(57)【要約】  一態様において、本発明は、疎水性及び親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの特定の混合物を含む、乾燥し、流動性及び圧縮性のあるラパマイシン組成物を対象とする。他の態様において、本発明は、この組成物を製造する方法を対象とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、
ｂ．親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、
ｃ．ラパマイシンと
を含む、乾燥し、流動性及び圧縮性のある組成物。
【請求項２】
ラパマイシンと、
ｉ．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約２０００であり疎水性物質の重量パーセントが約９０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、
ii．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：３以上である（ａ）平均分子量が約２７５０であり疎水性物質の重量パーセントが約９０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、
iii．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約７，７００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、
iv．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：３以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１４，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約２０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、並びに
ｖ．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物
からなる群から選択される混合物とを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ｉ．（ａ）：（ｂ）のｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物と、
ii．ラパマイシンと
を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
ラパマイシンと、
ｉ．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L61とPluronic F127の混合物、
ii  ｗ／ｗ比率が約１：３以上であるPluronic L81とPluronic F127の混合物、
iii．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L92とPluronic F87の混合物、
iv．ｗ／ｗ比率が約１：３以上であるPluronic L92とPluronic F108の混合物、及び
ｖ．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L92とPluronic F127の混合物
からなる群から選択される混合物とを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L92とPluronic F127の混合物を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの総重量を基準として、少なくとも約５重量％の親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの総重量を基準として、少なくとも約１０重量％の親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーを含む、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
Carr指数が約２０未満である、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
Carr指数が約１０未満である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
Carr指数が約５未満である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
安定化剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
安定化剤がクエン酸である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
乾燥し、流動性及び圧縮性のあるラパマイシン組成物を調製するための方法であって、
ａ．（ｉ）疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、（ii）親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、（iii）ラパマイシンとを有機溶媒中で混合して有機混合物を形成するステップ、及び
ｂ．前記有機混合物を乾燥させるステップ
を含む方法。
【請求項１４】
ポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーが、
ｉ．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約２０００であり疎水性物質の重量パーセントが約９０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、
