(57)【要約】本発明は、生体分子、特にモノクローナル抗体の放射標識のための放射性ロジウム複合体、その調製方法及びその使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化３６】
2015517510.tif 000038
｛式中、
ｂは、単結合又は二重結合のいずれかであり；
・  ｂが二重結合の場合、ａは、存在せず、Ｒ３及びＲ４は、存在せず、そして
Ｒ１及びＲ２は、下記：
−  Ｈ、
−  ＯＲａ、
−  ＣＯＯＲａ、
−  ＮＲａＲｂ、
−  ＣＯＮＲａＲｂ、
−  ハロゲン、
−  ＮＯ２、
−  ＣＮ、
−  ＳＲａ、
−  ＣＯＳＲａ、
−  ＰＲａＲｂ、
−  Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲａ）２、
−  Ｐ（Ｏ）（ＯＲａ）２、
−  （Ｃ１−Ｃ１０）アルキル（これは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリールで置換され得る）、
−  （Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール（これらは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで置換され得る）、ならびに
−  ベクターに結合することが可能である官能基、及びターゲティング特性を有する官能基
からなる群より独立して選択されるか；
あるいは、Ｒ１及びＲ２は、これらを担持する炭素原子と一緒に、（Ｃ５−Ｃ１０）シクロアルケニル、（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロシクロアルケニル（これは、少なくとも１個の（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで置換され得る）、及び／又はＣＯ基を形成し得； 
・  ｂが単結合の場合、ａは、単結合であり、そして
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、下記：
−  Ｈ、
−  ＯＲａ、
−  ＣＯＯＲａ、
−  （Ｃ１−Ｃ１０）アルキル（これは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリールで置換され得る）、
−  （Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール（これらは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで置換され得る）、ならびに
−  ベクターに結合することが可能である官能基、及びターゲティング特性を有する官能基
からなる群より独立して選択され；
Ｒ５及びＲ６は、下記：
−  （Ｃ１−Ｃ１０）アルキル（これは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリールで置換され得る）、
−  （Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール（これらは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで置換され得る）
からなる群より独立して選択され；
ここで、Ｒ５及び／又はＲ６の該（Ｃ５−Ｃ１０）アリール、（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール及び（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基は、下記：
−  ＯＲａ、
−  ＣＯＨ、
−  ＣＯＯＲａ、
−  ＮＲａＲｂ、
−  ＣＯＮＲａＲｂ、
−  ハロゲン、
−  ＮＯ２、
−  ＣＮ、
−  ＳＲａ、
−  ＣＯＳＲａ、
−  ＰＲａＲｂ、
−  Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲａ）２、及び
−  Ｐ（Ｏ）（ＯＲａ）２
からなる群より選択される少なくとも１個の置換基で場合により置換されており；
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の該（Ｃ５−Ｃ１０）アリール、（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール、及び（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルは、ベクターに結合することが可能である官能基、及びターゲティング特性を有する官能基で場合により置換されており；そして
ここで、Ｒａ及びＲｂは、Ｈ、（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルの中から独立して選択され； 
Ｘは、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、及び２１１Ａｔからなる群より選択される重いハロゲンであり；
Ｌ１及びＬ２は、下記：
−
【化３７】
2015517510.tif 000039
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びａ、ｂは、上記のように定義されている］、
−  場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール、
−  ＣＯ基、
−  ＰＲｄＲｅＲｆ（ここで、Ｒｄ、Ｒｅ及びＲｆは、場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル及び場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリールから独立して選択される）、及び
−  場合により置換されている単環式、多環式又は非環式（Ｃ２−Ｃ１０）モノアルケン
からなる群より独立して選択されるか、
あるいは、Ｌ１とＬ２は、一緒に、場合により置換されている単環式、多環式又は非環式（Ｃ６−Ｃ１０）ジアルケンを形成し得る｝を有する化合物及びその薬学的に許容し得る塩又は塩基。
【請求項２】
式（Ｉ−１）：
【化３８】
2015517510.tif 000040
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｌ１、Ｌ２及びＸは、請求項１で定義されている］を有する、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１及びＲ２が、下記：
−  Ｈ、
−  ＮＯ２、
−  置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル
の中から選択されるか、
あるいは、Ｒ１及びＲ２が、これらを担持する炭素原子と一緒に、（Ｃ５−Ｃ１０）シクロアルケニル、又は少なくとも１個の（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロシクロアルケニル、及び／又はＣＯ基を形成し得る、
請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１及びＲ２が、Ｈである、請求項３記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ５が、場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリールで置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルである、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５が、ベンジル基である、請求項５記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ６が、場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリール、（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール及び（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルの中から選択される、請求項１〜６のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ６が、４−ニトロフェニルである、請求項７記載の化合物。
【請求項９】
Ｌ１及びＬ２が、一緒に、場合により置換されている単環式、多環式又は非環式（Ｃ６−Ｃ１０）ジアルケンを形成し得る、請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
Ｌ１がＬ２と一緒に、１，５−シクロオクタジエンを形成する、請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
官能基が、下記：
【化３９】
2015517510.tif 000041
からなる群より選択される、請求項１〜１０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１２】
Ｘが、２１１Ａｔである、請求項１〜１１のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の少なくとも１個が、ベクターに結合することが可能である官能基を含む、請求項１〜１２のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１４】
以下の式：
【化４０】
2015517510.tif 000042
で示されるうちの１つを有する、請求項１〜１３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１５】
請求項１３又は１４記載の少なくとも１つの化合物を含むコンジュゲートであって、該化合物の官能基を介してベクターに共有結合的に結合している、コンジュゲート。
【請求項１６】
式（ＩＩ）：
【化４１】
2015517510.tif 000043
［式中、ａ、ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｌ１及びＬ２は、請求項１〜１４のいずれか一項で定義されたとおりであり、そしてＹは、ハロゲン原子である］を有する化合物。
【請求項１７】
請求項１〜１４のいずれか一項記載の式（Ｉ）を有する化合物の調製方法であって、請求項１６記載の式（ＩＩ）の化合物の放射標識の工程を含む、方法。
【請求項１８】
放射標識の工程が、請求項１６記載の式（ＩＩ）の化合物中のＹと、（−Ｉ）の酸化状態のＸ（Ｘは、請求項１で定義されている）との配位子置換を含む、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
請求項１〜１５のいずれか一項記載の化合物を少なくとも１つの薬学的に許容し得る賦形剤と組み合わせて含む、医薬組成物。
【請求項２０】
腫瘍の処置又は位置確認におけるその使用のための、請求項１〜１５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２１】
腫瘍の処置方法であって、請求項１〜１４のいずれか一項記載の式（Ｉ）を有する化合物（ここで、該式（Ｉ）の化合物は、単独で投与されるか、又はベクターに結合される）の患者への投与を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体分子、特にモノクローナル抗体の放射標識のための放射性ロジウム複合体、その調製方法及びその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
