５４】
式ＩＩＩ−１の完全に保護されている五糖化合物（１０ｇ、５．４ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（２２０ｍＬ）に溶解させた。水酸化ナトリウムの水溶液（１１０ｍＬ、１．０Ｍ、２０当量、１１０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。添加を終えた後に、それを、反応が完了するまで一晩、撹拌した。それから、それを、１Ｍの塩化水素酸を用いて中和し、酢酸エチルを用いて抽出した。有機層を混合し、水、１０％のクエン酸、飽和生理食塩水を用いて逐次的に洗浄し、無水硫酸ナトリウムに通して乾燥させ、それから泡沫状の固体の形態において式ＩＶ−１の８．０ｇの化合物を得るために、減圧下において濃縮して溶媒を除去した。
ＥＳＭＳ：ｍ／Ｚ＝１４８６［Ｍ＋１］＋，１４８４［Ｍ−１］−。
【００５５】
実施例２：メチルＯ−（２−アミノ−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラヌロノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−イドピラヌロノシル）−（１→４）−２−アミノ−３−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（Ｉ−１）の調製
【００５６】
【化１２】
2015514098.tif 000013
【００５７】
窒素の保護下において、式ＩＶ−１の五糖化合物（８．０ｇ）を、テトラヒドロフランに溶解（４００ｍＬ）させ、水酸化ナトリウムの水溶液（３２ｍＬ、１．０Ｍ）を加え、テトラヒドロフランにおけるトリメチルホスフィンの溶液（５４ｍＬ、１Ｍ）を、アイスバスにおいて滴下して加え、それから温度を室温まで徐々に上昇させた。それを、反応が完了するまで一晩、撹拌した。希塩酸を、中和のためにｐＨが約７に達するまで加えた。泡沫状の固体の形態において式Ｉ−１の８．８ｇの化合物を得るために、それを減圧下において濃縮して、溶媒を除去した。未精製の生成物をさらなる精製なしに次の反応に供した。
ＨＰＬＣ純度：９０％。
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ＝１４０８［Ｍ＋１］＋，１４０６［Ｍ−１］−。
【００５８】
実施例３：メチルＯ−（２−アミノ−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラヌロノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−イドピラヌロノシル）−（１→４）−２−アミノ−３−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（Ｉ−１）の調製
【００５９】
【化１３】
2015514098.tif 000014
【００６０】
窒素の保護下において、式ＩＶ−１の五糖化合物（４．０ｇ）を、テトラヒドロフラン（２００ｍＬ）に溶解させ、水酸化ナトリウムの水溶液（１６ｍＬ、１．０Ｍ）を加え、トリフェニルホスフィン（７．１ｇ）をアイスバスにおいて加え、それから温度を室温まで徐々に上昇させた。それを、反応が完了するまで一晩、撹拌した。希塩酸を、中和のためにｐＨが約７に達するまで加えた。泡沫状の固体の形態において式Ｉ−１の１１．４ｇの化合物を得るために、それを減圧下において濃縮して、溶媒を除去した。未精製の生成物を、さらなる精製なしに次の反応に供した。
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ＝１４０８［Ｍ＋１］＋，１４０６［Ｍ−１］−。
【００６１】
実施例４：メチルＯ−（２−アミノ−３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラヌロノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−イドピラヌロノシル）−（１→４）−２−アミノ−３−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（Ｉ−１）の調製
【００６２】
【化１４】
2015514098.tif 000015
【００６３】
窒素の保護下において、式ＩＩＩ−１の五糖化合物（５．０ｇ、２．７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）に溶解させ、水（２０ｍＬ）を加え、テトラヒドロフランにおけるトリメチルホスフィンの溶液を、アイスバスにおいて滴下して加え、それから温度を室温まで徐々に上昇させた。それを、反応が完了するまで一晩、撹拌した。水酸化ナトリウムの水溶液（５５ｍＬ、１．０Ｍ）を滴下して加え、それを、反応が完了するまで室温において撹拌した。希塩酸を、中和のためにｐＨが約７に達するまで加えた。泡沫状の固体の形態において式Ｉ−１の８．４ｇの化合物を得るために、それを減圧下において濃縮して、溶媒を除去した。未精製の生成物をさらなる精製なしに次の反応に供した。
ＨＰＬＣ純度：８７％。
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ＝１４０８［Ｍ＋１］＋，１４０６［Ｍ−１］−。
【００６４】
