(57)【要約】  マウスＧＨＲ１０６モノクローナル抗体のヒト化形態及びそれらを使用する方法が記載される。ヒト化ＧＨＲ１０６モノクローナル抗体は、対応する腫瘍関連抗原であるゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）受容体に対して、マウスＧＨＲ１０６に匹敵する高い親和性及び特異性を有する。【選択図】図１
2015526071.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＧｎＲＨ受容体の細胞外ドメインのアミノ酸残基１−２９に存在するエピトープと特異的に反応し、かつ
１０−７Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）でＧｎＲＨ受容体に結合し、かつ
該受容体への結合についてＧｎＲＨと競合する、ヒト化モノクローナル抗体（ｍＡｂ）またはその断片。
【請求項２】
完全抗体である、請求項１記載のｍＡｂ。
【請求項３】
Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、Ｆｖ、またはｓｃＦｖ断片である、請求項１記載の断片。
【請求項４】
ＫａｂａｔまたはＣｈｏｔｈｉａのいずれかのナンバリングシステムに従って図６に示される重鎖可変領域の１つ及び／または軽鎖可変領域の１つに内在するＣＤＲ領域を含む、請求項１記載のｍＡｂまたは断片。
【請求項５】
ａ）  重鎖のＣＤＲ１領域が配列ＲＹＳＶＨであり；
ｂ）  重鎖のＣＤＲ２領域が配列ＭＩＷＧＧＧＳＴＤＹＮＳＰＳＬＫＳまたはＭＩＷＧＧＧＳＴＤＹＮＳＳＬＱＳまたはＭＩＷＧＧＳＴＤＹＮＳＳＬＱＳであり；
ｃ）  重鎖のＣＤＲ３領域が配列ＧＮＤＧＹＹＳＦＡＹであり；
ｄ）  軽鎖のＣＤＲ１領域が配列ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＹＬＡであり；
ｅ）  軽鎖のＣＤＲ２領域が配列ＷＡＳＴＲＥＳであり；かつ
ｆ）  軽鎖のＣＤＲ３領域が配列ＫＱＳＹＮＬＹＴである
請求項１記載のモノクローナル抗体（ｍＡｂ）または断片。
【請求項６】
重鎖がＨ６５、Ｈ６６またはＨ６４の可変領域を含む、請求項１記載のｍＡｂまたは断片。
【請求項７】
軽鎖がＬ４１、Ｌ４２またはＬ４３の可変領域を含む、請求項１記載のｍＡｂまたは断片。
【請求項８】
軽鎖がＬ４１、Ｌ４２またはＬ４３の可変領域を含む、請求項６記載のｍＡｂまたは断片。
【請求項９】
検出可能なマーカー及び／または治療薬に結合された、請求項１記載のｍＡｂまたは断片。
【請求項１０】
請求項１記載の抗体または断片及び薬学的に許容される添加剤を含む医薬組成物。
【請求項１１】
追加の治療薬をさらに含む、請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１記載のｍＡｂまたは断片を産生する組換え宿主細胞または不死化細胞。
【請求項１３】
哺乳動物細胞、微生物細胞、昆虫細胞または植物細胞である、請求項１２記載の組換え宿主細胞。
【請求項１４】
ｍＡｂまたは断片を産生させる方法であって、請求項１３記載の細胞を培養すること、及び該ｍＡｂまたは断片を回収することを含む方法。
【請求項１５】
請求項１記載のｍＡｂまたは断片を産生するトランスジェニック非ヒト動物またはトランスジェニック植物。
【請求項１６】
請求項１記載の抗体または断片をコードする１つ以上の核酸分子。
【請求項１７】
ヒト対象者における増殖性疾患を治療する方法であって、このような治療を必要とする対象者に、有効量の請求項１０記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
【請求項１８】
生殖補助の方法において卵巣刺激をコントロールする方法であって、このような処置を必要とするヒト対象者に、有効量の請求項１０記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
【請求項１９】
生殖補助の方法が体外受精（ＩＶＦ）である、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
子宮内膜症、子宮筋腫、子宮内膜の菲薄化、多嚢胞性卵巣疾患、及び性的早熟からなる群より選択されるエストロゲン依存性症状を治療する方法であって、このような治療を必要とするヒト対象者に、有効量の請求項１０記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
