(57)【要約】化合物およびそれらの薬学的組成物を提供する。これらの化合物は、免疫調節活性および／または抗炎症活性を有する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式を有する、実質的に純粋な化合物：
2015513555.tif 000015
式中、R1〜R5およびR10〜R14は独立に、H、OH、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基（例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、n-ブチル、イソブチル、s-ブチル、またはt-ブチル基）、C2〜C6アルケニル基、C2〜C6アルキニル基、C1〜C6アルコキシ基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、カルボニル、トリフルオロメチル、エステル、-COCH3、または-COOHであり；
R6およびR7は独立に、H、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、または-COOHであり；
R8およびR9は独立に、H、OH、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、アルコキシ、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、または-COOHであり；
Aは酸素、炭素、硫黄、または窒素原子であり；
アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキルアミノ、およびアルコキシ基は置換されていてもよくまたは置換されていなくてもよく；かつ
以下の少なくとも1つが成り立つことを条件とする：
a）R1が、H、OH、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、C2〜C6アルケニル基、C2〜C6アルキニル基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、カルボニル、トリフルオロメチル、エステル、-COCH3、または-COOHから選択される；
b）R2、R12、およびR13の少なくとも1つが、H、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、C2〜C6アルケニル基、C2〜C6アルキニル基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、カルボニル、トリフルオロメチル、エステル、-COCH3、または-COOHから選択される；
c）Aが、炭素、酸素、硫黄、または窒素原子である；ならびに
d）R6およびR7の少なくとも1つがHではない。
【請求項２】
Aが酸素原子である、請求項1記載の化合物。
【請求項３】
R6〜R9の少なくとも1つがHである、請求項1記載の化合物。
【請求項４】
R1、R2、およびR13の少なくとも1つがOHである、請求項1記載の化合物。
【請求項５】
R1およびR2の両方がOHである、請求項4記載の化合物。
【請求項６】
R2がHである、請求項1記載の化合物。
【請求項７】
R1がOCH3である、請求項1記載の化合物。
【請求項８】
R12およびR13の一方または両方がOHである、請求項1記載の化合物。
【請求項９】
化合物A1またはA2の構造：
2015513555.tif 000016
を有する、請求項1記載の化合物。
【請求項１０】
薬学的に許容される担体とともに製剤化された、請求項1記載の実質的に純粋な化合物を含む薬学的組成物。
【請求項１１】
薬学的に許容される担体とともに製剤化された、請求項9記載の実質的に純粋な化合物を含む薬学的組成物。
【請求項１２】
炎症を軽減するおよび／または免疫応答を調節するように対象を治療するための方法であって、そのような治療を必要とする対象に、請求項1記載の実質的に純粋な化合物の有効量を投与する段階を含む、方法。
【請求項１３】
前記化合物が、化合物A1または化合物A2：
2015513555.tif 000017
から選択される、請求項12記載の方法。
【請求項１４】
炎症を軽減するために用いられる、請求項12記載の方法。
【請求項１５】
TNF-α活性が阻害される、請求項12記載の方法。
【請求項１６】
感染症、環境毒素、自己免疫疾患、心血管疾患、腸炎、アレルギー、移植片拒絶反応、病的な免疫細胞の増殖もしくは活性、および／または呼吸器炎症と関連性のある状態を治療するために用いられる、請求項12記載の方法。
【請求項１７】
関節リウマチ、乾癬、心血管疾患、炎症性腸疾患、敗血症性ショック、および移植片拒絶反応からなる群より選択される状態を治療するために用いられる、請求項12記載の方法。
【請求項１８】
前記対象がヒトである、請求項12記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、2012年3月8日に提出された米国特許仮出願第61／608,347号の恩典を主張し、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
人体は、損傷、癌、微生物侵入などに応答して、その病的状態を抑えるため、および修復過程を開始するために炎症反応を生じさせる。炎症の間には、Tリンパ球、好中球およびマクロファージを含むさまざまな免疫細胞が感染部位に動員されてサイトカインを産生し、免疫応答を促進する。これらのサイトカインのうち、腫瘍壊死因子-α（TNF-α）は、免疫防御を媒介する主要な炎症誘発性タンパク質の1つである。
【０００３】
TNF-αは、急性期応答に加えて、腫瘍発生および関節リウマチ（RA）を含むさまざまな慢性疾患の進行にも関与することが示されている。TNF-α産生の調節不全は、腫瘍成長の開始1、細胞増殖2および浸潤3を含む、腫瘍発生のさまざまなステージに関与することが実証されている。腫瘍細胞増殖に関して、TNF-αは特定の増殖因子をアップレギュレートして悪性腫瘍成長を媒介する。このサイトカインは、血管新生を促進することで、腫瘍移行を援助する血管の成長に有利に働き、それ故に腫瘍転移において鍵となる役割を果たす。例えば、神経膠芽腫の移行およびメタロプロテイナーゼの誘導は、TNF-αの作用に対する応答として著しく強化される4。
【０００４】
TNF-αによって媒介される慢性疾患発症の例には、関節リウマチおよび炎症性腸疾患が含まれる。関節リウマチの患者は、滑膜組織中に低グレードの潜行性炎症を有する。炎症関節でのTNF-αの過剰産生は、関節軟骨および周囲の骨の緩徐な破壊を招くことが知られている。
【０００５】
敗血症の場合などにおける感染症の急性期には、TNF-αの制御不能な産生が、宿主に有害な影響を引き起こすことがよく知られている。敗血症は非循環器系集中治療室において2番目に多い死因であり、高所得国における全死因としても10番目に多い5。敗血症を招く感染症の臨床転帰は、主として、細菌エンドトキシン（例えば、リポ多糖［LPS］）による宿主免疫細胞、特に単球またはマクロファージの過剰刺激と関連性がある6-8。LPSによって過剰刺激されたマクロファージは、インターロイキン-1（IL-1）、IL-6およびTNF-αなどのメディエーターも高レベルに産生する9。これらのメディエーターは敗血症の発生病理に関係すると見なされており、宿主の死亡の寄与因子であることが見いだされている。TNF-α産生の阻害に向けられた新規治療法の開発は、上述したこれらの急性疾患および慢性疾患の治療を助ける一助になると考えられる。
【０００６】
病原体およびエンドトキシンに対する曝露後には、特定のキナーゼおよび転写因子を含む細胞内シグナル伝達経路が活性化されて、TNF-αの発現を誘導する。病原体誘導性TNF-α発現におけるマイトジェン活性化プロテイン（MAP）キナーゼおよび核因子κB（NF-κB）の関与は文献的に十分に立証されている10-12。マイコバクテリア、トリインフルエンザおよびHIV-1 Tatタンパク質は、MAPキナーゼを通じたTNF-αの誘導物質である13-15。
【０００７】
ヒトで知られているMAPキナーゼのサブタイプには、細胞外シグナル調節性キナーゼ1／2（ERK 1／2）、p38 MAPキナーゼおよびc-Jun N末端キナーゼ（JNK）の3つがある16-20。それらはタンパク質リン酸化のカスケードを通じて種々の細胞外刺激を伝達し、NF-κBなどの転写因子の活性化を招く。NF-κBの活性化は、IL-6およびTNF-αを含むサイトカインの産生において極めて重要である13-15。この過程は、I-κBキナーゼ（IKK）シグナロソーム複合体を介したI-κBのSer32およびSer36でのリン酸化、その後のプロテオソーム分解21、ならびにその結果としてのI-κBサブユニットおよびNF-κBサブユニットの解離22によって起こる。活性化されたNF-κBは、続いて細胞質から核に移行し、そこで応答性遺伝子のプロモーター領域内のκB結合部位と結合して、炎症誘発性メディエーターの転写の開始を導く。NF-κBの不適切な活性化は広範囲にわたるヒト疾患と関連性があるため23、それは治療用介入のための有望な標的と考えられている。
