(57)【要約】  本発明は、とりわけ、プロタンパク質転換酵素スブチリシン／ケキシン９型（ＰＣＳＫ９）の阻害剤を用いた治療の薬効および特異性を、生体試料の脂質の濃度、および／または脂質−脂質濃度比を検出し、それを対照と比較することによって測定するための方法、およびその使用を提供する。本発明は、とりわけ、ＰＣＳＫ９阻害薬が血清中低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）濃度を降下させることにおいて効率的に機能するか、およびＰＣＳＫ９阻害薬がいかなる有害な副作用、例えば、肝毒性なども示さないかを決定することに適用可能である。薬効および可能性のある有害な薬剤誘発性副作用を検出することにおいて、現在利用されている臨床マーカーよりも特異度および感度が高い脂質マーカーが提供される。前記脂質に対する抗体、ならびにＰＣＳＫ９阻害薬誘発性有害反応を予測および診断するためのその使用も提供される。本発明は、さらに、ＰＣＳＫ９阻害薬の有効性および薬剤誘発性有害反応を決定するための脂質、および／またはそれに対する抗体を含むキットに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における脂質降下薬を用いた治療の有効性を決定するための方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度を決定するステップであって、前記試料中の濃度が対照と比較して低下または上昇していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、
濃度の低下が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
濃度の上昇が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して減少または増加していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、
その減少が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
その増加が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【請求項２】
対象における脂質降下薬を用いた治療の有効性を予測するための方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度を決定するステップであって、前記試料中の濃度が対照と比較して上昇または低下していることにより前記治療が有効であろうことが示され、
濃度の上昇が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
濃度の低下が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して増加または減少していることにより前記治療が有効であろうことが示され、
その増加が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
その減少が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【請求項３】
脂質降下薬治療に対する対象の適合性を決定するための方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度を決定するステップであって、前記試料中の濃度が対照と比較して低下または上昇していることにより良好な治療適合性が示され、
濃度の低下が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
濃度の上昇が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して減少または増加していることにより良好な治療適合性が示され、
濃度の減少が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
その増加が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【請求項４】
脂質降下薬として、または心血管疾患およびその合併症を治療するために有用である化合物を同定するための方法であって、
（ａ）前記化合物を用いた治療を受けている前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度を決定するステップであって、前記試料中の濃度が対照と比較して低下または上昇していることにより脂質降下薬としての有用性が示され、
濃度の低下が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
濃度の上昇が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して減少または増加していることにより脂質降下薬としての有用性が示され、
その減少が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
その増加が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【請求項５】
脂質降下薬がＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーであり、前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーが、
（ａ）ＰＣＳＫ９に対する抗体、
（ｂ）ＰＣＳＫ９の阻害薬物、
（ｃ）ＬＤＬ−受容体とＰＣＳＫ９の相互作用を阻害する小分子、
（ｄ）ＬＤＬ−受容体のＰＣＳＫ９との相互作用ドメインを模倣するペプチド、
（ｅ）ＰＣＳＫ９に特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチド、または
（ｆ）ＰＣＳＫ９に特異的な低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）
であってもよい、請求項１から４までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーの特異性を決定するための方法であって、対象由来の試料中の１つもしくは複数の脂質の濃度または脂質−脂質濃度比が対照と比較され、前記１つまたは複数の前記脂質または脂質−脂質濃度比が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ、総ＬａｃＣｅｒ、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡ、総ＳＰＨ、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択され、
前記対照が、
（ａ）ＰＣＳＫ９機能喪失型変異を有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値、
（ｂ）ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルを有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値、または
（ｃ）公知の特異的なＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療した１つまたは複数の対象に由来する試料または値
であり、前記試料と対照中の前記１つもしくは複数の脂質または脂質−脂質濃度比の間に差異がないことにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療の特異性が示され、差異があることにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたは化合物によって非特異的な影響、例えば、１つまたは複数の有害な副作用などが引き起こされることが示される方法。
【請求項７】
ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルが、対照由来の１つもしくは複数の脂質の濃度または脂質−脂質濃度比を決定することによって作成される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
比較が行われる前記対象が、
（ａ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている患者、
（ｂ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている試験動物、
（ｃ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬を用いた治療を受けている患者または試験動物、または
（ｄ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー、ＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物またはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬を用いた治療を受けたことがなく、現在も受けていない患者または試験動物である、請求項１から７までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
比較が行われる前記対照が、脂質降下薬またはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーをそれぞれ用いて治療する前、または前記治療を中断している間の同じ対象由来の対照試料である、請求項１から５までまたは請求項８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
比較が行われる前記対照が、
（ａ）以前にＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療されていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値
（ｂ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療を受けていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値、
（ｃ）ＰＣＳＫ９遺伝子に任意の機能喪失型変異、例えば、Ｒ４６Ｌ（ｒｓ１１５９１１４７）などを有する１つまたは複数の対象由来の対照試料、または
（ｄ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療中であり、薬剤誘発性オフターゲット効果の徴候または履歴がない１つまたは複数の対象から確立された対照値
である、請求項１から８までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記対象または前記対象由来の試料におけるＬＤＬコレステロールのレベルを決定または評価するステップをさらに含み、対象のＬＤＬコレステロールレベルが低下していてもよい、請求項１から１０までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
（ａ）試料が、血液、血漿、血清、もしくはその画分、例えば、リポタンパク質画分など、または組織生検材料であり、かつ／または
（ｂ）脂質濃度および／または脂質比が、質量分析法、核磁気共鳴分光法、蛍光分光法または二面偏波式干渉法、ＨＰＬＣもしくはＵＰＬＣなどの高性能分離法、ＥＬＩＳＡなどのイムノアッセイを使用すること、および／または分析物に特異的に結合することができる結合部分を用いることによって決定される、請求項１から１１までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
心血管疾患のリスクを低下させる、またはそれを治療するものであってもよい療法において使用するためのＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーであって、
（ａ）対象もしくは対象由来の試料における、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択される１つまたは複数の脂質の濃度が低下する、
（ｂ）対象もしくは対象由来の試料における、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択される１つまたは複数の脂質の濃度が上昇する、または
（ｃ）対象もしくは対象由来の試料における、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が減少する、または
（ｄ）対象もしくは対象由来の試料における、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が増加する、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー。
【請求項１４】
心血管疾患がアテローム性動脈硬化症、冠動脈疾患、急性心筋梗塞、および／または脳卒中である、請求項１３に記載のＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー。
【請求項１５】
ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーが、
（ａ）ＰＣＳＫ９に対する１つまたは複数の抗体、
（ｂ）ＰＣＳＫ９の阻害薬物、
（ｃ）ＬＤＬ−受容体とＰＣＳＫ９の相互作用を阻害する小分子、
（ｃ）ＬＤＬ−受容体のＰＣＳＫ９との相互作用ドメインを模倣するペプチド、
（ｄ）ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的な１つまたは複数のｓｉＲＮＡ、および／または
（ｅ）ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的な１つまたは複数のアンチセンスオリゴヌクレオチド
から選択される、請求項５から１２までのいずれか１項に記載の方法、または請求項１３または１４に記載のＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー。
【請求項１６】
脂質降下薬を用いた治療の有効性を予測または決定するための、請求項１に記載の脂質のいずれか１つまたは脂質−脂質濃度比の脂質のいずれか１つに対する抗体の使用。
【請求項１７】
脂質降下薬がＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーである、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
対象におけるＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療に起因する１つまたは複数の有害な副作用を予防または治療するための、請求項１に記載の脂質のいずれか１つまたは脂質−脂質濃度比の脂質のいずれか１つに対する抗体の使用。
【請求項１９】
１つまたは複数の有害な副作用が肝毒性である、請求項６に記載の方法または請求項１８に記載の抗体。
【請求項２０】
請求項１から１２までのいずれか１項に記載の方法を実施するためのキットであって、
（ａ）請求項１に記載の脂質から選択される標準脂質を含み、
（ｂ）１つまたは複数の対照マーカー、例えば、１つもしくは複数の脂質、例えば、請求項１に記載の脂質、またはタンパク質など、
（ｃ）陽性対照および／または陰性対照、
（ｄ）内部標準物質および／または外部標準物質、
（ｅ）較正線対照、
（ｆ）請求項１に記載の脂質のいずれか１つに結合することができる、抗体であってもよい作用剤、および
（ｇ）前記方法または使用を実施するための試薬
から選択される１つまたは複数の別の参照化合物
を含んでもよいキット。
【請求項２１】
（ｉ）請求項１から１２までに記載の目的のいずれかのための、または
（ｉｉ）請求項１から１２までに記載の方法のいずれかにおける、
請求項２０に記載のキットの使用であって、対象由来の試料中の脂質濃度または脂質−脂質濃度比が、
（ａ）質量分析法、および／または
（ｂ）酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）
を使用することによって決定されてもよいキットの使用。
【請求項２２】
脂質降下薬を用いて対象を治療する方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度を決定するステップであって、前記試料中の濃度が対照と比較して低下または上昇していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、
濃度の低下が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
濃度の上昇が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して減少または増加していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、
その減少が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
その増加が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【請求項２３】
（ａ）前記脂質降下薬を前記対象に投与するステップ、および／または
（ｂ）有効性が高いことが決定されたら、前記脂質降下薬の投与を継続すること
をさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記対象を治療する前に前記対象における前記治療の有効性を予測するステップを含む、脂質降下薬を用いて対象を治療する方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度を決定するステップであって、前記試料中の濃度が対照と比較して上昇または低下していることにより前記治療が有効であろうことが示され、
濃度の上昇が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
濃度の低下が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して増加または減少していることにより前記治療が有効であろうことが示され、
その増加が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
その減少が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【請求項２５】
前記対象において前記治療が有効であろうことが決定されたら、前記脂質降下薬を前記対象に投与するステップをさらに含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
脂質降下薬治療に対する対象の適合性を決定することを含む、脂質降下薬を用いて対象を治療する方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度を決定するステップであって、前記試料中の濃度が対照と比較して低下または上昇していることにより良好な治療適合性が示され、
濃度の低下が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
濃度の上昇が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して減少または増加していることにより良好な治療適合性が示され、
濃度の減少が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
その増加が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【請求項２７】
（ａ）前記脂質降下薬を前記対象に投与するステップ、および／または
（ｂ）良好な治療適合性が決定されたら、前記脂質降下薬の投与を継続すること
をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
脂質降下薬がＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーである、請求項２２から２７までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて対象を治療する方法であって、対象由来の試料中の１つもしくは複数の脂質の濃度または脂質−脂質濃度比が対照と比較され、前記１つまたは複数の前記脂質または脂質−脂質濃度比が、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡ、総ＳＰＨ、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択され、
前記対照が、
（ａ）ＰＣＳＫ９機能喪失型変異を有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値、
