(57)【要約】チロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせてα５β１アンタゴニストを含む薬学的な組み合わせ。いくつかの実施態様において、そのα５β１アンタゴニストはボロシキシマブである。いくつかの実施態様において、そのチロシンキナーゼ阻害剤はスニチニブまたはその薬学的に受容可能な塩である。本発明はまた、その薬学的な組み合わせを患者に投与することによって、癌を治療する方法に関連する。本発明の方法によって治療され得る癌としては、腎細胞癌、黒色腫、膵臓癌、胃腸間質腫瘍、膀胱癌、乳癌、大腸癌、線維肉腫、肺癌、転移性黒色腫、前立腺癌、卵巣癌、および脾臓癌が挙げられる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
α５β１アンタゴニストおよびチロシンキナーゼ阻害剤を含む、癌を処置するための薬学的な組み合わせ。
【請求項２】
前記癌が、腎細胞癌、黒色腫、膵臓癌、胃腸間質腫瘍、膀胱癌、乳癌、大腸癌、線維肉腫、肺癌、転移性黒色腫、前立腺癌、卵巣癌、および脾臓癌からなる群より選択される、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項３】
前記α５β１アンタゴニストが抗体またはその抗原結合断片である、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項４】
前記抗体が、配列番号２を含む重鎖および配列番号４を含む軽鎖を含む、請求項３に記載の組み合わせ。
【請求項５】
前記抗体が、配列番号５を含む重鎖可変領域、配列番号６を含む軽鎖可変領域、およびヒト定常領域を含む、請求項３に記載の組み合わせ。
【請求項６】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、二単環式、二環式、およびヘテロ環式アリール化合物、ビニレンアザインドール誘導体、１−シクロプロピル−４−ピリジルキノロン、スチリル化合物、スチリル置換ピリジル化合物、キナゾリン誘導体、セレナインドールおよびセレン化物、三環系ポリヒドロキシ化合物、ベンジルホスホン酸化合物、ピロール置換２−インドリノン、アリール尿素化合物、ソラフェニブ、ソラフェニブトシレート、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、ニロチニブ、スニチニブ、リンゴ酸スニチニブ、バンデタニブおよびベバシズマブからなる群より選択される、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項７】
前記ピロール置換２−インドリノンが、スニチニブまたはその薬学的に受容可能な塩である、請求項６に記載の組み合わせ。
【請求項８】
前記ピロール置換２−インドリノンがリンゴ酸スニチニブである、請求項７に記載の組み合わせ。
【請求項９】
ボロシキシマブおよびリンゴ酸スニチニブを含む、請求項８に記載の組み合わせ。
【請求項１０】
ボロシキシマブおよびソラフェニブトシレートを含む、請求項６に記載の組み合わせ。
【請求項１１】
ボロシキシマブおよびベバシズマブを含む、請求項６に記載の組み合わせ。
【請求項１２】
前記α５β１アンタゴニストが、静脈内投与のために処方されたボロシキシマブである、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項１３】
前記ボロシキシマブ処方物が、５．５〜７．５のｐＨで、１．０ｍｇ／ｍＬと１５．０ｍｇ／ｍＬとの間のボロシキシマブ、２２ｍＭ〜２８ｍＭのクエン酸塩、１３５ｍＭ〜１６５ｍＭの塩化ナトリウム、０．０４％〜０．０６％のポリソルベート（ＴＷＥＥＮ（登録商標））８０を含む、請求項１２に記載の組み合わせ。
【請求項１４】
溶液が、６．５のｐＨで、１０．０ｍｇ／ｍＬのボロシキシマブ、２５ｍＭのクエン酸塩、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０５％のポリソルベート（ＴＷＥＥＮ（登録商標））８０を含む、請求項１３に記載の組み合わせ。
【請求項１５】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、カプセルとして処方されたリンゴ酸スニチニブである、請求項８に記載の組み合わせ。
【請求項１６】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、錠剤として処方されたソラフェニブトシレートである、請求項６に記載の組み合わせ。
【請求項１７】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、静脈内投与のために処方されたベバシズマブである、請求項６に記載の組み合わせ。
【請求項１８】
請求項９に記載の薬学的な組み合わせを投与することを含む、癌を処置または予防するための方法。
【請求項１９】
請求項１０に記載の薬学的な組み合わせを投与することを含む、癌を処置または予防するための方法。
【請求項２０】
請求項１１に記載の薬学的な組み合わせを投与することを含む、癌を処置または予防するための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌の予防または治療のための、α５β１インテグリンアンタゴニストおよびチロシンキナーゼ阻害剤を含む薬学的な組み合わせに関連する。
【背景技術】
【０００２】
癌は、制御されない細胞分裂によって特徴付けられる疾患または障害の種類である。癌は、全ての年齢の人々が発症し、そして先進諸国において死亡の主な原因の１つである。多くの異なる型の癌が存在する。診断されたら、癌を手術、化学療法および放射線療法の組み合わせで治療する。しかし、これらの治療はそれぞれ多くの望ましくない副作用を有する。それに加えて、癌は疾患の種類を指すので、癌の単一の治療が存在する可能性は低い。従って、癌の新規治療が必要である。
【０００３】
α５β１インテグリンと腫瘍血管新生との関連はよく証明されている。α５β１は、内皮細胞の表面に発現し、そして細胞外マトリックスのフィブロネクチンに対する遊走および結合を媒介する、ヘテロダイマーのインテグリンである。α５β１およびフィブロネクチンの間の結合相互作用は、腫瘍血管新生に重要であることが示された。腫瘍内の血管新生は、ＦＧＦ、ＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ等のような、１つまたはそれ以上の血管新生促進増殖因子の放出が、内皮細胞を局所的に活性化した時に始まる。これらの活性化内皮細胞は次いで、そのα５β１インテグリンを介して、細胞外マトリックスのフィブロネクチンに結合することによって、新しい血管を形成する。α５β１アンタゴニストは、インビボ腫瘍モデルにおいて、血管新生を阻害することが示された。
【０００４】
プロテインキナーゼは、タンパク質のチロシン、セリン、およびスレオニン残基の水酸基のリン酸化を触媒する酵素である。２つの型のプロテインキナーゼ：チロシンキナーゼおよびセリン−スレオニンキナーゼが存在する。
【０００５】
チロシンキナーゼは、チロシン残基のリン酸化を触媒する酵素である。２つの型のチロシンキナーゼ：受容体型チロシンキナーゼおよび細胞内チロシンキナーゼ（非受容体型チロシンキナーゼ）が存在する。チロシンキナーゼは、細胞内シグナル伝達経路に関与し、そして細胞の成長、増殖、分化、抗アポトーシスシグナル伝達および神経突起の伸長のような、重要な細胞機能を調節する。点突然変異等のようなメカニズムによる、これらの酵素の制御されない活性化は、様々な形式の癌を引き起こし得る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の典型的な実施態様は、チロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせた、α５β１アンタゴニストを含む薬学的な組み合わせに関連する。その薬学的な組み合わせは、第一の量のα５β１アンタゴニストを、第二の量のチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて含み、それらは共に癌の予防または治療のために治療的に有効な量を含む。いくつかの実施態様において、α５β１アンタゴニストは、ボロシキシマブ（ｖｏｌｏｃｉｘｉｍａｂ）またはその抗原結合断片である。いくつかの実施態様において、そのチロシンキナーゼ阻害剤は、スニチニブ（ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ）またはその薬学的に受容可能な塩である。他の実施態様において、そのチロシンキナーゼ阻害剤は、ソラフェニブ（ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）またはその薬学的に受容可能な塩である。さらなる実施態様において、そのチロシンキナーゼ阻害剤は、ベバシズマブ（ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）またはその抗原結合断片である。本発明の他の実施態様は、その薬学的な組み合わせを患者に投与することによって、癌を予防または治療する方法に関連する。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１Ａ】図１Ａおよび１Ｂは、横紋筋肉種（Ａ６７３）のマウス異種移植モデルにおける、各薬剤単独と比較した、時間をわたっての腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１、およびチロシンキナーゼ阻害剤、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標））の薬学的な組み合わせの効果を説明する、２つの別々の研究のプロットである。
