(57)【要約】  本発明は、一般式（Ｉ）の化合物を、溶媒および増粘剤と組み合わせて含む医薬組成物、ならびに、薬物としての、具体的には、パピローマウイルス感染症を治療および予防するための、その使用、ならびにそれを調製するための方法に関する。2015522529.tif 000015
2015522529.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
2015522529.tif 000014
［式中、
Ｇ１は、結合、または、好ましくは同一の、１個もしくは２個のアルキル基で置換されていてもよい、１〜４個の炭素原子からなる直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の炭化水素鎖を表し、
Ａは、
−メタまたはパラ位において、
ハロゲン原子、または、各々がハロゲン原子、アルコキシもしくはアシル基などの、同一のもしくは異なる１個もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、シアノ、アルコキシ、ハロアルコキシ、アシルアミノアルキルもしくは−ＸＲ基（式中、Ｘは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＯ−を表し、Ｒはアリールアルキル、シクロアルキルまたはアリール基を表す）、あるいは
各々がアシルもしくはアルコキシ基などの、同一のもしくは異なる１個もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、シクロアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基で、
−かつ／あるいは、オルトまたはメタ位において、アルキル基で
置換されていてもよい、フェニルなどのアリール基を表し、
Ｂは、オルト位において、複素環、好ましくは、ピペリジン−１−イル基などのＮ−シクロアルキルで置換され、かつ、オルト’位において、メチルなどのアルキル基で置換されていてもよい、アリール基、好ましくは、フェニルを表し、
ｎは、１〜４の整数、好ましくは、１〜２の整数であり、より好ましくは、１であり、
Ｒ１は、好ましくはＲ３に対してオルト位にある、メトキシなどのアルコキシ基を表し、
Ｒ２は、水素、または、塩素もしくは臭素などのハロゲン原子、あるいは、好ましくはＲ３に対してメタ位にある、メチルなどのアルキル基を表し、
Ｒ３は、酸またはエステル基、好ましくは、酸を表す。］
の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を溶媒および増粘剤と組み合わせて含む、医薬組成物。
【請求項２】
前記医薬組成物の総重量に対して、０．０１〜１０重量％、特に、２〜８重量％、好ましくは、約５重量％の式（Ｉ）の化合物を含むことを特徴とする、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記増粘剤が、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボマーまたはそれらの混合物であり、好ましくは、ヒドロキシプロピルセルロースであることを特徴とする、請求項１および２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記医薬組成物の総重量に対して、０．０１〜５０重量％、特に、０．０５〜１０重量％、特に、０．５〜５重量％、好ましくは、１〜５重量％の増粘剤を含むことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記溶媒が、プロピレングリコール、グリセロール、ポリエチレングリコールまたはそれらの混合物であり、特に、プロピレングリコールであることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記医薬組成物の総重量に対して、４０〜９９．９重量％、特に、８０〜９９．５重量％、特に、８５〜９９重量％、好ましくは、９０〜９５重量％の溶媒を含むことを特徴とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記医薬組成物の総重量に対して、
０．０１〜１０重量％、特に、２〜８重量％の式（Ｉ）の化合物、
０．０１〜５０重量％、特に、０．０５〜１０重量％、特に、０．５〜５重量％、好ましくは、１〜５重量％の増粘剤、および
４０〜９９．９重量％、特に、８０〜９９．５重量％、特に、８５〜９９重量％、好ましくは、９０〜９５重量％の溶媒
を含むことを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記医薬組成物の総重量に対して、
０．０１〜１０重量％、特に、２〜８重量％、好ましくは、約５重量％の式（Ｉ）の化合物、
０．０５〜１０重量％、特に、０．５〜５重量％、特に、１〜５重量％、好ましくは、約３重量％の、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボマーおよびそれらの混合物から選択される増粘剤、ならびに
８０〜９９．５重量％、特に、８５〜９９重量％、特に、９０〜９５重量％、好ましくは、約９２重量％の、プロピレングリコール、グリセロール、ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物から選択される溶媒
を含むことを特徴とする、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記医薬組成物の総重量に対して、次の組成：
０．０１〜１０重量％、特に、２〜８重量％、好ましくは、約５重量％の式（Ｉ）の化合物、
