(57)【要約】  本発明は、癌および眼疾患等の疾患を治療する際に使用するための二重アンジオポエチン−２／Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を含む薬学的組み合わせに関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つ以上の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤と、１つ以上の抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤とを含む、薬学的組み合わせ。
【請求項２】
前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤が、配列番号１〜２０から選択される、請求項１に記載の薬学的組み合わせ。
【請求項３】
前記抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤が、ＢＩＢＦ１１２０、スニチニブ、ソラフェニブ、アキシチニブ、ＰＴＫ７８７、チボザニブ、パゾパニブ、ペグジネタニブ、およびラムシルマブから選択される、前記請求項のいずれかに記載の薬学的組み合わせ。
【請求項４】
配列番号１４に記載の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤と、ＢＩＢＦ１１２０とを含む、請求項３に記載の薬学的組み合わせ。
【請求項５】
配列番号１４に記載の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤と、スニチニブとを含む、請求項３に記載の薬学的組み合わせ。
【請求項６】
配列番号１５に記載の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤と、ＢＩＢＦ１１２０とを含む、請求項３に記載の薬学的組み合わせ。
【請求項７】
配列番号１６に記載の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤と、ＢＩＢＦ１１２０とを含む、請求項３に記載の薬学的組み合わせ。
【請求項８】
配列番号１７に記載の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤と、ＢＩＢＦ１１２０とを含む、請求項３に記載の薬学的組み合わせ。
【請求項９】
配列番号１８に記載の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤と、ＢＩＢＦ１１２０とを含む、請求項３に記載の薬学的組み合わせ。
【請求項１０】
１つ以上の抗悪性腫瘍剤をさらに含む、前記請求項のいずれかに記載の薬学的組み合わせ。
【請求項１１】
１つ以上の薬学的に許容される希釈剤と、任意選択的にさらなる薬学的に許容される薬剤と混合される、請求項１〜１０のいずれかに記載の薬学的組み合わせを含む、薬学的組成物。
【請求項１２】
以下を備える、組み合わせ調製キットの形態の、請求項１１に記載の薬学的組成物
（ｉ）請求項２に記載の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤を含む第１の薬学的組成物を収容する第１の区画と、
（ｉｉ）請求項３に記載の抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を含む第２の薬学的組成物を収容する第２の区画と、任意選択的に、
（ｉｉｉ）１つ以上のさらなる抗悪性腫瘍剤を含む１つ以上の薬学的組成物を収容する第３の区画。
【請求項１３】
癌の治療のための薬物の製造のための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組み合わせまたは請求項１１に記載の薬学的組成物の、使用。
【請求項１４】
薬物として使用するための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組み合わせ、または請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
癌の治療のための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組み合わせ、または請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
前記癌が、非小細胞肺癌、腎細胞癌、卵巣癌、乳癌、結腸直腸癌、膵癌から選択される、請求項１３に記載の使用、または請求項１５に記載の組み合わせ、または請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤と併用して癌の治療に使用するための二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤。
【請求項１８】
治療有効量の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤をそれを必要とする患者に投与することを含み、さらに、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後７２時間以内に治療有効量の抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を同じ患者に投与することとを含む、癌の治療方法。
【請求項１９】
前記抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与が、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後、３６時間以内、好ましくは２４時間以内、好ましくは１２時間以内、好ましくは６時間以内、好ましくは３時間以内、好ましくは２時間以内、好ましくは１時間以内、好ましくは３０分以内に行われる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与が、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の前記投与と同時に行われる、請求項１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌、眼疾患およびその他等の疾患を治療する際に使用するための、二重アンジオポエチン−２／Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を含む薬学的組み合わせに関する。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍が約１ｍｍ3の臨界サイズに達すると、それらは、酸素および栄養素を含む血液供給を維持してさらに増殖できるように、血管新生に依存するようになる。米国特許出願公開第２００８／００１４１９６号に要約されるように、血管新生は、固形腫瘍および転移を含む多くの疾患の病変形成に関係している。
【０００３】
腫瘍増殖の症例において、血管新生は、過形成から新形成への移行、ならびに腫瘍の増殖および転移のための栄養供給に極めて重要であると考えられ（Ｆｏｌｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３９−５８，１９８９）、腫瘍細胞に正常細胞と比べて増殖優位性を獲得させる。したがって、抗血管新生療法は、いくつかの種類の腫瘍のための重要な治療選択肢となっている。これらの治療法は、ＶＥＧＦ（Ａｖａｓｔｉｎ）またはその受容体（ＳｕｔｅｎｔおよびＳｏｒａｆｉｎｉｂ）を中和することによるＶＥＧＦ経路の遮断に焦点を合わせてきた（Ｆｅｒｒａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．２００４  Ｍａｙ；３（５）：３９１−４００）。
【０００４】
例えば、米国特許出願公開第２００８／００１４１９６号および国際公開第ＷＯ２００８／１０１９８５号に記載されるように、血管新生は、固形腫瘍および転移、ならびに眼疾患を含む多くの疾患の病因に関与している。最も重要な血管新生促進因子の１つは、ＶＥＧＦ−Ａまたは血管透過性因子（ＶＰＦ）とも称される血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）である。ＶＥＧＦは、胎盤増殖因子（ＰｌＧＦ）、ＶＥＧＦ−Ｂ、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ、ＶＥＧＦ−Ｅ、およびＶＥＧＦ−Ｆを含む遺伝子ファミリーに属する。ヒトＶＥＧＦの単一遺伝子のｍＲＮＡの交互スプライシングによって、少なくとも６つのアイソフォーム（ＶＥＧＦ１２１、ＶＥＧＦ１４５、ＶＥＧＦ１６５、ＶＥＧＦ１８３、ＶＥＧＦ１８９、およびＶＥＧＦ２０６）が生成されるが、ＶＥＧＦ１６５が最も豊富なアイソフォームである。
【０００５】
ＶＥＧＦと相互作用する２つのＶＥＧＦチロシンキナーゼ受容体（ＶＥＧＦＲ）、すなわち、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１としても知られる）およびＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲまたはＦｌＫ−１としても知られる）が特定されている。ＶＥＧＦＲ−１は、ＶＥＧＦに対して最も高い親和性を有する一方で、ＶＥＧＦＲ−２は、ＶＥＧＦに対していくらか低い親和性を有する。Ｆｅｒｒａｒａ（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｒｅｖ．２００４，２５：５８１−６１１）は、ＶＥＧＦに関する詳細な説明を提供しており、その受容体との相互作用、ならびに正常および病的プロセスにおけるその機能は、Ｈｏｅｂｅｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．２００４，５６：５４９−５８０に見出だすことができる。
【０００６】
ＶＥＧＦは、正常および異常な血管新生の両方の中心的な制御因子であると報告されている（Ｆｅｒｒａｒａ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｓ−Ｓｍｙｔｈ，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｒｅｖ．１９９７，１８：４−２５；Ｆｅｒｒａｒａ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．１９９９，７７：５２７−５４３）。血管形成のプロセスに寄与する他の増殖因子と比較して、ＶＥＧＦは、脈管系内の内皮細胞に対するその高い特異性において特有である。
【０００７】
ＶＥＧＦ  ｍＲＮＡは、大多数のヒト腫瘍によって過剰発現される。腫瘍増殖の症例において、血管新生は、過形成から新形成への移行、ならびに腫瘍の増殖および転移のための栄養供給に極めて重要であると考えられ（Ｆｏｌｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３９−５８，１９８９）、腫瘍細胞に正常細胞と比べて増殖優位性を獲得させる。したがって、抗血管新生療法は、いくつかの種類の腫瘍のための重要な治療選択肢となっている。これらの治療法は、ＶＥＧＦ経路の遮断に焦点を合わせてきた（Ｆｅｒｒａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．２００４  Ｍａｙ；３（５）：３９１−４００。
【０００８】
血管新生および異なるプロセスにおけるＶＥＧＦおよびその役割の解明により、治療的介入の可能性のある新しい標的が提供されている。ＶＥＧＦの機能は、ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼの活性化を遮断または防止し、その結果、ＶＥＧＦ受容体シグナル伝達経路に干渉する小分子によって阻害されている（Ｓｃｈｌａｅｐｐｉ  ａｎｄ  Ｗｏｏｄ，１９９９，Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  Ｒｅｖ．，１８：４７３−４８１）。細菌または植物毒素を含有する細胞傷害性コンジュゲートは、ＶＥＧＦが腫瘍血管新生に及ぼす刺激作用を阻害することができる。ＶＥＧＦ−ＤＴ３８５毒素コンジュゲート（ＶＥＧＦ１６５に融合されたかまたは化学的にコンジュゲートされたジフテリア毒素ドメイン）は、例えば、腫瘍増殖をｉｎ  ｖｉｖｏで効率的に阻害する。腫瘍増殖の阻害は、Ｆｌｋ−１変異体または可溶性ＶＥＧＦ受容体をレトロウイルスによって送達することによっても達成することができる。
【０００９】
Ａ４．６．１およびＭＶ８３３等のＶＥＧＦ中和抗体が、ＶＥＧＦがその受容体と結合するのを遮断するために開発され、前臨床的な抗腫瘍活性を示している（Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  １９９３，３６２：８４１−８４４；Ｆｏｌｋｍａｎ  Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１９９５，１：２７−３１；Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９７，５７：４５９３−４５９９；Ｋａｎａｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  １９９８，７７：９３３−９３６；Ｆｅｒｒａｒａ  ａｎｄ  Ａｌｉｔａｌｏ  Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１９９９，５：１３５９−１３６４；３２０，３４０。治療的抗ＶＥＧＦ手法による臨床試験についての考察は、Ｃａｍｐｏｃｈｉａｒｏ  ａｎｄ  Ｈａｃｋｅｔｔ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２００３，２２：６５３７−６５４８を参照のこと）。