アスタチン−２１１は、周囲の健康な組織に影響を与えずに小さな腫瘍体積における高放射線量を可能にする、標的アルファ療法のための有望な放射性核種である。適切な腫瘍ターゲティング生体分子と関連して、アスタチン−２１１は、その放射線物理特性のおかげで、癌の処置のための最良の候補の一つとなっている。特に、その物理的半減期（７．２１時間）は、放射線治療のために標識される生体分子の薬物動態に適合する（Zalutsky MR, Vaidyanathan G (2000) Curr Pharm Des. 6; 1433-1455）。これは、α粒子をビスマス２０９に照射することによりＢｉ−２０９（α、２ｎ）Ａｔ−２１１核反応を介して生成される。
【０００３】
アスタチンは、最も重いハロゲンである。この元素の安定的な同位体はないこと、及び最も寿命の長い同位体はわずか８．１時間の半減期である（Ａｔ−２１０）ことから、その化学は十分に理解されていない。加えて、数少ないサイクロトロンだけがアスタチン−２１１を生成することができるに過ぎない。そのため、アスタチンの反応性を研究及び予測するために、ヨウ素が一般的に使用されている。ヨウ素−１２５は、容易に入手可能であり、この状況下で特に有用である。しかし、アスタチンとヨウ素の化学において幾つかの類似点が認められる場合でも、多くの面で顕著な違い（例えば、アスタチンの金属特性）があり、ヨウ素を用いて得られた予備結果は、同様の条件下でアスタチンを用いて再現し得ない。
【０００４】
幾つかの酸化状態のアスタチンが確立されている（−１、０、＋１、＋３、＋５、＋７）。生体分子の標識のために、Ａｔ−２１１は一般的に、＋１の酸化状態で分子ベクターに結合して炭素−アスタチン結合（芳香族炭素−アスタチン（Zalutsky MR, Pradeep K. Garg, Henry S. Friedman, and Darell D. Bigner (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A, 86, 7149-7153）を形成し、又はホウ素−アスタチン結合（Wilbur DS, Chyan MK, Hamlin DK, Perry MA. (2009) Bioconjugate Chem. 20; 591-602）を形成するか、また頻度は少ないが、−１の酸化状態で結合する（例えば、金属−アスタチン結合）（Pruszynski M, Bilewicz A, Zalutsky MR (2007) Bioconjugate Chem. 19; 958-965）。
【０００５】
アスタチン−２１１は、分子ベクターにコンジュゲーションの後、様々な癌の標的放射性核種治療用に検討されている。しかし、インビボにおいて、この原子で標識された分子ベクターの脱アスタチン化が観察され、これにより健康な器官の非特異的な照射が引き起こされた。その分子ベクターへのアスタチンの結合の安定性を増加させるための標識方法の改善が依然として必要である。
【０００６】
アスタチンのために開発された標識方法はまた、ヨウ素の放射性同位体に適用することができる。治療のために最も多くの場合で考慮される同位体は、ヨウ素−１３１である。それは、８日の半減期を有するβ粒子放射体である。それは、安定なキセノン−１３１に崩壊する。適切なベクターにより、ヨウ素−１３１は、既に癌治療のための臨床応用を見出している（Macklis MR (2006) Int. J. Radiation Oncology Biol. Phys. 66; S30-S34）。容易に入手可能なヨウ素−１２５が、上記のより高価な同位体の使用の前に、予備放射性標識試験のために一般的に使用される。特に細胞内部移行ベクターと結合した場合のその極端に短いオージェ電子放出に関する治療のために、その使用が検討されている（Meredith MR et al (1995) J. Nucl. Med. 36; 2229-2233）。
【０００７】
ヨウ素−１２３及びヨウ素−１２４は、癌検出のための最も有用なヨウ素同位体を表す。１３．２時間の半減期及びγ崩壊を有しているため、ヨウ素−１２３はガンマカメラ検出による様々な診断用途に適している（Bourguignon MH, Pauwels EKJ, Loc'h C, Maziere B (1997) Eur. J. Nucl. Med. 24; 331-344）。ヨウ素−１２４は、陽電子放射により４．２日の半減期で崩壊する。それは、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）においてトレーサーとして使用することができる（Pentlow KS et al (1996) J. Nucl. Med. 37; 1557-1562）。
【０００８】
したがって、ハロゲンの放射性同位体で生体分子の放射性標識を可能にする新たな安定的な複合体を提供する必要がある。
【０００９】
本発明の目的は、生体分子、特にモノクローナル抗体の放射性標識のための新規な放射性複合体を提供することである。
【００１０】
本発明の目的は、標識化された生体分子が標識化されたままにしておくことを許し、かつ安定化した＋１の酸化状態のロジウム原子に結合したハロゲンを用いることによって検出される又は照射される特定の器官に結合する、放射性ハロゲン複合体を提供することである。
【００１１】
本発明の別の目的は、これらの複合体の調製方法を提供することである。
【００１２】
本発明の別の目的は、良好な収率でのこれらの複合体の調製方法を提供することである。
【００１３】
したがって本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2015517510.tif 000002
｛式中、
ｂは、単結合又は二重結合のいずれかであり；
・  ｂが二重結合の場合、ａは、存在せず、Ｒ３及びＲ４は、存在せず、そして
Ｒ１及びＲ２は、下記：
−  Ｈ、
−  ＯＲａ、
−  ＣＯＯＲａ、
−  ＮＲａＲｂ、
−  ＣＯＮＲａＲｂ、
−  ハロゲン、
−  ＮＯ２、
−  ＣＮ、
−  ＳＲａ、
−  ＣＯＳＲａ、
−  ＰＲａＲｂ、
−  Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲａ）２、
−  Ｐ（Ｏ）（ＯＲａ）２、
−  （Ｃ１−Ｃ１０）アルキル（これは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリールで置換され得る）、
−  （Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール（これらは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで置換され得る）、ならびに
−  ベクターに結合することが可能である官能基、及びターゲティング特性を有する官能基
からなる群より独立して選択されるか；
あるいは、Ｒ１及びＲ２は、これらを担持する炭素原子と一緒に、（Ｃ５−Ｃ１０）シクロアルケニル、（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロシクロアルケニル（これは、少なくとも１個の（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで置換され得る）、及び／又はＣＯ基を形成し得； 
・  ｂが単結合の場合、ａは、単結合であり、そして
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、下記：
−  Ｈ、
−  ＯＲａ、
−  ＣＯＯＲａ、
−  （Ｃ１−Ｃ１０）アルキル（これは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリールで置換され得る）、
−  （Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール（これらは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで置換され得る）、ならびに
−  ベクターに結合することが可能である官能基、及びターゲティング特性を有する官能基
からなる群より独立して選択され；
Ｒ５及びＲ６は、下記：
−  （Ｃ１−Ｃ１０）アルキル（これは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリールで置換され得る）、
−  （Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール（これらは、少なくとも１個の場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで置換され得る）
からなる群より独立して選択され；
ここで、Ｒ５及び／又はＲ６の該（Ｃ５−Ｃ１０）アリール、（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール及び（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基は、下記：
−  ＯＲａ、
−  ＣＯＨ、
−  ＣＯＯＲａ、
−  ＮＲａＲｂ、
−  ＣＯＮＲａＲｂ、
−  ハロゲン、
−  ＮＯ２、
−  ＣＮ、
−  ＳＲａ、
−  ＣＯＳＲａ、
−  ＰＲａＲｂ、
−  Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲａ）２、及び
−  Ｐ（Ｏ）（ＯＲａ）２
からなる群より選択される少なくとも１個の置換基で場合により置換されており；
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の該（Ｃ５−Ｃ１０）アリール、（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール、及び（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルは、ベクターに結合することが可能である官能基、及びターゲティング特性を有する官能基で場合により置換されており；そして
ここで、Ｒａ及びＲｂは、Ｈ、（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルの中から独立して選択され； 
Ｘは、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、及び２１１Ａｔからなる群より選択される重いハロゲンであり；
Ｌ１及びＬ２は、下記：
−
【化２】
2015517510.tif 000003
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びａ、ｂは、上記のように定義されている］、
−  場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール、
−  ＣＯ基、
−  ＰＲｄＲｅＲｆ（ここで、Ｒｄ、Ｒｅ及びＲｆは、場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル及び場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリールから独立して選択される）、及び
−  場合により置換されている単環式、多環式又は非環式（Ｃ２−Ｃ１０）モノアルケン
からなる群より独立して選択されるか、
あるいは、Ｌ１とＬ２は、一緒に、場合により置換されている単環式、多環式又は非環式（Ｃ６−Ｃ１０）ジアルケンを形成し得る｝を有する化合物及びその薬学的に許容し得る塩又は塩基に関する。
【００１４】
驚くべきことに、本発明者らは、（＋Ｉ）の酸化状態のロジウムを有する式（Ｉ）の複合体が、Ｎ−複素環式カルベン配位子によって安定化されていることを見出した。
【００１５】
さらに、（＋Ｉ）酸化状態のロジウムは、アスタチドと強力な結合を形成する軟らかい金属カチオンである。
