(57)【要約】  本発明は、一般式Ｉ：2015533778.tif 000062［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａ及びＷはここに記載の通りである］を有する新規化合物、それらの化合物を含む組成物、及びそれらの化合物を使用する方法を提供する。
2015533778.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
2015533778.tif 000056
［式中、
Ｒ１は、フェニル、ピリジニル、チエニル、ピリミジニル、ピラゾリル、ピリジノニルもしくはピロリルであって、非置換であるか、又はＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、ハロゲンもしくはトリフルオロメチルで一度か二度置換されており、
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル又はＣ１−６アルキルスルホニルであり、
Ａは、フェニル、ピリジニル、ピリジノニル、チエニル、ピラゾリルもしくはピロリルであって、非置換であるか、又はＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシもしくはトリフルオロメチルで一度か二度か三度置換されており、
Ｗは、−Ｎ−又は−ＣＨである］
の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、
Ｒ１が、非置換であるか、又はＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルもしくはハロゲンで一度か二度置換されているフェニル、ピリジニル、あるいはチエニルであり；
Ｒ２が、水素又はＣ１−６アルキルスルホニルであり、
Ａが、フェニル又はピリジニルであって、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、ハロゲンもしくはヒドロキシで一度か二度か三度置換されており、
Ｗが、−Ｎ−又は−ＣＨである、
化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の化合物であって、
Ｒ１が、非置換であるか、又はメトキシ、メチル、フルオロもしくはクロロで一度か二度置換されているフェニル、ピリジニル、あるいはチエニルであり、
Ｒ２が、水素又はメチルスルホニルであり、
Ａが、フェニル又はピリジニルであって、エトキシ、メトキシ、メチル、フルオロ、クロロ又はヒドロキシで一度か二度か三度置換されており、
Ｗが、−Ｎ−又は−ＣＨである、
化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ１が、非置換であるか、又はＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルもしくはハロゲンで一度か二度置換されているフェニル、ピリジニル、あるいはチエニルであり、
Ｒ２が、水素であり、
Ａが、フェニル又はピリジニルであって、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、ハロゲンもしくはヒドロキシで一度か二度か三度置換されており、
Ｗが、−ＣＨである、
請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が、非置換であるか、又はメトキシ、メチル、フルオロもしくはクロロで一度か二度置換されているフェニル、ピリジニル、あるいはチエニルであり、
Ｒ２が、水素であり、
Ａが、フェニル又はピリジニルであって、エトキシ、メトキシ、メチル、フルオロ、クロロ又はヒドロキシで一度か二度か三度置換されており、
Ｗが、−ＣＨである、
請求項１、２又は４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１が、フェニルであり、
Ｒ２が、水素であり、
Ａが、フェニルであって、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲン又はヒドロキシで一度か二度置換されており、
Ｗが、−Ｎ−である、
請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１が、フェニルであり、
Ｒ２が、水素であり、
Ａが、フェニルであって、メトキシ、フルオロ、クロロ又はヒドロキシで一度か二度置換されており、
Ｗが、−Ｎ−である、
請求項１、２又は６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
（Ｒ）−２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−セタミド、
２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
（Ｒ）−２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
（Ｓ）−２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−（４’−メチル−［３，３’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド、
２−（２’−メトキシ−［３，４’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド、
２−［５−（５−エトキシ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−［５−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−（５’−フルオロ−２’−メトキシ−［３，４’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド、
２−（５’−クロロ−［３，３’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｏ−トリル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−フルオロ−フェニル）−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｍ−トリル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−クロロ−フェニル）−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトアミド、
２−［５−（２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−チオフェン−３−イル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｐ−トリル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（３−クロロ−フェニル）−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（４−クロロ−フェニル）−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（３−メトキシ−フェニル）−アセトアミド、
Ｎ−｛２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセチル｝−メタンスルホンアミド、
２−［５−（５−クロロ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ピリジン−２−イル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−チオフェン−２−イル−アセトアミド、
２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
（Ｒ）−２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
（Ｓ）−２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
（Ｒ）−２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
（Ｓ）−２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−［６−（３−メトキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、及び
（Ｒ）−２−［６−（３−メトキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド
から選択される、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
（ａ）触媒と塩基の存在下、式（Ａ）
2015533778.tif 000057
の化合物と、
2015533778.tif 000058
、
（ｂ）触媒と塩基の存在下、式（Ｂ）
2015533778.tif 000059
の化合物と、
2015533778.tif 000060
、
（ｃ）ＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡの存在下、式（Ｃ）
2015533778.tif 000061
の化合物と、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミド
との反応を含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物の調製のための方法であって、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｗ及びＡは、請求項１から７のいずれか一項に記載の通りであり、Ｘは、クロロ、ブロモ又はヨードである
、方法。
【請求項１０】
治療的活性物質として使用するための、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１から９のいずれか一項に従う化合物及び治療的に不活性な担体を含む、薬学的組成物。
【請求項１２】
がん、特に、膀胱がん、頭頸部がん、乳がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、卵巣がん（ｏｖａｒｙ  ｃａｎｃｅｒ）、大腸がん、肺がん、脳腫瘍、喉頭がん、リンパ系のがん、肝臓がん、皮膚がん、造血系のがん、泌尿生殖器のがん、消化器がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、骨がん、小細胞肺がん、神経膠腫、結腸直腸がん及び膵臓がんの治療のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１３】
胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は結腸直腸がんの治療のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１４】
がん、特に、膀胱がん、頭頸部がん、乳がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、卵巣がん（ｏｖａｒｙ  ｃａｎｃｅｒ）、大腸がん、肺がん、脳腫瘍、喉頭がん、リンパ系のがん、肝臓がん、皮膚がん、造血系のがん、泌尿生殖器のがん、消化器がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、骨がん、小細胞肺がん、神経膠腫、結腸直腸がん及び膵臓がんの治療用医薬の調製のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１５】
胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は結腸直腸がんの治療用医薬の調製のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１６】
がん、特に、膀胱がん、頭頸部がん、乳がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、卵巣がん（ｏｖａｒｙ  ｃａｎｃｅｒ）、大腸がん、肺がん、脳腫瘍、喉頭がん、リンパ系のがん、肝臓がん、皮膚がん、造血系のがん、泌尿生殖器のがん、消化器がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、骨がん、小細胞肺がん、神経膠腫、結腸直腸がん及び膵臓がんの治療のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は結腸直腸がんの治療のための、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
請求項９の方法に従って製造される場合の請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物を有効量投与することを含む、がんの治療のための方法。
【請求項２０】
