(57)【要約】本発明は、スピロ環アシルグアニジン及びβ−セクレターゼ酵素（ＢＡＣＥ１）活性の阻害剤としてのその使用、それを含有する医薬組成物、ならびに神経変性障害、認知機能低下、認知機能障害により特徴付けられる障害、認知症、及びβ−アミロイド凝集体の産生により特徴付けられる疾患の処置における治療薬としてそれを使用する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記：
【表５】
2015529666.tif 000120
2015529666.tif 000121
より選択される構造式によって表される化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
【請求項２】
医薬としての使用のための、請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容し得る塩。
【請求項３】
薬学的に許容し得る佐剤、希釈剤及び／又は担体と混合した、請求項１記載の少なくとも１つの化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む、医薬組成物。
【請求項４】
ＢＡＣＥ１媒介の障害又は疾患の処置における使用のための、請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容し得る塩。
【請求項５】
ＢＡＣＥ１媒介の障害又は疾患が、神経変性障害、認知機能低下、認知機能障害、認知症、及びβ−アミロイド沈着又は神経原線維変化の産生により特徴付けられる疾患からなる群より選択される、請求項４記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容し得る塩。
【請求項６】
障害又は疾患が、アルツハイマー病、トリソミー２１（ダウン症）、オランダ型遺伝性アミロイドーシス脳出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、老年認知症、脳アミロイド血管症、変性認知症、血管及び変性由来の混合型認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上性麻痺に関連する認知症、皮質基底変性に関連する認知症、アルツハイマー病のびまん性レビー小体型、萎縮型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）及び緑内障からなる群より選択される、請求項５記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容し得る塩。
【請求項７】
疾患叉は障害がアルツハイマー病である、請求項６記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容し得る塩。
【請求項８】
疾患叉は障害が緑内障である、請求項６記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容し得る塩。
【請求項９】
対象におけるＢＡＣＥ１媒介の障害の処置用の医薬の製造のための、請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の使用。
【請求項１０】
ＢＡＣＥ１媒介の疾患又は障害が、神経変性障害、認知機能低下、認知機能障害、認知症、及びβ−アミロイド沈着又は神経原線維変化の産生により特徴付けられる疾患からなる群より選択される、請求項９記載の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の使用。
【請求項１１】
疾患又は障害が、アルツハイマー病、トリソミー２１（ダウン症）、オランダ型遺伝性アミロイドーシス脳出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、老年認知症、脳アミロイド血管症、変性認知症、血管及び変性由来の混合型認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上性麻痺に関連する認知症、皮質基底変性に関連する認知症、アルツハイマー病のびまん性レビー小体型、萎縮型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）及び緑内障からなる群より選択される、請求項１０記載の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の使用。
【請求項１２】
疾患叉は障害がアルツハイマー病である、請求項１１記載の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の使用。
【請求項１３】
疾患叉は障害が緑内障である、請求項１１記載の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の使用。
【請求項１４】
対象におけるＢＡＣＥ１媒介の障害又は疾患を処置する方法であって、対象に有効量の請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容しうる塩を投与することを含む、方法。
【請求項１５】
ＢＡＣＥ１媒介の障害又は疾患が、神経変性障害、認知機能低下、認知機能障害、認知症、及びβ−アミロイド沈着又は神経原線維変化の産生により特徴付けられる疾患からなる群より選択される、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
障害又は疾患が、アルツハイマー病、トリソミー２１（ダウン症）、オランダ型遺伝性アミロイドーシス脳出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、老年認知症、脳アミロイド血管症、変性認知症、血管及び変性由来の混合型認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上性麻痺に関連する認知症、皮質基底変性に関連する認知症、アルツハイマー病のびまん性レビー小体型、萎縮型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）及び緑内障からなる群より選択される、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
障害又は疾患がアルツハイマー病である、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
障害又は疾患が緑内障である、請求項１６記載の方法。
【請求項１９】
下記：
【化１１０】
2015529666.tif 000122
2015529666.tif 000123
からなる群より選択される化合物；又はその塩。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連特許出願
本出願は、2012年8月27日出願の米国特許仮出願第61/693512号、2013年3月15日出願の米国特許仮出願第61/788839号、及び2013年4月26日出願の米国特許仮出願第61/816458号の利益を主張する。上記出願の各々の全教示が参照により本明細書に組み入れられる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、スピロ環アシルグアニジン及びβ−セクレターゼ酵素（ＢＡＣＥ１）活性の阻害剤としてのその使用、それを含有する医薬組成物、ならびに神経変性障害、認知機能低下、認知機能障害により特徴付けられる障害、認知症、ならびにβ−アミロイド沈着及び／又は神経原線維変化の産生により特徴付けられる疾患の処置における治療薬としてそれを使用する方法に関する。
【０００３】
発明の背景
β−アミロイド（また、本明細書において「Ａベータ」又は「Ａβ」とも称する）沈着及び神経原線維変化は、アルツハイマー病（ＡＤ）に関連する２つの主要な病理学的特徴である。臨床的に、ＡＤは、記憶、認知、思考、判断及び見当識の喪失によって特徴付けられる。同様に、疾患が進行するにつれて、多重認知機能の全体的障害が発生するまで、運動能力、知覚能力及び言語能力も影響を受ける。これらの認知損失は徐々に生じるが、典型的には４〜１２年で重度の障害そして最終的に死に至る。
【０００４】
β−アミロイド沈着は、優勢的にＡβペプチドの凝集体であり、これは換言するとＡＰＰのタンパク質分解の産物である。より詳細には、Ａβペプチドは、一つ以上のγ−セクレターゼによるＣ末端でのＡＰＰの切断、及びβ−セクレターゼ酵素（ＢＡＣＥ１）（また、β−アミロイド生成経路の一部として、アスパルチルプロテアーゼ及びメマプシン２としても公知である）によるＮ末端でのＡＰＰの切断の結果として生じる。
【０００５】
ＢＡＣＥ活性は、ＡＰＰからのＡβペプチドの産生に直接的に相関し、そして研究は、ますます、ＢＡＣＥの阻害がＡβペプチドの産生を阻害することを指摘している。
【０００６】
アミロイド発生プラーク及び血管アミロイド脈管障害もまた、トリソミー２１（ダウン症）、オランダ型遺伝性アミロイドーシス脳出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、及び他の神経変性障害の患者の脳を特徴付ける。神経原線維変化はまた、認知症を誘発する障害を含む他の神経変性疾患で起こる。
【０００７】
カスパーゼ−３媒介の異常なアミロイド前駆体タンパク質プロセシング、実験的緑内障でのＲＧＣにおけるＡβの発現の増加、及び緑内障の患者における硝子体Ａβレベルの低下（網膜Ａβ沈着と一致する）の証拠により、近年、Ａβは、緑内障における網膜神経節細胞（ＲＧＣ）のアポトーシスの発症に関与することが報告されている。アミロイド沈着はまた、萎縮型（dry）加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）に罹患している患者及びＡＭＤの動物モデルにおける黄斑変性症とも関連している。
【０００８】
WO 2010/021680、WO2011/106414及びWO 2010/105179は、β−セクレターゼ阻害剤としてスピロ環骨格を有するスピロ環アシルグアニジンを開示している。
【０００９】
発明の概要
本発明は、ＢＡＣＥ１の阻害剤であり、かつ患者における高いβ−アミロイド沈着又はβ−アミロイドレベルによって特徴付けられる疾患又は障害の処置における治療薬として有用な化合物を提供する。開示されたＢＡＣＥ１阻害剤は、以下の特徴：
（１）ＢＡＣＥ１酵素活性の強力な阻害（アッセイ１）
（２）細胞アッセイにおける心臓ｈＥＲＧチャネルに対する高い選択性（アッセイ２）、
（３）細胞リン脂質症アッセイにおけるリン脂質症の誘起に対する低い性向（アッセイ３）、及び
（４）肝細胞における代謝分解に対する高い安定性（アッセイ４）
を有する。
【００１０】
したがって、本発明は、ＢＡＣＥ１阻害剤、心臓ｈＥＲＧチャネルに対する高い選択性、及び低いリン脂質症活性、及び代謝分解に対する高い安定性としての高い効力の組み合わせを示す化合物を提供する。
【００１１】
本発明の一つの実施態様は、下記：
【化１】
2015529666.tif 000002
より選択される構造式によって表される化合物、又は前述の化合物の任意の薬学的に許容し得る塩である。直前に記載の化合物は、本明細書において「本発明の化合物」と呼ぶ。
【００１２】
本発明の別の実施態様は、医薬としての使用のための、本発明の化合物又はその薬学的に許容し得る塩である。
【００１３】
本発明の別の実施態様は、薬学的に許容し得る佐剤、希釈剤又は担体と混合した、本発明の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を含む、医薬組成物である。
【００１４】
本発明の別の実施態様は、対象におけるＢＡＣＥ１媒介の障害又は疾患の処置における使用のための、本発明の化合物又はその薬学的に許容し得る塩である。
【００１５】
本発明の別の実施態様は、対象におけるＢＡＣＥ１媒介の障害の処置用の医薬の製造のための、本発明の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の使用である。
【００１６】
本発明の別の実施態様は、ＢＡＣＥ１媒介の疾患又は障害を有する対象を処置する方法であって、対象に有効量の本発明の化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含む、方法である。
【００１７】
さらに本発明の別の実施態様は、本発明の化合物の調製において使用される中間体である。これらの中間体は、下記：
【化２】
2015529666.tif 000003
2015529666.tif 000004
より選択される構造式によって表されるか、又は前述の化合物の任意の塩である。
【００１８】
発明の詳細な記載
本発明の化合物は、ｈＥＲＧチャネルに対する高い選択性、リン脂質症の誘起に対する低い性向、及び高い代謝安定性と共に、ＢＡＣＥ１酵素及びＡβの生成に対して強力な活性を呈する。例えば、本発明の化合物は、ＩＣ５０＜１５nMでＢＡＣＥ１阻害、１０μMで３５％未満のｈＥＲＧ阻害、少なくとも１００μMの第１有効濃度（ＦＥＣ）でリン脂質症、及び１μMで肝血流の２５％未満の代謝安定性を示した。これらを合わせた特性は、ヒトにおける病理学的状態の処置のために、特にアルツハイマー病、ならびにＢＡＣＥ１によって媒介される他の障害及び疾患の処置のために、本発明の化合物を有用にしている。
【００１９】
生体異物によるｈＥＲＧ（human Ether-a-go-go-Related Gene／ヒト遅延整流性カリウムイオンチャネル遺伝子）チャネルの阻害、そしてそれに続く心再分極の遅延は、Sanguinetti et al. （1995, Cell, Apr. 21, 81(2):299-307）及びそれに続く大量の証拠により確証されたように、特異的な多形性心室性頻脈性不整脈、心室性不整脈（torsade de pointes）のリスクの増大と関連する。早い段階でこのリスクを回避するために、ｈＥＲＧチャネルの異種発現を用いてインビトロ系内のｈＥＲＧ相互作用に対するスクリーニングが一般的に実践されており、このタイプのアッセイはまた、ＩＣＨガイドラインＳ７Ｂにより推奨されるように、後に前臨床候補プロファイリングの重要な部分でもある（International Conference on Harmonization (2005): ICH Topic S 7 B: The nonclinical Evaluation of the Potential for delayed Ventricular Repolarization; (QT Interval Prolongation) by Human Pharmaceuticals (www.ich.org/products/guidelines/safety/article/safety-guidelines.html)）。このように、本発明の化合物により示されるもののような、低いｈＥＲＧチャネル阻害は、治療上非常に望ましい。
【００２０】
リン脂質症は、過剰なリン脂質が細胞内に蓄積する脂質貯蔵障害である。薬物誘発性リン脂質症は、望ましくない薬物反応である。したがって、有害な副作用を回避するために、リン脂質症の可能性が低い化合物は、ヒトの治療的使用のために好ましい。
【００２１】
代謝安定性は、良好な薬物動態特性を有する薬物を選択する及び／又は設計する状況において生体内分解に対する化合物の感受性を指す。多くの薬物のための代謝の主要部位は、肝臓である。インタクトな肝細胞は、チトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）、他の非Ｐ４５０酵素、及び第II相酵素、例えばスルホトランスフェラーゼ及びグルクロノシルトランスフェラーゼを含有し、よって、インビトロで薬物代謝を研究するための主要なモデル系を表している。増強された代謝安定性は、増加した生物学的利用能及びより長い半減期を含む幾つかの利点と関連しており、これは、患者の投与頻度を低下させかつ少なくすることができる。したがって、増強された代謝安定性は、薬物のために使用される予定の化合物にとって有利な特徴である。
【００２２】
以下の表１に提供するデータは、本発明の化合物が、強力なＢＡＣＥ１阻害活性、心臓ｈＥＲＧに対する選択性、リン脂質症の誘起に対する低い性向、及び高い代謝安定性の組み合わせを有することを示している。表２は、WO 2010/105179に記載されている特定の比較化合物が、これらの基準の１つ以上を満たしていないことを表すデータを提供している。
【００２３】
本明細書において明確に定義されてない用語については、本開示及び本文に照らして当業者によりそれらに与えられる意味が与えられるべきである。しかし、本明細書で使用するように、特に断りがない限り、下記の用語は指定の意味を有し、下記の慣例が順守される。
【００２４】
本発明の化合物が、すべての互変異性形態を示さずに名称又は構造で記述される場合、該化合物及びその薬学的に許容し得る塩はすべての互変異性体を包含することを理解されたい。
【００２５】
本発明の化合物が、立体化学を明記せずに名称又は構造で記述される場合、該化合物及びその薬学的に許容し得る塩は、すべての立体異性体、光学異性体及び幾何異性体（例えば、エナンチオマー、ジアステレオマー、Ｅ／Ｚ異性体等）及びそのラセミ体、ならびに別個のエナンチオマーの異なる割合での混合物、ジアステレオマーの混合物、又は前述の形態のうちの任意のものの混合物を包含することを理解されたい。
【００２６】
立体異性体、光学異性体又は幾何異性体が名称又は構造で記述される場合、命名又は描写された立体異性体、光学異性体又は幾何異性体の立体的純度、光学的純度及び／又は幾何的純度は、少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、９９％又は９９．９％（重量）純粋であることを理解されたい。立体異性体、光学異性体及び幾何異性体の純度は、混合物中の命名又は描写された立体異性体、光学異性体及び幾何異性体の重量を、混合物中のすべての立体異性体、光学異性体及び幾何異性体の総重量で割ることによって決定される。
【００２７】
本発明の化合物又はその薬学的に許容し得る塩が構造により命名される又は描写される場合、該化合物の溶媒和物、水和物及び無水形態、ならびにその薬学的に許容し得る塩の溶媒和物、水和物及び無水形態が本発明に包含されることを理解されたい。「溶媒和物」は、溶媒分子が結晶化の間に結晶格子中に取り込まれた結晶形態を指す。溶媒和物には、水、又は非水性溶媒、例えばエタノール、イソプロパノール、ＤＭＳＯ、酢酸、エタノールアミン、及びＥｔＯＡｃが含まれ得る。水が結晶格子中に取り込まれた溶媒分子である溶媒和物は、典型的には「水和物」と称される。水和物は、化学量論的量の水和物も、種々な量の水を含有する組成物も含む。「無水形態」は、溶媒もしくは水を含まない、又は実質的に結晶構造中に溶媒もしくは水を組み込まれていない化合物を指す（例えば、化合物に対する溶媒又は水の１：１０、１：２０、１：１００又は１：２００未満のモル比）。
【００２８】
塩