ii．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：３以上である（ａ）平均分子量が約２７５０であり疎水性物質の重量パーセントが約９０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、
iii．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約７，７００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、
iv．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：３以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１４，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約２０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、並びに
ｖ．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物
からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ステップ（ａ）が、
ｉ．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L61とPluronic F127の混合物、
ii  ｗ／ｗ比率が約１：３以上であるPluronic L81とPluronic F127の混合物、
iii．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L92とPluronic F87の混合物、
iv．ｗ／ｗ比率が約１：３以上であるPluronic L92とPluronic F108の混合物、及び
ｖ．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L92とPluronic F127の混合物
からなる群から選択される混合物を混合することを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
有機溶媒が、アルコール及びハロゲン化炭化水素からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
有機溶媒がエタノールである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
有機溶媒がジクロロメタンである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
少量の水が有機溶媒に加えられる、請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
水が、有機溶媒水混合物の約２５重量％未満を占める、請求項２０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１１年１２月１３日に出願した米国特許出願第１３／３２４，４０７号明細書の優先権を主張するものであり、同文献の開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
一態様において、本発明は、ラパマイシンと、疎水性及び親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物とを含む、乾燥し、流動性及び圧縮性のあるラパマイシン組成物を対象とする。他の態様において、本発明は、この組成物を製造する方法を対象とする。
【背景技術】
【０００３】
ラパマイシン、又はシロリムスは、イースター島由来の土壌試料中で、ストレプトミセス・ハイグロスコピクス（Streptomyces hygroscopicus）という細菌の産生物として最初に発見されたマクロライドである。主に免疫抑制薬として市販されているものの、より最近では、この薬物についていくつかの追加的な適応が報告されている。これらの適応のうちいくつかにおいて、ある特定の細胞型において保持され得るラパマイシンの量を増加させることが有用と思われる。
【０００４】
ある特定の細胞型における活性材料の取込みを増強するために、疎水性物質含有量が５０重量％以上のある特定のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーを医薬用賦形剤として使用することが、いくつかの刊行物に記載されている。例えば、米国特許第５，８４０，３１９号明細書；米国特許第６，０６０，５１８号明細書；Alakhov et al., “Hypersensitization of Multidrug Resistant Human Ovarian Carcinoma Cells by Pluronic P85 Block Coploymer”, Bioconjugate Chem. 7, 209-216 (1996)；及びBatrakova et al., “Anthracycline antibiotics non-covalently incorporated into copolymer micelles: in vivo evaluation of anti-cancer activity”; British Journal of Cancer 74: 1545-1552 (1996)を参照されたい。この効果は、そのような細胞におけるＡＢＣ媒介性流出機構（ABC mediated efflux mechanism）の阻害により達成されると考えられる。米国特許第６，３８７，４０６号明細書を参照されたい。
【０００５】
残念なことに、そのような疎水性のブロックコポリマー（ポロキサマーとしても公知であり、Pluronicの商品名で販売されている）は、生理的温度で、水溶液中で凝集することが見いだされている（米国特許第６，３８７，４０６号明細書、実施例３４を参照されたい）。生理的条件下でのこうした凝集は、米国特許第６，３８７，４０６号明細書に記載されているように、そのような疎水性のポロキサマーをある特定の親水性のポロキサマーとブレンドすることにより、排除することができる。
