(57)【要約】  本発明は、ペネタマート（ＰＮＴ）またはその製剤学的同等製剤；および少なくとも一の油性ビヒクルを含む組成物に関する。【選択図】  図１６
2015522608.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ペネタマート（ＰＮＴ）またはその薬剤的同等製剤；および少なくとも一つの油性ビヒクルを含む組成物。
【請求項２】
粘度が、温度２０℃およびせん断速度１／ｓでカップシリンダー法により測定された３０００ｍＰａｓ未満である、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
該ペネタマート（ＰＮＴ）またはその製剤が該組成物の５５％（ｗ／ｖ）以下を構成する、請求項１または請求項２記載の組成物。
【請求項４】
ペネタマート（ＰＮＴ）の濃度が１５〜５５％（ｗ／ｖ）である、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
該組成物中のペネタマート（ＰＮＴ）濃度が２０〜３５％（ｗ／ｖ）である、請求項４記載の組成物。
【請求項６】
少なくとも一の固結防止剤を含む、請求項１ないし５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
該固結防止剤が非増粘性である、請求項６記載の組成物。
【請求項８】
該ビヒクル油が低粘度である、請求項１ないし７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
該油性ビヒクルがトリアセチンである、請求項１ないし８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
該組成物が液体形態である、請求項１ないし９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
該ペネタマート（ＰＮＴ）の粒径ｄ５０が８〜３０ミクロンである、請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
界面活性剤を含む、請求項１ないし１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
該界面活性剤がポリソルベート８０である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
保存料を含む請求項１ないし１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
該保存料がベンジルアルコールである、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
乳化剤または分散剤を含む、請求項１ないし１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
乳化剤または分散剤がｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ  Ｈ９０である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
該界面活性剤が７〜１６の親水親油バランス（ＨＬＢ）を有する化合物より選択される、請求項１２ないし１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
請求項１ないし１８のいずれか一項に記載の組成物を含む注射器。
【請求項２０】
ペネタマート５ｇを含む請求項１９に記載の注射器。
【請求項２１】
微生物感染症の治療または予防のために、請求項１ないし１８のいずれか一項に記載の組成物により動物を治療する方法であって、それを必要とする動物に対する該組成物の筋肉内または皮下注射を含む方法。
【請求項２２】
該微生物感染症が前臨床または臨床乳房炎である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
約三日間繰り返される一日当たりペネタマート５ｇの投与計画を含む、請求項２１または２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
ａ）均質な油混合液を形成するために（ｉ）容器に油を準備するか、または（ｉｉ）容器の中で油と界面活性剤を混合するかのいずれかによって油性ビヒクルを調製する段階：および
ｂ）有効剤を油性ビヒクルに分散する段階、
を含む、請求項１２ないし１７のいずれか一項記載の組成物の製造方法。
【請求項２５】
段階ａ）において保存料が該油性ビヒクルに添加される、請求項２４に記載の製造方法。
【請求項２６】
段階ｂ）において高せん断分散装置が使用される、請求項２４または２５に記載の製造方法。
【請求項２７】
添付の実施例および図に関連して本明細書の最良の形態セクションにおいて実質的に記載される、および添付の実施例および図によって説明される組成物。
【請求項２８】
添付の実施例および図に関連して本明細書の最良の形態セクションにおいて実質的に記載される、および添付の実施例および図によって説明される注射器。
【請求項２９】
添付の実施例および図に関連して本明細書の最良の形態セクションにおいて実質的に記載される、および添付の実施例および図によって説明される動物の治療方法。
【請求項３０】
添付の実施例および図に関連して本明細書の最良の形態セクションにおいて実質的に記載される、および添付の実施例および図によって説明される製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、注射用抗生物質製剤およびその使用方法、ならびに特異的にではないが具体的には泌乳動物における乳房炎の治療または予防に関する。
【背景技術】
【０００２】
例えば、乳牛等の動物における微生物感染症は、典型的に泌乳期間に乳房内（ＩＭＭ）注入、筋肉内（ＩＭ）または皮下（ＳＣ）注射によって治療または予防される。
【０００３】
典型的には、例えば、ペニシリン類またはペネタマート（ＰＮＴ）等のベンジルペニシリン（ＢＰ）のプロドラッグ類等の抗生物質が、ウシ乳房炎を治療するための有効剤として好まれて使用されてきた。ＰＮＴはベンジルペニシリンのジエチルアミノエチルエステルである。家畜で使用するための製剤においてＰＮＴは、ヨウ化水素酸塩（ＨＩ）として取り込まれる。ＰＮＴ  ＨＩは、乳牛における乳房炎の治療のために、泌乳期間（ＵＢＲＯ  ＹＥＬＬＯＷ（登録商標）、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）および非泌乳期間（ＵＢＲＯ  ＲＥＤ（登録商標）、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｍ）の乳房内用製品においても、同様に泌乳期間の注射用懸濁剤（Ｍａｍｙｚｉｎ（登録商標）、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  ＩｎｇｅｌｈｅｉｍおよびＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）、Ｂａｙｅｒ  Ａｎｉｍａｌ  Ｈｅａｌｔｈ）においても使用される。
【０００４】
ＰＮＴは、加水分解によってベンジルペニシリンとジエチルアミノエタノールがそれから遊離されるプロドラッグである。該化合物の抗菌活性は、もっぱらベンジルペニシリンに関係している。例えば、ヨーロッパおよびニュージーランドにおける牛乳に対する最大残留基準値（ＭＲＬ）は、４μｇ／ｋｇ（欧州医薬品庁（ＥＭＥＡ）、英国薬局方（ＢＰ））である。
【０００５】
ベンジルペニシリンのプロドラッグとしてペネタマートヨウ化水素酸塩は、その特別な薬物動態の結果として乳房炎の治療に有効である。筋肉内投与後にペネタマートヨウ化水素酸塩は、注射部位から吸収され、血液に入る際に加水分解によってベンジルペニシリンとジエチルアミノエタノールに部分的に解離する。血液のｐＨ（７．２）において平衡が成立し、ここで有効剤の９１．８％は、残りがペネタマートの状態のまま、その加水分解された形態（ベンジルペニシリン）で存在する。該平衡は、ベンジルペニシリンとジエチルアミノエタノールの再会合によって保たれる。血清のピークレベル（解離したペニシリンＧとして測定）には、注射３．７６時間後に急速に到達する（Ｆｒｉｔｏｎ  ２００３年）。
