(57)【要約】  サブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログを用いて細胞増殖及び分化を刺激するための組成物及び方法が提供される。ある様態においては、本方法は、幹細胞をサブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログと接触させることによって、幹細胞を分化を刺激又は向上させるステップを提供する。別の様態においては、本方法は病気、疾病、又は疾患を治療すべく有効量のサブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログを対象に投与するステップを提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
幹細胞疾患を治療又は寛解させる方法であって、対象に有効量のサブスタンスＰアナログを投与するステップを含み、前記サブスタンスＰアナログが、式（Ｉ）：
Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）  （配列番号１１）、
又はその薬学的に許容可能な塩であり、
Ｘａａ１がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ２がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ３がＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ４がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ５がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、
Ｚ１がＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、
各々のＲが独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、
残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」の各々が独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す、
ことを特徴とする方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法において、
Ｘａａ１がＡｒｇであり、
Ｘａａ２がＰｒｏであり、
Ｘａａ３がＬｙｓであり、
Ｘａａ４がＰｒｏであり、
Ｘａａ５がＧｌｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである、
ことを特徴とする方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法において、
前記残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、
Ｚ１がＨ２Ｎ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法において、前記サブスタンスＰアナログが、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ                          （配列番号１）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ                      （配列番号２）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ                          （配列番号３）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ                  （配列番号４）、
ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ                          （配列番号５）、
ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ  （配列番号６）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）                    （配列番号７）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）            （配列番号８）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）                  （配列番号９）、又は、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）          （配列番号１０）、
であることを特徴とする方法。
【請求項５】
請求項１に記載の方法において、
前記サブスタンスＰアナログがＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、
Ｚ１がＮＨ２であり、
Ｚ２がＣ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする方法。
【請求項６】
請求項１に記載の方法において、前記幹細胞疾患が、無巨核球症、再生不良性貧血、ブラックファン・ダイアモンド貧血、先天性血球減少症、先天性赤血球異形成貧血、先天性角化異常症、ファンコニ貧血、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、赤芽球ろう、急性骨髄線維症、原因不明骨髄様化生、真性多血症、本態性血小板血症、重症型ベータサラセミア、鎌状赤血球症、家族性赤血球貪食リンパ組織球症、血球貪食、ランゲルハンス細胞組織球症（組織球症Ｘ）、慢性肉芽腫症、先天性好中球減少症、毛細血管拡張性運動失調症、先天性造血障害（ｍｙｅｌｏｋａｔｈｅｘｉｓ）、裸リンパ球症候群、白血球粘着不全症、重症複合免疫不全症（ＳＣＩＤ）、分類不能型免疫不全症、裸リンパ球症候群、チェディアック・東症候群、コストマン症候群、オーメン症候群、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠損症、細網異形成症、ウィスコット・アルドリッチ症候群、Ｘ連鎖リンパ増殖性疾患、副腎白質ジストロフィ、フコシド症、ゴーシェ病、ハンター症候群（ＭＰＳ−ＩＩ）、ハーラー症候群（ＭＰＳ−ＩＨ）、クラッベ病、レッシュ・ナイハン症候群、マンノシドーシス、マロトー・ラミー症候群（ＭＰＳ−ＶＩ）、異染性白質ジストロフィ、ムコリピドーシスＩＩ（Ｉ細胞病）、神経セロイドリポフスチン症（バッテン病）、ニーマン・ピック病、サンドホフ病、サンフィリポ症候群（ＭＰＳ−ＩＩＩ）、モルキオ症候群（ＭＰＳ−ＩＶ）、スライ症候群、β−グルクロニダーゼ欠損症（ＭＰＳ−ＶＩＩ）、副腎白質ジストロフィ、シャイエ症候群（ＭＰＳ−ＩＳ）、スライ症候群、ティサックス病、ウォルマン病、ムコ多糖症（ＭＰＳ）、急性混合白血病、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性未分化細胞性白血病、成人Ｔ細胞白血病、成人Ｔ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、若年性慢性骨髄性白血病（ＪＣＭＬ）、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、骨髄／ナチュラルキラー細胞前駆急性白血病、非ホジキンリンパ腫、前リンパ球性白血病、急性骨髄線維症、原因不明骨髄様化生（骨髄線維症）、アミロイドーシス、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、本態性血小板血症、真性多血症、多発性骨髄腫、形質細胞性白血病、ワルデンストローム・マクログロブリン血症、軟骨毛髪形成不全、グランツマン血小板無力症、無巨核球症、先天性血小板減少症、先天性造血性ポルフィリン症（ギュンター病）、ディジョージ症候群、大理石骨病、脳腫瘍、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、乳癌、神経芽細胞腫、腎細胞癌、横紋筋肉腫、小細胞肺癌、精巣癌、胸腺腫（胸腺癌）、慢性活動性エプスタイン・バールウイルス感染症、エヴァンス症候群、多発性硬化症、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、胸腺異形成症、チェディアック・東症候群、慢性肉芽腫症、好中球アクチン欠乏症、細網異形成症、難聴、聴力障害、糖尿病、心疾患、肝疾患、筋ジストロフィ、パーキンソン病、脊髄損傷、又は脳卒中であることを特徴とする方法。
【請求項７】
請求項１に記載の方法において、白血球、リンパ球、好中球、杆状球、単球、顆粒球、赤血球、好酸球、好塩基球、又は血小板が前記対象中で増加することを特徴とする方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法において、前記リンパ球がＴリンパ球又はＢリンパ球であることを特徴とする方法。
【請求項９】
請求項１に記載の方法において、前記サブスタンスＰアナログの投与が、高増殖能性幹及び前駆細胞（ＨＰＰ−ＳＰ細胞）、多分化能幹細胞集団（ＣＦＣ−ＧＥＭＭ集団）、顆粒球マクロファージコロニー形成細胞（ＧＭ−ＣＦＣ）、巨核球コロニー形成細胞（Ｍｋ−ＣＦＣ）、Ｔリンパ球コロニー形成細胞（Ｔ−ＣＦＣ）、Ｂリンパ球コロニー形成細胞（Ｂ−ＣＦＣ）、巨核球コロニー形成細胞（ＣＦＵ−Ｍｋ細胞）、赤芽球バースト形成細胞（ＢＦＵ−Ｅ細胞）、赤芽球コロニー形成細胞（ＣＦＵ−Ｅ細胞）、又は顆粒球／マクロファージコロニー形成細胞（ＣＦＵ−ＧＭ細胞）の分化の増加を生じることを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法において、前記対象がヒトであることを特徴とする方法。
【請求項１１】
細胞と、当該細胞の分化を刺激するのに有効な量のサブスタンスＰアナログとを含む組成物であって、前記サブスタンスＰアナログが、式（Ｉ）：
Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）  （配列番号１１）、
又はその薬学的に許容可能な塩であり、
Ｘａａ１がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ２がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ３がＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ４がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ５がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、
Ｚ１がＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、
各々のＲが独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、
残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」が独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す、
ことを特徴とする組成物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の組成物において、
Ｘａａ１がＡｒｇであり、
Ｘａａ２がＰｒｏであり、
Ｘａａ３がＬｙｓであり、
Ｘａａ４がＰｒｏであり、
Ｘａａ５がＧｌｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである、
ことを特徴とする組成物。
【請求項１３】
請求項１１に記載の組成物において、
前記残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、
Ｚ１がＨ２Ｎ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする組成物。
【請求項１４】
請求項１１に記載の組成物において、前記サブスタンスＰアナログが、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ                          （配列番号１）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ                      （配列番号２）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ                          （配列番号３）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ                  （配列番号４）、
ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ                          （配列番号５）、
ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ  （配列番号６）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）                    （配列番号７）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）            （配列番号８）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）                  （配列番号９）、又は、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）          （配列番号１０）、
であることを特徴とする組成物。
【請求項１５】
請求項１１に記載の組成物において、
前記サブスタンスＰアナログがＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、
Ｚ１がＮＨ２であり、
Ｚ２がＣ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする組成物。
【請求項１６】
請求項１１に記載の組成物において、前記細胞が未分化細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項１７】
請求項１１に記載の組成物において、前記細胞が幹細胞、前駆細胞、又は部分的に分化された細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項１８】
請求項１７に記載の組成物において、前記幹細胞が造血幹細胞、リンパ球幹細胞、又は骨髄造血幹細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項１９】
請求項１１に記載の組成物において、前記分化がＣＤ１５を発現する細胞の増加を生じることを特徴とする組成物。
【請求項２０】
請求項１１に記載の組成物において、前記サブスタンスＰアナログが非経口投与されることを特徴とする組成物。
【請求項２１】
細胞、基質、及びサブスタンスＰアナログを含む、創傷治癒を促進するための組成物であって、前記サブスタンスＰアナログが、式（Ｉ）：
Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２  （Ｉ）  （配列番号１１）、
又はその薬学的に許容可能な塩であり、
Ｘａａ１がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ２がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ３がＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ４がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ５がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、
Ｚ１がＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、
各々のＲが独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、
残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」が独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す、
ことを特徴とする組成物。
【請求項２２】
請求項２１に記載の組成物において、
Ｘａａ１がＡｒｇであり、
Ｘａａ２がＰｒｏであり、
Ｘａａ３がＬｙｓであり、
Ｘａａ４がＰｒｏであり、
Ｘａａ５がＧｌｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである、
ことを特徴とする組成物。
【請求項２３】
請求項２１に記載の組成物において、
前記残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、
Ｚ１がＨ２Ｎ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする組成物。
【請求項２４】
請求項２１に記載の組成物において、前記サブスタンスＰアナログが、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ                          （配列番号１）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ                      （配列番号２）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ                          （配列番号３）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ                  （配列番号４）、
ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ                          （配列番号５）、
ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ  （配列番号６）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）                    （配列番号７）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）            （配列番号８）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）                  （配列番号９）、又は、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）          （配列番号１０）、
であることを特徴とする組成物。
【請求項２５】
請求項２１に記載の組成物において、
前記サブスタンスＰアナログがＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、
Ｚ１がＮＨ２であり、
Ｚ２がＣ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする組成物。
【請求項２６】
請求項２１に記載の組成物において、前記細胞が幹細胞、前駆細胞、及び線維芽細胞からなる群から選択されることを特徴とする組成物。
【請求項２７】
請求項２６に記載の組成物において、前記前駆細胞が血管内の前駆細胞、又は内皮前駆細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項２８】
請求項２１に記載の組成物において、前記細胞が胎盤細胞、又は臍帯血細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項２９】
請求項２１に記載の組成物において、前記基質がコラーゲン、フィブリノーゲン、フィブリン、水素、又は羊膜同種移植片を含むことを特徴とする組成物。
【請求項３０】
請求項２１に記載の組成物において、前記創傷が糖尿病性創傷であることを特徴とする組成物。
【請求項３１】
請求項２１に記載の組成物において、前記創傷が褥瘡性潰瘍であることを特徴とする組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連する出願データ］
２００８年７月２４日に出願されたこの国際特許出願は、２００７年７月２７日出願の米国仮特許出願第６０／９５２，３９４号、２００７年７月３０日出願の米国仮特許出願第６０／９５２，６９１号、２００７年８月２０日出願の米国仮特許出願第６０／９６５，５８０号、２００７年１０月２日出願の米国仮特許出願第６０／９９７，３１４号、２００７年１０月１２日出願の米国仮特許出願第６０／９７９，７６９号、２００７年１０月２６日出願の米国仮特許出願第６０／９８３，０１２号、２００８年１月２９日出願の米国仮特許出願第６１／０２４，３５４号、２００８年３月２４日出願の米国仮特許出願第６１／０３８，８７１号、２００８年３月２６日出願の米国仮特許出願第６１／０３９，６８６号、２００８年３月２７日出願の米国仮特許出願第６１／０３９，８６７号、２００８年３月２７日出願の米国仮特許出願第６１／０３９，８６６号、２００８年３月２７日出願の米国仮特許出願第６１／０３９，８６０号、及び２００８年４月２４日出願の米国仮特許出願第６１／０４７，７０９号の米国特許法第３５条セクション１１９（ｅ）の利益を主張し、本出願と同日付で出願された同時係属中の米国特許出願（別称、代理人整理番号第ＩＲＢ−００４号）、本出願と同日付で出願された同時係属中の国際特許出願（別称、代理人整理番号第１２２４１−０４７−２２８号）、本出願と同日付で出願された同時係属中の国際特許出願（別称、代理人整理番号第１２２４１−０４６−２２８号）、本出願と同日付で出願された同時係属中の国際特許出願（別称、代理人整理番号第１２２４１−０４９−２２８号）と関連づけられ、上述の各々の全体的な内容は引用によって本明細書中に組み込まれる。
【０００２】
本発明は細胞分化の分野に関する。特に、多能性細胞の増殖及び分化刺激、及び多能性細胞の分化のない増殖刺激に関する。
【背景技術】
【０００３】
幹細胞は疾病を治療し、寛解させる途方もない可能性を有している。しかしながら、幹細胞の培養において進歩があるにもかかわらず、障壁が残ったままである。幹細胞培養は増殖するのが比較的遅く、特にサイトカイン及び増殖因子等のアイテム用の培地は高価となる。更には、特定の機能細胞への分化を選択的に促進することは有益であろう。改善が必要とされる。
【０００４】
更には、ヒト骨髄細胞（ＨＢＭＣ）のような幹細胞の可能な療法への組み込みの成功は、ａ）分化のない、数の上での幹細胞の増殖と、ｂ）特定の細胞型又は細胞型の集合への分化と、ｃ）現存の組織への機能的な統合の促進とに依存する。
【０００５】
歴史的に、ＨＢＭＣのような幹細胞は、放射線照射されるが生存細胞であるマウス細胞の支持細胞層で増殖させ、これらの細胞由来の培地で調整されてきた。これらの方法は、マウスの支持細胞及び培地から得られる人畜共通感染症のリスクを増大させ、かつ、再現性及び拡張性がそれらの臨床上の可能性を大きく制限する点において顕著な弱点を有している。更に、ヒトドナーからＨＢＭＣを補充する必要がある。新しいＨＢＭＣの株化細胞はヒト支持細胞層で得られてきたが、この系は再現性の乏しさを来たし、大規模なＨＢＭＣの増殖に対する制限を呈する。改善が必要である。
【発明の概要】
【０００６】
本方法及び組成物は、細胞増殖又は分化の分野に関する。特定の様態においては、本方法及び組成物はインビトロでの細胞増殖又は分化を提供する。特定の様態においては、本方法及び組成物はインビボでの細胞増殖又は分化を提供する。
【０００７】
特定の様態においては、組成物は、細胞の分化又は増殖を向上させ、刺激し、あるいは誘発する本明細書中に記載のような、１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログを有する細胞培地又は細胞培養液を含むことができ、方法はそれに関連するものである。
【０００８】
特定の様態においては、組成物は、必要な場合に対象内で細胞の分化又は増殖を向上させ、刺激し、あるいは誘発できる１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログを有する医薬組成物を具えることができ、方法はそれに関連するものである。
【０００９】
特定の様態においては、組成物は創傷治癒を促進し、向上させ、あるいは誘発するために、１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログと細胞とを有する医薬組成物を含むことができる。好ましい様態においては、創傷治癒組成物は細胞と１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログトを有する三次元の基質を含み、細胞は創傷治癒を促進すべく分化又は増殖するように、誘発又は促進される。
【００１０】
ある態様においては、本方法は、幹細胞疾患を治療する、あるいは寛解させるステップを提供し、対象に有効量のサブスタンスＰアナログを投与するステップを含み、サブスタンスＰアナログは、式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２  （Ｉ）  （配列番号１１）又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００１１】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシン、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は総て−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００１２】
別の様態においては、幹細胞疾患は、無巨核球症（ａｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｏｓｉｓ）、再生不良性貧血、ブラックファン・ダイアモンド貧血、先天性血球減少症、先天性赤血球異形成貧血、先天性角化異常症、ファンコニ貧血、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、赤芽球ろう、急性骨髄線維症、原因不明骨髄様化生、真性多血症、本態性血小板血症、重症型ベータサラセミア、鎌状赤血球症、家族性赤血球貪食リンパ組織球症、血球貪食、ランゲルハンス細胞組織球症（組織球症Ｘ）、慢性肉芽腫症、先天性好中球減少症、毛細血管拡張性運動失調症、先天性造血障害（ｍｙｅｌｏｋａｔｈｅｘｉｓ）、裸リンパ球症候群、白血球粘着不全症、重症複合免疫不全症（ＳＣＩＤ）、分類不能型免疫不全症、裸リンパ球症候群、チェディアック・東症候群、コストマン症候群、オーメン症候群、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠損症、細網異形成症、ウィスコット・アルドリッチ症候群、Ｘ連鎖リンパ増殖性疾患、副腎白質ジストロフィフコシド症、ゴーシェ病、ハンター症候群（ＭＰＳ−ＩＩ）、ハーラー症候群（ＭＰＳ−ＩＨ）、クラッベ病、レッシュ・ナイハン症候群、マンノシドーシス、マロトー・ラミー症候群（ＭＰＳ−ＶＩ）、異染性白質ジストロフィ、ムコリピドーシスＩＩ（Ｉ細胞病）、神経セロイドリポフスチン症（バッテン病）、ニーマン・ピック病、サンドホフ病、サンフィリポ症候群（ＭＰＳ−ＩＩＩ）、モルキオ症候群（ＭＰＳ−ＩＶ）、スライ症候群、β−グルクロニダーゼ欠損症（ＭＰＳ−ＶＩＩ）、副腎白質ジストロフィ、シャイエ症候群（ＭＰＳ−ＩＳ）、スライ症候群、ティサックス病、ウォルマン病、ムコ多糖症（ＭＰＳ）、急性混合白血病、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性未分化細胞性白血病、成人Ｔ細胞白血病、成人Ｔ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、若年性慢性骨髄性白血病（ＪＣＭＬ）、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、骨髄／ナチュラルキラー細胞前駆急性白血病、非ホジキンリンパ腫、前リンパ球性白血病、急性骨髄線維症、原因不明骨髄様化生（骨髄線維症）、アミロイドーシス、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、本態性血小板血症、真性多血症、多発性骨髄腫、形質細胞性白血病、ワルデンストローム・マクログロブリン血症、軟骨毛髪形成不全、グランツマン血小板無力症、無巨核球症、先天性血小板減少症、先天性造血性ポルフィリン症（ギュンター病）、ディジョージ症候群、大理石骨病、脳腫瘍、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、乳癌、神経芽細胞腫、腎細胞癌、横紋筋肉腫、小細胞肺癌、精巣癌、胸腺腫（胸腺癌）、慢性活動性エプスタイン・バールウイルス感染症（ｃｈｒｏｎｉｃ  ａｃｔｉｖｅ  Ｅｐｓｔｅｉｎ  ｂａｒｒ）、エヴァンス症候群、多発性硬化症、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、胸腺異形成症、チェディアック・東症候群、慢性肉芽腫症、好中球アクチン欠乏症、細網異形成症、難聴、聴力障害、糖尿病、心疾患、肝疾患、筋ジストロフィ、パーキンソン病、脊髄損傷、又は脳卒中である。
