(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）の化合物、当該化合物を製造するためのプロセス及び固相ペプチド合成におけるその生成物の使用に関する。式Ｉの化合物は、ペプチド鎖のＬｙｓ部分に連結されたＧｌｕ−脂肪族アルキル側鎖構成単位を含むペプチド薬の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）用の汎用的なペプチド中間体である。
2015518821.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１５】
2015518821.tif 000017
［式中、
Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なっており、水素又はエステル保護基を示し、
Ｒ３は、水素又はアミノ保護基であり、そして
Ｒ４は、Ｃ１２−２０−アルキルである］
で表される化合物ならびにそのエナンチオマー、ジアステレオマー及び塩。
【請求項２】
エステル保護基が、フェニルで場合により置換されているＣ１−４−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、ピペリジニル又はジメチルアミノボラニルから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、水素又はＣ１−４−アルキルであり、そして、Ｒ２が、水素又はＣ２−４−アルケニルである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２が、水素又はアリルである、請求項１〜３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルである、請求項１〜４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ４が、Ｃ１４−１６−アルキルである、請求項１〜５に記載の化合物。
【請求項７】
式：
【化１６】
2015518821.tif 000018
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、上記のとおりである］
で表される、請求項１〜６に記載の化合物ならびにそのエナンチオマー、ジアステレオマー及び塩。
【請求項８】
式：
【化１７】
2015518821.tif 000019
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、上記のとおりである］
で表される、請求項１〜６に記載の化合物ならびにそのエナンチオマー、ジアステレオマー及び塩。
【請求項９】
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、Ｒ２が、水素であり、Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルであり、そして、Ｒ４が、Ｃ１５−アルキルである；
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２が、アリルであり、Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルであり、そして、Ｒ４が、Ｃ１５−アルキルである
請求項７又は８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２が、水素であり、Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルであり、そして、Ｒ４が、ペンタデシルである；
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２が、アリルであり、Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルであり、そして、Ｒ４が、ペンタデシルである
請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
式Ｉ（式中、Ｒ２は、水素である）の化合物の調製のためのプロセスであって、以下の工程を含むプロセス：
ａ）式：
【化１８】
2015518821.tif 000020
［式中、Ｒ１及びＲ４は、上記のとおりである］
で表されるグルタミン酸誘導体又はその塩を、式：
【化１９】
2015518821.tif 000021
［式中、Ｒ２’は、エステル保護基であり、そして、Ｒ３は、上記のとおりである］
で表されるリシン酸誘導体又はその塩とカップリングさせて、式：
【化２０】
2015518821.tif 000022
［式中、Ｒ１、Ｒ２’、Ｒ３及びＲ４は、上記のとおりである］
で表される化合物を形成する工程、及び
ｂ）エステル保護基Ｒ２’を除去する工程。
【請求項１２】
ペプチド鎖のＬｙｓ部分に連結されたＧｌｕ−脂肪族アルキル側鎖構成単位を含むペプチドの固相ペプチド合成における式Ｉの化合物の使用。
【請求項１３】
固相ペプチド合成が、ＦＭＯＣ固相ペプチド合成である、請求項１２に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式：
【化１】
2015518821.tif 000003
［式中、
Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なっており、水素又はエステル保護基を示し、