【０００６】
ペネタマートの非解離形態は、乳（ｐＨ６．６〜６．８）および血漿（ｐＨ７．２）およびその弱塩基性状態（ｐＫａ＝８．４）の間に存在するｐＨ勾配のために、血液乳関門を容易に通り過ぎる。ペネタマートの親油性の性質は、そのリポタンパク質性の血液乳関門を横切る通過をより助長する。ペネタマートは、血液乳関門を通過するときに解離し始め、ベンジルペニシリンを遊離しながら、解離は乳房のあらゆる場所で薬剤が拡散する間中継続する。ベンジルペニシリンは、乳のより低いｐＨの結果として乳房内で有効剤を補足しながら濃度を増して、乳房内（ｐＫａ＝２．８）で急速にイオン化される。
【０００７】
筋肉内（ＩＭ）または皮下（ＳＣ）注射用の市販の現行のＰＮＴ製品は、使用時に滅菌水により溶液または懸濁液に再構成するための粉末の形態である（例えば、Ｍａｍｙｚｉｎ（登録商標）Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  ＩｎｇｅｌｈｅｉｍまたはＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）Ｂａｙｅｒ  Ａｎｉｍａｌ  Ｈｅａｌｔｈｅ）。これらの製品の典型的な投与量には、一日量がＰＮＴ５ｇ三回の投与量、または翌日５ｇの投与量を伴う１０ｇ一回の投与量が含まれる。
【０００８】
水性ビヒクルの使用は、ＰＮＴが注射部位で急速に分解し、従って急速に吸収されることを可能にする。泌乳期間の乳房炎を治療するために特に好ましい特性には、有効剤の急速な吸収、有効な治療作用および短い休薬期間が含まれる。血液乳関門を通過し乳房において濃縮するペネタマートの能力は、有効な治療作用および十分に短い休薬期間を提供する。
【０００９】
治療有効剤としてのその有効性にもかかわらず、注射剤としてペニシリンまたはＰＮＴを含む現在利用可能な組成物の不利な点は、いったん粉から水溶液に再構成されたときのその限定されたシェルフライフ（しばしば、わずか２〜３日）である。これは、例えば、一のバイアルから無菌の水性ビヒクルを引き出し、粉を含む第二のバイアルに該液体を分散し、溶液または均質な懸濁液が形成されるまで混合すること等によって、粉を液状形態に再構成しなければならないユーザーにとって不便である。いったん製品が再構成されれば、それは限られた安定期間内に使用されねばならないし、さもなければそれは廃棄されねばならない。
【００１０】
現在のところ、ウシ乳房炎または他の疾病を治療するための、すぐに使えるＩＭ／ＳＣ注射用ＰＮＴ製剤は市販されていない。すぐに使える注射用製剤を開発するうえでの重要な問題は、水性ビヒクル中でＰＮＴの保存安定性がないことである。非水性ビヒクルの使用がＰＮＴ製剤に対して避けられてきたのは、油性ビヒクルは特に典型的にＩＭ／ＳＣ注射後に有効剤のかなり緩やかな放出を与えるからである。有効剤の緩効性は、泌乳牛に対する休薬期間を延長するであろうし、それは特に好ましくないことであり、該製品の商品化を妨げるであろう。
【００１１】
公表された特許文献ＵＳ４，４４６，１４４は、ＰＮＴが水性または油性基剤で作成され得る適当なビヒクルにおける懸濁液または溶液中で使用し得ると述べている。非水性ビヒクルがより良い安定性を提供すると示されている。ＵＳ４，４４６，１４４に記載された製剤は、例えば水溶液または水性懸濁液として提供される注射等の非経口使用向けである。有効剤の速放性または水性製剤に関する生物学的同等性を獲得することの望ましさについては言及されていない。
【００１２】
非水性ビヒクルを用いるＩＭ／ＳＣ注射用ＰＮＴ組成物の製剤化については、わずかな研究しかなかった。Ｅｄｗａｒｄｓ，Ｓ．Ｊ．（１９６４），Ｔｈｅ  Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  Ｒｅｃｏｒｄ，Ｖｏｌ．７８，Ｎｏ．１７，５８３‐５は、筋肉内注射後の乳中ペニシリン濃度に関する研究を記述している。
【００１３】
水性ビヒクルへのＰＮＴの再構成を必要とする先行技術の製品は、投与されたときの有効剤の急速な吸収という有利な点についてと、再構成された組成物の限られた保存安定性という不利な点について、折り合いを提供する。
【００１４】
すぐに使え、優れた保存安定性を有しおよび有効剤を急速に放出するＰＮＴ組成物に対する長年の要望が存在していた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
前記の問題に対処すること、または少なくとも人々に有用な選択肢を提供することが本発明の目的である。
【００１６】
任意の特許または特許出願を含め本明細書で引用するすべての引用文献は、参照することにより本明細書で援用される。任意の引用文献が先行技術を構成することを認めるわけではない。引用文献の議論は、その著者が主張することを述べているのであり、出願人らは引用した文書の精確さおよび妥当性に異議を唱える権利を留保する。本明細書で多数の先行技術刊行物が参照されているとはいえ、これらの文献のいかなるものも、ニュージーランドまたはいかなる他の国において当該技術分野における技術常識の一部を形成することを認めるものではないことは、明確に理解されるであろう。
【００１７】
本明細書を通して、単語「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」または「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」もしくは「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」等のその変化形は、記した要素、整数もしくは段階、または要素、整数もしくは段階の群を含むことを意味するが、しかしいかなる他の要素、整数もしくは段階、または要素、整数もしくは段階の群は含まないことを意味することを理解されるであろう。
【００１８】
本発明のさらなる態様および有利な点は、例としてのみ与えられる以下の記載より明らかとなるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本発明の一態様によれば、ペネタマート（ＰＮＴ）またはその薬剤的同等製剤；および少なくとも油性ビヒクルを含む組成物が提供される。
【００２０】
該組成物の粘度は、好ましくはカップシリンダー法により、温度２０℃およびせん断速度（１／ｓ）で測定して３０００ｍＰａｓ未満である。
【００２１】
油性ビヒクルにはここでまた、水に部分的にしか溶解しない非水溶性ビヒクルが含まれる−例えば好ましい油性ビヒクルはトリアセチンである。トリアセチンは２０℃で約２３ｍＰａｓの粘度および１．１６ｇ／ｃｍ３の密度を有する。
【００２２】
ペネタマート（ＰＮＴ）またはその薬剤的同等製剤は、好ましくは組成物の５５％（ｗ／ｖ）以下を構成する。
【００２３】
該組成物は、好ましくは少なくとも一の固結防止剤を含む。
【００２４】
本発明のさらなる一態様によれば、ペネタマート（ＰＮＴ）またはその薬剤的同等製剤；少なくとも一の油性ビヒクル；および少なくとも一の非増粘性固結防止剤を含む、組成物が提供される。
【００２５】
本発明のさらなる一態様によれば、ペネタマート（ＰＮＴ）またはその薬剤的同等製剤；および一の低粘性油性ビヒクルを含む組成物が提供さる。
【００２６】
該組成物は、好ましくはペネタマート（ＰＮＴ）またはその薬剤的同等製剤の懸濁液を含む。
【００２７】
本発明のさらなる一態様によれば、ペネタマート（ＰＮＴ）またはその薬剤的同等製剤；および２５℃で２．０と１００．０ｍＰａの間の粘度範囲を有する少なくとも一の油性ビヒクルを含む組成物が提供される。
【００２８】
発明者らは、先行技術のＰＮＴ組成物の有する多数の不利な点を克服し得るＰＮＴ組成物を製剤化した。
【００２９】
本発明は、水性基剤の注射剤と同様の生物学的利用能または生物学的同等性を与え得る、すぐに使える注射用ＰＮＴ組成物を提供する。
【００３０】
本発明の組成物は、油性ビヒクルを用いることによって有効剤の加水分解を有利に回避する。初期の研究は、３０℃、１８０日保存後でさえもＰＮＴの活性または他の安定性の重要点の劣化を実質的に示さなかった。
