(57)【要約】  本発明は、一般式（Ｉ）：式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ＭおよびＸは、本明細書に記載する通りである、を有する新規化合物、該化合物を含む組成物、および該化合物を用いる方法を提供する。
2015511614.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2015511614.tif 000087
式中、
Ｒ１は、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２は、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３は、チアゾリル、チエニル、イミダゾリル、イソキサゾリルまたはピリジニルであり；これは非置換であるかあるいはハロゲンまたはＣ１−６アルキルによって置換されており；
Ｘは、酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５は、独立に、水素、Ｃ１−６アルキルおよびトリフルオロＣ１−６アルキルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５は、付着した炭素原子と一緒に、３〜７員シクロアルキルを形成するか；あるいは
Ｘが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方は、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方は、付着している炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、ピロリジニル、モルホリニルまたはピペリジニル環を形成し、該環は非置換であるかまたはフルオロによって置換されており；
Ｍは、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルボキシ、ジＣ１−６アルキルアミノＣ２−６アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジＣ１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシ−ＣｙＨ２ｙ−、
【化２】
2015511614.tif 000088
であり；
Ｒ７は、Ｃ１−６アルキルまたはトリフルオロＣ１−６アルキルであり；
ｙは、１−６である
の化合物；
あるいはその薬学的に許容されうる塩、または互変異性体。
【請求項２】
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、非置換であるかまたはＣ１−６アルキルもしくはハロゲンによって１回置換された２−チアゾリルであるか；あるいはハロゲンによって１回置換された２−チエニルまたは２−ピリジニルであるか；あるいはＣ１−６アルキルによって１回置換された２−イミダゾリルであるか；あるいは非置換であるかまたはＣ１−６アルキルによって１回置換された３−イソキサゾリルであり；
Ｘが酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、Ｃ１−６アルキルおよびトリフルオロＣ１−６アルキルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、３〜７員シクロアルキルを形成するか；あるいは
Ｘが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方が、付着している炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、モルホリニル；またはフルオロによって置換されたピロリジニルもしくはピペリジニルを形成し；
Ｍが、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルボキシ、ジＣ１−６アルキルアミノ−Ｃ２−６アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジＣ１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシ−ＣｙＨ２ｙ−、
【化３】
2015511614.tif 000089
であり；
Ｒ７が、Ｃ１−６アルキルまたはトリフルオロＣ１−６アルキルであり；
ｙが、１−６である
請求項１記載の化合物；
あるいはその薬学的に許容されうる塩、または互変異性体。
【請求項３】
Ｒ１が、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、フルオロによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が
【化４】
2015511614.tif 000090
であり；
Ｘが、酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、メチルおよびトリフルオロメチルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、シクロプロピルを形成するか；あるいはＸが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着している炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、
【化５】
2015511614.tif 000091
を形成し；
Ｍが、メトキシカルボニル、カルボキシ、ジメチルアミノエトキシカルボニル、アミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、メチルアミノカルボニル、メチルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシプロピル、
【化６】
2015511614.tif 000092
であり；
Ｒ７がメチルまたはトリフルオロエチルである
請求項１または２記載の化合物；
あるいはその薬学的に許容されうる塩、または互変異性体。
【請求項４】
Ｒ１がＣ１−２アルコキシカルボニルであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって１回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が２−チアゾリルであり；
Ｘが酸素であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、Ｃ１−６アルキルおよびトリフルオロＣ１−６アルキルより選択され；
Ｍが、Ｃ１−６アルコキシカルボニルまたはカルボキシである
請求項１または２記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がメトキシカルボニルであり；
Ｒ２が
【化７】
2015511614.tif 000093
であり；
Ｒ３が
【化８】
2015511614.tif 000094
であり；
Ｘが酸素であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、メチルおよびトリフルオロメチルより選択され；
Ｍが、メトキシカルボニルまたはカルボキシである
請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって１回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が２−チアゾリルであり；
Ｘが、−Ｎ−Ｃ１−６アルキルまたは−Ｎ−トリフルオロＣ１−６アルキルであり；
Ｒ４が水素であり；
Ｒ５が水素であるか；
またはＲ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、３〜７員シクロアルキルを形成し；
Ｍがカルボキシである
請求項１または２記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１がメトキシカルボニルであり；
Ｒ２が
【化９】
2015511614.tif 000095
であり；
Ｒ３が
【化１０】
2015511614.tif 000096
であり；
Ｘが、−ＮＣＨ３または
【化１１】
2015511614.tif 000097
であり；
Ｒ４が水素であり；
Ｒ５が水素であるか；
またはＲ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、シクロプロピルを形成し；
Ｍがカルボキシである
請求項１、２、３または６のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、２−チアゾリル；またはハロゲンによって１回置換された２−ピリジニル；またはＣ１−６アルキルによって１回置換された２−イミダゾリルであり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が水素であり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒にモルホリニルを形成し；
Ｍが、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルボキシまたはヒドロキシ−ＣｙＨ２ｙ−であり；
ｙが１−６である
請求項１または２記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１が、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が
【化１２】
2015511614.tif 000098
であり；
Ｒ３が
【化１３】
2015511614.tif 000099
であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が水素であり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に
【化１４】
2015511614.tif 000100
を形成し；
Ｍが、メトキシカルボニル、カルボキシまたはヒドロキシメチル−である
請求項１、２、３または８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり； 
Ｒ２が、ハロゲンによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、非置換であるかまたはＣ１−６アルキルもしくはハロゲンによって１回置換された２−チアゾリルであるか；あるいはハロゲンによって１回置換された２−チエニルまたは２−ピリジニルであるか；あるいはＣ１−６アルキルによって１回置換された２−イミダゾリルであるか；あるいは非置換であるかまたはＣ１−６アルキルによって１回置換された３−イソキサゾリルであり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、フルオロによって置換されたピロリジニルまたはピペリジニルを形成し；
Ｍが、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルボキシ、ジＣ１−６アルキルアミノＣ２−６アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジＣ１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシ−ＣｙＨ２ｙ−、
【化１５】
2015511614.tif 000101
であり；
ｙが１−６である
請求項１または２記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１が、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が
【化１６】
2015511614.tif 000102
であり；
Ｒ３が、
【化１７】
2015511614.tif 000103
であり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、
【化１８】
2015511614.tif 000104
を形成し；
Ｍが、メトキシカルボニル、カルボキシ、ジメチルアミノエトキシカルボニル、アミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、メチルアミノカルボニル、メチルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシプロピル、
【化１９】
2015511614.tif 000105
である
請求項１、２、３または１０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１２】
式（Ｉ’）
【化２０】
2015511614.tif 000106
式中、
Ｒ１は、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２は、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３は、非置換であるかまたはＣ１−６アルキルによって置換された２−チアゾリル、あるいはハロゲンによって置換された２−ピリジニルであり；
Ｘは、酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５は、独立に、水素、Ｃ１−６アルキルおよびトリフルオロＣ１−６アルキルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５は、付着した炭素原子と一緒に、３〜７員シクロアルキルを形成するか；あるいは
Ｘが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方は、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方は、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、モルホリニル；またはフルオロによって置換されたピロリジニルを形成し；
Ｒ６は、水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７はＣ１−６アルキルである
の請求項１記載の化合物；
あるいはその薬学的に許容されうる塩、または互変異性体。
【請求項１３】
Ｒ１が、メトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、フルオロによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、
【化２１】
2015511614.tif 000107
であり；
Ｘが、酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、メチルおよびトリフルオロメチルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒にシクロプロピルを形成するか；あるいはＸが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に
【化２２】
2015511614.tif 000108
を形成し；
Ｒ６が、水素またはメチルであり；
Ｒ７がメチルである
請求項１２記載の化合物；
あるいはその薬学的に許容されうる塩、または互変異性体。
【請求項１４】
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、ハロゲンによって置換された、２−チアゾリルまたは２−ピリジニルであり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒にモルホリニルを形成し；
Ｒ６が、水素またはＣ１−６アルキルである
請求項１２記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ１が、メトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、
【化２３】
2015511614.tif 000109
であり；
Ｒ３が、
【化２４】
2015511614.tif 000110
であり
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、
【化２５】
2015511614.tif 000111
を形成し；
Ｒ６が、水素またはメチルである
請求項１２、１３または１４のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、非置換であるかまたはＣ１−６アルキルによって置換された２−チアゾリル、あるいはハロゲンによって置換された２−ピリジニルであり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、フルオロによって置換されたピロリジニルを形成し；
Ｒ６が、水素またはＣ１−６アルキルである
請求項１２記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ１が、メトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、
【化２６】
2015511614.tif 000112
であり；
Ｒ３が、
【化２７】
2015511614.tif 000113
であり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に
【化２８】
2015511614.tif 000114
を形成し
Ｒ６が、水素またはメチルである
請求項１２、１３および１６のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１８】