句「薬学的に許容し得る」は、本明細書において、堅実な医学判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応又は他の問題又は合併症がなく、かつ妥当な有益性／リスク率に相応している、ヒトおよび動物の組織と接触する使用に適している、化合物、材料、組成物及び／又は剤形を指すために使用される。
【００２９】
本明細書において使用されるとき、「薬学的に許容し得る塩」とは、その酸性又は塩基性塩を作ることにより親化合物が修飾されている、開示化合物の誘導体のことを指す。薬学的に許容し得る塩の例は、非限定的に、アミンのような塩基性残基の鉱酸又は有機酸塩；カルボン酸のような酸性残基のアルカリ又は有機塩；等を包含する。例えば、そのような塩は、アンモニア、Ｌ−アルギニン、ベタイン、ベネタミン、ベンザチン、水酸化カルシウム、コリン、デアノール、ジエタノールアミン（２，２’−イミノビス（エタノール））、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）−エタノール、２−アミノエタノール、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、リジン、水酸化マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン、ピペラジン、水酸化カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン、水酸化ナトリウム、トリエタノールアミン（２，２’，２”−ニトリロトリス（エタノール））、トロメタミン、水酸化亜鉛、酢酸、２，２−ジクロロ−酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、２，５−ジヒドロキシ安息香酸、４−アセトアミド−安息香酸、（＋）−ショウノウ酸、（＋）−カンファー−１０−スルホン酸、炭酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、デカン酸、硫酸ドデシル、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、エチレンジアミン四酢酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、Ｄ−グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、Ｄ−グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、２−オキソ−グルタル酸、グリセロリン酸、グリシン、グリコール酸、ヘキサン酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、イソ酪酸、ＤＬ−乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、リジン、マレイン酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、ＤＬ−マンデル酸、メタンスルホン酸、ガラクタル酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オクタン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸（エンボン酸）、リン酸、プロピオン酸、（−）−Ｌ−ピログルタミン酸、サリチル酸、４−アミノ−サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、（＋）−Ｌ−酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸及びウンデシレン酸からの塩を含む。好ましい塩は、Ｌ−マンデル酸及びマレイン酸である。さらなる薬学的に許容し得る塩は、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛等のような金属からのカチオンで形成されることができる（また、Pharmaceutical salts, Berge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., (1977), 66, 1-19を参照のこと）。
【００３０】
本発明の薬学的に許容し得る塩は、塩基性又は酸性部分を含有する親化合物から、慣用の化学的方法により合成することができる。一般に、かかる塩は、遊離の酸又は塩基の形態のこれらの化合物を、水中、又はエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールもしくはアセトニトリルのような有機希釈剤中、又はそれらの混合物中、十分な量の適切な塩基又は酸と反応させることによって、調製することができる。
【００３１】
例えば、本発明の化合物を精製するか又は単離するために有用な、上記以外の酸の塩（例えば、トリフルオロ酢酸塩）もまた、本発明の一部分を構成する。
【００３２】
生物学的データ
ＢＡＣＥ１アッセイ（アッセイ１）
化合物の阻害活性を、市販の基質 HiLyte Fluor（商標）488-Glu-Val-Asn-Leu-Asp-Ala-Glu-Phe-Lys-（QXL（商標）520）-OH（配列番号：１）（AnaSpec, San Jose, CA）、及び切断型ヒトβ−セクレターゼ（ｍｙｃ−ｈｉｓタグに融合され、かつＨＥＫ２９３／ＢＡＣＥｅｃｔ．細胞からOptiMEM（商標）（Invitrogen）中に分泌されたＢＡＣＥ１（アミノ酸１−４５４））を用いて、ＢＡＣＥ１活性の蛍光クエンチングアッセイによって評価した。基質をＤＭＳＯ中、１mg／mLで溶解した。
【００３３】
アッセイは、３８４ウェルプレート内で、総アッセイ容量５０μL中、ＢＡＣＥ１の細胞外ドメインを含むOptiMEM（商標）（２４時間かけて採取し、遠心分離により細胞片を排除した上清）の存在下、所望の２倍の濃度の試験化合物及び２％ＤＭＳＯを含有する水２５μL、１μM 基質ペプチド、２０mM ＮａＯＡｃ（ｐＨ４．４）、及び０．０４％Triton-X100で実施した。一般に、化合物希釈液２５μLをプレートに入れ、続いて、０．２％Triton X-100を含む水で１：１０に希釈したOptiMEM（商標）を含有するＢＡＣＥ１ １０μLを添加した。反応を、ＮａＯＡｃ緩衝液中の基質１５μLの添加により開始した。反応物を室温（暗所）でインキュベートし、Envision（登録商標） Multilabel Reader（Perkin Elmer）により、基質の切断を、６０分間の動力学的として記録した（励起波長：４８５nm、蛍光波長：５３８nm）。酵素を含有しないブランクウェルを各プレートに含めた。
【００３４】
蛍光強度は、３８４個のウェルすべてで反応の速度を導出するために、時間に対して回帰した。これらの速度は、１％ＤＭＳＯを含有する無阻害対照を１００％として及び酵素の非存在下で行われたブランク対照を０％として用いて、パーセントコントロールを計算するために使用した。ＩＣ５０値は、Assay Explorer（登録商標）を使用して試験化合物濃度に対するパーセントコントロールを当て嵌めて計算した。
【００３５】
ｈＥＲＧ−チャネルアッセイ（アッセイ２）
細胞：  ＨＥＫ（ヒト胚腎臓）２９３細胞を、ｈＥＲＧ ｃＤＮＡで安定的にトランスフェクトした。
【００３６】
ピペットと溶液：
細胞を、下記を含有する浴溶液で灌流した（mM）：ＮａＣｌ（１３７）、ＫＣｌ（４．０）、ＭｇＣｌ２（１．０）、ＣａＣｌ２（１．８）、グルコース（１０）、ＨＥＰＥＳ（１０）、ｐＨ７．４（ＮａＯＨを用いて）。パッチピペットは、水平プラーを使用してホウケイ酸ガラス管から作製されており、下記を含有するピペット溶液で充填した（mM）：Ｋ−アスパラギン酸（１３０）、ＭｇＣｌ２（５．０）、ＥＧＴＡ（５．０）、Ｋ２ＡＴＰ（４．０）、ＨＥＰＥＳ（１０．０）、ｐＨ７．２（ＫＯＨを用いて）。微小電極の抵抗値は、２〜５MΩの範囲であった。
【００３７】
刺激及び記録：
膜電流を、EPC-10パッチクランプ増幅器及びPatchMasterソフトウェアを用いて記録した。ｈＥＲＧ媒介膜電流を、パッチクランプ技術の全細胞構成を使用して、３５℃で記録した。トランスフェクトされたＨＥＫ２９３細胞を、−６０mVの保持電位に固定し、ｈＥＲＧ媒介不活性化テール（tail）電流を、１５秒間隔で繰り返される固定振幅を有するパルスパターン（活性化／不活性化：２０００ms間に４０mV； リカバリー：２ms間に−１２０mV； ２msで４０mVに上昇； テール電流の不活性化：５０ms間に４０mV）を使用して誘発した。各パルス間のインターバルの間に、０．２倍に縮小した４つのパルスを、Ｐ／ｎリーク電流差し引き法のために記録した。安全に許容できるリンギングのない記録レベルまで、Ｒｓ補償を用いた。
【００３８】
化合物の調製及び適用：
試験化合物の様々な濃度を、検査される様々な細胞のそれぞれに順次適用した。ベースライン電流の定常状態レベルを、第１試験化合物濃度の適用前に、少なくとも６つのスイープについて測定した。
【００３９】
試験化合物をＤＭＳＯに溶解してマスターストック溶液を生成し、これをＤＭＳＯでさらに希釈して、より低い濃度のために必要なストック溶液とした。細胞外緩衝液中の最終希釈は、実験を開始する前にそれぞれ、１：１０００希釈工程によりこれらのストックから新たに調製した。
【００４０】
データ分析：
ピーク電流振幅は、＋４０mVまでのランプの後で３ms測定した。ベースライン及び各濃度について、次の濃度を適用する前の最後の３つのスイープのピーク電流を平均した。残留電流（Ｉ／Ｉ０）は、実際の平均ピーク電流と平均ベースラインピーク電流の割合として、各細胞について計算した。
【００４１】
インビトロ・リン脂質症アッセイ（アッセイ３）
試験化合物のリン脂質形成（phospholipidogenic）電位を、ヒト造血Ｕ９３７細胞株を用いてアッセイした。試験原理は、細胞を蛍光色素ナイルレッドで染色することによりリン脂質含量を分析することであった。
【００４２】
Ｕ９３７細胞を、１０％ＦＢＳ、１％ＤＭＳＯ、及び０．００５％ゲンタマイシンを含有するＲＰＭＩ培地中、０．５×１０６細胞／mLで細胞培養プレートに播種した。細胞を、標準的培養条件下、様々な濃度の試験化合物を含むか又は含まずに、４８時間培養した。
【００４３】
収集のために、細胞を１３０×ｇで４分間遠心分離し、ＰＢＳで１回洗浄した。次に、２×０．５mLの細胞懸濁液を、非固定細胞の測定のために調製した（ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）の生存能力測定用に０．５mL及びナイルレッド測定用に０．５mL）。
【００４４】
残りの細胞を、３．７％ホルムアルデヒドで３０分間固定した。さらなる遠心分離工程の後、細胞をナイルレッド処理溶液１．３mL（１μg／mL）で再懸濁し、室温で５分間インキュベートした。次いで、細胞懸濁液をＰＢＳ ３mLで２回洗浄し、１３０×ｇで４分間遠心分離した。上清を廃棄し、細胞をＰＢＳ ０．５mLで再懸濁し、フローサイトメトリー測定のために保持した。
【００４５】
０．５mLの非固定細胞サンプルのナイルレッド染色のために、使用準備済ナイルレッド溶液５０μL（１０μg／mL）をサンプル毎に加えた。サンプルを、氷上に５分間保持した。その後、それらを、ＰＢＳ ４mLで１回洗浄（４℃、２５０×ｇ、８分間）し、最後にＰＢＳ ４００μLに再懸濁し、フローサイトメトリー測定のために保持した。
【００４６】
生存率測定のために、使用準備済ＰＩ溶液１２．５μL（１０μg／mL）を非固定細胞懸濁液０．５mLに添加した。１５分間の氷上でのインキュベーションの後、サンプルをCoulter Epics XL/MCL フローサイトメーターを使用するフローサイトメトリーにより測定した。
【００４７】
各サンプルの細胞の生存率を、チャンネル２（５６８〜５９０nm）でのＰＩ含有量のフローサイトメトリー測定によって決定した。生細胞と死細胞との間の蛍光依存分化のためのカットオフゲートは、細胞培養培地対照サンプルの解析に基づいて規定された。
【００４８】
対照サンプルに対して９０％以上の細胞生存率を有するサンプルだけを、リン脂質症について分析した。各ナイルレッドサンプル（非固定サンプル及び固定サンプル）を、チャネル１（５０４〜５４１nm）及びチャネル４（６６０〜６８０nm）でのフローサイトメトリーによって測定した。
【００４９】
各チャネル毎に、試験サンプルの相対ナイルレッド蛍光強度を、対照サンプルと比較して計算し、対照蛍光強度のパーセントとして表した。試験化合物のリン脂質形成電位及び第一の有効濃度（ＦＥＣ）の評価は、固定細胞及び非固定細胞についての両方の波長における蛍光強度に基づいて手作業で行われた。
【００５０】
インビトロ肝細胞安定性アッセイ（アッセイ４）
試験化合物の代謝分解を、肝細胞懸濁液中でアッセイした。凍結保存肝細胞を、５％菌種血清を含有する適切な緩衝系（例えば、ダルベッコ改変イーグル培地＋グルカゴン３．５μg／５００mL、インスリン２．５mg／５００mL、及び３．７５mg／ヒドロコルチゾン５００mL）中でインキュベートした。インキュベーター（３７℃、１０％ＣＯ２）中で３０分間のプレインキュベーション（３７℃、１０％ＣＯ２）に続き、試験化合物溶液５μL（８０μM；ＤＭＳＯストック溶液中の２mMから調製し、培地で１：２５に希釈した）を、肝細胞懸濁液３９５μL（０．２５〜５×１０６細胞／mL範囲中の細胞密度、典型的には１×１０６細胞／mL；試験化合物の最終濃度１μM、最終ＤＭＳＯ濃度０．０５％）中に加えた。
【００５１】
細胞を６時間インキュベート（インキュベーター、Orbitalシェーカー）し、試料（２５μL）を０、０．５、１、２、４及び６時間時に採取した。試料をアセトニトリル中に移し、遠心分離（５分間）によりペレット化した。上清を新しい96 DeepWell（商標）プレートに移し、窒素下で蒸発させ、再懸濁した。化合物の減少は、ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。ＣＬｉｎｔ（インビトロ肝固有クリアランス（hepatic intrinsic clearance））を、以下のように算出した：
ＣＬｉｎｔ＝用量／ＡＵＣ＝（Ｃ０／ＣＤ）／ＡＵＤ＋Ｃｌａｓｔ／ｋ）×１０００／６０
Ｃ０：インキュベーション中の初期濃度［μM］；
ＣＤ：生細胞の細胞密度［細胞／mL］；
ＡＵＤ：曲線下面積［μM×ｈ］；
Ｃｌａｓｔ：最後のデータ点の濃度［μM］；
ｋ：化合物の減少についての回帰直線の傾き（slope）［ｈ−１］。
【００５２】
算出したインビトロ肝固有クリアランスを、固有インビボ肝クリアランス（Ｃｌｉｎｔ, ｉｎ ｖｉｖｏ）にスケールアップし、かつ以下のように、算出したインビトロ肝固有クリアランスを用いて肝臓モデル（ウエル・スタード（well-stirred）モデル）の使用により肝インビボ血液クリアランス（ＣＬ）を予測した：
ＣＬｉｎｔ, ｉｎ ｖｉｖｏ［mL／分／kg］＝（ＣＬｉｎｔ［μL／分／１０６細胞］×肝細胞充実性（hepatocellularity）［１０６細胞／ｇ肝臓］×肝臓因子［ｇ／kg体重］）／１０００
ＣＬ［mL／分／kg］＝ＣＬｉｎｔ, ｉｎ ｖｉｖｏ［mL／分／kg］×肝血流量［ml／分／kg］／（ＣＬｉｎｔ, ｉｎ ｖｉｖｏ［mL／分／kg］＋肝血流量［mL／分／kg］）
【００５３】
インビボ血中クリアランスを肝血流量のパーセントに変換した（％Ｑｈ）：
％Ｑｈ＝ＣＬ［mL/分/kg］／肝血流量［mL/分/kg］）×１００
肝細胞充実性、ヒト：１．２×１０７細胞／ｇ肝臓；
肝臓因子、ヒト：２５．７ｇ／kg体重；
肝血流量、ヒト：２１mL／（分×kg）。
【００５４】
ラット脳Ａβ低減アッセイ（アッセイ５）
本発明の化合物のインビボ有効性を、ラット脳Ａβ低減（減少）アッセイにおいて実証し、データを表３に示す。５〜６週齢の雄性Sprague-Dawleyラットを使用して、脳アミロイドペプチドＡβ１−ｘを低減する本発明の化合物の能力を実証した。化合物は、表３に示すように、単一用量で、１％ポリソルベート-80及び０．５％Ｎatrosol（登録商標）で強制経口投与した。動物を、投与の３時間後に屠殺し、脳を切除し、小脳と左右の大脳とに解剖し、液体窒素中で急速冷凍した。
【００５５】
プロテアーゼ阻害剤（cOmplete, Roche Applied Science）を補填した２０mM Tris−ＨＣＬ、ｐＨ８．５、０．２％Triton-X100中、ガラス製Dounceホモジナイザーを用いて、大脳を、４℃でホモジナイズ（重量当たり５容量）した。ホモジネートを１２０，０００×ｇで４℃にて６０分間遠心分離し、上清を回収し、化学発光検出（Meso-Scale Discovery (MSD), Rockville, MD）を用いるイムノアッセイを使用してＡβ１−ｘを分析した。
【００５６】
ストレプトアビジン９６ウェルプレート（MSD）を、Orbitalシェーカー上で室温にて１時間、５％Blocker A 溶液（MSD）を用いてプレブロックし、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で４回洗浄した。ウェルを、ビオチン化抗体ＳＩＧ−３９１５５（クローン Ｍ３．２、齧歯類Ａβのアミノ酸の１０−１５に対して特異的）の２０ng／ウェルで室温にて１時間プリコーティングし、ＰＢＳで４回洗浄した。Ａβ１−ｘの分析のために、切除された脳の溶解物又はＡβ１−４０標準物質（８〜５００pg／mL、２倍増量）のいずれかの２５μLを、絶えず振盪しながら室温で１時間インキュベートした。ウェルをＰＢＳで４回洗浄し、検出抗体（MSDにより供給されるSulfo-TAG標識 抗−Ａβ４０抗体）２５μLを加え、室温で１時間インキュベートした。ＰＢＳで４回洗浄の後、化学発光検出試薬（Read Buffer T, MSD）１５０μLを加え、プレートをMSD Sector Imager 6000機器で読み取った。較正曲線を、非線形４パラメーター回帰モデルに当て嵌め、Ａβ１−ｘの濃度を、切除された脳の溶解物を含有する各ウェル毎に計算した。Ａβ低減の割合を、溶剤のみで処置した動物からの脳について得られた平均Ａβ濃度との差異に基づいて算出した。
【００５７】
表１は、本発明の化合物の下記の特性を示す： アッセイ１で測定されたＢＡＣＥ１阻害能力、アッセイ２で測定されたｈＥＲＧ阻害、アッセイ３で測定されたリン脂質症の第一有効濃度（ＦＥＣ）、及びアッセイ４で測定された代謝安定性。
【００５８】
【表１】
2015529666.tif 000005
【００５９】
表２は、WO 2010/105179に記載されている特定の比較化合物と比べて、本発明の化合物が以下の特性の少なくとも一つを有することを示すデータを提供する： １）ＢＡＣＥ１酵素アッセイにおいて有意により低いＩＣ５０阻害値、ｈＥＲＧの有意により低いパーセント阻害、リン脂質症の誘起に対する有意により低い性向、及び有意により大きな代謝安定性。
【００６０】
【表２】
2015529666.tif 000006
2015529666.tif 000007
2015529666.tif 000008
2015529666.tif 000009
【００６１】
アッセイ５に記載のように、脳Ａβを減少させる本発明の化合物の能力をラットにおいて実証し、そしてインビボでの有効性のデータを表３に示す。
