(57)【要約】  式(I)：2015529253.tif 000147(I)(式中、R1は、-CH2CH2CF3であり；R2は、-CH2CH2CH2F、-CH2CF2CH3、-CH2CH2CF3、-CH2CH(CH3)CF3、-CH2CH2CF2CH3、2015529253.tif 000148であり；R3は、Hまたは-CH3であり；環Aは、フェニルまたはピリジニルであり；ならびにRX、Ry、Ra、Rb、yおよびzは、本明細書に定義される)の化合物を開示する。また、Notch受容体を阻害するためにかかる化合物を使用する方法ならびにかかる化合物を含有する医薬組成物も開示する。これらの化合物は、様々な治療領域(例えば癌)における、疾患もしくは障害の処置、予防、または進行の遅延において有用である。
2015529253.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)：
【化１】
2015529253.tif 000144
(I)
［式中、
R1は、-CH2CH2CF3であり;
R2は、-CH2CH2CH2F、-CH2CF2CH3、-CH2CH2CF3、-CH2CH(CH3)CF3、-CH2CH2CF2CH3、
【化２】
2015529253.tif 000145
であり;
R3は、Hまたは-CH3であり;
環Aは、フェニルまたはピリジニルであり;
各Raは、独立して、F、Cl、-CN、-OH、-CH3、シクロプロピル、-CF3、-OCH3、-OCF3、および／または-O(シクロプロピル)であり;
各Rbは、独立して、F、Cl、-CH3、-CF3、-CN、および／または-OCH3であり;
yは、0、1、または2であり；ならびに
zは、0、1、または2である;
但し、R1およびR2の1つおよびただ1つが-CH2CH2CF3である］
の化合物。
【請求項２】
R3が、Hであり;
環Aが、フェニルであり;
各Raが、独立して、F、Cl、-CH3、シクロプロピル、-OCH3、および／または-O(シクロプロピル)であり;
Rbが、Fまたは-CH3であり;
yが、0、1、または2であり；ならびに
zが、0または1である、請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
環Aがフェニルである、請求項1に記載の化合物。
【請求項４】
R2が-CH2CH2CF3である、請求項1に記載の化合物。
【請求項５】
R2が、
【化３】
2015529253.tif 000146
である、請求項1に記載の化合物。
【請求項６】
R2が、-CH2CH2CH2F、-CH2CH2CF3、-CH2CH(CH3)CF3、または-CH2CH2CF2CH3である、請求項1に記載の化合物。
【請求項７】
(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-メチル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(1)；(2R,3S)-3-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(2)；(2R,3S)-N-((3S)-9-(シクロプロピルオキシ)-5-(3-フルオロフェニル)-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(3)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(4-(トリフルオロメチル)シクロヘキシル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(4)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(5)；(2R,3S)-3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-N-((3S)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(6)；(2R,3S)-N-((3S)-9-(シクロプロピルオキシ)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(7)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(8)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-5-(3-フルオロフェニル)-9-メチル-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(9)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-5-(3-メチルフェニル)-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(10)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-フルオロ-5-(3-メチルフェニル)-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(11)；(2R,3S)-N-((3S)-9-シクロプロピル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(12)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(13)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-フルオロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(14)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(15)；(2R,3S)-3-(3-フルオロプロピル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(16)；(2R,3S)-3-(3-フルオロプロピル)-N-((3S)-8-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(17)；(2R,3S)-3-(2,2-ジフルオロプロピル)-N-((3S)-2-オキソ-5-フェ��ル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(18)；(2R,3S)-N-((3S)-9-フルオロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((2S)-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(19)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(3-フルオロプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(20)；(2R,3S)-3-(3,3-ジフルオロブチル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(21)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((2R)-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(22)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((2S)-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(23)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(3,3-ジフルオロブチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(24)；ならびに(2R,3S)-3-((1-フルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-メチル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(25)、
から選択される、請求項1に記載の化合物。
【請求項８】
請求項１〜7のいずれか1項に記載の化合物；および医薬上許容し得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項９】
癌の治療における療法に使用するための、請求項1〜8のいずれか1項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
癌の治療のために、前記治療が、更にダサチニブ、パクリタキセル、タモキシフェン、デキサメタゾンおよびカルボプラチンから選択される1つ以上の別の薬剤を含み、それらが連続してまたは同時に投与される、請求項9に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１１】
癌の治療のための医薬の製造において用いるための、請求項1〜8のいずれか1項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、Notch阻害剤として有用なベンゾジアゼピノン化合物に関する。本発明は、さらに、Notch経路に関連する症状、例えば、癌および他の増殖性疾患の治療に有用である、少なくとも1つの本発明の化合物を含有する医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
Notchシグナル伝達は、様々な細胞プロセス(例えば、細胞運命決定、分化、増殖、アポトーシス、および血管形成)に関与している(非特許文献１；非特許文献２)。Notchタンパク質は、1回貫通型ヘテロ二量体膜貫通分子である。Notchファミリーには、4つの受容体、NOTCH1〜4が含まれ、それらは、DSLファミリーに属するリガンド(Delta-like 1、3、4、ならびにJagged 1および2)に結合することによって活性化される。
【０００３】
NOTCHの活性化および成熟には、γセクレターゼ(プレセニリン1もしくはプレセニリン2、ニカストリン、APH1、およびPEN2を含む多タンパク質複合体)により仲介されるタンパク質分解性の切断工程を含む、一連のプロセシング工程が必要とされる。NOTCHが切断されると、NOTCH細胞内ドメイン(NICD)が膜から遊離される。遊離されたNICDは核へ移行し、そこでCSLファミリーメンバー(RBPSUH, ”suppressor of hairless”、およびLAG1)と協力して、転写活性化因子として機能する。NOTCH標的遺伝子には、HESファミリーメンバー(例えばHES-1)が含まれる。HES-1は、遺伝子の転写抑制因子(例えば、HERP1(HEY2としても知られる)、HERP2(HEY1としても知られる)、およびHATH1(ATOH1としても知られる))として機能する。
【０００４】
Notch経路の異常な活性化は腫瘍形成の一因である。Notchシグナル伝達の活性化は、様々な固形腫瘍(卵巣癌、膵癌、および乳癌を含む)、ならびに血液腫瘍(例えば、白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫)の病因に関与している。様々な固形腫瘍および血液腫瘍の治療におけるNotch阻害の役割およびその有用性が、非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；非特許文献８；非特許文献９；非特許文献１０；および非特許文献１１に記載されている。
【０００５】
Notch阻害剤として有用であって、かつ効果的な濃度の薬物曝露をもたらす十分な代謝安定性を有する化合物が、依然として必要とされている。さらに、患者に経口投与または静脈内投与することができる、Notch阻害剤として有用な化合物が依然として必要とされている。
【０００６】
特許文献１は、神経障害(例えば、アルツハイマー病)を治療するために有用なスクシノイルアミノベンゾジアゼピン化合物を開示している。この文献には、γセクレターゼ活性およびアミロイドタンパク質の神経への沈着の形成に関連するアミロイド前駆体タンパク質のプロセシングを阻害することが開示されている。
【０００７】
出願人らは、Notch阻害剤として活性を有し、かつ静脈内投与または経口投与により効果的な濃度の薬物曝露をもたらす十分な代謝安定性を有する有望な化合物を見いだした。薬物としての性能にとって重要である、望ましい安定性、生物学的利用能、治療指数、および毒性値を有する医薬品として有用である、これらの化合物を提供する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第7,053,084号明細書(B1)
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Bray, Nature Reviews Molecular Cell Biology, 7:678-689 (2006).
【非特許文献２】Fortini, Developmental Cell 16:633-647 (2009).
【非特許文献３】Miele, L. et al., Current Cancer Drug Targets, 6:313-323 (2006).
【非特許文献４】Bolos, V. et al., Endocrine Reviews, 28:339-363 (2007).
【非特許文献５】Shih, I.-M. et al., Cancer Research, 67:1879-1882 (2007).
【非特許文献６】Yamaguchi, N. et al., Cancer Research, 68:1881-1888 (2008).
【非特許文献７】Miele, L., Expert Review Anti-cancer Therapy, 8:1197-120、1 (2008).
【非特許文献８】Purow, B., Current Pharmaceutical Biotechnology, 10、154-160 (2009).
【非特許文献９】Nefedova, Y. et al., Drug Resistance Updates, 11:210-218 (2008).
【非特許文献１０】Dufraine, J. et al., Oncogene, 27:5132-5137 (2008).
【非特許文献１１】Jun, H.T. et al., Drug Development Research, 69:319-328 (2008).
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
(発明の概要)
本発明は、Notchシグナル伝達経路の選択的阻害剤として有用なビス(フルオロアルキル)1,4-ベンゾジアゼピノン化合物を提供することにより、前述の要求を満たす。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、医薬的に許容される担体；および少なくとも１つの式(I)の化合物を含有する医薬組成物も提供する。
【００１２】
本発明は、少なくとも１つの式(I)の化合物を哺乳動物患者に投与することを含む、Notch受容体の活性に関連する疾患または障害の治療方法も提供する。
【００１３】
本発明は、式(I)の化合物を製造するための方法および中間体も提供する。
【００１４】
本発明は、療法に用いるための式(I)の化合物も提供する。
【００１５】
本発明は、癌の治療のための医薬の製造における式(I)の化合物の使用も提供する。
【００１６】
式(I)の化合物および該化合物を含有する組成物は、様々なNotch受容体-関連症状の治療、予防または治癒において使用できるNotch阻害剤である。これらの化合物を含有する医薬組成物は、様々な治療領域(例えば、癌)における、疾患もしくは障害の治療、予防、または進行の遅延において有用である。
【００１７】
本発明のこれらおよび他の特徴を、以下に続けて開示するように、拡充して記載する。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
(発明の詳細な説明)
本発明の第一態様は、少なくとも1つの式(I)：
【化１】
2015529253.tif 000003
(I)
［式中、
R1は、-CH2CH2CF3であり;
R2は、-CH2CH2CH2F、-CH2CF2CH3、-CH2CH2CF3、-CH2CH(CH3)CF3、-CH2CH2CF2CH3、
【化２】
2015529253.tif 000004
であり;
R3は、Hまたは-CH3であり;
環Aは、フェニルまたはピリジニルであり;
各Raは、独立して、F、Cl、-CN、-OH、-CH3、シクロプロピル、-CF3、-OCH3、-OCF3、および／または-O(シクロプロピル)であり;
各Rbは、独立して、F、Cl、-CH3、-CF3、-CN、および／または-OCH3であり;
yは、0、1、または2であり；ならびに
zは、0、1、または2である;
但し、R1およびR2の1つおよびただ1つが-CH2CH2CF3である］
の化合物、または少なくとも1つのそのプロドラッグを提供する。
【００１９】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、環Aはフェニルであり；ならびにR1、R2、R3、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、R3がHである化合物が含まれる。この実施態様には、R3がHであり、zが1または2である化合物も含まれる。
【００２０】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、環Aは、ピリジニルであり；ならびに、R1、R2、R3、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、R3がHである化合物が含まれる。この実施態様には、R3がHであり、zが1または2である化合物も含まれる。
【００２１】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R2は、-CH2CH2CH2F、-CH2CF2CH3、-CH2CH2CF3、-CH2CH(CH3)CF3、または-CH2CH2CF2CH3であり；ならびにR1、R3、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、R3がHである化合物も含まれる。
【００２２】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R2は、
【化３】
2015529253.tif 000005
であり；ならびに、R1、R3、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、R3がHである化合物も含まれる。
【００２３】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R2が
【化４】
2015529253.tif 000006
；ならびに、R1、R3、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、R3がHである化合物も含まれる。
【００２４】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R3はHであり；ならびに、R1、R2、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、化合物(式中、R3は、重水素(D)またはトリチウム(T)である)が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルである化合物も含まれる。
【００２５】
一実施態様は、式(I)(式中、R3は-CH3であり；ならびに、R1、R2、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。R3には、メチル基が挙げられるが、これは１以上の水素原子が、重水素(D)および／またはトリチウム(T)により、同位体的に置換される。この実施態様の一実施態様において、R3は-CD3である。この実施態様には、環Aがフェニルである化合物も含まれる。
【００２６】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、yは1であり、R1、R2、R3、環A、RX、Ry、Ra、Rb、zは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。実施態様において、環Aがフェニルである化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、zが0または1である化合物も含まれる。
【００２７】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R3は、Hであり；環Aはフェニルであり；各Raは、独立して、F、Cl、-CH3、シクロプロピル、-OCH3、および／または-O(シクロプロピル)の化合物であり；Rbは、Fまたは-CH3であり；zは、0または1であり；ならびにR1、R2、yは、第一態様において規定される)を提供する。
【００２８】
一実施態様は、下記構造：
【化５】
2015529253.tif 000007
(式中、R1、R2、R3、Ra、Rbは、第一態様において規定される)を有する少なくとも1つの式(I)の化合物を提供する。この実施態様に含まれるものは、化合物(式中、Raは、F、Cl、-CH3、-OCH3、シクロプロピル、または-O(シクロプロピル)であり；ならびにRbは、Fまたは-CH3である)である。この実施態様には、RaがFまたは-CH3であり；ならびに、RbがFまたは-CH3である化合物も含まれる。
【００２９】
一実施態様は、下記構造：
【化６】
2015529253.tif 000008
(式中、R1、R2、R3、Raは、第一態様において規定される)
を有する少なくとも1つの式(I)の化合物を提供する。この実施態様には、RaがF、Cl、-CH3、-OCH3、シクロプロピル、または-O(シクロプロピル)である化合物に含まれる。この実施態様には、RaがF、Cl、または-CH3である化合物も含まれる。
【００３０】
一実施態様は、(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-メチル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(1)；(2R,3S)-3-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(2)；(2R,3S)-N-((3S)-9-(シクロプロピルオキシ)-5-(3-フルオロフェニル)-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(3)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(4-(トリフルオロメチル)シクロヘキシル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(4)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(5)；(2R,3S)-3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-N-((3S)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(6)；(2R,3S)-N-((3S)-9-(シクロプロピルオキシ)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(7)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(8)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-5-(3-フルオロフェニル)-9-メチル-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(9)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-5-(3-メチルフェニル)-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(10)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-フルオロ-5-(3-メチルフェニル)-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(11)；(2R,3S)-N-((3S)-9-シクロプロピル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(12)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(13)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-フルオロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(14)；(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(15)；(2R,3S)-3-(3-フルオロプロピル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(16)；(2R,3S)-3-(3-フルオロプロピル)-N-((3S)-8-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(17)；(2R,3S)-3-(2,2-ジフルオロプロピル)-N-((3S)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(18)；(2R,3S)-N-((3S)-9-フルオロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((2S)-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(19)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(3-フルオロプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(20)；(2R,3S)-3-(3,3-ジフルオロブチル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(21)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((2R)-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(22)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((2S)-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(23)；(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(3,3-ジフルオロブチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(24)；ならびに(2R,3S)-3-((1-フルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-メチル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(25)、
から選択される式(I)の化合物を提供する。
【００３１】
一実施態様は、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおいて測定されたとおり、少なくとも45分という代謝半減期値を有する、少なくとも1つの式(I)の化合物を提供する。
【００３２】
一実施態様は、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおいて測定されたとおり、少なくとも60分という代謝半減期値を有する、少なくとも1つの式(I)の化合物を提供する。
【００３３】
本発明は、その精神または本質的特性から逸脱することなく、他の具体的な形態で具現化されうる。本発明は、本明細書に記載された本発明の態様および/または実施態様の全ての組み合わせを包含する。本発明のあらゆる実施態様はいずれの他の実施態様と組み合わされて、さらなる実施態様を説明しうると理解される。また、実施態様のそれぞれ個々の要素は、いずれの実施態様からのあらゆる他の要素と組み合わせてさらなる実施態様を説明するものであることも理解される。
【００３４】
(定義)
本発明の特徴および利点は、以下の詳細な説明を読むことで、当業者によってさらに容易に理解されうる。当然のことながら、上部および下部の別個の実施態様中に明確な根拠として記載された本発明のある特定の特徴を組み合わせて、単独の実施態様を形成してもよい。反対に、単独の実施態様中に簡潔な根拠として記載された本発明の様々な特徴を組み合わせて、それらのサブコンビネーションを形成してもよい。本明細書において、例として特定された実施態様かまたは好ましい実施態様は、例示目的であって限定するものではないことが意図される。
【００３５】
本明細書において他に特に記載のない限り、単数形の言及には複数の言及もまた含まれうる。例えば、「a」および「an」は、１かまたは１以上のいずれかを示しうる。
【００３６】
別段の記載がない限り、原子価が満たされていないいずれのヘテロ原子は、その原子価を満たすのに十分な水素原子を有すると考える。
【００３７】
本明細書に記載の定義は、引用により本明細書に援用されるいずれの特許、特許出願、および/または特許出願公開に記載された定義よりも優先される。
【００３８】
本発明を説明するために用いられる様々な用語の定義を以下に記載する。これらの定義は、本明細書の全体を通して(それらが他に特定の場合に限定されない限り)、個別に、またはより大きな基の一部としてのいずれかで用いられる用語に適用される。
【００３９】
本明細書の全体を通して、基およびそれらの置換基は、安定な部分および化合物をもたらすように、当業者により選択されうる。
【００４０】
当分野で用いられる慣習に従って、
【化７】
2015529253.tif 000009
は本明細書において、コアまたは骨格構造への部分または置換基の結合点である結合を表すために、構造式中で用いられる。
【００４１】
本明細書で用いる用語「ハロ」および「ハロゲン」は、F、Cl、Br、またはIを言う。
【００４２】
本明細書で用いる用語「アルキル」は、例えば、1〜12個の炭素原子、1〜6個の炭素原子、または1〜4個の炭素原子を含む、分枝鎖および直鎖両方の飽和脂肪族炭化水素基を言う。アルキル基の例としては、限定はされないが、メチル(Me)、エチル(Et)、プロピル(例えば、n-プロピルおよびi-プロピル)、ブチル(例えば、n-ブチル、i-ブチル、sec-ブチル、およびt-ブチル)、およびペンチル(例えば、n-ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル)、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、2-エチルブチル、3-メチルペンチル、ならびに4-メチルペンチルが挙げられる。シンボル「C」の後に下付き文字で数字が記載されている場合、該下付き文字は特定の基が有しうる炭素原子の数をより具体的に定義する。例えば、「C1-C6アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖および分枝鎖アルキル基を意味する。
【００４３】
該語句「医薬的に許容される」は本明細書において、適切な医学的判断の範囲内で、妥当な利益/リスク比に見合って、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずにヒトおよび動物の組織と接触して用いるのに適した、化合物、物質、組成物、および/または剤形を意味するように用いられる。
【００４４】
式(I)の化合物は、アモルファスな固形物または結晶性の固形物として提供され得る。凍結乾燥を用いて、固形物として式(I)の化合物を提供することができる。
【００４５】
式(I)の化合物の溶媒和物(例えば、水和物)もまた、本発明の範囲内であることはまた理解されるべきである。用語「溶媒和物」とは、式(I)の化合物と、１つ以上の溶媒分子(有機または無機であってもよい)との物理的会合を意味する。この物理的会合には、水素結合が含まれる。特定の例において、例えば、１つ以上の溶媒分子が結晶性固体の結晶格子内に組み込まれている場合には、溶媒和物を単離することができる。「溶媒和物」には、溶液相および単離可能な溶媒和物の両方が含まれる。例示的な溶媒和物には、水和物、エタノレート、メタノレート、イソプロパノレート、アセトニトリル溶媒和物、酢酸エチル溶媒和物が含まれる。溶媒和物化に関する方法は、当分野では既知である。
【００４６】
in vivoで変換されて生理活性剤(すなわち、式(I)の化合物)を提供することができるいずれの化合物も、本発明の範囲および精神の範囲内にあるプロドラッグである。
【００４７】
様々な形態のプロドラッグが当分野において周知であり、以下:
a)Wermuth, C.G. et al., The Practice of Medicinal Chemistry, Chapter 31, Academic Press (1996)；
b)Bundgaard, H. ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985)； 
c)Bundgaard, H., Chapter 5, “Design and Application of Prodrugs,” Krosgaard-Larsen, P. et al., eds., A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Harwood Academic Publishers (1991)； および、
d)Testa, B. et al., Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism, Wiley-VCH (2003)
に記載されている。
【００４８】
加えて、式(I)の化合物は、製造後に単離および精製して、重量で99％以上の式(I)の化合物(「実質的に純粋な」)を含む組成物を得て、次いでそれを本明細書に記載のとおり用いるかまたは製剤化するのが好ましい。そのような「実質的に純粋な」式(I)の化合物も、本発明の一部として本明細書において意図される。
【００４９】
「安定な化合物」および「安定な構造」とは、反応混合物から有用な純度への単離、および有効な治療薬への製剤化に耐えるのに十分強い化合物を示すことを意図する。本発明は安定な化合物を具体化するものと意図される。
【００５０】
「治療上有効な量」は、NOTCH受容体の阻害剤として作用するか、または増殖性疾患(例えば癌)を治療もしくは予防するのに有効である、本発明の化合物単独の量か、特許請求された化合物の組み合わせの量か、または他の活性成分と組み合わされた本発明の化合物の量を包含することを意図する。
【００５１】
本明細書で用いる「治療すること」または「治療」には、哺乳動物、とりわけヒトにおける疾患状態の治療が含まれ、ならびに:(a)とりわけ、哺乳動物が疾患状態に罹りやすいが、まだ罹患していると診断されていない場合において、哺乳動物での疾患状態が生じるのを予防すること；(b)疾患状態の抑制、すなわち、その進行を抑止すること；および/または(c)疾患状態を軽減すること、すなわち、疾患状態の退行をもたらすこと、が含まれる。
【００５２】
本発明の化合物は、本発明の化合物に出現する原子の全ての同位体を含むことを意図する。同位体には、原子番号が同一であるが質量数が異なる原子が含まれる。一般的な例として、限定されることなく、水素の同位体にはジュウテリウム(D)およびトリチウム(T)が含まれる。炭素の同位体としては13Cおよび14Cが挙げられる。同位体で標識された本発明の化合物は一般に、当業者に公知の通常の技法によってか、または本明細書に記載されたものと類似した方法によって、他で用いられる非標識試薬の代わりに適切な同位体-標識試薬を用いて、製造することができる。
【００５３】
式(I)で示される化合物は、治療する症状に適切ないずれの方法(部位特異的治療の必要性、または送達される式(I)の化合物の量に依存し得る)によっても投与されることができる。
【００５４】
