(57)【要約】本発明は、アンジオテンシンペプチドの経口送達のための様々な製剤を提供する。特に本発明は、アンジオテンシンペプチドの安定性を保ち、血流へのその吸収を増進する、様々な経口製剤を提供する。結果として、本発明に従って送達されるアンジオテンシンペプチドは、長い半減期および治療上有効な生物学的利用能を達成し得る。一態様において、本発明は、（ａ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドと、（ｂ）少なくとも１つの薬学的に許容されるｐＨ降下剤と、（ｃ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドの生物学的利用能を促進するために効果的な少なくとも１つの吸収促進剤と、（ｄ）保護ビヒクルと、を含む、経口投与のための固体剤形を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
経口投与のための固体剤形であって、
（ａ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドと、
（ｂ）少なくとも１つの薬学的に許容されるｐＨ降下剤と、
（ｃ）前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドの生物学的利用能を促進するために効果的な少なくとも１つの吸収促進剤と、
（ｄ）保護ビヒクルと、を含む、固体剤形。
【請求項２】
前記固体剤形が、カプセルまたは錠剤である、請求項１に記載の固体剤形。
【請求項３】
前記ｐＨ降下剤が、クエン酸である、請求項１または２に記載の固体剤形。
【請求項４】
前記クエン酸が、４００ｍｇを超える量で存在する、請求項３に記載の固体剤形。
【請求項５】
前記クエン酸が、５００ｍｇを超える量で存在する、請求項３に記載の固体剤形。
【請求項６】
前記クエン酸が、前記固体剤形の総重量の５０％を超える量で存在する、請求項３に記載の固体剤形。
【請求項７】
前記ｐＨ降下剤が、酒石酸である、請求項１または２に記載の固体剤形。
【請求項８】
前記吸収促進剤が、アシルカルニチンである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項９】
前記アシルカルニチンが、ラウロイルカルニチンである、請求項８に記載の固体剤形。
【請求項１０】
前記ラウロイルカルニチンが、５０〜１００ｍｇの範囲の量で存在する、請求項９に記載の固体剤形。
【請求項１１】
前記ラウロイルカルニチンが、前記固体剤形の総重量の５〜１０％の範囲の量で存在する、請求項９に記載の固体剤形。
【請求項１２】
前記保護ビヒクルが、前記固体剤形の総重量の２０％未満を占める、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項１３】
前記保護ビヒクルが、腸溶コーティングである、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項１４】
前記固体剤形が、ＰＲＯＳＯＬＶ（登録商標）等の充填剤、ＰＯＬＹＰＬＡＳＤＯＮＥ（商標）クロスポビドン等の崩壊剤、二酸化ケイ素等の滑剤、またはフマル酸ステアリルナトリウム等の滑沢剤から選択される１つ以上の賦形剤をさらに含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項１５】
前記固体剤形が、カプトプリルをさらに含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項１６】
前記固体剤形が、８００〜１２００ｍｇの範囲の総重量を有する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項１７】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、１０〜１０００ｍｇの範囲の量で存在する、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項１８】
経口投与のための固体剤形であって、
（ａ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドと、
（ｂ）クエン酸と、
（ｃ）ラウロイルカルニチンと、
（ｄ）保護ビヒクルと、を含む、固体剤形。
【請求項１９】
前記クエン酸が、５００ｍｇを超える量で存在し、前記ラウロイルカルニチンが、５０〜１００ｍｇの範囲の量で存在する、請求項１８に記載の固体剤形。
【請求項２０】
前記固体剤形が、カプセルまたは錠剤である、請求項１８または１９に記載の固体剤形。
【請求項２１】
前記保護ビヒクルが、腸溶コーティングである、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項２２】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）の天然に存在するアンジオテンシン（１−７）のアミノ酸配列を含む、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項２３】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、配列番号１の機能的等価物である、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項２４】
前記機能的等価物が、直鎖ペプチドである、請求項２３に記載の固体剤形。
【請求項２５】
前記直鎖ペプチドが、前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）に見られる前記７個のアミノ酸から少なくとも４個のアミノ酸を含む配列を含み、前記少なくとも４個のアミノ酸が、それらが前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）で見られるときのそれらの相対位置を維持する、請求項２４に記載の固体剤形。
【請求項２６】
前記直鎖ペプチドが、前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）に見られる前記７個のアミノ酸から少なくとも５個のアミノ酸を含む配列を含み、前記少なくとも５個のアミノ酸が、それらが前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）で見られるときのそれらの相対位置を維持する、請求項２４に記載の固体剤形。
【請求項２７】
前記直鎖ペプチドが、前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）に見られる前記７個のアミノ酸から少なくとも６個のアミノ酸を含む配列を含み、前記少なくとも６個のアミノ酸が、それらが前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）で見られるときのそれらの相対位置を維持する、請求項２４に記載の固体剤形。
【請求項２８】
前記少なくとも４個、５個、または６個のアミノ酸がそれぞれ、それらが前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）で見られるときのそれらの相対間隔をさらに維持する、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項２９】
前記直鎖ペプチドが、４〜２５個のアミノ酸を含有する、請求項２４〜２８のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項３０】
前記直鎖ペプチドが、前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）の断片である、請求項２４〜２９のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項３１】
前記直鎖ペプチドが、前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）内にアミノ酸置換、欠失、および／または挿入を含む、請求項２４〜３０のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項３２】
前記直鎖ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号２）のアミノ酸配列を有する、請求項３１に記載の固体剤形。
【請求項３３】
前記直鎖ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号６）のアミノ酸配列を有する、請求項３１に記載の固体剤形。
【請求項３４】
前記機能的等価物が、環状ペプチドである、請求項２３に記載の固体剤形。
【請求項３５】
前記環状ペプチドが、アミノ酸の間に結合を含む、請求項３４に記載の固体剤形。
【請求項３６】
前記結合が、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）内の位置Ｔｙｒ４およびＰｒｏ７に対応する残基に位置する、請求項３５に記載の固体剤形。
【請求項３７】
前記結合が、チオエーテル架橋である、請求項３５または３６に記載の固体剤形。
【請求項３８】
前記環状ペプチドが、それ以外ではＡｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）の前記天然に存在するアンジオテンシン（１−７）のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む、請求項３４〜３７のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項３９】
前記環状ペプチドが、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）内の位置Ｖａｌ３を置換するノルロイシン（Ｎｌｅ）を含む、請求項３４〜３８のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項４０】
前記環状ペプチドが、以下の式：
【化７】
2015529684.tif 000016
を有する４，７−環化アンジオテンシン（１−７）である、請求項３６に記載の固体剤形。
【請求項４１】
前記アンジオテンシン（１−７）ペプチドが、プロテアーゼ耐性、血清安定性、および／または生物学的利用能を増加させるために１つ以上の化学修飾を含む、請求項３４〜４０のいずれか１項に記載の固体剤形。
【請求項４２】
前記１つ以上の化学修飾が、ペグ化を含む、請求項４１に記載の固体剤形。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年９月１７日に出願された米国仮特許出願第６１／７０１，９７２号に対する優先権を主張するものであり、その開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
経口送達は、注射、経鼻投与、および他の投与経路と比較して、より便利であり、より低い患者の不快感を伴うため、典型的に所望の投与経路である。しかしながら、ペプチドは分解の影響を受けやすいため、ペプチドの経口投与は一般に困難である。アンジオテンシンのような短鎖ペプチドの経口投与は、短鎖ペプチドが、典型的に二次または三次構造を欠き、したがって胃および腸の両方のタンパク質分解酵素の影響をより受けやすいため、さらにいっそう問題となる傾向がある。これらの酵素は、短鎖ペプチドを速やかに分解することができ、それが血流に吸収され得る前にそれを不活性にする。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明は、アンジオテンシンペプチドの効果的な経口送達のための組成物および方法を提供する。特に本発明は、アンジオテンシンペプチドの安定性を保ち、血流へのその吸収を増進する、様々な経口製剤を提供する。結果として、本発明に従って送達されるアンジオテンシンペプチドは、長い半減期および治療上有効な生物学的利用能を達成し得る。
【０００４】
一態様において、本発明は、（ａ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドと、（ｂ）少なくとも１つの薬学的に許容されるｐＨ降下剤と、（ｃ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドの生物学的利用能を促進するために効果的な少なくとも１つの吸収促進剤と、（ｄ）保護ビヒクルと、を含む、経口投与のための固体剤形を提供する。
【０００５】
いくつかの実施形態において、好適な固体剤形は、カプセルまたは錠剤である。
【０００６】
いくつかの実施形態において、好適なｐＨ降下剤は、クエン酸である。いくつかの実施形態において、クエン酸は、約２００ｍｇを超える（例えば、約２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇを超える）量で存在する。いくつかの実施形態において、クエン酸は、固体剤形の総重量の約２０％を超える（例えば、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％を超える）量で存在する。
【０００７】
いくつかの実施形態において、好適なｐＨ降下剤は、酒石酸である。
【０００８】
いくつかの実施形態において、好適な吸収促進剤は、アシルカルニチンである。いくつかの実施形態において、アシルカルニチンは、ラウロイルカルニチンである。いくつかの実施形態において、ラウロイルカルニチンは、約２０〜２００ｍｇの範囲（例えば、２０〜１５０ｍｇ、２０〜１００ｍｇ、２０〜９０ｍｇ、２０〜８０ｍｇ、５０〜２００ｍｇ、５０〜１５０ｍｇ、５０〜１００ｍｇ、５０〜９０ｍｇ、５０〜８０ｍｇの範囲）の量で存在する。いくつかの実施形態において、ラウロイルカルニチンは、約２０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、１００ｍｇ、１１０ｍｇ、１２０ｍｇ、１３０ｍｇ、１４０ｍｇ、１５０ｍｇ、１６０ｍｇ、１７０ｍｇ、１８０ｍｇ、１９０ｍｇ、または２００ｍｇの量で存在する。いくつかの実施形態において、ラウロイルカルニチンは、固体剤形の総重量の約２〜２０％（例えば、２〜１５％、２〜１０％、２〜７．５％、５〜２０％、５〜１５％、５〜１０％、５〜７．５％）の範囲の量で存在する。いくつかの実施形態において、ラウロイルカルニチンは、固体剤形の総重量の約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、または２０％以上の量で存在する。いくつかの実施形態において、ラウロイルカルニチンは、固体剤形の総重量の約２５％、２４％、２３％、２２％、２１％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％以下の量で存在する。
【０００９】
いくつかの実施形態において、好適な保護ビヒクルは、腸溶コーティングである。いくつかの実施形態において、保護ビヒクルは、固体剤形の総重量の約２５％、２４％、２３％、２２％、２１％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％以下の量を占める。
【００１０】
いくつかの実施形態において、本発明に従う固体剤形は、１つ以上の賦形剤をさらに含む。特定の実施形態において、１つ以上の賦形剤は、ＰＲＯＳＯＬＶ（登録商標）等の充填剤、ＰＯＬＹＰＬＡＳＤＯＮＥ（商標）クロスポビドン等の崩壊剤、二酸化ケイ素等の滑剤、またはフマル酸ステアリルナトリウム等の滑沢剤から選択される。
【００１１】
いくつかの実施形態において、本発明に従う固体剤形は、カプトプリルをさらに含む。
【００１２】
いくつかの実施形態において、好適な固体剤形は、約５００〜１５００（例えば、約５００〜１２００ｍｇ、５００〜１０００ｍｇ、６００〜１５００ｍｇ、６００〜１２００ｍｇ、６００〜１０００ｍｇ、７００〜１５００ｍｇ、７００〜１２００ｍｇ、７００〜１０００ｍｇ、８００〜１５００ｍｇ、８００〜１２００ｍｇ、８００〜１０００ｍｇ）の範囲の総重量を有する。いくつかの実施形態において、好適な固体剤形は、約５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１１００ｍｇ、１２００ｍｇ、１３００ｍｇ、１４００ｍｇ、または１５００ｍｇ以上の総重量を有する。いくつかの実施形態において、好適な固体剤形は、約２０００ｍｇ、１９００ｍｇ、１８００ｍｇ、１７００ｍｇ、１６００ｍｇ、１５００ｍｇ、１４００ｍｇ、１３００ｍｇ、１２００ｍｇ、１１００ｍｇ、１０００ｍｇ、９００ｍｇ、８００ｍｇ、７００ｍｇ、６００ｍｇ、または５００ｍｇ以下の総重量を有する。
【００１３】