４−（４−フルオロ−フェニル）−６−（１−メトキシカルボニル−１−メチル−エトキシメチル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；６−（１−カルボキシ−２，２，２−トリフルオロ−エトキシメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；６−｛［（１−カルボキシ−シクロプロピル）−メチル−アミノ］−メチル｝−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸；４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸メチルエステル；４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸；（Ｓ）−４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸；（Ｓ）−４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸；４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸；４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸；６−（２−（Ｓ）−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；６−（２−（Ｒ）−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；４−［（Ｓ）−６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステル；４−［６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸；６−（４，４−ジフルオロ−２−メトキシカルボニル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；６−（２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；６−（２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−２−メチル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−１−［（Ｓ）−５−シアノ−６−（４−フルオロ−フェニル）−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸；（Ｓ）−４−［５−シアノ−６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸；（Ｓ）−１−［（Ｓ）−５−シアノ−６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステル；（Ｓ）−６−（２−カルボキシ−５，５−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｒ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステル；（Ｓ）−４−［６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸；（Ｓ）−４−［（Ｓ）−６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸；（Ｒ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（４−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（４−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−２−（５−クロロ−チアゾール−２−イル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（２Ｓ，４Ｒ）−２−カルボキシ−４−フルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−イソキサゾール−３−イル−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｒ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−２−メチル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ）−２−カルボキシ−４−フルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（５−メチル−イソキサゾール−３−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（３−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｒ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（３−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−｛［カルボキシメチル−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−アミノ］−メチル｝−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−メトキシカルボニル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−［（Ｓ）−２−（２−ジメチルアミノ−エトキシカルボニル）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（２−カルバモイル−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルバモイル−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピ
リミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−ジメチルカルバモイル−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−メチルカルバモイル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−メタンスルホニルアミノカルボニル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（チアゾール−２−イルカルバモイル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；４−（４−フルオロ−フェニル）−６−（（Ｒ）−３−ヒドロキシメチル−モルホリン−４−イルメチル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−ヒドロキシメチル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−［４，４−ジフルオロ−２−（３−ヒドロキシ−プロピル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（５−メチル−［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；および（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（３−メチル−［１，２，４］オキサジアゾール−５−イル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
より選択される、請求項１〜１７のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか一項記載の化合物を調製するためのプロセスであって、
（ａ）式（Ａ）
【化２９】
2015511614.tif 000115
式中、Ｒ１〜Ｒ５、ＭおよびＸは、請求項１〜１７のいずれか一項におけるように定義される
の化合物を、酸の存在下で反応させる工程を含む、前記プロセス。
【請求項２０】
療法的に活性である物質として使用するための、請求項１〜１８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２１】
請求項１〜１８のいずれか一項記載の化合物および療法的に不活性であるキャリアーを含む、医薬組成物。
【請求項２２】
Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療または予防のための請求項１〜１８のいずれか一項記載の化合物の使用。
【請求項２３】
Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療または予防のための医薬の調製のための、請求項１〜１８のいずれか一項記載の化合物の使用。
【請求項２４】
Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療または予防のための、請求項１〜１８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２５】
請求項１９のプロセスにしたがって製造された際の、請求項１〜１８のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２６】
Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療または予防のための方法であって、請求項１〜１８のいずれか一項に定義されるような化合物の有効量を投与する工程を含む、前記方法。
【請求項２７】
本明細書に先に記載される通りの発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒトにおける療法および／または予防に有用な有機化合物、そして特に、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染を治療するために有用なＨＢＶカプシドをターゲティングすることによるＨＢＶ阻害剤に関する。
【発明の概要】
【０００２】
ＨＢＶは、ウイルスのヘパドナウイルス科の種である。ＨＢＶは、世界中で、深刻な公衆衛生上の問題であり、特にアジア太平洋地域で、４億人を超える人々が、この小分子エンベロープ型ＤＮＡウイルスに慢性感染している。大部分の個体は、急性症状後、感染を消散させるようであるが、１５〜４０％のＨＢＶ患者は、最終的に、生存している間に、臨床的疾患を発展させ、最も顕著には肝炎、肝硬変、および肝細胞癌を発展させるであろう。毎年５０万〜１００万の人々が、ＨＢＶ感染によって引き起こされる肝臓疾患の末期で死亡する。
【０００３】
ＨＢＶライフサイクルは、肝細胞表面上の同定されていない受容体と「デーン」粒子の結合で始まる。進入後、ウイルスゲノムは核に送達され、ここでウイルスの弛緩した環状ＤＮＡのＤＮＡ修復を通じて、共有結合閉環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ）が形成される。ほとんどの他のＤＮＡウイルスの機構とは異なり、ＨＢＶ  ｃｃｃＤＮＡは、１．１ゲノム単位長のＲＮＡコピー（プレゲノムＲＮＡ）の逆転写（ｒｅｔｒｏｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ）を通じて複製する。ウイルスプレゲノムＲＮＡは、他の２つのウイルス構成要素、カプシドタンパク質およびポリメラーゼ、ならびにいくつかの宿主因子と相互作用して、カプシド粒子を形成し、ここでウイルスＤＮＡ複製が起こる。カプシド形成されたゲノムの大部分のコピーは、次いで、ウイルス粒子集合および分泌のため、エンベロープタンパク質と効率的に会合し；これらのゲノムのうち少数は、核へと逸れ、ここでｃｃｃＤＮＡに変換される。
【０００４】
現在、市場には、２つのタイプの抗ＨＢＶ剤、ウイルスポリメラーゼをターゲティングするヌクレオシド（ヌクレオチド）類似体（ラミブジン、アデフォビル、テノフォビル、テルビブジンおよびエンテカビル）、および宿主免疫機能を調節するインターフェロンがある。ラミブジンおよびアデフォビルに対する耐性を与えるポリメラーゼの一次配列における突然変異が臨床的に同定されてきており、そしてこれは、ラミブジン療法開始後、３年以内に、治療された患者の７０％が経験する、血清ウイルス力価のリバウンドの根底にある。テルビブジン、アデフォビルおよびエンテカビルに対する耐性は、よりまれにしか起こらないが、記録されてきている。インターフェロンアルファは、Ｂ型肝炎に利用可能な他の主要な療法であるが、長期反応が劣っており、そして衰弱させる副作用があるために限定される。いくつかのウイルス遺伝子型は、インターフェロン療法に対してよい反応を示さない。ここで、ＨＢＶ感染の臨床的な治癒の標準は、ＨＢｓＡｇの喪失および／または血清変換である。大部分（ほぼ９０％または９０％より多い）の治療された患者はこの目標を達成できない。この揺り戻しは、主に、核中にウイルスｃｃｃＤＮＡの安定なプールが存在するためであり、該ＤＮＡは、それ自体は複製しないため、ヌクレオシド（ヌクレオチド）類似体はアクセス不能である。
【０００５】
したがって、改善された特性を伴う治療、およびＨＢＶ感染に対する療法の開発中の多様なアプローチに関する医学的必要性が、確かにある。
ＨＢＶカプシドタンパク質は、ＨＢＶ複製において必須の役割を果たす。ＨＢＶは、２４０コピーのカプシド（またはコア）タンパク質を含む、正十二面体のコアを有する。カプシドタンパク質の主な生物学的機能は、構造タンパク質として働き、プレゲノムＲＮＡをカプシドで包み、そして細胞質中に未成熟カプシド粒子を形成することである。この段階は、ウイルスＤＮＡ複製の必要要件である。ＨＢＶカプシドは、細胞質中に存在するコア二量体の多くのコピーから、自発的に自己集合する。三量体核の形成およびそれに続く伸長反応は、完了するまで、１つの二量体サブユニットを同時に添加することによって起こることが示されてきている。この機能に加え、カプシドタンパク質は、Ｃ末端リン酸化部位の異なるリン酸化状態を通じて、ウイルスＤＮＡ合成を制御する。ほぼ全長の弛緩した環状ＤＮＡが、ウイルスプレゲノムＲＮＡの逆転写を通じて形成された場合、未成熟カプシドは成熟カプシドになる。一方、カプシドタンパク質は、カプシドタンパク質のＣ末端領域のアルギニン・リッチドメイン中に位置する、核局在化シグナルによって、ウイルス弛緩性環状ゲノムの核転写を促進する。核において、ウイルスｃｃｃＤＮＡミニ染色体の構成要素として、カプシドタンパク質は、ｃｃｃＤＮＡミニ染色体の機能性において、構造的および制御的役割を果たしうる。カプシドタンパク質はまた、小胞体中のウイルス性巨大エンベロープタンパク質とも相互作用し、そして肝細胞からのインタクトなウイルス粒子の放出を誘発する。
【０００６】
いくつかのカプシド関連抗ＨＢＶ阻害剤が報告されてきている。例えば、ＡＴ−６１およびＡＴ−１３０と称される化合物を含む、フェニルプロペンアミド誘導体（Ｆｅｌｄ  Ｊ．ら  Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００７，  １６８−１７７）、およびＶａｌｅａｎｔ  Ｒ＆Ｄのチアゾリン−４−オンのクラス（ＷＯ２００６／０３３９９５）が、ｐｇＲＮＡパッケージングを阻害することが示されてきている。近年の研究は、フェニルプロペンアミドが、実際に、ＨＢＶカプシド集合の加速因子であり、そしてこれらの作用が空のカプシドの形成を生じることを示唆した。これらの非常に興味深い結果が、ウイルス集合成功における動力学経路の重要性を例示する。
【０００７】
Ｂａｙ  ４１−４１０９、Ｂａｙ  ３８−７６９０およびＢａｙ  ３９−５４９３と称される化合物を含むヘテロアリールジヒドロピリミジンまたはＨＡＰが、組織培養に基づくスクリーニングにおいて発見された（Ｄｅｒｅｓ  Ｋ．ら  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００３，  ８９３）。これらのＨＡＰ類似体は、合成アロステリック活性化因子として作用し、そしてコアタンパク質の分解を導く、異常なカプシド形成を誘導することが可能である。ＨＡＰ類似体はまた、おそらく、ＨＡＰと、個々のサブユニット間結合の一過性破壊であるカプシド「呼吸（ｂｒｅａｔｈｉｎｇ）」中に逃れた二量体との相互作用によって、あらかじめ集合したカプシド由来のコアタンパク質を、非カプシドポリマーに再編成した。Ｂａｙ  ４１−４１０９を、ＨＢＶ感染トランスジェニックマウスまたはヒト化マウスモデルに投与し、そしてこれは、ＨＢＶ  ＤＮＡ減少を伴い、ｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を持つことが立証された（Ｄｅｒｅｓ  Ｋ．ら  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００３，  ８９３；  Ｂｒｅｚｉｌｌｏｎ  Ｎ．ら  ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ２０１１，  ｅ２５０９６．）。分子「くさび」として働く小分子であるビス−ＡＮＳは、カプシド−タンパク質の正常な配置およびカプシド形成に干渉することもまた示された（Ｚｌｏｔｎｉｃｋ  Ａ．ら  Ｊ．  Ｖｉｒｏｌ．  ２００２，  ４８４８−４８５４）。
【０００８】
本発明の目的は、式Ｉの新規化合物、その製造法、本発明にしたがった化合物に基づく薬剤およびその産生、ならびにＨＢＶ感染の治療または予防のための式Ｉの化合物の使用である。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】Ｂａｙ  ４１−４１０９は、ヒト肝臓ミクロソームにおいて、ＸＬＶＩに変換された。
【図２】静脈内および経口投与後、オスＩＣＲマウスにおけるＢａｙ  ４１−４１０９の平均±ＳＤ血漿濃度−時間曲線＊。＊肝臓における薬剤曝露は、肝臓ホモジネート中でＢａｙ  ４１−４１０９が不安定であるため、入手可能でない。
【図３】静脈内および経口投与後、オスＩＣＲマウスにおける実施例６の平均±ＳＤ血漿および組織濃度−時間曲線。
【図４】静脈内および経口投与後、オスＩＣＲマウスにおける実施例１１の平均±ＳＤ血漿および組織濃度−時間曲線。
【図５】静脈内および経口投与後、オスＩＣＲマウスにおける実施例１３の平均±ＳＤ血漿および組織濃度−時間曲線。
【図６】静脈内および経口投与後、オスＩＣＲマウスにおける実施例１９の平均±ＳＤ血漿および組織濃度−時間曲線。
【図７】化合物ＸＸＶＩＩのＸ線構造。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
定義
本明細書において、用語「Ｃ１−６アルキル」は、単独で、または組み合わせて、１〜６、特に１〜４炭素原子を含有する飽和、直鎖または分枝鎖アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、１−ブチル、２−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル等を意味する。特定の「Ｃ１−６アルキル」基は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルである。
【００１１】
用語「シクロアルキル」は、単独で、または組み合わせて、３〜７炭素原子、特に３〜６炭素原子を含有する飽和炭素環、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル等を指す。特定のシクロアルキル基は、シクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。
【００１２】
用語「Ｃ１−６アルコキシ」は、単独で、または組み合わせて、基、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は上に定義した通りである；例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ、２−ブトキシ、ｔ−ブトキシ等を意味する。特にＣ１−６アルコキシ基は、メトキシおよびエトキシであり、より具体的にはメトキシである。
【００１３】
用語「Ｃ２−６アルコキシ」は、単独で、または組み合わせて、基、Ｃ２−６アルキル−Ｏ−、ここで、「Ｃ２−６アルキル」は、単独で、または組み合わせて、２〜６、特に２〜４炭素原子を含有する飽和直鎖または分枝鎖アルキル基；例えばエトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ、２−ブトキシ、ｔ−ブトキシ等を意味する。
【００１４】
用語「Ｃ１−２アルコキシ」は、単独で、または組み合わせて、メトキシまたはエトキシを指す。