また、本発明には、少なくとも1つの式(I)の化合物；ならびに1以上の無毒の医薬的に許容される担体および/または希釈剤および/またはアジュバント(本明細書においてまとめて「担体」物質と称される)、さらに、必要に応じて、他の活性成分を含有する医薬組成物の類が包含される。該式(I)の化合物は、いずれの適切な経路によって、好ましくはそのような経路に適応した医薬組成物の形態で、目的の治療に対して有効な量で、投与されうる。本発明の化合物および組成物は、例えば、通常の医薬的に許容される担体、アジュバント、およびビヒクルを含む用量単位剤形で、経口、粘膜、または非経口(parentally)(血管内、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、および胸骨内を含む)で投与されてもよい。例えば、該医薬担体は、マンニトールもしくはラクトースおよび微結晶セルロースの混合物を含んでよい。該混合物は、さらなる成分、例えば、滑沢剤(例えば、ステアリン酸マグネシウム)および崩壊剤(例えばクロスポビドン)を含んでもよい。該担体混合物は、ゼラチンカプセルに詰められるか、または錠剤として圧縮されてもよい。該医薬組成物は、例えば、経口剤形または注入液として投与されてもよい。
【００５５】
経口投与の場合、該医薬組成物は、例えば、錠剤、カプセル剤、液体カプセル剤、懸濁剤、または液剤の形態であってもよい。該医薬組成物は、好ましくは、特定の量の活性成分を含む用量単位の形態で製造される。例えば、該医薬組成物は、約1〜2000 mg、好ましくは約1〜500 mg、およびさらに好ましくは約5〜150 mgの範囲の量の活性成分を含有する錠剤またはカプセル剤として提供されてもよい。ヒトまたは他の哺乳動物に対する適切な1日用量は、患者の症状および他の因子に応じて幅広く変化させてもよいが、ルーチンな方法を用いて決定することができる。
【００５６】
本明細書において意図されるいずれの医薬組成物も、例えば、いずれの許容可能で適切な経口製剤によって経口で送達され得る。経口製剤の例としては、限定はされないが、例えば、錠剤、トローチ剤、ドロップ剤(lozenge)、水性もしくは油性懸濁剤、分散性粉末剤もしくは顆粒剤、エマルジョン剤、硬もしくは軟カプセル剤、シロップ剤、およびエリキシル剤が挙げられる。経口投与用の医薬組成物は、経口投与用の医薬組成物の製造において当業者に公知のあらゆる方法に従って、製造され得る。医薬的に服用しやすい(palatable)製剤を提供するために、本発明による医薬組成物は、甘味剤、香味剤、着色剤、粘滑剤、抗酸化剤、または保存剤から選択される少なくとも1つの剤を含み得る。
【００５７】
錠剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物と錠剤の製造に適した少なくとも1つの無毒の医薬的に許容される賦形剤を混合することによって製造され得る。賦形剤の例としては、限定はされないが、例えば、不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、およびリン酸ナトリウムなど；造粒および崩壊剤、例えば、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、コーンスターチ、およびアルギン酸など；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン、ポリビニル-ピロリドン、およびアラビアゴム(acacia)など；ならびに、滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、およびタルクなどが挙げられる。加えて、錠剤は、コーティングされないか、あるいは不快な味の薬剤の嫌な味をマスクするかまたは消化管での活性成分の崩壊および吸収を遅延させることによって活性成分の効果を長時間持続させるために公知の技法によってコーティングされ得る。水溶性矯味物質の例としては、限定はされないが、ヒドロキシプロピル-メチルセルロースおよびヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる。時間遅延物質(time delay material)の例としては、限定はされないが、エチルセルロースおよび酢酸酪酸セルロースが挙げられる。
【００５８】
硬ゼラチンカプセル剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物と少なくとも1つの不活性固形物希釈剤(例えば炭酸カルシウム；リン酸カルシウム；およびカオリンなど)を混合することによって製造され得る。
【００５９】
軟ゼラチンカプセル剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物を、少なくとも1つの水溶性担体(例えば、ポリエチレングリコールなど)；および少なくとも1つの油媒体(例えば、ラッカセイ油、流動パラフィン、およびオリーブ油など)と混合することによって製造され得る。
【００６０】
水性懸濁剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物を水性懸濁剤の製造に適した少なくとも1つの賦形剤と混合することによって製造され得る。水性懸濁剤の製造に適した賦形剤の例としては、限定はされないが、例えば、懸濁化剤(例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム(gum tragacanth)、およびアカシアガムなど)；崩壊剤または湿潤剤(例えば、天然のリン脂質(例えばレシチン)など)；アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物(例えば、ポリオキシエチレンステアレートなど)；エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物(例えば、ヘプタデカエチレン-オキシセタノール(oxycetanol)など)；エチレンオキシドと部分エステル(脂肪酸およびヘキシトールに由来)との縮合生成物(例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエートなど)；および、エチレンオキシドと部分エステル(脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来)との縮合生成物(例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエートなど)が挙げられる。水性懸濁剤はまた、少なくとも1つの保存剤(例えば、p-ヒドロキシ安息香酸エチルおよびp-ヒドロキシ安息香酸n-プロピルなど)；少なくとも1つの着色剤；少なくとも1つの香味剤；および/または、少なくとも1つの甘味剤(限定はされないが、例えば、スクロース、サッカリン、およびアスパルテームを含む)を含むことができる。
【００６１】
油性懸濁剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物を、植物油(例えば、ラッカセイ油；オリーブ油；ゴマ油；およびヤシ油など)；または鉱物油(例えば、流動パラフィンなど)のいずれかの中に懸濁させることによって製造することができる。油性懸濁剤はまた、少なくとも1つの増粘剤、例えば、蜜ロウ；固形パラフィン；およびセチルアルコールなどを含むことができる。風味のよい(palatable)油性懸濁剤を提供するために、すでに上述した甘味剤のうちの少なくとも1つ、および/または少なくとも1つの香味剤を、該油性懸濁剤に加えることができる。油性懸濁剤はさらに、限定はされないが、例えば、抗酸化剤(例えば、ブチルヒドロキシアニソール、およびα-トコフェロールなど)を含めた少なくとも1つの保存剤を含むことができる。
【００６２】
分散性散剤および顆粒剤を、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物と、少なくとも1つの分散剤および/または湿潤剤；少なくとも1つの懸濁化剤；ならびに/あるいは少なくとも1つの保存剤とを混合させることによって製造することができる。適切な分散剤、湿潤剤、および懸濁化剤は、すでに上述したものである。保存剤の例としては、限定はされないが、例えば、抗酸化剤(例えば、アスコルビン酸)が挙げられる。加えて、分散性散剤および顆粒剤はまた、少なくとも1つの賦形剤(限定はされないが、例えば、甘味剤；香味剤；および着色剤を含む)を含むことができる。
【００６３】
少なくとも1つの式(I)の化合物の乳剤は、例えば、水中油型乳剤として製造され得る。式(I)の化合物を含有する乳剤の油性相は、公知の方法で公知の成分から構成されうる。該油相は、限定はされないが、例えば、植物油(例えば、オリーブ油およびラッカセイ油など)；鉱物油(例えば、流動パラフィンなど)；およびそれらの混合物によって製造され得る。該相は、単に乳化剤のみを含有してもよいが、少なくとも1つの乳化剤と脂肪もしくは油または脂肪と油の両者との混合物を含有してもよい。適切な乳化剤としては、限定はされないが、例えば、天然のリン脂質(例えば、大豆レシチン)；脂肪酸およびヘキシトール無水物由来のエステルまたは部分エステル(例えば、ソルビタンモノオレエートなど)；および部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物(例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートなど)が挙げられる。好ましくは、親水性乳化剤は、安定剤として作用する親油性乳化剤を一緒に含まれる。また、油および脂肪の両方が含まれることが好ましい。安定剤の有無にかかわらず乳化剤はいわゆる乳化ワックスを形成し、該ワックスは油および脂肪と一緒に、クリーム製剤の油性分散相を形成するいわゆる乳化軟膏基剤を形成する。乳剤はまた、甘味剤、香味剤、保存剤、および/または抗酸化剤を含むこともできる。本発明の製剤における使用に適切な乳化剤および乳化安定剤には、Tween 60、Span 80、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレート、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリルジステアレートが、単独かまたはワックスもしくは当分野で周知の他の物質と共に含まれる。
【００６４】
式(I)の化合物はまた、例えば、静脈内、皮下、および/または筋肉内に、いずれの医薬的に許容される適切な注射可能な形態によって、投与され得る。注射可能な形態の例としては、限定はされないが、例えば、許容可能なビヒクルおよび溶媒(例えば、水、リンガー液、および生理食塩水など)を含有する無菌の水溶液；無菌の水中油型マイクロエマルション；および水性もしくは油性の懸濁液が挙げられる。
【００６５】
非経口投与用の製剤は、水性または非水性の等張で無菌の注射液剤または懸濁剤の形態であってもよい。これらの液剤および懸濁剤は、無菌の粉末または顆粒から、経口投与用の製剤での使用において言及した担体または希釈剤のうちの1つ以上を用いるか、または他の適切な分散剤もしくは湿潤剤および懸濁化剤を用いることによって、製造されうる。該化合物は、水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、トウモロコシ油、綿実油、ラッカセイ油、ゴマ油、ベンジルアルコール、塩化ナトリウム、トラガカントガム(tragacanth gum)、および/または様々な緩衝剤中に溶解されうる。他のアジュバントおよび投与様式が、製薬分野において広く周知である。また、該活性成分を、適切な担体(生理食塩水、ブドウ糖(dextrose)、または水を含む)との組成物、あるいはシクロデキストリン(すなわち、CAPTISOL(登録商標))、共溶媒可溶化剤(すなわち、プロピレングリコール)またはミセル可溶化剤(すなわち、Tween 80)との組成物として、注射により投与してもよい。
【００６６】
無菌の注射製剤はまた、無毒の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌の注射可能な溶液または懸濁液(例えば、1,3-ブタンジオール中の溶液)であってよい。許容されるビヒクルおよび溶媒の中で用いてもよいものは、水、リンガー液、および生理食塩水である。加えて、無菌の固定油が、溶媒または懸濁化媒質として通常用いられる。この目的のために、いずれの刺激の少ない固定油(合成モノ-またはジグリセリドが含まれる)を用いてもよい。さらに、脂肪酸(例えばオレイン酸など)が注射剤の製造で用いられる。
【００６７】
無菌の注射可能な水中油型マイクロエマルションは、例えば、1)少なくとも1つの式(I)の化合物を油性相(例えば、大豆油およびレシチンの混合物など)中に溶解させること；2)油相を含む式(I)を水とグリセロールの混合物と合わせること；そして、3)該混合物(combination)を処理してマイクロエマルションを形成させることによって、製造され得る。
【００６８】
無菌の水性もしくは油性の懸濁剤は、当分野で既に公知の方法に従って、製造され得る。例えば、無菌の水性の液剤または懸濁剤は、無毒の非経口的に許容される希釈剤または溶媒(例えば、1,3-ブタンジオールなど)を用いて製造され得て；無菌の油性の懸濁剤は、無菌で無毒の許容される溶媒または懸濁化媒質(例えば、無菌の固定油(例えば、合成モノ-またはジグリセリド)；および脂肪酸(例えばオレイン酸など)など)を用いて製造され得る。
【００６９】
本発明の医薬組成物で使用してもよい医薬的に許容される担体、アジュバント、およびビヒクルとしては、限定はされないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、自己乳化型ドラッグデリバリーシステム(SEDDS)(例えば、d-α-トコフェロールポリエチレングリコール 1000 コハク酸塩)、医薬剤形で用いる界面活性剤(例えば、Tween、CREMOPHOR(登録商標)界面活性剤(BASF)を含むポリエトキシ(polyethoxylated)ヒマシ油、または他の同様のポリマーデリバリーマトリックス)、血清タンパク質(例えばヒト血清アルブミン)、緩衝物質(例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム)、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質(例えば、プロタミン硫酸塩、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸塩、ワックス、ポリエチレン-ポリオキシプロピレン-ブロック重合体、ポリエチレングリコール)および羊毛脂が挙げられる。シクロデキストリン(例えば、α-、β-、およびγ-シクロデキストリン)または化学修飾誘導体(例えば、2-および3-ヒドロキシプロピル-シクロデキストリンを含むヒドロキシアルキルシクロデキストリン)、あるいは他の可溶化誘導体もまた、本明細書に記載の式の化合物の送達を高めるために有利に用いられうる。
【００７０】
本発明の医薬的に活性な化合物は、ヒトおよび他の哺乳動物を含む患者に投与するための薬剤を製造する薬学の通常の方法に従って、加工され得る。該医薬組成物は、通常の製薬工程(例えば、滅菌)で処理されてよく、ならびに/あるいは通常のアジュバント(例えば、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤など)を含んでもよい。加えて、錠剤および丸薬は、腸溶コーティングを用いて製造され得る。そのような組成物は、アジュバント(例えば、湿潤剤、甘味剤、香味剤、および芳香剤)も含有してもよい。
【００７１】
投与する化合物の量、ならびに本発明の化合物および/または組成物を用いた疾患状態の治療のための投与レジメンは、対象の年齢、体重、性別および病状、疾患の種類、疾患の重篤性、投与経路および投与頻度、ならびに用いる特定の化合物を含む様々な因子に依存する。従って、該投与レジメンは大きく変化させてもよいが、標準的な方法を用いてルーチン的に決定することができる。1日用量は、約0.001〜100 mg/kg体重、好ましくは約0.005〜約50 mg/kg体重、最も好ましくは約0.01〜10 mg/kg体重が適切でありうる。1日用量を、1日あたり1〜4回で投与することができる。
【００７２】
治療目的で、本発明の活性化合物は、通常、指定された投与経路に適する1つ以上のアジュバントと組み合わされる。経口投与の場合、該化合物を、ラクトース、スクロース、デンプン粉末、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウム塩およびカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、および/またはポリビニルアルコールと混合した後、投与しやすいように錠剤化するかまたはカプセルに包んでもよい。そのようなカプセルまたは錠剤には、ヒドロキシプロピルメチルセルロース中に活性化合物が分散した状態で提供することができるような、徐放性製剤が含まれうる。
【００７３】
本発明の医薬組成物は、式(I)の化合物またはそのプロドラッグ、ならびに、適宜、いずれかの医薬的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルから選択されるさらなる物質(agent)を含有する。本発明の別の組成物は、本明細書に記載の式(I)の化合物またはそのプロドラッグ、ならびに医薬的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含有する。
【００７４】
(有用性)
式(I)の化合物は、癌、例えば、Notch活性化に依存した癌の治療に有用である。Notch活性化は、様々な固形腫瘍(卵巣、膵臓、ならびに乳癌を含む)および血液腫瘍(例えば、白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫)の病因と関係している。
【００７５】
一実施態様において、癌の治療のための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む、該方法を提供する。本実施態様の方法は、限定はされないが、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頚部癌、腎癌、肝癌、肺癌(非小細胞肺癌(NSCLC)を含む)、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、前立腺癌、甲状腺癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、悪性線維性組織球腫(MFH)、線維肉腫、膠芽腫/星状細胞腫、神経芽腫、メラノーマ、T細胞急性リンパ性白血病(T-ALL)、および中皮腫を含む、様々な癌を治療するために用いることができる。例えば、この実施態様の方法は、乳癌、大腸癌、または膵臓癌の治療に用いられる。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００７６】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌は結腸直腸癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００７７】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌はトリプルネガティブの乳癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００７８】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌は非小細胞肺癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００７９】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌は膵臓癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００８０】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌は卵巣癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００８１】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌はメラノーマである。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００８２】
一実施態様において、癌の治療のための医薬の製造における少なくとも1つの式(I)の化合物の使用を提供する。好ましくは、本実施態様において、治療される癌には、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頚部癌、腎癌、肝癌、肺癌(非小細胞肺癌(NSCLC)を含む)、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、前立腺癌、甲状腺癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、悪性線維性組織球腫(MFH)、線維肉腫、膠芽腫/星状細胞腫、神経芽腫、メラノーマ、T細胞急性リンパ性白血病(T-ALL)、および中皮腫のうちの1つ以上が含まれる。本実施態様の適切な医薬には、非経口投与用の医薬(例えば、液剤および懸濁剤など)および経口投与用の医薬(例えば、錠剤、カプセル剤、液剤、および懸濁剤など)が含まれる。
【００８３】
一実施態様は、癌の治療における療法で使用するための少なくとも1つの式(I)の化合物を提供する。本実施態様において、治療対象の癌には、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頚部癌、腎癌、肝癌、肺癌(非小細胞肺癌(NSCLC)を含む)、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、前立腺癌、甲状腺癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、悪性線維性組織球腫(MFH)、線維肉腫、膠芽腫/星状細胞腫、神経芽腫、メラノーマ、T細胞急性リンパ性白血病(T-ALL)、および中皮腫のうちの1つ以上が含まれる。
【００８４】
一実施態様において、哺乳動物におけるNotch活性化に依存している癌の治療のための方法であって、少なくとも1つの式(I)の化合物を患者に投与することを含む、該方法を提供する。この実施態様の方法はまた、限定はされないが、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頚部癌、腎癌、肝癌、肺癌(非小細胞肺癌(NSCLC)を含む)、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、前立腺癌、甲状腺癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、悪性線維性組織球腫(MFH)、線維肉腫、膠芽腫/星状細胞腫、神経芽腫、メラノーマ、T細胞急性リンパ性白血病(T-ALL)、および中皮腫を含む、様々な癌を治療するために用いられ得る。好ましくは、この実施態様の方法は、乳癌、大腸癌、または膵臓癌を治療するために用いられる。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。適切な投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００８５】
癌の治療において、化学療法薬および/または他の治療(例えば、放射線療法)の組み合わせが、多くの場合に有利である。第2(または第3)の薬剤は、第1の治療薬と同じかまたは異なる作用メカニズムを有していてよい。例えば、投与される2つ以上の薬剤が異なる様式または細胞周期の異なる段階で作用し、ならびに/あるいは、該2つ以上の薬剤が重複しない毒性または副作用を有し、ならびに/あるいは、組み合わされた該薬剤が各々、患者が呈する特定の病態の治療において実証済みの効果を有している、薬剤の組み合わせを用いてもよい。
【００８６】
一実施態様において、癌の治療のための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与すること；ならびに、１つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００８７】
該句「別の抗癌剤」とは、以下のうちのいずれか1つ以上から選択される薬剤を言う:アルキル化剤(ナイトロジェンマスタード、アルキルスルホネート、ニトロソウレア、エチレンイミン誘導体、およびトリアゼンを含む)；抗血管新生剤(マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤を含む)；代謝拮抗剤(アデノシンデアミナーゼ阻害剤、葉酸拮抗剤、プリン類似体、およびピリミジン類似体を含む)；抗生物質または抗体(モノクローナル抗体、CTLA-4抗体、アントラサイクリンを含む)；アロマターゼ阻害剤；細胞周期応答調節剤；酵素；ファルネシル-タンパク質トランスフェラーゼ阻害剤；ホルモン性および抗ホルモン性の薬剤およびステロイド(合成アナログ、グルココルチコイド、エストロゲン/抗エストロゲン[例えば、SERM]、アンドロゲン/抗アンドロゲン、プロゲスチン、プロゲステロン受容体アゴニスト、ならびに黄体形成ホルモン放出ホルモン[LHRH]アゴニストおよびアンタゴニストを含む)；インスリン様増殖因子(IGF)/インスリン様増殖因子受容体(IGFR)系調節剤(system modulator)(IGFR1阻害剤を含む)；インテグリン-シグナル伝達阻害剤；キナーゼ阻害剤(マルチキナーゼ阻害剤、および/または、SrcキナーゼまたはSrc/ablの阻害剤、サイクリン依存性キナーゼ[CDK]阻害剤、pan-Her、Her-1およびHer-2抗体、VEGF阻害剤(抗-VEGF抗体を含む)、EGFR阻害剤、マイトジェン活性化タンパク質[MAP]阻害剤、MET阻害剤、MEK阻害剤、オーロラキナーゼ阻害剤、PDGF阻害剤、ならびに他のチロシンキナーゼ阻害剤またはセリン/スレオニンキナーゼ阻害剤を含む)；微小管撹乱物質(例えば、エクチナサイジンまたはそれらのアラログおよび誘導体)；微小管安定化剤(例えば、タキサン、ならびに天然のエポチロンおよびそれらの合成および半合成アナログ)；微小管結合の不安定化剤(ビンカアルカロイドを含む)；トポイソメラーゼ阻害剤；プレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤；白金配位錯体(platinum coordination complex)；シグナル伝達阻害剤；ならびに、抗癌および細胞傷害性薬物として用いられる他の薬剤(例えば、生物学的応答調節剤、増殖因子、および免疫調節剤)。
【００８８】
従って、本発明の化合物を、癌または他の増殖性疾患の治療において有用な他の抗癌治療と組み合わせて投与してもよい。本発明は、癌の治療のための医薬の製造における少なくとも1つの式(I)の化合物の使用も包含し、ならびに/あるいは、該式(I)の化合物は他の抗癌剤もしくは細胞傷害性薬物および癌の治療のための治療法と組み合わせて用いられるとの説明書を付した、式(I)の化合物のパッケージを包含する。本発明はさらに、キット形態(例えば、一緒にパッケージされるか、別個のパッケージに入れられてキットとして共に販売されるか、または共に処方されるようにパッケージされる)での少なくとも1つの式(I)の化合物と1つ以上のさらなる薬剤の組み合わせを包含する。
【００８９】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；ダサチニブ；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００９０】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；パクリタキセル；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００９１】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；タモキシフェン；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００９２】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；グルココルチコイド；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。適切なグルココルチコイドの例はデキサメタゾンである。
【００９３】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；カルボプラチン；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００９４】
本発明の化合物は、前述の症状に関連した副作用への対処におけるそれらの特定の有用性について選択された他の治療薬と共に、製剤化されるかまたは同時投与され得る。例えば、本発明の化合物は、悪心、過敏症および胃刺激を防ぐための薬剤(例えば、制吐薬ならびにH1およびH2抗ヒスタミン薬)と共に製剤化されうる。
【００９５】
一実施態様において、式(I)の化合物；キナーゼ阻害剤(小分子、ポリペプチド、抗体など)、免疫抑制剤、抗癌剤、抗ウイルス剤、抗炎症剤、抗真菌剤、抗生物質、または抗血管過剰増殖化合物から選択される1つ以上のさらなる薬剤；ならびに、いずれの医薬的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含有する医薬組成物を提供する。
【００９６】
上記の他の治療薬は、本発明の化合物と組み合わせて用いられる場合、例えば、Physicians' Desk Reference (PDR)に示されている量か、または他に当業者により決定される量で用いられてもよい。本発明の方法において、そのような他の治療薬は、本発明の化合物の投与よりも前、同時、または後で投与されうる。
【００９７】
しかしながら、いずれかの特定の対象に対する具体的な用量レベルおよび投与頻度は変化させてもよく、一般的には、限定はされないが、例えば、投与形態での特定の式(I)の化合物の生物学的利用能、該特定の式(I)の化合物の代謝安定性および作用期間、対象の種、体重、全般的な健康状態、性別、および食餌、投与の様式および時間、排出速度、薬剤の組み合わせ、ならびに特定の症状の重篤度を含む様々な因子に依存しうる。例えば、1日用量は、約0.001〜100 mg/kg体重、好ましくは約0.005〜約50 mg/kg体重、そして最も好ましくは約0.01〜10 mg/kg体重が適切でありうる。該1日用量を、1日当たり1〜4回で投与することができる。
【００９８】
該投与は継続的であることができる(すなわち、毎日、または間欠的)。本明細書で用いる用語「間欠的な」または「間欠的に」は、規則的または不規則な間隔のいずれかで休止および開始することを意味する。例えば、間欠投与には、1〜6日／週の投与；周期的な投与(例えば、連続2〜8週間の連日投与、その後、最大1週間の投与しない休止期間)；または隔日投与が含まれる。
【００９９】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、それを必要としている患者に毎日1回以上、継続的に投与する。例えば、治療上有効な量の式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、連日、毎日1回以上投与する。
【０１００】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、毎日1回以上、間欠的に投与する。例えば、治療上有効な量の式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、間欠的スケジュールに従って毎日1回以上投与する。
【０１０１】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、連日、毎日1回以上投与し、その後、1日以上投与を休止する。好ましくは、治療上有効な量の式(I)の化合物を投与する。休薬期間を伴う連続投与の例は、次のとおりである:7日間の治療の後、7日の治療休止；14日間の治療の後、7日間の治療休止；および、7日間の治療の後、14日間の治療休止の周期。治療/治療休止の周期を、患者を治療するために必要な複数回繰り返すことができる。
【０１０２】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、間欠投与スケジュールに従って投与する。間欠投与スケジュールは、患者に式(I)の化合物を投与する日および患者に式(I)の化合物を投与しない日を含む繰り返しスケジュールである。間欠投与スケジュールの例は次のとおりである:週に4日で連続3週間投与した後、1週投与休止し、4週間間隔で繰り返す；週に5日で連続2週間投与した後、1週投与休止し、3週間間隔で繰り返す；ならびに、週に4日で1週間投与した後、2週投与休止し、3週間間隔で繰り返す。好ましくは、治療上有効な量の式(I)の化合物を投与する。
【０１０３】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、1日投与した後、6日休止し、1週間スケジュールで繰り返す。
【０１０４】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、1日投与した後、6日休止し、1〜4週間スケジュールで繰り返し、次いで1週間休止した。例えば、式(I)の化合物は、1日投与した後、6日休止して3週間、次いで1週間休止した。この4週サイクルを、１回以上繰り返すことができる。
【０１０５】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、連続2日投与した後、5日休止し、1週間スケジュールで繰り返す。
【０１０６】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、連続3日投与した後、4日休止し、1週間スケジュールで繰り返す。
【０１０７】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、1日投与した後、10〜13日休止する。
【０１０８】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物は、各々1日に1回投与される(QD)。この実施態様には、1日に1回の経口投与が含まれる。
【０１０９】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物は、各々1日に2回投与される(BID)。この実施態様には、1日に2回の経口投与が含まれる。
【０１１０】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物は、隔日にて投与される：1日投与した後に、1日休止する。この2日サイクルを、１回以上繰り返すことができる。
【０１１１】
(製造方法)
本発明の化合物は、有機合成の分野の当業者に周知の多くの方法で製造することができる。本発明の化合物は、以下に記載される方法、および有機合成化学の分野で公知の合成方法、あるいは当業者により認められているその改変方法を用いて合成することができる。好ましい方法としては、限定はされないが、以下に記載のものが挙げられる。本明細書中の全ての引用文献は、引用によりその全般が本明細書に援用される。
【０１１２】
本発明の化合物は、この項に記載の反応および技法を用いて製造されうる。該反応は、用いる試薬および物質に適した溶媒中で実施され、もたらされる変換に対して適切なものである。また、以下に記載の合成方法の説明において、提示した反応条件(溶媒の選択、反応雰囲気、反応温度、実験時間およびワークアップ方法を含む)は全て、該反応の標準である条件となるように選択され、それは当業者によって容易に認識されるべきであると解される。分子の様々な部分に存在する官能性が、提示された試薬および反応に適合しなければならないことは、有機合成の分野の当業者により理解される。反応条件に適合する置換基がそのように制限され、よって代替方法が用いられなくてはならないことは当業者にとっては容易に明白である。これにより、本発明の目的の化合物を得るために、合成工程の順序を改変する判断か、またはさらに別の1つの特定のプロセススキームを選択する判断が、しばしば必要とされうる。また、この分野のいずれの合成経路の計画における別の主流の判断が、本願に記載の化合物に存在する反応性官能基の保護のために用いられる保護基の賢明な選択であることが認識されるであろう。Greeneら(Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley and Sons (1999))により、熟練した実践者のための多くの別法についての信頼できる説明が記載されている。
【０１１３】