（ｂ）ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルを有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値、または
（ｃ）公知の特異的なＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療した１つまたは複数の対象に由来する試料または値
であり、前記試料と対照中の前記１つもしくは複数の脂質または脂質−脂質濃度比の間に差異がないことにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療の特異性が示され、差異があることにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたは化合物によって非特異的な影響、例えば、１つまたは複数の有害な副作用などが引き起こされることが示される方法。
【請求項３０】
ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルが、対照由来の１つもしくは複数の脂質の濃度または脂質−脂質濃度比を決定することによって作成される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーが、
（ａ）ＰＣＳＫ９に対する１つまたは複数の抗体、
（ｂ）ＰＣＳＫ９の阻害薬物、
（ｃ）ＬＤＬ−受容体とＰＣＳＫ９の相互作用を阻害する小分子、
（ｄ）ＬＤＬ−受容体のＰＣＳＫ９との相互作用ドメインを模倣するペプチド、
（ｅ）ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的な１つまたは複数のｓｉＲＮＡ、および／または
（ｆ）ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的な１つまたは複数のアンチセンスオリゴヌクレオチド
である、請求項２９から３０までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
比較が行われる前記対象が、
（ａ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている患者、
（ｂ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている試験動物、
（ｃ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬を用いた治療を受けている患者または試験動物、または
（ｄ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー、ＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物またはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬を用いた治療を受けたことがなく、現在も受けていない患者または試験動物
である、請求項２２から３１までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
比較が行われる前記対照が、脂質降下薬またはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーをそれぞれ用いて治療する前、または前記治療を中断している間の同じ対象由来の対照試料である、請求項２２から２８までまたは請求項３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
比較が行われる前記対照が、
（ａ）以前にＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療されていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値、
（ｂ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療を受けていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値、
（ｃ）ＰＣＳＫ９遺伝子に任意の機能喪失型変異、例えば、Ｒ４６Ｌ（ｒｓ１１５９１１４７）などを有する１つまたは複数の対象由来の対照試料、または
（ｄ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療中であり、薬剤誘発性オフターゲット効果の徴候または履歴がない１つまたは複数の対象から確立された対照値
である、請求項２２から３２までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記対象または前記対象由来の試料におけるＬＤＬコレステロールのレベルを決定または評価するステップをさらに含み、対象のＬＤＬコレステロールレベルが低下していてもよい、請求項２２から３４までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
（ａ）試料が、血液、血漿、血清、もしくはその画分、例えば、リポタンパク質画分など、または組織生検材料であり、かつ／または
（ｂ）脂質濃度および／または脂質比が、質量分析法、核磁気共鳴分光法、蛍光分光法または二面偏波式干渉法、ＨＰＬＣもしくはＵＰＬＣなどの高性能分離法、ＥＬＩＳＡなどのイムノアッセイを使用すること、および／または分析物に特異的に結合することができる結合部分を用いることによって決定される、請求項２２から３５までのいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂質のレベルおよび脂質−脂質濃度比を測定して、プロタンパク質転換酵素スブチリシン／ケキシン９型（ＰＣＳＫ９）を標的とする治療の薬効および特異性を測定することを伴う方法に関する。本発明は、とりわけ、ＰＣＳＫ９標的化治療が効率的に機能するか、およびＰＣＳＫ９標的化合物がオフターゲット効果を示さないかを決定することに適用可能である。本発明は、ＰＣＳＫ９標的化治療に対する患者の適合性(compliance)を評価するためにも有用である。当該方法は、生体試料の脂質バイオマーカーレベルを分析し、それを対照と比較することを含む。
【背景技術】
【０００２】
血漿低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）コレステロールは、冠状血管疾患に対する確立されたリスクファクターである。一般に、高血中コレステロールレベルはスタチンを用いて治療される。しかし、患者の最初の血漿中コレステロール値が高いまたは患者がスタチン治療に対する抵抗性を示す場合、高投与量のスタチンでさえ、コレステロールレベルを十分に低下させるために十分には効率的でない可能性がある。また、高スタチン投与量により、副作用のリスクが増加し得る。したがって、冠状血管疾患（ＣＶＤ）を予防および治療するためには新しいコレステロール降下介入が必要である。
【０００３】
ヒト遺伝的研究により、ＰＣＳＫ９が、血漿中ＬＤＬレベルの調節において中心的な役割を果たすことが示されている（Abifadel, M. et al. 2003. Mutations in PCSK9 cause autosomal dominant hypercholesterolemia. Nat Genet 34: 154-156）。ＰＣＳＫ９は、セリンプロテアーゼ、プロタンパク質転換酵素のファミリーに属する（Seidah, N. G. et al. 2003. The secretory proprotein convertase neural apoptosis-regulated convertase 1(NARC-1): liver regeneration and neuronal differentiation. Proc Natl Acad Sci U S A 100: 928-933）。しかし、その酵素活性とは関係なく、ＰＣＳＫ９は、細胞外でＬＤＬ−Ｒに結合し、そのリソソーム分解を容易にし、したがって、ＬＤＬ−Ｒが細胞表面に戻って再利用されることを阻害することにより、肝細胞表面上で発現されるＬＤＬ−受容体（ＬＤＬ−Ｒ）の数を減少させる（Horton, J. D. et al. 2009. PCSK9: a convertase that coordinates LDL catabolism. J Lipid Res 50 Suppl: S172-177）。ＰＣＳＫ９遺伝子に機能喪失型変異を有する個体では、血漿中ＬＤＬコレステロールレベルが低下しており、ＣＶＤから保護される（Cohen, J. et al. 2005. Low LDL cholesterol in individuals of African descent resulting from frequent nonsense mutations in PCSK9. Nat Genet 37: 161-165; Abifadel, M. et al. 2003. Mutations in PCSK9 cause autosomal dominant hypercholesterolemia. Nat Genet 34: 154-156）。対照的に、ＰＣＳＫ９遺伝子における機能獲得型変異は、血漿中ＬＤＬレベルの上昇および早発性ＣＶＤに関連することが示されている（Abifadel, M. et al. 2003）。さらに、マウスにおいてヒトＤ３７４Ｙ機能獲得ＰＣＳＫ９を発現させることにより、Ｄ３７４Ｙマウスでは野生型マウスと比較してより多くのトリアシルグリセロールリッチリポタンパク質が循環中に分泌されることが示されたので、ＬＤＬ−Ｒ活性の低下が高コレステロール血症の唯一の原因ではない可能性があることが示されている（Herbert, B. et al. 2010. Increased secretion of lipoproteins in transgenic mice expressing human D374Y PCSK9 under physiological genetic control. Arterioscler Thromb Vasc Biol 30: 1333-1339）。これらの知見により、ＰＣＳＫ９が高コレステロール血症の治療における潜在的な標的として位置づけられる。
【０００４】
マウスでは、ＰＣＳＫ９は主に肝臓、小腸、および腎臓において発現される（Zaid, A. et al. 2008. Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9(PCSK9): hepatocyte-specific low-density lipoprotein receptor degradation and critical role in mouse liver regeneration. Hepatology 48: 646-654）。マウスにおけるＰＣＳＫ９の完全なノックアウトにより、循環しているＬＤＬコレステロールレベルがおよそ４０％低下することが示されている（Rashid, S. et al. 2005. Decreased plasma cholesterol and hypersensitivity to statins in mice lacking Pcsk9. Proc Natl Acad Sci U S A 102: 5374-5379）。ＨＭＧ−補酵素Ａレダクターゼ阻害剤であるスタチンの投与により、ＬＤＬレベルがはるかに大きく低下することが示され、これは、ＣＶＤの治療におけるスタチンとＰＣＳＫ９阻害の同時使用の潜在性を示している。しかし、ＰＣＳＫ９は、マウス肝臓再生において役割を果たすことが示されている（Zaid, A. et al. 2008. Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9(PCSK9): hepatocyte-specific low-density lipoprotein receptor degradation and critical role in mouse liver regeneration. Hepatology 48: 646-654）。したがって、ＰＣＳＫ９機能の完全な阻害により、肝臓損傷時の合併症、さらには死亡のリスクが増す可能性がある。他方では、同じ試験において、ＰＣＳＫ９ヘテロ接合体ノックアウトマウスにおいて、ＰＣＳＫ９活性の５０％減少は有害ではなく、肝臓再生は損なわれないことが実証された。
【０００５】
最近、ヒトにおいて、スタチンおよび他の脂質降下薬物により、ステロール調節エレメント−結合タンパク質−２（ＳＲＥＢＰ−２）が活性化されることによって血清中ＰＣＳＫ９タンパク質レベルが上昇することが示されている（Careskey, H. E. et al. 2008. Atorvastatin increases human serum levels of proprotein convertase subtilisin/kexin type 9. J Lipid Res 49: 394-398およびKonrad, R. J. et al. 2011. Effects of currently prescribed LDL-C-lowering drugs on PCSK9 and implications for the next generation of LDL-C-lowering agents. Lipids Health Dis 10: 38）。これらの知見により、スタチンまたは他のＬＤＬ降下薬剤と組み合わせたＰＣＳＫ９阻害が最も効率的な治療転帰を実現するために必要であることが示唆される。
【０００６】
ＰＣＳＫ９は脂質異常症を治療するための潜在的な標的であるので、本発明者はＰＣＳＫ９欠乏の血漿中リピドームに対する影響を、ヘテロ接合体ＰＣＳＫ９ノックアウトマウスおよびホモ接合体ＰＣＳＫ９ノックアウトマウスにおいて、分子脂質のレベルでの脂質恒常性の変化を同定することを目的とした質量分析法適用を使用して調査した。そのような変化を、ＰＣＳＫ９遺伝子の既知の遺伝的バリアントの機能性に関する現在の知見を利用することによってヒトにおいても調査した。要するに、既知の機能喪失型変異を有する対象におけるリピドミックプロファイルを、主要対立遺伝子を有する対象におけるものと比較した。そのような特異的な有効性の読み取りは、ＰＣＳＫ９に作用する新しい化合物の開発および選択ならびにＰＣＳＫ９阻害剤の臨床的有効性のモニタリングの間に有用になる。定型的かつ正確な有効性の読み取りを使用して、望ましくないオフターゲット効果を、そのような非特異的な潜在的に有害な薬物の影響を示す可能性がある所定の有効性プロファイルからの偏差としてモニタリングすることもできる。
【０００７】
本発明に従って、脂質をさまざまな技法によって分析することができる。本発明に関しては、エレクトロスプレーイオン化質量分析法に基づくリピドミクスが好ましい技術である。ショットガンおよび標的化分析方法の優れた品質および特異性は、適切な環境でセットアップすれば、医薬品の安全性に関する非臨床試験の実施の基準のガイドライン（ＧＬＰ）などのストリンジェントな規制基準に適合する。
最先端技術と比較して、本明細書において同定されるバイオマーカーは、その技術の感度と特異度の両方が高いので、最小の試料量からでさえ分析することができる。
本発明では、ＰＣＳＫ９阻害薬の有効性および特異性を示すバイオマーカーを同定する。バイオマーカーにより、個体が、的確なＰＣＳＫ９阻害薬を的確な時間および用量で受けることを確実にし、それにより、この治療領域を、他のやり方ではより一般的に適用される医薬および／または治療レジメンを個別化することに向けて広げるという使命が容易なものになる。同定されたバイオマーカーは、ＰＣＳＫ９に対する新しい薬剤の開発者が、作用剤候補の中から特異的なリード化合物を選択するために使用することもできる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、とりわけ、ＰＣＳＫ９阻害を示す脂質および脂質−脂質比を提供する。これは、リピドミックプラットフォームで分析されたものと同等の脂質組成を示す機能喪失型変異に関するノックアウト動物データおよびヒト変換データに基づく。同定された脂質を使用して、ＰＣＳＫ９阻害の程度およびその特異性をモニタリングすることができる。これにより、通常はＬＤＬコレステロールの読み取りに依拠するＰＣＳＫ９阻害の調査のための新規の改善された方法がもたらされる。しかし、ＬＤＬコレステロール測定では、ＰＣＳＫ９阻害により、望ましくない副作用が引き起こされる可能性がある、有益かつ必須の脂質の降下も起こらないかに関してはいかなる情報ももたらされない。患者に対する有害作用が引き起こされる可能性がある、ＬＤＬコレステロールのレベルの過度の低下が起こらないかも難題である。本明細書において同定される脂質マーカーにより、ＰＣＳＫ９阻害の有効性およびその特異性に関する改善された知見がもたらされる。
【０００９】
ＰＣＳＫ９は脂質異常症を治療するための潜在的な標的であるので、本発明者はＰＣＳＫ９欠乏の血漿中リピドームに対する影響を、ヘテロ接合体ＰＣＳＫ９ノックアウトマウスおよびホモ接合体ＰＣＳＫ９ノックアウトマウスにおいて、分子脂質のレベルでの脂質恒常性の変化を同定することを目的とする質量分析法適用を使用して調査した。ＰＣＳＫ９対立遺伝子の一方または両方を欠くマウスにおけるＰＣＳＫ９欠乏の影響および高脂肪食によって引き起こされる脂質バイオマーカーの差異を調査するために、脂質プロファイルを、通常固形飼料またはウェスタン固形飼料のいずれかを与えた野生型、ヘテロ接合体およびホモ接合体のＰＣＳＫ９ノックアウトマウスから作成した。そのような変化を、ＰＣＳＫ９遺伝子の既知の遺伝的バリアントの機能性に関する現在の知見を利用することによってヒトにおいても調査した。要するに、既知の機能喪失型変異を有する対象由来の試料のリピドミックプロファイルを、主要対立遺伝子を有する対象由来の試料のリピドミックプロファイルと比較した。そのような特異的な有効性の読み取りは、ＰＣＳＫ９に作用する新しい化合物の開発および選択ならびにＰＣＳＫ９阻害剤の臨床的有効性のモニタリングの間に有用になる。定型的かつ正確な有効性の読み取りを使用して、望ましくないオフターゲット効果を、そのような非特異的な潜在的に有害な薬物の影響を示す可能性がある所定の有効性プロファイルからの偏差としてモニタリングすることもできる。
【００１０】
遺伝子の機能喪失型変異に起因する天然のＰＣＳＫ９阻害により、この変異の保有者の冠動脈疾患（ＣＡＤ）リスクが低い理由が少なくとも部分的に説明され得る、好都合な血漿中の分子脂質の変化が生じる。したがって、ＰＣＳＫ９機能の喪失に起因する変化からの偏差は望ましくない非特異的なオフターゲット効果に起因する可能性があるので、同定されたバイオマーカーを、ＰＣＳＫ９を標的とする任意の療法についての特異性指標として使用することができる。図１は、ＰＣＳＫ９阻害により、ＣＡＤリスクを上昇させる脂質が降下することを示す。さらに、ＰＣＳＫ９阻害をスタチン治療の脂質効果作用と比較した。スタチンクラス薬物により、肝臓ＬＤＬ−受容体が上方制御され、したがって、循環からのＬＤＬ−受容体媒介性脂質除去が増加することによって血漿脂質が降下する。ＰＣＳＫ９阻害によっても同様に、肝臓ＬＤＬ−受容体の発現の増加および循環からのＬＤＬ−受容体媒介性脂質除去の増加に起因する脂質降下が引き起こされる。したがって、理論的には、これらの２つの治療モダリティにより、同様の血漿脂質変化が生じるはずである。図１は、ＰＣＳＫ９機能喪失に起因する特異的な脂質変化を、ＰＣＳＫ９を標的とする療法についての有効性および特異性の読み取りとして使用することができることを示す。この点について、図２は、スタチンが、多くの脂質バイオマーカーのレベルにＰＣＳＫ９機能の喪失とは違うように影響を及ぼすことを示し、これにより、血漿脂質を降下させることに対するスタチンの効果が、特異的なＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーの効果よりも広範であり、特異性が低いことが示される。
【００１１】
本発明は、ＰＣＳＫ９を標的とする治療の薬効および特異性を測定するために脂質レベルを必要とする方法に関する。本発明は、とりわけ、ＰＣＳＫ９標的化治療が効率的に機能するか、およびＰＣＳＫ９標的化合物がオフターゲット効果を有さないかを決定するために適用可能である。また、本発明を使用して、ＰＣＳＫ９標的化治療における患者の適合性を評価することができる。当該方法は、生体試料の脂質レベルを分析すること、およびそれを対照と比較することを含む。
本発明の一態様では、新しい薬物化合物の機能を分析するため、ならびにＰＣＳＫ９を標的とする治療に関する患者における薬効および特異性を検出するための方法、リピドミックマーカー、抗体などの作用剤およびキットが本明細書で開示され、かつ／または特許請求されている。
本発明による方法は、例えば、ａ）ＰＣＳＫ９阻害薬を用いて治療されている、治療される予定の、または治療されていた対象または試験動物由来の生体試料を用意するステップ、ｂ）前記試料中の、本発明による有用なリピドミックマーカーであると本明細書において同定される１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）および／または１つもしくは複数の脂質比（複数可）を決定するステップ、ならびにｃ）前記決定された脂質濃度（複数可）および／または脂質比（複数可）を対応する対照における脂質濃度（複数可）と比較するステップを含んでよい。