【００１６】
定義:
用語「Ｎ−複素環カルベン」は、下記式：
【化３】
2015517510.tif 000004
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ａ及びｂは、上記のように定義されている］で示される基を指す。
【００１７】
用語「（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル」とは、鎖に１〜１０個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖であり得る、飽和又は不飽和の脂肪族炭化水素基を意味する。好ましいアルキル基は、鎖に１〜６個の炭素原子を有する。「分岐鎖」とは、メチル、エチル又はプロピルのような低級アルキル基が直鎖アルキル鎖に結合していることを意味する。「低級アルキル」とは、直鎖又は分岐鎖であり得る、鎖中の１〜４個の炭素原子を意味する。
【００１８】
「アルケン」又は「アルケニル」とは、２個の炭素原子間に少なくとも１つの二重結合を含み、かつ２〜１０個の炭素原子、好ましくは６〜１０個の炭素原子を含む、不飽和アルキルを意味する。「モノアルケン」は、ただ１つの二重結合を有するアルケンを指し、ジアルケンは、２つの二重結合を有するアルケンを指す。アルケン基は、非環式、単環式又は多環式（例えば、二環式）又は非環式であることができる。
【００１９】
本発明によると、「（Ｃ５−Ｃ１０）シクロアルケニル」は、５〜１０個の間の炭素原子を含む、環状アルケニル基を指す。
【００２０】
用語「（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロシクロアルケニル」は、５〜１０個の炭素原子を含む、環状アルケニル基を指し、ここで、１個以上の炭素原子は、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子のような１個以上のヘテロ原子；例えば、１もしくは２個の窒素原子、１もしくは２個の酸素原子、１もしくは２個の硫黄原子、又は異なるヘテロ原子の組み合わせによって置き換えられている。ヘテロシクロアルケニル部分の例には、ピリミジン又はヘキサヒドロピリミジンが含まれるが、これらに限定されない。
【００２１】
「アルキニル」とは、２個の炭素原子の間に少なくとも１つの三重結合を含み、かつ２〜１０個の炭素原子、好ましくは６〜１０個の炭素原子を含む、不飽和アルキルを意味する。
【００２２】
用語「（Ｃ５−Ｃ１０）アリール」は、置換可能な任意の環原子が置換基で置換され得る、芳香族の単環式、二環式、又は三環式の炭化水素環系を意味する。アリール部分の例には、フェニル及びナフチルが含まれるが、これらに限定されない。
【００２３】
用語「（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール」は、置換可能な任意の環原子が置換基で置換され得、かつ１個以上の炭素原子が、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子のような１個以上のヘテロ原子；例えば、１もしくは２個の窒素原子、１もしくは２個の酸素原子、１もしくは２個の硫黄原子、又は異なるヘテロ原子の組み合わせで置き換えられている、芳香族単環式、二環式、又は三環式の炭化水素環系を指す。ヘテロアリール部分の例には、イミダゾールが含まれるが、これに限定されない。
【００２４】
用語「ハロゲン」（又は「Ｈａｌ」）は、周期表の１７属の原子（ハロゲン）を指し、特に、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素原子が含まれる。
【００２５】
用語「重いハロゲン」は、ヨウ素及びアスタチンを指す。
【００２６】
表現「ＣＯ」は：
−Ｒ１及びＲ２が、これらを担持している炭素原子と一緒に形成する（Ｃ５−Ｃ１０）シクロアルケニルもしくは（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロシクロアルケニル基に属する炭素原子中の基、又は
−Ｌ１及び／又はＬ２がＣＯの場合、ロジウム原子に結合しているＣＯ基
を指す。
【００２７】
用語「ベクター」は、生物学的標的組織（処置される又は検出される病態に応じて）を認識することができる分子を指す。
【００２８】
特に、この用語は、生体分子を指す。
【００２９】
用語「ベクター」はまた、細胞に結合している有機化合物、又は細胞によって発現されるトランスポーターによって輸送される有機化合物（例えば、非限定的に、グルコース、アミノ酸、生体アミン）、特定の受容体に結合しているペプチド（例えば、非限定的に、ソマトスタチン、コレシストキニン、ニューロテンシン受容体）、ハプテン及び薬物を指す場合もある。
【００３０】
用語「ベクター」はまた、ナノカプセル、リポソーム、デンドリマー、又はカーボンナノチューブのような標的細胞を認識することができるナノキャリア化合物を指す場合もある。これらのナノキャリアは、必要に応じて、腫瘍特異的リガンドに結合し得る。
【００３１】
「生体分子」とは、抗体又はそのフラグメント又は任意の抗体構築物（抗体工学により得られるミニボディ、ジアボディ（二重特異性抗体）等のような）、ならびに標的細胞に結合するように選択される組換えタンパク質又は合成ペプチド（例えば、非限定的に、アフィボディ（Affibody））であると理解される。
【００３２】
表現「ベクターに結合することが可能である官能基」は、ベクターの化学官能基に対して反応性である化学基を指し、よってベクターとシントンとの間に安定な化学結合を形成することができる（これが、式（Ｉ）の化合物である）。
【００３３】
表現「ターゲティング特性を有する官能基」は、ベクターである化学基（例えば、非限定的に、ペプチド、ハプテン及び薬物）を指す。表現「ターゲティング特性を有する官能基」はまた、ベクターの特性を式（Ｉ）の化合物に与える化学基を指す場合もある。特にこの用語は、非限定的に、ハプテン、ペプチド又は薬物を指す場合もある。
【００３４】
ベクターに結合することが可能である又はターゲティング特性を有するこのような官能基のうち、以下：
−  ＮＯ２、
−
【化４】
2015517510.tif 000005
−
【化５】
2015517510.tif 000006
−  ＯＨ、
−  ＣＯＨ、
−  ＣＯＯＨ、
−  ＮＨ２、
−  ＮＨＲｋ（ここで、Ｒｋは、場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル及び場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリールの群より選択される）
−
【化６】
2015517510.tif 000007
−  ＮＣＳ、
−  ＮＣＯ、
−  ＳＨ、
−
【化７】
2015517510.tif 000008
（ここで、Ｒｌは、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリールである）、例えば、
【化８】
2015517510.tif 000009
−  （Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、
−  （Ｃ１−Ｃ１０）アルキレン−Ｎ３、
−  Ｎ３基、ならびに
−  ビオチニル及びその誘導体
が挙げられ得る。
【００３５】
好ましい実施態様において、官能基は、下記：
【化９】
2015517510.tif 000010
からなる群より選択される。
【００３６】
特別な実施態様において、本発明は、式（Ｉ−１）：
【化１０】
2015517510.tif 000011
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６、Ｌ１、Ｌ２及びＸは、上記のように定義されている］を有する化合物に関する。
【００３７】
好ましい実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、下記：
−  Ｈ、
−  ＮＯ２、
−  置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル
の中から選択されるか、
あるいは、Ｒ１及びＲ２は、これらを担持する炭素原子と一緒に、（Ｃ５−Ｃ１０）シクロアルケニル、少なくとも１個の（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロシクロアルケニル、及び／又はＣＯ基を形成し得る。
【００３８】
別の好ましい実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、下記：
−  Ｈ、
−  ＮＯ２、
−  エチル基（ベクターに結合することが可能である官能基、及びターゲティング特性を有する官能基で置換されている）
の中から選択されるか、
あるいは、Ｒ１及びＲ２は、一緒に、１個以上の（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルで置換されているヘキサヒドロピリミジン、及び／又はＣＯ基を形成し得る。
【００３９】
好ましくは、Ｒ１及びＲ２は、Ｈ又はＮＯ２である。
【００４０】
好ましくは、Ｒ１及びＲ２は、Ｈである。
【００４１】
特別な実施態様において、Ｒ５は、場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリールで置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルである。
【００４２】
特別な実施態様において、Ｒ５は、下記：
【化１１】
2015517510.tif 000012
［式中、
Ｒｊは、Ｈ、ベクターに結合することが可能である官能基、及びターゲティング特性を有する官能基、例えば：
−  ＮＯ２、
−
【化１２】
2015517510.tif 000013
−
【化１３】
2015517510.tif 000014
−  ＯＨ、
−  ＣＯＨ、
−  ＣＯＯＨ、
−  ＮＨ２、
−  ＮＨＲｋ（ここで、Ｒｋは、場合により置換されている（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル及び場合により置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリールの群より選択される）
−
【化１４】
2015517510.tif 000015
−  ＮＣＳ、
−  ＮＣＯ、
−  ＳＨ、
−
【化１５】
2015517510.tif 000016
（ここで、Ｒｌは、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ５−Ｃ１０）アリール又は（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリールである）、例えば、
【化１６】
2015517510.tif 000017
−  （Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、
−  （Ｃ１−Ｃ１０）アルキレン−Ｎ３、
−  Ｎ３基、ならびに
−  ビオチニル及びその誘導体
からなる群より選択される］である。
【００４３】
好ましい実施態様において、官能基は、下記：
【化１７】
2015517510.tif 000018
からなる群より選択される。
【００４４】
別の特別な実施態様において、Ｒ５は、ベンジル基である。
【００４５】
好ましくは、Ｒ６は、好ましくは置換されている（Ｃ５−Ｃ１０）アリール、（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール及び（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルの中から選択される。
