(57)【要約】本発明は、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体と抗がん剤とを活性成分として含む新規な医薬組成物およびこれらの組成物の治療への応用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗がん剤と、
ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体と
を活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２】
前記抗体が、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体、好ましくはキメラ12G4またはヒト化12G4モノクローナル抗体である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記モノクローナル抗体が、ヒト化12G4抗体またはヒト化12G4モノクローナル抗体の断片であり、前記ヒト化12G4モノクローナル抗体が、変異され、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含み、前記変異ヒト化12G4モノクローナル抗体が、特に、好ましくは10-7Ｍ未満、特に10-8Ｍ未満、特に10-9Ｍから10-11Ｍまでの範囲のKDを特徴とするAMHR-IIについての親和性を有する、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ヒト化12G4モノクローナル抗体が：
a)
-配列番号１または配列番号２で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号３または配列番号３と少なくとも80%の相同性を有する配列で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される軽鎖と、
b)
-配列番号４または配列番号５で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号６または配列番号６と少なくとも80%の相同性を有する配列で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される重鎖と
を含むかまたはそれらで構成され、
ヒト化12G4モノクローナル抗体が、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含み、好ましくは10-7Ｍ未満、特に10-8Ｍ未満、特に10-9Ｍから10-11Ｍまでの範囲のヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)についてのKDを有する、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記変異ヒト化12G4モノクローナル抗体が：
a)
-配列番号７または配列番号８で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号３で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される軽鎖と、
b)
-配列番号９または配列番号10で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号６で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される重鎖と
を含むかまたはそれらで構成される、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
変異ヒト化12G4モノクローナル抗体が、3C23Kクローンにより生成されるか、またはヒト化12G4モノクローナル抗体の断片が、3C23Kクローンにより生成される変異ヒト化12G4モノクローナル抗体の断片である、請求項４または５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
抗体が、動物遺伝子組換えにより生成される組換え抗体である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
抗がん剤が、パクリタキセル、またはオキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチンからなる群より選択される白金塩、特にカルボプラチンである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
3C23Kクローンにより生成される変異12G4モノクローナル抗体とカルボプラチンとを含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
3C23Kクローンにより生成される変異12G4モノクローナル抗体とパクリタキセルとを含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
静脈内または腹腔内経路による投与を意図する製剤での請求項１〜10のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
患者に投与される抗体の治療有効量が、約0.07 mgから約35000 mgまで、好ましくは約0.7 mgから約7000 mgまで、好ましくは約0.7 mgから約1400 mgまで、好ましくは約0.7 mgから約700 mgまで、より好ましくは約0.7 mgから約70 mgまでの範囲である、請求項１〜11のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
患者に投与される抗がん剤の治療有効量が、約10 mgから約700 mgまで、好ましくは約20 mgから約350 mgまでの範囲であり、好ましくは約110 mgである、請求項１〜12のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
患者に投与される抗体の用量が、約70 mgであり、患者に投与される抗がん剤の用量が、約110 mgである、請求項１〜13のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
抗がん剤とヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体とを含む、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための組成物。
【請求項１６】
ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態が、がん、特に卵巣癌である、請求項15に記載の医薬品として用いるための組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体を活性成分として含む新規医薬組成物、およびこれらの組成物の治療への使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒト抗ミュラー管ホルモンは、560アミノ酸の糖タンパク質であり、TGF-βファミリーの一員である。これは、胎児精巣のセルトリ細胞から分泌されるホルモンであり、ミュラー管の変性を引き起こす。成体において、これはセルトリ細胞およびライディッヒ細胞(精巣)ならびに顆粒膜細胞(卵巣)で発現される。これは、濾胞形成の調節における成体卵巣の活性において役割を演じる。
【０００３】
抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)は、573アミノ酸のペプチドであり、セリン-トレオニンキナーゼ活性を有する。これは、ヒト生殖器系の発達と関連するミュラー管の退縮に関与する。ミュラー管は男性において萎縮し、ここでこれは前立腺小嚢と精巣垂(sessile hydatid)とだけを形成するが、女性において維持され、ファロピウス管、子宮および膣の大部分を生じる。この受容体はヒト卵巣上皮腫瘍細胞上で頻繁に発現される。
【０００４】
国際出願WO 2008/053330は、卵巣癌を治療するためのAMHR-IIを指向するマウス12G4モノクローナル抗体について記載している。
【０００５】
国際出願WO 2011/141653は、対応する非変異キメラ抗体のものと少なくとも等しい親和性、AMHR-II受容体に関する特異性を有し、免疫応答を誘発しない変異ヒト化12G4抗体またはその断片について記載している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態を有する患者にとって有利な代替治療を提案することである。
ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態は、特に、卵巣癌、特に転移性卵巣癌、漿液性がん、副腎腫(l'hypernephrome)、類内膜(l'endometrioide)、コロイド状上皮(l'epithelium colloide)であり得る。これはまた、前立腺癌、胚細胞癌、子宮内膜癌、子宮のミュラー管混合悪性腫瘍、平滑筋肉腫および子宮内膜間質肉腫であり得る。
【０００７】
卵巣癌は、婦人科のがんの主な原因であり、女性のがんによる死亡の５番目に多い原因である。卵巣がんの組織学的起源は、以下の３つである：
表面上皮(様々なサブタイプの上皮腫瘍)、これは卵巣癌の85〜90%を占める、
性索/間質(顆粒膜腫瘍(卵巣癌の全体の３%))、これは卵巣腫瘍の約10%を占める、
胚細胞、これは卵巣癌の５%を占める。
これは、初期段階中は一般的に無症状であり、よって、そのあだ名は「サイレントキラー」である(La Marca A.、Volpe A. The Anti-Mullerian hormone and ovarian cancer. Human Reproduction Update、第13巻、第３号、265〜273頁、2007)。
