(57)【要約】  本発明は、セラメクチンの新規な重要中間体とその合成方法を提供する。また、ドラメクチンを出発原料とし、水素化、酸化、オキシム化、および脱糖によりセラメクチンを得る新規合成プロセスを提供する。本発明の新規プロセスは、工程数が少なく、操作が容易であり、高収率、低コストであり殆ど汚染をもたらさず、工業的な大量生産により適している。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（ＩＩＩ）で表される化合物。
【化１】
2015512424.tif 000010
【請求項２】
請求項１に記載の式（ＩＩＩ）の化合物を調製する方法であって、
酸化反応により式（ＩＩ）の化合物から式（ＩＩＩ）の化合物を調製することを特徴とする、方法。
【化２】
2015512424.tif 000011
【請求項３】
上記酸化反応は、塩基性条件下、酸化剤としてジメチルスルホキシドを用い、活性化剤存在下で行うことを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
上記活性化剤は、フェノキシホスホロジクロリド、塩化オキサリル、無水トリフルオロ酢酸、無水酢酸、および三酸化硫黄−ピリジン錯体から選択され、
上記塩基は、トリエチルアミンおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンから選択されることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
上記酸化反応に用いる酸化剤は、デス・マーチン試薬であることを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
上記酸化反応に用いる溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン、アセトン、およびテトラヒドロフランから選択され、
上記酸化反応の温度は、−７８℃〜３０℃であることを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
以下の式（ＩＶ）で表される化合物。
【化３】
2015512424.tif 000012
【請求項８】
請求項７に記載の式（ＩＶ）の化合物を調製する方法であって、
酸性条件下、求核試薬により式（ＩＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物に変換することを特徴とする、方法。
【化４】
2015512424.tif 000013
【請求項９】
上記求核試薬は水であり、
上記酸性条件は、酸性シリカゲル、Ｃ１−Ｃ８の一塩基酸、Ｃ２−Ｃ８の二塩基酸、またはＣ４−Ｃ８の三塩基酸によって形成することを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
式（ＩＩＩ）の化合物、式（ＩＶ）の化合物、またはそれらの混合物を、オキシム化および脱糖反応により、セラメクチンに変換する工程を含むことを特徴とする、セラメクチンの調製方法。
【化５】
2015512424.tif 000014
【請求項１１】
上記反応に用いる溶媒は、Ｃ１−Ｃ３アルコールとジオキサンと水とにより形成される均一系、または、Ｃ１−Ｃ３アルコールと水とにより形成される均一系から選択され、
反応温度は、０〜６０℃であることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
セラメクチンの調製における式（ＩＩＩ）の化合物および／または式（ＩＶ）の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔技術分野〕
本発明は、抗寄生虫薬の合成方法に関し、特に、セラメクチンの新規合成方法に関する。
【０００２】
〔背景技術〕
