(57)【要約】  その立体化学的異性体形態、塩及び溶媒和物を含む式Ｉ【化１】2015503537.tif 000090（式中、Ｒ及びＲ’は、本明細書に定義した意味を有する）のＨＣＶ複製の阻害剤。本発明は、前記化合物の調製のためのプロセス、それらを含有する医薬組成物、及びＨＣＶ療法における単独での、又は他のＨＣＶ阻害剤との組み合わせでのそれらの使用にも関する。
2015503537.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
2015503537.tif 000080
の化合物、又はその立体異性体、（式中：
【化２】
2015503537.tif 000081
の少なくとも一方は、
【化３】
2015503537.tif 000082
を含む群から独立して選択され、
他方の
【化４】
2015503537.tif 000083
は、
【化５】
2015503537.tif 000084
を更に含む群から選択され、
Ｒ及びＲ’は、−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３、任意選択でハロ及びメチルから選択される１つ又は２つの置換基で置換されたアリール、又はヘテロシクロアルキルから独立して選択され、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜４アルキル；メトキシ又はヒドロキシルで置換されたＣ２〜４アルキル；並びに任意選択でハロ及びメチルから独立して選択される１つ又は２つの置換基で置換されたフェニルから選択され；
Ｒ２は、ヒドロキシル、アミノ、モノ−又はジ−Ｃ１〜４アルキルアミノ、Ｃ１〜４アルキル−カルボニルアミノ、Ｃ１〜４アルキルオキシカルボニルアミノであり；
Ｒ３は、水素又はＣ１〜４アルキルである）
又はその薬学的に許容され得る塩若しくは溶媒和物。
【請求項２】
少なくとも一方の
【化６】
2015503537.tif 000085
が
【化７】
2015503537.tif 000086
を含む群から独立して選択される、請求項１に記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】
少なくとも一方の
【化８】
2015503537.tif 000087
が独立して、
【化９】
2015503537.tif 000088
である、請求項１又は２に記載の式Ｉの化合物。
【請求項４】
式Ｉａ
【化１０】
2015503537.tif 000089
のものである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２がＣ１〜４アルキルカルボニルアミノ又はＣ１〜４アルキルオキシカルボニルアミノであり、Ｒ３が水素である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１が、分岐鎖Ｃ３〜４アルキル；メトキシで置換されたＣ２〜３アルキル；並びに任意選択でハロ及びメチルから選択される１つの置換基で置換されたフェニルから選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容され得る担体とを含有する医薬組成物。
【請求項８】
薬物としての使用のための請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
哺乳動物におけるＨＣＶ感染の予防又は処置における使用のための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＨＣＶ感染の処置における同時の、別個の、又は連続した使用のための組み合わせ製剤としての、（ａ）請求項１〜６のいずれか一項に定義された式Ｉの化合物、及び（ｂ）他のＨＣＶ阻害剤を含む製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肝炎Ｃウィルス（ＨＣＶ）の阻害剤であるヘテロ−二環式誘導体、特に、キナゾリノン誘導体、それらの合成、並びに、ＨＣＶの処置又は予防における単独での又は他のＨＣＶ阻害剤との組み合わせでのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＨＣＶは、ヘパシウィルス属のフラビウィルス科（Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ）ウィルスファミリーに属する一本鎖のプラスセンスＲＮＡウィルスである。ウィルスゲノムは、複数の構造及び非構造タンパク質をコードする単一オープンリーティングフレームに変わる。
【０００３】
初期の急性感染後、感染した大部分の個人は、ＨＣＶが肝細胞内で優先的に複製するが直接細胞壊死性ではないため、慢性肝炎に罹患する。詳細には、活発なＴ−リンパ球応答の欠如、及びウィルスが突然変異する高い傾向により、高い率の慢性感染が促進されると思われる。慢性肝炎は肝線維症に進行して、硬変、末期肝疾患、及びＨＣＣ（肝細胞癌腫）をもたらす可能性があり、肝臓移植の主要な原因となっている。
【０００４】
地理的に異なって分布する６つの主なＨＣＶ遺伝子型及び５０を超えるサブタイプが存在する。ＨＣＶ遺伝子型１は、欧州及び米国内で優勢な遺伝子型である。ＨＣＶの広範な遺伝子異質性は、重要な診断的及び臨床的意味を有し、おそらくワクチン開発における困難さ、及び現在の治療法に対する応答の欠如を説明するものである。
【０００５】
ＨＣＶの伝播は、汚染された血液又は血液製品との接触、例えば輸血後又は静脈内薬物使用を介して生じ得る。血液スクリーニングに用いられる診断試験の導入により、輸血後ＨＣＶ発生率の下方傾向がもたらされている。しかしながら、末期肝疾患への遅い進行を考慮すると、存在する感染症は、重大な医学的及び経済的負担を数十年間もたらし続けるであろう。
【０００６】
現在のＨＣＶ療法は、リバビリンと組み合わせた（ペグ化）インターフェロン−α（ＩＦＮ−α）に基づいている。この組み合わせ療法は、遺伝子型１ＨＣＶにより感染された患者の４０％、及び遺伝子型２及び３により感染された患者の約８０％に持続的なウィルス学的応答を生じている。この組み合わせ療法は、ＨＣＶ遺伝子型１の限定された効力に加えて、インフルエンザ様症状、血液学的異常及び精神神経症状を含む有意な副作用を有する。それ故、より有効な、より簡便な、またより耐性の高い処置が必要とされている。
【０００７】
ＨＩＶ薬物、特にＨＩＶプロテアーゼ阻害剤による経験によって、準最適な薬物動態及び複雑な投与計画は、不注意による服薬率の不足を急速にもたらすことが教示された。このことは、ＨＩＶ治療計画における各薬物の２４時間トラフ濃度（最低血漿濃度）が、一日のうちの大部分にて、ＩＣ９０又はＥＤ９０閾値を頻繁に下回ることを意味する。少なくともＩＣ５０、及びより現実的にはＩＣ９０又はＥＤ９０の２４時間トラフレベルが、薬物回避変異体（ｄｒｕｇ  ｅｓｃａｐｅ  ｍｕｔａｎｔｓ）の発生を遅延させるのに不可欠であることが考えられる。そのようなトラフレベルを可能にするのに必要な薬物動態及び薬物代謝の速度を達成することは、薬物設計に厳しい挑戦を提供する。
【０００８】
ＨＣＶのＮＳ５Ａタンパク質は、ＮＳ４Ｂタンパク質の下流、及びＮＳ５Ｂタンパク質の上流に位置している。ウィルスセリンプロテアーゼＮＳ３／４Ａによる翻訳後切断の後、ＮＳ５Ａは、低リン酸化（５６−ｋＤａ、ｐ５６）又は高リン酸化種（５８−ｋＤａ、ｐ５８）のいずれかとして存在する亜鉛含有３−ドメインリン酸化タンパク質に成熟する。ＨＣＶのＮＳ５Ａは、ウィルス複製及び感染性粒子の会合、並びにその宿主細胞の環境の調節を含む、ウィルス寿命の複数の局面に関与している。このタンパク質に起因する酵素的機能は存在しないが、多数のウィルス及び細胞因子と相互作用することが報告されている。
【０００９】
多数の特許及び特許出願が、特にＮＳ５Ａを標的とするＨＣＶ阻害活性を有する化合物を開示している。国際公開第２００６／１３３３２６号パンフレットは、スチルベン誘導体を開示すると共に、国際公開第２００８／０２１９２７号パンフレット及び国際公開第２００８／０２１９２８号パンフレットは、ＮＳ５ＡＨＣＶ阻害活性を有するビフェニル誘導体を開示している。国際公開第２００８／０４８５８９号パンフレットは、４−（フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール誘導体及びそれらの抗ウィルス使用を開示している。国際公開第２００８／０７０４４７号パンフレットは、ベンゾイミダゾール部分を含む、多様なＨＣＶ阻害化合物を開示している。国際公開第２０１０／０１７４０１号パンフレット及び国際公開第２０１０／０６５６８１号パンフレットは、両方ともＨＣＶ  ＮＳ５Ａのビス−イミダゾール阻害剤を開示している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
例えば副作用、限定された効力、耐性の出現、及び服薬率の不足等の現在のＨＣＶ療法の欠点を克服することができ、また持続的なウィルス負荷応答を改善するＨＣＶ阻害剤が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、以下のパラメータの１つ以上に関して有用な特性を有するＨＣＶ阻害キナゾリノン誘導体の群に関する。抗ウィルス効力、耐性の発生の好ましいプロファイル、低い又は殆ど存在しない毒性及び遺伝毒性、好ましい薬物動態及び薬力学、処方及び投与の容易さ、並びに低い又は殆ど存在しない他の薬物物質、特に他の抗ＨＣＶ薬剤との薬物−薬物相互作用。
【００１２】
本発明の化合物はまた、他のウィルス、特にＨＩＶに対する活性を有さないという事実により魅力的であり得る。ＨＩＶ感染患者は、ＨＣＶ等の共感染に苦しむことが多い。ＨＩＶも阻害するＨＣＶ阻害剤を用いてそれらの患者を処置することにより、耐性ＨＩＶ株の発生がもたらされる場合がある。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
第１の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）；
【化１】
2015503537.tif 000003
で表すことができる式Ｉの化合物のサブグループ、又はその立体異性体：（式中、
【化２】
2015503537.tif 000004
の少なくとも一方は、
【化３】
2015503537.tif 000005
を含む群から独立して選択され、
他方の
【化４】
2015503537.tif 000006
は、
【化５】
2015503537.tif 000007
を更に含む群から選択され、
Ｒ及びＲ’は、−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３、任意選択でハロ及びメチルから選択される１つ又は２つの置換基で置換されたアリール、又はヘテロシクロアルキルから独立して選択され、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜４アルキル；メトキシ又はヒドロキシルで置換されたＣ２〜４アルキル；並びに任意選択でハロ及びメチルから独立して選択される１つ又は２つの置換基で置換されたフェニルから選択され；
Ｒ２は、ヒドロキシル、アミノ、モノ−又はジ−Ｃ１〜４アルキルアミノ、Ｃ１〜４アルキル−カルボニルアミノ、Ｃ１〜４アルキルオキシカルボニルアミノであり；
Ｒ３は、水素又はＣ１〜４アルキルである）
又はその薬学的に許容され得る塩若しくは溶媒和物を提供する。
【００１４】
好ましい実施形態では、
【化６】
2015503537.tif 000008
は、
【化７】
2015503537.tif 000009
を含む群から独立して選択される。
【００１５】
更により好ましくは、少なくとも一方の
【化８】
2015503537.tif 000010
が独立して、
【化９】
2015503537.tif 000011
である式Ｉの化合物である。
【００１６】
より好ましくは、本発明の化合物は、式Ｉａ
【化１０】
2015503537.tif 000012
で表すことができる化合物を提供する。
【００１７】
本発明の更なる実施形態において、Ｒ２はＣ１〜４アルキルカルボニルアミノ又はＣ１〜４アルキルオキシカルボニルアミノを含む群から選択される。
【００１８】
本発明の更なる別の実施形態において、Ｒ１は、分岐鎖Ｃ３〜４アルキル；メトキシで置換されたＣ２〜３アルキル；並びに任意選択でハロ及びメチルから選択される１つの置換基で置換されたフェニルから選択される。
【００１９】
本発明の更なる別の実施形態において、Ｒ３は水素である。
【００２０】
更なる実施形態において、Ｒ及びＲ’は同一である。
【００２１】
尚更なる実施形態において、Ｒ２はＣ１〜４アルキルカルボニルアミノ又はＣ１〜４アルキルオキシカルボニルアミノであり、Ｒ３は水素である。
【００２２】
本発明はまた、特に遺伝子型１ａ又は１ｂのＨＣＶ感染の処置又は予防のための方法を提供し、当該方法は、治療的有効量の前記に定義した化合物を、当該処置又は予防を必要とする対象に投与することを含む。
【００２３】
本明細書に言及する化合物及び中間体の純粋な立体異性体は、前記化合物又は中間体の同一の基本分子構造の他のエナンチオマー又はジアステレオマー形態を実質的に含まない異性体として定義される。特に、用語「立体異性体的に純粋な」は、少なくとも８０％の立体異性体過剰（即ち、最小９０％の１つの異性体及び最大１０％の他の可能な異性体）から１００％迄の立体異性体過剰（即ち、１００％の１つの異性体及び他の異性体なし）、更に、特に９０％超〜最大１００％の立体異性体過剰を有する化合物又は中間体、尚更に、特に９４超〜最大１００％の立体異性体過剰、最も特には９７％超〜最大１００％の立体異性体過剰を有する化合物又は中間体に関する。用語「エナンチオマー的に純粋な」及び「ジアステレオマー的に純粋な」は、同様の方法で理解するべきであるが、それぞれ、問題となっている混合物のエナンチオマー的過剰、ジアステレオマー的過剰が考慮される。
【００２４】
本発明の化合物及び中間体の純粋な立体異性体は、当技術分野にて既知の手順を適用することにより得ることができる。例えば、エナンチオマーは、光学活性酸又は塩基を用いたそれらのジアステレオマー塩の選択的結晶化によって、互いに分離することができる。光学活性酸の例は、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸及びカンファースルホン酸である。代替的に、エナンチオマーは、キラル固定相を用いたクロマトグラフィー法によって分離することができる。前記純粋な立体化学的異性体は、反応が立体特異的に起こることを条件として、適切な出発物質の対応する純粋な立体異性体から誘導することもできる。特定の立体異性体が所望される場合、前記化合物は立体特異的な製剤方法によって合成されることが好ましい。それらの方法は、エナンチオマー的に純粋な出発物質を有利に使用するであろう。
【００２５】
式Ｉの化合物のジアステレオマーラセミ体は、従来の方法によって別々に得ることができる。有利に使用され得る適切な物理的分離方法は、例えば、選択的結晶化及びクロマトグラフィー、例えばカラムクロマトグラフィー又は超臨界流体クロマトグラフィーである。
【００２６】
本明細書で以前定義した式Ｉの化合物、及び式Ｉの化合物のサブグループは、数個のキラル中心を有する。２−炭素原子におけるピロリジン環の立体中心が特に興味深い。この位置における立体配置は、Ｌ−プロリンに対応するものであってもよく、即ち
【化１１】
2015503537.tif 000013
又はＤ−プロリンに対応するもの、即ち
【化１２】
2015503537.tif 000014
であってもよい。
【００２７】
式Ｉａ
【化１３】
2015503537.tif 000015
に従った、本明細書に定義した式Ｉの化合物、又はそのサブグループが特に興味深い。
【００２８】
Ｒ３がＨである基−ＣＲ１Ｒ２Ｒ３の立体配置も興味深く：Ｒ１が分岐鎖Ｃ３〜４アルキル；メトキシで置換されたＣ２〜３アルキルから選択される場合、Ｓ−立体配置が好ましく；Ｒ１が、任意選択でハロ及びメチルから独立して選択される１つ又は２つの置換基で置換されたフェニルから選択される場合；Ｒ−立体配置が好ましい。
【００２９】
薬学的に許容され得る付加塩は、式（Ｉ）の化合物又はそのサブグループの治療的に有効な無毒酸及び塩基付加塩形態を含む。式Ｉの化合物、又は本明細書に特定した式Ｉの化合物のサブグループの遊離形態、即ち非塩形態が興味深い。
【００３０】
薬学的に許容され得る酸付加塩は、塩基形態をそれらの適切な酸で処理することにより都合よく得ることができる。適切な酸は、例えば、ハロゲン化水素酸、例えば塩酸又は臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、及び同様の酸等の無機酸；又は例えば、酢酸、プロピオン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸（即ちエタン二酸）、マロン酸、コハク酸（即ちブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸（即ちヒドロキシルブタン二酸）、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸、及び同様の酸等の有機酸を含む。逆に、前記塩形態は、適切な塩基で処理することにより遊離塩基形態に変換され得る。
【００３１】
