(57)【要約】化合物１、（３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸）と、充填剤、崩壊剤、界面活性剤、結合剤、及び潤滑剤から選択される少なくとも１つの賦形剤とを含む医薬組成物であって、この組成物は、嚢胞性線維症などのＣＦＴＲ媒介性疾患の治療のために、これを必要としている患者に経口投与するのに好適である。化合物１を含む医薬組成物の調製プロセスも開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、及び／又は化合物１塩酸塩形態Ａと、
ｂ．充填剤と、
ｃ．崩壊剤と、
ｄ．界面活性剤と、
ｅ．潤滑剤と、
ｆ．結合剤又は滑剤の少なくとも一方と、を含む、経口投与のための錠剤。
【請求項２】
化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、及び／又は化合物１塩酸塩形態Ａが、前記錠剤中に、約２５ｍｇ〜約５００ｍｇの範囲の量で存在する、請求項１に記載の錠剤。
【請求項３】
前記錠剤中の化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、及び／又は化合物１塩酸塩形態Ａの前記量が、前記錠剤の重量に対して約１５重量％〜約７５重量％の範囲である、請求項１に記載の錠剤。
【請求項４】
前記錠剤中の化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、及び／又は化合物１塩酸塩形態Ａの前記量が、前記錠剤の重量に対して約４０重量％〜約７０重量％の範囲である、請求項１に記載の錠剤。
【請求項５】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数５１】
2015504920.tif 000069
【請求項６】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数５２】
2015504920.tif 000070
【請求項７】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数５３】
2015504920.tif 000071
【請求項８】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数５４】
2015504920.tif 000072
【請求項９】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数５５】
2015504920.tif 000073
【請求項１０】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数５６】
2015504920.tif 000074
【請求項１１】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数５７】
2015504920.tif 000075
【請求項１２】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数５８】
2015504920.tif 000076
【請求項１３】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数５９】
2015504920.tif 000077
【請求項１４】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６０】
2015504920.tif 000078
【請求項１５】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６１】
2015504920.tif 000079
【請求項１６】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６２】
2015504920.tif 000080
【請求項１７】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６３】
2015504920.tif 000081
【請求項１８】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６４】
2015504920.tif 000082
【請求項１９】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６５】
2015504920.tif 000083
【請求項２０】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６６】
2015504920.tif 000084
【請求項２１】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６７】
2015504920.tif 000085
【請求項２２】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６８】
2015504920.tif 000086
【請求項２３】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数６９】
2015504920.tif 000087
【請求項２４】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数７０】
2015504920.tif 000088
【請求項２５】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数７１】
2015504920.tif 000089
【請求項２６】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数７２】
2015504920.tif 000090
【請求項２７】
下記の処方を有する、請求項１に記載の錠剤。
【数７３】
2015504920.tif 000091
【請求項２８】
前記錠剤が更に、少なくとも１つの追加治療薬を含む、請求項１に記載の錠剤。
【請求項２９】
前記追加治療薬がＣＦＴＲ調節因子である、請求項２８に記載の錠剤。
【請求項３０】
前記ＣＦＴＲ調節因子がＣＦＴＲ相乗剤である、請求項２９に記載の錠剤。
【請求項３１】
前記ＣＦＴＲ調節因子が、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドである、請求項２９に記載の錠剤。
【請求項３２】
化合物１が、Ｃｕ  Ｋ  α線を用いて得られた粉末Ｘ線回折において、１５．２〜１５．６度、１６．１〜１６．５度、及び１４．３〜１４．７度の１つ以上のピークによって特徴付けられる形態Ｉである、請求項１に記載の錠剤。
【請求項３３】
化合物１形態Ｉが、１５．４、１６．３、及び１４．５度の１つ以上のピークで特徴付けられる、請求項３２に記載の錠剤。
【請求項３４】
化合物１が、図１に実質的に類似の回折パターンによって特徴付けられる形態Ｉである、請求項１に記載の錠剤。
【請求項３５】
化合物１が、図２に実質的に類似の回折パターンによって特徴付けられる形態Ｉである、請求項１に記載の錠剤。
【請求項３６】
患者における疾患の治療又は重症度の低減のための方法であって、
請求項１の錠剤を該患者に投与する工程であって、該疾患は、嚢胞性線維症、ぜんそく、喫煙誘発ＣＯＰＤ、慢性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、膵炎、膵機能不全、男性不妊、軽い肺疾患、特発性膵炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、肝疾患、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固−線溶欠乏症、プロテインＣ欠乏症、１型遺伝性血管性水腫、脂質代謝障害、家族性高コレステロール血症、１型乳び血症、無βリポたんぱく血症、リソソーム蓄積症、アイセル病／偽ハーラー、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー・ナジャー症候群ＩＩ型、多腺性内分泌障害／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠乏、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、糖鎖欠損糖タンパク質症候群１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノゲン血症、ＡＣＴ欠乏症、尿崩症（ＤＩ）、神経骨端軟骨板性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース病、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経疾患、ハンチントン病、脊髄小脳失調Ｉ型、球脊髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、及び筋強直性ジストロフィー、海綿状脳症、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病、ファブリー病、ストロイスラー・シャインカー症候群、ＣＯＰＤ、ドライアイ病、シェーグレン症候群、骨粗鬆症、骨減少症、ゴーラム症候群、クロライドチャネル病、先天性筋緊張症、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、及び原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ）、線毛の構造及び／又は機能の遺伝性障害、内臓逆位を伴うＰＣＤ、内臓逆位を伴わないＰＣＤ、及び線毛形成不全から選択される、工程を含む方法。
【請求項３７】
前記疾患が、嚢胞性線維症、気腫、ＣＯＰＤ、又はドライアイ病である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記疾患が、前記患者がＦ５０８ｄｅｌ  ＣＦＴＲ突然変異を有する嚢胞性線維症である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記患者が、Ｆ５０８ｄｅｌのホモ接合型である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記患者が、Ｆ５０８ｄｅｌのヘテロ接合型である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
前記方法が、追加治療薬を投与する工程を含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４２】
前記治療薬が、粘液溶解剤、気管支拡張薬、抗生物質、抗感染剤、抗炎症剤、ＣＦＴＲ相乗剤、又は栄養剤から選択される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記追加治療薬が、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
請求項１の錠剤と、別の治療薬又はその医薬組成物と、を含む、キット。
【請求項４５】
前記化合物１が形態Ｉである、請求項４４に記載のキット。
【請求項４６】
前記治療薬が、化合物１以外の嚢胞性線維症の修復薬である、請求項４４に記載のキット。
【請求項４７】
前記治療薬が、嚢胞性線維症の相乗剤である、請求項４４に記載のキット。
【請求項４８】
前記治療薬が、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドである、請求項４４に記載のキット。
【請求項４９】
請求項１の錠剤と、前記治療薬とが、別々の容器内にある、請求項４４に記載のキット。
【請求項５０】
前記別々の容器が瓶である、請求項４９に記載のキット。
【請求項５１】
前記別々の容器がバイアルである、請求項４９に記載のキット。
【請求項５２】
前記別々の容器がブリスターパックである、請求項４９に記載のキット。
【請求項５３】
化合物１を含む錠剤を調製するための連続的プロセスであって、
ａ）化合物１、充填剤、及び崩壊剤をブレンダー内で混合する工程であって、混合物を形成する、工程と、
ｂ）水、結合剤、及び界面活性剤と共に造粒溶液を調製する工程と、
ｃ）工程ｂ）の該造粒溶液を添加しながら、工程ａ）の該混合物を連続二軸造粒機に供給する工程であって、顆粒を製造する、工程と、
ｄ）工程ｃ）の該顆粒を乾燥させてこれを粉砕する工程と、
ｅ）工程ｄ）の該粉砕した顆粒を、充填剤、崩壊剤、及び潤滑剤と混合する工程であって、混合物を形成する、工程と、
ｆ）工程ｄ）の該混合物を圧縮して錠剤にする工程と、
ｇ）工程ｅ）の該錠剤をコーティングする工程と、を含む、プロセス。
【請求項５４】
化合物１が形態Ｉである、請求項５３に記載のプロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸（化合物１）を含む医薬組成物、そのような組成物の製造方法、及びこれを含む医薬組成物を投与するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＣＦＴＲは、吸収上皮細胞及び分泌上皮細胞を含む様々な細胞タイプで発現するｃＡＭＰ／ＡＴＰ媒介性アニオンチャネルであり、膜を通過するアニオン流を調節し、また他のイオンチャネル及びタンパク質の活性を調節する。上皮細胞において、ＣＦＴＲの正常な機能は、呼吸器組織及び消化器組織を含む身体全体の電解質輸送の維持に必須である。ＣＦＴＲは、約１４８０個のアミノ酸からなり、経膜ドメインのタンデム反復で形成されるタンパク質をコード化しており、それぞれが６つの経膜らせんと、ドメインに結合するヌクレオチドとを含む。２つの経膜ドメインは、極性のある大きな調節（Ｒ）ドメインにより複数のリン酸化反応部位と結合しており、これによりチャネル活性及び細胞内移動を調節する。
【０００３】
遺伝子コード化ＣＦＴＲは、同定及び配列決定されている（Ｇｒｅｇｏｒｙ，Ｒ．Ｊ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４７：３８２〜３８６、Ｒｉｃｈ，Ｄ．Ｐ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４７：３５８〜３６２）、（Ｒｉｏｒｄａｎ，Ｊ．Ｒ．ら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４５：１０６６〜１０７３を参照）。この遺伝子中に欠陥があると、ＣＦＴＲの突然変異により、ヒトにおいて最も一般的な致死的遺伝疾患である嚢胞性線維症（ＣＦ）を引き起こす。嚢胞性線維症は、米国で乳幼児２，５００人に約１人が罹患している。米国人口全体では最高１０００万人が、欠陥遺伝子のコピーを１つ有するが、明白な病的影響は伴わない。一方、ＣＦ関連遺伝子のコピーを２つ有する人は、慢性肺疾患を含む衰弱性及び致死性の症状に苦しんでいる。
【０００４】
嚢胞性線維症患者においては、呼吸器上皮に内因的に発現したＣＦＴＲの突然変異により、肺尖部アニオン分泌が減少し、イオン及び流体輸送の不均衡を生じる。結果として生じたアニオン輸送の減少によって、肺における粘液蓄積が増加し、細菌感染症を合併して、最終的にＣＦ患者を死亡させる。呼吸器疾患に加えて、ＣＦ患者は典型的に、消化器の問題及び膵機能不全に苦しんでおり、これは治療なしに放置されると死に至る。更に、嚢胞性線維症の男性患者の大半は生殖不能であり、嚢胞性線維症の女性患者においては妊娠能力が低下する。ＣＦ関連遺伝子のコピー２つの場合に見られる重度の作用とは対照的に、ＣＦ関連遺伝子のコピー１つを有する人は、コレラに対する耐性、及び下痢による脱水に対する耐性が高いことが示されているが、これはおそらく、この母集団内にＣＦ遺伝子が比較的高頻度で存在することを説明している。
【０００５】
ＣＦ染色体のＣＦＴＲ遺伝子の配列分析により、様々な疾患誘発性突然変異が明らかにされている（Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｇ．Ｒ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４６：３６６〜３６９、Ｄｅａｎ，Ｍ．ら（１９９０）Ｃｅｌｌ  ６１：８６３：８７０、及びＫｅｒｅｍ，Ｂ−Ｓ．ら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４５：１０７３〜１０８０、Ｋｅｒｅｍ，Ｂ−Ｓら（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８７：８４４７〜８４５１）。科学文献及び医学文献の報告によれば、これまでに、ＣＦ遺伝子中で１０００を超える疾患誘発性突然変異が見出されている。最も優勢な突然変異は、ＣＦＴＲアミノ酸配列の５０８位におけるフェニルアラニンの欠失であり、一般的にはＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲと呼ばれている。この突然変異は、嚢胞性線維症の症例の約７０％に生じており、重症疾患に関連している。他の突然変異としては、Ｒ１１７Ｈ及びＧ５５１Ｄが挙げられる。
【０００６】
Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失により、新生タンパク質の適切な折り畳みが阻害される。これにより、突然変異タンパク質のＥＲからの退出ができなくなり、また原形質膜へのトラフィッキングができなくなる。その結果、膜内に存在するチャネルの数は、野生型ＣＦＴＲを発現する細胞中で観察される数よりはるかに少ない。突然変異は、トラフィッキングの支障に加えて、チャネルゲーティングの欠陥を引き起こす。膜内のチャネル数の減少と、ゲーティングの欠陥とによって、上皮を通過するアニオン輸送の減少がもたらされ、イオン及び流体輸送の欠陥を引き起こす（Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．（１９９０）、ＦＡＳＥＢ  Ｊ．４：２７０９〜２７２７）。しかしながら、研究により、膜内のＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ数の減少は、野生型ＣＦＴＲより少ないながらも、機能的であることが示されている（Ｄａｌｅｍａｎｓら（１９９１）、Ｎａｔｕｒｅ  Ｌｏｎｄ．３５４：５２６〜５２８、Ｄｅｎｎｉｎｇら、前出、Ｐａｓｙｋ  ａｎｄ  Ｆｏｓｋｅｔｔ（１９９５）、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：１２３４７〜５０）。Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲに加え、トラフィッキング、合成及び／又はチャネルゲーティングの欠陥を生じさせるＣＦＴＲのその他の疾患誘発性突然変異を上方調節又は下方調節することで、アニオン分泌を変化させ、疾患の進行及び／又は重症度を変えることができると考えられる。
【０００７】
ＣＦＴＲはアニオンの他に様々な分子を輸送するが、この役割（アニオンの輸送）が、上皮を通してイオン及び水を輸送する重要なメカニズムにおける一要素であることは明らかである。その他の要素には、上皮Ｎａ＋チャネル、ＥＮａＣ、Ｎａ＋／２Ｃｌ−／Ｋ＋コトランスポーター、Ｎａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰアーゼポンプ、及び細胞内への塩化物の取り込みを担う側底膜Ｋ＋チャネルが挙げられる。
【０００８】
これらの要素が協働して、細胞内における選択的な発現及び局在化によって、上皮を通過する指向性輸送を達成する。塩化物の吸収は、頂端膜上に存在するＥｎａＣ及びＣＦＴＲ、並びに細胞の側底膜面上で発現するＮａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰアーゼポンプ及びＣｌ−チャネルの協調した活性によって行われる。内腔側からの塩化物の二次活性輸送は、細胞内塩化物の蓄積を招き、これは次にＣｌ−チャネルによって細胞から受動的に離れ、結果としてベクトル輸送を生じさせ得る。側底膜表面上のＮａ＋／２Ｃｌ−／Ｋ＋コトランスポーター、Ｎａ＋−Ｋ＋−ＡＴＰアーゼポンプ及び側底膜Ｋ＋チャネル、並びに内腔側上のＣＦＴＲの配列は、内腔側上のＣＦＴＲを介した塩化物の分泌を調整する。水はおそらく能動的に輸送されることはないため、上皮を通過する水の流動は、ナトリウム及び塩化物のバルク流によって生成される極めて小さな経上皮浸透圧勾配に依存する。
上述のように、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失により、新生タンパク質の適切な折り畳みが阻害され、これにより、突然変異タンパク質のＥＲからの退出ができなくなり、また原形質膜へのトラフィッキングができなくなると考えられている。その結果、原形質膜に存在する成熟タンパク質の量が不十分となり、上皮組織内の塩化物輸送が顕著に減少する。実際に、ＥＲ機構によりＡＴＰ結合カセット（ＡＢＣ）トランスポーターの小胞体（ＥＲ）処理の欠陥を招くこの細胞現象は、ＣＦ疾患だけではなく、広範なその他の孤立性及び遺伝性疾患の原因ともなることが示されている。ＥＲ機構に機能不全を引き起こし得る方法には２つあり、これらは、タンパク質のＥＲ輸送への結合の消失による分解、又は、これらの欠陥のある／折り畳みが不適切なタンパク質のＥＲ蓄積の、いずれかである［Ａｒｉｄｏｒ  Ｍら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．、５（７）、ｐｐ  ７４５〜７５１（１９９９）、Ｓｈａｓｔｒｙ，Ｂ．Ｓ．ら、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、４３、ｐｐ  １〜７（２００３）、Ｒｕｔｉｓｈａｕｓｅｒ，Ｊ．ら、Ｓｗｉｓｓ  Ｍｅｄ  Ｗｋｌｙ、１３２、ｐｐ  ２１１〜２２２（２００２）、Ｍｏｒｅｌｌｏ，ＪＰら、ＴＩＰＳ、２１、ｐｐ．４６６〜４６９（２０００）、Ｂｒｏｓｓ  Ｐ．ら、Ｈｕｍａｎ  Ｍｕｔ．、１４、ｐｐ．１８６〜１９８（１９９９）］。
国際公開（ＰＣＴ）ＷＯ  ２００７０５６３４１号には、ＣＦＴＲ活性のモジュレータとして、及び、ゆえに嚢胞性線維症などのＣＦＴＲ媒介疾患に対する有用な治療法として、塩形態の化合物１が開示されている。実質的に結晶質であり塩を含まない化合物１形態Ｉは、米国特許出願公開第ＵＳ２００９０１７０９０５号（２００８年１２月４日出願）に開示されている。化合物１形態ＩＩ及び化合物１塩酸塩形態Ａは、米国特許出願公開第ＵＳ２０１１０２６３６５４号（２０１１年４月７日出願）に開示されている。これら出願はすべて、参照により全体が本明細書に組み込まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開（ＰＣＴ）ＷＯ  ２００７０５６３４１号
【特許文献２】米国特許出願公開第ＵＳ２００９０１７０９０５号
【特許文献３】米国特許出願公開第ＵＳ２０１１０２６３６５４号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｇｒｅｇｏｒｙ，Ｒ．Ｊ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４７：３８２〜３８６
【非特許文献２】Ｒｉｃｈ，Ｄ．Ｐ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４７：３５８〜３６２
【非特許文献３】Ｒｉｏｒｄａｎ，Ｊ．Ｒ．ら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４５：１０６６〜１０７３
【非特許文献４】Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｇ．Ｒ．ら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４６：３６６〜３６９
【非特許文献５】Ｄｅａｎ，Ｍ．ら（１９９０）Ｃｅｌｌ  ６１：８６３：８７０
【非特許文献６】Ｋｅｒｅｍ，Ｂ−Ｓ．ら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４５：１０７３〜１０８０
【非特許文献７】Ｋｅｒｅｍ，Ｂ−Ｓら（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８７：８４４７〜８４５１
【非特許文献８】Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．（１９９０）、ＦＡＳＥＢ  Ｊ．４：２７０９〜２７２７
【非特許文献９】Ｄａｌｅｍａｎｓら（１９９１）、Ｎａｔｕｒｅ  Ｌｏｎｄ．３５４：５２６〜５２８
【非特許文献１０】Ｐａｓｙｋ  ａｎｄ  Ｆｏｓｋｅｔｔ（１９９５）Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：１２３４７〜５０
【非特許文献１１】Ａｒｉｄｏｒ  Ｍら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．、５（７）、ｐｐ  ７４５〜７５１（１９９９）
【非特許文献１２】Ｓｈａｓｔｒｙ，Ｂ．Ｓ．ら、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、４３、ｐｐ  １〜７（２００３）
【非特許文献１３】Ｒｕｔｉｓｈａｕｓｅｒ，Ｊ．ら、Ｓｗｉｓｓ  Ｍｅｄ  Ｗｋｌｙ、１３２、ｐｐ  ２１１〜２２２（２００２）
【非特許文献１４】Ｍｏｒｅｌｌｏ，ＪＰら、ＴＩＰＳ、２１、ｐｐ．４６６〜４６９（２０００）
【非特許文献１５】Ｂｒｏｓｓ  Ｐ．ら、Ｈｕｍａｎ  Ｍｕｔ．、１４、ｐｐ．１８６〜１９８（１９９９）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
化合物１は、アイバカフトール（Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミド）との組み合わせの一部であり、嚢胞性線維症の治療用に食品医薬品局（ＦＤＡ）から「画期的な治療薬」指定を受けており、本出願時点においてわずか２件だけが認められているものの１つである（もう一方はアイバカフトール）。このことは、対症的治療を超える、嚢胞性線維症の原因に対する効果的治療に対して、満たされていない大きなニーズがあることを示す。更に、ＦＤＡ承認薬の一般的な課題には、しばしば、それを必要としている患者が薬剤を利用できないことが挙げられる。したがって、継続的かつ制御された方法で調製するための本開示の化合物１の処方及びプロセスに対して、満たされていない大きなニーズが存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、下記の構造を有する３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸（化合物１）を含む医薬組成物、医薬品、及び固体投与形態に関する：
【００１３】
【化１】
2015504920.tif 000002
【００１４】
一態様において、本発明は下記を含む医薬組成物を提供する：
ａ．化合物１、
ｂ．充填剤、
ｃ．崩壊剤、
ｄ．界面活性剤、
ｅ．潤滑剤、及び
ｆ．滑剤又は結合剤。
【００１５】
他の実施形態において、化合物１は実質的に結晶質固体形態の１つである。一実施形態において、化合物１は実質的に結晶質形態Ｉ（化合物１形態Ｉ）である。一実施形態において、化合物１は実質的に結晶質形態ＩＩ（化合物１形態ＩＩ）である。一実施形態において、化合物１は実質的に結晶質塩酸塩形態（化合物１塩酸塩形態Ａ）である。用語「化合物１」は、本明細書全体にわたって使用される場合、非結晶質形態を含む様々な形態の中で、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、及び／又は化合物１塩酸塩形態Ａの固相形態を含むことが理解されよう。
【００１６】
いくつかの実施形態において、この医薬組成物は２５ｍｇ〜４００ｍｇを含む。いくつかの実施形態において、この医薬組成物は組成物１を２５ｍｇ含む。いくつかの実施形態において、この医薬組成物は組成物１を５０ｍｇ含む。いくつかの実施形態において、この医薬組成物は組成物１を１００ｍｇ含む。いくつかの実施形態において、この医薬組成物は組成物１を１２５ｍｇ含む。いくつかの実施形態において、この医薬組成物は組成物１を１５０ｍｇ含む。いくつかの実施形態において、この医薬組成物は組成物１を２００ｍｇ含む。いくつかの実施形態において、この医薬組成物は組成物１を２５０ｍｇ含む。いくつかの実施形態において、この医薬組成物は組成物１を３００ｍｇ含む。いくつかの実施形態において、この医薬組成物は組成物１を４００ｍｇ含む。
【００１７】
一態様において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する：
【００１８】
【数１】
2015504920.tif 000003
【００１９】
一態様において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する：
【００２０】
【数２】
2015504920.tif 000004
【００２１】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００２２】
【数３】
2015504920.tif 000005
【００２３】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００２４】
【数４】
2015504920.tif 000006
【００２５】
別の一態様において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する：
【００２６】
【数５】
2015504920.tif 000007
【００２７】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００２８】
【数６】
2015504920.tif 000008
【００２９】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００３０】
【数７】
2015504920.tif 000009
【００３１】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００３２】
【数８】
2015504920.tif 000010
【００３３】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００３４】
【数９】
2015504920.tif 000011
【００３５】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００３６】
【数１０】
2015504920.tif 000012
【００３７】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００３８】
【数１１】
2015504920.tif 000013
【００３９】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００４０】
【数１２】
2015504920.tif 000014
【００４１】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００４２】
【数１３】
