(57)【要約】本発明は、ＭＤＴ-６３７の新規な結晶性多形体、特に、薬剤製造に特に適した物理化学的特性を有する結晶性多形体、そのアモルファス形、コンポジット形、および製造方法を提供する。本明細書に記載される新規な多形は、ＲＳウイルスによって引き起こされる疾患等の、呼吸器疾患の治療に有用である。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＤＴ-６３７の多形体を含む組成物。
【請求項２】
前記ＭＤＴ-６３７の多形体が、Ｐ-３二水和物、Ｐ-３エタノラート、Ｐ-３一水和物、Ｐ-３無水物、Ｐ-２無水物、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７またはＰ-８の結晶形を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
Ｐ-３二水和物、Ｐ-３エタノラート、Ｐ-３一水和物、Ｐ-３無水物、Ｐ-２無水物、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７またはＰ-８のアモルファス形を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
任意に、一以上の薬学的に許容できる担体を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
パターンＰ-２の水和物結晶形に特有の回析ピークが、図１に示されるものである、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
パターンＰ-３の一水和物結晶形に特有の回析ピークが、図９に示されるものである、請求項２に記載の組成物。
【請求項７】
パターンＰ-３の二水和物結晶形に特有の回析ピークが、図８に示されるものである、請求項２に記載の組成物。
【請求項８】
パターンＰ-２の無水物結晶形に特有の回析ピークが、図２に示されるものである、請求項２に記載の組成物。
【請求項９】
パターンＰ-３の無水物結晶形に特有の回析ピークが、図１０に示されるものである、請求項２に記載の組成物。
【請求項１０】
Ｐ-３のエタノラート結晶形に特有の回析ピークが、図１１に示されるものである、請求項２に記載の組成物。
【請求項１１】
Ｐ-４結晶形に特有の回析ピークが、図１９に示されるものであり、Ｐ-６結晶形に特有の回析ピークが、図２０に示されるものであり、Ｐ-７結晶形に特有の回析ピークが、図２１に示されるものであり、Ｐ-８結晶形に特有の回析ピークが、図２２に示されるものである、請求項２に記載の組成物。
【請求項１２】
パラミクソウイルス亜科あるいはニューモウイルス亜科による感染からもたらされる疾患を治療する方法であって、患者の治療に有効な量で物質を投与することを含み、前記物質がＭＤＴ-６３７の多形体を含む、治療方法。
【請求項１３】
前記ＭＤＴ-６３７の多形体が、Ｐ-３二水和物、Ｐ-３エタノラート、Ｐ-３一水和物、Ｐ-３無水物、Ｐ-２無水物、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７またはＰ-８の結晶形を含む、請求項１２に記の方法。
【請求項１４】
前記ＭＤＴ-６３７の多形体が、Ｐ-３二水和物、Ｐ-３エタノラート、Ｐ-３一水和物、Ｐ-３無水物、Ｐ-２無水物、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７またはＰ-８のアモルファス形を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
パターンＰ-２の水和物結晶形に特有の回析ピークが、図１に示されるものであり、パターンＰ-３の一水和物結晶形に特有の回析ピークが、図９に示されるものであり、または、パターンＰ-３の二水和物結晶形に特有の回析ピークが、図８に示されるものである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記疾患を治療する方法が、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）に関連する症状を軽減および予防することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
前記症状が、鼻炎、中耳炎、肺炎、細気管支炎および死亡を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記物質が、乳幼児、高齢者、免疫力がない個体等の限られた能力を有する患者および制限された吸気量を有する患者への送達しやすさのために最適化される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
ＲＳウイルスによる感染を治療するための方法であって、患者の治療に有効な量で物質を投与することを含み、前記物質がＭＤＴ-６３７の多形体を含む、治療方法。
【請求項２０】
前記ＭＤＴ-６３７の多形体が、Ｐ-３二水和物、Ｐ-３エタノラート、Ｐ-３一水和物、Ｐ-３無水物、Ｐ-２無水物、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７またはＰ-８の結晶形を含む、請求項１９に記の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１２年６月２９日に提出された米国仮出願第６１／６６６，２５８に基づく優先権を主張し、その内容は全体として参照により本明細書に包含される。
【０００２】
本発明は、ウイルス感染症、およびそれに関連する疾患、特に、パラミクソウイルス科（パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科サブファミリーを含む）といったウイルスによって引き起こされるウイルス感染症および疾患を予防および治療するための化合物、組成物および方法に関する。より具体的には、本発明は、ＭＤＴ-６３７の新規な結晶性多形体、特に、製剤のために有利な物理化学的特性を有する結晶多形体、そのアモルファス形、コンポジット形、および、製造方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ＭＤＴ-６３７は、以下の構造式で表される医薬品有効成分（active pharmaceutical ingredient：ＡＰＩ）である（化学名：フェノール、２,２'-[(４-ヒドロキシフェニル)メチレン]ビス[４-[[(５-メチル-１Ｈ-テトラゾール-１-イル)イミノ]メチル]]；別名：５,５'-ビス[１-(((５-メチル-１-Ｈ-テトラゾリル)イミノ)メチル]-２,２',４''-メチリジン トリスフェノール；分子式 Ｃ25Ｈ22Ｎ10Ｏ3）
【化１】
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【０００４】
ＭＤＴ-６３７は、米国特許第６，４９５，５８０（参照により本明細書に包含される）で記載されているように抗ウイルス治療活性を発揮する。さらに、米国特許出願第１０／５２４，１６２および米国特許出願第１０／５２４，３１３（参照により本明細書に包含される）は、関連する化合物および組成物を記載している。ＭＤＴ-６３７は、ウイルス感染症、およびそれに関連する疾患、特に、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科サブファミリーを含むパラミクソウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染症および疾患の予防および治療に関連する。
【０００５】
多くの重大なヒトの疾患（流行性耳下腺炎、麻疹を含む）は、パラミクソウイルスによって引き起こされ、且つ、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳウイルス／ＲＳＶ）は、米国および世界の両方において乳幼児および子供の細気管支炎および肺炎の主原因である。ＭＤＴ-６３７の作用機序は、いくらか詳細に（以下の理論によって拘束されることを望まないが）解明されており、ＭＤＴ-６３７は、ＲＳＶ治療の標的であるウイルス融合タンパク質を標的とし且つブロックすることによって作用すると思われている。極めて強力（リバビリンの４万倍強力）であることに加えて、ＭＤＴ-６３７は、感染前および後の両方でＲＳＶのウイルス数を減少させるのに効果的であることも示した。
【０００６】
パラミクソウイルス科は、ウイルスの多様なグループからなり、２つのサブファミリー、パラミクソウイルス亜科とニューモウイルス亜科に分類される。
【０００７】
パラミクソウイルス科の主要なヒトウイルスは：麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、パラインフルエンザウイルス（タイプ１，２，３，４ａおよび４ｂ）、およびＲＳウイルス（ＲＳＶ）である。パラミクソウイルス科のウイルスはすべて、呼吸器経路を通じて広がり、高い伝染性を有する。多くの重大なヒト疾患が、パラミクソウイルスによって引き起こされる。これらには、２００１年に７４５，０００件の死をもたらした流行性耳下腺炎、麻疹が含まれ、また、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）は、米国および世界の両方において乳幼児と子供の細気管支炎と肺炎の主原因である。
【０００８】
パラミクソウイルスは他の動物種における様々な疾患、例えば、イヌジステンパーウイルス（イヌ）、アザラシジステンパーウイルス（アザラシ）、クジラ目のモルビリウイルス（イルカおよびネズミイルカ）、ニューカッスル病ウイルス（トリ）および牛疫ウイルス（ウシ）の原因でもある。ヘニパウイルス等のいくつかのパラミクソウイルスは、動物宿主に自然に発生するが、ヒトにも感染し得る人畜共通病原体である。また、タイセイヨウサケ・パラミクソウイルス、ベイロン（Beilong）ウイルス、Ｊウイルス、タイヘイヨウサケ・パラミクソウイルスおよびタイラム（Tailam）ウイルス等のある種の「割り当てられない」ウイルスも含まれる。
【０００９】
パラインフルエンザウイルスは、乳幼児および子供における呼吸器疾患の２番目に主要な原因である。それらは、子供および高齢者に、肺炎、気管支炎およびクループをもたらす可能性がある。パラインフルエンザウイルスによる感染は、典型的には、鼻感冒、咽頭炎、微熱、および気管支炎を特徴とする軽度の上気道感染症を引き起こす。また、パラインフルエンザウイルスは、６か月〜５才の子供における、クループあるいは咽頭気管気管支炎の最大の原因である。
【００１０】
ヒトＲＳＶは、ニューモウイルスグループのプロトタイプ・メンバーであり、乳幼児および低年齢小児における肺炎および細気管支炎を引き起こす、主要な小児科のウイルス性気道病原体である。米国国立衛生研究所によれば、ヒトＲＳＶ感染は、乳幼児および低年齢小児における重症の呼吸疾患の唯一の最も重大な原因であり、小児性細気管支炎の主原因であり、先進工業国における乳幼児と低年齢小児の入院の最大の原因である。米国単独では、８５，０００〜１４４，０００の乳幼児がＲＳＶ感染で毎年入院しており、病院における２０〜２５％の肺炎症例および最大で７０％の細気管支炎症例を招いている。世界的なＲＳＶ疾病負担は、毎年６４００万の症例および１６万の死と推定される。
【００１１】
ＲＳＶ感染を年少期に経験した子供は、その後反復性の喘鳴や喘息のリスクが高く、特に早産児および気管支肺異形成症のある乳幼児では、パリビズマブ等の抗-ＲＳＶモノクローナル抗体による予防的な受動免疫が強く推奨される。ＲＳＶはまた、高齢者、心肺疾患を有する人、および免疫障害を持つ個体において重大な問題である。米国における老人ホームでのＲＳＶ罹患率は、年間約５〜１０％であり（致死率２〜８％）、６４才を超える年齢の人のうち、１年あたりの死亡件数は約１万に達する。
【００１２】
ＲＳＶのためのワクチンを開発する試みは継続されているが、まだどれも安全性と有効性が実証されていない。ワクチン開発は、１９６０年代後半に導入された初期のホルマリン不活性化ＲＳＶワクチンによって生じた副作用によって翳りを見せた。予防接種を受けた子供は、ＲＳＶ下気道疾患の発生率が増加し、死を含む異常に重症な疾患を発症した。リバビリン［１-β-Ｄ-リボフラノシル-１Ｈ-１,２,４-トリアゾール-３-カルボキサミド］（米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によってＲＳＶ疾患の治療のために承認された唯一の薬剤である抗ウイルス性ヌクレオシド）による化学療法は、特定のＲＳＶ患者（例えば、重度の合併症の高いリスクを持つ人、あるいはこの感染で重症である人）のためだけに検討される。しかしながら、その有効性と価値には議論の余地がある。最近の研究は、リバビリン治療による患者への臨床上または経済的なメリットが実証できないことを報告している。さらに、リバビリンは、ある種の毒性の副作用を持ち、これらを最小限にするために、閉鎖された環境で厳密な管理手順に従わなければならない。
【００１３】
ヒト静注用免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）製剤は、ＲＳＶ疾患のリスクが高い特定の患者における予防的使用のために認可されている。この薬物の投与は、従前の集中治療により制限された静脈アクセス、および易感染性の心肺機能を有する子供に２〜４時間にわたる大容量の点滴静注を必要とする。さらに、点滴静注は、ＲＳＶシーズンの間、毎月の通院を余儀なくさせ、今度は子供たちを院内感染のリスクにさらす。
【００１４】