【００１２】
本発明のリピドミックマーカーにより、ＰＣＳＫ９阻害薬の有効性および特異性を高感度で特異的に検出することが可能になる。これにより、患者のケアおよび治療転帰の実現を改善すること、毒性症状の発生およびそれにさらされることを緩和すること、ならびに薬剤誘発性オフターゲット効果に関連する罹患率／死亡率の低下を実現することが容易になる。したがって、本明細書において記載され、特許請求されているリピドミックマーカーにより、ＰＣＳＫ９阻害薬を用いて治療された、または治療される予定の患者に関して薬物介入を個々に調整することが可能になる。また、本発明は、ＰＣＳＫ９阻害化合物を試験する動物実験に適用可能である。本発明により、新規の脂質降下薬剤に関するよりよい特異性評価を行うことが可能になる。
したがって、本発明の一態様では、対象における脂質降下薬物を用いた治療の有効性を決定するための方法であって、前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して低下または上昇していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が表２〜５中の減少した脂質から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が表２〜５中の増加した脂質から選択されることを含む方法が提供される。
【００１３】
好ましい実施形態では、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の減少した脂質から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の増加した脂質から選択される。
代替の実施形態では、本発明は、対象における脂質降下薬物を用いた治療の有効性を決定するための方法であって、前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比（複数可）が対照と比較して減少または増加していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択され、その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択されるステップを含む方法に関する。
好ましい実施形態では、その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比は表４〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択され、その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比は表４〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択される。
【００１４】
本発明の別の態様では、対象における（すなわち、脂質降下治療をまだ受けていない対象における）脂質降下薬物を用いた治療の有効性を予測するための方法であって、前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して上昇または低下していることにより前記治療が有効であろうことが示され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が表２〜５中の減少した脂質から選択され、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が表２〜５中の増加した脂質から選択されるステップを含む方法が提供される。
好ましい実施形態では、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の減少した脂質から選択され、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の増加した脂質から選択される。
代替の実施形態では、本発明は、対象における（すなわち、脂質降下治療をまだ受けていない対象における）脂質降下薬物を用いた治療の有効性を予測するための方法であって、前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して増加または減少していることにより前記治療が有効であろうことが示され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択され、その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択されるステップを含む方法に関する。
好ましい実施形態では、その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比は表４〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択され、その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比は表４〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択される。
【００１５】
上記の実施形態は前記脂質降下薬物を用いた治療をまだ受けていない対象に対して有用である。
さらに別の実施形態では、本発明は、脂質降下薬物治療に対する対象の適合性を決定するための方法であって、前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して低下または上昇していることにより良好な治療適合性が示され、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が表２〜５中の減少した脂質から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が表２〜５中の増加した脂質から選択されるステップを含む方法に関する。
好ましい実施形態では、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の減少した脂質から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の増加した脂質から選択される。
【００１６】
代替の実施形態では、本発明は、脂質降下薬物治療に対する対象の適合性を決定するための方法であって、前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比（複数可）が対照と比較して減少または増加していることにより良好な治療適合性が示され、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択され、その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択されるステップを含む方法に関する。
好ましい実施形態では、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比は表４〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比は表４〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択される。
【００１７】
さらなる実施形態では、本発明は、脂質降下薬物として、または心血管疾患およびその合併症を治療するために有用である化合物を同定するための方法であって、前記化合物を用いた治療を受けている前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して低下または上昇していることにより脂質降下薬物としての有用性が示され、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が表２〜５中の減少した脂質から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が表２〜５中の増加した脂質から選択されるステップを含む方法に関する。
好ましい実施形態では、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の減少した脂質から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の増加した脂質から選択される。
【００１８】
代替の実施形態では、本発明は、脂質降下薬物として、または心血管疾患およびその合併症を治療するために有用である化合物を同定するための方法であって、前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して低下または上昇していることにより脂質降下薬物としての有用性が示され、その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択され、その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択されるステップを含む方法に関する。
好ましい実施形態では、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択される。
本発明の方法または他の実施形態の任意の好ましい実施形態では、前記脂質降下薬物はＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーである。
【００１９】
本発明の方法は、循環しているＬＤＬのレベルを測定するステップをさらに含んでよい。投与後にＬＤＬのレベルが上昇する場合、これにより、当該化合物が脂質降下薬物として有用ではないことが示される。逆に、投与後にＬＤＬのレベルが低下する場合、これにより、当該化合物が脂質降下薬物として有用であることが示される。
あるいは、本発明の方法は、ＰＣＳＫ９がＬＤＬ受容体に結合することを妨げる化合物の能力を測定するステップをさらに含んでよい。投与後に化合物によりＰＣＳＫ９がＬＤＬ受容体に結合することが妨げられない場合、これにより、当該化合物が脂質降下薬物として有用ではないことが示される。投与後に化合物によりＰＣＳＫ９がＬＤＬ受容体に結合することが妨げられる場合、これにより、当該化合物が脂質降下薬物として有用であることが示される。
さらなる実施形態では、本発明は、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーの特異性を決定するための方法であって、対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度または脂質−脂質濃度比を対照と比較するステップであって、前記１つもしくは複数の脂質または１つもしくは複数の脂質−脂質濃度比が表２〜５中の脂質および脂質−脂質濃度比から選択され、対照がＰＣＳＫ９機能喪失型変異を有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値であるステップを含む方法に関する。
この方法の代替の実施形態では、対照は、ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルを有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値である。ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルは、対照から１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または脂質−脂質濃度比を決定することによって生成することができる。
この方法のさらに別の代替的な実施形態では、対照は、公知の特異的なＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療された１つまたは複数の対象に由来する試料または値である。
【００２０】
この方法に従って試料中の前記１つもしくは複数の脂質または１つもしくは複数の脂質−脂質濃度比と対照中の前記１つもしくは複数の脂質または１つもしくは複数の脂質−脂質濃度比の間に差異がないことにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療の特異性が示される。逆に、試料中の前記１つもしくは複数の脂質または１つもしくは複数の脂質−脂質濃度比と対照中の前記１つもしくは複数の脂質または１つもしくは複数の脂質−脂質濃度比の間に差異があることにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたは化合物によって引き起こされる非特異的な影響、例えば、１つまたは複数の有害な副作用などが示される。
この方法の好ましい実施形態では、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の減少した脂質および脂質−脂質濃度比から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質は表４〜５中の増加した脂質および脂質−脂質濃度比から選択される。
【００２１】
本明細書において記載され、特許請求されている本発明の全ての態様および実施形態に関連して、比較が行われる前記対象は、（ａ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーもしくはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている患者；（ｂ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーもしくはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている試験動物；（ｃ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬物を用いた治療を受けている患者もしくは試験動物、または（ｄ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー、ＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物もしくはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬物を用いた治療を受けたことがなく、現在も受けていない患者もしくは試験動物であってよい。
脂質降下薬物（例えば、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー）を用いた治療の有効性を決定するもしくは有効性を予測するため、脂質降下薬物治療（例えば、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー）に対する対象の適合性を決定するため、または脂質降下薬物（例えば、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー）として有用である化合物を同定するための、本明細書に開示されている方法に関して、比較が行われる対照は、同じ対象から、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療の前にまたは前記治療を中断している間に得た対照試料であってよい。
【００２２】
本発明の目的に関して、対照試料は、（ａ）患者の群から、例えば、集団由来の種々の試料を混合することによって得ることもできる。患者の群を使用する場合、次いで、集団由来のいくつかの脂質プロファイルを組み合わせ、この組合せからリピドミックマーカーを創出する。本明細書において記載され、かつ／または特許請求されている方法の目的として、対象由来の試料中の個々の脂質のレベルもしくは量または脂質−脂質濃度比を対照における脂質のレベルもしくは量または脂質−脂質濃度比と比較する。
一実施形態では、比較が行われる対照は、以前にＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療されていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値であってよい。比較が行われる対照は、患者集団由来の試料の組合せを表す試料であってもよい。あるいは、対照は、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療を受けていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値であってよい。別の代替として、対照は、本発明によるリピドミックマーカーに関わるデータのセット、例えば、ＰＣＳＫ９遺伝子に任意の機能喪失型変異、例えばＲ４６Ｌ（ｒｓ１１５９１１４７）などを有する１つまたは複数の対象由来の対照試料から取得した場合の試料中の本発明による脂質（複数可）の濃度または脂質−脂質濃度比（複数可）に関する情報であってよい。別の代替として、対照は、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療中であり、薬剤誘発性オフターゲット効果の徴候または履歴がない１つまたは複数の対象から確立された対照値であってよい。
前記情報、したがって対応するデータのセットは、以前に決定、算出または推定されたものであってもよく、まだ決定、算出または推定されていないものであってもよく、文献から取得したものであってもよい。
対照試料は、血液、血漿、血清、尿または組織、またはそのリポタンパク質画分であることが好ましい。
【００２３】
本発明の全ての態様および実施形態に関して、本明細書において特許請求され、かつ／または記載されている任意の方法は、前記対象または前記対象由来の試料におけるＬＤＬコレステロールのレベルを決定または評価するステップをさらに含んでよい。一実施形態では、対象のＬＤＬコレステロールレベルは低下している。
本発明の方法によると、試料は、血液、血漿、血清、または尿であってよい。試料は、血液、血漿、血清または尿の画分、例えば、リポタンパク質画分であってもよい。血液試料を調製することができ、それから当業者に周知の技法を用いて血漿または血清、またはその画分を分離することができる。あるいは、対象由来の試料と対照試料の両方が組織試料（例えば、組織生検材料）またはそのリポタンパク質画分であってもよい。別の代替では、試料は、任意の哺乳動物細胞（例えば、赤血球）であってよい。
【００２４】
本発明の方法によるリピドミックマーカー（すなわち、本明細書において記載され、特許請求されている脂質、脂質濃度、またはリピドミックマーカーの組合せ）に関する情報を対象の試料から収集すること、および対照試料からも収集することは、種々の化学的な高分解能分析技法によって実施することができる。特に適切な分析技法としては、これだけに限定されないが、質量分析法および核磁気共鳴分光法が挙げられる。実際に、個々の脂質または脂質のクラスを分解することおよびそれを使用して構造的な情報をもたらすことができる任意の高分解能技法を使用して、対象の試料から、および対照試料からも本発明によるリピドミックマーカーを決定することができる。したがって、本発明の方法の目的に関しては、脂質濃度（複数可）または脂質比（複数可）は、質量分析法を使用することによって決定されることが好ましい。しかし、核磁気共鳴分光法、蛍光分光法もしくは二面偏波式干渉法、ＨＰＬＣもしくはＵＰＬＣなどの高性能分離方法、ＥＬＩＳＡなどのイムノアッセイおよび／または脂質分析物に特異的に結合することができる結合部分の使用も、この点について有用である。
上に示されている通り、本発明の方法の代替のまたは別の実施形態に従って、試料中の脂質分析物を、分析物を分析物に特異的に結合することができる結合部分と結合させることによって検出し、かつ／または数量化することができる。結合部分は、例えば、リガンド−受容体対、すなわち、特異的な結合相互作用を有することができる分子の対のメンバーを含んでよい。結合部分は、例えば、抗体−抗原、酵素−基質、核酸に基づくリガンド、他のタンパク質リガンド、または当技術分野で公知の他の特異的な結合対などの特異的な結合対のメンバーも含んでよい。
特に好ましい実施形態では、質量分析法（ＭＳ）を用いて本発明のリピドミックマーカーを決定し、ＭＳ計器は、直接注入法およびＨＰＬＣもしくはＵＰＬＣなどの高性能分離方法と連結されてもよい。収集された脂質プロファイルを対照と比較する際に、収集されたリピドミックマーカーにおける個々の脂質または脂質のクラスの量を使用する。
【００２５】
本発明は、療法において使用するためのＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーも包含する。そのような療法は、抗コレステロール血症の治療であることが好ましい。同様に、そのような療法により、アテローム性動脈硬化症、冠動脈疾患、急性心筋梗塞および／または脳卒中などの心血管疾患のリスクが低下する、またはそれが治療されることが好ましい。本発明のこの態様に関しては、前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーにより、対象における表２〜５中の減少した脂質から選択される１つまたは複数の脂質の濃度が低下する。対応する治療方法も同様に包含される。