2015504920.tif 000015
【００４３】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００４４】
【数１４】
2015504920.tif 000016
【００４５】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００４６】
【数１５】
2015504920.tif 000017
【００４７】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００４８】
【数１６】
2015504920.tif 000018
【００４９】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００５０】
【数１７】
2015504920.tif 000019
【００５１】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００５２】
【数１８】
2015504920.tif 000020
【００５３】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００５４】
【数１９】
2015504920.tif 000021
【００５５】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００５６】
【数２０】
2015504920.tif 000022
【００５７】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００５８】
【数２１】
2015504920.tif 000023
【００５９】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００６０】
【数２２】
2015504920.tif 000024
【００６１】
別の一実施形態において、本発明は、下記の構成成分を含む医薬組成物を提供する。
【００６２】
【数２３】
2015504920.tif 000025
【００６３】
別の一態様において、本発明は、化合物１と、１つ以上の製薬上許容される賦形剤（例えば充填剤、崩壊剤、界面活性剤、希釈剤、結合剤、滑剤、及び潤滑剤、並びにこれらの任意の組み合わせ）とを含む錠剤形態の医薬組成物を提供し、ここにおいてこの錠剤は約３０分以内に少なくとも約５０％の溶解度を有する。別の一実施形態において、この溶解速度は約３０分以内に少なくとも約７５％である。別の一実施形態において、この溶解速度は約３０分以内に少なくとも約９０％である。
【００６４】
別の一態様において、本発明は、化合物１を含む粉末混合物又は顆粒と、１つ以上の製薬上許容される賦形剤（例えば充填剤、崩壊剤、界面活性剤、希釈剤、結合剤、滑剤、及び潤滑剤）とを含む錠剤からなる医薬組成物を提供し、ここにおいてこの錠剤は少なくとも約５ｋＰの硬度を有する（ｋＰ＝キロポンド、１ｋＰ＝〜９．８Ｎ）。別の一実施形態において、この錠剤は４００回転させた後に１．０％未満の標的摩損度を有する。別の一態様において、本発明は、化合物１形態ＩＩと化合物１とを含む粉末混合物又は顆粒と、１つ以上の製薬上許容される賦形剤（例えば充填剤、崩壊剤、界面活性剤、希釈剤、結合剤、滑剤、及び潤滑剤）とを含む錠剤からなる医薬組成物を提供し、ここにおいてこの錠剤は少なくとも約５ｋＰの硬度を有する（ｋＰ＝キロポンド、１ｋＰ＝〜９．８Ｎ）。別の一実施形態において、この錠剤は４００回転させた後に１．０％未満の標的摩損度を有する。
【００６５】
別の一態様において、本発明は、本明細書に記述されるように、追加治療薬を更に含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、追加治療薬は、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドである。
【００６６】
別の一態様において、本発明は、哺乳動物におけるＣＦＴＲ媒介性疾患の治療方法を提供し、この方法には、本明細書に記述される医薬組成物の有効量をその哺乳動物に投与する工程が含まれる。いくつかの実施形態において、このＣＦＴＲ媒介性疾患は、嚢胞性線維症、気腫、ＣＯＰＤ、又は骨粗鬆症である。他の実施形態において、このＣＦＴＲ媒介性疾患は、嚢胞性線維症である。この方法は更に、追加治療薬を投与する工程を含み得、ここにおいていくつかの実施形態において、この追加治療薬は、粘液溶解剤、気管支拡張薬、抗生物質、抗感染剤、抗炎症剤、ＣＦＴＲ相乗剤、又は栄養剤から選択される。別の一実施形態において、追加治療薬は、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドである。別の一実施形態において、この患者はＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ突然変異を有する。別の一実施形態において、この患者はＦ５０８ｄｅｌのホモ接合型である。別の一実施形態において、この患者はＦ５０８ｄｅｌのヘテロ接合型である。
【００６７】
別の一態様において、本発明は、本発明の錠剤と、別の治療薬、又はその医薬組成物とを含むキットを特徴とする。別の一実施形態において、錠剤中の化合物１は形態Ｉである。別の一実施形態において、この治療薬は、化合物１以外の嚢胞性線維症修復薬である。別の一実施形態において、この治療薬は、嚢胞性線維症相乗剤である。別の一実施形態において、この治療薬は、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドである。別の一実施形態において、この錠剤及び治療薬は、別々の容器内にある。別の一実施形態において、この別々の容器は瓶である。別の一実施形態において、この別々の容器はバイアルである。別の一実施形態において、この別々の容器はブリスターパックである。
【００６８】
別の一態様において、本発明は、化合物１及び賦形剤をスクリーニング及び秤量する工程と、化合物１及び賦形剤を好適な時間混合する工程と、この混合物をローラーコンパクションしてリボンにし、このリボンを顆粒状に粉砕する工程と、この顆粒を追加造粒賦形剤と一緒に好適な時間混合する工程と、混合物を圧縮して錠剤にする工程と、この錠剤をコーティングする工程と、所望により、錠剤の面の一方又は両方にモノグラムを印刷する工程とを含む、ローラーコンパクションプロセスによって、本明細書に記述される医薬組成物を製造するためのプロセスを提供する。
【００６９】
別の一態様において、本発明は、化合物１及び賦形剤をスクリーニング及び秤量する工程と、界面活性剤及び結合剤を含む造粒液体を加えながら化合物１及び賦形剤を好適な時間、好適な混合速度で混合し、この混合物を切断して顆粒にする工程と、この顆粒を乾燥させる工程と、この顆粒を追加造粒賦形剤と一緒に好適な時間混合する工程と、混合物を圧縮して錠剤にする工程と、この錠剤をコーティングする工程と、所望により、錠剤の面の一方又は両方にモノグラムを印刷する工程とを含む、高剪断造粒プロセスによって、本明細書に記述される医薬組成物を製造するためのプロセスを提供する。
【００７０】
別の一態様において、本発明は、化合物１及び賦形剤をスクリーニング及び秤量する工程と、化合物１及び賦形剤をブレンダー内で混合し、この混合物を、界面活性剤及び結合剤を含む造粒液体を好適な時間、好適な速度で加えながら、連続的造粒機に供給し、この混合物を切断して顆粒にする工程と、この顆粒を乾燥させる工程と、この顆粒を追加造粒賦形剤と一緒に好適な時間混合する工程と、混合物を圧縮して錠剤にする工程と、この錠剤をコーティングする工程と、所望により、錠剤の面の一方又は両方にモノグラムを印刷する工程とを含む、二軸湿式造粒プロセスによって、本明細書に記述される医薬組成物を製造するための連続的又は準連続的プロセスを提供する。
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１】化合物１形態Ｉの単結晶構造から計算したＸ線回折パターンである。
【図２】化合物１形態Ｉの実際の粉末Ｘ線回折パターンである。
【図３】化合物１形態ＩＩの粉末Ｘ線回折パターンである。
【図４】次のものから選択される化合物１形態ＩＩのＸ線回折パターンである。  １）化合物１形態ＩＩ、メタノール溶媒和物、  ２）化合物１形態ＩＩ、エタノール溶媒和物、  ３）化合物１形態ＩＩ、アセトン溶媒和物、  ４）化合物１形態ＩＩ、２−プロパノール溶媒和物、  ５）化合物１形態ＩＩ、アセトニトリル溶媒和物、  ６）化合物１形態ＩＩ、テトラヒドロフラン溶媒和物、  ７）化合物１形態ＩＩ、酢酸メチル溶媒和物、  ８）化合物１形態ＩＩ、２−ブタノン溶媒和物、  ９）化合物１形態ＩＩ、蟻酸エチル溶媒和物、及び  １０）化合物１形態ＩＩ、２−メチルテトラヒドロフラン溶媒和物。
【図５】化合物１形態ＩＩ、メタノール溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図６】化合物１形態ＩＩ、エタノール溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図７】化合物１形態ＩＩ、アセトン溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図８】化合物１形態ＩＩ、２−プロパノール溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図９】化合物１形態ＩＩ、アセトニトリル溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図１０】化合物１形態ＩＩ、テトラヒドロフラン溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図１１】化合物１形態ＩＩ、酢酸メチル溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図１２】化合物１形態ＩＩ、２−ブタノン溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図１３】化合物１形態ＩＩ、蟻酸エチル溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図１４】化合物１形態ＩＩ、２−メチルテトラヒドロフラン溶媒和物のＸ線回折パターンを示す。
【図１５】化合物１形態ＩＩ、アセトン溶媒和物の示差走査熱量計（ＤＳＣ）トレースである。
【図１６】化合物１形態ＩＩ、アセトン溶媒和物の熱重量分析（ＴＧＡ）プロットである。
【図１７】単結晶Ｘ線解析に基づく化合物１形態ＩＩ、アセトン溶媒和物の立体構造図である。
【図１８】化合物１塩酸塩形態Ａの二量体の立体構造図である。
【図１９】結晶構造から計算した化合物１塩酸塩形態ＡのＸ線回折パターンである。
【図２０】化合物１の１ＨＮＭＲスペクトルである。
【図２１】化合物１塩酸塩の１ＨＮＭＲスペクトルである。
【図２２】化合物１形態Ｉの示差走査熱量計（ＤＳＣ）トレースである。
【図２３】単結晶Ｘ線解析に基づく化合物１形態Ｉの立体構造図である。
【図２４】単結晶Ｘ線解析に基づく化合物１形態ＩＩ、アセトン溶媒和物の立体構造図である。
【図２５】化合物１形態ＩＩ、アセトン溶媒和物の固相１３Ｃ  ＮＭＲスペクトル（１５．０ｋＨｚスピン）である。
【図２６】化合物１形態ＩＩ、アセトン溶媒和物の固相１９Ｆ  ＮＭＲスペクトル（１２．５ｋＨｚスピン）である。
【図２７】結晶構造から計算した化合物１塩酸塩形態ＡのＸ線回折パターンである。
【図２８】高剪断造粒（ＨＳＧ）プロセス及び二軸湿式造粒（ＴＳＷＧ）プロセスによって製造された錠剤の、化合物１のｐＨ勾配溶解プロファイルを示すグラフである（ＬＯＤは「乾燥時損失（ｌｏｓｓ  ｏｎ  ｄｒｙｉｎｇ）」を意味し、粉末／顆粒中の水分量を定義する測定単位である。）
【発明を実施するための形態】
【００７２】
定義
本明細書で使用されるとき、「ＣＦＴＲ」は嚢胞性線維症膜コンダクタンス調節因子の略である。
【００７３】
本明細書で使用されるとき、「ΔＦ５０８」又は「Ｆ５０８ｄｅｌ」は、ＣＦＴＲタンパク質内の特定の突然変異である。この突然変異は、５０８位でのアミノ酸フェニルアラニンのコドンを含む３つのヌクレオチドが欠失しているものであり、結果としてこの特定のフェニルアラニンが欠失したＣＦＴＲタンパク質を生じる。
【００７４】
本明細書で使用されるとき、特定の突然変異（例えばＦ５０８ｄｅｌ）について「ホモ接合型」である患者は、対立遺伝子の両方に同じ突然変異を有する。
【００７５】
本明細書で使用されるとき、特定の突然変異（例えばＦ５０８ｄｅｌ）について「ヘテロ接合型」である患者は、対立遺伝子の一方にこの突然変異を有し、もう一方の対立遺伝子には別の突然変異を有する。
【００７６】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＦＴＲ修復薬」は、細胞表面に対する機能性ＣＦＴＲタンパク質の量を増加又は誘発し、これにより機能的活性を増加させる化合物を指す。
【００７７】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＦＴＲ相乗剤」は、細胞表面にあるＣＦＴＲタンパク質のチャネル活性を増加又は誘発し、これにより機能的活性を増加させる化合物を指す。
【００７８】
本明細書で使用されるとき、用語「有効医薬成分」又は「ＡＰＩ」は、生物学的に活性な化合物を指す。代表的なＡＰＩには、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸（化合物１）が挙げられる。
【００７９】
用語「固体形態（ｓｏｌｉｄ  ｆｏｒｍ）」、「固体形態（ｓｏｌｉｄ  ｆｏｒｍｓ）」、及び関連する用語は、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸（化合物１）に関して本明細書で使用されるとき、主として液体状態又は気体状態ではない化合物１を含む、結晶又は同様物の固体形態を指す。
【００８０】
本明細書で使用されるとき、用語「実質的に非晶質」は、その分子の位置に長距離規則度がほとんど又は全くない固体材料を指す。例えば、実質的に非晶質の材料は、約１５％未満の結晶化度（例えば約１０％未満の結晶化度、又は約５％未満の結晶化度）を有する。また用語「実質的に非晶質」は、結晶化度がない（０％）材料を指す「非晶質」という記述も含む。
【００８１】
本明細書で使用されるとき、用語「実質的に結晶質」（実質的に結晶質の化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａという表現に使用される際）は、その分子の位置に主として長距離規則度を有する固体材料を指す。例えば、実質的に結晶質の材料は、約８５％超の結晶化度（例えば約９０％超の結晶化度、又は約９５％超の結晶化度）を有する。また用語「実質的に結晶質」は、結晶化度１００％を有する材料を指す「結晶質」という記述も含むことに留意されたい。
【００８２】
本明細書で使用される用語「結晶質」及び関連する用語は、物質、化合物、生成物、又は形態を記述するのに使用されるとき、その物質、化合物又は生成物が、Ｘ線回折で測定したときに実質的に結晶質であることを意味する。（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２１版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、Ｍｄ．（２００３）、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ、第２３版、１８４３〜１８４４（１９９５）を参照）。
【００８３】
本明細書で使用されるとき、用語「組成物」は一般に、通常は１つ以上の薬剤（例えば１つの薬剤（例えば化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａ））と１つ以上の薬学的賦形剤である、２つ以上の構成成分の組成物を指す。
【００８４】
本明細書で使用されるとき、用語「固体剤形」は一般に、カプセル、錠剤、ピル、粉末及び顆粒を含む経口投与方法に使用される場合の医薬組成物を指す。そのような固体剤形において、有効成分は、少なくとも１つの製薬上許容される不活性な賦形剤又は担体と混合される。
【００８５】
本明細書で使用されるとき、「賦形剤」には、医薬組成物中の機能性成分及び非機能性成分が含まれる。
【００８６】
本明細書で使用されるとき、「崩壊剤」は、医薬組成物を水和させて錠剤の分散を促す賦形剤である。本明細書で使用されるとき、「希釈剤」又は「充填剤」は、医薬組成物に嵩高性を付与する賦形剤である。
【００８７】
本明細書で使用されるとき、「界面活性剤」は、高い溶解度及び／又は湿潤性を医薬組成物に付与する賦形剤である。
【００８８】
本明細書で使用されるとき、「結合剤」は、高い凝集力又は引張り強度（例えば硬さ）を医薬組成物に付与する賦形剤である。
【００８９】
本明細書で使用されるとき、「滑剤」は、高い流動性を医薬組成物に付与する賦形剤である。
【００９０】
本明細書で使用されるとき、「着色剤」は、望ましい色を医薬組成物に付与する賦形剤である。着色剤の例としては、例えばＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  ＃１アルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  ＃２、その他のＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ着色剤、二酸化チタン、酸化鉄、及び／又はこれらの組み合わせなど、市販されている顔料が挙げられる。一実施形態において、本発明により提供される医薬組成物は紫色である。
【００９１】
本明細書で使用されるとき、「潤滑剤」は、錠剤に成形される医薬組成物に添加される賦形剤である。この潤滑剤は、顆粒を圧密して錠剤にし、またダイプレスから医薬組成物の錠剤を排出させるのを促進する。
【００９２】
本明細書で使用されるとき、「立方センチメートル」及び「ｃｃ」は、体積の単位を表わすのに互換可能に使用される。１ｃｃ＝１ｍＬである。
【００９３】
本明細書で使用されるとき、「キロポンド」及び「ｋＰ」は互換可能に使用され、力の測定単位を指す。ここにおいてｋＰ＝約９．８ニュートンである。
【００９４】
本明細書で使用されるとき、「摩損度」は、外部圧力に対抗して、錠剤の形状を無傷に保ち保持する特性を指す。摩損度は、式１に示される数式を使用して定量化することができる。
【００９５】
【数２４】
2015504920.tif 000026
式中、Ｗ０は錠剤の元の重量、Ｗｆは摩損度試験器（ｆｒｉａｂｉｌａｔｏｒ）にかけた後の錠剤の最終重量である。摩損度は、実験錠剤を１００回転又は４００回転させる標準ＵＳＰ試験装置を使用して測定される。本発明のいくつかの錠剤は、摩損度が５．０％未満である。別の一実施形態において、摩損度は２．０％未満である。別の一実施形態において、標的摩損度は、４００回転後に１．０％未満である。
【００９６】
本明細書で使用されるとき、「平均粒子直径」は、レーザー光散乱、画像解析、又はふるい分析などの技法を用いて測定したときの平均粒子直径である。一実施形態において、本発明により提供される医薬組成物を調製するのに使用される顆粒は、１．０ｍｍ未満の平均粒子直径を有する。
【００９７】
本明細書で使用されるとき、「嵩密度」は、材料の粒子の質量を、粒子が占める合計体積で割ったものである。合計体積には、粒子の体積、粒子間空間体積、及び内部の穴の容積が含まれる。嵩密度は材料固有の特性ではなく、材料の加工方法に依存して変化し得る。一実施形態において、本発明により提供される医薬組成物を調製するのに使用される顆粒は、０．５〜０．７ｇ／ｃｃの嵩密度を有する。
【００９８】
本発明の薬剤化合物の有効量又は「治療的有効量」は、被験者の疾患の状態、年齢、及び体重などの要素、並びに、被験者に望ましい反応を誘発させる本発明の化合物の効力によって、異なる可能性がある。用量レジメンは、最適な治療的反応をもたらすよう調節することができる。有効量はまた、本発明の化合物の毒性又は有害影響（例えば副作用）があったとしても、有益な治療効果がそれを上回って有用である量である。
【００９９】
本明細書で使用されるとき、別に記載のない限り、化合物の「治療的有効量」及び「有効量」という用語は、疾病又は疾患の治療又は管理に治療的利点をもたらすか、あるいは、疾病又は疾患に伴う１つ以上の症状を遅延させるか又は最小限に抑えるのに、十分な量を意味する。化合物の「治療的有効量」及び「有効量」は、単独で、又は１つ以上の他の薬剤との組み合わせで、疾病又は疾患の治療又は管理に治療的利点を提供する、治療薬の量を意味する。用語「治療的有効量」及び「有効量」は、治療全体を改善するか、疾病又は疾患の症状又は原因を低減又は回避するか、あるいは、他の治療薬の治療有効性を強化する量を包含し得る。
【０１００】
「実質的に純粋な化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａ」という表現に使用される「実質的に純粋」とは、約９０％超の純度を意味する。別の一実施形態において、実質的に純粋とは、約９５％超の純度を意味する。別の一実施形態において、実質的に純粋とは、約９８％超の純度を意味する。別の一実施形態において、実質的に純粋とは、約９９％超の純度を意味する。
【０１０１】
化合物１（例えば化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、化合物１塩酸塩形態Ａ）に関して、組成物又は剤形の成分の用量、量、又は重量パーセントに関連して使用されるとき、用語「約」及び「およそ」は、その特定の用量、量、又は重量パーセントから得られるものと同等の薬理学的効果をもたらすことが当業者により認識される用量、量、又は重量パーセントを意味する。具体的には、用語「約」又は「およそ」は、当業者により決定される特定の値についての許容誤差を意味し、これは部分的に、その値がどのように測定又は決定されているかに依存する。特定の実施形態において、用語「約」又は「およそ」は、標準偏差１、２、３、又は４以内であることを意味する。特定の実施形態において、用語「約」又は「およそ」は、所与の値又は範囲の３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％、又は０．０５％以内であることを意味する。
【０１０２】
他に記載のない限り、用語「化合物１」は、本明細書に記述される化合物１の固体形態、例えば化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａ、並びにこれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない。
【０１０３】
医薬組成物
本発明は、実質的に結晶質形態であり得る化合物１を含む、医薬組成物、医薬製剤、及び固体剤形を提供する。いくつかの実施形態において、化合物１は結晶質形態Ｉである（化合物１形態Ｉ）。いくつかの実施形態において、化合物１は結晶質形態ＩＩである（化合物１形態ＩＩ）。いくつかの実施形態において、化合物１は結晶質塩酸塩形態である（化合物１塩酸塩形態Ａ）。この態様のいくつかの実施形態において、医薬組成物中に存在する化合物１の量は、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、又は４００ｍｇである。この態様のいくつかの実施形態において、医薬組成物中に存在する化合物１の重量パーセント／重量比パーセントは、１０〜７５パーセントである。これら及び他の実施形態において、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸が実質的に純粋な化合物１として存在する。「実質的に純粋」とは、純度９０パーセント超、好ましくは純度９５パーセント超、より好ましくは純度９９．５パーセント超を意味する（すなわち、化合物１の他の結晶質形態と混合されていない）。
【０１０４】
よって一態様において、本発明は下記を含む医薬組成物を提供する。
ａ．化合物１、
ｂ．充填剤、
ｃ．崩壊剤、
ｄ．界面活性剤、
ｅ．希釈剤、
ｆ．潤滑剤、及び
ｇ．滑剤又は結合剤。
【０１０５】
この態様の一実施形態において、この医薬組成物は、２５ｍｇの化合物１を含む。この態様の他の一実施形態において、この医薬組成物は、５０ｍｇの化合物１を含む。この態様の他の一実施形態において、この医薬組成物は、１００ｍｇの化合物１を含む。この態様の他の一実施形態において、この医薬組成物は、１２５ｍｇの化合物１を含む。この態様の他の一実施形態において、この医薬組成物は、１５０ｍｇの化合物１を含む。この態様の他の一実施形態において、この医薬組成物は、２００ｍｇの化合物１を含む。この態様の他の一実施形態において、この医薬組成物は、２５０ｍｇの化合物１を含む。この態様の他の一実施形態において、この医薬組成物は、３００ｍｇの化合物１を含む。この態様の他の一実施形態において、この医薬組成物は、４００ｍｇの化合物１を含む。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、この医薬組成物は化合物１を含み、ここにおいて化合物１は、組成物の重量の少なくとも１５重量％（例えば少なくとも２０重量％、少なくとも３０重量％、少なくとも４０重量％、少なくとも５０重量％、少なくとも６０重量％、又は少なくとも７０重量％）の量で存在する。
【０１０７】
いくつかの実施形態において、この医薬組成物は、化合物１、充填剤、希釈剤、崩壊剤、界面活性剤、滑剤、及び潤滑剤を含む。この実施形態において、この組成物は、組成物の重量に対して約２０重量％〜約５０重量％（例えば約２５〜３５重量％）の化合物１を含み、より典型的には、組成物の重量に対して２５重量％〜約４５重量％（例えば約２８〜３２重量％）の化合物１を含む。
【０１０８】
いくつかの実施形態において、この組成物は、化合物１、充填剤、希釈剤、崩壊剤、界面活性剤、結合剤、及び潤滑剤を含む。この実施形態において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約３０重量％〜約６０重量％（例えば約４０〜５５重量％）の化合物１を含み、より典型的には、組成物の重量に対して３５重量％〜約７０重量％（例えば約４５〜５５重量％）の化合物１を含む。
【０１０９】
組成物中の化合物１の濃度は、化合物１の望ましい量を提供するのに必要な医薬組成物の量、及び医薬組成物の望ましい溶解度特性など、いくつかの要素に依存する。
【０１１０】
別の一実施形態において、医薬組成物は化合物１を含み、ここにおいて固体形態の化合物１は、光散乱法（例えばＭａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（イギリス）から販売されているＭａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ）によって測定された平均粒子直径が０．１マイクロメートル〜１０マイクロメートルである。別の一実施形態において、化合物１の粒径は１マイクロメートル〜５マイクロメートルである。別の一実施形態において、化合物１の粒径Ｄ５０は２．０マイクロメートルである。
【０１１１】
示されているように、化合物１に加えて、本発明のいくつかの実施形態において、経口製剤である医薬組成物は更に、１つ以上の賦形剤（例えば充填剤、崩壊剤、界面活性剤、希釈剤、結合剤、滑剤、潤滑剤、着色剤、又は香料、及びこれらの任意の組み合わせ）を含む。
【０１１２】
本発明に好適な充填剤は、医薬組成物の成分に対して適合性であり、すなわち、医薬組成物の溶解度、硬さ、化学的安定性、物理的安定性、又は生物活性を実質的に低下させない。代表的な充填剤には、セルロース、変性セルロース（例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース）、酢酸セルロース、微結晶セルロース、リン酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、デンプン（例えばコーンスターチ、じゃがいもデンプン）、糖類（例えばソルビトール、乳糖、ショ糖、又は同様物）、あるいはこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１１３】
ここで、一実施形態において、この医薬組成物は、少なくとも１つの充填剤を、組成物の重量に対して少なくとも５重量％（例えば少なくとも約２０重量％、少なくとも約３０重量％、又は少なくとも約４０重量％）含む。例えば、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約１０重量％〜約６０重量％（例えば約２０重量％〜約５５重量％、約２５重量％〜約５０重量％、又は約２７重量％〜約４５重量％）の充填剤を含む。別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して少なくとも約２０重量％（例えば少なくとも３０重量％又は少なくとも４０重量％）の微結晶セルロース（例えばＭＣＣ  Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０２）を含む。更に別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約１０重量％〜約６０重量％（例えば約２０重量％〜約５５重量％、又は約２５重量％〜約４５重量％）の微結晶セルロースを含む。
【０１１４】
本発明に好適な崩壊剤は、医薬組成物の分散を強化し、医薬組成物の成分に対して適合性であり、すなわち、医薬組成物の化学的安定性、物理的安定性、硬さ、又は生物活性を実質的に低下させない。代表的な崩壊剤には、クロスカルメロースナトリウム、グリコール酸ナトリウムデンプン、又はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１１５】
ここで、一実施形態において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約１０重量％以下（例えば約７重量％以下、約６重量％以下、又は約５重量％以下）の量の崩壊剤を含む。例えば、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約１重量％〜約１０重量％（例えば約１．５重量％〜約７．５重量％、又は約２．５重量％〜約６重量％）の崩壊剤を含む。別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約１０重量％以下（例えば７重量％以下、６重量％以下、又は５重量％以下）のクロスカルメロースナトリウムを含む。更に別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約１重量％〜約１０重量％（例えば約１．５重量％〜約７．５重量％、又は約２．５重量％〜約６重量％）のクロスカルメロースナトリウムを含む。いくつかの例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約０．１％〜約１０重量％（例えば約０．５重量％〜約７．５重量％、又は約１．５重量％〜約６重量％）の崩壊剤を含む。更に他の例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約０．５％〜約１０重量％（例えば約１．５重量％〜約７．５重量％、又は約２．５重量％〜約６重量％）の崩壊剤を含む。
【０１１６】