【００６２】
【表３】
2015529666.tif 000010
【００６３】
処置方法
本発明は、対象において上昇したβ−アミロイド沈着又はβ−アミロイドレベルにより特徴付けられる障害又は疾患の処置において有用である化合物に関し、β−セクレターゼ酵素（ＢＡＣＥ１）活性の阻害は、神経変性障害、認知機能低下、認知機能障害により特徴付けられる障害、認知症、ならびにβ−アミロイド沈着及び／又は神経原線維変化の産生により特徴付けられる疾患の治療、寛解又は予防を含むがこれらに限定されず、治療上有効である。
【００６４】
本発明の化合物は、アルツハイマー病、トリソミー２１（ダウン症）、オランダ型遺伝性アミロイドーシス脳出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、老年認知症、脳アミロイド血管症、変性認知症、血管及び変性由来の混合型認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上性麻痺に関連する認知症、皮質基底変性に関連する認知症、アルツハイマー病のびまん性レビー小体型、萎縮型加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）及び緑内障の処置に有用である。「中央地理的萎縮」としても知られている、ＡＭＤの「萎縮（dry）」形態は、神経感覚網膜下の網膜色素上皮層への萎縮に起因し、これが、目の中央部の光受容体（桿体及び錐体）の損失により視力低下を引き起こす。この病態に対して医学的又は外科的処置は現在のところ利用不可能である。これまでのところ利用可能な処置（例えば、国立眼研究所（National Eye Institute）によって提案された）は、萎縮黄斑変性症の進行を遅らせ得る抗酸化剤である、ルテイン及びゼアキサンチンの高用量と一緒にビタミンサプリメントの使用が含まれる。緑内障は、目内部の流体圧力が増し、それにより視神経及び視力の低下に不可逆的な損傷を引き起こす疾患である。Ａβは、実験的緑内障においてアポトーシス網膜神経節細胞と共局在し、かつ用量及び時間依存的様式で有意な網膜神経節細胞のアポトーシスを誘導する。
【００６５】
したがって、本発明は、医薬としての、化合物又はその薬学的に許容し得る塩に関する。
【００６６】
さらに、本発明は、β−セクレターゼ酵素（ＢＡＣＥ１）活性の阻害が治療上有効である、疾患及び／又は病態の処置における化合物の使用に関する。
【００６７】
さらに、本発明は、神経変性障害、認知機能低下、認知機能障害により特徴付けられる障害、認知症、及びβ−アミロイド沈着又は神経原線維変化の産生により特徴付けられる疾患の処置における化合物の使用に関する。
【００６８】
したがって、本発明は、アルツハイマー病、トリソミー２１（ダウン症）、オランダ型遺伝性アミロイドーシス脳出血（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、老年認知症、脳アミロイド血管症、変性認知症、血管及び変性由来の混合型認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上性麻痺に関連する認知症、皮質基底変性に関連する認知症、アルツハイマー病のびまん性レビー小体型、萎縮型ＡＭＤ、及び緑内障の処置における本発明の化合物の使用に関する。
【００６９】
本発明はまた、それを必要とする患者における過剰なＢＡＣＥ１活性に関する又は関連する障害の処置のための方法であって、該患者に有効量の開示化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含む、方法を提供する。本発明はまた、それを必要とする対象におけるＢＡＣＥ１活性を阻害するための方法であって、有効量の少なくとも１つの開示化合物又はその薬学的に許容し得る塩を対象に投与すること及び／又は対象の受容体と有効量の少なくとも１つの開示化合物又はその薬学的に許容し得る塩とを接触させることを含む、方法を提供する。本発明はまた、それを必要とする対象におけるβ-アミロイド沈着を寛解させるための方法であって、該対象に有効量の少なくとも１つの開示化合物又はその薬学的に許容し得る塩を投与することを含む、方法を提供する。
【００７０】
本発明は、それを必要とする対象におけるＢＡＣＥ１媒介の障害を処置する又は寛解するための治療法であって、それを必要とする対象に有効量の本明細書において記載された本発明の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩もしくはその組成物を投与することを含む、治療法を含む。
【００７１】
本明細書において使用されるとき、用語「対象」及び「患者」は、互換的に使用してもよく、処置を必要とする哺乳動物、例えば、ペット（例えば、イヌ、ネコなど）、家畜（例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギなど）及び実験動物（例えば、ラット、マウス、モルモットなど）を意味する。典型的には、対象は処置を必要とするヒトである。
【００７２】
本明細書において使用されるとき、用語「処置すること」又は「処置」は、所望の薬理学的及び／又は生理学的効果を得ることを指す。効果は、予防的（すなわち、障害又は疾患が発生する可能性を減少させること）又は治療的であることができ、これには、部分的又は十分に、以下の結果の一つ以上を達成することを含む：疾患、障害または症候群の程度を部分的に又は完全に減少させること；臨床症状又は障害に関連する指標を寛解する又は改善すること；あるいは疾患、障害又は症候群の進行の可能性を遅らせる、阻害する又は減少させること。
【００７３】
１日当たり利用可能な本発明の化合物の用量範囲は、通常、０．１〜３０００mg、好ましくは１〜２０００mg、より好ましくは１０〜１０００mg、最も好ましくは５０〜５００mgである。各用量単位は、好都合には０．１〜１０００mg、好ましくは２５〜２５０mgを含有し得る。
【００７４】
実際の薬学的有効量又は治療用量は、当然、当業者に公知の要素、例えば、患者の年齢及び体重、投与の経路ならびに疾患の重篤度に依存するであろう。いずれの場合でも、本組み合わせ（combination）は、患者の特有の状態に基づき、薬学的に有効な量を送達することを可能にする用量及び方法で投与されるであろう。
【００７５】
医薬組成物
本発明の化合物を投与するための適切な製剤は、当業者には明らかであろうし、かつ例えば、錠剤、丸剤、カプセル剤、坐剤、ロゼンジ剤、トローチ剤、液剤、シロップ剤、エリキシル剤、サッシェ剤、注射剤、吸入剤、及び粉末剤等を含む。医薬活性化合物の含量は、組成物全体の０．１〜９５wt.-％、好ましくは５〜９０wt.-％の範囲内にあるべきである。
【００７６】
適切な錠剤は、例えば、１種以上の本発明の化合物を、公知の賦形剤、例えば、不活性希釈剤、担体、崩壊剤、佐剤、界面活性剤、結合剤及び／又は滑沢剤と混合することによって得てもよい。錠剤はまた、幾つかの層からなってもよい。
【００７７】
併用療法
一つの実施態様において、本発明は、本明細書において記載された疾患又は障害を処置する又は寛解するための併用療法を含む。併用療法は、本発明の少なくとも１つの化合物を、下記群より選択される１つ以上の薬剤と組み合わせて投与することを含む：例えば、γセクレターゼ阻害剤又はモジュレーター；Ａβオリゴマー又はＡβ原線維の形成をブロッキングするアミロイド凝集阻害剤（例えば、ELND-005）；直接的又は間接的に作用する神経保護及び／又は疾患修飾物質；抗−酸化体（例えば、ビタミンＥ又はギンコライド）；抗炎症作用物質（例えば、ＣＯＸ阻害剤である、付加的に又は排他的にＡβ低下特性を有するＮＳＡＩＤ）；ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（スタチン）；アセチルコリンエステラーゼ阻害剤（例えば、ドネペジル、リバスチグミン、タクリン、及びガランタミン）；ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト（例えば、メマンチン）；ＡＭＰＡ受容体アゴニスト；ＡＭＰＡ受容体陽性モジュレーター、ＡＭＰＡｋｉｎｅ、モノアミン受容体再取り込み阻害剤、神経伝達物質の濃度又は放出を調節する物質；成長ホルモンの分泌を誘導する物質（例えば、イブタモレン・メシラート及びカプロモレリン）；ＣＢ−１受容体アンタゴニスト又はインバースアゴニスト；抗生物質（例えば、ミノサイクリン又はリファンピシン）；ＰＤＥ２、ＰＤＥ４、ＰＤＥ５、ＰＤＥ９、ＰＤＥ１０阻害剤、ＧＡＢＡＡ受容体インバースアゴニスト、ＧＡＢＡＡ受容体アンタゴニスト、ニコチン性受容体アゴニスト又は部分アゴニスト又は陽性モジュレーター、α４β２ニコチン性受容体アゴニスト又は部分アゴニスト又は陽性モジュレーター、α７ニコチン性受容体アゴニスト又は部分アゴニスト又は陽性モジュレーター；ヒスタミンＨ３アンタゴニスト、５ＨＴ−４アゴニスト又は部分アゴニスト、５ＨＴ−６アンタゴニスト、α２−アドレノ受容体アンタゴニスト、カルシウムアンタゴニスト、ムスカリン受容体Ｍ１アゴニスト又は部分アゴニスト又は陽性モジュレーター、ムスカリン受容体Ｍ２アンタゴニスト、ムスカリン受容体Ｍ４アンタゴニスト、代謝型グルタミン酸−受容体５陽性モジュレーター、抗うつ薬、例えば、シタロプラム、フルオキセチン、パロキセチン、セルトラリン及びトラゾドン；抗不安薬、例えば、ロラゼパム及びオキサゼパム；抗精神病薬、例えば、アリピプラゾール、クロザピン、ハロペリドール、オランザピン、クエチアピン、リスペリドン及びジプラシドン、ならびに本発明の化合物の効力及び／又は安全性を増大させ、及び／又は望ましくない副作用が低減されるようなやり方で受容体又は酵素を調節する他の物質。本発明の化合物はまた、上記の疾患及び病態の処置のための免疫療法（例えば、Ａβもしくはその一部との能動免疫化、又はヒト化抗−Ａβ抗体もしくはナノボディとの受動免疫化）と組み合わせて使用し得る。
【００７８】
併用療法は、本発明の化合物と１つ以上の他の薬剤の併用投与（co-administration）、該化合物及び１つ以上の他の薬剤の連続投与（sequential administration）、化合物及び１つ以上の他の薬剤を含有する組成物の投与、又は該化合物及び１つ以上の他の薬剤を含有する別個の組成物の同時投与（simultaneous administration）を含む。
【００７９】
実験の部
化合物の調製方法
本発明の化合物は、容易に入手可能な試薬及び出発物質を利用する慣用の方法を用いて調製することができる。本発明の中間体の調製において使用される試薬は、商業的に得ることができるか、又は文献に記載された標準的な手順によって調製することができるかのいずれかである。
【００８０】
マイクロ波反応は、Discover SPシステムを使用してＣＥＭ反応器中、又はBiotage, Initiator 60 EXP中で行った。ＮＭＲデータが提示される場合、スペクトルは、Varian-400（400MHz）で得られた。スペクトルは、重水素化溶媒を基準として括弧内に示されるプロトンの数、多重度及び、特定の場合、結合定数と共にテトラメチルシランからのppm低磁場として報告される。化合物は、以下に記載するような基本的な分取ＨＰＬＣ法によって精製した。
【００８１】
方法１：
移動相Ａ：水（０．０５％ＮＨ４ＯＨを含む）； 移動相Ｂ：ＡＣＮ； 流速：２５mL／分； 検出：ＵＶ２２０nm／２５４nm； カラム：Phenomenex Gemini C18 ２５０＊３０mm＊５um； カラム温度：３０℃。
時間（分単位）          ％Ａ          ％Ｂ
０．０                ６８          ３２
１２．００              ３８          ６２
１２．２０                ０        １００
１３．５                  ０        １００
１３．７                ９０          １０
【００８２】
方法２：
移動相Ａ：水（０．０５％ＮＨ４ＯＨを含む）； 移動相Ｂ：ＡＣＮ； 流速：２５mL／分； 検出：ＵＶ２２０nm／２５４nm； カラム： Durashell C18 ２５０＊３０mm＊５um； カラム温度：３０℃。
時間（分単位）          ％Ａ          ％Ｂ
０．０                ６７          ３３
１２．００              ４７          ５３
１２．２０                ０        １００
１３．５                  ０        １００
１３．７                ９０          １０
【００８３】
ＬＣ−ＭＳデータは、以下のクロマトグラフィー条件を利用することによって得られた：
【００８４】
方法１：
ＨＰＬＣシステム：Waters ACQUITY； カラム：Waters ACQUITY CSH（商標） C18 １．７μM
ガードカラム：Waters Assy. Frit、０．２μM、２．１mm； カラム温度：４０℃
移動相Ａ：ＴＦＡ：水（１：１０００、ｖ：ｖ）、移動相Ｂ：ＴＦＡ：ＡＣＮ（１：１０００、ｖ：ｖ）； 流速：０．６５mL／分； 注入量：２μL； 収集時間：約１．５分間
【００８５】
勾配プログラム：
時間（分）          Ｂ％
０                １０
０．８            ９０
１．２０          ９０
１．２１          １０
【００８６】
質量分析計パラメータ
質量分析計：Waters SQD； イオン化：陽性エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）；モードスキャン（０．２秒毎に１００〜１４００m/z）； ＥＳキャピラリー電圧：３．５kv； ＥＳコーン電圧：２５Ｖ； ソース温度：１２０℃； 脱溶媒和温度：５００℃； 脱溶媒和ガス流：窒素設定６５０（Ｌ／時間）； コーンガス流：窒素設定５０（Ｌ／時間）
【００８７】
方法２： 
ＨＰＬＣシステム：ＤＡ−及びＭＳ−検出器を備えたWaters Alliance； カラム： Waters XBridge C18 ４．６×３０mm、３．５μm； カラム温度：６０℃。
移動相：Ａ：ＴＦＡ：水（１：１０００、ｖ：ｖ）  移動相Ｂ：ＭｅＯＨ； 流速：４mL／分
勾配プログラム：
時間（分）          Ｂ％
０                ５
１．６            １００
１．８５          １００
１．９            １００
【００８８】
方法３：
ＨＰＬＣシステム：ＤＡ−及びＭＳ−検出器を備えたWaters Alliance； カラム： Waters XBridge C18 ４．６×３０mm、３．５μm； カラム温度：６０℃．
移動相：Ａ：ＴＦＡ：水（１：１０００、ｖ：ｖ）  移動相Ｂ：ＡＣＮ；流速：５mL／分
勾配プログラム：
時間（分）          Ｂ％
０                ３
０．２            ３
１．６        １００
１．７        １００
【００８９】
方法４：
ＨＰＬＣシステム：ＤＡ−及びＭＳ−検出器を備えたWaters Alliance Detector； カラム： Waters XBridge C18 ４．６×３０mm、３．５μm； カラム温度：６０℃。
移動相：Ａ：ＴＦＡ：水（１：１０００、ｖ：ｖ）  移動相Ｂ：ＭｅＯＨ； 流速：４mL／分
勾配プログラム：
時間（分）          Ｂ％
０                ５
０．２            ５
１．５        １００
１．７５      １００
１．８５          ５
【００９０】
化合物のＳＦＣ分離及び特性を、以下の方法により実施した：
【００９１】
方法Ａ：
機器：Thar SFC 80； カラム：ＡＤ ２５０mm＊３０mm、５μm； 移動相：Ａ：超臨界ＣＯ２、Ｂ：ＩＰＡ（０．０５％ＤＥＡ）、６０mL／分でＡ：Ｂ＝８０：２０； カラム温度：３８℃； ノズル圧力：１００Bar； ノズル温度：６０℃； 蒸発温度：２０℃； トリマー温度：２５℃； 波長：２２０nm。
【００９２】
方法Ｂ
機器：SFC MG2； カラム：OＪ ２５０mm＊３０mm、５um； 移動相：Ａ：超臨界ＣＯ２、Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ＤＥＡ）、７０mL／分でＡ：Ｂ＝９０：１０； カラム温度：３８℃； ノズル圧力：１００Bar； ノズル温度：６０℃； 蒸発温度：２０℃； トリマー温度：２５℃； 波長：２２０nm。
【００９３】
本発明は、以下の略語が使用され得る、以下の実施例により例示される。
【００９４】
【表４】
2015529666.tif 000011
2015529666.tif 000012
【００９５】
実施例１
【化３】
2015529666.tif 000013
【００９６】
工程１：  中間体３の合成
【化４】
2015529666.tif 000014
無水ＴＨＦ（１Ｌ）中の６−ブロモ−インダン−１−オン（１００．００ｇ、４７３．８mmol）の混合物に、０℃で、ｔ−ＢｕＯＫ（５８．５ｇ、５２１．２mmol）を加えた。５分後、混合物を室温に温め、さらに１０分間撹拌した後、メチルメタクリラート（４９．８ｇ、５３．２mL、４９７．５mmol、１．０５当量）を一度に加えた。２時間後、メチルアクリラート（４９．０ｇ、５１．２mL、５６８．６mmol、１．２当量）を反応混合物に加えた。室温で３時間の撹拌の後、ＭｅＩ（１０１ｇ、４４．３mL、７１０．７mmol、１．５当量）を反応混合物に加え、混合物をさらに１６時間撹拌した。Ｈ２Ｏ（１Ｌ）を加え、続いてＬｉＯＨ＊Ｈ２Ｏ（７９．５ｇ、１８９５mmol、４．０当量）を加えた。混合物を室温で２８時間撹拌した。ＴＨＦを減圧下で除去した。残留物をＨ２Ｏ（１Ｌ）で希釈し、濾過し、濾液が中性になるまでＨ２Ｏで洗浄した。生成物をＭｅＯＨで洗浄して、中間体３（５０ｇ）を与えた。
【００９７】
工程２：  中間体４の合成
【化５】
2015529666.tif 000015
ＦｅＣｌ３（６．０ｇ、３７．０mmol）とトルエン（６０mL）との混合物を、０℃に冷却した。ＴＨＦ（４８mL）中の中間体３（１１．９ｇ、３７．０mmol）の混合物を、上記混合物に加えた。混合物を０℃で５分間撹拌し、次に−１０℃に冷却した。ＴＨＦ（１２mL）中のｔ−ＢｕＮＨ２−ＢＨ３（３．５ｇ、４０．７mmol）の溶液を、反応混合物に−１０℃で滴下した。反応混合物を約−１０℃で３０分間撹拌し、ＨＣｌ水溶液（６N、１０mL）でクエンチし、約０℃で３０分間撹拌し、次に室温に温まるにまかせた。混合物を濃縮してＴＨＦを除去し、トルエン（６０mL）を加えた。水層を除去し、有機相を水（３×６０mL）で洗浄した。有機相を半分の容量に濃縮し、５０℃に加熱して溶液を得て、次に１時間かけて０℃に冷却し、０℃で１時間保持した。固体を濾過し、冷（０℃）トルエン（１２mL）で洗浄し、減圧下で乾燥させて、化合物４（９．９３ｇ）を与えた。
LC-MS (方法1): tR = 1.24分, MS (ESI) m/z 323.1 [M+H] + .