【００１３】
別の様態においては、白血球、リンパ球、好中球、杆状球、単球、顆粒球、赤血球、好酸球、好塩基球、又は血小板は対象内で増加する。ある様態においては、リンパ球はＴリンパ球又はＢリンパ球である。別の様態においては、サブスタンスＰアナログの投与は高増殖能性の幹及び前駆細胞（ｈｉｇｈ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ−ｓｔｅｍ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｅｌｌ：ＨＰＰ−ＳＰ細胞）、多分化能幹細胞集団（ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｃｅｌｌｓ−ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ，ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ，ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ  ｃｅｌｌ：ＣＦＣ−ＧＥＭＭ集団）、顆粒球マクロファージコロニー形成細胞（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ−ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ−ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｃｅｌｌ：ＧＭ−ＣＦＣ）、巨核球コロニー形成細胞（ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｕｎｉｔ−ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ  ｃｅｌｌ：Ｍｋ−ＣＦＣ）、Ｔリンパ球コロニー形成細胞（Ｔ−ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ−ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｃｅｌｌ：Ｔ−ＣＦＣ）、Ｂリンパ球コロニー形成細胞（Ｂ−ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ−ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｃｅｌｌ：Ｂ−ＣＦＣ）、巨核球コロニー形成細胞（ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｕｎｉｔ−ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ  ｃｅｌｌ：ＣＦＵ−Ｍｋ細胞）、赤芽球バースト形成細胞（ｂｌａｓｔ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｕｎｉｔ−ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ  ｃｅｌｌ：ＢＦＵ−Ｅ細胞）、赤芽球コロニー形成細胞（ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｕｎｉｔ−ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ  ｃｅｌｌ：ＣＦＵ−Ｅ細胞）、又は顆粒球／マクロファージコロニー形成細胞（ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｕｎｉｔ−ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ／ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｃｅｌｌ：ＣＦＵ−ＧＭ細胞）の分化を生じる。ある様態においては、その対象はヒトである。
【００１４】
別の態様においては、組成物は細胞と、その細胞の分化を刺激するのに有効な量のサブスタンスＰアナログとを含み、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシン、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。特定の態様においては、サブスタンスＰアナログはサブスタンスＰではない。
【００１５】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。別の様態においては、サブスタンスＰアナログは  ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００１６】
ある様態においては、細胞は未分化細胞である。別の様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、又は部分的に分化された細胞である。別の様態においては、細胞は造血幹細胞、リンパ球幹細胞、又は骨髄造血幹細胞である。別の様態においては、分化はＣＤ１５を発現する細胞の増加を生ずる。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは非経口投与される。
【００１７】
更に別の態様においては、組成物は創傷治癒の促進を提供し、細胞、基質、及びサブスタンスＰアナログを含み、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００１８】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。ある様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００１９】
ある様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、及び線維芽細胞からなる群から選択される。ある様態においては、前駆細胞は血管内の前駆細胞又は内皮前駆細胞である。別の様態においては、細胞は胎盤細胞又は臍帯血細胞である。ある様態においては、基質はコラーゲン、フィブリノーゲン、フィブリン、水素、又は羊膜同種移植片からなる。別の様態においては、創傷は糖尿病性創傷である。更に別の様態においては、創傷は褥瘡性潰瘍である。
【００２０】
ある態様においては、組成物は細胞と、その細胞の増殖を刺激するのに有効な量のサブスタンスＰアナログとを含んでもよく、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００２１】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００２２】
ある様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、部分的に分化された細胞、及び分化細胞からなる群から選択される。別の様態においては、細胞は未分化細胞である。別の様態においては、細胞及びサブスタンスＰは細胞の分化を刺激するのに有効な量である。別の様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、及び部分的に分化された細胞からなる群から選択される。別の様態においては、細胞は造血系起源である。
【００２３】
ある態様においては、本方法は障害、疾病、又は疾患のための治療法を提供し、対象にサブスタンスＰを投与するステップを含み、サブスタンスＰは障害、疾病、又は疾患を治療するために必要な範囲で、細胞増殖を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、障害は内部組織又は器官の障害である。別の様態においては、疾病又は疾患は幹細胞の疾病又は疾患である。ある様態においては、幹細胞の疾病又は疾患は細胞増殖の障害により生じる。別の様態においては、幹細胞の疾病又は疾患は細胞分化の障害により生じる。更に別の様態においては、細胞はＣＤ３４陽性である。ある様態においては、細胞は造血幹細胞である。別の様態においては、細胞は造血前駆細胞である。
【００２４】
ある態様においては、本方法は障害、疾病、又は疾患のための治療法を提供し、対象にサブスタンスＰを投与するステップを含み、サブスタンスＰは障害、疾病、又は疾患を治療するために必要な範囲で、細胞分化を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、障害は内部組織又は器官の障害である。別の様態においては、疾病又は疾患は幹細胞の疾病又は疾患である。ある様態においては、幹細胞の疾病又は疾患は細胞増殖の障害により生じる。別の様態においては、幹細胞の疾病又は疾患は細胞分化の障害により生じる。更に別の様態においては、細胞はＣＤ３４陽性である。ある様態においては、細胞は造血幹細胞である。別の様態においては、細胞は造血前駆細胞である。別の様態においては、細胞は敷石領域形成細胞（ｃｏｂｂｌｅｓｔｏｎｅ  ａｒｅａ−ｆｏｒｍｉｎｇ  ｃｅｌｌ）に分化する。更に別の様態においては、細胞は骨髄球系細胞系譜の細胞に分化する。ある様態においては、骨髄球系細胞系譜の細胞は赤血球、顆粒球、単球、又は栓球である。別の様態においては、細胞はリンパ球系細胞系譜の細胞に分化する。ある様態においては、リンパ球系細胞系譜の細胞は小リンパ球である。
【００２５】
ある態様においては、本方法は障害、疾病、又は疾患のための治療法を提供し、対象にサブスタンスＰアナログを投与するステップを含み、サブスタンスＰアナログは障害、疾病、又は疾患を治療するために必要な範囲で、細胞増殖を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、障害は内部組織又は器官の障害である。別の様態においては、疾病又は疾患は幹細胞の疾病又は疾患である。ある様態においては、幹細胞の疾病又は疾患は細胞増殖の障害により生じる。別の様態においては、幹細胞の疾病又は疾患は細胞分化の障害により生じる。更に別の様態においては、細胞はＣＤ３４陽性である。ある様態においては、細胞は造血幹細胞である。別の様態においては、細胞は造血前駆細胞である。
【００２６】
ある態様においては、本方法は障害、疾病、又は疾患のための治療法を提供し、対象にサブスタンスＰアナログを投与するステップを含み、サブスタンスＰアナログは障害、疾病、又は疾患を治療するために必要な範囲で、細胞分化を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、障害は内部組織又は器官の障害である。別の様態においては、疾病又は疾患は幹細胞の疾病又は疾患である。ある様態においては、幹細胞の疾病又は疾患は細胞増殖の障害により生じる。別の様態においては、幹細胞の疾病又は疾患は細胞分化の障害により生じる。更に別の様態においては、細胞はＣＤ３４陽性である。ある様態においては、細胞は造血幹細胞である。別の様態においては、細胞は造血前駆細胞である。別の様態においては、細胞は敷石領域形成細胞に分化する。更に別の様態においては、細胞は骨髄球系細胞系譜の細胞に分化する。ある様態においては、骨髄球系細胞系譜の細胞は赤血球、顆粒球、単球、又は栓球である。別の様態においては、細胞はリンパ球系細胞系譜の細胞に分化する。ある様態においては、リンパ球系細胞系譜の細胞は小リンパ球である。
【００２７】
ある態様においては、本方法は内在性サブスタンスＰ経路を発現上昇させるステップを含む治療法を提供し、発現増加は細胞増殖を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、発現増加はプレプロタキキニン−Ｉ遺伝子の発現増加によって得られる。別の様態においては、発現増加はニューロキニンＩ受容体アゴニストによって得られる。
【００２８】
ある態様においては、本方法は内在性サブスタンスＰ経路を発現上昇させるステップを含む治療法を提供し、発現増加は細胞分化を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、発現増加はプレプロタキキニン−Ｉ遺伝子の発現増加によって得られる。別の様態においては、発現増加はニューロキニンＩ受容体アゴニストによって得られる。
【００２９】
ある態様においては、本方法は細胞増殖を刺激するステップを提供し、細胞をサブスタンスＰと接触させるステップを含み、サブスタンスＰは細胞増殖を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、細胞はＣＤ３４陽性である。別の様態においては、細胞は造血幹細胞である。更に別の様態においては、細胞は造血前駆細胞である。
【００３０】
ある態様においては、本方法は細胞増殖を刺激するステップを提供し、細胞をサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは細胞増殖を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、細胞はＣＤ３４陽性である。別の様態においては、細胞は造血幹細胞である。更に別の様態においては、細胞は造血前駆細胞である。
【００３１】
ある態様においては、本方法は細胞分化を刺激するステップを提供し、細胞をサブスタンスＰと接触させるステップを含み、サブスタンスＰは細胞分化を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、細胞はＣＤ３４陽性である。別の様態においては、細胞は造血幹細胞である。更に別の様態においては、細胞は造血前駆細胞である。ある様態においては、細胞は敷石領域形成細胞に分化する。別の様態においては、細胞は骨髄球系細胞系譜の細胞に分化する。ある別の様態においては、骨髄球系細胞系譜の細胞は赤血球、顆粒球、単球、又は栓球である。別の様態においては、細胞はリンパ球系細胞系譜の細胞に分化する。ある様態においては、リンパ球系細胞系譜の細胞は小リンパ球である。
【００３２】
ある態様においては、本方法は細胞分化を刺激するステップを提供し、細胞をサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは細胞分化を刺激するのに有効な量である。ある様態においては、細胞はＣＤ３４陽性である。別の様態においては、細胞は造血幹細胞である。更に別の様態においては、細胞は造血前駆細胞である。ある様態においては、細胞は敷石領域形成細胞に分化する。別の様態においては、細胞は骨髄球系細胞系譜の細胞に分化する。ある別の様態においては、骨髄球系細胞系譜の細胞は赤血球、顆粒球、単球、又は栓球である。別の様態においては、細胞はリンパ球系細胞系譜の細胞に分化する。ある様態においては、リンパ球系細胞系譜の細胞は小リンパ球である。
【００３３】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは、細胞を培養する方法であってもよく、細胞を培地及びサブスタンスＰと接触させるステップを含み、サブスタンスＰは細胞増殖を刺激するのに、あるいはその培養に有効な量である。ある様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、部分的に分化された細胞、又は分化細胞である。
【００３４】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは、細胞を培養する方法であってもよく、細胞を培地及びサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは細胞増殖を刺激するのに、あるいはその培養に有効な量である。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは約１０−８Ｍないし約１０−１８Ｍの濃度である。別の様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、又は部分的に分化された細胞である。
【００３５】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは、細胞を培養する方法であってもよく、細胞を培地及びサブスタンスＰと接触させるステップを含み、サブスタンスＰは細胞分化を刺激するのに、あるいはその培養に有効な量である。ある様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、部分的に分化された細胞、又は分化細胞である。
【００３６】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは、細胞を培養する方法であってもよく、細胞を培地及びサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは細胞分化を刺激するのに、あるいはその培養に有効な量である。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは約１０−８Ｍないし約１０−１８Ｍの濃度である。別の様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、又は部分的に分化された細胞である。
【００３７】
ある態様においては、サブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログを含む細胞培養培地を提供する。ある様態においては、培地は増殖因子を更に含む。ある様態においては、増殖因子はＩＬ−２、ＩＬ−３、ＥＰＯ、ＴＰＯ、Ｆｌｔ−３、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＳＣＦ、前述の１又はそれ以上の組合せからなる群から選択される。
【００３８】
別の態様においては、本方法はＣＦＣ−ＧＥＭＭのコロニー形成を増加させるステップを提供し、ＣＦＣ−ＧＥＭＭを有効量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、多数の増加したコロニーはＣＦＣ−ＧＥＭＭから生成される。別の様態においては、本方法は他のコロニー型のコロニー形成を増加させるためのものである。
【００３９】
更に別の態様においては、組成物は線維芽細胞の増殖を促進するステップを提供し、細胞と、担体と、サブスタンスＰアナログとを含み、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００４０】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）であってもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００４１】
ある様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、線維芽細胞、内皮前駆細胞、又は上皮前駆細胞である。別の様態においては、担体は糖、デンプン、セルロース、トラガント末、麦芽、ゼラチン、滑石、カカオ脂、ろう、油、グリコール、寒天、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、発熱物質を含有しない水、等張食塩水、リンガー液、エチルアルコール、リン酸バッファ溶液、及び潤滑剤からなる群からなる群から選択される。
【００４２】
ある態様においては、組成物は線維芽細胞の増殖を促進するための包帯を提供し、包帯は線維芽細胞の増殖を促進するのに有効な量のサブスタンスＰアナログを含み、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００４３】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）であってもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００４４】
ある様態においては、包帯は細胞を更に含む。別の様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、線維芽細胞、内皮前駆細胞、又は上皮前駆細胞である。ある様態においては、包帯は液体包帯である。別の様態においては、包帯はゲル、基質、ガーゼ、及び抗菌ドレッシング剤からなる群から選択された材料から作られる。
【００４５】
ある態様においては、組成物はコラーゲン形成を促進するための包帯を提供し、包帯は細胞と、コラーゲン形成を促進するのに有効な量のサブスタンスＰアナログとを含み、サブスタンスＰアナログは式Ｉ：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００４６】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ  （配列番号３）；ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００４７】
ある様態においては、細胞は幹細胞、前駆細胞、線維芽細胞、内皮前駆細胞、又は上皮前駆細胞である。別の様態においては、包帯は液体包帯である。更に別の様態においては、包帯はゲル、基質、ガーゼ、及び抗菌ドレッシング剤からなる群から選択された材料から作られる。
【００４８】
ある態様においては、本方法はコラーゲン形成を促進するステップを提供し、コラーゲン生成細胞を、コラーゲン生成を促進するのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００４９】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）であってもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、コラーゲン生成細胞は線維芽細胞である。
【００５０】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは線維芽細胞の増殖を促進する方法であり、線維芽細胞を、線維芽細胞の増殖を促進するのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式Ｉ：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００５１】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）であってもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００５２】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは線維芽細胞の増殖を促進する方法であり、線維芽細胞の増殖を促進するのに有効な量の内在性サブスタンスＰ活性を発現増加させるステップを含む。ある様態においては、発現増加はプレプロタキキニン−Ｉ遺伝子の発現増加によって得られる。別の様態においては、発現増加はニューロキニンＩ受容体アゴニストによって得られる。
【００５３】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは内皮の増殖を促進する方法であり、内皮の増殖を促進するのに有効な量の内在性サブスタンスＰ活性を発現増加させるステップを含む。ある様態においては、発現増加はプレプロタキキニン−Ｉ遺伝子の発現増加によって得られる。別の様態においては、発現増加はニューロキニンＩ受容体アゴニストによって得られる。
【００５４】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは外皮の増殖を促進する方法であり、外皮の増殖を促進するのに有効な量の内在性サブスタンスＰ活性を発現増加させるステップを含む。ある様態においては、発現増加はプレプロタキキニン−Ｉ遺伝子の発現増加によって得られる。別の様態においては、発現増加はニューロキニンＩ受容体アゴニストによって得られる。
【００５５】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは内皮前駆細胞を動員する方法であり、内皮前駆細胞を、動員を刺激するのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式Ｉ：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００５６】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００５７】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは上皮前駆細胞を動員する方法であり、上皮前駆細胞を、動員を刺激するのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式Ｉ：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００５８】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）である。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００５９】
ある態様においては、本方法は哺乳類中の循環内皮前駆細胞を増加させるステップを提供し、循環内皮前駆細胞を、循環内皮細胞の数を増加させるのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式１：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００６０】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【００６１】
ある態様においては、本方法は哺乳類中の循環上皮前駆細胞を増加させるステップを提供し、循環上皮前駆細胞を、循環上皮細胞の数を増加させるのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式１：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【００６２】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）である。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【図面の簡単な説明】
【００６３】
【図１】図１は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（Ｓａｒ９−ＳＰ）と、サブスタンスＰ（ＳＰ）とについて、濃度に対するＢＦＵ−Ｅのコロニー数を提供する。
【図２】図２は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（Ｓａｒ９−ＳＰ）と、サブスタンスＰ（ＳＰ）とについて、濃度に対するＣＦＵ−Ｅのコロニー数を提供する。
【図３】図３は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（Ｓａｒ９−ＳＰ）と、サブスタンスＰ（ＳＰ）とについて、濃度に対するＣＦＵ−ＧＭのコロニー数を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００６４】