【図１Ｂ】図１Ａおよび１Ｂは、横紋筋肉種（Ａ６７３）のマウス異種移植モデルにおける、各薬剤単独と比較した、時間をわたっての腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１、およびチロシンキナーゼ阻害剤、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標））の薬学的な組み合わせの効果を説明する、２つの別々の研究のプロットである。
【図２】図２は、腎臓癌（ＳＮ１２Ｃ）のマウス異種移植モデルにおける、各薬剤単独と比較した、時間をわたっての腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１、およびチロシンキナーゼ阻害剤、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標））の薬学的な組み合わせの効果を説明するプロットである。
【図３】図３は、腎臓癌（７８６−０）のマウス異種移植モデルにおける、各薬剤単独と比較した、腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１、およびチロシンキナーゼ阻害剤、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標））の薬学的な組み合わせの効果を説明するプロットである。
【図４】図４は、腎臓癌（７８６−０）のマウス異種移植モデルにおける、コントロールと比較した、腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１（マウスα５β１に高い親和性で結合する）、そのアナログ、キメラ抗体ボロシキシマブ（ヒトα５β１に高い親和性で結合するが、マウスα５β１と交差反応しない）、およびチロシンキナーゼ阻害剤、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標））の薬学的な組み合わせの効果を説明するプロットである。
【図５】図５は、腎臓癌（７８６−０）のマウス異種移植モデルにおける、コントロールと比較した、腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１（マウスα５β１に高い親和性で結合する）、そのアナログ、キメラ抗体ボロシキシマブ（ヒトα５β１に高い親和性で結合するが、マウスα５β１と交差反応しない）、およびチロシンキナーゼ阻害剤、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標））の薬学的な組み合わせの効果を説明するプロットである。
【図６Ａ】図６Ａおよび６Ｂは、腎臓癌（Ａ６７３）のマウス異種移植モデルにおける、コントロールと比較した、腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１（マウスα５β１に高い親和性で結合する）、そのアナログ、キメラ抗体ボロシキシマブ（ヒトα５β１に高い親和性で結合するが、マウスα５β１と交差反応しない）、およびチロシンキナーゼ阻害剤、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）の薬学的な組み合わせの効果を説明する、２つの別々の研究のプロットである。
【図６Ｂ】図６Ａおよび６Ｂは、腎臓癌（Ａ６７３）のマウス異種移植モデルにおける、コントロールと比較した、腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１（マウスα５β１に高い親和性で結合する）、そのアナログ、キメラ抗体ボロシキシマブ（ヒトα５β１に高い親和性で結合するが、マウスα５β１と交差反応しない）、およびチロシンキナーゼ阻害剤、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）の薬学的な組み合わせの効果を説明する、２つの別々の研究のプロットである。
【図７Ａ】図７Ａおよび７Ｂは、黒色腫（ＬＯＸ）のマウス異種移植モデルにおける、コントロールと比較した、腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１（マウスα５β１に高い親和性で結合する）、そのアナログ、キメラ抗体ボロシキシマブ（ヒトα５β１に高い親和性で結合するが、マウスα５β１と交差反応しない）、およびチロシンキナーゼ阻害剤、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）の薬学的な組み合わせの効果を説明する、２つの別々の研究のプロットである。
【図７Ｂ】図７Ａおよび７Ｂは、黒色腫（ＬＯＸ）のマウス異種移植モデルにおける、コントロールと比較した、腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１（マウスα５β１に高い親和性で結合する）、そのアナログ、キメラ抗体ボロシキシマブ（ヒトα５β１に高い親和性で結合するが、マウスα５β１と交差反応しない）、およびチロシンキナーゼ阻害剤、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）の薬学的な組み合わせの効果を説明する、２つの別々の研究のプロットである。
【図８Ａ】図８Ａおよび８Ｂは、肺癌（Ｈ４６０）のマウス異種移植モデルにおける、コントロールと比較した、腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１（マウスα５β１に高い親和性で結合する）、そのアナログ、キメラ抗体ボロシキシマブ（ヒトα５β１に高い親和性で結合するが、マウスα５β１と交差反応しない）、およびチロシンキナーゼ阻害剤、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）の薬学的な組み合わせの効果を説明する、２つの別々の研究のプロットである。
【図８Ｂ】図８Ａおよび８Ｂは、肺癌（Ｈ４６０）のマウス異種移植モデルにおける、コントロールと比較した、腫瘍体積に対する、α５β１アンタゴニスト、モノクローナル抗体３３９．１（マウスα５β１に高い親和性で結合する）、そのアナログ、キメラ抗体ボロシキシマブ（ヒトα５β１に高い親和性で結合するが、マウスα５β１と交差反応しない）、およびチロシンキナーゼ阻害剤、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）の薬学的な組み合わせの効果を説明する、２つの別々の研究のプロットである。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本明細書中で言及される、全ての特許および刊行物は、そのような特許および刊行物で開示される全ての配列を含んで、明白に参考文献に組み込まれる。本明細書中で他に規定されなければ、本明細書中で使用される全ての技術的および科学的用語は、本発明が属する当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。本明細書中で記載された様々な実施態様と同様の、または等価なあらゆる方法および材料を、本発明の実施または試験において使用し得る。
【０００９】
本明細書中で開示された全ての最大（または最低）の数字の限界は、そのようなより低い（またはより高い）数字の限界が本明細書中で明白に書かれたように、全てのより低い（またはより高い）数字の限界を含むことが意図される。さらに、本明細書中で開示された全ての数字の範囲は、そのようなより広い数字の範囲内に含まれる、すべてのより狭い数字の範囲を含むことが、そのようなより狭い数字の範囲が全て明白に本明細書中で書かれたように意図される。
【００１０】
本明細書中で使用される「少なくとも」という語句は、値または用語のリストと組み合わせて使用される場合、リスト中の各値または用語に適用することを意味する。例えば、「少なくとも８５％、９０％、９５％、および９９％の配列同一性」という語句は、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、および／または少なくとも９９％の配列同一性を指して使用する。
【００１１】
本明細書中で使用される「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語およびその同種のものは、その包括的な意味で使用される、すなわち、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語およびその対応する同種のものと等価である。
【００１２】
