(57)【要約】  式(I)：2015533811.tif 000095(I)［式中、R1は、−CH2CH2CF3であり；R2は、−CH2CH2CF3、または−CH2CH2CH2CF3であり；R3は、−CH2CF3、−CH2CN、−CH2(シクロプロピル)、ピリジニル、クロロピリジニル、またはテトラヒドロピラニルであり；環Aは、フェニルまたはピリジニルであり；Ra、Rb、y、およびzは、本明細書に規定される］の化合物を開示する。Notch 受容体を阻害するためにかかる化合物を使用する方法、かかる化合物を含む医薬組成物も開示される。これらの化合物は、様々な治療領域(例えば、癌)における疾患または障害の治療、予防または進行遅延に有用である。
2015533811.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)：
【化１】
2015533811.tif 000094
(I)
［式中、
R1は、−CH2CF2CH3または−CH2CH2CF3であり；
R2は、−CH2CH2CF3、−CH2CH2CH2CF3、または−CH2CF2CH3であり；
R3は、−CH2CF3、−CH2CN、−CH2(シクロプロピル)、ピリジニル、クロロピリジニル、またはテトラヒドロピラニルであり；
環Aは、フェニルまたはピリジニルであり；
各Raは、独立して、F、Cl、Br、−CN、−OH、−CH3、シクロプロピル、−CF3、−CH2CF3、−OCH3、−OCF3、および／または−O(シクロプロピル)であるか；または
2つの隣接するRaは、それらが連結している炭素原子と共に、ジオキソール環を形成する；
各Rbは、独立して、F、Cl、−CH3、−CF3、−CN、および／または−OCH3であり；
yは、0、1、または2であり；および
zは、0、1、または2である］
の化合物。
【請求項２】
環Aが、フェニルである、請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
R2が、−CH2CH2CF3である、請求項1に記載の化合物。
【請求項４】
R3が、ピリジニル、クロロピリジニル、またはテトラヒドロピランである、請求項1に記載の化合物。
【請求項５】
R3が、−CH2CF3、−CH2CN、または−CH2(シクロプロピル)である、請求項1に記載の化合物。
【請求項６】
Raが、−OCH3であるか；または、
2つの隣接するRaが、それらが連結している炭素原子と共に、ジオキソール環を形成する；
Rbが、−OCH3であり；
yは、0、1、または2であり；および
zは、0または1である、請求項2に記載の化合物。
【請求項７】
(2R,3S)-N-((3S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(2-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-3-(4,4,4-トリフルオロブチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(1)；(2R,3S)-N-((3S)-1-(5-クロロ-2-ピリジニル)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(2)；(2R,3S)-N-((7S)-6−オキソ−9-フェニル-5-(2-ピリジニル)-6,7-ジヒドロ-5H-[1,3]ジオキソロ[4,5-h][1,4]ベンゾジアゼピン-7−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(3)；(2R,3S)-N-((3S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(3-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-3-(4,4,4-トリフルオロブチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(4)；(2R,3S)-N-((3S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(3-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(5)；(2R,3S)-N-((3S)-1-(シクロプロピルメチル)-5-(4-メトキシフェニル)-2−オキソ−2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(6)；(2R,3S)-N-((3S)-7-メトキシ-2−オキソ−5-フェニル-1-(2,2,2-トリフルオロエチル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(7)；(2R,3S)-N-((3S)-1-(シクロプロピルメチル)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-3-(2,2-ジフルオロプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(8)；および(2R,3S)-N-((3S)-1-(シクロプロピルメチル)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2-(2,2-ジフルオロプロピル)-3-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(9)
から選択される、請求項1に記載の化合物。
【請求項８】
請求項１〜7のいずれか1項に記載の化合物；および医薬上許容し得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項９】
癌の治療における療法に使用するための、請求項1〜8のいずれか1項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
癌の治療のために、前記治療が、更にダサチニブ、パクリタキセル、タモキシフェン、デキサメタゾンおよびカルボプラチンから選択される1つ以上の別の薬剤を含み、それらが連続してまたは同時に投与される、請求項9に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１１】
癌の治療のための医薬の製造において用いるための、請求項1〜8のいずれか1項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、Notch阻害剤として有用なベンゾジアゼピノン化合物に関する。本発明は、さらに、Notch経路に関連する症状、例えば、癌および他の増殖性疾患の治療に有用である、少なくとも1つの本発明の化合物を含有する医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
Notchシグナル伝達は、様々な細胞プロセス(例えば、細胞運命決定、分化、増殖、アポトーシス、および血管形成)に関与している(非特許文献１；非特許文献２)。Notchタンパク質は、1回貫通型ヘテロ二量体膜貫通分子である。Notchファミリーには、4つの受容体、NOTCH1〜4が含まれ、それらは、DSLファミリーに属するリガンド(Delta-like 1、3、4、ならびにJagged 1および2)に結合することによって活性化される。
【０００３】
NOTCHの活性化および成熟には、γセクレターゼ(プレセニリン1もしくはプレセニリン2、ニカストリン、APH1、およびPEN2を含む多タンパク質複合体)により仲介されるタンパク質分解性の切断工程を含む、一連のプロセシング工程が必要とされる。NOTCHが切断されると、NOTCH細胞内ドメイン(NICD)が膜から遊離される。遊離されたNICDは核へ移行し、そこでCSLファミリーメンバー(RBPSUH, ”suppressor of hairless”、およびLAG1)と協力して、転写活性化因子として機能する。NOTCH標的遺伝子には、HESファミリーメンバー(例えばHES-1)が含まれる。HES-1は、遺伝子の転写抑制因子(例えば、HERP1(HEY2としても知られる)、HERP2(HEY1としても知られる)、およびHATH1(ATOH1としても知られる))として機能する。
【０００４】
Notch経路の異常な活性化は腫瘍形成の一因である。Notchシグナル伝達の活性化は、様々な固形腫瘍(卵巣癌、膵癌、および乳癌を含む)、ならびに血液腫瘍(例えば、白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫)の病因に関与している。様々な固形腫瘍および血液腫瘍の治療におけるNotch阻害の役割およびその有用性が、非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；非特許文献８；非特許文献９；非特許文献１０；および非特許文献１１に記載されている。
【０００５】
Notch阻害剤として有用であって、かつ効果的な濃度の薬物曝露をもたらす十分な代謝安定性を有する化合物が、依然として必要とされている。さらに、患者に経口投与または静脈内投与することができる、Notch阻害剤として有用な化合物が依然として必要とされている。
【０００６】
特許文献１は、神経障害(例えば、アルツハイマー病)を治療するために有用なスクシノイルアミノベンゾジアゼピン化合物を開示している。この文献には、γセクレターゼ活性およびアミロイドタンパク質の神経への沈着の形成に関連するアミロイド前駆体タンパク質のプロセシングを阻害することが開示されている。
【０００７】
出願人らは、Notch阻害剤として活性を有し、かつ静脈内投与または経口投与により効果的な濃度の薬物曝露をもたらす十分な代謝安定性を有する有望な化合物を見いだした。薬物としての性能にとって重要である、望ましい安定性、生物学的利用能、治療指数、および毒性値を有する医薬品として有用である、これらの化合物を提供する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第7,053,084号明細書(B1)
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Bray, Nature Reviews Molecular Cell Biology, 7:678-689(2006).
【非特許文献２】Fortini, Developmental Cell 16:633-647(2009).
【非特許文献３】Miele, L. et al., Current Cancer Drug Targets, 6:313-323(2006).
【非特許文献４】Bolos, V. et al., Endocrine Reviews, 28:339-363(2007).
【非特許文献５】Shih, I.-M. et al., Cancer Research, 67:1879-1882(2007).
【非特許文献６】Yamaguchi, N. et al., Cancer Research, 68:1881-1888(2008).
【非特許文献７】Miele, L., Expert Review Anti-cancer Therapy, 8:1197-1201(2008).
【非特許文献８】Purow, B., Current Pharmaceutical Biotechnology, 10:154-160(2009).
【非特許文献９】Nefedova, Y. et al., Drug Resistance Updates, 11:210-218(2008).
【非特許文献１０】Dufraine, J. et al., Oncogene, 27:5132-5137(2008).
【非特許文献１１】Jun, H.T. et al., Drug Development Research, 69:319-328(2008).
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
(発明の概要)
本発明は、Notchシグナル伝達経路の選択的阻害剤として有用なビス(フルオロアルキル)1,4-ベンゾジアゼピノン化合物を提供することにより、前述の要求を満たす。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、医薬的に許容される担体；および少なくとも１つの式(I)の化合物を含有する医薬組成物も提供する。
【００１２】
本発明は、少なくとも１つの式(I)の化合物を哺乳動物患者に投与することを含む、Notch受容体の活性に関連する疾患または障害の治療方法も提供する。
【００１３】
本発明は、式(I)の化合物を製造するための方法および中間体も提供する。
【００１４】
本発明は、療法に用いるための式(I)の化合物も提供する。
【００１５】
本発明は、癌の治療のための医薬の製造における式(I)の化合物の使用も提供する。
【００１６】
式(I)の化合物および該化合物を含有する組成物は、様々なNotch受容体-関連症状の治療、予防または治癒において使用できるNotch阻害剤である。これらの化合物を含有する医薬組成物は、様々な治療領域(例えば、癌)における、疾患もしくは障害の治療、予防、または進行の遅延において有用である。
【００１７】
本発明のこれらおよび他の特徴を、以下に続けて開示するように、拡充して記載する。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
(発明の詳細な説明)
本発明の第一態様は、少なくとも1つの式(I)：
【化１】
2015533811.tif 000003
(I)
［式中、
R1は、−CH2CF2CH3または−CH2CH2CF3であり；
R2は、−CH2CH2CF3、−CH2CH2CH2CF3、または−CH2CF2CH3であり；
R3は、−CH2CF3、−CH2CN、−CH2(シクロプロピル)、ピリジニル、クロロピリジニル、またはテトラヒドロピラニルであり；
環Aは、フェニルまたはピリジニルであり；
各Raは、独立して、F、Cl、Br、−CN、−OH、−CH3、シクロプロピル、−CF3、−CH2CF3、−OCH3、−OCF3、および／または−O(シクロプロピル)であるか；または
2つの隣接するRaは、それらが連結している炭素原子と共に、ジオキソール環を形成する；
各Rbは、独立して、F、Cl、−CH3、−CF3、−CN、および／または−OCH3であり；
yは、0、1、または2であり；および
zは、0、1、または2である］
の化合物、またはそのプロドラッグを提供する。
【００１９】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R1は、−CH2CF2CH3であり、R2、R3、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである式(I)の化合物が含まれる。
【００２０】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R1は、−CH2CH2CF3であり、R2、R3、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである式(I)の化合物が含まれる。
【００２１】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R2は、−CH2CH2CF3であり、R1、R3、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである式(I)の化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、かつR1が−CH2CH2CF3である化合物も含まれる。
【００２２】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R2は、−CH2CH2CH2CF3であり、R1、R3、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである式(I)の化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、かつR1が−CH2CH2CF3である化合物も含まれる。
【００２３】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R2は、−CH2CF2CH3であり、R1、R3、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである式(I)の化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、かつR1が−CH2CH2CF3である化合物も含まれる。
【００２４】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R3は、−CH2CF3、−CH2CN、−CH2(シクロプロピル)であり；ならびに、R1、R2、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである式(I)の化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、かつR1が−CH2CH2CF3である化合物も含まれる。
【００２５】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、R3は、ピリジニル、クロロピリジニル、またはテトラヒドロピラニルであり；および、R1、R2、環A、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)の化合物を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである式(I)の化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、かつR1が−CH2CH2CF3である化合物も含まれる。
【００２６】
一実施態様は、式(II)：
【化２】
2015533811.tif 000004
(II)
(式中、R1、R2、R3、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)
の構造を有する、少なくとも1つの式(I)(式中、環Aはフェニルである)を提供する。
【００２７】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、環Aは、ピリジニルであり；および、R1、R2、R3、Ra、Rb、y、およびzは、第一態様において規定される)を提供する。
【００２８】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、環Aはフェニルであり、Raは、F、Cl、−CN、−CH3、シクロプロピル、−CF3、−OCH3、−OCF3、および／または−O(シクロプロピル)であるか；または、2つの隣接するRaは、それらが連結している炭素原子と共に、ジオキソール環を形成する；Rbは、独立して、F、Cl、−CH3、−CF3、−CN、および／または−OCH3であり；yは、0または1であり；zは、0または1であり；ならびに、R1、R2、およびR3は、第一態様において規定される)を提供する。この実施態様には、化合物(式中、Raは−OCH3であり；Rbは−OCH3であり、yは0または1であり；および、zは、0または1である)が含まれる。
【００２９】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、yは、0または2であり；zは、0または1であり；ならびに、R1、R2、R3、環A、Ra、およびRbは、第一態様において規定される)を提供する。この実施態様には、環Aがフェニルである化合物が含まれる。
【００３０】
一実施態様は、少なくとも1つの式(I)(式中、Raは、−OCH3であるか、または2つの隣接するRaは、それらが連結している炭素原子と共に、ジオキソール環を形成する；Rbは−OCH3であり；yは、0、1、または2であり；zは、0または1であり；および、R1、R2、R3、おｙび環Aは、第一態様において規定される)を提供する。
【００３１】
一実施態様は、下記構造：
【化３】
2015533811.tif 000005
(式中、R1、R2、R3、環A、Rb、およびzは、第一態様において規定される)を有する少なくとも1つの式(I)の化合物を提供する。実施態様には、環Aがフェニルである化合物が含まれる。この実施態様には、環Aがフェニルであり、かつzが0または1である化合物も含まれる。
【００３２】
一実施態様は、後記から選択される式(I)の化合物を提供する：(2R,3S)-N-((3S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(2-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-3-(4,4,4-トリフルオロブチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(1)；(2R,3S)-N-((3S)-1-(5-クロロ-2-ピリジニル)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(2)；(2R,3S)-N-((7S)-6−オキソ−9-フェニル-5-(2-ピリジニル)-6,7-ジヒドロ-5H-[1,3]ジオキソlo[4,5-h][1,4]ベンゾジアゼピン-7−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(3)；(2R,3S)-N-((3S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(3-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-3-(4,4,4-トリフルオロブチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(4)；(2R,3S)-N-((3S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(3-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(5)；(2R,3S)-N-((3S)-1-(シクロプロピルメチル)-5-(4-メトキシフェニル)-2−オキソ−2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(6)；(2R,3S)-N-((3S)-7-メトキシ-2−オキソ−5-フェニル-1-(2,2,2-トリフルオロエチル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(7)；(2R,3S)-N-((3S)-1-(シクロプロピルメチル)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-3-(2,2-ジフルオロプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(8)；および(2R,3S)-N-((3S)-1-(シクロプロピルメチル)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2-(2,2-ジフルオロプロピル)-3-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(9)。
【００３３】
一実施態様は、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおいて測定されたとおり、少なくとも45分という代謝半減期値を有する、少なくとも1つの式(I)の化合物を提供する。
【００３４】
一実施態様は、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおいて測定されたとおり、少なくとも60分という代謝半減期値を有する、少なくとも1つの式(I)の化合物を提供する。
【００３５】
本発明は、その精神または本質的特性から逸脱することなく、他の具体的な形態で具現化されうる。本発明は、本明細書に記載された本発明の態様および/または実施態様の全ての組み合わせを包含する。本発明のあらゆる実施態様はいずれの他の実施態様と組み合わされて、さらなる実施態様を説明しうると理解される。また、実施態様のそれぞれ個々の要素は、いずれの実施態様からのあらゆる他の要素と組み合わせてさらなる実施態様を説明するものであることも理解される。
【００３６】
(定義)
本発明の特徴および利点は、以下の詳細な説明を読むことで、当業者によってさらに容易に理解されうる。当然のことながら、上部および下部の別個の実施態様中に明確な根拠として記載された本発明のある特定の特徴を組み合わせて、単独の実施態様を形成してもよい。反対に、単独の実施態様中に簡潔な根拠として記載された本発明の様々な特徴を組み合わせて、それらのサブコンビネーションを形成してもよい。本明細書において、例として特定された実施態様かまたは好ましい実施態様は、例示目的であって限定するものではないことが意図される。
【００３７】
本明細書において他に特に記載のない限り、単数形の言及には複数の言及もまた含まれうる。例えば、「a」および「an」は、１か、または１以上のいずれかを示しうる。
【００３８】
他に指示のない限り、原子価が満たされていないいずれのヘテロ原子は、その原子価を満たすのに十分な水素原子を有すると考える。
【００３９】
本明細書に記載の定義は、引用により本明細書に援用されるいずれの特許、特許出願、および/または特許出願公開に記載された定義よりも優先される。
【００４０】
本発明を説明するために用いられる様々な用語の定義を以下に記載する。これらの定義は、本明細書の全体を通して(それらが他に特定の場合に限定されない限り)、個別に、またはより大きな基の一部としてのいずれかで用いられる用語に適用される。
【００４１】
本明細書の全体を通して、基およびそれらの置換基は、安定な部分および化合物をもたらすように、当業者により選択されうる。
【００４２】
本明細書で用いる用語「ハロ」および「ハロゲン」は、F、Cl、Br、またはIを言う。
【００４３】
本明細書で用いる用語「アルキル」は、例えば、1〜12個の炭素原子、1〜6個の炭素原子、または1〜4個の炭素原子を含む、分枝鎖および直鎖両方の飽和脂肪族炭化水素基を言う。アルキル基の例としては、限定はされないが、メチル(Me)、エチル(Et)、プロピル(例えば、n-プロピルおよびi-プロピル)、ブチル(例えば、n-ブチル、i-ブチル、sec-ブチル、およびt-ブチル)、およびペンチル(例えば、n-ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル)、n-ヘキシル、2-メチルペンチル、2-エチルブチル、3-メチルペンチル、ならびに4-メチルペンチルが挙げられる。シンボル「C」の後に下付き文字で数字が記載されている場合、該下付き文字は特定の基が有しうる炭素原子の数をより具体的に定義する。例えば、「C1-C6アルキル」は、1〜6個の炭素原子を有する直鎖および分枝鎖アルキル基を意味する。
【００４４】
該語句「医薬的に許容される」は本明細書において、適切な医学的判断の範囲内で、妥当な利益/リスク比に見合って、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずにヒトおよび動物の組織と接触して用いるのに適した、化合物、物質、組成物、および/または剤形を意味するように用いられる。
【００４５】
式(I)の化合物は、アモルファスな固形物または結晶性の固形物として提供され得る。凍結乾燥を用いて、固形物として式(I)の化合物を提供することができる。
【００４６】
式(I)の化合物の溶媒和物(例えば、水和物)もまた、本発明の範囲内であることはまた理解されるべきである。用語「溶媒和物」とは、式(I)の化合物と、１つ以上の溶媒分子(有機または無機であってもよい)との物理的会合を意味する。この物理的会合には、水素結合が含まれる。特定の例において、例えば、１つ以上の溶媒分子が結晶性固体の結晶格子内に組み込まれている場合には、溶媒和物を単離することができる。「溶媒和物」には、溶液相および単離可能な溶媒和物の両方が含まれる。例示的な溶媒和物には、水和物、エタノレート、メタノレート、イソプロパノレート、アセトニトリル溶媒和物、酢酸エチル溶媒和物が含まれる。溶媒和物化に関する方法は、当分野では既知である。
【００４７】
in vivoで変換されて生理活性剤(すなわち、式(I)の化合物)を提供することができるいずれの化合物も、本発明の範囲および精神の範囲内にあるプロドラッグである。
【００４８】
様々な形態のプロドラッグが当分野において周知であり、以下:
a)Wermuth, C.G. et al., The Practice of Medicinal Chemistry, Chapter 31, Academic Press(1996)；
b)Bundgaard, H. ed., Design of Prodrugs, Elsevier(1985)；