【００４６】
特別な実施態様において、Ｒ６は、下記：
【化１８】
2015517510.tif 000019
［式中、Ｒｉは、Ｈ、ＮＯ２、及び（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルからなる群より選択される］である。
【００４７】
別の実施態様において、Ｒ６は、メチル基である。
【００４８】
別の実施態様において、Ｒ６は、４−ニトロフェニル基である。
【００４９】
本発明によると、Ｌ１及びＬ２は、共有結合分類（Covalent Bond Classification)(Green, M. L. H. (1995-09-20). "A new approach to the formal classification of covalent compounds of the elements". Journal of Organometallic Chemistry 500 (1-2): 127-148.）に従ってＬに分類される、２−電子供与性配位子の中から選択される。これらの配位子は、本発明の化合物の安定化において役割を担う。
【００５０】
特別な実施態様において、Ｌ１及びＬ２は、一緒に、場合により置換されている単環式、多環式又は非環式（Ｃ６−Ｃ１０）ジアルケンを形成し得る。
【００５１】
好ましくは、Ｌ１はＬ２と一緒に、１，５−シクロオクタジエン又はノルボルナジエンを形成する。
【００５２】
より好ましくは、Ｌ１はＬ２と一緒に、１，５−シクロオクタジエンを形成する。
【００５３】
特別な実施態様において、Ｘは、２１１Ａｔである。
【００５４】
別の実施態様において、Ｘは、１３１Ｉ、１２４Ｉ又は１２５Ｉからなる群より選択される重いハロゲンである。
【００５５】
別の実施態様において、本発明による化合物は、ベクターに結合することが可能である官能基を含む、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の少なくとも１個を含む。
【００５６】
特別な実施態様において、本発明の化合物は、ベクターに結合することが可能である官能基であるＲ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の少なくとも１個、ならびに／又はＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の該（Ｃ５−Ｃ１０）アリール、（Ｃ５−Ｃ１０）ヘテロアリール、及び（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル（ベクターに結合することが可能である少なくとも１個の官能基で置換されている）の少なくとも１個を含む。
【００５７】
本発明の幾つかの具体的な化合物は、以下の式：
【化１９】
2015517510.tif 000020
で示されるうちの１つを有する。
【００５８】
本発明はまた式（ＩＩ）：
【化２０】
2015517510.tif 000021
［式中、ａ、ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｌ１及びＬ２は、上記のように定義されているとおりであり、そしてＹは、ハロゲン原子である］を有する化合物に関する。
【００５９】
特別な実施態様において、Ｙは、Ｃｌである。
【００６０】
別の実施態様において、Ｙは、Ｂｒ又はＩである。
【００６１】
調製の方法：
本発明はまた、上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物の調製方法であって、上記で定義された式（ＩＩ）の化合物の放射標識の工程を含む、方法に関する。
【００６２】
特別な実施態様において、放射標識の工程は、上記で定義された式（ＩＩ）の化合物中のＹと、（−Ｉ）の酸化状態のＸとの配位子置換を含む。
【００６３】
別の実施態様に従って、配位子置換反応時間は、４５〜６０分間で構成され、好ましくは３７℃で６０分間である（実施例１０を参照のこと）。
【００６４】
特別な実施態様において、配位子置換反応時間は、１０〜６０分間で構成され、好ましくは６０℃で１５分間である。
【００６５】
特別な実施態様において、配位子置換反応時間は、１００℃で５分間である。
【００６６】
特別な実施態様において、放射標識は、還元剤（例えば、非限定的に、システイン）と２１１Ａｔとの反応を含む。
【００６７】
特別な実施態様において、システインの水溶液を、３Mの硝酸を含有し得るＤＩＰＥ（ジイソプロピルエーテル）中のアスタチンに添加し得る。得られた混合物は、１０／８の（ＤＩＰＥ＋硝酸）／水の割合で二相系を形成し得る。
【００６８】
式（ＩＩ）又は式（Ｉ−２）の化合物は、当業者に公知の調製方法により得ることができる。
【００６９】
調製の特別な方法は、本発明を制限することなく、以下に記載される。
【００７０】
特別な実施態様において、上記で定義された式（ＩＩ）の化合物は、以下の工程：
−  式（ＩＩＩ）：
【化２１】
2015517510.tif 000022
（式中、ａ、ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は、上記のように定義されており、そしてＨａｌは、ハロゲン原子を表す）で示される化合物とＡｇ２Ｏとの反応、
−  続く、得られた混合物と、化合物［Ｒｈ（Ｌ１Ｌ２）Ｙ］２（式中、Ｌ１、Ｌ２及びＹは、上記で定義されたとおりである）との反応
を含む、方法により得る。
【００７１】
別の態様に従って、式（Ｉ−２）：
【化２２】
2015517510.tif 000023
（式中、ａ、ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｌ１及びＬ２は、上記のように定義されている）で示される化合物の調製方法は、以下の工程：
−  式（ＩＩＩ）：
【化２３】
2015517510.tif 000024
（式中、ａ、ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は、上記のように定義されており、そしてＨａｌは、ハロゲン原子を表す）で示される化合物とＡｇ２Ｏとの反応、
−  続く、得られた混合物と、化合物［Ｒｈ（Ｌ１Ｌ２）Ｙ］２（式中、Ｙは、上記のとおりである）とのＫＩの存在下での反応
を含む。
【００７２】
特別な実施態様において、Ｈａｌは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。
【００７３】
特別な実施態様において、式（Ｉ）：
【化２４】
2015517510.tif 000025
（式中、ａ、ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｌ１、Ｌ２及びＸは、上記のように定義されている）で示される化合物の調製は、以下の工程：
−  式（ＩＩＩ）：
【化２５】
2015517510.tif 000026
（式中、ａ、ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は、上記で定義されたとおりであり、そしてＨａｌは、ハロゲン原子を表す）で示される化合物とＡｇ２Ｏとの反応、
−  続く、得られた混合物と、化合物［Ｒｈ（Ｌ１Ｌ２）Ｙ］２（式中、Ｙは、上記で定義されたとおりである）との（−Ｉ）の酸化状態のＸの存在下での反応
を含む。
【００７４】
特別な実施態様において、Ｈａｌは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。
【００７５】
特別な実施態様において、［Ｒｈ（Ｌ１Ｌ２）Ｙ］２化合物は、１，５−シクロオクタジエンロジウムクロリド二量体によって表され、これは、式Ｒｈ２Ｃｌ２（Ｃ８Ｈ１２）２を有する化合物で、一般的には［ＲｈＣｌ（ＣＯＤ）］２と略される。それは、以下の式：
【化２６】
2015517510.tif 000027
によって表され得る。
【００７６】
略語ＣＯＤは、本出願のすべてにおいてシクロオクタジエン基を指す。
【００７７】
放射標識方法：
特別な実施態様において、本発明は、ターゲティング特性を有する官能基を有する式（Ｉ）の化合物を形成するための、配位子置換を用いる式（ＩＩ）の化合物の放射標識に関する。
【００７８】
別の実施態様において、本発明は、式（ＩＩ）の化合物の放射標識であって、第１工程で配位子置換を用いて、ベクターに結合することができる官能基を有する式（Ｉ）の化合物を形成し、第２工程で式（Ｉ）の化合物をベクター（例えば、非限定的に、抗体、抗体のフラグメント及びその誘導体）にカップリングさせる、式（ＩＩ）の化合物の放射性標識に関する。
【００７９】
さらに別の実施態様において、本発明は、第１工程で、ベクターに結合することができる官能基を有する式（ＩＩ）の化合物をベクター（例えば、非限定的に、抗体、抗体のフラグメント及びその誘導体）にカップリングさせること、次いで、ベクターに結合している式（Ｉ）の化合物を形成するために配位子置換を用いて、得られた化合物を放射標識することに関する。好ましくは、ベクターは抗体である。
【００８０】
カップリングの方法は当業者に周知であり、かつ以下の参考文献に見出し得る：
- David M. Wong and Shan S. Jameson, Chemistry of Protein and Nucleic Acid Cross- Linking and Conjugation Second Edition, CRC Press 2011 (NY), 604 p.;
- N. L. Benoiton, Peptide Bond Formation: Active Esters in HoubenWeyl Methods of Organic Chemistry Synthesis of Peptides and Peptidomimetics (2001), WORKBENCH EDITION;
- Emmanuel Basle, Nicolas Joubert and Mathieu Pucheault, Protein Chemical Modification on Endogenous Amino Acids, Chemistry & Biology (2010), Volume 17, Issue 3, 213-227;
- Sletten, E. M.; Bertozzi, C. R. Bioorthogonal Chemistry: Fishing for Selectivity in a Sea of Functionality. Angew. Chem. Int. Ed. (2009), 48, 6974-6998;
- Shuang Liu, Bifunctional Coupling Agents for Radiolabeling of Biomolecules and Target-Specific Delivery of Metallic Radionuclides, Advanced Drug Delivery Reviews, Volume 60, Issue 12, 15 September 2008, Pages 1347-1370;
- Wu AM, Senter PD, Arming antibodies: prospects and challenges for immunoconjugates. Nat Biotechnol 2005, 23:1137-1146;及び
- Alan R. Fritzberg, Ronald W. Berninger, Stephen W. Hadley and Dennis W. Wester, Approaches to Radiolabeling of Antibodies for Diagnosis and Therapy of Cancer, Pharmaceutical Research (1988), Volume 5, Number 6, 325-334.