好ましい実施形態では、前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーにより、対象における表４〜５中の減少した脂質から選択される１つまたは複数の脂質が減少する。
代替の実施形態では、前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーにより、対象における表２〜５中の増加した脂質から選択される１つまたは複数の脂質が増加する。好ましい実施形態では、前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーにより、対象における表４〜５中の増加した脂質から選択される１つまたは複数の脂質が増加する。
【００２６】
さらなる代替的な実施形態では、前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーにより、表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が減少する。好ましい実施形態では、前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーにより、表４〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から選択される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が減少する。
さらに別の代替的な実施形態では、前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーにより、表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が増加する。好ましい実施形態では、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーにより、表４〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から選択される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が増加する。
【００２７】
本発明の目的に関して、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーは、（ａ）１つまたは複数のＰＣＳＫ９に対する抗体、（ｂ）ＰＣＳＫ９の阻害薬物、（ｃ）ＬＤＬ−受容体とＰＣＳＫ９の相互作用を阻害する小分子；（ｄ）ＬＤＬ−受容体のＰＣＳＫ９との相互作用ドメインを模倣するペプチド、（ｅ）ＰＣＳＫ９に特異的な１つまたは複数のｓｉＲＮＡ、および／または（ｅ）ＰＣＳＫ９に特異的な１つまたは複数のアンチセンスヌクレオチドから選択することができる。本発明の目的に関して、ＰＣＳＫ９に対する抗体が、脂質降下薬、またはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーとして特に好ましい。
脂質降下薬を用いた治療の有効性を予測または決定するための、表２〜５において定義されている脂質のいずれか１つまた脂質−脂質濃度比の脂質のいずれか１つに対する抗体の使用も、本発明に包含される。好ましい実施形態では、抗体は、表４〜５において定義されている脂質のいずれか１つまたは脂質−脂質濃度比の脂質のいずれか１つに対する抗体である。対応する治療方法も同様に包含される。好ましい実施形態では、脂質降下薬物はＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーである。
対象におけるＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療に起因する１つまたは複数の有害な副作用を予防または治療するための、表２〜５において定義されている脂質のいずれか１つまたは脂質−脂質濃度比の脂質のいずれか１つに対する抗体の使用も本発明の一部である。好ましい実施形態では、抗体は、表４〜５において定義されている脂質のいずれか１つまたは脂質−脂質濃度比の脂質のいずれか１つに対するものである。対応する治療方法も同様に包含される。
本発明の目的に関して、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療に起因する、またはそれによって引き起こされる有害な副作用は肝毒性であり得る。
【００２８】
本明細書において記載され、かつ／または特許請求されている方法および使用を実施するためのキットであって、試薬および参照化合物を含むキットも、本発明に包含される。参照化合物は、これだけに限定されないが、以下の１つまたは複数であってよい：（ａ）表２〜５中の脂質から選択される標準脂質（複数可）、（ｂ）１つまたは複数の対照マーカー（例えば、１つまたは複数の脂質から、好ましくは本明細書において記載され、かつ／または特許請求されているリピドミックマーカーのいずれかに対応する脂質、または他の脂質（複数可）、例えば、総ＰＣ、または別の分子、例えば、タンパク質、ｃ）陽性対照および／または陰性対照、ｄ）内部標準物質および／または外部標準物質、ｅ）較正線対照、（ｆ）表２〜５中の脂質のいずれか１つに結合することができる抗体または他の結合部分。試薬は、前記方法または使用を実施するために有用な溶液（複数可）、溶媒（複数可）、および／または緩衝液（複数可）である。
【００２９】
本発明の一実施形態では、本明細書において記載され、かつ／または特許請求されている方法を実施するためのキットであって、試薬および参照化合物を含むキットが提供される。参照化合物は、これだけに限定されないが、以下の１つまたは複数であってよい：（ａ）表２〜５において定義されている脂質から選択される標準脂質（複数可）、場合によって、（ｂ）１つまたは複数の対照マーカー（例えば、１つまたは複数の脂質から、好ましくは本明細書において記載され、かつ／または特許請求されているリピドミックマーカーのいずれかに対応する脂質、または別の脂質（複数可）、例えば、総ＰＣ、または別の分子、例えば、タンパク質）、（ｃ）陽性対照および／または陰性対照、（ｄ）ヒトにおける化学修飾された分子、タグが付けられた分子または内在しない分子であってもなくてもよい、内部標準物質および／または外部標準物質、（ｅ）較正線対照、および（ｆ）表２〜５中の脂質のいずれか１つに結合することができる抗体であってもよい作用剤から選択される１つまたは複数の別の参照化合物、ならびに（ｇ）前記方法または使用を実施するための試薬（複数可）。
【００３０】
本発明による好ましいキットは、例えば、上で列挙されている構成物の以下の組合せを含む：（ａ）および（ｂ）、場合によって（ｇ）；（ａ）および（ｃ）、場合によって（ｇ）；（ａ）および（ｄ）、場合によって（ｇ）；（ａ）および（ｅ）、場合によって（ｇ）；（ａ）および（ｆ）、場合によって（ｇ）；（ａ）、（ｂ）および（ｃ）、場合によって（ｇ）；（ａ）、（ｂ）および（ｄ）、場合によって（ｇ）；（ａ）、（ｂ）および（ｅ）、場合によって（ｇ）；（ａ）、（ｂ）および（ｆ）、場合によって（ｇ）；（ａ）、（ｃ）および（ｄ）、場合によって（ｇ）；（ａ）、（ｃ）および（ｅ）、場合によって（ｇ）；（ａ）、（ｃ）および（ｆ）、場合によって（ｇ）；（ａ）、（ｄ）および（ｅ）、場合によって（ｇ）；（ａ）、（ｄ）および（ｆ）、場合によって（ｇ）；または（ａ）、（ｅ）および（ｆ）、場合によって（ｇ）。
好ましい一実施形態では、特許請求されているキットの１つまたは複数の対照マーカー（複数可）は、臨床の場で定期的に測定される分子（複数可）である。例えば、１つまたは複数の前記対照マーカー（複数可）がａｐｏＡ、ａｐｏＢ、アルブミンまたは総ＰＣ、またはそれらの組合せである実施形態が好ましい。
キットは、本発明の目的のいずれかのために使用され、そこで、対象由来の試料中の脂質濃度（複数可）、脂質比（複数可）またはその脂質の組合せ（複数可）を、質量分析法を使用することによって決定することが好ましい。試料は、質量分析法の前に精製および／または他の試料前調製ステップ（複数可）に供されてよい。精製ステップは、これだけに限定されないが、クロマトグラフィー、例えば、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、超高速液体クロマトグラフィー（ｕｌｔｒａ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）（ＵＰＬＣ）および／または超高速液体クロマトグラフィー（ｕｌｔｒａ  ｈｉｇｈ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）（ＵＨＰＬＣ）であってよい。試料前調製ステップは、これだけに限定されないが、固相抽出（ＳＰＥ）、誘導体化、液液抽出、および／またはリポタンパク質分画であってよい。前記質量分析法による決定は、タンデム質量分析法によって行うことができる。
【００３１】
代替の好ましい実施形態では、キットを使用し、対象由来の試料中の脂質濃度（複数可）、脂質比（複数可）またはその脂質の組合せ（複数可）を、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）を使用することによって決定する。
本発明の別の実施形態では、本発明の方法を実施するためのイムノアッセイにおいて使用することができるキットが提供される。例示的なキットは、これだけに限定されないが、（ａ）表２〜５中の脂質のいずれか１つに結合することができる抗体（複数可）、および、場合によって、以下の１つまたは複数：
（ｂ）前記酵素に特異的な基質、
（ｃ）停止液、
（ｄ）表２〜５中の脂質のいずれかに結合することができる抗体（複数可）でコーティングされたアッセイプレート、
（ｅ）標準物質（複数可）および／または較正線用標準物質（複数可）、ならびに
（ｆ）アッセイを実施するために必要な緩衝液および／または試薬
を含む。
【００３２】
別の例示的なキットは、これらに限定されないが、
（ａ）酵素とコンジュゲートした、表２〜５中の脂質のいずれか１つに結合することができる抗体（複数可）、および、場合によって、以下の１つまたは複数：
（ｂ）前記酵素に特異的な基質、
（ｃ）停止液、
（ｄ）表２〜５中の脂質のいずれかに結合することができる抗体（複数可）でコーティングされたアッセイプレート、
（ｅ）標準物質（複数可）および／または較正線用標準物質（複数可）、ならびに
（ｆ）アッセイを実施するために必要な緩衝液および／または試薬
を含む。
別の例示的なキットは、これらに限定されないが、
（ａ）酵素とコンジュゲートした表２〜５中の脂質のいずれか１つ（複数可）、および、場合によって、以下の１つまたは複数：
（ｂ）前記酵素に特異的な基質、
（ｃ）停止液、
（ｄ）表２〜５中の脂質のいずれかに結合することができる抗体（複数可）でコーティングされたアッセイプレート、
（ｅ）標準物質（複数可）および／または較正線用標準物質（複数可）、ならびに
（ｆ）アッセイを実施するために必要な緩衝液および／または試薬
を含む。
【００３３】
別の例示的なキットは、これらに限定されないが、
（ａ）検出可能な標識、例えば、ビオチンとコンジュゲートした、表２〜５中の脂質のいずれか１つに結合することができる抗体（複数可）、および、場合によって、以下の１つまたは複数：
（ｂ）前記酵素に特異的な基質、
（ｃ）停止液、
（ｄ）表２〜５中の脂質のいずれかに結合することができる抗体（複数可）でコーティングされたアッセイプレート、
（ｅ）標準物質（複数可）および／または較正線用標準物質（複数可）、ならびに
（ｆ）アッセイを実施するために必要な緩衝液および／または試薬
を含む。
【００３４】
さらに別の例示的なキットは、これらに限定されないが、
（ａ）検出可能な標識とコンジュゲートした表２〜５中の脂質のいずれか１つ（複数可）、および場合によって以下の１つまたは複数：
（ｂ）前記酵素に特異的な基質、
（ｃ）停止液、
（ｄ）表２〜５中の脂質のいずれかに結合することができる抗体（複数可）でコーティングされたアッセイプレート、
（ｅ）標準物質（複数可）および／または較正線用標準物質（複数可）、ならびに
（ｆ）アッセイを実施するために必要な緩衝液および／または試薬
を含む。
上記の実施形態による好ましいキットは、例えば、上で列挙されている構成物の以下の組合せを含む：（ａ）および（ｂ）；（ａ）および（ｃ）；（ａ）および（ｄ）；（ａ）および（ｅ）；（ａ）および（ｆ）；（ａ）、（ｂ）および（ｃ）；（ａ）、（ｂ）および（ｄ）；（ａ）、（ｂ）および（ｅ）；（ａ）、（ｂ）および（ｆ）；（ａ）、（ｃ）および（ｄ）；（ａ）、（ｃ）および（ｅ）；（ａ）、（ｃ）および（ｆ）；（ａ）、（ｄ）および（ｅ）；（ａ）、（ｄ）および（ｆ）、（ａ）、（ｅ）および（ｆ）、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）および（ｄ）；（ａ）（ｃ）、（ｄ）および（ｅ）；（ａ）、（ｄ）、（ｅ）および（ｆ）；（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）および（ｅ）；または（ａ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）および（ｆ）。
【００３５】
上記の実施形態のキットの別の好ましい例では、キットは、酵素とコンジュゲートしており、上記の実施形態の（ａ）の抗体に結合することができる抗体をさらに含む。
上記の実施形態のキットのさらに好ましい例では、キットは、検出可能な標識、例えば、ビオチンまたは蛍光標識とコンジュゲートしており、上記の実施形態の（ａ）の抗体に結合することができる抗体をさらに含む。
上記の実施形態のキットのさらに好ましい例では、キットは、上記の実施形態の（ａ）の抗体上の検出可能な標識に特異的である、タンパク質とコンジュゲートした酵素、例えば、ストレプトアビジンとコンジュゲートしたアルカリホスファターゼをさらに含む。
【００３６】
本発明は、本明細書において記載され、特許請求されている方法を実施するための、本発明のキットの使用も含む。この点で使用されるキットは、競合ＥＬＩＳＡであってよく、
（ａ）表２〜５中の脂質のいずれか１つに対する抗体（複数可）または抗血清、
（ｂ）酵素とコンジュゲートした、表２〜５中のいずれか１つの脂質のいずれか１つ（複数可）、
（ｃ）標準物質（複数可）および／または較正線用標準物質（複数可）、
（ｄ）抗体に結合することができる抗体、例えば、ウサギＩｇ、ヤギＩｇ、マウスＩｇ、モルモットＩｇ、ラットＩｇ、またはヒツジＩｇに結合することができる抗体でコーティングされたアッセイプレート、
（ｅ）前記酵素に特異的な基質、
（ｆ）停止液、ならびに
（ｇ）前記方法または使用を実施するための試薬（複数可）
を含む。
一例では、標準物質（複数可）および／または較正線用標準物質（複数可）は、表２〜５中の脂質のいずれか１つで定義されている脂質から選択される標準脂質（複数可）である。
【００３７】
この競合ＥＬＩＳＡキットの例示的な使用は以下の通りである：
１．アッセイプレートのウェルを、ウサギ抗体に結合することができる抗体でコーティングする。
２．試料をウェルに加え、場合によって較正線用標準物質（複数可）を他のウェルに加える。
３．アルカリホスファターゼとコンジュゲートした表２〜５中の脂質のいずれか１つの溶液を加え、その後、表２〜５中の脂質のいずれか１つに結合することができるウサギポリクローナル抗体を加える。
４．試料のインキュベート中にウサギポリクローナル抗体が、試料またはコンジュゲート中の表２〜５中の脂質のいずれか１つに競合的に結合する。
５．プレートを洗浄し、結合した試料またはコンジュゲート中の脂質のみを残す。
６．脂質コンジュゲート上のアルカリホスファターゼによって触媒されると呈色反応を生じる特異的な基質溶液を加える。
７．反応を、特異的な停止液によって停止させ、各ウェルにおける色の発生を適切な光の長さ、例えば４０５ｎｍにおいて読み取る。
８．競合ＥＬＩＳＡでは、色の強度は試料中の脂質の量に間接的に比例する。
【００３８】
本発明のキットの全てに、全てが本明細書で定義されている通り、（ｉ）対象における脂質降下薬物を用いた治療の有効性を決定するため、（ｉｉ）対象における脂質降下薬物を用いた治療の有効性を予測するため、（ｉｉｉ）脂質降下薬物治療に対する対象の適合性を決定するため、（ｉｖ）脂質降下薬物として、もしくは心血管疾患およびその合併症を治療するために有用である化合物を同定するため、または（ｖ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーの特異性を決定するためにそれを使用するための説明書が付随してよい。
【００３９】
本明細書で記載され、特許請求された本発明の全ての態様および実施形態に関して、脂質濃度（複数可）または脂質比（複数可）の決定は、一般には、アッセイを使用して実施される。
【００４０】
本明細書で提示されている本発明の教示に関して適用された当該技術および方法は、とりわけ以下の基準に起因して当分野の同様の試みとは区別される。試料の調製では、不適切な取扱いから生じる可能性がある潜在的な人為的結果を回避するために試料を厳密に制御し、等しく処理する。本発明に関連して、試料は、氷上でゆっくりと慎重に解凍され、その後、直接、液体の取扱いにおいて現在最も精度が高い特注の自動脂質抽出に供され、したがって、潜在的な誤差が最小になる。さらに、脂質安定性に劇的に影響を及ぼし得るので、試料凍結融解サイクルを厳密に制御する。自動脂質抽出は、クロロホルムおよびメタノールを使用するＦｏｌｃｈおよび共同研究者による方法に基づく（Folch J, et al: A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues. J Biol Chem 1957, 226(1):497-509）。この方法は、極性から非極性までの広範囲の脂質クラスを最適な回収率で、したがって、脂質種の喪失を防止して抽出すべき場合に好ましい。適用可能である場合、脂質クラスに特異的な非内在性脂質を内部標準物質として使用して、モニタリングされた分子脂質種の同定（偽陽性を最小にして）および数量化において最も高い精度を得た。この方法では、内在性分子脂質の絶対的または半絶対的な量を最も高い精度で決定し、これは現在の技術を用いて実現することができる。内在性脂質およびそれぞれの標準物質を分子脂質レベルでモニターした。このように、偽陽性同定を最小限にするだけでなく、分子脂質を正確に決定し数量化することができた。分析の質を新規の品質管理システムを使用して厳密に制御した。これは、主に、多数の内部標準物質（ＩＳ）、外部標準物質（ＥＳ）、ＩＳ／ＥＳ比、および計器対照試料によって制御した。これらの構成成分を厳密に制御することにより、技術的外れ値および生物学的外れ値を容易に同定し、さらなる分析から除いた。各分子脂質について感度、選択性および数量化において最良の精度を得るために、種々の標的化プラットフォームを使用した。いくつかの脂質は、質量分析法に基づく多数の反応モニタリング（ＭＲＭ）と組み合わせた高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、超高速液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）または超高速液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）を使用して最もよく分析され、他の脂質は、質量分析法に基づくプレカーサーイオンスキャニング（ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｉｏｎ  ｓｃａｎｎｉｎｇ）およびニュートラルロススキャニング（ｎｅｕｔｒａｌ  ｌｏｓｓ  ｓｃａｎｎｉｎｇ）技法と組み合わせた直接注入によって最もよく分析された。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】ＣＶＤ合併症に起因して死亡した患者と安定ＣＡＤの患者の間（Ａ）、Ｒ４６Ｌ機能喪失型変異の保有者と対照の間（Ｂ）、アトルバスタチンを用いた治療後の患者と治療前の同じ患者の間（Ｃ）、およびシンバスタチンを用いた治療後の患者と治療前の同じ患者の間（Ｄ）の脂質濃度の百分率の変化の平均を示すグラフである。Ｃｅｒはセラミドであり、ＬａｃＣｅｒはラクトシルセラミドである。
【図２】特異的なＰＳＣＫ９阻害によって引き起こされる脂質変化（ＰＣＳＫ９機能喪失遺伝子を１つ有する患者）を示すグラフである。脂質降下薬であるアトルバスタチンおよびシンバスタチンによって引き起こされる脂質変化も示されている。
【図３】通常固形飼料食またはウェスタン食を与えた（それぞれＣおよびＤ）ＰＣＳＫ９-/-マウス（Ａ）およびＰＣＳＫ９+/-マウス（Ｂ）の、野生型（ＷＴ）と比較した血漿中の分子脂質平均濃度の百分率差を示すグラフである。有意性はスチューデントのｔ検定に基づく。各符号は、ＭＳアプリケーションによって測定された特定のカテゴリーの脂質分子に対応する。
【図４】ＰＣＳＫ９遺伝子にＲ４６Ｌバリアントを有するヒト男性ＣＡＤ患者の、Ｒ４６Ｌ変異を有さないＣＡＤ患者と比較した血漿中の分子脂質平均濃度の百分率差を示すグラフである。有意性はスチューデントのｔ検定に基づく。各点は、ＭＳアプリケーションによって、または臨床的なキットによって測定された脂質分子に対応する。
