(57)【要約】柑橘類の緑化病やＨＬＢと呼ばれる状態によりその成長と発展が阻害された柑橘類の樹木に外因的に適用された場合、トレハロース又はトレハロース−６−リン酸はこの問題の致命的な影響を克服することができる。トレハロースまたはトレハロース−６−リン酸による樹木組織の再生については、枯れ死しかかっている木に外因的に適用した７２時間経過直後から文書として記録されている。組織の再生は、葉の天蓋の完全な再生、果実の芽の発達に続いて、花の開花および花の豊富で健康的な果物への結実へと続く。枯れ死した思われる木の組織の多くは、適用後２から４ヶ月以内に健康的な新葉で覆うことができた。トレハロースまたはトレハロース−６−リン酸を土壌に適用する場合、規定のホルモンを追加することにより、新しい天蓋と根組織の発達がさらに促進された。
2015519044.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物の成長を促進する方法であって、トレハロースまたはトレハロース−６−リン酸を含む水溶液を混合する工程、及び柑橘類の緑化病に冒された樹木に前記水溶液を適用する工程を含む、方法。
【請求項２】
前記水溶液が樹木の葉の天蓋に適用される、請求項１の方法。
【請求項３】
前記水溶液が樹木の根系に適用される、請求項１の方法。
【請求項４】
前記水溶液が樹木の幹の底部に適用され、そして前記水溶液は樹木の根系に浸出する、請求項１の方法。
【請求項５】
トレハロースまたはトレハロース−６−リン酸を含む水溶液を含む、植物の成長促進混合物。
【請求項６】
前記水溶液が、さらにサイトカイニンおよびジベレリンを含む、請求項５の植物の成長促進混合物。
【請求項７】
前記水溶液が、さらに、少なくともサイトカイニンおよびジベレリンを含む複数の植物ホルモンを含む、請求項５の植物の成長促進混合物。
【請求項８】
前記水溶液が、約０．００３から０．３重量パーセントのサイトカイニン及び約０．１から１０重量パーセントのジベレリンを含む、請求項６の植物の成長促進混合物。
【請求項９】
前記水溶液が、約０．００１５から約０．１５重量％のサイトカイニンおよび約０．５から約５重量％のジベレリンを含む、請求項６の植物の成長促進混合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願発明は、作物植物、特に、柑橘類の緑化病（citrus greening）またはフアングロンビン（Huanglonbing）（ＨＬＢまたは黄龍病）と呼ばれる世界的規模の流行病によって壊滅的な影響を受けた柑橘類ファミリーのメンバー植物において、外因的に適用される非還元糖トレハロースのシグナリング効果（signaling effect）に関する。本願発明はまた、外因的に適用された他の非還元糖または類似の材料又は代謝産物のシグナリング効果に関し、特に柑橘類の緑化病またはＨＬＢと呼ばれ、そしてカンディダツス  リベリバクター(Candidatus Liberibacter)細菌により引き起こされる世界的規模の流行病によって壊滅的な影響を受けた柑橘類ファミリーのメンバー植物に対するシグナリング効果に関する。カンディダツス  リベリバクター細菌は、アジアシトラスキジラミ、ミカンキジラミによって伝播され、柑橘類の樹木の師管部に制約（resrcition）を引き起こす。これは明らかに柑橘類の樹木において植物ホルモンの大きな不均衡を誘発する。
【０００２】
従来技術
柑橘類の緑化により「より容易に」感染が誘発されるために、柑橘類の緑化する条件や樹木の一般的な「健康」をさらに悪化させる、非生物的または生物的であり得る、その底流となり/随伴して起きる障害がある。
さらに、他の任意の作物植物または他の植物上の他の細菌は、植物において、同様なまたは他の形態の植物ホルモンバランスの崩壊の影響を受けて、その結果、成長及び発展が損なわれるおそれのあることが示唆されている。同様に、細菌感染がなくとも、単純に最適なホルモンバランスを失った他の樹木または植物は衰退するが、これは柑橘類の緑化病においてより急速に起こり、そして有機体の老化と共に起こり得るしまた実際に起きている。
【０００３】
