(57)【要約】本発明は、全般的に大環状化合物および療法におけるそれらの使用に関する。より具体的には、本発明はアポトーシスのインヒビター（ＩＡＰ）の活性を調節する、および／または癌などの病的状態を処置するのに有用である、大環状化合物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
2015504425.tif 000151
またはその医薬的に許容できる塩
［式中：
ｎはそれぞれ、独立して１または２であり；
Ｒ１はそれぞれ、独立して水素、シクロアルキルおよび−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−Ｒ４から選択され、その際、Ｒ４はそれぞれ独立して水素、アリール、およびシクロアルキルから選択され、少なくとも１つのＲ１は水素以外のものであり；
Ｒ２はそれぞれ、水素であり；あるいは
Ｒ１およびＲ２は、それらが共通に結合している炭素原子と一緒になってシクロアルキルを形成し；
Ｒ６はそれぞれ、独立して−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−Ｒ９であり、その際、Ｒ９はそれぞれ独立して水素、アリール、ヘテロアリールおよびシクロアルキルから選択され；Ｒ６のアリール、ヘテロアリールまたはシクロアルキルの部分はいずれも、独立してハロ、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルケニルオキシ、フェニル、フェニルオキシ、およびフェニルメチルオキシから選択される最高２個の置換基で所望により置換されていてもよく；Ｒ６の−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−部分の１つの−ＣＨ２−は−Ｏ−で所望により置き換えられていてもよく；
Ｒ７はそれぞれ、独立して水素およびメチルから選択され；
Ｒ８はそれぞれ、独立してメチルおよびエチルから選択され；
Ｘはそれぞれ、独立して下記のものから選択され：
【化２】
2015504425.tif 000152
Ｚはそれぞれ、
【化３−１】
2015504425.tif 000153
であり、その際、
【化３−２】
2015504425.tif 000154
はそれぞれ化合物への結合点を表わし；
Ｙはそれぞれ、下記のものから選択され：
【化４−１】
2015504425.tif 000155
【化４−２】
2015504425.tif 000156
その際、
【化４−３】
2015504425.tif 000157
は化合物の−Ｃ＝Ｏ部分への結合点を表わし；
【化４−４】
2015504425.tif 000158
は化合物の−ＮＨ部分への結合点を表わし；
【化４−５】
2015504425.tif 000159
はＺへ第１結合点を表わし；
【化４−６】
2015504425.tif 000160
はＺへ第２結合点を表わし；
Ａは、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３もしくは
【化５】
2015504425.tif 000161
または以上のいずれかの互変異性体形態から選択され、その際：
Ｒ３は、ＯＨ、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、ＮＨＣＮ、ＮＨＳＯ２Ｒ１０、ＮＨＯＲ１１またはＮ（Ｒ１２）（Ｒ１３）であり；
Ｒ１０およびＲ１１は、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロアルキル（それらはいずれも置換されていてもよい）、および水素から選択され；
Ｒ１２およびＲ１３はそれぞれ、独立して水素、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−ＮＨ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）および−（Ｃ−１Ｃ４アルキレン）−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル）から選択され、あるいはＲ１２およびＲ１３は、それらが共通に結合している窒素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１個の追加ヘテロ原子を含んでもよい飽和複素環を形成し、この飽和複素環はメチルで所望により置換されていてもよい］。
【請求項２】
Ｒ７がメチルであり、Ｒ８がメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
−ＮＨ−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−Ｃ（Ｏ）−により表わされる化合物部分が下記のものから選択される、請求項１に記載の化合物：
【化６−１】
2015504425.tif 000162
［式中の
【化６−２】
2015504425.tif 000163
はＸのアミノ部分への結合点を表わす］。
【請求項４】
−ＮＨ−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−Ｃ（Ｏ）−により表わされる化合物部分が
【化７】
2015504425.tif 000164
である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ６）−Ｃ（Ｏ）−により表わされる化合物部分が下記のものから選択される、請求項１に記載の化合物：
【化８−１】
2015504425.tif 000165
［式中：
【化８−２】
2015504425.tif 000166
はＸの−Ｃ＝Ｏ部分への結合点を表わし；
【化８−３】
2015504425.tif 000167
はＹのアミノ部分への結合点を表わす］。
【請求項６】
−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ６）−Ｃ（Ｏ）−により表わされる化合物部分が
【化９】
2015504425.tif 000168
である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｘが下記のものから選択される、請求項１に記載の化合物：
【化１０】
2015504425.tif 000169
【請求項８】
Ｘが下記のものから選択される、請求項７に記載の化合物：
【化１１】
2015504425.tif 000170
【請求項９】
Ｘが
【化１２】
2015504425.tif 000171
である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙが下記のものから選択される、請求項１に記載の化合物：
【化１３−１】
2015504425.tif 000172
【化１３−２】
2015504425.tif 000173
【請求項１１】
Ｙが
【化１４】
2015504425.tif 000174
である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１はそれぞれ同一であり；
Ｒ２はそれぞれ同一であり；
Ｒ６はそれぞれ同一であり；
Ｒ７はそれぞれ同一であり；
Ｒ８はそれぞれ同一であり；
Ｘはそれぞれ同一であり；
Ｙはそれぞれ同一であり；
Ｚはそれぞれ同一であり；
ｎはそれぞれ同一である；
請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
化合物が、化合物番号１００〜１５０および１０００〜１０５２のいずれか１つから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
請求項１に記載の化合物および医薬的に許容できるキャリヤーを含む、医薬的に許容できる組成物。
【請求項１５】
患者において癌を処置する方法であって、その必要がある患者にその癌の処置に有効な量の請求項１４に記載の組成物を投与する工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の引照
[0001]  本出願は、U.S. Provisional Patent Application No. 61/557823, 2011年11月9日出願に基づく優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
[0002]  本発明は、全般的に大環状化合物および療法におけるそれらの使用に関する。より具体的には、本発明はアポトーシスのインヒビター(Inhibitors of Apoptosis)（ＩＡＰ）の活性を調節する、および／または癌などの病的状態を処置するのに有用である、大環状化合物に関する。
【背景技術】
【０００３】
[0003]  アポトーシスまたはプログラム細胞死は、無脊椎動物および脊椎動物の発達およびホメオスタシスにおいて重要な役割を果たす、遺伝的および生化学的に調節された機序である。
【０００４】
[0004]  早期細胞死をもたらすアポトーシス迷走はさまざまな発達障害に関連づけられている。細胞死の欠如をもたらすアポトーシス欠陥は、癌および慢性ウイルス性感染症に関連づけられている(Thompson et al., (1995) Science 267, 1456-1462)。
【０００５】
[0005]  カスパーゼは、アポトーシスの実行に際して鍵となる役割を果たす、システインを含有するアスパラギン酸特異的プロテアーゼである。カスパーゼは、それらの不活性チモーゲン形態からタンパク質分解プロセシングにより活性化されると、生命に必須の細胞タンパク質を細胞内から消化する。カスパーゼはそのように強力なプロテアーゼであるので、早期細胞死を阻止するためにはこのファミリーのタンパク質を緊密に制御することが必要である。タンパク質分解プロセシングのほかに、カスパーゼはアポトーシスのインヒビター（ＩＡＰ）として知られる分子ファミリーによっても調節される(Deveraux et al., J Clin Immunol (1999), 19:388-398)。ＩＡＰは、ショウジョウバエからヒトにまで及ぶすべての生物にみられ、多くのヒト癌で過剰発現することが知られている。ＩＡＰは常に１〜３つのバキュロウイルスＩＡＰリピート(Baculovirus IAP repeat)（ＢＩＲ）ドメインを含み、大部分の形態はカルボキシル末端ＲＩＮＧフィンガーモチーフをも保有する。ＢＩＲドメイン自体は４つのアルファ−ヘリックスおよび３つのβ鎖を含む約７０残基の亜鉛結合ドメインであり、亜鉛イオンに配位するシステインおよびヒスチジン残基を含む(Hinds et al., (1999) Nat. Struct. Biol. 6, 648-651)。ＢＩＲドメインはカスパーゼを阻害することにより抗アポトーシス作用を引き起こすと考えられている。
【０００６】
[0006]  一例として、ヒトＸ染色体に連結したＩＡＰ（ＸＩＡＰ）はカスパーゼ３、カスパーゼ７、およびＡｐａｆ−１−シトクロムＣ仲介によるカスパーゼ９活性化を阻害する(Deveraux et al., (1998) EMBO J. 17, 2215-2223)。カスパーゼ３およびカスパーゼ７はＸＩＡＰのＢＩＲ２ドメインにより阻害され、一方、ＸＩＡＰのＢＩＲ３ドメインはカスパーゼ９活性の阻害に関与する。ＸＩＡＰは成体および胎児の大部分の組織に広く発現し(Liston et al., Nature, 1996, 379(6563):349)、ＮＣＩ  ６０細胞系パネルの多数の腫瘍細胞系には過剰発現する(Fong et al., Genomics, 2000, 70:113; Tamm et al., Clin. Cancer Res. 2000, 6(5): 1796)。腫瘍細胞におけるＸＩＡＰの過剰発現は、さまざまなアポトーシス促進刺激に対して腫瘍細胞を保護するのに寄与することが証明され、また化学療法に対する抵抗性を増大させる(LaCasse et al., Oncogene, 1998, 17(25):3247)。これと一致して、急性骨髄性白血病を伴なう患者についてＸＩＡＰタンパク質レベルと生存率の間の強い相関性が証明された(Tamm et al., 前掲)。
【０００７】
[0007]  アポトーシスを行なうようにシグナルを受けた正常細胞では、ミトコンドリアタンパク質Ｓｍａｃ(second mitochondrial activator of caspases；ＤＩＡＢＬＯとしても知られる）により実行されるＩＡＰ仲介による阻害が一部除かれる。Ｓｍａｃはアミノ酸２３９個の前駆体分子として合成される；Ｎ末端の５５残基がミトコンドリアターゲッティング配列として作用し、これは輸入後に除去される。成熟形態のＳｍａｃはミトコンドリアの膜間空間に存在する。アポトーシスが誘導された時点で、Ｓｍａｃはミトコンドリアから細胞質ゾル内へ放出され、そこでシトクロムｃと一緒にＩＡＰ類に結合し、カスパーゼに対するＩＡＰの阻害作用を排除する。Ｓｍａｃは本質的に、現在までに試験されたすべてのＩＡＰ類と相互作用し、したがって哺乳動物におけるアポトーシスの主要な調節物質であると思われる。
【０００８】
[0008]  アンチセンスオリゴヌクレオチドによるＸＩＡＰ発現ダウンレギュレーションは、腫瘍細胞を広範なアポトーシス促進剤により誘導される死に対して増感させることがインビトロおよびインビボの両方で示された。Ｓｍａｃ／ＤＩＡＢＬＯ由来のペプチドも、多種多様な腫瘍細胞系をさまざまなアポトーシス促進薬により誘導されるアポトーシスに対して増感させることが証明された。ＩＡＰ阻害はアポトーシスを促進して、アポトーシスに対して感受性である疾患および状態を処置するための実行可能な機序であると思われるので、ＩＡＰを阻害できる化合物を開発するというニーズが依然としてある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Thompson et al., (1995) Science 267, 1456-1462
【非特許文献２】Deveraux et al., J Clin Immunol (1999), 19:388-398
【非特許文献３】Hinds et al., (1999) Nat. Struct. Biol. 6, 648-651
【非特許文献４】Deveraux et al., (1998) EMBO J. 17, 2215-2223
【非特許文献５】Liston et al., Nature, 1996, 379(6563):349
【非特許文献６】Fong et al., Genomics, 2000, 70:113
【非特許文献７】Tamm et al., Clin. Cancer Res. 2000, 6(5): 1796
【非特許文献８】LaCasse et al., Oncogene, 1998, 17(25):3247
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
[0009]  本発明は、大環状化合物、そのような化合物を用いてＩＡＰの活性を調節する方法および多様な病的状態を処置するための方法を提供する。１観点において本発明は、式Ｉにより表わされる化合物を提供する：
【００１１】
【化１】
2015504425.tif 000002
【００１２】
これにはその医薬的に許容できる塩類が含まれ、式中の可変基は詳細な記載中に定義されるものである。
【００１３】
[0010]  他の観点において、本発明は、アポトーシスに対して感受性である病的状態に罹患しているかまたは罹患しやすい患者を処置する方法を提供する。多数の病的状態を処置できる。この方法は、本明細書に記載する大環状化合物を含む療法有効量の組成物を患者に投与することを含む。たとえば、本明細書に記載する化合物は、感染症、増殖性疾患（たとえば、癌）、および自己免疫疾患を治療または予防するために使用できる。
【００１４】
[0011]  他の観点において、本発明は、細胞のＩＡＰ活性を阻害し、こうしてアポトーシスを促進する方法を提供する。この方法は、本明細書に記載する化合物に細胞を曝露することを含む。
【００１５】
[0012]  本発明の以上および他の観点および態様は、以下の詳細な記載および特許請求の範囲を参照することによってより十分に理解できる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
[0013]  本発明は、大環状化合物、そのような化合物を用いてＩＡＰ、特にＸＩＡＰの活性を調節する方法、および多様な病的状態、特に癌を処置する方法を提供する。本発明の実施には、別途指示しない限り、有機化学、薬理学および生化学の一般的手法を採用する。たとえば、有機化合物を合成するための方法は、文献、たとえば“Comprehensive Organic Synthesis” (B.M. Trost & I. Fleming, eds., 1991-1992)に記載されている。本発明の多様な観点を以下の各セクションに述べる；ただし、１つの特定のセクションに記載した本発明の観点をいずれか特定のセクションに限定すべきではない。さらに、ある可変語が定義されていない場合、その可変語の従来の定義が支配する。
【００１７】
Ｉ．大環状化合物
[0014]  １観点において、本発明は式Ｉの化合物：
【００１８】
【化２】
2015504425.tif 000003
【００１９】
またはその医薬的に許容できる塩を提供する
［式中：
ｎはそれぞれ、独立して１または２であり；
Ｒ１はそれぞれ、独立して水素、シクロアルキルおよび−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−Ｒ４から選択され、その際、Ｒ４はそれぞれ独立して水素、アリール、およびシクロアルキルから選択され、少なくとも１つのＲ１は水素以外のものであり；
Ｒ２はそれぞれ、水素であり；あるいは
Ｒ１およびＲ２は、それらが共通に結合している炭素原子と一緒になってシクロアルキルを形成し；
Ｒ６はそれぞれ、独立して−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−Ｒ９であり、その際、Ｒ９はそれぞれ独立して水素、アリール、ヘテロアリールおよびシクロアルキルから選択され；Ｒ６のアリール、ヘテロアリールまたはシクロアルキルの部分はいずれも、独立してハロ、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルケニルオキシ、フェニル、フェニルオキシ、およびフェニルメチルオキシから選択される最高２個の置換基で所望により置換されていてもよく；Ｒ６の−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−部分の１つの−ＣＨ２−は−Ｏ−で所望により置き換えられていてもよく；
Ｒ７はそれぞれ、独立して水素およびメチルから選択され；
Ｒ８はそれぞれ、独立してメチルおよびエチルから選択され；
Ｘはそれぞれ、独立して下記のものから選択され：
【００２０】
【化３】
2015504425.tif 000004
【００２１】
Ｚは、
【００２２】
【化４−１】
2015504425.tif 000005
【００２３】
であり、その際、
【００２４】
【化４−２】
2015504425.tif 000006
【００２５】
はそれぞれ化合物への結合点を表わし；
Ｙはそれぞれ、独立して下記のものから選択され：
【００２６】
【化５−１】
2015504425.tif 000007
【００２７】
その際、
【００２８】
【化５−２】
2015504425.tif 000008
【００２９】
は化合物の−Ｃ＝Ｏ部分への結合点を表わし；
【００３０】
【化５−３】
2015504425.tif 000009
【００３１】
は化合物の−ＮＨ部分への結合点を表わし；
【００３２】
【化５−４】
2015504425.tif 000010
【００３３】
はＺへ第１結合点を表わし；
【００３４】
【化５−５】
2015504425.tif 000011
【００３５】
はＺへ第２結合点を表わし；
Ａは、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３もしくは
【００３６】
【化６】
2015504425.tif 000012
【００３７】
または以上のいずれかの互変異性体形態から選択され、その際：
Ｒ３は、ＯＨ、ＮＨＣＮ、ＮＨＳＯ２Ｒ１０、ＮＨＯＲ１１またはＮ（Ｒ１２）（Ｒ１３）であり；
Ｒ１０およびＲ１１は、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロアルキル（それらはいずれも置換されていてもよい）、および水素から選択され；
Ｒ１２およびＲ１３はそれぞれ、独立して水素、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−ＮＨ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、−（Ｃ１−Ｃ４アルキレン）−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）および−（Ｃ−１Ｃ４アルキレン）−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル）から選択され、あるいはＲ１２およびＲ１３は、それらが共通に結合している窒素原子と一緒になって、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１個の追加ヘテロ原子を含んでもよい飽和複素環を形成し、この飽和複素環はメチルで所望により置換されていてもよい］。
【００３８】
[0015]  式Ｉのより広い観点において、Ｘはさらに
【００３９】
【化７】
2015504425.tif 000013
【００４０】
から選択される。
【００４１】
[0016]  式Ｉの他のより広い観点において、Ｙはさらに
【００４２】
【化８】
2015504425.tif 000014
【００４３】
から選択される。
【００４４】
[0017]  式Ｉのさらに他のより広い観点において、Ｒ３はさらに−Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）から選択される。
【００４５】
[0018]  式Ｉのさらに他のより広い観点において、Ａはさらに
【００４６】
【化９】
2015504425.tif 000015
【００４７】
およびそれの互変異性体から選択される。
【００４８】
[0019]  式Ｉの特定の態様において、Ｒ７はメチルであり、Ｒ８はメチルである。
【００４９】
[0020]  式Ｉの特定の態様において、−ＮＨ−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−Ｃ（Ｏ）−により表わされる化合物部分は下記のものから選択され：
【００５０】
【化１０−１】
2015504425.tif 000016
【００５１】
その際、
【００５２】
【化１０−２】
2015504425.tif 000017
【００５３】
はＸのアミノ部分への結合点を表わす。これらの態様のより特定の観点において、Ｘは
【００５４】
【化１１】
2015504425.tif 000018
【００５５】
である。
【００５６】
[0021]  式Ｉの特定の態様において、−ＮＨ−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−Ｃ（Ｏ）−により表わされる化合物部分は
【００５７】
【化１２】
2015504425.tif 000019
【００５８】
から選択される。
【００５９】
[0022]  式Ｉの特定の態様において、−ＮＨ−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−Ｃ（Ｏ）−により表わされる化合物部分は下記のものから選択され：
【００６０】
【化１３−１】
2015504425.tif 000020
【００６１】
その際、
【００６２】
【化１３−２】
2015504425.tif 000021
【００６３】
はＸの−Ｃ＝Ｏ部分への結合点を表わし；
【００６４】
【化１３−３】
2015504425.tif 000022
【００６５】
はＹのアミノ部分への結合点を表わす。これらの態様のより特定の観点において、−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ６）−Ｃ（Ｏ）−により表わされる化合物部分は
【００６６】
【化１４】
2015504425.tif 000023
【００６７】
である。
【００６８】
[0023]  式Ｉの特定の態様において、Ｘは下記のものから選択される：
【００６９】
【化１５】
2015504425.tif 000024
【００７０】
これらの態様の１観点において、Ｘは下記のものから選択される：
【００７１】
【化１６】
2015504425.tif 000025
【００７２】
これらの態様の別観点において、Ｘは下記のものから選択される：
【００７３】
【化１７】
2015504425.tif 000026
【００７４】
これらの態様のより特定の観点において、Ｘは
【００７５】
【化１８】
2015504425.tif 000027
【００７６】
である。
【００７７】
[0024]  式Ｉの特定の態様において、Ｙは下記のものから選択される：
【００７８】
【化１９−１】
2015504425.tif 000028
【００７９】
【化１９−２】
2015504425.tif 000029
【００８０】
これらの態様の１観点において、Ｘは
【００８１】
【化２０】
2015504425.tif 000030
【００８２】
である。
【００８３】
[0025]  式Ｉの特定の態様において、ｎはそれぞれ１である。
【００８４】
[0026]  式Ｉの特定の態様において、化合物はホモダイマーである（たとえば、Ｒ１はそれぞれ同一であり；Ｒ２はそれぞれ同一であり；Ｒ６はそれぞれ同一であり；Ｒ７はそれぞれ同一であり；Ｒ８はそれぞれ同一であり；Ｘはそれぞれ同一であり；Ｙはそれぞれ同一であり；Ｚはそれぞれ同一であり；ｎはそれぞれ同一である）。
【００８５】
[0027]  式Ｉの代表的化合物を下記の表に示す。
【００８６】
【表１−１】
2015504425.tif 000031
【００８７】
【表１−２】
2015504425.tif 000032
【００８８】
【表１−３】
2015504425.tif 000033
【００８９】
【表１−４】
2015504425.tif 000034
【００９０】
【表１−５】
2015504425.tif 000035
【００９１】
【表１−６】
2015504425.tif 000036
【００９２】
【表１−７】
2015504425.tif 000037
【００９３】
【表１−８】
2015504425.tif 000038
【００９４】
【表１−９】
2015504425.tif 000039
【００９５】
【表１−１０】
2015504425.tif 000040
【００９６】
【表１−１１】
2015504425.tif 000041
【００９７】
【表１−１２】
2015504425.tif 000042
【００９８】
【表１−１３】
2015504425.tif 000043
【００９９】
【表１−１４】
2015504425.tif 000044
【０１００】
【表１−１５】
2015504425.tif 000045
【０１０１】
【表１−１６】
2015504425.tif 000046
【０１０２】
【表１−１７】
2015504425.tif 000047
【０１０３】
【表１−１８】
2015504425.tif 000048
【０１０４】
【表１−１９】
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【０１０５】
【表１−２０】
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【０１０６】
【表１−２１】
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【０１０７】
【表１−２２】
2015504425.tif 000052
【０１０８】
【表１−２３】
2015504425.tif 000053
【０１０９】