c)Bundgaard, H., Chapter 5, “Design and Application of Prodrugs,” Krosgaard-Larsen, P. et al., eds., A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Harwood Academic Publishers(1991)；および、
d)Testa, B. et al., Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism, Wiley-VCH(2003)
に記載されている。
【００４９】
加えて、式(I)の化合物は、製造後に単離および精製して、重量で99％以上の式(I)の化合物(「実質的に純粋な」)を含む組成物を得て、次いでそれを本明細書に記載のとおり用いるかまたは製剤化するのが好ましい。そのような「実質的に純粋な」式(I)の化合物も、本発明の一部として本明細書において意図される。
【００５０】
「安定な化合物」および「安定な構造」とは、反応混合物から有用な純度への単離、および有効な治療薬への製剤化に耐えるのに十分強い化合物を示すことを意図する。本発明は安定な化合物を具体化するものと意図される。
【００５１】
「治療上有効な量」は、NOTCH受容体の阻害剤として作用するか、または増殖性疾患(例えば癌)を治療もしくは予防するのに有効である、本発明の化合物単独の量か、特許請求された化合物の組み合わせの量か、または他の活性成分と組み合わされた本発明の化合物の量を包含することを意図する。
【００５２】
本明細書で用いる「治療すること」または「治療」には、哺乳動物、とりわけヒトにおける疾患状態の治療が含まれ、ならびに:(a)とりわけ、哺乳動物が疾患状態に罹りやすいが、まだ罹患していると診断されていない場合において、哺乳動物での疾患状態が生じるのを予防すること；(b)疾患状態の抑制、すなわち、その進行を抑止すること；および/または(c)疾患状態を軽減すること、すなわち、疾患状態の退行をもたらすこと、が含まれる。
【００５３】
本発明の化合物は、本発明の化合物に出現する原子の全ての同位体を含むことを意図する。同位体には、原子番号が同一であるが質量数が異なる原子が含まれる。一般的な例として、限定されることなく、水素の同位体には重水素(D)およびトリチウム(T)が含まれる。炭素の同位体としては13Cおよび14Cが挙げられる。同位体で標識された本発明の化合物は一般に、当業者に公知の通常の技法によってか、または本明細書に記載されたものと類似した方法によって、他で用いられる非標識試薬の代わりに適切な同位体-標識試薬を用いて、製造することができる。
【００５４】
式(I)で示される化合物は、治療する症状に適切ないずれの方法(部位特異的治療の必要性、または送達される式(I)の化合物の量に依存し得る)によっても投与されることができる。
【００５５】
また、本発明には、少なくとも1つのその式(I)の化合物；ならびに1以上の無毒の医薬的に許容される担体および/または希釈剤および/またはアジュバント(本明細書においてまとめて「担体」物質と称される)、さらに、必要に応じて、他の活性成分を含有する医薬組成物の類が包含される。該式(I)の化合物は、いずれの適切な経路によって、好ましくはそのような経路に適応した医薬組成物の形態で、目的の治療に対して有効な量で、投与されうる。本発明の化合物および組成物は、例えば、通常の医薬的に許容される担体、アジュバント、およびビヒクルを含む用量単位剤形で、経口、粘膜、または非経口(parentally)(血管内、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、および胸骨内を含む)で投与されてもよい。例えば、該医薬担体は、マンニトールもしくはラクトースおよび微結晶セルロースの混合物を含んでよい。該混合物は、さらなる成分、例えば、滑沢剤(例えば、ステアリン酸マグネシウム)および崩壊剤(例えばクロスポビドン)を含んでもよい。該担体混合物は、ゼラチンカプセルに詰められるか、または錠剤として圧縮されてもよい。該医薬組成物は、例えば、経口剤形または注入液として投与されてもよい。
【００５６】
経口投与の場合、該医薬組成物は、例えば、錠剤、カプセル剤、液体カプセル剤、懸濁剤、または液剤の形態であってもよい。該医薬組成物は、好ましくは、特定の量の活性成分を含む用量単位の形態で製造される。例えば、該医薬組成物は、約1〜2000 mg、好ましくは約1〜500 mg、およびさらに好ましくは約5〜150 mgの範囲の量の活性成分を含有する錠剤またはカプセル剤として提供されてもよい。ヒトまたは他の哺乳動物に対する適切な1日用量は、患者の症状および他の因子に応じて幅広く変化させてもよいが、ルーチンな方法を用いて決定することができる。
【００５７】
本明細書において意図されるいずれの医薬組成物も、例えば、いずれの許容可能で適切な経口製剤によって経口で送達され得る。経口製剤の例としては、限定はされないが、例えば、錠剤、トローチ剤、ドロップ剤(lozenge)、水性もしくは油性懸濁剤、液体カプセル剤、分散性粉末剤もしくは顆粒剤、エマルジョン剤、硬もしくは軟カプセル剤、シロップ剤、およびエリキシル剤が挙げられる。経口投与用の医薬組成物は、経口投与用の医薬組成物の製造において当業者に公知のあらゆる方法に従って、製造され得る。医薬的に服用しやすい(palatable)製剤を提供するために、本発明による医薬組成物は、甘味剤、香味剤、着色剤、粘滑剤、抗酸化剤、または保存剤から選択される少なくとも1つの剤を含み得る。
【００５８】
錠剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物と錠剤の製造に適した少なくとも1つの無毒の医薬的に許容される賦形剤を混合することによって製造され得る。賦形剤の例としては、限定はされないが、例えば、不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、およびリン酸ナトリウムなど；造粒および崩壊剤、例えば、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、コーンスターチ、およびアルギン酸など；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン、ポリビニル-ピロリドン、およびアラビアゴム(acacia)など；ならびに、滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、およびタルクなどが挙げられる。加えて、錠剤は、コーティングされないか、あるいは不快な味の薬剤の嫌な味をマスクするかまたは消化管での活性成分の崩壊および吸収を遅延させることによって活性成分の効果を長時間持続させるために公知の技法によってコーティングされ得る。水溶性矯味物質の例としては、限定はされないが、ヒドロキシプロピル-メチルセルロースおよびヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる。時間遅延物質(time delay material)の例としては、限定はされないが、エチルセルロースおよび酢酸酪酸セルロースが挙げられる。
【００５９】
硬ゼラチンカプセル剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物と少なくとも1つの不活性固形物希釈剤(例えば炭酸カルシウム；リン酸カルシウム；およびカオリンなど)を混合することによって製造され得る。
【００６０】
軟ゼラチンカプセル剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物を、少なくとも1つの水溶性担体(例えば、ポリエチレングリコールなど)；および少なくとも1つの油媒体(例えば、ラッカセイ油、流動パラフィン、およびオリーブ油など)と混合することによって製造され得る。
【００６１】
水性懸濁剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物を水性懸濁剤の製造に適した少なくとも1つの賦形剤と混合することによって製造され得る。水性懸濁剤の製造に適した賦形剤の例としては、限定はされないが、例えば、懸濁化剤(例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム(gum tragacanth)、およびアカシアガムなど)；崩壊剤または湿潤剤(例えば、天然のリン脂質(例えばレシチン)など)；アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物(例えば、ポリオキシエチレンステアレートなど)；エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物(例えば、ヘプタデカエチレン-オキシセタノール(oxycetanol)など)；エチレンオキシドと部分エステル(脂肪酸およびヘキシトールに由来)との縮合生成物(例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエートなど)；および、エチレンオキシドと部分エステル(脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来)との縮合生成物(例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエートなど)が挙げられる。水性懸濁剤はまた、少なくとも1つの保存剤(例えば、p-ヒドロキシ安息香酸エチルおよびp-ヒドロキシ安息香酸n-プロピルなど)；少なくとも1つの着色剤；少なくとも1つの香味剤；および/または、少なくとも1つの甘味剤(限定はされないが、例えば、スクロース、サッカリン、およびアスパルテームを含む)を含むことができる。
【００６２】
油性懸濁剤は、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物を、植物油(例えば、ラッカセイ油；オリーブ油；ゴマ油；およびヤシ油など)；または鉱物油(例えば、流動パラフィンなど)のいずれかの中に懸濁させることによって製造することができる。油性懸濁剤はまた、少なくとも1つの増粘剤、例えば、蜜ロウ；固形パラフィン；およびセチルアルコールなどを含むことができる。風味のよい(palatable)油性懸濁剤を提供するために、すでに上述した甘味剤のうちの少なくとも1つ、および/または少なくとも1つの香味剤を、該油性懸濁剤に加えることができる。油性懸濁剤はさらに、限定はされないが、例えば、抗酸化剤(例えば、ブチルヒドロキシアニソール、およびα-トコフェロールなど)を含めた少なくとも1つの保存剤を含むことができる。
【００６３】
分散性散剤および顆粒剤を、例えば、少なくとも1つの式(I)の化合物と、少なくとも1つの分散剤および/または湿潤剤；少なくとも1つの懸濁化剤；ならびに/あるいは少なくとも1つの保存剤とを混合させることによって製造することができる。適切な分散剤、湿潤剤、および懸濁化剤は、すでに上述したものである。保存剤の例としては、限定はされないが、例えば、抗酸化剤(例えば、アスコルビン酸)が挙げられる。加えて、分散性散剤および顆粒剤はまた、少なくとも1つの賦形剤(限定はされないが、例えば、甘味剤；香味剤；および着色剤を含む)を含むことができる。
【００６４】
少なくとも1つの式(I)の化合物の乳剤は、例えば、水中油型乳剤として製造され得る。式(I)の化合物を含有する乳剤の油性相は、公知の方法で公知の成分から構成されうる。該油相は、限定はされないが、例えば、植物油(例えば、オリーブ油およびラッカセイ油など)；鉱物油(例えば、流動パラフィンなど)；およびそれらの混合物によって製造され得る。該相は、単に乳化剤のみを含有してもよいが、少なくとも1つの乳化剤と脂肪もしくは油または脂肪と油の両者との混合物を含有してもよい。適切な乳化剤としては、限定はされないが、例えば、天然のリン脂質(例えば、大豆レシチン)；脂肪酸およびヘキシトール無水物由来のエステルまたは部分エステル(例えば、ソルビタンモノオレエートなど)；および部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物(例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートなど)が挙げられる。好ましくは、親水性乳化剤は、安定剤として作用する親油性乳化剤を一緒に含まれる。また、油および脂肪の両方が含まれることが好ましい。安定剤の有無にかかわらず乳化剤はいわゆる乳化ワックスを形成し、該ワックスは油および脂肪と一緒に、クリーム製剤の油性分散相を形成するいわゆる乳化軟膏基剤を形成する。乳剤はまた、甘味剤、香味剤、保存剤、および/または抗酸化剤を含むこともできる。本発明の製剤における使用に適切な乳化剤および乳化安定剤には、Tween 60、Span 80、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレート、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリルジステアレートが、単独かまたはワックスもしくは当分野で周知の他の物質と共に含まれる。
【００６５】
式(I)の化合物はまた、例えば、静脈内、皮下、および/または筋肉内に、いずれの医薬的に許容される適切な注射可能な形態によって投与され得る。注射可能な形態の例としては、限定はされないが、例えば、許容可能なビヒクルおよび溶媒(例えば、水、リンガー液、および生理食塩水など)を含有する無菌の水溶液；無菌の水中油型マイクロエマルション；および水性もしくは油性の懸濁液が挙げられる。
【００６６】
非経口投与用の製剤は、水性または非水性の等張で無菌の注射液剤または懸濁剤の形態であってもよい。これらの液剤および懸濁剤は、無菌の粉末または顆粒から、経口投与用の製剤での使用において言及した担体または希釈剤のうちの1つ以上を用いて、他の適切な分散剤もしくは湿潤剤および懸濁化剤を用いることによって、製造されうる。該化合物は、水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、トウモロコシ油、綿実油、ラッカセイ油、ゴマ油、ベンジルアルコール、塩化ナトリウム、トラガカントガム(tragacanth gum)、および/または様々な緩衝剤中に溶解されうる。他のアジュバントおよび投与様式が、製薬分野において広く周知である。また、該活性成分を、適切な担体(生理食塩水、ブドウ糖(dextrose)、または水を含む)との組成物、あるいはシクロデキストリン(すなわち、CAPTISOL(登録商標))、共溶媒可溶化剤(すなわち、プロピレングリコール)またはミセル可溶化剤(すなわち、Tween 80)との組成物として、注射により投与してもよい。
【００６７】
無菌の注射製剤はまた、無毒の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌の注射可能な溶液または懸濁液(例えば、1,3-ブタンジオール中の溶液)であってよい。許容されるビヒクルおよび溶媒の中で用いてもよいものは、水、リンガー液、および生理食塩水である。加えて、無菌の固定油が、溶媒または懸濁化媒質として通常用いられる。この目的のために、いずれの刺激の少ない固定油(合成モノ-またはジグリセリドが含まれる)を用いてもよい。さらに、脂肪酸(例えばオレイン酸など)が注射剤の製造で用いられる。
【００６８】
無菌の注射可能な水中油型マイクロエマルションは、例えば、1)少なくとも1つの式(I)の化合物を油性相(例えば、大豆油およびレシチンの混合物など)中に溶解させること；2)油相を含む式(I)を水とグリセロールの混合物と合わせること；そして、3)この合わせた混合物を処理してマイクロエマルションを形成させることによって、製造され得る。
【００６９】
無菌の水性もしくは油性の懸濁剤は、当分野で既に公知の方法に従って、製造され得る。例えば、無菌の水性の液剤または懸濁剤は、無毒の非経口的に許容される希釈剤または溶媒(例えば、1,3-ブタンジオールなど)を用いて製造され得て；無菌の油性の懸濁剤は、無菌で無毒の許容される溶媒または懸濁化媒質(例えば、無菌の固定油(例えば、合成モノ-またはジグリセリド)；および脂肪酸(例えばオレイン酸など)など)を用いて製造され得る。
【００７０】
本発明の医薬組成物で使用してもよい医薬的に許容される担体、アジュバント、およびビヒクルとしては、限定はされないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、自己乳化型ドラッグデリバリーシステム(SEDDS)(例えば、d-α-トコフェロールポリエチレングリコール 1000 コハク酸塩)、医薬剤形で用いる界面活性剤(例えば、Tween、CREMOPHOR(登録商標)界面活性剤(BASF)を含むポリエトキシ(polyethoxylated)ヒマシ油、または他の同様のポリマーデリバリーマトリックス)、血清タンパク質(例えばヒト血清アルブミン)、緩衝物質(例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム)、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質(例えば、プロタミン硫酸塩、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸塩、ワックス、ポリエチレン-ポリオキシプロピレン-ブロック重合体、ポリエチレングリコール)および羊毛脂が挙げられる。シクロデキストリン(例えば、α-、β-、およびγ-シクロデキストリン)または化学修飾誘導体(例えば、2-および3-ヒドロキシプロピル-シクロデキストリンを含むヒドロキシアルキルシクロデキストリン)、あるいは他の可溶化誘導体もまた、本明細書に記載の式の化合物の送達を高めるために有利に用いられうる。
【００７１】
本発明の医薬的に活性な化合物は、ヒトおよび他の哺乳動物を含む患者に投与するための薬剤を製造する薬学の通常の方法に従って、加工され得る。該医薬組成物は、通常の製薬工程(例えば、滅菌)で処理されてよく、ならびに/あるいは通常のアジュバント(例えば、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤など)を含んでもよい。加えて、錠剤および丸薬は、腸溶コーティングを用いて製造され得る。そのような組成物はまた、アジュバント(例えば、湿潤剤、甘味剤、香味剤、および芳香剤)を含有してもよい。
【００７２】
投与する化合物の量、ならびに本発明の化合物および/または組成物を用いた疾患状態の治療のための投与レジメンは、対象の年齢、体重、性別および病状、疾患の種類、疾患の重篤性、投与経路および投与頻度、ならびに用いる特定の化合物を含む様々な因子に依存する。従って、該投与レジメンは大きく変化させてもよいが、標準的な方法を用いてルーチン的に決定することができる。1日用量は、約0.001〜100 mg/kg体重、好ましくは約0.005〜約50 mg/kg体重、最も好ましくは約0.01〜10 mg/kg体重が適切でありうる。1日用量を、1日あたり1〜4回で投与することができる。
【００７３】
治療目的で、本発明の活性化合物は、通常、指定された投与経路に適する1つ以上のアジュバントと組み合わされる。経口投与の場合、該化合物を、ラクトース、スクロース、デンプン粉末、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウム塩およびカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、および/またはポリビニルアルコールと混合した後、投与しやすいように錠剤化するかまたはカプセルに包んでもよい。そのようなカプセルまたは錠剤には、ヒドロキシプロピルメチルセルロース中に活性化合物が分散した状態で提供することができるような、徐放性製剤が含まれうる。
【００７４】
本発明の医薬組成物は、式(I)の化合物、ならびに、適宜、いずれかの医薬的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルから選択されるさらなる物質(agent)を含有する。本発明の別の組成物は、本明細書に記載の式(I)の化合物、ならびに医薬的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含有する。
【００７５】
(有用性)
式(I)の化合物は、癌、例えば、Notch活性化に依存した癌の治療に有用である。Notch活性化は、様々な固形腫瘍(卵巣、膵臓、ならびに乳癌を含む)および血液腫瘍(例えば、白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫)の病因と関係している。
【００７６】
一実施態様において、癌の治療のための方法であって、それを必要としている哺乳動物に式(I)の化合物を投与することを含む、該方法を提供する。本実施態様の方法は、限定はされないが、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頚部癌、腎癌、肝癌、肺癌(非小細胞肺癌(NSCLC)を含む)、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、前立腺癌、甲状腺癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、悪性線維性組織球腫(MFH)、線維肉腫、膠芽腫/星状細胞腫、神経芽腫、メラノーマ、T細胞急性リンパ性白血病(T-ALL)、および中皮腫を含む、様々な癌を治療するために用いることができる。例えば、実施態様の方法は、乳癌、大腸癌、または膵臓癌の治療に用いられる。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００７７】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌は結腸直腸癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００７８】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌はトリプルネガティブの乳癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００７９】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌は非小細胞肺癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００８０】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌は膵臓癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００８１】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌は卵巣癌である。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００８２】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与することを含む該方法を提供し、ここで、該癌はメラノーマである。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。本実施態様における投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００８３】
一実施態様において、癌の治療のための医薬の製造における少なくとも1つの式(I)の化合物の使用を提供する。好ましくは、本実施態様において、治療される癌には、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頚部癌、腎癌、肝癌、肺癌(非小細胞肺癌(NSCLC)を含む)、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、前立腺癌、甲状腺癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、悪性線維性組織球腫(MFH)、線維肉腫、膠芽腫/星状細胞腫、神経芽腫、メラノーマ、T細胞急性リンパ性白血病(T-ALL)、および中皮腫のうちの1つ以上が含まれる。本実施態様の適切な医薬には、非経口投与用の医薬(例えば、液剤および懸濁剤など)および経口投与用の医薬(例えば、錠剤、カプセル剤、液剤、および懸濁剤など)が含まれる。
【００８４】
一実施態様は、癌の治療における療法で使用するための少なくとも1つの式(I)の化合物を提供する。本実施態様において、治療対象の癌には、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頚部癌、腎癌、肝癌、肺癌(非小細胞肺癌(NSCLC)を含む)、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、前立腺癌、甲状腺癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、悪性線維性組織球腫(MFH)、線維肉腫、膠芽腫/星状細胞腫、神経芽腫、メラノーマ、T細胞急性リンパ性白血病(T-ALL)、および中皮腫のうちの1つ以上が含まれる。
【００８５】
一実施態様において、哺乳動物におけるNotch活性化に依存している癌の治療のための方法であって、少なくとも1つの式(I)の化合物を患者に投与することを含む、該方法を提供する。この実施態様の方法はまた、限定はされないが、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頚部癌、腎癌、肝癌、肺癌(非小細胞肺癌(NSCLC)を含む)、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、前立腺癌、甲状腺癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、悪性線維性組織球腫(MFH)、線維肉腫、膠芽腫/星状細胞腫、神経芽腫、メラノーマ、T細胞急性リンパ性白血病(T-ALL)、および中皮腫を含む、様々な癌を治療するために用いられ得る。好ましくは、この実施態様の方法は、乳癌、大腸癌、または膵臓癌を治療するために用いられる。好ましくは、該哺乳動物はヒトである。例えば、癌を治療するために治療上有効な量が、本実施態様の方法において投与されうる。適切な投与経路には、非経口投与および経口投与が含まれる。
【００８６】
癌の治療において、化学療法薬および/または他の治療(例えば、放射線療法)の組み合わせが、多くの場合に有利である。第2(または第3)の薬剤は、第1の治療薬と同じかまたは異なる作用メカニズムを有していてよい。例えば、投与される2つ以上の薬剤が異なる様式または細胞周期の異なる段階で作用し、ならびに/あるいは、該2つ以上の薬剤が重複しない毒性または副作用を有し、ならびに/あるいは、組み合わされた該薬剤が各々、患者が呈する特定の病態の治療において実証済みの効果を有している、薬剤の組み合わせを用いてもよい。
【００８７】
一実施態様において、癌の治療のための方法であって、それを必要としている哺乳動物に少なくとも1つの式(I)の化合物を投与すること；ならびに、１つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００８８】
該句「別の抗癌剤」とは、以下のうちのいずれか1つ以上から選択される薬剤を言う:アルキル化剤(ナイトロジェンマスタード、アルキルスルホネート、ニトロソウレア、エチレンイミン誘導体、およびトリアゼンを含む)；抗血管新生剤(マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤を含む)；代謝拮抗剤(アデノシンデアミナーゼ阻害剤、葉酸拮抗剤、プリン類似体、およびピリミジン類似体を含む)；抗生物質または抗体(モノクローナル抗体、CTLA-4抗体、アントラサイクリンを含む)；アロマターゼ阻害剤；細胞周期応答調節剤；酵素；ファルネシル-タンパク質トランスフェラーゼ阻害剤；ホルモン性および抗ホルモン性の薬剤およびステロイド(合成アナログ、グルココルチコイド、エストロゲン/抗エストロゲン[例えば、SERM]、アンドロゲン/抗アンドロゲン、プロゲスチン、プロゲステロン受容体アゴニスト、ならびに黄体形成ホルモン放出ホルモン[LHRH]アゴニストおよびアンタゴニストを含む)；インスリン様増殖因子(IGF)/インスリン様増殖因子受容体(IGFR)系調節剤(system modulator)(IGFR1阻害剤を含む)；インテグリン-シグナル伝達阻害剤；キナーゼ阻害剤(マルチキナーゼ阻害剤、および/または、SrcキナーゼまたはSrc/ablの阻害剤、サイクリン依存性キナーゼ[CDK]阻害剤、pan-Her、Her-1およびHer-2抗体、VEGF阻害剤(抗-VEGF抗体を含む)、EGFR阻害剤、マイトジェン活性化タンパク質[MAP]阻害剤、MET阻害剤、MEK阻害剤、オーロラキナーゼ阻害剤、PDGF阻害剤、ならびに他のチロシンキナーゼ阻害剤またはセリン/スレオニンキナーゼ阻害剤を含む)；微小管撹乱物質(例えば、エクチナサイジンまたはそれらのアラログおよび誘導体)；微小管安定化剤(例えば、タキサン、ならびに天然のエポチロンおよびそれらの合成および半合成アナログ)；微小管結合の不安定化剤(ビンカアルカロイドを含む)；トポイソメラーゼ阻害剤；プレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤；白金配位錯体(platinum coordination complex)；シグナル伝達阻害剤；ならびに、抗癌および細胞傷害性薬物として用いられる他の薬剤(例えば、生物学的応答調節剤、増殖因子、および免疫調節剤)。