用語「ＣｙＨ２ｙ」は、単独で、または組み合わせて、１〜６、特に１〜４炭素原子を含有する飽和直鎖または分枝鎖アルキル基を意味する。
【００１５】
用語「アミノ」は、単独で、または組み合わせて、一級（−ＮＨ２）、二級（−ＮＨ−）または三級アミノ
【００１６】
【化１】
2015511614.tif 000003
【００１７】
を指す。
用語「カルボニル」は、単独で、または組み合わせて、基、−Ｃ（Ｏ）−を指す。
用語「カルボキシ」は、単独で、または組み合わせて、基、−ＣＯＯＨを指す。
【００１８】
用語「シアノ」は、単独で、または組み合わせて、基、−ＣＮを指す。
用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。ハロゲンは特にフッ素または塩素であり、より具体的にはフッ素である。
【００１９】
用語「ヒドロキシ」は、単独で、または組み合わせて、基、−ＯＨを指す。
用語「スルホニル」は、単独で、または組み合わせて、基、−Ｓ（Ｏ）２−を指す。
用語「モルホリニル」は、単独で、または組み合わせて、基
【００２０】
【化２】
2015511614.tif 000004
【００２１】
を指す。
用語「ピロリジニル」は、単独で、または組み合わせて、基
【００２２】
【化３】
2015511614.tif 000005
【００２３】
を指す。
用語「ピペリジニル」は、単独で、または組み合わせて、基
【００２４】
【化４】
2015511614.tif 000006
【００２５】
を指す。
用語「互変異性体」は、互変異性化と呼ばれる化学反応によって容易に相互変換する有機化合物の構造異性体を指す。この反応は、一般的に、水素原子またはプロトンのホルマール移動を生じ、これには、単結合および隣接二重結合のスイッチが付随する。例えば、一般式（Ｉ）
【００２６】
【化５】
2015511614.tif 000007
【００２７】
の化合物およびその互変異性体
【００２８】
【化６】
2015511614.tif 000008
【００２９】
である。
用語「薬学的に許容されうる塩」は、式Ｉの化合物の生物学的有効性および特性を保持し、そして適切な非毒性有機または無機酸、あるいは有機または無機塩基から形成される、慣用的な酸付加塩または塩基付加塩を指す。酸付加塩には、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸および硝酸などの無機酸に由来するもの、ならびにｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸等などの有機酸に由来するものが含まれる。塩基付加塩には、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、および水酸化四級アンモニウム由来のもの、例えば水酸化テトラメチルアンモニウムが含まれる。薬学的化合物の塩への化学修飾は、化合物の改善された物理的および化学的安定性、吸湿性、流動性および可溶性を得るための、薬学的化学者に周知の技術である。これは例えば、Ｂａｓｔｉｎ  Ｒ．Ｊ．ら，  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ２０００，  ４，  ４２７−４３５；またはＡｎｓｅｌ，  Ｈ．ら，  ：  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  第６版中（１９９５），  ｐｐ．１９６および１４５６−１４５７に記載される。具体的には、式Ｉの化合物のナトリウム塩である。
【００３０】
１またはいくつかのキラル中心を含有する一般式Ｉの化合物は、ラセミ体、ジアステレオマー混合物、または光学活性単一異性体のいずれかとして存在してよい。ラセミ体は、既知の方法にしたがって、エナンチオマーに分離可能である。特に、結晶化によって分離可能なジアステレオマー塩は、例えばＤ−またはＬ−酒石酸、マンデリン酸、リンゴ酸、乳酸またはカンファースルホン酸などの光学活性酸との反応によって、ラセミ混合物から形成される。
Ｂ型肝炎ウイルスの阻害剤
本発明は、（ｉ）一般式Ｉ：
【００３１】
【化７】
2015511614.tif 000009
【００３２】
式中、
Ｒ１は、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２は、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３は、チアゾリル、チエニル、イミダゾリル、イソキサゾリルまたはピリジニルであり；これは非置換であるかあるいはハロゲンまたはＣ１−６アルキルによって置換されており；
Ｘは、酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５は、独立に、水素、Ｃ１−６アルキルおよびトリフルオロＣ１−６アルキルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５は、付着した炭素原子と一緒に、３〜７員シクロアルキルを形成するか；あるいは
Ｘが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方は、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方は、付着している炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、ピロリジニル、モルホリニルまたはピペリジニル環を形成し、該環は非置換であるかまたはフルオロによって置換されており；
Ｍが、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルボキシ、ジＣ１−６アルキルアミノＣ２−６アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジＣ１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシ−ＣｙＨ２ｙ−、
【００３３】
【化８】
2015511614.tif 000010
【００３４】
であり；
Ｒ７は、Ｃ１−６アルキルまたはトリフルオロＣ１−６アルキルであり；
ｙは、１−６である
を有する新規化合物；
あるいはその薬学的に許容されうる塩、または互変異性体を提供する。
【００３５】
本発明の別の態様は、（ｉｉ）式Ｉの化合物であって、
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、非置換であるかまたはＣ１−６アルキルもしくはハロゲンによって１回置換された２−チアゾリルであるか；あるいはハロゲンによって１回置換された２−チエニルまたは２−ピリジニルであるか；あるいはＣ１−６アルキルによって１回置換された２−イミダゾリルであるか；あるいは非置換であるかまたはＣ１−６アルキルによって１回置換された３−イソキサゾリルであり；
Ｘが酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、Ｃ１−６アルキルおよびトリフルオロＣ１−６アルキルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、３〜７員シクロアルキルを形成するか；あるいは
Ｘが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方が、付着している炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、モルホリニル；またはフルオロによって置換されたピロリジニルもしくはピペリジニルを形成し；
Ｍが、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルボキシ、ジＣ１−６アルキルアミノ−Ｃ２−６アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジＣ１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシ−ＣｙＨ２ｙ−、
【００３６】
【化９】
2015511614.tif 000011
【００３７】
であり；
Ｒ７が、Ｃ１−６アルキルまたはトリフルオロＣ１−６アルキルであり；
ｙが、１−６である
前記化合物；
あるいはその薬学的に許容されうる塩、または互変異性体である。
【００３８】
本発明のさらなる態様は、（ｉｉｉ）式Ｉの化合物であって、
Ｒ１が、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、フルオロによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が
【００３９】
【化１０】
2015511614.tif 000012
【００４０】
であり；
Ｘが、酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、メチルおよびトリフルオロメチルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、シクロプロピルを形成するか；あるいはＸが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着している炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、
【００４１】
【化１１】
2015511614.tif 000013
【００４２】
を形成し；
Ｍが、メトキシカルボニル、カルボキシ、ジメチルアミノエトキシカルボニル、アミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、メチルアミノカルボニル、メチルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシプロピル、
【００４３】
【化１２】
2015511614.tif 000014
【００４４】
であり；
Ｒ７がメチルまたはトリフルオロエチルである
前記化合物；
あるいはその薬学的に許容されうる塩、または互変異性体である。
【００４５】
本発明の別の態様は、（ｉｖ）式Ｉの化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１がＣ１−２アルコキシカルボニルであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって１回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が２−チアゾリルであり；
Ｘが酸素であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、Ｃ１−６アルキルおよびトリフルオロＣ１−６アルキルより選択され；
Ｍが、Ｃ１−６アルコキシカルボニルまたはカルボキシである
前記化合物である。
【００４６】
本発明のさらなる態様は、（ｖ）式Ｉの化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１がメトキシカルボニルであり；
Ｒ２が
【００４７】
【化１３】
2015511614.tif 000015
【００４８】
であり；
Ｒ３が
【００４９】
【化１４】
2015511614.tif 000016
【００５０】
であり；
Ｘが酸素であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、メチルおよびトリフルオロメチルより選択され；
Ｍが、メトキシカルボニルまたはカルボキシである
前記化合物である。
【００５１】
本発明の別の態様は、（ｖｉ）式Ｉの化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって１回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が２−チアゾリルであり；
Ｘが、−Ｎ−Ｃ１−６アルキルまたは−Ｎ−トリフルオロＣ１−６アルキルであり；
Ｒ４が水素であり；
Ｒ５が水素であるか；
またはＲ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、３〜７員シクロアルキルを形成し；
Ｍがカルボキシである
前記化合物である。
【００５２】
本発明のさらなる態様は、（ｖｉｉ）式Ｉの化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１がメトキシカルボニルであり；
Ｒ２が
【００５３】
【化１５】
2015511614.tif 000017
【００５４】
であり；
Ｒ３が
【００５５】
【化１６】
2015511614.tif 000018
【００５６】
であり；
Ｘが、−ＮＣＨ３または
【００５７】
【化１７】
2015511614.tif 000019
【００５８】
であり；
Ｒ４が水素であり；
Ｒ５が水素であるか；
またはＲ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、シクロプロピルを形成し；
Ｍがカルボキシである
前記化合物である。
【００５９】
本発明の別の態様は、（ｖｉｉｉ）式Ｉの化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、２−チアゾリル；またはハロゲンによって１回置換された２−ピリジニル；またはＣ１−６アルキルによって１回置換された２−イミダゾリルであり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が水素であり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒にモルホリニルを形成し；
Ｍが、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルボキシまたはヒドロキシ−ＣｙＨ２ｙ−であり；
ｙが１−６である
前記化合物である。
【００６０】
本発明のさらなる態様は、（ｉｘ）式Ｉの化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が
【００６１】
【化１８】
2015511614.tif 000020
【００６２】
であり；
Ｒ３が
【００６３】
【化１９】
2015511614.tif 000021
【００６４】
であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が水素であり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に
【００６５】
【化２０】
2015511614.tif 000022
【００６６】
を形成し；
Ｍが、メトキシカルボニル、カルボキシまたはヒドロキシメチル−である
前記化合物である。
【００６７】
本発明の別の態様は、（ｘ）式Ｉの化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり； 
Ｒ２が、ハロゲンによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、非置換であるかまたはＣ１−６アルキルもしくはハロゲンによって１回置換された２−チアゾリルであるか；あるいはハロゲンによって１回置換された２−チエニルまたは２−ピリジニルであるか；あるいはＣ１−６アルキルによって１回置換された２−イミダゾリルであるか；あるいは非置換であるかまたはＣ１−６アルキルによって１回置換された３−イソキサゾリルであり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、フルオロによって置換されたピロリジニルまたはピペリジニルを形成し；
Ｍが、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルボキシ、ジＣ１−６アルキルアミノＣ２−６アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジＣ１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシ−ＣｙＨ２ｙ−、
【００６８】
【化２１】
2015511614.tif 000023
【００６９】
であり；
ｙが１−６である
前記化合物である。
【００７０】
本発明のさらなる態様は、（ｘｉ）式Ｉの化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が
【００７１】
【化２２】
2015511614.tif 000024
【００７２】
であり；
Ｒ３が、
【００７３】
【化２３】
2015511614.tif 000025
【００７４】
であり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、
【００７５】
【化２４】
2015511614.tif 000026
【００７６】
を形成し；
Ｍが、メトキシカルボニル、カルボキシ、ジメチルアミノエトキシカルボニル、アミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、メチルアミノカルボニル、メチルスルホニルアミノカルボニル、２−チアゾリルアミノカルボニル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシプロピル、
【００７７】
【化２５】
2015511614.tif 000027
【００７８】
である
前記化合物である。
本発明の別の態様は、（ｘｉｉ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
式（Ｉ’）
【００７９】
【化２６】
2015511614.tif 000028
【００８０】
式中、
Ｒ１は、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２は、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３は、非置換であるかまたはＣ１−６アルキルによって置換された２−チアゾリル、あるいはハロゲンによって置換された２−ピリジニルであり；
Ｘは、酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５は、独立に、水素、Ｃ１−６アルキルおよびトリフルオロＣ１−６アルキルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５は、付着した炭素原子と一緒に、３〜７員シクロアルキルを形成するか；あるいは
Ｘが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方は、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方は、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、モルホリニル；またはフルオロによって置換されたピロリジニルを形成し；
Ｒ６は、水素またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７はＣ１−６アルキルである
前記化合物である。
【００８１】
本発明のさらなる態様は、（ｘｉｉｉ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、メトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、フルオロによって１回または２回置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、