【０００８】
４つの段階と予後があり(FIGO分類: International Federation of Gynaecology and Obstetrics)、これについては、生存率はステージ２から著しく減少する：
ステージＩ:卵巣に限定される腫瘍(５年生存率:90〜70%)、
ステージII:１または２つの卵巣中と、骨盤にまで拡張した腫瘍(５年生存率:70〜40%)、
ステージIII:１または２つの卵巣中と、骨盤の外側にまで拡張した腫瘍(５年生存率:20%)、
ステージIV:腹膜転移を除く遠隔転移(５年生存率:＜10%)、
(Fauci, Braunwaldら、Principles of internal medicine. Harrison's第17版/National Cancer Institute cancer.gov / CNGOF (French National Colleges of Gynaecologists and Obstetricians)。
【０００９】
卵巣癌に関して、治療のために用いられる主な方策は、手術および化学療法、特に第一選択処置としてカルボプラチンとパクリタキセルとの混合物である。
【００１０】
上皮増殖因子受容体(EGFR、Ozols R. F.ら、Focus on epithelial ovarian cancer、Cancer Cell. 2004年１月; 5(1): 19〜24)を指向するセツキシマブのようなモノクローナル抗体も、最近、開発されている。CA-125を指向するアバゴボマブ、血管内皮増殖因子(VEGF-A)を指向するアバスチンまたは葉酸受容体アルファ(FRA)を指向するファーレツズマブのようなその他のモノクローナル抗体は、現在第III相にある。
【００１１】
本発明の目的は、現在開発されている抗体が標的にするのとは異なる標的を指向する治療を提案することである。本発明は、AMHR-IIと関連する様々な病態に対する治療を提案する利点をもたらす。さらに、卵巣癌の場合、本発明は、腫瘍量を低減するために参照療法よりも効果的であり、よって患者の状態のより迅速な改善を可能にする治療の可能性をもたらす。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
この目的は、本発明による組成物により達成される。
本発明は、
抗がん剤と、
ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体と
を活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明において、用語「抗体」は、４つの鎖、すなわち２つの軽鎖と２つの重鎖(それぞれが可変領域と定常領域とを含む)とからなる多量体タンパク質である免疫グロブリンのことをいう。より厳密には、それぞれの軽鎖は、可変領域(VL)と定常領域(CL)とからなる。それぞれの重鎖は、可変領域(VH)と、３つの定常ドメインCH1、CH2およびCH3からなる定常領域とからなる。ドメインCH2およびCH3は、ドメインFcを構成する。軽鎖の可変領域は、４つのフレームワークドメインに囲まれた３つの抗原認識決定領域(相補性決定領域、CDR)からなる。可変領域の３次元折りたたみは、３つのCDRがタンパク質の同じ側に露出され、規定された抗原を認識する特異的構造の形成を可能にするようなものである。
【００１４】
「抗がん剤」は、巨大分子(DNA、RNA、タンパク質など)の生合成に干渉するか、もしくは細胞増殖を阻害できるか、または例えばアポトーシスもしくは細胞傷害により細胞死を導くことができる任意の分子と定義される。抗がん剤としては、アルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤およびインターカレート剤、代謝拮抗剤、切断剤(agents scindants)、チューブリン干渉剤、モノクローナル抗体が挙げられる。
【００１５】
「医薬的に許容される賦形剤」は、細胞、細胞培養物、組織または生物などの生物系に適合する非毒性物質のことをいう。
【００１６】
具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、前記AMHR-IIと結合する抗体が、ポリクローナル抗体である、医薬組成物に関する。
用語「ポリクローナル抗体」は、標的タンパク質の様々な抗原決定基を認識できる抗体の混合物のことをいう。
【００１７】
別の具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、前記抗体が、モノクローナル抗体、好ましくはキメラの又はヒト化12G4モノクローナル抗体である、医薬組成物に関する。
「モノクローナル抗体」は、標的タンパク質の単一の抗原決定基だけを認識する抗体と定義される。
「キメラモノクローナル抗体」により、軽鎖および重鎖の可変領域が、軽鎖および重鎖の定常領域の種とは異なる種に属する抗体を意味する。拡張してまたは慣例によって、キメラ抗体は、ヒト起源の定常部分を有する抗体のことをいう。
【００１８】
本発明によるキメラ抗体は、遺伝子組み換えの技術を用いて調製してよい。例えば、キメラ抗体は、マウスモノクローナル抗体の重鎖の可変領域をコードする相補DNA (cDNA)のヌクレオチド配列またはゲノム配列(イントロンを含む)と、それと連結されたヒト抗体の重鎖の定常領域をコードするヌクレオチド配列とを含むキメラ遺伝子を構築することにより作製してよく、また、マウスモノクローナル抗体の軽鎖の可変領域をコードするヌクレオチド配列と、それと連結されたヒト抗体の軽鎖の定常領域をコードするヌクレオチド配列とを含むキメラ遺伝子を構築することにより作製してよい。プロトプラスト融合または任意のその他の技術により前記キメラ遺伝子を例えばマウス骨髄腫の株化細胞にトランスフェクションすることにより、形質転換細胞によるマウス-ヒトキメラ抗体が生成される。このような抗体の調製について最初に記載した文献は、Morrisonら、Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.、81、6851〜55頁(1984)である。文献Boulianne, G. L.ら、Nature、312: 643〜646 (1984)、Sun, L.K.ら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1984)、214〜218、US 4,816,567、US 6,331,415、US 6,808,901およびEP 125023も当業者により参考文献として用いられ、ウサギFab断片とヒトFc断片とから形成される抗体を得るための、免疫グロブリンの鎖間ジスルフィドブリッジの分割とその後のこれらの同じジスルフィドブリッジの規則的な再構成の手順について記載するBobrzecka, K.ら、Immunology Letters 2、151〜155頁も参照できる。
【００１９】
文献FR 2641468に記載されるキメラ抗体の調製のための別の可能なアプローチは、マウスモノクローナル抗体のFab'断片を、カップリング剤、例えばジイミドを用いてヒトポリクローナル免疫グロブリン、特にIgGまたはFc断片にグラフトすることである。Ig-Fab' (Fab'-Igともいう)、Fc-Fab'または(Fab')2型のキメラ抗体をこのようにして得ることができる。このようなキメラ抗体は、可変部分だけでなくFab'断片全体をグラフトすることを特徴とする。
一方、別の著者らは、ポリクローナル抗体のFab'断片をIgGまたはFc断片にグラフトすることによる一価キメラ抗体の生成について記載している(G.T. Stevensonら、Med. Oncol. & Tumor、1985、Pharmacother.、第１巻、第４号、275〜278、1984)。
ヒト免疫グロブリンの軽鎖および重鎖の定常領域をコードする遺伝子の部分による、マウス免疫グロブリンの軽鎖および重鎖の定常領域をコードする遺伝子の部分の間のインビボ相同組換えも、このような抗体を得るために用いることができる手段である(US 5,204,244またはUS 5,202,238)。これは、網羅的な列挙ではない。
【００２０】
「ヒト化モノクローナル抗体」により、抗原認識に関与する領域(超可変領域(CDR:相補性決定領域)と、時折、FR領域(フレームワーク領域)のあるいくつかのアミノ酸)の配列のいくらかまたは全てが非ヒト起源(好ましくはマウス)のものであるが、抗原認識に関与しない定常領域および可変領域の配列がヒト起源のものである抗体を意味する。
【００２１】
本発明によるヒト化抗体は、Jonesら、Nature、1986、321-522-525により最初に文書化されたもののような公知の技術により調製できる。これは、ヒト抗体の超可変領域(CDR)をマウス起源の超可変領域(ともに軽鎖のレベルであるが、重鎖のレベルでも)で置き換えることを含んだ。当業者に「CDRグラフト化」の名称の下で現在では公知のこの技術は、Singerら、J. Immun. 150: 2844〜2857 (1993)、Riechmanら、Nature、第332巻、323: 326 (1988)または特許US 5,225,539; US 5,585,089; EP 0682040(これらも参考文献として用いることができる)のような多数の文献に記載されている。
【００２２】
しかし、CDR領域のグラフト化により生成されるヒト化抗体のほとんどは、CDRを含む非ヒトアミノ酸の空間配置および抗原との結合におけるフレームワーク領域のあるいくつかのアミノ酸の主な役割のせいで、マウス抗体と比べて親和性が低減している。このために、今日では、当業者は、ヒト受容Ig中で、CDRだけでなく抗原の結合部位に貢献し得るフレームワーク領域の残基もしばしば置き換えるのである。
【００２３】
