(57)【要約】タンパク質含量が少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．、好ましくは少なくとも約９０ｗｔ％であり、大部分が２Ｓキャノーラタンパク質から成り、タンパク質ミセル塊沈降ステップからの上澄みに由来するキャノーラタンパク質製品が、乳製品類似物又は植物／乳製品ブレンド冷凍デザートミックスのタンパク質成分を少なくとも部分的に与えるために使用される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
冷凍デザート製品の所望の組成を実現するのに十分な割合でタンパク質、脂肪、香味料、甘味料、安定化剤、及び乳化剤を含む組成を有する冷凍デザートミックスであって、タンパク質成分が少なくとも部分的にキャノーラタンパク質製品によって与えられ、該キャノーラタンパク製品が、タンパク質含量が少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．であり、主に２Ｓキャノーラタンパク質からなり、タンパク質ミセル塊沈降ステップからの上澄みに由来する、冷凍デザートミックス。
【請求項２】
０から約３０ｗｔ％の脂肪、
０．１から約１８ｗｔ％のタンパク質、
０から約４５ｗｔ％の甘味料、
０から約３ｗｔ％の安定化剤、
０から約４ｗｔ％の乳化剤
を含む組成を有する、請求項１に記載のミックス。
【請求項３】
０から約１８ｗｔ％の脂肪、
０．１から約６ｗｔ％のタンパク質、
０から約３５ｗｔ％の甘味料、
０から約１ｗｔ％の安定化剤、
０から約２ｗｔ％の乳化剤
を含む組成を有する、請求項１に記載のミックス。
【請求項４】
乳製品原材料を含有せず乳製品類似物冷凍デザートミックスとして分類できる、請求項１に記載のミックス。
【請求項５】
植物原材料及び乳製品原材料のブレンドを含有する、請求項１に記載のミックス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の参照
この出願は２０１２年２月１５日出願の米国仮特許出願第61/599,048号及び２０１２年１２月１９日出願の第61/739,037号の３５ＵＳＣ１１９（ｅ）による優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、キャノーラタンパク質製品、特に単離物を使用して調製される、乳製品類似物（dairy analogue）冷凍デザート製品及び植物／乳製品（plant/dairy）ブレンドである冷凍デザート製品の調製において使用されるミックスに関する。
【０００３】
発明の背景
タンパク質含量が少なくとも１００ｗｔ％（Ｎ×６．２５）であるキャノーラ油糧種子タンパク質単離物は、本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、２００２年５月３日出願の同時係属米国特許出願第10/137,391号（米国特許出願公開第2003-0125526 A1号及び国際公開第02/089597号）、及び２００４年６月９日出願の米国特許出願第10/476,230号（米国特許出願公開第2004-0254353 A1号）、（現在は米国特許第7,687,087号）に記載のような方法によって、油糧種子ミールから得ることができる。この手順は、塩水溶液を使用してキャノーラ油糧種子ミールを抽出するステップと、得られるタンパク質水溶液を油糧種子ミール残渣から分離するステップと、選択膜技術を使用することによってイオン強度を実質的に一定に保ちながら水溶液のタンパク質濃度を少なくとも約２００ｇ／Ｌまで増加させるステップと、得られる濃縮タンパク質溶液を冷水中で希釈してタンパク質ミセルを形成させるステップと、タンパク質ミセルを沈降させて（settle）、アモルファス状、粘着性、ゼラチン状、グルテン様のタンパク質ミセル塊（ｐｒｏｔｅｉｎ  ｍｉｃｅｌｌａｒ  ｍａｓｓ（ＰＭＭ））を形成させるステップと、タンパク質ミセル塊を上澄みから回収するステップとを含み、ＰＭＭのタンパク質含量が少なくとも約１００ｗｔ％（Ｎ×６．２５）である、多段階プロセスを伴う。本明細書で使用するタンパク質含量は乾燥重量に基づいて決定される。回収されるＰＭＭは乾燥させてもよい。
【０００４】
この方法の一実施形態において、ＰＭＭ沈降ステップからの上澄みを、上澄みからキャノーラタンパク質単離物を回収するために処理する。この手順は、最初に限外ろ過膜を使用して上澄みを濃縮し、濃縮物を乾燥させることによって行ってもよい。得られるキャノーラタンパク質単離物のタンパク質含量は少なくとも約９０ｗｔ％、好ましくは少なくとも約１００ｗｔ％（Ｎ×６．２５）である。
【０００５】
米国特許出願第10/137,391号及び第13/476,230号に記載の手順は、本質的にはバッチ法である。本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、２００２年１１月１９日出願の米国特許出願第10/298,678号（米国特許出願公開第2004-0039174 A1号及び国際公開第03/043439号）（現在は放棄されている）、２００８年８月２６日出願の米国特許出願第12/230,199号（現在は米国特許第7,704,534号）、２００５年３月５日出願の米国特許出願第10/496,071号（米国特許出願公開第2003-0015910 A1）（現在は放棄されている）、及び２００８年８月２７日出願の米国特許出願第12/230,303号（現在は米国特許第7,625,588号）において、キャノーラタンパク質単離物を作るための連続法が記載されている。それらによれば、キャノーラ油糧種子ミールを連続的に塩水溶液と混合し、混合物はパイプを通って運ばれ、その間にタンパク質をキャノーラ油糧種子ミールから抽出してタンパク質水溶液を形成させ、イオン強度を実質的に一定に保ちながら、タンパク質水溶液を連続的に選択膜操作を通して運んでタンパク質水溶液のタンパク質含量を少なくとも約５０ｇ／Ｌまで増加させ、得られる濃縮タンパク質溶液を連続的に冷水と混合してタンパク質ミセルを形成させ、タンパク質ミセルを連続的に沈降させ、一方で上澄みは所望の量のＰＭＭが沈降容器中に蓄積するまで連続的にあふれさせる。ＰＭＭを沈降容器から回収し、乾燥させてもよい。ＰＭＭのタンパク質含量は少なくとも約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）、好ましくは少なくとも約１００ｗｔ％である。あふれた上澄みは、上記のように、そこからキャノーラタンパク質単離物を回収するために処理してもよい。
【０００６】
キャノーラ種子は約１０から約３０ｗｔ％のタンパク質を含有することが知られており、いくつかの異なるタンパク質成分が特定されている。これらのタンパク質としては、クルシフェリンとして知られる１２Ｓグロブリン、７Ｓタンパク質、及びナピン（ｎａｐｉｎ）として知られる２Ｓ貯蔵タンパク質が挙げられる。本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、２００３年４月１５日出願の同時係属米国特許出願第10/413,371号（米国特許出願公開第2004-0034200 A1号及び国際公開第03/088760号）（現在は米国特許第7,662,922号）、２００５年４月２９日出願の米国特許出願第10/510,766号（米国特許出願公開第2005-0249828 A1号）（現在は放棄されている）、及び２００９年１１月１３日出願の米国特許出願第12/618,432号（２０１０年３月１１日公開の米国特許公開第2010-0063255号）（現在は放棄されている）に記載されるように、上記の手順は、濃縮タンパク質水溶液を希釈してＰＭＭを形成させることと、上澄みを処理してさらなるタンパク質を回収することとを含み、異なるタンパク質プロファイルの単離物の回収につながる。
【０００７】
この点に関して、ＰＭＭに由来するキャノーラタンパク質単離物は、約６０から約９８ｗｔ％の７Ｓタンパク質、約１から約１５ｗｔ％の１２Ｓタンパク質、及び０から約２５ｗｔ％の２Ｓタンパク質のタンパク質成分組成を有する。上澄みに由来するキャノーラタンパク質単離物は、約６０から約９５ｗｔ％の２Ｓタンパク質、約５から約４０ｗｔ％の７Ｓタンパク質、及び０から約５ｗｔ％の１２Ｓタンパク質のタンパク質成分組成を有する。このように、ＰＭＭに由来するキャノーラタンパク質単離物は主に（predominantly）７Ｓタンパク質であり、上澄みに由来するキャノーラタンパク質単離物は主に２Ｓタンパク質である。上記の米国特許出願第10/413,371号に記載されるように、２Ｓタンパク質の分子質量は約１４，０００ダルトンであり、７Ｓタンパク質の分子質量は約１４５，０００ダルトンであり、１２Ｓタンパク質の分子質量は約２９０，０００ダルトンである。
【０００８】
本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、２０１１年６月１４日発行の米国特許第7,959,968号、及び２０１１年７月１９日発行の米国特許第7,981,450号において、主に２Ｓキャノーラタンパク質から成り、改善された溶解特性を有し、キャノーラタンパク質ミセルの形成及び沈殿（precipitation）からの上澄みよりも２Ｓキャノーラタンパク質の割合が多く７Ｓキャノーラタンパク質の割合が少ない、新規キャノーラタンパク質単離物が記載されている。この方法は、場合により濃縮後に、ＰＭＭ形成からの上澄みを加熱して、７Ｓタンパク質を沈殿させることと、その後沈殿した７Ｓタンパク質を除去することと、熱処理した溶液を乾燥させることとを含む。
【０００９】
