(57)【要約】  本発明は、約１〜約１８の平均アスペクト比を有する粒子を含んだ圧粉ＯＲＣ粉体を含有する止血材料に関するものであり、ボールミルされたＯＲＣ粉体など、前記圧粉ＯＲＣ粉体は、好ましくは圧粉装置で加工されている。本発明は更に、止血材料を作製する方法、並びに止血粉体を患者の創傷の上及び／又は中に塗布することによって創傷を治療する方法に関する。
2015517388.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
圧粉ＯＲＣ粉体を含んだ止血材料であって、前記圧粉ＯＲＣ粉体は、約１〜約１８の平均アスペクト比を有する粒子を含む、止血材料。
【請求項２】
前記圧粉ＯＲＣ粉体は、ボールミルされたＯＲＣ粉体である、請求項１に記載の止血材料。
【請求項３】
前記圧粉ＯＲＣ粉体は、転圧加工されたＯＲＣ粉体か又はハンマーミル加工されたＯＲＣ粉体である、請求項１に記載の止血材料。
【請求項４】
前記止血材料は、添加剤を更に含み、前記添加剤は、ＣＭＣ若しくは他の多糖類、カルシウム塩、抗感染症薬、止血促進薬、ゼラチン、コラーゲン、又はそれらの組み合わせである、請求項１に記載の止血材料。
【請求項５】
請求項１に記載の止血材料と、食塩液と、を含む、止血ペースト。
【請求項６】
前記止血ペーストは、１００００Ｐａ・ｓ超の粘度を有する、請求項５に記載の止血ペースト。
【請求項７】
前記圧粉ＯＲＣ粉体は、少なくとも０．４５ｇ／ｃｍ３のタップ密度を有する、請求項１に記載の止血材料。
【請求項８】
前記圧粉ＯＲＣ粉体は、少なくとも７．５ｃｍ／ｓの流動性を有する、請求項１に記載の止血材料。
【請求項９】
前記圧粉ＯＲＣ粉体は、１．７５マイクロメートル〜１１６マイクロメートルの平均粒径を有し、メジアン径は３６マイクロメートルである、請求項１に記載の止血材料。
【請求項１０】
前記圧粉ＯＲＣ粉体は、約１〜約５の平均アスペクト比、少なくとも０．６７ｇ／ｃｍ３のタップ密度、及び少なくとも７０の流動性を有する粒子を含む、請求項１に記載の止血材料。
【請求項１１】
請求項１に記載の止血材料を作製する方法であって、
ＯＲＣ系の材料を圧粉装置の中に導入する工程と、
粉体が約１〜約１８のアスペクト比に達するまで、前記ＯＲＣ系の材料を前記粉体へと圧粉する工程と、を含む、方法。
【請求項１２】
前記ＯＲＣ材料は、ＯＲＣ織物、ＯＲＣ不織布、又は細断ＯＲＣ材料である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記圧粉は、ボールミリングによって実施される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記圧粉は、転圧によって又はハンマーミリングによって実施される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＯＲＣ材料を添加剤と混合する工程を更に含み、前記添加剤は、ＣＭＣ、カルシウム塩、抗感染症薬、止血促進薬、ゼラチン、コラーゲン、食塩水、又はそれらの組み合わせである、請求項１１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、効能を改善させた吸収性止血粉体、特に酸化再生セルロースでできた圧粉体、及びそのような粉体を製造するための方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
多種多様な状況において、ヒトを含む動物は、創傷が原因で又は外科的処置の間に出血に見舞われ得る。いくつかの状況においては、出血は比較的軽いものであり、通常の血液凝固が、簡単な応急処置の実施に加われば、それだけで十分である。他の状況においては、相当な出血が発生し得る。これらの局面では通常、専門的な設備及び物資、並びに適切な救助を施すように訓練された人員が必要となる。
【０００３】
上述の問題に対処する取り組みにおいて、過剰な出血を抑制するための物質が開発されてきた。局所吸収性止血剤（ＴＡＨ）が手術の用途で広く使用されている。ＴＡＨは、酸化セルロース（ＯＣ）、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）、ゼラチン、コラーゲン、キチン、キトサンなどに基づく製品を包含する。止血特性を改善するために、上記の物質に基づくスキャフォールドが、トロンビン及びフィブリノゲンなど、生物学的に誘導された凝固因子と組み合わされ得る。
【０００４】
出血の抑制は、失血を最小限にするために、術後の合併症を低減するために、そして手術室における手術時間を短縮化するために、外科手技において必須かつ重要である。その生分解性と殺菌及び止血特性が故に、酸化セルロース及び酸化再生セルロースは、神経系外科手術、腹部外科手術、心臓血管手術、胸部外科手術、頭頚部外科手術、骨盤外科手術、並びに皮膚及び皮下組織手技を含めて、様々な手術手技において局所的な止血創傷包帯として長きにわたり使用されてきた。粉体、織布、不織布、編物、及び他の形態で作られるか否かにかかわらず、酸化セルロース材料に基づいた様々な種類の止血剤を形成するための多数の方法が知られている。現在利用されている止血創傷包帯には、セルロース繊維の均質性を向上させた酸化セルロースである酸化再生セルロース（ＯＲＣ）を含んだ編物又は不織布が挙げられる。商業的に入手可能なそのような止血創傷包帯の例には、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）吸収性止血剤、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＮＵ−ＫＮＩＴ（登録商標）吸収性止血剤、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＦＩＢＲＩＬＬＡＲ吸収性止血剤、及びＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＳＮｏＷ（商標）吸収性止血剤が挙げられ、これらはすべて、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｗｏｕｎｄ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ（Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ，Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，Ｎ．Ｊ．，Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙの一部門である）から入手可能である。酸化セルロースを含有する市販の吸収性止血剤の他の例には、オランダ国アムステルダムのゲリタメディカル社（Gelita Medical BV）によるＧｅｌｉｔａＣｅｌ（登録商標）吸収性セルロース包帯が挙げられる。商業的に入手可能な上記の酸化セルロース止血剤は、止血をもたらすための多孔質構造を有する編物又は不織布である。
【０００５】
