(57)【要約】本発明は、トランス−クロミフェンが規定のサイズ範囲を有する微粒子形態であるという点で特徴づけられる、トランス−クロミフェンならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を提供する。本発明は、規定されたサイズ範囲を有するトランス−クロミフェンまたは薬学的に許容される塩および溶媒和物を含むか、またはそれらを使用して製剤化された医薬組成物、ならびに二次性性腺機能低下症、２型糖尿病、コレステロール上昇、トリグリセリド上昇、消耗症、リポジストロフィ、女性不妊および男性不妊、良性前立腺肥大症、前立腺癌、乳癌、卵巣癌ならびに子宮内膜癌を含む障害の治療でのそれらの使用にも関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物が微粒子の形態であり、前記粒子が約３０ミクロン未満の平均粒子サイズを有し、前記粒子の少なくとも約９０％が約５０ミクロン未満のサイズを有するという点で特徴づけられる、化合物トランス−クロミフェンならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物。
【請求項２】
前記粒子が、約５〜約２０ミクロンの間の平均粒子サイズを有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
非溶媒和結晶性形態である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
前記化合物が、トランス−クロミフェンクエン酸塩である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物および１つまたは複数の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含むか、またはそれらを使用して製剤化された、医薬製剤。
【請求項６】
前記化合物が、トランス−クロミフェンクエン酸塩である、請求項５に記載の医薬製剤。
【請求項７】
前記製剤が、カプセルである、請求項５または６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項８】
約５〜約１００ｍｇのトランス−クロミフェンクエン酸塩を含む、請求項７に記載の医薬製剤。
【請求項９】
１２．５ｍｇ、２５ｍｇまたは５０ｍｇのトランス−クロミフェンクエン酸塩を含む、請求項８に記載の医薬製剤。
【請求項１０】
微結晶性セルロースおよび／またはステアリン酸マグネシウムをさらに含む、請求項５〜９のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１１】
各々のカプセルが、約１２．５ｍｇのトランス−クロミフェンクエン酸塩、約８５．５ｍｇの微結晶性セルロースおよび約２．０ｍｇのステアリン酸マグネシウムを含む、請求項１０に記載の医薬製剤。
【請求項１２】
ヒト男性における二次性性腺機能低下症の治療での使用のための、またはそれに関連する障害の治療のための、請求項５〜１１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１３】
前記二次性性腺機能低下症と関連する障害が、筋肉質量の減少、骨密度の減少、性的衝動の減少、精子減少症および無精子症から選択される、請求項１２に記載の使用のための医薬製剤。
【請求項１４】
ヒト女性における不妊の治療における使用のための、請求項５〜１１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１５】
前記製剤が、５日連続の期間の間毎日の用量として無排卵女性へ投与される、請求項１４に記載の使用のための医薬製剤。
【請求項１６】
ヒト男性における２型糖尿病を治療および／または予防する方法における使用のための、請求項５〜１１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１７】
ヒト女性における乳癌の治療または予防のための、請求項５〜１１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１８】
ヒト女性における子宮内膜癌、子宮癌または卵巣癌の治療のための、請求項５〜１１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１２年８月２１日に出願された米国仮出願第６１／６９１，７２２号の利益を主張し、その内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、様々なホルモン依存性障害の治療に有用な微粒子形態のトランス−クロミフェンに関する。より詳細には、トランス−クロミフェンは、生物学的利用能の促進を提供する粒子サイズ範囲のものである。
