(57)【要約】  (1-メチル-1H-ピロール-3-イル)フェニルに基づくアミノ残基を有するピロロベンゾジアゼピン(PBDs)が、改善された細胞毒性特性及びＤＮＡ結合特性を有する有効性の高い化合物であることを、見いだした。2015515972.tif 0000622015515972.tif 0000632015515972.tif 0000642015515972.tif 000065
2015515972.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式Ｉの化合物：
【化１】
2015515972.tif 000051
又はそれらの塩又は溶媒和物（ただし、式中において：  
点線の二重結合は、Ｃ２及びＣ３の間の単結合又は二重結合の存在を示し;
R2は、以下から選択され：  -H, -OH, =O, =CH2, -CN, -R, OR, ハロ、ジハロ、=CHR, =CHRR’, -O-SO2-R, CO2R及びCOR;
R7は、以下から選択され：  H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR’, ニトロ、Me3Sn及びハロ;
ただし、R及びR’ は、それぞれ独立に、以下から選択され：  所望により置換された、C1-7 アルキル、C3-20 ヘテロシクリル、及びC5-20 アリール基; 
R10 及びR11 は、一体となって二重結合を形成するか、又はそれぞれ以下から選択され：  H及びQRQ 、ただし、QはO, S及びNHから選択され、RQ はH又はC1-7 アルキル、又はH及びSOxM、ただし、xは2又は3であり、Ｍは一価の薬学的に許容可能なカチオンであり;
Ａは、以下のいずれかであり:
【化２】
2015515972.tif 000052
又は
【化３】
2015515972.tif 000053
ただし、式中、X及びYは、以下から選択され:  CH及びNMe; COH及びNMe; CH及びS; N 及びNMe; N及びS;
Bは、単結合又は以下であり:
【化４】
2015515972.tif 000054
ただし、式中、X及びYは、上記規定した通りであり;  及び
R1 はC1-4 アルキルである）。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、基Ａにおいて、Ｘ及びＹが以下から選択された化合物：  CH及びNMe; CH 及びS; N 及びNMe; 及び N 及び S。
【請求項３】
請求項２に記載の化合物であって、基Ａにおいて、Ｘ及びＹが以下から選択された化合物：  CH及びNMe;  及びN 及びNMe。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の化合物であって、Ｂが単結合である化合物。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれかに記載の化合物であって、ＢがＢ１であり、Ｂ１においてＸ及びＹが以下から選択された化合物：  CH 及び NMe; CH 及び S; N 及び NMe; 及び N 及び S。
【請求項６】
請求項５に記載の化合物であって、基Ｂ１において、Ｘ及びＹが以下から選択された化合物：  CH 及び NMe;及び N 及び NMe。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載の化合物であって、R7が以下から選択された化合物：  H, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR’, 及びハロ。
【請求項８】
請求項７に記載の化合物であって、R7 が以下から選択された化合物：  H及びOR。
【請求項９】
請求項８に記載の化合物であって、R7がOR7Aであり、ただし、R7Aが随意に置換されたC1-7アルキルである、化合物。
【請求項１０】
請求項９に記載の化合物であって、R7Aが以下から選択された化合物：  Me, CH2Ph 及びアリール。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物であって、R10及びR11が一体となって二重結合を形成している、化合物。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物であって、R10がＨであり、R11がORQである化合物。
【請求項１３】
請求項１２に記載の化合物であって、RQが以下から選択された化合物：  H又はMe。
【請求項１４】
請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物であって、R10がＨであり、R11がSO3Mである化合物。
【請求項１５】
請求項１４に記載の化合物であって、ＭがNa+である化合物。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれかに記載の化合物であって、R1 が C1-2 アルキルである、化合物。
【請求項１７】
請求項１６に記載の化合物であって、R1がメチルである、化合物。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれかに記載の化合物であって、R2が以下から選択された化合物：  -H, -OH, =O, =CH2, -CN, -R, -OR, =CHR, =CRR’, -O-SO2-R, -CO2R、及び-COR。
【請求項１９】
請求項１８に記載の化合物であって、R2が以下から選択された化合物：  -H, =CH2, -R, =CHR, 及び =CRR’。
【請求項２０】
請求項１８に記載の化合物であって、R2が次のコンフィギュレーションC1にある化合物:
【化５】
2015515972.tif 000055
【請求項２１】
請求項１〜１９のいずれかに記載の化合物であって、R2が随意に置換されたC5-20アリールである化合物。
【請求項２２】
請求項２１に記載の化合物であって、R2が以下から選択された化合物：  随意に置換されたフェニル、随意に置換されたナフチル、随意に置換されたピリジル、随意に置換されたキノリニル又はイソキノリニル。
【請求項２３】
請求項２１又は請求項２２に記載の化合物であって、R2基が１〜３個の置換基を有する、化合物。
【請求項２４】
請求項２１〜２３のいずれかに記載の化合物であって、随意の置換基が以下から選択された化合物：  メトキシ、エトキシ、フルオロ、クロロ、シアノ、ビス−オキシ−メチレン、メチル−ピペラジニル、モルホリノ、及びメチル−チエニル。
【請求項２５】
請求項２１又は請求項２２に記載の化合物であって、R2が以下から選択された化合物：  4-メトキシ-フェニル, 3-メトキシフェニル, 4-エトキシ-フェニル, 3-エトキシ-フェニル, 4-フルオロ-フェニル, 4-クロロ-フェニル, 3,4-ビスオキシメチレン-フェニル, 4-メチルチエニル, 4-シアノフェニル, 4-フェノキシフェニル, キノリン-3-イル、及びキノリン-6-イル、イソキノリン-3-イル及びイソキノリン-6-イル、2-チエニル, 2-フラニル, メトキシナフチル、及びナフチル。
【請求項２６】
請求項１〜１９のいずれかに記載の化合物であって、R2が以下から選択された化合物：  
(a) C1-5 飽和脂肪族アルキル; 
(b) C3-6 飽和シクロアルキル;
(c)
【化６】
2015515972.tif 000056
ただし、式中、R21, R22 及びR23 は、それぞれ独立に、以下から選択される：  H, C1-3 飽和アルキル、C2-3 アルケニル、C2-3 アルキニル、及びシクロプロピル、ただし、R2 基中の炭素原子の総数は５個を超えない;
(d)
【化７】
2015515972.tif 000057
ただし、式中、R25a 及びR25b のうちの１個がHであり、もう１個が以下から選択される:  フェニル、ただし、フェニルは以下から選択された基によって随意に置換される：  ハロ、メチル、メトキシ; ピリジル; 及びチオフェニル; 及び
(e)
【化８】
2015515972.tif 000058
ただし、式中、R24 は以下から選択される: H; C1-3 飽和アルキル; C2-3 アルケニル; C2-3 アルキニル; シクロプロピル; フェニル、ただし、フェニルは以下から選択された基によって随意に置換される：  ハロ、メチル、メトキシ; ピリジル; 及びチオフェニル。
【請求項２７】
請求項２６に記載の化合物であって、R2が以下から選択された化合物：  メチル、エチル、プロピル、ブチル、又はペンチル。 
【請求項２８】
請求項２６に記載の化合物であって、R2が以下から選択された化合物：  シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシル。
【請求項２９】
請求項２６に記載の化合物であって、R2が、
【化９】
2015515972.tif 000059
であり、R2基中の炭素原子の総数が、４個を超えない、化合物。
【請求項３０】
請求項２６又は請求項２９に記載の化合物であって、R21, R22 及び R23 のいずれか１個がHであり、他の２個の基が、以下から選択された化合物：  H, C1-3 飽和アルキル、C2-3 アルケニル, C2-3 アルキニル、及びシクロプロピル。
【請求項３１】
請求項２６又は請求項２９に記載の化合物であって、R21, R22 及び R23 のいずれか２個がHであり、他の１個の基が、以下から選択された化合物：  H, C1-3 飽和アルキル、C2-3 アルケニル, C2-3 アルキニル、及びシクロプロピル。
【請求項３２】
請求項３０又は請求項３１に記載の化合物であって、Hでない基が以下から選択された基である化合物：  メチル、及びエチル。
【請求項３３】
請求項２６に記載の化合物であって、R2が
【化１０】
2015515972.tif 000060
であり、Ｈではない基が随意に置換されたフェニルである、化合物。
【請求項３４】
請求項２６に記載の化合物であって、R2が
【化１１】
2015515972.tif 000061
であり、R24が、Ｈ及びメチルから選択された、化合物。
【請求項３５】
請求項１〜３４のいずれかに記載の化合物であって、
R2 が以下の基のいずれかから選択されたものである場合には： -H, -OH, -CN, -R, -OR, ハロ, −O−SO2−R, −CO2R及び −COR、
Ｃ２及びＣ３の間に二重結合が存在する、化合物。
【請求項３６】
請求項１〜３４のいずれかに記載の化合物であって、
R2 が以下の基のいずれかから選択されたものである場合には：=O, =CH2, =CHR, =CHRR’、
Ｃ２及びＣ３の間に単結合が存在する、化合物。
【請求項３７】
請求項１〜１７のいずれかに記載の化合物であって、
Ｃ２及びＣ３の間に二重結合が存在しない場合には、R2 がＨである、化合物。
【請求項３８】
請求項１〜３７のいずれかに記載の化合物、及び薬学的に許容可能なキャリア又は希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項３９】
治療方法における使用のための、請求項１〜３７のいずれかに記載の化合物。
【請求項４０】
増殖性疾患の治療のための医薬の製造における、請求項１〜３７のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項４１】
増殖性疾患の治療方法における使用のための、請求項１〜３７のいずれかに記載の化合物。
【請求項４２】
増殖性疾患に苦しむ患者の治療の方法であって、以下を含む方法：
請求項１〜３７のいずれかに記載の化合物、又は請求項３８に記載の組成物の、治療的に許容される量を、上記患者へ投与する工程。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）に関し、特に4-(1-メチル-1H-ピロール-3-イル)ベンジルに基づく、置換基を有するアミノ酸残基、を有するＰＢＤモノマー、及びＰＢＤモノマーを合成する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）は、ＤＮＡの特定の配列を認識して結合する能力を有している。特に好ましい配列は、PuGPuである。最初のＰＢＤ抗腫瘍抗生物質、アントラマイシン、は、１９６５年に発見された(Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5793-5795 (1965); Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5791-5793 (1965))。以来、多数の天然のＰＢＤが報告されており、１０を超える合成経路が、種々のアナログのために開発されてきた(Thurston, et al., Chem. Rev. 1994, 433-465 (1994))。ファミリーメンバーとして以下が含まれる；アベイマイシン(Hochlowski, et al., J. Antibiotics, 40, 145-148 (1987))、キカマイシン(Konishi, et al., J. Antibiotics, 37, 200-206 (1984)) 、DC-81(日本国特許第58-180 487; Thurston, et al., Chem. Brit., 26, 767-772 (1990); Bose, et al., Tetrahedron, 48, 751-758 (1992))、マゼトラマイシン(Kuminoto, et al., J. Antibiotics, 33, 665-667 (1980))、ネオトラマイシンA及びB (Takeuchi, et al., J. Antibiotics, 29, 93-96 (1976))、ポロトラマイシン(Tsunakawa, et al., J. Antibiotics, 41, 1366-1373 (1988))、プロトラカルシン(Shimizu, et al, J. Antibiotics, 35, 972-978 (1982); Langley and Thurston, J. Org. Chem., 52, 91-97 (1987))、シバノマイシン(DC-102)(Hara, et al., J. Antibiotics, 41, 702-704 (1988); Itoh, et al., J. Antibiotics, 41, 1281-1284 (1988))、シビロマイシン(Leber, et al., J. Am. Chem. Soc., 110, 2992-2993 (1988))、及びトママイシン(Arima, et al., J. Antibiotics, 25, 437-444 (1972))。ＰＢＤは、次の一般式を有する：
【化１】
2015515972.tif 000003
【０００３】
これらは、置換基の数、タイプ及び位置が異なっており、芳香環Ａ環及びピロール環Ｃ環のいずれにおいてもであり、このＣ環の飽和度においてもである。Ｂ環において、イミン(N=C)、カルビノールアミン(NH-CH(OH))、又はカルビノールアミン  メチル  エーテル(NH-CH(OMe))のいずれかが、N10-C11位にあり、この位置はＤＮＡのアルキル化の原因となる電子親和性中心である。既知の天然プロダクトは全て、キラルＣ１１ａ位において（Ｓ）−コンフィグレーションを有し、これはＣ環からＡ環へと向いて見たときに右回りのツイストを付与する。これは、ＢフォームＤＮＡのマイナーグルーブとのイソヘリシティに適した三次元形状を与えて、結合部位においてぴったりと適合するようにさせる(Kohn, In Antibiotics III.  Springer-Verlag, New York, pp. 3-11 (1975); Hurley及び Needham-VanDevanter, Acc. Chem. Res., 19, 230-237 (1986))。これらのマイナーグルーブに付加物を形成させる能力によって、ＤＮＡプロセッシングと干渉することができ、それによって抗腫瘍剤として使用できる。この化合物の合成は、以下にレビューされている：Thurston, D.E., et al., Chem. Rev., 1994, 94, 433-465及び Thurston, D.E., et al., Chem. Rev., 2011, 111, 2815-2864。
【０００４】
ピロール及びイミダゾールとＰＢＤとのコンジュゲートが多数報告されており、例えば：
【化２】
2015515972.tif 000004
ただし、式中、n = 1-3であり(Damayanthi, Y., et al., Journal of Organic Chemistry, 64(1), 290-292 (1999))；
【化３】
2015515972.tif 000005
ただし、式中、n=1-3であり、及び
【化４】
2015515972.tif 000006
ただし、式中n=1-2であり(Kumar, R. 及び Lown, J.W. Oncology Research, 13(4), 221-233 (2003)); Kumar, R., et al., Heterocyclic Communications, 8(1), 19-26 (2002));
【化５】
2015515972.tif 000007
ただし、式中n = 1-4であり(Baraldi, P.G., et al., Journal of Medicinal Chemistry, 42(25), 5131-5141 (1999));
【化６】
2015515972.tif 000008
ただし、式中n=3である (Wells, G., et al., Proc. Am. Assoc. Canc. Res., 2003, 44, 452)。
【０００５】
WO 2007/039752及びWells, G, et al., Journal of Medicinal Chemistry 2006, 49, 5442-5461において、以下の化合物(GWL-78)
【化７】
2015515972.tif 000009
及び関連する構造が、本願発明者のいずれかによる業績として開示されている。この化合物は、その構成要素であるＰＢＤ及びジピロール成分と比較して５０倍に至るまで増加したＤＮＡ結合親和性を示す。
【０００６】
WO 2005/085177において、本願発明者のいずれかが、ＤＮＡ結合において有用な特性を有するビアリールコアを含むアミノ酸を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】日本国特許第58-180 487
【特許文献２】国際公開WO 2007/039752号
【特許文献３】国際公開WO 2005/085177号
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5793-5795 (1965)
【非特許文献２】Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5791-5793 (1965)
【非特許文献３】Thurston, et al., Chem. Rev. 1994, 433-465 (1994)
【非特許文献４】Hochlowski, et al., J. Antibiotics, 40, 145-148 (1987)
【非特許文献５】Konishi, et al., J. Antibiotics, 37, 200-206 (1984)
【非特許文献６】Thurston, et al., Chem. Brit., 26, 767-772 (1990)
【非特許文献７】Bose, et al., Tetrahedron, 48, 751-758 (1992)
【非特許文献８】Kuminoto, et al., J. Antibiotics, 33, 665-667 (1980)
【非特許文献９】Takeuchi, et al., J. Antibiotics, 29, 93-96 (1976)
【非特許文献１０】Tsunakawa, et al., J. Antibiotics, 41, 1366-1373 (1988)
【非特許文献１１】Shimizu, et al, J. Antibiotics, 35, 972-978 (1982)
【非特許文献１２】Langley and Thurston, J. Org. Chem., 52, 91-97 (1987)
【非特許文献１３】Hara, et al., J. Antibiotics, 41, 702-704 (1988)
【非特許文献１４】Itoh, et al., J. Antibiotics, 41, 1281-1284 (1988)
【非特許文献１５】Leber, et al., J. Am. Chem. Soc., 110, 2992-2993 (1988)
【非特許文献１６】Arima, et al., J. Antibiotics, 25, 437-444 (1972)
【非特許文献１７】Kohn, In Antibiotics III.  Springer-Verlag, New York, pp. 3-11 (1975)
【非特許文献１８】Hurley及び Needham-VanDevanter, Acc. Chem. Res., 19, 230-237 (1986)
【非特許文献１９】Thurston, D.E., et al., Chem. Rev., 1994, 94, 433-465
【非特許文献２０】Thurston, D.E., et al., Chem. Rev., 2011, 111, 2815-2864
【非特許文献２１】Damayanthi, Y., et al., Journal of Organic Chemistry, 64(1), 290-292 (1999)
【非特許文献２２】Kumar, R. 及び Lown, J.W. Oncology Research, 13(4), 221-233 (2003)
【非特許文献２３】Kumar, R., et al., Heterocyclic Communications, 8(1), 19-26 (2002)
【非特許文献２４】Baraldi, P.G., et al., Journal of Medicinal Chemistry, 42(25), 5131-5141 (1999)
【非特許文献２５】Wells, G., et al., Proc. Am. Assoc. Canc. Res., 2003, 44, 452
【非特許文献２６】Wells, G, et al., Journal of Medicinal Chemistry 2006, 49, 5442-5461
【発明の概要】
【０００９】
本発明者は、先行技術のＰＢＤコンジュゲートの特性、特に細胞毒性及びＤＮＡ結合性が、改善可能であることを、見いだした。特に、本願発明は、ＰＢＤコンジュゲートにおいて高い効果の化合物を生じる、単独のヘテロアリール  ベースのアミノ酸残基と組み合わせた、単独の4-(1-メチル-1H-ピロール-3-イル)ベンジル  ベースのアミノ酸残基の導入に関する。
【００１０】
本発明の第一の態様は、次の式Ｉの化合物、又はその塩又若しくはその溶媒和物を提供する：
【化８】
2015515972.tif 000010
ただし、式中：
点線の二重線は、Ｃ２及びＣ３の間の単結合又は二重結合の存在を表し；
R2は、-H, -OH, =O, =CH2, -CN, -R, OR, ハロ, ジハロ, =CHR, =CHRR’, -O-SO2-R, CO2R 及びCORから選択され;
R7は、H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR’, ニトロ, Me3Sn 及びハロから選択され;
ただし、R及びR’は、独立に、任意に置換されていてもよいC1-7 アルキル, C3-20 ヘテロシクリル、及びC5-20 アリール基から選択され; 
R10 及び R11 は、一緒に二重結合を形成するか、あるいは、それぞれ以下から選択され：  H及び QRQ、ただし、Q は、O, S 及びNHから選択され、RQ はH 又はC1-7 アルキル、又はH 及びSOxM、ただし、x は2 又は3、及びM は、製薬的に許容可能な一価のカチオンであり;
Aは:
【化９】
2015515972.tif 000011
又は
【化１０】
2015515972.tif 000012
であり、ただし、 X 及びY は次から選択され: CH及び NMe; COH及びNMe; CH 及びS; N 及びNMe; N 及びS;
Bは、単結合か、又は:
【化１１】
2015515972.tif 000013
であり、ただし、 X 及び Y は、上記の通りであり;  且つ
R1 はC1-4 アルキルである。
【００１１】
そこで、Ｂ１は、以下の構造を有することができる：
【００１２】
【表１】
2015515972.tif 000014
【００１３】
本発明の第二の態様は、式Ｉの化合物の合成方法を提供する。
【００１４】
本発明の第三の態様は、本発明の第一の態様の化合物と、製薬的に許容可能なキャリア（担体）又は溶媒（希釈剤）を含む、医薬組成物を、提供する。