【００８９】
従って、本発明の化合物を、癌または他の増殖性疾患の治療において有用な他の抗癌治療と組み合わせて投与してもよい。本発明はさらに、癌の治療のための医薬の製造における式(I)の化合物の使用を包含し、ならびに/あるいは、該式(I)の化合物は他の抗癌剤もしくは細胞傷害性薬物および癌の治療のための治療法と組み合わせて用いられるとの説明書を付した、式(I)の化合物のパッケージを包含する。本発明はさらに、キット形態(例えば、一緒にパッケージされるか、別個のパッケージに入れられてキットとして共に販売されるか、または共に処方されるようにパッケージされる)での少なくとも1つの式(I)の化合物と1つ以上のさらなる薬剤の組み合わせを包含する。
【００９０】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；ダサチニブ；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００９１】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；パクリタキセル；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００９２】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；タモキシフェン；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００９３】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；グルココルチコイド；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。適切なグルココルチコイドの例はデキサメタゾンである。
【００９４】
一実施態様において、癌を治療するための方法であって、それを必要としている哺乳動物に、少なくとも1つの式(I)の化合物；カルボプラチン；および適宜、1つ以上の別の抗癌剤を投与することを含む、該方法を提供する。
【００９５】
本発明の化合物は、前述の症状に関連した副作用への対処におけるそれらの特定の有用性について選択された他の治療薬と共に、製剤化されるかまたは同時投与され得る。例えば、本発明の化合物は、悪心、過敏症および胃刺激を防ぐための薬剤(例えば、制吐薬ならびにH1およびH2抗ヒスタミン薬)と共に製剤化されうる。
【００９６】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物；キナーゼ阻害剤(小分子、ポリペプチド、抗体など)、免疫抑制剤、抗癌剤、抗ウイルス剤、抗炎症剤、抗真菌剤、抗生物質、または抗血管過剰増殖化合物から選択される1つ以上のさらなる薬剤；ならびに、いずれの医薬的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含有する医薬組成物を提供する。
【００９７】
上記の他の治療薬は、本発明の化合物と組み合わせて用いられる場合、例えば、Physicians' Desk Reference(PDR)に示されている量か、または他に当業者により決定される量で用いられてもよい。本発明の方法において、そのような他の治療薬は、本発明の化合物の投与よりも前、同時、または後で投与されうる。
【００９８】
しかしながら、いずれの特定の対象に対する具体的な用量レベルおよび投与頻度は変化させてもよく、一般的には、限定はされないが、例えば、投与形態での特定の式(I)の化合物の生物学的利用能、該特定の式(I)の化合物の代謝安定性および作用期間、対象の種、体重、全般的な健康状態、性別、および食餌、投与の様式および時間、排出速度、薬剤の組み合わせ、ならびに特定の症状の重篤度を含む様々な因子に依存しうる。例えば、1日用量は、約0.001〜100 mg/kg体重、好ましくは約0.005〜約50 mg/kg体重、そして最も好ましくは約0.01〜10 mg/kg体重が適切でありうる。該1日用量を、1日当たり1〜4回で投与することができる。
【００９９】
該投与は継続的であることができる(すなわち、毎日、または間欠的)。本明細書で用いる用語「間欠的な」または「間欠的に」は、規則的または不規則な間隔のいずれかで休止および開始することを意味する。例えば、間欠投与には、1〜6日／週の投与；周期的な投与(例えば、連続2〜8週間の連日投与、その後、最大1週間の投与しない休止期間)；または隔日投与が含まれる。
【０１００】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、それを必要としている患者に毎日1回以上、継続的に投与する。例えば、治療上有効な量の式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、連日、毎日1回以上投与する。
【０１０１】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、毎日1回以上、間欠的に投与する。例えば、治療上有効な量の式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、間欠的スケジュールに従って毎日1回以上投与する。
【０１０２】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、連日、毎日1回以上投与し、その後、1日以上投与を休止する。好ましくは、治療上有効な量の式(I)の化合物を投与する。休薬期間を伴う連続投与の例は、次のとおりである：7日間の治療の後、7日の治療休止；14日間の治療の後、7日間の治療休止；および、7日間の治療の後、14日間の治療休止の周期。治療/治療休止の周期を、患者を治療するために必要な場合には複数回繰り返すことができる。
【０１０３】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、それを必要としている患者に、間欠投与スケジュールに従って投与する。間欠投与スケジュールは、患者に式(I)の化合物を投与する日および患者に式(I)の化合物を投与しない日を含む繰り返しスケジュールである。間欠投与スケジュールの例は、次のとおりである:週に4日で連続3週間投与した後、1週投与休止し、4週間間隔で繰り返す；週に5日で連続2週間投与した後、1週投与休止し、3週間間隔で繰り返す；ならびに、週に4日で1週間投与した後、2週投与休止し、3週間間隔で繰り返す。好ましくは、治療上有効な量の式(I)の化合物を投与する。
【０１０４】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、1日投与した後、6日休止し、1週間スケジュールで繰り返す。
【０１０５】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、1日投与した後、6日休止し、1〜4週間スケジュールで繰り返し、次いで1週間休止した。例えば、式(I)の化合物は、1日投与した後、6日休止して3週間、次いで1週間休止した。この4週サイクルを、１回以上繰り返すことができる。
【０１０６】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、連続2日投与した後、5日休止し、1週間スケジュールで繰り返す。
【０１０７】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、連続3日投与した後、4日休止し、1週間スケジュールで繰り返す。
【０１０８】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物を、1日投与した後、10〜13日休止する。
【０１０９】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物は、各々1日に1回投与される(QD)。この実施態様には、1日に1回の経口投与が含まれる。
【０１１０】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物は、各々1日に2回投与される(BID)。この実施態様には、1日に2回の経口投与が含まれる。
【０１１１】
一実施態様において、少なくとも1つの式(I)の化合物は、隔日にて投与される：1日投与した後に、1日休止する。この2日サイクルを、1回以上繰り返すことができる。
【０１１２】
(製造方法)
本発明の化合物は、有機合成の分野の当業者に周知の多くの方法で製造することができる。本発明の化合物は、以下に記載される方法、および有機合成化学の分野で公知の合成方法、あるいは当業者により認められているその改変方法を用いて合成することができる。好ましい方法としては、限定はされないが、以下に記載のものが挙げられる。本明細書中の全ての引用文献は、引用によりその全般が本明細書に援用される。
【０１１３】
本発明の化合物は、この項に記載の反応および技法を用いて製造されうる。該反応は、用いる試薬および物質に適した溶媒中で実施され、もたらされる変換に対して適切なものである。また、以下に記載の合成方法の説明において、提示した反応条件(溶媒の選択、反応雰囲気、反応温度、実験時間およびワークアップ方法を含む)は全て、該反応の標準である条件となるように選択され、それは当業者によって容易に認識されるべきであると解される。分子の様々な部分に存在する官能性が、提示された試薬および反応に適合しなければならないことは、有機合成の分野の当業者により理解される。反応条件に適合する置換基がそのように制限され、よって代替方法が用いられなくてはならないことは当業者にとっては容易に明白である。これにより、本発明の目的の化合物を得るために、合成工程の順序を改変する判断か、またはさらに別の1つの特定のプロセススキームを選択する判断が、しばしば必要とされうる。また、この分野のいずれの合成経路の計画における別の主流の判断が、本願に記載の化合物に存在する反応性官能基の保護のために用いられる保護基の賢明な選択であることが認識されるであろう。Greeneら(Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley and Sons(1999))により、熟練した実践者のための多くの別法についての信頼できる説明が記載されている。
【０１１４】
式(I)の化合物を、以下のスキームで説明される方法を参照して製造してもよい。そこに示される通り、最終生成物は式(I)と同一の構造式を示す化合物である。いずれの式(I)の化合物も、適切な置換基を用いて、試薬の適切な選択により、該スキームによって、製造されうることが理解されよう。溶媒、温度、圧力、および他の反応条件は、当業者によって容易に選択されうる。出発物質は、市販されているか、あるいは、当業者によって容易に製造される。化合物の構成要素は、本明細書のこの箇所もしくは他の場所で定義される。
【０１１５】
スキーム1〜4に要約される方法を用いて、式(I)の化合物を合成することができる。
【化４】
2015533811.tif 000006
【０１１６】
ベンゾジアゼピノン(iv)は、当業者に公知の多くの方法で製造されうる。例えば、スキーム1に示したとおり、文献に概説された方法(例えば、Sherrill, R.G. et al., J. Org. Chem., 60:730(1995)；または当業者に公知の他の経路)に従って、適切に置換された2-アミノベンゾフェノン(i)(例えば、Walsh, D.A., Synthesis, 677(1980)；および本明細書に記載の参考文献または当業者に公知の他の方法から)を、保護グリシン誘導体(ii)(PG = 保護基, 例えば PG=CBz, Katritzky, A.R., J. Org. Chem., 55:2206-2214(1990)参照)に結合させて、試薬(例えば、アンモニア)で処理して環化させて、ベンゾジアゼピノン(iii)を得てもよい。得られたラセミ混合物を、分離させて(当業者に公知の方法を用いて)、個々のエナンチオマーを得るか、あるいはラセミ体として用いてもよい。また、R3がHである場合、(iii)を、例えば、溶媒(例えば、DMF)中で、塩基(例えば、K2CO3またはCs2CO3)の存在下にて、アリールまたはアルキルハライドを用いて処理し、その他のR3置換基を得ることができる。
【０１１７】
工程2：当業者には既知のいくつかの方法により、(iii)を脱保護してもよい。例えば、PG = CBzを有する化合物(iii)を、溶媒(例えば、AcOH)中で、試薬(例えば、HBr)を用いて処理してもよい。化合物(iv)をラセミ体として使用してもよい。別法として、化合物(iv)を、標準的な方法(例えば、キラル分取クロマトグラフィー)を用いて、エナンチオマー分割に供してもよい。
【化５】
2015533811.tif 000007
【０１１８】
化合物(xii)を、スキーム2に概説した合成順序により製造できる。
【０１１９】
工程1：当業者に公知の複数の方法で、酸(v)を、化合物(vii)に変換させることができる。例えば、溶媒(例えば、DCM)中において試薬(例えば、塩化オキサリル)を用いて酸(v)を処理して、酸塩化物(vi)を得る。化合物(vi)を、標準条件下でオキサゾリジノン(a)を用いて処理して、化合物(vii)を得ることができる(Evans, D.A. et al., J. Am. Chem. Soc., 112：4011(1990))。
【０１２０】
工程2：スキーム2の第2工程は、低温で(例えば、−78℃)、不活性雰囲気下において、溶媒(例えば、THF)中で、化合物(vii)を、塩基(例えば、ナトリウム ビス(トリメチルシリル)-アミドまたはリチウムジイソプロピルアミド)を用いて処理することにより達成される。得られる(vii)のエノラートを、試薬(例えば、tert-ブチル ブロモアセテート)により処理して、化合物(viii, Ry = t-ブチル)を得る。
【０１２１】
工程3：化合物(viii)から(ix)への変換は、適切な温度で、溶媒の混合液(例えば、THF/水)を用いて、化合物(viii)を、過酸化水素および水酸化リチウムで処理することにより達成され得る。
【０１２２】
工程4：化合物(ix)を、溶媒(例えば、THF)中、低温で(例えば、−78℃)、不活性雰囲気下において、塩基(例えば、LDA)を用いて、(ix)のエノラートを生成させて、適切な脱離基(例えば、LG = トリフレート)を有する試薬(R2-LG)によるさらなる処理により、化合物(x)および化合物(xi)の混合物に変換できる。ジアステレオマー(x/xi)の得られる混合物を、その後、次の合成工程で利用してもよい。
【０１２３】
工程5：別法としては、混合物(x/xi)を、エピマー化条件で処理して(例えば、LDAおよび塩化ジエチルアルミニウムによる処理)、その後メタノールまたは酢酸によりクエンチして、目的のジアステレオマーリッチにしてもよい。得られる化合物(x/xi)のジアステレオマーリッチな混合物を、その後、次の合成工程で利用するか、またはこのジアステレオアイソマー混合物を、必要に応じて、適切な条件(例えば、分取HPLC、分取キラルHPLCまたはシリカゲルクロマトグラフィー)を用いて分離して、この得られる純粋な所望のジアステレオマー(xi)を、その後の工程で使用してもよい。
【０１２４】
工程6：別法としては、ジアステレオマー混合物の酸(x)および(xi)を、例えば、溶媒(例えば、DMF)中で、塩基(例えば、K2CO3)の存在下において、臭化ベンジルを用いて処理することにより保護してもよい。得られるジアステレオアイソマーの混合物を、必要に応じて、適切な条件（例えば、分取HPLC、分取キラルHPLCまたはシリカゲルクロマトグラフィー)を用いて分離してもよく、またこの得られる純粋な所望のジアステレオマー化合物(xii)をその後の工程で使用した。
【０１２５】
工程7：スキーム2の最終工程は、脱保護工程であって、当業者には公知の幾つかの方法により達成され得る。例えば、化合物(xii)におけるRw=ベンジルについて、溶媒(例えば、MeOH)中において、水素雰囲気下で触媒(例えばパラジウム炭素)を用いる水素化条件下での処理により、その後に利用できる化合物(xi)を得ることができる。
【０１２６】
あるいは、化合物(xi)を、スキーム3に見られる工程の順序に従って製造できる。
【化６】
2015533811.tif 000008
【０１２７】
工程1：スキーム3の第1工程は、当業者に公知の複数の方法の1つ、例えば、溶媒(例えば、THF)中において適切な温度で、試薬(例えば三フッ化ホウ素エーテラート)の存在下に置換アセトイミデート(例えば化合物(xiv))を用いる処理により、化合物(xiii)をエステル(xv)に変換することによって達成される。
【０１２８】
工程2：酸(v)を、当業者には既知の複数の方法で化合物(vi)に変換することができる。例えば、溶媒(例えば、DCM)中において試薬(例えば、塩化オキサリル)を用いて酸(v)を処理することにより、酸塩化物(vi)を得る。化合物(vi)を、標準的な条件下でオキサゾリジノン(a)を用いて処理して、化合物(vii)を得ることができる(Evans, D.A. et al., J. Am. Chem Soc., 112：4011(1990))。
【０１２９】
工程3：化合物(vii)を、複数の方法(Baran, P. et al., J. Am. Chem. Soc., 130(34)：11546(2008))でジアステレオマー(xvi)の混合物に変換できる。例えば、化合物(xv)を、溶媒(例えば、トルエン)中において、低温(例えば、−78℃)で、不活性雰囲気下(例えば、N2)に、塩基(例えば、LDA)を用いて処理した。得られる混合液を、溶媒(例えば、トルエン)中で不活性雰囲気下(例えば、N2)に、塩化リチウムおよび塩基(例えば、LDA)で処理した化合物(vii)の溶液に加えた。得られる化合物(xv)および(vii)のエノラートの混合物に、低温(例えば、−78℃)で、不活性雰囲気下(例えば、N2)にて、ビス(2-エチルヘキサノイルオキシ)銅を加えて、室温まで昇温させて、化合物(xvi)を得た。
【０１３０】
工程4：化合物(xvi)を、適切な温度にて、溶媒の混合液(例えば、THF/水)を用いて、過酸化水素および水酸化リチウムで処理することによって、化合物(x)および化合物(xi)の混合物へ変換させてもよい。次いで、得られるジアステレオマーの混合物を、次の合成工程に使用した。必要であれば、この時点で、得られるジアステレオマー混合物を、シリカゲルクロマトグラフィーまたは分取HPLCによって分離してもよい。
【０１３１】
工程5：別法として、混合物(x/xi)を、エピマー化条件で処理した(例えば、LDAおよび塩化ジエチルアルミニウムで処理することによって)後、メタノールまたは酢酸でクエンチして、目的のジアステレオマーリッチにしてもよい。得られるジアステレオマーを多く含む混合物を、その後に、次の合成工程で利用するか、またはこのジアステレオアイソマーの混合物を、必要に応じて、適切な条件(例えば、分取HPLC、分取キラルHPLCまたはシリカゲルクロマトグラフィー)を用いて分離してもよく、そして得られる純粋な所望のジアステレオマー(xi)を、次の工程において使用した。
【０１３２】
工程6：別法として、ジアステレオマー混合物の酸(x)および(xi)を、例えば、溶媒(例えば、DMF)中において、塩基(例えば、K2CO3)の存在下で、臭化ベンジルを用いる処理により保護してもよい。得られるジアステレオアイソマーの混合物を、必要に応じて、適切な条件(例えば、分取HPLC、分取キラルHPLCまたはシリカゲルクロマトグラフィー)を用いて分離してもよく、また得られる純粋な所望のジアステレオマー化合物(xii)をその後の工程で使用した。
【０１３３】
工程7：スキーム3の最終工程は、脱保護工程であり、当業者には既知の幾つかの方法において達成され得る。例えば、化合物(xii)におけるRw = ベンジルについて、溶媒(例えば、MeOH)中において、水素雰囲気下にて、触媒(例えば、パラジウム炭素)を用いる水素化条件下での処理により、その後に、例えばスキーム4の工程1において利用できる化合物(xi)を得た。
【化７】
2015533811.tif 000009
【０１３４】
工程1：構造(iv)の化合物を、カップリング試薬(例えば、TBTU)および塩基(例えば、TEA)の存在下で、溶媒(例えば、DMF)中において、純粋なジアステレオマー化合物(xi)または化合物(x/xi)のジアステレオマー混合物のいずれかとカップリングさせて、化合物(xiii)を、適宜、カップリングパートナーのエナンチオマーおよび／またはジアステレオマー純度に拠り、ジアステレオマー純粋な化合物またはジアステレオアイソマー混合物のいずれかとして得る。この混合物を、次の工程において、そのまま使用するか、または必要に応じて、適切な分離技術(例えば、キラル分取クロマトグラフィー)を用いて精製して、ジアステレオマー純粋化合物を得ることができる。
【０１３５】
工程2：化合物(xiii)を、適切な温度(例えば、0℃)で、溶媒(例えば、DCM)中において、酸(例えばTFA)を用いる処理により、化合物(xiv)を、ジアステレオマー純粋な化合物またはジアステレオアイソマー混合物のいずれかとして得た。この混合物を、そのまま使用しても、または必要に応じて、適切な分離技術(例えば、キラル分取クロマトグラフィー)を用いて精製して、ジアステレオマー純粋な化合物を得てもよい。
【０１３６】
工程3：化合物(xiv)の化合物(xv)への変換は、溶媒(例えば、DMF)中において、適切なアミン源(例えば、塩化アンモニウムまたはアンモニア)、カルボジイミド(例えばEDC)、HOBTおよび塩基(例えばTEA)と、化合物(xiv)とのカップリングにより達成され得る。必要であれば、該ジアステレオマー混合物を、適切な分離技術(例えば、キラル分取クロマトグラフィー)を用いて分離してもよい。また、R3がHであるならば、(xv)は、例えば、塩基(例えばK2CO3またはCs2CO3)の存在下で、溶媒(例えば、DMF)中においてアリールまたはアルキルハライドにより処理して、別のR3置換基を得てもよい。
【実施例】
【０１３７】
(実施例)
本発明は以下の実施例においてさらに明確にされる。該実施例は例示のみを目的として提供されることが理解されるべきである。上記の考察および例から、当業者であれば、本発明の本質的特徴を確認することができ、そして、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、変更および改変を行って本発明を様々な使用および条件に適応させることができる。結果として本発明は、本明細書に記載の実例によって制限されるのではなく、むしろ添付の特許請求の範囲によって定義される。
【０１３８】
【表１−１】
2015533811.tif 000010
【表１−２】
2015533811.tif 000011
【０１３９】
中間体S-1：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化８】
2015533811.tif 000012
(S-1)
中間体S-1A：3,3,3-トリフルオロプロピル トリフルオロメタンスルホネート
【化９】
2015533811.tif 000013
(S-1A)
DCM(120 mL)中の2,6-ルチジン(18.38 mL, 158 mmol)の冷たい攪拌溶液(−25℃)に、3分間かけてTf2O(24.88 mL, 147 mmol)を加えて、該混合液を、5分間攪拌した。該反応混合液に、3分間の時間をおいて3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オール(12 g, 105 mmol)を加えた。2時間後に、該反応混合液を、室温へ昇温させて、1時間攪拌した。該反応混合液を、その体積を半分に濃縮して、次いでシリカゲルカラム(330g ISCO)に直接重層して、精製し、該生成物をDCMにより溶出して、中間体S-1A(13.74 g, 53%)を無色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 4.71(2 H, t, J=6.15 Hz), 2.49-2.86(2 H, m).
【０１４０】
中間体S-1B：(4S)-4-ベンジル-3-(5,5,5-トリフルオロペンタノイル)-1,3-オキサゾリジン-2-オン
【化１０】
2015533811.tif 000014
(S-1B)
DCM(50 mL)中の5,5,5-トリフルオロペンタン酸(14.76 g, 95 mmol)およびDMF(0.146 mL)の攪拌溶液に、塩化オキサリル(8.27 mL, 95 mmol)をゆっくりと加えた。2時間後に、該混合液を、濃縮乾固させた。別のフラスコに、THF(100 mL)中の(S)-4-ベンジルオキサゾリジン-2-オン(16.75 g, 95 mmol)を入れて、次いで−78℃に冷却した。該溶液に、n-BuLi(2.5M, 37.8 mL, 95 mmol)を10分かけてゆっくりと加えて、10分間攪拌して、次いでTHF(50 mL)中の上記酸塩化物の溶液を、ゆっくりと5分間かけて加えた。該混合液を、30分間攪拌して、次いで室温へと昇温させた。該混合液を、飽和NH4Cl水溶液でクエンチして、次いで10%LiCl水溶液を加えて、混合液を、Et2Oで抽出した。該有機層を、飽和NaHCO3水溶液で洗浄して、次いで食塩水で洗浄して、乾燥させて(MgSO4)、濾過し、濃縮乾固させた。該残留物を、SiO2クロマトグラフィーにより精製して(ISCO, 330 g カラム, 100%ヘキサン〜100%EtOAcのグラジエントにより溶出する)、生成物として中間体S-1Bを得た；(25.25 g, 85%)：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 7.32-7.39(2 H, m), 7.30(1 H, d, J=7.05 Hz), 7.18-7.25(2 H, m), 4.64-4.74(1 H, m), 4.17-4.27(2 H, m), 3.31(1 H, dd, J=13.35, 3.27 Hz), 3.00-3.11(2 H, m), 2.79(1 H, dd, J=13.35, 9.57 Hz), 2.16-2.28(2 H, m), 1.93-2.04(2 H, m).
【０１４１】
中間体S-1C：tert-ブチル(3R)-3-(((4S)-4-ベンジル-2−オキソ−1,3-オキサゾリジン-3−イル)カルボニル)-6,6,6-トリフルオロヘキサノエート
【化１１】
2015533811.tif 000015
(S-1C)
窒素雰囲気下で、THF(20 mL)中の中間体S-1B(3.03 g, 9.61 mmol)の冷たい攪拌溶液(−78℃)に、NaHMDS(THF中で1.0M)(10.6 mL, 10.60 mmol)を加えた。2時間後に、tert-ブチル 2-ブロモアセテート(5.62 g, 28.8 mmol)を、−78℃で、シリンジから希釈せずにそのまま加えて、同じ温度で攪拌を維持した。6時間後に、該反応混合液を、室温まで昇温させた。該反応混合液を、飽和NH4ClとEtOAcとの間に分配した。有機相を分離して、水相を、EtOAc(3x)で抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させ(Na2SO4)、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 5%〜100% 溶媒 A/B=ヘキサン/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 120g)。適切な画分の濃縮により、中間体S-1C(2.79 g, 67.6%)を無色の粘性油状物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 7.34(2 H, d, J=7.30 Hz), 7.24-7.32(3 H, m), 4.62-4.75(1 H, m, J=10.17, 6.89, 3.43, 3.43 Hz), 4.15-4.25(3 H, m), 3.35(1 H, dd, J=13.60, 3.27 Hz), 2.84(1 H, dd, J=16.62, 9.57 Hz), 2.75(1 H, dd, J=13.35, 10.07 Hz), 2.47(1 H, dd, J=16.62, 4.78 Hz), 2.11-2.23(2 H, m), 1.90-2.02(1 H, m), 1.72-1.84(1 H, m), 1.44(9 H, s).