セラメクチンは、（５Ｚ，２５Ｓ）−２５−シクロヘキシル−４’−Ｏ−デ（２，６−ジデオキシ−３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−アラビノ−ヘキソピラノシル）−５−デメトキシ−２５−デ（１−メチルプロピル）−２２，２３−ジヒドロ−５−（ヒドロキシイミノ）エバーメクチン Ａ１ａとの化学名を有する（“ａ”は２５位の置換基が（ｓ）−sec−ブチル基である天然のエバーメクチンを表し、“Ａ”は５位の置換基がメトキシ基であるエバーメクチンを表し、“１”は２２−２３位に二重結合があるエバーメクチンを表している）。セラメクチンは、次の化学式を有する。
【０００３】
【化１】
2015512424.tif 000002
【０００４】
セラメクチンは、新しい遺伝子組換え菌株であるストレプトマイセスエバーミチリス（Streptomyces avermitilis）の発酵によって生産される。セラメクチンは、エバーメクチン類に属する新規化合物である。この新世代の抗寄生虫薬は、アメリカのファイザー社で開発され、化学合成を経由した、ドラメクチンの構造修飾によって生産される。
【０００５】
セラメクチンは、内部寄生虫（線虫）と外部寄生虫（節足昆虫）との両者に対して抗寄生虫活性を示す。他のエバーメクチン類も同様の効果を有するが、セラメクチンは、昆虫の、グルタミン酸によってコントロールされる塩素イオンチャネルを阻害することによって、迅速かつ致死的に、昆虫に非麻痺性の神経筋麻痺を引き起こす。猫または犬の皮膚表面に投与後、上記薬剤は血中に吸収され、薬剤の一部は動物が毛づくろいをする際に経口から消化管および血中に入る。薬物動態学の結果は、セラメクチンが、局所的な外用後、血漿中に持続的に吸収されることを示している。実験データは、セラメクチンが皮膚（特に皮脂腺）に貯留することによって、髪の寄生虫を死滅させるのに十分な薬物濃度になることを示している。薬剤を適用して３０日間経過後に捕集した皮膚片は、依然として蚤の幼生と卵を死滅させ得る。従って、従来の同様の薬剤と比較して、セラメクチンは、有効性が低い、容易に再発する、不便、ペットの抵抗力が低い、という欠点を克服できる。セラメクチンは、ペットやその飼い主を苦しめる蚤や糸状虫やマダニや疥癬虫や耳ダニのような内部寄生虫と外部寄生虫を、迅速に、効果的に、都合よく、完全に殺すことができる。セラメクチンの安全性は高く、経口投与または注射のどちらでも良い効果を得ることができる。
【０００６】
セラメクチンの合成方法は以下の文献で報告されている：米国特許第５９８１５００号、欧州特許第６７７０５４号、国際公開第９４０１５９４４号、および中国特許第９４１０１９１７号。セラメクチンは、ドラメクチンの水素化、脱糖、酸化、およびオキシム化によって調製される。第一工程の水素化では、トルエンを溶媒とし、ウィルキンソン触媒を用いて式（ＩＩ）の化合物が調製される。第二工程の脱糖は、硫酸を用いてイソプロパノール中で行う。第三工程の酸化は、活性二酸化マンガンの存在下、無水エチルエーテル中で行う。第四工程のオキシム化は、ヒドロキシルアミン塩酸塩を用いて無水ピリジン中で行う。最終的に、セラメクチンは、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いた精製により得られる。この方法は、セラメクチンの調製方法の基本特許の方法である。この方法は、反応経路が長く、全収率が低く、工業化における操作性が悪いという欠点がある。
【０００７】