他に示されなければ、それぞれ核酸は左から右へ、５’から３’の方向で書かれ、アミノ酸配列は左から右へ、アミノからカルボキシルの方向で書かれる。
【００１３】
本明細書中で提供される標題は、明細書全体として参照することによって有し得る、本発明の様々な局面または実施態様の制限ではない。よって、下記で規定される用語は、明細書全体として参照することによって、より完全に規定される。
【００１４】
薬学的な組み合わせ
本発明の典型的な実施態様は、チロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせたα５β１アンタゴニストを含む、薬学的な組み合わせに関連する。その薬学的な組み合わせは、第一の量のα５β１アンタゴニストを第二の量のチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて含み、それは共に癌の予防または治療のために治療的に有効な量を含む。いくつかの実施態様において、本発明の薬学的な組み合わせは、その構成医薬品単独（すなわち組み合わせでない）による治療と比較して、癌の治療において相乗効果（すなわち相加効果）を示し得ることが企図される。
【００１５】
本明細書中で使用される「薬学的な組み合わせ」という用語は、２つまたはそれ以上の薬物の組み合わせを意味する。その薬剤を、単一の丸剤または溶液におけるように共同で、または２つまたはそれ以上の別の丸剤、２つまたはそれ以上の別の溶液、または１つまたはそれ以上の溶液および１つまたはそれ以上の丸剤におけるように、別々に投与し得る。別々に投与するなら、その薬物を同時に、連続的に、またはお互い特定の期間内に投与し得る。
【００１６】
本明細書中で使用される「治療的に有効な量」という用語は、第一の量の第一の薬物と組み合わせた第二の量の第二の薬物、および任意で、さらなる量のさらなる薬物を意味し、それらは共に癌の１つまたはそれ以上の症状または合併症を予防、軽減、減弱、または治療する。治療的に有効な量を決定する臨床的な方法は、当業者に周知である。例えば、治療的に有効な量は、組み合わせて、腫瘍のサイズを減少させる；癌細胞の数を減少させる；腫瘍の増殖を阻害する；腫瘍の転移を阻害する；および患者において癌に関連する１つまたはそれ以上の症状または合併症をある程度予防または緩和する効果を有する量を指す。
【００１７】
本明細書中で使用される「患者」という用語は、ヒトおよび非ヒト哺乳類を意味する。
【００１８】
α５β１アンタゴニスト
上記の薬学的な組み合わせは、α５β１アンタゴニスト、その薬学的に受容可能な塩、またはその抗原結合断片を含む。しかし、その薬学的な組み合わせは、複数のα５β１アンタゴニストを含み得る。本明細書中で使用される「α５β１アンタゴニスト」という用語は、α５β１インテグリンに結合し、そしてインテグリンがそのリガンド、フィブロネクチンに結合するのを阻害する化合物を意味する。α５β１アンタゴニストの種類の例は、抗体、ペプチド、および小分子有機化合物を含むがこれに限らない。
【００１９】
いくつかの実施態様において、そのα５β１アンタゴニストは抗体またはその抗原結合断片である。本明細書中で使用される「抗体」という用語は、特定の抗原と免疫学的に反応性である免疫グロブリン分子を意味する。その用語は、モノクローナルおよびポリクローナル抗体、およびキメラ抗体、ヒト化抗体、および二重特異性抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、トリアボディ（ｔｒｉａｂｏｄｙ）およびテトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｙ）のようなヘテロ結合抗体のような、遺伝的に操作した形式も含む。本発明で有用なモノクローナル、ポリクローナル、キメラ、ヒト化、およびヘテロ結合抗体を産生する方法は、当該分野で公知である。
【００２０】
「抗原結合断片」という用語は、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、およびｒＩｇＧのような、抗体の抗原結合断片、すなわち抗原結合能力を有する断片を意味する。本発明で有用な公知の抗体から抗原結合断片を産生する方法は、当該分野で公知である。
【００２１】
α５β１アンタゴニスト活性を有する抗体またはその抗原結合断片の例は、ボロシキシマブ（いくつかの参考文献においては「Ｍ２００」とも呼ばれる）、Ｆ２００、ＩＩＡ１、ＮＫＩ−ＳＡＭ−１、ＪＢＳ５、および本明細書中で開示された様々なヒト化抗体を含むがこれに限らない。これらの抗体およびその抗原結合断片のアミノ酸配列および作製および使用の方法は、他の参考文献の中で特に、米国特許第６，８５２，３１８号、米国特許出願公開第２００５／００５４８３４号および米国特許出願公開第２００５／０２６０２１０号において開示され、それらはそれぞれ本明細書中でその全体として参考文献に組み込まれる。
【００２２】
いくつかの実施態様において、そのα５β１アンタゴニストはボロシキシマブである。ボロシキシマブは、固形腫瘍の治療のために開発されている抗α５β１抗体である。ボロシキシマブは、α５β１インテグリンに特異的に結合する、高親和性、キメラＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ボロシキシマブは現在、黒色腫、腎細胞癌、および膵臓癌の治療に関して、３つの別々の第ＩＩ相臨床試験中である。
【００２３】
ボロシキシマブ、その調製、処方、および癌治療のための使用は、当該分野で公知であり、そして他の参考文献の中で特に、米国特許出願公開第２００５／００５４８３４号および米国特許出願公開第２００５／０２６０２１０号において開示されている。ボロシキシマブは、配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、その重鎖のアミノ酸配列は、配列番号１の核酸配列によってコードされ、そして軽鎖のアミノ酸配列は、配列番号３の核酸配列によってコードされる。
【００２４】
いくつかの実施態様において、そのα５β１アンタゴニストは、ボロシキシマブの抗原結合断片である。そのような断片、その調製、およびその使用は、他の参考文献の中で特に、米国特許出願公開第２００５／００５４８３４号において開示されている。そのような断片は、配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施態様において、その抗原結合断片を、ヒト定常領域と結合させる。
【００２５】
いくつかの実施態様において、そのα５β１アンタゴニストはＦ２００、ボロシキシマブのＦａｂ断片である。Ｆ２００、その調製、およびその使用は当該分野で公知である。例えば、それは、他の参考文献の中で特に、米国特許出願公開第２００５／００５４８３４号において開示されている。それはＦａｂ断片であるので、Ｆ２００軽鎖ＤＮＡおよびアミノ酸配列は、ボロシキシマブ軽鎖ＤＮＡおよびアミノ酸配列と同じである。Ｆ２００は、配列番号８のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施態様において、重鎖のアミノ酸配列は、配列番号７の核酸配列によってコードされる。
【００２６】
いくつかの実施態様において、そのα５β１アンタゴニストはヒト化抗体である。ヒトα５β１インテグリンに特異的に結合する異なるヒト化抗体の範囲の例は、米国特許第６，８５２，３１８号において開示され（例えば図１および２を参照のこと）、そして下記で記載され、ここでその抗体は：配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；または配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【００２７】
いくつかの実施態様において、本発明の薬学的な組み合わせにおいて有用なα５β１アンタゴニストは、ボロシキシマブ、ＩＩＡ１、およびＩＩＡ１のヒト化バージョンから選択される抗α５β１抗体のＣＤＲ配列を含む抗体である。ボロシキシマブ、ＩＩＡ１および上記で列挙したヒト化抗α５β１抗体は、同一のＣＤＲ配列を共有し、それは米国特許第６，８５２，３１８号において開示された様々なアミノ酸配列で示される（例えば図２を参照のこと）。
【００２８】
抗α５β１抗体ボロシキシマブは、マウスα５β１インテグリンと交差反応しない。他の実施態様において、本発明はモノクローナル抗体３３９．１を提供し、それはマウスα５β１を標的として、結合特性および機能阻害特徴は、ヒトα５β１に対するボロシキシマブと同様である。３３９．１の重鎖可変領域（配列番号２２）および３３９．１の軽鎖可変領域（配列番号２３）のアミノ酸配列を、添付の配列表で示す。
【００２９】
他の実施態様において、そのα５β１アンタゴニストはペプチドである。本明細書中で使用される「ペプチド」という用語は、ペプチド結合またはペプチド結合のアナログで共に連結したアミノ酸またはアミノ酸アナログのオリゴマーおよびポリマーを含む。従って、ペプチドは２つまたはそれ以上のアミノ酸を含み、それはＬ−アミノ酸またはＤ−アミノ酸のいずれか、化学的に修飾されたアミノ酸、天然に存在するまたは天然に存在しないアミノ酸、またはアミノ酸アナログであり得る。α５β１ペプチドアンタゴニストを、ペプチドのライブラリーをスクリーニングすることによって同定し得る、化学合成の周知の方法を用いて調製し得る、または市販の供給源から購入し得る。