【請求項２１】
ａ）  生物学的サンプルを請求項１記載のモノクローナル抗体または断片に接触させる段階；及び
ｂ）  該モノクローナル抗体または断片が該サンプルに結合するか否かを検出する段階を含む増殖性疾患を検出する方法であって、ここで、該サンプルへの結合は該サンプル中の細胞上にＧｎＲＨ受容体が存在することを示し、それによって、該サンプル中の増殖性疾患を呈する細胞を検出される方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年７月２７日に出願された米国特許出願第６１／６７６，７６３号および２０１３年３月１２日に出願された米国特許出願第１３／７９７，６５３号の優先権を主張するものである。これらの文書の内容は、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０００２】
ＥＦＳ−ＷＥＢにより提出された配列表への参照
ＭＰＥＰ  １７３０  ＩＩ．Ｂ．２（ａ）（Ｃ）で認可され定義されたＵＳＰＴＯ  ＥＦＳ−ＷＥＢサーバーを介する以下の配列表の電子提出の全内容は、あらゆる目的のために、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。配列表は、電子出願された次のテキストファイルとして確認される：
ファイル名                  作成日                サイズ(バイト)
616342000400seqlist.txt    ２０１２年３月１２日  ２０，７３５バイト
【０００３】
技術分野
本発明は、マウス由来のＧＨＲ１０６モノクローナル抗体のヒト化の分野に関する。ＧＨＲ１０６は、多くのヒト組織起源の癌細胞の表面に高度に発現される、ヒトＧｎＲＨ受容体の細胞外ドメインを特異的に認識する。ＧＨＲ１０６のヒト化形態は、ヒトのホルモン感受性癌における治療的応用のために、及び、ヒトの生殖能力を調節する際に利用することができる。
【背景技術】
【０００４】
ＧＨＲ１０６モノクローナル抗体は、ヒトＧｎＲＨ受容体の細胞外ドメインに対応する合成ペプチドに対して免疫化したマウスで生成されたものであり、ＧｎＲＨアゴニストとして挙動するが、当分野で公知のアゴニストよりもはるかに長い半減期を有することが見出された。ＧｎＲＨアゴニストは、排卵障害、子宮内膜症、子宮筋腫、性的早熟、およびいくつかのタイプの癌など、さまざまな問題に対処するために使用されている。
【０００５】
マウスｍＡｂであるＧＨＲ１０６は、その可変領域のアミノ酸配列を含めて、ＰＣＴ公開公報ＷＯ２０１１／０２６２４２に記載されており、その開示は、特にＧＨＲ１０６と同様の特異性を有する抗体の使用に関して、参照により本明細書に組み入れられる。
【０００６】
生化学的および免疫学的実験から、ＧＨＲ１０６はＧｎＲＨ受容体に対して高い特異性および親和性を有することが実証されている。インビトロでのアポトーシスおよび抗増殖アッセイが実施され、ＧＨＲ１０６はヒトにおけるほぼ全ての癌細胞または癌組織の表面と反応することが立証された。補体依存性細胞傷害は、μｇ／ｍｌの範囲の濃度のＧＨＲ１０６の存在下で、癌細胞において誘導され得る。また、モデル系に移植された腫瘍細胞のＧＨＲ１０６によるインビボ増殖阻害も、ヌードマウス実験において実証された。
【０００７】
ＧＨＲ１０６ベースの抗癌剤または生殖調節薬をヒトで使用するためには、元のマウスＧＨＲ１０６モノクローナル抗体をヒト化形態に改変することが不可欠である。
【発明の概要】
【０００８】
発明の開示
本発明のＧＨＲ１０６のヒト化型は、元のマウスＧＨＲ１０６に匹敵するまたはそれと同等のＧｎＲＨ受容体に対する親和性および特異性を有することが示された。
【０００９】
したがって、一態様では、本発明は、ＧＨＲ１０６と実質的に同等の特異性および親和性を有し、ヒトＧｎＲＨ受容体の細胞外ドメイン中の残基１−２９に存在するエピトープに結合する、ヒト化抗体またはその断片に関する。特に、図６に示される可変領域を有する抗体またはその断片は、本発明の一部である。
【００１０】
本発明の完全抗体に関して、重鎖の定常領域はＩｇＧであり、かつ軽鎖の定常領域はカッパ（κ）であることが好ましい。しかし、ＩｇＭ、ＩｇＡおよびＩｇＥなどの他のＩｇ形態も含まれ、また、その軽鎖にラムダ（λ）定常領域を有する実施形態も同様に含まれる。