抗体をヒト化するための別の技術は、特異的決定残基(特異性決定領域、SDR)をグラフト化する技術であり、これは、CDR領域全体をもはやグラフトせず、非ヒト抗体のSDR領域だけをヒト可変領域においてグラフトすることからなる(Tamuraら、J Immunol. 2000; 164: 1432〜41)。SDR領域は、抗原と直接接触するCDRの領域と定義される(Padlanら(1995)、FASEB J. 9: 133〜139)。この技術は、よって、SDRの同定を必要とする。このことは、例えば、既に同定されたSDRのデータベース(http://paradox.harvard.edu/sdr)を用いて抗原-抗体複合体の3D構造を決定することにより、またはヒト可変配列を、DomainGapAlign、CLUSTALW2、CLUSTALX、BLASTもしくはFASTAのようなコンピュータソフトウェアを用いて非ヒト種のものと比較することにより行うことができる。
ヒト化抗体を得るための別の代替は、「簡略CDR(CDR abreges)」とよばれる領域のグラフト化からなる(「簡略CDRのグラフト化」)。これは、SDR領域といくらかの隣接残基とを、配列の上流および下流にグラフトすることを含む。De Pascalisら、The Journal of Immunology、2002、169: 3076〜3084; Kashmiri Syed V.Sら、Methods、第36巻、2005年５月号、25〜34頁の文献を参考文献として用いることができる。
【００２４】
Antitopeにより開発された複合ヒト化技術(WO 2006082406)は、フレームワーク領域を独立して考慮し、抗原と相互作用する残基の提示が、それらの配向においてよりよく保存されるようにヒト等価物を別に選択することを狙いとするCDRグラフト化技術である。
ImmunoGen (US 5,639,641)またはXoma (EP 0571613、US 5,766,886、US 5,770,196、US 5,821,123、US 5,869,619) により開発された「上張り(veneering)」ともよばれるいわゆる表面変更技術「可変ドメイン表面変更(resurfacing)」を用いることもできる。この技術は、マウス抗体のフレームワーク領域中の表面上に露出した残基を、ヒト抗体の表面上で通常見出される残基で置き換えることにより、マウス可変ドメインにヒト「プロフィール」を与えることからなる。Roguskaら、Proc Natl Acad Sci USA 1994; Mark G. E.ら、(1994) Handbook of Experimental Pharmacology、第113巻: The pharmacology of monoclonal Antibodies、Springer-Verlag、105〜134頁による文献も参考文献として用いることができる。
【００２５】
AvantGenにより開発されたGermliner(商標)プラットフォームも用いることができる(http://www.avantgen.com/AvantGensTechnologiesandServices.pdf)。これにより、CDR3だけが非ヒト起源のものであるヒト化抗体を得ることができる。
これは網羅的な列挙ではない。前記ヒト化抗体を得ることは、さらに、好ましくは、親和性成熟プロセスと組み合わされる。
【００２６】
ヒト化12G4モノクローナル抗体の生成は、国際出願WO 2011/141653に詳細に記載されている。この発明に記載される抗体は、単離および生成される。これらの抗体は成熟であり、すなわち抗原を認識することを可能にする特別の３次元構造を有し、抗原認識のために必須な全ての翻訳後修飾、特にグリコシル化ならびに分子内および分子間ジスルフィドブリッジの形成を有する。
【００２７】
別の態様によると、本発明は、Fc、Fab'-SH、Fd、Fv、Fab、F(ab')2、Fab'、dsFv、scFv、Sc(Fv)2、ダイアボディ、トリアボディもしくはテトラボディまたはナノボディからなる断片の群から選択される、上で定義される変異ヒト化12G4モノクローナル抗体の断片に関する。
【００２８】
さらにより具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、キメラまたはヒト化12G4モノクローナル抗体が、変異され、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含む、医薬組成物に関する。
【００２９】
さらにより具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、キメラまたはヒト化12G4モノクローナル抗体が、変異され、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含み、好ましくは10-7Ｍ未満、特に10-8Ｍ未満、特に10-9Ｍから10-11Ｍまでの範囲のKDを特徴とするAMHR-IIについての親和性を有する、医薬組成物に関する。
より具体的には、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合するモノクローナル抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、前記モノクローナル抗体が、ヒト化12G4抗体またはヒト化12G4モノクローナル抗体の断片であり(前記ヒト化12G4モノクローナル抗体は変異されている)、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含み、前記変異抗体が、好ましくは10-7Ｍ未満、特に10-8Ｍ未満、特に10-9Ｍから10-11Ｍまでの範囲のKDを特徴とするヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)についての親和性を有する、医薬組成物に関する。
【００３０】
「変異ヒト化12G4モノクローナル抗体」により、軽鎖の可変領域および/または軽鎖の定常領域および/または重鎖の可変領域または重鎖の定常領域において少なくとも１つの変異が行われたヒト化12G4モノクローナル抗体を意味する。本発明による組成物中の変異ヒト化12G4抗体は、対応する非変異キメラ抗体のものと少なくとも等しい親和性、AMHR-IIに関する特異性を有し、免疫応答を誘発しない。
【００３１】
さらにより具体的に、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合するモノクローナル抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、前記変異ヒト化モノクローナル抗体が：
a)
-配列番号１または配列番号２で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号３または配列番号３と少なくとも80%の相同性を有する配列で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される軽鎖と、
b)
-配列番号４または配列番号５で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号６または配列番号６と少なくとも80%の相同性を有する配列で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される重鎖と
を含むかまたはそれらで構成され、
ヒト化12G4モノクローナル抗体が、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含み、好ましくは10-7Ｍ未満、特に10-8Ｍ未満、特に10-9Ｍから10-11Ｍまでの範囲のヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)についてのKDを有する、医薬組成物に関する。
【００３２】
さらにより具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、キメラまたはヒト化12G4モノクローナル抗体が、変異され、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含む、医薬組成物に関する。
【００３３】
抗体の異なる部分のアミノ酸配列の参照を、以下の表に示す。
【表１】
2015506341.tif 000002
【００３４】
さらにより具体的に、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合するモノクローナル抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、前記変異ヒト化モノクローナル抗体が：
a)
-配列番号７または配列番号８で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号３で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される軽鎖と、
b)
-配列番号９または配列番号10で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号６で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される重鎖と
を含むかまたはそれらで構成される、医薬組成物に関する。
【００３５】
さらにより具体的に、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合するモノクローナル抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、前記変異ヒト化モノクローナル抗体が：
a)配列番号11(リーダーなし)または配列番号12(リーダーあり)で表されるアミノ酸配列で構成される軽鎖と、
b)配列番号13(リーダーなし)または配列番号14(リーダーあり)で表されるアミノ酸配列を含むかまたはそれで構成される重鎖と
を含むかまたはそれらで構成される、医薬組成物に関する。
【００３６】