本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、２０１２年３月２７日発行の米国特許第8,142,822号、及び２０１１年４月１５日出願の米国特許出願第12/737,085号（２０１１年８月１８日公開の米国特許公開第2011/0200720号）において、主に２Ｓキャノーラタンパク質から成り、キャノーラタンパク質ミセルの形成及び沈殿からの上澄みよりも７Ｓキャノーラタンパク質の割合が少ない、キャノーラタンパク質単離物の調製の別の手順が記載されている。この方法は、場合により濃縮後に、７Ｓキャノーラタンパク質を上澄みから等電沈殿（ｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃａｌｌｙ  ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｎｇ）させることと、続いて沈殿した７Ｓキャノーラタンパク質の除去後に乾燥させることとを含む。
【００１０】
本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、２００９年８月１８日出願の米国特許出願第12/542,922号（２０１０年２月１８日公開の米国特許公開第2010/0040763号）（「Ｃ２００Ｃａ」）（現在は２０１３年１月１日発行の米国特許第8,343,566号）、及び２０１０年４月２１日出願の第12/662,594号（２０１０年１１月１０日公開の米国特許公開第2010/0291285号）（「Ｃ２００ＣａＣ」）において、主に２Ｓキャノーラタンパク質から成るキャノーラタンパク質製品を調製するための別の手順が記載されており、この手順はそのような熱処理を含まず、さらには低ｐＨの水中で完全に可溶性、透明、及び耐熱性であるだけでなく一般にフィチン酸がより少ない製品をもたらす。
【００１１】
後者の米国特許出願に記載される手順は：
約５ｍＳから約３０ｍＳ、好ましくは約８から約１０ｍＳの導電率をもたらすように、キャノーラタンパク質ミセル塊の沈殿からの上澄みへカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを添加して、フィチン酸カルシウムの沈殿を形成させることと、
得られる溶液から、沈殿したフィチン酸カルシウムを除去して清澄（clear）溶液を得ることと、
場合により、塩酸の添加などにより、清澄溶液のｐＨを約２．０から約４．０、好ましくは約２．９から約３．２に調整することと、
場合によりｐＨ調整された清澄溶液を、少なくとも約５０ｇ／Ｌ、好ましくは約５０から約５００ｇ／Ｌ、より好ましくは約１００から約２５０ｇ／Ｌのタンパク質含量まで濃縮して、清澄濃縮キャノーラタンパク質溶液を得ることと、
場合により、多量のｐＨ３の水などによって清澄濃縮キャノーラタンパク質溶液をダイアフィルトレーション（ｄｉａｆｉｌｔｅｒｉｎｇ）することと、
場合により、粒状活性炭処理などの着色物質（colour）除去ステップを行うことと、
濃縮タンパク質溶液を乾燥させてキャノーラタンパク質製品を得ることと
を含む。
【００１２】
上記の米国特許出願第12/542,922号に記載のように、キャノーラタンパク質製品は好ましくはタンパク質含量が少なくとも約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．、より好ましくは少なくとも約１００ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．であるキャノーラタンパク質単離物であるが、キャノーラタンパク質製品は上記の米国特許出願第12/662,594号に記載のように約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５ｄ．ｂ．）から９０ｗｔ％未満（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．のより低い純度を有していてもよい。
【００１３】
上澄みはカルシウム塩の添加前に中間濃度まで部分的に濃縮されてもよい。生成する沈殿を除去し、得られる溶液を場合により上記のように酸性化し、最終濃度までさらに濃縮し、次いで場合によりダイアフィルトレーションし乾燥させる。
【００１４】
あるいは、上澄みを最初に最終濃度まで濃縮してもよく、カルシウム塩を濃縮した上澄みへ添加し、得られる沈殿を除去し、溶液を場合により酸性化し、次いで場合によりダイアフィルトレーションし乾燥させる。
【００１５】
上記の手順において、沈殿の除去を省略するという選択肢があり、これによって製品中のフィチン酸塩含量が高くなる。そのような手順では、カルシウム塩を上澄み、部分的に濃縮した上澄み、又は完全に濃縮した上澄みへ添加し、沈殿を除去しない。酸性化により沈殿は再可溶化される。
【００１６】
酸性化を省略し、自然のままのｐＨで溶液の処理を行うというさらなる選択肢がある。この選択肢では、カルシウム塩を上澄み、部分濃縮した上澄み、又は濃縮した上澄みへ添加して沈殿を形成させ、これを除去する。次いで得られる溶液を酸性化ステップを行わずに上記のように処理する。
【００１７】
カルシウム塩の添加前に上澄みを部分濃縮し、沈殿の除去後に完全に濃縮する場合、上澄みを最初に約５０ｇ／Ｌ以下のタンパク質濃度まで濃縮し、沈殿の除去後に、次いで少なくとも約５０ｇ／Ｌ、好ましくは約５０から約５００ｇ／Ｌ、より好ましくは約１００から約２５０ｇ／Ｌのタンパク質濃度まで濃縮する。
【００１８】
上記の方法の別の変形形態では、カルシウム塩を２段階で添加してもよく、少量のカルシウムを最初に上澄みへ添加して約１ｍＳから約３．５ｍＳ、好ましくは約１ｍＳから約２ｍＳの導電率をもたらすが、これは沈殿を形成させるのに不十分である。
【００１９】
得られる溶液を上記の条件下で酸性化し部分濃縮する。カルシウム塩の残りを部分濃縮した溶液へ添加して約４ｍＳから約３０ｍＳ、好ましくは約４から約１０ｍＳの導電率をもたらし、沈殿の形成をもたらす。次いで沈殿を除去する。得られる清澄溶液を上記の条件下でその最終濃度まで濃縮し、次いでダイアフィルトレーションし乾燥させてもよい。
【００２０】
発明の概要
タンパク質含量が少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．、好ましくは少なくとも約９０ｗｔ％、より好ましくは少なくとも約１００ｗｔ％であり、２Ｓタンパク質を主に含み、ＰＭＭ沈降ステップからの上澄みに由来する、これらの新規キャノーラタンパク質製品は、乳、大豆、又は他の原料に由来する従来のタンパク性原材料の少なくとも部分的な代用品として、乳製品類似物冷凍デザートミックス又は乳製品原材料及び植物原材料のブレンドであるミックスにおいて効果的に使用できることが、今や見出された。そのような冷凍デザートミックスは、優れた風味特性を有し、そのため冷凍デザート製品の調製において冷凍させてもよく、その製品もまた優れた風味特性を有する。そのような冷凍デザート製品としては、限定はされないが、すくい取り可能な（scoopable）冷凍デザート、ソフト（soft serve）冷凍デザート、及びスティック上に提供される又はされない成型又は押出し製品などの冷凍ノベルティ製品（frozen novelty products）が挙げられる。そのような冷凍デザート製品は、シロップ、果物、ナッツ、及び／又は他の粒子、又は冷凍ノベルティ製品の場合のコーティングなどの、任意の種類の含有物を、冷凍デザートミックスと組み合わせて含有してもよい。
【００２１】
非常におおまかに言えば、冷凍乳製品デザートミックス、乳製品類似物冷凍デザートミックス、及び植物／乳製品ブレンドである冷凍デザートミックスはすべて、典型的には水、タンパク質、脂肪、香味料（flavourings）、甘味料（sweetner）、及び他の固形分を、安定化剤（stabilizer）及び乳化剤と共に含む。これらの成分の割合は冷凍デザート製品の所望の組成に応じて様々である。乳製品類似物又は植物／乳製品ブレンド冷凍デザートミックスから調製できる乳製品類似物又は植物／乳製品ブレンド冷凍デザート製品の範囲は、冷凍乳製品デザートミックスから調製できる冷凍乳製品デザート製品の範囲と同等であると考えてよい。
【００２２】
様々な冷凍乳製品デザートにおいて提案されるミックスの組成は、http://www.uoguelph.ca/foodscience/dairy-science-and-technology/dairy-products/ice-cream/ice-cream-formulations/suggested-mixes（H.Douglas Goff教授、Dairy Science and Technology Education Series、ゲルフ大学、カナダ）で見つけることができる。いくつかの様々な種類の冷凍乳製品デザートミックスの組成の違いを説明するために、この参照文献からのサンプルとなる組成を表１から６で下記に示す。
【００２３】
【表１】
2015512618.tif 000002
【００２４】
【表２】
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【００２５】
【表３】
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【００２６】
【表４】
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【００２７】
【表５】
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【００２８】
【表６】
2015512618.tif 000007
【００２９】
上記のように、乳製品類似物又は植物／乳製品ブレンド冷凍デザートミックス中の成分の割合は、冷凍乳製品デザートミックス中の成分の割合と同様に様々であってよい。冷凍乳製品デザートミックスは脂肪及びタンパク質／固形分の乳製品原料を利用する。乳製品類似物冷凍デザートミックスは完全に植物ベースであるが、一方植物／乳製品ブレンドは植物及び乳製品の原材料の組み合わせを利用する。
【００３０】
乳製品類似物又は植物／乳製品ブレンド冷凍デザートミックス配合物において使用される原材料の典型的な種類は以下に記載される。記載されない他の種類の原材料もそのような冷凍デザートミックス配合物において使用してもよい。