０．０５〜１０重量％、特に、０．５〜５重量％、特に、１〜５重量％、好ましくは、約３重量％のヒドロキシプロピルセルロース、および
８０〜９９．５重量％、特に、８５〜９９重量％、特に、９０〜９５重量％、好ましくは、約９２重量％のプロピレングリコール
を有することを特徴とする、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ゲル状であることを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ゲルが、５，０００〜５０，０００ｍＰａ・ｓ、特に、１５，０００〜２５，０００ｍＰａ・ｓの粘度を有することを特徴とする、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
式（Ｉ）の化合物が、次の特徴：
Ｇ１が、結合、または、１〜４個の炭素原子からなる直鎖かつ飽和の炭化水素鎖を表し、好ましくは、結合を表し、
Ａが、メタまたはパラ位において、好ましくは、パラ位において、メトキシなどのアルコキシ基で、あるいは、アシルもしくはアルコキシ基などの、同一のもしくは異なる１個もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、フェニルもしくはベンジルなどのアリールもしくはアリールアルキル基で、置換された、アリール、好ましくは、フェニルを表し、
Ｂが、オルト位において、複素環、好ましくは、ピペリジン−１−イル基などのＮ−シクロアルキルで置換され、かつ、オルト’位において、メチルなどのアルキル基で置換されていてもよい、アリール基、好ましくは、フェニルを表し、
Ｒ２は、好ましくはＲ３に対してメタ位にある、臭素原子などのハロゲン原子を表す
を有することを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
式（Ｉ）の化合物が、次の特徴：
Ａが、パラ位においてベンジル基で置換されたフェニル基を表し、
Ｂが、オルト位においてピペリジン−１−イル基で置換され、かつ、オルト’位においてメチル基で置換されたフェニル基を表し、
Ｇ１が結合を表す
を有することを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
式（Ｉ）の化合物が、４−［Ｎ’−（４−ベンジル−フェニル）−Ｎ’−（２−メチル−６−ピペリジン−１−イル−フェニル）−ヒドラジノカルボニルメチル］−５−ブロモ−２−メトキシ−安息香酸またはその薬学的に許容可能な塩、特に、そのカリウム塩であることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
薬物としての、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
パピローマウイルス感染症、特に、ＨＰＶ６またはＨＰＶ１１感染症の治療および予防における使用のための、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
パピローマウイルス感染症に関連する病変または疾患、特に、尖圭コンジローマおよび扁平コンジローマなどの肛門性器疣贅、喉頭、結膜または口腔の乳頭腫、再発性呼吸器乳頭腫症、低異型度および高異型度の上皮内新生物、ボーエン様丘疹症、尋常性疣贅、足底疣贅、ミルメシア疣贅、表在性疣贅または扁平疣贅、疣贅状表皮発育異常症、ならびに癌腫、特に、肛門性器癌の予防または治療における使用のための、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物を調製するための方法であって、次の工程：
ｉ）式（Ｉ）の化合物を前記溶媒の一部に混ぜ入れて、溶液Ａを得る工程、
ｉｉ）前記増粘剤を前記溶媒の残部に混ぜ入れて、溶液Ｂを得る工程、および
ｉｉｉ）溶液Ａと溶液Ｂを混合して、前記医薬組成物を得る工程
を含む、方法。
【請求項１９】
４−［Ｎ’−（４−ベンジル−フェニル）−Ｎ’−（２−メチル−６−ピペリジン−１−イル−フェニル）−ヒドラジノカルボニルメチル］−５−ブロモ−２−メトキシ−安息香酸のカリウム塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、出願ＷＯ２００７／１３５１０６において具体的に記載された、パピローマウイルスに関連する感染症の治療および予防に有用な化合物の医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
出願ＷＯ２００７／１３５１０６に記載された化合物は、次の構造：
【化１】
2015522529.tif 000003
［式中、
Ａは、場合により置換されていてもよい、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニルまたは複素環基を表し、
Ｂは、場合により置換されていてもよい、アリールまたは複素環を表し、
Ｒ１およびＲ２は、独立に、水素原子または様々な置換基を表し、
Ｒ３は、酸官能基またはこの官能基のプロドラッグもしくは生物学的等価基を表し、
Ｇ１は、結合または炭化水素鎖を表し、
Ｇ２は、
【化２】
2015522529.tif 000004
基を表し、ここで、Ｒは、水素原子または様々な置換基を表し、Ｗは、Ｏ、ＳまたはＮＨを表し、Ｇは、結合または炭化水素鎖を表す。］
を有する。
【発明の概要】
【０００３】
しかしながら、これらの化合物の処方物はＷＯ２００７／１３５１０６には記載されていない。
【０００４】
パピローマウイルスに関連する感染症の治療および予防に有用なこれらの化合物は、具体的には肛門性器部の、皮膚および粘膜へ局所適用されることが特に意図される。
【０００５】
本発明者らは、極めて単純な医薬組成物によって有効成分の迅速かつ高い放出が可能であることを発見した。
【０００６】
よって、本発明は、目的として、一般式（Ｉ）：