上記で説明されている発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳動物における治療に有用であり、特に細胞増殖を阻害し、がんの治療のために有用なＣＤＫ８又はサイクリンＣを過剰発現させる細胞周期停止及びアポトーシスを引き起こすのに有用な有機化合物に関する。
【０００２】
発明の分野
サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）複合体は、セリン／スレオニンキナーゼファミリーによく保存されており、調節パートナー（通常、サイクリン）の結合により活性化されることが示されている。合計２０のＣＤＫファミリーメンバー、及び配列と機能の類似性に基づいた５のＣＤＫ様タンパク質がある。ＣＤＫは種々の主要な細胞周期の移行を調節し、転写、アポトーシス及び神経機能の調節において重要な役割を果たしている。
【０００３】
ＣＤＫの調節異常は、がん、アルツハイマー型認知症（ＡＤ）、パーキンソン病、脳卒中／虚血、疼痛、外傷性脳損傷、腎疾患、炎症病態、２型糖尿病、ウイルス感染（ＨＳＶ、ＨＣＭＶ、ＨＰＶ、ＨＩＶ）などの病理学的事象、並びに増殖性及び非増殖性疾患の両方に関連している。
【０００４】
ＣＤＫ８は、サイクリンＣ依存性ＣＤＫファミリーキナーゼであり、転写調節因子としてと機能している。ＣＤＫ８のいくつかのリン酸化の標的は同定されており、ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（ＲＮＡＰＩＩ）Ｃ末端ドメイン（ＣＴＤ）、ヒストンＨ３、一般的な転写因子（ＧＴＦ）のサブユニット及び特定の転写活性化因子が含まれる。ＣＤＫ８はまた、βカテニン経路、血清応答ネットワーク、腫瘍増殖因子ＴＧＦβシグナル伝達経路、ｐ５３経路などの発がんシグナル伝達経路において、及び、甲状腺ホルモン依存性転写において、転写活性化補助因子とされてきた。ＣＤＫ８及びサイクリンＣの共局在化は、ＡＤなどの神経変性疾患においても報告された。ＣＤＫ８は、しばしば、大腸がん、胃がん及び黒色腫など種々のヒトのがんにおいて異常調節されることが見出された。ショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）によるＣＤＫ８の阻害は、がん細胞の増殖を阻害し、インビトロ及びインビボモデルにおいて細胞周期停止及びアポトーシスを誘導する。オオアザミ（シリバム・マリアナム）から分離されたシリマリンの主要な有効成分であるシリビニンは、ＣＤＫ８発現のダウンレギュレーションを経て大腸がんにおける強い細胞増殖阻害を示したものの、臨床開発中の知られている直接的なＣＤＫ８阻害剤は存在しない。したがって、がん患者のためのＣＤＫ８阻害剤を開発するという、対処されていない重大な医学的需要が存在する。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の目的は、式Ｉの新規化合物、それらの製造、本発明に従う化合物に基づく医薬及びそれらの生産、並びにがんの治療のための式Ｉの化合物の使用である。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
定義
本明細書で使用される場合、用語「Ｃ１−６アルキル」は、単独又は組み合わせで、１から６個、特に１から４個の炭素原子を含有する、飽和直鎖もしくは分枝鎖状アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、１−ブチル、２−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどを意味する。特定の「Ｃ１−６アルキル」基は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルである。
【０００７】
用語「Ｃ１−６アルコキシ」とは、単独又は組み合わせで、「Ｃ１−６アルキル−Ｏ−」を意味し（「Ｃ１−６アルキル」は上記で定義した通りである）、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、２−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ等である。特定の「Ｃ１−６アルコキシ」基は、メトキシ及びエトキシであり、とりわけメトキシである。
【０００８】
用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素を意味する。ハロゲンは特に、フッ素又は塩素である。
【０００９】
用語「ヒドロキシ」は、単独又は組み合わせで、−ＯＨ基を指す。
【００１０】
用語「カルボニル」は、単独又は組み合わせで、−Ｃ（Ｏ）−基を指す。
【００１１】
用語「スルホニル」は、単独又は組み合わせで、−Ｓ（Ｏ）２−基を指す。
【００１２】
本発明に記載の化合物は、それらの薬学的に許容される塩の形態で存在し得る。用語「薬学的に許容される塩」は、式Ｉの化合物の生物学的有効性及び特性を保持し、且つ適切な非毒性の有機酸又は無機酸あるいは有機塩基又は無機塩基から形成される一般的な酸付加塩若しくは塩基付加塩を指す。酸付加塩の例としては、塩化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸及び硝酸等の無機酸から誘導されるもの、並びに、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸等の有機酸から誘導されるものが挙げられる。塩基付加塩の例としては、アンモニウム、カリウム、ナトリウム及び第四級アンモニウムの水酸化物、例えば、テトラメチルアンモニウム水酸化物から誘導されるものが挙げられる。薬学的化合物の塩への化学修飾は、化合物の物理的及び化学的安定性、吸湿性、流動性並びに溶解度を改善するために、薬化学者にとって周知の技術である。その技術は、例えば、Ｂａｓｔｉｎ  Ｒ．Ｊ．等，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ２０００，４，４２７−４３５；又は、Ａｎｓｅｌ，Ｈ．等．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，第６版（１９９５），ｐｐ．１９６及び１４５６−１４５７に記載されている。特に、式Ｉの化合物のナトリウム塩である。
【００１３】
一又はいくつかのキラル中心を含有する一般式Ｉの化合物は、ラセミ体、ジアステレオマー混合物、又は光学活性な単一の異性体のいずれかとして存在し得る。ラセミ体は、既知の方法によりエナンチオマーに分離され得る。特に、結晶化により分離され得るジアステレオマー塩は、光学活性な酸、例えばＤ−もしくはＬ−酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸又はカンファースルホン酸、との反応によりラセミ混合物から生成される。
【００１４】
ＣＤＫ８又はサイクリンＣの阻害剤
本発明は、一般式Ｉ：
2015533778.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、フェニル、ピリジニル、チエニル、ピリミジニル、ピラゾリル、ピリジノニルもしくはピロリルであって、非置換であるか、又はＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、ハロゲンもしくはトリフルオロメチルで一度か二度置換されており、
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル又はＣ１−６アルキルスルホニルであり、
Ａは、フェニル、ピリジニル、ピリジノニル、チエニル、ピラゾリルもしくはピロリルであって、非置換であるか、又はＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシもしくはトリフルオロメチルで一度か二度か三度置換されており、
Ｗは、−Ｎ−又は−ＣＨである］
を有する新規化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１５】
本発明の別の実施態様は、（ｉｉ）式Ｉ
［式中、
Ｒ１は、非置換であるか又はＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルもしくはハロゲンで一度か二度置換されているフェニル、ピリジニル、あるいはチエニルであり、
Ｒ２は、水素又はＣ１−６アルキルスルホニルであり、
Ａは、フェニル又はピリジニルであって、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、ハロゲンもしくはヒドロキシで一度か二度か三度置換されており、
Ｗは、−Ｎ−又は−ＣＨである］
の化合物又はその薬学的に許容される塩である。
【００１６】
本発明の更なる実施態様は、（ｉｉｉ）式Ｉ
［式中、
Ｒ１は、非置換であるか、又はメトキシ、メチル、フルオロもしくはクロロで一度か二度置換されているフェニル、ピリジニル、あるいはチエニルであり、
Ｒ２は、水素又はメチルスルホニルであり、
Ａは、フェニル又はピリジニルであって、エトキシ、メトキシ、メチル、フルオロ、クロロもしくはヒドロキシで一度か二度か三度置換されており、
Ｗは、−Ｎ−又は−ＣＨである］
の化合物又はその薬学的に許容される塩である。
【００１７】
本発明の別の実施態様は、（ｉｖ）式Ｉ
[式中、
Ｒ１は、非置換であるか、又はＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルもしくはハロゲンで一度か二度置換されているフェニル、ピリジニル、あるいはチエニルであり、
Ｒ２は、水素であり、
Ａは、フェニル又はピリジニルであって、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、ハロゲンもしくはヒドロキシで一度か二度か三度置換されており、
Ｗは、−ＣＨである]
の化合物又はその薬学的に許容される塩である。
【００１８】
本発明の更なる実施態様は、（ｖ）式Ｉ
[式中、
Ｒ１は、非置換であるか、又はメトキシ、メチル、フルオロもしくはクロロで一度か二度置換されているフェニル、ピリジニル、あるいはチエニルであり、
Ｒ２は、水素であり、
Ａは、フェニル又はピリジニルであって、エトキシ、メトキシ、メチル、フルオロ、クロロもしくはヒドロキシで一度か二度か三度置換されており、
Ｗは、−ＣＨである]
の化合物又はその薬学的に許容される塩である。
【００１９】
本発明の別の実施態様は、（ｖｉ）式Ｉ
[式中、
Ｒ１は、フェニルであり、
Ｒ２は、水素であり、
Ａは、フェニルであって、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲン又はヒドロキシで一度か二度置換されており、
Ｗは、−Ｎ−である]
の化合物又はその薬学的に許容される塩である。
【００２０】
本発明の更なる実施態様は、（ｖｉｉ）式Ｉ
[式中、
Ｒ１は、フェニルであり、
Ｒ２は、水素であり、
Ａは、フェニルであって、メトキシ、フルオロ、クロロ又はヒドロキシで一度か二度置換されており、
Ｗは、−Ｎ−である]
の化合物又はその薬学的に許容される塩である。
【００２１】
式Ｉの特定の化合物は、それらの活性データ、ＮＭＲデータ及びＭＳデータを含み、以下の表１、２及び３にまとめられている。
【００２２】
2015533778.tif 000004
2015533778.tif 000005
2015533778.tif 000006
2015533778.tif 000007
2015533778.tif 000008
【００２３】
2015533778.tif 000009
2015533778.tif 000010
2015533778.tif 000011
2015533778.tif 000012
2015533778.tif 000013
2015533778.tif 000014
【００２４】
2015533778.tif 000015
【００２５】
式Ｉのより特定の化合物には、下記のものが含まれる：
（Ｒ）−２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−セタミド、
２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
（Ｒ）−２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｏ−トリル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−フルオロ−フェニル）−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−クロロ−フェニル）−アセトアミド、
２−［５−（２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−チオフェン−３−イル−アセトアミド、
２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
（Ｒ）−２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、
２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド、及び
（Ｒ）−２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド。
【００２６】
合成