本発明に好適な界面活性剤は、医薬組成物の湿潤性を強化し、医薬組成物の成分に対して適合性であり、すなわち、医薬組成物の化学的安定性、物理的安定性、硬さ、又は生物活性を実質的に低下させない。代表的な界面活性剤には、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）、フマル酸ステアリルナトリウム（ＳＳＦ）、ポリエチレン２０ソルビタンモノオレエート（例えばＴｗｅｅｎ（商標））、これらの任意の組み合わせ、及び同様物が挙げられる。
【０１１７】
ここで、一実施形態において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約１０重量％以下（例えば約５重量％以下、約２重量％以下、約１重量％以下、約０．８重量％以下、又は約０．６重量％以下）の量の界面活性剤を含む。例えば、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約１０重量％〜約０．１重量％（例えば約５重量％〜約０．２重量％、又は約２重量％〜約０．３重量％）の界面活性剤を含む。別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して１０重量％以下（例えば約５重量％以下、約２重量％以下、約１重量％以下、約０．８重量％以下、又は約０．６重量％以下）のラウリル硫酸ナトリウムを含む。更に別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約１０重量％〜約０．１重量％（例えば約５重量％〜約０．２重量％、又は約２重量％〜約０．３重量％）のラウリル硫酸ナトリウムを含む。
【０１１８】
本発明に好適な結合剤は、医薬組成物の錠剤強度を強化し、医薬組成物の成分に対して適合性であり、すなわち、医薬組成物の化学的安定性、物理的安定性、又は生物活性を実質的に低下させない。代表的な結合剤には、ポリビニルピロリドン、リン酸水素カルシウム、ショ糖、コーン（トウモロコシ）デンプン、変性セルロース（例えばヒドロキシメチルセルロース）、又はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１１９】
ここで、一実施形態において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して少なくとも約０．１重量％（例えば少なくとも約１重量％、少なくとも約３重量％、少なくとも約４重量％、又は少なくとも約５重量％）の量の結合剤を含む。例えば、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約０．１重量％〜約１０重量％（例えば約１重量％〜約１０重量％、又は約２重量％〜約７重量％）の結合剤を含む。別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して少なくとも約０．１重量％（例えば少なくとも約１重量％、少なくとも約２重量％、少なくとも約３重量％、又は少なくとも約４重量％）のポリビニルピロリドンを含む。更に別の一例において、この医薬組成物は滑剤を含み、組成物の重量に対して約０．１重量％〜約１０重量％（例えば約１重量％〜約８重量％、又は約２重量％〜約５重量％）の量のポリビニルピロリドンを含む。
【０１２０】
本明細書に好適な希釈剤は、望ましい寸法の錠剤を調製するために製剤に必要な嵩を加えることができ、一般に、医薬組成物の成分に対して適合性であり、すなわち、医薬組成物の溶解度、硬さ、化学的安定性、物理的安定性、又は生物活性を実質的に低下させない。代表的な希釈剤には、糖類（例えば粉糖、圧縮糖（ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｂｌｅ  ｓｕｇａｒ）、デキストレート、デキストリン、デキストロース、乳糖、マンニトール、ソルビトール、セルロース、及び変性セルロース（例えば粉末セルロース））、タルク、リン酸カルシウム、デンプン、又はこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０１２１】
ここで、一実施形態において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して４０重量％以下（例えば３５重量％以下、３０重量％以下、又は２５重量％以下、又は２０重量％以下、又は１５重量％以下、又は１０重量％以下）の希釈剤を含む。例えば、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約４０重量％〜約１重量％（例えば約３５重量％〜約５重量％、又は約３０重量％〜約７重量％、又は約２５重量％〜約１０重量％、又は約２０重量％〜約１５重量％）の希釈剤を含む。別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して４０重量％以下（例えば３５重量％以下、２５重量％以下、又は１５重量％以下）のマンニトールを含む。更に別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約３５重量％〜約１重量％（例えば約３０重量％〜約５重量％、又は約２５重量％〜約１０重量％）のマンニトールを含む。
【０１２２】
本発明に好適な滑剤は、医薬組成物の流動性を強化し、医薬組成物の成分に対して適合性であり、すなわち、医薬組成物の溶解度、硬さ、化学的安定性、物理的安定性、又は生物活性を実質的に低下させない。代表的な滑剤には、コロイド状二酸化ケイ素、タルク、又はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１２３】
ここで、一実施形態において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して２重量％以下（例えば１．７５重量％、１．２５重量％以下、又は１．００重量％以下）の量の滑剤を含む。例えば、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約２重量％〜約０．０５重量％（例えば約１．５重量％〜約０．０７重量％、又は約１．０重量％〜約０．０９重量％）の滑剤を含む。別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して２重量％以下（例えば１．７５重量％、１．２５重量％以下、又は１．００重量％以下）のコロイド状二酸化ケイ素を含む。更に別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約２重量％〜約０．０５重量％（例えば約１．５重量％〜約０．０７重量％、又は約１．０重量％〜約０．０９重量％）のコロイド状二酸化ケイ素を含む。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、この医薬組成物は、顆粒−ビーズ混合物が表面（混合ボウル、圧縮ダイ及び／又はパンチの表面）に付着するのを防ぐことができる潤滑剤を含み得る経口医薬固体剤形を含み得る。潤滑剤は更に、顆粒内の粒子間摩擦を低減し、圧縮を改善し、圧縮された医薬組成物のダイプレスからの取り外しを改善する。この潤滑剤はまた、医薬組成物の成分に対して適合性であり、すなわち、医薬組成物の溶解度、硬さ、又は生物活性を実質的に低下させない。代表的な潤滑剤には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸、ステアリン酸アルミニウム、ロイシン、ベヘン酸グリセリル、硬化植物油、又はこれらの任意の組み合わせが挙げられる。一実施形態において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して５重量％以下（例えば４．７５重量％、４．０重量％以下、又は３．００重量％以下、又は２．０重量％以下）の量の潤滑剤を含む。例えば、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約５重量％〜約０．１０重量％（例えば約４．５重量％〜約０．５重量％、又は約３重量％〜約１重量％）の潤滑剤を含む。別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して５重量％以下（例えば４．０重量％以下、３．０重量％以下、又は２．０重量％以下、又は１．０重量％以下）のステアリン酸マグネシウムを含む。更に別の一例において、この医薬組成物は、組成物の重量に対して約５重量％〜約０．１０重量％（例えば約４．５重量％〜約０．１５重量％、又は約３．０重量％〜約０．５０重量％）のステアリン酸マグネシウムを含む。
【０１２５】
本発明の医薬組成物は所望により、組成物の視覚的魅力、味、及び／又はにおいを改善するために、１つ以上の着色剤、香味料、及び／又は香料を含み得る。好適な着色剤、香味料、又は香料は、医薬組成物の成分に対して適合性であり、すなわち、医薬組成物の溶解度、化学的安定性、物理的安定性、硬さ、又は生物活性を実質的に低下させない。一実施形態において、この医薬組成物は、着色剤、香味料、及び／又は香料を含む。一実施形態において、本発明により提供される医薬組成物は紫色である。
【０１２６】
いくつかの実施形態において、この医薬組成物は、錠剤を含むか、又は錠剤に成形することができ、この錠剤は、着色剤でコーティングすることができ、所望により好適なインクを用いて、ロゴ、その他の画像、及び／又はテキストでラベル付けすることができる。更に他の実施形態において、この医薬組成物は、錠剤を含むか、又は錠剤に成形することができ、この錠剤は、着色剤でコーティングすることができ、ワックスがけすることができ、所望により好適なインクを用いて、ロゴ、その他の画像、及び／又はテキストでラベル付けすることができる。好適な着色剤及びインクは、医薬組成物の成分に対して適合性であり、すなわち、医薬組成物の溶解度、化学的安定性、物理的安定性、硬さ、又は生物活性を実質的に低下させない。好適な着色剤及びインクは、任意の色であってよく、かつ、水性又は溶媒系である。一実施形態において、この医薬組成物から製造された錠剤は、着色剤でコーティングされ、次に好適なインクを用いて、ロゴ、その他の画像、及び／又はテキストでラベル付けされる。例えば、本明細書に記述される医薬組成物を含む錠剤は、着色剤を含むフィルムコーティング約３重量％（例えば約６重量％未満又は約４重量％未満）でコーティングすることができる。着色された錠剤は、好適なインクを用いて、錠剤の有効成分の強さを示すロゴ及びテキストでラベル付けすることができる。別の一例において、本明細書に記述される医薬組成物を含む錠剤は、着色剤を含むフィルムコーティング約３重量％（例えば約６重量％未満又は約４重量％未満）でコーティングすることができる。
【０１２７】
別の一実施形態において、この医薬組成物から製造された錠剤は、着色剤でコーティングされ、ワックスがけされ、次に好適なインクを用いて、ロゴ、その他の画像、及び／又はテキストでラベル付けされる。例えば、本明細書に記述される医薬組成物を含む錠剤は、着色剤を含むフィルムコーティング約３重量％（例えば約６重量％未満又は約４重量％未満）でコーティングすることができる。着色された錠剤は、出発材料の錠剤コア重量に対して約０．０１％  ｗ／ｗの量を秤量したカルナバワックス粉末でワックスがけすることができる。ワックスがけされた錠剤は、好適なインクを用いて、錠剤の有効成分の強さを示すロゴ及びテキストでラベル付けすることができる。別の一例において、本明細書に記述される医薬組成物を含む錠剤は、着色剤を含むフィルムコーティング約３重量％（例えば約６重量％未満又は約４重量％未満）でコーティングすることができる。着色された錠剤は、出発材料の錠剤コア重量に対して約０．０１％  ｗ／ｗの量を秤量したカルナバワックス粉末でワックスがけすることができる。ワックスがけされた錠剤は、例えば黒色インクなどの製薬グレードインク（例えば、Ｃｏｌｏｒｃｏｎ、Ｉｎｃ．（Ｗｅｓｔ  Ｐｏｉｎｔ、ＰＡ）から販売されている溶媒系インクであるＯｐａｃｏｄｅ（登録商標）Ｓ−１−１７８２３）を用いて、錠剤の有効成分の強さを示すロゴ及びテキストでラベル付けすることができる。
【０１２８】
代表的な一医薬組成物は、組成物の重量に対して、約１５重量％〜約７０重量％（例えば約１５重量％〜約６０重量％、約１５重量％〜約５０重量％、又は約１５重量％〜約４０重量％、又は約２０重量％〜約７０重量％、又は約３０重量％〜約７０重量％、又は約４０重量％〜約７０重量％、又は約５０重量％〜約７０重量％）の化合物１を含む。上述の組成物は更に、１つ以上の製薬上許容される賦形剤を含み、例えば、約２０重量％〜約５０重量％の充填剤、約１重量％〜約５重量％の崩壊剤、約２重量％〜約０．３重量％の界面活性剤、約０．１重量％〜約５重量％の結合剤、約１重量％〜約３０重量％の希釈剤、約２重量％〜約０．０５重量％の滑剤、及び約５重量％〜約０．１重量％の潤滑剤を含み得る。あるいは、この医薬組成物は、組成物の重量に対して、約１５重量％〜約７０重量％（例えば約２０重量％〜約４０重量％、約２５重量％〜約６０重量％、又は約３０重量％〜約５５重量％）の化合物１、並びに１つ以上の賦形剤、例えば、約２０重量％〜約５０重量％の充填剤、約１重量％〜約５重量％の崩壊剤、約２重量％〜約０．３重量％の界面活性剤、約０．１重量％〜約５重量％の結合剤、約１重量％〜約３０重量％の希釈剤、約２重量％〜約０．０５重量％の滑剤、及び約５重量％〜約０．１重量％の潤滑剤を含有する組成物を含む。
【０１２９】
他の代表的な医薬組成物は、組成物の重量に対して、約１５重量％〜約７０重量％（例えば約１５重量％〜約６０重量％、約１５重量％〜約５０重量％、又は約１５重量％〜約４０重量％又は約２０重量％〜約７０重量％、又は約３０重量％〜約７０重量％、又は約４０重量％〜約７０重量％、又は約５０重量％〜約７０重量％）の化合物１、並びに１つ以上の賦形剤、例えば、約２０重量％〜約５０重量％の充填剤、約１重量％〜約５重量％の崩壊剤、約２重量％〜約０．３重量％の界面活性剤、約０．１重量％〜約５重量％の結合剤、約１重量％〜約３０重量％の希釈剤、約２重量％〜約０．０５重量％の滑剤、及び約２重量％〜約０．１重量％の潤滑剤を含む。
【０１３０】
他の代表的な医薬組成物は、組成物の重量に対して、約１５重量％〜約７０重量％（例えば約１５重量％〜約６０重量％、約１５重量％〜約５０重量％、又は約１５重量％〜約４０重量％又は約２０重量％〜約７０重量％、又は約３０重量％〜約７０重量％、又は約４０重量％〜約７０重量％、又は約５０重量％〜約７０重量％）の化合物１、並びに１つ以上の賦形剤、例えば、約２０重量％〜約５０重量％の充填剤、約１重量％〜約５重量％の崩壊剤、約２重量％〜約０．３重量％の界面活性剤、約０．１重量％〜約５重量％の結合剤、約１重量％〜約３０重量％の希釈剤、約２重量％〜約０．０５重量％の滑剤、及び約２重量％〜約０．１重量％の潤滑剤を含む。
【０１３１】
他の代表的な医薬組成物は、約１５重量％〜約７０重量％（例えば約１５重量％〜約６０重量％、約１５重量％〜約５０重量％、又は約１５重量％〜約４０重量％、又は約２０重量％〜約７０重量％、又は約３０重量％〜約７０重量％、又は約４０重量％〜約７０重量％、又は約５０重量％〜約７０重量％）の化合物１、並びに１つ以上の賦形剤、例えば、約２０重量％〜約５０重量％の充填剤、約１重量％〜約５重量％の崩壊剤、約２重量％〜約０．３重量％の界面活性剤、約０．１重量％〜約５重量％の結合剤、約１重量％〜約３０重量％の希釈剤、約２重量％〜約０．０５重量％の滑剤、及び約２重量％〜約０．１重量％の潤滑剤を含む。
【０１３２】
一実施形態において、本発明は、次のものを含む顆粒状医薬組成物である。
ａ．組成物の重量に対して約３０重量％の化合物１、
ｂ．組成物の重量に対して約４２重量％の微結晶セルロース、
ｃ．組成物の重量に対して約２１重量％のマンニトール、
ｄ．組成物の重量に対して約３重量％のクロスカルメロースナトリウム、
ｅ．組成物の重量に対して約１重量％のラウリル硫酸ナトリウム、
ｆ．組成物の重量に対して約２重量％のステアリン酸マグネシウム、及び
ｇ．組成物の重量に対して約０．５重量％のコロイドシリカ。
【０１３３】
本発明の経口製剤に処方される別の顆粒状組成物は次のものを含む。
ａ．約５０重量％の化合物１、
ｂ．組成物の重量に対して約３０重量％の微結晶セルロース、
ｃ．組成物の重量に対して約１３重量％のマンニトール、
ｄ．組成物の重量に対して約２重量％のクロスカルメロースナトリウム、
ｅ．組成物の重量に対して約４重量％のポリビニルピロリドン、及び
ｆ．組成物の重量に対して約１重量％のラウリル硫酸ナトリウム。
【０１３４】
一実施形態において、本発明の医薬経口製剤は、次のものを含む。
ａ．組成物の重量に対して約３０重量％の化合物１、
ｂ．組成物の重量に対して約４２重量％の微結晶セルロース、
ｃ．組成物の重量に対して約２１重量％のマンニトール、
ｄ．組成物の重量に対して約３重量％のクロスカルメロースナトリウム、
ｅ．組成物の重量に対して約１重量％のラウリル硫酸ナトリウム、
ｆ．組成物の重量に対して約２．５重量％のステアリン酸マグネシウム、及び
ｇ．組成物の重量に対して約０．５重量％のコロイドシリカ。
【０１３５】
本発明の別の医薬経口製剤は、次のものを含む。
ａ．組成物の重量に対して約５０重量％の化合物１、
ｂ．組成物の重量に対して約３０重量％の微結晶セルロース、
ｃ．組成物の重量に対して約１３重量％のマンニトール、
ｄ．組成物の重量に対して約４重量％のクロスカルメロースナトリウム、
ｅ．組成物の重量に対して約４重量％のポリビニルピロリドン、
ｆ．組成物の重量に対して約１重量％のラウリル硫酸ナトリウム、及び
ｇ．組成物の重量に対して約０．５重量％のステアリン酸マグネシウム。
【０１３６】
本発明の別の医薬経口製剤は、次のものを含む。
ａ．組成物の重量に対して約６０重量％の化合物１、
ｂ．組成物の重量に対して約２０重量％の微結晶セルロース、
ｃ．組成物の重量に対して約１３重量％のマンニトール、
ｄ．組成物の重量に対して約４重量％のクロスカルメロースナトリウム、
ｅ．組成物の重量に対して約４重量％のポリビニルピロリドン、
ｆ．組成物の重量に対して約１重量％のラウリル硫酸ナトリウム、及び
ｇ．組成物の重量に対して約０．５重量％のステアリン酸マグネシウム。
【０１３７】
本発明の別の医薬経口製剤は、次のものを含む。
ａ．約１５０〜２５０ｍｇの化合物１、
ｂ．約４０〜５０ｍｇのマンニトール、
ｃ．約１２０〜１３０ｍｇの微結晶セルロース、
ｄ．約１０〜２０ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、
ｅ．約１０〜２０ｍｇのポリビニルピロリドン、
ｆ．約１〜５ｍｇのラウリル硫酸ナトリウム、及び
ｇ．約１〜５ｍｇのステアリン酸マグネシウム。
【０１３８】
本発明の別の医薬経口製剤は、次のものを含む。
ａ．約２００ｍｇの化合物１、
ｂ．約４３ｍｇのマンニトール、
ｃ．約１２３ｍｇの微結晶セルロース、
ｄ．約１５ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、
ｅ．約１３ｍｇのポリビニルピロリドン、
ｆ．約３ｍｇのラウリル硫酸ナトリウム、及び
ｇ．約４ｍｇのステアリン酸マグネシウム。
【０１３９】
本発明の別の医薬経口製剤は、次のものを含む。
ａ．約２００ｍｇの化合物１、
ｂ．約４５ｍｇのマンニトール、
ｃ．約１２３ｍｇの微結晶セルロース、
ｄ．約１５ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、
ｅ．約１０．４ｍｇのポリビニルピロリドン、
ｆ．約２．６ｍｇのラウリル硫酸ナトリウム、及び
ｇ．約４ｍｇのステアリン酸マグネシウム。
【０１４０】
本発明の別の医薬経口製剤は、次のものを含む。
ａ．組成物の重量に対して約７０重量％の化合物１、
ｂ．組成物の重量に対して約１２重量％の微結晶セルロース、
ｃ．組成物の重量に対して約１１重量％のマンニトール、
ｄ．組成物の重量に対して約４重量％のクロスカルメロースナトリウム、
ｅ．組成物の重量に対して約４重量％のポリビニルピロリドン、
ｆ．組成物の重量に対して約１重量％のラウリル硫酸ナトリウム、及び
ｇ．組成物の重量に対して約０．５重量％のステアリン酸マグネシウム。
【０１４１】
本発明の医薬組成物は、錠剤形状、カプセル形状、パウチ形状、トローチ形状、又はその他の経口投与に適した固体剤形に加工することができる。ここでいくつかの実施形態において、この医薬組成物は錠剤形状である。
【０１４２】
本発明の更に別の医薬経口製剤において、初期硬さ５〜２１ｋＰ±２０パーセントを有する成形された医薬錠剤組成物は、組成物の重量に対して約３０重量％の化合物１、組成物の重量に対して約４２重量％の微結晶セルロース、組成物の重量に対して約２１重量％のマンニトール、組成物の重量に対して約３重量％のクロスカルメロースナトリウム、組成物の重量に対して約１重量％のラウリル硫酸ナトリウム、組成物の重量に対して約２．５重量％のステアリン酸マグネシウム、及び、組成物の重量に対して約０．５重量％のコロイドシリカを含む。ここにおいて、成形された医薬錠剤中の化合物１の量は、約２５ｍｇ〜約２５０ｍｇの範囲であり、例えば、１錠当たりの化合物１が５０ｍｇ、又は７５ｍｇ、又は１００ｍｇ、又は１５０ｍｇ、２００ｍｇ、又は２５０ｍｇである。
【０１４３】
本発明の更に別の医薬経口製剤において、初期硬さ５〜２１ｋＰ±２０パーセントを有する成形された医薬錠剤組成物は、組成物の重量に対して約４９重量％の化合物１、組成物の重量に対して約２９重量％の微結晶セルロース、組成物の重量に対して約１２．６重量％のマンニトール、組成物の重量に対して約４重量％のクロスカルメロースナトリウム、組成物の重量に対して約４重量％のポリビニルピロリドン、組成物の重量に対して約１重量％のラウリル硫酸ナトリウム、及び、組成物の重量に対して約０．５重量％のステアリン酸マグネシウムを含む。成形された医薬錠剤中の化合物１の量は、約２５ｍｇ〜約２５０ｍｇの範囲であり、例えば、１錠当たりの化合物１が５０ｍｇ、又は７５ｍｇ、又は１００ｍｇ、又は１５０ｍｇ、２００ｍｇ、又は２５０ｍｇである。
【０１４４】
特定の実施形態において、成形された医薬錠剤は、約１００ｍｇの化合物１を含む。特定の実施形態において、成形された医薬錠剤は、約２００ｍｇの化合物１を含む。
【０１４５】
本発明の別の一態様は、化合物１及びその他の賦形剤（例えば充填剤、崩壊剤、界面活性剤、結合剤、滑剤、着色剤、潤滑剤、又はこれらの任意の組み合わせ）を含む錠剤又はカプセルからなる医薬製剤を提供し、このそれぞれは上述され、及び下記の実施例に記載されており、ここにおいてこの錠剤は、約３０分以内に少なくとも約５０％（例えば少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９９％）の溶解度を有する。一例において、この医薬組成物は、２５ｍｇ〜２５０ｍｇの範囲の量（例えば、２５ｍｇ、又は５０ｍｇ、又は７５ｍｇ、又は１００ｍｇ、又は１５０ｍｇ、２００ｍｇ、又は２５０ｍｇ）の化合物１と、１つ以上の賦形剤（例えば充填剤、崩壊剤、界面活性剤、結合剤、滑剤、着色剤、潤滑剤、又はこれらの任意の組み合わせ）とを含む錠剤からなり、このそれぞれは上述され、及び下記の実施例に記載されており、ここにおいてこの錠剤は、約３０分以内に約５０％〜約１００％（例えば、約５５％〜約９５％、又は約６０％〜約９０％）の溶解度を有する。別の一例において、この医薬組成物は、化合物１と、充填剤、希釈剤、崩壊剤、界面活性剤、結合剤、滑剤、及び潤滑剤のうち１つ以上の賦形剤とを含む組成物を含む錠剤からなり、ここにおいてこの錠剤は、約３０分以内に少なくとも約５０％（例えば少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９９％）の溶解度を有する。
【０１４６】
一実施形態において、この錠剤は、少なくとも約２５ｍｇ（例えば少なくとも約３０ｍｇ、少なくとも約４０ｍｇ、又は少なくとも約５０ｍｇ）の化合物１と、充填剤、希釈剤、崩壊剤、界面活性剤、結合剤、滑剤、及び潤滑剤のうち１つ以上の賦形剤とを含む組成物を含む。別の一実施形態において、この錠剤は、少なくとも約２５ｍｇ（例えば少なくとも約３０ｍｇ、少なくとも約４０ｍｇ、少なくとも約５０ｍｇ、少なくとも約１００ｍｇ、又は少なくとも約１５０ｍｇ）の化合物１と、充填剤、希釈剤、崩壊剤、界面活性剤、結合剤、滑剤、及び潤滑剤のうち１つ以上の賦形剤とを含む組成物を含む。
【０１４７】
溶解度は、標準ＵＳＰ  Ｔｙｐｅ  ＩＩ装置で、９００ｍＬのＤＩ水に溶かした０．１％  ＣＴＡＢを５０ｍＭリン酸二水素カリウムでｐＨ  ６．８に緩衝した溶媒を採用し、約３７℃の温度で約５０〜７５ｒｐｍで攪拌することにより、測定することができる。装置の各試験容器において、実験錠剤１錠が試験される。溶解度はまた、標準ＵＳＰ  Ｔｙｐｅ  ＩＩ装置で、９００ｍＬの５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ  ６．８）に溶かした０．７％ラウリル硫酸ナトリウムの溶媒を採用し、約３７℃の温度で約６５ｒｐｍで攪拌することにより、測定することができる。装置の各試験容器において、実験錠剤１錠が試験される。溶解度はまた、標準ＵＳＰ  Ｔｙｐｅ  ＩＩ装置で、９００ｍＬの５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ  ６．８）に溶かした０．５％ラウリル硫酸ナトリウムの溶媒を採用し、約３７℃の温度で約６５ｒｐｍで攪拌することにより、測定することができる。装置の各試験容器において、実験錠剤１錠が試験される。
【０１４８】
化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、化合物１塩酸塩形態Ａの製造方法
化合物１
化合物１は、他の固体形態のための出発点として使用され、これは、スキーム１〜４により、酸塩化物部分をアミン部分と結合させることによって調製することができる。
【０１４９】
スキーム１．酸塩化物部分の合成。
【０１５０】
【化２】
2015504920.tif 000027
【０１５１】
スキーム１は、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボニルクロリドの調製を示しており、これは、化合物１のアミド連結を形成するためにスキーム３で使用される。
【０１５２】
出発物質２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−カルボン酸は、Ｓａｌｔｉｇｏ（Ｌａｎｘｅｓｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎの子会社）から市販されている。２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−カルボン酸のカルボン酸部分を還元して第一級アルコールにした後、塩化チオニル（ＳＯＣｌ２）を使用して対応する塩化物に変換することによって５−（クロロメチル）−２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソールを得て、これを次にシアン化ナトリウムを使用して２−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）アセトニトリルに変換する。２−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）アセトニトリルを塩基及び１−ブロモ−２−クロロエタンで処理して、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボニトリルを得る。１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボニトリルのニトリル部分を、塩基を用いてカルボン酸に変換し、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボン酸を得、これに塩化チオニルを用いて望ましい酸塩化物に変換する。
【０１５３】
スキーム２．酸塩化物部分の別の合成。
【０１５４】
【化３】
2015504920.tif 000028
【０１５５】
スキーム２は、必要な酸塩化物の別の合成を示す。５−ブロモメチル−２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソールは、パラジウム触媒の存在下でシアノ酢酸エチルと結合して、対応するアルファシアノエチルエステルを形成する。カルボン酸のエステル部分のけん化により、シアノエチル化合物が得られる。シアノエチル化合物を塩基の存在下、１−ブロモ−２−クロロエタンでアルキル化することにより、シアノシクロプロピル化合物を得る。シアノシクロプロピル化合物を塩基で処理することにより、カルボン酸塩が得られ、これを酸処理によりカルボン酸に変換する。次に、塩化チオニル又は同様物などの塩素化剤を使用して、カルボン酸の酸塩化物への変換が達成される。
【０１５６】
スキーム３．アミン部分の合成。
【０１５７】
【化４】
2015504920.tif 000029
【０１５８】
スキーム３は、必要なｔｅｒｔ−ブチル３−（６−アミノ−３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエートの調製を示し、これはスキーム３において１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボニルクロリドと結合することにより化合物１を得る。パラジウム触媒によって、２−ブロモ−３−メチルピリジンを３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニルボロン酸と結合させることにより、ｔｅｒｔ−ブチル３−（３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエートが得られ、これは次に望ましい化合物に変換される。
【０１５９】
スキーム４．３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸の酸性塩の形成。
【０１６０】
【化５】
2015504920.tif 000030
【０１６１】
スキーム４は、トリエチルアミン及び４−ジメチルアミノピリジンを用いて、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボニルクロリドを、ｔｅｒｔ−ブチル３−（６−アミノ−３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエートと結合させて、最初に化合物１のｔｅｒｔ−ブチルエステルを提供することを示す。
【０１６２】
化合物１形態Ｉ
化合物１形態Ｉは、化合物１の塩形態（例えば塩酸塩）を、有効な時間にわたって適切な溶媒に分散又は溶解させることにより調製される。ｔｅｒｔ−ブチルエステルをＨＣｌなどの酸で処理することにより、化合物１の塩酸塩が得られ、これは典型的に結晶質固体である。化合物１形態Ｉはまた、適切な酸（例えば蟻酸）で処理することにより、ｔ−ブチルエステル前駆体から直接調製することもできる。
【０１６３】
３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸の塩酸塩を使用して、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸の塩酸塩を、有効な時間にわたって適切な溶媒に分散又は溶解させることにより、形態Ｉを作製することができる。３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸の他の塩、例えば他の鉱酸又は有機酸に由来する塩も使用することができる。このような他の塩は、ｔ−ブチルエステル部分の酸媒介加水分解に由来する。他の酸に由来する塩としては、例えば、硝酸、硫酸、リン酸、ホウ酸、酢酸、安息香酸、マロン酸が挙げられ得る。３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸の塩形態は、使用される溶媒に応じて可溶性である場合も可溶性でない場合もあるが、溶解性の欠如が形態Ｉの形成を妨げることはない。例えば、一実施形態において、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸の塩酸塩形態は水にごくわずかしか溶けないが、この適切な溶媒は、水、又はアルコール／水混合物（例えば５０％メタノール／水混合物）であり得る。一実施形態において、適切な溶媒は水である。