【００３０】
α５β１アンタゴニスト活性を有するペプチドの例は、アミノ酸配列ＣＲＲＥＴＡＷＡＣ（配列番号２１）を含むペプチド、またはＡＴＮ−１６１（Ａｔｔｅｎｕｏｎ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を含むがこれに限らない。α５β１アンタゴニストペプチドは、他の参考文献の中で特に、米国特許第６，８５２，３１８号において開示されている。
【００３１】
さらなる実施態様において、そのα５β１アンタゴニストは小分子有機化合物またはその薬学的に受容可能な塩である。α５β１アンタゴニスト活性を有する小分子有機化合物の例は、一般的な化学構造（Ｓ）−２−フェニルスルフォニルアミノ−３−｛｛｛８−（２−ピリジニルアミノメチル）−｝−１−オキサ−２−アザスピロ｛４，５｝−デカ−２−エニル｝カルボニルアミノ｝プロピオン酸を有するヘテロ環を含むがこれに限らない。いくつかの実施態様において、その化合物はＳＪ７４９であり、それは化学構造：（Ｓ）−２−｛（２，４，６−トリメチルフェニル）スルフォニル｝アミノ−３−｛７−ベンジルオキシカルボニル−８−（２−ピリジニルアミノメチル）−１−オキサ−２，７−ジアザスピロ−｛４，４｝−ノナ−２−エン−３−イル｝カルボニルアミノ｝プロピオン酸を有する。これらの化合物、その合成方法、およびその使用は、米国特許第５，７６０，０２９号において開示され、それは本明細書中でその全体として参考文献に組み込まれる。
【００３２】
本明細書中で使用される「薬学的に受容可能な塩」という用語は、親化合物の薬理学的有効性および性質を保持する塩を指す。そのような塩は、親化合物の遊離塩基と無機酸の反応によって得られる酸付加塩、または親化合物に存在する酸性プロトンが金属イオンによって置換されるか、または有機塩基と配位する場合に形成される塩を含む。薬学的に受容可能な塩の例は、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、炭酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、カリウム塩、およびマグネシウム塩である。
【００３３】
チロシンキナーゼ阻害剤
上記の医薬品の組合せは、チロシンキナーゼ阻害剤、その薬学的に受容可能な塩、またはその抗原結合断片を含む。しかし、その医薬品の組合せは、複数のチロシンキナーゼ阻害剤を含み得る。本明細書中で使用される「チロシンキナーゼ阻害剤」という用語は、タンパク質のチロシン残基の水酸基のリン酸化を阻害する化合物を意味し、それは細胞の成長、増殖、分化およびアポトーシスシグナル伝達を阻害するよう作用する。チロシンキナーゼ阻害剤の種類の例は、抗体、ペプチドおよび小分子有機化合物を含むがこれに限らない。チロシンキナーゼの阻害はメカニズムに制限されず、そして本発明のチロシンキナーゼ阻害剤は、例えばチロシンキナーゼ受容体および／またはその受容体のリガンドの機能に拮抗することによって作用し得る。
【００３４】
チロシンキナーゼ阻害剤は、多数の種類の細胞受容体に拮抗し得る。例えば、チロシンキナーゼ阻害剤が拮抗し得る受容体のいくつかは、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲαおよびＰＤＧＦＲβ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２、およびＶＥＧＦＲ３）、表皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、幹細胞因子受容体（ＫＩＴ）、Ｆｍｓ様チロシンキナーゼ−３（ＦＬＴ３）、コロニー刺激因子受容体１型（ＣＳＦ−１Ｒ）、Ｒａｆキナーゼ、Ｓｒｃファミリーのキナーゼ、およびグリア細胞系統由来神経栄養因子受容体（ＲＥＴ）を含むがこれに限らない。チロシンキナーゼ阻害剤は、１つまたはそれ以上のこれらの受容体を阻害する。
【００３５】
いくつかの実施態様において、そのチロシンキナーゼ阻害剤は、小分子有機化合物である。チロシンキナーゼを阻害する小分子有機化合物の例は、二単環式、二環式、およびヘテロ環式アリール化合物、ビニレンアザインドール誘導体、１−シクロプロピル−４−ピリジルキノロン、スチリル化合物、スチリル置換ピリジル化合物、キナゾリン誘導体、セレナインドールおよびセレン化物、三環系ポリヒドロキシ化合物、ベンジルホスホン酸化合物、およびピロール置換２−インドリノンである。これらの化合物、その調製および使用は、他の参考文献の中で特に、国際特許出願公開第ＷＯ９２／２０６４２、ＷＯ９４／１４８０８、ＷＯ９４／０３４２７、ＷＯ９２／２１６６０、ＷＯ９１／１５４９５号、米国特許第５，３３０，９９２、５，２１７，９９９、５，３０２，６０６、６，５７３，２９３、７，１２５，９０５号；および欧州特許出願公開第ＥＰ０５６６２６６号において開示され、それらはそれぞれ本明細書中でその全体として参考文献に組み込まれる。
【００３６】
チロシンキナーゼを阻害する小分子有機化合物のさらなる例は、商業的にはＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）として知られるソラフェニブ；商業的にはＳＰＲＹＣＥＬ（登録商標）として知られるダサチニブ（ｄａｓａｔｉｎｉｂ）、商業的にはＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）として知られるエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）、商業的にはＩＲＥＳＳＡ（登録商標）として知られるゲフィチニブ、商業的にはＧＬＥＥＶＡＣ（登録商標）およびＧＬＩＶＥＣ（登録商標）として知られるイマチニブ（ｉｍａｔｉｎｉｂ）、商業的にはＴＹＫＥＲＢ（登録商標）およびＴＹＣＥＲＢ（登録商標）として知られるラパチニブ（ｌａｐａｔｉｎｉｂ）、ニロチニブ（ｎｉｌｏｔｉｎｉｂ）、商業的にはＳＵＴＥＮＴ（登録商標）として知られるスニチニブ、および商業的にはＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標）として知られるバンデタニブ（ｖａｎｄｅｔａｎｉｂ）である。
【００３７】
いくつかの実施態様において、そのチロシンキナーゼ阻害剤は、ピロール置換２−インドリノンである。ピロール置換２−インドリノンおよびその薬学的に受容可能な塩、その調製、およびその使用は、当該分野において公知である。例えば、それらは、他の参考文献の中で特に、米国特許第６，５７３，２９３および７，１２５，９０５号において開示され、それらはそれぞれこれによって本明細書中で参考文献に組み込まれる。ピロール置換２−インドリノンの薬学的に受容可能な塩の例は、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、炭酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、カリウム塩およびマグネシウム塩を含むがこれに限らない。
【００３８】
いくつかの実施態様において、そのピロール置換２−インドリノンはスニチニブである。スニチニブの好ましい薬学的に受容可能な塩は、リンゴ酸スニチニブである。スニチニブは、いくつかの受容体型チロシンキナーゼを標的とする多キナーゼ阻害剤（ｍｕｌｔｉ−ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）である。商業的にはＳＵＴＥＮＴ（登録商標）として公知であるリンゴ酸スニチニブは、化学的には、ブタン二酸，ヒドロキシ−，（２Ｓ）−化合物とＮ−［２−（ジエチルアミノ）エチル］−５−［（Ｚ）−（５−フルオロ−１，２−ジヒドロ−２−オキソ−３Ｈ−インドール−３−イリジン）メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキサミド（１：１）として表される。リンゴ酸スニチニブは、複数の受容体型チロシンキナーゼを阻害する小分子有機化合物であり、それらのいくつかは腫瘍の増殖、病的血管新生、および癌の転移性の進行に関係する。例えば、スニチニブは、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲαおよびＰＤＧＦＲβ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２およびＶＥＧＦＲ３）、幹細胞因子受容体（ＫＩＴ）、Ｆｍｓ様チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）、コロニー刺激因子受容体１型（ＣＳＦ−１Ｒ）、およびグリア細胞系統由来神経栄養因子受容体（ＲＥＴ）の阻害剤である。Ｐｆｉｚｅｒ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ）によって販売されているＳＵＴＥＮＴ（登録商標）は、進行腎細胞癌およびメシル酸イマチニブに対する疾患進行または不耐性の後の胃腸間質腫瘍の両方に対する適用を有する。
【００３９】
