(57)【要約】表皮再生の増強が必要な患者における表皮再生を増強するための方法が本明細書で提供され、上記方法は、上記患者に、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体、および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物を局所投与する工程を包含する。例えば、瘢痕性脱毛症を処置もしくは改善するための方法が提供され、上記方法は、それが必要な患者に、開示される化合物を含む薬学的に受容可能な組成物を局所投与する工程を包含する。開示される化合物を使用して毛嚢前駆細胞を保護するための方法および毛嚢前駆細胞を含む組成物もまた、提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
表皮再生の増強が必要な患者における表皮再生を増強するための方法であって、該方法は、該患者に、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物を局所投与する工程を包含する、方法。
【請求項２】
前記表皮再生を増強することは、瘢痕性脱毛症を処置もしくは改善することであり、それが必要な患者に、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物を局所投与する工程を包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記瘢痕性脱毛症は、毛孔性扁平苔癬である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記瘢痕性脱毛症は、慢性皮膚エリテマトーデス、毛孔性角化症もしくは毛包性角化症である、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、ドキシサイクリン、ヒドロキシクロロキン、ミコフェノール酸モフェチル、リファンピン、クリンダマイシン、およびスペルミジンからなる群より選択される化合物を投与する工程をさらに包含する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記患者は、ヒトである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記患者は、皮膚創傷もしくは熱傷を患っている、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
哺乳動物皮膚の除毛前に毛嚢前駆細胞を保護するための方法であって、該方法は、該細胞と、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む薬学的に受容可能な組成物とを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項９】
患者における創傷治癒を促進する方法であって、該方法は、該患者に、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項１０】
前記創傷は、熱傷、瘢痕、皮下外傷創傷、もしくは手術創である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物は、Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸もしくはその薬学的に受容可能な塩を含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物は、少なくとも約１ｍＭ濃度の前記Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記組成物は、約１ｍＭ〜約１０ｍＭの濃度のＮ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
毛嚢前駆細胞を含む組成物を保護および／もしくは保存するための方法であって、ここで該方法は、該毛嚢前駆細胞と、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸  またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体とを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項１５】
前記毛嚢前駆細胞と、約１ｍＭ〜約１０ｍＭの濃度のＮ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体とを接触させる工程を包含する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法に従う使用のための、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む、組成物。
【請求項１７】
請求項５〜７のいずれか１項に記載の方法に従う使用のための、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む、組成物。
【請求項１８】
請求項８に記載の方法に従う使用のための、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む、組成物。
【請求項１９】
請求項９または１０に記載の方法に従う使用のための、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む、組成物。
【請求項２０】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法における使用のための、Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸もしくはその薬学的に受容可能な塩を含む、組成物。
【請求項２１】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法に従う使用のための、少なくとも約１ｍＭの濃度のＮ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む、組成物。
【請求項２２】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法に従う使用のための、約１ｍＭ〜約１０ｍＭの濃度のＮ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む、組成物。
【請求項２３】
請求項１４に記載の方法に従う使用のための、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む、組成物。
【請求項２４】
請求項１５に記載の方法に従う使用のための、約１ｍＭ〜約１０ｍＭの濃度のＮ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む、組成物。
【請求項２５】
Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む組成物であって；
該組成物は、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、ドキシサイクリン、ヒドロキシクロロキン、ミコフェノール酸モフェチル、リファンピン、クリンダマイシン、およびスペルミジンからなる群より選択される少なくとも１種の化合物をさらに含む、
組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、２０１２年９月１３日に出願した米国出願第６１／７００，６２３号に対する優先権を主張する。米国出願第６１／７００，６２３号は、その全体が参考として援用される。
【背景技術】
【０００２】
背景
皮膚およびその付属毛嚢構造は、十分に組織化された構造様式、ならびに幹細胞自己複製、増殖、移動および分化系統決定を調節する分子機構によって特徴付けられる優れたシステムを有する。各毛嚢は、不変部分（これは皮脂腺およびその基礎をなす膨大部を含む）および動的に再生する部分（これは成長期（活発な成長相）、退行期（再構築相）および最後に休止期（静止相）のサイクルを経る）から構成される。毛嚢サイクルを制御する２つの重要な要素は、毛嚢の膨大部に位置する濾胞上皮幹細胞（ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ）、および毛乳頭（ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ  ｐａｐｉｌｌａ）を構成する特化した間葉細胞である。
【０００３】
上皮幹細胞は多能性であり、上方に移動して創傷修復の間に表皮細胞を生成するための表皮前駆細胞として働くか、または下方に移動して毛母前駆細胞（これは、毛幹をさらに生じる）に変わるかのいずれかである娘細胞を生じる。
【０００４】
毛の成長が遅くなり得るかもしくは停止し得る理由はいくつかある。毛線維の生成は、例えば、毛母細胞がそれらの増殖能を使い果たしたことが理由で停止し得る：このことは、毛母細胞の増殖能が、新たな毛周期の開始時に一度きり決定され、新たな毛母細胞が成長相全体の間に生成されないということを想定している。
【０００５】
幹細胞は、新たな毛母細胞を連続して生成し得る。毛線維の生成は、上記幹細胞が新たな子孫を生成するのを止めるように指示されている場合に停止し得る。
【０００６】
瘢痕性脱毛症（ｃｉｃａｔｒｉｃｉａｌ  ｏｒ  ｓｃａｒｒｉｎｇ  ａｌｏｐｅｃｉａ）として分類される脱毛症のいくつかのタイプ（例えば、毛孔性扁平苔癬、前頭部の線維化脱毛症（ｆｒｏｎｔａｌ  ｆｉｂｒｏｓｉｎｇ  ａｌｏｐｅｃｉａ）、慢性皮膚エリテマトーデス、毛孔性角化症（ｋｅｒａｔｏｓｉｓ  ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉｓ）、毛包性角化症（ｓｐｉｎｕｌｏｓａ  ｄｅｃａｌｖａｎｓ）もしくは脱毛性毛嚢炎）は、膨大部における毛嚢幹細胞の破壊および恒久的な脱毛を引き起こす障害である。従って、毛嚢の基本的な自己再生能力が保持されるように毛嚢幹細胞の破壊を妨げることは、幹細胞破壊に関連する障害を患っている患者における毛の再生を可能にし得る。よって、毛嚢が保持され再生し得るように毛嚢幹細胞を保存する有効な薬剤が必要である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
概要
本開示は、表皮再生の増強が必要な患者における表皮再生を増強するための方法を提供し、上記方法は、上記患者に、本明細書で開示される化合物（例えば、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸）またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物を局所投与する工程を包含する。
【０００８】
例えば、一部は、瘢痕性脱毛症を処置もしくは改善する方法に関し、上記方法は、それが必要な患者に、本明細書で開示される化合物を含む薬学的に受容可能な組成物を局所投与する工程を包含する。例えば、瘢痕性脱毛症を処置もしくは改善する方法が本明細書で提供され、上記方法は、それが必要な患者に、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物を局所投与する工程を包含する。
【０００９】
