(57)【要約】  本出願は、例えばβ−アレスチンエフェクターとして作用する化合物、ならびに例えば慢性および急性心血管疾患の治療におけるその使用について説明する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）の配列
（ここで、
Ｚｚは、ＡｒｇまたはＭｅｔであり；
Ａａは、ＴｙｒまたはＤ−Ｃｙｓであり；
Ｘｘは、Ｐｒｏ、ＮＭｅＩｌｅ、Ｉｌｅ、ｃｙＨｅｎ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３であり；
Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり；
Ｙｙは、任意のアミノ酸残基、Ｄ−Ａｌａ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在であり；
但し、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない）
を含むペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２】
Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである、請求項１に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３】
Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である、請求項１に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４】
Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである、請求項１に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項５】
Ｙｙは不存在である、請求項１に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項６】
ＸｘはｃｙＨｅｘである、請求項１〜５のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項７】
ＸｘはｃｙＰｅｎである、請求項１〜５のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項８】
Ｘｘは、プロリン、Ｎ−メチル−イソロイシン、またはイソロイシンである、請求項１〜５のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項９】
ＸｘはＡＡ０１である、請求項１〜５のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１０】
ＸｘはＡＡ０２である、請求項１〜５のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１１】
ＸｘはＡＡ０３である、請求項１〜５のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１２】
Ｂｂは、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１３】
Ｂｂは、ＰｒｏまたはＣｙｓである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１４】
Ｘｘはプロリンであり、およびＹｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである、請求項１、２、１２、または１３のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１５】
ＸｘはｃｙＨｅｘであり、およびＹｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である、請求項１、２、１２、または１３のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１６】
Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である、請求項１５に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１７】
Ｙｙは不存在である、請求項１５に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１８】
ＸｘはｃｙＰｅｎであり、およびＹｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である、請求項１、２、１２、または１３のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項１９】
Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である、請求項１８に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２０】
Ｙｙは不存在である、請求項１８に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２１】
ＸｘはＡＡ０１であり、およびＹｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である、請求項１、２、１２、または１３のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２２】
Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである、請求項２１に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２３】
ＸｘはＡＡ０２であり、およびＹｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である、請求項１、２、１２、または１３のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２４】
Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである、請求項２３に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２５】
ＸｘはＡＡ０３であり、およびＹｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である、請求項１、２、１２、または１３のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２６】
Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである、請求項２５に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２７】
Ｘｘは、ＩｌｅまたはＮＭｅＩｌｅであり、およびＹｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である、請求項１、２、１２、または１３のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２８】
Ｙｙは、Ｄ−アラニンまたは不存在である、請求項２７に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項２９】
Ｂｂはシステインである、請求項２７または２８に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３０】
Ｚｚはアルギニンである、請求項１〜２９のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３１】
Ｚｚはメチオニンである、請求項１〜２９のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３２】
Ａａはチロシンである、請求項１〜３１のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３３】
ＡａはＤ−システインである、請求項１〜３１のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３４】
ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号１〜２４および２９〜６０からなる群から選択される配列を含む、請求項１に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３５】
Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号２６）の配列：
（ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである）
を含むペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３６】
ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号１、４〜１０、および６０からなる群から選択される配列を含む、請求項３５に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３７】
Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ｃｙＨｅｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２７）の配列：
（ここで、
Ｚｚは、リシン、アルギニン、またはメチオニンであり、
Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉ−Ｐｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり、および
Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である）
を含むペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３８】
Ｂｂは、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉ−Ｐｒ、Ｐｒｐ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＭＨ−Ｍｅであり、およびＹｙは不存在である、請求項３７に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項３９】
ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号２、１１〜１７、３１〜３２、３４〜３９、４１〜５０、および５４〜５７からなる群から選択される配列を含む、請求項３７に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４０】
Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ｃｙＰｅｎ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号２８）の配列：
（ここで、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである）
を含むペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４１】
ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号３、１８〜２４、および５９からなる群から選択される配列を含む、請求項４０に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４２】
Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＡＡ０１−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号６１）の配列：
（ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である）を含むペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４３】
Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである、請求項４２に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４４】
ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号３３または配列番号４０を含む、請求項４２に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４５】
Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＡＡ０２−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号６２）の配列：
（ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である）を含むペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４６】
Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである、請求項４５に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４７】
ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号２９または３０を含む、請求項４５に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４８】
Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｄ−Ｃｙｓ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｃｙｓ−Ｙｙ（配列番号６３）の配列：
（ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である）を含むペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項４９】
Ｙｙは、Ｄ−アラニンまたは不存在である、請求項４８に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項５０】
Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＮＭｅＩｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号６４）の配列：
（ここで、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである）
を含むペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項５１】
ＹｙはＤ−アラニンである、請求項５０に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項５２】
ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号５８を含む、請求項５０に記載のペプチドまたはペプチド模倣体。
【請求項５３】
ａ）請求項１〜５２のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体；
ｂ）ペプチドまたはペプチド模倣体の配列のメンバーは、それらがａ）に記載の配列中で現われるようなそれらの相対位置を維持しており、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーは、ａ）に記載のアミノ酸またはアミノ酸類似体のうちの１つまたはそれ以上の間に挿入されており、およびペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなる、ペプチドまたはペプチド模倣体；または
ｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に少なくとも８５％同一であるペプチドまたはペプチド模倣体；
を含む組成物。
【請求項５４】
ペプチドまたはペプチド模倣体は環状である、請求項１〜５２のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体、または請求項５３に記載の組成物。
【請求項５５】
ペプチドまたはペプチド模倣体は二量体化されている、請求項１〜５２のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体、または請求項５３に記載の組成物。
【請求項５６】
ペプチドまたはペプチド模倣体は三量体化されている、請求項１〜５２のいずれか１項に記載のペプチドまたはペプチド模倣体、または請求項５３に記載の組成物。
【請求項５７】
請求項１〜５５のいずれか１項に記載の１つまたはそれ以上のペプチドまたはペプチド模倣体、ならびに薬学上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項５８】
薬学上許容される担体は、滅菌された純水、リン酸緩衝化生理食塩水、またはグルコース水溶液である、請求項５７に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
それを必要とする患者または対象に、治療有効量の請求項１〜５７のいずれか１項に記載の１種またはそれ以上のペプチド、ペプチド模倣体、または組成物を投与することを含む、心血管障害の治療方法。
【請求項６０】
心血管障害は、慢性高血圧、高血圧性緊急症、急性鬱血性心不全、狭心症、急性心筋梗塞、左心室不全、脳血管不全、頭蓋内出血、心不全、急性非代償性心不全、本態性高血圧、術後高血圧、高血圧性心疾患、高血圧性腎疾患、腎血管性高血圧、悪性高血圧、腎移植後患者安定化、拡張型心筋症、心筋炎、心移植後患者安定化、ステント後管理に関連する障害、神経性高血圧、子癇前症、腹部大動脈瘤、または血行動態要素を伴う任意の心血管障害である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
心血管障害は急性心血管障害である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６２】
急性心血管障害は、急性高血圧性緊急症、妊娠中毒症、急性心筋梗塞、急性鬱血性心不全、急性虚血性心疾患、肺高血圧、術後高血圧、片頭痛、網膜症、または術後心臓／弁手術である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
それを必要とする対象または対象に、治療有効量の請求項１〜５７のいずれか１項に記載の１種またはそれ以上のペプチド、ペプチド模倣体、または組成物を投与することを含む、ＡＴ１Ｒに関連したウイルス感染性疾患の治療方法。
【請求項６４】
それを必要とする対象または対象に、Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）
（ここで、
ＺｚはＡｒｇまたはＭｅｔであり；
Ａａは、ＴｙｒまたはＤ−Ｃｙｓであり；
Ｘｘは、Ｐｒｏ、ＮＭｅＩｌｅ、Ｉｌｅ、ｃｙＨｅｎ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３であり；
Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり、および
Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在であり；
但し、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない）
を含む治療有効量の１種またはそれ以上のペプチドまたはペプチド模倣体を投与することを含む、心血管障害の治療方法。
【請求項６５】
１種またはそれ以上のペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号１〜２４および２９〜６０からなる群から選択される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
心血管障害は、慢性高血圧、高血圧性緊急症、急性鬱血性心不全、狭心症、急性心筋梗塞、左心室不全、脳血管不全、頭蓋内出血、心不全、急性非代償性心不全、本態性高血圧、術後高血圧、高血圧性心疾患、高血圧性腎疾患、腎血管性高血圧、悪性高血圧、腎移植後患者安定化、拡張型心筋症、心筋炎、心移植後患者安定化、ステント後管理に関連する障害、神経原性高血圧、子癇前症、腹部大動脈瘤、または血行動態要素を伴う任意の心血管障害である、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
心血管障害は、急性心血管障害である、請求項６４に記載の方法。
【請求項６８】
それを必要とする対象または対象に、Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）
（ここで、
ＺｚはＡｒｇまたはＭｅｔであり；
Ａａは、ＴｙｒまたはＤ−Ｃｙｓであり；
Ｘｘは、Ｐｒｏ、ＮＭｅＩｌｅ、Ｉｌｅ、ｃｙＨｅｎ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３であり；
Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり；
Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在であり；
但し、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない）
を含む治療有効量の１種またはそれ以上のペプチドまたはペプチド模倣体を投与することを含む、ＡＴ１Ｒに関連したウイルス感染性疾患の治療方法。