【００３１】
このことは、再構成および２５℃保存後にわずか約２日（または２〜８℃保存でちょうど一週間）のシェルフライフしか有さない、Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）等の先行技術の製剤に優る明確な利点である。利用者は、本発明の組成物をすぐに使える液状製剤中に、例えば事前に用意された注射器中に保存し得る。大規模な酪農場において、および特に泌乳季節の間に本発明は、業界で現在使用されている他の組成物に優った重要な貢献を当該技術分野に呈示する。
【００３２】
種々の油性基剤の組成物は、注射用液体として抗生物質を送達するために当該分野において従来から知られている。油は、水性基剤の使用の結果生じ得る、有効剤の加水分解（すなわち分解、それ故に安定性に乏しい）を回避するために使用される。しかしながら該油の使用は、比較的に長時間にわたる有効剤の緩効性を提供するために利用されてきた。
【００３３】
本発明は、驚いたことにＰＮＴの急速な放出および短い休薬期間（ｗｉｔｈｈｏｌｉｄｉｎｇ  ｐｅｒｉｏｄ、ＷＨＰ）を提供する。これらの有利な特徴は双方とも、泌乳期間の乳房炎の治療／予防用の水性基剤の組成物Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）によって提供される。このことは、当初の予想と反している。
【００３４】
従来利用できる油性の注射用製剤は、顕著に長い持続放出特性を有する。
【００３５】
従って本発明は、速い放出性、短い残留性および短いＷＨＰが望まれる、泌乳動物における乳房炎等の症状の治療または予防に特別に適用し得る。
【００３６】
さらに、本発明の使用はまた驚いたことに、Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）等の先行技術の水性基剤の組成物と類似した、および潜在的により優れた生物学的利用能の特性を有することが見出だされた。先行技術は、必要とされる生物学的利用能のために、水性基剤系でのＰＮＴ製剤の提供に焦点を合わせてきた。同時に油性の製剤はまた、緩効性およびより長い休薬期間をもたらすだろうとも予想された。
【００３７】
そこで発明者らは、乳房炎の治療用ＳＣ／ＩＭ注射に適したＰＮＴ組成物の乏しい安定性とシェルフライフという現行の問題に対処するための解決策を明らかにした。本発明はまた、動物の泌乳期間の乳房炎の治療または予防に典型的に使用される他の動物用組成物と比較して、ＷＨＰおよび生物学的利用能の特性を改善するための方法も提供する。
【００３８】
さらに発明者らによるベンジルペニシリン（ペニシリンＧ）および／またはプロカインペニシリン試験で使われた油性ビヒクルは（中国特許第１５１７０９０号）、これらペニシリン類が保存において化学的に不安定であることを明らかにした。従って、トリアセチン（または他の油性ビヒクル）を含むＰＮＴの長期間の安定性は、ほとんど予期しなかったことである。
【００３９】
特に発明者らの試験は、本発明の好ましい製剤においてプロカインペニシリンをペネタマートに置き代えると、生じた組成物が化学的に不安定であることを特定した。加速安定性試験の一月後に組成物の成分は、暗褐色の沈殿物形成とともに灰白色から暗黄色への変色をもたらしつつ、急速に分解するように見えた。分解成分には気体が含まれているように見えて、結果として生じた圧力により容器の膨張をもたらした。従って、ＣＮ  １５１７０９０に記載された製剤に、保存安定性があるとは知られていない。
【００４０】
トリアセチンの使用は、化学的にもおよび物理的にも保存安定な製剤を提供する。トリアセチン単独で、他の油性ビヒクル製剤の固結の問題を有利に防止した。界面活性剤の添加は、保存の際の組成物の再懸濁性をさらに改善した。
【００４１】
休薬期間は、既知であるが不安定なＭａｍｙｚｉｎと言う製品の休薬期間と同等であることが見出だされ、しかもそれは生物学的に同等であった。
【００４２】
本明細書を通して用語ペネタマート（ＰＮＴ）は、ベンジルペニシリン（ＢＰ）のジエチルアミノエチルエステル・プロドラッグと受け取られるべきである。本発明において信頼できる抗菌有効剤であるのはＢＰであり、産業界で良く知られている通りである。
【００４３】
油性ビヒクルは、ＷＨＰおよび生物学的利用能の特性に関し、現行の利用可能な水性基剤のペネタマート組成物と比較して所望の結果を与えることが見出だされた。
【００４４】
油性ビヒクルの種類と量は、所望の薬剤放出および／または休薬期間を提供する任意の適当な油性ビヒクルとその量より選択し得る。
【００４５】
ＰＮＴと油性ビヒクルとの比は、好ましくは１：１ないし１：４（ｗ／ｖ）の間である。
【００４６】
しかしながら本発明の組成物はまた、例えばウシやウマにおける子宮筋層炎、呼吸器感染症および腐蹄症等のＰｅｎｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）で治療される細菌感染症と同様の他の細菌感染症の治療のためにも使用し得る。
【００４７】
油性ビヒクルは、好ましくはオレイン酸エチル、中鎖脂肪酸トリグリセリドまたはトリアセチンである。
【００４８】
初期の試験の間に、オレイン酸エチルは、本発明の有利な特性、すなわちＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）と比較して、増加した安定性、ならびに維持された（改善されていないとしても）ＷＨＰおよび生物学的利用能を示す良い例となった。
【００４９】
先行技術文献ＣＮ  １０１８２２６３７は、β‐ラクタム系抗生物質用の担体としてのオレイン酸エチルの使用を開示する。該組成物は、懸濁剤２％、増粘剤０．１〜３％およびベンジルアルコール等の保存料と共に有効剤２〜５％を含む。懸濁剤には、粘度を増加させるステアリン酸アルミニウムが含まれ、および増粘剤にはＴｗｅｅｎ８０が含まれるといわれる。
【００５０】
本発明は、β‐ラクタムのエステルとして異なる特性や担体要求性を有すると予想され得るペネタマートヨウ化水素酸塩を特に使用する点において、この文献と区別される。本製剤における最低限２０％のＰＮＴは、先行技術文献の２〜５％に対し異なる問題を提起するので、抗生物質の量は顕著に異なる。ビヒクルとしてオレイン酸エチルを使用するとき本発明は、懸濁剤として増粘剤を使用せず、むしろ懸濁液の沈降を防止しようとするよりも、本発明は組成物の再懸濁性を提供するために界面活性剤を頼りにする。オレイン酸エチルを使用するとき本発明は、三月までの長期の安定性を有することが見出だされた。
【００５１】
さらに後続の試験は、注射に適していてかつ懸濁したＰＮＴの固結を生じることが少ないトリアセチンが遥かに優れたビヒクルであることを明らかにした。
【００５２】
しかしながら、いくつもの異なる油性ビヒクルが使用し得て、それらが依然として本明細書記載の有利な結果をもたらす必要条件を提供することが理解されるであろう。
【００５３】
当業者は、過度の実験を行うことなく他の油性ビヒクルが、オレイン酸エチル、中鎖脂肪酸トリグリセリド、トリアセチンまたは少なくとも二の油性ビヒクルの組み合せの代わりとして使用され得ることを明らかに認識し得るであろう。
【００５４】
使用に適当と考えられるビヒクルの他の例には、大豆油、棉実油、トウモロコシ油、ひまわり油、落花生油、ゴマ油およびパラフィン油が含まれる。他の油性ビヒクルも、本発明の範囲内とみなされる。
【００５５】
該組成物中のＰＮＴ濃度は、好ましくは１５％〜５５％（ｗ／ｖ）の間である。
【００５６】
該組成物中のＰＮＴ濃度は、最も好ましくは２０％ないし３５％（ｗ／ｖ）の間である。
【００５７】
発明者らは、該組成物中のこれらの好ましいＰＮＴ含量が、一定の投与量において動物に対し有効剤約５ｇを提供するために十分であり得ることを特定した。以前の研究において、このＰＮＴ含量は、Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）と同様の治療効果を提供すると特定された。
【００５８】
ＰＮＴの粒径ｄ５０（メディアン径）は、好ましくは１〜１００ミクロンの間である。
【００５９】
ＰＮＴの粒径ｄ５０は、最も好ましくは９５％が５０ミクロン未満で８〜３０ミクロンの間である。