いくつかの実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１０〜１０００ｍｇ（例えば、約１０〜９００ｍｇ、１０〜８００ｍｇ、１０〜７００ｍｇ、１０〜６００ｍｇ、１０〜５００ｍｇ、１００〜１０００ｍｇ、１００〜９００ｍｇ、１００〜８００ｍｇ、１００〜７００ｍｇ、１００〜６００ｍｇ、１００〜５００ｍｇ、１００〜４００ｍｇ、１００〜３００ｍｇ、２００〜１０００ｍｇ、２００〜９００ｍｇ、２００〜８００ｍｇ、２００〜７００ｍｇ、２００〜６００ｍｇ、２００〜５００ｍｇ、２００〜４００ｍｇ、３００〜１０００ｍｇ、３００〜９００ｍｇ、３００〜８００ｍｇ、３００〜７００ｍｇ、３００〜６００ｍｇ、３００〜５００ｍｇ）の範囲の量で存在する。いくつかの実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ以上の量で存在する。いくつかの実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１０００ｍｇ、９５０ｍｇ、９００ｍｇ、８５０ｍｇ、８００ｍｇ、７５０ｍｇ、７００ｍｇ、６５０ｍｇ、６００ｍｇ、５５０ｍｇ、５００ｍｇ、４５０ｍｇ、４００ｍｇ、３５０ｍｇ、３００ｍｇ、２５０ｍｇ、２００ｍｇ、１５０ｍｇ、または１００ｍｇ以下の量で存在する。
【００１４】
ある特定の実施形態において、本発明は、（ａ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドと、（ｂ）クエン酸と、（ｃ）ラウロイルカルニチンと、（ｄ）保護ビヒクルと、を含む、経口投与のための固体剤形を提供する。特定の実施形態において、クエン酸は、５００ｍｇを超える量で存在し、ラウロイルカルニチンは、５０〜１００ｍｇの範囲の量で存在する。
【００１５】
ある特定の実施形態において、固体剤形は、カプセルまたは錠剤である。ある特定の実施形態において、好適な保護ビヒクルは、腸溶コーティングである。
【００１６】
様々な実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）の天然に存在するアンジオテンシン（１−７）のアミノ酸配列を含む。
【００１７】
様々な実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、配列番号１の機能的等価物である。いくつかの実施形態において、機能的等価物は、直鎖ペプチドである。いくつかの実施形態において、直鎖ペプチドは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）に見られる７個のアミノ酸から少なくとも４個のアミノ酸を含む配列を含み、少なくとも４個のアミノ酸は、それらが天然に存在するアンジオテンシン（１−７）で見られるときのそれらの相対位置を維持する。いくつかの実施形態において、直鎖ペプチドは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）に見られる７個のアミノ酸から少なくとも５個のアミノ酸を含む配列を含み、少なくとも５個のアミノ酸は、それらが天然に存在するアンジオテンシン（１−７）で見られるときのそれらの相対位置を維持する。いくつかの実施形態において、直鎖ペプチドは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）に見られる７個のアミノ酸から少なくとも６個のアミノ酸を含む配列を含み、少なくとも６個のアミノ酸は、それらが天然に存在するアンジオテンシン（１−７）で見られるときのそれらの相対位置を維持する。いくつかの実施形態において、少なくとも４個、５個、または６個のアミノ酸はそれぞれ、それらが天然に存在するアンジオテンシン（１−７）で見られるときのそれらの相対間隔をさらに維持する。
【００１８】
いくつかの実施形態において、直鎖ペプチドは、４〜２５個のアミノ酸（例えば、４〜２０個、４〜１５個、４〜１４個、４〜１３個、４〜１２個、４〜１１個、４〜１０個、４〜９個、４〜８個、４〜７個のアミノ酸）を含有する。いくつかの実施形態において、直鎖ペプチドは、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、または２５個のアミノ酸を含有する。
【００１９】
いくつかの実施形態において、直鎖ペプチドは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）の断片である。
【００２０】
いくつかの実施形態において、直鎖ペプチドは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）内にアミノ酸置換、欠失、および／または挿入を含む。
【００２１】
特定の実施形態において、直鎖ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号２）のアミノ酸配列を有する。
【００２２】
特定の実施形態において、直鎖ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号６）のアミノ酸配列を有する。
【００２３】
いくつかの実施形態において、機能的等価物は、環状ペプチドである。いくつかの実施形態において、環状ペプチドは、アミノ酸の間に結合を含む。いくつかの実施形態において、その結合は、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）内の位置Ｔｙｒ４およびＰｒｏ７に対応する残基に位置する。いくつかの実施形態において、結合は、チオエーテル架橋である。
【００２４】
特定の実施形態において、環状ペプチドは、それ以外ではＡｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）の天然に存在するアンジオテンシン（１−７）のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。
【００２５】
ある特定の実施形態において、環状ペプチドは、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）内の位置Ｖａｌ３を置換するノルロイシン（Ｎｌｅ）を含む。
【００２６】
ある特定の実施形態において、環状ペプチドは、以下の式を有する４，７−環化アンジオテンシン（１−７）である。
【化１】
2015529684.tif 000002
【００２７】
様々な実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、プロテアーゼ耐性、血清安定性、および／または生物学的利用能を増加させるために１つ以上の化学修飾を含む。いくつかの実施形態において、１つ以上の化学修飾は、ペグ化を含む。
【００２８】
本発明は、本明細書に記載の経口製剤を投与するための方法をさらに提供する。
【００２９】
本出願において使用される、「約（ａｂｏｕｔ）」および「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」という用語は、同等のものとして使用される。約／およその有無にかかわらず、本出願において使用される任意の数詞は、当業者によって理解される任意の標準的変動を含むことを意味する。
【００３０】
本発明の他の特徴、目的、および利点は、以下の詳細な説明において明らかである。しかしながら、この詳細な説明は、本発明の実施形態を示すが、限定ではなく単なる例示として与えられることを理解されたい。本発明の範囲内の様々な変更および修正が、詳細な説明から当業者に明らかとなるであろう。
【００３１】
図面は、限定ではなく単なる例示説明を目的とする。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】様々な投与経路間で比較される、曲線下面積（ＡＵＣ）によって表されるアンジオテンシン（１−７）の総暴露を示す例示的な結果を表す。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
定義
本発明がより容易に理解されるように、ある特定の用語がまず下記に定義される。以下の用語および他の用語に対する追加の定義は、本明細書全体にわたって記載される。
【００３４】
動物：本明細書において使用される、「動物」という用語は、動物界の任意の構成員を指す。いくつかの実施形態において、「動物」は、任意の発達段階におけるヒトを指す。いくつかの実施形態において、「動物」は、任意の発達段階における非ヒト動物を指す。ある特定の実施形態において、非ヒト動物は、哺乳類（例えば、齧歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類、および／またはブタ）である。いくつかの実施形態において、動物としては、哺乳類、鳥類、爬虫類、両生類、魚類、昆虫類、および／または蠕虫類が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子操作した動物、および／またはクローンであり得る。
【００３５】
およそまたは約：本明細書において使用される、「およそ」または「約」という用語は、対象の１つ以上の値に適用されるとき、定められた基準値と似た値を指す。ある特定の実施形態において、「およそ」または「約」という用語は、特に指定のない限り、またはそれ以外では文脈から明らかでない限り（そのような数値が可能な値の１００％を超える場合を除いて）、定められた基準値のいずれかの方向に（より大きいか、またはそれ未満）２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％以下の値の範囲を指す。
【００３６】
生物学的利用能：本明細書において使用される、「生物学的利用能」という用語は、一般に対象の血流に到達する投与用量の割合（％）を指す。
【００３７】
生物学的に活性な：本明細書において使用される、「生物学的に活性な」という表現は、生物系内、特に生物内で活性を有する任意の薬剤の特徴を指す。例えば、生物に投与されるとき、その生物に対して生物学的効果を有する薬剤は、生物学的に活性であると見なされる。特定の実施形態において、ペプチドが生物学的に活性である場合、ペプチドの少なくとも１つの生物活性を共有するそのペプチドの一部分は、典型的に「生物学的に活性な」部分と称される。ある特定の実施形態において、固有の生物活性を有しないが、１つ以上の天然に存在するアンジオテンシン化合物の効果を阻害するペプチドは、生物学的に活性であると見なされる。
【００３８】
担体または希釈剤：本明細書において使用される、「担体」および「希釈剤」という用語は、薬学的製剤の調製に有用な薬学的に許容される（例えば、ヒトへの投与に安全かつ非毒性の）担体または希釈物質を指す。例示的な希釈剤としては、滅菌水、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、ｐＨ緩衝液（例えば、リン酸緩衝生理食塩水）、滅菌生理食塩水、リンガー溶液、またはブドウ糖液が挙げられる。
【００３９】
剤形：本明細書において使用される、「剤形」および「単位剤形」という用語は、治療される患者のための治療薬の物理的に別個の単位を指す。各単位は、所望の治療効果をもたらすように計算された既定量の活性物質を含有する。しかし、組成物の総投薬量は、堅実な医学的判断の範囲内で担当医師により決定されることが理解されるであろう。
【００４０】
投与計画：「投与計画」（または「治療計画」）は、その用語が本明細書において使用される場合、典型的に期間によって分離されて、対象に個別に投与される単位用量の組（典型的に複数）である。いくつかの実施形態において、付与される治療薬は、推奨される投与計画を有し、１つ以上の用量を含み得る。いくつかの実施形態において、投与計画は、それぞれが同じ長さの期間によって互いに分離される複数の用量を含み、いくつかの実施形態において、投与計画は、複数の用量および少なくとも２つの異なる期間で分離する個別の用量を含む。いくつかの実施形態において、治療薬は、既定の期間にわたって連続的に投与される。いくつかの実施形態において、治療薬は、１日１回（ＱＤ）または１日２回（ＢＩＤ）投与される。
【００４１】
賦形剤：本明細書において使用される、「賦形剤」という用語は、その物理的品質（すなわち、粘稠度）、薬物動態的特性（すなわち、生物学的利用能）、薬理学的特性、およびそれらの組み合わせを改善する目的で、薬物および／または製剤に付加される任意の不活性物質を指す。
【００４２】
機能的等価物または機能的誘導体：本明細書において使用される、「機能的等価物」または「機能的誘導体」という用語は、アミノ酸配列の機能的誘導体の文脈において、元の配列のそれと実質的に類似する生物活性を保持する分子を意味する。機能的誘導体または等価物は、天然の誘導体であり得るか、または組み換えまたは合成によって調製される。例示的な機能的誘導体は、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または付加を有するアミノ酸配列を含むが、但し、タンパク質の生物活性は保存される。置換するアミノ酸は、望ましくは、置換したアミノ酸のそれと類似する化学物理的特性を有する。望ましい同様の化学物理的特性としては、電荷、かさ高性、疎水性、親水性等の類似性が挙げられる。
【００４３】
改善する、増加する、または減少する：本明細書において使用される、「改善する」、「増加する」、もしくは「減少する」、または文法的等価物は、本明細書に記載の治療の開始前の同じ個体における測定値、または本明細書に記載の治療の不在下の対照個体（もしくは複数の対照個体）における測定値等のベースライン測定値と相対的な値を示す。「対照個体」は、治療される個体と同じ形態の疾患を患う個体であり、治療される個体とほぼ同じ年齢である（治療される個体および対照個体（複数可）における疾患の段階が同等であることを保証するため）。
【００４４】
インビトロ：本明細書において使用される、「インビトロ」という用語は、多細胞生物内ではなく、人工的な環境において、例えば、試験管または反応容器中、細胞培養物中等で発生する事象を指す。
【００４５】
インビボ：本明細書において使用される、「インビボ」という用語は、ヒトおよび非ヒト動物等の多細胞生物内で発生する事象を指す。細胞ベース系の文脈において、この用語は、生細胞内で（例えば、インビトロ系と対照的に）発生する事象を指すように使用され得る。
【００４６】
単離された：本明細書において使用される、「単離された」という用語は、（１）最初に産生された時にそれが会合していた構成成分の少なくともいくつかから分離された（天然において、および／もしくは実験環境においてのいずれか）、ならびに／または（２）人間の手によって産生、調製、および／もしくは製造された物質および／または実体を指す。単離された物質および／または実体は、それらが最初に会合していた他の構成成分の少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％、約９８％、約９９％、実質的に１００％、または１００％から分離され得る。いくつかの実施形態において、単離された薬剤は、約８０％超、約８５％超、約９０％超、約９１％超、約９２％超、約９３％超、約９４％超、約９５％超、約９６％超、約９７％超、約９８％超、約９９％超、実質的に１００％、または１００％純粋である。本明細書において使用される場合、物質は、他の構成成分を実質的に含まない場合、「純粋」である。本明細書において使用される、「単離された細胞」という用語は、多細胞生物内に含有されない細胞を指す。
【００４７】
ペプチド：本明細書において使用される、「ペプチド」という用語は、ペプチド結合を介して一緒に結合されたアミノ酸の連続鎖を指す。典型的に、この用語は、長さの短いアミノ酸鎖を指すために使用されるが、当業者であれば、この用語が任意の特定の長さの鎖に限定されず、ペプチド結合を介して一緒に結合される２個のアミノ酸を含む最短の鎖を指し得ることを理解するであろう。しかしながら、典型的にペプチドは、５０個、４５個、４０個、３５個、３０個、２５個、２０個、１５個、１０個以下のアミノ酸のアミノ酸鎖を指す。当業者には既知のように、ペプチドは加工および／または修飾されてよい。
【００４８】
薬学的に許容される：本明細書において使用される、「薬学的に許容される」という用語は、対象に投与されるとき、望ましくないアレルギー反応または抗原反応をもたらさない任意の実体または組成物を指す。
【００４９】
タンパク質：本明細書において使用される「タンパク質」という用語は、別個の単位として機能する１つ以上のポリペプチドを指す。単一ポリペプチドが、別個の機能単位であり、別個の機能単位を形成するために他のポリペプチドとの永久的または一時的な物理的会合を必要としない場合、「ポリペプチド」および「タンパク質」という用語は同義的に使用されてもよい。別個の機能的単位が、互いに物理的に会合する複数のポリペプチドからなる場合、「タンパク質」という用語は、物理的に結合され、別個の単位として一緒に機能する複数のポリペプチドを指す。
【００５０】
安定性：本明細書において使用される、「安定な」という用語は、治療薬が長期間にわたってその治療効果（例えば、その意図された生物活性および／または物理化学的完全性の全てまたは大部分）を維持する能力を指す。治療薬の安定性、および薬学的組成物がそのような治療薬の安定性を維持する能力は、長期間にわたって評価され得る（例えば、少なくとも１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、１２ヶ月、１８ヶ月、２４ヶ月、３０ヶ月、３６ヶ月以上）。ある特定の実施形態において、本明細書に記載の薬学的組成物は、それらが一緒に調合される１つ以上の治療薬を安定化することができるか、または代替としてその分解を遅延もしくは防止することができるように調合されている。製剤の文脈において、安定な製剤は、その中の治療薬が、保管時および加工（例えば、冷凍／解凍、機械的混合、および凍結乾燥）中にその物理的および／または化学的完全性、ならびに生物活性を本質的に保持するものである。
【００５１】