式(I)の化合物を、以下のスキームで説明される方法を参照して製造してもよい。そこに示される通り、最終生成物は式(I)と同一の構造式を示す化合物である。いずれの式(I)の化合物も、適切な置換基を用いて、試薬の適切な選択により、該スキームによって、製造されうることが理解されよう。溶媒、温度、圧力、および他の反応条件は、当業者によって容易に選択されうる。出発物質は、市販されているか、あるいは、当業者によって容易に製造される。化合物の構成要素は、本明細書のこの箇所もしくは他の場所で定義される。
【０１１４】
スキーム1〜7に要約される方法を用いて、式(I)の化合物を合成することができる。
スキーム1
【化８】
2015529253.tif 000010
【０１１５】
ベンゾジアゼピノン(iv)は、当業者に公知の多くの方法で製造されうる。例えば、スキーム1に示したとおり、文献に概説された方法(例えば、Sherrill, R.G. et al., J. Org. Chem., 60:730 (1995)；または当業者に公知の他の経路)に従って、適切に置換された2-アミノベンゾフェノン(i)(例えば、Walsh, D.A., Synthesis, 677 (1980)；および本明細書に記載の参考文献または当業者に公知の他の方法から)を、保護グリシン誘導体(v)(PG = 保護基, 例えば PG=CBz, Katritzky, A.R., J. Org. Chem., 55:2206-2214 (1990)参照)に結合させて、試薬(例えば、アンモニア)で処理して環化させて、ベンゾジアゼピノン(iii)を得てもよい。得られたラセミ混合物を、分離させて(当業者に公知の方法を用いて)、個々のエナンチオマーを得るか、あるいはラセミ体として用いてもよい。また、R3がHである場合、(iii)を、例えば、溶媒(例えばDMF)において試薬(例えば、MeI)および塩基(例えば、K2CO3)を用いて処理して、メチルであるR3を製造することができる。
【０１１６】
工程2：当業者には既知のいくつかの方法により、(iii)を脱保護してもよい。例えば、PG = CBzを有する化合物(iii)を、溶媒(例えば、AcOH)中で、試薬(例えば、HBr)を用いて処理してもよい。化合物(iv)をラセミ体として使用してもよい。別法として、化合物(iv)を、標準的な方法(例えば、キラル分取クロマトグラフィー)を用いてエナンチオマー分割に供してもよい。
スキーム2
【化９】
2015529253.tif 000011
【０１１７】
スキーム2の化合物(xii)を、スキーム2に記載の合成順序により製造できる。
【０１１８】
工程1：当業者に公知の複数の方法で、酸(v)を、化合物(vii)に変換させることができる。例えば、溶媒(例えば、DCM)中において試薬(例えば、塩化オキサリル)を用いて酸(v)を処理して、酸塩化物(vi)を得る。化合物(vi)を、標準条件下においてオキサゾリジノン(a)で処理して、化合物(vii)を得ることができる(Evans, D.A. et al., J. Am. Chem. Soc., 112：4011(1990))。
【０１１９】
工程2：スキーム2の第2工程は、低い温度(例えば、-78℃)で不活性雰囲気下において、溶媒(例えば、THF)中で、化合物(vii)を、塩基(例えば、ナトリウム ビス(トリメチルシリル)-アミドまたはリチウムジイソプロピルアミド)で処理することにより達成される。得られる(vii)のエノラートを、試薬(例えば、tert-ブチル ブロモアセテート)により処理して、化合物(viii, Ry = t-ブチル)を得る。
【０１２０】
工程3：化合物(viii)から(ix)への変換は、適切な温度で、溶媒の混合液(例えば、THF/水)を用いて、化合物(viii)を、過酸化水素および水酸化リチウムで処理することにより達成され得る。
【０１２１】
工程4：化合物(ix)を、溶媒(例えば、THF)中、低温(例えば、-78℃)で、不活性雰囲気下に、塩基(例えば、LDA)を用いて、(ix)のエノラートを生成させて、さらに適切な脱離基(例えば、LG = トリフレート)を有する試薬(R2-LG)で処理することにより、化合物(x)および化合物(xi)の混合物に変換できる。ジアステレオマー(x/xi)の得られる混合物を、その後、次の合成工程で利用してもよい。
【０１２２】
工程5：別法としては、混合物(x/xi)を、エピマー化条件で処理して(例えば、LDAおよび塩化ジエチルアルミニウムによる処理)、その後メタノールまたは酢酸によりクエンチして、目的のジアステレオマーリッチにしてもよい。得られる化合物(x/xi)のジアステレオマーリッチな混合物を、その後、次の合成工程で利用するか、またはこのジアステレオアイソマー混合物を、必要に応じて、適切な条件(例えば、分取HPLC、分取キラルHPLCまたはシリカゲルクロマトグラフィー)を用いて分離して、この得られる純粋な目的のジアステレオマー(xi)を、次の工程で使用してもよい。
【０１２３】
工程6：別法としては、ジアステレオマー混合物の酸(x)および(xi)を、例えば、溶媒(例えば、DMF)中で、塩基(例えば、K2CO3)の存在下において、臭化ベンジルで処理することにより保護してもよい。得られるジアステレオアイソマーの混合物を、必要に応じて、適切な条件(例えば、分取HPLC、分取キラルHPLCまたはシリカゲルクロマトグラフィー)を用いて分離してもよく、またこの得られる純粋な目的のジアステレオマー化合物(xii)をその後の工程で使用した。
【０１２４】
工程7：スキーム2の最終工程は、脱保護工程であり、当業者には公知の幾つかの方法により達成され得る。例えば、化合物(xii)におけるRw=ベンジルについて、溶媒(例えば、MeOH)中において、水素雰囲気下において、触媒(例えば、パラジウム炭素)を用いる水素化条件下での処理により、その後に利用できる化合物(xi)を得ることができる。
【０１２５】
あるいは、化合物(xi)を、スキーム3に見られる工程の順序に従って製造できる。
スキーム3
【化１０】
2015529253.tif 000012
【０１２６】
工程1：スキーム3の第1工程は、当業者に公知の複数の方法の1つ、例えば、溶媒(例えば、THF)中において、適切な温度で、試薬(例えば、三フッ化ホウ素エーテラート)の存在下において、置換アセトイミデート(例えば、化合物(xiv))を用いる処理により、化合物(xiii)をエステル(xv)に変換することによって達成される。
【０１２７】
工程2：酸(v)を、当業者には既知の複数の方法で化合物(vi)に変換することができる。例えば、溶媒(例えば、DCM)中において、試薬(例えば、塩化オキサリル)を用いて酸(v)を処理することにより、酸塩化物(vi)を得る。化合物(vi)を、標準的な条件下でオキサゾリジノン(a)を用いて処理して、化合物(vii)を得ることができる(Evans, D.A. et al., J. Am. Chem Soc., 112：4011(1990))。
【０１２８】
工程3：化合物(vii)を、複数の方法(Baran, P. et al., J. Am. Chem. Soc., 130(34)：11546(2008))でジアステレオマー(xvi)の混合物に変換できる。例えば、化合物(xv)を、溶媒(例えば、トルエン)中において、低温(例えば、-78℃)で、不活性雰囲気下(例えば、N2)に、塩基(例えば、LDA)を用いて処理した。得られる混合物を、溶媒(例えば、トルエン)中において、不活性雰囲気下(例えば、N2)にて、塩化リチウムおよび塩基(例えば、LDA)で処理した化合物(vii)の溶液に加えた。得られる化合物(xv)および(vii)のエノラートの混合物に、低温(例えば、-78℃)で、不活性雰囲気下(例えば、N2)にて、ビス(2-エチルヘキサノイルオキシ)銅を加えて、室温まで昇温させて、化合物(xvi)を得た。
【０１２９】
工程4：化合物(xvi)から化合物(x)および化合物(xi)混合物への変換は、適切な温度で、溶媒の混合液(例えば、THF/水)を用いて、過酸化水素および水酸化リチウムで処理することにより達成され得る。次いで、得られるジアステレオマーの混合物を、次の合成工程に使用することができる。必要であれば、この時点で、得られるジアステレオマー混合物を、シリカゲルクロマトグラフィーまたは分取HPLCによって分離してもよい。
【０１３０】
工程5：別法として、混合物(x/xi)を、エピマー化条件で処理して(例えば、LDAおよび塩化ジエチルアルミニウムで処理することにより)、その後メタノールまたは酢酸でクエンチして、目的のジアステレオマーリッチにしてもよい。得られるジアステレオマーリッチな混合物を、次いで、その後の合成工程で利用するか、またはこのジアステレオアイソマーの混合物を、必要に応じて、適切な条件(例えば、分取HPLC、分取キラルHPLCまたはシリカゲルクロマトグラフィー)を用いて分離してもよく、得られる純粋な目的のジアステレオマー(xi)を、次の工程において使用した。
【０１３１】
工程6：別法として、ジアステレオマー混合物の酸(x)および(xi)を、例えば、溶媒(例えば、DMF)中にて、塩基(例えば、K2CO3)の存在下において、臭化ベンジルで処理することにより保護してもよい。得られるジアステレオアイソマーの混合物を、必要に応じて、適切な条件(例えば、分取HPLC、分取キラルHPLCまたはシリカゲルクロマトグラフィー)を用いて分離してもよく、また得られる純粋な目的のジアステレオマー化合物(xii)をその後の工程で使用した。
【０１３２】
工程7：スキーム3の最終工程は、脱保護工程であり、当業者には既知の幾つかの方法において達成され得る。例えば、化合物(xii)におけるRw = ベンジルについて、溶媒(例えば、MeOH)中で、水素雰囲気下において、触媒(例えば、パラジウム炭素)を用いる水素化条件下での処理により、その後の工程で、例えばスキーム4の工程1において利用できる化合物(xi)を得た。
スキーム4
【化１１】
2015529253.tif 000013
【０１３３】
工程1：構造(iv)の化合物を、カップリング試薬(例えば、TBTU)および塩基(例えば、TEA)の存在下に、溶媒(例えば、DMF)中で、純粋なジアステレオマー化合物(xi)または化合物(x/xi)のジアステレオマー混合物のいずれかとカップリングさせて、化合物(xiii)を、カップリングパートナーのエナンチオマーおよび／またはジアステレオマー純度に拠り、必要に応じて、ジアステレオマー純粋な化合物またはジアステレオアイソマー混合物のいずれかとして得る。この混合物を、次の工程においてそれ自体を使用するか、または必要に応じて、適切な分離技術(例えば、キラル分取クロマトグラフィー)を用いて精製して、ジアステレオマー純粋化合物を得ることができる。
【０１３４】
工程2：化合物(xiii)を、適切な温度(例えば、0℃)で、溶媒(例えば、DCM)中において、酸(例えば、TFA)で処理することにより、化合物(xiv)を、ジアステレオマー純粋な化合物またはジアステレオアイソマー混合物として得た。この混合物を、そのまま使用しても、または必要に応じて、適切な分離技術(例えば、キラル分取クロマトグラフィー)を用いて精製して、ジアステレオマー純粋化合物を得てもよい。
【０１３５】
工程3：化合物(xiv)の化合物(xv, R4=H)への変換は、溶媒(例えば、DMF)中において、化合物(xiv)を、適切なアミン源(例えば、塩化アンモニウムまたはアンモニア)、カルボジイミド(例えば、EDC)、HOBTおよび塩基(例えばTEA)とカップリングさせることにより、達成され得る。必要であれば、該ジアステレオマー混合物を、適切な分離技術(例えば、キラル分取クロマトグラフィー)を用いて分離してもよい。
【実施例】
【０１３６】
(実施例)
本発明は以下の実施例においてさらに明確にされる。該実施例は例示のみを目的として提供されることが理解されるべきである。上記の考察および例から、当業者であれば、本発明の本質的特徴を確認することができ、そして、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、変更および改変を行って本発明を様々な使用および条件に適応させることができる。結果として本発明は、本明細書に記載の実例によって制限されるのではなく、むしろ添付の特許請求の範囲によって定義される。
【０１３７】
(略語)
【表１】
2015529253.tif 000014
【０１３８】
中間体S-1：(R)-2-((S)-1-(tert-ブトキシ)-3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-1-オキソプロパン-2-イル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化１２】
2015529253.tif 000015
(S-1)
中間体S-1A：ジエチル 2-((2,2-ジクロロ-3-オキソシクロブチル)メチル)マロネート
【化１３】
2015529253.tif 000016
(S-1A)
【０１３９】
無水Et2O(20 mL)中のCu.Zn(1.771 g, 13.73 mmol)およびジエチル 2-アリルマロネート(1.084 mL, 5.49 mmol)の攪拌懸濁液に、還流で、Et2O(10 mL)中で塩化ホスホリル(1.127 mL, 12.09 mmol)および2,2,2-トリクロロアセチルクロリド(1.357 mL, 12.09 mmol)の溶液を、滴下漏斗により2時間かけて滴加した。得られる混合物を、次いで終夜還流加熱した。室温まで冷却した後に、混合物を、CELITE(登録商標)を通して濾過し、EtOAcで洗浄した。該濾液を、濃縮して、残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して(80 g, EtOAc/ヘキサン=0〜50%)、中間体S-1A(1.59 g, 93%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 4.32-4.23(m, 4H), 3.58(dd, J=8.9, 6.1 Hz, 1H), 3.47-3.32(m, 1H), 3.16-2.92(m, 2H), 2.51(ddd, J=14.3, 7.2, 6.1 Hz, 1H), 2.40-2.25(m, 1H), 1.36-1.30(m, 6H).
【０１４０】
中間体S-1B：ジエチル 2-((3-オキソシクロブチル)メチル)マロネート
【化１４】
2015529253.tif 000017
(S-1B)
0℃で酢酸(50 mL)中の亜鉛(10.42 g, 159 mmol)を十分に攪拌した混合液に、酢酸(50 mL)中の中間体S-1A(12.4 g, 39.9 mmol)溶液を滴加した。該混合液を、次いで60℃に終夜加熱した。室温に冷却した後に、該反応混合液を、氷-水に注ぎ入れて、EtOAcで抽出した。該有機層を、水、飽和NaHCO3水溶液および食塩水で洗浄して、次いで乾燥させて、濃縮した。該残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して(220 g カラム, EtOAc/ヘキサン=0〜40%)、中間体S-1B(6.91 g, 71.6%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 4.29-4.19(m, 4H), 3.35(t, J=7.5 Hz, 1H), 3.25-3.12(m, 2H), 2.82-2.71(m, 2H), 2.53-2.38(m, 1H), 2.24(t, J=7.6 Hz, 2H), 1.33-1.28(m, 6H).
【０１４１】
中間体S-1C：ジエチル 2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)マロネート
【化１５】
2015529253.tif 000018
(S-1C)
0℃でDCM(100 mL)中の中間体S-1B(6.9 g, 28.5 mmol)の溶液に、DAST(12 mL, 91 mmol)を滴加した。該混合液を、室温で終夜攪拌した。0℃に冷却した後に、飽和NaHCO3水溶液を注意深く加えた。該混合液を、泡沸が止むまで30分間攪拌した。該有機層を分離して、乾燥させて、濃縮した。該残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して(80 g カラム, EtOAc/ヘキサン=0〜20%)、中間体S-1C(6.48 g, 86%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 4.27-4.16(m, 4H), 3.28(t, J=7.3 Hz, 1H), 2.79-2.61(m, 2H), 2.30-2.07(m, 5H), 1.33-1.26(m, 6H).
【０１４２】
中間体S-1D：2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)マロン酸
【化１６】
2015529253.tif 000019
(S-1D)
EtOH(25 mL)中の中間体S-1C(6.48 g, 24.52 mmol)の溶液に、4 N NaOH(25 mL, 100 mmol)を加えた。該混合液を、100℃で2時間加熱還流した。室温に冷却した後に、混合液を体積の約半量に濃縮した。該残留物を、次いでエーテルで抽出して、このエーテル層を少量の水を用いて逆抽出した。水層を合わせて、濃HClで酸性化して、EtOAcで抽出した。該抽出物を合わせて、MgSO4上で乾燥させて、濾過して、濃縮した。粗製残留物を、ヘキサンと共に超音波処理して、該固体沈殿物を、濾過により集めて、ヘキサンで濯ぎ洗い、乾燥させて、中間体S-1D(4.86 g, 95%)を得た。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 12.75(br. s., 1H), 3.18(t, J=7.4 Hz, 1H), 2.69-2.53(m, 2H), 2.33-2.14(m, 2H), 2.14-1.99(m, 1H), 1.95-1.85(m, 2H).
【０１４３】
中間体S-1E：3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)プロパン酸
【化１７】
2015529253.tif 000020
(S-1E)
バルーンを備えた密閉したバイアル(30 mL)内で、中間体S-1D(4.86 g, 23.35 mmol)を、160℃で1時間加熱した。該反応混合液を、室温に冷却して、中間体S-1E(3.8 g, 99%)を得た。MS(ES)：m/z =163  [M-H+];1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 12.10(br. s., 1H), 2.73-2.54(m, 2H), 2.29-2.00(m, 5H), 1.69(q, J=7.5 Hz, 2H).
【０１４４】
中間体S-1F：tert-ブチル 3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)プロパノエート
【化１８】
2015529253.tif 000021
(S-1F)
ヘキサン(20 mL)およびTHF(20 mL)中の中間体S-1E(3.8 g, 23.15 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)に、N2下において、tert-ブチル 2,2,2-トリクロロアセトイミデート(8.29 mL, 46.3 mmol)を数回に分けて5分間かけて加えて、該反応混合液を、15分間攪拌した。ボロントリフルオリドエーテル錯体(0.293 mL, 2.315 mmol)を、0℃で加えて、該反応混合液を、浴が温まるにつれて室温まで昇温させて、終夜攪拌した。透明な反応混合液に、NaHCO3(5g)を加えて、60分間攪拌を継続させた。該懸濁液を、MgSO4を通して濾過して、ヘキサン(300 mL)で洗浄して、得られる溶液を、数時間静置させた。得られる固体を同じMgSO4フィルターにより濾過して、ヘキサン(100 mL)で洗浄した。該濾液を濃縮して、粗製物質を、100%ヘキサン〜20%EtOAc/ヘキサン中に溶出するシリカゲルクロマトグラフィー(120g column)により精製して、中間体S-1F(4.4 g, 19.98 mmol, 86%収率)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 2.85-2.53(m, 2H), 2.31-2.08(m, 5H), 1.80(q, J=7.2 Hz, 2H), 1.47(s, 9H).
【０１４５】
中間体S-1G：(S)-4-イソプロピル-3-(5,5,5-トリフルオロペンタノイル)をキサゾリジン-2-オン
【化１９】
2015529253.tif 000022
(S-1G)
DCM(50 mL)およびDMF(3滴)中の5,5,5-トリフルオロペンタン酸(5.04 g, 32.3 mmol)の攪拌溶液に、塩化オキサリル(3.4 mL, 38.8 mmol)を5分間かけて滴加した。全ての泡沸が止むまで該溶液を攪拌した。該反応混合液を、減圧濃縮して、淡黄色の油状物を得た。別のフラスコに、-78℃でTHF(100 mL)中の(4S)-4-(プロパン-2-イル)-1,3-オキサゾリジン-2-オン(4.18 g, 32.4 mmol)の溶液を入れて、n-BuLi(13.0 mL, 32.5 mmol, ヘキサン中で2.5M)を、シリンジから5分間かけて滴加した。10分間攪拌した後、THFに溶解した(20 mL)上記酸塩化物を、15分間かけてカニューレにより加えた。該反応混合液を、0℃に昇温させて、浴温が温まるにつれて室温まで昇温させて、終夜攪拌した。次いで、該反応混合液に、飽和NH4Clを加えて、それをEtOAc(2x)で抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させて(Na2SO4)、濾過し、減圧濃縮した。該粗製物質を、シリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン/EtOAc)により精製して、中間体S-1G(7.39 g, 86%)を無色の油状物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)d 4.44(1 H, dt, J=8.31, 3.53 Hz), 4.30(1 H, t, J=8.69 Hz), 4.23(1 H, dd, J=9.06, 3.02 Hz), 2.98-3.08(2 H, m), 2.32-2.44(1 H, m, J=13.91, 7.02, 7.02, 4.03 Hz), 2.13-2.25(2 H, m), 1.88-2.00(2 H, m), 0.93(3 H, d, J=7.05 Hz), 0.88(3 H, d, J=6.80 Hz).
【０１４６】
中間体S-1H：(2S,3R)-tert-ブチル 2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)ヘキサノエート、および
中間体S-1I：(2R,3R)-tert-ブチル 2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)ヘキサノエート
【化２０】
2015529253.tif 000023
ジイソプロピルアミン(3.0、1 mL, 21.11 mmol)を、THF(28.8 mL)に溶解して、-78℃に冷却した。nBuLi(ヘキサン中1.6 M)(13.10 mL, 20.95 mmol)を、5分間かけて滴加した。5分後に、〜0.5 M LDA溶液を0℃で維持した。別のフラスコ内で、塩化リチウム(1.221 g, 28.8 mmol)を、オーブン内で終夜乾燥させて、次いでヒートガンで加熱しながら高真空下にて乾燥させて、窒素下において冷却した。トルエンで1回共沸混合させた中間体S-1G(1.4 g, 5.24 mmol)を、トルエン(10 mL)と共に(窒素下で)、LiClを含むフラスコに移して、次いで-78℃に冷却した。トルエンで1回共沸させた中間体S-1F(2.077 g, 9.43 mmol)を、トルエン(10 mL)に溶解して、-78℃に冷却した。LDA(0.5 M LDA溶液を13.1 mL)の溶液に、-78℃でLiCl/オキサゾリジノン(1.4 g, 5.24 mmol)溶液に5分かけて滴加した。該反応混合液を、-78℃で15分間攪拌して、次いで0℃で10分間、次いで-78℃に冷却した。LDA(0.5 M LDA溶液を23.6 mL)の溶液を、中間体S-1Fの溶液に滴加して、-78℃で30分間攪拌した。次いで、この溶液を、-78℃で、カニューレ(一定陰圧、全て30秒以内で添加)からLiCl/オキサゾリドン溶液に加えた。移行1分後に、終夜オーブン内で乾燥させた固体ビス((2-エチルヘキサノイル)オキシ)銅(5.50 g, 15.72 mmol)を、-78℃で加えて、フラスコを、水浴で40℃に移して、15分間撹拌した。該反応を、5% NH4OH溶液(30 mL 飽和 NH4OH/水150 mL)でクエンチして、酢酸エチル(2x100 mL)で抽出した。この抽出物を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させて、濃縮した。粗製混合液を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(40g カラム, EtOAc/ヘキサン0〜35%)、1.3：1の中間体S-1HおよびS-1I混合液(1.196 g, 47%)を得た。
【０１４７】
中間体S-1：(R)-2-((S)-1-(tert-ブトキシ)-3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-1-オキソプロパン-2-イル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸、および
中間体S-1J：(R)-2-((R)-1-(tert-ブトキシ)-3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-1-オキソプロパン-2-イル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化２１】
2015529253.tif 000024
水(7 mL)中のLiOH(0、176 g, 7.35 mmol)の氷-水で冷却した溶液に、50% H2O2(1.502 mL, 24.51 mmol)を滴加した。得られる溶液を、0℃で、THF(21 mL)中の1.3：1のS-1HおよびS-1I混合物(1.85 g, 4.23 mmol)の溶液に滴加した。該混合液を、0℃で攪拌して、週末にわたり温めた。得られる混合液を、飽和NaHCO3水溶液(10 mL)で処理して、その後Na2S2O3(20 mL)水溶液をゆっくりと加えた。該混合液を、1時間攪拌して、次いで濃縮して、THFを除去した。該水層に、1N NaOH(4 mL)を加えて、該混合液をDCMで抽出した。水層を、氷水浴中で冷却して、濃HClを用いてpH3までゆっくりと酸性化した。得られる混合液を、固体NaClで飽和させて、EtOAcで抽出した。抽出物を合わせて、飽和NaClで洗浄して、MgSO4で乾燥させて、濾過して、濃縮し、中間体S-1およびS-1J(1.19 g, S-1J：S-1 = 1：1.3のジアステレオマー混合液として)を得た。(ES)：m/z = 373 [M-H+].
【０１４８】
中間体S-1：(R)-2-((S)-1-(tert-ブトキシ)-3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-1-オキソプロパン-2-イル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸、および
中間体S-1J：(R)-2-((R)-1-(tert-ブトキシ)-3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-1-オキソプロパン-2-イル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化２２】
2015529253.tif 000025
THF(16 mL)中の1.3：1の中間体S-1：中間体S-1J(1.08 g, 2.89 mmol)混合物の冷たい攪拌溶液(-78℃)に、LDA(THF/ヘキサン/エチルベンゼン中の2.0M, Aldrich)(3.5 mL, 7.00 mmol)を、5分間かけてシリンジから滴加した(反応溶液において内部温度は-64℃を決して超えない, J-KEM(登録商標)probe)。該反応混合液を、15分間攪拌して、次いで室温へ昇温させて(24℃水浴)、15分間攪拌した。該混合液を、次いで15分間-78℃に冷却して、該反応混合液に、シリンジからEt2AlCl(ヘキサン中で1M, Aldrich)(7.2 mL, 7.20 mmol)を加えて(内部温度は決して-55℃を超えない)、10分間攪拌して、次いで室温に15分間温めた(24℃浴)。該混合液を、次いで冷却して、15分間-78℃に戻した。該反応混合液を、カニューレにより、5分間かけてMeOH(26 mL, 643 mmol)を入れたRB フラスコ(250 mL)に移して、激しく攪拌しながら-78℃に予め冷却した。フラスコを、浴から外して、氷に続いて1N HCl(26 mL, 26.0 mmol)をゆっくりと加えた。該反応混合液を、室温まで昇温させると、この時にガスの発生が止んだ。該反応混合液を、EtOAc(250 mL)で希釈して、該有機相を分離した。該有機相を、水(50 mL, 2775 mmol)中のフッ化カリウム(1.51 g, 26.0 mmol)および1N HCl(7.2 mL, 7.20 mmol)の溶液で洗浄して、続いて食塩水、次いで乾燥させて(Na2SO4)、濾過して、濃縮乾固させて、12.3：1(S-1：S-1J)のジアステレオマー混合液を得た。該粗製物質を、さらなる精製なしに次の工程で使用した。
【０１４９】
中間体S-1K：(2R,3S)-1-ベンジル 4-tert-ブチル 3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシネート
【化２３】
2015529253.tif 000026
(S-1K)
上記DMF(10 mL)中のS-1およびS-1J(1.1 g, 2.94 mmol)の混合溶液に、K2CO3(0.690 g, 5.00 mmol)および臭化ベンジル(0.524 mL, 4.41 mmol)を加えた。該混合液を、室温で終夜攪拌した。水(100 mL)を加えて、該混合液を、EtOAc(2 x 100 mL)で抽出した。この抽出物を合わせて、10% LiCl(2 x 100 mL)、次いで食塩水(100 mL)で洗浄して、乾燥させて(Na2SO4)、濾過して、濃縮乾固させた。粗製ジアステレオマー混合液を、シリカゲルクロマトグラフィー(SiO2, 120 g カラム, 0% トルエン/ヘキサン〜80% トルエン/ヘキサン, 15分間のグラジエント)により分離して、中間体S-1K(0.89, 65%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 7.43-7.35(m, 5H), 5.24-5.15(m, 2H), 2.72-2.55(m, 3H), 2.48(td, J=10.2, 3.5 Hz, 1H), 2.17-1.95(m, 5H), 1.93-1.81(m, 2H), 1.79-1.69(m, 1H), 1.46(s, 9H), 1.37-1.28(m, 1H).
【０１５０】
中間体S-1：(R)-2-((S)-1-(tert-ブトキシ)-3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-1-オキソプロパン-2-イル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化２４】
2015529253.tif 000027
(S-1)
MeOH(37.500 ml)中の中間体S-1K(870 mg, 1.873 mmol)溶液を、窒素雰囲気下において、10% パラジウム炭素(100 mg, 0.940 mmol)で処理した。該反応混合液を、窒素でパージして、次いでH2ガスでパージした。該反応混合液を、水素雰囲気下において、室温で攪拌した。4時間後に、該反応混合液を、CELITE(登録商標)パッドを通して濾過して、フィルターケーキをMeOHで洗浄した。該濾液を濃縮乾固させて、中間体S-1(660 mg, 94%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 2.77-2.63(m, 3H), 2.56(ddd, J=10.3, 8.6, 3.7 Hz, 1H), 2.36-2.06(m, 5H), 2.05-1.87(m, 2H), 1.84-1.72(m, 1H), 1.61-1.52(m, 1H), 1.49(s, 9H).
【０１５１】
中間体S-2：(R)-2-((S)-1-アミノ-3-(1-フルオロシクロブチル)-1-オキソプロパン-2-イル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化２５】
2015529253.tif 000028
(S-2)
中間体S-2A：1-アリルシクロブタノール
【化２６】
2015529253.tif 000029
(S-2A)
テトラヒドロフラン(30 mL)中のシクロブタノン(3.48 g, 49.7 mmol)の溶液に、0℃で、2.0 M アリルマグネシウムクロリド(49.7 mL, 99 mmol)を滴加した。該混合液を、0℃で1時間攪拌して、次いで室温で1時間攪拌した。該反応混合液を、飽和NH4Cl水溶液に続いて6N HClでクエンチした。該残留物を、EtOAcで抽出した。この抽出物を合わせて、飽和NaHCO3水溶液および食塩水で洗浄して、次いで乾燥させて、濃縮した。該残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して(40 g カラム, EtOAc/ヘキサン=0〜50%)、中間体S-2A.(4.55g,収率 81%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 5.98-5.82(m, 1H), 5.26-5.14(m, 2H), 2.40(d, J=7.3 Hz, 2H), 2.14-2.04(m, 4H), 1.92(s, 1H), 1.84-1.71(m, 1H), 1.63-1.48(m, 1H).
【０１５２】
中間体S-2B：1-(3-ヒドロキシプロピル)シクロブタノール
【化２７】
2015529253.tif 000030
(S-2B)
THF(15 mL)中の中間体S-2A(0.92 g, 8.20 mmol)の溶液に、1.0 M ボランテトラヒドロフラン錯体(16.40 mL, 16.40 mmol)を滴加して、該溶液を、室温で1時間攪拌した。該混合液を、0℃に冷却して、1N NaOH(15 mL)を注意深く加えた後に、50%H2O2(2 mL)を加えた。該混合液を、室温で終夜攪拌し、次いで濃縮して、THFを除去した。該残留物を、水で希釈して、EtOAcで抽出した。この抽出物を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させて、濃縮した。該残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して(40 g カラム, EtOAc/ヘキサン=50〜100%)、中間体S-2B (0.69 g,収率 65%)を無色の油状物として得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 3.72(t, J=5.7 Hz, 1H), 2.59(br. s., 1H), 2.35(br. s., 1H), 2.16-1.97(m, 2H), 1.84-1.67(m, 2H), 1.62-1.47(m, 1H).
【０１５３】
中間体S-2C：3-(1-ヒドロキシシクロブチル)プロピル ベンゾエート
【化２８】
2015529253.tif 000031
(S-2C)
DCM(15 mL)中の中間体S-2B(0.69 g, 5.30 mmol)の溶液に、0℃でTEA(1.108 mL, 7.95 mmol)を加えて、その後DCM(2 mL)中の塩化ベンゾイル(1.02 g, 7.25 mmol)溶液を加えた。該混合液を、0℃で2時間攪拌して、次いでDCMで希釈して、水および食塩水で洗浄して、乾燥させて、濃縮した。該残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して(24 g カラム, EtOAc/ヘキサン=0〜40%)、中間体S-2C(1.2 g, 97%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 8.11-8.05(m, 2H), 7.62-7.56(m, 1H), 7.51-7.44(m, 2H), 4.41(t, J=6.5 Hz, 2H), 2.18-1.99(m, 4H), 1.97-1.87(m, 2H), 1.86-1.75(m, 2H), 1.60-1.55(m, 2H).