1H-NMR (CDCl3): δ: 7.889-7.894 (s, 1H), 7.671-7.696 (d, 1H), 7.311-7.332 (d, 1H), 3.605 (s, 1H), 2.981 (s, 2H), 1.769-1.797 (m, 4H), 1.072-1.082 (m, 2H), 1.019-1.056 (m, 6H).
【００９８】
工程３：  中間体５の合成
【化６】
2015529666.tif 000016
ＡＣＮ（１２０mL）中の中間体４（６．０ｇ、１８．６mmol）とＣｕＩ（０．７１ｇ、３．７２mmol、０．２当量）との混合物を、６０℃に加熱し、２−（フルオロスルホニル）ジフルオロ酢酸（１３．２ｇ、７４．４mmol）を加えた。混合物を６０℃で２０分間撹拌した。混合物を冷却し、Ｈ２Ｏでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ及びブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗生成物１５ｇを与え、これをシリカゲルカラム（溶離剤： 石油エーテル：酢酸エチル ３００：１〜５０：１）により精製して、中間体５（４．６ｇ）を与えた。
【００９９】
工程４：  中間体６の合成
【化７】
2015529666.tif 000017
乾燥ＴＨＦ（４０mL）中の中間体５（３．４ｇ、９．２mmol）とチタン（IV）エトキシド（２１ｇ、９２mmol）との混合物を、室温で１時間撹拌した。（Ｓ）−Ｎ−tert−ブチルスルフィンアミド（４．５ｇ、３６．８mmol）を加え、得られた混合物をＮ２雰囲気下、８０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を冷却し、水（４００mL）を加えた。混合物を濾過し、水層を酢酸エチル（３×４００mL）で抽出した。分離した有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１）により精製して、中間体６（３．９ｇ）を生成した。
【０１００】
工程５：  中間体７の合成
【化８】
2015529666.tif 000018
ｔ−ＢｕＬｉ溶液（３２mL、４１．０mmol、ヘキサン中１．３M ）を、無水ＴＨＦ（５０mL）中のエチルビニルエーテル（７．０５ｇ、８２mmol）の溶液にＮ２雰囲気下、−７８℃で滴下し、混合物を２０分間撹拌した。得られた混合物を０℃でさらに４５分間撹拌し、次に−７８℃に冷却した。無水ＴＨＦ（８０mL）中の中間体６（３．９ｇ、８．２mmol）を含有している、−７８℃で予め冷却した溶液を滴下し、混合物を−７８℃で２時間撹拌した。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（５０mL）でクエンチし、酢酸エチル（３×３００mL）で抽出した。有機相を合わせ、減圧下で濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法２）により精製して、中間体７（３．３ｇ）を与えた。
【０１０１】
工程６：  中間体８の合成
【化９】
2015529666.tif 000019
中間体７（１０ｇ、１８．２mmol）をＤＣＭ（５：１、１００mL）中のＭｅＯＨの溶液に加え、−７８℃に冷却した。オゾンを混合物中に２０分間泡立て入れた。１０分間のさらなる撹拌の後、混合物をＮ２で１５分間パージし、次にＭｅ２Ｓ（２０mL）で−７８℃にて処理した。それが室温に温まるにまかせ、室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１〜５：１）により精製して、中間体８（６ｇ）を生成した。
【０１０２】
工程７：  中間体９の合成
【化１０】
2015529666.tif 000020
濃硫酸（４８μL）をＤＭＡ（２０mL）に加え、溶媒をＮ２で２０分間パージした。５０mL容量の丸底フラスコに、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（０．３ｇ）及びＸｐｈｏｓ（１．２５ｇ）をＮ２下で加え、次に上記溶媒を移し入れた。得られた混合物を８０℃で３０分間加熱して、混合物Ａを与えた。
【０１０３】
別のフラスコ中、ＤＭＡ（５０mL）をＮ２でパージし、中間体８（２．２ｇ、４．０mmol）、Ｚｎ（ＣＮ）２（０．５ｇ、４．０mmol）及び亜鉛粉末（１４．１mg）を加えた。混合物Ａをこの溶液に加え、得られた混合物を９０℃で１時間加熱した。反応混合物を室温に冷まし、水（１００mL）及び酢酸エチル（１００mL）で希釈し、１０分間撹拌した。混合物をCeliteを通して濾過し、有機層を分離した。水層を酢酸エチル（２×３０mL）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。残留物をシリカゲルゲルフラッシュカラム（石油エーテル：酢酸エチル； ２０：１〜３：１）により精製して、中間体９（１．５ｇ）を生成した。
【０１０４】
工程８：  中間体１０の合成
【化１１】
2015529666.tif 000021
ＭｅＯＨ（１１mL）中の中間体９（０．５ｇ、１．０１mmol）の混合物に、ジオキサン中のＨＣｌ（４M、２．２５mL）を加えた。得られた混合物を１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、粗中間体１０（５２９mg）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１０５】
工程９：  中間体１１の合成
【化１２】
2015529666.tif 000022
ＤＣＭ（６mL）中の中間体１０（５２９mg、１．３５mmol）の溶液に、Ｈ２Ｏ（６mL）及びＮａＨＣＯ３（１．１３ｇ、１３．５mmol）を室温で加えた。チオホスゲン（３１０mg、２．７mmol）を激しく撹拌しながら加え、混合物を１時間撹拌した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（３×４０mL）で抽出した。有機層を合わせ、ブライン（２×４０mL）で洗浄し、乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗中間体１１（５２０mg）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１０６】
工程１０：  中間体１２の合成
【化１３】
2015529666.tif 000023
ＴＨＦ（１０mL）中の中間体１１（２００mg、０．５２mmol）の混合物に、３，３，３−トリフルオロ−プロピルアミン塩酸塩（１５６mg、１．０４mmol）及びＴＥＡ（５２６mg、５．２mmol）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３０mL）で抽出した。有機層を合わせ、ブライン（１０mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を与えた。残留物を分取ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル； １：１）により精製して、中間体１２（２６５mg）を与えた。
【０１０７】
工程１１：  実施例１の合成
【化１４】
2015529666.tif 000024
ＭｅＯＨ（１０mL）中の中間体１２（２６５mg、０．５９mmol）の混合物に、水酸化アンモニウム水溶液（１．５mL）及びｔ−ＢｕＯ２Ｈ（０．８mL、ノナン中５．０M 溶液）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌し、次に飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（０．５mL）でクエンチした。残留物をＥｔＯＡｃ（２０mL）とＨ２Ｏ（１０mL）に分配した。有機層を分離し、ブライン（１０mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（方法２）により精製して、実施例１（８６．９mg）を与えた。
LC-MS (方法1):  tR = 0.92分, MS (ESI) m/z 435.2 [M+H]+.
1H-NMR (CD3OD): δ 7.65 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.82-3.85 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.24 (s, 1H), 3.15 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.56 (m, 3H), 1.23-1.79 (m, 5H), 0.956-1.02 (m, 7H).
19F NMR: δ -66.64.
【０１０８】
中間体２０の合成
工程１：  中間体１３の合成
【化１５】
2015529666.tif 000025
ＤＭＦ（２００mL）中の中間体４（２０．０ｇ、６１．９mmol）の混合物に、ＮａＨ（５．０ｇ、１２３．８mmol）を０℃で加え、混合物を０℃で１５分間撹拌した。ヨウ化メチル（１７．６ｇ、１２３．８mmol）を０℃で加え、混合物を室温に温め、室温で１．５時間撹拌した。混合物をＨ２Ｏでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏで、続いてブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮して、粗生成物を与え、これをシリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル； ３０：１〜５：１）により精製して、中間体１３（２０ｇ）を与えた。
【０１０９】
工程２：  中間体１４の合成
【化１６】
2015529666.tif 000026
乾燥ＴＨＦ（２００mL）中の中間体１３（２０．０ｇ、５９．３mmol）とチタン（IV）エトキシド（１０８．２ｇ、４７４．４mmol）との混合物を、室温で１時間撹拌した。（Ｓ）−Ｎ−tert−ブチルスルフィンアミド（２９ｇ、２３７．２mmol）を加え、得られた混合物を８０℃でＮ２雰囲気下、一晩撹拌した。反応混合物を冷却し、水（４００mL）を加えた。混合物を濾過し、水層を酢酸エチル（３×４００mL）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗中間体を与えた。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル； ２０：１）により精製して、中間体１４（１８．４ｇ）を生成した。
【０１１０】
工程３：  中間体１５の合成
【化１７】
2015529666.tif 000027
ｔ−ＢｕＬｉ（１３１mL、１７０．３mmol、ヘキサン中１．３M ）を、無水ＴＨＦ（１００mL）中のエチルビニルエーテル（１２．３ｇ、１７０．３mmol、５．０当量）の溶液に−７８℃でＮ２下、滴下し、混合物を２０分間撹拌した。得られた混合物を０℃でさらに４５分間撹拌し、−７８℃に再冷却した。無水ＴＨＦ（５０mL）中の中間体１４（１５．０ｇ、３４．１mmol）の予め冷却した溶液を−７８℃で滴下し、混合物を−７８℃で２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（５０mL）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×３００mL）で抽出した。有機相を合わせ、減圧下で濃縮して、残留物を与え、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル； ５０：１〜３：１）により精製して、それぞれ中間体１５（１１ｇ）及び１５Ａ（１．４４ｇ）を与えた。
LC-MS (方法 1) tR = 5.67分; MS (ESI) m/z 514.2 [M+H]+.
1H-NMR (CD3OD): δ7.546 (s, 1H), 7.454-7.479 (d, 1H), 7.208-7.228 (d, 1H), 4.620-4.755 (d, 1H), 4.373-4.381 (m, 1H),4.048-4.055 (m, 1H), 3.844-3.903 (m, 2H), 3.458-3.474 (s, 3H), 2.986-3.000 (m, 2H), 2.326-2.377 (m, 1H), 1.969-2.001 (m, 1H), 1.671 (s, 1H), 1.457-1.520 (t, J = 12 Hz, 3H),1.373-1.408 (m, 2H), 1.328 (s, 9H), 1.169-1.278 (m, 5H), 1.073-1.106(d, 3H).
【０１１１】
工程４：  中間体１６の合成
【化１８】
2015529666.tif 000028
中間体１５（４．８ｇ、９．３７mmol）を、ＭｅＯＨ中のＤＣＭの混合物（５：１、４０mL）に加え、混合物を−７８℃に冷却した。オゾンを混合物中に２０分間泡立て入れた。混合物をＮ２で１０分間パージし、Ｍｅ２Ｓ（１０mL）で−７８℃にて処理した。混合物が室温に温まるにまかせ、室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル； ２０：１〜８：１）により精製して、中間体１６（３．５ｇ）を与えた。
LC-MS (方法1): tR = 1.30分; MS (ESI) m/z 516.1 [M+H]+.
1H NMR (CDCl3): δ7.84 (s, 1H), 7.42-7.44 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.09-7.11 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.40 (s, 1H), 4.26-4.39 (m, 2H), 3.44 (s, 3H), 2.93-2.97 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 2.70-2.74 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 2.22-2.30 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 1.75-1.79 (m, 1H), 1.61-1.66 (m, 1H), 1.54-1.57 (m, 2H), 1.32-1.38 (m, 4H), 1.14 (s, 9H), 1.06-1.08 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.89-0.91 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.67-0.74 (m, 1H).
【０１１２】
工程５：  中間体１７の合成
【化１９】
2015529666.tif 000029
ＭｅＯＨ（１０mL）中の中間体１６（５．１ｇ、１０mmol）の混合物に、ジオキサン中のＨＣｌ（４．０M、８．０mL）を加えた。得られた混合物を１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、粗中間体１７（６．０ｇ）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１１３】
中間体１７の代替合成
工程１．  中間体１８の合成
【化２０】
2015529666.tif 000030
中間体１４（５．００ｇ、１１．４mmol）、ジエトキシアセトニトリル（３．５mL、２４．４mmol）及びＴＨＦ（５０mL）の混合物を、−７℃に冷却し、ＬＤＡ（２５．０mL、４５．０mmol、ＴＨＦ／ヘプタン／エチルベンゼン中１．８M ）で滴下処理した。混合物を−７℃〜−２℃で２時間撹拌し、次に水（５０mL）及び飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２５mL）でクエンチした。ヘキサン（１００mL）を加え、層を分離した。有機層を水、ブラインで洗浄し、減圧下で濃縮して、粗中間体１８（９．００ｇ）を与え、これを次の工程で直接使用した。
LC-MS (方法 1):  tR = 3.74 分, MS (ESI) m/z 523.2/525.2 [M-OEt+H]+
【０１１４】
工程２．  中間体１７の合成
【化２１】
2015529666.tif 000031
ＥｔＯＨ（３０mL）中の上記中間体１８（９．００ｇ、１１．４mmol）の混合物を、ＨＣｌ水溶液（６N、２０mL）で処理した。反応混合物を７５℃で２４時間加熱し、室温に冷ました。反応物をトルエン（５０mL）で抽出し、水相（ｐＨ＝８）をＮａＯＨ水溶液（２N、約６０mL）で塩基性化した。トルエン（１００mL）を加え、混合物を１０分間撹拌した。有機層を分離し、ＮａＨＣＯ３水溶液、ブラインで洗浄し、減圧下で濃縮した。ヘキサンを加え、溶液を減圧下で濃縮して、粗中間体１７（３．４７ｇ）を与え、これを次の工程で直接使用した。
LC-MS:  tR = 0.86 分, MS (ESI) m/z 410.2/412.2 [M+H]+
【０１１５】
工程６：  中間体１９の合成
【化２２】
2015529666.tif 000032
窒素下、ＤＭＦ（１５mL）中の化合物１７（５００mg、１．９mmol）、Ｚｎ（ＣＮ）２（３００mg、２．６mmol）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１５０mg、０．１６mmol）、ｄｐｐｆ（１６０mg、０．３２mmol）及びＺｎ粉末（６０mg、０．９mmol）の混合物を、CEMマイクロ波反応器中、１２０℃に３時間加熱した。混合物を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルカラム（溶離剤：石油エーテル：酢酸エチル； ２０：１〜８：１）により精製して、中間体１９（３００mg）を与えた。
LC-MS:  tR = 0.880; MS (ESI) m/z 308.1 [M+H] +.
【０１１６】
工程７：  中間体２０の合成
【化２３】
2015529666.tif 000033
ＣＨＣｌ３（２０mL）中の中間体１９（３．１ｇ、７．４mmol）の溶液に、ＴＭＳＩ（１０mL）を加え、６５℃で２時間撹拌した。混合物を室温に冷まし、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（１０mL）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０mL）を加え、混合物を１０分間撹拌した。残留物をＤＣＭ（４０mL）とＨ２Ｏ（１０mL）とに分配した。有機層を分離し、ブライン（１０mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗中間体２０（２．６ｇ）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１１７】
中間体２６の合成
工程１：  中間体２２の合成
【化２４】
2015529666.tif 000034
無水ＴＨＦ（２０mL）中の中間体２１（２．０ｇ、１０．６mmol）の混合物を、メチルマグネシウムブロミド（１４mL、４２mmol、Ｅｔ２Ｏ中３．０M ）に−３０℃でＮ２雰囲気下、加えた。混合物を撹拌−３０℃で４時間撹拌し、次に０℃で撹拌しながら、Ｈ２Ｏ（４０mL）及びＨＣｌ水溶液（１M、５０mL）の添加によりクエンチした。混合物を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×５０mL）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２×５０mL）で洗浄し、乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗中間体２２（２．１ｇ）を与え、これを精製せずに次の工程で直接使用した。
1H NMR: (CDCl3): δ 4.97 (br, 1H), 3.10 (s, 2H), 2.17 (br, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.20 (s, 6H).
【０１１８】
工程２：  中間体２３の合成
【化２５】
2015529666.tif 000035
無水ＤＣＭ（５０mL）中の中間体２２（３．０ｇ、１５．９mmol）の混合物に、ＤＡＳＴ（２．３mL、１７．４mmol）を−７８℃でＮ２雰囲気下、加えた。混合物を−７８℃で１時間撹拌し、次に一晩室温に温まるにまかせた。混合物を０℃に冷却し、撹拌しながら０℃で飽和ＮａＨＣＯ３の水層（３０mL）のゆるやかな添加によりクエンチした。混合物を分離し、水層をＤＣＭ（２×２０mL）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２×３０mL）で洗浄し、乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗中間体２３（２．５ｇ）を生成し、これを精製せずに次の工程で直接使用した。
1H NMR: (CDCl3): δ 4.82 (br, 1H), 3.30-3.35 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.24-3.26 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.37 (s, 3H), 1.35 (s, 3H).
19F NMR: (CDCl3): δ -144.93.