【０１４２】
中間体S-1D：(2R)-2-(2-tert-ブトキシ-2-オキソエチル)-5,5,5-トリフルオロペンタン酸
【化１２】
2015533811.tif 000016
(S-1D)
THF(50 mL)および水(15 mL)中の中間体S-1C(2.17 g, 5.05 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)に、H2O(2 mL)中のLiOH(0.242 g, 10.11 mmol)およびH2O2(2.065 mL, 20.21 mmol)の溶液を加えた。10分間後に、該反応混合液を、氷浴から取り出して、１時間攪拌して、次いで0℃に再度冷却した。飽和NaHCO3水溶液(25mL)および飽和Na2SO3水溶液(25mL)を、該反応混合液に加えた。該反応混合液を、10分間攪拌して、次いで部分濃縮した。得られる混合液を、DCM(2x)で抽出して、氷冷し、濃HClを用いてpH3に酸性とした。該混合液を、固体NaClで飽和させて、EtOAc(3x)で抽出して、次いでMgSO4上で乾燥させて、濾過して、無色の油状物に濃縮して、中間体S-1D(1.2514g, 92%)を得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 2.83-2.95(1 H, m), 2.62-2.74(1 H, m), 2.45(1 H, dd, J=16.62, 5.79 Hz), 2.15-2.27(2 H, m), 1.88-2.00(1 H, m), 1.75-1.88(1 H, m), 1.45(9 H, s).
【０１４３】
中間体S-1：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸、および
中間体S-1E：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化１３】
2015533811.tif 000017
THF(60 mL)中の中間体S-1D(5 g, 18.50 mmol)の冷たい攪拌溶液(−78℃)に、LDA(22.2 mL, 44.4 mmol, 2.0M)を7分間かけてゆっくりと加えた。2時間攪拌した後、中間体S-1A(6.38 g, 25.9 mmol)を、該反応混合液に3分かけて加えた。60分間後、該反応混合液を、−25℃に昇温させて(氷/MeOH/ドライアイス)、さらに60分間攪拌して、この時点で、飽和NH4Cl水溶液を加えた。分離した水相を、1N HCl水溶液を用いてpH3に酸性とし、次いでEt2Oで抽出して、有機層を合わせて、食塩水(x2)で洗浄して、MgSO4上で乾燥させて、濾過して濃縮し、1：4(S-1：S-1E)の中間体S-1および中間体S-1E(6.00 g, 89%)の混合液(1H NMRにより決定されたとおり)を淡黄色の固形物として得た。1H NMR(500 MHz, CDCl3)δ ppm 2.81(1 H, ddd, J=10.17, 6.32, 3.85 Hz), 2.63-2.76(1 H, m), 2.02-2.33(4 H, m), 1.86-1.99(2 H, m), 1.68-1.85(2 H, m), 1.47(9 H, s).
【０１４４】
中間体S-1：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸、および
中間体S-1E：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化１４】
2015533811.tif 000018
THF(91 mL)中の中間体S-1および中間体S-1E(5.97 g, 16.30 mmol)の混合物の冷たい攪拌溶液(−78℃)に、LDA(19 mL, 38.0 mmol, THF/ヘキサン/エチルベンゼン中で2.0M)を、シリンジにより10分かけて滴加した(内部温度は−65℃を決して超えない、反応溶液中のJ-KEM(登録商標)probe)。該反応混合液を、15分間攪拌して、室温に昇温させて(24℃の水浴)、15分間攪拌して、15分間−78℃に冷却した。該反応混合物に、Et2AlCl(41 mL, 41.0 mmol, ヘキサン中で1M)を、シリンジにより加えた(内部温度は決して−55℃を超えない)。該反応混合液を、10分間攪拌して、15分間室温へ昇温させて(24℃浴)、次いで15分間−78℃に冷却した。一方、1000mLの丸底フラスコにMeOH(145 mL)を入れて、−78℃に予め冷却した。しっかりと攪拌しながら、該反応混合液を、カニューレによりMeOHに5分間かけて移した。フラスコを浴から外して、氷を加えて、その後1N HCl(147 mL, 147 mmol)をゆっくりと加えた。HClを加えた時にガスの発生を観察した。該反応混合液を、室温まで昇温させ、ガスの発生が止んだ。該反応混合液を、EtOAc(750mL)で希釈して、NaClで飽和させて、該有機相を分離して、水(291 mL)中のフッ化カリウム(8.52 g, 147 mmol)および1N HCl(41 mL, 41.0 mmol)溶液、食塩水(100 mL)で洗浄して、乾燥させて(Na2SO4)、濾過して濃縮し、次いで、真空下で乾燥させた。1H NMRにより、生成物が、9：1の中間体S-1および中間体S-1Eの混合物であったことが示された。得られる中間体S-1および中間体S-1E(6.12 g, >99%収率)を、多く含む混合物を暗琥珀色の固形物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 2.64-2.76(2 H, m), 2.04-2.35(4 H, m), 1.88-2.00(2 H, m), 1.71-1.83(2 H, m), 1.48(9 H, s).
【０１４５】
中間体S-1を製造するための別法：
中間体S-1F：(2R,3S)-1-ベンジル 4-tert-ブチル 2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシネート
【化１５】
2015533811.tif 000019
(S-1F)
DMF(63 ml)中の9：1の中間体S-1および中間体S-1E(5.98 g, 16.33 mmol)を多く含む混合液の攪拌溶液に、炭酸カリウム(4.06 g, 29.4 mmol)および臭化ベンジル(2.9 ml, 24.38 mmol)を加えた。該反応混合液を、終夜攪拌した。該反応混合液を、EtOAcで希釈して(1000 mL)、10% LiCl(3x200 mL)、食塩水(200 mL)で洗浄して、次いで乾燥させて(Na2SO4)、濾過して濃縮し、次いで真空下で乾燥させた。該残留物を、トルエン：ヘキサンのグラジエントを用いるSiO2クロマトグラフィーにより精製した。ジアステレオマー純粋な中間体S-1F(4.81g, 65%)を無色の固形物として得た：1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ 7.32-7.43(m, 5H), 5.19(d, J=12.10 Hz, 1H), 5.15(d, J=12.10 Hz, 1H), 2.71(dt, J=3.52, 9.20 Hz, 1H), 2.61(dt, J=3.63, 9.63 Hz, 1H), 1.96-2.21(m, 4H), 1.69-1.96(m, 3H), 1.56-1.67(m, 1H), 1.45(s, 9H).
【０１４６】
中間体S-1：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化１６】
2015533811.tif 000020
(S-1)
【０１４７】
MeOH(100 mL)中の中間体S-1F(4.81 g, 10.54 mmol)の溶液に、10% パラジウム炭素(wet, Degussa type, 568.0 mg, 0.534 mmol)をH2圧のフラスコにおいて加えた。容器を、N2(4x)に続いて、H2(2x)でパージして、次いで50 psiまで加圧して、終夜振とうした。該反応混合液を脱気して、パージし、混合液を、CELITE(登録商標)を通して濾過して、MeOHで洗浄して、次いで濃縮して、真空下で乾燥させた。中間体S-1(3.81 g, 99%収率)を、無色の固形物として得た：1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ 2.62-2.79(m, 2H), 2.02-2.40(m, 4H), 1.87-2.00(m, 2H), 1.67-1.84(m, 2H), 1.48(s, 9H).
【０１４８】
中間体S-1を製造するための別法：
中間体S-1：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化１７】
2015533811.tif 000021
(S-1)
中間体S-1Eとの混合物として中間体S-1を、上記と同一の方法において中間体S-1Dから製造して、1：2.2の中間体S-1および中間体S-1E(8.60 g, 23.48 mmol)の混合物を得て、これを、THF(91mL)中のLDA(THF、エチルベンゼンおよびヘプタン中の2.0 M 溶液, 28.2 mL, 56.4 mmol)およびジエチル塩化アルミニウム(ヘキサン中で1.0M 溶液, 59 mL, 59.0 mmol)を用いて富化した。上記したような後処理の後に、得られる残留物は、13.2：1(1H NMRにより)の中間体S-1および中間体S-1Eの混合物であることが判り、これを次の通りに処理した：粗生成物を、MTBE(43 mL)に溶解した。ヘキサン(26 mL)を、30℃以下の温度に維持しながら、該反応混合液にゆっくりと入れた。該反応混合液を、10分間攪拌した。次に、tert-ブチルアミン(2.7 mL, 1.1eq)を、30℃以下の温度に維持しながら、20分間かけてゆっくりと入れた。この添加により発熱が見られた。該反応混合物を、2時間、30℃以下で攪拌して濾過した。該固形物質を、5：3のMTBE：ヘキサン(80mL)で洗浄して、該濾液を濃縮して、静置した。濾過した固形物を、ジクロロメタン(300mL)に溶解して、1N HCl(100mL)で洗浄して、有機層を、食塩水(100mL x 2)で洗浄し、次いで45℃以下で減圧濃縮した。中間体S-1(5.46 g, 64%)を得た。
【０１４９】
中間体S-1を製造するための第2の別法：
中間体S-1G：tert-ブチル 5,5,5-トリフルオロペンタノエート
【化１８】
2015533811.tif 000022
(S-1G)
THF(30 mL)およびヘキサン(30 mL)中の5,5,5-トリフルオロペンタン酸(5 g, 32.0 mmol)の攪拌溶液に、0℃で、tert-ブチル 2,2,2-トリクロロアセトイミデート(11.46 mL, 64.1 mmol)を加えた。該混合液を、0℃で15分間攪拌した。三フッ化ホウ素エーテラート(0.406 mL, 3.20 mmol)を加えて、該反応混合液を、室温まで終夜昇温させた。澄明な反応混合液に、固形物のNaHCO3を加えて(5 g)、30分間攪拌した。該混合液を、MgSO4に通して濾過して、ヘキサン(200 mL)で洗浄した。該溶液を、45分間静置させて、得られる固形物質を同じMgSO4フィルター上で再度濾過することにより除去して、ヘキサン(100 mL)で洗浄し、加熱せずに減圧濃縮した。体積を、約30 mLに減らして、清潔なフリット漏斗により濾過して、ヘキサン(5 mL)で洗浄して、次いで加熱せずに減圧濃縮した。得られた溶媒を含まない油状物を、0.45μm ナイロン膜フィルターディスクを通して濾過して、中間体S-1G(6.6 g, 31.4 mmol 98%収率)を無色の油状物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 1.38(s, 9 H), 1.74-1.83(m, 2 H), 2.00-2.13(m, 2 H), 2.24(t, J=7.28 Hz, 2 H).
【０１５０】
中間体S-1H：(4S)-4-(プロパン-2−イル)-3-(5,5,5-トリフルオロペンタノイル)-1,3-オキサゾリジン-2-オン
【化１９】
2015533811.tif 000023
(S-1H)
DCM(50 mL)およびDMF(3滴)中の5,5,5-トリフルオロペンタン酸(5.04 g, 32.3 mmol)の攪拌溶液に、塩化オキサリル(3.4 mL, 38.8 mmol)を5分間かけて滴加して、該溶液を、全ての泡沸が止むまで攪拌した。該反応混合液を、減圧下で濃縮して、淡黄色の油状物を得た。THF(100 mL)中の(4S)-4-(プロパン-2−イル)-1,3-オキサゾリジン-2-オン(4.18 g, 32.4 mmol)の溶液を別のフラスコに入れて、−78℃で5分間かけて、シリンジによりn-BuLi(ヘキサン中で2.5M)(13.0 mL, 32.5 mmol)を滴加した。10分間攪拌した後、THF(20 mL)に溶解した上記酸塩化物を、カニューレにより15分間かけて加えた。該反応混合液を、0℃に昇温させ、浴が温まるにつれて室温まで昇温させて、終夜攪拌した。該反応混合液に、飽和NH4Clを加えた、次いでEtOAc(2x)で抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させ(Na2SO4)、濾過して、減圧下で濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 5%〜60% 溶媒A/B=ヘキサン/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 120g)により精製した。適切な画分を濃縮して、中間体S-1H(7.39 g, 86%)を無色の油状物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 4.44(1 H, dt, J=8.31, 3.53 Hz), 4.30(1 H, t, J=8.69 Hz), 4.23(1 H, dd, J=9.06, 3.02 Hz), 2.98-3.08(2 H, m), 2.32-2.44(1 H, m, J=13.91, 7.02, 7.02, 4.03 Hz), 2.13-2.25(2 H, m), 1.88-2.00(2 H, m), 0.93(3 H, d, J=7.05 Hz), 0.88(3 H, d, J=6.80 Hz).
【０１５１】
中間体S-1I：(2S,3R)-tert-ブチル 6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサノエート、および
中間体S-1J：(2R,3R)-tert-ブチル 6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサノエート
【化２０】
2015533811.tif 000024
窒素雰囲気下でTHF(59 mL)中のジイソプロピルアミン(5.3 mL, 37.2 mmol)の冷たい攪拌溶液(−78℃)に、n-BuLi(ヘキサン中で2.5M)(14.7 mL, 36.8 mmol)を加えた。該反応混合液を、次いで0℃まで昇温させて、0.5 M LDAの溶液を得た。別の容器に、中間体S-1H(2.45 g, 9.17 mmol)を入れて、該物質を、ベンゼンを用いて2回共沸混合させた(RotoVapの空気吸入口に窒素入口(inlet)を装着して湿気を完全に排除した)、次いでトルエン(15.3 mL)を加えた。この溶液を、乾燥塩化リチウムを入れたフラスコに加えた(1.96 g, 46.2 mmol)。−78℃に冷却した得られた混合液に、LDA溶液(21.0 mL, 10.5 mmol)を加えて、−78℃で10分間攪拌して、0℃で10分間昇温させ、次いで−78℃に再冷却した。中間体S-1G(3.41 g, 16.07 mmol)を含む別の反応容器(これもまた、ベンゼンと2回共沸混合させた)に、トルエン(15.3 mL)を加えて、−78℃まで冷却して、LDA(37.0 mL, 18.5 mmol)を加えて、得られた溶液を、−78℃で25分間攪拌した。この時点で、エステル由来のエノラートを、カニューレにより、オキサゾリジノンエノラートの溶液に移して、−78℃でさらに5分間攪拌した後、セプタムを取り外して、固体粉末状のビス(2-エチルヘキサノイルオキシ)銅(9.02 g, 25.8 mmol)を、直ぐに反応容器に加えて、該セプタムを元に戻した。容器を、冷却浴から直ちに取り出して、急速旋回させながら温水浴(40℃)に入れると、同時に最初の青緑色から茶色へと変色した。該反応混合液を、20分間攪拌して、5％NH4OH水溶液(360 mL)に注ぎ入れ、EtOAc(2x)で抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させ(Na2SO4)、濾過して、減圧下で濃縮した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0%〜60% 溶媒 A/B=ヘキサン/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 120g)により精製した。適切な画分を濃縮して、中間体S-1IおよびS-1Jの混合物(2.87 g, 66%)を淡黄色の粘性油状物として得た。1H NMRにより、該生成物が、2.74および2.84 ppmでの多重線の積分により決定したとおり、1.6：1のS-1I：S-1Jのジアステレオマーの混合物であることが示された：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 4.43-4.54(2 H, m), 4.23-4.35(5 H, m), 4.01(1 H, ddd, J=9.54, 6.27, 3.51 Hz), 2.84(1 H, ddd, J=9.41, 7.28, 3.64 Hz), 2.74(1 H, ddd, J=10.29, 6.27, 4.02 Hz), 2.37-2.48(2 H, m, J=10.38, 6.98, 6.98, 3.51, 3.51 Hz), 2.20-2.37(3 H, m), 1.92-2.20(8 H, m), 1.64-1.91(5 H, m), 1.47(18 H, s), 0.88-0.98(12 H, m).
【０１５２】
中間体S-1：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸、および
中間体S-1E：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化２１】
2015533811.tif 000025
【０１５３】
THF(140 mL)および水(42 mL)中の中間体S-1Iおよび中間体S-1J(4.54 g, 9.51 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)に、過酸化水素(水中で30%)(10.3 g, 91 mmol)およびLiOH(685.3 mg, 28.6 mmol)を順次に加えて、該混合液を1時間攪拌した。この時点で、反応容器を、冷却浴から取り出して、次いで1.5時間攪拌した。反応の完了を、HPLCにより判定した。該反応混合液に、飽和NaHCO3(45 mL)および飽和Na2SO3(15 mL)を加えて、次いで減圧下で部分濃縮した。得られる粗製溶液を、DCM(3x)で抽出した。該水相を1N HClを用いてpH1〜2に酸性として、DCM(3x)およびEtOAc(1x)で抽出した。該有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、乾燥させ(Na2SO4)、濾過して、減圧下で濃縮して、中間体S-1およびS-1Eの混合物(3.00 g, 86%)を無色の油状物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 2.76-2.84(1 H, m, ジアステレオマー2), 2.64-2.76(3 H, m), 2.04-2.35(8 H, m), 1.88-2.00(4 H, m), 1.71-1.83(4 H, m), 1.48(9 H, s, ジアステレオマー1), 1.46(9 H, s, ジアステレオマー2)；1H NMRにより、t-ブチル基のピークの積分により1.7：1のS-1E：S-1Fの混合物が示された。
【０１５４】
中間体S-1：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸、および
中間体S-1F：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化２２】
2015533811.tif 000026
THF(19 mL)中のジイソプロピルアミン(1.7 mL, 11.93 mmol)の冷たい攪拌溶液(−78℃)に、窒素雰囲気下で、n-BuLi(ヘキサン中で2.5M)(4.8 mL, 12.00 mmol)を加えた。該混合液を、5分間攪拌して、次いで0℃に昇温させた。別の容器中で、THF(18 mL)中の中間体S-1およびS-1Eの混合液(1.99 g, 5.43 mmol)の冷たい攪拌溶液(−78℃)に、上記で調製したLDA溶液を、カニューレにより25分間かけてゆっくりと加えた。該混合液を、15分間攪拌して、次いで、室温まで(24℃の水浴中に置く)15分間昇温させて、次いで15分間−78℃に再冷却した。該反応混合液に、シリンジによりEt2AlCl(ヘキサン中で1M)(11.4 mL, 11.40 mmol)を加えて、10分間攪拌して、15分間室温まで昇温させて、次いで15分間−78℃に再度冷却した。メタノール(25 mL)を、迅速に加えて、室温まで昇温させながら激しく攪拌して、次いで元の体積の〜1/4まで濃縮した。該混合液を、EtOAcに溶解して、1N HCl(50 mL)および氷(75 g)を用いて洗浄した。該水相を分離して、EtOAc(2x)で抽出した。有機相を合わせて、KF(75 mL 水中で2.85g)および1N HCl(13 mL)[得られる溶液はpH3〜4]の混合液で洗浄し、次いで食塩水で洗浄して、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、減圧下で濃縮して、9：1(S-1：S-1E)の中間体S-1および中間体S-1Eのジアステレオマー混合液(2.13 g, >99%)(1H NMRにより決定されたとおり)を、淡黄色の粘性油状物として得た：1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 2.64-2.76(2 H, m), 2.04-2.35(4 H, m), 1.88-2.00(2 H, m), 1.71-1.83(2 H, m), 1.48(9 H, s).
【０１５５】
中間体S-2：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3-フルオロプロピル)ヘキサン酸
【化２３】
2015533811.tif 000027
(S-2)
中間体S-2：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-7,7,7-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘプタン酸、および
中間体S-2A：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-7,7,7-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘプタン酸
【化２４】
2015533811.tif 000028
(S-2)      (S-2A)
THF(30 mL)中の中間体S-1D(1.72 g, 6.36 mmol)の冷たい攪拌溶液(−78℃)に、7分間かけてLDA(7.32 mL, 14.6 mmol)をゆっくりと加えた。1時間攪拌後、4,4,4-トリフルオロブチルトリフルオロメタンスルホネート(2.11 g, 8.11 mmol)を、2分間かけて該反応混合液に加えた。15分間後に、該反応混合液を、1時間−25℃まで温めて(氷/MeOH/ドライアイス)、次いで−78℃に冷却した。80分間後、この反応を、飽和NH4Cl水溶液(10 mL)でクエンチした。該反応混合液を、再度食塩水で希釈して、該溶液を、1N HClを用いてpH 3に調整した。該水層を、エーテルで抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させて、減圧下で濃縮して、中間体S-2およびS-2A(2.29 g, 95%)の混合液を無色の油状物として得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 2.83-2.75(m, 1H), 2.64(ddd, J=9.9, 6.7, 3.6 Hz, 1H), 2.32-2.03(m, 5H), 1.98-1.70(m, 3H), 1.69-1.52(m, 3H), 1.50-1.42(m, 9H)．1H NMRにより、t-Bu基のピークの積分により1：4.5のジアステレオマーの混合液(S-2：S-2A)が示された。
【０１５６】
中間体S-2：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-7,7,7-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘプタン酸、および
中間体S-2A：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-7,7,7-トリフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘプタン酸
【化２５】
2015533811.tif 000029
中間体S-2および中間体S-2Aの混合液(2.29 g, 6.02 mmol)を、THF(38 mL)中にとり、無色の溶液を得て、これを−78℃に冷却した。次いで、LDA(7.23 mL, 14.5 mmol)(ヘプタン中で2.0M/THF/エチルベンゼン)を、該反応混合液に3分間かけてゆっくりと加えた。15分間攪拌後、該反応混合液を、室温で水浴においた。15分間後に、該反応混合液を、−78℃浴に戻して、次いで塩化ジエチルアルミニウム(14.5 mL, 14.5 mmol)(ヘキサン中で1M)を5分間かけてゆっくりと加えた。該反応混合液を、−78℃で攪拌した。15分間後に、該反応混合液を、室温で10分間水浴中に置いて、次いで−78℃浴に冷却し戻した。15分間後に、該反応液を、MeOH(30.0 mL, 741 mmol)でクエンチして、−78℃の浴から外して、濃縮した。該反応混合液に、氷およびHCl(60.8 mL, 60.8 mmol)を加えて、次いでEtOAc(2 x 200 mL)で抽出した。該有機層を、H2O(55 mL)および1N HCl(17.0 mL)中のフッ化カリウム(3.50g, 60.3 mmol)で洗浄した。該有機層を、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させて、減圧濃縮して、中間体S-2および中間体S-2Aを多く含む混合物(2.25g, 98%収率)を明黄色の油状物として得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 2.83-2.75(m, 1H), 2.64(ddd, J=9.9, 6.7, 3.6 Hz, 1H), 2.32-2.03(m, 5H), 1.98-1.70(m, 3H), 1.69-1.52(m, 3H), 1.50-1.42(m, 9H). 1H NMRにより、所望のジアステレオマー中間体S-2が多い9：1の割合が示された。
【０１５７】
中間体S-2B：(2R,3S)-1-ベンジル 4-tert-ブチル 2,3-ビス(4,4,4-トリフルオロブチル)スクシネート
【化２６】
2015533811.tif 000030
(S-2B)
9：1の中間体S-2および中間体S-2AとDMF(30 mL)中の炭酸カリウム(1.60 g, 11.58 mmol)との攪拌した混合液(2.24 g, 5.89 mmol)に、臭化ベンジル(1.20 mL, 10.1 mmol)を加えた。該反応混合液を、室温にて19時間攪拌した。該反応混合液を、酢酸エチル(400 mL)で希釈して、10% LiCl 溶液(3 x 100 mL)、食塩水(50 mL)で洗浄して、次いで無水硫酸マグネシウム上で乾燥させて、濾過して、真空下で濃縮乾固させた。該残留物を、フラッシュクロマトグラフィー(Teledyne ISCO CombiFlash 0%〜100% 溶媒 A/B=ヘキサン/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 220 g, 254 nmで検出、220 nmでモニタリング)により精製した。適切な画分の濃縮により、中間体S-2B(1.59 g, 57.5%)を得た。HPLC：RT= 3.863 分(CHROMOLITH(登録商標)SpeedRODカラム4.6 x 50 mm, 4分間かけて10〜90% メタノール水溶液(0.1% TFAを含む), 4 mL/分, 220 nmでモニタリング)。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 7.40-7.34(m, 5H), 5.17(d, J=1.8 Hz, 2H), 2.73-2.64(m, 1H), 2.55(td, J=10.0, 3.9 Hz, 1H), 2.16-1.82(m, 5H), 1.79-1.57(m, 3H), 1.53-1.49(m, 1H), 1.45(s, 9H), 1.37-1.24(m, 1H).