従来から、作物植物の大半は、よく研究され、そして州が推奨する生産慣例に基づき育成されており、その焦点は、専らまたは主として、特に、主要なミネラル、窒素、リン、カリウム、および場合によっては他のミネラルを十分または過剰に供給することに当てられている。このアプローチは農業生産全体で広く行われているが非生産的となり得るし、更に、作物植物の生産性を最大にするために用いることができるシグナル伝達分子を過剰に用いて、最適な遺伝子を発現させると言う全体的な生物界の実情に全く沿っていないアプローチである（現状において、多くの知られていないシグナル伝達分子が存在し、そしてそれ以外の多くのものについては、植物中のホルモンバランスを最適化することを助けるための、よく知られた植物成長調整物質を外因的に用いることの可能性については、全くといってよい程知られていない）。柑橘類の緑化病における課題、すなわち、作物成長におけるホルモンバランスと代謝シグナル伝達の不調整、に対する対策としては、ホルモン、シグナルリングまたは調節分子の最適なバランスを産生し、そして作物植物全体の成長及び発展のために代謝産物の最適な移送や分配をするために、これらのシグナル代謝産物及び/又は調節ホルモンを外因的に適用することである。作物樹木を最終的な死に至らしめる柑橘類の緑化病、これはまたＨＬＢと呼ばれているが、この「病気」が植物の成長と作物生産に対してもたらす好ましくない特徴は、光合成産物移送システム、または植物組織体において解剖学的に「師管部」と呼ばれる「パイプライン」部分の機能不全である様に思われる。作物生産シグナリングと"食物"の移送に必要な少なくとも2つの主要なシステムが、基本的にはまず部分的に冒され、続いて死に至りその後最終的には完全に停止（shut down）される。最初の危機を示す側面は、成長と発展のための遺伝子発現の適切なシグナリングのための、植物調節ホルモンおよび代謝産物にとり必須の移送についての危機である。
【０００４】
この移送における危機は、これらのシグナリング分子または調節分子の、茎の先端から根の先端への下方向への移送だけでなく、根の先端から茎の先端への上方向への移送及びいずれかの側への移送や、または、その他の移送においてである。さらに、上記の危機は、次に二次的に、葉または光合成葉緑体の他の部位からの、光合成産物の移送の渋滞または移送路の詰まり、そして付随的に葉の中に過度に糖を堆積させて、移動することのないと思われるデンプンを生成する。その結果、さらに作物植物の適切な生長と発展のために絶対的に必須である糖及び代謝産物の移送を困難にする。上記の、この様な機能の不全により、全体として作物植物の緩慢な且つ曲折ある死がもたらされる。
【０００５】
本願発明の目的
本願発明の一つの目的は、調節ホルモンおよび/またはシグナリング代謝産物をより効率的に合成し、そしてそれらを豊富に移送させる刺激を与える化学組成物または混合物を提供することである。前記調節ホルモンおよび/またはシグナリング代謝産物は、茎の先端から根の先端まで、及び根の先端から茎の先端まで及び成長する作物植物の全ての関連する組織を含め、植物全体の生産性を高めるために遺伝子発現を最適化し、または最大化さえする様に制御する。
【０００６】
本願発明の他の目的は、代謝産物の合成部位から組織部位に、糖、アミノ酸および他の光合成産物を、より効率的かつ豊富に移送させる様に刺激する化学組成物または混合物を提供することであり、これらの分子は、特に、それが柑橘類の緑化病による場合と同様な危機にさらされた状態にあるときには、作物の成長と発達のために必要である。
【０００７】
本願発明の他の目的は、機能不全にある組織を置き換えるために、作物植物全体に新しい組織が発達するように刺激する化学組成物または混合物を提供することである。
【０００８】
本願発明の他の目的は、本明細書に記載の、または任意の他の病気を引き起こす細菌または有機体により、または、作物植物に他のあらゆるストレスや危機状態の組織を招来する他の任意の要因によって生じる、ホルモンおよび植物全体にわたるシグナリング分子のバランスの乱れによって、機能不全の状態にある組織を置き換えるために、作物植物全体に新しい組織が発達するように刺激する化学組成物または混合物を提供することである。
本願発明の他の目的は、細胞分裂及び細胞分化、及びそれによって植物科学において導管組織と呼ばれる新たな「移送組織」パイプラインの発達を促進させる化学組成物または混合物を提供することであり、その組織は師管部、木質部細胞外空間、および作物植物中の新しい及び全ての関連する組織の発達のために調節ホルモン及びシグナリング分子の移送のための、関連するその他の組織を含む。
【０００９】
本願発明の他の目的は、作物植物の通常の及び最適な成長及び発達のために、調節ホルモン及びシグナリング分子を新たに合成し及び移送させるために、作物植物全体に新しい組織を発達させ、危機に陥りゆっくりと死に向かっている作物植物を「再出発」させるために、外因的にシグナリング分子及び/又は外因的に調節ホルモンを適用する方法を提供することである。