他の実施態様において、そのチロシンキナーゼ阻害剤は、アリール尿素化合物である。アリール尿素化合物およびその薬学的に受容可能な塩、その調製、およびその使用は、当該分野で公知である。例えば、それらは、他の参考文献の中で特に、米国特許出願公開第２００３／０２１６４４６、２００３／０２３２７６５および２００４／００２３９６１号において開示され、それらはそれぞれこれによって本明細書中で参考文献に組み込まれる。アリール尿素化合物の薬学的に受容可能な塩の例は、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、炭酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、カリウム塩およびマグネシウム塩を含むがこれに限らない。
【００４０】
いくつかの実施態様において、そのアリール尿素化合物はソラフェニブである。ソラフェニブの好ましい薬学的に受容可能な塩は、ソラフェニブトシレートである。商業的にはＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）として知られるソラフェニブトシレートは、化学名４−（４−｛３−［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］ウレイド｝フェノキシ）Ｎ２−メチルピリジン−２−カルボキサミド４−メチルベンゼンスルホネートを有する。ソラフェニブは、複数の受容体型チロシンキナーゼを阻害する小分子有機化合物であり、そのいくつかは、腫瘍の増殖、病的血管新生、および癌の転移性の進行に関係する。例えば、ソラフェニブはＣＲＡＦ、ＢＲＡＦ、ＫＩＴ、ＦＬＴ−３、ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥＧＦＲ−３、およびＰＤＧＦＲ−βの阻害剤である。Ｏｎｙｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ、ＣＡ）によって販売されているＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）は、腎細胞癌の治療に適用を有する。
【００４１】
さらなる実施態様において、そのチロシンキナーゼ阻害剤は、チロシンキナーゼの機能に拮抗する抗体またはその抗原結合断片である。チロシンキナーゼ受容体および／またはその受容体に結合するリガンド（例えば増殖因子）に対する抗体の結合によって、機能の阻害が起こり得る。いくつかの実施態様において、そのチロシンキナーゼ阻害剤はベバシズマブである。ベバシズマブは、ヒト血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）に結合し、そしてその生物学的活性を阻害する、組換えヒト化モノクローナルＩｇＧ１抗体である。ベバシズマブ、その調製、およびその使用は、当該分野で公知である。例えば、それは他の参考文献の中で特に、Ｐｒｅｓｔａら、「Ｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎ  Ａｎｔｉ−Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ」、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第５７巻、４５９３−４５９９頁（１９９７）において開示されている。商業的にはＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）として知られるベバシズマブは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ（Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ）によって販売されている。ベバシズマブは、結腸または直腸の転移性癌腫、および転移性非扁平上皮、非小細胞肺癌の治療に適用を有する。
【００４２】
処方および投与
薬学的な組み合わせ中のそれぞれの薬物を、単離されたおよび精製された形式で投与し得、そして癌細胞または腫瘍と直接接触させ得る。α５β１アンタゴニストおよびチロシンキナーゼ阻害剤を産生および精製する方法は、本明細書中で引用された参考文献において開示されている。純度および均一性を、ポリアクリルアミドゲル電気泳動および高速液体クロマトグラフィーのような、標準的な分析的化学技術を用いて決定し得る。調製物に存在する主な種である化合物は、実質的に精製されたと考えられる。例えば、電気泳動ゲルにおいて本質的に１本のバンドを示す化合物は、実質的に精製されている。いくつかの実施態様において、本発明の薬学的な組み合わせにおいて使用されるそれぞれの薬物は、少なくとも８５％純粋、少なくとも９５％純粋、またはさらに少なくとも９９％純粋である。
【００４３】
あるいは、その薬学的な組み合わせの薬物を、投与の前に１つまたはそれ以上の薬学的組成物に処方し得る。本明細書中で使用される「薬学的組成物」という用語は、薬学的に受容可能な担体または賦形剤中で処方された薬物を意味する。従って、その薬学的な組み合わせの薬物を、別々の薬学的組成物に、または１つまたはそれ以上の薬学的組成物に処方し得る。そのような薬学的組成物は、通常薬学的に受容可能な担体または薬学的に受容可能な賦形剤中で処方された薬物を含む。適当な処方は、選択された投与経路に依存する。薬剤（薬物）の処方および投与の技術は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡにおいて見出し得る。
【００４４】
本明細書中で使用される「薬学的に受容可能な担体」および「薬学的に受容可能な賦形剤」という用語は、薬物の投与を促進し、患者に有意な刺激を引き起こさず、そして投与された薬物の薬理学的活性および性質を抑制せず、そして採用された投与量および濃度においてそれに接触する細胞または患者に対して無毒性である、担体、賦形剤または希釈剤を指す。薬学的に受容可能な担体および賦形剤の例は、緩衝剤、共溶媒、浸透圧剤（ｔｏｎｉｃｉｔｙ  ａｇｅｎｔ）、ｐＨ調整剤、抗酸化剤、糖、ゼラチン、ゴム、色素、結合剤、潤滑剤、増量剤、崩壊剤、保存剤、香料、増粘剤、着色料および乳化剤を含むがこれに限らない。
【００４５】
α５β１アンタゴニストまたはチロシンキナーゼ阻害剤を含む薬学的組成物を、経口、皮下、静脈内、硝子体内、鼻腔内、局所、経皮、経粘膜、腹腔内、筋肉内、肺内、膣内、直腸内、眼内、脳室内、またはくも膜下腔内を含むがこれに限らない、様々な方法で患者に投与し得る。いくつかの実施態様において、その組成物を静脈内または経口投与する。
【００４６】
薬学的組成物を、当該分野で周知の過程によって、例えば従来の混合、溶解、顆粒化、糖衣丸製造、湿式粉砕、乳化、カプセル封入、封入、または凍結乾燥過程によって製造し得る。薬学的組成物を、丸剤、溶液、錠剤、カプセル、液体、ゲル、懸濁液、糖衣丸コア、エアロゾルスプレー、坐剤等として製造し得、それは選択された投与経路に依存する。
【００４７】
注射のために、薬物を水性溶液中で処方し得る。いくつかの実施態様において、その溶液は水中５％のデキストロース、０．９％生理食塩水、またはハンクス液またはリンゲル液のような生理学的に適合性の緩衝液である。さらに、活性化合物（薬物）の懸濁液を、親油性媒体またはリポソーム中で調製し得る。適当な親油性媒体は、ゴマ油のような脂肪油；オレイン酸エチルおよびトリグリセリドのような合成脂肪酸エステル；またはリポソームのような材料を含む。水性注射懸濁液はまた、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランのような、懸濁液の粘性を高める物質を含み得る。任意で、その懸濁液はまた、高度に濃縮された溶液の調製を可能にするために、適当な安定剤および／または化合物の溶解性を高める薬剤を含み得る。あるいは、その活性成分（薬物）は、滅菌、発熱物質を含まない水、水中５％のデキストロース、または０．９％の生理食塩水のような、適当な媒体で使用前に構成するための粉末形式であり得る。
【００４８】
薬物を、例えばボーラス注射または持続注入による、非経口投与のために処方し得る。注射のための処方は、アンプル、バイアル、複数回投与の容器、静脈内バッグまたはボトルのような、単位投与形式で提示し得る。
【００４９】
経粘膜投与のために、浸透すべきバリアに適当な浸透剤を処方中で使用する。そのような浸透剤は、当該分野で一般的に公知である。
【００５０】
経口投与のために、薬物を、薬学的に受容可能な担体と組み合わせることによって処方し得る。そのような担体は、薬物を、経口摂取のための錠剤、丸剤、ロゼンジ、糖衣丸、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液等として処方することを可能にする。経口使用のための薬学的組成物を、固体賦形剤を用いて、望ましいなら適当な補助剤を加えた後に、任意でできた混合物を粉砕して、そして顆粒の混合物を処理して作製して、錠剤または糖衣丸のコアを得ることができる。有用な賦形剤は、ラクトース、ショ糖、マンニトール、またはソルビトールを含む糖；トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプンおよびジャガイモデンプンのようなセルロース調製物；およびゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）のような他の材料のような増量剤を含む。もし望ましいなら、架橋ポリビニルピロリドン、寒天またはアルギン酸のような崩壊剤を加え得る。アルギン酸ナトリウムのような塩も使用し得る。