哺乳動物皮膚の除毛の前に毛嚢前駆細胞（ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｅｌｌ）を保護するための方法もまた、本明細書で企図され、上記方法は、上記細胞と、本明細書で開示される化合物（例えば、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸）またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む薬学的に受容可能な組成物とを接触させる工程を包含する。
【００１０】
毛嚢前駆細胞を含む組成物を保護および／もしくは保存するための方法であって、ここで上記方法は、上記毛嚢前駆細胞と、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸とを接触させる工程を包含する方法もまた、提供される。
【００１１】
患者における創傷治癒を促進する方法もまた、本明細書で企図され、上記方法は、上記患者に、本明細書で開示される化合物（例えば、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸）またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物を投与する工程を包含する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、実施例２に記載される研究の実験デザインを示す。
【図２】図２は、Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸の投与後のＫ−１５免疫反応性の刺激を示すプールされたデータを示す。
【図３】図３は、Ｋ１５陽性細胞のＤＰＡＩ染色を示す。
【図４】図４は、Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸の投与後のＫ−１９免疫反応性の刺激を示すプールされたデータを示す。
【図５】図５は、Ｋ１９陽性細胞のＤＰＡＩ染色を示す。
【図６】図６は、Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸の投与後の低濃度および高濃度でのＫ１９陽性細胞の増大した数を示すプールされたデータを示す。
【図７】図７は、６日目に０．１ｍＭ用量においてＮ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸を投与した後のＬＤＨ活性の増大を示す（プールされたデータ）。
【図８】図８は、６日目に高用量（１ｍＭ）  Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸の投与後の毛幹伸長の阻害を示す（プールされたデータ）。
【図９】図９は、種々の濃度でのＮ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸の退行期を示す（プールされたデータ）。
【図１０】図１０は、種々の投与量のＮ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸での退行期に向かう傾向を示す（プールされたデータ、各実験での各毛周期ステージのパーセンテージを比較する、ｎ＝５；０．４＝４０％）。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
（詳細な説明）
本開示の特徴および他の詳細が、次に、より具体的に記載される。本発明のさらなる記載の前に、明細書、実施例および添付される特許請求の範囲において用いられる特定の用語がここに集められる。これらの定義は、本開示の残りを考慮して読まれるべきであり、当業者により理解されるべきである。そうでないと定義されない限り、本明細書中で使用される全ての技術的および科学的な用語は、当業者により一般に理解されるものと同じ意味を有する。
【００１４】
（定義）
用語「処置」は、状態、疾患、および障害などの改善（ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ）をもたらす、あらゆる影響（例えば、減らすこと（ｌｅｓｓｅｎｉｎｇ）、軽減すること（ｒｅｄｕｃｉｎｇ）、調節すること、または排除すること）を含む。
【００１５】
本明細書中で用いられる場合、用語「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する不飽和の直鎖または分枝の炭化水素（例えば、２〜１２個の炭素原子、２〜１０個の炭素原子、または２〜６個の炭素原子の直鎖または分枝の基であって、本明細書中でそれぞれＣ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニルおよびＣ２〜Ｃ６アルケニルと称される）を指す。例示的なアルケニル基としては、ビニル、アリル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ブタジエニル、ペンタジエニル、ヘキサジエニル、２−エチルヘキセニル、２−プロピル−２−ブテニル、４−（２−メチル−３−ブテン）−ペンテニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１６】
本明細書中で用いられる場合、用語「アルコキシ」は、酸素に結合するアルキル基（−Ｏ−アルキル−）を指す。例示的なアルコキシ基としては、１〜１２個の炭素原子、１〜８個の炭素原子、または１〜６個の炭素原子のアルキル基、アルケニル基またはアルキニル基を含む基であって、本明細書中でそれぞれがＣ１〜Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、およびＣ１〜Ｃ６アルコキシと称されるものが挙げられるが、これらに限定されない。例示的なアルコキシ基としては、メトキシ、エトキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。同様に、例示的な「アルケノキシ」基としては、ビニルオキシ、アリルオキシ、ブテノキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１７】
本明細書中で用いられる場合、用語「アルキル」は、飽和の直鎖または分枝の炭化水素（例えば、１〜１２個の炭素原子、１〜１０個の炭素原子、または１〜６個の炭素原子の直鎖または分枝の基であって、本明細書中でそれぞれＣ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、およびＣ１〜Ｃ６アルキルと称される）を指す。例示的なアルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、２−メチル−１−プロピル、２−メチル−２−プロピル、２−メチル−１−ブチル、３−メチル−１−ブチル、２−メチル−３−ブチル、２，２−ジメチル−１−プロピル、２−メチル−１−ペンチル、３−メチル−１−ペンチル、４−メチル−１−ペンチル、２−メチル−２−ペンチル、３−メチル−２−ペンチル、４−メチル−２−ペンチル、２，２−ジメチル−１−ブチル、３，３−ジメチル−１−ブチル、２−エチル−１−ブチル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、アルキルは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルを指す。特定の実施形態において、シクロアルキルは、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキルを指す。
【００１８】
アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基は、いくつかの実施形態において、必要に応じて、以下から選択される少なくとも１つの基で置換され得るか、以下から選択される少なくとも１つの基によって介在され得る；アルカノイル、アルコキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド（ａｍｉｄｏ）、アミジノ、アミノ、アリール、アリールアルキル、アジド、カーバメート、カーボネート、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシル、イミノ、ケトン、ニトロ、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、スルフェート、スルフィド、スルホンアミド、スルホニルおよびチオカルボニル。
【００１９】
本明細書中で用いられる場合、用語「アルキニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する不飽和の直鎖または分枝の炭化水素（例えば、２〜１２個の炭素原子、２〜８個の炭素原子、または２〜６個の炭素原子の直鎖または分枝の基であって、本明細書中でそれぞれＣ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニルおよびＣ２〜Ｃ６アルキニルと称される）を指す。例示的なアルキニル基としては、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、メチルプロピニル、４−メチル−１−ブチニル、４−プロピル−２−ペンチニル、および４−ブチル−２−ヘキシニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２０】
本明細書中で用いられる場合、用語「アミド（ａｍｉｄｅ）」または「アミド（ａｍｉｄｏ）」は、形式−ＲａＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）−、−ＲａＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）Ｒｃ−、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃの基（ｒａｄｉｃａｌ）を指し、ここでＲａ、ＲｂおよびＲｃは、アルコキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド（ａｍｉｄｅ）、アミノ、アリール、アリールアルキル、カーバメート、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、水素、ヒドロキシル、ケトン、およびニトロから、それぞれ独立して選択される。上記アミド（ａｍｉｄｅ）は、その炭素、その窒素、Ｒｂ、Ｒｃ、またはＲａを介して別の基に結合し得る。上記アミド（ａｍｉｄｅ）はまた、環式であり得る（例えば、ＲｂおよびＲｃ、ＲａおよびＲｂ、またはＲａおよびＲｃが結合していて、３員環〜１２員環（例えば、３員環〜１０員環または５員環〜６員環）を形成し得る）。用語「カルボキサミド」は、構造−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃを指す。
【００２１】