上述した治療計画のいずれも、ＲＳＶ感染に対する効果的なワクチンあるいは治療薬の要求を満たしていない。脆弱な人々（小児、免疫力が無い、高齢者）における高い死亡率を伴う、高リスクの発生を考えると、ニューモウイルス感染症に関連する合併症を軽減および排除できる新規で効果的な治療計画に対する明確な必要性が存在する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
上述したように、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科病原体に関連する様々な感染が存在し、その結果、感染に関連する合併症を軽減し排除できる改良された治療計画に対する必要性が存在することは明白である。現在、そのような治療薬は存在しない。特に、既存の医薬品の欠点を克服するＲＳＶ感染に対する新規な抗ウイルス性薬剤および治療の必要性が存在する。
【００１６】
ＭＤＴ-６３７は、効果的な抗ウイルス性化合物として認識されているが、効果的で安全な投薬を可能にする送達様式や最適な分布といった望ましい治療特性を有する改良された組成物に対する必要性がなお存在している。さらに、有利な物理的および化学的特性、安定性およびハンドリング特性を有する組成物が必要である。さらに、それによって不均一な組成が生じる可能性を減らすことができる、新規で一貫して予測可能な製造方法が必要である。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科感染によって生じる、あるいはそれらに関連する感染を治療および予防するための新規な組成物を提供することによって、従来技術のワクチンおよび治療薬に対する改善を提供する。特に、本発明の新規な組成物および方法は、パラミクソウイルス科の主要ウイルス（麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、パラインフルエンザウイルス（タイプ１，２，３，４ａ，４ｂ）およびＲＳウイルスを含むがこれらに限定されない）によって生じる感染の治療的介入のために好適である。本発明の改良された組成物および方法は、鼻炎、中耳炎、肺炎および細気管支炎等の症状を軽減できる治療的介入に関する分野におけるこれまで満たされていなかった要求を満たす。さらに、本発明の新規な組成物および方法は、改良された安定性、改良された溶解性、低い投薬濃度、取扱い、投薬および投与しやすさ、並びに副作用および毒性の有意な減少および非存在のため、特に望ましい。驚くべきことに、本明細書に記載された組成物は、治療的有効性に関し予期できない結果を示す。
【００１８】
ここに記載された方法および組成物は、特に、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科感染の治療に特に適しているが、当業者に明らかなように、それらはさらなる適応症のために利用されてもよい。
【００１９】
本発明は、独特の構造、水和あるいは溶媒和レベルを持つＭＤＴ-６３７の新規な結晶形、並びにその新規な製造方法を提供する。
【００２０】
本発明は、ＭＤＴ-６３７の薬物送達のために特に有利であることが見いだされたパターンＭＤＴ-６３７ Ｐ-３二水和物（あるいは単にＰ-３二水和物）形として命名された新規な結晶形を提供する。
【００２１】
別の面では、本発明は、Ｐ-３二水和物の精製および製造において重要な役割を果たすＰ-３エタノラートの新規な結晶形を提供する。
【００２２】
別の面では、本発明はＰ-３一水和物の新規な結晶形を提供する。
【００２３】
別の面では、本発明はＰ-３無水物の新規な結晶形を提供する。
【００２４】
別の面では、本発明は周囲条件において最も熱力学的に安定な形であることが示されたパターンＰ-２水和物（あるいは単にＰ-２水和物）形と命名された、さらなる新規なＭＤＴ-６３７ Ｐ-２結晶形を提供する。
【００２５】
別の面では、本発明は、Ｐ-２無水物の新規な結晶形を提供する。
【００２６】
別の面では、本発明は、好ましくは９８％（ｗ／ｗ）を超えるＡＰＩ含量を持つ高純度の生成物をもたらす、Ｐ-２およびＰ-３形の精製再結晶化方法を提供する。
【００２７】
別の面では、本発明は、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７およびＰ-８（または、ＭＤＴ-６３７ Ｐ-４、ＭＤＴ-６３７ Ｐ６、ＭＤＴ-６３７ Ｐ７およびＭＤＴ-６３７ Ｐ８）と表記されるＰＸＲＤパターンを示す、他の新規な結晶形を提供する。
【００２８】
別の面では、本発明は新規なアモルファス形を提供する。
【００２９】
別の面では、本発明は、適切な医薬品賦形剤中に分散したＡＰＩの新規な固形コンポジット形を提供する。
【００３０】
さらに、本発明のいくつかの新規な結晶形は、低い投薬レベル、取扱いおよび加工しやすさ（微粒子化、製剤混合およびブリスター充填等）を実現し、強化された投薬計画および投与、低い投与量、並びに副作用および毒性の有意な減少および非存在を可能にする、改良した溶解性及び／又は固体安定性のため、特に望ましい。本明細書に記載の新規な結晶形は、それらの物理化学的および治療的特性において予期できない結果を示す。
【００３１】
本発明は、治療的有効量のＰ-３二水和物、またはＰ-３エタノラート、またはＰ-３一水和物、またはＰ-３無水物、またはＰ-２無水物、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７、Ｐ-８の結晶形、あるいはアモルファス形、またはその組み合わせ、及び、少なくとも一つの薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物を含む。
【００３２】
さらに、本明細書に記載の結晶形および合成方法は、従来技術の組成物および方法の改良であり、それらは増強された治療的価値を持つ改良された医薬製剤および剤形の製造を可能にする新規な多形体を含む。
【００３３】
その結果として、本発明の目的は、様々なウイルス感染症の治療および予防、特に、呼吸器薬物送達を使用するウイルス感染症の治療および予防に関連する医薬製品をもたらす、新規なＭＤＴ-６３７結晶形およびその製造方法の開示を提供することである、そのような形態および組成物は、送達しやすさのため、投薬のため、安定性および毒性減少のために最適化される。
【００３４】
その結果として、本発明の目的は、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科感染に関連する症状を軽減および予防するための新規な組成物および方法を提供することである。
【００３５】
本発明の別の目的は、麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、パラインフルエンザウイルス、およびＲＳウイルス （ＲＳＶ）に関連する症状を軽減および予防するための新規な組成物および方法を提供することである。
【００３６】
本発明の別の目的は、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）に関連する症状を軽減および予防するための新規な組成物および方法を提供することであり、ここでそのような症状には、鼻炎、中耳炎、肺炎、細気管支炎および死が含まれる。
【００３７】
また、本発明の別の目的は、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科感染に関連する症状を軽減および予防するための新規な組成物および方法を提供することであり、ここでそのような組成物は、低い投与量で送達されてもよい。
【００３８】
本発明のさらなる目的は、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科感染に関連する症状を軽減および予防するための新規な組成物および方法を提供することであり、ここでそのような組成物は、送達しやすさのため、投薬のため、安定性および毒性減少のために最適化される。
【００３９】
本発明のさらなる目的は、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科感染に関連する症状を軽減および予防するための新規な組成物および方法を提供することであり、ここでそのような組成物は、乳幼児、高齢者、免疫力がない個体等の限られた能力を有する患者および制限された吸気量を有する患者への送達しやすさのために最適化される。
【００４０】
本発明の別の目的は、パラミクソウイルス亜科およびニューモウイルス亜科感染に関連する症状を軽減および予防するための新規な組成物および方法を提供することであり、ここでそのような方法は、治療コンプライアンスを促進し推進する。
【００４１】
また、本発明の別の目的は、ＲＳＶに関連する症状を軽減および予防するための新規な組成物および方法を提供することであり、ここで、そのような組成物は、制限された吸気量を有する患者への送達しやすさのために最適化される。
【００４２】
本発明の別の目的は、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）に関連する症状を軽減および予防するための新規な組成物および方法を提供することであり、ここで、そのような症状には、鼻炎、中耳炎、肺炎、細気管支炎および死が含まれ、そのような組成物は、送達しやすさのため、投薬のため、安定性および毒性減少のために最適化され、且つそのような組成物には、独自性を有する組成物および方法が含まれる。
【００４３】
本発明のさらなる目的は、ＭＤＴ-６３７の独特の多形体および関連化合物を含む新規な組成物および方法を提供することである。
【００４４】
本発明の別の目的は、ＭＤＴ-６３７の独特の多形体および関連化合物を含む新規な組成物および方法を提供することであり、ここで、そのような組成物は、Ｐ-２、Ｐ-３、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７およびＰ-８と表記されるＰＸＲＤパターンを示す多形体を含む。
【００４５】
本発明の別の目的は、ＭＤＴ-６３７の独特の多形体および関連化合物、および薬学的に許容できる賦形剤を含む新規な組成物および方法を提供することである。
【００４６】
本発明のさらなる目的は、ＭＤＴ-６３７の独特の多形体を含む新規な組成物および方法を提供することであり、ここでそのような多形体は、吸入による患者への送達のために最適化される。
【００４７】
本発明のこれらおよび他の目的、特徴および利点は、以下に開示された実施形態の詳細な説明および添付の請求項を確認することにより、明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】図１は、Ｐ-２水和物結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図２】図２は、Ｐ-２無水物結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図３】図３は、Ｐ-２水和物結晶形に特有のＦＴＩＲパターンを示す。
【図４】図４は、Ｐ-２水和物結晶形に特有のＤＳＣトレースを示す
【図５】図５は、Ｐ-２水和物結晶形に特有のＴＧＡトレースを示す。
【図６】図６は、パターンＰ２の無水物と水和物の結晶形間の変換に関する特有のＤＶＳ吸脱着曲線を示す。
【図７】図７は、高純度のＰ-２水和物結晶形を製造するための、結晶化、ろ過、乾燥および水和プロセスの一例を示すフローチャートである。
【図８】図８は、Ｐ-３二水和物結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図９】図９は、Ｐ-３一水和物結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図１０】図１０は、Ｐ-３無水物結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図１１】図１１は、Ｐ-３エタノラート結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図１２】図１２は、Ｐ-３二水和物結晶形に特有のＦＴＩＲパターンを示す。
【図１３】図１３は、Ｐ-３二水和物結晶形に特有のＤＳＣトレースを示す。
【図１４】図１４は、Ｐ-３二水和物結晶形に特有のＴＧＡトレースを示す。
【図１５】図１５は、温度２０℃での、パターンＰ-３の無水物、一水和物および二水和物の結晶形間の変換に関する特有のＤＶＳ吸脱着曲線を示す。
【図１６】図１６は、高純度のＰ-３二水和物結晶形を製造するための、再結晶、ろ過、乾燥および水和プロセスの一例を示すフローチャートである。
【図１７】図１７は、結晶形のＰ-２およびＰ-３ファミリーの熱力学的関係（階層）を図示する。
【図１８】図１８ａおよび１８ｂは、模擬肺液（ＳＬＦ）における異なる結晶形の溶解性を示すグラフである：Ｐ-２、Ｐ-３、およびＰ-３（約７５ｗ／ｗ％）とＰ-２（約２５ｗ／ｗ％）の混合物。データは、（ａ）非水素化 ＤＰＰＣ（米国、Sigma-Aldrich社）および（ｂ）水素化ＤＰＰＣ（米国、Lipoid社）界面活性剤（０．０２ｗ／ｖ％濃度）である。各データポイントは、３７℃で得られた三通りのサンプルを表す。
【図１９】図１９は、Ｐ-４結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図２０】図２０は、Ｐ-６結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図２１】図２１は、Ｐ-７結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図２２】図２２は、Ｐ-８結晶形に特有のＰＸＲＤパターンを示す。