【００８２】
【化２７】
2015511614.tif 000029
【００８３】
であり；
Ｘが、酸素または−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、メチルおよびトリフルオロメチルより選択されるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒にシクロプロピルを形成するか；あるいはＸが−ＮＲ７である場合、Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に
【００８４】
【化２８】
2015511614.tif 000030
【００８５】
を形成し；
Ｒ６が、水素またはメチルであり；
Ｒ７がメチルである
前記化合物である。
【００８６】
本発明のさらにさらなる態様は、（ｘｉｖ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３が２−チアゾリルであり；
Ｘが酸素であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、Ｃ１−６アルキルおよびトリフルオロＣ１−６アルキルより選択され；
Ｒ６が、水素またはＣ１−６アルキルである
前記化合物である。
【００８７】
本発明のさらにさらなる態様は、（ｘｖ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、メトキシカルボニルであり；
Ｒ２が、
【００８８】
【化２９】
2015511614.tif 000031
【００８９】
であり；
Ｒ３が、
【００９０】
【化３０】
2015511614.tif 000032
【００９１】
であり
Ｘが酸素であり；
Ｒ４およびＲ５が、独立に、水素、メチルおよびトリフルオロメチルより選択され；
Ｒ６が、水素またはメチルである
前記化合物である。
【００９２】
本発明の別のさらなる態様は、（ｘｖｉ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、２−チアゾリルであり；
ＸがＮＣ１−６アルキルであり；
Ｒ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、３〜７員シクロアルキルを形成し；
Ｒ６が、水素である
前記化合物である。
【００９３】
本発明のさらなる態様は、（ｘｖｉｉ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、メトキシカルボニルであり；
Ｒ２が、
【００９４】
【化３１】
2015511614.tif 000033
【００９５】
であり；
Ｒ３が、
【００９６】
【化３２】
2015511614.tif 000034
【００９７】
であり；
Ｘが−ＮＣＨ３であり；
Ｒ４およびＲ５が、付着した炭素原子と一緒に、シクロプロピルを形成し
Ｒ６が、水素である
前記化合物である。
【００９８】
本発明のさらにさらなる態様は、（ｘｖｉｉｉ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、２−チアゾリル；またはハロゲンによって置換された２−ピリジニルであり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、モルホリニルを形成し；
Ｒ６が、水素またはＣ１−６アルキルである
前記化合物である。
【００９９】
本発明のさらなる態様において、（ｘｉｘ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、メトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、
【０１００】
【化３３】
2015511614.tif 000035
【０１０１】
であり；
Ｒ３が、
【０１０２】
【化３４】
2015511614.tif 000036
【０１０３】
であり
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に
【０１０４】
【化３５】
2015511614.tif 000037
【０１０５】
を形成し
Ｒ６が、水素またはメチルである
前記化合物である。
【０１０６】
本発明のさらにさらなる態様は、（ｘｘ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、Ｃ１−２アルコキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、ハロゲンによって置換されたフェニルであり；
Ｒ３が、非置換であるかまたはＣ１−６アルキルによって置換された２−チアゾリル、あるいはハロゲンによって置換された２−ピリジニルであり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、フルオロによって置換されたピロリジニルを形成し；
Ｒ６が、水素またはＣ１−６アルキルである
前記化合物である。
【０１０７】
本発明の別のさらなる態様は、（ｘｘｉ）式Ｉ’の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または互変異性体であって
Ｒ１が、メトキシカルボニルまたはシアノであり；
Ｒ２が、
【０１０８】
【化３６】
2015511614.tif 000038
【０１０９】
であり；
Ｒ３が、
【０１１０】
【化３７】
2015511614.tif 000039
【０１１１】
であり；
Ｘが−ＮＲ７であり；
Ｒ４およびＲ５の一方が、水素またはメチルであり、そしてもう一方が、付着した炭素原子および−ＮＲ７と一緒に、
【０１１２】
【化３８】
2015511614.tif 000040
【０１１３】
を形成し；
Ｒ６が、水素またはメチルである
前記化合物である。
【０１１４】
活性データ、ＮＭＲデータおよびＭＳデータを含めて、式Ｉの特定の化合物を、以下の表１および２に要約する。
表１：特定の化合物の構造、名称および活性データ
【０１１５】
【表１−１】
2015511614.tif 000041
【０１１６】
【表１−２】
2015511614.tif 000042
【０１１７】
【表１−３】
2015511614.tif 000043
【０１１８】
【表１−４】
2015511614.tif 000044
【０１１９】
【表１−５】
2015511614.tif 000045
【０１２０】
【表１−６】
2015511614.tif 000046
【０１２１】
【表１−７】
2015511614.tif 000047
【０１２２】
【表１−８】
2015511614.tif 000048
【０１２３】
【表１−９】
2015511614.tif 000049
【０１２４】
【表１−１０】
2015511614.tif 000050
【０１２５】
【表１−１１】
2015511614.tif 000051
【０１２６】
【表１−１２】
2015511614.tif 000052
【０１２７】
【表１−１３】
2015511614.tif 000053
【０１２８】
【表１−１４】
2015511614.tif 000054
【０１２９】
【表１−１５】
2015511614.tif 000055
【０１３０】
表２：特定の化合物のＮＭＲおよびＭＳデータ
【０１３１】
【表２−１】
2015511614.tif 000056
【０１３２】
【表２−２】
2015511614.tif 000057
【０１３３】
【表２−３】
2015511614.tif 000058
【０１３４】
【表２−４】
2015511614.tif 000059
【０１３５】
【表２−５】
2015511614.tif 000060
【０１３６】
【表２−６】
2015511614.tif 000061
【０１３７】
【表２−７】
2015511614.tif 000062
【０１３８】
【表２−８】
2015511614.tif 000063
【０１３９】
【表２−９】
2015511614.tif 000064
【０１４０】
式Ｉのより具体的な化合物には、以下が含まれる：
４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸；
４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸；
（Ｓ）−４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸；
（Ｓ）−４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸；
４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸；
４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸；
６−（２−（Ｓ）−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
６−（２−（Ｒ）−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
４−［６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸；
６−（４，４−ジフルオロ−２−メトキシカルボニル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
６−（２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
６−（２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−２−メチル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−１−［（Ｓ）−５−シアノ−６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステル；
（Ｓ）−６−（２−カルボキシ−５，５−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（４−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−２−（５−クロロ−チアゾール−２−イル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（３−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−メトキシカルボニル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（２−カルバモイル−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−ジメチルカルバモイル−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（チアゾール−２−イルカルバモイル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−ヒドロキシメチル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（５−メチル−［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；および
（Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（３−メチル−［１，２，４］オキサジアゾール−５−イル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル。
【０１４１】
薬剤が中程度のまたは低いクリアランスを有することは非常に重要であり、これは、これがしばしば、優れた経口生物学的利用能およびターゲット臓器における高曝露を導くためである。化合物または薬剤のクリアランスを減少させると、次いで、潜在的に、有効性のために必要な１日用量が劇的に減少する可能性があり、そしてしたがって、はるかにより優れた安全性プロファイルを生じさせる。以下の実施例から、本発明の４−メチルジヒドロピリミジンの代謝安定性および肝臓曝露の顕著な増加が見られてきている。
【０１４２】
４−水素−ジヒドロピリミジン、例えばＢａｙ  ４１−４１０９を、ヒト、ラットまたはマウス肝臓ミクロソームで処理すると、ピリミジン産物ＸＬＶＩに酸化可能である。この実験において、ヒト、オスのウィスターラットおよびオスＣＤ−１マウス由来のプールした肝臓ミクロソーム（２０ｍｇ／ｍｌ）を、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（米国ニュージャージー州フランクリンレイクス）より得た。インキュベーション反応混合物は、総体積４００μｌ中、最終濃度０．１Ｍのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．４）、０．５ｍｇ／ｍｌミクロソームタンパク質、５μＭの試験化合物および１ｍＭ  ＮＡＤＰＨを含有した。インキュベーションを６０分間行い、そして３００μｌの混合物を１５０μｌの氷冷メタノールに移し、反応を終結させた。３分間ボルテックスし、そして４０００ｒｐｍ、４℃で１０分間遠心分離した後、清澄な上清を直接、分析に用いた。エレクトロスプレーイオン化モードを用い、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ＡＰＩ  ３２００  Ｑ  ＴＲＡＰ  ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ系によって分析した。
【０１４３】
ピリミジン産物ＸＬＶＩは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏクリアランス試験における主な代謝産物であり（図１）、そしてＨｅｐＤＥ１９細胞に基づくアッセイにおいて、ＨＢＶ  ＤＮＡ減少に対して不活性であり、ＥＣ５０値は１００μＭを超えた。一方、本発明の一連の４−メチル−ジヒドロピリミジンは、コア構造の芳香環化の問題を持たなかった。
【０１４４】
ＨＢＶウイルスは肝細胞を感染させ、そして肝臓中で複製する。有効なウイルス抑制を有するためには、抗ＨＢＶ薬剤がターゲット臓器において十分な曝露を有することが重要である。以下の知見は、本発明の４−メチルジヒドロピリミジン類似体の代謝安定性増加および高い肝臓曝露を強調する。
【０１４５】
本実験において、収集直後に生理食塩水を添加する（１ｇ肝臓組織：５ｍＬ生理食塩水）ことによって、新鮮なマウス肝臓試料をホモジナイズした。１４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した後、プールした上清を用いて、肝臓ホモジネート溶液を調製した。肝臓ホモジネート中の有効な化合物濃度は、１００、３００、および１０００ｎｇ／ｍＬであった。次いで、これらを室温でインキュベーションした。０、１５および３０分間のインキュベーション時間後、１８０μｌのＭｅＯＨアリコットを２０μｌのホモジネートにそれぞれ添加した。これらの試料をすべて、１５００ｒｐｍで５分間、ボルテックス混合し、そして１４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のため、上清を９６ウェルプレートに移した。結果を要約し、そして表３に示した。
【０１４６】
表３．  マウス肝臓ホモジネート中に残る、Ｂａｙ  ４１−４１０９および実施例１３の割合。
【０１４７】
【表３】
2015511614.tif 000065
【０１４８】
＊：ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって直接計算されたデータ、相対標準偏差は２０％。
＊＊：検出されない
１５分および３０分の個々の試料のピーク面積を、同じ濃度レベルの０分のものに比較することによって、ＣＤ−１マウス肝臓ホモジネートにおけるＢａｙ  ４１−４１０９および実施例１３の安定性を評価した。
【０１４９】
生理食塩水で処理した肝臓ホモジネートにおいて、Ｂａｙ  ４１−４１０９が安定でないことが明らかに結論づけ可能である。３つの異なる濃度レベルで、室温で１５分間インキュベーションした後、約２％の化合物が検出された。３０分間インキュベーションした試料では、わずか０．１６％しか見られなかった（１０００ｎｇ／ｍＬで。装置感度のため、１００ｎｇ／ｍＬおよび３００ｎｇ／ｍＬ試料では検出されなかった）。
【０１５０】
実施例１３は、生理食塩水で処理した肝臓ホモジネート中で安定であると結論づけ可能である。
静脈内（またはｉ．ｖ．）または経口（またはｐ．ｏ．）投与後、オスＩＣＲマウスにおいて、選択した化合物のｉｎ  ｖｉｖｏ  ＤＭＰＫを評価した。単回用量薬物動態（ＳＤＰＫ）研究において、化合物を６％のＳｏｌｕｔｏｌ溶液（Ｓｏｌｕｔｏｌ：エタノール、１：１、ｖ／ｖ）、およびｉ．ｖ．用量用の９４％の０．９％生理食塩水に溶解した。ｐ．ｏ．投与のため、化合物を０．８９％微結晶セルロースおよび０．１１％カルボキシメチルセルロースナトリウム水溶液と混合するか、または懸濁物として１％ＲＣ５９１と混合した。マウス血漿および／または肝臓中のＢａｙ  ４１−４１０９、実施例６、実施例１１、実施例１３および実施例１９の単回用量曝露レベルを図２〜６に示す。
合成
任意の慣用的な手段によって、本発明の化合物を調製してもよい。これらの化合物を合成するために適したプロセス、ならびにその出発材料を、以下のスキームおよび実施例に提供する。すべての置換基、特に、Ｒ１〜Ｒ５、ＭおよびＸは、別に示さない限り、上に定義する通りである。さらに、そして明確に別に言及しない限り、すべての反応、反応条件、略語および記号は、有機化学の一般的な当業者に周知である意味を有する。
【０１５１】
４−メチル−５−エステル−６−メチル−ジヒドロピリミジンに基づく類似体、中間体−１の一般的な合成スキーム（スキーム１）
本明細書記載の化合物の１つのカテゴリーは、式、中間体−１、式中、Ｒ８はＣ１−６アルキルである、を持つ、４−メチル−５−エステル−６−メチル−ジヒドロピリミジンに基づく類似体に関連する。
【０１５２】
【化３９】
2015511614.tif 000066
【０１５３】
スキーム１に示す一般的な合成法にしたがって、関心対象の化合物、中間体−１を調製することも可能である。
スキーム１
【０１５４】
【化４０】
2015511614.tif 000067
【０１５５】
商業的に入手可能なニトリルＩＩ、塩化アンモニウムおよびトリメチルアルミニウムからアミジンＩＩＩを調製してもよい。典型的には、トルエン中の塩化アンモニウムの混合物に、０℃で、トリメチルアルミニウムを添加することによって、反応を行う。３０分後、ニトリルＩＩをフラスコに添加し、そして反応混合物を８０℃で一晩攪拌する。
【０１５６】
商業的に入手可能なエステルＩＶおよびエチニル−ベンゼンＶのインジウム・トリフレート触媒縮合反応によって、α，β−不飽和ケトンＶＩが生じる。典型的には、ｏ−キシレン中、１２０℃で２時間、反応を行う。
【０１５７】
テトラ置換α，β−不飽和ケトンＶＩを合成する代替法として、特にＲ８がｔｅｒｔ−ブチル基である場合、エステルＩＶと置換ベンズアルデヒドＶＩＩの縮合によって、ケトンＶＩＩＩを調製してもよい。典型的には、触媒量のピペリジンおよび酢酸と、エタノール中、室温で一晩、反応を行う。