【０１５８】
中間体S-2：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(4,4,4-トリフルオロブチル)ヘキサン酸
【化２７】
2015533811.tif 000031
(S-2)
窒素下においてMeOH(10 mL)およびEtOAc(10 mL)中の中間体S-2B(1.59 g, 3.37 mmol)の攪拌溶液に、10% Pd/C(510 mg)を加えた。空気を、水素で置換して、該反応混合液を、室温にて2.5時間攪拌した。パラジウム触媒を、濾過して、4 μM ポリカーボネートフィルムを通して濾去し、MeOHで濯いだ。濾液を、減圧下で濃縮して、中間体S-2(1.28 g, 99%)を得た。1H NMR(400MHz, クロロホルム-d)δ 2.76-2.67(m, 1H), 2.65-2.56(m, 1H), 2.33-2.21(m, 1H), 2.17-2.08(m, 3H), 1.93(dtd, J=14.5, 9.9, 5.2 Hz, 1H), 1.84-1.74(m, 2H), 1.70-1.52(m, 3H), 1.48(s, 9H).
【０１５９】
中間体S-3：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3-フルオロプロピル)ヘキサン酸
【化２８】
2015533811.tif 000032
(S-3)
中間体S-3A：3-フルオロプロピルトリフルオロメタンスルホネート
【化２９】
2015533811.tif 000033
(S-3A)
DCM(30 mL)中の2,6-ルチジン(4.60 mL, 39.5 mmoL)の冷たい攪拌溶液(−25℃)に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(6.00 mL, 35.5 mmoL)を、3分間かけて加えた。次いで、3-フルオロプロパン-1-オール(1.61 g, 20.6 mmoL)を加えた。該反応混合液を、2.5時間、室温まで昇温させた。該反応混合液を、次いでその体積の半量まで濃縮して、フラッシュクロマトグラフィー(Teledyne ISCO CombiFlash, 定組成 DCM, REDISEP(登録商標)SiO2 120 g, 254 nMで検出、220 nmでモニタリング)により精製した。適切な画分の濃縮により、中間体S-3A(2.92 g, 67.4%)を得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 4.69(2 H, t, J=6.16 Hz), 4.65(1 H, t, J=5.50 Hz), 4.54(1 H, t, J=5.61 Hz), 2.25(1 H, dt, J=11.39, 5.86 Hz), 2.19(1 H, dt, J=11.44, 5.94 Hz).
【０１６０】
中間体S-3：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6-フルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸および中間体S-3B：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6-フルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化３０】
2015533811.tif 000034
THF(15 mL)中の中間体S-1D(1.01 g, 3.73 mmol)の冷たい攪拌溶液(−78℃)に、LDA(4.56 mL, 8.21 mmol)を、5分間かけてゆっくりと加えた。1.5時間攪拌した後に、中間体S-3A(1.02 g, 4.85 mmol)を、該反応混合液に3分間かけて加えた。17分後に、該反応混合液を、1.5時間、浴(氷/MeOH/ドライアイス)中で−25℃まで昇温させた。該反応を、水(15 mL)でクエンチして、次いでCH2Cl2(3x 20 mL)で抽出した。該有機層を、1N NaOH(3x 20 mL)を用いて再度抽出して、水層を合わせた。該水層を、氷/水浴中で冷却して、次いで6 N HClを用いてpH1に酸性とした。次に、該水層を、固体のNaClを用いて飽和させて、EtOAc(2x 85 mL)で抽出した。有機相を合わせて、食塩水で洗浄して、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させて、減圧下で濃縮して、中間体S-3および中間体S-3B(0.96 g, 78%)の混合液を、油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 4.48-4.56(1 H, m), 4.36-4.44(1 H, m), 2.75-2.83(1 H, m), 2.61-2.72(1 H, m), 2.08-2.34(2 H, m), 1.83-1.98(3 H, m), 1.66-1.82(4 H, m), 1.44-1.51(9 H, m). 1H NMRにより、t-Bu基に対するピークの積分により1：6.4のジアステレオマー(中間体S-3：中間体S-3B)混合物が示された。
【０１６１】
中間体S-3：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6,6,6-トリフルオロ-2-(3-フルオロプロピル)ヘキサン酸、および
中間体S-3B：(2R,3R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-6-フルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化３１】
2015533811.tif 000035
中間体S-3および中間体S-3B(0.30 g, 0.91 mmol)の混合物をTHF(5 mL)に移して、無色の溶液を得て、これを−78℃に冷却した。次いで、LDA(1.11 mL, 2.00 mmol)(ヘプタン/THF/エチルベンゼン中で1.8M)を、該反応混合液に、3分間かけてゆっくりと加えた。15分間攪拌後、該反応混合液を、室温の水浴においた。15分間後に、該反応混合液を、−78℃の浴に置いて、次いで塩化ジエチルアルミニウム(1.91 mL, 1.91 mmol)(ヘキサン中で1M)を5分間かけてゆっくりと加えた。該反応混合液を−78℃で攪拌した。15分間後に、該反応混合液を、10分間室温の水浴中に置いて、次いで−78℃の浴に再度冷却した。15分間後に、該反応混合液を、MeOHでクエンチし(5.51 mL, 136 mmol)、−78℃の浴から出して、濃縮した。該反応混合液に、氷およびHCl(8.17 mL, 8.17 mmol)を加えて、次いでEtOAc(2x)で抽出した。該有機層を、H2O(16 mL)および1N HCl(10.0 mL)中のフッ化カリウムで洗浄した(0.48g, 8.26 mmol)。該有機層を、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させて、減圧下で濃縮し、中間体S-3および中間体S-3B(0.20g, 65%収率)の混合物を淡黄色の油状物として提供する。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 4.47-4.56(1 H, m), 4.33-4.43(1 H, m), 2.59-2.76(2 H, m), 2.21-2.35(1 H, m), 2.06-2.19(1 H, m), 1.88-2.00(1 H, m), 1.59-1.85(6 H, m), 1.47(9 H, s). 1H NMRにより、所望のジアステレオマー中間体S-3が多い9：1の割合が示された。
【０１６２】
中間体S-4：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-5,5-ジフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化３２】
2015533811.tif 000036
(S-4)
中間体S-4A：ベンジル 4,4-ジフルオロペンタノエート
【化３３】
2015533811.tif 000037
(S-4A)
DAST(19.22 mL, 145 mmol)を、DCM(120 mL)中のベンジル 4-オキソペンタノエート(20 g, 97 mmol)の冷却した溶液(0℃)に滴加した。該混合液を、室温まで昇温させて、次いで40℃で72時間加熱した。該混合液を、ゆっくりと氷および飽和炭酸水素ナトリウム混合液に加えた。該混合液を、溶液からガスが発生しなくなるまで、30分間攪拌した。該有機層を分離して、該水溶液を、DCM(2x240mL)で抽出した。有機抽出物を合わせて、乾燥させて(MgSO4)、溶媒を減圧下で慎重に除去した。粗製物質を、ヘキサン中の100%ヘキサン〜40%EtOAcで溶出するISCO(120g カラム)により精製して、生成物である中間体S-4A(7.87 g, 34.5 mmol, 35.6%収率)を黄色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 7.29-7.51(5 H, m), 5.17(2 H, s), 2.53-2.67(2 H, m), 2.14-2.36(2 H, m), 1.63(3 H, t, J=18.38 Hz).
【０１６３】
中間体S-4B：4-ジフルオロペンタン酸
【化３４】
2015533811.tif 000038
(S-4B)
THF(45 mL)およびMeOH(15 mL)中の中間体S-4A(5000 mg, 21.91 mmol)の溶液に、LiOH(32.9 mL, 32.9 mmol)を加えて、次いで混合液を室温で1時間攪拌した。該反応混合液を濃縮して、有機相を除去して、水(10 mL)で希釈して、DCM(20ml)で抽出した。該水層を1N HClを用いてpH2まで酸性化し、次いでDCM(3x20 mL)で抽出した。該有機相を合わせて、Na2SO4上で乾燥させて、次いで減圧下で濃縮して、中間体S-4B(2062 mg, 14.93 mmol, 68.2%収率)を黄色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 11.20-11.61(1 H, m), 2.58(2 H, t, J=7.81 Hz), 2.10-2.32(2 H, m, J=16.18, 16.18, 8.03, 7.81 Hz), 1.63(3 H, t, J=18.38 Hz).
【０１６４】
中間体S-4C：4-ジフルオロペンタン酸
【化３５】
2015533811.tif 000039
(S-4C)
N2下で、n-ヘキサン(6 mL)およびTHF(6 mL)中の中間体S-4B(700 mg, 5.07 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)(少なくとも15分間事前冷却した)に、tert-ブチル 2,2,2-トリクロロアセトイミデート(1.814 mL, 10.14 mmol)を、5分間かけて数回に分けて加え、15分間攪拌した。ボロントリフルオリドジエチルエーテラート(0.065 mL, 0.512 mmol)を加えて、該反応混合液を、終夜、浴温が上がるにつれて室温まで昇温させた。透明な反応混合液に、NaHCO3(3g)を加えて、懸濁液を、60分間攪拌した。懸濁液を、MgSO4を通して濾過して、ヘキサン(300 mL)で洗浄した。該濾液を、30分間静置して、得られる固体を同じMgSO4フィルターを通して濾過し、ヘキサン(100 mL)で洗浄した。該濾液を濃縮して、粗製物質を、ヘキサン中の100% ヘキサン〜50% EtOAcにより溶出する、ISCO(40g カラム)により精製して、生成物である中間体S-4C(519 mg, 2.67 mmol, 52.7%収率)を、明黄色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 2.34(2 H, d, J=8.14 Hz), 2.01-2.16(2 H, m), 1.53(3 H, t, J=18.38 Hz), 1.38(9 H, s).
【０１６５】
中間体S-4D：(3R)-tert-ブチル 2-(2,2-ジフルオロプロピル)-6,6,6-トリフルオロ-3-((S)-4-イソプロピル-2-オキソオキサゾリジン-3-カルボニル)ヘキサノエート
【化３６】
2015533811.tif 000040
(S-4D)
中間体S-4D(279 mg, 0.607 mmol, 45.3%収率)を、中間体S-1Hについて記載した方法により、中間体S-4C(455 mg, 2.343 mmol)および中間体S-1G(358 mg, 1.339 mmol)から製造して、1.2：1のジアステレオマー混合物を得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 4.43-4.53(2 H, m), 4.22-4.36(4 H, m), 4.03-4.11(1 H, m), 3.02-3.10(1 H, m), 2.93-3.02(1 H, m), 2.48-2.65(1 H, m), 2.35-2.49(2 H, m), 2.23-2.35(1 H, m), 1.91-2.23(3 H, m), 1.74-1.89(2 H, m), 1.53-1.70(3 H, m), 1.42-1.51(9 H, m).
【０１６６】
中間体S-4：(2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-5,5-ジフルオロ-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化３７】
2015533811.tif 000041
(S-4)
THF(9 mL)および水(3 mL)中の中間体S-4D(279 mg, 0.607 mmol)の冷たい攪拌溶液(0℃)に、H2O2(0.375 mL, 6.12 mmol)を加え、続いてLiOH(44.1 mg, 1.840 mmol)を加えた。該反応混合液を、徐々に室温まで昇温させて、3時間攪拌した。飽和Na2SO3水溶液(5 mL)および飽和NaHCO3(10 mL)の溶液を加えた。該混合液を、5分間攪拌して、次いで該反応混合液を、部分濃縮した。該混合液を、DCM(15mL)で抽出して、該水相を、pH〜2まで酸性化して、NaClで飽和させて、DCM(2x30mL)で抽出した。抽出物を合わせて、MgSO4上で乾燥させて、濾過して濃縮し、中間体S-4を1.2：1のジアステレオマー混合物(169 mg, 0.485 mmol, 80%収率)の明黄色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 2.89-3.04(1 H, m), 2.68-2.86(1 H, m), 2.38-2.60(2 H, m), 2.19-2.38(1 H, m), 2.07-2.20(1 H, m), 1.87-2.03(2 H, m), 1.73-1.88(1 H, m), 1.63(3 H, t, J=18.49 Hz), 1.37-1.53(9 H, m).
【０１６７】
中間体S-5：(2R)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-2-(2,2-ジフルオロプロピル)-6,6,6-トリフルオロヘキサン酸
【化３８】
2015533811.tif 000042
(S-5)
中間体S-5A：(S)-4-ベンジル-3-(4,4-ジフルオロペンタノイル)オキサゾリジン-2-オン
【化３９】
2015533811.tif 000043
(S-5A)
100 mL 丸底フラスコにおいて、DCM(9 mL)中の4,4-ジフルオロペンタン酸(1.7 g, 12.31 mmol)およびDMF(0.019 mL, 0.246 mmol)を加えて、無色の溶液を得た。塩化オキサリル(1.077 mL, 12.31 mmol)をゆっくりと加えて、得られる混合液を、室温にて 3時間攪拌した。得られる混合液を、濃縮乾固させた。別の100 mL丸底フラスコに、THF(23 mL)中の(S)-4-ベンジルオキサゾリジン-2-オン(2.181 g, 12.31 mmol)を入れて、次いで−78℃に冷却した。次に、n-BuLi(4.92 mL, 12.31 mmol)を5分間かけてゆっくりと加えた。THF(10 mL)中の上記酸塩化物の溶液を、−78℃でこの反応にゆっくりと加えた。該反応混合液を、−78℃で約1時間攪拌して、次いで室温まで昇温させて、窒素下で終夜攪拌した。該反応混合液を、飽和NH4Cl水溶液(約60 mL)を用いてクエンチした。得られる混合液を、EtOAc(200 mL)および水(約60 mL)で希釈した。層を分離して、水層をEtOAc(250 mL)で抽出した。EtOAc抽出物を合わせて、乾燥させて(MgSO4)、濾過して、真空で濃縮して、暗黄色の油状物を得た。粗製物質を、シリカゲルクロマトグラフィー(80 g ISCO カラム.  A：ヘキサン, B：DCM, 20%〜100% 溶出)により精製して、中間体S-5A(1.65 g, 5.55 mmol, 45.1%収率)を得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 7.23-7.39(3 H, m), 7.17-7.24(2 H, m), 4.67(1 H, ddd, J=9.85, 3.69, 3.41 Hz), 4.13-4.26(2 H, m), 3.29(1 H, dd, J=13.42, 3.30 Hz), 3.16(2 H, ddd, J=13.98, 8.47, 6.82 Hz), 2.77(1 H, dd, J=13.31, 9.57 Hz), 2.19-2.41(2 H, m), 1.53-1.75(3 H, m).
【０１６８】
中間体S-5B：(S)-tert-ブチル 3-((S)-4-ベンジル-2-オキソオキサゾリジン3-カルボニル)-5,5-ジフルオロヘキサノエート
【化４０】
2015533811.tif 000044
(S-5B)
200 mL 丸底フラスコにおいて、THF(20 mL)中の中間体S-5A(1.67 g, 5.62 mmol)を加えて、無色の溶液を得た。該溶液を、−78℃に冷却して、次いでTHF中の1M NaHMDS(6.74 mL, 6.74 mmol)を、−78℃で8分かけて該反応混合液にゆっくりと加えた。混合液を、78℃で20分間攪拌して、次いで5分間かけてtert-ブチル 2-ブロモアセテート(1.648 mL, 11.23 mmol)をゆっくりと加えた。該混合液を、-78℃で攪拌して、浴をゆっくりと室温まで昇温させて、次いで終夜攪拌を継続させた。該反応を、飽和NH4Cl水溶液でクエンチして、EtOAcで抽出した。該有機層を合わせて、MgSO4上で乾燥させて、濾過して、濃縮した。粗製生成物を、5% EtOAc/ヘキサンから50% EtOAc/ヘキサンへのグラジエントにより溶出するシリカゲルクロマトグラフィー(330 g カラム, ISCO)により精製した。分画物を合わせて、真空で濃縮して、中間体S-5B(1.73 g, 4.20 mmol, 74.9%収率)を得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 7.30-7.39(2 H, m), 7.26(3 H, d, J=1.98 Hz), 4.60-4.73(1 H, m), 4.42-4.55(1 H, m), 4.16(2 H, s), 3.26-3.39(1 H, m), 2.68-2.86(2 H, m), 2.51-2.62(1 H, m), 2.32-2.51(1 H, m), 2.04(1 H, s), 1.66(3 H, t, J=18.60 Hz), 1.44(9 H, s).
【０１６９】
中間体S-5C：(S)-2-(2-tert-ブトキシ-2-オキソエチル)-4,4-ジフルオロペンタン酸
(S-5C)
【化４１】
2015533811.tif 000045
THF(15 mL)中の中間体S-5C(1.5 g, 3.65 mmol)の溶液を、0℃に冷却した。水(5 mL)中のLiOH(0.262 g, 10.94 mmol)およびH2O2(2.011 mL, 32.8 mmol)の別の溶液を調製した。LiOH/H2O2溶液を、THF混合液に加えて、氷/水浴中で30分間攪拌した。該反応混合液を、氷浴から外して、室温へと昇温させた。該反応混合液を、さらに2時間攪拌して、次いで氷/水浴中で冷却した。混合液に、飽和NaHCO3水溶液(30 mL)および飽和Na2SO3水溶液(30 mL)を加えて、該反応混合液を、氷浴中で1時間攪拌した。THFを、減圧下除去して、該水層をDCMで抽出した。該水層を、濃HClを用いてpH2まで酸性化し、次いでEtOAcで抽出した。該有機層を合わせて、食塩水で洗浄して、次いでMgSO4上で乾燥させた。懸濁液を、次いで濾過して、粘性の無色の油状物に濃縮して、真空下で乾燥させて、生成物の中間体S-5C(837 mg, 3.32 mmol, 91%収率)を得た。1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 3.01-3.14(1 H, m), 2.55-2.74(2 H, m), 2.33-2.51(1 H, m), 2.05(1 H, s), 1.64(3 H, t, J=18.49 Hz), 1.44(9 H, s).
【０１７０】
中間体S-5D：3,3,3-トリフルオロプロピル トリフルオロメタンスルホネート
【化４２】
2015533811.tif 000046
(S-5D)
DCM(120 mL)中の2,6-ルチジン(18.38 mL, 158 mmol)の冷たい攪拌溶液(−25℃)に、Tf2O(24.88 mL, 147 mmol)を3分間かけて加え、混合液を5分間攪拌した。該反応混合液に、3分の間隔をおいて3,3,3-トリフルオロプロパン-1-オール(12 g, 105 mmol)を加えた。2時間後に、該反応混合液を、室温へ昇温させて、1時間攪拌した。該反応混合液を、その体積を半分に濃縮して、次いでシリカゲルカラムに直接重層して精製し(330g ISCO)、該生成物をDCMにより溶出して、中間体S-5D(13.74 g, 53%)を無色の油状物として得た。1H NMR(400 MHz, CDCl3)d ppm 4.71(2 H, t, J=6.15 Hz), 2.49-2.86(2 H, m).