【０００８】
現在、関節リウマチ、乾癬、乾癬性関節炎および強直性脊椎炎の治療では、モノクローナルTNF-α抗体が疾患進行の抑制に重要な役割を果たしている。同様に、いくつかの無作為化二重盲検プラセボ比較臨床試験がクローン病の患者でも行われている。これらの臨床試験の結果から、抗TNF-α抗体（インフリキシマブ）がその患者に対して有益な効果を有することが示されている24。
【０００９】
さらに、最近の諸研究では、TNF-α産生を含む炎症性反応が心血管疾患（CVD）の発生病理においても重要な役割を果たす可能性が示されている。TNF-αがアテローム発生およびアテローム硬化プラークを不安定化してそれらの破裂を招き、その結果、CVD患者における心筋梗塞または脳卒中をもたらす可能性が示唆されている。
【００１０】
微生物感染症の際には、マクロファージが活性化されて、免疫応答を媒介するサイトカインを産生させる。侵入する微生物およびその生物学的特性に応じて、宿主免疫系は種々のサイトカインセットを利用して、侵入する病原体と局所的および全身的に闘う。
【００１１】
1つの好例はマイコバクテリア感染症であり、この場合には炎症誘発性サイトカインTNF-αが炎症を波及させ、肉芽腫の形成によって微生物を閉じこめることにより、宿主生存において決定的な役割を果たす25。マイコバクテリア増殖を抑制する上でのTNF-αの防御的役割は、抗TNF-α抗体療法を受けている患者における結核の再燃によって例示されている26。
【００１２】
炎症誘発性サイトカインの作用は防御的であるものの、それらの過剰産生は宿主にとって有害作用を有する可能性がある。事実、炎症誘発性サイトカインの制御不能な誘導は、低血圧、臓器不全、さらには死亡などの合併症を招く恐れがある27、28。実際に、内毒素血症患者におけるTNF-αの過剰産生は重篤で有害な症状を招く。関節リウマチなどの慢性疾患において、TNF-α過剰発現は損傷因子であることが知られており、それは進行性の関節破壊を伴う29。
【００１３】
近年、TNF-αの中和およびその望ましくない炎症誘発作用の抑制を目的とする免疫治療薬が開発された。これらには、可溶性TNF-α受容体（エンブレル）および抗TNF-α抗体（インフリキシマブ）が含まれる。それらの新規性および疾患の進行を停止させる有効性にもかかわらず、それらは非常に費用のかかる治療レジメンである。さらに、アスピリン、イブプロフェンおよびインドメタシンを含む非ステロイド性抗炎症薬（NSAID）は、関節リウマチおよび炎症性腸疾患などの炎症性疾患に伴う急性および慢性疼痛を緩和することがよく知られている。しかし、それらは進行期の関節リウマチおよび関連した自己免疫疾患の治療には有効でない。これらの薬物にはまた、胃腸刺激、大量出血および骨髄抑制を含む重大な有害作用が伴う。したがって、炎症性疾患および免疫疾患を治療するための治療薬が必要である。
【発明の概要】
【００１４】
簡単な概要
本発明は、免疫調節活性および／または抗炎症活性を有する、化合物およびこれらの化合物を含む組成物を提供する。
【００１５】
1つの態様において、本発明は、式（I）によって表される化合物、およびそれらの塩を提供する：
2015513555.tif 000002
式中、R1〜R5およびR10〜R14は独立に、H、OH、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基（例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、n-ブチル、イソブチル、s-ブチルまたはt-ブチル基）、C2〜C6アルケニル基、C2〜C6アルキニル基、C1〜C6アルコキシ基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、カルボニル、トリフルオロメチル、エステル、-COCH3、または-COOHであり；
R6およびR7は独立に、H、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、または-COOHであり；
R8およびR9は独立に、H、OH、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、アルコキシ、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、または-COOHであり；
Aは酸素、炭素、硫黄または窒素原子であり；かつ
アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキルアミノおよびアルコキシ基は置換されていても置換されていなくてもよい。
【００１６】
ある態様において、本発明は、以下の少なくとも1つが成り立つという条件で、実質的に式（I）によって表される化合物を提供する：
a）R1が、H、OH、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、C2〜C6アルケニル基、C2〜C6アルキニル基、C1〜C6アルコキシ基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、カルボニル、トリフルオロメチル、エステル、-COCH3、または-COOHから選択される；
b）R2、R12およびR13の少なくとも1つが、H、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、C2〜C6アルケニル基、C2〜C6アルキニル基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、カルボニル、トリフルオロメチル、エステル、-COCH3、または-COOHから選択される；
c）Aが炭素、酸素、硫黄または窒素原子である；ならびに
d）R6およびR7の少なくとも1つがHではない。
【００１７】
1つの具体的な態様において、本発明は、以下の構造を有する化合物A1を提供する：
2015513555.tif 000003
。
【００１８】
別の具体的な態様において、本発明は、以下の構造を有する化合物A2を提供する：
2015513555.tif 000004
。
【００１９】
有利なことに、1つの態様において、本発明の化合物はLPS誘導性TNF-α産生を阻害することができる。
【００２０】
本発明はまた、薬学的に許容される担体および本発明の化合物を含む薬学的組成物も対象とする。1つの好ましい態様において、本組成物は本発明の化合物を有効成分として含む。
【００２１】
本発明はまた、動物、好ましくはヒトを含む哺乳動物における炎症の阻害のための、本化合物またはそれらを含む組成物の使用方法も対象とする。本発明はまた、動物、好ましくはヒトを含む哺乳動物における免疫活性の調節のための、前記化合物または前記化合物を含む組成物の使用方法も対象とする。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】化合物A1、化合物A2およびシマラセマートA（Cim A）の化学構造を示す。
【図２】図2（A〜C）は、化合物A1、化合物A2およびCim AによるLPS誘導性TNF-α産生の阻害を示している。PBMac細胞を（A）25および50ug／mlのA1、または（B）25および50ug／mlのA2、または（C）25および50ug／mlのCim Aとともに18時間インキュベートし、その後に10ng／mlのLPSを添加してさらに24時間インキュベートする。培養上清を収集し、固相酵素免疫アッセイ（ELISA）によってTNF-α産生に関してアッセイする。示している結果は、細胞を異なるドナーから入手した少なくとも3回の独立した実験の平均値±標準偏差（S.D.）である。* P＜0.05、** P＜0.01、対照との比較。
【図３】化合物A1、化合物A2、およびCim Aが細胞傷害作用をほぼ全く有しないことを示す。PBMac細胞とさまざまな濃度の化合物とのインキュベーションを行っても、対照と比較して細胞の代謝活性に有意差は生じない。PBMacに対する化合物A1、A2、およびCim A（25〜75ug／ml）の細胞傷害作用を、MTT（3-[4,5-ジメチルチアゾール-2-イル]-2,5-ジ-フェニルテトラゾリウム臭化物）アッセイによって、48時間の時間経過にわたって判定している。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
詳細な説明
本発明は、有用な免疫調節活性および／または抗炎症活性を有する化合物を提供する。本発明はさらに、これらの化合物を含む組成物、さらには対象における炎症性または免疫性病態の治療に用いるための方法も提供する。
【００２４】
化合物
