(57)【要約】フリーラジカルをクエンチするのに有用な組成物および方法であって、該組成物は、酸化的ストレスおよび炎症のカスケードを開始するフリーラジカルをクエンチすることによって、免疫調節特性を増強するのに有効である、ジヒドロケルセチン、ビタミンＣおよびアラビノガラクタン、特にカラマツアラビノガラクタンを含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジヒドロケルセチン、
ビタミンＣ、および
アラビノガラクタン
を含む、栄養補助食品組成物。
【請求項２】
前記アラビノガラクタンが、カラマツアラビノガラクタンとして存在する、請求項１に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項３】
前記カラマツアラビノガラクタンが、約９．１ｋＤａから約３７ｋＤａの分子量を有する、請求項２に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項４】
前記組成物が、カプセル剤、錠剤、液剤、ミクロソーム、坐剤または皮膚パッチとして投与されるように製剤化される、請求項２に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項５】
薬学的に許容可能な担体をさらに含む、請求項３に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項６】
前記組成物が、酸化的ストレスおよび炎症のカスケードを開始するフリーラジカルをクエンチすることによって前記カラマツアラビノガラクタンの免疫調節特性を増強するのに有効である、請求項２に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項７】
前記ジヒドロケルセチンおよびカラマツアラビノガラクタンが、シベリアカラマツ（Ｓｉｂｅｒｉａｎ  Ｌａｒｃｈ）およびダフリアカラマツ（Ｄａｈｕｒｉａｎ  Ｌａｒｃｈ）の製材用丸太および樹皮から抽出される、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項８】
前記ジヒドロケルセチンが約４ｍｇから約４５０ｍｇの範囲の量で存在し、前記ビタミンＣが７ｍｇから約７００ｍｇの範囲の量で存在し、前記カラマツアラビノガラクタンが約３８ｍｇから約３０００ｍｇの範囲の量で存在する、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項９】
前記ジヒドロケルセチンが約１５ｍｇから約１５０ｍｇの範囲の量で存在し、前記ビタミンＣが２０ｍｇから約２００ｍｇの範囲の量で存在し、前記カラマツアラビノガラクタンが約１２ｍｇから約１５００ｍｇの範囲の量で存在する、請求項８に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１０】
前記ジヒドロケルセチンが約５０ｍｇの量で存在し、前記ビタミンＣが約７０ｍｇの量で存在し、前記カラマツアラビノガラクタンが約５０ｍｇの量で存在する、請求項９に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１１】
前記フリーラジカルをクエンチすることが血液細胞の柔軟性を増加させる、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１２】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、コラーゲンの健康を維持し、前記コラーゲンのヒトの身体生産を刺激する、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１３】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、毛細血管強度を支持し、毛細血管透過性を調節する、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１４】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、反応性窒素種を除去するのに有効である、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１５】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、紫外線により生成されたフリーラジカル損傷に対して目を保護するのに有効である、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１６】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、好中球内の十分な抗酸化保護を提供するのに有効である、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１７】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、食作用の間に産生されたＲＯＳに対して十分な抗酸化保護を提供するのに有効である、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１８】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、精液ＤＮＡに対する酸化的損傷を防ぐことによって精液に対して十分な抗酸化保護を提供するのに有効である、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項１９】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、細胞膜または脂肪酸脂質の過酸化前に水相中のＲＯＳを排除することによってＬＤＬ酸化に対して保護するのに有効である、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項２０】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、ビタミンＥをその活性状態に戻して再生するのに有効である、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項２１】
前記ビタミンＣが、ジヒドロアスコルビン酸の形態で存在し、血液細胞および腸細胞の膜に、より容易に浸透し、その後、前記ジヒドロアスコルビン酸は、アスコルビン酸に戻るように細胞内で還元する、すなわちビタミンＣの還元型になる、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項２２】
前記フリーラジカルをクエンチすることが、細胞質ゾル内でビタミンＣ局在化を有意に支援し、血漿中の細胞内蓄積を提供するのに有効である、請求項６に記載の栄養補助食品組成物。
【請求項２３】
ジヒドロケルセチン、ビタミンＣおよびカラマツアラビノガラクタンとして存在するアラビノガラクタンを含む組成物を、これを必要とする哺乳動物に投与することによって、酸化的ストレスおよび炎症のカスケードを開始するフリーラジカルをクエンチする工程を含む、カラマツアラビノガラクタンの免疫調節特性を増強する方法。
【請求項２４】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、血液細胞の柔軟性を増加させる、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
アスコルビン酸−アスコルビン酸オキシダーゼ反応混合物が、アスコルビン酸ラジカルの初期の強度および前記アスコルビン酸ラジカルの寿命を増加させる、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、健康なコラーゲンを維持し、前記コラーゲンの産生を刺激する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、毛細血管強度を支持し、毛細血管透過性を調節する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、ラジカル酸素種および反応性窒素種の両方を排除する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