【図２３】図２３は、アセトニトリル-水５０／５０（Ｖ／Ｖ）溶液におけるＰ-２、Ｐ-３形およびそれらの物理的混合物に関する、時間の関数としての、２５℃での撹拌懸濁液における薬物濃度の溶解性試験の結果を示す。
【図２４】図２４は、本発明での使用に好適であり、実施例２７の例として記載された吸入器の模式図を示す。
【図２５】図２５は、高用量レベルのＭＤＴ-６３７ Ｐ-３多形体と、吸入しても肺機能に影響を与えないプラセボについての連続的な肺活量測定を示すグラフである。
【図２６】図２６は、ＭＤＴ-６３７ Ｐ-３多形体の３つの用量レベルそれぞれに関する、１０日間の投薬における限られたプラズマ暴露を示すグラフである（２日と１０日の間の集積は最小化）。
【図２７】図２７は、研究１のための患者を選択する際に使用された試験対象患者基準及び除外基準を示す表１７である。
【図２８】図２８は、研究１のための患者を選択する際に使用された試験対象患者基準及び除外基準を示す表１８である。
【図２９】図２９は、研究１のための患者を選択する際に使用された試験対象患者基準及び除外基準を示す表１９である。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
本発明は、本明細書に含まれる特定の実施形態に関する以下の詳細な説明を参照することによって、より簡単に理解されるかもしれない。その一部を形成し、例示として本開示の様々な実施形態を示している添付の図面が参照される。本発明は、その特定の実施形態の具体的詳細を参照して記載されているが、そのような詳細は、本発明の範囲を限定するものではない。
【００５０】
２０１２年６月２９日に出願された米国仮出願第６１／６６６，２５８号、１９９９年１月２９日に出願された米国特許第６，４９５，５８０号、２００３年８月１１日に出願された米国特許出願第１０／５２４，１６２号、２００３年８月１１日に出願された米国特許出願第１０／５２４，３１３号を含む参考文献により、本明細書で言及された参考文献の全文は、全体としてここに包含される。
【００５１】
本発明は、米国特許第６，４９５，５８０号に記載され、その構造が以下に示される化合物ＭＤＴ-６３７の新規な多形体を提供する。本明細書に記載された多形体は、その独自の結晶形が、従来技術及び／又は理論上の計算／予測に従わないか、それらから生じないという点で、新規であり自明ではない。本明細書に記載された多形体は、従来技術の化学合成ステップあるいは手順から得られない特定の非自明な結晶化コンディション下で製造される：最終合成ステップからの結晶化は、本明細書に記載された適切な管理なしでは、異なる形態あるいは異なる形態の混合物をもたらすかもしれない。さらなる新規な点は、発見された結晶形が、溶解性、溶解速度、安定性、化学反応性、吸湿性、粉末ハンドリング特性等の予期できないユニークな生理学的性質を有し、これらが増強された治療的価値を有する改良された医薬製剤および剤形の製造を可能にする有利な性質を提供する、ということである。
【００５２】
以下の理論に拘束されることを意図しないが、ＭＤＴ-６３７、その異性体および多形体は、融合阻害剤として機能すると考えられる。例えば、ＲＳＶの場合は、ＭＤＴ-６３７、その異性体および多形体が、Ｆ融合およびＧ付着糖タンパク質により、ＲＳＶのヒト細胞への付着を妨げる融合阻害剤として働くと考えられる。
【００５３】
本明細書で使用される「医薬品有効成分」、「ＡＰＩ」、「薬物」あるいは「薬」という語句および用語は、化学名：フェノール、２,２'-[(４-ヒドロキシフェニル)メチレン]ビス[４-[[(５-メチル-１Ｈ-テトラゾール-１-イル)イミノ]メチル]]；別名：５,５'-ビス[１-(((５-メチル-１-Ｈ-テトラゾリル)イミノ)メチル]-２,２',４''-メチリジン トリスフェノール：分子式 Ｃ25Ｈ22Ｎ10Ｏ3）を持ち、以下の構造で表されるＭＤＴ-６３７化合物を指す。
【化２】
2015524391.tif 000004
【００５４】
本明細書で使用される、用語「パターンＰ-２、またはＰ-３、またはＰ-４、またはＰ-６、またはＰ-７、またはＰ-８の結晶形」または「Ｐ-２、またはＰ-３、またはＰ-４、またはＰ-６、またはＰ-７、またはＰ-８形」または、ＭＤＴ-６３７ Ｐ２、ＭＤＴ-６３７ Ｐ３、ＭＤＴ-６３７ Ｐ-４、ＭＤＴ-６３７ Ｐ６、ＭＤＴ-６３７ Ｐ７、ＭＤＴ-６３７ Ｐ８は全て、それらの発見時に従って順次番号を付けられた、それらのＰＸＲＤパターンによるＡＰＩの異なる多形体および溶媒和物の表記である。同形の溶媒和物等のいくつかの結晶形は、類似したＰＸＲＤパターンを示すかもしれない。
【００５５】
本明細書中で使用される用語「特有のＰＸＲＤパターン」または「特有のＦＴＩＲパターン」は、これらのパターンが、解析法および機器によって明確にされる限度内において同じ位置および順序のピークを示すことを意味する。異なるサンプル、機器および測定の自然変動における変化のため、ピーク位置は、報告された位置から外れるかもしれない。ＰＸＲＤの場合、この偏差は、２θ値において０．２度程度になるかもしれない。機器およびサンプルの可変性、粒子径、結晶化度、および従来技術において知られている優先的な結晶方位事象のため、ＰＸＲＤピーク強度には大きな違いがあるかもしれない。
【００５６】
本明細書で使用される用語「特有のＤＳＣトレース」または「特有のＴＧＡトレース」または「特有のＤＳＣ曲線」は、温度および相対湿度（％ＲＨ）の関数として測定された、パラメータの変化の大きさ等の対応する依存性の形、並びに、そのような依存性における主要な変曲点に言及する。これらの依存は、異なるサンプルおよび測定技術における変化、特に初期サンプルの水和の程度、利用した機器の種類および走査速度における変化に起因して有意な偏差を示し得ることが、従来技術において理解されている。
【００５７】
本明細書で使用される用語「結晶化度」は、通常ＰＸＲＤピークの広幅化と関連している結晶格子の不完全度（結晶の欠陥の数の多さ）を一般に示す。
【００５８】
本明細書で使用される用語「固体組成物」は、一般に、適切な医薬品賦形剤の固体マトリクス中に分散されたＡＰＩに言及する（分子分散、アモルファス分散あるいはナノ粒子の形態でもよい）。
【００５９】
本明細書で使用される用語「水混和性溶媒」には、一般に、相分離せずに薬剤溶液と何らかの比率で混和されることができる溶媒が含まれる。
【００６０】
本明細書で使用される用語「水非混和性溶媒」には、一般的に、相分離せずに薬剤溶液と部分的にのみ混和されることができる溶媒が含まれる。
【００６１】
本明細書で使用される用語「貧溶媒（antisolvent）」には、一般に、薬剤化合物の結晶化に使用できる溶媒であって、薬剤溶液とは混和できるが、薬剤がそこに実質的に溶解しない溶媒が含まれる。
【００６２】
本明細書で使用される用語「周囲条件」は、一般に、通常１５〜３７℃の温度および４０〜１００％の相対湿度の範囲に言及する。
【００６３】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容できる賦形剤または薬学的に許容できる担体」には、所望の特定の剤形に適切な、固体あるいは液体物質、希釈剤、分散あるいは懸濁剤、界面活性剤、等張剤、増粘あるいは乳化剤、保存剤、固体バインダー、潤滑剤等が含まれる。レミングトンの薬学（Remington's Pharmaceutical Sciences）、１５版、Ｅ. Ｗ. マーティン著（Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1975）は、医薬組成物の製剤化において使用される様々な担体およびその調製のための既知の技術を開示している。望ましくない生物学的作用を生じる、または医薬組成物の他の成分と有害な方法で相互作用するような、本発明のＡＰＩと適合しない慣習的な担体を除いて、その使用は、本発明の範囲内であると考えられる。
【００６４】
同じ薬物の結晶（多）形とは、その中で分子が、異なる配列及び／又は異なる分子のコンフォメーションを持つ、同じ純物質の異なる結晶形と定義できる（Grant、D.J.W.、Theory and Origin of polymorphism、in polymorphism in Pharmaceutical Solids、H.G. Brittain、Editor 1999、Marcel Dekker: New York）。しかしながら、様々な国において医薬品をコントロールまたはモニターする規制機関、および、一般の製薬業界は、固体多形を広く定義する。この定義には、薬物を含む全ての結晶形が含まれ、異なる化学量論的および非化学量論的関係を持つ溶媒和物、並びに、塩およびアモルファス物質も含まれる（U.S. Department of Health and Human Services、F.D.A., Center for Drug Evaluation and Research (ODER), ANDAs: Pharmaceutical Solid polymorphism, Chemistry, Manufacturing, and Controls Information, in Guidance for Industry 2007）。本明細書で使用される「形（形態）」あるいは「多形（体）」あるいは「結晶多形（体）」は、その中で分子が、異なる配列及び／又は異なる分子のコンフォメーションを持つ異なる結晶形であると理解され、純物質の複数の形態および薬物を含む全ての結晶形が含まれ、異なる化学量論的および非化学量論的関係を持つ溶媒和物、並びに、塩およびアモルファス物質も含まれる。
【００６５】
現在医薬開発中の、合成および半合成起源の分子の大多数が、高分子量と有意な立体配座可動性を有する。そのような分子は、複数の多形体と多数の溶媒和物を持つかもしれない。結晶多形は、薬物（医薬品有効成分、ＡＰＩ）と固形製剤の両方の特性のいくつかに直接的な影響を持つ。例えば、結晶多形は、融点、固有密度、硬度、吸湿性等のＡＰＩの物理化学的特性；かさ密度、流動性、凝集性等の粉末特性に影響を与える可能性があり、また、例えばフーリエ変換赤外（ＦＴＩＲ）分光法を使用してまたは核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法によって測定される粉末Ｘ線回析（ＰＸＲＤ）バターン及び／又は分光パターン等の分析特性、および、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）および熱重量分析（ＴＧＡ）を使用して測定されるような熱挙動、並びに動的水蒸気吸着（ＤＶＳ）法を使用して測定されるような水分吸着／脱着特性の点でも異なるかもしれない。重要なことに、結晶多形は、様々な溶媒（体液を含む）における平衡溶解度および溶解速度に影響を与え、それゆえ同じ薬物分子に対し、様々な薬物動態プロファイルおよび治療濃度をもたらすかもしれない。不安定なまたは準安定性の多形体は、保管あるいは処理の間に、熱力学的により安定な多形体に変換するかもしれない。また、同じ薬物分子の多形体は、処理後および保管の際に異なる化学的不純物と分解生成物を示すかもしれない。このように、異なる多形体は、製剤にとって有利な特性と不利な特性を持ちうる。ＭＤＴ-６３７の新規な多形体の構造、性質および調製方法が本発明の主題である。
【００６６】
粉末Ｘ線回析（ＰＸＲＤ）による分析は、結晶形同定のための主要技術として使用され、ブラッグ-ブレンターノ光学系（Bragg-Brentano optics）のブルカー（Bruker）社のＤ８ Ａｄｖａｎｃｅ回析計を使用して当該分野おいて既知の方法で行われた。波長１．５４１８Åの通常のＣｕＫα線は、全ての分析を通じて４０ｋＶと４０ｍＡｂの設定で生成された。試料は、シリコン低バックグラウンドホルダーの上に乗せられ、スムースで、薄く、均一な試料表面を形成するために、ワックスペーパーとスライド・ガラスを用いて平らにされた。データは、０．０１°２θのステップにおいて、０．３秒／ステップの速度にて、３〜４０°２θ値から収集された。回析パターンは、Ｅｖａ １３ ｓｏｆｔｗａｒｅ（ドイツ、カールスルーエのＢｒｕｋｅｒ ＡＸＳ社）を用いて処理された。
【００６７】
後述するように、ＡＰＩの複数の新規な多形体と溶媒和物が発見された。パターンＰ-２とＰ-３の物質は、新規な医薬品剤形の開発のための安定性、溶解性、および、適合性に関して、特有の有用性を示す。これらの特異的な多形体は、最終ＡＰＩ製造工程に大きな関係があり、製品の製造性に与える影響が大きい；例えば、純度、微粒子化、紛体混合、用量充填、および、製剤性能（紛体力価、含量均一性およびエアロゾル化効率（当業者に既知の、アンダーセン・カスケード・インパクター[Andersen Cascade Impactor：ＡＣＩ]、次世代インパクター[New Generation Impactor：ＮＧＩ]技術等のカスケード・インパクター[ＣＩ]によって測定できる、送達用量および空気動力学的粒径分布）を含むがこれらに限定されない）。
【００６８】
パターンＰ-２の水和物結晶形に特有の回析ピークを図１に示し、表１に一覧を示す。Ｐ-２水和物の最も特徴的なピークは、２θ値：４．８３°；８．４２°；９．６１°；１１．８３°；１４．６０°；１６．９４°；１９．２５°；２０．４６°；２４．０９°；２４．８５°；２７．７６°；２８．５６°で観察される。
【００６９】
表１．Ｐ-２（水和物結晶形）特有の回析ピーク
【表１】
2015524391.tif 000005
【００７０】
パターンＰ-２の無水物結晶形に特有の回析ピークを図２に示し、表２に一覧を示す。Ｐ-２無水物形の最も特徴的なピークは、２θ値：８．５８°；１０．６４°；１２．５８°；１４．５１°；１５．８９°；１７．２０°；２１．０６°；２１．４１°；２２．３７°；２５．４３°；２７．６２°で観察される。