【請求項６９】
１種またはそれ以上のペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号１〜２４および２９〜６０からなる群から選択される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
それを必要とする対象または対象に、有効量の請求項１〜５８のいずれか１項に記載の１種またはそれ以上のペプチド、ペプチド模倣体、または組成物を投与することを含む、β−アレスチンを作動させる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、β−アレスチンエフェクターとして作用する化合物に関する。このような化合物は、急性心不全または急性高血圧性緊急症などの心血管疾患の治療においてかなりの治療的有用性を提供することができる。
【背景技術】
【０００２】
アゴニスト（例えば、アンジオテンシンＩＩ）で受容体を刺激することが、ヘテロ三量体「Ｇタンパク質」の活性化をもたらし、次いで、その活性化がセカンドメッセンジャー／下流へのシグナル伝達（例えば、ジアシルグリセロール、イノシトール三リン酸、カルシウムなどを介する）および生理学的機能（例えば、血圧および体液の恒常性）の変化をもたらすというシグナル伝達パラダイムに基づいて、ＧＰＣＲを標的とする薬物が開発されてきた。血圧および体液の恒常性に関連する病状を治療するために、ＧＰＣＲを標的とするさらなる薬物が求められている。
【０００３】
関連技術に関する上記の説明は、係属中の米国特許出願を含めて本明細書に記載のいずれかの文献が、本出願の先行技術であると認めることをいかなる点でも意図するものではない。さらに、記載の製品、方法および／または装置に関連する任意の不都合に関する本明細書中での説明は、実施形態または特許請求の範囲を制約することを意図するものではない。実際、実施形態の態様は、記載したそれらの不都合を経験することなしに、記載の製品、方法、および／または装置に関するある特定の特徴を含むことができる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本明細書に記載の実施形態は、ａ）Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）の配列（ここで、Ｚｚは、ＡｒｇまたはＭｅｔであり、Ａａは、ＴｙｒまたはＤ−Ｃｙｓであり、Ｘｘは、Ｐｒｏ、Ｉｌｅ、ＮＭｅＩｌｅ、ｃｙＨｅｘ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３であり、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり、およびＹｙは、任意のアミノ酸残基、Ｄ−Ａｌａ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在である）を含むペプチドまたはペプチド模倣体；ｂ）該ペプチドまたはペプチド模倣体の配列中のメンバーが、ａ）に記載の配列中で出現するようなそれらの相対的位置を維持し、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーが、ａ）に記載の１つまたはそれ以上のアミノ酸またはアミノ酸類似体の間に挿入され、および該ペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなる、ペプチドまたはペプチド模倣体；またはｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に対して少なくとも８５％同一であるペプチドまたはペプチド模倣体；を含む組成物を提供する。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号１〜２４および２９〜６０からなる群から選択される配列を含む。一部の実施形態において、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない。一部の実施形態において、Ｚｚは、リシンでもよい。
【０００５】
本明細書に記載の実施形態は、ａ）Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号２６）の配列（ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシンまたはヒスチジンである）を含むペプチドまたはペプチド模倣体；ｂ）該ペプチドまたはペプチド模倣体の配列中のメンバーが、ａ）に記載の配列中で出現するようなそれらの相対的位置を維持し、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーが、ａ）に記載の１つまたはそれ以上のアミノ酸またはアミノ酸類似体の間に挿入され、および該ペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなるペプチドまたはペプチド模倣体；またはｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に対して少なくとも８５％同一であるペプチドまたはペプチド模倣体；を含む組成物を提供する。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号１、４〜１０、および６０からなる群から選択される配列を含む。
【０００６】
本明細書に記載の実施形態は、ａ）Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ｃｙＨｅｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２７）の配列（ここで、Ｚｚは、アルギニン、リシンまたはメチオニンであり、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である）を含むペプチドまたはペプチド模倣体、；ｂ）該ペプチドまたはペプチド模倣体の配列中のメンバーが、ａ）に記載の配列中で出現するようなそれらの相対的位置を維持し、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーが、ａ）に記載の１つまたはそれ以上のアミノ酸またはアミノ酸類似体の間に挿入され、および該ペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなるペプチドまたはペプチド模倣体；またはｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に対して少なくとも８５％同一であるペプチドまたはペプチド模倣体；を含む組成物を提供する。一部の実施形態において、Ｂｂは、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−ＥｔまたはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり、およびＹｙは、不存在である。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号２、１１〜１７、３１〜３２、３４〜３９、４１〜５１、および５４〜５７からなる群から選択される配列を含む。
【０００７】
本明細書に記載の実施形態は、ａ）Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ｃｙＰｅｎ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号２８）の配列（ここで、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである）を含むペプチドまたはペプチド模倣体からなる群から選択されるペプチドまたはペプチド模倣体；ｂ）該ペプチドまたはペプチド模倣体の配列中のメンバーが、ａ）に記載の配列中で出現するようなそれらの相対的位置を維持し、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーが、ａ）に記載の１つまたはそれ以上のアミノ酸またはアミノ酸類似体の間に挿入され、および該ペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなる、ペプチドまたはペプチド模倣体；またはｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に対して少なくとも８５％同一であるペプチドまたはペプチド模倣体；を含む組成物を提供する。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号３、１８〜２４、および５９からなる群から選択される配列を含む。
【０００８】
本明細書に記載の実施形態は、ａ）Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＡＡ０１−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号６１）の配列（ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である）を含むペプチドまたはペプチド模倣体；ｂ）該ペプチドまたはペプチド模倣体の配列中のメンバーが、ａ）に記載の配列中で出現するようなそれらの相対的位置を維持し、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーが、ａ）に記載の１つまたはそれ以上のアミノ酸またはアミノ酸類似体の間に挿入され、および該ペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなるペプチドまたはペプチド模倣体；またはｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に対して少なくとも８５％同一であるペプチドまたはペプチド模倣体；を含む組成物を提供する。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号３３または配列番号４０を含む。
【０００９】
本明細書に記載の実施形態は、ａ）Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＡＡ０２−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号６２）の配列（ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である）を含むペプチドまたはペプチド模倣体；ｂ）該ペプチドまたはペプチド模倣体の配列中のメンバーが、ａ）に記載の配列中で出現するようなそれらの相対的位置を維持し、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーが、ａ）に記載の１つまたはそれ以上のアミノ酸またはアミノ酸類似体の間に挿入され、および該ペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなるペプチドまたはペプチド模倣体；またはｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に対して少なくとも８５％同一であるペプチドまたはペプチド模倣体；を含む組成物を提供する。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジンである。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号２９または３０を含む。
【００１０】
本明細書に記載の実施形態は、ａ）Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｄ−Ｃｙｓ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｃｙｓ−Ｙｙ（配列番号６３）の配列（ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である）を含むペプチドまたはペプチド模倣体；ｂ）該ペプチドまたはペプチド模倣体の配列中のメンバーが、ａ）に記載の配列中で出現するようなそれらの相対的位置を維持し、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーが、ａ）に記載の１つまたはそれ以上のアミノ酸またはアミノ酸類似体の間に挿入され、および該ペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなるペプチドまたはペプチド模倣体；またはｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に対して少なくとも８５％同一であるペプチドまたはペプチド模倣体；を含む組成物を提供する。一部の実施形態において、Ｙｙは、Ｄ−アラニンまたは不存在である。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号５２または５３を含む。一部の実施形態において、配列番号６３を含むペプチドまたはペプチド模倣体は、環状ペプチドを形成する。該環状ペプチドは、２つのシステイン（Ｄ−ＣｙｓおよびＣｙｓ）残基の間で形成されるジスルフィド結合によって形成され得る。
【００１１】
本明細書に記載の実施形態は、ａ）Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＮＭｅＩｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号６４）の配列（ここで、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である）を含むペプチドまたはペプチド模倣体；ｂ）該ペプチドまたはペプチド模倣体の配列中のメンバーが、ａ）に記載の配列中で出現するようなそれらの相対的位置を維持し、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーが、ａ）に記載の１つまたはそれ以上のアミノ酸またはアミノ酸類似体の間に挿入され、および該ペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなるペプチドまたはペプチド模倣体；またはｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に対して少なくとも８５％同一であるペプチドまたはペプチド模倣体；を含む組成物を提供する。一部の実施形態において、Ｙｙは、Ｄ−アラニンである。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号５８を含む。
【００１２】
一部の実施形態において、本明細書に記載のペプチドまたはペプチド模倣体は、単離または精製されたペプチドまたはペプチド模倣体として提供される。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、環状である。一部の実施形態において、環状のペプチドまたはペプチド模倣体は、ジスルフィド結合によって形成される。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、二量化される。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、三量化される。
【００１３】
本明細書に記載の実施形態は、それを必要とする対象に、治療有効量の本明細書に記載の１種またはそれ以上の組成物、ペプチド、ペプチド模倣体、または医薬組成物を投与することを含む、心血管障害の治療方法を提供する。一部の実施形態において、心血管障害は、慢性高血圧、高血圧性緊急症、急性鬱血性心不全、狭心症、急性心筋梗塞、左心室不全、脳血管不全、頭蓋内出血、心不全、急性非代謝性心不全、本態性高血圧、術後高血圧、高血圧性心疾患、高血圧性腎疾患、腎血管性高血圧、悪性高血圧、腎移植後患者安定化、拡張型心筋症、心筋炎、心移植後患者安定化、ステント後管理に関連した障害、神経性高血圧、子癇前症、腹部大動脈瘤、または血行動態要素を伴う任意の心血管障害である。一部の実施形態において、心血管障害は、急性心血管障害である。一部の実施形態において、急性心血管障害は、急性高血圧性緊急症、妊娠中毒症、急性心筋梗塞、急性鬱血性心不全、急性虚血性心疾患、肺高血圧、術後高血圧、片頭痛、網膜症、または術後心臓／弁手術である。
【００１４】
本明細書に記載の実施形態は、それを必要とする対象に、治療有効量の本明細書に記載の１種またはそれ以上の組成物、ペプチド、ペプチド模倣体、または医薬組成物を投与することを含む、ＡＴ１Ｒに関連したウイルス感染性疾患の治療および／または予防方法を提供する。
【００１５】
本明細書に記載の実施形態は、それを必要とする対象に、Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）（ここで、Ｚｚは、ＡｒｇまたはＭｅｔであり、ＡａはＴｙｒまたはＤ−Ｃｙｓであり、Ｘｘは、Ｐｒｏ、Ｉｌｅ、ＮＭｅＩｌｅ、ｃｙＨｅｘ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３であり、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在である）を含む治療有効量の１種またはそれ以上のペプチドまたはペプチド模倣体を投与することを含む、心血管障害の治療方法を提供する。一部の実施形態において、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない。一部の実施形態において、Ｚｚはリシンでよい。一部の実施形態において、１つまたはそれ以上のペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号１〜２４または２９〜６０を含む。
【００１６】
本明細書に記載の実施形態は、それを必要とする対象に、Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）（ここで、Ｚｚは、ＡｒｇまたはＭｅｔであり、ＡａはＴｙｒまたはＤ−Ｃｙｓであり、Ｘｘは、Ｐｒｏ、Ｉｌｅ、ＮＭｅＩｌｅ、ｃｙＨｅｘ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３であり、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在である）を含む治療有効量の１種またはそれ以上のペプチドまたはペプチド模倣体を投与することを含む、ＡＴ１Ｒに関連したウイルス感染性疾患の治療方法を提供する。一部の実施形態において、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない。一部の実施形態において、Ｚｚはリシンでもよい。一部の実施形態において、１つまたはそれ以上のペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号１〜２４または２９〜６０を含む。
【００１７】
本明細書に記載の実施形態は、それを必要とする対象に、治療有効量の本明細書に記載の１種またはそれ以上のペプチド、ペプチド模倣体、組成物または医薬組成物を投与することを含む、β−アレスチンを作動（ａｇｏｎｉｚｅ）させる方法を提供する。
【００１８】
本明細書に記載の実施形態は、ａ）Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）の配列（ここで、ＡａはＴｙｒであり、Ｘｘは、ＮＭｅＩｌｅ、プロリン、ｃｙＨｅｘ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、またはＩｌｅであり、ＢｂはＰｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｍｅ、またはＣｙｓであり、Ｙｙは、任意のアミノ酸残基、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在であり、Ｚｚは、ＡｒｇまたはＭｅｔであり、但し、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない）を含むペプチドまたはペプチド模倣体；ｂ）該ペプチドまたはペプチド模倣体の配列中のメンバーが、ａ）に記載の配列中で出現するようなそれらの相対的位置を維持し、１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体からなるスペーサーが、ａ）に記載の１つまたはそれ以上のアミノ酸またはアミノ酸類似体の間に挿入され、および該ペプチドまたはペプチド模倣体の全長が、８〜２５個のアミノ酸および／またはアミノ酸類似体からなるペプチドまたはペプチド模倣体；またはｃ）ａ）に記載のペプチドまたはペプチド模倣体に対して少なくとも８５％同一であるＦａペプチドまたはペプチド模倣体；を含む組成物を提供する。一部の実施形態において、Ｚｚはリシンでもよい。一部の実施形態において、Ｙｙは不存在である。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、ＹｙはＤ−アラニンである。一部の実施形態において、Ｘｘはプロリンであり、およびＹｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＨｅｘであり、およびＹｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＰｅｎであり、およびＹｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、ＸｘはＮ−メチル−イソロイシンであり、およびＹｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、ＸｘはＮ−メチル−イソロイシンであり、Ｚｚはアルギニンであり、Ａａはチロシンであり、Ｂｂはプロリンであり、およびＹｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。
【００１９】
本明細書に記載の実施形態は、本明細書に記載の１種またはそれ以上の化合物（すなわち、ペプチドまたはペプチド模倣体）および薬学上許容される担体を含む医薬組成物を提供する。該化合物は、後記でさらに説明されるような固体または溶液（例えば、水溶液）など、任意の形態で採用され得る。例えば、該化合物を、単独でまたは適切な添加物と共に凍結乾燥された形態で得て、採用することができる。