【０１５４】
中間体S-2D：3-(1-ヒドロキシシクロブチル)プロピル ベンゾエート
【化２９】
2015529253.tif 000032
(S-2D)
DCM(150 mL)中の中間体S-2C(12.75 g, 54.4 mmol)の溶液に、0℃でDAST(12.8 mL, 97 mmol)を加えた。該混合液を、室温で3.5時間攪拌した。飽和NaHCO3を、次いで注意深く加えて、該混合液をDCMで抽出した。この抽出物を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させて、濃縮した。該残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して(220g カラム, EtOAc/ヘキサン=0〜25%)、中間体S-2D(9.6 g, 75%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 8.17-7.98(m, 2H), 7.64-7.56(m, 1H), 7.51-7.43(m, 2H), 4.44-4.35(m, 2H), 2.45-2.25(m, 2H), 2.22-2.06(m, 2H), 2.01-1.77(m, 5H), 1.55-1.47(m, 1H).
【０１５５】
中間体S-2E：3-(1-フルオロシクロブチル)プロパン-1-オール
【化３０】
2015529253.tif 000033
(S-2E)
THF(150 mL)/MeOH(150 mL)中の中間体S-2D(9.6 g, 40.6 mmol)の溶液に、1N NaOH(81 mL, 81 mmol)を加えた。該混合液を、室温で4.5時間攪拌して、次いで濃縮して、元々の体積の約30%に濃縮した。残留物を、EtOAcで抽出した。この抽出物を合わせて、飽和NaHCO3、食塩水で洗浄して、次いで乾燥させて、濃縮した。該残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して(120 g カラム, EtOAc/ヘキサン=0〜50%)、中間体S-2E(4.63 g, 86%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 3.72(q, J=5.9 Hz, 2H), 2.44-2.22(m, 2H), 2.18-2.05(m, 2H), 1.92-1.76(m, 3H), 1.76-1.66(m, 2H), 1.55-1.46(m, 1H), 1.38(t, J=5.0 Hz, 1H).
【０１５６】
中間体S-2F：3-(1-フルオロシクロブチル)プロパン酸
【化３１】
2015529253.tif 000034
(S-2F)
アセトン(150 mL)中の中間体S-2E(4.63 g, 35.0 mmol)の溶液に、ジョーンズ試薬(38.9 mL, 52.5 mmol)を加えた。該混合液を、室温で2.5時間攪拌した。該反応混合液を、次いでEtOAcで希釈して、10%NaHSO3で洗浄した。該水層を、EtOAcで抽出して、この抽出物を合わせて、食塩水で洗浄して、MgSO4上で乾燥させ、濾過して、濃縮して粗製の酸を得て、これをヘキサンで磨砕して、中間体S-2F(4.28 g, 84%)を得た。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 12.13(s, 1H), 2.32-2.03(m, 6H), 2.02-1.89(m, 2H), 1.81-1.68(m, 1H), 1.48(dquind, J=11.1, 8.8, 2.4 Hz, 1H).
【０１５７】
中間体S-2G：3-(1-フルオロシクロブチル)プロパン酸
【化３２】
2015529253.tif 000035
(S-2G)
中間体S-2G(2.22 g, 63%)を、中間体S-1Gと同様の方法において、(R)-4-イソプロピルオキサゾリジン-2-オン(1.944 g, 15.05 mmol)および中間体S-2F(2 g, 13.68 mmol)から製造した。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 4.46(dt, J=8.4, 3.5 Hz, 1H), 4.33-4.27(m, 1H), 4.26-4.21(m, 1H), 3.07(qdd, J=17.1, 9.1, 6.2 Hz, 2H), 2.47-2.26(m, 3H), 2.23-2.03(m, 4H), 1.92-1.78(m, 1H), 1.56-1.46(m, 1H), 0.97-0.88(m, 6H).
【０１５８】
中間体S-2H：tert-ブチル 5,5,5-トリフルオロペンタノエート
【化３３】
2015529253.tif 000036
(S-2H)
THF(30 mL)中の5,5,5-トリフルオロペンタン酸(5 g, 32.0 mmol)およびヘキサン(30 mL)の攪拌溶液に、0℃で、tert-ブチル 2,2,2-トリクロロアセトイミデート(11.46 mL, 64.1 mmol)を加えた。該混合液を、15分間、0℃で攪拌した。三フッ化ホウ素エーテラート(0.406 mL, 3.20 mmol)を加えて、該反応混合液を、終夜室温に昇温させた。透明な反応混合液に、固体NaHCO3(5 g)を加えて、30分間攪拌した。該混合液を、MgSO4に通して濾過し、ヘキサン(200 mL)で洗浄した。該溶液を、45分間静置して、得られる固体物質を同じMgSO4フィルター上で再度濾過により除去して、ヘキサン(100 mL)で洗浄し、加熱せずに減圧下で濃縮した。体積を、約30 mLに低下させて、清潔なフリット漏斗から濾過して、ヘキサン(5 mL)で洗浄して、次いで加熱せずに減圧下で濃縮した。得られるニート油状物を、0.45μmのナイロン膜フィルターディスクを通して濾過して、中間体S-2H(6.6 g, 31.4 mmol 98%収率)を無色の油状物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 1.38(s, 9 H), 1.74-1.83(m, 2 H), 2.00-2.13(m, 2 H), 2.24(t, J=7.28 Hz, 2 H).
【０１５９】
中間体S-2I：(R)-tert-ブチル 5,5,5-トリフルオロ-2-((S)-3-(1-フルオロシクロブチル)-1-((R)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-イル)-1-オキソプロパン-2-イル)ペンタノエート、および
中間体S-2J：(S)-tert-ブチル 5,5,5-トリフルオロ-2-((S)-3-(1-フルオロシクロブチル)-1-((R)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-イル)-1-オキソプロパン-2-イル)ペンタノエート
【化３４】
2015529253.tif 000037
1.2：1の中間体S-2I：S-2J(1.03 g, 52%)の混合液を、中間体S-1Hと同様の方法にて中間体S-2G(1.1 g, 4.28 mmol)および中間体S-2H(1.59 g, 7.48 mmol)から製造した。HPLC：RT= 3.200 min(H2O/MeOH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)SpeedRODカラム 4.6 x 50 mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z =468 [M+H+].
【０１６０】
中間体S-2K：(R)-tert-ブチル 2-((S)-1-アミノ-3-(1-フルオロシクロブチル)-1-オキソプロパン-2-イル)-5,5,5-トリフルオロペンタノエート
【化３５】
2015529253.tif 000038
(S-2K)
THF(20 mL)中の1.2：1の中間体S-2Iおよび中間体S-2J(1.03 g, 2.203 mmol)の混合溶液に、0℃で、水(5 mL)中のLiOH(0.158 g, 6.61 mmol)および50% H2O2(1.215 mL, 19.83 mmol)の冷たい溶液を加えた。添加後に、該混合液を、室温で終夜攪拌した。飽和NaHCO3(10 mL)水溶液を、その後Na2S2O3(20 mL)水溶液をゆっくりと加えた。該混合液を、1時間攪拌して、次いで濃縮して、THFを除去した。該水層に、1N NaOH(4 mL)を加えて、該混合液を、DCMで抽出した。氷水浴において該水層を冷却して、ゆっくりと濃HClを用いてpH3に酸性化した。得られる混合液を、固体NaClで飽和させて、EtOAcで抽出した。抽出物を合わせて、飽和NaClで洗浄して、MgSO4で乾燥させて、濾過して、濃縮し、粗製の酸(0.560 g)を無色の油状物として得た。10℃で、THF(12 mL)中の酸(390 mg, 1.094 mmol)の粗混合液の溶液に、HOBT(503 mg, 3.28 mmol)に続いてEDC(629 mg, 3.28 mmol)を加えた。該混合液を、5分間攪拌して、次いでMeOH(3.28 mL, 6.57 mmol)中の2Nアンモニアを加えた。該混合液を、次いで室温で終夜攪拌した。該反応混合液を、EtOAcで希釈して、水、飽和NaHCO3水溶液および食塩水で洗浄した。該有機相を、MgSO4で乾燥させて、濾過して、濃縮乾固させた。該残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して(24 g カラム, EtOAc/ヘキサン=0〜50%)、中間体S-2K(183 mg, 47%)を得た。MS(ES)：m/z =356  [M+H+]；1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)d  5.71(br. s., 1H), 5.37(br. s., 1H), 2.74-2.49(m, 2H), 2.44-2.24(m, 3H), 2.23-2.08(m, 4H), 1.93-1.74(m, 4H), 1.51(s, 9H).
【０１６１】
中間体S-2：(R)-2-((S)-1-アミノ-3-(1-フルオロシクロブチル)-1-オキソプロパン-2-イル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化３６】
2015529253.tif 000039
(S-2)
DCM(4 mL)中の中間体S-2K(182 mg, 0.512 mmol)の溶液に、TFA(4 mL)を加えた。該混合液を、室温で3時間攪拌した。該反応混合液を、次いでトルエンで希釈して、濃縮し、目的の生成物を白色固体(152 mg, 99%)として得た。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 12.73(br. s., 1H), 7.59(br. s., 1H), 7.01(br. s., 1H), 2.62-2.53(m, 1H), 2.39(td, J=9.6, 4.5 Hz, 1H), 2.31-1.95(m, 7H), 1.83-1.52(m, 4H), 1.49-1.30(m, 1H).
【０１６２】
中間体S-3：(2R)-2-(2-(tert-ブトキシ)-1-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-2-オキソエチル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化３７】
2015529253.tif 000040
(S-3)
中間体S-3A：tert-ブチル 2-(4,4-ジフルオロシクロヘキシリデン)アセテート
【化３８】
2015529253.tif 000041
(S-3A)
THF(10 mL)中の水素化ナトリウム(0.298 g, 7.46 mmol)の懸濁液を、0℃に冷却した。THFで希釈したtert-ブチル ジエチルホスホノアセテート(1.751 mL, 7.46 mmol)(10 mL)を滴加した。該反応混合液を、冷却浴から外して、室温で30分間攪拌した。該反応混合液を、次いで0℃に冷却して、THF(2 mL)で希釈した4,4-ジフルオロシクロヘキサノン(1 g, 7.46 mmol)を加えた。該反応混合液を、窒素下において、終夜室温で攪拌した。該反応を、飽和NH4Cl(50 mL)でクエンチした。該水相を、ジエチルエーテル (3 x 25 mL) で抽出した。該有機層を合わせて、Na2SO4で乾燥させて、濾過して、濃縮した。粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0%〜50% 溶媒 A/B=ヘキサン/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 40g)。適切な画分の濃縮により、中間体S-3A(1.43 g, 83%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 5.68(s, 1H), 3.02(td, J=6.7, 0.9 Hz, 2H), 2.43-2.36(m, 2H), 2.12-1.97(m, 4H), 1.51(s, 9H).
【０１６３】
中間体S-3B：tert-ブチル 2-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)アセテート
【化３９】
2015529253.tif 000042
(S-3B)
MeOH(20 mL)中の中間体S-3A(1.4 g, 6.03 mmol)溶液を、10%パラジウム炭素(1 g, 0.940 mmol)で処理して、懸濁液を得た。該混合液を、次いで3回窒素でパージし、次いで3回水素でパージした。水素下で2時間攪拌した後、該反応混合液を、CELITE(登録商標)を通して濾過して、減圧下でエバポレートし、中間体S-3B(1.4g, 100%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 2.19(d, J=6.8 Hz, 2H), 2.15-2.03(m, 2H), 1.91-1.74(m, 4H), 1.77-1.65(m, 1H), 1.47(s, 9H), 1.42-1.27(m, 2H).
【０１６４】
中間体S-3C：(3R)-tert-ブチル 2-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)ヘキサノエート
【化４０】
2015529253.tif 000043
(S-3C)
中間体S-3C(0.473 g, 56%)を、中間体S-1Hと同様の方法において中間体S-3B(0.456 g, 1.71 mmol)および中間体S-1G(0.7 g, 2.99 mmol)から製造した。1H NMRにより、1.45および1.47 ppmでの一重項の積分により決定したとおり、生成物が1：1のジアステレオマーの混合液であることが示された：1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 4.57-4.17(m, 4H), 2.80-2.56(m, 1H), 2.49-2.27(m, 1H), 2.28-1.57(m, 9H), 1.49-1.43(m, 9H), 1.36-1.23(m, 4H), 1.01-0.86(m, 6H).
【０１６５】
中間体S-3：(2R)-2-(2-(tert-ブトキシ)-1-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-2-オキソエチル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化４１】
2015529253.tif 000044
(S-3)
THF(11.6 mL)および水(3.9 mL)中の中間体S-3C(0.473 g, 0.947 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)に、過酸化水素(水中で30%)(1.07 g, 9.47 mmol)、LiOH(68 mg, 2.84 mmol)を順次加えて、該混合液を1時間攪拌した。この時点で、該反応容器を、冷却浴から外して、次いで6時間攪拌した。該反応混合液に、飽和NaHCO3(10 mL)および飽和Na2SO3(15 mL)を加えて、次いで混合液を、減圧下で部分濃縮した。得られる粗製溶液を、DCM(2x)で抽出した。該水相を1N HClを用いてpH1〜2に酸性として、DCM(3x)およびEtOAc(1x)で抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させ(Na2SO4)、濾過して、減圧濃縮して、中間体S-3(0.3 g, 82%)を無色の油状物として得た：1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 2.32-2.05(m, 4H), 1.99-1.55(m, 12H), 1.55-1.45(m, 9H). 1H NMR 示すed a 1：1.
【０１６６】
中間体S-4：(2R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-5,5-ジフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化４２】
2015529253.tif 000045
(S-4)
中間体S-4A：ベンジル 4,4-ジフルオロペンタノエート
【化４３】
2015529253.tif 000046
(S-4A)
DAST(19.22 mL, 145 mmol)を、DCM(120 mL)中のベンジル 4-オキソペンタノエート(20 g, 97 mmol)の冷たい溶液(0℃)に滴加した。該混合液を、室温に昇温させて、次いで40℃で72時間加熱した。該混合液を、氷および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の混合液に、ゆゆっくりと注ぎ入れた。該混合液を、さらなる泡沸が観察されなくなるまで、30分間攪拌した。該有機層を分離して、該水溶液を、DCM(2x240mL)で抽出した。有機抽出物を合わせて、乾燥させて(MgSO4)、溶媒を注意深く減圧下で除去した。粗製物質を、ヘキサン中で100% ヘキサン〜40% EtOAcを用いて溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(120g カラム)、生成物である中間体S-4A(7.87 g, 34.5 mmol, 35.6%収率)を黄色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 7.29-7.51(5 H, m), 5.17(2 H, s), 2.53-2.67(2 H, m), 2.14-2.36(2 H, m), 1.63(3 H, t, J=18.38 Hz).
【０１６７】
中間体S-4B：4-ジフルオロペンタン酸
【化４４】
2015529253.tif 000047
(S-4B)
THF(45 mL)およびMeOH(15 mL)中の中間体S-4A(5000 mg, 21.91 mmol)の溶液に、LiOH(32.9 mL, 32.9 mmol)の溶液を加えて、次いで該混合液を、室温で1時間攪拌した。該反応混合液を濃縮して、有機物を除去して、水(10 mL)で希釈して、DCM(20 mL)で抽出した。該水層を、1N HClを用いてpH2に酸性化し、次いでDCM(3x20 mL)で抽出した。該有機相を合わせて、Na2SO4上で乾燥させて、次いで減圧下で濃縮して、中間体S-4B(2062 mg, 14.93 mmol, 68.2%収率)を黄色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 11.20-11.61(1 H, m), 2.58(2 H, t, J=7.81 Hz), 2.10-2.32(2 H, m, J=16.18, 16.18, 8.03, 7.81 Hz), 1.63(3 H, t, J=18.38 Hz).
【０１６８】
中間体S-4C：4-ジフルオロペンタン酸
【化４５】
2015529253.tif 000048
(S-4C)
N2下において、n-ヘキサン(6 mL)およびTHF(6 mL)中の中間体S-4B(700 mg, 5.07 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)(少なくとも15分間事前に冷却)に、5分間かけてtert-ブチル 2,2,2-トリクロロアセトイミデート(1.814 mL, 10.14 mmol)を数回に分けて加え、該混合液を15分間攪拌した。ボロントリフルオリドジエチルエーテラート(0.065 mL, 0.512 mmol)を加えて、該反応混合液を、終夜、浴温が上がるにつれて室温まで昇温させた。該透明な反応混合液に、NaHCO3(3g)を加えて、懸濁液を60分間攪拌した。該懸濁液を、MgSO4を通して濾過して、ヘキサン(300 mL)で洗浄した。該濾液を、30分間静置して、得られる固体を、同じMgSO4フィルターから濾過して、ヘキサン(100 mL)で洗浄した。該濾液を濃縮して、粗製物質を、ヘキサン中で100%ヘキサン〜50% EtOAcを用いて溶出するシリカゲルクロマトグラフィー(40g column)により精製して、生成物である中間体S-4C(519 mg, 2.67 mmol, 52.7%収率)を明黄色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 2.34(2 H, d, J=8.14 Hz), 2.01-2.16(2 H, m), 1.53(3 H, t, J=18.38 Hz), 1.38(9 H, s).
【０１６９】
中間体S-4D：(3R)-tert-ブチル 2-(2,2-ジフルオロプロピル)-6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)ヘキサノエート
【化４６】
2015529253.tif 000049
(S-4D)
1.2：1ジアステレオマーの混合液(279 mg, 0.607 mmol, 45.3%収率)として中間体S-4Dを、中間体S-1Hについて記述した方法により、中間体S-4C(455 mg, 2.343 mmol)および中間体S-1G(358 mg, 1.339 mmol)から製造した。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 4.43-4.53(2 H, m), 4.22-4.36(4 H, m), 4.03-4.11(1 H, m), 3.02-3.10(1 H, m), 2.93-3.02(1 H, m), 2.48-2.65(1 H, m), 2.35-2.49(2 H, m), 2.23-2.35(1 H, m), 1.91-2.23(3 H, m), 1.74-1.89(2 H, m), 1.53-1.70(3 H, m), 1.42-1.51(9 H, m).
【０１７０】
中間体S-4：(3R)-tert-ブチル 2-(2,2-ジフルオロプロピル)-6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)ヘキサノエート
【化４７】
2015529253.tif 000050
(S-4)
THF(9 mL)および水(3 mL)中の中間体S-4D(279 mg, 0.607 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)に、H2O2(0.375 mL, 6.12 mmol)、次いでLiOH(44.1 mg, 1.840 mmol)を加えた。該反応混合液を、室温まで徐々に温めて、3時間攪拌した。飽和Na2SO3水溶液(5 mL)および飽和NaHCO3(10 mL)の溶液を加えた。該混合液を、5分間攪拌して、次いで該反応混合液を、部分濃縮した。該混合液を、DCM(15 mL)で抽出して、水相を、1N HClを用いてpH〜2の酸性として、NaClで飽和させて、DCM(2x30mL)で抽出した。この抽出物を合わせて、MgSO4上で乾燥させて、濾過して、濃縮して、該生成物を、1.2：1のジアステレオマーの混合液の中間体S-4(169 mg, 0.485 mmol, 80%収率)として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 2.89-3.04(1 H, m), 2.68-2.86(1 H, m), 2.38-2.60(2 H, m), 2.19-2.38(1 H, m), 2.07-2.20(1 H, m), 1.87-2.03(2 H, m), 1.73-1.88(1 H, m), 1.63(3 H, t, J=18.49 Hz), 1.37-1.53(9 H, m).
【０１７１】
中間体S-5：(2R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-5-メチル-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化４８】
2015529253.tif 000051
(S-5)
中間体S-5A：(E)-tert-ブチル 5,5,5-トリフルオロ-4-メチルペンタ-2-エノエート
【化４９】
2015529253.tif 000052
(S-5A)
THF(10 mL)中のtert-ブチル 2-(ジメトキシホスホリル)アセテート(9.78 g, 43.6 mmol)溶液を、0℃で窒素雰囲気下において、THF(30 mL)中のNaH懸濁液(鉱油中で60%分散)(1.903 g, 47.6 mmol)にゆっくりと移し入れた。添加完了の後に、該反応混合液を、0℃で10分間攪拌して、次いで室温へと昇温させた。30分攪拌後に、該反応混合液を、0℃に再冷却して、THF(10 mL)中の3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロパノール(5 g, 39.7 mmol)溶液を加えて、該氷浴を取り外した。25℃で12時間後に、水(60 mL)およびEtOAc(60 mL)混合液との間に分配した。水層を、EtOAc(60 mL)で抽出して、該有機層を合わせて、水(60 mL)および食塩水で連続的に洗浄した。得られる溶液を、MgSO4上で乾燥させて、減圧下で濃縮して、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより精製して(330g カラム, 20分かけてヘキサン中で0%〜15% EtOAc)、中間体S-5A(3.61 g, 16.10 mmol, 40.6%収率)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 6.77(dd, J=15.8, 7.7 Hz, 1H), 5.95(dd, J=15.7, 0.6 Hz, 1H), 3.12-2.93(m, 1H), 1.56-1.47(m, 9H), 1.37-1.27(m, 3H).
【０１７２】
中間体S-5B：tert-ブチル 5,5,5-トリフルオロ-4-メチルペンタノエート
【化５０】
2015529253.tif 000053
(S-5B)
窒素雰囲気下においてMeOH(30 mL)中の中間体S-5A(2 g, 8.92 mmol)の攪拌溶液に、10% Pd/C(0.949 g, 0.892 mmol)を加えて、該懸濁液を、4時間水素化した(1 atm, バルーン)。該懸濁液を、CELITE(登録商標)パッドを通して濾過して、このフィルターケーキを、MeOH(3 x 10 mL)で濯いだ。濾液および洗液を合わせて真空濃縮して、透明な油状物として中間体S-5B(1.55 g, 6.85 mmol, 77%収率)を得た。1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 2.46-2.23(m, 3H), 2.04-1.90(m, 1H), 1.65-1.53(m, 1H), 1.51-1.43(m, 9H), 1.13(d, J=7.0 Hz, 3H).
【０１７３】
中間体S-5C：(3R)-tert-ブチル 6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)-2-(3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)ヘキサノエート
【化５１】
2015529253.tif 000054
(S-5C)
中間体S-5C(1.79 g, 3.64 mmol, 36.1%収率)を、中間体S-1Hと同様の方法において、中間体S-5B(4.11 g, 18.19 mmol)および中間体S-1G(2.7 g, 10、10 mmol)から製造した。LC/MS, m/z 490.5(M-1)。HPLC RT = 1.86min.  LC/MS(Luna C18 4.6x 30mm, 3μ, 2分間かけて0%〜95% B, 流速 = 4 mL/分, 220 nmで検出, A：10：90 H2O：ACN NH4OAc/B：10：90 H2O：ACN NH4OAc). ジアステレオマー比を、1H NMRにおけるt-ブチルシグナルの積分により2.8：2.2：1.3：1であると決定した。
【０１７４】
中間体S-5：(2R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-5-メチル-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化５２】
2015529253.tif 000055
(S-5)
THF(21 mL)および水(7 mL)中の中間体S-5C(2.5 g, 5.09 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)に、H2O2(水中で50%)(3.12 mL, 50.9 mmol)、次いで水酸化リチウム一水和物(0.640 g, 15.26 mmol)を加えた。該反応混合液を、1.5時間かけて室温へ昇温させた。3.5時間後に、氷を加えて(コントロール試験に)、攪拌して、該反応混合液を、飽和NaHCO3(25 mL)および10% Na2SO3(50 mL)で処理して、次いで室温で30分間攪拌した。該水相を、1N HClを用いて酸性として(pH〜1-2まで)、NaClで飽和させて、DCM(2x125 mL)で抽出した。該抽出物を合わせて、乾燥させて(Na2SO4)、濾過して、濃縮し、4つのジアステレオマー混合物(1.97 g, 5.18 mmol, 102%収率)を透明な油状物として得て、これを次の工程にてさらなる精製なしに使用した。LC/MS, m/z 379.4(M-1). HPLC RT = 1.27min. LC/MS(Luna C18 4.6 x 30mm, 3μ, 2分間で0%〜95% B, 流速 = 4 mL/分, 220 nmで検出, A：10：90 H2O：ACN NH4OAc/B：10：90 H2O：ACN NH4OAc). ジアステレオマー比を、2.8：2.2：1.3：1であると決定した。
【０１７５】
中間体S-6：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3-フルオロプロピル)ヘキサン酸
【化５３】
2015529253.tif 000056
(S-6)
中間体S-6A：3-フルオロプロピルトリフルオロメタンスルホネート
【化５４】
2015529253.tif 000057
(S-6A)
DCM(30 mL)中の2,6-ルチジン(4.60 mL, 39.5 mmol)の冷たい攪拌溶液(-25℃)に、3分間かけてトリフレート無水物(6.00 mL, 35.5 mmol)を加えた。次いで、3-フルオロプロパン-1-オール(Oakwood, cat. 010306-25G, 1.61 g, 20.6 mmol)を加えた。該反応混合液を、2.5時間室温へ昇温させた。該反応混合液を、その体積を半分に濃縮して、フラッシュクロマトグラフィー(Teledyne ISCO CombiFlash, isocratic DCM, REDISEP(登録商標)SiO2 120 g, 254 nMで検出, 220 nmでモニタリング)により精製した。適切な画分の濃縮により、中間体S-6A(2.92 g, 67.4%)を得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 4.69(2 H, t, J=6.16 Hz), 4.65(1 H, t, J=5.50 Hz), 4.54(1 H, t, J=5.61 Hz), 2.25(1 H, dt, J=11.39, 5.86 Hz), 2.19(1 H, dt, J=11.44, 5.94 Hz).
【０１７６】
中間体S-6B：(4S)-4-ベンジル-3-(5,5,5-トリフルオロペンタノイル)-1,3-オキサゾリジン-2-オン
【化５５】
2015529253.tif 000058
(S-6B)
DCM(50 mL)中の5,5,5-トリフルオロペンタン酸(14.76 g, 95 mmol)およびDMF(0.146 mL)の攪拌溶液に、塩化オキサリル(8.27 mL, 95 mmol)をゆっくりと加えた。2時間後に、該混合液を、濃縮乾固させた。別のフラスコにTHF(100 mL)中の(S)-4-ベンジルオキサゾリジン-2-オン(16.75 g, 95 mmol)を入れて、次いで-78℃に冷却した。該溶液に、10分間かけてn-BuLi(2.5M, 37.8 mL, 95 mmol)をゆっくりと加えて、10分間攪拌して、次いで、THF(50 mL)中の上記酸塩化物の溶液を、5分間かけてゆっくりと加えた。該混合液を、30分間攪拌して、次いで室温へと昇温させた。該混合液を、飽和NH4Cl水溶液でクエンチして、次いで10%LiCl水溶液を加えて、該混合液をEt2Oで抽出した。該有機層を、飽和NaHCO3水溶液、次いで食塩水で洗浄して、乾燥させて(MgSO4)、濾過して、濃縮乾固させた。該残留物を、SiO2クロマトグラフィーにより精製して(ISCO, 330 g カラム, 100%ヘキサン〜100%EtOAcのグラジエントにより溶出する)、生成物である中間体S-6Bを得た；(25.25 g, 85%)：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 7.32-7.39(2 H, m), 7.30(1 H, d, J=7.05 Hz), 7.18-7.25(2 H, m), 4.64-4.74(1 H, m), 4.17-4.27(2 H, m), 3.31(1 H, dd, J=13.35, 3.27 Hz), 3.00-3.11(2 H, m), 2.79(1 H, dd, J=13.35, 9.57 Hz), 2.16-2.28(2 H, m), 1.93-2.04(2 H, m).