【００５１】
薬物を、糖衣丸コアとして処方し得る。この目的のために、任意でアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー溶液、および適当な有機溶媒または溶媒混合物を含み得る、濃縮糖溶液を使用し得る。同定のために、または異なる組み合わせの活性化合物投与量を特徴付けるために、色素（ｄｙｅｓｔｕｆｆｓ）または色素（ｐｉｇｍｅｎｔｓ）を、錠剤または糖衣丸コーティングに加え得る。
【００５２】
薬物をまた、ゼラチンでできたプッシュフィット（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセルとして、およびゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトールのような可塑剤でできた軟らかい、密封カプセルとして処方し得る。プッシュフィット（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセルは、ラクトースのような増量剤；デンプンのような結合剤；および／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤；および任意で安定剤と混合して薬物を含み得る。ソフトカプセルにおいて、薬物を、脂肪油、液体パラフィン、または液体ポリエチレングリコールのような、適当な液体に溶解または懸濁し得る。あるいは、薬物をハードゼラチンカプセルとして処方し得る。
【００５３】
吸入による投与のために、薬物を、加圧パックまたは噴霧器およびジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、または二酸化炭素のような適当な噴霧剤を用いて、エアロゾルスプレーの形式で送達し得る。加圧エアロゾルの場合、計量した量を伝達するためのバルブを提供することによって、投与単位をコントロールし得る。吸入器（ｉｎｈａｌｅｒ）または注入器（ｉｎｓｕｆｆｌａｔｏｒ）で使用するための、例えばゼラチンのカプセルまたはカートリッジを、薬物の粉末混合物およびラクトースまたはデンプンのような適当な粉末基剤を含んで処方し得る。
【００５４】
薬物をまた、例えば、カカオバターまたは他のグリセリドのような従来の坐剤基剤を用いて、坐剤または保持浣腸のような直腸内組成物に処方し得る。
【００５５】
それに加えて、薬物をデポー調製物として処方し得る。そのような長時間作用型組成物を、例えば皮下の埋め込みによって、または筋肉内注射によって投与し得る。薬物を、適当なポリマー性または親水性材料を用いて、イオン交換樹脂を用いて、または難溶性の塩として、この投与経路のために処方し得る。
【００５６】
さらに、薬物を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスのような、徐放性システムを用いて、薬物を伝達し得る。様々な徐放性材料が当業者に周知である。徐放性カプセルは、その化学的性質に依存して、薬物を数日から１００日までの期間をかけて放出する。薬物の化学的性質および安定性に依存して、安定化のためのさらなる戦略を採用し得る。
【００５７】
いくつかの実施態様において、そのα５β１アンタゴニストは、その抗原結合断片を含む抗α５β１抗体であり、それを、ｐＨ５．５から７．５で、１．０ｍｇ／ｍＬから１５．０ｍｇ／ｍＬのα５β１アンタゴニスト、２２ｍＭから２８ｍＭのクエン酸塩、１３５ｍＭから１６５ｍＭの塩化ナトリウム、０．０４％−０．０６％のポリソルベート（ＴＷＥＥＮ（登録商標））８０の溶液を含む薬学的組成物として処方する。いくつかの実施態様において、その液体処方のｐＨの範囲は、ｐＨ６．０およびｐＨ７．０の間、ｐＨ６．３およびｐＨ６．７の間、ｐＨ６．４および６．６の間、または約ｐＨ６．５である。好ましくは、その組成物は安定および等張である。特に好ましい実施態様において、その薬学的組成物は、ｐＨ６．５において、１０．０ｍｇ／ｍＬのα５β１アンタゴニスト、２５ｍＭのクエン酸塩、１５０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０５％のポリソルベート（ＴＷＥＥＮ（登録商標））８０の溶液を含む。好ましくは、その組成物を２〜８℃で冷蔵する。
【００５８】
本発明の薬学的な組み合わせにおいて有用な抗α５β１抗体の例示的な処方、投与量、投与方法、および他の治療プロトコールは、米国特許出願公開第２００５／０２６０２１０号において開示され、これは参考として本明細書に援用される。
【００５９】
いくつかの実施態様において、その薬学的に受容可能な塩を含むスニチニブを、１２．５ｍｇ、２５ｍｇまたは５０ｍｇのスニチニブと同等のリンゴ酸スニチニブ、マンニトール、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、およびステアリン酸マグネシウムを含むカプセルを含む薬学的組成物として処方する。
【００６０】
いくつかの実施態様において、その薬学的に受容可能な塩を含むソラフェニブを、２００ｍｇのソラフェニブと同等のソラフェニブトシレート、クロスカルメロースナトリウム、結晶セルロース、ヒプロメロース、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、二酸化チタン、および酸化鉄（ＩＩＩ）を含む錠剤を含む薬学的組成物として処方する。
【００６１】
いくつかの実施態様において、その抗原結合断片を含むベバシズマブを、それぞれ４ｍｌまたは１６ｍｌの単回使用バイアル中に１００ｍｇまたは４００ｍｇのベバシズマブを含む薬学的組成物として処方する。１００ｍｇ、４ｍｌのバイアルを、２４０ｍｇのα，α−トレハロース二水和物、２３．２ｍｇのリン酸ナトリウム（一塩基、一水和物）、４．８ｍｇのリン酸ナトリウム（二塩基、無水）、１．６ｍｇのポリソルベート２０、および水で処方する。４００ｍｇ、１６ｍｌのバイアルを、９６０ｍｇのα，α−トレハロース二水和物、９２．８ｍｇのリン酸ナトリウム（一塩基、一水和物）、１９．２ｍｇのリン酸ナトリウム（二塩基、無水）、６．４ｍｇのポリソルベート２０、および水で処方する。好ましくは、それぞれの組成物を２〜８℃で冷蔵する。それに加えて、組成物を光から保護することが好ましい。患者への投与前に、必要な量のベバシズマブをバイアルから取り、そして１００ｍｌの０．９％生理食塩水に希釈することも好ましい。
【００６２】
薬物を、投与の方法に依存して様々な単位投与形式で投与し得る。本発明の特定の実施態様において使用する正確な投与量および投与の頻度は、治療の目的に依存し、そして周知の技術を用いて当業者によって確認し得る。当該分野において公知であるように、全身対局所伝達、年齢、体重、一般的な健康、性別、食事、投与の時間、薬剤の相互作用、および状態の重症度に関する調整が必要であり得る。
【００６３】
投与量および間隔を、個々に調整して、薬理学的効果を維持するために十分な薬物の血漿レベルを提供し得る。これらの血漿レベルを、最低有効濃度（ＭＥＣ）と呼ぶ。ＭＥＣは、各薬物に関して変動するが、インビトロのデータから推定し得る。ＭＥＣを達成するために必要な投与量は、個々の特徴および投与経路に依存する。ＨＰＬＣアッセイまたはバイオアッセイを使用して血漿濃度を決定し得る。投与間隔も、ＭＥＣ値を用いて決定し得る。１０−９０％の時間、好ましくは３０−９０％の間、そして最も好ましくは５０−９０％の間、ＭＥＣより上の血漿レベルを維持するレジメを用いて薬物を投与するべきである。
【００６４】
いくつかの実施態様において、患者の体重（ｋｇのような）あたりの薬物の重量（ｍｇのような）（すなわち「ｍｇ／ｋｇ」）に基づいて、薬物を患者に投与する。他の実施態様において、薬物の重量（ｍｇのような）に基づいて、薬物を患者に投与する。さらなる実施態様において、血液容積（ｍｌのような）あたりの薬物の量（ｍＭのような）に基づいて、薬物を患者に投与する。
【００６５】
一般的に、α５β１アンタゴニストの有効な投与量は、１−１５ｍｇ／ｋｇの範囲である。好ましくは、その投与量は１０−１５ｍｇ／ｋｇである。好ましくは、α５β１抗体アンタゴニスト、またはその抗原結合断片を、患者の体重（ｋｇ）あたりの抗体の重量（ｍｇ）に基づいて、患者に投与し、そして０．１−１５ｍｇ／ｋｇの、ボロシキシマブのようなα５β１アンタゴニスト抗体、またはＦ２００のようなその抗原結合断片を含む。例えば、抗体またはその抗原結合断片の適当な濃度は、０．１−１５ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．０−５．０ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、５−１０ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１０−１５ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇまたは１５ｍｇ／ｋｇを含むがこれに限らない。好ましくは、その濃度は１０または１５ｍｇ／ｋｇのいずれかである。