さらにより具体的に、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合するモノクローナル抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、前記変異ヒト化モノクローナル抗体が、3C23Kクローンにより生成される、医薬組成物に関する。
3C23Kクローンにより生成される変異ヒト化モノクローナル抗体は、国際出願WO 2011/141653に詳細に記載されている。ヒト化12G4モノクローナル抗体と比べて、3C23K抗体は3C_23抗体の変異と、さらなる変異とを、軽鎖の可変領域のCDR中に有し(E184K)、ここでは、グルタミン酸がリジンで置き換えられ、すなわち酸性アミノ酸が塩基性アミノ酸で置き換えられているので、完全に異なる電荷を有するが(反対の符号であるので)、まだ活性を示し、特に、非変異ヒト化12G4 抗体のものより非常によく、非変異キメラ12G4抗体のものよりもかなり大きい親和性を示し、免疫応答を引き起こさない。
3C23Kクローンにより生成される変異ヒト化モノクローナル抗体は、約50%の含量のフコース化を示す。
【００３７】
別の態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合するモノクローナル抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、前記変異ヒト化モノクローナル抗体が、出願WO 2011/141653に記載され、3C_23、6B_78、4C_35および5B_42からなる群より選択されるクローンにより生成される、医薬組成物に関する。
【００３８】
具体的な実施形態において、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、前記抗体が、動物遺伝子組換えにより生成される組換え抗体である、医薬組成物に関する。
この組換え抗体は、よって、当業者に知られる任意の技術、例えば抗体の重鎖および/または軽鎖をコードするヌクレオチド配列の発現および/または分泌を可能にする１以上のベクターで形質転換された宿主細胞における組換えにより生成できる。ベクターは、通常、プロモーター、翻訳開始および停止シグナル、ならびに転写の調節のために適当な領域を含む。これは、宿主細胞において安定に維持され、翻訳されたタンパク質の分泌を規定する特定のシグナルを場合によって有してよい。当業者は、これらの異なるエレメントを、用いる細胞宿主との関係で選択して最適化する。このようなベクターは、当業者が一般的に用いる方法により調製され、得られるクローンは、標準的な方法により適切な宿主に導入できる。細胞宿主は、原核または真核系、例えば細菌細胞、酵母細胞または動物細胞、特に哺乳類細胞から選択できる。モノクローナル抗体の生成のための好ましい哺乳類細胞は、YB2/0ラット系統、CHOハムスター系統、PER.C6TM(Crucell)、293、K562、NS0、SP2/0、BHKまたはCOSである。昆虫細胞を用いることも可能である。別の生成方法は、トランスジェニック生物、例えば植物または特にウサギ、ヤギもしくはブタのようなトランスジェニック動物の乳における組換え抗体の発現である。好ましい実施形態によると、抗体は、この糖タンパク質を生成するように遺伝子改変された非ヒトトランスジェニック哺乳動物の乳において生成される。好ましくは、トランスジェニックウサギまたはヤギの乳、好ましくはトランスジェニックヤギの乳である。有利には、動物遺伝子組換えにより、特にトランスジェニックヤギの乳腺において生成される抗体は、ガラクトシル化の程度が高い、例えば70%より高いグリコシル化を有する。
【００３９】
特に、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、抗がん剤が、パクリタキセルまたはオキサリプラチン、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群より選択される白金塩である、医薬組成物に関する。
【００４０】
抗がん剤は、白金塩以外の化学療法剤、小分子、モノクローナル抗体または血管新生抑制ぺプチボディから選択してもよい。
白金塩以外の化学療法剤は、インターカレート剤(DNA複製および転写の遮断)、例えばアントラサイクリン(ドキソルビシン、peg化リポソームドキソルビシン)、トポイソメラーゼ阻害剤(カンプトテシンおよび誘導体:カレニテシン、トポテカン、イリノテカン)またはSJG-136、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤(ボリノスタット、ベリノスタット、バルプロ酸)、アルキル化剤(ベンダムスチン、グルホスファミド、テモゾロミド)、有糸分裂阻害植物アルカロイド、例えばタキサン(ドセタキセル、パクリタキセル)、ビンカアルカロイド(ビノレルビン)、エポチロン(ZK-エポチロン、イクサベピロン)、代謝拮抗剤(ゲムシタビン、エラシタラビン、カペシタビン)、キネシンスピンドルタンパク質(KSP)阻害剤(イスピネシブ)、トラベクテジンまたはオムブラブリン(コンブレタスタチンA-4誘導体)を含む。
【００４１】
小分子としては、ポリ(ADP-リボース)ポリメラーゼ(PARP)阻害剤:オラパリブ、イニパリブ、ベリパリブ、ルカパリブ、CEP-9722、MK-4827、BMN-673、キナーゼ阻害剤、例えばチロシンキナーゼ阻害剤(TKI)が挙げられ、なかでも抗VEGFR分子(ソラフェニブ、スニチニブ、セジラニブ、バンデタニブ、パゾパニブ、BIBF 1120、セマキサニブ、カボザンチニブ、モテサニブ)、抗HER2/EGFR分子(エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ)、抗PDGFR分子(イマチニブ、BIBF 1120)、抗FGFR分子(BIBF 1120)、オーロラキナーゼ/チロシンキナーゼ阻害剤(ENMD-2076)、Src/Ablキナーゼ阻害剤(サラカチニブ)またはペリフォシン、テムシロリムス(mTOR阻害剤)、アルボシジブ(サイクリン依存性キナーゼ阻害剤)、 ボラセルチブ(PLK1 (polo様キナーゼ１)タンパク質の阻害剤、LY2606368 (チェックポイントキナーゼ1(chk 1)の阻害剤、GDC-0449 (ヘッジホッグ経路阻害剤)、ジボテンタン(ETA受容体の遮断薬)、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ(プロテアソーム阻害剤)、サイトカイン、例えばIL-12、IL-18、IL-21、INF-アルファ、INF-ガンマが挙げられる。
【００４２】
抗体としては、抗VEGF:ベバシズマブ、抗VEGFR:ラムシルマブ、抗HER2/EGFR:トラスツズマブ、ペルツズマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、MGAH22、マツズマブ、抗PDGFRアルファ:IMC-3G3、抗葉酸受容体:ファーレツズマブ、抗CD27: CDX-1127、抗CD56: BB-10901、抗CD105: TRC105、抗CD276: MGA271、抗AGS-8: AGS-8M4、抗DR5: TRA-8、抗HB-EGF: KHK2866、抗メソテリン:アマツキシマブ、BAY 94-9343(免疫毒素)、カツマキソマブ(EpCAM/CD3 ２重特異性抗体)、抗IL2R:ダクリズマブ、抗IGF-1R:ガニツマブ、抗CTLA-4:イピリムマブ、抗ルイスY: Hu3S193、SGN-15(免疫毒素)、抗CA125:オレゴボマブ、抗HGF:リロツムマブ、抗IL6:シルツキシマブ、抗TR2:チガツズマブ、抗アルファ５ベータ１インテグリン:ボロシキシマブ、抗HB-EGF: KHK2866が挙げられる。
血管新生抑制ぺプチボディは、AMG 386およびCVX-241から選択される。
【００４３】
より具体的に、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、抗がん剤が、カルボプラチンである、医薬組成物に関する。
さらにより具体的に、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、変異ヒト化モノクローナル抗体が、3C23Kクローンにより生成され、抗がん剤が、カルボプラチンである、医薬組成物に関する。
【００４４】
具体的な態様において、本発明は、抗がん剤とAMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、抗がん剤が、パクリタキセルである、医薬組成物に関する。
より具体的な態様において、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、変異ヒト化モノクローナル抗体が、3C23Kクローンにより生成され、抗がん剤が、パクリタキセルである、医薬組成物に関する。
【００４５】
具体的な態様において、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含む、静脈内または腹腔内経路による投与を意図する製剤での医薬組成物に関する。
【００４６】
本発明の医薬組成物は、任意の適切な投与経路、例えば非経口、経口、舌下、膣、直腸または経皮経路により、好ましくは静脈内、皮下または皮内注射により投与できる。筋肉内、腹腔内、滑膜内、くも膜下腔内または腫瘍内注射も可能である。注射は、急速投与の形で、または連続注入により行うことができる。抗体組成物および抗がん剤の組成物を別々に投与する場合、これらの組成物は、投与の形態が同一または異なっていてよい。
【００４７】
非経口投与用の調製物は、滅菌水性もしくは非水性液剤、懸濁剤または乳剤を含み得る。非水性溶剤の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、例えばオリーブ油、または注射用有機エステル、例えばオレイン酸エチルである。水性賦形剤は、水、アルコール/水溶液およびエマルジョンまたは懸濁液を含む。
【００４８】