【化３】
2015522529.tif 000005
［式中、
Ｇ１は、結合、または、好ましくは同一の、１個もしくは２個のアルキル基で置換されていてもよい、１〜４個の炭素原子からなる直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の炭化水素鎖を表し、
Ａは、
−メタまたはパラ位において、
ハロゲン原子、または、各々がハロゲン原子、アルコキシもしくはアシル基などの、同一のもしくは異なる１個もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、シアノ、アルコキシ、ハロアルコキシ、アシルアミノアルキルもしくは−ＸＲ基（式中、Ｘは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＯ−を表し、Ｒはアリールアルキル、シクロアルキルまたはアリール基を表す）、あるいは
各々がアシルもしくはアルコキシ基などの、同一のもしくは異なる１個もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、シクロアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基で、
−かつ／あるいはオルトまたはメタ位において、アルキル基で
置換されていてもよい、フェニルなどのアリール基を表し、
Ｂは、オルト位において、複素環、好ましくは、ピペリジン−１−イル基などのＮ−シクロアルキルで置換され、かつ、オルト’位において、メチルなどのアルキル基で置換されていてもよい、アリール基、好ましくは、フェニルを表し、
ｎは、１〜４の整数、好ましくは、１〜２の整数であり、より好ましくは、１であり、
Ｒ１は、好ましくはＲ３に対してオルト位にある、メトキシなどのアルコキシ基を表し、
Ｒ２は、水素、または、塩素もしくは臭素などのハロゲン原子、あるいは、好ましくはＲ３に対してメタ位にある、メチルなどのアルキル基を表し、
Ｒ３は、酸またはエステル基、好ましくは、酸を表す。］
の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を増粘剤と組み合わせて含む、医薬組成物を有する。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、本発明による組成物を製造するための方法のダイヤグラムを表す。
【発明の具体的説明】
【０００８】
本発明において、「薬学的に許容可能な」の意味することは、一般に安全かつ無毒で生物学的にも他の点でも望ましくないものではない医薬組成物を調製するのに有用であるということ、さらに、動物用だけでなくヒト医薬品用にも許容されるということである。
【０００９】
本発明において、化合物の「薬学的に許容可能な塩」とは、本明細書において定義するように、薬学的に許容可能であり、かつ、親化合物の所望の薬理学的活性を有する塩を意味する。そのような塩としては、
（１）水和物および溶媒和物、
（２）無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などとともに形成されるか；または有機酸、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシナフトエ酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコン酸、２−ナフタレンスルホン酸、プロピオン酸、サリチル酸、コハク酸、ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリメチル酢酸、トリフルオロ酢酸などとともに形成される酸付加塩；ならびに
（３）親化合物中に存在する酸プロトンが、金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン（例えば、Ｎａ＋、Ｋ＋もしくはＬｉ＋）、アルカリ土類金属イオン（Ｃａ２＋もしくはＭｇ２＋など）もしくはアルミニウムイオンに置き換えられるか；または有機もしくは無機塩基と配位結合する場合に形成される塩が挙げられる。許容される有機塩基としては、ジエタノールアミン、エタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、トリエタノールアミン、トロメタミンなどが挙げられる。許容される無機塩基としては、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウムが挙げられる。
【００１０】
そのような塩は、特に、アルカリ金属塩、特に、カリウム塩である。
【００１１】
「不飽和」とは、本発明の文脈において、基が１以上の不飽和を含むことを意味する。
【００１２】
「不飽和」とは、本発明の文脈において、二重結合または三重結合を意味する。
【００１３】
「ハロゲン」とは、本発明の文脈において、フッ素、臭素、塩素またはヨウ素原子を意味する。有利には、「ハロゲン」はフッ素、臭素または塩素原子である。
【００１４】
「アルキル」基とは、本発明の文脈において、１〜６個の炭素原子を含んでなる直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素鎖、具体的には、次の基：メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルまたはｎ−ヘキシルを意味する。有利には、「アルキル」基はメチルである。
【００１５】
「シクロアルキル」基とは、本発明の文脈において、２環１組になって縮合または架橋が可能である、３〜１２個の炭素原子を含んでなる、飽和の単環系または多環系、好ましくは、単環系、二環系または三環系、例えば、次の基：シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、アダマンチル、デカリニルまたはノルボルニルを意味する。