【０１７７】
中間体S-6C：tert-ブチル(3R)-3-(((4S)-4-ベンジル-2-オキソ-1,3-オキサゾリジン-3-イル)カルボニル)-6,6,6-トリフルオロヘキサノエート
【化５６】
2015529253.tif 000059
(S-6C)
窒素雰囲気下において、THF(20 mL)中の中間体S-6B(3.03 g, 9.61 mmol)の冷たい攪拌溶液(-78℃)に、NaHMDS(THF中で1.0M)(10.6 mL, 10.60 mmol)を加えた。2時間後に、tert-ブチル 2-ブロモアセテート(5.62 g, 28.8 mmol)を、-78℃でシリンジからそのまま加えて、同じ温度で攪拌を維持した。6時間後に、該反応混合液を、室温まで昇温させた。該反応混合液を、飽和NH4ClとEtOAcとに分配された。該有機相を分離して、該水相を、EtOAc(3x)で抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させ(Na2SO4)、濾過して、減圧濃縮した。該残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 5%〜100% 溶媒 A/B=ヘキサン/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 120g)。適切な画分の濃縮により、中間体S-6C(2.79 g, 67.6%)を無色粘性の油状物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 7.34(2 H, d, J=7.30 Hz), 7.24-7.32(3 H, m), 4.62-4.75(1 H, m, J=10.17, 6.89, 3.43, 3.43 Hz), 4.15-4.25(3 H, m), 3.35(1 H, dd, J=13.60, 3.27 Hz), 2.84(1 H, dd, J=16.62, 9.57 Hz), 2.75(1 H, dd, J=13.35, 10.07 Hz), 2.47(1 H, dd, J=16.62, 4.78 Hz), 2.11-2.23(2 H, m), 1.90-2.02(1 H, m), 1.72-1.84(1 H, m), 1.44(9 H, s).
【０１７８】
中間体S-6D：(2R)-2-(2-tert-ブトキシ-2-オキソエチル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化５７】
2015529253.tif 000060
(S-6D)
THF(50 mL)および水(15 mL)中の中間体S-6C(2.17 g, 5.05 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)に、H2O(2 mL)中のLiOH(0.242 g, 10.11 mmol)およびH2O2(2.065 mL, 20.21 mmol)溶液を加えた。10分後に、該反応混合液を、氷浴から外して、1時間攪拌して、次いで0℃に冷却した。飽和NaHCO3水溶液(25 mL)および飽和Na2SO3水溶液(25 mL)を、該反応混合液に加えて、10分間攪拌して、部分濃縮した。得られる混合液を、DCM(2x)で抽出して、氷冷して、濃HClを用いてpH3の酸性とした。該混合液を、固体NaClで飽和して、EtOAc(3x)で抽出して、次いでMgSO4上で乾燥させて、濾過して、濃縮して、中間体S-6D(1.25g, 92%)を無色の油状物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 2.83-2.95(1 H, m), 2.62-2.74(1 H, m), 2.45(1 H, dd, J=16.62, 5.79 Hz), 2.15-2.27(2 H, m), 1.88-2.00(1 H, m), 1.75-1.88(1 H, m), 1.45(9 H, s).
【０１７９】
中間体S-6：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6-フルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸、および
中間体S-6E：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3-フルオロプロピル)ヘキサン酸
【化５８】
2015529253.tif 000061
THF(15 mL)中のS-6D(1.01 g, 3.73 mmol)の冷たい攪拌溶液(-78℃)に、5分間かけてLDA(4.56 mL, 8.21 mmol)をゆっくりと加えた。攪拌1.5時間後に、中間体S-6A(1.02 g, 4.85 mmol)を、3分かけて反応混合液に加えた。17分間後に、該反応混合液を、1.5時間-25℃に昇温させた(氷/MeOH/ドライアイス)。該反応を、水(15 mL)でクエンチして、CH2Cl2(3 x 20 mL)で抽出した。該有機層を、1N NaOH(3 x 20 mL)で再抽出して、水層を合わせた。該水層を、氷/水浴中で冷却して、次いで6N HClを用いてpH1まで酸性化した。次に、該水層を、固体NaClで飽和させて、EtOAc (2 x 85 mL) で抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させて、減圧濃縮して、1：6.4の中間体S-6および中間体S-6Eの混合物(0.96 g, 78%)を油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 4.48-4.56(1 H, m), 4.36-4.44(1 H, m), 2.75-2.83(1 H, m), 2.61-2.72(1 H, m), 2.08-2.34(2 H, m), 1.83-1.98(3 H, m), 1.66-1.82(4 H, m), 1.44-1.51(9 H, m).
【０１８０】
中間体S-6：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6-フルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸、および
中間体S-6E：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3-フルオロプロピル)ヘキサン酸
【化５９】
2015529253.tif 000062
1：6.4の中間体S-6および中間体S-6Eの混合液(0.30 g, 0.91 mmol)を、THF(5 mL)に溶解して、-78℃に冷却して無色溶液を得た。次いで、LDA(1.11 mL, 2.00 mmol)(ヘプタン/THF/エチルベンゼン中で1.8M)を、該反応混合液に3分かけてゆっくりと加えた。15分間攪拌した後、該反応混合液を、室温で水浴においた。15分後に、該反応混合液を、-78℃の浴に戻して、次いで塩化ジエチルアルミニウム(1.91 mL, 1.91 mmol)(ヘキサン中で1M)を5分かけてゆっくりと加えた。該反応混合液を、-78℃で攪拌した。15分後に、該反応混合液を、室温で10分間、水浴中に置いて、次いで冷却して、-78℃の浴に戻して冷却した。15分後に、該反応液を、MeOH(5.51 mL, 136 mmol)でクエンチして、-78℃の浴を外して、濃縮した。該反応混合液に、氷およびHCl(8.17 mL, 8.17 mmol)を加えて、次いで混合液を、EtOAc(2x)で抽出した。該有機層を合わせて、H2O(16 mL)および濃HCl(10.0 mL, 10.0 mmol)中のフッ化カリウム(0.48g, 8.26 mmol)で洗浄した。該有機層を、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させて、減圧濃縮して、9：1の中間体S-6および中間体S-6E混合物(0.20g, 65%収率)を明黄色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 4.47-4.56(1 H, m), 4.33-4.43(1 H, m), 2.59-2.76(2 H, m), 2.21-2.35(1 H, m), 2.06-2.19(1 H, m), 1.88-2.00(1 H, m), 1.59-1.85(6 H, m), 1.47(9 H, s).
【０１８１】
中間体S-7：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6-ジフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘプタン酸
【化６０】
2015529253.tif 000063
(S-7)
中間体S-7A：tert-ブチル 5-オキソヘキサノエート
【化６１】
2015529253.tif 000064
(S-7A)
t-ブチルアセテート(600 mL)中の5-オキソヘキサン酸(25 g, 192 mmol)の溶液に、過塩素酸(500 μL, 8.31 mmol)を加えて、得られる淡黄色溶液を、室温で、乾燥させたチューブにて65時間攪拌した。該反応液を、酢酸エチル(400 mL)で希釈して、次いで炭酸水素ナトリウム塩(50 g, 595 mmol)および水(100 mL)の混合液でクエンチした。該有機層を、飽和炭酸水素ナトリウム食塩水溶液(5 x 150 mL)、水(1 x 100 mL)、食塩水(1 x 75 mL)で抽出して、硫酸ナトリウム上で乾燥させて、濾過した。該溶媒を、真空で除去して、表題化合物を、淡色油状物(a light oil)として(30.55 g, 85%)得た。1H NMR(500MHz, クロロホルム-d)δ 2.50(t, J=7.2 Hz, 2H), 2.25(t, J=7.3 Hz, 2H), 2.16(s, 3H), 1.89-1.83(m, 2H), 1.46(s, 9H).
【０１８２】
中間体S-7B：tert-ブチル 5,5-ジフルオロヘキサノエート
【化６２】
2015529253.tif 000065
(S-7B)
窒素下において、乾燥させた耐圧瓶(75 mL)に、中間体S-7A(6.0 g, 32.2 mmol)からの物質および無水ジクロロメタン(37.5 mL)を加えた。得られる淡黄色溶液を、穏やかなアルゴン流下において、少し冷却して、(ジエチルアミノ)硫黄トリフルオリド(18 ml, 136 mmol)をゆっくりと加えた。該反応を、しっかりとキャップを閉めて、室温で2時間攪拌して、次いで37℃に18時間加熱した。該反応を、-20℃に冷却して、ゆっくりと(30分間かけて)炭酸水素ナトリウム塩(110 g, 1.31 mmol)、氷水(1600 mL)およびジクロロメタン(400 mL)を入れたビーカー内でクエンチした。得られる2相混合液を、ジクロロメタン(1200 mL)で希釈して、水(1 x 75 mL)、食塩水(1 x 75 mL)で洗浄して、硫酸ナトリウム上で乾燥させて、濾過し、蒸発乾固させて、粗製黄色の油状物(10.3 g)を得た。ヘキサン/ジクロロメタンのグラジエントを用いるシリカゲル精製の後に、表題化合物(4.45 g, 66.3%)を無色の油状物として単離した。1H NMR(500MHz, クロロホルム-d)δ 2.30(t, J=7.2 Hz, 2H), 1.95-1.75(m, 4H), 1.62(t, J=18.5 Hz, 3H), 1.47(s, 9H).
【０１８３】
中間体S-7C：(3R)-tert-ブチル 2-(3,3-ジフルオロブチル)-6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)ヘキサノエート
【化６３】
2015529253.tif 000066
(S-7C)
中間体S-7Cを、S-1Hについて前述したとおりの一般的な方法に従って中間体S-7B(3.8 g, 18.25 mmol)および中間体S-1G(3.21 g, 12.0、1 mmol)から製造した。酢酸エチル/ヘキサンのグラジエントを用いるシリカゲルクロマトグラフィーによる精製により、その後の反応において直接使用される中間体S-7C(390 mg)を得た；HPLC：RT=4.23 min(MeOH/H2O/0.1% TFA, Luna C18 2 x 50mm x 3μ, 4分間のグラジエント, 流速 = 0.8 mL/分, 波長=220nm)；MS(ES)m/z=496 [M+Na]；1H NMR(500MHz, クロロホルム-d)δ 4.52(dt, J=8.4, 3.3 Hz, 1H), 4.38-4.23(m, 2H), 4.10-4.02(m, 1H), 2.71(ddd, J=10.4, 6.6, 3.9 Hz, 1H), 2.51-2.36(m, 1H), 2.19-1.77(m, 8H), 1.58(t, J=18.3 Hz, 3H), 1.50-1.45(m, 9H), 0.94(dd, J=15.9, 7.1 Hz, 6H).
【０１８４】
中間体S-7：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6-ジフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘプタン酸
【化６４】
2015529253.tif 000067
(S-7)
中間体S-7を、中間体S-1Iについて前述したとおりの一般的な方法に従って中間体S-7C(389.5 mg, 0.823 mmol)、水酸化リチウム(62 mg, 2.59 mmol)および水中で30%の過酸化水素(810 mL, 7.93 mmol)から製造して、表題化合物(340 mg, 100%)を得た。1H NMR(500MHz, クロロホルム-d)δ 2.76-2.70(m, 1H), 2.65(td, J=8.9, 4.0 Hz, 1H), 2.35-2.22(m, 1H), 2.19-2.08(m, 1H), 2.03-1.72(m, 6H), 1.61(t, J=18.4 Hz, 3H), 1.49(s, 9H).
【０１８５】
中間体S-8：(2R)-2-(2-(tert-ブトキシ)-2-オキソ-1-(4-(トリフルオロメチル)シクロヘキシル)エチル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化６５】
2015529253.tif 000068
(S-8)
中間体S-8A：tert-ブチル 2-(4-(トリフルオロメチル)シクロヘキシリデン)アセテート
【化６６】
2015529253.tif 000069
(S-8A)
ヘキサン(10 mL)中の水素化ナトリウム(0.241 g, 6.02 mmol)の懸濁液を、15分間攪拌して、次いでこのヘキサンをデキャンテーションして、THF(10 mL)を加えた。0℃に冷却した後に、THF(10 mL)で希釈したtert-ブチル ジエチルホスホノアセテート(1.41 mL, 6.06 mmol)を滴加した。該反応混合液を、冷却浴から出して、室温で30分間攪拌した。該反応混合液を、次いで0℃に冷却して、THF(2 mL)で希釈した4,4-ジフルオロシクロヘキサノン(1 g, 6.02 mmol)を加えた。該反応混合液を、窒素下において、終夜室温で攪拌した。該反応を、次いで飽和NH4Cl水溶液(50 mL)でクエンチした。該水相を、ジエチルエーテル(3x25 mL)で抽出した。該有機層を合わせて、Na2SO4で乾燥させて、濾過して、濃縮した。該粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0%〜50% 溶媒 A/B=ヘキサン/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 40g)。適切な画分の濃縮により、中間体S-8A(1.16 g, 73%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 5.63(s, 1H), 3.93(d, J=14.3 Hz, 1H), 2.38(d, J=13.6 Hz, 1H), 2.34-2.14(m, 2H), 2.14-2.05(m, 2H), 1.91(td, J=13.9, 4.4 Hz, 1H), 1.55-1.43(m, 11H).
【０１８６】
中間体S-8B：tert-ブチル 2-(4-(トリフルオロメチル)シクロヘキシル)アセテート
【化６７】
2015529253.tif 000070
(S-8B)
MeOH(20 mL)中の中間体S-8A(1.15g, 4.35 mmol)および10% パラジウム炭素(0.463 g, 0.435 mmol)の溶液を、混合して、懸濁液を得た。次いで、該混合液を、真空にて窒素で3回パージした後、真空にて水素を用いて3回パージした。攪拌後、水素下において、2時間、該反応混合液を、CELITE(登録商標)を通して濾過し、減圧下でエバポレートして、目的の化合物(1.16g, 100%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 2.32-2.23(m, 1H), 2.22-2.04(m, 2H), 2.02-1.85(m, 3H), 1.83-1.68(m, 1H), 1.67-1.52(m, 3H), 1.47(s, 8H), 1.44-1.28(m, 1H), 1.09-0.95(m, 1H).
【０１８７】
中間体S-8C：(3R)-tert-ブチル 6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)-2-(4-(トリフルオロメチル)シクロヘキシル)ヘキサノエート
【化６８】
2015529253.tif 000071
(S-8C)
4つのジアステレオマー(S-8C)(0.428 g, 33%)の混合物を、中間体S-1Hと同様の方法において中間体S-8B(0.66 g, 2.47 mmol)および中間体S-1G(1.15g, 4.32 mmol)から製造した。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 4.55-4.17(m, 2H), 2.24-1.79(m, 8H), 1.75-1.50(m, 6H), 1.50-1.41(m, 9H), 1.38-1.20(m, 4H), 1.07-0.79(m, 6H).
【０１８８】
中間体S-8：(2R)-2-(2-(tert-ブトキシ)-2-オキソ-1-(4-(トリフルオロメチル)シクロヘキシル)エチル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化６９】
2015529253.tif 000072
(S-8)
THF(10 mL)および水(3 mL)中の上記S-8C(0.428 g, 0.805 mmol)の混合物の冷たい攪拌溶液(0℃)に、過酸化水素(水中で30%)(0.913 g, 8.05 mmol)およびLiOH(58 mg, 2.42 mmol)を順次添加して、該混合液を1時間攪拌した。この時点で、反応容器を、冷却浴から取り出して、次いで6時間攪拌した。該反応混合液に、飽和NaHCO3(10 mL)および飽和Na2SO3(15 mL)を加えた後に、それを減圧下で部分濃縮した。得られる粗製溶液を、DCM(2x)で抽出した。該水相を、1N HClを用いてpH1〜2に酸性として、DCM(3x)およびEtOAc(1x)で抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させて(Na2SO4)、濾過して、減圧濃縮して、ジアステレオマー混合物として中間体S-8(0.3 g, 89%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 2.86-2.47(m, 3H), 2.30-2.14(m, 1H), 2.08-1.70(m, 8H), 1.56-1.41(m, 9H), 1.39-1.03(m, 5H).
【０１８９】
中間体S-9：(2R)-2-(2-(tert-ブトキシ)-1-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-2-オキソエチル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化７０】
2015529253.tif 000073
(S-9)
中間体S-9A：2-(3,3-ジフルオロシクロブチル)酢酸
【化７１】
2015529253.tif 000074
(S-9A)
アセトン(5 mL)中の2-(3,3-ジフルオロシクロブチル)エタノール(270 mg, 2.0 mmol, Bogen, S. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 18：4219(2008)に記述したとおりに製造)溶液を、30分かけて室温にて、ジョーンズ試薬(2.7 mmol, 1 mL of 2.7 M 溶液)で処理した。2時間後に、別のジョーンズ試薬(0.25 mL)を加えた。1時間後に、該反応混合液を、CELITE(登録商標)を通して濾過して、減圧濃縮した。該反応混合液を、酢酸エチル(10 mL)に再溶解して、水(2 x 20 mL)、食塩水(20 mL)で洗浄して、次いでMgSO4上で乾燥させた。該混合液を、次いで濾過し、濃縮して、中間体S-9A(275 mg, 92%収率)を黄褐色の固体として得た。1H NMR(500 MHz, クロロホルム-d)δ 2.74-2.87(2 H, m), 2.57-2.62(2 H, m), 2.48-2.56(1 H, m, J=8.60, 4.30, 4.30, 1.94 Hz), 2.23-2.35(2 H, m).
【０１９０】
中間体S-9B：tert-ブチル 2-(3,3-ジフルオロシクロブチル)アセテート
【化７２】
2015529253.tif 000075
(S-9B)
tert-ブチル 2,2,2-トリクロロアセトイミデート(1.58 mL, 8.3 mmol)を、5分かけて0℃で、THF(5 mL)およびヘキサン(5 mL)中の中間体S-9B(620 mg, 4.1 mmol)に加えた。30分後に、BF3-Et2O(0.052 mL, 0.41 mmol)を加えた。1時間後に、該反応混合液を、氷浴から取り出して、室温で攪拌した。16時間後に、該反応混合液を、飽和NaHCO3(50 mL)に注ぎ入れて、ヘキサン(2 x 50 mL)で抽出して、Na2SO4上で乾燥させて、濾過し、減圧濃縮した。該反応混合液を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(DCM)、中間体S-9B(720 mg, 3.5 mmol, 85%収率)を透明な油状物として単離した。1H NMR(500 MHz, クロロホルム-d)δ 2.74-2.87(2 H, m), 2.57-2.62(2 H, m), 2.48-2.56(1 H, m, J=8.60, 4.30, 4.30, 1.94 Hz), 2.23-2.35(2 H, m).
【０１９１】
中間体S-9C：(3R)-tert-ブチル 2-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)ヘキサノエート
【化７３】
2015529253.tif 000076
(S-9C)
1.4：1のジアステレオマー混合物としての中間体S-9C(500 mg, 44%収率)を、中間体S-1Hについて記述したとおりの一般的な方法に従って、中間体S-9B(900 mg, 1.8 mmol)およびS-1G(650 mg, 2.4 mmol)から製造した。HPLC：RT = 2.25 min(LCMS：PHENOMENEX(登録商標)Luna 5 micron C18 4.6 x 30 mm, 2分間で0〜100 B(1分間の保持時間を含む), 流速 = 5 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：10% メタノール/90% 水 0.1% TFA；溶媒 B：10% 水 90% メタノール 0.1% TFA).  MS(ES)：m/z = 494.24  [M+Na]+.
【０１９２】
中間体S-9
1.4：1のジアステレオマー混合物としての中間体S-9(80 mg, 48%収率)を、中間体S-1Iについて記述した方法に従って、中間体S-9C(220 mg, 0.47 mmol)から製造した。HPLC：RT = 1.57 min(LCMS：Luna C18 4.6 x 30mm 3 micron；溶媒 A：10：90 H2O：ACN, 10 mM NH4OAc. 溶媒 B：10：90 H2O：ACN, 10 mM NH4OAc；2分で0%〜95%B；4 mL/分の流速).  MS(ES)：m/z = 359.4  [M-H]+.
【０１９３】
中間体A-1：(2-アミノ-3-シクロプロポキシフェニル)(3-フルオロフェニル)メタノン
【化７４】
2015529253.tif 000077
(A-1)
中間体A-1A：メチル 2-ニトロ-3-(ビニルオキシ)ベンゾエート
【化７５】
2015529253.tif 000078
(A-1A)
酢酸銅(II)(11.98 g, 65.9 mmol)およびジクロロメタン(80 mL)の混合液を、室温で10分間攪拌して、2,4,6-トリビニル-1,3,5,2,4,6-トリオキサトリボリナンとピリジン(1：1)(10.63 g, 44.2 mmol, 0.67 eq)、メチル 3-ヒドロキシ-2-ニトロベンゾエート(米国公開番号第2012/0035194号A1, [0202])(13 g, 65.9 mmol)、ピリジン(26.7 mL, 330 mmol)、モレキュラー・シーブ(1 g)を加えた。得られる深青色の混合液を、換気しながら室温で5日間攪拌した。該反応溶液を、CELITE(登録商標)パッドを通して濾過して、少量のジクロロメタンで洗浄した。該濾液を、3M 酢酸アンモニウム水溶液(2x)、水および食塩水で洗浄して、次いで乾燥させて、真空濃縮した。粗生成物の混合液を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(15分かけて0%〜20% EtOAC/DCM, 120g カラム)、中間体A-1A(7.42 g, 33.2 mmol, 50.4%収率)を得た。HPLC：RT= 2.487 min(H2O/MeOH(TFA), SunFire C18 3.5μm, 2.1 x 30 mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 246 [M+Na]+；1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 7.77(dd, J=7.8, 1.2 Hz, 1H), 7.55(t, J=8.1 Hz, 1H), 7.38(dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 6.61(dd, J=13.6, 5.9 Hz, 1H), 4.95(dd, J=13.6, 2.4 Hz, 1H), 4.69(dd, J=5.9, 2.4 Hz, 1H), 3.93(s, 3H), 1.56(s, 1H), 0.03(s, 1H).
【０１９４】
中間体A-1B：メチル 3-シクロプロポキシ-2-ニトロベンゾエート
【化７６】
2015529253.tif 000079
(A-1B)
3首フラスコ(500 mL)において、ジクロロメタン(100 mL)中の2,2,2-トリクロロ酢酸(16.30 g, 100 mmol)の溶液を、滴下漏斗により-10℃まで、窒素雰囲気下において、ジエチル亜鉛(1M ヘキサン, 100 mL, 100 mmol)溶液にゆっくりと加えた。該反応混合液を、10分間攪拌した。次に、ジヨードメタン(8 mL, 100 mmol)を、シリンジにより滴加して、該反応溶液を10分間攪拌した。ジクロロメタン(20 mL)中の中間体A-1A(7.42 g, 33.2 mmol)溶液を滴下漏斗によりゆっくりと加えた。該溶液を、終夜室温に昇温させた。該反応混合液を、0℃に冷却して、1M HClでクエンチした。該反応溶液を、分液漏斗に移して、水層をジクロロメタン(3x)で抽出した。この抽出物を合わせて、飽和炭酸水素ナトリウム塩、水および食塩水で洗浄して、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させて、濾過して、濃縮した。粗製生成物の混合液を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(15分かけて0%〜30% EtOAc/ヘプタン, 220g カラム)、中間体A-1B(4.7 g, 19.81 mmol, 60.0%収率)を得た。HPLC：RT= 2.66 min(H2O/MeOH(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 2.1 x 30 mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 260 [M+Na]+；1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 7.68-7.57(m, 2H), 7.57-7.41(m, 1H), 4.03-3.82(m, 4H), 0.94-0.78(m, 4H).
【０１９５】
中間体A-1C：3-シクロプロポキシ-2-ニトロ安息香酸
【化７７】
2015529253.tif 000080
(A-1C)
THF(30 mL)およびMeOH(30 mL)中の中間体A-1B(4.7 g, 19.81 mmol)溶液を、水(15 mL, 833 mmol)中の水酸化リチウム(2.88 g, 120 mmol)で処理した。該混合液を、室温で2時間攪拌した。有機溶媒を、減圧下で除去した。得られる水性スラリーを、水で希釈して、1M HClで酸性化して、酢酸エチル(3X)で抽出した。抽出物を合わせて、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させて、濾過して、濃縮して、中間体A-1C(4.35 g, 19.8 mmol, 98%収率)を黄色固体として得た。HPLC：RT= 2.186 min(H2O/MeOH(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 2.1 x 30 mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 246 [M+Na]+；1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 7.76(dd, J=7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.68-7.46(m, 2H), 4.02(tt, J=6.0, 2.9 Hz, 1H), 1.00-0.52(m, 4H).
【０１９６】
中間体A-1D：2-アミノ-3-シクロプロポキシ安息香酸
【化７８】
2015529253.tif 000081
(A-1D)
RB フラスコ(50 mL)に、中間体A-1C(205 mg, 0.919 mmol)、10% Pd/C(25 mg, 0.919 mmol)およびメタノール(6 mL)を入れた。フラスコを、減圧下において窒素(3x)に続いて水素バルーン(3x)でフラッシュした。得られる懸濁液を、水素バルーン下において室温で終夜攪拌した。該溶液を、CELITE(登録商標)を通して濾過して、メタノールで洗浄して、該濾液を濃縮して油状物を得た。粗製物質を、トルエン(2x)と共に共沸混合して、真空下で乾燥させて、粗製中間体A-1D(175 mg, 0.906 mmol, 99%収率)を固体として得た。該生成物を、さらなる精製なしに次の反応に使用した。HPLC：RT= 2.31 min(H2O/MeOH(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 2.1 x 30 mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 194.12 [M+H]+.
【０１９７】
中間体A-1E：2-アミノ-3-シクロプロポキシ-N-メトキシ-N-メチルベンズアミド
【化７９】
2015529253.tif 000082
(A-1E)
フラスコ内において、室温で、DMF(50 mL)中の中間体A-1D(6.61 g, 34.2 mmol)、N,O-ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(10.01 g, 103 mmol)、N-エチル-N''-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(7.87 g, 41.1 mmol)および1-ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物(6.29 g, 41.1 mmol)を加えた。該溶液に、トリエチルアミン(19.07 mL, 137 mmol)を加えた。該反応溶液を、60℃で終夜攪拌して、次いで室温まで冷却した。該反応混合液を、水と酢酸エチルとの間に分配して、分液漏斗に移して、有機層を、10% LiCl、水、食塩水で洗浄した。該有機相を、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させて、濾過して、濃縮し、暗色の油状物を得た。粗製生成物の混合液を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(15分かけて0%〜50%のEtOAc/DCM, 120g カラム)、中間体A-1E(5.2 g, 22.01 mmol, 64.3%収率)を得た。HPLC：RT= 1.975 min(H2O/MeOH(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 2.1 x 30 mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 237.12 [M+H]+；1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 7.17(dd, J=8.0、1.2 Hz, 1H), 7.02(dd, J=7.9, 1.3 Hz, 1H), 6.67(t, J=7.9 Hz, 1H), 4.78(br. s., 2H), 3.88-3.73(m, 1H), 3.69-3.56(m, 3H), 3.36(s, 3H), 0.92-0.72(m, 4H).