【０１６４】
３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸の塩から形態Ｉを形成するための有効な時間は、２〜２４時間又はそれ以上の任意の時間であり得る。必要な時間の長さは、温度に反比例することが知られている。すなわち、温度が高いほど、酸の解離に影響をもたらして形態Ｉを形成するのに必要な時間が短くなる。溶媒が水の場合、分散液を室温で約２４時間攪拌することで、形態Ｉが収率約９８％で得られる。プロセス目的のために３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸の塩の溶液が望ましい場合は、高温を使用することができる。高温で有効な時間にわたって溶液を攪拌した後、冷却による再結晶で、実質的に純粋な形態Ｉが得られる。一実施形態において、実質的に純粋とは、約９０％超の純度を意味する。別の一実施形態において、実質的に純粋とは、約９５％超の純度を意味する。別の一実施形態において、実質的に純粋とは、約９８％超の純度を意味する。別の一実施形態において、実質的に純粋とは、約９９％超の純度を意味する。選択される温度は、使用する溶媒に部分的に依存し、当業者が十分に決定できる範囲である。一実施形態において、この温度は、室温〜約８０℃である。別の一実施形態において、この温度は、室温〜約４０℃である。別の一実施形態において、この温度は、約４０℃〜約６０℃である。別の一実施形態において、この温度は、約６０℃〜約８０℃である。
【０１６５】
化合物１形態Ｉはまた、化合物１の塩の前駆体である３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）−ｔ−ブチルベンゾエート（スキーム３を参照）から直接形成することができる。ここで、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）−ｔ−ブチルベンゾエートは、適切な反応条件下で適切な酸（例えば蟻酸）と反応させることで、化合物１形態Ｉが得られる。
【０１６６】
化合物１形態Ｉは更に、有機溶媒で再結晶させることにより精製することができる。有機溶媒の例としては、トルエン、クメン、アニソール、１−ブタノール、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸イソブチル、メチルｔ−ブチルエーテル、メチルイソブチルケトン、及び１−プロパノール−水混合物が挙げられるがこれらに限定されない。温度は、上述の通りであり得る。例えば、形態Ｉは、完全に溶解するまで７５℃で１−ブタノールに溶解する。この溶液を０．２℃／分の速度で１０℃まで冷却すると、形態Ｉの結晶が得られ、これは濾過により分離することができる。
【０１６７】
一実施形態において、化合物１形態Ｉは、Ｃｕ  Ｋ  α線を用いて得られた粉末Ｘ線回折において、１５．２〜１５．６度、１６．１〜１６．５度、及び１４．３〜１４．７度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは、１５．４、１６．３、及び１４．５度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、１４．６〜１５．０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、１４．８度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、１７．６〜１８．０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、１７．８度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、１６．４〜１６．８度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、１６．４〜１６．８度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、１６．６度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、７．６〜８．０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、７．８度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、２５．８〜２６．２度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、２６．０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、２１．４〜２１．８度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、２１．６度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、２３．１〜２３．５度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態Ｉは更に、２３．３度のピークによって特徴付けられる。いくつかの実施形態において、化合物１形態Ｉは、図１に実質的に類似した回折パターンによって特徴付けられる。いくつかの実施形態において、化合物１形態Ｉは、図２に実質的に類似した回折パターンによって特徴付けられる。
【０１６８】
いくつかの実施形態において、化合物１形態ＩのＤ９０粒径分布は、約８２μｍ以下である。いくつかの実施形態において、化合物１形態ＩのＤ５０粒径分布は、約３０μｍ以下である。
【０１６９】
化合物１形態ＩＩ
化合物１形態ＩＩは、化合物１形態Ｉを適切な溶媒中において十分な濃度で十分な時間スラリー化することにより調製される。このスラリーを遠心分離又は減圧下で濾過し、室温条件で十分な時間乾燥させることで、化合物１形態ＩＩを得る。
【０１７０】
いくつかの実施形態において、約２０〜４０ｍｇの化合物１形態Ｉを、約４００〜６００μＬの適切な溶媒中でスラリー化する。別の一実施形態において、約２５〜３５ｍｇの化合物１形態Ｉを、約４５０〜５５０μＬの適切な溶媒中でスラリー化する。別の一実施形態において、約３０ｍｇの化合物１形態Ｉを、約５００μＬの適切な溶媒中でスラリー化する。
【０１７１】
いくつかの実施形態において、化合物１形態Ｉが溶媒と共にスラリー化される時間は、１時間〜４日間である。より具体的には、化合物１形態Ｉが溶媒と共にスラリー化される時間は、１〜３日間である。より具体的には、この時間は２日間である。
【０１７２】
いくつかの実施形態において、適切な溶媒は、化合物１形態ＩＩの結晶格子内の空間に入るのに十分な寸法の有機溶媒から選択される。他の実施形態において、この溶媒（ｔｈｅ  ｓｏｌｖａｔｅ）は、約１００Å３の大きさの空間に入るのに十分な寸法である。
【０１７３】
他の実施形態において、この溶媒は、メタノール、エタノール、アセトン、２−プロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸メチル、２−ブタノン、蟻酸エチル、及び２−メチルテトラヒドロフランからなる群から選択される。
【０１７４】
他の実施形態において、これらの溶媒の２つ以上の混合物を使用して、化合物１形態ＩＩを得ることができる。あるいは、化合物１形態ＩＩは、これらの溶媒のうち１つ以上及び水を含む混合物から得ることができる。
【０１７５】
いくつかの実施形態において、化合物１形態ＩＩを乾燥させるための有効な時間は１〜２４時間である。より具体的には、この時間は６〜１８時間である。より具体的には、この時間は約１２時間である。
【０１７６】
別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは、化合物１の塩形態（例えば化合物１の塩酸塩）を有効な時間にわたって適切な溶媒に分散又は溶解させることによって調製される。
【０１７７】
本明細書に開示される化合物１形態ＩＩは、化合物１の結晶格子を含み、この結晶格子の空間は空であるか、又は好適な溶媒の１つ以上の分子によって占有されているか、又は部分的に占有されている。好適な溶媒には、メタノール、エタノール、アセトン、２−プロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸メチル、２−ブタノン、蟻酸エチル、及び２−メチルテトラヒドロフランが挙げられるがこれらに限定されない。化合物１の同形溶媒和物形態の特定の物理的特性（例えば粉末Ｘ線回折、融点、及びＤＳＣ）は、対象となる特定の溶媒分子によって実質的に影響を受けない。
【０１７８】
一実施形態において、化合物１形態ＩＩは、Ｃｕ  Ｋ  α線を用いて得られた粉末Ｘ線回折において、２１．５０〜２１．９０度、８．８０〜９．２０度、及び１０．８０〜１１．２０度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは、Ｃｕ  Ｋ  α線を用いて得られた粉末Ｘ線回折において、２１．５０〜２１．９０度、８．８０〜９．２０度、１０．８０〜１１．２０度、１８．００〜１８．４０度、及び２２．９０〜２３．３０度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは、２１．７０、８．９８、及び１１．０４度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは、２１．７０、８．９８、１１．０４、１８．１６、及び２３．０６度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは、２１．５０〜２１．９０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、２１．７０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、８．８０〜９．２０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、８．９８度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１０．８０〜１１．２０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１１．０４度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１８．００〜１８．４０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１８．１６度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、２２．９０〜２３．３０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、２３．０６度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、２０．４０〜２０．８０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、２０．６３度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、２２．００〜２２．４０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、２２．２２度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１８．４０〜１８．８０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１８．５７度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１６．５０〜１６．９０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１６．６６度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１９．７０〜２０．１０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは更に、１９．８６度のピークによって特徴付けられる。
【０１７９】
いくつかの実施形態において、化合物１形態ＩＩは、図３に実質的に類似した回折パターンによって特徴付けられる。いくつかの実施形態において、化合物１形態ＩＩは、図４に示されるものに実質的に類似した回折パターンによって特徴付けられる。
【０１８０】
別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩを形成する溶媒和物は、メタノール、エタノール、アセトン、２−プロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸メチル、２−ブタノン、蟻酸エチル、及び２−メチルテトラヒドロフランからなる群から選択される。次の化合物１形態ＩＩについての回折パターンが図に示されている：メタノール（図５）、エタノール（図６）、アセトン（図７）、２−プロパノール（図８）、アセトニトリル（図９）、テトラヒドロフラン（図１０）、酢酸メチル（図１１）、２−ブタノン（図１２）、蟻酸エチル（図１３）、及び２−メチルテトラヒドロフラン（図１４）。
【０１８１】
別の一実施形態において、本発明は、ＤＳＣ、又は当事者に周知の類似の分析方法によって決定される、２つ以上の相転移を呈する化合物１形態ＩＩを提供する。いくつかの実施形態において、化合物１形態ＩＩのＤＳＣは、図１５に示すＤＳＣトレースに実質的に類似である。この態様の他の一実施形態において、このＤＳＣは２つの相転移を呈する。別の一実施形態において、このＤＳＣは３つの相転移を呈する。別の一実施形態において、相転移の１つは２００〜２０７℃で起こる。別の一実施形態において、相転移の１つは２０４〜２０６℃で起こる。別の一実施形態において、相転移の１つは１８３〜１９０℃で起こる。別の一実施形態において、相転移の１つは１８５〜１８７℃で起こる。別の一実施形態において、化合物１、溶媒和物形態Ａの融点は１８３℃〜１９０℃である。別の一実施形態において、化合物１、溶媒和物形態Ａの融点は１８５℃〜１８７℃である。
【０１８２】
別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは、ＴＧＡで測定した場合に１〜１０重量パーセント（ｗｔ％）の溶媒和物を含む。いくつかの実施形態において、化合物１形態ＩＩのＴＧＡは、図１６に示すＴＧＡトレースに実質的に類似である。別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩは、ＴＧＡ、又は当事者に周知の類似の分析方法にで測定した場合に、２〜５重量％の溶媒和物を含む。
【０１８３】
別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩアセトン溶媒和物の立体構造は、単独Ｘ線解析に基づいて、図１７に示すものに実質的に類似である。
【０１８４】
別の一実施形態において、化合物１形態ＩＩアセトン溶媒和物は、Ｐ２１／ｎ空間群と、下記の単位胞寸法を有する。
ａ＝１６．５２３５（１０）Å  α＝９０°
ｂ＝１２．７４２５（８）Å    β＝１０３．７３６（４）°
ｃ＝２０．５５１２（１３）Å  γ＝９０°。
【０１８５】
化合物１塩酸塩形態Ａ
化合物１塩酸塩形態Ａは、化合物１の塩酸塩を最小限の溶媒に溶かし、溶媒を時間をかけて蒸発させて除去することにより、化合物１の塩酸塩から調製することができる。別の一実施形態において、この溶媒はアルコールである。別の一実施形態において、この溶媒はエタノールである。時間をかけた蒸発は、一般に、溶媒の蒸発を妨げることによって実施される。例えば、一実施形態において、時間をかけた蒸発には、化合物１の塩酸塩をバイアル中に溶かす工程と、フィルムに貫通した穴を含むパラフィルムでバイアルを覆う工程とが含まれる。
【０１８６】
一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは、Ｃｕ  Ｋ  α線を用いて得られた粉末Ｘ線回折において、８．８０〜９．２０度、１７．３０〜１７．７０度、及び１８．２０〜１８．６０度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは、Ｃｕ  Ｋ  α線を用いて得られた粉末Ｘ線回折において、８．８０〜９．２０度、１７．３０〜１７．７０度、１８．２０〜１８．６０度、１０．１０〜１０．５０、及び１５．８０〜１６．２０度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは、８．９６、１７．５１、及び１８．４５度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは、８．９６、１７．５１、１８．４５、１０．３３、及び１６．０１度の１つ以上のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは、８．８０〜９．２０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは、８．９６度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１７．３０〜１７．７０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは、１７．５１度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１８．２０〜１８．６０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１８．４５度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１０．１０〜１０．５０度度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１０．３３度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１５．８０〜１６．２０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１６．０１度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１１．７０〜１２．１０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１１．９４度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、７．９０〜８．３０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、８．１４度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、９．９０〜１０．３０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１０．１０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１６．４０〜１６．８０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１６．５５度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、９．３０〜９．７０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、９．５４度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１６．４０〜１６．８０度のピークによって特徴付けられる。別の一実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは更に、１６．５５度のピークによって特徴付けられる。いくつかの実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは、図１８に示される二量体として特徴付けられる。
【０１８７】
いくつかの実施形態において、化合物１塩酸塩形態Ａは、図１９に実質的に類似した回折パターンによって特徴付けられる。
【０１８８】
別の一実施形態において、本発明は、Ｐ−１空間群と、下記の単位胞寸法を有する結晶質化合物１塩酸塩形態Ａを特徴とする。
ａ＝１０．２７０２（２）Å  α＝６７．０２７０（１０）°
ｂ＝１０．８７８２（２）Å  β＝６６．１８１０（１０）°
ｃ＝１２．４８２１（３）Å  γ＝７２．４７６０（１０）°。
【０１８９】
医薬組成物の製造方法
本発明の投与単位形態は、混合物又は組成物（例えば粉末又は顆粒）を圧力下で圧密又は圧縮して、安定な３次元形状（例えば錠剤）を形成することによって製造することができる。本明細書で使用されるとき、「錠剤」は、コーティングの有無を問わず、すべての形状及び寸法の圧縮された医薬投与単位形態を含む。
【０１９０】
本明細書で使用される表現「投与単位形態」は、治療を受ける患者に適した、物理的に別個になっている薬剤単位を指す。一般に、圧密された混合物は、圧密前の混合物よりも高い密度を有する。本発明の投与単位形態は、凹状及び／又は凸状面、角が丸くなった形状又は角が鋭い形状、並びに丸形から矩形まで含む、ほぼ任意の形状を有し得る。いくつかの実施形態において、本発明の圧縮された投与形態は、平らな面を有する丸形錠剤を含む。本発明の固体医薬投与形態は、圧縮固体医薬投与形態を形成する当業者に周知の、任意の圧密及び圧縮方法によって調製することができる。特定の実施形態において、本明細書に提供される製剤は、例えば関連するテキストブックに記述されているような、医薬製剤分野において当業者に周知である従来方法を使用して調製することができる。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２１版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、Ｍｄ．（２００３）、Ａｎｓｅｌら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  Ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、第７版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、（１９９９）、Ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、第４版、Ｒｏｗｅら編、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ（２００３）、Ｇｉｂｓｏｎ、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  Ａｎｄ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ、ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ（２００１）を参照のこと。これらの参考文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１９１】
造粒と圧縮
いくつかの実施形態において、活性剤である化合物１と、含まれている製薬上許容される賦形剤（例えば充填剤、希釈剤、崩壊剤、界面活性剤、滑剤、結合剤、潤滑剤、又はこれらの任意の組み合わせ）とを含む粉末を含む固体形状には、乾式造粒プロセスを行うことができる。乾式造粒プロセスは、粉末を凝集させて、更なるプロセスに好適な寸法を有するより大きな粒子にする。乾式造粒により、混合物の流動性が改善され、これにより質量の変動又は成分の均質性を満たす必要がある錠剤製造が可能になる。
【０１９２】
本明細書に記述される製剤は、１つ以上の混合及び乾式造粒工程を使用して製造することができる。混合及び造粒工程の順序及び数は、重要なものではないと考えられる。ただし、賦形剤と化合物１のうち少なくとも１つに、乾式造粒又は湿式高剪断造粒を行ってから、圧縮を行って錠剤にすることができる。錠剤圧縮の前に化合物１と賦形剤に対して一緒に行われる乾式造粒は、驚くべきことに、本組成物及び製剤の成分間に密接な物理的接触を提供する単純で安価かつ効率的な方法となり、これにより、良好な安定性を備えた錠剤製剤が得られると見られる。乾式造粒は、機械的プロセスによって実施することができ、これは、湿式造粒プロセス（これも本明細書において想到される）とは対照的に、液体物質を使用せずに（水溶液の形態でも、有機溶質系溶液でも、又はこれらの混合物でもなく）、混合物にエネルギーを伝達する。一般に、機械的プロセスは、ローラーコンパクションにより提供されるような圧密を必要とする。乾式造粒の代替方法の例は、スラッギングである。
【０１９３】
いくつかの実施形態において、ローラーコンパクションは、１つ以上の物質に非常に集中的に機械的圧密を行う工程を含む造粒プロセスである。いくつかの実施形態において、粉末の混合物を含む医薬組成物が、２本の反対方向に回転するローラーの間でローラーコンパクションにより圧縮され、固体のシートを形成し、これを次にふるい内で砕いて粒子状物質を形成する。この粒子状物質中では、成分間の密接な機械的接触が得られる。ローラーコンパクション装置の例は、Ｇｅｒｔｅｉｓ  Ｍａｓｃｈｉｎｅｎ＋Ｐｒｏｃｅｓｓｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ＡＧ製のＭｉｎｉｐａｃｔｏｒ（登録商標）Ｇｅｒｔｅｉｓ  ３Ｗ−Ｐｏｌｙｇｒａｎである。
【０１９４】
いくつかの実施形態において、本発明による錠剤圧縮は、いかなる液体物質も使用せずに（水溶液の形態でも、有機溶質系溶液でも、又はこれらの混合物でもなく）、すなわち乾式造粒プロセスで、行うことができる。典型的な一実施形態において、結果として得られるコア又は錠剤は、１〜１５ｋＰの範囲、例えば１．５〜１２．５ｋＰ、好ましくは２〜１０ｋＰの範囲の圧縮強度を有する。
【０１９５】
簡単な製造手順
いくつかの実施形態において、成分は、本明細書に記載される処方に従って秤量される。次に、すべての粒子間成分をふるいにかけ、よく混合する。この成分は、好適な潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）で潤滑することができる。次の工程は、粉末混合物及び寸法を揃えた成分の圧密／スラッギング工程を含み得る。次に、圧密／スラッギングされた混合物を粉砕して顆粒状にし、ふるいにかけて、望ましい寸法を得る。次に、この顆粒は、例えばステアリン酸マグネシウムなどで更に潤滑することができる。次に本発明の顆粒組成物を好適なパンチで圧縮して、本発明による様々な医薬製剤にすることができる。所望により、この錠剤は、フィルム、着色剤、その他のコーティングを用いてコーティングすることができる。
【０１９６】
本発明の他の一態様は、化合物１と、１つ以上の賦形剤（充填剤、希釈剤、結合剤、滑剤、界面活性剤、潤滑剤、崩壊剤から選択される）とを含む組成物の混合物を提供する工程と、この組成物を圧縮して、約３０分以内に少なくとも約５０％の溶解度を有する錠剤にする工程とを含む、医薬組成物の製造方法を提供する。
【０１９７】
別の一実施形態において、粉末及び液体成分の混合物から本発明の医薬製剤を得るために、湿式造粒プロセスが実施される。例えば、化合物１と、１つ以上の賦形剤（充填剤、希釈剤、結合剤、滑剤、界面活性剤、潤滑剤、崩壊剤から選択される）とを含む組成物の混合物を含む医薬組成物は、本明細書に示す処方に従って秤量される。次に、すべての粒子間成分をふるいにかけ、高剪断若しくは低剪断造粒機、又は二軸造粒機内で、水、又は界面活性剤を加えた水、又は結合剤を加えた水、又は界面活性剤及び結合剤を加えた水を用いて混合して、粉末混合物を顆粒化する。界面活性剤及び／又は結合剤を加えるか又は加えずに、水以外の流体を使用して、粉末混合物を顆粒化することもできる。次に、湿潤顆粒を所望により、好適な粉砕機を使用して粉砕することができる。次に、所望により、任意の好適な方法で成分を乾燥させることにより、混合物から水を除去することができる。次に、乾燥した顆粒を所望により、必要な寸法に粉砕することができる。次に、追加の顆粒賦形剤を混合により加えることができる（例えば充填剤、希釈剤、及び崩壊剤）。次に、寸法を揃えた顆粒を更に、ステアリン酸マグネシウム、及び崩壊剤（例えば、クロスカルメロースナトリウム）で潤滑することができる。次に本発明の顆粒組成物を好適なパンチで圧縮して、本発明による様々な医薬製剤にすることができる。所望により、この錠剤は、フィルム、着色剤、その他のコーティングを用いてコーティングすることができる。
【０１９８】
特に好ましい一実施形態において、本発明の医薬組成物は、連続二軸湿式造粒機（ＴＳＷＧ）プロセスによって調製される。連続製造により、オンラインモニタリング及び制御を備えた高品質かつ高い均質性の生成物が得られる。連続製造は更に、「データ豊富」な設計スペースを備えた設計開発により品質を促進し、下流プロセス及び最終生成物の品質に対する上流変数の影響を理解するのが容易になる。加えて、本発明の医薬組成物は、商業規模装置で早期に完成されるため、スケールアップの際のリスク及び開発後期での処方変更を回避する。最後に、連続製造は、プロセス制御の改善、生成物取扱いの削減、及び真の徐放性効率などの商業的な製造上の利点を有する。全体的な結果として、プロセスチェック数が少なく、より強靱で、制御可能で、かつスケーラブルなプロセスとなり、生成物品質の改善がもたらされ、よって患者の安全性が高まる。
【０１９９】
例えば、一般的な造粒技法である高剪断造粒（ＨＳＧ）は、過剰な造粒が生じるリスクとプロセス制御の悪さで知られている。このプロセスをスケールアップすることは非常に難しく、大きなリスクを伴う。ＨＳＧプロセスから連続ＴＳＷＧプロセスに変えることによって、同じ装置を使用してより長い時間作動させることにより、異なるバッチサイズを製造するスケールアップが可能になる。これにより、湿式造粒プロセスで一般的に生じるスケールアップリスクが排除される。加えて、ＴＳＷＧプロセスはより強靱であり、過剰造粒に対する影響が少ないことが見出された。化合物１錠剤について、図２８に見られるように、ＨＳＧプロセスは水分量の増加により有意な溶解遅延を示し、一方でＴＳＷＧプロセスは同様範囲の水添加に対して変化を示さなかった。驚くべきことに、二軸湿式造粒プロセスを用いた場合、４５〜５５重量パーセントの化合物１を含む錠剤製剤、及び６０〜７０重量パーセントの化合物１を含む錠剤製剤では、性能の変化は見られなかった。これは、ＨＳＧプロセスとは違っていた。加えて、この連続的な、生成物の品質を改善するプロセスは、必要としている患者が薬剤を入手できないというＦＤＡからの一般的な苦情に対処する。