【０１１９】
工程３：  中間体２４の合成
【化２６】
2015529666.tif 000036
無水ＤＣＭ（１０mL）中の中間体２３（２．０ｇ、１０．５mmol、粗）の混合物に、ジオキサン中のＨＣｌ（４M、１０mL、４０mmol）を撹拌しながら加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、その後、溶媒を減圧下で除去した。残留物を、ＤＣＭ−石油エーテルの混合物（１：１、３×１０mL）で処理し、沈殿物を回収し、減圧下で乾燥させて、粗中間体２４（１．１ｇ）を生成し、これを精製せずに次の工程で直接使用した。
1H NMR: (CD3OD): δ 3.15-3.25 (d, J = 20.0 Hz, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.48 (s, 3H). 19F NMR: (CDCl3): δ -147.59.
【０１２０】
中間体２４は、下記の手順に従ってジベンジルアミンから代替的に得ることができる：
工程１：  中間体２２ａの合成
【化２７】
2015529666.tif 000037
ＭｅＯＨ（３．８mL）中のＬｉＢｒ（１．６６ｇ、１９．０６mmol、０．２当量）のスラリーに、Ｂｎ２ＮＨ（１８．８０ｇ、９５．３０mmol、１．０当量）を約２０〜２５℃で加えた。イソブチレンオキシド（１０．３１ｇ、１４２．９５mmol、１．５当量）を、温度を６５℃未満に維持できる速度で加えた。添加が完了した後、バッチを約６０℃で６時間撹拌した。バッチを約２０℃に冷却し、トルエン（３７．６mL）及び水（１８．８mL）を加えた。約５分間の撹拌の後、層を分離した。有機相を減圧下で濃縮して油状物とし、トルエンを加え、溶液を再び蒸留して油状物とした。化合物２２ａを、収率９９％でトルエン溶液（３３．８８ｇ、７５．１wt.％）として得て、次の工程で直接使用した。
1H NMR: (CDCl3): δ 1.11 (s, 6H), 2.42 (s, 1H), 2.56 (s, 2H), 3.70 (s, 4H), 7.23-7.35 (m, 10H).
【０１２１】
工程２：  中間体２３ａの合成
【化２８】
2015529666.tif 000038
無水トルエン（４０mL）中の中間体２２ａ（１０．３２ｇ、７５．１wt.％、２８．７７mmol）の溶液を、−２０℃に冷却した。温度を−１０℃未満に維持しながら、Deoxo-Fluor（７．０ｇ、３１．６４mmol、１．１０当量）を滴下した。混合物を−２０℃〜−１０℃で３時間撹拌した。次に、温度を１０℃未満に維持しながら、反応物をＫＯＨ水溶液（８５wt.％ＫＯＨペレットの６．４６ｇ、９６．８６mmol、水２５．８４ｇ中３．４０当量）の添加によりクエンチした。混合物を室温に温め、層を分離した。有機層を水（３×２５mL）で洗浄した。有機相を減圧下で濃縮し、水含有が＜２００ppmとなるまでヘプタンで繰り返し蒸留した。粗生成物をヘプタン（２５mL）で希釈し、シリカゲルパッド（シリカゲル８ｇ）を通して濾過した。シリカゲルパッドをヘプタン（２×２０mL）で濯ぎ、合わせたヘプタンの濾液を最小容量まで減圧下で蒸留し、イソプロパノールで繰り返し蒸留した。イソプロパノール（４０mL）を加え、溶液を−１０℃に冷却した。温度を３０℃未満に維持しながら、イソプロパノール中の塩化水素溶液（８．３mL、５．２N、４３．１６mmol、１．５０当量）を加えた。２０〜２５℃で１時間撹拌した後、混合物を７５℃に加熱して、清澄な溶液を得て、この温度で１５分間保持した。混合物を２０〜２５℃に冷却し、この温度で２〜３時間撹拌した。固体を濾過し、ヘプタンで洗浄し、２０〜２５℃にて減圧下で乾燥させて、生成物を白色の固体（５．７４ｇ、９１wt.％）として収率６５％で与えた。
1H NMR: (CDCl3): δ 1.31-1.35 (d, J = 21.5 Hz, 6H), 3.35-3.38 (d, J = 18.8 Hz, 2H), 4.39-4.45 (dd, J = 18.6 Hz, J = 3.5 Hz, 4H), 7.50-7.62 (m, 10H).
19F NMR: (CDCl3): δ -143.58.
【０１２２】
中間体２３ａは、下記の手順に従ってジベンジルアミンから代替的に得ることができる：
【化２９】
2015529666.tif 000039
Dean-Starkトラップ（イソブチルアルデヒドを予め充填した）を備えた反応容器に、ジベンジルアミン（４０．０６ｇ、２０３．０６mmol）、イソブチルアルデヒド（１９．０４ｇ、２６４．９８mmol、１．３０当量）及びトルエン（２０mL）を入れた。温度を徐々に約１１５℃に上げながら、混合物を窒素下、加熱還流して水（約３．８mL）を約４時間で除去した。次に過剰量のイソブチルアルデヒド及びトルエンを減圧下で蒸留した。粗液体を−１０℃に冷却し、Ｎ，Ｎ，−ジメチルアセトアミド（１００mL）中のＮ−フルオロベンゼンスルホンイミド（ＮＦＳＩ、７６．８４ｇ、２４３．６７mmol、１．２０当量）の溶液を、２０℃未満でゆっくりと加えた。完全に変換するまで（５〜２０時間）、混合物を室温で撹拌した。混合物を０℃に冷却し、Ｎ，Ｎ，−ジメチルアセトアミド（４８mL）中のＮａＢＨ４（４．２２ｇ、１１１．６８mmol、０．５５当量）の溶液を２０℃未満で加えた。添加の後、混合物を室温で２．５時間撹拌した。混合物を１０℃に冷却し、水（４０mL）中のＮａＯＨ溶液（１０．５６ｇ、２６３．９８、１．５０当量）をゆっくりと加え（ガスが放出した）、続いて水２００mLを加えた。混合物を室温で０．５時間撹拌し、ヘプタン（２５０mL）で抽出した。有機層を水（２×１５０mL）で洗浄し、常圧で蒸留（１１５℃まで）した。２−プロパノール（１５０mL）を加え、混合物を蒸留して溶媒（５０mL）を除去した。無水酢酸（２．０７ｇ、２０．２９mmol、０．１０当量）を約３０℃で加え、０．５時間撹拌した。混合物に、２−プロパノール中の４．５M ＨＣｌ（５４mL、２４３．６７mol、１．２０当量）を、約３０℃で加えた。得られた懸濁液を６０℃で１時間撹拌し、次に２０℃に１時間冷却した。固体を濾過し、２−プロパノール（５０mL）で濯ぎ、乾燥させて、白色の固体（２３ａ）（４７．４６ｇ、純度９７．７％）を収率７４％で与えた。
【０１２３】
工程３：  中間体２４の合成
【化３０】
2015529666.tif 000040
水素化容器に、１０％パラジウム担持炭素（水で５０％湿潤、０．５３ｇ、０．２５mmol、０．０１当量）、２３ａ（８．７４ｇ、８９．５wt.％、２５．４１mmol、１．００当量）及びメタノール（２４mL）を入れた。混合物を６０℃にてＨ２４００psiで５〜８時間水素化した。２０〜２５℃に冷却したあと、混合物を、Celiteパッドを通して濾過し、パッドをＭｅＯＨで濯いだ。溶媒を４〜５mLの容量まで減圧下で５０℃にて蒸留した。ＭＴＢＥ（２５mL）を撹拌しながらバッチに滴下して、スラリーを形成した。５０℃で３０分間の撹拌の後、バッチを２０〜２５℃に冷却し、この温度で１時間保持し、濾過した。固体をＭＴＢＥで濯ぎ、次に２５℃で４時間、減圧下で乾燥させた。化合物２４を白色の固体（３．２４ｇ、９６wt.％）として収率９６％で得た。 1H NMR: (CD3OD): δ 1.44-1.49 (d, J = 21.2 Hz, 6H), 3.13-3.18 (d, J = 19.7 Hz, 2H). 19F NMR: (CDCl3): δ -147.55.
【０１２４】
工程４：  中間体２５の合成
【化３１】
2015529666.tif 000041
ＴＨＦ（５．０Ｌ）中のチオウレア（２３．０ｇ、３０２mmol）の撹拌した混合物に、アルゴン下、０℃でＮａＨ（２９．９ｇ、７５５mmol、鉱油中６０％）を加えた。５分後、氷浴を取り外し、反応混合物を室温で１０分間撹拌した。混合物を０℃に冷却し、Ｂｏｃ２Ｏ（１３８ｇ、６３５mmol）を加えた。その温度で３０分間の撹拌の後、氷浴を取り外した。得られたスラリーを室温でさらに２時間撹拌した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５００mL）でクエンチし、水（５．０Ｌ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×２．０Ｌ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、中間体２５（８０．０ｇ）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
LCMS (方法 1): tR = 1.15 分, MS (ESI) m/z 575.2 [2M+Na]+.
【０１２５】
工程５：  中間体２６の合成
【化３２】
2015529666.tif 000042
中間体２５（３．９ｇ、１４．２mmol）と無水ＴＨＦ（２８５mL）との混合物に、ＮａＨ（０．６８ｇ、１７．０mmol、鉱油中６０％）を０℃で加え、混合物を１時間撹拌し、次にＴＦＡＡ（２．２０mL、１５．６mmol）を加え、撹拌をさらに１時間続けた。無水ＴＨＦ（１３０mL）中の中間体２４（２．０ｇ、１５．６mmol）とＥｔ３Ｎ（３．９６mL、２８．４０mmol）との予め混合した混合物を加え、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。水（１５０mL）を加えて反応物をクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃ（３×２００mL）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離剤：石油エーテル：酢酸エチル ５０：１〜８：１）により精製して、中間体２６（２．４９ｇ）を与えた。
LC-MS (方法 1): tR = 1.08 分, MS (ESI) m/z 194.8 [M-55]+.
1H NMR (CD3OD): δ 3.88-3.93 (m, 2H), 1.53 (s, 9H), 1.43 (s, 3H), 1.38 (s, 3H)
19F NMR (CD3OD): δ -144.15
【０１２６】
実施例２
【化３３】
2015529666.tif 000043
【０１２７】
工程１：  中間体２７の合成
【化３４】
2015529666.tif 000044
ＤＭＦ（５mL）中の中間体２０（５５０mg、１．６１mmol）の溶液に、中間体２６（４２５mg、１．６９mmol）、ＥＤＣＩ（６１４mg、３．２２mmol）及びＤＩＥＡ（４１６mg、３．２２mmol）を加えた。混合物を室温で３６時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（２００mL）を、続いて水（２０mL）を加え、混合物を１０分間撹拌した。有機層を分離し、水（３×２０mL）、ブライン（３×５０mL）で洗浄し、乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗生成物を生成した。残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル； ５：１）により精製して、中間体２７（５４７mg）を生成した。
LC-MS: tR = 1.14; MS (ESI) m/z 513.3 [M+H]+.
【０１２８】
工程２：  実施例２の合成
【化３５】
2015529666.tif 000045
ＤＣＭ（５mL）中の中間体２７（４００mg、０．５６mmol）の混合物に、ＴＦＡ（１mL）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。この混合物に、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０mL）を加え、１０分間撹拌した。混合物をＤＣＭ（１０mL）とＨ２Ｏ（１０mL）とに分配した。有機層を分離し、ブライン（１０mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（基本方法１）及びＳＦＣの方法Ａにより精製して、実施例２の化合物（３０３．９mg）を与えた。
LC-MS (方法 1): tR = 0.90 分, MS (ESI) m/z 413.2[M+H]+.
1H-NMR (CD3OD): δ 7.63-7.65 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.49-7.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.69-3.76 (m, 2H), 3.26-3.30 (m, 1H), 3.15-3.19 (m, 1H), 2.55-2.59 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 1.79-1.84 (m, 1H), 1.27-1.63 (m, 11H), 1.03-1.09 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 1.00-1.01 (t, J = 4.0 Hz, 3H), 0.96-0.97 (d, J = 4.0 Hz, 3H). 19F NMR: (CD3OD): δ -139.5.
【０１２９】
実施例３
【化３６】
2015529666.tif 000046
【０１３０】
工程１：  中間体２８の合成
【化３７】
2015529666.tif 000047
２−メチルプロポナール（９．３ｇ、１２９mmol）をｔ−ＢｕＮＨ２（４．７５ｇ、１２９mmol）に０℃で加え、室温で２時間撹拌した。この混合物に、ＣＨＣｌ３（１３０mL）を加え、混合物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。得られた溶液に、ＮＣＳ（１８．２０ｇ、１３６mmol）を０℃で加え、続いて室温で５時間撹拌した。水（１００mL）を反応混合物に注ぎ、混合物をＣＨＣｌ３（３×１００mL）で抽出した。合わせた有機層を水（２００mL）で洗浄し、減圧下で濃縮した。得られた残留物に、濃ＨＣｌを加えた。混合物を室温で５時間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３（２００mL）を加えた。生成物をＣＨＣｌ３で抽出し、残留物を大気圧で蒸留して、中間体２８（２ｇ）を得た。
1H NMR (CDCl3): δ 9.44 (s, 1H), 1.65 (s, 6H).
【０１３１】
工程２：  中間体２９の合成
【化３８】
2015529666.tif 000048
無水ＴＨＦ（２２mL）中の中間体２８（１．０６ｇ、１０mmol）とチタン（IV）エトキシド（２．７２mL、１２mmol）との混合物に、（±）Ｎ−tert−ブチルスルフィンアミド（１．２１ｇ、９mmol）を加えた。得られた混合物を還流下、Ｎ２雰囲気下、４時間撹拌した。反応混合物を冷却し、水（２０mL）を加えた。得られた混合物を濾過し、水層を酢酸エチル（３×２０mL）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、中間体２９（１ｇ）を与えた。
1H NMR (CDCl3): δ 7.94 (s, 1H), 1.71 (s, 6H), 1.14(s, 9H).
【０１３２】
工程３：  中間体３０の合成
【化３９】
2015529666.tif 000049
無水ＴＨＦ（５mL）中の中間体２９（０．７ｇ、３．３３mmol）の溶液に、ＮａＢＨ４（０．２５ｇ、６．６６mmol）を０℃で加えた。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（５mL）、ＫＨＣＯ３水溶液（２０mL）、及びＥｔＯＡｃ（２０mL）でクエンチした。水層をＥｔＯＡｃ（２×２０mL）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗中間体３０（２６０mg）を生成して、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
1H NMR (CDCl3): δ 3.40-3.45 (m, 1H), 3.11-3.17 (m, 1H), 1.55-1.57 (m, 6H), 1.23 (s, 9H).
【０１３３】
工程４：  中間体３１の合成
【化４０】
2015529666.tif 000050
乾燥ＭｅＯＨ（３mL）中の中間体３０（４５０mg、２．１２mmol）の混合物に、ジオキサン中のＨＣｌ（４M、２mL）を加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、粗生成物３１を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１３４】
実施例３を、実施例１と同様の方法で、工程１０で中間体３１を使用して合成した。
LC-MS (方法 1):  tR= 0.86 分, MS (ESI) m/z 429.2 [M+H]+.
1H NMR: (CD3OD): δ 7.60-7.62 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.45-7.47 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 3.76-3.85 (m, 2H), 3.11-3.25 (m, 2H), 2.51-2.56 (m, 1H), 1.57-1.58 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 1.42-1.52 (m, 9H), 1.23-1.26 (m, 1H), 1.03-1.09 (m, 1H), 0.97-0.99 (m, 3H), 0.93-0.94 (m, 3H) ppm.
【０１３５】
実施例４
【化４１】
2015529666.tif 000051
【０１３６】
工程１：  中間体３２の合成
【化４２】
2015529666.tif 000052
tert−ブタノール（５０mL）中のジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４（３Ｈ）−オン（５０．０ｇ、５００mmol）と２−クロロアセトニトリル（３５．０ｇ、３５０mmol）との混合物を、３０分間撹拌した。この混合物に、tert−ブタノール（５００mL）中のｔ−ＢｕＯＫ（６０ｇ、５５０mmol）の溶液を４０分間かけて加えた。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。それを水（１００mL）で希釈し、ＨＣｌ（１０％水溶液、２０mL）でクエンチした。反応混合物をその元の容量の１／３に濃縮し、Ｅｔ２Ｏ（３×２００mL）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮して、粗中間体３２（５７ｇ）を与え、これを精製せずに次の工程で直接使用した。
【０１３７】
工程２：  中間体３３の合成
【化４３】
2015529666.tif 000053
ポリプロピレン瓶中のＤＣＭ（２００mL）中の中間体３２（５７ｇ）の混合物に、０℃で、７０％フッ化水素−ピリジン（５０mL）をゆっくりと加えた。混合物が一晩室温に温まるにまかせた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５００mL）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２００mL）に注いだ。泡立ちが停止するまで、さらなる固体ＮａＨＣＯ３を使用して混合物を注意深く中和した。水層をＥｔＯＡｃ（３×５００mL）で抽出した。合わせた有機層を、ＨＣｌ水溶液（１％、２００mL）、ブラインで洗浄し、濃縮乾固して、粗中間体３３（５４ｇ）を与え、これを精製せずに次の工程で直接使用した。
1H NMR: (CDCl3): δ 4.37  (m, 2H), 3.96-2.70 (m, 4H), 1.97 - 1.81 (m, 4H).