【０００６】
親水性及び疎水性のコポリマーのこうした混合物を使用することによりある特定の薬物の有効性が大きく向上することは、臨床試験において示されている。例えば、Valle et al.; “A phase 2 study of SP1049C, doxorubicin in P-gylcoprotein-targeting pluronics, in patients with advanced adenocarcinoma of the esophagus and gastroesophageal junction”; Invest New Drugs; DOI 10.1007/s10637-010-9399-1; published 24 February 2010には、SP1049C（ドキソルビシンと疎水性のPluronic L61と親水性のPluronic F127とを含む組成物）が、評価可能な患者集団（ＩＴＴ製剤（ITT formulation）中４３％）において４７％の奏功率を示した第II相試験が記載されている。これに対し、Ezdinli et al. “Chemotherapy of Advanced Esophageal Carcinoma”; Cancer 46:2149-2153; 1980には、進行食道癌患者を対象とした第II相試験において単独療法として評価した際にアドリアマイシン（遊離ドキソルビシン製剤）が引き出した奏功率はわずか５％であったことが示されている（2152ページ、第１カラムの第１段落全体を参照されたい）。
【０００７】
残念なことに、Pluronic L61をPluronic F127と水溶液中で（活性材料と共に）混合し、この混合物を凍結乾燥させて蝋状のペレットを形成することにより調製された、Valleの研究において用いられた疎水性及び親水性のブロックコポリマーの製剤は、水溶液中で速やかに溶解しない。米国特許出願公開第２００７／０１９６４９３号明細書を参照されたい。したがって、そのような組成物は、典型的な医療場面において使用する場合には注意が必要であり、その理由は、蝋状のポリマー混合物が液体の適用媒体（典型的には生理食塩水）に完全に溶解してから患者に投与することを確実にするには時間をかけなくてはならないからである。米国特許出願公開第２００７／０１９６４９３号明細書には、そのような蝋状の混合物は、糖又は類似の材料、好ましくは乳糖を、乾燥するとポリマー組成物を形成するこのような材料を水溶液に含ませることにより、ポリマーマトリックス中に組み込めば、水性媒体に速やかに溶解する、ということが開示されている。
【０００８】
米国特許出願公開第２００７／０１９６４９３号明細書には、水性媒体に速やかに溶解する混合物が開示されているが、当該組成物の蝋状の性質は、丸剤又は他の類似の投与形態での使用には不適当となる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】米国特許第５，８４０，３１９号明細書
【特許文献２】米国特許第６，０６０，５１８号明細書
【特許文献３】米国特許第６，３８７，４０６号明細書
【特許文献４】米国特許出願公開第２００７／０１９６４９３号明細書
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Alakhov et al., “Hypersensitization of Multidrug Resistant Human Ovarian Carcinoma Cells by Pluronic P85 Block Coploymer”, Bioconjugate Chem. 7, 209-216 (1996)
【非特許文献２】Batrakova et al., “Anthracycline antibiotics non-covalently incorporated into copolymer micelles: in vivo evaluation of anti-cancer activity”; British Journal of Cancer 74: 1545-1552 (1996)
【非特許文献３】Valle et al.; “A phase 2 study of SP1049C, doxorubicin in P-gylcoprotein-targeting pluronics, in patients with advanced adenocarcinoma of the esophagus and gastroesophageal junction”; Invest New Drugs; DOI 10.1007/s10637-010-9399-1; published 24 February 2010
【非特許文献４】Ezdinli et al. “Chemotherapy of Advanced Esophageal Carcinoma”; Cancer 46:2149-2153; 1980
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
したがって、疎水性ポロキサマー（このコポリマーは、室温で液体である）が呈するＡＢＣ媒介性流出阻害を有効利用できるラパマイシンの医薬製剤であって、生理的条件下で凝集せず、錠剤及び他の乾燥した適用形態の作製に適している製剤が必要である。
【００１２】
したがって、本発明の目的は、そのような疎水性ポロキサマーを含み、自由流動性で圧縮性の粉末の形態であるラパマイシン組成物を提供することである。
【００１３】
本発明のさらなる目的は、このラパマイシン組成物を製造する方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
一態様において、本発明は、
ａ．疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、