Ａｓｈｔｏｎ及びＭｏｓｅｒの米国特許第３，３６４，２００号は、綿球の統合酸化セルロースステープルファイバの形態の吸収性外科用止血材を説明している。
【０００６】
Ｈｕｅｙの公開された米国特許出願公開第２００８／００２７３６５号は、出血部位上に配置するためにシートに形成される圧縮性の成形可能な塊の形態の酸化セルロースを利用し、リムを受容するように寸法決定された管状シェルの形態のスリーブを更に有する、止血を促進するための装置を説明している。
【０００７】
Ｌｏｏｎｅｙらの公開された米国特許出願公開第２００４／０００５３５０号は、カルボキシル−酸化セルロースから作製された繊維性布地基材を利用し、布地を通して均一に分配され、生体適合性、水溶性、又は水膨潤性セルロースポリマーから作製された多孔性の高分子マトリックスを含有する止血用創傷包帯を開示しており、布地は、約３重量パーセント以上の水溶性オリゴ糖を含有する。
【０００８】
Ｈｅｒｚｂｅｒｇらによるものであり、「ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ  ＡＮＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＰＲＥＶＥＮＴＩＮＧ  ＯＲ  ＲＥＤＵＣＩＮＧ  ＰＯＳＴＯＰＥＲＡＴＩＶＥ  ＩＬＥＵＳ  ＡＮＤ  ＧＡＳＴＲＩＣ  ＳＴＡＳＩＳ」と題された特許公開第ＷＯ  ２００７／０７６４１５号には、電動ミルの切刃を使用した、ＯＲＣのミリング、特に低温ミリングが開示されている。
【０００９】
Ｈｏｗｓｍｏｎ  ａｎｄ  Ｍａｒｃｈｅｓｓａｕｌｔによる「Ｔｈｅ  Ｂａｌｌ−Ｍｉｌｌｉｎｇ  ｏｆ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  Ｆｉｂｅｒｓ  ａｎｄ  Ｒｅｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ  Ｅｆｆｅｃｔｓ」と題された記事（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌｕｍｅ  １  Ｉｓｓｕｅ  ３，Ｐａｇｅｓ  ３１３〜３２２，（１９５９））には、セルロースをボールミリングした結果として得られる微細構造が非結晶化過程に及ぼす影響の調査結果が報告されている。非結晶化の速度は、微細構造の種類に敏感であり、水分の存在によって加速される。分子鎖の崩壊の程度は、二酸化炭素中よりも空気雰囲気中でより強くなり、機械的に誘発される遊離基の分離が他の分子鎖切断過程と共に生じることが示唆される。種々の回数のミリング後における試料の密度及び水分率を調べたところ、水分率と密度との直線関係が、試験した全範囲にわたって保たれることが示された。この関係は、天然のセルロースと再生セルロースに関して同じであった。ボールミルされた試料の再結晶の過程は様々な条件下で調べられており、加水分解的に誘発した人絹の再結晶と比較されている。この文献は、セルロース繊維のボールミリングの結果として得られる微細構造が非結晶化過程に及ぼす影響について開示している。
【００１０】
米国特許第６，６２７，７４９号には、乳棒及び乳鉢を使用して、又はボールミル若しくは任意の他の通常の実験用粉砕機において、酸化再生セルロースを粉砕するプロセスが開示されている。更には、コットンリンターシートが開始セルロース源として使用されるとき、製品の繊維長が反応時間の増加に伴って減少することが開示されている。ボールミルされると、製品の長い繊維構造はより短い繊維へと変化して、緩く充填された球状塊となる。これらの試料の結晶化度における著しい変化が、ボールミリングの結果として生じることはない。これらの文献には、短い繊維又は緩く充填した球状塊を形成するようにボールミルされた、長い繊維の酸化セルロースが開示されている。
【００１１】
関連する他の文献には、米国特許第６，３０９，４５４号「Ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ  ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｈｅｒｅｏｆ」、米国特許第５，６９６，１９１号、同第６，６２７，７４９号、Ｋｙｏｋｏらへの同第６，２２５，４６１号、ＰＣＴ特許公開第ＷＯ２００１／０２４８４１  Ａ１号「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｗｏｕｎｄ  Ｃｏｎｔｒａｃｔｕｒｅ」、及びＤａｅ  Ｓｉｋらへの欧州特許公開第１，３２３，４３６号が挙げられる。
【００１２】
関連する他の文献には、「Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｏｘｉｄｉｚｅｄ  ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ／ｃｏｌｌａｇｅｎ  ｉｎ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｗｏｕｎｄ  ｒｅｐａｉｒ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ」と題された記事（Ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ３４（２００２）  １５４４〜１５５６，Ｂｒｅｄａ  Ｃｕｌｌｅｎ  ｅｔ  ａｌ．）と、Ｒａｎｇａｍらによる記事「ｔｅａｃｈｉｎｇ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｍａｋｉｎｇ  ｓｉｌｋ  ｐｏｗｄｅｒｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｍｉｌｌｉｎｇ  ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ」［Ｐｏｗｄｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １８５（２００８），ｐ８７〜９５］と、２種類の構成成分、つまり酸化セルロース粉体とデキストランの２０％水溶液とからなるオキシセロデックス（Oxycelodex）ペーストを開示する、Ｙａｓｎｉｔｓｋｉｉらによる記事「Ｏｘｙｃｅｌｏｄｅｘ，ａ  ｎｅｗ  ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ」（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ，１８，５０６〜５）とが挙げられる。
【００１３】