【背景技術】
【０００３】
クロミフェンはタモキシフェンに関連する選択的エストロゲン受容体モジュレーターである。クロミフェンはエストロゲン受容体に結合し、脳下垂体上の視床下部での正常なエストロゲンフィードバックおよびその後の負のフィードバックを妨げる。このことは、黄体形成ホルモン（ＬＨ）および卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の増加を導く。男性において、性腺刺激ホルモンのレベルのこれらの増加は、精巣のライディッヒ細胞を刺激し、より高いテストステロンレベルの生産をもたらす。例えば、Ｔｅｎｏｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．６４：１１０３，（１９８７）およびＴｅｎｏｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．６４：１１１８（１９８７）は、クロミフェンによる治療後に若い男性および高齢の男性の両者でＦＳＨとＬＨの増加を見出した。男性における遊離テストステロンおよび全テストステロンの増加も見出され、若い男性では著しい増加が示された。
【０００４】
女性において、クロミフェンはシス異性体およびトランス異性体の両方の混合物として現在承認され、シス異性体は無排卵性女性の排卵誘発のために約３０％〜５０％（Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ）存在する。クロミフェンの投与に続く無排卵女性におけるＬＨおよびＦＳＨの増加は、卵胞発育および最終的に排卵をもたらす。薬物を用量１００ｍｇ／日までで５日間毎日投与することが推奨される。
【０００５】
Ｅｒｎｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｓｃｉ．６５：１４８（１９７６）は、クロミフェンが２つの幾何異性体の混合物であることを示しており、それらはｃｉｓ，−Ｚ−，クロミフェン（シス−クロミフェンまたはズクロミフェン）およびトランス−，Ｅ−，クロミフェン（トランス−クロミフェンまたはエンクロミフェン）と称される。Ｅｒｎｓｔらによれば、トランス−クロミフェンＨＣＩは１４９℃〜１５０．５℃の融点を有し、一方シス−クロミフェンＨＣＩは１５６．５℃〜１５８℃の融点を有する。Ｅｒｎｓｔらは、（トランス異性体）は抗エストロゲン性（ＡＥ）であり、一方、シス異性体はより強力でよりエストロゲン性の形態であり、抗エストロゲン活性を有することも報告されていることについてさらに指摘した。この著者らは、排卵活性に対する薬物の作用が両方の形態に起因すると考え、この混合物がトランス−クロミフェン単独よりも効果的であると述べる。トランス異性体は視床下部のレベルで排卵を支援する。エストロゲン性の異性体シス−クロミフェンは、排卵を導く生理的経路中のどこかで排卵の促進に寄与する。異性体は異なるインビボの半減期を有することも報告されている。シス異性体は、単回投与後１か月間、過剰な残存血中レベルのままであることが報告されている。
【０００６】
クロミフェンは、視力障害、腹部不快感、女性化乳房、精巣腫瘍、血管運動性紅潮、吐き気および頭痛を含む多数の副作用を伴う。さらに、他の研究は、クロミフェンが遺伝毒性作用および腫瘍促進作用を持つことを示唆する。これらの観察の正味の転帰は、現在のフォーマットのクロミフェン（シス異性体を３０％〜５０％の間で有する）が、テストステロン欠乏症の治療のための男性での長期療法として許容できないだろうということである。
【０００７】
クロミフェンのトランス異性体（トランス−クロミフェンまたはエンクロミフェン）の経口投与は、男性における二次性性腺機能低下症から無排卵女性における排卵誘発までの広い範囲の障害の治療に効果的であることが実証された。トランス−クロミフェンの物理的特性の改善は多くの有益な治療法を提供する可能性があるだろう。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｔｅｎｏｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．６４：１１０３，（１９８７）およびＴｅｎｏｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．６４：１１１８（１９８７）