【００１５】
本発明の第四の態様は、本発明の第一の態様の化合物の、治療方法における使用を提供する。
【００１６】
本発明の第五の態様は、本発明の第一の態様の化合物の、増殖性疾患の治療のための医薬の製造における使用を提供する。この態様は、さらに、増殖性疾患の治療における、第一の態様の化合物の使用を提供する。
【００１７】
本発明の第六の態様は、第一の態様の化合物又は第三の態様の組成物の、治療のための許容量を、患者に投与することを含む、増殖性疾患に苦しむ患者の治療方法を提供する。
【００１８】
本発明の第四から第六の態様において、本発明の化合物は、単独で投与してもよく、他の治療と組み合わせることもでき、治療されるべき状態に応じて、同時であってもよく、逐次的（連続）であってもよい。本発明の第三の態様において、医薬組成物は、１又はそれより多くの（例えば、２、３、又は４の）有効成分をさらに含んでいてもよい。
【００１９】
［定義］
［置換基］
本明細書で使用される「任意に（随意に、追加的に、所望により）置換された」(optionally substituted)の用語は、置換されていないか、あるいは置換されている、親基（ペアレントグループ）に関する。
【００２０】
特に別途定めない限り、本明細書で使用される「置換された」(substituted)の用語は、１又はそれより多数の置換基を備えた親基に関する。本明細書で使用される「置換基」（substituent）の用語は、通常の意味において使用され、親基へ共有結合的に結合した化学部分、適切な場合には親基に融合した化学部分に関する。非常に広範な置換基が知られており、それらを形成し、広範な親基に導入する方法もまた知られている。
【００２１】
置換基の例をさらに詳細に以下に説明する。
C1-7 アルキル:  本明細書における「C1-7 アルキル」の用語は、１〜７個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を取り除くことによって得られる一価基に関し、この炭化水素は、脂肪族であってもよく脂環式であってもよく、飽和又は不飽和（例えば、部分不飽和、完全不飽和）であってもよい。そこで、用語「アルキル」は、後述して論じる、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル等の、サブクラスを含む。
【００２２】
飽和アルキル基の例としては、メチル(C1), エチル(C2), プロピル(C3), ブチル(C4), ペンチル(C5), ヘキシル(C6)、及びヘプチル(C7)が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００２３】
飽和直鎖アルキル基の例としては、メチル(C1), エチル(C2), ｎ−プロピル(C3), ｎ−ブチル(C4), ｎ−ペンチル（アミル）(C5), ｎ−ヘキシル(C6)、及びｎ−ヘプチル(C7)が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００２４】
飽和分枝アルキル基の例としては、イソ−プロピル(C3), イソ−ブチル(C4), sec−ブチル(C4), tert−ブチル(C4), イソ−ペンチル(C5),及びネオ−ペンチル(C5)が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００２５】
C2-7 アルケニル:  本明細書で使用される「C2-7アルケニル」の用語は、１又はそれより多数の炭素炭素二重結合を有する、アルキル基に関する。
【００２６】
不飽和アルケニル基の例としては、エテニル（ビニル、-CH=CH2）, 1-プロペニル (-CH=CH-CH3), 2-プロペニル (アリル, -CH-CH=CH2), イソプロペニル (1-メチルビニル, -C(CH3)=CH2), ブテニル (C4), ペンテニル (C5)、及びヘキセニル (C6)が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００２７】
C2-7 アルキニル:  本明細書で使用される「C2-7 アルキニル」の用語は、１又はそれより多数の炭素炭素三重結合を有する、アルキル基に関する。
【００２８】
不飽和アルキニル基の例としては、エチニル (エチニル, -C≡CH)、及び2-プロピニル (プロパルギル, -CH2-C≡CH)が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００２９】
C3-7 シクロアルキル:  本明細書で使用される「C3-7 シクロアルキル」の用語は、環式基でもあるアルキル基に関する；  すなわち、環式炭化水素（炭素環）化合物の脂環式環原子から水素原子を取り除くことによって得られる一価部分であり、該部分は３〜７個の炭素原子を有し、３〜７個の環原子を有する。
【００３０】
シクロアルキル基の例としては、以下から得られるものが含まれるが、これらに限定されるものではない：
飽和単環式炭化水素化合物：
シクロプロパン(C3), シクロブタン(C4), シクロペンタン (C5), シクロヘキサン(C6), シクロヘプタン (C7), メチルシクロプロパン(C4), ジメチルシクロプロパン(C5), メチルシクロブタン (C5), ジメチルシクロブタン(C6), メチルシクロペンタン(C6), ジメチルシクロペンタン(C7)、及びメチルシクロヘキサン(C7);
不飽和単環式炭化水素化合物：
シクロプロペン(C3), シクロブテン(C4), シクロペンテン(C5), シクロヘキセン(C6), メチルシクロプロペン(C4), ジメチルシクロプロペン(C5), メチルシクロブテン(C5), ジメチルシクロブテン(C6), メチルシクロペンテン(C6), ジメチルシクロペンテン(C7)、及び メチルシクロヘキセン (C7); 及び
飽和多環式炭化水素化合物： 
ノルカラン(C7), ノルピナン(C7), ノルボルナン(C7)。
【００３１】
C3-20 ヘテロシクリル:  本明細書で使用される「C3-20 ヘテロシクリル」の用語は、ヘテロ環式化合物の環原子から水素原子を取り除くことによって得られる一価部分に関し、該部分は３〜２０個の環原子を有し、１〜１０個の環ヘテロ原子を有する。好ましくは、それぞれの環は、３〜７個の環原子を有し、１〜４個の環ヘテロ原子を有する。
【００３２】
本明細書の文脈においては、プレフィックス（例えば、C3-20, C3-7, C5-6,等）は、環原子の数又は環原子の数の範囲を表し、この原子は、炭素原子であるか、ヘテロ原子である。例えば、本明細書において使用される「C5-6ヘテロシクリル」の用語は、５又は６個の環原子を有するヘテロシクリル基に関する。
【００３３】
単環式ヘテロシクリル基の例としては、以下から得られるものが含まれるが、これらに限定されるものではない：
N1:   アジリゼン (C3), アゼチジン (C4), ピロリジン（テトラヒドロピロール）(C5), ピロリン (例えば、 3-ピロリン、2,5-ジヒドロピロール) (C5), 2H-ピロール又は3H-ピロール(イソピロール、イソアゾール) (C5), ピペリジン(C6), ジヒドロピリジン(C6), テトラヒドロピリジン(C6), アゼピン(C7);
O1:   オキシラン(C3), オキセタン(C4), オキソラン(テトラヒドロフラン) (C5), オキソール(ジヒドロフラン) (C5), オキサン(テトラヒドロピラン) (C6), ジヒドロピラン(C6), ピラン(C6), オキセピン(C7);
S1:   チイラン (C3), チエタン (C4), チオラン (テトラヒドロチオフェン) (C5), チアン(テトラヒドロチオピラン) (C6), チエパン(C7);
O2:   ジオキソラン(C5), ジオキサン(C6), 及びジオキセパン(C7);
O3:   トリオキサン (C6);
N2:   イミダゾリジン (C5), ピラゾリジン (ジアゾリジン) (C5), イミダゾリン(C5), ピラゾリン (ジヒドロピラゾール) (C5), ピペラジン (C6);
N1O1:   テトラヒドロオキサゾール (C5), ジヒドロオキサゾール(C5), テトラヒドロイソキサゾール(C5), ジヒドロイソキサゾール(C5), モルフォリン(C6), テトラヒドロオキサジン(C6), ジヒドロオキサジン(C6), オキサジン (C6);
N1S1:   チアゾリン (C5), チアゾリジン (C5), チオモルフォリン(C6); 
N2O1:   オキサジアジン (C6);
O1S1:   オキサチオール (C5)及びオキサチアン(チオキサン) (C6); 及び、
N1O1S1:   オキサチアジン(C6)。
【００３４】
置換された単環式ヘテロシクリル基の例としては、以下から得られるものが含まれる：  糖類で、環状形態のもの、例えば、フラノース(C5)、例えばアラビノフラノース、リキソフラノース、リボフラノース、及びキシロフラノース等、及びピラノース(C6)、例えばアロピラノース、アルトピラノース、グルコピラノース、マンノピラノース、グロピラノース、イドピラノース、ガラクトピラノース、及びタロピラノース等。
【００３５】
C5-20 アリール:  本明細書で使用される「C5-20 アリール」の用語は、芳香族化合物の芳香環原子から水素原子を取り除くことによって得られる一価部分に関し、該部分は３〜２０個の環原子を有する。好ましくは、それぞれの環は、５〜７個の環原子を有する。
【００３６】
本明細書の文脈においては、プレフィックス（例えば、C3-20, C5-7, C5-6,等）は、環原子の数又は環原子の数の範囲を表し、この原子は、炭素原子であるか、ヘテロ原子である。例えば、本明細書において使用される「C5-6アリール」の用語は、５又は６個の環原子を有するアリール基に関する。
【００３７】
これらの環原子は、「カルボアリール基」においてのように、全て炭素原子であってもよい。
カルボアリール基の例としては、以下から得られるものが含まれるが、これらに限られるものではない：  ベンゼン（すなわち、フェニル）(C6), ナフタレン (C10), アズレン (C10), アントラセン (C14), フェナントレン (C14), ナフタセン(C18), 及びピレン(C16)。
【００３８】
少なくとも１以上の芳香環を含む、縮合環を含むアリール基の例としては、以下から得られるものが含まれるが、これらに限られるものではない：  インダン(例えば2,3-ジヒドロ-1H-インデン) (C9), インデン(C9), イソインデン (C9), テトラリン(1,2,3,4-テトラヒドロナフタレン(C10), アセナフテン(C12), フルオレン(C13), フェナレン(C13), アセフェナントレン(C15), 及びアセアントレン(C16)。
【００３９】
あるいは、環原子は、「ヘテロアリール基」においてのように、１又はそれより多数のヘテロ原子を、含んでいてもよい。単環式ヘテロアリール基の例としては、以下から得られるものが含まれるが、これらに限られるものではない：  
N1:   ピロール(アゾール) (C5), ピリジン(アジン) (C6);
O1:   フラン(オキソール) (C5);
S1:   チオフェン (チオール) (C5);
N1O1:   オキサゾール (C5), イソキサゾール (C5), イソキサジン (C6);
N2O1:   オキサジアゾール(フラザン) (C5); 
N3O1:   オキサトリアゾール (C5);
N1S1:   チアゾール(C5), イソチアゾール (C5);
N2:   イミダゾール (1,3-ジアゾール) (C5), ピラゾール(1,2-ジアゾール)(C5), ピリダジン(1,2-ジアジン) (C6), ピリミジン (1,3-ジアジン) (C6) (例えば、シトシン、チミン、ウラシル), ピラジン(1,4-ジアジン) (C6);
N3:   トリアゾール(C5), トリアジン(C6); 及び、
N4:   テトラゾール(C5)。
【００４０】
縮合環を含むヘテロアリール基の例としては、以下から得られるものが含まれるが、これらに限られるものではない：
以下から得られるC9 (２つの縮合環を備える)：  ベンゾフラン(O1), イソベンゾフラン(O1), インドール(N1), イソインドール(N1), インドリジン(N1), インドリン(N1), イソインドリン(N1), プリン(N4) (例えば、アデニン、グアニン), ベンズイミダゾール(N2), インダゾール(N2), ベンゾオキサゾール(N1O1), ベンズイソキサゾール(N1O1), ベンゾジオキソール(O2),  ベンゾフラザン(N2O1), ベンゾトリアゾール(N3), ベンゾチオフラン(S1), ベンゾチアゾール (N1S1), ベンゾチアジゾール(N2S);
以下から得られるC10 (２つの縮合環を備える)：  クロメン(O1), イソクロメン(O1), クロマン(O1), イソクロマン(O1), ベンゾジオキサン (O2), キノリン(N1), イソキノリン(N1), キノリジン (N1),  ベンゾキサジン (N1O1), ベンゾジアジン(N2), ピリドピリジン(N2), キノキサリン(N2), キナゾリン (N2), シノリン(N2), フタラジン (N2), ナフチリジン(N2), プテリジン (N4); 
以下から得られるC11 (２つの縮合環を備える)：  ベンゾジアゼピン (N2); 
以下から得られるC13 (３つの縮合環を備える)：  カルバゾール(N1), ジベンゾフラン(O1), ジベンゾチオフェン(S1), カルボリン (N2), ペリミジン(N2), ピリドインドール(N2); 及び、
以下から得られるC14 (３つの縮合環を備える)：  アクリジン(N1), キサンテン(O1), チオキサンテン(S1), オキサントレン(O2), フェノキサチイン(O1S1), フェナジン(N2), フェノキサジン(N1O1), フェノチアジン(N1S1), チアントレン(S2), フェナントリジン(N1), フェナントロリン(N2), フェナジン(N2)。
【００４１】
上述の基は、単独であっても他の置換基の一部であっても、それら自身や追加の置換基として以下に挙げる基から選択された、１又はそれより多数の基によって随意に置換されていてもよい。
【００４２】
ハロ： -F, -Cl, -Br、及び -I
ヒドロキシ: -OH
【００４３】
エーテル：  -OR、ただし、Rはエーテル置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基 (C1-7 アルコキシ基となる、後述する), C3-20 ヘテロシクリル基(C3-20 ヘテロシクリルオキシ基となる), 又は C5-20 アリール基(C5-20 アリールオキシ基となる), 好ましくはC1-7アルキル基である。
【００４４】
アルコキシ：  -OR, ただし、Rはアルキル基であり、例えば、C1-7 アルキル基である。C1-7 アルコキシ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない： -OMe (メトキシ), -OEt (エトキシ), -O(nPr) (n-プロポキシ), -O(iPr) (イソプロポキシ), -O(nBu) (n-ブトキシ), -O(sBu) (sec-ブトキシ), -O(iBu) (イソブトキシ), 及び -O(tBu) (tert-ブトキシ)。
【００４５】
アセタール：  -CH(OR1)(OR2), ただし、R1 及びR2 は独立してアセタール置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基, C3-20 ヘテロシクリル基, 又は C5-20 アリール基, 好ましくはC1-7 アルキル基、又は、「環状（環式）」アセタール基である場合には、R1 及びR2はそれらが結合している２個の酸素原子及びそれらが結合している炭素原子と共に、４〜８個の環原子を有するヘテロ環式の環を形成する。アセタール基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない： -CH(OMe)2, -CH(OEt)2, 及び -CH(OMe)(OEt)。
【００４６】
ヘミアセタール：  -CH(OH)(OR1)、ただし、R1 はヘミアセタール置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基, C3-20 ヘテロシクリル基, 又はC5-20 アリール基, 好ましくはC1-7 アルキル。ヘミアセタール基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：-CH(OH)(OMe)、及び -CH(OH)(OEt)。
【００４７】
ケタール：  -CR(OR1)(OR2)、ただし、R1 及びR2 はアセタールのために規定したものと同様であり、Rは水素以外のケタール置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは、C1-7 アルキル基。ケタール基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない： -C(Me)(OMe)2, -C(Me)(OEt)2, -C(Me)(OMe)(OEt), -C(Et)(OMe)2, -C(Et)(OEt)2、及び-C(Et)(OMe)(OEt)。
【００４８】
ヘミケタール：  -CR(OH)(OR1)、ただし、R1 はヘミアセタールのために規定したものと同様であり、Rは水素以外のヘミケタール置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又は、C5-20 アリール基、 好ましくはC1-7 アルキル基。ヘミアセタール基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない： -C(Me)(OH)(OMe), -C(Et)(OH)(OMe), -C(Me)(OH)(OEt) 、及び -C(Et)(OH)(OEt)。
【００４９】
オキソ(ケト、-オン): =O
チオン(チオケトン): =S
【００５０】
イミノ（イミン）：  =NR、ただし、Rは、イミノ置換基であり、例えば、水素, C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは、水素又はC1-7 アルキル基。エステル基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：   =NH, =NMe, =NEt, 及び =NPh。
【００５１】
ホルミル（カルバルデヒド、カルボキサルデヒド）：  -C(=O)H。
【００５２】
アシル（ケト）：  -C(=O)R、ただし、Rは、アシル置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基 (C1-7 アルキルアシル又はC1-7 アルカノイルとなる)、C3-20 ヘテロシクリル基(C3-20 ヘテロシクリルアシルとなる)、又はC5-20 アリール基(C5-20 アリールアシルとなる)、好ましくはC1-7 アルキル基。アシル基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない： -C(=O)CH3 (アセチル), -C(=O)CH2CH3 (プロピオニル), -C(=O)C(CH3)3 (t-ブチリル), 及び -C(=O)Ph (ベンゾイル、フェノン)。
【００５３】
カルボキシ（カルボン酸）: -C(=O)OH
チオカルボキシ(チオカルボン酸): -C(=S)SH
チオロカルボキシ(チオロカルボン酸): -C(=O)SH
チオノカルボキシ(チオノカルボン酸): -C(=S)OH
【００５４】
イミド酸: -C(=NH)OH
ヒドロキサム酸: -C(=NOH)OH
【００５５】
エステル（カルボキシレート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル）：  -C(=O)OR、ただし、Rはエステル置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはC1-7 アルキル基。エステル基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない： -C(=O)OCH3, -C(=O)OCH2CH3, -C(=O)OC(CH3)3、及び -C(=O)OPh。
【００５６】
アシロキシ（リバースエステル）：  -OC(=O)R、ただし、Rはアシロキシ置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、 C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはC1-7 アルキル基。アシロキシ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -OC(=O)CH3 (アセトキシ)、-OC(=O)CH2CH3, -OC(=O)C(CH3)3, -OC(=O)Ph、及び-OC(=O)CH2Ph。
【００５７】
オキシカルボイルオキシ：  -OC(=O)OR、ただし、Rはエステル置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはC1-7 アルキル基。エステル基の例としては、以下が、これらに限られるものではない：  -OC(=O)OCH3, -OC(=O)OCH2CH3, -OC(=O)OC(CH3)3, 及び -OC(=O)OPh。
【００５８】
アミノ：  -NR1R2、ただし、R1 及びR2 は、独立に、アミノ置換基であり、例えば、水素、C1-7 アルキル基 (C1-7 アルキルアミノ又はジ-C1-7 アルキルアミノとなる)、C3-20 ヘテロシクリル基、C5-20 アリール基、好ましくはH又はC1-7 アルキル基、又は、「環状（環式）」アミノ基である場合には、R1 及びR2は、 それらが結合している窒素原子と共に、４〜８個の環原子を有するヘテロシクロ環を形成する。アミノ基は、プライマリー（一級）(-NH2)、セカンダリー（二級）(-NHR1)、又はターシャリー（三級）(-NHR1R2)であってもよく、カチオンの形態である場合には, クウォータナリー（四級）(-+NR1R2R3)とすることができる。アミノ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない： -NH2, -NHCH3, -NHC(CH3)2, -N(CH3)2, -N(CH2CH3)2、及び-NHPh。環式アミノ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルフォリノ、及びチオモルフォリノ。
【００５９】
アミド（カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキサミド）：  -C(=O)NR1R2、ただし、R1 及びR2 は、独立して、アミノ基のために規定したものと同様の、アミノ置換基である。アミド基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：   -C(=O)NH2, -C(=O)NHCH3, -C(=O)N(CH3)2, -C(=O)NHCH2CH3、及び-C(=O)N(CH2CH3)2、アミド基であることに加えてR1 及び R2はそれらが結合している窒素原子と共にヘテロ環構造を、形成することもでき、例えば以下である：ピペリジノカルボニル、モルフォリノカルボニル、チオモルフォリノカルボニル、及びピペラジノカルボニル。
【００６０】
チオアミド(チオカルバミル):  -C(=S)NR1R2、ただし、R1 及びR2は、独立に、アミノ基のために規定したものと同様の、アミノ置換基である。アミド基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない： -C(=S)NH2, -C(=S)NHCH3, -C(=S)N(CH3)2、及び -C(=S)NHCH2CH3。
【００６１】
アシルアミド（アシルアミノ）:   -NR1C(=O)R2、ただし、R1 は、アミド置換基であり、例えば、水素、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは、水素又はC1-7 アルキル基、及びR2 は、アシル置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20アリール基、好ましくは、水素又はC1-7 アルキル基。アシルアミド基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -NHC(=O)CH3 , -NHC(=O)CH2CH3、及び -NHC(=O)Ph。 R1及びR2 は、共に、環状構造を形成してもよく、例えば以下である：  サクシニミジル(succinimidyl)、マレイミジル(maleimidyl)、及びフタリミジル(phthalimidyl):
【化１２】
2015515972.tif 000015
【００６２】
