(57)【要約】  ｉ）次の式を有する乳酸オリゴマー：2015526413.tif 000053（式中、ｎは２〜２０、２〜１９または２〜１８の整数であり、該乳酸オリゴマーの全重量の約１０〜約２０重量％は、ｎが２に等しいトリマーＨＬ3であり、該乳酸オリゴマーの数平均分子量 Ｍn は約２００〜約５００である）およびii）粘膜付着剤を含む組成物。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｉ）次の式を有する乳酸オリゴマー：
【化１】
2015526413.tif 000051
（式中、ｎは２〜２０、２〜１９または２〜１８の整数であり、該乳酸オリゴマーの全重量の約１０〜約２０重量％は、ｎが２に等しいトリマーＨＬ3であり、該乳酸オリゴマーの数平均分子量Ｍnは約２００〜約５００である）
および
ii）粘膜付着剤
を含む組成物。
【請求項２】
乳酸オリゴマーの数平均分子量Ｍnが約２００〜約４００である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
乳酸オリゴマーのＭnが約２３０〜約３４０である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
乳酸オリゴマーの多分散性指数が約１．４５以上である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
乳酸オリゴマーの多分散性指数が１．４５〜約６または約２〜６である、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
重合度ＰＤｎが多くとも約４．１である、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
重合度ＰＤｎが２．５〜約４．１である、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
重合度ＰＤｎが３〜約４．１である、請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
重合度ＰＤｎが約２〜約３．８である、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
酸のオリゴマーが、乳酸オリゴマーにおけるモノマー単位の数の関数としての％での含量を示す分子量分布曲線における反映として、ｎが１〜１３の範囲内にあるオリゴマー類の範囲を含む、請求項１〜９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
乳酸オリゴマーが、約２００〜約２４０の範囲の数平均分子量、約２９０〜約５００の範囲の重量平均分子量、１．４５〜２．５の範囲の多分散性指数を有する、請求項１〜１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
乳酸オリゴマーが重合度２．５〜３．８を有する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
乳酸オリゴマーが、約２５５〜約４２５の範囲の数平均分子量、約３７０〜５８０の範囲の重量平均分子量、１．４５〜２．５の範囲の多分散性指数を有する、請求項１および４〜１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
乳酸オリゴマーが３〜４．１の重合度を有する、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
粘膜付着剤が、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース(HEC)、ヒドロキシプロピルセルロース(HPC)、エチルヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムを含むカルボキシメチルセルロースおよび微結晶セルロース、ならびにそれらの混合物から選択されるセルロース誘導体である、請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
粘膜付着剤が、
適度に架橋された澱粉を含む澱粉誘導体；
アクリルポリマー；
カルボマーおよびその誘導体（Polycarbophyl, Carbopol（商標）など)；
ポリエチレンオキサイド（PEO）；
キトサン（ポリ−（Ｄ−グルコサミン））；
ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、スクレログルカン、トラガント、ゲラン、キサンタンガムもしくはグアーガムを含む天然ポリマー；
ポリコ−（メチルビニルエーテル／無水マレイン酸）、または
それらの混合物
である、請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１７】
粘膜付着剤がヒドロキシプロピルメチルセルロースである、請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１８】
ヒドロキシプロピルメチルセルロースの粘度が約１０〜約２０ｃｐである、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
乳酸オリゴマーが：
１０〜２０重量％の ＨＬ2(すなわち ｎ＝１)
１０〜２０重量％の ＨＬ4(すなわち ｎ＝３)
１０〜１５重量％の ＨＬ5(すなわち ｎ＝４) 
５〜１５重量％の ＨＬ6(すなわち ｎ＝５)
を含む、請求項１〜１８のいずれかに記載の組成物。
【請求項２０】
乳酸オリゴマーが HL10、HL11、HL12、HL13および HL14 をそれぞれ１〜５重量％含む、請求項１〜１９のいずれかに記載の組成物。
【請求項２１】
乳酸オリゴマーが、次の組成：
７〜１０％のＨＬ1、
１２〜１５重量％のＨＬ2（すなわちｎ＝１）、
１４〜１６重量％のＨＬ3（すなわちｎ＝２）、
１１〜１５重量％のＨＬ4（すなわちｎ＝３）、
１０〜１４重量％のＨＬ5（すなわちｎ＝４）、
８〜１０重量％のＨＬ6（すなわちｎ＝５）、および
漸減する重量％のＨＬ7〜ＨＬ18
を有する OMLA 6 である、請求項１〜２０のいずれかに記載の組成物。
【請求項２２】
乳酸オリゴマーが約２２５〜約２７５の数平均分子量を有する、請求項１、２、４〜１０および１５〜２１のいずれかに記載の組成物。
【請求項２３】
膣投与用にデザインされた請求項１〜２２のいずれかに記載の組成物。
【請求項２４】
固形または半固形組成物の形態にある、請求項１〜２３のいずれかに記載の組成物。
【請求項２５】
タンポン、ヴァギトリウム、膣エアゾル、膣カップ、膣ゲル、膣インサート、膣パッチ、膣リング、膣スポンジ、膣坐剤、膣クリーム、膣乳剤、膣フォーム、膣ローション、膣軟膏、膣散剤、膣シャンプー、膣液剤、膣スプレー、膣懸濁液、膣錠、膣ロッド、膣ディスク、半透過性パッケージングまたはそれらの組合せの形態にある、請求項１〜２４のいずれかに記載の組成物。
【請求項２６】
膣錠の形態にある請求項１〜２５のいずれかに記載の組成物。
【請求項２７】
緩衝剤をさらに含む請求項１〜２６のいずれかに記載の組成物。
【請求項２８】
凍結乾燥剤をさらに含む請求項１〜２７のいずれかに記載の組成物。
【請求項２９】
乳酸オリゴマーが次の式：
【化２】
2015526413.tif 000052
（式中、ｎは２〜２０、２〜１９または２〜１８の整数である）
を有する乳酸オリゴマーであって、
該乳酸オリゴマーの全重量の約１０〜約２０重量％は、ｎが２に等しいトリマーＨＬ3であり、
該乳酸オリゴマーが約２００〜約２４０の範囲の数平均分子量、約２９０〜約５００の範囲の重量平均分子量、１．４５〜２．５の範囲の多分散性指数を有するか；あるいは
該乳酸オリゴマーが約２５５〜約４２５の範囲の数平均分子量、約３７０〜５８０の範囲の重量平均分子量、１．４５〜２．５の範囲の多分散性指数、および３〜４．１の重合度を有する
乳酸オリゴマー。
【請求項３０】
重合度２．５〜３．８を有する請求項２９に記載の乳酸オリゴマー。
【請求項３１】
重合度３〜４．１を有する請求項２９に記載の乳酸オリゴマー。
【請求項３２】
組成物の製造方法が、
i）任意に１種以上の医薬的に許容される賦形剤とともに水を容器中に入れて、医薬的に許容される賦形剤が溶解するまで混合する、
ii) ｉ）からの溶液を約８０℃に加熱する、
iii) 粘膜付着剤を少しずつ加え、加えるたびにゆっくり混合する、
iv）混合物を約５５℃に冷却する、
v) 断続的に均質化しながら上記の容器に乳酸オリゴマーを加える、
vi) v）からの材料を型に充填する、
vii) 充填された型を約−２５℃で冷凍する、そして
viii）vii)から得られた冷凍材料を凍結乾燥する
工程を含む、請求項１〜２８のいずれかで定義された組成物を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、乳酸のオリゴマーを含有する新規な医薬組成物に関するものである。
この組成物は、局所ｐＨの低下が３．８〜５の間に到達するのが好ましい疾病または症状の治療または予防のための使用に適している。そのような疾病または症状は、細菌性、ウィルス性または真菌性の疾患を含む。
【０００２】
この組成物は、特に、女性の感染症のような女性の疾患を治療するのに適している。この組成物は、膣炎を治療するのに有用であることが判明した。
この組成物は、活性成分である乳酸を長時間にわたって放出するので、１週間に１〜２回の投与で、所期の治療効果が得られる。
【背景技術】
【０００３】
婦人科または生殖器官の感染症とは、一般に生殖器官を冒す３つの異なったタイプの感染症をいう。
エンドジーナス感染症は、細菌性膣炎およびカンジドシスを含み、これらは通常、膣中に存在する生物の過剰生育からもたらされる。
【０００４】
エンドゲナス感染症は、世界中で、下部の女性器官の感染症(LGTIs)の最も一般的な型を表し、それらは容易に治療され得る。しかしながら、それらは一般に再発し、そのことが医学的に大きな問題となっている。
医原性感染症は第２のグループを表し、それは感染性の作用物（細菌またはその他の微生物）が、月経の調節、誘発性の吸収、ＩＵＤ装着または分娩中のような種々のルートを介して、生殖器管内へ入ったときに起こる。
【０００５】
最後に、性的に伝達される感染症(ＳＴＩｓ) は、感染したパートナーとの性的行為を介して伝達されるウィルス、細菌または寄生性の微生物のような微生物により惹き起こされる。ＳＴＩｓの中には、ＨＩＶ、クラミジア・トラコーマ、コンジローム・アキュミナタ、梅毒およびナイセリア淋病のような種々の重篤な疾患がある。ＳＴＩｓは、男性および女性の両方に起こり得るが、妊娠中または出産中に母親から子供に伝達されることもあり得る。
【０００６】
細菌性膣炎(ＢＶ) は、最も頻繁に起こる女性の感染症であり、最もありふれた女性の生殖器官の症状である。ＢＶは妊娠中に増える合併症に関連しており、骨盤の感染性疾患の病原および女性がＨＩＶにかかりやすい危険性を含んでいる。その病因については、まだ多くの疑問が残っており、それが感染症の再発防止を複雑にしている。
【０００７】
ＢＶは、嫌気性菌の過剰繁殖および通常のラクトバチルス群の欠乏であり、膣の正常な細菌叢の不均衡を惹き起こす。ＢＶは、周産期前の出産を伴い、早産を惹き起こす。ＢＶの特定および治療は、そのような結果を低減させ得る。ＢＶの再発を予防するために、一連の治療オプションが試みられてきた。
【０００８】
ＢＶの頻繁なエピソードが再感染または再発の結果であるかどうかは、まだ明らかになっていない。ＢＶと性行為との関連は、ＢＶが性的に伝達されることおよび追加的なエピソードが再感染によるということを示唆している。
しかしながら、性的な伝達および再感染の理論を支持する証拠はなく、ＢＶの繰り返されるエピソードの危険因子を検討したいくつかの研究は、それが再発によるものであることを示唆している。
早期の再発が現れる女性は、治療の終期に普通でない退院を訴えがちである。さらに、治療後に治ったと考える自覚症状のない女性は、異常な膣細菌叢をもち続ける。その上、異常さがひどいほど、より早期に再発しやすい。
【０００９】
無害の細菌を用いて病原性の微生物を置き換える細菌治療の価値は、未解決のままである。
【００１０】
性的衝動の欠如した性心理症候および感染の懸念は、細菌性膣炎のエピソード再発およびそれに伴う悪臭の結果として、女性たちにより報告されるだろう。しかしながら、男性パートナーの協同治療は、ＢＶ再発の割合を低下させない。しかしながら、女性の性的パートナーのコンドーム使用は、細菌性膣炎の再発の危険性を低下させるのに役立つだろう。ホルモンによる避妊の採用は、細菌性膣炎の出現率を高めないが、子宮内の避妊器具またはシステムを使う女性では、ＢＶの危険性が増すだろう。
【００１１】
膣の排出物
膣の排出物は通常現れる症候であり、それは生理的または病理的であり得る。ＢＶは泌尿器科医院に通う女性において最も一般的な診断であるが、陰門膣のカンジダ症は女性の生殖人生の間に約７５％の女性が罹る膣排出物のもう一つのありふれた感染性の原因である。
【００１２】
細菌性膣炎のおよそ５０％のケースでは自覚症状がなく、この症状の真の流行は世間でおよそ１０〜３０％である。膣の上皮に移ったラクトバチルスは、感染を防御する役割を担うだろう。通常の膣細菌叢（ラクトバチルス）は、膣のｐＨを３．８〜４．４の間に保つ。膣の分泌物の質および量は、同じ女性でも時によって変わることがある。膣の分泌物には大きな変動があり、個々の女性は彼女自身の正常感覚を有しており、許容できるか過度であるかについて、彼女自身の感覚を有している。
【００１３】
膣の病原性分泌物の主な問題は悪臭である。この臭いは、細菌性膣炎に特有であり、アミン類、主にトリメチルアミンにより惹き起こされる魚の腐敗臭の特徴を有している。その他の臨床的な症状の発現は、過剰な排出および腐敗性の感覚である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
この発明は、２００８年１０月９日に頒布されたWO 2008/119518に開示された発明をさらに発展させたものである。
WO 2008/119518では、乳酸のオリゴマー類およびそれらの治療的および予防的用途が記載されている。しかしながら、そこに記載された製剤は、初期の臨床試験中に予想された速すぎる排出などのような問題を有していたため、投与部位に長期間残留して、１週間に１回ないし２回の投与で済むような、患者に優しい組成物を開発する必要性があった。
【００１５】
上記から明らかなように、女性の感染症、特に細菌性膣炎の処置に使用するのに適しており、かつ現在知られている１日１回以上の投与を必要とする治療方法に比べて、より少ない投与回数を可能ならしめる製剤を開発する必要性があった。
【００１６】
その目的のために、本発明者らは、乳酸のオリゴマー類が使用に適していることを見出した（WO 2008/119518参照）。
一方で上記のオリゴマー類は水性の媒体と接触すると乳酸を放出し、他方で該オリゴマー類は乳酸の貯蔵庫として作用し、すべての乳酸をすぐには放出せず、乳酸の放出は問題のオリゴマーに依存する。
【００１７】
しかしながら、乳酸のオリゴマー類は、平均分子量および多分散性指数により異なった物理的外観を有しており、ある種のオリゴマー類は組成物に加工しやすい。重合の度合い（PDn）も関連している。
【００１８】
望ましい期間内に好ましい効果をもたらし、同時に最終使用者の使用に適した組成物中に該オリゴマーを供給できる、乳酸のオリゴマーを選択することも重要である。
【００１９】
本発明はこれらの問題に向けられており、乳酸オリゴマーの組成物が初期の効果を発揮するかどうかを調べるために、予備的な臨床試験が行われた。
【００２０】
種々の組成物がWO 2008/119518中に記述されている。しかしながら、本発明者らは、１週間に１回の投与を可能ならしめる望ましい持続効果を達成するためには、乳酸オリゴマーがより広い分子量分布、すなわちWO 2008/119518中で期待されたよりも大きな多分散性指数を有していなければならないことを見出した。さらに、重合度（PDn）は４．１より高くてはいけない。
本発明者らは、およそ半固形〜固形の間であり、ほぼ粘着性〜潤滑性の間にある物理的な外観を有する乳酸オリゴマーを選択することが重要であることをも見出した。
このことは、乳酸オリゴマーを使用に適した組成物に加工するために重要である。平均分子量の数値および多分散性指数は、所期の期間の治療効果ならびに医薬組成物の製造を容易にするか、あるいは可能ならしめる物理的な外観を得るのに、重要なパラメーターであるということが予想される。