米国特許第６９０６１８４号、欧州特許第１００３７６４号、国際公開第９９００７７２１号、中国特許第９８８０８１０６号などでは、セラメクチンは、ドラメクチンを出発原料として用いた三工程の化学合成によって調製されている。初めに、Ｃ−２２，２３位の二重結合を水素化によって単結合に変換する。第二工程は酸化であり、Ｃ−５位の水酸基のみをケトンに酸化する。第三工程はオキシム化と脱糖であり、Ｃ−５位のケトンをオキシム化する一方、糖分子を脱糖することにより、セラメクチンが得られる。この方法はファイザー社によって開発された基本特許の方法を改良したものである。この方法では、酸化生成物とヒドロキシルアミン塩酸塩との中間体から５−オキシムが得られる反応と、単糖誘導体が生成する加水分解反応とが、単一の同時反応として同時に起こる。これにより、反応操作が極めて簡便になり、処理と分離工程とを減らすことができ、結果としてセラメクチンの全収率および品質を高める。しかしながら、第二工程では、後処理が困難である活性二酸化マンガンを酸化剤として大量に使用するため、工業生産すると重大な環境問題をもたらすだろう。第三工程のオキシム化と脱糖では、イソプロパノール／水系を使用するため、長い反応時間を要し、工業生産の効率を上げるには不適切である。
【０００８】
セラメクチンと（Ｒ）−４−シアノ−３−ヒドロキシ酪酸エチル（Shixiang Lv, Master’s Thesis of Northeast Agricultural University, 2009）との合成方法の研究でもドラメクチンを出発原料として用いており、セラメクチンが三工程で合成されている。第一工程は、触媒的水素化による式（ＩＩ）の化合物の調製を含んでおり、反応条件が最適化され、９５．８％の収率が得られる。第二工程の酸化では、酸化剤Ａの添加と酸化剤Ａの刺激とのそれぞれによって上記中間体ＩＩが調製され、収率は９３．４％である。第三工程のオキシム化と脱糖では、粗製のセラメクチンが得られる。最適な反応条件は、トリエチルアミンおよび４５℃であり、この反応条件は、トリエチルアミン法とリン酸水素二ナトリウム法とを用い、反応濃度を変え、室温で反応を行うことで決定された。この反応条件により、７５．５％の収率が得られる。最後に、溶媒Ａを用いて二度結晶化し、セラメクチン（純度＞９８．５％）が得られる。その全収率は５５％である。この方法は、上述した二つの方法に基づいて開発された、成功した改良である。この方法は、短い反応経路、穏やかな反応条件、全収率５５％という利点を有している。しかし、第二工程の酸化において、酸化剤の後処理によって重金属で汚染された汚染水が大量に生成するため、工業生産が制限される可能性がある。
【０００９】
本発明は、従来技術に基づいた創意に富む成果を生み出し、上述した方法の欠点を克服し、操作性が容易な酸化、反応時間の短縮、生産効率の向上、および汚染を低減するセラメクチンの新規合成スキームを提供する。
【００１０】
〔発明の説明〕
本発明の一つの目的は、セラメクチンの新規な重要中間体（式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物）およびその調製方法を提供することである。本発明の別の目的は、上記中間体に基づくセラメクチンの新規調製方法を提供することである。
【００１１】
本発明の一形態では、セラメクチンの合成に用い得る、次のような新規中間体を提供する。
【００１２】
【化２】
2015512424.tif 000003
【００１３】
本発明の他の形態では、式（ＩＩＩ）の化合物の調製方法を提供する。この方法は、式（ＩＩ）の化合物の酸化により式（ＩＩＩ）の化合物を調製することを含む。
【００１４】
【化３】
2015512424.tif 000004
【００１５】
好ましくは、上記酸化における酸化剤はジメチルスルホキシドであって、酸化は塩基性条件下でジメチルスルホキシドと活性化剤の相乗効果のある状態で行う。ここで、活性化剤は、フェノキシホスホロジクロリド、塩化オキサリル、無水トリフルオロ酢酸、無水酢酸、および三酸化硫黄−ピリジン錯体から好ましくは選択され、塩基は、トリエチルアミンおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンから選択される。
【００１６】
また好ましくは、上記酸化における酸化剤としてデス・マーチン試薬を用いる。
【００１７】
好ましくは、酸化時の溶媒はジクロロメタン、クロロホルム、トルエン、アセトン、テトラヒドロフランである。