【表１−２４】
2015504425.tif 000054
【０１１０】
【表１−２５】
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【０１１１】
【表１−２６】
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【０１１２】
【表１−２７】
2015504425.tif 000057
【０１１３】
【表１−２８】
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【０１１４】
【表１−２９】
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【０１１５】
【表１−３０】
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【０１１６】
【表１−３１】
2015504425.tif 000061
【０１１７】
【表１−３２】
2015504425.tif 000062
【０１１８】
【表１−３３】
2015504425.tif 000063
【０１１９】
【表１−３４】
2015504425.tif 000064
【０１２０】
【表１−３５】
2015504425.tif 000065
【０１２１】
【表１−３６】
2015504425.tif 000066
【０１２２】
【表１−３７】
2015504425.tif 000067
【０１２３】
【表１−３８】
2015504425.tif 000068
【０１２４】
【表１−３９】
2015504425.tif 000069
【０１２５】
【表１−４０】
2015504425.tif 000070
【０１２６】
【表１−４１】
2015504425.tif 000071
【０１２７】
【表１−４２】
2015504425.tif 000072
【０１２８】
【表１−４３】
2015504425.tif 000073
【０１２９】
【表１−４４】
2015504425.tif 000074
【０１３０】
【表１−４５】
2015504425.tif 000075
【０１３１】
【表１−４６】
2015504425.tif 000076
【０１３２】
【表１−４７】
2015504425.tif 000077
【０１３３】
【表１−４８】
2015504425.tif 000078
【０１３４】
【表１−４９】
2015504425.tif 000079
【０１３５】
【表１−５０】
2015504425.tif 000080
【０１３６】
【表１−５１】
2015504425.tif 000081
【０１３７】
【表１−５２】
2015504425.tif 000082
【０１３８】
【表１−５３】
2015504425.tif 000083
【０１３９】
【表１−５４】
2015504425.tif 000084
【０１４０】
【表１−５５】
2015504425.tif 000085
【０１４１】
【表１−５６】
2015504425.tif 000086
【０１４２】
[0028]  １態様において、式Ｉの化合物は表１に示すいずれか１つの化合物から選択される。
【０１４３】
[0029]  本発明の化合物は、下記の合成スキームに示す反復ペプチドカップリング法を用いて製造できる。代表的な一般合成プロトコルをスキーム１〜６に提示する。それらのスキームおよび付随する合成法の記載は本発明を説明する目的で挙げるものであり、本発明の範囲または精神を限定するものと解釈すべきではない。
【０１４４】
[0030]  本明細書中で用いる略語には下記のものが含まれる：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）；ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）；ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）；ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）；９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）；メタノール（ＭｅＯＨ）；塩化メチレン（ＤＣＭ）；ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）；ｔｅｒｔ−ブチル（ｔＢｕ）；テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）；トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）；１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）；１，１’−ジカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）；１，１’−チオカルボニルジイミダゾール（ＴＣＤＩ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）；１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）、フェニル（Ｐｈ）、および（Ｚ）−２，２，６，６−テトラメチル−５−オキソヘプタ−３−エン−３−オレイン酸銅（ＩＩ）（Ｃｕ（ｔｈｄ）２）。
【０１４５】
[0031]  各スキームにおいて、Ｐはそれぞれ独立して選択された保護基、たとえばＦｍｏｃまたはＢｏｃである。Ｙ’は本明細書中で定義したいずれかのＹ部分の誘導体であって、Ａ基が除かれたものである。スキーム中でＹ’に結合したものとして描かれたＰ基は、Ｙ中に“１”と表記された結合に存在する遊離アミノ基に結合している。スキーム中でＹ’に結合したものとして描かれたアルキンは、Ｙ中に“４”と表記された結合において結合している。Ｘは本明細書中に述べるいずれかのＸ部分を意味するものとする。スキーム中でＸに結合したものとして描かれた−ＯＨ基はいずれも、“２”と表記された結合においてＸの末端−Ｃ（Ｏ）に結合している。スキーム中でＸに結合したものとして描かれたＰ基はいずれも、“１”と表記された結合においてＸの第二級アミン残基に結合している。
【０１４６】
[0032]  スキーム１は式Ｉの化合物の一般合成法を描いたものであり、この場合、化合物はホモダイマーである（たとえば、Ｒ１はそれぞれ同一であり；Ｒ２はそれぞれ同一であり；Ｒ６はそれぞれ同一であり；Ｒ７はそれぞれ同一であり；Ｒ８はそれぞれ同一であり；Ｘはそれぞれ同一であり；Ｙはそれぞれ同一であり；Ｚはそれぞれ同一であり；ｎはそれぞれ同一である）。スキーム１において、Ｐはそれぞれ独立して選択された保護基、たとえばＦｍｏｃまたはＢｏｃであり；Ｙ’はＹ（前記に定義したもの）の誘導体であって、Ａ基が除かれたものである。
【０１４７】
【化２１−１】
2015504425.tif 000087
【０１４８】
【化２１−２】
2015504425.tif 000088
【０１４９】
[0033]  スキーム１において、塩素化した樹脂１０と、Ｙ’の保護されたアルキン誘導体１１を、ＤＣＭおよびジイソプロピルエチルアミンの存在下で反応させて、樹脂連結した化合物１２を形成する。化合物１２を脱保護し（たとえば、ＤＢＵおよびピペリジンでＤＭＦ中において処理することにより）、次いで保護されたアミノ酸１３とＨＡＴＵおよびＮ−メチルモルホリンの存在下で反応させて、樹脂連結した化合物１４を製造する。脱保護した後、保護されたアジドアミノ酸１５を添加して、樹脂連結した化合物１６を製造する。１６を脱保護した後、保護されたアミノ酸１７を添加して１８を製造する。さらに１ラウンドの脱保護に続いてアミノ酸１９を添加して、樹脂連結した化合物２０を製造する。Ｃｕ２＋試薬をＤＩＰＥＡ、アスコルビン酸および２，６−ジメチルピリジンの存在下で用いてアジド基とアルキン基を互いに反応させてトリアゾールＺを形成して、樹脂連結した環状ダイマー２１を製造し、これをＴＦＡで脱保護し、樹脂から開裂させると、式Ｉの化合物が得られる。
【０１５０】
[0034]  スキーム２は式Ｉの化合物の一般合成法を描いたものであり、この場合、化合物はヘテロダイマーである。スキーム２において、Ｐはそれぞれ独立して選択された保護基、たとえばＦｍｏｃまたはＢｏｃであるが、このスキームではＰ５はＰ１と異なり、かつ区別して開裂されなければならない（たとえば、一方はＦｍｏｃであり、他方はＢｏｃである）；Ｙ’はＹ（前記に定義したもの）の誘導体であって、Ａ基が除かれたものである。
【０１５１】
【化２２−１】
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【０１５２】
【化２２−２】
2015504425.tif 000090
【０１５３】
[0035]  スキーム２において、市販の樹脂連結したアミノ酸２２と保護されたアジドアミノ酸１５を、ＨＡＴＵおよびＮ−メチルモルホリンの存在下で反応させて、樹脂連結した化合物２３を製造する。あるいは、塩素化した樹脂１０をアミノ酸にカップリングさせて、２３を製造する。２３を脱保護した後、保護されたアミノ酸１７をＨＡＴＵおよびＮ−メチルモルホリンの存在下で添加して、樹脂連結した化合物２４を形成する。保護されたアミノ酸１９を同様に添加して、樹脂連結した化合物２５を製造し、これを次いで樹脂から開裂させて、アミノ保護されたアジド含有ペプチド２６を製造する。
【０１５４】
[0036]  次いで化合物２６と樹脂連結したアミノ保護されたアルキン１２を、Ｃｕ２＋試薬、ＤＩＰＥＡ、アスコルビン酸および２，６−ジメチルピリジンの存在下で反応させて、樹脂連結したトリアゾール化合物２７を形成する。化合物２７を次いでＹのアルキン誘導体２８とカップリングさせて、樹脂連結した化合物２９を形成する。次いで化合物２９とアミノ酸保護されたアジド含有ペプチド２６を、Ｃｕ２＋試薬、ＤＩＰＥＡ、アスコルビン酸および２，６−ジメチルピリジンの存在下で反応させて、樹脂連結したトリアゾール化合物３０を形成し、次いでこれを脱保護してＰ１（ただし、Ｐ５ではない）を除去し、ＨＡＴＵおよびＮ−メチルモルホリンで環化する。得られた樹脂連結した化合物３１を次いでＴＦＡで処理してＰ５を除去し、化合物を樹脂から開裂させると、式Ｉの化合物が得られる。
【０１５５】
[0037]  スキーム３は式Ｉの化合物の一般合成法を描いたものであり、この場合、化合物はホモダイマーまたはヘテロダイマーである。スキーム３において、Ｐはそれぞれ独立して選択された保護基、たとえばＦｍｏｃまたはＢｏｃであり；Ｙ’はＹ（前記に定義したもの）の誘導体であって、Ａ基が除かれたものである。化合物３２（スキーム１または２に描いた方法により得ることができる）と１，１’−ジカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）を反応させ、続いて適宜置換されたスルホンアミド３３をＤＢＵの存在下で反応させて、分離可能なモノ−およびビス−アシルスルホンアミド誘導体３４および３５の混合物を得る。３４および３５のＰ５保護基を、たとえばＴＦＡで除去すると、それぞれ３６および３７が得られる。
【０１５６】
【化２３−１】
2015504425.tif 000091
【０１５７】
【化２３−２】
2015504425.tif 000092
【０１５８】
[0038]  スキーム４は式Ｉの化合物の一般合成法を描いたものであり、この場合、化合物はヘテロダイマーである。スキーム４において、Ｐはそれぞれ独立して、Ｐ１、Ｐ５およびＰ６が異なりかつ区別して開裂させることができるように選択された保護基である（たとえば、１つはＦｍｏｃであり、１つはＢｏｃであり、他はＴＢＳである）。Ｙ’はＹ（前記に定義したもの）の誘導体であって、Ａ基が除かれたものである。
【０１５９】
【化２４−１】
2015504425.tif 000093
【０１６０】
【化２４−２】
2015504425.tif 000094
【０１６１】
[0039]  スキーム４において、標準的なペプチドカップリング法（ＥＤＣ、ＨＯＡｔ、Ｂｏｃ−保護されたアミノ酸）および適切な溶媒（たとえば、ＤＭＦ）を用いて、線状ペプチド３９を製造することができる。樹脂連結した、アミノ保護されたアルキン３８と化合物３９をＣｕ２＋試薬、ＤＩＰＥＡ、アスコルビン酸および２，６−ジメチルピリジンの存在下で反応させて、樹脂連結したトリアゾール化合物４０を形成する。中間体４０を次いで適切に保護されたアミノ酸と逐次カップリングさせて、樹脂連結したペプチド化合物４１を得る。Ｐ６をＰ５の存在下で除去し、続いて臭化プロパルギルでアルキル化すると、樹脂連結したアルキン４２が得られる。４２をＣｕ２＋試薬、ＤＩＰＥＡ、アスコルビン酸および２，６−ジメチルピリジンの存在下で環化すると、樹脂連結した大環状化合物４３が得られる。４３のＰ５基を、たとえばＴＦＡで除去すると、モノエステル４４が得られる。たとえば水酸化リチウムによる４４の塩基促進加水分解により、式Ｉの化合物が得られる。
【０１６２】
[0040]  スキーム５は式Ｉの化合物の一般合成法を描いたものであり、この場合、化合物はヘテロダイマーであり、Ａはカルボン酸アイソスター、たとえばテトラゾールである。スキーム５において、Ｐはそれぞれ独立して選択された保護基、たとえばＦｍｏｃまたはＢｏｃであり；Ｙ’はＹ（前記に定義したもの）の誘導体であって、Ａ基が除かれたものである。
【０１６３】
【化２５】
2015504425.tif 000095
【０１６４】
[0041]  スキーム５において、塩素化した樹脂４５と保護されたＹ’のテトラゾール誘導体４６を、ジクロロメタンおよびジイソプロピルエチルアミンの存在下で反応させて、樹脂連結した化合物４７を形成する。数ラウンドの逐次脱保護およびペプチドカップリング反応を実施して、樹脂連結した化合物４８を製造する。銅（ＩＩ）促進されたＤＩＰＥ、アスコルビン酸および２，６−ジメチルピリジンの存在下でのトリアゾールＺの形成により、樹脂連結した環状ダイマー４９になる。中間体４９を次いでたとえばＴＦＡで脱保護し、開裂させて、式Ｉの化合物を製造することができる。
【０１６５】
[0042]  スキーム５に描いた合成法を用い、中間体４６をアミノ酸誘導体、たとえば化合物５３、５４、５７、５９、６０、６３、６６および７０（スキーム６）で置き換えることにより、別のカルボン酸アイソスターを含む式Ｉの化合物を製造することもできる。これらの中間体は当業者に既知の一般法に従って製造でき、それには下記の参考文献中にある方法が含まれる: Synlett, 2007, 17, 2643; Tetrahedron, 2009, 65, 9536; Tetrahedron Lett. 2005, 46, 311; Tetrahedron Lett, 2007, 48, 1479。
【０１６６】
【化２６−１】
2015504425.tif 000096
【０１６７】
【化２６−２】
2015504425.tif 000097
【０１６８】
ＩＩ．療法適用
[0043]  本発明の化合物および医薬組成物は、アポトーシスに対して感受性であるいずれかの疾患または状態の治療または予防に有用である。これらには、感染症（たとえば、皮膚感染症、消化器感染症、尿路感染症、泌尿生殖器感染症、全身性感染症）、増殖性疾患（たとえば、癌）、および自己免疫疾患（たとえば、リウマチ性関節炎、狼瘡）が含まれる。これらの化合物および医薬組成物は、動物、好ましくは哺乳動物（たとえば、家畜、ネコ、イヌ、マウス、ラット）、より好ましくはヒトに投与することができる。いずれかの投与方法を用いて化合物または医薬組成物を動物に送達することができる。特定の態様において、化合物または医薬組成物を経口投与する。他の態様において、化合物または医薬組成物を非経口投与する。
【０１６９】
[0044]  １態様において、本発明の化合物は患者においてアポトーシスを行なうことができないタイプのいずれかの癌の処置に使用できる。これには癌（これらに限定されない）を含めた充実性腫瘍；カポジ肉腫を含めた肉腫；赤芽球腫；グリア芽腫；髄膜腫；星状細胞腫；メラノーマ；および筋芽細胞腫が含まれるが、これらに限定されない。非充実性腫瘍癌、たとえば白血病の治療または予防も本発明により考慮される。
【０１７０】
[0045]  本発明の化合物で処置できるタイプの癌には、脳癌、皮膚癌、膀胱癌、卵巣癌、乳癌、胃癌、膵臓癌、前立腺癌、結腸癌、血液癌、肺癌および骨癌が含まれるが、これらに限定されない。そのようなタイプの癌の例には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：神経芽腫、腸癌、たとえば直腸癌、結腸癌、家族性腺腫性ポリーポーシス癌および遺伝性ポリーポーシス結腸直腸癌、食道癌、口唇癌、喉頭癌、下咽頭癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、髄様甲状腺癌、乳頭状甲状腺癌、腎癌、腎実質性癌、卵巣癌、子宮頚癌、子宮体癌、子宮内膜癌、絨毛癌、膵臓癌、前立腺癌、精巣癌、乳癌、尿路癌、メラノーマ、脳腫瘍、たとえばグリア芽腫、星状細胞腫、髄膜腫、髄芽腫および末梢神経外胚葉腫瘍、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、成人Ｔ細胞白血病リンパ腫、びまん性大Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、肝細胞癌、胆嚢癌、気管支癌、小細胞性肺癌、非小細胞性肺癌、多発性骨髄腫、基礎細胞腫、テラトーマ、網膜芽腫、脈絡膜メラノーマ、セミノーマ、横紋筋肉腫、頭蓋咽頭腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫。
【０１７１】
[0046]  腫瘍にみられるアポトーシス欠損のほかに、アポトーシス抵抗性に起因する、免疫系の自己反応性細胞を排除する能力の欠損は、自己免疫疾患の発病に際して鍵となる役割を果たすと考えられる。自己免疫疾患は、免疫系の細胞が自身の臓器および分子に対する抗体を産生すること、あるいは組織を直接攻撃してその組織を破壊することを特徴とする。それらの自己反応性細胞がアポトーシスを受け損なうと、疾患が顕性になる。アポトーシス調節の欠損は、全身性エリテマトーデスまたはリウマチ性関節炎などの自己免疫疾患において確認されている。
【０１７２】
[0047]  したがって、他の態様によれば、本発明は、その必要がある患者に本発明の化合物または組成物を投与することにより自己免疫疾患を処置する方法を提供する。そのような自己免疫疾患の例には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：膠原病、たとえばリウマチ性関節炎、全身性エリテマトーデス、シャープ症候群(Sharp's syndrome)、ＣＲＥＳＴ症候群(calcinosis, Raynaud's syndrome, esophageal dysmotility, telangiectasia；石灰沈着症、レイノー症候群、食道運動障害、毛細血管拡張症）、皮膚筋炎、血管炎（ヴェーグナー病(Morbus Wegener's)）およびシェーグレン症候群(Sjogren's syndrome)、腎疾患、たとえばグッドパスチャー症候群(Goodpasture's syndrome)、および急速進行性糸球体腎炎および膜性増殖性糸球体腎炎ＩＩ型、内分泌疾患、たとえばＩ型糖尿病、自己免疫性多腺性内分泌障害−カンジダ症−外胚葉栄養障害(autoimmune polyendocrinopathy-candidiasis-ectodermal dystrophy)（ＡＰＥＣＥＤ）、自己免疫性副甲状腺機能亢進症、悪性貧血、性腺機能不全、特発性副腎皮質機能低下症（アジソン病）(Morbus Addison's)、甲状腺機能亢進症、橋本甲状腺炎および原発性粘液水腫、皮膚疾患、たとえば尋常性天疱瘡、水疱性類天疱瘡、妊娠性疱疹、表皮水疱症および多形性大紅斑、肝疾患、たとえば原発性胆汁性肝硬変症、自己免疫性胆管炎、自己免疫性１型肝炎、自己免疫性２型肝炎、原発性硬化性胆管炎、神経疾患、たとえば多発性硬化症、重症筋無力症、ランバート-イートン筋無力症候群(myasthenic Lambert-Eaton syndrome)、後天性神経ミオトミー、ギラン−バレー症候群(Guillain-Barre syndrome)（ミュラー−フィッシャー症候群(Muller-Fischer syndrome)）、スティッフマン症候群、小脳変性、失調症、眼球クローヌス、知覚神経障害およびアカラシア（弛緩不能症）、血液疾患、たとえば自己免疫性溶血性貧血、特発性血小板減少性紫斑病（ウェルホーフ病(Morbus Werlhof)）、自己免疫反応に関連する感染性疾患、たとえばエイズ、マラリアおよびシャーガス病(Chagas disease)。
【０１７３】
[0048]  本発明の化合物は細胞をアポトーシスシグナルに対して増感させるのに有用である。したがって、１態様において、本発明の化合物を、放射線療法、または細胞増殖抑制活性もしくは抗新生物活性をもつ第２の療法剤と併用する。適切な細胞増殖抑制性の化学療法化合物には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：（ｉ）代謝拮抗剤、たとえばシタラビン(cytarabine)、フルダラビン(fludarabine)、５−フルオロ−２’−デオキシウリジン、ゲムシタビン(gemcitabine)、ヒドロキシ尿素またはメトトレキセート(methotrexate)；（ｉｉ）ＤＮＡ分断剤、たとえばブレオマイシン(bleomycin)；（ｉｉｉ）ＤＮＡ架橋剤、たとえばクロラムブシル(chlorambucil)、シスプラチン(cisplatin)、シクロホスファミド(cyclophosphamide)またはナイトロジェンマスタード；（ｉｖ）インターカレーション剤、たとえばアドリアマイシン(adriamycin)（ドキソルビシン(doxorubicin)）またはミトキサントロン(mitoxantrone)；（ｖ）タンパク質合成阻害剤、たとえばＬ−アスパラギナーゼ、シクロヘキシミド(cycloheximide)、ピューロマイシン(puromycin)またはジフテリア毒素；（ｖｉ）トポイソメラーゼＩ毒素、たとえばカンプトテシン(camptothecin)またはトポテカン(topotecan)；（ｖｉｉ）トポイソメラーゼＩＩ毒、たとえばエトポシド(etoposide)（ＶＰ−１６）またはテニポシド(teniposide)；（ｖｉｉｉ）微小管作用剤( microtubule-directed agent)、たとえばコルセミド(colcemid)、コルヒチン(colchicine)、パクリタキセル(paclitaxel)、ビンブラスチン(vinblastine)またはビンクリスチン(vincristine)；（ｉｘ）キナーゼ阻害剤、たとえばフラボピリドール(flavopiridol)、スタウロスポリン(staurosporin)、ＳＴＩ５７１（ＣＰＧ  ５７１４８Ｂ）またはＵＣＮ−Ｏｌ（７−ヒドロキシスタウロスポリン）；（ｘ）種々の治験薬、たとえばチオプラチン(thioplatin)、ＰＳ−３４１、フェニルブチレート、ＥＴ−１８−ＯＣＨ３、またはファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（Ｌ−７３９７４９、Ｌ−７４４８３２）；ポリフェノール類、たとえばケルセチン(quercetin)、レスベラトール(resveratrol)、ピセアタンノール(piceatannol)、没食子酸エピガロカテキン(epigallocatechin gallate)、テアフラビン(theaflavin)類、フラバノール(flavanol)類、プロシアニジン(procyanidin)類、ベツリン酸(betulinic acid)およびその誘導体；（ｘｉ）ホルモン、たとえばグルココルチコイド類またはフェンレチニド(fenretinide)；ならびに（ｘｉｉ）ホルモンアンタゴニスト、たとえばタモキシフェン(tamoxifen)、フィナステリド(finasteride)またはＬＨＲＨアンタゴニスト。この態様の１観点において、本発明の化合物は、シスプラチン、ドキソルビシン、タキソール(taxol)、タキソテール(taxotere)およびマイトマイシンＣからなる群から選択される細胞増殖抑制化合物と共投与される。より特定の観点において、細胞増殖抑制化合物はドキソルビシンである。
【０１７４】
[0049]  併用療法は、これらの療法剤を逐次投与すること、すなわちそれぞれの療法剤を異なる時点で投与すること、およびこれらの療法剤または少なくとも２種類の療法剤を実質的に同時に投与することを含むものとする。実質的な同時投与は、たとえば固定比率の各療法剤を含む単一剤形、または複数の、各療法剤についての単一剤形を、対象に投与することにより達成できる。各療法剤の逐次投与または実質的に同時の投与は、いずれか適切な経路により行なうことができ、これには経口経路、静脈内経路、筋肉内経路、および粘膜組織を通した直接吸収が含まれるが、これらに限定されない。これらの療法剤を同一経路または異なる経路により投与することができる。たとえば、選択した組合わせのうちの第１療法剤を静脈内経路で投与し、一方、その組合わせのうちの他の療法剤を経口投与することができる。あるいは、たとえばすべての療法剤を経口投与してもよく、またはすべての療法剤を静脈内注射により投与してもよい。併用療法には、前記の療法剤をさらに他の生物活性成分および非薬物療法（たとえば、外科処置または放射線処置）との組合わせで投与することもを含めることができる。併用療法がさらに非薬物処置を含む場合、その非薬物処置は、それらの療法剤と非薬物処置の組合わせの協同作用(co-action)から有益な効果が達成される限り、いずれか適切な時点で実施できる。たとえば、適宜な例では、非薬物処置を、おそらく数日間、さらには数週間、療法剤の投与から時間的に離した場合にも、なお有益な効果が達成される。
【０１７５】
ＩＩＩ．医薬組成物および投薬
[0050]  本発明はまた、療法有効量の１種類以上の式Ｉの大環状化合物を１種類以上の医薬的に許容できるキャリヤー（添加剤）および／または希釈剤、ならびに場合により１種類以上の追加の前記療法剤と一緒に配合したものを含む、医薬的に許容できる組成物を提供する。以下に詳細に記載するように、本発明の医薬組成物は固体または液体の形態で投与するために特別に配合でき、それには下記に適合させたものが含まれる：（１）経口投与、たとえば飲薬（水性または非水性の液剤または懸濁液剤）、錠剤、たとえば口腔、舌下および全身吸収を目標としたもの、ボーラス剤、散剤、顆粒剤、舌に適用するためのペースト剤；（２）非経口投与、たとえば皮下、筋肉内、静脈内または硬膜外注射によるもの、たとえば無菌の液剤もしくは懸濁液剤、または持続放出配合物；（３）局所適用、たとえばクリーム剤、軟膏剤、または皮膚に適用する制御放出パッチもしくはスプレー剤；（４）膣内または直腸内、たとえばペッサリー、クリーム剤または発泡剤；（５）舌下；（６）眼内；（７）経皮；あるいは（８）鼻内。
【０１７６】
[0051]  “医薬的に許容できる”という句は、本明細書において、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症なしに、妥当な損益比との釣合いで、ヒトおよび動物の組織と接触させて使用するのに適した化合物、材料、組成物および／または剤形を表わすために用いられる。
【０１７７】