【００１１】
さらに他の態様では、本発明は、ヒト対象の癌の治療、及び生殖のコントロールにおける、本発明の抗体の使用方法に対する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】本明細書に記載されたヒト化の第１ラウンドの後のヒト化抗体の抗原結合親和性を示す。
【図２】第２ラウンドの後のヒト化抗体の抗原結合親和性を示す。
【図３】第３ラウンドの後のヒト化抗体の抗原結合親和性を示す。
【図４】精製された組換え抗体のＳＤＳ−ＰＡＧＥ像を示す。
【図５】第４ラウンドの後のヒト化抗体の抗原結合親和性を示す。
【図６】ＧＨＲ１０６のヒト化形態およびマウスＧＨＲ１０６の重鎖および軽鎖可変領域のアミノ酸配列を示す。
【図７】図６の可変領域をコードするヌクレオチド配列を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明のヒト化抗体は、さまざまな形態をとることができ、例えば、完全抗体、ヒトＧｎＲＨ受容体の細胞外ドメイン中の残基１−２９に存在するエピトープと免疫反応性である断片、例えばＦａｂ、Ｆａｂ’、およびＦ（ａｂ’）２断片、ならびに組換え産生された単鎖抗体であり得る。以下に示す得られたヒト化形態は、マウスＧＨＲ１０６と同等の親和性および特異性を示し、実質的に類似のまたは同一のＣＤＲ領域を含む。
【００１４】
重鎖と軽鎖の両方の可変領域のＣＤＲ領域は、当技術分野で公知の多数の方法によって決定することができ、例えば、Ｋａｂａｔのナンバリングシステムは、軽鎖において、ＣＤＲ１を残基２４−３４、ＣＤＲ２を残基５０−５６、ＣＤＲ３を残基８９−９７と定義しており、重鎖において、ＣＤＲ１を残基３１−３５、ＣＤＲ２を残基５０−６５、ＣＤＲ３を残基９５−１０２と定義している（Ｗｕ，  Ｔ．  Ｔ．，  ａｎｄ  Ｋａｂａｔ，  Ｅ．  Ａ．，  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  （１９７０）  １３２：２１１−２５０）。ＣＤＲはまた、Ｃｈｏｔｈｉａのシステムに従って決定することができ、これはわずかに異なる結果を与える（Ｃｈｏｔｈｉａ，  Ｃ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  （１９８９）  ３４２：８７７−８８３；  Ａｌ−Ｌａｚｉｋｅｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  （１９９７）  ２７３：９２７−９４８）。さまざまな後続の著者らは、いくつかのマイナーな修正を提案している。ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの両システムによって割り当てられたＣＤＲが、本発明の範囲内に含まれる。
【００１５】
サンドイッチおよび／または結合イムノアッセイは、本明細書に記載のヒト化形態とマウスＧＨＲ１０６との間の実質的同等性を実証するために使用された。ヒトＧｎＲＨ受容体の細胞外ドメイン中の残基１−２９に存在するエピトープである同種抗原に対するそれぞれの親和性および特異性は、それらの実質的同等性を確立するための２つの重要なパラメータである。
【００１６】
以前に確立されたサンドイッチおよび／または結合イムノアッセイは、ヒト化形態とマウスＧＨＲ１０６との間の実質的同等性または類似性を実証するためのツールとして使用された。ＧｎＲＨ受容体中の同種抗原に対すそれぞれの親和性および特異性は、それらの実質的同等性を確立すると共に、ＧＨＲ１０６について記載された有用性をそれらが有することを示すものであるが、ただし、ここではヒト対象者に関してそのような有用性を有することを示すものである。
【００１７】
以下の実施例は、本発明を例示するために提供され、本発明を限定するものではない。
【実施例１】
【００１８】
ヒトフレームワークドナーの選択は、ＣＤＲを含むまたは含まないＶＬおよびＶＨ配列を用いて、生殖細胞系列の検索と、これに続くヒトＩｇＧデータベースの再配列により実施した。ヒトＩｇＧの結果を得るために、通常は、各ヒットを再検討して、不適切なドナー（例えば、マウス配列またはヒト化配列など）を排除する。ＶＬおよびＶＨ配列に関して、各グループでのベストヒットをアライメントさせた。最後に、１つの生殖細胞系列ＦＲドナーおよび１つの再配列（成熟）ＦＲドナーを配列類似性および他の要因に基づいて選択した。該要因には、ＣＤＲ長（ＣＤＲ−Ｈ３を除く）、ＣＤＲのカノニカル構造、キーとなる位置のプロリン残基、またはヒト化抗体の適正な折りたたみに影響を与えうる要因が含まれていた。