Ｌｏｏｎｅｙらへの米国特許出願第２００６／０２３３８６９号には、剪断／細断プロセスを用いてＯＲＣミクロ繊維をＯＲＣ織物から作製することについて開示されている。棒状の形状をなす繊維が、約３５マイクロメートル〜４３５０マイクロメートルに及ぶ大きさを有していた。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、約１〜約１８の平均アスペクト比を有する粒子を有する圧粉ＯＲＣ粉体を含んだ止血材料に関するものである。圧粉ＯＲＣ粉体は好ましくは、ボールミリングによって作製される。より好ましくは、圧粉ＯＲＣ粉体は、転圧加工されたＯＲＣ粉体又はハンマーミル加工されたＯＲＣ粉体であってよい。止血材料は好ましくは、少なくとも０．４５ｇ／ｃｍ３のタップ密度、及び／又は少なくとも７．５ｃｍ／ｓの流動性、及び／又は１．７５マイクロメートル〜１１６マイクロメートルの平均粒径を有し、メジアン径は３６マイクロメートルである。一実施形態において、止血材料は、約１〜約５の平均アスペクト比、少なくとも０．６７ｇ／ｃｍ３のタップ密度、及び少なくとも７０の流動性を有する粒子を備えた粉体である。
【００１５】
一実施形態において、止血材料は、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）若しくは他の多糖類、カルシウム塩、抗感染症薬、止血促進薬、ゼラチン、コラーゲン、又はそれらの組み合わせなどの添加剤を更に含む。
【００１６】
別の実施形態において、止血材料は、上述の止血材料と食塩液とを含んだペーストの形態をなす。ペーストは好ましくは、室温にて１００００Ｐａ・ｓ超の粘度を有する。
【００１７】
別の実施形態において、本発明は、ＯＲＣ系の材料を粉体へと、前記粉体が約１〜約１８のアスペクト比に達するまで圧粉することによって、上述の止血材料を作製する方法に関するものである。ＯＲＣ系の材料は、織物の形態をなすＯＲＣであっても、不織布の形態をなすＯＲＣであっても、細断ＯＲＣ材料であってもよい。一実施形態において、圧粉はボールミリングによって実施される。別の実施形態において、圧粉は、転圧によって又はハンマーミリングによって実施される。更に別の実施形態において、ＯＲＣ系の材料は、ＣＭＣ、カルシウム塩、抗感染症薬、止血促進薬、ゼラチン、コラーゲン、食塩水、又はそれらの組み合わせなどの添加剤と組み合わされ得る。
【００１８】
別の実施形態において、本発明は、上述の止血粉体を患者の創傷の上及び／又は中に塗布することによって創傷を治療する方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】動的光散乱法によって測定した、ボールミルされた材料の粒径分布のグラフである。
【図２】ＳＥＭによって測定した、ボールミルされた材料の粒径分布のグラフである。
【図３】細断及びボールミルされたＯＲＣ粉体に関する凝固時間対アスペクト比として示された、試験管内血液凝固試験の結果のグラフである。
【図４】細断及びボールミルされたＯＲＣ粉体に関する凝固時間対アスペクト比として示された、試験管内血液凝固試験のグラフである。
【図５】数種類の粉体に関する止血時間のグラフである。
【図６】流動性材料の平均粘度を示すグラフである。
【図７】止血の効力試験、つまり、脾臓の生検パンチモデル（ｎ＝１０）における、流動性ペースト及び添加剤を加えた外科用粉体の止血時間（ＴＴＨ）のグラフである。
【図８】止血の効力試験、つまり、脾臓の生検パンチモデルにおける様々な材料の止血時間（ＴＴＨ）のグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明者らは、特異的な性質を有する圧粉ＯＲＣ粉体を、ＯＲＣ系の材料から又は事前に細断されたＯＲＣ系の材料から作製するためのプロセスを発見し、それにより、結果として得られる粉体は、抗接着性バリア、止血剤、組織シーラントなど、様々な外科及び創傷治癒用途に使用され得る。本発明の圧粉ＯＲＣ粉体を作製するための出発原料として使用される酸化再生セルロース材料は、既知でありかつ商業的に入手可能なものである。それらの材料には、酸化多糖類、特に酸化セルロース及びそれらの中和誘導体を含んだ吸収性の織布若しくは編物又は不織布材料が挙げられる。例えば、セルロースは、カルボキシル−酸化又はアルデヒド−酸化セルロースであってよい。より好ましくは、限定するものではないが酸化再生セルロースを含めた酸化再生多糖類が使用され得る。酸化再生セルロースは、再生されていないセルロースに対して均等度がより高度であるがために好ましい。再生セルロース、及び酸化再生セルロースを作製する方法の詳細な説明が米国特許第３，３６４，２００号、同第５，１８０，３９８号、及び同第４，６２６，２５３号に記載されており、これらの特許の各々の内容は、そのすべての内容が記載されたものとして、参照によって本明細書に組み込まれる。利用され得る材料の例には、限定するものではないが、ＩＮＴＥＲＣＥＥＤ（登録商標）吸収性接着バリア、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）吸収性止血剤、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＮＵ−ＫＮＩＴ（登録商標）吸収性止血剤、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＦＩＢＲＩＬＬＡＲ吸収性止血剤、又はＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＳｎｏＷ（商標）吸収性止血剤（それぞれ、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｗｏｕｎｄ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ（Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，Ｎ．Ｊ．の一部門である）から入手可能）が挙げられる。
【００２１】
本発明の粉体はタップ密度が高くかつアスペクト比が低いがために、結果として得られるＯＲＣ粉体は、ペースト又は粉体のいずれの形態においても、優れた止血特性と良好な組織適合性及び流動性で、止血剤として働くことができる。加えて、これらのＯＲＣ材料は、他の薬剤及びバイオポリマーと物理的に混和されて、組織への接着性、封止特性、及び／又は抗接着性を改善することができる。
【００２２】
本発明の一態様において、約０．３５ｇ／ｃｍ３〜約１ｇ／ｃｍ３、より好ましくは０．４２ｇ／ｃｍ３〜０．７８ｇ／ｃｍ３など０．４ｇ／ｃｍ３〜０．９ｇ／ｃｍ３に及ぶタップ密度を有する高タップ密度の粉体へと圧縮される、低アスペクト比（１．５〜１９など１〜２０）の粒子を作製するための方法が提供される。この発明的方法は、ボールミリングプロセスを利用して、これらの特定のアスペクト比を有するＯＲＣの粒子を直接、上記で特徴付けられるＯＲＣ織物又は不織布などのＯＲＣ材料から作製するために用いられる。本発明の粒子は、３００マイクロメートル、２００マイクロメートル未満、及び１００マイクロメートル未満など、５００マイクロメートル未満の全体的大きさ（最大寸法）を有する。
【００２３】
低アスペクト比（１〜２０）の粒子が、粉体材料をなす粒子の大部分、すなわち、粒子の８０％超又は９０％超など、５０％超を構成すべきである。３００、２００マイクロメートル未満、及び１００マイクロメートル未満など、５００マイクロメートル未満の全体的大きさ（最大寸法）を有する粒子が、粉体材料をなす粒子の大部分、すなわち、粒子の８０％超又は９０％超など、５０％超を構成すべきである。