哺乳類の身体は体細胞、生殖細胞、及び幹細胞という３の細胞型からなる。成人の約１００，０００，０００，０００，０００（１０１４）個の細胞の各々が独自のゲノムのコピー又は複数のコピーを有し、唯一の例外が、赤血球のような完全分化状態で核を欠く特定の細胞型である。体細胞及び幹細胞を含む細胞の大部分は二倍体であり、各染色体の１のコピーを有することを示す。
【００６５】
これらの細胞型の間の差異を理解するために、細胞再生及び細胞分化の考察は必要である。細胞再生は、細胞が元の細胞の特徴を保持する２の細胞に分割される場合に生じる。細胞分化は、細胞が分化される場合に生じるが、生成された２の細胞のうちの少なくとも１つが元の細胞よりも更に特殊化される。「未分化」細胞は更に、分化を受けたことのない細胞であってもよく、限定しないが、例えば胚性幹細胞であってもよい。「未分化」細胞は更に完全には分化されない、すなわち、更に分化する能力を有する細胞であってもよい。
【００６６】
体細胞はヒトの身体を構成するほとんどの細胞を含み、神経細胞又は筋細胞のような完全な分化細胞を含む。生殖細胞は、卵子及び精子といった配偶子を生じる細胞の系統のいずれかである。他方、幹細胞は細胞分裂を通じて長期間自己再生できる未分化細胞である。幹細胞は特定の生理学上又は実験上の条件下で、部分的に又は完全に分化されうる。
【００６７】
幹細胞は一般的には、胚性幹細胞又は成体幹細胞のいずれかとして特徴づけられる。胚性幹細胞は胚から得られる未分化細胞である。胚性幹細胞は不定期間分割され、最終的には多様な分化細胞を生じさせる能力を有する。成体幹細胞は分化された組織で見られる未分化細胞である。成体幹細胞は自己再生でき、成体幹細胞が配置された組織を構成する細胞型を生じさせることができる。
【００６８】
幹細胞は前駆細胞を生じさせることができる。幹細胞は自己再生及び分化することができるが、前駆細胞は分化のみすることができる。更に、前駆細胞は、それがなることができる細胞型に多くの場合更に限定される。多数の前駆細胞は休止状態であり、それらが属する組織でほとんど活性化しない。主要な前駆細胞の役割は、自然減によって失われた細胞を置換することである。組織の損傷又は障害で、前駆細胞は増殖因子又はサイトカインにより活性化でき、修復プロセスに重要な細胞分裂の増加を導く。
【００６９】
幹細胞及び前駆細胞の例は限定しないが、造血幹細胞（更なる考察については下を参照）と、間質細胞、脂肪細胞、及び複数種類の骨細胞を生じさせる骨髄由来の成体幹細胞である間葉系幹細胞と、前駆細胞の一種であり、様々な種類の皮膚細胞を生じさせる上皮幹細胞と、分化された筋組織に貢献する前駆細胞の一種である筋衛星細胞とを含む。
【００７０】
造血幹細胞は限定しないが、例えば骨髄、胎盤、及び臍帯血に見られる。造血幹細胞はリンパ及び骨髄系譜の細胞を生じさせる。リンパ系譜の細胞は、Ｔ細胞及びＢ細胞を含む白血球である小リンパ球細胞を生じさせ、重要な免疫系の成分である。骨髄系譜の細胞は赤血球、顆粒球、単球、及び栓球を生じさせる。赤血球（ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ）は赤血球細胞（ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌ）とも呼ばれ、肺から器官及び組織に酸素を運ぶべく機能する。顆粒球は、好酸球、好中球、及び好塩基球といった３種類の白血球を含む。単球は、異物を貪食すべく免疫系で機能する白血球である。単球は更に分化して、マクロファージを生じさせることができ、貪食作用において更なる役割を果たす。栓球は血小板とも呼ばれ、血液凝固及び免疫反応に機能する。
【００７１】
間質細胞は通常は骨髄中にある異種性の細胞集団である。間質細胞は骨髄から得られる細胞を含んでもよく、脂肪細胞、前脂肪細胞、線維芽細胞、繊維芽細胞コロニー形成単位（ＣＦＵ−Ｆ）、骨芽細胞、細網細胞、及びマクロファージを含む。
【００７２】
［定義］
本発明の内容をより明確かつ簡潔に記載するよう、以下の定義は、以下に記載された説明、実施例及び添付の請求項に用いられる特別な用語の意味の用法及び範囲について、指針を与えることを目的とする。
【００７３】
「ある（ａ）」、「ある（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」といった単数形の使用は、文脈が明らかにそうでないことを指示しない限り、複数の関連事項を含む。従って例えば、「ある細胞（ａ  ｃｅｌｌ）」に対する関連事項は複数の細胞を含み、「あるアナログ（ａｎ  ａｎａｌｏｇ）」に対する関連事項は複数のこのようなアナログを含む。
【００７４】
用語「アルキル（ａｌｋｙｌ）」は飽和型の分岐鎖、直鎖、又は環状の炭化水素基のことである。一般的に、アルキル基は限定しないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ターシャルブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル等を含む。好ましい様態においては、アルキル基は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルである。
【００７５】
用語「アルケニル（ａｌｋｅｎｙｌ）」は少なくとも１の炭素間二重結合を有する不飽和型の分岐鎖、直鎖、又は環状の炭化水素基のことである。そのラジカルは１又はそれ以上の二重結合について、シス又はトランス構造のいずれであってもよい。一般的なアルケニル基は限定しないが、エテニル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、ｔｅｒｔ−ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル等を含む。好ましい様態においては、アルケニル基は（Ｃ１−Ｃ６）アルケニルである。
【００７６】
用語「アルキニル（ａｌｋｙｎｙｌ）」は少なくとも１の炭素間三重結合を有する不飽和型の分岐鎖、直鎖、又は環状の炭化水素基のことである。一般的なアルキニル基は限定しないが、エチニル、プロピニル、ブチニル、イソブチニル、ペンチニル、ヘキシニル等を含む。好ましい様態においては、アルキニル基は（Ｃ１−Ｃ６）アルキニルである。
【００７７】
用語「アリール（ａｒｙｌ）」は共役π電子系を有する不飽和型環状炭化水素基のことである。一般的なアリール基は限定しないが、ペンタ−２，４−ジエン、フェニル、ナフチル、アントラシル、アズレニル、クリセニル、コロネニル（ｃｏｒｏｎｅｎｙｌ）、フルオランテニル、インダセニル、イデニル（ｉｄｅｎｙｌ）、オバレニル（ｏｖａｌｅｎｙｌ）、ペリレニル、フェナレニル、フェナントレニル、ピセニル、プレイアデニル（ｐｌｅｉａｄｅｎｙｌ）、ピレニル、ピラントレニル（ｐｙｒａｎｔｈｒｅｎｙｌ）、ルビセニル（ｒｕｂｉｃｅｎｙｌ）等を含む。好ましい様態においては、アリール基は（Ｃ５−Ｃ２０）アリールであり、（Ｃ５−Ｃ１０）が特に好ましい。
【００７８】
用語「アルカリル（ａｌｋａｒｙｌ）」は、末端の炭素に結合された水素原子のうちの１つがアリール部分と置換される、直鎖のアルキル基、アルケニル基、又はアルキニル基のことである。一般的なアルカリル基は限定しないが、ベンジル、ベンジリデン、ベンジリジン、ベンゼノベンジル（ｂｅｎｚｅｎｏｂｅｎｚｙｌ）、ナフテノベンジル（ｎａｐｈｔｈｅｎｏｂｅｎｚｙｌ）等を含む。好ましい様態においては、アルカリル基は（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリルである。すなわち、アルカリル基のアルキル、アルケニル、又はアルキニル部分は（Ｃ１−Ｃ６）であり、アリール部分は（Ｃ５−Ｃ２０）である。特定の好ましい様態においては、アルカリル基は（Ｃ６−Ｃ１３）アルカリルである。すなわち、アルカリル基のアルキル、アルケニル、又はアルキニル部分は（Ｃ１−Ｃ３）であり、アリール部分は（Ｃ５−Ｃ１０）である。
【００７９】
用語「アルクヘテロアリール（ａｌｋｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ）」は、末端の炭素原子に結合された水素原子のうちの１つがヘテロアリール部分と置換される、直鎖のアルキル基、アルケニル基、又はアルキニル基のことである。好ましい様態においては、アルクヘテロアリール基は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールである。すなわち、アルクヘテロアリールのアルキル、アルケニル、又はアルキニル部分は（Ｃ１−Ｃ６）であり、ヘテロアリールは５ないし２０員環のヘテロアリールである。特定の好ましい様態においては、アルクヘテロアリールは６ないし１３員環のアルクヘテロアリールである。すなわち、アルキル、アルケニル、又はアルキニル部分は５ないし１０員環のヘテロアリールである。
【００８０】
用語「細胞分化（ｃｅｌｌ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）」又は「分化（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）」は、細胞の成熟化又は特殊化のことである。その以前の細胞よりもより特殊化する細胞は、細胞が分化し続けるかどうかに依存して、分化し、部分的に分化してきたと言うことができる。細胞分化の測定は本明細書中の別の場所で考察する。分化の障害は分化のプロセスを通じて生じうるいずれかの異常のことであり、限定しないが、特定の分化細胞型と関連づけられる細胞マーカを発現できないことを含む。
【００８１】
用語「細胞増殖（ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）」又は「増殖（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）」は、細胞がより多くの細胞を生成するよう分割するプロセスのことである。細胞増殖の測定は本明細書中の別の場所で考察する。
【００８２】
用語「敷石領域形成細胞（ｃｏｂｂｌｅｓｔｏｎｅ  ａｒｅａ−ｆｏｒｍｉｎｇ  ｃｅｌｌ）」は、敷石領域形成細胞アッセイにおいて、間質支持細胞層の下に非屈折細胞層を形成するよう移動する造血幹細胞の分画のことである。
【００８３】
用語「ヘテロアリール（ｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ）は、１又はそれ以上の炭素原子がＮ、Ｐ、Ｏ、Ｓ、Ａｓ、Ｓｅ、Ｓｉ、Ｔｅ等のような別の原子と置換されたアリール部分のことである。一般的なヘテロアリール基は限定しないが、アクリダルシン、アクリジン、アルサントリジン、アルシンドール、アルシンドリン（ａｒｓｉｎｄｏｌｉｎｅ）、カルバゾール、β−カルボリン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリジン、イソアルシンドール、イソアルシノリン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソホスホインドール（ｉｓｏｐｈｏｓｐｈｏｉｎｄｏｌｅ）、イソホスフィノリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソキサゾール、ナフチリジン、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、ホスホインドール、ホスフィノリン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、セレノフェン、テルロフェン、チオフェン、及びキサンテンを含む。好ましい様態においては、ヘテロアリール基は５ないし２０員環のヘテロアリールであり、５ないし１０員環のアリールが特に好ましい。
【００８４】
用語「液体包帯（ｌｉｑｕｉｄ  ｂａｎｄａｇｅ）」は、治癒を促進するよう創傷上に配置される場合に、粘性を実質的に増加させうる液体又はゲルのことである。本明細書中で提供された組成物及び方法によると、液体包帯は、治癒を促進するよう創傷上に配置できるほぼ固形形態まで、粘度を増加させうる液体又はゲル中に、幹細胞又は前駆細胞、あるいはその組合せを含む。
【００８５】
用語「リンパ球生成細胞（ｌｙｍｐｈｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｃｅｌｌ）」はリンパ系譜の細胞のことであり、前駆細胞を含む任意の成熟段階でのＴ細胞、Ｂ細胞、又はナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む。
【００８６】
用語「薬学的に許容可能な担体（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  ｃａｒｒｉｅｒ）」又は「担体（ｃａｒｒｉｅｒ）」は、無毒性、非活性固体、半固体、又は液体の注入剤、賦形剤、希釈剤、カプセル化用物質、あるいは任意の種類の補助剤をのことである。
【００８７】
用語「前駆細胞」又は「前駆体」は、特定の細胞型又は系譜に分化するよう関係づけられた細胞のことである。これらの細胞は一般的には、単能性又は多分化能性であり、通常は自己再生できない。
【００８８】
用語「幹細胞（ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ）」は細胞分裂（例えば、自己再生（ｓｅｌｆ−ｒｅｎｅｗａｌ））を通じて長期間自己再生可能な未分化細胞のことである。幹細胞は特定の生理学上又は実験上の条件下で、部分的に又は完全に分化されてもよい。幹細胞は多能性又は多分化能性であってもよい。
【００８９】
用語「幹細胞の疾病（ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ  ｄｉｓｅａｓｅ）」又は「幹細胞疾患（ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）」は、限定しないが幹細胞の増殖又は分化のような、幹細胞の遺伝子型又は表現型の影響を与えることによって、防止、治療、又は寛解できる、いずれかの病気、疾患、又は疾病のことである。
【００９０】
用語「置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリル、ヘテロアリール、又はアルクヘテロアリール（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｌｋｙｌ，ａｌｋｅｎｙｌ，ａｌｋｙｎｙｌ，ａｒｙｌ，ａｌｋａｒｙｌ，ｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ  ｏｒ  ａｌｋｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ）」は１又はそれ以上の水素原子が別の置換基と置換されるアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリル、ヘテロアリール、又はアルクヘテロアリール基のことである。好ましい置換基は−ＯＲ、−ＳＲ、−ＮＲＲ、−ＮＯ２、−ＣＮ、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲを含み、各々のＲは独立であり、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリル、ヘテロアリール、又はアルクヘテロアリールである。
【００９１】
「未分化（ｕｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ）」細胞という用語は、分化を受けたことのない細胞、限定しないが例えば胚性幹細胞のことであってもよい。「未分化」細胞は更に完全には分化されない、すなわち、未だに更に分化する能力を有する細胞のことであってもよい。
【００９２】
用語「内在性サブスタンスＰ経路を発現増加させる（ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  ａｎ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅ  Ｐ  ｐａｔｈｗａｙ）」は、サブスタンスＰが機能するいずれかの経路の活性を増加させることである。例えば、プレプロタキキニン−Ｉ遺伝子の転写の増加は、サブスタンスＰをコード化し、内在性サブスタンスＰ経路を発現増加できる。サブスタンスＰ経路を発現増加する別の例は、サブスタンスＰが作用する受容体、例えば、ニューロキニンＩを活性化することである。ニューロキニンＩは例えば、アゴニストによって活性化してもよい。
【００９３】
［方法］
アミノ末端の、１ないし４個目の内在性サブスタンスＰのペプチド（ＲＰＫＰ）は、リンパ系及び骨髄系の双方の幹細胞、ならびに前駆細胞の増殖を抑制することが示されてきた（米国特許第７，１１９，０７１号参照）。一方、天然のサブスタンスＰ（ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１））は赤血球及び骨髄の系譜で骨髄前駆細胞を刺激することも示されてきた。Ｒａｍｅｓｈｗａｒ，ｅｔ  ａｌ，１９９３，Ｂｌｏｏｄ，８１（２）  ３９１−３９８。しかしながら驚くべきことに、出願人は本明細書中に記載のような特定のサブスタンスＰアナログが、天然化合物より低い（いくつかの場合においては、対数スケールで小さい）濃度で、幹細胞の増殖又は分化を刺激し、同一のアミノ末端（ＲＰＫＰ）を含むサブスタンスＰアナログがサブスタンスＰより非常に低濃度で幹細胞の増殖又は分化を刺激するのを見出した。
【００９４】
ある様態においては、サブスタンスＰアナログである［Ｓａｒ９，Ｍｅｔ（Ｏ）２１１］−サブスタンスＰが、本明細書中に記載のように、幹細胞の増殖又は分化を刺激するのに用いることができる。［Ｓａｒ９，Ｍｅｔ（Ｏ）２１１］−サブスタンスＰの配列は、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）のように書いてもよい。［Ｓａｒ９，Ｍｅｔ（Ｏ）２１１］−サブスタンスＰは更にＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のことである。ある様態においては、幹細胞の増殖又は分化を刺激するのに用いられるサブスタンスＰアナログの濃度は、サブスタンスＰが用いられる濃度よりも約３桁の規模で小さく（対数スケールで３小さく）できる。本明細書中で提供されるのは、ヒト幹細胞の増殖又は分化の刺激、促進、又は向上のための方法である。
【００９５】
本明細書中に記載された組成物及び方法によると、サブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログは、幹細胞、前駆細胞、又は増殖又は分化する能力を有するその他の細胞の増殖又は分化を刺激するのに用いることができる。ある様態においては、幹細胞として振る舞うように再プログラムされてきた非幹細胞は、本明細書中に記載された組成物及び方法で用いられてもよい。例えば、増殖ポテンシャルのわずかな、あるいは無い分化細胞が、より幹細胞様になるよう転写制御因子をコード化させる遺伝子で形質移入できる。Ｔａｋａｈａｓｈｉ，Ｋ．＆Ｙａｍａｎａｋａ，Ｓ．，２００６，Ｃｅｌｌ  １２６：６６３−６７６参照。
【００９６】
ある様態においては、本方法はサブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログの存在時にインビトロで幹細胞の増殖又は分化の刺激、促進、又は向上させるステップを提供する。いくつかの様態においては、本方法は、未分化又は未感作の細胞、限定しないが例えば幹細胞の選択的な分化を提供する。好ましい幹細胞の型は細胞表面マーカの有無によって検出してもよい。
【００９７】
ある様態においては、本方法はサブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログの投与によって、インビボで幹細胞の増殖又は分化を刺激、促進又は向上するステップを提供する。ある様態においては、１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログは、幹細胞の増殖又は分化を増加させることによって治療又は寛解できる病気、疾患、又は疾病を有する対象に投与できる。
【００９８】
分化を刺激、向上、又は助長することなく、インビトロで幹細胞を増殖することは有用になりうる。ある様態においては、本方法はサブスタンスＰアナログの存在下においてインビトロで、あるいはサブスタンスＰアナログの投与によってインビボで、幹細胞の増殖を刺激するステップを提供する。ある様態においては、ヒト骨髄細胞（ＨＢＭＣ）はサブスタンスＰアナログの存在下においてインビトロで、あるいはサブスタンスＰアナログの投与によってインビボで、増殖するよう刺激される。
【００９９】
［細胞型］
ある様態においては、本方法は造血性の幹細胞又は前駆細胞の増殖又は分化の向上を提供する。ある様態においては、本方法はインビボ又はインビトロでの、造血細胞の増殖又は分化の、刺激又は向上を提供する。ある様態においては、本方法はインビトロでの造血前駆細胞のコロニー形成の刺激を提供する。ある様態においては、本方法はインビボ又はインビトロでのリンパ球生成細胞の増殖又は分化の向上を提供する。
【０１００】
ある様態においては、幹細胞はリンパ系細胞であってもよい。別の様態においては、幹細胞は造血細胞であってもよい。ある様態においては、幹細胞は間質細胞であってもよい。ある様態においては、本方法は、顆粒球、マクロファージ、赤血球、リンパ球、又は栓球（血小板）の増殖を刺激するのに用いてもよい。
【０１０１】
ある様態においては、本方法はサブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログを用いて間葉系幹細胞の分化を刺激又は促進するステップを提供する。ある様態においては、本方法はサブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログを用いて上皮幹細胞の分化を刺激又は促進するステップを提供する。ある様態においては、本方法はサブスタンスＰ又はサブスタンスＰアナログを用いて筋衛星細胞の分化を刺激又は促進するステップを提供する。
【０１０２】
ある様態においては、刺激されて増殖しうる細胞集団は、高増殖能性の幹及び前駆細胞（ＨＰＰ−ＳＰ）、多分化能幹細胞集団（ＣＦＣ−ＧＥＭＭ）、赤芽球バースト形成細胞（ＢＦＵ−Ｅ）、顆粒球マクロファージコロニー形成細胞（ＧＭ−ＣＦＣ）、巨核球コロニー形成細胞（Ｍｋ−ＣＦＣ）、Ｔリンパ球コロニー形成細胞（Ｔ−ＣＦＣ）、又はＢリンパ球コロニー形成細胞（Ｂ−ＣＦＣ）であってもよい。
【０１０３】
ＨＰＰ−ＳＰ集団は、ＣＤ９０陽性／ＣＤ１３３陽性／ＣＤ３４陽性マーカを発現する幹細胞及び前駆細胞を含む。ＢＦＵ−Ｅ集団は、ＣＤ３８陽性／グリコフォリンＡ陽性マーカを発現する赤血球細胞からなる。ＧＭ−ＣＦＣ集団は、ＣＤ３８陽性／ＣＤ１４陽性／ＣＤ１５陽性マーカを発現する顆粒球マクロファージコロニー形成細胞を含む。Ｍｋ−ＣＦＣ集団は、ＣＤ４１陽性／ＣＤ６１陽性マーカを発現する巨核球コロニー形成細胞を含む。Ｔ−ＣＦＣ集団は、ＣＤ３陽性／ＣＤ４陽性／ＣＤ８陽性細胞マーカを発現するＴリンパ球コロニー形成細胞を含む。Ｂ−ＣＦＣ集団は、ＣＤ１９陽性マーカを発現するＢリンパ球コロニー形成細胞を含む。ＣＦＣ−ＧＥＭＭ集団は顆粒球、赤血球、マクロファージ、及び巨核球の細胞を含む。ＣＦＣ−ＧＥＭＭ集団の細胞は、特定の系譜用の細胞マーカ、ならびにＣＤ３４陽性及びＣＤ１３３陽性を表示する（例えば、顆粒球はＣＤ３８陽性／ＣＤ１４陽性／ＣＤ１５陽性、ならびにＣＤ３４陽性及びＣＤ１３３陽性のマーカを表示するであろうし、赤血球細胞はＣＤ３８陽性／グリコフォリンＡ陽性マーカ、ならびにＣＤ３４陽性及びＣＤ１３３陽性のマーカを表示するであろう）。
【０１０４】
ある様態においては、幹細胞はリンパ系細胞にしてもよい。別の様態においては、幹細胞は骨髄系細胞にしてもよい。ある様態においては、幹細胞は間葉系幹細胞にしてもよい。ある様態においては、幹細胞は単能性、多能性、又は多分化能性にしてもよい。
【０１０５】
ある様態においては、本方法は前駆細胞、顆粒球、マクロファージ、赤血球、リンパ球、又は血小板への分化を刺激するように用いてもよい。ある様態においては、本方法は、膠細胞、心筋層、肝実質細胞、蝸牛細胞、骨芽細胞、軟骨細胞、筋細胞、脂肪細胞、膵島β細胞、神経細胞、結合組織、線維芽細胞、皮膚、軟骨、又は骨への幹細胞の分化を促進又は刺激するのに用いてもよい。
【０１０６】
ある様態においては、本明細書で提供されるのは、動物に有効量のサブスタンスＰアナログを投与するステップを含む、間質性、間葉性、又は胎盤性の細胞分化の増殖を促進又は刺激するための方法である。
【０１０７】
ある様態においては、間葉系幹細胞は間質細胞、脂肪細胞、及び複数種類の骨細胞へ分化するのを促進できる。ある様態においては、上皮幹細胞（前駆細胞）は様々な種類の皮膚細胞に分化するのを促進できる。ある様態においては、筋衛星細胞（前駆細胞）は筋組織に分化するのを促進できる。好ましい様態においては、本発明の方法は胎盤細胞とともに用いることができる。より好ましい様態においては、本発明の方法はヒト胎盤細胞とともに用いることができる。
【０１０８】
［細胞のソース］
本明細書中に記載の方法及び組成物に有用な幹細胞は、任意のソースからのものにできる。ある様態においては、幹細胞は骨髄から、好ましくは、生存しているヒトから取得（成体幹細胞）してもよい。ある様態においては、幹細胞は既成の培養組織又は株化細胞、限定しないが住民投票事項７１（Ｐｒｏｐｏｓｉｔｉｏｎ  ７１）によって設立されたＣａｌｉｆｏｒｎｉａ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙ、又は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙから取得してもよい。ある様態においては、幹細胞は月経血からのものでよい。Ｍｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ，２００７，Ｊ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．５（５７）：１−１０、Ｇａｒｇｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ，２００７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ  １９：３７７−３８３、Ｇａｒｇｅｔｔ  ａｎｄ  Ｃｈａｎ  ２００６，Ｍｉｎｅｒｖａ  Ｇｉｎｅｃｏｌ．５８（６）：５１１−２６。ある様態においては、幹細胞は乳歯から得られるものであってもよい。Ｍｉｕｒａ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ，（２００３）  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  １００（１０）：５８０７−５８１２。別の様態においては、幹細胞は羊水から得られるものであってもよい。Ｄｅ  Ｃｏｐｐｉ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．（２００７），Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２５，１００−１０６。別の様態においては、幹細胞は蝸牛幹細胞、毛細胞、又はコルチ器官の未分化細胞であってもよい。Ｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１４（２７）：２９３７−４３、Ｙｅｒｕｋｈｉｍｏｖｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｄｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２９（３）：２５１−２６０参照。
【０１０９】
ある様態においては、幹細胞は胚性幹細胞であってもよい。胚性幹細胞は胎盤又は臍帯血から取得してもよく、あるいは胎盤由来の接着細胞（ＰＤＡＣ、ニュージャージー州のＣｅｌｇｅｎｅ社）であってもよい。全体を引用として本明細書中に組み込まれる米国特許第７，０４５，１４８号、第７，２５５，８７９号、第７，３１１，９０５号、第５，４８６，３５９号、第５，００４，６８１号、第５，１９２，５５３号を参照。
【０１１０】
［培養条件］
