(57)【要約】  本発明は、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置における使用のための薬草組成物に関する。本発明はまた、薬草組成物の調製方法、およびこのような薬草組成物を用いるための方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花および／または結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分を含んでいる薬草組成物。
【請求項２】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花および／または結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される活性成分を含んでいる、請求項１に記載の薬草組成物。
【請求項３】
Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物から選択される活性成分を含んでいる、請求項１に記載の薬草組成物。
【請求項４】
Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される活性成分を含んでいる、請求項１に記載の薬草組成物。
【請求項５】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される活性成分を含んでいる、請求項１に記載の薬草組成物。
【請求項６】
前記組成物が薬学的に許容される担体または賦形剤をさらに含む、前述の請求項１〜５のいずれか１項に記載の薬草組成物。
【請求項７】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミン含有物質を１：１：１〜１６：８：５の比で含む、請求項２に記載の薬草組成物。
【請求項８】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを１：１〜１：５の比で含む、請求項３に記載の薬草組成物。
【請求項９】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質を１：１〜１０：５の比で含む、請求項５に記載の薬草組成物。
【請求項１０】
請求項２に記載の薬草組成物であって、
（ａ）約３０重量％以上約７０重量％以下のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物と、
（ｂ）約２０％以上約４０％以下のＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａと、
（ｃ）約３％以上約４０％以下のクルクミンまたはクルクミン含有物質と、
を含んでいる薬草組成物。
【請求項１１】
請求項３に記載の薬草組成物であって、
（ａ）約１０重量％以上約５０重量％以下のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物と、
（ｂ）約５０％以上約８５％以下のＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａと、
を含んでいる薬草組成物。
【請求項１２】
前記クルクミン含有物質が、約２０％以上約３０％以下のクルクミンを含んでいる、請求項１、２および４〜１０のいずれか１項に記載の薬草組成物。
【請求項１３】
前記クルクミン含有物質が、ターメリックである、請求項１２に記載の薬草組成物。
【請求項１４】
ＴＮＦ−α（腫瘍壊死因子−α）によって媒介される疾患の予防または処置における使用のための請求項１〜１３のいずれか１項に記載の薬草組成物。
【請求項１５】
ＴＮＦ−αによって媒介される前記疾患が、炎症性疾患、または炎症性要素を有する疾患、または腎嚢胞性疾患である、請求項１４に記載の使用のための薬草組成物。
【請求項１６】
請求項１５に記載の使用のための薬草組成物であって、前記炎症性疾患または炎症性要素を有している疾患が、冠動脈性心疾患、アテローム性動脈硬化症、高脂血症、虚血再かん流障害、脳卒中、悪液質、高血圧、血管炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、多発性硬化症、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、皮膚遅延型過敏性障害、強直性脊椎炎、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、慢性移植片対宿主病、乾癬、結膜炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、ベーチェット病、炎症性腸疾患、骨粗しょう症／骨吸収、慢性閉塞性肺疾患または喘息から選択される、薬草組成物。
【請求項１７】
請求項１６に記載の使用のための薬草組成物であって、前記炎症性疾患または炎症性要素を有している疾患が、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、乾癬、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、骨粗しょう症／骨吸収、クローン病、アテローム性動脈硬化症または強直性脊椎炎から選択される、薬草組成物。
【請求項１８】
前記腎嚢胞性疾患が、多発性嚢胞腎である、請求項１５に記載の使用のための薬草組成物。
【請求項１９】
前記多発性嚢胞腎が、常染色体優性多発性嚢胞腎または常染色体劣性多発性嚢胞腎である、請求項１７に記載の使用のための薬草組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＴＮＦ−α（腫瘍壊死因子−α）によって媒介される疾患の予防または処置における使用のための薬草組成物に関する。本発明はまた、この薬草組成物の調製方法、およびこのような薬草組成物を用いるための方法も提供する。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）またはカヘキシンあるいはカケクチンは、マクロファージ分泌のポリペプチドホルモンである。これは、感染、損傷および炎症の発病機序における主なメディエーターである。ＴＮＦ−α変換酵素（ＴＡＣＥ、ＡＤＡＭ−１７としても公知）は、細胞表面からのＴＮＦの放出を媒介し、かつまたＴＮＦの作用を中和し得るＴＮＦ受容体のプロセシングに関与する。ＴＡＣＥは、エフェクター（例えば、マクロファージ）に対して作用するか、または標的（例えば、内皮）細胞に作用するか次第で、炎症促進性または抗炎症性のいずれかとして作用し得る（Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２００８年，第２１４巻，１４９〜１６０ページ）。
【０００３】
ＴＮＦは、主な炎症性サイトカインであって、宿主防御および炎症において中心的な役割を有する（Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００３年，第３巻，７４５〜７５６ページ）。その生物学的機能を発揮するために、ＴＮＦは、細胞および組織で示差的に発現し、別個のおよび重複する両方のシグナル伝達経路を開始する、ＴＮＦＲ１およびＴＮＦＲ２と呼称される、２つの異なる受容体と相互作用する。これらの多様なシグナル伝達カスケードはある範囲の細胞応答をもたらし、これには細胞の死、生存、分化、増殖および遊走を包含する。細胞培養の研究、およびレセプターノックアウトマウスを用いた研究に基づいて、ＴＮＦによって活性化され、かつ組織損傷に関連する炎症促進性およびプログラムされた細胞死の経路の両方が、ＴＮＦＲ１を主に通じて媒介されることがわかっている（Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２００８年，第２１４巻，１４９〜１６０ページ）。
【０００４】
ＴＮＦＲ１はまた、他のシグナル伝達反応を活性化することが公知であり、これらには、ｒａｓ−ｒａｆ−ＭＥＫ１−ＥＲＫ−１，２経路およびホスファチジルイノシトール−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）が挙げられ、Ａｋｔも活性化する。ＥＲＫ−１，２およびＡｋｔは一般には、細胞の生存および増殖と関連している。ＴＮＦ−αは、糸球体障害の動物モデルにおいて炎症性細胞の増加について、ある役割を有する。ＴＮＦ−αの投与は、成体のＰＫＤ２＋／−ヘテロ接合性マウスで嚢胞形成を刺激することが報告されている（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，２００９年，第１８巻，第２号，９９〜１０６ページ）。ＴＮＦ−αはまた、ＰＫＤ２＋／−マウスにおいて、インビボで嚢胞形成を刺激する（Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００８年，第１４巻，第８号，８６３〜８６８ページ。）。
【０００５】
ＴＮＦ−αは、炎症性腸疾患、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、骨粗しょう症／骨吸収、クローン病、潰瘍性大腸炎、乾癬、ベーチェット病、強直性脊椎炎、全身性エリテマトーデス、アレルギー性喘息および腎嚢胞性疾患（例えば多発性嚢胞腎（ＰＫＤ））等多くの症状でメディエーターとして関係しているとみなされている。
【０００６】
ＰＫＤは、慢性腎疾患の最も一般的な遺伝的原因であり、かつ末期腎不全の主な原因である。これは、透析または腎移植には一般的な適応である。ＰＫＤは、大きさが漸増する、腎実質での多くの液体の充満した嚢胞の蓄積によって特徴付けられる。この拡張する嚢胞は、周囲の正常なネフロンを圧迫して、腎機能の低下を生じる。ＰＫＤは、常染色体優性の形質（ＡＤＰＫＤ）または常染色体劣性の形質（ＡＲＰＫＤ）のいずれかで遺伝される。ＡＤＰＫＤは、１：４００〜１：１０００の頻度であり、かつ最も一般的な単一遺伝子病の１つである。ＡＤＰＫＤの特徴的な症状としては、タンパク尿、腹痛、ならびに触知可能な腎臓に続く血尿、高血圧、膿尿症、尿毒症および結石が挙げられる。
【０００７】
ＡＲＰＫＤは主に乳児および小児が罹患し、かつ１：２０，０００という頻度を有すると推定されている。最も極端な例は、ポーター（ｐｏｔｔｅｒ）の表現型に関連しており、これは、肺形成不全、特徴的な顔貌、ならびに脊椎および四肢の異常からなる。症例の有意な部分（最大３０％まで）は、新生児の期間までにとりわけ呼吸不全で死亡する。生存者では、高血圧および腎不全（末期腎臓疾患（ＥＳＲＤ）を含む）（小児の最大三分の一までが腎代替療法を必要とする）が、腎疾患の主な徴候である（Ａｎｎｕａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００９年，第６０巻，３２１〜３３７ページ）。
【０００８】
ＴＮＦ−αはまた、アルツハイマー病（ＡＤ）、パーキンソン病、脳卒中、および頭部外傷などの神経疾患におけるメディエーターと関係しているともみなされる。（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，２０１２年，第９巻，１０６ページ）。ＴＮＦ−αのレベルは、ＡＤ患者のＣＳＦ内で２５倍程度と推定されることがわかっている（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１９９９年，第１９巻、第４号，２２３〜３０ページ）。
【０００９】
特定のモノクローナル抗体（例えば；インフリキシマブ、アダリムマブおよびエタネルセプト）が、クローン病および関節リウマチのようなＴＮＦ−αによって媒介される疾患の処置に現在用いられている。しかし、ＰＫＤの臨床管理では選択肢は限られている。ＰＫＤの患者の管理は、対症療法、例えば、疼痛のための鎮痛薬；嚢胞感染のための抗生物質；プレＥＳＲＤ患者での血圧コントロールおよびＥＳＲＤ患者の透析または移植から構成される。トルバプタン、ラパマイシン、ロスコビチン、トリプトリドおよびオクトレオチドなどの特定の治験薬物が現在、前臨床試験および臨床試験において研究されている。
【００１０】