【０１３８】
工程３：  中間体３４の合成
【化４４】
2015529666.tif 000054
２−プロパノール（１０００mL）及び水（２５０mL）中の中間体３３（５４ｇ；３４０mmol）の混合物に、０℃で、ＮａＢＨ４（２０ｇ、５０９mmol）を加えた。混合物を撹拌し、３時間かけて室温に温まるまかせた。反応物をアセトン（５０mL）でクエンチし、さらに１時間撹拌した。清澄な液体をデカンテーションにより固体から分離した。ＥｔＯＡｃ（１００mL）を使用して固体を洗浄し、濾液を合わせた。合わせた有機溶液を減圧下で濃縮し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の５〜２０％酢酸エチル）により精製して、中間体３４（２２ｇ）を与えた。
1H NMR: (CDCl3): δ:3.82-3.77 (m, 4H), 3.72-3.52 (dd, J = 20.8, 6.4 Hz, 2H), 2.69(s, 1H), 1.82-1.60 (m, 4H).
【０１３９】
工程４：  中間体３５の合成
【化４５】
2015529666.tif 000055
ＭｓＣｌ（２５．８ｇ、２２５mmol）を、ＤＣＭ（２００mL）中の中間体３４（２０ｇ、１５０mmol）とＴＥＡ（２２．７ｇ、２２５mmol）との混合物に０℃で加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、次に水（１００mL）を加えた。水層をＤＣＭ（２×２００mL）で抽出し、有機相を合わせ、乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗中間体３５（３０ｇ）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
1H NMR: (CDCl3): δ:4.22  (d, J = 20.0 Hz, 2H), 3.87-3.82 (m, 4H), 3.06(s, 3H), 1.88-1.68 (m, 4H).
【０１４０】
工程５：  中間体３６の合成
【化４６】
2015529666.tif 000056
ＤＭＦ（１５０mL）中の中間体３５（１０ｇ、４７mmol）の混合物に、ＮａＮ３（１６ｇ、２５０mmol）及びＮａＨＣＯ３（９．３ｇ、１００mmol）を室温で加えた。混合物を１２０℃で２０時間撹拌した。反応物を水で室温にてクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２×２００mL）で抽出した。有機相を合わせ、乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗中間体３６（８ｇ）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１４１】
工程６：  中間体３７の合成
【化４７】
2015529666.tif 000057
ＥｔＯＡｃ（１００mL）中の中間体３６（８ｇ、５０mmol）の混合物に、Ｎ２雰囲気下、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．８ｇ）を加え、混合物を脱気し、水素と３回交換した。最終混合物を室温で水素雰囲気１atm下、２４時間撹拌した。触媒を、Celiteパッドを通して濾別し、ＥｔＯＡｃ（２×５０mL）で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮して、中間体３７（５．３ｇ）を生成した。
1H NMR: (CD3OD): δ 3.83-3.79 (m, 4H), 2.76-2.71 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 1.83-1.65 (m, 4H).
19F NMR: (CD3OD) δ: -169.66.
【０１４２】
実施例４を、実施例１と同様の方法で、工程１０で中間体３７を使用して合成した。
LC-MS (方法 1): tR = 0.80 分, MS (ESI) m/z 455.2 [M+H]+.
1H-NMR: (CD3OD): δ 7.61-7.63 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.47-7.49 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.63-3.83 (m, 6H), 3.23-3.27 (m, 1H), 3.12-3.16 (m, 1H), 2.52-2.57 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 1.48-1.82 (m, 7H), 1.38-1.44 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 1.23-1.28 (m, 1H), 0.97-1.05 (m, 4H), 0.94-0.95 (d, J = 4.0 Hz, 3H).
19F NMR: (CD3OD): δ -160.48
【０１４３】
実施例５
【化４８】
2015529666.tif 000058
【０１４４】
工程１：  中間体３８の合成
【化４９】
2015529666.tif 000059
ＣＨＣｌ３（２５mL）中の中間体１７（３．６ｇ、７．４mmol）の溶液に、ＴＭＳＩ（１０mL）を加え、混合物を６５℃で２時間撹拌した。混合物を室温に冷まし、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（１０mL）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０mL）を加え、混合物を１０分間撹拌した。混合物をＤＣＭ（５０mL）とＨ２Ｏ（１０mL）とに分配した。有機層を分離し、ブライン（１０mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗中間体３８（２．６ｇ）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１４５】
工程２：  中間体３９の合成
【化５０】
2015529666.tif 000060
ＤＭＦ（２０mL）中の中間体３８（２．５ｇ、６．４mmol）の混合物に、中間体２６（１．８ｇ、７．０mmol、１．１当量）、ＥＤＣＩ（２．５ｇ、１３mmol）及びＤＩＥＡ（１．７ｇ、１３mmol）を加えた。混合物を一晩撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×３０mL）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×３０mL）で洗浄し、乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗生成物を与え、これをカラム（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１〜５：１）により精製して、中間体３９（２．８ｇ）を与えた。
【０１４６】
工程３：  中間体４０の合成
【化５１】
2015529666.tif 000061
ジオキサン（５mL）中の中間体３９（３５０mg、０．６mmol）の溶液に、Ｎ２雰囲気下、５−ピリミジンボロン酸（９０mg、０．６６mmol）及びＣｓ２ＣＯ３水溶液（２mL、水中２M ）を加えた。Ｎ２流を５分間泡立てることによって混合物をパージし、次にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４０mg、０．０６mmol）を加えた。混合物を１１０℃でＮ２雰囲気下、２時間撹拌した。反応物を室温に冷まし、ＥｔＯＡｃで希釈し、濾過した。濾液をＮａ２ＣＯ３水溶液（５mL）で洗浄し、減圧下で濃縮して、粗中間体４０（３００mg）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１４７】
工程４：  実施例５の合成
【化５２】
2015529666.tif 000062
ＤＣＭ（５mL）中の中間体４０（３００mg、０．５３mmol）の溶液に、ＴＦＡ（１mL）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。この混合物に、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０mL）を加え、１０分間撹拌した。残留物をＤＣＭ（１０mL）とＨ２Ｏ（１０mL）とに分配した。有機層を分離し、ブライン（１０mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（基本、方法１）により精製して、実施例５（１４１mg）を与えた。
LC-MS (方法1): MS (ESI) m/z 466.2[M+H]+. 1H NMR: (CD3OD): δ 9.12 (s, 1H), 9.02 (s, 2H), 7.64-7.62 (dd, J = 7.6, 1.6 Hz,1H), 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 3.80-3.66 (m, 2H), 3.30-3.13 (m, 2H), 2.59 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 1.85 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 1.65-1.32 (m, 10H), 1.11-1.05 (m, 1H), 1.02 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.02(d, J = 6.4 Hz, 3H). 19F NMR: (CD3OD): δ -139.27.
【０１４８】
実施例６
【化５３】
2015529666.tif 000063
【０１４９】
工程１：  中間体４１の合成
【化５４】
2015529666.tif 000064
エタノール（２３mL）及び水（１０mL）中の中間体３９（１．０ｇ、１．８mmol）の混合物に、ＮａＮ３（３００mg、３．６mmol）、ＣｕＩ（４０mg、１０％）、アスコルビン酸ナトリウム（４０mg、０．２０mmol、５％）及びＮ，Ｎ’−ジメチル−シクロヘキサン−１，２−ジアミン（４０mg、０．２８mmol、１５％）をＮ２雰囲気下、加えた。混合物を９０℃でＮ２雰囲気下、３時間撹拌した。混合物を室温に冷まし、ＥｔＯＡｃで希釈し、濾過した。濾液を濃縮して、粗中間体４１（８３０mg）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１５０】
工程２：  中間体４２の合成
【化５５】
2015529666.tif 000065
ＭｅＯＨ（１０mL）中の中間体４１（８３０mg、１．６mmol）の混合物に、窒素雰囲気下、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．１ｇ）を加え、混合物を脱気し、水素と３回交換した。混合物を室温で水素雰囲気１atm下、４時間撹拌した。混合物を、Celiteパッドを通して濾過し、ＥｔＯＡｃ（２×１０mL）で洗浄した。合わせた濾液及び洗浄液を減圧下で濃縮して、中間体４２（０．７ｇ）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
LC-MS (方法1): tR = 0.99 分, MS (ESI) m/z 503.2 [M+H] +.
【０１５１】
工程３：  中間体４３の合成
【化５６】
2015529666.tif 000066
ＤＣＭ（５mL）中の中間体４２（３５０mg、０．７mmol）の混合物に、Ｅｔ３Ｎ（０．２mL、１．２mmol、２．０当量）及び塩化２−フルオロ−２−メチルプロパノイル（１５０mg、２mmol）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。反応物を水でクエンチし、ＤＣＭ（２×１０mL）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×１５mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗中間体４３（３２０mg）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１５２】
工程４：  実施例６の合成
【化５７】
2015529666.tif 000067
ＤＣＭ（５mL）中の中間体４３（３２０mg、０．５４mmol）の混合物に、ＴＦＡ（１mL）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０mL）でクエンチした。混合物をＤＣＭ（１０mL）とＨ２Ｏ（１０mL）とに分配した。有機層を分離し、ブライン（１０mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（基本方法１）により精製して、実施例６（１７９．９mg）を与えた。
LC-MS (方法 1): LC-MS tR = 0.86 分, MS (ESI) m/z 491.2[M+H]+.
1H NMR: (CD3OD): δ 7.42 (m 1H), 7.30 (m, 2H), 3.78-3.71 (m, 2H), 3.17-3.05 (m, 2H), 2.59 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 1.80 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.64-1.53 (m, 8H), 1.42-1.34 (m, 8H), 1.08-0.96 (m, 7H).
19F NMR: (CD3OD): δ -138.95, -147.61.
【０１５３】
実施例７
【化５８】
2015529666.tif 000068
【０１５４】
工程１：  中間体４４の合成
【化５９】
2015529666.tif 000069
ＴＨＦ（２．０Ｌ、０．２４M ）に溶解した６−ブロモ−インダン−１−オン（１００．０ｇ、０．４８mol）の溶液に、ｔ−ＢｕＯＫ（６４．０ｇ、０．５７mol）を０℃で一度に加えた。反応物を０℃で５分間撹拌し、室温でさらに１０分間撹拌した。メチルメタクリラート（５６．０mL、０．５３mol）を一度に加えた。３０分後、メチルアクリラート（５２．０mL、０．５７mol）を一度に加え、混合物を一晩撹拌した。この反応混合物に、ＤＭＦ（２６０mL、１．８M ）及びＥｔＩ（７６．０mL、０．９６mol）を加え、混合物を一晩撹拌した。反応物を飽和クエン酸水溶液（２００mL）でクエンチし、有機層を分離した。ＥｔＯＡｃを減圧下で除去し、粗物質をＨ２Ｏ（３Ｌ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×３Ｌ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、粗中間体４４（２００ｇ）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１５５】
工程２：  中間体４５の合成
【化６０】
2015529666.tif 000070
中間体４４（２００．０ｇ、０．５１mol）をＤＭＳＯ（１．０Ｌ、０．５M ）と混合し、ＬｉＣｌ（２１５．０ｇ、５．１mol）を加えた。混合物を１２０℃に４日間加熱した。混合物を減圧下で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、濾過し、濾液を濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝３０：１）により精製して、粗中間体を与えた。中間体を最少量のＭｅＯＨに溶解し、ＭｅＯＨ中のＮａＯＭｅ（３０％、２０mL）を加えた。２０分後、混合物を濾過して、中間体４５（４０ｇ）を与えた。
1H-NMR: (CDCl3): δ 7.93 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 10.8, 2.4 Hz, 1H), 7.42-7.45 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.34 (s, 2H), 2.60-2.70 (m, 1H), 2.36-2.47 (m, 1H), 1.76-1.99 (m, 5H), 1.21-1.30 (m, 1H), 1.07 (d, J = 8.8 Hz, 3H), 0.90 (t, J = 9.6 Hz, 3H) ppm.
【０１５６】
工程３：  中間体４６の合成
【化６１】
2015529666.tif 000071
中間体４６を、中間体４５から、実施例１の工程２に記載されている方法と同様の方法により合成した。
1H-NMR: (CDCl3): δ 7.81 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 8.1, 2.1 Hz, 1H), 7.42-7.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.34 (s, 2H), 2.60-2.70 (m, 1H), 2.36-2.47 (m, 1H), 1.76-1.99 (m, 5H), 1.21-1.30 (m, 1H), 1.07 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.90 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ppm.
【０１５７】
工程４：  中間体４７の合成
【化６２】
2015529666.tif 000072
ＤＭＦ（５００mL）中の中間体４６（３０．０ｇ、０．０８mol）の溶液に、ＮａＨ（８．０ｇ、０．１６mol）を０℃で加えた。混合物を０℃で３０分間撹拌し、次にＭｅＩ（２５．０mL、０．４mol）を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をＨ２Ｏ（１００mL）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×３００mL）で抽出した。有機層を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２０／１）により精製して、中間体４７（２２．０ｇ）を与えた。
1H-NMR: (CDCl3): δ 7.81 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.63 (m, J =  8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.41 (s, 3H), 2.91 (s, 2H), 2.46-2.52 (m, 1H), 1.75-1.79 (m, 1H), 1.59-1.62 (m, 1H), 1.29-1.47 (m, 5H), 1.08-1.15 (m, 1H), 0.98 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.78 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
【０１５８】
工程５：  中間体４８の合成
【化６３】
2015529666.tif 000073
乾燥ＴＨＦ（４００mL）中の中間体４７（２２．０ｇ、０．０６mol）とチタン（IV）エトキシド（１３０mL、０．６２mol）との混合物を、室温で１時間撹拌した。（Ｓ）−Ｎ−tert−ブチルスルフィンアミド（３０．０ｇ、０．２５mol）を加え、得られた混合物をＮ２下、８０℃で一晩撹拌した。反応混合物を冷却し、水（２００mL）を加えた。混合物を濾過し、水層をＥｔＯＡｃ（３×４００mL）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝２０：１）により精製して、それぞれ中間体４８Ａ（７．０ｇ）及び４８（１０．０ｇ）を与えた。
【０１５９】
工程６：  中間体４９の合成
【化６４】
2015529666.tif 000074
無水ＴＨＦ（５０mL）中のエトキシ−エテン（４．７mL、４９．５mmol）の混合物に、−７８℃で、ｔ−ＢｕＬｉ（３８．０mL、４９．５mmol、ヘキサン中１．３M ）を２０分間かけて滴下し、混合物を２０分間撹拌した。得られた混合物を０℃でさらに４５分間撹拌し、次に−７８℃に冷却し戻した。
【０１６０】
無水ＴＨＦ（６０mL）中の中間体４８（４．５ｇ、９．９mmol）の予め冷却した溶液を、−７８℃で、上記溶液に３０分間かけて滴下し、混合物を−７８℃で２．５時間撹拌した。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（５０mL）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×１００mL）で抽出した。合わせた有機相を減圧下で濃縮して、残留物を与え、これをカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝２０：１）により精製して、中間体４９（３．５ｇ）を与えた。
LC-MS (方法 1): tR = 5.94 分, MS (ESI) m/z 528.1 [M+H]+.
【０１６１】
工程７：  中間体５０の合成
【化６５】
2015529666.tif 000075
中間体４９（３．５ｇ、６．６０mmol）を、ＤＣＭとＭｅＯＨとの混合物（５：１； ４０mL）に溶解し、−７８℃に冷却した。オゾンを混合物に２０分間泡立て入れた。反応物をさらに１０分間撹拌し、その後、混合物をＮ２でパージし、Ｍｅ２Ｓで−７８℃にて処理した。反応物が室温に温まるにまかせ、さらに３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油／ＥｔＯＡｃ＝１５／１）により精製して、中間体５０（２．３ｇ）を与えた。
1H-NMR: (CDCl3): δ 7.83 (s, 1H), 7.43 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.26-4.43 (m, 3H), 3.42 (s, 3H), 2.95 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.68 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.32-2.37 (m, 1H), 2.17 (s, 1H), 1.91-1.97 (m, 1H), 1.82-1.89 (m, 1H), 1.63-1.68 (m, 1H), 1.31-1.40 (m, 6H), 1.13 (s, 9H), 0.90-0.95 (m, 6H), 0.68 (t, J = 12.0 Hz, 1H).
【０１６２】
工程８：  中間体５１の合成
【化６６】
2015529666.tif 000076
濃硫酸（４９μL）をＤＭＡ（２０mL）に加え、溶媒をＮ２で２０分間パージした。５０mL容量の丸底フラスコに、Ｎ２下、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１．３５ｇ）及びＸｐｈｏｓ（３．１５ｇ）を入れ、上記溶液に移した。得られた混合物を８０℃で３０分間加熱して、混合物Ａを与えた。
【０１６３】
別のフラスコ中、ＤＭＡ（３０mL）をＮ２下、２０分間パージし、中間体５０（２．３ｇ、４．５０mmol）、Ｚｎ（ＣＮ）２（５２７mg、４．５０mmol）及びＺｎ粉末（１５mg）を加え、続いて混合物Ａを加えた。得られた混合物を９０℃で４０分間加熱した。反応混合物を室温に冷まし、水（８０mL）及びＥｔＯＡｃ（１００mL）で希釈した。１０分間の撹拌の後、混合物を、Celiteを通して濾過し、有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（３×１００mL）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製して、中間体５１（１．８ｇ）を与えた。
LC-MS(方法1): tR = 1.19 分, MS (ESI) m/z 475.2 [M+H]+.