【００６０】
これは、現在利用可能なＰｅｎｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）製剤中のＰＮＴの概算の粒径である。この特徴は、該組成物の生物学的利用能を提供または改善することを助長するために重要である。
【００６１】
特に好ましい実施形態において組成物は、固結を防止する少なくとも一の賦形剤を含む。
【００６２】
驚いたことに、特定の界面活性剤等のさらなる賦形剤の含有は、ＰＮＴの非水性懸濁液の物理的安定性を劇的に改善し得る。例えばポリソルベート８０は、好ましい実施形態において特に効果を奏する。
【００６３】
懸濁液は、典型的にコロイド状二酸化ケイ素またはステアリン酸アルミニウム等の標準的な固結防止剤または増粘剤を添加することによって物理的に安定化される。コロイド状二酸化ケイ素は、非経口的に投与されてはならない一方で（医薬品添加物ハンドブック）、ステアリン酸アルミニウムは懸濁液の粘度を高め、そのことがビヒクルからの薬剤放出を遅らせる。これらの作用剤は、ＰＮＴの懸濁液を物理的に安定化するための実際的な解決を実現しない。
【００６４】
トリアセチンは、ＰＮＴの懸濁液の物理的安定性を劇的に改善し、同時に満足できる化学的安定性も実現するビヒクルであることが見出だされた。トリアセチンが部分的に水に可溶であり、（しかし一方いまだ油性ビヒクルと考えられている）それは有効剤の加水分解をもたらすと予想されるということを考えると、これは驚くことである。
【００６５】
これに反して水やプロピレングリコール等の非油性ビヒクルは、ＰＮＴの懸濁液の良好な物理的安定性を実現するが、しかし当該ＰＮＴの懸濁液は、数日（例えば水性基剤のＭａｍｙｚｉｎ）またはプロピレングリコールについては２月未満だけ化学的に安定である。さらにこれは、許容可能なシェルフライフを有するすぐに使えるＰＮＴ組成物に対する実際的な解決を実現しない。
【００６６】
驚くべきことにまた、特定の賦形剤と組み合わせたオレイン酸エチルまたは中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油性ビヒクルは、化学的安定性を損なうことなくＰＮＴの懸濁液の物理的安定性を改善することも見出だされた。
【００６７】
親水新油バランス（ＨＬＢ）値は、界面活性剤の溶解性の指標である。ＨＬＢ値が低ければ低いほど、界面活性剤はそれだけ脂溶性または油溶性である。ＨＬＢ値が高ければ高いほど、界面活性剤はそれだけ水溶性または親水性である。ＨＬＢ値は非イオン性界面活性剤に対してのみ用いられる。
【００６８】
油性ビヒクルとしてトリアセチンを使用しない（例えば、代わりにオレイン酸エチルを使用する）製剤においては、固結（大量の粒子の塊）を防止するために乳化剤および界面活性剤等の表面活性剤が必須である。
【００６９】
相対的に低い４．３というＨＬＢ値を有するスパン８０（モノオレイン酸ソルビタン）は、油性ビヒクルに可溶であるが、しかしＰＮＴの懸濁液の物理的安定性をほとんど改善しなかった。相対的に高い１５．０というＨＬＢ値を有するツイン８０（ポリソルベート８０）は、油性ビヒクルに実際上不溶であり、しかもＰＮＴの懸濁液の物理的安定性を顕著に改善した。油性ビヒクル中で不溶性の界面活性剤オレイン酸ＰＥＧ１２（ＨＬＢ１３．７）もまた、物理的安定性を改善した。
【００７０】
驚いたことに、特定の種類のレシチンはＰＮＴの懸濁液の物理的安定性を劇的に改善し得るが、一方の種類のレシチンは改善しないことが見出だされた。例えば、油性ビヒクル中に実際上不溶性（室温下）の水素添加大豆レシチンは、ＰＮＴの懸濁液の物理的安定性に好影響をもたらすが、しかし油性ビヒクル中に可溶化された大豆レシチンはもたらさない。
【００７１】
中鎖脂肪酸トリグリセリドおよび水素添加大豆レシチンから成る油性ビヒクルへのスパン８０の添加は、ＰＮＴの懸濁液の物理的安定性に悪影響をもたらさず、ＰＮＴの生物学的利用能を増加させ得る。
【００７２】
しかしながら、いくつかの異なる界面活性剤は、上記の界面活性剤に代替し得て、さらに、本明細書記載の有利な結果をもたらす化学的安定性を損なうことなく、物理的に安定なＰＮＴの懸濁液を提供することが理解されるだろう。当業者は、ＰＮＴの懸濁液を安定化するための任意の特定の界面活性剤を容易に確かめることができるであろう。
【００７３】
さらに、界面活性剤の包含は組成物の有益な安定性にも短いＷＨＰにも有害な影響を与えなかった。
【００７４】
予想および油性ビヒクルからの薬剤放出の典型的な特性に反して、本発明の油性ビヒクルからのＰＮＴ放出は、対照の水性基剤の製剤と同等にまたはそれ以上に急速であり得ることが見出された。
【００７５】
油性ビヒクルからのこの急速な放出特性は、それがＰＮＴの急速な吸収を可能とし、それ故に急速な治療効果を提供するので、重要であり得る。
【００７６】
非トリアセチン基剤の製剤に関して界面活性剤は、好ましくは約７〜１６という親水新油バランス（ＨＬＢ）を有する化合物より選択される。
【００７７】
界面活性剤は、より好ましくは１２以上のＨＬＢを有する。
【００７８】
油性ビヒクルとしてのトリアセチンを有する好ましい実施形態において、界面活性剤は水素添加大豆レシチンである。レシチンはイオン成分を含むので、ＨＬＢ系は適切には適用され得ないことに留意すべきである。
【００７９】
この界面活性剤は、投与後の油性基剤からのＰＮＴの放出を実質的に改善することが明らかにされた（最良の形態セクションの実施例３を参照されたい）。本明細書で例示した結果を与えられれば当業者は、例えば７〜１６のＨＬＢ範囲内にある水素添加大豆レシチンと類似する界面活性剤（ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  ｏｒ  ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ）もまた、本組成物と類似する有益な効果を提供するであろうことを予想し得るであろう。
【００８０】
しかしながらツイン８０は、ビヒクルとしてトリアセチンを有するときに顕著に良い結果を示した。それは固結防止化合物として良く作用し、その上増粘特性を有さない。
【００８１】
好ましい実施形態において、少なくとも一の保存料が含まれる。例えば、メチルパラベンおよびプロピルパラベンまたはベンジルアルコールが保存料として使用し得る。
【００８２】
ベンジルアルコールは、トリアセチンと良く混合し、油性ビヒクル中でその活性を保持し、同様に注射に適しているので、トリアセチンを含む製剤について好ましい。
【００８３】
製品の有用性にとって保存料は、すぐに使える組成物が何度も使用されることを可能にするので重要である。容器から一用量を取り出した後の、本発明製品の安定性および無菌状態を試験するために研究を行った：
この研究において、１００ｍＬの透明なＰＥＴバイアルに充填され室温に保存されたペネタマート懸濁液（好ましい薬剤処方に準拠）は、１６Ｇの皮下注射針を備えた１０ｍＬの使い捨ての滅菌注射器を使用して、四週間の各週ごとに口を開けた。そのたびごとにサンプルの適当な量を取り出し、２８日後に物理的、化学的および微生物学的特性について残りのサンプルを分析した。その結果は、ペネタマート懸濁液が室温で２８日の期間にわたり頻回の口開け後に物理的および化学的に安定なままであることを示す。
【００８４】
さらにサンプルの無菌状態は、実施した２８日の安定性試験期間後に、頻回の口開けによっては損なわれなかった。
【００８５】
治療方法
本発明の他の態様によれば、微生物感染症の治療または予防用の実質的に本明細書に記載された組成物による動物の治療方法が提供され、ここで該方法には必要とする動物への該組成物の筋肉内または皮下注射が含まれる。
【００８６】
該微生物感染症は、好ましくは前臨床または臨床乳房炎である。
【００８７】
該治療方法には、好ましくは約三日間繰り返される一日あたりＰＮＴ５ｇという投与計画が含まれる。
【００８８】
代わりの投与計画には、最初の日の最初の投与としてＰＮＴ１０ｇの送達、それに続く二日目のさらなるＰＮＴ５ｇの送達が含まれる。このような投与は、現在、Ｐｅｎｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）に勧められているものと同様である。