対象：本明細書において使用される、「対象」という用語は、ヒトまたは任意の非ヒト動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、または霊長類）を指す。ヒトは、出生前および出生後の形態を含む。多くの実施形態において、対象は、ヒトである。対象は、患者であり得、疾患の診断または治療のために医療提供者を訪れるヒトを指す。「対象」という用語は、本明細書において「個体」または「患者」と同義的に使用される。対象は、疾患または障害を患い得るか、またはその影響を受けやすいが、疾患または障害の症状を示し得るか、または示さない場合がある。
【００５２】
実質的に：本明細書において使用される、「実質的に」という用語は、対象の特徴もしくは特性の範囲または程度全体もしくはほぼ全体を示す定性的条件を指す。生物学の分野における当業者は、生物学的および化学的現象が、完了に向かう、および／もしくは完全性に進むか、または絶対的な結果を達成もしくは回避するとしても極めてまれであることを理解するであろう。したがって、「実質的に」という用語は、本明細書において、多くの生物学的および化学的現象に固有である潜在的な完全性の欠失を捉えるために使用される。
【００５３】
治療上有効な量：本明細書において使用される、治療薬の「治療上有効な量」は、疾患、障害、および／もしくは状態を患うか、またはその影響を受けやすい対象に投与されるとき、その疾患、障害、および／または状態を治療する、診断する、予防する、および／または症状（複数可）の発症を遅延させるのに十分な量を意味する。治療上有効な量が、典型的に、少なくとも１つの単位用量を含む投与計画を介して投与されることは、当業者に理解されるであろう。
【００５４】
治療する：本明細書において使用される、「治療する」、「治療」、または「治療している」という用語は、特定の疾患、障害、および／または状態を部分的または完全に緩和する、改善する、軽減する、阻害する、予防する、発症を遅延させる、その１つ以上の症状もしくは特徴の重症度を減少させる、および／または発症を減少させるために使用される任意の方法を指す。治療は、疾患に関連する病理を発生させる危険性を減少させる目的で、疾患の兆候を示さない、および／または疾患の早期兆候のみを示す対象に投与され得る。
【００５５】
本発明の他の特徴、目的、および利点は、以下の詳細な説明において明らかである。しかしながら、詳細な説明は、本発明の実施形態を示しているが、限定ではなく単なる例示として付与されることを理解されたい。本発明の範囲内の様々な変更および修正は、詳細な説明から当業者に明らかとなるであろう。
【００５６】
ある特定の実施形態の詳細な説明
とりわけ本発明は、対象への経口投与に好適なアンジオテンシン（１−７）の製剤を提供する。そのような投与は、疾患、障害、または状態の治療を含む種々の理由のためであり得る。
【００５７】
いくつかの実施形態において、（ａ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドと、（ｂ）少なくとも１つの薬学的に許容されるｐＨ降下剤と、（ｃ）アンジオテンシン（１−７）ペプチドの生物学的利用能を促進するために効果的な少なくとも１つの吸収促進剤と、（ｄ）保護ビヒクルと、を含む、経口投与のための固体剤形が提供される。
【００５８】
いくつかの実施形態において、固体剤形は、カプセルまたは錠剤である。経口製剤を作製するための様々な方法および成分は、当該技術分野において既知であり、当業者であれば、これらの方法および成分のうちのどれが本明細書に記載されるように本発明に適合するかを決定することができると予想される。そのような方法および成分も、本発明の範囲内として企図される。
【００５９】
本発明の様々な態様が、以下の節において詳細に説明される。節の使用は、本発明を限定することを意味しない。各節は、本発明の任意の態様に適用することができる。本出願において、「または」の使用は、特に指定のない限り、「および／または」を意味する。
【００６０】
アンジオテンシン（１−７）ペプチド
本明細書において使用される、「アンジオテンシン（１−７）ペプチド」という用語は、天然に存在するアンジオテンシン（１−７）、および天然に存在するアンジオテンシン（１−７）の任意の機能的等価物、類似体、または誘導体の両方を指す。本明細書において使用される、「ペプチド」および「ポリペプチド」は、同義的な用語であり、ペプチド結合によって一緒に結合された２つ以上のアミノ酸を指す。本明細書において使用される、「ペプチド」および「ポリペプチド」は、直鎖および環状ペプチドの両方を含む。「アンジオテンシン−（１−７）」、「アンジオテンシン−（１−７）」、および「Ａｎｇ−（１−７）」は、同義的に使用される。
【００６１】
天然に存在するアンジオテンシン（１−７）
天然に存在するアンジオテンシン（１−７）（Ａｎｇ−（１−７）とも称される）は、下に示される７アミノ酸ペプチドである。
Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）
これはレニン−アンジオテンシン系の一部であり、構成的に産生され、主に肝臓によって循環に放出されるα−２−グロブリンである、アンジオテンシノーゲンとしても知られる前駆体から変換される。アンジオテンシノーゲンは、セルピンファミリーの構成員であり、レニン基質としても知られる。ヒトアンジオテンシンは、４５２アミノ酸長であるが、他の種は、様々な異なるサイズのアンジオテンシノーゲンを有する。典型的に、最初の１２個のアミノ酸は、アンジオテンシンの活性に最も重要である。
Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９−Ｌｅｕ１０−Ｖａｌ１１−Ｉｌｅ１２（配列番号４）
【００６２】
異なる種類のアンジオテンシンが、様々な酵素の作用によって形成され得る。例えば、アンジオテンシン（１−７）は、アンジオテンシン変換酵素２（ＡＣＥ２）の作用によって生成される。
【００６３】
Ａｎｇ−（１−７）は、Ｍａｓ受容体の内因性リガンドである。Ｍａｓ受容体は、７つの経膜貫通領域を含有するＧ−タンパク質共役受容体である。本明細書において使用される、「アンジオテンシン−（１−７）受容体」という用語は、Ｇタンパク質共役Ｍａｓ受容体を包含する。
【００６４】
本明細書において使用される、「天然に存在するアンジオテンシン（１−７）」という用語は、天然源から精製された任意のアンジオテンシン（１−７）ペプチド、および天然に存在するアンジオテンシン（１−７）のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を有する、任意の組み換えにより産生された、または化学的に合成されたペプチドを含む。
【００６５】
Ａｎｇ−（１−７）の機能的等価物、類似体、または誘導体
いくつかの実施形態において、本発明に好適なアンジオテンシン（１−７）ペプチドは、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価物である。本明細書において使用される場合、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価物は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）に対するアミノ酸配列同一性を共有し、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）と実質的に同じか、または同様の活性を保持する、任意のペプチドを指す。例えば、いくつかの実施形態において、本明細書に記載の天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価物は、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において既知の方法を使用して決定される血管新生促進活性、または一酸化窒素遊離、血管拡張、改善された内皮機能、抗利尿、または血管新生に好影響を及ぼす本明細書に論じられる他の特性等の活性を有する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価物は、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において既知の様々な方法を使用して決定して、アンジオテンシン−（１−７）受容体（例えば、Ｇタンパク質共役Ｍａｓ受容体）に結合することができるか、または活性化することができる。いくつかの実施形態において、Ａｎｇ−（１−７）の機能的等価物は、アンジオテンシン（１−７）類似体もしくは誘導体、または機能的誘導体とも称される。
【００６６】
典型的に、アンジオテンシン（１−７）の機能的等価物は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）に対するアミノ酸配列類似性を共有する。いくつかの実施形態において、本発明に従うＡｎｇ−（１−７）の機能的等価物は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）に見られる７個のアミノ酸から少なくとも３個（例えば、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個）のアミノ酸を含む配列を含有し、少なくとも３個（例えば、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、または少なくとも７個）のアミノ酸は、それらが天然に存在するアンジオテンシン（１−７）で見られるときのそれらの相対位置および／または間隔を維持する。
【００６７】
いくつかの実施形態において、Ａｎｇ−（１−７）の機能的等価物は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）のアミノ酸配列と少なくとも５０％（例えば、少なくとも６０％、７０％、８０％、または９０％）同一の配列を含有する任意のペプチドも包含する。アミノ酸配列同一性の割合（％）は、アミノ酸配列のアラインメントによって決定することができる。アミノ酸配列のアラインメントは、当該技術分野における技術の範囲内である様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＡＬＩＧＮ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア等の公的に入手可能なコンピューターソフトウェアを使用して達成することができる。当業者は、比較される配列の完全長にわたって最大のアライメントを達成するために必要とされる任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。好ましくは、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２ソフトウェアを使用して、アミノ酸配列の同一性を決定する（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ２６６，４６０−４８０（１９９６）；ｈｔｔｐ：／／ｂｌａｓｔ．ｗｕｓｔｌ／ｅｄｕ／ｂｌａｓｔ／ＲＥＡＤＭＥ．ｈｔｍｌ）。ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２は、いくつかの検索パラメータを使用し、それらの大部分がデフォルト値に設定される。調整可能なパラメータは、以下の値で設定される：重複スパン＝１、重複分画＝０．１２５、ワード閾値（Ｔ）＝１１。ＨＳＰスコア（Ｓ）およびＨＳＰ  Ｓ２パラメータは、動的値であり、特定の配列の組成物に応じて、プログラム自体によって確立されるが、最小値は、調整されてよく、上に示されるように設定される。
【００６８】
いくつかの実施形態において、Ａｎｇ−（１−７）の機能的等価物、類似体、または誘導体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の断片である。いくつかの実施形態において、Ａｎｇ−（１−７）の機能的等価物、類似体、または誘導体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内にアミノ酸置換、欠失、および／または挿入を含む。Ａｎｇ−（１−７）機能的等価物、類似体、または誘導体は、置換、付加、および／または欠失によってアミノ酸配列を変化させることによって作製することができる。例えば、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）（配列番号１）の配列内の１つ以上のアミノ酸残基は、機能的等価物として作用し、サイレント変化をもたらす、同様の極性の別のアミノ酸によって置換することができる。配列内のアミノ酸の置換は、そのアミノ酸が属するクラスの他の構成員から選択されてもよい。例えば、正電荷（塩基性）アミノ酸は、アルギニン、リジン、およびヒスチジンを含む。非極性（疎水性）アミノ酸としては、ロイシン、イソロイシン、アラニン、フェニルアラニン、バリン、プロリン、トリプトファン、およびメチオニンが挙げられる。非電荷極性アミノ酸としては、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、およびグルタミンが挙げられる。負電荷（酸）アミノ酸としては、グルタミン酸およびアスパラギン酸が挙げられる。アミノ酸グリシンは、非極性アミノ酸ファミリーまたは非電荷（中性）極性アミノ酸ファミリーのいずれかに含まれ得る。アミノ酸のファミリー内で行われる置換は、一般に、同類置換であることが理解される。例えば、ペプチド阻害剤のアミノ酸配列は、修飾または置換され得る。
【００６９】
Ａｎｇ−（１−７）機能的等価物、類似体、および誘導体の例は、下記の「例示的なアンジオテンシン（１−７）ペプチド」という表題の節において説明される。
【００７０】
アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、任意の長さであり得る。いくつかの実施形態において、本発明に従うアンジオテンシン（１−７）ペプチドは、例えば、４〜２５個のアミノ酸（例えば、４〜２０個、４〜１５個、４〜１４個、４〜１３個、４〜１２個、４〜１１個、４〜１０個、４〜９個、４〜８個、４〜７個のアミノ酸）を含有することができる。いくつかの実施形態において、直鎖ペプチドは、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、または２５個のアミノ酸を含有する。
【００７１】
いくつかの実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、プロテアーゼ耐性、血清安定性、および／または生物学的利用能を増加させるために１つ以上の修飾を含む。いくつかの実施形態において、好適な修飾は、ペグ化、アセチル化、グリコシル化、ビオチニル化、Ｄ−アミノ酸および／もしくは非天然アミノ酸との置換、および／またはペプチドの環化から選択される。
【００７２】
本明細書において使用される、「アミノ酸」という用語は、その最も広い意味において、ポリペプチド鎖に組み込まれ得る任意の化合物および／または基質を指す。ある特定の実施形態において、アミノ酸は、一般構造Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｈ）（Ｒ）−ＣＯＯＨを有する。ある特定の実施形態において、アミノ酸は、天然に存在するアミノ酸である。特定の実施形態において、アミノ酸は、合成または非天然アミノ酸（例えば、α，α−二置換アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸）であり、いくつかの実施形態において、アミノ酸は、ｄ−アミノ酸であり、特定の実施形態において、アミノ酸は、ｌ−アミノ酸である。「標準アミノ酸」は、いずれも天然にペプチドの組み込まれるｌ−およびｄ−アミノ酸の両方を含む、天然に存在するペプチドにおいて一般に見出される２０個の標準アミノ酸のうちのいずれかを指す。「非標準」または「非在来型アミノ酸」は、それが合成によって調製されるか、または天然源から得られるかにかかわらず、標準アミノ酸以外の任意のアミノ酸を指す。本明細書において使用される、「合成または非天然アミノ酸」は、塩、アミノ酸誘導体（例えば、アミド）、および／または置換を含むが、これらに限定されない化学的に修飾されたアミノ酸を包含する。ペプチド中にカルボキシおよび／またはアミノ末端アミノ酸を含むアミノ酸は、メチル化、アミド化、アセチル化、および／またはその活性に悪影響を及ぼすことなくペプチドの循環半減期を変更することができる他の化学基との置換によって修飾され得る。非在来型または非天然アミノ酸の例としては、シトルリン、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、４−（Ｅ）−ブテニル−４（Ｒ）−メチル−Ｎ−メチルトレオニン（ＭｅＢｍｔ）、Ｎ−メチル−ロイシン（ＭｅＬｅｕ）、アミノイソ酪酸、スタチン、およびＮ−メチル−アラニン（ＭｅＡｌａ）が挙げられるが、これらに限定されない。アミノ酸は、ジスルフィド結合に関与し得る。「アミノ酸」という用語は、「アミノ酸残基」と同義的に使用され、遊離アミノ酸および／またはペプチドのアミノ酸残基を指し得る。それが遊離アミノ酸を指すか、またはペプチドの残基を指すかは、用語が使用される文脈から明らかとなるであろう。
【００７３】