1つの局面において、本発明は、強力な抗炎症効果および免疫調節効果を有する化合物を提供する。
【００２５】
1つの態様において、本発明は、式（I）によって表される化合物、およびそれらの塩を提供する：
2015513555.tif 000005
式中、R1〜R5およびR10〜R14は独立に、H、OH、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基（例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、n-ブチル、イソブチル、s-ブチルまたはt-ブチル基）、C2〜C6アルケニル基、C2〜C6アルキニル基、C1〜C6アルコキシ基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、カルボニル、トリフルオロメチル、エステル、-COCH3、または-COOHであり；
R6およびR7は独立に、H、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、または-COOHであり；
R8およびR9は独立に、H、OH、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、アルコキシ、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、または-COOHであり；
Aは酸素、炭素、硫黄または窒素原子であり；かつ
アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキルアミノおよびアルコキシ基は置換されていても置換されていなくてもよい。
【００２６】
ある態様において、本発明は、以下の少なくとも1つが成り立つという条件で、実質的に式（I）によって表される化合物を提供する：
a）R1が、H、OH、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、C2〜C6アルケニル基、C2〜C6アルキニル基、C1〜C6アルコキシ基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、カルボニル、トリフルオロメチル、エステル、-COCH3、または-COOHから選択される；
b）R2、R12およびR13の少なくとも1つが、H、直鎖もしくは分枝鎖C1〜C6アルキル基、C2〜C6アルケニル基、C2〜C6アルキニル基、ハロ、アミノ、アルキルアミノ、アシル、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、カルボニル、トリフルオロメチル、エステル、-COCH3、または-COOHから選択される；
c）Aが炭素、酸素、硫黄または窒素原子である；ならびに
d）R6およびR7の少なくとも1つがHではない。ある態様において、R1〜R14のアルキル基は独立に、C1〜C4アルキル、C1〜C3アルキル、エチル基またはメチル基であり、これらはすべて置換されていてもよい。ある態様において、R1〜R14の少なくとも1つは、H、OH、OCH3またはCH3から選択される。
【００２７】
1つの態様において、Aは酸素原子である。1つの態様において、R6〜R9の1つまたは複数はHである。
【００２８】
1つの態様において、R1、R2およびR13の少なくとも1つはOHである。別の態様において、R1およびR2は両方ともOHである。1つの態様において、R1はOCH3である。1つの態様において、R2はHである。別の態様において、R12およびR13の一方または両方はOHである。
【００２９】
1つの態様において、R1〜R14の1つまたは複数はHではない。別の態様において、R3〜R14の1つまたは複数はHではない。
【００３０】
1つの具体的な態様において、本発明は、以下の構造を有する化合物A1を提供する：
2015513555.tif 000006
。
【００３１】
別の具体的な態様において、本発明は、以下の構造を有する化合物A2を提供する：
2015513555.tif 000007
。
【００３２】
有利なことに、本発明の化合物は抗炎症活性および免疫調節活性を有する。ある態様において、本発明の化合物はTNF-α産生を阻害する。TNF-αの過剰産生には毒性があり、重度の合併症をもたらす恐れがあるため、この壊滅的な炎症性反応を抑えることは、臨床管理において患者にとって有益である可能性がある。
【００３３】
加えて、本発明の化合物は、MAPキナーゼおよび／またはNF-ΚBの活性化を無効化する。TNF-α、MAPキナーゼおよびNF-ΚBは、サイトカインの産生およびある範囲にわたる免疫応答の調節において鍵となる役割を果たすメディエーターである。したがって、本発明の化合物を、TNF-αの下流エフェクターを調節するために用いることもできる。
【００３４】
加えて、本発明の化合物は、5-リポキシゲナーゼ（5-LOX）活性を阻害し、LTB4などのロイコトリエン類の生合成を阻止する。5-LOX阻害により、リポキシン類、ロイコトリエン類、プロスタグランジン類およびトロンボキサン類を含む広範囲にわたる炎症誘発性メディエーターの生合成および活性が阻止されることが報告されている。特に、5-LOXの阻害によってロイコトリエン類の生合成が阻止されることは、文書により十分に立証されている。したがって、本化合物は、ロイコトリエン類によって誘導される病的状態を予防するため、好転させるため、または改善するために有用である。
【００３５】
本発明において例示されるように、化合物A1および化合物A2は、LPS誘導性TNF-α産生を強力に低下させる。
【００３６】
「アルキル」という用語は、本明細書で用いる場合、炭素および水素を含む、線状または分枝状の飽和一価基（monovalent radical）のことを指す。いくつかの態様において、アルキル基は1個〜約8個の炭素原子を含み、これには、線状であってもよい炭素原子1〜4個または1〜3個の炭化水素基が含まれうる。アルキル基の代表的な例には、メチル、エチル、プロピル、2-プロピル、n-ブチル、イソ-ブチル、tert-ブチル、およびペンチルが非限定的に含まれる。
【００３７】
「アルケニル」または「アルケニレン」という用語はそれぞれ、少なくとも1つの二重結合を有する一価または二価のヒドロカルビル基のことを指す。アルケニル基またはアルケニレン基は、環状、分枝非環状、または直鎖非環状であってよい。いくつかの態様において、アルケニル基またはアルケニレン基は二重結合を1つのみ含む。他の態様において、アルケニル基またはアルケニレン基は2つまたはそれ以上の二重結合を含む。さらなる態様において、アルケニル基またはアルケニレン基は、エチニル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、ヘキセニルなどによって例示されるような、主鎖に2〜8個の炭素原子を含む低級アルケニル基またはアルケニレン基でありうる。
【００３８】
「アルキニル」または「アルキニレン」という用語はそれぞれ、少なくとも1つの三重結合を有する一価または二価のヒドロカルビル基のことを指す。いくつかの態様において、アルキニル基またはアルキニレン基は三重結合を1つのみ含む。他の態様において、アルキニル基またはアルキニレン基は2つまたはそれ以上の三重結合を含む。さらなる態様において、アルキニル基またはアルキニレン基は、エチニル、プロピニル、イソプロピニル、ブチニル、イソブチニル、ヘキシニルなどによって例示されるような、主鎖に2〜8個の炭素原子を含む低級アルキニルまたはアルキニレンでありうる。
【００３９】
「炭化水素」または「ヒドロカルビル」という用語は、炭素および水素の元素のみからなる有機化合物または基のことを指す。ヒドロカルビルには、アルキル、アルケニルおよびアルキニル部分が含まれる。
【００４０】
「アシル」という用語は、-C(O)Rという基（radical）を意味し、式中、Rは水素、アルキルまたはシクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルである。1つの態様において、-C(O)Rという基のR基はC1〜C4アルキルである。アシル基の例には、ホルミル、アセチル、およびエチルカルボニルが非限定的に含まれる。
【００４１】
「ハロ」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを意味する。
【００４２】
「ヒドロキシ」という用語は、-OHという基を意味する。
【００４３】