さらに、モノクローナル抗体は、特定の有害効果を伴っている。これらの薬物は、非経口経路によってのみ投与されるので、それらは、免疫原性、急性および遅延性の注入反応および注射部位の反応などの有害な影響を伴う。これらの薬物はまた、自己免疫障害および感染とも関連する。結核およびこれらの薬物に関連する潜伏性結核再発のリスクが、特に懸念される。脱髄および血液学的な異常のまれな出現もまた、関節リウマチにアダリムマブを投与されている患者でも見られた。さらに、これらの薬物は高価である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
従って、ＴＮＦ−α活性の増大によって生じる疾患の予防または処置のための改良された別の薬剤が必要である。
【００１２】
本発明の発明者らは、ここでＴＮＦ−α活性の増大によって生じる疾患の予防または処置のためのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（スファランサス・インディクス）の開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分を含んでいる薬草組成物を提供する。
【００１３】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓは、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ属およびキク科に属している植物種である。これは、紫色またはピンク色の花をもつ芳香性のハーブである。これは神経鎮静剤、利尿剤、駆虫薬および血液浄化剤である。これは皮膚疾患、フィラリア症、てんかん、貧血症、肥満、ならびに肛門および膣の疾患のような種々の疾患で用いられる（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ＆  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１０年，１（ｉｉｉ），１１３〜１３３ページ）。
【００１４】
Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａは、主に亜鉛を含んでいる伝統的なハーボミネラル調製物である。いくつかのアーユルベーダのテキストでは、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａは、結核、風邪、消化不良、虚弱、糖尿病および貧血の場合に推奨される（Ａｎｃｉｅｎｔ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ，１９９６年，第ＸＶＩ巻（２），１１８〜１２１ページ、およびＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｏ−ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｈａｔａｋａｋｈｙａ  Ｒａｓａ（カルナータカ州、バンガロールのラジーヴ・ガンディー保健科学大学に提出された学位論文（２００９年））。
【００１５】
クルクミンは、インドのスパイスであるターメリックの主な構成要素である。ターメリック中のクルクミンは、胆嚢による胆汁の産生を促進することが示されている。クルクミンはまた、強力な抗酸化剤である。ターメリック（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ）は、インドを含む南アジアの森林で自生しており、種々の病気を処置することが公知であった。ターメリックは、消化および肝臓の異常、皮膚疾患および創傷を処置するために抗炎症剤としてアーユルベーダ医療と漢方医学の両方で用いられており、かつ周知の消毒薬である。これはまた鼓腸を防ぐことも助ける。ターメリックは鉄が豊富で、貧血に有用である（Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００９年，１（２）８６〜１０８ページ）。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明の一態様によれば、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花および／または結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分を含んでいる薬草組成物が提供される。
【００１７】
別の態様によれば、本発明の薬草組成物は、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置における使用のために提供される。
【００１８】
別の態様によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置のための方法であって、本発明の薬草組成物の治療上有効な量をその必要な被験体に投与する工程を包含する方法が提供される。
【００１９】
別の態様によれば、細菌感染、イースト菌感染症、真菌感染症、およびウイルス感染から選択される外因性の感染の予防または処置のための方法であって、本発明の薬草組成物の治療上有効な量をその必要な被験体に投与する工程を包含する方法が提供される。
【００２０】
別の態様によれば、本発明の薬草組成物の調製方法が提供される。
【００２１】
本発明の別の態様によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の処置における使用のための薬草組成物を含んでいる、薬剤の製造のための方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】図１は、ＴＮＦ−α阻害に対するＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａの種々の用量の効果を示しているグラフ表示である。
【図２Ａ】図２Ａは、ＴＮＦ−α阻害に対するターメリック（２５％クルクミン含有）の種々の用量の効果を示しているグラフ表示である。
【図２Ｂ】図２Ｂは、ＴＮＦ−α阻害に対するターメリックの種々の用量の効果を示しているグラフ表示である。
【図３】図３は、ＴＮＦ−α阻害に対する単独での種々の用量のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓおよびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、および種々の容量で上記二つを組み合わせた効果を示しているグラフ表示である。
【図４Ａ】図４Ａは、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびターメリック（２５％クルクミン含有）を含む薬草組成物のＴＮＦ−α阻害に対する効果を示しているグラフ表示である。
【図４Ｂ】図４Ｂは、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびターメリックを含んでいる薬草組成物のＴＮＦ−α阻害に対する効果を示しているグラフ表示である。
【図５Ａａ】図５Ａａは、腎嚢胞の大きさに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓおよびクルクミンを含んでいる薬草組成物の効果を示しているグラフ表示である。
【図５Ａｂ】図５Ａｂは、腎嚢胞の大きさに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓおよびターメリックを含んでいる薬草組成物の効果を示しているグラフ表示である。
【図５Ａｃ】図５Ａｃは、腎嚢胞の大きさに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、クルクミンおよびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを含んでいる薬草組成物の効果を示しているグラフ表示である。
【図５Ａｄ】図５Ａｄは、腎嚢胞の大きさに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、ターメリックおよびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを含んでいる薬草組成物の効果を示しているグラフ表示である。
【図５Ｂａ】図５Ｂａは、腎嚢胞の大きさに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、クルクミンおよびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを含んでいる薬草組成物の効果を示しているグラフ表示である。
【図５Ｂｂ】図５Ｂｂは、腎嚢胞の大きさに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、ターメリックおよびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを含んでいる薬草組成物の効果を示しているグラフ表示である。
【図５Ｃａ】図５Ｃａは、腎嚢胞の大きさに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、クルクミンおよびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを含んでいる薬草組成物の効果を示しているグラフ表示である。
【図５Ｃｂ】図５Ｃｂは、腎嚢胞の大きさに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、ターメリックおよびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを含んでいる薬草組成物の効果を示しているグラフ表示である。
【図６】図６は、マウスの慢性の耳炎症に対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、ターメリックおよびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを含んでいる薬草組成物の効果を示しているグラフ表示である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本明細書において前記でおよび以降で用いられる一般的な用語は好ましくは、別段示さない限り、本開示の文脈内で以下の意味を有する。従って、本発明の文脈内で用いられる一般的な用語の定義は、本明細書において下に示される：
【００２４】
単数形「ある、１つの（ａ、ａｎ：不定冠詞）」、および「この、その（ｔｈｅ：定冠詞）」とは、文脈が明確に他を示すのでない限り複数の言及を包含する。
【００２５】
「治療上有効な量」という用語は、本明細書において用いる場合、本発明の薬草組成物の量であって、その必要な被験体に投与した場合、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患が低減、処置または緩和されるようにＴＮＦ−αの活性を阻害するのに十分な量を指す。
【００２６】
「被験体」という用語は、本明細書において用いる場合、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の処置の必要な動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを指す。被験体という用語は、本発明の状況で患者という用語と交換可能に用いられ得る。
【００２７】
「哺乳動物」という用語は、本明細書において用いる場合、ヒト、および非ヒト哺乳動物を包含するものとする。非ヒト哺乳動物としては限定するものではないが、家畜、例えば、ウシ、ブタ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラットおよびマウス、ならびに家畜以外の動物が挙げられる。
【００２８】
「処置する、処理する（ｔｒｅａｔ）」または「処置、処理（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、本明細書において用いる場合、予防、寛解［すなわち、疾患または随伴症状の重篤度の低減］、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の退縮または治癒を包含する。
【００２９】