【００１０】
ほとんどの臨床経験は、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）とも称されるＡ４．６．１で得られている。
【００１１】
マウスにおける最近の研究により、Ｔｉｅ２受容体のリガンドであるアンジオポエチン２（Ａｎｇ２）が、ＶＥＧＦ等の他の血管新生因子の機能を有効にさせることにより血管リモデリングを制御することが示されている。Ａｎｇ２は、主として内皮細胞によって発現され、低酸素症および他の血管新生因子によって強力に誘発され、腫瘍血管の柔軟性を調節して血管をＶＥＧＦおよびＦＧＦ２に応答させることが実証されている（Ａｕｇｕｓｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．２００９  Ｍａｒ；１０（３）：１６５−７７）。この役割と一致して、Ａｎｇ２の欠損または阻害は、血管新生の低下を引き起こす（Ｆａｌｃｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ．２００９  Ｎｏｖ；１７５（５）：２１５９−７０．）。Ａｎｇ２の血清濃度の上昇が、結腸直腸癌、ＮＳＣＬＣ、およびメラノーマに罹患する患者について報告されている（Ｇｏｅｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．２０１０  Ｏｃｔ  ２６；１０３（９）：１４０７−１４；Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｓｔ．２００７  Ｊｕｌ；１３２（１）：２００−６；Ｈｅｌｆｒｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００９  Ｆｅｂ  １５；１５（４）：１３８４−９２）。ＣＲＣ癌において、Ａｎｇ２血清レベルが、抗ＶＥＧＦ治療に対する治療応答と相関している。
【００１２】
Ａｎｇ−Ｔｉｅ系は、２つの受容体（Ｔｉｅ１およびＴｉｅ２）、ならびに３つのリガンド（Ａｎｇ１、Ａｎｇ２、およびＡｎｇ４）からなる（Ａｕｇｕｓｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．２００９  Ｍａｒ；１０（３）：１６５−７７．）。Ｔｉｅ２、Ａｎｇ１、およびＡｎｇ２は、このファミリーの最もよく研究されたメンバーであり、Ｔｉｅ１は、オーファン受容体であり、Ａｎｇ４の血管リモデリングのための役割は、依然として定義される必要がある。Ａｎｇ２およびＡｎｇ１は、Ｔｉｅ２が結合および活性化すると、反対の機能を媒介する。Ａｎｇ２によって媒介されるＴｉｅ２の活性化は、内皮細胞の活性化、周皮細胞の解離、血管の漏出、および血管の発芽の誘導をもたらす。Ａｎｇ２とは対照的に、Ａｎｇ１のシグナル伝達は、周皮細胞を動員することによって血管の完全性を維持し、それによって内皮細胞の静止状態を維持する。
Ａｎｇ２は、Ｔｉｅ２受容体チロシンキナーゼの分泌された６６ｋＤａのリガンドである（Ａｕｇｕｓｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．２００９  Ｍａｒ；１０（３）：１６５−７７）。Ａｎｇ２は、Ｎ末端のコイル状のコイルドメインと、Ｃ末端のフィブリノゲン様ドメインとからなり、後者は、Ｔｉｅ２の相互作用に必要である。Ａｎｇ２は、主として内皮細胞によって発現され、低酸素症およびＶＥＧＦを含む他の血管新生因子によって強力に誘発される。Ｔｉｅ２は、内皮細胞、造血性幹細胞、および腫瘍細胞上に見出される。Ａｎｇ２−Ｔｉｅ２は、腫瘍血管の柔軟性を調節して血管をＶＥＧＦおよびＦＧＦ２に応答させることが実証されている。
【００１３】
Ｉｎ  ｖｉｔｒｏでは、Ａｎｇ２は、穏やかなマイトジェン、化学誘引物質、およびヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の管形成誘導因子として作用することが示されている。Ａｎｇ２は、線維芽細胞で異所的に発現されるＴｉｅ２のチロシンリン酸化を誘導し、例えば、ＨＵＶＥＣ中のＥＲＫ−ＭＡＰＫ、ＡＫＴ、およびＦＡＫのリン酸化等の下流シグナリング事象を促進する。Ａｎｇ１によって誘導される内皮細胞応答におけるＡｎｇ２の拮抗的な役割が記載されている。
Ａｎｇ２の欠乏は、マウスにおいて深刻なリンパのパターン形成障害をもたらすことが示されている。Ａｎｇ２の損失は、胚血管発生にとって重要ではないが、Ａｎｇ２欠乏マウスは、網膜および腎臓における持続性の血管障害を有する。血管新生の部位（例えば、卵巣）におけるＡｎｇ２発現の動的パターンとともに、これらの知見は、Ａｎｇ２が、ＶＥＧＦ等の他の血管新生因子の機能を発揮させることによって血管リモデリングを制御することを示唆している。
Ａｎｇ２−Ｔｉｅ２系は、血管新生スイッチ、および腫瘍の血管新生の後期段階の間に非常に重要な役割を果たす。Ａｎｇ２の発現は、腫瘍関連内皮において強力に上方制御される。腫瘍増殖の減少は、Ａｎｇ２欠損マウスに移植されたとき、特に腫瘍増殖の初期段階で観察されている。Ａｎｇ２  ｍＡｂによるＡｎｇ２の治療的遮断は、多様な腫瘍異種移植モデルにおいて広範囲の有効性を示している。
【００１４】
Ｎｏｔｃｈシグナル伝達経路は、細胞間の情報伝達に重要であり、胚発生の間および成体における複数の細胞分化プロセスを制御する遺伝子調節機構に関与する。Ｎｏｔｃｈシグナル伝達は、多くの癌、例えば、Ｔ細胞性急性リンパ性白血病および固形腫瘍において調節不全である（Ｓｈａｒｍａ  ｅｔ  ａｌ．２００７，Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ  ６  （８）：９２７−３０；Ｓｈｉｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００７  Ｍａｒ  １；６７（５）：１８７９−８２）。
【００１５】
Ｄｌｌ４（またはデルタ様４またはデルタ様リガンド４）は、Ｎｏｔｃｈリガンドのデルタファミリーのメンバーである。Ｄｌｌ４の細胞外ドメインは、Ｎ末端ドメイン、デルタ／セレート／Ｌａｇ−２（ＤＳＬ）ドメイン、および直列する８つの上皮増殖因子（ＥＧＦ）様リピートからなる。一般的に、ＥＧＦドメインは、アミノ酸残基２１８〜２５１（ＥＧＦ−１；ドメイン１）、２５２〜２８２（ＥＧＦ−２；ドメイン２）、２８４〜３２２（ＥＧＦ−３；ドメイン３）、３２４〜３６０（ＥＧＦ−４；ドメイン４）、および３６２〜４００（ＥＧＦ−５；ドメイン５）を、ｈＤｌｌ４のアミノ酸残基約１７３〜２１７のＤＳＬドメインおよびアミノ酸残基約２７〜１７２のＮ末端ドメインとともに含むと認識されている（国際公開第ＷＯ２００８／０７６３７９号）。
【００１６】
Ｄｌｌ４は、血管内皮、とりわけ動脈内皮で高度に選択的な発現を示すことが報告されている（Ｓｈｕｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖｅｌｏｐ．１４：１３１３−１３１８）。マウスにおける最近の研究により、Ｄｌｌ４が、ＶＥＧＦによって誘導され、血管の発芽および分岐を制限する負のフィードバック調節因子であることが示されている。この役割と一致して、Ｄｌｌ４の欠損または阻害は、過剰な血管新生をもたらす（Ｓｃｅｈｎｅｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．２００７  Ｊｕｎ  １；１０９（１１）：４７５３−６０）。この無制限な血管新生は、非生産的な脈管構造の形成に起因して、抗ＶＥＧＦ治療に耐性を示す腫瘍においてさえも、逆説的に腫瘍増殖を減少させる（Ｔｈｕｒｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ．２００７  Ｍａｙ；７（５）：３２７−３１；国際公開第ＷＯ２００７／０７０６７１号；Ｎｏｇｕｅｒａ−Ｔｒｏｉｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．２００６  Ｄｅｃ  ２１；４４４（７１２２））。さらに、ＶＥＧＦおよびＤｌｌ４を組み合わせた阻害は、複数の腫瘍型の異種移植モデルにおいて、抗ＶＥＧＦ単独と比較して優れた抗腫瘍活性を提供することが示されている（Ｎｏｇｕｅｒａ−Ｔｒｏｉｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．２００６  Ｄｅｃ  ２１；４４４（７１２２）：１０３２−７；Ｒｉｄｇｗａｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．  ２００６  Ｄｅｃ  ２１；４４４（７１２２）：１０８３−７）。
【００１７】
これらの結果から、Ｄｌｌ４は、癌治療のための有望な標的であるとされ、（前）臨床開発中のＤｌｌ４を標的とするいくつかの生物学的化合物が記載されている：ＲＥＧＮ−４２１（＝ＳＡＲ１５３１９２；Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ，Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ；国際公開第ＷＯ２００８０７６３７９号）、ＯＰＭ−２１Ｍ１８（ＯｎｃｏＭｅｄ；Ｈｏｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ．２００９  Ａｕｇ  ７；５（２）：１６８−７７）、およびＭＥＤＩ０６３９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ  ＬＬＣ，ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ；Ｊｅｎｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．２０１２  Ａｕｇ；１１（８）：１６５０−６０）完全ヒトＤｌｌ４抗体；ＹＷ１５２Ｆ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ヒト化Ｄｌｌ４抗体（Ｒｉｄｇｗａｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．２００６  Ｄｅｃ  ２１；４４４（７１２２）：１０８３−７）；Ｄｌｌ４−Ｆｃ（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ，Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）、Ｄｌｌ４の細胞外領域およびヒトＩｇＧ１のＦｃ領域からなる組換え融合タンパク質（Ｎｏｇｕｅｒａ−Ｔｒｏｉｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ．２００６  Ｄｅｃ  ２１；４４４（７１２２））。
しかしながら、最新技術のモノクローナル抗体（ＭＡｂ）および融合タンパク質は、それらの治療用途の点でいくつかの欠点を有する。分解を防止するためには、それらを凍結温度付近で保存しなければならない。また、それらは腸管で急速に消化されるため、経口投与に適していない。癌治療のためのＭＡｂの別の主要な制限は、腫瘍組織への浸透不良であり、その結果、低濃度となり、腫瘍内の全細胞を標的とすることができない。この分野における従来技術の最も深刻な欠点は、それらの臨床効果が限られていることである。
【発明の概要】
【００１８】
現在利用可能な抗血管新生療法の欠点によって、有効性が限定されてきた。そのため、抗血管新生療法を改善することが、本発明の目的である。
本発明の別の目的は、治療に対する内因性および獲得性の耐性に関連して抗血管新生療法を改善することである。
患者の忍容性が良好なそのような治療薬を提供することが、本発明のさらなる目的である。
本発明者は、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を含む薬学的組み合わせが、ヒトの治療に使用することができる、個々の薬剤単独よりも高い抗腫瘍効果を有することを発見した。
この知見に基づいて、本発明は、特に癌および眼疾患の治療に好適な、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を含む新規薬学的組み合わせを提供する。
本発明による組み合わせのさらなる長所は、いくつかの重複する血管新生シグナル伝達経路を通して治療に対する耐性を媒介できることである。
別の態様において、本発明はまた、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤と併用して癌の治療に使用するための二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤にも関する。
別の態様において、本発明は、治療有効量の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤をそれを必要とする患者に投与することを含み、さらに、当該二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後７２時間以内に、治療有効量の抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を同じ患者に投与することとを含む、癌の治療方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】ＮＣＩ−Ｈ１９７５腫瘍の増殖動態を示す。ＮＣＩ−Ｈ１９７５腫瘍担持マウスを、ベバシズマブ、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１、ベバシズマブおよびＢＩ−１の組み合わせ、ＢＩＢＦ  １１２０およびＢＩ−１の組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。１日目は実験の初日であり、１４日目は最終日であった。