【００１６】
「Ｎ−シクロアルキル」基とは、本発明の文脈において、１個の炭素原子が１個の窒素原子で置換されている、上記に定義したシクロアルキル基を意味し、分子との結合はこの窒素原子によって行われる。「Ｎ−シクロアルキル」基は、有利には、ピペリジン−１−イルまたはピロリジン−１−イル基である。
【００１７】
「アシル」基とは、本発明の文脈において、式−Ｃ（Ｏ）−Ｚ（式中、Ｚは上記に定義したアルキル基またはフェニルを表す）の基を意味する。「アシル」基は、有利には、アセチル、エチルカルボニルまたはベンゾイル基であり得る。
【００１８】
「アルコキシ」基とは、本発明の文脈において、酸素原子を介して分子と連結される、上記に定義したアルキル基を意味する。「アルコキシ」基は、具体的には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉｓｏ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシまたはｔｅｒｔ−ブトキシ基であり得る。
【００１９】
「ハロアルコキシ」基とは、本発明の文脈において、１個または複数個の、上記に定義したハロゲン原子で置換された、上記に定義したアルコキシ基を意味する。好ましくは、「ハロアルコキシ」基は、フルオロアルコキシ、すなわち、１個または複数個のフッ素原子で置換されたアルコキシ基、例えば、−ＯＣＦ３または−ＯＣＨ２ＣＦ３基である。
【００２０】
「アリール」基とは、本発明の文脈において、好ましくは５〜１０個の炭素原子を含んでなり、かつ、１個または複数個の結合した環を含む芳香族基、例えば、フェニルまたはナフチル基などを意味する。有利には、「アリール」基はフェニルである。
【００２１】
「複素環」とは、本発明の文脈において、２環１組になって縮合、スピロ縮合または架橋が可能であり、かつ、Ｏ、ＳおよびＮから選択される同一のまたは異なる１〜４個のヘテロ原子を含み、場合によって、１個または２個のオキソまたはチオキソ基を含んでもよい、３〜１２員の、飽和、不飽和または芳香族の単環系または多環系、好ましくは、単環系または二環系を意味し、多環系の場合、１つの環は芳香族であってよく、他の環は芳香族、飽和または不飽和であってよいと理解される。有利には、「複素環」は、次の基：ピペリジル、ピペラジル、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピラジジニル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、インドリル、キノリル、イソキノリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキシニル、ベンゾ［１，２，５］チアジアゾリル、ベンゾ［１，２，５］オキサジアゾリル、［１，２，３］トリアゾリルおよび［１，２，４］トリアゾリルに関する。
【００２２】
「アリールアルキル」基とは、本発明の文脈において、上記に定義したアルキル基を介して分子と連結される、上記に定義したアリール基を意味する。好ましくは、「アリールアルキル」基はベンジル基である。
【００２３】
「アシルアミノアルキル」とは、本発明の文脈において、式−Ａｌｋ−ＮＨＣＯ−Ａｌｋ’（式中、ＡｌｋおよびＡｌｋ’は、互いに独立に、上記に定義したアルキル基を表す）の基を意味する。
【００２４】
「酸」とは、本発明の文脈において、ＣＯＯＨ基を意味する。
【００２５】
「エステル」とは、本発明の文脈において、−ＣＯ−Ｏ−Ａｌｋ基（式中、Ａｌｋは、上記に定義したアルキル基を表す）を意味する。
【００２６】
「増粘剤」とは、本発明の文脈において、流体、例えば、液体の粘度を高める化合物を意味する。よって、「増粘剤」は、流体のレオロジー特性を変化させ、それによって、粘性が高まる。
【００２７】
有利には、本発明による組成物は、該組成物の総重量に対して、０．０１〜１０重量％、特に、２〜８重量％、好ましくは、約５重量％の式（Ｉ）の化合物を含む。
【００２８】
前記増粘剤は、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースまたはカルボマーであり得る。また、前記増粘剤は、これらの混合物の形態であり得る。好ましくは、前記増粘剤は、ヒドロキシプロピルセルロースである。
【００２９】
本発明による組成物は、この増粘剤を、該組成物の総重量に対して、０．０１〜５０重量％、特に、０．０５〜１０重量％、特に、０．５〜５重量％、好ましくは、１〜５重量％を含み得る。
【００３０】
本発明による組成物は、有利には、プロピレングリコール、グリセロールまたはポリエチレングリコールなどの溶媒をさらに含み得る。また、前記溶媒は、これらの混合物の形態であり得る。好ましくは、前記溶媒は、プロピレングリコールである。
【００３１】
本発明による組成物は、この溶媒を、該組成物の総重量に対して、４０〜９９．９重量％、特に、８０〜９９．５重量％、特に、８５〜９９重量％、好ましくは、９０〜９５重量％含み得る。
【００３２】
従って、本発明による組成物は、有利には、式（Ｉ）の化合物、増粘剤および溶媒を含んでなり、好ましくは、式（Ｉ）の化合物、増粘剤および溶媒中に存在する。
【００３３】
この医薬組成物は、特に、以下を含んでなってもよいし、以下として存在してもよい（重量パーセントは該医薬組成物の総重量に対して表される）：
０．０１〜１０重量％、特に、２〜８重量％の式（Ｉ）の化合物、
０．０１〜５０重量％、特に、０．０５〜１０重量％、特に、０．５〜５重量％、好ましくは、１〜５重量％の前記増粘剤、および
４０〜９９．９重量％、特に、８０〜９９．５重量％、特に、８５〜９９重量％、好ましくは、９０〜９５重量％の前記溶媒。