「予防」という用語は、本明細書において用いる場合、その必要な被験体に対する本発明の薬草組成物の予防的な投与を指す。この用語はまた、ＴＮＦ−α媒介性の疾患またはその疾患の１つ以上の症状の完全または部分的な予防または減弱を指す。
【００３０】
「炎症性要素を有する疾患」という用語は、本明細書において用いる場合、ある疾患であって、炎症が一般的または重大な症状である疾患を指す。炎症性要素を有する疾患としては、限定するものではないが例えば、神経変性疾患（例えばアルツハイマー病）、血管の疾患（例えばアテローム性動脈硬化症）、代謝性障害（例えば２型糖尿病）、および腎疾患（例えば腎炎）が挙げられる。
【００３１】
「ＴＮＦ−αによって媒介される疾患（ＴＮＦ−α媒介性の疾患）」という用語は、本明細書において用いる場合、その状態の発現または進行においてＴＮＦ−αが重大な役割を有する状態を指す。ＴＮＦ−αによって媒介される状態の例としては、以下に限定するものではないが例えば、冠動脈性心疾患、アテローム性動脈硬化症、高脂血症、虚血再かん流障害、脳卒中、悪液質、高血圧、血管炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、多発性硬化症、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、皮膚遅延型過敏性障害、強直性脊椎炎、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、慢性移植片対宿主病、乾癬、結膜炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、ベーチェット病、炎症性腸疾患、骨粗しょう症／骨吸収、慢性閉塞性肺疾患または喘息が挙げられる。
【００３２】
「薬学的に許容される」という用語は、本明細書において用いる場合、担体、希釈剤、賦形剤および／または塩が処方物の他の成分と適合しなければならず、そのレシピエントに有害であってはならないことを意味する。本明細書において用いる場合、「薬学的に許容される」という用語も、その組成物または剤形が、合理的なリスク・ベネフィット比と釣り合っており、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症なしで動物またはヒトでの使用に適切な、正当な医学的判断の範囲内であることを意味する。
【００３３】
本発明の一実施形態によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置のための薬草組成物が提供される。
【００３４】
別の実施形態によれば、本発明は、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分を含んでいる薬草組成物に関する。
【００３５】
なお別の実施形態によれば、本発明は、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａから選択される活性成分を含んでいる薬草組成物に関する。
【００３６】
なお別の実施形態では、本発明は、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される活性成分を含んでいる薬草組成物に関する。
【００３７】
別の実施形態によれば、本発明は、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される活性成分を含んでいる薬草組成物に関する。
【００３８】
さらに別の実施形態によれば、上記で言及される１つ以上の実施形態に引用される本発明の薬草組成物は、薬学的に許容される担体または賦形剤をさらに含んでもよい。
【００３９】
本発明の別の態様によれば、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミン含有物質を１：１：１〜１６：８：５の比で含んでいる、薬草組成物が提供される。
【００４０】
本発明の別の態様によれば、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにクルクミン含有物質から選択される活性成分を１：１〜１０：１の範囲の比で含む薬草組成物が提供される。
【００４１】
本発明の別の態様によれば、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンから選択される活性成分を１：１：１〜１５：１：１の範囲の比で含んでいる、薬草組成物が提供される。
【００４２】
本発明の別の態様によれば、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａから選択される活性成分を１：１〜１：：５の範囲の比で含んでいる、薬草組成物が提供される。
【００４３】
本発明の別の態様によれば、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにクルクミンから選択される活性成分を１：１〜１０：１の範囲の比で含んでいる、薬草組成物が提供される。
【００４４】
本発明の別の実施形態によればクルクミン含有物質は、約２０％以上約３０％以下のクルクミンを含む。
【００４５】
本発明のさらに別の実施形態によれば、このクルクミン含有物質は、ターメリックである。
【００４６】
本発明のさらに別の実施形態によれば、本明細書に提供される薬草組成物の活性成分は、炎症性疾患、または炎症性要素を有する疾患、または腎嚢胞性疾患の処置において相乗効果を示す。
【００４７】
本発明の別の態様によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置のための方法であって、その必要な被験体に対して、治療上有効な量の薬草組成物を投与する工程を包含する方法が提供される。
【００４８】
本発明の別の実施形態によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置のための方法であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分を含んでいる薬草組成物の治療上有効な量をその必要な被験体に投与する工程を包含する方法が提供される。
【００４９】
本発明の別の態様によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置における使用のための薬草組成物が提供される。
【００５０】
本発明の別の実施形態によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置における使用であって、治療上有効な量の薬草組成物をその必要な被験体に投与する工程を包含する使用のために；Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分を含んでいる薬草組成物が提供される。
【００５１】
本発明の別の態様によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置における使用のため、薬草組成物を含んでいる薬剤の製造のための方法が提供される。
【００５２】
本発明の別の実施形態によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患の予防または処置における使用のための薬剤の製造のための方法であって、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分を含んでいる治療上有効な量の薬草組成物をその必要な被験体に投与する工程を包含する方法が提供される。
【００５３】
本発明の別の実施形態によれば、ＴＮＦ−αによって媒介される疾患は、炎症性疾患または炎症性要素を有している疾患、または腎嚢胞性疾患である。
【００５４】
本発明の別の実施形態によれば、炎症性疾患または炎症性要素を有している疾患であって、冠動脈性心疾患、アテローム性動脈硬化症、高脂血症、虚血再かん流障害、脳卒中、悪液質、高血圧、血管炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、肝硬変、肝線維症、肝炎、糖尿病、若年性糖尿病、多発性硬化症、分類不能型免疫不全症  （ＣＶＩＤ）、アルツハイマー病、てんかん、皮膚遅延型過敏性障害、強直性脊椎炎、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、慢性移植片対宿主病、乾癬、結膜炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、ベーチェット病、炎症性腸疾患、腎炎、骨粗しょう症／骨吸収、慢性閉塞性肺疾患、気管支炎または喘息から選択される疾患の予防または処置のための方法が提供される。
【００５５】
本発明の別の実施形態によれば、炎症性疾患または炎症性要素を有している疾患であって、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、骨粗しょう症／骨吸収、アテローム性動脈硬化症または強直性脊椎炎から選択される疾患の予防または処置のための方法が提供される。
【００５６】
本発明の別の実施形態によれば、治療上有効な量の薬草組成物をその必要な被験体に投与する工程を包含する、腎嚢胞性疾患の予防または処置のための方法が提供される。
【００５７】
本発明のさらに別の実施形態によれば、この腎嚢胞性疾患とは、多発性嚢胞腎（ＰＫＤ）である。
【００５８】
本発明のさらに別の実施形態によれば、この多発性嚢胞腎は、常染色体優性多発性嚢胞腎（ＡＤＰＫＤ）または常染色体劣性多発性嚢胞腎（ＡＲＰＫＤ）である。
【００５９】
本発明のさらに別の実施形態によれば、フォンヒッペル・リンドウ病、髄質性嚢胞腎（ＮＰＨＰ）、バルデー・ビードル症候群（ＢＢＳ）、ジュベール症候群（ＪＢＴＳ）およびメッケル・グルーバー症候群（ＭＫＳ）から選択される疾患の予防または処置のための方法であって、本発明の治療上有効な量の薬草組成物をその必要な被験体に投与する工程を包含する方法が提供される。
【００６０】
本発明のさらなる実施形態によれば、細菌感染、イースト菌感染症、真菌感染症およびウイルス感染から選択される感染の予防または処置のための方法であって、本発明の薬草組成物の治療上有効な量をその必要な被験体に投与する工程を包含する方法が提供される。細菌感染としては、グラム陽性、グラム陰性、嫌気性または好気性の細菌による感染が挙げられる。感染の例としては限定するものではないが、皮膚感染および爪の真菌が挙げられる。
【００６１】
本発明のさらなる実施形態によれば、栄養補助食品として薬草組成物を用いるための方法が提供される。
【００６２】
本発明のさらなる実施形態によれば、貧血の予防、処置または貧血の罹患率を低下するための栄養補助食品として薬草組成物を用いるための方法が提供される。
【００６３】
本発明のさらなる実施形態によれば、消化不良および胃弱の予防または処置のための栄養補助食品として薬草組成物を用いるための方法が提供される。
【００６４】
薬学的に許容される担体と会合して、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分の治療上有効な量を含む薬草組成物が提供される。この組成物はさらに、ＴＮＦ−αに対して阻害効果を有する、薬学的に活性な化合物を含んでもよい。この薬学的に活性な化合物は、限定するものではないが、トルバプタン、ラパマイシン、ロスコビチン、トリプトリド、オクトレオチドおよびエタネルセプトから選択され得る。
【００６５】
この薬草組成物は、約１０重量％以上１００重量％以下、例えば、約４０重量％以上９０重量％以下、または約６０重量％以上約８０重量％以下の薬草組成物を含んでもよい。薬学的な剤形におけるこの薬草組成物の量は、約５０ｍｇ以上約１０００ｍｇ以下であってもよい。
【００６６】
この薬草組成物は、１０重量％以上８０重量％以下、または約２０重量％以上７０重量％以下、または約４０重量％以上約６０重量％以下のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物を含んでもよい。
【００６７】
この薬草組成物は、１０重量％以上６０重量％以下、または約２０重量％以上５０重量％以下、または約３０重量％以上約４０重量％以下のＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａの抽出物を含んでもよい。
【００６８】