【００２４】
本発明の別の態様において、低アスペクト比で高タップ密度のＯＲＣの粒子を含んだ、ボールミリングプロセスから得られた製品は、優れた止血及び血液凝固特性を有することが示されている。
【００２５】
ＯＲＣは、当業者に既知の吸収性止血材である。酸化セルロース材料に基づいた様々なタイプの止血剤を、粉体、織布、不織布、編物、及び他の形態、並びにそれらの組み合わせに形成するための多数の方法が知られている。現在利用されている止血創傷包帯には、セルロース繊維の均質性を向上させた酸化セルロースである酸化再生セルロース（ＯＲＣ）を含んだ編物又は不織布が挙げられる。商業的に入手可能なそのような止血創傷包帯の例には、ＳＵＲＧＩＣＡＬ（登録商標）吸収性止血剤、ＳＵＲＧＩＣＡＬ（登録商標）ＮＵ−ＫＮＩＴ（登録商標）吸収性止血剤、ＳＵＲＧＩＣＡＬ（登録商標）ＦＩＢＲＩＬＬＡＲ吸収性止血剤、又はＳＵＲＧＩＣＡＬ（登録商標）ＳＮｏＷ（商標）吸収性止血剤が挙げられ、これらはすべて、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｗｏｕｎｄ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ（Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，Ｎ．Ｊ．，Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙの一部門である）から入手可能である。
【００２６】
本発明の更なる実施形態において、ボールミルされたＯＲＣ粒子は、止血特性、創傷治癒特性、及び取扱い適性を更に改善するように、ゼラチン、コラーゲン、セルロース、キトサン、多糖類、デンプン、ＣＭＣ、カルシウム塩などの止血添加剤、トロンビン、フィブリノゲン、及びフィブリンで例示される生物由来の止血薬、限定するものではないがプロコアグラント酵素、タンパク質、及びペプチドを含む更なる生物学的止血薬を含め、当業者に既知の添加剤を利用して、様々な添加剤と組み合わされ得るが、そのような各薬剤は、天然のものであっても、組換え型であっても、合成のものであってもよく、また、フィブロネクチン、ヘパリナーゼ、第Ｘ／Ｘａ因子、第ＶＩＩ／ＶＩＩａ因子、第ＩＸ／ＩＸａ因子、第ＸＩ／ＸＩａ因子、第ＸＩＩ／ＸＩＩａ因子、組織因子、バトロキソビン、アンクロッド、エカリン、フォンビルブランド因子、アルブミン、血小板表面糖タンパク質、バソプレシン及びバソプレシン誘導体、エピネフリン、セレクチン、プロコアギュラント毒（procoagulant venom）、プラスミノーゲン活性化因子阻害因子、血小板活性化薬、止血活性を有する合成ペプチド、上記の誘導体、並びにそれらの任意の組み合わせからなる群から更に選択されてもよい。ボールミリングされたＯＲＣ粒子と組み合わせて使用され得る、好ましい生物学的止血薬は、トロンビン、フィブリノゲン及びフィブリンと、グルコン酸クロルヘキシジン（ＣＨＧ）、トリクロサン、銀、及び当該技術分野で知られる同様の抗菌／抗微生物薬などの抗感染症薬と、止血薬の粘着性を増加させる添加剤と、希釈剤、食塩水、及び当該技術分野で知られる同様の添加剤である。
【００２７】
本開示において、粉体のアスペクト比は、ＳＥＭ又は光学顕微鏡下で適切な倍率で可視であるとき、粒子のアスペクト比を、粒子の最長寸法（長さ）を粒子の最短寸法（幅）で割った測定値と定義して、粉体を含んだ粒子の平均アスペクト比として定義される。最小アスペクト比（ＡＲ）が１であることは、最短寸法に等しい最長寸法を有する、丸い粒子であることに対応する。アスペクト比が約２０であることは、直径の２０倍の長さを有する繊維状粒子であることに対応する。実験試料のアスペクト比はＳＥＭ撮像によって決定されたものであった。好ましいアスペクト比は、本発明によれば、１〜２０、より好ましくは約１．５〜約１７．５である。
【００２８】
止血剤粒子の流動性は、外科手技中の粉体の展開に影響を及ぼすパラメータである。展開を容易にするため、外科手術の環境では、高度な流動性が好まれる。嵩密度とは、タップされていない粉体試料の質量と、粒子間の空隙容量の寄与を含めたその粉体試料の体積との比である。タップ密度とは、粉体の容器を機械的に軽く叩くことによって得られる、増加した粉体の嵩密度の測定値である。タップ密度は、流動性と相関すると思われる。展開及び混合を容易にするために、高度なタップ密度が好まれる。好まれるタップ密度は、約０．３５ｇ／ｃｍ３〜約１ｇ／ｃｍ３、より好ましくは０．４２ｇ／ｃｍ３〜０．７８ｇ／ｃｍ３など、０．４ｇ／ｃｍ３〜０．９ｇ／ｃｍ３である。タップ密度は、本願においては特に明記しない限り、改良ＵＳＰ  ６１６法を用いて測定されるものであり、この改良ＵＳＰ  ６１６法において、１グラムの粉体が、乾燥した１０ｍＬのメスシリンダーに導入され、約２分間にわたって手動で１００回、軽く叩かれる。
【００２９】
また、止血剤粉体の圧出力は、外科手技中の粉体又はペーストの展開に関連する重要なパラメータである。液体をシリンジから排出するため、また液体をシリンジの中に引き込むために必要な労力は、それぞれ圧出力及び吸引力として知られている。しかしながら、デュアルシリンジ混合装置には圧出力の測定値がより重要となる。
【００３０】
デュアルシリンジ混合装置は、初期には分離している液体及び固体の担体を混合し、次いでその配合された内容物を、相互連結された出口を介して、連結された２本のシリンジの間で前後に送ることによって、実質的に均質なペースト混合物を生成する。したがって、ペーストをシリンジから分配するための圧出力が低いことが、混合を容易にするために、また究極的には、結果として得られるペーストを展開するために好ましい。無菌のベクトンディッキンソン（Beckton Dickinson）社製の雄型ルーアーロック１ｍＬシリンジを使用して第１又は第２の０．１ｍＬのペーストが圧出されるとき、望ましい圧出力は、表３に見られるような同様のアスペクト比で６．７２Ｎ（１．５１ポンド）未満である。
【００３１】
各特性の最適な組み合わせは、驚くべきことに、ＯＲＣをボールミリングすることによって達成可能であることが判明したが、細断することだけでは達成され得ない。好ましいボールミリングの方法のうちの１つについて以下に説明する。ボールと試料を５００ｍＬの粉砕ジャーの中に置くことによって、事前にトリミングした５０ｇのＳＵＲＧＩＣＥＬ織物（１０．２ｃｍ×１０．２ｃｍ（４インチ×４インチ））を１２の高密度ジルコニア（直径２０ｍｍの酸化ジルコニウムＺｒＯ２（米国ニュージャージー州クリフトン（Clifton）のグレンミルズ社（Glen Mills Inc.））でボールミルした。このジャーはラッチブラケットの中へ圧締めされ、次いで遊星ボールミルＰＭ１００（米国ペンシルバニア州ニュータウン（Newtown）のレッチェ社（Retsch, Inc.））上で均衡化され得る。次いで、ミリングを３００ｒｐｍにて双方向で３０分間にわたって実施し、次いで、室温にて冷却するために１時間にわたって停止した。このプロセスを必要に応じて繰り返した。