【００１０】
本願発明の他の目的は、危機に陥りゆっくりと死に向かっている作物植物を「再出発」させるのみならず、作物植物の通常の及び最適な成長及び発達のために、調節ホルモン及びシグナリング分子を新たに合成し及び移送させ、作物植物全体に新しい組織を発達させること、及び、また、比較的長期且つ生産性を有する期間に亘り、継続的に「健康的」な成長をさせ、これらの分子を継続して合成し及び移送させるために、外因的にシグナリング分子及び/又は外因的に調節ホルモンを適用する方法を提供するものである。
【００１１】
本願発明の他の目的は、作物植物の通常及び最適な成長及び発達のために、調節ホルモン及びシグナリング分子を新たに合成し及びそれを移送させ、作物全体に新しい組織を発展させ、危機に陥りゆっくりと死に向かっている作物を「再出発」させるのみならず、比較的長期且つ生産性を有する期間に亘り、継続的に「健康的」な成長をさせ、これらの分子を継続して合成及び移送させるために、外因的にシグナリング分子及び/又は外因的に調節ホルモンを適用する方法を提供するものであり、その様な適用によって、以前に柑橘類の緑化病により危機的な状態に陥っていた組織の目詰まり状態を解消し、及びオートファジーおよび/または他の手段によって、以前に危機的なパターンにあった代謝材料を再循環及び使用して、新しい及び効果的な組織の成長を可能とする。
【００１２】
本願発明の他の目的は、作物植物の通常の及び最適な成長及び発達のために、新たに調節ホルモン及びシグナリング分子を合成し及びそれを移送させて、作物植物全体に新しい組織を発展させ、危機に陥りゆっくりと死に向かっている作物を「再出発」させるのみならず、比較的長期且つ生産性を有する期間に亘り、継続的に「健康的」な成長をさせるこれらの分子を継続して合成及び移送させるために、外因的にシグナリング分子及び/又は外因的に調節ホルモンを適用する方法を提供するものであり、その様な適用によって、以前に柑橘類の緑化病により危機的な状態に陥っていた組織の目詰まり状態を解消し、及びオートファジーおよび/または他の手段によって、以前危機的なパターンにあった代謝材料を再循環及び使用して、さらに、新しい及び機能的な組織の発達を可能とする。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
発明を限定するためでなく例示として示すものであるが、本願発明は添付の図面に基づいて以下本明細書に詳細に説明されている。トレハロースを葉の天蓋、または葉の天蓋と地中の根に至る木の幹の底部に適用すると共に、成長ホルモン調節剤及び/又は他の分子及び/又はミネラルを適用した結果を示す。
【図１】図１は、葉にトレハロースを適用する前のオレンジの木の状態を示す。
【図２】図２は、葉の天蓋を１度トレハロースで処理した後、その４ヵ月後の２０１１年１１月３０日に新たにトレハロースでほぼ完全に処理した図１の木の、２０１２年３月２２日現在の状態を示す。
【図３】図３は、処理後４ヶ月後経過した後において、枯れ死したと思われた枝に形成された新しい葉を示す。
【図４】図４は、柑橘類の緑化病により重篤状態となった樹木に、処理４カ月経過後においても、枯れ死にしたと思われた枝に新しい葉が成長している状態をクローズアップして示す。
【図５】図５は、処理後３ヶ月経過した、図１及び２に示す木に花が多数開花した状態を示す。
【図６】図６は、葉面にトレハロースを、及びまた柑橘類の樹木の幹の下部にトレハロースとホルモンの混合物を灌注することにより処理し、そして植物の冠の部位の土壌及び根に化学品の混合物の残余分を浸み込ませた別の樹木を示す。
【図７】図７は、図６に示す処理された木であり、７２時間前は枯れ死にしたと思われた小さな枝につけた３つの新しい葉を示す。
【図８】図８は、図６に示すように処理後７２時間経過後の小さな枝の先につけた新しい葉を示す。
【図９ａ】図９ａは、処理後１２ヶ月後のオレンジの木になっている果実を示す。
【図９ｂ】図９ｂは、処理後１４ヶ月後のオレンジの木になっている果実を示す。 そして
【図９ｃ】図９ｃは、図９ｂの木の新しい葉の初期の状態を示す。
【発明の概要】
【００１４】
上に記載された本願発明の目的は、本願発明の他の特徴および利点と共に、植物の成長促進混合物を記載するものとして本願発明に組み込まれる。前記混合物は、新らたに発達する植物組織に光合成産物を移送させるために、少なくともシグナリング分子トレハロース、好ましくはトレハロースまたはトレハロース−６−リン酸、または二つ列挙された化合物と同様の効果を奏する他の化合物を含む。