【００６６】
本発明の薬学的な組み合わせにおいて有用な抗α５β１抗体の典型的な投与量およびレジメが、米国特許出願公開第２００５／０２６０２１０号において開示され、これは参考として本明細書に援用される。
【００６７】
好ましくは、α５β１ペプチドおよび小分子有機化合物アンタゴニストを、１−１００ピコモル／血液容積のｍｌの濃度で投与する。好ましくは、その投与量を、１時間以上かけた静脈内注入として患者に投与する。さらなる投与量を、患者において定常状態の血清濃度が確立するように、延長した時間をかけて投与し得る。例えば、１０ｍｇ／ｋｇの注入を、１年の過程で週１回投与し得る。
【００６８】
一般的に、チロシンキナーゼ阻害剤の有効な投与量は、１−１０００ｍｇの範囲である。好ましくは、その投与量は１−６００ｍｇである。
【００６９】
好ましくは、薬学的組成物が０．１−１００ｍｇのスニチニブまたはその薬学的に受容可能な塩を含むように、薬剤の重量に基づいて、スニチニブを患者に投与する。例えば、スニチニブまたはその薬学的に受容可能な塩の適当な濃度は、０．１−１００ｍｇ、１２．５ｍｇ、０．１−２５ｍｇ、２５ｍｇ、２５−５０ｍｇ、３７．５ｍｇ、５０ｍｇ、５０−７５ｍｇ、６２．５ｍｇ、７５ｍｇ、７５−１００ｍｇ、８７．５ｍｇおよび１００ｍｇを含むがこれに限らない。
【００７０】
リンゴ酸スニチニブは、商業的にはＳＵＴＥＮＴ（登録商標）として公知である。ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）カプセルは、１２．５、２５または５０ｍｇのスニチニブと等価なリンゴ酸スニチニブを含む、プリントされたハードシェルカプセルとして供給される。胃腸間質腫瘍および腎細胞癌の治療のために推奨されるＳＵＴＥＮＴ（登録商標）の投与量は、４週間の治療に続く２週間の休止のスケジュールで、１日１回５０ｍｇの経口投与である。個々の安全性および耐容性に基づいて、１２．５ｍｇずつの投与量増加または減少が推奨される。
【００７１】
好ましくは、薬学的組成物が１−８００ｍｇのソラフェニブまたはその薬学的に受容可能な塩を含むように、薬剤の重量に基づいて、ソラフェニブを患者に投与する。例えば、ソラフェニブまたはその薬学的に受容可能な塩の適当な濃度は、２００ｍｇ、４００ｍｇ、６００ｍｇおよび８００ｍｇを含むがこれに限らない。
【００７２】
ソラフェニブトシレートは、商業的にはＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）として公知である。ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）錠は、２００ｍｇのソラフェニブと等価のソラフェニブトシレートを含む、赤い、丸い、フィルムコートされた錠剤として供給される。腎細胞癌の治療のために推奨されるＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）の投与量は、１日２回投与の４００ｍｇ（２つの２００ｍｇ錠）である。
【００７３】
好ましくは、ベバシズマブ、またはその抗原結合断片を、患者の体重（ｋｇ）あたりの抗体の重量（ｍｇ）に基づいて患者に投与し、そして０．１−２０ｍｇ／ｋｇのベバシズマブ、またはその抗原結合断片を含む。例えば、抗体またはその抗原結合断片の適当な濃度は、０．１−２０ｍｇ／ｋｇ、１．０−５．０ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、５−１０ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１０−１５ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１７．５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇを含むがこれに限らない。
【００７４】
薬学的な組み合わせの個々の薬物を別々に投与する場合、１日あたりに投与する各薬物の投与の数は、必ずしも同じである必要はないかもしれない。例えば、１つの薬物は、より長い作用時間を有し得、そしてより少ない回数を投与する必要がある。
【００７５】
キット
本発明のいくつかの実施態様は、各薬物を別々に投与し得る薬物の組み合わせを投与することによる癌の予防または治療に関連するので、本発明はまた、別々の薬物または薬学的組成物をキット形式に組み合わせることに関連する。すなわち、２つまたはそれ以上の別々のユニット：１つまたはそれ以上のα５β１アンタゴニスト薬学的組成物および１つまたはそれ以上のチロシンキナーゼ阻害剤薬学的組成物が組み合わされたキットが企図される。そのキットは、好ましくは別々の成分の投与に関する指示を含む。別々の成分を異なる投与形式で、例えば経口および非経口で投与しなければならない、または異なる投与間隔で投与する場合に、そのようなキット形式は特に有利である。
【００７６】
適応症
上記の薬学的な組み合わせは、腎細胞癌、黒色腫、膵臓癌、胃腸間質腫瘍、膀胱癌、乳癌、大腸癌、線維肉腫、肺癌、転移性黒色腫、前立腺癌、卵巣癌、および脾臓癌を含むがこれに限らない、多くの種類の固形腫瘍の治療のための治療アプローチを提供する。いくつかの実施態様において、本発明は、その腫瘍細胞の表面にα５β１インテグリンを発現するあらゆる癌の治療のための、薬学的な組み合わせを提供する。その表面にα５β１インテグリンを発現する腫瘍細胞は、当該分野で公知であり、そして例えば米国特許出願公開第２００５／０２６０２１０号において開示され、これは参考として本明細書に援用される。
【００７７】
本発明を実施するための方式および方法は、以下の実施例を参照することによって、当業者によってより完全に理解され得、その実施例はいかなる方式においても本発明またはそれに向けられた請求の範囲を制限することを意図しない。
【実施例】
【００７８】
実施例１
この実施例は、α５β１インテグリンアンタゴニスト、ボロシキシマブアナログである３３９．１抗体と組み合わせたチロシンキナーゼ阻害剤、ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）の効果の研究を説明する。その研究を、３つの異なる癌：横紋筋肉種（Ａ６７３）、腎臓癌（ＳＮ−１２Ｃ）、および腎臓癌（７８６−０）の前臨床マウス異種移植腫瘍モデルを用いて行った。
【００７９】
ボロシキシマブはマウスα５β１インテグリンと交差反応しないので、これらのマウス異種移植実験においてはボロシキシマブではなく代替抗体、３３９．１を用いた。３３９．１抗体は、マウスα５β１を標的とし、ヒトα５β１を標的とするボロシキシマブと同様の性質を有する。３３９．１重鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号２２）および３３９．１軽鎖可変領域のアミノ酸配列（配列番号２３）を、添付した配列表において示す。従って、それは、マウスα５β１インテグリンに起因する、異種移植腫瘍増殖に対する血管新生効果を標的とし得るので、ボロシキシマブのマウスアナログを用いることが、有効性のより良い基準を提供することが企図された。
【００８０】
確立したＡ６７３、ＳＮ−１２Ｃ、または７８６−０異種移植腫瘍を有するマウスを、媒体、３３９．１、ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、または３３９．１および最大下の投与量のＳＵＴＥＮＴ（登録商標）で治療した。３３９．１抗体を、１０ｍｇ／ｋｇで週２回、腹腔内に投与し、そしてＳＵＴＥＮＴ（登録商標）を２０ｍｇ／ｋｇで毎日経口投与した。
【００８１】
腫瘍モデルＡ６７３、ＳＮ−１２Ｃ、および７８６−０による研究に関する、異種移植腫瘍の増殖対治療日数のプロットを、それぞれ図１、２、および３に示す。その結果は、抗α５β１アンタゴニストをチロシンキナーゼ阻害剤、ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）と組み合わせて使用した場合のより大きな腫瘍縮小の傾向を示唆する。
【００８２】
実施例２
この実施例は、癌の前臨床モデルを用いた、ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、ボロシキシマブおよびボロシキシマブアナログ、３３９．１の組み合わせ効果の研究を説明する。具体的には、その研究を腎臓癌（７８６−０）のマウス異種移植腫瘍モデルを用いて行った。
【００８３】
ボロシキシマブを含む薬学的組成物を用いて、ヒト癌患者の治療の完全な抗腫瘍効果のモデルとするために、この研究において、ボロシキシマブ代替抗体、３３９．１に加えて、ボロシキシマブを用いた。３３９．１抗体は、腫瘍異種移植モデルを支持するように発達するマウス脈管構造を標的とし得、一方ボロシキシマブはヒト７８６．０腫瘍細胞のヒトα５β１インテグリンを標的とし得る。従って、異種移植モデルにおけるボロシキシマブおよび３３９．１の組み合わせは、腫瘍および脈管構造の両方を標的とすることによって、ヒトにおけるボロシキシマブの臨床試験の結果により近いモデルとなることが期待される。
【００８４】