【００７１】
表２．Ｐ-２（無水物結晶形）特有の回析ピーク
【表２】
2015524391.tif 000006
【００７２】
温度および湿度制御下で得られたＰ-２形のＰＸＲＤデータは、格子膨張と水の取り込みに起因する、Ｐ-２の水和物形と無水物形の回析パターン間の明白な差を示した。それゆえ、格子は劇的な構造変化を受けないが、ＰＸＲＤピークの移動から、Ｐ-２格子の水和物形と無水物形を見分けることは可能である。
【００７３】
図３は、Ｐ-２水和物に特有のＦＴＩＲパターンを示す。その領域で最も特徴的な吸収帯は、８００−１２００ｃｍ-1の間にあり、Ｐ-２結晶形に対応し、８３６．５ｃｍ-1；９８０．９ｃｍ-1、ダブルピーク１０８０．０および１０９１．９ｃｍ-1、１２０８．９ｃｍ-1、１２３８．６ｃｍ-1および１２８７．６７ｃｍ-1である。
【００７４】
Ｐ-２水和物のＤＳＣトレース（図４）は、シャープな融解ピークを約２６３℃に示し、４０℃〜６０℃の間の小さな熱事象を伴う（ＴＧＡデータ［図５］により、この温度間隔内における重量の減少によって確認されるように脱水と思われる）。特定の理論に拘束されることは望まないが、Ｐ-２が約６０℃の温度で比較的容易に水を失うが、格子の遷移無く溶解し、安定な脱水生成物（さらなる相転移がない安定な結晶格子）とともにチャンネル水和物を構成する可能性があると考えられる。
【００７５】
吸着・脱着等温線（図６）のＤＶＳ測定による小さな平衡ステップ（１％ＲＨ）を使用した臨界水分活性の評価は、Ｐ-２水和物と無水形の間の転移のためのこの活性が、通常３０〜４０％ＲＨの間にあることを示す。水に特有の重量測定による減少は、１〜４．５％ｗ／ｗの間である。
【００７６】
本明細書中の特定の形態の製造は、それらの熱力学的関係（相図）の把握を通じておよび結晶化プロセスの動力学を通じてコントロールされた。パターンＰ-２水和物の高純度物質は、貧溶媒として水を使用するアセトン／水混合物中に溶解されたＰ-３エタノラート形から、図７に開示される平行冷却結晶化によって再結晶化された。生成物は、管理された条件下で、ろ過され、洗浄され、乾燥された。エタノールが存在しないことは、1Ｈ ＮＭＲ回析で確認された。製造された物質の化学的純度は、ＨＰＬＣ法を使用して測定され、望ましい９９．０％以上であった。
【００７７】
Ｐ-２無水物形は、Ｐ-２水和物から、この物質を３０％ＲＨ未満で脱水することによって及び／又は６０℃以上に加熱することによって得ることができる。
【００７８】
パターンＰ-３の二水和物結晶形に特有の回析ピークを図８に示し、表３に一覧を示す。Ｐ-３二水和物の最も特徴的なピークは、２θ値: ７．０３°；８．１６°；９．４７°と９．７５°のダブルピーク；１１．６０°；１４．２４°；１７．９５°、１９．６４°；２０．２６°；２４．５２°；２６．２４°；２７．２５°で観察される。パターンＰ-３の全ての結晶形は同形であり、それゆえそれらのＰＸＲＤパターンは類似しており、対応するピーク値は、Ｐ-３二水和物（図８；表３）、一水和物（図９；表４）；無水物（図１０；表５）及びエタノラート（図１１；表６）結晶形で互いに非常に近い。前述したように、ピーク位置は、ＰＸＲＤ機器の正確性、サンプルの調製、ピークフィッティング手順の影響を受ける。それゆえ、測定したピーク位置のずれが予想される。しかしながら、特有のＰＸＲＤパターンは、ピーク強度とともにピーク位置を考察することによって、および、一つのＰＸＲＤパターンを参照パターンと関連付けることによって、当業者に容易に認識可能である。
【００７９】
表３．Ｐ-３（二水和物結晶形）特有の回析ピーク
【表３】
2015524391.tif 000007
【００８０】
表４．Ｐ-３（一水和物結晶形）特有の回析ピーク
【表４】
2015524391.tif 000008
【００８１】
表５．Ｐ-３（無水物結晶形）特有の回析ピーク
【表５】
2015524391.tif 000009
【００８２】
表６．Ｐ-３（エタノラート形）特有の回析ピーク
【表６】
2015524391.tif 000010
【００８３】
図１２は、Ｐ-３水和物に特有のＦＴＩＲパターンを示す。その領域で最も特徴的な吸収帯は、８００−１２００ｃｍ-1の間にあり、Ｐ-３結晶形に対応し、８３１．５ｃｍ-1；９９４．９ｃｍ-1、１０９２．０ｃｍ-1、１２１１．０ｃｍ-1、１２３７．７ｃｍ-1および１２９０．５ｃｍ-1である。
【００８４】
Ｐ-３二水和物のＤＳＣトレース（図１３）は、２２０℃と２８０℃の間にワイドな吸熱事象を示し、その特有のデルタ形状のピークは、この間隔における、異なる形態間の再結晶／遷移のような複数の熱事象を示唆する。ＴＧＡデータは、この物質について、３０℃から１００℃の間に５〜７％の重量減少を示す（図１４）。それゆえ、Ｐ-３二水和物は、Ｐ-２水和物より高温で水を失うが、この事象の後、いくつかのさらなる変化を受け、前記融解ピークは、異なる形態に対応するかもしれない。
【００８５】
Ｐ-３形のための吸着・脱着等温線のＤＶＳ測定による小平衡ステップ（１％ＲＨ）を使用する臨界的な水分活性の評価（図１５）は、約３と１３％ＲＨに、２つの転移点（一および二水和物）を示す。Ｐ-３二水和物に特有の水の重量損失は、５．５〜８．５％ｗ／ｗの間である。Ｐ-２とＰ-３形の間のＤＶＳ曲線の著明な違いは、これらの形態の相定量分析のための補助的な技術として利用できる。
【００８６】
Ｐ-３エタノラートは、特定の臨界濃度を超える十分な量のエタノールを含む溶液からの結晶化によって得られた。ＡＰＩ精製とＰ-３エタノラート形生成の両方のために使用された、アセトン／水／エタノール系におけるこの臨界濃度は、約３３％ｖ／ｖであることが見いだされた。再現可能な結晶化プロセスは、この限界を超えるエタノール濃度で達成された。図１６は、平行冷却結晶化による、貧溶媒としてエタノールを使用するアセトン／水混合物中に溶解されたＰ-３エタノラートの再結晶、その後の、管理された条件下での、ろ過、洗浄、水和および乾燥ステップによって得られる高純度のＰ-３二水和物の製造方法を図示する。エタノールが存在しないことは、1Ｈ ＮＭＲ回析で確認された。製造された物質の化学的純度は、ＨＰＬＣ法を使用して測定され、望ましい９９．０％以上であった。
【００８７】
Ｐ-３一水和物とＰ-３無水物形は、Ｐ-３二水和物から、一水和物については、この物質を約１３％ＲＨ未満で、無水物形については約３％ＲＨ未満で乾燥することによって、及び／又は、好ましくは６０℃を超える温度でそれを長時間加熱することによって得ることができる。
【００８８】
Ｐ-２二水和物が周囲条件（すなわち、好ましくは１５〜３７℃の温度、好ましくは４０〜１００％の相対湿度）下で最も安定な結晶形であることが発見された。Ｐ-３エタノラートが、好ましくは０．３を超える、十分なエタノール活性（溶液中の十分に高濃度のエタノール）を伴う最も安定な結晶形であることも発見された。図１７は、様々なＰ-２とＰ-３形の間の熱力学的関係の略図を示す。
【００８９】
時間依存性溶解性の研究は、サーファクタント：ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）を含む模擬肺液（ＳＬＦ）中で実施された。ＤＰＰＣは、ヒトの肺に存在する主要なサーファクタントである。ＭＤＴ-６３７は、鼻孔を通じた肺への送達のために処方されるので、ＡＰＩ溶解性を０．０２％ＤＰＰＣでモディファイされたＳＬＦ中で評価することは非常に重要であり、そのような情報は肺における薬物機能性を理解するのに役立つ。図１８は、０．０２％ｗ／ｖ濃度の２つの異なるＤＰＰＣサーファクタントを用いた、および、Ｐ-２水和物、Ｐ-３二水和物並びに混合Ｐ-３／Ｐ-２物質を用いた、３７℃で５日間実施された溶解研究の結果を示す。データは、Ｐ-２水和物の１００ｎｇ／ｍＬ（１９６ｎＭ）に対して、Ｐ-３二水和物の溶解性が約５５０ｎｇ／ｍＬ（１０７７ｎＭ）であることを示す。同様にＰ-２とＰ-３形両方のために、これらの研究の間に評価された純水への溶解性は、著しく低く、ＨＰＬＣ検出限界である約６ｎＭ未満である。これらの結果は、第一に、Ｐ-２形がＰ-３二水和物の溶解性より約５〜６倍低いことを示す。
【００９０】
さらに、Ｐ-３二水和物は、実施例において示されるように、４０℃／７５％ＲＨでの４週間の開放皿（open-dish）安定性研究において、固体変化および化学分解に対して安定であった。
【００９１】
Ｐ-３二水和物はまた、実施例で示されるように、４０℃／７５％ＲＨで３９週間、密封したガラス瓶中で貯蔵されても、ラクトースを含む製剤中での固体変換に対して安定であった。
【００９２】
さらに、実施例で示されるように、微粒子化は、結晶化度、相純度に影響を与えず、または、Ｐ-３二水和物に化学分解を引き起こさなかった。
【００９３】
上述した実験を受けて、Ｐ-３二水和物が、Ｐ-２水和物より熱力学的安定性が低い形態であるにも関わらず、固体変換、脱水および化学分解に対して動力学的に安定であり、且つ、Ｐ-２水和物形より著しく高い溶解性という利点を持つことが発見された。Ｐ-３二水和物は、それゆえ医薬開発のために十分に頑強で適切な結晶形である。Ｐ-３二水和物とＰ-２水和物の主要な物理化学的特性のいくつかの比較が表７に示される。
【００９４】
【表７】
2015524391.tif 000011
【００９５】
当業者によって認識されるように、選択される多形体は、典型的に最も熱力学的に安定な形態である。なぜなら、準安定形の高い溶解性あるいは優れた粉末特性は、通常、それらの加工及び／又は保管の間のどちらかにおける最終製品内でのそのような形態の制御できない変換に関連する制御リスクを、正当化しない。しかしながら、予期されることとは対照的に、発明者らは、先に議論したようにおよび実施例において議論するように、それが製品開発のためのより実行可能な選択肢を示すことを考慮して、好ましい実施形態のために、熱力学的安定性がより低い形態であるＰ-３二水和物を選択した。とはいえ、安定性の低い固体の開発は賢明ではなく、溶解性の多種多様の減少のリスクおよび、ＲＳＶの臨床株に対する潜在的な薬物濃度は著しい。
【００９６】
Ｐ-２とＰ-３パターンの結晶形に加えて、他の新規な結晶形が発見された。これらは、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７およびＰ-８を含むが、これらに限定されない。
【００９７】
パターンＰ-４の結晶形に特有の回析ピークを図１９と表８に示す。Ｐ-４形の最も特徴的なピークは、２θ値: ４．３１°、７．９９°、９．３７°、１１．０２°、１３．０４°、１３．４３°、１４．１８°、１６．１３°、１６．７０°、１７．０８°、１７．４２°、１７．９２°で観察される。この形態は、飽和ＤＭＦ溶液から、冷却、蒸発または貧溶媒結晶化手順を使用して得られた。特定の理論に拘束されることを望まないが、Ｐ-４結晶形はＤＭＦ溶媒和物であろうと信じられる。
【００９８】
表８．Ｐ-４（結晶形）特有の回析ピークパターン
【表８】
2015524391.tif 000012
【００９９】
パターンＰ-６の結晶形に特有の回析ピークを図２０と表９に示す。Ｐ-６形の最も特徴的なピークは、２θ値: ３．４３°と３．８９°のダブルピーク、６．８９°、７．８７°と８．２５°のダブルピーク、１０．８８°、１３．０６°および１３．８１°、１６．１２°、１７．３８°および１８．５１°で観察される。この形態は、飽和ＤＭＦ溶液から、ＭＴＢＥを用いた貧溶媒結晶化を使用して得られた。
【０１００】
表９．Ｐ-６（結晶形）特有の回析ピークパターン
【表９】
2015524391.tif 000013
【０１０１】
パターンＰ-７の結晶形に特有の回析ピークを図２１と表１０に示す。Ｐ-７形の最も特徴的なピークは、２θ値: ５．１８°、６．５９°、７．７０°、１０．０２と１０．６２°のダブルピーク、１２．１８°と１２．５０°のダブルピーク、１５．１６°、１５．８８°と１６．４°のダブルピーク、１７．２０°と１７．４２°のダブルピーク、１８．０７°と１８．２５°のダブルピークで観察される。この形態は、飽和ＮＭＰ溶液から、二相三成分系ＮＭＰ-シクロヘキサン-水における貧溶媒沈殿法によって得られた。
【０１０２】
表１０．Ｐ-７（結晶形）特有の回析ピークパターン
【表１０】
2015524391.tif 000014
【０１０３】
パターンＰ-８の結晶形に特有の回析ピークを図２２と表１１に示す。Ｐ-８形の最も特徴的なピークは、２θ値: ４．１５°、７．８５°、９．３３°、１４．２９°、１５．８４と１６．６８と１７．１４°のトリプルピーク、１８．５３°、２０．２７°、２３．９０°、２４．８０°および２７．３９°で観察される。この形態は、２つの異なる結晶化システム、最初に、水添加による飽和ＤＭＳＯ溶液からの貧溶媒沈殿、次に、貧溶媒としてアセトン／水-混合物を使用する飽和ＤＭＦ溶液からの貧溶媒沈殿によって得られた。
【０１０４】
表１１．Ｐ-８（結晶形）特有の回析ピークパターン
【表１１】
2015524391.tif 000015
【０１０５】
アモルファス形のＰＸＲＤパターンは、特有の回析ピークを示さないが、典型的に一以上の極大を伴う「ハロー(halos)」を示す。これらの極大の位置は、アモルファス物質のために使用される調製技術によって変わるかもしれない。アモルファス形は、（ａ）飽和ＡＰＩ溶液の急冷；（ｂ）ＡＰＩ溶液の高速蒸発；（ｃ）高速貧溶媒沈殿；（ｄ）噴霧乾燥および（ｅ）凍結乾燥を含むがこれらに限定されない複数の技術によって得ることができる。実施例は後で提供される。
【０１０６】