アミノカルボニルオキシ:   -OC(=O)NR1R2、ただし、R1及びR2 は、独立に、アミノ基のために規定したものと同様の、アミノ置換基である。アミノカルボニルオキシ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -OC(=O)NH2, -OC(=O)NHMe, -OC(=O)NMe2、及び-OC(=O)NEt2。
【００６３】
ウレイド:  -N(R1)CONR2R3 、ただし、R2 及び R3 は、独立に、アミノ基のために規定したものと同様の、アミノ置換基であり、R1 はウレイド置換基であり、例えば、水素、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは、水素又はC1-7 アルキル基。ウレイド基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -NHCONH2, -NHCONHMe, -NHCONHEt, -NHCONMe2, -NHCONEt2, -NMeCONH2, -NMeCONHMe, -NMeCONHEt, -NMeCONMe2, 、及び -NMeCONEt2。
【００６４】
グアニジノ：  -NH-C(=NH)NH2
【００６５】
テトラゾルイル: ４個の窒素原子と１個の炭素原子を有する、五員芳香環；
【化１３】
2015515972.tif 000016
【００６６】
イミノ: =NR、ただし、Rは、イミノ置換基であり、例えば、水素、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはH 又はC1-7アルキル基。イミノ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない： =NH, =NMe、及び =NEt。
【００６７】
アミジン（アミド）: -C(=NR)NR2、ただし、それぞれのRは、アミジン置換基であり、例えば、水素、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはH又はC1-7 アルキル基。アミジン基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -C(=NH)NH2, -C(=NH)NMe2、及び-C(=NMe)NMe2。
【００６８】
ニトロ： -NO2
ニトロソ：  -NO
アジド:  -N3
【００６９】
シアノ（ニトリル、カルボニトリル）: -CN
イソシアノ: -NC
シアナト: -OCN
イソシアナト: -NCO
【００７０】
チオシアノ(チオシアナト): -SCN
イソチオシアノ (イソチオシアナト): -NCS
スルフヒドリル(チオール、メルカプト):  -SH
【００７１】
チオエーテル（スルフィド）:  -SR、ただし、Rは、チオエーテル置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基(C1-7アルキルチオ基となる)、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはC1-7 アルキル基。C1-7 アルキルチオ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -SCH3 及び-SCH2CH3。
【００７２】
ジスルフィド：  -SS-R、ただし、Rは、ジスルフィド置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又は C5-20 アリール基、好ましくはC1-7 アルキル基(C1-7 アルキルジスルフィドとなる)。C1-7 アルキルジスルフィド基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -SSCH3 、及び-SSCH2CH3。
【００７３】
スルフィン（スルフィニル、スルフォキシド）：  -S(=O)R、ただし、Rは、スルフィン置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基 、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはC1-7 アルキル基。スルフィン基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -S(=O)CH3、及び-S(=O)CH2CH3。
【００７４】
スルホン（スルホニル）:  -S(=O)2R、ただし、Rは、スルホン置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはC1-7 アルキル基であって、例えば、以下を含む：  フッ化（フッ素置換された）又は全フッ素置換された、C1-7 アルキル基。スルホン基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -S(=O)2CH3 (メタンスルホニル、メシル), -S(=O)2CF3 (トリフリル), -S(=O)2CH2CH3 (エシル), -S(=O)2C4F9 (ノナフリル), -S(=O)2CH2CF3 (トレシル), -S(=O)2CH2CH2NH2 (タウリル), -S(=O)2Ph (フェニルスルホニル、ベシル), 4-メチルフェニルスルホニル (トシル), 4-クロロフェニルスルホニル(クロシル), 4-ブロモフェニルスルホニル (ブロシル), 4-ニトロフェニル (ノシル), 2-ナフタレンスルホネート(ナプシル)、及び5-ジメチルアミノ-ナフタレン-1-イルスルホネート(ダンシル)。
【００７５】
スルフィン酸(スルフィノ):   -S(=O)OH, -SO2H
スルホン酸 (スルホノ):  -S(=O)2OH, -SO3H
【００７６】
スルフィネート（スルフィン酸エステル）:  -S(=O)OR;  ただし、Rは、スルフィネート置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは、C1-7 アルキル基。スルフィネート基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -S(=O)OCH3 (メトキシスルフィニル;  メチルスルフィネート)、及び -S(=O)OCH2CH3 (エトキシスルフィニル;  エチルスルフィネート)。
【００７７】
スルホネート(スルホン酸エステル):   -S(=O)2OR、ただし、Rは、スルホネート置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又は C5-20 アリール基、好ましくは、C1-7 アルキル基。スルホネート基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：   -S(=O)2OCH3 (メトキシスルホニル; メチルスルホネート)、及び -S(=O)2OCH2CH3 (エトキシスルホニル; エチルスフホネート)。
【００７８】
スルフィニルオキシ:  -OS(=O)R、ただし、Rはスルフィニルオキシ置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基 、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは、C1-7 アルキル基。スルフィニルオキシ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：   -OS(=O)CH3 、及び -OS(=O)CH2CH3。
【００７９】
スルホニルオキシ:   -OS(=O)2R、ただし、Rはスルホニルオキシ置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは、C1-7 アルキル基。スルホニルオキシ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -OS(=O)2CH3 (メシレート) 、及び-OS(=O)2CH2CH3 (エシレート)。
【００８０】
スルフェート（硫酸エステル）:  -OS(=O)2OR;  ただし、Rはスルフェート置換基であり、例えば、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは、C1-7 アルキル基。スルフェート基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -OS(=O)2OCH3 、及び-SO(=O)2OCH2CH3。
【００８１】
スルファミル (スルファモイル;  スルフィン酸アミド;  スルフィンアミド):  -S(=O)NR1R2、ただし、R1 及び R2 は、独立に、アミノ基のために規定したものと同様の、アミノ置換基である。スルファミル基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -S(=O)NH2, -S(=O)NH(CH3), -S(=O)N(CH3)2, -S(=O)NH(CH2CH3), -S(=O)N(CH2CH3)2、及び-S(=O)NHPh。
【００８２】
スルホンアミド(スルフィナモイル; スルホン酸アミド; スルホンアミド):   -S(=O)2NR1R2、ただし、R1 及びR2 は、独立に、アミノ基のために規定したものと同様の、アミノ置換基である。スルホンアミド基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH(CH3), -S(=O)2N(CH3)2, -S(=O)2NH(CH2CH3), -S(=O)2N(CH2CH3)2、及び -S(=O)2NHPh。
【００８３】
スルファミノ:  -NR1S(=O)2OH、ただし、R1 は、アミノ基のために規定したものと同様の、アミノ置換基である。スルファミノ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -NHS(=O)2OH、及び -N(CH3)S(=O)2OH。
【００８４】
スルホンアミノ:   -NR1S(=O)2R、ただし、R1 は、アミノ基のために規定したものと同様の、アミノ置換基であり、そして、Rは、スルホンアミノ置換基であり、例えば、以下である：  C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはC1-7 アルキル基。スルホンアミノ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -NHS(=O)2CH3 、及び-N(CH3)S(=O)2C6H5。
【００８５】
スルフィンアミノ：  -NR1S(=O)R、ただし、R1は、アミノ基のために規定したものと同様の、アミノ置換基であり、そして、Rは、スルフィンアミノ置換基であり、例えば、以下である：  C1-7アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはC1-7アルキル基。スルフィンアミノ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -NHS(=O)CH3、及び-N(CH3)S(=O)C6H5。
【００８６】
ホスフィノ(ホスフィン):  -PR2、ただし、Rはホスフィノ置換基であり、例えば以下である：  -H、C1-7 アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは-H、C1-7 アルキル基、又はC5-20 アリール基。ホスフィノ基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -PH2,-P(CH3)2, -P(CH2CH3)2, -P(t-Bu)2、及び-P(Ph)2。
【００８７】
ホスホ：  -P(=O)2
【００８８】
ホスフィニル(ホスフィンオキシド):  -P(=O)R2、ただし、Rはホスフィニル置換基であり、例えば以下である：  C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくはC1-7 アルキル基、又はC5-20アリール基。ホスフィニル基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -P(=O)(CH3)2, -P(=O)(CH2CH3)2, -P(=O)(t-Bu)2、及び-P(=O)(Ph)2。
【００８９】
ホスホン酸(ホスホノ):   -P(=O)(OH)2
【００９０】
ホスホネート(ホスホノエステル):  -P(=O)(OR)2、ただし、Rはホスホネート置換基であり、例えば以下である：  -H、C1-7 アルキル基、C3-20ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは-H, C1-7 アルキル基、又はC5-20 アリール基。ホスホネート基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -P(=O)(OCH3)2, -P(=O)(OCH2CH3)2, -P(=O)(O-t-Bu)2、及び-P(=O)(OPh)2。
【００９１】
リン酸(ホスホノオキシ):  -OP(=O)(OH)2
【００９２】
ホスフェート（リン酸エステル）(ホスホノオキシエステル):  -OP(=O)(OR)2、ただし、Rはホスフェート置換基であり、例えば以下である：  -H、C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは-H、C1-7 アルキル基、又はC5-20アリール基。ホスフェート基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -OP(=O)(OCH3)2, -OP(=O)(OCH2CH3)2, -OP(=O)(O-t-Bu)2、及び-OP(=O)(OPh)2。
【００９３】
亜リン酸:  -OP(OH)2
【００９４】
亜リン酸エステル（ホスファイト）:   -OP(OR)2、ただし、Rはホスファイト置換基であり、例えば以下である：  -H、C1-7アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20アリール基、好ましくは-H、C1-7 アルキル基、又はC5-20 アリール基。ホスファイト基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -OP(OCH3)2, -OP(OCH2CH3)2, -OP(O-t-Bu)2、及び-OP(OPh)2。
【００９５】
ホスホラミダイト: -OP(OR1)-NR22、ただし、R1及びR2 はホスホラミダイト置換基であり、例えば以下である：  -H、(随意に置換された) C1-7 アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは-H、C1-7 アルキル基、又はC5-20アリール基。ホスホラミダイト基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -OP(OCH2CH3)-N(CH3)2, -OP(OCH2CH3)-N(i-Pr)2、及び-OP(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2。
【００９６】
ホスホラミデート:  -OP(=O)(OR1)-NR22、ただし、R1及びR2はホスホラミデート置換基であり、例えば以下である：  -H、(随意に置換された) C1-7アルキル基、C3-20 ヘテロシクリル基、又はC5-20 アリール基、好ましくは-H, C1-7 アルキル基、又はC5-20 アリール基。ホスホラミデート基の例としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  -OP(=O)(OCH2CH3)-N(CH3)2、-OP(=O)(OCH2CH3)-N(i-Pr)2、及び-OP(=O)(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2。
【００９７】
［窒素保護基］
窒素保護基は、技術分野において公知である。好ましい窒素保護基は、次の一般式を有するカルバメート保護基である：
【化１４】
2015515972.tif 000017
【００９８】
多数の使用可能なカルバメート窒素保護基が、Wuts, P.G.M. 及びGreene, T.W.著、 「Protective Groups in Organic Synthesis」, 第４版, Wiley-Interscience, 2007年の706〜771ページにリストされている。この文献を参照として取り込む。
【００９９】
特に好ましい保護基には、以下が含まれる：Alloc, Troc, Teoc, BOC, Doc, Hoc, TcBOC, Fmoc, 1-Adoc 及び 2-Adoc。
【０１００】
［ヒドロキシル保護基］
ヒドロキシル保護基は、技術分野において公知である。多数の好適な基が、Wuts, P.G.M. 及びGreene, T.W.著、「Protective Groups in Organic Synthesis」, 第４版, Wiley-Interscience, 2007年の16〜366ページにリストされている。この文献を参照として取り込む。
【０１０１】
特に有利であるクラスには、以下が含まれる：  シリルエーテル、メチルエーテル、アルキルエーテル、ベンジルエーテル、エステル、ベンゾアート（安息香酸塩／エステル）、カルボネート（炭酸塩／エステル）、スルホネート（スルホン酸塩／エステル）。
【０１０２】
特に好ましい保護基には、THPが含まれる。
【０１０３】
［増殖性疾患］
この技術分野の当業者は、ある候補化合物が、あらゆる特定の種類の細胞に対しての増殖性の症状を治療するか否かを、容易に検討／検出することができる。例えば、特定の化合物によってもたらされる活性を評価するために容易に使用可能であるアッセイを、以下に例示する。
【０１０４】
「増殖性疾患」の用語は、望ましくない、過剰な又は異常な細胞の不必要な又は制御されていない細胞増殖に関し、インビボ又はインビトロを問わず、例えば、腫瘍性（新生物性）の又は過形成性の増殖などである。
【０１０５】
増殖性の症状の例としては、良性の、前ガン性の、及びガン性の細胞増殖が含まれるが、これらに限られるものではなく、これらの細胞増殖としては、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  新生物及び腫瘍(例えば、組織球腫、神経膠腫、星状細胞腫、骨腫)、ガン(例えば、肺ガン、小細胞肺ガン、胃ガン又は消化器ガン（胃腸ガンを含む）、腸ガン、大腸ガン、結腸ガン、肝臓ガン（ヘパトーマ）、乳ガン、神経グリア芽細胞腫（グリオブラストーマ）、子宮頸ガン、卵巣ガン、前立腺ガン、精巣ガン、肝臓ガン、直腸ガン、結腸直腸ガン、子宮内膜ガン又は子宮ガン、唾液腺ガン、腎臓ガン、前立腺ガン、外陰部ガン、甲状腺ガン、肝ガン（ヘパティックカルシノーマ）、肛門ガン、陰茎ガン、頭部ガン及び頚部ガン、膀胱ガン、膵臓ガン、脳腫瘍、肉腫、骨肉腫、カポジ肉腫、黒色腫（メラノーマ）)、白血病、乾癬、骨疾患、線維増殖性疾患(例えば、結合組織の)、及びアテローム性動脈硬化症。特に好適なガンとして、白血病、卵巣ガンを含むが、これらに限られるものではない。
【０１０６】
治療される細胞の種類には、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  肺、胃腸（消化器）（例えば、結腸、大腸、腸を含む）、胸部（乳房）、卵巣、前立腺、肝臓（肝）、腎臓（腎）、膀胱、膵臓、脳、及び皮膚。
【０１０７】
特に好適なガンとして、以下が含まれるが、これらに限られるものではない：  脳腫瘍（ERポジティブ及びERネガティブなものの両方を含む）、膵臓ガン、肺ガン、白血病。
【０１０８】
［治療方法］
上述のように、本発明は、本発明の第一の態様の化合物の、治療方法における使用をも、提供する。
【０１０９】
「治療における有効量」の用語は、患者に対して利益をもたらすために十分な量である。このような利益とは、少なくとも１以上の症状が少なくとも改善することと言える。実際の投与量、及び投与の時間経過及びレートは、治療される対象の性質及び重症度に依存する。治療の処方、例えば、投与量の決定は、一般開業医及びその他の医師の責任の範囲内にある。
【０１１０】
化合物は、単独で投与されてもよく、その他の治療法との組み合わせであってもよく、それは同時であってもよく、連続的であってもよく、それは治療される症状に依存する。治療及び療法の例として、以下を含むが、これらに限られるものではない：  化学療法（例えば医薬を含む、有効成分の投与）；  手術；  放射線療法。
【０１１１】
化学療法剤の例には、以下が含まれる：  エルロチニブ(TARCEVA (登録商標)、Genentech/OSI Pharm.)、ドセタキセル(タキソテール(登録商標)、Sanofi-Aventis)、5-FU (フルオロウラシル、5-フルオロウラシル、CAS番号51-21-8)、ゲムシタビン(GEMZAR (登録商標)、Lilly)、PD-0325901 (CAS番号391210-10-9、Pfizer)、シスプラチン(シス-ジアミン、ジクロロ白金(II)、CAS番号15663-27-1)、カルボプラチン(CAS番号41575-94-4)、パクリタキセル(タキソール(登録商標)、Bristol-Myers Squibb Oncology、Princeton、N.J.)、トラスツズマブ(HERCEPTIN (登録商標)、Genentech)、テモゾロマイド(4-メチル-5-オキソ-2,3,4,6,8-ペンタアザビシクロ[4.3.0]ノナ-2,7,9-トリエン-9-カルボキサミド、CAS番号85622-93-1、TEMODAR (登録商標)、TEMODAL (登録商標)、Schering Plough)、タモキシフェン((Z)-2-[4-(1,2-ジフェニルブタ-1-エニル)フェノキシ]-N,N-ジメチルエタンアミン、NOLVADEX (登録商標)、ISTUBAL (登録商標)、VALODEX (登録商標))、及びドキソルビシン(ADRIAMYCIN(登録商標))、Akti-1/2、HPPD、及びラパマイシン。
【０１１２】