本発明による医薬組成物は、１以上の医薬的に許容される補形剤または賦形剤を有利に含む。例えば、製薬の用途に適合し、当業者に知られる生理食塩水、生理的、等張、緩衝溶液などが挙げられる。組成物は、分散剤、可溶化剤、安定化剤、保存剤などから選択される１以上の剤または賦形剤を含有してよい。製剤(液体および/または注射可能および/または固体)中で用いることができる剤または賦形剤は特に、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリソルベート80、マンニトール、ゼラチン、ラクトース、植物油、アカシアなどである。組成物は、注射用懸濁剤、ゲル、油、錠剤、坐剤、散剤、硬ゼラチンカプセル剤、軟カプセル剤などの形で処方できる。
【００４９】
具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、患者に投与される抗体の治療有効量が、約0.07 mgから約35000 mgまで、好ましくは約0.7 mgから約7000 mgまで、好ましくは約0.7 mgから約1400 mgまで、好ましくは約0.7 mgから約700 mgまで、より好ましくは約0.7 mgから約70 mgまでの範囲である、医薬組成物に関する。
活性成分の投与量は、特に投与方法に依存し、当業者により容易に決定される。抗体の治療有効量(単位用量)は、数週間から数ヶ月にわたって週１回以上の投与で、0.01 mg/kgから500 mg/kgまで、好ましくは0.1 mg/kgから500 mg/kgまで、好ましくは0.1 mg/kgから100 mg/kgまで、好ましくは0.1 mg/kgから20 mg/kgまで、好ましくは0.1 mg/kgから10 mg/kgまで、より好ましくは1 mg/kgから10 mg/kgまで変動してよい。有効単位用量は、よって、体重70 kgの「平均的」患者について算出される用量から容易に導き出すことができる。
【００５０】
別の具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、患者に投与される抗がん剤の治療有効量が、約10 mgから約700 mgまで、好ましくは約20 mgから約350 mgまでの範囲であり、好ましくは約110 mgである、医薬組成物に関する。
抗がん剤の投与量は、特に投与方法に依存し、当業者により容易に決定される。治療有効量(単位用量)は、数週間から数ヶ月にわたって週１回以上の投与で、0.2 mg/m2から10 g/m2まで、好ましくは0.2 mg/m2から１g/m2まで、好ましくは２mg/m2から１g/m2まで、好ましくは20 mg/m2から１g/m2まで、より好ましくは20 mg/m2から0.5 g/m2まで変動してよい。有効単位用量は、よって、体表面積が約1.8 m2である「平均的」患者について算出される用量から導き出すことができる。
【００５１】
さらにより具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを活性成分として、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて含み、患者に投与される抗がん剤の治療有効量が、約110 mgであり、患者に投与される抗体の治療有効量が、約70 mgである、医薬組成物に関する。
【００５２】
本発明は、抗がん剤とヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体とを含む、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための組成物にも関する。
「治療」により、症状が目に見える、顕在する病態を処置するための手段を意味する。「予防」により、前記病態が発生することを妨げるための手段を意味する。
【００５３】
ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態は、特に：
- 卵巣癌、特に転移性卵巣癌およびその様々なサブタイプ、特に漿液性、明細胞、類内膜、粘液性、
- 胚細胞癌、
- 子宮内膜癌、
- 子宮のミュラー管混合悪性腫瘍、
- 平滑筋肉腫、
- 子宮内膜間質肉腫、
- 前立腺癌、
- 精巣癌
であり得る。
【００５４】
AMHR-II抗原を発現する腫瘍、すなわち好ましくは細胞の表面上で、細胞における著しいレベルのAMHR-II抗原の発現が観察される腫瘍は、優先的に標的にされる。
本発明によると、２つの治療剤を組み合わせて用いて、これらの両方の抗増殖効果を強化する。
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、前記抗体がポリクローナル抗体である組成物に関する。
【００５５】
別の具体的な態様によると、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、前記抗体が、モノクローナル抗体であり、好ましくはキメラまたはヒト化12G4モノクローナル抗体である、組成物に関する。
【００５６】
別の具体的な態様によると、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、前記抗体が、変異ヒト化12G4 抗体または変異ヒト化12G4モノクローナル抗体の断片であり、前記モノクローナル抗体が、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含む、組成物に関する。
【００５７】
別の具体的な態様によると、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、前記抗体が、変異ヒト化12G4 抗体または変異ヒト化12G4モノクローナル抗体の断片であり、前記モノクローナル抗体が、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含み、好ましくは10-7Ｍ未満、特に10-8Ｍ未満、特に10-9Ｍから10-11Ｍまでの範囲のKDを特徴とするAMHR-II親和性を有する、組成物に関する。別の具体的な態様によると、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、前記抗体が、変異ヒト化12G4抗体または変異ヒト化12G4モノクローナル抗体の断片であり、前記モノクローナル抗体が、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含む、組成物に関する。
【００５８】
別の具体的な態様によると、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、前記12G4抗体が：
a)
-配列番号１または配列番号２で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号３または配列番号３と少なくとも80%の相同性を有する配列で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される軽鎖と、
b)
-配列番号４または配列番号５で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号６または配列番号６と少なくとも80%の相同性を有する配列で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される重鎖と
を含むかまたはそれらで構成され、
ヒト化12G4モノクローナル抗体が、変異され、軽鎖および/または重鎖中に少なくとも１つの変異を含み、好ましくは10-7Ｍ未満、特に10-8Ｍ未満、特に10-9Ｍから10-11Ｍまでの範囲のヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)についてのKDを有する、組成物に関する。
【００５９】
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、ヒト化モノクローナル抗体が：
a)
-配列番号７または配列番号８で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号３で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される軽鎖と、
b)
-配列番号９または配列番号10で表されるアミノ酸配列の可変領域と、
-配列番号６で表されるアミノ酸配列の定常領域と
を含むかまたはそれらで構成される重鎖と
を含むかまたはそれらで構成される、組成物に関する。
【００６０】
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、ヒト化12G4モノクローナル抗体が、クローン3C-23Kにより生成される、組成物に関する。
【００６１】
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、ヒト化12G4モノクローナル抗体が、クローン 3C-23Kにより生成されるヒト化12G4モノクローナル抗体の断片である、組成物に関する。
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、抗体が、動物遺伝子組換えにより生成される組換え抗体である、組成物に関する。
【００６２】
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態が、がん、具体的には卵巣癌である、組成物に関する。
【００６３】
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、抗がん剤が、パクリタキセルまたはオキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチンで構成される群より選択される白金塩である、組成物に関する。
【００６４】
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、抗がん剤が、カルボプラチンである、組成物に関する。
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、抗がん剤が、パクリタキセルである、組成物に関する。
