(57)【要約】  本発明の開示は、一般的にアルファへリックス模倣構造、特に、βカテニンの阻害剤であるアルファへリックス模倣構造に関する。本発明の開示は、また、びまん型全身性硬化症及び限局型全身性硬化症を含む強皮症の治療における適用、並びにかかるアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤を含む医薬組成物に関する。【選択図】図１
2015536300.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
強皮症の治療のための、下記式（Ｉ）：
【化１】
2015536300.tif 000005
（式中、: 
Ａは−ＣＨＲ７−
（式中、Ｒ７は、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリールアルキル、置換されていてもよいシクロアルキルアルキル、置換されていてもよいヘテロシクロアルキルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいシクロアルキル又は置換されていてもよいヘテロシクロアルキルである）であり；
Ｇは−ＮＨ−、−ＮＲ６−、−Ｏ−、−ＣＨＲ６−又は−Ｃ（Ｒ６）２−
（式中、Ｒ６は、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニルおよび置換されていてもよいアルキニルから独立して選択される）であり；
Ｒ１は、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリールアルキル、置換されていてもよいシクロアルキルアルキル又は置換されていてもよいヘテロシクロアルキルアルキルであり；
Ｒ２は−Ｗ２１−Ｗ２２−Ｒｂ−Ｒ２０
（式中、Ｗ２１は−（ＣＯ）−又は−（ＳＯ２）−であり；Ｗ２２は、結合、−Ｏ−、−ＮＨ−、又は置換されていてもよい低級アルキレンであり；Ｒｂは結合又は置換されていてもよい低級アルキレンであり；且つＲ２０は、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル、置換されていてもよいアルキニル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいシクロアルキル又は置換されていてもよいヘテロシクロアルキルである）であり；且つ
Ｒ３は、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいアルケニル又は置換されていてもよいアルキニルである）
を有するアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤化合物又はその製薬上許容し得る塩。
【請求項２】
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソヘキサヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］オキサジアジン−１（６Ｈ）−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（（２−アミノベンゾ［ｄ］チアゾール−４−イル）メチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、 
４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、
ナトリウム４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート、
ナトリウム４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（ナフタレン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート、 
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−Ｎ−（（Ｓ）−１−フェニルエチル）−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシ−２，６−ジメチルベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルメチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（ベンゾ［ｃ］［１，２，５］チアジアゾール−４−イルメチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−８−（イソキノリン−５−イルメチル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−８−（（５−クロロチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−３−イル）メチル）−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノキサリン−５−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、および