この薬草組成物は、１重量％以上４０重量％以下、または約５重量％以上２０重量％以下、または約５重量％以上約１５重量％以下のターメリックの抽出物を含んでもよい。
【００６９】
本発明の別の実施形態によれば、（ａ）約３０重量％以上７０重量％以下のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物；（ｂ）約２０％以上約４０％以下のＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ；ならびに（ｃ）約３％以上約４０％以下のクルクミンまたはクルクミン含有物質、を含んでいる薬草組成物が提供される。
【００７０】
本発明のさらなる実施形態によれば、（ａ）約１０重量％以上５０重量％以下のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物ならびに；（ｂ）約５０％以上約８５％以下のＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを含んでいる、薬草組成物が提供される。
【００７１】
この薬草組成物は、経口的に、非経口的に（静脈内、皮下、筋肉内、血管内または注入を含む）、舌下、口腔内経路を介して、経皮的に、直腸内に、経粘膜的に、局所にまたは吸入を介して投与されてもよい。この薬草組成物は、処置される条件に対して適切な任意の経路によって投与され得る。好ましい経路は、処置対象の被験体の条件で変化し得ることが理解されるであろう。例えば、皮膚感染については、薬草組成物を経口的に投与してもよいし、または局所に投与してもよい。
【００７２】
本明細書に記載される薬草組成物は、経口投与に適切な形態で、例えば、錠剤またはカプセルとして；非経口注射（静脈内、皮下、筋肉内、血管内または注入を含む）のために、例えば、油性または水性のビヒクル中の滅菌溶液、懸濁液またはエマルジョンとして；局所投与のために、例えば、軟膏、クリーム、ゲル、ローションまたはコロジオンとして；直腸投与のために、例えば、坐剤またはペッサリーとしてであってもよい。
【００７３】
経口使用のために、薬草組成物は、例えば、錠剤、カプセル、トローチ剤、粉末、再構成用の粉末型、分散性顆粒、カシェー、水性または油性の懸濁物、水溶液、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形態で投与されてもよい。経口投与された組成物は、薬学的に口当たりのよい調製物を得るために、１つ以上の任意の剤、例えば、フルクトース、アスパルテームまたはサッカリンのような甘味料；ペパーミント、冬緑油、またはチェリーのような香味料；着色料；および防腐剤を含んでもよい。浸透活性駆動化合物を囲む選択的透過性の膜も、本発明の薬草組成物の経口投与に適切である。経口組成物は、標準的なビヒクル、例えば、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、滑石、サッカリンナトリウム、糖、セルロース、炭酸マグネシウムなどを含んでもよい。このようなビヒクルは医薬品等級のものが好ましい。
【００７４】
筋肉内、腹腔内、皮下および静脈内の使用のため、滅菌ビヒクルを通常使用して、溶液のｐＨを適切に調整して、緩衝化すべきである。非経口投与は、注射によってもよいし、または連続注入によってもよい。
【００７５】
軟膏およびクリームのためには、薬草組成物を水中油型基剤に処方しても、または油中水型基剤に処方してもよい。
【００７６】
直腸使用のためには、薬草組成物を、坐剤またはペッサリーの形態で投与してもよい。坐剤は、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分、適切な坐剤基剤および添加物、例えば、防腐剤、抗酸化剤、乳化剤などを含む。適切な坐剤基剤としては、天然または合成のトリグリセリドまたはパラフィン炭化水素が挙げられる。
【００７７】
坐剤とは、１つ以上の薬理学的または治療上活性な成分を放出する体温で融解するか、または軟化する直腸内の挿入のための固形物である。直腸坐剤で利用される薬学的に許容される物質は、基剤またはビヒクルおよび融点を上昇させる剤である。基剤の例としては、ココアバター（カカオ脂）、グリセリン−ゼラチン、カーボワックス（ポリオキシエチレングリコール）ならびに脂肪酸のモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドの適切な混合物が挙げられる。種々の基剤の組み合わせが用いられてもよい。坐剤の融点を上昇する剤としては、鯨ろうおよびワックスが挙げられる。坐剤は、圧縮法によって調製されても、または成型によって調製されてもよい。
【００７８】
薬草組成物は、ナノ粒子溶液として処方されても、または懸濁物として処方されてもよい。
【００７９】
本明細書に記載される薬草組成物の治療上有効な用量は、少なくとも、処置されている状態の性質、送達の方式、薬学的処方物、代謝、他の要因（例えば、患者の性別、体重、年齢および状態）に依存し、かつ最終的には、従来の用量漸増試験を用いて臨床家によって決定される。１日あたり約１ｍｇ／ｋｇ以上約１００ｍｇ／ｋｇ以下（体重１ｋｇあたり）；特に１日あたり約１ｍｇ／ｋｇ以上約５０ｍｇ／ｋｇ以下（体重１ｋｇあたり）であることが予測され得る。所望の用量は、単回用量として投与されても、または複数回用量として投与されてもよい。
【００８０】
本発明の別の態様によれば、本発明の薬草組成物の調製方法が提供される。
【００８１】
本発明の別の実施形態によれば、本発明の薬草組成物は、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分を、ジメチルスルホキシド、エタノールまたは水から選択される適切な溶媒中に、かつＴｗｅｅｎ−８０から選択される乳化剤の存在下で溶解することによって調製される。
【００８２】
活性成分の抽出物は、従来の抽出技術、例えば、限定するものではないが、アルコール（例えば、エタノール）、水、エタノールと水との混合物を含む抽出溶媒を用いる溶媒抽出；水による浸出；水またはアルコール溶媒による浸軟およびソックスレー抽出などの従来にない技術；凍結乾燥；超音波処理およびマイクロ波支援抽出によって生成されてもよい。
【００８３】
[実験]
別段言及しない限り、全ての温度は摂氏温度である。また、これらの実施例および他のいずれでも、略号は以下の意味を有する：
【００８４】
【表１】
2015535236.tif 000002
【００８５】
＜薬草組成物の構成要素＞
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ：
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの乾燥した開花結実頭部（２００ｇ）を粉砕した。粉末化された材料を、メタノール（２．５Ｌ）を用いて、６０℃で３時間撹拌することによって抽出した。その抽出物を減圧下で濾過した。この抽出プロセスを２回以上繰り返した。その抽出物を混合して濃縮した。
収率：  ２３．２９ｇ（１１．６５重量％）。
【００８６】
Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ：
Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（ＹａｓｈａｄａのＣａｌｘ、すなわち亜鉛）は、Ｓｈｒｅｅ  Ｄｈｏｏｔａｐａｐｅｓｈｗａｒ  Ｌｔｄ，Ｐａｎｖｅｌ，Ｉｎｄｉａ．から入手した。
【００８７】
ターメリック：
商業的な供給源から得たターメリック（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ）をそのまま用いた。ターメリック（２５％クルクミン含有）は、Ｓａｎａｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｓｉｋａｎｄｒａｂａｄ，Ｕｔｔａｒ  Ｐｒａｄｅｓｈ，Ｉｎｄｉａから入手した。
【００８８】
クルクミン：
クルクミンは、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ，ＵＳＡから入手した。
【００８９】
以下の実施例は、例示であって、本発明の範囲を限定はしない。合理的なバリエーション、例えば、合理的な技術者に思い浮かぶものは、本発明の範囲から逸脱することなく本明細書においてなすことができる。また本発明を記述するには、明確にするために特定の用語を使用する。しかし、本発明は、そのように選択された特定の専門用語に限定する意図はない。各々の特定の要素は、類似の方法で行って同様の目的を達成する全ての技術的等価物を包含することが理解されるべきである。
【００９０】
インビボ実験：
全ての実験は、動物実験統制管理委員会（ＣＰＣＳＥＡ）のガイドラインに従って、また施設動物倫理委員会（ＩＡＥＣ）（Ｐｉｒａｍａｌ  Ｅｎｔｅｒｐｒｉｓｅｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｇｏｒｅｇａｏｎ，Ｍｕｍｂａｉ，Ｉｎｄｉａ）の承認に従って行った。
【００９１】
炎症性サイトカインＴＮＦ−αに対する本発明の薬草組成物のインビボ有効性は、Ｂａｌｂ／ｃマウスで研究した。
【００９２】
以下の実験に用いる動物：
Ｂａｌｂ／ｃ雄性マウス（８以上１０以下の週齢、秤量１８ｇ以上２２ｇ以下（Ｐｉｒａｍａｌ  Ｅｎｔｅｒｐｒｉｓｅｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｍｕｍｂａｉの動物舎施設）。動物を、２２℃以上２５℃以下でかつ５５以上７０％以下の湿度で、１２時間明／１２時間暗のサイクルで維持した特定の病原体なしの条件下で、個々に換気したケージで飼育した。このマウスは、実験の前、最短で２日間順応させた。動物はラミナフローのフードで取り扱った。全ての食物および水をオートクレーブした。マウスは、ペレットのげっ歯類用食餌（Ｐｒａｎａｖ  Ａｇｒｏ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｄｉａ）およびＵＶ濾過水に自由にアクセスさせた。
【００９３】
（実施例１）
Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるＬＰＳ誘導性のＴＮＦ−αに対するＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ＹＢ）の効果
【００９４】
用量調製：Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａの必要量（１００ｍｇ／ｍＬ、７５ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、２５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬおよび２．５ｍｇ／ｍＬの濃度を得るための必要量）を、平滑なペーストが形成されるまでＴｗｅｅｎ８０で倍散した。カルボキシメチルセルロース（０．５％）溶液を、倍散しながら徐々に添加して、均一な懸濁物を形成した。
【００９５】
サンプルの保管条件
Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａを２２℃以上２５℃以下で保管した。
【００９６】
投薬
マウスを、以下の１０の処置群に無作為化した（ｎ＝６）：
ｉ）第１群：コントロール群：マウスにビヒクルを投与した（１０ｍＬ／ｋｇ，ｐ．ｏ．）。
ｉｉ）第２群：１ｍｇ／ｋｇのリポポリサッカライド（ｉ．ｐ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｉｉ）第３群：１．５ｍｇ／ｋｇのロリプラム（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｖ）第４群：１０００ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖ）第５群：７５０ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉ）第６群：５００ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉ）第７群：２５０ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉｉ）第８群：１００ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｘ）第９群：５０ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｘ）第１０群：２５ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