実施例５：メチルＯ−（３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−６−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラヌロノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−デオキシ−３，６−ジ−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−２−Ｏ−スルホ−α−Ｌ−イドピラヌロノシル）−（１→４）−３−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−６−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシドの１０ナトリウム塩（ＩＩ−１）の調製
【００６５】
【化１５】
2015514098.tif 000016
【００６６】
窒素の保護下において、式Ｉ−１の化合物（８．８ｇ）を、ピリジン（５０ｍＬ）およびトリエチルアミン（１０ｍＬ）の混合溶液に溶解させ、三酸化硫黄−ピリジン錯体（１０ｇ、６３ｍｍｏｌ）を加えた。それを、反応が完了するまで一晩、室温において撹拌した。炭酸水素ナトリウムの飽和溶液を加えて、反応を停止させた。それを、赤褐色の油状物を得るために、減圧下において濃縮して溶媒を除去した。それを、イオン交換カラムおよびセファデックスＬＨ−２０カラムクロマトグラフィーを用いて逐次的に精製した。生成物を混合し、減圧下において溶媒を除去し、それから乾燥させて、泡沫状の固体の形態において式ＩＩ−１の８．２ｇの化合物を得た。その１Ｈ ＮＭＲは図１に示されている通りであり、そのＨＳＱＣ ＮＭＲは図２に示されている通りである。
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ＝１０５５．５［Ｍ−７Ｎａ＋５Ｈ］２−／２，６８８．９［Ｍ−９Ｎａ＋６Ｈ］３−／３。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：（selected for anomeric Ｈ） δ ５．５９（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），５．３７（ｓ，１Ｈ），５．２７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），４．９３（according to ＨＳＱＣ ＮＭＲ），４．７２（according to ＨＳＱＣ ＮＭＲ）。
【００６７】
実施例６：メチルＯ−（３，４−ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−６−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラヌロノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−デオキシ−３，６−ジ−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−２−Ｏ−スルホ−α−Ｌ−イドピラヌロノシル）−（１→４）−３−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−６−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシドの１０ナトリウム塩（ＩＩ−１）の調製
【００６８】
【化１６】
2015514098.tif 000017
【００６９】
窒素の保護下において、式Ｉ−１の五糖化合物（３．０ｇ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶解させ、三酸化硫黄−トリメチルアミン錯体（７．２ｇ）を加えた。それを、反応が完了するまで５０℃に加熱した。炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を、反応を停止させるために加えた。それを、溶媒を除去するために減圧下において濃縮して、赤褐色の油状物を得た。それを、イオン交換カラムおよびセファデックスＬＨ−２０カラムクロマトグラフィーを用いて逐次的に精製した。糖を含んでいる部分を混合し、減圧下において溶媒を除去し、それから乾燥させて２．７ｇの泡沫状の固体を得た。泡沫状の固体を、ピリジン（５０ｍＬ）およびトリエチルアミン（１０ｍＬ）の混合溶液に溶解させ、三酸化硫黄−ピリジン錯体（５．１ｇ）を加えた。それを、反応が完了するまで一晩、室温において撹拌した。炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を、反応を停止させるために加えた。それを、溶媒を除去するために減圧下において濃縮して、赤褐色の油状物を得た。それを、イオン交換カラムおよびセファデックスＬＨ−２０カラムクロマトグラフィーを用いて逐次的に精製し、対象とされるサンプルを回収した。それらを混合し、溶媒を除去するために減圧下において濃縮し、乾燥させて、泡沫状の固体の形態において式ＩＩ−１の２．６ｇの化合物を得た。
【００７０】
実施例７：メチルＯ−（２−デオキシ−６−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−デオキシ−３，６−ジ−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２−Ｏ−スルホ−α−Ｌ−イドピラヌロノシル）−（１→４）−２−デオキシ−６−Ｏ−スルホ−２−スルホアミノ−α−Ｄ−グルコピラノシドの１０ナトリウム塩（ＶＩ−１、フォンダパリヌクスナトリウム）の調製
【００７１】
【化１７】
2015514098.tif 000018