これらの実験において、確立した異種移植腫瘍を有するマウスを、媒体および媒体、媒体およびＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、３３９．１＋ボロシキシマブおよび媒体、または３３９．１＋ボロシキシマブおよびＳＵＴＥＮＴ（登録商標）で治療した。３３９．１抗体およびボロシキシマブを、２５ｍｇ／ｋｇの３３９．１の最初の投与量以外は１０ｍｇ／ｋｇで週２回、腹腔内に投与し、そしてＳＵＴＥＮＴ（登録商標）を２０ｍｇ／ｋｇで毎日経口投与した。
【００８５】
上記の研究の結果を、図４にプロットしたデータによって説明する。腎臓癌の７８６−０モデルにおいて、コントロールと比較して、統計学的に有意な効果が、ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、３３９．１およびボロシキシマブの組み合わせで観察された。
【００８６】
これらの結果は、癌、特に腎細胞癌を有する患者における、ボロシキシマブおよびＳＵＴＥＮＴ（登録商標）（スニチニブ）の薬学的な組み合わせの使用を支持する。
【００８７】
実施例３
この実施例は、腎臓癌（７８６−０）のマウス異種移植腫瘍モデルを用いた、ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、ボロシキシマブおよびボロシキシマブアナログ、３３９．１の薬学的な組み合わせの組み合わせ効果の研究を説明する。
【００８８】
上記の実施例２で説明したように、３３９．１抗体は、腫瘍異種移植モデルを支持するように発達するマウス脈管構造を標的とし得、一方ボロシキシマブはヒト７８６．０腫瘍細胞のヒトα５β１インテグリンを標的とし得るので、代替抗体、３３９．１に加えて、ボロシキシマブを用いた。従って、異種移植モデルにおけるボロシキシマブおよび３３９．１の組み合わせは、腫瘍および脈管構造の両方を標的とすることによって、ヒトにおけるボロシキシマブの臨床試験の結果により近いモデルとなることが期待される。
【００８９】
これらの実験において、確立した異種移植腫瘍を有するマウスを、媒体および媒体、媒体およびＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、３３９．１＋ボロシキシマブおよび媒体、または３３９．１＋ボロシキシマブおよびＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）で治療した。３３９．１抗体およびボロシキシマブを、２５ｍｇ／ｋｇの３３９．１の最初の投与量以外は１０ｍｇ／ｋｇで週２回、腹腔内に投与し、そしてＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）を１２．５ｍｇ／ｋｇで毎日経口投与した。
【００９０】
上記の実験の結果を、図５に示した腫瘍体積対試験日数のプロットによって説明する。腎臓癌の７８６−０モデルにおいて、ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、３３９．１およびボロシキシマブの薬学的な組み合わせによって、コントロールと比較して、統計学的に有意な効果が観察された。
【００９１】
これらの結果は、癌、特に腎細胞癌を有する患者における、ボロシキシマブおよびＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）（ソラフェニブ）の薬学的な組み合わせの使用を支持する。
【００９２】
実施例４
この実施例は、３つの異なる癌の前臨床モデルを用いた、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、ボロシキシマブおよびボロシキシマブアナログ、３３９．１の組み合わせ効果の研究を説明する。具体的には、横紋筋肉腫（Ａ６７３）、黒色腫（ＬＯＸ）、および肺癌（Ｈ４６０）のマウス異種移植腫瘍モデルを用いて、その研究を行った。ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）（ベバシズマブ）は、ＶＥＧＦ増殖因子リガンドに結合することによって、チロシンキナーゼＶＥＧＦ受容体を阻害するよう作用する、上市された癌治療薬である。
【００９３】
上記の実施例２で説明したように、３３９．１抗体は、腫瘍異種移植モデルを支持するように発達するマウス脈管構造を標的とし得、一方ボロシキシマブはヒト７８６．０腫瘍細胞のヒトα５β１インテグリンを標的とし得るので、代替抗体、３３９．１に加えて、ボロシキシマブを用いた。従って、異種移植モデルにおけるボロシキシマブおよび３３９．１の組み合わせは、腫瘍および脈管構造の両方を標的とすることによって、ヒトにおけるボロシキシマブの臨床試験の結果により近いモデルとなることが期待される。
【００９４】
これらの実験において、確立した異種移植腫瘍を有するマウスを、媒体および媒体、媒体およびＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、３３９．１＋ボロシキシマブ、または３３９．１＋ボロシキシマブおよびＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）で治療した。Ａ６７３異種移植による研究において、３３９．１抗体およびボロシキシマブを１０ｍｇ／ｋｇで週２回、腹腔内投与し、そしてＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）を０．５ｍｇ／ｋｇで週２回投与した。ＬＯＸおよびＨ４６０異種移植による研究に関して、２５ｍｇ／ｋｇの３３９．１の最初の投与量を用いたいくつかの研究を除いて、３３９．１抗体およびボロシキシマブを１０ｍｇ／ｋｇで週２回、腹腔内投与し、そしてＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）を１０ｍｇ／ｋｇで週２回投与した。
【００９５】
上記の実験の結果を、それぞれ図６、７、および８に示す、腫瘍体積対試験日数のプロットによって説明する。これらの結果は、抗α５β１アンタゴニストをＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）と共に使用した場合のより高い腫瘍縮小の傾向を示唆する。
【００９６】
マウス異種移植モデルにおける３３９．１によるこれらの結果は、ボロシキシマブおよびベバシズマブの薬学的な組み合わせを、ヒト癌患者における、特に腎臓癌、肺癌、および黒色腫の適応症で、可能性のある治療として示唆する。
【００９７】
実施例５
薬学的な組み合わせに関する臨床試験モデル
この実施例は、癌を治療するために用いるボロシキシマブおよびＳＵＴＥＮＴ（登録商標）の組み合わせを支持するために行い得る、可能性のあるヒト臨床試験を説明する。
【００９８】
転移性腎細胞癌を有する患者に、疾患が進行するまで、静脈内プラセボと組み合わせてＳＵＴＥＮＴ（登録商標）を経口投与（５０ｍｇ  ｑｄ、４週間オン、２週間オフ）、または静脈内ボロシキシマブ（１０または１５ｍｇ／ｋｇ  ｑ２ｗ）と組み合わせてＳＵＴＥＮＴ（登録商標）を経口投与（５０ｍｇ  ｑｄ、４週間オン、２週間オフ）する。治療後、患者を評価して疾患の進行までの時間を決定する。患者を評価して、プラセボプラスＳＵＴＥＮＴ（登録商標）で治療した患者と比較して、ボロシキシマブプラスＳＵＴＥＮＴ（登録商標）で治療した患者の反応期間も決定する。疾患指向性Ｘ線検査画像診断、理学的検査、生命徴候の測定、および他の標準的な臨床検査測定によるような、安全性および有効性の測定も行う。
【００９９】
当業者は、そこに内在するものと同様に、目的を実行し、そして述べられた結果および利点を得るために本発明をよく適応させることを容易に認識する。本明細書中で記載された組成物および方法は代表的、典型的な実施態様であり、そして本発明の範囲の制限として意図されない。
【０１００】
本発明の特定の実施態様が説明および記載されたが、様々な他の変化および修飾を、本発明の意図および範囲から離れることなく行い得ることが、当業者に明らかである。従って添付の請求において、本発明の範囲内にある全てのそのような変化および修飾を含むことが意図される。
【０１０１】
本明細書中で適当に説明的に記載された本発明を、本明細書中で具体的に開示されていないあらゆる要素または制限の非存在下で実施し得る。採用された用語および表現は、制限ではなく説明の用語として用いられ、そしてそのような用語および表現の使用において、示されたおよび説明された特徴のあらゆる同等物またはその一部を除外する意図はない。
【０１０２】
本発明は、本明細書中で広範囲におよび一般的に説明された。一般的な開示の範囲内に入る、より狭い種および亜属のそれぞれも、本発明の部分を形成する。これは、除外されるものが本明細書中で具体的に引用されるかどうかに関わらず、条件またはその属からあらゆる内容を除去する負の制限を有する本発明の一般的な説明を含む。
【０１０３】
全ての特許および刊行物は、個々の刊行物それぞれが具体的におよび個々に参考文献に組み込まれると示されたように同じ程度、本明細書中で参考文献に組み込まれる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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