「固体組成物」はＡＰＩのさらにもう一つの実施形態である。アモルファス形と同様に、固体組成物は、特異的な結晶ＡＰＩ回析ピークと同定できる特有のＰＸＲＤパターンを生じないかもしれない。この発明の一つの重要な側面は、ＡＰＩのための調製方法論である：ある実施形態では、固体複合微粒子の形態の、賦形剤マトリクスが使用され、その際、薬物は選択された賦形剤の均一な固相内に配合される。賦形剤は、様々なパラメータ−薬物溶解速度、バイオスペース（biospaces）への微粒子送達後の粘膜付着特性の付与、賦形剤の抗ウイルス特性の相乗的な組み合わせ（ＡＰＩ単独で達成されるより大きな、より著しい及び／又は延長した治療上の抗ウイルス効果を提供するため）−を含むがこれらに限定されないパラメータを最適化するために選択される。
【０１０７】
固体組成物の製造プロセスは、（ａ）飽和ＡＰＩ溶液と飽和賦形剤溶液の混合下での急速共沈冷却；（ｂ）適切なＡＰＩ-賦形剤溶液の急速蒸発；（ｃ）適切なＡＰＩ-賦形剤溶液の噴霧乾燥；（ｄ）適切なＡＰＩ-賦形剤溶液の凍結乾燥といったいくつかの技術を含むが、これらに限定されない。実施例は後で提供される。
【０１０８】
ＡＰＩと選択された賦形剤の固体組成物または製剤は、複合固体微粒子、またはフィルム、または複合マトリクスを形成し、そこで薬物と賦形剤は、複合相内で物理的もしくは化学的に互いに付着し、賦形剤は小分子あるいは高分子物質であってもよく、ラクトース、トレハロース、糖類、マンニトール、アミノ酸、ポリマー（ヒドロキシプロピルメチルセルロース[ＨＰＭＣ]およびカルボキシメチルセルロース・ナトリウムを含む微結晶性セルロースの様々な化学修飾物[例えば、ペンシルベニア州、フィラデルフィアのＦＭＣ社から入手できるＡｖｉｃｅｌＣＬ-６１１、ＲＣ-５８１、ＲＣ-５９１]、ＦＭＣ社からＧＥＬＣＡＲＩＮ[登録商標]、ＶＩＳＣＡＲＩＮ[登録商標]、およびＳＥＡＳＰＥＮ ＰＦ[登録商標]カラギーナンとして提供されている、紅藻[カラギーナン]から抽出される天然に存在する多糖、および、ポリソルベート８０等の様々な分散および湿潤剤を含むがこれらに限定されない）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム[ＥＤＴＡ]）およびオスモル濃度調整剤（例えば、ブドウ糖）の様々な形態および化学修飾物を含むが、これらに限定されない。
【０１０９】
現在利用できる治療学と比べて、本明細書に記載されるＭＤＴ-６３７化合物は、有意に増強された有効性を示す。前記化合物に特異的に関連する重要な有効性の特徴は、以下を含む：入院期間と集中治療／人工呼吸器への進行の減少、症状持続期間の減少および呼吸困難指数の減少。さらに、本発明の化合物および組成物は、ＲＳＶの薬剤耐性株、すなわちＳＹＮＡＧＩＳ(登録商標)(パリビズマブ)に耐性を示す株、に対しても有効である。
【０１１０】
実施例、特に実施例２７に記載されるように、ＭＤＴ-６３７化合物の安全性を評価する実験およびフェース１臨床プログラムは、成功裏に完了された。ＭＤＴ-６３７ Ｐ３等のＭＤＴ-６３７多形体は、最大１３２ｍｃｇＴＩＤの３用量で１０日間、安全で良好な耐容性を示すことが確認された。最初のランダム化二重盲検プラセボ対照研究（研究１）において、ＭＤＴ６３７は健常人に単回漸増用量で投与され、肺機能、ＥＣＧ、器官臨床検査値あるいは理学的検査において、臨床的に重要な変化は観察されなかった。
【０１１１】
安全性および耐容性を評価するために設計された第二の研究（研究２）においても、ＭＤＴ-６３７は健常人に１０日間投与された。漸増用量は、１日２回６６ｍｃｇ〜１日３回１３２ｍｃｇで、１０日間、約４０人のボランティアでテストされた。研究結果は、ＭＤＴ-６３７が、１０日間、１日３回１３２ｍｃｇまでの量で安全で良好な耐容性を示すこと：さらに、重要な変化は、肺機能においてあるいは肺の有害事象のレポートにおいて観察されないことを実証した。
【０１１２】
さらに安全性と耐容性を評価するために設計された第三の研究（研究３）において、ＭＤＴ-６３７の漸増用量は、間欠性または軽度から中等度の喘息を持つ患者に投与された。漸増用量は、１日１回６６ｍｃｇ〜１日３回１３２ｍｃｇで、約１０人のボランティアでテストされた。研究結果は、肺機能においてあるいは肺の有害事象のレポートにおいて、臨床的に重要な変化はないことを実証した。
【０１１３】
発見された結晶形を持つＡＰＩ製剤または組成物は、投与のために様々な形態（粉末、ペレット、タブレット、カプレット、ピルまたは糖衣錠を含む）で製造されてもよく、またカプセル、ブリスター等の適切な入れ物に充填されてもよく、懸濁液の場合は、ボトルもしくはバイアルの中に充填されてもよい。そのような製剤の投与方法は、当業者に周知であり、フェイスマスク・ネブライザー、フェイスマスク・インヘラー、インヘラー、ネブライザーおよびその変化型による送達を含むがそれらに限定されない。
【０１１４】
腸内もしくは非経口投与に適切な医薬用の有機もしくは無機の固体あるいは液体の担体を、前記組成物を製造するために使用することができる。ゼラチン、ラクトース、スターチ、マグネシウム、ステアレート、タルク、植物性および動物性油脂、ガム、ポリアルキレングリコール、あるいは薬剤のための他の既知のキャリアもしくは賦形剤は全て担体として適切かもしれない。
【０１１５】
好ましくは、ＡＰＩ結晶形は、アモルファスおよび結晶形のラクトース等の薬学的に許容できる賦形剤とともに、様々な呼吸器製剤を使用する肺もしくは鼻の薬物送達のために調製されることができ、及び／又は、より効率的な薬物送達を可能にするためにナノ粒子として適切な賦形剤マトリクス中に分散されることができる。
【０１１６】
本発明の医薬組成物において、前記活性薬剤は、何らかの治療的有効量（必要に応じて担体及び／又は補助的活性薬剤を含む組成物の総重量に対して、典型的には０．１％以上であり且つ一般的に９０重量％以下）で存在してもよい。好ましくは、活性薬剤の割合は、組成物の１〜５０重量％の間で変化する。投与の様式に応じて、前記医薬組成物は、０．０５〜９９重量％、好ましくは０．１〜７０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％の活性成分、および、１〜９９．９５重量％、好ましくは３０〜９９．９重量％、より好ましくは５０〜９９．９重量％の薬学的に許容できる担体を含む（全ての％は、組成物の総重量を基準とする）。
【０１１７】
適切な用量レベルは、一般的に、１日あたり患者の体重１ｋｇあたり、約０．００１〜１０００ｍｇであり、単回もしくは複数回投与で投与されることができる。様々な面において、前記用量レベルは、１日あたり約０．０１〜約５００ｍｇ／ｋｇ、１日あたり約０．１〜２５０ｍｇ／ｋｇあるいは１日あたり約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇである。適切な用量レベルは、１日あたり約０．００１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、１日あたり約０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ、１日あたり約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ、１日あたり約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇあるいは１日あたり０．１〜５０ｍｇ／ｋｇとすることができる。この範囲内において、前記投与量は、１日あたり０．０５〜０．５、０．５〜５．０あるいは５．０〜５０ｍｇ／ｋｇであってもよい。吸入投与のために、前記組成物は、０．０１〜１０００ミリグラムの活性成分、特に、治療される患者の投与量の、症状による調節のために、０．０１、０．１、１．０、５．０、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７５０、８００、９００および１０００ミリグラムの活性成分を含む、微粉化されたもしくは吸入組成物として提供される。前記多形体は、１日あたり１〜４回（例えば、１日あたり１〜２回）の投与計画で投与されることができる。この投薬計画は、最適な治療反応を提供するために調節することができる。
【０１１８】
単位用量は、１日２度以上、例えば１日２、３、４、５あるいは６回、投与されてもよい。様々な場合において、そのような単位用量は、７０ｋｇの成人に対する総投与量が、投与あたり、患者の体重１ｋｇにつき０．００１〜約１５ｍｇの範囲になるように１日あたり１または２回投与されることができる。さらなる面では、投与量は、投与あたり、患者の体重１ｋｇにつき、０．０１〜約１．５ｍｇであり、そのような治療は、何週間もしくは何か月、場合によっては何年にも延長しうる。しかしながら、当業者に十分に理解されているように、ある特定の患者に対する特定の用量レベルは、使用される特定の多形体の活性；治療される個体の年齢、体重、全体的な健康、性別、および食事、投与の時間およびルート；排泄率；以前に投与されていた他の薬物：および治療を受けている特定の疾患の重症度を含む様々なファクターによって決まることが理解されるであろう。
【０１１９】
当業者に明らかなように、いくつかのケースでは、これらの範囲外の投与量を使用することが必要となりうる。さらに、臨床医あるいは治療中の医師は、個別の患者の反応に関連して、どのように、そしていつ、治療を始め、中断し、調節し、または終了するか理解するであろう。
【０１２０】
本発明はさらに、ヒトを含む動物におけるパラミクソウイルスによる感染に関連する疾患を治療するための、一以上の開示された多形体、生成物、あるいは組成物を、薬学的に許容できる担体もしくは希釈剤と組み合わせて含む医薬を製造するための方法に関連する。このように、ある面では、本発明は、少なくとも１つの開示された多形体あるいは少なくとも１つの開示された生成物と、薬学的に許容できる担体もしくは希釈剤とを組み合わせて含む医薬を製造するための方法に関する。
【０１２１】
開示された医薬組成物は、さらに、上述した病態の治療に通常使用される他の治療効果のある多形体を含むことができる。
【０１２２】
一面において、本発明は、開示された多形体を含む医薬組成物に関する。すなわち、治療的有効量の少なくとも１つの開示された多形体あるいは少なくとも１つの開示された方法の生成物と、薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物が提供される。
【０１２３】
ある面では、開示された医薬組成物は、活性成分としての開示された多形体、薬学的に許容できる担体、及び、任意に、他の治療成分あるいは補助剤を含む。本組成物は、経口、吸入、直腸、局所、および非経口（皮下、筋肉内、および静脈内を含む）投与に適切なものを含むが、どのようなケースでも、最も適切なルートは、特定のホスト、活性成分がそのために投与されるコンディションの性質および重症度によって決まるであろう。前記医薬組成物は、単位用量の形態で使いやすく提供されることができ、薬学の分野で周知の方法で調製されることができる。
【０１２４】
様々な面において、本発明はまた、薬学的に許容できる担体もしくは希釈剤、および、活性成分として、治療的有効量の開示された多形体、開示された製造方法の生成物、その溶媒和物、あるいは水和物を含む医薬組成物に関する。さらなる面では、開示された多形体、開示された製造方法の生成物、その溶媒和物、水和物は、投与目的のために様々な医薬品剤形に製剤化されてもよい。
【０１２５】
実際には、この発明の多形体は、従来の調剤配合技術により、医薬担体との密接な混合物中に、活性成分として配合されることができる。前記担体は、投与のために望まれる製剤の形態（例えば、経口、吸入あるいは非経口的[静脈内を含む]）に応じて多種多様の形態をとることがきる。このように、本発明の医薬組成物は、それぞれ所定量の活性成分を含むカプセル、カシェー（cachets）あるいはタブレット等の、経口投与に適切な個別の単位として提供されることができる。さらに、前記組成物は、粉末として、顆粒として、粒子として、溶液として、水性液体中の懸濁液として、非水性液体として、水中油型エマルションとして、あるいは油中水型液体エマルションとして、存在してもよい。前記組成物は、吸入方法および装置による投与のために製剤化されてもよい。上述した一般的な剤形に加えて、本発明の多形体は、制御された放出手段及び／又は送達装置によって投与されることもできる。前記組成物は、何らかの調剤方法によって調製できる。一般に、そのような方法は、前記活性成分を、一以上の必須成分を構成する担体と関係させるステップを含む。一般に、前記組成物は、前記活性成分と、液体キャリアあるいは微粉化した固体キャリアあるいはその両方とを、均一におよび密接に混合することによって調製される。生成物は、その後、所望の製品に都合よく仕上げられる。
【０１２６】
投与し易さおよび投与量の均一性のために、前述した医薬組成物を単位用量形態に製剤化することが特に有利である。本明細書で使用される単位用量形態とは、単位投与量として適切な物理的に別々の単位を意味し、各単位は、必要な医薬担体と関連して所望の治療効果を発揮するよう計算された、あらかじめ決められた量の活性成分を含む。そのような単位用量形態の例は、タブレット（分割錠あるいはコーティング錠を含む）、カプセル、ピル、粉末小包、ウエハー（wafers）、座薬、注射液、計量吸入薬、あるいは懸濁液等、および分離されたそれらの複数分である。
【０１２７】
このように、この発明の医薬組成物は、本明細書に開示されるような、薬学的に許容できる担体および多形体を含むことができる。本発明の多形体は、一以上の他の治療効果のある化合物と組み合わせて、医薬組成物中に含まれてもよい。
【０１２８】