【００８１】
これらの方法はまた、式（Ｉ）の化合物の官能基を介してベクターに結合している該化合物が「コンジュゲート」と呼ばれる、コンジュゲーション方法としても知られている。
【００８２】
本発明は、本発明による化合物の官能基を介してベクターに共有結合的に結合している、少なくとも１つの該化合物を含む、コンジュゲートに関する。
【００８３】
医薬組成物：
本発明はまた、上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物を、少なくとも１つの薬学的に許容し得る賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物であって、該化合物が、必要に応じて、生体分子、より好ましくは抗体、及びナノキャリア化合物から選択されるベクターに結合している、医薬組成物に関する。
【００８４】
本発明はまた、上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物を、少なくとも１つの薬学的に許容し得る賦形剤と組み合わせて含む薬物であって、該化合物が、必要に応じて、好ましくは、抗体のような生体分子及びナノキャリア化合物から選択されるベクターに結合している、薬物に関する。
【００８５】
式（Ｉ）を有する本発明の化合物を単独で投与することは可能であるが、これらを医薬組成物として提供することが好ましい。動物及びヒトの両方の使用のために、本発明による有用な医薬組成物は、上記で定義された式（Ｉ）を有する少なくとも１つの化合物を、１つ以上の薬学的に許容しうる担体及び場合により他の治療成分と一緒に含む。
【００８６】
特定の好ましい実施態様において、併用療法において必要な活性成分は、同時投与のための単一の医薬組成物中に組み合わせ得る。
【００８７】
組成物、担体、希釈物及び試薬を指すように、本明細書で使用される、用語「薬学的に許容し得る」及びその文法的変形は、互換的に使用され、かつ、吐き気、めまい、胃の不調のような望ましくない生理作用を発生することなく、そのような物質を哺乳動物に投与することができることを表す。
【００８８】
活性成分をその中に溶解又は分散させた薬理学的組成物の調製は、当技術分野において十分に理解されており、かつ製剤化に基づいて制限されることはない。典型的には、そのような組成物は、溶液又は懸濁液のいずれかの注射剤として調製される;しかし、使用前に液体中の溶液又は懸濁液に適した固体形態もまた調製されることができる。調製物を乳化することもできる。特に、医薬組成物は、固体剤形、例えば、カプセル剤、錠剤、丸剤、粉剤、糖衣錠又は顆粒剤に製剤化され得る。
【００８９】
溶剤の選択及び溶剤中の活性物質の含有量は、一般的に、活性化合物の溶解度及び化学特性、特定の投与方法及び薬務で順守される規定に応じて決定される。例えば、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウムのような賦形剤、及び崩壊剤、例えば、デンプン、アルギン酸及び特定の複合ケイ酸塩（ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム及びタルクのような潤滑剤と組み合わせた）を、錠剤を調製するために使用し得る。カプセル剤を調製するために、ラクトース及び高分子量のポリエチレングリコールを使用することが有利である。水性懸濁剤が使用される場合、これらは、乳化剤又は懸濁を容易にする薬剤を含有することができる。スクロース、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール及びクロロホルム又はそれらの混合物のような希釈剤も使用し得る。
【００９０】
医薬組成物は、経口、直腸、経鼻、口腔、眼内、舌下、経皮、直腸、局所、膣内、非経口（皮下、動脈内、筋肉内、静脈内、皮内、髄腔内及び硬膜外など）、嚢内及び腹腔内を含む局所又は全身投与により、適切な製剤でヒト及び動物に投与することができる。好ましい経路を、例えば、レシピエントの状態により変更し得ることが理解されるであろう。
【００９１】
製剤は、薬学分野で周知の任意の方法により単位投与剤形で調製することができる。そのような方法は、活性成分を１つ以上の補助成分からなる担体と組み合わせる工程を含む。一般的に、製剤は、活性成分を液体担体もしくは微粉化固体担体又はその両方に、均一かつ密接に組み合わせて、必要であれば、次に、生成物を成形することにより製造される。
【００９２】
医薬用途：
上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物は、医薬組成物中に単独で使用し得るか、又は投与前にベクターに結合させ得る。用語「ベクター」は上記で定義され、特に、生体分子、例えば、抗体もしくはそのフラグメント又は任意の抗体構築物（抗体工学により得られるミニボディ、ジアボディなど）、ペプチドもしくはハプテン、又はナノカプセル、リポソーム、デンドリマーもしくはカーボンナノチューブのような標的細胞を認識することができるナノキャリア化合物を指す。該標的細胞は、該細胞を殺傷又は検出するために放射性核種が輸送される必要がある細胞である。
【００９３】
本発明はまた、腫瘍の処置又は位置確認におけるその使用のための、上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物（単独で投与されるか、又はベクターに結合される）に関する。
【００９４】
特に、本発明はまた、腫瘍の処置におけるその使用のための、上記で定義された式（Ｉ）［式中、Ｘは、２１１Ａｔである］を有する化合物（単独で投与されるか、又はベクターに結合される）に関する。
【００９５】
有利な実施態様によると、本発明は、腫瘍の検出におけるその使用のための、上記で定義された式（Ｉ）［式中、Ｘは、１２３Ｉ又は１２４Ｉである］を有する化合物（単独で投与されるか、又はベクターに結合される）に関する。
【００９６】
有利な実施態様によると、本発明は、腫瘍の処置におけるその使用のための、上記で定義された式（Ｉ）［式中、Ｘは、１３１Ｉ又は２１１Ａｔである］を有する化合物（単独で投与されるか、又はベクターに結合される）に関する。
【００９７】
特定の実施態様によると、本発明は、小型原発腫瘍疾患、転移性癌疾患、好ましくは微小転移、及び播種性血液学的癌の処置における、上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物に関する。
【００９８】
用語「小型原発腫瘍疾患」は、最大５cmの直径を有する原発性腫瘍を指す。
【００９９】
用語「転移」又は「転移性癌疾患」は、別の局在位置に移動した原発腫瘍からの細胞によって形成される二次腫瘍を指す。そのサイズが直径１cmを超えない場合、転移は「微小」又は「微小転移性疾患」と呼ばれる。
【０１００】
用語「血液学的癌」は、骨髄腫、リンパ腫又は白血病のような血液、骨髄、及びリンパ節に影響を与える癌の種類を指す。
【０１０１】
特別な実施態様において、本発明は、骨髄腫、リンパ腫、急性骨髄性又はリンパ芽球性白血病、前立腺癌の骨転移、腹膜播種卵巣転移、神経膠腫、小細胞肺癌、及びＣＥＡ陽性腫瘍の転移（肝臓、結腸癌、甲状腺髄様癌、小細胞肺癌）からなる群より選択される疾患の処置における、その使用のための上記で定義された式（Ｉ）の化合物に関する。「ＣＥＡ陽性の肝転移」とは、癌胎児抗原に陽性である腫瘍転移を意味する。
【０１０２】
特別な実施態様において、本発明は、上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物の患者への投与（単独で投与されるか、又はベクターに結合される）を含む、腫瘍の処置の方法に関する。
【０１０３】
特別な実施態様において、本発明はまた、上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物の患者への投与（単独で投与されるか、又はベクターに結合される）を含む、腫瘍の位置確認の方法に関する。
【０１０４】
調製方法の幾つかの例は、本発明を限定することなく、以下に示す。
【０１０５】
実施例：
実施例で使用される材料及び方法を以下に記載する：
【０１０６】