【０２００】
一実施形態において、この連続的プロセスは、ロス・イン・ウェイト供給により、連続的インライン混合機に、個々の賦形剤及び化合物１を供給することから出発する。この混合機から、材料が連続的に運ばれ、二軸湿式造粒、乾燥、粉砕、追加造粒賦形剤添加、混合、圧縮、及びフィルムコーティングを経てプロセスされる。
【０２０１】
例えば、一実施形態において、化合物１を含む錠剤は、下記のフローチャートにより連続的に調製され得る。
【０２０２】
【数２５】
2015504920.tif 000031
【０２０３】
この代表的な混合物の成分それぞれについて、上記及び後述の実施例で説明される。更に、この混合物は、上記及び後述の実施例で説明されるように、１つ以上の着色剤、１つ以上の香味料、及び／又は１つ以上の香料などの所望による添加物を含み得る。いくつかの実施形態において、この混合物中のこれら成分（及び任意の所望による添加物）それぞれの相対的濃度（例えば重量％）も、上記及び後述の実施例に示されている。この混合物を構成する成分は、順に提供することができ、又は任意に添加物を組み合わせて提供することができる。また、成分、又は成分の組み合わせは、任意の順序で提供され得る。一実施形態において、潤滑剤は、この混合物に添加される最後の成分である。
【０２０４】
別の一実施形態において、この混合物は、化合物１と、任意の１つ以上の賦形剤（結合剤、滑剤、界面活性剤、希釈剤、潤滑剤、崩壊剤、及び充填剤）とを含む組成物を含み、ここにおいてこれら成分はそれぞれ、粉末形態で提供される（例えば、光散乱により測定した平均粒子直径が２５０μｍ以下（例えば１５０μｍ以下、１００μｍ以下、５０μｍ以下、４５μｍ以下、４０μｍ以下、又は３５μｍ以下）の粒子として提供される）。例えば、この混合物は、化合物１、希釈剤、滑剤、界面活性剤、潤滑剤、崩壊剤、及び充填剤の組成物を含み、ここにおいてこれら成分はそれぞれ、粉末形態で提供される（例えば、光散乱により測定した平均粒子直径が２５０μｍ以下（例えば１５０μｍ以下、１００μｍ以下、５０μｍ以下、４５μｍ以下、４０μｍ以下、又は３５μｍ以下）の粒子として提供される）。別の一例において、この混合物は、化合物１、希釈剤、結合剤、界面活性剤、潤滑剤、崩壊剤、及び充填剤の組成物を含み、ここにおいてこれら成分はそれぞれ、粉末形態で提供される（例えば、光散乱により測定した平均粒子直径が２５０μｍ以下（例えば１５０μｍ以下、１００μｍ以下、５０μｍ以下、４５μｍ以下、４０μｍ以下、又は３５μｍ以下）の粒子として提供される）。
【０２０５】
別の一実施形態において、この混合物は、化合物１、並びに、結合剤、滑剤、希釈剤、界面活性剤、潤滑剤、崩壊剤、及び充填剤の任意の組み合わせの組成物を含み、ここにおいてこれら成分はそれぞれ、実質的に水を含まない。この成分はそれぞれ、成分の重量に対して、５重量％未満（例えば２重量％未満、１重量％未満、０．７５重量％未満、０．５重量％未満、又は０．２５重量％未満）の水を含む。例えば、この混合物は、化合物１、希釈剤、滑剤、界面活性剤、潤滑剤、崩壊剤、及び充填剤の組成物を含み、ここにおいてこれら成分はそれぞれ、実質的に水を含まない。いくつかの実施形態において、この成分はそれぞれ、成分の重量に対して、５重量％未満（例えば２重量％未満、１重量％未満、０．７５重量％未満、０．５重量％未満、又は０．２５重量％未満）の水を含む。
【０２０６】
別の一実施形態において、混合物を圧縮して錠剤にする工程は、型（例えば金型）に混合物を充填し、混合物に圧力を印加することにより達成される。これは、ダイプレス又は他の類似の装置を用いて達成することができる。いくつかの実施形態において、化合物１及び賦形剤の混合物は、最初に顆粒形態に加工され得る。この顆粒を次に、寸法を揃えて錠剤に圧縮するか、又は製薬分野で既知の方法によりカプセル化のために処方される。型内の混合物に圧力を印加するのは、各圧縮中に同じ圧力を用いて、又は、圧力中に異なる圧力を用いて、繰り返すことができることに留意されたい。別の一例において、粉末成分又は顆粒の混合物は、約３０分間で溶解度が約５０％以上（例えば、約３０分間で溶解度が約５５％以上、又は約３０分間で溶解度が約６０％以上）の錠剤を形成するのに十分な圧力を印加するダイプレスを用いて圧縮することができる。例えば、この混合物は、硬さが少なくとも約５ｋＰ（少なくとも約５．５ｋＰ、少なくとも約６ｋＰ、少なくとも約７ｋＰ、少なくとも約１０ｋＰ、又は少なくとも１５ｋＰ）の錠剤を製造するよう、ダイプレスを用いて圧縮される。いくつかの例において、混合物は、約５〜２０ｋＰの錠剤硬さを製造するよう圧縮される。
【０２０７】
いくつかの実施形態において、本明細書に記述される医薬組成物を含む錠剤は、錠剤の重量に対して約３．０重量％の、着色剤を含むフィルムコーティングでコーティングされ得る。特定の例において、この錠剤をコーティングするのに使用される着色剤懸濁液又は溶液は、その着色剤懸濁液又は溶液の重量に対して、約２０％  ｗ／ｗの固形物を含む。また更なる例において、コーティングされた錠剤は、ロゴ、その他の画像、又はテキストでラベル付けすることができる。
【０２０８】
別の一実施形態において、医薬組成物を製造する方法は、固体形態の混合物（例えば粉末及び／又は液体成分の混合物）を提供する工程と、ここにおいてこの混合物は、化合物と、１つ以上の賦形剤（結合剤、滑剤、希釈剤、界面活性剤、潤滑剤、崩壊剤、及び充填剤から選択される）とを含み、この混合物が実質的に均一になるまで混合物を混合する工程と、この混合物を顆粒形態に圧縮又は圧密する工程とを含む。次に、上記及び後述の実施例に示されるように、化合物１を含む顆粒組成物を圧縮して錠剤にするか、又はカプセルに製剤することができる。あるいは、医薬組成物を製造する方法は、化合物１と１つ以上の賦形剤（例えば結合剤、滑剤、希釈剤、界面活性剤、潤滑剤、崩壊剤、及び充填剤）の混合物を提供する工程と、この混合物が実質的に均一になるまで混合する工程と、この混合物を、後述の実施例に示すように乾燥造粒組成物を用いてローラーコンパクターで顆粒形態に圧縮／圧密する工程か、あるいは、後述の実施例に示すように高剪断湿潤顆粒圧密プロセスを用いて圧縮／圧密し、顆粒にする工程を含む。例えば本明細書に記述される錠剤などの医薬製剤は、本明細書に記述される選択された賦形剤に加えて、化合物１を組み込むことによって調製された顆粒を使用して製造することができる。
【０２０９】
いくつかの実施形態において、この混合物は、手動混合、ミキサー、ブレンダー、これらの任意の組み合わせ、又は同様方法を用いて、攪拌、混合、振盪、又は同様方法により、混合される。成分又は成分の組み合わせが順に添加される場合、混合は、連続する添加の間に行うことができ、成分添加を通じで連続的に行うことができ、すべての成分又は成分の組み合わせを添加した後に行うことができ、又は、これらの任意の組み合わせで行うことができる。混合物は、実質的に均一な組成物になるまで混合される。
【０２１０】
別の一実施形態において、本発明は、０．１マイクロメートル〜５０マイクロメートルの有意な粒径画分を有する粒子を製造するのに好適な、空気圧を用いた好適な従来型粉砕装置内で、化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、化合物１塩酸塩形態Ａをジェットミリングする工程を含む。別の一実施形態において、この粒径は０．１マイクロメートル〜２０マイクロメートルである。別の一実施形態において、この粒径は０．１マイクロメートル〜１０マイクロメートルである。別の一実施形態において、この粒径は１．０マイクロメートル〜５マイクロメートルである。更に別の一実施形態において、化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、化合物１塩酸塩形態Ａは、２．０マイクロメートルの粒径Ｄ５０を有する。
【０２１１】
様々な実施形態において、第２の治療薬を、化合物１と一緒に配合して、例えば錠剤又はカプセルの、単一又は単回投与形態を形成することができる。
【０２１２】
上述に従って調製された投与形態は、米国薬局方２９、Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ  Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ、Ｉｎｃ．、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、Ｍｄ．、２００５（「ＵＳＰ」）の試験第７１１号「Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ（溶解）」に従ってインビトロ溶解評価を行い、有効物質がこの投与形態から放出される速度を決定することができる。有効物質の含有量及び不純物レベルは、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）などの技法により便利に測定される。
【０２１３】
いくつかの実施形態において、本発明は、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）及び／又はポリプロピレン及び／又はガラス製の容器及びクロージャー、グラシン紙、アルミニウムパウチ、並びに、アルミニウム又は高密度ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）（所望により乾燥剤、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリビニリデンジクロリド（ＰＶＤＣ）、ＰＶＣ／ＰＥ／ＰＶＤＣ、及び同様物を含む）からなるブリスター又はストリップなどの、パッケージング材料の使用を含む。これらのパッケージ材料は、製薬分野で一般的に採用されている化学的又は物理的滅菌技法を用いてパッケージ及びその内容物の適切な滅菌を行った後、様々な医薬組成物及び製剤を滅菌状態で保存するのに使用することができる。
【０２１４】
医薬組成物の投与方法
一態様において、本発明の医薬組成物は、１日１回又は約２４時間ごとに、患者に投与することができる。あるいは、本発明の医薬組成物は、１日２回又は約１２時間ごとに、患者に投与することができる。これらの医薬組成物は、約２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、又は４００ｍｇの化合物１を含む経口製剤として投与される。この態様において、化合物１に加え、この医薬組成物は、充填剤、希釈剤、崩壊剤、界面活性剤、結合剤と滑剤のうち少なくとも１つ、及び潤滑剤を含む。例えば、４００ｍｇの化合物１の用量は、それぞれ２００ｍｇの化合物１を含む本発明の錠剤２錠、又は、それぞれ１００ｍｇの化合物１を含む本発明の錠剤４錠を含み得る。
【０２１５】
当然のことながら、本発明の化合物及び製薬上許容される組成物及び製剤は、併用療法に採用することができる。すなわち、化合物１及びその製薬上許容される組成物は、１つ以上の他の望ましい治療若しくは医学的手順と同時に、又はこれの前に、又はこれの後に、投与することができる。併用レジメンに採用する療法（療法又は手順）の具体的な組み合わせには、望ましい療法及び／又は手順との適合性、並びに達成したい治療効果が考慮される。また、採用される療法は、同じ疾患について望ましい効果を達成し得るか（例えば、本発明の化合物は、同じ疾患を治療するのに使用される他の薬剤と同時に投与され得る）、又は、異なる効果（例えば、副作用をコントロールする）を達成し得ることが、理解されよう。本明細書で使用されるとき、特定の疾患（例えばＣＦＴＲ媒介性疾患）又は病状を治療又は予防するために通常投与される追加治療薬は、「治療される疾患又は病状に適切な」ものとして知られる。
【０２１６】
一実施形態において、この追加治療薬は、粘液溶解剤、気管支拡張薬、抗生物質、抗感染剤、抗炎症剤、本発明の化合物１以外のＣＦＴＲモジュレータ、又は栄養剤から選択される。
【０２１７】
一実施形態において、この追加薬は、（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドル−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドである。別の一実施形態において、この追加薬は、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドである。別の一実施形態において、この追加薬は、表１から選択される。
【０２１８】
【表１】
2015504920.tif 000032
【０２１９】
別の一実施形態において、この追加薬は、上記の薬剤の任意の組み合わせである。例えば、この組成物は、化合物１、（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドル−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド、及びＮ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドを含み得る。別の一例において、この組成物は、化合物１、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミド、及び表１の任意の化合物（すなわち、表１の化合物１〜１４）、又はこれらの任意の組み合わせを含み得る。
【０２２０】
一実施形態において、この追加治療薬は抗生物質である。本明細書で有用な代表的な抗生物質としては、トブラマイシン（トブラマイシン吸入粉末（ＴＩＰ）を含む）、アジスロマイシン、アズトレオナム（アズトレオナムのエアロゾル形態を含む）、アミカシン（そのリポソーム製剤を含む）、シプロフロキサシン（この吸入投与に好適な製剤を含む）、レボフラキサシン（そのエアロゾル製剤を含む）、並びに２つの抗生物質（例えばホスホマイシンとトブラマイシン）の組み合わせが挙げられる。
【０２２１】
別の一実施形態において、この追加薬は粘液溶解剤である。本明細書で有用な代表的な粘液溶解剤には、Ｐｕｌｍｏｚｙｍｅ（登録商標）が挙げられる。
【０２２２】
別の一実施形態において、この追加治療薬は気管支拡張薬である。代表的な気管支拡張薬には、アルブテロール、硫酸メタプロテネロール、酢酸ピルブテロール、サルメテロール、又は硫酸テトラブリン（ｔｅｔｒａｂｕｌｉｎｅ）が挙げられる。
【０２２３】
別の一実施形態において、この追加薬は肺気道表面液の回復に有効である。そのような薬剤は細胞内外の塩の動きを改善し、肺気道の粘液がより水和した状態になり、よって、より容易に排出できるようになる。そのような薬剤の例としては、高張性生理食塩水、デヌホソル四ナトリウム（［［（３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１−イル）−３−ヒドロキシオキソラン−２−イル］メトキシ−ヒドロキシホスホリル］［［［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソピリミジン−１−イル）−３、４−ジヒドロキシオキソラン−２−イル］メトキシ−ヒドロキシホスホリル］オキシ−ヒドロキシホスホリル］リン酸水素塩）、又はブロンキトール（マンニトールの吸入処方）が挙げられる。
【０２２４】
別の一実施形態において、この追加薬は抗炎症剤、すなわち肺の炎症を低減し得る薬剤である。本明細書で有用なそのような薬剤の例としては、イブプロフェン、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、シルデナフィル、吸入グルタチオン、ピオグリタゾン、ヒドロキシクロロキン、又はシンバスタチン（ｓｉｍａｖａｓｔａｔｉｎ）が挙げられる。
【０２２５】
別の一実施形態において、この追加薬は化合物１以外のＣＦＴＲモジュレータであり、すなわち、ＣＦＴＲ活性を変化させる効果を有する薬剤である。そのような薬剤の例としては、アタルレン（「ＰＴＣ１２４（登録商標）」、３−［５−（２−フルオロフェニル）−１，２，４−オキサジアゾル−３−イル］安息香酸）、シナプルチド、ランコブチド、デペレスタット（ヒト遺伝子組換え型好中球エラスターゼ阻害剤）、及びコビプロストン（７−｛（２Ｒ、４ａＲ、５Ｒ、７ａＲ）−２−［（３Ｓ）−１，１−ジフルオロ−３−メチルペンチル］−２−ヒドロキシ−６−オキソオクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル｝ヘプタン酸塩）が挙げられる。
【０２２６】
別の一実施形態において、この追加薬は栄養剤である。代表的な栄養剤には、パンクレリパーゼ（パンクレアチン酵素代替）が挙げられ、これにはＰａｎｃｒｅａｓｅ（登録商標）、Ｐａｎｃｒｅａｃａｒｂ（登録商標）、Ｕｌｔｒａｓｅ（登録商標）、又はＣｒｅｏｎ（登録商標）、Ｌｉｐｒｏｔｏｍａｓｅ（登録商標）（旧称Ｔｒｉｚｙｔｅｋ（登録商標））、Ａｑｕａｄｅｋｓ（登録商標）、又はグルタチオン吸入が挙げられる。一実施形態において、この追加栄養剤はパンクレリパーゼである。
【０２２７】
別の一実施形態において、この追加薬は、ゲンタマイシン、クルクミン、シクロホスファミド、４−フェニルブチラート、ミグルスタット、フェロジピン、ニモジピン、フィロキシンＢ（Ｐｈｉｌｏｘｉｎ  Ｂ）、ゲニステイン（ｇｅｎｉｅｓｔｅｉｎ）、アピゲニン、ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰモジュレータ（例えばロリプラム）、シルデナフィル、ミルリノン、タダラフィル、アムリノン、イソプロテレノール、アルブテロール、及びアルメテロール、デオキシスパーガリン、ＨＳＰ  ９０阻害剤、ＨＳＰ  ７０阻害剤、プロテオソーム（ｐｒｏｔｅｏｓｏｍｅ）阻害剤（例えばエポキソマイシン、ラクタシスチンなど）が挙げられる。
【０２２８】
別の一実施形態において、この追加薬は、３−アミノ−６−（４−フルオロ−フェニル）−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、５−アミノ−６’−メチル−３−トリフルオロメチル−［２，３］ビピリジニル−６−カルボン酸（３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−６−シクロプロピル−Ｎ−（３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド、３−アミノ−６−メトキシ−Ｎ−（３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−（トリフルオロメチル）プロピル）−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド、３−アミノ−６−（４−フルオロ−フェニル）−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｓ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−６−メトキシ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｓ−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−６−メトキシ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−６−（２，４−ジクロロ−フェニル）−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｓ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−６−（２，４−ジクロロ−フェニル）−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−６−（４−フルオロ−フェニル）−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−５，６−ｂｉｓ−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｓ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−５，６−ｂｉｓ−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド；（Ｓ）−３−アミノ−６−エトキシ−Ｎ−（３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド、３−アミノ−６−メトキシ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｓ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−６−メトキシ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−６−（４−フルオロ−フェニル）−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−５，６−ｂｉｓ−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｓ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、３−アミノ−５，６−ｂｉｓ−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（（Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピル）−アミド、又はこれらの製薬上許容される塩から選択される化合物である。別の一実施形態において、この追加薬は、米国特許第８，２４７，４３６号及び国際公開第２０１１／１１３８９４号に開示されている化合物であり、これらはそれぞれ参照により全体が本明細書に組み込まれる。
【０２２９】
一実施形態において、この追加薬はトリメチルアンゲリシンである。別の一実施形態において、この追加薬は、ＷＯ  ２０１２１７１９５４号に開示されている化合物であり、参照によりこの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２３０】
他の実施形態において、この追加薬は、ＷＯ  ２００４０２８４８０号、ＷＯ  ２００４１１０３５２号、ＷＯ  ２００５０９４３７４号、ＷＯ  ２００５１２０４９７号、又はＷＯ  ２００６１０１７４０号に開示されている化合物である。
【０２３１】
別の一実施形態において、この追加薬は、ＣＦＴＲ調節活性を呈するベンゾ［ｃ］キノリジニウム誘導体、又はＣＦＴＲ調節活性を呈するベンゾピラン誘導体である。
【０２３２】
別の一実施形態において、この追加薬は、米国特許第７，２０２，２６２号、同第６，９９２，０９６号、ＵＳ２００６０１４８８６４号、ＵＳ２００６０１４８８６３号、ＵＳ２００６００３５９４３号、ＵＳ２００５０１６４９７３号、ＷＯ２００６１１０４８３号、ＷＯ２００６０４４４５６号、ＷＯ２００６０４４６８２号、ＷＯ２００６０４４５０５号、ＷＯ２００６０４４５０３号、ＷＯ２００６０４４５０２号、又はＷＯ２００４０９１５０２号に開示されている化合物である。別の一実施形態において、この追加薬は、ＷＯ２００４０８０９７２号、ＷＯ２００４１１１０１４号、ＷＯ２００５０３５５１４号、ＷＯ２００５０４９０１８号、ＷＯ２００６０９９２５６号、ＷＯ２００６１２７５８８号、又はＷＯ２００７０４４５６０号に開示されている化合物である。別の一実施形態において、この追加薬は、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドである。
【０２３３】
一実施形態において、必要としている被験者に対し、６００ｍｇの化合物１を投与し、次に２５０ｍｇのＮ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミド（化合物２）を併用投与することができる。これらの実施形態において、用量は、本発明の１つ以上の錠剤を投与することにより達成できる。例えば、６００ｍｇの化合物１の投与は、それぞれ２００ｍｇの化合物１を含む錠剤３錠、それぞれ１５０ｍｇの化合物１を含む錠剤４錠、又は、４００ｍｇの化合物１を含む錠剤１錠と２００ｍｇの化合物１を含む錠剤１錠とを投与することによって達成できる。化合物２は、化合物２及び製薬上許容される担体を含む医薬組成物として投与され得る。投与期間は、疾患の改善が達成されるまで、又は被験者の担当医の指示があるまで継続することができ、例えば、投与期間は１週間未満、１週間、２週間、３週間、又は１ヶ月、又はそれより長くなり得る。併用投与期間より先に、化合物１単独の投与期間を先行させることができる。例えば、６００ｍｇの化合物１を２週間投与し、次に２５０ｍｇの化合物２を更に１週間追加で併用投与することができる。別の一実施形態において、６００ｍｇの化合物１を２８日間ｂｉｄ（１日２回）で投与し、次に２５０ｍｇの化合物２を２８日間ｂｉｄ（１日２回）で投与することができる。別の一実施形態において、６００ｍｇの化合物１を２８日間ｑｄ（１日１回）で投与し、次に２５０ｍｇの化合物２を２８日間ｑｄ（１日１回）で投与することができる。別の一実施形態において、６００ｍｇの化合物１を２８日間ｑｄ（１日１回）で投与し、次に２８日間、６００ｍｇの化合物１のｑｄ（１日１回）と、２５０ｍｇの化合物２のｑ１２ｈ（１２時間に１回）を併用投与することができる。別の一実施形態において、６００ｍｇの化合物１をｑｄ（１日１回）で投与、及び２５０ｍｇの化合物２をｑｄ（１日１回）で投与することができる。
【０２３４】
一実施形態において、必要としている被験者に対し、６００ｍｇの化合物１を投与し、次に４５０ｍｇのＮ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミド（化合物２）を併用投与することができる。これらの実施形態において、用量は、本発明の１つ以上の錠剤を投与することにより達成できる。例えば、６００ｍｇの化合物１の投与は、それぞれ２００ｍｇの化合物１を含む錠剤３錠、又は、それぞれ１５０ｍｇの化合物１を含む錠剤４錠を投与することによって達成できる。化合物２は、化合物２及び製薬上許容される担体を含む医薬組成物として投与され得る。投与期間は、疾患の改善が達成されるまで、又は被験者の担当医の指示があるまで継続することができ、例えば、投与期間は１週間未満、１週間、２週間、３週間、又は１ヶ月、又はそれより長くなり得る。併用投与期間より先に、化合物１単独の投与期間を先行させることができる。例えば、６００ｍｇの化合物１を２週間投与し、次に４５０ｍｇの化合物２を更に１週間追加で併用投与することができる。別の一実施形態において、６００ｍｇの化合物１を２８日間ｂｉｄ（１日２回）で投与し、次に４５０ｍｇの化合物２を２８日間ｂｉｄ（１日２回）で投与することができる。
【０２３５】
一実施形態において、必要としている被験者に対し、４００ｍｇの化合物１を投与し、次に３５０ｍｇのＮ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミド（化合物２）を併用投与することができる。これらの実施形態において、用量は、本発明の１つ以上の錠剤を投与することにより達成できる。例えば、４００ｍｇの化合物１の投与は、それぞれ２００ｍｇの化合物１を含む錠剤２錠、又は、それぞれ１００ｍｇの化合物１を含む錠剤４錠を投与することによって達成できる。化合物２は、化合物２及び製薬上許容される担体を含む医薬組成物として投与され得る。投与期間は、疾患の改善が達成されるまで、又は被験者の担当医の指示があるまで継続することができ、例えば、投与期間は１週間未満、１週間、２週間、３週間、又は１ヶ月、又はそれより長くなり得る。併用投与期間より先に、化合物１単独の投与期間を先行させることができる。例えば、４００ｍｇの化合物１を２週間投与し、次に３５０ｍｇの化合物２を更に１週間追加で併用投与することができる。別の一実施形態において、４００ｍｇの化合物１を２８日間ｑ８ｈ（８時間おき）で投与し、次に３５０ｍｇの化合物２を２８日間ｑ８ｈ（８時間おき）で投与することができる。
【０２３６】
一実施形態において、必要としている被験者に対し、４００ｍｇの化合物１を投与し、次に２５０ｍｇのＮ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミド（化合物２）を併用投与することができる。これらの実施形態において、用量は、本発明の１つ以上の錠剤を投与することにより達成できる。例えば、４００ｍｇの化合物１の投与は、それぞれ２００ｍｇの化合物１を含む錠剤２錠、又は、それぞれ１００ｍｇの化合物１を含む錠剤４錠を投与することによって達成できる。化合物２は、化合物２及び製薬上許容される担体を含む医薬組成物として投与され得る。投与期間は、疾患の改善が達成されるまで、又は被験者の担当医の指示があるまで継続することができ、例えば、投与期間は１週間未満、１週間、２週間、３週間、又は１ヶ月、又はそれより長くなり得る。併用投与期間より先に、化合物１単独の投与期間を先行させることができる。例えば、４００ｍｇの化合物１を２週間投与し、次に１５０ｍｇ又は２５０ｍｇの化合物２を更に１週間追加で併用投与することができる。別の一実施形態において、４００ｍｇの化合物１を２８日間ｂｉｄ（１日２回）で投与し、次に２５０ｍｇの化合物２を２８日間ｂｉｄ（１日２回）で投与することができる。別の一実施形態において、４００ｍｇの化合物１を２８日間ｂｉｄ（１日２回）で投与し、次に２５０ｍｇの化合物２を２８日間ｑｄ（１日１回）で投与することができる。別の一実施形態において、４００ｍｇの化合物１を２８日間ｑｄ（１日１回）で投与し、次に２８日間、４００ｍｇの化合物１のｑｄ（１日１回）と、２５０ｍｇの化合物２のｑ１２ｈ（１２時間に１回）を併用投与することができる。別の一実施形態において、４００ｍｇの化合物１をｂｉｄ（１日２回）で投与、及び２５０ｍｇの化合物２をｑｄ（１日１回）で投与することができる。
【０２３７】
一実施形態において、必要としている被験者に対し、４００ｍｇの化合物１を１日１回、次に１５０ｍｇの化合物２を１日１回併用投与することができる。これらの実施形態において、用量は、本発明の１つ以上の錠剤を投与することにより達成できる。例えば、４００ｍｇの化合物１の投与は、それぞれ２００ｍｇの化合物１を含む錠剤２錠、又は、それぞれ１００ｍｇの化合物１を含む錠剤４錠を投与することによって達成できる。化合物２は、化合物２及び製薬上許容される担体を含む医薬組成物として投与され得る。投与期間は、疾患の改善が達成されるまで、又は被験者の担当医の指示があるまで継続することができ、例えば、投与期間は１週間未満、１週間、２週間、３週間、又は１ヶ月、又はそれより長くなり得る。併用投与期間より先に、化合物１単独の投与期間を先行させることができる。例えば、４００ｍｇの化合物１を２週間投与し、次に１５０ｍｇ又は２５０ｍｇの化合物２を更に１週間追加で併用投与することができる。
【０２３８】
一実施形態において、必要としている被験者に対し、４００ｍｇの化合物１を１日１回、次に１５０ｍｇの化合物２を１２時間ごとに併用投与することができる。別の一実施形態において、必要としている被験者に対し、４００ｍｇの化合物１を１日１回、次に２５０ｍｇの化合物２を１２時間ごとに併用投与することができる。これらの実施形態において、用量は、本発明の１つ以上の錠剤を投与することにより達成できる。例えば、４００ｍｇの化合物１の投与は、それぞれ２００ｍｇの化合物１を含む錠剤２錠、又は、それぞれ１００ｍｇの化合物１を含む錠剤４錠を投与することによって達成できる。化合物２は、化合物２及び製薬上許容される担体を含む医薬組成物として投与され得る。投与期間は、疾患の改善が達成されるまで、又は被験者の担当医の指示があるまで継続することができ、例えば、投与期間は１週間未満、１週間、２週間、３週間、又は１ヶ月、又はそれより長くなり得る。併用投与期間より先に、化合物１単独の投与期間を先行させることができる。例えば、４００ｍｇの化合物１を２週間投与し、次に１５０ｍｇ又は２５０ｍｇの化合物２を更に１週間追加で併用投与することができる。