【非特許文献２】Ｅｒｎｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｓｃｉ．６５：１４８（１９７６）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、トランス−クロミフェンが微粒子形態であり、前記粒子が約３０ミクロン未満、および好ましくは約５〜２０ミクロンの間の平均粒子サイズを有するという点で特徴づけられる、トランス−クロミフェンを提供する。
【００１０】
さらに、本発明は、少なくとも９０％の粒子が約５０ミクロン未満の粒子サイズを有するトランス−クロミフェンを包含する。
【００１１】
微粒子形態のトランス−クロミフェンを含むか、またはそれを使用して製剤化された医薬組成物も提供される。組成物は、二次性性腺機能低下症、２型糖尿病、コレステロール上昇、トリグリセリド上昇、消耗症、リポジストロフィ、女性不妊および男性不妊、良性前立腺肥大症、前立腺癌、乳癌、子宮癌ならびに卵巣癌を限定されずに含む多様な障害の治療のために使用される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】トランス−クロミフェンの化学構造を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は様々な形態で実施され得るが、複数の実施形態の以下の記載は、本開示は、本発明の例証として判断されるべきであり、例証された具体的な実施形態へ本発明を限定するものであるとは意図されないという理解により行われる。見出しは利便性のためのみに提供され、多少なりとも本発明を限定するとは解釈するべきできない。任意の見出しの下で例証された実施形態は、他の見出しの下で例証された実施形態と組合せることができる。
【００１４】
本明細書に存在する任意の数またはデータにより形成することができる任意の範囲、比および比の範囲は、本発明のさらなる実施形態を表わすことを理解すべきである。これには、有限の上方境界および／または下方境界を含むかまたは含まないで形成することができる範囲が含まれる。したがって、当業者は、多くのかかる比、範囲および比の範囲が本明細書において提示されたデータおよび数から明確に導き出すことができ、すべてが本発明の実施形態を表わすことを認識するだろう。
【００１５】
本化合物、組成物および方法が開示および記述される前に、本明細書において使用される用語は特定の実施形態のみを記述する目的のためのものであり、限定するとは意図されないことを理解すべきである。本明細書および添付の請求項において使用される時、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」には、文脈が明確に指示しない限り、複数の指示物が含まれることに注目すべきである。
【００１６】
「経口」投与という用語は、活性薬剤が服用されるように設計された（すなわち吸収のために胃腸系へ送達されるように設計された）製剤中にあることを意味する。
【００１７】
「有効投薬量」という用語は、特定の病態を治療するのに十分な組成物の活性成分の量を意味する。
【００１８】
「治療する」または「治療」という用語は、本明細書において使用される時、任意のプロゲステロン依存性の障害または疾患の任意の治療を指し、障害もしくは疾患を抑制すること、障害もしくは疾患の発症を阻止すること；障害もしくは疾患を軽減すること、例えば障害もしくは疾患の退行を引き起こすこと；または疾患もしくは障害により引き起こされた病態を軽減すること、疾患もしくは障害の症状を軽減することを含むが、これらに限定されない。
【００１９】
「予防する」または「予防」という用語は、プロゲステロン依存性の障害または疾患に関連して、何も生じていなかったならば障害もしくは疾患の発症の開始を予防するか、または障害もしくは疾患が既に存在していたならばさらなる障害もしくは疾患の発症を予防することを意味する。
【００２０】
「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容される非毒性の無機酸または有機酸から調製される塩を指す。無機酸には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸およびリン酸が含まれるが、これらに限定されない。有機酸には、脂肪族酸、芳香族酸、カルボン酸および有機スルホン酸（限定されないが、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、フマル酸、グルコン酸、イセチオン酸、乳酸、リンゴ酸、粘液酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、グリコール酸、グルクロン酸、マレイン酸、フランカルボン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、サリチル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、パントテン酸、ベンゼンスルホン酸、ステアリン酸、スルファニル酸、アルギン酸およびガラクツロン酸を含む）が含まれるが、これらに限定されない。好ましい塩はクエン酸塩である。