【００１５】
本願発明は、作物植物に外因的に適用される非還元糖トレハロースのシグナリング効果に関し、特に、本願発明のこの特定の例においては、柑橘類の緑化病またはHuanglonbing（ＨＬＢまたは黄龍病）と呼ばれる、世界的規模で流行している病気により壊滅的影響をうけている柑橘類ファミリーのメンバー植物に関するものである。
【００１６】
本願発明はまた、他の外因的に適用される非還元糖または類似の材料又は代謝産物のシグナリング効果に関し、特に、本願発明のこの特定の例においては、柑橘類の緑化病またはＨＬＢと呼ばれ、そしてカンディダツス  リベリバクター細菌により引き起こされる世界的規模の流行病によって壊滅的な影響を受けている柑橘類ファミリーのメンバー植物へのシグナリング効果に関する。カンディダツス  リベリバクター細菌は、アジアシトラスキジラミ、ミカンキジラミによって伝播され、柑橘類の樹木において師管部への制約（restriction）を引き起こす。この問題は、柑橘類の樹木において明らかに、植物ホルモンの非常に大きな不均衡を誘発する。柑橘類の緑化により「より容易な」感染が誘発されるため、柑橘類の緑化する条件や樹木の一般的な「健康」をさらに悪化させる、非生物的または生物的であっても良い、底流となる、随伴しておきる障害がある。さらに、他の任意の作物植物または他の植物上の他の細菌が、植物において、同様なまたは他の形態の、植物ホルモンバランスの崩壊の影響を受けて、その結果、成長及び発展が損なわれる恐れのあることが示唆されている。同様に、細菌感染がなくとも、単純に最適なホルモンバランスを失った他の樹木または植物は衰退するが、これは柑橘類の緑化病においてより急速に起こり、そして有機体の老化と共に起こり得るしまた実際に起きている。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
トレハロースまたはトレハロース−６−リン酸を、冒された柑橘類の樹木の葉の天蓋に散布する葉面散布における好ましい適用例では、水性溶液中の濃度は、１エーカー当たり水１００ガロン容積中０．０００２％から２％であり、好ましくは１エーカー当たり水１００ガロン容積中０．０２％であるのがよい。
【００１８】
１エーカー当たり水１００ガロン容積中０．０２％の好ましい濃度の場合、新しい組織の発達をさらに促進するためにサイトカイニンおよびジベレリンのような他の植物ホルモンを添加しても良いが、必ずしもサイトカイニンおよびジベレリンに限定されない。
植物の成長促進混合物が、トレハロースによって刺激されたことによる大量の細胞分裂および細胞分化によって、植物の栄養摂取と発達を大きく促進させることが観察され、さらに付随して起きる障害又は柑橘類の緑化障害により樹木に影響を与える病気によっては、さらにサイトカイニン及びジベレリンなどのホルモンの適用により促進させることができ、この場合ホルモンは、有効な、後成的な（epigenetic）方法によるとこれらのホルモンに限定されることはなく、そして作物植物においてより頑強な、健康的にそしてより経済的に生産性のある部分を作り出す。
【００１９】
余剰分は土壌に滴下して、柑橘類の樹木の根に浸透するトレハロースまたはトレハロース−６−リン酸が冒された樹木の幹の下部に適用される、土壌への適用における好ましい適用方法においては、その水性溶液の濃度は、１エーカー当たり水１００ガロン容積中０．０００２％から２％であり、好ましくは０．０２％であるのがよい。さらに、余剰分は土壌に滴下して、柑橘類の樹木の根に浸透するトレハロースまたはトレハロース−６−リン酸が冒された樹木の幹の下部に適用される、土壌への適用における好ましい適用方法においては、その水溶液の濃度は、１エーカー当たり水１００ガロン容積中０．０００２％から２％であり、さらに新しい組織の発達を促進するために好ましくは０．０２％のトレハロースまたはトレハロース-6 -リン酸並びにサイトカイニンおよびジベレリンのような他の植物ホルモンが使用されるのが良いが、ホルモンは必ずしもサイトカイニンおよびジベレリンに限定されない。シグナリング分子トレハロースまたはトレハロース−６−リン酸は、好ましくは、ミネラル  コバルトまたはマンガンの様な他の構成要素と共に、又はこの構成要素なしに水溶液により植物に適用されるのが好ましい。これらの他の構成要素は、作物植物が、高温、水不足などの生物的または非生物的ストレス条件に苦しむときに、トレハロース又はトレハロース−６−リン酸と組み合わされてエチレンの有害な影響を抑える。