本発明の化合物は、任意の一般的な方法によって調製され得る。これらの化合物及びその出発物質を合成するための適切な方法を下記のスキーム並びに実施例において提供する。特に断らない限り、すべての置換基、特にＲ１、Ｒ２、Ａ及びＷは、上記で定義した通りである。また、明示的に別段の記載がない限り、すべての反応、反応条件、略語及び記号は、有機化学の当業者によく知られている意味を有する。
【００２７】
中間体の一般的合成経路（スキーム１）
2015533778.tif 000016
【００２８】
中間体ＩＩ−１、ＩＩ−２及びＩＩは、スキーム１に従って調製され得る。方法１）により、室温で３日間、ＤＣＭ中のＴＥＡの存在下、２，６−ジクロロ−ピラジンと２−アミノ−２−フェニル−アセトアミドをカップリングさせて、中間体ＩＩ−１を得るか、あるいは、方法２）により、３，５−ジブロモ−ピリジンとアミノ−フェニル−酢酸をカップリングさせて、中間体ＩＩＩを得る。この反応は、ＤＭＳＯ又は１，４−ジオキサンなどの適切な溶媒中、適切な銅触媒、リガンド、例えばジメチルルアミノ−酢酸又はＬ−プロリン、及び適切な塩基、例えばＫ２ＣＯ３又はＣｓ２ＣＯ３の存在下で行われ得る。次いで、中間体ＩＩＩがアンモニア／ジオキサン溶液と反応し、ＤＭＦ中のＨＡＴＵ下でアミドＩＩ−２を得る。中間体ＩＩは、方法３）により調製され得る。アミンＩＶとアルデヒドとのストレッカー反応で中間体Ｖを得る。濃ＨＣｌ溶液下、Ｖの加水分解で中間体ＩＩを得る。
【００２９】
化合物Ｉａの一般的合成経路（スキーム２）
2015533778.tif 000017
【００３０】
化合物Ｉａは、スキーム２に従って調製され得る。化合物Ｉａを得るための一つの方法は、化合物ＩＩとボロン酸又はボロン酸エステルとのカップリングでＩａを得ることである。この反応は、ＤＭＥ／Ｈ２Ｏ、１，４−ジオキサン／Ｈ２Ｏ又はＤＭＦ／Ｈ２Ｏなどの適切な溶媒中、適切なＰｄ触媒、例えばＰｄ（ＰＰｈ３）４又はＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２、及び適切な塩基、例えばＫ３ＰＯ４、Ｎａ２ＣＯ３、Ｋ２ＣＯ３又はＣｓ２ＣＯ３の存在下で行われ得る。あるいは、化合物Ｉａは、適切なＰｄ触媒の存在下で化合物ＩＩとビス（ピナコラート）ジボロンとのカップリングと、それに続く、ボロン酸ＶＩを生じる加水分解反応によっても調製され得る。ボロン酸ＶＩとハロゲン化物との鈴木カップリング反応は、結果として化合物Ｉａを生じる。
【００３１】
化合物Ｉｂの一般的合成経路（スキーム３）
2015533778.tif 000018
【００３２】
化合物Ｉｂは、スキーム３に従って調製され得る。中間体ＩＩＩとボロン酸又はボロン酸エステルとのカップリングでＶＩＩが生じる。この反応は、適切なＰｄ触媒、例えばＰｄ（ＰＰｈ３）４又はＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２、及び適切な塩基、例えばＫ３ＰＯ４、Ｎａ２ＣＯ３、Ｋ２ＣＯ３又はＣｓ２ＣＯ３の存在下で行われ得る。ＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡの条件下での化合物ＶＩＩとＣ１−６アルキルスルホニルアミドの縮合は、結果として化合物Ｉｂを生じさせる。
【００３３】
本発明はまた、
（ａ）触媒と塩基の存在下、式（Ａ）
2015533778.tif 000019
の化合物と、
2015533778.tif 000020
、
（ｂ）触媒と塩基の存在下、式（Ｂ）
2015533778.tif 000021
の化合物と、
2015533778.tif 000022
、
（ｃ）ＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡの存在下、式（Ｃ）
2015533778.tif 000023
の化合物と、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミド、
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａ及びＷは特に断らない限り、上で定義した通りであり、Ｘはクロロ、ブロモ又はヨードである］
との反応を含む、式Ｉの化合物の調製のための方法に関する。
【００３４】
工程（ａ）において、触媒は、例えばＰｄ（ＰＰｈ３）４又はＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２であってもよく、塩基は例えばＫ３ＰＯ４、Ｎａ２ＣＯ３、Ｋ２ＣＯ３又はＣｓ２ＣＯ３であってもよく；
工程（ｂ）において、触媒は例えばＰｄ（ＰＰｈ３）４であってもよく、塩基は例えばＫ２ＣＯ３であってもよい。
【００３５】
上記の方法に従って製造される場合の式Ｉの化合物もまた、本発明の目的物である。
【００３６】
薬学的組成物及び投与
本発明はまた、治療的活性物質として使用するための式Ｉの化合物に関する。
【００３７】
別の実施態様は、本発明の化合物及び治療上不活性な担体、希釈剤もしくは賦形剤を含有する薬学的組成物又は医薬、並びにそのような組成物及び医薬を調製するための、本発明の化合物の使用方法を提供する。一実施例では、式Ｉの化合物は、周囲温度で、適切なｐＨ及び所望の純度で、生理学的に許容される担体、すなわち、用いる用量及び濃度でレシピエントに対して非毒性の担体と混合することにより生薬投与形態に製剤化される。製剤のｐＨは主に、特定の用途及び化合物の濃度に依存するが、特に約３から約８までの任意の範囲である。一実施例では、式Ｉの化合物は、酢酸緩衝液中ｐＨ５で処方される。別の実施態様において、式Ｉの化合物は無菌である。該化合物は、例えば、固体又は非晶質組成物として、凍結乾燥製剤として、又は水溶液として保存されてもよい。
【００３８】
組成物は、良好な医療行為に合致した方法で処方され、投与され、投薬される。この観点において考慮すべき要因には、治療すべき特定の障害、治療すべき特定の哺乳類、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤送達部位、投与方法、投与日程、及び医療従事者に知られる他の要因が含まれる。投与されるべき化合物の「有効量」は、このような考慮により決定され、ＣＤＫ８活性を阻害するのに必要な最小量となる。例えば、このような量は、正常な細胞、又は哺乳動物全体に毒性である量より少ないであろう。
【００３９】
一例において、用量当たり非経口投与での本発明の化合物の薬学的有効量は、１日当たり約０．１から５０ｍｇ／患者の体重ｋｇの範囲であり、使用される化合物の通常の初期範囲は約０．３から約１５ｍｇ／ｋｇ／日である。別の実施態様において、錠剤及びカプセルなどの経口単位剤形は、好ましくは約５ｍｇから約５００ｍｇの本発明の化合物を含有する。
【００４０】
本発明の化合物は、経口、局所（口腔及び舌下を含む）、直腸内、膣内、経皮、非経口、皮下、腹腔内、肺内、皮内、髄腔内及び硬膜外及び鼻腔内、並びに、必要に応じて局所治療、病巣内投与を含む任意の適切な方法により投与され得る。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与が含まれる。
【００４１】
本発明の化合物は、例えば、錠剤、散剤、カプセル剤、溶液剤、分散剤、懸濁剤、シロップ剤、スプレー剤、坐剤、ゲル剤、乳剤、パッチなど任意の簡便な投与形態でも投与され得る。このような組成物は、薬学的調製物における一般的な成分、例えば、希釈剤、担体、ｐＨ調整剤、甘味料、増量剤、及び追加の活性剤を含有し得る。
【００４２】
典型的な製剤は、本発明の化合物を担体又は賦形剤と混合することによって調製される。適切な担体及び賦形剤は当業者に周知であり、例えば、Ａｎｓｅｌ，Ｈｏｗａｒｄ  Ｃ．等，Ａｎｓｅｌ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２００４；Ｇｅｎｎａｒｏ，Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．等．Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００；及びＲｏｗｅ，Ｒａｙｍｏｎｄ  Ｃ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ．Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２００５に詳細な説明がある。製剤は、薬物（すなわち、本発明の化合物又はその薬学的組成物）の洗練された見栄えを提供するため、あるいは薬学的製品（すなわち医薬）の製造を補助するため、一又は複数の緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、湿潤剤、潤滑剤、乳化剤、懸濁化剤、防腐剤、抗酸化剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、香味剤、希釈剤及び他の既知の添加剤も含み得る。
【００４３】
適切な経口剤形の一例は、約９０ｍｇから３０ｍｇの無水ラクトース、約５ｍｇから４０ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、約５ｍｇから３０ｍｇのポリビニルピロリドン（「ＰＶＰ」）Ｋ３０、及び約１ｍｇから１０ｍｇのステアリン酸マグネシウムを配合した本発明の化合物を約５ｍｇから５００ｍｇ含有する錠剤である。粉末成分は最初に混ぜ合わせ、次にＰＶＰの溶液と混合する。得られた組成物は、乾燥させ、顆粒化し、ステアリン酸マグネシウムと混合し、一般的な装置を使用して錠剤の形態に圧縮することができる。エアロゾル製剤の例は、例えば、リン酸緩衝液などの適切な緩衝液中に、５ｍｇから４００ｍｇの本発明の化合物を溶解し、必要に応じて等張化剤（ｔｏｎｉｃｉｆｉｅｒ）、例えば塩化ナトリウムなどの塩を添加することによって調製することができる。この溶液は、不純物及び汚染物を除去するために、例えば０．２ミクロンのフィルターを用いて濾過することができる。
【００４４】
したがって、ある実施態様は、式Ｉの化合物又はその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を含む薬学的組成物を包含する。更なる実施態様は、薬学的に許容される担体又は賦形剤と共に式Ｉの化合物又はその立体異性体もしくは薬学的に許容される塩を含む薬学的組成物を包含する。
【００４５】
別の実施態様は、過剰増殖性疾患の治療に使用するための式Ｉの化合物を含む薬学的組成物を包含する。別の実施態様は、がんの治療に使用するための式Ｉの化合物を含む薬学的組成物を包含する。
【００４６】
適応症及び治療法
本発明の化合物は、タンパク質のキナーゼ活性を阻害する。したがって、本発明の化合物は、細胞増殖を阻害し、特定のがん細胞における細胞周期停止及びアポトーシスを誘導するのに有用である。
【００４７】
本発明の化合物は、細胞増殖を阻害し、ＣＤＫ８又はサイクリンＣを過剰発現する細胞における細胞周期停止及びアポトーシスを誘導するのに有用である。
【００４８】
あるいは、本発明の化合物は、細胞増殖を阻害し、例えばＣＤＫ８又はサイクリンＣの調節解除によりアポトーシス経路が破壊されるか、又は増殖経路が過剰発現／又は不死化されている細胞における細胞周期停止及びアポトーシスを誘導するのに有用である。
【００４９】
本発明の実施態様は、がん、特に、膀胱がん、頭頸部がん、乳がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、卵巣がん（ｏｖａｒｙ  ｃａｎｃｅｒ）、大腸がん、肺がん、脳腫瘍、喉頭がん、リンパ系のがん、肝臓がん、皮膚がん、造血系のがん、泌尿生殖器のがん、消化器がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、骨がん、小細胞肺がん、神経膠腫、結腸直腸がん及び膵臓がんの治療のための化合物の使用を含む。本発明の更なる実施態様は、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は結腸直腸がんの治療のための化合物の使用を含む。
【００５０】
本発明の別の実施態様は、がん、特に、膀胱がん、頭頸部がん、乳がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、卵巣がん（ｏｖａｒｙ  ｃａｎｃｅｒ）、大腸がん、肺がん、脳腫瘍、喉頭がん、リンパ系のがん、肝臓がん、皮膚がん、造血系のがん、泌尿生殖器がん、消化器がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、骨がん、小細胞肺がん、神経膠腫、結腸直腸がん及び膵臓がんの治療用医薬の調製のための化合物の使用を含む。
【００５１】
本発明の更なる実施態様は、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は結腸直腸がんの治療用医薬の調製のための化合物の使用を含む。
【００５２】
本発明の別の実施態様は、がん、特に、膀胱がん、頭頸部がん、乳がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、卵巣がん（ｏｖａｒｙ  ｃａｎｃｅｒ）、大腸がん、肺がん、脳腫瘍、喉頭がん、リンパ系のがん、肝臓がん、皮膚がん、造血系のがん、泌尿生殖器のがん、消化器がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、骨がん、小細胞肺がん、神経膠腫、結腸直腸がん及び膵臓がんの治療のための式Ｉの化合物に関する。