ある特定の実施形態において、アンジオテンシン−（１−７）ペプチドは、１つ以上のＬ−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸、および／または非天然アミノ酸を含有する。
【００７４】
天然に存在するアミノ酸のみを含有するペプチドに加えて、ペプチド模倣薬またはペプチド類似体もまた、本発明によって包含される。ペプチド類似体は、テンプレートペプチドの特性に類似する特性を有する非ペプチド薬として、製薬業界において一般に使用されている。非ペプチド化合物は、「ペプチド模倣薬（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｍｉｍｅｔｉｃｓ）」またはペプチド模倣薬（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ）と呼ばれる（Ｆａｕｃｈｅｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．５４：２８３−２８７（１９８６）、Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３０：１２２９−１２３９（１９８７））。ペプチド模倣薬は、治療上有用なペプチドに構造的に関連し、同等または増強された治療または予防効果をもたらすために使用され得る。一般に、ペプチド模倣薬は、天然に存在する受容体結合ポリペプチド等のパラダイムポリペプチド（すなわち、生物学的または薬理学的活性を有するポリペプチド）と構造的に同様であるが、当該技術分野において周知の方法によって、−ＣＨ２ＮＨ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シスおよびトランス）、−ＣＨ２ＳＯ−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、−ＣＯＣＨ２−等の結合によって任意に置換される１つ以上のペプチド結合を有する（Ｓｐａｔｏｌａ，Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｖｅｇａ  Ｄａｔａ，１（３）：２６７（１９８３）、Ｓｐａｔｏｌａ  ｅｔ  ａｌ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．３８：１２４３−１２４９（１９８６）、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｒｅｓ．１４：１７７−１８５（１９７９）、およびＷｅｉｎｓｔｅｉｎ．Ｂ．，１９８３，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ  ｅｄｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ−Ｙｏｒｋ，）。そのようなペプチド模倣薬は、より経済的な産生、より優れた化学的安定性、増強された薬理学的特性（例えば、半減期、吸収性、効力、効率等）、減少した抗原性等を含む、天然に存在するポリペプチドを超える著しい利点を有し得る。
【００７５】
Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、通常はペプチドの一部ではない追加の化学部分を含有する他の種類のペプチド誘導体も含むが、但し、その誘導体はペプチドの所望の機能的活性を保持する。そのような誘導体の例としては、（１）アミノ末端または別の遊離アミノ基のＮ−アシル誘導体（アシル基は、アルカノイル基（例えば、アセチル、ヘキサノイル、オクタノイル）、アロイル基（例えば、ベンゾイル）、またはＦ−ｍｏｃ等の保護基（フルオレニルメチル−Ｏ−ＣＯ−）であり得る）、（２）カルボキシ末端または別の遊離カルボキシもしくはヒドロキシル基のエステル、（３）カルボキシ末端またはアンモニアもしくは好適なアミンとの反応によって産生された別の遊離カルボキシル基のアミド、（４）リン酸化誘導体、（５）抗体または他の生物学的リガンドおよび他の種類の誘導体に複合体化した誘導体、および（６）ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖に複合体化した誘導体が挙げられる。
【００７６】
Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、合成（例えば、全固相合成、部分的固相合成、断片縮合、古典的溶液合成、天然−化学的ライゲーション）および組み換え技術を含む、当業者に既知のペプチド合成の任意の方法によって得られてよい。例えば、ペプチドまたはペプチド誘導体は、固相ペプチド合成によって得ることができ、つまり簡潔には、Ｃ末端アミノ酸のカルボキシル基を樹脂（例えば、ベンズヒドリルアミン樹脂、クロロメチル化樹脂、ヒドロキシメチル樹脂）にカップリングすること、および連続してＮ−α保護アミノ酸を付加することからなる。保護基は、当該技術分野において既知の任意のそのような基であり得る。それぞれの新たなアミノ酸を成長鎖に付加する前に、その鎖に付加された前のアミノ酸の保護基が除去される。そのような固相合成は、例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９（１９６４）、Ｖａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２１３：１３９４−１３９７（１９８１）、米国特許第４，３０５，８７２号および同第４，３１６，８９１号、Ｂｏｄｏｎｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｄ．（Ｌｏｎｄｏｎ），３８：１５９７（１９６６）、およびＰｉｅｔｔａ  ａｎｄ  Ｍａｒｓｈａｌｌ，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．６５０（１９７０）（Ｌｕｂｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．″Ｐｅｐｔｉｄｅｓ″Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２１．１１，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｄｅｓ．Ｔｈｉｅｍｅ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，７１３−８０９（２００５）において考察される技術による）において開示された。アミノ酸の適切な樹脂へのカップリングも当該技術分野において周知であり、米国特許第４，２４４，９４６号において開示された（Ｈｏｕｖｅｒ−Ｗｅｙｌ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｖｏｌ  Ｅ２２ａ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ，Ｍｕｒｒａｙ  Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｅｄｉｔｏｒ−ｉｎ−Ｃｈｉｅｆ，Ｔｈｉｅｍｅ．Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  ２００２において考察される）。
【００７７】
別段に定義されない限り、本明細書において使用される科学的および技術的用語、ならびに命名法は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。一般に、細胞培養、感染、分子生物学方法等の手順は、当該技術分野において使用される一般的方法である。そのような標準技術は、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２００１、およびＳａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．，２００１等の参照  マニュアルにおいて見出すことができる。
【００７８】
Ａｎｇ−（１−７）ペプチドの調製の任意のプロセス中、関心の分子のうちのいずれかにおいて感受性反応基を保護することが望ましい場合がある。これは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  Ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｂｙ  Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，１９９１，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ−Ｙｏｒｋ、およびＰｅｐｔｉｄｅｓ：ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｂｙ  Ｓｅｗａｌｄ  ａｎｄ  Ｊａｋｕｂｋｅ，２００２，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｗｈｅｉｎｈｅｉｍ  ｐ．１４２に記載されるもののような在来型保護基によって達成され得る。例えば、αアミノ保護基としては、アシル型保護基（例えば、トリフルオロアセチル、ホルミル、アセチル）、脂肪族ウレタン保護基（例えば、ｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）、シクロヘキシルオキシカルボニル）、芳香族ウレタン型保護基（例えば、フルオレニル−９−メトキシ−カルボニル（Ｆｍｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、Ｃｂｚ誘導体）、およびアルキル型保護基（例えば、トリフェニルメチル、ベンジル）が挙げられる。アミノ酸側鎖保護基としては、ベンジル（ＴｈｒおよびＳｅｒの場合）、Ｃｂｚ（Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ，Ｌｙｓ）、メチルエチル、シクロヘキシル（Ａｓｐ、Ｈｉｓ）、Ｂｏｃ（Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｃｙｓ）等が挙げられる。これらの保護基は、当該技術分野において既知の方法を使用し、便宜的な後次段階で除去されてよい。
【００７９】
さらに、Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、ＦＭＯＣプロトコルに従い、有機相中で保護基とともに合成され得る。望ましくは、ペプチドは、Ｃ１８クロマトグラフィーカラム上で高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて、７０％の収率で精製され、１０〜６０％のアセトニトリル勾配で溶出される。ペプチドの分子量は、質量分析によって検証することができる（Ｆｉｅｌｄｓ，Ｇ．Ｂ．″Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ″Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ．Ｖｏｌ．２８９，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９７７において考察される）。
【００８０】
代替として、Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、例えば、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を使用して、組み換え系内で調製されてもよい。ポリペプチドは、同じポリペプチド内に上記修飾のうちの複数を含有し得ることが理解される。
【００８１】
ペプチドは、生物活性をインビトロで誘発する際に効果的であり得るが、それらのインビボでの有効性は、プロテアーゼの存在によって減少する場合がある。血清プロテアーゼは、特異的な基質要求性を有する。基質は、開裂のためにＬ−アミノ酸およびペプチド結合の両方を有しなければならない。さらに、血清中のプロテアーゼ活性の最も顕著な構成成分を表すエクソペプチダーゼは、通常、ペプチドの第１のペプチド結合に作用し、遊離Ｎ末端を必要とする（Ｐｏｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１０：１２６８−１２７３（１９９３））。これを考慮すると、多くの場合、修飾版のペプチドを使用することが有利である。修飾ペプチドは、Ａｎｇ−（１−７）の所望の生物活性を付与する元のＬ−アミノ酸ペプチドの構造的特徴を保持するが、有利にプロテアーゼおよび／またはエクソペプチダーゼによる開裂の影響を容易に受けにくい。
【００８２】
コンセンサス配列の１つ以上のアミノ酸の、同じ種類のＤ−アミノ酸との組織的置換（例えば、Ｌ−リジンの代わりにＤ−リジン）が、より安定なペプチドを生成するために使用されてよい。したがって、本発明のペプチド誘導体またはペプチド模倣薬は、正順または逆順のいずれかで全てＬ、全てＤ、またはＤ、Ｌペプチドの混合であり得る。Ｎ末端またはＣ末端Ｄ−アミノ酸の存在は、ペプチダーゼが、Ｄ−アミノ酸を基質として利用することができないため、ペプチドのインビボ安定性を増加させる。（Ｐｏｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１０：１２６８−１２７３（１９９３））。逆Ｄペプチドは、Ｄ−アミノ酸を含有するペプチドであり、Ｌ−アミノ酸を含有するペプチドに対して逆配列で並べられる。したがって、Ｌ−アミノ酸ペプチドのＣ末端残基は、Ｄ−アミノ酸ペプチド等のＮ末端になる。逆Ｄ−ペプチドは、Ｌ−アミノ酸ペプチドと同じ二次構造、およびしたがって同様の活性を保持するが、インビトロおよびインビボで酵素分解に対して耐性が高いため、元のペプチドよりも優れた治療効果を有することができる（Ｂｒａｄｙ  ａｎｄ  Ｄｏｄｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：６９２−６９３（１９９４）、Ｊａｍｅｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：７４４−７４６（１９９４））。同様に、逆Ｌペプチドは、標準方法を使用して生成されてよく、親ペプチドのＣ末端が、逆ＬペプチドのＮ末端の代わりになる。重要な二次構造（例えば、短鎖ペプチド）を有しないＬ−アミノ酸ペプチドの逆Ｌ−ペプチドは、元のＬ−アミノ酸ペプチドと同じＬ−アミノ酸ペプチドの側鎖の間隔および構造を保持し、したがって、多くの場合に同様の活性を有することが企図される。さらに、逆ペプチドは、Ｌ−アミノ酸とＤ−アミノ酸との組み合わせを含有し得る。アミノ酸間の間隔および側鎖の構造は保持されてよく、元のＬ−アミノ酸ペプチドと同様の活性をもたらす。
【００８３】
ペプチドのＮ末端またはＣ末端残基に作用するペプチダーゼに耐性を付与するための別の有効な手法は、ペプチド末端に化学基を付加することであり、修飾ペプチドがペプチダーゼの基質でなくなるようにする。１つのそのような化学修飾は、末端のいずれかまたは両方におけるペプチドのグリコシル化である。特定の化学修飾、特にＮ末端グリコシル化は、ヒト血清中のペプチドの安定性を増加させることが示されている（Ｐｏｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１０：１２６８−１２７３（１９９３））。血清安定性を増強する他の化学修飾としては、アセチル基等の１個〜２０個の炭素の低級アルキルからなるＮ末端アルキル基の付加、および／またはＣ末端アミドもしくは置換アミド基の付加が挙げられるが、これらに限定されない。特に、本発明は、Ｎ末端アセチル基および／またはＣ末端アミド基を担持するペプチドからなる修飾ペプチドを含む。
【００８４】
ペプチドの部分列内の天然アミノ酸に対する非天然に存在するアミノ酸の置換は、タンパク質分解への耐性を付与することもできる。そのような置換は、例えば、生物活性に影響を及ぼすことなく、Ｎ末端に作用するエクソペプチダーゼによるタンパク質分解への耐性を付与することができる。非天然に存在するアミノ酸の例としてはα、α−二置換アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸、Ｃ−α−メチルアミノ酸、β−アミノ酸、およびβ−メチルアミノ酸が挙げられる。本発明において有用なアミノ酸類似体としては、β−アラニン、ノルバリン、ノルロイシン、４−アミノ酪酸、オリチン、ヒドロキシプロリン、サルコシン、シトルリン、システイン酸、シクロヘキシルアラニン、２−アミノイソ酪酸、６−アミノヘキサン酸、ｔ−ブチルグリシン、フェニルグリシン、ｏ−ホスホセリン、Ｎ−アセチルセリン、Ｎ−ホルミルメチオニン、３−メチルヒスチジン、および他の非在来型アミノ酸が挙げられ得るが、これらに限定されない。さらに、非天然に存在するアミノ酸を用いるペプチドの合成は、当該技術分野において日常的である。
【００８５】
さらに、コンセンサス配列または実質的に同一のコンセンサス配列変異を含む拘束ペプチドは、当該技術分野において周知の方法によって生成され得る（Ｒｉｚｏ  ａｎｄ  Ｇｉｅｒａｓｃｈ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１：３８７−４１８（１９９２））。例えば、拘束ペプチドは、ジスルフィド架橋を形成することができるシステイン残基を付加することによって生成されてよく、それによって環状ペプチドをもたらす。環状ペプチドは、遊離Ｎ末端またはＣ末端を有しないように構築され得る。したがって、それらは、エクソペプチダーゼによるタンパク質分解の影響を受けにくいが、ペプチド末端において開裂しないエンドペプチダーゼの影響を受けやすい場合がある。Ｎ末端またはＣ末端Ｄ−アミノ酸を有するペプチドおよび環状ペプチドのアミノ酸配列は、Ｎ末端もしくはＣ末端Ｄ−アミノ酸残基の存在、またはそれらの環状構造を除いて、それらがそれぞれ対応するペプチドの配列と通常は同一である。