使用される医薬担体は、例えば、固体、液体あるいは気体であってもよい。固形担体の例は、ラクトース、白土（terra alba）、スクロース、タルク、ゼラチン、アガー、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸を含む。液状担体の例は、シュガーシロップ、ピーナッツオイル、オリーブオイルおよび水である。気体状担体の例は、二酸化炭素および窒素を含む。本装置およびプロセスの上述した実施形態は、特に「好ましい」実施形態は、単に実施の可能な例であり、単に、開示した内容の指針の明確な理解のために記述されていることが強調される。これらおよび他のそのような変更および変化は全て、この開示の範囲内に含まれ、続く特許請求の範囲によって保護されることが意図されている。それゆえ、開示の範囲は、添付の特許請求の範囲に示される場合を除き、限定されることを意図していない。
【０１２９】
以下の特定の実施例は、本発明を、吸入器を使用する治療方法に適用した場合を説明する。当然のことながら、手順中に多少の変化を含む他の例は、当業者に明白であり、本発明はこれらの特定の説明された実施例に限定されない。
【実施例】
【０１３０】
Ｐ-２およびＰ-３結晶形の結晶化プロセスの開発
【０１３１】
概要
実験は、結晶化スペース（特に、溶媒組成および冷却速度）を明らかにするために実施され、最も重要なプロセスに関連する結晶形Ｐ-２水和物、Ｐ-３エタノラートおよびＰ-３二水和物が、制御可能な様式で製造できることを証明した。
【０１３２】
［実施例１］
Ｐ-３再結晶／精製（試験的バッチの例）：５４０ｍｇのＭＤＴ-６３７（出発物質である純度約９６．５％のＰ-３エタノラート）は、温めたアセトン１３．５ｍＬ中に懸濁された（５５±５℃）。生じた混合物は、水（４．４ｍＬ）で希釈され（５５±５℃）、透明な溶液をもたらした。前記溶液は、撹拌しながら、１８ｍＬの無水エタノールにゆっくりと添加された。前記透明溶液は、自然に室温に冷めるまで撹拌され、約３時間撹拌された。核形成はゆっくりであるが、重い沈殿物が、室温撹拌の過程において形成された。前記固体は、濾過により収集され、無水エタノール（３×１ｍＬ）を用いて漏斗上で洗浄された。収集された生成物は、５５±５℃で真空乾燥され、４００ｍｇ（７４％）をもたらし、ＨＰＬＣ:（９９．３Ａ％）、ＤＳＣ:（開始２５６．５８℃／ピーク２６２．７０℃）、1Ｈ ＮＭＲ：残留するエタノールを伴う構造と一致する、ＰＸＲＤ:得られたＰ-３エタノラート形。生成物は、水で洗浄され、カール・フィッシャー（ＫＦ）分析によりＰ-３二水和物への変換（６．８％）および1Ｈ ＮＭＲによりエタノールの欠如が示された。
【０１３３】
［実施例２］
Ｐ-２水和物（再結晶／精製、デモバッチ）:７０．５ｇのＭＤＴ-６３７（出発物質である純度約９６．５％のＰ-３エタノラート）は、アセトン１，７６３ｍL中に懸濁された（５５±５℃）。この混合物は、添加の間、温度を５５±５℃に維持しながら水（５７１ｍＬ）で希釈された。得られた混合物は、約１５分間５５±５℃で撹拌された。熱は除去され、混合物は室温まで自然冷却され、一晩撹拌された。沈殿した固体は、濾過により収集され、アセトン／水の１：１混合物を用いて漏斗上で洗浄された（３×１５０ｍＬ）。収集された固体は、５５±５℃で真空乾燥され、５５．７ｇ（７９％）の生成物をもたらした。1Ｈ ＮＭＲ：残留エタノールまたはアセトンの所見がない構造Ｐ-２と一致する、ＨＰＬＣ:（９９．４Ａ％）、ＫＦ:（１．２％）。
【０１３４】
［実施例３］
Ｐ-３エタノラート結晶形（ａ）の結晶化スペースの決定：出発物質であるＰ-３パターン・エタノラートは、水性アセトン／エタノール（使用したエタノール／水性アセトンの最初のボリュームは、０．８２ｖエタノール：１ｖ水性アセトン）から再結晶された。室温（Ｒ.Ｔ.）で２４時間平衡化する。少なくとも８時間０〜５℃まで冷却する。パターンＰ-３の物質が得られた。
【０１３５】
［実施例４］
Ｐ-３エタノラート結晶形（ｂ）の結晶化スペースの決定：出発物質であるＰ-３パターン・エタノラートは、水性アセトン／エタノール（実施例３に比べて２０％過剰のエタノール)（１．１５ｖエタノール：１ｖ水性アセトン）から再結晶された。室温で２４時間平衡化する。少なくとも８時間０〜５℃まで冷却する。パターンＰ-３の物質が得られた。
【０１３６】
［実施例５］
Ｐ-３エタノラート結晶形（ｃ）の結晶化スペースの決定：出発物質であるＰ-３パターン・エタノラートは、水性アセトン／エタノール（実施例３より２０％少ないエタノール)（０．５ｖエタノール：１ｖ水性アセトン）から再結晶された。室温で２４時間平衡化する。少なくとも８時間０〜５℃まで冷却する。パターンＰ-３の物質が得られた。
【０１３７】
［実施例６］
Ｐ-３エタノラート結晶形（ｄ）の結晶化スペースの決定：出発物質であるＰ-３パターン・エタノラートは、水性アセトン／エタノール／水（１ｖ水性アセトン：１．７ｖ[１：１ エタノール／水]）から再結晶された。室温で２４時間平衡化する。少なくとも８時間０〜５℃まで冷却する。パターンＰ-２無水物形の物質が得られた。
【０１３８】
［実施例７］
Ｐ-３エタノラート結晶形（ｅ）の結晶化スペースの決定：出発物質であるＰ-３パターン・エタノラートは、水性アセトン／エタノール（使用したエタノール／水性アセトンの最初のボリュームは、０．８２ｖエタノール：１ｖ水性アセトン）から再結晶された。加熱した水性アセトン溶液が、冷たい（０〜５℃）エタノールに添加され、得られた混合物はさらに０〜５℃まで冷却され、０〜５℃で約８時間平衡化される。パターンＰ-３の部分的にアモルファスの物質（低結晶化度）が得られた。
【０１３９】
［実施例８］
Ｐ-３エタノラート結晶形（ｆ）の結晶化スペースの決定：出発物質であるＰ-３パターン・エタノラートは、水性アセトン／エタノール（使用したエタノール／水性アセトンの最初のボリュームは、０．８２ｖエタノール：１ｖ水性アセトン）から再結晶された。加熱した水性アセトン溶液が、温かい（５５±５℃）エタノールに添加され、得られた混合物は、０．２℃／分の速度で０〜５℃までゆっくり冷やされ、０〜５℃で約８時間平衡化される。パターンＰ-３の物質が得られた。このように、実施例１〜８は、Ｐ-３パターン・エタノラートの製造が、十分な量のエタノール貧溶媒（３３％ｖ／ｖエタノール以上）を用いてコントロールできることを示す。しかしながら、過剰の水（実施例６）は、結晶化したＰ-２物質をもたらした。また、非常に急速な冷却結晶化は、結晶化度の低い生成物をもたらすかもしれない（実施例７）。
【０１４０】
［実施例９］
水性エタノール中の様々なＡＰＩ形の平衡溶解度：この溶解性は、スラリー平衡およびＨＰＬＣを用いた溶液濃度測定を使用して、Ｐ-２およびＰ-３結晶形について測定された。以下の溶解度が、７５/２５％ｖ／ｖのエタノール/水中で、室温にて観察される。Ｐ-３エタノラート：２３９．９μｇ／ｍＬ；Ｐ-２水和物：４１６．５μｇ／ｍＬ。これらのデータは、エタノール／水-混合物中で、Ｐ-３エタノラートが最も溶けにくく、それゆえＰ-２より安定な形態であることを示す。結果として、Ｐ-３エタノラートの再現可能な結晶化プロセスは、熱力学的に制御された結晶化プロセスを使用して達成されることができる。
【０１４１】
［実施例１０］
ＮＭＰ溶液からのＰ-２二水和物の沈殿：５９４．７ｍｇのＡＰＩは、２０ｍＬのＮＭＰ溶媒中に、撹拌および６０℃までゆっくり加熱されながら、溶解された。得られた原液は、３００ｍＬの純水に添加され、１４時間放置された。沈殿物は水で洗浄され、４０℃で乾燥された。４１８ｍｇの生成物が得られ、ＰＸＲＤ分析により、部分的にアモルファスのＰ-２二水和物形であることが示された。
【０１４２】
［実施例１１］
ＤＭＦ溶液からのＰ-２無水物の沈殿：ＡＰＩを８％ｗ／ｖ含むＤＭＦ溶液が、撹拌および６０℃までゆっくり加熱されながら、調製された。この原液５ｍＬが、１７０ｍＬのメタノール貧溶媒に添加された。ゆっくりとした沈殿が２時間観察された。沈殿物はメタノールで洗浄され、４０℃で乾燥された。２６０ｍｇの生成物が得られ、ＰＸＲＤ分析により、Ｐ-２無水物形と一致する構造を示した。
【０１４３】
他の形態および複合物の沈殿
［実施例１２］
ＤＭＦ溶液からのＰ-４物質の沈殿：３００ｍｇのＡＰＩが、５ｍＬのＤＭＦ溶媒中に、撹拌および６０℃までゆっくり加熱されながら、溶解された。得られた原液は、室温で４日間ゆっくりと蒸発させるために、５０ｍＬのオープン・ビーカーに入れられた。沈殿物（１６６ｍｇ）は、収集され、ＰＸＲＤを使用して分析された。このパターンは、ＤＭＦを用いた蒸発、冷却あるいは貧溶媒沈殿の間に反復されるだけであることから、生成物は、Ｐ-４パターンと同定され、おそらくＤＭＦ溶媒和物形からなる。
【０１４４】
［実施例１３］
ＤＭＦ溶液からのＰ-６物質の沈殿：ＡＰＩ原液を８％ｗ／ｖ含むＤＭＦ ５ｍＬが、７５ｍＬのＭＴＢＥ貧溶媒に添加された。早い沈殿が観察された。沈殿物はＭＴＢＥで洗浄され、４０℃で乾燥された。２６４ｍｇの生成物が得られ、ＰＸＲＤ分析により、Ｐ-６パターンと一致する構造を示した。
【０１４５】
［実施例１４］
Ｐ-７物質の沈殿：ＡＰＩ原液を４％ｗ／ｖ含むＮＭＰ １０ｍＬが、７５ｍＬのシクロヘキサンに添加された。数時間たっても沈殿は観察されず溶媒の相分離が発生した。したがって、１００ｍＬの水が添加され、三成分混合物は、２０分間撹拌され、平衡化するために１４時間放置された。沈殿物は水で洗浄され、４０℃で乾燥された。３８０ｍｇの生成物が得られ、ＰＸＲＤ分析により、Ｐ-７パターンと一致する構造を示した。
【０１４６】
［実施例１５］
Ｐ-８物質の沈殿：ＡＰＩ原液を８％ｗ／ｖ含むＤＭＳＯ ５ｍＬが、１００ｍＬの水に添加された。早い沈殿が観察された。沈殿物は水で洗浄され、４０℃で乾燥された。３０８ｍｇの生成物が得られ、ＰＸＲＤ分析により、Ｐ-８パターンと一致する構造を示した。
【０１４７】
［実施例１６］
アモルファス物質の沈殿：１００ｍｇのＡＰＩは、温めたアセトン３ｍＬ中に懸濁された（５５±５℃）。生じた混合物は、水（０．７ｍＬ）で希釈され（５５±５℃）、透明な溶液をもたらした。溶液は、６０℃に加熱されたガラス・プレート上に流し込まれた。得られた６０ｍｇの生成物は、ＰＸＲＤで分析した際、明確な回析ピークを示さず、アモルファス構造と同定された。
【０１４８】
［実施例１７］
ＡＰＩと賦形剤の共沈：１００ｍｇのＡＰＩは、温めたアセトン１３．５ｍＬ中に懸濁された（５５±５℃）。生じた混合物は、水（４．４ｍＬ）で希釈され（５５±５℃）、透明な溶液をもたらした。５００ｍｇのヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテート サクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）が、同じ溶液中に溶解された。溶液は、６０℃に加熱されたガラス・プレート上に流し込まれた。得られた４２０ｍｇの生成物は、ＰＸＲＤで分析した際、明確なＡＰＩ回析ピークを示さず、ＨＰＭＣＡＳポリマー・マトリクス中のＡＰＩのアモルファス分散と同定された。
【０１４９】
Ｐ-２およびＰ-３結晶形の平衡溶解度および熱力学的安定性
［実施例１８］
図２３は、アセトニトリル-水５０／５０（Ｖ／Ｖ）溶液中での、Ｐ-２、Ｐ-３形およびそれらの混合物について、時間に応じた、２５℃での撹拌懸濁液での薬物濃度の溶解性研究の結果を示す。それは、２５℃において、Ｐ-３と比較してＰ-２の溶解性が約４０％低いことを示す。複数の形態の混合物：Ｐ-３（約７５％ｗ／ｗ）およびＰ-２（約２５％ｗ／ｗ）は、間欠的な溶解性を示した。時間に応じて、Ｐ-３およびＰ-３＋Ｐ-２物質の両方の溶解性は明らかに減少した。これらのデータは、Ｐ-２のより低い溶解性、より大きい熱力学的安定性および、所定の温度での、より溶けにくいＰ-２形へのＰ-３形の変換を示す。
【０１５０】
［実施例１９］
２５℃での、５０／５０アセトニトリル／水混合物中のＰ-２およびＰ-３結晶形の間の１０日間にわたる競合的スラリー安定性試験は、ＰＸＲＤ相定量分析（複数のピーク比の評価に基づく）を使用して特定されるように、Ｐ-３がＰ-２に変換することを示した。Ｐ-２水和物に関するスラリーの組成は、５０％（０日）から７７％（４日）、８５％（１０日）に変化した。この溶媒系における対応する溶解度は、１９０μｇ／ｍＬ（Ｐ-２）および３１０μｇ／ｍＬ（Ｐ-３）であることが見出された。それゆえ、Ｐ-２水和物は所定の温度にて、より熱力学的に安定である。
【０１５１】
［実施例２０］
６つの判明した層（Ｐ-２、Ｐ-３、Ｐ-４、Ｐ-６、Ｐ-７およびＰ-８）の等量粉末混合物、各５０ｍｇが、７５／２５アセトン-水溶媒（５０ｍＬ）中で、２５℃にて１２日間にわたり撹拌された。ＰＸＲＤ分析は、全ての形態がＰ-２水和物に変換したことを示し、Ｐ-２水和物がこれらのコンディションにおいて最も熱力学的に安定な形態であることが示された。
【０１５２】
［実施例２１］
模擬肺液が、Ｍｏｓｓらによって記載された方法（Health Physics 1979, v36, 447-448）に従って調製された。模擬肺液（ｐＨ ７．４）の組成を表１２に示す。
【０１５３】
【表１２】
2015524391.tif 000016
【０１５４】