【００２１】
ここで議論されるように、アムセル（Amsel）の基準は、ＢＶの診断およびＢＶの治療効果を評価する手段としても用いられる。
【００２２】
アムセルの基準は、
i) 均質な分泌物（淡色、白色、黄色）、
ii) 手がかりとなる細胞の存在、
iii) 分泌物に水酸化カリウムを適用したときの魚臭の放出、
iv) 約４．５のｐＨ。
【００２３】
４つの基準のうち３つが満たされると、その患者はＢＶを保有している。
しかしながら、本発明者らは、治療後または治療中の膣内のｐＨが、（上記のその他の基準とともに）治療が成功したかどうかを評価するのに決定的でないことを見出した。
最も重要な基準は、ｐＨの実際の値ではなくて、ｐＨの確実な低下が生じているということのようである。
したがって、上記の基準に関する研究に見られるように、０．５単位またはそれ以上のｐＨ低下が認められれば、その他のアムセルの基準が一つだけあるいは少々満たされなくても、治療は成功したといえる。
【００２４】
それゆえ、ＢＶの治療効果を評価するためには、次の点が試験されるべきである：
i) 均質な分泌物（淡色、白色、黄色）、
ii) 手がかりとなる細胞の存在、
iii) 分泌物に水酸化カリウムを適用したときの魚臭の放出、
iv) ΔｐＨが治療前と治療後の膣内のｐＨの差であるとしたとき、ΔｐＨが０．５未満（すなわち、０．５を含まない）。
もし、４つの基準のうち３つが該当すれば、治療はＢＶに対して効果的でなかったということになる。
【００２５】
本発明の目的は、取扱いおよび患者による膣内挿入が簡単で、しかも効果の持続期間は、（１度以上の投与、あるいは週に２回のように週に１回以上の投与が必要となるような状況もあり得るが）１回または月に１回の投与が（再発の予防のために）充分であるという形態で、乳酸オリゴマーを含有する組成物を提供することである。
さらに、本発明の目的は、量的な変動、崩壊、溶出、安定性などの変動に関して、一般に適用できる要件を満たす再現できる方法で、容易に製造できる組成物を提供することでもある。
【００２６】
本発明の組成物中の乳酸オリゴマーの作用モードは、適用部位における弱酸性の環境を順々に確実にする乳酸を徐々に放出することである。
原理的に、このことは、そのような組成物が、弱酸性の環境を確立することにより恩恵を受けるどのような疾病または症状の治療にも使用できることを意味する。
【００２７】
そのような例は、
i)婦人科の感染症、
ii)細菌、ウィルスもしくは真菌感染症、またはその他の医学的な理由、例えばロイコプラシアもしくは「バーニング・マウス・シンドローム」による口腔粘膜の損傷、
iii) 痔疾、切れ痔、肛門の掻痒または直腸炎のような直腸の疾患または症状、
iv)けが、血液脱出、アトピー性の皮膚炎、乾癬症、アクネ、ロサシア、ウルチカリア、掻痒症、光皮膚炎、多汗症、脱毛症、ならびに細菌感染症、ウィルス感染症、真菌感染症、および外部寄生生物症のような皮膚の疾患または症状、
v)カリエスおよび／または歯周炎および／または口臭の治療または予防、あるいは
vi)分泌欠乏症のような酸の障害において有利な効果が見られる胃腸病
【００２８】
本発明の組成物は、婦人科の感染症の予防および／または治療における使用に特に適している。
婦人科の感染症は、細菌性膣炎、非特異的コルピティス、老人性コルピティス、子宮頚炎、および尿道炎のような細菌感染症であり得る。
それは、またカンジダ症（カンジダ・アルビカンス）、クリプトコッカス症、放線菌症のような真菌感染症、またはヒト免疫不全ウィルス（HIV）、ヘルペス・シンプレックス・ウィルス（HSV）、ヒト・パピローマ・ウィルス（HPV）のようなウィルス感染症でもあり得る。
【００２９】
乳酸の放出は次のとおりである：
【化１】
2015526413.tif 000002
【００３０】
細菌性膣炎（ＢＶ）：その背景および疫学
ＢＶは、悪臭を放つ膣の排出物、４．５より高い膣のｐＨ、陽性のアミン試験、および淡い均質の白色蛍光、および顕微鏡で手がかりとなる細胞の存在、および時には膣の灼熱または疥癬により特徴づけられる。
【００３１】
膣の細菌叢は、正常なラクトバチルス（ＬＢ）が、低減された数のＬＢおよび膣のガルドネレラの過剰繁殖、マイコプラズマ・ホミニス、およびストレプトコッカス、プリボテラ spp、およびモビルンカス spp のような嫌気性菌の菌叢に対して優勢となることによって改善される。
【００３２】
細菌性膣炎は、通常、次の４つのアムセル基準のうちの３つが該当することによって診断される：
１：膣のｐＨが４．５より高い、
２：膣液中に手がかりとなる（膣の上皮）細胞の存在、
３：淡い灰色または白色の均質な分泌物、または
４：ＫＯＨ「ウィッフ」試験の陽性（膣液に１０％水酸化カリウムを加えたときの魚臭の放出）。
【００３３】
ある種の罹患しやすくする因子は、若年、黒人、膣洗浄、喫煙、および IUD 避妊のようなＢＶの危険性が増すことを示している。いくつかの報告は、性的行為、性的パートナーの変更、および多数のパートナーに伴うＢＶに関連している。
【００３４】
細菌性膣炎の管理
メトロニダゾールおよびクリンダマイシンの経口または経膣製剤を使用するとき、女性は当初８０〜９０％の治療応答を示すが、３か月以内に１５〜３０％が再発する。
ラクトバチルス、過酸化水素の生成、膣のｐＨおよび細菌に伴うＢＶの過剰生育の間の関連を考慮すると、これらのうちの一つだけの調整が一部の女性をＢＶの再発から救うこともあり得るが、すべてのケースを解決するには不十分である。
【００３５】
ラクトバチルス、過酸化水素の生成、膣のｐＨおよび細菌に伴うＢＶの過剰生育の間の相互関係はよく知られているが、ＢＶの発症因子は未解決のままである。
【００３６】
この相互関係の一面だけに的を絞った治療は、一部の女性をＢＶの再発から救うかもしれないが、組み合わせたアプローチがより優れている。細菌性膣炎は自覚症状がないこともあり得るので、再発はしばしば治療の失敗と識別できないこともある。したがって、細菌性膣炎の再発は、初期に有効な治療を施すことによって防ぐことができるかもしれない。
【００３７】
酸性化の特性
膣の低いｐＨは、ラクトバチルスの代謝による乳酸の生成、および外陰膣炎を惹き起こす膣の上皮細胞によるグリコーゲンの乳酸への変換に起因している。培養中のラクトバチルスは、その生育媒体をｐＨ３．２〜４．８に酸性化する。そのようなｐＨ領域で、安定した平衡状態が進展して、酸性化が自動的に抑制される。
嫌気性菌はｐＨ４．５以下では生育が乏しくなる。インビボ研究は、細菌を伴ったＢＶの濃度が、膣のｐＨ上昇とともに高くなることを示している。
しかしながら、乳酸と低いｐＨが、過酸化水素よりもこれらの細菌の抑制に、より高い効果をもたらすことが見出された。しかしながら、性行為の後とか月経中のように膣のｐＨが上昇しているときには、細菌の過剰生育が起こり得る。
興味深いことに、低いｐＨはラクトバチルスの上皮細胞への付着にとって重要であるようにみえる。
Gardner および Dukes による初期の研究に示されているように、細菌を伴ったＢＶを健康な膣に接種することによっても、ＢＶが誘発され得る［Gardner HL, Dukes CD． Haemophilus vaginalis vaginitis．Am J Obstet Gynecol 1955;69:962-76］。
【００３８】
かくして、ＢＶ発症の正確なメカニズムは未解決のままである。ＢＶはラクトバチルス（LB）の数の減少および低下した過酸化水素の生成に伴っている。膣ｐＨの上昇および有機体を付随したＢＶの過剰増殖がある。ＢＶ中のラクトバチルス種を産出する過酸化水素の低下を、何が惹き起こしているか、今でも知られていない。
【００３９】
換言すれば、従来、ＢＶを予防ないし治療する主な目標は、膣のｐＨを４．５以下に保つことであると、一般に認められてきた。このことにより、正常なＬＢが再構築されるまで病原性細菌の繁殖を抑制して、ｐＨを維持できるだろう。
しかしながら、本明細書に記載の実施例に見られるように、ＢＶの管理において重要な因子は、ｐＨを最初の値から低くすることであり、結果はｐＨを４．５以下にすることはさほど重要でないことを示している。最も著しく有効なことは、ｐＨそのものを下げることである。
ｐＨが原初の値から０．５ｐＨ単位以上（１．０のように）低下するということは、効果的な治療であることが、実施例で実証された。
したがって、一連の処置後に個々のＢＶ治療を評価する改訂基準は、次のようになるだろう：
i) 均質な分泌物（淡色、白色、黄色）、
ii) 手がかりとなる細胞の存在、
iii) 分泌物に水酸化カリウムを適用したときの魚臭の放出、
iv) 治療から３〜４日後に測定したとき、膣のｐＨ低下が０．５ｐＨ単位未満である。
４つの基準のうち少なくとも３つが該当していれば、その患者はＢＶに罹患している、すなわち治療が有効でなかったことを示している。
【００４０】
一時的なまたは病気予防の基準に基づけば、断続的なｐＨ低減治療は、ＢＶの再発を予防すると考えることもできるだろう。
【００４１】
乳酸オリゴマー含有組成物
本発明は、乳酸オリゴマー含有組成物、該組成物の製造方法、ならびに局所的なｐＨ低下が望まれる症状の治療または予防のための該組成物の使用に関するものである。
そのｐＨは、約３．５〜約５のｐＨ値の範囲まで低下されなければならない。
そのような症状は上記のとおりであり、細菌性膣炎の予防および／または治療を含む。
【００４２】
上記のように、本発明は、WO 2008/119518に報告された知見をさらに進展させたものである。
多くの乳酸オリゴマーおよびそれらを含む組成物が記載されているけれども、本発明者らは次のような最適の性状を有する乳酸オリゴマーを選択する必要があることを見出した。
i) 医薬組成物に加工できること、
ii) 望ましい効果を有すること、
iii) 望ましい作用期間を有すること、および
iv) 患者が使用するのに便利であること。
さらに、主な目的は、適用部位に望ましい期間留まる組成物を開発することであるので、本発明者らは、最終組成物の好ましい粘膜付着性がどのようにして得られるかということに関する技術的な問題に直面した。
【００４３】
これらの問題は、
i)次の式で表される乳酸オリゴマー
【化２】
2015526413.tif 000003
（式中、ｎは２〜２０、２〜１９または２〜１８の整数であり、乳酸オリゴマーの全重量の約１０〜約２０重量％は、ｎが２に等しいトリマー、ＨＬ3であり、および
ii)粘膜付着剤
を含む組成物を提供することにより解決された。
【００４４】
本明細書に記載の実施例に見られるように−そしてWO 2008/119518で予想されたのとは対照的に−（ここで議論されているように、再発が問題でなければ）本発明者らは、乳酸オリゴマーが１回あるいは２回より多くの投与を避けるのに充分な作用時間を達成するための性状を有していなければならないことを見出した。
かくして、数平均分子量は、約２００〜約５００の範囲でなければならず、重合度ＰＤｎは多くても４．１でなければならず、分子量分布は余り狭すぎてはならず、すなわち特定の酸オリゴマーは１〜１３の範囲にあるｎを有するオリゴマー類の範囲を含む。重合分散インデックスは１．４５以上でなければならない。
【００４５】
特に、数平均分子量は約２００〜約２４０の範囲でなければならず、重量平均分子量は約２９０〜約５００の範囲でなければならず、重合分散インデックスは１．４５〜２．５の範囲でなければならない。通常、重合度は２．５〜３．８でなければならない。
【００４６】
数平均分子量は約２５５〜約４２５の範囲でもよく、したがって重量平均分子量は約３７０〜５８０の範囲であり、重合分散インデックスは１．４５〜２．５の範囲である。通常、重合度は３〜４．１でなければならない。
【００４７】
さらに、上記のように、乳酸オリゴマー類は平均分子量および重合分散性によって異なった物理的外観を有する。物理的外観は、液状（低い平均分子量）から半固体状ないし固体状（より高い平均分子量）であり得る。乳酸オリゴマー類のあるものは、組成物に必要な粘膜付着性を付与するのに充分な粘着性を有している。
しかしながら、本発明者らは、たとえ選択された乳酸オリゴマー類がいくらかの粘膜付着性を有していても、組成物が所期の期間投与部位に確実に留まるためには、乳酸オリゴマーと粘膜付着剤との組合せが必要であることを見出した。
【００４８】
乳酸オリゴマーの数平均分子量Ｍnは、約２００〜約５００の範囲である。実施例で見られるように、好ましい結果は、約２００〜約３５０の数平均分子量を有する乳酸オリゴマーで得られた。
【００４９】
上記のように、多分散性指数も比較的速やかな作用発現および効果の持続性を確実にするために重要である。組成物中の乳酸オリゴマーに含まれる低い分子量が速やかな作用発現および短いまたは普通の期間に関与していると信じられている理論にもかかわらず、組成物中の乳酸オリゴマーに含まれる「高い」分子量がより長い作用時間に関与している。
【００５０】
かくして、本発明の組成物は、約１．４５〜約６の多分散性指数を有する乳酸オリゴマーを含んでいる。実施例に見られるように、酸オリゴマーの重合度（ＰＤｎ）が約２．５〜約４．１であるときに、特に酸オリゴマーが３〜３．６の重合度を有するときに、好ましい結果が得られた。
【００５１】
実施例で示されているように、本発明による組成物は：
１０〜２０重量％のＨＬ2（すなわちｎ＝１）
１０〜２０重量％のＨＬ4（すなわちｎ＝３）
１０〜１５重量％のＨＬ5（すなわちｎ＝４）
５〜１５重量％のＨＬ6（すなわちｎ＝５）
の乳酸オリゴマーを含んでいる。
【００５２】
乳酸オリゴマーは、１重量％〜５重量％のＨＬ10、およびＨＬ11；ＨＬ10、ＨＬ11、およびＨＬ12；ＨＬ10、ＨＬ11、ＨＬ12、およびＨＬ13；ＨＬ10、ＨＬ11、 ＨＬ12、ＨＬ13、およびＨＬ14
をそれぞれ含んでいてもよい。
特に興味深いのは、乳酸オリゴマーが次の組成を有するＯＭＬＡ ３、６またはＯＭＬＡ ２２の組成物である：
７〜１０重量％のＨＬ1
１２〜１５重量％のＨＬ2（すなわちｎ＝１）
１４〜１６重量％のＨＬ3（すなわちｎ＝２）
１１〜１５重量％のＨＬ4（すなわちｎ＝３）
１０〜１４重量％のＨＬ5（すなわちｎ＝４）
８〜１０重量％のＨＬ6（すなわちｎ＝５）、および
ＨＬ7‐ＨＬ18の重量％の低下。
【００５３】
この乳酸オリゴマーは、図３（ＯＭＬＡ ３およびＯＭＬＡ ６）ならびに図５（ＯＭＬＡ ２２）にも詳細に記載されており、そこでは数平均分子量および重合度が記載されている（ＯＭＬＡ ３：Ｍｎは２５８、ＰＩは１．４８そしてＰＤｎは３．３３；ＯＭＬＡ ６：Ｍｎ ３１３、ＰＩは１．５０およびＰＤｎ ４．１；ならびにＯＭＬＡ ２２：Ｍｎ ２５５およびＰＤｎ ３．２９またはＭｎ ２６５、ＰＩは１．４６およびＰＤｎ ３．４３）。
【００５４】
上記のように、本発明による組成物中の重要な試剤は、粘膜付着剤である。乳酸オリゴマーと粘膜付着剤の粘膜付着性が組み合わさった効果により、適用部位（例えば膣内）へ投与した後、適用部位における比較的少量の体液を利用して粘膜付着性となり、充分な治療効果をもたらす期間、粘膜に付着する組成物を得ることを可能ならしめた。
【００５５】
粘膜付着性（すなわち生体付着性）は、合成および天然の高分子物質が体内の種々の粘膜表面に付着するプロセスとして定義される。ある分子が粘膜付着性を有しているか、あるいはそのような粘膜付着性の物質が医薬製剤または組成物中に構成成分として含まれていると、薬剤の局所作用または粘膜細胞による薬剤の吸収が高められ、あるいは持続化され得る。
さらに、分子内に粘膜付着性があったり、あるいは粘膜付着性の成分が含まれていたりすると、適用部位における薬剤の放出および作用が長期間にわたって増強され得る。組成物が望ましい長期間にわたって適用部位に留まることも重要である。
【００５６】
粘膜付着剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、エチルヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムを含むカルボキシメチルセルロース、および微結晶性セルロース、ならびにそれらの混合物から選択されるセルロース誘導体であってもよい。
【００５７】
個々のセルロース誘導体は、次のとおりである：
ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）：