酸性プロトンを含む式（Ｉ）の化合物はまた、適切な有機及び無機塩基を用いた処理によって、それらの塩基付加塩、特に金属又はアミン付加塩形態に変換されてもよい。適切な塩基塩形態は、例えば、アンモニウム塩、アルカリ及びアルカリ土類金属塩、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩等、有機塩基との塩、例えばベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン塩、並びにアルギニン、リシン等のアミノ酸との塩を含む。
【００３２】
用語「溶媒和物」は、式Ｉの化合物、及びその塩が形成することができる、薬学的に許容され得る溶媒和物を包含する。そのような溶媒和物は、例えば水和物、アルコラート、例えばエタノラート、プロパノラート等である。
【００３３】
式Ｉの化合物のいくつかはまた、互変異性形態で存在してもよい。例えば、アミド（−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−）基の互変異性形態は、イミノアルコール（−Ｃ（ＯＨ）＝Ｎ−）である。本明細書で表される構造式には明白に示されないが、互変異性形態は本発明の範囲内に含まれることを意図する。
【００３４】
基又は基の一部として本明細書で使用される「Ｃ１〜４アルキル」は、例えばメチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、１−ブチル、２−ブチル、２−メチル−１−プロピル、２−メチル−２−プロピル等の、１〜４個の炭素原子を有する飽和の直鎖又は分岐鎖炭化水素基を定義する。本発明の目的において、Ｃ１〜４アルキルの中でも、Ｃ３〜４アルキル、即ち、１−プロピル、２−プロピル、１−ブチル、２−ブチル、２−メチル−１−プロピル、２−メチル−２−プロピル等の、３個又は４個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖炭化水素基が興味深い。２−プロピル、２−ブチル、２−メチル−１−プロピル、２−メチル−２−プロピル等の分岐鎖Ｃ３〜４アルキルが特に興味深い可能性がある。
【００３５】
基又はその一部としての用語「Ｃ３〜６シクロアルキル」は、環式構造を形成する３〜６個の炭素原子を有する飽和環式炭化水素基を定義する。Ｃ３〜６シクロアルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが挙げられる。
【００３６】
基又は基の一部としての「Ｃ１〜４アルコキシ」は、式−Ｏ−Ｃ１〜４アルキルの基を意味し、ここでＣ１〜４アルキルは、上記に定義した通りである。Ｃ１〜４アルコキシの例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシが挙げられる。
【００３７】
用語「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードに一般的である。
【００３８】
本明細書で使用される用語「（＝Ｏ）」又は「オキソ」は、炭素原子に結合している場合、カルボニル部分を形成する。原子は、原子の結合価がそれを許可する場合にのみ、オキソ基で置換され得ることに留意するべきである。
【００３９】
基又はその一部として定義する目的にて本明細書で使用される「アリール」は、任意選択でＮ、Ｏ及びＳ、特にＮ及びＯから選択される１つ又は２つのヘテロ原子を含む芳香環構造を意味する。前記芳香環構造は、５個又は６個の環原子を有してもよい。
【００４０】
基の定義にて本明細書で使用される接頭辞「ヘテロ−」は、基がＮ、Ｏ及びＳ、特にＮ及びＯから選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含むことを意味する。例えば、用語「ヘテロアリール」は、Ｎ、Ｏ及びＳ、特にＮ及びＯから選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含む、用語「アリール」に関して定義された芳香環構造、例えばフラニル、オキサゾリル、ピリジニルを意味する。代替的に、用語「ヘテロＣ３〜６シクロアルキル」は、更にＮ、Ｏ及びＳ、特にＮ及びＯから選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含む、「Ｃ３〜６シクロアルキル」に関して定義された飽和環式炭化水素基、例えばテトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニルチアモル、ピペリジニルを意味する。
【００４１】
分子部分上の基（例えばフェニル上の置換基）の位置が特定されない場合、又は浮遊結合（ｆｌｏａｔｉｎｇ  ｂｏｎｄ）によって表される場合、それらの基は、得られる構造が化学的に安定である限り、それらの分子部分の任意の原子上に位置することができる。任意の可変物（ｖａｒｉａｂｌｅ）が分子内に２回以上存在する場合、各々の定義は独立している。
【００４２】
用語「式Ｉの化合物」、又は「本化合物」又は類似した用語が本明細書で使用される場合は常に、可能な立体異性体を含む式Ｉの化合物と、その薬学的に許容され得る塩及び溶媒和物とが含まれることを意味する。
【００４３】
一般的合成方法
スキーム１
【化１４】
2015503537.tif 000016
式Ｉの化合物の合成に使用する構築ブロックは、スキーム１に記載されている。α−アミノケトンＩＩａ（スキーム１、Ａ’＝ＮＨ２）、（ここでＸは、ハロゲン、特にブロモ又はヨードである）を、アミノ基アシル化のためのカップリング試薬、好ましくはＨＡＴＵの存在下、ＤＩＰＥＡ等の塩基の存在下、好適に保護された誘導体ＩＩＩ（式中、ＰＧ’は窒素上の保護基、好ましくはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである）とカップリングさせる。かように形成した中間体を、好ましくは０℃〜１５０℃の範囲の温度にて酢酸アンモニウムで処理して、一般式ＩＶのイミダゾール化合物に環化する。
【００４４】
代替的に、中間体イミダゾールＩＶは、α−ハロケトンＩＩｂ（式中、Ｘ及びＡ’は、各々独立してハロ原子を表し、Ｘは、好ましくはヨード又はブロモから選択され、Ａ’は、好ましくはクロロ、ブロモ又はヨードから選択される）を、好適な塩基、例えばＤＩＰＥＡの存在下、好適に保護された化合物ＩＩＩ（式中、ＰＧ’は、窒素上の保護基、好ましくはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである）とカップリングさせ、次いで、上述したようにイミダゾール中間体ＩＶに環化することにより得ることができる。この中間体ＩＶを、Ｐｄ触媒条件下、例えばＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２、ビス（ピナコラート）−ジボロン、及び塩基、例えば酢酸カリウムの存在下で、式Ｖのボロン酸エステルに転換してもよい。
【００４５】
他の構築ブロックをスキーム２（ａ、ｂ）に記載する。
【００４６】
スキーム２ａ
【化１５】
2015503537.tif 000017
式ＩＸ及びＩＸａの化合物の合成を、スキーム２ａに記載する。ＶＩ（Ｘ’は、ヨード又はブロモから選択されるハロゲン、好ましくはブロモである）及びＶＩＩから出発するアミド結合形成は、化合物ＶＩＩＩの形成をもたらす。この反応は、化合物ＶＩＩを酸ハロゲン化物、例えば酸フッ化物又は酸塩化物に変換した後、塩基の存在下、ＶＩと反応させることにより達成することができる。他の例は、カップリング試薬４−（４，６−ジメトキシ［１．３．５］トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド又はＢＦ４（ＤＭＴＭＭ）の使用による、ＶＩ及びＶＩＩからのＶＩＩＩの形成である。次いで、化合物ＶＩＩＩを塩基性、例えばエタノール中ＫＯＨ又はＮａ２ＣＯ３の条件下、一般式ＩＸの化合物に変換する。式Ｉの化合物ＩＸが脱保護され得る場合、（ＰＧがｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルと等しい場合、ジオキサン中ｆｅ  ＨＣｌ）形成されたアミンを典型的なアミド結合形成条件下、式Ｒ（ＣＯ）ＯＨの酸とカップリングしてもよい（ＨＡＴＵ及びＤＩＰＥＡ又はＥＤＣＩ／ＨＯＢｔ／ＤＩＰＥＡのような塩基で処理することによりｆｅ）。
【００４７】
同様に、式ＩＶの化合物を、スキーム２ｂに示すように式ＩＶａ及びＶａの化合物に転換してもよい。
【００４８】
スキーム２ｂ
【化１６】
2015503537.tif 000018
スキーム３
【化１７】
2015503537.tif 000019
スキーム２ａに記載した方法により得られた構築ブロックＩＸと、Ｖ（スキーム１、２ｂ）とを、Ｓｕｚｕｋｉ−Ｍｉｙａｕｒａ条件を用いて構造Ｘに変換してもよい（スキーム３）。
【００４９】
スキーム４
【化１８】
2015503537.tif 000020
４のＰＧ’及びＰＧが、それぞれＲ’（Ｃ＝Ｏ）−及びＲ（Ｃ＝Ｏ）−を表す場合、一般構造Ｘの化合物は、式Ｉの化合物の定義に該当する。その場合、スキーム３は、例えばＳｕｚｕｋｉカップリングにてＶａ及びＩＸａを使用することによる、式Ｉの化合物の合成を記載する。代替的に、Ｘはスキーム４に記載されるように保護され得る。ＰＧ又はＰＧ’がｔｅｒｔブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）を表す場合、例えば酸（例えばｉＰｒＯＨ中のＨＣｌ）で処理することにより。化合物ＸＩＩＩは、スキーム５に記載するように、酸Ｒ−（Ｃ＝Ｏ）ＯＨ及びビスアミンＸＩＩＩの間の伝統的なアミド形成により、式Ｉｂの化合物（式中、Ｒ及びＲ’は、同一である）に転換されてもよい。好ましい方法は、ＤＩＰＥＡのような塩基の存在下のＨＡＴＵ、又はＨＯＢｔ／ＥＤＣＩ／ＤＩＰＥＡの使用である。
【００５０】
スキーム５
【化１９】
2015503537.tif 000021
ＰＧ’がＰＧと異なる場合、スキーム４に記載したように、選択的脱保護により、Ｘから出発して化合物ＸＩＩ又はＸＩをもたらすことが可能である。例えばＰＧ’がｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）と等しく、かつＰＧがベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）と等しい場合、選択的脱保護は、ｉＰｒＯＨ中のＨＣｌのような酸性条件下、室温でＢｏｃ−保護基を除去することにより、又は触媒、例えばＰｄ（ＯＨ）２の存在下の水素のような還元条件下でＣＢｚ−保護基を除去することにより、行うことができる。
【００５１】
ＰＧ’がＲ’（Ｃ＝Ｏ）−を表し、又はＰＧがＲ（Ｃ＝Ｏ）−を表す場合、スキーム１〜３に記載したような化合物Ｘの合成は、それぞれ式ＸＩＶ（スキーム６）又はＸＸＩＶ（スキーム７）の化合物をもたらす。化合物ＸＩＶ及びＸＶＩは、典型的なアミド形成条件下で、それぞれ化合物ＸＩＩ及びＲ’（Ｃ＝Ｏ）ＯＨ又はＸＩ及びＲ（Ｃ＝Ｏ）ＯＨから得ることができる。次いで、これらの化合物を式Ｉの化合物に転換してもよい。ＸＩＶをＸＶに選択的に脱保護した後、ＸＶとＲ（Ｃ＝Ｏ）−ＯＨとの間でアミド結合を形成することにより、式Ｉの化合物がもたらされる。次いで、類似した反応の連続を適用して、ＸＩＶをＸＶＩＩに転換し、式Ｉの化合物に進行することができる。
【００５２】
スキーム６
【化２０】
2015503537.tif 000022
スキーム７
【化２１】
2015503537.tif 000023
更なる態様において、本発明は、治療的有効量の本明細書に特定した式Ｉの化合物と、薬学的に許容され得る担体とを含有する医薬組成物に関する。この文脈における治療的有効量は、感染した対象におけるＨＣＶ感染の安定化又は低減に十分な量、又は、ＨＣＶ感染の危険性を有する対象における予防に十分な量である。尚更なる態様では、本発明は、本明細書に特定した医薬組成物の調製プロセスに関し、当該プロセスは、薬学的に許容され得る担体を、治療的有効量の本明細書に特定した式Ｉの化合物と密に混合することを含む。
【００５３】
従って、本発明の化合物又はその任意のサブグループは、投与目的のために様々な医薬形態に処方され得る。適切な組成物としては、薬物の全身投与のために通常使用される全組成物が引用され得る。本発明の医薬組成物を調製するために、活性成分としての特定の化合物、任意選択で付加塩形態又は金属複合体の有効な量を、薬学的に許容され得る担体と混合して密な混合物とし、この担体は、投与に所望される製剤の形態に応じて、非常に様々な形態をとり得る。これらの医薬組成物は、特に経口、直腸内、経皮投与、又は非経口注射による投与に好適な単位剤形が望ましい。例えば、組成物を経口剤形に調製する際、縣濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤及び液剤等の経口液体製剤の場合、例えば、水、グリコール、油、アルコール等の任意の通常の医薬媒体を使用することができ；又は、散剤、丸剤、カプセル剤及び錠剤の場合、澱粉、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤、錠剤崩壊剤等の固体担体を使用することができる。投与の容易さにより、錠剤及びカプセル剤は最も有利な経口投与単位剤形となり、その場合、固体医薬担体が明らかに使用される。非経口組成物の場合、担体は、通常、少なくとも大部分が無菌水を含むが、例えば溶解性を補助する他の成分を含む場合があるであろう。例えば、担体が生理食塩水溶液、又はブドウ糖溶液、又は生理食塩水とブドウ糖溶液との混合物を含む注射用溶液が調製され得る。注射用縣濁液も調製され得、その場合、適切な液体担体、懸濁剤等が使用され得る。使用直前に液体剤形製剤に変換されることが意図される固体剤形製剤も含まれる。経皮投与に好適な組成物では、担体は任意選択で、浸透促進剤及び／又は好適な湿潤剤を含み、これらは任意選択で少ない割合の任意の性質の好適な添加剤と組み合わされ、これらの添加剤は、有意な有害効果を皮膚に導入しない。本発明の化合物は、当技術分野にて既知の任意の送達システムを使用して、溶液、縣濁液又は乾燥粉末の形態で、経口吸入又は通気を介して投与することもできる。
【００５４】
前述した医薬組成物を、投与の容易さ、投与量の均一性のために、単位剤形に処方することが特に有利である。本明細書で使用される単位剤形は、単位投与量として好適な物理的に別個の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共同して所望の治療効果を生じるよう計算された所定の量の活性成分を含む。そのような単位剤形の例は、錠剤（分割錠剤又は被覆錠剤を含む）、カプセル剤、丸剤、坐薬、粉末小包、オブラート剤（ｗａｆｅｒｓ）、注射用溶液又は縣濁液等、及び分離されたそれらの集まりである。
【００５５】
式Ｉの化合物は、ＨＣＶに対する活性を示し、ＨＣＶ感染又はＨＣＶに関連した疾病の処置及び予防にて使用することができる。後者には、硬変に繋がる進行性（ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ）肝線維症、炎症及びｎｅｃｒｏｓｉｓ、末期肝疾患、及びｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ癌腫が挙げられる。本発明の多数の化合物は、更に、ＨＣＶの変異型株に対して活性であることが既知である。加えて、本発明の化合物は、バイオアベイラビリティの観点から魅力的な特性を有し、容認可能な半減期、ＡＵＣ（曲線下面積）、ピーク及びトラフ値、並びに不十分に急速な開始又は組織滞留等の好ましくない現象を有さないことを含む、好ましい薬物動態プロファイルを示し得る。
【００５６】
ＨＣＶに対する式Ｉの化合物のインビトロでの抗ウィルス活性はＬｏｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８５：１１０−１１３に基づき、遺伝子型１ｂの場合、Ｋｒｉｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ７５：４６１４−４６２４及びＬｏｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ７７：３００７−３０１９、並びに遺伝子型１ａの場合、Ｙｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ７８：７９０４−７９１５（参照により本明細書に組み込まれる）により記載されている更なる変更を有する細胞ＨＣＶレプリコン系にて試験することができ、これは実験セクションにて更に例示される。このモデルは、完全なＨＣＶ感染モデルではないが、現在入手可能な自律的ＨＣＶ  ＲＮＡ複製の最も頑強かつ効率的なモデルとして広く容認されている。ＨＣＶレプリコンモデルにおいて、ＨＣＶ機能と特異的に相互作用する化合物を、細胞傷害性又は細胞分裂停止効果を付与する化合物と区別し、その結果、ＨＣＶＲＮＡの低下、又は関連したレポーター酵素濃度の低下をもたらすことが重要であることを理解するであろう。例えば、レサズリン等の蛍光発生酸化還元色素を使用したミトコンドリアの酵素の活性に基づく細胞傷害性の評価に関する分野におけるアッセイが既知である。更に、ホタルルシフェラーゼ等の、関連したレポーター遺伝子活性の非選択的阻害の評価のための細胞カウンタースクリーニングが存在する。適切な細胞タイプは、ルシフェラーゼレポーター遺伝子を用いた安定なトランスフェクションにより装備され得、当該遺伝子の発現は構成的に活性な遺伝子プロモーターに依存し、またそのような細胞は、非選択的阻害剤を排除するためのカウンタースクリーンとして使用することができる。