【図２】１９日目の絶対腫瘍体積を示す。ＮＣＩ−Ｈ１９７５腫瘍担持マウスを、ベバシズマブ、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１、ベバシズマブおよびＢＩ−１の組み合わせ、ＢＩＢＦ  １１２０およびＢＩ−１の組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。１４日目の個々の絶対腫瘍体積がプロットされている。各記号は、個々の腫瘍を表す。水平線は、腫瘍体積中央値を表す。
【図３】経時的な体重の変化を示す。ＮＣＩ−Ｈ１９７５腫瘍担持マウスを、ベバシズマブ、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１、ベバシズマブおよびＢＩ−１の組み合わせ、ＢＩＢＦ  １１２０およびＢＩ−１の組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。体重変化の中央値を経時的にプロットする。１日目は実験の初日であり、１４日目は最終日であった。
【図４】ＣＸＦ  ２４３腫瘍の増殖動態を示す。ＣＸＦ  ２４３腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１およびＢＩＢＦ  １１２０の組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図５】ＬＸＦＥ  ２１１腫瘍の増殖動態を示す。ＬＸＦＥ  ２１１腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ベバシズマブ、ＢＩ−１およびベバシズマブの組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図６】ＬＸＦＥ  ２１１腫瘍の増殖動態を示す。ＬＸＦＥ  ２１１腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１およびＢＩＢＦ  １１２０の組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図７】ＬＸＦＥ  １４２２腫瘍の増殖動態を示す。ＬＸＦＥ  １４２２腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ベバシズマブ、ＢＩ−１およびベバシズマブの組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図８】ＬＸＦＥ  １４２２腫瘍の増殖動態を示す。ＬＸＦＥ  １４２２腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１およびＢＩＢＦ  １１２０の組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図９】ＭＡＸＦ  ４０１腫瘍の増殖動態を示す。ＭＡＸＦ  ４０１腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ベバシズマブ、ＢＩ−１およびベバシズマブの組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図１０】ＭＡＸＦ  ４０１腫瘍の増殖動態を示す。ＭＡＸＦ  ４０１腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１およびＢＩＢＦ  １１２０の組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図１１】ＯＶＸＦ  １３５３腫瘍の増殖動態を示す。ＯＶＸＦ  １３５３腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１およびＢＩＢＦ  １１２０の組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図１２】ＰＡＸＦ  ５４６腫瘍の増殖動態を示す。ＰＡＸＦ  ５４６腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ベバシズマブ、ＢＩ−１およびベバシズマブの組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図１３】ＰＡＸＦ  ５４６腫瘍の増殖動態を示す。ＰＡＸＦ  ５４６腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１およびＢＩＢＦ  １１２０の組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【図１４】ＲＸＦ  １２２０腫瘍の増殖動態を示す。ＲＸＦ  １２２０腫瘍担持マウスを、ＢＩ−１、スニチニブ、ＢＩ−１およびスニチニブの組み合わせ、またはビヒクルのみで処置した。腫瘍体積中央値を経時的にプロットする。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本明細書で使用される「薬学的組み合わせ」は、患者に一緒に適用されると、当該患者に特定の治療効果をもたらすことが意図される２つ以上の異なる薬学的に活性な物質を指し、すなわち、本発明の文脈においては、１つ以上の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および１つ以上の抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤である。「一緒に適用される」とは、連続適用または同時適用のいずれかを意味する。
一実施形態において、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与の６ヶ月〜１週間前の任意の時点で投与される。好ましい実施形態において、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与の３ヶ月〜１週間、６週間〜１週間、１ヶ月〜１週間、３週間〜１週間、および２週間〜１週間前の任意の時点で投与される。一実施形態において、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与の１週間〜０日前の任意の時点で投与される。
当然のことながら、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤が二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の前に投与されることも、本発明の範囲内である。よって、上述の実施形態は、この代替の実施形態に準用される。
【００２１】
二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤を抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤と同時に投与するとは、両方の薬物が同じ時間に投与されることを意味する。これは、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の両方を、１つの用量、バイアル、袋、容器、注射器等に存在させることによって達成することができる。
二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の後続投与とは、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤が二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の直ぐ後に投与されること、またはその逆を意味する。直ぐとは、１、２、３、４、５、１０、２０、３０、４５、６０分、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、または２４時間を含む。
本明細書における「患者」は、哺乳動物、特にヒトを指す。
【００２２】
本明細書で使用される「二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤」は、Ａｎｇ２およびＤｌｌ４の両方の血管新生促進活性を少なくとも８０％阻害することができる任意のペプチドに基づく分子を指す。好適な二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、好ましくは、各Ａｎｇ２およびＤｌｌ４のための別個の結合領域を含む。好適な二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、当該技術分野で既知の任意の二重特異性結合分子、例えば、架橋Ｆａｂ、架橋ｓｃＦｖｓ、二重特異性ＩｇＧ、ＣｒｏｓｓＭａｂ、Ｆｃａｂ、Ｚｙｂｏｄｙ、Ｓｕｒｒｏｂｏｄｙ、単一軽鎖（ｓＬＣ）抗体、ＤＡＲＴ、Ｎａｎｏｂｏｄｉｅｓ（登録商標）、ドメイン抗体（ｄＡｂｓ）、ＤＡＲＰｉｎｓによって形成することができる。特定の実施形態において、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、Ｎａｎｏｂｏｄｉｅｓ（登録商標）である。好ましい実施形態において、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、体内におけるそれらの半減期を延長するための手段とともに提供される。この目的に好適な手段は、例えば、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤に融合されたヒトＦｃ領域または血清アルブミン分子である。本明細書において好ましい他の好適な手段は、血清アルブミンに結合する、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤によって含まれるさらなる結合領域である。特に好ましいのは、ヒトアルブミン−１１（Ａｌｂ１１）に結合するそのようなさらなる結合領域である。好適な二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、同時係属ＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０５５８９７に見出だすことができる。本発明の好ましい実施形態において、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、配列番号１〜２０のいずれかによる結合分子から選択される。
「ＢＩ−１」は、配列番号１４による二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４  Ｎａｎｏｂｏｄｙ（登録商標）結合剤である。
本明細書で使用される「抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤」は、少なくともＶＥＧＦ−Ｒ２の、好ましくはＶＥＧＦ−Ｒ１および／またはＶＥＧＦ−Ｒ３の血管新生促進活性も阻害する全ての薬学的に許容される分子を含む。特に好ましい抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤は、ＢＩＢＦ１１２０、スニチニブ、ソラフェニブ、アキシチニブ、ＰＴＫ７８７、チボザニブ、パゾパニブ、ペグジネタニブ、およびラムシルマブである。
本明細書で使用される「ＢＩＢＦ１１２０」は、３−Ｚ−［１−（４−（Ｎ−（（４−メチル−ピぺラジン−１−イル）−メチルカルボニル）−Ｎ−メチル−アミノ）−アニリノ）−１−フェニル−メチレン］−６−メトキシカルボニル−２−インドリノン−モノエタンスルホネートである。ＢＩＢＦ１１２０は、ＶＥＧＦ−Ｒ１、ＶＥＧＦ−Ｒ２、およびＶＥＧＦ−Ｒ３の活性を阻害する。
【００２３】
本明細書で使用される「癌」は、一般的に、全ての悪性新生物疾患を指す。例えば、限定されないが、以下の癌は、本発明による組み合わせを用いて治療することができる：