反応性酸素および反応性窒素種（ＲＯＳ−ＲＮＳ）が、ヒドロキシル、ペルオキシル、スーパーオキシド、ペルオキシ亜硝酸およびニトロキシドラジカル、一重項酸素および次亜塩素酸塩からなる群から選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、眼に対する紫外線により生成されたフリーラジカル損傷に対して十分な抗酸化保護を提供する、請求項２３に記載の方法。
【請求項３１】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、好中球に対する十分な抗酸化保護を提供する、請求項２３に記載の方法。
【請求項３２】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、食作用の間に産生されたＲＯＳに対して十分な抗酸化保護を提供する、請求項２３に記載の方法。
【請求項３３】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、精液ＤＮＡに対する酸化的損傷を防ぐことによって精液に対して十分な抗酸化保護を提供する、請求項２３に記載の方法。
【請求項３４】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、細胞膜または脂肪酸脂質の過酸化前に水相中のＲＯＳを排除することによってＬＤＬ酸化に対して保護する、請求項２３に記載の方法。
【請求項３５】
前記フリーラジカルをクエンチする工程がさらに、ビタミンＥをその活性状態に戻して再生する、請求項２３に記載の方法。
【請求項３６】
前記ビタミンＣが、ジヒドロアスコルビン酸の形態で存在し、前記ジヒドロアスコルビン酸は、血液細胞および腸細胞の膜に、より容易に浸透し、その後、前記ジヒドロアスコルビン酸は、細胞内でアスコルビン酸に還元する、請求項２３に記載の方法。
【請求項３７】
前記フリーラジカルをクエンチする工程が、細胞質ゾル内でビタミンＣ局在化を有意に支援し、血漿中の細胞内蓄積を提供する、請求項２３に記載の方法。
【請求項３８】
ジヒドロケルセチン、ビタミンＣおよびカラマツアラビノガラクタンとして存在するアラビノガラクタンを含む組成物を、これを必要とする哺乳動物に投与することによって免疫系を調節する方法。
【請求項３９】
炎症およびアレルギー性反応が抑制される、請求項３８に記載の免疫系を調節する方法。
【請求項４０】
免疫機能が増強する、請求項３８に記載の免疫系を調節する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明および開示は、酸化的ストレスによる炎症性サイトカインの上方制御の阻害およびその結果により健康効果を生じる、哺乳動物、特にヒトにおけるフリーラジカルをクエンチする化合物および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
特に循環機能および悪性腫瘍のリスクに関して、酸化的ストレスとヒトの健康との関係は現在十分に認められている科学である（非特許文献１）。全ての好気性生物は酸素を必要とする。ヒトは食物なしで数週間、および水なしで数日間生存できるが、酸素なしでは数分間も生存できない。しかしながら、ヒトに生命を与える同じ分子はまた、老化および死の最終的にヒトの変性疾患の原因となる老化および老化プロセス自体の変性疾患の源でもある。ヒトは生存し続けるのに酸素を必要とするが、ヒトの好気性酸素の利用は、器官、細胞およびさらにヒトの身体の細胞器官、細胞ミトコンドリアならびに核のＤＮＡおよびＲＮＡおよびリボソームに対して毒性がある危険なフリーラジカルを生成する。
【０００３】
酸化的ストレス
多くの公開されている研究は、変性疾患および促進老化の発生におけるフリーラジカルに関与している（非特許文献２、非特許文献３）。若者は、正常な生理学的プロセスの間に生成されたフリーラジカルを減少および中和させる抗酸化酵素スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）、カタラーゼ、およびグルタチオンペルオキシダーゼを自然に生成する。ＳＯＤおよび他の重要な抗酸化酵素のレベルは年齢と共に減少し、年齢に関連した疾患に苦しむ原因となる。酸素の毒性は、１８７８年に、実験動物を純酸素に露出した場合に最初に発見され、これらの有害な作用は１８９９年にさらに確立された。常圧の大気圧を超えた純酸素の高圧室に入れた場合、実験動物はわずか数分以内に死んだ。対照的に、純酸素の圧力が数日間にわたってゆっくり増加する場合、動物は何とか生存した。なぜなら、それらの身体は、酸素毒性に対して防御する正常なレベルより高く誘導できる抗酸化酵素を生成する時間があったからである。正常より高い酸素濃度に露出された動物の肺は、酸素過剰として知られた状態である、非常に多くの酸素によって引き起こされた大きな組織損傷を現す。したがって、正常より高い濃度において、酸素は毒性要素であり、常圧において、ヒトはかなり明確に定義された種に特異的な寿命まで生存できる（非特許文献４）。
【０００４】
ヒトにおいて酸素の第１の毒性の副作用は１９世紀および２０世紀初めに明らかになり、それは深海ダイビングの間の空気の高圧呼吸の最初の症例であり、酸素中毒症および窒素酔いが、ダイバーの死、麻痺または生涯の衰弱を引き起こした。英国の第２次世界大戦の間、１日に数時間、純酸素を呼吸していたパイロットは、気腫、汚れた肺および非常に促進した加齢の作用を発症した。一部の場合、パイロットは彼らの年齢より３倍より多く年をとった男性のように見え、そのように行動した。酸素毒性の最も悲惨なエピソードの１つは、１９４０年代後半において、新生児が酸素が多い保育器に入れられたときに発生した。新生児の数人は盲目になった。なぜなら彼らの眼組織は、正常より高い酸素濃度の毒性作用に対して防御する食物抗酸化剤カロチノイドをまだ蓄積していなかったためである（非特許文献５）。
【０００５】
老化の様々なフリーラジカル理論および老化の酸素フリーラジカル理論は全て、老化および老化の変性疾患が主に好気性生物の酸素利用から引き起こされることを主張している。地球上の生命の進化において、植物は二酸化炭素を使用することによって光合成により太陽のエネルギーを利用するように発展し、それらは生産物により毒性代謝として酸素を放出する。しかしながら、非常に高度な運動性を有する動物の最終的な進化は、海を渡り、陸を歩き回るのに非常に多くのエネルギー源を必要としたので、それらは多い酸素雰囲気下の動物相によって生成された酸素を直接呼吸するように発展した。それらの細胞はシトクロムオキシダーゼを利用する４段階の還元プロセスで酸素を水に還元できるミトコンドリアを発展させた。酸素分子は、特にそれ自体で化学的に反応しないが、その還元の間に強力な化学反応中間体を生成する。酸素の部分的に還元された形態は４段階で最終的に変換され、酸素還元から放出される水およびエネルギーを生成するための４つの電子付加が普遍的な貯蔵分子ＡＴＰに入れられる。ほぼ８０％の酸素はシトクロムＣオキシダーゼを使用してミトコンドリア内で水に還元され、１％のみの電子（スーパーオキシド）が、スーパーオキシドラジカルの最初の形成から最後のシトクロムＣオキシダーゼの間に輸送段階Ｉにわたって漏出する。酸素は一端に入り、水は他端から出ていき、形成される少しの検出可能なフリーラジカル中間体により完全に還元される。不幸にも、好気性生物における２０％の酸素還元が、シトクロムオキシダーゼが利用されていない酸素分子への単一の電子付加により生じる。これは一般にパウリの排他原理の量子法則に従って銅および鉄含有酵素の存在下で生じ、酸素原子に対する単一の電子付加が行われなければならない。なぜなら、酸素分子の酸素原子の各々における両方の不対電子は、同一の平行スピンを有し、任意の時点での１つより多い平行電子付加が、量子メカニズムにより妨げられるからである。