化学療法剤の例には、さらに以下が含まれる：  オキサリプラチン(ELOXATIN (登録商標)、Sanofi)、ボルテゾミブ(VELCADE (登録商標)、Millennium Pharm.)、スーテント(SUNITINIB (登録商標)、SU11248、Pfizer)、レトロゾール(FEMARA (登録商標)、Novartis)、イマチニブメシレート(GLEEVEC (登録商標)、Novartis)、XL-518 (Mek阻害剤、Exelixis、WO 2007/044515)、ARRY-886 (Mek阻害剤、AZD6244、Array BioPharma、Astra Zeneca)、SF-1126 (PI3K阻害剤、Semafore Pharmaceuticals)、BEZ-235 (PI3K阻害剤、Novartis)、XL-147 (PI3K阻害剤、Exelixis)、PTK787/ZK 222584 (Novartis)、フルベストラント(FASLODEX (登録商標)、AstraZeneca)、ロイコボリン(フォリン酸)、ラパマイシン(シロリムス、RAPAMUNE (登録商標)、Wyeth)、ラパチニブ(TYKERB (登録商標)、GSK572016、Glaxo Smith Kline)、ロナファーニブ(SARASAR (商標)、SCH 66336、Schering Plough)、ソラフェニブ(NEXAVAR (登録商標)、BAY43-9006、Bayer Labs)、ゲフィチニブ(イレッサ(登録商標)、AstraZeneca)、イリノテカン(CAMPTOSAR (登録商標)、CPT-11、Pfizer)、チピファルニブ(ZARNESTRA (商標)、Johnson & Johnson)、ABRAXANE (商標) (Cremophorフリー)、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子処方物(American Pharmaceutical Partners、Schaumberg、Il)、バンデタニブ(rINN、ZD6474、ZACTIMA (登録商標)、AstraZeneca)、クロラムブシル、AG1478、AG1571 (SU 5271; Sugen)、テムシロリムス(TORISEL (登録商標)、Wyeth)、パゾパニブ(GlaxoSmithKline)、カンフォスファミド(TELCYTA (登録商標)、Telik)、チオテパ及びシクロスホスファミド(cyclosphosphamide)(CYTOXAN (登録商標)、NEOSAR (登録商標));ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファンなどのアルキルスルホネート;ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ(meturedopa)及びウレドーパ(uredopa)などのアジリジン;アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチロメラミンを含む、エチレンイミン及びメチルアメラミン(methylamelamines);アセトゲニン(特にブラタシン及びブラタシノン);カンプトテシン(合成類似体トポテカンを含む);ブリオスタチン;カリスタチン; CC-1065 (そのアドゼレシン、カルゼルシン及びビゼレシン合成類似体を含む);クリプトフィシン(特にクリプトフィシン1及びクリプトフィシン8);ドラスタチン;デュオカルマイシン(合成類似体、KW-2189及びCB1-TM1を含む);エリュテロビン;パンクラチスタチン;サルコジクチイン;スポンギスタチン;クロランブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロライド、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード;カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロリムスチン、ニムスチン及びラニムスチン(ranimnustine)などのニトロソ尿素;抗生物質、例えばエンジイン抗生物質(例えばカリケアマイシン、カリケアマイシンガンマ1I、カリケアマイシンオメガI1 (Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33:183〜186);ジネミシン、ジネミシンA;クロドロネートなどのビスフォスフォネート;エスペラマイシン;並びにネオカルチノスタチン発色団及び関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団)、アクラシノマイシン(aclacinomysins)、アクチノマイシン、オートラマイシン(authramycin)、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン(carabicin)、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシニス(chromomycinis)、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、6-ジアゾ-5-オキソ-L-ノルロイシン、モルホリノ-ドキソルビシン、シアノモルホリノ-ドキソルビシン、2-ピロリノ-ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシン)、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、ネモルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンCなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンなど;メトトレキセート及び5-フルオロウラシル(5-FU)などの抗代謝物;デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセートなどの葉酸類似体;フルダラビン、6-メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体;アンシタビン、アザシチジン、6-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクシウリジンなどのピリミジン類似体;カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン;アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎剤;フォリン酸などの葉酸補充液;アセグラトン;アルドホスファミドグリコシド;アミノレブリン酸;エニルウラシル;アムサクリン;ベストラブシル;ビスアントレン;エダトラキセート(edatraxate);デフォファミン(defofamine);デメコルシン;ジアジクォン;エルフォルニチ(elfornithine);酢酸エリプチニウム;エポチロン;エトグルシド;硝酸ガリウム;ヒドロキシ尿素;レンチナン;ロイダイニン(lonidainine);メイタンシン及びアンサマイトシンなどのメイタンシノイド;ミトグアゾン;ミトキサントロン;モピダンモール(mopidanmol);ニトラエリン(nitraerine);ペントスタチン;フェナメット;ピラルビシン;ロソキサントロン;ポドフィリン酸;2-エチルヒドラジド;プロカルバジン;PSK (登録商標)多糖類複合体(JHS Natural Products、Eugene、OR);ラゾキサン;リゾキシン;シゾフィラン;スピロゲルマニウム;テヌアゾン酸;トリアジクオン; 2,2',2"-トリクロロトリエチルアミン;トリコテセン(特にT-2トキシン、ベラクリン(verracurin) A、ロリジンA及びアングイジン);ウレタン;ビンデシン;ダカルバジン;マンノムスチン;ミトブロニトール;ミトラクトール;ピポブロマン;ガシトシン(gacytosine);アラビノシド(「Ara-C」);シクロホスファミド;チオテパ; 6-チオグアニン;メルカプトプリン;メトトレキセート;シスプラチン及びカルボプラチンなどの白金類似体（白金アナログ）;ビンブラスチン;エトポシド(VP-16);イホスファミド;ミトキサントロン;ビンクリスチン;ビノレルビン(NAVELBINE (登録商標));ノバントロン;テニポシド;エダトレキセート;ダウノマイシン;アミノプテリン;カペシタビン(XELODA (登録商標)、Roche);イバンドロネート; CPT-11;トポイソメラーゼ阻害剤RFS 2000;ジフロロメチルオルニチン(DMFO);レチノイン酸などのレチノイド;並びに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸及び誘導体。
【０１１３】
「化学療法剤」の定義にさらに含まれるのは、(i)例えばタモキシフェン(NOLVADEX (登録商標);クエン酸タモキシフェンを含める)、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、4-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、LY117018、オナプリストン、及びFARESTON (登録商標) (クエン酸トレミフェン)を含めて、抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体モジュレーター(SERM)など、腫瘍に対するホルモン作用を調節又は阻害する作用をする抗ホルモン剤、(ii)例えば4(5)-イミダゾール、アミノグルテチミド、MEGASE (登録商標) (酢酸メゲストロール)、AROMASIN (登録商標) (エキセメスタン;Pfizer)、ホルメスタニー(formestanie)、ファドロゾール、RIVISOR (登録商標) (ボロゾール)、FEMARA (登録商標) (レトロゾール; Novartis)及びARIMIDEX (登録商標) (アナストロゾール; AstraZeneca)など、副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、(iii)フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロリド及びゴセレリン;並びにトロキサシタビン(1,3-ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体)などの抗アンドロゲン、(iv) MEK阻害剤(WO 2007/044515)などのタンパク質キナーゼ阻害剤、(v)脂質キナーゼ阻害剤、(vi)アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異所性細胞増殖に関係するシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えば、オブリメルセン(GENASENSE (登録商標)、Genta Inc.)などのPKC-アルファ、Raf及びH-Ras、(vii) VEGF発現阻害剤(例えば、ANGIOZYME (登録商標))及びHER2発現阻害剤などのリボザイム、(viii)遺伝子治療ワクチンなどのワクチン、例えば、ALLOVECTIN (登録商標)、LEUVECTIN (登録商標)及びVAXID (登録商標); PROLEUKIN (登録商標) rIL-2;ラルトテカン(登録商標)などのトポイソメラーゼ1阻害剤;アバレリクス(登録商標) rmRH、(ix)ベバシズマブ(AVASTIN (登録商標)、Genentech)などの血管新生抑制物質;並びに上記の任意の薬学的に許容される塩、酸及び誘導体である。
【０１１４】
「化学療法剤」の定義にさらに含まれるのは、アレムツズマブ(Campath)、ベバシズマブ(AVASTIN (登録商標)、Genentech);セツキシマブ(ERBITUX (登録商標)、Imclone);パニツムマブ(VECTIBIX (登録商標)、Amgen)、リツキシマブ(RITUXAN (登録商標)、Genentech/Biogen Idec)、ペルツズマブ(OMNITARG(商標)、2C4、Genentech)、トラスツズマブ(HERCEPTIN (登録商標)、Genentech)、トシツモマブ(Bexxar、Corixia)及び抗体薬物コンジュゲート、ゲムツズマブオゾガマイシン(MYLOTARG (登録商標)、Wyeth)などの治療抗体である。
【０１１５】
本発明のコンジュゲートと組み合わせた化学療法剤として治療的可能性を有するヒト化単クローン抗体には、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネオズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ(cidfusituzumab)、シドツズマブ(cidtuzumab)、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エピラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ(motovizumab)、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ(nolovizumab)、ヌマビズマブ(numavizumab)、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ、ペクフシツズマブ(pecfusituzumab)、ペルツズマブ(pectuzumab)、ペルツズマブ、パキセリズマブ、ラリビズマブ(ralivizumab)、ラニビズマブ、レスリビズマブ(reslivizumab)、レスリズマブ、レシビズマブ(resyvizumab)、ロベリズマブ、ルプリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ(sontuzumab)、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ(talizumab)、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツクシツズマブ(tucusituzumab)、ウマビズマブ(umavizumab)、ウルトキサズマブ及びビシリズマブが含まれる。
【０１１６】
本発明による医薬組成物、及び本発明による使用のための医薬組成物は、有効成分（活性成分）、すなわち式Ｉの化合物に加えて、薬学的（製薬的）に許容可能な賦形剤、担体（キャリア）、バッファ（緩衝剤）、安定化剤、又はその他の当業者に公知の材料（物質）を含有させることができる。そのような材料は、非毒性であるべきであり、有効成分の効力に干渉しないものであるべきである。担体又はその他の材料の詳細な性質は、その投与の経路に依存するものであり、これは例えば、経口、あるいは、例えば、皮膚、皮下、又は静脈内への注射によるものとできる。
【０１１７】
経口投与のための医薬組成物は、錠剤、カプセル、粉末又は液状の形態であってよい。錠剤は固体担体又はアジュバントを含むことができる。液体医薬組成物は、一般に、水、石油、動物油又は植物油、鉱油又は合成油などの液体担体を含む。生理的食塩水溶液、デキストロース若しくは他の多糖類溶液、又はエチレングリコール、プロピレングリコール若しくはポリエチレングリコールなどのグリコールが含まれ得る。カプセルは、ゼラチンなどの固体担体を含むことができる。
【０１１８】
静脈内、皮膚若しくは皮下の注入、又は苦痛部位での注入のために、有効成分（活性成分）は、パイロジェンフリーであり、適切なpH、等張性及び安定性を有する非経口的に許容可能な水溶液の形態であってよい。本分野における関連技術を有する者は、例えば塩化ナトリウム注入液、リンゲル注入液、乳酸リンゲル注入液などの等張ビヒクルを使用して適当な溶液を調製することが十分にできる。保存料、安定剤、緩衝剤、抗酸化剤及び/又は他の添加剤が、所望により含まれていてもよい。
【０１１９】
［投与量］
化合物の適切な投与量が患者によって様々であり得ることは、当分野の技術者によって理解されよう。最適な投与量を決定することは、一般に、任意のリスク又は有害な副作用に対する治療的利益のレベルのバランスをとることを伴う。選択された投与量は、以下を含む様々なファクター（因子）に依存するが、これらにこれらに限定されるものではない：  特定の化合物の活性、投与の経路、投与の時間、化合物の排出速度、治療の持続期間、組み合わせて使用される他の薬物、化合物及び/又は材料、症状の重症度、並びに患者の種、性別、年齢、重量、状態、全般的な健康及び前病歴。一般に投与量は、実質的に危険又は有害な副作用を引き起こすことなく所望の効果を達成する局所濃度を作用部位で達成するように選択されるが、化合物の量及び投与の経路は、最終的に、医師、獣医又は臨床医（臨床師）の裁量による。
【０１２０】
投与は、治療の過程を通して、一用量にて連続的又は断続的に（例えば、分割用量にて適切な間隔で）実行することができる。投与の最も有効な手段及び投与量を決定する方法は当業者によく知られており、治療法に使用される処方物、治療法の目的、治療される標的細胞(単数又は複数)、及び治療される対象によって変動する。単一又は複数の投与は、治療する医師、獣医又は臨床医（臨床師）によって選択される用量レベル及びパターンで実施することができる。
【０１２１】
一般に、活性化合物の適当な用量は、1日当たり、対象の1キログラム体重当たり約100ngから約25mg (より典型的には約1μgから約10mg)の範囲である。活性化合物が塩、エステル、アミド又はプロドラッグなどである場合、投与される量は親化合物に基づいて算出され、それで、使用される実際の重量が比例して増加される。
【０１２２】
一実施形態において、活性化合物は、以下の投与量計画に従ってヒト患者に投与される：  約100mg、一日3回。
【０１２３】
一実施形態において、活性化合物は、以下の投与量計画に従ってヒト患者に投与される：  約150mg、一日2回。
【０１２４】
一実施形態において、活性化合物は、以下の投与量計画に従ってヒト患者に投与される：  約200mg、一日2回。
【０１２５】
疾患の予防又は治療に関し、本発明の化合物の適切な投与量は、上述の通り、治療される疾患のタイプ、疾患の重症度及び過程、該分子が予防的目的のために投与されるのか又は治療的目的のために投与されるのか、以前の治療法、患者の臨床歴及び抗体に対する応答、並びに主治医の裁量に依存する。該分子は、一回で又は一連の治療にわたって患者に適切に投与される。疾患の型及び重症度に依存して約1μg/kgから15mg/kg (例えば0.1〜20mg/kg)の分子が、患者に投与するための初期候補投与量であり、例えば、一回又は複数の分離した投与によるか、又は持続注入による。典型的な一日投与量は、上述されている因子に依存して、約1μg/kgから100mg/kg以上の範囲であり得る。患者に投与される化合物の例示的な投与量は、患者体重の約0.1mg/kgから約10mg/kgの範囲である。数日以上にわたる反復投与については、症状に依存し、疾患症状の所望の抑制が生じるまで治療は持続される。例示的な投薬計画は、化合物の約4mg/kgの初期負荷用量、続いて追加の用量を、毎週、二週間毎又は三週間毎に投与する治療過程（コース）を含む。他の投与量計画も有用であり得る。この治療の進行は、従来の技術及びアッセイによって容易にモニタリングされる。
【０１２６】
［他の形態を含む］
別段の指定がない限り、上記に含まれるものには、これらの置換基の、公知のイオン、塩、溶媒和物及び保護された形態がある。例えば、カルボン酸(-COOH)への言及には、そのアニオン性(カルボキシレート)の形態(-COO - )、塩又は溶媒和物、並びに従来の保護形態も含まれる。同様に、アミノ基への言及には、アミノ基のプロトン化形態(-N + HR 1 R 2 )、塩又は溶媒和物、例えば塩酸塩、並びにアミノ基の従来の保護形態が含まれる。同様に、ヒドロキシル基への言及には、そのアニオン性形態(-O - )、塩又は溶媒和物、並びに従来の保護形態も含まれる。
【０１２７】
［異性体、塩、及び溶媒和物］
ある種の化合物は、１又はそれ以上の特定の、幾何学的、光学的、エナンチオマー性、ジアステレオマー性、エピマー性、アトロピック性（atropic）、立体異性体性、互変異性体性、立体配座性、又はアノマー性の形態として存在し、これには以下が含まれるが、これらに限られるものではない：シス-及びトランス-形態；E-及びZ-形態；c-、t-及びr-形態；エンド-及びエキソ-形態；R-、S-及びメソ-形態；D-及びL-形態；d-及びl-形態；(+)及び(-)形態；ケト-、エノール-及びエノラート-形態；syn-及びanti-形態；向斜-及び背斜-形態；α-及びβ-形態；アキシアル及びエクアトリアル形態；舟-、椅子-、ねじれ-、エンベロープ-及び半椅子-形態；並びにそれらの組合せ、なお、これらは以降で「異性体」（又は「異性体形態」）と総称することがある。
【０１２８】
本発明の好適な化合物は、Ｃ１１位において以下のステレオケミストリー性（立体異性体性）を有する：
【化１５】
2015515972.tif 000018
【０１２９】
互変異性体形態に関して下記で考察されている場合を除き、本明細書で使用される通りの「異性体」という用語から特に除外されるのは、構造(又は構成)異性体であることに留意されたい（即ち、単に空間における原子の位置によるよりも、むしろ原子間の接続において異なる異性体）。例えば、メトキシ基、-OCH3への言及は、その構造異性体、ヒドロキシメチル基、-CH2OHへの言及と解釈されるべきではない。同様に、オルト-クロロフェニルへの言及は、その構造異性体、メタ-クロロフェニルへの言及と解釈されるべきではない。しかし、構造のクラスへの言及は、そのクラス内に入る構造異性体形態が当然含まれる(例えばC1-7アルキルにはn-プロピル及びiso-プロピルが含まれ、ブチルにはn-、iso-、sec-及びtert-ブチルが含まれ、メトキシフェニルにはオルト-、メタ-及びパラ-のメトキシフェニルが含まれる)。
【０１３０】
上記の除外は、互変異性体形態、例えばケト-形態、エノール-形態及びエノラート-形態に関するものではなく、例えば以下に示すような互変性異性体に関するものではない：  ケト/エノール(下記に図示されている)、イミン/エナミン、アミド/イミノアルコール、アミジン/アミジン、ニトロソ/オキシム、チオケトン/エンチオール、N-ニトロソ/ヒドロキシアゾ、及びニトロ/aci-ニトロ。
【化１６】
2015515972.tif 000019
【０１３１】
「異性体」という用語に特に含まれるのは、一つ又は複数の同位体置換を有する化合物であることに留意されたい。例えば、Hは、 1 H、 2 H (D)及び 3 H (T)を含めて、任意の同位体形態であってよく、Cは、 12 C、 13 C及び 14 Cを含めて、任意の同位体形態であってよく、Oは、 16 O及び 18 Oを含めて、任意の同位体形態であってよい。
【０１３２】
別段の指定がない限り、特定の化合物への言及には、（全体的に又は部分的に）そのラセミ混合物及び他の混合物を含めて、全てのこうした異性体形態が含まれる。こうした異性体形態の調製（例えば不斉合成）及び分離（例えば分別結晶及びクロマトグラフィーの手段）のための方法は、当技術分野において知られているか、又は本明細書において教示されている方法、若しくは公知の様式における公知の方法を適用することによって容易に得られるかのいずれかである。
【０１３３】
別段の指定がない限り、特定の化合物への言及には、それらのイオン、塩、溶媒和物、及び保護された形態も、例えば以下に述べるように、含まれている。
【０１３４】
活性化合物の対応する塩、例えば薬学的（製薬的に）許容される塩を、調製、精製及び／又は取り扱うことは、好都合又は望ましいことがある。薬学的に許容される塩の例は、Bergeら、J.Pharm. Sci.、66、1〜19 (1977)において考察されている。
【０１３５】
例えば、化合物がアニオン性であるか、又はアニオン性となり得る(例えば-COOHは-COO- となり得る)官能基を有する場合には、適当なカチオンと塩を形成することができる。適当な無機カチオンの例には、以下が含まれるが、これらに限定されるものではない：Na + 及びK + などのアルカリ金属イオン、Ca 2+ 及びMg 2+ などのアルカリ土類カチオン、並びにAl +3 などの他のカチオン。適当な有機カチオンの例には、アンモニウムイオン(即ちNH4+ )及び置換アンモニウムイオン(例えばNH3R + 、NH2R2+ 、NHR3+ 、NR4+ )が含まれるが、これらに限定されるものではない。好適な置換アンモニウムイオンの例としては、以下から得られる（誘導される）ものがある：  エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン及びトロメタミン、並びにリシン及びアルギニンなどのアミノ酸。通常の第4級アンモニウムイオンの一例はN(CH3)4+ である。
【０１３６】
化合物がカチオン性であるか、又はカチオン性となり得る(例えば-NH2は-NH3+ となり得る)官能基を有する場合には、適当なアニオンと塩を形成することができる。適当な無機アニオンの例には、以下から得られる（誘導される）ものがあるが、これらに限定されるものではない：  無機酸:塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸及び亜リン酸。
【０１３７】
適当な有機アニオンの例には、以下の有機酸から得られた（誘導された）ものが含まれるが、これらに限定されるものではない：  2-アセチオキシ(acetyoxy)安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、桂皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、粘液酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、及び吉草酸。適当なポリマー有機アニオンの例には、以下のポリマー酸から得られた（誘導された）ものが含まれるが、これらに限定されるものではない：  タンニン酸、カルボキシメチルセルロース。
【０１３８】
活性化合物の対応する溶媒和物を調製、精製及び/又は取り扱うことは、好都合又は望ましいことがある。「溶媒和物」という用語は、本明細書において、溶質(例えば活性化合物、活性化合物の塩)及び溶媒の複合体を指す通常の意味で使用される。溶媒が水であるならば、溶媒和物は、好適には水和物、例えば一水和物、二水和物、三水和物等とすることができる。
【０１３９】
式Ｉの化合物は、以下に図示するように、求核性溶媒(H2O, RAOH, RANH2, RASH)がＰＢＤ部分のイミン結合を超えて追加された化合物を含み、以下の図では溶媒は水又はアルコール(RAOH、ただしRAは、上述したエーテル置換基である)である：
【化１７】
2015515972.tif 000020
【０１４０】
これらの形態は、ＰＢＤのカルビノールアミン及びカルビノールアミンエーテルの形態と呼ぶことができる。これらの平衡のバランスは、化合物が見いだされる条件と、その部分それ自体の性質に、依存する。
【０１４１】
これらの化合物は、例えば凍結乾燥によって、固体の形態で単離してもよい。
【０１４２】
［一般的合成ルート］
式Ｉの化合物であって、R10 及びR11 がともに二重結合を形成している化合物は、式２（Formula2）の化合物から合成することができる。
【化１８】
2015515972.tif 000021
【０１４３】