【００８６】
環状ペプチド
いくつかの実施形態において、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的等価物、類似体、または誘導体は、環状ペプチドである。本明細書において使用される、環状ペプチドは、２つの非隣接残基の間に分子内共有結合を有する。分子内結合は、主鎖対主鎖、側鎖対主鎖、または側鎖対側鎖の結合であり得る（すなわち、直鎖ペプチドの末端官能基および／または末端もしくは内部残基の側鎖官能基が、環化を達成するように結合され得る）。典型的な分子内結合としては、ジスルフィド、アミド、およびチオエーテル結合が挙げられる。ポリペプチドを環化するための様々な手段は、そのようなペプチドに作製され得る多くの他の修飾と同様に、当該技術分野において周知である。一般的な論考については、その内容が参照により本明細書に組み込まれる、国際特許公開第ＷＯ０１／５３３３１号および同第ＷＯ９８／０２４５２号を参照されたい。そのような環状結合および他の修飾を、本発明の環状ペプチドおよび誘導体化合物に適用することもできる。
【００８７】
本明細書に記載の環状ペプチドは、Ｌ−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸の残基、またはそれらの任意の組み合わせを含み得る。アミノ酸は、天然または非天然の源に由来し得るが、但し、少なくとも１つのアミノ基および少なくとも１つのカルボキシル基が分子内に存在し、α−アミノ酸およびβ−アミノ酸が一般に好まれる。環状ペプチドは、１つ以上の希少アミノ酸（例えば、４−ヒドロキシプロリンもしくはヒドロキシリジン）、有機酸または共通アミノ酸のアミドおよび／もしくは誘導体、例えば、エステル化された（例えば、ベンジル、メチル、もしくはエチルエステル）またはアミド化されたおよび／もしくはＮ末端アミノ基の修飾（例えば、アセチル化もしくはアルコキシカルボニル化）を有し、多種多様な側鎖修飾および／または置換（例えば、メチル化、ベンジル化、ｔ−ブチル化、トシル化、アルコキシカルボニル化等）のうちのいずれかを有するか、または有しないＣ末端カルボンを含有してもよい。好適な誘導体としては、Ｎ−アセチル基（環化前に直鎖ペプチドのＮ末端を表すアミノ基がアセチル化されるように）および／またはＣ末端アミド基（すなわち、直鎖ペプチドのカルボキシ末端は、環化前にアミド化される）を有するアミノ酸が挙げられる。環状ペプチドとともに存在し得る一般的なアミノ酸以外の残基としては、ペニシラミン、β，β−テトラメチレンシステイン、β，β−ペンタメチレンシステイン、β−メルカプトプロピオン酸、β，β−ペンタメチレン−β−メルカプトプロピオン酸、２−メルカプトベンゼン、２−メルカプトアニリン、２−メルカプトプロリン、オルニチン、ジアミノ酪酸、α−アミノアジピン酸、ｍ−アミノメチル安息香酸、およびα，β−ジアミノプロピオン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８８】
直鎖ペプチドの合成に続いて、Ｎ−アセチル化および／またはＣ−アミド化の有無にかかわらず、環化は、当該技術分野において周知の様々な技法のうちのいずれかによって達成され得る。一実施形態において、結合は、反応性アミノ酸側鎖の間で生成され得る。例えば、ジスルフィド架橋が、種々の方法のうちのいずれかを使用して、ペプチドを酸化することにより２つのチオール含有残基を含む直鎖ペプチドから形成され得る。１つのそのような方法において、チオールの空気酸化は、塩基性または中性の水性媒質のいずれかを使用して、数日間にわたってジスルフィド結合を生成することができる。ペプチドを高希釈で使用し、凝集および分子間副反応を最小化する。代替として、Ｉ２およびＫ３Ｆｅ（ＣＮ）６等の強力な酸化剤を使用して、ジスルフィド結合を形成することができる。当業者であれば、Ｍｅｔ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＨｉｓの感受性側鎖を酸化しないように注意を払う必要があることを認識するであろう。さらなる実施形態において、環化は、アミド結合の形成によって達成されてよい。例えば、ペプチド結合は、末端官能基間（すなわち、環化前の直鎖ペプチドのアミノ末端およびカルボキシ末端）で形成されてもよい。別のそのような実施形態において、直鎖ペプチドは、Ｄ−アミノ酸を含む。代替として、環化は、Ｎ−末端アセチル基および／またはＣ−末端アミドの有無にかかわらず、１つの末端と残基側鎖とを結合することによって、または２つの側鎖を使用することによって達成され得る。ラクタム結合を形成することができる残基としては、リジン、オルニチン（Ｏｒｎ）、α−アミノアジピン酸、ｍ−アミノメチル安息香酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、グルタミン酸塩、またはアスパラギン酸塩が挙げられる。アミド結合を形成するための方法は、一般に当該技術分野において周知である。１つのそのような方法において、カルボジイミド媒介性ラクタム形成は、カルボン酸のＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤ  ＡＣ、またはＤＣＣＩとの反応によって達成することができ、遊離アミノ基と即時に反応して環化を完了させることができるＯ−アシル尿素の形成をもたらす。代替として、環化は、アジド方法を使用して行うことができ、そこでは反応性アジド中間物が、アルキルエステルからヒドラジドを介して生成される。代替として、環化は、活性化エステルを使用して達成され得る。エステルのアルコキシ炭素上の電子求引性置換基の存在は、アミノ分解に対するそれらの感受性を増加させる。ｐ−ニトロフェノール、Ｎ−ヒドロキシ化合物、およびポリハロゲン化フェノールのエステルの高い反応性は、これらの「活性エステル」をアミド結合の合成において有用にした。さらなる実施形態において、チオエーテル結合がチオール含有残基と適切に誘導体化されたα−アミノ酸の側鎖の間で形成され得る。例として、リジン側鎖は、カルボジイミドカップリング方法（ＤＣＣ、ＥＤＡＣ）を通じてブロモ酢酸にカップリングされ得、次にチオエーテル結合を形成するために上述の残基を含有するチオールのうちのいずれかの側鎖と反応し得る。ジチオエーテルを形成するために、任意の２つのチオール含有側鎖がＤＭＦにおいてジブロモエタンおよびジイソプロピルアミンと反応し得る。
【００８９】
例示的なアンジオテンシン−（１−７）ペプチド
ある特定の態様において、本発明は、直鎖アンジオテンシン−（１−７）ペプチドを提供する。上述のように、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の構造は以下のとおりである。
Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）
【００９０】
本発明のペプチドおよびペプチド類似体は、一般に以下の配列：
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７（配列番号５）
によって表すことができるか、またはその薬学的に許容される塩であり得る。
【００９１】
Ｘａａ１は、任意のアミノ酸またはジカルボン酸である。ある特定の実施形態において、Ｘａａ１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ａｃｐｃ（１−アミノシクロペンタンカルボン酸）、Ａｌａ、Ｍｅ２Ｇｌｙ（Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン）、Ｐｒｏ、Ｂｅｔ（ベタイン、１−カルボキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルメタンアミニウム水酸化物）、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｓａｒ（サルコシン）、またはＳｕｃ（コハク酸）である。特定のそのような実施形態において、Ｘａａ１は、ＡｓｐまたはＧｌｕ等の負電荷アミノ酸、典型的にＡｓｐである。
【００９２】
Ｘａａ２は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｃｉｔ（シトルリン）、Ｏｒｎ（オルニチン）、アセチル化Ｓｅｒ、Ｓａｒ、Ｄ−Ａｒｇ、およびＤ−Ｌｙｓである。ある特定の実施形態において、Ｘａａ２は、ＡｒｇまたはＬｙｓ等の正電荷アミノ酸、典型的にＡｒｇである。
【００９３】
Ｘａａ３は、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ（ノルロイシン）、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、ＨｙｄｒｏｘｙＰｒｏ（ヒドロキシプロリン）、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）、Ａｃｐｃ、またはＴｙｒである。ある特定の実施形態において、Ｘａａ３は、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＮｌｅ等の脂肪族アミノ酸、典型的にＶａｌまたはＮｌｅである。
【００９４】
Ｘａａ４は、Ｔｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ３）、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒ（ホモセリン）、ａｚａＴｙｒ（ａｚａ−α１−ホモ−Ｌ−チロシン）、またはＡｌａである。ある特定の実施形態において、Ｘａａ４は、Ｔｙｒ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒ等のヒドロキシル置換アミノ酸、典型的にＴｙｒである。
【００９５】
Ｘａａ５は、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｖａｌ、またはＧｌｙである。ある特定の実施形態において、Ｘａａ５は、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＮｌｅ等の脂肪族アミノ酸、典型的にＩｌｅである。
【００９６】
Ｘａａ６は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、または６−ＮＨ２−Ｐｈｅ（６−アミノフェニルアライン）である。ある特定の実施形態において、Ｘａａ６は、ＡｒｇまたはＨｉｓ等の完全または部分的に正電荷のアミノ酸である。
【００９７】
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、Ｐｒｏ、またはＡｌａである。
【００９８】
ある特定の実施形態において、Ｘａａ１〜Ｘａａ７は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内の対応するアミノ酸と同一である。ある特定のそのような実施形態において、Ｘａａ１〜Ｘａａ７のうちの１つまたは２つを除く全てが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内の対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態において、Ｘａａ１〜Ｘａａ６の全てが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内の対応するアミノ酸と同一である。
【００９９】
ある特定の実施形態において、Ｘａａ３は、Ｎｌｅである。Ｘａａ３がＮｌｅであるとき、Ｘａａ１−Ｘａａ２およびＸａａ４〜７のうちの１つ以上は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内の対応するアミノ酸と任意に同一である。ある特定のそのような実施形態において、Ｘａａ１−Ｘａａ２およびＸａａ４〜７のうちの１つまたは２つを除く全てが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内の対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態において、Ｘａａ１−Ｘａａ２およびＸａａ４〜７の全てが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内の対応するアミノ酸と同一であり、アミノ酸配列：Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ（配列番号２）を生じる。
【０１００】
ある特定の実施形態において、ペプチドは、アミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ（配列番号２）を有する。
【０１０１】
ある特定の実施形態において、ペプチドは、アミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｃｙｓ（配列番号６）またはＡｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｃｙｓ（配列番号３）を有する。
【０１０２】
いくつかの実施形態において、本明細書において使用される、直鎖アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９（配列番号２３）の配列を有するペプチドであり、これはＡｎｇ（１−９）の配列と同一である。いくつかの実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｎｇ（１−９）の誘導体である。Ａｎｇ（１−９）誘導体を含む例示的なＡｎｇ（１−９）ペプチドについては、その開示が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許公開第２０１２／０１７２３０１号を参照されたい。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、直鎖アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｌａ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号２４）のアミノ酸配列を有するペプチドである。配列番号２４から誘導される付加配列は、その開示が参照により本明細書に組み込まれる、欧州特許出願第２，２６４，０４８号において見出され得る。
【０１０４】
本明細書に記載の直鎖ペプチドの変異型がさらに企図され、変異型は、コンパレータペプチドの１つ以上の機能的特性を維持する。変異型は、本明細書に記載の例示的な直鎖ペプチドのうちのいずれかに対して少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有し得る。
【０１０５】
例示的な環状アンジオテンシン（１−７）ペプチド
ある特定の態様において、本発明は、例えば、Ａｎｇ内の位置Ｔｙｒ４およびＰｒｏ７に対応するアミノ酸の側鎖間に結合を含む、環状アンジオテンシン−（１−７）（Ａｎｇ−（１−７））を提供する。これらのペプチド類似体は、典型的に、７個のアミノ酸残基を含むが、開裂可能な配列を含むこともできる。以下でさらに詳述されるように、本発明は、断片および類似体を含み、１つ以上のアミノ酸が、別のアミノ酸（断片を含む）によって置換される。
【０１０６】
以下の節は、４位および７位におけるチオエーテル結合連結残基に関して本発明の態様を説明するが、他の結合（上記のような）が、チオエーテル架橋を置換し得ること、および他の残基が環化され得ることを理解されたい。チオエーテル架橋は、一硫化架橋とも称され、またはＡｌａ−Ｓ−Ａｌａの場合、ランチオニン架橋とも称される。チオエーテル架橋を含むペプチドは、以下の式のうちの１つを有する２つのアミノ酸によって形成され得る。
【化２】
2015529684.tif 000003
【化３】
2015529684.tif 000004
【化４】
2015529684.tif 000005
【０１０７】
これらの式において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、独立して、−Ｈ、アルキル（例えば、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル）またはアラルキル基であり、アルキルおよびアラルキル基は、１つ以上のハロゲン、−ＯＨ、または−ＮＲＲ’基と任意に置換される（ＲおよびＲ’は、独立して、−ＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルである）。ある特定の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、それぞれ独立して、−Ｈまたは−ＣＨ３であり、例えば、全てが−Ｈである。
【０１０８】