【００３１】
冷凍デザートミックスに使用される脂肪原料は、任意の好都合な食品グレードの乳製品若しくは植物に由来する脂肪原料又は脂肪原料ブレンドであってよい。適切な脂肪原料としては、限定はされないが、乳、クリーム、バターオイル、豆乳、大豆油、ココナッツ油、及びパーム油が挙げられる。ある種の原材料は多様な成分を配合物へ与え得ることを特筆するべきである。例えば、配合物中に乳又は豆乳を含有すると、脂肪、タンパク質、他の固形分、及び水が与えられる。冷凍デザートミックス中の脂肪のレベルは、約０から約３０ｗｔ％、好ましくは約０から約１８ｗｔ％の範囲であってよい。
【００３２】
冷凍デザートミックスに使用されるタンパク質原料は、任意の好都合な食品グレードの乳製品若しくは植物に由来するタンパク質原料又はタンパク質原料ブレンドであってよい。適切なタンパク質原料としては、限定はされないが、クリーム、乳、脱脂粉乳、乳清タンパク質濃縮物、乳清タンパク質単離物、大豆タンパク質濃縮物、及び大豆タンパク質単離物が挙げられる。上記のように、ある種の原材料はタンパク質を含めた多様な成分を配合物へ与え得る。冷凍デザートミックス中のタンパク質レベルは、約０．１から約１８ｗｔ％、好ましくは約０．１から約６ｗｔ％の範囲であってよい。
【００３３】
冷凍デザートミックス中で使用される甘味料（一種もしくは複数種）の選択及びレベルは、冷凍デザート製品の甘さ、カロリー値、及びテクスチャーなどの要素に影響を与えるだろう。様々な甘味料を冷凍デザートミックスに利用することができ、限定はされないが、スクロース、コーンスターチ由来原材料、糖アルコール、スクラロース、及びアセスルファムカリウムが挙げられる。甘味料のブレンドが、最終製品における所望の品質を得るためにしばしば使用される。冷凍デザートミックス中に添加される甘味料全体のレベルは、約０から約４５ｗｔ％、好ましくは約０から約３５ｗｔ％の範囲であってよい。
【００３４】
冷凍デザートミックス中で使用される安定化剤としては、限定はされないが、ローカストビーンガム、グアーガム、カラギーナン、カルボキシメチルセルロース、及びゼラチンを挙げることができる。冷凍デザートミックス中の安定化剤のレベルは、約０％から約３％、好ましくは約０％から約１％であってよい。
【００３５】
冷凍デザートミックス中で使用される乳化剤としては、限定はされないが、卵黄、モノグリセリド、ジグリセリド、及びポリソルベート８０を挙げることができる。冷凍デザートミックス中の乳化剤のレベルは、約０％から約４％、好ましくは約０％から約２％の範囲であってよい。
【００３６】
本発明において、上記のキャノーラタンパク質製品を乳製品類似物又は植物／乳製品ブレンド冷凍デザートミックスに組み込んで、少なくとも一部の必要なタンパク質及び固形分を供給する。
【００３７】
発明の一般的説明
ここで使用されるキャノーラタンパク質製品を提供する方法の最初のステップは、キャノーラ油糧種子又はキャノーラ油糧種子ミールからのタンパク性材料を可溶化させることを含む。キャノーラ種子又はミールから回収されるタンパク性材料は、キャノーラ種子中に天然に生じるタンパク質であってもよく、あるいはタンパク性材料は遺伝子操作により改変された、ただし天然タンパク質の特有の疎水性及び極性を有するタンパク質であってもよい。キャノーラミールは、様々なレベルの非変性タンパク質を含むキャノーラ油糧種子からキャノーラ油を除去することにより得られる任意のキャノーラミールであってよく、例えば高温ヘキサン抽出又は低温油押出（extrusion）法により得られる。キャノーラ種子をタンパク質原料として使用する場合、キャノーラ種子の粉砕塊（ｇｒｏｕｎｄ  ｍａｓｓ）を提供するために、それらを最初に粉砕しなければならない。次いでタンパク性材料を、粉砕したキャノーラ油糧種子から可溶化させる（solubilize）ことができる。あるいは、高せん断ポンプなどの任意の好都合な器具を使用して種子を湿式粉砕して、種子を粉砕すると同時にタンパク質を可溶化させてもよい。キャノーラ種子からのキャノーラタンパク質単離物の回収は、より具体的には、本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、２００９年８月２８日出願の同時係属米国出願第12/542,931号（２０１０年２月１８日公開の米国特許公開第2010-0041871号）、及び２０１１年３月２２日出願の第12/787,465号（２０１１年７月２８日公開の米国特許公開第2011-018149号）に記載されている。
【００３８】
タンパク質の可溶化は、食品グレードの塩溶液を使用することにより最も効率的に行われるが、なぜなら塩の存在が、粉砕した油糧種子又は油糧種子ミールからの可溶性タンパク質の除去を促進するからである。塩は通常は塩化ナトリウムであるが、塩化カリウムなどの他の塩を使用してもよい。相当量のタンパク質の可溶化を行うことができるように、塩溶液のイオン強度は少なくとも約０．０５、好ましくは少なくとも約０．１０である。塩溶液のイオン強度が増すと、タンパク質の可溶化の度合いは最初は最大値に達するまで増大する。その後のイオン強度の増加は可溶化される全タンパク質を増加させない。最大のタンパク質の可溶化を引き起こす食品グレードの塩溶液のイオン強度は、関与する塩に依存し、またタンパク質原料が油糧種子ミールである場合は選択される油糧種子ミールに依存する。
【００３９】
イオン強度の増加と共にタンパク質の沈殿に必要な希釈の度合いが増すことを考慮して、通常は約０．８未満のイオン強度値、より好ましくは約０．１から約０．１５の値を利用するのが好ましい。
【００４０】
バッチ法では、タンパク質の塩による可溶化は、約１℃から約７５℃、好ましくは約１５℃から約６５℃、より好ましくは約２０℃から約３５℃の温度で行われ、通常は約１から約６０分である可溶化時間を短縮するために、好ましくは撹拌を伴う。全体としての高い製品収率を実現するために、実行可能な限り十分に多くのタンパク質を油糧種子又は油糧種子ミールから抽出するように可溶化を行うことが好ましい。
【００４１】
連続法では、キャノーラ油糧種子又はミールからのタンパク質の抽出は、キャノーラ油糧種子又はミールからのタンパク質の連続抽出の実施に合う任意の方法で行われる。一実施形態において、粉砕したキャノーラ油糧種子又はキャノーラ油糧種子ミールを連続的に食品グレードの塩溶液と混合し、その混合物が、本明細書に記載のパラメーターに従って所望の抽出を行うのに十分な滞留時間のための、長さを有するパイプ又は導管を通して且つ流量で、運ばれる。そのような連続的手順では、好ましくは、実行可能な限り多くのタンパク質をキャノーラ油糧種子又はミールから抽出するように可溶化を行うために、約１分までから約６０分までの時間で塩による可溶化ステップが行われる。連続的手順における可溶化は、約１℃と約７５℃の間、好ましくは約１５℃と約６５℃の間、より好ましくは約２０℃と約３５℃の間の温度で行われる。
【００４２】
食品グレードの塩水溶液のｐＨは一般に約５から約６．８、好ましくは約５．３から約６．２である。塩溶液のｐＨは、必要に応じて任意の好都合な酸、通常は塩酸、又はアルカリ、通常は水酸化ナトリウムを使用することにより、抽出ステップで使用するために約５から約６．８の範囲内の任意の所望の値に調整してもよい。
【００４３】
可溶化ステップの間、食品グレードの塩溶液中の粉砕された油糧種子又は油糧種子ミールの濃度は非常に様々であってよい。粉砕油糧種子の典型的な濃度値は約５から約２５％ｗ／ｖである。油糧種子ミールの典型的な濃度値は約５から約１５％ｗ／ｖである。
【００４４】
塩水溶液によるタンパク質抽出ステップは、キャノーラ油糧種子中に存在しまたキャノーラミール中に存在する場合がある脂肪を可溶化するというさらなる効果を有し、そのため水性相中に脂肪が存在することにつながる。
【００４５】
抽出ステップから得られるタンパク質溶液は一般に、タンパク質濃度が約３から約４０ｇ／Ｌ、好ましくは約１０から約３０ｇＬである。
【００４６】
塩水溶液は抗酸化剤を含有してもよい。抗酸化剤は、亜硫酸ナトリウム又はアスコルビン酸などの任意の好都合な抗酸化剤であってよい。採用される抗酸化剤の量は溶液の約０．０１から約１ｗｔ％までで様々であってよく、好ましくは約０．０５ｗｔ％である。抗酸化剤はタンパク質溶液中のフェノール類の酸化を阻害する働きをする。
【００４７】
抽出ステップから得られる水性相は次いで、デカンター型遠心分離機を使用しその後ディスク遠心分離及び／又はろ過を行って残留する種子材料又はミールを除去することなどによる、任意の好都合な方法で、残留するキャノーラ種子材料又はミールから分離してもよい。分離ステップは典型的には抽出ステップと同じ温度で行われるが、約１℃から約７５℃、好ましくは約１５℃から約６５℃、より好ましくは約２０℃から約３５℃の範囲内の任意の温度で行ってもよい。分離した残留する種子材料又はミールは、廃棄するために乾燥させるか又は残留するタンパク質を回収するためにさらに処理してもよい。分離した残留する種子材料又はミールを新しい塩溶液で再抽出することにより、残りのタンパク質を回収することができ、清澄化の際に生じるタンパク質溶液を、下記で説明されるさらなる処理のために最初のタンパク質溶液と合わせることができる。あるいは、分離した残留する種子材料又はミールは、等電沈殿法によって又はタンパク質残渣を回収するための任意の他の好都合な手順によって処理してもよい。
【００４８】
キャノーラタンパク質水溶液は、任意の適切な食品グレードの非シリコーン系消泡剤などの消泡剤で処理して、さらなる処理の際に形成される泡の体積を減少させてもよい。使用される消泡剤の量は一般に約０．０００３％ｗ／ｖを超える。あるいは、その記載の量の消泡剤を抽出ステップで添加してもよい。
【００４９】
キャノーラタンパク質水溶液中に存在する脂肪は、本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、米国特許第5,844,086号及び第6,005,076号に記載のような手順によって除去してもよい。