「置換された」という用語は、本明細書で用いる場合、化合物または化学部分の少なくとも1つの水素原子が、第2の化学部分によって置き換えられていることを指す。置換基の非限定的な例には、本明細書に開示された例示的な化合物および態様に認められるもの、ならびにハロゲン；アルキル；アルケニル；アルキニル；ヒドロキシ；アルコキシル；アミノ；ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）；および-COOHがある。本明細書に開示された化学基はすべて、そうでないことが明記されている場合を除き、置換可能である。例えば、本明細書に記載の「置換された」アルキル、アルケニル、またはアルキニル部分は、ヒドロカルビル部分、ハロ、アルコキシ、および-COOHなどの第2の化学部分によって置換された部分である。置換されたアルキル基には、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシルアルキル、およびアミノアルキルが非限定的に含まれる。
【００４４】
「ハロアルキル」という用語は、1つまたは複数の同じまたは異なるハロ原子によって置換されたアルキルを意味する。ハロアルキル基の代表的な例には、-CH2Cl,-CH2Br、-CF3、-CH2CH2Cl、および-CH2CCl3が非限定的に含まれる。
【００４５】
「アミノ」という用語は、本明細書で用いる場合、-NH2のことを指す。
【００４６】
「アルキルアミノ」という用語は、-NHRまたは-NR2という基を意味し、ここでRは独立にアルキル基である。ある態様において、アルキルアミノのアルキル基はC1〜C4アルキルである。アルキルアミノ基の代表的な例には、メチルアミノ、(1-メチルエチル)アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、メチルエチルアミノ、およびジ(1-メチルエチル)アミノが非限定的に含まれる。
【００４７】
「ヒドロキシアルキル」という用語は、1つまたは複数の、好ましくは1つ、2つ、または3つのヒドロキシ基によって置換された、本明細書に定義された通りのアルキル基を意味する。ある態様において、ヒドロキシアルキルは、1つまたは複数のヒドロキシ基によって置換されたC1〜C6アルキル、または好ましくはC1〜C4アルキルである。ヒドロキシアルキルの代表的な例には、ヒドロキシメチル、2-ヒドロキシエチル、2-ヒドロキシプロピル、3-ヒドロキシプロピル、1-(ヒドロキシメチル)-2-メチルプロピル、2-ヒドロキシブチル、3-ヒドロキシブチル、4-ヒドロキシブチル、2,3-ジヒドロキシプロピル、2-ヒドロキシ-1-ヒドロキシメチルエチル、2,3-ジヒドロキシブチル、3,4-ジヒドロキシブチルおよび2-(ヒドロキシメチル)-3-ヒドロキシ-プロピル、好ましくは2-ヒドロキシエチル、2,3-ジヒドロキシプロピル、ならびに1-(ヒドロキシメチル)2-ヒドロキシエチルが非限定的に含まれる。
【００４８】
「アルコキシ」という用語は、本明細書で用いる場合、-ORxという基のことを指し、式中、RxはC1〜C6アルキル基である。1つの態様において、RxはC1〜C4アルキル基である。例示的なアルコキシ基には、メトキシ、エトキシ、およびプロポキシが非限定的に含まれる。
【００４９】
ある態様において、本発明は、式（I）によって表される実質的に純粋な化合物を提供する。「実質的に純粋な」という用語は、本明細書で用いる場合、純度が99％を上回ることを指す。
【００５０】
本発明の化合物は、植物から単離すること、または合成することができる。本明細書で用いる場合、「単離された」とは、それらが天然に存在しうる任意の環境から取り出された化合物のことを指す。例えば、単離された化合物Xとは、化合物Xを単離することができる植物の中に存在している時の化合物Xのことは指さないと考えられる。好ましい態様において、本発明の化合物は、純度が少なくとも75％であり、好ましくは純度が少なくとも90％であり、より好ましくは純度が95％を上回り、最も好ましくは純度が99％を上回る（実質的に純粋である）。
【００５１】
本発明はさらに、式（I）の化合物の立体異性体を包含する。「立体異性体」という用語は、鏡像異性的に／立体異性的に純粋な、および鏡像異性的に／立体異性的に濃縮された、本明細書に開示された化合物のすべてを範囲に含む。
【００５２】
1つの態様において、本発明は、式（I）の化合物の鏡像異性体形態に関する。本発明の化合物の鏡像異性体形態は、互いを実質的に含まない（すなわち、鏡像異性体過剰の状態にある）。言い換えると、「R」型の化合物は「S」型の化合物を実質的に含まず、それ故に「S」型に対して鏡像異性体過剰の状態にある。逆に、「S」型の化合物は「R」型の化合物を実質的に含まず、それ故に「R」型に対して鏡像異性体過剰の状態にある。本発明の1つの態様において、鏡像異性体化合物は、鏡像異性体過剰率が少なくとも約80％である。1つの好ましい態様において、本化合物は鏡像異性体過剰率が少なくとも約90％である。1つのより好ましい態様において、本化合物は鏡像異性体過剰率が少なくとも約95％である。1つのさらにより好ましい態様において、本化合物は鏡像異性体過剰率が少なくとも約97.5％である。1つの最も好ましい態様において、本化合物は鏡像異性体過剰率が少なくとも約99％である。
【００５３】
ある態様において、式（I）の化合物には、国際出願第PCT／IB2009／055970号および国際出願第PCT／IB2011／002582号に開示された化合物のいずれも含まれない。
【００５４】
1つの具体的な態様において、式（I）の化合物に、以下の構造を有するシマラセマートA（Cim A）は含まれない：
2015513555.tif 000008
。
【００５５】
ある態様において、式（I）の化合物に、以下の化合物は含まれない：
1）式（X）の化合物
2015513555.tif 000009
式中、R1はHであり、R2はCH3であり、R3はHである；
式中、R1はCH3であり、R2はHであり、R3はHである；
式中、R1はCH3であり、R2はHであり、R3はOCH3である；
式中、R1はHであり、R2はCH3であり、R3はOCH3である；または
式中、R1はHであり、R2はHであり、R3はHである；
2）式（XI）の化合物
2015513555.tif 000010
式中、R1はOCH3であり、R2はOHであり、R3はOCH3であり、R4はOHである；
式中、R1はHであり、R2はOHであり、R3はOCH3であり、R4はOHである；
式中、R1〜R3は独立にOCH3であり、R4はOHである；
式中、R1〜R2はOCH3であり、R3〜R4はOHである；または
式中、R1〜R2はHであり、R3はOCH3であり、R4はOHである；ならびに
3）式（XII）の化合物
2015513555.tif 000011
式中、R1はHであり、R2はCH3である。
【００５６】
ある態様において、式（I）の化合物に、以下の参考文献に記載された化合物は含まれない：He et al., Cimicifuga species identification by high performance liquid chromatography-photodiode array/mas spectrometric/evaporative light scattering detection for quality control of black cohosh products. Journal of Chromatography A, 1112 (2006) 241-254；日本特許出願公開第JP2005-029571号；Mizushina et al., Petasiphenol: a DNA polymerase λ inhibitor, Biochemistry (2002), 41 14463-14471；Burdette et al., Black Cohosh (Cimicifuga Racemosa L.) protects against menadione-induced DNA damage through scavenging of reactive oxygen species: bioassay-directed isolation and characterization of active principles, J. Agric. Food Chem. (2002), 50, 7022-7028；Fache et al. Total synthesis of cimiracemate B and analogs, Tetrahedron 61 (2005) 5261-5266；Mizushina et al., Some anti-chronic inflammatory compounds are DNA polymerase λ inhibitors, Biochemistry Phamacology 66 (2003), 1935-1944；Takeuchi et al., Structural relationship of curcumin derivatives binding to the BRCT domain of human DNA polymerase λ, Genes to Cells (2006) 11, 223-235；およびPhytochemisiry (2002) Vol. 61 No. 4 pages 409-413.