メトロース-60-SH-15、メトロース-60-SH-50、メトロース-60-SH-10000、メトロース-65-SH-50、メトロース-65-SH-400、メトロース-65-SH-1500、メトロース-90-SH-400、メトロース-90-SH-4000、メトロース-90-SH-15000、メトロース-90-SH-100000、ファルマコート606、信越、東京、日本；しかしながら、以下に述べるように、粘度が10〜20 cP の範囲にあるＨＰＭＣが好ましい。
【００５８】
メチルセルロース（ＭＣ）：
メトロースSM-4 (MC1)、メトロース SM-15 (MC2) メトロース SM-100 (MC3), メトロースSM-400 (MC4)、メトロース SM-1500 (MC5)、メトロース SM-4000 (MC6)、信越；最初に挙げられた３つのメチルセルロースが好ましい。
【００５９】
クロスカルメロースナトリウム（ＣＭＣ）：
低粘度ＣＭＣ（CMC1）、中粘度ＣＭＣ（CMC2）、高粘度ＣＭＣ（CMC3）、シグマ‐アルドリッチ、セントルイス、アメリカ
【００６０】
ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）：
ナトロソール250 HX、ハーキュルズ、ウィルミントン、アメリカ
【００６１】
粘膜付着剤は、次のものであってよい。
適度に架橋したデンプンを含むデンプン誘導体；
アクリルポリマー；
カルボマーおよびその誘導体（ポリカーボフィル、カーボポール（商標）、など）；
キトサン（ポリ−（Ｄ−グルコサミン）；
ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、スクレログルカン、トラガカント、ゲラン、キサンタンガムまたはグアーガムを含む天然ポリマー；
ポリコ（メチルビニルエーテル／無水マレイン酸）、およびそれらの混合物、ならびにそれらと一つ以上の上記のセルロース誘導体。
【００６２】
実施例に見られるように、粘膜付着剤がヒドロキシプロピルメチルセルロースであるときに、好ましい結果が得られた。
【００６３】
ヒドロキシプロピルメチルセルロース (ＨＰＭＣ) は、ヒプロメロース（hypromellose）（米国薬局方）またはヒプロメロースム（ヨーロッパ薬局方）とも表される。その化学名は、セルロース  ２−ヒドロキシプロピルメチルエーテルである（CAS 9004-65-3）。置換パターンによって、ＨＰＭＣは異なったタイプに分類される：
【００６４】
【表１】
2015526413.tif 000004
【００６５】
さらに、個々のタイプは、多くの異なった粘度のタイプで入手できる（例えば、Handbook of Pharmaceutical Excipients、第４版、PhP Press、2003参照）。かくして、タイプ 2910 は、３〜１５cP の範囲の粘度、より詳細には次の粘度：３、４．５、６および１５cPを有する品質で入手できる（例えば、日本の信越化学から入手可能）。その粘度は見かけの粘度である。ＨＰＭＣの粘度測定に関する詳細は、Handbook of Pharmaceutical Excipients、第４版、PhP Press, 2003 に示されているように、２％ w/vの水溶液について２０℃での測定である。
【００６６】
実施例で報告されている興味深い結果は、粘度１５ｃＰを有するタイプ 2910が用いられたときのものである。
当業者は、本明細書に記載された実施例に基づいて、特にそこに示された結果を参考にして、粘膜付着剤、特にＨＰＭＣと乳酸オリゴマーとの他の組合せを用いるために、必要な調節を行うことができる。
【００６７】
かくして、本発明の組成物は、粘膜付着剤としてＨＰＭＣを含むことができ、ヒドロキシプロピルメチルセルロースの粘度は１０〜２０ｃＰである。
【００６８】
組成物中の粘膜付着剤の濃度は、１０〜６５重量％、２０〜６０重量％、３０〜５０重量％、あるいは３５〜４５重量％の範囲であってよい。
特に興味深い実施例では、組成物中の粘膜付着剤の濃度が３９〜４２重量％である（実施例９）。
【００６９】
ヒドロキシプロピルメチルセルロースが用いられるとき、それは通常５〜６５重量％、２０〜６０重量％、３０〜５０重量％あるいは３５〜４５重量％である。
【００７０】
実施例に示されているように、好ましいｐＨ低下効果は、本発明の組成物を用いた臨床試験で得られている。
さらに、上記の組成物は、適用部位に留まっていて、脱落したり排出されたりしなかった。
上記の臨床試験では、さらに、ＢＶに罹患している女性が、本発明の組成物を用いた１回だけの治療、すなわち１回だけの投与で、有効に治療されたことを確認している。いくつかの症例では、投与が１週間に１回ないし２回、通常１回だけでよかった。再発が予想されるケースでは、月に１回の治療を繰り返すことが勧められる。
【００７１】
本発明による組成物は、一つ以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでいてもよい。
【００７２】
医薬的に許容される賦形剤は、担体、希釈剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、粘度調節剤、保存剤、ゲル化もしくは膨潤剤、界面活性剤、乳化剤、懸濁化剤、坐薬基剤、ヴァギトリーもしくはペッサリー、クリーム、軟膏、ゲル、ローション、シャンプー、泡、スプレーなどの基剤からなる群から選択される。
医薬的に許容される賦形剤の個々の選択は、個々の形態ないし製剤、例えば投与形態による。
当業者は、例えば Remington's Pharmaceutical Sciences（Gennaro, Alfonso R., ed., 18. ed., 1990, xvi, Mack, ISBN: 0-912734-04-3）中にガイダンスを見出すことができる。
【００７３】
最終の製剤は、乳酸塩、燐酸塩、コハク酸塩、リジン塩、酢酸塩、シピオネート、吉草酸塩、ヘミコハク酸塩、酪酸塩、もしくはトロメタモール塩単独またはこれらの組合せのような、１種もしくは数種の医薬的に許容される塩を含んでいてもよい。
各投与製剤に含まれる乳酸オリゴマーの量は、投与単位当たり０．０１ｍｇ〜５０ｇの範囲でよいが、好ましくは０．５ｍｇ〜５ｇである。
実施例に示されているように、好ましい投与量は約２５０ｍｇ〜約１ｇ、例えば６００ｍｇである。すべての投与量が、通常、組成物中に含まれている。
上記のように、重要な特徴は、ｐＨを低下させることであって、組成物が正常な生理学的ｐＨを復元するのに有効である必要はないが、本発明の組成物は膣内の正常な生理学的ｐＨを復元することができる。
ｐＨの低下は、トリメチルアミンの生成を介する特徴的で不快な膣炎の悪臭を引き起こす嫌気性細菌の数を減少させる。
【００７４】
上記の組成物は、少なくとも５重量％の乳酸オリゴマーを含む。実施例に見られるように、乳酸オリゴマーの含量は、通常２０〜８０重量％の範囲であり、特に２０〜５０重量％の範囲である。
いくつかの実施例では、最終組成物中の濃度は、３０〜４５重量％である。特に興味深い実施例では、組成物中の乳酸オリゴマーの濃度は、３５〜３６重量％である（実施例９）。
【００７５】
本発明の組成物中の乳酸オリゴマーの含量は、約200〜2000 mgの乳酸、特に500〜 1000 mgの乳酸に相当する。特に興味深い実施例では、乳酸オリゴマーの含量は、700 mgの乳酸に相当する（実施例９）。
【００７６】
ある実施形態において、１種以上の乳酸オリゴマーは、室温で水に曝されたとき、少なくとも１６時間、少なくとも２０時間、少なくとも２４時間、少なくとも３６時間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも６日間、少なくとも７日間のように、少なくとも８時間、あるいは少なくとも１２時間以上にわたって、乳酸を溶出し続ける。
【００７７】
組成物が婦人科の用途に意図されている場合には、該組成物は、膣内または膣を介した適用を含む膣投与用に設計される。
【００７８】
組成物は固体状、その用途によって、半固体状あるいは液状であってもよい。
【００７９】
個々の剤形は、それぞれの投与経路によって選択されるべきである。
したがって、（胃腸器官への）経口投与用には、例えば固形の投与形態（例えば錠剤、カプセル剤、サシェット）、散剤、顆粒剤、丸剤、ペレットなどのような半固形もしくは固形の組成物が好ましい。
局所投与もしくは口腔への投与には、ゲル、クリーム、軟膏、ローション、散剤、パッチ、歯磨き、口腔洗浄剤などが適している。
当業者は、そのような製剤の調製や医薬的に許容される適当な賦形剤の選択に際して、Remington's Pharmaceutical Sciences 中の手引きを見出すだろう。
【００８０】
特別な観点において、組成物は膣へ投与されるように設計される。そのような場合には、次の投与形態が適している：タンポン、ヴァギトリウム、膣エアゾル、膣カップ、膣ゲル、膣インサート、膣パッチ、膣リング、膣スポンジ、膣坐剤、膣クリーム、膣乳剤、膣フォーム、膣ローション、膣軟膏、膣散剤、膣シャンプー、膣液剤、膣スプレー、膣懸濁液、膣錠、膣ロッド、膣ディスク、膣用器具、半浸透性パッケージングおよびそれらの組合せ。
実施例に見られるように、適した組成物は膣錠の形態にある。
【００８１】
本発明の膣錠は、緩衝剤またはｐＨ調整剤、充填剤、結合剤、凍結乾燥助剤、あるいは錠剤の製造工程および／または凍結乾燥工程を含む製造工程において通常用いられるその他の医薬的に許容される賦形剤を含んでいてもよい。
【００８２】
適当な緩衝剤またはｐＨ調整剤は、ｐＨを約３〜約５に調整するのに適した医薬的に許容される緩衝剤であってよい。
【００８３】
適当な剤は、乳酸塩（例えば乳酸ナトリウム）、酢酸塩、クエン酸塩、マロン酸塩、リン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩などを含む。
実施例に見られるように、緩衝剤またはｐＨ調整剤としては乳酸塩が好ましい。この方法において、その剤は乳酸オリゴマーのモノマーと同一であり、緩衝剤のペアーが乳酸／乳酸オリゴマー／乳酸塩であるという点で有利である。
【００８４】
ｐＨ調整剤の緩衝剤は、酸性環境のより速やかな回復を得るために、４より低いような、約５より低いｐＨをもたらし、治療応答およびラクトバチルスの再生育を最適化する。
緩衝剤のｐＨ低下効果は、組成物が投与されるときの適用部位におけるｐＨ値に依存する。
【００８５】
実施例から明らかなように、乳糖は好ましい賦形剤である。乳糖は充填剤または凍結乾燥助剤であるが、当業者は乳糖をどのようにしてその他の賦形剤と置き換えるかを知っているので、本発明は乳糖の使用に限定されるものではない。その他の適当な賦形剤は、例えばマルトースおよびトレハロースである。
【００８６】
乳糖またはそれと均等な物質の濃度は、通常５〜３５重量％の範囲である。特に、上記の濃度は本発明の組成物中、５〜２０重量％または５〜１５重量％の範囲内である。
実施例９に見られるように、その濃度は約９〜１０重量％である。例えば、スクロース、ラクチュロース、セロビオースなどのようなその他のジサッカライド類も本発明での使用に適している。
本発明の組成物において、ジサッカライドは通常、組成物の適当な構造に寄与する。
【００８７】
乳酸オリゴマーは、コントロールされた医薬放出送達システムとしての器具中に組み込まれていてもよい。
組成物は、例えばラクトバチルスにとって生育維持の源として役立つグリコーゲンもしくは前駆体またはそれらの誘導体を含んでいてもよい。
【００８８】
組成物は、ラクトバチルス・アシドフィルスまたはそれに似た種のような生きた微生物の形態にあるプロバイオティクスを含んでいてもよく、それは適当量投与されたとき、ラクトバチルス優勢膣細菌叢のラクトバチルス株再生をもたらし、患者に健康という利益を授ける。
【００８９】
医薬的に許容される賦形剤は、親油性または親水性の担体であってもよい。親油性担体の例は、ワックス、オイル、イソプロピルミリステート、固形のトリグリセライド類およびココアバターである。親水性担体の例は、グリセロール、プロピレングリコール、ポリオキシエチレングリコールである。
【００９０】
病原−抗粘着剤
組成物は、一つ以上の病原−抗粘着剤をさらに含んでいてもよい。膣の環境において有利な酸性化の性質を与えるラクトバチルスは、膣の粘膜に付着性でない。しかしながら、病原性の真菌類は粘膜に付着性を有しており、病原性の細菌は粘膜に接触して、通常の健康な膣粘膜の保護ライニングを退化させる。
このことは、敏感な患者における膣炎の再発の危険を高めるかもしれない。したがって、製剤は、そのような病原体による粘膜付着を防止して、細菌性膣炎の予防、抑制および治療に有利な１種または数種の化合物を含む。
【００９１】
本発明は、病原性の微生物、特に嫌気性細菌および真菌の粘膜付着を防ぐ１種または数種の担体コア物質を含んでいてもよい。抗付着剤は、付着を防ぐバリヤーとして作用するか、またはすでに付着している微生物の脱離を誘発する剤として作用する物質であってもよい。
脱離を誘発する抗付着剤の例は、マンノース、ラクトース、キシリトールおよびその他の糖アルコール類であってよい。
【００９２】
上記の病原−抗粘着剤は、マンノース、ラクトース、キシリトールおよびその他の糖アルコールからなる群から選択することができる。ここに述べられているように、ラクトースは他の目的にも役立つが、抗粘着剤としてのみ存在するときには、その濃度は、他の病原−抗粘着剤と同じ、すなわち最終組成物の０．０１〜２０重量％の範囲内であってよい。
【００９３】
抗菌性
月経の周期を通じた細菌の研究は、非ＬＢ菌種の濃度が月経時に、より高くなっていたことを示した。したがって、膣細菌叢の不安定性があるので、そのときに細菌の過剰生育の可能性がある。
【００９４】
組成物に抗菌性の成分を加えるか含ませるというアイデアは、病原性の細菌が膣のムチン・ライニングを退化させる加水分解酵素を生成するということである。
病原体のこの効果は、正常な膣粘膜の保護ライニングを損傷する。
【００９５】
組成物は、クリンダマイシンまたはメトロニダゾールのような抗菌剤のような１種以上の抗微生物剤、茶の木油のような精油類、Hg、Cu、Pb または Ag のようなカチオンまたは元素、ポリエン抗真菌剤、イミダゾール、トリアゾール、アリルアミン類、エチノカンジン、アシクロビル、アマンタジン、アルコール類、４級アンモニウム化合物類、ホウ酸、クロルヘキシジングルコネート、過酸化水素、ウレア過酸化水素、ヨウ素、マーキュロクロム、オクテニン２塩酸塩、フェノール性（石炭酸）化合物類、塩化ナトリウム、次亜塩素酸ナトリウム、ノンオキシノール、ならびにこれらの組合せおよび／または混合物を含んでいてもよい。
H2O2 のような酸素添加化合物は、細菌性の膣炎に特徴的な病原性の嫌気性菌にとって不利な環境をもたらすだろう。加えて、H2O2 のようないくつかの酸素添加化合物は、病原菌に対する抗菌性を加えることもできる。それ自体が H2O2 を産生するラクトバチルスは、例えば H2O2 の悪影響が少ない。
【００９６】
抗菌剤は、当業者に認められた適当な濃度で用いられ得る。抗菌剤の濃度は、組成物の0.01〜50重量％、0.01〜25重量％、0.05〜25重量％、0.1〜10重量％、0.5〜5重量％のように、0.01重量％以上であってよい。
【００９７】
本発明の組成物は、クリンダマイシン、テトラサイクリン、アモキシシリン、アンピシリン、エリスロマイシン、ドキシサイクリン、ルメフロキサシン、ノルフロキサシン、アフロキサム、シプロフラキシン、アジトロマイシン、セフルトキシンおよびクロルキナルドールからなる群から選択される抗菌剤をさらに含んでいてもよい。
【００９８】
本発明の組成物は、ここに記載されているような婦人科の感染症の予防および／または治療のための１種以上の抗菌剤を含んでいてもよい。
【００９９】
そのような抗菌剤は、クリンダマイシン、テトラサイクリン、アモキシシリン、アンピシリン、エリスロマイシン、ドキシサイクリン、ルメフロキサシン、ノルフロキサシン、アフロキサム、シプロフラキシン、アジトロマイシン、セフルトキシンからなる群から選択され得る。
【０１００】
抗菌剤の量は、１投与当たり5 mg〜1000 mgの範囲でよい。
【０１０１】
抗菌剤は、テトラサイクリン、テトラサイクリン、ドキシサイクリン、アジスロマイシンまたはエリスロマイシンからなる群、あるいは１種以上のブロード・スペクトラムの抗菌剤から選択することもできる。
【０１０２】
ブロード・スペクトラムの抗菌剤は、ゴノレアまたはクラミジア感染症の予防および／または治療のために、クリンダマイシン、テトラサイクリン、アモキシシリン、アンピシリン、エリスロマイシン、ドキシサイクリン、ルメフロキサシン、ノルフロキサシン、アフロキサム、シプロフラキシン、アジトロマイシン、セフルトキシンからなる群から選択され得る。