【００５０】
そこで記載されているように、キャノーラタンパク質水溶液を約３℃から約７℃の温度まで冷却して、デカントなどの任意の好都合な手順によって除去するために脂肪を水性相から分離させてもよい。あるいは、クリーム分離機を使用したより高温での遠心分離など、任意の他の好都合な手順により、脂肪を除去してもよい。脂肪を除去したら、キャノーラタンパク質水溶液をろ過によりさらに清澄化してもよい。キャノーラタンパク質水溶液から回収されるキャノーラ油は、キャノーラ油の商業用途での使用のために処理してもよい。
【００５１】
あるいは、キャノーラタンパク質水溶液は、３相デカンターを使用するなどの任意の好都合な手順によって、油相及び残留するキャノーラ種子材料又はミールから同時に分離してもよい。次いでキャノーラタンパク質水溶液をろ過によりさらに清澄化してもよい。
【００５２】
キャノーラタンパク質水溶液は、粉末活性炭又は粒状活性炭などの吸着剤で処理して着色物質及び／又は臭気化合物を除去してもよい。そのような吸着剤による処理は、任意の好都合な条件下で、一般には分離したタンパク質水溶液の周囲温度で行ってよい。粉末活性炭については、約０．０２５％から約５％ｗ／ｖ、好ましくは約０．０５％から約２％ｗ／ｖの量が使用される。吸着剤はろ過などの任意の好都合な手段によってキャノーラタンパク質溶液から除去してもよい。
【００５３】
粉砕したキャノーラ油糧種子又は油糧種子ミールの塩水溶液による抽出の代替として、そのような抽出を水のみを使用して行ってもよいが、水のみの利用は塩水溶液よりも少量のタンパク質しか粉砕油糧種子又は油糧種子ミールから抽出しない傾向がある。そのような代替法を使用する場合、下記で説明される濃縮ステップの間溶液中のタンパク質を維持するために、残留する粉砕種子材料又は油糧種子ミールから分離した後、及び脂肪除去ステップを利用する場合はその後に、上記で論じた濃度の塩をタンパク質溶液へ添加してもよい。
【００５４】
別の代替法は、約６．８を超える、一般には約９．９までの比較的高ｐＨ値の食品グレードの塩溶液により、粉砕油糧種子又は油糧種子ミールを抽出する。食品グレードの塩溶液のｐＨは、水酸化ナトリウム水溶液などの任意の好都合な食品グレードのアルカリを使用することにより、所望のアルカリ値に調整してもよい。あるいは、約ｐＨ５未満、一般には約ｐＨ３までの（down to about pH 3）比較的低ｐＨの塩溶液により、粉砕油糧種子又は油糧種子ミールを抽出してもよい。そのような代替法を使用する場合、抽出ステップから得られる水性相は次いで残留するキャノーラ種子材料又はミールから分離され、必要ならば、上記のように脱脂される。
【００５５】
高ｐＨ又は低ｐＨの抽出ステップから得られるタンパク質水溶液は、次いで下記に論じるようなさらなる処理の前に、上記で論じたように約５から約６．８、好ましくは約５．３から約６．２の範囲にｐＨ調整される。そのようなｐＨ調整は、必要に応じて塩酸などの任意の好都合な酸、又は水酸化ナトリウムなどのアルカリを用いて行ってもよい。
【００５６】
キャノーラタンパク質水溶液は、そのイオン強度を実質的に一定に保ちながら、そのタンパク質濃度を増加させるために濃縮される。そのような濃縮は一般に、タンパク質濃度が少なくとも約５０ｇ／Ｌ、好ましくは少なくとも約２００ｇ／Ｌ、より好ましくは少なくとも約２５０ｇ／Ｌである濃縮タンパク質溶液をもたらすように行われる。
【００５７】
濃縮ステップは、バッチ法又は連続法に合った任意の好都合な方法で、限外ろ過又はダイアフィルトレーションなどの任意の好都合な選択膜技術を使用することなどにより、様々な膜材料及び構成を考慮して、約３，０００から約１００，０００ダルトン、好ましくは約５，０００から約１０，０００ダルトンなどの適切な分子量カットオフを有し、連続法に関してはタンパク質水溶液が膜を通過すると所望の度合いの濃縮が可能となるような寸法を有する、中空糸膜又はスパイラル型膜（ｓｐｉｒａｌ−ｗｏｕｎｄ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）などの膜を使用して、行ってもよい。
【００５８】
良く知られているように、限外ろ過及び同様の選択膜技術では、低分子量種が膜を通過するのは可能であるが、一方で高分子量種が通過するのは妨げられる。低分子量種としては、食品グレードの塩のイオン種だけでなく、炭水化物、色素、及び抗栄養因子などの原料物質から抽出される低分子量物質、並びに任意の低分子量形態のタンパク質も挙げられる。膜の分子量カットオフは通常、様々な膜材料及び構成を考慮して、不純物が通過するのを可能にしながら溶液中に相当な割合のタンパク質が確実に保持されるように選択される。
【００５９】
次いで、濃縮タンパク質溶液には、抽出溶液と同じモル濃度及びｐＨの塩水溶液を使用してダイアフィルトレーションステップを施してもよい。そのようなダイアフィルトレーションは、約１から約２０倍容量のダイアフィルトレーション溶液、好ましくは約５から約１０倍容量のダイアフィルトレーション溶液を使用して行ってもよい。ダイアフィルトレーション操作において、透過液と共に膜を通過することによって、さらなる量の不純物がキャノーラタンパク質水溶液から除去される。有意なさらなる量の不純物又は目に見える着色物質が透過液中に存在しなくなるまで、ダイアフィルトレーション操作を行ってもよい。そのようなダイアフィルトレーションは、濃縮ステップと同じ膜を使用して行ってもよい。しかし、必要に応じて、ダイアフィルトレーションステップは、様々な膜材料及び構成を考慮して、約３，０００から約１００，０００ダルトン、好ましくは約５，０００から約１０，０００ダルトンの範囲の分子量カットオフを有する膜など、異なる分子量カットオフの別個の膜を使用して行ってもよい。
【００６０】
あるいは、ダイアフィルトレーションステップは、濃縮前のキャノーラタンパク質水溶液又はタンパク質濃度が約５０ｇ／Ｌ以下である部分的に濃縮されたキャノーラタンパク質水溶液に適用してもよい。ダイアフィルトレーションはまた、濃縮プロセスの間の複数の時点で適用してもよい。ダイアフィルトレーションを濃縮前又は部分濃縮溶液に適用する場合、得られるダイアフィルトレーション済み溶液を次いでさらに濃縮する。
【００６１】
ダイアフィルトレーションステップの少なくとも一部の間、抗酸化剤がダイアフィルトレーション媒体中に存在していてもよい。抗酸化剤は、亜硫酸ナトリウム又はアスコルビン酸などの任意の好都合な抗酸化剤であってもよい。ダイアフィルトレーション媒体中で使用される抗酸化剤の量は、使用される物質に依存し、約０．０１から約１ｗｔ％で様々であってもよく、好ましくは約０．０５ｗｔ％である。抗酸化剤は、キャノーラタンパク質溶液中に存在するフェノール類の酸化を阻害する働きをする。
【００６２】
濃縮ステップ及びダイアフィルトレーションステップは、任意の好都合な温度、一般には約２℃から約６５℃、好ましくは約２０から約３５℃で、所望の度合いの濃縮及びダイアフィルトレーションを行うための時間をかけて行ってもよい。使用される温度及び他の条件は、ある程度、濃縮を行うのに使用される膜装置及び溶液の所望のタンパク質濃度に依存する。
【００６３】
濃縮され場合によりダイアフィルトレーションされたタンパク質溶液には、必要に応じて米国特許第5,844,086号及び第6,005,076号に記載のようなさらなる脱脂操作を施してもよい。あるいは、濃縮され場合によりダイアフィルトレーションされたタンパク質溶液は、任意の他の好都合な手順によってさらに脱脂されてもよい。
【００６４】
濃縮され場合によりダイアフィルトレーションされたタンパク質溶液は、粉末活性炭又は粒状活性炭などの吸着剤で処理して着色物質及び／又は臭気化合物を除去してもよい。着色物質吸着剤として使用できる別の材料はポリビニルピロリドンである。
【００６５】
そのような吸着剤処理は、任意の好都合な条件下、一般にはキャノーラタンパク質溶液の周囲温度で行ってもよい。粉末活性炭については、約０．０２５％から約５％ｗ／ｖ、好ましくは約０．０５％から約２％ｗ／ｖの量を使用してもよい。ポリビニルピロリドンを着色物質吸着剤として使用する場合、約０．５％から約５％ｗ／ｖ、好ましくは約２％から約３％ｗ／ｖの量を使用してもよい。吸着剤は、ろ過などによる任意の好都合な手段によってキャノーラタンパク質溶液から除去してもよい。
【００６６】
場合による着色物質除去ステップから得られる、濃縮され場合によりダイアフィルトレーションされたタンパク質溶液には、低温殺菌を施して微生物負荷を低減させてもよい。そのような低温殺菌は、任意の所望の低温殺菌条件下で行ってもよい。一般に、濃縮され場合によりダイアフィルトレーションされたタンパク質溶液を、約５５℃から約７０℃、好ましくは約６０℃から約６５℃の温度まで、約３０秒から約６０分、好ましくは約１０から約１５分、加熱する。低温殺菌した濃縮タンパク質溶液を次いで下記のようなさらなる処理のために、好ましくは約２５℃から約４０℃の温度まで冷却してもよい。
【００６７】
濃縮ステップ及び場合によるダイアフィルトレーションステップにおいて使用される温度に応じて、及び低温殺菌ステップが行われるかどうかによって、濃縮タンパク質溶液を少なくとも約２０℃、及び約６０℃まで、好ましくは約２５℃から約４０℃の温度まで温めて、その後の希釈ステップ及びミセル形成の機能を促進するように、濃縮タンパク質溶液の粘度を低下させてもよい。濃縮タンパク質溶液は、それを超えると冷水による希釈に際してミセル形成が生じないような温度を超えて加熱されるべきではない。
【００６８】
濃縮ステップ、及び場合によるダイアフィルトレーションステップ、場合による脱脂ステップ、場合による着色物質除去ステップ、及び場合による低温殺菌ステップから得られる濃縮タンパク質溶液は次いで、望ましい希釈の度合いを実現するのに必要な体積を有する冷水と濃縮タンパク質溶液とを混合することによってミセル形成が行われるように希釈される。ミセル経路によって得ようとするキャノーラタンパク質の割合及び上澄みからの割合に応じて、濃縮したタンパク質溶液の希釈の度合いは様々であってよい。希釈レベルが低いほど、一般には、より多くの割合のキャノーラタンパク質が水性相中にとどまる。