【００２０】
心血管障害の治療方法も提供される。このような方法は、それを必要とする対象に、治療有効量の本明細書に記載の１種またはそれ以上の化合物を投与することを含む。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
特記しない限り、本明細書中で使用されるすべての技術および科学用語は、開示される実施形態が属する技術分野の当業者が一般的に理解すると同様の意味を有する。本明細書に記載のものに類似したまたは等価な方法および材料を、本発明の実施形態を実施または試験する際に使用することができるが、適切な方法および材料を以下で説明する。本明細書中で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許、およびその他の参考文献は、参照によってそれらの全体で組み入れられる。矛盾がある場合、定義を含め、本明細書が優先する。さらに、材料、方法および実施例は、単なる例示であって、限定することを意図したものではない。実施形態のその他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかであろう。
【００２２】
本明細書に記載の実施形態の理解を促進する目的で、ある特定の実施形態が参照され、それらを説明するのに特殊な専門用語が使用される。本明細書中で使用される術語は、特定の実施形態のみを説明する目的のために存在するのであって、本発明の開示範囲を限定することを意図するものではない。
【００２３】
本発明のタンパク質、ヌクレオチド配列、ペプチドなど、および方法を説明する前に、これらの実施形態は、記載された特定の方法論、プロトコール、細胞株、ベクター、および試薬に限定されるものではなく、変更できると解される。また、本明細書中で使用される術語は、特定の実施形態を説明する目的のためにのみ存在するのであって、本発明の実施形態または特許請求の範囲を限定することを意図するものではないことを理解されたい。本明細書に記載の組成物は、各残基において、Ｄ型アミノ酸、Ｌ型アミノ酸、ＤおよびＬ型アミノ酸からなるラセミ型骨格、またはこれらの任意の混合物を含むことができる。すなわち、各位置において、残基は、Ｄ型アミノ酸残基またはＬ型アミノ酸残基でよく、各位置は、文脈がそうでないことを規定しない限り、独立にそれぞれ他の位置に関してＤまたはＬでよい。
【００２４】
本明細書中で使用する場合、表現「それを必要とする（ｉｎ  ｎｅｅｄ  ｔｈｅｒｅｏｆ）」は、動物または哺乳動物が、特定の方法または治療を必要とすると確認または推測されたことを意味する。一部の実施形態において、その確認は、任意の診断手段によることができる。本明細書に記載の方法および治療のいずれにおいても、動物または哺乳動物は、それを必要とする可能性がある。一部の実施形態において、動物または哺乳動物は、特定の疾患、障害または状態が広く認められる状況にあるか、またはそのような状況に移行している。
【００２５】
本明細書中で使用する場合、用語「対象」、「個体」または「患者」は、互換的に使用され、マウス、ラット、その他のげっ歯動物、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウマ、または霊長類（ヒトなど）などの哺乳動物を含む任意の動物を意味する。
【００２６】
本明細書中で使用する場合、用語「ａ」または「ａｎ」は、文脈がそうでないことを明確に指摘しない限り、「少なくとも１つ」または「１つまたはそれ以上」を意味する。
【００２７】
本明細書中で使用する場合、用語「約」は、該数値が近似であり、その小さな変動が開示される実施形態の実施に有意に影響を及ぼさないことを意味する。数字で表した限界を使用する場合、文脈がそうでないことを指摘しない限り、「約」は、該数値が±１０％まで変動してもよく、開示される実施形態の範囲に包含されることを意味する。数値が用語「約」を伴って使用される場合、用語「約」を伴わない数値も開示され、用語「約」を伴わないで使用することもできる。
【００２８】
本明細書中で使用する場合、用語「動物」には、限定はされないが、ヒト、ならびに野生、飼育（ｄｏｍｅｓｔｉｃ）、および放牧（ｆａｒｍ）動物などの非ヒトの脊椎動物が含まれる。
【００２９】
本明細書中で使用する場合、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」（および「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」、「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」、および「ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ」などの任意の形態ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）、および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」（および「ｈａｖｅ」、「ｈａｓ」などの任意の形態のｈａｖｉｎｇ）、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」（および［ｉｎｃｌｕｄｅｓ］、「ｉｎｃｌｕｄｅ」などの任意の形態のｉｎｃｌｕｄｉｎｇ、または「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」（および［ｃｏｎｔａｉｎｓ］、［ｃｏｎｔａｉｎ］などの任意の形態のｃｏｎｔｚａｉｎｉｎｇ）は、包括的または非限定的であり、列挙されていないさらなる要素または方法の工程を排除しない。
【００３０】
本明細中で使用する場合、表現「Ｘ〜Ｙの整数」は、両端点を包含する任意の整数を意味する。すなわち、範囲が開示される場合、両端点を包含する範囲中の各整数を開示している。例えば、表現「Ｘ〜Ｙの整数」は、１、２、３、４または５、同様に範囲１〜５を開示している。
【００３１】
本明細書中で使用する場合、用語「哺乳動物」は、げっ歯動物（すなわち、マウス、ラットまたはモルモット）、サル、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、またはヒトを意味する。一部の実施形態において、哺乳動物はヒトである。
【００３２】
本明細書中で使用する場合、表現「治療有効量」は、研究者、獣医師、医師またはその他の臨床医が組織、器官系、動物、個体またはヒトにおいて得ようとしている生物学的または医学的応答を誘発する活性化合物または医薬の量を意味する。治療効果は、治療されている障害、または所望される生物学的効果に依存する。かくして、治療効果は、障害に関連する症状の重症度の低下、および／または障害進行の抑制（部分的または全面的）、治療改善、治癒、障害または副作用の予防または除去でよい。治療応答を誘発するのに必要とされる量は、対象の年齢、健康状態、体格、および性別に基づいて決定することができる。最適量は、また、治療に対する対象の応答を監視することに基づいて決定することができる。
【００３３】
本明細書中で使用する場合、用語「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療される（ｔｒｅａｔｅｄ）」または「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、目的が、望ましくない生理学的状態、障害または疾患を予防または減速（軽減）すること、あるいは有益なまたは所望の臨床結果を得ることである、治療処置および／または予防もしくは抑制手段を指すことができる。本明細書に記載の実施形態の目的に関して、有益なまたは所望の臨床結果には、限定はされないが、症状の緩和；状態、障害または疾患の程度の縮小；状態、障害または疾患の安定化状態（すなわち、悪化していない）；状態、疾患または疾患進行の開始遅延または減速；看取の可能または不可能にかかわらず、状態、障害または疾患状態の改善または寛解（部分的または全体的のいずれにせよ）；患者によって必ずしも認識できない少なくとも１つの測定可能な身体パラメーターの改善；あるいは状態、障害もしくは疾患の増強または改善が含まれる。治療は、また、過度なレベルの副作用なしに臨床的に有意な応答を誘発することを含むことができる。治療は、また、治療を受けない場合に予想される生存に比較して、生存を延長させることを包含することができる。したがって、「心血管障害の治療」または「心血管障害を治療すること」は、心血管障害に関連した一次現象または二次症状のいずれかを予防、軽減または改善する活動を意味する。
【００３４】
本出願は、化合物、β−アレスチンエフェクターについて説明する。いずれか特定の理論に拘泥するものではないが、本明細書に記載の化合物は、ＡＴ１アンジオテンシン受容体を介するβ−アレスチン／ＧＲＫを介するシグナル伝達のアゴニストとして作用する。したがって、これらの化合物は、限定はされないが、急性心不全および急性高血圧性緊急症などの心血管疾患の治療においてかなりの治療的利益を提供するシグナル伝達経路をモジュレートする。
【００３５】
一部の実施形態によれば、本明細書に記載の化合物は、次式：Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）を含み、ここで、Ａａは、チロシンまたはＤ−システインであり；Ｘｘは、プロリン、ｃｙＨｅｘ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、ＮＭｅＩｌｅ、またはＩｌｅであり；Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｍｅ、またはＣｙｓであり；Ｙｙは、任意のアミノ酸残基、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在であり；Ｚｚは、ＡｒｇまたはＭｅｔである。一部の実施形態において、Ｚｚはリシンでもよい。一部の実施形態において、Ｘｘはプロリンである。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＨｅｘである。一部の実施形態において、ＸｘはＣｙＰｅｎである。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０１である。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０２である。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０３である。一部の実施形態において、Ｘｘは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である。一部の実施形態において、Ｘｘは、ｃｙＨｅｘまたはｃｙＰｅｎである。一部の実施形態において、Ｘｘは、プロリン、イソロイシン、またはＮ−メチル−イソロイシンである。一部の実施形態において、Ｘｘは、ｃｙＨｅｘ、プロリン、イソロイシン、またはＮ−メチル−イソロイシンである。一部の実施形態において、Ｘｘは、プロリンまたはＮ−メチル−イソロイシンである。一部の実施形態において、Ｘｘは、ＡＡ０１またはＡＡ０２である。一部の実施形態において、Ｘｘは、ＡＡ０１またはＡＡ０３である。一部の実施形態において、Ｘｘは、ＡＡ０２またはＡＡ０３である。一部の実施形態において、Ｙｙは、真核生物または原核生物の天然に存在する任意のアミノ酸残基である。一部の実施形態において、Ｙｙは、ヒスチジン、アラニン、イソロイシン、アルギニン、ロイシン、アスパラギン、リシン、アスパラギン酸、メチオニン、システイン、フェニルアラニン、グルタミン酸、トレオニン、グルタミン、トリプトファン、グリシン、バリン、オルニチン、プロリン、セレノシステイン、ピロリシン、セリン、タウリンまたはチロシンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、Ｙｙはグリシンである。一部の実施形態において、Ｙｙはアラニンである。一部の実施形態において、Ｙｙはアルギニンである。一部の実施形態において、Ｙｙはアスパラギンである。一部の実施形態において、Ｙｙはアスパラギン酸である。一部の実施形態において、Ｙｙはシステインである。一部の実施形態において、Ｙｙはグルタミンである。一部の実施形態において、Ｙｙはグルタミン酸である。一部の実施形態において、Ｙｙはイソロイシンである。一部の実施形態において、Ｙｙはリシンである。一部の実施形態において、Ｙｙはメチオニンである。一部の実施形態において、Ｙｙはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、Ｙｙはプロリンである。一部の実施形態において、Ｙｙはセリンである。一部の実施形態において、Ｙｙはトレオニンである。一部の実施形態において、Ｙｙはトリプトファンである。一部の実施形態において、Ｙｙはチロシンである。一部の実施形態において、Ｙｙはバリンである。一部の実施形態において、Ｙｙはフェニルアラニンではない。一部の実施形態において、Ｙｙは、Ｄ型のアミノ酸である。一部の実施形態において、ＹｙはＤ−Ａｌａである。一部の実施形態において、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、ＢｂはＰｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない。
【００３６】
一部の実施形態によれば、化合物は、次式：Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）を含み、ここで、ＡａはＴｙｒであり；Ｘｘは、プロリン、ｃｙＨｅｘ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、ＮＭｅＩｌｅ、またはＩｌｅであり；Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｍｅ、またはＣｙｓであり；Ｙｙは、任意のアミノ酸残基、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在であり；Ｚｚは、ＡｒｇまたはＭｅｔである。一部の実施形態において、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない。一部の実施形態において、ＡａはＴｙｒであり；ＺｚはＡｒｇであり；Ｘｘは、プロリン、ＣｙＨｅｘ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、ＮＭｅＩｌｅ、またはＩｌｅであり；Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｍｅ、またはＣｙｓであり；Ｙｙは、任意のアミノ酸残基、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である（但し、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない）。一部の実施形態において、ＡａはＴｙｒであり；ＺｚはＡｒｇであり、ＸｘはＰｒｏであり；Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｍｅ、またはＣｙｓであり；Ｙｙは、任意のアミノ酸残基、Ｄ−Ａｌａ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である。一部の実施形態において、ＡａはＴｙｒであり；ＺｚはＡｒｇであり；ＸｘはＰｒｏであり；ＢｂはＰｒｏであり；Ｙｙは、任意のアミノ酸残基、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である。一部の実施形態において、ＡａはＴｙｒであり、ＺｚはＡｒｇであり、ＸｘはＰｒｏであり、ＢｂはＰｒｏであり、Ｙｙは、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、またはＰｈｅである。一部の実施形態において、ＡａはＴｙｒであり、ＺｚはＭｅｔである。一部の実施形態において、ＡａはＴｙｒであり、ＺｚはＭｅｔであり、ＸｘはｃｙＨｅｘである。一部の実施形態において、ＡａはＴｙｒであり、ＺｚはＭｅｔであり、ＸｘはＰｒｏである。一部の実施形態において、ＡａはＴｙｒであり、ＺｚはＭｅｔであり、ＸｘはＰｒｏであり、Ｙｙは、Ｌ−ＡｌａまたはＤ−Ａｌａである。一部の実施形態において、ＡａはＴｙｒであり、ＺｚはＬｙｓである。
【００３７】
一部の実施形態において、化合物は、配列番号１〜２４および２９〜６０からなる群から選択される配列を含む。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号２を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号６を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号７を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号８を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号９を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１０を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１１を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１２を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１３を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１４を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１５を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１６を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１７を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１８を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１９を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号２０を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号２１を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号２２を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号２３を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号２４を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号２９を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３０を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３１を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３２を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３３を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３４を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３５を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３６を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３７を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３８を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３９を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４０を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４１を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４２を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４３を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４４を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４５を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４６を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４７を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４８を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号４９を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５０を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５１を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５２を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５３を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５４を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５５を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５６を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５７を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５８を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５９を含まない。一部の実施形態において、化合物は、配列番号６０を含まない。一部の実施形態において、化合物は、同じ組成物中に上記の１種を超える組合せを含まない。