ある特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）に従うチオエーテル架橋を含むＡｎｇ類似体または誘導体を提供する。典型的に、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して、−Ｈおよび−ＣＨ３から選択される。式（Ｉ）に従うチオエーテル架橋を含むペプチドは、例えば、ランチビテオティック酵素によって、またはジスルフィドの硫黄押出によって産生され得る。一実施例において、硫黄が押出されるジスルフィドは、４位のＤ−システインおよび７位のＬ−システインによって、または４位のＤ−システインおよび７位のＬ−ペニシラミンによって形成され得る（例えば、Ｇａｌａｎｄｅ，Ｔｒｅｎｔ  ａｎｄ  Ｓｐａｔｏｌａ（２００３）Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ７１，５３４−５５１を参照）。
【０１０９】
他の実施形態において、２つのアミノ酸の結合は、式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）に表される架橋であり得る。式（ＩＩ）に従うチオエーテル架橋を含むペプチドは、例えば、４位のＤ−ホモシステインおよび７位のＬ−システインによって形成されたジスルフィドの硫黄押出によって作製され得る。同様に、式（ＩＩＩ）におけるようにチオエーテル架橋を含むペプチドは、例えば、４位のＤ−システインおよび７位のＬ−ホモシステインによって形成されるジスルフィドの硫黄押出によって作製され得る。
【０１１０】
上述のように、本発明のＡｎｇ類似体および誘導体は、長さおよびアミノ酸組成において様々である。本発明のＡｎｇ類似体および誘導体は、好ましくは、生物活性を有するか、またはタンパク質分解により活性化され得る不活性前駆体分子である（例えば、１０個のアミノ酸を有するアンジオテンシン（Ｉ）が、どのように２個のアミノ酸の開裂によって活性断片に変換されるか）。Ａｎｇ類似体または誘導体のサイズは、様々であり得るが、３−７Ｎｌｅ−チオエーテル環構造を含む「コア」五量体セグメントが包含される限り、典型的に、約５〜１０個のアミノ酸である。本発明の類似体または誘導体のアミノ酸配列は、異なり得るが、但し、典型的にそれは生物学的に活性であるか、またはタンパク質分解によって活性化し得る。類似体または誘導体の生物活性は、放射性リガンド結合試験、インビトロ細胞活性化アッセイ、およびインビボ実験を含む、当該技術分野において既知の方法を使用して決定することができる。例えば、Ｇｏｄｅｎｙ  ａｎｄ  Ｓａｙｅｓｋｉ，（２００６）Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９１：Ｃ１２９７−１３０７、Ｓａｒｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．（２００６）７１：７９４−８０２、およびＫｏｚｉａｒｚ  ｅｔ  ａｌ．，（１９３３）Ｇｅｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２４：７０５−７１３を参照されたい。
【０１１１】
ペプチドの長さのみが変化するＡｎｇ類似体および誘導体は、以下を含む。
天然のＡｎｇ−（１−７）から誘導される、［Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−７）と指定された４，７−環化類似体（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７、配列番号７）、
天然のアンジオテンシンＩ（Ａｎｇ−（１−１０））から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−１０）と指定された４，７−環化類似体（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９−Ｌｅｕ１０、配列番号８）、
天然のアンジオテンシンＩＩ（Ａｎｇ−（１−８））から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−８）と指定された４，７−環化類似体（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８、配列番号９）、
天然のアンジオテンシンＩＩＩ（Ａｎｇ−（２−８））から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（２−８）と指定された４，７−環化類似体（Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８、配列番号１０）、
天然のアンジオテンシンＩＶ（Ａｎｇ−（３−８））から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（３−８）と指定された４，７−環化類似体（Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８、配列番号１１）、
天然のＡｎｇ−（１−７）から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−７）と指定された４，７−環化類似体（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７、配列番号１２）、および
天然のＡｎｇ−（１−９）から誘導される、［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−９）と指定された４，７−環化類似体（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９、配列番号１３）。
これらの類似体は、式（Ｉ）〜（ＩＩＩ）に示されるチオエーテル架橋のうちの１つを、Ｃｙｃ４−７部分として有することができ、例えば、Ｃｙｃ４およびＣｙｃ７は、式（Ｉ）によって表され、Ｒ１〜Ｒ４は、それぞれ−Ｈまたは−ＣＨ３であり、典型的に−Ｈである。
【０１１２】
天然のアンジオテンシンペプチドのアミノ酸配列と比較して、Ｃｙｃ４−７類似体の４位および７位におけるアミノ酸は、上に示されるチオエーテル環構造の導入を許すように修飾される。Ａｎｇ類似体の長さに加えて、３位、４位、および７位以外の位置におけるアミノ酸は、天然に存在するペプチドと同じであるか、または異なるが、但し、典型的に類似体は生物学的機能を保持する。［Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−１０）のような不活性前駆体の類似体の場合、生物学的機能は、それを生物学的に活性な断片（例えば、Ａｎｇ−（１−８）もしくはＡｎｇ−（１−７））に開裂することができるアンジオテンシン変換酵素に対する類似体の感受性、またはその断片の生物活性の一方または両方を指す。ある特定の実施形態において、本発明のＡｎｇ類似体または誘導体は、固有の機能を有しないが、１つ以上の天然に存在するアンジオテンシン化合物の効果を阻害する。
【０１１３】
ある特定の実施形態において、本発明のＡｎｇ類似体は、式（ＩＶ）によって表される。
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｃｙｃ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｃｙｃ７（ＩＶ、配列番号１４）
【０１１４】
Ｘａａ１は、任意のアミノ酸であるが、典型的にＧｌｕまたはＡｓｐ等の負電荷アミノ酸、より典型的にＡｓｐである。
【０１１５】
Ｘａａ２は、ＡｒｇまたはＬｙｓ等の正電荷アミノ酸、典型的にＡｒｇである。
【０１１６】
Ｘａａ３は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌ等の脂肪族アミノ酸、典型的にＶａｌである。
【０１１７】
Ｃｙｃ４は、Ｃｙｃ７と併せてチオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ４は、Ｄ−立体異性体および／またはＬ−立体異性体、典型的にＤ−立体異性体であり得る。Ｃｙｃ４（Ｃｙｃ７と併用される）の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）に示される。典型的に、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）中のＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、特に−Ｈである。
【０１１８】
Ｘａａ５は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌ等の脂肪族アミノ酸、典型的にＩｌｅである。
【０１１９】
Ｘａａ６は、Ｈｉｓである。
【０１２０】
Ｃｙｃ７は、例えば、式（Ｉ）、（ＩＩ）、または（ＩＩＩ）中のＣｙｃ４と併せて、チオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ７は、Ｄ−立体異性体および／またはＬ−立体異性体、典型的にＬ−立体異性体であり得る。Ｃｙｃ７（Ｃｙｃ４と併用される）の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、および（ＩＶＩＩＩ）に示される。典型的に、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、および（ＩＶ）中のＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、特に−Ｈである。
【０１２１】
ある特定の実施形態において、Ｘａａ１〜Ｘａａ６（Ｃｙｃ４およびＣｙｃ７を除く）のうちの１つ以上は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内の対応するアミノ酸と同一である。ある特定のそのような実施形態において、Ｘａａ１〜Ｘａａ６のうちの１つまたは２つを除く全てが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内の対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態において、Ｘａａ１〜Ｘａａ６の全てが、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）内の対応するアミノ酸と同一である。
【０１２２】
ある特定の実施形態において、Ｃｙｃ４およびＣｙｃ７は、独立して、Ａｂｕ（２−アミノ酪酸）およびＡｌａ（アラニン）から選択され、Ａｌａは、少なくとも１つの位置に存在する。したがって、環状類似体は、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）、Ｒ１〜Ｒ４は、それぞれ−Ｈである）、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｂｕ７−（式（Ｉ）：Ｒ１〜Ｒ３は、−Ｈであり、Ｒ４は、−ＣＨ３である）または−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）：Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、−Ｈであり、Ｒ２は、−ＣＨ３である）によって形成されたチオエーテル結合を有することができる。環状類似体の特定の例は、−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−または−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−結合を含む。
【０１２３】
ある特定の実施形態において、本発明は、アミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｂｕ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（配列番号１５）またはアミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（配列番号１６）を有する４位と７位との間にチオエーテル架橋を有するＡｎｇ−（１−７）類似体を提供し、以下の構造図によって表される：
【化５】
2015529684.tif 000006
【化６】
2015529684.tif 000007
【０１２４】
ある特定の実施形態において、本発明のＡｎｇ類似体または誘導体は、式（ＩＶ）によって表される。
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｃｙｃ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０（ＩＶ、配列番号１７）
上記のように、Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ８、Ｘａａ９、およびＸａａ１０のうちの１つ以上は、ある特定の実施形態において不在である。例えば、（１）Ｘａａ１０が不在であるか、（２）Ｘａａ９およびＸａａ１０が不在であるか、（３）Ｘａａ８、Ｘａａ９、およびＸａａ１０が不在であるか、（４）Ｘａａ１が不在であるか、（５）Ｘａａ１およびＸａａ１０が不在であるか、（６）Ｘａａ１、Ｘａａ９、およびＸａａ１０が不在であるか、（７）Ｘａａ１、Ｘａａ８、Ｘａａ９、およびＸａａ１０が不在であるか、（８）Ｘａａ１およびＸａａ２が不在であるか、（９）Ｘａａ１、Ｘａａ２、およびＸａａ１０が不在であるか、（１０）Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ９、およびＸａａ１０が不在であるか、または（１１）Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ８、Ｘａａ９およびＸａａ１０が不在である。これらの実施形態のそれぞれについて、残りのアミノ酸は下記の値を有する。
【０１２５】
Ｘａａ１は、存在するとき、任意のアミノ酸であるが、典型的に、ＧｌｕまたはＡｓｐ等の負電荷アミノ酸、より典型的にはＡｓｐである。
【０１２６】
Ｘａａ２は、存在するとき、ＡｒｇまたはＬｙｓ等の正電荷アミノ酸、典型的にＡｒｇである。
【０１２７】
Ｎｌｅ３は、ノルロイシンである。
【０１２８】
Ｃｙｃ４は、Ｃｙｃ７と併せてチオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ４は、Ｄ−立体異性体および／またはＬ−立体異性体、典型的にＤ−立体異性体であり得る。Ｃｙｃ４（Ｃｙｃ７と併用される）の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）に示される。典型的に、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）中のＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、特に−Ｈである。
【０１２９】
Ｘａａ５は、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｉｌｅ、またはＶａｌ等の脂肪族アミノ酸、典型的にＩｌｅである。
【０１３０】
Ｘａａ６は、Ｈｉｓである。
【０１３１】
Ｃｙｃ７は、例えば、式（Ｉ）、（ＩＩ）、または（ＩＩＩ）中のＣｙｃ４と併せて、チオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ７は、Ｄ−立体異性体および／またはＬ−立体異性体、典型的にＬ−立体異性体であり得る。Ｃｙｃ７（Ｃｙｃ４と併用される）の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）に示される。典型的に、式（Ｉ）、（ＩＩ）、および（ＩＩＩ）中のＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、特に−Ｈである。
【０１３２】
Ｘａａ８は、存在するとき、Ｐｒｏ以外のアミノ酸、典型的にＰｈｅまたはＩｌｅである。ある特定の実施形態において、Ｉｌｅは、Ａｎｇ（１−８）の阻害剤をもたらす。ある特定の実施形態において、Ｐｈｅは、Ａｎｇ（１−８）またはＡｎｇ（１−１０）の生物活性を維持する。
【０１３３】
Ｘａａ９は、存在するとき、Ｈｉｓである。
【０１３４】
Ｘａａ１０は、存在するとき、例えば、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、またはＬｅｕ等の脂肪族残基、典型的にＬｅｕである。
【０１３５】
ある特定の実施形態において、Ｘａａ１〜Ｘａａ１０（Ｎｌｅ３、Ｃｙｃ４、およびＣｙｃ７を除く）のうちの１つ以上は、天然に存在するＡｎｇ（Ａｎｇ−（１−７）、Ａｎｇ（１−８）、Ａｎｇ（１−９）、Ａｎｇ（１−１０）、Ａｎｇ（２−７）、Ａｎｇ（２−８）、Ａｎｇ（２−９）、Ａｎｇ（２−１０）、Ａｎｇ（３−８）、Ａｎｇ（３−９）、およびＡｎｇ（３−１０）を含む）内の対応するアミノ酸と同一である。ある特定のそのような実施形態において、Ｘａａ１〜Ｘａａ１０のうちの１つまたは２つを除く全て（それらが存在する場合）、天然に存在するＡｎｇ内の対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態において、Ｘａａ１〜Ｘａａ１０の全てが（それらが存在する場合）、天然に存在するＡｎｇ内の対応するアミノ酸と同一である。