【０１７１】
中間体S-5：((2R,3S)-3-(tert-ブトキシカルボニル)-2-(2,2-ジフルオロプロピル)-6,6,6-トリフルオロヘキサン酸
【化４３】
2015533811.tif 000047
(S-5)
THF(10 mL)中の中間体S-5C(500 mg, 1.982 mmol)を、50 mL 丸底フラスコに入れて、無色の溶液を得た後、これを−78℃に冷却した。LDA(2.423 mL, 4.36 mmol)を、該反応液に、5分間かけてゆっくりと加えた。次いでこの反応混合液を、−78℃で3時間攪拌した。中間体S-5D(634 mg, 2.58 mmol)を、3分間かけて該反応物に滴加して、攪拌を−78℃で30分間続けた。該反応混合液を、次いで−15℃(氷/メタノール浴)まで昇温させて、−15℃で1時間維持した。該反応混合液を、次いで水(20 mL)を用いてクエンチした。次に、大部分のTHFを、減圧下で除去して、次いで1N NaOH(1 mL)を加えて、水相を、DCMで抽出した。DCM層を、1N NaOH(2 x 20 mL)を用いて抽出した。プールした水相を、0℃に冷却して、6M HClを用いて酸性化して、次いで酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせて、食塩水で洗浄して、MgSO4上で乾燥させて、次いで濾過して、濃縮した。粗製生成物を、カラムクロマトグラフィー(ISCO)(80gカラム)により精製して、23分にて10% EtOAc/ヘキサン〜100% EtOAcに溶出により、中間体S-5を1.2：1のジアステレオマー混合物(213 mg, 0.612 mmol, 30.9%収率)として得た。
【０１７２】
実施例1
(2R,3S)-N-((3S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(2-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-3-(4,4,4-トリフルオロブチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド(1)
【化４４】
2015533811.tif 000048
中間体1A：ベンジル 2−オキソ−5-フェニル-1-(ピリジン−2−イル)-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3-イルカルバメート
【化４５】
2015533811.tif 000049
(1A)
ジオキサン(25 mL)中のベンジル 2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3-イルカルバメート(1.20 g, 3.11 mmol, J. Med. Chem., 49：2311-2319(2006)に従って製造, 化合物 #4a)、2-ヨードピリジン(1.00 g, 4.88 mmol)、ヨウ化第一銅(0.15 g, 0.788 mmol)およびCs2CO3(3.05 g, 9.36 mmol)の攪拌混合液に、窒素下で(+/-)-トランス-1,2-ジアミノシクロヘキサン(0.19 mL, 1.58 mmol)を加えた。該反応混合液を、次いで120℃に加熱して、10分間穏やかに還流した。次いで、それを窒素下で室温まで冷却した。この混合液を、EtOAc(100 mL)、リン酸塩緩衝液(40 mL)(pH 4)および飽和NaHCO3溶液(40 mL)で希釈した。不溶性物質を、CELITE(登録商標)の2インチのパッドを通して濾去して、EtOAc(2 x 30 mL)で濯いだ。水相を分離して、EtOAc(160 mL)で抽出した。EtOAc抽出物を合わせて、飽和NaHCO3溶液(1 x 30 mL)および食塩水(1 x 20 mL)で洗浄して、次いで乾燥させて(MgSO4)、濾過して、真空濃縮した。残留物を、シリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン/EtOAc)により精製して、中間体1A(0.88 g, 61%)を得た：1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ 8.61(1 H, d, J=8.14 Hz), 8.47(1 H, dd, J=4.73, 1.21 Hz), 7.94-8.03(1 H, m), 7.64(2 H, d, J=7.92 Hz), 7.47-7.60(4 H, m), 7.27-7.44(9 H, m), 6.97(1 H, d, J=8.14 Hz), 5.39(1 H, d, J=8.36 Hz), 5.10(2 H, s)；HPLC：RT = 2.930 分(CHROMOLITH(登録商標)ODS 4.6 x 50 mm(4 min grad), 4分間かけて10〜90%MeOH水溶液(0.% TFAを含む)で溶出, 4 mL/分, 220 nmでモニタリング)；MS(ES)：m/z= 463.3 [M+H]+.
【０１７３】
中間体1B：(S)-3-アミノ-5-フェニル-1-(ピリジン−2−イル)-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-2(3H)-オン
【化４６】
2015533811.tif 000050
(1B)
中間体1A(5.24 g, 11.33 mmol)および33% HBr/HOAc(50 mL, 11.33 mmol)を併せて、室温にて2時間攪拌した。該反応混合液を、エーテル(300 mL)で希釈した。得られる沈殿物濾過により収集して、エーテル(2 x 50 mL)で濯ぎ、次いで真空下で乾燥させた。該固体を、水(100 mL)に溶解して、固体のNaHCO3を加えて塩基性とした。該混合液を、EtOAc(2 x 200 mL)で抽出して、有機抽出物を合わせて、水(1 x 40 mL)および食塩水(1 x 50 mL)で洗浄して、次いで乾燥させて(MgSO4)、濾過して、真空で濃縮して、粗製ラセミ体のアミンを得た。この固体を、分取SFCクロマトグラフィー(Berger SFC MGII, AD-H 250 x 30 mm ID, 5μm, 78/22 CO2/MeOH(0.1% DEAを含む), 85 mL/分)により精製した。該生成物を含有する画分を濃縮した後に、終夜真空乾燥させて、中間体1B(1.576 g, 42.4%)を無色の固形物として得た：1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ 8.47(1 H, dd, J=4.73, 1.65 Hz), 7.98(1 H, td, J=7.70, 1.98 Hz), 7.62(3 H, dd, J=14.75, 7.48 Hz), 7.45-7.57(5 H, m), 7.26-7.43(3 H, m), 6.92(1 H, d, J=8.14 Hz), 4.57(1 H, br. s.), 2.67(1 H, br. s.)；キラルHPLC：RT = 5.160 min(Berger SFC, AD-H 250 x 4.6 mm ID, 5μm, 75/25 CO2/MeOH with 0.1% DEA, 2.0 mL/分)；HPLC：RT = 1.290 min(CHROMOLITH(登録商標)ODS 4.6 x 50 mm(4 min grad), 4分で10〜90%MeOH水溶液(0.% TFAを含む)により溶出, 4 mL/分, 220 nmでモニタリング)；MS(ES)：m/z= 329.0 [M+H]+.
【０１７４】
中間体1C：(2S,3R)-tert-ブチル 6,6,6-トリフルオロ-3-(((S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(ピリジン−2−イル)-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)カルバモイル)-2-(4,4,4-トリフルオロブチル)ヘキサノエート
【化４７】
2015533811.tif 000051
(1C)
DMF(1 mL)中の中間体1B(60 mg, 0.183 mmol)、中間体S-2(90 mg, 0.238 mmol)、Et3N(0.033 mL, 0.238 mmol)の溶液を、o-ベンゾトリアゾール−1−イル−N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム テトラフルオロボーレート(64.5 mg, 0.201 mmol)で処理した。混合液を、室温にて3時間攪拌して、次いで水および少量の飽和NaHCO3水溶液を加えた。得られる混合液を、EtOAc(2x)で抽出して、該有機層を合わせて、濃縮乾固させた。粗製生成物を、100% DCM〜40% EtOAc/DCMのグラジエントにより溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィー(40 g ISCO カラム)により精製して、中間体1C(63 mg, 50%)を得た。HPLC：RT = 3.531 min(CHROMOLITH(登録商標)ODS 4.6 x 50 mm(3 min grad), 4分かけて10〜90%MeOH水溶液(0.% TFAを含む)で溶出, 4 mL/分, 220 nmでモニタリング)；MS(ES)：m/z= 691 [M+H]+.
【０１７５】
中間体1D：(2S,3R)-6,6,6-トリフルオロ-3-(((S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(ピリジン−2−イル)-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)カルバモイル)-2-(4,4,4-トリフルオロブチル)ヘキサン酸
【化４８】
2015533811.tif 000052
(1D)
DCM(1 mL)中の中間体1C(62 mg, 0.090 mmol)の溶液を、TFA(1 mL)で処理した。該反応混合液を、室温にて1.5時間攪拌し、次いで濃縮乾固させて、中間体1D(67 mg, 100%)を得た。HPLC：RT = 3.011 min(CHROMOLITH(登録商標)ODS 4.6 x 50 mm(3 min grad)4分間かけて10〜90%MeOH水溶液(0.% TFA含有)による溶出, 4 mL/分, 220 nmでモニタリング)；MS(ES)：m/z= 634 [M+H]+.
【０１７６】
実施例1
DMF(1 mL)中の中間体1D(67 mg, 0.090 mmol)、HOBT(20.62 mg, 0.135 mmol)、EDC(25.8 mg, 0.135 mmol)および塩化アンモニウム(28.8 mg, 0.539 mmol)の溶液を、(0.141 mL, 0.808 mmol)で処理して、混合液を室温にて終夜攪拌した。該反応混合液に、水を加えると、オフホワイトの沈殿物が形成した。該固体を、濾取して、水で濯ぎ、真空下で乾燥させた。粗製物質を、分取HPLC(カラム：CHIRALPAK(登録商標)AD 4.6 x 250 mm, 13%(1：1,MeOH/EtOH)/ヘプタン, 流速 = 1 mL/分)により精製して、実施例1(39 mg, 68%)を得た。HPLC：RT= 10.001 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 634[M+H+]；1H NMR(500MHz, DMSO-d6)δ 9.55(1 H, d, J=6.94 Hz), 8.44-8.52(1 H, m), 8.00(1 H, td, J=7.77, 1.94 Hz), 7.65-7.72(2 H, m), 7.48-7.64(6 H, m), 7.32-7.45(3 H, m), 6.95-7.10(2 H, m), 5.55(1 H, d, J=7.21 Hz), 2.78(1 H, td, J=9.92, 4.86 Hz), 2.44(1 H, td, J=10.61, 2.91 Hz), 2.07-2.34(3 H, m), 1.29-1.71(7 H, m).
【０１７７】
実施例2
(2R,3S)-N-((3S)-1-(5-クロロ-2-ピリジニル)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化４９】
2015533811.tif 000053
(2)
中間体2A：3-アミノ-1-(5-クロロピリジン−2−イル)-5-フェニル-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-2(3H)-オン
【化５０】
2015533811.tif 000054
(2A)
中間体2Aを、5-クロロ-2-ヨードピリジンを用いて中間体1Aに記載したとおりに製造した。ラセミ混合物を、分取SFCクロマトグラフィー(Berger SFC MGII, CHIRALCEL(登録商標)OJ-H 250 x 30 mm ID, 5μm, 80/20 CO2/MeOH, 85 mL/分)により精製して、中間体3Aを得た。RT= 3.44 min(H2O/CH3OH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)ODS S5 4.6 x 50 mm, グラジエント= 3 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 497 [M+H+].
【０１７８】
中間体2B：3-アミノ-1-(5-クロロピリジン−2−イル)-5-フェニル-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-2(3H)-オン
【化５１】
2015533811.tif 000055
(2B)
中間体2Bを、中間体1Bについて記述した方法に従って、酢酸(15 mL)中の中間体2A(0.78 g, 1.56 mmol)および33% HBrから製造して、中間体2B(0.56 g, 99%)を得た。RT= 2.43 min(H2O/CH3OH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)ODS S5 4.6 x 50 mm, グラジエント= 3 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 363 [M+H+].
【０１７９】
実施例2
実施例2を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体2Bおよび中間体S-1から製造した。HPLC：RT=10.96 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 654.4 [M+H+]；1H NMR(500MHz, DMSO-d6)δ 9.61(d, J=7.5 Hz, 1H), 8.54(d, J=2.5 Hz, 1H), 8.14(dd, J=8.6, 2.8 Hz, 1H), 7.70(d, J=8.6 Hz, 1H), 7.66-7.63(m, 3H), 7.62-7.56(m, 2H), 7.53-7.47(m, 2H), 7.45-7.35(m, 2H), 7.13(br. s., 1H), 7.04(d, J=8.0 Hz, 1H), 5.60(d, J=7.2 Hz, 1H), 2.85(td, J=10.3, 4.0 Hz, 1H), 2.54(br. s., 1H), 2.46-2.38(m, 1H), 2.29-2.21(m, 1H), 2.17(dd, J=19.7, 8.6 Hz, 3H), 1.80-1.70(m, 1H), 1.68-1.56(m, 2H).
【０１８０】
実施例3
(2R,3S)-N-((7S)-6−オキソ−9-フェニル-5-(2-ピリジニル)-6,7-ジヒドロ-5H-[1,3]ジオキソlo[4,5-h][1,4]ベンゾジアゼピン-7−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化５２】
2015533811.tif 000056
(3)
中間体3A：6,7-ジフェニル-5H-[1,3]ジオキソロ[4,5-f]インドール
【化５３】
2015533811.tif 000057
(3A)
Dean-Stark装置を備えたフラスコに、3,4-(メチレンジオキシ)アニリン(5.0g, 36.4 mmol)、p-トルエンスルホン酸(245 mg, 1.2 mmol)、ベンゾイン(5.20 g, 24.4 mmol)、およびキシレン(30 mL)を入れた。混合液を、10時間加熱還流して、次いで室温まで冷却した。該反応混合液を、クロロホルムで希釈して、次いで10% 硫酸で2回、水で1回、食塩水で1回洗浄した。該有機層を、最小体積まで濃縮して、石油エーテルを加えた。該混合液を、十分攪拌して、次いで沈殿した固体を濾去して、乾燥させて、中間体3A(7.0 g, 92%)を得た。HPLC：RT = 2.261 min(H2O/MeCN(NH4OAcを含む), PUROSPHER(登録商標)Star RP-18 3 μM, 4 x55mm, グラジエント= 3 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES, 負のイオン化)：m/z= 312[M-H]-.
【０１８１】
中間体3B：N-(6-ベンゾイルベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5−イル)ベンズアミド
【化５４】
2015533811.tif 000058
(3B)
AcOH(140 mL)中の中間体3A(7.0 g, 22 mmol)の溶液に、水(6.7 mL)中のモリブデン酸アンモニウム(67 mg, 0.054 mmol)の溶液を加えた。この混合液を、65℃に加熱して、次いでおおよそ15分かけてH2O2(H2O中で30%, 8.93 mL, 78.8 mmol)を滴加した。2時間後に、反応混合液を、室温に冷却して、水で希釈した。該固体を濾去して、水で洗浄して、乾燥させて、中間体3B(6.0g, 79%)を得た：1H NMR(400MHz, CDCl3)δ ppm 12.56(s, 1H), 8.59(s, 1H), 8.10-8.08(m, 2H), 7.67-7.60(m, 2H), 7.59-7.50(m, 6H), 7.06(s, 1H), 6.07(s, 2H).
【０１８２】
中間体3C：6-アミノベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5−イル)(フェニル)メタノン
【化５５】
2015533811.tif 000059
(3C)
中間体3B(73 g, 0.211 mol)を、EtOH(292 mL)に溶解した。NaOH(水中で50%, 182.5 mL, 2.28 mol)を加えて、次いで該溶液を、2時間加熱還流した。該反応混合液を、室温に冷却して、次いで水で希釈した。該固体を濾去して、水で洗浄して、乾燥させて、中間体3C(42g, 95%)を得た。1H NMR(400MHz, CDCl3)δ ppm 7.57-7.55(m, 2H), 7.49-7.42(m, 3H), 6.85(s, 1H), 6.39(br s, 2H), 6.23(s, 1H), 5.89(s, 2H).
【０１８３】
中間体3D：ベンジル(6−オキソ−9-フェニル-6,7-ジヒドロ-5H-[1,3]ジオキソロ[4',5'：4,5]ベンゾ[1,2-e][1,4]ジアゼピン-7−イル)カルバメート
【化５６】
2015533811.tif 000060
(3D)
DCM(70 mL)中の中間体3C(7.0 g, 30 mmol)および2-(1H-ベンゾ[d][1,2,3]トリアゾール−1−イル)-2-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)酢酸(J. Org. Chem., 55：2206-2214(1990))(12.06 g, 37 mmol)の溶液に、0℃で、DCM(70 mL)中のジシクロヘキシルカルボジイミド(9.16g, 66 mmol)を加えた。該反応混合液を、室温にて終夜攪拌して、次いで飽和NaHCO3水溶液を加えた。該層を分離して、水層をDCMで2回洗浄した。該有機層を合わせて、水および食塩水で順次洗浄して、次いでNa2SO4上で乾燥させて、濾過して、濃縮乾固させた。この物質を、MeOH(140 mL)に溶解して、0℃に冷却した。水酸化アンモニウム(水中で28〜30%, 140 mL)を滴加した。該反応混合液を、徐々に室温まで昇温させた。3時間の後に、該反応混合液を、0℃に冷却して、次いで酢酸(140 mL)およびNH4OAc(14.25g, 184 mmol)を加えた。該反応混合液を、終夜攪拌して、次いで10% NaOH水溶液を加えた。該固体を濾去して、水で洗浄して、乾燥させて、中間体3D(3.5g, 27%)を得た。HPLC：RT = 1.856 min(H2O/MeCN(NH4OAcを含む), Ascentis Express C-18 2.7 μM, 2.1x50mm, グラジエント= 4 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z= 430[M+H]+.
【０１８４】
中間体3E：(S)-7-アミノ-9-フェニル-5-(ピリジン−2−イル)-5H-[1,3]ジオキソロ[4',5'：4,5]ベンゾ[1,2-e][1,4]ジアゼピン-6(7H)オン
【化５７】
2015533811.tif 000061
(3E)
中間体3Eを、実施例1について記載した方法に従って、中間体3Dおよび2-ヨードピリジンから製造した。ラセミ体を、分取SFCクロマトグラフィー(Berger SFC MGII, OD-H 250 x 30 mm ID, 5μm, 73/17 CO2/MeOH, 85 mL/分)により精製して、中間体4Eを得た。RT= 1.668 min(H2O/CH3OH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)ODS S5 4.6 x 50 mm, グラジエント= 3 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 373.2 [M+H+].
【０１８５】
実施例3
実施例3を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体3Eおよび中間体S-1から製造した。HPLC：RT= 9.70 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 572.2 [M+H+]；1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 9.57(d, J=7.3 Hz, 1H), 8.52-8.43(m, 1H), 7.98(td, J=7.8, 2.0 Hz, 1H), 7.70-7.63(m, 3H), 7.61-7.46(m, 4H), 7.40(ddd, J=7.4, 4.8, 1.0 Hz, 1H), 7.15(s, 1H), 6.83(s, 1H), 6.56(s, 1H), 6.14(dd, J=5.5, 0.9 Hz, 2H), 5.63(d, J=7.3 Hz, 1H), 2.84(td, J=10.3, 3.9 Hz, 1H), 2.46-2.37(m, 1H), 2.35-2.24(m, 1H), 2.17(dd, J=19.3, 8.9 Hz, 3H), 1.81-1.69(m, 2H), 1.66-1.54(m, 2H).
【０１８６】
実施例4
(2R,3S)-N-((3S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(3-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-3-(4,4,4-トリフルオロブチル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化５８】
2015533811.tif 000062
(4)
中間体4A：(S)-3-アミノ-5-フェニル-1-(ピリジン−3−イル)-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-2(3H)-オン
【化５９】
2015533811.tif 000063
(4A)
中間体4Aを、3-ヨードピリジンを用いる実施例1について概説した方法に従って製造した。ラセミ混合物を、分取キラルクロマトグラフィー(OJ 250 x 30 mm ID, 5 μm, 定組成, 30% 1：1 EtOH：MeOH/ヘプタン)により精製して、中間体4Aを得た。RT= 1.338 min(H2O/CH3OH(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)ODS S5 4.6 x 50 mm, グラジエント= 3 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 329.2 [M+H+].
【０１８７】
実施例4
実施例4を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体4Aおよび中間体S-2から製造した。HPLC：RT=8.14 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 634.3. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ ppm 9.55(1 H, d, J=7.04 Hz), 8.56(1 H, dd, J=4.73, 1.43 Hz), 8.47(1 H, d, J=2.20 Hz), 7.69-7.77(3 H, m), 7.56-7.65(3 H, m), 7.47-7.56(3 H, m), 7.35-7.43(2 H, m), 7.07(2 H, d, J=8.14 Hz), 5.55(1 H, d, J=7.26 Hz), 2.74-2.84(1 H, m), 2.52-2.58(1 H, m), 2.40-2.48(1 H, m), 2.08-2.35(3 H, m), 1.54-1.69(3 H, m), 1.27-1.52(3 H, m).
【０１８８】
実施例5
(2R,3S)-N-((3S)-2−オキソ−5-フェニル-1-(3-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化６０】
2015533811.tif 000064
(5)
実施例5を、実施例1について示した一般的な方法に従って、中間体4Aおよび中間体S-1から製造した。HPLC：RT= 7.97 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 620.3 [M+H+]；1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ ppm 9.60(1 H, d, J=7.48 Hz), 8.56(1 H, dd, J=4.73, 1.43 Hz), 8.49(1 H, d, J=2.20 Hz), 7.73-7.78(1 H, m), 7.68-7.72(1 H, m), 7.66(1 H, br. s.), 7.53-7.64(4 H, m), 7.51(2 H, d, J=8.14 Hz), 7.35-7.44(2 H, m), 7.15(1 H, s), 7.05(1 H, d, J=8.14 Hz), 5.59(1 H, d, J=7.70 Hz), 2.86(1 H, td, J=10.29, 4.07 Hz), 2.50-2.55(1 H, m), 2.32-2.46(1 H, m), 2.09-2.29(3 H, m), 1.71-1.82(1 H, m), 1.55-1.68(3 H, m).
【０１８９】
実施例6
(2R,3S)-N-((3S)-1-(シクロプロピルメチル)-5-(4-メトキシフェニル)-2−オキソ−2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化６１】
2015533811.tif 000065
(6)
中間体6A：(2-アミノフェニル)(4-メトキシフェニル)メタノン
【化６２】
2015533811.tif 000066
(6A)
【０１９０】
マグネシウム(1.646 g, 67.7 mmol)およびエチルエーテル(47.0 ml)を入れた250 mL 丸底フラスコに、ジブロモエタン(2滴)を加えて、該混合液を、15分間加熱還流した。ジエチルエーテル(47.0 ml)中のp-ブロモアニソール(6.35 ml, 50.8 mmol)を、滴下漏斗から、還流温度を維持しながらゆっくりと加えた。得られる混合液を、3時間加熱して、次いで室温まで冷却した。ジエチルエーテル(47.0 ml)中の2-アミノベンゾニトリル(2 g, 16.93 mmol)の溶液を、15分間かけて滴加した。添加後に、混合液を16時間還流した。次いで、体積を、半量に低下させて、得られる混合液を、氷(100 g)でゆっくりとクエンチした。次に、6N HCl(10 mL)を加えて、混合液を、室温にて16時間攪拌した。pHを、5N NaOHを用いてpH 8に調整して、飽和NaHCO3(50ml)で希釈した。該相を分離して、水層を酢酸エチル(2x200 mL)で逆抽出した。該有機層を合わせて、乾燥させて(MgSO4)、濾過して、濃縮した。粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィー(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0%〜70% 溶媒 A/B=ヘプタン/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 120g)により精製した。適切な画分の濃縮により、中間体6A(3.13 g, 81%)を得た。1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ 7.62-7.55(m, 2H), 7.34-7.22(m, 2H), 7.09-7.01(m, 2H), 6.87-6.78(m, 3H), 6.53(ddd, J=8.0, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 3.85(s, 3H).