【０１５８】
α，β−不飽和ケトンＶＩＩＩへのメチル基の１，４−マイケル付加によって、ケトンＩＸを調製してもよい。典型的には、ＴＨＦ溶液中のヨウ化銅にメチルリチウム溶液を０℃で添加することによって反応を行い、そして０℃で１時間攪拌し、次いでＴＨＦ中のＶＩＩＩの溶液を−７８℃で混合物に添加し、そして−７８℃で１時間攪拌する。
【０１５９】
ケトンＩＸを酸化的に除去することによって、α，β−不飽和ケトンＶＩを調製してもよい。典型的には、ＴＨＦ中のケトンＩＸの溶液に水素化ナトリウムを添加することによって反応を行い、次いで、塩化フェニルセレニルを添加して、そして室温で１時間攪拌する。混合物をペンテン、エーテルおよび飽和重炭酸ナトリウムで処理した後、有機層をＨ２Ｏ２溶液（３０％）で処理して、そして室温で１時間攪拌する。
【０１６０】
α，β−不飽和ケトンＶＩとアミジンＩＩＩの縮合反応によって、一般構造、中間体−１を持つ類似体を調製することも可能である。典型的には、ＮＭＰ中のＶＩの溶液を、１滴ずつ、１２０℃で、ＮＭＰ中のアミジンＩＩＩおよびＮａＨＣＯ３の混合物に添加することによって、反応を行い、添加後、混合物を１２０℃で３０分間攪拌した後、ワークアップする。
【０１６１】
４−メチル−５−シアノ−６−窒素−置換−２，４−ジヒドロ−ピリミジンに基づく類似体、中間体−３のための一般的な合成スキーム（スキーム−２）
【０１６２】
【化４１】
2015511614.tif 000068
【０１６３】
スキーム２に示す一般的な合成法にしたがって、関心対象の化合物、中間体−３を調製することも可能である。
スキーム２
【０１６４】
【化４２】
2015511614.tif 000069
【０１６５】
中間体−２の脱保護によって、化合物ＸＩを得ることも可能である。典型的には、ＴＦＡとともにＤＣＭ中、室温で２時間、反応を行う。
アンモニアとＸＩから、カップリング反応によって、化合物ＸＩＩを得ることも可能である。典型的には、ＤＣＭ中、ジオキサン溶液のＨＡＴＵおよびアンモニアと、室温で１時間、反応を行う。
【０１６６】
化合物ＸＩＩからの脱水反応によって、シアノ化合物、中間体−３を得ることも可能である。典型的には、１，２−ジクロロエタン中、塩化チオニルまたは無水トリフルオロ酢酸と、還流下で１時間、反応を行う。
【０１６７】
４−メチル−５−エステルまたはシアノ−６−アミノアルキル−ジヒドロピリミジンに基づく類似体Ｉａのための一般合成スキーム（スキーム３）
【０１６８】
【化４３】
2015511614.tif 000070
【０１６９】
スキーム３に示す一般的な合成法にしたがって、関心対象の化合物Ｉａを調製することも可能である。
スキーム３
【０１７０】
【化４４】
2015511614.tif 000071
【０１７１】
エステル、中間体−１またはシアノ、中間体−３を、不活性有機溶媒、例えばＤＣＭ中、塩基としてのジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートおよびＤＭＡＰで、典型的には室温で２４時間、処理することによって、Ｂｏｃ保護化合物ＸＩＩＩを得ることも可能である。
【０１７２】
化合物ＸＩＩＩのブロム化によって、化合物ＸＩＶを得ることも可能である。典型的には、テトラクロロメタン中、触媒としてのＮＢＳおよびＡＩＢＮとともに、８０℃で２時間、反応を行う。
【０１７３】
化合物ＸＩＶとＸＶの置換反応を通じて、アミノ置換中間体ＸＶＩを得ることも可能である。不活性有機溶媒、例えばＤＣＭ、ＴＨＦまたはＤＭＦ中、適切な有機塩基、例えばＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、無機塩基、例えばＮａＨ、Ｎａ２ＣＯ３、またはｔ−ＢｕＯＫを用いて、室温又は５０℃で１〜１０時間反応を行うことも可能である。
【０１７４】
脱保護剤として、ＤＣＭ中のＴＦＡまたはＭｅＯＨ中のＨＣｌで、ＸＶＩを室温で処理する脱保護から、化合物Ｉａを得ることも可能である。
４−メチル−５−エステルまたはシアノ−６−アルコキシメチル−ジヒドロピリミジンに基づく類似体Ｉｂのための一般合成スキーム（スキーム４）
【０１７５】
【化４５】
2015511614.tif 000072
【０１７６】
スキーム４に示す一般的な合成法にしたがって、関心対象の化合物Ｉｂを調製することも可能である。
スキーム４
【０１７７】
【化４６】
2015511614.tif 000073
【０１７８】
化合物ＸＩＶとアルコールＸＶＩＩの置換反応によって、化合物ＸＶＩＩＩを得ることも可能である。典型的には、ＮａＨを無水ＴＨＦ中のアルコールＸＶＩＩの溶液に室温で添加することによって、反応を行い、次いで、臭化物ＸＩＶをフラスコに添加して、そして混合物を室温で３時間攪拌する。
【０１７９】
ＤＣＭ中のＴＦＡまたはＭｅＯＨ中のＨＣｌで、室温でＸＶＩＩＩを処理することによって、化合物Ｉｂを得ることも可能である。
本発明はまた、
（ａ）酸の存在下での、式（Ａ）
【０１８０】
【化４７】
2015511614.tif 000074
【０１８１】
の化合物の反応を含む、式Ｉの化合物の調製のためのプロセスにも関し；
式中、Ｒ１〜Ｒ５、ＭおよびＸは別に示さない限り、上に定義する通りである。
工程（ａ）において、酸は、例えばＴＦＡまたはＨＣｌであることも可能である。
医薬組成物および投与
本発明はまた、療法的に活性である物質として使用するための式Ｉの化合物にも関する。
【０１８２】
上記プロセスにしたがって製造された際の式（Ｉ）の化合物もまた、本発明の目的である。
別の態様は、本発明の化合物および療法的に不活性であるキャリアー、希釈剤または賦形剤を含有する医薬組成物または薬剤、ならびに本発明の化合物を用いて、こうした組成物および薬剤を調製する方法を提供する。１つの例において、周囲温度、適切なｐＨ、および所望の度合いの純度で、生理学的に許容されうるキャリアー、すなわち使用する投薬量および濃度でレシピエントに非毒性であるキャリアーとともに混合することによって、式Ｉの化合物を生薬（ｇａｌｅｎｉｃａｌ）投与型に配合してもよい。配合物のｐＨは、主に、化合物の特定の使用および濃度に応じるが、好ましくは、約３〜約８の間のどこかの範囲である。１つの例において、式Ｉの化合物をｐＨ５の酢酸緩衝液中に配合する。別の態様において、式Ｉの化合物は無菌である。化合物を、例えば、固形または不定形組成物として、凍結乾燥配合物として、あるいは水溶液として保存してもよい。
【０１８３】
組成物を、優れた医学的実施と一致した様式で配合し、投薬し、そして投与する。この背景において考慮するための要因には、治療される特定の障害、治療される特定のヒト、個々の患者の臨床状態、障害の原因、剤の送達部位、投与法、投与スケジュール、および開業医に知られる他の要因が含まれる。投与すべき化合物の「有効量」は、こうした考慮に支配され、そして血清ＨＢＶ  ＤＮＡレベルの抑制、またはＨＢｅＡｇのＨＢｅＡｂへの血清変換、またはＨＢｓＡｇ喪失、またはアラニンアミノトランスフェラーゼレベルの正常化および肝臓組織像の改善に必要な最小量である。例えば、こうした量は、正常の細胞、またはヒト全体に毒性である量よりも下でありうる。
【０１８４】
１つの例において、用量あたり非経口的に投与される本発明の化合物の薬学的に有効な量は、約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲、または１日あたり約０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ患者体重の範囲であり、用いられる化合物の典型的な初期範囲は、０．３〜１５ｍｇ／ｋｇ／日である。別の態様において、経口単位投薬型、例えば錠剤およびカプセルは、本発明の化合物を約０．１〜約１０００ｍｇ含有する。
【０１８５】
経口、局所（頬側および舌下を含む）、直腸、膣、経皮、非経口、皮下、腹腔内、肺内、皮内、クモ膜下腔内および硬膜外および鼻内、ならびに局所治療が望ましい場合、病変内投与を含む、任意の適切な手段によって本発明の化合物を投与してもよい。非経口注入には、筋内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与が含まれる。
【０１８６】
任意の慣用的投与型、例えば錠剤、粉末、カプセル、溶液、分散物、懸濁物、シロップ、スプレー、座薬、ジェル、エマルジョン、パッチ等で、本発明の化合物を投与してもよい。こうした組成物は、薬学的調製において慣用的な構成要素、例えば希釈剤、キャリアー、ｐＨ修飾剤、甘味料、充填剤、およびさらなる活性剤を含有してもよい。
【０１８７】
本発明の化合物およびキャリアーまたは賦形剤を混合することによって、典型的な配合物が調製される。適切なキャリアーおよび賦形剤が当業者に周知であり、そして例えば、Ａｎｓｅｌ，  Ｈｏｗａｒｄ  Ｃ．ら，  Ａｎｓｅｌ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ．  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  ２００４；  Ｇｅｎｎａｒｏ，  Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．ら  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ．  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  ２０００；およびＲｏｗｅ，  Ｒａｙｍｏｎｄ  Ｃ．  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ．  Ｃｈｉｃａｇｏ，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，  ２００５に詳細に記載される。配合物にはまた、１またはそれより多い緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、湿潤剤、潤滑剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、酸化防止剤、不透明化（ｏｐａｑｕｉｎｇ）剤、流動促進剤、プロセシング補助剤、着色剤、甘味料、香料剤、フレーバー剤、希釈剤、および薬剤（すなわち本発明の化合物またはその医薬組成物）のエレガントな提示を提供するかまたは薬学的製品（すなわち医薬品）の製造を補助する他の既知の添加剤が含まれてもよい。
【０１８８】
適切な経口投薬型の例は、約９０ｍｇ〜３０ｍｇの無水ラクトース、約５ｍｇ〜４０ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、約５ｍｇ〜３０ｍｇのポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）Ｋ３０、および約１ｍｇ〜１０ｍｇのステアリン酸マグネシウムと組み合わせられた約０．１ｍｇ〜１０００ｍｇの本発明の化合物を含有する錠剤である。粉末化成分をまず、ともに混合し、そして次いで、ＰＶＰの溶液と混合する。生じた組成物を乾燥させ、顆粒化し、ステアリン酸マグネシウムと混合し、そして慣用的装置を用いて、錠剤型に圧縮してもよい。本発明の化合物、例えば５ｍｇ〜４００ｍｇを適切な緩衝溶液、例えばリン酸緩衝液中に溶解し、望ましい場合、等張化剤（ｔｏｎｉｃｉｆｉｅｒ）、例えば塩化ナトリウムなどの塩を添加することによって、エアロゾル配合物の例を調製してもよい。例えば０．２ミクロン・フィルターを用いて、溶液をろ過して、不純物および混入物を取り除いてもよい。
【０１８９】
したがって、態様には、式Ｉの化合物、あるいはその立体異性体または薬学的に許容されうる塩を含む医薬組成物が含まれる。さらなる態様において、薬学的に許容されうるキャリアーまたは賦形剤と一緒に、式Ｉの化合物、あるいはその立体異性体または薬学的に許容されうる塩を含む医薬組成物が含まれる。
徴候および治療法
本発明の化合物は、ＨＢＶの新規ＤＮＡ合成を阻害し、そしてＨＢＶ  ＤＮＡレベルを減少させることも可能である。したがって、本発明の化合物は、ＨＢＶ感染の治療または予防に有用である。
【０１９０】
本発明は、ＨＢＶ感染の治療または予防のための式Ｉの化合物の使用に関する。
ＨＢＶ感染に関連する疾患の治療または予防に有用な医薬の調製のための式Ｉの化合物の使用は、本発明の目的である。
【０１９１】
本発明は、特に、ＨＢＶ感染の治療または予防のための医薬の調製のための式Ｉの化合物の使用に関する。
別の態様には、治療が必要なヒトにおいて、ＨＢＶ感染を治療するかまたは予防する方法であって、前記ヒトに、療法的有効量の式Ｉの化合物、その立体異性体、互変異性体、プロドラッグ、または薬学的に許容されうる塩を投与する工程を含む、前記方法が含まれる。
併用療法
本発明の化合物を、ＨＢＶの治療または予防のため、インターフェロン、ＰＥＧ化インターフェロン、ラミブジン、アデフォビルジピボキシル、エンテカビル、テルビブジン、およびテノフォビルジソプロキシルと一緒に用いてもよい。
【実施例】
【０１９２】
本発明は、以下の実施例を参照することによってより十分に理解されるであろう。しかしこれらは、本発明の範囲を限定すると見なされてはならない。
本明細書で用いる略語は以下の通りである：
ＡＩＢＮ：  アゾビスイソブチロニトリル
Ｂｏｃ：  ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ｔ−ＢｕＯＫ：  カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド
ｃａｌｃ’ｄ：  計算値
ＣＣ５０：  細胞傷害性濃度５０％
ＣＣｌ４：  テトラクロロメタン
ＣＤＣｌ３：  重水素化クロロホルム
ＣＣＫ−８：  細胞計数キット−８
ＣＤＩ：  Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール
ＣＭＶ：  サイトメガロウイルス
ｄ：  日
ＤＩＰＥＡ：  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＣＭ：  ジクロロメチレン
ＤＭＡＰ：  Ｎ，Ｎ’−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ：  ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：  ジメチルスルホキシド
ＤＮＡ：  デオキシリボ核酸
ＥＤＣＩ：  １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＥＤＴＡ：  エチレンジアミン四酢酸
ｅｘｐ：  期待値
ＥｔＯＡｃ：  酢酸エチル
ＦＢＳ：  ウシ胎児血清
ｇ：  グラム
ＥＣ５０：  アセチル化チューブリンの５０％誘導に必要な濃度
ＦＢＳ：  ウシ胎児血清
ｈ：  単数または複数の時間
ＨＡＰ：  ヘテロアリールジヒドロピリミジン
ＨＡＴＵ：  ２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＢｅＡｂ：  Ｂ型肝炎ｅ抗体
ＨＢｅＡｇ：  Ｂ型肝炎ｅ抗原
ＨＢｓＡｇ：  Ｂ型肝炎表面抗原
ＨＣｌ：  塩化水素
ＨＰＬＣ：  高性能液体クロマトグラフィ
Ｈｚ：  ヘルツ
Ｉｎ（ＯＴｆ）３：  トリフルオロメタンスルホン酸インジウム（ＩＩＩ）
ＩＰＡ：  イソプロパノール
ＫＯＨ：  水酸化カリウム
ＬＣ／ＭＳ：  液体クロマトグラフィ質量分析装置
ＬｉＯＨ：  水酸化リチウム
ＬＤＡ：  リチウム・ジイソプロピルアミド
ＭｅＯＤ−ｄ４またはＣＤ３ＯＤ：  重水素化メタノール
ＭｅＯＨ：  メタノール
ｍｇ：  ミリグラム
ＭＨｚ：  メガヘルツ
ｍｉｎ：  単数または複数の分
ｍＬ：  ミリリットル
ｍＭ：  ミリモル
ＮＭＰ：  １−メチル−ピペリジン−２−オン
ｍｍｏｌ：  ミリモル
ＮａＣｌ：  塩化ナトリウム
ＮａＯＨ：  水酸化ナトリウム
ＮＢＳ：  Ｎ−ブロモスクシンイミド
ＮＥｔ３：  トリエチルアミン
ＮＭＲ：  核磁気共鳴
ＰＢＳ：  リン酸緩衝生理食塩水
ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣ：  調製用高性能液体クロマトグラフィ
ＲＰ−ＨＰＬＣ：  逆相高性能液体クロマトグラフィ
ｒｔ：  室温
ＳＤＰＫ：  単回用量薬物動態
ＳＦＣ：  超臨界液体クロマトグラフィ
ＳＳＣ：  生理食塩水−クエン酸ナトリウム緩衝液
ＴＥＡ：  トリエチルアミン
ＴＦＡ：  トリフルオロ酢酸
ＴＦＡＡ：  無水トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：  テトラヒドロフラン
μｌ：  マイクロリットル
μＭ：  マイクロモル
一般的な実験条件
以下の装置の１つを用いたフラッシュクロマトグラフィによって、中間体および最終化合物を精製した：ｉ）Ｂｉｏｔａｇｅ  ＳＰ１系およびＱｕａｄ  １２／２５カートリッジモジュール、ｉｉ）ＩＳＣＯコンビ−フラッシュクロマトグラフィ装置。シリカゲルブランドおよび孔サイズ：ｉ）ＫＰ−ＳＩＬ  ６０Å、粒子サイズ：  ４０〜６０μＭ；  ｉｉ）ＣＡＳ登録番号：シリカゲル：  ６３２３１−６７−４、粒子サイズ：  ４７〜６０ミクロン  シリカゲル；  ｉｉｉ）Ｑｉｎｇｄａｏ  Ｈａｉｙａｎｇ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，  ＬｔｄのＺＣＸ、孔：  ２００〜３００または３００〜４００。
【０１９３】
ＸＢｒｉｄｇｅＴＭ  Ｐｒｅｐ−Ｃ１８（５μｍ、ＯＢＤＴＭ  ３０×１００ｍｍ）カラムまたはＳｕｎＦｉｒｅＴＭ  Ｐｒｅｐ−Ｃ１８（５μｍ、ＯＢＤＴＭ  ３０×１００ｍｍ）カラムを用いて、逆相カラム上の調製用ＨＰＬＣによって、中間体および最終化合物を精製した。Ｗａｔｅｒｓ  ＡｕｔｏＰ精製系（カラム：  ＸＢｒｉｄｇｅＴＭ  Ｐｒｅｐ−Ｃ１８、３０ｘ１００ｍｍ、サンプルマネージャー２７６７、ポンプ２５２５、検出装置：  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱおよびＵＶ  ２４８７、溶媒系：アセトニトリル、および水中の０．１％水酸化ナトリウム）。ＳＦＣキラル分離のため、Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＳＦＣ−Ｍｕｌｔｉｇｒａｍ  ＩＩＩ系、溶媒系：  ９５％ＣＯ２および５％  ＩＰＡ（ＩＰＡ中の０．５％ＴＥＡ）、背圧１００ｂａｒ、検出ＵＶ、２５４ｎｍを用いて、キラルカラム（Ｄａｉｃｅｌ  ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣ、５μｍ、３０×２５０ｍｍ）によって、中間体を分離した。
【０１９４】
ＬＣ／ＭＳ（ＷａｔｅｒｓＴＭ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２７９５−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ）を用いて、化合物のＬＣ／ＭＳスペクトルを得た。ＬＣ／ＭＳ条件は以下の通りであった（駆動時間６分間）：
酸性条件：  Ａ：  Ｈ２Ｏ中の０．１％ギ酸；  Ｂ：  アセトニトリル中の０．１％ギ酸；
塩基性条件：  Ａ：  Ｈ２Ｏ中の０．０１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ；  Ｂ：  アセトニトリル；