【０００６】
酸素分子への単一電子付加は１００％の化学量論収率でスーパーオキシドラジカルを形成する。スーパーオキシドは生物系において形成される第１のフリーラジカルである。酸素分子への第２の電子付加は過酸化水素を生成し、酸素分子への第３の電子付加はヒドロキシルラジカルを生成し、第４の電子付加は酸素を水に還元する。
【０００７】
炎症カスケード
酸化的ストレスの場合と同様に、炎症と様々な疾患、特に老化との関連は十分に確立されているが、これらの２つの破壊的経路の間の相互接続は比較的最近実証されているだけである。１９８０年代に始まったＨＩＶ流行に関連して、Ｎ−アセチルシステインの利点、食事のシステインの少ない毒性源、直接前駆体およびグルタチオンペリオキシダーゼ合成における律速因子が発見されたことが最初に公開された。研究者は、ＨＩＶ感染の個体がそれらの循環Ｔ細胞中で細胞内ＧＳＨレベルを減少させることを実証した。ＧＳＨは、ＲＯＳの産生に対する最初の主要な低分子細胞内防御であるので、研究者は、ＧＳＨの観察された減少が、炎症サイトカインの上昇したレベルに対する連続曝露により誘導される慢性酸化的ストレスに起因するという仮説を立てた（非特許文献６）。より最近、糖尿病が、ストレス−シグナル伝達経路の変化および最終的な末端器官損傷、すなわちランゲルハンス島におけるベータ細胞を導く、酸化的ストレスと呼ばれる状態である、反応性酸素種の産生と抗酸化防御との間の顕著な不均衡に関連することが示されている（Ｈｅｌｍｕｔ  Ｓｅｉｓｓ、１９９０）。酸化的ストレスおよび代謝炎症は、組織壊死因子α、単球走化性タンパク質−１およびインターロイキン−６を含む、炎症性サイトカインの発現を上方制御し、また、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）、ホスホキナーゼＣアイソフォーム、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼおよびカッパＢキナーゼの阻害剤などのストレス感受性キナーゼを活性化する（非特許文献７）。
【０００８】
ジヒドロケルセチン
ジヒドロケルセチンはビオフラボノイドである。フラボノイドは広範囲の生化学的および薬理学的特性を示し、その最も完全に特徴付けられている効果の１つは、潜在的因子のスクリーニングのためのマーカーとして化学的予防指標により測定される、化学的予防活性である。タキシフォリンとしても知られている、ジヒドロケルセチンは高い解毒能力を示すが、細胞内で低い細胞毒性を示し、高い化学的予防を表す。解毒酵素、細胞周期調節タンパク質、成長因子およびＤＮＡ修復タンパク質をコードする遺伝子を含む、いくつかの遺伝子の発現を調節することが示されている。最近の遺伝子マイクロアレイ研究の結果は、第ＩＩ相解毒酵素、ＮＱＯ１およびＧＳＴＭ１が、上方制御するが、第Ｉ相解毒酵素、ＣＹＰ２Ｅ１はタキシフォリンの存在下で下方制御されることを示している。非特許文献８を参照のこと。ヒト肺胎児線維芽細胞（ＴＩＧ−１）および臍帯静脈内皮（ＨＵＶＥ）細胞に対する細胞毒性の測定が調べられ、ジヒドロケルセチンは、ＴＩＧ−１において＞３００マイクロモルおよびＨＵＶＥ細胞において＞２００マイクロモルの５０％致死濃度を有し、１０個の試験したフラボノイドのうち最低の細胞毒性であることが示されている（非特許文献９）。
【０００９】
ジヒドロケルセチンは、強力な抗酸化物質であり、ラジカル酸素種および反応性窒素種の副作用を顕著に減少させる食品内の１つの物質である（非特許文献１０、非特許文献１１、非特許文献１２）。それは、ケルセチン、オリゴプロアントシアニジン（ＯＰＣ）におよびカテキン形成に関与しているフラボノイド生合成経路における本質的な分子中間体であることが発見され、抗酸化物質としてのその優位性は再三にわたり実証されている（非特許文献１３、非特許文献１４）。
【００１０】
ジヒドロケルセチンはフリーラジカル損傷から細胞膜を保護し、毛細血管の活動を改善し、身体を通る血液微小循環の回復を支持する。酸化的ストレスは、例えば培養した腎細胞において示されるように細胞レベルで減少する（非特許文献１５）。
【００１１】
血液細胞を含むヒト細胞内へのジヒドロケルセチンの透過性に起因して、ジヒドロケルセチンは、種々の反応性フリーラジカル種からの細胞レベルでの確実な保護を示している。
【００１２】
ジヒドロケルセチンはケルセチンに近い程度で急速または定量的に小さな活性化合物まで身体の酵素によって破壊されないので、ジヒドロケルセチンの血漿レベルは通常のケルセチンよりヒトの身体において高いままである。さらに、ジヒドロケルセチンは、細菌変異原性試験においてケルセチンより４００倍低い変異原性であり、ケルセチンはＤＨＱについて４ｎｍから１６２６ｎｍｏｌの最小の変異原性用量を有する（非特許文献１６）。
【００１３】
ジヒドロケルセチンは、活性化したヒト好中球によってルミノール依存性化学発光（ＣＬｌｕｍ）の生成を阻害し（非特許文献１７）、炎症の間のそれらの付着性を阻害することが示されている（非特許文献１８）。ジヒドロケルセチンはシリカにより誘発された損傷から食細胞を保護することが報告されている（非特許文献１９）。ジヒドロケルセチンは肥満細胞によるヒスタミン放出の阻害剤として活性があることが示されている（非特許文献２０）。
【００１４】
生体模倣系（ミセル）におけるカテキンおよびタキシフォリンの両方の分配係数が求められた。なぜなら、これらの特性もまた、この種の化合物の抗酸化作用に起因し得るからである。ｌｏｇＰ値が異なって帯電されたミセルを用いて化合物の静電相互作用に応じて求められた（最高値が両性イオン性およびカチオン性ミセルについて得られた）。化合物の酸化促進作用が、銅によって触媒される、フェントン反応によって誘導された８−ヒドロキシ−２’−デオキシグアノシンの酸化により評価された。得られたデータは、研究下のフラボノイドがこの特定の系において酸化促進活性を示さなかったことを表した（非特許文献２１）。心臓血管機能もまた、フラボノイドによって、特にジヒドロケルセチンによって支持されている。それは、脂肪酸二層における脂質の酸化に関与する酵素である、リポキシゲナーゼを阻害することが示されている（非特許文献２２）。ビタミンＣと組み合わせて、ジヒドロケルセチンは、赤血球変形能を増加させ、それらの凝集を減少させる（非特許文献２３）。脂質過酸化反応に対するミクロソームの改善された耐性もまた、ジヒドロケルセチンについて実証されている（非特許文献２４）。
【００１５】
ジヒドロケルセチンは、酸素ラジカル吸収能（ＯＲＡＣ）のその比較のＵＳＤＡランキングにより示され、天然生成物が、生細胞内に侵入し、酸化的損傷から保護できる抗酸化物質を含有しているかどうかを試験するために使用されているペルオキシルラジカルに対する細胞に基づいた抗酸化保護（ＣＡＰ−ｅ）アッセイなどの他のさらなる研究によって支持されているようにビタミンＡ、ＣおよびＥより非常に強力な抗酸化物質である。このように、いずれかの保護効果がＣＡＰ−ｅアッセイにおいて見られる場合、生成物によって生物学的に有意な抗酸化保護を示す。
【００１６】
過酸化物ラジカルは脂肪酸および他の脂質の酸化的損傷に関連し、過酸化物およびヒドロキシルラジカルなどのラジカルが、脂質内のフリーラジカル生成の伝播段階に起因すると考えられているより非常に多くの損傷を引き起こし得る理由を示している。関連する化学反応によれば、主な抗酸化能アッセイは本質的に２つのカテゴリーに分けられる：（１）水素原子移動（ＨＡＴ）反応に基づいたアッセイおよび（２）一電子移動（ＥＴ）反応に基づいたアッセイ。
【００１７】