[0052]  本明細書中で用いる“医薬的に許容できるキャリヤー”という句は、医薬的に許容できる材料、組成物またはビヒクル、たとえば液状または固体状の増量剤、希釈剤、賦形剤、加工助剤（たとえば、滑沢剤、タルク  ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムもしくはステアリン酸亜鉛、またはステアリン酸）、または溶剤  封入剤であって、対象化合物をある臓器または身体部分から他の臓器または身体部分へ運搬または輸送するのに関与するものを意味する。各キャリヤーは、配合物の他の成分と適合性でありかつ患者に損傷を与えないという意味で“許容できる”ものでなければならない。医薬的に許容できるキャリヤーとして使用できる材料の若干例には下記のものが含まれる：（１）糖類、たとえば乳糖、グルコースおよびショ糖；（２）デンプン、たとえばトウモロコシデンプンおよびバレイショデンプン；（３）セルロースおよびそれの誘導体、たとえばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；（４）粉末状トラガント；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）賦形剤、たとえばカカオ脂および坐剤ろう；（９）油類、たとえばラッカセイ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油；（１０）グリコール類、たとえばプロピレングリコール；（１１）ポリオール類、たとえばグリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール；（１２）エステル類、たとえばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；（１３）寒天；（１４）緩衝剤、たとえば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質を含まない水；（１７）等張塩類溶液；（１８）リンガー液；（１９）エチルアルコール；（２０）ｐＨ緩衝液；（２１）ポリエステル類、多糖類および／またはポリアンヒドリド類；ならびに（２２）医薬配合物に用いられる他の無毒性適合性物質。
【０１７８】
[0053]  湿潤剤、乳化剤および滑沢剤、たとえばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、矯味矯臭剤および香料、保存剤、ならびに抗酸化剤が組成物中に存在してもよい。
【０１７９】
[0054]  医薬的に許容できる抗酸化剤の例には下記のものが含まれる：（１）水溶性抗酸化剤、たとえばアスコルビン酸、塩酸システイン、硫酸水素ナトリウム、重亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど；（２）油溶性抗酸化剤、たとえばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロールなど；および（３）金属キレート化剤、たとえばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸など。
【０１８０】
[0055]  本発明の配合物には、経口、鼻内、局所（口腔および舌下を含む）、直腸、膣および／または非経口投与に適したものが含まれる。配合物は好都合には単位剤形で提供でき、医薬技術分野で周知のいずれかの方法により調製できる。キャリヤー材料と組み合わせて単一剤形を調製できる有効成分の量は、処置されるホスト、個々の投与方式に応じて変動するであろう。キャリヤー材料と組み合わせて単一剤形を調製できる有効成分の量は、一般に、療法効果を生じる化合物量であろう。一般に１００パーセントのうち、この量は約０．１パーセントから約９９パーセントまで、好ましくは約５パーセントから約７０パーセントまで、最も好ましくは約１０パーセントから約３０パーセントまでの有効成分の範囲であろう。
【０１８１】
[0056]  特定の態様において、本発明の配合物は、シクロデキストリン、セルロース、リポソーム、ミセル形成剤、たとえば胆汁酸、ならびにポリマー状キャリヤー、たとえばポリエステル類およびポリアンヒドリド類からなる群から選択される賦形剤；ならびに本発明の化合物を含む。特定の態様において、上記の配合物は本発明の化合物を経口による生物学的利用が可能になるようにする。
【０１８２】
[0057]  これらの配合物または組成物を調製する方法は、本発明の化合物をキャリヤーおよび場合により１種類以上の補助成分と混和する工程を含む。一般に、配合物は本発明の化合物を液体キャリヤーもしくは微粉砕した固体キャリヤーまたは両方と均一かつ密に混和し、次いで必要ならば生成物を成形することにより調製される。
【０１８３】
[0058]  経口投与に適した本発明の配合物は、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、トローチ剤（着香した基剤、通常はショ糖およびアラビアゴムまたはトラガントを使用）、散剤、顆粒剤の形態で、または水性もしくは非水性の液体中における液剤もしくは懸濁液剤として、または水中油型もしくは油中水型のエマルジョンとして、またはエリキシル剤もしくはシロップ剤として、または香錠（不活性基剤、たとえばゼラチンおよびグリセリン、またはショ糖およびアラビアゴムを使用）および／またはマウスウォッシュなどとしての形態であってもよく、それぞれ前決定量の本発明化合物を有効成分として含有する。本発明の化合物をボーラス剤、舐剤またはペースト剤として投与することもできる。
【０１８４】
[0059]  経口投与用の本発明の固体剤形（カプセル剤、錠剤、丸剤、糖衣丸、散剤、顆粒剤、トローチ剤など）においては、有効成分を１種類以上の医薬的に許容できるキャリヤー、たとえばクエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム、および／または下記のいずれかと混合する：（１）充填剤または増量剤、たとえばデンプン、乳糖、ショ糖、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸；（２）結合剤、たとえばカルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖および／またはアラビアゴム；（３）保湿剤、たとえばグリセロール；（４）崩壊剤、たとえば寒天、炭酸カルシウム、バレイショもしくはタピオカのデンプン、アルギン酸、ある種のシリケート類、および炭酸ナトリウム；（５）溶解遅延剤、たとえばパラフィン；（６）吸収促進剤、たとえば第四級アンモニウム化合物、および界面活性剤、たとえばポロキサマーおよびラウリル硫酸ナトリウム；（７）湿潤剤、たとえばエチルアルコール、モノステアリン酸グリセロール、および非イオン界面活性剤；（８）吸収剤、たとえばカオリンおよびベントナイトクレー；（９）滑沢剤、たとえばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸、およびその混合物；（１０）着色剤；ならびに（１１）制御放出剤、たとえばクロスポビドンまたはエチルセルロース。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、医薬組成物は緩衝剤を含有することもできる。同様なタイプの固体組成物を、たとえば乳糖(lactoseまたはmilk sugar)および高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤の使用により、ソフトおよびハードシェルゼラチンカプセルの充填物としても使用できる。
【０１８５】
[0060]  錠剤は、場合により１種類以上の補助成分と共に圧縮または成形することにより作成できる。圧縮錠は、結合剤（たとえば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、保存剤、崩壊剤（たとえば、グリコール酸デンプンナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性剤または分散剤を用いて製造できる。成形錠は、不活性液体希釈剤で湿潤させた粉末状化合物の混合物を適切な機械で成形することにより作成できる。
【０１８６】
[0061]  本発明の医薬組成物の錠剤および他の固体剤形、たとえば、糖衣丸、カプセル剤、丸剤および顆粒剤は、場合により割線を施すことができ、あるいはコーティングおよびシェル、たとえば腸溶コーティングおよび医薬配合技術分野で周知である他のコーティングを備えたものとして製造できる。それらは、たとえば希望する放出プロフィールを得るための種々の割合のヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／またはマイクロスフェアを用いて、含まれる有効成分の徐放または制御放出が得られるように配合することもできる。それらを迅速放出用に配合することができる；たとえば凍結乾燥したもの。それらを、たとえば細菌捕獲フィルターによる濾過により、または無菌固体組成物の形の殺菌剤を含有させることにより殺菌し、それを使用直前に無菌水または他のいずれかの注射用媒体に溶解することができる。これらの組成物は、場合により不透明化剤を含有してもよく、また有効成分（単数または複数）を専らまたは優先的に消化管の特定部分で、場合により遅延様式で放出する組成のものであってもよい。使用できる埋込み組成物の例は、ポリマー物質およびろうを含有する。有効成分は、適切ならば１種類以上の前記賦形剤を用いてマイクロカプセル化された形態であってもよい。
【０１８７】
[0062]  本発明の化合物を経口投与するための液体剤形には、医薬的に許容できるエマルジョン、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁液剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。液体剤形は、有効成分のほかに、当技術分野で一般に用いられる不活性希釈剤、たとえば水または他の溶剤、可溶化剤および乳化剤、たとえば下記のものを含有することができる：エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油類（特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにその混合物。
【０１８８】
[0063]  経口用組成物は、不活性希釈剤のほかに、佐剤、たとえば湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、矯味矯臭剤、着色剤、香料および保存剤を含有することもできる。
【０１８９】
[0064]  懸濁液剤は、有効化合物のほかに、懸濁化剤、たとえばエトキシル化イソステアリルアルコール類、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天およびトラガント、ならびにその混合物を含有することができる。
【０１９０】
[0065]  直腸または膣に投与するための本発明の医薬組成物の配合物は坐剤として提供することができ、それらは１種類以上の本発明化合物を、室温では固体であるが体温では液体であり、したがって直腸または膣腔内で融解して有効化合物を放出する、１種類以上の適切な非刺激性の賦形剤またはキャリヤー（たとえば、カカオ脂、ポリエチレングリコール、坐剤ろうまたはサリチレートを含む）と混合することにより製造できる。
【０１９１】
[0066]  膣投与に適した本発明の配合物には、適切であることが当技術分野で知られているキャリヤーを含有するペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、発泡剤またはスプレー配合物も含まれる。
【０１９２】
[0067]  本発明の化合物を局所または経皮投与するための剤形には、散剤、スプレー剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、液剤、パッチ剤および吸入剤が含まれる。有効化合物を、無菌条件下で、医薬的に許容できるキャリヤーと、および必要な場合があるいずれかの保存剤、緩衝剤または噴射剤と混合することができる。
【０１９３】
[0068]  軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤およびゲル剤は、本発明の有効化合物のほかに、賦形剤、たとえば動物性および植物性の脂肪、油、ろう、パラフィン、デンプン、トラガント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはその混合物を含有することができる。
【０１９４】
[0069]  散剤およびスプレー剤は、本発明の化合物のほかに、賦形剤、たとえば乳糖、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物を含有することができる。スプレー剤はさらに、慣用される噴射剤、たとえばクロロフルオロハイドロカーボン（フロン）、ならびに揮発性の非置換炭化水素、たとえばブタンおよびプロパンを含有することができる。
【０１９５】
[0070]  経皮パッチは、身体への本発明化合物の制御送達をもたらすという付加された利点をもつ。そのような剤形は、化合物を適切な媒体に溶解または分散させることにより作成できる。皮膚を通る化合物のフラックスを増大させるために吸収促進剤も使用できる。そのようなフラックスの速度は、速度制御膜を付与するか、あるいは化合物をポリマーマトリックスまたはゲルに分散させることにより制御できる。
【０１９６】
[0071]  眼科用の配合物、眼軟膏剤、散剤、液剤なども本発明の範囲に含まれるものとする。
【０１９７】
[0072]  非経口投与に適した本発明の医薬組成物は、１種類以上の本発明化合物を１種類以上の医薬的に許容できる無菌等張の水性または非水性の溶液、分散液、懸濁液もしくはエマルジョンとの組合わせで含み、あるいは使用直前に再構成して無菌の注射用液剤または分散液剤にすることができる無菌粉末であり、それらは糖類、アルコール類、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、配合物を対象レシピエントの血液と等張にする溶質、または懸濁化剤もしくは増粘剤を含有することができる。
【０１９８】
[0073]  本発明の医薬組成物中に使用できる適切な水性または非水性キャリヤーの例には、水、エタノール、ポリオール類（たとえば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、およびその適切な混合物、植物油、たとえばオリーブ油、ならびに注射用有機エステル、たとえばオレイン酸エチルが含まれる。たとえばレシチンなどのコーティング剤の使用により、分散液剤の場合は要求される粒度の維持により、また界面活性剤の使用により、適正な流動性を維持できる。
【０１９９】
[0074]  これらの組成物は、佐剤、たとえば保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤を含有することもできる。対象化合物に対する微生物の作用の防止は、種々の抗細菌剤および抗真菌剤、たとえばパラベン、クロロブタノール、フェノール  ソルビン酸などを含有させることにより保証できる。等張化剤、たとえば糖類、塩化ナトリウムなどを組成物に含有させるのが望ましい場合もある。さらに、注射用医薬剤形の持続吸収は、吸収を遅延させる作用剤、たとえばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを含有させることによりもたらすことができる。
【０２００】
[0075]  ある場合には、薬物の作用を持続させるために、皮下または筋肉内注射からの薬物吸収速度を低下させることが望ましい。これは、水溶性の低い結晶質または非晶質物質の懸濁液剤の使用により達成できる。その際、薬物の吸収速度はそれの溶解速度に依存し、溶解速度は結晶サイズおよび結晶形態に依存する可能性がある。あるいは、非経口投与剤形の遅延吸収は、薬物を油性ビヒクルに溶解または懸濁することにより達成できる。
【０２０１】
[0076]  注射用デポー剤形は、対象化合物が生分解性ポリマー、たとえばポリラクチド−ポリグリコリドにマイクロカプセル封入されたマトリックスを形成することにより作成される。薬物とポリマーの比、および使用する特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出速度を制御できる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（アンヒドリド）が含まれる。注射用デポー配合物は、薬物を身体組織と適合性であるリポソームまたはマイクロエマルジョン中に捕捉することによっても調製できる。
【０２０２】
[0077]  本発明の化合物を医薬としてヒトおよび動物に投与する場合、それらをそのままで、またはたとえば０．１〜９９％（より好ましくは、１０〜３０％）の有効成分を医薬的に許容できるキャリヤーと組合わせて含有する医薬組成物として投与することができる。
【０２０３】
[0078]  選択した投与経路に関係なく、本発明の化合物（適切な水和形で使用できる）および／または本発明の医薬組成物を、当業者に既知の一般法により配合して医薬的に許容できる剤形にする。
【０２０４】
[0079]  本発明の医薬組成物中の有効成分の実際の投与レベルは、個々の患者、組成物、および投与様式について、その患者に対して毒性のない状態で希望する療法応答を達成するのに有効な有効成分量が得られるように変更できる。
【０２０５】
[0080]  選択する投与レベルは、下記を含むさまざまな要因に依存するであろう：使用する特定の本発明化合物またはそのエステル、塩もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、使用する特定の化合物の排出または代謝の速度、吸収の速度および程度、処置の期間、使用する特定の化合物と併用する他の薬物、化合物および／または物質、処置される患者の年齢、性別、体重、状態、全般的健康状態および以前の病歴、ならびに医療分野で周知のこれらに類する要因。
【０２０６】
[0081]  この分野の通常の技術をもつ医師または獣医は、必要な医薬組成物の有効量を容易に決定および処方することができる。たとえば、医師または獣医は、医薬組成物中に使用する本発明化合物の用量を、希望する療法効果を達成するために要求されるものより低いレベルで開始し、希望する効果が達成されるまで徐々に投与量を増加させることができる。
【０２０７】
[0082]  一般に、本発明化合物の適切な１日量は、療法効果を生じるのに有効な最低用量の化合物量であろう。そのような有効用量は、一般に前記の要因に依存するであろう。一般に、ある患者についての本発明化合物の経口、静脈内、脳室内および皮下用量は、１日当たり約０．０１から約５０ｍｇ／体重ｋｇまでの範囲であろう。
【０２０８】
[0083]  所望により、有効化合物の有効１日量を、その日全体において適宜な間隔で分けて投与される２、３、４、５、６またはそれ以上の小用量で、場合により単位剤形で投与することができる。本発明の特定の観点において、投与量は１日当たり投与されるものである。
【０２０９】
[0084]  本発明の化合物を単独で投与することができるが、その化合物を医薬配合物（組成物）として投与することが好ましい。
【０２１０】
ＩＶ．定義
[0085]  本発明の理解を容易にするために、多数の用語および句を以下に定義する。
【０２１１】
[0086]  用語“アルキル”は、技術分野で認識されており、飽和直鎖または分枝鎖炭化水素、たとえば炭素原子１〜１２、１〜１０、または１〜６個の直鎖基または分枝鎖基、すなわち本明細書中でそれぞれＣ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、およびＣ１−Ｃ６アルキルと呼ぶものを表わす。代表的なアルキル基には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、２−メチル−１−プロピル、２−メチル−２−プロピル、２−メチル−１−ブチル、３−メチル−１−ブチル、２−メチル−３−ブチル、２，２−ジメチル−１−プロピル、２−メチル−１−ペンチル、３−メチル−１−ペンチル、４−メチル−１−ペンチル、２−メチル−２−ペンチル、３−メチル−２−ペンチル、４−メチル−２−ペンチル、２，２−ジメチル−１−ブチル、３，３−ジメチル−１−ブチル、２−エチル−１−ブチル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなど。
【０２１２】
[0087]  用語“シクロアルキル”は、技術分野で認識されており、シクロアルカンから誘導される、炭素原子３〜１０、３〜８、４〜８、または４〜６個の一価飽和の環式、二環式または架橋環式（たとえば、アダマンチル）炭化水素基、すなわち本明細書中でたとえば“Ｃ４−８シクロアルキル”と呼ぶものを表わす。代表的なシクロアルキル基には、シクロヘキサン、シクロペンタン、シクロブタン、およびシクロプロパンが含まれるが、これらに限定されない。
【０２１３】
[0088]  用語“置換された”は、官能基を含む部分の水素原子の置き換えを表わす。別途指示しない限り、“置換されていてもよい”基はその基の置換可能な各位置に適切な置換基をもつことができ、いずれか特定の構造中の１より多い位置を、特定した群から選択される１より多い置換基で置換できる場合、その置換基は各位置において同一でも異なってもよい。本発明において考慮する置換基の組合わせは、好ましくは結果的に安定な、または化学的に可能な化合物を形成するものである。本明細書中で用いる用語“安定な”は、それらの製造、検出、および特定の態様においてはそれらの回収、精製、ならびに本明細書に開示する目的のうち１以上のための使用を可能にする条件におかれた際に、実質的に変化しない化合物を表わす。
【０２１４】
[0089]  “置換されていてもよい”基の置換可能な炭素原子（たとえば、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、または炭素環、アリール、複素環もしくはヘテロアリール上の炭素原子）上の適切な一価置換基は、独立して下記のものである：ハロゲン; -(CH2)0-4R゜; -(CH2)0-4OR゜; -O(CH2)0-4C(O)OR゜; -(CH2)0-4CH(OR゜)2; -(CH2)0-4SR゜; -(CH2)0-4Ph（R゜で置換されていてもよい）; -(CH2)0-4O(CH2)0-1Ph（R゜で置換されていてもよい）; -CH=CHPh（R°で置換されていてもよい）；
【０２１５】
【化２７】
2015504425.tif 000098
【０２１６】
-(C1-4 直鎖または分枝鎖アルキレン)O-N(R゜)2;または-(C1-4 直鎖または分枝鎖アルキレン)C(O)O-N(R゜)2；これらにおいて、Ｒ゜はそれぞれ下記に定めるように置換されていてもよく、独立して水素、Ｃ１−６脂肪族、-CH2Ph、 -O(CH2)0-1Ph、または０〜４個のヘテロ原子（独立して窒素、酸素もしくは硫黄から選択される）をもつ５〜６員の飽和、部分不飽和もしくはアリール環であり、あるいは上記の定義ではあるけれども、２つの独立して存在するＲ゜がそれらの間に介在する原子（単数または複数）と一緒になって、０〜４個のヘテロ原子（独立して窒素、酸素もしくは硫黄から選択される）をもつ３〜１２員の飽和、部分不飽和またはアリール単環式環または二環式環を形成しており、それらは下記に定めるように置換されていてもよい。
【０２１７】
[0090]  Ｒ゜（または２つの独立して存在するＲ゜がそれらの間に介在する原子と一緒になることにより形成した環）上の適切な一価置換基は、独立して下記のものである：ハロゲン，
【０２１８】
【化２８】
2015504425.tif 000099
【０２１９】
-(C1-4 直鎖または分枝鎖アルキレン)C(O)OR●、またはSSR●；これらにおいて、Ｒ●はそれぞれ置換されていないか、あるいは“ハロ”が前置された場合は１個以上のハロゲンでのみ置換されており、独立してＣ１−４脂肪族、-CH2Ph、 -O(CH2)0-1Ph、または０〜４個のヘテロ原子（独立して窒素、酸素もしくは硫黄から選択される）をもつ５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環から選択される。Ｒ゜の飽和炭素原子上の適切な二価置換基には、＝Ｏおよび＝Ｓが含まれる。
【０２２０】
[0091]  “置換されていてもよい”基の飽和炭素原子上の適切な二価置換基には、下記のものが含まれる：=O, =S, =NNR*2, =NNHC(O)R*, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)2R*, =NR*, =NOR*, -O(C(R*2))2-3O-, または-S(C(R*2))2-3S-；これらにおいて、独立して存在するＲ＊はそれぞれ水素、Ｃ１−６脂肪族（以下に定めるように置換されていてもよい）、または０〜４個のヘテロ原子（独立して窒素、酸素もしくは硫黄から選択される）をもつ置換されていない５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環から選択される。“置換されていてもよい”基の置換可能な隣接炭素類に結合する適切な二価置換基には、-O(CR*2)2-3O-が含まれ、その際、独立して存在するＲ＊はそれぞれ水素、Ｃ１−６脂肪族（以下に定めるように置換されていてもよい）、または０〜４個のヘテロ原子（独立して窒素、酸素もしくは硫黄から選択される）をもつ置換されていない５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環から選択される。
【０２２１】
[0092]  Ｒ＊の脂肪族基上の適切な置換基には、下記のものが含まれる：ハロゲン, -R●, -(ハロR●), -OH, -OR●, -O(ハロR●), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR●, -NH2, -NHR●, -NR●2, または-NO2；これらにおいて、Ｒ●はそれぞれ置換されていないか、あるいは“ハロ”が前置された場合は１個以上のハロゲンでのみ置換されており、独立してＣ１−４脂肪族、-CH2Ph、 -O(CH2)0-1Ph、または０〜４個のヘテロ原子（独立して窒素、酸素もしくは硫黄から選択される）をもつ５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環である。
【０２２２】
[0093]  “置換されていてもよい”基の置換可能な窒素上の適切な置換基には、下記のものが含まれる：-R†, -NR†2, -C(O)R†, -C(O)OR†, -C(O)C(O)R†, -C(O)CH2C(O)R†, -S(O)2R†, -S(O)2NR†2, -C(S)NR†2, -C(NH)NR†2, または-N(R†)S(O)2R†；これらにおいて、R†はそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６脂肪族（以下に定めるように置換されていてもよい）、置換されていない−ＯＰｈ、または０〜４個のヘテロ原子（独立して窒素、酸素もしくは硫黄から選択される）をもつ置換されていない５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環であり、あるいは上記の定義ではあるけれども、２つの独立して存在するＲ†がそれらの間に介在する原子（単数または複数）と一緒になって、０〜４個のヘテロ原子（独立して窒素、酸素もしくは硫黄から選択される）をもつ置換されていない３〜１２員の飽和、部分不飽和またはアリール単環式環または二環式環を形成しており、それらは以下に定めるように置換されていてもよい。
【０２２３】
[00100]  Ｒ†の脂肪族基上の適切な置換基は、独立して下記のものである：ハロゲン, -R●, -(ハロR●), -OH, -OR●, -O(ハロR●), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR●, -NH2, -NHR●, -NR●2, または-NO2；これらにおいて、Ｒ●はそれぞれ置換されていないか、あるいは“ハロ”が前置された場合は１個以上のハロゲンでのみ置換されており、独立してＣ１−４脂肪族、-CH2Ph、 -O(CH2)0-1Ph、または０〜４個のヘテロ原子（独立して窒素、酸素もしくは硫黄から選択される）をもつ５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環である。
【０２２４】
[00101]  用語“部分(moiety)”は、本発明の化合物の一部を表わし、少なくとも１個の水素原子および少なくとも１個の炭素原子を含む。
【０２２５】
[00102]  用語“アルキレン”は、アルキル基の二価ラジカル(diradical)を表わす。
【０２２６】