【００５７】
本明細書に特定した式Ｉの化合物又はそのサブグループは、それらの抗ＨＣＶ特性に起因して、ＨＣＶに感染した恒温動物、特にヒトの処置におけるＨＣＶ複製の阻害、及び、恒温動物、特にヒトにおけるＨＣＶ感染の予防に有用である。本発明は更に、ＨＣＶに感染した、又はＨＣＶによる感染の危険性を有する恒温動物、特にヒトの処置方法に関し、前記方法は、治療的又は予防的に有効な量の、本明細書にて以前定義した式Ｉの化合物の投与を含む。
【００５８】
従って、本明細書に特定した式Ｉの化合物は、医薬、特に抗ＨＣＶ医薬として使用されてもよい。前記医薬としての使用又は処置方法は、ＨＣＶ感染対象又はＨＣＶ感染に罹りやすい対象に、ＨＣＶ感染に関連した症状及び病状を軽減又は予防するのに有効な量を全身投与することを含む。
【００５９】
本発明はまた、ＨＣＶ感染の処置又は予防のための医薬の製造における本化合物の使用に関する。
【００６０】
一般に、有効な抗ウィルス一日量は、約０．０１〜約５０ｍｇ／ｋｇ、又は約０．０２〜約３０ｍｇ／ｋｇ体重であろうと想定される。必要な用量を２、３、４又はそれ以上のサブ用量として、一日において適切な間隔で投与することが適切であり得る。前記サブ用量は、例えば単位剤形当たり約１〜約５００ｍｇ、又は約１〜約３００ｍｇ、又は約１〜約１００ｍｇ、又は約２〜約５０ｍｇの活性成分を含む単位剤形として処方されてもよい。
【００６１】
組み合わせ療法
本発明はまた、式Ｉの化合物、その薬学的に許容され得る塩又は溶媒和物と、他の抗ウィルス化合物、特に他の抗ＨＣＶ化合物との組み合わせに関する。用語「組み合わせ」は、ＨＣＶ感染の処置における同時の、別個の、又は連続した使用のための組み合わせ製剤としての、（ａ）本明細書で以前定義した式Ｉの化合物と、（ｂ）他の抗ＨＣＶ阻害剤とを含む製品に関する。
【００６２】
本発明の組み合わせは、薬物として使用されてもよい。従って、本発明は、ＨＣＶウィルスに感染した哺乳動物におけるＨＣＶ活性を阻害するのに有用な薬物の製造のための、式（Ｉ）の化合物、又は、上記に定義したその任意のサブグループの使用に関し、ここで前記薬物は組み合わせ療法にて使用され、前記組み合わせ療法は、特に、式（Ｉ）の化合物と、少なくとも１つの他の抗ＨＣＶ薬、例えばＩＦＮ−α、ペグ化ＩＦＮ−α、リバビリン、アルブフェロン、タリバビリン、ニタゾキサニド  Ｄｅｂｉｏ０２５又はそれらの組み合わせとを含む。
【００６３】
本発明の化合物と組み合わせることができる他の薬剤には、例えば、ＨＣＶポリメラーゼのヌクレオシド及び非−ヌクレオシド阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、ヘリカーゼ阻害剤、ＮＳ４Ｂ阻害剤、及び内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）を機能的に阻害する他の薬剤、及びＨＣＶ細胞付着又はウィルス侵入、ＨＣＶＲＮＡ翻訳、ＨＣＶＲＮＡ転写、複製又はＨＣＶ成熟、会合又はウィルス放出を阻害する他の薬剤が挙げられる。これらのクラスにおける特定の化合物には、テラプレビル（ＶＸ−９５０）、ボセプレビル（ＳＣＨ−５０３０３４）、ナルラプレビル（ＳＣＨ−９００５１８）、ＩＴＭＮ−１９１（Ｒ−７２２７）、ＴＭＣ−４３５３５０（ＴＭＣ−４３５）、ＭＫ−７００９、ＢＩ−２０１３３５、ＢＩ−２０６１（シルプレビル）、ＢＭＳ−６５００３２、ＡＣＨ−１６２５、ＡＣＨ−１０９５、ＧＳ９２５６、ＶＸ−９８５、ＩＤＸ−３７５、ＶＸ−５００、ＶＸ−８１３、ＰＨＸ−１７６６、ＰＨＸ２０５４、ＩＤＸ−１３６、ＩＤＸ−３１６、ＡＢＴ−４５０、ＥＰ−０１３４２０（及び同類物）及びＶＢＹ−３７６等のＨＣＶプロテアーゼ阻害剤が挙げられ；本発明にて有用なヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤には、ＴＭＣ６４９１２８、Ｒ７１２８、ＰＳＩ−７８５１、ＰＳＩ７９７７、ＩＮＸ−１８９、ＩＤＸ−１８４、ＩＤＸ−１０２、Ｒ１４７９、ＵＮＸ−０８１８９、ＰＳＩ−６１３０、ＰＳＩ−９３８及びＰＳＩ−８７９、並びに、２’−Ｃ−メチル修飾ヌクレオシド、４’−アザ修飾ヌクレオシド、及び７’−デアザ修飾ヌクレオシドとして誘導されたものを含む様々な他のヌクレオシド及びヌクレオチド類似体及びＨＣＶ阻害剤が挙げられる。本発明にて有用な非−ヌクレオシドＨＣＶポリメラーゼ阻害剤には、ＨＣＶ−７９６、ＨＣＶ−３７１、ＶＣＨ−７５９、ＶＣＨ−９１６、ＶＣＨ−２２２、ＡＮＡ−５９８、ＭＫ−３２８１、ＡＢＴ−３３３、ＡＢＴ−０７２、ＰＦ−００８６８５５４、ＢＩ−２０７１２７、ＧＳ−９１９０、Ａ−８３７０９３、ＪＫＴ−１０９、ＧＬ−５９７２８、ＧＬ−６０６６７、ＡＢＴ−０７２、ＡＺＤ−２７９５及びＴＭＣ６４７０５５が挙げられる。
【００６４】
以下の実施例は、本発明を説明することを意味し、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【００６５】
実験部分：
ＬＣＭＳ方法
方法Ａ：一般的：、移動相Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）停止時間：２分；勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０．０１［９０／１０］〜０．９［２０／８０］〜１．５［２０／８０］〜１．５１［９０／１０］；流速：１．２ｍＬ／分；カラム温度：５０℃
方法Ａ１：Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣＭＳ  ２０１０、Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＸＲ−ＯＤＳ、３＊３０ｍｍ
方法Ａ２：Ｘｔｉｍａｔｅ  Ｃ１８  ２．１＊３０ｍｍ、３ｕｍ
方法Ａ３：ＳＨＩＭＡＤＺＵ  Ｓｈｉｍ  ｐａｃｋ  ２＊３０
【００６６】
方法Ｂ：Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００、ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−ＡＱ、５０×２．０ｍｍ  ５μｍ移動相Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．０５％ＴＦＡ停止時間：１０分；勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０［１００／０］〜１［１００／０］〜５［４０／６０］〜７．５［４０／６０］〜８［１００／０］；流速：０．８ｍＬ／分；カラム温度：５０℃
【００６７】
方法Ｃ：Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００、ＹＭＣ−ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−ＡＱ、５０×２．０ｍｍ  ５μｍ移動相Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）；停止時間：１０分；勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０［９０／１０］〜０．８［９０／１０］〜４．５［２０／８０］〜７．５［２０／８０］〜８［９０／１０］；流速：０．８ｍＬ／分；カラム温度：５０℃
【００６８】
方法Ｄ：Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣＭＳ  ２０１０、Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＸＲ−ＯＤＳ、３＊３０ｍｍ、移動相Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）停止時間：２分；勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０．０１［１００／０］〜０．９［７０／３０］〜１．５［７０／３０］〜１．５１［１００／０］；流速：１．２ｍＬ／分；カラム温度：５０℃
【００６９】
方法Ｅ：液体クロマトグラフィー：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２６９５、ＵＶ検出器：Ｗａｔｅｒｓ  ９９６  ＰＤＡ、範囲：２１０〜４００ｎｍ；質量検出器：Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ、イオン源：ＥＳ＋、ＥＳ−使用したカラム：ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８  ３．５μ  ４．６×１００ｍｍ移動相Ａ：１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＯＣＨ＋Ｈ２Ｏ中０．１％ＨＣＯＯＨ；移動相Ｂ：ＣＨ３ＯＨ；カラム温度：５０℃；流速：１．５ｍＬ／分。勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０［６５／３５］〜７［５／９５］〜９．６［５／９５］〜９．８［６５／３５］〜１２［６５／３５］。
【００７０】
方法Ｆ：Ｘｔｉｍａｔｅ  Ｃ１８  ２．１＊３０ｍｍ、３ｕｍ、移動相Ａ：Ｈ２Ｏ（１．５ｍＬ  ＴＦＡ／４Ｌ）；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．７５ｍＬ  ＴＦＡ／４Ｌ）停止時間：３分；勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０．０［９０／１０］〜１．３５［２０／８０］〜２．２５［２０／８０］〜２．２６［９０／１０］；３．０［９０／１０］流速：０．８ｍＬ／分；カラム温度：５０℃
【００７１】
方法Ｇ：一般的条件：移動相Ａ：Ｈ２Ｏ（１．５ｍＬ  ＴＦＡ／４Ｌ）；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．７５ｍＬ  ＴＦＡ／４Ｌ）停止時間：２分；勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０．０［１００／０］〜０．９［４０／６０］〜１．５［４０／６０］〜１．５１［１００／０］；２．０［１００／０］流速：１．２ｍＬ／分；カラム温度：５０℃。
方法Ｇ１：Ｘｔｉｍａｔｅ  Ｃ１８、２．１＊３０ｍｍ、３ｕｍ
【００７２】
方法Ｈ：一般的条件：移動相Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）停止時間：１０分；勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０．０［９０／１０］〜０．８［９０／１０］〜４．５［２０／８０］〜７．５［２０／８０］；９．５［９０／１０］流速：０．８ｍＬ／分；カラム温度：５０℃
方法Ｈ１：Ａｇｉｌｅｎｔ  ＴＣ−Ｃ１８、２．１＊５０ｍｍ、５ｕｍ
【００７３】
方法Ｉ：Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣＭＳ  ２０１０、Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＸＲ−ＯＤＳ、３＊３０ｍｍ、移動相Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）停止時間：７分；勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０．０１［９０／１０］〜６．０［２０／８０］〜６．５［２０／８０］〜６．５１［９０／１０］；流速：０．８ｍＬ／分；カラム温度：５０℃
【００７４】
方法Ｊ：Ａｇｉｌｅｎｔ  ＴＣ−Ｃ１８、５０×２．１ｍｍ、５μｍ、移動相Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）停止時間：１０分；後時間（Ｐｏｓｔ  Ｔｉｍｅ）：０．５分；勾配時間（分）［％Ａ／％Ｂ］０［１００／０］〜１［１００／０］〜５［４０／６０］〜７．５［１５／８５］〜９．５［１００／０］；流速：０．８ｍＬ／分；カラム温度：５０℃
【００７５】
中間体の合成：
【化２２】
2015503537.tif 000024
２−ブロモ−１−（６−ブロモナフタレン−２−イル）エタノン（５２６．５ｇ、１２０４．ｍｍｏｌ）をＣＨ３ＣＮ（６０００ｍＬ）に溶解した。Ｂｏｃ−Ｌ−プロリン（２８４ｇ、１３２５ｍｍｏｌ）を溶液に加え、反応混合物を室温で２０分間撹拌した。Ｅｔ３Ｎ（４８０ｍＬ、３６１２ｍｍｏｌ）を溶液に滴加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌した。溶媒を真空除去し、粗物質ＳＣ−１（７９４ｇ）を更に精製することなく次のステップに使用した。方法Ａ１；室温：１．６８分。ｍ／ｚ：４８４．１（Ｍ＋Ｎａ）＋正確な質量：４６１．１
【００７６】
【化２３】
2015503537.tif 000025
ＳＣ−１（７９４ｇ、１２０４ｍｍｏｌ）をトルエン（６０００ｍＬ）に溶解し、酢酸アンモニウム（１８５５ｇ、２４０９６ｍｍｏｌ）を溶液に加えた。混合物を１００℃で１２時間撹拌した。溶液を酢酸エチル（１０００ｍＬ）で希釈し、水（２×５００ｍＬ）で洗浄した。無機層を酢酸エチル（２×５００ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を真空濃縮した。残留物をＣＨ３ＣＮ（３００ｍＬ）中にて０℃で０．５時間粉砕して化合物ＳＣ−２（１４０ｇ、２６％  １−（６−ブロモナフタレン−２−イル）エタノンに基づく収率）をもたらした。方法Ａ；室温：１．２８分。ｍ／ｚ：４４２．１（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４４１．１
【００７７】
【化２４】
2015503537.tif 000026
化合物ＳＣ−２（７５ｇ、１７０ｍｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン／ＨＣｌ（７５０ｍＬ）を室温で加え、混合物を１時間撹拌した。この混合物を濾過して化合物ＳＣ−３（７３ｇ）を得た。
【００７８】
【化２５】
2015503537.tif 000027
（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（４７．２ｇ、２７０ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１２００ｍＬ）溶液に、ＨＯＢｔ（３６．４ｇ、２７０ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（５１．６ｇ、２７０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。混合物を室温で３０分間撹拌し、ＳＣ−３（７３ｇ）を加えた。次いで、溶液を０℃に冷却し、ジイソプロピルエチルアミン（７５ｇ、５７８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。この混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１５００ｍＬ）で希釈し、ＮａＯＨ水溶液（０．５Ｎ、１０００ｍＬ）で洗浄した。有機層をブラインで洗浄した。組み合わせた有機層を乾燥し、濃縮した。得られた粗生成物をＣＨ３ＣＮで洗浄して化合物ＳＣ−４（８０ｇ）をもたらした。
【００７９】
【化２６】
2015503537.tif 000028
Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１１．６ｇ、１５．８ｍｍｏｌ）を、化合物ＳＣ−２（１４０ｇ、３１６．５ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（１６０．７ｇ、６３３ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（６２ｇ、６３３ｍｍｏｌ）及びトルエン（４０００ｍＬ）の混合物に窒素下で加えた。反応混合物を８５℃で１５時間撹拌した。冷却後、ＣＨ２Ｃｌ２を加え、混合物をＮａ２ＣＯ３で洗浄した後、ブラインで洗浄した。水をＣＨ２Ｃｌ２（３×９００ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。残留物をヘキサン／ｉ−Ｐｒ２Ｏ（３／２、２×１５０ｍＬ）の混合溶媒中で再結晶化して、化合物ＳＣ−５（１０５ｇ、６３％収率）をもたらした。方法Ａ３；室温：１．３５分。ｍ／ｚ：４９０．１（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４８９．３
【００８０】
【化２７】
2015503537.tif 000029
ＳＣ−４（６９ｇ、１３８．２ｍｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（７０．２ｇ、２７６．４ｍｍｏｌ）及びＣＨ３ＣＯＯＫ（２７．１ｇ、２７６．４ｍｍｏｌ）をトルエン（１５００ｍＬ）に加えた後、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５ｇ、６．９ｍｍｏｌ）をＮ２下にて室温で加えた。反応混合物を８０℃で一晩撹拌した。冷却後、酢酸エチル（１０００ｍＬ）を加え、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１５００ｍＬ）及びブラインで洗浄した。水層を酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過後、真空濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物ＳＣ−６（５２ｇ、６８％収率）をもたらした。方法Ｃ；室温：４．０１分。ｍ／ｚ：５４７．３（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：５４６．３