【００７２】
式ＩＩ−１の８．２ｇの五糖を、メタノールおよび水の１５０ｍＬの混合溶液（１：１、ｖ／ｖ）に溶解させ、３ｇのパラジウムカーボン（１０％）を加えた。反応を、７０ｐｓｉの水素圧のもとに反応が完了するまで実施した。パラジウムカーボン触媒をろ過によって除去し、溶媒を減圧下において除去した。それを、６．４ｇの最終生成物を得るために、アニオン交換カラムおよびセファデックスＧ２５を用いて逐次的に精製した。その１Ｈ ＮＭＲは図３に示されている通りである。
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ＝１７２７．７［Ｍ＋Ｈ］＋，１７４９．７［Ｍ＋Ｎａ］＋。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：（selected for anomeric Ｈ） δ ５．６１（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．５１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１９（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．０２（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）。
【図面の簡単な説明】
【００７３】
【図１】実施例５にしたがって調製された式ＩＩ−１の化合物の１Ｈ ＮＭＲを示す。
【図２】実施例５にしたがって調製された式ＩＩ−１の化合物のＨＳＱＣ ＮＭＲを示す。
【図３】実施例７にしたがって調製されたフォンダパリヌクスナトリウムの１Ｈ ＮＭＲを示す。
【図１】
2015514098.tif 000026
【図２】
2015514098.tif 000027
【図３】
2015514098.tif 000028
【手続補正書】
【提出日】平成26年12月1日(2014.12.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘパリン五糖の調製のための中間体として使用され得る、以下の式Ｉ：
【化１】
2015514098.tif 000029
を有している化合物であって、
複数の単糖単位の立体配置および各単糖の間をつなぐ結合の立体化学は、Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｄ−グルクロノシル−β−１，４−Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｌ−イドロノシル−α−１，４−Ｄ−グルコースであり、各置換基の定義づけは、以下の通りである：
Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得；
Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表しており；
Ｒ５は、水素イオンまたはアルカリ金属イオンを表している、化合物。
【請求項２】
Ｒが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ベンジルまたはシクロヘキシルから選択されることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒがメチルであり；Ｒ４がベンジルまたは置換されているベンジルであり；Ｒ５が水素イオンまたはナトリウムイオンであることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ヘパリン五糖の調製のための中間体として使用され得る、以下の式ＩＩ：
【化２】
2015514098.tif 000030
を有している化合物であって、
複数の単糖単位の立体配置および各単糖の間をつなぐ結合の立体化学は、Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｄ−グルクロノシル−β−１，４−Ｄ−グルコシル−α−１，４−Ｌ−イドロノシル−α−１，４−Ｄ−グルコースであり、各置換基の定義づけは、以下の通りである：
Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得；
Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表している、化合物。
【請求項５】
Ｒが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ベンジルまたはシクロヘキシルから選択され、好ましくはＲがメチルであり；Ｒ４がベンジルまたは置換されているベンジルであることを特徴とする請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の調製のための方法であって、
ａ）第１に、以下の式ＩＩＩ：
【化３】
2015514098.tif 000031
の完全に保護されている五糖化合物を、水酸化ナトリウムを用いて処理して、Ｒ５がナトリウムイオンである以下の式ＩＶ：
【化４】
2015514098.tif 000032
を有している化合物を得るために式ＩＩＩの化合物がエステル加水分解に供されること、代替的に、Ｒ５が水素イオンである式ＩＶを有している化合物を得るために、式ＩＩＩの化合物がエステル加水分解および続く酸による中和に供されること、