（６Ｓ，９Ｓ）−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
から選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
４−（（（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、および
（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
から選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
請求項１、２又は３に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項５】
有効量の請求項１、２又は３に記載の化合物をそれを必要とする患者に投与することを含む、強皮症の治療方法。
【請求項６】
強皮症がびまん型全身性硬化症である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
強皮症が限局型全身性硬化症である、請求項５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、2012年10月19日に提出された米国仮出願61/716,080の優先権を主張し、この仮出願は、その全体が本明細書中に組み込まれる。
【０００２】
開示の背景
Wnt/βカテニンシグナルは、ヒト生物学の多くの面におけるその重要な役割の先駆けとして浮上している。このシグナル経路は、胚発生や器官形成、組織及び器官のホメオスタシスの維持、また、ガン、及び炎症性障害や線維症等の他のヒトの障害（disorder）の病態に関与する。また、分化、増殖、生存、酸化的ストレス、形態形成等の生理学的事象においても不可欠である。しかしながら、この経路の異常活性化は、多数の病態においても顕著である。
【０００３】
強皮症/全身性硬化症(SSc)は、線維症(または硬化症)、血管変化症、及び自己抗体を特徴とする慢性全身性自己免疫疾患(主として皮膚)である。２つの主な形態がある。限局型全身性硬化症/強皮症は、手、腕及び顔に主に作用する皮膚症状に関与する。びまん型全身性硬化症/強皮症は、急速に進行し、皮膚の広い面積、及び1以上の内臓器官、しばしば腎臓、食道、心臓及び肺に作用する。
【０００４】
Wnt-10b発現は、全身性硬化症の患者からの病変皮膚生検標本や、ブレオマイシン誘導性線維症のマウスから得られた病変皮膚生検標本において増加した。Wnt-10b発現トランスジェニックマウスは、真皮線維症に伴う皮下脂肪組織の進行性消失、コラーゲン沈着の増大、線維芽細胞の活性化、及び筋繊維芽細胞の沈着を示した。Wnt活性は、これらの生検標本におけるコラーゲン遺伝子発現と相関性があった。トランスジェニックマウスから移植された皮膚繊維芽細胞は、持続性Wnt/βカテニンシグナルを示し、また、コラーゲン及びα-平滑筋アクチン遺伝子発現を上昇させた。正常繊維芽細胞及び前脂肪細胞のWnt-10b感染は、脂質生成の阻害と、形質転換成長因子β(TGFβ)非依存性の線維化遺伝子発現の上方制御とをもたらした。
【０００５】
SScは、皮膚におけるWnt-10b発現の増大に関連付けられる。異所性Wnt-10bは、トランスジェニックマウスにおいて皮下脂肪組織の喪失及びTGFβ非依存性真皮線維症を引き起こす。これらの発見は、Wnt-10bが、脂質生成を抑制すると同時に、線維形成転写プログラムを誘導することにより、間葉細胞の筋繊維芽細胞への分化をオンすることを示唆する。Wnt-10bトランスジェニックマウスは、線維症環境におけるWntシグナルを調査するための新規の動物モデルを示す (Wei J et al., Arthritis Rheum. 63(6): 1707-17, 2011)。
【発明の概要】
【０００６】
本発明の開示の簡潔な概要
本発明の開示は、βカテニン阻害剤を投与することにより限局型及びびまん型全身性硬化症を含む強皮症を治療する方法を提示する。本発明の開示はまた、アルファヘリックス模倣βカテニン阻害剤化合物、及びβカテニン阻害剤を含む組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】以下のように採点される真皮線維症スコアの概要：0=有意な変化なし；1=かろうじて検出可能な重症度からわずかな重症度まで；2=軽い重症度；3=並の重症度；4=著しい重症度。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
開示の詳細な説明