Ｒ３は、水素又はアミノ保護基であり、そして
Ｒ４は、Ｃ１２−２０−アルキルである］
で表される化合物ならびにそのエナンチオマー、ジアステレオマー及び塩に関する。
【０００２】
本発明は、さらなる実施態様において、式Ｉの化合物の調製のためのプロセス及び固相ペプチド合成における式Ｉの化合物の使用に関する。
【０００３】
本発明の化合物は、ペプチド鎖のＬｙｓ部分に連結されたＧｌｕ−脂肪族アルキル側鎖構成単位を含むペプチド薬の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）用の汎用的なペプチド中間体であることが見いだされた。例えば、ＧＬＰ−１類似体２型糖尿病ペプチド薬であるリラグルチドを挙げることができる。リラグルチドは、Ｇｌｕ−ヘキサデカノイル側鎖構成単位をＬｙｓ２６位に有する（Wikipedia, the free encyclopedia of 30.04.2012）。
【０００４】
本発明の目的は、Ｇｌｕ−脂肪族アルキル側鎖を有し、かつＳＰＰＳに容易に挿入することができる新規ペプチド中間体を提供することである。
【０００５】
式：
【化２】
2015518821.tif 000004
［式中、
Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なっており、水素又はエステル保護基を示し、
Ｒ３は、水素又はアミノ保護基であり、そして
Ｒ４は、Ｃ１２−２０−アルキルである］
で表される本発明の化合物ならびにそのエナンチオマー、ジアステレオマー及び塩が非常によくこの目的にかなう可能性を有することが見いだされた。
【０００６】
置換基Ｒ４について使用される用語「Ｃ１２−２０アルキル」は、１２〜２０個の炭素原子の分岐鎖又は直鎖の一価の飽和脂肪族炭化水素基、特に、直鎖の一価の飽和脂肪族炭化水素基を指す。この用語は、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシル及びエイコサニル基によって例示することができる。
【０００７】
特定の実施態様において、Ｒ４は、Ｃ１４−１６アルキル、さらにより特定すると、Ｃ１５アルキルを指す。
【０００８】
より特定すると、Ｒ４は、テトラデシル、ペンタデシル又はヘキサデシルであるが、特に、ペンタデシルである。
【０００９】
置換基Ｒ３について使用される用語「アミノ保護基」は、アミノ基の反応性を妨害するために従来使用される一般的な置換基を指す。適切なアミノ保護基は、デジタル印刷された"Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis - A Practical Approach" W.C.Chan & P.D. White, Oxford University Press, 2000, reprinted 2004 に記載されている。
【００１０】
特定すると、Ｒ３は、Ｆｍｏｃ（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル）である。
【００１１】
置換基Ｒ１及びＲ２について使用される用語「エステル保護基」は、ヒドロキシ基の反応性を妨害するために従来使用される任意の置換基を指す。適切なヒドロキシ保護基は、Green T., "Protective Groups in Organic Synthesis", Chapter 1 , John Wiley and Sons, Inc., 1991, 10-142 に記載されており、これは、フェニルで場合により置換されているＣ１−４−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、ピペリジニル又はジメチルアミノボラニルから選択することができる。Ｒ１及びＲ２についての特定のエステル保護基は、Ｃ１−４−アルキル又はＣ２−４−アルケニルである。
【００１２】
より特定すると、Ｒ１は、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２は、アリルである。
【００１３】
本発明の化合物に関連した用語「塩」は、当業者にとって慣用的な塩を包含し、塩酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩又はギ酸塩（formiate）などが適用される。
【００１４】
本発明の特定の実施態様において、Ｒ１は、水素又はＣ１−４−アルキルであり、そして、Ｒ２は、水素又はＣ２−４−アルケニルである。
【００１５】
本発明の別のより特定の実施態様において、Ｒ１は、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２は、水素又はアリルである。
【００１６】
本発明の特定の実施態様において、式Ｉの化合物は、式：
【化３】
2015518821.tif 000005
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、上記のとおりである］
ならびにそのエナンチオマー、ジアステレオマー及び塩を有する。
【００１７】
以下に示すような置換パターンを有する式Ｉａ又はＩｂの化合物が、本発明のさらにより特定の実施態様である：
・  Ｒ１  ｔ−ブチル、Ｒ２  水素、Ｒ３  Ｆｍｏｃ、Ｒ４  Ｃ１５−アルキル、特定すると、ペンタデシル。