【００８１】
ＳＦＣ：カラム：（ＡＳ）−Ｈ  １５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：３ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＥｔＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中５〜４０％Ｂ：室温：３．１１分
ＳＦＣ：カラム：ＯＤ−Ｈ  ５０ｍｍ×４．６ｍｍ；３ｕｍ。流速：４ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＥｔＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中５〜４０％Ｂ：室温：１．３４分
【００８２】
【化２８】
2015503537.tif 000030
１−（６−ブロモナフタレン−２−イル）−２−クロロエタノン（５．５３ｇ、１８．７９ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１５ｍＬ）に溶解し、ＰＲ−１（４．２７ｇ、１８．７９ｍｍｏｌ）及びＮＥｔ３（６．６５ｇ、６５．７６ｍｍｏｌ）を２５℃で加え、混合物を５時間撹拌した。揮発性物質を真空除去して残留物をもたらし、これをそのままで使用した。得られた残留物（１０ｇ、１８．７９ｍｍｏｌ）の溶液を乾燥トルエン（５０ｍＬ）に溶解し、２０℃で撹拌した。ＮＨ４ＯＡｃ（２９ｇ、３７５．８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１００℃で２時間撹拌した。溶液を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（４０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過後、揮発性物質を真空除去した。得られた残留物をシリカゲル（ｓｉｌｉｃ  ｇｅｌ）カラムクロマトグラフィー（勾配溶離液：石油エーテル／酢酸エチル  １００／１〜１／１００）により精製した。純粋な画分を収集し、溶媒を真空除去して化合物ＳＣ−７（６．５ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：０．９４分。ｍ／ｚ：４５６．０（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４５５．１
【００８３】
【化２９】
2015503537.tif 000031
化合物ＳＣ−７（６．５ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解し、２０℃で撹拌した。４Ｎ  ＨＣｌ／ジオキサン（３０ｍＬ）を０℃で滴加した。次いで、混合物を２５℃で１時間撹拌し、その後、揮発性物質を真空除去して残留物（８ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：０．８４分。ｍ／ｚ：３５３．９（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：３５３．１
【００８４】
この残留物を、更に精製することなく次のステップに使用した。得られた残留物（８ｇ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（５．５ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（６．０ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（４ｍＬ、３１．５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）中の混合物を０℃で撹拌し、ＤＩＰＥＡ（１８．４８ｇ、１４３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１２時間撹拌した。この混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。揮発性物質を真空除去し、得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル  １００／１〜１／１００）により精製した。純粋な画分を収集し、溶媒を真空除去して化合物ＳＣ−８（４．６ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．００分。ｍ／ｚ：５１２．９（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：５１２．１
【００８５】
【化３０】
2015503537.tif 000032
化合物ＳＣ−８（４．６ｇ、８．９９ｍｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（４．５７ｇ、１７．９９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．６６ｇ、０．９ｍｍｏｌ）及びＫＯＡｃ（１．７６ｇ、１７．９９ｍｍｏｌ）のジオキサン（５０ｍＬ）中の混合物を、Ｎ２雰囲気（ａｔｍｏｓｐｈｅｒ）下にて１００℃で２時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶離液：石油エーテル／酢酸エチル  １００／１〜１／１００）により精製した。生成物を含む画分を収集し、溶媒を真空除去して化合物ＳＣ−９（４．８ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：０．９８分。ｍ／ｚ：５５９．３（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：５５８．３
【００８６】
【化３１】
2015503537.tif 000033
化合物ＰＲ−２（３０ｇ、１２３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２０ｍＬ）溶液に、エタン−１，２−ジオール（５３．６ｇ、８６４ｍｍｏｌ）、トリエトキシメタン（５４．６ｇ、３６９ｍｍｏｌ）及びＴｓＯＨ（３ｇ、３．６９ｍｍｏｌ）を２５℃で加えた。混合物を５時間還流撹拌した。この混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液（４００ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。有機相を真空濃縮した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝１０：１）により精製して、化合物ＰＲ−３（８．４ｇ）をもたらした。
【００８７】
【化３２】
2015503537.tif 000034
撹拌している化合物ＰＲ−３（８．４ｇ、２９．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ、１：１）溶液に、ＮａＯＨ（５．８５ｇ、１４６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２０℃で１時間撹拌し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で処理した。無機層を分離し、２Ｎ  ＨＣｌを用いてｐＨ＝４に調整し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮して化合物ＰＲ−４（５．９ｇ）をもたらした。
【００８８】
【化３３】
2015503537.tif 000035
撹拌している化合物ＰＲ−４（５．９ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（１０．６ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２０℃で０．５時間撹拌した。次いで、１−（６−ブロモナフタレン−２−イル）−２−クロロエタノン（９．２ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）及びＮａＩ（４．８６ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）を混合物に加え、撹拌を２０℃で２時間継続した。混合物を水（９０ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝５：１）により精製して、残留物（５．９ｇ）をもたらした。
【００８９】
上述したように得られた、得られた残留物（８．４ｇ、１６．２ｍｍｏｌ）のオートクレーブ内で撹拌しているキシレン（８０ｍＬ）溶液に、ＮＨ４ＯＡｃ（２６．２ｇ、３２．３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１６０℃で１時間撹拌した。混合物を冷却し、水（９０ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で抽出し；組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝２：１）により精製して、化合物ＳＣ−１０（５．２ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．０７分。ｍ／ｚ：５００．０（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４９９．１
【００９０】
【化３４】
2015503537.tif 000036
撹拌している化合物ＳＣ−１０（５．２ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）及びルチジン（２．２ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）の０℃の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＯＴｆ（９．２ｇ、４０．６ｍｍｏｌ）を滴加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し；組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮して化合物ＳＣ−１１（３．０ｇ）を灰白色固体としてもたらした。方法Ａ２；室温：０．９８分。ｍ／ｚ：４０１．９（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４０１．１
【００９１】
【化３５】
2015503537.tif 000037
撹拌している化合物ＳＣ−１１（３．０ｇ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（１．５７ｇ、９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１．７３ｇ、９ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（０．１２ｇ、０．９ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液に、ＮＥｔ３（１５．２ｇ、１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２０℃で２時間撹拌し、飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍＬ）で抽出し；組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝１：１）により精製して、白色固体残留物（２．２ｇ）をもたらした。撹拌しているこの残留物（２．２ｇ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．２ｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）の乾燥ジオキサン（２５ｍＬ）溶液に、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５ｇ、５．９３ｍｍｏｌ）及びＫＯＡｃ（０．７７ｇ、７．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２０分間還流撹拌し、水でクエンチし、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝１：１）により精製して、化合物ＳＣ−１２（１．９ｇ）を固体としてもたらした。方法Ａ２；室温：０．９７分。ｍ／ｚ：６０５．１（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：６０４．３
【００９２】
【化３６】
2015503537.tif 000038
化合物ＰＲ−５（１５．７ｇ、６３．１ｍｍｏｌ）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍＬ）に溶解し、この溶液にＤＭＦ（１．５ｍＬ）を加えた。塩化オキサリル（１３．５ｍＬ、１５７．５ｍｍｏｌ）を室温で滴加した。反応混合物を室温で０．５時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、残留物（ＰＲ−６、２２ｇ）を、更に精製することなく直接使用した。
【００９３】
【化３７】
2015503537.tif 000039
化合物ＰＲ−６（粗物質２２ｇ）の乾燥ＴＨＦ（２５０ｍＬ）溶液に、２−アミノ−４−ブロモベンズアミド（７．６ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）及び１Ｎ  ＮａＯＨ（水溶液８５ｍＬ、８５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を水中１Ｎ  ＮａＯＨ水（１５ｍＬ）、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮して粗残留物（１７ｇ）をもたらした。エタノール（２５０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２５０ｍＬ）中の、上述したものと同様に得た粗残留物（２５ｇ）、及びＮａ２ＣＯ３（１７．８ｇ、１６８ｍｍｏｌ）を２時間還流した。有機溶媒を真空除去した。混合物をジクロロメタン（２×２００ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル）により精製した。所望の画分を乾燥する迄蒸発させた。得られた残留物を酢酸エチル（５０ｍＬ）中で撹拌し、沈殿物を濾去し、酢酸エチルで洗浄して化合物ＱＡ−１（１７ｇ）をもたらした。
【００９４】
【化３８】
2015503537.tif 000040
化合物ＱＡ−１（８ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）をＨＯＡｃ（８０ｍＬ）に溶解し、４０％ＨＢｒ（４０ｍＬ）を加えた。混合物を８０℃で一晩撹拌した。殆どの溶媒を真空除去した。沈殿物を濾去し、メチルｔ−ブチルエーテルで洗浄した。固体をトルエン（２×２０ｍＬ）と共蒸発させて、粗残留物（６．５ｇ）をもたらした。次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（１２０ｍＬ）中のこの残留物の一部（６．４ｇ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（４．５ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（４．９ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（１．１５ｇ、８．５ｍｍｏｌ）を０℃に冷却した。ＤＩＰＥＡ（１４．８ｍＬ、８５．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１．５時間撹拌した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した。残留物をシリカゲルカラム（ｃｏｌｏｍｎ）クロマトグラフィー（勾配溶離液：石油エーテル：酢酸エチル：１００：０〜０：１００）により精製して、化合物ＱＡ−２（３．３ｇ）をもたらした。
【００９５】
【化３９】
2015503537.tif 000041
ＴＨＦ（７０ｍＬ）中の化合物ＰＲ−７（７．０ｇ、２３．２１ｍｍｏｌ）を０℃で撹拌した。二塩化オキサリル（７ｍＬ、４６．２ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（２滴）を滴加し、混合物を０℃で１０分間撹拌した。この混合物を１時間還流撹拌した。この混合物を冷却し、真空蒸発させて化合物ＰＲ−８（７ｇ）をもたらした。