【００６９】
ミセル経路によって最大の割合のタンパク質を得ることが望まれる場合、濃縮タンパク質溶液は約５倍から約２５倍、好ましくは約１０倍から約２０倍で希釈される。
【００７０】
濃縮タンパク質溶液と混合される冷水は温度が約１５℃未満、一般には約１℃から約１５℃、好ましくは約１０℃未満であるが、なぜならタンパク質ミセル塊の形態であるタンパク質単離物の改善された収率は、使用する希釈係数（dilution factors）ではこれらのより低い温度によって得られるからである。
【００７１】
バッチ操作では、上記で論じられるように、所望の体積を有する冷水の静止体（static body）へ濃縮タンパク質溶液のバッチを加える。濃縮タンパク質溶液の希釈及び結果として起こるイオン強度の低下は、高度に会合したタンパク質分子の雲様のマス（cloud-like mass）がミセル状の別々のタンパク質液滴の形態で形成されることを引き起こす。バッチ法では、タンパク質ミセルを冷水体中で沈降させて、凝集し、合体した、緻密な、アモルファスの粘着性のグルテン様タンパク質ミセル塊（ＰＭＭ）を形成させる。沈降は遠心分離などによって促進されてもよい。そのような誘発される沈降は、タンパク質ミセル塊の液体含量を減少させ、それにより水分含量が一般に全ミセル塊の約７０重量％〜約９５重量％から一般に約５０重量％〜約８０重量％の値まで減少する。このようにミセル塊の水分含量が減少すると、ミセル塊の吸蔵される塩の含量、ひいては乾燥単離物の塩の含量も減少する。
【００７２】
あるいは、希釈操作は、Ｔ字管の１つの入口に濃縮タンパク質溶液を連続的に通し、その間に希釈水をＴ字管の他の入口に供給し、管内で混合させることによって、連続的に行ってもよい。希釈水は、濃縮タンパク質溶液の所望の度合いの希釈を実現するのに十分な流量でＴ字管内に供給される。
【００７３】
管内での濃縮タンパク質溶液及び希釈水の混合は、タンパク質ミセルの形成を開始させ、混合物は連続的にＴ字管の出口から沈降容器へ供給され、沈降容器からは満杯になると上澄みがあふれ出ることが可能である。混合物は好ましくは液体本体（body of liquid）内の乱れ（turbulence）を最小限にする方法で沈降容器中の液体本体へ供給される。
【００７４】
連続法では、タンパク質ミセルが沈降容器中で沈降して凝集し、合体した、緻密な、アモルファスの粘着性のグルテン様タンパク質ミセル塊（ＰＭＭ）を形成することを可能にし、その手順は所望の量のＰＭＭが沈降容器の底に蓄積するまで続けられ、そうすると蓄積したＰＭＭは沈降容器から取り出される。セジメンテーション（sedimentation）による沈降の代わりに、ＰＭＭを遠心分離により連続的に分離してもよい。
【００７５】
キャノーラタンパク質単離物を回収するための連続法を利用することによって、バッチ法と比較して、不純物混入の機会が少なく、より高い製品品質につながり、この方法はより小型な装置で行うことができる。
【００７６】
沈降した塊から残りの水性相をデカンテーションすること又は遠心分離などによって、沈降したＰＭＭを残りの水性相又は上澄みから分離する。ＰＭＭは湿った形態で使用してもよいし又は噴霧乾燥若しくは凍結乾燥などの任意の好都合な技術によって乾燥させて乾燥した形態としてもよい。乾燥ＰＭＭは約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超える、好ましくは少なくとも約１００ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．の高タンパク質含量を有し、実質的に非変性である（示差走査熱量測定法により測定される）。
【００７７】
本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、上記の米国特許第7,662,922号に記載されるように、ＰＭＭは主に７Ｓキャノーラタンパク質から成り、約６０から９８ｗｔ％の７Ｓタンパク質、約１から約１５ｗｔ％の１２Ｓタンパク質、及び０から約２５ｗｔ％の２Ｓタンパク質のタンパク質成分組成を有する。
【００７８】
ＰＭＭ形成及び沈降ステップからの上澄みは、希釈ステップで沈殿しなかった相当量のキャノーラタンパク質を含有し、そこからキャノーラタンパク質製品を回収するために処理される。
【００７９】
米国特許第7,687,087号に記載されるように、希釈ステップからの上澄みは、ＰＭＭの除去に続いて、濃縮してそのタンパク質濃度を増加させてもよい。そのような濃縮は、溶液中に相当な割合のキャノーラタンパク質を保持しながら、塩、炭水化物、色素、及び他の原料物質から抽出される低分子量物質を含めた低分子量種が膜を通過するのを可能にする適切な分子量カットオフを有する膜を使用して、限外ろ過などの任意の好都合な選択膜技術を使用して行われる。様々な膜材料及び構成を考慮して、約３，０００から約１００，０００ダルトン、好ましくは約５，０００から約１０，０００ダルトンの分子量カットオフを有する限外ろ過膜を使用してもよい。このように上澄みの濃縮は、タンパク質を回収するため乾燥させる必要がある液体の体積、ひいては乾燥に必要なエネルギーも減少させる。上澄みは一般に少なくとも約５０ｇ／Ｌ、好ましくは約１００から４００ｇ／Ｌ、より好ましくは約２００から約３００ｇ／Ｌのタンパク質含量まで濃縮される。
【００８０】
濃縮した上澄みには次いで水、食塩水（saline）、又は酸性化した水を使用したダイアフィルトレーションステップを施してもよい。そのようなダイアフィルトレーションは、約１から約２０倍容量のダイアフィルトレーション溶液、好ましくは約５から約１０倍容量のダイアフィルトレーション溶液を使用して行ってもよい。ダイアフィルトレーション操作では、透過液と共に膜を通過することによって、さらなる量の不純物が水性の上澄みから除去される。有意なさらなる量の不純物又は目に見える色が透過液中に存在しなくなるまで、ダイアフィルトレーション操作を行ってもよい。そのようなダイアフィルトレーションは、濃縮ステップと同じ膜を使用して行ってもよい。しかし、必要に応じて、ダイアフィルトレーションは、様々な膜材料及び構成を考慮して、約３，０００から約１００，０００ダルトン、好ましくは約５，０００から約１０，０００ダルトンの範囲の分子量カットオフを有する膜などの、別の膜を使用して行ってもよい。
【００８１】
あるいは、ダイアフィルトレーションステップは、濃縮前の上澄み又はタンパク質濃度が約５０ｇ／Ｌ以下である部分的に濃縮した上澄みに適用してもよい。ダイアフィルトレーションはまた、濃縮プロセスの間の複数の時点で適用してもよい。ダイアフィルトレーションを濃縮前又は部分濃縮した上澄みに適用する場合、得られるダイアフィルトレーションされた溶液を次いでさらに濃縮する。
【００８２】
濃縮ステップ及びダイアフィルトレーションステップは、ここで、その後回収されるキャノーラタンパク質製品が約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．未満、例えば少なくとも約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．などのタンパク質を含有するように行ってもよい。キャノーラタンパク質水溶液を部分的に濃縮する及び／又は部分的にダイアフィルトレーションすることにより、部分的にのみ不純物を除去することが可能である。このタンパク質溶液を次いで乾燥させて、より純度のレベルが低いキャノーラタンパク質製品を得てもよい。
【００８３】
ダイアフィルトレーションステップの少なくとも一部の間、抗酸化剤がダイアフィルトレーション媒体中に存在していてもよい。抗酸化剤は、亜硫酸ナトリウム又はアスコルビン酸などの任意の好都合な抗酸化剤であってよい。ダイアフィルトレーション媒体中で使用される抗酸化剤の量は、使用される物質に依存し、約０．０１から約１ｗｔ％で様々であってもよく、好ましくは約０．０５ｗｔ％である。抗酸化剤は、キャノーラタンパク質溶液中に存在するフェノール類の酸化を阻害する働きをする。
【００８４】
濃縮され場合によりダイアフィルトレーションされたタンパク質溶液に、上記の着色物質除去操作の代替としての着色物質除去操作を施してもよい。ここで、粒状活性炭（ＧＡＣ）だけでなく粉末活性炭を使用してもよい。着色物質吸着剤として使用できる別の物質はポリビニルピロリドンである。
【００８５】
着色物質吸着剤による処理ステップは、任意の好都合な条件の下で、一般にはキャノーラタンパク質溶液の周囲温度で行ってもよい。粉末活性炭については、約０．０２５％から約５％ｗ／ｖ、好ましくは約０．０５％から約２％ｗ／ｖの量を使用してもよい。ポリビニルピロリドンを着色物質吸着剤として使用する場合、約０．５％から約５％ｗ／ｖ、好ましくは約２％から約３％ｗ／ｖの量を使用してもよい。着色物質吸着剤は、ろ過などによる任意の好都合な手段によってキャノーラタンパク質溶液から除去してもよい。
【００８６】
濃縮され場合によりダイアフィルトレーションされた上澄みは、キャノーラタンパク質製品を得るために、噴霧乾燥若しくは凍結乾燥などの任意の好都合な技術によって乾燥させて乾燥した形態としてもよい。そのようなキャノーラタンパク質製品は約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超えるタンパク質含量を有し、好ましくはキャノーラタンパク質製品は、約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超える、より好ましくは約１００ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂを超えるタンパク質含量を有する単離物であり、実質的に非変性である（示差走査熱量測定法により測定される）。
【００８７】