・  Ｒ１  ｔ−ブチル、Ｒ２  アリル、Ｒ３  Ｆｍｏｃ、Ｒ４  Ｃ１５−アルキル、特定すると、ペンタデシル。
【００１８】
より特定の実施態様において、式Ｉの化合物は、式Ｉａを有する。
【００１９】
本発明の化合物は、原理的には、ペプチド合成の当業者に公知であるプロセスで調製することができる。
【００２０】
式Ｉ（式中、Ｒ２は、水素である）の化合物の調製について、当該プロセスは、以下の工程を含む：
ａ）式：
【化４】
2015518821.tif 000006
［式中、Ｒ１及びＲ４は、上記のとおりである］
で表されるグルタミン酸誘導体又はその塩を、式：
【化５】
2015518821.tif 000007
［式中、Ｒ２’は、エステル保護基であり、そして、Ｒ３は、上記のとおりである］
で表されるリシン酸誘導体又はその塩とカップリングさせて、式：
【化６】
2015518821.tif 000008
［式中、Ｒ１、Ｒ２’、Ｒ３及びＲ４は、上記のとおりである］
で表される化合物を形成する工程、及び
ｂ）エステル保護基Ｒ２’を除去する工程。
【００２１】
工程ａ）
工程ａ）は、式ＩＩのグルタミン酸誘導体と式ＩＩＩのリシン酸誘導体のカップリングを要する。
【００２２】
式ＩＩのグルタミン酸誘導体は、以下のスキーム１に従って、市販の出発物質から調製することができる。
【００２３】
【化７】
2015518821.tif 000009
【００２４】
適切な市販の式ＩＩのグルタミン酸誘導体は、（Ｓ）−５−ベンジル  １−tert−ブチル２−アミノ−ペンタンジオエート塩酸塩である。
【００２５】
式ＩＩＩのリシン酸誘導体は、市販されている。適切には、（Ｓ）−アリル  ６−アミノ−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−アミノヘキサノエートが使用される。
【００２６】
次いで、式ＩＩのグルタミン酸誘導体と式ＩＩＩのリシン酸誘導体のカップリングを、ペプチド合成用の古典的な技術を適用して実施することができる。
【００２７】
従って、式ＩＩのグルタミン酸誘導体は、当技術分野において慣用的な活性化剤、例えば、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）又はジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）から選択されるカルボジイミド、あるいは、例えば、１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）又は１−ヒドロキシ−７−アザ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）から選択されるトリアゾールで最初に活性化される。
【００２８】
適切な有機溶媒（例えば、ジクロロメタンのような）中に適用したＣＤＩ（１，１’−カルボニルジイミダゾール）で最良の結果が達成された。
【００２９】
次いで、カップリングを、トリエチルアミンなどの有機塩基の存在下、通常室温で、式ＩＩＩのリシン酸誘導体を用いて行うことができる。
【００３０】
得られた式Ｉｂのジペプチド化合物は、有機相から、溶媒の蒸発、その後の、適切な有機溶媒、例えば、ジエチルエーテル中での残留物の結晶化によって得ることができる。
【００３１】
上記の式Ｉａの亜属（subgenus）としての式Ｉｂの化合物が、本発明の特定の実施態様である。
【００３２】
式Ｉｂの化合物の特定の代表例は、（Ｓ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート（Ｒ１＝ｔ−ブチル、Ｒ２’＝アリル、Ｒ３＝Ｆｍｏｃ及びＲ４＝ペンタデシルを有する）である。
【００３３】
工程ｂ）
工程ｂ）は、式Ｉａの化合物を形成するためのエステル保護基Ｒ２’の除去を要する。
【００３４】
この反応は、当業者によく知られている。
【００３５】
アリル基を除去するための適切な系は、例えば、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン又はメチルテトラヒドロフランなどの有機溶媒中の、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）のようなＰｄ源及びフェニルシランの溶液である。
【００３６】
反応は、室温で行うことができる。
【００３７】
得られた式Ｉａのジペプチドは、有機相から、溶媒の蒸発、その後の、適切な有機溶媒、例えば、ヘプタン及び／又はヘプタン／ジクロロメタンの混合物による粗生成物の温浸によって得ることができる。
【００３８】
上記のように、式Ｉの化合物は、固相ペプチド合成、特に、ペプチド鎖のＬｙｓ部分に連結されたＧｌｕ−脂肪族アルキル側鎖構成単位を含むペプチドの合成において、汎用的な中間体として使用することができる。
【００３９】
さらにより特定すると、式Ｉの化合物は、そのようなペプチドのＦＭＯＣ固相ペプチド合成において使用することができる。
【００４０】
実施例
略語：
ｒ．ｔ．＝室温、ＤＣＭ＝ジクロロメタン、ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン、ＴＢＭＥ＝tert−ブチルメチルエーテル、ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル、ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー。
【００４１】
実施例１