【００１９】
ホモロジーモデリングを使用して、テンプレート抗体のＣＤＲを含むまたは含まないＶＬ及びＶＨ配列についてＰＤＢデータベースを検索することによってテンプレート抗体構造を得た。以下の条件が考慮された：
（１）配列相同性、
（２）ＣＤＲの長さ、
（３）ＣＤＲのカノニカル構造、及び
（４）正しいジスルフィド結合を有するモデル。
抗体構造モデルの抗原結合領域は、ＣＤＲループデータベース及びカノニカル構造クラスならびにテンプレート構造との比較により最適化された。
【００２０】
ＣＤＲグラフティング及び復帰突然変異
構造モデリングを使用して、ＣＤＲの構成に影響を与える可能性のあるＣＤＲループの外側の残基を同定した。以下の結合または相互作用の要因が考慮された：ＣＤＲ残基の主鎖と側鎖の水素結合、立体障害、及び他の相互作用。
【００２１】
ＣＤＲループ構造に大きな影響を及ぼすと予想される残基に対して復帰突然変異を行った。また、（１）適切なＶＬ及びＶＨ相互作用のためのＦＲドナー中のヘテロダイマー界面、（２）鎖内ドメイン界面、ならびに（３）既知構造中の抗原／エピトープに対する直接相互作用における残基を含む、他の重要な残基についても検証した。
【００２２】
上記の検討事項に基づいて、復帰突然変異の組み合わせは、このようなプロセスの最小限の要求のバランスを取るように設計された。ヒトに対する低い免疫原性、及び、抗原結合親和性の最大の保存が得られる。
【００２３】
ヒト化ＧＨＲ１０６モノクローナル抗体の予備特性評価
４ラウンドのヒト化設計の後に、数種のヒト化ＧＨＲ１０６モノクローナル抗体が作製され、発現され、アフィニティ精製された。
【００２４】
抗原結合アッセイを実施するために、癌細胞で被覆したＥＬＩＳＡプレートを用いて、抗体の親和性を試験した。トランスフェクトしたＣＨＯ細胞から組換え的に産生された種々の抗体を含む上清を連続希釈し、ＥＬＩＳＡウェルに添加して３７℃で１時間インキュベートした。続いてプレートを洗浄緩衝液で洗浄し、その後ヤギ抗ヒトＩｇＧ抗体に結合させたＨＲＰと共に６０分間インキュベートした。その後、プレートを洗浄緩衝液で洗浄してから、ＨＲＰ基質のＴＭＢを発色のために各ウェルに添加した。生データを収集して、マイクロプレートリーダー（ＢＭＧ  Ｌａｂｔｅｃｈ社製のＰＯＬＡＲｓｔａｒ  Ｏｍｅｇａ）により解析した。
【００２５】
すべての抗体は、ヒトＩｇＧ重鎖定常領域及び軽鎖κ定常領域を含むように産生された。
【００２６】
第１ラウンドのヒト化
第１ラウンドのヒト化設計により、３つの重鎖（Ｈ４１からＨ４３）と３つの軽鎖（Ｌ４１からＬ４３）が得られた。設計された各配列の遺伝子を合成し、クローニングして完全長の重鎖及び軽鎖の両方を作製した。各ＤＮＡの配列を確認した。４×４行列（ｍａｔｒｉｘ）（表１）を設計して、１６種類の組換え抗体（Ｈ４０とＬ４０からなる対照の親抗体を含む）を作製した。各抗体ペアのＤＮＡを、付着性ＣＨＯ細胞にトランスフェクトして組換え抗体を産生させた。
【００２７】
【表１】
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【００２８】
トランスフェクションの５日後、ＣＨＯ細胞からの培地を回収し、馴化培地中のＩｇＧレベルを抗ヒトＩｇＧ／Ｆｃ  ＥＬＩＳＡ（ＬａｋｅＰｈａｒｍａ製品カタログ番号２００１００２）により測定した。産生レベルに変動は見られるものの、各抗体ペアは以下の表２に示すように産生及び分泌された。
【００２９】
【表２】
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【００３０】
図１は、第１ラウンドのヒト化後の、上述の抗原結合アッセイ及び用量反応性の結果を示す。親の重鎖Ｈ４０とヒト化軽鎖を有する抗体はすべて、顕著な結合親和性を示す抗体であった。３つのヒト化重鎖を有する抗体はいずれも顕著な結合親和性を示さなかった。
【００３１】
第２ラウンドのヒト化
３つの、よりヒト化された重鎖（Ｈ４１Ａ、Ｈ４１Ｂ及びＨ４１Ｃ）を設計した。３つの追加の抗体Ｈ４１Ａ−Ｌ４０、Ｈ４１Ｂ−Ｌ４０及びＨ４１Ｃ−Ｌ４０を産生させて、アッセイした。図２は、第２ラウンドのヒト化後の、抗原結合アッセイ及び用量反応性を示す。第２ラウンドの３つのヒト化重鎖はいずれも顕著な結合親和性を示さなかった。