[00103]  用語“ハロアルキル”は、少なくとも１個のハロゲン原子で置換されたアルキル基を表わす。たとえば、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３など。
【０２２７】
[00104]  用語“アラルキル”は、アリール基で置換されたアルキル基を表わす。
【０２２８】
[00105]  用語“ヘテロアラルキル”は、ヘテロアリール基で置換されたアルキル基を表わす。
【０２２９】
[00106]  用語“アルケニル”および“アルキニル”は当技術分野で認識されており、前記のアルキルと同様な長さであるけれどもそれぞれ少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む不飽和脂肪族基を表わす。
【０２３０】
[00107]  用語“アリール”は、当技術分野で認識されており、炭素環式芳香族基を表わす。代表的なアリール基には、フェニル、ナフチル、アントラセニルなどが含まれる。用語“アリール”には、２以上の炭素環式環をもつ多環式環系であって２個以上の炭素が２つの接合した環に共通であるもの（それらの環は“縮合環”である）も含まれ、それらにおいて少なくとも１つの環は芳香族であり、たとえば他の環はシクロアルキル、シクロアルケニルおよび/またはアリールであってもよい。
【０２３１】
[00108]  用語“アリーレン”は、アリール基の二価ラジカルを表わす。
【０２３２】
[00109]  用語“ヘテロアリール”は、当技術分野で認識されており、少なくとも１個の環ヘテロ原子を含む芳香族基を表わす。特定の例では、ヘテロアリール基は１、２、３または４個の環ヘテロ原子を含む。ヘテロアリール基の代表例には、ピロリル、フラニル、チオフェニル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピラジニル、ピリダジニルおよびピリミジニルなどが含まれる。用語“ヘテロアリール”には、２以上の環をもつ多環式環系であって２個以上の炭素が２つの接合した環に共通であるもの（それらの環は“縮合環”である）も含まれ、それらにおいて少なくとも１つの環はヘテロ芳香族であり、たとえば他の環はシクロアルキル、シクロアルケニルおよび/またはアリールであってもよい。
【０２３３】
[00110]  用語“飽和複素環”は、少なくとも１個の環ヘテロ原子を含む飽和環式基を表わす。ヘテロ原子は互いに同一でも異なってもよい。ヘテロ原子の例には、窒素、酸素および硫黄が含まれるが、これらに限定されない。酸素を含む飽和複素環の例には、テトラヒドロフランおよびテトラヒドロ−２Ｈ−ピランが含まれるが、これらに限定されない。窒素を含む飽和複素環の例には、ピロリジンおよびピペリジンが含まれるが、これらに限定されない。
【０２３４】
[00111]  用語“アミン”および“アミノ”は、当技術分野で認識されており、置換されいてないアミンおよび置換されたアミンの両方、たとえば一般式
【０２３５】
【化２９】
2015504425.tif 000100
【０２３６】
により表わすことができるものを表わし、式中のＲ６０は独立して水素またはアルキルを表わす。
【０２３７】
[00112]  用語“アルコキシル”および“アルコキシ”は、当技術分野で認識されており、前記に定義したアルキル基に酸素ラジカルが結合したものを表わす。代表的なアルコキシル基には、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが含まれる。“エーテル”は、２つの炭化水素が酸素により共有結合したものである。用語“アルケニルオキシ”は、当技術分野で認識されており、前記に定義したアルケニル基に酸素ラジカルが結合したものを表わす。
【０２３８】
[00113]  本発明のある化合物は、特定の幾何異性体または立体異性体の形態で存在する可能性がある。さらに、本発明のポリマーは光学活性である可能性もある。本発明はそのような化合物をすべて本発明の範囲に含まれるものとして考慮し、それにはシス−およびトランス−異性体、Ｒ−およびＳ−鏡像異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）−異性体、（Ｌ）−異性体、それのラセミ混合物、およびそれの他の混合物が含まれる。追加の不斉炭素原子が置換基、たとえばアルキル基などに存在する可能性がある。そのような異性体およびその混合物はすべて本発明に含まれるものとする。
【０２３９】
[00114]  たとえば、本発明の化合物の特定の鏡像異性体を希望する場合、それは不斉合成により製造でき、あるいはキラル助剤で誘導体化することにより製造でき、この場合は得られるジアステレオマー混合物を分離し、助剤の基を開裂させると純粋な希望する鏡像異性体が得られる。あるいは、分子が塩基性官能基、たとえばアミノ、または酸性官能基、たとえばカルボキシルを含む場合、光学活性である適宜な酸または塩基とのジアステレオマー塩を形成し、続いてこうして形成されたジアステレオマーを当技術分野で周知の分別結晶化またはクロマトグラフィー手段により分割し、その後、純粋な鏡像異性体を回収する。
【０２４０】
[00115]  別途指示しない限り、開示した化合物が立体化学的特性を特定せずに名称を挙げられ、または構造式により示され、それが１以上のキラル中心をもつ場合、それは可能性があるその化合物のすべての立体異性体およびその鏡像異性体混合物を表わすと理解される。
【０２４１】
[00116]  本明細書中で用いる用語“患者”は、本発明の方法により処置すべき生物を表わす。そのような生物には、好ましくは哺乳動物（たとえば、ネズミ、サル、ウマ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコなど）が含まれるがこれらに限定されず、最も好ましくはヒトが含まれる。
【０２４２】
[00117]  本明細書中で用いる用語“有効量”は、有益なまたは希望する結果を生じるのに十分な化合物（たとえば、本発明の化合物）量を表わす。有効量は１回以上の投与、適用または投薬で投与することができ、特定の配合または投与経路に限定されないものとする。本明細書中で用いる用語“処置”には、状態、疾患、障害などの改善、たとえば軽減、低減、調節、回復または排除、あるいはその症状の回復をもたらす、何らかの作用が含まれる。
【０２４３】
[00118]  本明細書中で用いる用語“医薬組成物”は、有効成分と、組成物をインビボまたはエクスビボでの診断または療法に特に適切なものにする不活性または活性キャリヤーとの組合わせを表わす。
【０２４４】
[00119]  本明細書中で用いる用語“医薬的に許容できる塩”は、本発明化合物の医薬的に許容できるいずれかの塩であって、対象に投与した際に本発明の化合物または活性であるその代謝産物もしくは残基を供給できるものを表わす。当業者に知られているように、本発明化合物の“塩類”は、無機または有機の酸および塩基から誘導できる。酸の例には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、マレイン酸、リン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、コハク酸、トルエン−ｐ−スルホン酸、酒石酸、酢酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、安息香酸、マロン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ベンゼンスルホン酸などが含まれるが、これらに限定されない。他の酸、たとえばシュウ酸自体は医薬的に許容できないが、本発明の化合物およびそれらの医薬的に許容できる酸付加塩を得る際に中間体として有用な塩類の製造に使用できる。
【０２４５】
[00120]  塩基の例には、アルカリ金属（たとえば、ナトリウム）水酸化物、アルカリ土類金属（たとえば、マグネシウム）、水酸化物、アンモニア、および式ＮＷ４＋の化合物（ＷはＣ１−４アルキルである）などが含まれるが、これらに限定されない。
【０２４６】
[00121]  塩類の例には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、フルコヘプタノエート、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パルモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、ウンデカン酸塩などが含まれるが、これらに限定されない。塩の他の例には、本発明化合物のアニオンが適切なカチオン、たとえばＮａ＋、ＮＨ４＋およびＮＷ４＋（ＷはＣ１−４アルキル基である）などと化合したものが含まれる。
【０２４７】
[00122]  療法用として、本発明化合物の塩類は医薬的に許容できると考えられる。しかし、医薬的に許容できない酸および塩基の塩類も、たとえば医薬的に許容できる化合物の製造または精製に際して利用できる。
【実施例】
【０２４８】
[0094]  以上に全般的に記載した本発明は、以下の実施例を参照することによってより容易に理解されるであろう；それらは本発明の特定の観点および態様を説明するためのものにすぎず、本発明を限定するためのものではない。
【０２４９】
実施例１−化合物１２７の合成
[0095]  化合物１２７を、標準的なＦｍｏｃ化学により、Ｐｒｏｔｅｉｎ  ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＰｒｅｌｕｄｅペプチド合成装置（“Ｐｒｅｌｕｄｅ”）（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，米国アリゾナ州ツーソン）を用いて製造した。
【０２５０】
【化３０】
2015504425.tif 000101
【０２５１】
[0096]  ＤＣＭ（８ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｌ−チロシンプロパルギルエーテル（７３；０．５ｍｍｏｌ，２２０ｍｇ）およびＤＩＰＥＡ（１０当量，５ｍｍｏｌ，６４６ｍｇ，０．８７３ｍＬ）を、Ｂｉｏｒａｄ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）分取カラム内の２−クロロトリチル樹脂（１０；Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，１．５８ｍｍｏｌ／ｇ，３当量，１．５ｍｍｏｌ，０．９５ｇ）に添加した。樹脂を２時間揺動し、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）を添加し、続いてさらに３０分間揺動した。溶媒を濾過により除去し、固体樹脂７４をＰｒｅｌｕｄｅ反応器へ移した。
【０２５２】
【化３１】
2015504425.tif 000102
【０２５３】
[0097]  樹脂７４（０．５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で膨潤させ、穏やかなＮ２流で３０秒毎に混合した。溶媒を排除し、樹脂をＤＭＦ中２％ＤＢＵ，２％ピペリジン溶液（洗浄当たり１５ｍＬおよび５分）で２回洗浄し、穏やかなＮ２流で３０秒毎に混合することにより、Ｆｍｏｃ基を樹脂に支持された構築ブロックから除去した。樹脂をＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で６回洗浄した。（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（７５；ＤＭＦ中の０．１Ｍ溶液，１５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）を次いで添加し、続いてＨＡＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ溶液，７．５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ＤＭＦ中１．０Ｍ，２．５ｍＬ，５当量，２．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２５４】
【化３２】
2015504425.tif 000103
【０２５５】
[0098]  樹脂をＤＭＦ中２％ＤＢＵ，２％ピペリジン溶液（洗浄当たり１５ｍＬおよび５分）で２回洗浄し、穏やかなＮ２流で３０秒毎に混合することにより、Ｆｍｏｃ基を樹脂に支持された構築ブロック７６から除去した。樹脂をＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で６回洗浄した。（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−アジドピロリジン−２−カルボン酸（７７；ＤＭＦ中の０．１Ｍ溶液，１５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＨＡＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ溶液，７．５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ＤＭＦ中１．０Ｍ，２．５ｍＬ，５当量，２．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２５６】
【化３３】
2015504425.tif 000104
【０２５７】
[0099]  樹脂をＤＭＦ中２％ＤＢＵ，２％ピペリジン溶液（洗浄当たり１５ｍＬおよび５分）で２回洗浄し、穏やかなＮ２流で３０秒毎に混合することにより、Ｆｍｏｃ基を樹脂に支持された構築ブロック７８から除去した。樹脂をＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で６回洗浄した。（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３，３−ジメチルブタン酸（７９；ＤＭＦ中の０．１Ｍ溶液，１５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＨＡＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ溶液，７．５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ＤＭＦ中１．０Ｍ，２．５ｍＬ，５当量，２．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により５時間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２５８】
【化３４】
2015504425.tif 000105
【０２５９】
[00100]  樹脂をＤＭＦ中２％ＤＢＵ，２％ピペリジン溶液（洗浄当たり１５ｍＬおよび５分）で２回洗浄し、穏やかなＮ２流で３０秒毎に混合することにより、Ｆｍｏｃ基を樹脂に支持された構築ブロック８０から除去した。樹脂をＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で６回洗浄した。（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパン酸（８１；ＤＭＦ中の０．１Ｍ溶液，１５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＨＡＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ溶液，７．５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ＤＭＦ中１．０Ｍ，２．５ｍＬ，５当量，２．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２６０】
【化３５】
2015504425.tif 000106
【０２６１】
[00101]  （Ｚ）−２，２，６，６−テトラメチル−５−オキソヘプタ−３−エン−３−オレイン酸銅（ＩＩ）（０．５当量，０．２５ｍｍｏｌ，１０８ｍｇ）、アスコルビン酸（３当量，１．５ｍｍｏｌ，２６４ｍｇ）、ＤＩＰＥＡ（１０当量，５ｍｍｏｌ，０．９ｍＬ）、２，６−ジメチルピリジン（１０当量，５ｍｍｏｌ，０．６ｍＬ）の、ＤＭＦ（７ｍＬ）およびＴＨＦ（７ｍＬ）中における調製したばかりの溶液を、樹脂８２上の線状ペプチドに添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄して、保護されたダイマー型の大環状化合物８３を得た。対応するモノマー型の大環状化合物８４がこの反応の副産物として製造された。
【０２６２】
【化３６】
2015504425.tif 000107
【０２６３】
[00102]  得られた樹脂結合した環化生成物８３を、ＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬ×６；３０秒）およびＤＣＭ（洗浄当たり１５ｍＬ×６；３０秒）で洗浄し、次いでＤＣＭ中の５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（１０ｍＬ×５分，１０ｍＬ×３０秒，１０ｍＬ×５分，１０ｍＬ×３０秒）で脱保護し、樹脂から開裂させた。このＴＦＡ洗浄はＰｒｅｌｕｄｅで開裂および採集法を用いて自動化された。Ｇｅｎｅｖａｃ  ＥＺ２．２エバポレーター内でランプオフ(lamp off)で低／中ＢＰにおいて、粗反応混合物（１２７を含有）がきわめて粘稠な油または乾燥固体を形成するまで蒸発させることにより溶媒を除去した。
【０２６４】
[00103]  対応するモノマー型の大環状化合物からの化合物１２７の分離は、ＧＸ  ２８１リキッドハンドラー、ＵＶ／ＶＩＳ  １５５検出器（２２０ｎｍおよび２５４ｎｍ）、および３２１ポンプ（Ｇｉｌｓｏｎ，Ｉｎｃ．，米国ワイオミング州ミドルトン）（２０ｍＬ／分で作動）を含むＧｉｌｓｏｎ  ＨＰＬＣで、Ｗａｔｅｒｓ  Ｘｔｅｒｒａ  Ｐｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ８，５ｕｍ，１９×１００ｍｍカラムＰＮ  １８６００１９３５（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，米国マサチュセッツ州ミルフォード）を用いて達成された；５％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）から３５％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）まで増大する溶媒勾配を用い、続いて１００％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）でカラムを迅速フラッシュした。
【０２６５】
[00104]  式Ｉの他のホモダイマー型の大環状化合物は、各工程で適宜なＦｍｏｃ−またはＢｏｃ−保護された構築ブロックに置き換えることにより同様に製造された。
【０２６６】
実施例２−化合物１３５および他の代表的な大環状化合物の合成
[00105]  化合物１３５の線状前駆体を標準的なＦｍｏｃ化学によりＰｒｅｌｕｄｅで構築した。
【０２６７】
【化３７】
2015504425.tif 000108
【０２６８】
[00106]  Ｐｈｅ置換された樹脂８５（Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄し、次いでそれに懸濁し、穏やかなＮ２流で３０秒毎に混合した。（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−アジドピロリジン−２−カルボン酸（７７，ＤＭＦ中の０．１Ｍ溶液，１５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）、続いてＨＡＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ溶液，７．５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ＤＭＦ中１．０Ｍ，２．５ｍＬ，５当量，２．５ｍｍｏｌ）を、樹脂８５（０．５ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂８６をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２６９】
【化３８】
2015504425.tif 000109
【０２７０】
[00107]  樹脂をＤＭＦ中２％ＤＢＵ，２％ピペリジン溶液（洗浄当たり１５ｍＬおよび５分）と２回混合し、その間、穏やかなＮ２流で３０秒毎に混合することにより、Ｆｍｏｃ基を樹脂に支持された構築ブロック８６から除去した。樹脂をＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で６回洗浄した。（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタン酸（８７；ＤＭＦ中の０．１Ｍ溶液，１５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）、続いてＨＡＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ溶液，７．５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ＤＭＦ中１．０Ｍ，２．５ｍＬ，５当量，２．５ｍｍｏｌ）を、樹脂８６（０．５ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により５時間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂８８をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２７１】
【化３９】
2015504425.tif 000110
【０２７２】
[00108]  樹脂をＤＭＦ中２％ＤＢＵ，２％ピペリジン溶液（洗浄当たり１５ｍＬおよび５分）と２回混合し、その間、穏やかなＮ２流で３０秒毎に混合することにより、Ｆｍｏｃ基を樹脂に支持された構築ブロック８８から除去した。樹脂をＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で６回洗浄した。（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパン酸（７９；ＤＭＦ中の０．１Ｍ溶液，１５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）、続いてＨＡＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ溶液，７．５ｍＬ，３当量，１．５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ＤＭＦ中１．０Ｍ，２．５ｍＬ，５当量，２．５ｍｍｏｌ）を、樹脂（０．５ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂８９をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２７３】
【化４０】
2015504425.tif 000111
【０２７４】
[00109]  樹脂８９をＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で６回洗浄した。樹脂をＣＨ２Ｃｌ２（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で６回洗浄し、次いでＣＨ２Ｃｌ２：ＡｃＯＨ：ＣＦ３ＣＨ２ＯＨの混合物（３：１：１，２０ｍＬ）で洗浄した。反応混合物を穏やかな窒素流により２時間撹拌し、続いてＣＨ２Ｃｌ２：ＡｃＯＨ：ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３：１：１，２０ｍＬ）で３０秒間、２回目の洗浄を行なった。これらのＡｃＯＨ洗液を合わせて溶媒を真空中で除去した。生成物９０をＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｓｏｌｅｒａ  １シテスムで精製した；５０ｍＬ／分で作動；Ｂｉｏｔａｇｅ  ｓｎａｐ  ６０ｇ  Ｃ１８カラム（Ｂｉｏｔａｇｅ  ＡＢ，スウェーデン、ウプサラ）で、１５％アセトニトリル／水（０．１％のＤＩＰＥＡを含有）から６０％アセトニトリル／水（０．１％のＤＩＰＥＡを含有）まで増大する溶媒勾配を用い、続いて１００％アセトニトリル（０．１％のＤＩＰＥＡを含有）でカラムを迅速フラッシュした。
【０２７５】
【化４１】
2015504425.tif 000112
【０２７６】
[00110]  （Ｚ）−２，２，６，６−テトラメチル−５−オキソヘプタ−３−エン−３−オレイン酸銅（ＩＩ）（０．５当量，０．０７５ｍｍｏｌ，３２ｍｇ）、アスコルビン酸（３当量，０．４５ｍｍｏｌ，７９ｍｇ）、ＤＩＰＥＡ（１０当量，１．５ｍｍｏｌ，０．１６０ｇ）、２，６−ジメチルピリジン（１０当量，１．５ｍｍｏｌ，０．１９４ｇ）および線状ペプチド前駆体（９０；１当量，０．１５ｍｍｏｌ，６６ｍｇ）の、ＤＭＦ（２ｍＬ）およびＴＨＦ（２ｍＬ）中における調製したばかりの溶液を、Ｆｍｏｃアミノ酸樹脂７４に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂９１をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２７７】
【化４２】
2015504425.tif 000113
【０２７８】
[00111]  プロパルギルアミン（９２；０．０９１ｍＬ，１０当量，１．５ｍｍｏｌ）、続いてＨＡＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ溶液，４．５ｍＬ，６当量，０．９ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ＤＭＦ中１．０Ｍ，１．５ｍＬ，１０当量，１．５ｍｍｏｌ）を、樹脂９１上のペプチド（０．１５ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂９３をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２７９】
【化４３】
2015504425.tif 000114
【０２８０】
[00112]  （Ｚ）−２，２，６，６−テトラメチル−５−オキソヘプタ−３−エン−３−オレイン酸銅（ＩＩ）（０．５当量，０．０７５ｍｍｏｌ，３２ｍｇ）、アスコルビン酸（３当量，０．４５ｍｍｏｌ，７９ｍｇ）、ＤＩＰＥＡ（１０当量，１．５ｍｍｏｌ，０．１６０ｇ）、２，６−ジメチルピリジン（１０当量，１．５ｍｍｏｌ，０．１９４ｇ）および線状ペプチド９４（１当量，０．１５ｍｍｏｌ，６６ｍｇ）の、ＤＭＦ（２ｍＬ）およびＴＨＦ（２ｍＬ）中における調製したばかりの溶液を、線状ペプチド樹脂９３（０．１５ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂９５をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２８１】
【化４４】
2015504425.tif 000115
【０２８２】
[00113]  樹脂をＤＭＦ中２％ＤＢＵ，２％ピペリジン溶液（洗浄当たり１５ｍＬおよび５分）と２回混合し、その間、穏やかなＮ２流で３０秒毎に混合することにより、Ｆｍｏｃ基を樹脂に支持された構築ブロック９５から除去した。樹脂をＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で６回洗浄した。ＨＡＴＵ（ＤＭＦ中の０．２Ｍ溶液，２．２５ｍＬ，３当量，０．４５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ＤＭＦ中１．０Ｍ，１．５ｍＬ，１０当量，２．５ｍｍｏｌ）を樹脂（０．１５ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により３０分間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂９６をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０２８３】