【００６５】
具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、3C23Kクローンにより生成される12G4モノクローナル抗体とカルボプラチンとを含む組成物に関する。
【００６６】
別の具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、3C23Kクローンにより生成される12G4モノクローナル抗体とパクリタキセルとを含む組成物に関する。
【００６７】
別の具体的な態様において、本発明は、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含む、静脈内または腹腔内経路による投与を意図する製剤での組成物に関する。
【００６８】
別の具体的な態様において、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、モノクローナル抗体と抗がん剤とが、別々、同時または逐次的投与を意図する、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための組成物に関する。
抗体と抗がん剤とは、１つの同じ医薬組成物中で組み合わせてよいか、または同時もしくは逐次的に投与できる別々の医薬組成物の形で用いてよい。特に、製品は、別々、すなわち付随してまたは独立して、例えば時間差を置いて投与してよい。
【００６９】
より具体的に、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、抗体と抗がん剤とが同じ医薬組成物中で組み合わされている、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための組成物に関する。
【００７０】
別の具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、患者に投与される抗体の治療有効量が、約0.07 mgから約35000 mgまで、好ましくは約0.7 mgから約7000 mgまで、好ましくは約0.7 mgから約1400 mgまで、好ましくは約0.7 mgから約700 mgまで、より好ましくは約0.7 mgから約70 mgまでの範囲である、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための組成物に関する。
【００７１】
別の具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、患者に投与される抗がん剤の治療有効量が、約10 mgから約700 mgまで、好ましくは約20 mgから約350 mgまでの範囲であり、好ましくは約110 mgである、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための組成物に関する。
【００７２】
別の具体的な態様によると、本発明は、抗がん剤と、AMHR-IIと結合する抗体とを含み、患者に投与される抗体の治療有効量が約70 mgであり、患者に投与される抗がん剤の用量が約110 mgである、AMHR-IIと関連する病態の予防または治療において医薬品として用いるための組成物に関する。
好ましい実施形態では、抗がん剤、特にカルボプラチンまたはパクリタキセルの投与量は、約0.01 mg/kgから約500 mg/kgまで、例えば0.1 mg/kgから300 mg/kgまで、または１日あたり約0.1 mgから20 gまでの範囲である。
変形として、より高い初期負荷用量と、その後の１回以上のより低い用量とを投与してもよい。別の変形として、それほど高くない初期負荷用量と、その後の１回以上のより高い用量とを投与してもよい。
【００７３】
具体的な実施形態において、抗AMHR-II抗体とカルボプラチンとは、約10/１から約0.1/１まで、特に約10/１から約１/１まで、または約１/１から約0.1/１までの範囲の抗体/カルボプラチンの比率で用いてよい。
別の具体的な実施形態において、抗AMHR-II抗体とパクリタキセルとは、約10/１から約0.1/１まで、特に約10/１から約１/１まで、または約１/１から約0.1/１までの範囲の抗体/パクリタキセルの比率で用いてよい。
【００７４】
本発明は、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体と抗がん剤とを含み、組み合わせ調製物の形である、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態、特にがん、より具体的に卵巣癌の予防または治療を意図する医薬品としての同時、逐次的または別々の使用のための製品にさらに関する。
具体的な態様によると、本発明は、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体と抗がん剤とを含み、組み合わせ調製物の形である、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態、特にがん、より具体的に卵巣癌の予防または治療を意図する医薬品としての同時、逐次的または別々の使用のための、抗体と抗がん剤との同時使用のための製品に関する。
【００７５】
別の具体的な態様によると、本発明は、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体と抗がん剤とを含み、組み合わせ調製物の形である、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態、特にがん、より具体的に卵巣癌の予防または治療を意図する医薬品としての同時、逐次的または別々の使用のための、抗体が抗がん剤の前に投与される、抗体と抗がん剤との逐次的使用のための製品に関する。
【００７６】
別の具体的な態様によると、本発明は、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と結合する抗体と抗がん剤とを含み、組み合わせ調製物の形である、ヒト抗ミュラー管ホルモンII型受容体(AMHR-II)と関連する病態、特にがん、より具体的に卵巣癌の予防または治療を意図する医薬品としての同時、逐次的または別々の使用のための、抗がん剤が抗体の前に投与される、抗体と抗がん剤との逐次的使用のための製品に関する。
【００７７】
以下の図面、表および実施例は、本発明の範囲を限定することなく本発明を説明する。
【図面の簡単な説明】
【００７８】
【図１】図1Aは、腫瘍細胞の注射の日から数えた日数の関数としての平均腫瘍量(ｙ軸上にmm3で表す)の変動を示す。図1Bは、腫瘍細胞の注射の日から数えた日数の関数としての腫瘍量中央値(ｙ軸上にmm3で表す)の曲線を示す。それぞれのグラフにおいて、塗りつぶした四角と重なる曲線は対照群におけるマウスの平均値を表し、菱形と重なる連続曲線は無関係の抗体LFB-R565で処置したマウスの群を表し、塗りつぶした三角形と重なる曲線は3C23K抗体で処置したマウスの群を表し、塗りつぶした円と重なる連続曲線はカルボプラチンで処置したマウスの群を表し、塗りつぶした円と重なる点線の曲線はカルボプラチンと無関係の抗体LFB-R565とで処置したマウスの群を表し、塗りつぶした三角形と重なる点線の曲線はカルボプラチンと3C23K抗体とで処置したマウスの群を表す。
【図２】図2A〜2Fは、群ごとの個別の腫瘍量の曲線を示す。2A〜2Fのグラフのそれぞれについて、ｘ軸は、腫瘍細胞の注射の日から数えた日数を示し、ｙ軸は、腫瘍量を示し、それぞれの曲線は、１匹の動物についての腫瘍量の発展を示す。図2Aは、マウスの対照群を示し、図2Bは、無関係の抗体LFB-R565で処置したマウスの群を示し、図2Cは、3C23K抗体で処置したマウスの群を示し、図2Dは、カルボプラチンで処置したマウスの群を示し、図2Eは、カルボプラチンと無関係の抗体とで処置したマウスの群を示し、図2Fは、カルボプラチンと3C23K抗体とで処置したマウスの群を示す。
【図３】図3A、3Bおよび3Cは、単剤療法にて3C23K抗体で、単剤療法または3C23K抗体との組み合わせにてパクリタキセルで、およびパクリタキセルでそれぞれ処置したマウスの４群における平均腫瘍量(3A)または腫瘍量中央値(3B)およびパーセント生存の変動を示す。NaCl溶液を対照として用いた。図3Aは、腫瘍細胞の注射の日から数えた日数の関数としての平均腫瘍量(ｙ軸上にmm3で表す)の変動を示す。図3Bは、腫瘍細胞の注射の日から数えた日数の関数としての腫瘍量中央値(ｙ軸上にmm3で表す)の曲線を示す。図3Cは、腫瘍細胞の注射の日から数えた日数の関数としての４群についてのそれぞれのパーセンテージ生存(ｙ軸上に)を示す。図3A〜3Cにおいて、菱形と重なる曲線は、対照溶液で処置した群に対応し、四角と重なる曲線は、単剤療法にて3C23K抗体で処置した群に対応し、円い点と重なる曲線は、パクリタキセルで処置した群に対応し、三角形と重なる曲線は、3C23K抗体とパクリタキセルとの組み合わせで処置した群に対応する。
【図４】図4A、4B、4Cおよび4Dは、対照溶液で(4A)、単剤療法にて3C23K抗体で(4B)、単剤療法にてパクリタキセルで(4C)、または3C23K抗体とパクリタキセルとの組み合わせで(4D)それぞれ処置したマウスの４群における個別の腫瘍量の曲線をそれぞれ示す。
【００７９】
表１は、処置予定のまとめを示す。
表２は、個別の腫瘍量についての未処理データのまとめを示す。
表３は、平均腫瘍量と標準偏差(SD)とについての未処理データのまとめを示す。
表４は、腫瘍量中央値とＴ/Ｃ比とについての未処理データを示す。
表５は、腫瘍量の統計分析を示す。
表６は、個別の体重についての未処理データのまとめを示す。
表７は、平均体重と標準偏差(SD)とについての未処理データのまとめを示す。
表８は、個別の体重についての未処理データのまとめを示す。
表９は、個別の腫瘍量についての未処理データのまとめを示す。
表10は、平均体重の変化についての未処理データのまとめを示す。
表11は、平均腫瘍量についての未処理データのまとめを示す。