培養中の幹細胞の増殖は、サイトカイン及び増殖因子のアレイを含む培地を用いることによって促進できる。このようなサイトカイン及び増殖因子は、例えばＢｉｏｓｏｕｒｃｅ社、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、及びＡｐｏｌｌｏ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ社のような多数の商業ベンダから入手可能である。幹細胞培養中に用いられるサイトカイン及び増殖因子は限定しないが、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、インターロイキン３（ＩＬ−３）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、幹細胞因子（ＳＣＦ）、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、Ｆｌｔ３リガンド（Ｆｌｔ３−Ｌ）、インターロイキン２（ＩＬ−２）、インターロイキン７（ＩＬ−７）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、骨形態形成蛋白質−２（ＢＭＰ−２）、骨形態形成蛋白質−７（ＢＭＰ−７）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、酸性線維芽細胞増殖因子（ａＦＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、線維芽細胞増殖因子−４（ＦＧＦ−４）、線維芽細胞増殖因子−５（ＦＧＦ−５）、線維芽細胞増殖因子−６（ＦＧＦ−６）、線維芽細胞増殖因子−８（ＦＧＦ−８）、線維芽細胞増殖因子−９（ＦＧＦ−９）、線維芽細胞増殖因子−１０（ＦＧＦ−ＩＯ）、線維芽細胞増殖因子−１６（ＦＧＦ−１６）、線維芽細胞増殖因子−１７（ＦＧＦ−１７）、線維芽細胞増殖因子−１８（ＦＧＦ−１８）、線維芽細胞増殖因子−１９（ＦＧＦ−１９）、フィブロネクチン、グリア細胞由来神経栄養因子（ＧＤＮＦ）、インターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）、インスリン様増殖因子Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）、インスリン様増殖因子ＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）、インターロイキン１β（ＩＬ−１β）、インターロイキン８（ＩＬ−８）、インターロイキン１１（ＩＬ−１１）、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）、インスリン、ケラチノサイト増殖因子（ＫＧＦ）、ラミニン、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、神経成長因子７Ｓ（ＮＧＦ７Ｓ）、ニュールツリン、神経栄養因子−３（ＮＴ−３）、神経栄養因子−４（ＮＴ−４）、オンコスタチンＭ、血小板由来増殖因子ＡＡホモ二量体（ＰＤＧＦ−ＡＡ）、血小板由来増殖因子ＡＢ（ＰＤＧＦ−ＡＢ）、血小板由来増殖因子ＢＢ（ＰＤＧＦ−ＢＢ）、αシヌクレイン、βシヌクレイン、トランスフォーミング増殖因子α（ＴＧＦ−α）、トランスフォーミング増殖因子β１（ＴＧＦ−β１）、トランスフォーミング増殖因子β２（ＴＧＦ−β２）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）、ソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）、レチノイン酸（ＲＡ）、又はその組合せを含む。
【０１１１】
別の様態においては、例えばリンパ球生成細胞などの細胞は１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログの存在下で増殖因子及びサイトカインからなる培地中に培養される。サブスタンスＰアナログは更に系譜特有の増殖因子の効果を向上又は増強するよう作用できる。本明細書中で提供された方法は、顆粒球／マクロファージ前駆細胞への選択的な幹細胞の分化を増加できる。ある様態においては、選択的な分化は、コントロール集団と比較して幹細胞から分化された機能細胞の約２００％ないし約２５０％の増加を提供する。
【０１１２】
ある様態においては、幹細胞は有効量の１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログと、サイトカイン又は増殖因子との存在下において、インビトロで分化するよう刺激できる。サブスタンスＰアナログの存在下において、使用される増殖因子及びサイトカインの濃度は、その他の場合に用いられるよりも低くでき、増殖因子及びサイトカインの「最適下限（ｓｕｂ−ｏｐｔｉｍａｌ）」濃度と称される。幹細胞の増殖及び分化を刺激するようインビトロで用いられる増殖因子又はサイトカインの量は、当該技術分野で既知のように細胞集団の種類によって変化する。Ｒａｍｅｓｈｗａｒ  ｅｔ  ａｌ．１９９３，Ｂｌｏｏｄ，８１（２）：３９１−３９８、Ｒｉｃｈ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ，２００５，Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｓｃｉ．，８７（２）：４２７−４４１、米国特許第７，３５４，７２９号、及び第７，３５４，７３０号、ならびに米国特許出願第１１／５６１，１３３号参照。例えば、当該技術分野におけるある技術は、約２０ｎｇの顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、約１０ｎｇのインターロイキン３（ＩＬ−３）、及び約５０ｎｇの幹細胞因子（ＳＣＦ）とともに、培養中にＧＭ−ＣＦＣ集団を培養することである。サブスタンスＰアナログの添加によって、サイトカイン及び増殖因子の減少（約０．４ｎｇのＧＭ−ＣＳＦ、約０．２ｎｇのＩＬ−３、及び１ｎｇのＳＣＦ）を伴うＧＭ−ＣＦＣの培養が可能となる。実施例３参照。
【０１１３】
ある様態においては、培地中のサイトカイン又は増殖因子の減少は、サブスタンスＰ又はそのアナログの不存在下で有効な濃度より、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、又は約７０％低くてもよい。特定の様態においては、本方法及び組成物は、サブスタンスＰ又はそのアナログの不存在下で有効な濃度より、約２０倍ないし約５０倍低い濃度で用いた細胞培養液を提供する。
【０１１４】
ある様態においては、細胞培養液中のサブスタンスＰアナログ濃度は、約１０−６Ｍ、約１０−７Ｍ、約１０−８Ｍ、約１０−９Ｍ、約１０−１０Ｍ、約１０−１１Ｍ、約１０−１２Ｍ、約１０−１３Ｍ、約１０−１４Ｍ、約１０−１５Ｍ、約１０−１６Ｍ、又は約１０−１７Ｍであってもよい。好ましい様態においては、細胞培養液中のサブスタンスＰアナログ濃度は約１０−９Ｍないし約１０−１４Ｍであってもよい。
【０１１５】
［増殖又は分化の評価］
ある様態においては、造血幹細胞の増殖は、幹細胞がサブスタンスＰアナログの不存在下で培養される場合よりも約５０％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、又は約２００％、あるいはそれより大きく、サブスタンスＰアナログの存在下においてインビトロで刺激できる。ある好ましい様態においては、リンパ球生成細胞は、コントロール集団と比較して約１５０％、約２００％、約２５０％、約３００％、約３５０％、又はそれより大きな速度で培養されうる。
【０１１６】
増殖は細胞内アデノシン三リン酸（ｉＡＴＰ）濃度を介して評価できる。Ｒｉｃｈ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ  ２００５，Ｔｏｘ．Ｓｃｉ．，８７（２）：４２７−４４１、及びＲｅｅｍｓ  ｅｔ  ａｌ，２００８  Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ，４８：６２０−６２８。ある様態においては、本方法はサブスタンスＰアナログを用いた幹細胞の増殖を提供し、ｉＡＴＰは約０．５μＭ／ウェル、約１．０μＭ／ウェル、又は約１．５μＭ／ウェルであってもよい。
【０１１７】
ある様態においては、本方法はコロニー形成細胞アッセイにより測定されるような分化の増加を提供する。特定の様態においては、本方法は約５０％、約１００％、約１５０％、約２００％、約２５０％、約３００％、又はそれ以上の増加を提供する。ある様態においては、分化は造血前駆細胞のコロニー形成単位の増加によって示してもよい。
【０１１８】
幹細胞集団は、当該技術分野の当業者に既知の任意の方法を用いて細胞表面マーカによって同定してもよく、例えば、限定しないが、特異的な表面抗原分類（ＣＤ）の抗原を対象とする蛍光標識抗体を含む。当該技術分野で既知の蛍光技術は、本明細書中に記載の方法とともに用いてもよい。例えば、Ｋｕｓｓｅｒ  ａｎｄ  Ｒａｎｄａｌｌ，２００３，Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｃｙｔｏｃｈｅｍ．５１：５−１４参照。幹細胞の分化を検出する他の方法は、本明細書中に記載の方法とともに用いてもよく、例えばレポータ遺伝子の使用を含む。Ｅｉｇｅｓ  ｅｔ  ａｌ，２００１，Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．１１：５１４−５１８。
【０１１９】
ある様態においては、細胞マーカは限定しないが、胎児肝臓キナーゼ１（Ｆｌｋ１）、平滑筋細胞特異的なミオシン重鎖、血管内皮細胞カドヘリン、骨特異的アルカリホスファターゼ（ＢＡＰ）、ヒドロキシアパタイト、オステオカルシン（ＯＣ）、骨形成タンパク質受容体（ＢＭＰＲ）、ＣＤ４、ＣＤ９、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ２９、ＣＤ４１、ＣＤ４１Ａ、ＣＤ５９、ＣＤ７３、ＣＤ９０、ＣＤ１０５、ＣＤ８、ＣＤ３４、ＣＤ３４陽性／Ｓｃｏ１陽性／Ｌｉｎ陰性の特性、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＤ６１、ｃ−Ｋｉｔ、コロニー形成単位（ＣＦＵ）、繊維芽細胞コロニー形成単位（ＣＦＵ−Ｆ）、Ｈｏｅｃｈｓｔ染料、白血球共通抗原（ＣＤ４５）、系譜の表面抗原（Ｌｉｎ）、Ｍａｃ−１、グリコフォリンＡ（ＣＤ２３５ａ）、７−アミノアクチノマイシンＤ（７−ＡＡＤ）、ＣＤ３８、ＣＤ１１７、ＣＤ３、ＣＤ１９、ＣＤ５６、Ｍｕｃ−１８（ＣＤ１４６）、幹細胞抗原（Ｓｃａ−１）、Ｓｔｒｏ−１抗原、Ｔｈｙ−１、ＩＩ及びＩＶコラーゲン、ケラチン、硫酸プロテオグリカン、脂肪細胞脂質結合蛋白質（ＡＬＢＰ）、脂肪酸輸送体（ＦＡＴ）、脂肪細胞脂質結合蛋白質（ＡＬＢＰ）、Ｙ染色体、核型、アルブミン、インテグリンＢ１、ＣＤ１３３、グリア線維酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）、微小管結合タンパク質１（ＭＡＰ−２）、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＰＢ）、ネスチン、神経型チューブリン、神経フィラメント（ＮＦ）、ニューロスフェア、ノギン、Ｏ４、Ｏｌ、シナプトフィジン、タウ、サイトケラチン１９（ＣＫ１９）、グルカゴン、インスリン、インスリン促進因子１（ｉｎｓｕｌｉｎ−ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ−１：ＰＤＸ−１）、膵ポリペプチド、ソマトスタチン、アルカリホスファターゼ、アルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）、骨形成タンパク質４、ブラキュリ、表面抗原３０（ＣＤ３０）、クリプト（ＴＤＧＦ−Ｉ）、ＧＡＴＡ−４遺伝子、ＧＣＴＭ−Ｉ、起源（ｇｅｎｅｓｉｓ）、生殖細胞核因子、肝細胞核因子５（ＨＮＦ−４）、神経細胞接着分子（Ｎ−ＣＡＭ）、ポリシアル酸神経細胞接着分子（ＰＳＡ−ＮＣＡＭ）、Ｏｃｔ−４、Ｐａｘ６、ステージ特異的胚抗原３（ＳＳＥＡ−３）、ステージ特異的胚抗原４（ＳＳＥＡ−４）、幹細胞因子（ＳＣＦ又はｃ−ｋｉｔリガンド）、テロメラーゼ、ＴＲＡ−１−６０、ＴＲＡ−１−８１、ビメンチン、ＭｙｏＤ、Ｐａｘ＆、ミオゲニン、ＭＲ４、ミオシン重鎖、ミオシン軽鎖、ＣＤ１５０、ＣＤ４８、ＡＴＰ結合カセットスーパファミリＧメンバ２（ＡＴＰ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｃａｓｓｅｔｔｅ  ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ  Ｇ  ｍｅｍｂｅｒ  ２：ＡＢＣＧ２）、ｐ７５ニューロトロフィンＲ（ＮＴＲ）、Ｍｕｓａｓｈｉホモログ１（ＭＳＩ１）、転写因子のＳＲＹ（性決定領域Ｙ）のボックス（ＳＯＸ）ファミリ、Ｓｏｘ２、ナノグ、ＣＵＢドメイン含有蛋白質１（ＣＤＣＰｌ）、転写因子ｐｕ１、転写因子ｔｗｉｓｔ１、クラス５ＰＯＵドメイン転写因子１（ＰＯＵ  ｄｏｍａｉｎ  ｃｌａｓｓ  ５  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ  １：ＰＯＵ５Ｆ１）、転写因子ＲＥＸｌ、ポドカリキシン、テロメラーゼ逆転写酵素（ＴＥＲＴ）、Ｏｔｘ２、Ｍｙｏ７ａ、又はその組合せであってもよい。
【０１２０】
好ましい様態においては、細胞マーカは分化のしるしとして有用なものであってもよく、例えば、限定しないが、ＣＤ２００、ＣＤ１０５、ＣＤ１Ｏ、ＣＤ３４、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ１３３、ＣＤ９０、ＣＤ１１７、ＨＬＡ−Ｇ発現、又はサイトケラチンを含む。
【０１２１】
［治療上及び臨床上のアプリケーション］
［Ａ．創傷治癒］
天然のサブスタンスＰは創傷治癒を促進するのに有用なように開示されてきた。米国特許第５，６１６，５６２号、米国特許出願第２００７０１５４４８号、欧州特許出願第ＥＰ１３０８１６５号、Ｂｅｎｒａｔｈ  ｅｔ  ａｌ，１９９５，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．２００：１７−２０、Ｐａｒｅｎｔｉ，ｅｔ  ａｌ，１９９６，Ｎａｕｎｙｎ−Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇ’ｓ  Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３５３：４７５−４８１、Ｋａｈｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ，１９９３，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２４９：２８１−２８６、Ｚｉｃｈｅ，ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｌｅｔｔ．４８：７−１１，Ｂｒａｉｎ，１９９７，Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．３７：１３３−１５２、及びＮｉｌｓｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ，１９８５，Ｎａｔｕｒｅ  ３１５：６１−６３参照。
【０１２２】
出願人は、特定のサブスタンスＰアナログが本明細書中に記載のように、天然化合物より低濃度で（対数スケールの場合においては、それ未満で）幹細胞の増殖又は分化を刺激することを発見した。いずれの理論とも結びつかないが、出願人は本明細書中に記載のサブスタンスＰアナログが、［Ｓａｒ９Ｍｅｔ（Ｏ２）１１］−サブスタンスＰを含み、いくつかの理由のためにサブスタンスＰより有効であると考える。最初に、サブスタンスＰアナログはニューロキニン１（ＮＫ１）受容体に対し、サブスタンスＰよりも大きな親和性を有し、ひいては二次的なメッセージシグナルを惹起しやすい。Ｓａｇａｎ，ｅｔ  ａｌ．１９９６，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐｅｒ．Ｔｈｅｒ．２７６：１０３９−１０４８。更に、本明細書中の別の場所に記載のように、本発明のサブスタンスＰアナログはサブスタンスＰより分解の傾向が低く、より長期間生物学的効果を及ぼす。好ましいサブスタンスＰアナログは、［Ｓａｒ９Ｍｅｔ（Ｏ２）１１］−サブスタンスＰを含み、ＮＫ１受容体に特異的であるが、一方、サブスタンスＰは更に、ニューロキニン２（ＮＫ２）及びニューロキニン３（ＮＫ３）の受容体を活性化できる。Ｔｏｕｓｉｇｎａｎｔ，ｅｔ  ａｌ．１９９０，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．５２４：２６３−２７０。
【０１２３】
更に、いずれの理論とも結びつかないが、出願人は本明細書中に記載のサブスタンスＰアナログが、［Ｓａｒ９Ｍｅｔ（Ｏ２）１１］−サブスタンスＰを含み、局所的にも全身的にも双方で生物学的効果を及ぼすと考える。体循環に吸収された場合、サブスタンスＰアナログは造血幹細胞（ＨＳＣ）に接触する。サブスタンスＰアナログは次いで、ＨＳＣの、顆粒球マクロファージ前駆体への分化を促進し、顆粒球及びマクロファージの循環レベルの増加を導くことができる。実施例２参照。
【０１２４】
更に、サブスタンスＰアナログは更に局所的効果を及ぼすことができる。創傷部位又はその近くで、サブスタンスＰアナログは肥満細胞の脱顆粒に直接的な効果を及ぼすと考えられ、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）及びインターロイキン３（ＩＬ−３）を含む増殖因子の生成を増加させる。更に、肥満細胞の脱顆粒は、単球走化性タンパク質１（ＭＣＰ）、ＣＣＬ５、局所的な顆粒球及びマクロファージの集団を増加させるインターロイキン８（ＩＬ−８）のようなケモカインの生成を増加させうる。更には、Ｋｕｌｋａ  ｅｔ  ａｌ．２００７，Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２３：３９８−４１０参照。体循環中の場合、サブスタンスＰアナログは内皮前駆細胞（ＥＰＣ）に接触し、これらの細胞の創傷部位への動員を促進するのと同時に、ＥＰＣの分化を促進すると考えられる。ＥＰＣの分化及び動員を促進することによって、創傷部位中のＥＰＣの集団は増加する。ＥＰＣは脈管形成を増加及び促進でき、血管新生は更に創傷治癒を促進する。Ｇａｌｉａｎｏ，ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１６４：１９３５−１９４７。
【０１２５】
マクロファージは臨床上の役割を果たし、デブリドマン、抗菌作用、基質の合成及び制御、細胞活性化、ならびに血管新生という創傷治癒プロセスを向上できる。これらのプロセスの向上は創傷閉鎖速度の増加を導くことができる。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は同様にこれらの治癒プロセスを向上させるマクロファージを直接的に活性化する効果を有することができる。
【０１２６】
本明細書中に記載の方法により生成された細胞は、多様なアプリケーション用に用いられうる。例えば、本明細書中で提供された方法は、エクスビボの基質又は骨格に移すことができる幹細胞の増殖又は分化をインビボで刺激するのに用いてもよい。本方法に好適な基質又は骨格は、細胞接着を可能にし、細胞移動を可能にし、細胞及び生化学的因子を送達及び保持し、重要な細胞養分および発現した生成物の拡散を可能にし、細胞段階の振る舞いを変えるべく機械的及び生物学的な影響を与える。基質又は骨格は、合成型の細胞外基質、天然型の細胞外基質、又は合成物であってもよい。天然型の細胞外基質は例えば、コラーゲン、フィブロネクチン、死体の組織、基底膜、又は胎盤からなる組織基質であってもよい。例えば、米国特許第７，３１１，９０４号参照。合成型の骨格は、例えばポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸−ポリグリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ）、炭素繊維、リン酸カルシウムなどにしてもよい。ある様態においては、骨格はナノファイバの骨格であってもよい（マサチューセッツ州ケンブリッジの３ＤＭ社のＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標）参照）。米国特許公報第２００７０２５８９４８、２００６００５７７２０、２００６００４０３８６、２００６００１５９６１、２００６００１０５０９、２００６００１０５０８、及び２００５０１５８８５８号参照。
【０１２７】
ある様態においては、細胞は創傷治癒又は血液細胞再生を刺激するために用いられうる。ある様態においては、本方法は組織増殖を刺激するために用いてもよい。前記組織増殖は例えば、ヒトの器官の再生であってもよい。ある様態においては、細胞は疾患又は疾病の治療中に用いてもよい。
【０１２８】
ある様態においては、細胞及び１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログはゲル、基質、及び／又は別の好適な担体を懸濁剤に添加してもよく、包帯として用いてもよい。例えば、重合可能な液体又はゲル中に前駆細胞及び１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログを含む液体包帯は、創傷治癒を促進すべく創傷の上に配置してもよい。別の様態においては、包帯は基質中に前駆細胞と１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログトを含む包帯を構成してもよい。組成物及び本方法は以下に記載のように創傷治癒のいずれかの段階に影響を与えることができる。本発明の組成物及び方法は、例えば、内部組織又は器官上の創傷などの内部にある創傷、又は、例えば外側の表面又は開口部上などの外部にある創傷を治療するのに用いてもよい。
【０１２９】
ある様態においては、本明細書中に記載の包帯は外部の十分な厚さの、あるいは深い創傷の治療のために用いてもよい。このような創傷は治癒又は閉鎖するのが困難である。ある様態においては、創傷は外傷性創傷、糖尿病性創傷、又は褥瘡性潰瘍であってもよい。
【０１３０】
創傷治癒は、炎症、増殖及びリモデリング段階を含む段階で生じる。炎症段階においては、好中球及びマクロファージがバクテリアを細菌を浄化し、貪食作用を通じた創傷部位からの他のデブリ、及びマクロファージは増殖段階の開始を促進する因子を放出する。増殖段階においては、血管新生、線維増殖、肉芽組織の形成、上皮形成、及び収縮が生じる。血管新生は、新しい血管の形成であり、創傷部位に養分を与える。線維増殖は線維芽細胞の創傷部位への移動である。線維芽細胞は細胞外基質（ＥＣＭ）及びコラーゲンの成分を堆積し、治癒プロセスに対し重要である。肉芽組織は新しい血管、線維芽細胞、炎症細胞、内皮細胞、筋線維芽細胞、及び新しい暫定的なＥＣＭからなる。上皮形成は、上皮細胞（ケラチノサイト）が周囲組織から創傷部位に移動し、ついで、創傷部位を再上皮化するのに必要な細胞を供給するために増殖する際に生じる。収縮は線維芽細胞が筋線維芽細胞に分化する際に生じ、それは平滑筋細胞と同様のものである。筋線維芽細胞の収縮は創傷部位の大きさを減少させる。最終的には、リモデリング段階においては、元の器質化されていないコラーゲンの線維は分解され、新しく、強く、器質化されたコラーゲンの線維がその位置に形成され、創傷部位の引張り強さを増加させる。不必要な血管は更に、アポトーシスを通じて除去される。前述の記載は創傷治癒プロセスの完全な説明を提供することを意味していない。多くの他の、当該技術分野の当業者に公知のステップが、創傷治癒プロセスを通じて生じる。本発明の組成物及び方法は、創傷治癒に関するいずれのプロセスを刺激又は改善してもよい。
【０１３１】
上述のように、線維芽細胞は創傷治癒で重要な役割を果たす。線維芽細胞はコラーゲンを形成する細胞であり、皮膚の構成及び支持を提供する主要な真皮の成分である。経時的に、線維芽細胞は不活性になり、コラーゲン生成が遅くなる。サブスタンスＰは（ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ、配列番号１）はサイトカインで誘発される線維芽細胞の増殖を増大することが示されてきた。Ｃｕｒｙ  ｅｔ  ａｌ，２００７  Ｊ．Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔ．Ｒｅｓ．７８（７）：１３０９−１３１５、Ｋａｈｌｅｒ，１９９６，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．１６６：６０１−  ６０８、Ｋａｔａｙａｍａ  ａｎｄ  Ｎｉｓｈｉｏｋａ  １９９７，Ｊ．Ｄｅｒｍ．Ｓｃｉ  １５（３）：２１０−２０６、Ｋｉｍｂａｌｌ  ａｎｄ  Ｆｉｓｈｅｒ  １９９８，Ａｎｎａｌｓ  ＫＹ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ５４０（１）：６８１−６８３、及びＺｉｃｈｅ  ｅｔ  ａｌ，１９９０，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１００（１）：１１−１４参照。しかしながら、サブスタンスＰのアナログは分解に対する耐性を有利に実証でき、ひいては、直接的に、及び増殖因子で駆動された増殖の促進を介して、の双方で線維芽細胞の増殖を刺激する場合の利点を改善してきた。
【０１３２】
本明細書中で提供されるのは、線維芽細胞の増殖又は発生を刺激又は促進するための方法であり、当該方法は１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログを実質的に純化された線維芽細胞に添加するステップと、前記線維芽細胞の成長、増殖又は発生を刺激するステップとを含む。実質的に純化された線維芽細胞は好ましくはドナーから収集される。好ましい様態においては、本方法は自己の線維芽細胞に適用される。すなわち、ドナーから収集される線維芽細胞は１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログを有する培地で培養中に増殖され、次いで、発生又は実質的に発生した線維芽細胞は元のドナーに投与される。好ましい様態においては、本方法は鼻唇溝への皮膚注入剤などの美容目的のため、又は瘢痕の外観を改善するために用いてもよい。国際公開公報第２０００／０７３４１８号、及び米国特許第５，８６６，１６７号参照。
【０１３３】
ある様態においては、線維芽細胞は哺乳類のものである。ある様態においては、線維芽細胞はブタ、ウマ、又はウシである。好ましい様態においては、線維芽細胞はヒトである。ある様態においては、線維芽細胞は皮膚線維芽細胞であってもよい。
【０１３４】
線維芽細胞は当該技術分野の当業者に公知のように培養中に成長させることができる。Ｊａｒｍａｎ−Ｓｍｉｔｈ，ｅｔ  ａｌ．２００４，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｊ．２０（２−３）：２１７−２２２、Ｗｅｔｚｅｌｓ，ｅｔ  ａｌ，１９９８，Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  １３；１３２５−１３３０、Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ，１９７２，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ６９（１１）：３２６０−３２６２、Ｗａｔｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，１９９９，Ａｒｃｈ．Ｆａｃｉａｌ  Ｐｌａｓｔ．Ｓｕｒｇ．１：１６５−１７０、国際公開公報第１９９８／３６７０４号参照。培養中及びインビボでの双方における線維芽細胞の増殖は少なくとも２のメカニズムを通じて生じると考えられる。１のメカニズムは真皮中の線維芽細胞の直接刺激を介するものである。第２に、サブスタンスＰアナログは更に、増殖を駆動する増殖因子に関連すると考えられる。この点においては、サブスタンスＰアナログは線維芽細胞の増殖を更に促進する増殖因子、伝達物質等の生成又は放出をトリガ又は刺激すると考えられる。いずれの理論によっても結びつかないが、サブスタンスＰアナログは血管新生を促進又は刺激し、創傷への血流を増加させると考えられる。血流の増加はマクロファージのような免疫ドーピング型の細胞の湿潤を促進して、創傷治癒を促進する。更に、サブスタンスＰアナログは創傷治癒を促進するために、幹細胞、特に顆粒球の増殖又は分化を刺激する能力を実証してきた。
【０１３５】