ここで、Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得；Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ２０のアルキル、置換されているアルキル、水素イオン、ナトリウムイオンを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得、同じ分子式におけるＲ１は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ２は、直鎖状もしくは分枝鎖状の脂肪族アシル、またはアリールアシルを表しており、同じ分子式におけるＲ２は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ３はアジド基を表しており；Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ５は、水素イオンまたはアルカリ金属イオンを表しており；
ｂ）第２に、式Ｉの化合物を得るために、還元剤を用いて式ＩＶの化合物を処理すること、すなわちＲ３基がアミノ基に還元されることを包含していることを特徴とする方法。
【請求項７】
式ＩＩＩの化合物におけるＲ２が、アセチル、４−オキソバレリルおよびベンゾイルから選択され、上記酸が好ましくは塩化水素酸であることを特徴とする請求項６に記載の方法。
【請求項８】
式ＩＶの化合物が、分離および精製の後に還元に供され得るか、代替的に式ＩＶの化合物が、分離および精製なしのワンポット反応処理に供され得る、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の調製のための方法であって、
ａ）第１に、以下の式ＩＩＩ：
【化５】
2015514098.tif 000033
の完全に保護されている五糖化合物を、以下の式Ｖ：
【化６】
2015514098.tif 000034
の化合物を得るために還元剤を用いて処理する、すなわちＲ３基をアミノ基に還元すること、
ここで、Ｒは、Ｃ１−Ｃ２０のアルキルまたは置換されているアルキルを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得；Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ２０のアルキル、置換されているアルキル、水素イオン、ナトリウムイオンを表しており、ここで、アルキルは、直鎖状のアルキル、または分枝鎖状もしくは環状のアルキルであり得、同じ分子式におけるＲ１は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ２は、直鎖状もしくは分枝鎖状の脂肪族アシル、またはアリールアシルを表しており、同じ分子式におけるＲ２は、同じ基または異なる基を表しており；Ｒ４は、ベンジルまたは置換されているベンジルを表しており、同じ分子式におけるＲ４は、同じ基または異なる基を表しており；
ｂ）第２に、水酸化ナトリウムを用いて式Ｖの化合物を処理して、Ｒ５がナトリウムイオンである式Ｉの化合物を得るために式Ｖの化合物がエステル加水分解に供されること、代替的に、Ｒ５が水素イオンである式Ｉの化合物を得るために式Ｖの化合物がエステル加水分解および続く酸による中和に供されることを包含していることを特徴とする、方法。
【請求項１０】
式ＶにおけるＲ２が、アセチル、４−オキソバレリルおよびベンゾイルから選択され、上記酸が好ましくは塩化水素酸であることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
上記還元剤が、トリメチルホスフィン、トリエチルホスフィン、トリブチルホスフィン、トリフェニルホスフィンまたは硫化水素から選択されることを特徴とする請求項６〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
請求項４または５に記載の式ＩＩの化合物の調製のための方法であって、
請求項１〜３のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物を、硫酸化試薬を用いて処理すること；および式ＩＩの化合物を得るために、得られた未精製の生成物を、ナトリウムイオン交換樹脂を用いて処理すること；硫酸化反応は、１ステップまたは複数ステップにおいて実施され得ることを特徴とする方法。
【請求項１３】
上記硫酸化剤が、三酸化硫黄−ピリジン錯体、三酸化硫黄−トリメチルアミン錯体、三酸化硫黄−トリエチルアミン錯体、または気体の三酸化硫黄から選択されることを特徴とする請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
式ＶＩのヘパリン五糖化合物の調製のための方法であって、
水酸化パラジウムまたはパラジウム炭素の触媒を用いて水素条件下において、請求項４または５に記載の式ＩＩの化合物を処理して、式ＶＩ：
【化７】
2015514098.tif 000035
のヘパリン五糖化合物を得るために式ＩＩの化合物のＲ４基のすべてを除去することを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物または請求項４もしくは５に記載の式ＩＩの化合物の、ヘパリン五糖、好ましくはフォンダパリヌクスナトリウムの調製における、使用。
【国際調査報告】
2015514098.tif 000036
2015514098.tif 000037
2015514098.tif 000038
2015514098.tif 000039
2015514098.tif 000040
2015514098.tif 000041