（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸
ａ）（Ｓ）−５−ベンジル  １−tert−ブチル  ２−パルミトアミドペンタンジオエート
【化８】
2015518821.tif 000010
２００mLの３口フラスコ中、（Ｓ）−５−ベンジル  １−tert−ブチル  ２−アミノ−ペンタンジオエート塩酸塩（５．００ｇ、１４．９mmol）、トリエチルアミン（３．１２ｇ、３０．７mmol）及びテトラヒドロフラン（１００mL）の混合物を０〜５℃で１５分間撹拌した。この懸濁液に、パルミトイルクロリド（４．３５ｇ、１５．５mmol）を１０分以内にシリンジで加えた。反応混合物を０〜５℃でさらに３０分間撹拌した。ＴＬＣ（ＥＥ／ヘプタン  １：１、出発物質のＲＦ＝０．１、生成物のＲＦ＝０．６、２５４nmでKomarowsky試薬によって検出した（cf. P. Stevens, J. Chromatog. 1964, 14, 269)）に関しては、変換は完了していた。反応混合物に、水（６０mL）及びtert−ブチルメチルエーテル（７０mL）を加え、混合物をｒ．ｔ．で５分間撹拌した。有機層を分離し、ブライン（１２０mL）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固して、（Ｓ）−５−ベンジル  １−tert−ブチル  ２−パルミトアミドペンタンジオエート（８．２１ｇ、＞９９％）を白色の固体として９８．９％の化学純度（ＬＣ法は、以下を参照されたい）で得た。
Ｍ．ｐ．４７℃；ＥＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５３１．３９（Ｍ＋Ｈ）＋
【００４２】
ＬＣ法：X-BridgeフェニルカラムＮｏ．８２３、５０×４．６mm、ＩＤ２．５μm；移動相、Ａ：水／ＮＣＭｅ（９５：５）、Ｂ：ＮＣＭｅ、Ｃ：水／グリシン（ｐＨ９）；流速：３ml／分；５０／４／５５（Ａ／Ｂ／Ｃ）〜７／８８／５（Ａ／Ｂ／Ｃ）の勾配で２分以内、７／８８／５（Ａ／Ｂ／Ｃ）の定組成で０．８分間。保持時間：０．５４分（（Ｓ）−及び（Ｒ）−５−ベンジル  １−tert−ブチル  ２−アミノ−ペンタンジオエート）、２．１７分（（Ｓ）−及び（Ｒ）−５−ベンジル  １−tert−ブチル  ２−パルミトアミドペンタンジオエート）。
【００４３】
ｂ）（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタン酸
【化９】
2015518821.tif 000011
２５０mLの３口フラスコ中、粗（Ｓ）−５−ベンジル  １−tert−ブチル  ２−パルミトアミドペンタンジオエート（１３．２ｇ、２４．８mmol）、１０％パラジウム炭素（１．３１ｇ、１．２０mmol）及びＴＨＦ（１５０mL）の混合物を、水素雰囲気下、室温で撹拌した。ＴＬＣ（ＥＥ／ヘプタン  １：１、出発物質のＲＦ＝０．５、生成物のＲＦ＝０．２、Komarowsky試薬によって検出した（cf. P. Stevens, J. Chromatog. 1964, 14, 269)）に関しては、２３時間後に変換は完了していた。黒色の懸濁液をガラス繊維フィルターに通し、得られた無色の濾液を蒸発乾固して粗生成物（１１．３ｇ）を得て、次いで、これをヘプタンから結晶化させることによって精製して、（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタン酸（８．７８ｇ、収率７６％）を白色の固体として９７．７％の化学純度（ＬＣ法は、以下を参照されたい）で得た。
Ｍ．ｐ．６３℃；ＥＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４４０．３３（Ｍ−Ｈ）−
【００４４】
ＬＣ法：X-BridgeフェニルカラムＮｏ．８２３、５０×４．６mm、ＩＤ２．５μm；移動相、Ａ：水／ＮＣＭｅ（９５：５）、Ｂ：ＮＣＭｅ、Ｃ：水／グリシン（ｐＨ９）；流速：３ml／分；５０／４／５５（Ａ／Ｂ／Ｃ）〜７／８８／５（Ａ／Ｂ／Ｃ）の勾配で２分以内、７／８８／５（Ａ／Ｂ／Ｃ）の定組成で０．８分間。保持時間：０．７７分（（Ｓ）−及び（Ｒ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタン酸）、２．１７分（（Ｓ）−及び（Ｒ）−５−ベンジル  １−tert−ブチル  ２−パルミトアミドペンタンジオエート）。
【００４５】
ｃ）（Ｓ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート
【化１０】
2015518821.tif 000012
５００mLの３口フラスコ中、（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタン酸（８．７７ｇ、１９．４mmol）、１，１’−カルボニルジイミダゾール（３．３０ｇ、２０．４mmol）及びＤＣＭ（１２５mL）の混合物を室温で９０分間撹拌した。得られた白色の懸濁液に、ＤＣＭ（５０mL）中の（Ｓ）−アリル  ６−アミノ−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−アミノヘキサノエート（８．６８ｇ、１９．５mmol）及びトリエチルアミン（１．９６ｇ、１９．４mmol）の溶液を１５分以内に加えた。反応混合物をｒ．ｔ．でさらに９０分間撹拌して変換を完了した（ＴＬＣ（ＥＥ／ヘプタン  １：１、出発物質のＲＦ＝０、生成物のＲＦ＝０．