【００５３】
本発明の更なる実施態様は、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は結腸直腸がんの治療のための式Ｉの化合物に関する。
【００５４】
別の実施態様は、がんの治療又は予防を必要とする哺乳動物におけるその治療法又は予防法であって、治療的有効量の式Ｉの化合物、その立体異性体、互変異性体、プロドラッグ又は薬学的に許容される塩を前記哺乳動物に投与することを含む方法を包含する。治療又は予防の対象である具体的ながんとしては、膀胱がん、頭頸部がん、乳がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、卵巣がん（ｏｖａｒｙ  ｃａｎｃｅｒ）、大腸がん、肺がん、脳腫瘍、喉頭がん、リンパ系のがん、肝臓がん、皮膚がん、造血系のがん、泌尿生殖器のがん、消化器がん、卵巣がん（ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、骨がん、小細胞肺がん、神経膠腫、結腸直腸がん及び膵臓がんが挙げられる。本発明は、より具体的には、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）もしくは直腸結腸がんの治療又は予防を必要とする哺乳動物におけるその治療法又は予防法であって、治療的有効量の式Ｉの化合物、その立体異性体、互変異性体、プロドラッグ又は薬学的に許容される塩を前記哺乳動物に投与することを含む方法に関する。別の実施態様は、神経変性疾患の治療又は予防を必要とする哺乳動物におけるその治療法又は予防法であって、治療的有効量の式Ｉの化合物、その立体異性体、互変異性体、プロドラッグ又は薬学的に許容される塩を前記哺乳動物に投与することを含む方法を包含する。治療の対象となる具体的な神経変性疾患としては、アルツハイマー型認知症、パーキンソン病、ハンチントン病及び筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）が挙げられる。
【００５５】
併用療法
本発明の化合物は、がんの治療のための小分子阻害剤、例えば、チロシンキナーゼ阻害剤、セリン／スレオニンキナーゼ阻害剤、脂質キナーゼ阻害剤、タンパク質−タンパク質阻害剤など、細胞傷害性薬物、放射線療法、抗体及びがんワクチンと組み合わせて使用され得る。
【実施例】
【００５６】
実施例
本発明は以下の実施例を参照することによって、より完全に理解されるであろう。しかしながら、それらは本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【００５７】
本明細書で使用される略語は以下の通りである：
2015533778.tif 000024
2015533778.tif 000025
【００５８】
一般的実験条件
中間体及び最終化合物は、次の装置のうちの一つを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した：ｉ）バイオタージＳＰ１系及びクワッド１２／２５カートリッジモジュール、ｉｉ）ＩＳＣＯコンビ−フラッシュクロマトグラフィー装置。シリカゲルのブランド及び細孔サイズ：ｉ）ＫＰ−ＳＩＬ６０Å、粒子サイズ：４０−６０μＭ；ｉｉ）ＣＡＳ登録番号：シリカゲル：６３２３１−６７−４、粒子サイズ：４７−６０ミクロンシリカゲル；iii）Ｑｉｎｇｄａｏ  Ｈａｉｙａｎｇ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ製ＺＣＸ、細孔：２００−３００又は３００−４００。
【００５９】
中間体及び最終化合物は、Ｘ  ＢｒｉｄｇｅＴＭ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８（５μｍ，ＯＢＤＴＭ  ３０×１００ｍｍ）カラム又はＳｕｎＦｉｒｅＴＭ  Ｐｅｒｐ  Ｃ１８（５μｍ，ＯＢＤＴＭ  ３０×１００ｍｍ）カラムを使用した逆相カラム上の分取ＨＰＬＣにより精製した。
【００６０】
ＬＣ／ＭＳスペクトルは、ＭｉｃｒｏＭａｓｓ  Ｐｌａｔｅｆｏｒｍ  ＬＣ（ＷａｔｅｒｓＴＭ  ａｌｌｉａｎｃｅ  ２７９５−ＺＱ２０００）を使用することで得られた。標準的なＬＣ／ＭＳ条件は、次の通りであった（実行時間６分）：酸性条件：Ａ：Ｈ２Ｏ中０．１％のギ酸；Ｂ：アセトニトリル中０．１％のギ酸；塩基性条件：Ａ：Ｈ２Ｏ中０．０１％のＮＨ３・Ｈ２Ｏ；Ｂ：アセトニトリル；中性条件：Ａ：Ｈ２Ｏ；Ｂ：アセトニトリル。
【００６１】
質量スペクトル（ＭＳ）：一般に、親質量を示すイオンのみが報告され、特に断りがない限り、引用される質量イオンは正の質量イオン（Ｍ＋Ｈ）＋である。
【００６２】
マイクロ波支援反応は、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ  Ｓｉｘｔｙ中で実施された。
【００６３】
ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ４００ＭＨｚを使用することで得られた。
【００６４】
空気感受性の試薬を用いる反応はすべてアルゴン雰囲気下で行われた。特に断りがない限り、試薬は市販業者から入手したまま更なる精製を行わず使用した。
【００６５】
以下の実施例は、上記のスキームで概説した一般的な方法により調製された。これらは本発明の意味を説明することを意図し、本発明の意味の範囲で限定を表すものでは全くない。
【００６６】
調製実施例
実施例１：  （Ｒ）−２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
工程１：  ５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ−フェニル−酢酸の調製
2015533778.tif 000026
３，５−ジブロモピリジン（１９ｇ，８０ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１５０ｍＬ）溶液に、２−フェニルグリシン（１８ｇ，１２０ｍｍｏｌ）、銅（Ｉ）ヨウ化物（１．５２ｇ，８ｍｍｏｌ）、Ｌ−プロリン（１．８４ｇ，１６ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（２２ｇ，１６０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、９０℃で１２時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水（５００ｍＬ）で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０：１）で精製し、５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ−フェニル−酢酸（５．６ｇ）を得た。
【００６７】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000027
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ−２−フェニル−酢酸（２．８ｇ，９．１５ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に、３６．６ｍＬのＮＨ３溶液（１，４−ジオキサン中０．５Ｍ）及びトリエチルアミン（１．８５ｇ，１８．３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を３０分撹拌し、その後ＨＡＴＵ（７．０ｇ，１８．３ｍｍｏｌ）をバッチで添加し、次いでその混合物を室温で一晩撹拌した。得られた混合液を水（２００ｍＬ）で希釈し、次いでＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０：１）で精製し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（１．２ｇ）を得た。
【００６８】
工程３：  （Ｒ）−２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（１５０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１１５ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１３８ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（１０５ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。冷却後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで希釈した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（２５ｍｇ）を得た。
【００６９】
２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（２５ｍｇ）からキラルＳＦＣによって二つのエナンチオマーを分離し、キラルな（Ｒ）−２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（１０ｍｇ）を得た。
【００７０】
実施例２：  ２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
Ａｒ雰囲気下、ＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，３ｍＬ）中の２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（１５２ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）、３−クロロ−４−ヒドロキシフェニルボロン酸ピナコールエステル（１５２ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（３５ｍｇ，０．０５ｍｍｏｌ）、２−（ジシクロヘキシルホスフィノ））ビフェニル（３５ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＣＯ３（１０６ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）の混合物を１３０℃で３０分マイクロ波照射に曝露した後、該反応混合物を真空中で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（４５ｍｇ）を得た。
【００７１】
実施例３：  （Ｒ）−２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（４５ｍｇ）からキラルＳＦＣによって二つのエナンチオマーを分離し、キラルな（Ｒ）−２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（１０ｍｇ）を得た。
【００７２】
実施例４：  （Ｓ）−２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（４５ｍｇ）からキラルＳＦＣによって二つのエナンチオマーを分離し、キラルな（Ｓ）−２−［５−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（８ｍｇ）を得た。
【００７３】
実施例５：  ２−（４’−メチル−［３，３’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミドの調製
Ａｒ雰囲気下、ＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，４．５ｍＬ）中の２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（２００ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、（４−メチル−３−ピリジニル）−ボロン酸（９０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（４０ｍｇ）及び炭酸カリウム（１８０ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）の混合物をマイクロ波で９０℃になるまで４０分加熱した。次いで、残留物をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−（４’−メチル−［３，３’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（３０ｍｇ）を得た。
【００７４】
実施例６：  ２−（２’−メトキシ−［３，４’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミドの調製