本発明によるさらなる実施態様において、ブロード・スペクトラムの抗菌剤の量は、１投与当たり100 mg〜3000 mgの範囲内である。
【０１０３】
ブロード・スペクトラムの抗菌剤は、ゴノレアの予防および／または治療のために、テトラサイクリン、アモキシシリン、アンピシリン、ルメフロキサシン、ノルフロキサシン、アフロキサム、シプロフラキシン、アジトロマイシンまたはセフルトキシンからなる群からも選択され得る。
本発明のさらなる実施態様において、ブロード・スペクトラム抗菌剤の量は、１投与当たり、400 mg〜3000 mgの範囲内である。
あるいは、ブロード・スペクトラムの抗菌剤は、クラミジア感染症の治療のために、テトラサイクリン、ドキシサイクリンおよびエリスロマイシンからなる群から選択され得る。
さらなる実施態様において、ブロード・スペクトラム抗菌剤の量は、１投与当たり100 mg〜2000 mgの範囲内である。
さらなる実施態様において、製剤はタンポンの形態にある。
【０１０４】
組成物は、テトラサイクリン、ドキシサイクリンおよびエリスロマイシンからなる群から選択される抗クラミジア剤を含んでいてもよい。
【０１０５】
組成物は、ミコナゾール、テルコナゾール、イソコナゾール、フェンチコナゾール、フルコナゾール、ナイスタチン、ケトコナゾール、クロトリマゾール、ブトコナゾール、エコナゾール、チオコナゾール、イトラコナゾール、5-フルオラシルおよびメトロニダゾールからなる群から選択される抗真菌剤をさらに含んでいてもよい。
【０１０６】
もう一つの実施態様において、抗真菌剤の量は、カンジダ症の治療のために、１投与当たり0.1 mg〜2000 mgの範囲内である。
さらなる実施態様において、一つ以上の抗真菌剤は、ケトコナゾール、ミコナゾールおよびメトロニダゾールからなる群から選択され、該抗真菌剤はタンポンに組み込まれていてもよい。
組成物は、殺精子剤を含むこともできる。
【０１０７】
本発明の組成物は、個々の投与経路および投与形態に応じて選択される、医薬的に許容される賦形剤を含んでいてもよい。
当業者は、関連の医薬教科書の手引きに従って、そのような賦形剤を選択することができるだろう。
【０１０８】
特定の組成物
本発明の特定の組成物は、次のとおりである：
【０１０９】
20〜80重量％の乳酸オリゴマー
2〜35重量％の凍結乾燥剤／充填剤
20〜60重量％の粘膜付着剤
【０１１０】
20〜80重量％の乳酸オリゴマー
2〜20重量％の凍結乾燥剤／充填剤
20〜60重量％の粘膜付着剤
【０１１１】
20〜70重量％の乳酸オリゴマー
5〜15重量％の凍結乾燥剤／充填剤
20〜50重量％の粘膜付着剤
【０１１２】
30〜70重量％の乳酸オリゴマー
5〜15重量％の凍結乾燥剤／充填剤
30〜50重量％の粘膜付着剤
【０１１３】
20〜60重量％の乳酸オリゴマー
5〜15重量％の凍結乾燥剤／充填剤
20〜50重量％の粘膜付着剤
【０１１４】
30〜60重量％の乳酸オリゴマー
5〜15重量％の凍結乾燥剤／充填剤
30〜50重量％の粘膜付着剤
【０１１５】
30〜50重量％の乳酸オリゴマー
7〜12重量％の凍結乾燥剤／充填剤
35〜50重量％の粘膜付着剤
【０１１６】
30〜40重量％の乳酸オリゴマー
7〜12重量％の凍結乾燥剤／充填剤
35〜45重量％の粘膜付着剤
【０１１７】
約35〜36重量％の乳酸オリゴマー
約9〜10重量％の凍結乾燥剤／充填剤
約35〜45重量％の粘膜付着剤
【０１１８】
上記の乳酸オリゴマーは、ここに記載されているとおりである。
【０１１９】
上記の凍結乾燥剤／充填剤はラクトースであってよい。
また、上記の粘膜付着剤は HPMC、特に HPMC 15cP であってよい。
上記の組成物は、一つ以上のｐＨ調整剤または緩衝剤を含んでいてもよい。
存在するときには、そのような剤の濃度は、通常、約2〜約20重量％、約5 〜約20重量％または約10〜約15重量％である。
【０１２０】
さらに、上記の組成物は、乳酸ナトリウムのような緩衝剤を、5〜20重量％、特に14〜15重量％のように、10〜20重量％の濃度で含んでいてもよい。
より特定の実施例が以下に示される。
【０１２１】
乳酸オリゴマー
本発明は、特定の乳酸オリゴマーに関するものでもあり、該オリゴマーは本発明者らが知るかぎり、新規な化合物である。
より詳細には、本発明は以下のものを提供する。
【０１２２】
次の式を有する乳酸オリゴマー
【化３】
2015526413.tif 000005
ここで、ｎは２〜２０、２〜１９または２〜１８の整数であり、該乳酸オリゴマーの全重量の約１０〜約２０重量％はｎ＝２を有するトリマーＨＬ3である。さらに、数平均分子量は約２００〜約５００の範囲内であり、重合度ＰＤｎは多くとも４．１であり、分子量分布は狭すぎず、特定の酸オリゴマーはｎが１〜１３の範囲にあるオリゴマー類の範囲を含み、多分散性指数は１．４５以上である。
【０１２３】
特に、数平均分子量は約200〜約240であり、重量平均分子量は約290〜約500の範囲内であり、多分散性指数は1.45〜2.5の範囲内であり、重合度は2.5〜3.8である。
【０１２４】
数平均分子量は約255〜約425の範囲内であってもよく、重量平均分子量は約370〜580の範囲内であってもよく、多分散性指数は1.45〜2.5の範囲内であってもよく、重合度は3〜4.1である。
【０１２５】
上記の仕様を満たし得る構成を有する特定の乳酸オリゴマー類を以下に示す。
本発明の乳酸オリゴマーは：
10〜20重量％のHL2 (すなわちn=1)
10〜20重量％のHL4 (すなわちn=3)
10〜15重量％のHL5 (すなわちn=4)
5〜15重量％のHL6 (すなわちn=5)
を含む。
【０１２６】
本発明の乳酸オリゴマーは、HL10およびHL11；HL10、HL11およびHL12；HL10、HL11、HL12およびHL13；HL10、HL11、HL12、HL13およびHL14をそれぞれ1〜5重量％含んでいてもよい。
【０１２７】
次に示すより詳細な乳酸オリゴマー類は、約255〜約425の範囲の数平均分子量を有していて、上記の条件を満たしている。
【０１２８】
乳酸オリゴマー OMLA 3 は、次の構成を有している：
7〜10重量％のHL1、
12〜15重量％のHL2 (すなわち n=1)
14〜16重量％のHL3 (すなわち n=2)
11〜16重量％のHL4 (すなわち n=3)
10〜15重量％のHL5 (すなわち n=4)
7〜10重量％のHL6 (すなわち n=5)、および
漸減する重量％のHL7〜HL18 。
【０１２９】
本発明の乳酸オリゴマーは、次の式を有する。
【化４】
2015526413.tif 000006
ここで、
約7.5のように 7〜10重量％のHL1
約14のように 12〜15重量％のHL2 (すなわち n=1)
約15.5のように 14〜16重量％のHL3 (すなわち n=2) 
約14のように 11〜16重量％のHL4 (すなわち n=3)
約13のように 10〜15重量％のHL5 (すなわち n=4)
約9のように 7〜10重量％のHL6 (すなわち n=5)、および
漸減する重量％のHL7〜HL18 。
【０１３０】
本発明の乳酸オリゴマー OMLA 6 は、次の構成を有している。
3 〜 10重量％のHL1
7 〜 15重量％のHL2 (すなわちn=1)
10 〜 15重量％のHL3 (すなわちn=2)
10 〜 15重量％のHL4 (すなわちn=3)
9 〜 15重量％のHL5 (すなわちn=4)
7 〜 12重量％のHL6 (すなわちn=5)および
漸減する重量％のHL7〜HL18
【０１３１】
本発明の乳酸オリゴマーは、次の式を有する。
【化５】
2015526413.tif 000007
ここで、
5.5のように 3 〜 10重量％のHL1
9.5のように 7 〜 15重量％のHL2 (すなわちn=1)
12のように 10 〜 15重量％のHL3 (すなわちn=2)
12のように 10 〜 15重量％のHL4 (すなわちn=3)
11のように 9 〜 15重量％のHL5 (すなわちn=4)
9のように 7 〜 12重量％のHL6 (すなわちn=5)および
漸減する重量％のHL7〜HL18 。
【０１３２】
本発明によるもう一つの乳酸オリゴマーは、次の構成を有するOMLA 22である。
7 〜 9重量％のように 5 〜 10重量％の HL1
13 〜 14重量％のように 12 〜 15重量％の HL2 (すなわちn=1)
15 〜 16重量％のように 10 〜 20重量％の HL3 (すなわち n=2)
約14重量％のように 10 〜 17重量％の HL4 (すなわち n=3)
約12重量％のように 9 〜 15重量％の HL5 (すなわち n=4)
約9重量％のように 7 〜 12重量％の HL6 (すなわち n=5)および
漸減する重量％の HL7〜HL18 。
【０１３３】
次の式を有する本発明の乳酸オリゴマー
【化６】
2015526413.tif 000008
ここで、
約5〜約8重量％は n=0であり、
約9〜約14重量％は n=1であり、
約12〜約16重量％は n=2であり、
約12〜約14重量％は n=3であり、
約11〜約13重量％は n=4であり、
約8〜約10重量％は n=5であり、
約6.5〜約8.5重量％は n=6であり、
約5〜約7重量％は n=7であり、
約4〜約6重量％は n=8であり、
100重量％までの残りは、n=9、n=10、n=11、n=12、n=13、n=14、n=15、n=16および／またはn=17を有する１種以上のオリゴマー類である。
【０１３４】
上記の乳酸オリゴマーの数平均分子量 Mn 、重量平均分子量 Mw、多分散性指数および重合度は、前記のとおりである。
【０１３５】
本発明の乳酸オリゴマーは、図 3 (OMLA 3 および 6) および図 5 (OMLA 22) にも詳細に記載されており、そこでは数平均分子量および多分散性が示されている(OMLA 3: Mn は 258 であり、PDn は 3.33である；OMLA 6: Mn は 313 であり、PDn は 4.1である；OMLA 22: Mn 255 および PDn 3.29 または Mn 265 および PDn 3.43)である。
【０１３６】
本発明の乳酸オリゴマー類は、本発明による乳酸化合物類のオリゴマー類の光学異性体のすべての組合せを含む。（例えば R および S エナンチオマー類、D- および L-フォーム類）ならびにラセミ、ジアステレオマー、メソおよびそのような異性体との他の混合物。
【０１３７】
さらに、乳酸オリゴマー類は、それに対応するエステル類、アミド類、チオエステル類または塩類に変換されていてもよい。乳酸オリゴマー類の塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムもしくはアンモニウムまたはトロメタモール塩のような、医薬的に許容されるいずれの塩であってもよい。
さらに、乳酸オリゴマー類は、金属または高分子化合物とのコンプレックスであってもよい。
【０１３８】
上記の乳酸オリゴマーは、0.1 〜 50重量％、1 〜 50重量％、1 〜 30重量％または 5 〜 30重量％のように、室温で少なくとも１重量％の水溶性を有する。
乳酸オリゴマー類の水溶性は、オリゴマーの長さに依存している。その上、その溶解性は希アルカリ溶液中で高められ得る。
【０１３９】
本発明の組成物の製造方法
本発明は、ここに記載された組成物の製造方法をも提供するものであり、該方法は次の工程を含む。
【０１４０】
i) 任意に１種以上の医薬的に許容される賦形剤とともに、水を約８０℃に加熱する、
ii) 粘膜付着剤を少しずつ加え、加えるたびにゆっくり混合する、
iii) 混合物を冷却する、
iv) 断続的に均質化しながら乳酸オリゴマーを加える、
v) iv)からの材料を型に充填する、
vi) 充填された型を冷凍する、そして
vii) vi)で得られた冷凍材料を凍結乾燥する。
【０１４１】
上記の製造方法において、凍結乾燥が好適な製造工程であることが判明した。しかしながら、水溶液中のすべての成分の混合物を凍結乾燥し、得られる材料を打錠して錠剤にすることもできる。
【０１４２】
上記の製造方法は、以下の実施例中に詳細に記載されているが、その他の製造方法も採用し得る。
【０１４３】
定義
「乳酸オリゴマー」および「OMLA」という語は、同意語として用いられており、ここで定義されるように、式Ｉで表される乳酸のオリゴマー類を意味する。
【０１４４】
しかしながら、乳酸のオリゴマー類の使用に関連して、オリゴマー類の小さな構造上の変更は、乳酸を放出するという能力に影響を与えないということが期待される。
したがって、末端のカルボン酸および／またはヒドロキシ基が、例えばエステル、アミド、（カルボン酸に対する）チオエステル、あるいは（ヒドロキシ基に対する）エーテルに誘導体化されたオリゴマー類の誘導体は、本発明に従って用いられるのに適しているということが予期される。
したがって、次の式IIで表される乳酸のオリゴマー類の誘導体：
【化７】
2015526413.tif 000009
（ここで、ｎは式(I)において前記で定義されたとおりであり、R は H、R1R2N-、R1O-または R1S-および医薬的に許容されるそれらの塩であり、R1、R2 および R3 は同一もしくは異なって、H、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert-ブチル、ペンチル、ヘキシルを含むC1-C6 アルキル、またはベンジルを含むアリールならびに医薬的に許容されるそれらの塩から選択され、
X は H またはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert-ブチル、ペンチル、ヘキシルを含むアルキルもしくはアシル、-OCR4 （ここで R4 はH、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert-ブチル、ペンチル、ヘキシルを含む C1-C6 アルキルまたはベンジルを含むアリールから選択される）ならびにそれらの医薬的に許容される塩である。ただし、X が H であるときR は OH でない）
も、組み合せて用いるか、あるいは前記の式(I)の乳酸オリゴマー類の代わりとして用いることができる。
【０１４５】
「抗微生物」という用語は、細菌（例えば グループ B ストレプトコッカス）、真菌、ウィルスまたは寄生虫のような微生物の生育を阻止するか抑制する効果を意図している。
「抗菌」という用語は、細菌の生育を阻止ないし抑制する効果を意味する。
「抗真菌」という語は、真菌の生育を阻止ないし抑制する効果を意味する。
「抗ウィルス」という語は、ウィルスの複製能力を阻止ないし抑制し、ウィルスが増殖、再生、あるいは生育する能力を防止する効果を意味する。
【０１４６】
「重量平均分子量」あるいは「Ｍw」という語は、ポリマーの分子量の記述を意味する。
重量平均分子量は、Mw = Σi(NiMi2) / Σi(NiMi) として計算される：ここで、Ni は分子量 Mi の分子の数である。
直観的に、仮に重量平均分子量がｗであるときに、ランダムなモノマーを取ると、そのモノマーが属するポリマーは平均して重量ｗを有することになる。重量平均分子量は、例えばマススペクトル、NMR スペクトル、光散乱、小角ニュートロン散乱（SANS）、Ｘ線散乱、および沈降速度により測定することができる。
【０１４７】
「数平均分子量」あるいは「Ｍn」という語は、ポリマーの分子量の特定を意味する。数平均分子量は個々のポリマーの分子量の平均である。それは、ポリマー分子ｎの分子量を測定し、重量を合計し、ｎで割ることにより、すなわち Mn = Σi(NiMi) / Σi(Ni)（ここで、Ni は分子量 Mi の分子の数である）により決定される。
ポリマーの数平均分子量は、例えばマススペクトル、NMR スペクトル、蒸気圧浸透圧、末端基滴定、および束一性により決定することができる。
【０１４８】
「多分散性指数」という語は、一つのポリマー試料における分子量分布の程度を意味し、それは一つのポリマーの数平均分子量に対する重量平均分子量の割合として決定される。
【０１４９】
「重合度」あるいは「PDn」という語は、モノマー単位の分子量で割った数平均分子量のことである。PDn = (Mn -18)/72 。
【０１５０】
「製剤」および「組成物」という語は、相互に置き換えることができ、１種以上の乳酸オリゴマーを、粘膜付着剤および任意に１種以上の医薬的に許容される賦形剤あるいは皮膚もしくは粘膜への局所投与用に使用できるようなものとともに含む組成物を意味する。