５、Komarowsky試薬によって検出した（cf. P. Stevens, J. Chromatog. 1964, 14, 269)）によって決定した）。次に、ＤＣＭ（５０mL）及び水（４０mL）を混合物に加え、層を分離した。水層をＤＣＭ（２０mL）で抽出し、合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒の蒸発後、残留した粗生成物（１６．０ｇ）をジエチルエーテルから結晶化することによって精製して、（Ｓ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート（１５．２ｇ、９１％）を白色の固体として９６．５％の化学純度（ＬＣ法は、以下を参照されたい）ならびに＞９９．９％のエナンチオマー及びジアステレオマー純度（キラルＬＣ法は、以下を参照されたい）で得た。
Ｍ．ｐ．１１８℃；ＥＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝８３２．５５（Ｍ＋Ｈ）＋
【００４６】
ＬＣ法：X-Bridgeフェニルカラム、５０×４．６mm、ＩＤ２．５μm；移動相、Ａ：水／ＮＣＭｅ（９５：５）、Ｂ：ＮＣＭｅ、Ｃ：０．１％ギ酸水溶液；流速：２ml／分；６５／２５／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）〜１０／８０／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）の勾配で１０分以内、１０／８０／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）の定組成で２分間。保持時間：９．５９分（（Ｓ）−アリル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート））。
【００４７】
キラルＬＣ法：Chiracel OD-RHカラムＮｏ．７４５＆Ｎｏ．７０２、１５０×４．６mm、ＩＤ５μm；移動相、Ａ：ＮＣＭｅ、Ｂ：水／ＨＣｌＯ４（ｐＨ２）；流速：１ml／分、６８：３２（Ａ／Ｂ）の定組成で３２分間、６８／３２（Ａ／Ｂ）〜７５／２５（Ａ／Ｂ）の勾配で０．５分以内、７５／２５（Ａ／Ｂ）の定組成で２９．５分間。保持時間：４５．３９分（（Ｒ）−アリル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｒ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート）、４７．７５分（（Ｒ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート）、５１．９８分（（Ｓ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｒ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート）、５５．６６分（（Ｓ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート）。
【００４８】
実施例２
（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸
【化１１】
2015518821.tif 000013
５００mLの３口フラスコ中、（Ｓ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート（１０．０ｇ、１１．４mmol）、フェニルシラン（７．０２ｇ、６２．９mmol）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１．００ｇ、０．８５mmol）及びＤＣＭ（２５０mL）の混合物を室温で撹拌した。ＴＬＣ（ＥＥ／ヘプタン  ３：１、出発物質のＲＦ＝０．２、生成物のＲＦ＝０、２５４nmでのＵＶで検出した）に関しては、１１分後に変換は完了していた。反応混合物をＤＣＭ（５０mL）で希釈し、水（５０mL）、ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム水溶液（０．５％、３０mL）及びブライン（３０mL）で連続して洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ロータリーエバポレーターで蒸発乾固した。残留した粗生成物を、ｒ．ｔ．で、最初にヘプタン（２５mL）で、その後、ヘプタン／ＤＣＭ（９：１）で温浸して、濾過及び乾燥後、粗（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸（８．９２ｇ）を７７．２％の化学純度（ＬＣ法は、以下を参照されたい）で得た。粗生成物は、主要不純物としてトリフェニルホスフィンオキシドを１１％含有していた。粗生成物の試料１ｇの分取超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ法、以下を参照されたい）は、純粋な（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸（０．７５ｇ、７２％）を白色の固体として９６．７％の化学純度（ＬＣ法は、以下を参照されたい）、９８．０％のエナンチオマー純度及び９９．８％のジアステレオマー純度（キラルＬＣ法は、以下を参照されたい）で与えた。