[00114]  得られた樹脂結合した環化生成物９６を、ＤＭＦ（洗浄当たり１５ｍＬ×６；３０秒）およびＣＨ２Ｃｌ２（洗浄当たり１５ｍＬ×６；３０秒）で洗浄し、次いでＣＨ２Ｃｌ２中の５％  ＴＦＡ（１０ｍＬ×５分，１０ｍＬ×３０秒，１０ｍＬ×５分，１０ｍＬ×３０秒）で処理した。このＴＦＡ洗浄はＰｒｅｌｕｄｅで開裂および採集法を用いて自動化された。ＴＦＡ洗液を合わせて、Ｇｅｎｅｖａｃ  ＥＺ２．２エバポレーター内でランプオフ（lamp off）で低／中ＢＰにおいて、粗反応混合物がきわめて粘稠な油または乾燥固体を形成するまで蒸発させることにより溶媒を除去した。
【０２８４】
[00115]  化合物１３５の精製は、ＧＸ  ２８１リキッドハンドラー、ＵＶ／ＶＩＳ  １５５検出器（２２０ｎｍおよび２５４ｎｍ）を含むＧｉｌｓｏｎ  ＨＰＬＣで達成された。３２１ポンプを２０ｍＬ／分で作動させ、Ｗａｔｅｒｓ  Ｘｔｅｒｒａ  Ｐｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ８，５ｕｍ，１９×１００ｍｍカラムＰＮ  １８６００１９３５で、５％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）から３５％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）まで増大する溶媒勾配を用い、続いて１００％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）でカラムを迅速フラッシュした。
【０２８５】
実施例３−化合物１４７、１４８および他の代表的な大環状化合物の合成
【０２８６】
【化４５】
2015504425.tif 000116
【０２８７】
[00116]  化合物１２７（６２ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２ｍＬ，３：１）中における溶液に、トリエチルアミン（２０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）および二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２３ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１５時間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物を飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液（０．５ｍＬ）で摩砕処理した。白色沈殿を順にＨ２Ｏ（０．５ｍＬ）および水（０．５ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥させて、化合物９７を白色固体（６２ｍｇ，８８％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  １７０５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８８】
[00117]  化合物９７（１５ｍｇ，０．００９ｍｍｏｌ）およびＣＤＩ（７ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（０．７ｍＬ）に溶解し、室温で２時間撹拌した。シクロプロピルスルホンアミド（Ａｌｄｒｉｃｈ，１１．４ｍｇ，０．０９４ｍｍｏｌ）の、ＴＨＦ（０．３ｍＬ）およびＤＢＵ（０．０１４ｍＬ，０．０９４ｍｍｏｌ）中における溶液を、次いで添加した。得られた溶液を室温で１２時間撹拌し、次いで真空中で濃縮すると、黄色の油が得られた。ＴＦＡ（１ｍＬ）のＤＣＭ（１ｍＬ）中における溶液をこの油に添加し、得られた混合物を３０分間撹拌した。反応物を次いで真空中で濃縮した。
【０２８９】
[00118]  化合物１４８（２．４ｍｇ，１４％）からの化合物１４７（５．５ｍｇ，３１％）の分離は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＨＰＬＣで達成された；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＡＸＩＡ  ５ｕｍ，２１．２×１００ｎｍカラムで、１０％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）から４５％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）まで増大する溶媒勾配を用い、続いて１００％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）でカラムを迅速フラッシュした。
【０２９０】
実施例４−化合物１４９、１５０および他の代表的な大環状化合物の合成
【０２９１】
【化４６】
2015504425.tif 000117
【０２９２】
[00119]  （Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（９８，Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，８２０ｍｇ，２．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中における溶液に、ＥＤＣ．ＨＣｌ（４９８ｍｇ，２．６ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（３５４ｍｇ，２．６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を０℃で１５分間撹拌し、（Ｓ）−メチル  ２−アミノ−３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）フェニル）プロパノエート（９９，８８５ｍｇ，２．８６ｍｍｏｌ，Hansen, D. W., Pilipauskas, D. J. Org. Chem. 1985, 50, 945-950の記載に従って製造）およびＮ−メチルモルホリン（７８９ｍｇ，７．８９ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を室温にまで高め、３０分間撹拌した。次いで１０％水酸化リチウム水溶液で反応を停止し、酢酸エチルで抽出した。有機層を真空中で濃縮し、生じた残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；８０ｇのカラム；１０−６０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類で溶離）により精製して、表題化合物（１．４２ｇ，９０％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ６０７．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９３】
【化４７】
2015504425.tif 000118
【０２９４】
[00120]  （Ｓ）−メチル  ２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−ナフタレン−２−イル）プロパンアミド）−３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）フェニル）プロパノエート（２００，Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，１．２１ｇ，２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中における溶液に、ＤＣＭ中の３０％  ＴＦＡ（２０ｍＬ）を添加した。得られた溶液を室温で１．５時間撹拌し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で反応を停止し、ＤＣＭで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮すると、２００の遊離アミンが得られ、これをそれ以上精製せずにそのまま用いた。
【０２９５】
[00121]  （２Ｓ，４Ｓ）−４  アジド−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−カルボン酸（２０１，Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，６１５ｍｇ，２．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中における溶液に、ＥＤＣ．ＨＣｌ（４６０ｍｇ，２．４ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１３６ｍｇ，２．４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌した。上記の遊離アミンおよびＮ−メチルモルホリン（６０７ｍｇ，６ｍｍｏｌ）の溶液を次いで添加した。反応混合物を室温にまで高め、１時間撹拌した。次いで１０％水酸化リチウム水溶液で反応を停止し、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；８０ｇのカラム；２０−６０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類で溶離）により精製して、化合物２０２（１．３ｇ，８７％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ７４５．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９６】
【化４８】
2015504425.tif 000119
【０２９７】
[00122]  実施例４の化合物２０２の合成に関するものと同様な方法に従って、化合物２０２（７４５ｍｇ，１ｍｍｏｌ）を化合物２０４に変換し、フラッシュクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；８０ｇのカラム；１０−６０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類で溶離）により精製して、表題化合物（０．７８ｇ，９１％）を白色泡状物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ８５８．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９８】
【化４９】
2015504425.tif 000120
【０２９９】
[00123]  実施例４の化合物２０２の合成に関するものと同様な方法に従って、化合物２０４（８５７ｍｇ，１ｍｍｏｌ）を化合物２０６に変換し、フラッシュクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；８０ｇのカラム；１０−１００％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類で溶離）により精製して、表題化合物（０．８２７ｇ，８３％）を白色泡状物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ９４３．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３００】
【化５０】
2015504425.tif 000121
【０３０１】
（Ｚ）−２，２，６，６−テトラメチル−５−オキソヘプタ−３−エン−３−オレイン酸銅（ＩＩ）（Ａｌｄｒｉｃｈ，０．００２ｍｍｏｌ，１ｍｇ）、アスコルビン酸（０．０１５ｍｍｏｌ，２．５ｍｇ）、ＤＩＰＥＡ（０．０５ｍｍｏｌ，５ｍｇ）、２，６−ジメチルピリジン（０．０５ｍｍｏｌ，６ｍｇ）および線状ペプチド前駆体（２０６，０．０１ｍｍｏｌ，１０ｍｇ）の、ＤＭＦ（１ｍＬ）およびＴＨＦ（１ｍＬ）中における調製したばかりの溶液を、Ｆｍｏｃアミノ酸樹脂７４（１０ｍｇ）に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により１２時間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂２０７をＤＭＦ（３×２ｍＬ）、次いでＤＣＭ（２×３ｍＬ）で洗浄した。
【０３０２】
【化５１−１】
2015504425.tif 000122
【０３０３】
【化５１−２】
2015504425.tif 000123
【０３０４】
[00124]  実施例１の化合物８２の合成に関するものと同様な方法に従って、標準的なＦｍｏｃ化学を用いてＰｒｏｔｅｉｎ  ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＰｒｅｌｕｄｅペプチド合成装置で、樹脂２０７（３０ｍｇ）を樹脂連結したペプチド２１２に変換した。
【０３０５】
【化５２】
2015504425.tif 000124
【０３０６】
[00125]  樹脂２１２に、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）のＴＨＦ（１Ｍ，０．５ｍＬ）中における溶液を添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により１時間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂を順にＴＨＦ（２ｍＬ）およびＤＣＭ（２×３ｍＬ）で洗浄した。ＤＭＦ（１．５ｍＬ）、Ｋ２ＣＯ３（８０ｍｇ）および臭化プロパルギル（０．３ｍＬ，Ａｌｄｒｉｃｈ，トルエン中８０％）を次いで溶液に添加し、得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂２１３を順にＤＭＦ（２×３ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２×３ｍＬ）、ＤＭＦ（２×３ｍＬ）およびＤＣＭ（２×３ｍＬ）で洗浄した。
【０３０７】
【化５３】
2015504425.tif 000125
【０３０８】
[00126]  （Ｚ）−２，２，６，６−テトラメチル−５−オキソヘプタ−３−エン−３−オレイン酸銅（ＩＩ）（０．００４ｍｍｏｌ，２ｍｇ）、アスコルビン酸（０．０３ｍｍｏｌ，５ｍｇ）、ＤＩＰＥＡ（０．１ｍｍｏｌ，１０ｍｇ）、２，６−ジメチルピリジン（０．１ｍｍｏｌ，１２ｍｇ）の、ＤＭＦ（０．８ｍＬ）およびＴＨＦ（０．８ｍＬ）中における調製したばかりの溶液を、樹脂２１３に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により１２時間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂２１４をＤＭＦ（２×３ｍＬ）、次いでＤＣＭ（２×３ｍＬ）で洗浄した。
【０３０９】
[00127]  得られた、樹脂に結合した環化生成物２１４をＤＣＭ中の３０％  ＴＦＡ（４ｍＬ，３０分）で脱保護し、樹脂から開裂させた。このＴＦＡ溶液を次いで真空中で濃縮すると粘稠な油が得られ、これをＳｈｉｍａｄｚｕ  ＨＰＬＣで精製した；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＡＸＩＡ  ５ｕｍ，２１．２×１００ｎｍカラムで、１０％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）から４０％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）まで増大する溶媒勾配を用い、続いて１００％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）でカラムを迅速フラッシュした。化合物１５０を白色固体として単離した。
【０３１０】
【化５４】
2015504425.tif 000126
【０３１１】
[00128]  化合物１５０（６ｍｇ）のＴＨＦ（０．５ｍＬ）中における懸濁液に、ＬｉＯＨ水溶液（１Ｍ，０．３ｍＬ）を添加した。反応物を室温で３時間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＳｈｉｍａｄｚｕ  ＨＰＬＣで精製した；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＡＸＩＡ  ５ｕｍ，２１．２×１００ｎｍカラムで、１０％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）から４０％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）まで増大する溶媒勾配を用い、続いて１００％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）でカラムを迅速フラッシュした。化合物１４９を白色固体（４．６ｍｇ，８３％）として単離した。
【０３１２】
実施例５−生物活性の評価
[00129]  代表的な化合物をＸＩＡＰ  ＢＩＲ２およびＢＩＲ３ならびにｃＩＡＰ  ＢＩＲ３活性の阻害について試験した。実験の方法および結果を以下に提示する。
【０３１３】
実験法：
Ａ．  ＸＩＡＰ−ＢＩＲ２／ＳＭＡＣペプチドＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイ
[00130]  白色平底３８４ウェルＰｒｏｘｉＰｌａｔｅｓ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）内でアッセイを実施した。最終アッセイ体積は１０μＬであり、Ｈｉｓ−ＢＩＲ２（１２４−２４０／Ｃ２０２Ａ／Ｃ２１３Ｇ）、ビオチニル化ＳＭＡＣペプチド、および被験化合物を、２５ｍＭのＨｅｐｅｓ、１００ｍＭのＮａＣｌ、０．１％のＢＳＡ、および５ｍＭのＣａＣｌ２からなるアッセイ緩衝液に添加することにより調製された。反応物を室温で６０分間インキュベートした。６０分後、２．５μＬのＡｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ検出試薬（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を反応混合物に添加し、室温、暗所で１２０分間インキュベートした。この反応により発生したＡｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ信号をＥｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒで検出した。１００％阻害についての無タンパク質対照反応および０％阻害についてのビヒクルのみの反応により発生したＡｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ信号から、阻害データを計算した。アッセイにおける試薬の最終濃度は、５０ｎＭのＨｉｓ−ＢＩＲ２（１２４−２４０／Ｃ２０２Ａ／Ｃ２１３Ｇ）、５０ｎＭのビオチニル化ＳＭＡＣペプチド、４μｇ／ｍＬのＡｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ検出試薬、および０．５％のＤＭＳＯであった。用量応答曲線を作成して、キナーゼ活性を５０％阻害するのに必要な濃度（ＩＣ５０）を決定した。化合物を１０ｍＭでジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、１１種類の濃度で評価した。ＩＣ５０値を非線形回帰分析により求めた。
【０３１４】
Ｂ．  ＸＩＡＰ−ＢＩＲ３  ＳＭＡＣペプチド蛍光偏光アッセイ(Fluorescence Polarization Assay)（ＦＰＡ）
[00131]  黒色平底３８４ウェルプレート内でアッセイを実施した。最終アッセイ体積は５０μＬであり、Ｎ−Ｈｉｓ−Ｔｂ−ＢＩＲ３（２４１−３５６，ＸＩＡＰ）、フルオレセイン修飾したＳＭＡＣペプチド、および被験化合物を、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、１ｍＭのＥＤＴＡ、５０ｍＭのＮａＣｌ、および０．０５％のＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８からなるアッセイ緩衝液に添加することにより調製された。反応物を室温で６０分間インキュベートし、反応物の蛍光偏光をＬＪＬ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒで検出した。１００％阻害についての無タンパク質対照反応および０％阻害についてのビヒクルのみの反応により生じたｍＰ値から、阻害データを計算した。アッセイにおける試薬の最終濃度は、１３０ｎＭのＮ−Ｈｉｓ−Ｔｂ−ＢＩＲ３（２４１−３５６，ＸＩＡＰ）、１．４ｎＭのフルオレセイン修飾したＳＭＡＣペプチド、および１％のＤＭＳＯであった。用量応答曲線を作成して、偏光活性を５０％阻害するのに必要な濃度（ＩＣ５０）を決定した。化合物を１０ｍＭでジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、１１種類の濃度で評価した。ＩＣ５０値を非線形回帰分析により求めた。
【０３１５】
結果：
[00132]  ＢＩＲ２およびＢＩＲ３アッセイの結果を下記の表２に示す。ＢＩＲ２のＩＣ５０値を下記のように報告する：“Ａ”は２μＭ未満のＩＣ５０値を示す；“Ｂ”は２μＭ〜１２μＭのＩＣ５０値を示す；“Ｃ”は１２μＭを超えるＩＣ５０値を示す。“ＮＴ”はその化合物をそのアッセイで試験しなかったことを意味する。ＢＩＲ３のＩＣ５０値を下記のように報告する：“Ａ”は５０ｎＭ未満のＩＣ５０値を示す；“Ｂ”は５０ｎＭ〜１００ｎＭのＩＣ５０値を示す；“Ｃ”は１００ｎＭを超えるＩＣ５０値を示す。“ＮＴ”はその化合物をそのアッセイで試験しなかったことを意味する。
【０３１６】
表２−特定の式Ｉの化合物のＢＩＲ２およびＢＩＲ３阻害活性
【０３１７】
【表２】
2015504425.tif 000127
【０３１８】
Ｃ．  ｃＩＡＰ１−ＢＩＲ３  ＳＭＡＣペプチドの蛍光偏光アッセイ（ＦＰＡ）
[00133]  黒色丸底９６ウェルプレート内でアッセイを実施した。最終アッセイ体積は３０μＬであり、Ｎ−Ｈｉｓ−Ｔｂ−ＢＩＲ３（２６２−３５２，ｃＩＡＰ１）、フルオレセイン修飾したＳＭＡＣペプチド、および被験化合物を、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、１ｍＭのＥＤＴＡ、５０ｍＭのＮａＣｌ、および０．０５％のＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８からなるアッセイ緩衝液に添加することにより調製された。反応物を室温で６０分間インキュベートし、反応物の蛍光偏光をＬＪＬ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒで検出した。１００％阻害についての無タンパク質対照反応および０％阻害についてのビヒクルのみの反応により生じたｍＰ値から、阻害データを計算した。アッセイにおける試薬の最終濃度は、３６．１ｎＭのＮ−Ｈｉｓ−Ｔｂ−ＢＩＲ３（２６２−３５２，ｃＩＡＰ１）、１．４ｎＭのフルオレセイン修飾したＳＭＡＣペプチド、および１％のＤＭＳＯであった。用量応答曲線を作成して、偏光活性を５０％阻害するのに必要な濃度（ＩＣ５０）を決定した。化合物を１０ｍＭでジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、８種類の濃度で評価した。ＩＣ５０値を非線形回帰分析により求めた。
【０３１９】
[00134]  このアッセイの結果を表３に示す。特定の化合物のみを試験した。ＩＣ５０値を下記のように報告する：“Ａ”は５０ｎＭ未満のＩＣ５０値を示す；“Ｂ”は５０ｎＭ〜１００ｎＭのＩＣ５０値を示す；“Ｃ”は１００ｎＭを超えるＩＣ５０値を示す。
【０３２０】
表３．  ｃＩＡＰ１−ＢＩＲ３  ＳＭＡＣペプチド蛍光偏光アッセイにより測定した特定の式Ｉの化合物のＢＩＲ３阻害活性
【０３２１】
【表３】
2015504425.tif 000128
【０３２２】
実施例６−中間体３１２、化合物１００３および他の代表的な大環状化合物の合成
[00135]  鍵となるテトラペプチド中間体３１２の溶液相合成を、以下に概説する合成スキームを用いて実施した。
【０３２３】
【化５５】
2015504425.tif 000129
【０３２４】
[00136]  （２Ｓ，４Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−メチル  ４−（（メチルスルホニル）オキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート。（２Ｓ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−メチル  ４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（３００；５３．０ｍｍｏｌ，１３．０ｇ）のＤＣＭ（１００ｍＬ）中における溶液に、トリエチルアミン（８５ｍｍｏｌ，１１．８ｍＬ）を添加し、得られた溶液を０℃に冷却した。内部温度を熱電対でモニターしながら、メタンスルホニルクロリド（５８．３ｍｍｏｌ，４．５５ｍＬ）を温度が３．５℃を超えない速度で添加し、反応混合物を０℃で２時間撹拌した。１Ｎ  ＨＣｌで反応を停止し、ＤＣＭ（３×）で抽出した。有機層を合わせて水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をヘキサンで摩砕処理するとメシレート３０１（１７．１ｇ）が固体として得られ、これをそのまま次の工程に用いた。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．８分，ｍ／ｚ  ２６８．１。
【０３２５】
[00137]  （２Ｓ，４Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−メチル  ４−アジドピロリジン−１，２−ジカルボキシレート。（２Ｓ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−メチル  ４−（（メチルスルホニル）オキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（３０１；５３．０ｍｍｏｌ，１７．２ｇ）をＤＭＦ（８０ｍＬ）に溶解し、ナトリウムアジド（８０ｍｍｏｌ，５．１７ｇ）をこの混合物に添加した。反応物を７０℃に加熱した。反応が完了した時点で、混合物を室温に冷却し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）に注入し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機抽出液を合わせて順に飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（７０ｍＬ）、１０％  ＬｉＣｌ水溶液（４×１００ｍＬ）およびブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した（ＴＬＣ−１：１  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン類，Ｒｆ＝０．６）。得られた油をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン類中０−１００％  ＥｔＯＡｃ）により精製して、３０２（１２．３ｇ，８５％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．５７分，ｍ／ｚ  ２９３．２（Ｍ＋Ｎａ）；１７１．３（Ｍ＋１−ＢＯＣ）．ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．８７分，ｍ／ｚ  ２１５．１；１７１．１−２７０．１３に一致。