【００３２】
ＯＲＣ試料は、１２個のＺｒＯ２ボール（直径２０ｍｍ（米国ニュージャージー州クリフトン（Clifton）のグレンミルズ社（Glen Mills Inc.））など５個〜３０個以上の高密度ＺｒＯ２ボールと試料を粉砕ジャー（２５０ｍＬ；５００ｍＬ以上）に入れることによって、それらのボールでボールミルされ得る。このジャーはラッチブラケットの中へ圧締めされ、次いでミル（遊星ボールミルＰＭ１００（米国ペンシルバニア州ニュータウン（Newtown）のレッチェ社（Retsch, Inc.）など）上で均衡化され得る。次いでミリングを、１５０ｒｐｍ〜５００ｒｐｍ、例えば３００ｒｐｍで、１０分間〜３０分間など、５分間〜６０分間にわたって実施することができる。
【００３３】
高密度でかつ低アスペクト比の圧粉ＯＲＣ粉体を生成する、ボールミリング以外の他の方法が利用され得る。転圧とは、ロールミルによって粉体を連続的に圧粉することを指す。粉体は通常、送りねじによってロールに送出され、圧力及び剪断力によって高密度化される。転圧は、製薬、鉱物、及び化学産業を含めた多様な産業で用いられる粉体凝集プロセスである。流動性不足の粉体混合物の転圧は、２本の逆転ローラー間における粉体のスクリューフィードを必要とする。次いで、これらの逆転ローラーは粉体を圧粉ゾーンに引き込み、高圧を加えて、圧粉体のストリップを形成する。２本の逆転ローラー間の圧力によってそのようなストリップ又はリボンに圧粉された粉体は次いで、低アスペクト比の微粒子へと更にミリングされる。本発明において、織布若しくは不織布のＯＲＣ材料、又は細断若しくはボールミルされたＯＲＣ材料は、所望の低アスペクト比及び高密度のＯＲＣ粒子に達するように更に転圧され得る。
【００３４】
ハンマーミルは、十分に低いアスペクト比と高いタップ密度を有するＯＲＣ粒子を作製するために使用され得るもう１つの方法である。ハンマーミルは衝撃作用によって動作するものであり、大多数の乾燥した易流動性材料を微粉砕する。材料が頂部からハンマーミルの中に供給され、次いで粉砕チャンバーの中に落ちる。この材料は、高速で回転する一連の焼入鋼ハンマーによって接触される。材料は、これらのハンマーとの繰返し接触、粉砕チャンバーの壁との接触、及び粒子間の接触によって粉砕される。粒子が、粉砕チャンバーの底半部を被覆する孔あきスクリーンを通過することによって、脱出するのに十分に小さくなるまで、材料はハンマーミル粉砕チャンバー内に残留する。
【００３５】
ハンマーミルとは本質的には、垂直又は水平回転シャフトを収容したスチールドラム、又はハンマーが装着されているドラムである。ハンマーは、クロスの端部で自在に揺動するか、あるいは中心ローターに固定される。ローターは、材料が供給ホッパーに供給される間、ドラムの内側で高速で回転される。材料はハンマーバーで衝撃を与えられ、それによって細断され、選択したサイズのドラム内のスクリーンを通じて排出される。ハンマーミルは、第１の、第２の、又は第３のクラッシャーとして使用され得るものであり、すなわち、ＯＲＣは、織布又は不織布材料のＯＲＣ源から、又は細断若しくはボールミルされたＯＲＣ材料からハンマーミルされ得る。切断（細断）とボールミリング及び他の圧粉／ミリングプロセスとの主な違いは、ボールミリング及び他の圧粉プロセスで利用される鋭利な刃を用いない、圧砕による機械的な押付けである。鋭利な刃が無いが故に、粒子は、粒子の形状、表面、タップ密度などの点において、細断された（すなわち刃を利用してミリングされた）粒子とは異なる種々の特性を得る。
【００３６】
本発明については、上で概ね説明した。以下の非限定的な例により、更なる詳細が示される。
【実施例】
【００３７】
実施例１．ＯＲＣボールミルされた粉体（ＢＭＰ）を含んだ圧粉の調製。
１０．２ｃｍ×１０．２ｃｍ（４インチ×４インチ）の事前にトリミングした数片の非滅菌ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）織物（エチコン社（ETHICON, Inc.）、ロット番号７Ａ８６Ｓ４）を、ミリングに先立って２４時間にわたって真空乾燥させた。試料の総重量は６グラムであった。次いで、各試料を１２個の高密度ＺｒＯ２ボール（直径２０ｍｍ（米国ニュージャージー州クリフトン（Clifton）のグレンミルズ社（Glen Mills Inc.）））と混合し、２５０ｍＬの粉砕ジャーに入れて密封した。このジャーをラッチブラケットの中へ圧締めし、次いでミル（遊星ボールミルＰＭ１００（米国ペンシルバニア州ニュータウン（Newtown）のレッチェ社（Retsch, Inc.））上で均衡化した。３００ｒｐｍで１０分間にわたってミリングを実施した。次いで、ミリングされた粉体を真空オーブン（フィッシャーサイエンティフィック社（Fisher Scientific）のモデル２８０Ａ  Ｉｓｏｔｅｍｐ真空オーブン）に入れて、真空ポンプ（ラブケアアメリカ社（LabCare America）のＰｕｍｐ  ＰＶ−３５）によって６５℃で２．５時間にわたって乾燥させた。ミリングされた粉体を最終的に窒素ボックスに格納した。
【００３８】
窒素ボックスに保管した５０グラムの非滅菌ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）織物（エチコン社のロット番号７Ａ８６Ｓ４）を１０．２ｃｍ×１０．２ｃｍ（４インチ×４インチ）の大きさに事前に切断し、ミリングプロセスの前に２４時間にわたって真空乾燥させた。各試料を１２個の高密度ＺｒＯ２ボール（直径２０ｍｍ（米国ニュージャージー州クリフトン（Clifton）のグレンミルズ社（Glen Mills Inc.）））と混合し、次いで細砕ジャー（容量５００ｍＬ）に入れて密封した。このジャー（総質量＝〜７．４ｋｇ）をラッチブラケットの中へ圧締めし、次いでミル（遊星ボールミルＰＭ１００（米国ペンシルバニア州ニュータウン（Newtown）のレッチェ社（Retsch, Inc.）ＳＮ：１２８０８１２０７Ｈ）上で均衡化した。３００ｒｐｍで３０分間、同じ回転数でミリングを実施した。ミリングされたＯＲＣ粉体を粉砕ジャーから取り出し、真空オーブン（フィッシャーサイエンティフィック社（Fisher Scientific）のＭｏｄｅｌ  ２８０Ａ  Ｉｓｏｔｅｍｐ真空オーブン）及び真空ポンプ（ラブケアアメリカ社（LabCare America）のＰｕｍｐ  ＰＶ−３５）によって６５℃で２．５時間にわたって乾燥させた。
【００３９】
加えて、上述したものと同じ方法を用いて、本発明の粉体を調製する際にＯＲＣ系のＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＮＵ−ＫＮＩＴ（登録商標）吸収性止血剤を利用した。
【００４０】
光学顕微鏡及びＳＥＭ画像の分析により、ボールミリングの時間がより長くなると、結果として得られるＢＭＰ粒子は、細長い高アスペクト比（＞１０）の構造から、１に近いアスペクト比を有する一層丸い塊へと遷移することが示されている。