中性条件：  Ａ：  Ｈ２Ｏ；  Ｂ：  アセトニトリル。
【０１９５】
質量スペクトル（ＭＳ）：  一般的に、親質量を示すイオンのみを報告し、そして別に記載しない限り、引用した質量イオンは陽性質量イオン（Ｍ＋Ｈ）＋である。
肝臓ホモジネート安定性試験に関するＬＣ−ＭＳ／ＭＳ装置：  バイナリポンプ、脱気装置、ＣＴＣＰＡＬオートサンプラーおよびサーモスタットカラムで構成されるＡｇｉｌｅｎｔ  １２９０シリーズＬＣ系を適用した。末端キャップ化Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ＲＰ−１８（３×１００ｍｍ）上、室温で、クロマトグラフィ分離を達成した。
【０１９６】
陽性イオン化モードで、ＡＪＳ  ＥＳＩインターフェースを備えたフルスキャンモードのＡｇｉｌｅｎｔ  ６５３０  Ｑ−ＴＯＦ装置上で、質量分析検出を実行した。Ａｇｉｌｅｎｔ  ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ  Ｗｏｒｋｓｔａｔｉｏｎ  Ｄａｔａ  Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  Ｂ．０４．００およびＡｇｉｌｅｎｔ  ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒＷｏｒｋｓｔａｔｉｏｎ  Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｂ．０４．００を用いて、データプロセシングを行った。
【０１９７】
Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  Ｓｉｘｔｙマイクロ波合成装置中で、マイクロ波補助反応を行った。
Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ４００ＭＨｚを用いて、ＮＭＲスペクトルを得た。
【０１９８】
空気感受性試薬を伴う反応はすべて、アルゴン大気下で行った。別に示さない限り、試薬を商業的供給者から受け取ったまま、さらなる精製を伴わずに用いた。
上記スキームに概略する一般的な方法によって、以下の例を調製した。これらは本発明の意味を例示するよう意図されるが、いかなる意味でも、本発明の意味内に限定を提示してはならない。
調製実施例
実施例１  ４−（４−フルオロ−フェニル）−６−（１−メトキシカルボニル−１−メチル−エトキシメチル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
スキーム１およびスキーム４に示す一般的な合成法にしたがって、表題化合物を調製した。詳細な合成経路をスキーム５に示すように提供する。
【０１９９】
スキーム５
【０２００】
【化４８−１】
2015511614.tif 000075
【０２０１】
【化４８−２】
2015511614.tif 000076
【０２０２】
トルエン（４００ｍＬ）中のＮＨ４Ｃｌの攪拌懸濁物に、０℃で３０分間に渡って、Ａｌ（ＣＨ３）３溶液（１．０Ｍ、５６ｍＬ）を添加した。混合溶液を室温で３０分間攪拌した後、トルエン（１０ｍＬ）中のチアゾール−２−カルボニトリル（５．２４ｇ、４７．６ｍｍｏｌ）の溶液をフラスコに添加した。反応混合物を８０℃で１６時間攪拌した後、室温に冷却し、そして次いで、ＤＣＭ中のシリカゲルのスラリー内に混合物を注いだ。２０分間攪拌した後、スラリーを濾過し、そしてＭｅＯＨで３回洗浄し、そして真空下で濃縮して、チアゾール−２−カルボキサミジンＸＩＸの粗精製産物を得て、これを次の工程の反応で、さらに精製せずに用いた。ＭＳ：  計算値（ＭＨ＋）１２８．２、期待値（ＭＨ＋）１２８．１。
【０２０３】
ｏ−キシレン（２０ｍＬ）中の３−オキソ−酪酸メチルエステル（５．０ｇ、４３．１ｍｍｏｌ）、１−エチニル−４−フルオロ−ベンゼン（５．０ｇ、４１．７ｍｍｏｌ）およびＩｎ（ＯＴｆ）３（４００ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）の混合物を１２０℃で１〜２時間加熱した。溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル：  １／１０）によって、残渣を精製して、淡黄色油として、ＸＸを得た（４．０ｇ、収率：  ４０．８％）。
【０２０４】
あらかじめ１２０℃に加熱したＮＭＰ（１０ｍＬ）中のチアゾール−２−カルボキサミジンＸＩＸ（１．７ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（２．５ｇ、２９．８ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮＭＰ（１０ｍＬ）中の（Ｅ）−２−アセチル−３−（４−フルオロ−フェニル）−ブト−２−エン酸メチルエステルＸＸ（２．４ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）を約１時間で、１滴ずつ添加した。混合物を１２０℃で０．５時間攪拌した後、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）および水で反応をワークアップした。有機層を乾燥させ、そして濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル、１／４〜１／２）によって残渣を精製して、黄色粘性油として、４−（４−フルオロ−フェニル）−４，６−ジメチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルＸＸＩを得た（１．７ｇ、収率：  ４８．３％）。ＭＳ：  計算値（ＭＨ＋）３４６、期待値（ＭＨ＋）３４６。1H NMR (MeOD-d4, 400 MHz) 7.93 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 7.72 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 7.51-7.47 (m, 2H), 7.04 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 3.45 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.90 (s, 3H)。
【０２０５】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のＸＸＩ（１．０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＡＰ（０．１５ｇ、１．２ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（０．９４ｇ、４．３ｍｍｏｌ）を添加し、そして混合物を一晩攪拌した。混合物を水（１５ｍＬ）および塩水（１５ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、そして濃縮し、そして残渣をカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル、１／４〜１／３）によって精製して、黄色固体として、４−（４−フルオロ−フェニル）−４，６−ジメチル−２−チアゾール−２−イル−４Ｈ−ピリミジン−１，５−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル５−メチルエステルＸＸＩＩを得た（０．９１ｇ、収率：  ７０．５％）。
【０２０６】
ＣＣｌ４（３０ｍＬ）中のＸＸＩＩ（０．９０ｇ、２．０２ｍｍｏｌ）およびＮＢＳ（０．５４ｇ、３．０３ｍｍｏｌ）の溶液を５０℃に加熱し、次いで、ＡＩＢＮ（３０ｍｇ）を添加して反応を開始した。混合物を２時間攪拌した。カラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル、１／４〜１／３）によって、混合物を精製して、黄色固体として、６−ブロモメチル−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−４Ｈ−ピリミジン−１，５−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル５−メチルエステルＸＸＩＩＩを得た（１．０３ｇ、収率：  ９７．３％）。
【０２０７】
ＴＨＦ中の２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピオン酸メチルエステル（５９ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）溶液に、室温で水素化ナトリウム（１２ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、混合物を室温で３０分間攪拌した。化合物ＸＸＩＩＩ（１０５ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を添加し、そして室温で一晩攪拌した。次いで、混合物を水およびＥｔＯＡｃの間で分配した。有機相を乾燥させ、濃縮し、そしてさらなる精製を伴わずに次の工程で用いた。
【０２０８】
上記工程由来の粗精製産物ＸＸＩＶをＤＣＭ中に溶解し、そして次いで、ＴＦＡを添加した。混合物を室温で２時間攪拌した。溶媒を除去し、そして残渣を調製用−ＨＰＬＣによって精製して、黄色固体として実施例１を得た（４０ｍｇ、収率：  ２工程に関して４３％）。ＭＳ：  計算値４６２（ＭＨ＋）、期待値４６２（ＭＨ＋）。
1H NMR (MeOD-d4, 400MHz), 7.95 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 7.75 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 7.49-7.45 (m, 2H), 7.04 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 4.71-4.62 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.43 (s, 3H), 1.92 (s, 3H), 1.57 (s, 6H)。
【０２０９】
実施例２  ６−（１−カルボキシ−２，２，２−トリフルオロ−エトキシメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピオン酸メチルエステルの代わりに３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−プロピオン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム５の実施例１と同様に、表題化合物を調製し、こうして得られたメチルエステルをスキーム３に示すようにＬｉＯＨによって加水分解した。ＭＳ：  計算値４８８（ＭＨ＋）、期待値４８８（ＭＨ＋）。1H NMR (MeOD-d4, 400MHz), 7.94 (d, 1H, J = 2.8 Hz), 7.93 (d, 1H, J = 2.8 Hz), 7.53-7.49 (m, 2H), 7.07-7.03 (m, 2H), 4.85-4.78 (m, 2H), 4.40-4.37 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 1.94 (s, 3H)
。
【０２１０】
実施例３  ６−｛［（１−カルボキシ−シクロプロピル）−メチル−アミノ］−メチル｝−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
スキーム１およびスキーム３に示す合成法にしたがって、表題化合物を調製した。詳細な合成経路を、スキーム６に示すように提供する。
【０２１１】
スキーム６
【０２１２】
【化４９】
2015511614.tif 000077
【０２１３】
ＤＭＦ中の６−ブロモメチル−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−４Ｈ−ピリミジン−１，５−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル５−メチルエステルＸＸＩＩＩ（１．００ｇ、１．９０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウムの溶液に、１−メチルアミノ−シクロプロパンカルボン酸メチルエステル（２５８ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を４０℃で３時間攪拌し、そしてＬＣ−ＭＳは、反応が終了したことを示した。混合物を水および酢酸エチル間で分配した。有機相を乾燥させ、そして濃縮して、粗精製産物を得て、これをさらなる精製を伴わずに次の工程に用いた。
【０２１４】
上記工程由来の粗精製産物ＸＸＶをＤＣＭ中に溶解し、そして次いで、ＴＦＡを添加した。混合物を室温で２時間、攪拌した。ＬＣ−ＭＳは、反応が終了したことを示した。溶媒を除去し、そしてさらなる精製を伴わずに残渣を次の工程に用いた。
【０２１５】
上記工程由来の粗精製産物ＸＸＶＩをＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、そして水（２ｍＬ）中のＬｉＯＨを混合物に添加した。混合物を室温で２時間攪拌し、そしてＬＣ−ＭＳは、反応が終了したことを示した。溶媒を除去し、そして混合物を、希塩酸で、ｐＨ（３〜５）に調整した。調製用−ＨＰＬＣによって混合物を精製して、黄色固体として実施例３を得た（０．６３ｇ、３工程の収率：  ７３％）。ＭＳ：  計算値４５９（ＭＨ＋）、期待値４５９（ＭＨ＋）。1H NMR (MeOD-d4, 400MHz), 8.12 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 8.06 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 7.63-7.60 (m, 2H), 7.15 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 4.30 (s, 2H), 3.51 (s, 3H), 2.79 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.52-1.51 (m, 2H), 1.38-1.37 (m, 2H)。
【０２１６】
実施例４  ４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸
１−メチルアミノ−シクロプロパンカルボン酸メチルエステルの代わりにモルホリン−３−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム６の実施例３と同様に、表題化合物を調製した。ＬＣ−ＭＳ：  計算値４７５（ＭＨ＋）、期待値４７５（ＭＨ＋）。1H NMR (MeOD-d4, 400 MHz) δ 8.10 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.64-7.61 (m, 2H), 7.15-7.12 (m, 2H), 4.32-4.31 (m, 2H), 4.18-4.14 (m, 2H), 3.99-3.72 (m, 3H), 3.51-3.49 (m, 4H), 3.02 (m, 1H), 2.11 (d, 3H)。
【０２１７】
実施例５  ４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸メチルエステル
１−メチルアミノ−シクロプロパンカルボン酸メチルエステルの代わりにモルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム６の実施例３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２１８】
実施例６  ４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸
スキーム６に示すようなＭｅＯＨ中のＬｉＯＨを用いた実施例５の加水分解から、表題化合物を調製した。
【０２１９】
実施例７  （Ｓ）−４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸
スキーム１およびスキーム３に示す合成法にしたがって、表題化合物を調製した。詳細な合成経路を、スキーム７に示すように提供する。
【０２２０】
スキーム７
【０２２１】
【化５０】
2015511614.tif 000078
【０２２２】
ＳＦＣによって、ＸＸＩからキラル中間体化合物ＸＸＶＩＩを分離し、そして絶対立体化学をＸ線回折研究によって決定した（図７を参照されたい）。置換反応において、１−メチルアミノ−シクロプロパンカルボン酸メチルエステルの代わりにモルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸メチルエステルＸＸＶＩＩＩを用いることによって、スキーム６の実施例３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２２３】
実施例８  （Ｓ）−４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸
１−メチルアミノ−シクロプロパンカルボン酸メチルエステルの代わりにモルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２２４】
実施例９  ４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸
スキーム８に示す方法にしたがって、表題化合物を調製した。
【０２２５】
スキーム８
【０２２６】
【化５１】
2015511614.tif 000079
【０２２７】
スキーム５に示すものと同じ方法において、化合物ＸＸＩＸの合成に５−フルオロ−ピリジン−２−カルボニトリルを用いた。スキーム５およびスキーム６と類似の方法にしたがって、置換反応において、モルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸メチルエステルＸＸＸを用いることによって、ＸＸＩＸを実施例９に変換した。
【０２２８】
実施例１０  ４−［６−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸
置換反応において、モルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸メチルエステルの代わりにモルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム８の実施例９と同様に、表題化合物を調製した。
【０２２９】
実施例１１  ６−（２−（Ｓ）−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
１−メチルアミノ−シクロプロパンカルボン酸メチルエステルの代わりに４，４−ジフルオロ−ピロリジン−（Ｓ）−２−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム６の実施例３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２３０】