【００２１】
「溶媒和物」という用語は、１つまたは複数の溶質の分子（トランス−クロミフェン）を溶媒の分子と共に含む凝集を表わす。
【００２２】
「平均粒子サイズ」という用語は、レーザー光線回折散乱によって決定される、同等の球の直径として定義される。
【００２３】
様々な実施形態において、本発明は規定された狭い範囲内の粒子サイズを備えたトランス−クロミフェンを提供する。規定された狭い範囲内の粒子サイズの制御は有益なインビボの生物学的利用能を提供する。
【００２４】
本発明に記載のトランス−クロミフェンの平均粒子サイズは、約３０ミクロン未満、好ましくは約５〜約２０ミクロンの間である。さらに、発明は、約５０ミクロン未満の粒子サイズを有する粒子が少なくとも９０％であるトランス−クロミフェンを包含する。より好ましくは、平均粒子サイズ範囲は約５〜約２０ミクロンの間であり、約３５ミクロン未満のサイズを有する粒子が少なくとも９０％である。
【００２５】
本発明は、規定された狭い範囲内の粒子サイズを備えたトランス−クロミフェンおよび１つまたは複数の薬学的に許容される担体を含むか、またはそれらを使用して製剤化された医薬組成物も提供する。
【００２６】
トランス−クロミフェンの化学名は、トランス−２−（ｐ−（２−クロロ−１，２−ジフェニルビニル）フェノキシ）トリエチルアミン（または２−［４−（２−クロロ−１，２−ジフェニルエテニル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジエチルエタンアミン）である。化学構造は図１で図示される。「トランス−クロミフェン」は、その塩および溶媒和物も好ましいクエン酸塩と共に包含する。トランス−クロミフェンは、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）であり、性腺刺激ホルモン分泌のステロイドフィードバック阻害により視床下部レベルで妨害し、それによってＦＳＨおよびＬＨの放出を増加させると考えられる。
【００２７】
トランス−クロミフェンは確立している手順に従って製造することができる。米国特許第２，９１４，５６３号はクロミフェンの調製を記述し、その全体は参照により本明細書に組み込まれる。米国特許第３，８４８，０３０号はクロミフェンのシス異性体およびトランス異性体を分離する方法を記述し、その全体は参照により本明細書に組み込まれる。
【００２８】
約３０ミクロン未満、好ましくは約５〜約２０ミクロンの間の平均粒子サイズ内のトランス−クロミフェンは、静脈内、皮下、口腔、経粘膜、髄腔内、皮内、大槽内、筋肉内、経皮、腹腔内、硬膜外、膣、直腸、鼻腔内、舌下、関節内、脳脊髄内および滑液内を含むが、これらに限定されない多様な経路により投与することができるが、経口投与が好ましい経路である。したがって、本発明の別の態様は、効果的な量のトランス−クロミフェンまたはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む医薬組成物である。
【００２９】
トランス−クロミフェンは、製剤の重量で０．１％〜９９．９％の間で医薬組成物中に存在し、組成物中の唯一の活性薬剤であり得るか、または組成物の意図される使用に依存して１つまたは複数の追加の活性薬剤と組合せることができる。組成物は約１ｍｇ〜約２００ｍｇの間の投薬量でトランス−クロミフェンを含むことができる（至適投薬量の決定は当技術分野における当業者レベルを用いるが）。組成物は約１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１１０ｍｇ、１２０ｍｇ、１３０ｍｇ  １４０  ｍｇ１５０ｍｇ、１６０ｍｇ、１７０ｍｇ、１８０ｍｇ、１９０ｍｇ、２００ｍｇ、またはその間の投薬量でトランス−クロミフェンを含むことができる。好ましくは、組成物は５〜１００ｍｇの投薬量で、例えば１２．５ｍｇ、２５ｍｇまたは５０ｍｇの投薬量でトランス−クロミフェンを含む。「薬学的に許容される」によって、担体、希釈剤、賦形剤および塩が製剤の他の成分と適合性があり、そのレシピエントに有害であってはならないことが意味される。