【００４１】
ここで表１を参照すると、ボールミリングプロセスの間に収集された温度データが、ボールミリングプロセスの全体を通じて取られた読みと共に示されている。これらのデータが示すこととして、限られた温度上昇が生じたに過ぎず、ボールミリングの３０分後に３８℃の最高温度が記録され、これは低アスペクト比のＢＭＰを得るのに十分なものであった。
【００４２】
【表１】
2015517388.tif 000003
＊  温度は、開いた粉砕ジャーの上部に試料及びＺｒＯ２ボールと共にＩＲ測温体を置いたときに得られたものである。
【００４３】
転圧ＯＲＣ粉体
篩目１７２６〜１５０を装備したＦｉｔｚ  Ｍｉｌｌに通してＯＲＣ織物を細断することによって、細断ＯＲＣ粉体を得た。未加工の嵩密度及びタップ密度は、標準ＵＳＰ  ６１６に従って測定して、それぞれ０．２ｇ／ｍＬ及び０．２６ｇ／ｍＬであった。細断ＯＲＣ粉体を転圧器（ＷＰ  １２０×４０Ｖ、＃９００−００７１（ペンシルベニア州アレクサンダーワーク社（Alexanderwerk, Inc））に供給した。５リットルの高流速ホッパーには、ヘリカルバンドスクリューが供給スクリューの上に水平に装着されていた。高出力供給スクリューには、摩擦ピン用のレリーフが備えられていた。ホッパー入口の一重螺旋と真空エリアの二重螺旋が供給スクリューの前方に向かっていた。混入空気をローラーの前で除去するために、真空脱気フィルターパイプ（＜１μｍ）を供給スクリューの周りに据え付けた。試料は十分良好に流動して、２．２ｍｍ〜２．７ｍｍの薄片をなした。約１８０バール、１６．２Ｋｎ  ｃｍのローラー幅で繊維を破断させるためには、より高い圧力が必要であった。試料を円滑に移動させるための供給スクリュー輸送の手順に対し、圧力は約６Ｋｇ／時であった。標準的なローター角度は、粗い破断に対する１．２５ｍｍの篩、及び微細な粒状化に対する０．６３ｍｍの篩で始まる。丸い篩（１．２５ｍｍの丸形）を使用して開始し、次いで、更に強力な剪断のために０．８０ｍｍの四角い篩を使用した。圧粉の後、各試料を、振幅変調ＡＴＭソニックシフターで５分間、８０、１００、１２０、１４０、１７０、２３０、及び２７０メッシュの一連の網篩に通して篩分けした。粒子の分布は、パン底部において、３１．１％（＞１８０メッシュ）、０．７％（＞１５０メッシュ）、０％（＞１２５メッシュ）、０．１％（１０６メッシュ）、３．６％（９０メッシュ）、２０．２％（６３メッシュ）、５％（５３メッシュ）、及び３７．６％であった。サンプル（＞１８０メッシュ）を除き、篩分けした試料の残りは繊維の形態をなしていた。サンプル（＞１８０メッシュ）のアスペクト比及びタップ密度は、それぞれ約１．５ｇ／ｍＬ及び０．４４ｇ／ｍＬであった。
【００４４】
比較の目的で、細断／剪断されたＯＲＣ粉体を、以下のように同じ開始ＯＲＣ織物から調製した。大量のＯＲＣ織物をシュレッダー（米国イリノイ州のフィッツパトリックカンパニー（Fitz Patrick Company）社のＦｉｔｚＭｉｌｌ）の中に入れ、６０００ｒｐｍの速度で加工した。細断されたＯＲＣ粉体が、ＦｉｔｚＭｉｌｌメッシュ１７２６−０８０篩を用いて得られた。更に篩分けすること、及び／又は細断の時間を変化させることにより、結果として、比較を目的として様々なアスペクト比の細断／剪断されたＯＲＣ粉体が作製された。
【００４５】
実施例２．圧粉ＯＲＣ粉体又はボールミルされた粉体（ＢＭＰ）の物理的特性決定
更なる特性決定のために、ＢＭＰを９９％のイソプロパノールに入れて３分間にわたって音波ミキサーで攪拌及び混合した。乾燥させた後、走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）及び動的光散乱法（ＤＬＳ）によって、ＢＭＰと細断ＯＲＣ粉体（比較例）の両方を特性決定した。ＤＬＳ分析が示すところでは、ＢＭＰの粒径の範囲は、約１．７５マイクロメートル〜１１６マイクロメートルであり、長さの中央値は３６マイクロメートルであった。動的ＳＥＭ写真をドラフティングプログラム（ホリバ・インスツルメンツ社（Horiba Instruments, Inc）製）にインポートし、１０３個の粒子を長さ及び幅について測定した。大多数の粒子は、１．０〜２．５のアスペクト比（Ｌ／Ｗ）を示した。図１と２との比較により示されることとして、種々の技法の測定値は概ね同じ傾向を示唆しており、ＳＥＭによる測定値はＤＬＳデータと一致している。
【００４６】
細断／剪断ＯＲＣ粉体のＳＥＭ分析を比較の目的で示す。この粉体は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる、ルーニー（Looney）らによる米国特許出願公開第２００６／０２３３８６９号に記載されている粉体に類似したものであり、それに記載された粉体は、約３０の長さ（Ｌ）対幅（Ｗ）（Ｗ：１５μｍ、Ｌ：３５〜８６０μｍ）の平均アスペクト比を有するものであった。ボールミルされた外科用粉体の平均アスペクト比は、剪断した外科用繊維（ＦｉｔｚＭｉｌｌ  １７２６−０８０網篩で得られる）の約２０分の１である。ＢＭＰのタップ密度（０．７８ｇ／ｍＬ）は、寸断したサージセルのタップ密度（０．２６ｇ／ｍＬ）の約３倍超である。
【００４７】
比較例
本発明のボールミルされた粉体と実質的に同じアスペクト比を有する細断ＯＲＣ粉体を作製した。６０００ｒｐｍの、網篩を備えたＦｉｔｚ  Ｍｉｌｌを通じてＯＲＣ織物を細断し、続いて、篩振盪機（米国オハイオ州のＷ．Ｓ．タイラー社（W.S. Tyler）、モデル：ＲＸ−２９、ＳＮ：１０−１０４６）を用いて４５、８０、１２０、４００の一連の網篩を通じて篩分けすることによって、細断ＯＲＣ粉体を得た。上述したような光学測定技法を用いて、アスペクト比の特性決定を実施した。
【００４８】
実施例３．粒子のアスペクト比がタップ密度及び流動性に与える影響：ＢＭＰ対細断／剪断粉体
改良されたＵＳＰ  １１７４法（粉体流動）を用いて粒子の流動性を測定した。天秤（メトラー・トレド社（Mettler Toledo）のＥｘｃｅｌｌｅｎｔ  ＸＳ２０４、ＥＴＨＩＣＯＮ  ＢＡ−０４６）の４桁を使用して、ガラス管（外径：０．８ｃｍ、内径：０．６ｃｍ、長さ：３１ｃｍ）を通じて移動するときの粉体の重量を測定した。粉体の流速を、移動時間と総移動距離（４０ｃｍ）から決定した。
【００４９】
ここで表２を参照するが、細断ＯＲＣ粉体とＢＭＰのタップ密度及び流動性の比較が示されている。このデータの分析から示唆されることとして、実質的に同じか又は同様のアスペクト比にて、ＢＭＰは、細断粉体と比べて、より高いタップ密度と、より良好な流動性を示している。より低いアスペクト比におけるＢＭＰの高度な流動性とタップ密度は、いかなるアスペクト比の細断粉体でも得られないものである。
【００５０】
【表２】
2015517388.tif 000004
【００５１】
実施例４．粒子のアスペクト比が血液凝固に与える影響：ＢＭＰ対細断／剪断粉体