【０３２６】
[00138]  （２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−カルボン酸。（２Ｓ，４Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−メチル  ４−アジドピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（３０２；４５．５ｍｍｏｌ；１２．３ｇ）をＴＨＦ（５０ｍＬ）／ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶解し、得られた溶液を２Ｎ  ＬｉＯＨ（１１４ｍｍｏｌ，５６．９ｍＬ）で処理した。反応混合物を完全な変換がみられるまで室温で撹拌し、その時点で混合物を１Ｎ  ＨＣｌで酸性（ｐＨ３）にし、溶液をＣＨ２Ｃｌ２（３×）で抽出した。有機抽出液を合わせて乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。Ｅｔ２Ｏを残留物に添加し、混合物を３倍濃縮して、３０３（１１．３ｇ，９６％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．７３分，ｍ／ｚ  ２５７．２。
【０３２７】
[00139]  （２Ｓ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−アジド−２−（（（Ｓ）−１−メトキシ−３−（ナフタレン−２−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボキシレート。（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−カルボン酸（３０３；３９．８ｍｍｏｌ，１０．２ｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（３７９ｍＬ）中における０℃の溶液に、ＥＤＣ（４５．５ｍｍｏｌ，８．７２ｇ）、続いて３Ｈ−［１，２，３］−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−オール（ＨＯＡｔ，４５．５ｍｍｏｌ，６．１９ｇ）を添加した。０．５時間後、Ｎ−メチルモルホリン（１１４ｍｍｏｌ，１２．５ｍＬ）および（Ｓ）−メチル  ２−アミノ−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート（３０４；３７．９ｍｍｏｌ，８．６９ｇ）を混合物に添加し、得られた反応物を室温にまで高めながら一夜撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃに注入し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機抽出液を合わせて１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで洗浄した。有機抽出液をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮すると、油が得られた。この残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ，２５ｇのカラム，２０％ヘキサン類／ＥｔＯＡｃ−１００％ＥｔＯＡｃ）により精製して、３０５（１４．３ｇ，８１％）を油として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．０４分，ｍ／ｚ  ４６８．４。
【０３２８】
[00140]  （Ｓ）−メチル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジドピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート，ＴＦＡ。ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）中の（２Ｓ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−アジド−２−（（（Ｓ）−１−メトキシ−３−（ナフタレン−２−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボキシレート（３０５；３０．７ｍｍｏｌ，１４．３ｇ）に、ＴＦＡ（５０ｍＬ）を添加した。ＴＬＣ（１：１  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）による反応モニタリングは、２時間以上で変換を証明し、これをＬＣＭＳ（ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．７２分，ｍ／ｚ  ３６８．３）により確認した。溶媒を真空中で除去し、残留物をトルエンから濃縮して（２×）、残留ＴＦＡを除去した。粗製の油３０６をそれ以上精製せずにそのまま次の工程に用いた。
【０３２９】
[00141]  （Ｓ）−メチル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート。（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，３−ジメチルブタン酸（３０７；３２．２ｍｍｏｌ，７．４４ｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（３０６ｍＬ）中における溶液に、０℃で、ＥＤＣ（３６．８ｍｍｏｌ，７．０５ｇ）、続いて３Ｈ−［１，２，３］−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−オール（ＨＯＡｔ；３６．８ｍｍｏｌ；５．０１ｇ）を添加した。０．５時間後、Ｎ−メチルモルホリン（９２ｍｍｏｌ，１０．１ｍＬ）および（Ｓ）−メチル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジドピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート，ＴＦＡ（３０６；３０．６ｍｍｏｌ，１１．２６ｇ）の溶液を最初の反応混合物に注入し、得られた溶液を室温にまで高めながら一夜撹拌した。反応完了が確認された時点で（ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．１２分，ｍ／ｚ  ５８１．４）、反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２に注入し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（３×）で抽出し、有機抽出液を合わせて１Ｎ  ＨＣｌおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。有機抽出液をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗製の油をシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  ３００ｇのカラム，ヘキサン類−ＥｔＯＡｃ）により精製して、３０８（１６．３ｇ，９１％）を白色泡状物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．１２分，ｍ／ｚ  ５８１．４。
【０３３０】
[00142]  （Ｓ）−メチル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジメチルブタノイル）−４−アジドピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート。ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）中の（Ｓ）−メチル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート（３０８；２８ｍｍｏｌ；１６．３ｇ）に、ＴＦＡ（５０ｍＬ）を添加した。反応混合物を１時間撹拌した後（ＬＣＭＳはＢＯＣ基の除去が完了したことを示した）、溶媒を真空中で除去し、生じた残留物をＣＨ２Ｃｌ２溶液に装入した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、２Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮すると、油が得られた。粗生成物３０９を遊離塩基として次の工程に用いた。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．７９分，ｍ／ｚ  ４８１．４。
【０３３１】
[00143]  （Ｓ）−メチル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）−プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート。（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパン酸（３１０；２９．４ｍｍｏｌ，５．９８ｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（２８０ｍＬ）中における溶液に、０℃で、ＥＤＣ（３３．６ｍｍｏｌ，６．４５ｇ）、続いて３Ｈ−［１，２，３］−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−オール（ＨＯＡｔ，３３．６ｍｍｏｌ，４．５８ｇ）を添加した。３０分後、Ｎ−メチルモルホリン（８４ｍｍｏｌ，９．２４ｍｌ）および（Ｓ）−メチル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジメチルブタノイル）−４−アジドピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート（３０９；２８ｍｍｏｌ，１３．４７ｇ）の溶液を添加し、得られた反応混合物を室温にまで高めながら一夜撹拌した。反応が完了した時点で（ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．１２分，ｍ／ｚ  ６６６．５）、混合物をＣＨ２Ｃｌ２および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に注入した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した（３×）。有機抽出液を合わせて１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮すると、油が得られた。粗製残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  ３００ｇのカラム，ヘキサン類−ＥｔＯＡｃ）により精製して、３１１（１６．６ｇ，８９％）を白色泡状物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．１２分，ｍ／ｚ  ６６６．４。
【０３３２】
[00144]  （Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）−プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸。（Ｓ）−メチル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパン−アミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート（３１１，２４．９９ｍｍｏｌ  １６．６４ｇ）をＴＨＦ（２２．６ｍＬ）／ＭｅＯＨ（２２．６ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  ＬｉＯＨ（６２．５ｍｍｏｌ，３１．２ｍＬ）で処理した。得られた反応混合物を室温で撹拌した。反応の変換が完了した時点で（ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．０２分，ｍ／ｚ  ６５２．５）、混合物を１Ｎ  ＨＣｌで酸性（ｐＨ３）にし、この溶液をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（３×）。有機抽出液を合わせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、３１２（１６．０４ｇ，８９％）を白色固体として得た。MS (ESI+), 室温, 1.03分，m/z 652.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.92 - 7.69 (m, 3H), 7.56 - 7.28 (m, 3H), 4.68 - 4.52 (m, 2H), 4.49 - 4.21 (m, 2H), 4.07 (dd, J = 10.6, 6.6 Hz, 1H), 3.64 - 3.50 (m, 2H), 3.39 (dd, J = 10.6, 6.2 Hz, 1H), 3.22 - 3.01 (m, 2H), 2.81 - 2.63 (m, 3H), 2.45 - 2.33 (m, 1H), 1.89 - 1.65 (m, 2H), 1.48 - 1.29 (m, 9H), 1.20 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.90 (s, 9H). パラレルHPLC: 10 - 100%, 12分かけて3分の保持時間, 溶媒A = H2O中0.05% TFA : MeCN (95:5) - 溶媒B = H2O中0.05% TFA : MeCN (5:95); 流速 = 1 mL/分Sunfire C18 3.5 um, 3.0×150 mm; 12.323分 89.5% @ 220 nM 89.8% 254 nM; Xbridge Phenyl 3.5um, 3.0×150 mm 11.371分 91.6% @ 220 nM 91.4% @ 254。
【０３３３】
【化５６】
2015504425.tif 000130
【０３３４】
[00145]  化合物３１３（３１９ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）およびＣＤＩ（１７８ｍｇ，１．１当量，１．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、４０℃で１時間撹拌した。ベンゼンスルホンアミド（３１４，Ａｌｄｒｉｃｈ，２３６ｍｇ，１．５当量，１．５ｍｍｏｌ）の、ＴＨＦ（２ｍＬ）およびＤＢＵ（０．３ｍＬ，２当量，２．０ｍｍｏｌ）中における溶液を次いで混合物に添加し、得られた溶液を室温で２時間撹拌した。次いでＨＣｌ水溶液（１Ｎ，１０ｍＬ）で反応を停止し、酢酸エチルで抽出した。有機層を真空中で濃縮し、生じた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇのカラム，０−５％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶離）により精製した。
【０３３５】
[00146]  得られたアシルスルホンアミド中間体に、ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｎ，５ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で２時間撹拌し、次いで真空中で濃縮して、中間体３１５（３１２ｍｇ，８７％）をＨＣｌ塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ３５９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３３６】
【化５７】
2015504425.tif 000131
【０３３７】
[00147]  ペプチド３１２（６５ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）中における溶液に、化合物３１５（３６ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．０３３ｍＬ，０．３ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（３８ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した後、次いで１０％塩化リチウム水溶液で停止し、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇのカラム，０−８％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭで溶離）により精製して、中間体３１６（２５ｍｇ，２５％）を黄色の油として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ９２２．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３３８】
【化５８】
2015504425.tif 000132
【０３３９】
[00148]  化合物３１６（２５ｍｇ，０．０２５ｍｍｏｌ）に、（Ｚ）−２，２，６，６−テトラメチル−５−オキソヘプタ−３−エン−３−オレイン酸銅（ＩＩ）（０．００４ｍｍｏｌ，２ｍｇ）、アスコルビン酸（０．００３ｍｍｏｌ，５ｍｇ）、ＤＩＰＥＡ（０．００３ｍｍｏｌ，１０ｍｇ）、２，６−ジメチルピリジン（０．００３ｍｍｏｌ，１２ｍｇ）の、ＤＭＦ（０．８ｍＬ）およびＴＨＦ（０．８ｍＬ）中における調製したばかりの溶液を添加した。得られた混合物を室温で２４時間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物を５０％  ＴＦＡ／ＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解し、室温で１時間撹拌した。
【０３４０】
[00149]  反応混合物を次いで真空中で濃縮し、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＨＰＬＣで精製した；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＡＸＩＡ  ５ｕｍ，２１．２×１００ｎｍカラムで、１０％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）から４０％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）まで増大する溶媒勾配を用い、続いて１００％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）でカラムを迅速フラッシュした。目的とする大環状化合物１００３（３．４ｍｇ，１５％）を白色固体として単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ８９２．９（Ｍ＋２Ｈ）＋。
【０３４１】
[00150]  大環状化合物（表一覧）１００４〜１００７を前記と同様な方法で製造した。
【０３４２】
実施例７−化合物１０１３および他の代表的な大環状化合物の合成
【０３４３】
【化５９】
2015504425.tif 000133
【０３４４】
[00151]  実施例１の化合物８２の合成に関するものと同様な方法に従って、標準的なＦｍｏｃ固相ペプチド合成を用いてＰｒｏｔｅｉｎ  ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＰｒｅｌｕｄｅペプチド合成装置で（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（４３ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）を樹脂連結したペプチド３２４に変換した。
【０３４５】
【化６０】
2015504425.tif 000134
【０３４６】
[00152]  （Ｚ）−２，２，６，６−テトラメチル−５−オキソヘプタ−３−エン−３−オレイン酸銅（ＩＩ）（３２ｍｇ，０．５当量，０．０７５ｍｍｏｌ）、アスコルビン酸（７９ｍｇ，３当量，０．４５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１６０ｇ，１０当量，１．５ｍｍｏｌ）、２，６−ジメチルピリジン（０．１９４ｇ，１０当量，１．５ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃチロシンプロパルギルエーテルメチルエステル３２５（６６ｍｇ，１．５当量，０．１５ｍｍｏｌ）の、ＤＭＦ（２ｍＬ）およびＴＨＦ（２ｍＬ）中における調製したばかりの溶液を、ペプチド樹脂３２４に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により５時間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂３２６をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０３４７】
【化６１−１】
2015504425.tif 000135
【０３４８】
【化６１−２】
2015504425.tif 000136
【０３４９】
[00153]  実施例１の化合物８２の合成に関するものと同様な方法に従って、標準的なＦｍｏｃ固相ペプチド合成を用いてＰｒｏｔｅｉｎ  ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＰｒｅｌｕｄｅペプチド合成装置で、樹脂連結したペプチド３２６を樹脂連結したペプチド３３０に変換した。
【０３５０】
【化６２】
2015504425.tif 000137
【０３５１】
[00154]  （Ｚ）−２，２，６，６−テトラメチル−５−オキソヘプタ−３−エン−３−オレイン酸銅（ＩＩ）（３２ｍｇ，０．５当量，０．０７５ｍｍｏｌ）、アスコルビン酸（７９ｍｇ，３当量，０．４５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１６０ｇ，１０当量，１．５ｍｍｏｌ）、２，６−ジメチルピリジン（０．１９４ｇ，１０当量，１．５ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃアミノ酸３３１（６６ｍｇ，１．５当量，０．１５ｍｍｏｌ）の、ＤＭＦ（２ｍＬ）およびＴＨＦ（２ｍＬ）中における調製したばかりの溶液を、ペプチド樹脂３３０に添加した。反応混合物を穏やかな窒素流により５時間撹拌した。試薬を反応器から排除し、樹脂３３２をＤＭＦ（１５ｍＬ×５分）で洗浄した。
【０３５２】
【化６３】
2015504425.tif 000138
【０３５３】
[00155]  樹脂をＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液（洗浄当たり８ｍＬおよび５分間）と２回混合し、その間、穏やかなＮ２流で撹拌することにより、Ｆｍｏｃ基を樹脂に支持された構築ブロック３３２から除去した。樹脂をＤＭＦ（洗浄当たり８ｍＬおよび３０秒）で４回洗浄して、樹脂３３３を得た。
【０３５４】
【化６４】
2015504425.tif 000139
【０３５５】
[00156]  樹脂３３３をＣＨ２Ｃｌ２（洗浄当たり１５ｍＬおよび３０秒）で３回洗浄し、次いでＣＨ２Ｃｌ２：ＡｃＯＨ：ＣＦ３ＣＨ２ＯＨの混合物（３：１：１，２０ｍＬ）で洗浄した。反応混合物を２時間揺動し、続いて２回目のＣＨ２Ｃｌ２：ＡｃＯＨ：ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３：１：１，２０ｍＬ）による３０秒間の洗浄を行なった。ＡｃＯＨ洗液を合わせて溶媒を真空中で除去した。
【０３５６】
[00157]  アセトニトリル（２０ｍＬ）中の得られた線状ペプチド（１５ｍｇ，０．００９ｍｍｏｌ）に、ＨＡＴＵ（９．８ｍｇ，３当量，０．０２６ｍｍｏｌ）およびヒューニッヒ塩基(Hunig’s base)（０．０４５ｍＬ，３当量，０．０２６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、真空中で濃縮して、大環状ペプチド３３４を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  １７１９．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３５７】
【化６５】
2015504425.tif 000140
【０３５８】
[00158]  化合物３３４（８ｍｇ）のＴＨＦ（２ｍＬ）中における溶液に、ＬｉＯＨ水溶液（１Ｍ，０．３ｍＬ）を添加した。反応物を室温で３時間撹拌し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＤＣＭ中の３０％  ＴＦＡ（２ｍＬ）に溶解し、室温で２時間撹拌した。反応混合物を次いで真空中で濃縮し、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＨＰＬＣで精製した；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＡＸＩＡ  ５ｕｍ，２１．２×１００ｎｍカラムで、１０％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）から４０％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）まで増大する溶媒勾配を用い、続いて１００％アセトニトリル／水（０．１％のＴＦＡを含有）でカラムを迅速洗浄して、目的化合物１０１３を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）  ｍ／ｚ  ７４６．５（Ｍ＋２Ｈ）＋。
【０３５９】
実施例８−化合物１４７および他の代表的な大環状化合物の合成
【０３６０】
【化６６】
2015504425.tif 000141
【０３６１】
[00159]  （Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）−アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸。（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）−プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（３１２，１．５６５ｍｍｏｌ，１０２０ｍｇ）、（Ｓ）−メチル  ２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（４−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）フェニル）プロパノエート（３２５，１．６４ｍｍｏｌ，７４９ｍｇ）および（４Ｒ，５Ｓ，Ｚ）−２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキサ−２−エン酸ナトリウム（０．３９１ｍｍｏｌ，８５ｍｇ）に、マグネティックスターラーを備えた１００ｍＬ丸底フラスコ内で、ｔ−ＢｕＯＨ（１８ｍＬ）、および硫酸銅（ＩＩ）・５水和物（０．０７８ｍｍｏｌ，１９．５４ｍｇ）を含有するＨ２Ｏ（９ｍＬ）を添加した。溶液は直ちに黄色になり、これを５分間撹拌した。ＴＨＦ（１８ｍＬ）を混合物に添加して不溶性物質を可溶化した。反応混合物に蓋をし、ＬＣＭＳによりモニターしながら室温で撹拌した。３時間後、反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×７５ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製した。目的生成物を含有するプールした画分を真空中で濃縮し、生じた残留物をＥｔＯＡｃに装入し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で一夜濃縮して、３３５（１．４３ｇ，８３％）を白色泡状物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．１６分，ｍ／ｚ  １１０７．６。