【０１６４】
工程９：  中間体５２の合成
【化６７】
2015529666.tif 000077
ＭｅＯＨ（１０mL）中の中間体５１（５９０mg、１．２４mmol）の混合物に、ジオキサン中の４M ＨＣｌ溶液（２mL）を加えた。得られた混合物を３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、粗中間体５２（５５０mg）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
LC-MS (方法 1): tR = 0.88 分, MS (ESI) m/z 322.1 [M-48]+.
【０１６５】
工程１０：  中間体５３の合成
【化６８】
2015529666.tif 000078
ＣＨＣｌ３（１０mL）中の中間体５２（５５０mg、１．５９mmol）の混合物に、ＴＭＳＩ（２．５mL、１５．９mmol）を室温でゆっくりと加えた。混合物を６０℃で２時間撹拌し、次に室温に冷えるにまかせた。ＭｅＯＨ（５mL）及び飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（５mL）溶液を１０分間かけて加えた。層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２（３×４０mL）で抽出した。有機層を合わせ、水（２×４０mL）で洗浄し、乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗中間体５３（４００mg）を生成した。
【０１６６】
工程１１：  中間体５４の合成
【化６９】
2015529666.tif 000079
ＤＭＦ（１５mL）中の中間体５３（１．２ｇ、３．３０mmol）の混合物に、中間体２６（８５０mg、３．３０mmol）、ＥＤＣＩ（１．２８ｇ、６．６０mmol）及びＤＩＥＡ（１．２mL、６．６０mmol）を加えた。混合物を３０℃で一晩撹拌した。溶液を室温に冷まし、ＥｔＯＡｃ（２０mL）及び水（２０mL）を加えた。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×６０mL）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×５０mL）で洗浄し、乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝５／１）により精製して、５４（７６０mg）を与えた。
【０１６７】
工程１２：  実施例７の合成
【化７０】
2015529666.tif 000080
ＤＣＭ（８mL）中の中間体５４（７５０mg、１．４３mmol）の混合物に、ＴＦＡ（２mL）を加え、室温で１時間撹拌た。飽和ＮａＨＣＯ３溶液の添加により、反応混合物のｐＨを８．５に調整した。有機層を分離し、減圧下で濃縮して、粗生成物を生成した。残留物を、分取ＨＰＬＣ（基本、方法２）により精製して、実施例７（４６５mg）を与えた。
LC-MS (方法 1): tR = 0.85 分, MS (ESI) m/z 427.2 [M+H]+.
1H-NMR: (CD3OD): 7.65 (dd,J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.65-3.80 (m, 2H), 3.12-3.29 (m, 2H), 2.64-2.69 (m, 1H), 1.79-1.84 (m, 2H), 1.51-1.55 (m, 1H), 1.32-1.50 (m, 9H), 1.32-1.42 (m, 1H), 1.00-1.20 (m, 4H), 0.78 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
19F-NMR: (CD3OD): -139.444.
【０１６８】
実施例８
【化７１】
2015529666.tif 000081
【０１６９】
工程１：  中間体５６の合成
【化７２】
2015529666.tif 000082
トルエン（２００mL）中の（Ｒ）−２−（クロロメチル）オキシラン（５５、１０９mL、１．６２mol）とＢＦ３．ＯＥｔ２（３．４mL、０．０２７mol）との混合物を、３０℃の内部温度に加熱し、反応温度を３６〜３８℃に維持するために十分な速さで２−クロロエタノール（４９ｇ、０．５３mol）を滴下した。得られた混合物を３６℃で２０分間熟成させた。混合物を１６℃に冷却し、反応温度を２０℃未満に維持しながら、ＮａＯＨ水溶液（２５０mL、２３％）を激しく撹拌しながら１時間かけて加えた。混合物を室温で１時間熟成させた。２つの層を分離し、水相をトルエン（１３０mL）で抽出した。合わせた有機層を水（１００mL）で洗浄し、生成物の損失について蒸留物をモニターしながら得られた有機層を低容量まで蒸発させて、最終中間体５６（２３ｇ）を与えた。
1H-NMR: (CDCl3): δ 3.33-3.84 (m, 9H).
【０１７０】
工程２：  中間体５７の合成
【化７３】
2015529666.tif 000083
ＤＣＭ（５００mL）中の中間体５６（８１．０ｇ、０．６８６mol）の混合物に、ＴＥＡ（１９６mL、１．３７mol）及びＭｓＣｌ（８０mL、１．０２９mol）を０℃で加えた。混合物を室温で５時間撹拌し、水（２００mL）でクエンチし、ジクロロメタン（２×２００mL）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗中間体５７（１３２．８ｇ）を与え、これを精製せずに次の工程で直接使用した。
【０１７１】
工程３：  中間体５８の合成
【化７４】
2015529666.tif 000084
ＤＭＦ（６４０mL）中の中間体５７（１３２．８ｇ、０．６７７mol）の混合物に、ＮａＮ３（８８．０ｇ、１．３５mol）、ＮａＨＣＯ３（１７０．６ｇ、２．０３mol）及びＮａＩ（２０．３ｇ、０．１３５mol）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を水（３００mL）でクエンチし、次に酢酸エチル（２×３００mL）で抽出した。合わせた有機層を水で、次にブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗中間体５８（９６ｇ）を与え、これを精製せずに次の工程で直接使用した。
【０１７２】
工程４：  中間体５９の合成
【化７５】
2015529666.tif 000085
ＭｅＯＨ（１００mL）中の中間体５８（３．６ｇ、２５．４８mmol）の混合物に、窒素雰囲気下、Ｐｄ／Ｃ（０．４ｇ、１０％含有）を加え、混合物を脱気し、水素と３回交換した。最終混合物を水素バルーン下、室温で２４時間撹拌した。触媒を、Celiteパッドを通して濾別し、ＭｅＯＨ（２×５０mL）で洗浄した。合わせた濾液及び洗浄液を減圧下で濃縮して、粗中間体５９（２．９３ｇ）を与えた。
【０１７３】
工程５：  中間体６０の合成
【化７６】
2015529666.tif 000086
ＴＨＦ（５０mL）中の中間体５９（１．１ｇ、１０mmol）の溶液に、Ｅｔ３Ｎ（３．０ｇ、３０mmol）及び（Ｂｏｃ）２Ｏ（２．６ｇ、１２mmol）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。反応物を水（２０mL）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２×３０mL）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２０mL）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を与え、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル； １００：１〜２０：１）により精製して、純粋な中間体６０（５００mg）を与えた。
【０１７４】
工程６：  中間体６１の合成
【化７７】
2015529666.tif 000087
中間体６０（２０ｇ、９２mmol）をＭｅＯＨ（１５０mL）に溶解し、次にジオキサン中のＨＣｌの溶液（４M、３０mL、１２０mmol）を加えた。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。ＭｅＯＨを減圧下で除去して、純粋な中間体６１（１４ｇ）を生成し、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
1H NMR (CD3OD): δ 3.62-3.90 (m, 6H), 3.32-3.35 (m, 1H), 3.01-3.04 (m, 1H), 2.85-2.90 (m, 1H).
【０１７５】
工程７：  中間体６２の合成
【化７８】
2015529666.tif 000088
無水ＴＨＦ（６００mL）中の中間体２５（１２．３ｇ、４４．５５mmol）の混合物に、ＮａＨ（２．１ｇ、５３．４６mmol、鉱油中６０％）を０℃で加えた。反応混合物を１時間撹拌し、続いてＴＦＡＡ（６．９mL、４９．０mmol）を添加し、撹拌をさらに１時間続けた。無水ＴＨＦ（３００mL）中の中間体６１（７．５ｇ、４９．０mmol）及びＥｔ３Ｎ（１２．４mL、８９．１mmol）を加え、得られた反応混合物を室温で一晩撹拌した。Ｈ２Ｏ（３００mL）を加えて反応物をクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃ（３×３５０mL）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中５〜５０％酢酸エチル）により精製して、中間体６２（７．９５ｇ）を与えた。
LCMS (方法 1): tR = 0.90 分, MS (ESI) m/z 221.1 [M-55]+.
1H NMR (CD3OD): δ 3.80-3.90 (m, 4H), 3.70-3.80 (m, 2H), 3.55-3.65 (m 2H), 3.35-3.40 (m, 1H), 1.57 (s, 9H).
【０１７６】
実施例８を、中間体５３及び中間体６２から、実施例７の工程１１及び１２に記載されている方法に従って合成した。
LC-MS (方法 1): tR = 0.87 分, MS (ESI) m/z 453.2[M+H]+.
1H-NMR (CD3OD): 7.64 (dd, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.49 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.51-3.86 (m, 8H), 3.11-3.35 (m, 3H), 2.64-2.69 (m, 1H), 1.78-1.84 (m, 2H), 1.49-1.55 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.13-1.20 (m, 1H), 0.99-1.06 (m, 4H), 0.78 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
【０１７７】
実施例９
【化７９】
2015529666.tif 000089
【０１７８】
工程１：  中間体６２の合成
【化８０】
2015529666.tif 000090
無水ＴＨＦ（９００mL）中の６−ブロモ−インダン−１−オン １（５０．０ｇ、２３６mmol）とメチルアクリラート（４２．０ｇ、４７２mmol）との混合物を、０℃に予め冷却し、ｔ−ＢｕＯＫ（３１．８ｇ、２８４mmol、１．１当量）を３０分間かけて少しずつ加えた。混合物を１時間かけて室温に温め、室温でさらに４０分間撹拌した。ＤＭＦ（２００mL）及びＥｔＩ（７４ｇ、４７２mmol）をこの反応混合物に加え、混合物を室温で一晩撹拌した。ＴＨＦを減圧下で除去した。残留物をＨ２Ｏ（３００mL）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３００mL）で抽出した。有機層を減圧下で濃縮して、粗中間体６３（１２０．０ｇ）を与えた。この生成物を次の工程でそのまま使用した。
【０１７９】
ＤＭＳＯ（９００mL）中の中間体６３（１２０．０ｇ、３１０mmol）とＬｉＣｌ（１３０．０ｇ、３１００mmol）との混合物を、一晩還流した。混合物を水（３Ｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×４００mL）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ； ２０：１）により精製して、中間体６４（１５ｇ）を与えた。
1H NMR: (CDCl3): δ 7.91 (s, 1H), 7.74 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.80 (s, 2H), 2.48-2.53 (m, 2H), 2.33-2.49 (m, 1H), 2.15-2.23 (m, 1H), 1.75-1.95 (m, 4H), 1.21-1.40 (m, 1H), 0.88 (t, J = 8.0 Hz, 3H).
【０１８０】
工程２：  中間体６６の合成
【化８１】
2015529666.tif 000091
ＴＨＦ（２０mL）とＭｅＯＨ（５mL）との混合物に、−７８℃で、中間体６４（６．０ｇ、１８．７mmol）、ＮａＢＨ４（３５５mg、９．３mmol）及びＣｅＣｌ３．７Ｈ２Ｏ（７０mg、０．１９mmol）を加えた。混合物を−７８℃で２０分間撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（３０mL）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（４００mL×４）で抽出した。有機層を合わせ、減圧下で濃縮して、粗中間体６５（６．５ｇ）を与えた。
【０１８１】
ＤＭＦ（１００mL）中の中間体６５（６．５ｇ、２０．０mmol）とＮａＨ（３．２ｇ、８０．０mmol）との混合物に、ＭｅＩ（１１．４ｇ、８０．０mmol）を０℃で加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をＨ２Ｏでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し、減圧下で濃縮して、粗生成物を与え、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤：石油エーテル：酢酸エチル； ２０：１〜１５：１）により精製して、中間体６６（３．５ｇ）を与えた。
LC-MS (方法 1):  tR = 1.32 分, MS (ESI) m/z 339.1 [M+H]+.
1H NMR: (CDCl3): δ 7.88 (s, 1H), 7.69 (dd, J= 8.4, 2.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 2.97 (s, 2H), 2.88-2.94 (m, 1H), 2.21-2.26 (m, 1H), 1.81-1.87 (m, 1H), 1.70-1.78 (m, 1H), 1.40-1.59 (m, 4H), 1.12-1.39 (m, 2H), 0.88 (t, J = 8.0 Hz, 3H).
【０１８２】
工程３：  中間体６７＆６７Ａの合成
【化８２】
2015529666.tif 000092
乾燥ＴＨＦ（４０mL）中の中間体６６（３．５ｇ、１０．４mmol）とチタン（IV）エトキシド（２３．７ｇ、１０４mmol）との混合物を、室温で１時間撹拌した。（Ｓ）−Ｎ−tert−ブチルスルフィンアミド（１．６ｇ、１１．６mmol）を加え、得られた混合物をＮ２雰囲気下、８０℃で一晩撹拌した。反応混合物を冷却し、水（４００mL）を加え、濾過した。水層をＥｔＯＡｃ（３×２００mL）で抽出した。分離した有機相を合わせ、乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ； ２０：１）により精製し、化合物が以下の順番で溶離して、それぞれ中間体６７Ａ（１．５ｇ）及び６７（１．５ｇ）を与えた。
【０１８３】
工程４：  中間体６８の合成
【化８３】
2015529666.tif 000093
無水ＴＨＦ（２０mL）中のエトキシ−エテン（１．３ｇ、１７．０mmol）の混合物に、−７８℃で、Ｎ２雰囲気下、ｔ−ＢｕＬｉ（１３．０mL、１７．０mmol、ヘキサン中１．３M ）を滴下し、２０分間撹拌した。得られた混合物を０℃でさらに４５分間撹拌し、次に−７８℃に冷却し戻した。この混合物に、無水ＴＨＦ（２０mL）中の中間体６７（１．５ｇ、３．４mmol）の予め冷却した溶液を−７８℃で滴下し、２．５時間撹拌した。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（５０mL）でクエンチし、次にＥｔＯＡｃ（３×１００mL）で抽出した。有機相を合わせ、減圧下で濃縮して、粗生成物を与え、これをシリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル； ２０：１）により精製して、中間体６８（１．２ｇ）を与えた。
【０１８４】
工程５：  中間体６９の合成
【化８４】
2015529666.tif 000094
中間体６８（１．２ｇ、２．４mmol）を、ＤＣＭ中のメタノールの混合物（５：１、２０mL）に加え、−７８℃に冷却した。オゾンを混合物に２０分間泡立て入れた。混合物をＮ２でパージし、Ｍｅ２Ｓ（５mL）で−７８℃にて処理した。反応物が室温に温まるにまかせ、さらに３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物を分取ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル；３：１）により精製して、中間体６９（８６０mg）を与えた。
LC-MS (方法 1): tR = 1.35 分, MS (ESI) m/z 516.1 [M+H]+.
【０１８５】
工程６：  中間体７０の合成
【化８５】
2015529666.tif 000095
ＭｅＯＨ（１０mL）中の中間体６９（８６０mg、１．７mmol）に、ジオキサン中のＨＣｌ（４M、２mL）を加えた。得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、粗中間体７０（８００mg）を与え、これをさらなる精製をせずに次の工程で使用した。
【０１８６】
実施例９を、中間体７０から、実施例７の工程１０〜工程１２に記載された方法により合成した。
LC-MS (方法 1): tR = 0.79 分, MS (ESI) m/z 413.2 [M+H]+.
1H-NMR (CD3OD): 7.66 (dd, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 3.69-3.76 (m, 2H), 3.12-3.27 (m, 3H), 1.78-1.95 (m, 3H), 1.32-1.42 (m, 11H), 1.11-1.18 (m, 1H), 0.78 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
19F-NMR (CD3OD): -139.768.
【０１８７】
実施例１０
【化８６】
2015529666.tif 000096
実施例１０を、実施例１に記載された方法により、工程１０でシクロプロピルメチルアミンを使用して調製した。
LC-MS (方法 1): tR = 1.02分; [M+H]+ = 393.
1HNMR (CD3OD) δ(ppm): 7.62 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1 H), 7.47 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.26 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 3.47 (dd, J = 14.8, 6.4 Hz , 1 H), 3.34 (dd, J = 14.8, 6.4 Hz, 1 H), 3.24 (d, J =16.0 Hz, 1 H), 3.12 (d, J = 16.0 Hz, 1 H), 2.54 (t, J = 10.0 Hz, 1 H), 1.79, (d, J = 12.4 Hz, 1 H), 1.60 -1.40 (m, 3 H), 1.22 (m, 2 H), 1.03 (m ,1 H), 0.99 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.94 (d, J = 6.0 Hz, 3 H), 0.49 (m, 2H), 0.32 (m, 2 H). 
【０１８８】
実施例１１
【化８７】
2015529666.tif 000097
実施例１１を、実施例１に記載された方法により、第１工程で６−クロロインダン−１−オンを、かつ工程１０で２−アミノメチルピリミジンを使用して調製した。
LC-MS (方法 1) tR = 0.90 分 m/z 440, 442 (MH+)
1H NMR (CD3OD) δ 8.73 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 7.38 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 7.27-7.24 (m, 2H), 5.01 (s, 2H), 3.14-3.05 (m, 2H), 2.60 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 1.77-1.74 (m, 1H), 1.67-1.58 (m, 1H), 1.55-1.45 (m, 1H), 1.40-1.24 (m, 3H), 1.01-0.97 (m, 6H).