【００３８】
一部の実施形態において、Ｘｘはプロリンであり、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＨｅｘであり、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＰｅｎであり、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。
【００３９】
一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ａａ−Ｘｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２５）を含み、ここで、Ｚｚは、ＡｒｇまたはＭｅｔであり；Ａａは、ＴｙｒまたはＤ−Ｃｙｓであり；Ｘｘは、Ｐｒｏ、Ｉｌｅ、ｃｙＨｅｘ、ｃｙＰｅｎ、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３であり；Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり；Ｙｙは、任意のアミノ酸残基、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、または不存在である。一部の実施形態において、Ｚｚはリシンでもよい。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、Ｙｙは不存在である。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＨｅｘである。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＰｅｎである。一部の実施形態において、Ｘｘは、プロリン、Ｎ−メチル−イソロイシンまたはイソロイシンである（但し、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０１である。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０２である。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０３である。一部の実施形態において、Ｂｂは、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅである。一部の実施形態において、Ｂｂは、ＰｒｏまたはＣｙｓである。一部の実施形態において、Ｘｘはプロリンであり、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＨｅｘであり、Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である。一部の実施形態において、ＸｘはＣｙＨｅｘであり、Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＨｅｘであり、Ｙｙは不存在である。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＰｅｎであり、Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＰｅｎであり、Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、またはＡＡ０３である。一部の実施形態において、ＸｘはｃｙＰｅｎであり、Ｙｙは不存在である。一部の実施形態において、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない。
【００４０】
一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０１であり、Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０１であり、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０２であり、Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０２であり、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０３であり、Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である。一部の実施形態において、ＸｘはＡＡ０３であり、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、ＸｘはＩｌｅであり、Ｙｙは、ＡＡ０１、ＡＡ０２、ＡＡ０３、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、または不存在である。一部の実施形態において、ＸｘはＩｌｅであり、Ｙｙは、Ｄ−アラニンまたは不存在である（但し、ＡａがＴｙｒであり、およびＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅではない。一部の実施形態において、ＸｘがＩｌｅであるなら、Ｂｂは、Ｌ−システインまたはＤ−システインである。
【００４１】
一部の実施形態によれば、化合物は、次式：Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号２６）を含み、ここで、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、Ｄ−アラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、化合物は、配列番号１、４〜１０、および６０からなる群から選択される配列を含む。
【００４２】
一部の実施形態によれば、化合物は、次式：Ｓａｒ−Ｚｚ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ｃｙＨｅｘ−Ｈｉｓ−Ｂｂ−Ｙｙ（配列番号２７）を含み、ここで、Ｚｚは、アルギニン、リシン、またはメチオニンであり；Ｂｂは、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり；Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である。一部の実施形態において、Ｂｂは、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅである。一部の実施形態において、Ｂｂは、Ｐｒｏ−ＮＨ−ｉＰｒ、Ｐｒｏ−ＮＨ−ネオペンチル、Ｐｒｏ−ＮＨ−Ｅｔ、またはＰｒｏ−ＮＨ−Ｍｅであり、Ｙｙは不存在である。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、化合物は、配列番号２および１１〜１７からなる群から選択される配列を含む。
【００４３】
一部の実施形態によれば、次式：Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ｃｙＰｅｎ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号２８）を含む化合物が提供され、ここで、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、Ｄ−アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、またはフェニルアラニンである。一部の実施形態において、Ｙｙは、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３、１８〜２４、および５９からなる群から選択される配列を含む。
【００４４】
一部の実施形態において、次式：Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＡＡ０１−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号６１）を含む化合物が提供され、ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である。一部の実施形態において、Ｙｙは不存在である。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、化合物は、配列番号３３または４０を含む。
【００４５】
一部の実施形態において、次式：Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＡＡ０２−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｙｙ（配列番号６２）を含む化合物が提供され、ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である。一部の実施形態において、Ｙｙは不存在である。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、化合物は、配列番号２９または３０を含む。
【００４６】
一部の実施形態において、次式：Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｄ−Ｃｙｓ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｃｙｓ−Ｙｙ（配列番号６３）を含む化合物が提供され、ここで、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、ヒスチジン、または不存在である。一部の実施形態において、Ｙｙは不存在である。一部の実施形態において、Ｙｙは、アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、トレオニン、セリン、メチオニン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸、リシン、アスパラギン、グルタミン酸、トリプトファン、プロリン、チロシン、またはヒスチジンである。一部の実施形態において、ＹｙはＤ−アラニンである。一部の実施形態において、化合物は、配列番号５２または５３を含む。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、配列番号５２または５３を含む。一部の実施形態において、配列番号６３を含むペプチドまたはペプチド模倣体は、環状ペプチドを形成する。該環状ペプチドは、２つのシステイン（Ｄ−ＣｙｓおよびＣｙｓ）残基の間に形成されるジスルフィド結合によって形成することができる。
【００４７】
本明細書中で使用される略語の一部の定義を下記に示す。本明細書中で明確に定義されない略語は、いずれも、当業者による慣習的使用法に従って使用される。
【００４８】
【表１】
2015506960.tif 000002
【００４９】
【表２】
2015506960.tif 000003
【００５０】
【表３】
2015506960.tif 000004
【００５１】
上式の化合物の環状形態、環状縮合型（ｔｒｕｎｃａｔｅｄ）形態、環状縮合型二量化形態、および環状縮合型三量化形態を、任意の既知法を使用して調製することができる。縮合型形態は、本明細書に記載のペプチドまたはペプチド模倣体のどちらか一方の末端または双方の末端から除去される１つまたはそれ以上のアミノ酸残基を有する。ペプチドは、それぞれの末端から独立に除去される１つまたは２つのアミノ酸を有することができる。一部の実施形態によれば、上式の化合物の環状形態は、遊離アミノ基および遊離カルボキシル基を架橋することによって調製することができる。一部の実施形態によれば、環状化合物の形成は、当技術分野で公知の手段を用い、必要なら適切に保護し、脱水剤で処理することによって従来のように実施することができる。一部の実施形態によれば、開鎖（線状形態）から環状形態への反応は、プロリンのトランスからシスへの異性化を伴う可能性がある。一部の実施形態によれば、開鎖（線状形態）から環状形態への反応は、分子内環化を伴う可能性がある。
【００５２】
本発明の実施形態の化合物の例には、限定はされないが、下表１に挙げる化合物が含まれる。
【００５３】
【表４】
2015506960.tif 000005
【００５４】
【表５】
2015506960.tif 000006
【００５５】
ＧＰＣＲ活性の測定
実施形態の化合物は、ＡＴ１アンジオテンシン受容体を介するβ−アレスチン／ＧＲＫ介在性シグナル伝達のアゴニストである。化合物がＧタンパク質介在性シグナル伝達をもたらす能力は、Ｇタンパク質介在性シグナル伝達またはＧＰＣＲ活性、またはこのようなシグナル伝達／活性の不在を検出するのに使用される当技術分野で公知の任意のアッセイを使用して測定することができる。「ＧＰＣＲ活性」とは、ＧＰＣＲがシグナルを伝達する能力を指す。このような活性は、例えば、異種細胞において、ＧＰＣＲ（またはキメラＧＰＣＲ）をＧタンパク質および下流のエフェクター（ＰＬＣまたはアデニル酸シクラーゼなど）と連結させること、および細胞内カルシウムの増加を測定することによって測定することができる（例えば、ＯｆｆｅｒｍａｎｓおよびＳｉｍｏｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：１５１７５〜１５１８０（１９９５）参照）。受容体の活性は、リガンドで誘発される［Ｃａ２＋］ｉの変化を蛍光Ｃａ２＋指示色素および蛍光造影を使用して記録することによって効果的に測定することができる。「天然リガンドで誘発される活性」とは、本明細書中で使用する場合、ＧＰＣＲの天然リガンドによるＧＰＣＲの活性化を指す。活性は、ＧＰＣＲの活性を測定するための任意の数のエンドポイントを利用して評価することができる。例えば、ＧＰＣＲの活性は、カルシウム動員などのアッセイ（例えば、エクオリン発光アッセイ）を利用して評価することができる。
【００５６】
一般に、ＧＰＣＲ介在性シグナル伝達をモジュレートする化合物を試験するためのアッセイは、間接的または直接的にＧＰＣＲの影響下にある任意のパラメーター、例えば、機能的、物理的または化学的効果の測定を含む。それには、インビトロ、インビボおよびエキソビボでの、リガンドの結合、イオンフラックス、膜電位、電流、転写、Ｇタンパク質の結合、遺伝子の増幅、がん細胞の発現、ＧＰＣＲのリン酸化または脱リン酸化、シグナル伝達、受容体−リガンドの相互作用、セカンドメッセンジャーの濃度（例えば、ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、ＩＰ３、ＤＡＧまたは細胞内Ｃａ２＋）の変化が含まれ、また、神経伝達
物質またはホルモン放出の増減、あるいは特定の化合物、例えば、トリグリセリドの合成の増加などのその他の生理学的効果が含まれる。このようなパラメーターは、当業者に公知の任意の手段、例えば、分光学的特徴（例えば、蛍光、吸光度、屈折率）、流体力学的（例えば、形状）、クロマトグラフィー、または溶解特性、パッチクランピング、電位感受性色素、全細胞電流、放射性同位体流出、誘導性マーカー、ＧＰＣＲの転写活性化の変化；リガンド結合アッセイ；電位、膜電位および伝導率の変化；イオン流動アッセイ；細胞内セカンドメッセンジャー（ｃＡＭＰおよびイノシトール三リン酸（ＩＰ３））の変化；細胞内カルシウムレベルの変化；神経伝達物質の放出などによって測定することができる。
【００５７】
Ｇタンパク質受容体が活性になると、該受容体は、Ｇタンパク質（例えば、Ｇｑ、Ｇｓ、Ｇｉ、Ｇｏ）に結合し、Ｇタンパク質へのＧＴＰの結合を刺激する。次いで、Ｇタンパク質は、ＧＴＰアーゼとして作用し、ＧＴＰをＧＤＰへ徐々に加水分解し、それによって、受容体は、通常状態下で失活する。Ｇタンパク質介在性シグナル伝達またはＧＰＣＲの活性は、ＧＴＰの結合および／またはＧＴＰのＧＤＰへの加水分解を検出および／または測定する能力のあるアッセイ系を利用して測定することができる。
【００５８】
Ｇｓは、アデニルシクラーゼ酵素を刺激する。一方、Ｇｉ（およびＧｏ）タンパク質は、この酵素を阻害する。アデニルシクラーゼは、ＡＴＰのｃＡＭＰへの変換を触媒する。したがって、Ｇｓタンパク質に結合する構成的に活性化されたＧＰＣＲは、細胞内ｃＡＭＰレベルの上昇と関連する。一方、Ｇｉ（またはＧｏ）に結合する活性化ＧＰＣＲは、細胞内ｃＡＭＰレベルの低下と関連する。したがって、ｃＡＭＰを検出するアッセイを利用して、候補化合物が、例えば、受容体に対してインバースアゴニストであるかどうかを判定することができる（すなわち、このような化合物は、ｃＡＭＰレベルを低下させる）。ｃＡＭＰを測定するための当技術分野で公知の種々の手段を利用することができ；１つの手段は、ＥＬＩＳＡをベースにしたフォーマットにおける抗ｃＡＭＰ抗体の使用に依拠する。利用できる別のタイプのアッセイが、全細胞セカンドメッセンジャーレポーター系のアッセイである。遺伝子上のプロモーターは、特定の遺伝子がコードするタンパク質の発現を駆動する。環状ＡＭＰは、ｃＡＭＰ応答性ＤＮＡ結合タンパク質または転写因子（ＣＲＥＢ）の結合を促進することによって遺伝子発現を駆動し、次いでｃＡＭＰ応答性ＤＮＡ結合タンパク質または転写因子（ＣＲＥＢ）がｃＡＭＰ応答要素と呼ばれる特定の部位でプロモーターへ結合し、遺伝子の発現を駆動する。レポーター遺伝子の前に複数のｃＡＭＰ応答要素を含むプロモーター、例えば、β−ガラクトシダーゼまたはルシフェラーゼを有するレポーター系を構築することができる。したがって、構成的に活性化されたＧｓ結合受容体は、ｃＡＭＰの蓄積をもたらし、その蓄積が、次いで、遺伝子およびレポータータンパク質の発現を活性化する。次いで、β−ガラクトシダーゼまたはルシフェラーゼなどのレポータータンパク質を、標準的な生化学的アッセイを使用して検出することができる。
【００５９】
ＧｑおよびＧｏは、ホスホリパーゼＣ酵素の活性化に関連し、ホスホリパーゼＣは、次いで、リン脂質ＰＩＰ２を加水分解し、２種の細胞内メッセンジャー：ジアシクログリセロール（ＤＡＧ）およびイノシトール１，４，５−三リン酸（ＩＰ３）を放出する。ＩＰ３の蓄積増加は、ＧｑおよびＧｏ関連受容体の活性化と関連している。ＩＰ３の蓄積を検出するアッセイを利用して、候補化合物がＧｑまたはＧｏ関連受容体に対してインバースアゴニストであるかどうかを判定することができる（すなわち、このような化合物は、ＩＰ３のレベルを低下させる）。Ｇｑ依存性受容体は、Ｇｑ依存性ホスホリパーゼＣがＡＰ１要素を含む遺伝子の活性化を引き起こすＡＰ１受容体アッセイを使用して調べることもできる。
【００６０】
潜在的な活性化因子、阻害剤またはモジュレーターで処理されるＧＰＣＲを含むサンプルまたはアッセイを、阻害剤、活性化因子またはモジュレーターを含まない対照サンプルと比較して、阻害の程度を調べる。対照サンプル（阻害剤で処理されていない）には、１００％の相対的ＧＰＣＲ活性値が割り当てられる。ＧＰＣＲの阻害は、ＧＰＣＲ活性値が対照と比較して約９９％、９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、７０％、６０％、５０％、または２５％である場合に達成される。ＧＰＣＲの活性化は、ＧＰＣＲ活性値が対照（活性化因子で処理されていない）と比較して１１０％、１５０％、２００〜５００％（すなわち、対照に比較して２〜５倍大きい）、または１０００〜３０００％またはそれ以上である場合に達成される。
【００６１】
ＧＰＣＲポリペプチドの機能に対する化合物の効果は、前記パラメーターのいずれかを調べることによって測定することができる。ＧＰＣＲ活性に影響を及ぼす任意の適切な生理学的変化を利用して、化合物のＧＰＣＲおよび天然リガンド介在性ＧＰＣＲ活性に対する影響を評価することができる。機能的結果を無傷の細胞または動物を使用して測定する場合、伝達物質放出、ホルモン放出、既知および未同定の双方の遺伝子マーカーに対する転写変化（例えば、ノーザンブロット）、細胞代謝（細胞成長など）の変化またはｐＨ変化、および細胞内セカンドメッセンジャー（Ｃａ２＋、ＩＰ３またはｃＡＭＰなど）の変化などの、種々の効果を測定することもできる。
【００６２】
ＧＰＣＲシグナル伝達およびシグナル伝達のアッセイ方法に関する一般的総説については、例えば、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、２３７および２３８巻（１９９４）ならびに９６巻（１９８３）；Ｂｏｕｒｎｅら、Ｎａｔｕｒｅ  １０：３４９：１１７〜２７（１９９１）；Ｂｏｕｒｎｅら、Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：１２５〜３２（１９９０）；Ｐｉｔｃｈｅｒら、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６７：６５３〜９２（１９９８）を参照されたい。
【００６３】
ＧＰＣＲ活性のモジュレーターは、組換えまたは天然に存在する前記のようなＧＰＣＲポリペプチドを使用して試験される。タンパク質を、単離し、細胞中で発現させ、細胞由来の膜中で発現させ、組織または動物中で発現させることができる。例えば、脂肪細胞、免疫系の細胞、形質転換細胞、または膜を使用して、前記のＧＰＣＲポリペプチドを試験することができる。モジュレーションは、本明細書に記載のインビトロまたはインビボアッセイの１つを利用して試験される。シグナル伝達は、また、異種シグナル伝達ドメインに共有結合でつながれた受容体の細胞外ドメイン、または受容体の膜貫通もしくは細胞質ドメインに共有結合でつながれた異種細胞外ドメインなどのキメラ分子を使用して、溶解または固体状態での反応により、インビトロで調べることができる。さらに、関心のあるタンパク質のリガンド結合ドメインを、インビトロで、溶解または固体状態での反応で利用して、リガンド結合についてアッセイすることができる。
【００６４】