近頃、生理活性タンパク質又はペプチドにおいて発見された二次構造の折れ曲がり（reverse-turns）を模倣する非ペプチド化合物が開発されている。例えば、米国特許番号５，４４０，０１３および公開ＰＣＴ出願番号ＷＯ９４／０３４９４、ＷＯ０１／００２１０Ａ１、およびＷＯ０１／１６１３５Ａ２は、それぞれ折れ曲がりの三次元的構造を模倣する、立体配座的に制約された非ペプチド化合物を開示する。また、 米国特許番号５，９２９，２３７およびその一部継続出願米国特許番号６，０１３，４５８は、生理活性ペプチドおよびタンパク質の二次構造の折れ曲がり部位を模倣する、立体配座的に制約された化合物を開示する。ＷＯ２００７／０５６５１３およびＷＯ２００７／０５６５９３では、折れ曲がり模倣薬に関し、生理活性ペプチドおよびタンパク質の二次構造のアルファへリックス部位を模倣する、立体配座的に制約された化合物が開示されている。
【０００９】
本発明の開示は、新規化合物、医薬組成物及び強皮症の治療方法を提供する。本発明者らは、βカテニンシグナルを抑制することが、限局型及びびまん型全身性硬化症の両方の治療に対する効果的なアプローチであることを見つけ出した。
【００１０】
本発明のアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤の構造および化合物が、ＷＯ２０１０／０４４４８５、ＷＯ２０１０／１２８６８５、ＷＯ２００９／１４８１９２、ＵＳ２０１１／００９２４５９において開示され、それぞれその全体が参照されることにより本明細書中に組み込まれる。これらの化合物は、現在、強皮症の治療において有用であることが分かっている。
【００１１】
本発明のアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤の好ましい構造は以下の式（Ｉ）：
【００１２】
【化１】
2015536300.tif 000003
【００１３】
（式中、Ａは−ＣＨＲ７−
（式中、
Ｒ７は、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロアリールアルキル、置換されていてもよいシクロアルキルアルキル又は置換されていてもよいヘテロシクロアルキルアルキルである）であり；
Ｇは、−ＮＨ−、−ＮＲ６−、又は−Ｏ−
（式中、
Ｒ６は、低級アルキル又は低級アルケニルである）であり；
Ｒ１は、−Ｒａ−Ｒ１０；
（式中、
Ｒａは、置換されていてもよい低級アルキレンであり、かつ 
Ｒ１０は、置換されていてもよい二環式縮合アリール又は置換されていてもよい二環式縮合ヘテロアリールであり；
Ｒ２は、−（ＣＯ）−ＮＨ−Ｒｂ−Ｒ２０
（式中、 
Ｒｂは、結合又は置換されていてもよい低級アルキレンであり；かつ
Ｒ２０は、置換されていてもよいアリール又は置換されていてもよいヘテロアリールである）であり；
Ｒ３は、Ｃ１−４アルキルである）を有する。
これらの化合物は、強皮症の予防及び/又は治療に特に有用である。
【００１４】
本発明のアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤のさらに好ましい構造は、上記式（Ｉ）において以下の置換基：
Ａは−ＣＨＲ７−、
（式中、
Ｒ７は、ヒドロキシル又はＣ１−４アルキルで置換されていてもよいアリ
ールアルキルである）であり；
Ｇは、−ＮＨ−、−ＮＲ６−、又は−Ｏ−
（式中、
Ｒ６はＣ１−４アルキル又はＣ１−４アルケニルである）であり；
Ｒ１は、−Ｒａ−Ｒ１０；
（式中、
Ｒａは、Ｃ１−４アルキレンであり、かつ
Ｒ１０は、ハロゲン又はアミノ基で置換されていてもよい、
二環式縮合アリール又は二環式縮合ヘテロアリールである）であり；
Ｒ２は、−（ＣＯ）−ＮＨ−Ｒｂ−Ｒ２０
（式中、
Ｒｂは、結合又はＣ１−４アルキレンであり；且つ
Ｒ２０は、アリール又はヘテロアリールである）であり；且つ
Ｒ３は、Ｃ１−４アルキルである）
を有する。
これらの化合物は、強皮症の予防及び/又は治療に特に有用である。
【００１５】
本発明の最も好ましいアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤は次のとおりである: 
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソヘキサヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］オキサジアジン−１（６Ｈ）−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（（２−アミノベンゾ［ｄ］チアゾール−４−イル）メチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、
４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−８−（ナフタレン−１−イルメチル）−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、
ナトリウム４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート、 