ある様態においては、線維芽細胞は、線維芽細胞の成長及び増殖を刺激するために、１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログと接触させてもよい。別の様態においては、線維芽細胞は線維芽細胞の培養物であり、培地は血清添加培地である。ある様態においては、増殖は約１２時間、約１日、約３日、又は約５日の培養で生じる。ある様態においては、培地に添加すべきサブスタンスＰアナログの量は、約０．０１μＭないし約１０μＭの最終濃度を得るのに十分な量であってもよい。特定の様態においては、線維芽細胞は約５％のＦＢＳと、サブスタンスＰアナログの存在下で約１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０日間培養される。特定の様態においては、線維芽細胞は約０．５％のＦＢＳと、サブスタンスＰアナログの存在下で約１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０日間培養される。特定の様態においては、ＦＢＳは、例えばＶａｌｌｅｙ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ＆Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社から商業上入手可能なようなＦＢＳの代替品に代替される。
【０１３６】
インビトロでの線維芽細胞の刺激は、サブスタンスＰアナログを線維芽細胞の培地に添加することによって得てもよい。線維芽細胞は、約２．５％、約５％、約７．５％、約１０％、又は約１５％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含む培地のウェルプレートに播種してもよい。
【０１３７】
ある様態においては、本方法はエクスビボの組織のリモデリングを提供する。三次元の細胞外基質はヒト細胞用の骨格として開発されてきた。これらの基質は３次元構造の細胞増殖を可能にする立体構造的な構造を提供する。米国特許第７，３１１，９０４号、第７，３５８，２８４号、第７，３３８，５１７号、及び第７，１０８，７２１号参照。ある様態においては、本方法はサブスタンスＰアナログの組織基質への添加が、線維芽細胞の増殖及び分化を促進するように提供する。好ましい様態においては、組織基質は対象に適用されて、外部の創傷治癒を促進する。外部創傷（すなわち、皮膚の真皮及び表皮に対する創傷）は記載される。他の種類の創傷は、本発明の方法及び組成物の範囲内にある。例えば、組織基質は口腔創傷等を治療するのに用いてもよく、歯肉の線維芽細胞の組織リモデリングが有用になりうる。別の例においては、組織基質が促進、又は組織の傷害を置換するように対象内に移植してもよい。
【０１３８】
更に別の様態においては、本方法はサブスタンスＰアナログの創傷に対する塗布を提供する。好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログは、組織の外傷及び創傷に直接的に塗布される。ある好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログは粉末、ゲル、軟膏、クリーム、又は噴霧のような医薬組成物として、又はドレッシング剤又は包帯等のデバイスを介して塗布されてもよい。
【０１３９】
当該技術分野の当業者に明らかなように、本明細書中で提供された方法及び組成物は、線維芽細胞の増殖又は創傷治癒を促進すると知られる他の方法及び組成物とともに用いてもよい。例えば、サブスタンスＰアナログは例えば、上皮増殖因子又はそのアナログ（米国特許第７，０８４，２４６号）、塩化セチルピリジニウムのような創傷クレンザ（米国特許第４，７７４，３２９号）、あるいはＡｌｇｉｃｅｌｌ（登録商標）Ａｇ抗菌アルギン酸ドレッシング剤（ニュージャージー州プリンストンのＤｅｒｍａ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社）のような包帯と組合わせて用いてもよい。好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログは創傷及び周囲組織に対し高度に適合するドレッシング剤に塗布可能な組成物と組合せ、手指間、足指間、又は関節上のような領域を堅固にカバーするように適用できる。ある様態においては、サブスタンスＰアナログはポリヒドロゲル組成物と組合わせてもよい。
【０１４０】
更に別の態様においては、本方法及び組成物は少なくともサブスタンスＰアナログと、第２の創傷治療アイテムを含むキットを提供する。ある様態においては、キットはサブスタンスＰアナログと、創傷デブリドマン用の材料及び組成物と、創傷用包帯とを含む。ある様態においては、キットは１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログと、上皮増殖因子又はそのアナログといった創傷治癒を促進する組成物とを含む。
【０１４１】
［Ｂ．疾病及び疾患］
本明細書中に記載の方法は、幹細胞疾患を治療、防止又は寛解させるために用いることができる。ある様態においては、本方法は、骨髄不全疾患、異常ヘモグロビン症、組織球疾患、遺伝性免疫疾患、遺伝性代謝疾患、白血病性、リンパ腫性、骨髄異形成性又は骨髄増殖性の疾患、形質細胞疾患、遺伝性疾患、悪性疾患、食細胞疾患のような病気、疾患、又は疾病、及び、幹細胞で治療又は寛解できる他の疾患を、治療、防止又は寛解させるために用いられる。本方法で治療できる疾病又は疾患は、無巨核球症（ａｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｏｓｉｓ）、再生不良性貧血、ブラックファン・ダイアモンド貧血、先天性血球減少症、先天性赤血球異形成貧血、先天性角化異常症、ファンコニ貧血、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、赤芽球ろう、急性骨髄線維症、原因不明骨髄様化生（骨髄線維症）、真性多血症、本態性血小板血症、重症型ベータサラセミア、鎌状赤血球症、家族性赤血球貪食リンパ組織球症、血球貪食、ランゲルハンス細胞組織球症（組織球症Ｘ）、慢性肉芽腫症、先天性好中球減少症、毛細血管拡張性運動失調症、先天性造血障害（ｍｙｅｌｏｋａｔｈｅｘｉｓ）、裸リンパ球症候群、白血球粘着不全症、重症複合免疫不全症（ＳＣＩＤ）（アデノシンデアミナーゼ欠損症、Ｔ細胞及びＢ細胞の不存在下でのＳＣＩＤ、Ｔ細胞、通常のＢ細胞の不存在下でのＳＣＩＤを含む）、分類不能型免疫不全症、裸リンパ球症候群、チェディアック・東症候群、コストマン症候群、オーメン症候群、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠損症、細網異形成症、ウィスコット・アルドリッチ症候群、Ｘ連鎖リンパ増殖性疾患、副腎白質ジストロフィフコシド症、ゴーシェ病、ハンター症候群（ＭＰＳ−ＩＩ）、ハーラー症候群（ＭＰＳ−ＩＨ）、クラッベ病、レッシュ・ナイハン症候群、マンノシドーシス、マロトー・ラミー症候群（ＭＰＳ−ＶＩ）、異染性白質ジストロフィ、ムコリピドーシスＩＩ（Ｉ細胞病）、神経セロイドリポフスチン症（バッテン病）、ニーマン・ピック病、サンドホフ病、サンフィリポ症候群（ＭＰＳ−ＩＩＩ）、モルキオ症候群（ＭＰＳ−ＩＶ）、スライ症候群、β−グルクロニダーゼ欠損症（ＭＰＳ−ＶＩＩ）、副腎白質ジストロフィ、シャイエ症候群（ＭＰＳ−ＩＳ）、スライ症候群、ティサックス病、ウォルマン病、ムコ多糖症（ＭＰＳ）、急性混合白血病、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性未分化細胞性白血病、成人Ｔ細胞白血病、成人Ｔ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、若年性慢性骨髄性白血病（ＪＣＭＬ）、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、骨髄／ナチュラルキラー細胞前駆急性白血病、非ホジキンリンパ腫、前リンパ球性白血病、急性骨髄線維症、原因不明骨髄様化生（骨髄線維症）、アミロイドーシス、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、本態性血小板血症、真性多血症、不応性貧血（芽球増加を伴う不応性貧血（ＲＡＥＢ）、移行期の芽球増加を伴う不応性貧血（ＲＡＥＢ−Ｔ）、環状鉄芽球を伴う不応性貧血（ＲＡＲＳ）を含む）、多発性骨髄腫、形質細胞性白血病、ワルデンストローム・マクログロブリン血症、軟骨毛髪形成不全、グランツマン血小板無力症、���巨核球症（ａｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｏｓｉｓ）、先天性血小板減少症、先天性造血性ポルフィリン症（ギュンター病）ディジョージ症候群、大理石骨病、脳腫瘍、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、乳癌、神経芽細胞腫、腎細胞癌、横紋筋肉腫、小細胞肺癌、精巣癌、胸腺腫（胸腺癌）、慢性活動性エプスタイン・バールウイルス感染症（ｃｈｒｏｎｉｃ  ａｃｔｉｖｅ  Ｅｐｓｔｅｉｎ  ｂａｒｒ）、エヴァンス症候群、多発性硬化症、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、胸腺異形成症、チェディアック・東症候群、慢性肉芽腫症、好中球アクチン欠乏症、細網異形成症、難聴、聴力障害、糖尿病、心疾患、肝疾患、筋ジストロフィ、パーキンソン病、脊髄損傷、又は脳卒中であってもよい。
【０１４２】
特定の様態においては、幹細胞疾患は不応性貧血（芽球増加を伴う不応性貧血（ＲＡＥＢ）、移行期の芽球増加を伴う不応性貧血（ＲＡＥＢ−Ｔ）、又は環状鉄芽球を伴う不応性貧血（ＲＡＲＳ）を含む）を含む骨髄増殖性疾患ではない。特定の様態においては、幹細胞疾患は薬剤誘発型、又は放射線によるものではない。
【０１４３】
［Ｃ．エクスビボでの骨髄細胞の増殖］
ある様態においては、本方法は実質的に純化された骨髄の間葉系幹細胞のエクスビボでの増殖を提供する。ある様態においては、本方法は培養中の骨髄細胞の維持を提供する。本方法はサブスタンスＰアナログの培地への添加により、インビトロで長期の間、骨髄細胞の細胞培養液を提供する。本明細書中に記載されたサブスタンスＰアナログは、分化を促進することなく細胞の自己再生を促進する。従って、細胞は分化なく、長期間あるいは無期限に培養液中に維持できる。
【０１４４】
増殖因子のない無血清培地はインビトロで幹細胞を増幅できないため、例えば、ウシ胎仔血清かヒト血清か、同種か自己か、血清か血漿かといった使用される血清の種類は問題となりうる。プリオン、ウイルス、又は人畜共通感染症の混入の可能性は、異種血清抗原に対する免疫反応の可能性と同様に存在する。Ｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，２００６，Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  ２４（１２）：２８８８−９０参照。本明細書中に記載された方法は、人畜共通感染症の感染のリスクが減少している点で有利である。
【０１４５】
骨髄培養の方法は、Ｗｏｌｆｅｄ  ａｌ，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（１０）：３３２４−３０、Ｇａｒｔｎｅｒ  ａｎｄ  Ｋａｐｌａｎ，１９８０，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７７（８）：４７５６−５９、Ｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，２００６，Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  ２４（１２）：２８８８−９０、Ｄａ  Ｓｉｌｖａ  Ｍｅｉｒｅｌｌｅｓ  ａｎｄ  Ｎａｒｄｉ  ２００３，Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．１２３（４）  ７０２−１、Ｔａｍａｍａ  ｅｔ  ａｌ，２００５，Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  ２４（３）：６８５−９５、Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ，１９９７，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １３８（１０）  ４４５６−６２で記載されたものを含む既知又は開発されたものであってもよい。
【０１４６】
ある様態においては、骨髄細胞は化学的に規定された培地中でサブスタンスＰアナログを用いて増殖される。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは約１０−３ないし約１０−１７Ｍの量である。より好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログは約１０−６ないし約１０−１４Ｍの量である。
【０１４７】
本発明によって用いることができるヒト造血系の液体培養は、例えばＩＭＤＭ、ＭＥＭ、ＤＭＥＭ、ＲＰＭＩ１６４０、アルファ培地、又はマッコイ培地といった公知の培地成分を用いて１ｍｌあたり１０４ないし１０９個の細胞数である細胞密度の培養液で増殖してもよく、血清アルブミン、コレステロール、及び／又はレシチンの組合せ、セレン、ならびに向き塩を用いてもよい。当該技術分野で公知のように、これらの培養液は１０４ないし１０−７Ｍの濃度でのヒドロコルチゾンのような副腎皮質ステロイド、あるいは、同等の効力ある用量でコルチゾン、デキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈｏｓｏｎｅ）、又はソルメドロールのような他の副腎皮質ステロイドで補充される。これらの培養液は一般的には、概略で生理学的なｐＨ、すなわち、６．９ないし７．４で維持される。培地は一般的には４ないし２０重量パーセントの酸素、好ましくは６ないし８重量パーセントの酸素を含む、酸素含有大気に曝される。
【０１４８】
ある様態においては、培地はインターロイキン１、インターロイキン３、インターロイキン６、インターロイキン７、インターロイキン８、インターロイキン９、インターロイキン１０、インターロイキン１１、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、幹細胞因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、線維芽細胞増殖因子−２、上皮増殖因子、トランスフォーミング増殖因子β、肥満細胞増殖因子、又はエリスロポエチンのようなサイトカインを更に有してもよい。
【０１４９】
ある様態においては、本方法は顆粒球、マクロファージ、又は血小板のエクスビボでの増殖を提供し、前記方法はサブスタンスＰアナログを用いて骨髄、臍帯血、又は胎盤血を培養するステップを含む。Ｑｉｕ  ｅｔ  ａｌ，１９９９  Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒ．Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ．８（６）：６０９−１８、Ｍａｄｋａｉｋａｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ａｃｔａ  Ｈａｅｍａｔｏｌ．１１８：１５３−９参照。血液細胞の増殖又は分化は、ヒトの貧血症、血小板減少症、及び白血球減少症に対抗するのに有用にできる。
【０１５０】
ある様態においては、本方法は動員剤を用いて骨髄から末梢に動員された骨髄造血幹細胞のエクスビボでの増殖を提供する。好ましい様態においては、動員された細胞はＣＤ３４陽性細胞である。ある様態においては本方法は、ＣＤ３４陽性細胞の収集、サブスタンスＰアナログで補充された培地における細胞の増殖、及び細胞のヒトへの投与を提供する。
【０１５１】
ある様態においては、本方法はサブスタンスＰアナログの培地への添加による、ヒト臍帯血からの前駆細胞の促進及び維持を提供する。引用によって本明細書中に組み込まれる、Ｍａｄｋａｉｋａｒ  ｅｔ  ａｌ，２００７，Ａｃｔａ  Ｈａｅｍａｔｏｌ．１１８：１５３−  ９、Ｂｒｏｘｍｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１９８９  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｄ．８６：３８２８−３２参照。
【０１５２】
ある様態においては、ＨＢＭＣ又は臍帯血細胞のエクスビボでの増殖を提供し、当該増殖は平均有核細胞数の増加、平均ＣＤ３４陽性細胞数の増加、細胞コロニー数の増加、又は生存率の増加であってもよい。ある様態においては、平均の有核細胞数又はＣＤ３４陽性細胞数において約２０％、約３０％、約４０％、又は約５０％の増加がある。より大きな増加が好ましい。サブスタンスＰアナログの存在下でクローン状態で形成されたＨＢＭＣコロニーの大きさは、サブスタンスＰアナログの不存在下で形成されたコロニーより約２倍、約３倍、又は約４倍大きい。
【０１５３】
［サブスタンスＰ及びそのアナログ］
当該技術分野の当業者によって理解されるように、サブスタンスＰはペプチド：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ（配列番号１）、又は、一文字表示ではＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）のことである。このように、本明細書に記載の方法及び組成物で用いられるようなサブスタンスＰアナログは、配列番号１に対する１又はそれ以上のアミノ酸置換を含むサブスタンスＰアナログのことであり、その受容体（ＮＫ−Ｉ）に結合させるためにサブスタンスＰと競合するか、例えば、Ｓｈｕｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２００６，１６（４）：１０６５−１０６９に記載のような当該技術分野における従来のアッセイによってＮＫ−Ｉ（ニューロキニン）受容体を刺激するか、のいずれかをすることができる。アミノ酸置換は保存的置換であっても、非保存的置換であってもよい。更に、アミノ酸置換は非標準アミノ酸（例えば、遺伝暗号によって通常にコード化される２０個のアミノ酸以外のアミノ酸）の置換を含んでもよい。ある例においては、サブスタンスＰアナログはノルロイシン（Ｎｌｅ）を含んでもよい。更に別の例においては、サブスタンスＰアナログはサルコシン（Ｓａｒ）又はＮ−メチルグリシン（ＭｅＧｌｙ）を含んでもよい。更に別の例においては、サブスタンスＰアナログは１ないし４の塩素、より好ましくは１の塩素と置換されるフェニルアラニンを含んでもよい。
【０１５４】
ある様態においては、サブスタンスＰアナログは例えば、１１番目のアミノ酸の位置がノルロイシン、すなわちペプチドが、Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｉｎ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｎｌｅ（ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ）（配列番号２）となるサブスタンスＰアナログのような、［Ｎｌｅ１１］−サブスタンスＰである。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは［Ｐｒｏ９］−サブスタンスＰであり、９番目のアミノ酸の位置がプロリンであるサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｐｒｏ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ（ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ）（配列番号３）を有する。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは［Ｓａｒ９］−サブスタンスＰであり、９番目のアミノ酸の位置  がサルコシン又はＮ−メチルグリシンであるサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  ＭｅＧｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ（ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ）（配列番号４）を有する。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは［Ｔｙｒ８］−サブスタンスＰであり、８番目のアミノ酸の位置がチロシンであるサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ（ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ）（配列番号５）を有する。［ｐ−Ｃｌ−Ｐｈｅ７，８］−サブスタンスＰは、位置７及び８のフェニルアラニン残基が４位で塩素化されたサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ（４−Ｃｌ）  Ｐｈｅ（４−Ｃｌ）  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ−ＮＨ２（ＲＰＫＰＱＱＦ（４−ＣＬ）Ｆ（４−ＣＬ）ＧＬＭ）（配列番号６）を有する。ある様態においては、１１番目のアミノ酸残基はメチオニンスルホキシドであり、ＲＰＩＣＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）となる。ある様態においては、９番目のアミノ酸残基はサルコシンであり、１１番目の残基はメチオニンスルホキシドであり、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）となる。ある様態においては、１１番目のアミノ酸残基はメチオニンスルホンであり、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）２（配列番号９）となる。［Ｓａｒ９，Ｍｅｔ（Ｏ２）１１］−サブスタンスＰは、９番目のアミノ酸の位置がサルコシン又はＮ−メチルグリシンであり、１１番目のアミノ酸の位置がＭｅｔ（Ｏ２）であるサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  ＭｅＧｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ−Ｏ２（ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ−Ｏ２）（配列番号１０）を有する。
【０１５５】
ある様態においては、本方法はサブスタンスＰアナログの添加による、インビトロ又はインビボでの幹細胞の増殖又は分化の向上を提供し、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：
Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）  （配列番号１１）、
又はその薬学的に許容可能な塩であり、
Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、
Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、
Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、
Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、
各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、
残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体
を示す。
【０１５６】
特定の様態においては、サブスタンスＰアナログはサブスタンスＰ（配列番号１）を含む。特定の様態においては、ブスタンスＰアナログはサブスタンスＰ（配列番号１）からなる。特定の様態においては、サブスタンスＰアナログはサブスタンスＰ（配列番号１）ではない。
【０１５７】
ある様態においては、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：
Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）  （配列番号１１）
であってもよく、
Ｘａａ１はＡｒｇであり、
Ｘａａ２はＰｒｏであり、
Ｘａａ３はＬｙｓであり、
Ｘａａ４はＰｒｏであり、
Ｘａａ５はＧｌｎであり、
Ｘａａ６はＧｌｎであり、
Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０はＬｅｕであり、
Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシン
である。
【０１５８】
好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログは本明細書に記載されたような式（Ｉ）であってもよく、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。
【０１５９】
特定の様態においては、サブスタンスＰアナログは、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ                          （配列番号１）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ                      （配列番号２）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ                          （配列番号３）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ                  （配列番号４）、
ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ                          （配列番号５）、
ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ  （配列番号６）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）                    （配列番号７）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）            （配列番号８）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）                  （配列番号９）、又は、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）          （配列番号１０）、
であってもよい。
【０１６０】
更により好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２であってもよく、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【０１６１】
ある様態においては、メチオニン残基側鎖の硫黄（Ｓ）は酸化されてもよい。ある様態においては、メチオニンはメチオニンスルホキシド（−ＮＨ−（αＣＨ（ＣＯ）−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３）である。ある様態においては、メチオニンはメチオニンスルホン又はメチオニンＳ，Ｓ−ジオキシド（−ＮＨ−αＣＨ（ＣＯ）−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ２）ＣＨ３）であり、本明細書中ではＭｅｔ（Ｏ）２のことである。サブスタンスＰアナログのアミノ末端（本明細書中でＺ１と示される）、又はカルボキシ末端（本明細書中でＺ２と示される）が変更できることは当該技術分野の当業者に明白である。その様態内に含まれるのは、サブスタンスＰアナログの「ブロック（ｂｌｏｃｋｅｄ）」形態、すなわち、Ｎ末端及び／又はＣ末端がＮ末端の−ＮＨ２又はＣ末端の−Ｃ（Ｏ）ＯＨと反応可能な成分でブロックされるサブスタンスＰアナログの形態である。いくつかの様態においては、サブスタンスＰアナログのＮ末端及び／又はＣ末端の装填物（ｃｈａｒｇｅ）はＮ−アシル化したペプチド、アミド、エステル、ヒドラジド、アルコール、及びその置換体であってもよい。本発明の好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログのＮ末端及び／又はＣ末端のいずれか（好ましくは双方の末端）がブロックされる。一般的には、Ｎ末端ブロック基はＲＣ（Ｏ）−を含み、Ｒは−Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールである。好ましいＮ末端ブロック基はアセチル、ホルミル、及びダンシルを含む。一般的には、Ｃ末端ブロック基は−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ及び−Ｃ（Ｏ）ＯＲを含み、各々のＲは独立であり、上のように規定される。好ましいＣ末端ブロック基はそれらを含み、各々のＲは独立であり、メチルである。別の好ましい様態においては、Ｃ末端の官能基はアミド化される。