【００９７】
処置
ＣＭＣ−Ｔｗｅｅｎ８０（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ，ＵＳ）に懸濁したＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（１０ｍＬ／ｋｇ）を、第４群〜第１０群の全てのＢａｌｂ／ｃマウスに投与した。陽性のコントロール群の動物は、ロリプラムを１．５ｍｇ／ｋｇ投与された。１時間後、滅菌のパイロジェンフリーの生理食塩水中に溶解したリポポリサッカライド（ＬＰＳ）を１０の全ての群のマウスに対して１ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内に投与した。ＬＰＳ投与後、１．５時間後に動物を麻酔して、血液サンプルを、眼窩後法によってヘパリン含有（５μｌ）のエッペンドルフチューブ中に収集した。血漿を４０００ｒｐｍでかつ４℃の遠心分離によって分けて、−８０℃で分析まで保管した。
【００９８】
血液サンプル中のＴＮＦ−αレベルを、マウスのＴＮＦ−αのＥＬＩＳＡキット（ＢＤ  Ｏｐｔ  ＥＩＡ）を用いてアッセイして、コントロール群と比較したＴＮＦ−α放出の阻害パーセントを算出した。
【００９９】
ＴＮＦ−α阻害の結果を図１に示す。
【０１００】
結論：Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａの経口投与は、Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるＬＰＳ誘発性のＴＮＦ−α産生において用量依存性の反応を示した。
【０１０１】
（実施例２Ａ）
Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるＬＰＳ誘発性のＴＮＦ−αに対するターメリックの効果
【０１０２】
用量調製：必要な量のターメリック（２５％クルクミンを含有）（１００ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、２５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、２．５ｍｇ／ｍＬ、１．２５ｍｇ／ｍＬ、０．６２５ｍｇ／ｍＬおよび０．３１２５ｍｇ／ｍＬの濃度を得るための必要量）を、平滑なペーストが形成されるまでＴｗｅｅｎ８０で倍散した。カルボキシメチルセルロース（０．５％）溶液を、倍散しながら徐々に添加して均一な懸濁物を形成した。
【０１０３】
サンプルの保管条件
ターメリックのサンプルを２２℃以上２５℃以下で保管した。
【０１０４】
投薬
マウスは、以下の１２の処置群に無作為化した（ｎ＝６）：
ｉ）第１群：コントロール群：マウスには、ビヒクル（１０ｍＬ／ｋｇ，ｐ．ｏ．）を投与した。
ｉｉ）第２群：１ｍｇ／ｋｇのリポポリサッカライド（ｉ．ｐ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｉｉ）第３群：１．５ｍｇ／ｋｇのロリプラム（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｖ）第４群：１０００ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖ）第５群：５００ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉ）第６群：２５０ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉ）第７群：１００ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉｉ）第８群：５０ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｘ）第９群：２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｘ）第１０群：１２．５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｘｉ）第１１群：６．２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｘｉｉ）第１２群：３．１２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
【０１０５】
処置
ターメリック（１０ｍＬ／ｋｇ）は、第４群〜第１２群の全てのＢａｌｂ／ｃマウスに投与した。ポジティブコントロール群の動物には、ロリプラムを１．５ｍｇ／ｋｇ投与した。１時間後、滅菌のパイロジェンフリーの生理食塩水中に溶解したリポポリサッカライド（ＬＰＳ）を１２の全ての群のマウスに対して１ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内に投与した。ＬＰＳ投与後、１．５時間後に動物を麻酔して、血液サンプルを、眼窩後法によってヘパリン含有（５μｌ）のエッペンドルフチューブ中に収集した。血漿を４０００ｒｐｍでかつ４℃の遠心分離によって分けて、−８０℃で分析まで保管した。
【０１０６】
血液サンプル中のＴＮＦ−αレベルを、マウスＴＮＦ−αのＥＬＩＳＡキット（ＢＤ  Ｏｐｔ  ＥＩＡ）を用いてアッセイして、コントロール群と比較したＴＮＦ−α放出の阻害パーセントを算出した。
【０１０７】
ＴＮＦ−α阻害の結果を図２Ａに示す。
【０１０８】
結論：より低用量での２５％クルクミンでのターメリックの経口投与は、Ｂａｌｂ／ｃマウスでＬＰＳ誘発性のＴＮＦ−α産生を阻害した。
【０１０９】
（実施例２Ｂ）
Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるＬＰＳ誘発性ＴＮＦ−αに対するターメリックの効果
【０１１０】
用量調製：必要な量のターメリック（１００ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、２５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、２．５ｍｇ／ｍＬ、１．２５ｍｇ／ｍＬ、および０．６２５ｍｇ／ｍＬの濃度を得るための必要量）を、平滑なペーストが形成されるまでＴｗｅｅｎ８０で倍散した。カルボキシメチルセルロース（０．５％）溶液を、倍散しながら徐々に添加して均一な懸濁物を形成した。
【０１１１】
サンプルの保管条件
ターメリックのサンプルを２２℃以上２５℃以下で保管した。
【０１１２】
投薬
マウスを、以下の１１の処置群に無作為化した（ｎ＝６）：
ｉ）第１群：コントロール群：マウスには、ビヒクル（１０ｍＬ／ｋｇ，ｐ．ｏ．）を投与した。
ｉｉ）第２群：１ｍｇ／ｋｇのＬＰＳ（ｉ．ｐ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｉｉ）第３群：１．５ｍｇ／ｋｇのロリプラム（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｖ）第４群：１０００ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖ）第５群：５００ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉ）第６群：２５０ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉ）第７群：１００ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉｉ）第８群：５０ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｘ）第９群：２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｘ）第１０群：１２．５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｘｉ）第１１群：６．２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
【０１１３】
処置
ターメリック（１０ｍＬ／ｋｇ）は、第４群〜第１１群の全てのＢａｌｂ／ｃマウスに投与した。ポジティブコントロール群の動物には、ロリプラムを１．５ｍｇ／ｋｇ投与した。１時間後、滅菌のパイロジェンフリーの生理食塩水中に溶解したリポポリサッカライド（ＬＰＳ）を１１の全ての群のマウスに対して１ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内に投与した。ＬＰＳ投与後、１．５時間後に動物を麻酔して、血液サンプルを、眼窩後法によってヘパリン含有（５μｌ）のエッペンドルフチューブ中に収集した。血漿を４０００ｒｐｍでかつ４℃の遠心分離によって分けて、−８０℃で分析まで保管した。
【０１１４】
血液サンプル中のＴＮＦ−αレベルを、マウスＴＮＦ−αのＥＬＩＳＡキット（ＢＤ  Ｏｐｔ  ＥＩＡ）を用いてアッセイして、コントロール群と比較したＴＮＦ−α放出の阻害パーセントを算出した。
【０１１５】
ＴＮＦ−α阻害の結果を図２Ｂに示す。
【０１１６】
結論：より低用量でのターメリックの経口投与は、Ｂａｌｂ／ｃマウスでＬＰＳ誘発性のＴＮＦ−α産生を阻害した。
【０１１７】
（実施例３）
Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるＬＰＳ誘発性ＴＮＦ−αに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）の抽出物およびＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ＹＢ）の組み合わせの効果
【０１１８】
用量調製：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物およびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａの必要量（５ｍｇ／ｍＬ＋５ｍｇ／ｍＬ；５ｍｇ／ｍＬ＋１０ｍｇ／ｍＬ；５ｍｇ／ｍＬ＋２５ｍｇ／ｍＬ）を、平滑なペーストが形成されるまでＴｗｅｅｎ８０で倍散した。カルボキシメチルセルロース（０．５％）溶液を、倍散しながら徐々に添加して、均一な懸濁物を形成した。Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ単独で濃度２５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬおよび５ｍｇ／ｍＬを、実施例１に記載のとおり調製した。
【０１１９】
サンプルの保管条件
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓおよびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａのサンプルを、２２℃以上２５℃以下で保管した。
【０１２０】
投薬
マウスは、以下の１０の処置群に無作為化した（ｎ＝６）：
ｉ）第１群：コントロール群：マウスにビヒクル（１０ｍＬ／ｋｇ，ｐ．ｏ）を投与した。
ｉｉ）第２群：１ｍｇ／ｋｇのリポポリサッカライド（ｉ．ｐ．）を一日一回投与されたマウス
ｉｉｉ）第３群：１．５ｍｇ／ｋｇのロリプラム（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｖ）第４群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖ）第５群：５０ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉ）第６群：１００ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉ）第７群：２５０ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉｉ）第８群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物および５０ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を一日一回投与されるマウス