【００１８】
好ましくは、反応温度は−７８℃〜３０℃の間である。
【００１９】
米国特許第６９０６１８４号によれば、上述した酸化における式（ＩＩ）の化合物は、ウィルキンソン触媒の作用下での二重結合への付加によってＣ−２２，２３位の二重結合を単結合へと変換することによって得られる。
【００２０】
【化４】
2015512424.tif 000005
【００２１】
本発明の他の形態では、式（ＩＶ）の化合物の調製方法を提供する。この方法は、酸性条件下で、式（ＩＩＩ）の化合物と求核試薬とを、式（ＩＶ）の化合物に変換することを含む。
【００２２】
【化５】
2015512424.tif 000006
【００２３】
好ましくは、この反応で用いられる求核試薬は水である。
【００２４】
この反応は酸性条件下で行われ、酸性条件は、好ましくは、酸性シリカゲル、Ｃ１−Ｃ８の一塩基酸、Ｃ２−Ｃ８の二塩基酸、またはＣ４−Ｃ８の三塩基酸によって形成される。
【００２５】
この反応において、式（ＩＩＩ）の化合物は、好ましくは、酸性条件下で水などの求核試薬による求核付加反応を起こし、付加生成物としてケトン−水化合物、すなわち式（ＩＶ）の化合物を生成する。この化合物は熱力学的に不安定であり、脱水により元のケトンに戻る傾向がある。この付加反応は可逆反応であり、反応の平衡は反応物質に大きく偏り易い。分離工程中、式（ＩＶ）の化合物は脱水によって式（ＩＩＩ）の化合物に戻る傾向にあるため、式（ＩＶ）の化合物を分離することは難しい。また、式（ＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＶ）の化合物と同等の効果を有するため、精製する必要は無い。
【００２６】
本発明の更に別の形態では、セラメクチンの調製方法を提供する。この方法は、オキシム化および脱糖反応により、式（ＩＩＩ）の化合物、式（ＩＶ）の化合物、またはそれらの混合物からセラメクチンを形成する工程を含む。
【００２７】
【化６】
2015512424.tif 000007
【００２８】
好ましくは、この反応は、Ｃ１−Ｃ３アルコールとジオキサンと水とにより形成される均一系、または、Ｃ１−Ｃ３アルコールと水とにより形成される均一系中で行われる。
【００２９】
好ましくは、この反応の温度は０〜６０℃である。
【００３０】
以下に示すように、セラメクチンの好ましい反応スキームは、スキーム１の酸化剤としてジメチルスルホキシドを用い、スキーム２の酸化剤としてデス・マーチン試薬を用いることである。
【００３１】
【化７】
2015512424.tif 000008
【００３２】
上記反応の第一工程では、ドラメクチンを、好ましくはトルエンを溶媒として、溶解する。この反応は、ウィルキンソン触媒である塩化トリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）の作用下で、０〜１０ｋｇの圧力、２０〜６０℃の温度で行われ、１〜４８時間後に終了する。式（ＩＩ）の化合物は、濾過および溶媒の除去によって分離される。
【００３３】
第二工程では、溶媒として、好ましくはジクロロメタンが用いられるが、クロロホルム、トルエン、アセトン、テトラヒドロフラン等の他の有機溶媒を使用することもできる。攪拌しながらジメチルスルホキシドを添加し、攪拌しながら０℃に冷却した後、トリエチルアミンを滴下する。トリエチルアミンの滴下終了後、混合液を−３５℃〜２５℃に冷却する。その後、フェノキシホスホロジクロリドを滴下し、滴下終了後、温度を維持する。この反応は、約０．５〜４時間後に終点に達し、炭酸水素ナトリウム水溶液により反応をクエンチする。得られた反応物を分液して抽出し、有機層を回収した後、濃縮、乾燥することにより、黄色がかった物質として式（ＩＩＩ）の化合物が得られる。式（ＩＩＩ）の化合物は、酸性条件下、求核試薬の存在により、式（ＩＶ）の化合物に変換し得る。しかしながら、式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物との間の相互変換は、第三工程および最終生成物の品質に影響を及ぼさないだろう。