Ｍ．ｐ．１１９℃；ＥＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７９２．５２（Ｍ＋Ｈ）＋
【００４９】
ＬＣ法：X-BridgeフェニルカラムＮｏ．８２３、５０×４．６mm、ＩＤ２．５μm；移動相、Ａ：水／ＮＣＭｅ（９５：５）、Ｂ：ＮＣＭｅ、Ｃ：０．１％ギ酸水溶液；流速：２ml／分；６５／２５／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）〜１０／８０／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）の勾配で１０分以内、１０／８０／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）の定組成で２分間。保持時間：８．６５分（（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸）、９．５９分（（Ｓ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート））。
【００５０】
キラルＬＣ法：Chiracel OD-RHカラムＮｏ．７４５＆Ｎｏ．７０２、１５０×４．６mm、ＩＤ５μm；移動相、Ａ：ＮＣＭｅ、Ｂ：水／ＨＣｌＯ４（ｐＨ２）；流速：１ml／分、６８：３２（Ａ／Ｂ）の定組成で３２分間、６８／３２（Ａ／Ｂ）〜７５／２５（Ａ／Ｂ）の勾配で０．５分以内、７５／２５（Ａ／Ｂ）の定組成で２９．５分間。保持時間：２１．５６分（（Ｒ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｒ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸）、２３．５２分（（Ｒ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸）、２５．６８分（（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｒ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸）、２８．３２分（（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸）。
【００５１】
分取ＳＦＣ法：Viridis２−エチルピリジンＯＢＤカラム、１５０×３０mm、ＩＤ５μm；カラム温度５０℃；移動相、Ａ：ＣＯ２、Ｂ：ＭｅＯＨ；流速：６０ml／分、８０：２０（Ａ／Ｂ）〜６０／４０（Ａ／Ｂ）の勾配で１０分以内。
【００５２】
実施例３
（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸
【化１２】
2015518821.tif 000014
２５０mLの３口フラスコ中、（Ｓ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート（１２．０ｇ、１３．７mmol）、フェニルシラン（２．２８ｇ、２０．４mmol）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（９６．０mg、０．０８mmol）及びＤＣＭ（１２０mL）の混合物をｒ．ｔ．で撹拌した。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９：１、出発物質のＲＦ＝０．９、生成物のＲＦ＝０．３、２５４nmでのＵＶで検出した）に関しては、３時間後に変換は完了していた。次いで、反応混合物を、ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム水溶液（０．５％、２０mL）及びブライン（７５mL）で連続して洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、ロータリーエバポレーターで蒸発乾固して、粗（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸（１１．６ｇ）を９３．５％の化学純度（ＬＣ法は、実施例２を参照されたい）、＞９９．９％のエナンチオマー純度及び９９．７％のジアステレオマー純度（キラルＬＣ法は、実施例２を参照されたい）で得た（残留トリフェニルホスフィンオキシドを１．２％含有していた）。次いで、粗生成物をヘプタン（２３０mL）にｒ．ｔ．で１時間懸濁し、混合物を濾過し、フィルターケーキをヘプタン（５０mL）で洗浄して、（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸（１０．９ｇ、収率９７％）を帯黄色の固体として９６．２％の化学純度（ＬＣ法は、実施例２を参照されたい）、＞９９．９％のエナンチオマー純度及び９９．８％のジアステレオマー純度（キラルＬＣ法は、実施例２を参照されたい）で得た（残留トリフェニルホスフィンオキシドを０．８％含有していた）。
Ｍ．ｐ．１１９℃；ＥＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７９２．５２（Ｍ＋Ｈ）＋
【００５３】
実施例４
（（Ｒ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート
【化１３】
2015518821.tif 000015