ｉｘ）第９群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物および１００ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を一日一回投与されたマウス
ｘ）第１０群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物および２５０ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ｐ．ｏ．）を一日一回投与されるマウス
【０１２１】
処置
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１０ｍＬ／ｋｇ）、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（１０ｍＬ／ｋｇ）、ならびにＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物の組み合わせ（１０ｍＬ／ｋｇ）を、それぞれ、Ｂａｌｂ／ｃマウスの第４群、第５群〜第７群、および第８群〜第１０群に投与した。
【０１２２】
動物のポジティブコントロール群は、ロリプラムを１．５ｍｇ／ｋｇ投与された。１時間後、滅菌のパイロジェンフリーの生理食塩水中に溶解したリポポリサッカライド（ＬＰＳ）を１０の全ての群のマウスに対して１ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内に投与した。ＬＰＳ投与後、１．５時間後に動物を麻酔して、血液サンプルを、眼窩後法によってヘパリン含有（５μｌ）のエッペンドルフチューブ中に収集した。血漿を４０００ｒｐｍでかつ４℃の遠心分離によって分けて、−８０℃で分析まで保管した。
【０１２３】
血液サンプル中のＴＮＦ−αレベルを、マウスＴＮＦ−αのＥＬＩＳＡキット（ＢＤ  Ｏｐｔ  ＥＩＡ）を用いてアッセイして、コントロール群と比較したＴＮＦ−α放出の阻害パーセントを算出した。
【０１２４】
ＴＮＦ−α阻害の結果を図３に示す。
【０１２５】
結論：Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるＬＰＳ誘発性のＴＮＦ−αに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）の抽出物およびＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ＹＢ）の併用は、相乗作用的な反応を示した。
【０１２６】
（実施例４Ａ）
Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるＬＰＳ誘発性のＴＮＦ−αに対する、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ＹＢ）およびターメリック（Ｔｒ）の組み合わせの効果
【０１２７】
用量調製：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびターメリックの必要量（５ｍｇ／ｍＬ＋５ｍｇ／ｍＬ＋５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ＋５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ＋１．２５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ＋０．６２５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ＋０．３１２５ｍｇ／ｍＬ）を、平滑なペーストが形成されるまでＴｗｅｅｎ８０を用いて倍散した。カルボキシメチルセルロース（０．５％）溶液を倍散しながら徐々に添加して均一な懸濁物を形成した。
【０１２８】
サンプルの保管条件
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびターメリックのサンプルを、２２℃以上２５℃以下で保管した。
【０１２９】
投薬
マウスは、以下の９つの処置群に無作為化した（ｎ＝６）：
ｉ）第１群：コントロール群：マウスは、ビヒクル（１０ｍＬ／ｋｇ，ｐ．ｏ．）を投与された。
ｉｉ）第２群：１ｍｇ／ｋｇのリポポリサッカライド（ｉ．ｐ．）を一日一回投与されたマウス
ｉｉｉ）第３群：１．５ｍｇ／ｋｇのロリプラム（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｖ）第４群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、５０ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および５０ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖ）第５群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、２５ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および５０ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉ）第６群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、２５ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉ）第７群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、２５ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および１２．５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉｉ）第８群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、２５ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および６．２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｘ）第９群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、２５ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および３．１２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス。
【０１３０】
処置
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびターメリック（１０ｍＬ／ｋｇ）を含んでいる薬草組成物を、第４群〜第７群のＢａｌｂ／ｃマウスに投与した。動物のポジティブコントロール群（第３群）は、ロリプラムを１．５ｍｇ／ｋｇ投与された。１時間後、滅菌のパイロジェンフリーの生理食塩水中に溶解したリポポリサッカライド（ＬＰＳ）を９つの全ての群のマウスに対して１ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内に投与した。ＬＰＳ投与後、１．５時間後に動物を麻酔して、血液サンプルを、眼窩後法によってヘパリン含有（５μｌ）のエッペンドルフチューブ中に収集した。血漿を４０００ｒｐｍでかつ４℃の遠心分離によって分けて、−８０℃で分析まで保管した。
【０１３１】
血液サンプル中のＴＮＦ−αレベルを、マウスＴＮＦ−αのＥＬＩＳＡキット（ＢＤ  Ｏｐｔ  ＥＩＡ）を用いてアッセイして、コントロール群と比較したＴＮＦ−α放出の阻害パーセントを算出した。
【０１３２】
ＴＮＦ−α阻害の結果を図４Ａに示す。
【０１３３】
結論：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）、Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ＹＢ）およびターメリックを含んでいる薬草組成物は、ＬＰＳ誘発性のＴＮＦ−α産生の低下において相乗効果的反応を示した。
【０１３４】
（実施例４Ｂ）
Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるＬＰＳ誘発性のＴＮＦ−αに対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびターメリック（２５％クルクミン含有）の組み合わせの影響。
【０１３５】
用量調製：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびターメリックの必要量（５ｍｇ／ｍＬ＋５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ；５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ＋１．２５ｍｇ／ｍＬ；５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ＋０．６２５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ＋２．５ｍｇ／ｍＬ＋０．３１２５ｍｇ／ｍＬ）を、平滑なペーストが形成されるまでＴｗｅｅｎ８０で倍散した。カルボキシメチルセルロース（０．５％）溶液を倍散しながら徐々に添加して均一な懸濁物を形成した。
【０１３６】
サンプルの保管条件
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）、Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａおよびターメリックを２２℃以上２５℃以下で保管した。
【０１３７】
投薬
マウスを、以下の７つの処置群に無作為化した：
ｉ）第１群：コントロール群：マウスに、ビヒクル（１０ｍＬ／ｋｇ，ｐ．ｏ．）を投与した。
ｉｉ）第２群：１ｍｇ／ｋｇのリポポリサッカライド（ｉ．ｐ．）を一日一回投与されたマウス
ｉｉｉ）第３群：１．５ｍｇ／ｋｇのロリプラム（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｉｖ）第４群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、５０ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖ）第５群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、２５ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および１２．５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉ）第６群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、２５ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および６．２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
ｖｉｉ）第７群：５０ｍｇ／ｋｇのＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物、２５ｍｇ／ｋｇのＹａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、および３．１２５ｍｇ／ｋｇのターメリック（ｐ．ｏ．）を１日１回投与されたマウス