脳腫瘍、例えば、聴神経鞘腫、星状細胞腫、例えば、毛様細胞性星状細胞腫、線維性星細胞腫、原形質星状細胞腫、肥胖性星細胞腫、未分化星状細胞腫および神経膠芽腫、脳リンパ腫、脳転移、下垂体性腫瘍、例えばプロラクチノーマ、ＨＧＨ（ヒト成長ホルモン）産生性腫瘍およびＡＣＴＨ産生性腫瘍（副腎皮質刺激ホルモン）、頭蓋咽頭腫、髄芽腫、髄膜腫および乏突起神経膠腫；神経腫瘍（新生物）、例えば、植物性神経系の腫瘍、例えば、交感神経芽細胞腫、神経節腫、傍神経節腫（褐色細胞腫、クロム親和性細胞腫）および頚動脈小体腫瘍、末梢神経系の腫瘍、例えば、断端神経腫、神経線維腫、神経線維腫症（神経鞘腫、シュワン腫）および悪性シュワン腫。骨髄腫瘍；腸癌、例えば、直腸癌および結腸癌、小腸及び十二指腸の腫瘍；食道癌、または扁平上皮癌、バレット食道における腺癌、腺様嚢胞癌、小細胞癌およびリンパ腫等の食道の癌；眼瞼腫瘍、例えば、基底細胞腫または基底細胞癌；膵癌、または導管細胞腺癌、腺房細胞癌、膵島細胞癌、リンパ腫および膵臓の肉腫等の膵臓の癌；膀胱癌、または表在性および浸潤性の移行上皮癌、扁平上皮癌および腺癌等の膀胱の癌；肺癌（気管支癌）、例えば、小細胞気管支癌（燕麦細胞癌）および非小細胞気管支癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、扁平上皮癌、腺癌および大細胞気管支癌；乳癌、例えば、上皮内および浸潤性の乳管癌、膠様癌、浸潤性小葉癌、管状癌、腺嚢癌腫および乳頭癌等の乳癌；非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、バーキットリンパ腫、低悪性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）および菌状息肉腫；子宮癌または宮内膜癌または子宮体癌；ＣＵＰ症候群（原発不明癌）；卵巣癌、または粘液性、子宮内膜、もしくは漿液性癌等の卵巣癌；胆嚢癌；胆管癌、例えば、クラッツキン腫瘍；精巣癌、例えば、セミノーマおよび非セミノーマ；リンパ腫（リンパ肉腫）、例えば、悪性リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば慢性リンパ性白血病、白血病性細網内皮症、免疫細胞腫、形質細胞腫（多発性骨髄腫）、免疫芽細胞腫、バーキットリンパ腫、Ｔゾーン菌状息肉腫、大細胞未分化リンパ芽球腫およびリンパ芽球腫；喉頭癌、例えば、声帯の腫瘍、声門上部、声門、および声門下の喉頭腫瘍；骨癌、例えば骨軟骨腫、軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、骨腫、類骨腫、骨芽細胞腫、好酸球性肉芽腫、巨細胞腫、軟骨肉腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、細網肉腫、形質細胞腫、線維性骨異形成症、若年性骨嚢腫および動脈瘤性骨嚢腫；頭頚部腫瘍、例えば、唇、舌、口底、口腔、歯肉、口蓋、唾液腺、咽喉、鼻腔、副鼻腔、喉頭、および中耳の腫瘍；  肝臓癌、例えば、肝臓細胞癌または肝細胞癌（ＨＣＣ）；白血病、例えば、急性白血病、例えば、急性リンパ性／リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）；慢性白血病、例えば、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）；胃癌、例えば、乳頭状、管状、および粘液性腺癌、印環細胞癌、腺扁平上皮癌、小細胞癌、および未分化癌等の胃癌、；メラノーマ、例えば、表在拡大型、結節性、悪性黒子、および末端黒子型メラノーマ；腎癌、例えば、腎臓細胞癌、例えば、腎明細胞癌または副腎腫またはグラヴィッツ腫瘍、乳頭癌、およ���オンコサイトーマ；食道癌または食道の癌；陰茎癌；前立腺癌；咽喉癌、または例えば、上咽頭の扁平上皮癌（上咽頭癌）、中咽頭（中咽頭癌）、および下咽頭癌等の咽頭の癌；網膜芽細胞腫、腟癌、または扁平上皮癌、腺癌、および上皮内癌を含む膣癌および外陰部；悪性メラノーマおよび肉腫；甲状腺癌、例えば、乳頭状、濾胞性、および髄様甲状腺癌、ならびに未分化癌；皮膚の棘細胞腫、類表皮癌、および基底細胞癌；胸腺腫、上皮内および浸潤性の移行上皮癌を含む尿道の癌。
【００２４】
抗悪性腫瘍剤との組み合わせ
本発明の好ましい実施形態において、本明細書に記載の薬学的組み合わせは、１つ以上の「抗悪性腫瘍剤」をさらに含む：この用語は、組織、系、動物、哺乳類、ヒト、または他の対象において抗悪性腫瘍効果をもたらす物質を指して本明細書で使用される。特に、抗悪性腫瘍治療において、他の化学療法剤、ホルモン剤、抗体剤、ならびに上記以外の外科および／または放射線治療との併用療法が想定される。したがって、本発明による併用療法は、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与、ならびに他の抗悪性腫瘍剤を含む他の治療剤の任意選択的な使用を含む。そのような薬剤の組合せは、一緒にまたは別々に投与されてもよく、別々に投与される場合、それは、短い間隔および長い間隔の両方で、任意の順序で、同時にまたは順次に行われてもよい。
治療される疾患に応じて、本明細書に記載の本発明の薬学的組み合わせは、単独で使用されてもよいか、あるいは、具体的には、ＤＮＡ傷害剤、ＤＮＡ脱メチル化剤、もしくはチューブリン結合剤、または癌細胞において血管新生、シグナル伝達経路、もしくは有糸分裂チェックポイントを阻害するかまたは免疫調節機能（ＩＭＩＤ）を有する治療的に活性な化合物から選択される、１つ以上の抗悪性腫瘍剤と併用されてもよい。
【００２５】
抗悪性腫瘍剤は、任意選択的に同じ薬学的組成物の成分として、本明細書に記載の薬学的組み合わせと同時に、またはその投与の前もしくは後に投与されてもよい。
特定の実施形態において、抗悪性腫瘍剤は、ＥＧＦＲファミリー、ＶＥＧＦ−Ｒファミリー、ＩＧＦ−１Ｒ、インスリン受容体、オーロラＡ、オーロラＢ、ＰＬＫおよびＰＩ３キナーゼ、ＦＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、Ｒａｆ、ＫＳＰ、またはＰＤＫ１の阻害剤の群から選択される１つ以上の阻害剤であってもよい。
抗悪性腫瘍剤のさらなる例は、ＣＤＫ、Ａｋｔ、Ｓｒｃ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ｃＫｉｔ、ｃＭｅｔ／ＨＧＦ、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ｃ−Ｍｙｃ、Ｆｌｔ３、ＨＳＰ９０、ヘッジホッグアンタゴニストの阻害剤、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ、Ｍｅｋ、ｍＴｏｒ、ＮＦｋａｐｐａＢ、プロテアソーム、Ｒｈｏの阻害剤、Ｗｎｔシグナル伝達もしくはＮｏｔｃｈシグナル伝達の阻害、またはユビキチン化経路阻害剤である。
【００２６】
抗悪性腫瘍剤のさらなる例は、ＤＮＡポリメラーゼ、トポイソメラーゼＩＩの阻害剤、マルチチロシンキナーゼ阻害剤、ＣＸＣＲ４アンタゴニスト、ＩＬ３ＲＡ阻害剤、ＲＡＲアンタゴニスト、ＫＩＲ阻害剤、免疫治療ワクチン、ＴＵＢ阻害剤、Ｈｓｐ７０誘導剤、ＩＡＰファミリー阻害剤、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、ＴＮＦ阻害剤、ＥｒｂＢ１受容体チロシンキナーゼ阻害剤、マルチキナーゼ阻害剤、ＪＡＫ２阻害剤、ＲＲ阻害剤、アポトーシス誘導剤、ＨＧＰＲＴａｓｅ阻害剤、ヒスタミンＨ２受容体アンタゴニスト、およびＣＤ２５受容体アゴニストである。
オーロラ阻害剤の例は、限定されないが、ＰＨＡ−７３９３５８、ＡＺＤ−１１５２、ＡＴ−９２８３、ＣＹＣ−１１６、Ｒ−７６３、ＶＸ−６６７、ＭＬＮ−８０４５、ＰＦ−３８１４７３５、ＳＮＳ−３１４、ＶＸ−６８９、ＧＳＫ−１０７０９１６、ＴＴＰ−６０７、ＰＨＡ−６８０６２６、ＭＬＮ−８２３７、ＢＩ８４７３２５、およびＥＮＭＤ−２０７６である。
ＰＬＫ阻害剤の例は、ＧＳＫ−４６１３６４、ＢＩ２５３６、およびＢＩ６７２７である。
ｒａｆ阻害剤の例は、ＢＡＹ−７３−４５０６（ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤でもある）、ＰＬＸ−４０３２、ＲＡＦ−２６５（ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤でもある）、ソラフェニブ（ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤でもある）、ＸＬ−２８１、Ｎｅｖａｖａｒ（ＶＥＧＦ−Ｒの阻害剤でもある）、およびＰＬＸ４０３２である。
ＫＳＰ阻害剤の例は、イスピネシブ、ＡＲＲＹ−５２０、ＡＺＤ−４８７７、ＣＫ−１１２２６９７、ＧＳＫ−２４６０５３Ａ、ＧＳＫ−９２３２９５、ＭＫ−０７３１、ＳＢ−７４３９２１、ＬＹ−２５２３３５５、およびＥＭＤ−５３４０８５である。
【００２７】
ｓｒｃおよび／またはｂｃｒ−ａｂｌ阻害剤の例は、ダサチニブ、ＡＺＤ−０５３０、ボスチニブ、ＸＬ−２２８（ＩＧＦ−１Ｒ阻害剤でもある）、ニロチニブ（ＰＤＧＦＲおよびｃＫｉｔ阻害剤でもある）、イマチニブ（ｃＫｉｔ阻害剤でもある）、ＮＳ−１８７、ＫＸ２−３９１、ＡＰ−２４５３４（ＥＧＦＲ、ＦＧＦＲ、Ｔｉｅ２、Ｆｌｔ３の阻害剤でもある）、ＫＭ−８０、およびＬＳ−１０４（Ｆｌｔ３、Ｊａｋ２の阻害剤でもある）である。
ＰＤＫ１阻害剤の例は、ＡＲ−１２である。
Ｒｈｏ阻害剤の例は、ＢＡ−２１０である。
ＰＩ３キナーゼ阻害剤の例は、ＰＸ−８６６、ＰＸ−８６７、ＢＥＺ−２３５（ｍＴｏｒ阻害剤でもある）、ＸＬ−１４７、およびＸＬ−７６５（ｍＴｏｒ阻害剤でもある）、ＢＧＴ−２２６、ＣＤＣ−０９４１である。
ｃＭｅｔまたはＨＧＦ阻害剤の例は、ＸＬ−１８４（ＶＥＧＦ−Ｒ、ｃＫｉｔ、Ｆｌｔ３の阻害剤でもある）、ＰＦ−２３４１０６６、ＭＫ−２４６１、ＸＬ−８８０（ＶＥＧＦ−Ｒの阻害剤でもある）、ＭＧＣＤ−２６５（ＶＥＧＦ−Ｒ、Ｒｏｎ、Ｔｉｅ２の阻害剤でもある）、ＳＵ−１１２７４、ＰＨＡ−６６５７５２、ＡＭＧ−１０２、ＡＶ−２９９、ＡＲＱ−１９７、ＭｅｔＭＡｂ、ＣＧＥＮ−２４１、ＢＭＳ−７７７６０７、ＪＮＪ−３８８７７６０５、ＰＦ−４２１７９０３、ＳＧＸ−１２６、ＣＥＰ−１７９４０、ＡＭＧ−４５８、ＩＮＣＢ−０２８０６０、およびＥ−７０５０である。
【００２８】
Ｎｏｔｃｈ経路阻害剤の例は、ＭＥＧＦ０４４４Ａである。
ｃ−Ｍｙｃ阻害剤の例は、ＣＸ−３５４３である。
Ｆｌｔ３阻害剤の例は、ＡＣ−２２０（ｃＫｉｔおよびＰＤＧＦＲの阻害剤でもある）、ＫＷ−２４４９、ＬＳ−１０４（ｂｃｒ−ａｂｌおよびＪａｋ２の阻害剤でもある）、ＭＣ−２００２、ＳＢ−１３１７、レスタウルチニブ（ＶＥＧＦ−Ｒ、ＰＤＧＦＲ、ＰＫＣの阻害剤でもある）、ＴＧ−１０１３４８（ＪＡＫ２の阻害剤でもある）、ＸＬ−９９９（ｃＫｉｔ、ＦＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、およびＶＥＧＦ−Ｒの阻害剤でもある）、スニチニブ（ＰＤＧＦＲ、ＶＥＧＦ−Ｒ、およびｃＫｉｔの阻害剤でもある）、およびタンヅチニブ（ＰＤＧＦＲおよびｃＫｉｔの阻害剤でもある）である。
【００２９】
ＨＳＰ９０阻害剤の例は、タネスピマイシン、アルベスピマイシン、ＩＰＩ−５０４、ＳＴＡ−９０９０、ＭＥＤＩ−５６１、ＡＵＹ−９２２、ＣＮＦ−２０２４、およびＳＮＸ−５４２２である。
ＪＡＫ／ＳＴＡＴ阻害剤の例は、ＣＹＴ−９９７（チューブリンとも相互作用する）、ＴＧ−１０１３４８（Ｆｌｔ３の阻害剤でもある）、およびＸＬ−０１９である。
Ｍｅｋ阻害剤の例は、ＡＲＲＹ−１４２８８６、ＡＳ−７０３０２６、ＰＤ−３２５９０１、ＡＺＤ−８３３０、ＡＲＲＹ−７０４、ＲＤＥＡ−１１９、およびＸＬ−５１８である。
ｍＴｏｒ阻害剤の例は、テムシロリムス、デフォロリムス（ＶＥＧＦ阻害剤としても作用する）、エベロリムス（加えてＶＥＧＦ阻害剤である）、ＸＬ−７６５（ＰＩ３キナーゼ阻害剤でもある）、およびＢＥＺ−２３５（ＰＩ３キナーゼ阻害剤）である。
Ａｋｔ阻害剤の例は、ペリフォシン、ＧＳＫ−６９０６９３、ＲＸ−０２０１、およびトリシリビンである。
【００３０】
ｃＫｉｔ阻害剤の例は、マスチニブ、ＯＳＩ−９３０（ＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤としても作用する）、ＡＣ−２２０（Ｆｌｔ３およびＰＤＧＦＲの阻害剤でもある）、タンヅチニブ（Ｆｌｔ３およびＰＤＧＦＲの阻害剤でもある）、アキシチニブ（ＶＥＧＦ−ＲおよびＰＤＧＦＲの阻害剤でもある）、スニチニブ（Ｆｌｔ３、ＰＤＧＦＲ、ＶＥＧＦ−Ｒの阻害剤でもある）、およびＸＬ−８２０（ＶＥＧＦ−Ｒ−およびＰＤＧＦＲ阻害剤としても作用する）、イマチニブ（ｂｃｒ−ａｂｌ阻害剤でもある）、ニロチニブ（ｂｃｒ−ａｂｌおよびＰＤＧＦＲの阻害剤でもある）である。
ヘッジホッグアンタゴニストの例は、ＩＰＩ−６０９、ＣＵＲ−６１４１４、ＧＤＣ−０４４９、ＩＰＩ−９２６、およびＸＬ−１３９である。
ＣＤＫ阻害剤の例は、セリシクリブ、ＡＴ−７５１９、Ｐ−２７６、ＺＫ−ＣＤＫ（ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＰＤＧＦＲも阻害する）、ＰＤ−３３２９９１、Ｒ−５４７、ＳＮＳ−０３２、ＰＨＡ−６９０５０９、ＰＨＡ−８４８１２５、およびＳＣＨ−７２７９６５である。
プロテアソーム阻害剤の例は、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、およびＮＰＩ−００５２（ＮＦｋａｐｐａＢの阻害剤でもある）。
プロテアソーム阻害剤／ＮＦｋａｐｐａＢ経路阻害剤のレは、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、ＮＰＩ−００５２、ＣＥＰ−１８７７０、ＭＬＮ−２２３８、ＰＲ−０４７、ＰＲ−９５７、ＡＶＥ−８６８０、およびＳＰＣ−８３９である。
ユビキチン化経路の阻害剤の一例は、ＨＢＸ−４１１０８である。
脱メチル化剤の例は、５−アザシチジンおよびデシタビンである。
抗血管新生剤の例は、ＦＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、およびＶＥＧＦの阻害剤、ならびにサリドマイドであり、そのような薬剤は、限定されないが、以下から選択される：オララツマブ、ペグジネタニブ、モテサニブ、ＣＤＰ−７９１、ＳＵ−１４８１３、テラチニブ、ＫＲＮ−９５１、ＺＫ−ＣＤＫ（ＣＤＫの阻害剤でもある）、ＡＢＴ−８６９、ＢＭＳ−６９０５１４、ＲＡＦ−２６５、ＩＭＣ−ＫＤＲ、ＩＭＣ−１８Ｆ１、ＩＭｉＤ、サリドマイド、ＣＣ−４０４７、レナリドミド、ＥＮＭＤ−０９９５、ＩＭＣ−Ｄ１１、Ｋｉ−２３０５７、ブリバニブ、セジラニブ、１Ｂ３、ＣＰ−８６８５９６、ＩＭＣ−３Ｇ３、Ｒ−１５３０（Ｆｌｔ３の阻害剤でもある）、スニチニブ（ｃＫｉｔおよびＦｌｔ３の阻害剤でもある）、アキシチニブ（ｃＫｉｔの阻害剤でもある）、レスタウルチニブ（Ｆｌｔ３およびＰＫＣの阻害剤でもある）、バタラニブ、タンヅチニブ（Ｆｌｔ３およびｃＫｉｔの阻害剤でもある）、パゾパニブ、ＰＦ−３３７２１０、Ｅ−７０８０、ＣＨＩＲ−２５８、ソラフェニブトシル酸塩（Ｒａｆの阻害剤でもある）、バンデタニブ、ＣＰ−５４７６３２、ＯＳＩ−９３０、ＡＥＥ−７８８（ＥＧＦＲおよびＨｅｒ２の阻害剤でもある）、ＢＡＹ−５７−９３５２（Ｒａｆの阻害剤でもある）、ＢＡＹ−７３−４５０６（Ｒａｆの阻害剤でもある）、ＸＬ−８８０（ｃＭｅｔの阻害剤でもある）、ＸＬ−６４７（ＥＧＦＲおよびＥｐｈＢ４の阻害剤でもある）、ＸＬ−８２０（ｃＫｉｔの阻害剤でもある）、ニロチニブ（ｃＫｉｔおよびｂｒｃ−ａｂｌの阻害剤でもある）、ＣＹＴ−１１６、ＰＴＣ−２９９、ＢＭＳ−５８４６２２、ＣＥＰ−１１９８１、ドビチニブ、ＣＹ−２４０１４０１、ＥＮＭＤ−２９７６、ラムシルマブ、ペグジネタニブ、およびＢＩＢＦ１１２０。
【００３１】