表12は、腫瘍量中央値とＴ/Ｃ比とについての未処理データのまとめを示す。
表13は、統計分析の結果を示す。
表14は、生存パラメータについての未処理データのまとめを示す。
表15は、生存パラメータを示す。
【実施例】
【００８０】
雌性Swissヌードマウスでのヒト卵巣癌Cov434-AMHRII Asc1a5のモデルにおける、単剤療法またはカルボプラチンとの組み合わせでの3C23Kクローンにより生成される抗体(3C23K抗体)の活性評価
１.プロトコール
雌性Swissヌードマウス(Harlan Laboratories)に、第０日(D0)に150μLの容量でMatrigel(１:１比)中の7.106細胞のCov434-AMHRII Asc1a5(cDNA AMHRIIでトランスフェクトしたヒト卵巣癌の株化細胞)を皮下注射(s.c.)した。
3C23K抗体は、以下のスキームに従って評価した：６週間にわたって週２回、約10 mg/kg/注射にて合計12回の注射、この投与計画は以下、「Q3-4D12」という。別の群のマウスを、計画Q3-4D12に従って約10 mg/kg/注射で投与する無関係の抗体LFB-R565で処置した。
【００８１】
カルボプラチンは、最適下限の用量、すなわち約60 mg/kg/注射にて、以下のスキームに従って評価した：４週間にわたって週１回、この投与計画は、以下、「Q7D4」という。
カルボプラチンは、3C23K抗体または無関係の抗体LFB-R565との組み合わせでも評価した。カルボプラチンは、約60 mg/kg/注射にてQ7D4計画に従って、3C23K抗体または無関係の抗体LFB-R565は、約10 mg/kg/注射にて計画Q3-4D12に従って投与した。
マウスを、D11に、腫瘍量が50と158 mm3との間になったときに無作為化し、D13に処置を開始した(群あたり９匹のマウス)。処置日時は、表１に記載する。
【００８２】
単剤療法での3C23K抗体または単剤療法でのパクリタキセルの活性に対する3C23K 抗体とパクリタキセルとの組み合わせの活性を評価する関係において、3C23K抗体は、以下の計画に従って注射した：４週間にわたって週１回、Q7D4計画に従って約10 mg/kg/注射の用量で合計４回の注射；パクリタキセルは、以下の計画に従って注射した：４週間にわたって週１回、約15 mg/kg/注射の用量で合計４回の注射(Q7D4計画)。
マウスを、D13に、腫瘍量が58と150 mm3の間になったときに無作為化し、処置をD14に開始した(群あたり８匹のマウス)。
【００８３】
ａ.インビボでの実験のモニタリング
腫瘍は、通常、週２回計測した。腫瘍量(TV)は、以下の式を用いて算出した(ここで、長さは最長腫瘍直径に相当し、幅は最短腫瘍直径に相当し、腫瘍高さ)：TV (mm3) = (長さ×幅×高さ) / ２。
個別の腫瘍量の曲線をプロットした。
さらに、各群について、算出した平均腫瘍量または腫瘍量中央値を用いて腫瘍成長の曲線をプロットした。
動物は、腫瘍量が2000 mm3に到達したときまたは倫理的な理由により犠牲にした。平均値および中央値の曲線ならびに統計分析は群の20%のマウスが死亡したときに停止した。
１群あたり９匹のマウスを用いるある実験において、曲線および分析は、よって、群あたり８つより少ない値が得られた(８匹のマウスが生存)場合に停止した。
１群あたり８匹のマウスを用いるある実験において、曲線および分析は、群あたり７つより少ない値が得られた(７匹のマウスが生存)場合に停止した。
【００８４】
ｂ.処置効力の評価
処置対照群に対する処置マウスの腫瘍量中央値の比(Ｔ/Ｃ)として定義される腫瘍増殖の阻害は、以下のようにして算出した：
Ｔ/Ｃ = (処置群の平均TV / 対照群の平均TV)×100
National Cancer Instituteは、製品の抗腫瘍活性を評価するための以下の基準を用いた(Bisseryら、1991):
- Ｔ/Ｃが42%より大きい場合、製品は、効果がないとみなす。
- Ｔ/Ｃが42%と10%の間である場合、製品は、抗腫瘍効果を示す。
- Ｔ/Ｃが10%未満である場合、製品は、確かに効果的である。
さらに、処置が毒性効果を有するかを同定するために、マウスの体重を個別に週１回モニタリングした。マウスの平均体重は、群の20%のマウスが死亡するまで各群について算出した。
【００８５】
ｃ.統計分析
異なる群の間の統計的な差を、ANOVA比較により、Statgraphics centurion XVソフトウェアを用いて分析した。
ANOVAの表は、分散を２つの成分、すなわち群間成分と群内成分に分解する。比Ｆは、群内推定値に対する群間推定値の比である。試験ＦのＰ値が0.05以上である場合、95%の信頼水準で２群の平均値の間に統計的有意差はない。0.05未満のＰ値は、95%の信頼水準での２群の平均値の間の有意差を示す。
Ｆ比およびＰ値を用いる実験における統計分析の未処理データは、全ての実験について添付に示す。
【００８６】
Kruskal-Wallis検定も行った。Ｐ値が0.05以上である場合、95%の信頼水準で２群の中央値の間に統計的有意差はない。0.05未満のＰ値は、95%の信頼水準での２群の中央値の間の有意差を示す。
【００８７】
２.結果
2.1カルボプラチンと組み合わせた3C23K抗体の抗腫瘍活性の評価
3C23K抗体または3C23Kは、対照(NaCl溶液)およびLFB-R565抗体(またはLFB-R565)と比較して有意な抗腫瘍活性を示すことが明らかである(図１および２；表２、３、４および５)。対照と比べて、3C23KのＴ/Ｃ比は、D14からD36まで減少し、D18に、Ｔ/Ｃ比は33%であり、D36まで絶えず23%未満であった(表４)。無関係の抗体LFB-R565と比べて、Ｔ/Ｃ比は、D14からD36まで減少し、D18に、Ｔ/Ｃ比は41%であり、D36まで絶えず26%未満であった(表４)。
また、無関係の抗体LFB-R565での処置は、Ｔ/Ｃ比が68%未満に決してならなかったので(表４)、対照と比較して抗腫瘍活性を示さない(図１および２；表２、３、４および５)。
カルボプラチンも、対照または無関係の抗体LFB-R565と比較して有意な抗腫瘍活性を示す(図１および２；表２、３、４および５)。D18からD36まで、対照と比べてＴ/Ｃ比は徐々に減少し、値はD36にて40%であり、このことは抗腫瘍活性を示した(表４)。同様に、無関係の抗体LFB-R565で処置した群と比較した場合に、Ｔ/Ｃ比はD25からD36まで減少し、D36に35%に到達した(表４)。
【００８８】
カルボプラチンで処置した群についての結果と同様の結果が、対照群と比較してカルボプラチン+LFB-R565の組み合わせを用いて得られた。D18からD36まで、Ｔ/Ｃ比は徐々に減少し、D36にＴ/Ｃ比は40%であり、このことは抗腫瘍活性を示した(表４)。
カルボプラチン+LFB-R565で処置した群を処置群とみなし、LFB-R565単独と比較した場合、Ｔ/Ｃ比の減少がD22から開始して観察され、42%未満の２つのＴ/Ｃ比が、D25およびD36に見出された(表４)。
さらに、カルボプラチン+LFB-R565またはカルボプラチン単独で処置した群との間に差はなかった(図１；表２、３、４および５)。
【００８９】
単剤療法で用いた3C23K (10 mg/kg、Q3-4D12)およびカルボプラチン(60 mg/kg、Q7D4)は、試験した用量にて、このCov434-AMHRII Asc1a5異種移植腫瘍モデルにおいて抗腫瘍効果を示した(図１および２；表２、３、４および５)。
さらに、この試験条件において、3C23Kは、カルボプラチンより大きい抗腫瘍効果を示した。実際に、カルボプラチンで処置した群に比べて3C23Kで処置した群のＴ/Ｃ比は、D14からD39まで減少し、D22からD39までＴ/Ｃ比は42%未満であり、このことは、カルボプラチンのものより大きい3C23Kの抗腫瘍活性を示す(表４)。
【００９０】
3C23Kと組み合わせてカルボプラチンで処置した群を対照群と比較した場合、この組み合わせは、非常に強い抗腫瘍効果を示した：D18にＴ/Ｃ比は24%であり、D22からD36までＴ/Ｃ比は10%未満であった(図１および２；表２、３、４および５)。
また、カルボプラチン(60 mg/kg、Q7D4)と3C23K(10 mg/kg、Q3-4D12)との組み合わせは、単剤療法で用いたそれぞれの成分、3C23K(10 mg/kg、Q3-4D12)またはカルボプラチン(60 mg/kg、Q7D4)よりも強い抗腫瘍効果を示した(図１および２；表２、３、４および５)。
実際に、カルボプラチン+3C23Kで処置した群をカルボプラチンで処置した群と比較した場合、この組み合わせは、より大きい抗腫瘍活性を示した：D14にＴ/Ｃ比は減少し始め、D25からD43まで算出された比は11%未満であった。
さらに、3C23Kとカルボプラチンとで処置した群を3C23Kで処置した群と比較した場合、この組み合わせは、3C23Kでの単剤療法のものよりも大きい抗腫瘍活性を示した。D18にＴ/Ｃ比は減少し始め、D22とD29の間に42%未満であり(このことは抗腫瘍の有利性を示す)、D32とD49の間に11%未満であった(このことは抗腫瘍の大きい有利性を示す) (図１および２；表２、３、４および５)。
さらに、カルボプラチンと3C23Kとで処置した群は、無関係の抗体LFB-R565と組み合わせたカルボプラチンと比較しても、抗腫瘍の有利性を示した(表４)。
【００９１】
処置は、32日目まで影響を示さなかった(表６および７)。D32に、カルボプラチン、カルボプラチン+LFB-R565およびカルボプラチン+3C23Kで処置した群について体重の一過的な減少が観察された。D28のカルボプラチンの３回目の注射の後のこの減少は、D25での前回の測定と比較して15%以下であった。カルボプラチンまたはカルボプラチン+LFB-R565で処置した群について減少は同様であり(約15%)、カルボプラチン+3C23Kで処置した群について約１%であった。これらの３群において、軽度で一過性の体重の減少は、毒性効果とみなされなかった。なぜなら、この減少は、D34のカルボプラチンの４回目の注射の後に確認されなかったからである(表６および７)。