【００３２】
第３ラウンドのヒト化
したがって、ヒト化重鎖Ｈ４１ＡＢＣを作製し、２つの追加の抗体（Ｈ４１ＡＢＣ−Ｌ４０、Ｈ４１ＡＢＣ−Ｌ４１）を産生させて、アッセイした。抗体７１４９＋７１５０を陰性対照としてこのアッセイに加えた。図３は、第３ラウンドの、ヒト化後の抗原結合アッセイ及び用量反応性を示す。ヒト化重鎖Ｈ４１ＡＢＣは顕著な結合親和性を示さなかった。
【００３３】
第４ラウンドのヒト化
第４ラウンドのヒト化設計はゼロからスタートして、３つの新しい重鎖（Ｈ６４からＨ６６）を作製した。結合アッセイから、ヒト化軽鎖Ｌ４２が、親の重鎖Ｈ４０と組み合わせたとき、抗原への強い結合を示すことが明らかとなった。したがって、試験するために５種類の抗体セット（表３）を設計した（対照の親抗体及び陰性対照抗体７１４９＋７１５０を含む）。
【００３４】
抗体Ｈ６４−Ｌ４２、Ｈ６５−Ｌ４２、Ｈ６６−Ｌ４２、Ｈ４０−Ｌ４２及び７１４９＋７１５０のためのプラスミドを、血清の非含有の化学組成の特定された培地を用いて、１００ｍＬのＣＨＯ細胞懸濁液にトランスフェクトして抗体を作製した。トランスフェクションの７日後、馴化培地を回収し、澄明化した。馴化培地中の全抗体を、プロテインＡビーズ（ＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅ（商標）、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）を用いて精製した。精製されたサンプルをＳＤＳ−ＰＡＧＥで分離し（図４）、抗体の濃度をＵＶ分光光度計で定量した（表３）。
【００３５】
【表３】
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【００３６】
抗原結合用量反応性（表４）曲線を図５に示す。結合力価は、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアにより決定し、表５に報告した。
【００３７】
【表４】
2015526071.tif 000006
【００３８】
【表５】
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【００３９】
このように、ＧＨＲ１０６のヒト化は４ラウンドのヒト化後に成功裏に完了した。３つすべてのヒト化軽鎖は、親の軽鎖に匹敵する優れた結合力を示した。Ｌ４２を、その後のヒト化抗体アッセイのために選択した。４ラウンドで合計１０種類のヒト化重鎖が作製された。第４ラウンドで作製されたＨ６４は、親の重鎖Ｈ４０に匹敵するすぐれた結合力を示した。まとめると、Ｈ６４Ｌ４２は、親抗体と同等の結合力を有する最良のヒト化ペアであるようである。図６は、ＧＨＲ１０６のヒト化形態の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列と、マウスＧＨＲ１０６のそれとの比較を示す。図７Ａ〜Ｃは、それらをコードする核酸配列を示す。
【００４０】
したがって、本発明の各種抗体及び断片は、表６に示される抗体Ａｂ１〜Ａｂ９である。
【００４１】
【表６】
2015526071.tif 000008
【図６】
2015526071.tif 000009
【図７Ａ】
2015526071.tif 000010
【図７Ｂ】
2015526071.tif 000011
【図７Ｃ】
2015526071.tif 000012
【図１】
2015526071.tif 000013
【図２】
2015526071.tif 000014
【図３】
2015526071.tif 000015
【図４】
2015526071.tif 000016
【図５】
2015526071.tif 000017
【配列表】
2015526071000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成27年3月10日(2015.3.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＧｎＲＨ受容体の細胞外ドメインのアミノ酸残基１−２９に存在するエピトープと特異的に反応し、かつ
１０−７Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）でＧｎＲＨ受容体に結合し、かつ