２５mLの３口フラスコ中、（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタン酸（５００mg、１．１２mmol）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１７５mg、１．１４mmol）、１，１’−カルボニルジイミダゾール（２００mg、１．２３mmol）及びＤＣＭ（１０mL）の混合物を室温で９０分間撹拌した。得られた白色の懸濁液に、ＤＣＭ（５mL）中の（Ｒ）−アリル６−アミノ−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−アミノヘキサノエート（５０７mg、１．１２mmol）及びトリエチルアミン（１１３mg、１．１２mmol）の溶液を５分以内に加えた。反応混合物を室温でさらに６０分間撹拌して、変換を完了した（ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９５：５、出発物質のＲＦ＝０、生成物のＲＦ＝０．２、２５４nmでのＵＶで検出した））によって決定した。次に、水（１０mL）を混合物に加え、層を分離した。水層をＤＣＭ（３０mL）で抽出し、合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒の蒸発後、残留した粗生成物（９８３mg）をジエチルエーテルから結晶化することによって精製して、（Ｒ）−アリル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート（６８６mg、７０％）を白色の固体として９４．２％の化学純度（ＬＣ法は、以下を参照されたい）ならびに＞９９．９％のエナンチオマー及びジアステレオマー純度（キラルＬＣ法は、実施例１ｃを参照されたい）で得た。
Ｍ．ｐ．１１４℃；ＥＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝８３２．５４（Ｍ＋Ｈ）＋
ＬＣ法：X-Bridgeフェニルカラム、５０×４．６mm、ＩＤ２．５μm；移動相、Ａ：水／ＮＣＭｅ（９５：５）、Ｂ：ＮＣＭｅ、Ｃ：０．１％ギ酸水溶液；流速：２ml／分；６５／２５／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）〜１０／８０／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）の勾配で１０分以内、１０／８０／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）の定組成で２分間。保持時間：９．５５分（（Ｒ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート））。
【００５４】
実施例５
（Ｒ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸
【化１４】
2015518821.tif 000016
２５mLの３口フラスコ中、（Ｒ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート（６７５mg、０．７６mmol）、フェニルシラン（３５１mg、３．１４mmol）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２０．０mg、０．０２mmol）及びＤＣＭ（７mL）の混合物を１０℃で撹拌した。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９５：５、出発物質のＲＦ＝０．８、生成物のＲＦ＝０．２、２５４nmでのＵＶで検出した）に関しては、２５分後に変換は完了していた。さらに１５分後、反応混合物をＤＣＭ（１０mL）で希釈し、水（１０mL）、ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム水溶液（０．５％、１０mL）及びブライン（１０mL）で連続して洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させて、ロータリーエバポレーターで蒸発乾固して、粗（Ｒ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸（６３１mg）を８７．４の化学純度（ＬＣ法は、以下を参照されたい）、＞９９．９％のエナンチオマー純度及び９８．８％のジアステレオマー純度（キラルＬＣ法は、実施例２を参照されたい）で得た。粗生成物は、主要不純物としてトリフェニルホスフィンオキシドを６％含有していた。粗生成物の試料６０３mgの分取超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ法は、実施例２を参照されたい）は、純粋な（Ｒ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸（３４８mg、５９％）を白色の固体として９８．７％の化学純度（ＬＣ法は、以下を参照されたい）、＞９９．９％のエナンチオマー純度及び９９．４％のジアステレオマー純度（キラルＬＣ法は、実施例２を参照されたい）で与えた。
Ｍ．ｐ．１２５℃；ＥＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７９２．５２（Ｍ＋Ｈ）＋
【００５５】