ｂ．親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、
ｃ．ラパマイシンと
を含む、乾燥し、流動性及び圧縮性のある組成物を対象とする。
【００１５】
別の態様において、本発明は、乾燥し、流動性及び圧縮性のあるラパマイシン組成物を製造するための方法であって、
ａ．
ｉ．疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、
ii．親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、
iii．ラパマイシンと
を有機溶媒中で混合して有機組成物を形成するステップ、及び
ｂ．該有機組成物を乾燥させるステップ
を含む方法を対象とする。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
一態様において、本発明は、
ａ．疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、
ｂ．親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、
ｃ．ラパマイシンと
を含む、乾燥し、流動性及び圧縮性のある組成物を対象とする。
【００１７】
好ましくは、本組成物は、ラパマイシンと、
ｉ．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約２０００であり疎水性物質の重量パーセントが約９０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、
ii．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：３以上である（ａ）平均分子量が約２７５０であり疎水性物質の重量パーセントが約９０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、
iii．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約７，７００であり疎水性物質の重量百分率が約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、
iv．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：３以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１４，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約２０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物、並びに
ｖ．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％である疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％である親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物
からなる群から選択される混合物とを含む。
【００１８】
最も好ましくは、本組成物は、
ｉ．（ａ）：（ｂ）のｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの混合物と、
ii．ラパマイシンと
を含む。
【００１９】
本明細書において用いられる場合、語句「〜以上（or higher）」は、ブロックコポリマーの比と一緒に用いられるときは、その比における２番目の数字が、提示されている数字より大きくてもよいことを意味するように意図したものである。したがって、例えば、語句「１：４以上」は、１：５を含めることを意図したものではあるが、１：２を含めることを意図したものではない。
【００２０】
本明細書において用いられる場合、用語「ラパマイシン」は、ラパマイシンの薬学的に許容される塩を含めることを意図したものである。
【００２１】
加えて、本明細書において用いられる場合、用語「約」は、分子量又は重量パーセント組成などの値と一緒に用いられるときは、書かれている値、及び、本発明の特性を有する組成物をもたらすものとして当業者であれば認識するであろう値の範囲を意味することを意図したものである。
【００２２】
さらに、本明細書において用いられる場合、用語「疎水性物質の重量パーセント」は、ブロックコポリマー中に含有されるポリ（プロピレンオキシド）の重量パーセントを意味することを意図したものである。したがって、「疎水性の」ブロックコポリマーは、ポリ（エチレンオキシド）より高い重量パーセントのポリ（プロピレンオキシド）を含有するであろうし、「親水性の」ブロックコポリマーは、ポリ（プロピレンオキシド）より高い重量パーセントのポリ（エチレンオキシド）を含有するであろう。
【００２３】
本発明の組成物において用いられるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーは、BASF Corporation社からPluronicの商標で市販されている。とりわけ、上の説明は、次に挙げるPluronicに適用される：
Pluronic L61：平均分子量が２０００であり疎水性物質の重量パーセントが９０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー。
Pluronic L81：平均分子量が２７５０であり疎水性物質の重量パーセントが９０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー。
Pluronic L92：平均分子量が３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが８０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー。
Pluronic F87：平均分子量が７７００であり疎水性物質の重量パーセントが３０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー。