該受容体への結合についてＧｎＲＨと競合する、ヒト化モノクローナル抗体（ｍＡｂ）またはその断片。
【請求項２】
完全抗体である、請求項１記載のｍＡｂ。
【請求項３】
Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、Ｆｖ、またはｓｃＦｖ断片である、請求項１記載の断片。
【請求項４】
ＫａｂａｔまたはＣｈｏｔｈｉａのいずれかのナンバリングシステムに従って図６に示される重鎖可変領域の１つ及び／または軽鎖可変領域の１つに内在するＣＤＲ領域を含む、請求項１〜請求項３のいずれか１項に記載のｍＡｂまたは断片。
【請求項５】
ａ）  重鎖のＣＤＲ１領域が配列ＲＹＳＶＨであり；
ｂ）  重鎖のＣＤＲ２領域が配列ＭＩＷＧＧＧＳＴＤＹＮＳＰＳＬＫＳまたはＭＩＷＧＧＧＳＴＤＹＮＳＳＬＱＳまたはＭＩＷＧＧＳＴＤＹＮＳＳＬＱＳであり；
ｃ）  重鎖のＣＤＲ３領域が配列ＧＮＤＧＹＹＳＦＡＹであり；
ｄ）  軽鎖のＣＤＲ１領域が配列ＫＳＳＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＹＬＡであり；
ｅ）  軽鎖のＣＤＲ２領域が配列ＷＡＳＴＲＥＳであり；かつ
ｆ）  軽鎖のＣＤＲ３領域が配列ＫＱＳＹＮＬＹＴである
請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載のモノクローナル抗体（ｍＡｂ）または断片。
【請求項６】
重鎖がＨ６５、Ｈ６６またはＨ６４の可変領域を含む、請求項１〜請求項５のいずれか１項に記載のｍＡｂまたは断片。
【請求項７】
軽鎖がＬ４１、Ｌ４２またはＬ４３の可変領域を含む、請求項１〜請求項６のいずれか１項に記載のｍＡｂまたは断片。
【請求項８】
検出可能なマーカー及び／または治療薬に結合された、請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載のｍＡｂまたは断片。
【請求項９】
請求項１〜請求項８のいずれか１項に記載の抗体または断片及び薬学的に許容される添加剤を含む医薬組成物。
【請求項１０】
追加の治療薬をさらに含む、請求項９記載の医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜請求項８のいずれか１項に記載のｍＡｂまたは断片を産生する組換え宿主細胞または不死化細胞。
【請求項１２】
哺乳動物細胞、微生物細胞、昆虫細胞または植物細胞である、請求項１１記載の組換え宿主細胞。
【請求項１３】
ｍＡｂまたは断片を産生させる方法であって、請求項１２記載の細胞を培養すること、及び該ｍＡｂまたは断片を回収することを含む方法。
【請求項１４】
請求項１〜請求項８のいずれか１項に記載のｍＡｂまたは断片を産生するトランスジェニック非ヒト動物またはトランスジェニック植物。
【請求項１５】
請求項１〜請求項８のいずれか１項に記載の抗体または断片をコードする１つ以上の核酸分子。
【請求項１６】
ヒト対象者における増殖性疾患を治療するための、請求項９又は請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１７】
生殖補助の方法において卵巣刺激をコントロールするための、請求項９又は請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１８】
生殖補助の方法が体外受精（ＩＶＦ）である、請求項１７記載の医薬組成物。
【請求項１９】
子宮内膜症、子宮筋腫、子宮内膜の菲薄化、多嚢胞性卵巣疾患、及び性的早熟からなる群より選択されるエストロゲン依存性症状を治療するための、請求項９又は請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項２０】
ａ）  生物学的サンプルを請求項１〜請求項８のいずれか１項に記載のモノクローナル抗体または断片に接触させる段階；及び
ｂ）  該モノクローナル抗体または断片が該サンプルに結合するか否かを検出する段階を含む増殖性疾患を検出する方法であって、ここで、該サンプルへの結合は該サンプル中の細胞上にＧｎＲＨ受容体が存在することを示し、それによって、該サンプル中の増殖性疾患を呈する細胞を検出される方法。
【国際調査報告】
2015526071.tif 000018
2015526071.tif 000019
2015526071.tif 000020