【００９６】
【化４０】
2015503537.tif 000042
化合物ＰＲ−８（７ｇ、２１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７０ｍＬ）溶液に、２−アミノ−４−ブロモベンズアミド（４．５ｇ、２１ｍｍｏｌ）及び１Ｎ  ＮａＯＨ（４２ｍＬ、４２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。この混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を収集し、０．５Ｎ  ＮａＯＨ、ブラインで洗浄し、乾燥し、真空濃縮して粗残留物（９ｇ）をもたらした。Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）及びＴＨＦ（２００ｍＬ）中のこの残留物（９ｇ）及びＮａ２ＣＯ３（５．７ｇ、５４ｍｍｏｌ）を２時間還流撹拌した。混合物を真空濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×）で抽出し、ブラインで洗浄し、乾燥し、真空蒸発させた。残留物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ（３×）、ブラインで洗浄し、乾燥し、真空蒸発させてＱＡ−３（４．４ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．２７分。ｍ／ｚ＝：４８４．０（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４８３．１
【００９７】
【化４１】
2015503537.tif 000043
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の化合物ＰＲ−２（１０ｇ、４１．２ｍｍｏｌ）に、１、３−プロパンジオール（２２ｇ、２８８−ｍｍｏｌ）、オルトギ酸トリエチル（１８．３ｇ、１２３．６ｍｍｏｌ）及びトルエン−４−スルホン酸（１ｇ、０．２ｍｍｏｌ）を２５℃で加えた。混合物を２時間還流撹拌した。混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液（４００ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し、分離した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。有機相を真空濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝５：１）により精製し、得られた化合物（３．８ｇ）をＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（４０ｍＬ、１：１）に溶解した。ＮａＯＨ（２．５２ｇ、６３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で処理した。組み合わせた無機層を分離し、２Ｎ  ＨＣｌを用いてｐＨ＝４に調製し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮して化合物ＰＲ−９（５．９ｇ）をもたらした。
【００９８】
【化４２】
2015503537.tif 000044
二塩化オキサリル（２．５ｍＬ、１３．１１ｍｍｏｌ）を化合物ＰＲ−９（２．５ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）、２−アミノ−４−ブロモベンズアミド（２．５ｇ、１０．４９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）及びピリジン（２０ｍＬ）中の混合物に、室温で滴加した。混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空除去した。残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エーテル＝１：１）により精製した。得られた中間体アミド化合物（０．９８ｇ）、Ｎａ２ＣＯ３（１．０８ｇ．１０．１５ｍｍｏｌ）、Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）及びＣＨ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）を還流下で２時間撹拌した。殆どのＣＨ３ＣＨ２ＯＨを真空除去し、得られた残留物を酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をｔ−ブチルメチルエーテルで洗浄して、化合物ＱＡ−４（０．８９ｇ）をもたらした。
【００９９】
【化４３】
2015503537.tif 000045
撹拌している化合物ＱＡ−４（０．８９ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）及びルチジン（０．４１ｇ、３．８４ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液に、０℃でＴＭＳＯＴｆ（１．７ｇ、７．６８ｍｍｏｌ）を滴加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出し；組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。得られた残留物をそのままで次の反応に使用した（０．３ｇ）。方法Ａ２；室温：０．６８分。ｍ／ｚ＝：３６８．０（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：３６７．０。ＮＥｔ３（０．５ｍＬ、２．４６ｍｍｏｌ）を、得られた上記の残留物（０．３ｇ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（０．２２ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．１７ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（０．２４ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）溶液に氷水浴内で加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝１：１）により精製して、化合物ＱＡ−５（０．２ｇ）をもたらした。
方法Ａ２；室温：１．１４分。ｍ／ｚ＝：５４７．１（Ｍ＋Ｎａ）＋正確な質量：５２４．１
【０１００】
【化４４】
2015503537.tif 000046
塩化オキサリル（２．９ｍＬ、３３ｍｍｏｌ）を化合物ＰＲ−１（５ｇ、２２ｍｍｏｌ）、２−アミノ−４−ブロモベンズアミド（４．７ｇ、２２ｍｍｏｌ）及びピリジン（５０ｍＬ）の混合物に滴加した。この混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空除去した。得られた残留物をクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エーテル＝５：１）により精製して、中間体（３．６ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．１５分。ｍ／ｚ＝：４４７．７（Ｍ＋Ｎａ）＋正確な質量：４２５．１。得られた上記の中間体（３．６ｇ）、Ｎａ２ＣＯ３（２．７ｇ．２５．４ｍｍｏｌ）、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）及びＣＨ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）を還流下で２時間撹拌した。殆どのＣＨ３ＣＨ２ＯＨを真空除去した。残留物を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をｔ−ブチルメチルエーテルで洗浄して、化合物ＱＡ−６（３．４ｇ）をもたらした。
【０１０１】
【化４５】
2015503537.tif 000047
化合物ＱＡ−６（３．４ｇ、８．４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ）を混合物に０℃で滴加した。反応混合物を室温で５時間撹拌した。溶媒を真空除去した。残留物をｔ−ブチルメチルエーテルで洗浄し、得られた粗残留物をそのままで使用した（２．７ｇ）。氷水浴内で冷却したこの粗物質（２．７ｇ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（２．７５ｇ、１５．７６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２．４２ｇ、１７．３３ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（３．３２ｇ、１７．３３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（１４ｍＬ、７８．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１２時間撹拌した。混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝１：１）により精製して、化合物ＱＡ−７（２．５ｇ）をもたらした。ＳＦＣ：カラム：ＡＤ−Ｈ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．３５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＥｔＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中５〜４０％Ｂ：室温：９．９９分
【０１０２】
【化４６】
2015503537.tif 000048
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中の化合物ＰＲ−１０（２．０ｇ、７．３ｍｍｏｌ）を０℃で撹拌した。二塩化オキサリル（２．３ｇ、１８．２ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（２滴）を滴加し、混合物を０℃で１０分間撹拌した。この混合物を２０℃で１時間撹拌した。混合物を冷却し、真空蒸発させた。残留物をトルエン（２×１０ｍＬ）で２回希釈し、蒸発させて残留物（ＰＲ−１１、２．５ｇ）をもたらした。
【０１０３】
【化４７】
2015503537.tif 000049
化合物ＰＲ−１１（２．５ｇ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、２−アミノ−４−ブロモベンズアミドｅ（１．５７ｇ、７．３ｍｍｏｌ）及び１Ｎ  ＮａＯＨ（１４．６ｍＬ、１４．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。この混合物を酢酸エチル（２×）で抽出した。有機層を組み合わせ、０．５Ｎ  ＮａＯＨ、ブラインで洗浄し、乾燥し、真空濃縮して残留物（３．５ｇ）をもたらし、これをＨ２Ｏ（５０ｍＬ）及びＴＨＦ（５０ｍＬ）中でＮａ２ＣＯ３（２．３２ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）と共に撹拌し、２時間還流した。揮発性物質を真空除去した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２×）で抽出し、ブラインで洗浄し、乾燥し、揮発性物質を真空除去した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ（３×）、ブラインで洗浄し、乾燥し、揮発性物質を真空除去して、化合物ＱＡ−８（１．５ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．１５分。ｍ／ｚ＝：４５３．９（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４５３．１
【０１０４】
【化４８】
2015503537.tif 000050
ＣｌＣＯＣＯＣｌ（４４．４ｍＬ、５１０．２ｍｍｏｌ）をＰＲ−１２（１００．６ｇ、３７４ｍｍｏｌ）、２−アミノ−４−ブロモベンズアミド（７３．２ｇ、３４０ｍｍｏｌ）及びピリジン（７６０ｍＬ）の混合物に、窒素下にて０℃で滴加した。この混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を真空除去した。残留物を飽和ＮａＨＣＯ３に加え、得られた混合物を酢酸エチルで３回抽出した。組み合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した。得られた残留物をクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝５０：１）により精製して、中間体アミド化合物（５０．６ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．１５分。ｍ／ｚ＝：４９０．１（Ｍ＋Ｎａ）＋正確な質量：４６７．１。得られた上記の中間体（５０．６１ｇ）、Ｎａ２ＣＯ３（３４．５１ｇ。３２５．６ｍｍｏｌ）、Ｈ２Ｏ（３００ｍＬ）及びＣＨ３ＣＨ２ＯＨ（３００ｍＬ）の溶液を３時間還流撹拌した。ＥｔＯＨを真空除去し、混合物を酢酸エチルで抽出した（３×３００ｍＬ）。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。得られた残留物をｔ−ブチルメチルエーテルで洗浄して化合物ＱＡ−９（３９．２ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．３７分。ｍ／ｚ＝：４４８．１（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４４７．１
【０１０５】
【化４９】
2015503537.tif 000051
ＱＡ−９（３９．２ｇ、８７．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４００ｍＬ）に溶解した。ＨＣｌ／ジオキサン（４７０ｍＬ）をこの混合物に０℃で滴加した。反応混合物を室温で３．５時間撹拌した。溶媒を注意深く真空除去した。得られた残留物をｔ−ブチルメチルエーテルで洗浄して残留物（３０．８ｇ）をもたらした。
方法Ａ２；室温：０．９２分。ｍ／ｚ＝：３４８．１（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：３４７．１
【０１０６】
ＤＩＰＥＡ（５４．２ｍＬ、３０８ｍｍｏｌ）を０℃で上記の残留物（３０．８４ｇ、６１．６ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（１１．９ｇ、６７．８ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（３５．０ｇ、９２．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２６５ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で加えた。次に、反応混合物を窒素下にて室温で３時間撹拌した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した。残留物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）により精製して化合物ＱＡ−１０（３１．１ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．２８分。ｍ／ｚ＝：５０７．２（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：５０６．１
【０１０７】
【化５０】
2015503537.tif 000052
１−（６−ブロモナフタレン−２−イル）−２−クロロエタノン（１５ｇ、５５．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）中の混合物に、化合物ＰＲ−１２（６７ｇ、３１０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７．８ｇ、６０．８ｍｍｏｌ）及びＮａＩ（９．１ｇ、６０．８ｍｍｏｌ）を２５〜３５℃で加えた。次に、反応混合物を４０〜４５℃に加熱し、この温度で１〜２時間撹拌した。酢酸エチル（１００ｍＬ）を加え、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、乾燥した後、真空濃縮して残留物をもたらした。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、（２Ｓ，３ａＳ，７ａＳ）−２−（２−（６−ブロモナフタレン−２−イル）−２−オキソエチル）１−ｔｅｒｔ−ブチルヘキサヒドロ−１Ｈ−インドール−１，２（２Ｈ，３Ｈ）−ジカルボキシレート（２８ｇ）を油としてもたらした。トルエン（３００ｍＬ）中のこの中間体（２８ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）にＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（４５．９ｇ、５９６．２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を７５〜８５℃に加熱した。この反応混合物を７５〜８５℃で１２時間撹拌した。溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄した。有機層を真空濃縮して、化合物ＳＣ−１３（１６ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．１４分。ｍ／ｚ＝：４９６．２（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４９５．２