【００３４】
有利には、この医薬組成物は、以下を含んでなるか、または、以下として存在する（重量パーセントは該医薬組成物の総重量に対して表される）：
０．０１〜１０重量％、特に、２〜８重量％、好ましくは、約５重量％の式（Ｉ）の化合物、
０．０５〜１０重量％、特に、０．５〜５重量％、特に、１〜５重量％、好ましくは、約３重量％の、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボマーおよびそれらの混合物から選択される増粘剤、ならびに
８０〜９９．５重量％、特に、８５〜９９重量％、特に、９０〜９５重量％、好ましくは、約９２重量％の、プロピレングリコール、グリセロール、ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物から選択される溶媒。
【００３５】
好ましくは、本発明による組成物は、式（Ｉ）の化合物、ヒドロキシプロピルセルロースおよびプロピレングリコールを含んでなり、好ましくは、式（Ｉ）の化合物、ヒドロキシプロピルセルロースおよびプロピレングリコールとして存在する。
【００３６】
従って、本発明によるこの組成物は、特に、該組成物の総重量に対して、次の組成を有する：
０．０１〜１０重量％、特に、２〜８重量％、好ましくは、約５重量％の式（Ｉ）の化合物、
０．０１〜５０重量％、特に、０．０５〜１０重量％、特に、０．５〜５重量％、特に、１〜５重量％、好ましくは、約３重量％のヒドロキシプロピルセルロース、および
４０〜９９．９重量％、特に、８０〜９９．５重量％、特に、８５〜９９重量％、特に、９０〜９５重量％、好ましくは、約９２重量％のプロピレングリコール。
【００３７】
本発明による組成物は、特にゲル状で提供される。
【００３８】
この場合、前記ゲルは、欧州薬局方２．２．１０の基準に従って測定された、具体的には、５，０００〜５０，０００ｍＰａ・ｓ、特に、１５，０００〜２５，０００ｍＰａ・ｓの粘度を有する。粘度は、より具体的には、ブルックフィールド型ＨＤＢＶ＋装置または同等物を使用して２５℃で、１０ｒｐｍの速度において２１番スピンドルを用いて測定される。粘度値は１分の回転後に得られる。
【００３９】
有利には、Ｇ１は、結合、または、１〜４個の炭素原子からなる直鎖かつ飽和の炭化水素鎖を表し、好ましくは、結合を表す。
【００４０】
有利には、上記に定義したＡという基は、メタまたはパラ位において、好ましくは、パラ位において、メトキシなどのアルコキシ基で、あるいは、アシルもしくはアルコキシ基などの、同一のもしくは異なる１個もしくは２個の置換基で置換されていてもよい、フェニルもしくはベンジルなどのアリールもしくはアリールアルキル基で、置換された、アリール、好ましくは、フェニルである。
【００４１】
有利には、Ｂは、オルト位において、複素環、好ましくは、ピペリジン−１−イル基などのＮ−シクロアルキルで置換され、かつ、オルト’位において、メチルなどのアルキル基で置換されていてもよい、アリール基、好ましくは、フェニルを表す。
【００４２】
有利には、Ｒ２は、好ましくはＲ３に対してメタ位にある、臭素原子などのハロゲン原子を表す。
【００４３】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物は次の特徴を有する：
Ａは、パラ位においてベンジル基で置換されたフェニル基を表し、
Ｂは、オルト位においてピペリジン−１−イル基で置換され、かつ、オルト’位においてメチル基で置換されたフェニル基を表し、
Ｇ１は結合を表し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびｎは上記に定義したとおりである。
【００４４】
具体的には、式（Ｉ）の化合物は、４−［Ｎ’−（４−ベンジル−フェニル）−Ｎ’−（２−メチル−６−ピペリジン−１−イル−フェニル）−ヒドラジノカルボニルメチル］−５−ブロモ−２−メトキシ−安息香酸またはその薬学的に許容可能な塩、具体的には、そのカリウム塩である。
【００４５】
実際には、そのカリウム塩は、特に、その塩酸塩と比べて、この化合物の溶解度を高め、生成物の製剤化を容易にする。
【００４６】
よって、本発明はまた、目的として、４−［Ｎ’−（４−ベンジル−フェニル）−Ｎ’−（２−メチル−６−ピペリジン−１−イル−フェニル）−ヒドラジノカルボニルメチル］−５−ブロモ−２−メトキシ−安息香酸のカリウム塩を有する。
【００４７】
本発明はまた、特に、パピローマウイルス感染症、具体的には、ＨＰＶ６またはＨＰＶ１１感染症を予防または治療するための、薬物としての使用のためのこの特定塩にも関する。
【００４８】
このカリウム塩は、特に、パピローマウイルス感染症に関連する病変または疾患、具体的には、尖圭コンジローマおよび扁平コンジローマなどの肛門性器疣贅、喉頭、結膜または口腔の乳頭腫、再発性呼吸器乳頭腫症、低異型度および高異型度の上皮内新生物、ボーエン様丘疹症、尋常性疣贅、足底疣贅、ミルメシア疣贅、表在性疣贅または扁平疣贅、疣贅状表皮発育異常症、ならびに癌腫、具体的には、肛門性器癌の予防または治療を可能にする。
【００４９】
このカリウム塩は、特に、ＨＰＶ６およびＨＰＶ１１感染症を原因とする病変、具体的には、疣贅およびコンジローマの治療に特に有用である。
【００５０】
本発明はまた、このカリウム塩を、少なくとも１種の薬学的に許容可能な賦形剤と組み合わせて含むあらゆる医薬組成物にも関する。
【００５１】
本発明はまた、目的として、特に、パピローマウイルス感染症、具体的には、ＨＰＶ６またはＨＰＶ１１感染症を予防または治療するための、薬物としての使用のための本発明による組成物を有する。
【００５２】
本発明はまた、パピローマウイルス感染症、具体的には、ＨＰＶ６またはＨＰＶ１１感染症の予防または治療に有用な薬物を調製するための本発明による組成物の使用にも関する。