Ａｒ雰囲気下、ＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，２ｍＬ）中の２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（６０ｍｇ，０．１９７ｍｍｏｌ）、２−メトキシピリジン−４−ボロン酸（３９ｍｇ，０．２５６ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１ｍｇ，０．００９８ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（８１ｍｇ，０．５９ｍｍｏｌ）の混合物を９５℃で１時間マイクロ波照射に曝露した後、真空中で濃縮した。残留物を酢酸エチルとブラインとの間で分配した。水層を分離し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−（２’−メトキシ−［３，４’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（１４ｍｇ）を得た。
【００７５】
実施例７：  ２−［５−（５−エトキシ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（６０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、５−エトキシ−２−フルオロフェニルボロン酸（４８ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（１１ｍｇ，０．０１ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（８１ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）、続いてＤＭＥ（１ｍＬ）及びＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）を、磁気撹拌棒を備えた１０ｍＬマイクロ波バイアルに添加した。アルゴン雰囲気下、容器を蓋で密閉し、次いで得られた混合物をマイクロ波下で９０℃になるまで４０分加熱した。混合物を室温に冷却後、水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物をＣ−１８逆相ＨＰＬＣカラムで精製し、目的の２−［５−（５−エトキシ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（２０ｍｇ）を白色の固体として得た。
【００７６】
実施例８：  ２−［５−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（６０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、３−クロロ−４−フルオロフェニルボロン酸（４５ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１ｍｇ，０．０１ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（８１ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）、続いてＤＭＥ（１ｍＬ）及びＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）を、磁気撹拌棒を備えた１０ｍＬマイクロ波バイアルに添加した。アルゴン雰囲気下、容器を蓋で密閉し、次いで得られた混合物をマイクロ波下で９０℃になるまで４０分加熱した。混合物を室温に冷却後、水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、それをＣ−１８逆相ＨＰＬＣカラムで精製し、目的の２−［５−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（２５ｍｇ）を白色の固体として得た。
【００７７】
実施例９：  ２−（５’−フルオロ−２’−メトキシ−［３，４’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミドの調製
Ａｒ雰囲気下、ＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，４ｍＬ）中の２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（２００ｍｇ，０．６５６ｍｍｏｌ）、（５−フルオロ−２−メトキシピリジン−４−イル）ボロン酸（３３６ｍｇ，１．９６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（７６ｍｇ，０．０６６ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（５４２ｍｇ，３．９３ｍｍｏｌ）の混合物を１０５℃で２時間マイクロ波照射に曝露した後、真空中で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−（５’−フルオロ−２’−メトキシ−［３，４’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（３５ｍｇ）を得た。
【００７８】
実施例１０：  ２−（５’−クロロ−［３，３’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミドの調製
Ａｒ雰囲気下、ＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，２ｍＬ）中の２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（１００ｍｇ，０．３２８ｍｍｏｌ）、（５−クロロピリジン−３−イル）ボロン酸（６２ｍｇ，０．３９３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１９ｍｇ，０．０１６ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（１３６ｍｇ，０．９８ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で５０分マイクロ波照射に曝露した後、真空中で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−（５’−クロロ−［３，３’］ビピリジニル−５−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（４５ｍｇ）を得た。
【００７９】
実施例１１：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｏ−トリル−アセトアミドの調製
工程１：  ５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ−ｏ−トリル−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000028
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及び２−メチル−ベンズアルデヒド（ｂｅｎｚａｌｄｅｈｙ）（５．８３ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ−ｏ−トリル−アセトニトリル（１０．０３ｇ）を得た。
【００８０】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ｏ−トリル−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000029
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ−ｏ−トリル−アセトニトリル（２．００ｇ，６．６ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌａｑ（４ｍＬ）の混合物を４０℃で１時間撹拌した。水（２００ｍＬ）をこの反応混合物に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ｏ−トリル−アセトアミド（１．５２ｇ）を得た。
【００８１】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｏ−トリル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ｏ−トリル−アセトアミド（３２０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。反応がＬＣ／ＭＳにより示されるように完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｏ−トリル−アセトアミド（６５ｍｇ）を得た。
【００８２】
実施例１２：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−フルオロ−フェニル）−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（２−フルオロ−フェニル）−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000030
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及び２−フルオロ−ベンズアルデヒド（６．０３ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（２−フルオロ−フェニル）−アセトニトリル（８．３５ｇ）を得た。
【００８３】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（２−フルオロ−フェニル）−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000031
濃ＨＣｌ（６ｍＬ）と（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（２−フルオロ−フェニル）−アセトニトリル（３ｇ，１０ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で約１時間撹拌した。ＴＬＣでモニターされた反応の完了に際し、混合物を水（２００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、次いで減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（２−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（１．７５ｇ）を黄色の固体として得た。
【００８４】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−フルオロ−フェニル）−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（２−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（３２４ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−フルオロ−フェニル）−アセトアミド（７５ｍｇ）を得た。
【００８５】
実施例１３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｍ−トリル−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−ｍ−トリル−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000032
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及び３−メチル−ベンズアルデヒド（５．８３ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−ｍ−トリル−アセトニトリル（８．５２ｇ）を得た。
【００８６】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ｍ−トリル−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000033
濃ＨＣｌ（６ｍＬ）中（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−ｍ−トリル−アセトニトリル（３ｇ，１０ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で４０分攪拌した。ＴＬＣでモニターされた反応の完了に際し、反応液をＨ２Ｏ／ＥＡ（１／１，５００ｍＬ）で希釈した。水層を分離し、アンモニアでｐＨ＝９に調整し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で抽出した。有機層を真空中で濃縮し、再結晶させ、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ｍ−トリル−アセトアミド（１．２ｇ）を黄色の固体として得た。
【００８７】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｍ−トリル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ｍ−トリル−アセトアミド（３２０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、ｒａｃ−２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｍ−トリル−アセトアミド（８０ｍｇ）を得た。