０．１％ＤＰＰＣの水溶液が、Ｍａｒｑｕｅｓらによって公表された手順に従って調製された（Dissolution Technologies, August 2011）。０．０２％ＤＰＰＣで改変されたＳＬＦ溶液が、０．１％ＤＰＰＣ溶液をＳＬＦで希釈することによって調製された。ＮＢ１１８１Ｐ５９-６０が、０．０２％ＤＰＰＣで改変されたＳＬＦおよびＳＬＦの調製手順の詳細のために参照される。２種類のＤＰＰＣがこの研究において使用された。水素化ＤＰＰＣは、リポイド社（Lipoid LLC、USA）によって供給され、非水素化ＤＰＰＣは、シグマアルドリッヒ社（Sigma-Aldrich、catalogue # P0763-1G）によって供給された。０．０２％ＤＰＰＣで改変されたＳＬＦは、ミセル及び／又はエマルションの形成を示す、濁った／乳白色の懸濁液のようになった。濁った溶液から固体薬物を分離するために、透析チューブ（Sigma-Aldrich catalogue # D9277-100FT）が使用された。０．０２％ＤＰＰＣで改変されたＳＬＦの薬物飽和溶液が調製され、透析チューブ（〜１０ｍＬ容積）中に注意深く移された。前記チューブはその後、０．０２％水素化ＤＰＰＣまたは０．０２％ＤＰＰＣで改変された約１００ｍＬのＳＬＦで満たされた容器内に入れられた。作業ボトルが、０．０２％水素化ＤＰＰＣを含むＳＬＦの研究において、容器として使用された。しかしながら、透析チューブが、結晶皿中で、曲がりやねじれが少ない、より良好なレイアウトを持つことが後に明らかになった。それゆえ、結晶皿は、０．０２％ＤＰＰＣを含むＳＬＦの研究において容器として使用された。薬物の各ロットのために、３つのサンプルが用意され、３７℃に維持されたグローブ・ボックス（Coy Labs製）内に置かれた。サンプルは、回転板上に置かれ、それはその後比較的遅いスピードで回転された。サンプルは、ＨＰＬＣ分析のために、様々な時点で採取された。ＨＰＬＣ分析のためのサンプル調製手順が、０．０２％水素化ＤＰＰＣまたは０．０２％ＤＰＰＣで改変されたＳＬＦ中のサンプルのために開発された。サンプル溶液は、エタノールで１：３の比率に希釈された。希釈の約１時間後、それはＨＰＬＣ分析のために濾過された。ガラスの容積測定用ピペットが、使用され、問題は解消された。結果は図１８に示される。
【０１５５】
化学および製剤安定性
［実施例２２］
強制分解実験は、１２０℃で７日間、密閉されたガラス瓶中にＰ-２水和物およびＰ-３二水和物物質の固形サンプルを置くことによって行われた。以下の結果が得られた：
（ａ）Ｐ-３サンプル：ＡＰＩは９８．７％から９３．３％に減少した；コントロールにおける６ピーク〜ストレス・サンプルにおける１６ピーク、（ｂ）Ｐ-２サンプル：ＭＤＴ-６３７は９９．２％から９９．１％に減少した；％；コントロールにおける４ピーク〜ストレス・サンプルにおける５ピーク。データを表１３に示す。バッチＰ２２４-１３５-２は、Ｐ-２水和物に対応し、２２４-１６３-１はＰ-３二水和物に対応する。このように、Ｐ-２形は、Ｐ-３二水和物と比べて、加速固体化学分解に対してより安定な形態であることが示された。
【０１５６】
【表１３】
2015524391.tif 000017
【０１５７】
［実施例２３］
微粉化された、Ｐ-３二水和物物質が、テフロン(登録商標)で内貼りしたキャップ付きの１．８５ｍＬのアンバーボトルで保管された。２５℃／６０％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨは、保管条件および最悪の場合の保管条件に応じて想定された。ガラス瓶中でのＡＰＩ保管に関する１２ヶ月に渡るデータは、ＤＳＣおよびＰＸＲＤ分析の両方により、形態の変化が観察されないことを示した。
【０１５８】
［実施例２４］
Ｐ-３二水和物とＰ-２水和物物質は、４０℃／７５％ＲＨで４週間、幅広の開放ガラスボトル内に置かれた。結果は、ＤＳＣおよびＰＸＲＤ分析の両方によって形態に変化が無いことを示した。表１４に示されるように、両方の形態について、許容できる化学安定性が観察された。
【０１５９】
【表１４】
2015524391.tif 000018
【０１６０】
［実施例２５］
ＡＰＩのＰ-３二水和物形とラクトース（６．３％ｗ／ｗ）の製剤が、３９週間、密閉されたガラスボトル中に、恒常性４０℃／７５％ＲＨで放置された。サンプルを取り出した後、ラクトースは精製水中へ溶解させることによって取り除かれた。参照製剤が、水中での形態変換の可能性を除くため、同じラクトース抽出手順にかけられた。このサンプルは、結晶形の変化を示さなかった。
【０１６１】
微粉化および製剤
［実施例２６］
ＭＤＴ-６３７ ＡＰＩの４つのロットが、２インチ・スパイラル・ジェットミルを用いて微粉末化された。それぞれの実験から入手できる物質のおおよその量およびミルにかけられていない物質の初期の粒子径分布（ＰＳＤ）を表１５に示す。
【０１６２】
【表１５】
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【０１６３】
微粉化されたＰ-２水和物、Ｐ-３二水和物および物理的混合物について、得られた粒子径分布（ＰＳＤ）パーセンタイルを表１６に示す。
【表１６】
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【０１６４】
より高いミリング圧力にて、Ｐ-２水和物物質は、Ｐ-３二水和物物質と比べてより大きな粒子をもたらし、両方の物質は同様の針状の粒形を示すため、これは、Ｐ-２水和物化合物のより高い硬度に起因するものと認められる。両方の形態の微粒子化は、所望の呼吸用サイズ範囲において（例えば、１〜２μｍの間のＤ50、および５μｍ未満のＤ90）ＰＳＤを製造するために十分に制御されることができた。さらに、微粒子化は、Ｐ-３二水和物形およびＰ-２水和物形の両方の結晶化度、相純度に影響を与えなかった。
【０１６５】
［実施例２７］
ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の安全性および耐容性
以下の研究の目的は、健常者および喘息患者における、ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の単一および複数用量の、安全性、耐容性、局所的および全身的な薬物動態を評価することであった。
【０１６６】
フェース１試験のために、マイクロドーズ・インヘラー（MicroDose Inhaler：能動的、電子的ＤＰＩ）のような吸入器が、薬物のエアロゾル化を成人の換気呼吸と同期化するために、およびバルブ付エアロゾル・マスクにフィットするように構成するために開発された（図２４）。要約すれば、マイクロドーズ・インヘラー・オペレーションは、送達まで、保護ブリスター内に含まれる薬物粉末を含む。前記ブリスターは、外部から穴をあけられ、その後マイクロドーズ・インヘラー内の圧電振動子と接触させられる。患者が吸引すると、空気流センサーが自動的に、粉末粒子を脱凝集するためにエネルギーを提供し、それらを吸入空気流中にエアロゾル化する前記圧電をオンにし、同期された送達を提供する。マイクロドーズ・インヘラーは圧力低下によって動作し、０．１〜２．０秒の範囲の予め定められた持続時間（好ましくは０．１秒）の一連の短いエアロゾル・バーストを、各吸入サイクルの早期に、１６回の連続した呼吸のために生じさせるようにプログラムされた。研究は以下のように実施された。
【０１６７】
研究１；健常人における吸入されたＭＤＴ-６３７の安全性、耐容性、および薬物動態を評価するための、ランダム化二重盲検プラセボ対照単回漸増用量（Single Ascending Dose : ＳＡＤ）研究［ＳＡＤ治験］
研究目的：研究１の目的は、一秒量（Forced Expiratory Volume in the First Second ：ＦＥＶ1）への影響を含む、安全で良好な耐容性を示すＭＤＴ-６３７ Ｐ３の吸入量の範囲を決定することであった。さらなる目的は、鼻孔吸入後の、ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の体内吸収の速度と範囲およびトラフ鼻洗浄ＭＤＴ-６３７ Ｐ３薬物濃度を決定することであった。
【０１６８】
研究デザイン；単一施設二重盲検ランダム化プラセボ対照逐次群
各患者は、以下にリストされるＭＤＴ-６３７ Ｐ３（あるいはプラセボ）の経鼻吸入量を投与された（１日１回あるいは１日３回[ＴＩＤ]、１日間）。研究は３つのビジットから構成された；ビジット１（スクリーニング）、ビジット２（投薬）およびビジット３（経過観察）；患者はビジット２と３の間、クリニックから一時帰宅させられた。ビジット１にて、試験対象患者基準の全てを満たし、除外基準には一つも該当しない患者（表１７、図２７）は、スクリーニングから１４日以内に、ビジット２に戻る資格を得た。前記患者は投薬の前日に研究施設に入院し、投薬後少なくとも２４時間研究施設にて観察され、投薬後７日目に、ビジット３に戻された。
【０１６９】
８人の患者のグループが、以下のコホートランダム化３：１（アクティブ：プラセボ）のそれぞれに登録された。
【表１７】
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【０１７０】
研究薬物および製剤
・プラセボ：吸入グレードのラクトース・ブレンド（100% RESPITOSE[登録商標] ＭＬ００３ [米国、ニュージャージー州、プリンストン]）
・アクティブ：吸入グレードのラクトース（ＭＬ００３）を含むドライパウダーとして処方された微粉化ＭＤＴ-６３７ Ｐ３
・低力価処方：RESPITOSE(登録商標) ＭＬ００３中の０．６３％ｗ／ｗ ＭＤＴ-６３７
・高力価処方：RESPITOSE(登録商標) ＭＬ００３中の６．３％ｗ／ｗ ＭＤＴ-６３７
【０１７１】
投与量とルート
ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の用量は、２つの種のＧＬＰ毒性研究における無毒性量（ＮＯＡＥＬ）に基づいて、並びに、従前の吸入溶液製剤（ＶＰ１４６３７製剤と称する）を使用した従前の臨床経験に基づいて、決定された。アクティブおよび対応プラセボの両方は、専用の送達システム（マイクロドーズ・インヘラー）からフェイスマスク吸入により投与された。
【０１７２】
各服用レベルにて、６人の患者が、ＭＤＴ-６３７ Ｐ３を投与され、２人の患者が対応プラセボを投与された。各コホートから得られた安全性および耐容性結果に基づいて、治験責任医師、医療監視員およびＭＤＴが共同で、プロトコルで指定された用量増大ルールに基づいて、次の服用レベルに進むかどうか決定した。少なくとも７日間（後の用量グループにおけるビジット２の投薬日の間）、連続的な投薬コホートを隔てた。第二のコホートは、何らかの用量レベルでの研究のために利用された（その用量における最初のコホートからの知見を確認することが必要であれば）。
【０１７３】
単回投与量は、午前中に投与された。ＴＩＤ投与量は、６時間の間隔で投与されたが、３投与量のうち１回目は午前中に投与された。
【０１７４】
評価
主要評価項目
安全性および耐容性が、以下によって評価された；
・ビジット１，２，３でのバイタルサイン
・ビジット１，２，３での理学的検査
・ビジット１（スクリーニング），ビジット２およびビジット３（退院）での所定の臨床検査（血液学、臨床化学、尿検査）
・ビジット１，２，３での心電図
・ビジット１（スクリーニング）とビジット２での肺活量測定（ＦＥＶ1）評価、すなわち、投薬前後の比較
・患者が研究から免除されるまでの、研究薬物の投与による有害事象評価
【０１７５】
副次的評価項目
・薬物動態評価項目（Ｃmax、Ｔmax、ＡＵＣ、Ｔ1/2）および用量比例性が、ビジット２から得られた限られた数の血漿サンプルに基づいて評価された。
【０１７６】
分析
人口統計および基本的情報は、治療シークエンスによって提示され、要約され、全群に渡る。
研究に登録され、研究のための治療を受けた患者は、彼らが研究完了前に中止した場合は、交代する可能性を有した（スポンサーの裁量により）。有害事象／有害経験（ＡＥ）に伴って研究を中止した場合、そのＡＥが治療とは無関係であることが判明できない限り、患者は交代されなかった。
【０１７７】
安全性および耐容性は、薬物投与研究後の、理学的検査、心電図（ＥＣＧ)(ＱＴｃ間隔で）、臨床検査（尿検査、血液学、化学）、肺活量測定および有害事象評価の結果に基づいて、評価された。
【０１７８】
薬物動態変数（Ｃmax、Ｔmax、ＡＵＣ、Ｔ1/2）は、ビジット２で採取された血液サンプルに基づいて評価された。
【０１７９】
研究２；１０日間、健常人に投与された吸入ＭＤＴ-６３７（Ｐ３）の安全性、耐容性、および薬物動態を評価するための、ランダム化二重盲検プラセボ対照研究（複数漸増用量：ＭＡＤ治験）
研究目的：：研究２の目的は、ＲＳＶ感染した患者のために開発されたＭＤＴ-６３７ Ｐ３の反復吸入量の範囲の耐容性と安全性を評価することであった。研究２の第二の目的は、１０日間の投薬に渡る、ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の体内吸収の速度と範囲および鼻粘膜ＭＤＴ-６３７ Ｐ３薬物濃度を測定することであった。
【０１８０】
研究デザイン；単一施設二重盲検ランダム化プラセボ対照逐次群
患者は１２人の患者からなるコホートに登録された。各コホート内で、９人の患者が、ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の経鼻吸入量を投与された、３人の患者が対応プラセボを投与された。研究は３つのビジットからなった；ビジット１（スクリーニング）、ビジット２（投薬）およびビジット３（経過観察）；患者は、薬物動態用（ＰＫ）試料採取、肺活量測定および安全性評価のために、研究施設に滞在した。試験対象患者基準の全てを満たし、除外基準には一つも該当しない患者（表１８、図２８）が、この研究のための資格を得た。１日目は、投薬の最初の日であり、１０日目は、投薬の最終日であり、その後、患者はＰＫ試料採取および肺活量測定のために、最終投与後２４時間、研究施設に留まった。ビジット３は経過観察ビジットであり、最終投与後７〜１０日間である。コホートは以下のように投与された。