【００３４】
第三工程では、ヒドロキシルアミン塩酸塩を、式（ＩＩＩ）の化合物、式（ＩＶ）の化合物、またはそれらの混合物と、０〜６０℃の水浴中で１〜４８時間反応させると終点に達し、好ましくは、メタノール／ジオキサン／水の混合溶媒の作用下で反応させる。その後、抽出のためにジクロロメタンと水とを反応溶液に加え、有機層を回収し、濃縮、乾燥することにより、粗製のセラメクチンを得る。
【００３５】
本発明は、従来技術と比較して、以下の利点を有している。
【００３６】
本発明は、従来の技術文献に記載されている製法に基づいて開発された新規な製法であり、従来技術の製法の欠点を克服し、セラメクチンの新規な調製方法を提供する。
【００３７】
本発明によれば、セラメクチンは、ドラメクチンを出発原料として三工程の化学合成を経て調製される。第一工程の水素化は、米国特許第６９０６１８４号を参照して、ウィルキンソン触媒の作用下での付加反応によって、Ｃ−２２，２３位の二重結合を単結合に変換することを含んでいる。本発明において、第二工程の酸化では、ジメチルスルホキシドやデス・マーチン試薬等を酸化剤として使用し、Ｃ−５位のヒドロキシル基をケトンに酸化する一方、Ｃ−４’位の糖をカルボニルに酸化する。これにより、セラメクチン調製のための新規な中間体が得られる。これらの酸化剤は、後処理が容易であり、低汚染である。第三工程におけるオキシム化および脱糖では、Ｃ−５位のケトンをオキシム化する一方、Ｃ−４’位の糖分子を脱糖することにより、セラメクチンが得られる。本発明では、溶媒の種類を替えることによって反応時間が著しく短縮される。本発明の製法は、従来技術文献に記載されている水素化、酸化、オキシム化、および脱糖の各工程よりも、次の点で明らかに優れている。本製法の全収率が著しく向上し、本製法の反応時間が短縮され、生産効率が著しく向上すると共に、汚染が低減される。
【００３８】
〔実施例〕
以下の実施例は、本発明の具体的な実施形態を例証するために、本発明の全ての態様について十分に説明することを目的としているが、本発明は以下の実施例に限定されない。
【００３９】
［実施例１］
水素化反応
圧力テストされた清浄な５Ｌの水素化タンクにトルエンを３Ｌ秤量し、フィードバルブを開け、ドラメクチン３００ｇと塩化トリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）９ｇとを攪拌しながら上記タンクに添加した。フィード口を閉じ、タンク中の空気を窒素で三度パージした。水素バルブを開け、タンク中の圧力を３ｋｇに維持した。タンク内の温度を５０℃になるまで上昇させ、この温度を１〜６時間維持した。水素化終了後、タンク内の水素圧力を解除した。窒素で三度パージした後、空にした。その後、底のバルブを開きタンク中の物質をフラスコへ移した。溶媒を濾過によって取り除き、式（ＩＩ）の化合物を分離した（２８８ｇ，ＨＰＬＣ：９５．２％）。
【００４０】
［実施例２］
酸化反応
上述した式（ＩＩ）の化合物を１００ｇ秤量し、ジクロロメタン１Ｌに溶解した。デス・マーチン試薬１８８ｇをよく攪拌しながら添加した。終点に達するまで、反応を室温で２時間行った。生成物を、珪藻土を補助に用いて濾過し、不溶性の固体残渣を除去した。炭酸水素ナトリウム／チオ硫酸ナトリウム（１：１）の水溶液５００ｍＬを、濾液に加え洗浄した。水層をジクロロメタン２００ｍＬで再度一回洗浄した。有機層を混合し、水で一回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで３０分間乾燥した。固形物を濾過によって取り除き、濾液を濃縮し、淡黄色の式（ＩＩＩ）の化合物を得た（９６ｇ，ＨＰＬＣ：８９％）。
【００４１】
式（ＩＩＩ）の化合物の１Ｈ ＮＭＲおよび１３Ｃ ＮＭＲデータを以下に示す。
【００４２】
【表１】
2015512424.tif 000009