本発明による組成物は、適当な剤形で、特に膣投与を含む膣への投与に適した形態で存在し得る。
【０１５１】
「抗付着剤」という語は、婦人科の病原性微生物有機体またはウィルスの付着性を低減させる剤、特にそのような有機体あるいはウィルスの脱離を引き起こすような剤を意味する。
【０１５２】
「付着」という語は、粘膜のような表面への付着ないし「固着」をもたらすか、あるいは促進する効果を意味する。
粘膜への付着については、「粘膜付着」という語も用いられる。
【０１５３】
「膣投与用の組成物」という語は、膣へ導入され、そこで活性成分が溶出して吸収され、粘膜上で作用する医薬を意味し、ヴァギトリウムおよび「ペッサリー」（これらは同義語として用いられる）を含む多くの異なった剤形が用いられ得る。
【０１５４】
治療方法
上記の組成物および新規な乳酸オリゴマーは、ここに記載される疾患および症状の治療に用いられ得る。
【０１５５】
したがって、それらは婦人科の感染症の予防および／または治療のための方法において用いることができ、該方法はここに定義された乳酸オリゴマーの有効量を、ここに定義された組成物の任意の形態で、患者に投与することを含む。
【０１５６】
本発明は、膣から放出される悪臭の管理、予防および／または治療のための方法をも提供するものであり、該方法はここに定義された乳酸オリゴマーの有効量を、ここに定義された組成物の任意の形態で、患者に投与することを含む。
【０１５７】
本発明は、膣から放出される悪臭の管理、予防および／または治療のための方法を提供するものでもあり、該方法はここに定義された乳酸オリゴマーの有効量を、ここに定義された組成物の任意の形態で、患者に投与することを含み、該組成物は衛生器具を含む。
【図面の簡単な説明】
【０１５８】
【図１】図１−製造方法およびプロセス・コントロールのフローチャートを示す。
【図２】図２−実施例５からの投与療法を示す。
【図３】図３−製剤（OMLA 3 および 6）において用いられたバッチの平均分子量Ｍnおよび重合度ＰＤnとともにオリゴマー分布を示す。
【図４】図４−製剤（OMLA 4、5 および 7）において用いられ得なかったバッチの平均分子量Ｍnおよび重合度ＰＤnとともにオリゴマー分布を示す。
【図５】図５−バッチ（OMLA 21 および 22）についての平均分子量 Ｍn および重合度ＰＤnとともにオリゴマー分布を示す。
【図６】図６−ｐＨ３．５〜５．５の水（900 ml）中における、Laccure 膣錠および Lacta膣用ゲルからの、乳酸の量（ｍｇ）として計算された全体の酸の放出を示す。
【図７】図７−ｐ‐値を含む平均ｐＨ値（MV）を示す。
【図８】図８−統計的に高度に顕著なｐＨ値の低下を示す。
【図９】図９−Laccure 膣錠で１週間に１回（ow）および１週間に２回（bw）の治療中の、訪問 1 からの膣ｐＨの低下（平均値および 95% 信頼限界）を示す。
【０１５９】
以下の実施例を参照して、本発明をさらに詳しく説明するが、これらの実施例は本発明を包含するために注意深く選択された。
したがって、これらの実施例はいかなる意味においても本発明を制限するものとして解釈されるべきでない。
【０１６０】
方法および分析の手順
外観
乳酸オリゴマーの膣錠の外観は視覚検査により検討される。
【０１６１】
同定
乳酸オリゴマーの膣錠の同定は、ヨーロッパ薬局方 2.3.1.に従って、ラクテートについての陽性反応により確認される。
【０１６２】
乳酸オリゴマーの分析
遊離酸の決定は、pH 8.4 におけるメタノール中、カリウムメチレートでの非水系滴定により行われる。
【０１６３】
酸全体の決定は、滴定により行われる。過剰の NaOH を加えて、オリゴマーを加水分解し、その溶液を HCl で滴定する。
【０１６４】
遊離酸と全体の酸との間の差異は、結合している酸、したがって酸として利用できない全量についての情報を与える。乳酸オリゴマーについての分析は、遊離酸と酸全体との間の差、およびラクテートモノマーの分子量、ならびに遊離酸の量および乳酸の分子量を用い、無水の基準に基づいて計算される。
【０１６５】
重合度
重合度は、全体の酸の含量を遊離酸の含量で割ることにより決定される（両者は上記の滴定により決定される）
【０１６６】
マスの単一性
マスの単一性は、ヨーロッパ薬局方 2.9.5.に従って決定される。
【０１６７】
水分含量
製剤中の水分含量は、ヨーロッパ薬局方 2.5.12 Method A に従い、溶媒としてクロロホルムを用いた体積測定のカール・フィッシャー滴定の平均により決定される。
【０１６８】
ｐＨ
製剤を水（25 ml）中に溶解する。ｐＨはヨーロッパ薬局方 2.2.3.に従って決定される。
【０１６９】
溶解
溶解試験は、パドル・セット100 rpm（ヨーロッパ薬局方 2.9.3 Apparatus 2）を用い、0.9% NaCl（900 ml）中、37oC で行われる。
製剤（錠剤）に金網中のシンカーを用意し、ｐＨインジケータとしてのブロモクレゾール・グリーン、メチル・レッドおよびブロモチモール・ブルーとともに、溶解容器中に入れる。
所定の時間間隔で、0.5 M NaOH を加えて、ｐＨを5.0〜5.5 に上げる。溶解は 48時間続き、錠剤を加水分解するのに必要であった理論量で割られた加えられた、塩基の総量として評価される。
【０１７０】
微生物学的品質
好気性微生物学的カウントの総量（TAMC）およびイースト／カビを合わせたカウントの総量（TYMC）の試験は、ヨーロッパ薬局方 2.6.12 curr. ed.に従って行われ、
シュドモナス・エルギノーザ、スタフィロコッカス・アウレウスおよびカンジダ・アルビカンスについての試験は、ヨーロッパ薬局方 2.6.13 curr. ed.に従って行われる。
【０１７１】
乳酸オリゴマーの遊離酸の決定
この方法は、カリウムメチレートでの非水滴定の手段により、L-乳酸オリゴマー中の遊離酸の決定を記述する。
【０１７２】
器具
滴定器              Metrohm 716 DMS Titrino
電極                Solvotrode Metrohm 6.0229.100. 結合 LL pH ガラス電極、
基準電解質 エタノール中の LiCl
はかり              0.001g より優れた精度を有する適当なはかり
同等の器具が用いられる。
【０１７３】
評価
遊離酸の計算
次の等式に従って遊離酸の量を計算する：
【数１】
2015526413.tif 000010
ここで、
FA = 遊離酸についての分析結果（mol/g）
V = pH 8.4 を得るのに必要なカリウムメチレートの量（mL）
C = カリウムメチレートの濃度（mol/L）
m = 試料の重量（mg）
【０１７４】
乳酸オリゴマーの酸全体の決定
この方法は、Ｌ−乳酸オリゴマー中の乳酸の全量の決定を記述する。過剰の NaOH を加えてオリゴマーをけん化し、次いで溶液を HCl で電位差滴定する。
【０１７５】
器具
滴定器              Metrohm 716 DMS Titrino
電極                Metrohm 6.0234.110 Combined LL Micro pH- ガラス電極
はかり              0.001g より優れた精度を有する適当なはかり
加熱板
同等の器具が用いられ得る。
【０１７６】
計算
酸全体の計算（mol/g）
次の等式に従って、酸の全量（mol/g）を計算する：
【数２】
2015526413.tif 000011
ここで、
VNaOH = 試料に加えられた NaOH の全量（mL）
CNaOH = NaOH の濃度（mol/L）
VEPl = 滴定に用いられた HCL の全量（mL）
CHCl = HCl の濃度（mol/L）
m = 試料の重量（mg）
【０１７７】
無水ベースの総乳酸オリゴマー（% m/m）の分析結果の計算
次の等式に従って、無水ベースの総乳酸オリゴマーとして表された分析結果を計算する：
【数３】
2015526413.tif 000012
ここで、
MwLactate = ラクテートの分子量、すなわち72.06（g/mol）
MwLacticacid = 乳酸の分子量、すなわち90.08（g/mol）
TA = 7.1による酸全体（mol/g）
FA= 遊離酸（mol/g）
CH2O = 水分含量（% m/m）
【０１７８】
鎖の長さの平均の計算
次の等式に従って、鎖の長さの平均（または重合度）を計算する：
【数４】
2015526413.tif 000013
ここで、
PD= 重合度
FA= 方法 M186 (mol/g) による遊離酸
TA= 上記で決定された酸全体（mol/g）
【０１７９】
Ｌ−乳酸オリゴマーの平均分子量の計算
次の等式に従って、Ｌ−乳酸オリゴマーの平均分子量を計算する：
【数５】
2015526413.tif 000014
ここで、
Mw =Ｌ−乳酸オリゴマーの平均分子量（g/mol）
PD = 前記による重合度
MwLactate = ラクテートの分子量、すなわち 72.06（g/mol）
MwH2O = 水の分子量、すなわち 18.02 （g/mol）
【実施例】
【０１８０】
実施例１
乳酸オリゴマーを含む組成物
次の組成を有する膣錠を調製した：
【表２】
2015526413.tif 000015
* 乳酸に相当する量。乳酸オリゴマーの実際の量は乳酸オリゴマーの重合度に依存する。
** 用いられた乳酸オリゴマーについての重合度 3.5 で計算した目標重量
【０１８１】
乳酸オリゴマー
乳酸オリゴマーは、投与後にｐＨを低下させる医療器具中で用いられる。水に接触すると、乳酸オリゴマーは徐々に加水分解されて活性成分である乳酸になる。この乳酸オリゴマーは、WO 2008/119518中に記載されているように本質的ではあるが、最終物質のより高い多分散性をもたらす条件下および精製手段により調製される。重合度は、ここに規定されているように、滴定により決定されたとき、約3.0〜約4.1 でなければならない。
【０１８２】
ナトリウム−（Ｓ）−ラクテート
ナトリウム−（Ｓ）−ラクテートは緩衝剤として用いられ、投与後に水和したときに製剤が酸性になり過ぎるのを防止する。このナトリウム−（Ｓ）−ラクテートは、50% 水溶液として製剤に加えられる。このナトリウム−（Ｓ）−ラクテートの溶液は、Merck Chemicals により供給されている。
【０１８３】
ラクトース１水和物
ラクトースは、凍結乾燥を助長するために凍結乾燥助剤として、また製剤に硬さとよりよい感触を与えるために用いられる。DMV-Fonterra がラクトース１水和物の供給者である。
【０１８４】
ヒプロメロース
ヒプロメロースは、濃厚剤および粘膜付着助剤として用いられる。それは、錠剤が投与されて水化されたときに、乳酸オリゴマーと一緒になって、ゲルを形成する。用いられたヒプロメロースの品質は、日本の信越化学工業（株）から提供されている Pharmacoat 615 である。ヒプロメロースはヒドロキシプロピルメチルセルロースである。
【０１８５】
膣錠の製造
適当な型にゲルを充填し、その材料を凍結乾燥して、粘性の高い液状ゲル（liquid gel）製剤を製造するのに適した方法が、以下に記載されている。より詳しい記載は、実施例２にある。
【０１８６】
上記の製剤は比較的多量のヒプロメロースを含んでおり、このヒプロメロースは、比較的多量の乳酸オリゴマーと一緒になって、高度に濃縮されて粘性のゲルをもたらす。
多量のヒプロメロースを溶解するためには、ヒプロメロースが溶解しない高温で、ラクトースおよび乳酸ナトリウムを含む水溶液にヒプロメロースを加える。冷却すると、ヒプロメロースが膨潤して溶け始め、溶液をより一層粘性にする。
乳酸オリゴマーを加え、均一な物質を得るために、断続的に均質化しながら室温まで冷却し続ける。この冷却工程は、ゲル中に空気が入るのを避けるために、真空下で行われる。
【０１８７】
このゲルを、予め形成されたプラスチックの卵型の殻に充填し、ドライアイスを使って凍結させる。次いで、凍結乾燥工程中に昇華を可能ならしめる大きな空間を確保するために、凍結乾燥前にプラスチックの殻を取り除く。
【０１８８】
初期の凍結と乾燥（凍結乾燥）が終ったときに、最終包装前の完成品の水分含量を低減させるために、少なくとも２４時間、室温で２次的な乾燥を行う。
【０１８９】
包装
Oliver-Tolas Healthcare Packaging から供給されている外寸が 15x15 cm のアルミニウムの袋に錠剤を入れ、その袋をヒートシールする。
【０１９０】
実施例２
乳酸オリゴマーの錠剤を製造する製造方法
【０１９１】
乳酸オリゴマー膣錠のためのバッチ処方
【表３】
2015526413.tif 000016
* 乳酸として。乳酸オリゴマーの実際の量は、原料の重合度に基づいて計算される。
【０１９２】
製造工程の記述
製造工程のフローチャートを図１に示す。
【０１９３】
実施例３
乳酸オリゴマー含有膣錠の特徴
【０１９４】
溶解
実施例１および２に記載のようにして製造された錠剤を、ここに記載の溶解性試験に付した。
【０１９５】
乳酸オリゴマーおよび乳酸の溶出を、ここに記載するように滴定によって測定した。かくして、溶解したパーセントは、放出されたオリゴマー類と該放出オリゴマー類から形成された乳酸との合計である。
【０１９６】
結果は次のとおりである：
t=0 で試験を開始
t = 6 時間で、20% ± 10% が放出された、
t= 24 時間で、35% ± 10% が放出された、すなわち累積すると約 55% が放出された、
48 時間で、少なくとも 30% が放出された、すなわち累積すると少なくとも 85% が放出された。
【０１９７】
実施例４
乳酸オリゴマー含有組成物の安定性
医薬製品についての支持データを提供するために、製剤の技術的な安定性試験を行った。上記の安定性試験は、６か月の試験であり、試験が３６か月に延びることもあり得る。
【０１９８】
安定性試験の概要が、表１および表２に示されている。
表１ アルミニウム・バッグ中の乳酸オリゴマー膣錠の安定性試験における試験品の保管条件および試験時間のポイント
【表４】
2015526413.tif 000017
カッコ内の試験は任意である。
* 同じ３つのパウチの重量変化は、各保管条件における安定性試験の間に行われた。
【０１９９】
表２  安定性試験 TS-1009-09 における試験パラメータおよび試験方法
【表５】
2015526413.tif 000018
【０２００】
結果
臨床試験で用いられた乳酸オリゴマー膣錠の安定性が安定性試験で調査された。最初の２４か月からのデータが評価されて、ここに報告されている。
上記の製剤は、25 ℃ /相対湿度 60% で２４か月までの試験期間内、および 40 ℃/相対湿度 75% で６か月までの試験期間内に安定であり、劣化を示さなかった。
これらの結果に基づいて、25 ℃より高くない温度で保管されたときの当該製品の推薦貯蔵寿命は３６か月であると推定される。
【０２０１】
表３ 25 ℃/相対湿度60% で貯蔵した材料についての結果
【表６】
2015526413.tif 000019
【０２０２】
【表７】
2015526413.tif 000020
【０２０３】
表４ 40℃/相対湿度75%で保管された物質についての結果
【表８】
2015526413.tif 000021
物質の溶解性は、両安定性試験において限度に適合している。
【０２０４】
外観
錠剤の外観は、試験された両方の保管条件で変化しなかった。
【０２０５】
分析
最初の試験と、両方の保管条件で３か月および６か月試験との間に、分析において僅かな減少が見られた。25℃/相対湿度 60% で、分析は後で分析された２つの時点について、再び増加した結果となった。したがって、中間時点での低い結果は、分析方法の精度における範囲を反映していると合理的に信じることができる。すべての数値は、充分に設定された限度内である。
【０２０６】
重合度 − 平均分子量
試験期間中、どの保管条件下でも、重合度あるいは平均分子量の減少は検出されなかった。
【０２０７】
水分含量
すべての数値が設定された限度より充分に低かった。このことは最初のパッケージが湿気に対して不透過性であることを意味している。
【０２０８】
pH
試験期間中、ｐＨの変化は記録されなかった。
【０２０９】
実施例５
Lactal および Vivag と比較した、400 mg OMLA 膣錠および500 mg OMLA 膣ペッサリーについての、健康な女性における実用性試験
【０２１０】
この試験の目的は、乳酸オリゴマーと市販されている２つのラクテート製品とを含む、２つの異なった組成物を比較することであった。
【０２１１】
試験物質