【００９２】
３.結論
本研究において、本発明者らは、10 mg/kg、Q3-4D12での3C23Kと最適下限の用量のカルボプラチン60 mg/kg、Q7D4との組み合わせを、対照群と比較して、Cov434-AMHRII Asc1a5異種移植腫瘍を有する雌性ヌードマウスについて評価した。無関係の抗体LFB-R565 (10 mg/kg、Q3-4D12)も、単独またはカルボプラチンとの組み合わせで試験した。
【００９３】
結果は、カルボプラチン(60 mg/kg Q7D4)が、Cov434-AMHRII Asc1a5に対して抗腫瘍活性を奏することを証明する。結果は、3C23K(10 mg/kg Q3-4D12)が、Cov434-AMHRII Asc1a5に対して抗腫瘍活性を奏することも証明する。
しかし、カルボプラチン単独で観察された抗腫瘍活性は、3C23K単独(10 mg/kg、Q3-4D12)で観察されたものよりも低かった。
3C23Kとカルボプラチンとの組み合わせは、3C23K単独またはカルボプラチン単独と比較した場合に有利性を示し、最小限でも相加効果を有する。
最後に、単独またはカルボプラチンとの組み合わせでの3C23Kの抗腫瘍活性は、単独または組み合わせにて無関係の抗体を用いて効力が観察されなかったので、特異的である。
【００９４】
【表２−１】
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【００９５】
【表２−２】
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【００９６】
【表３−１】
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【００９７】
【表３−２】
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【００９８】
【表３−３】
2015506341.tif 000007
【００９９】
【表４】
2015506341.tif 000008
【０１００】
【表５】
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【０１０１】
【表６−１】
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【０１０２】
【表６−２】
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【０１０３】
【表６−３】
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【０１０４】
【表６−４】
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【０１０５】
【表６−５】
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【０１０６】
【表７−１】
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【０１０７】
【表７−２】
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【０１０８】
【表８】
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【０１０９】
2.2パクリタキセルと組み合わせた3C23K抗体の抗腫瘍活性の評価
3C23K抗体およびパクリタキセルを、単剤療法または組み合わせで、Cov434-AMHRII Asc1a5腫瘍細胞(ヒト卵巣癌の株化細胞)の注射を受けたマウスにおいてインビボで評価する。処置は、注射の14日後に開始する。
上記のQ7D4計画に従って10 mg/kgで投与された3C23K抗体は、対照溶液(NaCl溶液)と比較して、有意な抗腫瘍活性を示すことが観察された(図３および４；表９、11、12、13、14および15)。
対照溶液で処置した群に比べて、3C23K抗体で処置した群のＴ/Ｃ比は、D20から開始して減少した。D20にＴ/Ｃ比は57%であり、D40まで絶えず29%未満であった(表12)。
パクリタキセル単独は、対照溶液と比較して控えめな腫瘍増殖阻害を示す。D24からD41まで、Ｔ/Ｃ比は83%から53%まで変化する。
【０１１０】
対照と比較して、3C23K抗体とパクリタキセルとの組み合わせで処置した群において、より大きい抗腫瘍活性が得られた(図３および４；表９、11、12、13、14および15)。Ｔ/Ｃ比は、D20に38%未満であり、D41まで常に28%未満であった(表12)。さらに、D31、D35およびD41のＴ/Ｃ比はそれぞれ６%、11%および12%であった。Bisseryらにより1991に記載された結果と比較して、本発明の結果は、Ｔ/Ｃ比がD31とD41の間に10%付近およびそれ未満であり、このことは、3C23K抗体とパクリタキセルとの組み合わせを用いる処置が効果的な治療であることを示す。
【０１１１】
さらに、Q7D4計画に従って10 mg/kgで投与された3C23K抗体は、パクリタキセルのものよりも大きい抗腫瘍効果を示した。実際に、パクリタキセルで処置した群と比べて3C23Kで処置した群のＴ/Ｃ比は、D20から開始して減少した。D20のＴ/Ｃ比は47%であり、D41に39%未満であり(表12)、このことは、パクリタキセルのものより大きい3C23Kの抗腫瘍活性を示す。
【０１１２】
3C23K抗体(10 mg/kg、Q7D4)とパクリタキセル(15 mg/kg、Q7D4計画)との組み合わせは、単剤療法で用いたそれぞれの成分、3C23K (10 mg/kg、Q7D4)またはパクリタキセル(15 mg/kg、Q7D4計画)よりも強い抗腫瘍効果を示した。
実際に、上記の組み合わせで処置した群をパクリタキセルで処置した群と比較した場合、この組み合わせは、より大きい抗腫瘍活性を示した：D20にＴ/Ｃ比は減少し始め、比はD20に31%であり、D41まで35%未満であった(表12)。
上記の組み合わせで処置した群を3C23K抗体で処置した群と比較した場合、この組み合わせは、3C23Kでの単剤療法のものよりも大きい抗腫瘍活性を示した。D31にＴ/Ｃ比は減少し始め、Ｔ/Ｃ比はD31に27%であり、D48まで42%未満であった(表12)。これらの２群の間に差は示されたにもかかわらず、腫瘍成長の49%阻害が観察されたので、D51にＴ/Ｃ比は51%だけである(表12)。
【０１１３】
腫瘍量の統計分析は、Ｔ/Ｃ比の分析の結果を確認する。
単剤療法での3C23K抗体およびパクリタキセルとの組み合わせでの3C23K抗体は、D20から開始してD41まで、対照(NaCl溶液)のものと比較して有意な抗腫瘍活性を示す(表13)。
単剤療法でのパクリタキセルは、対照のものと有意に異なる活性を示さない(表13)。
単剤療法での3C23K抗体は、D20から開始してD41まで、単剤療法でのパクリタキセルのものとは有意に異なる抗腫瘍活性を示す(表13)。
単剤療法でのパクリタキセル処置と比較して、3C23K抗体とパクリタキセルとの組み合わせでの処置は、D20から開始してD41まで、よりよい抗腫瘍活性を示す(表13)。
【０１１４】
生存パラメータに基づく統計分析も、Ｔ/Ｃ比および腫瘍量の分析についての結果を確認する。
単剤療法での3C23K抗体および3C23K抗体とパクリタキセルとの組み合わせはそれぞれ、対照と比較して有意な抗腫瘍活性を示す(表15)。
単剤療法でのパクリタキセルは、対象のものと有意に異なる活性を示さない(表15)。
単剤療法での3C23K抗体は、単剤療法でのパクリタキセルのものとは有意に異なる抗腫瘍活性を示す(表15)。単剤療法でのパクリタキセル処置と比較して、3C23K抗体とパクリタキセルとの組み合わせでの処置は、よりよい抗腫瘍活性を示す(表15)。
処置は、体重に対して影響しない(表８および10)。
【０１１５】
結論として、3C23K抗体とパクリタキセルとの組み合わせは、3C23K単独またはパクリタキセル単独と比べて有利性を示し、最小限でも相加効果を有する。
【０１１６】
【表９】
2015506341.tif 000018
【０１１７】
【表１０】
2015506341.tif 000019
【０１１８】
【表１１】
2015506341.tif 000020
【０１１９】
【表１２】
2015506341.tif 000021
【０１２０】
【表１３】
2015506341.tif 000022
【０１２１】
【表１４−１】
2015506341.tif 000023
【０１２２】
【表１４−２】
2015506341.tif 000024
【０１２３】
【表１５】
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【０１２４】
【表１６】
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【図１】
2015506341.tif 000027
【図２−１】
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【図２−２】
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【図３】
2015506341.tif 000030
【図４−１】
2015506341.tif 000031
【図４−２】
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【配列表】
2015506341000001.app
【国際調査報告】
2015506341.tif 000033
2015506341.tif 000034
2015506341.tif 000035
2015506341.tif 000036
2015506341.tif 000037
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