本発明のＢＭＰ及び比較例として調製した細断ＯＲＣ粉体は、それぞれ種々のアスペクト比を有するものであり、より長時間のミリング又は細断を伴って上記のように調製され、結果としてより低いアスペクト比をなした。各試料の平均アスペクト比をＳＥＭによって決定した。
【００５２】
次いでこれらの粉体の血液凝固効果を、以下のように、試験管内で実験的に試験した。新鮮なブタの血液を月齢４ヶ月の雌ブタ（４５Ｋｇ）から、数本の４．５ｍＬ  ＢＤバキュテイナに３．２％の緩衝クエン酸ナトリウムと共に収集した。次いでこの血液を食塩水（０．９％  ＮａＣｌ  ＵＳＰ、Ｌｏｔ＃０８２４２０、バクスターヘルスケア（Baxter Healthcare））で、１／１（ｖ／ｖ）の比に希釈した。ＳＴ４凝固分析器を使用して試験管内血液凝固時間を測定した。続いて、２００μＬの希釈血液を収容した各キュベットに、２ｍｇの各試験物品を加えた。各試料を３通りに試験した。
【００５３】
ここで図３及び４を参照すると、試験の結果が、細断ＯＲＣ粉体とＢＭＰに関して凝固時間対アスペクト比として示されている。図４は図３と同じデータを、狭い範囲のアスペクト比に関して示している。提示するデータの分析から示唆されることとして、低アスペクト比において、特に約１〜約１８のアスペクト比において、ＢＭＰは、細断ＯＲＣ粉体と比べて、一層良好な血液凝固を示し、あるアスペクト比では凝固時間が最大で３倍速いものとなっている。
【００５４】
実施例５．粒子のアスペクト比がＯＲＣペーストの圧出力に与える影響：ＢＭＰ対細断／剪断粉体
使用した材料及び方法は以下の通りである。種々のアスペクト比（ＡＲ）を有する０．０９５グラムのＯＲＣ粉体を、ベクトンディッキンソン社（Beckton Dickinson）製の雄型ルーアーロック１ｍＬシリンジに事前に充填した。試料をアダプタと連結し、０．２ｍＬの食塩水［０．９  ＮａＣｌ（水溶液）］を事前に充填した別のベクトンディッキンソン社製の雄型ルーアーロックシリンジと、前後に２０回、移動させて事前に混合し、続いて、３０秒間放置して完全に水和させた。ペーストの圧出力をインストロン試験機（モデル：５５４４）及びロードセル（ＬＣ−１０５）によって測定した。圧出力を、第１の０．１ｍＬの圧出溶体に関して、次いで第２の０．１ｍＬの圧出溶体に対して記録し、その結果を表３に示す。約１〜約５の低いアスペクト比においては、細断ＯＲＣ粉体は食塩水と混合できず、装置の負荷制限内でシリンジから圧出され得なかった。それに対して、ＢＭＰ粉体は、同様のアスペクト比で混合でき、６．７２Ｎ（１．５１ポンド）未満の力でシリンジから分配された。
【００５５】
【表３】
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＊最大負荷（ポンド）；＊＊力がロードセルの最大許容値の近くに達したため測定を中止した。１回目の０．１ｍＬ食塩水の平均圧出力：１．０２Ｎ（０．２３ポンド）。
【００５６】
実施例６．生体内止血実験：ＢＭＰ対比較対照
Ｓｕｒｇｉｃｅｌ  Ｏｒｉｇｉｎａｌ、Ｆｉｂｒｉｌｌａｒ、食塩水と混合したＳＵＲＧＩＦＬＯ（登録商標）止血母材（Hemostatic Matrix）（ＳＵＲＧＩＦＬＯ／食塩水）、及びトロンビンと混合したＳＵＲＧＩＦＬＯ（登録商標）止血母材（Hemostatic Matrix）（ＳＵＲＧＩＦＬＯ／トロンビン）を含む比較対照に関し、そして、ＢＭＰ、及びＢＭＰ  Ｐｌｕｓを含んだ発明的材料（ＢＭＰは上述のようにボールミリングによってＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）織物から作製された粉体である）に関し、以下のブタの生検パンチ脾臓モデルで止血時間（ＴＴＨ）を評価した。ＢＭＰ  Ｐｌｕｓは、上述のようにボールミリングすることによって、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）及びクエン酸カルシウムと混合されたＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）織物でできた粉体である。ＳＵＲＧＩＦＬＯ（登録商標）止血母材（Hemostatic Matrix）は、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｗｏｕｎｄ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ（Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，Ｎ．Ｊ．，Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙの一部門である）から入手可能である。
【００５７】
生検パンチの切開部（長さ６ｍｍ、深さ３ｍｍ）をブタの脾臓に形成した。ここで表４を参照するが、各試験の繰返し回数を１０回（Ｎ＝１０）として、負の対照としてのガーゼを含む７種類の試験物品を創傷に別々に貼り付けた。タンポン挿入法を３０秒間にわたって施し、続いて３０秒間、観察した。止血が達成されなかった場合、更なるタンポン挿入法を施して出血を停止させた。数枚の外科用ガーゼを負の対照として使用した。
【００５８】
【表４】
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【００５９】
止血実験の結果を図５に示す。ＢＭＰ及びＢＭＰ  ＰｌｕｓのＴＴＨは、Ｓｕｒｇｉｃｅｌ  Ｏｒｉｇｉｎａｌ及びＦｉｂｒｉｌｌａｒ（正の対照）よりも速いものであった。加えて、ＢＭＰ  Ｐｌｕｓは、生検パンチモデルにおいてＢＭＰよりも速いＴＴＨを示した。ＢＭＰ  ＰｌｕｓのＴＴＨは、Ｓｕｒｇｉｆｌｏ／トロンビンと同程度に良好であった（平均ＴＴＨ：２分以内）。提示したデータの分析から、本発明のＢＭＰ及びＢＭＰ  Ｐｌｕｓの良好な止血特性が示されている。
【００６０】
実施例７．粘度の特性決定
ＢＭＰを上述（実施例５）のように調製し、ペーストの作製に利用した。６ｍＬの各シリンジに、１グラムのＢＭＰを加えた。プランジャを２．２ｍＬに事前に配置した。次いで、このシリンジを、別のシリンジに連結し、ＢＭＰ／食塩水の混合物を各シリンジとの間で、すぐに使用できる稠度に達するように１０回、前後に移送することによって、２ｍＬの滅菌食塩水と混合した。必要に応じて更なる移送を施した。１グラム／１．６ｍＬ、１グラム／１．８ｍＬ、１グラム／２ｍＬ、及び１グラム／２．２ｍＬの濃度が評価されたが、試料の最初の２つの濃度は混合が非常に困難なものであり、ゲル塊がシリンジに発見された。２．２ｍＬ当たり１グラムの濃度は、１グラム／２ｍＬと比較して過度に希薄であった。提示したデータは１グラム／２ｍＬに対応している。商業的に入手可能なＳＵＲＧＩＦＬＯ（登録商標）止血母材（比較対照）を２ｍＬの滅菌食塩水と混合した。
【００６１】