【０１９８】
中間体A-1
テトラヒドロフラン(100 mL)中の1-フルオロ-3-ヨードベンゼン(1.009 mL, 8.59 mmol)の溶液を、窒素下においてドライアイス/アセトン浴中で-78℃に冷却した。次いで、n-BuLi(ヘキサン中で1.8 M, 5.37 mL, 8.59 mmol)の溶液を、シリンジから15分かけて加えて、60分間攪拌し、暗黄色の懸濁液を得た。次いで、THF(10 mL)中の中間体A-1E(0.58 g, 2.455 mmol)溶液を、シリンジにより加えて、該反応混合液を、-78℃で40分間攪拌した。40分後に、該混合液を、氷および1N HClの混合液に注ぎ入れて、酢酸エチルに抽出した。該有機層を、水および食塩水で洗浄して、濃縮した。粗製生成物の混合液を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(15分かけて0%〜100%のEtOAC ヘプタン, 40 g カラム)、中間体A-1(0.46 g, 1.696 mmol, 69.1%収率)を得た。HPLC：RT= 3.481 min(H2O/MeOH(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 2.1 x 30 mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 272.16 [M+H]+；1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 7.48-7.40(m, 2H), 7.36(ddd, J=9.3, 1.9, 1.1 Hz, 1H), 7.27-7.18(m, 2H), 7.08(dd, J=8.3, 1.2 Hz, 1H), 6.58(t, J=8.0 Hz, 1H), 6.39(br. s., 2H), 3.83(t, J=4.5 Hz, 1H), 0.86(d, J=4.4 Hz, 4H).
【０１９９】
表1に挙げた下記中間体A-2〜A-5を、適切なアニリンおよび有機金属試薬を用いて中間体A-1について記述した一般的な合成方法に従って製造した。
表1：
【表２】
2015529253.tif 000083
1 MeOH/H2O/0.1%TFA, Waters SunFire C18 3.5μ, 2.1x30mm, 1mL/分, 4分のグラジエント, 波長=254 nm.
2 H2O/MeOH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)ODS S5, 4.6x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220nm.
3 H2O/MeOH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)ODS S5, 4.6x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220nm.
4 H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 2.1x30mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm.
【０２００】
中間体A-6：(2-アミノ-4-メトキシフェニル)(フェニル)メタノン
【化８０】
2015529253.tif 000084
(A-6)
トリクロロボラン(ジクロロメタン中で1M)(180 mL, 180 mmol)を、0℃で、テトラクロロエタン(50 mL)中の3-メトキシアニリン(20 g, 160 mmol)の溶液に滴加して、該混合液を15分間攪拌した。ベンゾニトリル(32 g, 310 mmol)に続いて三塩化アルミニウム(24 g, 179 mmol)を加えて、該混合液を、30分かけて室温まで昇温させて、次いで5時間還流させた。該混合液を、0℃に冷却して、1.5 N HCl(300 mL)を注意深く添加して、該混合液を、次いで80℃で30分間加熱した。該混合液を、室温に冷却して、DCMで抽出した。該有機層を合わせて、乾燥させて、次いで濃縮して、粗製生成物を得た。該粗製物質を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(pet. エーテル/酢酸エチル)、中間体A-6(7.0 g)を得た。HPLC RT= 1.783 min(MeOH/H2O/0.1%TFA, ZORBAX登録商標SB C18 5μ, 4.6x50 mm, Flow = 5 mL/分, 2分のグラジエント, 波長=220 nm)；MS(ES)：m/z=228 [M+H+]. 
【０２０１】
中間体A-7：(2-アミノ-3-フルオロフェニル)(フェニル)メタノン
【化８１】
2015529253.tif 000085
(A-7)
中間体A-7A：7-フルオロ-3-ヒドロキシ-3-フェニルインドリン-2-オン
【化８２】
2015529253.tif 000086
(A-7A)
THF(40 mL)中の7-フルオロインドリン-2,3-ジオン(12.22 g, 74 mmol)の攪拌溶液に、0℃で、臭化フェニルマグネシウム(148 mL, 148 mmol)を滴加した。該反応混合液を、前記添加が完了した後に、15分間室温で攪拌させた。該反応混合液を、飽和NH4Clでクエンチして、EtOAcで抽出した。この抽出物を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させて(Na2SO4)、濾過して、濃縮した。該残留物を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(EtOAc/ヘキサン)、中間体A-7A(18.84 g, 88%)を黄色の固体として得た：1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)d 10.92(s, 1H), 7.37-7.25(m, 5H), 7.19(ddd, J=10.4, 8.1, 1.3 Hz, 1H), 7.04-6.92(m, 2H)；HPLC：RT = 1.810 min(CHROMOLITH(登録商標)SpeedRODカラム4.6 x 50 mm, 4分間で10〜90% メタノール水溶液(0.1% TFAを含む), 4 mL/分, 220 nmでモニタリング)；MS(ES)：m/z= 599 [M+H-H2O]+.
【０２０２】
中間体A-7
水(100 mL)中のフェロシアン化カリウム(20.87 g, 56.7 mmol)、炭酸水素ナトリウム塩(4.94 g, 58.8 mmol)およびNaOH(0.959 g, 23.97 mmol)の攪拌溶液に、110〜120℃で、DMF(12 mL)中の中間体A-7A(5.3 g, 21.79 mmol)溶液を加えて、10分間かけて滴加した。1.5時間還流した後に、該反応混合液を、室温に冷却した。該混合液を、DCMで2回抽出した。この抽出物を合わせて、水および10% LiClで洗浄して、乾燥させ(MgSO4)、濾過して、濃縮した。該残留物を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(EtOAc/ヘキサン)、中間体A-7(2.97g, 63%)を黄色の固体として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)d 7.63-7.71(2 H, m), 7.54-7.60(1 H, m), 7.45-7.53(2 H, m), 7.25-7.31(1 H, m), 7.17(1 H, ddd, J=11.11, 7.81, 1.32 Hz), 6.56(1 H, td, J=8.03, 5.06 Hz), 6.12(2 H, br. s.)；HPLC：RT = 2.513 min(CHROMOLITH(登録商標)SpeedRODカラム4.6 x 50 mm, 4分間で10〜90% メタノール水溶液(0.1% TFAを含む), 4 mL/分, 220 nmでモニタリング)；MS(ES)：m/z= 216 [M+H]+.
【０２０３】
中間体A-8：(2-アミノ-3-フルオロフェニル)(フェニル)メタノン
【化８３】
2015529253.tif 000087
(A-8)
中間体A-8を、中間体A-7について記述した方法に従って製造した。HPLC：RT = 2.07 min(H2O/MeOH(TFAを含む), SunFire C18 2.5μm, 2.1x30mm, グラジエント= 3 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z= 230 [M+H]+.
【０２０４】
中間体A-9：(2-アミノ-3-メトキシフェニル)(フェニル)メタノン
【化８４】
2015529253.tif 000088
(A-9)
中間体A-9A：8-メトキシ-2-メチル-4H-ベンゾ[d][1,3]オキサジン-4-オン
【化８５】
2015529253.tif 000089
(A-9A)
無水酢酸(50 ml, 530 mmol)中の2-アミノ-3-メトキシ安息香酸(10.1 g, 60.4 mmol)の溶液を、攪拌しながら180分間140℃に加熱した。該反応混合液を、室温に冷却して、濃縮して、中間体A-9A(11.51g, 100%)を得た：1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 7.59(dd, J=6.9, 2.3 Hz, 1H), 7.52-7.42(m, 2H), 3.89(s, 3H), 2.39(s, 3H)；HPLC：RT = 0.795 min(H2O/MeOH(TFAを含む), SunFire C18 2.5μm, 2.1x30mm, グラジエント= 2 min, 波長 = 220)；MS(ES)：m/z= 292 [M+H]+.
【０２０５】
中間体A-9
ジエチルエーテル(20 mL)、トルエン(10 mL)およびTHF(10 mL)中の中間体A-9A(1.0 g, 5.23 mmol)を入れた100 mLの丸底フラスコを、0℃に冷却した。臭化フェニルマグネシウム(1.9 mL, 5.75 mmol, Et2O中で3M)を一度で加えた。該反応混合液を、室温まで昇温させて、終夜攪拌した。該反応混合液を、0℃に冷却して、クラッシュアイス(30 g)および6N HCl(25 mL)を加えた。該反応混合液を、室温へとゆっくり昇温させた。該反応混合液を、酢酸エチル(100 mL)と食塩水(50 mL)の間とに分配した。該水相を分離して、酢酸エチル(1x100 mL)で抽出した。該有機層を合わせて、乾燥させて(MgSO4)、濾過して、濃縮した。該残留物を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して無色固体(882 mg)を得た。この物質を、AcOH(10 mL)に溶解して、濃HCl(6 mL, 72.0 mmol)で処理して、次いで攪拌しながら終夜100℃に加熱した。該反応混合液を、室温に冷却して、濃縮して、真空下で乾燥させた。該残留物を、酢酸エチル(100 mL)で希釈して、pHを飽和NaHCO3によりpH10に調整して、次いで該相を分離した。該水相を、酢酸エチル(2x50 mL)で抽出した。該有機相を合わせて、乾燥させて(MgSO4)、濾過して、濃縮した。該残留物を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(EtOAc/ヘキサン)、中間体A-9(370mg, 31%)を得た：1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 9.43(br. s., 2H), 7.70-7.63(m, 1H), 7.33-7.22(m, 5H), 7.10-7.03(m, 1H), 6.91(dd, J=6.7, 2.1 Hz, 1H), 3.87(s, 3H)：HPLC：RT = 1.888 min(H2O/MeOH(TFAを含む), SunFire C18 2.5μm, 2.1x30mm, グラジエント= 2 min, 波長 = 220)；MS(ES)：m/z= 228[M+H]+.
【０２０６】
中間体A-10：(2-アミノ-3-クロロフェニル)(m-トリル)メタノン
【化８６】
2015529253.tif 000090
(A-10)
中間体A-10A：(3-クロロ-2-ニトロフェニル)(m-トリル)メタノン
【化８７】
2015529253.tif 000091
(A-10A)
200 mL 丸底フラスコに、3-クロロ-2-ニトロ安息香酸(2.5 g, 12.40 mmol)およびテトラヒドロフラン(50 mL)を入れた。塩化オキサリル(1.194 mL, 13.64 mmol)をゆっくりと加えて、その後DMF(0.096 mL, 1.240 mmol)を加えた。該反応混合液を、室温で2時間攪拌した。0℃に冷却した後に、m-トリルマグネシウムブロミド(24.81 mL, 24.81 mmol)の1M 溶液を加えた。1時間後に、別のm-トリルマグネシウムブロミド(24.81 mL, 24.81 mmol)を加えた。さらに1時間後に、該反応混合液を、酢酸エチル(200 mL)と1N HCl(150 mL)との間に分配した。該水層を、酢酸エチル(2x100 mL)で逆抽出した。有機相を合わせて、Na2SO4で乾燥させて、濾過して、濃縮した。粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0%〜100% 溶媒 A/B= 酢酸エチル/ヘプタン, REDISEP(登録商標)SiO2 120g)。適切な画分の濃縮により、中間体A-10A(0.700 g, 21%)を得た。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 8.04(dd, J=8.1, 1.1 Hz, 1H), 7.82(t, J=7.9 Hz, 1H), 7.71(dd, J=7.7, 1.1 Hz, 1H), 7.66-7.54(m, 3H), 7.52-7.46(m, 1H), 2.40(s, 3H).
【０２０７】
中間体A-10：(2-アミノ-3-クロロフェニル)(m-トリル)メタノン
100 mL 丸底フラスコに、中間体A-10A(.710 g, 2.58 mmol)およびTHF(7.5 mL)を入れた。該反応混合液を、エタノール(14.75 mL)および水(3.7mL)で希釈した。これに、飽和塩化アンモニウム(4 mL)および鉄(0.647 g, 11.59 mmol)水溶液を加えた。該混合液を、次いで攪拌しながら100℃に加熱した。2時間後に、該反応混合液を、CELITE(登録商標)を通して濾過し、この濾液を酢酸エチル(100 mL)と飽和NaHCO3(75 mL)との間に分割した。該水層を、酢酸エチル(1x50 mL)で逆抽出した。該有機相を合わせて、Na2SO4で乾燥させて、濾過して、濃縮した。粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0%〜100% 溶媒 A/B= 酢酸エチル/ヘプタン, REDISEP(登録商標)SiO2 24g)。適切な画分の濃縮により、中間体A-10(0.417 g, 66%)を得た。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 7.56(dd, J=7.8, 1.4 Hz, 1H), 7.47-7.35(m, 4H), 7.31(dd, J=8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.01(s, 2H), 6.61(t, J=7.9 Hz, 1H), 2.39(s, 3H).
【０２０８】
中間体A-11：(2-アミノ-3-イソプロピルフェニル)(3-クロロフェニル)メタノン
【化８８】
2015529253.tif 000092
(A-11)
2-イソプロピルアニリン(3 mL, 21.19 mmol)を、0℃のトリクロロボラン(ジクロロメタン中で1M)(23.31 mL, 23.31 mmol)およびジクロロエタン(50 mL)の溶液に加えて、該混合液を10分間攪拌した。3-クロロベンゾニトリル(5.83 g, 42.4 mmol)に続いて三塩化アルミニウム(3.11 g, 23.31 mmol)を加えて、該混合液を、0℃で25分間攪拌した。氷浴を取り外して、混合液を終夜75℃に加熱した。該混合液を、室温に冷却した。6N HCl(60 mL, 10 eq)を、注意深く添加して、該混合液を75℃に加熱した。4時間後に、12 N HCl(10 mL)を加えて、終夜75℃で加熱を継続させた。該混合液を、室温に冷却して、エーレンマイヤーフラスコに移して、酢酸エチルで希釈し、0℃に冷却して、50% NaOH水溶液を用いて注意深くpH10とした。得られる混合液を、酢酸エチル(4x)で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせて、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させて、濾過して、濃縮して、透明な琥珀色の油状物を得た。この油状物を、最小量のヘプタンに懸濁させ、ISCO コンパニオンクロマトグラフィーシステム(220 g シリカカートリッジ, 0〜20% 酢酸エチル/ヘプタンを用いて溶出する, 150 mL/分)で精製して、中間体A-11(2.85 g, 10.41 mmol, 49.1%収率)を得た。HPLC RT= 3.876 min 10/90〜90/10(MeOH/H2O/0.1%TFA, Waters SunFire C18 3.5μ, 2.1x30mm, 1mL/分, 4分のグラジエント, 波長=254 nm)；MS(ES)：m/z=274 [M+1]；1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 7.63(t, J=1.7 Hz, 1H), 7.55-7.48(m, 2H), 7.44-7.29(m, 3H), 6.65(t, J=7.7 Hz, 1H), 6.43(br. s., 2H), 3.11-2.87(m, 1H), 1.34(d, J=6.8 Hz, 6H).
【０２０９】
中間体A-12：(2-アミノ-3-クロロフェニル)(フェニル)メタノン
【化８９】
2015529253.tif 000093
(A-12)
中間体A-12を、中間体A-9について記述した方法に従って製造した。HPLC RT = 2.11 min(PHENOMENEX(登録商標)Luna 5 micron C18 4.6 x 30 mm, MeOH/H2O/TFA, 2分のグラジエント, 波長=254nm). [M+H+] = 232.
中間体B-1：(S)-3-アミノ-9-メチル-5-フェニル-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-2(3H)-オン
【化９０】
2015529253.tif 000094
(B-1)
中間体B-1A：(S)-ベンジル(9-メチル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3-イル)カルバメート
【化９１】
2015529253.tif 000095
(B-1A)
THF(128 mL)中の2-(1H-ベンゾ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル)-2-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)酢酸(J. Org. Chem., 55：2206-2214(1990))(17.30 g, 53.0 mmol)の懸濁液を、0℃に冷却した。塩化オキサリル(4.64 mL, 53.0 mmol)に続いて、DMF(50 μL)に加えた。該反応混合液を、2時間0℃で攪拌した。中間体A-4(5.09 g, 24.09 mmol)およびN-メチルモルホリン(7.95 ml, 72.3 mmol)の溶液を加えて、該反応混合液を、徐々に室温まで昇温させた。2.5時間後に、アンモニア(MeOH中で7M)(21.29 ml, 149 mmol)を加えて、該反応混合液を、終夜攪拌した。得られる混合液を、EtOAc(250 mL)で希釈して、次いでH2O(250 mL)、1 M NaOH(250 mL)および食塩水(250 mL)で洗浄した。該有機層を濃縮して、次いで酢酸(48.2 ml)に懸濁させた。酢酸アンモニウム(9.29 g, 120 mmol)を加えた。2.5時間後に、H2Oを沈殿物に添加して、該生成物を粘性の固体として得た。該固体を、濾取して、最少量のMeOHに懸濁して、0℃に冷却した。得られる白色固体を濾取して、冷MeOHで洗浄し、次いでジエチルエーテルで洗浄した。得られる物質を、真空下で乾燥させた。エナンチオマーの混合液を、SFC(Berger SFC MGII, CHIRALCEL(登録商標)OJ-H 25 x 3cm, 5cm, 70/30 CO2/MeOH, 200 mL/分, 220 nmで検出)を用いて分離して、目的の化合物である中間体B-1A(1.6 g, 16.63%)を得た。HPLC RT  = 2.773 min(CHROMOLITH(登録商標)SpeedROD, 5.0μm, 4.6mm x 50mm, 10〜90% メタノール水溶液(0.1% TFAを含む), 4分のグラジエント, 220 nmでモニター). [M+H+] = 400.4.  1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 8.35(d, J=8.6 Hz, 1H), 7.56-7.37(m, 11H), 7.23-7.17(m, 1H), 7.16-7.12(m, 1H), 5.12-4.99(m, 3H), 2.42(s, 3H).
【０２１０】
中間体B-1
HOAc中の33%HBr(6.59 ml, 40.1 mmol)における中間体B-1A(1.6 g, 4.01 mmol)溶液を、室温で2時間攪拌した。エーテル(100 mL)を加えて、得られる黄色の懸濁液を、1時間0℃に冷却した。得られる固体を、濾取して、エーテルを用いて濯ぎ洗った。吸湿性固体を、次いでMeOHに溶解して、濃縮乾固させて、真空下で乾燥させた。該固体(HBr塩)を磨砕して、ヘキサン(残留HOAcを除去するために少量のEtOAcを含有)と共に超音波処理して、該固体を濾取した。真空下において乾燥させて、目的の生成物を得た。HPLC RT = 1.378 min(CHROMOLITH(登録商標)SpeedROD, 5.0μm, 4.6mm x 50mm, 10〜90% メタノール水溶液(0.1% TFAを含む), 4分のグラジエント, 220 nmでモニターした)。[M+H+] = 266.4.  1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 10.63(s, 1H), 8.99(br. s., 3H), 7.64-7.45(m, 6H), 7.28-7.22(m, 1H), 7.20-7.15(m, 1H), 5.05(d, J=4.6 Hz, 1H), 2.43(s, 3H).
【０２１１】
表2(中間体B-2-B-4)に挙げた下記化合物を、適切なアミノベンゾフェノンを用いる中間体B-1について記載した一般的な合成方法に従って製造した。
【表３】
2015529253.tif 000096
1 Luna C18 4.6x30mm 3μ H2O/MeOH TFA, グラジエント= 5 min, 波長 = 220 nm.
2 BEH C18 2.1x50mm 1.7μ；H2O/ CH3CN TFA, グラジエント= 1 min, 波長 = 220 nm.
3 H2O/MeOH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)ODS S5, 4.6x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220nm.
【０２１２】
キラル分離条件：
a 機器：Berger SFC MGII, Lux Cell-4 25 x 5cm, 5cm, 60/40 CO2/MeOH, 180 mL/分, 220 nmで検出
b 機器：Berger SFC MGII, Lux Cell -4 25 x 5cm, 5cm, 70/30 CO2/MeOH, 180 mL/分, 220 nmで検出
c 機器：Berger SFC MGII, Chiral IC 25 x 3cm, 5cm, 150/45 CO2/MeOH, 180 mL/分, 220 nmで検出
【０２１３】
表3(中間体B-5-B-10)に挙げた化合物を、所定のアミノベンゾフェノンを用いる中間体B-1について記載した合成方法に従って製造した。しかし、最終的なキラル分離は行わずに、ラセミ化合物を次の工程に使用した。
【表４】
2015529253.tif 000097
1 MeOH/H2O/0.1%TFA, Waters SunFire C18 3.5μ, 2.1x30mm, 1mL/分, 4分のグラジエント, 波長=254 nm.
2 H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 2.1x30mm, グラジエント= 2 min, 波長 = 220 nm.
3 H2O/MeOH(TFAを含む), BEH C18 1.7μm, 2.1x50mm, グラジエント= 2 min, 波長 = 220 nm.
4 H2O/MeOH(TFAを含む), PHENOMENEX(登録商標)C18, 2.5μm, 2.0x30mm, グラジエント= 2 min, 波長 = 220および254 nm.
5 H2O/MeOH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)ODS S5, 4.6x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm.
中間体B-11：3-(S)-3-アミノ-9-シクロプロピル-5-フェニル-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-2(3H)-オン
(B-11)
【化９２】
2015529253.tif 000098
中間体B-11A：ベンジル(9-ブロモ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3-イル)カルバメート
【化９３】
2015529253.tif 000099
(B-11A)
【０２１４】
中間体B-11Aを、中間体B-1について示した一般的な方法により中間体A-5から製造した。HPLC：RT= 2.048 min(H2O/MeOH(TFAを含む), Ascentis Express C18 2.7μm, 2.1x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 464  [M+H+].
中間体B-11B：ベンジル(9-シクロプロピル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3-イル)カルバメート
【化９４】
2015529253.tif 000100
(B-11B)
窒素下において、ジオキサン(12 mL)中の中間体B-11A(2.00 g, 4.31 mmol)、パラジウムジクロリドdppf(946 mg, 1.29 mmol)、二塩基性リン酸カリウム(2.25 g, 12.9 mmol)およびシクロプロピルボロン酸メチルイミノジ酢酸エステル(1.70 g, 8.61 mmol)の攪拌混合液に、水(3 mL)を加えた。該反応混合液を、85℃で20時間加熱して、次いで室温に冷却して、該混合液をEtOAcで(40 mL)希釈して、CELITE(登録商標)の1/2'パッドにて覆われた1'パッドのシリカゲルを通して濾過した。これをさらにEtOAcで溶出した。該濾液を減圧下にて濃縮して、フラッシュクロマトグラフィー(Teledyne ISCO CombiFlash 0%〜17% 溶媒 A/B=DCM/アセトン, REDISEP(登録商標)SiO2 120 g, 254 nMで検出, 220 nmでモニタリング)により精製した。適切な画分の濃縮により、中間体B-11B(1.20 g, 65%)を得た。HPLC：RT= 3.246 min(CHROMOLITH(登録商標)SpeedRODカラム4.6 x 50 mm, 4分間で10〜90% メタノール水溶液(0.1% TFAを含む), 4 mL/分, 220 nmでモニタリング)。MS(ES)：m/z = 426.1 [M+H+]；1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 10.29(s, 1H), 8.38(d, J=8.6 Hz, 1H), 7.57-7.32(m, 10H), 7.30(d, J=7.5 Hz, 1H), 7.20(t, J=7.6 Hz, 1H), 7.11(d, J=7.3 Hz, 1H), 5.08(s, 2H), 5.04(d, J=8.4 Hz, 1H), 2.26-2.13(m, 1H), 1.09-0.95(m, 2H), 0.87-0.78(m, 1H), 0.61-0.52(m, 1H).
【０２１５】
中間体B-11
中間体B-11を、中間体B-1について詳細に記述した一般的な方法に従って、33% HBr/酢酸で処理することにより、中間体B-11Bから製造した。このラセミ体を、SFCクロマトグラフィー(機器：Berger SFC MGII, キラル OD 25 x 3 cm ID, 5μm, 82/18 CO2/MeOH, 85 mL/分, 220 nmで検出)により分離した。HPLC：RT= 2.085 min(CHROMOLITH(登録商標)SpeedRODカラム4.6 x 50 mm, 4分間で10〜90% メタノール水溶液(0.1% TFAを含む), 4 mL/分, 220 nmでモニタリング)。LC/MS：M+H= 292.1. 1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 10.78(s, 1H), 9.01(br. s., 3H), 7.65-7.48(m, 5H), 7.38(dd, J=7.6, 1.2 Hz, 1H), 7.26(t, J=7.8 Hz, 1H), 7.19-7.14(m, 1H), 2.27-2.16(m, 1H), 1.14-0.98(m, 2H), 0.91-0.80(m, 1H), 0.67-0.56(m, 1H).
【０２１６】
中間体B-12：(3S)-3-アミノ-5-フェニル-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン
【化９５】
2015529253.tif 000101
(B-12)
ラセミ体の3-アミノ-5-フェニル-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン(J. Med. Chem., 49：2311-2319(2006), 化合物 #5)を、文献の方法に従って製造した。該エナンチオマーを、Berger SFC MGIII カラム：Lux 25x3 cm, 5cm；移動相：CO2において、30% MeOH+0.1% DEA；流速：150 mL/分；温度：40℃；検知機器の波長：250 nMにて、分割した。得られたS-エナンチオマーの中間体B-12を白色固体として得た：1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ ppm 10.67(1 H, br. s.), 7.58(1 H, td, J=7.65, 1.76 Hz), 7.37-7.53(5 H, m), 7.23-7.30(2 H, m), 7.14-7.22(1 H, m), 4.23(1 H, s), 2.60(2 H, br. s.)；HPLC：RT=3.0625 min(CO2中で30% MeOH + 0.1% DEA, OD-H Column上, 3 mL/分, 35℃, 96 bar, 230 nm, 10μl 注入)；[α]D = -208.3°(5.05 mg/mL, MeOH).
【０２１７】
中間体B-13：(S)-3-アミノ-9-フルオロ-5-フェニル-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-2(3H)-オン
【化９６】
2015529253.tif 000102
(B-13)
中間体B-13を、中間体B-1について詳細に記載した一般的な方法に従って中間体A-7から製造した。個々のエナンチオマーを、脱保護工程の後に分離して(Berger SFC MGIII キラルIA 25 x 2 cm ID, 5μm；移動相：CO2において15% MeOH；流速：60 mL/分；温度：30℃；検出機器の波長：220 nm)、次いで1N HClを用いて処理して、中間体B-13をHCl塩として得た。HPLC：RT= 1.29 min(H2O/MeOH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)ODS S5, 4.6x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220nm). LC/MS：M+H= 270, 1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 11.27(br. s., 1H), 9.08(br. s., 3H), 7.75-7.47(m, 6H), 7.42-7.29(m, 1H), 7.17(s, 1H), 5.21(s, 1H).