商業的供給源から購入した化学薬品は、試薬級グレード以上であり、さらに精製することなく使用した。すべての溶媒はＨＰＬＣグレード以上として得た。分析グレードの硝酸及び亜硫酸ナトリウムは、Merckから入手した。ジイソプロピルエーテルは、分析グレードでCarlo Erba Reagentsから得た。ＨＰＬＣ分析用の溶媒は、ＨＰＬＣグレードで得て、２０分間の超音波処理によって使用前に脱気した。
【０１０７】
アスタチン−２１１は、２時間の間、α粒子２８MeVの１．９５〜２．１５μA 粒子線で銅標的上に２４０μm厚さの自然なビスマス層を照射することによって、２０９Ｂｉ（α、２ｎ）２１１Ａｔ反応を用いて生成した。
【０１０８】
以下のプロトコルを用いて、ＤＩＰＥ中のアスタチン溶液（０．１MBq／μL）を生成した。照射された標的をビーカーに入れ、６５％硝酸５００μLを滴下ビスマス層上に滴下した。１０分後、酸性溶液を回収し、１６５℃で蒸発乾固した。酸性標的攻撃／蒸発乾固の工程を４回繰り返した。冷ました後、残留物を３２％硝酸３mLに溶解し、次にアスタチン−２１１をＤＩＰＥ（５００μL）中に抽出した。収集された活量を、ACAD 2000電離箱で測定した。
【０１０９】
分光分析：  １Ｈ及び１３Ｃ｛Ｈ｝のＮＭＲスペクトルを、Bruker AC（４００MHz）で得た。プロトンの化学シフトは、内部標準として溶媒ピークを用いて百万分率（ppm）として表される。質量スペクトルデータは、エレクトロスプレーイオン化を使用してBruker Daltonics Esquire HCT Ultra Ion Trapで得た。
【０１１０】
分析クロマトグラフィー：  シリカゲルクロマトグラフィーは、６０Aシリカゲル６０〜４３０μm（Carlo Erba SDS）を用いて行った。ＴＬＣは、プレコートしたシリカゲル 60 F254 ＴＬＣプラスチックシート（Merck）上で実行し、反応は、ＵＶ光（２５４nm）下、顕色によりモニターした。ヘプタン及び酢酸エチルの勾配溶離を使用した。
【０１１１】
ＨＰＬＣ分析は、Waters 486 Tuneable Absorbance Detector及びPackard Bioscience Flow Scintillation Analyser 150 TRを備えたWaters ＨＰＬＣシステムを用いて実施した。ヨウ素−１２５の放射標識のために、各１mLの画分を回収し、計数した。流速２mL／分でのヘプタン（Ａ）及び酢酸エチル（Ｂ）の勾配溶離（０〜３分：Ａ、３．０１〜９．５分：７０／３０（Ａ／Ｂ）、９．５１〜１５分：６０／４０（Ａ／Ｂ）、１５．０１〜２０分：Ａ）。Waters Prep NovaPack HR シリカカラムを、すべてのロジウム複合体分析管理のために使用した。放射性ＴＬＣを、ヘプタン／アセトン ３：２又はジクロロメタンで溶出するプレコートしたシリカゲル60 F254 ＴＬＣプラスチックシート（Merck）上で実施した。放射性ＴＬＣプレートをTyphoon 9410 Variable Mode Imager（GE Healthcare Bioscience）を用いて調べた。サイズ排除クロマトグラフィーを、リン酸緩衝生理食塩溶液で溶出するNAP5カートリッジ上で実施した。シリカゲルクロマトグラフィーによる精製を、SepPackシリカゲルカートリッジ（Oasis, France）を用いて実施した。
【０１１２】
実施例１：  式（ＩＩＩ）の化合物の調製
１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリウムブロミド
【化２７】
2015517510.tif 000028
ベンジルブロミド（７１２μL、６mmol）及び４−ニトロフェニルイミダゾール（２２２mg、１．２mmol）を、無水ＴＨＦ １０mL中で、還流下、不活性雰囲気下、４５時間撹拌した。次に沈殿物を濾過し、ＴＨＦで洗浄し、減圧下で乾燥させて、１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリウムブロミド（実施例１）３９３mg（９１％）をオフホワイトの粉末として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400.13 MHz): δ 10.37 (t, 1H, J = 1.5 Hz, N-CH-N), 8.57 (1H, m, H(イミダゾリウム骨格)), 8.55 (2H, m, H(ニトロベンジル)), 8.19 (1H, m, H(イミダゾリウム骨格)), 8.17 (2H, m, H(ニトロフェニル)), 7.64-7.58 (2H, m, Hm(ベンジル)), 7.52-7.43 (3H, m, Hp + Ho(ベンジル)), 5.61 (2H, s, CH2)。
13C NMR (DMSO-d6,100.16 MHz): δ 147.7 (カルベン), 139.5, 134.4, 129.1, 129.0, 128.9, 125.7, 123.7, 123.2, 121.8, 52.7 (CH2)。
MS (ES+) (M-Bn+H)+の計算値 190.1 (100%), 191.1 (11%) (M-Br)+: 280.1 (100%), 281.1 (18.7%), (2M-Br)+: 639.1 (100%), 641.1(95%), 640.1 (36%), 642.1 (36%) 
(M-Bn+H)+の実測値 190.0 (100%) (M-Br)+: 280.1 (100%), 280.8 (18.9%), (2M-Br)+: 639.0 (95 %), 641.0 (100%)
【０１１３】
実施例２：  式（ＩＩ）の化合物の調製
（１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリデン）（シクロオクタジエン）ロジウム（＋Ｉ）クロリド
【化２８】
2015517510.tif 000029
１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリウムブロミド（実施例１）（４４mg、０．１２２mmol）及び酸化銀（１４mg、０．０６１mmol）を、脱気した塩化メチレン４mL中で、暗所にて、室温で２時間撹拌した。得られた混合物をCeliteパッドで濾過した。次に［Ｒｈ（ＣＯＤ）Ｃｌ］２（３０mg、０．０６１mmol）を加えた。溶液を室温で１８時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（９９．５／０．５ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）により精製した。濃縮後、沈殿物が現れるまでヘプタンを加えた。生成物を濾過により回収し、減圧下で乾燥させた。次に（１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリデン）（シクロオクタジエン）ロジウム（＋Ｉ）クロリド（実施例２）４４mg（６５％）を暗黄色の粉末として得た。
1H NMR (CDCl3, 400.13 MHz): δ 8.59 (4H, m, H(ニトロベンジル)), 7.52-7.35 (5H, m, H(ベンジル)), 7.21 (1H, d, J = 2.0 Hz, H(イミダゾリデン骨格)), 6.91 (1H, d, J = 2.0 Hz, H(イミダゾリデン骨格)), 5.99 (2H, m, CH2), 5.31-5.12 (1H, m, CH(COD)), 5.12-5.03 (1H, m, CH(COD)), 3.23-3.14 (1H, m, CH(COD)), 2.58-2.50 (1H, m, CH(COD)), 2.40-2.28 (1H, m, CH2(COD)), 2.25-2.08 (2H, m, CH2(COD)), 1.93-1.73 (3H, m, CH2(COD)), 1.66-1.54 (2H, m, CH2(COD))
13C NMR (CDCl3, 100.16 MHz): δカルベン信号、検出されず、146.9, 145.1, 135.6, 129.1 (CH(ベンジル)), 128.6 (CH(ベンジル)), 128.5 (CH(ベンジル)), 125.1 (CH(ニトロフェニル)), 124.3 (CH(ニトロフェニル)), 122.2 (CH(イミダゾリデン)), 121.0 (CH(イミダゾリデン)), 99.5 (d, JC-Rh = 7.0 Hz, CH(COD)), 98.7 (d, JC-Rh = 7.0 Hz, CH(COD), 69.3 (d, JC-Rh = 14.0 Hz, CH(COD), 68.8 (d, JC-Rh = 14.0 Hz, CH(COD), 55.6 (CH2), 32.7 (CH2(COD)), 32.3 (CH2(COD)), 28.6 (br, m, CH2(COD)), 28.0 (CH2(COD))。