【図５】本発明の一部の実施形態によるシステムの概略図である。具体的には、本図は、開示されているシステムおよび方法によるコンピュータシステム１０６の実行に使用することができる種々のハードウェア、ソフトウェア、およびその他のリソースを例示するものである。示されている実施形態では、コンピュータシステム１０６はオペレーティングシステムの制御下で、またはそれとの組み合わせで作動するランダムアクセスメモリに連結した１つまたは複数のプロセッサ１１０を含んでよい。複数の実施形態では、プロセッサ（複数可）１１０は１つまたは複数のサーバー、クラスター、または他のコンピュータもしくはハードウェアリソースに含まれていてもよく、クラウドベースのリソースを使用して実行されてもよい。オペレーティングシステムは、例えば、Ｌｉｎｕｘ（商標）オペレーティングシステム、Ｕｎｉｘ（商標）オペレーティングシステム、または他のオープンソースまたは所有権下のオペレーティングシステムまたはプラットフォームの配布であってよい。プロセッサ（複数可）１１０は、ハードドライブまたはドライブアレイ上に記憶されたデータベースなどのデータストア１１２と通信して、プログラム命令を他のデータにアクセスまたは記憶することができる。  プロセッサ（複数可）１１０は、さらにネットワークインターフェース１０８を介して通信し、それが今度は１つまたは複数のネットワーク１０４、例えばインターネットまたは他の公的もしくは私的なネットワークを介して通信し、したがって、クライアント１０２、または他のデバイスもしくはサービスからクエリまたは他の要求を受信することができる。さらに、プロセッサ（複数可）１１０は、ネットワークインターフェース１０８を使用して、情報、命令、ワークフロークエリ部分ワークフロー、または他のデータをユーザーに１つまたは複数のネットワーク１０４を介して送信することができる。ネットワークインターフェース１０４は、１つまたは複数のサービスを含んでもよく、それに通信可能に連結されていてもよい。クライアント１０２は、例えば、インターネットに連結したパーソナルコンピュータであってよい。  プロセッサ（複数可）１１０は、一般に、本明細書に開示されている方法を実行するための制御論理および制御作業が実行されるようにプログラムまたは設定されていてよい。プロセッサ１１０は、さらに、コプロセッサ１１４に通信可能に連結（すなわち、通信チャネルによって連結）していてよい。コプロセッサ１１４は、本明細書に開示されている方法が実行されるように設定された専用のハードウェアおよび／またはファームウェア構成要素であってよい。したがって、本明細書に開示されている方法は、プロセッサ１１０および／またはコプロセッサ１１４によって実行することができる。  コンピュータシステム１０６の他の設定、付随するネットワーク接続、および他のハードウェア、ソフトウェア、およびサービスリソースが可能である。
【発明を実施するための形態】
【００４２】
定義
本明細書で使用されるいくつかの略語は以下の意味を有する：ＡＤＲは有害な薬物反応であり、ＭＳは質量分析法であり、ＨＰＬＣは高速液体クロマトグラフィーであり、ＵＰＬＣは超高速液体クロマトグラフィーである。
冠状血管疾患／心血管疾患（ＣＶＤ）は当技術分野におけるその一般的な意味を有し、体の心臓、心臓弁、血液、および脈管構造に影響を及ぼす多数の状態を分類するために使用される。心血管疾患としては、内皮機能障害、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、アテローム性動脈硬化症、うっ血性心不全、高血圧症、脳血管疾患、脳卒中、一過性脳虚血発作、深部静脈血栓症、末梢動脈疾患、心筋症、不整脈、大動脈弁狭窄症、および動脈瘤が挙げられる。そのような疾患には、頻繁にアテローム性動脈硬化症が伴う。本発明の好ましい実施形態では、心血管疾患はアテローム性動脈硬化症を伴う心血管疾患である。
ＣＡＤは冠動脈疾患であり、ＡＭＩは急性心筋梗塞であり、ＡＣＳは急性冠状動脈症候群であり、ＣＡＣは冠状動脈石灰化であり、ＲＣＴはコレステロール逆転送であり、ＬＤＬは低密度リポタンパク質であり、ＨＤＬは高密度リポタンパク質であり、ＬＤＬ−Ｃは低密度リポタンパク質コレステロールであり、ＨＤＬ−Ｃは高密度リポタンパク質コレステロールであり、ＡｐｏＡはアポリポタンパク質Ａであり、ＡｐｏＢはアポリポタンパク質Ｂであり、ＡｐｏＣはアポリポタンパク質Ｃであり、ＭＳは質量分析法であり、ＨＰＬＣは高速液体クロマトグラフィーであり、ＵＰＬＣは超高速液体クロマトグラフィーである。
【００４３】
本発明の目的に関して、脂質降下薬または薬剤は、ＰＣＳＫ９阻害剤またはサイレンサーであることが好ましい。
本明細書で使用される場合、対象とは、ヒトだけに限定することなく、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ウサギ、ブタおよびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）も含めた全ての哺乳動物を包含する。本発明による特に好ましい対象はヒトである。
本明細書で使用される場合、リスクが高い対象とは、一般には、薬効に影響を及ぼすまたは有害事象（例えば、甲状腺機能低下症、腎不全または肝疾患）のリスクを増加させる可能性がある疾患を有し、高薬物用量および／または多数の薬剤（薬物相互作用のリスクを引き起こす）を受けている対象、特にヒトである。
【００４４】
試料は、本明細書で使用される場合、対象または対象の群もしくは集団から得た任意の生体試料と定義される。本発明の目的に関して、生体試料は、全血、血清、または血漿であってよく、血清および血漿が好ましい。患者の血液試料を取得することは、通常の臨床診察の一部である。血液試料は、例えば、患者のコレステロールレベルを測定することに関連して取得することができる。収集された血液試料は、当業者に周知の技法を用いて調製することができ、血清または血漿を分離することができる。静脈血液試料は、針およびＢＤ  Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）Ｐｌａｓｔｉｃ  ＴｕｂｅまたはＶａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）Ｐｌｕｓ  Ｐｌａｓｔｉｃ  Ｔｕｂｅ（ＢＤ  Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）ＳＳＴ（商標）Ｔｕｂｅはスプレーコーティングしたシリカ（ｓｉｌｉａ）および血清分離用のポリマーゲルを含有する）を使用して患者から採取することができる。血清は、室温、１３００ＲＣＦで１０分遠心分離することによって分離し、小さなプラスチックチューブ中に入れて−８０℃で保管することができる。試料は、全血、血漿または血清の画分、例えば、リポタンパク質画分であってもよい。別の好ましい実施形態では、試料は、組織試料、例えば、筋肉生検組織、または尿、またはその画分（例えば、リポタンパク質画分）であってもよい。
【００４５】
本発明に従って比較が行われる対照中の脂質または他の分子は、本明細書では対照マーカーとも称される。
本明細書で使用される場合、対照とは、対照試料であってもよく、単に対照値であってもよい。対照が対照値である場合には、本発明の方法を開始する前にすでに決定、算出または推定されていてよいことが理解されよう。あるいは、対照値は、本発明の方法に従って前記１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または前記１つまたは複数の脂質比（複数可）の決定を行った後に決定、算出または推定され得る。したがって、本発明による適切な対照値は文献から取得したものであり得ることが理解されよう。
本明細書で使用される場合、同じ対象由来または別の対象由来の対照試料への言及は、対照試料が前記対象から直接得られたものであることを意味し得る。しかし、その代わりに、対照試料が、前記対象から直接得たまたは取得した試料の物理的または化学的処理、例えば、遠心分離、分画、酵素による消化、沈殿などの結果として得られたものであることも意味し得る。本明細書における１つもしくは複数の対象由来、対象の群由来または対象の集団由来の対照試料への言及のいずれにも同じことが当てはまる。
【００４６】
１つもしくは複数の対象由来の対照試料、または対象の群由来の対照試料もしくは対象の集団由来の対照試料という用語は、本明細書で使用される場合、対照試料が、前記２つ以上の対象、対象の群または対象の集団を代表することを意味することがさらに好ましい。この場合、代表するとは、本発明に関して比較が行われる前記対照試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）が、前記群または集団の対象由来の対応する個々の試料中の前記脂質（複数可）の平均濃度（複数可）に対応することを意味するものとする。前記対照試料中の全ての脂質の濃度が、前記群または集団の対象由来の対応する個々の試料中の前記脂質の平均濃度に対応することが好ましい。同様に、本発明に関して１つまたは複数の他の分子、例えば、他の脂質またはタンパク質、例えば、総ＰＣ、またはｐｏＡ、ａｐｏＢ、またはアルブミンなどと比較を行う場合、それぞれ、代表する対照試料は、この（これらの）分子（複数可）の濃度（複数可）が、前記群または集団の対象由来の対応する個々の試料中の前記分子（複数可）の平均濃度（複数可）に対応する場合のものである。好ましい実施形態では、１つまたは複数の対象由来の対照試料、対象の群由来の対照試料または対象の集団由来の対照試料は、本発明の意味では、前記２つ以上の対象、群または集団の対象から直接得たまたは取得した等量の試料を混合することによって、または等量のその画分、構成物または反応生成物（例えば、酵素反応生成物または沈殿物）を混合することによって得られる。
【００４７】
本明細書で使用される場合、対照試料は、同じ種類の生体組織または供給源から、同じ、または基本的に同じ様式で得られた場合には、対象の試料に対応する。例えば、対象の試料が全血、血漿または血清試料、またはその画分である場合、対応する対照試料は、同様に、それぞれ全血、血漿または血清試料、またはその画分になる。そのような対応する対照試料は、対象の群もしくは集団由来の全血、血漿または血清試料、または特定のその画分を混合することによって得られる、全血、血漿または血清試料、またはその画分を含み得ることが理解されよう（本明細書および特許請求の範囲における、本発明による適切な対照試料に関するさらなる説明も参照されたい）。例えば、必要な変更を加えて、組織および尿試料に同じことが当てはまる。
対照試料と比較してという単語は、本明細書で使用される場合、対照試料が対象のリピドミックマーカーに関して、すなわち、本発明の種々の態様および実施形態に関連して本明細書において具体的に記載され、かつ／または特許請求されている脂質（複数可）の１つまたは複数の濃度、脂質−脂質濃度比、または脂質−臨床濃度比、またはそれらの組合せに関して実際に分析される実施形態を包含するものと理解されよう。しかし、上記の単語は、前記対照試料中の前記リピドミックマーカーに関する対応する情報が単に文献から取得されたもの、または以前に決定、算出または推定されたもの、または、まだ決定、算出または推定されていないものである実施形態も包含することが理解されよう。
【００４８】
コンピュータで実行される方法という用語は、本発明に関しては、目的を達するために機械または装置を使用する方法を意味する。
プロセッサという用語は、命令を解釈し、実行することができるデバイスを意味する。詳細には、プロセッサは論理回路を用いて入力データを受信し、適切な出力データをもたらす。プロセッサはネットワークを介して互いに通信することができる。
脂質とは、本明細書で使用される場合、疎水性または両親媒性の小分子と定義される。
【００４９】
本発明の目的に関して、脂質は、以下の命名法に従って呼ばれる：ＣＥはコレステリルエステルであり、ＤＡＧはジアシルグリセロールであり、ＴＡＧはトリアシルグリセロールであり、ＰＣはホスファチジルコリンであり、ＰＣＯはアルキル連結ＰＣであり、ＰＣＰはアルケニル連結ＰＣであり、ＬＰＣはリゾホスファチジルコリンであり、ＰＥはホスファチジルエタノールアミンであり、ＰＥＯはアルキル連結ＰＥであり、ＰＥＰはアルケニル連結ＰＥであり、ＰＩはホスファチジルイノシトールであり、Ｃｅｒはセラミドであり、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒはガラクトシル−またはグルコシルセラミドであり、ＬａｃＣｅｒはラクトシルセラミドであり、Ｇｂ３はグロボトリアオシルセラミドであり、ＳＭはスフィンゴミエリンであり、Ｓ１Ｐはスフィンゴシン−１−リン酸であり、ＳＰＨはスフィンゴシンであり、ＳＡ１Ｐはスフィンガニン−１−リン酸であり、ＳＰＡはスフィンガニンである。
命名法Ｘ：Ｙは、Ｘが分子の脂肪酸（複数可）部分の炭素原子の総数を示し、Ｙが分子の脂肪酸部分（複数可）の二重結合の総数を示す。
命名法Ａ／Ｂは、ＤＡＧおよびＰＣの分子に関して、Ａ型およびＢ型の脂肪酸部分が分子のグリセロール骨格に付着していることを示す。
命名法（ｄＣ／Ａ）は、Ｃｅｒ、Ｇｂ、ＧｌｃＣｅｒ、ＬａｃＣｅｒおよびＳＭの分子に関して、Ｃはアミド連結を伴う長鎖塩基の種類を示し、Ａは脂肪酸部分を示す。
【００５０】
対照と比較した「増加」、「減少」、または「差異」とは、本発明によると、それぞれ、（ｉ）対象における脂質降下薬物を用いた治療の有効性を示すもの、（ｉｉ）対象における脂質降下薬物を用いた治療の有効性を予測するもの、（ｉｉｉ）脂質降下薬物治療に対する対象の適合性を示すもの、（ｉｖ）脂質降下薬物として、または心血管疾患およびその合併症を治療するために有用である化合物を示すもの、または（ｖ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーの特異性を示すものである。少なくとも５％の増加、減少または差異であることが好ましい。少なくとも１０％の増加、減少または差異であることがより好ましい。他の好ましい本発明による対照と比較した増加、減少または差異は、少なくとも１５％、より好ましくは少なくとも２０％、なおより好ましくは少なくとも２５％、５０％、７５％または１００％の増加、減少または差異である。同様に、１００％超の増加、減少または差異が特に好ましい。
【００５１】
本発明の目的に関して、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーは、ＰＣＳＫ９がＬＤＬ受容体、特に肝臓に存在するＬＤＬ受容体に結合することを妨げる分子である。本明細書で上記の通り、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーは、（ａ）ＰＣＳＫ９に対する抗体；（ｂ）ＰＣＳＫ９の阻害薬物；（ｃ）ＬＤＬ−受容体とＰＣＳＫ９の相互作用を阻害する小分子；（ｄ）ＬＤＬ−受容体のＰＣＳＫ９との相互作用ドメインを模倣するペプチド、（ｅ）ＰＣＳＫ９、特にＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的なｓｉＲＮＡ；または（ｆ）ＰＣＳＫ９、特にＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチドであることが好ましい。
好ましい実施形態では、ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーは、ＰＣＳＫ９がＬＤＬ受容体に結合することを妨げる抗体である。そのような抗体は当技術分野で周知であり（例えば、全て参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２００９／０５５７８３、ＷＯ２００８／０６３３８２、ＷＯ２００９／１００２９７、ＷＯ２００８／１２５６２３またはＷＯ２００９／０２６５５８を参照されたい）、本発明に関して適切に使用することができる。
【００５２】
本明細書で使用される場合、抗体という用語は、前記脂質との特異的な結合を示すモノクローナル抗体およびポリクローナル抗体、全抗体、抗体断片、ならびに抗体サブ断片を包含する。したがって、適切な抗体は、任意のクラスの免疫グロブリン全体、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、二重または多数の抗原またはエピトープ特異性を有するキメラ抗体またはハイブリッド抗体、またはハイブリッド断片を含めた断片、例えば、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’Ｆａｂなどであってよく、さらに、特異的な抗原に結合して複合体を形成することによって抗体のように作用する任意の免疫グロブリンまたは任意の天然、合成または遺伝子操作されたタンパク質を包含する。抗体という用語は、抗体の抗原結合性断片（例えば、単鎖抗体、単鎖可変ドメイン抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片およびｄＡｂ断片）ならびに完全な抗体を包含する。例えば、Ｅ．ｃｏｌｉのような遺伝的に形質転換した宿主においてＦａｂ分子を発現させ、組み立てることができる。したがって、先行抗体を生成する対象の多様性と等しいまたはそれを超える潜在的な多様性を有するＦａｂの集団を発現させるために、ラムダベクターシステムが利用可能である。Huse WD, et al., Science 1989, 246:1275-81を参照されたい。そのようなＦａｂは抗体の定義に含まれる。抗体断片またはサブ断片を含めた所与の分子の、抗体のように作用し、特異的な抗原に特異的に結合する能力は、当技術分野で公知の結合アッセイによって、例えば、対象の抗原を結合パートナーとして使用して決定することができる。
【００５３】
本発明による脂質に対する抗体は、当業者に周知の方法によって調製することができる。例えば、マウスを、アジュバントを伴う脂質を用いて免疫化することができる。血清抗体価のために、隔週で試験出血を実施しながら免疫化を２週間おきに３回施したマウスから脾細胞をプールとして回収する。脾細胞を、融合実験にすぐに使用するか、今後の融合において使用するために液体窒素中で保管する３つの一定分量として調製する。
次いで、Stewart & Fuller, J. Immunol. Methods 1989, 123:45-53の手順に従って融合実験を実施する。成長しているハイブリッドのウェル由来の上清を、前記脂質をコーティングした９６ウェルＥＬＩＳＡプレート上で酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）によってモノクローナル抗体（ＭＡｂ）分泌腺についてスクリーニングする。ＥＬＩＳＡ陽性培養物を限界希釈によってクローニングし、一般には、２回の段階的なクローニング実験の後に単一のコロニーからハイブリドーマが確立される。
本明細書で使用される場合、小分子という用語は、低分子量の有機化合物を指す。本発明による小分子の分子量の上限は２，５００ダルトンであることが好ましく、１，５００ダルトンであることがより好ましく、８００ダルトンであることが特に好ましい。本発明の小分子のサイズおよび電荷は、細胞膜を渡って急速に拡散することが可能になり、したがって、小分子が細胞内の作用部位に到達することができるようなものであることが好ましい。
ＰＣＳＫ９の阻害薬物は、本明細書で使用される場合、小分子であってよい。しかし、ＰＣＳＫ９の阻害薬物は、ポリマー、例えば、抗体以外のポリペプチド、糖タンパク質、プロテオグリカン、核酸、例えば、アプタマー、炭水化物、または脂質であってもよい。
【実施例】
【００５４】
（例１）
材料および方法
野生型（Ｗｔ）動物、ＰＣＳＫ９ホモ接合体ノックアウト（Ｐｃｓｋ９−／−）動物、およびＰＣＳＫ９ヘテロ接合体ノックアウト（Ｐｃｓｋ９＋／−）動物由来の血漿試料をリピドミック分析のために使用した。各群は３ヶ月齢の雄のマウス１８匹を有した。３ヶ月齢までマウスは同じ通常固形飼料食を受けていた（０日目）。その後、マウスにまず通常固形飼料食（ｒｅｇｕｌａｒ  ｃｈｏｗ−ｄｉｅｔ）（２０１８  Ｔｅｋｌａｄ  Ｇｌｏｂａｌ、Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を２週間与えた後、各群から３匹のマウスを組織試料採取のために屠殺した（１５日目）。残りのマウスについて、標準ウェスタン食（Ｗｅｓｔｅｒｎ  ｄｉｅｔ）（ＴＤ．８８１３７  Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ）に切り換えて２週間後に残りのマウス全てを屠殺した（３０日目）。ウェスタン食は糖、脂肪、およびコレステロールをそれぞれ３４％、２１％、および０．２％含有し、通常固形飼料食は、これらの成分をそれぞれ５％、６％、および０％含有した。
【００５５】
マウスを、出血前４時間にわたって絶食させた。ＥＤＴＡを含有する５００μｌのマイクロコンテナ（ＢＤ）を使用して約２５０μｌの頬出血を抜き取った。血液試料を４℃、３０００ｒｐｍで１５分遠心分離した。上清（５０〜１００μｌ）をきれいなエッペンドルフチューブに移した。リピドミック分析前に、試料採取したらすぐに試料を凍結し、−８０℃で保管した。
ショットガンリピドミック分析に関して、マウス血漿１０μｌを脂質抽出のために使用した。セラミドおよびセレブロシドを数量化するために、マウス血漿５０μｌを脂質抽出のために使用した。この試験設計により、通常固形飼料とウェスタン食の両方に関して完全な（−／−）ＰＣＳＫ９阻害または部分的な（＋／−）ＰＣＳＫ９阻害によって誘導される典型的なリピドミックプロファイルを決定することが可能になった。