粘度をシリンジの全体にわたって測定した（出発点（０ｍＬ〜１ｍＬ））。ペルチエ温度制御器を装備した制御歪み回転レオメーター（ＡＲＥＳ（ティー・エイ・インスツルメント社（TA Instrument Inc.））で粘度を測定した。混合した各試料を２５ｍｍの平行板とペルチエ板表面との間に挟み込んだ。すべての測定に対し、２枚の板の間の間隙を１．２５ｍｍに設定した。歪み＝１％、周波数＝１ｒａｄ／ｓ、及び温度＝２５℃とした動的時間掃引試験をすべての測定に用いた。第１の測定データ点を試料の粘度として記録した。三重反復測定を実施し、その結果が図６に記録されている。流動性ＢＭＰをベースとしたペーストの粘度は、Ｓｕｒｇｉｆｌｏの粘度よりも６倍超、高い。より高い粘度は、特定の種類の出血を処置する際に有用となり得る。
【００６２】
実施例８．生体内止血実験：ＯＲＣペースト対比較対照
以下のブタの生検パンチ脾臓モデルで止血時間（ＴＴＨ）を評価した。生検パンチの切開部（長さ６ｍｍ、深さ３ｍｍ）をブタの脾臓に形成した。タンポン挿入法を３０秒間にわたって施し、続いて３０秒間、観察した。ここで、以下のように調製した試験物品の濃度を参照する。各試験の繰返し回数を１０回（Ｎ＝１０）として、９種類の試験物品を創傷に別々に塗布した。止血が達成されなかった場合、更なるタンポン挿入法を施して出血を停止させた。数枚の外科用ガーゼを負の対照として使用した。結果を図７に記載する。粉体形態及びペースト形態における各試験物品の塗布量はそれぞれ０．２ｇ及び１ｍＬである。表５にすべての試験物品が列挙されている。
【００６３】
【表５】
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【００６４】
実施例５で述べたようにＢＭＰを調製した。
【００６５】
止血効果に関するデータが図７に示されており、図７は、ＢＭＰをベースとする粉体及びペースト（ＢＭＰと通常の食塩水との混合物）が良好な止血特性を有することを示唆している。ＢＭＰ／Ｃａ２＋／食塩水及びＢＭＰ／ＣＭＣ／Ｃａ２＋は優れた止血効果を有していた。Ｃａ２＋のＴＴＨが１０分間であることは、止血を達成できず、ＴＴＨ＝１０を割り当てられた試験であることに対応している。
【００６６】
実施例９．生体内止血実験：ＢＭＰ粉体対他の粉体
種々のアスペクト比を有するＢＭＰ対酸化セルロース粉体（ボールミルされたＧｅｌｉｔａＣｅｌ粉体）及びデンプン系の粉体（アリスタ（Arista））の止血効果が図８で比較されている。これらの粉体を作製する方法について以下に述べる。６グラムのＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）織物（エチコン社（Ethicon, Inc.））を１０．２ｃｍ×１０．２ｃｍ（４インチ×４インチ）の大きさに事前に切断し、ミリングプロセスの前に２４時間にわたって真空乾燥させた。各試料を１２個の高密度ＺｒＯ２ボール（直径２０ｍｍ（米国ニュージャージー州クリフトン（Clifton）のグレンミルズ社（Glen Mills Inc.）））と混合し、次いで粉砕ジャー（容量２５０ｍＬ）に入れて密封した。このジャー（総質量＝〜４．６ｋｇ）をラッチブラケットの中へ圧締めし、次いでミル（遊星ボールミルＰＭ１００（米国ペンシルバニア州ニュータウン（Newtown）のレッチェ社（Retsch, Inc.）ＳＮ：１２８０８１２０７Ｈ）上で均衡化した。３００ｒｐｍで３．５分間〜１０分間、同じ回転数でミリングを実施した。ミリングされたＯＲＣ粉体を粉砕ジャーから取り出し、真空オーブン（フィッシャーサイエンティフィック社（Fisher Scientific）のＭｏｄｅｌ  ２８０Ａ  Ｉｓｏｔｅｍｐ真空オーブン、ＳＮ：１５０７０６０６７１１６８）及び真空ポンプ（ラブケアアメリカ社（LabCare America）のＰｕｍｐ  ＰＶ−３５、ＳＮ：３０１０９００１１）にて、６５℃で２．５時間にわたって乾燥させた。結果として得られたＢＭＰを窒素ボックスに入れて保管した。各試料のアスペクト比はＳＥＭによって決定されたものである。同じ粉砕パラメータを用いることにより、１．９２のアスペクト比を有する、ミリングされたＧｅｌｉｔａＣｅｌ粉体は、２時間の細砕プロセスを必要とした。図８に提示するデータの分析から示唆されることとして、ＢＭＰは、粉体の同じアスペクト比で、比較用の粉体に対して、より良好な止血効果を示した。図８のプロットにおけるＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）粉体ＡＲ  ２０のデータ点は、細断ＯＲＣ粉体（比較例）に対応している。
【００６７】
〔実施の態様〕
（１）  圧粉ＯＲＣ粉体（compacted ORC powder）を含んだ止血材料であって、前記圧粉ＯＲＣ粉体は、約１〜約１８の平均アスペクト比を有する粒子を含む、止血材料。
（２）  前記圧粉ＯＲＣ粉体は、ボールミルされたＯＲＣ粉体である、実施態様１に記載の止血材料。
（３）  前記圧粉ＯＲＣ粉体は、転圧加工されたＯＲＣ粉体か又はハンマーミル加工されたＯＲＣ粉体である、実施態様１に記載の止血材料。
（４）  前記止血材料は、添加剤を更に含み、前記添加剤は、ＣＭＣ若しくは他の多糖類、カルシウム塩、抗感染症薬、止血促進薬、ゼラチン、コラーゲン、又はそれらの組み合わせである、実施態様１に記載の止血材料。
（５）  実施態様１に記載の止血材料と、食塩液と、を含む、止血ペースト。
【００６８】
（６）  前記止血ペーストは、１００００Ｐａ・ｓ超の粘度を有する、実施態様５に記載の止血ペースト。
（７）  前記圧粉ＯＲＣ粉体は、少なくとも０．４５ｇ／ｃｍ３のタップ密度を有する、実施態様１に記載の止血材料。
（８）  前記圧粉ＯＲＣ粉体は、少なくとも７．５ｃｍ／ｓの流動性を有する、実施態様１に記載の止血材料。
（９）  前記圧粉ＯＲＣ粉体は、１．７５マイクロメートル〜１１６マイクロメートルの平均粒径を有し、メジアン径は３６マイクロメートルである、実施態様１に記載の止血材料。
（１０）  前記圧粉ＯＲＣ粉体は、約１〜約５の平均アスペクト比、少なくとも０．６７ｇ／ｃｍ３のタップ密度、及び少なくとも７０の流動性を有する粒子を含む、実施態様１に記載の止血材料。
【００６９】
（１１）  実施態様１に記載の止血材料を作製する方法であって、
ＯＲＣ系の材料を圧粉装置の中に導入する工程と、
粉体が約１〜約１８のアスペクト比に達するまで、前記ＯＲＣ系の材料を前記粉体へと圧粉する工程と、を含む、方法。
（１２）  前記ＯＲＣ材料は、ＯＲＣ織物、ＯＲＣ不織布、又は細断ＯＲＣ材料である、実施態様１１に記載の方法。
（１３）  前記圧粉は、ボールミリングによって実施される、実施態様１２に記載の方法。
（１４）  前記圧粉は、転圧によって又はハンマーミリングによって実施される、実施態様１２に記載の方法。
（１５）  前記ＯＲＣ材料を添加剤と混合する工程を更に含み、前記添加剤は、ＣＭＣ、カルシウム塩、抗感染症薬、止血促進薬、ゼラチン、コラーゲン、食塩水、又はそれらの組み合わせである、実施態様１１に記載の方法。
【００７０】
（１６）  創傷を治療する方法であって、実施態様１に記載の止血粉体を患者の前記創傷の上及び／又は中に塗布する工程を含む、方法。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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