【００５７】
本発明の化合物は、国際出願第PCT／IB2009／055970号および国際出願第PCT／IB2011／002582号、ならびにHe et al., Cimicifuga species identification by high performance liquid cliromatography-photodiode array/mas spectrometric/evaporative light scattering detection for quality control of black cohosh products, Journal of Chromatography A, 1112 (2006) 241 -254；日本特許出願公開第JP2005-029571号；Mizushina et al., Petasiphenol: a DNA polymerase λ inhibitor, Biochemistry (2002), 41 14463-14471；Burdette et al., Black Cohosh (Cimicifuga Racemosa L.) protects against menadione-induced DNA damage through scavenging of reactive oxygen species: bioassay-directed isolation and characterization of active principles, J. Agric. Food Chem. (2002), 50, 7022-7028；Fache et al. Total synthesis of cimiracemate B and analogs, Tetrahedron 61 (2005) 5261-5266；Mizushina et al., Some anti-chronic inflammatory compounds are DNA polymerase λ inhibitors, Biochemistry Phamacology 66 (2003), 1935-1944；Takeuchi et al., Structural relationship of curcumin derivatives binding to the BRCT domain of human DNA polymerase λ, Genes to Cells (2006) 11, 223-235；およびPhytochemisiry (2002) Vol. 61 No. 4 pages 409-413を含む刊行物に記載された手法を含む、当技術分野において公知の手法を用いて調製することができる。
【００５８】
炎症性疾患および／または免疫障害の治療
本発明は、炎症性疾患および免疫障害の治療のための、本発明の化合物および本発明の化合物を含む組成物の使用を提供する。ある態様において、本発明は、炎症、アレルギー反応、細胞増殖と関連性のある疾患、血管新生および心血管疾患の治療を提供する。1つの具体的な態様において、本発明の化合物は、関節炎を治療するために用いることができる。
【００５９】
1つの態様において、本発明は、炎症性疾患および免疫障害を治療するための方法であって、そのような治療を必要とする対象に対して、式（I）の化合物またはそれらのプロドラッグもしくは代謝産物の有効量を投与する段階を含む方法を提供する。
【００６０】
好ましい態様において、本発明は、炎症および免疫障害の治療のための、化合物A1およびA2の使用に関する。
【００６１】
「治療」という用語、またはそのあらゆる文法的変形物（例えば、治療する、治療すること、および治療など）は、本明細書で用いる場合、疾患もしくは病態の症状を緩和もしくは改善すること、および／または疾患もしくは病態の重症度を低下させることを非限定的に含む。
【００６２】
「有効量」という用語は、本明細書で用いる場合、疾患または病態を治療もしくは改善することができる、または他の形で意図する治療効果を生じさせることができる量のことを指す。
【００６３】
「対象」または「患者」という用語は、本明細書で用いる場合、本発明による組成物を用いた治療を施すことのできる、霊長類などの哺乳動物を含む生物のことを記述している。開示された治療方法によって利益を得ることのできる哺乳動物種には、類人猿、チンパンジー、オランウータン、ヒト、小型サル類；イヌ、ネコなどの飼い慣らされた動物；ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ニワトリなどの家畜；ならびにマウス、ラット、モルモット、およびハムスターなどの他の動物が非限定的に含まれる。
【００６４】
1つの態様において、治療を必要とする対象は、本発明に従って治療しうる炎症性疾患または免疫障害と診断されている。1つの態様において、本発明は、対象が本発明に従って治療しうる炎症性疾患または免疫障害を有するか否かを診断することを含む。
【００６５】
本発明の化合物および薬学的組成物は、免疫および／または炎症の抑制が有益である任意の疾患、状態、または障害における炎症症状の治療または緩和に用いることができる。望まれない免疫反応および炎症を阻害するために本発明の化合物および組成物を用いることのできる炎症性疾患、状態、または障害には、関節リウマチを非限定的に含む関節炎、ならびに、免疫および／または炎症の抑制が有益である関節または筋骨格系の他の疾患、状態、または障害が非限定的に含まれる。
【００６６】
その上、本化合物および組成物は、アテローム硬化；動脈硬化；アテローム硬化型心疾患；再灌流傷害；心停止；心筋梗塞；脳血管疾患（脳卒中）を含む血管炎症性障害；呼吸器窮迫症候群、ならびに免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる他の心肺疾患、状態、または障害に伴う炎症を治療または緩和するためにも有用である。
【００６７】
加えて、本化合物および組成物は、消化性潰瘍；潰瘍性大腸炎、クローン病、過敏性腸症候群、他の炎症性の腸の状態、および免疫炎症抑制が有益と考えられる胃腸管の他の疾患、状態、または障害；肝線維症；肝硬変、ならびに免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる他の肝疾患、状態、または障害；甲状腺炎、ならびに免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる他の腺疾患、状態、または障害；糸球体腎炎、ならびに免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる他の腎臓および泌尿器の疾患、状態、または障害に伴う炎症を治療または緩和するためにも有用である。
【００６８】
加えて、本化合物および組成物は、外傷後炎症；敗血症性ショック；免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる伝染病；免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる、外科手術の炎症性合併症および副作用；免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる、骨髄移植および他の移植の合併症および／または副作用；例えばウイルス保有者による感染症に起因する、遺伝子療法の炎症性および／または免疫性の合併症および副作用に伴う炎症；ならびに後天性免疫不全症候群（AIDS）に伴う炎症を治療または緩和するためにも有用である。
【００６９】
ある態様において、本発明の化合物および薬学的組成物は、喘息および喘息関連疾患、例えば、運動誘発性喘息、鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、間質性肺疾患、慢性蕁麻疹、アトピー性皮膚炎、アレルギー性真菌疾患、鼻ポリープ症および副鼻腔疾患などを治療または改善するために有用である。