上記の米国特許第7,662,922号に記載されるように、上澄みに由来するキャノーラタンパク質単離物は主に２Ｓキャノーラタンパク質から成り、約６０から約９５ｗｔ％の２Ｓタンパク質、約５から約４０ｗｔ％の７Ｓタンパク質、及び０から約５ｗｔ％の１２Ｓタンパク質のタンパク質成分組成を有する。
【００８８】
あるいは、ＰＭＭの分離からの上澄みは、キャノーラタンパク質製品を上澄みから回収するための代替法によって処理してもよい。例えば本出願の譲受人に譲渡されその開示が参照により本明細書に組み込まれている、２００８年６月２０日出願の同時係属米国特許出願第12/213,500号（２００８年１２月４日公開の米国特許公開第2008-0299282号）に記載されるように、濃縮した上澄みは上澄みから７Ｓタンパク質を沈殿させるように熱処理し、その後キャノーラタンパク質製品を熱処理した溶液から回収することができる。
【００８９】
そのような熱処理は、濃縮した上澄み中に存在する７Ｓタンパク質の割合を減少させる、好ましくは７Ｓタンパク質の割合をかなりの程度で減少させるのに十分な温度及び時間プロファイルを使用して行ってもよい。一般に、濃縮した上澄みの７Ｓタンパク質含量は、熱処理により少なくとも約５０ｗｔ％、好ましくは少なくとも約７５ｗｔ％減少する。一般に、熱処理は、約７０℃から約１２０℃、好ましくは約７５℃から約１０５℃の温度で、約１秒から約３０分、好ましくは約５から約１５分かけて行ってよい。沈殿した７Ｓタンパク質を、遠心分離又はろ過又はその組み合わせなどの任意の好都合な方法で除去してもよい。
【００９０】
熱処理された、濃縮された上澄みは、沈殿した７Ｓタンパク質を除去した後、乾燥前に乾燥単離物の意図する用途に対応したｐＨまで、一般には約２から約５、好ましくは約２．５から約４のｐＨまで酸性化させてもよい。
【００９１】
熱処理された、濃縮された上澄みは、沈殿した７Ｓタンパク質を除去した後、キャノーラタンパク質製品を得るために、噴霧乾燥又は凍結乾燥などの任意の好都合な技術によって乾燥させて乾燥した形態としてもよい。そのようなキャノーラタンパク質製品は約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂを超えるタンパク質含量を有し、好ましくは製品は約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超える、より好ましくは約１００ｗｔ％を超える（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物であり、実質的に非変性である（示差走査熱量測定法により測定される）。
【００９２】
そのような新規キャノーラタンパク質製品は、高い割合の２Ｓタンパク質、好ましくはキャノーラタンパク質の少なくとも９０ｗｔ％、より好ましくは少なくとも約９５ｗｔ％を製品中に含有する。ある割合の７Ｓタンパク質も製品中に存在する。
【００９３】
あるいは、上記のような７Ｓタンパク質を沈殿させるための熱処理ステップは、上記の濃縮及びダイアフィルトレーションステップ前の上澄みに対して行ってもよい。堆積した７Ｓタンパク質の除去に続いて、上澄みを一般に約５０から約４００ｇ／Ｌ、好ましくは約２００から約３００ｇ／Ｌのタンパク質濃度まで濃縮し、場合によりダイアフィルトレーションを行い、場合により着色物質除去操作を行い、乾燥させてキャノーラタンパク質製品を得てもよい。
【００９４】
さらなる代替法として、上澄みを最初に約５０ｇ／Ｌ以下のタンパク質濃度まで部分的に濃縮してもよい。部分濃縮した上澄みを次いで上記のように熱処理して７Ｓタンパク質を沈殿させる。沈殿した７Ｓタンパク質の除去に続いて、上澄みを一般に約５０から約４００ｇ／Ｌ、好ましくは約２００から約３００ｇ／Ｌの濃度までさらに濃縮し、場合によりダイアフィルトレーションを行い、場合により着色物質除去操作を行い、乾燥させてキャノーラタンパク質製品を得てもよい。
【００９５】
沈殿した７Ｓタンパク質を、熱処理された上澄み又は熱処理された部分濃縮上澄みから、遠心分離又はろ過又はその組み合わせなどの任意の好都合な手段によって除去してもよい。
【００９６】
沈殿した７Ｓタンパク質の除去に続いて、熱処理された上澄み又は熱処理された部分濃縮上澄みは、上記で論じたように、濃縮若しくはダイアフィルトレーションの間又はその後の任意の時点で酸性化してもよい。
【００９７】
米国特許出願第12/213,500号にも記載されるように、ミセル形成及び沈殿からの上澄みを代替法で処理してキャノーラタンパク質製品を得てもよい。上記で論じたように、上澄みを最初にさらに濃縮又は部分濃縮してもよい。
【００９８】
塩（通常は塩化ナトリウムであるが、塩化カリウムなどの他の塩を使用してもよい）を最初に上澄み、部分濃縮した上澄み、又は濃縮した上澄みへ加えて、導電率が少なくとも約０．３ｍＳ、好ましくは約１０から約２０ｍＳである塩添加溶液を得る。
【００９９】
塩添加した上澄みのｐＨを、７Ｓタンパク質の等電沈殿を生じさせる値、一般には約２．０から約４．０、好ましくは約３．０から約３．５のｐＨに調整する。７Ｓタンパク質の等電沈殿は、広い温度範囲にわたって、一般には約５℃から約７０℃、好ましくは約１０℃から約４０℃で行ってもよい。沈殿した７Ｓタンパク質を、等電沈殿した上澄みから、遠心分離又はろ過又はその組み合わせなどの任意の好都合な手段により除去する。
【０１００】
等電沈殿した上澄みは、まだ濃縮されていない場合、次いで上記で論じたように濃縮し、ダイアフィルトレーションを行って塩を除去し、その後乾燥させて本発明のキャノーラタンパク質製品を得てもよい。濃縮されダイアフィルトレーションされた上澄みをろ過して残留する微粒子を除去し、場合により着色物質除去ステップを施し、上記で論じたように、その後本発明のキャノーラタンパク質製品を得るために噴霧乾燥又は凍結乾燥などの任意の好都合な技術により乾燥させて乾燥した形態としてもよい。そのようなキャノーラタンパク質製品は、約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超えるタンパク質含量を有し、好ましくは製品は約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超える、より好ましくは約１００ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超えるタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物である。
【０１０１】
別の代替法では、カルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを、最初に下記方法で濃縮又は部分濃縮されていてもよいＰＭＭの分離からの上澄みへ加えて、約５ｍＳから約３０ｍＳ、好ましくは８ｍＳから約１０ｍＳの導電率を実現してもよい。上澄み、部分濃縮した上澄み、又は濃縮した上澄みへ加えられる塩化カルシウムは、その濃水溶液などの任意の所望の形態であってよい。
【０１０２】
塩化カルシウムを加えることは、グロブリン及びアルブミン両方のタンパク質画分を溶液中に保持しながら、上澄み、部分濃縮した上澄み、又は濃縮した上澄みからフィチン酸カルシウムの形態でフィチン酸を堆積させる効果を有する。堆積したフィチン酸塩を、上澄み、部分濃縮した上澄み、又は濃縮した上澄みから遠心分離及び／又はろ過などによって回収して、清澄溶液を残す。必要に応じて、堆積したフィチン酸塩は除去されなくてもよく、その場合はさらなる処理によってフィチン酸塩含量がより高い製品が得られる。
【０１０３】
次いで溶液のｐＨを約２．０から約４．０、好ましくは約２．９から３．２の値に調整する。ｐＨ調整は、塩酸の添加などによって任意の好都合な方法で行ってよい。必要に応じて、酸性化ステップはここに記載される様々な選択肢から省略してもよい。
【０１０４】
ｐＨ調整した清澄溶液は、まだ濃縮されていない場合、そのタンパク質濃度を増加させるために濃縮してもよい。そのような濃縮は、溶液中に相当な割合のキャノーラタンパク質を保持しながら、塩、炭水化物、色素、及び他のタンパク質原料物質から抽出される低分子量物質を含めた低分子量種が膜を通過するのを可能にする適切な分子量カットオフを有する膜を使用して、限外ろ過などの任意の好都合な選択膜技術を使用して行われる。様々な膜材料及び構成を考慮して、約３，０００から１００，０００ダルトン、好ましくは約５，０００から約１０，０００ダルトンの分子量カットオフを有する限外ろ過膜を使用してもよい。このように溶液の濃縮は、タンパク質を回収するために乾燥させる必要がある液体の体積も減少させる。溶液は一般に、乾燥前に、少なくとも約５０ｇ／Ｌ、好ましくは約５０から約５００ｇ／Ｌ、より好ましくは約１００から約２５０ｇ／Ｌのタンパク質濃度まで濃縮してもよい。そのような濃縮操作は、上記のようにバッチ方式で又は連続操作で行ってもよい。
【０１０５】
カルシウム塩を添加する前に上澄みを部分濃縮する場合、上澄みを最初に約５０ｇ／Ｌ以下のタンパク質濃度まで濃縮し、沈殿物を除去した後、次いで少なくとも約５０ｇ／Ｌ、好ましくは約５０から約５００ｇ／Ｌ、より好ましくは約１００から約２５０ｇ／Ｌの濃度まで濃縮してもよい。
【０１０６】
別の代替法では、カルシウム塩を２段階で加えてもよい。この手順では、少量のカルシウムを上澄みへ加えて、沈殿を形成させるのに不十分である、約１ｍＳから約３．５ｍＳ、好ましくは約１ｍＳから約２ｍＳの導電率をもたらす。
【０１０７】
得られる溶液を上記の条件下で酸性化し部分濃縮する。残りのカルシウム塩を、部分的に濃縮した溶液へ加えて約４ｍＳから約３０ｍＳ、好ましくは約４から約１０ｍＳの導電率をもたらして、沈殿の形成をもたらす。次いで沈殿を除去する。得られる清澄溶液を次いで上記の条件下で濃縮する。
【０１０８】