R’10 は、窒素保護基であり、R’11 はO-R12（ただし、R12 は、H 又は水酸基保護基である）である。このようなテクニックは、この技術分野において公知であり、例えば、Wuts, P.G.M.及びGreene, T.W., Protective Groups in Organic Synthesis, 第4版、 Wiley-Interscience, 2007年に、記載されている。窒素及び水酸基保護基の両方が存在する場合には、これらは好適には、同じ条件において除去可能に選択される。
【０１４４】
この脱保護が、式HQRQの溶媒中で行われる場合には、R10及びR11 はそれぞれH 及びQRQとなる。これに代えて、これらの基は、脱保護が行われるこれらとは異なった溶媒へ化合物を添加することによって、導入することもできる。
【０１４５】
上述の式Ｉ（formula I）の化合物をSOxMであるR11を有するものへと転換（コンバージョン）することは、精製ステップの後に、適切なバイフルフィナート塩又はスルフィナート塩を添加することによって、達成できる。GB 2 053 894にはさらに方法が記載されており、この文献を引用して本明細書に取り込む。
【０１４６】
式２（formula 2）の化合物は、以下の式３（Formula 3）及び式４（Formula 4）の化合物を、標準的なアミド結合形成条件、例えばHOBt又はDMAP及び EDClの存在下で、カップリングすることによって得られる：
【化１９】
2015515972.tif 000022
【化２０】
2015515972.tif 000023
【０１４７】
式３の化合物は、次の式５（formula 5）の化合物から合成することができる：
【化２１】
2015515972.tif 000024
（ただし、式中、R’8 はC1-4 アルキル基、例えばメチルである。）
このカルボキシル基の脱保護は標準的な手段、例えば塩基による処理を使用して、行うことができる。
【０１４８】
式５の化合物は、WO 00/12506及びWO 2007/039752に記載された方法によって合成することができる。これらの文献を引用して本明細書に取り込む。特に、酪酸側鎖は、いずれの合成ステージにおいても、通常は適切な保護基と共に適切に、導入することができる。例えば、この側鎖は、保護された又は前駆体の形態を、ベンゼン環上の水酸基に対して、例えばミツノブ（Mitsunobo）カップリングを使用して、カップリングすることによって形成することができる。
【０１４９】
式４の化合物は、WO 2005/085177に開示された方法を使用して、合成することができる。この文献を引用して本明細書に取り込む。WO 2007/039752の開示を同様に参照する。
【０１５０】
［ＤＮＡ結合］
この化合物のDNA、及び特にオリゴヌクレオチドへの結合能力は、イオンペア逆相ＨＰＬＣアッセイを使用して、測定することができ、Rahman, K. M.等, Journal of the American Chemical Society 2009, 131, 13756、及びNarayanaswamy, M.等 Analytical Biochemistry 2008, 374, 173に開示されている通りである。DNA結合親和性は、以下の文献に記載されているように、ウシ胸腺熱変性アッセイ法を使用して、評価することもできる：Wells, G.等、Journal of Medicinal Chemistry 2006, 49, 5442; Jenkins, T. C.等、Journal of Medicinal Chemistry 1994, 37, 4529;及びGregson, S. J.等、Journal of Medicinal Chemistry 2001, 44, 737。
【０１５１】
［さらに好適な態様］
［Ｃ２］
好適な実施の態様において、Ｃ２炭素はsp2中心であり、
R2 が以下の基から選択されたいずれかである場合にＣ２及びＣ３の間に二重結合が存在するものとする：
-H, -OH, -CN, -R, -OR, ハロ, -O-SO2-R, -CO2R、及び -COR。
【０１５２】
R2 が以下の基から選択されたいずれかである場合にＣ２及びＣ３の間に二重結合が存在するものとはできない：
=O, =CH2, =CHR, =CHRR’。
【０１５３】
さらに異なる実施の態様において、Ｃ２及びＣ３の間には二重結合が存在せず、且つR2 がHである。
【０１５４】
［R2］
R2は以下から選択される：-H, -OH, =O, =CH2, -CN, -R, OR, ハロ, ジハロ, =CHR, =CHRR’, -O-SO2-R, CO2R、及びCOR。
【０１５５】
ある実施の態様において、R2 は以下から選択できる： -H, -OH, =O, =CH2, -CN, -R, -OR, =CHR, =CRR’, -O-SO2-R, -CO2R、及び-COR。
【０１５６】
ある実施の態様において、R2 は以下から選択できる：-H, =CH2, -R, =CHR、及び=CRR’。
【０１５７】
ある実施の態様において、R2 はHである。
ある実施の態様において、R2 は=Oである。
ある実施の態様において、R2 は=CH2である。
【０１５８】
ある実施の態様において、R2 は=CHRである。ＰＢＤ化合物中に、基=CHRは、以下のいずれのコンフィギュレーションを有してもよい：
【化２２】
2015515972.tif 000025
【０１５９】
ある実施の態様において、上記コンフィギュレーションは、コンフィギュレーション(C1)である。
【０１６０】
ある実施の態様において、R2 は=CRR’である。
ある実施の態様において、R2 は=CF2である。
【０１６１】
ある実施の態様において、R2 はRである。
ある実施の態様において、R2 は所望により置換されたC5-20 アリールである。
【０１６２】
R2 が所望により置換されたC5-20 アリールである場合に、好ましくは、所望により置換されたC5-7 アリール又はC8-10 アリールとすることができる。さらに好ましくは、R2 は、所望により置換されたフェニル、所望により置換されたピリジル、所望により置換されたキノリニル又はイソキノリニルとすることができる。これらの基のなかで、所望により置換されたフェニルが最も好ましい。
【０１６３】
R2 が所望により置換されたC5-20 アリールである場合に、好ましくは、１個から３個の置換基を有することができ、１個及び２個の置換基であることがさらに好ましく、ただ１個の置換基であることが最も好ましい。これらの置換基は、いずれの位置にもすることができる。
【０１６４】
R2 がC5-7アリール基である場合に、好ましくはただ１個の置換基が環原子上にあり、ただし、この環原子はこの化合物の残余への結合に隣接せず、すなわち、化合物の残余への結合に対して好ましくはβ又はγである。そこで、C5-7アリール基がフェニルである場合に、置換基は好ましくはメタ−又はパラ−位にあり、さらに好ましくはパラ−位にある。
【０１６５】
ある実施の態様において、R2 は以下から選択される：
【化２３】
2015515972.tif 000026
（ただし、アスタリスクは結合点を表す）。
【０１６６】
R2 がC8-10  アリール基である場合に、例えば、キノリニル又はイソキノリニルである場合に、キノリン又はイソキノリンの環のいずれの位置においていずれの数の置換基を有してもよい。ある実施の態様において、１個、２個又は３個の置換基を有し、近位の及び遠位の環又はその両方の上にあるものとできる（１個以上の置換基がある場合）。
【０１６７】
R2 が所望により置換されたC5-20アリールである場合に、置換基は、以下から選択することができる：  ハロ、ヒドロキシル、エーテル、ホルミル、アシル、カルボキシ、エステル、アシロキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、ウレイド、ニトロ、シアノ、及びチオエーテル。
【０１６８】
R2 が所望により置換されたC5-20アリールである場合に、置換基は、以下からなる群から選択することができる：  R, OR, SR, NRR’, NO2, ハロ, CO2R, COR, CONH2, CONHR、及びCONRR’。
【０１６９】
R2上の置換基がハロである場合に、好ましくは、F又はCl、さらに好ましくはClである。
【０１７０】
R2上の置換基がエーテルである場合に、ある実施の態様において、アルコキシ基、例えば、C1-7アルコキシ基（例えば、メトキシ、エトキシ）とすることができ、あるいは、ある実施の態様において、C5-7アリールオキシ基（例えば、フェノキシ、ピリジルオキシ、フラニルオキシ）とすることができる。
【０１７１】
R2上の置換基がC1-7アルキルである場合に、好ましくはC1-4アルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル）とすることができる。
【０１７２】
R2上の置換基がC3-7ヘテロシクリルである場合に、好ましくは、C6窒素含有ヘテロシクリル基とすることができ、例えば、モルフォリノ、チオモルフォリノ、ピペリジニル、ピペラジニルとすることができる。これらの基は、ＰＢＤ部分の残余の部分に窒素原子を介して、結合させることができる。これらの基は、さらに置換されてもよく、例えば、C1-4アルキル基によって置換されていてもよい。
【０１７３】
R2上の置換基がビス−オキシ−C1-3アルキレンである場合に、好ましくは、ビス−オキシ−メチレン又はビス−オキシ−エチレンである。
【０１７４】
R2に特に好ましい置換基には、以下が含まれる：  メトキシ、エトキシ、フルオロ、クロロ、シアノ、ビス−オキシ−メチレン、メチル−ピペラジニル、モルフォリノ、及びメチル−チエニル。
【０１７５】
置換されたR2基として、特に好ましくは、以下が含まれるが、これらに限定されるものではない：  4-メトキシ-フェニル, 3-メトキシフェニル, 4-エトキシ-フェニル, 3-エトキシ-フェニル, 4-フルオロ-フェニル, 4-クロロ-フェニル, 3,4-ビスオキシメチレン-フェニル, 4-メチルチエニル, 4-シアノフェニル, 4-フェノキシフェニル, キノリン-3-イル及びキノリン-6-イル、イソキノリン-3-イル及びイソキノリン-6-イル, 2-チエニル、2-フラニル、メトキシナフチル、及びナフチル。
【０１７６】
ある実施の態様において、R2 は所望により置換されたC1-12アルキルである。
【０１７７】
R2 が所望により置換されたC1-12アルキルである場合、以下から選択されたものとできる：
(a) C1-5 飽和脂肪族アルキル; 
(b) C3-6 飽和シクロアルキル;
(c)
【化２４】
2015515972.tif 000027
（ただし、R21, R22 及びR23 は、それぞれ独立に、以下から選択され：  H, C1-3 飽和アルキル, C2-3 アルケニル, C2-3 アルキニル、及びシクロプロピル、
ただし、R12 基中の炭素原子の総数は、５個を超えない。）;
(d)
【化２５】
2015515972.tif 000028
（ただし、R25a 及びR25b はいずれか１個がHであり、その余が以下から選択される：  フェニル、ただしフェニルは所望により次から選択された基によって置換される：ハロ  メチル、メトキシ；  ピリジル；及びチオフェニル）; 及び  
(e)
【化２６】
2015515972.tif 000029
（ただし、R24 は、以下から選択され：H; C1-3 飽和アルキル; C2-3 アルケニル; C2-3 アルキニル; シクロプロピル; フェニル, ただしフェニルは所望により次から選択された基によって置換される：ハロ  メチル、メトキシ；  ピリジル；及びチオフェニル）。
【０１７８】
R2 がC1-5飽和脂肪族アルキルである場合、メチル、エチル、プロピル、ブチル、又はペンチルとすることができる。ある実施の態様において、メチル、エチル、又はプロピル（ｎ−プロピル、又はイソプロピル）とすることができる。これらの実施の態様において、メチルとすることができる。異なった実施の態様において、ブチル、又はペンチルとすることができ、これらは直鎖又は分枝のものとすることができる。
【０１７９】
R2 がC3-6飽和シクロアルキルである場合、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロヘキシルとすることができる。ある実施の態様において、シクロプロピルとすることができる。
【０１８０】
R2 が
【化２７】
2015515972.tif 000030
である場合、R21, R22 及びR23 は、それぞれ独立に、以下から選択され：  H, C1-3 飽和アルキル, C2-3 アルケニル, C2-3 アルキニル、及びシクロプロピル、ただし、R2 基の炭素原子の総数は５個を超えない（５個未満である）。ある実施の態様において、R2 基の炭素原子の総数は、４個未満であり、又は３個未満である。
【０１８１】
ある実施の態様において、R21, R22 及びR23のいずれか１個がＨであり、その他の２個の基は、以下から選択される：  H, C1-3 飽和アルキル, C2-3 アルケニル, C2-3 アルキニル、及びシクロプロピル。
【０１８２】
他の実施の態様において、R21, R22 及びR23のいずれか２個がＨであり、その他の基は、以下から選択される：  H, C1-3 飽和アルキル, C2-3 アルケニル, C2-3 アルキニル、及びシクロプロピル。
【０１８３】
ある実施の態様において、Ｈではない基は、メチル及びエチルから選択される。これらの実施の態様において、Ｈではない基は、メチルである。
【０１８４】
ある実施の態様において、R21はHである。
ある実施の態様において、R22はHである。
ある実施の態様において、R23はHである。
【０１８５】
ある実施の態様において、R21及びR22はHである。
ある実施の態様において、R21及びR23はHである。
ある実施の態様において、R22及びR23はHである。
【０１８６】
R2が、
【化２８】
2015515972.tif 000031
である場合、R25a及びR25bのいずれか１個がＨであり、その他の基は、以下から選択される：  フェニル、ただしフェニルは所望により次から選択された基によって置換される：ハロ、メチル、メトキシ；  ピリジル；及びチオフェニル。ある実施の態様において、Ｈではない基は、所望により置換されたフェニルである。所望のフェニル置換基がハロである場合、好ましくはフルオロである。ある実施の態様において、フェニル基は、無置換である。
【０１８７】
R2が、
【化２９】
2015515972.tif 000032
である場合、R24が、以下から選択される：  H; C1-3 飽和アルキル; C2-3 アルケニル; C2-3 アルキニル; シクロプロピル; フェニル、ただしフェニルは所望により次から選択された基によって置換される：ハロ  メチル、メトキシ；  ピリジル；及びチオフェニル。ある実施の態様において、フェニル基は、無置換である。ある実施の態様において、R24は、以下から選択される：  H、メチル、エチル、エテニル、及びエチニル。これらのうちのある実施の態様において、R24は、H、及びメチルから選択される。
【０１８８】
ある実施の態様において、R2 はハロ又はジハロである。ある実施の態様において、R2 は、-F 又は -F2であり、 ただし、これらの置換基はそれぞれ以下の(C3)及び(C4)においてそれぞれ示される通りである：
【化３０】
2015515972.tif 000033
【０１８９】
R2は、好ましくは以下から選択される：  =CH2, =CH-R（ただし、Ｒはさらに好ましくは所望により置換されたC1-4アルキル基である）、及び-R（ただし、Ｒはさらに好ましくは所望により置換されたC5-20アリール基である）。R2に特に好ましい基は、以下を含む：  =CH2, =CH-Me, 及び所望により置換されたフェニル基。
【０１９０】
［R7］
R7 は、以下から選択され：  H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR’, ニトロ, Me3Sn 及びハロ;
R7 は、好ましくは以下から選択され：  H, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR’, 及びハロ。
R7 は、さらに好ましくは以下から選択される：  H及びOR。
【０１９１】
ある実施の態様において、R7はORであり、特にOR7Aであり、ただし、R7Aは独立に、所望により置換されたC1-7アルキルである。
【０１９２】
R7Aは、以下から選択することができる：  所望により置換されたC1-7飽和アルキル、及び所望により置換されたC2-4アルケニル。
【０１９３】
R7Aは、好ましくは以下から選択することができる：  Me, CH2Ph、及びアリル。
【０１９４】
［R10/R11］
R10及びR11は、一体となって二重結合を形成するか、あるいは、それぞれ以下から選択される：  H及びQRQ、ただし、QはO, S及びNHから選択され、RQはH又は C1-7 アルキル、又はH及びSOxM、ただし、ｘは２又は３であり、Ｍは一価の薬学的に許容されるカチオンである。
【０１９５】
ある実施の態様において、R10 及びR11は、一体となって二重結合を形成する。
【０１９６】
ある実施の態様において、R10 はHであり、R11 はORQである。これらの実施の態様において、RQ は好ましくはH又はMeから選択される。
【０１９７】
ある実施の態様において、R10はH であり、R11 はSOxMである。xは好ましくは3とすることができ、Mは好ましくはNa+とすることができる。
【０１９８】
［R1］
R1 はC1-4 アルキルである。
R1 は好ましくはC1-2 アルキル、さらに好ましくはメチルとすることができる。
【０１９９】
［A］
Ａは、次のいずれかである：
【化３１】
2015515972.tif 000034
又は
【化３２】
2015515972.tif 000035
（ただし、これらの式中、X及びYは、以下から選択される：  CH及びNMe; COH 及びNMe; CH及びS; N及びNMe; N 及びS。
【０２００】
ある実施の態様において、ＡはＡ１である。
ある実施の態様において、ＡはＡ２である。
【０２０１】
これらのいずれの実施の態様においても、X及びYは、好ましくは以下から選択することができる：  CH及びNMe; CH及びS; N及びNMe; 及び、N 及びS。X及びYは、さらに好ましくは以下から選択することができる：  CH及びNMe; 及び、N及びNMe。
【０２０２】
ある実施の態様において、X及びYはCH及びNMeである。
ある実施の態様において、X及びYはN及びNMeである。
【０２０３】
［Ｂ］
Ｂは、単結合又は下記のいずれかである：
【化３３】
2015515972.tif 000036
（ただし、式中、Ｘ及びＹは、上述して規定した通りであるが、独立して、選択する事が出来る）。
【０２０４】
ある実施の態様において、Ｂは、単結合である。
ある実施の態様において、Ｂは、Ｂ１である。
【０２０５】
これらのいずれの実施の態様においても、X及びYは、好ましくは以下から選択することができる：  CH及びNMe; CH及びS; N及びNMe; 及び、N 及びS。X及びYは、さらに好ましくは以下から選択することができる：  CH及びNMe; 及び、N及びNMe。
【０２０６】
ある実施の態様において、X及びYはCH及びNMeである。
ある実施の態様において、X及びYはN及びNMeである。
【図面の簡単な説明】
【０２０７】
［図面］
【図１】図１（Ａ）及び１（Ｂ）は、本発明の２種の化合物の最大耐用量を測定するためのアッセイの結果を示している；
【図２】図２は、本発明の化合物のインビボ活性を測定するためのアッセイの結果を示している；
【図３】図３は、図２に示したものと同じ化合物のインビボ活性を測定するための別なアッセイの結果を示している。
【実施例】
【０２０８】
［実施例］
［一般的方法］
旋光度を、ＡＤＰ２２０旋光計（Ｂｅｌｌｉｎｇｈａｍ  Ｓｔａｎｌｅｙ  Ｌｔｄ．）において測定した。濃度（ｃ）を、ｇ／１００ｍＬとして得た。融点を、デジタル融点装置（Ｅｌｅｃｔｒｏｔｈｅｒｍａｌ）を使用して測定した。ＩＲスペクトルを、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒスペクトル１０００ＦＴ  ＩＲ分光計において記録した。 1 Ｈおよび 13Ｃ  ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＮＭＲ分光計を使用して、それぞれ、４００および１００ＭＨｚにおいて、３００Ｋで取得した。化学シフトを、ＴＭＳ（δ＝０．０ｐｐｍ）と比較して報告する。シグナルを、ヘルツ（Ｈｚ）として与えられるカップリング定数により、ｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｄｔ（ダブルトリプレット）、ｄｄ（ダブルダブレット）、ｄｄｄ（ダブルダブルダブレット）またはｍ（マルチプレット）として指定する。プロ−ＰＢＤナンバリングシステムを、合成中間体の炭素及びプロトンのアサインメントに使用した（すなわち、最終三環式ＰＢＤ環系に基づいた）。質量分析（ＭＳ）データを、Ｗａｔｅｒｓ  ２９９６  ＰＤＡを含むＷａｔｅｒｓ  ２６９５  ＨＰＬＣと組み合わせられた、Ｗａｔｅｒｓ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ機器を使用して収集した。使用したＷａｔｅｒｓ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱパラメーターは、毛細管（ｋＶ）、３．３８；コーン（Ｖ）、３５；エクストラクター（Ｖ）、３．０；源温度（℃）、１００；脱溶媒和温度（℃）、２００；コーン流量（Ｌ／ｈ）、５０；脱溶媒和流量（Ｌ／ｈ）、２５０であった。高分解能質量分析（ＨＲＭＳ）データを、器具にサンプルを導入するために金属被覆されたホウケイ酸ガラスのチップを用いてＷａｔｅｒｓ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＱＴＯＦグローバルによりポジティブＷモードで記録した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）をシリカゲルアルミニウムプレート（メルク６０、Ｆ254）上で実施し、そしてフラッシュクロマトグラフィーは、シリカゲル（メルク６０、２３０〜４００メッシュＡＳＴＭ）を用いた。Radleys（商標）Green Houseシンセサイザを使用してパラレル反応を行い、IST Vacmaster（商標）を使用してパラレル精製を行った。パラレルで行う反応のために、Genevac VC 2000D (Genevac Technologies, UK)を使用して、溶剤（溶媒）を蒸発させた。精製された化合物をHeto-Lyolab 3000凍結乾燥機を使用して、凍結乾燥した。水素化反応は、Parr水素化装置へ接続したUHP-60H水素発生装置を使用して、行った。合成ビルディングブロックは、Maybridge Chemicals (UK), Bachem Chemicals (USA)、及びSigma-Aldrich (UK)から入手した。試薬と溶媒はSigma-Aldrich (UK)から入手した。
【０２０９】
［キー中間体の合成］
［(a) メチル 4-(4-(tert-ブトキシカルボニルアミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (5)］
【化３４】
2015515972.tif 000037
【０２１０】
［(i) 2-(トリクロロアセチル)-1-メチル  ピロール (2)］
N-メチルプロール(1)(113.06 g, 1.39 mol, 1.0 当量)のドライエーテル(350 mL) 溶液を、１時間及び１０分の時間をかけて、２リットルの三ツ口フラスコ中のドライエーテル(350 mL)中に溶解したトリクロロアセチルクロライド(254 g, 1.39 mol, 1.0 当量)の撹拌溶液へと、滴下した。反応によるHClガス生成物を窒素のフラッシュによって除去した。反応混合物は、１．５時間撹拌したままとして、反応の進行を、TLC及びLCMSによって定期的にモニターした。１．５時間後に、1 M K2CO3溶液を使用して、反応を消失させた。反応混合物は、エチルアセテート(3 x)によって抽出して、有機層を混合して、真空中で濃縮した。結晶性残渣は、ｎ−ヘキサンで洗浄して、最終的に真空下で乾燥した。収量281.18 g, 79.5%, NMRを文献と比較した。
IR, (FTIR, νmax /cm-1) 3299, 3121, 3008, 2954, 1789, 1674, 1521, 1406, 1206, 1100, 980, 881, 757; 1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.42 (1H, dd, J = 4.4, 1.6 Hz), 6.97 (1H, t, J = 1.6 Hz), 6.22 (1H, dd, J = 4.4, 2.4 Hz) 3.97 (3H, s); 13C NMR (CDCl3, 400 MHz):  δ 133.6, 124.0, 122.4, 108.9,  38.5.