【０１３６】
ある特定の実施形態において、Ｃｙｃ４およびＣｙｃ７は、独立して、Ａｂｕ（２−アミノ酪酸）およびＡｌａ（アラニン）から選択され、Ａｌａが、少なくとも１つの位置に存在する。したがって、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）、Ｒ１〜Ｒ４は、それぞれ−Ｈである）、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｂｕ７−（式（Ｉ）：Ｒ１〜Ｒ３は、−Ｈであり、Ｒ４は、−ＣＨ３である）、または−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）：Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、−Ｈであり、Ｒ２は、−ＣＨ３である）によって形成されたチオエーテル結合を含む環状類似体が包含される。特定の環状類似体は、−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−または−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−結合を含む。
【０１３７】
具体的に、本発明は、アミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｂｕ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（配列番号１８）またはアミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（配列番号１９）を有する４位と７位との間にチオエーテル架橋を有するＡｎｇ−（１−７）類似体または誘導体を提供する。
【０１３８】
別の態様において、本発明は、４位と７位との間にチオエーテル架橋を有し、Ａｎｇ−（１−８）拮抗活性を有するＡｎｇ−（１−８）類似体または誘導体、特にアミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｂｕ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｉｌｅ（配列番号２０）、アミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｉｌｅ（配列番号２１）、またはアミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｂｕ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｉｌｅ（配列番号２２）を有するＡｎｇ−（１−８）類似体または誘導体を提供する。
【０１３９】
アルキル基は、完全飽和の直鎖または分岐非芳香族炭化水素である。典型的に、直鎖または分岐アルキル基は、１個〜約２０個、好ましくは１個〜約１０個の炭素原子を有する。直鎖および分岐アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチル、およびオクチルが挙げられる。Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分岐アルキル基は、「低級アルキル」基とも称される。
【０１４０】
アラルキル基は、アリール基によって置換されたアルキル基である。芳香族（アリール）基としては、フェニル、ナフチル、およびアントラシル等の炭素環式芳香族基、ならびにイミダゾリル、チエニル、フリル、ピリジル、ピリミジル、ピラニル、ピラゾリル、ピロリル、ピラジニル、チアゾリル、オキサゾリル、およびテトラゾリル等のヘテロアリール基が挙げられる。芳香族基は、炭素環式芳香族環またはヘテロアリール環が１つ以上の他のヘテロアリール環に融合される、融合多環式芳香族環系も含む。例としては、ベンゾチエニル、ベンゾフリル、インドリル、キノリニル、ベンゾチアゾール、ベンゾキサゾール、ベンズイミダゾール、キノリニル、イソキノリニル、およびイソインドリルが挙げられる。
【０１４１】
誘導体および類似体を含むアンジオテンシン（１−７）ペプチドは、様々な実施形態において様々な異なる量で存在し得る。例えば、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１０〜１０００ｍｇ（例えば、約２０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、３０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、４０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、５０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、６０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、７０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、８０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、９０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、約１０〜９００ｍｇ、１０〜８００ｍｇ、１０〜７００ｍｇ、１０〜６００ｍｇ、１０〜５００ｍｇ、１００〜１０００ｍｇ、１００〜９００ｍｇ、１００〜８００ｍｇ、１００〜７００ｍｇ、１００〜６００ｍｇ、１００〜５００ｍｇ、１００〜４００ｍｇ、１００〜３００ｍｇ、２００〜１０００ｍｇ、２００〜９００ｍｇ、２００〜８００ｍｇ、２００〜７００ｍｇ、２００〜６００ｍｇ、２００〜５００ｍｇ、２００〜４００ｍｇ、３００〜１０００ｍｇ、３００〜９００ｍｇ、３００〜８００ｍｇ、３００〜７００ｍｇ、３００〜６００ｍｇ、３００〜５００ｍｇ、４００ｍｇ〜１，０００ｍｇ、５００ｍｇ〜１，０００ｍｇ、１００ｍｇ〜９００ｍｇ、２００ｍｇ〜８００ｍｇ、３００ｍｇ〜７００ｍｇ、４００ｍｇ〜７００ｍｇ、および５００ｍｇ〜６００ｍｇ）の範囲の量で存在する。いくつかの実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ以上の量で存在する。いくつかの実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、約１０００ｍｇ、９５０ｍｇ、９００ｍｇ、８５０ｍｇ、８００ｍｇ、７５０ｍｇ、７００ｍｇ、６５０ｍｇ、６００ｍｇ、５５０ｍｇ、５００ｍｇ、４５０ｍｇ、４００ｍｇ、３５０ｍｇ、３００ｍｇ、２５０ｍｇ、２００ｍｇ、１５０ｍｇ、または１００ｍｇ以下の量で存在する。
【０１４２】
いくつかの実施形態において、環状アンジオテンシン（１−７）ペプチドは、環化Ａｎｇ（１−９）ペプチド、または配列番号２４を含む環化ペプチドである。
【０１４３】
本明細書に記載の環状ペプチドの変異型がさらに企図され、変異型は、コンパレータペプチドの１つ以上の機能的特性を維持する。環化変異型は、本明細書に記載の例示的な環状ペプチドの配列のうちのいずれかに対して少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性で配列を有し得る。
【０１４４】
ｐＨ降下剤
本発明に好適なｐＨ降下剤は、ａ）消化管に対して毒性でない、ｂ）水素イオンを送達することができるか、または局所環境からより高い水素イオン含有量を誘導することができるかのいずれかである、および／またはｃ）そこで見出されるプロテアーゼに最適なｐＨを下回るように局所腸内ｐＨを降下させるのに十分な量で経口投与することができる、任意の薬学的に許容されるｐＨ降下剤、またはｐＨ降下剤の組み合わせを含むことが企図される。ｐＨ降下剤が本発明に好適であるかどうか、および適切な量を決定するために、様々な試験が使用されてよい。例えば、ｐＨ降下剤またはｐＨ降下剤の組み合わせは、１０ミリリットルの０．１Ｍ重炭酸ナトリウム溶液に付加されるときの特定の量が、溶液のｐＨを５．５、４．７、または３．５以下に降下させる場合、本発明に好適である。いくつかの実施形態において、ある量のｐＨ降下剤または薬剤の量を、１０ミリリットルの０．１Ｍ重炭酸ナトリウム溶液に付加し、ｐＨを３．４、３．２、３．０、または２．８以下に降下させてもよい。
【０１４５】
いくつかの実施形態において、好適なｐＨ降下剤または薬剤は、４．２を超えない（例えば、４．０、３．８、３．６、３．４、３．２、３．０、または２．８以下）のｐＫａを有する少なくとも１つのｐＨ降下剤を含む。本発明に好適な例示的ｐＨ降下剤としては、限定されないが、アセチルサリチル酸、酢酸、アスコルビン酸、クエン酸、フマル酸、グルクロン酸、グルタル酸、グリセリン酸、グリココール酸、グリオキシル酸、イソクエン酸、イソ吉草酸、乳酸、マレイン酸、オキサロ酢酸、オキサロコハクサン、プロピオン酸、ピルビン酸、コハク酸、酒石酸、および吉草酸等のカルボン酸；塩化アルミニウム；塩化亜鉛；アセチルグルタミン酸、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、ベタイン、カルニチン、カルノシン、シトルリン、クレアチン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、ヒドロキシリジン、ヒドロキシプロリン、ヒポタウリン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチルヒスチジン、ノルロイシン、オルニチン、フェニルアラニン、プロリン、サルコシン、セリン、タウリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンの酸塩を含むアミノ酸の酸塩（またはその誘導体）、フラクトース１，６二リン酸塩およびグルコースを含む特定のリン酸エステルが挙げられ、１，６二リン酸塩は、ある特定の実施形態において、適切なｐＨ降下剤でもあり得る。ある特定の実施形態において、クエン酸または酒石酸が、ｐＨ降下剤として使用される。
【０１４６】
任意の特定のｐＨ降下剤またはｐＨ降下剤の組み合わせの必要量は、異なり得る。典型的に、好適な量は、当該技術分野において既知であり、本明細書に記載の様々な試験を使用して決定され得る（例えば、上記の１０ミリリットルの０．１Ｍ重炭酸ナトリウム溶液中でｐＨ降下試験を使用する）。非限定例として、本発明に従う製剤に使用されるｐＨ降下剤の好適な量は、約１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４２５ｍｇ、４５０ｍｇ、４７５ｍｇ、５００ｍｇ、５２５ｍｇ、５５０ｍｇ、５７５ｍｇ、６００ｍｇ、６２５ｍｇ、６５０ｍｇ、６７５ｍｇ、７００ｍｇ、７２５ｍｇ、７５０ｍｇ、７７５ｍｇ、８００ｍｇ、８２５ｍｇ、８５０ｍｇ、８７５ｍｇ、９００ｍｇ、９２５ｍｇ、９５０ｍｇ、９７５ｍｇ、または１，０００ｍｇを超える量であり得る。他の実施形態において、使用されるクエン酸の量は、１，０００ｍｇを超えてよい。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、使用されるｐＨ降下剤（例えば、クエン酸または酒石酸）の好適な量は、特定の剤形の総重量の割合として測定され得る。非限定例として、使用されるｐＨ降下剤の好適な量は、固体剤形の総重量の約１０％以上（例えば、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％以上）の量であり得る。
【０１４８】
吸収促進剤
様々な実施形態において、本発明の製剤は、１つ以上の吸収促進剤を有する。本明細書において使用される、吸収促進剤は、他の構成成分が放出される水性または親油性環境のいずれかにおけるそれらの溶解度を増加させる、および／または腸壁全体で活性ペプチド（例えば、アンジオテンシン（１−７）ペプチド）の取り込みを促進する薬剤を指す。いくつかの実施形態において、吸収促進剤は、溶解度促進剤および／または取り込み促進剤と称される。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、吸収促進剤の混合物を有することが可能であり、促進された溶解度を提供するものもあれば、促進された取り込みを提供するものもあれば、両方を提供するものもある。所与の実施形態において、様々な数の吸収促進剤を有することが可能であり、限定されないが、１種、２種、３種、４種、５種、６種、７種、８種、９種、または１０種の吸収促進剤を含む。
【０１５０】
界面活性剤が、溶解度促進剤および取り込み促進剤の両方の特性を有する有用な吸収促進剤の例である。いくつかの実施形態において、界面活性剤が吸収促進剤として使用されるとき、それらは、製造プロセス中にカプセルの混合および充填を促進するための自由流動性粉末であり得る。他の実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチドの生物学的利用能を増加させるために界面活性剤が使用されるとき、その界面活性剤は、（ａ）コレステロール誘導体（例えば、胆汁酸）等のアニオン性界面活性剤、（ｂ）カチオン性界面活性剤（例えば、アシルカルニチン、リン脂質等）、（ｃ）非イオン性界面活性剤、および（ｄ）アニオン性界面活性剤と負電荷中和剤との混合物、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され得る。負電荷中和剤としては、アシルカルニチン、セチル塩化ピリジニウム等が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１５１】
いくつかの実施形態において、酸可溶性胆汁酸およびカチオン性界面活性剤は、一緒に吸収促進剤として使用される。アシルカルニチン（例えば、ラウロイルカルニチ）、リン脂質、および胆汁酸、いくつかの実施形態において特に効果的な吸収促進剤であり得る。
【０１５２】
種々の吸収促進剤が、様々な実施形態における使用に好適であるが、以下の例示的な列挙は、本発明のいくつかの実施形態を説明することが意図される。限定されないが、いくつかの好適な吸収促進剤としては、（ａ）サリチル酸ナトリウム、３−メトキシサリチル酸塩、５−メトキシサリチル酸塩、およびホモバニリン酸塩等のサリチル酸塩；（ｂ）タウロコール酸、タウロデオキシコール酸、デオキシコール酸、コール酸、グリコール酸、リトコール酸塩、ケノデオキシコール酸、ウルソデオキシコール酸、ウルソコール酸、デヒドロコール酸、フシジン酸等の胆汁酸；（ｃ）ポリオキシエチレンエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ  ３６Ｔ、Ｂｒｉｊ  ５２、Ｂｒｉｊ  ５６、Ｂｒｉｊ  ７６、Ｂｒｉｊ  ９６、Ｔｅｘａｐｈｏｒ  Ａ６、Ｔｅｘａｐｈｏｒ  Ａ１４、Ｔｅｘａｐｈｏｒ  Ａ６０等）、ｐ−ｔ−オクチルフェノールポリオキシエチレン（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−４５、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１１４、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−３０５等）、ノニルフェノキシポロキシエチレン（例えば、Ｉｇｅｐａｌ  ＣＯシリーズ）、ポリオキシエチレンソルビタンエステル（例えば、Ｔｗｅｅｎ−２０、Ｔｗｅｅｎ−８０等）等の非イオン性界面活性剤；（ｄ）ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム等のアニオン性界面活性剤；（ｅ）リゾレシチンおよびリゾホスファチジルエタノールアミン等のリゾリン脂質；（ｆ）アシルカルニチン、アシルコリン、およびアシルアミノ酸、例えば、ラウロイルカルニチン、ミリストイルカルニチン、パルミトイルカルニチン、ラウロイルコリン、ミリストイルコリン、パルミトイルコリン、ヘキサデシルリジン、Ｎ−アシルフェニルアラニン、Ｎ−アシルグリシン等；ｇ）ジヘプタノイルホスファチジルコリン、ジオクチルホスファチジルコリン等の水溶性リン脂質；（ｈ）中鎖長脂肪酸（カプリル酸、カプリン酸、およびラウリン酸）を含有するモノ−、ジ−、トリグリセリドの混合物である中鎖グリセリド；（ｉ）エチレン−ジアミン四酢酸；（ｊ）塩化セチルピリジニウム等のカチオン性界面活性剤；（ｋ）Ｌａｂｒａｓｏｌ、Ｌａｂｒａｆａｃ等のポリエチレングリコールの脂肪酸誘導体；および（ｌ）ラウロイルマルトシド、ラウロイルスクロース、ミリストイルスクロース、パルミトイルスクロース等のアルキルサッカリドが挙げられる。
【０１５３】
いくつかの実施形態において、吸収促進剤（複数可）は、薬学的組成物の全体重量（典型的に腸溶コーティングを除く）に対する重量％として測定された量で存在する。追加の非限定例として、実施形態に存在する吸収促進剤の量は、０．１〜２０重量％；０．５〜２０重量％；１．０〜２０重量％、２．０〜２０重量％、３．０〜２０重量％、４．０〜２０重量％、５．０〜２０重量％、５．０〜１５重量％、５．０〜１４重量％、５．０〜１３重量％、５．０〜１２重量％、５．０〜１２重量％、５．０〜１１重量％、５．０〜１０重量％、６．０〜１０重量％、７．０〜１０重量％、８．０〜１０重量％、９．０〜１０重量％、５．０〜９．０重量％、５．０〜８．０重量％、５．０〜７．０重量％、および５．０〜６．０重量％の範囲であり得る。