【０１９１】
中間体6B：ベンジル(5-(4-メトキシフェニル)-2−オキソ−2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)カルバメート
【化６３】
2015533811.tif 000067
(6B)
100 mL 丸底フラスコ内において、中間体6A(3.1 g, 13.64 mmol)および2-(1H-ベンゾ[d][1,2,3]トリアゾール−1−イル)-2-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)酢酸(5.34 g, 16.37 mmol)およびDCM(50 mL)を入れて、懸濁液とした。該混合液を、次いで0℃に冷却して、DCM(5 mL)中のDCC(3.94 g, 19.10 mmol)の溶液を加えた。該反応混合液を、室温へ昇温させて、室温にて16時間攪拌した。飽和NaHCO3(50 mL)を加えて、固体を濾過して、廃棄した。該有機相を分離して、MgSO4で乾燥させて、濾過して、減圧下で濃縮した。粗製反応混合液を、メタノール(100 mL)で希釈して、アンモニア(メタノール中で2N, 100 mL, 200 mmol)を加えて、混合液を室温にて、4時間攪拌した。次いで、AcOH(50 mL, 873 mmol)を、加えて、室温で窒素下において、終夜攪拌し続けた。粗反応混合液を、濃縮して、高真空下において乾燥させた。粗製生成物を、酢酸エチル(50 mL)で希釈して、次いでジエチルエーテル(300 mL)を用いて、徐々に再度希釈した。得られる固体を濾過して、風乾させた。粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0%〜50% 溶媒 A/B=ヘプタン/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 120g)。適切な画分の濃縮により、中間体6B(1.32 g, 23%)を得た。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 10.80(s, 1H), 8.35(d, J=8.6 Hz, 1H), 7.69-7.58(m, 1H), 7.49-7.21(m, 10H), 7.00(d, J=8.8 Hz, 2H), 5.08(s, 2H), 5.02(d, J=8.6 Hz, 1H), 3.82(s, 3H).
【０１９２】
中間体6C：3-アミノ-5-(4-メトキシフェニル)-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-2(3H)-オン
【化６４】
2015533811.tif 000068
(6C)
中間体6B(1000 mg, 2.407 mmol)を、酢酸(5 mL)中の33% HBrで処理して、懸濁液を得た。該反応混合液を、次いで、攪拌しながら3時間70℃で加熱した。該反応混合液を、次いでエーテル(100 mL)に注ぎ入れた。得られる固体を濾過して、次いで、DCM(100 mL)/飽和NaHCO3(100 mL)の間に分配した。該水相を、DCM(3x100 mL)で逆抽出した。該有機相を合わせて、MgSO4で乾燥させて、濾過して、濃縮し、中間体6C(0.608 g, 90%)を得た。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 10.61(br. s., 1H), 7.62-7.53(m, 1H), 7.44(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.34-7.23(m, 2H), 7.23-7.17(m, 1H), 6.99(d, J=9.0 Hz, 2H), 4.20(s, 1H), 3.81(s, 3H).
【０１９３】
中間体6D：(2S,3R)-tert-ブチル 6,6,6-トリフルオロ-3-((5-(4-メトキシフェニル)-2−オキソ−2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)カルバモイル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサノエート
【化６５】
2015533811.tif 000069
(6D)
DMF(5 mL)中の中間体6C(309 mg, 1.100 mmol)、中間体S-1(375 mg, 1.024 mmol)、およびTEA(0.595 mL, 4.27 mmol)の溶液を、o-ベンゾトリアゾール−1−イル−N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム テトラフルオロボーレート(329 mg, 1.024 mmol)で処理して、溶液を得た。該混合液を、室温にて窒素下において終夜攪拌した。該反応混合液を、次いで水(50 mL)で希釈した。得られる固体を、濾取し、風乾させて、中間体6D(0.500 g, 93%)を得た。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 10.81(d, J=6.6 Hz, 1H), 9.48(d, J=5.5 Hz, 1H), 7.64(t, J=6.4 Hz, 1H), 7.46(dd, J=8.7, 4.1 Hz, 2H), 7.39-7.21(m, 3H), 7.00(dd, J=8.8, 3.3 Hz, 2H), 5.22(dd, J=9.4, 7.6 Hz, 1H), 3.82(s, 3H), 2.96-2.83(m, 1H), 2.39-2.11(m, 4H), 1.91(s, 1H), 1.86-1.54(m, 4H), 1.44(s, 9H), 1.42-1.37(m, 1H).
【０１９４】
中間体6E：(2S,3R)-6,6,6-トリフルオロ-3-((5-(4-メトキシフェニル)-2−オキソ−2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)カルバモイル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化６６】
2015533811.tif 000070
(6E)
DCM(10 mL)中の中間体6D(350 mg, 0.556 mmol)の溶液を、TFA(2 mL, 26.0 mmol)で処理した。該反応混合液を、室温にて16時間攪拌した。該反応混合液を、次いで濃縮して、高真空下にて乾燥させた。粗製反応混合液を、DMF(6 mL)で希釈して、EDC(150 mg, 0.785 mmol)、HOBT(120 mg, 0.785 mmol)、DIPEA(1.096 mL, 6.28 mmol)、および塩化アンモニウム(336 mg, 6.28 mmol)で処理した。混合液を、室温にて窒素下において16時間攪拌した。さらなるEDC(150 mg, 0.785 mmol)、HOBT(120 mg, 0.785 mmol)およびDIPEA(1.096 mL, 6.28 mmol)を、加えて、さらに16時間攪拌し続けた。該反応混合液を、次いで水(75 mL)で希釈して、得られる固体を濾過して、風乾させた。粗製ジアステレオマーを、分取キラルHPLC(CHIRALPAK(登録商標)AD 5cmx50cm 10μM 定組成 30% i−プロパノール：ヘプタン 100mL/分)により分離して、中間体6E(0.085 g, 56%)を得た。 1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 10.82(s, 1H), 9.43(d, J=7.5 Hz, 1H), 7.64(td, J=7.7, 1.5 Hz, 2H), 7.52-7.41(m, 2H), 7.38-7.22(m, 3H), 7.13(s, 1H), 7.04-6.93(m, 2H), 5.25(d, J=7.5 Hz, 1H), 3.82(s, 3H), 2.80(td, J=10.0, 4.2 Hz, 1H), 2.47(br. s., 1H), 2.32-2.08(m, 4H), 1.84-1.57(m, 4H).
【０１９５】
実施例6
DMF(2 mL)中の中間体6E(48 mg, 0.084 mmol)、(ブロモメチル)シクロプロパン(0.040 mL, 0.419 mmol)、フッ化カリウム(酸化アルミニウムにて40%)(170 mg, 1.170 mmol)の混合液を、室温にて24時間攪拌した。追加の(ブロモメチル)シクロプロパン(0.040 mL, 0.419 mmol)を、加えて、24時間攪拌し続けた。該反応混合液を、水(50 mL)で希釈して、得られる固体を濾過して、風乾させた。粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィー(Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0%〜60% 溶媒 A/B=DCM/EtOAc, REDISEP(登録商標)SiO2 4g)により精製した。適切な画分の濃縮により、実施例6(0.014 g, 26%)を得た。 HPLC：RT = 10.42 min(H2O/CH3CN(TFAを含む), SunFire C18 3.5μm, 4.6x150mm, グラジエント= 15 min, 波長 = 220および254 nm)；MS(ES)：m/z = 627 [M+H+]；1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ 9.46(d, J=7.3 Hz, 1H), 7.79-7.63(m, 3H), 7.56-7.48(m, 2H), 7.42-7.32(m, 2H), 7.13(s, 1H), 7.06-6.98(m, 2H), 5.27(d, J=7.3 Hz, 1H), 4.17(dd, J=14.4, 7.4 Hz, 1H), 3.83(s, 3H), 3.66(dd, J=14.3, 7.0 Hz, 1H), 2.85-2.72(m, 1H), 2.47-2.42(m, 1H), 2.31-2.06(m, 3H), 1.76-1.47(m, 4H), 1.23-1.15(m, 1H), 0.73(t, J=7.5 Hz, 1H), 0.29-0.19(m, 1H), 0.14(tt, J=8.6, 4.5 Hz, 1H), 0.04(dq, J=9.2, 4.7 Hz, 1H), -0.02--0.11(m, 1H).
【０１９６】
実施例7
(2R,3S)-N-((3S)-7-メトキシ-2−オキソ−5-フェニル-1-(2,2,2-トリフルオロエチル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化６７】
2015533811.tif 000071
(7)
中間体7A：(2-アミノ-5-メトキシフェニル)(フェニル)メタノン
【化６８】
2015533811.tif 000072
(7A)
BCl3(4.5 mL, DCM中で1M, 4.47 mmol)の攪拌溶液に、0℃で、トルエン(5 mL)中の4-メトキシアニリン(0.5 g, 4.06 mmol)およびベンゾニトリル(0.837 g, 8.12 mmol)の混合液を、25分間かけて、窒素雰囲気下でゆっくりと加えた。該混合液を、5分間、0℃で攪拌して、次いで2分間かけて、0℃で、AlCl3(0.595 g, 4.47 mmol)を数回に分けて加えた。該反応混合液を、室温まで昇温させて、次いで115℃で8時間加熱した。該反応混合液を、室温に冷却して、30分間かけて、氷冷水(1 mL)および1.5N HCl水溶液(5 mL)を用いて順次クエンチした。該反応混合液を、100℃で2時間さらに還流して、0℃に冷却して、pHが〜8.5となるまで15分間かけて10% NaHCO3水溶液(20 mL)を滴加した。該水層を、EtOAc(3 x 25 mL)で抽出した。該有機層を合わせて、食塩水で洗浄して(2 x 10 mL)、乾燥させて(Na2SO4)、濾過して、真空濃縮した。粗製残留物を、溶離液としてEtOAc/ヘキサン(1：12)を用いるシリカゲル上のISCOクロマトグラフィーにより精製して、中間体7A(0.25g, 27%)を得た。HPLC：RT=1.37 min(MeOH/H2O(TFAを含む), CHROMOLITH(登録商標)speed ROD C18 5 μm, 4.6 x 30 mm, グラジエント= 3 min, 流速 = 5mL/分；移動相 A：10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA；移動相 B：90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA；波長 = 220)；MS(ES)：m/z=228 [M+H]+.
【０１９７】
中間体7B：ベンジル(7-メトキシ-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)カルバメート
【化６９】
2015533811.tif 000073
(7B)
乾燥THF(5mL)中の2-(1H-ベンゾ[d][1,2,3]トリアゾール−1−イル)-2-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)酢酸(0.446 g, 1.965 mmol)の溶液を、0℃に冷却して、次いで塩化オキサリル(0.171 mL, 1.34 mmol)で処理した。混合液を、30分間0℃で攪拌した。DCM(3 mL)中の中間体7A(0.235g, 1.034 mmol)およびNMM(0.237 mL, 2.59 mmol)の混合液を、上記混合液に加えた。得られる混合液を、室温にて2時間攪拌して、次いで濾過した。濾液を、2M メタノール性アンモニア(10 mL)で処理して、室温で12時間攪拌した。混合液を、次いで蒸発乾固させて、該残留物を、AcOH(5 mL)で処理して、室温で2時間攪拌した。該反応混合液を、次いで濃縮して、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色の固形物として中間体7Bを得る：70 mg(16.29%)。HPLC：RT=1.908 min(ACN/H2O with TFA, UPLC R BEH C18, 1.7 μm, 2.1 x 50 mm, グラジエント= 4 min, 流速 = 1.8mL/分；移動相 A：0.1% TFA in 水；移動相 B：アセトニトリル；波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z=416 [M+H]+；1H NMR(CDCl3)δ 8.681(brs, 1H), 7.565-7.583(d, J = 7.2Hz, 1H), 7.30-7.50(m, 7H), 7.097(brs, 2H), 6.80(brs, 1H), 6.22(d, J =8.4 Hz, 1H), 5.34(d, J=7.2 Hz, 1H), 5.17(s, 2H), 3.72(s, 3H).
【０１９８】
中間体7C：3-アミノ-7-メトキシ-5-フェニル-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-2(3H)-オン
【化７０】
2015533811.tif 000074
(7C)
中間体7B(0.5g, 1.2 mmol)を、AcOH中の33% HBr［3.5 mL(7 volumes)］で処理して、室温にて2時間攪拌した。ジエチルエーテル(25 mL)を、該反応混合液に添加して、沈殿した固体を濾取した。該固体を、水(3 mL)に溶解して、該溶液が塩基性となるまで10%重炭酸ナトリウム塩溶液を加えた。生成物を、酢酸エチル(2x25mL)で抽出して、該有機層を、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。該溶媒を、真空下で除去して、中間体7Cを白色の固形物として得た：収率 0.32 g(98%).  HPLC：RT=1.228(H2O/ACN(NH4OAcを含む), PUROSPHER(登録商標)Star RP-18(4x55)mm, 3μm, グラジエント= 3 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 282 [M+H+]；1H NMR(DMSO-d6：δ 10.46(brs, 1H), 7.42-7.53(m, 5H), 7.19-7.25(m, 2H), 6.72(d, J=2.4 Hz, 1H), 4.25(s, 1H), 3.39(s, 3H).
【０１９９】
中間体7D：(2S,3R)-tert-ブチル 6,6,6-トリフルオロ-3-((7-メトキシ-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)カルバモイル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサノエート
【化７１】
2015533811.tif 000075
(7D)
DMF(5 mL)中の中間体7C(330 mg, 1.173 mol)および中間体S-1(366 mg, 1.173 mmol)の溶液を、窒素雰囲気下で、0℃に冷却して、TBTU(490 mg, 1.525 mmol)で処理して、その後3分間かけてトリエチルアミン(0.40 mL, 2.34 mmol)を滴加した。該反応混合液を、さらに16時間室温で攪拌して、次いで0℃に冷却した。水(10 mL)を添加して、得られる固体を、濾取し、水(5 mL)で洗浄して、乾燥させて、中間体7Dを得た：収率 650 mg(89%)；HPLC：RT=2.282(H2O/ACN(NH4OAcを含む), PUROSPHER(登録商標)Star RP-18(4x55)mm, 3μm, グラジエント= 3 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 630 [M+H+]；1H NMR(DMSO-d6：ジアステレオマーの混合物として)δ 10.66(s, 1H), 9.50-9.52(dd, J = 9.6, 2.0 Hz, 1H), 7.5-7.6(m, 3H), 7.5(m, 2H), 7.2-7.3(m, 2H), 6.76-6.70(d, J=2.4, 1H), 5.25-5.29(t, 8.8 Hz, 1H), 3.7(s, 3H), 2.90-2.91(m, 1H), 2.50(m, 1H), 2.10-2.34(m, 4H), 1.48-1.90(m, 4H), 1.43(s, 9H).
【０２００】
中間体7E：(2S,3R)-6,6,6-トリフルオロ-3-((7-メトキシ-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)カルバモイル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)ヘキサン酸
【化７２】
2015533811.tif 000076
(7E)
窒素雰囲気下に0℃で、CH2Cl2(8 mL)中の中間体7D(1.03 mg, 0.836 mmol)の攪拌溶液に、トリフルオロ酢酸(3 mL)を2分間かけて滴加した。該反応混合液を、0℃で1時間攪拌して、次いで室温で5時間攪拌した。該反応混合液を、次いで濃縮して、氷冷水で処理した(50 grams)。15分間攪拌後、オフホワイトの沈殿物を濾過して、水(5 mL)で洗浄して、乾燥させて、中間体7Eを白色の固形物として得た：収率 = 500 mg(84%)；HPLC：RT=2.282(H2O/AcCN(NH4OAcを含む), PUROSPHER(登録商標)Star RP-18(4x55)mm, 3μm, グラジエント= 3 min, 波長 = 220 nm)；MS(ES)：m/z = 572 [M-H+]；1H NMR(DMSO-d6：ジアステレオマーの混合物として)δ 10.67(s, 1H), 9.51-9.54(t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.5-7.6(m, 3H), 7.5(m, 2H), 7.1-7.3(m, 4H), 6.771(s, 1H), 5.29(t, J= 8.0 Hz, 1H), 3.7(s, 3H), 2.80-2.91(m, 1H), 2.70(m, 1H), 2.50(m, 1H), 2.10-2.34(m, 3H), 1.50-1.90(m, 3H).
【０２０１】
中間体7F：(2R,3S)-N1-((S)-7-メトキシ-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)-2,3-ビス(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化７３】
2015533811.tif 000077
(7F)
0℃で窒素雰囲気下に、DMSO(6 mL)中の中間体7E(500 mg, 1.047 mmol)、pyBOP(0.65 mg, 1.25 mmol)、塩化アンモニウム(0.28 mg, 5.23 mmol)の攪拌溶液に、2分間かけてN,N'-ジイソプロピルエチルアミン(0.36 mL, 2.09 mmol)の溶液を滴加した。氷浴を外して、該反応混合液を、室温にて16時間攪拌した。該混合液を、次いで氷冷水(20 grams)に注ぎ入れて、1時間攪拌して、次いで濾過した。粗製残留物を、分取HPLC精製/分離に供し(Column-CHIRALCEL(登録商標)ODH(250x4.6)mm 5 micron, 移動相 A：0.2% ジエチルアミン-ヘキサン(80%), 移動相 B：エタノール(20%), @ 220 および 250 nm 流速-1mL/分, Run-20min)、中間体7Fを白色の固形物として得た：収率 180 mg(10%). 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ ppm 10.67(s, 1H), 9.444-9.463(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.60-7.7(brs, 1H), 7.51-7.54(m, 3H), 7.44-7.47(m, 2H), 7.24-7.28(m, 2H), 7.14-7.19(brs, 1H), 6.77-6.78(d, J = 4 Hz, 1H), 5.3-5.31(d, J = 4 Hz, 1H), 3.71(s, 3H), 2.78-2.84(m, 1H), 2.2.11-2.31(m, 4H), 1.60-1.74(m, 4H), MS(M-1)= 571. HPLC RT= 9.31 min(Xbridge フェニル(4.6x150 mm), 3.5 micron；1 mL/分 流速；12分かけてグラジエント10% B〜100% B(A：水/CH3CN(95：5)中で0.05% TFA, B：水/CH3CN(5：95)中で0.05% TFA @ 220 および 250 nm, 15 min 実施).
【０２０２】
実施例7
DMF(2.5 mL)中の中間体7F(30 mg, 0.052 mol)および炭酸セシウム(34 mg, 0.1 mmol)の攪拌溶液に、0℃で窒素雰囲気下において、1分間にわたり、2,2,2-トリフルオロエチルトリフルオロメタンスルホネート(24.3 mg, 0.10mm)を滴加した。該反応混合液を、さらに16時間室温にて攪拌し、次いで0℃に冷却した。該反応混合液を、次いで水(10 mL)でクエンチした。得られる沈殿物を濾過して、水(5 mL)で洗浄して、乾燥させて、実施例7を得た。粗製物質を、分取HPLC(Column-SYMMETRY(登録商標)Shield RP18(250x4.6)mm 5 micron, 移動相 A：0.05% TFA/水, 移動相 B：ACN @ 220 および 250 nm 流速-1mL/分, 25分間かけて、グラジエント40% B〜100% B)により精製して、実施例7を得た：収率17 mg(50%). 1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ ppm 7.55-7.60(m, 3H), 7.48-7.52(m, 4H), 7.329-7.351(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.149-7.179(dd, J = 4Hz and 12 Hz 1H), 6.805-6.812(d, J = 2.8 Hz, 1H), 5.92(brs, 1H), 5.63(brs,1H)5.605-5.625(d, J = 8 Hz, 1H), 5.14-5.22(m,1H), 4.05-4.13(m, 1H), 3.76(s, 3H), 2.56-2.65(m, 2H), 2.09-2.30(m, 5H), 1.80-2.0(m, 3H), MS(M+H+)= 655. HPLC RT=11.17 min(SunFire C18(4.6x150 mm), 3.5 micron；1 mL/分 流速；グラジエント10% B-100% B over 12 min(A：水/CH3CN(95：5)中0.05% TFA, B：水/CH3CN(5：95)中0.05% TFA @ 220 および 250 nm, 15 min 実施).
【０２０３】
実施例8
(2R,3S)-N-((3S)-1-(シクロプロピルメチル)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-3-(2,2-ジフルオロプロピル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化７４】
2015533811.tif 000078
(8)
中間体8A：(3S)-3-アミノ-5-フェニル-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン
【化７５】
2015533811.tif 000079
(8A)
ラセミ体の3-アミノ-5-フェニル-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン(J. Med. Chem., 49：2311-2319(2006), 化合物 #5)を、文献の方法に従って製造した。エナンチオマーを分離した(Berger SFC MGIII カラム：Lux 25x3 cm, 5cm；移動相：CO2中で30% MeOH+ 0.1% DEA；流速：150 mL/分；温度：40℃；検出波長：250 nM)。S-エナンチオマーである中間体8Aを白色の固形物として得た：1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ ppm 10.67(1 H, br. s.), 7.58(1 H, td, J=7.65, 1.76 Hz), 7.37-7.53(5 H, m), 7.23-7.30(2 H, m), 7.14-7.22(1 H, m), 4.23(1 H, s), 2.60(2 H, br. s.)；HPLC：RT=3.0625 min(30% MeOH + 0.1% DEA(CO2中), OD-Hカラム上, 3 mL/分, 35℃, 96 bar, 230 nm, 10μl inj)；[α]D = -208.3°(5.05 mg/mL, MeOH).
【０２０４】
中間体8B：(2R)-3-(2,2-ジフルオロプロピル)-N1-((S)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)-2-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化７６】
2015533811.tif 000080
(8B)
中間体8Bを、実施例1について示した一般的な方法に従って、1：1のジアステレオマーの混合物として、中間体8Aおよび中間体S-4から製造した。MS(ES)：m/z 525.1(M+H+). HPLC RT = 0.85 min.(BEH C18 2.1x 50mm, 1.7μ, 1分間(0.5分間の保持時間を含む)にて0〜100 B, 流速 = 1 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：100% 水/0.1% TFA；溶媒 B：100% ACN / 0.1% TFA). 1H NMR(400 MHz, MeOD)δ ppm 7.58-7.66(1 H, m), 7.54(3 H, d, J=1.54 Hz), 7.41(4 H, s), 7.19-7.29(1 H, m), 5.39(1 H, s), 2.78-2.92(1 H, m), 2.64-2.78(1 H, m), 2.34-2.59(2 H, m), 2.13-2.31(1 H, m), 1.95-2.14(1 H, m), 1.73-1.92(2 H, m), 1.47-1.69(3 H, m).