【０１３８】
処置
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１０ｍＬ／ｋｇ）、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（１０ｍＬ／ｋｇ）、ならびにＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物の組み合わせ（１０ｍＬ／ｋｇ）を、それぞれ、Ｂａｌｂ／ｃマウスの第４群、第５群〜第７群、および第８群〜第１０群に投与した。
【０１３９】
動物のポジティブコントロール群は、ロリプラムを１．５ｍｇ／ｋｇ投与された。１時間後、滅菌のパイロジェンフリーの生理食塩水中に溶解したＬＰＳを１２の全ての群のマウスに対して１ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内に投与した。ＬＰＳ投与後、１．５時間後に動物を麻酔して、血液サンプルを、眼窩後法によってヘパリン含有（５μｌ）のエッペンドルフチューブ中に収集した。血漿を４０００ｒｐｍでかつ４℃の遠心分離によって分けて、−８０℃で分析まで保管した。
【０１４０】
血液サンプル中のＴＮＦ−αレベルを、マウスＴＮＦ−αのＥＬＩＳＡキット（ＢＤ  Ｏｐｔ  ＥＩＡ）を用いてアッセイして、コントロール群と比較したＴＮＦ−α放出の阻害パーセントを算出した。
【０１４１】
ＴＮＦ−α阻害の結果を図４Ｂに示す。
【０１４２】
結論：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）、Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ（ＹＢ）およびターメリック（２５％クルクミン含有）を含んでいる薬草組成物は、ＬＰＳ誘発性のＴＮＦ−α産生の低下における相乗作用的な反応を示した。
【０１４３】
（実施例５）
腎嚢胞退縮に対する、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）、Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、クルクミンおよびターメリックの組み合わせの効果
【０１４４】
全実験は、Ｐｉｒａｍａｌ  Ｅｎｔｅｒｐｒｉｓｅｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｇｏｒｅｇａｏｎ，Ｍｕｍｂａｉ，Ｉｎｄｉａ．の施設動物倫理委員会（２９／１９９９／ＣＰＣＳＥＡ）の承認の下行った。
【０１４５】
腎嚢胞退縮に対する本発明の薬草組成物のインビボ有効性を、ゼブラフィッシュモルファントで研究した。ゼブラフィッシュの胚は、野性型のつがいの交配によって得た（Ｐｉｒａｍａｌ  Ｅｎｔｅｒｐｒｉｓｅｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｍｕｍｂａｉの動物舎施設）。
【０１４６】
以下の実験で用いられるようなゼブラフィッシュモルファントという用語は、１ｍＭのｉｆｔ８０または０．２５ｍＭのＰＫＤ２または０．５μＭのｎｅｋ８の翻訳ブロッキングアンチセンスモルホリノオリゴヌクレオチドを注射されたゼブラフィッシュ胚から育成されたゼブラフィッシュの幼生を指す。
【０１４７】
処置群：
ゼブラフィッシュ胚を、以下の１３の処置群に無作為化した（ｎ＝６）：
ｉ）第１群：ゼブラフィッシュ胚に０．１％のＤＭＳＯを投与した。
ｉｉ）第２群：ゼブラフィッシュ胚にコントロールモルホリノオリゴヌクレオチドを投与した。
ｉｉｉ）第３群：ゼブラフィッシュモルファントにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１５μｇ／ｍＬ）を投与した。
ｉｖ）第４群：ゼブラフィッシュモルファントにクルクミン粉末（１μｇ／ｍＬ）を投与した。
ｖ）第５群：ゼブラフィッシュモルファントにターメリック粉末（５μｇ／ｍＬ）を投与した。
ｖｉ）第６群：ゼブラフィッシュモルファントにＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（１μｇ／ｍＬ）を投与した。
ｖｉｉ）第７群：ゼブラフィッシュモルファントにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１０μｇ／ｍＬ）およびクルクミン粉末（１μｇ／ｍＬ）の組み合わせを投与した。
ｖｉｉｉ）第８群：ゼブラフィッシュモルファントにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１０μｇ／ｍＬ）およびターメリック粉末（１μｇ／ｍＬ）の組み合わせを投与した。
ｉｘ）第９群：ゼブラフィッシュモルファントにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１５μｇ／ｍＬ）およびターメリック粉末（５μｇ／ｍＬ）の組み合わせを投与した。
ｘ）第１０群：ゼブラフィッシュモルファントにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１０μｇ／ｍＬ）およびターメリック粉末（５μｇ／ｍＬ）の組み合わせを投与した。
ｘｉ）第１１群：ゼブラフィッシュモルファントにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１０μｇ／ｍＬ）、クルクミン粉末（１μｇ／ｍＬ）およびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（１μｇ／ｍＬ）の組み合わせを投与した。
ｘｉｉ）第１２群：ゼブラフィッシュモルファントにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１０μｇ／ｍＬ）、ターメリック粉末（５μｇ／ｍＬ）およびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（１μｇ／ｍＬ）の組み合わせを投与した。
ｘｉｉｉ）第１３群：ゼブラフィッシュモルファントにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの抽出物（１５μｇ／ｍＬ）、ターメリック粉末（５μｇ／ｍＬ）およびＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（１μｇ／ｍＬ）の組み合わせを投与した。
【０１４８】
処置：
Ｉ．  ｉｆｔ８０ノックアウトのゼブラフィッシュモルファントにおける治療処置の様式
ゼブラフィッシュの胚に、２００ｍＭのＫＣｌおよび０．１％のフェノールレッド中に１ｍＭのｉｆｔ８０翻訳ブロッキングアンチセンスモルホリノオリゴヌクレオチド（Ｇｅｎｅ−Ｔｏｏｌｓ，ＬＬＣ）を含有する溶液を、２細胞の段階で注射して、ｉｆｔ８０ノックアウトゼブラフィッシュモルファントを形成した。
コントロールモルホリノオリゴヌクレオチドを、第２群のゼブラフィッシュの胚に注射した。
【０１４９】
ＤＭＳＯ（０．１％）を、ネガティブコントロールとして第１群のゼブラフィッシュ胚に注射した。受精の２４時間後、第３群〜第１３群のゼブラフィッシュモルファントを、上記のような薬物処理に曝した。胚を１２ウェルのプレート中に維持して、それらのプレートをインキュベーター中で２８℃でインキュベートして、受精の２４時間後、４８時間後および９６時間後に読み取った。胚を受精後５日までさらに維持して、腎の形態を２．５％のメチルセルロース中で幼生を固定することによって文書記録化して、Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏ  Ｏｂｓｅｒｖｅｒ．Ａ１倒立顕微鏡Ｚｅｉｓｓ（（Ｚｅｉｓｓ  ＡｘｉｏＣａｍ  ＨＳｍ））で画像化した。腎浮腫の大きさは、腫れの周囲のポリゴンを描画して、Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｌｍａｇｅｒ４．５を用いて表面積をマイクロ平方で算出することによって測定した。
【０１５０】
処置：
ＩＩ．  ＰＫＤ２ノックアウトゼブラフィッシュモルファントにおける治療処置方法
ゼブラフィッシュの胚に、２００ｍＭのＫＣｌおよび０．１％のフェノールレッド中に０．２５ｍＭのＰＫＤ２翻訳ブロッキングアンチセンスモルホリノオリゴヌクレオチド（Ｇｅｎｅ−Ｔｏｏｌｓ，ＬＬＣ）を含有する溶液を２細胞段階で注射して、ＰＫＤ２ノックアウトゼブラフィッシュモルファントを形成した。コントロールモルホリノオリゴヌクレオチドは、第２群のゼブラフィッシュ胚に注射した。ＤＭＳＯ（０．１％）を、ネガティブコントロールとして、第一群のゼブラフィッシュ胚に注射した。受精の２４時間後、第３群〜第６群および第１１群〜第１３群のゼブラフィッシュモルファントを、上記のような薬物処置に曝した。胚を１２ウェルのプレート中に維持して、それらのプレートを２８℃で、インキュベーター中でインキュベートして、受精後２４時間、４８時間および９６時間の時点で読み取った。胚をさらに受精後５日まで維持して、腎臓の形態を、２．５％のメチルセルロース中に幼生を固定することによって文書記録化して、Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏ  Ｏｂｓｅｒｖｅｒ．Ａ１倒立顕微鏡  Ｚｅｉｓｓ  （（Ｚｅｉｓｓ  ＡｘｉｏＣａｍ  ＨＳｍ））で画像化した。腎浮腫の大きさは、腫れの周囲のポリゴンを描画して、Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｌｍａｇｅｒ４．５を用いて表面積をマイクロ平方で算出することによって測定した。
【０１５１】
ＩＩＩ．  ｎｅｋ８ノックアウトゼブラフィッシュモルファントにおける治療処置方法
ゼブラフィッシュの胚に、２００ｍＭのＫＣｌおよび０．１％のフェノールレッド中に０．５μＭのｎｅｋ８翻訳ブロッキングアンチセンスモルホリノオリゴヌクレオチド（Ｇｅｎｅ−Ｔｏｏｌｓ，ＬＬＣ）を含有する溶液を２細胞段階で注射してｎｅｋ８ノックアウトゼブラフィッシュモルファントを形成した。コントロールモルホリノオリゴヌクレオチドは、第２群のゼブラフィッシュ胚に注射した。ＤＭＳＯ（０．１％）を、ネガティブコントロールとして、第１群のゼブラフィッシュ胚に注射した。受精の２４時間後、第３群〜第６群および第１１群〜第１３群のゼブラフィッシュモルファントを、上記のような薬物処置に曝した。胚を１２ウェルのプレート中に維持して、それらのプレートを２８℃で、インキュベーター中でインキュベートして、受精後２４時間、４８時間および９６時間の時点で読み取った。胚をさらに受精後５日まで維持して、腎臓の形態を、２．５％のメチルセルロース中に幼生を固定することによって文書記録化して、Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏ  Ｏｂｓｅｒｖｅｒ．Ａ１倒立顕微鏡Ｚｅｉｓｓ（（Ｚｅｉｓｓ  ＡｘｉｏＣａｍ  ＨＳｍ））で画像化した。腎浮腫の大きさは、腫れの周囲のポリゴンを描画して、Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｌｍａｇｅｒ４．５を用いて表面積をマイクロ平方で算出することによって測定した。
【０１５２】
結果：図５Ａａ、図５Ａｂ、図５Ａｃ、図５Ａｄ、図５Ｂａ、図５Ｂｂ、図５Ｃａおよび図５Ｃｂは、腎嚢胞退縮に対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ）の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、クルクミンおよびターメリックの組み合わせの効果を示す。
【０１５３】
結論：Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（ＹＢ）およびターメリック（２５％クルクミン含有）を含む薬草組成物は、腎嚢胞退縮に対して相乗作用的反応を示した。
【０１５４】
（実施例６）
慢性の耳炎症に対するＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ）の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａおよびターメリックの組み合わせの効果