ＬＣ法：X-Bridgeフェニルカラム、５０×４．６mm、ＩＤ２．５μm；移動相、Ａ：水／ＮＣＭｅ（９５：５）、Ｂ：ＮＣＭｅ、Ｃ：０．１％ギ酸水溶液；流速：２ml／分；６５／２５／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）〜１０／８０／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）の勾配で１０分以内、１０／８０／１０（Ａ／Ｂ／Ｃ）の定組成で２分間。保持時間：８．３３分（（Ｒ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサン酸）、９．３５分（（Ｒ）−アリル  ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−６−（（Ｓ）−５−tert−ブトキシ−５−オキソ−４−パルミトアミドペンタンアミド）ヘキサノエート））。
【手続補正書】
【提出日】平成26年2月25日(2014.2.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１５】
2015518821.tif 000023
［式中、
Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なっており、水素又はフェニルで場合により置換されているＣ１−４−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、ピペリジニル又はジメチルアミノボラニルを示し、
Ｒ３は、水素又はアミノ保護基であり、そして
Ｒ４は、Ｃ１２−２０−アルキルである］
で表される化合物ならびにそのエナンチオマー、ジアステレオマー及び塩。
【請求項２】
Ｒ１が、水素又はＣ１−４−アルキルであり、そして、Ｒ２が、水素又はＣ２−４−アルケニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２が、水素又はアリルである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルである、請求項１〜３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ４が、Ｃ１４−１６−アルキルである、請求項１〜４に記載の化合物。
【請求項６】
式：
【化１６】
2015518821.tif 000024
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、上記のとおりである］
で表される、請求項１〜５に記載の化合物ならびにそのエナンチオマー、ジアステレオマー及び塩。
【請求項７】
式：
【化１７】
2015518821.tif 000025
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、上記のとおりである］
で表される、請求項１〜５に記載の化合物ならびにそのエナンチオマー、ジアステレオマー及び塩。
【請求項８】
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、Ｒ２が、水素であり、Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルであり、そして、Ｒ４が、Ｃ１５−アルキルである；
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２が、アリルであり、Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルであり、そして、Ｒ４が、Ｃ１５−アルキルである
請求項６又は７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２が、水素であり、Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルであり、そして、Ｒ４が、ペンタデシルである；
Ｒ１が、ｔ−ブチルであり、そして、Ｒ２が、アリルであり、Ｒ３が、９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルであり、そして、Ｒ４が、ペンタデシルである
請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
式Ｉ（式中、Ｒ２は、水素である）の化合物の調製のためのプロセスであって、以下の工程を含むプロセス：
ａ）式：
【化１８】
2015518821.tif 000026
［式中、Ｒ１及びＲ４は、上記のとおりである］
で表されるグルタミン酸誘導体又はその塩を、式：
【化１９】
2015518821.tif 000027
［式中、Ｒ２’は、エステル保護基であり、そして、Ｒ３は、上記のとおりである］
で表されるリシン酸誘導体又はその塩とカップリングさせて、式：
【化２０】
2015518821.tif 000028
［式中、Ｒ１、Ｒ２’、Ｒ３及びＲ４は、上記のとおりである］
で表される化合物を形成する工程、及び
ｂ）エステル保護基Ｒ２’を除去する工程。
【請求項１１】
ペプチド鎖のＬｙｓ部分に連結されたＧｌｕ−脂肪族アルキル側鎖構成単位を含むペプチドの固相ペプチド合成における式Ｉの化合物の使用。
【請求項１２】
固相ペプチド合成が、ＦＭＯＣ固相ペプチド合成である、請求項１１に記載の使用。
【国際調査報告】
2015518821.tif 000029
2015518821.tif 000030
2015518821.tif 000031