【００２０】
植物の成長促進混合物が、サイトカイニンとジベレリンなどのホルモンによって刺激されて、大量の細胞分裂および細胞分化によって、植物の栄養摂取と発達を大きく促進させることが観察され、作物植物においてより頑強な、健康的にそしてより経済的に生産性のある部分を作り出した。ただし、ホルモンはサイトカイニンおよびジベレリンに限定されるものではない。
【００２１】
植物の成長促進混合物が、サイトカイニンとジベレリンなどのホルモンによって刺激されて、大量の細胞分裂および細胞分化によって、植物の栄養摂取と発達を大きく促進させることが観察され、作物植物においてより頑強な、健康的にそしてより経済的に生産性のある部分を作り出し、そして特に作物植物の糖移送及びその効率を高め、その結果作物の生産性を大幅に向上させた。ただし、ホルモンはサイトカイニンおよびジベレリンに限定されることはない。
【００２２】
植物の成長促進混合物の使用により、果実を結ぶ芽を大きく発達させることが観測された。これらの芽は、続いて果実を結ぶ花になり、そして豊富な健康的な果実製品を生み出す。植物の成長促進混合物が、柑橘樹及び柑橘類果実の生産の前段階においてその成長を損なうとする証拠はなく、作物植物の収穫量を大幅に増大させることが観測された。
【００２３】
植物の成長促進混合物が、柑橘類の緑化病により不能となった表現型を新しい健康的な天蓋と根系を形成することによって克服し、シグナリング還元糖トレハロースを適用することにより作物植物の収穫量を大きく増加させることが観測された。その場合、トレハロースは１エーカーあたり少なくとも１００ガロンの水の容量で散布するが、枯れ死したように見えた末梢の葉に葉面散布する、または残っている葉やつぼみに散布することに限定されない。この場合、枯れ死しつつある樹木を混合物により可能な限り完全に覆う様にすることが肝要である。さらに、前述したように「土壌」に撒くことにより、非生物的または生物的かどうか関わらず、さらに、柑橘類の緑化病以外の他の障害が関係する困難な状況を救済することができる。
【００２４】
トレハロースを土壌に適用するか又は十分な材料が土壌中の根に入る木の幹に適用する好ましい実施の態様においては、化学組成物又は植物の成長促進混合物は、２つの植物ホルモン、すなわち、サイトカイニンとジベレリンの水性混合物を含む。または前述の様に樹木の「地上」部分への葉面散布としても適用される。当業者に知られている様に、サイトカイニンおよびジベレリンは種々の天然のソースから得ることができるか、またはそれらは化学的に合成することができる。ジベレリンは、好ましくは、以下の1以上から選択される：
GA1, GA2, GA3, GA4, GA5, GA6, GA7, GA8, GA9, GA10, GA11, GA12, GA13, GA14, GA15, GA16, GA17, GA18, GA19, GA20, GA21, GA22, GA23, GA24, GA25, GA26, GA27, GA28, GA29, GA30, GA31, GA32, GA33, GA34, GA35, GA36, GA37, GA38, GA39, GA40, GA41, GA42, GA43, GA44, GA45, GA46, GA47, GA48, GA49, GA50, GA51, GA52, GA53, GA54, GA55, GA56, GA57, GA58, GA59, GA60, GA61, GA62, GA63, GA64, GA65, GA66, GA67, GA68, GA69, GA70, GA71, GA72, GA73, GA74, GA75, GA76, GA77, GA78, GA79, GA80, GA81, GA82, GA83, GA84, GA85, GA86, GA87, GA88, GA89, GA90, GA91, GA92, GA93, GA94, GA95, GA96, GA97, GA98, GA99, GA100, GA101, GA102, GA103, GA104, GA105, GA106, GA107, GA108, GA109, GA110, GA111, GA112, GA113, GA114, GA115, GA116, GA117, GA118, GA119, GA120, GA121, GA122, GA123, GA124, GA125, GA126。