ナトリウム４−（（（６Ｓ，９Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（ナフタレン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−Ｎ−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−２−アリル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−９−メチル−４，７−ジオキソ−Ｎ−（（Ｓ）−１−フェニルエチル）−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、 
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシ−２，６−ジメチルベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルメチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−８−（ベンゾ［ｃ］［１，２，５］チアジアゾール−４−イルメチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−８−（イソキノリン−５−イルメチル）−２，９−ジメチル−４、７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−８−（（５−クロロチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−３−イル）メチル）−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソオクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、
（６Ｓ，９Ｓ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノキサリン−５−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド、および
（６Ｓ，９Ｓ）−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）−Ｎ−（チオフェン−２−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミド。
これらの化合物は、強皮症の予防及び/又は治療に特に有用である。
【００１６】
最も好ましい実施態様における化合物は、： 
４−（（（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−１−（ベンジルカルバモイル）−２，９−ジメチル−４，７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルジヒドロゲンホスフェート、又は
（６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−２，９−ジメチル−４、７−ジオキソ−８−（キノリン−８−イルメチル）オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボキサミドである。
これらの化合物は、強皮症の予防及び/又は治療に特に有用である。
【００１７】
拘束されることを望むものではないが、上記疾患の治療におけるこれらの化合物の有用性は、部分的には、本化合物が、環状AMP応答エレメント結合タンパク質(CBP)を抑制することにより、TCF4/βカテニン転写経路を阻害し、ひいてはwnt経路シグナルを変更することができることに基づいており、このことが結果を改善することが分かっている。
【００１８】
「βカテニン阻害剤」は、βカテニン活性を減少又は抑制し得る物質である。βカテニン活性としては、核への転位、ＴＣＦ（Ｔ細胞因子）転写因子の結合、およびＴＣＦ転写因子誘導性のＴＣＦ標的遺伝子の転写の共活性化が挙げられる。「βカテニン阻害剤」はまた、CBP及びβカテニンの相互作用を妨げ得る。このようにして、βカテニン阻害剤は、1以上の下流シグナル事象を低減させることを含めて、CBP/βカテニンシグナル及びCBP/βカテニンシグナル経路活性を抑制又は減少させる。
【００１９】
本明細書中に開示されているのは、強皮症/全身性硬化症の治療のためのアルファヘリックス模倣βカテニン阻害剤化合物である。
【００２０】
疾病
本明細書中に記載されるように、「治療（treatment）」とは、治療される個人又は細胞の疾病の経過を変化させるための試みにおける臨床的介入（clinical intervention）をいい、臨床的な病状の経過の間に行われ得る。治療の治療的効果としては、疾病の再発の抑制、症状の緩和、直接的又は間接的な疾病の病理学的帰結（pathological consequences）を軽減すること、疾病進行の速度を減少させること、病態の改善（amelioration）もしくは緩和（palliation）、および寛解（remission）、又は予後を改善することが挙げられるがこれに限定されない。
【００２１】