実施例１２  ６−（２−（Ｒ）−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
１−メチルアミノ−シクロプロパンカルボン酸メチルエステルの代わりに４，４−ジフルオロ−ピロリジン−（Ｒ）−２−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム６の実施例３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２３１】
実施例１３  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
置換反応において、モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸メチルエステルＸＸＶＩＩＩの代わりに４，４−ジフルオロ−ピロリジン−（Ｓ）−２−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２３２】
実施例１４  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
スキーム１およびスキーム３に示す合成法にしたがって、表題化合物を調製した。詳細な合成経路をスキーム９に示すように提供する。
【０２３３】
スキーム９
【０２３４】
【化５２】
2015511614.tif 000080
【０２３５】
無水エタノール（２００ｍＬ）中の３，４−ジフルオロ−ベンズアルデヒド（８．９６ｇ、６３．１ｍｍｏｌ）、３−オキソ−酪酸メチルエステル（７．３２ｇ、６３．１ｍｍｏｌ）、ピペリジン（０．２７ｇ、３．１６ｍｍｏｌ）および酢酸（０．１９ｇ、３．１６ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１２時間攪拌した。溶媒を除去した後、フラッシュカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１０）によって残渣を精製して、黄色固体として、２−［１−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−メト−（Ｚ）−イリデン］−３−オキソ−酪酸メチルエステルＸＸＸＩを得た（１３．６ｇ）。収率：  ９０％。ＭＳ：  計算値（Ｍ＋＋Ｈ）２４１．０、期待値（Ｍ＋＋Ｈ）２４１．１。
【０２３６】
メチルリチウムの溶液（エーテル中、１．６Ｍ、４８．７ｍＬ、７８ｍｍｏｌ）を、アルゴン下、０℃で、２００ｍＬの無水ＴＨＦ中のヨウ化銅（Ｉ）（１４．９ｇ、７８ｍｍｏｌ）の懸濁物に添加し、そして混合物を０℃で１時間攪拌した。５０ｍＬの無水ＴＨＦ中のＸＸＸＩ（８．０ｇ、３１．２ｍｍｏｌ）の溶液を、−７８℃で、混合物に１滴ずつ添加した。−７８℃で１時間攪拌した後、反応混合物を、飽和塩化アンモニウム溶液で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出し、塩水で洗浄し、そして無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。有機溶媒を除去した後、フラッシュカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１０）によって残渣を精製して、油として、６．３９ｇのＸＸＸＩＩを得た。収率：  ８０％。ＭＳ：  計算値（Ｍ＋＋Ｈ）２５７．１。
【０２３７】
ＮａＨ（６０％、１．１０ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）を、アルゴン下、無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のＸＸＸＩＩ（５．０ｇ、１８．３ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の塩化フェニルセレニル（５．３ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）の溶液を、シリンジを通じて、室温でフラスコに添加し、そして混合物を室温で１時間攪拌した。６０ｍＬのペンテン／エーテル混合物（ｖ／ｖ＝１／１）および３０ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ３溶液を、反応混合物に添加した。有機層を分離し、そして塩水で洗浄し、そしてＤＣＭ（５０ｍＬ）中のＨ２Ｏ２溶液（３０％、４ｍＬ）で処理した。混合物を室温で（０．５〜２時間）攪拌し、そしてＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈した。有機相を分離し、飽和重炭酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、水、および塩水で連続して洗浄し、そして無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。有機溶媒を除去した後、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１０）によって精製して、黄色油として、３．９７ｇのＸＸＸＩＩＩを得た。ＭＳ：計算値（Ｍ＋＋Ｈ）２５５．１、期待値（Ｍ＋＋Ｈ）２５５．１。
【０２３８】
ＮＭＰ（１５ｍＬ）中のＸＸＸＩＩＩ（２．５４ｇ、１０ｍｍｏｌ）、チアゾール−２−カルボキサミジン塩酸塩ＸＩＸ（１．６ｇ、１０ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（１．６８ｇ、２０ｍｍｏｌ）の混合物を１２０℃で３時間攪拌した。冷却後、混合物を水および酢酸エチル間で分離させた。有機層を乾燥させ、そして濃縮した。残渣を精製して、黄色固体として、４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４，６−ジメチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルＸＸＸＩＶを得た（２．００ｇ）。収率：  ５５％。ＭＳ：  計算値（Ｍ＋＋Ｈ）３６３．１、期待値（Ｍ＋＋Ｈ）３６３．１。
【０２３９】
キラル中間体ＸＸＸＶをＳＦＣによってＸＸＸＩＶから分離し、そして立体化学が知られる化合物ＸＸＶＩＩのものと、ＳＦＣ上の保持時間を比較することを通じて、絶対立体配置を割り当てた。
【０２４０】
化合物ＸＸＸＶから、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物、実施例１４を調製した。
実施例１５  ４−［（Ｓ）−６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステル
スキーム５およびスキーム６と同じ方法で実行された、ブロム化および以下の置換反応においてＸＸＸＩＶを用いることによって、スキーム１０に示す方法によって表題化合物を調製した。
【０２４１】
スキーム１０
【０２４２】
【化５３】
2015511614.tif 000081
【０２４３】
実施例１６  ４−［６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸
ＭｅＯＨ中のＬｉＯＨで実施例１５を加水分解することによって、表題化合物を得た。
【０２４４】
実施例１７  ６−（４，４−ジフルオロ−２−メトキシカルボニル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
置換反応において、モルホリン−（Ｒ）−３−カルボン酸メチルエステルＸＸＸＶＩＩＩの代わりに４，４−ジフルオロ−ピロリジン−（Ｓ）−２−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム８の実施例９と同様に、表題化合物を調製した。
【０２４５】
実施例１８  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
スキーム１１に示すような方法で、表題化合物を調製した。
【０２４６】
スキーム１１
【０２４７】
【化５４】
2015511614.tif 000082
【０２４８】
中間体ＸＸＩＸのＳＦＣキラル分離によって、化合物ＸＸＸＶＩを得て、そして立体化学が知られる化合物ＸＸＶＩＩのものと、ＳＦＣ上の保持時間を比較することを通じて、絶対立体配置を割り当てた。４，４−ジフルオロ−ピロリジン−（Ｓ）−２−カルボン酸メチルエステルＸＸＸＶＩＩを置換反応において用いた以外は、スキーム５およびスキーム６の方法にしたがうことによって、ＸＸＸＶＩから実施例９を調製した。
【０２４９】
実施例１９  ６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
アミジンの調製において、５−メチル−チアゾール−２−カルボニトリルを用いることによって、スキーム１２に示すような方法において、表題化合物を調製した。スキーム５の方法にしたがうことによって、化合物ＸＸＸＶＩＩＩを得た。そして４，４−ジフルオロ−ピロリジン−（Ｓ）−２−カルボン酸メチルエステルＸＸＸＶＩＩを、スキーム５およびスキーム６と同様の方法で、実施例１９の調製に用いた。
【０２５０】
スキーム１２
【０２５１】
【化５５】
2015511614.tif 000083
【０２５２】
実施例２０  ６−（２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−２−メチル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル
モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに４，４−ジフルオロ−２−メチル−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム６の実施例３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２５３】
実施例２１  （Ｓ）−１−［（Ｓ）−５−シアノ−６−（４−フルオロ−フェニル）−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸
スキーム２およびスキーム３に示す合成法にしたがって、表題化合物を調製した。詳細な合成経路をスキーム１３に示すように提供する。
【０２５４】
スキーム１３
【０２５５】
【化５６】
2015511614.tif 000084
【０２５６】
縮合反応において、３−オキソ−酪酸メチルエステルおよび３，４−ジフルオロ−ベンズアルデヒドの代わりに３−オキソ−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよび４−フルオロ−ベンズアルデヒドを用いることによって、スキーム９のＸＸＸＩＶと同様に、化合物４−（４−フルオロ−フェニル）−４，６−ジメチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルＸＸＸＩＸを調製した。
【０２５７】
ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の４−（４−フルオロ−フェニル）−４，６−ジメチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルＸＸＸＩＸ（１．０ｇ、２．５８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加し、そして混合物を３時間攪拌した。その後、溶媒および過剰ＴＦＡを真空中で除去した。残渣ＸＬをＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解し、これに、ジオキサン（１０ｍＬ、０．５Ｍ）中のＨＡＴＵ（１．２１ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）およびＮＨ３を添加し、そして混合物を一晩攪拌した。混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、そして水性ＮａＨＣＯ３および塩水で洗浄した。有機層を分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、そして濃縮して、淡黄色固体として、０．８９ｇの４−（４−フルオロ−フェニル）−４，６−ジメチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸アミドを得て、これを精製なしに、次の使用に直接用いた。
【０２５８】
上記粗精製中間体（０．８９ｇ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、ＴＦＡＡ（３ｍＬ）を添加し、そして混合物を３時間攪拌した。ＴＨＦおよび過剰のＴＦＡＡを除去した後、残渣をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に溶解した。この溶液に、Ｋ２ＣＯ３（２．０ｇ、１４．５ｍｍｏｌ）を添加し、そして混合物を室温で３時間攪拌した。次いで、混合物を濾過し、固体をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬＸ２）で洗浄した。合わせた濾過物を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル  １／３〜１／２）によって精製し、黄色固体として、ＸＬＩを得た（７００ｍｇ、総収率：  ８７．０％）．
キラル中間体ＸＬＩＩをＳＦＣによってＸＬＩから分離した。
【０２５９】
スキーム６の実施例３と同様に、ＸＬＩＩから、表題化合物、実施例２１を調製した。
実施例２２  （Ｓ）−４−［５−シアノ−６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸
スキーム２およびスキーム３に示す合成法にしたがって、表題化合物を調製した。スキーム１４に示すように、詳細な合成経路を提供する。
【０２６０】
スキーム１４
【０２６１】
【化５７】
2015511614.tif 000085
【０２６２】
出発物質として、３−オキソ−酪酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよび３，４−ジフルオロベンズアルデヒドを用いることによって、スキーム９のＸＸＸＩＶと同様に、化合物４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４，６−ジメチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルＸＬＩＩＩを調製した。
【０２６３】
スキーム１３のＸＬＩと同じ方法で、ｔｅｒｔ−ブチルエステルＸＬＩＩＩから、化合物４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４，６−ジメチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボニトリルＸＬＩＶを調製した。
【０２６４】
置換反応において、モルホリン−（Ｓ）−３−カルボン酸メチルエステルＸＸＶＩＩＩを用いることによって、スキーム５およびスキーム６に示すものと同じ方法で、表題化合物、実施例２２を調製した。
【０２６５】
実施例２３  （Ｓ）−１−［（Ｓ）−５−シアノ−６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸
スキーム２およびスキーム３に示す合成法にしたがって、表題化合物を調製した。詳細な合成経路をスキーム１５に示すように提供する。
【０２６６】
スキーム１５
【０２６７】
【化５８】
2015511614.tif 000086
【０２６８】
化合物ＸＬＶをＳＦＣによってラセミ体ＸＬＩＶからキラル分離し、そして立体化学が知られる化合物ＸＸＶＩＩのものと、ＳＦＣ上の保持時間を比較することを通じて、絶対立体配置を割り当てた。置換反応において、ＸＸＸＶＩＩを用いることによって、スキーム５およびスキーム６に示すものと同じ方法で、表題化合物を調製した。
【０２６９】
実施例２４  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに４−エチニル−１，２−ジフルオロ−ベンゼンを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７０】
実施例２５  （Ｓ）−６−（２−カルボキシ−５，５−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに５，５−ジフルオロ−ピペリジン−２−カルボン酸を用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７１】
実施例２６  （Ｓ）−６−（２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピペリジン−１−イルメチル）４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに４，４−ジフルオロ−ピペリジン−２−カルボン酸を用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７２】
実施例２７  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボニトリルを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７３】
実施例２８  （Ｒ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステルの調製
１−エチニル−４−フルオロ−ベンゼンの代わりに４−エチニル−１，２−ジフルオロ−ベンゼンを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７４】
実施例２９  （Ｓ）−４−［６−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−６−メチル−２−チアゾール−２−イル−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸の調製
（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸の代わりに（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸を用いることによって、実施例２８と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７５】
実施例３０  （Ｓ）−４−［（Ｓ）−６−（４−フルオロ−フェニル）−５−メトキシカルボニル−６−メチル−２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−３，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イルメチル］−モルホリン−３−カルボン酸の調製
（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸の代わりに（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸を用いることによって、実施例２７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７６】