【００５３】
本発明はまた、パピローマウイルス感染症、具体的には、ＨＰＶ６またはＨＰＶ１１感染症を予防または治療するための方法にも関し、その方法は、本発明による組成物の有効量を、それを必要とするヒトへ投与することを含む。
【００５４】
その組成物は、特に、局所に、特にゲル状で使用され、経口投与も想定され得る。
【００５５】
「局所」とは、本発明の文脈において、局所適用を意味する。この適用は、皮膚上または気道、口腔または肛門性器部などの粘膜上（外側または内側）で行うことができる。また、その適用は、病巣または腫瘍の内部または周辺での局所注射によって行うこともできる。好ましくは、その適用は、具体的には肛門性器部の、皮膚および／または粘膜上で行われる。
【００５６】
本発明による組成物は、特に、パピローマウイルス感染症に関連する病変または疾患、具体的には、尖圭コンジローマおよび扁平コンジローマなどの肛門性器疣贅、喉頭、結膜または口腔の乳頭腫、再発性呼吸器乳頭腫症、低異型度および高異型度の上皮内新生物、ボーエン様丘疹症、尋常性疣贅、足底疣贅、ミルメシア疣贅、表在性疣贅または扁平疣贅、疣贅状表皮発育異常症、ならびに癌腫、具体的には、肛門性器癌の予防または治療を可能にする。
【００５７】
本発明による組成物は、特に、ＨＰＶ６およびＨＰＶ１１感染症を原因とする病変、具体的には、疣贅およびコンジローマの治療に特に有用である。
【００５８】
本発明による組成物は、様々な成分を混合することにより調製することができる。
【００５９】
よって、本発明はまた、目的として、式（Ｉ）の化合物、増粘剤および溶媒を含む、本発明による組成物を調製するための方法を有し、その方法は、次の工程：
ｉ）式（Ｉ）の化合物を前記溶媒の一部に混ぜ入れて、溶液Ａを得る工程、
ｉｉ）前記増粘剤を前記溶媒の残部に混ぜ入れて、溶液Ｂを得る工程、および
ｉｉｉ）溶液Ａと溶液Ｂを混合して、本発明による医薬組成物を得る工程
を含む。
【００６０】
好ましくは、工程（ｉ）は室温で行われる。
【００６１】
好ましくは、工程（ｉｉ）は、前記増粘剤の均質溶液を得るために、加熱下で行われる。この工程は、特に、６０〜１００℃の間、好ましくは、７０〜８０℃の間の温度で行われる。溶液Ｂは、その後、冷却された後に工程（ｉｉｉ）で使用される。
【００６２】
好ましくは、工程（ｉｉｉ）は２０〜４０℃の温度で行われる。この場合、溶液Ａが入っている反応器が、溶液Ｂが入っている反応器に移されて空にされるか、またはその逆である。そのようにして空になった反応器は、標準的手法により少量の溶媒でさらに洗い流され得る。
【００６３】
本発明は、次の限定されない実施例を参照すればよりよく理解される。
【実施例】
【００６４】
実施例で用いられる有効成分は、４−［Ｎ’−（４−ベンジル−フェニル）−Ｎ’−（２−メチル−６−ピペリジン−１−イル−フェニル）−ヒドラジノカルボニルメチル］−５−ブロモ−２−メトキシ−安息香酸のカリウム塩（化合物（Ｉａ））である。
【００６５】
有効成分であるカリウム塩を得る１つの方法は、エタノールに可溶化させた目的の化合物の中性型の、エタノール性水酸化カリウムによる変換に基づく。中性型それ自体は、特許出願ＷＯ２００７／１３５１０６において特許請求されたとおり、塩酸塩型の該化合物の水洗浄から得られる。
【００６６】
５重量％の有効成分を含む、ゲル状の、本発明による組成物
【００６７】
【表１】
2015522529.tif 000006
【００６８】
医薬組成物は、５重量％の化合物（Ｉａ）を含有するゲルである。
ヒドロキシプロピルセルロース：
規格は欧州薬局方モノグラフ番号０３３７の規格である。
ヒドロキシプロピルセルロース源は、供給業者ＡＳＨＬＡＮＤによって再販売されている次のグレードを有するＫｌｕｃｅｌ(商標)である：ＭＦ−医薬品グレード、ＭＸＦ−医薬品グレードおよびＧＦ−医薬品グレード。
プロピレングリコール：
規格は欧州薬局方モノグラフ番号０４３０の規格である。
【００６９】
医薬組成物（ａ）〜（ｇ）の製造
有効成分（Ｉａ）をプロピレングリコールの一部に溶かす。ヒドロキシプロピルセルロースを「冷やした」プロピレングリコール中に分散させ、その後、混合物を加熱して、増粘剤の溶解物を得る。ゲルが４０℃まで冷却されたときに、有効成分（Ｉａ）のプロピレングリコール溶液を加え（この溶液が入っていた容器を少量のプロピレングリコールで洗い流し）、混合物を均質化する。室温に達するまで撹拌を継続する。
ゲルを製造するための方法を図１に示す。
以下の５，０００ｇバッチ（組成物（ｇ）に相当する）を、特に、この方法に従って調製した：
【００７０】
【表２】
2015522529.tif 000007
【００７１】
５，０００ｇバッチのゲルを得るために、有効成分を室温でプロピレングリコール約７５０ｇに溶かす。ヒドロキシプロピルセルロースをプロピレングリコール約３，６００ｇ中に分散させる。均質なゲルが得られるまで、７５±５℃で撹拌しながら混合物を加熱する。撹拌を継続しながら、調製物を４０℃以下まで冷ます。
【００７２】
撹拌しながら、溶液状態の有効成分を溶液状態のヒドロキシプロピルセルロースに注ぎ入れ、残りのプロピレングリコール（約２５０ｇ）が入った容器を洗い流す。撹拌しながら最終ゲルを３０±５℃まで冷ました後、充填する。
【００７３】
得られた医薬組成物は、粘性の高い、半透明の、無色〜薄黄色のゲルである。
【００７４】
医薬組成物（ｄ）から合成膜を通過する有効成分の拡散の研究
フランツ型拡散セル上に固定したセルロース製合成透析膜を通過する拡散の研究を、医薬組成物（ｄ）を用いて実施した。
【００７５】
膜を通過する化合物（Ｉａ）の拡散速度を６時間モニタリングした。拡散速度が停止したときに、医薬組成物（ｄ）から２０％を超える有効成分が放出された。
【００７６】
医薬組成物の生物活性