【０２３９】
別の一実施形態において、２００ｍｇの化合物１を２８日間ｑｄ（１日１回）で投与し、次に２８日間、２００ｍｇの化合物１のｑｄ（１日１回）と、２５０ｍｇの化合物２のｑ１２ｈ（１２時間に１回）を併用投与することができる。
【０２４０】
一実施形態において、１００ｍｇ、２００ｍｇ、及び３００ｍｇの化合物１錠剤を組み合わせて、数多くの異なる用量を形成することができる。例えば、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１１００ｍｇ、又は１２００ｍｇの化合物１の用量は、１００ｍｇ、２００ｍｇ、及び３００ｍｇの錠剤製剤及びそれらの倍数を使用することによって投与できる。例えば、９００ｍｇの化合物１の用量は、３００ｍｇの化合物１の錠剤３錠を用いて投与できる。６００ｍｇの化合物１の用量は、２００ｍｇの化合物１の錠剤３錠、又は、３００ｍｇの化合物１の錠剤２錠を用いて投与できる。この段落の任意の前述した用量が、化合物２の量、及び／又は上の３段落の用量スケジュールと共に投与することができる。
【０２４１】
これらの組み合わせは、嚢胞性線維症を含む本明細書に記述される疾病の治療に有用である。これらの組み合わせは、本明細書に記述されるキットにおいても有用である。
【０２４２】
本発明の組成物に含まれる追加治療薬の量は、単独活性薬剤としてその治療薬を含む組成物で通常投与され得る量を超えない。好ましくは、本明細書に開示される組成物中の追加治療薬の量は、単独治療活性薬剤としてその薬剤を含む組成物中に通常存在する量の約５０％〜１００％の範囲となる。
【０２４３】
別の一態様において、本発明は、本発明の錠剤と、別の治療薬、又はその医薬組成物とを含むキットを特徴とする。別の一実施形態において、錠剤中の化合物１は形態Ｉである。別の一実施形態において、この治療薬は、化合物１以外の嚢胞性線維症修復薬である。別の一実施形態において、この治療薬は、嚢胞性線維症相乗剤である。別の一実施形態において、この治療薬は、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドである。別の一実施形態において、この錠剤及び治療薬は、別々の容器内にある。別の一実施形態において、この別々の容器は瓶である。別の一実施形態において、この別々の容器はバイアルである。別の一実施形態において、この別々の容器はブリスターパックである。
【０２４４】
組成物の治療的使用
一態様において、本発明は更に、患者における疾患の治療、重症度の低減、又は対症的治療の方法を提供し、この方法には、本発明の医薬組成物の有効量を患者に投与する工程が含まれ、この疾患は、嚢胞性線維症、ぜんそく、喫煙誘発ＣＯＰＤ、慢性気管支炎、副鼻腔炎、便秘、膵炎、膵機能不全、先天性両側精管欠損症（ＣＢＡＶＤ）による男性不妊、軽い肺疾患、特発性膵炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、肝疾患、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝固−線溶欠乏症（例えばプロテインＣ欠乏症）１型遺伝性血管性水腫、脂質代謝障害（例えば家族性高コレステロール血症）、１型乳び血症、無βリポたんぱく血症、リソソーム蓄積症（例えばアイセル病／偽ハーラー、ムコ多糖症、サンドホッフ病／テイ−サックス病、クリグラー・ナジャー症候群ＩＩ型、多腺性内分泌障害／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠乏、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、糖鎖欠損糖タンパク質症候群（ｇｌｙｃａｎｏｓｉｓ  ＣＤＧ）１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノゲン血症、ＡＣＴ欠乏症、尿崩症（ＤＩ）、神経骨端軟骨板性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー・マリー・トゥース病、ペリツェウス・メルツバッハー病、神経変性疾患（例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経疾患（例えばハンチントン病、脊髄小脳失調Ｉ型、球脊髄性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、及び筋強直性ジストロフィー）、並びに海綿状脳症（例えば、遺伝性クロイツフェルト・ヤコブ病（プリオンタンパク質代謝欠陥による）、ファブリー病、ストロイスラー・シャインカー症候群、ＣＯＰＤ、ドライアイ病、シェーグレン症候群、骨粗鬆症、骨減少症、骨治癒及び骨成長（骨修復、骨再生、骨吸収の低下、及び骨沈着の増加）、ゴーラム症候群、クロライドチャネル病（例えば先天性筋緊張症（トムソン及びベッカー型））、バーター症候群ＩＩＩ型、デント病、過剰驚愕症、癲癇、リソソーム蓄積症、アンジェルマン症候群、及び原発性線毛ジスキネジア（ＰＣＤ、線毛の構造及び／又は機能の遺伝性障害を示す語）、内臓逆位を伴うＰＣＤ（カルタゲナー症候群とも呼ばれる）、内臓逆位を伴わないＰＣＤ、及び線毛形成不全から選択される。
【０２４５】
化合物１は、アイバカフトール（Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミド）との組み合わせの一部であり、嚢胞性線維症の治療用に食品医薬品局（ＦＤＡ）から「画期的な治療薬」指定を受けており、本出願時点においてわずか２件だけが認められているものの１つである（もう一方はアイバカフトール）。このことは、対症的治療を超えて、嚢胞性線維症の原因に対する効果的治療に対して、満たされていない大きなニーズがあることを示す。更に、ＦＤＡ承認薬の一般的な課題には、しばしば、それを必要としている患者が薬剤を利用できないことが挙げられる。したがって、継続的かつ制御された方法で調製するための本開示の化合物１の処方及びプロセスに対して、満たされていない大きなニーズが存在する。
【０２４６】
一態様において、本発明は更に、患者における疾患の治療、重症度の低減、又は対症的治療の方法を提供し、この方法には、本発明の医薬組成物の有効量を患者に投与する工程が含まれ、ここにおいてこの疾患は、熱性痙攣プラスを伴う全身てんかん（ＧＥＦＳ＋）、熱性及び無熱の痙攣を伴う全身てんかん、ミオトニー、先天性パラミオトニア、カリウム惹起性ミオトニー、高カリウム性周期性四肢麻痺、ＬＱＴＳ、ＬＱＴＳ／ブルガダ症候群、聾を伴う常染色体性優性型ＬＱＴＳ、常染色体性劣性型ＬＱＴＳ、異形症を伴うＬＱＴＳ、先天性及び後天性ＬＱＴＳ、ティモシー症候群、新生児持続性高インスリン性低血糖症、拡張型心筋症、常染色体性優性型ＬＱＴＳ、デント病、大理石骨病、バーター症候群ＩＩＩ型、筋中心核病、悪性高体温、及びカテコールアミン誘発性多形性頻拍から選択される。
【０２４７】
一態様において、本発明は更に、患者における嚢胞性線維症の治療、重症度の低減、又は対症的治療の方法を提供し、この方法には、本発明の医薬組成物の有効量を患者に投与する工程が含まれ、ここにおいてこの患者は、ＣＦＴＲ遺伝子突然変異Ｎ１３０３Ｋ、ΔＩ５０７、又はＲ５６０Ｔを有する。
【０２４８】
一態様において、本発明は更に、患者における嚢胞性線維症の治療、重症度の低減、又は対症的治療の方法を提供し、この方法には、本発明の医薬組成物の有効量を患者に投与する工程が含まれ、ここにおいてこの患者は、ＣＦＴＲ遺伝子突然変異Ｇ５５１Ｄを有する。別の一実施形態において、この患者はＧ５５１Ｄのホモ接合型である。別の一実施形態において、この患者はＧ５５１Ｄのヘテロ接合型であり、ここにおいて他方のＣＦＴＲ遺伝子突然変異は、Ｆ５０８ｄｅｌ、Ｇ５４２Ｘ、Ｎ１３０３Ｋ、Ｗ１２８２Ｘ、Ｒ１１７Ｈ、Ｒ５５３Ｘ、１７１７−１Ｇ−＞Ａ、６２１＋１Ｇ−＞Ｔ、２７８９＋５Ｇ−＞Ａ、３８４９＋１０ｋｂＣ−＞Ｔ、Ｒ１１６２Ｘ、Ｇ８５Ｅ、３１２０＋１Ｇ−＞Ａ、ΔＩ５０７、１８９８＋１Ｇ−＞Ａ、３６５９ｄｅｌＣ、Ｒ３４７Ｐ、Ｒ５６０Ｔ、Ｒ３３４Ｗ、Ａ４５５Ｅ、２１８４ｄｅｌＡ、又は７１１＋１Ｇ−＞Ｔのいずれか１つである。
【０２４９】
一態様において、本発明は更に、患者における嚢胞性線維症の治療、重症度の低減、又は対症的治療の方法を提供し、この方法には、本発明の医薬組成物の有効量を患者に投与する工程が含まれ、ここにおいてこの患者は、ＣＦＴＲ遺伝子突然変異Ｆ５０８ｄｅｌを有する。別の一実施形態において、この患者はＦ５０８ｄｅｌのホモ接合型である。別の一実施形態において、この患者はＦ５０８ｄｅｌのヘテロ接合型であり、ここにおいて他方のＣＦＴＲ遺伝子突然変異は、Ｇ５５１Ｄ、Ｇ５４２Ｘ、Ｎ１３０３Ｋ、Ｗ１２８２Ｘ、Ｒ１１７Ｈ、Ｒ５５３Ｘ、１７１７−１Ｇ−＞Ａ、６２１＋１Ｇ−＞Ｔ、２７８９＋５Ｇ−＞Ａ、３８４９＋１０ｋｂＣ−＞Ｔ、Ｒ１１６２Ｘ、Ｇ８５Ｅ、３１２０＋１Ｇ−＞Ａ、ΔＩ５０７、１８９８＋１Ｇ−＞Ａ、３６５９ｄｅｌＣ、Ｒ３４７Ｐ、Ｒ５６０Ｔ、Ｒ３３４Ｗ、Ａ４５５Ｅ、２１８４ｄｅｌＡ、又は７１１＋１Ｇ−＞Ｔのいずれか１つである。
【０２５０】
特定の実施形態において、化合物１を含む本発明の製薬上許容される組成物は、呼吸器及び非呼吸器上皮の頂端膜における残留ＣＦＴＲ活性を呈する患者における嚢胞性線維症の治療、重症度の低減、又は対症的治療に有用である。上皮表面での残留ＣＦＴＲ活性の存在は、当該技術分野で既知の方法（例えば標準の電気生理学的、生化学的、又は組織化学的技法）を使用して、容易に検出することができる。そのような方法はインビボ又はエクスビボでの電気生理学的技法、汗又は唾液のＣｌ−濃度の測定、又は細胞表面密度をモニターするためのエクスビボ生化学的又は組織化学的技法を使用することによって、ＣＦＴＲ活性を同定する。そのような方法を使用して、残留ＣＦＴＲ活性は、最も一般的な突然変異Ｆ５０８ｄｅｌ、並びに例えばＧ５５１Ｄ突然変異、又はＲ１１７Ｈ突然変異などの他の突然変異についてのヘテロ接合型又はホモ接合型患者を含め、様々な種類の突然変異についてのヘテロ接合型又はホモ接合型患者において容易に検出できる。特定の実施形態において、化合物１を含む医薬組成物は、残留ＣＦＴＲ活性をほとんど又は全く呈さない患者における嚢胞性線維症の治療、重症度の低減、又は対症的治療に有用である。特定の実施形態において、化合物１を含む医薬組成物は、呼吸器上皮の頂端膜における残留ＣＦＴＲ活性をほとんど又は全く呈さない患者における嚢胞性線維症の治療、重症度の低減、又は対症的治療に有用である。
【０２５１】
別の一実施形態において、本発明の化合物及び組成物は、残留ＣＦＴＲ活性が誘発又は増大されている患者における嚢胞性線維症の治療又は重症度の低減に有用である。そのような残留ＣＦＴＲ誘発因子又は増大因子は、薬理学的方法を用いて行うことができる。別の一実施形態において、本発明の化合物及び組成物は、遺伝子治療を使って（ｕｓｉｎｇ  ｏｒ）残留ＣＦＴＲ活性が誘発又は増大されている患者における嚢胞性線維症の治療又は重症度の低減に有用である。そのような方法は、細胞表面にあるＣＦＴＲの量を増加し、これにより、それまで欠けていた患者のＣＦＴＲ活性を誘発するか、又は患者の残留ＣＦＴＲ活性の既存レベルを増大させる。
【０２５２】
一実施形態において、本明細書に記述されるように、化合物１を含む本発明の医薬組成物は、例えば、クラスＩ突然変異（合成しない）、クラスＩＩ突然変異（折り畳み不良）、クラスＩＩＩ突然変異（調節又はゲート障害）、クラスＩＶ突然変異（コンダクタンス変化）、又はクラスＶ突然変異（合成減少）などの、残留ＣＦＴＲ活性を呈する特定の遺伝子型内にある患者における嚢胞性線維症の治療又は重症度の低減に有用である。
【０２５３】
一実施形態において、本明細書に記述されるように、化合物１を含む本発明の医薬組成物は、例えば、呼吸器上皮の頂端膜における残留ＣＦＴＲ活性の量に典型的に相関する、中程度〜軽度の臨床的表現型など、特定の臨床的表現型の範囲内にある患者における嚢胞性線維症の治療、重症度の低減、又は対症的治療に有用である。そのような表現型には、十分な膵臓機能を呈する患者が含まれる。
【０２５４】
一実施形態において、本明細書に記述されるように、化合物１を含む本発明の医薬組成物は、患者が残留ＣＦＴＲ活性を呈する、十分な膵臓機能、特発性膵炎、及び先天性両側精管欠損症、又は軽度の肺疾患として診断された患者の、治療、重症度の低減、又は対症的治療に有用である。
【０２５５】
一実施形態において、本明細書に記述されるように、化合物１を含む本発明の医薬組成物は、患者が野生型ＣＦＴＲを有する、十分な膵臓機能、特発性膵炎、及び先天性両側精管欠損症、又は軽度の肺疾患として診断された患者の、治療、重症度の低減、又は対症的治療に有用である。
【０２５６】
嚢胞性線維症に加え、ＣＦＴＲ活性の調節は、例えば分泌系疾患、及びＣＦＴＲにより媒介される他のタンパク質折り畳み疾患など、ＣＦＴＲの突然変異により直接起きた以外の疾患についても、利益があり得る。これには、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、ドライアイ病、及びシェーグレン症候群が含まれるが、これらに限定されない。ＣＯＰＤは進行性であり、完全に元通りに回復することがない気道狭窄として特徴付けられる。この気道狭窄は粘液の分泌過多、気腫、及び細気管支炎によるものである。突然変異体又は野生型ＣＦＴＲのアクチベータは、ＣＯＰＤで一般的である粘液分泌過多と粘膜線毛クリアランス不全に対する潜在的治療を提供する。具体的には、ＣＦＴＲにわたってアニオン分泌を増加させることで、気道表面液体の流体移送を促進することができ、これにより粘液を水和し、線毛流体の粘度を最適化することができる。これは、粘膜線毛クリアランスの強化と、ＣＯＰＤに伴う症状の軽減をもたらす。ドライアイ病は、涙の水性産生量の減少と、涙膜の脂質、タンパク質及びムチンのプロファイルの異常によって特徴付けられる。ドライアイには数多くの原因があり、この中には年齢、レーシック眼科手術、関節炎、投薬、化学／温熱やけど、アレルギー、及び疾病（嚢胞性線維症及びシェーグレン症候群など）が挙げられる。ＣＦＴＲを介したアニオン分泌の増加は、角膜内皮細胞及び眼の周囲の分泌腺からの流体輸送を増加させ、角膜の水分補給を増加させ得る。これが、ドライアイ病に伴う症状を軽減するのに役立ち得る。シェーグレン症候群は自己免疫疾患であり、眼、口、皮膚、呼吸器組織、肝臓、膣、及び腸を含む身体全体の水分産生腺を、免疫系が攻撃するものである。症状には、眼、口、及び膣の乾燥、並びに肺疾患が挙げられる。この疾患はまた、関節リウマチ、全身性狼瘡、全身性硬化症、及び多発筋炎／皮膚筋炎に伴う。不良なタンパク質輸送がこの疾患の原因と考えられており、この治療オプションは限られている。ＣＦＴＲ活性の増加因子又は誘発因子は、この疾患に冒されている様々な臓器を水和し、関連する症状の改善を助ける可能性がある。
【０２５７】
一実施形態において、本発明は、インビトロ又はインビボでアニオンチャネル活性を増加又は誘発する方法に関し、この方法は、本発明の医薬組成物にチャネルを接触させる工程を含む。別の一実施形態において、アニオンチャネルは塩素イオンチャネル又は重炭酸イオンチャネルである。別の一実施形態において、アニオンチャネルは塩素イオンチャネルである。
【０２５８】
必要とされる正確な量は、被験者の種、年齢、及び全身状態、感染の程度、具体的な薬剤、投与方法などに応じて、被験者によって異なる。本発明の化合物は好ましくは、投与のしやすさ及び投与量の均一性のために、投与単位の形態で製剤される。本明細書で使用される表現「投与単位の形態」は、治療を受ける患者に適した、物理的に別個になっている薬剤単位を指す。ただし、本発明の化合物及び組成物の一日合計投与量は、妥当な医学的判断の範囲内で主治医が決定するものであることが理解されよう。特定の患者又は生物に対する具体的な有効用量レベルは、治療される疾患とその疾患の重症度、採用される具体的な化合物の活性、採用される具体的な化合物、患者の年齢、体重、全体的な健康状態、性別及び食習慣、投与時間、投与経路、及び採用される具体的な化合物の排出率、治療の持続時間、採用される具体的な化合物、採用される具体的な化合物と併用又は同時に使用される薬剤、及び医学分野に周知である同様の要素を含む、様々な要素に応じて異なる。用語「患者」は、本明細書で使用されるとき、動物、好ましくは哺乳類、最も好ましくはヒトを意味する。
【０２５９】
本出願のあらゆる部分において、化合物名がその化合物の構造を正しく記述していない場合、その構造が名前に取って代わり、構造が優先される。
【実施例】
【０２６０】
ＸＲＰＤ（粉末Ｘ線回折）
化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態ＡのＸ線回折（ＸＲＤ）データは、ＨＩ−ＳＴＡＲ  ２次元検出器及びフラットグラファイトモノクロメータを備えたＢｒｕｋｅｒ  Ｄ８  ＤＩＳＣＯＶＥＲ粉末回折計で収集された。Ｋα放射のＣｕ密封管を、４０ｋＶ、３５ｍＡで使用した。サンプルを２５℃で、ゼロ背景のシリコンウエハの上に載せた。各サンプルについて、２つの異なるθ２角度：８°及び２６°で、それぞれ１２０秒で、２つのデータフレームを収集した。データはＧＡＤＤＳソフトウェアでまとめ、ＤＩＦＦＲＡＣＴｐｌｕｓＥＶＡソフトウェアで統合した。報告されたピーク位置の不確定性は±０．２度である。
【０２６１】
ジェットミリングの概要
微粉化されていない化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａをふるいにかけて、塊を除去してから、ジェットミルホッパーに入れる。ふるいはすべて使い捨てであり、ワイプしてから使用する。微粉化されていない化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａを、圧縮窒素ガスを使用して、制御された供給速度でジェットミルホッパーに加える。ガス圧力範囲は４０〜４５／４５〜７０（ベンチュリ／ミル）ＰＳＩであり、供給速度範囲は０．５〜１．６ｋｇ／時である。化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａは、粒子−粒子及び粒子−壁衝突によりミル内で微粉化し、処理された化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａを、微粉化生成物容器に移す。当業者には、望ましい粒径の化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａが、上記の条件に部分的に基づいて、ピンミリングによって達成され得ると考えられる。
【０２６２】
示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）
化合物１、化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、又は化合物１塩酸塩形態Ａの示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）データは、ＤＳＣ  Ｑ１００  Ｖ９．６  Ｂｕｉｌｄ  ２９０（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ、ＤＥ）を使用して収集された。温度はインジウムで較正し、熱容量はサファイヤで較正した。３〜６ｍｇのサンプルをアルミニウム皿に秤量し、これに１つのピンホールがある蓋を使用して圧着した。サンプルを、窒素パージ５０ｍＬ／分を行って、加熱速度１．０℃／分で２５℃〜３５０℃をスキャンした。Ｔｈｅｒｍａｌ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  Ｑ  ＳｅｒｉｅｓＴＭバージョン２．２．０．２４８ソフトウェアによってデータが収集され、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェアバージョン４．１Ｄ（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ、ＤＥ）で解析を行った。報告された数字は、単回の解析を示す。
【０２６３】
化合物１形態Ｉ、化合物１形態ＩＩ、及び化合物１塩酸塩形態Ａの単結晶構造決定
回折データは、密封管Ｃｕ  Ｋ−α源及びＡｐｅｘ  ＩＩ  ＣＣＤ検出器を備えたＢｒｕｋｅｒ  Ａｐｅｘ  ＩＩ回折計で取得された。構造を解析し、ＳＨＥＬＸプログラム（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ、Ｇ．Ｍ．、Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ．、（２００８）Ａ６４、１１２〜１２２）を使用して精緻化した。消滅法則と強度統計に基づいて、構造が解析され、Ｐ２１／ｎ空間群で精緻化した。
【０２６４】
Ｖｉｔｒｉｄｅ（登録商標）（ナトリウムｂｉｓ（２−メトキシエトキシ）水素化アルミニウム［又はＮａＡｌＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３）２］、トルエン中６５重量％の溶液）は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓから購入した。
【０２６５】
２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−カルボン酸は、Ｓａｌｔｉｇｏ（Ｌａｎｘｅｓｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎの子会社）から購入した。
【０２６６】
（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−メタノールの調製。
【０２６７】
【化６】
2015504920.tif 000033
【０２６８】
市販の２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−カルボン酸（１．０当量）をトルエン（１０倍容）中でスラリー化した。添加漏斗からＶｉｔｒｉｄｅ（登録商標）（２当量）を、温度を１５〜２５℃に維持する速度で加えた。添加の終了時に、温度を４０℃に上げて２時間（ｈ）置き、次に１０％（ｗ／ｗ）水溶液（ａｑ）ＮａＯＨ（４．０当量）を添加漏斗から注意深く加えて、温度を４０〜５０℃に維持した。更に３０分間（ｍｉｎ）攪拌した後、４０℃で層を分離させた。この有機相を２０℃に冷却し、次に水で洗い（２×１．５倍容）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮して、粗生成物（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−メタノールを得た。これは次の工程で直接使用した。
【０２６９】
５−クロロメチル−２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソールの調製。
【０２７０】
【化７】
2015504920.tif 000034
【０２７１】
（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−メタノール（１．０当量）を、ＭＴＢＥ（５倍容）に溶かした。触媒量の４−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）アミノピリジン（ＤＭＡＰ）（１ｍｏｌ  ％）を加え、次に添加漏斗からＳＯＣｌ２（１．２当量）を加えた。ＳＯＣｌ２は、反応槽内の温度を１５〜２５℃に維持する速度で添加された。温度を３０℃に上げて１時間置き、次に２０℃に冷却した。温度を３０℃より下に維持しながら、水（４倍容）を添加漏斗から加えた。更に３０分間攪拌した後、層を分離させた。この有機層を攪拌し、１０％（ｗ／ｖ）のＮａＯＨ水溶液（４．４倍容）を加えた。１５〜２０分間攪拌した後、層を分離させた。この有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮して、粗生成物５−クロロメチル−２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソールを得た。これは次の工程で直接使用した。
【０２７２】
（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−アセトニトリルの調製。
【０２７３】
【化８】
2015504920.tif 000035
【０２７４】
温度を３０〜４０℃に維持しながら、５−クロロメチル−２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール（１当量）のＤＭＳＯ（１．２５倍容）中溶液を、ＮａＣＮ（１．４当量）のＤＭＳＯ（３倍容）中スラリーに加えた。この混合物を１時間撹拌し、次に水（６倍容）を加え、次にメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）（４倍容）を加えた。３０分間攪拌した後、層を分離した。この水層をＭＴＢＥ（１．８倍容）で抽出した。合わせた有機層を水（１．８倍容）で洗い、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮して、粗生成物（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−アセトニトリル（９５％）を得た。これは次の工程で直接使用した。
【０２７５】
（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−１−酢酸エチル−アセトニトリルの合成。
【０２７６】
【化９】
2015504920.tif 000036
【０２７７】
反応槽を窒素でパージし、９００ｍＬのトルエンを入れた。この溶媒を窒素注入により１６時間以上脱気した。反応槽に次に、Ｎａ３ＰＯ４（１５５．７ｇ、９４９．５ｍｍｏｌ）を入れ、次いでｂｉｓ（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（７．２８ｇ、１２．６６ｍｍｏｌ）を入れた。ｔｅｒｔ−ブチルホスフィンのヘキサン（５１．２３ｇ、２５．３２ｍｍｏｌ）中１０％  ｗ／ｗ溶液を１０分間かけて２３℃で、窒素パージされた添加漏斗から入れた。この混合物を５０分間攪拌し、このとき、５−ブロモ−２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール（７５ｇ、３１６．５ｍｍｏｌ）を１分間かけて加えた。更に５０分間攪拌した後、この混合物にシアノ酢酸エチル（７１．６ｇ、６３３．０ｍｍｏｌ）を５分間かけて入れ、次いで水（４．５ｍＬ）を一度に入れた。この混合物を７０℃に加熱して４０分間置き、１〜２時間ごとにＨＰＬＣを使って、反応物質が生成物に転換された割合を分析した。転換完了が観察された後（通常、５〜８時間後に１００％転換）、この混合物を２０〜２５℃に冷却し、セライトパッドで濾過した。このセライトパッドをトルエン（２×４５０ｍＬ）ですすぎ、合わせた有機層を減圧下６０〜６５℃で３００ｍＬまで濃縮した。この濃縮物に２２５ｍＬのＤＭＳＯを入れ、減圧下７０〜８０℃で、溶媒の活発な蒸留が停止するまで濃縮した。この溶液を２０〜２５℃に冷まし、ＤＭＳＯで９００ｍＬに希釈し、工程２のための調製物とした。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．１６−７．１０（ｍ、２Ｈ）、７．０３（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．６３（ｓ、１Ｈ）、４．１９（ｍ、２Ｈ）、１．２３（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）。
【０２７８】
（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−アセトニトリルの合成。
【０２７９】
【化１０】
2015504920.tif 000037
【０２８０】
内部温度を４０℃未満に維持しながら、上述の（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−１−酢酸エチル−アセトニトリルのＤＭＳＯ溶液に、３Ｎ  ＨＣｌ（６１７．３ｍＬ、１．８５ｍｏｌ）を２０分間かけて加えた。この混合物を７５℃に加熱して１時間置き、１〜２時間ごとにＨＰＬＣで、転換率を分析した。転換率が９９％を超えたことが観察されたら（通常、５〜６時間後）、この反応物を２０〜２５℃に冷まし、ＭＴＢＥで抽出し（２×５２５ｍＬ）、十分な時間をかけて、抽出中に完全に相を分離させた。合わせた有機抽出物を、５％  ＮａＣｌで洗った（２×３７５ｍＬ）。この溶液をつぎに、０．１９〜０．３３ｋＰａ（１．５〜２．５Ｔｏｒｒ）の真空蒸留に適した装置に移し、この装置には、冷却された受け取りフラスコが備えられていた。この溶液を減圧下６０℃未満で濃縮し、溶媒を除去した。次に、結果として得られた油から、１２５〜１３０℃（炉の温度）及び０．１９〜０．２７ｋＰａ（１．５〜２．０Ｔｏｒｒ）で、（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−アセトニトリルを抽出した。（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−アセトニトリルを透明な油として分離し、５−ブロモ−２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソールからの収率は６６％（２工程）であり、ＨＰＬＣ純度は９１．５％  ＡＵＣであった（９５％のｗ／ｗアッセイに対応）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ  ７．４４（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、７．４３（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．２２（ｄｄ、Ｊ＝８．２、１．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．０７（ｓ、２Ｈ）。
【０２８１】
（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボニトリルの調製。
【０２８２】
【化１１】
2015504920.tif 000038
【０２８３】
（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−アセトニトリル（１．０当量）、５０重量％のＫＯＨ水溶液（５．０当量）、１−ブロモ−２−クロロエタン（１．５当量）、及びＯｃｔ４ＮＢｒ（０．０２当量）の混合物を、７０℃で１時間加熱した。この反応混合物を冷まし、ＭＴＢＥ及び水を入れた。この有機相を水及び食塩水で洗った。この溶媒を除去し、（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボニトリルを得た。
【０２８４】
１−（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボン酸の調製。