【００５６】
（例２）
材料および方法
この試験は、心血管疫学に関する大規模前向き試験であるＬＵＲＩＣ試験のサブコホートである。ＬＵＲＩＣデータベースは、ベースラインの冠動脈造影および日常的な臨床検査室データを含めた、３０００例の患者に関する臨床情報を含有する。この試験では、既知の機能喪失型変異（Ｒ４６Ｌ、ｒｓ１１５９１１４７, Abifadel, M. et al. 2003. Mutations in PCSK9 cause autosomal dominant hypercholesterolemia. Nat Genet 34: 154-156）を有する対象のリピドミックプロファイルと、ＰＣＳＫ９機能が正常である、主要対立遺伝子を有する対象のリピドミックプロファイルを比較した。この比較により、発明者がＰＣＳＫ９の部分的な欠乏によって誘導される典型的なリピドミックプロファイルを決定することが可能になった。臨床的特性が表１に記載されている。
【００５７】
【表１】
2015526696.tif 000002
【００５８】
分析方法
質量分析駆動リピドミクス
タンデム質量分析法と併せた直接注入、すなわちショットガンリピドミクス、トリアシルグリセロールリピドミクス、および液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）手法、すなわちセラミドおよびセレブロシドおよびスフィンゴシン（ｓｐｉｎｇｏｓｉｎｅ）リピドミクスを使用して、ＰＣＳＫ９濃度の減弱の影響を、ヒト血清およびマウス血清中の分子脂質種を分析することによって同定した。適用した方法は、特に、分子コレステリルエステル（ＣＥ）、遊離コレステロール（ＦＣ）、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、リゾホスファチジルコリン（ＬＰＣ）および他のリゾリン脂質（ＬＰＬ）、アルキル連結ホスファチジルコリンおよびアルケニル連結ホスファチジルコリン（それぞれＰＣ  ＯおよびＰＣ  Ｐ）および他のアルキル連結リン脂質およびアルケニル連結リン脂質（それぞれＰＬ  ＯおよびＰＬ  Ｐ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルグリセロール（ＰＧ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）、ホスファチジン酸（ＰＡ）、ジアシルグリセロール（ＤＡＧ）、トリアシルグリセロール（タグ）、セラミド（Ｃｅｒ）、グルコシル／ガラクトシルセラミド（Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ）、ラクトシルセラミド（ＬａｃＣｅｒ）、グロボトリアオシルセラミド（Ｇｂ３）、スフィンゴシン（ＳＰＨ）、スフィンゴシン−１−リン酸（Ｓ１Ｐ）、スフィンガニン（ＳＰＡ）、およびスフィンガニン−１−リン酸（ＳＡ１Ｐ）の数量化について最適化した。
【００５９】
方法に従って以下の材料を使用した。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）またはＬＣ−ＭＳグレードのクロロホルム、メタノール、水、アセトニトリル、ギ酸、メタノール、イソプロパノール、酢酸アンモニウム、酢酸、塩化カリウムおよびブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）はＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）から購入した。
【００６０】
セラミドおよびセレブロシドリピドミクスでは、超高速液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）カラム（Ａｃｑｕｉｔｙ  ＢＥＨ  Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ、ｉｄ．１．７μｍ）をＷａｔｅｒｓ（Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ、ＵＳＡ）から購入した。ＨＰＬＣプレカラム（Ｗｉｄｅｐｏｒｅ  Ｃ１８  ４×２．０ｍｍ）をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（Ｔｏｒｒａｎｃｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）から購入した。スフィンゴシンおよびスフィンゴシン−１−リン酸（リン酸（ｐｈｏｐｈａｔｅ））リピドミクス、親水性相互作用液体クロマトグラフィー（ＨＩＬＩＣ）カラム（Ａｔｌａｎｔｉｓ  ＨＩＬＩＣ  ３ｍｍ  ２．１×５０ｍｍ）およびＨＰＬＣグレードカラム（Ａｔｌａｎｔｉｓ  ＨＩＬＩＣ  ３ｍｍ  ２．１×１０ｍｍ）をＷａｔｅｒｓ（Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ、ＵＳＡ）から購入した。抽出のために使用した実験器具は全てクロロホルムに対して抵抗性であった。エアロゾル抵抗性フィルターチップ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＢｉｏＰｒｏｄｕｃｔｓ）およびエッペンドルフ２ｍｌセーフロックチューブ、９６ウェルｔｗｉｎ．ｔｅｃ  ＰＣＲプレート、およびＰｉｅｒｃｅ−ｉｔ−ｌｉｔｅ  ｔｈｅｒｍｏ−ｓｅａｌｉｎｇ  ｆｏｉｌをＶＷＲ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ、ＰＡ、ＵＳＡ）から購入した。ＣＯ−ＲＥＦｉｌｅｔ  Ｔｉｐおよび９６ウェル２ｍｌ  Ｗｈａｔｍａｎ  ＵｎｉｐｌａｔｅｓをＨａｍｉｌｔｏｎ  Ｒｏｂｏｔｉｃｓ（Ｂｏｎａｄｕｚ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。合成標準脂質をＡｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ（Ａｌａｂａｓｔｅｒ、ＡＬ、ＵＳＡ）、Ｍａｔｒｅｙａ（Ｐｌｅａｓａｎｔ  Ｇａｐ、ＰＡ、ＵＳＡ）、およびＣａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ（Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ、ＭＩ、ＵＳＡ）から購入した。
【００６１】
脂質を、以下のプロトコールに従ってクロロホルム：メタノール中に抽出した。データの正規化および内在性脂質の数量化のために、試料に既知量の非内在性合成内部標準物質をスパイクした。抽出後スパイク非内在性合成外部標準物質を品質管理のために使用した。標準物質のストック溶液を、適切に秤量した各標準物質をクロロホルム：メタノール（２：１、ｖ／ｖ）中に溶解させて５００μＭまたは１０００μＭの最終濃度を実現することによって調製した。標準物質ストックのそれぞれを含有する内部標準物質混合物を創出し、脂質抽出において使用した。
【００６２】
ショットガンおよび／またはトリアシルグリセロールリピドミクスおよび／または遊離コレステロールの数量化のためにヒト血漿およびマウス血漿１０μｌを使用し、セラミドおよびセレブロシドリピドミクスならびに／またはスフィンゴシンおよびスフィンゴシン−１−リン酸（リン酸（ｐｈｏｐｈａｔｅ））リピドミクスのためにヒト血漿およびマウス血漿それぞれ１０μｌおよび５０μｌを使用した。ヒト試料は、トリアシルグリセロール、遊離コレステロール、およびスフィンゴイド塩基については分析しなかった。脂質抽出を、Ｈａｍｉｌｔｏｎ  ＭＩＣＲＯＬＡＢ  ＳＴＡＲ  ｓｙｓｔｅｍ（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｒｏｂｏｔｉｃｓ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して自動で行った。よく混合した試料を、氷冷メタノールおよび０．１％ＢＨＴを含有する９６ウェル２ｍｌ  Ｗｈａｔｍａｎ  Ｕｎｉｐｌａｔｅ中に分注した。抽出プロトコールの各ステップの後に試料を徹底的に混合した。適切な体積の内部標準物質混合物およびクロロホルムおよびメタノールを加えることによって室温で抽出を進行させた。２０ｍＭの酢酸を加え、プレートを５００×ｇで５分遠心分離することにより、ショットガン、トリアシルグリセロール、セラミドおよびセレブロシド、ならびにスフィンゴシンおよびスフィンゴシン−１−リン酸（ｐｈｏｐｈａｔｅ）リピドミクスでは、有機相分離を容易にした。有機相を新しい９６ウェル２ｍｌ  Ｗｈａｔｍａｎ  Ｕｎｉｐｌａｔｅに移した。残った水含有相を、適切な体積のクロロホルムを加え、その後に遠心分離することによって洗浄した。２つの有機相をプールし、乾燥状態になるまでＮ2の下で蒸発させた。次いで、脂質抽出物を、合成外部標準物質の添加を含め、クロロホルム：メタノール（１：２、ｖ／ｖ）に再溶解させた。ＭＳ分析の前に、抽出物を２ｍｌのセーフロックエッペンドルフチューブ中、−２０℃で保管した。必要な体積の脂質抽出物をエッペンドルフ９６ウェルｔｗｉｎ．ｔｅｃ  ＰＣＲプレート中に分注し、蒸発を回避するためにアルミ箔を用いてプレートをヒートシールした。
【００６３】
ショットガンおよびトリアシルグリセロールリピドミクスにおいてだけでなく、遊離コレステロールを数量化する際にも、ロボットナノフローイオン源（ＮａｎｏＭａｔｅ  ＨＤ、Ａｄｖｉｏｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を備えたハイブリッドトリプル四重極／直線型イオントラップ質量分光計（ＱＴＲＡＰ  ５５００、ＡＢ  Ｓｃｉｅｘ）で脂質抽出物を分析した。この計器を陽イオンモードおよび陰イオンモードで作動させた。陽イオンでは、噴霧電圧を１．０〜１．４ｋＶに設定し、陰イオンモードでは、−１．０〜−１．４ｋＶにセットした。０．３〜０．８ｐｓｉのガス圧を使用し、インターフェース加熱器を６０℃に設定した。衝突エネルギー（ＣＥ）およびデクラスタリング電圧（ＤＰ）を、各脂質クラスについて合成標準物質を使用して最適化した。質量分光計を、２００Ｄａ／ｓの走査スピードを使用して単位分解モードで作動させた。分子脂質を、Stahlmanおよび共同研究者（Stahlman M, et al: High-throughput shotgun lipidomics by quadrupole time-of-flight mass spectrometry. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2009）に記載されているプレカーサーイオンスキャニング（ＭＰＩＳ）およびニュートラルロススキャニング（ＮＬＳ）を使用して、陽イオンモードと陰イオンモードの両方で分析した。トリアシルグリセロールを、ニュートラルロススキャニングを使用して陽イオンモードで分析した。遊離コレステロールを、分析前に塩化アセチルによってＣＥ２：０に誘導体化した（Liebisch, G., et al., High throughput quantification of cholesterol and cholesteryl ester by electrospray ionization tandem mass spectrometry (ESI-MS/MS). Biochim Biophys Acta、2006.1761(1): p. 121-8）。
【００６４】
セラミドおよびセレブロシドリピドミクスでは、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を以下のように行った。クロマトグラフィー装置は、ＣＴＣ  ＨＴＣ  ＰＡＬオートサンプラー（ＣＴＣ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  ＡＧ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、Ｒｈｅｏｓ  Ａｌｌｅｇｒｏ  ＵＨＰＬＣポンプ（Ｆｌｕｘ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＡＧ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、セラミドおよびセレブロシドリピドミクスのために６０℃に設定した外付けのカラムヒーター、およびインラインのプレカラムを伴うＡｃｑｕｉｔｙ  ＢＥＨ  Ｃ１８カラムからなった。抽出された試料それぞれ１０μｌを、５００μｌ／分の流速でプレカラム、その後分析カラムに注入し、質量分光計に送達した。セラミドおよびセレブロシドリピドミクスでは、脂質分析物を分離するために、０．１％ギ酸を含有するＨＰＬＣグレード水中１０ｍＭの酢酸アンモニウムを含む溶媒Ａおよび０．１％ギ酸を含有するアセトニトリル：イソプロパノール（４：３、ｖ／ｖ）中１０ｍＭの酢酸アンモニウムの溶媒Ｂを用いた勾配を使用した。勾配を以下のように構築した：０分−６５％Ｂ；２分−６５％Ｂ；２．５分−７５％Ｂ；１７．５分−１００％Ｂ；２２．５分−１００％Ｂ；２２．６分−６５％Ｂ；２５分−６５％Ｂ。
【００６５】
スフィンゴシンおよびスフィンゴシン−１−リン酸リピドミクスでは、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を以下のように行った。クロマトグラフィー装置は、ＣＴＣ  ＨＴＣ  ＰＡＬオートサンプラー（ＣＴＣ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  ＡＧ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、Ｒｈｅｏｓ  Ａｌｌｅｇｒｏ  ＵＨＰＬＣポンプ（Ｆｌｕｘ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＡＧ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、５０℃に設定した外付けのカラムヒーター、およびインラインのガードカラムを伴うＡｔｌａｎｔｉｓ  ＨＩＬＩＣカラムからなった。抽出された試料それぞれ１０μｌを、５００μｌ／分の流速で、ガードカラム、次いで分析カラムに注入し、質量分光計に送達した。スフィンゴシンおよびスフィンゴシン−１−リン酸リピドミクスでは、脂質分析物を分離するために、０．２％ギ酸を伴う超純水中５０ｍｍｏｌ／ｌのギ酸アンモニウムを含む溶媒Ａおよび０．２％ギ酸を伴うアセトニトリルの溶媒Ｂを用いた勾配を使用した。勾配を以下のように構築した：０分−９５％Ｂ；０．７０分−９５％Ｂ；１．５０分−７５％Ｂ；１．５１分−５０％Ｂ；１．７０分−５０％Ｂ；１．７１分−８５％Ｂ；３．００分−８５％Ｂ；３．１０分−９５％Ｂ；４．００分−９５％Ｂ。
【００６６】
セラミドおよびセレブロシドリピドミクスとスフィンゴシンおよびスフィンゴシン−１−リン酸リピドミクスのどちらにおいても、脂質抽出物をＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。ＭＳ分析は、Ｔｕｒｂｏ  Ｖ（商標）Ｉｏｎ  Ｓｏｕｒｃｅ（４０００  ＱＴＲＡＰ，  ＡＢ  Ｓｃｉｅｘ）を備えたハイブリッドトリプル四重極／直線型イオントラップ質量分光計で実施した。この計器は陽イオンモードで操作した。イオン源電圧は５５００Ｖに設定し、イオン源温度は４００℃に設定した。衝突エネルギー（ＣＥ）およびデクラスタリング電圧（ＤＰ）を、各脂質クラスについて合成標準物質を使用して最適化した。各走査に対して２０／２５秒のドウェル時間を適用した。多重反応モニタリング（ＭＲＭ）走査モードを適用し、これはSullardsおよび共同研究者による説明に基づいた（Sullards MC, et al: Structure-specific, quantitative methods for analysis of sphingolipids by liquid chromatography-tandem mass spectrometry: "inside-out" sphingolipidomics. Methods Enzymol 2007）。
データ処理を以下のように行った：最初に、保持時間（ＬＣモードで）および各ピークの同定を、内在標準物質を使用し、適用可能な場合には情報依存取得（Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ）（ＩＤＡ）実験によって行った。生のデータを、検出されたピークおよび保持時間（ＬＣモードで）に応じて自動で処理した。実際の脂質ピークからバックグラウンドノイズを分離するために、ストリンジェントなカットオフを適用した。各試料を制御し、ストリンジェントな判定基準を満たした場合にのみ許容した。検出されたピークのピーク面積数（ｃｐｓ）を対応する脂質の名称の一覧に変換した。脂質を、それらの濃度を引き出すために、それらのそれぞれの内部標準物質および試料体積に対して正規化した。
【００６７】
合成内部標準物質（ＩＳ）と対応する抽出後スパイク外部標準物質（ＥＳ）の比、および抽出されたマトリックスおよび溶媒のＭＳ分析が分析の品質管理（ＱＣ）としての機能を果たした。さらに、この計器の性能、すなわち、アッセイ内の変動およびアッセイ間の変動をモニタリングするために、抽出された参照血漿試料を分析した。
試料分析の前に合成または単離された標準物質を使用して較正線を得た。合成標準物質は適用に基づいて選択し、内在性脂質または対象の分析物（複数可）と同様の性質を有した。較正線は、最低限、予測される数量化範囲を包含する５つの標準物質の点からなった。較正線を使用して、モニタリングした各脂質クラスについての数量化のダイナミックレンジ、例えば、線形数量化限界を決定した。使用される内部標準物質は、内在性脂質種を数量化するために使用される内在性脂質と同様に挙動する。較正線は、内在性脂質を数量化するために使用したものと同じ内部標準物質に基づいた。
各プラットフォームについて、実際の脂質ピークからバックグラウンドノイズを分離するために、ストリンジェントなカットオフを適用した。各試料を制御し、許容判定基準を満たした場合にのみ許容した。検出されたピークの質量および数を対応する脂質の名称の一覧に変換した。脂質を、それらの濃度を引き出すために、それらのそれぞれの内部標準物質および試料体積に対して正規化した。
【００６８】
統計解析
対照群と症例群の間の脂質濃度の百分率の変化を以下の通り算出した：
１００＊（症例群におけるＡＶＧ［Ｃ］−対照群におけるＡＶＧ［Ｃ］）／対照群におけるＡＶＧ［Ｃ］。
統計的有意性をｔ検定に基づいて割り当てた。
倫理
ＬＵＲＩＣ試験は「Ｌａｎｄｅｓａｒｚｔｅｋａｍｍｅｒ  Ｒｈｅｉｎｌａｎｄ−Ｐｆａｌｚ」（Ｍａｉｎｚ、Ｇｅｒｍａｎｙ）において倫理審査委員会により認可された。書面のインフォームドコンセントを参加者のそれぞれから得た。マウス試験はＩＲＣＭ  ｂｉｏｅｔｈｉｃｓ  ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  ａｎｉｍａｌ  ｃａｒｅにより認可された。
【００６９】
結果
リピドミックバイオマーカーはＰＣＳＫ９活性の減弱の有意なバイオマーカーであると思われた。１つのＰｃｓｋ９対立遺伝子の喪失が、Ｐｃｓｋ９-/-マウスにおいて見られるものと同等のスフィンゴ脂質濃度の有意な変化を誘導するために十分であった。スフィンゴミエリン［ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）］種、セラミド［Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）］種、グルコシル／ガラクトシルセラミド［Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）］種、およびラクトシルセラミド［ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）］種を含有する脂肪酸１６：０が、Ｐｃｓｋ９-/-マウスおよびＰｃｓｋ９+/-マウスの両方において、動物に固形飼料食を与えた場合に、最も影響を受けた脂質種であると思われた（それぞれ図１Ａおよび図１Ｂ、および表２ａおよび表２ｂ）。それどころか、トリアシルグリセロール（ＴＡＧ）は、Ｐｃｓｋ９-/-マウスおよびＰｃｓｋ９+/-マウスの血漿中に野生型（Ｗｔ）マウスよりも有意に多く濃縮されることが示された。
ウェスタン食（図１Ｃ、表２ｃ）を与えたＰｃｓｋ９-/-マウスについて記録された有意な変化は通常固形飼料食条件と比較して明白に小さかった。興味深いことに、ウェスタン食では、脂質濃度の有意な変化がＰｃｓｋ９+/-マウスにおいてＰｃｓｋ９-/-マウスよりも大きいことが実証された（図１Ｄ、表２ｄ）。ウェスタン食を与えたＰＣＳＫ９欠損マウスの血漿の典型的な変化は、長い脂肪性アシル鎖を有するＣｅｒ種、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ種、およびＬａｃＣｅｒ種、例えば、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）およびＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）などの減少であると思われた。
【００７０】