ＨＡＴベースのアッセイのほとんどは、抗酸化物質および基質がアゾ化合物の分解を介して熱的に生成されたペルオキシルラジカルを競合する、競合反応スキームを適用している。ＯＲＡＣおよびＣＡＰ−ｅはまた、誘発された低密度のリポフェクタミン酸化および他の酸素ラジカル吸収の阻害のためのアッセイとして適用され得る。ＯＲＡＣｈｙｄｒｏおよびＣＡＰ−ｅは、熱的に生成されたペルオキシルラジカルおよびヒドロキシルラジカルを競合するジヒドロケルセチンにより生成された水素原子移動（ＨＡＴ）の能力を試験する。後者に関して、ＨＯＲＡＣアッセイ試験を使用することが必要される。抗酸化物質の還元力を測定する電子移動に基づいたアッセイと異なり、ＨＡＴベースのアッセイは水素原子供与能を測定する。水素原子移動はラジカル連鎖反応における重要なステップである。したがって、ＨＡＴに基づいたアッセイは、ラジカル連鎖を破壊する抗酸化能力により関連している。
【００１８】
ＨＡＴベースのアッセイの中で、ＯＲＡＣおよびＣＡＰ−ｅは抗酸化能を定量するためにＡＵＣ（曲線下面積）技術を利用した。ＡＵＣアプローチの利点は、それが異なる誘導期を示す抗酸化物質および誘導期を有さないこれらの試料の両方を等しく十分に適用することである。このアプローチは遅延時間法および初速度法を統一しており、しばしば複数の成分を含有し、複雑な反応速度論を有する食品試料に特に有用である。
【００１９】
したがって、ＯＲＡＣおよびＣＡＰ−ｅアッセイは、抗酸化能を定量するための選択方法として研究者ならびに食品および補助食品産業に広範に適用されている。実際に、抗酸化物質データベースは全フェノールアッセイと組み合わせＯＲＡＣアッセイを適用して生成されている。本発明者らのジヒドロケルセチンのＯＲＡＣｈｙｄｒｏ値は、４１２．３ｍｇのカプセル当たり３，８９０マイクロモルのＴｒｏｌｏｘ当量または１グラム当たり２８，０００マイクロモルのＴｒｏｌｏｘ当量と測定されている。本発明者らのジヒドロケルセチンのＣＡＰ−ｅ値は１グラム当たり９．９ＣＡＰ−ｅ単位と測定されている。
【００２０】
シベリアカラマツおよびダフリアカラマツ種、カラマツ種：Ｌ．ダフリカ（ｄａｈｕｒｉｃａ）Ｌ．、Ｌ．グメリニー（ｇｍｅｌｉｎｉｉ）、Ｌ．シビリカレデブ（ｓｉｂｉｒｉｃａ  ｌｅｄｅｂ．）もまた、シベリアと口語的に知られており、モンゴルカラマツが、ジヒドロケルセチンの商業的に適した市場量の優れた源である。
【００２１】
ビタミンＣ
ビタミンＣ（アスコルビン酸）の生物学的機能は、主に種々の生化学反応のために還元当量を提供するその能力に基づく。その還元力のために、ビタミンＣは最も生理的に関連する反応性酸素種を還元できる。このように、ビタミンＣは主に、還元鉄または銅金属酵素を必要とする反応のための補因子として、ならびに内部および外部の両方の細胞経路によって水相内で作用する保護用の抗酸化物質として機能する。
【００２２】
ビタミンＣは８個のヒト酵素のための電子供与体であることが知られている。これらの酵素のうちの３個はコラーゲン水酸化に関与し、２個はカルニチン生合成に利用され、３個はホルモンおよびアミノ酸生合成に利用される。このようにビタミンＣは鉄吸収、コラーゲン形成、骨成長およびアミノ酸代謝において役割を果たす。ビタミンＣは神経系のいくつかのホルモン成分の合成および調節に関与し、健康な歯、歯肉、軟骨、筋肉、血管および健康な免疫系を維持するのに役立つ。
【００２３】
次亜塩素酸塩は、ウイルスおよび細菌などの異種タンパク質を殺傷するためにそれを利用する免疫キラー細胞由来の過酸化水素から生成されるが、次亜塩素酸塩はまた、正常な身体タンパク質を損傷させる。抗酸化保護を提供するために、ビタミンＣについての成人のための推奨食事許容量（ＲＤＡ）はメスについて７５ｍｇ／日およびオスについて９０ｍｇ／日に設定されている。この摂取は尿中排泄をほとんど有さずにほぼ最大の好中球アスコルビン酸塩濃度を維持するはずである。
【００２４】
喫煙者は高い酸化的ストレスおよびビタミンＣの代謝回転を被っているので、彼らの推奨される摂取は約３５ｍｇ／日増加する。ビタミンＣを含む製剤はこれらの推奨に一致またはこれらの推奨を上回るはずであり、理想的には、ヒト臨床試験において実証されているようにビタミンＣについての共力剤および再利用剤としてジヒドロケルセチンを含むべきである。両方の栄養補助食品は、高いおよび低い親和性の輸送体により媒介される。恒常性制御に起因して、アスコルビン酸塩の生物学的半減期は８から４０日で広範に変化し、アスコルビン酸塩の身体プールに反比例する。３００ｍｇ未満の全身体プールはヒトにおける壊血病に関連しているのに対して、最大の身体プールは約２から４ｇに限定されている。
【００２５】
ロシアでアスコベルチン（Ａｓｃｏｖｅｒｔｉｎ）として知られているジヒドロケルセチンおよびビタミンＣの組み合わせは、凝集の減少および赤血球変形能の増加ならびに血管脳障害を有する患者における赤血球膜および血漿中の脂質過酸化反応の指標の減少を含む細胞レオロジー指標を改良することが示されている（非特許文献２５）。また、紫外線に起因する損傷からラット網膜細胞を保護することが示されている（非特許文献２６）。
【００２６】
アラビノガラクタン
エキナセア・プルプレア（Ｅｃｈｉｎａｃｅａ  ｐｕｒｐｕｒｅａ）、バプティシア・ティンクトリア（Ｂａｐｔｉｓｉａ  ｔｉｎｃｔｏｒｉａ）、ツヤ・オクシデンタリス（Ｔｈｕｊａ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ）、アンジェリカ・アクチロバ（Ａｎｇｅｌｉｃａ  ａｃｕｔｉｌｏｂａ）およびクルクマ・ロンガ（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ）などの十分に確立された免疫促進特性を有する多くのハーブは十分な量のアルビノガラクタンも含有する。多糖はしばしば、エキナセア（Ｅｃｈｉｎａｃｅａ）およびアストラガルス（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ）を含む、免疫促進のために使用される薬草に見られる。
【００２７】
アラビノガラクタンは、６，０００〜１２０，０００またはそれ以上の範囲の分子量を有する長く、高密度の分岐多糖のクラスであり、様々な種類の食用および非食用木本植物の細胞壁に見られる。アラビノガラクタンは、液体と十分に混合する適度に甘味を有する微細で乾燥したオフホワイトの粉末である。この安全で効果的な植物化学物質は、食物繊維として、さらに大量摂取で食品添加物として使用するためにＦＤＡ  ＧＲＡＳステータス承認を有する（非特許文献２７）（作者の記載なし）。唯一報告されている副作用は、それを摂取している人々の少しの割合における時折の腫脹および鼓腸である。
【００２８】
北米のカラマツ（ラリックス・オキシデンタリス（Ｌａｒｉｘ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ））は、その内皮から遊離アラビノガラクタンの豊富な収穫を提供する。アラビノガラクタンは有力な生物活性および免疫促進特性を有するので、この特有の食物繊維は臨床的に有用な栄養補助食品剤としてよりいっそうの注目を集めている。
【００２９】
カラマツは腸および免疫系に対するこれらの多糖の効果のための医薬として使用される。カラマツアラビノガラクタンは、酵素による分解に耐性があり、結腸細菌が発酵する大腸に侵入する消化されない可溶性食物繊維である。多くの食用および非食用植物は、ニラ種子、ニンジン、ダイコン、ブラックグラムビーンズ、西洋ナシ、トウモロコシ、小麦、赤ワイン、イタリアンライグラス、トマト、ブタクサ、ソルガム、笹およびココナツの果肉およびミルクを含む、アラビノガラクタンの豊富な源である。
【００３０】
アラビノガラクタンはカラマツ（カラマツ属（Ｌａｒｉｘ  ｓｐｐ．））に最も豊富にある。カラマツアラビノガラクタンは、以前にシベリアおよびモンゴルカラマツと口語的に述べられている、北米カラマツ（ラリックス・オキシデンタリス）またはシベリアンおよびダフリアカラマツ（カラマツ種：Ｌ．ダフリカ（ｄａｈｕｒｉｃａ）Ｌ．、Ｌ．グメリニー（ｇｍｅｌｉｎｉｉ）、Ｌ．シビリカレデブ（ｓｉｂｉｒｉｃａ  ｌｅｄｅｂ．））から抽出され得る。西洋カラマツが最も一般的に使用されている。
【００３１】
免疫調節