パピローマウイルスに対する有効成分の活性は、様々なｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験および細胞試験、例えば、Chiang et al. (1992), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 5799-5803、White et al. (2003), Journal of Biological Chemistry, 278:26765-26772またはFradet-Turcotte et al. (2010), Virology, 399:65-76によって記載されている試験によって評価することができる。
【００７７】
本発明では、２種類の試験を用いて、パピローマウイルスに対する化合物の生物活性を研究する。第１の試験（「Ｅ１／Ｅ２相互作用試験」）は、ヒト細胞におけるＨＰＶ（ヒトパピローマウイルス）のタンパク質Ｅ１とＥ２の間の相互作用を評価する。第２の試験（「複製試験」）はヒト細胞におけるウイルスゲノムＤＮＡの複製を測定する。
【００７８】
相互作用試験
Ｅ１およびＥ２間の相互作用の試験は、「哺乳動物細胞２−ハイブリッド」試験と通常呼ばれる試験と類似している。その試験は、レポーター遺伝子の発現を制御するプロモーターにおいてＨＰＶのＥ２タンパク質のＤＮＡ結合部位を含むレポーターベクターと、ＨＰＶのタンパク質Ｅ１およびＥ２をコードする発現ベクターとの共トランスフェクションに基づき、該Ｅ１タンパク質をＶＰ１６トランス活性化ドメインと融合させる。この試験により、タンパク質Ｅ１およびＥ２間の相互作用を追跡することができ、この相互作用はＨＰＶのゲノムの複製に必要なステップである。
【００７９】
Ｅ１およびＥ２間の相互作用の試験のために、ホタルルシフェラーゼをコードする遺伝子の転写を制御する最小アデノウイルス主要後期プロモーター（ＭＬＰ）より上流にＥ２タンパク質のいくつかのＤＮＡ結合部位（パリンドローム５’ＡＣＣＧＮＮＮＮＣＧＧＴ−３’）を含むレポーターベクターを構築した。また、Ｎ末端でＨＳＶ−１のＶＰ１６トランス活性化ドメインと融合したＨＰＶ  Ｅ１タンパク質発現ベクターも構築した。Ｅ２部位を含むこのレポーターベクターと、ＨＰＶ  Ｅ２タンパク質発現ベクターとの細胞株への共トランスフェクションは、ルシフェラーゼ活性のわずかな増加しかもたらさない。Ｅ２部位を含むこのレポーターベクターと、ＨＰＶ  Ｅ２タンパク質発現ベクターと、ＶＰ１６ドメインと融合したＥ１タンパク質発現ベクターとの共トランスフェクションは、細胞において強くトランス活性化するＥ２／Ｅ１−ＶＰ１６タンパク質複合体の形成を可能にし、ルシフェラーゼ活性の大幅な増加をもたらす。これは、細胞におけるタンパク質Ｅ１およびＥ２間の相互作用を示す。
【００８０】
複製試験
ウイルスゲノムＤＮＡの複製の試験は、ＨＰＶ複製起点（ｏｒｉ）を含むレポーターベクターと、ＨＰＶのタンパク質Ｅ１およびＥ２をコードする発現ベクターとの共トランスフェクションに基づく。この試験により、ＨＰＶのゲノムの複製に必要なＥ１およびＥ２の一連の生物学的機能を追跡することができる。
【００８１】
ウイルスゲノムＤＮＡ複製の試験のために、ＨＰＶ１１／ＨＰＶ６複製起点（ＬＣＲとも呼ばれ、ＨＰＶのタンパク質Ｅ１およびＥ２の結合部位を有する）と、ＳＶ４０プロモーターの転写制御下でホタルルシフェラーゼをコードする遺伝子とを含む「レプリコン」レポーターベクターを構築した。ＨＰＶ複製起点の存在は、ウイルスタンパク質Ｅ１またはＥ２の有無に関わらず、ルシフェラーゼ遺伝子の発現に対して転写効果をもたらさないことが確認された。このレプリコン−ベクターと、ＨＰＶタンパク質Ｅ１およびＥ２発現ベクターとのヒト細胞株への共トランスフェクションは、ルシフェラーゼ活性の増加をもたらし、この増加はＥ１およびＥ２の存在に依存的であり、レポーターベクター数の増加を示す。これは、ウイルス複製起点を含むこのレプリコン−ベクターの哺乳動物細胞における複製を可能にするウイルスタンパク質Ｅ１およびＥ２の活性によるものである。
【００８２】
本発明による医薬組成物における有効成分の製剤化が非製剤化有効成分の生物活性を変化させないことを示すために、本発明による医薬組成物（ａ）、（ｄ）、（ｆ）および（ｇ）についての、または調製直後のＴｒｉｓ−ＤＭＳＯ緩衝液（２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ８．０、５％ＤＭＳＯ）中の化合物（Ｉａ）についての、パピローマウイルスに対する生物活性を調べることにより、化合物（Ｉａ）の活性を測定した。
医薬組成物（ａ）、（ｄ）、（ｆ）および（ｇ）を同じ緩衝液で希釈して、有効成分と同じ濃度で、すなわち、０．２５〜４０μＭの範囲で試験した。
溶液状態のまたは医薬組成物（ａ）、（ｄ）、（ｆ）および（ｇ）中の、化合物（Ｉａ）を、腎上皮細胞または子宮頸癌細胞由来のヒト細胞株におけるＨＰＶ１１／ＨＰＶ６のタンパク質Ｅ１およびＥ２間の相互作用に対するその阻害活性について評価した。トランスフェクション後２日間、様々な用量（０．２５〜４０μＭ）を細胞培地中でインキュベートし、ルシフェラーゼ活性を測定して、ＨＰＶのタンパク質Ｅ１およびＥ２間の相互作用に対する該化合物のＩＣ５０を決定した。
【００８３】
また、溶液状態のまたは医薬組成物（ａ）、（ｄ）、（ｆ）および（ｇ）中の、化合物（Ｉａ）を、腎上皮細胞または子宮頸癌細胞由来のヒト細胞株におけるＨＰＶ１１／ＨＰＶ６のＥ１−およびＥ２−依存的ウイルス複製に対するその阻害活性についても評価した。トランスフェクション後２〜６日間、様々な用量（０．２５〜４０μＭ）を細胞培地中でインキュベートし、ルシフェラーゼ活性を、ルミノメーターを用いて測定して、ＨＰＶのゲノムの複製に対する該化合物のＩＣ５０を決定した。
【００８４】