ここに記載されている凍結乾燥技術を用いて、400 mg 膣錠を製造した。
【０２１２】
組成物は次のとおりであった。
【表９】
2015526413.tif 000022
【０２１３】
500 mgペッサリー
試験に用いられたペッサリーは、Academia Medical Gdansk の医薬技術部門で調製された。OMLA 30 をマクロゴール6000 と混合し、3 g 坐剤用の型に入れて作った。組成は次のとおりである。
【０２１４】
型に入れて作られたペッサリー [mg]
【表１０】
2015526413.tif 000023
【０２１５】
ラセミ体の乳酸 (85%)を120 (C で 30 時間加熱することにより、OMLA 30 を得た (Lund 大学)。
対照製品
Lactal 膣用ゲル 5 mL (Kullgren Pharma AB、スウェーデン) は、膣内の生理学的ｐＨバランスを修復する医療器具である。それは、乳酸、グリコーゲン、プロピレングリコール、メチルヒドロキシプロピルセルロース、乳酸ナトリウムおよび水を含んでいる。
【０２１６】
Vivag VG (膣用カプセル、Ferrosan AB)は、膣の細菌叢がバランスを崩したときに伝統的に用いられる天然薬品である。それは、凍結して乾燥したラクトバチルス・アシドフィルスを、ラクトースおよびステアリン酸マグネシウムとともに含んでいる。
この試験で用いられた Lactal および Vivag は、どちらも市販の製剤であった。
【０２１７】
試験の設計
試験のデザインは、図２に示されている。
【０２１８】
一人の対象者が OMLA ペッサリー 500 mg、OMLA 膣錠 400 mg、Lactal および Vivag の順序で試験された。
被験者は、ペッサリーおよび膣錠の投与後４日間、また Lactal および Vivag の投与後１日間、ｐＨを測定され、耐性／許容性が観察された。観察期間中の測定時間は、各日とも、投与後、０時間、４時間、８時間および１２時間であった。各試験の間に少なくとも１週間あけた。
【０２１９】
測定
膣粘膜内のｐＨは、pH ストリップス (pH-Fix 3.66.1、Macherey-Nagel)を用いて、被験者により測定された。被験者は、一般的な耐性／許容性を報告するとともに、経験した不快のタイプを報告した。
【０２２０】
結果
膣錠およびペッサリーは、どちらも膣のｐＨを約３日間低下させた。このｐＨ低下効果は、膣錠についてより強く見られた。膣錠はいかなる不快性も示さなかったし、一般的な耐性／許容性は「極めて良好」と評価された。
ペッサリーは、投与後、最初の２日間で排出され、その一般的な耐性／許容性は「やや不快」あるいは「良好だが最善ではない」と評価された。
【０２２１】
Lactal は、膣のｐＨを８時間低下させた。投与した後、最初の日に、緩やかな発熱および排出が報告された。一般的な耐性／許容性は「良好」と評価された。
Vivag は、膣のｐＨに対して効果がなく、不快さを示さなかった。
【０２２２】
実施例６
２つの異なったオリゴマー分布を有する OMLA 600 mg 膣錠についての実用性試験
乳酸のオリゴマーは、加水分解を介した乳酸の生成、および該オリゴマーのカルボキシレート末端基の直接作用により、膣のｐＨを低下させる可能性を有している。このことは、非生理学的に高い膣ｐＨの状況で有利である。
乳酸オリゴマー類と適当な粘膜付着性ポリマーとの製剤は、膣ｐＨを数日間低下させることができる。
【０２２３】
一人の健康な女性による上記の実用性試験において、乳酸オリゴマー 400 mg を含む膣錠は、有望なｐＨ低下性を示した。
この実用性試験において、効果の期間が延ばされるかどうかを調べるために、異なった分布の乳酸オリゴマー 600 mg を含む二つの製剤が新たに調製され、４人の健康な女性により試験された。
【０２２４】
活性成分
活性成分(OMLA)は、スウェーデンの Lund University で製造された。
乳酸のオリゴマー化は、Purac から供給された PURAC PF90（製品コード 20706、バッチＮｏ． 0609002001）の L(+)-乳酸 (LA)を加熱することにより行われた。このものの品質は、90 % の LA および10 % の水を含んでいる。
【０２２５】
OMLA 6 および OMLA 3 は、次の手順で製造された：
50 ml の LA を 50 ml の丸底フラスコに入れ、油浴中で、様々な時間、異なった温度で加熱した。このフラスコを熱い油浴中に入れた。溶液を加熱した時間はおよそ１０分間であった。このフラスコは手順の間中、外気に対して開けたままであり、該手順はフードの中で行われ、生成した水蒸気が排出されるようにした。反応終了後、フラスコを油浴から取り出し、栓で閉じ、室温まで放冷した。冷却の時間はおよそ２０分間であった。OMLA 3 は 120 (C で 18 時間保持され、OMLA 6 は 120 (C で 24 時間保持された。
【０２２６】
オリゴマー分布の分析は、オランダの Purac により行われた。液体クロマトグラフィーを用いて、乳酸、ラクチドおよび乳酸オリゴマーを分離し、UV 検出により定量した。オリゴマー類の実際の分離は、有機溶媒の濃度を試験中に高めていくグラジエント・システムで行われた。オリゴマー類の UV 応答は、カルボニル−およびエステル−結合が吸着すると知られている波長で測定された。定量は外部標準法を用いて行われた。
【０２２７】
製剤に使用できたバッチについての結果を図３に示し、使用できなかったバッチについての結果を図４に示す。数平均分子量 Mn は、個々のマクロ分子の分子量の算術平均である。
重合度 DPn は、ポリマー鎖中の繰返し単位の平均値である。
【０２２８】
試験で用いられた試料は、次のようにして製造された：
ラクトースおよび HPMC (Metolose 60SH 4000 cP) を水に溶解して粘性の溶液とした。OMLA 6 または OMLA 3 を加え、これらの全てを、小型の高せん断ミキサーを用いて、およそ３０秒間混合した。シリンジを用いて、得られたゲルを型（直径 15 mm、高さ >15 mm）に入れた。この型を、凍結させるために、-40 ℃、常圧で２時間凍結乾燥機（Christ Alpha 2-4）) に入れた。
次いで、凍結乾燥機を圧力 1 mbar まで脱気し、温度を手動で、約42 時間後に 20℃になるまで徐々に(-25、-10、0、10 ℃) 上げ、次いで圧力をさらに下げて 0.1 mbar とした。温度を２時間で３０℃に上げて、このプロセスを終了した。
【０２２９】
組成物は次のとおりである：
【表１１】
2015526413.tif 000024
** メトロース 60SH 4000 cP − 高粘度 (信越化学)。
錠剤は白色で、円柱状で、多孔性であった。
【０２３０】
51〜62 才の４人の健康な女性（平均 56.5 才）が試験に参加した。
【０２３１】
試験のデザイン
【表１２】
2015526413.tif 000025
【０２３２】
４人の被験者は、最初 OMLA 3、次いで OMLA 6 の 600 mg 膣錠で試験された。これらの被験者は、ｐＨを測定され、耐性／許容性が７日間観察された。
投与後の測定時間は、観察期間を通して、毎日、0、4 時間、8 時間および 12 時間であった。
投与の間隔は、少なくとも１週間であった。
【０２３３】
ｐＨ測定
膣粘膜におけるｐＨは、pH ストリップ（pH-Fix 3.6-6.1 Macherey-Nagel 製）を用いて、患者自身により測定された。
【０２３４】
耐性／許容性
被験者は、経験した不快さのタイプについてのコメントとともに、一般的な耐性／許容性を報告した。
【０２３５】
結果
ｐＨ測定
OMLA 3
最初の日は、４人の被験者全員の膣ｐＨが低下した。
２人の被験者が、それぞれ６日間および３日間のｐＨ低下効果の期間を示した。
OMLA 6
最初の日は、４人の被験者全員が膣ｐＨの低下を示した。
２人の被験者が、７日間以上のｐＨ低下効果の期間を示した。
２人の被験者が、水泳中およびジョギング中に錠剤が脱落したと報告した。
【０２３６】
実施例７
セルロースポリマー高含量の OMLA 膣錠 600 mg についての実用性試験：
１人の健康な女性による前記の実用性試験において、乳酸オリゴマー 400 mg を含む膣錠は有望なｐＨ低下性を示した。
引き続いて行われた実用性試験（実施例７で報告される）において、異なった分布の乳酸オリゴマー 600 mg を含む二つの新たな製剤が、４人の健康な女性で試験された。
これらの製剤は、最初の試験と比べて、より長い持続期間を示したが、粘膜付着性がより少なく、脱落する傾向が見られた。
それゆえに、粘膜付着性を高めるために、より高い含量のセルロースポリマーを含む新たな製剤が調製され、この実用性試験において試験された。
この報告は、セルロースポリマーが Metolose 60SH 15cP である試験の最初の部分に関するものである。
【０２３７】
活性成分
３バッチの活性成分（OMLA）が、オランダの Purac biomaterials, Gorinchemにより製造され、-15℃で７か月間保管された。これらのバッチは OMLA 21 および OMLA 22 とラベルされた。OMLA 22 は、重合度に関して前の試験で用いられた OMLA に最も近かったので、それがこの試験で用いられた。図５は、これらの乳酸オリゴマーの分子量分布および関連データを示す。
【０２３８】
オリゴマー分布の分析は、Purac により行われた。乳酸と乳酸オリゴマーは、液体クロマトグラフィにより分離され、ＵＶ検出により定量された。オリゴマー類の実際の分離は、測定中に有機溶媒の濃度を増す傾斜システムで行われた。オリゴマー類のＵＶ応答は、カルボニル−およびエステル−結合が吸収することが知られている波長で測定された。この定量は、外部標準法を用いて行われた。
【０２３９】
分析の結果は図５に示されている。イニシャルの分析と、-15℃で７か月経過後の分析はよく一致している。
【０２４０】
数平均分子量 Mn は、個々のマクロ分子の分子量の算術平均である。
重合度 DPn は、ポリマー鎖中の繰返し単位の平均値である。
【０２４１】
製剤
この試験で用いられた試料は、次の手順で調製された：
ラクトースおよび HPMC (Metolose 60SH 15cP) を水に溶解して、粘性の溶液を形成した。OMLA 22 を加え、小型の高せん断撹拌器を用いておよそ３０秒間撹拌した。得られたゲルを型（直径 16 mm、高さ<20 mmの、先が丸められた筒）に、シリンジを用いて充填した。
【０２４２】
凍結させるために、この型を -40 ℃、常圧の凍結乾燥機（Christ Alpha 2-4）中に２時間置いた。凍結乾燥機を圧力 1 mbar まで脱気し、手動で温度を徐々に（-25、-10、0、10℃）約 42 時間で 20℃まで上げ、次いで圧力を 0.1 mbar までさらに下げた。温度を２時間で 30℃に上げ、操作を終了した。
【０２４３】
試料の組成は次のとおりであった：
【表１３】
2015526413.tif 000026
**Metolose 60SH 15cP − 低粘度 (信越化学) −Hypromellose 615 に相当
【０２４４】
被験者
５２〜６３歳（平均５７．５歳）の４人の健康な女性が試験に参加した。
【０２４５】
試験デザイン
４人の被験者が OMLA 膣錠 600 mgで試験された。被験者はｐＨを測定され、耐性／許容性が少なくとも７日間観察された。基準となるｐＨを得るために、投与の１日前に４時点でｐＨが測定された。
【０２４６】
ｐＨ測定
膣粘膜におけるｐＨが、ｐＨ試験紙（pH-Fix 3.6-6.1 Macherey-Nagel 製）を用いて、被験者自身により測定された。
【０２４７】
耐性／許容性
被験者は、経験した不快さのタイプについてのコメントとともに、一般的な耐性／許容性を報告した。
【０２４８】
結果
ｐＨ測定
４人のうち３人の被験者において、ｐＨ−低下効果の持続期間が１週間以上であった。４人目の被験者では、最初の日にｐＨ低下効果があった。
【０２４９】
耐性／許容性
１人の被験者が、最初の日、２時間後に少しほてるような経験をし、２人の被験者では最初の２〜３日間、分泌物があり、汚れを感じた。耐性／許容性は、殆どが「極めて良好」と評価された。
【０２５０】
この試験は、グレード 15 cP の HPMC が、望ましい結果を得るのに極めて適していることを示した。
【０２５１】
実施例８
セルロースポリマー高含量の OMLA 膣錠 600 mg についての実用性試験：II
この試験は、上記の実施例７に記載の手順に従って行われた。しかしながら、もう一つの製剤が試験された。すなわち：
【表１４】
2015526413.tif 000027
** Pharmacoat 606 − 低粘度（信越化学）
【０２５２】
被験者
５２〜６３歳（平均５７．５歳）の４人の女性がこの試験に参加した。
【０２５３】
結果
ｐＨ測定
被験者４人のうちの２人において、ｐＨ低下効果の持続期間がおよそ４〜５日間であった。他の２人では、持続期間がおよそ１．５日間であった。
【０２５４】
実施例９
Laccure 膣錠とLactal 膣ゲルとのインビトロ比較
ラクトバチルスは通常の膣エコシステムを支配している。４．５未満の低い膣ｐＨはこの菌叢により生成される乳酸により維持されており、他の菌種による感染に対して保護している。
このエコシステムにおける妨害は、他の細菌、例えばガードネレラによる過剰成育に起因しており、その結果、ｐＨが４．５以上、典型的には５〜６に上昇する。この症状は細菌性膣炎またはＢＶと言われており、強烈な臭い魚臭を特徴とし、しばしば過剰な膣排泄物および膣ｐＨの上昇を伴う。
【０２５５】
ＢＶに罹った女性が婦人科医を訪れたときに受ける最近の治療は、抗菌剤によるものが支配的である。しかしながら、殆どの女性は専門家の助けなしで、彼女らの問題を解決しようとしており、しばしば４．５より低い生理学的に低いｐＨを回復するために、ｐＨ調整製品を使用している。
Lactal 膣ゲルは、広く使用されている非処方箋薬であり、ヒプロメロースにおける乳酸をベースとしている。Lactal は毎日、７日間投与される。
【０２５６】
Laccure AB は、新製品 Laccure 膣錠を開発した。この製品では、乳酸オリゴマー類に縮合された乳酸が、乳酸ナトリウム、ヒプロメロースおよびラクトースとともに含まれており、それが凍結−乾燥されて、固形の小卵-型の膣錠に成形されている。
膣粘膜における水分と接触すると、乳酸オリゴマー、乳酸ナトリウムおよびヒプロメロースは、錠剤からゆっくり放出されて、粘膜付着性のゲルを形成し、膣の粘膜に付着して、ｐＨを３．５に保つ。Laccure 膣錠は、少なくとも３〜４日間、最適には７日間の投与間隔を開けるようにデザインされている。
【０２５７】
この試験では、乳酸の含量、水に溶解した後のｐＨおよび酸の放出総量に関して、本発明による膣錠と Lactal 膣ゲルとを比較した。
【０２５８】
膣錠
この試験で用いられたバッチは、臨床試験用のバッチを製造する前の確認バッチとして製造された。このバッチは安定性試験にも用いられた。その組成を次の表に示す。
【０２５９】
表５  Laccure 膣錠の組成
【表１５】
2015526413.tif 000028
* 乳酸 700 mg に相当
【０２６０】
Lactal 膣ゲル
Lactal 膣ゲル（バッチ番号 10-029）は、スウェーデン・Malmo の地方薬局で入手した。Lactal の投与単位は、乳酸およびヒプロメロースを含み、乳酸ナトリウムで約ｐＨ３．５に緩衝された５mL のチューブである。
【０２６１】
方法
この試験で用いられた方法は、膣錠の放出のために採用された製品の明細な方法と同じである（表２）。
【０２６２】
表６  試験および方法
【表１６】
2015526413.tif 000029
【０２６３】
結果
酸全体の溶解を除いた試験の結果を次の表に示す。膣錠の１投与単位の重量は、Lactal 膣ゲルの１投与単位の約１／３であるが、膣錠中の乳酸の総含量は Lactal の約６倍である。
水に溶解した後のｐＨは、２４時間殆ど同じである。Lactal は乳酸オリゴマーを極めて少ししか含んでいないが、膣錠中の乳酸の重合度は、３．５である。
【０２６４】
表７ 試験結果
【表１７】
2015526413.tif 000030
【０２６５】
図６は、７５時間で膣錠から溶解した酸の総量、および同時間内にlactal 膣ゲルからの算定放出量を示す。
Laccure 膣錠からの酸性化剤の放出は、６時間後に乳酸約 150 mg に相当し、２４時間後に約 250 mg に相当し、７２時間後に約 310 mg に相当する量であった。この量は、１日に１回投与される Lactal の３投与分からの累積放出量に近かった。