【００８８】
実施例１４：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−クロロ−フェニル）−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（２−クロロ−フェニル）−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000034
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及び２−クロロ−ベンズアルデヒド（６．８３ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターされた反応の完了に際し、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（２−クロロ−フェニル）−アセトニトリル（８．１２ｇ）を得た。
【００８９】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（２−クロロ−フェニル）−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000035
１２ＮのＨＣｌ（６ｍＬ）に、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（２−クロロ−フェニル）−アセトニトリル（３ｇ，９ｍｍｏｌ）を添加し、その溶液を４０℃で約１時間撹拌した。ＴＬＣでモニターされた反応の完了に際し、反応液をＨ２Ｏ／ＥＡ（１／１，５００ｍＬ）で希釈した。水層を分離し、アンモニアでｐＨ＝９に調整し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で抽出した。有機層を真空中で濃縮し、再結晶させ、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（２−クロロ−フェニル）−アセトアミド（１．７５ｇ）を黄色の固体として得た。
【００９０】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−クロロ−フェニル）−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（２−クロロ−フェニル）−アセトアミド（３４０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２−クロロ−フェニル）−アセトアミド（６０ｍｇ）を得た。
【００９１】
実施例１５：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000036
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及び２，５−ジフルオロ−ベンズアルデヒド（６．９１ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトニトリル（９．６５ｇ）を得た。
【００９２】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000037
（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトニトリル（３．００ｇ，９．３ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（６ｍＬ）の混合物を４０℃で１時間撹拌した。水（２５０ｍＬ）をこの反応混合物に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトアミド（１．１５ｇ）を得た。
【００９３】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトアミド（３４２ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（２，５−ジフルオロ−フェニル）−アセトアミド（５５ｍｇ）を得た。
【００９４】
実施例１６：  ２−［５−（２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（６０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、５−メトキシ−２−フルオロフェニルボロン酸（４５ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１ｍｇ，０．０１ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（８１ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）、続いてＤＭＥ（１ｍＬ）及びＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）を、磁気撹拌棒を備えた１０ｍＬマイクロ波バイアルに添加した。アルゴン雰囲気下、容器を蓋で密閉し、次いで得られた混合物をマイクロ波下で９０℃になるまで４０分加熱した。混合物を室温に冷却し、水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、それをＣ−１８逆相ＨＰＬＣカラムで精製し、目的の２−［５−（２−フルオロ−５−メトキシ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（１５ｍｇ）を白色の固体として得た。
【００９５】
実施例１７：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−チオフェン−３−イル−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−チオフェン−３−イル−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000038
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（３．００ｇ，１７．３ｍｍｏｌ）及びチオフェン−３−カルバルデヒド（２．３４ｇ，２０．９ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（２０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（２．５８ｇ，２６．０ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−チオフェン−３−イル−アセトニトリル（３．６３ｇ）を得た。
【００９６】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−チオフェン−３−イル−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000039
濃ＨＣｌ（５ｍＬ）中（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−チオフェン−３−イル−アセトニトリル（２．４ｇ，８．２ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で３０分攪拌した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、水（２００ｍＬ）を反応混合物に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−チオフェン−３−イル−アセトアミド（１．３ｇ）を得た。
【００９７】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−チオフェン−３−イル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−チオフェン−３−イル−アセトアミド（３１２ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−チオフェン−３−イル−アセトアミド（８０ｍｇ）を得た。
【００９８】
実施例１８：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｐ−トリル−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−ｐ−トリル−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000040
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及び４−メチル−ベンズアルデヒド（５．８３ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−ｐ−トリル−アセトニトリル（９．０２ｇ）を得た。
【００９９】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ｐ−トリル−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000041
（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−ｐ−トリル−アセトニトリル（３．００ｇ，  ９．９ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（６ｍＬ）の混合物を４０℃で１時間撹拌した。水（２００ｍＬ）をこの反応混合物に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ｐ−トリル−アセトアミド（２．１６ｇ）を得た。
【０１００】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｐ−トリル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ｐ−トリル−アセトアミド（３２０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ｐ−トリル−アセトアミド（３６ｍｇ）を得た。
【０１０１】
実施例１９：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（３−クロロ−フェニル）−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（３−クロロ−フェニル）−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000042
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及び３−クロロ−ベンズアルデヒド（６．８３ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（３−クロロ−フェニル）−アセトニトリル（１０．２ｇ）を得た。
【０１０２】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（３−クロロ−フェニル）−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000043
（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（３−クロロ−フェニル）−アセトニトリル（３．００ｇ，９．３ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（６ｍＬ）の混合物を４０℃で１時間撹拌した。水（２００ｍＬ）をこの反応混合物に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（３−クロロ−フェニル）−アセトアミド（１．５５ｇ）を得た。
【０１０３】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（３−クロロ−フェニル）−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（３−クロロ−フェニル）−アセトアミド（３４０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（３−クロロ−フェニル）−アセトアミド（１８ｍｇ）を得た。
【０１０４】
実施例２０：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（４−クロロ−フェニル）−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（４−クロロ−フェニル）−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000044
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及び４−クロロ−ベンズアルデヒド（６．８３ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（４−クロロ−フェニル）−アセトニトリル（８．１０ｇ）を得た。