サイトカイニンは以下の１以上から選択される：
ゼアチン、種々の形態のゼアチン、Ｎ６−ベンジルアデニン、Ｎ６−（δ−２−イソペンチル）アデニン、１、３−ジフェニルウレア、チジアズロン、ＣＰＰＵ（ホルクロルフェニュロン）、キネチン、またはサイトカイニン活性を有する他の化学製剤。
好ましいジベレリンは、ジベレリン酸、ＧＡ３であり、ＧＡ３が、重量で約０．１から１０パーセントの間であるような量で水性混合物中に存在し、より好ましくは約０．５から約５重量％、最も好ましくは約０．０７５重量％から約０・１２５重量％である。好ましいサイトカイニンはキネチンであり、キネチンは重量で約０．００３％から０．３％の間の量で水性混合物中に存在し、より好ましくは約０．００１５重量％から０．１５重量％、最も好ましくは約０．０１重量％から約０．０５重量％である。
【００２５】
植物ホルモン、サイトカイニンおよびジベレリンの比率は、好ましくは１:１０から１:３００及びより好ましくは１:２０から１:４０である。約１:３０の比率が最も好ましい。しかしながら、最良の結果を得るために、サイトカイニンとジベレリンの絶対量は、処理される植物及びその果実の容積/重量に比例して変えることが必要である。サイトカイニンの絶対量は、好ましくは育成する植物１ヘクタール当たり１から３００ｍｇの間で変るが、より好ましくは育成する植物１ヘクタール当たり２０から８０ｍｇの間で変る。ジベレリンの絶対量は、好ましくは、育成する植物１ヘクタール当たり１００から１０，０００ｍｇの間で変るが、より好ましくは育成する植物１ヘクタール当たり５００から２，５００ｍｇの間で変る。
【００２６】
実施例
図面は、柑橘類の樹木や植物に、植物の成長促進混合物を適用した結果についていくつかの例を示している。たとえば、図１と２は、それぞれ、オレンジの木の葉にトレハロース適用する前および後の状態を示している。図１および図２に示す例では、水溶液は水１ガロン当たり１グラムのトレハロースの濃度で水とトレハロースとを組み合わせることによって調製した。その後、水溶液は１エーカー当り１００ガロンの割合で柑橘類の樹木の葉に適用した。図２は、水溶液により１回処理した後４ヶ月後の樹木を示している。図３は、処理４ヶ月後であっても、枯れ死したと思われる枝の上においてさえ形成された新葉を示している。図４は、柑橘類の重い緑化病に罹患した樹木を処理した４カ月後に、枯れ死したと思われた枝の上に成長した新葉のクローズアップを示している。同様に、図５は、同じ樹木に水溶液を１回適用した後３ヶ月後の状態を示しており、樹木は開花している。
【００２７】
図６−８は、本願発明の実施形態による水溶液を適用した結果の他の例を示している。例えば、図６は、水1ガロンあたり1グラムのトレハロース及び植物ホルモンサイトカイニンおよびジベレリンを含む溶液で処理した樹木を示している。サイトカイニンは、溶液の約０．００１５重量％を占めており、ジベレリンは、溶液の約０．５重量パーセントを占めていた。この例では、水溶液は樹木の幹の基部のすぐ周りの土壌に１樹木あたり1ガロンの割合で適用した。溶液は土壌に浸み込んだ。図７および図８は、溶液を適用した後約７２時間後の、既に枯れ死したと思われた枝につけた新しい葉を示す。
図９ａは、処理１２ヶ月後にオレンジの木になった果実を示す図である。 
図９ｂは、処理１４ヶ月後にオレンジの木になった果実を示す図である。そして 
図９ｃは、図９ｂの木の新しい葉の自然のままの状態を示している。
【００２８】
処理された樹木の葉や果実の外観は、柑橘類の緑化病、ＨＬＢの病原菌が存在しないことを示している。その様な細菌が存在しないことは、リアルタイム−ＰＣＲ、Ｃｔ値を決定する分子生物学的手法によっても実証される。 ４０代のＣｔ値は処理された木について、２０代のＣｔ値は感染した樹木について見られた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９ａ】
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【図９ｂ】
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【図９ｃ】
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【国際調査報告】
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