本明細書中で用いられる場合、用語「アミン」または「アミノ」は、形式−ＮＲｄＲｅ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｒｅ−、または−ＲｅＮ（Ｒｄ）Ｒｆ−の基を指し、ここでＲｄ、Ｒｅ、およびＲｆは、アルコキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド（ａｍｉｄｅ）、アミノ、アリール、アリールアルキル、カーバメート、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、水素、ヒドロキシル、ケトン、およびニトロから独立して選択される。上記アミノは、その窒素、Ｒｄ、ＲｅまたはＲｆを介して親分子の基に結合し得る。上記アミノはまた、環式であり得、例えば、Ｒｄ、ＲｅまたはＲｆのうちの任意の２つが一緒に結びつくか、またはＮと結びついて、３員環〜１２員環（例えば、モルホリノまたはピペリジニル）を形成し得る。用語「アミノ」はまた、あらゆるアミノ基の対応する第四級アンモニウム塩（例えば、−［Ｎ（Ｒｄ）（Ｒｅ）（Ｒｆ）］＋）を含む。例示的なアミノ基としては、アミノアルキル基が挙げられ、ここでＲｄ、ＲｅまたはＲｆの少なくとも１つはアルキル基である。
【００２２】
本明細書中で用いられる場合、用語「シクロアルコキシ」は、酸素に結合するシクロアルキル基を指す。
【００２３】
本明細書中で用いられる場合、用語「シクロアルキル」は、３〜１２個の炭素、３〜８個の炭素、４〜８個の炭素、または４〜６個の炭素の一価の飽和または不飽和の環式、二環式、または橋かけ二環式炭化水素基を指し、本明細書中で、例えば、シクロアルカンに由来する「Ｃ４〜８シクロアルキル」と称される。例示的なシクロアルキル基としては、シクロヘキサン、シクロヘキセン、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロブタンおよびシクロプロパンが挙げられるが、これらに限定されない。シクロアルキル基は、アルカノイル、アルコキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド（ａｍｉｄｏ）、アミジノ、アミノ、アリール、アリールアルキル、アジド、カーバメート、カーボネート、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシル、イミノ、ケトン、ニトロ、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、スルフェート、スルフィド、スルホンアミド、スルホニルおよびチオカルボニルで置換され得る。シクロアルキル基は、他のシクロアルキル基、アリール基、またはヘテロシクリル基に縮合され得る。特定の実施形態において、シクロアルキルは、Ｃ３〜Ｃ６アルキルを指す。
【００２４】
本明細書中で用いられる場合、用語「ハロ」または「ハロゲン」または「ハル（Ｈａｌ）」は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩを指す。
【００２５】
本明細書中で用いられる場合、用語「ハロアルキル」は、１つまたはそれより多くのハロゲン原子で置換されるアルキル基を指す。
【００２６】
本明細書中で用いられる場合、用語「ニトロ」は、基−ＮＯ２を指す。
【００２７】
本明細書中で用いられる場合、用語「フェニル」は、６員炭素環式芳香族環を指す。フェニル基はまた、シクロヘキサン環またはシクロペンタン環に縮合され得る。フェニルは以下に挙げられる１つまたはそれより多くの置換基で置換され得る；アルカノイル、アルコキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド（ａｍｉｄｏ）、アミジノ、アミノ、アリール、アリールアルキル、アジド、カーバメート、カーボネート、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシル、イミノ、ケトン、ニトロ、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、スルフェート、スルフィド、スルホンアミド、スルホニルおよびチオカルボニル。
【００２８】
本明細書中で用いられる場合、用語「薬学的に受容可能なキャリア」または「薬学的に受容可能な賦形剤」は、薬学的投与に適合する、任意の、および全ての、溶媒、分散媒体、コーティング、等張剤および吸収遅延剤などを指す。薬学的に活性な物質のためのそのような媒体および剤の使用は、当該分野において周知である。組成物はまた、補足的な、追加の、または増強された、治療上の機能を提供する他の活性化合物を含み得る。
【００２９】
本明細書中で用いられる場合、用語「薬学的組成物」は、１つまたはそれより多くの薬学的に受容可能なキャリアとともに調合される、少なくとも１つの本明細書中で開示される化合物を含む組成物を指す。
【００３０】
用語「個体」、「患者」または「被験体」は、交換可能に使用され、あらゆる動物（哺乳動物、より好ましくは、マウス、ラット、他のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ（ｓｗｉｎｅ）、ウシ（ｃａｔｔｌｅ）、ヒツジ、ウマ、または霊長類、そして最も好ましくはヒトが挙げられる）を含む。本明細書に開示される化合物は、哺乳動物（例えば、ヒト）に投与され得るが、他の哺乳動物（例えば、獣医学の処置を必要とする動物（例えば、家庭用動物（ｄｏｍｅｓｔｉｃ  ａｎｉｍａｌ）（例えば、イヌおよびネコなど）、家畜（ｆａｒｍ  ａｎｉｍａｌ）（例えば、ウシ（ｃｏｗ）、ヒツジ、ブタ（ｐｉｇ）およびウマなど）、および実験用動物（例えば、ラット、マウスおよびモルモットなど）））にも投与され得る。用語「調節」は、拮抗（ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ）（例えば、阻害）、作動（ａｇｏｎｉｓｍ）、部分拮抗（ｐａｒｔｉａｌ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ）および／または部分作動（ｐａｒｔｉａｌ  ａｇｏｎｉｓｍ）を含む。
【００３１】
本明細書において、用語「治療上有効な量」は、研究者、獣医師、医師または他の臨床医によって調べられる組織、系、動物またはヒトの生物学的反応または医学的反応を引き出す本対象の化合物の量を意味する。本明細書に開示される化合物は、治療上有効な量で投与され、疾患を処置する。あるいは、化合物の治療上有効な量は、望まれる治療効果および／または予防効果を達成するために必要とされる量（例えば、疾患もしくは障害の予防、または該疾患もしくは障害に関連する症状の減少（ｄｅｃｒｅａｓｅ）をもたらす量）である。
【００３２】
本明細書中で用いられる場合、用語「薬学的に受容可能な塩（複数可）」は、本組成物において使用される化合物中に存在し得る酸性基または塩基性基の塩を指す。性質において塩基性である、本組成物中に含まれる化合物は、種々の無機酸および有機酸によって広く多様な塩を形成することが可能である。そのような塩基性化合物の薬学的に受容可能な酸付加塩を調製するために使用され得る酸は、非毒性の酸付加塩を形成するものであって、すなわち、薬理学的に受容可能なアニオンを含む塩である。その塩としては、リンゴ酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩（ｇｅｎｔｉｓｉｎａｔｅ）、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、サッカリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸塩））が挙げられるが、これらに限定されない。アミノ部分を含む、本組成物に含まれる化合物は、上記の酸の他に種々のアミノ酸によって、薬学的に受容可能な塩を形成し得る。性質において酸性である、本組成物に含まれる化合物は、種々の薬理学的に受容可能なカチオンによって塩基塩を形成することが可能である。そのような塩の例としては、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、特にカルシウム塩、マグネシウム塩、ナトリウム塩、リチウム塩、亜鉛塩、カリウム塩もしくは鉄塩が挙げられる。
【００３３】
本開示の化合物は、１つもしくはそれより多くのキラル中心および／または二重結合を含み得、従って、立体異性体（例えば、幾何異性体、鏡像異性体またはジアステレオ異性体）として存在する。本明細書中で用いられる場合、用語「立体異性体」は、全ての幾何異性体、鏡像異性体またはジアステレオ異性体からなる。これらの化合物は、ステレオジェン炭素原子のまわりの置換基の立体配置に依存して、記号「Ｒ」または「Ｓ」によって示され得る。本発明は、これらの化合物の種々の立体異性体およびその混合物を含む。立体異性体は、鏡像異性体およびジアステレオ異性体を含む。鏡像異性体またはジアステレオ異性体の混合物は、命名法において「（±）」と示され得るが、当業者は、構造が暗示的にキラル中心を示し得ることを認識する。
【００３４】
本発明の化合物の個々の立体異性体は、不斉中心もしくはステレオジェン中心を含む市販されている開始材料から、または当業者に周知のラセミ混合物の調製と、続く分割方法によって、合成的に調製され得る。これらの分割方法は、以下により例示されている；（１）鏡像異性体の混合物のキラル補助剤への結合、再結晶化またはクロマトグラフィーによる、結果として生じるジアステレオ異性体の混合物の分離、および補助剤からの光学的に純粋な生成物の遊離、（２）光学的に活性な分割剤（ｒｅｓｏｌｖｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）を用いる塩形成、または（３）キラルクロマトグラフカラム上の光学的鏡像異性体の混合物の直接的な分離。立体異性体の混合物はまた、周知の方法（例えば、キラル相ガスクロマトグラフィー、キラル相高速液体クロマトグラフィー、キラル塩錯体として化合物を結晶化すること、またはキラル溶媒中で化合物を結晶化すること）によって、それを構成する立体異性体へと分割され得る。立体異性体はまた、周知の不斉の合成方法により立体異性的に（ｓｔｅｒｅｏｍｅｒｉｃａｌｌｙ）純粋な中間体、試薬および触媒から得られ得る。
【００３５】
幾何異性体はまた、本発明の化合物において、存在し得る。記号
【化１】
2015528479.tif 000002
は、本明細書に記載される単結合、二重結合、または三重結合であり得る結合を示す。本発明は、炭素−炭素二重結合のまわりの置換基の配置または炭素環式環のまわりの置換基の配置からもたらされる種々の幾何異性体およびその混合物を含む。炭素−炭素二重結合のまわりの置換基は、「Ｚ」または「Ｅ」の立体配置にあるものとして示され、ここで用語「Ｚ」および「Ｅ」は、ＩＵＰＡＣ規準に従って使用される。そうでないと特定されない限り、二重結合を示す構造は、「Ｅ」および「Ｚ」異性体の両方を含む。
【００３６】
炭素−炭素二重結合のまわりの置換基は、代替的に「シス」または「トランス」と称され得、ここで「シス」は二重結合の同じ側にある複数の置換基を表し、「トランス」は二重結合の反対側にある複数の置換基を表す。炭素環式環のまわりの置換基の配置は、「シス」または「トランス」と示される。用語「シス」は環の面の同じ側にある複数の置換基を表し、用語「トランス」は環の面の反対側にある複数の置換基を表す。環の面の同じ側および環の面の反対側の両方にある複数の置換基が配置される化合物の混合物は「シス／トランス」と示される。
【００３７】
本明細書中で開示される化合物は、薬学的に受容可能な溶媒（例えば、水およびエタノールなど）による溶媒和形態および非溶媒和形態において存在し得、本発明が溶媒和形態および非溶媒和形態の両方を含むことが意図される。１つの実施形態において、その化合物は、アモルファスである。１つの実施形態において、その化合物は、多形体である。別の実施形態において、その化合物は、結晶形態にある。