ＧＰＣＲ、ドメインまたはキメラタンパク質へのリガンド結合は、いくつかのフォーマットで試験することができる。結合は、溶液中で、二層膜中で、固相に付着させて、脂質単層中で、または小胞中で実施することができる。アッセイに関する一部の実施形態において、天然リガンドのその受容体への結合は、候補モジュレーターの存在下で測定される。別法として、候補モジュレーターの結合は、天然リガンドの存在下で測定することができる。しばしば、化合物が天然リガンドの受容体への結合と競合する能力を測定する競合アッセイが使用される。結合は、例えば分光特性（例えば、蛍光、吸光度、屈折率）の変化、流体力学的（例えば、形状）変化、またはクロマトグラフィーもしくは溶解特性の変化を測定することによって試験することができる。
【００６５】
受容体−Ｇタンパク質の相互作用を利用して、モジュレーターについてアッセイすることもできる。例えば、ＧＴＰの不在下で、天然リガンドなどの活性化因子の結合は、Ｇタンパク質（３つのすべてのサブユニット）と受容体との緊密な複合体の形成をもたらす。この複合体は、前に言及したように種々の方式で検出することができる。このようなアッセイを修正して、阻害剤を探索することができる。例えば、リガンドをＧＴＰの不在下に受容体およびＧタンパク質に添加して、緊密な複合体を形成することができる。阻害剤またはアンタゴニストは、受容体−Ｇタンパク質複合体の解離を調べることによって確認することができる。ＧＴＰの存在下で、他の２つのＧタンパク質サブユニットからのＧタンパク質αサブユニットの放出は、活性化の評価基準として役立つ。
【００６６】
活性化された、または阻害されたＧタンパク質は、次いで、タンパク質、酵素およびチャネルなどの下流エフェクターの特性を変化させる。古典的な例が、視覚系におけるトランスデューシンによるｃＧＭＰホスホジエステラーゼの活性化、促進性Ｇタンパク質によるアデニル酸シクラーゼの活性化、Ｇｑおよびその他の同族Ｇタンパク質によるホスホリパーゼＣの活性化、ならびにＧｉおよびその他のＧタンパク質による多様なチャネルのモジュレーションである。ホスホリパーゼＣによるジアシルグリセロールおよびＩＰ３の生成などの下流での結果、およびそれに続く、例えばＩＰ３によるカルシウム動員（後でさらに考察する）についても調べることができる。したがって、モジュレーターを、下流へのリガンド介在性効果を刺激または阻害する能力について評価することができる。候補モジュレーターを、受容体を活性化するニコチン酸または関連化合物により誘発されるカルシウム動員を阻害する能力について評価することができる。
【００６７】
他の例において、化合物がＧＰＣＲ活性を阻害する能力は、脂肪細胞における脂質分解、脂肪組織からの遊離脂肪酸の放出、およびリポタンパク質リパーゼ活性を測定することなどの下流アッセイを使用して測定することができる。これは、例えば、異なる量の化合物をＧＰＣＲと共にインキュベートする競合アッセイを利用して完遂することができる。
【００６８】
したがって、モジュレーターは、また、β−アレスチンの動員（ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ）が関連するアッセイを利用して同定することができる。β−アレスチンは、活性化されていない細胞の細胞質中に分布する調節タンパク質として働く。適切なＧＰＣＲへのリガンド結合は、β−アレスチンの細胞質から細胞表面への再分布と関連し、β−アレスチンは、細胞表面でＧＰＣＲと会合する。したがって、受容体の活性化、およびリガンドで誘発される受容体活性化に対する候補モジュレーターの効果は、細胞表面へのβ−アレスチンの動員を監視することによって評価することができる。これは、標識化されたβ−アレスチン融合タンパク質（例えば、β−アレスチン−緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ））を細胞中にトランスフェクトすること、およびその分布を共焦点顕微鏡法を利用して監視することによって頻繁に実施されている（例えば、Ｇｒｏａｒｋｅら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４（３３）：２３２６３〜６９（１９９９）参照）。
【００６９】
受容体の細胞内移行アッセイを利用して、受容体の機能を評価することもできる。リガンドが結合すると、Ｇタンパク質共役型受容体−リガンド複合体は、クラスリン被覆小胞のエンドサイトーシス過程によって細胞膜から細胞内に移行され；受容体上の細胞内移行モチーフは、アダプタータンパク質複合体に結合し、活性化された受容体のクラスリン被覆小孔および小胞中への動員を仲介する。活性化された受容体のみが細胞内に移行するので、細胞内に移行した受容体の量を測定することによってリガンド−受容体の結合を検出することが可能である。１つのアッセイフォーマットにおいて、細胞は、放射能標識化受容体で一時的にトランスフェクトされ、リガンド結合および受容体の細胞内移行を可能にするのに適した時間インキュベートされる。その後、表面に拘束された放射能を、酸溶液で洗浄することによって除去し、細胞を可溶化し、細胞内に移行した放射能の量を、リガンド結合のパーセンテージとして計算する。例えば、Ｖｒｅｃｌら、Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１２：１８１８〜２９（１９８８）およびＣｏｎｗａｙら、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．１８９（３）：３４１〜５５（２００１）を参照されたい。さらに、受容体細胞内移行の手段は、生存細胞におけるＧＰＣＲと他の細胞要素との相互作用をリアルタイムで光学的に測定することを可能にした（例えば、Ｂａｒａｋら、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５１（２）１７７〜８４（１９９７）参照）。モジュレーターを、対照細胞、および候補化合物と接触した細胞における受容体の細胞内移行レベルを比較することによって識別することができる。
【００７０】
生存細胞中でのＧＰＣＲ−タンパク質の相互作用を評価するのに使用できるもう１つの技術は、生物発光共鳴エネルギー移動（ＢＲＥＴ）に関連する。ＢＲＥＴに関する詳細な考察は、Ｋｒｏｅｇｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（１６）：１２７３６〜４３（２００１）中に見出すことができる。
【００７１】
Ｇタンパク質への受容体刺激性グアノシン５’−Ｏ−（γ−チオ）−三リン酸（［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ）の結合も、ＧＰＣＲのモジュレーターを評価するためのアッセイとして使用することができる。［３５Ｓ］ＧＴＰγＳは、すべてのタイプのＧタンパク質に対して高い親和性を有し、高い比活性で利用可能であり、非結合形態では不安定であるが、Ｇタンパク質に結合されていると加水分解されない放射能標識化ＧＴＰ類似体である。したがって、例えば液体シンチレーションカウンターを利用して、刺激された［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合を刺激されていない結合と対比することによってリガンドが結合した受容体を定量的に評価することが可能である。受容体−リガンド相互作用の阻害剤は、［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合の低下をもたらす。［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合アッセイの説明は、ＴｒａｙｎｏｒおよびＮａｈｏｒｓｋｉ、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４７（４）：８４８〜５４（１９９５）ならびにＢｏｈｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ４０８：７２０〜２３（２０００）中に提供されている。
【００７２】
モジュレーターがリガンドで誘導されるイオン流動に影響を及ぼす能力を測定することもできる。イオン流動は、ＧＰＣＲを発現している細胞または膜の分極（すなわち、電位）変化を測定することによって評価することができる。細胞分極の変化を測定するための１つの手段は、電圧クランプおよびパッチクランプ技術、例えば、「細胞接着」方式、［インサイド−アウト］方式、および「全細胞」方式で電流変化を測定すること（それによって、分極変化を測定すること）にある（例えば、Ａｃｋｅｒｍａｎら、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３６：１５７５〜１５９５（１９９７）参照）。全細胞電流は、好都合には、標準的な方法を使用して測定される（例えば、Ｈａｍｉｌら、ＰＦｌｕｇｅｒｓ．Ａｒｃｈｉｖ．３９１：８５（１９８１）参照）。その他の公知のアッセイとしては、放射能標識化イオン流動アッセイ、および電圧感受性色素を使用する蛍光アッセイが挙げられる（例えば、Ｖｅｓｔｅｒｇａｒｒｄ−Ｂｏｇｉｎｄら、Ｊ．Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｂｉｏｌ．８８：６７〜７５（１９８８）；ＧｏｎｚａｌｅｓおよびＴｓｉｅｎ、Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．４：２６９〜２７７（１９９７）；Ｄａｎｉｅｌら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｍｅｔｈ．２５：１８５〜１９３（１９９１）；Ｈｏｌｅｖｉｎｓｋｙら、Ｊ．Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １３７：５９〜７０（１９９４）参照）。一般に、試験予定の化合物は、１ｐＭ〜１００ｍＭの範囲で存在する。
【００７３】
Ｇタンパク質共役型受容体に関するアッセイには、限定はされないが、受容体の活性を報告するためにイオンまたは電圧感受性色素が負荷された細胞が含められる。このような受容体の活性を測定するためのアッセイは、また、他のＧタンパク質共役型受容体のための既知のアゴニストおよびアンタゴニスト、ならびに被試験化合物の活性を評価するための陰性または陽性対照としての本明細書に記載の天然リガンドを使用することができる。モジュレート性化合物（例えば、アゴニスト、アンタゴニスト）を同定するためのアッセイにおいて、細胞質中でのイオンレベルまたは膜電位の変化は、それぞれ、イオン感受性指示薬または膜電位蛍光指示薬を使用して監視される。採用できるイオン感受性指示薬および電位プローブの中には、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ社の１９９７年カタログ中に開示のものがある。Ｇタンパク質共役型受容体の場合、Ｇα１５およびＧα１６などの非特異的（ｐｒｏｍｉｓｃｕｏｕｓ）Ｇタンパク質を選択してアッセイに使用することができる（Ｗｉｌｋｉｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：１００４９〜１００５３（１９９１））。このような非特異的Ｇタンパク質は、異種細胞において、広範な範囲の受容体をシグナル伝達経路へカップリングすることを可能にする。
【００７４】
前に言及したように、リガンドの結合による受容体の活性化は、典型的には、後に続く細胞内事象、例えば、カルシウムイオンの細胞内蓄積を放出する、ＩＰ３などのセカンドメッセンジャーの増加を引き起こす。一部のＧタンパク質共役型受容体の活性化は、ホスファチジルイノシトールのホスホリパーゼＣ介在性加水分解を介するイノシトール三リン酸（ＩＰ３）の形成を刺激する（ＢｅｒｒｉｄｇｅおよびＩｒｖｉｎｅ、Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：３１５〜２１（１９８４））。次いで、ＩＰ３は、細胞内カルシウムイオン蓄積の放出を刺激する。したがって、細胞質カルシウムイオンレベルの変化、またはＩＰ３などのセカンドメッセンジャーレベルの変化を利用して、Ｇタンパク質共役型受容体の機能を評価することができる。このようなＧタンパク質共役型受容体を発現する細胞は、細胞内蓄積およびイオンチャネルの活性化の双方からの寄与の結果として細胞質カルシウムレベルの増加を示す可能性があり、この場合、内部蓄積からのカルシウム放出に由来する蛍光応答を区別するために、ＥＧＴＡなどのキレート化剤で場合により補足されたカルシウム不含緩衝液中でこのようなアッセイを実施することが、必須ではないが望ましいことがある。
【００７５】
他のアッセイは、リガンドの結合により活性化された場合に、アデニル酸シクラーゼなどの下流エフェクターを活性化または阻害することによる細胞内環状ヌクレオチド、例えば、ｃＡＭＰまたはｃＧＭＰのレベル変化をもたらす受容体の活性を測定することを含むことができる。一実施形態において、細胞内ｃＡＭＰまたはｃＧＭＰの変化は、イムノアッセイを使用して測定することができる。ＯｆｆｅｒｍａｎｎｓおよびＳｉｍｏｎ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：１５１７５〜１５１８０（１９９５）に記載の方法を利用して、ｃＡＭＰのレベルを測定することができる。また、Ｆｅｌｌｅｙ−Ｂｏｓｃｏら、Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐ．Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１１：１５９〜１６４（１９９４）に記載の方法を利用してｃＧＭＰのレベルを測定することができる。さらに、ｃＡＭＰおよび／またはｃＧＭＰを測定するためのアッセイキットが、参照によって本明細書に組み入れる米国特許第４，１１５，５３８号に記載されている。
【００７６】
別の実施形態において、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）の加水分解を、参照によって本明細書に組み入れる米国特許第５，４３６，１２８号により分析することができる。簡潔には、該アッセイは、細胞を３Ｈ−ミオイノシトールで４８時間以上標識することを含む。標識された細胞を、化合物で１時間処理する。処理された細胞を、溶解し、クロロホルム−メタノール−水で抽出し、その後、イノシトールリン酸を、イオン交換クロマトグラフィーで分離し、シンチレーション計数により定量する。刺激倍率は、アゴニストの存在下での１分当たり計数値（ｃｐｍ）の対照緩衝液の存在下でのｃｐｍに対する比率を計算することによって求められる。同様に、阻害倍率は、アンタゴニストの存在下でのｃｐｍの対照緩衝液（アゴニストを含んでいても含まなくてもよい）の存在下でのｃｐｍに対する比率を計算することによって求められる。
【００７７】
別の実施形態において、転写レベルを測定して、リガンドで誘導されるシグナル伝達に対する試験化合物の効果を評価することができる。注目のタンパク質を含む宿主細胞を試験化合物と、天然リガンドの存在下で任意の相互作用をもたらすのに十分な時間接触させ、次いで、遺伝子発現のレベルを測定する。このような相互作用をもたらすための時間は、ある経時変化（ｔｉｍｅ  ｃｏｕｒｓｅ）を実行することおよび転写レベルを時間の関数として測定することなどによって、経験的に決定することができる。転写量は、当業者にとって適切であることが知られている任意の方法を利用することによって測定することができる。例えば、注目のタンパク質に関するｍＲＮＡの発現は、ノーザンブロットを利用して検出することができ、あるいはそれらのポリペプチド産物を、イムノアッセイを利用して同定することができる。別法として、レポーター遺伝子を使用する転写をベースにしたアッセイを、参照によって本明細書に組み入れる米国特許第５，４３６，１２８号に記載のように使用することができる。レポーター遺伝子は、例えば、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、ホタルルシフェラーゼ、細菌ルシフェラーゼ、β−ガラクトシダーゼ、およびアルカリホスファターゼでよい。さらに、注目のタンパク質を、緑色蛍光タンパク質などのセカンドレポーターへの接着を介する間接的レポーターとして使用することができる（例えば、ＭｉｓｔｉｌｉおよびＳｐｅｃｔｏｒ、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １５：９６１〜９６４（１９９７）参照）。
【００７８】
次いで、転写量を、試験化合物の不在下での同一細胞中での転写量と比較するか、あるいは、注目のタンパク質を欠く実質上同一の細胞中での転写量と比較することができる。実質上同一の細胞は、その細胞から組換え細胞が調製されるが、異種ＤＮＡの導入によって改変されていない同じ細胞から誘導することができる。転写量のなんらかの相違は、試験化合物が、いくつかの方式で注目のタンパク質の活性を変化させたことを示す。
【００７９】
ＧＰＣＲアンタゴニストで処理されたサンプルを、天然リガンドを含むが試験化合物を含まない対照サンプルと比較して、モジュレーションの程度を調べる。対照サンプル（活性化因子または阻害剤で処理されていない）に、１００の相対ＧＰＣＲ活性値を割り当てる。ＧＰＣＲの阻害は、ＧＰＣＲ活性値が対照に比較して約９９％、９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、７０％、６０％、５０％または２５％である場合に達成される。ＧＰＣＲの活性化は、ＧＰＣＲ活性値が対照に比較して１１０％、１５０％、２００〜５００％、または１０００〜２０００％である場合に達成される。
【００８０】
β−アレスチン／ＧＲＫ介在性シグナル伝達の測定
化合物がＡＴ１アンジオテンシン受容体を介してβ−アレスチン／ＧＲＫ介在性シグナル伝達を活性化する能力は、ＡＴ１アンジオテンシン受容体を介するβ−アレスチン／ＧＲＫ介在性シグナル伝達、またはこのようなシグナル伝達の不在を検出するのに使用される当技術分野で公知の任意のアッセイを使用して測定することができる。一般に、活性化されたＧＰＣＲは、受容体のＣ末端尾部（および恐らくはその他の部位をも）をリン酸化するキナーゼのための基質になる。したがって、アンタゴニストは、γ標識化ＧＴＰから受容体への３２Ｐの移行を阻害し、このことを、シンチレーションカウンターを用いてアッセイすることができる。Ｃ末端尾部のリン酸化は、アレスチン様タンパク質の結合を促進し、Ｇタンパク質の結合を妨害する。キナーゼ／アレスチン経路は、多くのＧＰＣＲ受容体の脱感作においてカギとなる役割を演じる。
【００８１】
ＧＰＣＲが介在するβ−アレスチン機能の近位事象は、リガンドの結合に続く受容体への動員、およびＧＲＫによる受容体のリン酸化である。したがって、β−アレスチンの動員の測定を利用して、β−アレスチンの機能に対するリガンドの有効性を判定した。
【００８２】
ペプチド、誘導体および模倣体
明細書および特許請求の範囲中で使用される用語「ペプチジル」および「ペプチド性」は、本発明の実施形態によるペプチドの活性誘導体、変異体、および／または模倣体を包含すると解釈される。ペプチド性化合物は、本発明の実施形態によるペプチドの構造的に類似した生物活性等価体である。「構造的に類似した生物活性等価体」とは、実質上等価な治療効果をもたらすと確認された生物活性ペプチドの構造に十分に類似した構造を有するペプチジル化合物を意味する。例えば、ペプチドのアミノ酸配列に由来する、またはペプチドのアミノ酸配列骨格を有するペプチド性化合物は、該ペプチドの構造的に類似した生物活性等価体と見なされる。
【００８３】
用語「変異体」は、あるタンパク質またはペプチドのアミノ酸配列と比較した場合に、１つまたはそれ以上（すなわち、１、２、３、４など）のアミノ酸の置換、欠失および／または挿入が存在するタンパク質またはポリペプチドを指し、あるタンパク質またはペプチドの天然に存在する対立遺伝子変異体または代わりのスプライス変異体を包含する。用語「変異体」は、ペプチド配列中での１つまたはそれ以上のアミノ酸の類似または相同アミノ酸、または非類似アミノ酸での置き換えを含む。一部の変異体は、アミノ酸位置のうちの１つまたはそれ以上でのアラニン置換を含む。その他の置換は、タンパク質全体の正味電荷、極性、または疎水性にほとんどまたは全く影響を及ぼさない保存的置換を含む。保存的置換を下表に示す。一部の実施形態によれば、ペプチドまたはペプチド模倣体は、本明細書に記載の実施形態のアミノ酸またはアミノ酸類似体の配列と少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、８８％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を有する。
【００８４】
保存的アミノ酸配列
【表６】
2015506960.tif 000007
【００８５】
下表は、アミノ酸置換の別のスキームを示す：
【表７】
2015506960.tif 000008
【００８６】
他の変異体は、ａ）例えばシートまたはヘリックス配座のような置換領域中のポリペプチド骨格構造、（ｂ）標的部位の分子の電荷または疎水性、または（ｃ）側鎖の嵩高さを維持することに対するそれらの効果においてより有意に相違する残基を選択することなど、より保存的でないアミノ酸置換からなることができる。一般に、機能に対してより有意な効果を有すると予想される置換は、ａ）グリシンおよび／またはプロリンが、別のアミノ酸で置き換えられている、欠失または挿入されている置換、（ｂ）親水性残基、例えば、セリルまたはトレオニルが、疎水性残基、例えばロイシル、イソロイシル、フェニルアラニル、バリルまたはアラニルの代わりになっている（またはそれらの疎水性残基で置換されている）置換、（ｃ）システイン残基が、任意のその他の残基の代わりになっている（またはそれらのその他の残基で置換されている）置換、（ｄ）正に帯電した側鎖を有する残基、例えば、リシル、アルギニルまたはヒスチジルが、負電荷を有する残基、例えば、グルタミルまたはアスパルチルの代わりになっている（またはそれらの負電荷を有する残基で置換されている）置換、または（ｅ）嵩高い側鎖を有する残基、例えば、フェニルアラニンが、このような側鎖を有さない残基、例えばグリシンの代わりになっている（またはそれら側鎖を有さない残基で置換されている）置換である。その他の変異体としては、新規なグリコシル化および／またはリン酸化の部位を生じるように設計されたもの、または存在するグリコシル化および／またはリン酸化の部位を欠失するように設計されたものが挙げられる。変異体は、グリコシル化部位、タンパク分解開裂部位、および／またはシステイン残基に、少なくとも１つのアミノ酸置換を含む。変異体は、また、リンカーペプチド上のタンパク質またはペプチドのアミノ酸配列の前後に、さらなるアミノ酸残基を有するタンパク質およびペプチドも包含する。用語「変異体」は、また、アミノ酸配列の３’または５’末端のどちらか、あるいはその双方に隣接する、少なくとも１〜２５個まで（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０個）のさらなるアミノ酸を含む本発明の実施形態のタンパク質／ペプチドのアミノ酸配列を有するポリペプチドを包含する。