LRMS (ES+) (M-Cl)+の計算値: 490.1 (100%), 491.1 (27%), (2M-2Cl+CN)+: 1006.2 (100%), 1007.2 (53%), 1008.2 (14%) (2M-Cl)+. 1015.2 (100%), 1016.2 (54%), 1017.2 (34%), 1018.2 (17%) (M-Cl)+の実測値: 490.3 (100%), 491.1 (30%) (2M-2Cl+CN)+: 1006.4 (100%), 1007.2 (54%), 1008.1 (15%) (2M-Cl)+. 1015.3 (100%), 1016.2 (51%), 1017.2 (41%), 1018.1 (21%)
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝１１．７分。
【０１１４】
実施例３：  式（Ｉ）の化合物の調製
（１２５Ｉ）（１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリデン）（シクロオクタジエン）ロジウム（＋Ｉ）
【化２９】
2015517510.tif 000030
１２５ＮａＩ（０．１２〜３．７MBq）の水溶液１６μLに、ＡＣＮ（２１．５μmol/mL）中の実施例２の化合物４０μLを加えた。３０秒間の激しい撹拌後、混合物を１００℃で５分間インキュベートした。
ＨＰＬＣｔＲ＝８分
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４５
【０１１５】
実施例４：  式（Ｉ）の化合物の調製
（２１１Ａｔ）（１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリデン）（シクロオクタジエン）ロジウム（＋Ｉ）
【化３０】
2015517510.tif 000031
ＤＩＰＥ中のアスタチン（０．７５〜１．０５MBq）１０μLに、システイン（水中７．１mg/mL）を加えた。３０ｓの激しい撹拌後、ＡＣＮ中の実施例２の化合物を加えた。混合物を撹拌し、室温、３７、６０又は１００℃でインキュベートした。
【０１１６】
最適化手順：  ＤＩＰＥ中のアスタチン（０．７５〜１．０５MBq）１０μLに、システイン８μL（水中７．１mg/mL）を加えた。３０ｓの激しい撹拌後、ＡＣＮ（３mg/mL）中の実施例２の４０μLを加えた。混合物を撹拌し、６０℃で１５分間又は１００℃で５分間インキュベートした。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５２
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝６．８分。
【０１１７】
実施例５：  １−メシチル−１Ｈ−イミダゾールの調製
（Synthesis 2003 (17), 2661-2666に記載の化合物）
【化３１】
2015517510.tif 000032
２，４，６−トリメチルアニリン（１２．２mL、８７mmol）及び４０％グリオキサール水溶液（１０mL、８７mmol）を、メタノール２５mL中で室温にて１６時間撹拌した。次に塩化アンモニウム（９．３ｇ、１７４mmol）、パラホルムアルデヒド（５．２ｇ、１７４mmol）を加えた。メタノール２００mLの添加の後、混合物を還流下、１時間撹拌した。次にオルトリン酸１２mLを１０分間かけて優しく加えた。次に得られた混合物を還流下、８時間撹拌した。揮発物質を減圧下で除去し、次に残留物を氷に注ぎ入れ、ｐＨ９になるまで４０％ ＫＯＨ水溶液で中和した。得られた混合物を、酢酸エチル（４×１００mL）を使用して抽出した。有機相を合わせ、蒸留水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。濾過の後、揮発物を除去し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｐｔ／ＡｃＯＥｔ（５０：５０））に付した。濃縮の後、ジエチルエーテルを用いて生成物を再結晶化させた。濾過に続き、ジエチルエーテルで洗浄して、１−メシチル−１Ｈ−イミダゾールをオフホワイトの生成物（４．０３ｇ、２５％）として得た。
1H NMR (CDCl3, 400.13 MHz): 7.48 (t, J = 1.2 Hz, N-CH-N, 1H), 7.25 (t, J= 1.2 Hz, N-CH-CH, 1H), 6.98 (s, H メシチル, 2H), 6.90 (t, J= 12 Hz, N-CH-CH, 1H), 2.34 (s, CH3, 3H), 1.99 (s, CH3, 3H)。
【０１１８】
実施例６：  ４−（ブロモメチル）安息香酸ペルフルオロフェニルの調製
（Eur. J. Inorg. Chem. 2008, 3359-3366に記載の化合物）
【化３２】
2015517510.tif 000033
ＡｃＯＥｔ／ＤＭＦ（６０／２）６．２mL中の４−（ブロモメチル）安息香酸（４３０mg、２mmol）及びペンタフルオロフェノール（３６８mg、２mmol）に、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（４１３mg、２mmol）を０℃で不活性雰囲気下、加えた。混合物を０℃で１時間、次に室温で２時間撹拌した。溶液を濾別し、次に揮発物を減圧下で除去して、４−（ブロモメチル）安息香酸ペルフルオロフェニルを白色の固体（３７２mg、５０％）として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400.13 MHz): 8.22 (d, J= 8.4 Hz, Ho, 2H), 7.77 (d, J= 8.4 Hz, Hm, 2H), 4.87 (s, CH2, 2H)
19F NMR (DMSO-d6, 376.50 MHz): -154.4- -154.5 (m, 2F, Far), -158.5 (t, J=22.7 Hz, 1F, Far), -163.3- -163.4 (m, 2F, Far)。
【０１１９】
実施例７：  式（ＩＩＩ）の化合物の調製
３−メシチル−１−（４−（（ペルフルオロフェノキシ）カルボニル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾリウムブロミド
【化３３】
2015517510.tif 000034
実施例５の化合物（９３mg、０．５mmol）に、無水ＴＨＦ ３mL中の実施例６の化合物（１９０mg、０．５mmol）を、アルゴン下、加えた。混合物を一晩還流した。室温で冷ました後、混合物を濾過した。沈殿物を冷ＴＨＦで洗浄し、次に減圧下で乾燥させて、３−メシチル−１−（４−（（ペルフルオロフェノキシ）カルボニル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾリウムブロミドを白色の固体（１５０mg、５３％）として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400.13 MHz): 9.68 (s, N-CH-N, 1H), 8.32 (d, J= 8.4 Hz, Ho (ベンジル), 2H), 8.19-8.18 (m, H(イミダゾリウム骨格), 1H), 8.06 (m, H(イミダゾリウム骨格), 1H), 7.76 (d, J= 8.4 Hz, Hm (ベンジル), 2H), 7.02 (s, H(メシチル), 2H), 5.77 (s, CH2, 2H), 2.37 (s, CH3, 3H), 2.08 (s, CH3, 3H)
13C NMR (DMSO-d6, 100.16 MHz): 162.0, 142.2, 140.5, 138.2, 134.4, 131.4, 131.3, 129.4, 129.3, 126.3, 124.6, 123.6, 52.0, 20.7, 17.1.