Pluronic F108：平均分子量が１４，６００であり疎水性物質の重量パーセントが２０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー。
Pluronic F127：平均分子量が１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが３０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー。
【００２４】
したがって、本発明の乾燥し、流動性及び圧縮性のある賦形剤組成物は、次に挙げる混合物：
ｉ．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L61とPluronic F127の混合物、
ii  ｗ／ｗ比率が約１：３以上であるPluronic L81とPluronic F127の混合物、
iii．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L92とPluronic F87の混合物、
iv．ｗ／ｗ比率が約１：３以上であるPluronic L92とPluronic F108の混合物、
又は
ｖ．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L92とPluronic F127の混合物
を、ラパマイシンと共に含むことができる。
【００２５】
本組成物は、広範な親水性ポロキサマー対疎水性ポロキサマー比を有することができる。一実施形態において、本組成物は、親水性ポロキサマー対疎水性ポロキサマーの比１：３〜１：２５を有し、この比には１：３〜１：２５のすべての整数値（例えば、１：３、１：４、１：５、１：６など、最大１：２５）が含まれる。適当な賦形剤は、疎水性と親水性ポロキサマーの総重量を基準として少なくとも約５重量％の親水性ポロキサマー（例えば、F127）を含む（１：１９ｗ／ｗ比率）ことになり、一般的には、少なくとも約１０重量％の親水性ポロキサマーを含む（１：９ｗ／ｗ比率）ことになる。
【００２６】
本発明の組成物は、広範な総ポロキサマー（疎水性ポロキサマーと親水性ポロキサマー）対ラパマイシン比を有することができる。一般に、当該比は、すべて重量ベースで、一般的には約１００：１〜約１：１であり、典型的には約７５：１〜約２：１であり、好ましくは約６０：１〜約２０：１であり、より好ましくは約５０：１〜４０：１である。
【００２７】
本発明のラパマイシン組成物は、Carr指数が約２０未満、好ましくは約１０未満、最も好ましくは約５以下である、乾燥した流動し圧縮性を有する粉末である。これほどの流動性は、有機溶媒ではなく水を用いて作製された同一のブロックコポリマー混合物がはるかに高いCarr指数を呈することを考えると、予想外である。結果的に、当該組成物は、予想外に望ましい圧縮性を呈する。
【００２８】
さらに、用いられる疎水性ポロキサマーは液体であるが用いられる親水性ポロキサマーは蝋状の固体であることを考えると、当該組成物が自由流動性を有することは、予想外である。
【００２９】
本発明のラパマイシン組成物は、治療用量を患者にもたらすことができるように十分な量の活性成分を含み、その量は、当業者が容易に決定できる。正確な用量は、対象の年齢、サイズ、性別、及び状態、並びに治療しようとする障害の重症度などによって異なるであろうし、医師の裁量に任されるであろうということは、理解されよう。
【００３０】
ポロキサマー賦形剤を混合したものとラパマイシンに加え、本発明の医薬組成物は、他の薬学的に許容される賦形剤、例えば、糖、ポリアルコール、可溶性ポリマー、塩、及び脂質をさらに含有することができる。用いることができる適当な糖及びポリアルコールとしては、限定するものではないが、乳糖、ショ糖、マンニトール、及びソルビトールが挙げられる。用いることができる可溶性ポリマーの実例（illustrative）は、ポリオキシエチレン、ポロキサマー、ポリビニルピロリドン、及びデキストランである。有用な塩としては、限定するものではないが、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、及び塩化カルシウムが挙げられる。用いることができる脂質としては、限定するものではないが、脂肪酸エステル、糖脂質、及びリン脂質が挙げられる。典型的には、そのような追加的な賦形剤は、乾燥したポリオキサマー（polyoxamer）／ラパマイシン組成物とブレンドされる。
【００３１】
典型的には、本発明の組成物は、アルカリ環境におけるラパマイシンの分解を防止する安定化剤をさらに含む。製剤がアルカリ性にならないようにするいかなる薬学的に許容されるｐＨ調整剤を用いてもよい。そのような安定化剤の例としては、アスコルビン酸、乳酸、及びクエン酸が挙げられ、クエン酸がとりわけ好ましい。
【００３２】
本発明の乾燥し、流動性及び圧縮性のあるラパマイシン組成物は、
ａ．（ｉ）疎水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、（ii）親水性のポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーと、（iii）ラパマイシンとを有機溶媒中で混合して有機混合物を形成するステップ、及び
ｂ．該有機混合物を乾燥させるステップ
を含む方法により調製できる。
【００３３】
好ましくは、本組成物は、
（Ａ）ラパマイシンを、
ｉ．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約２０００であり疎水性物質の重量パーセントが約９０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー、
ii．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：３以上である（ａ）平均分子量が約２７５０であり疎水性物質の重量パーセントが約９０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー、