【０２６６】
結論
乳酸の総含量は、Lactal 膣錠において Lactal 膣ゲルより約６倍高く、これはLaccure 膣錠について１週間に１回の投与と合致する。
水に溶けると、この膣錠は Lactal 膣ゲルとほぼ同じｐＨに達する。
【０２６７】
Laccure 膣錠から最初の７２時間にインビトロで放出される酸性化剤の量は、１日に１回投与される Lactal の３投与からの累積放出量とほぼ同じであった。
【０２６８】
実施例１０
細菌性膣炎の患者における乳酸オリゴマー含有膣錠のｐＨ調節効果および安定性。並行グループでのオープン・コントロール試験。試験Ａ
【０２６９】
試験の目的
第１の目的
細菌性膣炎 (BV) に罹った被験者における Laccure 膣錠の安定性を評価すること。
【０２７０】
第２の目的
細菌性膣炎 (BV) に罹った被験者における Laccure 膣錠の耐性（許容性／使用者利便性）および効能を評価すること。
【０２７１】
第１の最終目的
任意に報告された不利な結果、および最終訪問時の陰門膣の診断について報告された不利な結果。
第２の最終目的
・１週間および２週間時点における膣ｐＨの正常化（４．５以下）。
・被験者の日記を介しての錠剤の許容性／使用者利便性
・錠剤の効能は、アムセルの基準を使っても確立される
【０２７２】
次の基準それぞれについて、１週間および２週間時点での患者の割合を測定することにより評価される。
１．淡色、白色、黄色、均質の分泌物
２．顕微鏡上での手がかりの細胞
３．アルカリ−すなわち１０％水酸化カリウム(KOH)溶液の添加による魚臭の放出
【０２７３】
さらに、アムセルの４番目の基準は、膣液のｐＨ> 4.5 であるが、ｐＨは上記の２番目の最終目的で触れられているので、上記では述べられていない。
【０２７４】
手がかりの細胞は、細菌によって覆われることにより特徴的な点として現れる膣の上皮細胞である。手がかりの細胞は、細菌性膣炎、特に一群のグラム可変性細菌であるガルドネレラ・ヴァギナリスにより惹き起こされる膣炎の医学的な徴候である。
この細菌性感染症は、臭い魚臭の、淡い膣分泌物をもたらす。また、膣のｐＨはしばしば５．５以上に上昇する。正常な膣のｐＨは４．５の辺りで変動する。
BV に罹患した患者の割合は、アムセルの４つの基準のうち３つが満たされれば確認される。
【０２７５】
試験のデザイン
この試験のデザインは適応性があり、二つの部分、Ａ部分およびＢ部分を含んでいる。
Ａ部分において、二つの異なった被験者のグループがあった；
- グループ 1 (10 人の患者): １週間に１回の Laccure 膣錠で２週間治療を受けている、進行中のＢＶに罹患している被験者。
- グループ 2 (10 人の患者): １週間に２回の Laccure 膣錠で２週間治療を受けている、進行中のＢＶに罹患している被験者。
進行中のＢＶに罹っている被験者は、無作為的にグループ１または２に分けられた。アムセルの基準がＢＶの診断に用いられた。
【０２７６】
次の基準のうち、少なくとも３つが満たされれば、その患者は進行中のＢＶに罹っていると診断された。
１．淡色、白色、黄色、均質の分泌物
２．顕微鏡上での手がかりの細胞
３．アルカリ−すなわち１０％水酸化カリウム(KOH)溶液の添加による魚臭の放出
４．４．５より高いｐＨ
【０２７７】
包括的基準
・少なくとも１８歳の女性
・アムセルの基準を用いた(スクリーニング試験で決定された)膣炎の確認された最近の診断
・試験を通じて、子宮内器具以外の他のすべての膣製品の使用を辞退することを望む被験者
・試験の期間中、性的交渉またはコンドームの使用を差し控えなければならない
・妊娠の可能性のある女性は、試験開始前に、尿によるネガティブな妊娠検査結果を有していなければならない
・被験者は、主に製品の許容性に関しているが、いくらかは性的活動に関して回答する意思を有している
・書面によるインフォームド・コンセントを出すことができ、かつ随時フォローアップに同意できる被験者
【０２７８】
結果
被験者
１週間に１回のグループのうち、２人の患者は試験を終了することができなかった。１人は不運な出来事のためであり、もう１人は試験中の生理のためである。
１週間に２回のグループのうちの１人の患者は、不運な出来事のため試験を終了することができなかった。
殆どすべての患者は１０日ごとの訪問に毎回出席したが、１週間に１回のグループでは３人の患者が出席せず、１週間に２回のグループでは２人の患者が出席しなかった。
【０２７９】
表８  試験を満たした患者数
【表１８】
2015526413.tif 000031
【０２８０】
基準線の特徴および統計
１週間に１回のグループの平均年齢は３３歳であり、１週間に２回のグループの平均年齢は２９歳であった。２人（黒人、ラテン系）を除いて、すべての患者が白人であった。すべての患者が、１回目の訪問時に、アムセルの基準により、ＢＶであることが確認された。
【０２８１】
１日目に次の結果が得られた。
表９  １日目の個々のアムセルの基準−淡色、白色、黄色、均質な分泌物
【表１９】
2015526413.tif 000032
【０２８２】
表１０  個々のアムセルの基準−１日目の顕微鏡上での手がかりの細胞
【表２０】
2015526413.tif 000033
【０２８３】
表１１  個々のアムセルの基準  CRFによる１日目の膣液のｐH >4.5
【表２１】
2015526413.tif 000034
【０２８４】
表１２  個々のアムセルの基準−アルカリ添加による魚臭の放出−１日目に10 % 水酸          化カリウム (KOH) 溶液
【表２２】
2015526413.tif 000035
【０２８５】
表１３  １日目に適合したアムセルの基準
【表２３】
2015526413.tif 000036
【０２８６】
第１の最終目標
膣の中央部 (MV) におけるｐH値
ｐＨはｐＨ電極で測定された。多くの発表ではｐＨが lacmus 試験紙で測定されているが、これは感度の劣る方法である。
【０２８７】
１回目の訪問から２回目の訪問までの間にｐＨが４．５未満に達したのは、１週間に１回のグループでは５人の患者だけであり、１週間に２回のグループでは４人の患者であった。ｐＨ４．７未満としたときには、上記の人数がそれぞれ６人と４人となった。すべての患者が試験中に、１回目の訪問時に比べて、ｐＨが低下していた。
【０２８８】
１回目の訪問時のｐＨの平均レベルは、１週間に１回のグループでは５．６であり、１週間に２回のグループでは５．３であった。１回目の訪問と２回目の訪問との間の変化は、１週間に１回のグループでは -0.99 であり、１週間に２回のグループでは -0.66 であった。このｐＨレベルの低下は、４回目の訪問のほかは、すべての比較で最高であったが、４回目の訪問時に、１週間に１回のグループで３人の患者が、また１週間に２回のグループで２人の患者が測定値をミスした。
【０２８９】
日１と日３または日４とのｐＨ値 (MV) の比較
後記のグラフは、日１と日４のｐＨ平均値 (MV) を示す。択一的に、もし日４が任意でなければｐＨは日３に測定された。Wilcoxon サインド・ランク・テストからのｐ−値も、グラフ中に含まれている。日１と日３または日４との間の差異は、両方の治療グループで、また二つの治療グループを合わせても、満足できるほどに顕著であった (p<0.05)。
このことは、Laccure 膣錠を使ったときに、ｐＨ値(MV)に対するイニシャル効果があったことを示している。平均値をプロットしたときにも、同様のパターンが得られた。
ｐＨ値の低下が図７に示されている。
【０２９０】
第２の効果の最終目標
細菌性膣炎
確認されたAmsel のクライテリア
１週間に１回のグループでは、すべての患者が３回目の訪問時にＢＶでなく、５回目の訪問時に８人の患者がＢＶでなかった。
１週間に２回のグループでは、３回目および５回目の訪問時に、それぞれ９人の患者がＢＶでなかった。
【０２９１】
表１４  アムセルの基準−１週間目および２週間目に確認されたＢＶ
【表２４】
2015526413.tif 000037
【０２９２】
表１５  １週間および２週間時にそれぞれＢＶでなかった患者−正確な95% 信頼区間を含む
【表２５】
2015526413.tif 000038
【０２９３】
アムセルの基準-淡色、白色、黄色、均質な分泌物
１週間に１回のグループでは、すべての患者が訪問３時点で「淡色、白色、黄色、均質な分泌物」を示さなかったが、訪問５時点で３人の患者について該基準が見られた。
１週間に２回のグループでは、訪問３時点および５週間時点でそれぞれ、８人の患者に「淡色、白色、黄色、均質な分泌物」が見られなかった。
【０２９４】
表１６  個々のアムセルの基準−淡色、白色、黄色、均質な分泌物、訪問による
【表２６】
2015526413.tif 000039
【０２９５】
アムセルの基準−顕微鏡上での手がかりの細胞
１週間に１回のグループでは、すべての患者が訪問３時点で手がかりの細胞を有していなかったが、訪問５時点では２人の患者について手がかりの細胞が見られた。
１週間に２回のグループでは、訪問３時点で７人の患者において手がかりの細胞がなく、訪問５時点で８人の患者において手がかりの細胞がなかった。
【０２９６】
表１７  個々のアムセルの基準−顕微鏡上での手がかりの細胞、訪問による
【表２７】
2015526413.tif 000040
【０２９７】
アムセルの基準−アルカリ添加による魚臭の放出
１週間に１回のグループでは、９人の患者が訪問３時点および訪問５時点で魚臭を示さなかった。
１週間に２回のグループでは、訪問３時点で８人の患者が魚臭を示さず、訪問５時点で９人の患者が魚臭を示さなかった。
【０２９８】
表１８  個々のアムセルの基準−アルカリ添加による魚臭の放出、訪問による
【表２８】
2015526413.tif 000041
【０２９９】
アムセルの基準−膣液のｐＨ >4.5 
１週間に１回のグループでは、３人の患者だけが訪問３時点でｐＨ４．５以下であり、１人だけが訪問５時点でそれに該当するのは１人だけであった。
１週間に２回のグループでは、３人の患者だけが訪問３時点でｐＨ４．５以下であり、それが訪問５時点では４患者であった。
【０３００】
表１９  個々のアムセルの基準−CRFによる膣液のｐＨ>4.5、訪問による
【表２９】
2015526413.tif 000042
【０３０１】
全体評価
両グループとも７人が治療により優れた改善を受けたというのが、試験者の全体的な評価であった。
【０３０２】
表２０  医師の全体的評価
【表３０】
2015526413.tif 000043
【０３０３】
ｐＨの差異
図７は、Laccure 膣錠で、１週間に１回（ow）および１週間に２回（bw）治療中における、訪問１からの膣ｐＨの低下（平均値、信頼限界 95%）を示す。
この図で見られるように、平均してすべての患者が訪問２以降にｐＨが０．５低下した。
全体的な見方からすれば、あたかもｐＨの低下がｐＨ値自体よりもはるかに価値のある測定であるように見える。
したがって、仮にｐＨが０．５単位以上低下し、その他のアムセルの基準が１つだけ満たされれば、あたかも治療が効果的であったかのように見える（４つのアムセルの基準のうち２つ以下が満たされても、治療は勿論効果的である）。通常、ｐＨが低下しても、ｐＨ値３．５より低くするべきではない。
【０３０４】
主効果の結論
欠落したデータおよび完遂した患者の数を考慮したとき、２１人のうち３人だけがプロトコールに従って試験を完了しなかった上記の試験データの品質は、良好である。
１週間に１回のグループでは１０人のうち３人の患者が、また１週間に２回のグループでは９人のうち４人の患者が、訪問５時点（２週間）で、ｐＨが４．５より低くなった。さらに、必ずしもｐＨが４．５未満となったわけではないが、訪問１（１日目）に比べて、すべての患者でｐＨ値が低下した。
訪問１から訪問２(日 3-4)にかけて、両方の治療グループで、また二つの治療グループを合わせても、ｐＨ平均値において統計的に顕著な低下があった(p<0.05)。
これらの結果は、Laccure 膣錠を用いたときに、ｐＨ平均値が低下したことを示している。この違いは、日 1 および日 3/4の間で統計的に顕著であった（MV pH - 膣の中央部で測定された）。
【０３０５】
アムセルの基準による全体的なＢＶ分類では、試験の終了時に、１１人中８人（１週間に１回）、また１０人中９人（１週間に２回）がＢＶを示さなかった。
ｐＨレベル以外の個々のアムセルの基準では、２週間を超える治療（１週間に１回および１週間に２回の両方）が、ほとんどすべての患者において、すべてのＢＶ基準を低下させたことを示した。
【０３０６】
治療の１５日目の日誌における患者の治療に対する認識は、個々の質問について完全にまたは部分的に同意していることを明らかに示した。
すなわち、
- 私は治療が患者に対して親切であることを経験した、
- 私は膣錠の投与間隔が充分に長かったと思う、
- 治療は総体的に良好であると感じた、
- 私の経験では膣錠は厄介でなかった、
- 私はこの治療が私の問題を軽減してくれたと思う、
- 私は市販されたときに、この治療をすることを考えている。
【０３０７】
医師の全体的な評価は、Laccure 膣錠を用いることにより、１週間当たりの錠剤の数（１または２）に関係なく、患者が殆どの症例において、大きく改善されたことを示した。
【０３０８】
総体的結論
この試験は ICH GCP に準じて、データの欠損なく、試験を完了した多数の患者で実施された。
ｐＨレベルは試験期間を通じて低下し、特に訪問１から訪問２にかけて断言できる。しかしながら、ほとんどの患者について４．５より低くはならなかった。
【０３０９】
ＢＶに対する効果は、治療グループに関係なく、アムセルの基準を用いて確認することができ、１週間後には両方のグループとも、ほとんど全ての患者においてＢＶが消失した。
【０３１０】
この治療に対する患者の総体的な評価は、治療結果に関する医師の見解のように、極めて良好であった。すべての患者が、市販されたらこの治療法を使うことを考えていた。
Laccure 膣錠での治療は、この患者群内では充分に耐性があったと考えられた。
臨床試験パートＡの結果は、臨床試験パートＢの開始およびデザインを決定するのにも用いられた。
【０３１１】
実施例１１
細菌性膣炎の患者における Laccure 膣錠のｐＨ調節効果および安定性。
並行グループでのオープン・コントロール試験および適合デザイン。試験Ｂ
【０３１２】
試験の目的
第１の目的
細菌性膣炎（ＢＶ）の被験者における Laccure 膣錠の効能を調べること。
第２の目的
細菌性膣炎（ＢＶ）の被験者における Laccure 膣錠の安定性、認容性、ｐＨレベルおよび患者の満足度を調べること。
【０３１３】
方法論
この試験は、３つの並行治療グループでのオープン・デザインであった。患者は次の治療のいずれかに無作為的に分けられた：
１週間に１回の Laccure 膣錠での１週間の治療（ＯＷ）、
１週間に２回の Laccure 膣錠での１週間の治療（ＢＷ）、
ＢＶの治療なしの対照群（Ｃ）。
【０３１４】
患者は次のスケジュールに従って病院を訪れた：
【表３１】
2015526413.tif 000044
【０３１５】
患者は、１週間に１回のグループでは日１の夕方に、１週間に２回のグループでは日１と日４の夕方に、それぞれ膣錠を自分で投与した。
無作為的に訪問３に分類された患者は、１週間に１回のグループでは日８の夕方に、１週間に２回のグループでは日８および日１１の夕方に、それぞれ自分で膣錠を投与した。
【０３１６】
被験者の数
フル・アナリシス・セット（FAS）およびパー・プロトコール（PP）がデータを出すのに用いられた。
上記の FAS は、試験膣錠の少なくとも１投与を受けたすべての分類された患者からなっていた（この人数は安定性の人数としても考えられていた）。
上記の PP は、試験膣錠の少なくとも１投与を受け、かつ重大なプロトコール違反、すなわち包含／除外クライテリアを満たさなかった、訪問３を欠落した、抗生物質を使用した、生理／出血があった、誤った数の膣錠を用いた、あるいは日１３を過ぎてから訪問３をしたなどの違反がなかったすべての分類された患者からなっていた。
対照群に関しては、上記の FAS はすべての患者から構成されており、PP は重大なプロトコール違反がなかった、すべての患者からなっていた。
【０３１７】
【表３２】
2015526413.tif 000045
【０３１８】
診断および包含のための基準