【０３６２】
[00160]  （Ｓ）−メチル  ２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（４−（（１−（（３Ｓ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（シクロプロパンスルホンアミド）−１−オキソ−３−（４−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）フェニル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（ナフタレン−２−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバモイル）ピロリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）フェニル）プロパノエート。（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（メチル）−アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（３３５，１．２９１ｍｍｏｌ，１４３０ｍｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（１２．９ｍＬ）中における溶液に、０℃で、ＥＤＣ（１．５５ｍｍｏｌ，２９７ｍｇ）、続いて３Ｈ−［１，２，３］−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−オール（ＨＯＡｔ，１．５５０ｍｍｏｌ，２１１ｍｇ）を添加した。１５分後、Ｎ−メチルモルホリン（３．８７ｍｍｏｌ，０．４２６ｍｌ）および（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（シクロプロパンスルホンアミド）−１−オキソ−３−（４−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）フェニル）プロパン−２−イル）カルバメート（３３６，１．５５ｍｍｏｌ，６５５ｍｇ，）の、ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中における溶液を添加した。反応混合物を０℃で撹拌し、ＬＣＭＳによりモニターした。反応物を２Ｎ  ＨＣｌで希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。得られたろう状固体（２．５ｇ，粗製）を分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８  ５０×２５０カラム）により精製して、３３７（１．５１ｇ，８３％）を白色泡状物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．３分，ｍ／ｚ  １４１２．３。
【０３６３】
[00161]  （Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メトキシ−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）−アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパンアミド）−３−（シクロプロパンスルホンアミド）−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸。（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（３１２，０．３２６ｍｍｏｌ，２１２ｍｇ）および（Ｓ）−メチル  ２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（４−（（１−（（３Ｓ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（シクロプロパンスルホンアミド）−１−オキソ−３−（４−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）フェニル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−（ナフタレン−２−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバモイル）ピロリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）フェニル）プロパノエート（３３７，０．３２６ｍｍｏｌ，４６０ｍｇ）および（４Ｒ，５Ｓ，Ｚ）−２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキサ−２−エン酸ナトリウム（０．０８１ｍｍｏｌ，１７．６１ｍｇ）に、ｔ−ＢｕＯＨ（１０．８６ｍＬ）、および硫酸銅（ＩＩ）・５水和物（０．０１６ｍｍｏｌ，４．０７ｍｇ）を含有するＨ２Ｏ（５．４３１ｍＬ）を添加した。溶液は直ちに黄色になった。ＴＨＦ（１８ｍＬ）を混合物に添加して不溶性物質を可溶化した。反応混合物をＮ２のブランケット下におき、室温で撹拌した。さらにＣｕＳＯ４−Ｈ２Ｏ（０．５当量）、およびＨ２Ｏ（１ｍＬ）中のアセルベート(acerbate)（０．２５当量）を混合物に添加して、反応を駆動して完了させた。出発物質が消費された時点で、反応物を２Ｎ  ＨＣｌで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した（４×）。有機層を合わせてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗製油を分取ＨＰＬＣ（２１．２×２５０のカラム  ５０−１００％  Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ／ＴＦＡ）により精製して、目的化合物（６００ｍｇ，８９％）を白色固体として得た。
【０３６４】
[00162]  単離した物質をＤＭＦ（６ｍＬ）に溶解し、ピペリジン（０．５ｍＬ）で処理してＦＭＯＣ基を除去した。３分後、溶媒を真空中で除去し、得られた油を２Ｎ  ＨＣｌに溶解し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（３×）。有機層を合わせて１０％  ＬｉＣｌ（２×）、ブライン（１×）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。得られたろう状生成物を分取ＨＰＬＣにより精製して、目的生成物３３８（３２０ｍｇ，６０％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．０６分，ｍ／ｚ  １８４１．１。
【０３６５】
[00163]  化合物１４７。ＣＨ２Ｃｌ２（７９０ｍＬ）中の（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メトキシ−３−オキソプロピル）フェノキシ）−メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパンアミド）−３−（シクロプロパン−スルホンアミド）−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｒ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（３３８，０．１７４ｍｍｏｌ，３２０ｍｇ）を装填した丸底フラスコに、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−メチルプロパン−２−アミン（０．５２１ｍｍｏｌ  ６０．１ｍｇ）および２−（３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イル）−１，１，３，３−テトラメチルイソウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（０．５２１ｍｍｏｌ，１９８ｍｇ）を含有するＤＭＦ（７９ｍＬ）を添加した。混合物をＮ２のブランケット下で一夜撹拌した。反応が完了した時点で、溶媒を真空中で除去し、残留物をＥｔＯＡｃに溶解した。この溶液を１０％  ＬｉＣｌ水溶液（３×）、１Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗製の油を分取ＨＰＬＣ（５０−１００％  Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ／ＴＦＡからＭｅＣＮ／ＴＦＡまで）により精製した。生成物を含有する画分を合わせて真空中で濃縮して、目的とする中間体（１１０ｍｇ，３５％）を白色固体として得た；ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．２０分，ｍ／ｚ  １８２４．８。
【０３６６】
[00164]  単離した物質をＴＨＦ（１５００μＬ）およびＭｅＯＨ（１５００μＬ）に溶解し、２Ｍ  ＬｉＯＨ（０．２００ｍｍｏｌ，１００μｌ）で処理した。得られた溶液を３０分間撹拌し、真空中で濃縮すると固体が得られ、これを直ちに１Ｎ  ＨＣｌ（５ｍＬ）に装入した。得られた溶液をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせて真空中で濃縮した。残留物を直ちに４０％  ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２に装入し、室温で撹拌した。脱保護工程が完了した時点で溶媒を真空中で除去した。残留物を分取ＨＰＬＣ（１０％−１００，４５分かけて；３０×１００  Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ  Ｌｕｎａカラム；ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製した。目的生成物を含有する画分を合わせて１Ｎ  ＨＣｌの存在下で凍結乾燥させて、１４７（６８ｍｇ，９４％）を白色固体として得た。LCMS:, 室温, 0.80分，M+2H = 805.4 M+1 1609.4，MW 1607.7と一致(Aquity, BEH C18 2.1×50 mm 1.7u); HPLC: YMC Pack ODS-AQ 3 um 150×4.6 mm (0415172016(W)), 0-100% B, 15分の勾配, 1.25 mL/分の流速(室温，8.261分, 94.1%);移動相A (0.1% TFA 水),移動相B (0.1% TFA MeCN)。
【０３６７】
実施例９−中間体３４３および代表的な大環状化合物の合成
【０３６８】
【化６７】
2015504425.tif 000142
【０３６９】
[00165]  （Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）−アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸。硫酸銅（ＩＩ）・５水和物（０．０３８ｍｍｏｌ，９．５８ｍｇ）および（４Ｒ，５Ｓ，Ｚ）−２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキサ−２−エン酸ナトリウム（０．１９２ｍｍｏｌ，４１．４ｍｇ）の、Ｈ２Ｏ（３．００ｍＬ）中における懸濁液を、溶液が暗褐色になって白色固体が沈殿するまで振とうした。この予備調製したスラリーを、（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（３１２，０．７６７ｍｍｏｌ，５００ｍｇ）および（Ｓ）−メチル  ２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（４−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）フェニル）プロパノエート（３２５，０．８０６ｍｍｏｌ，３６７ｍｇ）を含むｔ−ＢｕＯＨ（６ｍＬ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）溶液に添加した。反応混合物を室温で４０分間撹拌した（ＬＣ−ＭＳは８０％の変換を示した）。反応を駆動して完了させるために、さらに硫酸銅（ＩＩ）・５水和物（０．０３８ｍｍｏｌ，９．５８ｍｇ）を添加し、反応混合物を室温でさらにｌ時間撹拌した（ＬＣＭＳは完全な変換を示した）。この混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に注入し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機層を次いで真空中で濃縮し、逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×２５０ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；４５％−１００％の勾配を２５分で，３２分目に停止）により精製して、３３５を白色固体（６５５ｍｇ，７６％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．１５分，ｍ／ｚ  １１０７．６。
【０３７０】
[00166]  （Ｓ）−アリル  ２−（（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパンアミド）−３−（４−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）フェニル）プロパノエート。（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソ−プロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）−プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（３３５，０．５９２ｍｍｏｌ，６５５ｍｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（１２ｍＬ）中における溶液に、０℃で、ＥＤＣ（０．８８７ｍｍｏｌ，１７０ｍｇ）、続いて３Ｈ−［１，２，３］−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−オール（ＨＯＡｔ，０．８８７ｍｍｏｌ，１２１ｍｇ）を添加した。１５分後、Ｎ−メチルモルホリン（２．３７ｍｍｏｌ，０．２６０ｍｌ）および（Ｓ）−アリル  ２−アミノ−３−（４−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）フェニル）プロパノエート（３３９，０．７６９ｍｍｏｌ，１９９ｍｇ）の、ＣＨ２Ｃｌ２（６ｍＬ）中における溶液を添加した。溶液を０℃で撹拌し、室温にまで高め、室温で３時間撹拌した（ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．２４分，ｍ／ｚ  １３４９．５）。この粗製物質をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に注入し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、有機層を濃縮乾固した。生じた残留物を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ２１×２５０ｍｍ，溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ，４５％−１００％の勾配を２５分で）により精製して、３４０（７５０ｍｇ，９４％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．２４分，ｍ／ｚ  １３４９．８。
【０３７１】
[00167]  （Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）−カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパンアミド）−３−（アリルオキシ）−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸。硫酸銅（ＩＩ）・５水和物（０．０９３ｍｍｏｌ，０．０２３ｇ）および（４Ｒ，５Ｓ，Ｚ）−２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキサ−２−エン酸ナトリウム（０．４６３ｍｍｏｌ，１００ｍｇ）の、Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）中における懸濁液を、溶液が暗褐色になって白色固体が沈殿するまで振とうした。この予備調製したスラリーを、出発（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）−プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（３１２，１．２７ｍｍｏｌ，８２９ｍｇ）および（Ｓ）−アリル  ２−（（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパンアミド）−３−（４−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）フェニル）プロパノエート（３４０，１．１６ｍｍｏｌ，１．５６ｇ）の、ｔ−ＢｕＯＨ（１０ｍＬ）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に添加した。反応混合物を室温で４０分間撹拌した後、さらに硫酸銅（ＩＩ）・５水和物（０．０９３ｍｍｏｌ，２３ｍｇ）を添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応が完了した時点で、混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に注入し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機層を真空中で濃縮し、粗製物質を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×２５０ｍｍ，溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ，４５％−１００％の勾配を２５分で）により精製すると、目的とする中間体（２．３ｇ，８０％）が無色の油として得られ、これをそのまま次の工程に用いた。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．２８分，ｍ／ｚ  １��０１．１（Ｍ＋２）。
【０３７２】
[00168]  上記の中間体（０．９８ｍｍｏｌ，２．３ｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解し、ピペリジン（６ｍＬ）で室温において処理した。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、粗製物質を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×２５０ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；１５％−１００％の勾配を２５分で）により精製して、３４１（１．５ｇ，８５％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．１２分，ｍ／ｚ  ８９０．０（Ｍ＋２）。
【０３７３】
[00169]  化合物３４２。線状アミノ酸化合物３４１（０．４２２ｍｍｏｌ，７５０ｍｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（１６００．０ｍＬ）に溶解した。この溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１．２７ｍｍｏｌ，１６４ｍｇ）、およびＤＭＦ（１６０ｍＬ）中の２−（３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イル）−１，１，３，３−テトラメチルイソウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（１．２７ｍｍｏｌ，４８１ｍｇ）溶液を添加した。得られた混合物を室温で３６時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）に溶解した。有機層を冷０．５Ｎ  ＨＣｌおよびブラインで洗浄した。その後、水層をＥｔＯＡｃでさらに１回抽出し、有機層を合わせて真空中で濃縮した。この粗製の貧溶性物質を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；６５％−１００％の勾配を１０分で）により精製して、３４２（５００ｍｇ，６７％）を白色固体として得た。
【０３７４】
[00170]  化合物３４３。大環状生成物３４２（０．１３１ｍｍｏｌ，２３０ｍｇ）の無水ＴＨＦ（４ｍＬ）中における溶液を、窒素下におき、０℃に冷却し、フェニルシラン（０．７８ｍｍｏｌ，０．０９７ｍｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０１３ｍｍｏｌ，１５．１０ｍｇ）で処理した。反応混合物を室温にまで高め、室温で２時間撹拌し、その時点で出発物質が消費され、目的生成物がみられた；ＬＣＭＳ−ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．２３分，ｍ／ｚ  １７２１．３。粗製物質をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）に注入し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機層を真空中で濃縮し、粗製物質を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；５５％−１００％の勾配を１２分で）により精製して、３４３（１２６ｍｇ，５６％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．２３分，ｍ／ｚ  １７２１．３。
【０３７５】
[00171]  化合物１０１８、１０３５〜１０３７、１０３９、および１０４５〜１０４６。ＣＤＩ法：化合物３４３（１．０当量）およびＣＤＩ（１．１当量，１．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（０．１１Ｍ）に溶解し、室温ないし−４０℃で１〜２時間撹拌した。アミド（１．５当量）の、ＴＨＦ（０．７５Ｍ）およびＤＢＵ（２当量）中における溶液を、次いで添加し、得られた溶液を室温で２時間ないし２日間、撹拌した。次いで１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（０．１１Ｍ）で反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を真空中で濃縮し、０．５ｍＬの２Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液を残留物に添加した。混合物を室温で一夜撹拌し、次いで蒸発乾固した。得られた固体を３ｍＬの４０％  ＴＦＡ／ＤＣＭに溶解し、プラットフォーム上において室温で３時間撹拌し、蒸発乾固した。固体をＤＭＦに溶解し、分取ＨＰＬＣにより精製した。
【０３７６】
[00172]  化合物１０１９〜１０３４、１０３８、１０４２。ＨＡＴＵ法：バイアルに、ＤＭＦ中の環状ペプチド３４３原液５００ｕＬ、ＤＭＦ中のＨＡＴＵ原液１００ｕＬ、および５０ｕＬのＤＩＥＡを装填した。反応混合物をプラットフォームシェーカー上において室温で一夜撹拌し、次いで０．５ｍＬの２Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液を混合物に添加した。この混合物を室温で一夜撹拌し、次いで蒸発乾固した。得られた固体を３ｍＬの４０％  ＴＦＡ／ＤＣＭに溶解し、プラットフォーム上において室温で３時間撹拌し、蒸発乾固した。固体をＤＭＦに溶解し、分取ＨＰＬＣにより精製した。
【０３７７】
実施例１０−化合物（表一覧）１０４０〜１０４１の合成
【０３７８】
【化６８】
2015504425.tif 000143
【０３７９】
[00173]  酸３４５。大環状化合物３４４（０．１４１ｍｍｏｌ，２５０ｍｇ）をＴＨＦ（４ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１ｍＬ）に溶解し、ＬｉＯＨ水溶液（０．３５２ｍｍｏｌ，０．１７６ｍＬ）で処理した。混合物を室温で２０分間撹拌すると、メチルエステルの選択的加水分解が達成された。冷１Ｎ  ＨＣｌで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮すると、３４５（７０ｍｇ，２８％）が黄色の油として得られた。この物質をそれ以上精製せずにそのまま次の工程に用いた。
【０３８０】
[00174]  アミド３４７。酸３４５（０．０２０ｍｍｏｌ，３５ｍｇ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）中における溶液を、３，５−ジフルオロ−４−メトキシフェニル）メタンアミン（３４６，０．０６０ｍｍｏｌ，１０．３２ｍｇ）、ＨＡＴＵ（０．０４０ｍｍｏｌ，０．０９９ｍＬ）およびヒューニッヒ塩基（０．０９９ｍｍｏｌ，０．０１７ｍＬ）で処理した。反応混合物を室温で２日間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）に注入し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、３４７（３６ｍｇ，７６％）を得た。
【０３８１】
[00175]  化合物１０４０。アミド３４７（４．１７μｍｏｌ，８ｍｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（１．２ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（７．７９ｍｍｏｌ，０．６ｍＬ）で処理した。反応混合物を室温で３時間撹拌し、真空中で濃縮した。残留物を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；５％−１００％の勾配を１５分で）により精製して、目的生成物１０４０（１．１２ｍｇ，１３％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．８１分，ｍ／ｚ  ８３１．４（Ｍ＋２）。
【０３８２】
[00176]  化合物１０４１。アミド３４７（５．２２μｍｏｌ，１０ｍｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（１．５ｍＬ）に溶解し、ＴＭＳ−Ｉ（０．０５２ｍｍｏｌ，７．１０μｌ）で処理した。反応混合物を室温で２日間撹拌し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌ（５ｍＬ）で処理した。混合物を３０分間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（２×）で抽出した。有機層を真空中で濃縮し、残留物を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；５％−１００％の勾配を１５分で）により精製して、目的生成物１０４１（０．７６ｍｇ，７％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．７６分，ｍ／ｚ  ８２４．１（Ｍ＋２）。