濃縮されたカルシウム処理された上澄みに、次いで水を用いたダイアフィルトレーションステップを施してもよい。水は、その天然のｐＨ、ダイアフィルトレーションされるタンパク質溶液と同じｐＨ、又はそれらの間の任意のｐＨであってもよい。そのようなダイアフィルトレーションは、約１から約２０倍容量のダイアフィルトレーション溶液、好ましくは約５から約１０倍容量のダイアフィルトレーション溶液を使用して行ってもよい。ダイアフィルトレーション操作において、透過液と共に膜を通過することによってさらなる量の不純物が水性の上澄みから除去される。有意なさらなる量の不純物又は目に見える着色物質が透過液中に存在しなくなるまで、ダイアフィルトレーション操作を行ってもよい。そのようなダイアフィルトレーションは、濃縮ステップと同じ膜を使用して行ってもよい。しかし、必要に応じて、ダイアフィルトレーションは、様々な膜材料及び構成を考慮して、約３，０００から約１００，０００ダルトン、好ましくは約５，０００から約１０，０００ダルトンの範囲の分子量カットオフを有する膜などの別の膜を使用して行ってもよい。
【０１０９】
ダイアフィルトレーションステップの少なくとも一部の間、抗酸化剤がダイアフィルトレーション媒体中に存在していてもよい。抗酸化剤は、亜硫酸ナトリウム又はアスコルビン酸などの任意の好都合な抗酸化剤であってもよい。ダイアフィルトレーション媒体中で使用される抗酸化剤の量は、使用される物質に依存し、約０．０１から約１ｗｔ％で様々であってもよく、好ましくは約０．０５ｗｔ％である。抗酸化剤は、濃縮キャノーラタンパク質溶液中に存在するフェノール類の酸化を阻害する働きをする。
【０１１０】
濃縮され場合によりダイアフィルトレーションされたタンパク質溶液に、着色物質除去操作を施してもよい。本明細書において粒状活性炭（ＧＡＣ）だけでなく粉末活性炭を使用してもよい。着色物質吸着剤として使用できる別の物質はポリビニルピロリドンである。
【０１１１】
着色物質吸着剤による処理ステップは、任意の好都合な条件下で、一般にはキャノーラタンパク質溶液の周囲温度で行ってもよい。粉末活性炭については、約０．０２５％から約５％ｗ／ｖ、好ましくは約０．０５％から約２％ｗ／ｖの量を使用してもよい。ポリビニルピロリドンを色素吸着剤として使用する場合、約０．５％から約５％ｗ／ｖ、好ましくは約２％から約３％ｗ／ｖの量を使用してもよい。着色物質吸着剤は、ろ過などの任意の好都合な手段によってキャノーラタンパク質溶液から除去してもよい。
【０１１２】
濃縮され、場合によりダイアフィルトレーションされ、場合により吸着剤処理されたタンパク質溶液を、噴霧乾燥又は凍結乾燥などの任意の好都合な技術によって乾燥させて乾燥した形態とする。乾燥キャノーラタンパク質製品は約６０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超えるタンパク質含量を有し、好ましくは製品は、約９０ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．を超える、より好ましくは約１００ｗｔ％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂを超えるタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物であり、実質的に非変性である（示差走査熱量測定法により測定される）。キャノーラタンパク質製品は、一般にフィチン酸含量が低く、一般には約１．５重量％未満である。
【０１１３】
ここで製造されるキャノーラタンパク質製品は、アルブミン及びグロブリン画分の両方を含有し、酸性水溶液環境中で可溶性である。
【０１１４】
ＰＭＭ沈降ステップの上澄みに由来し、上記の手順のいずれかによって調製されるキャノーラタンパク質製品は、上記のように冷凍デザート製品を調製するのに使用される、乳製品類似物又は植物／乳製品冷凍デザートミックスにおいて使用するのに適している。
【０１１５】
例
例１：
この例は、冷凍デザートの調製に使用されるキャノーラタンパク質単離物の製造を示す。
【０１１６】
１００ｋｇのキャノーラミールを周囲温度で１０００Ｌの０．１５Ｍ  ＮａＣｌ溶液へ加え３０分間撹拌して、タンパク質水溶液を得た。キャノーラミール残渣を除去し、得られるタンパク質溶液を遠心分離により部分的に清澄化してタンパク質含量が１．４９重量％である７３５．８Ｌの部分清澄化タンパク質溶液を得た。部分清澄化タンパク質溶液をろ過してタンパク質溶液をさらに清澄化し、タンパク質含量が１．３７重量％である６８５Ｌの溶液が得られた。
【０１１７】
６８５Ｌのろ過したタンパク質抽出溶液を、１００，０００ダルトンの分子量カットオフを有するポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）膜で３５Ｌまで濃縮した。得られる濃縮タンパク質溶液のタンパク質含量は１７．８８重量％であった。濃縮タンパク質溶液を次いで１５０Ｌの０．１５Ｍ  ＮａＣｌ溶液でダイアフィルトレーションした。得られる濃縮及びダイアフィルトレーション済み溶液のタンパク質含量は１９．３８重量％であった。濃縮及びダイアフィルトレーション済みタンパク質溶液を次いで６３℃で１０分間低温殺菌して、タンパク質含量が１９．１４重量％である３５．８ｋｇの低温殺菌された、濃縮及びダイアフィルトレーション済みタンパク質溶液を得た。
【０１１８】
３５．６ｋｇの低温殺菌された、濃縮及びダイアフィルトレーション済みの３０℃のタンパク質溶液を、温度が４．１℃である３５６Ｌの冷ＲＯ水中で希釈した。白色の雲状物質がただちに生成した。沈殿したタンパク質を、上澄みと呼ばれる残りの水性相から遠心分離により分離した。沈殿した粘性、粘着性の塊（ＰＭＭ）を、ろ過したタンパク質溶液の３０．８ｗｔ％の収率で回収した。乾燥させたＰＭＭ由来のタンパク質は、タンパク質含量が９９．０３％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．であることが分かった。生成物にはＳＤ０７８−Ｊ１５−０７Ａ  Ｃ３００の記号表示を与えた。
【０１１９】
タンパク質含量が１．０５ｗｔ％である、上澄みのアリコート（aliquot）７５Ｌを、１０，０００ダルトンの分子量カットオフを有するポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）膜を使用して限外ろ過により４．８Ｌまで体積減少させた。濃縮したタンパク質溶液を次いで同じ膜で２０Ｌの逆浸透精製（ＲＯ）水によりダイアフィルトレーションした。ダイアフィルトレーションした濃縮済みタンパク質溶液は１５．２２重量％のタンパク質を含有していた。上澄みから回収された追加のタンパク質とあわせて、ろ過したタンパク質溶液の全タンパク質回収率は３８．６ｗｔ％であった。ダイアフィルトレーションされた濃縮済みタンパク質溶液を次いで噴霧乾燥させ、ＳＤ０７８−Ｊ１５−０７Ａ  Ｃ２００−０１の記号表示を与えた。Ｃ２００−０１のタンパク質含量は９６．１１％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．であった。
【０１２０】
例２：
この例は官能評価に使用される冷凍デザートの製造を示す。冷凍デザートは、例１に記載のように調製されたＳＤ０７６−Ｊ１５−０７Ａ  Ｃ２００−０１を使用して製造された。
【０１２１】
１４．４ｇのタンパク質を供給するのに十分なタンパク質粉末を量り分け、およそ５５０ｍｌの精製飲用水を加えた。タンパク質が完全に可溶化するまで試料を撹拌した。食品グレードのＮａＯＨ溶液を使用して溶液のｐＨを５．３７から６．８６へ調整した。ｐＨ調整した溶液へ７．２ｇのキャノーラ油（Ｃａｎａｄａ  Ｓａｆｅｗａｙ  Ｌｉｍｉｔｅｄ、Ｃａｌｇａｒｙ、ＡＢ）を加え、さらなる水により試料の体積を６００ｍｌとした。次いで試料を、微細エマルサースクリーン（ｅｍｕｌｓｏｒ  ｓｃｒｅｅｎ）を備えたＳｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ４ＲＴミキサーにより５，０００ｒｐｍで３分間処理した。
【０１２２】
キャノーラタンパク質溶液（５０７．１６ｇ）の試料を量り分け、次いで純粋なバニラエッセンス（１．９９ｇ）（Ｃｌｕｂ  Ｈｏｕｓｅ、ＭｃＣｏｒｍｉｃｋ  Ｃａｎａｄａ、Ｌｏｎｄｏｎ、ＯＮ）及びグラニュー糖（８９．８５ｇ）（Ｒｏｇｅｒｓ、Ｌａｎｔｉｃ  Ｉｎｃ．、Ｍｏｎｔｒｅａｌ、ＱＣ）を加え、糖が完全に溶解するまで混合物を撹拌した。ミックスのｐＨは６．８７であった。温度が９℃に到達するまでミックスを冷やした。冷やしたミックスをＣｕｉｓｉｎａｒｔ  ＩＣＥ−５０ＢＣＣアイスクリームメーカーのボウルへ移し、アイスクリームメーカーを４５分間稼働させて半固体の冷凍デザートを得た。製品をプラスチックのタブ型容器へ移し、官能評価が行われるまで約−２０℃の冷凍庫内で１時間保存した。
【０１２３】
例３：
この例は、例２で調製された冷凍デザートの官能評価を示す。
【０１２４】
冷凍デザートの試料を小さなカップへ移し、９人のパネリストを含む非公式の審査員団に盲検的に提示した。審査員団は冷凍デザートの風味に関してコメントをするように求められた。コメントに含まれたものは、「風味が非常に素晴らしい」、「良いバニラの味だ」、「豆っぽさ（ｂｅａｎｉｎｅｓｓ）は感じられない」、「素晴らしい風味だ」、「良い風味だ」、及び「後味がない」であった。
【０１２５】
例４：
この例は、冷凍デザートの調製に使用されるキャノーラタンパク質単離物の製造を示す。
【０１２６】
１７２ｋｇのキャノーラミールを周囲温度で１７２０Ｌの０．１５Ｍ  ＮａＣｌ溶液へ加え３０分間撹拌して、タンパク質水溶液を得た。キャノーラミール残渣を除去し、得られたタンパク質溶液を遠心分離により部分的に清澄化してタンパク質含量が１．３５重量％である１３５８Ｌの部分清澄化タンパク質溶液を得た。部分清澄化タンパク質溶液をろ過してタンパク質溶液をさらに清澄化し、タンパク質含量が１．１８重量％である１３０１Ｌの溶液が得られた。
【０１２７】