ＰＣＳＫ９機能喪失型変異を有するヒトにおいて同様のリピドミック変化が観察された。ＰＣＳＫ９遺伝子に公知の機能喪失型バリアント（Ｒ４６Ｌ）を有するヒトにおいて最も有意に低下した脂質種には、Ｐｃｓｋ９-/-マウスモデルおよびＰｃｓｋ９+/-マウスモデルにおいてすでに観察されものと同じＧｌｃ／ＧａｌＣｅｒ種、ＬａｃＣｅｒ種およびＳＭ種が含まれた（図２、表３）。しかし、ヒト試料の数は限られていたので、観察された変化の大部分は統計的有意性のレベルには達しなかった。さらに、空腹時ヒト血漿試料では、脂肪性アシル鎖長に基づく脂質種の分離を観察することができなかった。マウス血漿とは対照的に、ヒト血漿では、ＰＣＳＫ９欠乏に起因して２つのコレステリルエステル種、ＣＥ２０：３およびＣＥ２０：４の濃度が有意に低下した。
【００７１】
この試験では、上記の通り全部で１０９種の分子脂質および２５７種のＴＡＧ脂肪酸を数量化した。これらのうち６３種の分子脂質および１０５種のＴＡＧ脂肪酸が、設定基準に基づいて有意なバイオマーカーであった。分子脂質濃度に基づいて有意なバイオマーカー候補が表２および表３に示されている。ヒトでは、選択されたバイオマーカーの性能はＬＤＬコレステロールなどの伝統的に使用されているバイオマーカーよりも改善されていた。従来のマーカーよりも性能が改善された個々の脂質は表３ａに列挙されている。表３ｂには、個々の脂質よりも性能が改善された脂質−脂質濃度比が列挙されている。
同定されたバイオマーカー候補の中で選択された好ましい実施形態が表４および表５に列挙されている。
【００７２】
表６には、ｂｒｕｔｔｏ  ＴＡＧ種および各ｂｒｕｔｔｏ種に寄与する、可能性のある脂肪酸組合せが提示されている。Ｂｒｕｔｔｏ  ＴＡＧは、３つの脂肪酸の合計およびＴＡＧ分子の二重結合の数を示す。表６には、各ｂｒｕｔｔｏ  ＴＡＧ種の数例が提示されているが、他の組合せも同様に存在し得る。
【００７３】
【表２】
2015526696.tif 000003
【００７４】
2015526696.tif 000004
【００７５】
2015526696.tif 000005
【００７６】
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【００７７】
【表３】
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【００７８】
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【００７９】
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【００８０】
【表４】
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【００８１】
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【００８２】
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【００８３】
【表５】
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【００８４】
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【００８５】
【表６】
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【００８６】
【表７】
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【００８７】
【表８】
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【００８８】
【表９】
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【００８９】
【表１０】
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【００９０】
【表１１】
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【００９１】
【表１２】
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【００９２】
【表１３】
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【００９３】
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【００９４】
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【００９５】
要約すると、この試験は、ＰＣＳＫ９阻害剤およびサイレンサーの有効性および特異性を決定するための新規の脂質マーカーを提供する。ＬＤＬコレステロールの測定のみでは可能性のある有害な薬物反応に関する情報をもたらすために十分でないので、リピドミックバイオマーカーは、ＰＣＳＫ９阻害剤およびサイレンサーの有効性についての、特異度および感度がより高いマーカーである。
【００９６】
上記を考慮して、本発明は以下の項目も包含することが理解されよう：
１．脂質降下薬を用いて対象を治療する方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して低下または上昇していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、
濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の減少した脂質から、好ましくは
ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総ＬａｃＣｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の増加した脂質から、好ましくは
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
【００９７】
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比（複数可）が対照と比較して減少または増加していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、
その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の脂質−脂質濃度比から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
【００９８】
その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から、好ましくは、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【００９９】
２．（ａ）前記脂質降下薬を前記対象に投与するステップ、および／または
（ｂ）有効性が高いことが決定されたら、前記脂質降下薬の投与を継続すること
をさらに含む、項目１の方法。
【０１００】
３．前記対象を治療する前に前記対象における前記治療の有効性を予測するステップを含む、脂質降下薬を用いて対象を治療する方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して上昇または低下していることにより前記治療が有効であろうことが示され、
濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の減少した脂質から、好ましくは
ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
【０１０１】
濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の増加した脂質から、好ましくは
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
【０１０２】
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して増加または減少していることにより前記治療が有効であろうことが示され
その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
【０１０３】
その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から、好ましくは、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【０１０４】
４．前記対象において前記治療が有効であろうことが決定されたら、前記脂質降下薬を前記対象に投与するステップをさらに含む、項目３の方法。
【０１０５】
５．脂質降下薬治療に対する対象の適合性を決定することを含む、脂質降下薬を用いて対象を治療する方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して低下または上昇していることにより良好な治療適合性が示され、
濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の減少した脂質から、好ましくは、
ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
【０１０６】
濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の増加した脂質から、好ましくは、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
【０１０７】
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比（複数可）が対照と比較して減少または増加していることにより良好な治療適合性が示され、
濃度の減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度比から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
【０１０８】
その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度比から、好ましくは、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【０１０９】
６．（ａ）前記脂質降下薬を前記対象に投与するステップ、および／または
（ｂ）良好な治療適合性が決定されたら、前記脂質降下薬の投与を継続すること
をさらに含む、項目５の方法。
７．脂質降下薬がＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーである、項目１から６までのいずれか１つの方法。
【０１１０】
８．ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて対象を治療する方法であって、対象由来の試料中の１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または脂質−脂質濃度比（複数可）が対照と比較され、前記１つまたは複数の前記脂質（複数可）または脂質−脂質濃度比（複数可）が、表２〜５中の脂質および脂質−脂質濃度比から、好ましくは、
ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ、
【０１１１】
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡ、総ＳＰＨ、
【０１１２】
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択され、
前記対照が、
（ａ）ＰＣＳＫ９機能喪失型変異を有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値、
（ｂ）ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルを有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値、または
（ｃ）公知の特異的なＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療した１つまたは複数の対象に由来する試料または値
であり、前記試料と対照中の前記１つもしくは複数の脂質または脂質−脂質濃度比（複数可）の間に差異がないことにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療の特異性が示され、差異があることにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたは化合物によって非特異的な影響、例えば、１つまたは複数の有害な副作用などが引き起こされることが示される方法。
【０１１３】
９．ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルが、対照由来の１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または脂質−脂質濃度比を決定することによって作成される、項目８の方法。
【０１１４】
１０．前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーが、
（ａ）ＰＣＳＫ９に対する１つまたは複数の抗体、
（ｂ）ＰＣＳＫ９の阻害薬物、
（ｃ）ＬＤＬ−受容体とＰＣＳＫ９の相互作用を阻害する小分子、
（ｄ）ＬＤＬ−受容体のＰＣＳＫ９との相互作用ドメインを模倣するペプチド、
（ｅ）ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的な１つまたは複数のｓｉＲＮＡ、および／または
（ｆ）ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的な１つまたは複数のアンチセンスオリゴヌクレオチド
である、項目７または８の方法。
【０１１５】
１１．比較が行われる前記対象が、
（ａ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている患者、
（ｂ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている試験動物、
（ｃ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬を用いた治療を受けている患者または試験動物、または
（ｄ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー、ＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物またはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬を用いた治療を受けたことがなく、現在も受けていない患者または試験動物
である、項目１から１０までのいずれか１つの方法。
１２．比較が行われる前記対照が、脂質降下薬またはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーをそれぞれ用いて治療する前、または、前記治療を中断している間の同じ対象由来の対照試料である、項目１から７までまたは項目１１のいずれか１つの方法。
【０１１６】
１３．比較が行われる前記対照が、
（ａ）以前にＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療されていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値、
（ｂ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療を受けていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値、
（ｃ）ＰＣＳＫ９遺伝子に任意の機能喪失型変異、例えば、Ｒ４６Ｌ（ｒｓ１１５９１１４７）などを有する１つまたは複数の対象由来の対照試料、または
（ｄ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療中であり、薬剤誘発性オフターゲット効果の徴候または履歴がない１つまたは複数の対象から確立された対照値
である、項目１から１２までのいずれか１つの方法。
１４．前記対象または前記対象由来の試料におけるＬＤＬコレステロールのレベルを決定または評価するステップをさらに含み、対象のＬＤＬコレステロールレベルが低下していてもよい、項目１から１３までのいずれか１つの方法。
【０１１７】
１５．（ａ）試料が、血液、血漿、血清、もしくはその画分、例えば、リポタンパク質画分など、または組織生検材料であり、かつ／または
（ｂ）脂質濃度（複数可）および／または脂質比（複数可）が、質量分析法、核磁気共鳴分光法、蛍光分光法または二面偏波式干渉法、ＨＰＬＣもしくはＵＰＬＣなどの高性能分離法、ＥＬＩＳＡなどのイムノアッセイを使用すること、および／または分析物に特異的に結合することができる結合部分を用いることによって決定される、項目１から１４までのいずれか１つの方法。
【０１１８】
上記を考慮して、さらに、本発明が以下の態様も包含することが理解されよう：
１．対象における脂質降下薬を用いた治療が有効であるかの決定において使用するためのデータを得る方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の、表２〜５中の脂質から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ、総ＬａｃＣｅｒ、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択される１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップ、または
【０１１９】
（ｂ）前記対象由来の試料中の、表２〜５中の脂質−脂質濃度から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１、
【０１２０】
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１／ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップ
を含む方法。
【０１２１】
２．対象における脂質降下薬を用いた治療が有効であるかの予測において使用するためのデータを得る方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の、表２〜５中の脂質から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ、総ＬａｃＣｅｒ、
【０１２２】
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択される１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップ、または
【０１２３】
（ｂ）前記対象由来の試料中の、表２〜５中の脂質−脂質濃度から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１、
【０１２４】
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップ
を含む方法。
【０１２５】
３．対象における脂質降下薬を用いた治療の有効性を決定するための方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して低下または上昇していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の減少した脂質から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
【０１２６】
濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の増加した脂質から、好ましくは、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
【０１２７】
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比（複数可）が対照と比較して減少または増加していることにより前記治療の有効性が高いことが示され、
その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
【０１２８】
その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度から、好ましくは、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【０１２９】