iii．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約７，７００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー、
iv．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：３以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１４，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約２０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー、並びに
ｖ．ａ：ｂのｗ／ｗ比率が約１：４以上である（ａ）平均分子量が約３６５０であり疎水性物質の重量パーセントが約８０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー及び（ｂ）平均分子量が約１２，６００であり疎水性物質の重量パーセントが約３０％であるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマー
からなる群から選択されるポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）−ポリ（エチレンオキシド）ブロックコポリマーの組合せと有機溶媒中で混合して有機混合物（mixtur）を形成すること、及び
（Ｂ）該有機混合物を乾燥させること
により形成される。
【００３４】
最も好ましくは、当該組成物は、
ａ．ラパマイシンを、
ｉ．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L61とPluronic F127の混合物、
ii  ｗ／ｗ比率が約１：３以上であるPluronic L81とPluronic F127の混合物、
iii．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L92とPluronic F87の混合物、
iv．ｗ／ｗ比率が約１：３以上であるPluronic L92とPluronic F108の混合物、
及び
ｖ．ｗ／ｗ比率が約１：４以上であるPluronic L92とPluronic F127の混合物
からなる群から選択される１又は２以上の構成要素と、有機溶媒を用いて混合して有機組成物を形成すること、及び
ｂ．該有機組成物を乾燥させること
により調製される。
【００３５】
用いることができる好ましい有機溶媒としては、アルコール、とりわけエタノール、及び、ハロゲン化炭化水素、とりわけジクロロメタンが挙げられる。混合は、室温及び室圧で（at room temperature and pressure）典型的に実施されるが、それより高い又は低い温度及び／又は圧力を用いてもよい。
【００３６】
ある特定の実施形態において、少量の水を有機溶媒とブレンドすることが有用である場合がある。典型的には、そのような状況においては、水は、水／有機溶媒混合物の約２５重量％未満、好ましくは約１０重量％未満を占める。
【００３７】
いかなる従来の乾燥方法も利用できる。好ましい乾燥方法は、真空中での乾燥、及び、噴霧乾燥である。これらの方法を利用する際は、それらを行うための従来の手法のいずれを用いてもよい。
【００３８】
ある特定の実施形態において、ラパマイシンは、ポロキサマー／有機溶媒混合物が乾燥される前にラパマイシンを当該混合物に加えることにより、混合されたポロキサマー賦形剤中に組み込むことができる。他の実施形態において、ラパマイシン組成物は、ラパマイシンを、予め形成された流動性の粉末賦形剤とブレンドすることにより、形成できる。
【００３９】
本発明は、次に記載する本発明の実施例によりさらに例証できるが、これらの実施例は、単に例証の目的で含めるものであり、特に指示がない限り、本発明の範囲を限定することを意図したものではないことは理解されよう。本明細書、実施例、及び特許請求の範囲におけるすべてのパーセント、比、及び部数は、特に明記しない限り、重量ベースであり、近似値である。
［実施例］
【実施例１】
【００４０】
ＡＢＣ流出機構の阻害剤としてのPluronicの効果。
ＭＣＦ−７  ＡＤＲアドリアマイシン抵抗性細胞のコンフルエントな単層を洗浄し、トリプシン（typsin）−ＥＤＴＡでトリプシン処理し、ｐＨ７．２のＰＢＳで洗浄した。洗浄後の細胞を、チューブ１本当たり５×１０５細胞（５００マイクロリットル）として、５ｍｌのポリスチレンチューブ中に撒いた。チューブを１２００ＲＰＭで遠心分離し、ＰＢＳをデカントした。次いで細胞を、以下の表１に列挙するとおり、５００ｎＭのローダミン123と多様な濃度のPluronicとを含有するＰＢＳに再懸濁させたが、この際、Pluronicを含有しない参照試料及び０．０５％のL61を含有する参照試料を、各試験組に含めた。すべての試料を調製し、３連で試験したが、提示されている結果は、その平均を表すものである。細胞は、３７℃にて５％ＣＯ２で４５分間インキュベートした。インキュベーションの後、試料を４℃に冷却し、１２００ＲＰＭで遠心分離し、４ｍｌの冷ＰＢＳで１回洗浄し、５００マイクロリットルの冷ＰＢＳに再懸濁させた。１ウェル当たり３００マイクロリットルの細胞懸濁液を９６ウェルのポリスチレンプレート中に移し、λＥｘ４８５ｎｍ、及び発光λＥｍ５３０ｎｍで蛍光を測定した。Pluronicを含有しない試料の蛍光に対する、Pluronicでインキュベートした試料の蛍光の増加を、ローダミン123の取込みの増強と解釈する。この増強を、Pluronic L61の０．０５％溶液によりもたらされた効果に対して正規化する。
【００４１】
【表１】
2015513311.tif 000002
【００４２】
上の結果から、ＰＯＥ−ＰＯＰ−ＰＯＥという構造の多元ポリマー（multiple polymer）は、ＭＣＦ−７  ＡＤＲ細胞へのローダミン123の取込み増強をもたらすことが実証され、これらの細胞におけるＡＢＣ流出機構が阻害されると解釈される。とりわけ有効なPluronicは、L81、L92、及びL61である。