【０２１１】
［(ii) 1-(4-ブロモ-1-メチル-1H-ピロール -2-イル)-2,2,2-トリクロロエタノン (3)］
NBS (N-ブロモスクシンイミド, 2.36 g, 13.24 mmol, 1.0 当量.)を、-10℃ で、無水THF(35 mL)中に溶解した2-(トリクロロアセチル)-1-メチルピロール(2) (3 g, 13.24 mmol, 1.0 当量)の撹拌溶液中へ添加した。反応混合物を、-10℃で２時間保持して、次に、室温へ達するにまかせた（約４時間）。過剰のＴＨＦを真空中で蒸発させて、固体を、EtOAc/n-ヘキサン (1:9)の混合物中で再溶解した。得られた混合物をシリカのプラグを通してろ過し、ろ過物を真空中で蒸発させた。得られた固体をｎ−ヘキサンから再結晶化させて３を得た(3.55 g, 88%)。IR (FTIR, νmax /cm-1): 3148, 2956, 1669 (C=O),1458, , 1215, 1189, 1062, 923, 842, 823, 748, 678; 1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.46 (1H, d, J = 2.0 Hz), 6.95 (1H, d, J = 1.6 Hz) 3.95 (3H, s); 13C NMR (CDCl3, 100 MHz): δ  172.4, 132.8, 124.6, 132.2, 96.1, 38.7; EIMS m/z  (+EI) calc. for C7H5BrCl3NO (M)+ 305.38, LCMS  analysis found  306.86 (M+H)+
【０２１２】
［(iii) メチル 4-ブロモ-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (4)］
乾燥したMeOH(30 mL)中に溶解した1-(4-ブロモ-1-メチル-1H-ピロール-2-イル)-2,2,2-トリクロロ-エタノン(3)(3.28 g, 10.74 mmol, 1当量)の撹拌溶液へ、ナトリウムメトキシド溶液(0.5 mL)をシリンジによって添加した。ナトリウムメトキシド溶液は、鉱物油中のNaH 60%(43 mg, 1.07 mmol, 0.1当量)から調製した。これはあらかじめｎ−ヘキサンで洗浄してあった。この溶液を、３０分間の間にわたって、加熱して還流した。この３０分間で、TLC 分析は出発物質が完全に消費されたことを示した。塩基(pH 2)を中和するために、濃縮したH2SO4 を数滴、溶液に添加した。過剰のMeOHは、進級中で蒸発させ、残余のオイル（油分）は、EtOAc (50 mL)中に再溶解して、水(40 mL)で洗浄した。水性層をEtOAc (3 x 40 mL)で抽出して、有機相を混合して、乾燥し(MgSO4)、ろ過し、真空中で濃縮して、薄青白色の固体(2.28 g, 97%)として生成物を得た。IR (FTIR, νmax /cm-1): 3138, 2948, 1692, 1472, 1334, 1245, 1115, 1082, 921, 823, 753; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ  6.89 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.76 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 3.89 (s, 3H), 3.81 (s, 3H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 160.8, 128.7, 122.9, 119.2, 95.1, 51.2, 36.9; EIMS m/z (+EI) calc. for C7H8BrNO2 (M)+ 218.05 found  219.26 (M+H)+
【０２１３】
［(iv) メチル 4-(4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (5)］
テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム, Pd(PPh3)4  (0.477g, 0.413, 0.06当量)の触媒量を、K2CO3 (2.856 g, 3当量)を含む、EtOH、トルエン、及び水の9:3:1混合溶液(13.5 ml)中に溶解した、4 (1.5 g, 6.88 mmol, 1当量)及び(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)フェニル)ボロン酸(1.57 g, 6.88 mmol, 1.20当量)の溶液に、添加した。この溶液は、マグネティックスターラーを入れた10-20 mLマイクロウェーブバイアル中にある。それぞれ添加している間は、反応ベッセルを窒素でフラッシュした。反応混合物を、不活性N2雰囲気下でシールして、EMRYS（商標）Optimizer Microwave Station (Personal Chemistry)で、100℃12分間、マイクロウェーブ照射した。LCMS及びTLC分析によって各反応が完全に進行したことを確認した後に、冷却した反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈して、EtOAc (3 x 40 mL)で抽出して、ろ過物を混ぜ合わせて、MgSO4で乾燥して真空下で濃縮した。得られたオイル（油分）は、クロマトグラフィー(n-ヘキサン/EtOAc 9:1)へフラッシュして供し、５(収量 - 2.2 g, 97%)を得た。IR (FTIR, νmax /cm-1): 3353, 2975, 1696, 1521, 1441, 1366, 1264, 1235, 1209, 1058, 822, 799, 657; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.40 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.33 (d, 2 H, J = 8.8 Hz), 7.16 (d, 1H, J = 2.0 Hz,), 7.02 (d, 1H, J = 2.0), 6.45 (br s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 1.52 (s, 9H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 161.7, 152.8, 136.5, 129.5, 125.9, 125.6, 123.7, 123.0, 119.0, 114.6, 80.5, 51.1, 36.9, 28.4; EIMS m/z  (+EI) calc. for C18H22N2O4 (M)+ 330.38 found  330.46 (M+H)+
【０２１４】
［(b) 4-(4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸 (6)］
【化３５】
2015515972.tif 000038
【０２１５】
NaOH (2.0当量)の0.5 M溶液を、ジオキサン(40 mL)中に溶解した5 (1.0 g, 3.027 mmol)の溶液へ、添加した。 反応混合物を、室温下６時間、撹拌されるままにした。この時点で反応が完全に進行することがＴＬＣでわかった。過剰の1,4-ジオキサンを、真空下で蒸発させ、残余を水で希釈した。得られた溶液を0.5 M HCl で酸性化した。得られた生成物を、2 x エチルアセテート (100 mL x 2)と水で抽出して、有機層を混ぜ合わせて、塩水（brine）で洗浄し、MgSO4で乾燥して、真空下で濃縮した。生成物は、フラッシュクロマトグラフィー(エチルアセテート/n-ヘキサン 2:8)を使用して精製した。収量− 0.92 g, 96.8%。IR (FTIR, νmax /cm-1): 3371, 2979, 1698, 1671, 1522, 1445, 1367, 1285, 1161, 1112, 1047, 823, 803, 762, 714, 631; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.33 (1H, s), 7.55 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.50 (d, 2 H, J = 8.8 Hz), 7.36 (d, 1H, J = 2.0 Hz,), 7.22 (d, 1H, J = 2.0), 3.97 (s, 3H), 1.50 (s, 9H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 162.3, 153.7, 138.6, 123.0, 127.1, 126.0, 124.4, 124.0, 119.5, 115.1, 79.9, 36.9, 28.6; EIMS m/z  (+EI) calc. for C17H20N2O4 (M)+ 316.35 found  315.16 (M+H)+
【０２１６】
［(c)］
【化３６】
2015515972.tif 000039
【０２１７】
［(i) メチル 4-(4-アミノフェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (7)］
5 (1g, 3.027 mmol) を少量のMeOHに溶解して、 撹拌しながらゆっくりと、ジオキサン(15 mL)中に溶解した4M HClを添加した。この反応混合物は、６時間撹拌した。ＴＬＣが、この時点で反応が完全に行われることを示した。過剰の溶媒を真空下で蒸発させて褐色（ブラウン）の固体7をえた。この固体生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(n-ヘキサン/EtOAc 9:1)に供して、純粋な7を得た(065 g, 94.2%)。IR (FTIR, νmax /cm-1): 3366, 2987,1688, 1629, 1566, 1422, 1372, 1262, 1181, 1103, 1067, 951, 821, 784, 756; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.28 (2H, d,  J = 8.4 Hz), 7.11 (1H, d, J = 2.0 Hz), 6.96 (1H, d, J = 2.0 Hz), 6.68 (d, 2 H, J = 8.0 Hz), 3.94 (s, 3H), 3.83 (s, 3H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 161.7, 144.7, 126.2, 125.4 , 125.2, 115.5, 114.4, 51.0, 36.8; EIMS m/z  (+EI) calc. for C13H14N2O2 (M)+ 230.26 found  231.1 (M+H)+
【０２１８】
［(ii) メチル 4-(4-(4-(4-アミノフェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (8)］
0.2 g boc保護された6 (0.63 mmol, 1.2 当量)をDMF (5 mL)中に溶解し、この中には2.0当量のEDCI及び2.5当量のDMAPが添加されており、この混合物を３０分間撹拌した。この時点で、メチル 4-アミノ-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (80.9 mg, 0.52 mmol, 1.0当量)を添加し、この反応混合物を、さらに３時間、撹拌した。この時点で、反応が完全に進んだことをＴＬＣが示した。これを氷／水の混合物上へ注ぐことによって、この反応を消失させた。得られた混合物は、エチルアセテートで抽出した(3 x 50 mL)。組み合わさった抽出物を、飽和水性NaHCO3 (50 mL)、水(50 mL)、塩水（brine）(50 mL)で順に洗浄して、最後にMgSO4で乾燥した。過剰のエチルアセテートを、減圧下でロータリーエバポレーターで蒸発させ、粗生成物を、さらに精製することなく、ｂｏｃ脱保護ステップに使用して、８を得た。ｂｏｃ脱保護のために、組生成物を少量のMeOHで溶解し、ジオキサン(5 mL)中の4M HClを、撹拌しながらゆっくりと添加した。反応混合物を２時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行することをＴＬＣが示した。過剰の溶媒は、真空下で蒸発させて、褐色（ブラウン）固体(8)を得た。この固体生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(n-ヘキサン/EtOAc 9:1) に供して、純粋な８を得た。収量0.21 gm, 77%。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.72 (1H, s), 7.69 (1H, s), 7.57 (2H, d, J = 8.0 Hz), 7.46 (4H, d, J = 8.0 Hz), 7.41 (2H, d, J = 8.0 Hz), 7.20 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.06 (1H, d, J = 2.0 Hz, 7.02 (1H, d, J = 1.6 Hz), 6.92 (1H, s). m/z  (+EI) calc. for  C25H24N4O3 (M)+  428.48 found  429.26 ([M+H]+
【０２１９】
［(d)］
【化３７】
2015515972.tif 000040
【０２２０】
［(i) メチル 4-(4-(4-アミノフェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (9)］
２当量のEDCI及び2.5当量のDMAPを、 DMF (8 mL)中に溶解した6 (0.45 gm, 1.2 当量)の撹拌溶液に、添加した。この混合物を３０分間撹拌した後に、メチル 4-アミノ-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート(0.18 g, 1.18 mmol, 1.0当量)を添加した。この反応混合物を、さらに６時間撹拌した。この時点で、反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。これを氷／水の混合物上へ注ぐことによって、この反応を消失させた。得られた混合物は、エチルアセテートで抽出した(3 x 150  mL)。組み合わさった抽出物を、クエン酸(100 mL)、飽和水性NaHCO3  (100 mL)、水(100 mL)、塩水（brine）(100 mL)で順に洗浄して、最後にMgSO4で乾燥した。過剰のエチルアセテートを、減圧下でロータリーエバポレーターで蒸発させ、粗生成物9a (0.58 gm, 収率 90.6%)を、さらに精製することなく、ｂｏｃ脱保護ステップに使用して、９を得た。ｂｏｃ脱保護のために、0.29 gmの9aを少量のMeOHで溶解し、ジオキサン(15 mL)中の4M HClを、撹拌しながらゆっくりと添加した。反応混合物を６時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行することをＴＬＣが示した。過剰の溶媒は、真空下で蒸発させて、褐色（ブラウン）固体(9)を得た。この固体生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(n-ヘキサン/EtOAc 9:1) に供して、純粋な９を得た。収量0.21 gm, 95%。
【０２２１】
［(ii) メチル 4-(4-(4-(4-アミノフェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (10)］
水酸化リチウム(68 mg, 1.65 mmol, 3当量)を水性ジオキサン(8 ml ジオキサン, 4 ml水)中の9a (0.25 g, 0.55 mmol)へ室温で添加した。反応混合物を３時間撹拌した。この時点でＴＬＣが反応が完全に進行したことを示した。ジオキサンを高真空下で蒸発させて、残渣を水で希釈した。得られた溶液を1 Mクエン酸で酸性化して、エチルアセテート(2 x 50 mL)で抽出した。有機層を混ぜて、塩水（brine）(50 mL)で洗浄し、MgSO4 で乾燥し、最後に、ロータリーエバポレーターを使用して減圧下で濃縮し、加水分解された酸の形態の9a を白色固体として得た(収量0.23 g, 91.6%)。DMF中のこの白色固体(0.23 gm, 0.52 nmol)の撹拌溶液に対して、2.0当量のEDCI及び2.5当量のDMAPを添加した。混合物を２０分間撹拌した後に、市販のメチル 4-アミノ-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート(80.1 mg, 0.52 mmol, 1.0当量)を添加した。反応混合物はさらに３時間撹拌しておいた。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。これを氷／水混合物の上に流すことによってこの反応を消失させた。得られた混合物は、エチルアセテート (3 x 50 mL)で抽出した。混合した抽出物を、飽和水性NaHCO3 (50 mL)及び塩水(50 mL)で順に洗浄して最後にMgSO4で乾燥した。過剰のエチルアセテートは減圧下でロータリーエバポレーターによって蒸発させて、粗生成物をboc脱保護工程に使用して10を得た。boc脱保護のために、粗中間体を少量のMeOHに溶解して、ジオキサン(5 mL)中の4M HClをその撹拌溶液にゆっくりと添加した。反応混合物は３時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。過剰の溶媒を真空下で蒸発させて、褐色（ブラウン）固体(10)を得た。この固体生成物を、フラッシュクロマトグラフィ−に供して(n-ヘキサン/EtOAc 8:2)、純粋な10を得た。収量 0.20 gm, 83%（２工程に対して）。
1H-NMR  (DMSO, 400 MHz): δ 9.72 (1H, s), 8.09 (1H, t, J = 5.6 Hz), 7.71 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.49 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.40 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.27 (1H, d, J = 2.0), 7.19 (1H, d, J = 2.0), 7.03 (1H, dd, J = 4.0, 1.6 Hz), 7.00 (1H, t, J = 2.0 Hz), 6.84 (1H, d, J = 2.0 Hz), 6.10 (1H, m), 3.89 (3H, s). m/z  (+EI) calc. for  C25H26N6O4 (M)+  474.51 found  475.35 ([M+H]+
【０２２２】
［(e)］
【化３８】
2015515972.tif 000041
【０２２３】
［メチル 4-(4-(4-アミノフェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキシレート (11)］
0.3gmのboc保護された6 (0.94 mmol, 1.2当量)をDMF (5 mL)に溶解し、それへ2.0当量のEDCI及び2.5当量のDMAPを添加した。この混合物を３０分間した後に、メチル 4-アミノ-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキシレート(0.121 g, 0.79 mmol, 1.0当量)を添加した。反応混合物をさらに６時間撹拌したままとした。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。反応を、氷／水混合物の上に流して反応を消失させた。得られた混合物をエチルアセテート(3 x 150 mL)で抽出した。抽出物を混ぜ合わせて、飽和水性NaHCO3 (50 mL)、水(50 mL)、塩水(50 mL)で順に洗浄して、最後のMgSO4で乾燥した。過剰のエチルアセテートはロータリーエバポレーターによって減圧下で蒸発させて、粗生成物11a (0.48 gm)をboc脱保護工程に使用して11を得た。boc脱保護のために、粗中間体を少量のMeOHに溶解して、その撹拌溶液にジオキサン(5 mL)中の4M HClをゆっくりと添加した。反応混合物を２時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。過剰の溶媒は、真空下で蒸発させて、褐色（ブラウン）固体(11)を得た。この固体生成物をフラッシュクロマトグラフィーに供して(n-ヘキサン/EtOAc 9:1)、純粋な11を得た。収量0.35 gm, 81%（２工程に対して）。 
1H-NMR (DMSO, 400 MHz): 9.75 (1H, s), 8.03 (1H, s), 7.71 (2H, d, J = 8.8 Hz, 7.53 (1H, s), 7.52 (1H, s), 7.48 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.42 (1H, s), 7.19 (1H, d, J = 2.0), 3.94 (3H, s), 3.91 (3H, s), 3.89 (3H, s). m/z  (+EI) calc. for  C18H19N5O3 (M)+  353.38 found  354.42 ([M+H]+
【０２２４】
［(f) 4-(10-(アリルオキシカルボニル)-7-メトキシ-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H- ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)酪酸 (13)］
【化３９】
2015515972.tif 000042
【０２２５】
NaOHの0.5M溶液(1.4135 gのNaOHから調製した)を、ジオキサン中の12(化合物18, WO 2007/039752)の溶液へと室温で添加した。反応混合物を４時間撹拌したままとした。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。ジオキサンを高真空下で蒸発させて、残渣を水に溶解した。得られた溶液は、1 Mクエン酸で酸性化した後に、エチルアセテートによる抽出を行った(2 x 100 mL)。有機層を混合して、塩水(100 mL)で洗浄し、MgSO4 で乾燥し、最後にロータリーエバポレーターを使用して減圧下で濃縮した。収量−8.7 g, (94%)。1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.2 (2H, s), 6.90 (1H, s), 6.58 (1H, s), 5.85 (2H, d, J = 9.2 Hz), 5.73 (2H, d, J = 9.2 Hz), 5.03-5.13 (m, 6H), 4.68-4.35 (m, 4H),  4.09-4.01 (m, 4H), 3.91-3.82  (m, 8H), 3.69-3.46 (m, 8H), 2.60-2.55 (m, 4H), 2.18-2.00 (m, 10H), 1.76-1.55 (m, 4H), 1.53-1.43 (m, 8H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 177.6, 167.6, 149.8, 132.1, 131.9, 126.7, 117.3, 114.9, 110.8, 100.7, 96.0, 91.7, 88.5, 67.9, 66.6, 63.6, 60.1, 56.1, 46.5, 31.1, 30.3, 28.8, 25.2, 24.1, 23.2, 20.0; EIMS m/z  (+EI) calc. for C26H34N2O9 (M)+  518.56 found 519.26 (M+H)+