【００４３】
［実施例３］
酸化反応
上述した式（ＩＩ）の化合物１００ｇを秤量し、ジクロロメタン１Ｌに溶解した。よく攪拌しながら、ジメチルスルホキシド４８．５ｍＬを添加した。溶液を攪拌しながら−６０℃に冷却した後、ジクロロメタンで予め希釈された無水トリフルオロ酢酸６２．６ｍＬを滴下した。添加後、３０分間攪拌し、反応溶液にトリエチルアミン１２３ｍＬを滴下した。終点に達するまで、反応を−６０℃で２時間行った。反応溶液を水２００ｍＬで二度洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで３０分間乾燥した。固形物を濾過によって取り除き、濾液を濃縮し、淡黄色の式（ＩＩＩ）の化合物を得た（９３ｇ，ＨＰＬＣ：８５％）。
【００４４】
［実施例４］
酸化反応
上述した式（ＩＩ）の化合物を１００ｇ秤量し、１Ｌのトルエンに溶解した。よく攪拌しながら、ジメチルスルホキシド４６ｍＬを添加した。溶液を攪拌しながら−６５℃に冷却した後、トルエンで予め希釈された塩化オキサリル４５．３ｍＬを滴下した。添加後、−６５℃で３０分間攪拌し、内部温度を制御しながら、その温度で反応溶液にトリエチルアミン１２０ｍＬを滴下した。終点に達するまで、反応を１時間行った。反応溶液を５％の炭酸水素ナトリウムで一度洗浄した。生成物は層分離しており、有機層を水で再度一回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで１時間乾燥した。固形物を濾過によって取り除き、濾液を濃縮し、淡黄色の式（ＩＩＩ）の化合物を得た（９５．２ｇ，ＨＰＬＣ：５５．３％）。
【００４５】
［実施例５］
酸化反応
上述した式（ＩＩ）の化合物１００ｇを、清浄な２Ｌの四ツ口フラスコに添加し、１．０Ｌのジクロロメタンに溶解した。継続的に攪拌しながら、ジメチルスルホキシド４５ｍＬを四ツ口フラスコに添加した。溶液を攪拌しながら約０℃に冷却した後、トリエチルアミン８６ｍＬを滴下した。添加後、その混合溶液を−３５℃に冷却し、ジクロロメタン２００ｍＬで予め希釈された、フェノキシホスホロジクロリド溶液４７ｍＬを加えた。添加後、終点に達するまで、反応を−３０℃で２時間行った。その後、５％炭酸水素ナトリウム水溶液４００ｍＬを、フラスコに秤量して入れた。これを室温で３０分間攪拌した。生成物は層分離しており、上層の有機層を回収した。水層をジクロロメタン３００ｍＬで一度逆抽出した。有機層を混合した後、水４００ｍＬで一度洗浄し、無水硫酸ナトリウム１００ｇで乾燥した。無水硫酸ナトリウムを濾過によって取り除き、溶液を回収し４５℃で乾燥し、淡黄色の式（ＩＩＩ）の化合物を得た（９５ｇ，ＨＰＬＣ：９３％）。
【００４６】
［実施例６］
酸化反応
無水ジメチルスルホキシド２０ｍＬと無水ジクロロメタン８０ｍＬの混合溶媒に、式（ＩＩ）の化合物１０ｇとＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン５．８ｍＬとを添加した。０℃に冷却し、よく攪拌しながら三酸化硫黄−ピリジン錯体５．３ｇを添加した。反応溶液を室温にし、終点に達するまで攪拌を続けた。反応溶液に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液５０ｍＬと、ジクロロメタン２０ｍＬとを添加した。層分離するまで保持し、水層をジクロロメタン８０ｍＬで逆抽出した。ジクロロメタン層を混合し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液５０ｍＬで一度、飽和生理食塩水５０ｍＬで一度、それぞれ洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで３０分間乾燥した。減圧濾過し、濃縮し、淡黄色の式（ＩＩＩ）の化合物を得た（９．１ｇ，ＨＰＬＣ：８５％）。
【００４７】
［実施例７］
オキシム化と脱糖反応