【実施例２】
【００４３】
Pluronic混合物の付着性
以下に列挙するPluronicの混合物を、メタノール又はジクロロメタンのいずれかを溶媒として用い、下記の手順を用いて調製した。以下の表２に記載されているように、正確に計量された量のPluronicを、目盛付きのプラスチックバイアルに入れた。無水のエタノール又はジクロロメタンのいずれか５ｍＬを各バイアルに加え、均質になるまで材料を混合した。次いで、この混合物をSpeedVacシステムに入れ、こぼれないように試料を遠心分離しながら、減圧下で溶媒を除去した。残りの材料をガラス棒で粉砕して、固体を粉末に変換させた。続いて、各バイアルから材料を、逆さまにしたバイアルをタッピングすることにより別の計量された容器中に移し、移された量を重量ベースで決定した。材料は、質量の少なくとも９５％が移されていれば非付着性とみなした。結果を以下の表２に列挙する。
【００４４】
【表２】
2015513311.tif 000003
【００４５】
上の結果から、本発明の組成物は、流動性のある、非付着性の粉末であることが実証される。
【実施例３】
【００４６】
Pluronic混合物の圧縮性（Carr指数により示す）
上で作製した非付着性の組成物のそれぞれのかさ密度（ρＢ）、タップ密度（ρＴ）を測定し、Carr指数Ｃ＝１００＊（１−ρＢ／ρＴ）を計算した。対照として、水を溶媒として用いて同一の組成物を調製し、続いてこの水溶液を凍結乾燥させた。当該組成物のCarr指数を、同様に計算した。当該測定の結果を以下の表３に示す。
【００４７】
【表３】
2015513311.tif 000004
【００４８】
上の結果から、本発明の方法により作製した粉末の方が、予想外に低いCarr指数を呈し、したがって圧縮性が高いということが示される。
【実施例４】
【００４９】
ラパマイシン組成物の調製
１グラムのラパマイシンを２５ｍｌのエタノールに溶解した。その後、この溶液を、２０％のF-127のエタノール／水混合物（９７／３  Ｖ／Ｖ）溶液２００ｍｌに溶解した５グラムのL-92と混合した。この溶液を、常に撹拌しながら２０〜２５℃で３０分間インキュベートした。speed vacを使用してエタノールを除去し、高真空を用いて製剤をさらに乾燥させた。
【００５０】
製剤の組成：
F-127  ４０．０ｇ
L-92  ５．０ｇ
ラパマイシン  １．０ｇ
【実施例５】
【００５１】
F-127とL-92とクエン酸とを用いたラパマイシン組成物の調製
１グラムのラパマイシンを２５ｍｌのエタノールに溶解した。その後、この溶液を、２０％のF-127のエタノール／水混合物（９７／３  Ｖ／Ｖ）溶液２００ｍｌに溶解した５グラムのL-92及び２グラムのクエン酸と混合した。この溶液を、常に撹拌しながら２０〜２５℃で３０分間インキュベートした。speed vacを使用してエタノールを除去し、高真空を用いて製剤をさらに乾燥させた。
【００５２】
製剤の組成：
F-127  ４０．０ｇ
L-92  ５．０ｇ
ラパマイシン  １．０ｇ
クエン酸  ２．０ｇ
【実施例６】
【００５３】
F-127とL-92とクエン酸とを用いたラパマイシン組成物の調製
１グラムのラパマイシンを２５ｍｌのエタノールに溶解した。その後、この溶液を、２０％のF-127のエタノール／水混合物（９７／３  Ｖ／Ｖ）溶液２００ｍｌに溶解した５グラムのL-92及び２グラムのクエン酸と混合した。この溶液を、常に撹拌しながら２０〜２５℃で３０分間インキュベートした。speed vacを使用してエタノールを除去し、高真空を用いて製剤をさらに乾燥させた。この溶液を蒸留水に溶解し、凍結乾燥させた。
【００５４】
製剤の組成：
F-127  ４０．０ｇ
L-92  ５．０ｇ
ラパマイシン  １．０ｇ
クエン酸  ２．０ｇ
【実施例７】
【００５５】
製剤の溶解性及び安定性
実施例４〜６に従って調製した固形製剤２３ｍｇを、１ｍｌの水を加えることにより再構成した。すべての試料の溶解性を、ボルテックスにかけながら試料を混合することにより試験した。溶解後の試料を、目視検査した。結果を表４に示す。
【００５６】
【表４】
2015513311.tif 000005
【００５７】
この結果から、本発明の圧縮性のラパマイシン製剤は速やかに溶解するであろうということが示される。この結果からは、クエン酸の安定化効果も実証される。
【実施例８】
【００５８】
ラパマイシン製剤のバイオアベイラビリティー
上の実施例５に記載されている方法及び成分を用いて、ある量の「ポリマー状ラパマイシン」を調製した。対照として、製剤化されていないラパマイシンを含む「遊離ラパマイシン」組成物も調製した。
【００５９】
ポリマー状ラパマイシン製剤を、非近交系の雌のＩＣＲマウスの２つの群に、単回投与として（経口又は静脈内のいずれかで）投与した。遊離ラパマイシンは、第３群のみに経口投与した。
【００６０】
定期的に、すなわち以下の表５に示してある時点で、各群のマウス３匹から血液試料を採取した。全血をＥＤＴＡ−血液チューブ中に回収し、数回上下逆転させてから、実験期間を通じて、遮光容器（dark container）中の氷上で０℃にて保存した。実験の終了時点で、すべての試料は、保存のために−７０℃に置いた。ラパマイシンは光感受性であることから、製剤化した薬物及び血液試料は、実験期間を通じて常に遮光した。
【００６１】
個々のマウスのデータを用いて薬物動態学的解析を実施したが、この解析のために、PK Solutionsソフトウェア（Version 2.0）を用いて、各群について平均値及び平均値の標準誤差（ＳＥＭ）を計算した。当該解析の結果を以下の表５に要約する。
【００６２】
【表５】
2015513311.tif 000006
【００６３】
上のデータは、ポリマー状ラパマイシン製剤が、ラパマイシンの安定性とバイオアベイラビリティーの両方を顕著に増強し、当該薬物の経口投与を可能にすることを示している。
【国際調査報告】
2015513311.tif 000007