【００３８】
本発明はまた、同位体標識された化合物を含み、その化合物は、１つまたはそれより多くの原子が、通常自然界において見出される原子質量または質量数と異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられることを除いて、本明細書中に列挙された化合物と同一である。本明細書に開示される化合物に組み込まれ得る同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素および塩素の同位体（例えば、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、および３６Ｃｌ）が挙げられる。
【００３９】
特定の同位体標識された開示された化合物（例えば、３Ｈおよび１４Ｃで標識された化合物）は、化合物および／または基質の組織分布アッセイにおいて有用である。三重水素化（すなわち、３Ｈ）および炭素−１４（すなわち、１４Ｃ）同位体は、その調製および検出可能性の容易さのため、特に好ましい。さらに、より重い同位体での置換（例えば、重水素（すなわち、２Ｈ））は、より大きな代謝安定性（例えば、増大したインビボ半減期または減少した投与量要求）からもたらされる特定の治療上の利益を与え得、従って、いくつかの状況において好まれ得る。本発明の同位体標識された化合物は、例えば、本明細書中の実施例において開示される手順と類似した手順に沿って、同位体標識された試薬を同位体標識されていない試薬の代わりに用いることによって、一般的に調製され得る。
【００４０】
用語「プロドラッグ」は、インビボで変換されて、開示される化合物またはその化合物の薬学的に受容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物を生じる化合物を指す。変換は、種々のメカニズムによって（例えば、血液中における加水分解を介して）起こり得る。例えば、本明細書に開示される化合物またはその化合物の薬学的に受容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物がカルボン酸官能基を含む場合、プロドラッグは、酸性基の水素原子を基（例えば、（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１２）アルカノイルオキシメチル、４〜９個の炭素原子を有する１−（アルカノイルオキシ）エチル、５〜１０個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルカノイルオキシ）−エチル、３〜６個の炭素原子を有するアルコキシカルボニルオキシメチル、４〜７個の炭素原子を有する１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、５〜８個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、３〜９個の炭素原子を有するＮ−（アルコキシカルボニル）アミノメチル、４〜１０個の炭素原子を有する１−（Ｎ−（アルコキシカルボニル）アミノ）エチル、３−フタリジル、４−クロトノラクトニル、γ−ブチロラクトン−４−イル、ジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルアミノ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキル（例えば、β−ジメチルアミノエチル）、カルバモイル−（Ｃ１〜Ｃ２）アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルカルバモイル−（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルおよびピペリジノ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキル、ピロリジノ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキルまたはモルホリノ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキル）と置き換えることにより形成されるエステルを含み得る。
【００４１】
同様に、本明細書に開示される化合物がアルコール官能基を含む場合、プロドラッグは、アルコール基の水素原子を基（例えば、（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイルオキシメチル、１−（（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイルオキシ）エチル、１−メチル−１−（（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイルオキシ）エチル  （Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシカルボニルオキシメチル、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシカルボニルアミノメチル、スクシノイル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルカノイル、α−アミノ（Ｃ１〜Ｃ４）アルカノイル、アリールアシルおよびα−アミノアシル、またはα−アミノアシル−α−アミノアシル（ここで各α−アミノアシル基は、天然に存在するＬ−アミノ酸、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）２またはグリコシル（炭水化物のヘミアセタール形態のヒドロキシル基の除去から生じる基）から独立して選択される））と置き換えることにより形成され得る。
【００４２】
本明細書に開示される化合物がアミン官能基を組み込む場合、プロドラッグは、アミン基における水素原子を基（例えば、Ｒ−カルボニル、ＲＯ−カルボニル、ＮＲＲ’−カルボニル（ここでＲおよびＲ’は、それぞれ独立して（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、ベンジルであるか、またはＲ−カルボニルが天然のα−アミノアシルもしくは天然のα−アミノアシル−天然のα−アミノアシルである）、−Ｃ（ＯＨ）Ｃ（Ｏ）ＯＹ１（ここでＹ１はＨ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたはベンジルである）、−Ｃ（ＯＹ２）Ｙ３（ここでＹ２は（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、そしてＹ３は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、カルボキシ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、またはモノ−Ｎ−もしくはジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノアルキルである）、−Ｃ（Ｙ４）Ｙ５（ここでＹ４はＨまたはメチルであり、そしてＹ５はモノ−Ｎ−もしくはジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ、モルホリノ、ピペリジン−１−イルまたはピロリジン−１−イルである）と置き換えることにより形成され得る。
【００４３】
（化合物）
開示される方法のうちの１つまたは複数における使用が企図される化合物を以下に式Ｉによって示す。また、本明細書中で企図されるのは、式Ｉによって表される化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはＮ−オキシド、および例えば、薬学的にもしくは美容的に受容可能なキャリアもしくは賦形剤を含む組成物である。
【化２】
2015528479.tif 000003
ここでＸはＣ１〜Ｃ３アルキレンであって、必要に応じて、ハロゲンもしくはヒドロキシルから選択される、１つ、２つ、または３つの置換基で置換されるＣ１〜Ｃ３アルキレンであり；
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルおよびＣ２〜Ｃ６アルキニルからなる群より選択され；
Ｒ２は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ３は、それぞれの出現に対して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シアノ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシルおよびニトロからなる群より独立して選択され；
Ｒ４は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。
【００４４】
１つの実施形態において、Ｒ１はＣ１〜Ｃ６アルキル（例えば、メチル）であり得る。１つの実施形態において、Ｒ２は水素であり得る。別の実施形態において、Ｒ３は水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ハロゲン、およびヒドロキシルからなる群より選択され得る。さらなる実施形態において、Ｒ３は水素であり得る。１つの実施形態において、Ｒ４およびＲ５は、それぞれＣ１〜Ｃ６アルキルであり得る。別の実施形態において、Ｒ４は水素であり得、Ｒ５はメチルであり得る。１つの実施形態において、Ｘは（ＣＨ２）ｎであり得、ここでｎは１または２（例えば、１）である。
【００４５】
別の実施形態において、−ＮＲ２−ＣＯＲ１は、式ＩＩに示すようなＸに対してメタ位にあり得る。
【化３】
2015528479.tif 000004
【００４６】
別の実施形態において、−ＮＲ２−ＣＯＲ１は、式ＩＩＩに示すようなＸに対してパラ位にあり得る。
【化４】
2015528479.tif 000005
【００４７】
本開示は、下に示されるような式ＩＶによって表される化合物を、少なくとも一部、提供する。また、本明細書中で企図されるのは、式ＩＶによって表される化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはＮ−オキシド、および例えば、薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物である。
【化５】
2015528479.tif 000006
ここでＲ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルおよびＣ２〜Ｃ６アルキニルからなる群より選択され；
Ｒ２は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ３は、それぞれの出現に対して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シアノ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシルおよびニトロからなる群より独立して選択され；
Ｒ５は、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【００４８】