【０１６２】
置換型アミドは一般的には、限定しないが式−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−の群を含み、Ｒは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換型（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、置換型（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、置換型（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、置換型（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、置換型（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、置換型の５ないし２０員環のヘテロアリール、６ないし２６員環のアルクヘテロアリール、及び置換型の６ないし２６員環のアルクヘテロアリールである。
【０１６３】
アミド同配体は一般的には、限定しないが−ＣＨ２ＮＨ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シス型及びトランス型）、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、及び−ＣＨ２ＳＯ−を含む。このような非アミド結合を有する化合物、及びこのような化合物を調整するための方法は、当該技術分野で公知である（例えば、Ｓｐａｔｏｌａ，Ｍａｒｃｈ  １９８３，Ｖｅｇａ  Ｄａｔａ  Ｖｏｌ．１，Ｉｓｓｕｅ  ３、Ｓｐａｔｏｌａ，１９８３，”Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ”，Ｉｎ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ，ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐ．２６７（一般的な総説）、Ｍｏｒｌｅｙ，１９８０，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ  １：４６３−４６８、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，１９７９，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｒｏｔ．Ｒｅｓ．１４：１７７−１８５（−ＣＨ２ＮＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−）、Ｓｐａｔｏｌａ  ｅｔ  ａｌ，１９８６，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ  ３８：１２４３−１２４９（−ＣＨ２−Ｓ）、Ｈａｎｎ，１９８２，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．Ｉ．１：３０７−３１４（−ＣＨ＝ＣＨ−、シス型及びトランス型）、Ａｌｍｑｕｉｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９８０，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２３：１３９２−１３９８（−ＣＯＣＨ２−）、Ｊｅｎｎｉｎｇｓ−Ｗｈｉｔｅ  ｅｔ  ａｌ，ｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ．Ｌｅｔｔ．２３：２５３３（−ＣＯＣＨ２−）、欧州特許出願第ＥＰ４５６６５号（１９８２）ＣＡ９７：３９４０５（−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−）、Ｈｏｌｌａｄａｙ  ｅｔ  ａｌ，１９８３，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２４：４４０１−４４０４（−Ｃ（ＯＨ）ＣＨ２−）、及びＨｒｕｂｙ，１９８２，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ  ３１：１８９−１９９（−ＣＨ２−Ｓ−）参照）。
【０１６４】
更に、１又はそれ以上のアミド結合は、ペプチドの構造又は活性と有意には干渉しないペプチド模倣又はアミド模倣の成分と置換してもよい。好適なアミド模倣成分は例えば、Ｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，１９９３，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３６：３０３９−３０４９に記載される。
【０１６５】
［組成物］
ある様態においては、本明細書に記載された様態は、幹細胞活性の低下と関連する障害、疾病、又は疾患を防止、治療又は寛解すべく、サブスタンスＰアナログの投与のために組成物を提供する。ある様態においては、組成物は、本明細書中に記載されたように式（Ｉ）による有効量のサブスタンスＰアナログを含む。
【０１６６】
サブスタンスＰアナログの医薬組成物は治療上有効な量の本明細書に記載の化合物を含み、１又はそれ以上の薬学的に許容可能な担体とともに調合される。本明細書中で用いられるように、用語「薬学的に許容可能な担体」又は「担体」は、無毒性、非活性固体、半固体、又は液体の注入剤、希釈剤、カプセル化用物質、あるいは任意の種類の補助剤をのことである。薬学的に許容可能な担体として作用しうる物質の例は、ラクトース、グルコース、及びスクロースのような糖と、トウモロコシデンプン及びジャガイモデンプンのようなデンプンと、セルロースならびにカルボキシルメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、及び酢酸セルロースのようなその派生物と、トラガント末と、麦芽と、ゼラチンと、滑石と、カカオ脂及び坐剤蝋（ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｙ  ｗａｘ）のような賦形剤と、ラッカセイ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及びダイズ油のような油と、プロピレングリコールのようなグリコールと、オレイン酸エチル及びラウリン酸エチルのようなエステルと、寒天と、水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム、アルギン酸、発熱物質を含有しない水、等張食塩水、リンガー液、エチルアルコール、ならびにリン酸バッファ溶液のようなバッファ剤と、ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウムのような無毒性で適合可能な他の潤滑剤とであり、同時に、着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味、香味、及び芳香剤、保存剤、ならびに抗酸化剤は更に調合者の判断に応じて組成物中にあってもよい。医薬組成物はヒト及び他の動物に、経口的に、直腸に、非経口的に、大槽内に、腟内に、腹腔内に、局所的に（粉末、軟膏、又は液滴によって）、口腔内（ｂｕｃａｌｌｙ）に、あるいは、経口若しくは経鼻の噴霧、又は吸入用の液体エーロゾル若しくは乾燥粉末の調合物として投与してもよい。
【０１６７】
例えば、注射可能な水性又は油性の無菌の懸濁剤といった注射用の非経口製剤は、好適な分散剤又は湿潤剤、及び懸濁剤を用いて既知の技術によって調合できる。注射可能な無菌調合物は更に、例えば、１，３−ブタンジオールの溶液のような、非経口的に許容可能な無毒性の希釈剤又は溶媒の注射可能な無菌溶液、懸濁剤又は乳剤であってもよい。水、リンガー液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、及び生理食塩水が、用いることができる許容可能な賦形剤及び溶媒の中にある。更に、無菌の不揮発性油は溶媒又は懸濁溶媒として従来用いられる。この目的のために、刺激の少ない不揮発性油は合成モノグリセリド又はジグリセリドを含んで用いてもよい。更に、オレイン酸のような脂肪酸は注射液の調合に用いてもよい。
【０１６８】
注射可能な調合物は、例えば、細菌保持フィルタを通した濾過によって、あるいは、無菌水又は使用前の他の注射可能な無菌溶媒に溶解又は分散できる固形の無菌組成物の形態で滅菌剤を取り込むことによって、無菌化される。
【０１６９】
薬剤の効果を引き延ばすために、皮下又は筋肉内の注射で薬剤の吸収を遅くすることが大抵は所望される。このことは水溶性がわずかな結晶性又は非結晶性の物質の液体懸濁剤の使用によって得られる。薬剤の吸収速度は、同様に結晶の大きさ及び結晶の形態に依存できる溶解速度に依存する。代替的に、非経口投与される剤形の吸収の遅延は、油賦形剤に薬剤を溶解又は懸濁することによって得てもよい。注射可能なデポー剤の形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドのような生分解性ポリマ中に、薬剤のマイクロカプセル基質を形成することによって生成される。薬剤のポリマとの比率、及び用いられる特定のポリマの性質に依存して、薬剤の放出速度は制御される。他の生分解性ポリマの例は、ポリ（オルトエステル）とポリ（無水物）とを含む。
【０１７０】
注入可能なデポー剤は更に、リポソーム、又は体組織と互換性のあるミクロエマルジョンに薬剤を封入することによって調整してもよい。
【０１７１】
好ましい様態においては、非経口組成物は静脈内に、筋肉内に、皮下に、あるいは皮内に投与してもよい。
【０１７２】
静脈内、エーロゾル吸入、局所的、気管内、気管支内、鼻腔内、皮下、舌下、及び経口投与が用いることができる。エーロゾルが投与される際のサブスタンスＰ又はその生理活性アナログの好適な濃度範囲は、約０．１μＭないし約５０００ｍＭである。用いることができる例示的な濃度は、約１ｍＭ、約１０ｍＭ、約５０ｍＭ、約７５ｍＭ、約１００ｍＭ、約３００ｍＭ、及び約１０００ｍＭを含む。筋肉内注射については、体重に対し約０．１ないし１．０ｍｌ／ｋｇの容量を用いてもよい。
【０１７３】
当該技術分野の当業者は、例えば質量、分布、及びクリアランス速度などの従来のパラメータによって、本明細書中に記載の方法及び組成物で用いるサブスタンスＰアナログの用量を型どおりに決定してもよい。用量は一般的には、約０．５ｎｇ／ｋｇないし約５００ｍｇ／ｋｇである。
【０１７４】
経口投与の固体剤形はカプセル剤、錠剤、丸剤、粉末、及び顆粒剤を含む。このような固体剤形においては、活性化合物はクエン酸ナトリウム又はリン酸二カルシウムのような、薬学的に許容可能な少なくとも１の不活性な賦形剤又は担体、ならびに／又は、ａ）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、及びケイ酸のような注入剤又は増量剤、ｂ）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、及びアカシアなどの結合剤、ｃ）グリセロールのような湿潤剤、ｄ）寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモ又はタピオカのデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、及び炭酸ナトリウムのような崩壊剤、ｅ）パラフィンのような遅延剤溶液と、ｆ）四級アンモニウム化合物のような吸収促進剤、ｇ）例えば、アセチルアルコール及びグリセロールモノステアレートなどの湿潤剤、ｈ）カオリンクレイ及びベントナイトクレイのような吸収剤、及び、ｉ）滑石、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形のポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、及びその混合物のような潤滑剤と混合してもよい。カプセル剤、錠剤、及び丸剤の場合においては、剤形は更にバッファ剤を含んでもよい。
【０１７５】
同種類の固形組成物は更に、ラクトース又は乳糖、ならびに高分子量のポリエチレングリコールなどの賦形剤を用いて、軟質及び硬質のゼラチンカプセル剤中に注入剤として用いてもよい。
【０１７６】
錠剤、糖剤、カプセル剤、丸剤、及び顆粒剤の固体剤形は腸溶コーティング剤、及び医薬製剤技術で公知の他のコーティング剤などのコーティング剤及びシェルで調製してもよい。それらは選択的に乳白剤を含んでもよく、更に選択的に、遅延手段で腸管の特定部分に１又はそれ以上の活性成分を、単独にあるいは優先的に放出する組成物であってもよい。用いることが可能な包理する組成物の例は、高分子物質及びろうを含む。
【０１７７】
同種類の固形組成物は更に、ラクトース又は乳糖、ならびに高分子量のポリエチレングリコールなどの賦形剤を用いて、軟質及び硬質のゼラチンカプセル剤中に注入剤として用いてもよい。
【０１７８】
活性化合物は更に、上述のように１又はそれ以上の賦形剤を有するマイクロカプセル化した形態にしてもよい。錠剤、糖剤、カプセル剤、丸剤、及び顆粒剤の固体剤形は腸溶コーティング剤、放出制御コーティング剤、及び医薬製剤技術で公知の他のコーティング剤などのコーティング剤及びシェルで調製してもよい。このような固体剤形において、活性化合物はスクロース、ラクトース、又はデンプンなどの少なくとも１の不活性の希釈剤と混合してもよい。このような剤形は更に、通常の慣行のように、例えば錠剤成形用潤滑剤、ならびに、ステアリン酸マグネシウム及び結晶セルロースのような他の錠剤成形助剤などの不活性希釈剤以外の更なる物質を含んでもよい。カプセル剤、錠剤、及び丸剤の場合においては、剤形は更にバッファ剤を含んでもよい。それらは選択的に乳白剤を含んでもよく、更に選択的に、遅延手段で腸管の特定部分に１又はそれ以上の活性成分を、単独にあるいは優先的に放出する組成物であってもよい。用いることが可能な包理する組成物の例は、高分子物質及びろうを含む。
【０１７９】
胃腸管を通っての吸収は、特に好適な組成物で調合された場合、ペプチドによって得られうる。例えば、サブスタンスＰアナログのようなペプチドは、経口吸収を提供するようプロドラッグ組成物で生成してもよい。Ｂｏｒｃｈａｒｄｔ  １９９９，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ６２（１−２）：２３１−２３８、Ｃａｔｎａｃｈ  ｅｔ  ａｌ，１９９４，Ｇｕｔ  ３５（４）：４４１−４４４参照。別の様態においては、経口の投与経路（限定しないが、経口摂取、頬側及び舌下経路を含む）を用いてもよい。好ましい様態においては、好適な調合物（例えば、腸溶コーティング剤）は、例えば口腔粘膜、胃、及び／又は小腸の厳しい環境における、活性成分の分解を防止又は最小化するのに用いられる。
【０１８０】
経口投与用の液体剤形は、薬学的に許容可能な乳剤、ミクロエマルジョン、液剤、懸濁剤、シロップ、及びエリキシル剤を含む。活性化合物に加えて、液体剤形は例えば、水、あるいは、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実、落花生、トウモロコシ、胚芽、オリーブ、ヒマシ、及びゴマの油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、及びソルビタン脂肪酸エステル、ならびにその混合物といった他の溶媒、可溶化剤、及び乳化剤などの当該技術分野で共通に用いられる不活性の希釈剤を含んでもよい。不活性の希釈剤の他に、経口組成物は更に、湿潤剤、乳化剤、及び懸濁剤のような補助剤、甘味剤、香味剤、ならびに芳香剤を含んでもよい。
【０１８１】
直腸内又は腟内投与用の組成物は好ましくは、周囲温度で固体であるが、体温で液体となり、ひいては直腸又は膣腔内で融解し、活性化合物を放出するカカオ脂、ポリエチレングリコール、又は坐剤蝋といった好適な非刺激性の賦形剤又は担体と、本発明の化合物とを混合することによって調製できる坐剤である。
【０１８２】
化合物の局所的又は経皮投与のための剤形は、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、液剤、噴霧、吸入剤、又はパッチを含む。活性成分は必要に応じて、薬学的に許容可能な担体、及び、いずれかの必要な保存剤又はバッファ剤と、無菌条件下で混合してもよい。点眼用調合物、点耳剤等は更に、これらの様態の範囲内にあるように熟慮される。
【０１８３】
軟膏、ペースト、クリーム、及びゲルは本発明の活性化合物に加えて、動物性及び植物性の脂肪、油、ろう、パラフィン、デンプン、トラガント、セルロース派生物、ポリエチレングリコール、ケイ素、ベントナイト、ケイ酸、滑石、ならびに酸化亜鉛、又はその混合物といった賦形剤を含んでもよい。
【０１８４】
化合物及び組成物は更に、ラクトース、滑石、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、及びポリアミド粉末、あるいはこれらの物質の混合物のような賦形剤を含みうる局所的な粉末及び噴霧として用いるために調製してもよい。噴霧はクロロフルオロ炭化水素などの通例の噴霧剤を更に含んでもよい。
【０１８５】
経皮パッチは化合物の身体への送達の制御を提供する、更なる利点を有する。このような剤形は適切な培地中に化合物を溶解又は調剤することによってなされうる。吸収促進剤は更に皮膚を通る化合物の流動を増加させるために用いてもよい。その速度は、速度制御膜を提供するか、あるいは、ポリマの基質又はゲル中に化合物を分散するか、のいずれかによって制御してもよい。
【０１８６】
医薬組成物は更に、液体エーロゾル又は吸入可能な乾燥粉末として送達用に調合してもよい。液体エーロゾル調合物は、細菌が慢性気管支炎及び肺炎といった気管支感染症の患者に存在する場合に、大部分は終末細気管支及び呼吸細気管支へ送達できる粒子サイズに噴霧化してもよい。病原菌は、気道を通って気管支、細気管支、及び肺実質（ｌｕｎｇ  ｐａｒｅｎｃｈｅｍａ）に至るまで、特に終末細気管支及び呼吸細気管支中に共通に存在する。感染の増悪中、細菌は更に肺胞中に存在しうる。液体エーロゾル及び吸入可能な乾燥粉末調合物は好ましくは、気管支ツリーを通って終末細気管支に、最終的には実質組織に送達される。
【０１８７】
エーロゾル化された調合物は、ノズル式、振動多孔板式、又は超音波式噴霧器のような、エーロゾルを形成する装置を用いて送達してもよく、好ましくはエーロゾル粒子の構造が、大部分は１ないし５μｍの質量中央平均径（ｍａｓｓ  ｍｅｄｉｕｍ  ａｖｅｒａｇｅ  ｄｉａｍｅｔｅｒ）を有するように選択してもよい。更に調合物は、好ましくは平衡した重量オスモル濃度、イオン強度、及び塩化物濃度、ならびに有効量の化合物を送達部位に送達できる最小のエーロゾル化可能な濃度を有する。更に、エーロゾル化された調合物は好ましくは、気道の機能性を負に低下させず、所望されない副作用を生じさせない。
【０１８８】
例えば、ノズル式、振動多孔板式、超音波式噴霧器及び付勢式乾燥粉末吸入器などの、エーロゾル調合物の投与に好適なエーロゾル装置は調合物を、大部分は１ないし５μｍの粒径範囲のエーロゾル粒径に噴霧化できる。「大部分（Ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔｌｙ）」は少なくとも７０％、好ましくは９０％以上の総ての生成されたエーロゾル粒子が１ないし５μｍの範囲にあることを意味する。ノズル式噴霧器は、液体溶液をエーロゾル液滴に分割するよう空気圧によって作動する。振動多孔板式噴霧器は多孔板を通して溶媒の液滴を押し出すよう、迅速に振動する多孔板によって生成される音波真空（ｓｏｎｉｃ  ｖａｃｕｕｍ）を用いることによって作動する。超音波噴霧器は液体を小さなエーロゾルの液滴に剪断する圧電性結晶によって作動する。様々な好適な装置が入手可能であり、例えば、振動多孔板式噴霧器であるＡｅｒｏＮｅｂ及びＡｅｒｏＤｏｓｅ（カリフォルニア州サニーヴェールのＡｅｒｏＧｅｎ社）、噴霧器であるＳｉｄｅｓｔｒｅａｍ７（英国ウェストサセックス州のＭｅｄｉｃ−Ａｉｄ社）、ノズル式噴霧器であるＰａｒｉ  ＬＣ７及びＰａｎ  ＬＣ  Ｓｔａｒ７（バージニア州リッチモンドのＰａｒｉ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ社）、ならびに超音波噴霧器であるＡｅｒｏｓｏｎｉｃ（ドイツ共和国ハイデンの（ＤｅＶｉｌｂｉｓｓ  Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ  Ｐｒｏｄｕｋｔｅ（Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ）社）、及び、ＵｌｔｒａＡｉｒｅ７（イリノイ州ヴァーノンヒルズのＯｍｒｏｎ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）を含む。
【０１８９】
都合の良いことに、サブスタンスＰアナログは約０．１μＭないし１Ｍの濃度で、液体剤形として投与してもよい。より好ましくは約０．１ｍＭないし約１００ｍＭである。更なるより好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログは対象の体重に基づいて投与してもよい。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは約０．０１ｍｇ／ｋｇないし約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。より好ましい様態においては、組成物は約０．０５ｍｇ／ｋｇないし約５ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。他の例示的な剤形は、約１０ＯｍＭのサブスタンスＰアナログ溶液のうちの約１ｍＬ、約１ｍＭのサブスタンスＰアナログ溶液のうちの約１ｍＬ、又は、非経口投与されるか、あるいは吸入による約１０μＭのサブスタンスＰアナログ溶液のうちの約１ｍＬを含む。
【０１９０】
調合方法は、当該技術分野で公知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９９５）に開示される。本発明で用いる医薬組成物は、非発熱性の無菌溶液又は懸濁剤の形態、被覆カプセル剤、坐剤、凍結乾燥粉末、経皮パッチ、あるいは当該技術分野で知られる他の形態であってもよい。好ましい投与経路、ひいては医薬組成物の種類は、レシピエントの状態、年齢、及びコンプライアンスとともに変化しうることは分かるであろう。
【０１９１】
［投与］
本方法及び組成物は、幹細胞活性の低減と関連する障害、疾病、及び疾患の防止又は寛解のために、ある頻度及び期間で投与できる。ある様態においては、組成物は１回（例えば、単一用量）投与してもよい。ある様態においては、組成物は複数回、例えば、薬剤と同時に、あるいは、投薬計画に従って、投与してもよい。ある様態においては、組成物は、投薬計画又は治療計画（すなわち、化学療法又は放射線治療）後の規定の時間、日、週、あるいは月に与えてもよい。ある様態においては、組成物は、間欠的に、例えば、３日おき、７日おき、１４日おき、３０日おき、６０日おき、９０日おき、１８０日おき、３６０日おきに投与してもよい。
【０１９２】
サブスタンスＰアナログは１又はそれ以上の生体応答修飾物質と組み合わせて用いてもよい。好ましい様態においては、生体応答修飾物質は造血を増加できる。ある様態においては、生体応答修飾物質及びサブスタンスＰアナログは同時に、例えば同一日に投与してもよい。ある様態においては、生体応答修飾物質及びサブスタンスＰアナログはヒトの照射計画に基づいて、間隔を置いて投与してもよい。例えば、生体応答修飾物質を１日目に与え、併用する生体応答修飾物質を有する、あるいは、有しないサブスタンスＰアナログは、治療の３日前、１日前、２日目、３日目、７日目、１０日目、又は１４日目に投与してもよい。このような組合せは、放射線治療の前後のいずれに投与してもよい。このような組合せは、骨髄抑制が顕在化する前後のいずれに投与してもよい。
【０１９３】
本発明の治療の方法によると、所望の結果を得るのに必要な量と時間で、本発明の治療上有効な量の化合物を患者に投与することによって、ヒト又は下等哺乳類の患者で、障害、疾病、又は疾患が治療及び予防される。本発明の「治療上有効な量（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ａｍｏｕｎｔ）」の化合物によって、任意の内科療法に適用可能な、合理的なベネフィット／リスク比で障害、疾病、又は疾患を治療するのに十分な化合物の量が示される。しかしながら、本発明の化合物及び組成物の一日の全使用量は、安全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定されることは理解されよう。任意の特定の患者に対する治療上有効な量の特異的なレベルは、治療中の疾患及びその疾患の重症度と、使用される特異的な化合物の活性と、使用される特異的な組成物と、患者の年齢、体重、全体的な健康、性別及び食事内容と、使用される特異的な化合物の投与時間、投与経路、及び排出速度と、治療期間と、使用される特定の化合物と組合せて、あるいは同時に用いられる薬剤と、医療分野で公知の同様の因子と、を含む多種の因子に依存するであろう。
【０１９４】
［創傷の治療に関する様態のための調合物］
組成物は生理学的に許容可能な担体中に、本明細書中に記載のような式ＩによるサブスタンスＰアナログを含む。特定の様態においては、組成物は局所的な塗布に対し好適である。特定の様態においては、組成物は対象における移植又は部分移植に対し好適である。組成物は約０．０１ｆＭないし約１０ｍＭのサブスタンスＰアナログ、通常には約０．０１ｐＭないし約１ｍＭのサブスタンスＰアナログを含んでもよく、より通常には約０．１ｐＭないし１００ｍＭのサブスタンスＰアナログを含む。
【０１９５】
担体は治療すべき目的領域及び創傷の種類に依存して変えてもよい。皮膚に対する塗布用には、クリーム又は軟膏が通常好ましい。用いることが可能な当該技術分野で既知の好適な基剤はラノリン、Ｓｉｌｖａｄｅｎｅ（登録商標）（Ｍａｒｉｏｎ社）、及びＡｑｕａｐｈｏｒ（登録商標）（Ｄｕｋｅ社）を含む。
【０１９６】
ある様態においては、サブスタンスＰアナログの、治療上又は寛解性の効果が生じうる１又はそれ以上の部位へのゆっくりとした、あるいは制御された放出を可能にする制御又は持続型の放出担体であってもよい。ある様態においては、制御放出担体は例えば、ヒアルロン酸、コンドロイチン、ヒドロキシメチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、パラフィン、セチルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、プラスチベース、親水性ゼラチン、デキストリン、ステリルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、メトキシエチレン無水マレイン酸、ナノ粒子、リポソーム、又はその組合せなどの高分子担体であってもよい。
【０１９７】
ある様態においては、組成物は創傷に治療上又は寛解性の効果を及ぼしうる医薬化合物を更に含んでもよい。好ましい様態においては、医薬化合物は抗菌薬、抗真菌薬、銀、又はセチルピリジニウム（ｃｅｔｙｐｙｒｉｄｉｎｉｕｍ）（米国特許第４，７７４，３２９号）であってもよい。
【０１９８】
好ましい様態においては、担体はポリガラクツロ酸（ｐｏｌｙｇａｌａｃｔｕｒａｎｉｃ  ａｃｉｄ）である。より好ましい様態においては、担体はα１−４結合したポリガラクツロン酸である。別の好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログは米国特許第６，２７４，５４８号、第６，３１３，１０３号、第５，９２９，０５１号、及び第７，０２２，６８３号に述べられたようなアロエペクチン担体に組み込まれてもよい。