【００７０】
加えて、本発明の化合物および薬学的組成物は、片頭痛、呼吸器合胞体ウイルス細気管支炎、全身性肥満細胞症、嚢胞性線維症、膵炎、外陰部腟カンジダ症、癌、アテローム性硬化症、好酸球性膀胱炎、中耳炎、被膜拘縮、および好酸球性胃腸障害を含む、非喘息関連疾患の治療または改善のためにも有用である。
【００７１】
加えて、本発明の化合物および薬学的組成物は、心筋梗塞、急性心筋梗塞、脳卒中、アテローム性硬化症、血栓症、冠動脈形成術、大動脈瘤、血管炎症、内膜肥厚、高脂血症依存性大動脈瘤；嚢胞性線維症肺疾患；睡眠呼吸障害、閉塞性睡眠時無呼吸（OSA）；および慢性閉塞性肺疾患（COPD）などの脳血管および心血管疾患を含む疾患の治療または改善のためにも有用である。
【００７２】
加えて、本発明の化合物および薬学的組成物は、喘息、慢性気管支炎、および関連する閉塞性気道疾患；アレルギーおよびアレルギー反応、例えばアレルギー性鼻炎、接触皮膚炎、アレルギー性結膜炎など；炎症、例えば関節炎または炎症性腸疾患など；疼痛；皮膚障害、例えば乾癬、アトピー性湿疹など；心血管障害、例えば狭心症、心筋虚血、高血圧、血小板凝集など；免疫学的病因または化学的病因（シクロスポリン）によって誘導される虚血によって生じる腎不全；片頭痛または群発頭痛；目の病態、例えばぶどう膜炎；化学的、免疫学的または感染性刺激に起因する肝炎；外傷またはショック状態、例えば熱傷、エンドトキシン血症など；同種移植片拒絶反応；慢性肺疾患、例えば嚢胞性線維症、気管支炎、ならびに他の小気道疾患および大気道疾患；ならびに胆嚢炎などの疾患を含む肺障害を含む疾患の治療または改善のためにも有用である。
【００７３】
さらに、本化合物および組成物は、炎症を伴わない、マクロファージまたはT細胞と関連性のある免疫応答の諸局面を阻害するためにも有用である。本化合物および組成物は、マクロファージ抗原提示活性、マクロファージサイトカイン産生、T細胞サイトカイン産生、T細胞接着活性、T細胞増殖などを非限定的に含む、マクロファージまたはT細胞の活性を阻害することができる。したがって、本ペプチド、ペプチド誘導体および組成物は、体液性および／または細胞性免疫応答を抑制または阻害するために有用である。
【００７４】
本化合物および組成物は、単球およびリンパ球の量を減少させることにより、単球および白血球の増殖性疾患、例えば白血病を治療または緩和するためにも有用である。
【００７５】
本発明の化合物および薬学的組成物はさらに、角膜、骨髄、臓器、水晶体、ペースメーカー、天然および人工の皮膚組織などのような、天然または人工の細胞、組織および臓器の移植症例における移植片拒絶反応の予防および／または治療のためにも有用である。
【００７６】
本化合物および組成物は、耳炎、ならびに免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる他の耳鼻咽喉科疾患、状態、または障害；皮膚炎、ならびに免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる他の皮膚疾患、状態、または障害；歯周病、ならびに免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる他の歯科疾患、状態、または障害に伴う炎症を治療または緩和するためにも有用である。
【００７７】
加えて、化合物および組成物は、後部ぶどう膜炎；中間部ぶどう膜炎；前部ぶどう膜炎；結膜炎；脈絡網膜炎；網膜ぶどう膜炎；視神経炎；網膜炎および嚢胞様黄斑浮腫などの眼内炎症；交感性眼炎；強膜炎；色素性網膜炎；変性眼底疾患の免疫性および炎症性要素；眼外傷の炎症性要素；感染症によって引き起こされる眼の炎症；増殖性硝子体網膜症；急性虚血性視神経症；過度の瘢痕化、例えば緑内障濾過手術後のもの；眼インプラントに対する免疫性および／または炎症性反応、ならびに免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる他の免疫および炎症関連の眼科疾患、状態、または障害に伴う炎症を治療または緩和するためにも有用である。
【００７８】
その上、本化合物および組成物は、免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる、中枢神経系（CNS）および任意の他の臓器の両方における自己免疫性の疾患および状態または障害；パーキンソン病；パーキンソン病の合併症および／または副作用；AIDS関連認知症症候群（HIV関連脳症）；デビック病；シデナム舞踏病；アルツハイマー病、ならびに免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる中枢神経系の他の変性疾患、状態、または障害；脳卒中の炎症性要素；ポリオ後症候群；精神障害の免疫性および炎症性要素；脊髄炎；脳炎；亜急性硬化性全脳炎；脳脊髄炎；急性ニューロパチー；亜急性ニューロパチー；慢性ニューロパチー；ギラン・バレー症候群；シデナム舞踏病；重症筋無力症；偽性脳腫瘍；ダウン症候群；ハンチントン病；筋萎縮性側索硬化症；中枢神経系（CNS）の圧迫またはCNS外傷または脳血管の発作（脳卒中）もしくは感染症またはCNSの低酸素性虚血の炎症性要素；筋萎縮および筋ジストロフィーの炎症性要素；ならびに、免疫および／または炎症の抑制が有益と考えられる、中枢神経系および末梢神経系の免疫および炎症関連の疾患、状態、または障害に伴う炎症を治療または緩和するためにも有用である。
【００７９】
さらに別の態様において、本発明の化合物および組成物は、その免疫特権を失った脳、眼および精巣などの免疫特権部位で、免疫特権を回復させるためにも有用である。
【００８０】
治療用組成物および製剤
本発明はまた、薬学的に許容される担体と組み合わせることのできる形態にある、本発明の化合物を含む治療用組成物または薬学的組成物も提供する。この文脈において、化合物は例えば、単離されているか、または実質的に純粋であってよい。「担体」という用語は、化合物をそれとともに投与する、希釈剤、補助剤、添加剤、または媒体のことを指す。そのような薬学的担体は、鉱油などの石油、ラッカセイ油、ダイズ油およびゴマ油などの植物油、動物油、または合成由来の油のものを含む、水および油などの無菌液体でありうる。また、特に注射用溶液のためには、食塩液ならびに水性デキストロース溶液およびグリセロール溶液を液体担体として用いることもできる。中枢神経系における炎症の治療または緩和のために特に好ましい薬学的担体は、血液／脳関門を透過することのできる担体である。本明細書で用いる場合、担体には、天然に存在するような天然植物材料は含まれない。
【００８１】
本発明はまた、化合物のプロドラッグおよび代謝産物の使用にも関する。「プロドラッグ」という用語は、本明細書で用いる場合、本発明の化合物の代謝前駆体またはその薬学的に許容される形態のことを指す。一般に、プロドラッグは化合物の機能的誘導体を含み、それは対象に投与された時点では不活性であってよいが、インビボでは活性代謝産物の化合物に直ちに変換されうる。適したプロドラッグ誘導体の選択および調製のための従来の手順は、例えば、「Design of Prodrugs」, ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985に記載されている。好ましくは、本発明のプロドラッグは、溶解性、生物学的利用能、および安定性を非限定的に含む本発明の化合物の質を高める。それ故に、本方法に使用される化合物は、所望であれば、プロドラッグ形態で送達することができる。本発明に使用される化合物のプロドラッグは、修飾物が慣行的な操作またはインビボで切断されて親化合物となるように、化合物中に存在する官能基を修飾することによって調製することができる。