【００８７】
用語「変異体」は、また、２つのポリペプチドのアミノ酸の位置における類似性を比較するのに一般的に使用される標準的方法によって測定した場合に、本明細書に記載の本発明の実施形態のタンパク質のそのアミノ酸配列において少なくとも６０〜９９％（例えば、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、９８、９９％、両端を含めて）同一であるタンパク質を指す。２つのタンパク質の間の類似性または同一性の程度は、公知の方法により容易に計算することができる。同一性を求めるための方法は、試験される配列の間に最多の一致を与えるように設計される。同一性および類似性を求めるための方法は、公に利用可能なコンピュータプログラムの状態で編成されている。変異体は、場合に応じて、比較のタンパク質またはペプチドと比較して、典型的には１つまたはそれ以上（例えば、２、３、４，５など）のアミノ酸の置換、欠失、および／または挿入を有する。
【００８８】
関連するペプチドの同一性および類似性は、公知の方法により容易に計算することができる。このような方法としては、限定はされないが、Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．編、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８８）；Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｐｒｏｊｅｃｔｓ、Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｗ．編、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９３）；Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄａｔａ，Ｐａｒｔ  １，Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ａ．Ｍ．およびＧｒｉｆｆｉｎ，Ｈ．Ｇ．編、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ（１９９４）；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｎ  Ｈｅｉｎｊｅ，Ｇ．、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ（１９８７）；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐｒｉｍｅｒ，Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｍ．およびＤｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．編、Ｍ．Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９１）；およびＣａｒｉｌｌｏら、ＳＩＡＭ  Ｊ．Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍａｔｈ．，４８：１０７３（１９８８）中に記載の方法が挙げられる。
【００８９】
一部の実施形態において、同一性および／または類似性を求めるための方法は、試験される配列の間で最多の一致を与えるように設計される。同一性および類似性を求めるための方法は、公に利用可能なコンピュータプログラムの状態で記載されている。一部の実施形態において、２つの配列の間の同一性および類似性を求めるためのコンピュータプログラム法としては、限定はされないが、ＧＡＰ（Ｄｅｖｅｒｅｕｘら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．，１２：３８７（１９８４）；Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．，ＢＬＡＳＴＰ，ＢＬＡＳＴＮ，ａｎｄ  ＦＡＳＴＡ（Ａｌｔｓｃｈｕｌら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２１５：４０３〜４１０（１９９０））をはじめとするＧＣＧプログラムパッケージが挙げられる。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）およびその他の供給源から公に利用可能である（ＢＬＡＳＴマニュアル、Ａｌｔｓｃｈｕｌら、ＮＣＢ／ＮＬＭ／ＮＩＨ  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．２０８９４；Ａｌｔｓｃｈｕｌら、同上（１９９０））。周知のＳｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎアルゴリズムを利用して、同一性を求めることができる。ペプチド間の類似性を求めるには、ＢＬＡＳＴＰを、小さなサイズのペプチドを考慮に入れたデフォルト設定で使用することができる。
【００９０】
２つのアミノ酸配列を整列するためのある特定の整列スキームは、２つの配列の短い領域のみの一致をもたらすことができ、この小さな整列領域は、２つの完全長配列の間に有意な関係が存在しなくても、極めて高い配列同一性を有する可能性がある。したがって、一部の実施形態において、選択された整列方法（ＧＡＰプログラム）は、標的ポリペプチドの少なくとも８、１０、２０、３０、４０または５０個の連続したアミノ酸スパンの整列をもたらす。
【００９１】
例えば、コンピュータアルゴリズムＧＡＰ（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．）を使用して、配列のパーセント同一性を求める予定の２つのポリペプチドを、それらのそれぞれのアミノ酸の最適な一致のために整列する（アルゴリズムにより求められるような「一致スパン」）。ギャップ開放ペナルティ（平均対角成分の３倍として計算され；「平均対角成分」は、使用される比較行列の対角成分の平均であり；「対角成分」は、特定の比較行列によりそれぞれの完全アミノ酸一致に割り当てられたスコアまたは数である）、およびギャップ伸長ペナルティ（通常は、ギャップ開放ペナルティの１／１０倍である）、ならびにＰＡＭ２５０またはＢＬＯＳＵＭ６２などの比較行列が、アルゴリズムと一緒に使用される。標準的な比較行列（ＰＡＭ２５０比較行列にはＤａｙｈｏｆｆら、Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，５（３）（１９７８）；ＢＬＯＳＵＭ６２比較行列にはＨｅｎｉｋｏｆｆら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ，８９：１０９１５〜１０９１９（１９９２））も、アルゴリズムにより使用される。一部の実施形態において、ポリペプチドの配列比較のためのパラメーターとしては、次のものが挙げられる：アルゴリズム：Ｎｅｅｄｌｅｍａｎら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，４８：４４３〜４５３（１９７０）；比較行列：Ｈｅｎｉｋｏｆｆら、同上（１９９２）からのＢＬＯＳＵＭ６２；ギャップペナルティ：１２；ギャップ長ペナルティ：４；類似性の閾値：０。ＧＡＰプログラムは、上記パラメーターで使用することができる。前記パラメーターは、ＧＡＰアルゴリズムを使用してポリペプチドを比較するためのデフォルトパラメーター（末端ギャップに対するペナルティを含まない）である。
【００９２】
当業者は、その他の典型的なアルゴリズム、ギャップ開放ペナルティ、ギャップ伸長ペナルティ、比較行列、類似性の閾値などを、プログラムマニュアル、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｐａｃｋａｇｅ、バージョン９、１９９７年９月中に示されたものを含めて使用することができる。なされる予定の個々の選択は、当業者にとって明らかであり、ＤＮＡ対ＤＮＡ、タンパク質対タンパク質、タンパク質対ＤＮＡなどなされる予定の具体的比較、さらには所定の配列対の間に（この場合、ＧＡＰまたはＢｅｓｔＦｉｔが一般は使用される）、または１つの配列と大きな配列データベースとの間に比較が存在するかどうか（この場合、ＦＡＳＴまたはＢＬＡＳＴＡが使用される）によって決まる。
【００９３】
本発明の実施形態の化合物は、本明細書に記載の一般式の１つを有する化合物、さらにはその誘導体および／または模倣体を包含する。
【００９４】
用語「誘導体」は、プロセッシングおよびその他の翻訳後修飾などの自然なプロセスによるだけではなく、例えば１つまたはそれ以上のポリエチレングリコール分子、糖、ホスフェートおよび／またはその他のこのような分子（ここで、分子または分子（複数）は、野生型のタンパク質に自然に付着していることはない）の付加によるような化学修飾技術によって化学的に修飾された、化学修飾タンパク質またはポリペプチドを指す。誘導体は、塩を包含する。このような化学修飾は、基本的なテキストおよびより詳細なモノグラフ、ならびに膨大な研究文献中に詳しく記載されており、それらは、当業者にとって周知である。同じタイプの修飾が、所定のタンパク質またはポリペプチド中のいくつかの部位に同じまたは異なる程度で存在できることが認識されるであろう。また、所定のタンパク質またはポリペプチドは、多くのタイプの修飾を含むことができる。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖、およびアミノまたはカルボキシル末端を含め、タンパク質またはポリペプチドの任意の場所に存在することができる。修飾としては、例えば、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、共有結合によるフラビンの付着、共有結合によるヘム部分の付着、共有結合によるヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の付着、共有結合による脂質または脂質誘導体の付着、共有結合によるホスファチジルイノシトールの付着、架橋、環化、ジスルフィド結合、脱メチル化、共有結合による架橋の形成、システインの形成、ピログルタメートの形成、ホルミル化、γ−カルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカーの形成、ヒドロキシル化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解処理、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、グリコシル化、脂質付着、硫酸化、グルタミン酸残基のγ−カルボキシル化、ヒドロキシル化およびＡＤＰ−リボシル化、セレノイル化、アミノ酸のタンパク質への転移ＲＮＡ介在性付加、例えば、アルギニル化およびユビキチン化が挙げられる。例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎｓ−Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、第２版、Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９３）；およびＰｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｖａｌｅｎｔ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ、Ｂ．Ｃ．Ｊｏｈｎｓｏｎ編、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８３）中のＷｏｌｄ，Ｆ．「Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ：Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ」１〜１２頁；Ｓｅｉｆｔｅｒら、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１８２：６２６〜６４６（１９９０）；およびＲａｔｔａｎら、「Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ａｇｉｎｇ」Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．６６３：４８〜６２（１９９２）を参照されたい。用語「誘導体」は、分枝を伴ってまたは伴わないで、分枝状または環状になるタンパク質またはポリペプチドをもたらす化学修飾を包含する。環状、分枝状、および分枝環状の���ンパク質またはポリペプチドは、翻訳後の自然な処理に由来する可能性があり、および全合成法で作成することもできる。
【００９５】
一部の実施形態によれば、化合物は、Ｎ末端が、−ＮＲＲ１基に、−ＮＲＣ（＝Ｏ）Ｒ基に、−ＮＲＣ（＝Ｏ）ＯＲ基に、−ＮＲＳ（Ｏ）２Ｒ基に、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ基（ここで、ＲおよびＲ１は水素または低級アルキルであり、但し、ＲおよびＲ１は、双方が水素であることはない）に、スクシンイミド基に、ベンジルオキシカルボニル−ＮＨ−（ＣＢｚ−ＣＨ−）基に、またはフェニル環上に低級アルキル、低級アルコキシ、クロロおよびブロモからなる群から選択される１〜３個の置換基を有するベンジルオキシカルボニル−ＮＥ−基に誘導体化されている化合物を場合により包含することができる。
【００９６】
一部の実施形態によれば、化合物は、Ｃ末端が、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ２（ここで、Ｒ２は、低級アルコキシからなる群から選択される）に、および−ＮＲ３Ｒ４（ここで、Ｒ３およびＲ４は、水素および低級アルキルからなる群から独立に選択される）に誘導体化されている化合物を場合により包含することができる。
【００９７】
用語「ペプチド模倣体」または「模倣体」は、あるペプチドまたはタンパク質の生物学的活性を模倣しているが、化学的本質においてもはやペプチド性ではない生物学的に活性な化合物を指し、すなわち、それらは、もはやいかなるペプチド結合（すなわち、アミノ酸の間のアミド結合）も含まない。ここで、用語「ペプチド模倣体」は、プソイド−ペプチド、セミ−ペプチドおよびペプトイドのように本質的にはもはや完全にペプチド性ではない分子を包含するように、より広義的に使用される。このより広義的なペプチド模倣体（ここで、ペプチドの一部は、ペプチド結合を欠く構造で置き換えられている）の例を後記する。実施形態による完全または部分非ペプチド、ペプチド模倣体は、いずれにせよ、該ペプチド模倣体がベースとするペプチド中の活性基の三次元配置に密接に類似する反応性化学部分の空間配置を提供する。この類似した活性部位の幾何学的形状の結果として、ペプチド模倣体は、生物学的系に対して、ペプチドの生物学的活性に類似した効果を有する。
【００９８】
ペプチドおよびペプチド模倣体は、限定はされないが、約８〜約２５個、約８〜約２０個、約８〜約１５個、約８〜約１２個、約８〜約１０個、約８〜約９個、約９〜約２５個、約９〜約２０個、約９〜約１８個、約９〜約１５個、約９〜約１４個、約９〜約１２個、約１０〜約２５個、約１０〜約２０個、約１０〜約１５個、約１０〜約１４個、約１０〜約１２個、約１２〜約２５個、または約１２〜約２０個を有するものが挙げられる。一部の実施形態において、ペプチドまたはペプチド模倣体は、本明細書に記載のペプチドまたはペプチド模倣体の残基の間に挿入されたスペーサーを含む。一部の実施形態において、スペーサーは、本明細書に記載のペプチドまたはペプチド模倣体中に存在するアミノ酸またはアミノ酸類似体のうちの１つまたはそれ以上の間に挿入される１〜３個のアミノ酸またはアミノ酸類似体である。一部の実施形態において、スペーサーを含むペプチドの全長は、約８〜約２５個、約８〜約２０個、約８〜約１５個、約８〜約１２個、約８〜約１０個、約８〜約９個、約９〜約２５個、約９〜約２０個、約９〜約１８個、約９〜約１５個、約９〜約１４個、約９〜約１２個、約１０〜約２５個、約１０〜約２０個、約１０〜約１５個、約１０〜約１４個、約１０〜約１２個、約１２〜約２５個、または約１２〜約２０個のアミノ酸またはアミン酸類似体の長さである。
【００９９】
一部の実施形態において、実施形態のペプチド模倣体は、三次元形状および生物学的活性の双方で本明細書に記載のペプチドに実質上類似している。一部の実施形態によれば、ペプチド模倣体は、化合物の一方または双方の末端に保護基、および／または１つまたはそれ以上のペプチド結合の非ペプチド結合での置き換えを有する。このような修飾は、化合物を該化合物自体に比べてタンパク質分解性開裂を受けにくくすることができる。例えば、１つまたはそれ以上のペプチド結合を、代わりのタイプの共有結合（例えば、炭素−炭素結合またはアシル結合）で置き換えることができる。ペプチド模倣体は、また、ｔ−ブチルオキシカルボニル、アセチル、アルキル、スクシニル、メトキシスクシニル、スベリル、アジピル、アゼライル、ダンシル、ベンジルオキシカルボニル、フルオレニルメトキシカルボニル、メトキシアゼライル、メトキシアジピル、メトキシスベリル、および２，４−ジニトロフェニルなどのアミノ末端またはカルボキシル末端のブロック基を組み込み、それによって、模倣体を、タンパク質分解を受けにくくすることができる。非ペプチド結合およびカルボキシまたはアミノ末端ブロック基を単独でまたは組み合わせて使用して、模倣体を、対応するペプチド／化合物に比べてタンパク質分解を受けにくくすることができる。さらに、通常のＬ−立体異性体をＤ−アミノ酸で置換することにより、例えば分子の半減期の増大をもたらすことができる。
【０１００】
したがって、一部の実施形態によれば、化合物は、ペプチジル［−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ−］連結（結合）のうちの１つまたはそれ以上が、ペプチド結合（−ＣＯ−ＮＨ−）を置き換える−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２−ＳＯ−、−ＣＨ２−ＳＯ２−、−ＮＨ−ＣＯ−、または−ＣＨ＝ＣＨ−などの非ペプチジル連結で置き換えられたプソイドペプチドを場合により含むことができる。一部の実施形態によれば、化合物は、ペプチジル［−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ−］連結（結合）のうちの１つまたはそれ以上が、−ＣＨ２−カルバメート連結［−ＣＨ２−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ−］、ホスホネート連結、−ＣＨ２−スルホンアミド［−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ−］連結、ウレア［−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−］連結、−ＣＨ２−第二級アミン連結、またはアルキル化ペプチジル連結［−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ６−（ここで、Ｒ６は低級アルキルである）］で置き換えられたプソイドペプチドを場合により含むことができる。一部の模倣体は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−連結のゼロからすべてがプソイドペプチドで置き換えられている。
【０１０１】
当技術分野で公知のペプチドを構造的に修飾してペプチド模倣体を作り出すための方法の例には、とりわけＮ末端で、活性に有害な影響を与えることなしにタンパク質分解性分解に関する安定性の増大につながる可能性のあるＤ−アミノ酸残基構造をもたらす、骨格キラル中心の反転が含まれる。一例が、論文「Ｔｒｉｔｒｉａｔｅｄ  Ｄ−ａｌａ１−Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔ  Ｂｉｎｄｉｎｇ」Ｓｍｉｔｈ  Ｃ．Ｓ．ら、Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｒｅｓ．，１５，ｐｐ．３７１〜３７９（１９８８）中に示されている。第二の方法は、安定性のために、ＮからＣへの鎖間イミドおよびラクタムなどの環状構造を変化させることである（Ｅｄｅら、ＳｍｉｔｈおよびＲｉｖｅｒ（編）「Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ」Ｅｓｃｏｍ，Ｌｅｉｄｅｎ（１９９１），ｐｐ．２６８〜２７０）。この例は、その開示を参照によってその全体で本明細書に組み入れるＧｏｌｄｓｔｅｉｎ，Ｇ．らの米国特許第４，４５７，４８９号（１９８５）中に開示されたような、立体配座的に制限されたチモペンチン様化合物において示される。第三の方法は、ペプチド中のペプチド結合を、タンパク質分解に対する抵抗性を付与するプソイドペプチド結合で置き換えることである。−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２−ＳＯ−、−ＣＨ２−ＳＯ２−、−ＮＨ−ＣＯ−または−ＣＨ＝ＣＨ−などのプソイドペプチド結合を含むペプチドの合成は、有機化学の標準的な方法を利用する、溶液法によって、または固相合成と組み合わせた方法で実施される。したがって、例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−結合の導入は、ＦＥＨＲＥＮＴＺおよびＣＡＳＴＲＯによって発表された技術（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，６７６〜６７８，１９８３）により、溶液中でアルデヒドＦｍｏｃ−ＮＨ−ＣＨＲ−ＣＨＯを調製すること、ならびにそれを、ＳＡＳＡＫＩおよびＣＯＹによって発表された技術（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，８，１１９〜１２１，１９８８）により固相上または溶液中で成長しているペプチド鎖と縮合させることによって完遂される。
【０１０２】
医薬組成物／製剤