【０１８９】
実施例１２
【化８８】
2015529666.tif 000098
【０１９０】
工程１：  中間体７１の合成
【化８９】
2015529666.tif 000099
６−ブロモ−インダン−１−オン １（１００ｇ、４７４mmol）及びメチルアクリラート（８６．４ｇ、９９５mmol）を、ＴＨＦ ８００mLと混合し、ｔ−ＢｕＯＫ（１．０ｇ）を氷冷却しながら２回に分けて加えた。冷却浴を取り外し、残りのｔ−ＢｕＯＫ（６３．０ｇ）を等分量に分けて２０分間かけて加えた（総量６４．０ｇ、５６９mmol）。混合物を室温で２時間撹拌した。ＤＭＦ（２４０mL）を反応混合物に加え、続いてＭｅＩ（１３５ｇ、９４８mmol）を加え、混合物を２時間撹拌した。反応物を１０％クエン酸溶液でクエンチした。反応混合物を減圧下で濃縮し、濾過した。ケークを水で、続いてＭｅＯＨで洗浄して、粗中間体を与え、これをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１．８Ｌ／１．８Ｌ）と混合した。ＬｉＯＨ＊Ｈ２Ｏ（９２．０ｇ、２．１９mol）を加えた。混合物を室温で１６時間、次に７０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、濾過した。ケークをＨ２Ｏで洗浄し、次にそれをＭｅＯＨ（５０mL）で５分間撹拌し、再び濾過し、さらなる量のＭｅＯＨ（５０mL）で洗浄した。固体を回収して、中間体７１（７５ｇ）を与え、これを次の工程でそのまま使用した。
【０１９１】
工程２：  中間体７２の合成
【化９０】
2015529666.tif 000100
中間体７１１０．０ｇ（３２．５mmol）及び塩化第二鉄５３０mg（３．２７mmol）を、ＴＨＦ ２００mLと混合した。撹拌した混合物に、メトキシトリメチルシラン１４．０mL（１０２mmol）及びトリエチルシラン１６．０mL（１００mmol）を加え、混合物を周囲温度で３５分間撹拌した。混合物をリン酸緩衝液（ｐＨ７）に加え、１４時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで抽出し、有機相を乾燥させ、蒸発させた。残留物をＭＰＬＣ（シリカ３４０ｇ、シクロヘキサン／酢酸エチル（６０分間で１００／０〜８５／１５）により精製した。生成物を含有する画分を合わせ、溶媒を蒸発させて、中間体７２（３．６９ｇ）を生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 1.53 分 m/z 323/5 Br (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０１９２】
工程３：  中間体７３の合成
【化９１】
2015529666.tif 000101
中間体７２（１６．０ｇ、４９．５mmol）をＴＨＦ １００mLと混合し、チタン（IV）−エトキシド５７．０ｇ（２４９mmol）を加え、混合物を周囲温度で１時間撹拌した。この後、（Ｓ）−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミド １２．０ｇ（９９．０mmol）を加え、混合物を窒素下、３日間還流した。水２００mL及びＤＣＭ ２００mLを加え、混合物をCeliteを通して濾過した。有機層を分離し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をＭＰＬＣ（シリカ６００ｇ、シクロヘキサン／酢酸エチル（３時間で１００／０〜７５／２５、１５分間で９５／５〜８５／１５、１０分間 ０／１００）により精製した。生成物を含有する画分を合わせた。混合した画分をＭＰＬＣにより再びクロマトグラフィーに付した。所望の生成物が最初に溶離した。溶媒を蒸発させて、中間体７３（３．６９ｇ）を生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 1.61 分 m/z 426/8 Br (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０１９３】
工程４：  中間体７４の合成
【化９２】
2015529666.tif 000102
窒素下、ＴＨＦ ７０mLと混合したエチルビニルエーテル４．１４mL ｇ（４３．３mmol）を−７８℃に冷却し、tert−ブチルリチウム２５mL（ペンタン中１．７M、４３．４mmol）を加えた。混合物を０℃に温め、３０分間撹拌した。混合物をカニューレによって、ＴＨＦ １３０mL中の中間体７３（３．６９ｇ、８．６５mmol）の混合物に−７８℃で移した。混合物をこの温度で３０分間撹拌し、塩化アンモニウムの飽和水溶液１００mLを加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をＭＰＬＣ（シリカ ３４０ｇ、シクロヘキサン／酢酸エチル（７０分で９０／１０〜６０／４０）により精製した。生成物を含有する画分を合わせ、溶媒を蒸発させて、中間体７４（３．６２ｇ）を生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 1.20 分 m/z 598/500 Br (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０１９４】
工程５：  中間体７５の合成
【化９３】
2015529666.tif 000103
中間体７４（３．６２ｇ、９５％、６．８９mmol）を、ＤＣＭ ６０mL及びメタノール１５mLと混合し、−７８℃に冷却した。オゾンを混合物に２０分間泡立て入れた。混合物をＮ２でパージし、Ｍｅ２Ｓ（５mL、６８．４mmol）で−７８℃にて処理した。反応物が室温に温まるにまかせた。溶媒を減圧下で除去し、残留物をＭＰＬＣ（シリカ ３４０ｇ、シクロヘキサン／酢酸エチル（３５分間で９５／２５〜６５／３５）により精製した。生成物を含有する画分を合わせ、溶媒を蒸発させて、中間体７５（２．５０ｇ）を生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 1.20 分 m/z 500/2 Br (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０１９５】
工程６：  中間体７６の合成
【化９４】
2015529666.tif 000104
中間体７５（６５０mg、０．９８mmol）をメタノール ８mLと混合し、１，４−ジオキサン中のＨＣｌの４M 溶液１mLを０℃で加えた。混合物を同じ温度で２時間撹拌した。混合物を蒸発させ、残りの粗生成物７６を次の工程でそのまま使用した。
LC-MS (方法 2): tR = 1.20 分 m/z 396/8 Br (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０１９６】
工程７：  中間体７７の合成
【化９５】
2015529666.tif 000105
中間体７６（５３０mg、１．２３mmol）及びＮａＨＣＯ３（６７５mg、８．０４mmol）を、水８mL及び及びＤＣＭ ４mLと混合した。チオホスゲン１８８μL（２．５４mmol）を撹拌しながら０℃で加えた。混合物を０℃で１時間撹拌した。混合物をＤＣＭで抽出し、溶媒を蒸発させ、残りの粗生成物７７を次の工程でそのまま使用した。
LC-MS (方法 2) tR = 1.74 分 m/z 347/9 Br (M+H+)
【０１９７】
工程８：  中間体７８の合成
【化９６】
2015529666.tif 000106
２−アミノメチルピリミジン塩酸塩（５１０mg、８０％、０．９３mmol）を、ＴＨＦ ３mLと混合し、トリエチルアミン（２９０μL、２．０７mmol）を加えた。５分間の後、ＴＨＦ ７mLと混合した中間体７７を加え、混合物を周囲温度で２時間撹拌した。トリエチルアミン（２９０μL、２．０７mmol）を加え、混合物をさらに２時間撹拌した。混合物を蒸発させ、残留物をＭＰＬＣ（シリカ２５ｇ、シクロヘキサン／酢酸エチル（５０分間で１１０／０〜７０／３０）により精製した。生成物を含有する画分を合わせ、溶媒を蒸発させて、中間体７８（３０５mg）を生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 1.00 分 m/z 501/3 Br (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０１９８】
工程９：  中間体７９の合成
【化９７】
2015529666.tif 000107
中間体７８（３０３mg、０．６０mmol）、tert−ブチルヒドロペルオキシド（tert-butyhydroperoxide）（２．６５mL、１４．６mmol、デカン中５．５M）、アンモニア１０mL（７０．０mmol、メタノール中７M ）を混合し、室温で１４時間撹拌した。混合物を蒸発させ、残留物をＨＰＬＣ（カラム：Waters Sunfire； 溶離剤：Ａ：水＋０．１％ＴＦＡ； 溶離剤Ｂ：ＭｅＯＨ）により精製した。生成物を含有する画分を合わせ、メタノールを蒸発させ、残留物を凍結乾燥させて、中間体７９（１５５mg）をトリフルオロ酢酸塩として生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 1.00 分 m/z 484/6 Br (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０１９９】
工程１０：  中間体８０の合成
【化９８】
2015529666.tif 000108
中間体７９（７０mg、９０％、０．１１mmol）、２−（３−ピリジル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（５２．５mg、０．２６mmol）、クロロ（２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル）［２−（２−アミノエチル）フェニル］パラジウム（II）（１６．１mg、０．０２２mmol）、２M Ｎａ２ＣＯ３水溶液（２１０μL）、ジオキサン（１．４mL）及びメタノール（０．７５mL）をマイクロ波バイアル中で混合し、これにアルゴンを入れた。混合物を、マイクロ波オーブン（Biotage）中１４０℃で３０分間撹拌した。混合物をチオール・カートリッジ（Agilent Technologies、５００mg、PL-チオール MP SPE）により濾過し、メタノールを蒸発させて、残留物をＨＰＬＣ（カラム：Waters Sunfire； 溶離剤Ａ：水＋０．１％ＴＦＡ； 溶離剤Ｂ：ＭｅＯＨ）により精製した。生成物を含有する画分を合わせ、メタノールを蒸発させ、残留物を凍結乾燥させて、中間体８０（５６．５mg）をトリフルオロ酢酸塩として生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 1.00 分 m/z 483 (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０２００】
工程１１：  実施例１２の合成
【化９９】
2015529666.tif 000109
クロロホルム（１mL）中の中間体８０（２５mg、０．０４２mmol）の懸濁液に、ヨードトリメチルシラン（３０μL、９７％、０．２１mmol）を加え、混合物を６０分間撹拌した。反応物をメタノール（０．５mL）でクエンチし、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５mL）及び１０％Ｎａ２ＳＯ３水溶液（５mL）を加えた。混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を乾燥させ、蒸発させ、残留物をＨＰＬＣ（カラム：Waters Sunfire； 溶離剤Ａ：水＋０．１％ＴＦＡ； 溶離剤Ｂ：ＭｅＯＨ）により精製した。生成物を含有する画分を合わせ、メタノールを蒸発させて、残留物を凍結乾燥させて、実施例１２（１５．９mg）をトリフルオロ酢酸塩として生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 0.84 分 m/z 469 (M+H+)
1HNMR (DMSO-d6): δ 10.96 (br s, 1H), 9.58 (br s, 2H), 8.93 (d, 1H), 8.79 (d, 2H), 8.63 (dd, 1H), 8.14 (br d, 1H), 7.76 (dd, 1H), 7.70 (br s, 1H, 7.59 (dd, 1H), 7.51 (m, 2H), 5.18 (d, 1H), 5.08 (d, 1H), 4.30 (br s, OH) 3.16 (d, 1H), 3.02 (d, 1H), 2.94 (m, 1H), 1.78 (m, 1H), 1.58 - 1. 24 (m, 6H), 0.92 (d, 3H).
【０２０１】
実施例１３
【化１００】
2015529666.tif 000110
【０２０２】
工程１：  中間体８１の合成
【化１０１】
2015529666.tif 000111
中間体７５（１．５８ｇ、９０％、２．８４mmol）を、ＤＭＡ（６０mL）と混合し、アルゴンを混合物に泡立て入れた。シアン化亜鉛（５５６mg、４．７４mmol）及びクロロ（２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリ−ｉ−プロピル−１，１’−ビフェニル）［２−（２−アミノエチル）フェニル］パラジウム（II）（６９０mg、０．９３mmol）を室温で加えた。混合物を１２０℃で２０分間撹拌した。この後、混合物を３mbarで７０℃にて蒸発させ、残留物を水及び酢酸エチルと混合し、Celiteにより濾過し、相を分離した。水相を酢酸エチルで抽出し、有機相を合わせ、乾燥させ、蒸発させた。残留物をＭＰＬＣ（シリカ１００ｇ、７０分間でＣＨ／ＥＥ ８０／２０〜５５／４５）により精製した。生成物を含有する画分を合わせて、中間体８１（１．１７ｇ）を与えた。
LC-MS (方法 2): tR= 1.40 分  m/z 447 (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０２０３】
工程２：  中間体８２の合成
【化１０２】
2015529666.tif 000112
中間体８２を、実施例１２の工程６に記載された方法により、中間体８１（４．００ｇ、８０％、７．１７mmol）から合成した。粗生成物（４．１３ｇ）を得て、次の工程でそのまま使用した。
LC-MS (方法 2): tR= 1.11 分 m/z 343 (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は所望の生成物と一致する。
【０２０４】
工程３：  中間体８３の合成
【化１０３】
2015529666.tif 000113
中間体８３を、実施例１２の工程７に記載された方法により、中間体８２（４．１３ｇ、７０％、７．６３mmol）から合成した。粗生成物（４．６ｇ）を得て、次の工程でそのまま使用した。
LC-MS (方法 2): tR= 1.58 分 m/z 294 (M+H+)
【０２０５】
工程４：  中間体８４の合成
【化１０４】
2015529666.tif 000114
中間体８４を、実施例１２、工程８に記載された方法に従って、中間体８３（２００mg、０．３３mmol）から合成した。２−アミノメチルピリミジン塩酸塩の代わりに、３，３−ジフルオロシクロブチル）メタンアミン（６３mg、０．４９mmol）及びトリエチルアミン（３当量）を使用した。粗生成物をＭＰＬＣ（シリカ２５ｇ、４５分間でＣＨ／ＥＥ ６５／３５）により精製して、中間体８４（１４１mg）を生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 1.53 分 m/z 460 (M+H+)
【０２０６】
工程５：  中間体８５の合成
【化１０５】
2015529666.tif 000115
中間体８５を、実施例１２、工程９に記載された方法に従って、中間体８４（１３９mg、０．３０mmol）を使用して合成した。粗生成物をＨＰＬＣ（カラム： Waters Sunfire； 溶離剤Ａ：水＋０．１％ＴＦＡ； 溶離剤Ｂ：ＭｅＯＨ）により精製して、中間体８５（９６．８mg）をトリフルオロ酢酸塩として生成した。
LC-MS (方法 2): tR= 1.19 分 m/z 443 (M+H+)
1HNMR(DMSO-d6)は、所望の生成物と一致する。
【０２０７】
工程６：  実施例１３の合成
【化１０６】
2015529666.tif 000116
実施例１３を、実施例１２、工程１１に記載された方法に従って、中間体８５（４０mg、０．０７２mmol）を使用して合成した。粗生成物をＨＰＬＣ（カラム：Waters Sunfire； 溶離剤Ａ：水＋０．１％ＴＦＡ； 溶離剤Ｂ：ＭｅＯＨ）により精製して、実施例１３（２０mg）を生成した。
LC-MS (方法 2): tR = 0.88 分 m/z 429 (M+H+)
1HNMR (DMSO-d6): δ 10.83 (br s, 1H), 9.65 (br s, 2H), 7.90 (d, 1H), 7.84 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 4.35 (br s, OH), 3.78 (m, 2H), 3.20 (d, 1H), 3.03 (d, 1H), 2.88 (m, 1H), 2.68 - 2.26 (m, 5H), 1.72 (m, 1H), 1.54 (m, 1H), 1.45 - 1. 28 (m, 3H), 1.16 (m, 1H), 1.05 (t, 1H), 0.91 (d, 3H). 
【０２０８】
実施例１４
【化１０７】
2015529666.tif 000117
実施例１４を、実施例１３に記載された方法により、工程１で中間体１７を中間体７５の代わりに使用して合成した。
LC-MS (方法 3): tR = 0.96 分 m/z 443 (M+H+)
1HNMR (DMSO-d6): δ 10.85 (br s, 1H), 9.65 (br s, 2H), 7.88 (d, 1H), 7.84 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 4.40 (br s, OH), 3.78 (m, 2H), 3.20 (d, 1H), 3.06 (d, 1H), 2.68 - 2.26 (m, 6H), 1.60 - 1.04(m, 6H), 0.92 (d, 3H), 0.88 (d, 3H).
【０２０９】
実施例１５
【化１０８】
2015529666.tif 000118
実施例１５を、実施例１３に記載された方法により、工程１で中間体１７を中間体７５の代わりに使用し、かつ工程４で２−ピリジン−４−イル−エチルアミンを３，３−ジフルオロシクロブチル）メタンアミンの代わりに使用して合成した。
LC-MS (方法 3): tR= 0.96 分 m/z 444.5 (M+H+)
1HNMR (DMSO-d6): δ 10.81 (br s, 1H), 9.70 (br s, 2H), 8.55 (d, 2H), 7.84 (br s, 1H), 7.83 (dd, 1H), 7.55 (m, 3H), 4.30 (br s, OH), 4.06 - 3.90 (m, 2H), 3.16 - 2.96 (m, 4H), 2.40 (t, 1H), 1.49 (m, 1H), 1.35 (m, 2H), 1.18 (m, 1H), 1.02 - 0.90 (m, 2H), 0.88 (d, 3H), 0.86 (d, 3H).
【０２１０】
実施例１６
【化１０９】
2015529666.tif 000119
実施例１６を実施例１３に記載された方法により、工程１で中間体１７を中間体７５の代わりに使用し、かつ工程４で（２−メチル−ピリジン−４−イル）−メチルアミンを３，３−ジフルオロシクロブチル）メタンアミンの代わりに使用して合成した。
LC-MS (方法 4): tR= 0.82 分 m/z 444 (M+H+)
1HNMR (DMSO-d6): δ 10.96 (br s, 1H), 9.70 (br s, 2H), 8.52 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.85 (dd, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.28 (br s, 1H), 4.93 (s, 2H), 4.30 (br s, OH), 3.20 (d, 1H), 3.03 (d, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.47 (m, 1H), 1.59 - 1. 10 (m, 6H), 0.90 (d, 3H), 0.88 (d, 3H). 
【配列表】
2015529666000001.app
【国際調査報告】
2015529666.tif 000124
2015529666.tif 000125