【００８２】
「代謝産物」という用語は、対象における本発明の化合物のインビボ代謝を通じて生成される、例えば活性中間体または最終生成物を含む、薬理活性のある生成物のことを指す。代謝産物は、例えば、酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド、エステル化、脱エステル、酵素的切断などを非限定的に含む、対象における投与された化合物の同化および／または異化過程によって生じうる。
【００８３】
代謝産物は、典型的には、本発明の化合物の放射性標識（例えば、14Cまたは3H）同位体を調製し、それをラット、マウス、モルモット、小型サル類などの動物またはヒトに検出可能な用量（例えば、約0.5mg／kgを上回る）で非経口的に投与して、代謝が起こるのに十分な時間（典型的には約30秒〜約30時間）をおいた上で、その変換産物を尿、血液または他の生物試料から単離することによって同定される。これらの産物は、標識されていることから容易に単離される（またあるものは、代謝産物中に存続している結合エピトープと結合しうる抗体の使用によって単離される）。代謝産物の構造は、従来の様式で、例えば、MS、LC／MSまたはNMR分析によって決定されうる。一般に、代謝産物の分析は、薬物代謝試験の当業者に周知の手法に従って行われる。
【００８４】
適した薬学的添加剤には、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、白亜、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセリン、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールなどが含まれる。治療用組成物は、必要に応じて、少量の湿潤剤または乳化剤またはpH緩衝剤を含むこともできる。これらの組成物は、液体、溶液、懸濁液、乳濁液、錠剤、カプセル剤、粉末、持続放出製剤などの形態をとることができる。本組成物は、トリグリセリドなどの伝統的な結合剤および担体を用いて製剤化することができる。適した薬学的担体の例は、E. W. Martinによる「Remington's Pharmaceutical Sciences」に記載されている。そのような組成物は、治療用組成物の治療用有効量を、患者に対する適正な投与のための形態が得られるような適した量の担体とともに含む。製剤は投与様式に適合しているべきである。
【００８５】
1つの態様において、本組成物は、ヒトへの局所注射投与のために適している薬学的組成物として、定型的な手順に従って製剤化される。典型的には、局所注射投与のための組成物は、無菌等張水性緩衝液中の溶液である。必要であれば、組成物が、可溶化剤、および、注射部位の疼痛を和らげるためのリドカインなどの局所麻酔薬を含んでもよい。一般に、これらの成分は、例えば、有効物質の量を表示したアンプルなどの密封容器または薬袋（sachette）などの中にある乾燥凍結粉末もしくは無水濃縮物として、別々に、または単位投薬形態として1つに混ぜ合わされるかのいずれかで供給される。組成物が注射によって投与される場合には、これらの成分を投与の前に混合されうるように、注射用滅菌水または食塩水のアンプルを用意することができる。
【００８６】
本発明の治療用または薬学的組成物は、中性または塩の形態として製剤化することができる。薬学的に許容される塩には、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来するもののような、遊離アミノ基とともに形成されるもの、および、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、2-エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来するもののような、遊離カルボキシル基とともに形成されるものが含まれる。
【００８７】
本発明はまた、対象にいったん投与された場合に化合物がより安定になるようにする、すなわち、いったん投与された場合にそれが修飾されていない化合物と比較してより長期間にわたる有効性を有するようにする、化合物の修飾も提供する。そのような修飾は当業者に周知であり、例えば、マイクロカプセル化などがある。特定の疾患、状態、または障害の治療に有効な、本発明の治療用または薬学的組成物の量は、その疾患、状態、または障害の性質に依存すると考えられ、標準的な臨床的手法によって決定することができる。一般に、投与量は約0.001mg／kg〜約500mg／kgの範囲にわたる。
【００８８】
加えて、最適な投与量の範囲を同定する一助とするために、インビトロアッセイを任意で用いてもよい。製剤中に用いるべき正確な用量は、投与の経路、および疾患、状態、または障害の重篤度にも依存すると考えられ、それは臨床医の判断および各患者の状況に従って決定されるべきである。有効量を、インビトロまたは動物モデルの試験系から導き出された用量反応曲線から外挿することもできる。例えば、ヒトに対して有効なmg／kg用量を、ラット試験から生成されたデータに基づいて得るためには、ラットにおいて有効なmg／kg投与量を6で除算する。
【００８９】
例えば、適した単位投与量は、約0.01〜約500mg、約0.01〜約300mg、約0.01〜約200mg、約0.01〜約100mg、約0.01〜約50mg、約0.01〜約30mg、約0.01〜約20mg、約0.01〜約10mg、約0.01〜約5mg、約0.01〜約3mg、約0.01〜約1mg、または約0.01〜約0.5mgであってよい。そのような単位用量を、1日に複数回、例えば1日に2回または3回投与してもよい。
【００９０】
本発明はまた、本発明の薬学的組成物の成分の1つまたは複数、例えば、化合物、担体などが充填された1つまたは複数の容器を含む、薬学的パックまたはキットも提供する。
【００９１】
また、本発明の化合物を、伝統的な漢方医学診療と整合するように製剤化することもできる。特定の疾患、状態、または障害の治療に有効な、製剤の組成および投与量は、標準的な臨床的手法により、疾患、状態、または障害の性質に依存すると考えられる。
【００９２】
処方量の伝統的な漢方薬は、ヒトまたは動物に投与するために適した任意の薬物形態として製造することができる。適した形態には、例えば、チンキ剤、煎剤、および乾燥エキスが含まれる。これらは経口服用すること、静脈注射を通じて、または粘膜を通じて適用することができる。また、有効成分を、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、パレット（pallet）、トローチ、坐薬、経口液剤、殺菌した胃腸用懸濁注入剤、少量または大量の注入剤、凍結粉末注入剤、殺菌した粉末注入剤などとして製剤化することもできる。上述した方法はすべて、当業者に公知であり、書籍に記載されており、かつ、生薬学の臨床医によって一般的に用いられている。
【００９３】
好ましい態様において、本発明の化合物は、それぞれが所定量の有効成分を含有する、顆粒（例えば、湿性顆粒、乾燥顆粒）；カプセル、カシェ剤または錠剤といった離散的単位として調製される。
【００９４】
担体材料と組み合わせて単回用剤形を生産することのできる有効成分の量は、治療しようとする状態の種類および対象に応じて異なると考えられる。一般に、治療用組成物は有効成分を約5％〜約95％（w／w）含有する。より具体的には、治療用組成物は有効成分を約20％（w／w）〜約80％または約30％〜約70％（w／w）含有する。
【００９５】
チンキ剤は、薬草を、例えばワインまたはリキュールなどのアルコール溶液中に懸濁させることによって調製される。懸濁化期間の後に、その液体（アルコール溶液）を、1回に茶さじ1杯分ずつ、例えば1日2回または3回投与することができる。