また、抗悪性腫瘍剤は、ＥＧＦＲ阻害剤から選択されてもよく、小分子ＥＧＦＲ阻害剤または抗ＥＧＦＲ抗体であってもよい。抗ＥＧＦＲ抗体の例は、限定されないが、セツキシマブ、パニツムマブ、ニモツズマブ、ザルツムマブであり；小分子ＥＧＦＲ阻害剤の例は、ゲフィチニブ、エルロチニブ、バンデタニブ（ＶＥＧＦ−Ｒの阻害剤でもある）、およびアファチニブ（Ｈｅｒ２の阻害剤でもある）である。ＥＧＦＲ調節因子の別の例は、ＥＧＦ融合毒素である。
本明細書に記載の本発明の薬学的組み合わせとの併用に有用なさらなるＥＧＦＲおよび／またはＨｅｒ２阻害剤は、ラパチニブ、トラスツズマブ、ペルツズマブ、ＸＬ−６４７、ネラチニブ、ＢＭＳ−５９９６２６  ＡＲＲＹ−３３４５４３、ＡＶ−４１２、ｍＡＢ−８０６、ＢＭＳ−６９０５１４、ＪＮＪ−２６４８３３２７、ＡＥＥ−７８８（ＶＥＧＦ−Ｒの阻害剤でもある）、ＡＺＤ−８９３１、ＡＲＲＹ−３８０  ＡＲＲＹ−３３３７８６、ＩＭＣ−１１Ｆ８、Ｚｅｍａｂ、ＴＡＫ−２８５、ＡＺＤ−４７６９、およびアファチニブ（Ｈｅｒ２およびＥＧＦＲの二重阻害剤でもある）である。
本明細書に記載の薬学的組み合わせとの併用に有用なＤＮＡポリメラーゼ阻害剤は、Ａｒａ−Ｃ／シタラビン、Ｃｌｏｌａｒ／クロファラビンである。
本明細書に記載の薬学的組み合わせとの併用に有用なＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤は、Ｖｉｄａｚａ／アザシチジンである。
【００３２】
本明細書に記載の薬学的組み合わせとの併用に有用なアポトーシス誘導剤は、Ｔｒｉｓｅｎｏｘ／亜ヒ酸である。
本明細書に記載の薬学的組み合わせとの併用に有用なトポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、イダルビシン、ダウノルビシン、およびミトキサントロンである。
本明細書に記載の薬学的組み合わせとの併用に有用なＲＡＲアンタゴニストは、Ｖｅｓａｎｏｉｄ／トレチノインである。
本明細書に記載の薬学的組み合わせとの併用に有用なＨＧＰＲＴａｓｅ阻害剤は、Ｍｅｒｃａｐｔｏ／メルカプトプリンである。
本明細書に記載の薬学的組み合わせとの併用に有用なヒスタミンＨ２受容体アンタゴニストは、Ｃｅｐｌｅｎｅ／ヒスタミン塩酸塩である。
本明細書に記載の薬学的組み合わせとの併用に有用なＣＤ２５受容体アゴニストは、ＩＬ−２である。
また、抗悪性腫瘍剤は、ＩＧＦ−１Ｒおよびインスリン受容体経路を標的とする薬剤から選択されてもよい。そのような薬剤は、ＩＧＦ−１Ｒに結合する抗体（例えば、ＣＰ−７５１８７１、ＡＭＧ−４７９、ＩＭＣ−Ａ１２、ＭＫ−０６４６、ＡＶＥ−１６４２、Ｒ−１５０７、ＢＩＩＢ−０２２、ＳＣＨ−７１７４５４、ｒｈｕ  Ｍａｂ  ＩＧＦＲ）、およびＩＧＦ１−Ｒのキナーゼドメインを標的とする新規化学物質（例えば、ＯＳＩ−９０６またはＢＭＳ−５５４４１７、ＸＬ−２２８、ＢＭＳ−７５４８０７）を含む。
【００３３】
治療において、本明細書に記載の本発明の薬学的組み合わせと有利に併用することができる他の抗悪性腫瘍剤は、ＣＤ２０を標的とする分子であり、ＣＤ２０特異的抗体、例えば、リツキシマブ、ＬＹ−２４６９２９８、オクレリズマブ、ＭＥＤＩ−５５２、ＩＭＭＵ−１０６、ＧＡ−１０１（＝Ｒ７１５９）、ＸｍＡｂ−０３６７、オファツムマブ等、放射能標識ＣＤ２０抗体、例えば、トシツムマブおよびイブリツモマブチウキセタン等、または他のＣＤ２０指向性タンパク質（例えば、ＳＭＩＰ  Ｔｒｕ０１５、ＰＲＯ−１３１９２１、ＦＢＴ−Ａ０５、ベルツズマブ、Ｒ−７１５９等を含む。
本明細書の薬学的組み合わせは、白血球上に発現される他の表面抗原の阻害剤、具体的には、抗体または抗体様分子、例えば、抗ＣＤ２（シプリズマブ）、抗ＣＤ４（ザノリムマブ）、抗ＣＤ１９（ＭＴ−１０３、ＭＤＸ−１３４２、ＳＡＲ−３４１９、ＸｍＡｂ−５５７４）、抗ＣＤ２２（エプラツズマブ）、抗ＣＤ２３（ルミリキシマブ）、抗ＣＤ３０（イラツムマブ）、抗ＣＤ３２Ｂ（ＭＧＡ−３２１）、抗ＣＤ３８（ＨｕＭａｘ−ＣＤ３８）、抗ＣＤ４０（ＳＧＮ４０）、抗ＣＤ５２（アレムツズマブ）、抗ＣＤ８０（ガリキシマブ）と併用することができる。
本明細書の薬学的組み合わせと併用される他の薬剤は、イムノトキシン、例えば、ＢＬ−２２（抗ＣＤ２２イムノトキシン）、イノツズマブオゾガマイシン（抗ＣＤ２３抗体−カリケアマイシンコンジュゲート）、ＲＦＴ５．ｄｇＡ（抗ＣＤ２５リシン毒素Ａ鎖）、ＳＧＮ−３５（抗ＣＤ３０−アウリスタチンＥコンジュゲート）、およびゲムツズマブオゾガマイシン（抗ＣＤ３３カリケアマイシンコンジュゲート）、ＭＤＸ−１４１１（抗ＣＤ７０コンジュゲート）、または放射標識抗体、例えば、90Ｙ−エプラツズマブ（抗ＣＤ２２放射性イムノコンジュゲート）である。
【００３４】
さらに、本明細書の薬学的組み合わせは、免疫調節剤、例えばアポトーシスを誘発するかまたはシグナル伝達経路を変更する抗体、例えばＴＲＡＩＬ受容体調節因子であるマパツムマブ（ＴＲＡＩＬ−１受容体アゴニスト）、レキサツムマブ（ＴＲＡＩＬ−２受容体アゴニスト）、チガツズマブ、Ａｐｏｍａｂ、ＡＭＧ−９５１およびＡＭＧ−６５５；抗ＨＬＡ−ＤＲ抗体（１Ｄ０９Ｃ３等）、抗ＣＤ７４、破骨細胞分化因子リガンド阻害剤（デノスマブ等）、ＢＡＦＦアンタゴニスト（ＡＭＧ−６２３ａ等）、またはＴｏｌｌ様受容体のアゴニスト（例えば、ＴＬＲ−４もしくはＴＬＲ−９）と併用することができる。
本明細書に記載の本発明の薬学的組み合わせと併用できる他の抗悪性腫瘍剤は、限定されないが、以下から選択される：ホルモン、ホルモン類似体、および抗ホルモナール（例えばタモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、フルベストラント、酢酸メゲストロール、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロン、フィナステリド、酢酸ブセレリン、フルドロコルチゾン、フルオキシメステロン、メドロキシプロジェステロン、カプロン酸ヒドロキシプロジェステロン、ジエチルスチルベストロール、プロピオン酸テストステロン、フルオキシメステロン／等価物、オクトレオチド、アルゾキシフェン、パシレオチド、バプレオチド、アドレノコルチコステロイド／アンタゴニスト、プレドニゾン、デキサメタゾン、アミノグルテチミド）、アロマターゼ阻害剤（例えば、アナストロゾール、レトロゾール、リアロゾール、エクセメスタン、アタメスタン、フォルメスタン）、ＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト（例えば、酢酸ゴセレリン、ロイプロリド、アバレリクス、セトロレリクス、デスロレリン、ヒストレリン、トリプトレリン）、抗代謝薬（例えば、アンチフォレート、例えばメトトレキセート、トリメトトレキセート、ペメトレキセド、ピリミジン類似体、例えば５−フルオロウラシル、フルオロデオキシウリジン、カペシタビン、デシタビン、ネララビン、５−アザシチジン、およびゲミシタビン、プリンおよびアデノシン類似体、例えば、メルカプトプリン、チオグアニン、アザチオプリン、クラドリビンおよびペントスタチン、シタラビン、フルダラビン、クロファラビン）；抗腫瘍性抗生物質（例えば、アントラサイクリン、例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシンおよびイダルビシン、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、プリカマイシン、スプリカマイシン、アクチノマイシンＤ、ミトキサントロン、ミトキサントロンイダルビシン、ピキサントロン、ストレプトゾシン、アフィジコリン）；白金誘導体（例えば、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、ロバプラチン、サトラプラチン）；アルキル化剤（例えば、エストラムスチン、セムスチン、メクロレタミン、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、ダカルバジン、シクロホスファミド、イホスファミド、ヒドロキシウレア、テモゾロミド、ニトロソウレア、例えば、カルムスチンおよびロムスチン、チオテパ）；抗有糸分裂剤（例えば、ビンカアルカロイド、例えば、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ビンフルニンおよびビンクリスチン；ならびにタキサン、例えば、パクリタキセル、ドセタキセルおよびそれらの配合物、ラロタキセル；シモタキセル、およびエポチロン、例えば、イキサベピロン、パツピロン、ＺＫ−ＥＰＯ）；トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エピポドフィロトキシン、例えば、エトポシドおよびエトポフォス、テニポシド、アムサクリン、トポテカン、イリノテカン、バノキサントロン、カンプトテシン）および種々の化学療法剤、例えば、レチン酸誘導体、アミホスチン、アナグレリド、インターフェロンα、インターフェロンβ、インターフェロンγ、インターロイキン−２、プロカルバジン、Ｎ−メチルヒドラジン、ミトタン、及びポルフィマー、ベキサロテン、セレコキシブ、エチルエネミン／メチル−メラミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンチオホスホラミド、ヘキサメチルメラミン、および酵素  Ｌ−アスパラギナーゼ、Ｌ−アルギナーゼおよびメトロニダゾール、ミソニダゾール、デスメチルミソニダゾール、ピモニダゾール、エタニダゾール、ニモラゾール、ＲＳＵ  １０６９、ＥＯ９、ＲＢ  ６１４５、ＳＲ４２３３、ニコチンアミド、５−ブロモデオジウリジン、５−ヨードデオキシウリジン、ブロモデオキシシチジン、エリスロヒドロキシノニル−アデニン、アントラセネジオン、ＧＲＮ−１６３Ｌ（競合性テロメラーゼ鋳型アンタゴニスト）、ＳＤＸ−１０１（ＰＰＡＲアゴニスト）、タラボスタット（ＤＰＰ阻害剤）、フォロデシン（ＰＮＰ阻害剤）、アタシセプト（ＴＮＦファミリーメンバーＢＬｙＳおよびＡＰＲＩＬを標的とする可溶性受容体）、ＴＮＦ−α中和剤（Ｅｎｂｒｅｌ、Ｈｕｍｉｒａ、Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、ＸＬ−８４４（ＣＨＫ１／２阻害剤）、ＶＮＰ−４０１０１Ｍ（ＤＮＡアルキル化剤）、ＳＰＣ−２９９６  （アンチセンスｂｃｌ２阻害剤）、オバトクラックス（ｂｃｌ２阻害剤）、エンザスタウリン（ＰＫＣ−β調節因子）、ボリノスタット（ＨＤＡＣ阻害剤）、ロミデプシン（ＨＤＡＣ阻害剤）、ＡＴ−１０１（Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤）、プリチデプシン（多作用性デプシペプチド）、ＳＬ−１１０４７（ポリアミン代謝調節因子）。
【００３５】
本明細書に記載の本発明の薬学的組み合わせはまた、外科手術、幹細胞移植、放射線療法、内分泌療法、生物応答調節剤、温熱療法および寒冷療法を含む他の治療法、ならびに任意の有害作用を緩和するための薬剤（例えば、制吐剤）、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、光感作剤、例えば、ヘマトポルフィリン誘導体、Ｐｈｏｔｏｆｒｉｎ、ベンゾポルフィリン誘導体、Ｎｐｅ６、錫エチオポルフィリン、フェオホルバイド−ａ、バクテリオクロロフィル−ａ、ナフタロシアニン、フタロシアニン、亜鉛フタロシアニンと併用してもよい。
【００３６】
薬学的組成物および投与方法
本明細書で使用される「薬学的組成物」は、本明細書に記載の薬学的組み合わせを患者に投与可能にする手段を指す。これは、薬学的組成物の活性成分としての薬学的組み合わせが、１つ以上の薬学的に許容される希釈剤と、また任意選択的に、さらなる薬学的に許容される薬剤と混合されることを意味する。本明細書に記載の薬学的組成物は、薬学的組成物の患者への投与を可能にするいずれの形態であってもよく、例えば、薬学的組成物は、固体または液体の形態であってもよい。好ましい適用様式は、注入または注射（静脈内、筋肉内、皮下、腹腔内、皮内）による非経口であるが、吸入、経皮、経鼻、頬側、経口、および腫瘍内等の他の適用様式も適用され得る。非経口投与は、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内の注射または注入技術を含む。一態様において、薬学的組成物は、非経口投与される。さらに別の態様において、薬学的組成物は、静脈内投与される。
薬学的組成物は、該薬学的組成物を患者に投与した時に、化合物を生物学的に利用可能にするために製剤化することができる。薬学的組成物は、１つ以上の投薬単位の形態をとることができ、例えば、エアロゾル形態の化合物の容器は、複数の投薬単位を保持することができる。
【００３７】
薬学的組成物の調製に使用される材料は、使用される量では非毒性であり得る。当業者には、薬学的組成物中の活性成分（複数可）の最適な投与量が様々な要因に依存することは明白である。関連要因は、限定されないが、患者の種類（例えば、ヒト）、有効成分（すなわち、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤、任意選択的に抗悪性腫瘍剤）の特定の形態、投与様式、および用いられる薬学的組成物を含む。
薬学的に許容される担体またはビヒクルは、粒子であってもよく、薬学的組成物は、例えば、粉末形態であってもよい。担体（複数可）は液体であってもよく、薬学的組成物は、例えば、注射可能な液体である。薬学的組成物は、例えば、非経口注射のための液体の形態であってもよい。注射による投与ための薬学的組成物には、界面活性剤、保存剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、緩衝剤、安定剤、および等張剤のうちの１つ以上も含めることができる。