【００８９】
本発明の他の態様によれば、動物の微生物感染症を治療または予防するための、実質的に本明細書記載の組成物の製造における使用が提供される。
【００９０】
製造方法
本発明のさらなる態様によれば；
ａ）均質な油の混合物を形成するために（ｉ）容器中に油を供給するか、または（ｉｉ）容器中で油と界面活性剤を混合するかによって、油性ビヒクルを調製する段階；
ｂ）油性ビヒクル中に有効剤を分散させる段階、
を含む、実質的に上述した組成物の製造方法が提供される。
【００９１】
段階ａ）において、少なくとも一の保存料が油性ビヒクルに添加されてもよい。段階ａ）の油性ビヒクルは、濾過によって滅菌される。
【００９２】
段階ｂ）では、好ましくは高せん断分散装置を利用する。
【００９３】
該組成物の好ましい低粘度というさらなる利点は、製造過程にとって有益である。
【００９４】
なおまた、該低粘度は、該組成物の製造に続くバイアルまたは注射器等の容器への容易な充填を可能とする。
【００９５】
有効剤は、好ましくは微粉化される。微粉化された有効剤の使用は、該組成物内での固形物の急速な沈降を防止するのに役立ち得る。
【図面の簡単な説明】
【００９６】
本発明のさらなる態様は、例としてのみおよび添付の図と関連して与えられる以下に続く記載から明らかになるであろう：
【図１】Ｍａｍｙｚｉｎ筋肉内投与後の血漿および乳中ベンジルペニシリン平均濃度；
【図２】Ｅｄｗａｒｄｓ１９６５年によるＰＮＴの筋肉内投与後の乳中ベンジルペニシリン濃度；
【図３】種々のＰＮＴ組成物の筋肉内投与後の乳中ベンジルペニシリン濃度；
【図４】種々のＰＮＴ組成物の筋肉内投与後の血漿中ベンジルペニシリン濃度；
【図５】Ｍａｍｙｚｉｎおよび組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｄの筋肉内投与後の乳中ベンジルペニシリン濃度；
【図６】組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｅ、‐ｆおよび−ｇの筋肉内投与後の乳中抑制物質濃度；
【図７】組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｆおよび‐ｈの筋肉内投与後の乳中抑制物質濃度；
【図８】組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｉおよび‐ｊの筋肉内投与後の乳中抑制物質濃度；
【図９】Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔおよび組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｅおよび‐ｋの筋肉内投与後の乳中ベンジルペニシリン濃度；
【図１０】組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｅの種々の投与計画から成る筋肉内投与後の乳中ベンジルペニシリン濃度；
【図１１】Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔおよび組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｅ、‐ｋの筋肉内投与後の血漿中ベンジルペニシリン濃度；
【図１２】Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔとの関連での組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｅおよび‐ｋの筋肉内投与後のベンジルペニシリンの相対的生物学的利用能；
【図１３】Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔとの関連での組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｌ、‐ｄ、‐ａおよびｂの筋肉内投与後のベンジルペニシリンの相対的生物学的利用能；
【図１４】安定性試験の間の組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｌ、‐ｄおよび‐ｎからのＰＮＴの回収率；
【図１５】安定性試験の間の組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｏおよび‐ｐからのＰＮＴの回収率；
【図１６】実施例６由来の乳中のベンジルペニシリンの減衰  発明を実施するための最良の形態  本発明を例示するいくつかの製剤を以下に示す。
【００９７】
［実施例１］
本発明による例示製剤であり、実施例１中のパーセンテージは％（ｗ／ｗ）である。
【表１】
2015522608.tif 000003
【表２】
2015522608.tif 000004
【表３】
2015522608.tif 000005
【表４】
2015522608.tif 000006
【表５】
2015522608.tif 000007
【表６】
2015522608.tif 000008
【表７】
2015522608.tif 000009
【表８】
2015522608.tif 000010
【表９】
2015522608.tif 000011
【表１０】
2015522608.tif 000012
【表１０】
2015522608.tif 000013
【表１１】
2015522608.tif 000014
【表１２】
2015522608.tif 000015
【表１３】
2015522608.tif 000016
【表１４】
2015522608.tif 000017
【表１５】
2015522608.tif 000018
【表１６】
2015522608.tif 000019
【表１７】
2015522608.tif 000020
【００９８】
［実施例２］
短い休薬期間の例示
驚いたことに、組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ａおよび‐ｂの粘度を制御することによって注射部位での組成物からの薬剤放出は、６０時間と同等もしくは６０時間より短い、または規制当局から要請されている信頼区間を考慮すれば７２時間までの、乳中におけるＷＨＰを達成するために十分なほど速いことが図３に示す通り見出だされた。
【００９９】
両組成物は、ＰＮＴ１０ｇの投与として与えた。ＷＨＰ（休薬期間）は、濃度曲線がＭＲＬ（最大残留基準値）線に交差し、その次にくる１２の倍数の時と本明細書では定義する。例えば、算出された５２時間というＷＨＰは、６０時間という登録したＷＨＰを与えるであろう。これはまた、世界のいくつかの登録認定機関がＷＨＰの決定に対して信頼区間を考慮することを要求することをも含めて考えている。これらの結果は、５ＭｉｏＩＵ（ＰＮＴ５ｇと等価）の油性基剤の製剤に関する図２に示す、Ｅｄｗａｒｄｓ，Ｓ．Ｊ．（１９６４）、Ｔｈｅ  Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  Ｒｅｃｏｒｄ，Ｖｏｌ．７８，Ｎｏ．１７，５８３‐５のデータと、図３に示される結果を比較するならば特に驚くべきことである。
【０１００】
Ｅｄｗａｒｄｓのデータは、たった半分の投与量（ＰＮＴ５ｇ）について、８４時間より長いＷＨＰを暗示するであろう。Ｅｄｗａｒｄｓにより用いられた油性ビヒクルの組成物は、公開文献において開示されなかったが、しかしＥｄｗａｒｄｓの発見は、有効剤の放出はより遅くなると予想されるという、油性基剤ビヒクルに関する一般的な知識と一致している。
【０１０１】
ＰＮＴの吸収速度は、泌乳牛における乳房炎の治療にとって極めて重要な要素である。注射剤としての油性基剤の組成物は、一般的に緩効性の投薬形態とみなされている。一般的に注射用組成物の吸収速度は、親水性の薬剤を含む水溶液については速く、親油性の薬剤を含む油性溶液については遅い。油性懸濁液の薬剤の吸収速度の予測は、通常薬剤の特性に基づいている。
【０１０２】
ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ａおよび‐ｂと比較してはるかに高い粘度を有する組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｃは、９６時間より長いＷＨＰを有する。表１に試験組成物の粘度を記載する。図４は、ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｃがＰＮＴ１０ｇ投与後に図４中の全て他の組成物と比較してよりゆっくりと血液中に吸収され、しかもさらに、他の組成物と比較してより長いＷＨＰをもたらしながら、最終治療の３６時間後および４８時間後の血漿中のＢＰ濃度を高めたことを示す。
【表１８】
2015522608.tif 000021
【０１０３】
ＵＳ４，４４６，１４４において実施例５１ないし５３として開示されたＰＮＴ組成物もまた、１２‐ヒドロキシステアリンおよびモノステアリン酸アルミニウムの形態の相当量の増粘剤のために、同様の緩効性の放出および長い休薬期間を有すると考えられる。
【０１０４】
さらにＰＮＴ１０ｇの投与について、油性基剤の組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｄは、水性基剤のＭａｍｙｚｉｎ（登録商標）組成物（再構成後）とほとんど同等であることが、図５に示す通り見出だされた。油性基剤の製剤は一般的に緩効性の製剤であること、および特にＰＮＴの親油性に関して考慮すれば、これは驚くべきことである。
【０１０５】
また、界面活性剤濃度を増加することによりＷＨＰは、さらに短くし得ることも見出だされた。図７に示す通り、スパン８０を０．１５％含むＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｆと、スパン８０を１０％含むＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｈとの比較を行う。同様に図８は、ツイン８０を１．００％含むＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｌを、ツイン８０を１０％含むＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｊと比較する。界面活性剤の増加が休薬期間の短縮に対応することは明らかである。
【０１０６】
図９は、本発明の組成物についての、ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｅ、ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｋおよびＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）と比較しての三回の注射後の経時的な乳中のＢＰ濃度を示す。図に示すように、ＡＣＶＭ（農薬・動物用医薬品法）ガイドラインに従って算出された試験組成物のＷＨＰは（約４２〜４６時間）、現在市販されているＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）と同様である。驚いたことに、この短い休薬期間は、オレイン酸エチル基剤の組成物（ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｋ）にとって、任意の界面活性剤なしで可能であることが見出だされた。
【０１０７】
さらに驚いたことに、翌日のＰＮＴ５ｇを伴う１０ｇ、およびＰＮＴ５ｇ×３回の連日投与の投与計画について算出されたＷＨＰは、双方とも４８時間未満であり、それ故にニュージーランドＡＣＶＭガイドラインの算出法に従えば、図１０に示す通り４８時間のＷＨＰを有するであろうということが見出だされた。これは、ＰＮＴ１０ｇ＋５ｇの投与計画に従えば６０時間のＷＨＰを有する、水性懸濁液Ｍａｍｚｉｎ（登録商標）に対して驚くほどに有利である。
【０１０８】
［実施例３］
生物学的利用能の例示
図３は、種々の試験組成物、Ｍａｍｙｚｉｎ（登録商標）およびＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）についてのＰＮＴ１０ｇ投与後の乳中ＢＰ濃度を示す。再び、組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ａおよび‐ｂは、Ｍａｍｙｚｉｎ（登録商標）の放出特性と一致することが見て取られる。
【０１０９】
本明細書において生物学的同等性とは、双方に同じ投与量（相対的生物学的利用能）が与えられた対照製品（水性基剤のＰＮＴ組成物）と試験製品（油性基剤のＰＮＴ組成物）との間の曲線下面積の差異が２０％以下であるときと定義される（生物学的同等性＝１は；０．９から１．１までを限定する）（商標を付した製品の治療学的同等性に関するＡＣＶＭ登録基準およびガイドライン）。
【０１１０】
図４は、組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ａ、‐ｂおよび‐ｃについてのＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）と比較しての、ＰＮＴ１０ｇ投与後の血漿中のＢＰ濃度を示す。再び、ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ａおよび‐ｂは、Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）の放出特性と一致することが見て取られる。
【０１１１】
血漿中ＢＰについての相対的生物学的利用能の結果を表２に示す。条件を満たす組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ａおよびｂは、上で定義した生物学的利用能と生物学的に同等であるかまたはより高い生物学的利用能であるが、他方では高粘度製剤のＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｃは生物学的同等性を示さない。
【表１９】
2015522608.tif 000022
【０１１２】
Ｅｄｗａｒｄｓにより研究された油性基剤のＰＮＴ組成物のＡＵＣ２４時間は、等価の投与量において水性基剤のＰＮＴ組成物よりも表３に示す通り顕著に低かった。粘稠な組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｃは、Ｅｄｗａｒｄｓにおける５  ＭｉｏＩＵの油性組成物に匹敵する。Ｅｄｗａｒｄｓのデータは乳中であり図４は血漿中のデータを示すが、血漿と乳のＢＰの間には曲線下面積に関して図１に示す通り正の相関があるので、相対的生物学的利用能を比較することはいまだに適切である。
【表２０】
2015522608.tif 000023
【０１１３】
さらに異なるＨＬＢ値を有する異なる界面活性剤（スパン８０およびツイン８０）またはその組み合せは、同様の乳中ＢＰ濃度をもたらすことが見出だされた（図６）。
【０１１４】
驚いたことに、ＰＮＴ５ｇの三連日投与の投与計画に使用されるとき、油性基剤組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｅおよび‐ｋは、水溶液基剤（再構成時）Ｐｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）とほぼ同じ乳中ＢＰ濃度を有することが、図９に示す通り見出だされた。
【０１１５】
さらに驚くべき結果は、油性基剤組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｅおよび‐ｋについてのＰＮＴ５ｇの三連日投与の最終治療後の血漿中平均最大ＢＰ濃度Ｃｍａｘが、図１１に示す通りＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔと比較してより大きかったことである。
【０１１６】
さらに、油性基剤組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｅおよび‐ｋの相対的生物学的利用能は、１．０より大きいことが見出されたが、これは図１２に示す通りこれらの油性基剤組成物が２４時間にわたりおよび全体的にＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）よりも高い生物学的利用能を有することを意味する。