１３０１Ｌのろ過したタンパク質抽出溶液を、５，０００ダルトンの分子量カットオフを有するポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）膜で６７．２ｋｇまで濃縮した。得られる濃縮タンパク質溶液のタンパク質含量は２２．５０重量％であった。濃縮タンパク質溶液を次いで６３℃で１０分間低温殺菌して、タンパク質含量が２１．７５重量％である６６．８ｋｇの低温殺菌された濃縮済みタンパク質溶液を得た。
【０１２８】
６６．７ｋｇの２７℃の濃縮溶液を、温度が５℃である１０００．５Ｌの冷ＲＯ水中で希釈した。白色の雲状物質がただちに生成した。沈殿したタンパク質を上澄みと呼ばれる残りの水性相から遠心分離により分離した。沈殿した粘性、粘着性の塊（ＰＭＭ）を、ろ過したタンパク質溶液の４２．５ｗｔ％の収率で回収した。乾燥させたＰＭＭ由来のタンパク質は、タンパク質含量が１０１．１９％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．であることが分かった。生成物にはＳＤ０７６−Ｇ０３−０７Ａ  Ｃ３００の記号表示を与えた。
【０１２９】
タンパク質含量が０．７６重量％である１０５０Ｌの上澄みを、８５℃に１０分間加熱し、次いで遠心分離して沈殿したタンパク質を除去した。タンパク質含量が０．６４ｗｔ％である、１０４０Ｌのこの加熱処理及び清澄化済みタンパク質溶液を、１０，０００ダルトンの分子量カットオフを有するポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）膜を使用して限外ろ過により２９．１Ｌまで体積減少させた。濃縮タンパク質溶液は１６．６５重量％のタンパク質を含有していた。上澄みから回収される追加のタンパク質とあわせて、ろ過したタンパク質溶液の全タンパク質回収率は７４．１ｗｔ％であった。濃縮タンパク質溶液を次いで噴霧乾燥させ、ＳＤ０７６−Ｇ０３−０７Ａ  Ｃ２００ＨＳの記号表示を与えた。Ｃ２００ＨＳのタンパク質含量は９２．５６％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．であった。
【０１３０】
例５：
この例は官能評価に使用される冷凍デザートの製造を示す。冷凍デザートは、例４に記載のように調製されたＳＤ０７６−Ｇ０３−０７Ａ  Ｃ２００ＨＳを使用して製造された。
【０１３１】
１４．４ｇのタンパク質を供給するのに十分なタンパク質粉末を量り分け、およそ５５０ｍｌの精製飲用水を加えた。タンパク質が完全に可溶化するまで試料を撹拌した。食品グレードのＮａＯＨ溶液を使用して溶液のｐＨを５．６２から６．９０へ調整した。ｐＨ調整した溶液へ７．２ｇのキャノーラ油（Ｃａｎａｄａ  Ｓａｆｅｗａｙ  Ｌｉｍｉｔｅｄ、Ｃａｌｇａｒｙ、ＡＢ）を加え、さらなる水により試料の体積を６００ｍｌとした。次いで試料を、微細エマルサースクリーンを備えたＳｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ４ＲＴミキサーにより５，０００ｒｐｍで３分間処理した。
【０１３２】
キャノーラタンパク質溶液（５０７．１６ｇ）の試料を量り分け、次いで純粋なバニラエッセンス（１．９９ｇ）（Ｃｌｕｂ  Ｈｏｕｓｅ、ＭｃＣｏｒｍｉｃｋ  Ｃａｎａｄａ、Ｌｏｎｄｏｎ、ＯＮ）及びグラニュー糖（８９．８５ｇ）（Ｒｏｇｅｒｓ、Ｌａｎｔｉｃ  Ｉｎｃ．、Ｍｏｎｔｒｅａｌ、ＱＣ）を加え、糖が完全に溶解するまで混合物を撹拌した。ミックスのｐＨは６．８８であった。温度が９℃に到達するまでミックスを冷やした。冷やしたミックスをＣｕｉｓｉｎａｒｔ  ＩＣＥ−５０ＢＣＣアイスクリームメーカーのボウルへ移し、アイスクリームメーカーを４５分間稼働させて半固体の冷凍デザートを得た。製品をプラスチックのタブ型容器へ移し、官能評価が行われるまで約−２０℃の冷凍庫内で１時間保存した。
【０１３３】
例６：
この例は、例５で調製された冷凍デザートの官能評価を示す。
【０１３４】
冷凍デザートの試料を小さなカップへ移し、９人のパネリストを含む非公式の審査員団に盲検的に提示した。審査員団は冷凍デザートの風味に関してコメントをするように求められた。コメントに含まれたものは、「とても甘い」、「心地よい風味だ」、「豆のような（ｂｅａｎｙ）味はしない」、「非常に素晴らしい、甘いバニラの風味だ」、「甘い」、「良いバニラの味と共にわずかな甘い後味」「えぐみも渋みもない」、及び「非常に良い」であった。
【０１３５】
例７：
この例は、冷凍デザートの調製に使用されるキャノーラタンパク質単離物の製造を示す。
【０１３６】
１４３ｋｇのキャノーラミールを周囲温度で１５００Ｌの０．１５Ｍ  ＮａＣｌ溶液へ加え３０分間撹拌して、タンパク質水溶液を得た。キャノーラミール残渣を除去し、得られたタンパク質溶液を遠心分離により部分的に清澄化してタンパク質含量が１．３６重量％である１１４８．７Ｌの部分清澄化タンパク質溶液を得た。部分清澄化タンパク質溶液をろ過してタンパク質溶液をさらに清澄化し、タンパク質含量が１．２８重量％である１１２２Ｌの溶液が得られた。
【０１３７】
１１２２Ｌのろ過したタンパク質抽出溶液を、１００，０００ダルトンの分子量カットオフを有するポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）膜で６３．７４ｋｇまで濃縮した。得られた濃縮タンパク質溶液のタンパク質含量は１９．６４重量％であった。
【０１３８】
６３．３４ｋｇの３０℃の濃縮溶液を、温度が２℃である９５０．１Ｌの冷ＲＯ水中で希釈した。白色の雲状物質がただちに生成した。沈殿したタンパク質を上澄みと呼ばれる残りの水性相から遠心分離により分離した。沈殿した粘性、粘着性の塊（ＰＭＭ）を、ろ過したタンパク質溶液の５１．４ｗｔ％の収率で回収した。乾燥させたＰＭＭ由来のタンパク質は、タンパク質含量が９９．５４％（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．であることが分かった。生成物にはＳＤ０９２−Ｄ１４−０９Ａ  Ｃ３０７Ｃの記号表示を与えた。
【０１３９】
塩化カルシウムを添加することにより、９９５Ｌの上澄みを８．１６ｍＳの導電率に調整した。この溶液を次いで遠心分離して沈殿したフィチン酸塩物質を除去し、フィチン酸塩含量が減少した、清澄化したタンパク質溶液が９８０．６Ｌ得られた。フィチン酸塩含量が減少した、清澄化したタンパク質溶液を次いでＨＣｌの添加によりｐＨ３．０６に調整した。タンパク質含量が０．５０ｗｔ％である、９６０Ｌのこの酸性化した、フィチン酸含量が減少した、清澄化したタンパク質溶液を、１０，０００ダルトンの分子量カットオフを有するポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）膜を使用して限外ろ過により３５Ｌまで体積減少させた。濃縮タンパク質溶液を次いで同じ膜で１７０ＬのｐＨ３の逆浸透精製（ＲＯ）水によりダイアフィルトレーションした。ダイアフィルトレーションされた濃縮済みタンパク質溶液は１０．９１重量％のタンパク質を含有していた。上澄みから回収された追加のタンパク質とあわせて、ろ過したタンパク質溶液の全タンパク質回収率は７９．７ｗｔ％であった。３７．２７ｋｇの分量の濃縮物を、５Ｌのベッド体積（ＢＶ）の粒状活性炭に３ＢＶ／ｈｒの速度でｐＨ３で通すことにより、着色物質減少ステップを行った。着色物質を減少させた、タンパク質含量が９．７３重量％である３６．９３ｋｇのＧＡＣ処理済み溶液を、次いで噴霧乾燥させ、ＳＤ０９２−Ｄ１４−０９Ａ  Ｃ２００ＣａＣの記号表示を与えた。Ｃ２００ＣａＣのタンパク質含量は９１．４８（Ｎ×６．２５）ｄ．ｂ．であった。
【０１４０】
例８：
この例は官能評価に使用される冷凍デザートの製造を示す。冷凍デザートは、例７に記載のように調製されたＳＤ０９２−Ｄ１４−０９Ａ  Ｃ２００ＣａＣを使用して製造された。
【０１４１】
１４．４ｇのタンパク質を供給するのに十分なタンパク質粉末を量り分け、およそ５５０ｍｌの精製飲用水を加えた。タンパク質が完全に可溶化するまで試料を撹拌した。食品グレードのＮａＯＨ溶液を使用して溶液のｐＨを３．６０から６．８８へ調整した。ｐＨ調整した溶液へ７．２ｇのキャノーラ油（Ｃａｎａｄａ  Ｓａｆｅｗａｙ  Ｌｉｍｉｔｅｄ、Ｃａｌｇａｒｙ、ＡＢ）を加え、さらなる水により試料の体積を６００ｍｌとした。次いで試料を、微細エマルサースクリーンを備えたＳｉｌｖｅｒｓｏｎ  Ｌ４ＲＴミキサーにより５，０００ｒｐｍで３分間処理した。
【０１４２】
キャノーラタンパク質溶液（５０７．１６ｇ）の試料を量り分け、次いで純粋なバニラエッセンス（１．９９ｇ）（Ｃｌｕｂ  Ｈｏｕｓｅ、ＭｃＣｏｒｍｉｃｋ  Ｃａｎａｄａ、Ｌｏｎｄｏｎ、ＯＮ）及びグラニュー糖（８９．８５ｇ）（Ｒｏｇｅｒｓ、Ｌａｎｔｉｃ  Ｉｎｃ．、Ｍｏｎｔｒｅａｌ、ＱＣ）を加え、糖が完全に溶解するまで混合物を撹拌した。次いで温度が９℃に到達するまでミックスを冷やした。冷やしたミックスをＣｕｉｓｉｎａｒｔ  ＩＣＥ−５０ＢＣＣアイスクリームメーカーのボウルへ移し、アイスクリームメーカーを４５分間稼働させて温度が−４．５℃である半固体の冷凍デザートを得た。製品をプラスチックのタブ型容器へ移し、官能評価が行われるまで約−２０℃の冷凍庫内で１時間保存した。
【０１４３】
例９：
この例は、例８で調製された冷凍デザートの官能評価を示す。
【０１４４】
冷凍デザートの試料を小さなカップへ移し、８人のパネリストを含む非公式の審査員団に盲検的に提示した。審査員団は冷凍デザートの風味に関してコメントをするように求められた。コメントに含まれたものは、「素晴らしい風味、豆っぽさがない」、「素晴らしい天然のバニラの風味、良い甘さ、わずかにはちみつのように感じられる」、「全体として非常に受け入れやすい風味」、及び「全体として素晴らしい風味」であった。
【０１４５】
開示の概要
この開示の概要において、好ましい風味特性を有する冷凍デザート製品の製造に使用される乳製品類似物又は植物／乳製品ブレンド冷凍デザートミックスが、キャノーラタンパク質製品を使用して提供される。本発明の範囲内で改変が可能である。
【国際調査報告】
2015512618.tif 000008
2015512618.tif 000009