式（ＩＩＩ）の化合物２５２ｇを、メタノール１．８Ｌおよびジオキサン１．８Ｌに溶解した。ヒドロキシルアミン塩酸塩３００ｇの水溶液（精製水５００ｍＬ）を攪拌しながら添加した。反応溶液の内部温度を４０℃に上昇させ、終点に達するまで４時間反応させた。反応溶液に水１Ｌおよびジクロロメタン２Ｌを添加し、反応をクエンチした。分液して抽出し、水層をジクロロメタン４００ｍＬで逆抽出した。有機層を混合し、水４００ｍＬで一度洗浄した。有機層を回収し、無水硫酸ナトリウム１００ｇで乾燥し、減圧濾過した。濾液を濃縮して乾燥し、粗製のセラメクチンを得た（２０１ｇ，ＨＰＬＣ：８１．２％）。
【００４８】
［実施例８］
オキシム化と脱糖反応
式（ＩＩＩ）の化合物１００ｇをイソプロパノール８００ｍＬに溶解した。ヒドロキシルアミン塩酸塩１００ｇの水溶液（水２００ｍＬ）を、攪拌しながら添加した。反応溶液の内部温度を６０℃に上昇させ、終点に達するまで２．５時間反応させた。反応溶液に水１Ｌおよびジクロロメタン４００ｍＬを添加し、反応をクエンチした。分液して抽出し、水層をジクロロメタン５００ｍＬで逆抽出した。有機層を混合し、水５００ｍＬで一度洗浄した。有機層を回収し、無水硫酸ナトリウム１００ｇで乾燥し、濾過した。濾液を濃縮して乾燥し、粗製のセラメクチンを得た（８０ｇ，ＨＰＬＣ：６５．２％）。
【００４９】
［実施例９］
オキシム化と脱糖反応
式（ＩＩＩ）の化合物５０ｇを、メタノール４００ｍＬおよびジオキサン４００ｍＬに溶解し、内部温度を１０℃に冷却した。ヒドロキシルアミン塩酸塩５０ｇの水溶液（精製水５０ｍＬ）を、攪拌しながら添加した。反応溶液の内部温度を１０±２℃に制御し、反応が終点に達するまで１６８時間反応させた。反応溶液に水４００ｍＬおよびジクロロメタン１０００ｍＬを添加し、反応をクエンチした。分液して抽出し、水層をジクロロメタン２００ｍＬで逆抽出した。有機層を混合し、水２００ｍＬで一度洗浄した。有機層を回収し、無水硫酸ナトリウム５０ｇで乾燥し、減圧濾過した。濾液を濃縮して乾燥し、粗製のセラメクチンを得た（４６．８ｇ，ＨＰＬＣ：８０．９％）。
【００５０】
［実施例１０］
式（ＩＩＩ）の化合物から式（ＩＶ）の化合物の調製
式（ＩＩＩ）の化合物０．５ｇを一口フラスコに秤量し、アセトニトリル４ｍＬと水１ｍＬとをフラスコに加えた。また、室温でフラスコに酸性シリカゲル０．２５ｇを加えた。室温で３時間攪拌し、濾過して残渣を除去した。濾液を回収し、濃縮することにより、白色固体の生成物約０．４６ｇを得た。ＨＰＬＣによる測定によって、式（ＩＶ）の化合物の含有量は１６％であり、式（ＩＩＩ）の化合物の含有量は８３．２％であった。式（ＩＶ）の化合物の質量分析データは以下の通りである。ＭＳ（ｍ／ｚ）：９３６［Ｍ＋Ｎａ］。
【００５１】
［実施例１１］
式（ＩＩＩ）の化合物から式（ＩＶ）の化合物の調製
式（ＩＩＩ）の化合物０．１５ｇを一口フラスコに秤量し、アセトニトリル２ｍＬおよび水１ｍＬをフラスコに加えた。室温で、１０％酢酸を一滴フラスコに加えた。室温で２時間攪拌し、濾過して残渣を除去した。濾液を回収し、濃縮することにより、白色固体の生成物約０．１３ｇを得た。ＨＰＬＣによる測定によって、式（ＩＶ）の化合物の含有量は１２．３％であり、式（ＩＩＩ）の化合物の含有量は８７．１％であった。
【００５２】
［実施例１２］
オキシム化と脱糖反応
実施例９によって得られた、式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物との混合物０．２ｇを、メタノール２ｍＬおよびジオキサン２ｍＬに溶解した。精製水０．２ｍＬおよびヒドロキシルアミン塩酸塩０．２ｇを攪拌しながら加えた。反応溶液の内部温度を４０℃に上昇させ、終点に達するまで４時間反応させた。反応溶液に水５ｍＬおよびジクロロメタン５ｍＬを添加し、反応をクエンチした。分液して抽出し、水層をジクロロメタン５ｍＬで一度逆抽出した。有機層を混合し、水５ｍＬで一度洗浄した。有機層を回収し、無水硫酸ナトリウム１ｇで乾燥し、減圧濾過した。濾液を濃縮して乾燥し、粗製のセラメクチンを得た（０．１９ｇ，ＨＰＬＣ：７８．６％）。