【０１１７】
油性基剤組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｌ、‐ｄ、‐ａおよび‐ｂの、ＰＮＴ１０ｇ投与後の血漿中の相対的生物学的利用能を図１３に示す。結果は、該組成物がＰｅｎｅｔｈａｊｅｃｔ（登録商標）の少なくとも生物学的同等物であり、またはそれよりも高い生物学的利用能を有することを証明している。
【０１１８】
油性組成物の生物学的利用能が水性基剤のＰＮＴ組成物と比較して、より高いかまたは生物学的同等性を達成するために少なくとも生物学的利用能の下限値を満たすことを発見したのは非常に驚いたことであった。必然的にこれはまた図１に示す通り、血液と乳との間の正の相関により乳中ＢＰ濃度にも好影響を与える。これは、同じ生物学的利用能および効果を達成しながら、同時にＰＮＴ投与量の低減を可能とし得る。ＰＮＴ投与量の低減はまた、短い休薬期間をもたらし得る。
【０１１９】
［実施例４］
保存安定性の例示
ＰＮＴは、特許文献ＵＳ４，４４６，１４４においてなされた主張にもかかわらず、すべての非水性製剤においては化学的に安定でないことが見出だされた。図１４は、温度４０℃および湿度無規制の条件において、プロピレングリコール中のＰＮＴ（ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｌ）は、約二か月後に約３０％（ｗ／ｗ）だけ分解するが、一方でＰＮＴは、組成物ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｄおよび‐ｍ中で約六か月間化学的に安定であることを示す。
【０１２０】
さらに驚いたことに、ＰＮＴは水／水蒸気の存在下で加水分解し得るにもかかわらず、ＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｄおよび‐ｎは、４０℃およびＲＨ７５％において少なくとも三か月間化学的に安定であることが見出だされた。二か月後のＰＮＴ回収率を図４に示す。
【表２１】
2015522608.tif 000024
【０１２１】
ガラス容器が湿度に対する典型的に最良の保護を実現させる。ＰＮＴ粉末はＰＥＴバイアル中で安定である一方で、驚いたことに、液体中の拡散係数が粉末と比較して顕著に高いので、ＰＮＴ非水性懸濁液もまた安定である。
【０１２２】
本発明が、長期間にわたるＰＮＴの非常に良好な化学的保存安定性を示すことは明らかである。
【０１２３】
［実施例５］
物理的に安定な非水性ＰＮＴ懸濁液の例示
ウシ乳房炎の治療にとって、注射用組成物中のＰＮＴ濃度は２０％（ｗ／ｖ）以上になり得る。任意のさらなる賦形剤を含まないＰＮＴと油のこのような懸濁液は、制御された実験室条件下または保存中に物理的に安定に思える一方で、典型的な運送および取扱い下で懸濁液は、固結する性質を示し得る。沈降および／または固結特性に関する初期の試験は、サンプルを現実の輸送条件に置くことによって実施した。より制御され簡便な試験は、特設の撹拌装置を使用して実施した。制御された実験室内実験は、実世界の条件の結果と一致することが見出だされた。
【０１２４】
懸濁されたＰＮＴ粒子は、いくつかの組成物に関して、沈殿物を形成しながらバイアルまたは他の容器の底に沈降することが見出だされた。懸濁液にとって沈降し沈殿物を形成することはありふれたことであるとはいえ、実際の製品において有用であるためには、このような沈殿物は比較的に容易に再懸濁可能であるべきであり、固結は回避されるべきである。先行技術文献ＵＳ４，４４６，１４４は、植物油が最も高い安定度を実現することを示唆する。しかしながら、ゴマ油等の油性ビヒクルのＰＮＴの懸濁液、例えばＯＴ１１ＰＮＴＲＴＵ‐ｂ等は、実用的な時間枠内の振盪によって再懸濁可能ではない。
【０１２５】
固結した組成物を再懸濁するために要する時間は、３０分を超える場合もあった。組成物の沈降粒子を再懸濁するために要する時間は、好ましくは精々およそ数分である。再懸濁が必要であるならば、最も好ましくは１分未満であるべきである。
【０１２６】
従って、本発明の組成物中には固結防止剤を含むことが望ましい。
【０１２７】
長い休薬期間および乏しい生物学的利用能を回避するために本発明の組成物は、該組成物の粘度を実質的に増加させない固結防止剤を使用する。限定されるものではないが、このような非増粘性の固結防止剤には、溶媒、界面活性剤および乳化剤が含まれる。これらの作用剤は組成物の粘度に軽微な影響を与えるかもしれないが、しかし増粘剤になり得ると知られている固結防止剤であるコロイド状シリカおよびステアリン酸アルミニウムと比べれば大したことではない。
【０１２８】
ツイン８０（ポリソルベート８０）およびオレイン酸ＰＥＧ１２等の界面活性剤は、より容易に再分散されるより安定な懸濁液を提供することが見出だされた。
【０１２９】
驚いたことに、ＰＮＴ懸濁液の物理的安定性は、トリアセチン等の低水溶性であるビヒクルを使用することによって、保存および輸送の間に劇的に改善されることが見出だされた。一の試験においてＰＮＴ懸濁液ＯＴ１２ＰＮＴＲＴＵ‐ｑの組成物１００ｍＬは、１００ｍＬのＰＥＴバイアル中に入れた。
【０１３０】
第二の驚くべき例は、中鎖脂肪酸トリグリセリド基剤ビヒクルであるＯＴ１２ＰＮＴＲＴＵ‐ｒについてである。ＰＮＴ懸濁液への水素添加大豆レシチンの添加は、物理的安定性を顕著に改善した。
【０１３１】
好ましい組成物はＯＴ１２ＰＮＴＲＴＵ‐ｓであり、それは、安定性および再懸濁能にも有益であることが見出だされたベンジルアルコールと共に、ビヒクルとしてのおよび固結防止剤としてのトリアセチン、および固結防止剤としてのツイン８０を含む。
【０１３２】
［実施例６］
好ましい組成物は以下の通りである：
【表２２】
2015522608.tif 000025
【０１３３】
最終製剤においてペネタマートの含量（３３．３３％）は、水性基剤の先駆的な製品Ｍａｍｙｚｉｎ（登録商標）中のペネタマート濃度（再構成時）に一致するように選択される。ペネタマートはかなり高い投与量を必要とするので、該濃度は他の注射剤と比較して高いが、一方動物の一部位に注射され得る液体の実際的な最小量も存在する。個体のケーキの大きな塊は少量の塊よりも再懸濁することがより困難であるので、懸濁個体のこの高比率は固結の問題を悪化させる。
【０１３４】
ベンジルアルコールの含量は、保存料として使用されるときの標準的な量である。
【０１３５】
ポリソルベート８０およびｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ  Ｈ９０の含量は標準的な量であり、保存後の有効剤の再懸濁を支援するように機能する。トリアセチン単独で固結問題の大部分を打開するが、しかし分散および再懸濁はこれらの作用剤の添加によりさらに改善される（例えば、より速い再懸濁）。
【０１３６】
界面活性剤（ポリソルベート８０）はまた、トリアセチン担体が有効剤をより速く「湿らせる」のを助長してより速い分散を可能とするので、製造工程を改善する。界面活性剤がなければ有効剤は、初期に液体担体の上に浮かぶ傾向があり、しかも懸濁液として有効剤を分散するために多大な混合を必要とする。大量製造工程において、これは著しく不都合であろう。
【０１３７】
追加データ
最終製剤の安定性はまだ完了していないが、しかし室温でのシェルフライフは少なくとも１２月であると思われる。
【０１３８】
安定性試験：
【表２３】
2015522608.tif 000026
【０１３９】
安定性データ：
【表２４】
2015522608.tif 000027
【０１４０】
休薬期間
好ましい実施形態の休薬期間を測定するために研究、すなわち実施例６を実施した。該研究では２２頭の乳牛を使用し、それらに三日連続でペネタマート５ｇ（１５ｍＬ）を筋肉内注射した。最終の注射１２０時間後まで日に二回、全頭の乳牛より乳サンプルを採取した。搾乳１２、３６、４８、６０および７２時間由来の乳は、残留ペニシリンについて分析した。図１６に示された結果は、乳中残留ベンジルペニシリンが最終の注射約４１時間後に、０．００４ｍｇ／ｋｇのＭＲＬ（最大残留基準値）よりも少なくなることを示す。これは、毎日二回の搾乳に基づけば、４８時間の休薬期間を提供するであろう。