式Ｖの化合物もまた、下に示されるように企図され、式Ｖによって表される化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはＮ−オキシド、および例えば、薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物も企図される。
【化６】
2015528479.tif 000007
ここでＲ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルおよびＣ２〜Ｃ６アルキニルからなる群より選択され；
Ｒ３は、それぞれの出現に対して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、シアノ、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシルおよびニトロからなる群より独立して選択され；
Ｒ４は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ５は、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；ならびに
Ａは、縮合された５員複素環または６員複素環である。
【００４９】
１つの実施形態において、Ｒ１はＣ１〜Ｃ６アルキル（例えば、メチル）であり得る。別の実施形態において、Ｒ１およびＲ３は、それぞれＣ１〜Ｃ６アルキル（例えば、メチル）であり得る。１つの実施形態において、Ｒ２は水素であり得る。
【００５０】
いくつかの実施形態において、化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはＮ−オキシドは
【化７】
2015528479.tif 000008
によって表され得、
ここでｐは１または２であり；
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルおよびＣ２〜Ｃ６アルキニルからなる群より選択され；
Ｒ４およびＲ８は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群よりそれぞれ独立して選択される。
【００５１】
企図される化合物、および少なくとも１つの化合物を含む薬学的組成物は、以下からなる群より選択され得る：Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸（化合物Ａ）、Ｎ−アセチル−（Ｓ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸（化合物Ｂ）、ラセミ体Ｎ−アセチル−（Ｓ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸（化合物ＡＢ）；
【化８】
2015528479.tif 000009
４−アセトアミノ−Ｎ−ヒドロキシ−２−メトキシベンズアミド；１−アセチル−６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−５−カルボン酸、５−アセトアミド−２−ヒドロキシ安息香酸（例えば、アセチル化５−アミノサリチル酸（acetylated  5-aminosalicyclic  acid））、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはＮ−オキシド。本開示はまた、１つまたはそれより多くの薬学的にまたは美容的に受容可能なキャリアとともに調合される、本明細書中で開示される化合物を含む薬学的組成物を提供する。これらの調合物は、経口投与、直腸投与、局所投与、口腔投与および非経口（例えば、皮下、筋肉内、皮内、または静脈内）投与に適切な、または局所用途に適切な（例えば、皮膚に局所適用するのに適切な組成物の一部として）調合物を包含する。しかし、任意の所定の症例における最も適切な投与形態は、処置されている状態の度合いおよび重症度ならびに使用されている特定の化合物の性質に依存する。
【００５２】
開示される方法のうちの１つまたはそれより多くでの使用が企図されるさらなる化合物は、式ＶＩＩＩによって表される化合物、またはその薬学的に受容可能な塩、鏡像異性体もしくは立体異性体：
【化９】
2015528479.tif 000010
を含み、ここで：
Ｒ１およびＲ２は、ＨおよびＣ１−６アルキルからなる群より各々独立して選択されるか；またはＲ１およびＲ２は、これらが結合される窒素原子と一緒になって、必要に応じて置換され得る５個もしくは６個の原子を有する芳香族環もしくは脂肪族環を形成し；
ＹおよびＺは、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨ、−ＯＲ３、−ＣＨ（ＯＲ３）ＣＯＯＨからなる群より各々独立して選択され；そして
Ｒ３は、Ｈ、フェニル、ベンジル、ビニル、アリル、Ｃ１−６アルキルまたは１個もしくはそれより多くのハロゲンによって置換されたＣ１−６アルキルからなる群より選択される。
【００５３】
一実施形態において、Ｙは、ＨもしくはＣＯＯＨであり得る。例えば、Ｙは、Ｈであり得、Ｚは、ＣＨ（ＯＲ３）ＣＯＯＨであり得るか、またはＹは、ＣＯＯＨであり得、Ｚは、−ＯＲ３であり得る。いくつかの実施形態において、Ｒ３は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、もしくはイソプロピルであり得る。
【００５４】
他の実施形態において、上記ＮＲ１Ｒ２部分は、４’位にあり得るか、または３’位にあり得る。ある実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、Ｈである。
【００５５】
例示的化合物はまた、式ＩＸａもしくは式ＩＸｂによって表されるもの、またはその薬学的に受容可能な塩、鏡像異性体もしくは立体異性体：
【化１０】
2015528479.tif 000011
；あるいはその薬学的に受容可能な塩を含み、ここで：
Ｒ１およびＲ２は、ＨおよびＣ１−６アルキルからなる群より各々独立して選択されるか；またはＲ１およびＲ２は、これらが結合される窒素原子と一緒になって、５個もしくは６個の原子を有する芳香族環もしくは脂肪族環を形成し；
Ｒ６は、−ＮＨＯＨ、ＯＨ、および−ＯＲ９からなる群より選択され；
Ｒ９は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ４は、Ｈ、フェニル、ベンジル、ビニル、アリル、Ｃ１−６アルキルまたは１個もしくはそれより多くのハロゲンによって置換されたＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ５およびＲ７は、各々独立して、水素もしくはハロであるか；あるいは
Ｒ４およびＲ５、もしくはＲ４およびＲ６は一緒になって、ハロもしくはＣ１−６アルキルで必要に応じて置換された、５個もしくは６個の原子を有する縮合された複素環式環を形成し；そして
Ａは、縮合された複素環式環である。
【００５６】
ある実施形態において、式ＩＩａのＮＲ１Ｒ２部分は、４’位にあり得るか、または３’位にあり得る。ある実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、Ｈである。
【００５７】
Ｒ９はいくつかの実施形態において、メチル、エチル、ｎ−プロピル、もしくはイソプロピルであり得る。
【００５８】
いくつかの実施形態において、化合物は、
【化１１】
2015528479.tif 000012
によって表され得、
ここでｐは、１もしくは２であり、Ｒ６は、ＯＨもしくは−ＯＲ９であり、ここでＲ９は、上記で定義され、そしてＲ１０は、各々の存在に関して独立して、Ｈ、ハロ、もしくはＣ１−６アルキル（例えば、メチルもしくはエチル）からなる群より選択される。
【００５９】
本明細書で企図される例示的な化合物は、以下またはこれらの薬学的に受容可能な塩を含む：
【化１２】
2015528479.tif 000013
【００６０】
いくつかの実施形態において、企図される化合物は、４−アミノ−Ｎ−ヒドロキシ−２−メトキシベンズアミド（化合物１３）；６−メトキシキノリン−５−カルボン酸（化合物３６）；６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−５−カルボン酸（化合物３７）；５−ジイソプロピルアミノサリチル酸（化合物３８）を含む。
【００６１】
他の例示的化合物は、以下によって表されるものを含む：
【化１３】
2015528479.tif 000014
【００６２】
本明細書で企図される化合物は、例えば、以下の化合物のラセミ混合物、および鏡像異性体を含む：（±）−２−ヒドロキシ−３−（３’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物２０）；（±）−２−メトキシ−２−（４’−アミノフェニル）酢酸（化合物２３）；（±）−２−エトキシ−２−（３’−アミノフェニル）酢酸（化合物３２）；（±）−２−エトキシ−２−（４’−アミノフェニル）酢酸（化合物３３）；（±）−２−メトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）「±３４」（ラセミ形態）；（±）−２−エトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３９）；（±）−２−エトキシ−３−（３’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物４０）。
【００６３】
例えば、本明細書で開示される方法において使用される化合物は、以下のラセミ混合物の鏡像異性体：（Ｒ，Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−（３−アミノフェニル）酢酸（化合物１０）；（Ｒ，Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−（４−アミノフェニル）酢酸（化合物１１）；（Ｒ，Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物２１）；（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−２−（３’−アミノフェニル）酢酸（化合物２２）；（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−３−（３’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３５）；（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−３−（４−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）、ならびに鏡像異性体、例えば：（＋）２−Ｓ−メトキシ−３−（４−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）；（−）２−Ｒ−メトキシ−３−（４−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）であり得る。
【００６４】