【００９６】
煎剤は、薬草調合物の一般的な形態である。これは伝統的には素焼鉢の中で調製されるが、ガラス製、エナメル製またはステンレス鋼製の容器の中で調製することもできる。製剤を水中にある期間にわたって浸漬させ、続いて煮沸して、水の量が例えば半分になるまで煮詰める。
【００９７】
エキスは、薬用植物の必須成分の濃縮調合物である。典型的には、薬草を、適切に選択された溶媒、典型的には水、エタノール／水混合物、メタノール、ブタノール、イソ-ブタノール、アセトン、ヘキサン、石油エーテルまたは他の有機溶媒中に懸濁させることにより、薬草から必須成分を抽出する。抽出工程を、浸軟、パーコレーション、連続パーコレーション（repercolation）、向流抽出、ターボ抽出（turbo-extraction）によって、または二酸化炭素超臨界（温度／圧力）抽出によってさらに助長することもできる。薬草残渣を取り除くための濾過の後に、抽出用溶液をさらに蒸発させ、それによって濃縮して軟エキス（スピッサム抽出物（extractum spissum））を得てもよく、および／または、噴霧乾燥、真空オーブン乾燥、流動層乾燥もしくは凍結乾燥によって最終的には乾燥エキス、シッカム抽出物（extracum siccum）を得てもよい。軟エキスまたは乾燥エキスはさらに、投与用の所望の濃度となるように適した液体中に溶解させてもよく、または丸剤、カプセル剤、注入剤などの形態に加工処理してもよい。
【００９８】
以下は、本発明を実施するための手順および態様を例示している一実施例である。本実施例は限定的であるとみなされるべきではない。別に特記する場合を除き、パーセンテージはすべて重量比であり、溶媒混合物の比率はすべて容積比である。
【実施例】
【００９９】
材料および方法
化学物質
大腸菌（E. coli）由来のエンドトキシン（リポ多糖、LPS）をSigmaから購入し、TNF-α発現の誘導物質として用いた。デキサメタゾン（Sigma）を、TNF-αのLPS性誘導を阻害するための対照薬として用いた。
【０１００】
細胞培養および初代血液マクロファージの単離
香港赤十字社（Hong Kong Red Cross）によって提供された健常ドナー血液のバフィーコートから、本発明者らの以前の報告に記載された通りに、Ficoll-Paque（Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ）密度勾配遠心によって、ヒト末梢血単核球細胞（PBMC）を単離した。手短に述べると、バフィーコートを毎分3000回転（rpm）で15分間遠心して、血液細胞および血漿を分離した。将来の使用に備えて、熱非働化血清を濾過した。
【０１０１】
細胞層をリン酸緩衝食塩水（PBS）で1：1の比に希釈した。希釈した細胞をFicoll-Paqueの上にゆっくりと重ね、2300rpmで20分間遠心して、単核細胞を赤血球から分離させた。単核細胞層を取り出し、上清が清澄になるまでRPMI 1640培地で洗浄した。
【０１０２】
最後に細胞を、5％自己血清を加えたRPMI 1640培地中に再懸濁させて、1時間培養した。非付着性細胞をその後に除去し、残りの付着細胞はそれから、5％二酸化炭素（CO2）中にて37℃でさらに24時間インキュベートした。
【０１０３】
付着した単核球細胞を剥離させて、組織培養プレート上に播き、初代血液単核球細胞を初代血液マクロファージ（PBMac）に分化させるためにさらに7〜14日間インキュベートした。
【０１０４】
酵素結合免疫吸着法（ELISA）
Cim A、化合物A1、または化合物A2の前処理を行うか、または行わずに、LPSで処理したPBMacの培養上清をさまざまな時間間隔で収集し、-70℃で保存した。分泌されたTNF-αのレベルを、このサイトカインに対して特異的なELISAキット（R&D system, Minneapolis, MN）を用いて測定した。
【０１０５】
実施例1
本実施例では、本発明の化合物が優れた抗炎症活性を有することを示す。図1に示す通り、化合物A1、化合物A2、およびシマラセマートA（Cim A）は、LPS濃度10ng／mlで、LPS誘導性TNF-αタンパク質産生をそれぞれ26±15％、67±10％、および50±19％、有意に阻害する（図2A〜C）。具体的には、50μg／mlの濃度で、LPS誘導性TNF-α産生の阻害に関する化合物A2の活性は、Cim Aのそれよりも34％高い。また、図3に示す通り、化合物A1、化合物A2、およびCim Aは、細胞傷害作用をほぼ全く有しなかった。
【０１０６】
本明細書中に引用された刊行物、特許出願および特許を含むすべての参考文献は、それぞれの参考文献が参照により組み入れられることが個別にかつ具体的に示され、かつその全体が本明細書中に記述されている場合と同程度に、参照により本明細書に組み入れられる。
【０１０７】
「1つの（a）」および「1つの（an）」および「その（the）」、ならびに本発明を説明する文脈における類似の指示物は、本明細書において別の指定がない限り、または文脈によって明らかに否定されない限り、単数形および複数形の両方を範囲に含むものとみなされるべきである。
【０１０８】
本明細書における値の範囲に関する記述は、本明細書において別の指定がない限り、それぞれの別個の値がその範囲に収まることを個別に指すための簡潔な方法としての役割を果たすことを単に意図しており、それぞれの別個の値は、それらが本明細書において個別に記述されるのと同程度に本明細書に組み入れられる。別の指定がない限り、本明細書中に提供されたすべての厳密な値は、対応する大まかな値の代表物である（例えば、特定の因子または測定値に関して提供されるすべての例示的な厳密な値は、「約」によって適宜修飾される、対応する大まかな測定値を提供するものともみなすことができる）。
【０１０９】
本明細書中に提供される、いずれかおよびすべての例または例示的な言葉（例えば、「など（such as）」）は、本発明をより良く例示することのみを意図しており、別の指定がない限り、本発明の範囲に限定を課すものではない。本明細書中のいかなる言葉も、明示的に記述されていない限りは、いずれかの要素が本発明の実施のまえに必須であることを示すものとみなされるべきではない。
【０１１０】
1つまたは複数の要素に言及しての、「含む（comprising）」、「有する（having）」、「含む（including）」または「含む（containing）」などの用語を用いた、本発明の任意の態様の本明細書における記述は、本明細書において別の指定がない限り、または文脈によって他の様式で明らかに否定されない限り、その特定の1つまたは複数の要素「からなる」、「から本質的になる」、または「実質的に含む」、本発明の類似の態様に対する支持を提供することを意図している（例えば、特定の要素を含むとして本明細書中に記載された組成物は、別の指定がない限り、または文脈によって明らかに否定されない限り、その要素からなる組成物も記載するものと理解されるべきである）。
【０１１１】
本明細書に記載された実施例および態様が例示のみを目的とすること、ならびに当業者にはそれらに鑑みて種々の修正または変更が示唆されると考えられ、それらも本出願の趣旨および範囲に含まれることは了解されるであろう。
【０１１２】
参考文献
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【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３】
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【国際調査報告】
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