本明細書中に使用されているように、「治療有効量」および「有効量」という用語は、強皮症の進行もしくは発症、又は１以上のその症状を抑制するという結果をもたらすために、別の治療の効果を増強もしくは改善するために、および／または強皮症の１以上の症状を改善するために十分な本発明の組成物の量に言及すべく、区別せずに使用される。強皮症を患う対象のために、好ましい治療上の有効量は、線維症、血管変化症及び/又は自己抗体を軽減させるために効果的な量である。
【００２２】
治療上の有効量が、疾病の進行を緩和し、改善し、安定化し、食い止め、もしくは遅らせ、又は異なる方法で疾病の病理学的帰結を軽減させるために、あるいは疾病の症状を軽減させるために十分な１回分以上の用量において患者へ投与され得る。改善又は軽減は、恒久的である必要はなく、少なくとも１時間、少なくとも１日、又は少なくとも１週間以上の範囲の期間にわたるものであってもよい。有効量は、概して医者によって個別的に決定され、当業者の技能の範囲内である。有効量を得るための適切な用量を決定するときには、いくつかの要因が、通常は考慮される。これらの要因としては、患者の年齢、性別および体重、治療すべき疾患、疾患の重症度、並びに投与ルート、剤形、処方計画および所望の結果が挙げられる。
【００２３】
本明細書中に使用されるように、「対象」及び「患者」という用語は、区別することなく用いられ、動物、好ましくは、非霊長類（例えば、牛、豚、馬、猫、犬、ラット等）および霊長類（例えば、サルおよびヒト）等の哺乳動物、最も好ましくはヒトのことをいう。
【００２４】
本明細書中に記載されたアルファヘリックス模倣βカテニン阻害剤は、疾病を予防又は治療するのに有用である。特に本発明の開示は、強皮症の危険にさらされる（又はかかりやすい）対象を処置する、予防及び治療方法の両方を提供する。従って、本方法は、有効量のアルファヘリックス模倣βカテニン阻害剤をそれを必要とする対象に投与することによる、対象の強皮症の予防及び/又は治療を提供する。例えば、対象に、強皮症疾患の1以上の要因を改善するための取り組みにおいてアルファヘリックス模倣βカテニン阻害剤を投与し得る。
【００２５】
本明細書中に用いられるように、「強皮症」又は「全身性硬化症」は、血管変化症及び自己抗体が存在することに付随して起こる、皮膚又は内臓器官内の結合組織又は瘢痕組織の過度の沈着を特徴とする自己免疫疾患として定義される。強皮症における結合/瘢痕組織の沈着は、正常な健康の皮膚又は器官の結合組織レベルと比べて過剰である。この線維症は、しばしば壊死（necrosis）及び/又は炎症に付随して起こる。βカテニンシグナルは、コラーゲン等の細胞外マトリックスの過剰生産及び過剰沈着の誘導に関与する。
【００２６】
強皮症の原因は不明である。強皮症は、全ての器官の微小血管(細動脈)に作用する。最初に、細動脈の内皮細胞が平滑筋細胞とともにアポトーシスによって死に絶える。それらはコラーゲン及び他の線維状物質によって置き換えられる。炎症細胞、特にCD4+ヘルパーT細胞が細動脈に侵入し、更なる損傷を引き起こす。限局型全身性硬化症では、手、腕及び顔等の外表皮膚が主に影響を受ける。肺動脈高血圧は、3分の1弱の患者において起こり得、この形態の強皮症の最も深刻な合併症である。びまん型全身性硬化症では、皮膚や、腎臓、食道、心臓、及び肺等の内臓器官が影響を受ける。この形態の全身性硬化症は、障害をもたらし得る。両方の形態の疾病が致死的になり得る。
【００２７】
本発明はまた、βカテニン阻害剤化合物が併用療法において投与される方法を包含する。すなわち、該化合物は、強皮症の治療において有用な他の薬剤と併用して、ただし他の薬剤とは別に使用され得る。これらの併用法において化合物は、一般的に、他の薬剤と組み合わせて、体重1kg当たり1-100mgの1日投与量において日々投与されるだろう。他の薬剤は、一般的に治療上使用される量が投与されるだろう。しかしながら、具体的な投与計画は、有効な医学的判断を使用する医師によって決定されるだろう。
【００２８】
強皮症の治療とは、強皮症を患う対象を治療するための本明細書中に記載された化合物又は併用の投与をいう。強皮症の治療の一の結果は、過剰な結合組織の形成を軽減することである。強皮症の治療の別の結果は、炎症、自己抗体、及び免疫細胞の浸潤を軽減することである。肺線維症の治療の更に別の結果は、細動脈内皮細胞及び/又は平滑筋細胞のアポトーシス等の血管変化症を軽減することである。
【００２９】
本明細書中に記載されたアルファへリックス模倣βカテニン阻害剤は、本明細書中に記載された障害を治療又は予防することを目的とした、単独又は併用における対象への投与のための医薬組成物に組み込まれ得る。かかる組成物は、通常、活性薬剤および製薬上許容し得る担体を含む。本明細書中に使用されるように、「製薬上許容し得る担体」という用語としては、製薬上の投与に適用可能な、生理食塩水、溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延性剤等が挙げられる。また、追加の活性化合物も該組成物に組み込まれ得る。
【００３０】