企図される化合物の他のラセミタイプ混合物は、以下を含む：例えば、（±）−２−ヒドロキシ−２−（３’−アミノフェニル）酢酸（化合物１０）；（±）−２−ヒドロキシ−２−（４’−アミノフェニル）酢酸（化合物１１）；（±）−２−ヒドロキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物２１）および（±）−２−メトキシ−２−（３’−アミノフェニル）酢酸（化合物２２）。
【００６５】
開示される方法での使用が企図されるさらなる化合物：５−アミノサリチロ−ヒドロキサム酸（ａｍｉｎｏｓａｌｉｃｙｌｏ−ｈｙｄｒｏｘａｍｉｃ  ａｃｉｄ）（化合物５）；３−ジメチルアミノサリチル酸（化合物６）；２−メトキシ−４−アミノ安息香酸（化合物７）；２−メトキシ−５−アミノ安息香酸（化合物８）；５−メチルアミノサリチル酸（化合物９）；４−メチルアミノサリチル酸（化合物１２）；４−アセチルアミノサリチル酸（化合物１６）；２−エトキシ−４−アミノ安息香酸（化合物１８）；２−エトキシ−５−アミノ安息香酸（化合物１９）；４−ジメチルアミノサリチル酸（化合物２４）；２−エトキシ−４−アミノベンゾイルヒドロキサム酸（化合物２５）；６−ヒドロキシキノリン−５−カルボン酸（化合物２７）；２−（２−プロピル）オキシ−４−アミノ安息香酸（化合物３０）；４−（１−ピペラジニル）サリチル酸（化合物４１）；（Ｒ，Ｓ）５−オキサ−キノリン−６−カルボン酸（化合物１５）；６−メトキシキノリン−５−カルボン酸（化合物３６）；６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−５−カルボン酸（化合物３７）；５−ジイソプロピルアミノサリチル酸（化合物３８）；および４−ジイソプロピルアミノサリチル酸（化合物４２）。
【００６６】
本発明はまた、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含み；ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、ドキシサイクリン、ヒドロキシクロロキン、ミコフェノール酸モフェチル、リファンピン、クリンダマイシン、およびスペルミジンからなる群より選択される少なくとも１種の化合物をさらに含む組成物を提供する。
【００６７】
企図された化合物を作製するための方法は、例えば、ＷＯ２００７／０１０５１６およびＷＯ２００７／０１０５１４（各々、それらの全体において本明細書に参考として援用される）で見いだされ得る。
【００６８】
（治療上の適用）
本開示は、少なくとも一部は、治療上有効な量の本明細書で開示される化合物を投与する工程を包含する、患者（例えば、ヒト）における瘢痕性脱毛症を処置もしくは改善するための方法に関する。例えば、瘢痕性脱毛症を処置もしくは改善するための方法であって、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物をそれが必要な患者に局所投与する工程を包含する方法が、本明細書で提供される。ある実施形態において、例えば、上記瘢痕性脱毛症は、毛孔性扁平苔癬である。他の実施形態において、上記瘢痕性脱毛症は、慢性皮膚エリテマトーデス、毛孔性角化症、毛包性角化症、前頭部線維化脱毛症、エリテマトーデス、萎縮性脱毛症、中央部から遠心性に拡がる脱毛症（ｃｅｎｔｒａｌ  ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  ａｌｏｐｅｃｉａ）、ムチン脱毛症、毛孔性角化症・毛包性角化症（ｋｅｒａｔｏｓｉｓ  ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｉｓ  ｓｐｉｎｕｌｏｓａｄｅｃａｌｖａｎｓ）、脱毛性毛嚢炎、房状毛嚢炎（ｔｕｆｔｅｄ  ｆｏｌｌｉｃｕｌｉｔｉｓ）、解離性蜂巣炎（ｄｉｓｓｅｃｔｉｎｇ  ｃｅｌｌｕｌｉｔｉｓ）、ケロイド性毛包炎（ｆｏｌｌｉｃｕｌｌｉｔｉｓ  ｋｅｌｏｉｄａｌｉｓ）、および／またはびらん性皮膚疾患（ｅｒｏｓｉｖｅ  ｄｅｒｍａｔｏｓｉｓ）である。
【００６９】
ある実施形態において、開示される方法は、例えば、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、ドキシサイクリン、ヒドロキシクロロキン、ミコフェノール酸モフェチル、リファンピン、クリンダマイシン、およびスペルミジンからなる群より選択される化合物を投与する工程をさらに包含する。
【００７０】
本開示は、いくつかの実施形態において、本明細書で開示される化合物を使用して、哺乳動物皮膚の除毛の前に毛嚢前駆細胞を保護するための方法をさらに提供する。例えば、哺乳動物皮膚の除毛の前に毛嚢前駆細胞を保護するための方法であって、上記細胞と、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体を含む薬学的に受容可能な組成物とを接触させる工程を包含する方法が、本明細書で提供される。毛嚢前駆細胞の保護は、毛嚢が毛を再生および再成長させる能力を維持することを可能にする。
【００７１】
ある局面において、本開示はまた、本明細書で開示される化合物を使用して、表皮再生の増強が必要な患者における表皮再生を増強するための方法を提供する。例えば、いくつかの実施形態において、表皮再生の増強が必要な患者（例えば、皮膚創傷もしくは熱傷を患っている患者）における表皮再生を増強するための方法であって、上記患者に、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物を局所投与する工程を包含する方法が、本明細書で開示される。
【００７２】
別の局面において、本開示は、本明細書で開示される化合物を使用して創傷治癒の促進が必要な患者における創傷治癒を促進する方法を提供する。例えば、患者における創傷治癒を促進する方法であって、上記患者に、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸またはその薬学的に受容可能な塩もしくは立体異性体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む薬学的に受容可能な組成物を投与する工程を包含する方法が、本明細書で提供される。ある実施形態において、上記創傷は、熱傷、瘢痕、皮下外傷創傷（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｔｒａｕｍａ  ｗｏｕｎｄ）、もしくは手術創である。
【００７３】
毛嚢前駆細胞を含む組成物を保護および／もしくは保存するための方法であって、ここで上記方法が、上記毛嚢前駆細胞と、Ｎ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸とを接触させる工程を包含する方法もまた、本明細書で提供される。このような保護される組成物は、実験的にもしくは治療剤として（例えば、脱毛、関節炎が理由で、または損傷した組織の修復が理由で）使用される場合に、例えば、このような細胞の完全性を保存するために使用され得る。Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸および毛嚢前駆細胞を含む組成物が、本明細書で企図される。
【００７４】
開示される方法のある実施形態において、開示される組成物は、Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸を含む。開示される方法の他の実施形態において、開示される組成物は、少なくとも約１ｍＭの濃度のＮ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸を含む。例えば、開示される組成物は、少なくとも約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭもしくは約１０ｍＭの濃度を含み得る。ある他の実施形態において、開示される組成物は、少なくとも約１ｍＭ〜約１０ｍＭの濃度のＮ−アセチル−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸を含む。例えば、開示される組成物は、少なくとも約１．５ｍＭ〜約９．５ｍＭ、約２ｍＭ〜約９ｍＭ、約２．５ｍＭ〜約８．５ｍＭ、約３ｍＭ〜約８ｍＭ、約３．５ｍＭ〜約７．５ｍＭ、約４ｍＭ〜約７ｍＭもしくは約４．５ｍＭ〜約６．５ｍＭの濃度を含み得る。
【００７５】
例えば、開示される方法は、例えば、毛の成長を誘発するために必要な量より有意に多い有効量を例えば提供する高濃度の開示される化合物を有する組成物を局所適用する工程を包含し得る。例えば、このような組成物のこのような高濃度は、開示される化合物の約１ｍＭ〜約１０００ｍＭもしくはそれより大、例えば、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１０ｍＭ〜約１００ｍＭ、もしくは約１０ｍＭ〜約５０ｍＭを含み得る。
【００７６】
本明細書に開示される化合物は、そのような処置を必要としている被験体（動物および／またはヒト）へ最適の薬学的効力を提供する投与量で投与され得る。あらゆる特定の適用における使用のために必要とされる用量が患者ごとに、選択される特定の化合物もしくは組成物によってだけではなく投与経路、処置されている状態の性質、患者の年齢および状態、並行する投薬または患者によってその後続けられる特別な食事、ならびに当業者が認識する他の要因によっても変動して、適切な投与量については最終的には主治医の裁量であるということが正しく認識される。上に言及された医学的状態および疾患を処置するために、開示された化合物または組成物は、従来の非毒性の薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントおよびビヒクルを含む投与量単位の調合物において、経口で、局所的に、非経口で、吸入スプレーにより、または直腸に投与され得る。本明細書中で用いられる場合、用語  非経口は、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、胸骨内注射または注入技術を含む。
【００７７】
投与の頻度は、要因（例えば、投与経路、投薬量、および処置されている疾患状態）によって変動し得る。例示的な投与の頻度は、１日に少なくとも１回、１週間に少なくとも１回、および２週間ごとに少なくとも１回である。
【００７８】
企図される調合物または組成物は、開示される化合物を含み、そして代表的には、薬学的に受容可能なキャリアまたは賦形剤をも含んでもよい。
【００７９】
企図される組成物は、当該分野において周知のような、その意図される使用による種々の手段によって投与され得る。本明細書に開示される調合物は、局所投与され得る。これらの調合物は、従来の手段により調製され得、望まれる場合、開示される組成物はあらゆる従来の添加剤（例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、矯正剤、可溶化剤、懸濁補助剤（ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ  ａｉｄ）、乳化剤またはコーティング剤）と混合され得る。
【００８０】
本明細書に開示される調合物において、湿潤剤、乳化剤および滑沢剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、およびステアリン酸マグネシウム）、および着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤および香料、保存剤ならびに抗酸化剤が、その調合される剤において存在し得る。