【００５３】
［実施例１３］
式（ＩＶ）の化合物から式（ＩＩＩ）の化合物の調製
逆相Ｃ１８シリカゲルによって調製した、式（ＩＶ）の化合物のアセトニトリル溶液（ＨＰＬＣ含有量９８．５％）を、減圧条件下、４０℃で濃縮することにより、式（ＩＩＩ）の化合物に変換した。
【手続補正書】
【提出日】平成26年10月17日(2014.10.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（ＩＩＩ）で表される化合物。
【化１】
2015512424.tif 000015
【請求項２】
請求項１に記載の式（ＩＩＩ）の化合物を調製する方法であって、
酸化反応により式（ＩＩ）の化合物から式（ＩＩＩ）の化合物を調製することを特徴とする、方法。
【化２】
2015512424.tif 000016
【請求項３】
上記酸化反応は、塩基性条件下、酸化剤としてジメチルスルホキシドを用い、活性化剤存在下で行うことを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
上記活性化剤は、フェノキシホスホロジクロリド、塩化オキサリル、無水トリフルオロ酢酸、無水酢酸、および三酸化硫黄−ピリジン錯体から選択され、
上記塩基は、トリエチルアミンおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンから選択されることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
上記酸化反応に用いる酸化剤は、デス・マーチン試薬であることを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
上記酸化反応に用いる溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン、アセトン、およびテトラヒドロフランから選択され、
上記酸化反応の温度は、−７８℃〜３０℃であることを特徴とする、請求項２〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
以下の式（ＩＶ）で表される化合物。
【化３】
2015512424.tif 000017
【請求項８】
請求項７に記載の式（ＩＶ）の化合物を調製する方法であって、
酸性条件下、求核試薬により式（ＩＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物に変換することを特徴とする、方法。
【化４】
2015512424.tif 000018
【請求項９】
上記求核試薬は水であり、
上記酸性条件は、酸性シリカゲル、Ｃ１−Ｃ８の一塩基酸、Ｃ２−Ｃ８の二塩基酸、またはＣ４−Ｃ８の三塩基酸によって形成することを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
式（ＩＩＩ）の化合物、式（ＩＶ）の化合物、またはそれらの混合物を、オキシム化および脱糖反応により、セラメクチンに変換する工程を含むことを特徴とする、セラメクチンの調製方法。
【化５】
2015512424.tif 000019
【請求項１１】
上記反応に用いる溶媒は、Ｃ１−Ｃ３アルコールとジオキサンと水とにより形成される均一系、または、Ｃ１−Ｃ３アルコールと水とにより形成される均一系から選択され、
反応温度は、０〜６０℃であることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
セラメクチンの調製における、請求項１に記載の式（ＩＩＩ）の化合物および／または請求項７に記載の式（ＩＶ）の化合物の使用。
【国際調査報告】
2015512424.tif 000020
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