アラビノガラクタンは健康な免疫系機能を支持する（非特許文献２８）。カラマツアラビノガラクタンは、特に、炎症性免疫細胞産生または活性化を刺激せずに白血球などの有益な免疫細胞のレベルを増加させる（非特許文献２９）。カラマツアラビノガラクタンは骨髄におけるリンパ系細胞の産生を減少させる（非特許文献３０）。それは、インビトロおよびインビボでのマクロファージ増殖を促進し、抗炎症、抗補体および抗アレルギー効果を示すのに非常に効果的である（非特許文献３１）。
【００３２】
いくつかの研究により、カラマツアラビノガラクタンが動物において抗癌活性を有することが示されている。Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙにおいて報告された１９８７年の研究において、研究者は、器官特異的レクチン（タンパク質の種類を表す）が、悪性細胞が動物において転移する場所を決定するのに役立つという彼らの理論を試験した。アラビノガラクタンの注射はマウスの肝臓においてこれらのレクチンを遮断するのに効果的であり、したがってこのマウスの癌の分散を防ぐことが示された（非特許文献３２）。
【００３３】
この研究は、Ｃｏｌｏｇｎｅ、ドイツの研究者によって首尾良く再現され、１９８８年に公開された（非特許文献３３）。１９９１年にスウェーデンにおいて同様の研究により、アラビノガラクタンによる前処置が、実験動物において肝転移の数を減少させ、生存期間を延長させたことが発見された（非特許文献３４）。
【００３４】
１９９９年におけるＡｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｒｅｖｉｅｗにおいて公開されたカラマツアラビノガラクタン研究の概説は、物質が、ナチュラルキラー細胞活性を刺激し得、同様に免疫機能の他の態様を増強し得ることを報告した（非特許文献３５）。
【００３５】
カラマツアラビノガラクタンは、健康のための機能的マーカーである「ナチュラルキラー」（ＮＫ）細胞の細胞毒性を刺激するその能力に部分的に起因して免疫反応を増強する。医学文献リンクにおける報告は、慢性疲労症候群、ウイルス性肝炎、ＨＩＶ／ＡＩＤＳおよび自己免疫疾患、例えば多発性硬化症を含む種々の慢性疾患に対するＮＫ細胞活性化を減少させた。修飾されたかんきつペクチンは、免疫調節効果を提供しないが、カラマツアラビノガラクタンなどの動物における作用の同じ抗転移機構を有する。
【００３６】
十分に制御された研究において、カラマツアラビノガラクタンは、インターフェロンガンマ（ＩＦＮガンマ）、腫瘍壊死因子アルファ、インターロイキン−１ベータ（ＩＬ−１ベータ）およびインターロイキン−６（ＩＬ−６）の増加した放出を誘導した。これは免疫系の２つの強力な細胞：マクロファージおよびＮＫ細胞を活性化することを生じた。ＩＦＮガンマはＮＫ細胞毒性の観察された増強に最も関与したことが発見された（非特許文献３６）。
【００３７】
他の研究により、カラマツアラビノガラクタンは、グラム陰性桿菌、特に大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）およびクレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）によって引き起こされる小児中耳炎の頻度および重症度の減少を支持していることが示されている。
【００３８】
消化
消化不良は非常に一般的であり、多くの集団に影響を与える。繊維が低く、タンパク質および炭水化物が高い、典型的なアメリカの食事は、これらの消化不良を蔓延させている要因である。低いレベルの短鎖脂肪酸および高いレベルのアンモニアがこの種の食事に関連する。繊維、特にカラマツアラビノガラクタンの摂取は、不十分な食事によって引き起こされる有害作用に対処することを支援することが示されている。カラマツアラビノガラクタンは、短鎖脂肪酸を増加させ、結腸アンモニアレベルを減少させ、結腸内の有益な細菌の数を増加させ、免疫反応を改善することが示されている。カラマツアラビノガラクタンのこれらの有益な効果は、多くのこれらの非常に一般的な腸因子の有益な調節である。
【００３９】
腸管は、結腸内で好ましくない雰囲気を生じる多くの物質（抗生物質から原生動物寄生、砂糖の入った加工食品まで）にさらされる。この結果、便秘、下痢、カンジダ症、寄生虫感染および不十分な結腸の健康に起因する他の病態を生じ得る。結腸洗浄は、毎日出くわす多くの微生物に対する消化管曝露を最小化する重要な方法である。さらに、相対的に言って、適切に機能する結腸は、毒性物質、寄生虫および病原性酵母および細菌で満たされているものと比較して実際にかなりきれいである。
【００４０】
カラマツアラビノガラクタンはまた、プレバイオティクスとして作用すると考えられ、それは、特定の健康に有益性を与えるビフィドバクテリアおよびラクトバチルスのようなこのような細菌の結腸増殖を刺激する。カラマツアラビノガラクタンの摂取は、有益な腸微生物叢を増強する、特にラクトバチルスなどの嫌気性生物を増加させるのに顕著な効果を有する（非特許文献３７）。
【００４１】
短鎖脂肪酸、主に酢酸塩、プロピオン酸塩および酪酸塩は、特に分解に耐性があるデンプンおよび食物繊維から食事性炭水化物の発酵によって結腸内で生成され、腸の健康において重要な役割を果たす。これらの酸は結腸上皮細胞培養のための主要なエネルギー源である。アラビノガラクタンの吸収されていない繊維は、末端腸の微生物叢によって容易に発酵され、短鎖脂肪酸、主に酪酸塩、および少ない程度でプロピオン酸塩の増加した産生を生じる。
【００４２】
アンモニアがタンパク質および他の窒素含有物質の細菌発酵によって結腸内で副産物として生成される。研究により、５ｍｍｏｌ／Ｌ程度の低いアンモニアレベルが結腸を覆う上皮細胞に対する有害な効果を有し得ることが示されている。結腸上皮細胞に対するアンモニアの毒性は、細胞破壊を導き得、これらの細胞の代謝回転を増加させ得る。
【００４３】
多くの臨床医は、憩室症、浸漏性腸（ｌｅａｋｙ−ｇｕｔ）、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患、例えばクローン病および潰瘍性大腸炎を含む腸の状態のための補足支持物としてプロバイオティクスを使用する。研究により、カラマツアラビノガラクタン消費が、腸のアンモニア生成を減少させることが示されている（非特許文献３７）。さらに低いアンモニアレベルが腸の結腸細胞に対して損傷作用を有し得るので、カラマツアラビノガラクタンはアンモニアを解毒できない患者に対して対症的であり得る。
【００４４】
カラマツアラビノガラクタンは、単離され、同様の分子量および組成物の繰り返し単位から構成されるラリックス・オキシデンタリス（Ｌａｒｉｘ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ）由来の９ｋダルトンのアラビノガラクタン断片および精製されたアラビノガラクタン、３７ｋＤａの低分子量として特徴付けられる。９ｋＤａのアラビノガラクタンは、１２１℃でオートクレーブすることによって、または水素化ホウ素ナトリウムの存在下でアルカリ性溶液に曝露することによって３７ｋＤａのアラビノガラクタンから高収率で得られ得る。３７ｋＤａのアラビノガラクタンの重量平均分子量は、明度光散乱および沈降平衡によってそれぞれ３７および３８ｋＤａであると求められた。９ｋＤａのアラビノガラクタンの重量平均分子量は、明度光散乱および沈降平衡によってそれぞれ９．１および９．５ｋＤａであると求められた。
【００４５】
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法により、アラビノガラクタン（９ｋＤａ）について８．３ｋＤａの分布のピークにおいて分子量を得た。アラビノガラクタン（３７ｋＤａ）およびアラビノガラクタン（９ｋＤａ）の両方は、狭い分子量分布（Ｍｗ／Ｍｎ約１．２）を示した。アラビノガラクタン（３７ｋＤａ）およびアラビノガラクタン（９ｋＤａ）は、ほぼ同一の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル、単糖組成物および糖結合を示す。アラビノガラクタン（３７ｋＤａ）はアラビノガラクタン（９ｋＤａ）の共有結合したサブユニットから構成されていることが提案されている。アラビノガラクタン（３７ｋＤａ）およびアラビノガラクタン（９ｋＤａ）は、単離された肝細胞糖タンパク質受容体に十分に同等に結合する。結果として、アラビノガラクタン（９ｋＤａ）は薬物送達に関する肝細胞に使用するための候補であり、アラビノガラクタン（３７ｋＤａ）よりこのような使用のために好適であり得る。