19F NMR (DMSO-d6, 376.50 MHz): -154.5- -154.6 (m, 2F, Far), -158.3 (t, J=23.1 Hz, 1F, Far), -163.2- -163.3 (m, 2F, Far)。
【０１２０】
実施例８：  式（ＩＩ）の化合物の調製
（３−メシチル−１−（４−（（ペルフルオロフェノキシ）カルボニル）ベンジル）イミダゾリデン）（シクロオクタジエン）ロジウム（＋Ｉ）クロリド
【化３４】
2015517510.tif 000035
モレキュラーシーブ（４Ａ）のビーズ１個、実施例７の化合物（４４mg、０．０７７mmol）及びＡｇ２Ｏ（１４mg、０．０６mmol）に、脱気したジクロロメタン３mLを加えた。混合物を暗所にて室温で３時間撹拌した。ジクロロメタン１mL中の［Ｒｈ（ＣＯＤ）Ｃｌ］２（３０mg、０．０６mmol）を加え、溶液をアルゴン下、室温で一晩撹拌した。溶液をCeliteで濾過し、減圧下濃縮した。粗生成物をヘプタン／ジクロロメタン（１０／２）を用いて沈殿させ、濾過そしてヘプタンで洗浄した後、（３−メシチル−１−（４−（（ペルフルオロフェノキシ）カルボニル）ベンジル）イミダゾリデン）（シクロオクタジエン）ロジウム（＋Ｉ）クロリドを黄色の粉末（５０mg、８５％）として得た。
1H NMR (DMSO-d6, 400.13 MHz): 8.31 (2H, d, J= 8.4 Hz, Ho (ベンジル)), 7.70 (2H, d, J= 8.4 Hz, Hm (ベンジル)), 7.64 (d, J= 1.6 Hz, 1H, Hメシチル), 7.38 (d, J= 1.6 Hz, 1H, Hメシチル), 7.19 (s, N-CH-CH-, 1H), 7.07 (s, N-CH-CH-, 1H), 6.46 (d, J= 16 Hz, 1H, CH2), 5.81 (d, J= 16 Hz, 1H, CH2), 4.78-4.73 (m, COD, 1H), 4.57-4.51 (m, COD, 1H), 2.95 (m, COD, 2H), 2.12-2.00 (m, COD, 1H), 1.93-1.80 (m, COD, 1H), 1.88 (s, CH3, 3H), 2.43-2.36 (m, CH3, 6H), 1.75-1.36 (m, COD, 6H)。
13C NMR (DMSO-d6, 100.16 MHz): 162.2 (CO), 146.6 (カルベン), 138.3, 136.2, 136.1, 134.5, 131.0, 129.2, 128.8, 128.3, 125.1, 124.4, 122.9, 96.3 (COD), 95.1 (COD), 68.0 (d, COD, JC-Rh= 14 Hz), 67.5 (d, COD, JC-Rh= 14 Hz), 53.8 (CH2), 32.7, 32.0, 28.1, 28.0, 27.7, 20.8 (CH3), 19.4 (CH3), 17.6 (CH3)。
19F NMR (DMSO-d6, 376.50 MHz): -154.6- -154.7 (m, 2F, Far), -158.6 (t, J=23.1 Hz, 1F, Far), -163.3- -163.4 (m, 2F, Far)。
【０１２１】
実施例９：  式（Ｉ−２）の化合物の調製
（１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリデン）（シクロオクタジエン）ロジウム（＋Ｉ）ヨージド
【化３５】
2015517510.tif 000036
【０１２２】
経路Ａ
実施例１の化合物（４４mg、０．１２２mmol）及び酸化銀（４４mg、０．０６１mmol）を、脱気した塩化メチレン４mL中で、暗所にて室温で２時間撹拌した。得られた混合物をCeliteのパッドで濾過した。次に［Ｒｈ（ＣＯＤ）Ｃｌ］２（３０mg、０．０６１mmol．）及びＫＩ（５０mg、０．３０mmol）を加えた。溶液を室温で１８時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、残留物を、溶出相として塩化メチレンを用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。濃縮後、沈殿物が現れるまでヘプタンを添加した。生成物を濾過により回収し、真空下で乾燥させた。次に（１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリデン）（シクロオクタジエン）ロジウム（＋Ｉ）ヨージド４４mg（５８％）を橙色の粉末として得た。
【０１２３】
経路Ｂ
実施例２の化合物（１０mg、０．０１９mmol）及びＫＩ（１０mg、０．０６mmol）を、脱気した塩化メチレン１mL中で、暗所にて室温で２０時間撹拌した。揮発物質を減圧下で除去し、残留物を、溶出相として塩化メチレンを用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。濃縮後、沈殿物が現れるまでヘプタンを添加した。生成物を濾過により回収し、真空下で乾燥させた。次に（１−ベンジル−３−（４−ニトロフェニル）イミダゾリデン）（シクロオクタジエン）ロジウム（＋Ｉ）ヨージド９mg（７７％）を橙色の粉末として得た。
1H NMR (CDCl3, 400.13 MHz): δ 8.67-8.65 (2H, m, H(ニトロベンジル)), 8.45-8.41 (2H, m, H(ニトロベンジル)), 7.48-7.38 (5H, m, H(ベンジル)), 7.28-7.26 (1H, m, H(イミダゾリデン骨格)), 6.91 (1H, d, J = 2.0 Hz,H(イミダゾリデン骨格)), 6.00 (1H, m, CH2), 5.80 (1H, m, CH2), 5.36-5.28 (2H, m, CH(COD)), 3.38 (1H, br, CH(COD)), 2.74 (1H, br, CH(COD)), 2.33-2.20 (1H, m, CH2(COD)), 2.19-2.05 (2H, m, CH2(COD)), 1.93-1.75 (2H, m, CH2(COD)), 1.71-1.42 (3H, m, CH2(COD))
13C NMR (CDCl3, 100.16 MHz): δ 185.6 (d, JC-Rh = 49.6 Hz, C(カルベン)), 146.7, 145.1, 135.4, 129.1 (CH(ベンジル)), 128.7 (CH(ベンジル)), 128.5 (CH(ベンジル)), 124.6 (CH(ニトロフェニル)), 124.6 (CH(ニトロフェニル)), 124.2 (CH(ニトロフェニル)), 122.5 (CH(イミダゾリデン)), 121.3 (CH(イミダゾリデン)), 97.4 (d, JC-Rh = 7.0 Hz, CH(COD)), 96.7 (d, JC-Rh = 7.0 Hz, CH(COD), 72.1 (m, CH(COD), 56.0 (CH2), 32.3 (CH2(COD)), 31.5 (CH2(COD)), 29.2 (br, m, CH2(COD)), 28.0 (CH2(COD))。
MS (ES+) 計算値: 490.1 (M-I-)+, 382.0 (M-COD-I)+, 640.0 (M+Na)+, 1107.1, 1108.1 (2M-I)+ 実測値: 490.2, 382.0, 640.0, 1107.0, 1107.8。
ＨＰＬＣ：ｔＲ＝８．２分。
【０１２４】
実施例１０：  放射標識動態研究ａ
【表１】
2015517510.tif 000037
【０１２５】
ａ１）  Ａｔ−２１１（１０μL、０．７〜１．１MBq）、システイン（８μL、水溶液中７mg/mL）、ボルテックス ３０秒間。
２）  実施例２の化合物（ＣＨ３ＣＮ中３mg/mL）、加熱。
【０１２６】
結果は、高放射標識収率が１５分間かけて６０℃（８８％）及び５分間かけて１００℃（９５％）ですぐに得られたことを示す。許容し得る収率を得るために３７℃でより長い反応時間が必要であった（６０分間、７６％）。良好な収率（最大７７％）を、アスタチン溶液０．５nmol/μL以上について得た。
【０１２７】
放射標識反応は、放射性核種の半減期よりも著しく短い。
【０１２８】
実施例１１：  安定性試験
実施例４の化合物（７．５〜１０．５MBq）を、先に記載の手順に従って調製した。最終容量が約５０μLなるまで、得られた有機溶液を蒸発させた。複合体は、移動相としてＤＣＭ／ＭｅＯＨ（９９／１）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。活性は、アリコート５００μL毎に計数し、目的の画分を窒素気流下で濃縮した。次にヒト血清１mLを添加した。溶液を穏やかに撹拌し、２つのアリコートに分割し、それぞれ４℃及び３７℃で１５時間インキュベートした。次に、血清タンパク質を、有機溶媒の混合物（ＡＣＮ／ＤＣＭ １００／１）７５０μLを添加することによって沈殿させた。上清を４０００rpmで遠心分離により分離し、ＴＬＣにより制御した。
【０１２９】
分解は４℃又は３０℃のいずれでも観察されず、このことは、インビボにおける化学的及び酵素的安定性を示している。
【国際調査報告】
2015517510.tif 000044
2015517510.tif 000045