【０１４１】
これは、水性再構成懸濁液である製品Ｍａｍｙｚｉｎ（登録商標）の休薬期間４８時間と同等である。
【０１４２】
生物学的同等性
実施例６のＭａｍｙｚｉｎ（登録商標）との生物学的同等性を判定するために研究を実施した。
【０１４３】
２０頭の未経産乳牛を使用して２×２の交差研究を実施した。すべての未経産牛に、ペネタマートヨウ化水素酸塩の筋肉内投与１５ｍｇ／ｋｇを、実施例６の製剤または「Ｍａｍｙｚｉｎ」として０日および１４日に投与した。１４日の休薬期間の後に、治療を逆転させた。血液は、治療前、それから各治療の１、２、３、４、５、６、９、１２、１８、２４および３６時間後に採取した。血液は遠心分離して、血漿サンプルは凍結し、それからベンジルペニシリン分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳアッセイ）のために研究室に発送した。アッセイの結果は、生物学的同等性を研究するため、薬物動態パラメータを算出するために使用した。経時的な血中薬物濃度の「曲線下面積」（ＡＵＣ）によれば、好ましい治療法はＭａｍｙｚｉｎ（登録商標）と生物学的に同等である。
【０１４４】
好ましい製造工程は以下の通りである：
製剤化プロセス
・トリアセチンの５６％を適当な大きさの製造容器に添加する
・ベンジルアルコールとポリソルベート８０を撹拌しながら添加する
・混合液を０．２μｍの滅菌フィルテーを通して滅菌タンクの中にろ過する
・約５５℃に加熱し、温度を点検しかつ温度を維持する
・Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ  Ｈ９０を添加し、懸濁して十分に均質化する。均質性を点検する
・ペネタマートヨウ化水素酸塩（微粉化、無菌）を添加し、懸濁して十分に均質化する。均質性を点検する
・懸濁液を約２５℃に冷却する。温度を点検する
・トリアセチンにより規定の容量にする
・均質な懸濁液に均質化し、均質性を点検する
この製剤処方およびプロセスは、少なくとも従来のＰＮＴ治療と同様に作用する、安定で固結しない注射用製品を製造した。
【０１４５】
該製品は、ＬＶ１スピンドル装着のブルックフィールド粘度計により、３０ｒｐｍ、２０℃で７７ｃｐｓの粘度を有する。密度は１．２２４ｇ／ｃｍ３である。
【０１４６】
本発明の態様は、例としてのみ記載されたものであり、添付の特許請求の範囲を逸脱することなく、修正と追加がそれに対して成され得ることが理解されるであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【手続補正書】
【提出日】平成26年1月31日(2014.1.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ペネタマート（ＰＮＴ）またはその薬剤的同等製剤；少なくとも一つの油性ビヒクル；および固結防止剤を含む、筋肉内または皮下注射用のすぐに使える（ＲＴＵ）組成物。
【請求項２】
該固結防止剤が乳化剤または分散剤を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
該固結防止剤が界面活性剤を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
該界面活性剤が７〜１６の親水親油バランス（ＨＬＢ）を有する化合物より選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
該界面活性剤がポリソルベート８０である、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
乳化剤または分散剤が非脂溶性レシチンである、請求項２ないし５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
該非脂溶性レシチンがｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ  Ｈ９０である、請求項６記載の組成物。
【請求項８】
該固形防止剤がトリアセチンを含む、請求項１ないし７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
該固結防止剤が非増粘性である、請求項１ないし８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
粘度が、温度２０℃およびせん断速度１／ｓでカップシリンダー法により測定された３０００ｍＰａｓ未満である、請求項１ないし９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
該ペネタマート（ＰＮＴ）またはその製剤が該組成物の５５％（ｗ／ｖ）以下を構成する、請求項１ないし１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
ペネタマート（ＰＮＴ）の濃度が１５〜５５％（ｗ／ｖ）である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
該組成物中のペネタマート濃度が２０〜３５％（ｗ／ｖ）である、請求項１２記載の組成物。
【請求項１４】
該ビヒクル油が低粘度である、請求項１ないし１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
該組成物が液体形態である、請求項１ないし１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
該ペネタマート（ＰＮＴ）の粒径ｄ５０が８〜３０ミクロンである、請求項１ないし１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
保存料を含む請求項１ないし１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
該保存料がベンジルアルコールである、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
請求項１ないし１８のいずれか一項に記載の組成物を含む注射器。
【請求項２０】
ペネタマート５ｇを含む請求項１９に記載の注射器。
【請求項２１】
微生物感染症の治療または予防のために、請求項１ないし１８のいずれか一項に記載の組成物により動物を治療する方法であって、それを必要とする動物に対する該組成物の筋肉内または皮下注射を含む方法。
【請求項２２】
該微生物感染症が前臨床または臨床乳房炎である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
約三日間繰り返される一日当たりペネタマート５ｇの投与計画を含む、請求項２１または２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
ａ）均質な油混合液を形成するために容器中で油と固結防止剤を混合することによって油性ビヒクルを調製する段階：および
ｂ）有効剤を油性ビヒクルに分散する段階
を含む、請求項１ないし１８のいずれか一項に記載の組成物の製造方法。
【請求項２５】
段階ａ）において保存料が該油性ビヒクルに添加される、請求項２４に記載の製造方法。
【請求項２６】
段階ｂ）において高せん断分散装置が使用される、請求項２４または２５に記載の製造方法。
【請求項２７】
添付の実施例および図に関連して本明細書の最良の形態セクションにおいて実質的に記載される、および添付の実施例および図によって説明される組成物。
【請求項２８】
添付の実施例および図に関連して本明細書の最良の形態セクションにおいて実質的に記載される、および添付の実施例および図によって説明される注射器。
【請求項２９】
添付の実施例および図に関連して本明細書の最良の形態セクションにおいて実質的に記載される、および添付の実施例および図によって説明される動物の治療方法。
【請求項３０】
添付の実施例および図に関連して本明細書の最良の形態セクションにおいて実質的に記載される、および添付の実施例および図によって説明される製造方法。
【国際調査報告】
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