本明細書中に記載された化合物の有効量を哺乳動物、特にヒトに提供するために、如何なる適切な投与ルートも用いられ得る。例えば、経口、直腸、局所、非経口、眼、肺領域、鼻等が用いられ得る。剤形は、錠剤、トローチ、分散剤（dispersions）、懸濁剤、溶液、カプセル、クリーム、軟膏、エアロゾル等が挙げられる。
【００３１】
使用される活性成分の有効量は、使用される特定の化合物、投与方法、治療される疾患および治療される疾患の重症度に応じて変化し得る。かかる量は、当業者によって容易に確認され得る。
【００３２】
本明細書中に記載された化合物について示される強皮症及び/又は他の疾病を治療又は抑制するときには、本明細書中に記載された化合物が動物体重１キログラム当たり約０．０１ミリグラム〜約１００ミリグラムの１日投与量で投与された場合、好ましくは、１日単回用量として、又は１日に２〜６回に分割した用量において、又は徐放性製剤において与えられた場合に、おおむね満足な結果を得る。大部分の大型哺乳動物には、毎日の合計投薬量は約１．０ミリグラム〜約１０００ミリグラムである。７０kgの成人の場合、毎日の合計投薬量は、概ね約１ミリグラム〜約５００ミリグラムだろう。特に強力な化合物では、成人のための用量が０．１ｍｇにまで減少し得る。いくつかの場合には、毎日の投薬量が１グラムにまで多くなり得る。投薬計画は、最適な治療効果を提供すべく、この範囲内又はこの範囲外においても調整され得る。
【００３３】
経口投与は、通常、錠剤又はカプセルを用いてなされるだろう。錠剤およびカプセルにおける用量の例は、０．１ｍｇ、０．２５ ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、および７５０ｍｇである。他の経口剤形も、同一又は同様の用量を有し得る。
【００３４】
また、本明細書中に記載された化合物および製薬上許容し得る担体を含む医薬組成物が、本明細書中に記載される。本明細書中に記載された医薬組成物は、製薬上許容し得る担体、および所望により他の治療成分とともに、活性成分として、本明細書中に記載された化合物又は製薬上許容され得る塩を含む。また、プロドラッグが投与される場合には、医薬組成物は、プロドラッグ、又はその製薬上許容し得る塩を含み得る。
【００３５】
如何なる既定の場合においても最も適切なルートは、治療される疾患の特性および重症度および活性成分の特性によって決まるが、組成物は、経口投与、直腸投与、局所投与、非経口投与（皮下用、筋肉内用、および静脈用を含む）、眼投与（眼科用）、肺領域投与（点鼻もしくはバッカル吸入（buccal inhalation））、又は点鼻投与に適し得る。それらは便宜上、単位剤形において提示され、薬学分野において周知の方法によって調製され得る。
【００３６】
実用的な用途において本明細書中に記載された化合物は、従来の医薬品配合技術に従って、密な混合物（intimate admixture）中の活性成分として製薬上の担体と混合され得る。担体は、例えば、経口又は非経口（静脈内を含む）等の投与のために望ましい製剤の形態に応じて、多岐にわたる形態をとり得る。経口用剤形としての組成物の調製では、如何なる通常の製薬上の溶剤（pharmaceutical media）も、使用し得、例えば、懸濁剤、エリキシル剤および溶液などの経口液体製剤の場合には、例えば、水、グリコール、油、アルコール類、香味料、保存料、着色剤等が使用し得、例えば、粉末、硬カプセルおよびソフトカプセル、並びに錠剤等の経口固形製剤の場合には、でんぷん、砂糖、微結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤等の担体が使用し得、液体製剤よりも、経口固形製剤が好ましい。
【００３７】
投与の容易さのため、固形の医薬担体が使用される場合には、錠剤およびカプセルが最も都合のよい経口の用量単位剤形に相当する。必要に応じて、錠剤は、標準的な水性（aqueous）又は非水性（nonaqueous）の技術でコーティングされ得る。かかる組成物および製剤は、少なくとも０．１パーセントの活性化合物を含む必要がある。これらの組成物中の活性化合物の割合は、言うまでもなく、変化し得、便宜上その単位の約２重量パーセント〜約６０重量パーセントであり得る。上記治療に有用な組成物中の活性化合物の量は、有効量を得るであろう量である。また、活性化合物は、例えば、液滴又は噴霧剤として鼻腔内に投与され得る。
【００３８】
錠剤、丸薬（pills）、カプセル等は、トラガントガム、アカシア、コーンスターチ、又はゼラチン等の結合剤と、第二リン酸カルシウム等のビヒクルと、コーンスターチ、馬鈴薯デンプン、アルギン酸等の崩壊剤（disintegrating agent）と、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤と、スクロース、ラクトース又はサッカリン等の甘味剤とを含み得る。用量単位剤形がカプセル剤の場合、上記類型の原料に加えて、脂肪油等の液体担体も含み得る。
【００３９】