【０２２６】
［(g) メチル 4-[[4-[[4-(4-アミノフェニル)-1-メチル-ピロール-2-カルボニル]アミノ]-1-メチル-イミダゾール-2-カルボニル]アミノ]-1-メチル-ピロール-2-カルボキシレート (19)］
【化４０】
2015515972.tif 000043
【０２２７】
水酸化リチウム(40 mg, 1.65 mmol, 3当量)を、水性ジオキサン(8 ml ジオキサン, 4 ml 水)中の11a (0.25 g, 0.55 mmol)に室温で添加した。反応混合物を３時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。ジオキサンを高真空下で蒸発させて、残渣を水に溶解した。得られた溶液を１Ｍクエン酸で酸性化し、エチルアセテートで抽出した(2 x 50 mL)。有機層を混ぜ合わせて、塩水(50 mL)で洗浄し、MgSO4 で乾燥し、最後にロータリーエバポレーターを使用して減圧下で濃縮して、加水分解された酸の形態の17を白色個体として得た(収量0.235 g, 97%)。これをそれ以上に精製することなく次の反応に使用した。ＤＭＦ中にある17 (0.235 gm, 0.54 nmol)の撹拌溶液へ、2.0当量のEDCI及び2.5当量のDMAPを添加した。この混合物を２０分間撹拌した後に、市販のメチル 4-アミノ-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキシレート(100.00 mg, 0.54 mmol, 1.2当量)を添加した。反応混合物を、さらに３時間撹拌した。この時点で完全に反応が進行していたことをＴＬＣが示した。これを氷／水混合物上に流すことによって、反応を消失させた。得られた混合物をエチルアセテート抽出した(3 x 50 mL)。混ぜ合わせた抽出物を、飽和した水性NaHCO3 (50 mL)、及び塩水(50 mL)で順に洗浄し、最後にMgSO4で乾燥させた。過剰のエチルアセテートをロータリーエバポレーターによって減圧下で蒸発させて、粗生成物をboc脱保護工程に使用して１８を得た。 これを少量のMeOH に溶解して、撹拌溶液へ、ジオキサン(5 mL)中の4M HClを、ゆっくりと添加した。反応混合物を３時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。過剰の溶媒を真空下で蒸発させて、褐色（ブラウン）固体(19)を得た。固体生成物をフラッシュクロマトグラフィー (n-ヘキサン/EtOAc 8:2)に供して、純粋な19を得た。収量0.22 gm, 85%（２工程に対して）。
1H-NMR  (DMSO, 400 MHz): 10.09 (1H, s), δ 9.89 (1H, s), 7.78 (2H, d, J = 8.8), 7.68 (1H, s), 7.49 (2H, d, J = 8.64), 7.35 (1H, d, J = 1.6), 7.21 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.15 (1H, d, J = 2.0 Hz), 3.97 (6H, s), 3.90 (3H, s), 3.84 (3H, s)m/z  (+EI) calc. for  C23H23N7O4 (M)+  461.47 found  462.17 ([M+H]+
【０２２８】
［実施例１］
【化４１】
2015515972.tif 000044
【０２２９】
【表２】
2015515972.tif 000045
*比較例
【０２３０】
［(a) (S)-メチル 4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H- ピロロ [2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (16a)］
［(i) (11aS)-アリル 7-メトキシ-8-(4-(4-(5-(メトキシカルボニル)-1-メチル-1H-ピロール-3-イル)フェニルアミノ)-4-オキソブトキシ)-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート (15a)］
Alloc-THP保護されたPBD酸13 (3.72 g, 7.16 mmol, 1.2当量)の溶液を、DMFに溶解した。EDCI (2.49 g, 13.02 mmol, 2.0当量)及びDMAP (1.989 g, 16.28 mmol, 2.5当量)を、13の撹拌溶液へ室温で添加し、混合物を３０分間撹拌し、その後にMPB-エステル 7 (1.5 g, 6.514 mmol, 1.0当量)を添加した。反応混合物をさらに２時間撹拌した。その時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。これを氷／水混合物上に流すことによって反応を消失させた。得られた混合物をエチルアセテートで抽出した(3 x 150 mL)。混ぜた抽出物を、クエン酸 (200 mL)、飽和した水性NaHCO3 (250 mL)、水(250 mL)、塩水(250 mL)で順に洗浄し、最後にMgSO4で乾燥した。過剰のエチルアセテートをロータリーエバポレーターによって減圧下で蒸発させ、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(MeOH: CHCl3, 20:80)によって精製し、白色泡状（フォーム）固体、15aを得た。収量 − 4.05 g, 85.5%。  (FTIR, νmax /cm-1): 2949, 2362, 1704, 1600, 1514, 1436, 1372, 1269, 1203, 1107, 1021, 964, 765.  (1H NMR, 400 MHz, CDCl3): δ 7.82 (1H, s), 7.48 (2H, m), 7.41 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.40 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.23 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.17 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.04 (1H, d, J = 2.0 Hz), 5.93-5.65 (2H, m),  5.09-5.4.97 (m, 4H), 4.68-4.32 (m, 4H),  4.15-4.10 (m, 4H), 3.94-3.82  (m, 12H), 3.68 (m, 2H), 3.59-3.49 (m, 6H), 2.60-2.57 (m, 3H), 2.15-2.00 (m, 8H), 1.88-1.80 (m, 2H), 1.79- 1.70 (6H), 1.60-1.44 (m, 12H); (13C NMR, 100 MHz, CDCl3): δ 177.1, 170.5, 167.3, 161,6, 149.1, 136.3, 132.1, 131.9, 130.4, 128.9, 127.1, 125.9, 125.4, 123.5, 123.1, 120.3, 117.3, 114.6, 110.8, 91.5, 88.6, 68.2, 66.5, 64.3, 63.6, 60.3, 56.0, 51.1, 46.4, 36.8, 31.1, 30.9, 29.1, 25.1, 24.6, 23.2, 21.0, 20.1; m/z  (+EI) calc. for  C39H46N4O10 (M)+  730.80 found  731.67 ([M+H]+
【０２３１】
［(ii) (S)-メチル 4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H- ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (16a)］
パラジウムテトラキス[トリフェニルホスフィン] (5.60 mg, 4.8 μM, 0.05当量)を、 DCM (5 mL)中の、Alloc-THP-PBDコンジュゲート15a (70 mg, 0.097 mmol)、ピロリジン(8.36 mg, 0.117 mmol, 1.2当量)、及びトリフェニルホスフィン(8.62 mg, 0.25当量)の溶液へ添加した。 反応混合物を、室温で２時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。過剰のDCMを減圧下のロータリーエバポレーションで除去し、得られた残渣を真空内で乾燥させて、ピロリドンを除去した。生成物を絡むクロマトグラフィー(n-ヘキサン 65%%, EtOAc 35%によって溶出)で精製し、生成物を黄色がかった固体、3.37 (40 mg, 77%)として得た。  [α]22.7D + 165° (c = 0.046, CHCl3); IR (FTIR, νmax /cm-1)： 3297, 2944, 2358, 1701, 1598, 1567, 1508, 1442, 1374, 1264, 1212, 1181, 1106, 1072, 824, 730; 1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.68 (1H, s), 7.65 (1H, d, J = 4.5 Hz, H-11), 7.52 (1H, s, H-6), 7.46 (2H, dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 2Ar-H), 7.40 (2H, dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 2Ar-H), 7.16 (1H, d, J = 2.0 Hz, Py−H), 7.03 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H), 6.82 (1H, s, H-9), 4.12-4.20 (2H, m, CH2 側鎖リンカー), 3.94 (3H, s, N-CH3), 3.88 (3H, s, O-CH3), 3.68-3.71 (1H, m, H-11a) , 3.50-3.60 (2H, m, H2-3), 2.58-2.62 (2H, m, CH2), 2.26-2.31 (4H, m, CH2), 1.50-1.54 (2H, m, CH2); 13C-NMR (125 MHz, CDCl3): δ 164.5, 162.4, 161.6, 150.5, 147.8, 140.7, 125.9, 125.5 (2C), 123.6, 123.1, 120.3, 114.6, 111.8, 111.0, 94.4 (2C),  68.0, 63.7, 56.1, 53.7, 51.0, 46.6, 36.8, 31.9, 29.6, 25.2, 24.8, 24.1, 20.2; HRMS m/z  (+EI) calc. for  C30H32N4O6 (M+H)+  545.2400  found  545.2422 (M+H)+, δ 4ppm  
【０２３２】
化合物15b-d, g, h及び16b-d, g, hを同様の方法で製造し、化合物Ａを１３と反応させた後に脱保護を行った。
【０２３３】
［(b) (S)-メチル 4-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H- ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (16b)］
[α]22.7D+ 134° (c = 0.038, CHCl3); IR (FTIR, νmax /cm-1): 3850.89, 3732, 3619, 2443, 2354, 2228,  2169, 2091, 1971,1859, 1729, 1679, 1521,1265, 734, 629;  1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.72 (1H, s, NH), 7.69 (1H, s, NH), 7.66 (1H, d, J = 4.0 Hz, H-11), 7.57 (2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H), 7.53 (1H, s, H-6), 7.46 (4H, d, J = 8.0 Hz, 4Ar-H), 7.41 (2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H), 7.20 (1H, d, J = 2.0 Hz, Py-H), 7.06 (1H, d, J = 2.0 Hz, Py-H), 7.02 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H), 6.92 (1H, s, Py-H), 6.84 (1H, s, H-9),  4.12-4.20 (2H, m, CH2 側鎖リンカー), 4.00 (3H, s, N-CH3), 3.96(3H, s, N-CH3), 3.88 (3H, s, O-CH3), 3.84 (3H, s, O-CH3), 3.70-3.73 (1H, m, H-11a) , 3.55-3.61 (2H, m, H2-3), 2.58-2.62 (2H, m, CH2), 2.29-2.31 (2H, m, CH2), 1.93-2.06 (4H, m, CH2); 13C-NMR (125 MHz, CDCl3): δ 164.5, 162.4, 161.7, 150.7, 147.3, 139.2, 126.0, 125.6, 125.4 (2C), 125.2 (2C), 123.0, 120.4 (2C), 114.6 (2C), 111.4,  94.6 (2C), 68.3, 63.7, 56.1, 51.6 (2C), 41.0, 36.9, 31.9, 29.6, 25.2, 24.2, 24.1, 20.2;  HRMS m/z  (+EI) calc. for  C42H42N6O7 (M+H)+  743.3193  found  743.3193  ([M+H]+, δ 0.3 ppm)
【０２３４】
［(c) (S)-メチル 4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (16c) ］
[α]22.7D + 128° (c = 0.037, CHCl3);  IR (FTIR, νmax /cm-1): 3321, 2237, 2107, 2041,1967,1860, 1685,1517,1435,   1254, 1180, 1118, 749, 722, 696, 667;  1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.98 (1H, s, NH), 7.88 (1H, s, NH), 7.68 (1H, s, H-6), 7.65  (1H, d, J = 4.0 Hz, H-11), 7.64 (2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H), 7.54 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H), 7.52 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H), 7.45 (1H, d, J = 2.0 Hz, Py-H), 7.33 (2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H), 6.97 (1H, s, Py-H), 6.89 (1H, s, H-9), 4.08-4.18 (2H, m, CH2), 3.97 (3H, s, N-CH3), 3.89 (3H, s, N-CH3), 3.84 (3H, s, O-CH3), 3.79 (3H, s, O-CH3), 3.66-3.70 (1H, m, H-11a) , 3.55-3.60 (2H, m, H2-3), 2.56-2.61 (2H, m, CH2), 2.23-2.32 (4H, m, CH2), 2.00-2.05 (2H, m); 13C-NMR (125 MHz, CDCl3): δ 162.5, 161.6, 159.1, 150.4, 147.7, 138.4,  132.8, 132.1 131.9 (2C), 128.6, 128.4 (2C), 125.4(2C), 124.8, 123.0, 121.0, 120.4 (2C), 116.2, 114.6 (2C), 109.9,  94.2,  67.4, 63.6, 57.1,  53.7, 51.1, 46.7, 36.9,  36.7, 34.0, 29.6, 24.2; HRMS m/z  (+EI) calc. for  C36H38N6O7 (M)+  667.2880 found  667.2881 ([M+H]+, δ 0.1 ppm)
【０２３５】
［(d) (S)-エチル 4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H- ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキシレート (16d)］
[α]22.7D+ 122° (c = 0.028, CHCl3) , IR (FTIR, νmax /cm-1)： 3324，2355，2157，2109, 2032, 1913, 1600,1533, 1465, 1262, 1179, 1109, 751;  1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ 8.47 (1H, s, NH), 7.72 (1H, s, NH), 7.66  (1H, d, J = 4.0 Hz, H-11), 7.55 (1H, s, H-6), 7.52 (1H, d, J = 2.0, Py-H), 7.49 (2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H),  7.37 (2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H), 7.16 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H),7.03 (1H, s, Im-H),  6.91 (1H, s, H-9), 4.39-4.43 (2H, m, O-CH2) 4.13-4.22 (2H, m, CH2), 4.01 (3H, s, N-CH3), 3.99 (3H, s, N-CH3), 3.83 (3H, s, O-CH3), 3.68-3.72 (1H, m, H-11a) , 3.55-3.60 (2H, m, H2-3), 2.58-2.63 (2H, m, CH2), 2.24-2.32 (4H, m, CH2), 2.00-2.07 (2H, m, H2-1), 141-1.45 (3H, m, CH3); 13C-NMR (125 MHz, CDCl3): δ 163.1, 162.5, 158.7, 150.4, 147.7, 140.7, 137.2,  131.5, 125.6(2C), 125.4 (2C), 123.8, 123.0, 120.4 (2C), 114.5, 111.6, 110.8, 109.9,  100.0,  67.4, 61.5, 56.1,  53.7, 51.1, 46.7, 37.0,  36.0, 34.0, 29.6, 24.8, 24.2, 14.4; HRMS m/z  (+EI) calc. for  C36H39N7O7 (M)+  682.2989 found  682.2986 ([M+H]+, δ - 0.4 ppm).
【０２３６】
［(e) (S)-メチル 4-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H- ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (16g)］
[α]22.7D + 149° (c = 0.054, CHCl3); IR (FTIR, νmax /cm-1): 3310, 2947, 2358, 2168, 2153, 2132, 2070, 2011, 1989, 1651, 1538, 1434, 1402, 1257, 1107, 753; 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.02 (1H, s, NH), 7.88  (1H, d, J = 5.2 Hz, H-11), 7.68 (1H, s, H-6), 7.67 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H), 7.64 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H), 7.53(2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H), 7.45 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H), 7.31 (2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H), 7.20 (1H, s, Py-H),  6.96 (1H, s, Py-H), 6.89 (1H, bs, NH), 6.81 (1H, s, H-9), 6.78 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H), 6.71 (1H, bs, NH), 4.11-4.16 (2H, m, CH2), 3.97 (3H, s, N-CH3),  3.92 (3H, s, N-CH3), 3.88 (3H, s, N-CH3), 3.84 (3H, s, N-CH3), 3.79 (3H, s, O-CH3), 3.68-3.71 (1H, m, H-11a) , 3.55-3.60 (2H, m, H2-3), 2.56-2.61 (2H, m, CH2), 2.22-2.28 (4H, m, CH2), 1.99-2.04 (2H, m); HRMS m/z  (+EI) calc. for  C41H43N9O8 (M)+  790.3313 found   790.3314 [M+H]+, δ 0.1 ppm.