【０１８１】
【表１８】
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【０１８２】
研究薬物および製剤
・プラセボ：活性臨床ブレンドと同一の方法で処理された吸入グレードのラクトース（100% RESPITOSE(登録商標) ＭＬ００３）
・アクティブ：吸入グレードのラクトース（RESPITOSE(登録商標) ＭＬ００３）を含むドライパウダーとして、６．３％ｗ／ｗで処方された微粉化ＭＤＴ-６３７ Ｐ３
【０１８３】
投与量とルート
ＭＤＴ-６３７の用量は、ＧＬＰ毒性研究におけるＮＯＡＥＬに基づいて、並びに、研究１における従前の臨床経験（上記）に基づいて、決定された。アクティブおよび対応プラセボの両方は、マイクロドーズ・インヘラー装置を使用したフェイスマスクにより投与された。
【０１８４】
各服用レベルにて、９人の患者が、ＭＤＴ-６３７ Ｐ３を投与され、３人の患者が対応プラセボを投与された。各コホートから得られた安全性および耐容性結果に基づいて、治験責任医師、医療監視員およびスポンサー（ＭＤＴ）が共同で、プロトコルで指定された用量増大ルールに基づいて、次の服用レベルに進むかどうか決定した。研究１におけるコホート５（６６ｍｃｇ ＴＩＤ）からコホート６への用量増大が、この研究におけるコホート１の開始のために要求された。所定のコホートの最終投与（すなわち、１０日目）と、その後の投薬コホートにおける投薬開始は、少なくとも７日間隔てられ、続いて、全ての安全性データの見直しと、用量増加の決定が行われた。第二のコホートは、何らかの用量レベルで研究される可能性を有した（その用量における最初のコホートからの知見を確認することが必要であれば）。
【０１８５】
１日２回（ＢＩＤ）および１日３回（ＴＩＤ）の最初の投与量は、午前中に投与され、投薬の各日の０７：００時頃に開始された。各投与日において、ＢＩＤ投与量は１２時間の間隔で投与され、ＴＩＤ投与量は６時間の間隔で投与された。
【０１８６】
評価
主要評価項目
安全性および耐容性が、以下によって評価された；
・ビジット２，３での、バイタルサイン（血圧、心拍数、体温および呼吸速度）およびパルスオキシメトリ
・ビジット２，３での理学的検査
・ビジット２，３での所定の臨床検査（血液学、臨床化学、尿検査）
・ビジット２，３での心電図
・ビジット２，３での肺活量測定
・患者が研究から免除されるまでの、研究薬物の投与による有害事象評価
【０１８７】
副次的評価項目
・薬物動態評価項目（Ｃmax、Ｔmax、ＡＵＣ、Ｔ1/2）および用量比例性が、１日目の最初の投与量および１０日目の最終投与量後に、限られた数の血漿サンプルに基づいて評価された。
【０１８８】
ＭＤＴ-６３７ Ｐ３濃度のためのトラフ血漿サンプルは、２、５、１０日目の最初の１日用量の前の３０分以内に採取された。
【０１８９】
ＭＤＴ-６３７濃度は、６日目の投与の前および１５分後、および、最後の投与の２４時間後（１１日目）の鼻洗浄サンプルから決定された。
【０１９０】
分析
人口統計および基本的情報は治療シークエンスによって提示され、要約され、全群に渡る。
研究に登録され、研究のための治療を受けた患者は、彼らが研究完了前に中止した場合は、交代する可能性を有した（スポンサーの裁量により）。ＡＥに伴って研究を中止した場合、そのＡＥが治療とは無関係であることが判明できない限り、患者は交代されなかった。
【０１９１】
安全性および耐容性は、薬物投与研究後の、理学的検査、ＥＣＧ、臨床検査（尿検査、血液学、化学）、肺活量測定および有害事象評価の結果に基づいて、評価された。
【０１９２】
薬物動態変数（Ｃmax、Ｔmax、ＡＵＣ、Ｔ1/2）は、最初の投与量後（１〜２日目）および最後の投与量後（１０〜１１日目）に採取された血液サンプルに基づいて評価された。
【０１９３】
研究３；間欠性あるいは軽度から中程度の持続性喘息を有する患者における、吸入ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の安全性、耐容性を評価するための、二重盲検ランダム化、三期間クロスオーバー単回漸増用量研究（喘息治験）
研究目的；研究３の主目的は、間欠性あるいは軽度から中程度の持続性喘息を有する患者に吸入された際の、ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の安全性と耐容性を評価することであった。研究３の第二の目的は、ドライパウダーの吸入による投薬後の、ＭＤＴ-６３７の体内吸収の速度と範囲およびトラフ鼻洗浄ＭＤＴ-６３７薬物濃度を測定することであった。
【０１９４】
研究デザイン；単一施設二重盲検ランダム化、三期間クロスオーバー漸増用量
各患者は、研究の間、３つの分離した期間内に投薬された。各患者は、初回量のプラセボを投与され（期間１）、続いて、経鼻吸入ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の単回投与あるいは二重盲検プラセボのために、期間２で、無作為割付された。観察および休暇期間の後、患者は、以下に示すように単一の日に、研究薬物（ＭＤＴ-６３７ Ｐ３あるいはプラセボ）の３用量を投与されるために、期間３に復帰した。研究は、５つのビジットからなった。ビジット１（スクリーニング）、ビジット２，３並びに４（投薬）、およびビジット５（経過観察）；患者は、ビジット３と４の間に６日〜最大で１４日間、およびビジット４と５の間に７〜８日、クリニックから帰宅した。ビジット１にて、試験対象患者基準の全てに適合し、除外基準には一つも適合しなかった患者（表１９、図２９）が、スクリーニング後４２日以内に、ビジット２に戻る資格を得た。患者は、研究センターに二度（ビジット２のために１度、およびビジット４のために再び）、入院した。ビジット５は、安全性経過観察（外来患者）のビジットであった。
【０１９５】
約１０人の患者からなる一つのグループが、研究に参加した。
【表１９】
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【０１９６】
研究薬物および製剤
・プラセボ：活性臨床ブレンドと同一の方法で処理された吸入グレードのラクトース（100% RESPITOSE(登録商標) ＭＬ００３）
・アクティブ：吸入グレードのラクトース（ＭＬ００３）を含むドライパウダーとして処方された微粉化ＭＤＴ-６３７ Ｐ３
【０１９７】
投与量とルート
ＭＤＴ-６３７ Ｐ３の用量は、研究１における従前の臨床経験に基づいて、決定された。プラセボおよびアクティブの両方は、マイクロドーズ・インヘラー装置を使用したフェイスマスクにより、経鼻吸入用ドライパウダーとして投与された。ビジット２では、１０人全ての患者が、１日１回、プラセボを投与された。ビジット３では、患者は、８人の患者が１日１回６６ｍｃｇのＭＤＴ-６３７ Ｐ３を投与され、２人の患者が二重盲検プラセボを投与されるように、無作為に割り当てられた。ビジット４で、患者は再び、８人の患者が１日３回１３２ｍｃｇのＭＤＴ-６３７を投与され、２人の患者が二重盲検プラセボを投与されるように、無作為に割り当てられた。
【０１９８】
研究３の各ビジットから得られた安全性および耐容性結果、および、研究１と研究２から得られた安全性データに基づいて、治験責任医師、医療監視員およびスポンサー（マイクロドーズ セラピューテクス、ＭＤＴｘ）が共同で、プロトコルで指定された用量増大ルールに基づいて、次の用量投与に進むかどうか決定した。連続的な投薬コホートは、少なくとも７日間（ビジット３とビジット４の間）隔てられた。第二のコホートは、何らかの用量レベルで研究された（その用量における知見を確認することが必要であれば）。単回投与は、午前中に投与され、０７：００時頃に開始された。ＴＩＤ投与量は６時間の間隔で投与され、３投与量の１回目は、１日１回投与が行われたのとほぼ同じ午前中の時間に投与された。
【０１９９】
評価
主要評価項目
安全性および耐容性が、以下によって評価された；
・患者が研究から免除されるまでの、研究薬物の投与による有害事象評価
・ビジット２，３，４，５でのバイタルサイン
・ビジット２，４，５での理学的検査
・ビジット２，３，４，５での所定の臨床検査（血液学、臨床化学、尿検査）
・ビジット２，３，４，５での心電図
・ビジット３とビジット４での肺活量測定（ＦＥＶ1）
【０２００】
副次的評価項目
・薬物動態評価項目（Ｃmax、Ｔmax、ＡＵＣ、Ｔ1/2）が、ビジット４から得られた限られた数の血漿サンプルに基づいて評価された。
・鼻洗浄から測定されたトラフＭＤＴ-６３７ Ｐ３濃度
【０２０１】
分析
人口統計および基本的情報は治療によって提示され、要約され、全群に渡る。
研究に登録され、研究のための治療を受たが、研究完了前に中止した患者は、スポンサーの裁量により、交代する可能性を有した。ＡＥに伴って研究を中止した場合、そのＡＥが治療とは無関係であることが判明できない限り、患者は交代されなかった。
【０２０２】
安全性および耐容性は、薬物投与研究後の、有害事象評価、理学的検査、バイタルサイン、肺活量測定、ＥＣＧ（ＱＴｃ間隔で）および臨床検査（尿検査、血液学、化学）の結果に基づいて、評価された。
【０２０３】
薬物動態変数（Ｃmax、Ｔmax、ＡＵＣ、Ｔ1/2）は、ビジット４で採取された血液サンプルに基づいて評価された。ビジット４での鼻トラフ濃度が一覧表にされた。
【０２０４】
結果と考察
研究１：単回漸増用量研究
・３５人のボランティアにおいて２ｍｃｇ・１日１回〜１３２ｍｃｇ・１日３回で試験された漸増用量
・ＭＤＴ-６３７ Ｐ３は、１３２ｍｃｇ・１日３回までの用量にて、安全で良好な耐容性を示した
・全体で、４人の患者（１１．４％）が、研究の間に４件のＴＥＡＥを経験したことを報告した（有意な肺機能の変化あるいは肺のＡＥの報告は無かった）
・軽度のめまいが、治療中に発生した、ＰＩに関連する可能性がある唯一の有害事象であった
・臨床検査、バイタルサイン、心電図、理学的検査において、臨床的に有意な変化は無かった
・投与後２４時間における鼻洗浄濃度は、ＲＳＶのためのＭＤＴ-６３７ Ｐ３のＩＣ50よりも高かった
・一貫した低いＰＫ曝露（平均Ｃmax：３３．７±４．６ピコグラム／ｍＬ [１３２ｍｃｇ ＴＩＤコホート]）
【０２０５】
研究２：複数漸増用量研究
・３８人のボランティアにおいて、１０日間、最大１３２ｍｃｇ・１日３回で試験された漸増用量
・ＭＤＴ-６３７ Ｐ３は、１０日間、１３２ｍｃｇ・１日３回までの用量にて、安全で良好な耐容性を示した
・有意な肺機能の変化あるいは肺のＡＥの報告は無かった（図２５）
・２５人の患者が、治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）はないと報告した
・残りの１３人の患者が、全体で合計２０件のＴＥＡＥを報告し、全て軽度と判断された
・５件のＴＥＡＥが、研究治療に関連すると考えられた：眼の単収縮（可能性有）、のどの渇き（関連する）、頭痛（可能性有、プラセボ）、咽頭炎（可能性有）および嗜眠（可能性有）；いずれの事象にも措置は取られず、全て「解消した」と報告された。
・臨床検査、バイタルサイン、心電図、理学的検査において、臨床的に有意な変化は無かった
・投与前後、投与後２４時間における鼻洗浄濃度は、ＲＳＶのためのＭＤＴ-６３７ Ｐ３のＩＣ50より高かった
・一貫した低いＰＫ曝露（図２６）、最小限の蓄積
・１０日目の平均Ｃmaxは、１３２ｍｃｇ ＴＩＤの場合で、５０ピコグラム／ｍＬ以下
・ＡＵＣ0-24は、１．１６ｎｇ・ｈ／ｍＬであった。
・１５〜３０％範囲のＣＶ（優れた一貫性）
【０２０６】
研究３：喘息患者での単回漸増用量
・より敏感な気道を有する患者における反復投与刺激性を排除するために、６６ｍｃｇ・１日１回〜１３２ｍｃｇ・１日３回（ｎ＝１０の患者）で試験された漸増用量
・ＭＤＴ-６３７ Ｐ３は、喘息患者において、安全で良好な耐容性を示した
・臨床的に有意な肺機能の変化あるいは肺のＡＥの報告は無かった
・臨床検査、バイタルサイン、心電図、理学的検査において、臨床的に有意な変化は無かった
・１０人中８人の患者が有害事象はないと報告した
・１０人中残りの２人の患者は、（１）プラセボ時期の間の、無関係な月経性片頭痛の症状および（２）関連する可能性がある、中程度の頭痛および軽度の吐き気、を報告した
・薬物動態は、健康な集団と喘息の集団の間で同等であった
【０２０７】
結論
上記研究は、３つの研究において、ＭＤＴ-６３７ Ｐ３が、最大１３２ｍｃｇ・ＴＩＤの用量で、１０日間、安全で良好な耐容性を示すことを実証する。
ＭＤＴ-６３７ Ｐ３は、高い一貫性および低い全身曝露を示し、これは小児科の投薬にとって理想的と考えられる。重要なことに、重大な有害事象は観察されなかった。投与後１５分、６時間および２４時間に測定されたＭＤＴ-６３７ Ｐ３の鼻濃度は、ＲＳＶ ＩＣ50よりも高かった。
最終的に、肺の有害事象あるいは肺機能の変化は観察されず、心電図、臨床検査値、バイタルサインおよび理学的検査における、臨床的に有意な変化は、いずれも観察されなかった。
【０２０８】
本発明が、その精神および本質的な特性から逸脱することなく、他の特定の形態に具体化できることが当業者に理解されるであろう。ここで開示された実施形態は、それゆえ、全ての点で例示的と解され、限定的とは解されない。本発明の範囲は、前述の説明よりも添付の特許請求の範囲によって示され、その意味と範囲に入る全ての変更とその均等物は、そこに包含されることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【国際調査報告】
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