現に細菌性膣炎に罹っていることが確認された、すなわち次の４つの アムセルの基準：淡い白〜黄色の均質な排出物、顕微鏡上での手がかりの細胞、アルカリを加えたときの魚臭および４．５より高いｐＨのうち、少なくとも３つが該当した、年齢が１８歳以上の女性。
【０３１９】
試験製品、バッチＮｏ．投与量および投与モード
Laccure 膣錠、GMP バッチＮｏ．83601-1010-06 および 83601-1010-10、１週間に１回または１週間に２回、夕方に投与した。
各投与時に、試験者からの指示に従って、１錠の膣錠が膣内深部に挿入された。
【０３２０】
治療期間
治療期間は１週間であった。
【０３２１】
参考治療
参考治療はなかった。対照群は治療を受けなかった患者からなっていた。
【０３２２】
評価基準
第１の目標点：
１週間に１回の治療群と治療を受けなかった対照群との間で、１週間時点でアムセルの基準によるＢＶが認められなかった症例数を比較すること。
任意に報告された不利な出来事、および最終訪問時の陰門膣検査での不利な出来事。
第２の目標点：
−  他の治験グループとの間の、１週間後におけるアムセルの基準によるＢＶなしの症例数
−  試験期間を通じての膣ｐＨの変化
−  患者満足度（最終訪問時における質問による使用者利便性）
−  個々のアムセルの基準での、１週間経過時点における患者の割合として評価された錠剤の効能：
−  淡い、白〜黄色の均質な排出物を有する患者の割合
−  顕微鏡上での手がかりの細胞
−  アルカリ添加時の魚臭
−  ４．５より高いｐＨ
−  安全性の変数
【０３２３】
統計の手法
すべての有効性の変数は、訪問１（日１）から訪問３（日８）までのデータが出されたときに、FAS と PP 両方の人数を用いて分析された。
最初の分析では、１週間に１回の治療群と治療されなかった対照群との間で、アムセルの基準によるＢＶなしの被験者の人数を、訪問３（日８）時点で比較した。
応答レートは、論理的補正なしで、Chi-Square テストを用いて、二つのグループ間で比較した。
【０３２４】
訪問３（日８）時点でのアムセルの基準によるＢＶなしの２番目の分析では、１週間に２回の治療群と非治療の対照群、および合わせた治療群と非治療の対照群とを比較した。これらの分析は、上記の最初の分析と同じ手法で行われた。
【０３２５】
訪問３（日８）時点でＢＶなしの被験者の割合は、異なった治療群（すなわち、１週間に１回、１週間に２回および対象群ならびに合わせた治療群）によるＢＶなしの被験者の人数に対して、95% 信頼限界とともに、頻度表を用いて、示されている。Chi-square テストからの p-値は、表の中に含まれている。
【０３２６】
各治療群内（すなわち、１週間に１回、１週間に２回、合わせた治療群、および対照群）でのｐＨ値における，訪問１（日１）および訪問２（日４）／訪問３（日８）の間の差は、二つのテストを用いて分析された：
1. ワン−サンプル t-テストおよび
2. Wilcoxon サイン・ランク・テスト
【０３２７】
被験者の質問
異なった被験者満足度質問に対して応答した被験者の割合が、１週間に１回のグループと１週間に２回のグループとの間で、Chi-Square を用い、コンティニュイティ補正なしで比較された。
【０３２８】
個々の アムセルの基準
アムセルの基準による２番目のすべての目標点が、Chi-Square を用い、コンティニュイティ補正なしで分析された。
【０３２９】
結果
細菌性膣炎
訪問３時点でＢＶなしの患者数が、分析セットおよび治療群により、表２１に示されている。１週間に１回および１週間に２回それぞれについての応答レートを、対照群についての応答レートと比較すると、両方ともに高度に統計的に顕著な差があった（p<0.0001 すべての比較に対して）。
このことは、合わせた治療群を対照群と比較したときでも真実であった（p < 0.0001)。
これらの結果は、FAS および PP ともに同様であった。１週間に１回治療の応答レートと１週間に２回治療の応答レートの間に、統計的に顕著な差は見られなかった（FAS; p=0.3644, PP; p=0.3013)。
【０３３０】
表２１  アムセルの基準による細菌性膣炎（ＢＶ）を有する患者
【表３３】
2015526413.tif 000046
＊データベースをロックした後、対照群の１人の患者が訪問２（日４）の時点ですでに Laccure 膣錠での治療群に分類されていたことが見つかった。したがって、この患者は PP 分析セット加えられるべきでなかったし、この群におけるＢＶなしの正しい％は、7.4％であるべきだった。
【０３３１】
個々のアムセルの基準：異常な排出物、手がかり細胞および魚臭
表２２〜２４は、ベース・ライン（訪問１）時点および１週（訪問３）時点で、異常な（淡い、白〜黄色）膣排出物、手がかりの細胞または魚臭を有する患者の人数および割合を示す。pH>4.5。
【０３３２】
淡い、白〜黄色の膣排出物を有する患者の人数および割合が表２２に示されている。１週間に１回、１週間に２回および対照群に対する治療群を比較すると、１週間後の応答割合において、FAS および PP セットの両方で、統計的に顕著な差があった（p<0.0001）。１週間に１回と１週間に２回を比較すると、統計的に顕著な差は見られなかった。
【０３３３】
表２２  淡白〜淡黄色の均質な膣排出物（アムセルの基準）を有する患者の人数および割合
【表３４】
2015526413.tif 000047
【０３３４】
顕微鏡上で手がかりの細胞を有する患者の人数および割合が表２３に示されている。１週間に１回、１週間に２回、および対照群に対する治療群を比較すると、１週間後の応答割合において、FAS および PP セットの両方で、統計的に顕著な差があった（p<0.0001）。１週間に１回と１週間に２回を比較すると、統計的に顕著な差は見られなかった。
【０３３５】
表２３  顕微鏡上で手がかりの細胞（アムセルの基準）を有する患者の人数および割合
【表３５】
2015526413.tif 000048
【０３３６】
魚臭を発する膣排出物を有する患者の人数および割合が表２４に示されている。１週間に１回、１週間に２回、および対照群に対する治療群を比較すると、１週間後の応答割合において、FAS および PP セットの両方で、統計的に顕著な差があった（p<0.0001）。１週間に１回と１週間に２回を比較すると、統計的に顕著な差は見られなかった（p<0.05）。
【０３３７】
表２４  アルカリ添加により魚臭を発する膣排出物を有する患者の人数および割合（アムセルの基準）
【表３６】
2015526413.tif 000049
【０３３８】
ｐＨの変化
図８参照。
１週間に１回治療群および１週間に２回治療群において、ベース・ライン（日１）から日４（訪問２）および日８（訪問３）にかけて、FAS および PP 分析セットの両方で、平均および中間ｐＨの統計的に顕著な低下が見られた。
Laccure 膣錠を１錠用いたときのベース・ラインから日４までの中間の低下は、0.9 pH-単位 (p<0.0001)であったのに対して、対照群ではｐＨの低下が 0.2 pH-単位 (p<0.05) であった。
【０３３９】
Laccure 膣錠を用いた１週間に１回または２回（治療群合計）のベース・ラインから日８までの中間の低下は 0.5 pH-単位 (p<0.0001)であったのに対して、対照群 (ns)ではそのｐＨ低下が 0.2 pH- 単位であった。P-値は Wilcoxon サイン・ランク・テストを用いて計算された（図９参照）。
【０３４０】
膣のｐＨが >4.5 である患者の人数および割合は表２５に示されている。
１週間に１回、１週間に２回および治療群合計を対照群と比較すると、１週間後の応答割合において、FAS および PP 分析セットの両方で、統計的に顕著な差があった (p<0.05)。１週間に１回と１週間に２回を比較すると、統計的に顕著な差は見られなかった。
【０３４１】
表２５  ｐＨ >4.5 の患者の人数および割合（アムセルの基準）
【表３７】
2015526413.tif 000050
【０３４２】
許容性／使用者の利便性
１週間に１回または１週間に２回 Laccure 膣錠で治療された患者が、最終訪問日に９項目を含む質問に回答した。
FAS-分析セットでの応答割合および信頼限界が表２２に示されている。PP-分析での応答割合は同様であったので、この報告には提示されていない。
85 % より多くの患者は、治療が使用者に対して好ましかったということに、完全に同意していた。
85 % より多くの患者は、膣錠の挿入が容易であるということに、完全に同意していた。
90 % より多くの患者は、膣錠を使用するのが厄介でなかったということに、完全にまたは部分的に同意していた。
90 % より多くの患者は、より頻繁に投与しないことが楽であるということについて、完全にまたは部分的に同意していた。
90 % を超える患者は、治療が効果的であり、臭いの問題がなくなったということについて、完全にまたは部分的に同意していた。
【０３４３】
安全性
重篤で不利な結果 (SAE) はなかった。
【０３４４】
臨床試験の結論
試験は、ICH GCP ガイダンスに従って、データの欠落なく終了した多数の患者で、良好に行われた。
１週間に１回の治療群と非治療群との間で、訪問３（日８）時点で、アムセルの基準に従って、ＢＶなしの被験者の割合を比較するという第１の有効性目標点は、FAS および PP 分析セットを用いた両方で、１週間に１回の治療群が統計的に顕著に有利であった。
１週間に２回の治療群と治療をしなかった対照群との間、ならびに治療群合計と治療をしなかった対照群との間で比較した結果は、FAS および PP 分析セットを用いた両方で、顕著に満足できるものであった。
１週間に１回の治療と１週間に２回の治療との間での応答割合では、統計的に顕著な差は見られなかった。
【０３４５】
試験Ａと試験Ｂとの間での応答割合の数値的な比較は、１週間に１回または１週間に２回治療した被験者での効果は、殆ど同等であることを明らかに示している。
【０３４６】
３つのすべての群で、ベース・ラインから訪問２の間に、ｐＨ値の平均的な低下(MV) があった。この低下は、すべての群について統計的に顕著であった。
ベース・ラインから訪問３にかけてのｐＨ値の低下もあったが、この低下は２つの治療群についてだけであって、対照群については統計的に顕著でなかった。ｐＨの低下は、対照群に比べて、２つの治療群で実質的により大きかった。
【０３４７】
総括すると、この治療を受けた被験者の認識は、有効性および使用者の利便性という点において、極めて良好であった。
【０３４８】
Laccure 膣錠での治療は、この患者集団内では、充分に耐性があったと考えられた。
【図１】
2015526413.tif 000054
【図２】
2015526413.tif 000055
【図３】
2015526413.tif 000056
【図４】
2015526413.tif 000057
【図５】
2015526413.tif 000058
【図６】
2015526413.tif 000059
【図７】
2015526413.tif 000060
【図８】
2015526413.tif 000061
【図９】
2015526413.tif 000062
【手続補正書】
【提出日】平成26年7月4日(2014.7.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｉ）次の式を有する乳酸オリゴマー：
【化１】
2015526413.tif 000063
（式中、ｎは２〜２０、２〜１９または２〜１８の整数であり、該乳酸オリゴマーの全重量の約１０〜約２０重量％は、ｎが２に等しいトリマーＨＬ3であり、該乳酸オリゴマーの数平均分子量Ｍnは約２００〜約５００であり、重合度ＰＤｎが約２〜約３．８である）
および
ii）約１０〜約２０ｃＰの粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロースである粘膜付着剤
を含む組成物。
【請求項２】
乳酸オリゴマーの数平均分子量Ｍnが約２００〜約４００である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
乳酸オリゴマーのＭnが約２３０〜約３４０である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
乳酸オリゴマーの多分散性指数が約１．４５以上である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
乳酸オリゴマーの多分散性指数が１．４５〜約６または約２〜６である、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
乳酸オリゴマーが、乳酸オリゴマーにおけるモノマー単位の数の関数としての％での含量を示す分子量分布曲線における反映として、ｎが１〜１３の範囲内にあるオリゴマー類の範囲を含む、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
乳酸オリゴマーが、約２００〜約２４０の範囲の数平均分子量、約２９０〜約５００の範囲の重量平均分子量、１．４５〜２．５の範囲の多分散性指数を有する、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
乳酸オリゴマーが重合度２．５〜３．８を有する、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
乳酸オリゴマーが、約２５５〜約４２５の範囲の数平均分子量、約３７０〜５８０の範囲の重量平均分子量、１．４５〜２．５の範囲の多分散性指数を有する、請求項１および４〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
乳酸オリゴマーが：
１０〜２０重量％の ＨＬ2(すなわち ｎ＝１)
１０〜２０重量％の ＨＬ4(すなわち ｎ＝３)
１０〜１５重量％の ＨＬ5(すなわち ｎ＝４) 
５〜１５重量％の ＨＬ6(すなわち ｎ＝５)
を含む、請求項１〜９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
乳酸オリゴマーが HL10、HL11、HL12、HL13および HL14 をそれぞれ１〜５重量％含む、請求項１〜１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
乳酸オリゴマーが約２２５〜約２７５の数平均分子量を有する、請求項１、２、４〜６、１０および１１のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
膣投与用にデザインされた請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
固形または半固形組成物の形態にある、請求項１〜１３のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
タンポン、ヴァギトリウム、膣エアゾル、膣カップ、膣ゲル、膣インサート、膣パッチ、膣リング、膣スポンジ、膣坐剤、膣クリーム、膣乳剤、膣フォーム、膣ローション、膣軟膏、膣散剤、膣シャンプー、膣液剤、膣スプレー、膣懸濁液、膣錠、膣ロッド、膣ディスク、半透過性パッケージングまたはそれらの組合せの形態にある、請求項１〜１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項１６】
膣錠の形態にある請求項１〜１５のいずれかに記載の組成物。
【請求項１７】
緩衝剤をさらに含む請求項１〜１６のいずれかに記載の組成物。
【請求項１８】
凍結乾燥剤をさらに含む請求項１〜１７のいずれかに記載の組成物。
【請求項１９】
組成物の製造方法が、
i）任意に１種以上の医薬的に許容される賦形剤とともに水を容器中に入れて、医薬的に許容される賦形剤が溶解するまで混合する、
ii) ｉ）からの溶液を約８０℃に加熱する、
iii) 粘膜付着剤を少しずつ加え、加えるたびにゆっくり混合する、
iv）混合物を約５５℃に冷却する、
v) 断続的に均質化しながら上記の容器に乳酸オリゴマーを加える、
vi) v）からの材料を型に充填する、
vii) 充填された型を約−２５℃で冷凍する、そして
viii）vii)から得られた冷凍材料を凍結乾燥する
工程を含む、請求項１〜１８のいずれかで定義された組成物を製造する方法。
【国際調査報告】
2015526413.tif 000064
2015526413.tif 000065
2015526413.tif 000066