【０１５４】
いくつかの実施形態において、ｐＨ降下剤（複数可）の吸収促進剤（複数可）に対する重量比は、約３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１、１５：１、１６：１、１７：１、１８：１、１９：１、２０：１、または前述の例示的な比のうちのいずれか２つの間であり得る。所与の薬学的組成物中の全てのｐＨ降下剤の総重量および全ての吸収促進剤の総重量は、前述の例示的な比で含まれる。例えば、薬学的組成物が２つのｐＨ降下剤および３つの吸収促進剤を含む場合、前述の比は、両方のｐＨ降下剤の総合重量および３つの吸収促進剤全ての総合重量に基づいて計算される。
【０１５５】
いくつかの実施形態において、吸収促進剤（複数可）は、例えばｐＨ５．５未満、およびｐＨ３．０〜ｐＨ５．０の酸ｐＨで可溶性である。
【０１５６】
保護ビヒクル
本明細書において使用される、保護ビヒクルは、活性ペプチド（例えば、アンジオテンシン（１−７）ペプチド）を胃プロテアーゼから保護する担体、層、コーティング、または他のビヒクル等の任意の保護成分および／または構造を指す。典型的に、保護ビヒクルは、最終的に特定剤形中の活性成分および他の成分が放出され得るように溶解する。保護ビヒクルの一般的な形態は、腸溶コーティングである。いくつかの実施形態において、好適な腸溶コーティング（ｃｏｓｔｉｎｇ）は、０．１Ｎ  ＨＣｌ中の本発明の薬学的組成物の分解を少なくとも２時間防ぎ、次に該組成物が１００ｒｐｍで回転する溶解槽中のｐＨが６．３に増加した後３０分以内に、薬学的組成物の全ての含有物の完全な放出を許すことができる。
【０１５７】
多くの腸溶コーティングが当該技術分野において既知であり、１つ以上の実施形態において有用である。腸溶コーティングの非限定例としては、セルロース酢酸フタル酸塩、ヒドロキシプロピルメチルセルロースコハク酸塩、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタル酸塩、カルボキシルメチルエチルセルロース、およびメタクリル酸−メチルメタクリル酸塩コポリマーが挙げられる。いくつかの実施形態において、アンジオテンシン（１−７）ペプチド、溶解度および／または取り込み促進剤（複数可）等の吸収促進剤、およびｐＨ降下剤（複数可）が、実施形態の構成成分が保護された状態で胃を通過するのを許すために、十分に粘性の保護シロップに含まれる。
【０１５８】
好適な腸溶コーティングが、例えば、本発明の活性成分および他の構成成分がカプセル内に充填された後、カプセルに適用され得る。他の実施形態において、腸溶コーティングは、錠剤の外側にコーティングされるか、または活性成分の粒子の外面にコーティングされ、次に錠剤形態に圧搾されるか、またはカプセルに充填される。
【０１５９】
いくつかの実施形態において、本発明の全ての構成成分が担体またはビヒクルから放出され、可能な限り同時に腸内環境で可溶化されることが望ましい場合がある。いくつかの実施形態において、ビヒクルまたは担体が、小腸内で活性成分を放出することが好ましい場合もあり、経細胞または傍細胞輸送を増加させる取り込み促進剤は、望ましくない副作用を引き起こす可能性が、同じ取り込み促進剤が結腸内で後に放出された場合よりも低い。しかし、本発明は、結腸内と同様に小腸内で効果的であることが理解される。上述のものに加えて、多数のビヒクルまたは担体が当該技術分野において既知である。
【０１６０】
いくつかの実施形態において、腸溶コーティングの量を低く保つことが望ましい場合がある（特に、本発明の化合物がどれ程同時に放出されるかを最適化する際）。いくつかの実施形態において、腸溶コーティングは、固体剤形等の薬学的組成物の残りの重量に３０％を超えない重量を付加する（「残り」とは腸溶コーティング自体を除く薬学的組成物である）。他の実施形態において、腸溶コーティングは、２０％未満、１９％未満、１８％未満、１７％未満、１６％未満、１５％未満、１４％未満、１３％未満、１２％未満、１１％未満、または１０％未満を付加する。いくつかの実施形態において、腸溶コーティング等の保護ビヒクルは、薬学的組成物（例えば、固体剤形）の総重量の約２５％、２４％、２３％、２２％、２１％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％以下の量を占める。
【０１６１】
剤形
本明細書において使用される際、剤形は、活性薬物成分および非薬物成分の混合物を指す。液体剤形、固体剤形、および半固体剤形を含むが、これらに限定されない様々な剤形が、本発明に従って使用されてよい。一般的な剤形としては、丸剤、錠剤、カプセル、ドリンク、またはシロップが挙げられる。いくつかの実施形態において、丸剤、錠剤、またはカプセル等の固体剤形が使用される。
【０１６２】
典型的に、特に望ましい剤形は、アンジオテンシン−（１−７）ペプチド、ｐＨ降下剤、および吸収促進剤の同時放出を提供する。酸がペプチドの放出に近い時間に放出されるとき、酸はペプチドに対する望ましくないタンパク質分解の攻撃を最良に減少させることができるため、これは非常に望ましい。ほぼ同時の放出は、本発明の全ての構成成分を単一ピル、錠剤、またはカプセルとして投与することにより最良に達成される。
【０１６３】
様々な実施形態は、希釈剤、グリカント、滑沢剤、ゼラチン、カプセル、保存剤、着色剤等の一般的な薬学的賦形剤を、それらの通常知られているサイズおよび量で任意に含んでよい。例示的な非限定の賦形剤としては、プロソルト、ポリプラスタム、およびフマル酸ステアリルナトリウムが挙げられる。いくつかの実施形態において、別のペプチド（例えば、アルブミン、カゼイン、大豆タンパク質、他の動物または植物タンパク質等）は、非特異的吸着（例えば、腸内粘液障壁に対するアンジオテンシン（１−７）ペプチドの結合）を減少させるために含まれ、それによって高価なペプチド活性剤の必須濃度を低下させる。付加されるとき、付加ペプチドは、典型的に、薬学的組成物全体の重量（保護ビヒクルを除く）に対して１．０〜１０．０重量％である。典型的に、この付加ペプチドは、生理学的に活性ではなく、最も好ましくは大豆ペプチドまたは同種のもの等の食品ペプチドである。理論に束縛されることを意図せずに、この第２のペプチドは、望ましくはプロテアーゼ相互作用についてペプチド活性剤と競合する、プロテアーゼスカベンジャーとして作用することによって生物学的利用能を増加させることもできる。第２のペプチドは、活性化合物の肝臓通過を補助することもできる。
【０１６４】
いくつかの実施形態において、ｐＨ降下剤（複数可）、アンジオテンシン（１−７）ペプチド、吸収促進剤（複数可）、および他の賦形剤（各カテゴリの単一化合物または複数の化合物）が、剤形中に均一に分散される。他の実施形態において、剤形は、薬学的結合剤を含む顆粒を含んでよく、アンジオテンシン（１−７）ペプチド、ｐＨ降下剤、および吸収促進剤が、該結合剤内に均一に分散される。さらに他の実施形態において、顆粒は、有機酸の均一層、促進剤の層、および有機酸の外層によって取り囲まれるペプチドの層によって取り囲まれた酸コアからなる場合もある。顆粒は、ｐＨ降下剤、吸収促進剤、および本発明のペプチド活性剤と一緒に、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース等の薬学的結合剤からなる水性混合物から調製されてもよい。
【０１６５】
記載のように、様々な実施形態は、異なる量の成分および異なる成分も有し得る。ある特定の実施形態の処方に関係なく、その実施形態に存在する全ての成分の総重量は、特定の重量範囲内、例えば、約５００〜１５００（例えば、約５００〜１２００ｍｇ、５００〜１０００ｍｇ、６００〜１５００ｍｇ、６００〜１２００ｍｇ、６００〜１０００ｍｇ、７００〜１５００ｍｇ、７００〜１２００ｍｇ、７００〜１０００ｍｇ、８００〜１５００ｍｇ、８００〜１２００ｍｇ、８００〜１０００ｍｇ）であり得る。いくつかの実施形態において、好適な固体剤形は、約５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１１００ｍｇ、１２００ｍｇ、１３００ｍｇ、１４００ｍｇ、または１５００ｍｇ以上の総重量を有する。いくつかの実施形態において、好適な固体剤形は、約２０００ｍｇ、１９００ｍｇ、１８００ｍｇ、１７００ｍｇ、１６００ｍｇ、１５００ｍｇ、１４００ｍｇ、１３００ｍｇ、１２００ｍｇ、１１００ｍｇ、１０００ｍｇ、９００ｍｇ、８００ｍｇ、７００ｍｇ、６００ｍｇ、または５００ｍｇ以下の総重量を有する。
【実施例】
【０１６６】
実施例１．アンジオテンシン（１−７）ペプチドの経口送達
この実施例は、アンジオテンシン（１−７）が、本発明に従って例示的な製剤を使用し、効果的に経口送達され得ることを実証する。具体的に、アンジオテンシン（１−７）ペプチドを経口送達する実行可能性が、液体製剤中のそれを、十二指腸内注射（ＩＤ）を介して麻酔下のラットに投与することによって実証された。このモデルは、カプセルまたは錠剤等の経口送達された腸溶コーティング固体剤形から予期される放出および吸収を模倣する。
【０１６７】
最初に、雌Ｓｐｒａｑｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおけるベースライン薬物動態プロファイルが、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中のアンジオテンシン（１−７）の皮下（ＳＣ）投与によって得られた。血液試料（０．６ｍＬ）を、ペプチドの注射前、および注射後５分、１０分、２０分、３０分、６０分、および９０分に右頚動脈に埋め込まれたカニューレから採取し、等量のヘパリン化生理食塩水と置き換えた。
【０１６８】
抽出後、プロテアーゼ阻害剤カクテルを含有する試料を氷冷管に移した。試料を４ｏＣで遠心分離して血漿を得るまで氷上で保持した。次に、ＬＣ−ＭＳアッセイを使用して分析するまで、血漿の上清を−７０ｏＣで冷凍した。
【０１６９】
表１は、指定の時点および非コンパートメントＰＫ値で達成された例示的な個別のベースラインＡ（１−７）レベルを要約した。３匹のラットに０．３ｍＬの１０ｍｇ／ｍＬ  Ａ（１−７）を皮下注射として投与した。Ａ（１−７）の薬物動態を、非コンパートメントモデルを使用して決定し、個別の薬物動態を決定した。各時点の平均濃度を計算し、これらの平均値のＰＫ値を推定した。Ｔｍａｘは、投与後約１０〜９０分で達成された。この処置群の場合、半減期は約１５分であった。観察期間にわたる総平均Ａ（１−７）暴露は、６１４ｎｇ＊分／ｍＬであり、５８５〜６５６ｎｇ＊分／ｍＬの範囲であった。
【表１】
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【０１７０】
次に、アンジオテンシン（１−７）ペプチド（例えば、ＴＸＡ１２７）の経口送達を、腸溶コーティングされたカプセルによる腸へのペプチドの放出を模倣するラットモデルにおいて評価した。手短に述べると、麻酔下のラットの十二指腸を手術により露出させ、アンジオテンシン（１−７）ペプチドを、２７ゲージ針を通じて十二指腸に送達した。ベースラインは、ＰＢＳ中のアンジオテンシン（１−７）の十二指腸内投与によって得られた。ペプチド投与前および投与後５分、１０分、２０分、４０分、６０分、および９０分に血液試料を頚動脈から取り出した。続いて、腸溶コーティングされたカプセルの含有物を模倣する製剤である、４００ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ３．５）およびラウロイル−Ｌ−カルニチン（ＬＬＣ）（１０ｍｇ／ｍＬ）中のアンジオテンシン（１−７）ペプチドを十二指腸内投与した。ラットの循環中のＴＸＡ１２７の安定性を最大化するために、カプトプリル（例えば、０．５ｍｇ／ｍＬまたは５ｍｇ／ｍＬ）を製剤に付加してもよい。ベースライン試験と同時点で血液試料を採取し、分析のために上記のように処理した。例示的な結果を表２〜５に要約した。
【０１７１】
表２は、ＰＢＳ中に調合された０．３ｍＬの１０ｍｇ／ｍＬアンジオテンシン（１−７）（Ａ（１−７））で処置した合計６匹のラットからの例示的な結果を要約する。Ａ（１−７）の薬物動態を、非コンパートメントモデルを使用して決定した。各時点の平均濃度を計算し、これらの平均値のＰＫ値を推定した。これらを、全ての個別のＰＫパラメータの平均を取ることによって計算される平均ＰＫ値と比較した。Ｔｍａｘは、投与後約１０〜６０分で達成された。この処置群の場合、半減期は７〜１４０分の範囲であった。観察期間にわたる総平均Ａ（１−７）暴露は、４０３ｎｇ＊分／ｍＬであり、１２３〜８８１ｎｇ＊分／ｍＬの範囲であった。
【表２】
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【０１７２】
表３は、１０ｍｇ／ｍＬのＬＬＣ、４００ｍＭのクエン酸、１５０ｍＭのＮａＣｌ  ｐＨ３．５を含有する調製物中０．３ｍＬの１０ｍｇ／ｍＬ  Ａ（１−７）で処置したラットにおいて見出された例示的なＡ（１−７）の濃度を要約する。Ａ（１−７）の薬物動態を、非コンパートメントモデルを使用して決定した。さらに、各時点の平均濃度を計算し、これらの平均値のＰＫ値を推定した。これらを、全ての個別のＰＫパラメータの平均を取ることによって計算される平均ＰＫ値と比較した。Ｔｍａｘは、投与後約５〜１０分で達成された。この処置群の場合、半減期は９．３〜１７３．３分の範囲であった。観察期間にわたる総平均Ａ（１−７）暴露は、４，２７４ｎｇ＊分／ｍＬであり、４２２〜１９，５０２ｎｇ＊分／ｍＬの範囲であった。
【表３−１】
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【表３−２】
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【０１７３】
表４は、０．５ｍｇ／ｍＬのカプトプリル、１０ｍｇ／ｍＬのＬＬＣ、４００ｍＭのクエン酸塩、１５０ｍＭのＮａＣｌをｐＨ３．５で含有する調製物中の０．３ｍＬの１０ｍｇ／ｍＬ  Ａ（１−７）を投与した７匹のラットからの例示的な薬物動態の結果を要約する。Ａ（１−７）の薬物動態を、非コンパートメントモデルを使用して決定した。各時点の平均濃度を計算し、これらの平均値のＰＫ値を推定した。これらを、全ての個別のＰＫパラメータの平均を取ることによって計算される平均ＰＫ値と比較した。１，０００ｎｇ／ｍＬより大きい値を使用して、ＡＵＣを決定し、暴露の範囲についての視点を提供した。さらに、各時点の平均濃度を計算し、これらの平均値のＰＫ値を推定した。Ｔｍａｘは、投与後約５〜１０分で達成された。この処置群の場合、半減期は１１．９〜２９．１分の範囲であった。観察期間にわたる総平均Ａ（１−７）暴露は、７，１５２ｎｇ＊分／ｍＬであり、１，９６９〜９，２５７ｎｇ＊分／ｍＬの範囲であった。
【表４−１】
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【表４−２】
2015529684.tif 000013
【０１７４】
表５は、０．５ｍｇ／ｍＬのカプトプリル、１０ｍｇ／ｍＬのＬＬＣ、４００ｍＭのクエン酸塩、１５０ｍＭのＮａＣｌをｐＨ３．５で含有する調製物中の０．３ｍＬの１０ｍｇ／ｍＬ  Ａ（１−７）を付与した６匹のラットにおいて達成された例示的なＡ（１−７）レベルを要約する。ここでも、Ａ（１−７）の薬物動態を、非コンパートメントモデルを使用して決定し、個別の薬物動態パラメータも決定した。この分析において、１，０００ｎｇ／ｍＬより大きい値を使用して、ＡＵＣを決定し、暴露の範囲についての視点を提供した。各時点の平均濃度を計算し、これらの平均値のＰＫ値を推定した。Ｔｍａｘは、投与後約５〜１０分で達成された。この処置群の場合、半減期は７．９７〜２５．６分の範囲であった。観察期間にわたる総平均Ａ（１−７）暴露は、９，３９９ｎｇ＊分／ｍＬであり、１，００８〜２６，６５４ｎｇ＊分／ｍＬの範囲であった。
【表５−１】
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【表５−２】
2015529684.tif 000015
【０１７５】
さらに、図１は、様々な投与経路と製剤との間で比較したＡＵＣ値を示す。
【０１７６】
表１〜５および図１に示されるように、ラットモデル様経口送達を使用して、本発明に従う製剤で送達されるアンジオテンシン（１−７）は、ＰＢＳで送達されるアンジオテンシン（１−７）のベースラインプロファイルと比較して、観察期間にわたって半減期および総暴露を著しく改善する。これらの結果は、アンジオテンシン（１−７）が本発明に従って経口送達され得、循環において治療上有効な生物学的利用能を達成し得ることを実証する。
【０１７７】
等価物および範囲
当業者であれば、ほんの日常的な実験を使用して、本明細書に記載される具体的な実施形態に対する多くの等価物を認識するか、または確認することができるであろう。本発明の範囲は、上記の説明に限定されることを意図するものではなく、以下の特許請求の範囲に記載されるとおりである。
【図１】
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【配列表】
2015529684000001.app
【国際調査報告】
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2015529684.tif 000019