【００８１】
これらの調合物を調製する方法としては、本明細書に開示される組成物をそのキャリア、および、必要に応じて１つまたはそれより多くの副成分と会合させる工程が挙げられる。包括的に、その調合物は、剤を液体キャリアもしくは細かく分けられた固体キャリア、またはその両方と一様に、および密接に会合させること、そして必要な場合、製品を形作ることにより調製される。
【００８２】
懸濁剤は、本対象の組成物の他に、懸濁化剤（例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド（ａｌｕｍｉｎｕｍ  ｍｅｔａｈｙｄｒｏｘｉｄｅ）、ベントナイト、寒天およびトラガカント、ならびにこれらの混合物）を含み得る。
【００８３】
対象の組成物の経皮投与または局所投与の剤形としては、散剤、スプレー、軟膏剤、パスタ剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、液剤、パッチ、および吸入剤が挙げられる。活性な構成要素は、滅菌状態の下、薬学的に受容可能なキャリアと混合され得、必要とされ得るあらゆる保存剤、バッファー、またはプロペラントと混合され得る。
【００８４】
軟膏剤、パスタ剤、クリーム剤およびゲル剤は、対象の組成物の他に、賦形剤（例えば、動物性脂肪および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはこれらの混合物）を含み得る。
【００８５】
散剤およびスプレーは、対象の組成物の他に、賦形剤（例えば、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物）を含み得る。スプレーは、さらに慣習のプロペラント（例えば、クロロフルオロハイドロカーボン）、および揮発性の不飽和炭化水素（例えば、ブタンおよびプロパン）を含み得る。
【００８６】
本開示の組成物および化合物は、エアゾールにより代替的に投与され得る。これは、その化合物を含む、水性のエアゾール、リポソームの調製物、または固体の粒子を調製することにより達成される。非水性（例えば、フルオロカーボンプロペラント）懸濁剤が使用され得る。音波噴霧器は、その対象の組成物中に含まれる化合物の分解をもたらし得る剪断に剤を曝すことを最小限にするので使用され得る。
【００８７】
通例、水性エアゾールは、対象の組成物の水性の液剤または懸濁剤を従来の薬学的に受容可能なキャリアおよび安定剤とともに調合することにより作製される。そのキャリアおよび安定剤は、特定の対象の組成物の要求によって変動するが、代表的には、非イオン性界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ、またはポリエチレングリコール）、無害なタンパク質（例えば、血清アルブミン）、ソルビタンエステル、オレイン酸、レシチン、アミノ酸（例えば、グリシン）、バッファー、塩、糖、または糖アルコールを含む。エアゾールは、一般的に等張液剤から調製される。
【００８８】
非経口投与に適した本明細書に開示される薬学的組成物は、１つまたはそれより多くの薬学的に受容可能な滅菌等張の水性もしくは非水性の液剤、分散体（ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ）、懸濁剤または乳剤、あるいは滅菌散剤と組み合わせて対象の組成物を含み、使用直前に滅菌の注射可能な液剤または分散体に再構成され得、それは抗酸化剤、バッファー、静菌剤、調合物を意図される受容者の血液と等張にする溶質、または懸濁化剤もしくは増粘剤を含み得る。
【００８９】
本明細書に開示される薬学的組成物において用いられ得る適切な水性キャリアおよび非水性キャリアの例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよびポリエチレングリコールなど）、およびそれらの適切な混合物、植物油（例えば、オリーブ油）および注射可能な有機エステル（例えば、エチルオレエート）およびシクロデキストリンが挙げられる。ふさわしい流動性は、例えば、コーティング材料（例えば、レシチン）の使用、分散体の場合において必要とされる粒径の維持、および界面活性剤の使用により維持され得る。対象の組成物を用いた処置の効力は、当業者に公知の多数のやり方で決定され得る。
【００９０】
組成物が特定の構成要素を有する、含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）、または含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）として記載される本明細書の隅から隅まで、組成物はまた、列挙される構成要素から本質的になるか、または列挙される構成要素からなることが企図される。同様に、プロセスが、特定のプロセスの工程を有する、含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ、ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）、または包含する（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）として記載される場合、そのプロセスはまた、列挙されるプロセシング工程から本質的になるか、または列挙されるプロセシング工程からなる。そうでないと示されない限り、特定の手段（ａｃｔｉｏｎ）を行うための、工程の順序、または順序は、本発明が実施可能である限り重要ではない。さらに、そうでないと言及されない限り、２つまたはそれより多くの工程または手段が同時に行われ得る。
【実施例】
【００９１】
本明細書に開示される化合物は、有機合成分野における当業者に周知の多数の方法において調製され得る。より具体的には、本明細書に開示される化合物は、本明細書中に記載される反応および技術を用いて調製され得る。下に記載される合成方法の記載において、全ての提案される反応条件（溶媒の選択、反応気圧、反応温度、実験期間および試案手順が挙げられる）は、そうでないと示されない限り、その反応に対しての標準の条件であるとして選択され得ることが理解されるべきである。分子の種々の部分において存在する機能性は、提案される試薬および反応と適合性があるべきであることが、有機合成分野における当業者により理解される。その反応条件と適合しない置換基（ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ）は、当業者に明らかであり、従って、方法を交替することが意図される。実施例のための開始材料は、市販されているか、または標準方法により公知の材料から容易に調製される。
【００９２】
（実施例１  Ｎ−アセチル−（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸（Ｎ−アセチルＥ２）の調製；化合物Ａ）
０．５Ｌのガラス反応器に入った（Ｒ）−（−）−３−（４−アミノフェニル）−２−メトキシプロピオン酸（４０ｇ）にエチルアセテート（８０ｇ）および無水酢酸（６２．８ｇ）を添加した。この混合物を９０℃で１時間、攪拌した。冷却の際、減圧蒸留により溶媒を取り除いて、油性の残留物を得た。この残留物に水（１２０ｇ）およびエチルアセテート（１２０ｇ）を添加した。３５℃で１０分間、攪拌した後、これらの層を分離して、水層を捨てた。有機層の溶媒を減圧蒸留により取り除いた。次にアセトン（１２０ｇ）を添加し、結果として生じる混合物を溶解が完了するまで温めた。溶液を０℃まで冷却し、濾過により回収される生成物が沈殿した。その固体をアセトン（２０ｇ）ですすぎ、６５℃で乾燥して２６ｇの表題の化合物を得た。
【００９３】
（実施例２：幹細胞マーカーに対する化合物Ａの効果）
本研究の目的は、幹細胞マーカーＫ１５およびＫ１９の発現を評価することによって、毛嚢における幹細胞マーカーに対する化合物Ａの効果を決定することである。
【００９４】
（材料および方法）
（組織標本）
正常なヒト頭皮の皮膚を、インフォームド・コンセント後に慣用的なフェイスリフト術を受けている６名の女性から得た。全ての実験を、適切な倫理委員会承認を受けて、ヘルシンキ宣言のガイドラインに従って行った。標本起源に関する詳細は、表１に列挙される。
【表１】
2015528479.tif 000015
【００９５】
（毛嚢顕微解剖および器官培養）
通常どおりに染まった成長期ＶＩ  毛嚢（ＨＦ）（灰色／白色のＨＦは研究から排除した）を、正常ヒト頭皮の皮膚から顕微解剖し、Ｐｈｉｌｐｏｔｔモデルに従って器官培養した。化合物Ａもしくはビヒクルを、各培地交換につき１回投与した（すなわち、４８時間／７２時間ごと）。実験手順の全体像を図１に示す。
【００９６】
（Ｋ１５定量的免疫組織化学）
ケラチンＫ１５発現を調べるために、チラミドシグナル増幅法を以前に記載された（Ｋｌｏｅｐｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８）ように使用した。簡潔には、アセトン固定した凍結切片を、ＴＮＴ（Ｔｒｉｓ−ＨＣＬ  ＮａＣｌ  Ｔｗｅｅｎ）緩衝液（０．１ｍｏｌ／ｌ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，  ｐＨ  ７．５；０．１５ｍｏｌ／ｌ  ＮａＣｌおよび０．０５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０を含む）を使用して、５分間にわたって３回洗浄した。次に、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）中３％  Ｈ２Ｏ２で１５分間洗浄することによって西洋ワサビペルオキシダーゼをブロックした。１５分間のアビジンおよびビオチンでのインキュベーション、および３０分間のＴＮＴ中５％  ヤギ通常血清でのインキュベーションと、その間の洗浄工程によってプレインキュベーションを行った。マウス抗ヒトＫ１５（クローンＬＨＫ１５，  Ｃｈｅｍｉｃｏｎ，  Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，  ＵＳＡ）をＴＮＴ中に希釈して４℃で一晩インキュベートし、続いて、ビオチン化ヤギ抗マウス二次抗体（ＴＮＴ中１：２００）とともに４５分間室温でインキュベートした。次に、ストレプトアビジン西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＴＳＡキット；  Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ，  Ｂｏｓｔｏｎ，  ＭＡ，  ＵＳＡ）を、室温で３０分間施した（ＴＮＴ中１：１００）。上記反応を、ＦＩＴＣ−チラミド増幅試薬によって室温で５分間増幅した（上記キットで提供される増幅希釈液中１：５０）。上記免疫染色の強度を、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）によって定量した。ＨＦにおける規定された参照領域の染色強度を測定し、コントロールとＮ  化合物Ａ処置群との間で比較した。ＯＲＳにおける細胞総量と比較して、Ｋ１５陽性細胞のパーセンテージを計算した。
【００９７】
（Ｋ１９定量的免疫組織化学）