【０１９９】
特定の様態においては、サブスタンスＰアナログは天然型及び合成型の包帯、ならびに他の創傷ドレッシング剤に組み込み、創傷のサブスタンスＰアナログへの持続的な曝露を提供してもよい。
【０２００】
ある様態においては、組成物はサブスタンスＰアナログを含む液体包帯であってもよい。このような様態は創傷に塗布される場合に粘性を実質的に増加できる液体又はゲルであってもよい。
【０２０１】
ある様態においては、サブスタンスＰアナログは３次元の（３Ｄ）基質又は包帯に含浸させてもよい。このような基質及び包帯は当該技術分野に既知であり、商業上入手可能なものもある。例えばＮｇはナノ粒子とともに用いるための、灌流可能な３Ｄ細胞基質の組織培養チャンバについて述べている。Ｎｇ，ＣＰ．ａｎｄ  Ｐｕｎ，Ｓ．Ｈ．２００７，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒ．９９（６）：１４９０−１５０１。商業上入手可能な３Ｄ基質は、Ｍａｔｒｉｇｅｌ（登録商標）（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｓｏｎ社）及びＣｕｌｔｒｅｘ（登録商標）（Ｔｒｅｖｉｇｅｎ社）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｓｏｎ社、及びＳｉｇｍａ社から入手可能な、コラーゲン、フィブリノーゲン、及びフィブリンといった間質基質の成分、ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｓｏｎ社）、Ｅｘｔｒａｃｅｌ（登録商標）（Ｇｌｙｃｏｓａｎ社）、及びＨｙＬｉｎｋ（登録商標）（Ｇｌｙｃｏｓａｎ社）などの半合成型ヒドロゲル、ならびにＡｌｇｉＭａｔｒｉｘ  ３Ｄ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）、といった再構成された基底膜の抽出物を含む。
【０２０２】
特定の様態においては、組成物は幹細胞組織の構造を有するサブスタンスＰアナログを含んでもよい。Ｇｒａｙｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０（３）：９０５−９１２、Ｈｅｉｋｅ  ２００７，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ，１３（３５）：３５９７−３６０７、Ｌａｐｏｒｔｅ  ａｎｄ  Ｓｈｅａ，２００７，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．５９（４−５）：２９２−３０７、Ｌｕｔｏｌｆ，ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．２００３  １００（９）：５４１３−５４１８参照。好ましい様態においては、組織基質は胎盤幹細胞又はヒト羊膜同種移植片からなってもよい。米国特許第７，３１１，９０４号及びＡｃｅｌａｇｒａｆｔ（登録商標）（Ｃｅｌｇｅｎｅ社）参照。
【０２０３】
好ましい様態においては、化合物は１又はそれ以上のサブスタンスＰアナログと、増殖又は複製可能な１又はそれ以上の細胞とともに含浸された包帯又は３Ｄ基質である。ある様態においては、細胞は未感作細胞、幹細胞、又は前駆細胞である。別の様態においては、幹細胞は胎盤、臍帯血、胚性、又は成体幹細胞である。より好ましい様態においては、幹細胞は皮膚性の上皮幹細胞又は内皮前駆細胞である。
【０２０４】
特定の様態においては、本明細書中に記載の３Ｄ型の包帯又は基質は、十分な厚さ又は深い創傷の治療用に用いてもよい。基質内での線維芽細胞、内皮細胞、又は血管内細胞の分化又は増殖の刺激は、前記細胞の創傷領域への移動を可能にしうる。このような様態においては、コラーゲン形成及び血管再生は深い創傷の創傷治癒を向上、改善又は促進できる。ある様態においては、創傷は外傷性創傷、糖尿病性創傷、又は褥瘡性潰瘍であってもよい。
【０２０５】
３Ｄ型の包帯又は基質中のサブスタンスＰアナログの濃度は、約０．−１ｐｇ／ｍｌないし約１００ｐｇ／ｍｌであってもよい。より好ましい様態においては、濃度は約１ｐｇ／ｍｌないし約１０ｎｇ／ｍｌであってもよい。更により好ましい様態においては、濃度は約５ｐｇ／ｍｌないし約１００ｐｇ／ｍｌであってもよい。
【０２０６】
特定の様態においては、組成物は更に、サイトカイン、リンホカイン、インターロイキン、ケモカイン、及び増殖因子などの増殖促進化合物を含んでもよい。特定の様態においては、増殖因子は例えば、
上皮増殖因子、血小板由来増殖因子（血小板由来増殖因子−Ｂを含む）、インスリン、インスリン様増殖因子、トランスフォーミング増殖因子β、神経細胞増殖因子、線維芽細胞増殖因子、血管内皮増殖因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、ノイロトロピン、エリスロポエチン、トロンボポエチン、ミオスタチン、ケラチノサイト増殖因子、骨形態形成蛋白質、アクチビンなどであってもよい。他の増殖因子の濃度は一般的には、約０．０１ｐＭないし約１ｍＭにできる。
【０２０７】
［キット］
ある様態においては、本発明はサブスタンスＰアナログを投与するためのキットを提供する。このようなキットは例えば、投与のためのデバイス（例えば、注射器）及び少なくとも１のサブスタンスＰアナログを有することができる。
【０２０８】
ある様態においては、本明細書中で提供されるのは、サブスタンスＰアナログ及び薬剤を投与するためのキットである。例えば、このようなキットは抗癌剤及び少なくとも１のサブスタンスＰアナログの双方と、選択的に１又はそれ以上の生体応答修飾物質とを含んでもよい。特定の様態においては、サブスタンスＰアナログは本明細書中に記載のような式Ｉであってもよい。薬剤及びサブスタンスＰアナログは別個の、又は、分割されている、あるいは、分割されていない容器中にあってもよい。その２の薬剤は一般使用者に便利であり、かつ、有効期間中有効であるように、液体、乾燥、凍結乾燥、又は凍結の形態であってもよい。処理剤は一回で、あるいは経時的に、例えば、１日、１週、１月、６月又は１２月の期間にわたって投与してもよい。
【０２０９】
［実施例］
以下の実施例は、本発明を例示する意図であり、何らかの方法で本発明を限定することを意図していない。
【実施例１】
【０２１０】
［実施例１：天然のサブスタンスＰと比較した血漿Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の半減期］
本目的は、３の動物種の血漿中のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−ＮＨ２（配列番号１０））の半減期を決定することであった。
【０２１１】
マウス、ヒト、及び非ヒト霊長類（簡略化のために以降は霊長類と示す）の凍結血漿は、Ｂｉｏｃｈｅｍｅｄ社（バージニア州ウィンチェスター）から取得された（ヒト：ロット番号ＢＣ０６１１０７−０７、霊長類：ロット番号ＣＹＮＢＲＥＣ−２７０７０、マウス：ロット番号Ｓ−７４２４２）。ＥＤＴＡは血漿の単離中に抗凝固薬として、総ての試料に対し付加された。
【０２１２】
血漿は解凍され、９９０μＬが１．５ｍＬの微量遠心機バイアルに添加された。血漿中で最終濃度のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を有するように、１ｍｇ／ｍＬ又は１０ｍｇ／ｍＬのいずれかでの２の異なる原液が１倍濃度でｐＨ７．４のリン酸バッファ食塩水（ＰＢＳ）を用いて調製された。１ｍｇ／ｍＬ溶液のうちの１０μＬが、７μＭの最終濃度のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のために９９０μＬの血漿に添加され、試料は混合するためにボルテックスされた。１０ｍｇ／ｍＬ溶液のうちの１０μＬが、７０μＭの最終濃度のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のために９９０μＬの血漿に添加され、試料は混合するためにボルテックスされた。深い９６ウェルプレートにおいて、７μＭ又は７０μＭの血漿試料のうちの５０μＬが、５０μＬのｐＨ７．４の１倍濃度のＰＢＳ溶液と混合された。
【０２１３】
予備的な半減期評価のために、９６ウェルプレートは３７℃の乾燥器中に、０、３、１０、６０、１２０、及び１８０分間配置された。時点ごとの各試料は、９０％のアセトニトリル（ＡＣＮ）中で４５０ｎｇ／ｍＬのグリブリドと、水中の０．１％のギ酸とのうち、４００μＬの添加とともに終結される。各試料は２回試験された。プレートは４，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離され、上清は別の９６ウェルプレートに移された。上清は他の時点で収集されている間、−８０℃で保存された。試料はＴｕｒｂｏｖａｐ（登録商標）を用いて蒸発させ、次いで、４０％のアセトニトリル中のＰｒｏ９−サブスタンスＰ（配列番号３）と、水中の０．１％のギ酸とのうち、５０μＬを用いて再構成される。Ｐｒｏ９−サブスタンスＰは内部標準として機能した。予備的評価が一度完了した場合（データは示さず）、その時点は確定部分として能率化された。確定研究のために評価された時点は、０、１０、２０、３０、６０、及び１２０分であった。試料は液体クロマトグラフィ／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）によって、分析及び定量化された。
【０２１４】
ＭＳ装置はＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社によって製造され（モデル：ＡＰＩ４０００）、装置のＬＣ部分は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ社製の高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）ポンプ（品番：ＬＣ−１０ＡＤｖｐ）と、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ  ＨＰＬＣカラム（品番：３００ＳＢ−Ｃ１８（２．１ｘ７５ｍｍ））を含んだ。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を分解するために、系の溶媒は２の異なる移動相からなり、Ａ又はＢとして示された。移動相Ａは９５％のＨ２Ｏ、５％のＡＣＮ、及び０．１％のギ酸であり、移動相Ｂは９０％のＡＣＮ、１０％のＨ２Ｏ、及び０．１％のギ酸であった。ＨＰＬＣカラムでの分離のために用いられるプログラムは、０ないし１．５分でＢの０％からＢの５０％まで、及び１．５分ないし１．６分でＢの５０％からＢの９０％まで動く直線勾配と、１．６分ないし２分での９０％でのホールド、その後の２．１分まででのＢの９０％からＢの０％への勾配と、２．１ないし２．５分での０％でのホールドであった。ＬＣ／ＭＳは０．６ｍＬ／分の流速を用いて操作するようプログラムされ、５μＬの試料が各実行のためにＨＰＬＣカラム上に注入された。更には、装置はターボ型イオン噴霧源とともに構成され、陽イオンインタフェースと複数の反応モニタリング取得モードとで操作するよう設定された。供給源温度は５００℃であり、全実行時間は２．５分であった。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の親／娘イオン対は６９８．８／３４８．４であり、内部標準のＰｒｏ９−サブスタンスＰについては６９５．２／２１１．３であった。
【０２１５】
７μＭの低濃度で、マウス中の平均半減期は３３分であった（標準偏差３）。ヒト及び霊長類に対する７μＭでの平均半減期は、３７分（標準偏差４）の霊長類の平均半減期と非常に類似していた。７０μＭの高濃度で、マウスの平均半減期は３８分（標準偏差１）であった。７０μＭでの霊長類に対する平均半減期は５９分（標準偏差６）であり、ヒトについては６６分（標準偏差０）であった。どの理論とも結びつかないが、高濃度のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、酵素分解からＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を安定化又は保護する血漿中の他のタンパク質と結合させることによって、おそらくはエクスビボでの系を飽和した。従って、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の半減期は試験された３種について３０ないし６０分である。
【０２１６】
【表１】
2010534653.tif 000002
【０２１７】
サブスタンスＰに関しては、Ｂｅｒｇｅｒらは天然のサブスタンスＰがラットの脳部分で、及び、エクスビボでヒトの血漿で素早く分解することを報告した。Ｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９７９，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２８：３１７３−３１８０。１０−７Ｍ未満の濃度で天然ペプチドは、１ｍｇ／ｍＬのラットの脳のホモジネート部分でインキュベートされる場合に、９．３分の半減期を有した。エクスビボでの血漿中の天然ペプチドの半減期は２４分であった。
【０２１８】
天然のサブスタンスＰは０．２μＭが１ｍｇ／ｍＬのラットの脳のホモジネート中でインキュベートされた場合、約５分（±２分）の半減期を有すると、Ｂｌｕｍｂｅｒｇ及びＴｅｉｃｈｂｅｒｇは定量した。Ｂｌｕｍｂｅｒｇ  ａｎｄ  Ｔｅｉｃｈｂｅｒｇ，１９７９，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．９０（１）：３４７−３５４。
【実施例２】
【０２１９】
［実施例２：例示的なサブスタンスＰアナログであるＨｏｍｓｐｅｒａは、放射線治療に続き細胞増殖及び分化を刺激する］
本研究は、照射マウスを例示的なサブスタンスＰアナログで治療する効果を決定するためになされた。
［Ａ．物質及び方法］
【０２２０】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、トリフルオロ酢酸塩の凍結乾燥粉末として、ＣＳＢｉｏ社（カリフォルニア州メンローパーク、カタログ番号ＣＳ２６６３）を介してＩｍｍｕｎｅＲｅｇｅｎ社によって提供された。試料は可溶化されるまで−２０℃で保存された。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は濃度３００μＭの溶液を得るために、薄い無菌生理食塩水及び薄い酢酸で溶解した。
【０２２１】
５ないし６週齢かつ通常の生理学的状態の７２匹のＢａｌｂ／ｃマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ社）は、非照射コントロール（非治療コントロール）（ｎ＝１２）、照射コントロール（賦形剤コントロール）（ｎ＝２０）、照射／曝露前治療（ｎ＝２０）、及び照射／曝露後治療（ｎ＝２０）の４群に分けられた。動物は換気型のマイクロアイソレータケージに別個に収容され（ケージごとに４ないし５匹のマウス）、適宜Ｌａｂ  Ｄｉｅｔの固形飼料を供給し、治療前の５ないし７日間順応させた。１日目に、動物はＸ線照射器（ＲａｄＳｏｕｒｃｅ２０００）内に４分間置かれた。非照射コントロールは放射線曝露を受けないが、照射コントロールは１Ｇｙ／分のレベルで照射に曝された。動物は賦形剤コントロール又は同一の賦形剤溶液中の３００μＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のいずれかで治療された。非照射コントロール群及び照射コントロール群は、放射線曝露後の７日間毎日、鼻腔内に２５μＬの無菌生理食塩水が投与された。放射線曝露前にＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物は、放射線曝露の１日前、及びその後の７日間毎日、鼻腔内に３００μＭの溶液のうち２５μＬが投与された。放射線曝露後にＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療した動物は、表２に示すように放射線曝露後の７日間毎日、鼻腔内に３００μＭの溶液のうち２５μＬが投与された。
【０２２２】
【表２】
2010534653.tif 000003
【０２２３】
放射線曝露に続き、総括的観察が少なくとも１日おきになされた。動物の体重は、総ての照射動物について１、２、３、４、５、９、及び１２日目に記録された。コントロールを含む各群の３匹のマウスが、表２に列挙した各時点で、又は各マウスが瀕死状態になった際に屠殺された。照射コントロール群、照射／曝露前治療群、及び照射／曝露後治療群からの各々の８の残りのマウスは、３０日目まで、あるいは瀕死状態になった場合に生存時間について観察された。
【０２２４】
【表３】
2010534653.tif 000004
【０２２５】
死亡及び予期されない副作用は、気づいたらすぐに施設の獣医師に報告した。マウスは動物が瀕死状態になるとすぐに、ＣＯ２の調整によって屠殺された。以下の判断基準と一致した場合、マウスは瀕死状態であると見なされた。
１）１週間で２０％又はそれ以上の体重の減少
２）過剰な体重減少（＞２０％）に通ずる遷延性の過剰な下痢
３）持続性喘鳴及び呼吸促迫
４）極度の嗜眠
５）皮膚弛緩症により示された脱水
６）震えにより示された発熱
７）衰弱、猫背の姿勢、麻痺、不全麻痺、膨張した腹部、潰瘍、膿瘍、発作、又は出血として観察された持続的な、あるいは過剰な疼痛又は窮迫
【０２２６】
動物の死亡率の割合及び死亡までの時間は、本研究中に各群で記録された。
【０２２７】
［Ｂ．結果］
［１．動物の体重］
非照射コントロールの動物の体重は記録されなかった。総ての照射群の動物の体重は放射線曝露後の５日間で全体重のおよそ９０％まで同様に低減する傾向にあった。放射線に曝露され、かつ、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）とともに治療（照射後治療）された動物は、９日目までに体重の減少をかなり回復すると観察された。しかしながら、照射前治療の動物及び照射コントロール（賦形剤コントロール）の動物は、瀕死状態、あるいは１２日目に屠殺されるまで、体重が減少し続けた。照射コントロールの動物は、１２日目に１６．１％（＋／−１．６％）の体重が減少した。照射前治療の動物は１２日目に２０．２％（＋／−２．４％）の体重が減少したが、照射後治療の動物は１２日目に１０．６％（＋／−１．９％）の体重が減少した。
【０２２８】
［２．ＣＢＣ（血液の差）］
血液の差は白血球（ＷＢＣ）、リンパ球（ＬＹＭ）、単球（ＭＯＮ）、顆粒球（ＧＲＡ）、赤血球（ＲＢＣ）、及び血小板（ＰＬＴ）のレベルを評価した。結果は細胞数／リットルとして報告され、非照射コントロール群の値に基準化された。
【０２２９】
［３．  ６時間］
白血球及びリンパ球のレベルは、照射動物で有意に減少する傾向にあった。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で事前治療された動物は、検定の非照射コントロール（賦形剤コントロール）及び照射コントロールの動物よりも低いリンパ球数を有することが観察された。照射動物中の単球及び顆粒球の数は、照射コントロール群及びＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）事前治療群の双方に対し有意に増加することが観察された。単球は非照射コントロールより約２００％以上増加し、顆粒球は非照射コントロールより約３００％以上増加する。照射動物中の赤血球及び血小板のレベルは、非照射コントロールと有意な差異が見られなかった。
【０２３０】
［４．曝露後２４時間］
照射動物の白血球数は、曝露後２４時間で非照射コントロールよりも低くなり続けた。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療（照射前及び照射後の双方で治療）された動物は、照射コントロールよりも高い白血球数を有した。放射線曝露後にＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物は、放射線曝露前にＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物より多い白血球数を有することが観察された（約１９％に対し約３０％）。これと同一の傾向がリンパ球数（約４％に対し約１７％）及び単球数（約９５％に対し約１１９％）の双方で観察された。しかしながら、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物の単球数は、非照射コントロールの動物のものと同様であり、一方、照射コントロールの動物は、単球レベルでほぼ５倍の減少を伴うことが観察された（約２０％に対し約１００％）。曝露後のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物の顆粒球数は、非照射コントロール（１００％）、及び放射線曝露前にＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）に曝露された動物（約９５％）で観察されるものよりも有意に大きい（約１５８％）が、照射に曝され、かつ賦形剤コントロールを施した動物は、顆粒球数の減少（約７５％）を伴うことが観察された。更に、照射動物中の赤血球及び血小板の数は、非照射コントロールで見られるものと有意に異なることが観察されなかった。
【０２３１】
［５．曝露後４８時間］
放射線曝露後４８時間での照射動物の白血球数は、曝露後２４時間後に観察されたのと至って同様であった。更に、照射コントロールは非照射コントロールよりも少ないＷＢＣ数を有する（１００％に対し約１７％）ことが観察されたが、照射後の対象は約２倍の量（約３８％）を有した。曝露後４８時間でのリンパ球数は曝露後２４時間で観察されたものと酷似した。放射線曝露後に治療された動物は、３の照射群のリンパ球レベルを最も高くした（約１８％）。単球及び顆粒球のレベルも同様に、この傾向に従った。放射線曝露後にＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物は、非照射動物、コントロールの照射動物、及び放射線治療前の動物のものよりも大きな単球及び顆粒球のレベルを有することが観察された（単球については、１００％、３８％、及び７５％に対し約１２０％、顆粒球については１００％、７８％、及び１０２％に対し１７０％）。赤血球数は照射に曝される動物で有意な差異がなかった。しかしながら、照射に曝された動物は血小板数の有意な減少を伴うことが観察された。放射線曝露前又は後のいずれかで、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）に曝される動物は、コントロールの照射動物よりも少ない血小板数を有することが観察された（約４０％）。
【０２３２】
［６．曝露後９６時間］
白血球数は曝露後９６時間で減少し続けた。この時点で、放射線曝露前に賦形剤又はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された照射動物は、非照射コントロールのほぼ１／２５（約４％）の白血球数を有した。放射線曝露に続き、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物は、照射コントロールの動物で観察されるより、ほぼ３倍大きな（約１２％）の白血球数を有した。興味深いことに、同様の結果がリンパ球、単球、及び顆粒球について観察された。照射動物中の単球及び顆粒球のレベルは４８時間の結果と比較して曝露後９６時間で劇的に低下した。更に、放射線曝露に続いてＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物は、照射され、賦形剤コントロールで治療されたものよりも実質的に多数の細胞数を有することが観察された。赤血球数は本質的に変化ないままで継続した。血小板数は放射線曝露後４８時間で見られるものと同様に観察された。血小板数のほぼ５０％の減少が照射動物で観察され、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の小さな減少傾向によって動物が治療された。
【０２３３】
［７．フローサイトメトリ］
フローサイトメトリは動物群で細胞マーカを同定及び定量化するよう行われたが、結果は決定的な傾向を明らかにしなかった。例えば、非照射コントロールの動物は４の測定時点（６、１８、２４、及び４８時間）にわたって、陽性のＣＤ３４細胞及び陽性のＳｃａ−１細胞で有意な分散を伴うことが観察された。非照射コントロールは陽性のＣＤ１１７及びＣＤ９細胞の割合において低下傾向を有することが観察された。同様の結果が照射動物で観察された。
【０２３４】
［Ｃ．考察］
研究は照射及びＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）での治療（３００μＭ溶液のうちの２５μＬを鼻腔内投与）の、マウスでの生理学的効果を評価するために行われた。マウスは非照射コントロール、照射コントロール、照射／曝露前治療、及び照射／曝露後治療にグループ化された。照射動物は１分あたり１／Ｇｙの速度で４ＧｙのＸ線照射に曝された。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療されない照射動物は、体重の劇的な減少とＣＢＣマーカの有意な減少を伴うことが観察された。
【０２３５】
放射線曝露１日前開始で、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で８日間治療された動物は照射／非治療の動物よりも大きな体重減少を伴うことが観察された。代替的に、放射線曝露に続いてＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で７日間治療された動物は、照射コントロールと比較して体重低下の減少を伴うことが観察された。
【０２３６】
照射に曝された動物は白血球数、リンパ球数、単球数、顆粒球数、及び血小板数の有意な減少を伴うことが観察された。これらの効果のほとんどは、放射線曝露後６時間程度で早期に観察されたが、血小板レベルの減少は曝露後４８時間まで観察されなかった。放射線曝露前（及び、その後７日間）のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）での治療は、照射コントロールと比較した場合に白血球、リンパ球、単球、及び顆粒球の数の増加を生じさせた。しかしながら、照射の曝露後に開始するＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）での７日間の治療は、これらの同一の細胞型に更に大きな影響を与えることが観察された。放射線曝露に続いてＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物は、放射線曝露に続く最初の４８時間に、非照射コントロールの動物よりも多数の単球及び顆粒球を有することが観察された。しかしながら、これらの効果は曝露後９６時間で見られず、単球及び顆粒球の数は劇的に減少した。
【０２３７】
フローサイトメトリのデータ分析は、試験したいずれの群についても決定的な傾向を明らかにしなかった。非照射コントロールの動物は照射／薬剤治療の動物で見られるのと同様の分散のレベルを伴うことが観察された。これは、生物学的な分散、機器上の分散、又はその双方の産物である可能性がある。
【０２３８】
照射に曝された動物は、屠殺又は死亡まで継続する劇的な体重の減少を伴うことが観察された。照射に続いて７日間、毎日Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で治療された動物は有意な体重減少の低下が観察された。照射後の治療群は更に、照射コントロールの動物及び照射前治療の動物と比較した場合、白血球、リンパ球、単球、及び顆粒球のレベルの有意な増加を伴うことが観察された。放射線曝露に続くＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）での７日間の治療は、動物の体重を維持し、重要なＣＢＣマーカを増加させる最も有効な方法を与えた。
【実施例３】
【０２３９】
［実施例３．例示的なサブスタンスＰアナログであるＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の細胞分化及び増殖に対する効果］
［Ａ．序論］