【００４６】
粉末形態のカラマツアラビノガラクタンは、典型的に、約３グラム／小さじの濃度で小さじまたは大さじで投与される。成人の投薬量は、分けた用量で１日当たり大さじ１杯から３杯である。
【００４７】
そのマイルドな風味および水またはジュースへの優れた可溶性のために、子供に使用することは容易である。臨床的フィードバックにより、３パーセント未満の個体、通常、女性における腫脹および鼓腸の時折の反応が示唆されている。
【００４８】
Ｄｅｗｉｔｔ，Ｊｉｌｌ  Ｅ．により、Ｔｈｅ  Ｎａｎｃｉ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌに与えられている特許文献１は、源のある量の固体粒子を提供する工程、ガラクタンのための粒子および液体抽出媒体の混合物を形成する工程ならびに抽出したガラクタンを回収する工程を含む、源からガラクタンを抽出する方法を記載している。この改良は、源粒子からガラクタンの抽出を向上させるために混合物を有効量の音響エネルギーに供することである。
【００４９】
Ｍｙｈｉｌｌらにより、Ｌｉｆｅｌｉｎｅ  Ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐ．に与えられている特許文献２は、少なくとも約１５０ミリグラムのバコパモンニエラ抽出物を有する組成物を記載しており、バコパモンニエラ抽出物は４５パーセントのバコシドを有し、少なくとも約２２５ミリグラムのシリバム・マリアナム（オオアザミ）抽出物を有する。オオアザミ抽出物は、約７０パーセントから約８０パーセントのシリマリン、少なくとも約１５０ｍｇのアシュワガンダ（ａｓｈｗａｇａｎｄｈａ）粉末および少なくとも約７５ミリグラムのカメリアシネンシス（緑茶抽出物）を有する。緑茶抽出物は９８パーセントのポリフェノールを有し、ポリフェノールは、４５パーセント（−）−没食子酸エピガロカテキンおよび少なくとも７５ミリグラムのウコン（ターメリック）抽出物からなる。ターメリック抽出物は９５パーセントのクルクミンを有し、その組成物は、スーパーオキシドジスムターゼおよびカタラーゼからなる群から選択される少なくとも１つの抗酸化酵素の酵素活性レベルを増加させ、チオバルビツール酸反応性化学種の血漿濃度レベルを減少させ、それを必要とする哺乳動物被験体に有効量で投与される。
【００５０】
Ｐｒｉｃｅらにより、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｔａｎａ、Ｌａｒｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．およびＣｒｏｗｎ  Ｉｒｏｎ  Ｗｏｒｋｓ  Ｃｏ．に与えられている特許文献３は、アラビノガラクタンを有する滲出物、圧縮された植物繊維生成物および繊維質の木本植物材料由来の抽出液体を回収する方法を記載している。その方法は、繊維質の木本植物材料由来のアラビノガラクタンおよび繊維質の木本植物材料由来の第１の圧縮された植物繊維生成物を有する液体滲出物を回収するために任意に加えられる溶媒の非存在下で繊維質の木本植物材料を圧縮し、抽出液体および含浸された植物繊維を回収するために第１の植物繊維生成物を溶媒に含浸させる。
【００５１】
Ｐｉｎｃｅｍａｉｌらにより、Ｐｒｏｂｉｏｘ，ＳＡに与えられている特許文献４は、酸化的ストレスのためのリスク因子を有することが求められている個体の群における酸化的ストレスマーカーの相対量を決定する方法を記載している。その方法は、酸化的ストレスのためのリスク因子を有することが求められている個体の群の各々の個体から得られた全血またはその成分の試料中の少なくとも１０個の異なる酸化的ストレスマーカーの量を測定する工程、および酸化的ストレスのためのリスク因子を有することが求められている個体の群における酸化的ストレスマーカーの各々の量を、健康な個体の群における測定された酸化的ストレスマーカーの各々の量と比較する工程を提供する。健康な個体に対して酸化的ストレスのためのリスク因子を有することが求められている個体の群における酸化的ストレスマーカーの相対量がここで求められる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００５２】
【特許文献１】米国特許第４，９５０，７５１号
【特許文献２】米国特許第７，２４１，４６１号
【特許文献３】米国特許第５，７５６，０９８号
【特許文献４】米国特許第７，２８８，３７４号
【非特許文献】
【００５３】
【非特許文献１】Ｈａｒｍａｎ，Ｄ，１０６７  Ａｎｎ  Ｎ  Ｙ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  １０−２１（２００６）
【非特許文献２】Ｋｎｉｇｈｔ  ＪＡ．２８（６）Ａｎｎ  Ｃｌｉｎ  Ｌａｂ  Ｓｃｉ．（１９９８）
【非特許文献３】Ｈｕａｎｇ  Ｈ，Ｍａｎｔｏｎ  ＫＧ．９１１００−１７  Ｆｒｏｎｔ  Ｂｉｏｓｃｉ．（２００４）
【非特許文献４】Ｋｎｉｇｈｔ  ＪＡ．２８（６）Ａｎｎ  Ｃｌｉｎ  Ｌａｂ  Ｓｃｉ．（１９９８）
【非特許文献５】Ｒｅｅｄｙ  ＥＡ．２３（２）Ｎｅｏｎａｔａｌ  Ｎｅｗ３１−８（２００４）
【非特許文献６】Ｒｏｅｄｅｒｅｒ，Ｍら、８（２）ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ  Ｈｕｍ  Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ  ２０９−１７（１９９２）
【非特許文献７】Ｌａｍｂ，ＲＥ，Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ，ＢＪ，６２（７）Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｒａｃｔ  １０８７−９５（２００８）
【非特許文献８】Ｌｅｅ，ＳＢら、３０（６）Ｂｉｏｌ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ  １０７４−１０７９（２００７）
【非特許文献９】Ｍａｔｓｕｏ，Ｍら、２８（２）Ｂｉｏｌ  Ｐｈａｒｍ  ＢＵｌｌ  ２５３−９（２００５）
【非特許文献１０】Ｖａｌｋｏ，Ｍら、３９（１）Ｉｎｔ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｈｍ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．４４−８４（２００７）
【非特許文献１１】Ｋｏｓｔｙｕｋ  ＶＡ、Ｐｏｔａｐｏｖｉｃｈ  ＡＩ，３５５（１）Ａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  ４３−８（１９９８）
【非特許文献１２】Ｓｏｌｉｍａｎ  ＫＦ  ＆  Ｍａｚｚｉｏ  ＥＡ、２１８（４）Ｐｒｏｃ  Ｓｏｃ  Ｅｘｐ  ＢＩｏｌ  Ｍｅｄ  ３９０−７（１９９８）
【非特許文献１３】Ｔｉｕｋａｖｋｉｎａ  ＮＡ、Ｒｕｌｅｎｋｏ  ＩＡ、Ｋｏｌｅｓｎｉｋ  ＩＡ、６  Ｖｏｐｒ  Ｐｉｔａｎ．１２−５（１９９７）
【非特許文献１４】Ｔｅｓｅｌｋｉｎ，ＩＯら、４１（３）Ｂｉｏｆｉｚｋａ．６２０−４（１９９６）
【非特許文献１５】Ａｒｅｉａｓ，ＦＭら、６２（１）Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１１１−８（２００１）
【非特許文献１６】Ｊｕｒａｄｏ，Ｊ．ら、６（４）Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ  ２８９−９５（１９９１）
【非特許文献１７】Ｔ  Ｈａｒｔ，Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．１９９０、７３（２−３）：３２３−３５