以前に記載されたプロトコル（Ｋｌｏｅｐｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８）を使用して、Ｋ１９発現を調べた。簡潔には、アセトン固定した凍結切片を、ヤギ血清（Ｔｒｉｓ緩衝化生理食塩水中１０％，  Ｄａｋｏ）で予備処理した。上記切片を、第１に、Ｋ１９に対する一次抗体（マウス抗ヒト：  Ｋ１９  −  １：１０；  一晩，  ４℃で；  ＰＲＯＧＥＮ，  Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，  Ｇｅｒｍａｎｙ；）とともに、次いで、二次抗体としてＦＩＴＣ標識ヤギ抗マウス（ＴＢＳ中１：２００，  ４５分間，  室温，  Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）免疫グロブリンとともに、インキュベートした。ＤＡＰＩ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ，  Ｍａｎｎｈｅｉｍ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）で対比染色を行った。この免疫染色の強度を、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）によって定量した。ＨＦにおける規定された参照領域の染色強度を測定し、コントロールと化合物Ａ処置群との間で比較した。ＯＲＳにおける細胞総量と比較して、Ｋ１９陽性細胞のパーセンテージを計算した。
【００９８】
対応のないサンプルに関する両側スチューデントｔ検定を使用して統計分析を行った。メタ分析目的で、合計６回のアッセイ（各々、異なる女性個体に由来するＨＦを用いた）を実施した。ケラチン１９に関しては、５回のアッセイのみが分析に利用可能であった。なぜなら、定量的免疫組織形態測定法に使用可能な毛嚢切片の数が、このパラメーターについても実施するには十分でなかったからである。個々の実験によるデータの歪みを回避するために、読み取りパラメーターあたり（５〜６回のうちの）１回の個別の実験の排除を許容する厳密な排除基準を規定した。これら排除基準は、各研究パラメーターごとに異なったので、異なる実験（すなわち、６回のうちの１回、およびケラチン１９分析の場合には５回のうちの１回）を、各アッセイパラメーターごとに排除した。上記排除基準は以下であった：（ｉ）（例えば、患者の薬物療法、病歴などによって影響を受け得る）異常値によるデータの歪みを回避するために、６回の実験の間で多数派によって示された結果傾向からの最も極端な偏差；および（ｉｉ）最小限の質の基準を満たさないこと。
【００９９】
（結果）
化合物Ａの投与は、試験した全ての濃度においてケラチン−１５免疫反応性を強く刺激した（図２および図３）が、Ｋ１５陽性細胞の数は増大しなかった（図４）。化合物Ａの投与はまた、試験した全ての濃度においてケラチン１９免疫反応性を強く刺激し（図５）、コントロールと比較して、Ｋ１９陽性細胞の数に対しても刺激効果を有した（図６）。データから、化合物Ａは、毛嚢前駆体／幹細胞「保護」特性を有することが示される。
【０１００】
（実施例３：毛幹伸長に対する化合物Ａの効果）
本研究の目的は、毛幹伸長に対する化合物Ａの効果を決定することである。
【０１０１】
（材料および方法）
（組織標本）
本実施例で使用される組織標本起源に関する詳細は、上記の実施例２に記載されるとおりである。
【０１０２】
（ＬＤＨ測定）
上清中のＬＤＨ活性は、細胞傷害性の指標として働き得るので、これを製造業者の説明書（Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ；  Ｒｏｃｈｅ，  Ｍａｎｎｈｅｉｍ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）に従って測定した。サンプルの吸光度を、４９０ｎｍでＥＬＩＳＡプレートリーダーを使用して測定した。
【０１０３】
（毛幹伸長）
ＨＦの毛幹の長さの測定を、計数線つき対物レンズを備えたＺｅｉｓｓ倒立型双眼顕微鏡を使用して個々のＨＦに対して行った。
【０１０４】
（ＨＦサイクルステージ決定）
ＨＦサイクルステージ決定を、予め規定された形態基準に従って行い、成長期、および初期、中期もしくは後期の退行期にあるＨＦのパーセンテージを決定した。
【０１０５】
（増殖およびアポトーシスの測定）
増殖マーカーＫｉ−６７を用いてコロニー形成におけるアポトーシス細胞を評価するために、Ｋｉ−６７／末端ｄＵＴＰニック末端標識（ＴＵＮＥＬ）二重染色法を使用した。クリオスタット切片を、パラホルムアルデヒドおよびエタノール−酢酸（２：１）中で固定し、末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼの存在下でジゴキシゲニン−デオキシ−ＵＴＰ（ＡｐｏｐＴａｇフルオレセインインサイチュアポトーシス検出キット；  Ｉｎｔｅｒｇｅｎ，  Ｐｕｒｃｈａｓｅ，  ＮＹ）で標識し、その後、マウス抗Ｋｉ−６７抗血清（ＰＢＳ中１：２０、４℃で一晩；  Ｄａｋｏ， Ｇｌｏｓｔｒｕｐ，  Ｄｅｎｍａｒｋ）とともにインキュベートした。ＴＵＮＥＬ陽性細胞を抗ジゴキシゲニンフルオレセインイソチオシアネート結合体化抗体（ＡｐｏｐＴａｇキット）によって可視化したのに対して、Ｋｉ−６７をローダミン標識ヤギ抗マウス抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，  Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ， ＰＡ）によって検出した。陰性コントロールを、末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼおよびＫｉ−６７抗体を省略することによって行った。４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）（Ｒｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ ＧｍｂＨ，  Ｍａｎｎｈｅｉｍ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）で対比染色を行った。定量的免疫組織形態測定法（ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｙ）を行った；Ｋｉ−６７陽性細胞、ＴＵＮＥＬ陽性細胞、もしくはＤＡＰＩ陽性細胞を、上記ＨＦ毛母の予め規定された参照領域の中で計数し、Ｋｉ−６７／ＴＵＮＥＬ陽性細胞のパーセンテージを決定した。対応のないサンプルに関する両側スチューデントｔ検定を使用して統計分析を行った。メタ分析目的で、合計６回のアッセイ（各々、異なる女性個体に由来するＨＦを用いた）を実施した。個々の実験によるデータの歪みを回避するために、読み取りパラメーターあたり（５〜６回のうち）１つの個別の実験を排除する厳密な排除基準を規定した。これら排除基準は、各研究パラメーターごとに異なったので、異なる実験（すなわち、６回のうちの１回）を、各アッセイパラメーターごとに排除した。上記排除基準は以下であった：（ｉ）（例えば、患者の薬物療法、病歴などによって影響を受け得る）異常値によるデータの歪みを回避するために、６回の実験の間で多数派によって示された結果傾向からの最も極端な偏差；および（ｉｉ）最小限の質の基準を満たさない。
【０１０６】
（結果）
（ＬＤＨ活性）
上清中のＬＤＨ活性（細胞死および細胞溶解のパラメーター）の測定から、６日目の０．１ｍＭ  用量でのみ、ＬＤＨ活性の僅かな増大が示された（図７）。このことは、アッセイ条件下での化合物Ａ関連ＨＦ毒性が（あるにしても）非常に低いことを示唆する。
【０１０７】
（毛幹伸長）
化合物Ａの投与は、高用量（１ｍＭ）において毛幹伸長を僅かに、しかし有意に阻害した（図８）。より低い濃度は、伸長に対して影響を有しなかった。
【０１０８】
（毛周期効果）
一般に、化合物Ａは、高用量（１ｍＭ）で認められた毛幹伸長の減少と一致して、全ての濃度で退行期を誘発した（図９）。退行期の誘発に対する強い傾向がまた、個々の５回の実験の分析から明らかであった（図１０）。
【０１０９】
上記データは、化合物Ａの高用量（例えば、１ｍＭ以上）が後頭部のヒト女性頭皮毛幹において毛幹伸長を阻害することを示す。さらに、化合物Ａの全ての試験した濃度は、退行期誘発効果を有し、この効果は、高用量で認められた毛幹伸長の減少の根底にあり得る。
【０１１０】
（参考文献）
本明細書中で言及される全ての刊行物および特許（例えば、下に列挙されるそれらの項目が挙げられる）は、あたかも個々の刊行物または特許のそれぞれが具体的に、かつ個々に参考として援用されるかのごとく、本明細書によりその全体が参考として援用される。矛盾がある場合、本明細書中におけるあらゆる定義を含む本願が支配する。
【０１１１】
（均等物）
本対象の発明の特定の実施形態が論じられているが、上記の明細書は実例となるものであって限定するものではない。本発明の多くのバリエーションは、本明細書の検討の際に当業者に明らかとなる。本発明の全範囲は、均等物の全範囲とともに特許請求の範囲への参照、およびそのようなバリエーションとともに本明細書への参照により決定されるべきである。
【０１１２】
そうでないと示されない限り、本明細書および特許請求の範囲において使用される成分の量および反応条件などを表現する全ての数は、全ての例において用語「約」により修飾されるものとして理解されるべきである。従って、逆に示されない限り、本明細書および添付の特許請求の範囲において明記される数のパラメーターは、本発明により得られることが求められる、望ましい特性により変動し得る近似値である。
【０１１３】
文言「含む、包含する（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ／ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および文言「有する／含む（ｈａｖｉｎｇ／ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は、本発明に関して本明細書で使用される場合、述べられた特徴、整数、工程もしくは構成要素の存在を特定するために使用されるが、１以上の他の特徴、整数、工程、構成要素もしくはこれらの群の存在もしくは付加を排除しない。
【０１１４】
明瞭さのために、別個に実施形態の状況で記載される本発明のある特徴はまた、１つの実施形態で組み合わせて提供され得ることが認識される。逆に、明瞭さのために、１つの実施形態に関して記載される本発明の種々の特徴はまた、別個にもしくは任意の適切な部分組み合わせで提供され得る。
【図１】
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【図２】
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【図４】
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【図５】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図３】
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【図６】
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【国際調査報告】
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