【０２１８】
実施例1
(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-メチル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化９７】
2015529253.tif 000103
(1)
実施例1A：(2S,3R)-tert-ブチル 2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-6,6,6-トリフルオロ-3-(((S)-9-メチル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3-イル)カルバモイル)ヘキサノエート
【化９８】
2015529253.tif 000104
(1A)
DMF(4 mL)中の中間体B-1、2-ヒドロブロミド(308 mg, 0.721 mmol)、中間体S-1(225 mg, 0.601 mmol)およびTBTU(289 mg, 0.902 mmol)の溶液に、TEA(0.335 mL, 2.404 mmol)を加えた。該混合液を、室温で50分間攪拌した。NaHCO3の希釈溶液を、攪拌しながら加えた。得られる固体を濾取して、水で濯いで、乾燥させて、次いでシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(12 g column, EtOAc/ヘキサン=0〜70%)、実施例1A(327 mg, 99%収率)を得た。HPLC：RT=3.400  min(H2O/MeOH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)SpeedROD, 4.6x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)MS(ES)：m/z =622  [M+H+].
【０２１９】
実施例1
TFA/DCM(4 mL, 1/1)中の実施例1A(370 mg, 0.595 mmol)の溶液を、室温で1時間攪拌した。該反応混合液を、次いでトルエンで希釈して、濃縮して、さらに2回、DCM/トルエンと共に共沸混合した。得られる固体を、高真空下にて乾燥させた。該残留物を、THF(8 mL)に溶解して、HOBT(319 mg, 2.083 mmol)を加えて、該混合液を5分間攪拌した。その後、EDC(399 mg, 2.083 mmol)を加えて、さらに5分間攪拌し続けた。次いで、2N アンモニア(2.381 mL, 4.76 mmol)を加えた。該反応混合液を、室温で終夜攪拌して、濃縮した。水を、この攪拌した残留物に添加して、該混合液を超音波処理した。得られる固体を、濾取して、水で濯いで、次いで乾燥させた。該固体を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して(12 g column, EtOAc/ヘキサン=0.100)、実施例1(237 mg, 71%収率)を白色固体として得た。HPLC：RT=2.711 min(H2O/MeOH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)SpeedROD, 4.6x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)MS(ES)：m/z =565  [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.63-7.48(m, 4H), 7.47-7.40(m, 2H), 7.21(s, 2H), 5.38(s, 1H), 2.77(td, J=10.5, 4.0 Hz, 1H), 2.73-2.58(m, 2H), 2.56-2.42(m, 5H), 2.34-2.06(m, 5H), 2.02-1.91(m, 1H), 1.88-1.70(m, 2H), 1.70-1.60(m, 1H).
【０２２０】
実施例2
(2R,3S)-3-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化９９】
2015529253.tif 000105
(2)
実施例2を、実施例1について示した一般的な方法に従って中間体B-2および中間体S-3から製造した。実施例2を得た。HPLC：RT = 10.27 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 595 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 10.08(s, 1H), 9.48(d, J=7.5 Hz, 1H), 7.60-7.42(m, 5H), 7.38-7.19(m, 2H), 6.96(br. s., 1H), 6.92-6.83(m, 1H), 5.27(d, J=7.5 Hz, 1H), 3.94(s, 2H), 3.05-2.89(m, 1H), 2.57(d, J=5.1 Hz, 1H), 2.31-2.19(m, 1H), 2.10-1.90(m, 3H), 1.87-1.75(m, 1H), 1.73-1.41(m, 5H), 1.37-1.22(m, 1H).
【０２２１】
実施例3
(2R,3S)-N-((3S)-9-(シクロプロピルオキシ)-5-(3-フルオロフェニル)-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１００】
2015529253.tif 000106
(3)
実施例3を、実施例1について示した一般的な方法に従って中間体B-6および中間体S-3から製造した。この固体を、分取SFCクロマトグラフィーにより精製して(Welk O(RR)250 x 30 mm ID, 5μm, 84/16 CO2/MeOH, 120 mL/分)、実施例3を得た。HPLC：RT = 10.95 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 639 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 10.05(s, 1H), 9.47(d, J=7.3 Hz, 1H), 7.60(dd, J=8.3, 1.2 Hz, 1H), 7.55-7.45(m, 2H), 7.44-7.24(m, 4H), 6.94(dd, J=7.9, 1.1 Hz, 2H), 5.27(d, J=7.3 Hz, 1H), 4.03(tt, J=5.9, 2.9 Hz, 1H), 3.05-2.91(m, 1H), 2.32-2.17(m, 1H), 2.00(d, J=12.1 Hz, 4H), 1.77-1.41(m, 8H), 1.38-1.20(m, 2H), 0.99-0.92(m, 1H), 0.90-0.81(m, 2H), 0.80-0.67(m, 1H).
【０２２２】
実施例4
(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(4-(トリフルオロメチル)シクロヘキシル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１０１】
2015529253.tif 000107
(4)
実施例4を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-3および中間体S-8から製造した。この固体を、分取SFCクロマトグラフィーにより精製して(OD 250 x 30 mm ID, 5μm, 85/15 CO2/MeOH, 200 mL/分)、実施例4を、未知の立体化学を示す1つのジアステレオマーとして得た。HPLC：RT = 9.56 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 631 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 10.47(br. s., 1H), 9.46(d, J=7.0 Hz, 1H), 7.90-7.81(m, 1H), 7.61-7.50(m, 3H), 7.50-7.40(m, 3H), 7.33(d, J=3.7 Hz, 2H), 6.92(br. s., 1H), 5.31(d, J=7.0 Hz, 1H), 3.08-2.96(m, 1H), 2.50-2.42(m, 2H), 2.32-2.00(m, 2H), 1.89(t, J=12.3 Hz, 2H), 1.74(d, J=12.5 Hz, 1H), 1.66-1.53(m, 2H), 1.41(d, J=9.5 Hz, 1H), 1.35-1.07(m, 5H).
【０２２３】
実施例5
(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(4,4-ジフルオロシクロヘキシル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１０２】
2015529253.tif 000108
(5)
実施例5を、実施例1について示した一般的な方法に従って中間体B-3および中間体S-3から製造した。この固体を、分取SFCクロマトグラフィーにより精製して(Berger SFC MGII, Whelk-O1 AS-H 250 x 30 mm ID, 5μm, 85/15 CO2/MeOH, 85 mL/分)、実施例5を得た。HPLC：RT = 9.21 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 599 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 10.47(br. s., 1H), 9.50(br. s., 1H), 7.84(br. s., 1H), 7.63-7.42(m, 6H), 7.32(br. s., 2H), 6.96(s, 1H), 5.30(br. s., 1H), 3.09-2.92(m, 1H), 2.26(br. s., 1H), 2.00(d, J=11.2 Hz, 4H), 1.74-1.56(m, 6H), 1.40-1.19(m, 3H).
【０２２４】
実施例6
(2R,3S)-3-(3,3-ジフルオロシクロブチル)-N-((3S)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１０３】
2015529253.tif 000109
(6)
実施例6を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-12および中間体S-9から製造した。ジアステレオマー混合物を、分取HPLC[Gemini C18 25 x 2 cm ID, 5μm, 10分かけて60/40〜25/75水/ACN(0.1% TFAを含む), 2分間保持, 20.0 mL/分]により分離して、実施例6を得た。HPLC RT = 2.24 min(PHENOMENEX(登録商標)Luna 5 micron C18 4.6 x 30 mm, 4分かけて30〜100 B(1分間の保持時間を含む), 流速 = 5 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：10% メタノール/90% 水 0.1% TFA；溶媒 B：10% 水 90% メタノール 0.1% TFA),(M+H= 537.29). 1H NMR(500MHz, メタノール-d4)δ 7.66-7.59(m, 2H), 7.57-7.53(m, 2H), 7.52-7.47(m, 1H), 7.45-7.39(m, 2H), 7.37(dd, J=7.9, 1.2 Hz, 1H), 7.32(d, J=8.3 Hz, 1H), 7.28-7.22(m, 1H), 5.39(s, 1H), 2.83-2.73(m, 2H), 2.59(t, J=9.4 Hz, 2H), 2.54-2.15(m, 6H), 1.87-1.77(m, 1H), 1.76-1.66(m, 2H).
【０２２５】
実施例7
(2R,3S)-N-((3S)-9-(シクロプロピルオキシ)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１０４】
2015529253.tif 000110
(7)
実施例7を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-7および中間体S-1から製造した。ジアステレオマーの分離後(Berger SFC MGII, Regis Whelk-O R,R 25 x 3 cm ID, 5μm, 80/20 CO2/MeOH, 85 mL/分, 220 nmで検出)に、実施例7を得た。HPLC：RT= 10.714 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 607 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.65-7.47(m, 1H), 7.49-7.36(m, 1H), 7.25(t, J=8.1 Hz, 1H), 6.95(dd, J=7.9, 1.1 Hz, 1H), 5.40(s, 1H), 4.06-3.89(m, 1H), 2.88-2.40(m, 5H), 2.35-1.55(m, 8H), 1.01-0.81(m, 4H).
【０２２６】
実施例8
(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１０５】
2015529253.tif 000111
(8)
実施例8を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-2および中間体S-1から製造して、実施例8を得た。HPLC：RT=10.99 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 581.5 [M+H+]；1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 8.05(s, 1H), 7.55-7.49(m, 2H), 7.49-7.44(m, 1H), 7.42-7.33(m, 1H), 7.21-7.12(m, 1H), 7.11-7.05(m, 1H), 6.98(dd, J=7.9, 1.3 Hz, 1H), 5.84(br. s., 1H), 5.53(m, 2H), 3.99(s, 3H), 2.79-2.56(m, 3H), 2.51-2.42(m, 1H), 2.35-2.06(m, 6H), 1.96-1.74(m, 3H).
【０２２７】
実施例9
(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-5-(3-フルオロフェニル)-9-メチル-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１０６】
2015529253.tif 000112
(9)
実施例9を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-4および中間体S-1から製造して、実施例9を得た。HPLC：RT=10.653 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), Xbridge フェニル 3.5 μm, 3 x 150 mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 583.4 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.56-7.50(m, 1H), 7.47-7.40(m, 1H), 7.39-7.32(m, 2H), 7.28-7.22(m, 1H), 7.22-7.18(m, 2H), 5.36(s, 1H), 2.75(td, J=10.5, 4.2 Hz, 1H), 2.70-2.57(m, 2H), 2.56-2.41(m, 5H), 2.29-2.04(m, 4H), 1.98-1.87(m, 1H), 1.86-1.68(m, 2H), 1.67-1.57(m, 1H).
【０２２８】
実施例10
(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-5-(3-メチルフェニル)-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１０７】
2015529253.tif 000113
(10)
実施例10を、実施例1について示した一般的な方法に従って中間体B-8および中間体S-1から製造した。ジアステレオマー分離の後に(機器：Berger SFC MGIII, カラム：CHIRALPAK(登録商標)IC 25 x 3 cm, 5 μm；移動相：88/12 CO2/MeOH 流速：85 mL/分；220 nmで検出)、実施例10を得た。HPLC：RT=10.578 min[H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 599.3 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.79(dd, J=7.7, 1.5 Hz, 1H), 7.44(s, 1H), 7.39-7.23(m, 5H), 5.40(s, 1H), 2.77(td, J=10.4, 4.1 Hz, 1H), 2.72-2.60(m, 2H), 2.57-2.44(m, 2H), 2.38(s, 3H), 2.32-2.08(m, 4H), 2.01-1.89(m, 1H), 1.88-1.70(m, 2H), 1.68-1.57(m, 1H).
【０２２９】
実施例11
(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-フルオロ-5-(3-メチルフェニル)-2-オキソ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１０８】
2015529253.tif 000114
(11)
実施例11を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-9および中間体S-1から製造した。ジアステレオマー分離の後に(機器：Berger SFC MGIII, カラム：PHENOMENEX(登録商標)Lux セルロース-4 25 x 3 cm ID, 5μm；移動相：85/15 CO2/MeOH 流速：85 mL/分；220 nmで検出)、実施例11を得た。HPLC：RT=10.984 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), Xbridge フェニル 3.5 μm, 3 x 150 mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 583.3 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.50-7.43(m, 1H), 7.41(s, 1H), 7.36-7.21(m, 4H), 7.17(d, J=7.9 Hz, 1H), 5.43(s, 1H), 2.75(td, J=10.5, 4.2 Hz, 1H), 2.71-2.57(m, 2H), 2.55-2.42(m, 2H), 2.36(s, 3H), 2.30-2.05(m, 4H), 1.99-1.88(m, 1H), 1.86-1.69(m, 2H), 1.67-1.57(m, 1H).
【０２３０】
実施例12
(2R,3S)-N-((3S)-9-シクロプロピル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１０９】
2015529253.tif 000115
(12)
実施例12を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-11および中間体S-1から製造した。実施例12を得た。HPLC：RT= 8.551 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z =591.5  [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.63-7.48(m, 3H), 7.47-7.36(m, 3H), 7.26-7.17(m, 2H), 5.39(s, 1H), 2.78(td, J=10.5, 4.0 Hz, 1H), 2.73-2.58(m, 2H), 2.58-2.42(m, 2H), 2.36-2.04(m, 5H), 2.02-1.90(m, 1H), 1.89-1.70(m, 2H), 1.69-1.59(m, 1H), 1.21-1.05(m, 2H), 0.87-0.70(m, 2H).
【０２３１】
実施例13
(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１１０】
2015529253.tif 000116
(13)
実施例13を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-3および1.3：1の中間体S-1：S-1Jの混合物から製造した。ジアステレオマーの分離の後に(機器：Berger SFC MGIII, カラム：キラルIC 25 x 3 cm ID, 5μm；移動相：80/20 CO2/MeOH 流速：85 mL/分；220 nmで検出)、実施例13を得た。HPLC：RT= 10.124 min[H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm]；MS(ES)：m/z = 585.0 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.79(dd, J=7.7, 1.5 Hz, 1H), 7.63-7.50(m, 3H), 7.48-7.40(m, 2H), 7.36-7.24(m, 2H), 5.42(s, 1H), 2.78(td, J=10.5, 4.1 Hz, 1H), 2.73-2.59(m, 2H), 2.56-2.40(m, 2H), 2.34-2.04(m, 4H), 2.02-1.90(m, 1H), 1.88-1.70(m, 2H), 1.70-1.59(m, 1H).
【０２３２】
実施例14
(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-フルオロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１１１】
2015529253.tif 000117
(14)
実施例14を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-5および1.3：1の中間体S-1：S-1Jの混合物から製造した。ジアステレオマーの分離の後に(機器：Berger SFC MGIII, カラム：キラルIC 25 x 3 cm ID, 5μm；移動相：80/20 CO2/MeOH 流速：85 mL/分；220 nmで検出)、実施例14を得た。HPLC：RT= 7.770 min[H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm]；MS(ES)：m/z =569.2 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.61-7.40(m, 6H), 7.25(td, J=8.0, 5.0 Hz, 1H), 7.20-7.15(m, 1H), 5.43(s, 1H), 2.83-2.57(m, 3H), 2.56-2.38(m, 2H), 2.35-2.04(m, 4H), 2.03-1.92(m, 1H), 1.89-1.62(m, 3H).
【０２３３】
実施例15
(2R,3S)-3-((3,3-ジフルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１１２】
2015529253.tif 000118
(15)
実施例15を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-12および1.3：1の中間体S-1：S-1Jの混合物から製造した。ジアステレオマーの分離の後に(機器：Berger SFC MGIII, カラム：キラルIC 25 x 3 cm ID, 5μm；移動相：80/20 CO2/MeOH 流速：85 mL/分；220 nmで検出)、実施例15を得た。HPLC：RT= 7.690 min[H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm]；MS(ES)：m/z = 551.3 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.64(ddd, J=8.4, 7.3, 1.5 Hz, 1H), 7.59-7.49(m, 3H), 7.47-7.40(m, 2H), 7.36(ddd, J=16.2, 8.1, 1.0 Hz, 2H), 7.30-7.23(m, 1H), 5.41(s, 1H), 2.82-2.58(m, 3H), 2.55-2.40(m, 2H), 2.34-2.04(m, 4H), 2.03-1.91(m, 1H), 1.89-1.61(m, 3H).
【０２３４】
実施例16
(2R,3S)-3-(3-フルオロプロピル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１１３】
2015529253.tif 000119
(16)
実施例16を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-2および中間体S-6から製造した。この固体を、分取SFCクロマトグラフィーにより精製して(Berger SFC MGII, IC-H 250 x 21 mm ID, 5μm, 75/25 CO2/MeOH, 65 mL/分)、実施例6を得た。HPLC：RT= 8.06 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 537 [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 10.07(s, 1H), 9.43(d, J=7.0 Hz, 1H), 7.60(br. s., 1H), 7.57-7.50(m, 3H), 7.50-7.43(m, 2H), 7.36-7.30(m, 1H), 7.28-7.22(m, 1H), 7.02(br. s., 1H), 6.88(dd, J=7.8, 1.2 Hz, 1H), 5.22(d, J=7.0 Hz, 1H), 4.45(t, J=5.7 Hz, 1H), 4.33(t, J=5.8 Hz, 1H), 3.94(s, 3H), 2.81-2.70(m, 1H), 2.61(br. s., 1H), 2.48-2.37(m, 2H), 2.31-2.18(m, 1H), 1.69-1.48(m, 5H).
【０２３５】
実施例17
(2R,3S)-3-(3-フルオロプロピル)-N-((3S)-8-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１１４】
2015529253.tif 000120
(17)
実施例17を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-10および中間体S-6から製造した。ジアステレオアイソマーを、分取SFCクロマトグラフィー(Berger SFC MGII, キラルIC 250 x 30 mm ID, 5μm, 80/20 CO2/MeOH, 85 mL/分)により精製して、実施例17を得た。HPLC：RT=  7.95 min[H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm]；MS(ES)：m/z =  537.3 [M+H+]；1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 10.76(s, 1H), 9.43(d, J=7.5 Hz, 1H), 7.61(br. s., 1H), 7.56-7.49(m, 3H), 7.47-7.41(m, 2H), 7.23(d, J=8.8 Hz, 1H), 7.05(br. s., 1H), 6.88-6.83(m, 1H), 6.81(s, 1H), 5.23(d, J=7.3 Hz, 2H), 4.44(t, J=5.6 Hz, 2H), 4.33(t, J=5.7 Hz, 2H), 3.85(s, 3H), 2.78-2.57(m, 2H), 2.47-2.38(m, 1H), 2.30-2.15(m, 1H), 1.68-1.56(m, 3H).
【０２３６】
実施例18
(2R,3S)-3-(2,2-ジフルオロプロピル)-N-((3S)-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１１５】
2015529253.tif 000121
(18)
実施例18を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-12および中間体S-4から製造した。ジアステレオマーの分離の後に(Berger SFC, カラム：キラルAD-H 25 x 3 cm, 5 mm；移動相：80/20 CO2/MeOH 流速：80 mL/分；220 nmで検出)、実施例18を得た。MS(ES)：m/z 525.1 [M+H+]. HPLC RT = 0.85 min(BEH C18 2.1x 50mm, 1.7μ, 0〜100 B in 1 min(0.5分の保持時間を含む), 流速 = 1 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：100% 水 0.1% TFA；溶媒 B：100% ACN 0.1% TFA). 1H NMR(400 MHz, MeOD)δ ppm 7.58-7.66(1 H, m), 7.54(3 H, d, J=1.54 Hz), 7.41(4 H, s), 7.19-7.29(1 H, m), 5.39(1 H, s), 2.78-2.92(1 H, m), 2.64-2.78(1 H, m), 2.34-2.59(2 H, m), 2.13-2.31(1 H, m), 1.95-2.14(1 H, m), 1.73-1.92(2 H, m), 1.47-1.69(3 H, m).
【０２３７】
実施例19
(2R,3S)-N-((3S)-9-フルオロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((2S)-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１１６】
2015529253.tif 000122
(19)
実施例19を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-13および中間体S-5から製造した。ジアステレオマーの分離の後に(Berger SFC MGII, カラム：CHIRALPAK(登録商標)IC 25 x 3 cm, 5 mm；移動相：90/10 CO2/MeOH 流速：85 mL/分；220 nmで検出)、実施例19を得た。LC/MS, m/z 575.4(M+1). HPLC RT = 0.91 min.  LC/MS(BEH C18 2.1x 50mm, 1.7μ, 1分で0〜100B(0.5分の保持時間を含む), 流速 = 1 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：100% 水 0.1% TFA；溶媒 B：100% ACN 0.1% TFA). 1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.64-7.40(m, 6H), 7.29(d, J=4.8 Hz, 1H), 7.24-7.18(m, 1H), 5.48(s, 1H), 2.87-2.63(m, 2H), 2.61-2.42(m, 1H), 2.14(s, 3H), 1.96-1.67(m, 2H), 1.56-1.34(m, 1H), 1.16(d, J=6.8 Hz, 3H).
【０２３８】
実施例20
(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(3-フルオロプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１１７】
2015529253.tif 000123
(20)
実施例20を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-3および中間体S-6から製造した。HPLC：RT= 10.04 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 541.1 [M+H+]；1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 8.10(s, 1H), 7.68(dd, J=7.9, 1.3 Hz, 1H), 7.60(d, J=5.9 Hz, 1H), 7.52-7.46(m, 2H), 7.42-7.37(m, 2H), 7.33(dd, J=7.9, 1.3 Hz, 1H), 7.23-7.13(m, 2H), 6.32(br. s., 1H), 6.17(br. s., 1H), 5.53(d, J=7.5 Hz, 1H), 4.63-4.57(m, 1H), 4.56-4.50(m, 1H), 4.49-4.44(m, 1H), 4.43-4.35(m, 1H), 4.29(d, J=3.3 Hz, 1H), 2.73-2.58(m, 1H), 2.39-2.12(m, 4H), 1.99-1.76(m, 1H), 1.70-1.57(m, 1H).
【０２３９】
実施例21
(2R,3S)-3-(3,3-ジフルオロブチル)-N-((3S)-9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１１８】
2015529253.tif 000124
(21)
実施例21A：(2S,3R)-tert-ブチル 2-(3,3-ジフルオロブチル)-6,6,6-トリフルオロ-3-((9-メトキシ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3-イル)カルバモイル)ヘキサノエート
【化１１９】
2015529253.tif 000125
(21A)
CH2Cl2(3 mL)中の中間体B-2、2-ヒドロブロミド(66.0 mg, 0.149 mmol)、中間体S-7(53.0 mg, 0.146 mmol, HOAt(8 mg, 0.06 mmol)の懸濁液に、N-メチルモルホリン(0.100 mL, 0.91 mmol)に続いてEDC(40.0 mg, 0.209 mmol)を加えた。該混合液を、室温で5時間攪拌して、フラッシュクロマトグラフィー(SiO2, 0% 酢酸エチル/塩化メチレン〜15% 酢酸エチル/塩化メチレン、9カラム体積以上, 25 g column)により精製して、実施例21A(55.0 mg, 59.0%)を得て、これを次の工程に直接使用した。HPLC：RT= 4.28 min(H2O/MeOH(TFAを含む), PHENOMENEX(登録商標)Luna, 2.0x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 254 nm)MS(ES)：m/z = 626 [M+H+]；1H NMR(500MHz, クロロホルム-d)δ 8.02(s, 1H), 7.56-7.52(m, 2H), 7.49-7.45(m, 1H), 7.42-7.33(m, 2H), 7.19-7.14(m, 1H), 7.11-7.06(m, 1H), 6.98(dd, J=7.9, 1.1 Hz, 1H), 6.97-6.85(m, 1H), 5.56(d, J=8.1 Hz, 1H), 3.99(s, 3H), 2.71-2.56(m, 2H), 2.38-2.18(m, 2H), 2.02-1.74(m, 6H), 1.62(t, J = 18.6 Hz, 3H), 1.53-1.50(s, 9H).
【０２４０】
実施例21
DCM(10 mL)中の実施例21A(55.0 mg, 0.088 mmol)溶液を、TFA(10 mL)で処理して、室温で45分間攪拌した。溶媒を、蒸発させて、次いで残留物を、DCMに溶解して、再度蒸発させた。トルエンによる希釈および真空蒸留後に、得られる固体を、高真空下で数時間乾燥させた。該残留物を、THF(1.5 mL)に溶解して、HOAT(52.0 mg, 0.382 mmol)を加えて、該混合液を5分間攪拌した。その後、EDC(71.5 mg, 0.373 mmol)を加えて、さらに1分間攪拌し続けた。IPA(0.285 mL, 0.570 mmol)中の2N アンモニアを加えて、次いで該反応混合液を、室温で終夜攪拌した。THF(8 mL)およびCH2Cl2(15 mL)を加えて、該反応混合液を、5分間攪拌して、該固体を、濾去した。該濾液を、蒸発させて、粗製生成物を、少量の塩化メチレンに溶解して、フラッシュクロマトグラフィー(SiO2, 10以上のカラム体積で0% 酢酸エチル/塩化メチレン〜50% 酢酸エチル/塩化メチレンにより精製, 25 g column)により精製して、実施例21の化合物(34 mg, 68.1%)を得た：HPLC：95/5〜5/95 H2O/CH3CN/0.05%TFA, 流速=1mL/分, グラジエント=30min：SunFire C18 3.5μm, 3.0x150mm：RT=16.24 min；MS(ES)m/z=569 [M+H]+；1H NMR(500MHz, クロロホルム-d)δ 8.07(s, 1H), 7.56-7.44(m, 4H), 7.42-7.35(m, 2H), 7.20-7.14(m, 1H), 7.11-7.07(m, 1H), 6.98(dd, J=8.0, 1.1 Hz, 1H), 5.98(br. s., 1H), 5.57(br. s., 1H), 5.55(d, J=7.8 Hz, 1H), 3.99(s, 3H), 2.71-2.58(m, 2H), 2.36-2.14(m, 2H), 2.02-1.80(m, 6H), 1.63(t, J=18.5 Hz, 3H).
【０２４１】
実施例22
(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((2R)-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１２０】
2015529253.tif 000126
(22)
実施例22を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-3および中間体S-5から製造した。ジアステレオマーの分離の後に(Berger SFC MGII, カラム：CHIRALPAK(登録商標)IC 25 x 3 cm, 5 mm；移動相：90/10 CO2/MeOH 流速：85 mL/分；220 nmで検出)、実施例22を得た。MS(ES), m/z 591.3(M+H+). HPLC RT = 0.94 min.(BEH C18 2.1x 50mm, 1.7μ, 1分で0〜100 B(0.5分の保持時間), 流速 = 1 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：100% 水 0.1% TFA；溶媒 B：100% ACN 0.1% TFA). 1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.82-7.76(m, 1H), 7.63-7.50(m, 3H), 7.45(d, J=7.7 Hz, 2H), 7.37-7.26(m, 2H), 5.41(s, 1H), 2.80-2.64(m, 2H), 2.60-2.37(m, 1H), 2.34-2.12(m, 2H), 2.03-1.66(m, 4H), 1.16(d, J=7.0 Hz, 3H).
【０２４２】
実施例23
(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-((2S)-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１２１】
2015529253.tif 000127
(23)
実施例23を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体B-3および中間体S-5から製造した。ジアステレオマーの分離の後に(Berger SFC MGII, カラム：CHIRALPAK(登録商標)IC 25 x 3 cm, 5 mm；移動相：90/10 CO2/MeOH 流速：85 mL/分；220 nmで検出)、実施例23を得た。MS(ES), m/z 591.3(M+H+). HPLC RT = 0.95 min.(BEH C18 2.1x 50mm, 1.7μ, 1分で0〜100 B(0.5分の保持時間を含む), 流速 = 1 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：100% 水 0.1% TFA；溶媒 B：100% ACN 0.1% TFA). 1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.79(dd, J=7.9, 1.5 Hz, 1H), 7.65-7.57(m, 2H), 7.53(s, 1H), 7.45(d, J=7.7 Hz, 2H), 7.35(d, J=1.5 Hz, 1H), 7.30(d, J=7.9 Hz, 1H), 5.43(s, 1H), 2.85-2.64(m, 2H), 2.60-2.43(m, 1H), 2.35-2.08(m, 3H), 1.96-1.73(m, 2H), 1.51-1.39(m, 1H), 1.15(d, J=6.8 Hz, 3H).