【非特許文献１８】Ｗａｎｇ．，ＹＨ．ら、６７（１２）Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２２５１−６２（２００４）
【非特許文献１９】Ｋｏｓｔｙｕｋ  ＶＡ，Ｐｏｔａｐｏｖｉｃｈ  ＡＩ．、３５５（１）Ａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  ４３−８（１９９８）
【非特許文献２０】Ｂｒｏｎｎｅｒ  Ｃ．、Ｌａｎｄｒｙ  Ｙ．、１６（３）Ａｇｅｎｔｓ  Ａｃｔｉｏｎｓ  １４７−５１（１９８５）
【非特許文献２１】Ｔｅｉｘｅｉｒｉａ，Ｓ、３９（８）Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ  １０９９−１０８（２００５）
【非特許文献２２】Ｗｈｅｅｌｅｒ，Ｅ．Ｌ．およびＢｅｒｒｙ，Ｄ．Ｌ．、７（１）Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  ３３−６（１９８６）
【非特許文献２３】Ｐｌｏｔｎｉｋｏｖ，ＭＢ．ら、１０４（１２）Ｚｈ  Ｎｅｖｒｏｌ  Ｐｓｉｋｈｉａｔｒ  Ｉｍ  Ｓ  Ｓ  Ｋｏｒｓａｋｏｖａ  ３３−７（２００４）
【非特許文献２４】Ｋｒａｖｃｈｅｎｋｏ  ＬＶ、Ｍｏｒｏｚｏｖ  ＳＶ、Ｔｕｔｅｌ’ｙａｎ  Ｖ．Ａ．、１３６（６）Ｂｕｌｌ  Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ．、５７２−５（２００３）
【非特許文献２５】Ｐｌｏｔｎｉｋｏｖ，ＭＢ、１０４（１２）  Ｚｈ  Ｎｅｖｒｏｌ  Ｐｓｉｋｈｉａｔｒ  Ｉｍ  Ｓ  Ｓ  Ｋｏｒｓａｋｏｖａ  ３３−７（２００４）
【非特許文献２６】Ｌｏｇｖｉｎｏｓ，ＳＶら、１４０（５）Ｂｕｌｌ  Ｅｘｐ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ．５７８−８１（２００５）
【非特許文献２７】５（５）Ａｌｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  Ｒｅｖ  ４６３−６（２０００）
【非特許文献２８】Ｓｃｈｅｐｅｔｋｉｎ，ＩＡ、５（１３−１４）Ｉｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  １７８３−９９．（２００５）
【非特許文献２９】Ｋｅｌｌｙ，ＧＳ、４（２）Ａｌｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  Ｒｅｖ  ９６−１０３（１９９９）
【非特許文献３０】Ｃｕｒｒｉｅｒ，ＮＬ、１０（２−３）Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ：１４５−５３（２００３）
【非特許文献３１】Ｋｉｍ  ＬＳ、Ｗａｔｅｒｓ  ＲＦ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒ  ＰＭ．、７（２）Ａｌｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  Ｒｅｖ  １３８−４９（２００２）
【非特許文献３２】Ｂｅｕｔｈ，Ｊ．、１１３（１）Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ５１−５（１９８７）
【非特許文献３３】Ｂｅｕｔｈ，Ｊ．、６（２）Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  １１５−２０（１９８８）
【非特許文献３４】Ｈａｇｍａｒ  Ｂ．、Ｒｙｄ  Ｗ．、Ｓｋｏｍｅｄａｌ  Ｈ．、１１（６）Ｉｎｖａｓｉｏｎ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ３４８−５５（１９９１）
【非特許文献３５】Ｋｅｌｌｙ、ＧＳ、４（２）Ａｌｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  Ｒｅｖ  ９６−１０３（１９９９）
【非特許文献３６】Ｈａｕｅｒ  Ｊ、Ａｎｄｅｒｅｒ  ＦＡ．、３６（４）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．２３７−４４（１９９３）
【非特許文献３７】Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  ＲＲ、Ｆｅｉｒｔａｇ  Ｊ、Ｓｌａｖｉｎ  ＪＬ、２０（４）Ｊ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  Ｎｕｔｒ  ２７９−８５（２００１）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００５４】
本発明者らは、有力な抗酸化物質、ジヒドロケルセチンと、強力な免疫調節剤、カラマツアルビノガラクタンの組み合わせが、炎症性サイトカインの発現を上方制御する酸化的ストレスおよび代謝炎症のカスケードを遮断するのに効果的であることを発見した。本開示の一実施形態において、栄養補助食品組成物はフリー酸素ラジカルをクエンチするのに効果的であり、
・タキシフォリンとしても知られているジヒドロケルセチン、
・ビタミンＣとしても知られているアスコルビン酸、および
・アラビノガラクタン、最も具体的には低分子量のカラマツアラビノガラクタン
を含む。
【００５５】
その組成物は、カプセル剤、錠剤、液剤、ミクロソーム、座剤または皮膚パッチとして投与されてもよく、薬学的に許容可能な担体を含んでもよい。
【発明を実施するための形態】
【００５６】
以下の詳細な説明において、複数の特定の詳細が本発明のより完全な説明を提供するために記載されている。しかしながら、本発明はこれらの特定の詳細を用いずに実施されてもよいことは当業者に明白である。他の例において、周知の特徴は、本発明を妨げないように詳細に記載されていない。
【００５７】
上記の要旨、以下の本発明の説明および添付の請求項および要約において、参照が本発明の特定の特徴（方法の工程を含む）に対してなされ得る。本開示はこのような特定の特徴の可能な組み合わせを含むことは理解される。例えば、特定の特徴が本発明の特定の態様もしくは実施形態、または特定の請求項に関連して開示されている場合、その特徴はまた、可能な程度まで他の特定の態様および本発明の実施形態と組み合わせておよび／または関連して、ならびに全体的に本発明に使用され得る。
【００５８】
「含む」という用語およびその文法的に等価物は、他の構成要素、成分、工程などが必要に応じて存在することを意味するために本明細書に使用される。例えば、構成要素Ａ、ＢおよびＣを「含んでいる」（または「含む」）物品は、構成要素Ａ、ＢおよびＣからなり得る（すなわちのみからなり得る）または構成要素Ａ、ＢおよびＣのみだけでなく、１つ以上の構成要素もまた含んでもよい。２つ以上の規定された工程を含む方法に対する参照が本明細書になされる場合、規定された工程は、（文脈がその可能性を排除する場合を除いて）任意の順序でまたは同時に実施されてもよく、その方法は、（文脈がその可能性を排除する場合を除いて）規定された工程のいずれかの前、規定された工程の２つの間、または規定された工程の全ての後に実施される１つ以上の他の工程を含んでもよい。
【００５９】
「少なくとも」という用語の後の数または限定されていない物品の「一つ」（「一つを意味する」）は、本明細書において、その数で開始する範囲（規定される可変数に応じて上限を有するまたは上限を有さない範囲であり得る）の開始を示すために使用される。例えば、「少なくとも１つ」は１または１より大きいことを意味する。「多くとも」という用語の後の数は、本明細書において、その数で終了する範囲（規定される可変数に応じてその下限として１もしくは０を有する範囲または下限値を有さない範囲であり得る）の終わりを示すために使用される。例えば、「多くても４」とは４または４未満を意味し、「多くても４０％」とは４０％または４０％未満を意味する。この開示において、範囲が「（第１の数）から（第２の数）」または「（第１の数）〜（第２の数）」として与えられている場合、これは、その下限値が第１の数であり、その上限値が第２の数である範囲を意味する。例えば、０〜１０ｍｍとは、その下限値が０ｍｍであり、その上限値が１０ｍｍである範囲を意味する。