【０１０８】
【化５１】
2015503537.tif 000053
化合物ＳＣ−１３（１６ｇ、３２．３ｍｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン／ＨＣｌを室温で加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。この混合物を真空濃縮した。得られた残留物にＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）を加え、混合物を飽和Ｎａ２ＣＯ３で洗浄した。有機層を分離し、真空濃縮して、脱保護した中間体（１４ｇ）をもたらした。
【０１０９】
（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（７．９ｇ、４５．３ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１００ｍＬ）溶液に、ＨＯＢｔ（６．１ｇ、４５．３ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（８．６ｇ、４５．３ｍｍｏｌ）を室温で加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した後、上記で得られた脱保護中間体（１４ｇ）を加えた。次に、溶液を０℃に冷却し、ＤＩＰＥＡ（１２．５ｇ、９７．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。この混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）で希釈し、Ｎａ２ＣＯ３水溶液（０．５Ｎ、１００ｍＬ）及びブラインで洗浄した。有機層を乾燥し、濃縮して、ＳＣ−１４（１４ｇ）をもたらした。
【０１１０】
【化５２】
2015503537.tif 000054
化合物ＳＣ−１４（１４ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１２．９ｇ、２７６ｍｍｏｌ）及びＣＨ３ＣＯＯＫ（４．９６ｇ、５０．６ｍｍｏｌ）をトルエン（１００ｍＬ）中で撹拌した。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２をＮ２雰囲気下にて室温で加えた。反応混合物を８０℃で一晩撹拌した。冷却後、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）及びブラインで洗浄した。水層を酢酸エチルで抽出した。組み合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物ＳＣ−１５（１５ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．１７分。ｍ／ｚ＝：６０１．４（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：６００．４
【０１１１】
【化５３】
2015503537.tif 000055
塩化オキサリル（２．５ｍＬ、１３．１１ｍｍｏｌ）を、化合物ＰＲ−４（３．３ｇ、１２ｍｍｏｌ）、２−アミノ−４−ブロモベンズアミド（３．１ｇ、１４．５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）及びピリジン（３０ｍＬ）中の混合物に滴加した。混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空除去し、得られた残留物をクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エーテル＝１：１）により精製して、中間体アミド（０．７ｇ）をもたらした。この中間体アミド（０．７ｇ、）Ｎａ２ＣＯ３（０．８２ｇ、７．５ｍｍｏｌ）、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）及びＣＨ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）を２時間還流撹拌した。冷却後、ＣＨ３ＣＨ２ＯＨの大部分を真空除去した。残留物を酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をｔ−ブチルメチルエーテルで洗浄して、化合物ＱＡ−１１（０．５５ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．０４分。ｍ／ｚ＝：４５４．０（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４５３．１
【０１１２】
【化５４】
2015503537.tif 000056
撹拌している化合物ＱＡ−１１（０．５５ｇ、１．２ｍｍｏｌ）及び２，６−ルチジン（０．２５ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の０℃の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＯＴｆ（１．１ｇ、４．８ｍｍｏｌ）を滴加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮して残留物（０．５６ｇ）をもたらした。ＮＥｔ３（０．２４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を上記で得られた残留物（０．５６ｇ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（０．２９ｇ、１．４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．１ｇ）及びＥＤＣＩ（０．２７ｇ、１．４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液に氷水浴内で加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、Ｓａｔ．ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄し、最後にＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝１：１）により精製して、化合物ＱＡ−１２（０．３ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．１１分。ｍ／ｚ＝：５１１．１（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：５１０．１
【０１１３】
【化５５】
2015503537.tif 000057
撹拌しているＰＲ−１３（４．３２ｇ、１７．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６０ｍＬ）溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（８．１２ｇ、２６．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２０℃で０．５時間撹拌した。次いで、１−（６−ブロモナフタレン−２−イル）−２−クロロエタノン（７．２ｇ、２６．８５ｍｍｏｌ）及びＮａＩ（３．７５ｇ、２６．８５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を更に２０℃で２時間撹拌した。混合物を水（９０ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝５：１）により精製して、（Ｓ）−６−（２−（６−ブロモナフタレン−２−イル）−２−オキソエチル）５−ｔｅｒｔ−ブチル５−アザスピロ［２．４］ヘプタン−５，６−ジカルボキシレート（６．５ｇ）を得た。撹拌しているこの化合物（６．５ｇ）のトルエン（６０ｍＬ）溶液に、ＮＨ４ＯＡｃ（２１．６ｇ、２６７ｍｍｏｌ）を加えた後、反応混合物を８０℃で１２時間撹拌した。混合物を水（５０ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で抽出し；組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）により精製して、化合物ＳＣ−１６（３．２ｇ）をもたらした。方法Ａ２；室温：１．０８分。ｍ／ｚ＝：４７０．２（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：４６９．１
【０１１４】
【化５６】
2015503537.tif 000058
ＨＣｌ／ジオキサン中の化合物ＳＣ−１６（３．２ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）を１時間撹拌した。混合物を乾燥するまで真空濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮して残留物（２．８ｇ）をもたらした。乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中のこの残留物（２．８ｇ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（１．６３ｇ、９．１６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１．７５ｇ、９．１６ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（１．２４ｇ、９．１６ｍｍｏｌ）に、ＮＥｔ３（１．５４ｇ、１５．２６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２０℃で２時間撹拌し、飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エーテル＝１：１）により精製して、化合物ＳＣ−１７（３．２ｇ）を得た。方法Ａ２；室温：１．０３分。ｍ／ｚ＝：５２７．２（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：５２６．１
【０１１５】
【化５７】
2015503537.tif 000059
撹拌しているＳＣ−１７（３．２ｇ、６．１ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．４ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）の乾燥ジオキサン（３０ｍＬ）溶液に、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．９２ｇ、７．３２ｍｍｏｌ）及びＫＯＡｃ（１．２ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２０分間還流撹拌し、水でクエンチし、酢酸エチル（３×３０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により精製して、化合物ＳＣ−１８（２．７ｇ）をもたらした。
【０１１６】
【化５８】
2015503537.tif 000060
化合物ＱＡ−５（０．２ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、化合物ＳＣ−９（０．１９ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．１５ｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（５ｍＬ、２Ｎ）及びＴＨＦ（１０ｍＬ）の混合物を、Ｎ２下にて８０℃で０．５時間撹拌した。揮発性物質を真空除去した。ジクロロメタン（２０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去し、得られた粗物質を高速液体クロマトグラフィー（カラム：Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ  Ｃ１８  １５０＊２０ｍｍ＊５ｕｍ。方法：Ａ中２０〜４０％Ｂ、１４分間で。Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ  Ｂ：ＭｅＣＮ。流速（ｍＬ／分）：４０）により精製した。純粋な画分を収集し、飽和ＮａＨＣＯ３により中和した。有機溶媒を真空除去した。無機層を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を真空濃縮して化合物１（６０ｍｇ）を灰白色粉末としてもたらした。方法Ｊ；室温：４．６６分。ｍ／ｚ：８７５．５（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８７４．４；ＳＦＣ：カラム：ＡＳ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：４．３２分
【０１１７】
【化５９】
2015503537.tif 000061
撹拌している化合物ＳＣ−１２（３０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）、化合物ＱＡ−１２（３０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（０．５ｍＬ、２Ｎ）を加えた。反応混合物を２０分間還流撹拌し、水（２０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×５ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物を高速液体クロマトグラフィー（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｃ１８  １５０＊３０ｍｍ＊４ｕｍ。方法：Ａ中３０〜５０％Ｂ、１２分間で。Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ  Ｂ：ＭｅＣＮ。流速（ｍＬ／分）：２５）により精製した。純粋な画分を収集し、飽和ＮａＨＣＯ３で中和した。有機溶媒を真空濃縮した。沈殿物を濾過し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥して化合物２（２０ｍｇ）をもたらした。方法Ｊ；室温：４．６２分。ｍ／ｚ：９０７．７（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：９０６．４；ＳＦＣ：カラム：ＯＪ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．３５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中５％〜４０％Ｂ：室温：９．８８分；ＳＦＣ：カラム：ＯＤ−Ｈ  １５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．３５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：８．３４分
【０１１８】
【化６０】
2015503537.tif 000062
撹拌している化合物ＱＡ−７（１６０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、ＳＣ−９（２２３ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（２ｍＬ、２Ｎ）を加えた。反応混合物を２０分間還流撹拌し、水（２０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×５ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物を高速液体クロマトグラフィー（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｃ１８  １５０＊３０ｍｍ＊４ｕｍ、流速（ｍＬ／分）：４０移動相：Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ  Ｂ：ＭｅＣＮ、勾配：２５〜５５％）により精製した。純粋な画分を収集し、飽和ＮａＨＣＯ３により中和した。有機溶媒を真空濃縮した。沈殿物を濾過し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥して、化合物３（７２ｍｇ）生成物を黄色固体としてもたらした。方法Ｈ；室温：３．３９分。ｍ／ｚ：８１５．６（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８１４．４；ＳＦＣ：カラム：ＡＳ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．３５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＥｔＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：３．４０分；ＳＦＣ：カラム：ＯＤ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．３５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＥｔＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：８．１６分