【００３０】
本発明の医薬組成物は、容易に入手可能な周知の成分を使用して、当技術分野における公知の任意の手順によって調製することができる。例えば、トランス−クロミフェンは一般的な賦形剤、希釈剤または担体と共に製剤化し、錠剤、カプセル、懸濁物、粉末および同種のものへと形成することができる。かかる製剤に好適な賦形剤、希釈剤および担体の例には、フィラーおよび増量剤（デンプン、糖、マンニトールおよびケイ素含有誘導体等）；結合剤（カルボキシメチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチンならびにポリビニルピロリドン等）；保湿剤（グリセロール等）；崩壊剤（炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウムおよび架橋ポビドン等）；溶解遅延剤（パラフィン等）；再吸収促進剤（第四級アンモニウム化合物等）；界面活性剤（セチルアルコール、ポリソルベート８０、グリセロールモノステアレート等）；吸着性担体（カオリンおよびベントナイト等）；および潤滑剤（タルク、ステアリン酸カルシウムおよびステアリン酸マグネシウムならびに固体ポリエチルグリコール等）が限定されずに含まれる。
【００３１】
医薬組成物は、テストステロンを増加させるのに、例えば二次性性腺機能低下症の男性における二次性性腺機能低下症を治療するか、またはそれに関連する障害（その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，７５９，３６０号中に記述されるように精子減少症、無精子症、消耗症および鬱等であるが、これらに限定されない）を治療するのに、有用である。医薬組成物は、米国特許第７，３６８，４８０号（その内容全体は参照により本明細書に組み込まれる）中に記述されるようにコレステロールレベルを減少させるのにも有用である。医薬組成物を使用して、米国特許出願第２００８／０２４２７２６号（その内容全体は参照により本明細書に組み込まれる）中に記述されるように良性前立腺肥大症、前立腺癌およびトリグリセリド上昇からなる群から選択される病態を予防または治療することもできる。医薬組成物を使用して、米国特許出願第２００９／００９９２６５号（その内容全体は参照により本明細書に組み込まれる）中に記述されるように、メタボリックシンドロームから２型糖尿病への移行を予防すること、または２型糖尿病を治療すること、または空腹時血糖値を低下させることもできる。医薬組成物を使用して、女性不妊を治療することもでき、その場合に組成物は好ましくは月経周期の卵胞期初期に５日連続して毎日の用量として無排卵女性に投与される。医薬組成物は、乳癌を治療および／もしくは予防するのに、ならびに／または再発の可能性を最小限にするために外科手術による初期治療に続くアジュバント療法としても、有用である。医薬組成物は子宮内膜癌（または子宮癌）および卵巣癌の治療にも有用である。
【００３２】
本明細書において検討されたすべての参照文献は、それらの全体が参照により組み込まれる。
【００３３】
以下の実施例は、本発明の例証であることを意味し、添付の請求項において述べられるような本発明の範囲を限定することは意図しない。
【実施例１】
【００３４】
トランス−クロミフェンクエン酸塩の調製
クロミフェンクエン酸塩を以下の通り調製した。
【００３５】
過剰量の塩化水素を含有する２００ｃｃのエタノール中の２０ｇの１−［ｐ−（β−ジエチルアミノエトキシ）フェニル］−１，２−ジフェニルエタノールの混合物を、３時間還流した。溶媒および過剰な塩化水素を真空下で除去し、残留物を酢酸エチルおよび塩化メチレンの混合物中で溶解した。１４８〜１５７℃で融解して、１−［ｐ−（β−ジエチルアミノエトキシ）フェニル］−１，２−ジフェニルエチレン塩酸塩を得た。この塩酸塩を無水クロロホルム中のＮ−クロロスクシンイミドにより還流下で処理した。次いで得られた産物を遊離塩基に転換し、クエン酸により処理した。１１６．５〜１１８℃で融解して、１−［ｐ−（β−ジエチルアミノエトキシ）フェニル］−１，２−ジフェニルクロロエチレンの二水素クエン酸塩を得た。このプロセスによって得られたクロミフェンクエン酸塩は３０〜５０％のシス異性体および７０〜５０％のトランス異性体を含む。
【００３６】
次いで、米国特許第３，８４８，０３０号の実施例３１および３２中に記載されるプロセスを使用して、クロミフェン異性体のラセミ混合物からトランス−クロミフェンを分離した。
【実施例２】
【００３７】
粒子サイズ分析