【０２０５】
実施例8
DMF(1 mL)中の中間体8B(22 mg, 0.042 mmol)および(ブロモメチル)シクロプロパン(28.3 mg, 0.210 mmol)の攪拌混合液に、フッ化カリウム(酸化アルミニウムにて40%)(85 mg, 0.585 mmol)を加えた。該反応混合液を、室温で16時間攪拌した。固体物質を、濾去して、濾液を真空濃縮した。粗製生成物を、キラルSFC(Berger SFC MGIII, カラム：CHIRALPAK(登録商標)IC 25 x 15mm ID, 0.5 μm；移動相：80/20 CO2/EtOH(0.1% DEAを含む), 流速：50 mL/分；220 nmで検出)により精製して、実施例8(12 mg, 0.020 mmol, 48.5%収率)を白色の固形物として得た。MS(ES)：m/z 579.2(M+H+). HPLC RT = 0.97 min.(BEH C18 2.1x 50mm, 1.7μ, 1 分間で(0.5分間の保持時間を含む)0〜100 B, 流速 = 1 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：100% 水 / 0.1% TFA；溶媒 B：100% ACN / 0.1% TFA). 1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 7.53-7.65(4 H, m), 7.49(2 H, s), 7.41(3 H, d, J=7.70 Hz), 5.92-6.10(1 H, m), 5.51(2 H, d, J=7.70 Hz), 4.21-4.38(1 H, m), 3.49-3.65(1 H, m), 2.79-2.98(1 H, m), 2.45-2.72(2 H, m), 2.07-2.33(3 H, m), 1.89-2.03(1 H, m), 1.76-1.89(1 H, m), 1.67(3 H, t, J=18.60 Hz), 0.82-1.00(2 H, m), 0.34-0.43(1 H, m), 0.17-0.33(1 H, m), 0.11(2 H, br. s.).
【０２０６】
実施例9
(2R,3S)-N-((3S)-1-(シクロプロピルメチル)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-3−イル)-2-(2,2-ジフルオロプロピル)-3-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化７７】
2015533811.tif 000081
(9)
中間体9A：(3S)-2-(2,2-ジフルオロプロピル)-N1-((S)-2−オキソ−5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3−イル)-3-(3,3,3-トリフルオロプロピル)スクシンアミド
【化７８】
2015533811.tif 000082
(9A)
中間体9Aを、実施例1について示した一般的な方法に従って、1：1ジアステレオマーの混合物として中間体8Aおよび中間体S-5から製造した。HPLC RT = 0.84 min.(BEH C18 2.1x 50mm, 1.7μ, 1分間(0.5分間の保持時間を含む)において0〜100 B, 流速 = 1 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：100% 水 / 0.1% TFA；溶媒 B：100% ACN / 0.1% TFA)。1H NMR(400 MHz, MeOD)δ ppm 7.55-7.68(1 H, m), 7.43-7.57(3 H, m), 7.33-7.44(3 H, m), 7.19-7.34(2 H, m), 5.32-5.49(1 H, m), 2.96-3.13(1 H, m), 2.48-2.62(1 H, m), 2.30-2.48(1 H, m), 2.11-2.29(2 H, m), 1.84-2.06(3 H, m), 1.50-1.71(3 H, m).  MS(ES)：m/z = 525.2 [M+H+].
【０２０７】
実施例9
実施例9を、実施例8について記載した同じ方法で、中間体9Aから製造した。ジアステレオマーを、分取SFCにより分離して(Berger SFC MGIII, カラム：CHIRALPAK(登録商標)IC 25 x 15mm ID, 0.5 μm；移動相：80/20 CO2/EtOH(0.1% DEAを含む), 流速：50 mL/分；220 nmで検出)、表題化合物を得た。MS(ES)：m/z 579.2(M+H+). HPLC RT = 0.97 min.(BEH C18 2.1x 50mm, 1.7μ, 1分間で0〜100 B(0.5分間の保持時間を含む), 流速 = 1 mL/分, 254 nmで検出, 溶媒 A：100% 水 / 0.1% TFA；溶媒 B：100% ACN / 0.1% TFA). 1H NMR(400 MHz, クロロホルム-d)δ ppm 7.77-7.86(1 H, m), 7.50-7.66(3 H, m), 7.32-7.51(5 H, m), 6.36-6.50(1 H, m), 5.48(2 H, d, J=7.26 Hz), 4.18-4.39(1 H, m), 3.50-3.66(1 H, m), 2.82-2.99(1 H, m), 2.65-2.83(1 H, m), 2.35-2.59(1 H, m), 2.20-2.36(1 H, m), 2.01-2.24(3 H, m), 1.84-2.02(1 H, m), 1.59-1.71(3 H, m), 0.74-0.98(2 H, m), 0.33-0.44(1 H, m), 0.21-0.33(1 H, m), 0.10(2 H, d, J=4.62 Hz).
【０２０８】
比較化合物10〜13
比較化合物10〜13を、米国特許第7,053,084号(各々、実施例8、12a、38、45aについて)に記載の方法に従って製造できる。
【表２】
2015533811.tif 000083
(生物学的アッセイ)
本発明の化合物の薬理学的特性は、多くの生物学的アッセイによって確認されうる。以下に例示される生物学的アッセイを本発明の化合物で実施した。
【０２０９】
Notch-CBF1 トランス活性化アッセイ
Notch-CBF1(C-プロモーター結合因子I)セルベーストランス活性化アッセイは、放出されたNotch細胞内ドメインフラグメント(NICD)の、CBF1および他の核因子との結合における転写因子として機能する能力に基づいている。ルシフェラーゼアッセイを用いてNotch-CBF1転写活性の拮抗作用を測定した。HeLa子宮頚癌細胞に、切断されたNotch 1、Notch 2、Notch 3、もしくはNotch 4受容体を含むpCDNA3.1/Hygroプラスミド、および4コピーのCBF1結合部位を含むPGL3ルシフェラーゼ受容体ベクターを一時的に同時トランスフェクトする。次いで該細胞を、試験化合物の非存在下または存在下でのNotch-CBF1活性について試験した。DMEM(高グルコース、HEPES含有)、1X グルタミン/ペニシリン/ストレプトマイシンおよび10％ウシ胎仔血清中で維持されているHeLa細胞を、製造元の仕様書に従って、Monster Transfection Kit(Mirus #MIR2906)を用いて、T175フラスコ(4.5 x106 細胞/フラスコ)中において、一時的にトランスフェクトした。表2は、トランスフェクションについての各DNA量を示す。
表2
【表３】
2015533811.tif 000084
【０２１０】
トランスフェクションの6時間後、細胞をトリプシン処理し、384-ウェルの黒色のPoly-D-リジンコート組織培養プレートに、95 μL アッセイ培地(DMEM(高グルコース、HEPES含有)、1X グルタミン/ペニシリン/ストレプトマイシン、0.0125％BSA、1X 非必須アミノ酸)中、5x103細胞/ウェルの密度で、播種した。5 μM〜8.4x10-5 μM(3倍連続希釈)の最終濃度範囲で試験化合物を含むアッセイ培地(5 μL)を、該細胞に加えた後、該細胞プレートを、37℃および5％CO2で18時間インキュベートした。コントロールウェルには、DMSOビヒクル(総数)か、または0.5 μMの自製(in-house)小分子阻害剤が含まれていた(バックグラウンド数値)。各サンプルについて2連で用いた。ルシフェラーゼ活性を、製造元の仕様書(Promega, Cat. #: E2550)に従って、50 μl STEADY-GLO(登録商標)ルシフェラーゼ試薬を用いて20分のインキュベートした後に測定し、Envisionプレートリーダー(PerkinElmer, Boston, MA)により分析した。
【０２１１】
化合物のアンタゴニスト効力を、100 x [1-(サンプルの平均-バックグラウンドの平均)/(全体の平均-バックグラウンドの平均)]として表し、ここで、サンプルとは試験化合物の存在下におけるルシフェラーゼ活性であり、バックグラウンドとは小分子阻害剤コントロールの存在下でのルシフェラーゼ活性に等しく、全体とはDMSOウェルで誘導されたシグナルである。データを、4つのパラメータロジスティック適合方程式(fit equation)を用いてプロットし、IC50値を、ルシフェラーゼ活性の50％を阻害する化合物の濃度として定義した。
【０２１２】
以下の表3は、上述のNotch-CBF1トランス活性化アッセイで測定した、本発明の実施例1〜9および比較化合物10〜13についてのNotch 1およびNotch 3のIC50値を挙げたものである。幾つかの例において、この値は、複数回の実験(Nは実施した実験の数である)の平均である。実施例1〜9により例示される本発明の化合物は、Notch 1のIC50値について26.8 nM以下、Notch 3のIC50値について22.6 nM以下を示した。
【表４】
2015533811.tif 000085
【０２１３】
ハイスループット(HT)代謝安定性パネル
非経口投与された化合物は、血流に入り、肝臓を通る1つ以上の経路を経る。肝臓によって容易に代謝されない化合物を、治療上有効な血漿中濃度で、治療上有効な期間、投与することができる。
【０２１４】
経口投与される化合物は、典型的には、腸壁を通して血流中に吸収され、肝臓を通る第1の経路を経る。肝臓を通るこの第1の経路において容易に代謝されない化合物は、身体の他の部域に治療上有効な量で分配され得る。
【０２１５】
代謝安定性アッセイによって、10分間インキュベートした後のヒト、ラット、マウス、イヌ、および/またはサルのミクロソームを用いた、in vitroでのCYP-媒介代謝安定性を評価した。各化合物を2連で試験した。
【０２１６】
これらのアッセイの結果を、10分間インキュベートした後の反応混合物中に残存する親化合物の割合として表した(残存率)。概して、これらの結果を用いて、試験化合物のCYP-媒介またはNADPH-依存性の代謝の程度のみを評価した。該化合物が著しく代謝(＜40〜50％残存)された場合、このことにより、in vivoでの化合物の高いクリアランスはCYP-媒介代謝に起因することが示唆された。しかしながら、これらのin vitroアッセイにおいて化合物が中程度(50〜80％)または低い(＞85％)代謝を示した場合、高いクリアランスは依然として、in vivoでの他の代謝および排出経路を介している可能性があった。
【０２１７】
これらのアッセイの残存率の結果はin vivoでの化合物のクリアランスを予測するものであって、これら結果からCYP-媒介代謝が優位な排出経路であると仮定された。異なるミクロソーム種における、結果の範囲は、おおよそ表4に示される通りである。
【表５】
2015533811.tif 000086
【０２１８】
方法および材料
肝臓ミクロソームとのインキュベーション
試験化合物を、100％DMSO中の3.5 mMのストック溶液として得た。試験化合物を希釈して1.4％DMSOを含む50 μMアセトニトリル(ACN)溶液を作り、次いでそれをミクロソームとのインキュベーションのための100x ストックとして用いた。各化合物を、代謝安定性-ヒト、ラット、およびマウスアッセイ一式の3種をそれぞれ別々に、または代謝安定性-イヌ一式もしくは代謝安定性-サル一式を個々の種として、2連で試験した。化合物、NADPH、および肝臓ミクロソーム溶液を、インキュベーションのために、3つ工程で合わせた:
1.  100 mM NaPi, pH 7.4、5 mM MgCl2緩衝液中の、152 μlの肝臓ミクロソーム懸濁液(タンパク質濃度 1.1 mg/ml)を、37℃にて予め温めた。
2.  1.7 μlの50 μM 化合物(98.6％ACN, 1.4％DMSO)を同じチューブに加え、37℃にて5分間、予めインキュベートした。
3.  該反応を、予め温めた100 mM NaPi, pH 7.4中の10 mM NADPH溶液を17 μl加えることによって開始させた。
【０２１９】
反応成分をよく混合し、該反応混合液の75 μlをすぐに150 μlクエンチ/停止溶液に移し入れた(0-時点, T0)。反応液を、37℃で10分間インキュベートした後、さらなる75 μlのアリコートを150 μlのクエンチ溶液に移し入れた。100 μM DMN(注射剤品質管理のためのUV標準)を含むアセトニトリルを、クエンチ溶液として用いて、代謝反応を終了させた。
【０２２０】
クエンチした混合液を、ALLEGRA(登録商標)X-12遠心機、SX4750ローター(Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA)において、1500 rpm(〜500 X g)で15分間遠心分離して、変性したミクロソームのペレットを得た。次いで、親化合物とその代謝物の混合物を含む90 μlの体積の上清抽出物を、UV-LC/MS-MS分析のために別の96-ウェルプレートに移し、該混合物中に残存する親化合物の割合を決定した。
【表６】
2015533811.tif 000087
【０２２１】
サンプル分析−機器
HPLC：Pump - Thermo Surveyor；オートサンプラー - CTC/LEAP HTS；UV検出器 - Thermo Surveyor PDA plus；カラム - 0.5 μm インラインフィルターを備えたVARIAN(登録商標)C18, 3 μm, 2 x 20 mm；構造的完全性事前分析のための移動相：(A)98% 水, 2％アセトニトリル(10 mM 酢酸アンモニウム含有)；(B)10% 水, 90% アセトニトリル(10 mM 酢酸アンモニウム含有)；反応サンプル分析のための移動相：(A)98% 水, 2% アセトニトリル(0.1％ギ酸含有)；(B)2% 水, 98% アセトニトリル(0.1％ギ酸含有)；(C)0.1％水酸化アンモニウム／水；(D)0.1% 水酸化アンモニウム／アセトニトリル.
【０２２２】
質量分析計：Thermo TSQ QUANTUM(登録商標)Ultraトリプル四重極質量分析計
サンプル分析: 構造的完全性事前分析
【０２２３】
サンプル分析−構造的完全性事前分析
代謝安定性構造的完全性事前分析を用いて、アッセイした化合物の純度を評価した。化合物を、57 μlの3.5 mM DMSO溶液として96-ウェルプレート中に得た。該3.5 mM化合物DMSOストック溶液を、同じ体積のアセトニトリル、イソプロパノール、およびMilliQ-H2Oを含む溶液を用いて、18倍希釈した。得られた溶液(200 μM)を、Thermo LCQ Deca XP Plus イオントラップ質量分析計でのLC-UV/MS(Waters Sentry 2.1 mm ガードカラムを備えたWaters XBridge C18, 5 μm, 2 x 50 mm カラムおよび以下の表に記載のLC条件を用いて、5 μl注入量および1 ml/分の流速で)により、構造的完全性について分析した。得られたデータは、220 nmでのUV吸光度による純度を反映していた。50％以上の純度を有する化合物の結果のみを報告した。
【表７】
2015533811.tif 000088
【０２２４】
サンプル分析−インキュベートしたサンプル
MS/MS条件の最適化を、加熱エレクトロスプレー(H-ESI)源を備えたThermo TSQ QUANTUM(登録商標)トリプル四重極質量分析計において、自動注入によって実施し、SRMトランジションおよびそれらの対応する衝突エネルギー値を得た。1:1 メタノール:水中の20 μM濃度の化合物溶液を、流速90 μL/分で注入した後、流速50 μL/分で移動相を合わせ、その後供給源に導入した。全ての化合物を、まず移動相AおよびB(50％Aおよび50％B)を用い、必要であれば、移動相CおよびD(これもまた、50:50組成物である)を用いて、最適化した。最適化されたパラメータ(極性、SRMトランジションおよび衝突エネルギーを含む)を、Microsoft Access(登録商標)データベースに保存した。
【０２２５】
自動注入から得られた質量分析条件を用いて、代謝安定性アッセイからのインキュベーションサンプルを分析した。注入量は5 μlであって、流速は0.8 ml/分であった。用いたグラジエントを、以下の表に示した。全てのサンプルを、まず移動相AおよびBを用いたグラジエントにて注入した。必要であれば(例えば、クロマトグラフ的理由のため)、サンプルを同一のグラジエントで再注入した(ただし、移動相CおよびDを用いる)。全てのLC-MS/MS分析パラメータを、コンピューターを用いて生データファイルに保存した。
【０２２６】
【表８】
2015533811.tif 000089
【０２２７】
データ解析
ピーク積分を、XCALIBUR(登録商標)ソフトウェアを用いて行った。残存率の算出を、各化合物についてのT10分サンプルからのLC-MS/MSピーク領域とT0分サンプルからのLC-MS/MSピーク領域を比較することによって、実施した。
【０２２８】
品質の管理
一組の3つの化合物を、各アッセイプレートにおいて、試験化合物と一緒に試験した。これらコントロール化合物についての結果が以下に示す期待される範囲に該当した場合のみ、データを承認してアップロードした。
【表９】
2015533811.tif 000090
【０２２９】
代謝安定性半減期パネル
ヒトまたは動物の肝臓ミクロソームにおいて、in vitroで決定された代謝速度および半減期を用いて、化合物の固有クリアランス(CLint)および肝クリアランス(CLh,b)を決定した。これらのパラメータは、in vivoヒトクリアランス(in vivoでの薬物曝露のレベルを定義する)を予測するために有用であった(Obach et al., 1997, 1999)。
【０２３０】
代謝安定性半減期アッセイパネルは、ヒト、ラット、マウス、イヌおよびサルミクロソームにおける、in vitroでのCYP-媒介(NADPH-依存性)代謝のタイムコースおよび速度を評価する。該タイムコースは45分のインキュベーションに及び、0、5、10、15、30、および45分の時点が含まれ、その各々にて、混合物中の試験化合物の残存量を測定した。
【０２３１】
結果解釈ガイドライン
代謝安定性半減期アッセイの結果を半減期(T1/2, 分)として表した。一般に、これらの結果は、試験化合物のCYP-媒介またはNADPH-依存性の代謝の程度のみを評価するために用いられるべきである。該化合物が著しく代謝された(T1/2 ＜14分)場合、これにより、in vivoでの高いクリアランスはCYP-媒介代謝に起因することが示唆された。しかしながら、これらのin vitroアッセイにおいて、該化合物が中程度(50〜80％)または低い(＞85％)代謝を示した場合、高いクリアランスは依然としてin vivoでの他の代謝および排出経路を介している可能性があった。
【０２３２】
これらのアッセイの結果は、in vivoでの化合物のクリアランスを予測するものであって、これらの結果からCYP-媒介代謝が優位な排出経路であると仮定された。ヒトミクロソーム種において、結果の範囲は、おおよそ以下の表に示される通りであった。
【表１０】
2015533811.tif 000091
【０２３３】
方法および材料
肝臓ミクロソームはBD-Biosciences(Woburn, MA)から入手し、NADPHはAppliChem Incから入手した；全ての他の試薬はSigmaから入手した。
【０２３４】
肝臓ミクロソームとのインキュベーション
試験化合物を100％DMSO中の3.5 mMストック溶液として得た。該試験化合物を希釈して50 μM アセトニトリル(ACN)溶液(1.4％DMSO含有)を作り、その後、それをミクロソームとのインキュベーション用の100倍ストックとして用いた。各化合物を、ヒト、ラット、マウス、イヌおよびサルの肝臓ミクロソームにおいて試験した。化合物、NADPHおよび肝臓ミクロソーム溶液を、インキュベーションのために3つの工程で合わせた:
1.  450 μlの肝臓ミクロソーム懸濁液、100 mM NaPi(pH 7.4)、5 mM MgCl2緩衝液中の1.1 mg/mlのタンパク質濃縮物を、37℃にて予め温めた。
2.  5 μlの50 μM 化合物(98.6％ACN, 1.4％DMSO)を同じチューブに加え、37℃で5分間、プレインキュベートした。
3.  50 μlの予め温めた100 mM NaPi(pH 7.4)中の10 mM NADPH溶液を加えることによって、反応を開始させた。
【０２３５】
反応液の成分をよく混合し、すぐに65 μlを130 μlクエンチ/停止溶液に移し入れた(0-時点, T0)。反応液を37℃で5、10、15、30および45分間インキュベートし、各時点で65 μlのアリコートを130 μlのクエンチ溶液に移し入れた。内部標準(100 ng/ml)を含むアセトニトリルをクエンチ溶液として用いて、代謝反応を終了させた。
【０２３６】
クエンチした混合液を、ALLEGRA(登録商標)X-12遠心機, SX4750ローター(Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA)において、1500 rpm(〜500 X g)にて15分間、遠心分離を行い、変性したミクロソームを沈殿させた。その後、親化合物とその代謝物の混合物を含む90 μlの体積の上清抽出物を、LC/MS-MS分析のための別の96-ウェルプレートに移し、該混合物中に残存している親化合物の割合を決定した。
【表１１】
2015533811.tif 000092
【０２３７】
サンプル分析−機器
HPLC：ポンプ−島津LC-20 ADシリーズ バイナリポンプ；オートサンプラー−CTC/LEAP HTS.
【０２３８】
以下の表11は、ヒト代謝安定性半減期アッセイで測定した、本発明の実施例1〜9および比較化合物10〜13についての代謝半減値を挙げたものである。幾つかの例において、この値は、複数回の実験(Nは実施した実験の数である)の平均である。実施例1〜9により例示される本発明の化合物は、67分またはそれ以上長い代謝安定性半減期値を示した。これに対して、比較化合物10〜13は、8分またはそれ以下の代謝安定性半減期値を示した。
【表１２】
2015533811.tif 000093
【０２３９】
例示した本発明の化合物は、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおけるCYP-媒介性代謝から、低いクリアランスという驚くべき利点を示した。実施例1〜9により例示される本発明の化合物は、67分またはそれ以上長い代謝安定性半減値を示した。これに対して、比較化合物10〜13は、8分またはそれ以下の代謝安定性半減値を示した。比較化合物10〜13は、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおいて高いクリアランスを示しており、この化合物は肝ミクロソームにより排除されたことを示した。
【０２４０】
本発明の化合物(実施例1〜9)は、米国特許第7,456,172号に開示の比較化合物10〜13と比較され、とりわけ有利であることが見いだされている。本発明の化合物は、Notch 1およびNotch 3の阻害剤としての活性と肝臓ミクロソームについての優れた代謝安定性とを併せ持つ驚くべき利点を有していた。表3および11に示される通り、本発明の実施例1〜9は、Notch 1のIC50値が26.8 nM以下であって、Notch 3のIC50値が22.6 nM以下であり；そして、ヒト代謝安定性半減期アッセイにおいて67分以上のヒト代謝安定性半減期であった。対照的に、同様の試験において、比較化合物10〜13は、Notch 1のIC50値が5.1nM〜64.1nMの範囲であって、Notch 3のIC50値が12.5 nM〜74.5 nMであり；そして、ヒト代謝安定性半減期が8分以下であった。
【国際調査報告】
2015533811.tif 000096
2015533811.tif 000097
2015533811.tif 000098