コーティングとして、又は用量単位の物理的形状を修飾するべく、種々の他の原料が含まれ得る。例えば、錠剤は、シェラック、砂糖又はその両方でコーティングされ得る。シロップ剤又はエリキシル剤は、活性成分に加えて、甘味剤としてのスクロース、保存料としてのメチルパラベンおよびプロピルパラベン、色素、サクランボ又はオレンジフレーバー等の香料を含み得る。
【００４０】
経皮投与のために適用される製剤処方は、長期間、患者（recipient）の上皮と密接に接触させたままにすることを意図された個別のパッチ（patches）として提示され得る。例えば、活性成分は、Pharm. Res. 3(6):318 (1986)に一般的に記載されているように、イオントフォレシスによってパッチから送達され得る。
【００４１】
局所投与のために適用される製剤処方は、軟膏、クリーム、懸濁剤、ローション（lotion）、粉末、溶液、ペースト、ジェル（gel）、スプレー、エアロゾル、又はオイルとして調剤され得る。目、又は口や皮膚などの他の外部組織の治療のために、製剤は好ましくは局所軟膏又はクリームとして塗布される。軟膏内に製剤されるときには、活性成分は、パラフィン又は水混和性軟膏基剤のいずれかとともに用いられ得る。別の方法として、活性成分は、水中油型クリーム基剤又は油中水型基剤とともにクリーム内に調剤され得る。
【００４２】
また、本明細書中に記載された化合物は、非経口的にも投与され得る。これらの活性化合物の溶液又は懸濁剤は、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリソルベート８０、中鎖および長鎖脂肪酸のモノおよびジグリセリド等の界面活性剤又は界面活性剤の混合物と水中において適切に混合されて調製され得る。また、分散剤は、グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびその油中混合物において調製され得る。通常の貯蔵および使用条件下においてこれらの製剤は、微生物の増殖を妨げるための防腐剤を含む。
【００４３】
注射用途に適した医薬品形態としては、無菌の水溶液又は分散剤、および無菌の注射可能な溶液もしくは分散剤を即席で調製するための無菌の粉末が挙げられる。全てのケースにおいて、その形態は、無菌であり、容易に注射が可能である程度に流動性がある必要がある。製造および貯蔵条件において安定であり、細菌および真菌等の微生物の混入作用に対して保護される必要がある。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、それらの適切な混合物、および植物油を含有する溶剤又は分散媒であり得る。
【００４４】
本発明の開示は、さらに下記の限定されない実施例によって説明される。
【実施例】
【００４５】
本調査の目的は、ブレオマイシン誘導性真皮線維症のマウスモデルにおいて被験物質の化合物A、すなわちアルファヘリックス模倣βカテニン阻害剤化合物の効果を評価することであった。化合物Aは、4-(((6S,9S,9aS)-1-(ベンジルカルバモイル)-2,9-ジメチル-4,7-ジオキソ-8-(キノリン-8-イルメチル)オクタヒドロ-1H-ピラジノ[2,1-c][1,2,4]トリアジン-6-イル)メチル)フェニルジヒドロゲンホスフェートである。ネガティブ及びポジティブコントロール物質は、それぞれリン酸緩衝生理食塩水(PBS)及びデキサメタゾンである(DEX,強皮症の公知治療法として知られる)。
【００４６】
用量の調製。被験物質の高用量(0.5 mg/mL)の投薬溶液を、4mLの被験物質(20 mg/mLの貯蔵液)を36 mLのPBSと混合することによって作製した。低用量(0.05 mg/mL)の投薬溶液を、4mLの高用量の被験物質投薬溶液(0.5 mg/mL)を36 mLのPBSと混合することによって作製した。DEX投薬溶液(1 mg/mL)を、1mLのDEX貯蔵液(3 mg/mL)を2 mLのPBSと混合することによって作製した。被験物質及びポジティブコントロール物質を、 週1回作製し、等分し、光から保護して4℃において保存した。
【００４７】
本調査における使用のために、生後約6週間の45匹のメスのC3H/HeJ近交系マウス(Mus musculus)をJackson Laboratory (Bar Harbor, Maine)から入手した。これらの動物は、ヒトでの使用のために意図された薬剤の前臨床的評価においてしばしば用いられる、一般に認められた種類であるため、マウスを調査のために選択した。
【００４８】