液体薬学的組成物は、それらが溶液、懸濁液、または他の類似する形態のいずれにせよ、以下のうちの１つ以上も含むことができる：滅菌希釈剤、例えば、注射溶液、食塩水、好ましくは生理食塩水、リンガー溶液、等張食塩水、不揮発性油、例えば、溶媒または懸濁媒体として機能する合成モノグリセリドまたは合成ジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、シクロデキストリン、プロピレングリコール、または他の溶媒；安定剤、例えばアミノ酸；界面活性剤、例えばポリソルベート；抗菌剤、例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン；抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウム；キレート化剤、例えば、エチレンジアミン四酢酸；緩衝剤、例えば、アセテート、クエン酸塩、またはリン酸塩；および塩化ナトリウムまたはブドウ糖等の浸透圧の調節のための薬剤。非経口薬学的組成物は、アンプル、使い捨て注射器、またはガラス、プラスチック、もしくは他の材料からできた複数回投与用バイアルに封入することができる。生理食塩水は、例示的なアジュバントである。注射可能な薬学的組成物は、滅菌されていることが好ましい。
【００３８】
本明細書に記載の薬学的組成物はまた、乾燥させるか（凍結乾燥、噴霧乾燥、噴霧凍結乾燥、近臨界もしくは超臨界ガスによる乾燥、真空乾燥、通気乾燥）、沈殿させるか、または結晶化させるか、またはマイクロカプセル中に封入することができる：マイクロカプセルは、コアセルベーション技術によってまたは界面重合によって（例えば、ヒドロキシメチルセルロースもしくはゼラチンおよびポリ−（メチルメタクリレート）をそれぞれ用いて）、マクロエマルション中のコロイド状薬物送達系（例えばリポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセル）に調製されるか、または、例えば、ｐｃｍｃ技術（タンパク質でコーティングした微結晶）によって担体もしくは表面状に沈殿または固定化される。そのような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ  Ｒ．Ｅｄに開示されている。
【００３９】
抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の一例として、ＢＩＢＦ１１２０は、以下の充填物を含むゼラチンカプセルとして製剤化することができる：
・ＢＩＢＦ  １１２０エタンスルホネート半水和物（ｐｅｇ粉砕）
・中鎖トリグリセリド
・固形脂肪
・レシチン
【００４０】
上で特定した製剤は、以下から構成されてもよいゼラチンカプセルに充填されるのに好適である：
・グリセロール８５％（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）
・ゼラチン（Ｐｈ．Ｅｕｒ．，ＮＦ）
・二酸化チタンＥ１７１（Ｐｈ．Ｅｕｒ．，ＵＳＰ）
・酸化鉄レッドＥ１７２（ＮＦ）
・酸化鉄イエローＥ１７２（ＮＦ）
【００４１】
ＢＩＢＦ１１２０等の抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を製剤化するための他の選択肢は、例えば、特許出願第ＷＯ２００９／１４７２１２号および同第ＷＯ２００９／１４７２２０号に概説されている。
【００４２】
二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤は、典型的には静脈内適用のための輸液として製剤化される。典型的な例として、ＢＩ−１は、次のように製剤化することができる：
・ＢＩ−１                                        0.492 mmol/l
・コハク酸二ナトリウム六水和物                    22.3 mmol/l
・コハク酸                                        2.7 mmol/l
・無水トレハロース                                155.0 mmol/l
・２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン  32.436 mmol/l
・ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ  ２０）          0.244 mmol/l
・注射用水（ＷＦＩ）                              １リットルまで
【００４３】
当該技術分野で既知の他の好適な輸液製剤も使用することができる。
特定の障害または状態の治療に有効な薬学的組成物の量は、その障害または状態の性質に依存し、標準的な臨床技術によって決定することができる。さらに、最適な投与量範囲を特定する補助として、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏアッセイが任意選択的に用いられてもよい。薬学的組成物に用いられる正確な用量は、投与経路、および疾患または障害の重篤度にも依存し、医師の判断および各患者の状況によって決定されるべきである。
【００４４】
薬学的組成物は、好適な投与量が得られるように、有効量の薬物（複数可）または薬剤（複数可）を含む。典型的には、この量は、薬学的組成物の少なくとも約０．０１重量％の薬物または薬剤である。経口投与が意図される場合、この量は、薬学的組成物の約０．１重量％〜約８０重量％の範囲に変化してもよい。一態様において、経口薬学的組成物は、薬学的組成物の約４重量％〜約５０重量％の有効成分を含むことができる。さらに別の態様において、本発明の薬学的組成物は、非経口投薬単位が約０．０１重量％〜約２重量％の有効成分を含有するように調製される。
静脈内投与の場合、薬学的組成物は、患者の体重１ｋｇ当たり約１〜約５０ｍｇの薬物または薬剤を含むことができる。一態様において、薬学的組成物は、患者の体重１ｋｇ当たり約１、１．５、または２．５〜約５０ｍｇの薬物または薬剤を含むことができる。別の態様において、投与される量は、約１、１．５、または２．５〜約２５ｍｇ／体重１ｋｇの範囲の薬物または薬剤である。
【００４５】
いくつかの実施形態において、患者に投与される投与量は、０．１ｍｇ／患者の体重１ｋｇ未満〜約５０ｍｇ／患者の体重１ｋｇである。（ｍｇ／ｍｍ２への変換は、１．８ｍ２のＢＳＡおよび８０ｋｇの体重を使用することができる。）
本明細書で論じられるように、本明細書に記載の薬学的組成物は、計画通り患者に静脈内または皮下投与することができる：すなわち、例えば、毎日、毎週、隔週、３週間毎、または毎月、患者に投与されてもよい。例えば、本明細書に記載の薬学的組成物は、２〜１０週間、典型的には３〜６週間の期間、毎週投与されてもよい。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の薬学的組成物の投与計画は、投与サイクルの間、少なくとも５μｇ／ｍｌまたは少なくとも１０μｇ／ｍｌの血清抗体濃度を維持する。本明細書に記載の薬学的組成物は、例えば、１〜８、またはそれ以上のサイクルで投与することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の薬学的組成物は、長期的に対象に投与される。
【００４６】
例として、本発明は、０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約１．５〜８または２．５〜８ｍｇ／ｋｇの本明細書に記載される薬学的組成物を毎週投与することによって、骨髄性白血病等の癌を治療する方法を含む。この治療は、通常、約１〜３ヶ月、典型的には約２ヶ月続けることができる。一実施形態において、投与計画は、芽球の減少が認識されるまで継続される。例えば、投薬は、約６ヶ月まで継続されてもよい。この治療の後には、例えば隔週投与（または１ヶ月に２回）を含む頻度のより低い投与計画が続いてもよい。この投与計画は、芽球の減少および／または寛解を維持するために、１、２、３、４、５、６ヶ月、またはそれ以上継続されてもよい。
いくつかの実施形態において、注入反応を最小限に抑えるために、本明細書に記載の薬学的組成物とともに予防薬が投与されてもよい。好適な予防薬は、例えば、メチルプレドニゾロン、ジフェンヒドラミン、アセトアミノフェン、または他の好適な薬剤を含む。予防薬は、本明細書に記載の薬学的組成物の前にまたはそれとほぼ同時に投与されてもよい。
【００４７】
本明細書に記載の薬学的組成物は、任意の都合のよい経路によって、例えば、注入またはボーラス注射によって、上皮または皮膚粘膜被膜（例えば、口腔粘膜、直腸および腸粘膜等）を通した吸収によって投与されてもよい。投与は全身性または局所的であってもよい。種々の送達系が既知であり、例えば、リポソーム、微小粒子、マイクロカプセル、カプセル等内への封入が、本明細書に記載の薬学的組成物を投与するために用いられてもよい。
薬物または薬剤に適切であるように、本明細書に記載の薬学的組成物を、治療が必要な領域に局所的に投与することが望ましい場合がある。これは、例えば、かつ非限定的に、手術中の局所注入によって；例えば、術後の創傷手当と併せた、局所適用；注射によって；カテーテルを用いて；坐剤を用いて；または移植によって達成することが可能であり、インプラントは、シラスティック膜等の膜、または線維を含む、多孔質、非多孔質、またはゼラチン質材料である。一実施形態において、投与は、癌、腫瘍、または新生物もしくは新生物発生前組織の部位（または以前の部位）における直接注射によるものであってもよい。
【００４８】
本明細書に記載の薬学的組成物は、ポンプまたは種々のポリマー材料等の徐放系において送達することができる。さらに別の実施形態において、徐放系は、本明細書に記載の薬学的組成物の標的の近位に配置することができ、よって、ごくわずかな全身用量のみを必要とする（例えば、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，  ｖｏｌ．２，ｐｐ．１１５−１３８，１９８４に記載のＧｏｏｄｓｏｎを参照のこと）。Ｌａｎｇｅｒ（１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３）による考察で論じされる他の徐放系が使用されてもよい。
本明細書に記載の薬学的組成物は、薬物または薬剤に適切であるように、動物、特にヒトへの静脈内投与に適合した薬学的組成物として、日常的手順に従って製剤化される。典型的には、静脈内投与のための担体またはビヒクルは、滅菌等張緩衝液である。必要な場合、薬学的組成物は、可溶化剤も含むことができる。静脈内投与のための薬学的組成物は、任意選択的に、注射部位の疼痛を緩和するためにリグノカイン等の局所麻酔剤を含むことができる。一般的に、成分は、例えば、活性薬剤の量を示すアンプルまたはサシェ等の密封容器中の凍結乾燥粉末または不含水濃縮物として、単位剤形中に別々に供給されるかまたは一緒に混合されるかのいずれかである。薬物または薬剤を注入によって投与する場合、例えば、滅菌した医薬品グレードの水または生理食塩水を含む注入瓶を用いて分注することができる。薬物または薬剤を注射によって投与する場合、投与前に成分を混合することができるように、注射用滅菌水または生理食塩水のアンプルが提供されてもよい。
【００４９】
治療剤の薬学的組成物はまた、例えば、錠剤、ロゼンジ剤、水性もしくは油性の懸濁剤、顆粒剤、散剤、エマルション剤、カプセル剤、シロップ剤、またはエリキシル剤の形態の許容される剤形によって投与されてもよい。経口投与される薬学的組成物は、薬学的に美味な調製物を提供するために、１つ以上の任意選択的な薬剤、例えば、甘味剤、例えば、フルクトース、アスパルテーム、またはサッカリン；香味剤、例えば、ペパーミント、冬緑油、またはサクランボ；色素剤；および防腐剤を含有することができる。さらに、錠剤または丸剤の形態では、消化管内での崩壊および吸収を遅延させ、それによって長時間にわたって持続作用を提供するように、薬学的組成物をコーティングすることができる。浸透圧的に活性な駆動化合物を取り囲む選択的透過性膜も、経口投与される薬物または薬剤に好適である。これらの後者のプラットフォームでは、カプセルを取り囲む環境からの流体が駆動化合物に吸収され、化合物が膨潤し、開口部を通して薬剤または薬剤の薬学的組成物を排出する。これらの送達プラットフォームは、即時放出製剤のスパイク状プロファイルとは対照的に、本質的にゼロ次の送達プロファイルを提供することができる。グリセロールモノステアレートまたはグリセロールステアレート等の時間遅延物質も用いることができる。
薬学的組成物は、固体または液体投薬単位の物理的形態を変更する種々の材料を含むことができる。例えば、薬学的組成物は、活性成分の周囲にコーティングシェルを形成する材料を含むことができる。コーティングシェルを形成する材料は、典型的には不活性であり、例えば、砂糖、シェラック、および他の腸溶コーティング剤から選択することができる。代替として、活性成分は、ゼラチンカプセル内に包み込むことができる。
薬学的組成物は、担当医師によって決定される頻度でまたは期間にわたって、それを必要とする患者に投与することができる。薬学的組成物は、１日、２日、３日、５日、７日、１０日、１４日、２１日、２８日、１ヶ月、２ヶ月、またはそれよりも長い期間にわたって投与することができる。薬学的組成物は、１日から２ヶ月の間、またはそれよりも長い任意の期間投与できることを理解されたい。
【００５０】
組み合わせは、組み合わせ調製キットとして提示されてもよい。本明細書で使用される「組み合わせ調製キット」または「キット」という用語は、本発明による薬学的組み合わせを投与するために使用される薬学的組成物（単数または複数）を意味する。薬学的組み合わせの有効成分、すなわち、抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤、ならびに任意選択的に抗悪性腫瘍剤（複数可）が同時に投与される場合、組み合わせ調製キットは、錠剤等の単一の薬学的組成物中に、または別個の薬学的組成物中に各有効成分を含有することができる。有効成分が同時に投与されない場合、組み合わせ調製キットは、単一パッケージ内の薬学的組成物中に有効成分を含有するか、または別個のパッケージもしくは区画内の別個の薬学的組成物中に有効成分を含有するかのいずれかである。