４．対象における脂質降下薬を用いた治療の有効性を予測するための方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して上昇または低下していることにより前記治療が有効であろうことが示され、濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の減少した脂質から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
【０１３０】
濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の増加した脂質から、好ましくは、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
【０１３１】
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比が対照と比較して増加または減少していることにより前記治療が有効であろうことが示され、
その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
【０１３２】
その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度から、好ましくは、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【０１３３】
５．脂質降下薬治療に対する対象の適合性を決定するための方法であって、
（ａ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して低下または上昇していることにより良好な治療適合性が示され、濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の減少した脂質から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
【０１３４】
濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の増加した脂質から、好ましくは、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
【０１３５】
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比（複数可）が対照と比較して減少または増加していることにより良好な治療適合性が示され、
濃度の減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
【０１３６】
その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度から、好ましくは、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【０１３７】
６．脂質降下薬として、または心血管疾患およびその合併症を治療するために有用である化合物を同定するための方法であって、
（ａ）前記化合物を用いた治療を受けている前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質の濃度（複数可）を決定するステップであって、前記試料中の濃度（複数可）が対照と比較して低下または上昇していることにより脂質降下薬としての有用性が示され、
濃度の低下（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の減少した脂質から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒおよび総ＬａｃＣｅｒ
から選択され、
【０１３８】
濃度の上昇（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質が、表２〜５中の増加した脂質から、好ましくは、
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡおよび総ＳＰＨ
から選択されるステップ、または
【０１３９】
（ｂ）前記対象由来の試料中の１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップであって、前記試料中の脂質−脂質濃度比（複数可）が対照と比較して減少または増加していることにより脂質降下薬としての有用性が示され、
その減少（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の減少した脂質−脂質濃度から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）およびＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１
から選択され、
【０１４０】
その増加（複数可）が対照と比較される１つまたは複数の脂質−脂質濃度比が、表２〜５中の増加した脂質−脂質濃度から、好ましくは、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択されるステップ
を含む方法。
【０１４１】
７．脂質降下薬がＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーであり、前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーが、
（ａ）ＰＣＳＫ９に対する抗体、
（ｂ）ＰＣＳＫ９の阻害薬物、
（ｃ）ＬＤＬ−受容体とＰＣＳＫ９の相互作用を阻害する小分子、
（ｄ）ＬＤＬ−受容体のＰＣＳＫ９との相互作用ドメインを模倣するペプチド、
（ｅ）ＰＣＳＫ９に特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチド、または
（ｆ）ＰＣＳＫ９に特異的な低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）
であってもよい、態様１から６までのいずれか１つの方法。
【０１４２】
８．ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーの特異性を決定するための方法であって、対象由来の試料中の１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または脂質−脂質濃度比（複数可）が対照と比較され、前記１つまたは複数の前記脂質（複数可）または脂質−脂質濃度比（複数可）が、表２〜５中の脂質および脂質−脂質濃度比から、好ましくは、
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＣＥ１６：０、ＣＥ１６：１、ＣＥ１８：１、ＣＥ２０：３、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２０：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：１）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：０）、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２６：１）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＴＡＧ６０：１２、総Ｃｅｒ、総Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ、総ＬａｃＣｅｒ、
【０１４３】
ＬＰＣ１６：１、スフィンガニンｄ１８：０、スフィンガニン−１−リン酸ｄ１８：０、スフィンゴシンｄ１６：１、スフィンゴシンｄ１８：１、スフィンゴシン−１−リン酸ｄ１８：１、ＴＡＧ４９：２、ＴＡＧ５０：４、ＴＡＧ５２：４、ＴＡＧ５２：５、ＴＡＧ５３：３、ＴＡＧ５４：３、ＴＡＧ５４：４、ＴＡＧ５４：５、ＴＡＧ５４：６、ＴＡＧ５４：７、ＴＡＧ５４：８、ＴＡＧ５６：５、総Ｓ１Ｐ、総ＳＡ１Ｐ、総ＳＰＡ、総ＳＰＨ
Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＴＡＧ５２：４、ＣＥ１８：１／スフィンゴシンｄ１６：１、ＣＥ２２：２／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＣＥ２０：３／アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ｍｇ／ｄＬ）、ＣＥ２０：３／ＨＤＬコレステロール（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：１）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／アポリポタンパク質Ｃ−ＩＩＩ（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＤＡＧ１６：０／１８：１、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１８：０／２２：６、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／トリグリセリド（ＥＤＴＡ）（ｍｇ／ｄＬ）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）／ＬＰＣ２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／ＰＣ１６：０／２０：４、Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）／スフィンゴシンｄ１６：１、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＧｌｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／ＳＭ（ｄ１８：１／２３：１）（ｄ１８：１／２２：２−ＯＨ）、ＰＣ１６：０／１６：０／スフィンゴシンｄ１６：１、
ＴＡＧ５８：１０／ＴＡＧ６０：１２、ＣＥ１８：２／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ１８：３／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：３／ＰＣ１６：０／１６：０、ＣＥ２０：４／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＣＥ２０：４／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）、ＣＥ２０：５／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２２：０）／Ｃｅｒ（ｄ１８：１／２２：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＦＣ、Ｃｅｒ（ｄ１８：０／２４：０）／ＰＣ１６：０／１８：２、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、Ｃｅｒ（ｄ１８：１／１８：０）／Ｇｌｃ／ＧａｌＣｅｒ（ｄ１８：１／２４：０）、ＬＰＣ１６：１ＴＡＧ５６：５、ＬＰＣ１８：２／ＬａｃＣｅｒ（ｄ１８：１／１６：０）、ＬＰＣ１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）およびＰＣ１８：２／１８：２／ＳＭ（ｄ１８：１／１６：０）（ｄ１８：１／１５：１−ＯＨ）
から選択され、
【０１４４】
前記対照が、
（ａ）ＰＣＳＫ９機能喪失型変異を有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値、
（ｂ）ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルを有する１つまたは複数の対象に由来する試料または値、または
（ｃ）公知の特異的なＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療した１つまたは複数の対象に由来する試料または値
であり、前記試料と対照中の前記１つもしくは複数の脂質または脂質−脂質濃度比（複数可）の間に差異がないことにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療の特異性が示され、差異があることにより前記ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたは化合物によって非特異的な影響、例えば、１つまたは複数の有害な副作用などが引き起こされることが示される方法。
【０１４５】
９．ＰＣＳＫ９機能喪失型脂質プロファイルが、対照由来の１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または脂質−脂質濃度比を決定することによって作成される、態様８の方法。
【０１４６】
１０．比較が行われる前記対象が、
（ａ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている患者、
（ｂ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーまたはＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物を用いた治療を受けている試験動物、
（ｃ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬を用いた治療を受けている患者または試験動物、または
（ｄ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー、ＰＣＳＫ９を標的とする別の化合物またはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサー以外の脂質降下薬を用いた治療を受けたことがなく、現在も受けていない患者または試験動物である、態様１から９までのいずれか１つの方法。
１１．比較が行われる前記対照が、脂質降下薬またはＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーをそれぞれ用いて治療する前、または、前記治療を中断している間の同じ対象由来の対照試料である、態様１から７までまたは１０のいずれか１つの方法。
【０１４７】
１２．比較が行われる前記対照が、
（ａ）以前にＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いて治療されていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値
（ｂ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療を受けていない１つまたは複数の健康な対象から確立された対照値、
（ｃ）ＰＣＳＫ９遺伝子に任意の機能喪失型変異、例えば、Ｒ４６Ｌ（ｒｓ１１５９１１４７）などを有する１つまたは複数の対象由来の対照試料、または
（ｄ）ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーを用いた治療中であり、薬剤誘発性オフターゲット効果の徴候または履歴がない１つまたは複数の対象から確立された対照値
である、態様１から１０までのいずれか１つの方法。
１３．前記対象または前記対象由来の試料におけるＬＤＬコレステロールのレベルを決定または評価するステップをさらに含み、対象のＬＤＬコレステロールレベルが低下していてもよい、態様１から１２までのいずれか１つの方法。
【０１４８】
１４．（ａ）試料が、血液、血漿、血清、もしくはその画分、例えば、リポタンパク質画分など、または組織生検材料であり、かつ／または
（ｂ）脂質濃度（複数可）および／または脂質比（複数可）が、質量分析法、核磁気共鳴分光法、蛍光分光法または二面偏波式干渉法、ＨＰＬＣもしくはＵＰＬＣなどの高性能分離法、ＥＬＩＳＡなどのイムノアッセイを使用すること、および／または分析物に特異的に結合することができる結合部分を用いることによって決定される、態様１から１３までのいずれか１つの方法。
１５．ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーが、
（ａ）ＰＣＳＫ９に対する１つまたは複数の抗体、
（ｂ）ＰＣＳＫ９の阻害薬物、
（ｃ）ＬＤＬ−受容体とＰＣＳＫ９の相互作用を阻害する小分子、
（ｃ）ＬＤＬ−受容体のＰＣＳＫ９との相互作用ドメインを模倣するペプチド、
（ｄ）ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的な１つまたは複数のｓｉＲＮＡ、および／または
（ｅ）ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡに特異的な１つまたは複数のアンチセンスオリゴヌクレオチド
から選択される、態様７から１４までのいずれか１つの方法。
【０１４９】
１６．１つまたは複数の有害な副作用が肝毒性である、態様８の方法。
１７．コンピュータにより実行される方法である、態様１〜１６のいずれか１つに記載の方法。
１８．
（ｉ）少なくとも１つのプロセッサにより、前記試料中の前記１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または前記１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を反映する情報を得るステップ、
（ｉｉ）少なくとも１つのプロセッサにより、前記試料中の前記１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または前記１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップ、および
（ｉｉｉ）前記試料中の前記１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または前記１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を、使用者が読むことができる形式で出力するステップ
をさらに含む、態様１７に記載の方法。
【０１５０】
１９．（ｉｖ）少なくとも１つのプロセッサにより、対照と前記試料中の前記１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または前記１つまたは複数の脂質−脂質濃度比の間の百分率差を決定するステップ、および
（ｖ）決定するステップ（ｉｖ）において得られた百分率差を、使用者が読むことができる形式で出力するステップ
をさらに含む、態様１８に記載の方法。
２０．出力するステップにおいて得られた百分率差に基づいて、
対象における脂質降下薬を用いた治療が有効であるかを決定するステップ、
対象における脂質降下薬を用いた治療が有効であるかを予測するステップ、
対象が脂質降下薬治療に適合しているかを決定するステップ、
脂質降下薬として、または心血管疾患およびその合併症を治療するために有用である化合物を同定するステップ、または
ＰＣＳＫ９阻害剤／サイレンサーの特異性を決定するステップ
をさらに含む、態様１９に記載の方法。
【０１５１】
２１．決定するステップの後に、決定するステップにおいて得られた前記１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または前記１つまたは複数の脂質−脂質濃度比に基づいて、前記対象にすでに施された治療を変化させる、それを補う、またはそれを維持するステップをさらに含む、態様１〜１９のいずれかに記載の方法。
２２．決定するステップの後に、決定するステップにおいて得られた前記１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または前記１つまたは複数の脂質−脂質濃度比に基づいて前記対象を治療するステップをさらに含む、態様１〜２０のいずれかに記載の方法。
２３．前記１つもしくは複数の脂質の濃度（複数可）または前記１つまたは複数の脂質−脂質濃度比を決定するステップが、アッセイを使用して行われる、態様１〜２２のいずれか１つに記載の方法。
【０１５２】
当業者は、「実施例」および特許の記載全体の本文の両方に本明細書で記載されている特定の項目、実施形態および態様の多数の等価物を、常套的な実験だけを使用して理解し、または確認することができる。そのような等価物は、本発明の範囲内であるとみなされ、以下の特許請求の範囲に包含される。
【図２】
2015526696.tif 000025
【図４】
2015526696.tif 000026
【図５】
2015526696.tif 000027
【図１】
2015526696.tif 000028
【図３Ａ】
2015526696.tif 000029
【図３Ｂ】
2015526696.tif 000030
【図３Ｃ】
2015526696.tif 000031
【図３Ｄ】
2015526696.tif 000032
【国際調査報告】
2015526696.tif 000033
2015526696.tif 000034
2015526696.tif 000035
2015526696.tif 000036
2015526696.tif 000037
2015526696.tif 000038