【０１０５】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（４−クロロ−フェニル）−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000045
（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（４−クロロ−フェニル）−アセトニトリル（３．００ｇ，９．３ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（６ｍＬ）の混合物を４０℃で１．５時間撹拌した。水（２００ｍＬ）をこの反応混合物に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（４−クロロ−フェニル）−アセトアミド（１．２１ｇ）を得た。
【０１０６】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（４−クロロ−フェニル）−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（４−クロロ−フェニル）−アセトアミド（３４０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（−クロロ−フェニル）−アセトアミド（３５ｍｇ）を得た。
【０１０７】
実施例２１：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（３−メトキシ−フェニル）−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（３−メトキシ−フェニル）−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000046
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及び３−メトキシ−ベンズアルデヒド（６．６２ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（３−メトキシ−フェニル）−アセトニトリル（９．４１ｇ）を得た。
【０１０８】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（３−メトキシ−フェニル）−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000047
（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−（３−メトキシ−フェニル）−アセトニトリル（３．００ｇ，９．４ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（６ｍＬ）の混合物を４０℃で１．５時間撹拌した。水（２００ｍＬ）をこの反応混合物に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（３−メトキシ−フェニル）−アセトアミド（１．６１ｇ）を得た。
【０１０９】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（３−メトキシ−フェニル）−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−（３−メトキシ−フェニル）−アセトアミド（３４０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−（３−メトキシ−フェニル）−アセトアミド（７５ｍｇ）を得た。
【０１１０】
実施例２２：  Ｎ−｛２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセチル｝−メタンスルホンアミドの調製
工程１：  （Ｒ）−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−フェニル−酢酸の調製
2015533778.tif 000048
（Ｒ）−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−フェニル−酢酸（３０６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）、３−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（３６５ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（５８ｍｇ，０．０５ｍｍｏｌ）及びリン酸カリウム（８４８ｍｇ，４ｍｍｏｌ）、続いてＤＭＥ（５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１ｍＬ）を、磁気撹拌棒を備えた３５ｍＬマイクロ波バイアルに添加した。アルゴン雰囲気下、容器を蓋で密閉し、次いで得られた混合物をマイクロ波下で９０℃になるまで５５分加熱した。反応混合液を室温に冷却した。ＤＭＥを真空中で除去し、次いで残留物を２ＮのＮａＯＨ水溶液でｐＨ＝１２に塩基性化した。次いで混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、分離した水層を濃ＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化し、次いで酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮し、粗（Ｒ）−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−フェニル−酢酸（３９７ｍｇ）を黄色の油状物として得、それをそのまま精製せずに次の工程で使用した。
【０１１１】
工程２：  Ｎ−｛２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセチル｝−メタンスルホンアミドの調製
粗（Ｒ）−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−フェニル−酢酸（３９７ｍｇ，１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に、ＨＡＴＵ（７６０ｍｇ，２ｍｍｏｌ）、続いてＮ，Ｎ−ジプロピルエチルアミン（５１６ｍｇ，４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で１０分間撹拌した。次いでＤＭＦ（２ｍＬ）中のメタンスルホンアミド（３８０ｍｇ，４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物をそのままＣ−１８逆相ＨＰＬＣカラムで精製し、目的のＮ−｛２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセチル｝−メタンスルホンアミド（３０ｍｇ）を白色の固体として得た。
【０１１２】
実施例２３：  ２−［５−（５−クロロ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（６０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、５−クロロ−２，４−ジフルオロフェニルボロン酸（５０ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１ｍｇ，０．０１ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（８１ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）、続いてＤＭＥ（１ｍＬ）及びＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）を、磁気撹拌棒を備えた１０ｍＬマイクロ波バイアルに添加した。アルゴン雰囲気下、容器を蓋で密閉し、次いで得られた混合物をマイクロ波下で９０℃になるまで４０分加熱した。混合物を室温に冷却後、水（５ｍＬ）で希釈し、次いで酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、それをＣ−１８逆相ＨＰＬＣカラムで精製し、目的の２−［５−（５−クロロ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（４９ｍｇ）を白色の固体として得た。
【０１１３】
実施例２４：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ピリジン−２−イル−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリジン−２−イル−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000049
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（７．００ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）及びピリジン−２−カルバルデヒド（５．２０ｇ，４８．６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（６．０３ｇ，６０．８ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を２４時間還流した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリジン−２−イル−アセトニトリル（５．２５ｇ）を得た。
【０１１４】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ピリジン−２−イル−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000050
（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−ピリジン−２−イル−アセトニトリル（３．００ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（６ｍＬ）の混合物を４０℃で１時間撹拌した。水（２００ｍＬ）をこの反応混合物に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ピリジン−２−イル−アセトアミド（１．１８ｇ）を得た。
【０１１５】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ピリジン−２−イル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−ピリジン−２−イル−アセトアミド（３０６ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−ピリジン−２−イル−アセトアミド（４５ｍｇ）を得た。
【０１１６】
実施例２５：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−チオフェン−２−イル−アセトアミドの調製
工程１：  （５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−チオフェン−３−イル−アセトニトリルの調製
2015533778.tif 000051
５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミン（３．００ｇ，１７．３ｍｍｏｌ）及びチオフェン−３−カルバルデヒド（２．３４ｇ，２０．９ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（２０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳＣＮ（２．５８ｇ，２６．０ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。この反応混合物を１６時間還流した。ＴＬＣでモニターされた反応の完了に際し、反応液を濃縮した。残留物をＣｈｅｍｆｌａｓｈで精製し、石油エーテル中０％から４０％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出し、（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−チオフェン−３−イル−アセトニトリル（３．６３ｇ）を得た。
【０１１７】
工程２：  ２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−チオフェン−２−イル−アセトアミドの調製
2015533778.tif 000052