トランス−クロミフェンは、同等の球体積の直径を測定するのに適合した装置（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ  ２０００レーザー回折粒子サイズ分析器または同等の装置等）を使用して、サイズに関して特徴づけられる。サイズに関して特徴づけた後に、次いで、必要であるならば、好ましくは好適なミル回転率および供給率の条件下でピンミルを使用してトランス−クロミフェンを粉砕し、本発明に記載の上述の限界内の粒子サイズ値をもたらす。粉砕の効率を、Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ  ２０００レーザー回折粒子サイズ分析器を使用してサンプリングすることによって確認し、最終的な粒子サイズを類似の様式で確認する。
【００３８】
次いで、本発明に記載の上述の限界内の微粒子形態のトランス−クロミフェンを、必要に応じて賦形剤または担体と混合し、例えばカプセルの充填に使用することができる。粉砕の前または後の粒子の形状は不規則であるので、理論的に球の粒子が所有するサンプル特性に関連する粒子の特性の測定によってそれらを特徴づけることが必須である。このようにして粒子に「同等の球の直径」を割り当てる。
【００３９】
非常に多数の「未知の」粒子を特徴づけることから見出された値を、頻度ｖｓ直径でプロットすることができる。これは、サンプルのサイズ分布（すなわちサイズ分布曲線下の累積パーセンテージ）を表わす特徴的な曲線を与える。値はこれから直接読み取るか、または適切な直線を与えるように対数確率紙上でプロットすることができる。平均の同等の球体積の直径とは、５０％アンダーサイズ値である。見出された平均の同等の球体積の直径は、したがって、「未知の」粒子と同じ特性を有する理論的粒子の統計的表示である。以下のものは例としての記載である。
【００４０】
実施例１からのトランス−クロミフェンクエン酸塩の粒子サイズを分析した。トランス−クロミフェンクエン酸塩の屈折率は、ＭｃＣｒｏｎｅ  Ｗ．Ｃ．ら、Ｐｏｌａｒｉｚｅｄ  Ｌｉｇｈｔ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，ＭｃＣｒｏｎｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃｈｉｃａｇｏ，１９８４，ｐａｇｅｓ  １２６−１２７中で記述されるようなベッケ線法を使用して顕微鏡で測定した。サンプル屈折率はこの方法を使用して１．６２であると推定された。
【００４１】
Ｉｓｏｐａｒ  Ｇ（商標）中の０．１％（ｗ／ｖ）レシチン、ヘキサン中の０．１％（ｗ／ｖ）Ｓｐａｎ（商標）８５（トリオレイン酸ソルビタン）および水中の０．０１％（ｗ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０（ポリソルベート２０）を、トランス−クロミフェンクエン酸塩のための分散剤として評価した。サンプルは２つの有機分散剤の各々の中で容易に懸濁され、懸濁物は徐々に沈降する。水性分散剤中で懸濁されたサンプルにおいて部分的な溶解が観察され、したがって水中の０．０１％（ｗ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０は不適切であった。Ｉｓｏｐａｒ  Ｇ（商標）ベースの分散剤およびヘキサンベースの分散剤中で分散させたサンプルを、顕微鏡で検査した。サンプルの組成および形態は類似し、刃状結晶および針状結晶の長さが１０〜１５０μｍの間であることが明らかにされ、集塊における差異はわずかであり、４００μｍを超える柔らかい集塊物がいくつか観察された。ヘキサン中の０．１％（ｗ／ｖ）Ｓｐａｎ（商標）８５をさらなる分析のために選択した。
【００４２】
サンプル吸収（または屈折率の虚数成分）は、サンプルによって吸収された光の量の尺度であり、測定された散乱パターンからの粒子サイズ分布の計算における重要なパラメータである。サンプル吸収は実験的に測定することができないので、特定の化合物についての散乱パターンを使用して、「試行錯誤」で推定しなくてはならない。最初の粒子サイズ測定値は以下のパラメータを使用して収集し、粒子サイズ分布は様々なサンプル吸収値を使用して散乱データから計算した。
【００４３】
【表１】
2015527360.tif 000003
【００４４】
重み付き残差は、測定されたデータと数学モデルとの間の適合度の尺度であり、それはそのデータを粒子サイズ分布へと転換することを可能にする。０．０１のサンプル吸収率が最良適合をもたらし、すべての後続する粒子サイズ分析のために選択された。
【００４５】