【０２３７】
［(f) (S)-メチル 4-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (16h)］
[α]22.7D + 142° (c = 0.043, CHCl3);  IR (max cm-1)： 3408, 2358, 2168, 2148, 2019, 1978,1938, 1718, 1534, 1260, 1118, 757;  1H-NMR (500 MHz, CDCl3):  δ 8.72 (1H, s, NH), 8.12 (1H, s, NH), 7.71 (1H, s), 7.65  (1H, d, J = 4.4 Hz), 7.53 (1H, s), 7.48 (2H, d, J = 8.0 Hz), 7.47 (1H, s), 7.42 (2H, d, J = 1.6 Hz), 7.40 (2H, d, J = 8.0 Hz), 7.03 (1H, d, J = 1.6 Hz),  6.95 (1H, s), 6.82 (1H, s), 6.81 (1H, d, J = 1.6 Hz,), 4.12-4.21 (2H, m), 4.07 (3H, s),  4.00 (3H, s), 3.91 (3H, s), 3.89 (3H, s), 3.81 (3H, s), 3.69-3.72 (1H, m) , 3.55-3.61 (2H, m), 2.58-2.63 (2H, m), 2.26-2.32 (4H, m, CH2), 2.02-2.07 (2H, m,);  HRMS (EI, m/z):  Calc. for  C41H43N9O8 (MH+):  790.3313.  Found, 790.3314. 
【０２３８】
［実施例２］
【化４２】
2015515972.tif 000046
【０２３９】
【表３】
2015515972.tif 000047
【０２４０】
【表４】
2015515972.tif 000048
【０２４１】
［(ａ)］
［(i) 4-(4-(((11S,11aS)-10-((アリルオキシ)カルボニル)-7-メトキシ-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸(14a)］
Alloc-THP 保護されたPBD 酸13 (1.85 g, 3.57 mmol, 1.2当量)溶液を、DMF中に溶解した。EDCI (1.24 g, 6.48 mmol, 2.0当量)及びDMAP (0.99 g, 8.1 mmol, 2.5当量)を、13の撹拌溶液へ室温で添加し、混合物を３０分間撹拌した後に、メチル 4-アミノ-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート(0.5 g, 3.243 mmol, 1.0当量)を添加した。反応混合物をさらに６時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。これを氷／水混合物の上に流して反応を消失させた。得られた混合物をエチルアセテートで抽出した(3 x 150 mL)。混ぜ合わせた抽出物を、クエン酸 (200 mL)、飽和した水性NaHCO3 (250 mL)、水(250 mL)、塩水(250 mL)で順に洗浄して、最後にMgSO4で乾燥した。過剰のエチルアセテートを減圧下でロータリーエバポレーターによって蒸発させ、粗生成物(1.88 gm)を加水分解に使用して14aを得た。加水分解のために、水酸化リチウム(0.24 g, 5.71 mmol, 3当量)を、室温で、水性ジオキサン (75 ml ジオキサン、11.5 ml水)中の粗生成物(1.88 g, 2.87 mmol)へと添加した。反応混合物を３時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行したことをＴＬＣが示した。ジオキサンを、高真空下で蒸発させて、残渣を水に溶解した。得られた溶液を１Ｍクエン酸で酸性化した後に、エチルアセテートで抽出した(2 x 100 mL)。有機層を混ぜ合わせて、塩水(100 mL)で洗浄し、MgSO4 で乾燥し、最後に減圧下でロータリーエバポレーターを使用して濃縮して、14a を白色固体として得た（収量、1.68 gm, 74.0%（２段階に対して））。  1H-NMR  δ 9.09 (1H, s, NH), 7.39 (1H, d, J=2.0 Hz), 7.14 (1H, s, H-6), 7.12 (1H, s, H-6), 6.96 (1H, s, H-9), 6.76 (1H, d, J= 2.0 Hz, Py-H), 5.86-5.75 (2H, m, H-11), 5.13-4.84 (3H, m), 4.61-4.21 (2H,m), 4.06-3.88 (3H, m, 側鎖 H-1, ピラン H-6), 3.87 (3H, s, O/NCH3), 3.87 (3H, s, O/NCH3), 3.86 (3H, s), 3.53-3.44 (3H, m), 2.55-2.45 (2H, m), 2.13-1.88 (6H, m), 1.70-1.39 (6H). m/z  (+EI) calc. for  C32H40N4O10 (M)+  640.68 found  641.57 ([M+H]+
【０２４２】
［(ii) (11S,11aS)-アリル 7-メトキシ-8-(4-((5-((4-(5-(メトキシカルボニル)-1-メチル-1H-ピロール-3-イル)フェニル)カルバモイル)-1-メチル-1H-ピロール-3-イル)アミノ)-4-オキソブトキシ)-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート (15e)］
Alloc-THP保護されたPBD-Py 酸14a (150 mg, 0.23 mmol, 1.0当量)の溶液をDMFに溶解した。EDCI (2.49 g, 13.02 mmol, 2.0当量)及びDMAP (1.989 g, 16.28 mmol, 2.5 当量)を、13の撹拌溶液に室温で添加した。混合物を３０分間撹拌した後に、MPB-エステル7 (67.83 mg, 0.29 mmol, 1.25当量)を添加した。反応混合物をさらに３時間撹拌した。この時点で完全に反応が進行したことをＴＬＣが示した。これを氷／水混合物上に流して、反応を消失させた。得られた混合物はエチルアセテートで抽出した(3 x 150 mL)。混ぜ合わせた抽出物を、クエン酸(50 mL)、飽和した水性NaHCO3 (50 mL)、水(50 mL)、塩水(50 mL)で順に洗浄して、最後にMgSO4で乾燥した。過剰のエチルアセテートは減圧下でロータリーエバポレーターを使用して蒸発させ、粗生成物をさらに精製することなく直接に次の工程に使用した。    m/z  (+EI) calc. for  C45H52N6O11 (M)+  852.93 found  854.87 ([M+H]+
【０２４３】
［(iii) (S)-メチル 4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H- ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (16e)］
パラジウムテトラキス[トリフェニルホスフィン] (12.17 mg, 10.5 μM, 0.05当量)を、DCM (5 mL)中のAlloc-THP-PBD コンジュゲート15e (179 mg, 0.21 mmol)、ピロリジン(17.91 mg, 0.25 mmol, 1.2当量)、及びトリフェニルホスフィン(13.81 mg, 0.25当量)の溶液へ添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。この時点で反応が完全に進行していたことをＴＬＣが示した。過剰のDCMを減圧下のロータリーエバポレーションによって除去し、得られた残渣を真空下で乾燥して、ピロリドンを除去した。生成物は、高速液体クロマトグラフィー(1% TFAを含むアセトン:水勾配で溶出)によって精製して、生成物を、明るい黄色がかった固体、16e (48 mg, 34%、HPLC精製後)として得た。
[α]22.7D + 197° (c = 0.052, CHCl3) , IR (FTIR, νmax /cm-1): 3330, 2360, 2214, 2180, 2041, 2020, 1999, 1967, 1698, 1517, 1438, 1265, 1180, 1119, 756, 722, 696, 667,630; 1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ 7.77 (1H, s, NH), 7.68 (1H, s, H-6), 7.67 (2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H), 7.64  (1H, d, J = 5.0 Hz, H-11), 7.55 (2H, d, J = 8.0 Hz, 2Ar-H), 7.47 (1H, d, J = 2.0 Hz, Py-H),  7.43 (1H, s, NH), 7.18 (1H, d, J = 2.0 Hz, Py-H), 7.09 (1H, d, J = 2.0 Hz, Py-H), 7.05, (1H, d, J = 2.0 Hz, Py-H), 6.83 (1H, s, H-9), 4.09-4.16 (2H, m, CH2), 3.95 (3H, s, N-CH3), 3.90 (6H, s, N-CH3, O-CH3), 3.84 (3H, s, O-CH3), 3.67-3.71 (1H, m, H-11a) , 3.54-3.57 (2H, m, H2-3), 2.53-2.56 (2H, m, CH2), 2.23-2.30 (4H, m, CH2), 2.00-2.05 (2H, m);  13C-NMR (125 MHz, CDCl3): δ 169.8, 164.5, 162.6, 161.6, 159.5, 150.7, 147.9, 140.8, 133.1, 132.2, 132.1, 131.9, 131,7, 128.5, 128.4, 125.9, 125.5, 123.7, 123.1, 121.5, 120.7, 120.4, 119.7, 114.7, 112.0, 111.4, 103.9, 68.1, 56.2, 53.7, 51.0, 46.7, 36.8,  33.2, 29.6, 25.1, 24.1; HRMS m/z  (+EI) calc. for  C36H38N6O7 (M)+  667.2880 found  667.2882 ([M+H]+, δ 0.3 ppm).
【０２４４】
化合物14b, 15f 及び16fを同様の方法で製造し、化合物１３をイミダゾリルビルディングブロックと反応させた後に、MPBビルディングブロックと反応させて、最後に脱保護した。
【０２４５】
［(b) (S)-メチル 4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H- ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート (16f) ］
[α]22.7D + 188° (c = 0.052, CHCl3) , IR (FTIR, νmax /cm-1)：3301, 2169, 2136, 2018,1978, 1937,1680,1564,1518,1439, 1265,1181,1108,750,722;  1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δ 8.90 (1H, s, NH), 7.98 (1H, s, NH), 7.67 (1H, s, H-6), 7.63  (1H, d, J = 4.4 Hz, H-11), 7.59 (2H, d, J = 8.4 Hz, 2Ar-H), 7.46 (2H, d, J = 8.4 Hz, 2Ar-H), 7.42 (1H, s, Im-H),  7.19 (1H, d, J = 2.0 Hz, Py-H), 7.06 (1H, d, J = 1.6 Hz, Py-H),  6.83 (1H, s, H-9), 4.10-4.22 (2H, m, CH2), 4.07 (3H, s, N-CH3),  3.96 (6H, s, N-CH3, O-CH3 ), 3.84 (3H, s, O-CH3), 3.67-3.70 (1H, m, H-11a) , 3.54-3.58 (2H, m, H2-3), 2.57-2.67 (2H, m, CH2), 2.26-2.31 (4H, m, CH2), 1.98-2.05 (2H, m); 13C-NMR (125 MHz, CDCl3): δ 169.5, 164.5, 162.5, 161.6, 156.4, 150.4, 147.8, 135.6, 132.1, 131.9 (2C), 128.5, 128.4, 126.0, 125.6, 123.5, 123.1, 121.5, 119.7, 114.6(2C), 111.6, 111.0, 67.7, 56.1, 53.7, 51.1, 46.6, 36.9, 35.8,  33.9, 29.6, 24.7, 24.1; HRMS m/z  (+EI) calc. for  C35H37N7O7 (M)+  668.2833 found  668.2838 [M+H]+, δ 0.5 ppm.
【０２４６】
［実施例３］
発明に係る化合物16c-h の潜在的細胞毒性を、比較化合物16a, 16b 及びGWL-78と比較した。比較は、多数の腫瘍細胞株及び非ガン性細胞株WI38において、９６時間の曝露の後に、MTT (3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウム  ブロマイド)比色分析を用いて、以下に記載したように行った。
【０２４７】
以下を含むヒトガン細胞株の数タイプのパネルを使用して化合物の細胞毒性を検討した：  エピデルモイド (A431)、肺(A549)、卵巣(A2780)、及び胸（乳房）(MCF7及びMDAMB-231)、並びに非腫瘍性細胞株WI38。細胞は、37℃、5% CO2、加湿大気の通常の条件下で、10% ウシ胎児血清(Biosera, UK)、1% L-グルタミン、1%非必須アミノ酸、及び0.05%ヒドロコルチゾン(Gibco, Invitrogen, USA)を添加した、ダルベッコ修正イーグル培地又は修正イーグル培地（細胞株に依存する）中で増殖させた。次に細胞を、全容積160 μlで、９６穴プレートに播種し、実験開始前に、30-40%コンフルエンスに達するようにした。リガンドを滅菌した超純水に最大濃度100 μM で溶解し、十倍段階希釈系列を調製した。これらを体積40 μlで細胞に添加した。９６時間継続してそれぞれのリガンドに曝露させた後に、細胞毒性を、MTT (3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウム  ブロマイド) (Lancaster Synthesis Ltd, UK)比色分析によって測定した(Skehan P, S. R., et al., Journal of the National Cancer Institute 1990, 82, 1107)。吸光度は、分光測定器によってλ = 570 nmで定量した(ELx808, Bio-Tek Instruments, Inc., USA)。 IC50 値は、Origin 6.0(商標）ソフトウェアを使用して、用量反応分析によって算出した。
【０２４８】
【表５】
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*比較化合物
【０２４９】
発明の化合物16c-hの潜在的細胞毒性についても、比較化合物16a, 16b及びGWL-78と比較した。比較は、プライマリーＣＬＬ細胞株において、アネキシンVアッセイ(van Engeland, M, et al., Cytometry 1998, 31, 1−9)を使用して、以下に記載したように行った。
【０２５０】
単離された新鮮な末梢血CLL細胞(1 × 106 mL-1)を100 U/mLペニシリン、100 mg/mLストレプトマイシン及び10%ウシ胎児血清を添加した、RPMI培地(Invitrogen, Paisley, U.K.)で培養した。細胞を、37℃で加湿された5% CO2 雰囲気で、各化合物の存在下でインキュベートした。全ての化合物をDMSOに溶解して、プライマリーCLL細胞に対して系列段階希釈して評価した。さらに、薬剤が添加されないものについて、対照培養を行った。化合物の細胞毒性作用を、アネキシンV/プロピジウムヨウ化物フローサイトメトリーアッセイ(Bender Medsystems, Vienna, Austria)を使用して、定量した。全てのアッセイは二組で行い、LD50 値はPrism 6.0ソフトウェア(Graphpad Software Inc., San Diego, CA)を使用してシグモイド用量応答カーブから算出した。シグモイド用量応答カーブは、各濃度によって誘導されるアポトーシスのパーセンテージに対してlog [化合物濃度]をプロットすることによって得た。広範囲の濃度を、それぞれ各化合物の生物学的活性範囲（有効範囲）を確立するために使用した。
【０２５１】
【表６】
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【０２５２】
［実施例４］
16e及び16fを、乳ガン及び膵臓ガンのマウスモデルにおけるインビボ異種移植研究において使用した。
【０２５３】
最初に小スケール研究を行って、腹腔内投与(IP)を使用してスイスウェブスターマウスにおいてMTD（最大耐量）を決定した。化合物は概して何ら毒性の徴候を示すことなく許容性を示した。しかし、マイナーな体重減少が400 μg/Kg/日の投与量レベルの16eで観察された(図 1A)。あまり顕著でない体重減少が16fにおいても同じ投与量レベルで観察された。16fを使用した350 μg/Kg/日でのMTD実験の繰り返しだけが、体重減少あるいはその他の毒性の徴候を示さなかった(図 1B)。MTD研究においてやや良好な毒性プロファイルを示した16fに関し、さらに広範なインビボ腫瘍異種移植研究をこの分子について行うことを決定した。
【０２５４】
［ER-ネガティブMDA MB 231 乳ガン異種移植研究］
１６ｆの活性のインビボ研究を、マウスモデルにおけるER-ネガティブ MDA MB 231 乳ガン異種移植において行った。ヒト乳ガン細胞株MDA-MB-231 (5x106 細胞)を雌MF1ヌードマウス、2-3月齢及び体重20-25gの脇腹に異種移植するために使用した。小さな腫瘍片(約1mm3)を脇腹中へ皮下移植することによって継代を行った。腫瘍が約0.06cm3 (移植後３週間)に達したら、これをマウス４個体の３グループに分割した。グループを処理した薬剤は、250 μg/Kg/日又は300 μg/Kg/日のIV用量(DMSO中)で連続する５日間投与した後に薬剤無しで２日間を３週間、その後に４週間目に連続する２日間、この時点で投与を停止した。図２に示したように、16f は、コントロール（対照）マウス(▲)と比較して、顕著なインビボ抗腫瘍活性を、250 μg/Kg (◆)及び300 μg/Kg (■)用量レベルで、何ら毒性の徴候を示すことなく、示した(図2、ただし、矢印は最後に行った投与を示している)。腫瘍は、300 μg/Kg 用量レベルのケースで最後のIV用量投与の後、３週間まで再成長しなかった。
【０２５５】
［マウスモデルにおけるMia Paca 2 膵臓ガン異種移植］
16fのインビボ研究を、上記と同様の方法で、膵臓ガン異種移植マウスモデルにおいて行った。薬剤(16f)処理グループは、300 μg/Kg/日のIV用量で連続する５日間投与した後に後に薬剤無しで２日間、このサイクルを３週間続けた。16f は、300 μg/Kg用量レベルで何ら毒性の徴候を示すことなくコントロールと比較して顕著な抗腫瘍活性を生じた(図 3: ◆ 300 μg/Kg 16f; ■ コントロール)。薬剤をやめた後に腫瘍が直ちに再成長すること無力化する性質は顕著であり、最後の投与から２１日に至るまで成長は何ら観察されなかった。腫瘍及びコントロールの組織の断面（クロスセクション）を免疫組織化学染色に供した。その知見は、コントロールとの比較で実施例動物におけるNFkBインヒビション（阻害）と整合した。
【０２５６】
［実施例５］
16f をHeLa細胞株を使用して市販の転写因子活性化プロファイリングアレイアッセイ（Transcription Factor Activation Profiling Array Assay（商標）(Signosis)）で評価した。このアッセイでは、それぞれの転写因子のＤＮＡ結合サイトのコンセンサス配列に基づいたビオチン標識ＤＮＡプローブの回収を使用して、４８種の転写因子の活性が、同時にモニターできる。４時間で10 nMの濃度で７ｈまでにその活性が少なくとも３０％ダウンレギュレートされたトップ５の転写因子は以下である： NFAT, EGR, NF-kB, SMAD及びOCT-4。NF-kBの活性はおよそ50%まで減少した。
【０２５７】
１６ｆが、NF-kBの同族ＤＮＡ配列に結合し、それによって転写因子タンパク質の相互作用をブロックして多数の遺伝子の転写を阻害することによって、NF-kB-依存性遺伝子(例えば、IkB, BCL2, BCLXL)の発現をダウンレギュレートするのであろうという仮説に基づいて、この可能性をＣＬＬ細胞において検討することを決断した。このＣＬＬ細胞ではNF-kBシグナリングが活性であることが知られており、それは悪性腫瘍の発生と進行に密接に関連している。コントロールとしてアクチンタンパク質と比較し、NF-kB活性の代替としてリン酸化されたIkB及びp65のレベルを使用して、行ったウェスタンブロッティングは、次のことを示した。２４時間のインキュベーションの後、１６ｆは、0.1 nMまで下げた濃度において、リン酸化されたIkBαの有意な抑制を生じたが、リン酸化されたp65に対しては小さな効果（marginal effect）しか生じなかった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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