【０２４３】
実施例24
(2R,3S)-N-((3S)-9-クロロ-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-3-(3,3-ジフルオロブチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１２２】
2015529253.tif 000128
(24)
実施例24を、実施例21について示した一般的な方法に従って、中間体B-3、2-ヒドロブロミドおよび中間体S-7から製造した。粗製生成物を、少量の塩化メチレンに溶解して、フラッシュクロマトグラフィー(SiO2, 10以上のカラム体積で0% 酢酸エチル/塩化メチレン〜50% 酢酸エチル/塩化メチレン, 40 g column)により精製して、実施例24の化合物を得た。HPLC：95/5〜5/95 H2O/CH3CN/0.05%TFA, 流速=1 mL/分, グラジエント=30min：SunFire C18 3.5μm, 3.0x150mm：RT=16.8 min. MS(ES)m/z=573 [M+H]+；1H NMR(500MHz, クロロホルム-d)δ 8.16(br. s., 1H), 7.74(d, J=7.9 Hz, 1H), 7.68(dd, J=7.9, 1.4 Hz, 1H), 7.55-7.47(m, 3H), 7.43-7.37(m, 2H), 7.34(dd, J=7.9, 1.2 Hz, 1H), 7.20(t, J=7.9 Hz, 1H), 5.99(br. s., 1H), 5.69(br. s., 1H), 5.55(d, J=7.8 Hz, 1H), 2.80-2.71(m, 1H), 2.66-2.56(m, 1H), 2.32-2.13(m, 2H), 2.03-1.80(m, 6H), 1.61(t, 3H, J = 18.4 Hz).
【０２４４】
実施例25
(2R,3S)-3-((1-フルオロシクロブチル)メチル)-N-((3S)-9-メチル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3-イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化１２３】
2015529253.tif 000129
(25)
THF(2 mL)中の中間体B-1(31.9 mg, 0.120 mmol)、中間体S-2(30 mg, 0.100 mmol)、HOBT(30.7 mg, 0.200 mmol)、水(10.84 μl, 0.601 mmol)の溶液を、塩氷水浴中で冷却した後に、EDC(23.06 mg, 0.120 mmol)で処理した。該混合液を、塩氷水浴中で5.5時間攪拌して、次いで終夜ゆっくりと室温へ昇温させた。該溶媒を、窒素流下で除去して、該残留物を、DMF/MeOHに溶解して、分取逆相HPLC(YMC ODS C18 5μ 20 x 100 mm, 15分かけて40%〜90%のメタノール水溶液により溶出(0.1% TFAを含む), 20 mL/分, 254 nmでモニター)により精製した。目的の画分を濃縮して、次いで真空下で乾燥させ、実施例25(14 mg, 23%)を得た。HPLC：RT=7. 750 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z =547.4  [M+H+]；1H NMR(400MHz, メタノール-d4)δ 7.61-7.55(m, 2H), 7.54-7.47(m, 2H), 7.46-7.39(m, 2H), 7.26-7.19(m, 1H), 7.06(dd, J=7.9, 1.3 Hz, 1H), 5.36(s, 1H), 3.61(t, J=5.6 Hz, 2H), 3.45-3.36(m, 5H), 3.26-3.13(m, 2H), 3.10-2.89(m, 4H), 2.89-2.77(m, 3H), 2.38-1.72(m, 12H).
【０２４５】
比較化合物26〜29
比較化合物26〜29を、米国特許第7,053,084号(各々実施例8、12a、38および45について)に記述した方法に従って製造できる。
【表５】
2015529253.tif 000130
(生物学的アッセイ)
本発明の化合物の薬理学的特性は、多くの生物学的アッセイによって確認されうる。以下に例示される生物学的アッセイを本発明の化合物で実施した。
【０２４６】
Notch-CBF1 トランス活性化アッセイ
Notch-CBF1(C-プロモーター結合因子I)セルベーストランス活性化アッセイは、放出されたNotch細胞内ドメインフラグメント(NICD)の、CBF1および他の核因子との結合における転写因子として機能する能力に基づいている。ルシフェラーゼアッセイを用いてNotch-CBF1転写活性の拮抗作用を測定した。HeLa子宮頚癌細胞に、切断されたNotch 1、Notch 2、Notch 3、もしくはNotch 4受容体を含むpCDNA3.1/Hygroプラスミド、および4コピーのCBF1結合部位を含むPGL3ルシフェラーゼ受容体ベクターを一時的に同時トランスフェクトする。次いで該細胞を、試験化合物の非存在下または存在下でのNotch-CBF1活性について試験した。DMEM(高グルコース、HEPES含有)、1X グルタミン/ペニシリン/ストレプトマイシンおよび10％ウシ胎仔血清中で維持されているHeLa細胞を、製造者の仕様書に従って、Monster Transfection Kit(Mirus #MIR2906)を用いて、T175フラスコ(4.5 x106 細胞/フラスコ)中において、一時的にトランスフェクトした。表5は、トランスフェクションについての各DNA量を示す。
表5
【表６】
2015529253.tif 000131
【０２４７】
トランスフェクションの6時間後、細胞をトリプシン処理し、384-ウェルの黒色のPoly-D-リジンコート組織培養プレートに、95 μL アッセイ培地(DMEM(高グルコース、HEPES含有)、1X グルタミン/ペニシリン/ストレプトマイシン、0.0125％BSA、1X 非必須アミノ酸)中、5x103細胞/ウェルの密度で、播種した。5 μM〜8.4x10-5 μM(3倍連続希釈)の最終濃度範囲で試験化合物を含むアッセイ培地(5 μL)を、該細胞に加えた後、該細胞プレートを、37℃および5％CO2で18時間インキュベートした。コントロールウェルには、DMSOビヒクル(総数)か、または0.5 μMの自製(in-house)小分子阻害剤が含まれていた(バックグラウンド数値)。各サンプルについて2連で用いた。ルシフェラーゼ活性を、製造者の仕様書(Promega, Cat. #: E2550)に従って、50 μl STEADY-GLO(登録商標)ルシフェラーゼ試薬を用いて20分間インキュベートした後に測定し、Envisionプレートリーダー(PerkinElmer, Boston, MA)により分析した。
【０２４８】
化合物のアンタゴニスト効力を、100 x [1-(サンプルの平均-バックグラウンドの平均)/(全体の平均-バックグラウンドの平均)]として表し、ここで、サンプルとは試験化合物の存在下におけるルシフェラーゼ活性であり、バックグラウンドとは小分子阻害剤コントロールの存在下でのルシフェラーゼ活性に等しく、全体はDMSOウェルで誘導されたシグナルである。データを、4つのパラメータロジスティック適合方程式(fit equation)を用いてプロットし、IC50値を、ルシフェラーゼ活性の50％を阻害する化合物の濃度として定義した。
【０２４９】
以下の表6は、上述のNotch-CBF1トランス活性化アッセイで測定した、本発明の実施例16〜25および比較化合物26〜29についてのNotch 1およびNotch 3のIC50値を挙げたものである。幾つかの例において、この値は、複数回の実験(Nは実施した実験の数である)の平均である。実施例1〜25により例示される本発明の化合物は、Notch 1のIC50値について14.0 nM以下、Notch 3のIC50値について21.6 nM以下を示した。
【表７】
2015529253.tif 000132
【０２５０】
ハイスループット(HT)代謝安定性パネル
非経口投与された化合物は、血流に入り、肝臓を通る1つ以上の経路を経る。肝臓によって容易に代謝されない化合物を、治療上有効な血漿中濃度で、治療上有効な期間、投与することができる。
【０２５１】
経口投与される化合物は、典型的には、腸壁を通して血流中に吸収され、肝臓を通る第1の経路を経る。肝臓を通るこの第1の経路において容易に代謝されない化合物は、身体の他の部域に治療上有効な量で分配され得る。
【０２５２】
代謝安定性アッセイによって、10分間インキュベートした後のヒト、ラット、マウス、イヌ、および/またはサルのミクロソームを用いた、in vitroでのCYP-媒介代謝安定性を評価した。各化合物を2連で試験した。
【０２５３】
これらのアッセイの結果を、10分間インキュベートした後の反応混合物中に残存する親化合物の割合として表した(残存率)。概して、これらの結果を用いて、試験化合物のCYP-媒介またはNADPH-依存性の代謝の程度のみを評価した。該化合物が著しく代謝(＜40〜50%残存)された場合、このことにより、in vivoでの化合物の高いクリアランスはCYP-媒介代謝に起因することが示唆された。しかしながら、これらのin vitroアッセイにおいて化合物が中程度(50〜80％)または低い(＞85％)代謝を示した場合、高いクリアランスは依然として、in vivoでの他の代謝および排出経路を介している可能性があった。
【０２５４】
これらのアッセイの残存率の結果はin vivoでの化合物のクリアランスを予測するものであって、これら結果からCYP-媒介代謝が優位な排出経路であると仮定された。異なるミクロソーム種における、結果の範囲は、おおよそ表7に示される通りである。
【表８】
2015529253.tif 000133
【０２５５】
方法および材料
肝臓ミクロソームとのインキュベーション
試験化合物を、100％DMSO中の3.5 mMのストック溶液として得た。試験化合物を希釈して1.4％DMSOを含む50 μMアセトニトリル(ACN)溶液を作り、次いでそれをミクロソームとのインキュベーションのための100xストックとして用いた。各化合物を、代謝安定性-ヒト、ラット、およびマウスアッセイ一式の3種をそれぞれ別々に、または代謝安定性-イヌ一式もしくは代謝安定性-サル一式を個々の種として、2連で試験した。化合物、NADPH、および肝臓ミクロソーム溶液を、インキュベーションのために、3つの工程で合わせた:
1.  100 mM NaPi(pH 7.4)、5 mM MgCl2緩衝液中の、肝臓ミクロソーム懸濁液(タンパク質濃度 1.1 mg/ml)(152 μl)を、37℃にて予め温めた。
2.  50 μM 化合物(98.6％ACN, 1.4％DMSO)(1.7 μl)を同じチューブに加え、37℃で5分間、予めインキュベートした。
3.  予め温めた100 mM NaPi(pH 7.4)中の10 mM NADPH溶液を17 μl加えることによって、反応を開始させた。
【０２５６】
反応成分をよく混合し、該反応混合液の75 μlを、すぐに150 μlクエンチ/停止溶液に移し入れた(0-時点, T0)。反応液を、37℃で10分間インキュベートした後、さらなる75 μlのアリコートを150 μlのクエンチ溶液に移し入れた。100 μM DMN(注射剤品質管理のためのUV標準)を含むアセトニトリルを、クエンチ溶液として用いて、代謝反応を終了させた。
【０２５７】
クエンチした混合液を、ALLEGRA(登録商標)X-12遠心機、SX4750ローター(Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA)において、1500 rpm(〜500 X g)で15分間遠心分離して、変性したミクロソームのペレットを得た。次いで、親化合物とその代謝物の混合物を含む90 μlの体積の上清抽出物を、UV-LC/MS-MS分析のために別の96-ウェルプレートに移し、該混合物中に残存する親化合物の割合を決定した。
【表９】
2015529253.tif 000134
【０２５８】
サンプル分析-機器
HPLC：Pump - Thermo Surveyor；オートサンプラー - CTC/LEAP HTS；UV検出器 - Thermo Surveyor PDA plus；カラム- 0.5 μm インラインフィルターを備えたVARIAN(登録商標)C18, 3 μm, 2 x 20 mm；構造的完全性事前分析のための移動相：(A)98% 水, 2％アセトニトリル(10 mM 酢酸アンモニウム含有)；(B)10% 水, 90% アセトニトリル(10 mM 酢酸アンモニウム含有)；反応サンプル分析のための移動相：(A)98% 水, 2% アセトニトリル(0.1％ギ酸含有)；(B)2% 水, 98% アセトニトリル(0.1％ギ酸含有)；(C)0.1％水酸化アンモニウム／水；(D)0.1% 水酸化アンモニウム／アセトニトリル.
【０２５９】
質量分析計：Thermo TSQ QUANTUM(登録商標)Ultraトリプル四重極質量分析計
サンプル分析: 構造的完全性事前分析
【０２６０】
サンプル分析-構造的完全性事前分析
代謝安定性構造的完全性事前分析を用いて、アッセイした化合物の純度を評価した。化合物を、57 μlの3.5 mM DMSO溶液として96-ウェルプレート中に入れた。該3.5 mM化合物DMSOストック溶液を、同じ体積のアセトニトリル、イソプロパノール、およびMilliQ-H2Oを含む溶液を用いて、18倍希釈した。得られた溶液(200 μM)を、Thermo LCQ Deca XP Plus イオントラップ質量分析計でのLC-UV/MS(Waters Sentry 2.1 mm ガードカラムを備えたWaters XBridge C18, 5 μm, 2 x 50 mm カラムおよび以下の表に記載のLC条件を用いて、5 μl注入量および1 ml/分の流速で)により、構造的完全性について分析した。得られたデータは、220 nmでのUV吸光度による純度を反映していた。50％以上の純度を有する化合物の結果のみを報告した。
【表１０】
2015529253.tif 000135
【０２６１】
サンプル分析-インキュベートしたサンプル
MS/MS条件の最適化を、加熱エレクトロスプレー(H-ESI)源を備えたThermo TSQ QUANTUM(登録商標)トリプル四重極質量分析計において、自動注入により実施し、SRMトランジションおよびそれらの対応する衝突エネルギー値を得た。1:1 メタノール:水中の20 μM濃度の化合物溶液を、流速90 μL/分で注入した後、流速50 μL/分で移動相を合わせ、その後供給源に導入した。全ての化合物を、まず移動相AおよびB(50％Aおよび50％B)を用い、必要であれば、移動相CおよびD(これもまた、50:50組成物である)を用いて、最適化した。最適化されたパラメータ(極性、SRMトランジションおよび衝突エネルギーを含む)を、Microsoft Access(登録商標)データベースに保存した。
【０２６２】
自動注入から得られた質量分析条件を用いて、代謝安定性アッセイからのインキュベーションサンプルを分析した。注入量は5 μlであって、流速は0.8 ml/分であった。用いたグラジエントを、以下の表に示した。全てのサンプルを、まず移動相AおよびBを用いたグラジエントにて注入した。必要であれば(例えば、クロマトグラフ的理由のため)、サンプルを同一のグラジエントで再注入した(ただし、移動相CおよびDを用いる)。全てのLC-MS/MS分析パラメータを、コンピューターを用いて生データファイルに保存した。
【０２６３】
【表１１】
2015529253.tif 000136
【０２６４】
データ解析
ピーク積分を、XCALIBUR(登録商標)ソフトウェアを用いて行った。残存率の算出を、各化合物についてのT10分サンプルからのLC-MS/MSピーク領域とT0分サンプルからのLC-MS/MSピーク領域を比較することによって、実施した。
【０２６５】
品質の管理
一組の3つの化合物を、各アッセイプレートにおいて、試験化合物と一緒に試験した。これらコントロール化合物についての結果が以下に示す期待される範囲に該当した場合のみ、データを承認してアップロードした。
【表１２】
2015529253.tif 000137
【０２６６】
代謝安定性半減期パネル
ヒトまたは動物の肝臓ミクロソームにおいて、in vitroで決定された代謝速度および半減期を用いて、化合物の固有クリアランス(CLint)および肝クリアランス(CLh,b)を決定した。これらのパラメータは、in vivoヒトクリアランス(in vivoでの薬物曝露のレベルを定義する)を予測するために有用であった(Obach et al., 1997, 1999)。
【０２６７】
代謝安定性半減期アッセイパネルは、ヒト、ラット、マウス、イヌおよびサルミクロソームにおける、in vitroでのCYP-媒介(NADPH-依存性)代謝のタイムコースおよび速度を評価する。該タイムコースは45分のインキュベーションに及び、0、5、10、15、30、および45分の時点が含まれ、その各々にて、混合物中の試験化合物残存量を測定した。
【０２６８】
結果解釈ガイドライン
代謝安定性半減期アッセイの結果を半減期(T1/2, 分)として表した。一般に、これらの結果は、試験化合物のCYP-媒介またはNADPH-依存性の代謝の程度のみを評価するために用いられるべきである。該化合物が著しく代謝された(T1/2 ＜14分)場合、これにより、in vivoでの高いクリアランスはCYP-媒介代謝に起因することが示唆された。しかしながら、これらのin vitroアッセイにおいて該化合物が中程度(50〜80％)または低い(＞85％)代謝を示した場合、高いクリアランスは依然としてin vivoでの他の代謝および排出経路を介している可能性があった。
【０２６９】
これらのアッセイの結果はin vivoでの化合物のクリアランスを予測するものであって、これら結果からCYP-媒介代謝が優位な排出経路であると仮定された。ヒトミクロソーム種において、結果の範囲は、おおよそ以下の表に示される通りであった。
【表１３】
2015529253.tif 000138
【０２７０】
方法および材料
肝臓ミクロソームはBD-Biosciences(Woburn, MA)から入手し、NADPHはAppliChem Incから入手した；全ての他の試薬はSigmaから入手した。
【０２７１】
肝臓ミクロソームとのインキュベーション
試験化合物を100％DMSO中の3.5 mMストック溶液として得た。該試験化合物を希釈して50 μM アセトニトリル(ACN)溶液(1.4％DMSO含有)を作り、その後、それをミクロソームとのインキュベーション用の100倍ストックとして用いた。各化合物を、ヒト、ラット、マウス、イヌおよびサルの肝臓ミクロソームにおいて試験した。化合物、NADPHおよび肝臓ミクロソーム溶液を、インキュベーションのために3つの工程で合わせた:
1.   100 mM NaPi(pH 7.4)、5 mM MgCl2バッファー中の肝臓ミクロソーム懸濁液 (1.1 mg/mlのタンパク質濃度)(450 μl)を、37℃にて予め温めた。
2.   50 μM 化合物(98.6％ACN, 1.4％DMSO)(5 μl)を同じチューブに加え、37℃で5分間、プレインキュベートした。
3.  予め温めた100 mM NaPi(pH 7.4)中の10 mM NADPH溶液(50 μl)を加えることによって、反応を開始させた。
【０２７２】
反応液の成分をよく混合し、すぐに65 μlを130 μlクエンチ/停止溶液に移し入れた(0-時点, T0)。反応液を37℃で5、10、15、30および45分間インキュベートし、各時点で65 μlのアリコートを130 μlのクエンチ溶液に移し入れた。内部標準(100 ng/ml)を含むアセトニトリルをクエンチ溶液として用いて、代謝反応を終了させた。
【０２７３】
クエンチした混合液を、ALLEGRA(登録商標)X-12遠心機, SX4750ローター(Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA)において、1500 rpm(〜500 X g)にて15分間、遠心分離を行い、変性したミクロソームを沈殿させた。その後、親化合物とその代謝物の混合物を含む90 μlの体積の上清抽出物を、LC/MS-MS分析のための別の96-ウェルプレートに移し、該混合物中に残存している親化合物の割合を決定した。
【表１４】
2015529253.tif 000139
【０２７４】
サンプル分析-機器
HPLC：ポンプ-島津LC-20 ADシリーズ バイナリポンプ；オートサンプラー-CTC/LEAP HTS.
【０２７５】
以下の表14は、ヒト代謝安定性半減期アッセイで測定した、本発明の実施例1〜25および比較化合物26〜29についての代謝半減値を列挙する。幾つかの例において、この値は、複数回の実験(Nは実施した実験の数である)の平均である。実施例1〜25により例示される本発明の化合物は、33分またはそれ以上長い代謝安定性半減値を示した。これに対して、比較化合物26〜29は、8分またはそれ以下の代謝安定性半減値を示した。
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【０２７６】
例示した本発明の化合物は、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおけるCYP-媒介性の代謝から、低いクリアランスという驚くべき利点を示した。実施例1〜25により例示される本発明の化合物は、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおいて33分またはそれ以上長い代謝安定性半減値を示した。比較化合物26〜29は、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおいて高いクリアランスを示しており、この化合物は肝ミクロソームにより排除されたことを示した。
【０２７７】
本発明の化合物(実施例1〜25)は、米国特許第7,456,172号に開示の比較化合物26〜29と比較され、とりわけ有利であることが見いだされている。本発明の化合物は、Notch 1およびNotch 3の阻害剤としての活性と肝臓ミクロソームについての優れた代謝安定性とを併せ持つ驚くべき利点を有していた。表6および14に示される通り、本発明の実施例1〜25は、Notch 1のIC50値が14.0 nM以下であって、Notch 3のIC50値が21.2 nM以下であり；そして、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおいて33分以上のヒト代謝安定性半減期であった。これに対して、同様の試験において、比較化合物26〜29は、Notch 1のIC50値が5.1nM〜64.1nMの範囲であって、Notch 3のIC50値が12.5 nM〜74.5 nMであり；そして、ヒト代謝安定性半減期が8分以下であった。
【０２７８】
マウスにおけるヒト腫瘍異種移植モデル
全ての齧歯動物をHarlan Sprague Dawley Co.(Indianapolis, Indiana)から入手し、区別された(defined)病原体フリーのコロニー中のアンモニア-フリーの環境で維持した。全てのマウスを約1週間検疫した後で、それらを腫瘍増殖および薬効試験のために用いた。食物および水を自由裁量でマウスに摂食させた。Bristol-Myers Squibb 薬学研究所の動物管理プログラムは、米国実験動物管理公認協会(AAALAC)により公認されている。全ての実験を、Bristol-Myers Squibb (BMS)動物試験法およびガイドラインに従って、実施した。
【０２７９】
免疫不全のbalb/c nu/nuヌードマウスまたはNOD-SCIDマウス(Harlan Sprague Dawley)において、腫瘍異種移植片を皮下(SC)で増殖させて維持した。ドナーマウスから得られた腫瘍断片を用いて、適切なマウス系統(表15)において皮下移植片として腫瘍を増殖させた。
【表１６】
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【０２８０】
前臨床化学療法試験
有意義な反応を検出するに必要な数の動物を、実験開始時にプールし、各々に、13-内径トロカールを用いて腫瘍断片(〜20 mg)を皮下移植した。腫瘍を、予め定められたサイズ(size window)(該範囲外の腫瘍は除いた)まで増殖させ、動物を、様々な治療群およびコントロール群に均等に分配した。SAL-IGF(表10には含まれない)腫瘍モデルで実施した実験(典型的には各治療群およびコントロール群当たり5個体のマウスであった)を除いて、典型的には、各治療群およびコントロール群当たり8個体のマウスであった。個々の体重に基づいて各動物を処置した。処置された動物を、治療に関連する毒性/死亡数について毎日調べた。処置を開始する前に各群の動物の体重を測定し(Wt1)、その後、最後の処置用量の後に再度測定した(Wt2)。体重の差(Wt2-Wt1)は処置関連毒性の指標を提供する。
【０２８１】
腫瘍反応は、腫瘍が予め定められた「標的」サイズである0.5 gmまたは1 gm(腫瘍のタイプに依存する)に到達するまで、キャリパーを用いて週に2回腫瘍を測定することによって決定された。腫瘍重量(mg)を、式:
腫瘍重量 = (長さ x 幅2)÷ 2
から推定した。
【０２８２】
腫瘍反応判断基準は、腫瘍増殖阻害(％TGI)の観点から表わされる。腫瘍増殖遅延は、コントロール群(C)が予め定められた標的サイズに達するのに必要とされる時間(日)に対する、処置された腫瘍(T)が予め定められた標的サイズに達するのに必要とされる時間(日)の差として定義される。この目的のために、群の腫瘍重量は中間腫瘍重量(medium tumor weight)(MTW)として表わされる。
【０２８３】
腫瘍増殖阻害は、以下のとおり算出される：
【数１】
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(式中、
Ct = 処置の終了時におけるコントロールの腫瘍サイズの中央値
C0 = 処置開始時におけるコントロールの腫瘍サイズの中央値
Tt = 処置の終了時における処置群の腫瘍サイズの中央値
T0 = 処置開始時における処置群の腫瘍サイズの中央値)。
【０２８４】
活性は、少なくとも１腫瘍の体積倍加時間に等しい期間に50％以上の耐用性腫瘍増殖阻害(すなわち、TGI ≧ 50％)の達成または0.5以上のlog細胞死(LCK＞0.5)として定義され、薬剤処置は、少なくとも２腫瘍の体積倍加時間に等しい期間でなくてはならない。
【０２８５】
腫瘍反応はまた、コントロール群(C)が予め定められた標的サイズに到達するのに要する時間(日)に対する、処置群(T)が予め定められた標的サイズに到達するのに要する時間(日)の差として定義される、腫瘍増殖遅延(TGD値)の観点から表される。
【０２８６】
可能ならいつでも、抗腫瘍活性は、過剰な毒性(すなわち、1個体以上の死亡)が出現する直前の用量レベルとして定義される最大耐用量(MTD)までの用量レベルの範囲で決定された。死亡が発生した場合、死亡の日を記録した。腫瘍が標的サイズに達する前に死亡する処置マウスは、薬物毒性で死亡したと見なされる。標的サイズ未満の腫瘍を有するコントロールマウスで死亡したマウスはいなかった。薬物毒性により1個体以上が死亡した処置群は、過剰な毒性処置(toxic treatment)を有していたと見なし、それらのデータは化合物の抗腫瘍効果評価には含めない。
【０２８７】
処置耐容性に影響を及ぼす潜在的な薬物毒性相互作用は、化学療法試験の組み合わせにおいて、重要な考慮すべき事項である。組み合わせ治療の結果についての解釈は、同程度の耐性用量の組み合わせの抗腫瘍活性に対する、最良の反応の単剤の抗腫瘍活性の比較に基づかなくてはならない。従って、治療の相乗作用を、単独療法のいずれの耐性用量で達成された最適効果を超えた組み合わせ剤の許容的レジメンで達成された治療効果として定義した。データの統計的評価を、Gehanの一般化ウィルコクソン検定を用いて実施した。統計的有意性を、P＜0.05にて判断した。
【０２８８】
薬物投与
in vitroでの研究において、全ての剤を、100％DMSOに溶解させ、培地/10％ウシ胎仔血清中に連続希釈した。Notch阻害剤の齧歯動物への投与において、下記の賦形剤を用いた: ETOH/TPGS/PEG300(10:10:80)。Notch阻害剤を、典型的には、QDx15, 10日投与-2日投与休止のスケジュールで経口投与した(その他のスケジュールも評価して、有効であることが示されたけれども)。例えば、QDx12, 4日投与-3日投与休止を含む投与レジメンは、QDx15, 10日投与-2日投与休止と同等の有効性であることが示された。BID試験において、第2番目の用量は、第1番目の用量の6〜12時間後に与えた。
【０２８９】
In vivo 抗腫瘍活性
以下の表16は、マウスにおけるヒト腫瘍異種移植モデルで測定された本発明の実施例の抗腫瘍活性を挙げたものである。実施例1により例示される本発明の化合物は、経口投与(PO)での抗腫瘍活性を示した。
【表１７】
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【国際調査報告】
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