濃ＨＣｌ（５ｍＬ）中の（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−チオフェン−３−イル−アセトニトリル（２．４ｇ，８．２ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で３０分攪拌した。ＴＬＣでモニターして反応が完了した後、水（２００ｍＬ）を反応混合物に添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。次いで、水溶液を濃水酸化アンモニウムでｐＨ＝７．０−８．０にアルカリ化し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−チオフェン−２−イル−アセトアミド（１．３ｇ）を得た。
【０１１８】
工程３：  ２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−チオフェン−２−イル−アセトアミドの調製
２−（５−ブロモ−ピリジン−３−イルアミノ）−２−チオフェン−２−イル−アセトアミド（３２７ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２３１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（２１０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８０℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［５−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピリジン−３−イルアミノ］−２−チオフェン−２−イル−アセトアミド（４５ｍｇ）を得た。
【０１１９】
実施例２６：  ２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
工程１：  ２−（６−ピラジン−２−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミドの調製
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２，６−ジクロロピラジン（１４．９ｇ，０．１ｍｏｌ）のアセトニトリル（１００ｍＬ）溶液に、Ｄ（−）フェニルグリシンアミド（１８ｇ，０．１２ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２０．２ｇ，０．２ｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を７５℃で４８時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、反応混合物を冷却し、次いで溶媒を除去し、残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝２：１）で精製し、２−（６−ピラジン−２−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（６．５ｇ）を得た。
【０１２０】
工程２：  ２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
Ａｒ雰囲気下、ＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，３ｍＬ）中２−（６−クロロ−ピラジン−２−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（１７０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、３−クロロ−４−ヒドロキシフェニルボロン酸ピナコールエステル（２００ｍｇ，０．７８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（４５ｍｇ，０．０６５ｍｍｏｌ）、２−（ジシクロヘキシルホスフィノ））ビフェニル（４５ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）及びＮａ２ＣＯ３（１４０ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）の混合物を１３０℃で３０分マイクロ波照射に曝露し、次いで真空中で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（１２ｍｇ）を得た。
【０１２１】
実施例２７：  （Ｒ）−２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（２５ｍｇ）からキラルＳＦＣによって二つのエナンチオマーを分離し、キラルな（Ｒ）−２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（４ｍｇ）を得た。
【０１２２】
実施例２８：  （Ｓ）−２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（２５ｍｇ）からキラルＳＦＣによって二つのエナンチオマーを分離し、キラルな（Ｓ）−２−［６−（３−クロロ−４−ヒドロキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（６ｍｇ）を得た。
【０１２３】
実施例２９：  ２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−（６−クロロ−ピラジン−２−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（１７０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１５０ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１８０ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）及び５−クロロ−２−フルオロフェニルボロン酸（１７０ｍｇ，０．９７５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８５℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（５０ｍｇ）を得た。
【０１２４】
実施例３０：  （Ｒ）−２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（１０ｍｇ）からキラルＳＦＣによって二つのエナンチオマーを分離し、キラルな（Ｒ）−２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（２ｍｇ）を得た。
【０１２５】
実施例３１：  （Ｓ）−２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（１０ｍｇ）からキラルＳＦＣによって二つのエナンチオマーを分離し、キラルな（Ｓ）−２−［６−（５−クロロ−２−フルオロ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（１ｍｇ）を得た。
【０１２６】
実施例３２：  ２−［６−（３−メトキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−（６−クロロ−ピラジン−２−イルアミノ）−２−フェニル−アセトアミド（１７０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）のＤＭＥ−Ｈ２Ｏ（５：１，６ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１５０ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１８０ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）及び３−メトキシフェニルボロン酸（１５０ｍｇ，０．９７５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を脱気し、次いでＡｒ雰囲気下、８５℃で１０時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳでモニターして反応が完了した後、混合物を水で希釈し、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水とブラインで洗浄し、次いで乾燥させた。溶媒を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製し、２−［６−（３−メトキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（４５ｍｇ）を得た。
【０１２７】
実施例３３：  （Ｒ）−２−［６−（３−メトキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミドの調製
２−［６−（３−メトキシフェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（４５ｍｇ）からキラルＳＦＣによって二つのエナンチオマーを分離し、キラルな（Ｒ）−２−［６−（３−メトキシ−フェニル）−ピラジン−２−イルアミノ］−２−フェニル−アセトアミド（１８ｍｇ）を得た。
【０１２８】
生物学的実施例
実施例３４：  ＣＤＫ８／サイクリンＣ  ＬＡＮＣＥ  ＴＲ−ＦＲＥＴキナーゼアッセイ：
本発明の化合物の生物的活性は、以下に記載のアッセイを用いて決定することができる。
【０１２９】
ＣＤＫ８／サイクリンＣタンパク質をＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社から得た（カタログ番号ＰＶ４４０２）。配列ＰＡＳＶＰＰＳＰＳＬＳＲＨＳＳＰＨＱ（ｐＳ）ＥＤを有するＵＬｉｇｈｔ−グリコーゲンシンターゼ（Ｕｌｉｇｈｔ−ＧＳ）ペプチド、及びユーロピウム抗ホスホグリコーゲンシンターゼ（Ｓｅｒ６４１）［Ｅｕ抗Ｐ−ＧＳ（Ｓｅｒ６４１）］をＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社から入手した（カタログ番号ＴＲＦ０１３１−Ｍ及びＴＲＦ０２２０）。アデノシン−５’−三リン酸（ＡＴＰ）は、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社から入手した（カタログ番号ＰＶ３２２７）。
【０１３０】
反応緩衝液（５０ｍＭのヘペス，ｐＨ７．０，１０ｍＭのＭｇＣｌ２，１ｍＭのＥＧＴＡ，０．２ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ，０．８ｍＭのＤＴＴ）中の（１）式Ｉの化合物、（２）基質［Ｕｌｉｇｈｔ−ＧＳペプチド（８０ｎＭ）及びＡＴＰ（２４μＭ）］並びに（３）ＣＤＫ８／サイクリンＣ（１０ｎＭ）の混合物を３７℃で３０分インキュベートした。次いで、［Ｅｕ−抗Ｐ−ＧＳ（Ｓｅｒ６４１）］（１．５ｎＭ）を添加した。室温で３０分インキュベートした後、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社製Ｅｎｖｉｓｉｏｎリーダー（３４０ｎｍ励起、６１５ｎｍ及び６６５ｎｍ放射）を使用してＴＲ−ＦＲＥＴシグナルを検出した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ５（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ社）を使用し、阻害率又は用量反応率で反応性を分析した。
【０１３１】
ＣＤＫ８／サイクリン  ＬＡＮＣＥ  Ｕｌｔｒａ生化学的ＴＲ−ＦＲＥＴキナーゼアッセイの結果を表１に示す。
【０１３２】
実施例３５：  インビトロ細胞増殖アッセイ
９６ウェルプレートに細胞を、ウェル当たり５×１０３個播種し、２４時間前培養した。その細胞を、段階希釈した化合物で処理し、７２時間培養した。次いですべての培地を廃棄した後、１００μＬの１：１０（ｖ／ｖ）Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８（ＣＣＫ−８）−培養培地溶液をウェルに加えた。プレートをインキュベーター中で２時間展開し、波長４５０ｎｍでの吸光度をＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ１９０（ＭＤＳ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）を用いて測定した。試験化合物の阻害率（ＩＲ）は次式で決定した：ＩＲ（％）＝（ＯＤＤＭＳＯ−ＯＤ化合物／ＯＤＤＭＳＯ×１００％。５０％ＩＲ（ＩＣ５０）に相当する濃度を、ＳｏｆｔＭａｘ  Ｐｒｏを使用して試験化合物濃度に対するＩＲのプロット曲線で決定した。
インビトロ細胞増殖アッセイの結果を表３に示す。
【０１３３】
実施例Ａ
式Ｉの化合物は、以下の組成の錠剤を生産するための有効成分として、それ自体周知の方法で使用され得る：
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【０１３４】
実施例Ｂ
式Ｉの化合物は、以下の組成のカプセル剤を生産するための有効成分として、それ自体周知の方法で使用され得る：
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【国際調査報告】
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