ヘキサン中の０．１％（ｗ／ｖ）Ｓｐａｎ（商標）８５中で分散させたサンプルの粒子サイズの反復測定値は、およそ５分間の経過にわたって１０００ｒｐｍのポンプ速度で再循環させながら収集した。粒子サイズ（ｄ１０、ｄ５０、ｄ９０）を再循環時間に対してプロットした。ｄ１０およびｄ５０の両方についての値は一定期間の間狭い範囲内であった。ｄ９０における減少が主として最初の９０秒にわたって生じ、その後に漸減した。ｄ９０におけるこの減少は、凝集物が９０秒以内に分散し、ある程度の摩耗がより長い再循環により生じ得ることを示唆したので、さらなる分析のために９０秒の再循環時間を選択した。
【００４６】
サンプルの粒子サイズの反復測定値を、ポンプ速度を増加させて９０秒間再循環させながら収集して、粒子サイズに対するポンプ速度の効果を検討した。ｄ１０およびｄ５０における差異は小さかったが、ｄ９０は１５００ｒｐｍのポンプ速度で粒子サイズの増加を示し、２０００ｒｐｍでさらなる増加はなかった。凝集物の分散およびより大きな粒子の懸濁の両方を至適化し、刃および針の摩耗を最小限にするために、１５００ｒｐｍのポンプ速度を選択した。
【００４７】
１５００ｒｐｍのポンプ速度による粒子サイズ測定に続いて、懸濁されたサンプルを分散セルから回収し、顕微鏡で検査した。主要な粒子は適切に良好に分散し、顕微鏡写真は、類似の数およびサイズの刃および針があり、再循環の前に収集されたものと一致しており、摩耗が最小限にされたことが示唆された。
【００４８】
方法の再現性は、最終的な方法の条件を使用して、５つの重複した測定を行なうことによって評価した。ｄ１０、ｄ５０およびｄ９０についての相対的標準偏差は、それぞれ２．６０％、３．４２％および１０．７０％であった。すべては、ｄ１０、ｄ５０およびｄ９０についてそれぞれ＜３０％、＜１０％および＜１５％のＵＳＰ推奨内に収まった。
【００４９】
トランス−クロミフェンクエン酸塩の各々のサンプルの１つの粒子サイズ測定値は、最終的な方法の条件を使用して収集した。ロットのうちの３つは類似する二峰性の粒子サイズ分布を共有していたが、１つのロットははるかに大きな粒子からなる第３のモードを含有していた。残りのロットは二峰性であったが、二峰性分布を持つ先の３つのロットの分布よりもはるかに大きな粒子サイズを表わしていた。
【００５０】
最終的な方法の条件を使用する粒子サイズ測定に続いて、ヘキサン中の０．１％（ｗ／ｖ）Ｓｐａｎ（商標）８５中で分散したトランス−クロミフェンクエン酸塩の各々のロットの顕微鏡写真を収集した。この結果は粒子サイズの結果と一致していた。
【００５１】
類似する粒子サイズ分布を共有する３つのロットは、主として長さ１０〜１５０μｍの刃および針ならびに≦１０μｍの少数の等面多面体の粒子からなる類似する形態も共有していた。粒子サイズの決定のための最終的な条件は次の通りであった。
【００５２】
【表２】
2015527360.tif 000004
【００５３】
屈折率決定はＬｅｉｃａ  ＤＭ  ＬＰ顕微鏡を使用して実行した。単一のサブステージ偏光板を使用してサンプルを観察した。サンプルをスライドグラス上に置き、カバーグラスをサンプルの上に置き、公認のＣａｒｇｉｌｌ屈折率油を少量添加した。ベッケ線の移動をサンプルの焦点をずらしながら観察した。
【００５４】
偏光顕微鏡法は、Ｓｐｏｔ  Ｉｎｓｉｇｈｔカラーカメラを装備したＬｅｉｃａ  ＤＭ  ＬＰ顕微鏡を使用して実行した。交差偏光をファーストオーダーの赤色補償板と共に使用した。１０×、２０×または４０×の対物レンズをサンプルを観察するために使用した。イメージはＳｐｏｔ  Ａｄｖａｎｃｅｄソフトウェア（ｖ．４．５．９）を使用して周囲温度で捕捉した。
【００５５】
粒子サイズのデータは、Ｈｙｄｒｏ  ２０００μＰ分散ユニットを装備したＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＭＳ２０００を使用して捕捉した。データを収集し、体積ベースの測定を使用するＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ  ２０００  ｖ．５．６０ソフトウェアを使用して分析した。ＮＩＳＴトレーサブルガラスビーズを参照スタンダードとして使用した。
【００５６】
最終的な方法の条件を使用したトランス−クロミフェンクエン酸塩の粒子サイズを以下に再現する。
【００５７】
【表３】
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ａ．粒子の全体積のうちの１０％は示された粒子サイズ未満である。
ｂ．粒子の全体積のうちの５０％は示された粒子サイズ未満である。
ｃ．粒子の全体積のうちの９０％は示された粒子サイズ未満である。