【０３８３】
実施例１１−化合物１０４３の合成
【０３８４】
【化６９】
2015504425.tif 000144
【０３８５】
[00177]  アシルヒドラジド３４８。(J. Med. Chem. 2008, 51, 4430-4448に基づく)。中間体３４４（０．０１６ｍｍｏｌ，２８ｍｇ）をヒドラジン−Ｈ２Ｏ（０．２３６ｍｍｏｌ，１１．８４ｍｇ）で処理し、得られた混合物を８５℃に４時間加温し、室温に冷却し、一夜撹拌した。粗製混合物をＥｔＯＡｃ（４ｍＬ）に注入し、十分に撹拌し、真空中で濃縮した。粗製残留物を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ，１０％−１００％の勾配を１５分で）により精製して、目的生成物３４８（９．３ｍｇ，３３％）を白色固体として得た。
【０３８６】
[00178]  化合物１０４３。アシルヒドラジド３４８（５．１２μｍｏｌ，９．１ｍｇ）をＴＨＦ（１．０ｍＬ）に溶解し、ＣＤＩ（０．０２３ｍｍｏｌ，３．７４ｍｇ）およびＴＥＡ（０．０１５ｍｍｏｌ，２．１４２μｌ）で処理した。混合物を８３℃に５時間加熱した（ＬＣＭＳ−ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．２０分，ｍ／ｚ  １８０２．３）。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に注入し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２（１．０ｍＬ）に再溶解し、ＴＦＡ（０．６ｍＬ）をこの溶液に添加した。反応混合物を室温で一夜撹拌し、真空中で濃縮した。残留物を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ，溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；５％−１００％の勾配を１５分で）により精製して、１０４３（１．６１ｍｇ，１７％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．７４分，ｍ／ｚ  １５４６．６。
【０３８７】
実施例１２−化合物１０４４の合成
【０３８８】
【化７０】
2015504425.tif 000145
【０３８９】
[00179]  化合物１０４４。化合物３４４（０．０１４ｍｍｏｌ，２５ｍｇ）、ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（（４Ｒ，６Ｒ）−６−（２−アミノエチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−４−イル）アセテート（０．０２１ｍｍｏｌ，５．８２ｍｇ）、ＨＡＴＵ（０．０４３ｍｍｏｌ，１６．１８ｍｇ）およびヒューニッヒ塩基（０．０７１ｍｍｏｌ，０．０１２ｍｌ）を、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中で、反応バイアル内において混和した。反応混合物を室温で一夜撹拌した。この溶液をＥｔＯＡｃに注入し、０．５Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。生じた残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２（０．８ｍＬ）、ＴＦＡ（０．８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）に溶解した。混合物を室温で一夜撹拌し、真空中で濃縮した。生じた残留物を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；５％−１００％の勾配を１５分で）により精製して、１０４４（２．４９ｍｇ，８％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．７２分，ｍ／ｚ  １６４６．３。
【０３９０】
実施例１３−化合物３５６の合成
【０３９１】
【化７１】
2015504425.tif 000146
【０３９２】
[00180]  （Ｓ）−アリル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）−プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート。（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（３１２，１．９４９ｍｍｏｌ，１．２７ｇ）およびプロパ−２−エン−１−オール（２９．２ｍｍｏｌ，１．９９ｍＬ）をＤＭＦ（８．５８ｍＬ）に溶解し、得られた溶液を０℃に冷却した。この溶液をＮ，Ｎ−ジ−イソプロピルエチルアミン（３．９０ｍｍｏｌ，０．６７９ｍＬ）およびＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート（２．１４ｍｍｏｌ，０．８１５ｇ）で処理し、０℃で撹拌し、徐々に室温にまで高めた。反応が完了した時点で、混合物をＮａＨＣＯ３水溶液に注入し、ＥｔＯＡｃで抽出した（２×）。有機層を１Ｎ  ＨＣｌおよび１０％  ＬｉＣｌ水溶液（２×）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗製の油をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ  ２４ｇのカラム，ヘキサン類からＥｔＯＡｃへの勾配）により精製して、目的生成物３５０（１．０８７ｇ，８１％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．５２分，ｍ／ｚ  ６９２．４。
【０３９３】
[00181]  （Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（４−（（１−（（３Ｓ，５Ｓ）−５−（（（Ｓ）−１−（アリルオキシ）−３−（ナフタレン−２−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバモイル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）−アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）−フェニル）プロパン酸。丸底フラスコに、（Ｓ）−アリル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−アジド−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート（３５０，１．５６１ｍｍｏｌ，１．０８ｇ）、（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−アミノ）−３−（４−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）フェニル）プロパン酸（７４，１．５６１ｍｍｏｌ，０．６８９ｇ）、ｔ−ＢｕＯＨ（２５ｍＬ）、ＴＨＦ（２５ｍＬ）を装填した。この混合物に、硫酸銅（ＩＩ）・５水和物（０．０７８ｍｍｏｌ，０．０１９ｇ）および（４Ｒ，５Ｓ，Ｚ）−２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシヘキサ−２−エン酸ナトリウム（０．３９０ｍｍｏｌ，０．０８４ｇ）を含有するＨ２Ｏ（１２．５０ｍＬ）を添加した。黄色の反応混合物を室温で、アジド出発物質が消費されるまで撹拌した。混合物を１Ｎ  ＨＣｌ（５ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に注入した。この溶液をＥｔＯＡｃ（３×３５ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせてＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗製固体をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、シリカゲルに吸着させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ，２４ｇのカラム，ＣＨ２Ｃｌ２から１０％  ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２までの勾配）により精製して、３５１（１．６９ｇ，９６％）を泡状物として得た。
【０３９４】
[00182]  （Ｓ）−アリル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−２−シアノエチル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）−アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート。（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（４−（（１−（（３Ｓ，５Ｓ）−５−（（（Ｓ）−１−（アリルオキシ）−３−（ナフタレン−２−イル）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバモイル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）フェニル）プロパン酸（３５１，１．４４ｍｍｏｌ，１．６３ｇ）およびヒューニッヒ塩基（４．３１ｍｍｏｌ，０．７５４ｍＬ）の、ＴＨＦ（１３．０８ｍＬ）中における溶液に、−１０℃でクロリド炭酸イソブチル(isobutyl carbonochloridate)（２．１５７ｍｍｏｌ，０．２８２ｍＬ）を滴加した。反応混合物を−１０℃で３０分間撹拌した後、ＭｅＯＨ中の７Ｎ  ＮＨ３（１２．９４ｍｍｏｌ，１．８４９ｍＬ）を注射器で添加し、混合物を徐々に室温にまで高めた。完全にカルボキサミドに変換された時点で、ブライン（４０ｍＬ）で反応を停止し、１Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出液を合わせてＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮すると、第一級アミドが油として得られた。この中間体アミドをＣＨ２Ｃｌ２／ＴＨＦ（１：１，１ｍＬ）に溶解し、バーゲス試薬(Burgess reagent)（２．１５７ｍｍｏｌ，０．５１４ｇ）を数回に分けて１５分間かけて添加し、反応物をさらに２時間撹拌した。ブラインで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出し、真空中で濃縮した。生じた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ，４ｇのカラム，ヘキサン類からＥｔＯＡｃへ）により精製して、３５２（１．２３ｇ，７７％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．２１分，ｍ／ｚ  １１１４．６。
【０３９５】
[00183]  （Ｓ）−アリル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−シアノエチル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート。Ｆｍｏｃ保護した３５２（１．０７７ｍｍｏｌ，１．２ｇ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中における溶液を、ピペリジン（６．０６ｍｍｏｌ，０．６ｍＬ）で処理し、得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。粗製反応物をそのままｇｏｌｄ  Ｃ１８  １００ｇのカラムに装填し、物質を逆相クロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０１％  ＴＦＡ；勾配：３０％−９５％溶媒Ｂを１５分で）により精製して、目的生成物３５３（７３０ｍｇ，７６％）を無色の油として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．９９分，ｍ／ｚ  ８９２．４。
【０３９６】
[00184]  （Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）−アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパンアミド）−２−シアノエチル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸。（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）−カルボニル）アミノ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパン酸（３５４，１．０６４ｍｍｏｌ，１０７６ｍｇ）および（Ｓ）−アリル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−アミノ−２−シアノエチル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート（３５３，０．８１８ｍｍｏｌ，７３０ｍｇ）の、ＣＨ２Ｃｌ２（９ｍＬ）およびＤＭＦ（３ｍＬ）中における溶液に、ヒューニッヒ塩基（３．２７ｍｍｏｌ，０．５７２ｍＬ）およびＨＡＴＵ（２．０４６ｍｍｏｌ，７７８ｍｇ）を添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）に注入し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機層を真空中で濃縮し、粗製残留物を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×２５０ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；３０％−１００％の勾配を３３分で）により精製すると、目的とする中間体（５４０ｍｇ）が白色固体として得られ、これをそのまま次の工程に用いた。
【０３９７】
[00185]  （Ｓ）−アリル  ２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−（４−（（４−（（Ｓ）−２−（（（アリルオキシ）−カルボニル）アミノ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパンアミド）−２−シアノエチル）フェノキシ）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）−３−（ナフタレン−２−イル）プロパノエート（０．２８６ｍｍｏｌ，５４０ｍｇ）の無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中における溶液を、窒素下におき、０℃に冷却し、フェニルシラン（１．７１９ｍｍｏｌ，０．２１２ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０１４ｍｍｏｌ，１６．６ｍｇ）で処理した。反応混合物を４０分間かけて室温にまで高め、室温で２時間撹拌し、この時点で出発物質の完全な消費がみられた。この溶液を濾過し、溶媒を除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより、Ｃ１８  ＩＳＣＯシステム（１００ｇのＧｏｌｄカラム）を用いて精製して、３５５（５１０ｍｇ，３２％）を淡褐色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，１．０８分，ｍ／ｚ  ８８１．３（Ｍ＋２）。
【０３９８】
[00186]  シアノ置換された大環状化合物３５６。３５５（０．２９０ｍｍｏｌ，５１０ｍｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（９７５ｍＬ）中における溶液を、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−メチルプロパン−２−アミン（１．１６ｍｍｏｌ，１３３ｍｇ）および２−（３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（０．８６９ｍｍｏｌ，３３０ｍｇ）の、ＤＭＦ（９８ｍＬ）中における溶液で処理した。得られた反応混合物を室温で４０分間撹拌し、真空中で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）に注入し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌおよび１０％  ＬｉＣｌ溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃで再び抽出した。有機層を合わせて真空中で濃縮し、逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；６５％−１００％の勾配を１０分で）により精製して、化合物３５６を得た。
【０３９９】
実施例１４−化合物１０４７の合成
【０４００】
【化７２】
2015504425.tif 000147
【０４０１】
[00187]  ヒドロキシイミドアミド３５７。化合物３５６（０．０１７ｍｍｏｌ，３０ｍｇ）を、ＤＭＳＯ（１ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（０．０８６ｍｍｏｌ，０．０１５ｍＬ）および固体ヒドロキシルアミンＨＣｌ（０．０８６ｍｍｏｌ，５．９８ｍｇ）で処理した。反応混合物を７０℃に８時間加熱した。粗生成物を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；２０％−１００％の勾配を１５分で）により精製して、３５７を得た。
【０４０２】
[00188]  化合物１０４７。中間体３５７（５．６３μｍｏｌ，１０ｍｇ）を１，４−ジオキサン（１ｍＬ）に溶解し、１，４−ジオキサン（１００μＬ）中のＤＢＵ（６．７６μｍｏｌ，１．０１８μｌ）およびＣＤＩ（７．０４μｍｏｌ，１．１４１ｍｇ）で処理した。混合物を１時間、加熱還流し、室温に冷却し、ＥｔＯＡｃに注入し、冷０．５  ＨＣｌで洗浄した。有機層を真空中で濃縮した。粗製残留物をＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）およびＴＦＡ（１ｍＬ）に溶解し、ＬＣＭＳにより判定して生成物が形成されるまで室温で撹拌した。その時点で、溶媒を除去し、粗製の油を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８  ３０×１００ｍｍ；０−１００％  ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．５％  ＴＦＡを含有））により精製して、１０４７を白色固体（２．１ｍｇ，２１％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋），室温，０．７５分，ｍ／ｚ  １５４７．０。
【０４０３】
実施例１５−化合物１０４８の合成
【０４０４】
【化７３】
2015504425.tif 000148
【０４０５】
[00189]  化合物１０４８。マグネティックスターラーを備えた８ｍＬのバイアルに、シアノ置換された大環状化合物３５６（０．０１７ｍｍｏｌ，３０ｍｇ）、ナトリウムアジド（０．１３８ｍｍｏｌ，８．９５ｍｇ）およびＤＭＦ（１．５ｍＬ）を装填した。混合物に臭化Ｚｎ（ＩＩ）（０．０３４ｍｍｏｌ，７．７５ｍｇ）を添加し、得られた反応混合物を８０℃に２４時間加熱した。さらに１当量のＺｎＢｒ２を添加し、混合物を８５℃で３日間撹拌し、室温に冷却し、ＥｔＯＡｃに注入し、１０％  ＬｉＣｌで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２中の５０％  ＴＦＡで、完全な変換がみられるまで一夜処理した。生じた残留物を逆相分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎ−Ｌｕｎａ  Ａｘｉａ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×２５０ｍｍ；溶媒Ａ：９５％  Ｈ２Ｏ／５％  ＭｅＣＮ／０．０５％  ＴＦＡ；溶媒Ｂ：９５％  ＭｅＣＮ／５％  Ｈ２Ｏ／０．０５％  ＴＦＡ；５％−１００％の勾配を２８分で）により精製して、１０４８（４．５ｍｇ，１４％）を白色固体として得た。
【０４０６】
実施例１６−生物活性の追加評価
[00100]  代表的な化合物をＸＩＡＰ  ＢＩＲ３およびＸＩＡＰ  ＢＩＲ２−３活性の阻害について試験した。ＸＩＡＰ  ＢＩＲ２／ＳＭＡＣペプチドａｌｐｈａｓｃｒｅｅｎおよびＸＩＡＰ−ＢＩＲ３／ＳＭＡＣ  ＦＰＡについての実験法は実施例５にある。追加の実験法および結果を以下に提示する。
【０４０７】
Ａ．  ＸＩＡＰ−ＢＩＲ３／ＳＭＡＣ均一時間分解蛍光(Homogeneous Time Resolved Fluorescence)（ＨＴＲＦ）アッセイ
[00190]  黒色平底３８４ウェルプレートを用いてアッセイを実施した。最終アッセイ体積は５０μＬであり、Ｈｉｓ−ＢＩＲ３（２４１−３５６，ＸＩＡＰ）、フルオレセイン標識したＳＭＡＣペプチド、および被験化合物を、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、１ｍＭのＥＤＴＡ、５０ｍＭのＮａＣｌ、５０μｇ／ｍｌのＢＳＡ、および０．０５％のＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８からなるアッセイ緩衝液に添加することにより調製された。反応物を室温で６０分間インキュベートし、続いて１０μｌのマウス抗６ｘＨｉｓ−テルビウム標識Ｆａｂ（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｃｉｓ−ｂｉｏ）を反応物（４０μｌ）に添加し、さらに３０分間インキュベートした。ＨＴＲＦ信号、すなわち反応により発生するフルオレセインアクセプターの発光波長（５２０ｎｍ）およびテルビウムドナーの発光波長（６１５ｎｍ）における蛍光強度の比、５２０／６１５比を、次いでＥｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒで測定した。１００％阻害についての無タンパク質対照反応および０％阻害についてのビヒクルのみの反応により発生する５２０／６１５比から、阻害データを計算した。アッセイにおける試薬の最終濃度は、１ｎＭのＮ−Ｈｉｓ−ＢＩＲ３（２４１−３５６，ＸＩＡＰ）、５ｎＭのフルオレセイン標識したＳＭＡＣペプチド、０．２５ｎＭの抗Ｈｉｓ−Ｔｂ−Ｆａｂ、および０．１％のＤＭＳＯであった。用量応答曲線を作成して、ＨＴＲＦ信号を５０％阻害するのに必要な濃度（ＩＣ５０）を決定した。化合物を３ｍＭでジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、１１種類の系列希釈濃度で評価した。ＩＣ５０およびＫｉ値を非線形回帰分析により求めた。
【０４０８】
Ｂ．  ＸＩＡＰ−ＢＩＲ２−３二量体ＳＭＡＣペプチド均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）アッセイ
[00191]  黒色平底３８４ウェルプレートを用いてアッセイを実施した。最終アッセイ体積は５０μＬであり、Ｈｉｓ−ＢＩＲ２−３（１２５−３５６，Ｃ２０２Ａ／Ｃ２１３Ｇ，ＸＩＡＰ）、フルオレセイン標識した二量体ＳＭＡＣペプチド、および被験化合物を、２０ｍＭのリン酸ナトリウム、１ｍＭのＥＤＴＡ、５０ｍＭのＮａＣｌ、５０μｇ／ｍｌのＢＳＡ、および０．０５％のＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８からなるアッセイ緩衝液に添加することにより調製された。反応物を室温で６０分間インキュベートし、続いて１０μｌのマウス抗６ｘＨｉｓ−Ｔｂ  ＩｇＧ（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｃｉｓ−ｂｉｏ）を反応物（４０μｌ）に添加し、さらに３０分間インキュベートした。ＨＴＲＦ信号、すなわち反応により発生するフルオレセインアクセプターの発光波長（５２０ｎｍ）およびテルビウムドナーの発光波長（６１５ｎｍ）における蛍光強度の比、５２０／６１５比を、次いでＥｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒで測定した。１００％阻害についての無タンパク質対照反応および０％阻害についてのビヒクルのみの反応により発生する５２０／６１５比から、阻害データを計算した。アッセイにおける試薬の最終濃度は、０．５ｎＭのＮ−Ｈｉｓ−ＢＩＲ２−３（１２５−３５６，Ｃ２０２Ａ／Ｃ２１３Ｇ，ＸＩＡＰ）、２０ｎＭのフルオレセイン標識した二量体ＳＭＡＣペプチド、０．２５ｎＭの抗Ｈｉｓ−Ｔｂ−Ｆａｂ、および０．１％のＤＭＳＯであった。用量応答曲線を作成して、ＨＴＲＦ信号を５０％阻害するのに必要な濃度（ＩＣ５０）を決定した。化合物を３ｍＭでジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、１１種類の系列希釈濃度で評価した。ＩＣ５０およびＫｉ値を非線形回帰分析により求めた。
【０４０９】
結果：
[00192]  ＸＩＡＰ  ＢＩＲ３、ＸＩＡＰ  ＢＩＲ２およびＸＩＡＰ  ＢＩＲ２−３アッセイの結果を下記の表４に示す。ＸＩＡＰ  ＢＩＲ３のＦＰＡのＩＣ５０値を下記のように報告する：“Ａ”は５０ｎＭ未満のＩＣ５０値を示す；“Ｂ”は５０〜１００ｎＭのＩＣ５０値を示す；“Ｃ”は１００ｎＭを超えるＩＣ５０値を示す。ＸＩＡＰ  ＢＩＲ３のＨＴＲＦのＩＣ５０値を下記のように報告する：“Ａ”は１０ｎＭ未満のＩＣ５０値を示す；“Ｂ”は１０〜１００ｎＭのＩＣ５０値を示す；“Ｃ”は１００ｎＭを超えるＩＣ５０値を示す。ＸＩＡＰ  ＢＩＲ２のＡｌｐｈａｓｃｒｅｅｎのＩＣ５０値を下記のように報告する：“Ａ”は２μＭ未満のＩＣ５０値を示す；“Ｂ”は２〜１２μＭのＩＣ５０値を示す；“Ｃ”は１２μＭを超えるＩＣ５０値を示す。ＸＩＡＰ  ＢＩＲ２−３のＨＴＲＦのＩＣ５０値を下記のように報告する：“Ａ”は１ｎＭ未満のＩＣ５０値を示す；“Ｂ”は１〜１０ｎＭのＩＣ５０値を示す；“Ｃ”は１０ｎＭを超えるＩＣ５０値を示す。“ＮＴ”はその化合物をそのアッセイで試験しなかったことを意味する。
【０４１０】
表４．式Ｉの化合物の阻害活性
【０４１１】
【表４−１】
2015504425.tif 000149
【０４１２】
【表４−２】
2015504425.tif 000150
【０４１３】
援用
[00193]  本明細書中に述べる特許書類および科学文献のそれぞれの開示内容全体をあらゆる目的で援用する。
【０４１４】
均等物
[00194]  本発明はその精神または本質的特徴から逸脱することなく他の特定の形態で実施できる。したがって、以上の態様はすべての観点で説明のためのものであり、本明細書に記載する発明を限定するものではない。したがって、本発明の範囲は以上の記載によってではなく特許請求の範囲により示され、特許請求の範囲の均等物の意味および範囲に含まれるすべての変更は本発明に包含されるものとする。
【国際調査報告】
2015504425.tif 000175
2015504425.tif 000176
2015504425.tif 000177