実施例３１  （Ｒ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（４−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに４−メチル−チアゾール−２−カルボニトリルを用いることによって、実施例１３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７７】
実施例３２  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（４−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに４−メチル−チアゾール−２−カルボニトリルを用いることによって、実施例１３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７８】
実施例３３  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−２−（５−クロロ−チアゾール−２−イル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに５−クロロ−チアゾール−２−カルボニトリルを用いることによって、実施例１３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２７９】
実施例３４  （Ｓ）−６−（（２Ｓ，４Ｒ）−２−カルボキシ−４−フルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸を用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８０】
実施例３５  ６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−イソキサゾール−３−イル−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりにイソキサゾール−３−カルボニトリルを用いることによって、実施例１１と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８１】
実施例３６  （Ｒ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−２−メチル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−メチル−ピロリジン−２−カルボン酸を用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８２】
実施例３７  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（５−メチル−チアゾール−２−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに５−メチル−チアゾール−２−カルボニトリルを用いることによって、実施例１３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８３】
実施例３８  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（５−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに５−フルオロ−チオフェン−２−カルボニトリルを用いることによって、実施例１３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８４】
実施例３９  （Ｓ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ）−２−カルボキシ−４−フルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（２Ｓ，４Ｓ）−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸を用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８５】
実施例４０  ６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−（５−メチル−イソキサゾール−３−イル）−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに５−メチル−イソキサゾール−３−カルボニトリルを用いることによって、実施例１１と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８６】
実施例４１  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（３−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに３−フルオロ−チオフェン−２−カルボニトリルを用いることによって、実施例１３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８７】
実施例４２  （Ｒ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（３−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに３−フルオロ−チオフェン−２−カルボニトリルを用いることによって、実施例１３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８８】
実施例４３  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルボキシ−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−２−（４−フルオロ−チオフェン−２−イル）−４−メチル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
チアゾール−２−カルボニトリルの代わりに４−フルオロ−チオフェン−２−カルボニトリルを用いることによって、実施例１３と同様に、表題化合物を調製した。
【０２８９】
実施例４４  （Ｓ）−６−｛［カルボキシメチル−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−アミノ］−メチル｝−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（２，２，２−トリフルオロ−エチルアミノ）−酢酸を用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９０】
実施例４５  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−メトキシカルボニル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステルを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９１】
実施例４６  （Ｓ）−６−［（Ｓ）−２−（２−ジメチルアミノ−エトキシカルボニル）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸２−ジメチルアミノ−エチルエステルを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した
実施例４７  （Ｓ）−６−（２−カルバモイル−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミドを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９２】
実施例４８  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−カルバモイル−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸アミドを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９３】
実施例４９  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−２−ジメチルカルバモイル−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ジメチルアミドを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９４】
実施例５０  ６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−メチルカルバモイル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸メチルアミドを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９５】
実施例５１  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−メタンスルホニルアミノカルボニル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりにＮ−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボニル）−メタンスルホンアミドを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９６】
実施例５２  （Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（チアゾール−２−イルカルバモイル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸チアゾール−２−イルアミドを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９７】
実施例５３  ４−（４−フルオロ−フェニル）−６−（（Ｒ）−３−ヒドロキシメチル−モルホリン−４−イルメチル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（Ｒ）−１−モルホリン−３−イル−メタノールを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９８】
実施例５４  （Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに２−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−イル）−プロパン−２−オールを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０２９９】
実施例５５  （Ｓ）−６−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−ヒドロキシメチル−ピロリジン−１−イルメチル）−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−イル）−メタノールを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０３００】
実施例５６  （Ｓ）−６−［４，４−ジフルオロ−２−（３−ヒドロキシ−プロピル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに３−（４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−イル）−プロパン−１−オールを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０３０１】
実施例５７  （Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（５−メチル−［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに２−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−イル）−５−メチル−［１，３，４］オキサジアゾールを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０３０２】
実施例５８  （Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに５−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−イル）−１Ｈ−テトラゾールを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
【０３０３】
実施例５９  （Ｓ）−６−［（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−（３−メチル−［１，２，４］オキサジアゾール−５−イル）−ピロリジン−１−イルメチル］−４−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルの調製
（Ｓ）−モルホリン−３−カルボン酸メチルエステルの代わりに５−（（Ｓ）−４，４−ジフルオロ−ピロリジン−２−イル）−３−メチル−［１，２，４］オキサジアゾールを用いることによって、スキーム７の実施例７と同様に、表題化合物を調製した。
生物学的実施例
実施例６０  ＨＢＶ阻害アッセイ（生化学アッセイ）
細胞および培養条件：  ＨｅｐＤＥ１９（Ｈａｉｔａｏ  Ｇｕｏら，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，  ８１，  Ｎｏｖ．  ２００７，  １２４７２−１２４８４；  Ｒｉｃｈｅｎｇ  Ｍａｏら，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，  ８５，  Ｊａｎ．  ２０１１，  １０４８−１０５７）細胞は、Ｔｅｔ応答性転写活性化因子を発現するｐＴｅｔ−ｏｆｆプラスミド（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）、およびＨＢＶ  ｐｇＲＮＡ発現がテトラサイクリン応答性要素を含むＣＭＶ初期プロモーターによって調節されているｐＴＲＥＨＢＶＤＥプラスミドでのトランスフェクションを通じて、ＨｅｐＧ２（ＡＴＣＣ、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション）細胞から得られた。トランスフェクション細胞は、Ｇ４１８（ゲンチシンとしても知られる、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎより購入）で選択した。テトラサイクリン不含培地中、細胞は高レベルのＨＢＶ  ＤＮＡ複製およびＨＢＶウイルス分泌を支持する。これらの細胞を、１０％ウシ胎児血清、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、および１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン、０．５ｍｇ／ｍｌのＧ４１８および１μｇ／ｍｌテトラサイクリンを補充したダルベッコの修飾イーグル培地（ＤＭＥＭ）−Ｆ１２培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で維持した。
【０３０４】
抗ＨＢＶ活性および細胞傷害性：  ＨｅｐＤＥ１９細胞を、テトラサイクリン不含培地とともに９６ウェルプレート（３×１０４細胞／ウェル）内に植え付け、そして３７℃で一晩インキュベーションした。試験または対照化合物を、連続して培地で半対数希釈し、そしてプレートに添加した（各ウェル中、ＤＭＳＯ最終濃度を０．５％で維持した）。化合物処理５日後、細胞をＰＢＳで洗浄し、そして５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−１ｍＭ  ＥＤＴＡ−０．２％  ＣＡ−６３０（ｐＨ  ８．０）で、３７℃で２０分間、溶解した。遠心分離して核および他の破片を除去した後、上清を新規プレートに移し、そして２Ｍ  ＮａＯＨ／２０×ＳＳＣ（３Ｍ  ＮａＣｌ、０．３Ｍクエン酸ナトリウム、ｐＨ７．０）で、室温で３０分間インキュベーションした。次いで、試料をナイロン膜にトランスファーし、そして１Ｍ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）／２Ｍ  ＮａＣｌで中和した。ＤＩＧ標識ＨＢＶ特異的ＤＮＡプローブを用いたドットブロットによって、ＨＢＶ  ＤＮＡの存在を検出し、そしてドット密度によって定量化した。ＨＢＶ  ＤＮＡを５０％（ＥＣ５０）阻害する化合物濃度を決定した（表１を参照されたい）。
【０３０５】
化合物の抗ＨＢＶ効果が細胞傷害性によるかどうかを決定するため、ＨｅｐＤＥ１９細胞（５×１０３細胞／ウェル）を９６ウェルプレートに植え付け、そして化合物を上述のように処理した。処理５日後、２０μｌのＣＣＫ−８試薬の添加によって、細胞生存度を測定した。３７℃で４時間インキュベーションした後、４５０ｎｍおよび６３０ｎｍ（ＯＤ４５０およびＯＤ６３０）の波長の吸光度をプレート読み取り装置によって記録した。その結果、各化合物の５０％細胞傷害性濃度（ＣＣ５０）を決定した。
【０３０６】
本明細書に記載するように、ＨＢＶ活性および活性化を阻害する能力に関して、本発明の化合物を試験した。上記アッセイにおいて、実施例を試験し、そして約０．０１μＭ〜約５０μＭのＥＣ５０を有することが見出された。式Ｉの特定の化合物は、約０．１μＭ〜約３０μＭのＥＣ５０を有することが見出された。
【０３０７】
ＨｅｐＤｅ１９  ＥＣ５０（μＭ）およびＣＣ５０（μＭ）の結果を表１に示す。
実施例Ａ
式Ｉの化合物を、それ自体知られる方式で、以下の組成の錠剤の産生のための活性成分として用いてもよい：
錠剤あたり
活性成分                          ２００ｍｇ
微結晶性セルロース                １５５ｍｇ
コーンスターチ                      ２５ｍｇ
タルク                              ２５ｍｇ
ヒドロキシプロピルメチルセルロース  ２０ｍｇ
４２５ｍｇ
実施例Ｂ
式Ｉの化合物を、それ自体知られる方式で、以下の組成のカプセルの産生のための活性成分として用いてもよい：
カプセルあたり
活性成分              １００．０ｍｇ
コーンスターチ          ２０．０ｍｇ
ラクトース              ９５．０ｍｇ
タルク                    ４．５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム  ０．５ｍｇ
２２０．０ｍｇ
【図１】
2015511614.tif 000116
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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