【０１１９】
【化６１】
2015503537.tif 000063
化合物ＱＡ−７（０．１８４ｇ、０．４ｍｍｏｌ）、化合物ＳＣ−１２（０．２ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．０１ｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（５ｍＬ  ２Ｎ）及びＴＨＦ（１０ｍＬ）の混合物を、Ｎ２下にて８０℃で０．５時間撹拌した。揮発性物質を真空除去した。ジクロロメタン（２０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去し、得られた残留物を高速液体クロマトグラフィー（カラム：Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ  Ｃ１８  １５０＊２０ｍｍ＊５ｕｍ。方法：Ａ中２０〜４０％  Ｂ  １４分間で。Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％  ＴＦＡ  Ｂ：ＭｅＣＮ。流速（ｍＬ／分）：４０）により精製した。純粋な画分を収集し、飽和ＮａＨＣＯ３により中和した。有機溶媒を真空除去した。無機層を酢酸エーテル（３×１０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を真空濃縮して、化合物４（７２ｍｇ）を灰白色粉末としてもたらした。方法Ｊ；室温：４．６６分。ｍ／ｚ：８６１．７（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８６０．４；ＳＦＣ：カラム：ＯＪ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．３５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ｉＰｒＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：３．６８分
【０１２０】
【化６２】
2015503537.tif 000064
撹拌している化合物ＳＣ−１２（２５０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、化合物ＱＡ−２（２２３ｍｇ、０．４９６ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２０ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（１０ｍＬ、２Ｎ）を加えた。反応混合物を２０分間還流撹拌し、水（２０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物を高速液体クロマトグラフィー（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｃ１８  ２００＊３０ｍｍ＊４ｕｍ。方法：Ａ中３１〜５１％Ｂ、１２分間で。Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ  Ｂ：ＭｅＣＮ。流速（ｍＬ／分）：４０）により精製した。純粋な画分を収集し、飽和ＮａＨＣＯ３で中和した。有機溶媒を真空濃縮した。沈殿物を濾過し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥して化合物５（１１５ｍｇ）を固体としてもたらした。方法Ｊ；室温：４．６５分。ｍ／ｚ：８４９．５（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８４８．４；ＳＦＣ：カラム：ＯＪ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：１０．１分
【０１２１】
【化６３】
2015503537.tif 000065
化合物ＳＣ−９（１．０ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）、化合物ＱＡ−３（０．８７ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．２１ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＣＯ３（１．５２ｇ、１４．３２ｍｍｏｌ）のトルエン／エタノール／Ｈ２Ｏ＝１：１：１（３０ｍＬ）中の混合物を、Ｎ２下にて１００℃で２時間撹拌した。揮発性物質を真空除去した。ジクロロメタン（１５ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した。得られた残留物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル  １００／１〜１／１００）により精製した。純粋な画分を収集し、溶媒を真空濃縮して化合物６（１．０ｇ）をもたらした。方法Ａ；室温：１．０２分。ｍ／ｚ：８３４．５（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８３３．４；
【０１２２】
【化６４】
2015503537.tif 000066
メタノール（１０ｍＬ）中の化合物６（１．０ｇ、１．２０ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ２Ｏ（０．５２ｇ、２．４ｍｍｏｌ）、及びＮＥｔ３（０．３６６ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）を１０％  Ｐｄ／Ｃ（湿潤）（０．１ｇ）と共に、水素雰囲気下（３０Ｐｓｉ）にて２０℃で２４時間撹拌した。触媒を濾去し、濾液を真空濃縮した。得られた残留物（１．０ｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）に溶解し、２０℃で撹拌した。４Ｎ  ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）を０℃で滴加し、混合物を２５℃で１時間撹拌した。溶媒を真空除去し、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の得られた残留物、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（０．４６ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（０．５１ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（０．３５６ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）を０℃で撹拌し、ＤＩＰＥＡ（１．５５ｇ、１２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１２時間撹拌した。この混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル  １００／１〜１／１００）により精製した。純粋な画分を収集し、溶媒を真空濃縮して化合物７（０．１５ｇ）をもたらした。方法Ｉ；室温：３．８３分。ｍ／ｚ：８５７．６（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８５６．４；ＳＦＣ：カラム：ＡＳ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：４．１分
【０１２３】
【化６５】
2015503537.tif 000067
トルエン（５ｍＬ）、エタノール（５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（５ｍＬ）中の化合物ＱＡ−３（０．５ｇ、１ｍｍｏｌ）、化合物ＳＣ−１２（０．６３ｇ、１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．３５ｇ、０．３ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＣＯ３（０．４２ｇ、４ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下で１２時間還流した。溶媒を真空除去した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２×）で抽出し、組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した後、得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１０／１、次いで１／１００ｖ／ｖ）により精製した。純粋な画分を収集し、溶媒を真空濃縮して、化合物８（０．５５ｇ）をもたらした。
【０１２４】
【化６６】
2015503537.tif 000068
ＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物８（０．５５ｇ、０．６３ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ２Ｏ（０．２７ｇ、１．２４ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．１９ｇ、１．８８ｍｍｏｌ）を、触媒としての１０％  Ｐｄ／Ｃ（０．１５ｇ）と共に、水素雰囲気下にて（３０Ｐｓｉ）２０℃で１４時間撹拌した。触媒を濾去し、濾液を濃縮した。得られた粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した。４Ｎ  ＨＣｌ／ジオキサン（５ｍＬ）を０℃で加えた。混合物を２５℃で２時間撹拌した。溶媒を真空除去した。残留物をトルエン（２×５ｍＬ）と共蒸発させて、０．５ｇの脱保護中間体をもたらした。ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中のこの生成物（０．５ｇ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（０．１３ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（０．１８ｇ、０．９４ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（０．０４２ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を０℃で撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．４ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。この混合物をＨ２Ｏ（２×５ｍＬ）及びブライン（５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、得られた溶液を乾燥するまで真空濃縮した。残留物を高速液体クロマトグラフィー（Ｃ１８、溶離液：ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ  １５／８５〜３５／６５  緩衝剤として０．１％  ＣＦ３ＣＯＯＨを有する）により精製した。純粋な画分を収集し、混合物をＮａＨＣＯ３を用いてｐＨ＝９に塩基性化した。有機溶媒を蒸発させ、沈殿物を濾去し、真空乾燥して化合物９を固体（０．１２ｇ）としてもたらした。方法Ｈ；室温：３．８０分。ｍ／ｚ：９０３．６（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：９０２．４  
【０１２５】
ＳＦＣ：カラム：ＡＳ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．３５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：３．６８分；１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ０．８１（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、３Ｈ）、０．８６（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、３Ｈ）、０．８８（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、３Ｈ）、０．９４（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、３Ｈ）、１．１８〜１．３６（ｍ、２Ｈ）、１．４６（ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．６０〜１．７１（ｍ、１Ｈ）、１．７２〜１．８０（ｍ、２Ｈ）、１．８２〜１．９０（ｍ、１Ｈ）、１．９２〜１．９８（ｍ、１Ｈ）、１．９８〜２．０６（ｍ、２Ｈ）、２．０６〜２．１６（ｍ、１Ｈ）、２．１９〜２．２８（ｍ、１Ｈ）、２．３４〜２．４２（ｍ、１Ｈ）、２．４６（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．５４（ｓ、３Ｈ）、３．５５（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｄ、Ｊ＝１１．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．８８（ｄｄ、Ｊ＝９．４、８．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．９０〜４．０５（ｍ、５Ｈ）、４．０７（ｄ、Ｊ＝１０．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．３７〜４．５５（ｍ、１Ｈ）、４．７５（ｔ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．１１（ｔ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．５５（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．７１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．７５（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、７．９２（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．９５（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．０３（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、８．０４〜８．１０（ｍ、１Ｈ）、８．２０（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．２４〜８．３４（ｍ、２Ｈ）、１１．９９（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ）、１２．４０（ｓ、１Ｈ）
【０１２６】
【化６７】
2015503537.tif 000069
トルエン／エタノール／Ｈ２Ｏ＝１：１：１（３０ｍＬ）中の化合物ＳＣ−９（１．０ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）、化合物ＱＡ−２（０．８ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．２１ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＣＯ３（１．５２ｇ、１４．３２ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２下にて１００℃で２時間撹拌した。揮発性物質を真空除去した。ジクロロメタン（１００ｍＬ）及び水（４０ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空除去した。得られた黄色粉末（１．０ｇ）から、一部（６００ｍｇ）を高速液体クロマトグラフィー（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｃ１８  １５０＊３０ｍｍ＊４ｕｍ。方法：Ａ中２０〜５０％Ｂ、１１分間で。Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ  Ｂ：ＭｅＣＮ。流速（ｍＬ／分）：４０）により精製した。純粋な画分を収集し、飽和ＮａＨＣＯ３により中和した。有機溶媒を真空除去した。沈殿物を濾過し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥して化合物１０を灰白色粉末（３６０ｍｇ）としてもたらした。方法Ｈ；室温：３．３９分。ｍ／ｚ：８０３．４（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８０２．４；ＳＦＣ：カラム：ＡＳ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．３５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中５〜４０％Ｂ：室温：９．４８分