上記の医薬組成物は、溶液状態の化合物（Ｉａ）（非製剤化）と同じ生物活性を示す。溶液状態の化合物（Ｉａ）ならびに医薬組成物（ａ）、（ｄ）、（ｆ）および（ｇ）は、細胞におけるＨＰＶ１１／ＨＰＶ６のタンパク質Ｅ１およびＥ２間の相互作用と、細胞におけるＨＰＶ１１のタンパク質Ｅ１およびＥ２−依存的ウイルス複製の両方を阻害し、ＩＣ５０は約１μＭである。
【００８５】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏでの経皮吸収
フランツ型セル上に固定したヒト皮膚への用量１０ｍｇ／ｃｍ２の塗布後、医薬組成物（ｇ）からの化合物（Ｉａ）の経皮吸収を調べた。この研究は、経皮吸収を健康な皮膚と、肛門性器部の弱い角化のモデルとしての、剥離した皮膚とで比較することにより実施した。
【００８６】
医薬組成物（ｇ）への８時間または２４時間の曝露後に、各皮膚層（角質層、表皮、真皮）および皮膚を通り抜けたところ（受液部）（receiving fluid）に存在する化合物（Ｉａ）の量をＨＰＬＣにより定量する。
【００８７】
８時間の拡散後に得られた結果を下記表に示す。
【００８８】
【表３】
2015522529.tif 000008
【００８９】
８時間の拡散後の皮膚で測定した化合物（Ｉａ）の濃度は、ｉｎ  ｃｅｌｌｕｌｏで測定した有効成分の活性（ＩＣ５０）の１００倍（健康な皮膚）〜１０００倍（剥離した皮膚）の局所濃度に相当する。２４時間の拡散後でも類似した結果が得られた。同様に、ヒト皮膚の挙動を高度予測する動物モデルであるミニブタの皮膚でのｉｎ  ｖｉｔｒｏ経皮吸収研究でも類似した結果が観察された。
【００９０】
さらに、皮膚における有効成分の局所濃度が高い一方で、フランツ型セル上に固定したミニブタの皮膚を通り抜けた化合物（Ｉａ）は少量であった。結果として、用量１０ｍｇ／ｃｍ２の医薬組成物（ｇ）への２４時間の曝露後に受液部では塗布用量の約０．１％を示した。
【００９１】
また、医薬組成物（ｇ）からの化合物（Ｉａ）の経皮吸収を、トキシコキネティクス研究の間に、ｉｎ  ｖｉｖｏでも測定し、ミニブタの両側腹部に用量１０ｍｇ／ｃｍ２を１日２回、４２日間塗布することにより実施した。非常に感度のよいＬＣ−ＭＳ／ＭＳ生物学的分析法（検出限界＝０．５ｎｇ／ｍｌ）を用いて、研究の初日と最終日に、処置した動物の血液において化合物（Ｉａ）の存在を測定し、定量した。上に記載したヒト皮膚およびミニブタの皮膚でのｉｎ  ｖｉｔｒｏ経皮吸収研究と同様に、ミニブタの血液で検出された化合物（Ｉａ）は少量であった。結果として、塗布用量の約０．１％を示し、該医薬組成物からの化合物（Ｉａ）のｉｎ  ｖｉｖｏでの経皮吸収は低いことを示した。
【００９２】
これらの結果全体は、局所使用される薬物に望まれるように、医薬組成物（ｇ）の塗布後の皮膚における有効成分（化合物（Ｉａ））の局所濃度は高く、その全身曝露は低いことを示す。
【００９３】
耐性（Tolerance）
前臨床毒性研究中のミニブタおよび第Ｉａ相臨床試験中の健常志願者の双方において、医薬組成物（ｇ）に対する非常に良好な耐性が示された。ミニブタでは、用量１０ｍｇ／ｃｍ２を、ミニブタの側腹部の２５ｃｍ２、１２５ｃｍ２または２５０ｃｍ２領域に１日２回、４２日間塗布した。処置したいずれの領域も、該医薬組成物に対して大きな耐性が認められた。さらに、健常志願者の腰部の２５ｃｍ２領域に用量１０ｍｇ／ｃｍ２で、１日２回、７日間の塗布中にも、該医薬組成物に対する非常に良好な耐性が示された。処置を受けた８名の健常志願者では、局所反応も有害作用も認められなかった。
【００９４】
微生物学的特性
医薬組成物（ａ）および（ｇ）の保存効力（efficacy of antimicrobial preservation）は、欧州薬局方の方法（５．１．３−２の基準の適用による５．１．３の方法）に従って試験した。それらの結果を下の表に示す：
【００９５】
【表４】
2015522529.tif 000009
【００９６】
【表５】
2015522529.tif 000010
【００９７】
それらの結果は、欧州薬局方の方法５．１．３−２のＡ判定基準に適合する。
【００９８】
その抗菌保存性で当業者に知られているプロピレングリコールが存在することによって、前記処方物は微生物汚染から守られ、それゆえに、保存剤を追加する必要はない。
【００９９】
安定性研究
医薬組成物（ｇ）の安定性を５ｋｇの実験室用バッチで調べた。
【０１００】
ＩＣＨの推奨に従って次の保存条件を試験した：
長期条件：５℃±３℃、
中間的条件：２５℃±２℃／６０％±５％ＲＨ（相対湿度）、および
加速条件：４０℃±２℃／７５％±５％ＲＨ。
【０１０１】
試験方法は、日常的に用いられる方法であり、
外観の確認、
粘度の測定、および
ＨＰＬＣによる有効成分（Ｉａ）のアッセイ
を含む。
【０１０２】
得られた結果を次の表に示す：
【０１０３】
【表６】
2015522529.tif 000011
【０１０４】
【表７】
2015522529.tif 000012
【０１０５】
【表８】
2015522529.tif 000013
【０１０６】
粘度は、いずれの貯蔵条件および期間でも、安定した状態を保つ。
【０１０７】
有効成分（Ｉａ）の濃度およびゲルの外観は、いずれの貯蔵条件および期間でも、有効期間終了時の基準の範囲内にとどまり、貯蔵中のゲルの安定性を示している。
【図１】
2015522529.tif 000016
【国際調査報告】
2015522529.tif 000017
2015522529.tif 000018
2015522529.tif 000019
2015522529.tif 000020
2015522529.tif 000021
2015522529.tif 000022
2015522529.tif 000023
2015522529.tif 000024