【００６０】
用語「または」は、一連の代替物において代替物を関連づけるために使用される接続詞として本明細書で使用される。「および／または」という用語は、２つの選択肢のいずれかまたは両方が有効であり得るという意味の接続詞として本明細書に使用される。
【００６１】
特定の実施形態において、アラビノガラクタンは低分子量のカラマツアラビノガラクタン、ＬＡＧである。ジヒドロケルセチンは約４ｍｇから約４５０ｍｇの範囲の量で存在してもよく、ビタミンＣは７ｍｇから約７００ｍｇの範囲の量で存在し、アラビノガラクタンは約３８ｍｇから約３０００ｍｇの範囲の量で存在する。
【００６２】
より具体的には、ジヒドロケルセチンは約１５ｍｇから約１５０ｍｇの範囲の量で存在し、ビタミンＣは２０ｍｇから約２００ｍｇの範囲の量で存在し、カラマツアラビノガラクタンは約１２ｍｇから約１５００ｍｇの範囲の量で存在する。その最も特定の実施形態において、ジヒドロケルセチンは約５０ｍｇの量で存在し、ビタミンＣは約７０ｍｇの量で存在し、カラマツアラビノガラクタンは約５００ｍｇの量で存在する。
【００６３】
組成物は、酸化的ストレスおよび炎症のカスケードを開始するフリーラジカルをクエンチすることによってカラマツアラビノガラクタンの免疫調節特性を増強するのに効果的であり、抗炎症および抗アレルギー特性または免疫機能の増強を示し得る。
【００６４】
さらなる実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、微小血管系を誘導する血液細胞の柔軟性を支持する。
【００６５】
別の実施形態のジヒドロケルセチンにおいて、カラマツアラビノガラクタンとのアスコルビン酸−アスコルビン酸オキシダーゼ反応混合物は、アスコルビン酸ラジカルの初期の強度および延長されたアスコルビン酸ラジカルの寿命の両方に良い影響を及ぼす。
【００６６】
さらに別の実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、健康なコラーゲンを維持し、身体のコラーゲンの産生を刺激する。
【００６７】
さらなる実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、毛細血管強度を支持し、毛細血管透過性を調節するのに役立つ。
【００６８】
別の実施形態において、組成物はさらに、ヒドロキシル、ペルオキシル、スーパーオキシド、ペルオキシ亜硝酸およびニトロキシドラジカルなどの反応性酸素および窒素種（ＲＯＳ−ＲＮＳ）ならびに一重項酸素および次亜塩素酸塩を除去する。
【００６９】
別の実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、紫外線により生成されたフリーラジカル損傷に対して眼の十分な保護を提供する。
【００７０】
別の実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、好中球における抗酸化保護を提供する。
【００７１】
別の実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、食作用の間に産生されたＲＯＳに対する抗酸化保護を提供する。
【００７２】
別の実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、精液ＤＮＡに対する酸化的損傷に対して精液中の抗酸化保護を提供する。
【００７３】
別の実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、それらが細胞膜または脂肪酸脂質過酸化反応を開始する前に水相においてＲＯＳを除去することによってＬＤＬ酸化に対して保護する。
【００７４】
別の実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、ビタミンＥをその還元状態に戻して再生する。
【００７５】
別の実施形態において、ビタミンＣはジヒドロアスコルビン酸として存在し、血液細胞および腸細胞の膜に、より容易に浸透し、その後、ジヒドロアスコルビン酸、ビタミンＣの酸化型は、アスコルビン酸に戻るように細胞内で還元する、すなわちビタミンＣの還元型になる。
【００７６】
別の実施形態において、組成物によりフリーラジカルをクエンチすることはさらに、細胞質ゾル内でビタミンＣ局在化、血漿中の細胞内蓄積を増強する。
【００７７】
本発明者らはまた、ジヒドロケルセチン、ビタミンＣおよびアラビノガラクタンを含む組成物を投与することによって、酸化的ストレスおよび炎症のカスケードを開始するフリーラジカルの過剰な生成をクエンチすることによってカラマツアラビノガラクタンの免疫調節特性を増強する方法を発見した。
【００７８】
特定の実施形態において、この方法はフリーラジカルをクエンチする種々のさらなる利点を含む。フリーラジカルをクエンチする工程は、血液細胞の柔軟性を増加させ；健康なコラーゲンを維持し、前記コラーゲンの生成を刺激し；毛細血管強度を支持し、毛細血管透過性を調節し；眼に対する紫外線により生成されたフリーラジカル損傷に対して十分な抗酸化保護を提供し；好中球に対する十分な抗酸化保護を提供し；食作用の間に産生されたＲＯＳに対して十分な抗酸化保護を提供し；精液ＤＮＡに対する酸化的損傷を提供することによって精液のための十分な抗酸化保護を提供し；細胞膜または脂肪酸脂質の過酸化の前に水相内のＲＯＳを除去することによってＬＤＬ酸化に対して保護し；ビタミンＥをその還元型に戻して再生し；細胞質ゾル内でビタミンＣ局在化を有意に支援し、血漿中の細胞内蓄積を提供する。
【００７９】
さらに別の実施形態において、この方法は、組成物をこれを必要とする哺乳動物、最も具体的にはヒトに投与することによって免疫系を調節するために教示されている。組成物は免疫刺激特性を示し、組成物は炎症およびアレルギー反応を抑制するために使用され得る。
【００８０】
また、アスコルビン酸ラジカルの初期の強度および前記アスコルビン酸ラジカルの寿命を増加させるアスコルビン酸−アスコルビン酸オキシダーゼ反応混合物におけるビタミンＣを投与するための方法が教示される。
【００８１】
さらに別の実施形態において、ヒドロキシルラジカル、ペルオキシルラジカル、スーパーオキシドラジカル、ペルオキシ亜硝酸ラジカル、ニトロキシドラジカル、一重項酸素および次亜塩素酸塩を含む、反応性酸素種および反応性窒素種の両方をクエンチする方法が開示される。
【００８２】
さらに別の実施形態において、カラマツアラビノガラクタンの免疫刺激特性の増強が、請求項６に記載の組成物をそれを必要とする哺乳動物に投与することによって免疫系を調節する方法に使用される。この方法は、炎症およびアレルギー反応を抑制するためまたは免疫機能を増強するために使用され得る。
【００８３】
さらに別の実施形態において、ビタミンＣがジヒドロアスコルビン酸の形態で存在し、血液細胞および腸細胞の膜を、より容易に透過し、その後、ジヒドロアスコルビン酸がアスコルビン酸に細胞内で還元される、方法が開示される。
【００８４】
本発明は特に、その好ましい実施形態を参照して示され、記載されているが、形態および詳細の種々の変更が、添付の特許請求の範囲によって規定されている本発明の精神および範囲から逸脱せずに本明細書においてなされてもよいことは当業者により理解される。これらの当業者は、慣用の実験、本明細書に具体的に記載されている本発明の特定の実施形態に対する多くの等価物のみを使用して認識するかまたは確認できる。このような等価物は特許請求の範囲内に含まれる。
【国際調査報告】
2015513395.tif 000002
2015513395.tif 000003
2015513395.tif 000004