【０２８５】
【化１２】
2015504920.tif 000039
【０２８６】
（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボニトリルに、エタノール（５倍容）中６Ｍ  ＮａＯＨ（８当量）を用い、８０℃で一晩置いて加水分解させた。この混合物を室温まで冷まし、エタノールを減圧下で蒸発させた。この残留物を水及びＭＴＢＥに懸濁させ、１Ｍ  ＨＣｌを加え、層を分離した。ＭＴＢＥ層をジシクロヘキシルアミン（ＤＣＨＡ）（０．９７当量）で処理した。このスラリーを０℃に冷却し、濾過し、ヘプタンで洗って、対応するＤＣＨＡ塩を得た。この塩をＭＴＢＥ及び１０％クエン酸に懸濁させ、すべての固体が溶解するまで攪拌した。この層を分離し、ＭＴＢＥ層を水及び食塩水で洗った。溶媒をヘプタンに交換し、次に濾過して、５０℃の減圧炉で一晩乾燥させた後、１−（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボン酸を得た。
【０２８７】
１−（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボニルクロリドの調製。
【０２８８】
【化１３】
2015504920.tif 000040
【０２８９】
１−（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボン酸（１．２当量）を、トルエン（２．５倍容）中でスラリーにし、この混合物を６０℃に加熱した。ＳＯＣｌ２（１．４当量）を添加漏斗から加えた。３０分後、この反応混合物からトルエン及びＳＯＣｌ２を蒸留した。追加のトルエン（２．５倍容）を加え、結果として得られた混合物を再び蒸留し、油として生成物の酸塩化物を得た。これは更なる精製なしに使用された。
【０２９０】
ｔｅｒｔ−ブチル−３−（３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエートの調製。
【０２９１】
【化１４】
2015504920.tif 000041
【０２９２】
２−ブロモ−３−メチルピリジン（１．０当量）をトルエン（１２倍容）に溶かした。Ｋ２ＣＯ３（４．８当量）を加え、次に水（３．５倍容）を加えた。結果として得られた混合物をＮ２ストリーム下で１時間、６５℃で加熱した。次に３−（ｔ−ブトキシカルボニル）フェニルボロン酸（１．０５当量）及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（０．０１５当量）を加え、この混合物を８０℃に加熱した。２時間後、加熱を止め、水を加え（３．５倍容）、層を分離させた。この有機相を水（３．５倍容）で洗い、１０％メタンスルホン酸水溶液（２当量ＭｓＯＨ、７．７倍容）で抽出した。この水相を、５０％  ＮａＯＨ水溶液（２当量）で塩基性にし、ＥｔＯＡｃ（８倍容）で抽出した。この有機相を濃縮して、粗生成物ｔｅｒｔ−ブチル−３−（３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエート（８２％）を得た。これは次の工程で直接使用した。
【０２９３】
２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル）−３−メチルピリジン−１−オキシドの調製。
【０２９４】
【化１５】
2015504920.tif 000042
【０２９５】
ｔｅｒｔ−ブチル−３−（３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエート（１．０当量）をＥｔＯＡｃ（６倍容）に溶かした。水（０．３倍容）を加え、次に尿素−過酸化水素（３当量）を加えた。次に無水フタル酸（３当量）を固体として、反応槽内の温度が４５℃未満に維持される速度で、この混合物に少しずつ加えた。無水フタル酸添加を完了した後、この混合物を４５℃に加熱した。更に４時間撹拌した後、加熱を止めた。１０％  ｗ／ｗ  Ｎａ２ＳＯ３水溶液（１．５当量）を、添加漏斗から加えた。Ｎａ２ＳＯ３添加の完了後、この混合物を更に３０分間攪拌し、層を分離した。この有機層を攪拌し、１０％  ｗｔ／ｗｔ  Ｎａ２ＣＯ３水溶液（２当量）を加えた。３０分間攪拌した後、層を分離させた。この有機相を１３％  ｗ／ｖのＮａＣｌ水溶液で洗った。次にこの有機相を濾過し、濃縮して、粗生成物２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル）−３−メチルピリジン−１−オキシド（９５％）を得た。これは次の工程で直接使用した。
【０２９６】
ｔｅｒｔ−ブチル−３−（６−アミノ−３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエートの調製。
【０２９７】
【化１６】
2015504920.tif 000043
【０２９８】
２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル）−３−メチルピリジン−１−オキシド（１当量）及びピリジン（４当量）のアセトニトリル（８倍容）中溶液を、７０℃に加熱した。温度を７５℃未満に維持しながら、無水メタンスルホン酸（１．５当量）のＭｅＣＮ（２倍容）中溶液を、添加漏斗から５０分間かけて加えた。添加の完了後、この混合物を更に０．５時間攪拌した。この混合物を次に室温まで冷ました。エタノールアミン（１０当量）を添加漏斗から加えた。２時間攪拌した後、水（６倍容）を加え、この混合物を１０℃に冷却した。３時間攪拌した後、固形物を濾過により回収し、水（３倍容）で洗い、２：１アセトニトリル／水（３倍容）で洗い、次にアセトニトリルで洗った（２×１．５倍容）。固形物を、少量のＮ２流を用い、５０℃の真空炉で重量が一定（差が１％未満）になるまで乾燥させ、ｔｅｒｔ−ブチル−３−（６−アミノ−３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエートを赤黄色の固体として得た（収率５３％）。
【０２９９】
３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）−ｔ−ブチルベンゾエートの調製。
【０３００】
【化１７】
2015504920.tif 000044
【０３０１】
上記の酸塩化物粗生成物を、トルエン（酸塩化物に対して２．５倍容）に溶かし、これを添加漏斗から、ｔｅｒｔ−ブチル−３−（６−アミノ−３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエート（１当量）、ＤＭＡＰ（０．０２当量）、及びトリエチルアミン（３．０当量）のトルエン（ｔｅｒｔ−ブチル−３−（６−アミノ−３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエートに対して４倍容）中混合物に加えた。２時間後、水（ｔｅｒｔ−ブチル−３−（６−アミノ−３−メチルピリジン−２−イル）ベンゾエートに対して４倍容）をこの反応混合物に加えた。３０分間攪拌した後、層を分離した。この有機相を濾過し、濃縮して、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）−ｔ−ブチルベンゾエートを濃い油として得た（定量的粗生成物収量）。アセトニトリル（粗生成物に対して３倍容）を加え、結晶化するまで蒸留した。水（粗生成物に対して２倍容）を加え、この混合物を２時間撹拌した。固形物を濾過により回収し、１：１（体積比）のアセトニトリル／水で洗い（粗生成物に対して２×１倍容）、減圧濾過で部分的に乾燥させた。この固形物を、少量のＮ２流を用い、６０℃の真空炉で重量が一定（差が１％未満）になるまで乾燥させ、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）−ｔ−ブチルベンゾエートを茶色の固体として得た。
【０３０２】
３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸塩酸塩の調製。
【０３０３】
【化１８】
2015504920.tif 000045
【０３０４】
３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）−ｔ−ブチルベンゾエート（１．０当量）のＭｅＣＮ（３．０倍容）中スラリーに、水（０．８３倍容）を加え、次に濃ＨＣｌ水溶液（０．８３倍容）を加えた。この混合物を４５±５℃に加熱した。２４〜４８時間撹拌した後、反応が完了し、この混合物を室温まで冷ました。水（１．３３倍容）を加え、この混合物を攪拌した。固形物を濾過により回収し、水で洗い（２×０．３倍容）、減圧濾過で部分的に乾燥させた。この固形物を、少量のＮ２流を用い、６０℃の真空炉で重量が一定（差が１％未満）になるまで乾燥させ、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸塩酸塩をオフホワイトの固体として得た。
【０３０５】
化合物１の１ＨＮＭＲスペクトルが図２０に示されている。図２１は、塩酸塩としての化合物１の１ＨＮＭＲスペクトルを示す。
【０３０６】
下記の表２は、化合物１の１ＨＮＭＲデータを列記している。
【０３０７】
【表２】
2015504920.tif 000046
【０３０８】
化合物１形態Ｉの調製、方法Ａ。
【０３０９】
【化１９】
2015504920.tif 000047
【０３１０】
３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）安息香酸・ＨＣｌ（１当量）の水（１０倍容）中のスラリーを、室温で攪拌した。２４時間撹拌した後、サンプルを採取した。サンプルを濾過し、固形物を水で洗った（２回）。固形物サンプルをＤＳＣ分析に提出した。ＤＳＣ分析により形態Ｉへの完全な変換が示されたら、この固形物を濾過により回収し、水で洗い（２×１．０倍容）、減圧濾過で部分的に乾燥させた。次に、この固形物を、少量のＮ２流を用い、６０℃の真空炉で重量が一定（差が１％未満）になるまで乾燥させ、オフホワイトの固体として化合物１形態Ｉを得た（収率９８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）９．１４（ｓ、１Ｈ）、７．９９−７．９３（ｍ、３Ｈ）、７．８０−７．７８（ｍ、１Ｈ）、７．７４−７．７２（ｍ、１Ｈ）、７．６０−７．５５（ｍ、２Ｈ）、７．４１−７．３３（ｍ、２Ｈ）、２．２４（ｓ、３Ｈ）、１．５３−１．５１（ｍ、２Ｈ）、１．１９−１．１７（ｍ、２Ｈ）。
【０３１１】
化合物１形態Ｉの調製、方法Ｂ。
【０３１２】
【化２０】
2015504920.tif 000048
【０３１３】
３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）−ｔ−ブチルベンゾエート（１．０当量）の蟻酸（３．０倍容）中溶液を、攪拌しながら７０±１０℃で８時間加熱した。この反応は、クロマトグラフィー法により、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）−ｔ−ブチルベンゾエート）の残存量のＡＵＣが１．０％以下のときに完了したと見なされた。この混合物を室温まで冷ました。この溶液を水（６倍容）に加え、５０℃で加熱し、混合物を攪拌した。この混合物を、３−（６−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−３−メチルピリジン−２−イル）−ｔ−ブチルベンゾエートの濃度が０．８％（ＡＵＣ）以下になるまで、７０±１０℃に加熱した。固形物を濾過により回収し、水で洗い（２×３倍容）、減圧濾過で部分的に乾燥させた。この固形物を、少量のＮ２流を用い、６０℃の真空炉で重量が一定（差が１％未満）になるまで乾燥させ、オフホワイトの固体として化合物１形態Ｉを得た。
【０３１４】
化合物１形態ＩのＤＳＣトレースを図２２に示す。化合物１形態Ｉの融解は約２０４℃で生じる。
【０３１５】
化合物１形態Ｉの単結晶構造からＸ線回折パターンが計算された。これを図１に示す。表３に、図１の算出ピークを列記する。
【０３１６】
【表３】
2015504920.tif 000049
【０３１７】
実際の化合物１形態Ｉの粉末Ｘ線回折パターンを、図２に示す。表４に、図２の実際のピークを列記する。
【０３１８】
【表４】
2015504920.tif 000050
【０３１９】
濃縮１−ブタノール溶液を７５℃から１０℃まで０．２℃／分の速度で冷却することにより、無色結晶の化合物１形態Ｉが得られた。寸法０．５０×０．０８×０．０３ｍｍの結晶を選び、鉱油できれいにし、ＭｉｃｒｏＭｏｕｎｔに搭載し、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＰＥＸ  ＩＩシステムの中心に合わせた。逆格子空間に分割された４０フレームの３つのバッチを取得し、配向行列及び初回単位胞パラメータを得た。最終単位胞パラメータを取得し、全データセットに基づいて精緻化した。
【０３２０】
逆格子空間の回折データセットを、各フレームに対して３０秒の暴露で０．５°のステップを使用して、分解能０．８２Åで取得した。データは１００（２）Ｋで収集した。強度の集積及び単位胞パラメータの精緻化を、ＡＰＥＸＩＩソフトウェアを使用して達成した。データ収集後に結晶を観察し、分解の症状は見られなかった。
【０３２１】
単結晶Ｘ線解析に基づく化合物１形態Ｉの立体構造図を図２３に示す。化合物１形態Ｉは単斜結晶であり、Ｐ２１／ｎで、次の単位胞寸法を有する。ａ＝４．９６２６（７）Å、ｂ＝１２．２９９（２）Å、ｃ＝３３．０７５（４）Å、β＝９３．９３８（９）°、Ｖ＝２０１４．０Å３、Ｚ＝４。構造データから計算された化合物１形態Ｉの密度は、１００Ｋで１．４９２ｇ／ｃｍ３である。
【０３２２】
化合物１形態Ｉからの化合物１形態ＩＩの調製。
化合物１形態Ｉ（約３０ｍｇ）を、５００μＬの適切な溶媒（例えば、メタノール、エタノール、アセトン、２−プロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸メチル、２−ブタノン、蟻酸エチル、及び−メチルテトラヒドロフラン中に２日間スラリー化させた。次にこのスラリーを遠心濾過又は減圧濾過し、室温に一晩置いて乾燥させ、化合物１形態ＩＩを得た。
【０３２３】
化合物１形態ＩＩアセトン溶媒和物のＤＳＣトレースを図１５に示す。これには、２つの相転移が示されている。化合物１形態ＩＩアセトン溶媒和物の融点は約１８８℃及び２０５℃で生じている。
【０３２４】
実際の化合物１形態ＩＩの粉末Ｘ線回折パターンを、図３に示す。表５は、図３の実際のピークを、相対的強度の降順で列記している。
【０３２５】
【表５】
2015504920.tif 000051
【０３２６】
単結晶Ｘ線分析に基づく化合物１形態ＩＩアセトン溶媒和物の立体構造図を図２４に示す。化合物１形態ＩＩとアセトンとの間の化学量論は、約４．４：１である（１Ｈ  ＮＭＲからの算出値は４．４８：１、Ｘ線からの算出値は４．３８：１）。この結晶構造は、単位胞当たり２つの空隙又はポケットがある、又はホスト分子当たり１つの空隙がある、分子の充填を示している。このアセトン溶媒和物において、空隙の約９２パーセントがアセトン分子で占められている。化合物１形態ＩＩは、単斜のＰ２１／ｎ空間群で、次の単位胞寸法を有する。ａ＝１６．５２３５（１０）Å、ｂ＝１２．７４２５（８）Å、ｃ＝２０．５５１２（１３）Å、α＝９０°、β＝１０３．７３６（４）°、γ＝９０°、Ｖ＝４２０３．３（５）Å３、＝４。構造データから計算された化合物１形態ＩＩ中の化合物１の密度は、１００Ｋで１．４３０／ｃｍ３である。
【０３２７】
化合物１形態ＩＩアセトン溶媒和物の固相１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを図２５に示す。表６は、相対ピークの化学シフトを示す。
【０３２８】
【表６】
2015504920.tif 000052
【０３２９】
化合物１形態ＩＩアセトン溶媒和物の固相１９Ｆ  ＮＭＲスペクトルを図２６に示す。アステリスク付きのピークは、スピニングサイドバンドを示す。表７は、相対ピークの化学シフトを示す。
【０３３０】
【表７】
2015504920.tif 000053
【０３３１】
化合物１塩酸塩形態Ａの調製。
化合物１塩酸塩のエタノール中濃縮溶液をゆっくり蒸発させることにより、無色結晶の化合物１塩酸塩形態Ａが得られた。寸法０．３０×１／５×０．１５ｍｍの結晶を選び、鉱油できれいにし、ＭｉｃｒｏＭｏｕｎｔに搭載し、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＰＥＸＩＩ回折計の中心に合わせた。逆格子空間に分割された４０フレームの３つのバッチを取得し、配向行列及び初回単位胞パラメータを得た。最終単位胞パラメータを取得し、全データセットに基づいて精緻化した。
【０３３２】
図１８は、単結晶解析に基づく、二量体としての化合物１塩酸塩形態Ａの立体構造図を示す。結晶構造から計算した化合物１塩酸塩形態ＡのＸ線回折パターンを、図２７に示す。表８は、図２７の計算値ピークを、相対的強度の降順で記載している。
【０３３３】
【表８】
2015504920.tif 000054
【０３３４】
化合物１を含む例示的な経口医薬製剤
１００ｍｇのＡＰＩ（すなわち化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ａとして、表９に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。ドライローラーコンパクション装置製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ａ（１００ｍｇの化合物１を有するよう製剤）が調製される。表９において、グレード／ブランドは次の通り。微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０２、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  ＳＤ  １００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びコロイドシリカ：Ｃａｂｏｓｉｌ。
【０３３５】
【表９】
2015504920.tif 000055
【０３３６】
１００ｍｇのＡＰＩ（すなわち化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｂとして、表１０に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｂ（１００ｍｇの化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表１０において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、及び、錠剤組成物中−クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ。
【０３３７】
【表１０】
2015504920.tif 000056
【０３３８】
１００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｃとして、表１１に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｃ（１００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表１１において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、及び、錠剤組成物中−クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ。
【０３３９】
【表１１】
2015504920.tif 000057
【０３４０】
２００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｄとして、表１２に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｄ（２００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表１２において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、並びに、錠剤組成物中−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ２００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びステアリン酸マグネシウム：５７１２。
【０３４１】
【表１２】
2015504920.tif 000058
【０３４２】
２００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｅとして、表１３に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｅ（２００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表１３において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、並びに錠剤コア組成物中−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ２００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びステアリン酸マグネシウム：５７１２、並びにフィルムコーティング中−フィルムコーティング：Ｏｐａｄｒｙ  ＩＩ、ワックス：カルナバ。
【０３４３】
【表１３】
2015504920.tif 000059
【０３４４】
２００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｆとして、表１４に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｆ（２００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表１４において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、並びに錠剤コア組成物中−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ２００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びステアリン酸マグネシウム：５７１２、並びにフィルムコーティング中−フィルムコーティング：Ｏｐａｄｒｙ  ＩＩ、ワックス：カルナバ。
【０３４５】
【表１４】
2015504920.tif 000060
【０３４６】
１００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｇとして、表１５に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｇ（１００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表１５において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、及び、錠剤組成物中−クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ。
【０３４７】
【表１５】
2015504920.tif 000061
【０３４８】
１００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ又は形態ＩＩ）を含む例示的錠剤１Ｈとして、表１６に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｈ（１００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉ又は形態ＩＩを有するよう製剤）が調製される。表１６において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、並びに錠剤コア組成物中−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ２００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びステアリン酸マグネシウム：５７１２。
【０３４９】
【表１６】
2015504920.tif 000062
【０３５０】
１００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ又は形態ＩＩ）を含む例示的錠剤１Ｉとして、表１７に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｉ（１００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉ又は形態ＩＩを有するよう製剤）が調製される。表１７において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、並びに錠剤コア組成物中−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ２００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びステアリン酸マグネシウム：５７１２。
【０３５１】
【表１７】
2015504920.tif 000063
【０３５２】
３００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｊとして、表１８に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｊ（３００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表１８において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、並びに錠剤コア組成物中−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ２００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びステアリン酸マグネシウム：５７１２、並びにフィルムコーティング中−フィルムコーティング：Ｏｐａｄｒｙ  ＩＩ、ワックス：カルナバ。
【０３５３】
【表１８】
2015504920.tif 000064
【０３５４】
３００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｋとして、表１９に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。湿式高剪断造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｋ（３００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表１９において、グレード／ブランドは次の通り。高剪断造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、マンニトール：Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ  Ｃ５０、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、並びに錠剤コア組成物中−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ２００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びステアリン酸マグネシウム：５７１２、並びにフィルムコーティング中−フィルムコーティング：Ｏｐａｄｒｙ  ＩＩ、ワックス：カルナバ。
【０３５５】
【表１９】
2015504920.tif 000065
【０３５６】
２００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｌとして、表２０に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。二軸湿式造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｌ（２００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表２０において、グレード／ブランドは次の通り。二軸造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、並びに錠剤コア組成物中−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ２００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びステアリン酸マグネシウム：５７１２、並びにフィルムコーティング中−フィルムコーティング：Ｏｐａｄｒｙ  ＩＩ、ワックス：カルナバ。
【０３５７】
【表２０Ａ】
2015504920.tif 000066
【０３５８】
４００ｍｇのＡＰＩ（すなわち結晶質化合物１形態Ｉ）を含む例示的錠剤１Ｍとして、表２１に列記されている成分及び量で、錠剤が調製された。二軸湿式造粒製剤プロセスを用いて、例示的な錠剤１Ｍ（４００ｍｇの結晶質化合物１形態Ｉを有するよう製剤）が調製される。表２１において、グレード／ブランドは次の通り。二軸造粒混合物−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、ポリビニルピロリドン：Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＰＶＰ  Ｋ３０、並びに錠剤コア組成物中−微結晶セルロース：Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ２００、クロスカルメロースナトリウム：Ａｃｄｉｓｏｌ、及びステアリン酸マグネシウム：５７１２、並びにフィルムコーティング中−フィルムコーティング：Ｏｐａｄｒｙ  ＩＩ、ワックス：カルナバ。
【０３５９】
【表２１】
2015504920.tif 000067
【０３６０】
ローラーコンパクション造粒組成物からの錠剤製剤
装置／プロセス
装置
ローラーコンパクター：Ａｌｅｘａｎｄｅｒｗｅｒｋ  ＷＰ  １２０、Ｖｅｃｔｏｒ  ＴＦ−Ｍｉｎｉ、又はＶｅｃｔｏｒ  ＴＦ−Ｌａｂｏ。
【０３６１】
スクリーニング／秤量
化合物１及び賦形剤は、秤量前又は秤量後にスクリーニングすることができる。適切なスクリーンサイズはメッシュ２０、メッシュ４０、又はメッシュ６０である。化合物１は、１つ以上の賦形剤とあらかじめ混合して、スクリーニングを容易にすることができる。
【０３６２】
混合
化合物１及び賦形剤は、様々な順序でブレンダーに加えることができる。混合は、Ｔｕｒｂｕｌａブレンダー又はｖシェルブレンダーで実施できる。成分は潤滑剤なしで１０分間混合し、次に潤滑剤を加えて更に３分間混合することができる。
【０３６３】
ローラーコンパクション