【０１２７】
【化６８】
2015503537.tif 000070
トルエン（５ｍＬ）、ＣＨ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（５ｍＬ）中の化合物ＱＡ−８（０．５ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、化合物ＳＣ−１２（０．６２ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．３８ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＣＯ３（０．４７ｇ、４．４ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下にて１２時間還流した。溶媒を真空除去した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２×２０ｍＬ）で抽出し、有機層をブラインで洗浄し、乾燥した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１、次いで１／１００ｖ／ｖ）により精製した。純粋な画分を収集し、溶媒を真空除去して化合物１１（０．３５ｇ）をもたらした。
【０１２８】
【化６９】
2015503537.tif 000071
ＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物１１（０．３５ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ２Ｏ（０．１９ｇ、０．８８ｍｍｏｌ）及びＮＥｔ３（０．１３ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を、触媒としての１０％  Ｐｄ／Ｃ（０．１ｇ）を用いて、２０℃（３０Ｐｓｉ）で１４時間水素化した。完了後、触媒を濾去し、揮発性物質を真空除去して残留物（０．３ｇ）をもたらした。この残留物（０．３ｇ、）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解し、４Ｍ  ＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ）を０℃で加えた。混合物を２５℃で２時間撹拌した。溶媒を真空除去し、得られた残留物をトルエン（２×５ｍＬ）で２回希釈した後、トルエンを除去して残留物（０．３ｇ）をもたらした。ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中のこの残留物（０．３ｇ）、（Ｓ）−２−（メトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（０．０９３ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（０．１３ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（０．０３０ｇ、０２２ｍｍｏｌ）を０℃で撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．２８ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。この混合物をＨ２Ｏ（２×５ｍＬ）及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、揮発性物質を真空除去した。残留物を高速液体クロマトグラフィー（Ｃ１８、溶離液：ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ  １５／８５〜３５／６５  緩衝剤として０．１％  ＣＦ３ＣＯＯＨを有する）により精製した。純粋な画分を収集し、混合物をＮａＨＣＯ３を用いてｐＨ＝９に塩基性化した。有機溶媒を蒸発させ、沈殿物を濾過した。固体を真空乾燥した後、ＳＦＣクロマトグラフィー（Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＡＤ−Ｈ、２０μｍ；超臨界ＣＯ２：ＭｅＯＨ、ｖ／ｖ、２００ｍＬ／分）により精製した。純粋な画分を収集し、溶媒を真空除去して化合物１２（０．０６ｇ）をもたらした。方法Ｈ；室温：３．５分。ｍ／ｚ：８２９．５（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８２８．４；
【０１２９】
ＳＦＣ：カラム：ＡＳ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＥｔＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：３．６７分
【０１３０】
【化７０】
2015503537.tif 000072
撹拌しているＳＣ−１８（１．４ｇ、２．４５ｍｍｏｌ）、ＱＡ−１０（１．４９ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．２ｇ、０．２４５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液にＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ、２Ｎ）を加えた。反応混合物を２０分間還流撹拌し、水（２０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物を高速液体クロマトグラフィー（カラム：Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ  Ｃ１８  ２５０＊５０ｍｍ＊１０ｕｍ。方法：Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ  Ｂ：ＣＨ３ＣＮ、Ａ中２５〜４０％Ｂ  １７分間で。流速（ｍＬ／分）：９０）により精製した。純粋な画分を収集し、飽和ＮａＨＣＯ３により中和した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を真空濃縮して化合物１３（６００ｍｇ）をもたらした。方法Ｈ；室温：３．９２分。ｍ／ｚ：８７１．６（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８７０．４；
【０１３１】
【化７１】
2015503537.tif 000073
撹拌している化合物ＱＡ−１０（２．５ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）、化合物ＳＣ−１５（２．５ｇ、４．１３ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．２ｇ、０．４９６ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ、２Ｎ）を加えた。反応混合物を２０分間還流撹拌し、水（２０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残留物を高速液体クロマトグラフィー（カラム：Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ  Ｃ１８  ２５０＊５０ｍｍ＊１０ｕｍ。方法：Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ  Ｂ：ＣＨ３ＣＮ。Ａ中２５〜４０％Ｂ  １７分間で。流速（ｍＬ／分）：９０）により精製した。純粋な画分を収集し、飽和ＮａＨＣＯ３により中和した。有機溶媒を真空濃縮した。沈殿物を濾過し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥して化合物１４（１０００ｍｇ）を得た。方法Ｈ；室温：４．１１分。ｍ／ｚ：８９９．５（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８９８．５；ＳＦＣ：カラム：ＡＳ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：５．１分；ＳＦＣ：カラム：ＯＪ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：３．１４分
【０１３２】
【化７２】
2015503537.tif 000074
撹拌しているＱＡ−１０（２．０ｇ、３．９７ｍｍｏｌ）、化合物ＳＣ−６（１．８ｇ、３．３１ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．２ｇ、０．３９７ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ、２Ｎ）を加えた。反応混合物を２０分間還流撹拌し、水（２０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。得られた残留物を高速液体クロマトグラフィー（カラム：Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ  Ｃ１８  ２５０＊５０ｍｍ＊１０ｕｍ。方法：Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡＢ：ＣＨ３ＣＮ。Ａ中２５〜４０％Ｂ  １７分間で。流速（ｍＬ／分）：９０）により精製した。純粋な画分を収集し、飽和ＮａＨＣＯ３により中和した。有機溶媒を真空濃縮した。沈殿物を濾過し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥して化合物１５（７００ｍｇ）をもたらした。方法Ｈ；室温：３．８１分。ｍ／ｚ：８４５．５（Ｍ＋Ｈ）＋正確な質量：８４４．４；ＳＦＣ：カラム：ＡＳ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ＭｅＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：３．８４分；ＳＦＣ：カラム：ＡＳ−Ｈ  ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ；５ｕｍ。流速：２．５ｍＬ／分、移動相：Ａ：ＣＯ２  Ｂ：ｉＰｒＯＨ（０．０５％ジエチルアミン）；Ａ中４０％Ｂ：室温：５．１５分；
【０１３３】
生物学的実施例−式Ｉの化合物の抗ＨＣＶ活性
レプリコンアッセイ
式（Ｉ）の化合物をＨＣＶレプリコンにおける阻害活性に関して試験した。この細胞アッセイは、Ｌｏｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９９）２８５：１１０−１１３；Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（２００３）７７：３００７−３０１９）により記載され、遺伝子型１ｂの場合、Ｋｒｉｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（２００１）７５：４６１４−４６２４）及びＬｏｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（２００３）７７：３００７−３０１９）、並びに遺伝子型１ａの場合、Ｙｉ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（２００４）７８：７９０４−７９１５）により記載された変更を有する、多標的スクリーニング戦略における、バイシストロニックな発現コンストラクトに基づくものである。
【０１３４】
安定なトランスフェクション
方法は、以下のようなものである。アッセイは安定にトランスフェクトされた細胞ラインＨｕｈ−７  ｌｕｃ／ｎｅｏ（以下、Ｈｕｈ−Ｌｕｃと称する）を使用した。この細胞ラインは、脳心筋炎ウィルス（ＥＭＣＶ）からの内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）から翻訳されたＨＣＶタイプ１ｂの野生型ＮＳ３−ＮＳ５Ｂ領域、先行するレポーター部分（ＦｆＬ−ルシフェラーゼ）、及び選択可能なマーカー部分（ｎｅｏＲ、ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ）を含むバイシストロニックな発現コンストラクトをコードするＲＮＡを有する。コンストラクトは、ＨＣＶタイプ１ｂからの５’及び３’ＮＴＲｓ（非翻訳領域）が隣接する。Ｇ４１８（ｎｅｏＲ）の存在下でのレプリコン細胞の連続培養は、ＨＣＶ  ＲＮＡの複製に依存する。とりわけルシフェラーゼをコードする、ＨＣＶ  ＲＮＡを自律的にかつ高いレベルで複製する、安定にトランスフェクトされたレプリコン細胞を、抗ウィルス化合物のスクリーニングに使用した。
【０１３５】
レプリコン細胞を、様々な濃度で添加された試験及び対照化合物の存在下、３８４ウェルプレート内に播種した。３日間のインキュベーション後、ルシフェラーゼ活性をアッセイすることにより（標準的なルシフェラーゼアッセイ基質及び試薬、並びにＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＶｉｅｗＬｕｘ（商標）ｕｌｔｒａＨＴＳマイクロプレートイメージャを使用して）ＨＣＶ複製を測定した。対照培地中のレプリコン細胞は、任意の阻害剤の不在下で高いルシフェラーゼ発現を有する。化合物の阻害活性をＨｕｈ−Ｌｕｃ細胞上で監視し、各試験化合物に関する用量応答曲線を可能にした。次いで、ＥＣ５０値を計算し、これは、検出されたルシフェラーゼ活性のレベルを５０％低下させるのに必要な、又はより詳細には、遺伝的に関係があるＨＣＶレプリコンＲＮＡが複製する能力を低下させるのに必要な、化合物の量を表す。
【０１３６】
結果
式（Ｉ）の化合物がレプリコンアッセイにて２回以上試験された場合、全ての試験結果の平均をこの表１に提供する。
【０１３７】
【表１】
2015503537.tif 000075
【０１３８】
【表２】
2015503537.tif 000076
【０１３９】
【表３】
2015503537.tif 000077
【０１４０】
【表４】
2015503537.tif 000078
【０１４１】
一時的なトランスフェクション
一時的な設定では、Ｈｕｈ−７  ｌｕｎｅｔ肝細胞癌細胞ラインは、バイシストロニックな発現コンストラクトをコードする自己複製ＲＮＡで一時的にトランスフェクトされた。このコンストラクトは、ＨＣＶ（遺伝子型１ａ  Ｈ７７又は１ｂ  Ｃｏｎ１）のＮＳ３−ＮＳ５Ｂサブゲノム領域に先行するホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子を含む。ＨＣＶサブゲノム領域の翻訳は、脳心筋炎ウィルスの内部リボソーム侵入部位により仲介される。コンストラクトは更にＨＣＶ（それぞれ、遺伝子型１ａ  Ｈ７７又は１ｂ  Ｃｏｎ１）の５’及び３’非翻訳領域が隣接し、これはＲＮＡの複製を可能にする。
【０１４２】
細胞を、様々な濃度で添加された試験及び対照化合物の存在下、３８４ウェルプレート内に播種した。２日間のインキュベーション後、ルシフェラーゼ活性をアッセイすることにより（標準的なルシフェラーゼアッセイ基質及び試薬及び、並びにＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＶｉｅｗＬｕｘ（商標）ｕｌｔｒａＨＴＳマイクロプレートイメージャを使用して）ＨＣＶサブゲノムレプリコンＲＮＡの複製を測定した。対照培地中のＨＣＶサブゲノムレプリコン含有細胞は、任意の阻害剤の不在下で高いルシフェラーゼ発現を有する。化合物の阻害活性を監視し、各試験化合物に関する用量応答曲線を可能にした。次いで、ＥＣ５０値を計算し、これは、検出されたルシフェラーゼ活性のレベルを５０％低下させるのに必要な、又はより詳細には、遺伝的に関係があるＨＣＶレプリコンＲＮＡが複製する能力を低下させるのに必要な、化合物の量を表す。
【０１４３】
カウンタースクリーニング
カウンタースクリーニングの細胞ラインは、ヒトサイトメガロウィルス主要前初期（ｍａｊｏｒ  ｉｍｍｅｄｉａｔｅ−ｅａｒｌｙ）プロモーター−Ｌｕｃコンストラクト（Ｈｕｈ７−ＣＭＶ−Ｌｕｃ）を含むＨｕｈ−７肝細胞癌細胞ラインと、長末端反復−Ｌｕｃレポーター（ＭＴ４−ＬＴＲ−Ｌｕｃ）を含むＭＴ４Ｔ−細胞ラインとを含んでいた。
【０１４４】
【表５】
2015503537.tif 000079
【国際調査報告】
2015503537.tif 000091
2015503537.tif 000092