本明細書に記載の実施形態で使用するための医薬組成物は、１種またはそれ以上の生理学上許容される担体または添加剤を使用する標準的な技術によって製剤化することができる。一部の実施形態において、製剤は、緩衝剤および／または保存剤を含むことができる。化合物およびそれらの生理学上許容される塩および溶媒和物は、吸入、局所、経鼻、経口、非経口（例えば、静脈内、腹腔内、膀胱内または髄腔内）または経直腸を含む任意の適切な経路による投与のために、１種またはそれ以上の薬学上許容される担体を含むビヒクル中で製剤化することができ、その割合は、ペプチドの溶解度および化学的性質、選択した投与経路、および標準的な生物学的慣例によって決定される。
【０１０３】
一部の実施形態によれば、医薬組成物は、有効量の本明細書に記載の１種またはそれ以上の化合物と、例えば、薬学上許容される賦形剤、保存剤、可溶化剤、乳化剤、補助剤、および／またはその他の担体とを含んで提供される。このような組成物は、種々の緩衝剤成分（例えば、ＴＲＩＳまたはその他のアミン、炭酸塩、リン酸塩、アミノ酸、例えば、グリシンアミド塩酸塩（特に、生理学的ｐＨ範囲の）、Ｎ−グリシルグリシン、リン酸ナトリウムまたはカリウム（二塩基性、三塩基性）など、またはＴＲＩＳ−ＨＣｌもしくは酢酸塩）、ｐＨおよびイオン強度の賦形剤；洗浄剤および可溶化剤（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、Ｔｗｅｅｎ２０、Ｔｗｅｅｎ８０（ポリソルベート８０）、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ、ポリオール、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなどのなどの界面活性剤）、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム）、保存剤（例えば、Ｔｈｉｍｅｒｓｏｌ、ベンジルアルコール、パラベンなど）、および増量物質（例えば、蔗糖、乳糖、マンニトールなどの糖類、ポリビニルピロリドンまたはデキストランなどのポリマー）などの添加物；および／または材料のポリ乳酸、ポリグリコール酸などのポリマー性化合物の粒子状調合物中への、またはリポソーム中への組込みを含む。ヒアルロン酸を使用することもできる。このような組成物を採用して、本明細書に記載の化合物の物理的状態、安定性、インビボでの放出速度、およびインビボでのクリアランス速度に影響を及ぼすことができる。例えば、参照によって本明細書に組み入れるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版（１９９０、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．１８０４２）１４３５〜１７１２頁を参照されたい。組成物は、例えば、液体形態で調製することができ、あるいは凍結乾燥形態などの乾燥粉末状でもよい。このような組成物を投与する特定の方法は、後で説明する。
【０１０４】
製剤中に緩衝剤を含める場合、該緩衝剤は、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、クエン酸塩、グリシルグリシン、ヒスチジン、グリシン、リシン、アルギニン、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸ナトリウム、およびトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン、またはこれらの混合物からなる群から選択される。これらの特定の緩衝剤のそれぞれ１種は、代わりの実施形態を構成する。一部の実施形態において、緩衝剤は、グリシルグリシン、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸ナトリウム、またはこれらの混合物である。
【０１０５】
製剤中に薬学上許容される保存剤を含める場合、保存剤は、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、２−フェノキシエタノール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸ブチル、２−フェニルエタノール、ベンジルアルコール、クロロブタノール、およびチオメロサール、またはこれらの混合物からなる群から選択される。これらの特定の保存剤のそれぞれ１種は、代わりの実施形態を構成する。一部の実施形態において、保存剤は、フェノールまたはｍ−クレゾールである。
【０１０６】
一部の実施形態において、保存剤は、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌの濃度、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２５ｍｇ／ｍｌの濃度、または約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【０１０７】
医薬組成物中で保存剤を使用することは、当業者にとって周知である。好都合には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃ、第１９版、１９９５が参照される。
【０１０８】
一部の実施形態において、製剤は、さらに、キレート化剤を含むことができ、ここで、キレート化剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸、およびアスパラギン酸、ならびにこれらの混合物の塩から選択することができる。これらの特定のキレート化剤のそれぞれ１種は、代わりの実施形態を構成する。
【０１０９】
一部の実施形態において、キレート化剤は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、キレート化剤は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜２ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、キレート化剤は、２ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【０１１０】
医薬組成物中でのキレート化剤の使用は、当業者にとって周知である。好都合には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第１９版、１９９５が参照される。
【０１１１】
一部の実施形態において、製剤は、さらに、高分子量ポリマーまたは低分子量化合物の群から選択される安定剤を含むことができ、ここで、このような安定剤としては、限定はされないが、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ３３５０）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、種々の塩（例えば、塩化ナトリウム）、Ｌ−グリシン、Ｌ−ヒスチジン、イミダゾール、アルギニン、リシン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、トレオニン、およびこれらの混合物が挙げられる。これらの特定の安定剤のそれぞれ１種は、代わりの実施形態を構成する。一部の実施形態において、安定剤は、Ｌ−ヒスチジン、イミダゾール、およびアルギニンからなる群から選択される。
【０１１２】
一部の実施形態において、高分子量ポリマーは、０．１ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、高分子量ポリマーは、０．１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、高分子量ポリマーは、５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、高分子量ポリマーは、１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、高分子量ポリマーは、２０ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、高分子量ポリマーは、３０ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【０１１３】
一部の実施形態において、低分子量化合物は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、低分子量化合物は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、低分子量化合物は、５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、低分子量化合物は、１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、低分子量化合物は、２０ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態において、低分子量化合物は、３０ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【０１１４】
医薬組成物中での安定剤の使用は、当業者にとって周知である。好都合には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第１９版、１９９５が参照される。
【０１１５】
一部の実施形態において、製剤は、さらに、界面活性剤を含むことができ、ここで、界面活性剤は、洗浄剤、エトキシル化ヒマシ油、ポリグリコール化グリセリド、アセチル化モノグリセリド、ソルビタン脂肪酸エステル、ポロキサマー（１８８および４０７など）、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン誘導体、例えば、アルキル化およびアルコキシル化誘導体（ｔｗｅｅｎ類、例えば、Ｔｗｅｅｎ−２０またはＴｗｅｅｎ−８０）、モノグリセリドまたはそのエトキシル化誘導体、ジグリセリドまたはそのポリオキシエチレン誘導体、グリセロール、コール酸またはその誘導体、レシチン、アルコールおよびリン脂質、グリセロリン脂質（レシチン、ケファリン、ホスファチジルセリン）、グリセロ糖脂質（ガラクトピラノシド）、スフィンゴリン脂質（スフィンゴミエリン）、およびスフィンゴ糖脂質（セラミド、ガングリオシド）、ＤＳＳ（ドクサートナトリウム）、ドクサートカルシウム、ドクサートカリウム、ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）またはラウリル硫酸ナトリウム、ジパルミトイルホスファチジン酸、カプリル酸ナトリウム、胆汁酸およびその塩およびグリシンまたはタウリン複合体、ウルソデオキシコール酸、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、Ｎ−ヘキサデシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アンモニオ−１−プロパンスルホン酸塩、アニオン性（アルキル−アリール−スルホネート）一価界面活性剤、パルミトイルリゾホスファチジル−Ｌ−セリン、リゾリン脂質（例えば、エタノールアミン、コリン、セリンまたはトレオニンの１−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸エステル）、リゾホスファチジルおよびホスファチジルコリンのアルキル、アルコキシ（アルキルエステル）、アルコキシ（アルキルエーテル）−誘導体、例えば、リゾホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリンのラウロイルおよびミリストイル誘導体、およびコリン、エタノールアミン、ホスファチジン酸、セリン、トレオニン、グリセロール、イノシトール、および正に帯電したＤＯＤＡＣ、ＤＯＴＭＡ，ＤＣＰ，ＢＩＳＨＯＰ、リゾホスファチジルセリンおよびリゾホルファチジルトレオニンである極性頭部基の修飾物、双性イオン界面活性剤（例えば、Ｎ−アルキル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニオ−１−プロパンスルホネート、３−コールアミド−１−プロピルジメチルアンモニオ−１−プロパンスルホネート、ドデシルホスホコリン、ミリストイルリゾホスファチジルコリン、鶏卵リゾレシチン）、カチオン性界面活性剤（第四級アンモニウム塩基）（例えば、セチル−トリメチルアンモニウムブロミド、セチルピリジニウムクロリド）、非イオン性界面活性剤、ポリエチレンオキシド／ポリプロピレンオキシドブロックコポリマー（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ／Ｔｅｔｒｏｎｉｃ、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、ドデシルβ−Ｄ−グルコピラノシド）またはポリマー性界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ−４０，Ｔｗｅｅｎ−８０、Ｂｒｉｊ−３５）、フシジン酸誘導体（例えば、タウロ−ジヒドロスシジン酸ナトリウムなど）、Ｃ６〜Ｃ１２の長鎖脂肪酸（例えば、オレイン酸およびカプリル酸）およびその塩、ア��ルカルニチンおよび誘導体、リシン、アルギニンもしくはヒスチジンのＮα−アシル化誘導体、またはリシンもしくはアルギニンの側鎖アシル化誘導体、リシン、アルギニンまたはヒスチジンおよび中性または酸性アミノ酸の任意の組合せを含むジペプチドのＮα−アシル化誘導体、中性アミノ酸と２種の電荷アミノ酸との任意の組合せを含むトリペプチドのＮα−アシル化誘導体から選択することができるか、あるいは界面活性剤は、イミダゾリン誘導体、またはその混合物の群から選択することができる。これらの特定の界面活性剤のそれぞれ１種は、代わりの実施形態を構成する。
【０１１６】
医薬組成物中での界面活性剤の使用は、当業者にとって周知である。好都合には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第１９版、１９９５が参照される。
【０１１７】
一部の実施形態において、薬学上許容される甘味料は、サッカリン、サッカリンナトリウムもしくはカルシウム、アスパルテーム、アセスルファムカリウム、サイクラミン酸ナトリウム、アリテーム、ジヒドロカルコン甘味料、モネリン、ステビオサイドまたはスクラロース（４，１’，６’−トリクロロ−４，１’，６’−トリデオキシガラクトスクロース）、またはサッカリン、サッカリンナトリウムもしくはカルシウムなどの少なくとも１種の強力な甘味料、および場合により、ソルビトール、マンニトール、フルクトース、スクロース、マルトース、イソマルト、グルコース、水素化グルコースシロップ、キシリトール、カラメル、または蜂蜜などのバルク甘味料を含む。
【０１１８】
強力な甘味料は、好都合には、低濃度で採用される。例えば、サッカリンナトリウムの場合、濃度は、最終製剤の全体積を基準にしての０．０４％〜０．１％（ｗ／ｖ）の範囲でよく、一部の実施形態では、低用量製剤で約０．０６％、高用量製剤で約０．０８％である。バルク甘味料は、効果的には、約１０％〜約３５％、または約１０％〜１５％（ｗ／ｖ）の範囲のより多い量で使用することができる。
【０１１９】
製剤は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９８５またはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第１９版、１９９５中に記載の従来の技術により調製することができ、ここで、製薬工業におけるこのような通常的技術は、適切な成分を溶解および混合して、所望の最終製品を得ることを含む。
【０１２０】
表現「薬学上許容される」または「治療上許容される」は、ヒトに投与された場合に、生理学的に耐容性があり、および／または急性胃ぜん動、めまいなどのアレルギー性または類似の有害反応を典型的にはもたらさない、分子実体および組成物を指す。本明細書中で使用する場合、用語「薬学上許容される」は、動物およびとりわけヒトでの使用に関して、連邦政府または州政府の規制当局によって承認されているか、あるいは米国薬局方またはその他の一般的に認知されている薬局方（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、１９８５））中に列挙されていることを意味する。
【０１２１】
化合物の投与は、当技術分野で公知の任意の方法を使用して実施することができる。例えば、投与は、経皮、非経口、静脈内、動脈内、皮下、筋内、頭蓋内、眼窩内、眼内、心室内、嚢内、脊髄内、槽内、腹腔内、脳室内、鞘内、鼻腔内、エアゾール剤、坐剤、または経口での投与でよい。一部の実施形態において、医薬組成物は、注射、または経口、肺、経鼻、経皮、眼内での投与のために存在することができる。
【０１２２】
経口投与の場合には、ペプチドまたはその治療上許容される塩を、カプセル剤または錠剤などの単位剤形に製剤化することができる。錠剤またはカプセル剤は、結合剤、例えば、α化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース；フィラー、例えば、乳糖、微結晶セルロースまたはリン酸水素カルシウム；滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはシリカ；崩壊剤、例えば、馬鈴薯デンプンまたはデンプングリコール酸ナトリウム；または湿潤化剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムをはじめとする、薬学上許容される添加剤を用いる通常的手段で調製することができる。錠剤は、当技術分野で周知の方法で被覆することができる。経口投与のための液状調合物は、例えば、溶液剤、シロップ剤または懸濁剤の形態をとることができるか、あるいはそれらの液状調合物を、使用前に水またはその他の適切なビヒクルを用いて構成するための乾燥製品として提供することができる。このような液状調合物は、薬学上許容される添加物、例えば、懸濁化剤、例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体または水素化食用脂肪；乳化剤、例えば、レシチンまたはアラビアゴム；非水性ビヒクル、例えば、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコールまたは分画植物油；および保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピル、またはソルビン酸を用いる通常的手段で調製することができる。調合物は、また、適切なら、緩衝剤の塩、香味剤、着色剤および／または甘味剤を含むことができる。所望なら、経口投与用の調合物を、活性化合物の制御放出を提供するように適切に製剤化することができる。
【０１２３】
局所投与の場合には、組成物を、薬学上許容されるビヒクル中に０．１〜１０％、または０．５〜５％の活性化合物を含めて製剤することができる。このような製剤は、クリーム剤、ローション剤、舌下錠剤、エアゾール剤および／または乳剤の形態で存在することができ、この目的における当技術分野で従来通りの、マトリックスまたはレザバー型の経皮もしくは頬側パッチに含めることができる。
【０１２４】
非経口投与の場合には、化合物を、薬学上許容されるビヒクルまたは担体と組み合わせて、静脈内、皮下または筋内注射によって投与することができる。化合物は、注射による、例えば、ボーラス注射または連続点滴による非経口投与のために製剤化することができる。注射のための製剤は、単位剤形、例えばアンプルの状態で、または保存剤を添加した複数回投与用容器の状態で提供することができる。化合物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁剤、溶液剤または乳剤のような形態をとることができ、製剤化用薬剤、例えば懸濁化剤、安定剤および／または分散剤を含むことができる。別法として、活性成分は、使用前に適切なビヒクル、例えば、発熱性物質不含の滅菌水を用いて構成するための粉末形態で存在することができる。
【０１２５】
注射により投与する場合には、化合物を、緩衝液または保存剤、および溶液を等張性にするのに十分な量の薬学上許容される塩またはグルコースなどのその他の溶質を含むこともできる滅菌水性ビヒクル中の溶液の状態で使用するのが一般的である。一部の実施形態では、医薬組成物を、薬学上許容される担体を含めて製剤化し、注射可能物質を投与するための滅菌溶液または懸濁液を提供することができる。詳細には、注射可能物質は、通常的な形態で、液状の溶液もしくは懸濁液、注射に先立って液体中に溶解または懸濁するのに適した固形形態として、あるいは乳液として調製することができる。適切な添加剤は、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、マンニトール、乳糖、レシチン、アルブミン、グルタミン酸ナトリウム、システイン塩酸塩などである。さらに、所望なら、注射可能な医薬組成物は、湿潤化剤、ｐＨ緩衝剤など、少量の無毒性補助物質を含むことができる。所望なら、吸収増強性調合物（例えば、リポソーム）を利用することができる。適切な医薬担体は、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」中に記載されている。
【０１２６】
吸入により投与する場合には、化合物を、適切な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素またはその他の適切な気体を使用して加圧容器またはネブライザーからエアゾールスプレー調合物を提供する形態で好都合には送達することができる。加圧エアゾールの場合、投与単位は、計量された量を送達するようにバルブを備えることによって決定することができる。吸入器またはインサフレーター中で使用するための、例えばゼラチンからなるカプセル剤およびカートリッジ剤は、化合物と適切な粉末基剤（例えば、乳糖またはデンプン）との粉末混合物を含めて製剤化することができる。経鼻投与の場合には、化合物を、例えば液状スプレー剤として、粉剤として、または点滴剤の形態で使用することができる。
【０１２７】
化合物は、また、直腸用組成物、例えば従来の坐剤用基剤（例えば、カカオバターまたはその他のグリセリド）を含む、例えば坐剤または留置浣腸の状態で製剤化することができる。
【０１２８】
さらに、化合物は、デポ調合物として製剤化することができる。このような長期作用性製剤は、埋込み（例えば、皮下または筋内）によって、または筋内注射によって投与することができる。したがって、例えば、化合物を、適切なポリマー性もしくは疎水性材料を用いて（例えば、許容されるオイル中の乳液として）、またはイオン交換樹脂を用いて、あるいは難溶性誘導体として、例えば難溶性塩として製剤化することができる。