【００５８】
ロット番号３２３０５からのトランス−クロミフェンの粒子サイズ分布を以下に再現する。
【００５９】
【表４】
2015527360.tif 000006
【００６０】
本発明の粒子サイズ分布を備えたトランス−クロミフェンは、規定された範囲の外側の粒子サイズ分布を有するトランス−クロミフェンと比較して、一貫しており、改善されたインビボの吸収／生物学的利用能プロファイルを提供することが期待される。規定された粒子サイズ分布は、トランス−クロミフェンの胃腸管への一貫した送達および胃腸管から吸収の保証に加えて、製造プロセスの間の良好な制御を提供する。粒子サイズの制御は、所望される顆粒化を引き起こすのに要求される水の量の変動も最小限にする。
【００６１】
本発明の粒子サイズ分布を備えたトランス−クロミフェンは、単独でまたは別の活性薬剤と組み合わせて、一般的には好都合な製剤として投与されるだろう。以下の製剤は例示のみであり、本発明の範囲を限定するとは意図されない。
【実施例３】
【００６２】
製剤
トランス−クロミフェンを含むゼラチンカプセルを以下のものを使用して調製する。
【００６３】
【表５】
2015527360.tif 000007
【００６４】
結晶形態のトランス−クロミフェンを全微結晶性セルロースのうちの１／３とブレンドし、メッシュスクリーンを介して通過させて材料の良好な分布を保証する。次いで微結晶性セルロースの残りの２／３を、メッシュスクリーンを介して通過させ、粉末混合物とブレンドする。次いでもたらされた混合物を好適な粉砕機（例えばＣｏｍｉｌ（登録商標）ミル）を介して粉砕する。事前にメッシュスクリーンを介して通過させたステアリン酸マグネシウムを添加し、もたらされた顆粒と混合する。均一性分析に続いて、もたらされた混合物をゼラチンカプセルの中へカプセル化する。好ましいゼラチンカプセル（サイズ３）製剤は以下の通りである。
【００６５】
【表６】
2015527360.tif 000008
【００６６】
トランス−クロミフェンおよび追加の活性薬剤（例えばアロマターゼ阻害剤または経口テストステロン）を含む組み合わせカプセルは、上記の方法に従って調製することができる。
【００６７】
【表７】
2015527360.tif 000009
【００６８】
【表８】
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【００６９】
あるいは、各々５．０〜１００ｍｇのトランス−クロミフェンを含有する錠剤は以下の通り作製することができる。
【００７０】
【表９】
2015527360.tif 000011
【００７１】
錠剤製剤のために、トランス−クロミフェン、デンプンおよびセルロースをメッシュふるい（例えば４５号）を介して通過させ、完全に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液を生じた粉末と混合し、次いでそれをメッシュふるい（例えば１４号）を介して通過させる。生産された顆粒を５０〜６０℃で乾燥し、メッシュふるい（例えば１８号）を介して通過させる。次いで事前にふるい（例えば６号）を介して通過させたステアリン酸マグネシウムおよびタルクを顆粒へ添加し、混合した後にそれを錠剤機上で圧縮して錠剤を得る。
【００７２】
あるいは、５ｍｌの用量あたりの１．０〜１００ｍｇのトランス−クロミフェンを含有する各々の懸濁物を、以下の通り作製する。
【００７３】
【表１０】
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【００７４】
懸濁物のために、トランス−クロミフェンをメッシュふるい（例えば４５号）を介して通過させ、カルボキシルメチルセルロースナトリウムおよびシロップと混合して滑らかなペーストを形成する。安息香酸溶液、香料および着色料を水で希釈し、撹拌しながら添加する。次いで十分な水を添加して必要な体積にする。
【００７５】
あるいは、坐薬は以下の通り調製することができる。
【００７６】
【表１１】
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【００７７】
坐薬のために、トランス−クロミフェンをメッシュふるい（例えば６０号）を介して通過させ、必要最小限に加熱して事前に溶融した飽和脂肪酸グリセリド中で懸濁する。次いで混合物を坐薬型の中へ注ぎ、冷却する。
【図１】
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【国際調査報告】
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