【００５１】
一態様において、
（ｉ）抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤を含む第１の薬学的組成物を収容する第１の区画と、
（ｉｉ）抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を含む第２の薬学的組成物を収容する第２の区画と、任意選択的に、
（ｉｉｉ）１つ以上のさらなる抗悪性腫瘍剤を含む１つ以上の薬学的組成物を収容する第３の区画と、を備える、組み合わせ調製キットの形態の薬学的組成物が提供される。
一実施形態において、好適な薬学的組成物として有効成分を含む組み合わせ調製キットが提供され、有効成分は、連続的、個別、および／または同時投与に好適な形態で提供される。
一実施形態において、以下の構成要素を備える組み合わせ調製キットが提供される：好適な薬学的組成物として抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤を収容する第１の容器、好適な薬学的組成物として抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を収容する第２の容器、および前記第１および第２の容器を収容するための手段。
組み合わせキットはまた、投与量および投与の指示等の指示によって提供されてもよい。そのような投与量および投与の指示は、例えば、製剤ラベルによって、医師に提供される種類の指示であってもよいか、またはそれらは、医師によって提供される種類の指示、例えば、患者への指示等であってもよい。
別の態様において、本発明はまた、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤と併用して癌の治療に使用するための二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤にも関する。
【００５２】
別の態様において、本発明は、治療有効量の二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤をそれを必要とする患者に投与することを含み、当該二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後７２時間以内に、さらに治療有効量の抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を同じ患者に投与することとを含む、癌の治療方法に関する。
別の実施形態において、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与は、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後、３６時間以内に行われる。
別の実施形態において、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与は、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後、２４時間以内に行われる。
別の実施形態において、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与は、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後、１２時間以内に行われる。
別の実施形態において、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与は、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後、６時間以内に行われる。
【００５３】
別の実施形態において、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与は、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後、３時間以内に行われる。
別の実施形態において、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与は、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後、２時間以内に行われる。
別の実施形態において、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与は、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後、１時間以内に行われる。
別の実施形態において、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与は、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与の前または後、３０分以内に行われる。
別の実施形態において、抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤の投与は、前記二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の投与と同時に行われる。
・抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤と二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の同時投与は、典型的には、別個の注入容器からの同時注入により抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤および二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の両方を投与することによって、または
・同じ注入容器からの同時注入により抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤および二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤の両方を投与することによって、または
・抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を経口投与する一方で、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤を注入により投与することによって、または
・抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を経口投与する一方で、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤を皮下投与することによって、達成することができる。
【００５４】
実験の部
頭字語および略語
ＦＣＳ    ウシ胎仔血清
ｈ        時間
ＩｇＧ    免疫グロブリンＧ
ＰＢＳ    リン酸緩衝食塩水
ＴＧＩ    腫瘍増殖阻害、式：
ＴＧＩ＝１００×｛１−［（処置最終日−処置１日目）／（対照最終日−対照１日目）］｝で算出
【００５５】
１．ヒト非小細胞肺癌（ＮＣＩ−Ｈ１９７５）のマウスモデルにおいてベバシズマブおよびＢＩＢＦ  １１２０と併用されるＢＩ−１のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性
本試験の目的は、ヌードマウスのヒト非小細胞肺癌（ＮＣＩ−Ｈ１９７５）のモデルにおいて、ベバシズマブおよびＢＩＢＦ  １１２０と併用されるＢＩ−１の有効性を評価することであった。
【００５６】
１．１  材料および方法
１．１．１  試験デザイン
モデル：ヌードマウスにおいて増殖中のヒト非小細胞肺癌（ＮＣＩ−Ｈ１９７５）の皮下異種移植片
2015532272.tif 000002
【００５７】
１．１．２  試験化合物
この実験には、サンプルＩＤ番号Ｄ１１Ｂ２０Ｖ５０３のＢＩ−１を使用し、ＰＢＳで希釈した。バッチ番号１３３５６２のＢＩＢＦ  １１２０をＮａｔｒｏｓｏｌ  ０．５％（ヒドロキシエチルセルロースＮａｔｒｏｓｏｌ  ２５０  ＨＸ、ＶＷＲ）中に懸濁した。
Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ、２５ｍｇ／ｍｌ）をＲｏｃｈｅ（Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）（０．９％食塩水に溶解）から購入し、０．９％食塩水で希釈した。
【００５８】
１．１．３  マウス
マウスは、Ｔａｃｏｎｉｃ，Ｄｅｎｍａｒｋから購入した７週齢のメスＢｏｍＴａｃ：ＮＭＲＩ−Ｆｏｘｎ１ｎｕであった。到着後、マウスを実験に使用する前に、少なくとも５日間環境条件に馴化させた。温度２１．５±１．５℃および湿度５５±１０％の標準化された条件下、マウスを７匹（対照は１０匹）の群でＭａｋｒｏｌｏｎ（登録商標）ＩＩＩ型ケージに収容した。標準食餌（ＰＲＯＶＩＭＩ  ＫＬＩＢＡ）およびオートクレーブで滅菌した水道水を自由に与えた。（イソフルラン麻酔下で）皮下移植したマイクロチップを使用して各マウスを識別した。試験番号、動物識別番号、化合物および用量レベル、投与経路、ならびにスケジュールを示すケージカードを、試験を通して動物と一緒にしておいた。
【００５９】
１．１．４  腫瘍の確立、無作為化
皮下腫瘍を確立するために、遠心分離によりＮＣＩ−Ｈ１９７５細胞を収集し、洗浄して、ＰＢＳ＋５％ＦＣＳ中に５×１０７細胞／ｍｌで再懸濁した。次いで、５×１０６細胞を含有する１００μｌの細胞懸濁液をマウスの右側腹部に皮下注射した（マウス１匹当たり１つの部位）。腫瘍が十分に確立され、６３〜１０４ｍｍ３の体積に達したとき、治療群とビヒクル対照群との間でマウスを無作為に割り振った（細胞注入の７日後）。
【００６０】
１．１．５  試験化合物の投与
１日目に、全てのマウスの平均体重（２８ｇ）に対してＢＩ−１およびベバシズマブの用量を算出し、マウス１匹当たり１００μｌの体積で週２回腹腔内投与した。ＢＩＢＦ  １１２０は、体重（ｍｇ／ｋｇ）に従って用量を決定し、毎日経口投与した。
１．１．６  腫瘍増殖および副作用の監視
週３回（月曜、水曜、および金曜）、ノギスで腫瘍の直径を測定した。式「腫瘍体積＝長さ*直径２*π／６」に従って、各腫瘍の体積［ｍｍ３］を算出した。治療の副作用を監視するために、異常について毎日マウスを視診し、週３回（月曜、水曜、および金曜）体重を測定した。対照腫瘍が平均して約８００ｍｍ３のサイズに達したときに動物を屠殺した。加えて、直径１．５ｃｍを超える腫瘍を有するか、または体重の２０％を損失した動物は、倫理的な理由から安楽死させた。
【００６１】
ＴＧＩ値は、次のように算出した：
ＴＧＩ＝１００×｛１−［（処置最終日−処置１日目）／（対照最終日−対照１日目）］｝
【００６２】
１．１．７  腫瘍サンプル採取
安楽死の時点で（それぞれ、最後の経口処置から２４時間後および最後の腹腔処置から４日後）、群当たり５つの腫瘍を切除し、クライオチューブに入れて液体窒素中で瞬間凍結させ、−８０℃で保存した。
１．１．８  統計分析
１４日目に、腫瘍体積および体重のパラメータについて統計的評価を行った。
腫瘍体積には絶対値を用い、体重には１日目の初期体重を参照した変化の割合（％）を用いた。
変動が観察されたため、ノンパラメトリックな方法を適用した。
記述的検討のために、観察回数および中央値を算出した。考えられる治療効果を素早く概観するために、各治療群の腫瘍体積の中央値Ｔを、対照の中央値Ｃに対して参照した。
１日目からｄ日目までの腫瘍増殖の阻害（ＴＧＩ）
ＴＧＩ＝１００＊［（Ｃｄ−Ｃ１）−（Ｔｄ−Ｔ１）］／（Ｃｄ−Ｃ１）
式中、Ｃ１、Ｔ１＝１日目の実験開始時の対照群および治療群の腫瘍体積中央値
Ｃｄ、Ｔｄ＝１４日目の対照群および治療群の腫瘍体積中央値
【００６３】
片側減少マン・ホイットニー検定を適用して、各治療群を対照群と比較し、また単剤療法を対応する併用療法と比較して、効果として腫瘍体積の減少、および有害事象として体重増加の減少を調べた。
各サブトピック内で、ボンフェローニ−ホルム法に従って腫瘍体積のｐ値を複数比較（対照に対する比較、単剤療法に対する比較の組み合わせ）のために調整したが、考えられる有害作用を見逃さないために、体重のｐ値（認容性パラメータ）は調整しなかった。
有意性のレベルは、α＝５％に固定した。０．０５未満のｐ値（調整済み）を群間の統計的な有意差を示すと見なし、０．０５≦ｐ値＜０．１０であるときは常に、差は、暗示的なものであるとした。
【００６４】
１．２  結果
１．２．１  腫瘍体積−単剤
１４日の治療期間中、対照腫瘍は、体積中央値である８５ｍｍ3から７９１ｍｍ3の体積まで増殖した。
２．５サイクルの間、週２回腹腔内投与した２５ｍｇ／ｋｇのベバシズマブによる処置は、腫瘍の増殖を有意に遅延した（中央値ＴＧＩ＝８２％、ｐ＝０．００１０）。
２．５サイクルの間、毎日経口投与した５０ｍｇ／ｋｇのＢＩＢＦ  １１２０による処置は、腫瘍の増殖を有意に遅延した（中央値ＴＧＩ＝７５％、ｐ＝０．００１０）。
２．５サイクルの間、週２回腹腔内投与した１３．６ｍｇ／ｋｇのＢＩ−１による処置は、腫瘍の増殖を有意に遅延した（中央値ＴＧＩ＝７５％、ｐ＝０．００１０）。
２．５サイクルの間、週２回腹腔内投与した２５ｍｇ／ｋｇのベバシズマブおよび１３．６ｍｇ／ｋｇのＢＩ−１による処置は、腫瘍の増殖を有意に遅延した（ＴＧＩ中央値＝９９％、ｐ＝０．００１０）。
２．５サイクルの間、毎日経口投与した５０ｍｇ／ｋｇのＢＩＢＦ  １１２０および週２回腹腔内投与した１３．６ｍｇ／ｋｇのＢＩ−１による処置は、腫瘍の増殖を有意に遅延した（ＴＧＩ中央値＝９８％、ｐ＝０．００１０）。