この混合物を、Ａｌｅｘａｎｄｅｒｗｅｒｋ  ＷＰ  １２０を使用して、ローラーコンパクションによりリボンにし、顆粒状に粉砕することができる。使用するロールは２５ｍｍ、コンパクション圧力１８〜５０ｂａｒ、ローラー速度３〜１２ＲＰＭ、スクリューフィーダー速度２０〜８０ＲＰＭであり得る。一体型粉砕機のスクリーンサイズは、上のスクリーンが２ｍｍ、下のスクリーンが０．８ｍｍであり得る。
【０３６４】
混合
ローラーコンパクションされた顆粒は、Ｖシェルブレンダーを使用して、例えば充填剤及び潤滑剤などの追加造粒賦形剤と共に混合することができる。この混合時間は５分間、３分間、又は１分間であり得る。
【０３６５】
圧縮
圧縮混合物は、単一のステーションＲｉｖａ  ＭｉｎｉＰｒｅｓｓを１０ｍｍツールと共に使って、錠剤に圧縮された。用量１００ｍｇの錠剤の重量は約２００、２５０、又は３００ｍｇであり得る。
【０３６６】
フィルムコーティング
錠剤は、パンコーター（例えばＯ’Ｈａｒａ  Ｌａｂｃｏａｔ）を使用してフィルムコーティングすることができる。
【０３６７】
印刷
フィルムコーティングされた錠剤は、例えば、Ｈａｒｔｎｅｔｔ  Ｄｅｌｔａプリンターなどを用いて、錠剤の一方又は両方の面にモノグラムを印刷することができる。
【０３６８】
高剪断造粒組成物からの錠剤製剤
装置／プロセス
装置
造粒機：Ｐｒｏｃｅｐｔ  ＭｉＰｒｏ、２５０ｍＬ又は１Ｌの造粒ボウルを備えたもの。
【０３６９】
スクリーニング／秤量
化合物１及び賦形剤は、秤量前又は秤量後にスクリーニングすることができる。可能なスクリーンサイズはメッシュ２０、メッシュ４０、又はメッシュ６０である。化合物１は、１つ以上の賦形剤とあらかじめ混合して、スクリーニングを容易にすることができる。
【０３７０】
造粒作業
造粒液−ＳＬＳ及び結合剤を精製水に加えて、溶けるまで混合する。好適な割合は、水に対して、２．５％  ｗ／ｗのＳＬＳ及び１０．０％  ｗ／ｗのＰＶＰ  Ｋ３０である。
【０３７１】
造粒−賦形剤と化合物１を造粒ボウルに入れる。加える順序は、化合物１、崩壊剤、希釈剤、及び充填剤であり得る。この成分を２５０ｍＬボウル内で、羽根回転速度１０００ＲＰＭ、及びチョッパー速度１０００ＲＰＭで１分間混合することができる。造粒液をシリンジポンプで１．５〜４．５ｇ／分の速度で添加しながら、羽根回転速度２０００ＲＰＭ、チョッパー速度４０００ＲＰＭで造粒を実施することができる。この液添加時間は４〜１２分であり得る。必要な結合剤液を添加した後、顆粒は約１０秒〜約１分間、湿って塊になることがある。この高剪断造粒プロセスの顕著な利点の１つは、界面活性剤と結合剤の両方を含む造粒液を使用することで、改善された濡れ性によって、より良い造粒が得られることである。一実施形態において、この界面活性剤は、ＳＬＳである。
【０３７２】
粉砕
この顆粒は、スクリーンミル又はコーンミルを使用してサイズを小さくすることができる。
【０３７３】
乾燥
この顆粒は、真空炉、トレー乾燥機、バイコニカル乾燥機、又は流動床乾燥機を使用して乾燥することができる。この顆粒は、窒素パージされた真空炉を使って乾燥された。
【０３７４】
混合
この顆粒は、追加造粒賦形剤と混合することができる。この顆粒は、追加造粒崩壊剤、希釈剤、充填剤、及び潤滑剤と混合された。この顆粒は、潤滑剤を加える前にＴｕｒｂｕｌａブレンダーを使って３分間混合され、潤滑剤と共に１分間混合された。より大規模なブレンダー、例えば４クオート用量Ｖシェルブレンダーを使用することもできる。
【０３７５】
圧縮
圧縮混合物は、単一のステーションＲｉｖａ  ＭｉｎｉＰｒｅｓｓを、８ｍｍ又は１０ｍｍツールと共に使って、錠剤に圧縮された。用量１００ｍｇの錠剤の重量は約１６０、２００、又は２５０ｍｇであり得る。
【０３７６】
フィルムコーティング
錠剤は、パンコーター（例えばＯ’Ｈａｒａ  Ｌａｂｃｏａｔ）を使用してフィルムコーティングすることができる。
【０３７７】
印刷
フィルムコーティングされた錠剤は、例えば、Ｈａｒｔｎｅｔｔ  Ｄｅｌｔａプリンターなどを用いて、錠剤の一方又は両方の面にモノグラムを印刷することができる。
【０３７８】
連続二軸湿式造粒プロセスの錠剤製剤
装置／プロセス
装置
造粒機：ＣｏｎｓｉＧｍａ又はＬｅｉｓｔｒｉｔｚ又はＴｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ二軸造粒機。
【０３７９】
スクリーニング／秤量
化合物１及び賦形剤は、秤量前又は秤量後にスクリーニングすることができる。可能なスクリーンサイズはメッシュ２０、メッシュ４０、又はメッシュ６０である。化合物１は、１つ以上の賦形剤とあらかじめ混合して、スクリーニングを容易にすることができる。
【０３８０】
混合
化合物１及び賦形剤は、様々な順序でブレンダーに加えることができる。混合は、Ｔｕｒｂｕｌａブレンダー、ｖシェルブレンダー、ビンブレンダー、又は連続ブレンダーで実施することができる。成分は、バッチブレンダーで１０分間、又は、連続ブレンダーで連続的に混合することができる。
【０３８１】
造粒作業
造粒液−ＳＬＳ及び結合剤を精製水に加えて、溶けるまで混合する。好適な割合は、水に対して、２．５％  ｗ／ｗのＳＬＳ及び１０．０％  ｗ／ｗのＰＶＰ  Ｋ３０である。
【０３８２】
造粒−化合物１及び賦形剤を含む混合物を、ロス・イン・ウェイト・フィーダーを使用して、１０ｋｇ／時の速度で二軸造粒機に入れることができる。造粒液は、蠕動ポンプを使って３．５ｋｇ／時の速度で添加することができる。造粒機は、４００ＲＰＭの速度で作動させることができる。この二軸造粒プロセスの顕著な利点の１つは、界面活性剤と結合剤の両方を含む造粒液を使用することで、改善された濡れ性によって、より良い造粒が得られることである。一実施形態において、この界面活性剤は、ＳＬＳである。もう１つの利点は、このプロセスが連続的であり、いつの時点でも限定的な量の材料が処理されるため、このプロセスは良好に制御することができ、高品質の生成物を得ることができる点である。
【０３８３】
粉砕
この顆粒は、スクリーンミル又はコーンミルを使用してサイズを小さくすることができる。
【０３８４】
乾燥
この顆粒は、真空炉、トレー乾燥機、バイコニカル乾燥機、又は流動床乾燥機を使用して乾燥することができる。
【０３８５】
混合
この顆粒は、追加造粒賦形剤と混合することができる。この顆粒は、３００リットルのビンブレンダーを使って６０回転混合された。
【０３８６】
圧縮
圧縮混合物は、Ｃｏｕｒｔｏｙ  Ｍｏｄｕｌ  Ｐロータリープレスを使用して錠剤に圧縮された。
【０３８７】
フィルムコーティング
錠剤は、パンコーター（例えばＯ’Ｈａｒａ  Ｌａｂｃｏａｔ）を使用してフィルムコーティングすることができる。
【０３８８】
印刷
フィルムコーティングされた錠剤は、例えば、Ｈａｒｔｎｅｔｔ  Ｄｅｌｔａプリンターなどを用いて、錠剤の一方又は両方の面にモノグラムを印刷することができる。
【０３８９】
用量投与スケジュール
別の一態様において、本発明は、本発明により提供される医薬組成物の有効量を、必要としている被験者に投与する工程を含む、被験者におけるＣＦＴＲ媒介性疾患の治療の方法に関する。別の一実施形態において、この医薬組成物は、被験者に対し、２週間に１回投与される。別の一実施形態において、この医薬組成物は、被験者に対し、１週間に１回投与される。別の一実施形態において、この医薬組成物は、被験者に対し、３日に１回投与される。別の一実施形態において、この医薬組成物は、被験者に対し、１日に１回投与される。一実施形態において、医薬組成物が、表９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、又は１９による錠剤である場合、用量は１日に１回である。
【０３９０】
アッセイ
化合物のＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ修復特性の検出と測定のためのアッセイ
化合物のＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ調節特性を測定するための膜電位光学的手法。
【０３９１】
光学的膜電位アッセイは、ＧｏｎｚａｌｅｚとＴｓｉｅｎにより記述されている電圧感受性ＦＲＥＴセンサー（Ｇｏｎｚａｌｅｚ、Ｊ．Ｅ．ａｎｄ  Ｒ．Ｙ．Ｔｓｉｅｎ（１９９５）「Ｖｏｌｔａｇｅ  ｓｅｎｓｉｎｇ  ｂｙ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｅｎｅｒｇｙ  ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｉｎ  ｓｉｎｇｌｅ  ｃｅｌｌｓ」Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｊ  ６９（４）：１２７２〜８０、及びＧｏｎｚａｌｅｚ、Ｊ．Ｅ．ａｎｄ  Ｒ．Ｙ．Ｔｓｉｅｎ（１９９７）「Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｈａｔ  ｕｓｅ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｅｎｅｒｇｙ  ｔｒａｎｓｆｅｒ」Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ  ４（４）：２６９〜７７を参照）を利用し、これを、例えば電圧／イオンプローブ・リーダー（ＶＩＰＲ）（Ｇｏｎｚａｌｅｚ、Ｊ．Ｅ．、Ｋ．Ｏａｄｅｓら（１９９９）「Ｃｅｌｌ−ｂａｓｅｄ  ａｓｓａｙｓ  ａｎｄ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｉｏｎ−ｃｈａｎｎｅｌ  ｔａｒｇｅｔｓ」Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  Ｔｏｄａｙ  ４（９）：４３１〜４３９を参照）などの蛍光変化を測定するための装置と組み合わせる。
【０３９２】
これらの電圧感受性アッセイは、膜溶解性の電圧感受性染料ＤｉＳＢＡＣ２（３）と、蛍光リン脂質ＣＣ２−ＤＭＰＥ（これは原形質膜の外側弁尖に取り付けられ、ＦＲＥＴドナーとして作用する）との間の蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）の変化に基づく。膜電位（Ｖｍ）の変化により、マイナスに荷電したＤｉＳＢＡＣ２（３）が原形質膜にわたって再分布し、これによって、ＣＣ２−ＤＭＰＥからのエネルギー移動の量が変化する。蛍光発光の変化は、ＶＩＰＲ（商標）ＩＩを用いてモニターされた。これは、９６ウェル又は３８４ウェルのマイクロタイタープレートで細胞系スクリーニングを実施するよう設計された、一体型の液体処理・蛍光検出器である。
【０３９３】
１．修復化合物の同定
Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲに伴うトラフィッキング欠陥を修復する小分子を同定するため、単回添加ＨＴＳアッセイ形式が開発された。細胞は、試験化合物が存在する又は存在しない（陰性対照）状態で、３７℃で１６時間、無血清培地で培養された。陽性対照として、３８４ウェルプレートに播種された細胞を、２７℃で１６時間培養し、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲの「温度修復」とした。この細胞を次に、クレブス・リンゲル液で３回すすぎ、電圧感受性染料を搭載した。Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを活性化するため、１０μＭフォルスコリン及びＣＦＴＲ相乗剤のゲニステイン（２０μＭ）を、無Ｃｌ−培地と共に各ウェルに加えた。無Ｃｌ−培地を加えることで、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ活性化に応じてＣｌ−の外向き流束が促進され、結果として得られた膜の脱分極が、ＦＲＥＴによる電圧感受性染料を用いて光学的にモニターされた。
【０３９４】
２．相乗剤化合物の同定
Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲの相乗剤を同定するため、２回添加ＨＴＳアッセイ形式が開発された。１回目の添加で、無Ｃｌ−培地の、試験化合物を含んだもの又は含まないものを、各ウェルに加えた。２２秒後、第２の添加として、２〜１０μＭフォルスコリンを含む無Ｃｌ−培地を加え、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを活性化した。両方の添加後の細胞外Ｃｌ−濃度は２８ｍＭであり、これは、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲの活性化に応じてＣｌ−の外向き流束が促進され、結果として得られた膜の脱分極が、ＦＲＥＴによる電圧感受性染料を用いて光学的にモニターされた。
【０３９５】
３．溶液
水浴溶液Ｎｏ．１：（ｍＭ単位）ＮａＣｌ  １６０、ＫＣｌ  ４．５、ＣａＣｌ２  ２、ＭｇＣｌ２  １、ＨＥＰＥＳ  １０、ＮａＯＨによりｐＨ  ７．４。
【０３９６】
無塩化物水浴溶液：水浴溶液Ｎｏ．１の塩化物を、グルコン酸塩に置き換える。
【０３９７】
ＣＣ２−ＤＭＰＥ：ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストック溶液として調製し、−２０℃で保存した。
【０３９８】
ＤｉＳＢＡＣ２（３）：ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストック溶液として調製し、−２０℃で保存した。
【０３９９】
４．細胞培養
安定してＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを発現しているＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、膜電位の光学的測定に使用する。細胞は、１７５ｃｍ２培養フラスコ内の、２ｍＭグルタミン、１０％ウシ胎児血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン、及び２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳを添加したダルベッコ改変イーグル培地で、５％  ＣＯ２中、湿度９０％、３７℃に維持された。すべての光学的アッセイについて、３８４ウェルのマトリゲルコーティングされたプレートに細胞を３０，０００個／ウェル播種し、２時間３７℃で培養し、更に相乗剤アッセイのため２７℃で２４時間培養した。修復アッセイについては、化合物あり又はなしの細胞を２７℃又は３７℃で１６〜２４時間培養する。
【０４００】
化合物のＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ調節特性を測定するための電気生理学的アッセイ
１．Ｕｓｓｉｎｇチャンバアッセイ
光学的アッセイで同定されたＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ調節因子を更に特性付けるために、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを発現する極性化上皮細胞に対して、Ｕｓｉｎｇチャンバ実験が実施された。Ｃｏｓｔａｒ  Ｓｎａｐｗｅｌｌ細胞培養インサートで培養したＦＲＴΔＦ５０８−ＣＦＴＲ上皮細胞をＵｓｓｉｎｇチャンバ（Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）に搭載し、電圧クランプシステム（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｉｏｗａ、ＩＡ、及び、Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を使用して、単層を連続的に短絡させた。２ｍＶパルスを印加して、経上皮抵抗を測定した。この条件下で、ＦＲＴ上皮は４ＫΩ／ｃｍ２以上の抵抗を示した。溶液は２７℃に維持し、空気でバブリングさせた。電極オフセット電位及び液抵抗は、無細胞のインサートを使って補正した。この条件下で、電流は、頂端膜に発現しているＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを通るＣｌ−の流れを反映する。ＭＰ１００Ａ−ＣＥインタフェースとＡｃｑＫｎｏｗｌｅｄｇｅソフトウェア（ｖ３．２．６、ＢＩＯＰＡＣ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ、ＣＡ）を用いて、ＩＳＣがデジタル的に取得された。
【０４０１】
２．修復化合物の同定
典型的なプロトコルは、基底側〜頂端側膜のＣｌ−濃度勾配を利用した。この勾配をセットアップするため、通常のリンゲル液を基底側膜に使用し、ここで、頂端側ＮａＣｌを等モルのグルコン酸ナトリウム（ＮａＯＨでｐＨ  ７．４に調整）に置き換えて、上皮にわたる大きなＣｌ−濃度勾配を得た。すべての実験は無傷の単層で実施された。Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを完全に活性化するため、フォルスコリン（１０μＭ）及びＰＤＥ阻害剤ＩＢＭＸ（１００μＭ）を適用し、次にＣＦＴＲ相乗剤ゲニステイン（５０μＭ）を加えた。
【０４０２】
他の細胞タイプで観察されるように、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを安定して発現しているＦＲＴ細胞を低温で培養すると、原形質膜のＣＦＴＲの機能密度が増大する。修復化合物の活性を決定するため、細胞を、１０μＭの試験化合物と共に３７℃で２４時間培養し、次に３回洗ってから、記録を行った。化合物処理された細胞中のｃＡＭＰ媒介及びゲニステイン媒介のＩＳＣを、２７℃及び３７℃対照で正規化し、活性パーセントとして表した。修復化合物と共に細胞を予備培養することで、３７℃対照に比べ、ｃＡＭＰ媒介及びゲニステイン媒介のＩＳＣが有意に増加した。
【０４０３】
３．相乗剤化合物の同定
典型的なプロトコルは、基底側〜頂端側膜のＣｌ−濃度勾配を利用した。この勾配をセットアップするため、通常のリンゲル液を基底側膜に使用し、ナイスタチン（３６０μｇ／ｍＬ）で透過処理し、ここで、頂端側ＮａＣｌを等モルのグルコン酸ナトリウム（ＮａＯＨでｐＨ  ７．４に調整）に置き換えて、上皮にわたる大きなＣｌ−濃度勾配を得た。すべての実験は、ナイスタチン透過処理から３０分後に実施した。フォルスコリン（１０μＭ）及びすべての試験化合物を、細胞培養インサートの両方の側に加えた。推定されるＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ相乗剤の効果が、既知の相乗剤であるゲニステインと比較された。
【０４０４】
４．溶液
基底側溶液（ｍＭ単位）：ＮａＣｌ（１３５）、ＣａＣｌ２（１．２）、ＭｇＣｌ２（１．２）、Ｋ２ＨＰＯ４（２．４）、ＫＨＰＯ４（０．６）、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）（１０）、及びデキストロース（１０）。溶液はＮａＯＨでｐＨ  ７．４に調整された。
【０４０５】
頂端膜側溶液（ｍＭ単位）：基底側溶液と同じで、ＮａＣｌをグルコン酸ナトリウム（１３５）に置き換えたもの。
【０４０６】
５．細胞培養
我々の光学的アッセイから同定された、推定されるＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ調節因子について、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ（ＦＲＴΔＦ５０８−ＣＦＴＲ）を発現しているＦｉｓｈｅｒラット上皮（ＦＲＴ）細胞をＵｓｓｉｎｇチャンバ実験に使用した。細胞をＣｏｓｔａｒ  Ｓｎａｐｗｅｌｌ細胞培養インサートで培養し、３７℃、５％  ＣＯ２で５日間、５％ウシ胎児血清、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、及び１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを添加したＣｏｏｎ改変ＨａｍＦ−１２培地で培養した。化合物の相乗剤活性を特性付けるための使用の前に、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲの補正のために、細胞を２７℃で１６〜４８時間培養した。修復化合物の活性を決定するために、細胞は化合物あり又はなしで、２７℃又は３７℃で２４時間培養された。
【０４０７】
６．全細胞記録
温度及び試験化合物で修復された、安定的にＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを発現しているＮＩＨ３Ｔ３において、巨視的Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ電流（ＩΔＦ５０８）が、穴あきパッチを用いた全細胞記録によりモニターされた。簡単に言うと、Ａｘｏｐａｔｃｈ  ２００Ｂパッチクランプ増幅器（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、ＣＡ）を使って、ＩΔＦ５０８の電圧クランプ記録が室温で実施された。すべての記録は、サンプリング周波数１０ｋＨｚで、１ｋＨｚのローパスフィルタにより取得された。細胞内溶液で満たしたピペットは、５〜６ＭΩの抵抗を有していた。これらの記録条件で、室温でのＣｌ−（ＥＣｌ）の算出された逆転電位は−２８ｍＶであった。すべての記録で、シール抵抗＞２０ＧΩ、直列抵抗＜１５ＭΩであった。パルス生成、データ取得、及び分析は、Ｃｌａｍｐｅｘ  ８（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．）と共にＤｉｇｉｄａｔａ  １３２０  Ａ／Ｄインタフェースを装備したコンピュータを使用して実施した。水浴は２５０μＬ未満の生理食塩水を含み、重力駆動潅流システムを使用して２ｍＬ／分の速度で連続的に潅流させた。
【０４０８】
７．修復化合物の同定
原形質膜内の機能性Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲの密度を増加させる修復化合物の活性を決定するために、我々は、上記の穴あきパッチ記録技法を使用して、修復化合物での処理から２４時間後の電流密度を測定した。Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを完全に活性化させるため、１０μＭフォルスコリンと２０μＭゲニステインを細胞に加えた。我々の記録条件下で、２７℃での培養から２４時間後の電流密度は、３７℃での培養から２４時間後に観察されたものよりも高かった。この結果は、原形質膜におけるＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲの密度に対する低温培養の既知の影響に合致している。ＣＦＴＲ電流密度に対する修復化合物の影響を決定するために、細胞を１０μＭの試験化合物と共に３７℃で２４時間培養し、この電流密度を、２７℃及び３７℃対照と比較した（％活性）。記録の前に、細胞を、細胞外記録培地で３回洗い、残存する試験化合物を除去した。１０μＭの修復化合物であらかじめ培養したものは、３７℃対照に比べ、ｃＡＭＰ及びゲニステイン依存性電流が有意に増加した。
【０４０９】
８．相乗剤化合物の同定
安定的にＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを発現しているＮＩＨ３Ｔ３細胞において、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ相乗剤が巨視的Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ  Ｃｌ−電流（ＩΔＦ５０８）を増加させる能力も、穴あきパッチ記録技法を使用して調査された。光学的アッセイで同定された相乗剤は、光学的アッセイで観察された同様の抗力及び有効性を有するＩΔＦ５０８の、用量依存性の増加をもたらした。調べたすべての細胞において、相乗剤適用前と適用中の逆転電位はおよそ−３０ｍＶであり、これは計算値ＥＣｌである（−２８ｍＶ）。
【０４１０】
９．溶液
細胞内溶液（ｍＭ単位）：アスパラギン酸Ｃｓ（９０）、ＣｓＣｌ（５０）、ＭｇＣｌ２（１）、ＨＥＰＥＳ（１０）、及び２４０μｇ／ｍＬアンホテリシン−Ｂ（ＣｓＯＨでｐＨ  ７．３５に調整）。
【０４１１】
細胞外溶液（ｍＭ単位）：Ｎ−メチル−ｄ−グルカミン（ＮＭＤＧ）−Ｃｌ（１５０）、ＭｇＣｌ２（２）、ＣａＣｌ２（２）、ＨＥＰＥＳ（１０）（ＨＣｌでｐＨ  ７．３５に調整）。
【０４１２】
１０．細胞培養
安定してＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを発現しているＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、全細胞記録に使用する。細胞は、１７５ｃｍ２培養フラスコ内の、２ｍＭグルタミン、１０％ウシ胎児血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン、及び２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳを添加したダルベッコ改変イーグル培地で、５％  ＣＯ２中、湿度９０％、３７℃に維持された。全細胞記録では、ポリ−Ｌ−リジンコーティングされたカバーガラス上に２，５００〜５，０００個の細胞を播種し、２７℃で２４〜４８時間培養してから、相乗剤活性の試験に使用した。また修復剤活性を測定するため、３７℃で修復化合物あり又はなしで培養した。
【０４１３】
１１．単チャネル記録
ＮＩＨ３Ｔ３細胞において安定的に発現されている温度補正されたＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲの単チャネル活性と、相乗剤化合物の活性を、切除した裏返し膜パッチを使用して観察した。簡単に言うと、Ａｘｏｐａｔｃｈ  ２００Ｂパッチクランプ増幅器（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．）を使って、単チャネル活性の電圧クランプ記録が室温で実施された。すべての記録は、サンプリング周波数１０ｋＨｚで、４００Ｈｚのローパスフィルタにより取得された。パッチピペットはＣｏｒｎｉｎｇ  Ｋｏｖａｒ  Ｓｅａｌｉｎｇ  Ｎｏ．７０５２ガラス（Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｉｎｃ．、Ｓａｒａｓｏｔａ、ＦＬ）で製造され、細胞外溶液で満たしたときに５〜８ＭΩの抵抗を有していた。切除後に、１ｍＭ  Ｍｇ−ＡＴＰ、及び７５ｎＭのｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼ、触媒サブユニット（ＰＫＡ、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を加えることにより、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを活性化させた。チャネル活性を安定化させた後、重力駆動微小潅流システムを使ってパッチを潅流した。流入をパッチ近くに配置し、完全な溶液交換が１〜２秒以内になるようにした。速い潅流の中でＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ活性を維持するために、非特異性ホスファターゼ阻害剤Ｆ−（１０ｍＭ  ＮａＦ）を水浴溶液に加えた。これらの記録条件下で、チャネル活性は、パッチ記録の持続時間にわたって一定のままであった（最長６０分間）。細胞内溶液から細胞外溶液へ移動した正電荷によって生じた電流（アニオンは逆方向に移動する）は、正電流として示される。ピペット電位（Ｖｐ）は８０ｍＶに維持された。
【０４１４】
チャネル活性は、２つ以下の活性チャネルを含む膜パッチから解析された。実験の経過中、同時開放の最大数により、活性チャネルの数が決定された。単チャネル電流の振幅を決定するため、１２０秒間のＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲ活性で記録されたデータを、１００Ｈｚで「オフライン」でフィルタし、次にこれを使って全点振幅ヒストグラムを構築し、これをＢｉｏ−Ｐａｔｃｈ  Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェア（Ｂｉｏ−Ｌｏｇｉｃ  Ｃｏｍｐ．Ｆｒａｎｃｅ）を用いて多変数ガウス関数でフィッティングした。合計の微細電流及び開口確率（Ｐｏ）が、１２０秒間のチャネル活性から決定された。Ｐｏは、Ｂｉｏ−Ｐａｔｃｈソフトウェアを使って、又は、Ｐｏ＝Ｉ／ｉ（Ｎ）の関係から決定され、式中Ｉ＝平均電流、ｉ＝単チャネル電流振幅、及びＮ＝パッチ中の活性チャネルの数である。
【０４１５】
１２．溶液
細胞外溶液（ｍＭ単位）：ＮＭＤＧ（１５０）、アスパラギン酸（１５０）、ＣａＣｌ２（５），ＭｇＣｌ２（２）、及びＨＥＰＥＳ（１０）（Ｔｒｉｓ塩基でｐＨ  ７．３５に調整）。
【０４１６】
細胞内溶液（ｍＭ単位）：ＮＭＤＧ−Ｃｌ（１５０）、ＭｇＣｌ２（２）、ＥＧＴＡ（５）、ＴＥＳ（１０）、及びＴｒｉｓ塩基（１４）（ＨＣｌでｐＨ  ７．３５に調整）。
【０４１７】
１３．細胞培養
安定してＦ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲを発現しているＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、切除膜パッチクランプ記録に使用する。細胞は、１７５ｃｍ２培養フラスコ内の、２ｍＭグルタミン、１０％ウシ胎児血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ペニシリン／ストレプトマイシン、及び２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳを添加したダルベッコ改変イーグル培地で、５％  ＣＯ２中、湿度９０％、３７℃に維持された。単チャネル記録では、ポリ−Ｌ−リジンコーティングされたカバーガラス上に２，５００〜５，０００個の細胞を播種し、２７℃で２４〜４８時間培養してから使用した。
【０４１８】
上記の手順を使用して、化合物１の活性、すなわちＥＣ５０が測定された。これを表２０に示す。
【０４１９】
【表２０Ｂ】
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【０４２０】
その他の実施形態
本開示において参照されているすべての刊行物及び特許は、それぞれの個々の刊行物又は特許出願を具体的かつ個別に参照により組み込まれるよう記述されていた場合と同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。参照により組み込まれた特許又は刊行物のいずれかにおいて用語の意味が本開示に使用されている用語の意味と矛盾する場合は、本開示における用語の意味が優先されることが意図される。更に、上記の議論は、本発明の単なる例示的実施形態を開示し記述するものである。当業者には、そのような議論並びに添付の図面及び請求項から、下記の請求項に定義される本発明の要旨及び範囲から逸脱することなく、様々な変更、改変、及び変異物を作製可能であることが、容易に理解されよう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【国際調査報告】
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