各マウスの背の特定の部位にブレオマイシン(0.1 mL中に0.1 U)を6週間、1日1回皮下注射することによって、真皮線維症を局所的に誘導した。被験物質及びコントロール物質を、14日目(すなわち、ブレオマイシン注射の開始後2週間)から開始する1日2回の腹腔内注射によって投与した。グループ1-4のマウスに対し、被験/コントロール物質を、14日目（すなわち、最初のブレオマイシン注射から2週間後）から開始して4週間投与し(BID, IP)、投与を1日2回行った。グループ1は、200 μL/マウスのネガティブコントロール物質(PBS)を受けた。グループ2及び3は、それぞれ0.5及び5 mg/kgの用量において低及び高用量の被験物質投薬溶液(0.05及び0.5 mg/mLの化合物A)を受けた。グループ4は、1 mg/kgの用量においてDEX投薬溶液(1 mg/mL)を受けた。グループ2-4の動物に対し、10 mL/kgの体積用量（dose volumes）で投与し、個々の動物に対する体積用量は、直近の体重に基づいて週1度再計算した。動物は、投与を1日シフトさせた２つの群（cohort）においてブレオマイシン、被験物質及びコントロール物質を投与された。群Aは、各グループの最初の5匹の動物から構成された[x01 - x05, xは、調査グループ番号を示した(1, 2, 3又は4)]。群Bは、残りの動物から構成された(x06 - x10)。表1を参照。
【００４９】
【表１】
2015536300.tif 000004
【００５０】
マウスは、42日目、すなわち、6週間のブレオマイシン注射及び4週間の被験/コントロール物質処置後に安楽死させた。全個体の剖検（full gross necropsy）を各マウスにおいて行い、肉眼で見える異常を記録した。剖検では、ブレオマイシン注射部位の皮膚組織及び肺を採取した。これらの各組織を、二等分した。半分は試験施設の組織病理学的分析のために10%中性緩衝ホルマリン(NBF)中で固定した。もう半分は、可能性のある更なる分析のために-80℃において保存した。
【００５１】
ホルマリン固定された各マウスの皮膚及び肺組織を、組織病理学のために処理した。組織を、乾燥し、パラフィンに埋め込み、3-5 μmの厚さに切片化した。切片を、ヘマトキシリン/エオシン、マッソントリクローム（Masson's trichrome）を用いて染色し、カバーガラスにより覆った。スライドを、真皮線維症及び皮膚炎症について評価した。評価を、有資格の獣医病理学者の光学顕微鏡検査によって行った。真皮線維症及び炎症を、以下のように業界標準の5ポイント採点システムを用いて採点した：0=有意な変化なし;1=かろうじて検出可能な重症度からわずかな重症度まで; 2=軽い重症度; 3=並の重症度; 4=著しい重症度。
【００５２】
計算及び記述統計(平均, 標準偏差(SD)及び平均標準誤差(SEM))を、EXCEL(Office 2007; Microsoft, Redmond, WA)を用いて行った。必要に応じて、推測統計分析を、変動の一方向分析 (ANOVA)後のTukey-Kramer事後テスト又はノンパラメトリックテスト(Kruskal-Wallis 続いてDunn事後テスト)を用いるPRISM (Version 5.0; GraphPad Software, Inc., San Diego, CA)を使用して行った。病理組織学的重症度スコアを、ノンパラメトリックテストを用いて分析した。 0.05以下のP値(P<0.05)を、統計的に有意であると判断した。P値が特定されない場合、結果を調査し、違いが有意でないと判断した(NS; P > 0.05)。
【００５３】
本調査の間、平均体重の減少(11〜22%)が全てのグループにおいてみられた。犠牲となった処置グループ間における違いは、統計的には有意ではなかったが(P > 0.05)、グループ4の動物が、体重の最も大幅な減少を示し、グループ2の動物が、体重の最も小さな減少を示した。グループ１〜４の動物の上記体重の減少は、ブレオマイシンを毎日投与したことに起因すると考えられた。グループ4の動物においてみられた大幅な減少は、おそらくブレオマイシン及びDEXの両方の併用投与を反映していると思われる。
【００５４】
結果。ブレオマイシン誘導性真皮線維症及び炎症に特有の病斑は、全てのグループにおいてみられた。コラーゲン及び線維症の増加は、真皮において明らかであり、付属器構造を分ける濃厚コラーゲンの著しい沈着を構成した。多発性真皮及び皮下炎症(マクロファージ及びリンパ球や、数の減少した好中球及び好酸球で構成される。)は、うっ血とともに明確であった。表皮変化は、ケラチノサイトの増殖とともに、表皮肥厚（acanthosis）及び過角化症（hyperkeratosis）を含んだ。定性的には、被験物質を用いた処置は、両方の被験物質処置グループにおいて真皮線維症の量を緩やかに減少させるようにみえた。
【００５５】
ブレオマイシンを注入されたマウスの化合物Aを用いた処置は、真皮炎症スコアに有意な影響を与えなかった。しかしながら、ビヒクルで処置されたマウスをいずれかの用量のDEX(P<0.05)又は化合物Aで処置されたマウスと比較した場合には、真皮硬化スコアにおける有意な減少が認められた(P < 0.01; 図1)。
【００５６】
要約すれば、化合物Aを用いた処置は、真皮線維症を改善した。
【図１】
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【国際調査報告】
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2015536300.tif 000008
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