【００６５】
１．２．２  腫瘍体積−組み合わせ
ベバシズマブおよびＢＩ−１の組み合わせは、ベバシズマブ（ｐ＝０．００１２）またはＢＩ−１（ｐ＝０．０００６）単独よりも有意に効果的であった。
ＢＩＢＦ  １１２０およびＢＩ−１の組み合わせは、ＢＩＢＦ  １１２０（ｐ＝０．０００６）またはＢＩ−１（ｐ＝０．０００６）単独よりも有意に効果的であった。
１．２．３  体重
対照動物は、体重の６．０％が増加した。全ての治療群の体重増加は、対照に匹敵するものであった（有意差は認められなかった）。
【００６６】
１．３  結論
ベバシズマブ、ＢＩＢＦ  １１２０、ＢＩ−１、ベバシズマブとＢＩ−１との組み合わせ、およびＢＩＢＦ  １１２０とＢＩ−１との組み合わせは、全て、ＮＣＩ−Ｈ１９７５腫瘍の増殖を有意に遅延させた。
ベバシズマブとＢＩ−１との組み合わせ、およびＢＩＢＦ  １１２０とＢＩ−１との組み合わせは、両方とも、対応する単剤よりも有意に効果的であった。全ての治療薬は、良好な耐容性を示した。
上述の実験から得られた知見に基づいて、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を含む薬学的組み合わせは、確かに優れた抗血管新生効果を有し、したがって、提示されたように、優れた抗腫瘍効果も有すると結論づけることができる。また、実験期間にわたって全ての動物に体重の減少が見られなったことから、そのような薬学的組み合わせは、患者にとって良好に認容できることも示された。
【００６７】
２．ヒト非小細胞肺癌のマウスモデルにおいてベバシズマブおよびＢＩＢＦ１１２０と併用されるＢＩ−１のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性
本試験の目的は、ヌードマウスにおけるヒト非小細胞肺癌（ＬＸＦＥ  ２１１、ＬＸＦＥ  １４２２）、結腸癌（ＣＸＦ  ２４３）、乳癌（ＭＡＸＦ  ４０１）、卵巣癌（ＯＶＸＦ  １３５３）、膵癌（ＰＡＸＦ  ５４６）、および腎癌（ＲＸＦ  １２２０）のモデルにおいて、ベバシズマブ、ＢＩＢＦ１１２０、またはスニチニブと併用されるＢＩ−１の有効性を評価することであった。全てのモデルは、患者からヌードマウスに移植して皮下で継代させた患者由来腫瘍の異種移植片（ＰＤＸ）であった。これらのモデルは、組織像を含む親患者腫瘍の特徴の大半を保持する。
【００６８】
２．１  材料および方法
２．１．１  試験デザイン
【００６９】
モデル：ＬＸＦＥ  ２１１、ＬＸＦＥ  １４２２、ＣＸＦ  ２４３、ＭＡＸＦ  ４０１、ＯＶＸＦ  １３５３、およびＰＡＸＦ  ５４６
2015532272.tif 000003
【００７０】
モデル：ＲＸＦ  １２２０
2015532272.tif 000004
【００７１】
２．１．２  試験化合物
この実験には、サンプルＩＤ番号Ｄ１１Ｂ２０Ｖ５０３のＢＩ−１を使用し、ＰＢＳで希釈した。バッチ番号１３３５６２のＢＩＢＦ  １１２０をＮａｔｒｏｓｏｌ  ０．５％（ヒドロキシエチルセルロースＮａｔｒｏｓｏｌ  ２５０  ＨＸ、ＶＷＲ）中に懸濁した。ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）、２５ｍｇ／ｍｌ）をＲｏｃｈｅ（Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入し、０．９％食塩水に溶解し、０．９％食塩水で希釈した。スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ）錠剤を乳鉢および内筒を用いて粉砕し、１０８．４８ｍｇの粉末（３２ｍｇのＡＰＩに相当する；補正因子：３．３９）をＰＢＳに溶解した（ｐＨ５）。
【００７２】
２．１．３  マウス
マウスは、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ（Ｓｕｌｚｆｅｌｄ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入した５〜７週齢のメスＣｒｌ：ＮＭＲＩ−Ｆｏｘｎ１nuであった。到着後、マウスを実験に使用する前に、少なくとも５日間環境条件に馴化させた。温度２５±１℃および湿度５５±１０％の標準化された条件下、マウスをＭａｋｒｏｌｏｎ（登録商標）ＩＩ型個別換気ロングケージに収容した。標準食餌（Ｈａｒｌａｎ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓからのＴｅｋｌａｄ  Ｇｌｏｂａｌ  １９％  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｔｒｕｄｅｄ  Ｄｉｅｔ（Ｔ．２０１９Ｓ．１２））と、滅菌濾過および酸性化した（ｐＨ２．５）水道水を自由に与えた。耳クリップを使用して各マウスを識別した。試験番号、動物識別番号、化合物および用量レベル、投与経路、ならびにスケジュールを示すケージカードを、試験を通して動物と一緒にしておいた。
【００７３】
２．１．４  腫瘍の確立、無作為化
ヌードマウスにおいて連続継代した腫瘍異種移植片から腫瘍断片を得た。ドナーマウスから除去した後、腫瘍を断片に切断し（４〜５ｍｍの直径）、皮下移植までＰＢＳに入れた。イソフルランの吸入によりレシピエントマウスを麻酔した。小さな切開を行い、動物１匹当たり１つの腫瘍断片をピンセットで移植した。マウスを毎日監視した。
無作為化の時点で、腫瘍担持動物を腫瘍体積に応じて種々の群に層別化した。適切なサイズ（５０〜２５０ｍｍ3の体積）の腫瘍を担持する動物のみ、無作為化のために考慮した。無作為化に必要とされるマウスの数を満たした時にマウスを無作為化した。無作為化の日を０日目と表した。最初の投与日は１日目であった。
【００７４】
２．１．５  試験化合物の投与
１日目に、全てのマウスの平均体重（２８ｇ）に対してＢＩ−１およびベバシズマブの用量を算出し、マウス１匹当たり１００μｌの体積で週２回腹腔内投与した。ＢＩＢＦ１１２０およびスニチニブは、体重（ｍｇ／ｋｇ）に従って用量を決定し、毎日経口投与した。
【００７５】
２．１．６  腫瘍増殖および副作用の監視
週２回、ノギスで腫瘍の直径を測定した。式「腫瘍体積＝長さ*直径2*０．５」に従って、各腫瘍の体積［ｍｍ3］を算出した。治療の副作用を監視するために、異常について毎日マウスを視診し、週２回体重を測定した。直径１．５ｃｍを超える腫瘍を有するか、または体重の２０％を損失した動物は、倫理的な理由から安楽死させた。
ＴＧＩ値は、次のように算出した：
ＴＧＩ＝１００×｛１−［（処置最終日−処置１日目）／（対照最終日−対照１日目）］｝
【００７６】
２．１．７  腫瘍サンプル採取
安楽死の時点で（最後の処置から２４時間後）、群当たり５つの腫瘍を切除し、クライオチューブに入れて液体窒素中で瞬間凍結させ、−８０℃で保存した。
【００７７】
２．１．８  統計分析
腫瘍阻害の統計的有意性を評価するために、効果は一方向にのみ測定可能である（すなわち、腫瘍阻害は予測されるが、腫瘍刺激は予測されない）という仮説に基づいて、ノンパラメトリックなマン・ホイットニー−ウィルコクソンの片側Ｕ検定を行った。一般的に、Ｕ検定は、特定の日の絶対量に従って、２つの群の個々の腫瘍の順位を比較する（群間対比較）。ここでは、併用療法を受けている群とそれぞれの単剤療法を受けている群を比較するためにＵ検定を用いた。ボンフェローニ−ホルム法に従って、Ｕ検定から得られたｐ値を調整した。慣例により、ｐ値≦０．０５が、差の有意性を示す。
【００７８】
２．２  結果
２．２．１  腫瘍体積
ＢＩ−１／ベバシズマブ併用療法対ＢＩ−１およびベバシズマブ単剤療法
ＢＩ−１／ベバシズマブ併用療法では、ＴＧＩ値はＲＸＦ  １２２０の８４％からＰＡＸＦ  ５４６の１０６％までの範囲であり、７つ全ての腫瘍異種移植片において有意な有効性を示した。併用療法は、７つ全ての腫瘍モデルにおいて、ベバシズマブ単剤療法よりも有意に有効であった（ベバシズマブのＴＧＩ値：１０％〜６８％）。併用療法は、ＬＸＦＥ  ２１１、ＬＸＦＥ  １４２２、ＭＡＸＦ  ４０１、およびＰＡＸＦ  ５４６において、ＢＩ−１単剤療法よりも有意に有効であった（ＢＩ−１のＴＧＩ値：７６％〜９４％）。
【００７９】
ＢＩ−１／ＢＩＢＦ１１２０併用療法対ＢＩ−１およびＢＩＢＦ１１２０単剤療法
ＢＩ−１／ＢＩＢＦ１１２０併用療法では、ＴＧＩ値はＣＸＦ  ２４３の９５％からＭＡＸＦ  ４０１の１１０％までの範囲であり、試験した６つ全ての腫瘍異種移植片（ＣＸＦ  ２４３、ＬＸＦＥ  ２１１、ＬＸＦＥ  １４２２、ＭＡＸＦ  ４０１、ＯＶＸＦ  １３５３、ＰＡＸＦ  ５４６）において、試験した治療薬間で最も強い有効性を呈した。試験した全ての腫瘍モデルにおいて、対応する単剤療法（ＢＩ−０１のＴＧＩ値範囲：７６％〜９４％、ＢＩ−２０のＴＧＩ値：４０％〜７８％）に勝る有効性の利点が顕著であった。
【００８０】
ＢＩ−１／スニチニブ併用療法対ＢＩ−１およびスニチニブ単剤療法
スニチニブは、転移性腎細胞癌の治療のために登録されているため、ＢＩ−１／スニチニブ併用療法の有効性は、ＲＸＦ  １２２０腫瘍異種移植片を担持するマウスにおいてのみ試験した。この治療では、１０３％のＴＧＩ値がもたらされた。ＢＩ−１（ＴＧＩ値：７６％）およびスニチニブ（６２％）を用いた基準単剤療法に勝る有効性の利点が顕著であった。
【００８１】
結果の概要
【００８２】
2015532272.tif 000005
【００８３】
２．２．２  体重
全ての治療薬で、実験中に観察された体重損失の最大群中央値は、概して５％未満であり、通常、それぞれのビヒクル対照群で観察される値に相当するものであった。しかしながら、以下の例外が記録された：（ｉ）ビヒクル対照群に関するカヘキシー誘導性の腫瘍異種移植片ＬＸＦＥ  ２１１およびＲＸＦ  １２２０を用いた実験において、それぞれ、５．８％および１３．７％の体重損失の最大群中央値が観察された。さらに、ＬＸＦＥ  ２１１を用いた実験において、ベバシズマブ治療群およびＢＩ−２０治療群に、すなわち、最も弱い抗腫瘍効果を呈する２つの治療薬で、それぞれ、９．１％および５．９％の体重損失の最大中央値が観察された。（ｉｉ）ＣＸＦ  ２４３（体重損失の最大群中央値：１０．２％）、ＬＸＦＥ  １４２２（３．４％）、ＭＡＸＦ  ４０１（６．２％）、ＯＶＸＦ  １３５３（９．８％）、およびＰＡＸＦ  ５４６（４．３％）を用いた実験において、ＢＩ−１／ＢＩＢＦ１１２０併用療法を受けた群で体重損失の最も高い群中央値が記録された。さらに、ＲＸＦ  １２２０を用いた実験において、ＢＩ−１／スニチニブの組み合わせを投与した群で、２番目に高い体重損失の最大中央値（４．５％）が記録された。
【００８４】
ＢＩ−０１／ＢＩＢＦ１１２０またはベバシズマブ／ＢＩ−０１のいずれかの併用療法を受けた群において、全実験にわたって、それぞれ１１匹および６匹の死亡を伴い、より高い死亡率の傾向が見られた。これらの死亡は長期治療の後にのみ生じた（実験２５日目の前には死亡は見られなかった）。別途、ＲＸＦ  １２２０を用いた実験において、１１匹の動物を体重損失のために安楽死させたか、または死亡しているのが発見された。この後者の実験では、ほとんどの死亡がビヒクル対照群およびベバシズマブ治療群において、すなわち、最も弱い抗腫瘍効果を有する治療薬で生じたため、これらの死亡は、腫瘍によって誘導されたカヘキシーに関連している可能性が高い。ＣＸＦ  ２４３およびＯＶＸＦ  １３５３を用いた実験において、他の実験と比較して死亡数（それぞれ、９匹および６匹）がより高かった１つの理由は、両方の実験の期間が長かったことである（ほとんどの群で、それぞれ、８週間超および７週間超）。
【００８５】
２．３  結論
単剤療法におけるＢＩ−１、ならびに併用療法におけるＢＩ−１／ベバシズマブ、ＢＩ−１／ＢＩＢＦ１１２０、およびＢＩ−１／スニチニブは、試験した７つ全ての腫瘍異種移植片において有意な抗腫瘍効果を示した。
試験した併用療法は、全ての症例において、それぞれの単剤療法よりも有意により有効であった。
ＢＩ−１とＮＣＥ（ＢＩＢＦ１１２０またはスニチニブのいずれか）との組み合わせは、全ての実験において非常に有効な処置法であった（ＴＧＩ：９５％〜１１０％）。また、ＢＩ−１／ベバシズマブの組み合わせも、高い治療効果をもたらした（ＴＧＩ：８４％〜１０６％）。
上述の実験から得られた知見に基づいて、二重抗Ａｎｇ２／抗Ｄｌｌ４結合剤および抗ＶＥＧＦ−Ｒ剤を含む薬学的組み合わせは、確かに優れた抗血管新生効果を有し、したがって、提示されたように、優れた抗腫瘍効果も有すると結論づけることができる。また、実験期間にわたって全ての動物に体重の減少が見られなったことから、そのような薬学的組み合わせは、患者にとって良好に認容できることも示された。
【図１】
2015532272.tif 000006
【図２】
2015532272.tif 000007
【図３】
2015532272.tif 000008
【図４】
2015532272.tif 000009
【図５】
2015532272.tif 000010
【図６】
2015532272.tif 000011
【図７】
2015532272.tif 000012
【図８】
2015532272.tif 000013
【図９】
2015532272.tif 000014
【図１０】
2015532272.tif 000015
【図１１】
2015532272.tif 000016
【図１２】
2015532272.tif 000017
【図１３】
2015532272.tif 000018
【図１４】
2015532272.tif 000019
【配列表】
2015532272000001.app
【国際調査報告】
2015532272.tif 000020
2015532272.tif 000021
2015532272.tif 000022
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