【０１５５】
用いた動物：
Ｂａｌｂ／ｃ雄性マウス、８以上１２以下の週齢、秤量２２ｇ以上２８ｇ以下（Ｐｉｒａｍａｌ  Ｅｎｔｅｒｐｒｉｓｅｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｍｕｍｂａｉの動物舎施設）。動物は、１８℃以上２４℃以下でかつ５０％以上７０％以下の湿度で、１２時間明／１２時間暗のサイクルで維持した特定の病原体なしの条件下で、個々に換気したポリプロピレン製ケージで飼育した。このマウスは、実験の前、１週間の期間順応させた。動物はラミナフローのフードで取り扱った。マウスは、食物および精製水に自由にアクセスさせた。
【０１５６】
化合物の貯蔵条件
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ  （Ｓ．Ｉ．）、Ｙａｓｈａｄａ  Ｂｈａｓｍａ、ターメリックおよび標準化合物を、室温（２２℃以上２５℃以下）で保管した。
【０１５７】
薬物投与
マウスを、以下の５つの処置群に無作為化した（ｎ＝１０）：
ｉ）第１群：マウスには、プラセボクリーム（２５ｍｇ）を局所的に適用した。
ｉｉ）第２群：コントロール群：マウスには、吉草酸ベタメタゾンクリームＢＰ（２５ｍｇ）を局所的に適用した。
ｉｉｉ）第３群：マウスには、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（Ｓ．Ｉ．）クリーム（５％）のみ（２５ｍｇ）を局所的に適用した。
ｉｖ）第４群：マウスには、組成物Ａ（Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ（５％）、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（２．５％）およびターメリック（０．３％））、（２５ｍｇ）を局所的に適用した。
ｖ）第５群：マウスには、組成物Ｂ（Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ  （５％）、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ（２．５％）およびターメリック（０．６％））、（２５ｍｇ）を局所的に適用した。
【０１５８】
炎症誘導剤の調製
ＰＭＡ溶液を形成するための、２０μＬのアセトン中に溶解された４μｇのホルボール１２−ミリステート１３−アセテート（ＰＭＡ）（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）。その溶液を、−２０℃で保管した。
【０１５９】
処置
雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（８以上１２以下の週齢、体重２２ｇ以上２８ｇ以下の間）を、実験の開始前１週間実験条件に慣らした。０日目、全てのマウスの左右両耳の耳厚を、ノギスＰＯＣＯ  ２Ｔを用いて測定した。耳厚を記録した後、ＰＭＡ溶液を、第１群〜第５群の全ての動物の右耳の内面および外面に適用した。ＰＭＡの適用３０分後、耳の内面および外面（各々の側に対して１２．５ｍｇ）に、プラセボクリーム、Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓクリーム（５％）、吉草酸ベタメタゾンクリームＢＰ、組成物Ａおよび組成物Ｂを、それぞれ、第１群、第２群、第３群、第４群および第５群の動物に適用した。この手順を１〜１０日目を通じて繰り返した。動物は体重および耳厚を記録した後に１１日目に人道的に安楽死させた。
【０１６０】
耳厚における増加率は、それぞれの日の耳厚と０日目の基礎の耳厚とを比較することによって算出した。グラフには、ｘ軸上に研究の日数、およびｙ軸上には耳厚の増加率をプロットした。種々の処置でのグラフの曲線下面積（ＡＵＣ）を、プラセボ群のＡＵＣと比較した。
【０１６１】
図６は、ＰＭＡ誘発性の耳炎症に対する組成物Ａおよび組成物Ｂの効果を示す。
【０１６２】
表１は、ＰＭＡ誘発性の耳炎症に対する種々の処置の効果を示す。
【０１６３】
【表２】
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【０１６４】
結論：組成物Ａおよび組成物Ｂは、プラセボクリームと比較した場合、耳炎症の有意な改善を示す。
【０１６５】
よって組成物Ａおよび組成物Ｂは、乾癬の処置のための潜在的な代替物である。
【０１６６】
参考文献：Ｋｉｍｉｋｏ  Ｎａｋａｊｉｍａら、（Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１１年，１８７（１１），６１５７−８頁）は、乾癬のための化合物をスクリーニングするためにホルボール１２−ミリステート１３−アセテート（ＰＭＡ）−誘発性の耳モデルの使用を首尾よく実証した。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａａ】
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【図５Ａｂ】
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【図５Ａｃ】
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【図５Ａｄ】
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【図５Ｂａ】
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【図５Ｂｂ】
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【図５Ｃａ】
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【図５Ｃｂ】
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【図６】
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【手続補正書】
【提出日】平成27年8月19日(2015.8.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花および／または結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される少なくとも２つの活性成分を含んでいる薬草組成物。
【請求項２】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花および／または結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される活性成分を含んでいる、請求項１に記載の薬草組成物。
【請求項３】
Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物から選択される活性成分を含んでいる、請求項１に記載の薬草組成物。
【請求項４】
Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａおよびクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される活性成分を含んでいる、請求項１に記載の薬草組成物。
【請求項５】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質から選択される活性成分を含んでいる、請求項１に記載の薬草組成物。
【請求項６】
前記組成物が薬学的に許容される担体または賦形剤をさらに含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の薬草組成物。
【請求項７】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、Ｙａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａ、ならびにクルクミン含有物質を１：１：１〜１６：８：５の比で含む、請求項２に記載の薬草組成物。
【請求項８】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａを１：１〜１：５の比で含む、請求項３に記載の薬草組成物。
【請求項９】
Ｓｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物、ならびにクルクミンまたはクルクミン含有物質を１：１〜１０：５の比で含む、請求項５に記載の薬草組成物。
【請求項１０】
請求項２に記載の薬草組成物であって、
（ａ）３０重量％以上７０重量％以下のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物と、
（ｂ）２０重量％以上４０重量％以下のＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａと、
（ｃ）３重量％以上４０重量％以下のクルクミンまたはクルクミン含有物質と、
を含んでいる薬草組成物。
【請求項１１】
請求項３に記載の薬草組成物であって、
（ａ）１０重量％以上５０重量％以下のＳｐｈａｅｒａｎｔｈｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓの開花結実頭部の抽出物と、
（ｂ）５０重量％以上８５重量％以下のＹａｓｈａｄａ  ｂｈａｓｍａと、
を含んでいる薬草組成物。
【請求項１２】
前記クルクミン含有物質が、２０重量％以上３０重量％以下のクルクミンを含んでいる、請求項１、２および４〜１０のいずれか１項に記載の薬草組成物。
【請求項１３】
前記クルクミン含有物質が、ターメリックである、請求項１２に記載の薬草組成物。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の薬草組成物を含んでいる、ＴＮＦ−α（腫瘍壊死因子−α）によって媒介される疾患の予防または処置における使用のための薬剤。
【請求項１５】
ＴＮＦ−αによって媒介される前記疾患が、炎症性疾患、または炎症性要素を有する疾患、または腎嚢胞性疾患である、請求項１４に記載の薬剤。
【請求項１６】
請求項１５に記載の薬剤であって、前記炎症性疾患または炎症性要素を有している疾患が、冠動脈性心疾患、アテローム性動脈硬化症、高脂血症、虚血再かん流障害、脳卒中、悪液質、高血圧、血管炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、多発性硬化症、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、皮膚遅延型過敏性障害、強直性脊椎炎、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、慢性移植片対宿主病、乾癬、結膜炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、ベーチェット病、炎症性腸疾患、骨粗しょう症／骨吸収、慢性閉塞性肺疾患および喘息からなる群から選択される、薬剤。
【請求項１７】
請求項１６に記載の薬剤であって、前記炎症性疾患または炎症性要素を有している疾患が、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、変形性関節症、難治性関節リウマチ、慢性非リウマチ性関節炎、乾癬、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、骨粗しょう症／骨吸収、クローン病、アテローム性動脈硬化症および強直性脊椎炎からなる群から選択される、薬剤。
【請求項１８】
前記腎嚢胞性疾患が、多発性嚢胞腎である、請求項１５に記載の薬剤。
【請求項１９】
前記多発性嚢胞腎が、常染色体優性多発性嚢胞腎または常染色体劣性多発性嚢胞腎である、請求項１７に記載の薬剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６２】
表２は、ＰＭＡ誘発性の耳炎症に対する種々の処置の効果を示す。
【国際調査報告】
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