【０１２９】
組成物は、所望なら、活性成分を含む１つまたはそれ以上の単位剤形を含むことのできる容器またはディスペンサー装置中に準備することができる。容器は、例えば、金属またはプラスチック製の箔、例えばブリスターパックを包含することができる。容器またはディスペンサー装置には、投与のための使用説明書を添付することができる。
【０１３０】
投与量
化合物は、ＧＰＣＲ−リガンドの相互作用が全面的または部分的に介在する疾患および障害を予防、治療または制御するのに治療上有効な用量で患者に投与することができる。化合物のうちの１種またはそれ以上を含む医薬組成物は、患者において効果的な保護または治療応答を誘発するのに十分な量で患者に投与することができる。これを達成するのに十分な量は、「治療有効用量」または「治療有効量」と定義される。
【０１３１】
このような化合物の毒性および治療有効性は、例えば、細胞培養または実験動物における標準的な薬学的手順によって、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％にとって致死的な用量）およびＥＤ５０（集団の５０％にとって治療上有効な用量）を求めることによって、判定することができる。毒性効果と治療効果との間の用量比が、治療指数であり、比率ＬＤ５０／ＥＤ５０として表現することができる。大きな治療指数を示す化合物を使用できる。毒性副作用を示す化合物も使用できるが、このような化合物を罹患組織の部位に向ける送達システムは、正常細胞に対する傷害を最小化し、それによって副作用を低減するように配慮して設計されるべきである。
【０１３２】
細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータを利用して、ヒトで使用するための用量範囲を処方することができる。一部の実施形態において、このような化合物の用量は、毒性をほとんどまたは全く伴わないＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内にある。用量は、この範囲内で、採用される剤形および投与経路に応じて変更することができる。方法中で使用されるいずれの化合物についても、治療有効用量は、最初に、細胞の培養アッセイから推定することができる。用量は、動物モデルにおいて、細胞培養で測定されるようなＩＣ５０（症状の半数阻害を達成する試験化合物の濃度）を含む、循環血漿中濃度範囲を達成するように処方することができる。このような情報を利用して、ヒトにおける有用用量をより正確に決定することができる。血漿中レベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で測定することができる。一般に、モジュレーターの用量当量は、典型的な対照に対して、１ｎｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇである。
【０１３３】
化合物および／またはその薬学上許容される塩の投与量および投与頻度は、患者の年齢、状態および体格、ならびに治療されている症状の重症度のような因子を考慮して、主治医の判断により調節される。通常の技量を有する医師または獣医師は、状態の進行を予防し、逆行させ、または停止させるのに必要とされる薬物の有効量を容易に決定し、処方することができる。一般に、有効量は、０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、とりわけ０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜１ｍｇ／ｋｇ体重であると考えられる。より具体的には、有効量は、１２時間〜１４日間にわたる０．０１μｇ／ｋｇ体重／分〜１００μｇ／ｋｇ体重／分の静脈内投与により連続的に点滴することであると考えられる。必要とされる用量を、一日中、適切な間隔で２回、３回、４回またはそれ以上の分割用量として投与することが適切であることもある。前記の分割用量は、例えば、単位剤形当たり０．０１〜５００ｍｇ、とりわけ０．１ｍｇ〜２００ｍｇの活性成分を含む単位剤形として製剤化することができる。
【０１３４】
一部の実施形態において、ペプチドまたは模倣体は、約０．５μｇ／ｋｇ／分〜約２０μｇ／ｋｇ／分、約０．５μｇ／ｋｇ／分〜約１５μｇ／ｋｇ／分、約０．５μｇ／ｋｇ／分〜約１０μｇ／ｋｇ／分、約０．５μｇ／ｋｇ／分〜約５μｇ／ｋｇ／分、約０．５μｇ／ｋｇ／分〜約４μｇ／ｋｇ／分、約０．５μｇ／ｋｇ／分〜約３μｇ／ｋｇ／分、約０．５μｇ／ｋｇ／分〜約２μｇ／ｋｇ／分、約０．５μｇ／ｋｇ／分〜約１μｇ／ｋｇ／分、約１μｇ／ｋｇ／分〜約２μｇ／ｋｇ／分、約１μｇ／ｋｇ／分〜約３μｇ／ｋｇ／分、約１μｇ／ｋｇ／分〜約４μｇ／ｋｇ／分、約１μｇ／ｋｇ／分〜約５μｇ／ｋｇ／分、約１μｇ／ｋｇ／分〜約１０μｇ／ｋｇ／分、約１μｇ／ｋｇ／分〜約１５μｇ／ｋｇ／分、約１μｇ／ｋｇ／分〜約１５μｇ／ｋｇ／分、約１μｇ／ｋｇ／分〜約２０μｇ／ｋｇ／分の速度で投与される。一部の実施形態において、本明細書に記載のペプチドまたはペプチド模倣体は、０．５μｇ／ｋｇ／分、１μｇ／ｋｇ／分、２μｇ／ｋｇ／分、３μｇ／ｋｇ／分、４μｇ／ｋｇ／分、５μｇ／ｋｇ／分、６μｇ／ｋｇ／分、７μｇ／ｋｇ／分、８μｇ／ｋｇ／分、９μｇ／ｋｇ／分、１０μｇ／ｋｇ／分、１５μｇ／ｋｇ／分、または２０μｇ／ｋｇ／分の速度で投与される。用量は、約または少なくとも１〜２４時間で、または端点を含めて、その範囲で、任意に時間刻みで時間を増加させて投与することができる。一部の実施形態において、用量は、約１〜約７日間、約２〜約７日間、約３〜約７日間、約４〜約７日間、約５〜約７日間、または約６〜約７日間で投与される。一部の実施形態において、用量は、約１、約２、約３、約４、約５、約６または約７日間投与される。
【０１３５】
一部の実施形態において、医薬調合物は、単位剤形の状態で存在する。このような形態において、調合物は、適切な量の活性成分、例えば所望の目的を達成するのに有効な量を含む適切な大きさの単位用量に再分割される。単位用量の調合物中の活性化合物の量は、個々の適用に応じて、約０．０１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約０．０１ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約０．０１ｍｇ〜約５００ｍｇ、および約０．０１ｍｇ〜約２５０ｍｇに変更または調整することができる。使用される実際の用量は、患者の要求および治療されている状態の重症度に応じて変更することができる。個々の状況に適した投与レジメンの決定は、当業者の技量に包含される。好都合には、全用量を、１日の間で必要とされるような部分に分割し、投与することができる。
【０１３６】
医学的用途
組成物は、血圧の低下に順調に応答する任意の心血管障害を治療するのに有用である。これらの障害としては、慢性高血圧、高血圧性緊急症（急性高血圧性救急症）、急性鬱血性心不全、狭心症、急性心筋梗塞、左心室不全、脳血管不全、および頭蓋内出血が挙げられる。静脈内注射は、急性心血管障害を治療するための１つの非制約的方法である。このような方法は、それを必要とする患者または対象に治療有効量の１種またはそれ以上の化合物を投与することを含む。急性心血管障害の例には、限定はされないが、高血圧性緊急症、妊娠中毒症、および急性鬱血性心不全が含まれる。
【０１３７】
組合せ療法
前記のような組成物の１種またはそれ以上を、心血管および／または心腎障害を治療するためのその他の薬物と組み合わせて投与することによって、任意の心血管または心腎障害を治療する方法も提供される。これらのその他の薬物としては、フロセミドなどの利尿薬；ニトログリセリン、ニトロプルシッド、脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）またはその類似体などの血管拡張薬；ドブタミンなどの変力薬；カプトプリルおよびエナラプリルなどのアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬；カルベジロールおよびプロプラノロールなどのβ遮断薬；バルサルタンおよびカンデサルタンなどのアンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）；ならびに／またはスピロノラクトンなどのアルドステロンアンタゴニストが挙げられる。
【０１３８】
組合せ療法において、１種またはそれ以上の化合物または組成物は、心血管および／または心腎障害の治療の有効性を増大させるため、および高用量のこれらの治療薬に付随する副作用を低減するために、心血管および／または心腎障害を治療するための１種またはそれ以上の薬物と共投与される。
【０１３９】
前記の組合せ療法は、相乗的および相加的治療効果を有する。相乗性は、それらの薬剤を組み合わせた効果が、それらの個々の効果の合計を超えるような、２種またはそれ以上の薬剤の相互作用として定義される。例えば、ある疾患の治療における薬物Ａの単独での効果が２５％、薬物Ｂの単独での効果が２５％であるが、２種の薬物を組み合わせた場合に疾患の治療における効果が７５％であるなら、ＡとＢとの効果は相乗的である。
【０１４０】
相加性は、それらの薬剤を組み合わせた効果が、それらの個々の効果の合計と同じである、２種またはそれ以上の薬剤の相互作用として定義される。例えば、ある疾患の治療における薬物Ａの単独での効果が２５％、薬物Ｂの単独での効果が２５％であり、２種の薬物を組み合わせた場合に疾患の治療における効果が５０％であるなら、ＡとＢとの効果は相加的である。
【０１４１】
薬物治療レジメンの改善は、それらの薬剤を組み合わせた効果が共治療で使用されるどちらかまたは双方の薬剤による有害事象（ＡＥ）の発生率を低下させるような、２種またはそれ以上の薬剤の相互作用として記述することができる。有害事象（ＡＥ）の発生率のこの低下は、例えば、共治療で使用される薬剤のどちらかまたは双方をより低い用量で投与することの結果である可能性がある。例えば、表示用量で、薬物Ａの単独での効果が２５％であり、および４５％の有害事象発生率を有し；表示用量で、薬物Ｂの単独での効果が２５％であり、および３０％の有害事象発生率を有するが、２種の薬物をそれぞれの表示よりも低い用量で組み合わせた場合に、総合的効果が３５％であり（相乗的または相加的ではないが、改善）、有害事象発生率が２０％であるなら、薬物治療レジメンの改善が存在する。
【実施例】
【０１４２】
以下の実施例は、本明細書に記載の方法および組成物を例示するものであるが、限定するものではない。療法において一般に遭遇し当業者にとって明白である、種々の条件およびパラメーターに関するその他の適切な修正および適合は、該実施形態の趣旨および範囲に包含される。
【０１４３】
（実施例１）：化合物の合成
本明細書に記載のペプチドおよび中間体は、固相ペプチド合成法により調製した（Ｒ．Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９（１９６４）；Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｋｙ「Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、１９８４参照）。採用したペプチド合成および精製手順は、当技術分野で広く発表されている標準的な方法であり、限定はされないが、アミノ酸カップリング手順、洗浄工程、脱保護手順、樹脂離脱手順、ならびに市販の自動ペプチド合成機、市販の樹脂、および保護アミノ酸を使用するイオン交換およびＨＰＬＣ精製法を含む。より具体的には、ペプチドは、不溶性の支持樹脂に付着された酸に不安定なリンカーへのＦｍｏｃ保護アミノ酸（事前活性化されたまたはインサイチュで活性化された）の段階的付加、およびピペリジンでのＦｍｏｃ基の脱保護によって、それらのＣ末端から合成した。合成に続いて、樹脂に結合されたペプチドを、側鎖脱保護し、トリフルオロ酢酸およびカチオン捕捉剤を用いて樹脂から切り離した。ペプチドを、水抽出により、あるいはエーテルまたはｔ−ブチルメチルエーテルなどの有機溶媒からの沈殿、それに続く遠心分離およびデカントおよび／またはＨＰＬＣおよび凍結乾燥によって精製した。
【０１４４】
（実施例２）：β−アレスチン動員アッセイ
ＧＰＣＲが介在するβ−アレスチン機能の近位事象は、リガンドの結合に続く受容体への動員、およびＧＲＫによる受容体のリン酸化である。したがって、β−アレスチンの動員の測定を利用して、β−アレスチンの機能に対するリガンドの有効性を判定した。
【０１４５】
ヒトおよびラットのアンジオテンシン２の１型受容体（それぞれ、ヒトＡＴ１ＲおよびラットＡＴ１ａＲ）へのβ−アレスチン−２の動員を、ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ（商標）β−アレスチンアッセイ（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｆｒｅｍｏｎｔ  ＣＡ）を用いて測定した。細胞、プラスミド、および検出試薬は、ＤｉｓｃｏｖｅＲｘから購入し、アッセイは、製造業者の使用説明書により実施した。ヒトＡＴ１ＲおよびラットＡＴ１ａＲを、ｐＣＭＶ−ＰｒｏＬｉｎｋベクター中にクローニングし、配列決定により検証し、ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ  β−アレスチンＨＥＫ２９３細胞中にトランスフェクトした。安定的にトランスフェクトされたクローン細胞株を、ハイグロマイシンおよびＧ４１８を用いて選別した。これらのクローン細胞株を、すべての実験に使用した。
【０１４６】
アッセイでは、３８４ウェルのマイクロプレート（容積が２０μＬの小容積プレート「ＨｉＢａｓｅ」）の１つのウェルにつき４，０００〜８，０００個の細胞を播種し、インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２、飽和湿度）中で一夜増殖させた。ペプチドを、ＤＭＳＯ中に１０ｍＭの濃度で溶解した。次いで、ペプチドを、アッセイ用緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳを含むハンクス平衡塩溶液）で希釈し、細胞にペプチドを１００μＭ〜１ｐＭの範囲の最終濃度に到達するように添加した。次いで、細胞を、５％ＣＯ２中、３７℃で６０分間インキュベートし、続いて各ウェルに２μＬのＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ検出試薬を添加した。次いで、マイクロプレートを、室温で６０分間インキュベートし、次いで、ＢＭＧ  ＬａｂｔｅｃｈのＰＨＥＲＡｓｔｅｒ  Ｐｌｕｓマイクロプレートリーダーを使用して発光を測定した。受容体へのβ−アレスチン−２の動員を、任意単位で表現される相対発光強度として測定した。結果を下表２に示す。
【０１４７】
（実施例３）：ＩＰ１蓄積アッセイ
Ｇタンパク質結合の有効性に関する第二の測定も実施した。ＩＰ３は、Ｇα−ｑによるホスホリパーゼＣの活性化によって生じる。ＩＰ３は、ＩＰ１へ分解され、ＩＰ１は、塩化リチウムを用いて分解を遮断することによって、細胞中に蓄積するように強制することができる。したがって、本発明者らは、ＩＰ１の蓄積を測定して、Ｇタンパク質活性化に関するリガンドの有効性を判定した。
【０１４８】
ヒトおよびラットのアンジオテンシン２の１型受容体（それぞれ、ヒトＡＴ１ＲおよびラットＡＴ１ａＲ）によって生じるＩＰ１の蓄積を、Ｃｉｓｂｉｏから購入し、製造業者の使用説明書により使用されるＩＰ−Ｏｎｅ  Ｔｂキットを用いて測定した。クローン的に安定にトランスフェクトされ、ヒトＡＴ１ＴＲまたはラットＡＴ１ａＲを発現する細胞株を、すべての実験に使用した。
【０１４９】
アッセイでは、３８４ウェルの小容積マイクロプレート（容積が２０μＬの小容積プレート「ＨｉＢａｓｅ」）の１つのウェルにつき４，０００〜８，０００個の細胞を播種し、５％ＣＯ２中、３７℃で一夜増殖させた。次いで、細胞増殖培地を、５０ｍＭ塩化リチウムを含むＣｉｓｂｉｏで補足された刺激用緩衝液で置き換えた。ペプチドＴＲＶ０１１１３１８〜３３６；４６８〜４７１；４７９〜４８２；５４６〜５４８；８４７〜８６０；ＴＲＶ０１１１８７９〜８８５をＤＭＳＯ中に１０ｍＭの濃度で溶解した。アゴニストを検出するために、次いで、ペプチドを賦活緩衝液で希釈し、細胞にペプチドを１００μＭ〜１ｐＭの範囲の最終濃度に到達するように添加した。ペプチドの添加に続いて、細胞を、５％ＣＯ２中、３７℃で３０分間インキュベートし、次いで製造業者（Ｃｉｓｂｉｏ）の使用説明書により希釈した４μＬの事前混合ＨＴＲＦ  ＩＰ−Ｏｎｅ試薬で溶解した。マイクロプレートを、室温で６０〜９０分間インキュベートし、次いでＢＭＧ  ＬａｂｔｅｃｈのＰＨＥＲＡｓｔａｒ  Ｐｌｕｓマイクロプレートリーダーを使用して時間分割蛍光強度を測定した。ＩＰ１の蓄積を、６６５ｎｍおよび６２０ｎｍで測定される時間分割蛍光強度の比率変化として測定した。結果を下表２および３に示す。
【０１５０】
【表８】
2015506960.tif 000009
【０１５１】
【表９】
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【０１５２】
【表１０】
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【０１５３】
【表１１】
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【０１５４】
（実施例４）：カルシウム動員アッセイ
Ｇタンパク質の有効性は、多くの方法で測定することができる。ヘテロ三量体Ｇタンパク質のＧｑサブクラスに連結するＧＰＣＲは、アゴニストで活性化されると、広範な配列のシグナル伝達を活性化する。最も一般的に測定される経路の１つが、ホスファチジルイノシトール二リン酸を開裂してＩＰ３を放出し、次いで、ＩＰ３がＩＰ３受容体を介して細胞内蓄積から細胞質ゾルにカルシウムを放出する、Ｇα−ｑによるホスホリパーゼＣの活性化である。したがって、本発明者らは、細胞内遊離カルシウムを測定して、Ｇタンパク質の活性化に関するリガンドの有効性を判定した。
【０１５５】
ヒトおよびラットのアンジオテンシン２の１型受容体（それぞれ、ヒトＡＴ１ＲおよびラットＡＴ１ａＲ）によって生じる細胞内遊離カルシウムを、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから購入し、製造業者の使用説明書により使用されるＦｌｕｏ−４ＮＷキットを用いて測定した。クローン的に安定にトランスフェクトされ、ヒトＡＴ１ＲまたはラットＡＴ１ａＲを発現する細胞株をすべての実験で使用した。
【０１５６】
アッセイでは、９６ウェルマイクロプレートの容積が９０μＬの１つのセルにつき２５，０００個の細胞を播種し、５％ＣＯ２中、３７℃で一夜増殖させた。Ｆｌｕｏ−４ＮＷ色素を、プロベネシドおよびアッセイ用緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳを含むハンクス平衡塩溶液）と混合し、細胞増殖培地をこの混合物で置き換え、続いて５％ＣＯ２中、３７℃で３０〜４５分間インキュベートした。ペプチドを、脱イオン水に１ｍＭの濃度で溶解した。次いで、ペプチドを、さらに、アッセイ用緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳを含むハンクス平衡塩溶液）で希釈し、ペプチドを細胞に１０μＭ〜１ｐＭの範囲の最終濃度を達成するように添加した。ＢＭＧ  Ｌａｂｔｅｃｈから購入したＮＯＶＯｓｔａｒマイクロプレートリーダーを使用して蛍光強度を測定しながら、ペプチドを細胞に添加した。カルシウム動員を、リガンド添加の５秒および２０秒後の時点で基底に比較した倍率として表現される相対蛍光強度として測定した。
【０１５７】
（実施例５）：正常ラットにおけるペプチドの評価（予言的実施例）
本明細書に記載のペプチドの血管および心臓機能に対する効果を、麻酔された正常ラットでの予備的投薬実験において、０．１〜１０μｇ／ｋｇ／分の範囲の用量での静脈内点滴により試験する。種々の血行動態測定を、平均動脈圧、心拍数、および圧容積関係を含めて実施する。ペプチドは、心拍数にほとんどまたは全く影響せずに平均動脈圧の用量依存性低下をもたらすと予想される。さらに、ペプチドは、収縮期末圧容積関係の勾配を増大させ、事前に回復可能な１回心仕事量を保ち、血管収縮低下の背景にある１回拍出量の保持をもたらすと予想される。
【０１５８】
（実施例６）：ペーシングされた急性心不全のイヌモデルにおけるペプチドの評価（予言的実施例）
本明細書に記載のペプチド（０．０１、０．１、１、１０および１００μｇ／ｋｇ／分の段階的用量増加、それぞれ３０分で投与）を、ペースメーカーでペーシングされた心不全モデルにおいて投与する。ペースメーカーでペーシングされたイヌモデルには、ペースメーカーが埋め込まれ、イヌの心臓は、１分当たり２４０拍の速度で１０日間ペーシングされ、結果として、左心室収縮機能の低下、右側鬱血、およびレニン−アンジオテンシン系の活性上昇が生じる。心不全イヌにおいて、ペプチドのうちの１種またはそれ以上は、平均動脈圧、全身性血管抵抗、肺毛細血管楔入圧、および右動脈圧の用量依存性低下をもたらすと予想され、これらの動物において心拍出量は保持されると予想される。腎臓レベルで、腎血管抵抗のかなりの低下をもたらす腎血流の用量依存性増加が存在すると予想される。尿中ナトリウム排泄量は尿量と共に穏やかに増加し、尿中カリウムおよび糸球体ろ過率は維持される。
【０１５９】
一部の実施形態を特定の実施例に関して説明してきたが、当業者は、該実施形態に対してその趣旨および範囲から逸脱することなしに種々の修正をなし得ることを認識するであろう。
【０１６０】
本明細書中で言及されたおよび／または出願データシート中に列挙された前記の米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、外国特許、外国特許出願、および非特許刊行物のすべては、参照によってその全体で本明細書に組み入れる。
【配列表】
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【国際調査報告】
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2015506960.tif 000014
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