以下に記載の研究においては、ヒト骨髄から得られる造血細胞集団（あるいは、造血幹細胞、ＨＳＣ）がＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）とともに、あるいは、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）なしで培養され、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）が細胞の増殖又は分化に影響を与えるかどうかを決定した。
【０２４０】
増殖を評価するために、細胞内ＡＴＰ（ｉＡＴＰ）レベルが測定された。増殖中の細胞は一般的に高レベルのエネルギを要求し、それはｉＡＴＰによって提供されるため、ｉＡＴＰのレベルの増加は、細胞増殖の増加と相関する。
【０２４１】
増殖を試験又は評価するために、この場合において実験は、１４日のインキュベーション期間後の増殖及び分化に対するＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の効果を比較するように設計される。従って、より多くの、あるいは濃度の増加したサイトカイン又は増殖因子は、増殖のみより分化を支持するよう一般的には添加されるが、これらの濃度は更に増殖に有効である。従って、増殖は分化用に用いられるのと同様の条件下で試験された。
【０２４２】
分化を誘発するために、「最適な（ｏｐｔｉｍａｌ）」濃度の増殖因子及びサイトカインが用いられた。Ｒｉｃｈ，２００３，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｄｅｖｅｌ．６：１００−１０９，Ｒｉｃｈ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ，２００５，Ｊ．Ｔｏｘ．Ｓｃｉ．８７（２）：４２７−４４１。しかしながら、サブスタンスＰは造血を刺激し、分化に寄与するサイトカインの放出を促進することで知られるため、「最適下限（ｓｕｂｏｐｔｉｍａｌ）」濃度の増殖因子及びサイトカインは、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の効果が、飽和状態、ひいては最適なサイトカイン条件下で観察されない場合に更に用いられた。最適下限濃度は最適濃度の約５分の１であり、コロニー形成を支持することで知られる濃度であった。Ｒｉｃｈ，  ｐｅｒｓｏｎａｌ  ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ。
【０２４３】
［Ｂ．方法］
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（５ｍｇ、ロット番号Ｅ８４４）は固体化合物として出荷された。化合物は１ｍｌのイスコフ改変ダルベッコ培地（Ｉｓｃｏｖｅ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｅｄｉｕｍ：ＩＭＤＭ）に溶解され、培養中の最終用量が１ｎＭないし１ｘ１０−１６Ｍの範囲になるように、連続した用量反応は単一の対数用量で調製された。総ての希釈作業はＩＭＤＭ中で行われた。
【０２４４】
ヒトの骨髄吸引液から、単核細胞（ＭＮＣ）部分はＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ密度勾配遠心法を用いて骨髄全体から分離された。得られたＭＮＣ部分は、９９．９％の生存率を伴う６．２ｘ１０６細胞数／ｍｌの細胞濃度を有した。細胞濃度は培養中の最終細胞濃度が１０，０００細胞数／ウェルになるように調整された。
【０２４５】
ヒト骨髄のＭＮＣはＩＭＤＭ中に溶解され、ＣＡＭＥＯ（登録商標）−９６  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（コロラド州コロラドスプリングズのＨｅｍｏＧｅｎｉｘ社）中で、１０，０００細胞数／ウェルの濃度で培養された。Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（マスタミックス）は骨髄標的細胞（１部）を有し、生理食塩水混合物（４部）、メチルセルロース混合物（４部）、及び増殖因子混合物（１部）からなるＨｅｍｏＧｅｎｉｘ社専売の細胞培地である。Ｒｉｃｈ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ  ２００５，Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｓｃｉ  ８７（２）：４２７−４４１参照。
【０２４６】
異なる組合せ及び濃度の増殖因子は、細胞の特定の細胞型への分化を誘発するのに用いられる。標的となる細胞集団は、高増殖能性の幹及び前駆細胞（ＨＰＰ−ＳＰ）、多分化能幹細胞（ＣＦＣ−ＧＥＭＭ）、赤芽球バースト形成細胞（ＢＦＵ−Ｅ）、顆粒球マクロファージコロニー形成細胞（ＧＭ−ＣＦＣ）、巨核球コロニー形成細胞（Ｍｋ−ＣＦＣ）、Ｔリンパ球コロニー形成細胞（Ｔ−ＣＦＣ）、Ｂリンパ球コロニー形成細胞（Ｂ−ＣＦＣ）であった。
【０２４７】
本研究で用いられる増殖因子又はサイトカインはエリスロポエチン（ＥＰＯ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、インターロイキン３、６、２及び７（ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−２、及びＩＬ−７）、幹細胞因子（ＳＣＦ）、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、ならびに可溶性変異体のＦｌｔ３リガンド（Ｆｌｔ３−Ｌ）であった。
【０２４８】
各細胞型アッセイのために用いられる増殖因子又はサイトカインの濃度は、表４（最適な増殖濃度）及び表５（最適下限の増殖濃度）で提供される。
【０２４９】
【表４】
2010534653.tif 000005
【０２５０】
【表５】
2010534653.tif 000006
【０２５１】
最適下限濃度は用いられた最適濃度の約５０倍未満であった。
【０２５２】
１１μｌの希釈されたＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）溶液は、各ウェルに添加され、検出された細胞集団用の各１００μｌのマスタミックスがその後に添加された。細胞は５％のＣＯ２と５％のＯ２とからなる十分に加湿された雰囲気で、３７℃で１４日間、９６ウェルプレート中の７の標的細胞集団に対し、最適下限の、及び最適な刺激条件下で、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の存在又は不在下で、インキュベートされた。全コロニー数は倒立顕微鏡で手作業で計数され、その後すぐに、生物発光用にプレートを処理して、各ウェル中の細胞の細胞内ＡＴＰ濃度を決定した。本研究はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を取得して３０日以内、及びヒトの骨髄吸引液を取得して１４日以内に締めくくられた。
【０２５３】
総ての９６ウェルプレートを処理する前に、１ウェルごとの全コロニー数が顕微鏡によって手作業で計数された。変化の平均、標準偏差、割合の率は総ての群で計算され、移され、プロットされた。細胞内ＡＴＰ（ｉＡＴＰ）の濃度は手作業の計数後に測定された。ルミノメータの出力は規格外の相対発光単位（Ｒｅｌａｔｉｖｅ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ  Ｕｎｉｔｓ：ＲＬＵ）である。試料を測定する前に、ＡＴＰの検量線が行われた。これによって、ＲＬＵ値が規格化したＡＴＰ（μＭ）単位に自動計算できる。各ウェルから得られるＲＬＵとＡＴＰ値の双方のために、ルミノメータのソフトウェアは、変化の平均、標準偏差、割合の率を計算した。
【０２５４】
［Ｃ．結果］
データは、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）がヒト骨髄のＭＮＣから単離した造血幹細胞（ＨＳＣ）の増殖又は分化を刺激することを示す。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）はｉＡＴＰの増加によって示されるように、増殖を刺激した。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は更に造血前駆細胞のコロニー形成単位の増加によって示されるように、分化を刺激した。
【０２５５】
バックグラウンドは結果を理解する手助けになる。従来のＣＦＣアッセイは通常３５ｍｍのペトリ皿で２回実行される。最適下限の増殖因子の研究は、市販の培地で行うことができない。代わりに、別個の試薬が別個に調製及び添加されなければならない。この研究において、最適な増殖因子／サイトカイン濃度はＣＦＣアッセイのために通常に用いられるものである。このアッセイは機能的な分化アッセイであり、アッセイは標的細胞の機能的能力に依存して、生成中のコロニー型を同定する細胞を含むコロニーに分割及び分化することを示す。例えば、ＥＰＯ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＰＯなどの多くの系譜特異的な増殖因子は、系譜中の初期細胞用の増殖因子として、しかし、細胞の分化及び成熟用の生存因子として作用する点で、二機能性を示すことが知られている。因子がなければ、細胞はアポトーシスを始めるであろう。増殖を誘発するために、低濃度の増殖因子又はサイトカインが要求される。これらの濃度は多くの場合においては、ＣＦＣ分化アッセイ用の最適下限である。増殖のみが１４日目ではなく、７日目にＡＴＰアッセイを用いて測定された場合、異なる反応は、最適な及び最適下限の増殖因子／サイトカインの濃度を用いて観察することが可能である。本研究で検出された７の細胞集団について、１４日目での成長曲線は増殖が減少し分化が増加したことを示す。従って、１４日目に検出されたｉＡＴＰ濃度はコロニー内の残存の増殖を表わす。しかしながら、ＣＦＣ及びＡＴＰの双方のアッセイは同一条件下で行われたため、２の別個の表示から結果を直接的に比較することが可能である。これらの因子を考慮に入れると恐らくは、７の細胞集団間の反応は各コントロールに対する割合として最善に記載される。
【０２５６】
［１．コントロール］
培養の１４日後のコントロール値は表６及び表７に示される。多くの場合においては、コントロールの結果は期待値の範囲内にあり、細胞集団は３のカテゴリ：幹細胞集団、骨髄造血集団、及びリンパ球生成集団に分類される。２の幹細胞集団（ＨＰＰ−ＳＰ及びＢＦＵ−Ｅ）は最大の増殖及び分化ポテンシャルを示し、３の骨髄造血集団（ＣＦＣ−ＧＥＭＭ、ＧＭ−ＣＦＣ、及びＭｋ−ＣＦＣ）及び２のリンパ球生成集団（Ｔ−ＣＦＣ及びＢ−ＣＦＣ）がそれに続く。
【０２５７】
【表６】
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【０２５８】
【表７】
2010534653.tif 000008
【０２５９】
［２．Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の分化に対する効果］
最適な増殖因子の存在下において、ＢＦＵ−Ｅを除いた総ての細胞集団は分化ポテンシャルの向上又は増強を示した。ＢＦＵ−Ｅの用量反応は総ての化合物用量で有意にコントロール未満であったが、最低用量の１０−１６Ｍから１０−１３Ｍでのわずかな増加は、用いられる最高用量（１ナノモル（ｎＭ））での低減前に観察された。Ｂ−ＣＦＣについては、用量反応は釣鐘状の曲線であり、１０−１６Ｍでコントロール値未満で始まり、コントロール値まで低減する前に、１ピコモル（ｐＭ）で約１６３％のピークとなる。Ｍｋ−ＣＦＣ及びＣＦＣ−ＧＥＭＭの集団は更に、最低用量でのコントロール値から増加し、最高用量のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）でのコントロール値への低減前にそれぞれ、１０−１４Ｍないし１０−１３Ｍの間でピークに到達した。ＨＰＰ−ＳＰ、Ｔ−ＣＦＣ、及びＧＭ−ＣＦＣは総て、最低用量でコントロールより有意に高い値で開始した。Ｔ−ＣＦＣは、コントロールレベルへの低減前の１０−１６Ｍないし１０−１３Ｍの間で近似的にプラトーを形成した。ＨＰＰ−ＳＰ集団は１０−１５Ｍでピークとなり、その後コントロール値へ低減した。ＧＭ−ＣＦＣは、１０−１４Ｍでピークとなる総ての細胞集団のうちで最も大きな増強を生成した。
【０２６０】
最適下限の増殖因子／サイトカインの条件下で、ＧＭ−ＣＦＣ及びＣＦＣ−ＧＥＭＭの双方は１０−１４Ｍでピークとなり、その後低減する用量反応を生成したが、１ｎＭの最高用量でこれらの２の集団の値はコントロール値未満に低下しなかった。対照的に、Ｂ−ＣＦＣ及びＨＰＰ−ＳＰの集団は１ｎＭでわずかな低減を有する非常に漸進的な増加を生成した。Ｔ−ＣＦＣはコントロール値周りで前後し、１０−１３Ｍの後にコントロール値未満への低減を示した。ＢＦＵ−Ｅ及びＭｋ−ＣＦＣの双方が実質的に全用量反応についてコントロール値未満であったが、ピークはＭｋ−ＣＦＣについては１０−１４Ｍで、ＢＦＵ−Ｅについては１０−１３Ｍで生じた。用いられる最低用量でのコントロールより大きな値を示した集団については、用量反応は１０−１６Ｍより低い用量に拡張できた。
【０２６１】
［３．ｏｆ  Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の増殖に対する効果］
ＡＴＰ増殖アッセイは総ての細胞集団について、分化アッセイと異なる特性を示す。最適な増殖因子／サイトカインの条件でのＣＦＣアッセイのように、ＢＦＵ−Ｅは、用いられる最高用量で、コントロール値までの漸次的な増加を伴う、コントロール値未満の用量反応を示した。Ｔ−ＣＦＣについての用量反応はコントロールレベルで実質的に平坦であった。Ｂ−ＣＦＣは全用量範囲にわたって平坦であるが、コントロール値の約２００％となる用量反応を示した。総ての他の集団（ＨＰＰ−ＳＰ、ＣＦＣ−ＧＥＭＭ、ＧＭ−ＣＦＣ、及びＭｋ−ＣＦＣ）は通常Ｕ字形状の用量反応曲線を示し、最低用量のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）から約１０−１４Ｍまで低減し、約１０ｆＭないし１ｎＭで再び増加する。
【０２６２】
最適下限の増殖因子／サイトカイン濃度では、リンパ球生成細胞集団（Ｔ−ＣＦＣ及びＢ−ＣＦＣ）だけが、コントロール値以上の２００ないし３００％の集団を示した。しかしながら、これらの細胞集団の双方について、用量反応は実質的に平坦であった。Ｍｋ−ＣＦＣ集団は本質的に反応を示さないが、ＨＰＰ−ＳＰ、ＣＦＣ−ＧＥＭＭ、ＢＦＵ−Ｅ、及びＧＭ−ＣＦＣは、用いられる用量のほとんどに対しコントロールレベル未満となる用量反応を示した。
【０２６３】
しかしながら、Ｂ−ＣＦＣはＡＴＰ増殖中の最適な、及び最適下限の条件下で増加し、Ｔ−ＣＦＣは更にＡＴＰ増殖アッセイ中の最適下限条件下で増加するが、この増加の効果は、少なくとも用いられる用量範囲全体にわたる、用量依存性ではない。用量反応の非存在は、観察された反応が事実上プラトー効果であり、細胞集団が本研究で試験されるよりも更に低用量で化合物と感受性があることを示す。更に、これらの細胞は試験されたレベルで毒性を示さない。
【０２６４】
［Ｄ．考察］
１４日のインキュベーション後、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は増殖プロセスよりも分化に対し最大の効果を示した。注目すべきは、集団のほとんどについて、特徴的な細胞毒性が明確に存在しないことである。ＣＦＣ分化及びＡＴＰ増殖の双方のアッセイについて、ＢＦＵ−Ｅ集団は最適な、及び最適下限の条件下で抑制された唯一の集団であった。しかしながら、ＢＦＵ−Ｅ分化及び／又は増殖が増強される場合は、以下の実施例４を参照せよ。
【０２６５】
ＧＭ−ＣＦＣはＣＦＣ分化アッセイで最大の増強を示し、結果はサブスタンスＰの公表されたデータによるものである。Ｔ−ＣＦＣ及びＢ−ＣＦＣは最適な及び最適下限の条件下で、ＣＦＣ分化アッセイで用量反応を示した。しかしながら、Ｂ−ＣＦＣはＡＴＰ増殖中の最適な、及び最適下限の条件下で増加し、Ｔ−ＣＦＣは更にＡＴＰ増殖アッセイ中の最適下限条件下で増加するが、この増加の効果は、少なくとも用いられる用量範囲全体にわたる、用量依存性ではない。用量反応の非存在は、観察された反応が事実上プラトー効果であり、細胞集団が本研究で試験されるよりも更に低用量で化合物と感受性があることを示す。更に、これらの細胞は試験されたレベルで毒性を示さない。
【０２６６】
ＣＦＣ分化の表示を用いて観察される効果のいくつかは更に、サブスタンスＰについて発見され、文献に公表されてきた。ＡＴＰ増殖アッセイ及びＣＦＣ分化アッセイの結果の間の差は顕著である。第１に、高用量のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は増殖よりも分化を増加させ、効果は系譜特異的増殖因子、例えば、エリスロポエチンで知られる。第２に、検討中の用量範囲に曝されるほとんどのリンパ造血系細胞の集団について、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の主な効果は分化又は成熟化中にある。
【０２６７】
用いられる最低用量でのコントロールよりも大きな値を示す集団について、用量反応は１０−１６Ｍより低い用量に拡張できた。ｉＡＴＰを検出する前にコロニー数を評価する場合、コロニー数の変化は、化合物用量が増加した場合、コロニーの大きさの変化によるものであることは明らかであった。これは特に、ＨＰＰ−ＳＰ集団の場合であった。
【０２６８】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、最適な及び最適下限の双方の増殖因子条件下で、いくつかの造血前駆細胞の分化を刺激する際に有効であった。最適下限条件下では、ＨＰＰ−ＳＰ、ＧＭ−ＣＦＣ、ＣＦＣ−ＧＥＭＭ、及びＢ−ＣＦＣは分化するように顕著に刺激された。最適な条件下では、ＨＰＰ−ＳＰ、ＧＭ−ＣＦＣ、Ｔ−ＣＦＣ、Ｍｋ−ＣＦＣ、ＣＦＣ−ＧＥＭＭ、及びＢ−ＣＦＣの前駆細胞は分化するように刺激された。
【０２６９】
顆粒球／マクロファージ前駆細胞は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）に最も反応性があり、最適な及び最適下限の双方の増殖因子条件についてそれぞれ、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のないコントロールの約２５０％及び２００％で刺激された。ＣＦＣ−ＧＥＭＭ集団は、最適条件で約１７５％で、及び最適下限条件で約２２５％で、コントロール以上の驚くべきレベルまで更に刺激された。ＨＰＰ−ＳＰ及びＴ−ＣＦＣの細胞数は双方が、最適条件についてコントロール値の約１７５％であった。最適下限条件下において、Ｔ−ＣＦＣ集団はコントロール値から大きく変化しないが、ＨＰＰ−ＳＰ集団は集団のコントロールからほぼ１２５％増加した。最適条件において、Ｂ−ＣＦＣは約１０−１２ＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）濃度でコントロール集団の１６０％であった。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のＢ−ＣＦＣ細胞に対する効果は、最適下限条件下で顕著にならず、コントロール集団の１２５％で刺激されたのみであった。
【０２７０】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は更に、蛍光表示を用いてｉＡＴＰによって測定されるように増殖を刺激する際に有効であった。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の最も顕著な効果は、最適下限のサイトカインレベル下で培養されたＢ−ＣＦＣ及びＴ−ＣＦＣの前駆体に対してであった。Ｂ−ＣＦＣのｉＡＴＰレベルはＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のないコントロール集団からほぼ３００％増加し、Ｔ−ＣＦＣのｉＡＴＰレベルはコントロールから２００％増加した。更に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は試験された最低用量の１０−１６Ｍで有効であり、フェムトモル下限の濃度での増殖用の生物活性を示す。最適な増殖因子の条件に対する結果は、同一の細胞型（ＨＰＰ−ＳＰ、ＧＭ−ＣＦＣ、Ｔ−ＣＦＣ、Ｍｋ−ＣＦＣ、ＣＦＣ−ＧＥＭＭ、及びＢ−ＣＦＣの前駆細胞）がＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で刺激された点で、分化アッセイと同様である。Ｂ−ＣＦＣのｉＡＴＰレベルは更に、コントロールよりも有意に高かった（２００％）。
【実施例４】
【０２７１】
［実施例４．例示的なサブスタンスＰアナログであるＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の細胞分化及び増殖に対する効果（複数ドナーの研究）］
本研究は、３の異なる骨髄ドナーのヒト由来造血細胞集団を用いて、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）に反応したリンパ球造血系の分化を更に示すように行われた。
【０２７２】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（５ｍｇ、ロット番号Ｆ２０９）は固体化合物として出荷され、到着まで４℃で保存された。化合物は１ｍｌのイスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）に溶解され、培養中の最終用量が１ｎＭないし１ｘ１０−１６Ｍの範囲になるように、連続した用量反応は単一の対数用量で調製された。総ての希釈作業はＩＭＤＭ中で行われた。各ドナーからの細胞培養は異なる時間で開始され、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の新しい溶液は各々の別個の実験のために調製された。
【０２７３】
ヒトの骨髄吸引液から、各吸引液の単核細胞（ＭＮＣ）部分はＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ密度勾配遠心法を用いて骨髄全体から分離された。
【０２７４】
コロニー形成細胞（ＣＦＣ）アッセイは、最適な増殖因子／サイトカイン濃度を用いて実行された。試薬及び条件は、ＡＴＰ測定が行われないことを除いては、実施例３で用いたものと同様であった。各骨髄ドナーのＭＮＣ部分はＩＭＤＭに溶解され、Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（コロラド州コロラドスプリングズのＨｅｍｏＧｅｎｉｘ社）中で、５，０００細胞数／ウェルの濃度で培養された。
【０２７５】
標的となる細胞集団は、高増殖能性の幹及び前駆細胞（ＨＰＰ−ＳＰ）、多分化能幹細胞（ＣＦＣ−ＧＥＭＭ）、赤芽球バースト形成細胞（ＢＦＵ−Ｅ）、顆粒球マクロファージコロニー形成細胞（ＧＭ−ＣＦＣ）、巨核球コロニー形成細胞（Ｍｋ−ＣＦＣ）、Ｔリンパ球コロニー形成細胞（Ｔ−ＣＦＣ）、Ｂリンパ球コロニー形成細胞（Ｂ−ＣＦＣ）であった。
【０２７６】
本研究で用いられる増殖因子又はサイトカインはエリスロポエチン（ＥＰＯ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、インターロイキン３、６、２及び７（ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−２、及びＩＬ−７）、幹細胞因子（ＳＣＦ）、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、ならびに可溶性変異体のＦｌｔ３リガンド（Ｆｌｔ３−Ｌ）であった。
【０２７７】
ＣＦＣアッセイのために用いられた増殖因子又はサイトカインの濃度は、実施例３の表４で提供されたもの、例えば、最適条件と同一のものである。
【０２７８】
アッセイは９６ウェルプレート中で行われた。各ウェルに対し、１１μｌの試験化合物（Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標））希釈液は、検出された各細胞集団用の各１００μｌのＣｕｌｔｕｒｅ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘによって添加された。培養液は５％のＣＯ２と５％のＯ２とを含む十分に加湿された雰囲気で、３７℃で１４日間、インキュベートされた。その後、全コロニー数は倒立顕微鏡で手作業で計数された。
【０２７９】
変化の平均、標準偏差、割合の率は総ての群で計算され、移され、ドナーの関数としてプロットされた。コントロール値からの割合は計算され、更にドナーの関数としてプロットされた。更に、結果は総てのドナーの各々の別個の細胞集団と比較された。総ての結果はＭａｃ用のＰｒｉｓｍ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ５を用いてプロットされた。
【０２８０】
［Ａ．結果：個別の細胞集団からの反応］
［１．幹細胞］
３の総てのドナーについて、初期のＨＰＰ−ＳＰ幹細胞はより成熟した多分化能ＣＦＣ−ＧＥＭＭ幹細胞よりも大きな反応を示した。増強のレベルに対する変動が生じ、最高用量ではコロニー数の減少が通常に観察された。例えば、ＨＰＰ−ＳＰ細胞については、ドナー１が１０−１２Ｍ及び１０−１１ＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）濃度でコントロールの約３００％まで刺激されるが、ドナー２及び３はそれぞれ、コントロールの約２００％及び１７５％であった。双方のドナー２及び３は１０−１５ＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で最大に刺激され、濃度はドナー１に対するものより低かった。
【０２８１】
ＣＦＣ−ＧＥＭＭについてのドナー間の変動はあまり顕著でなく、その傾向は実施例３の最適な増殖因子で既に観察されたレベルと同様であった。ドナー１はコントロールより２００％大きい最大の増強を示したが、ドナー２及び３は双方ともコントロールの約１７５％であった。３の総てのドナーについて、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の最大の効果は１０−１４Ｍの用量で観察された。
【０２８２】
［２．造血系譜細胞］
ＧＭ−ＣＦＣ集団について、ドナー１及び２はバックグラウンド以上の反応を示したが、ドナー３は、ほぼ総ての試験されたＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）濃度についてコントロールレベルに非常に近かった。ドナー１及び２の双方が、それぞれ１０−１３ＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）でコントロールに対し、２００％及び１５０％まで最大に刺激された。ＧＭ−ＣＦＣで観察された傾向は単一の骨髄ドナーの研究からのものと同様である。更には、コロニー形成活性の２倍の増加と低濃度のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の有効性は、実施例６の複数ドナーの研究と一致する。
【０２８３】
３の総てのドナーについて、ＢＦＵ−ＥがＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の全用量範囲にわたって、ほとんどの場合において、コントロールよりも有意に大きい反応を示したことを、この研究は示した。実際に、ＢＦＵ−Ｅは１０−１１ＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で、第２のドナーからの総ての細胞集団のうちで、最大の反応を示した。コロニー数はドナーに依存して、コントロールに対し約１５０ないし３００％まで増加した。これらの刺激レベルは、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のＢＦＵ−Ｅコロニー形成を試験する実施例６の複数ドナーの研究と一致する。
【０２８４】
Ｍｋ−ＣＦＣ集団は更に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）に対する用量反応の変化を示した。しかしながら、ドナー１は化合物用量の増加とともに、増強の全体的な増加を示したが、ドナー２及び３の反応は比較的平坦であり、ドナー３は試験されたＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の用量にわたり、コントロールレベル未満又は近傍のいずれかであった。最大刺激の濃度がドナー間で変わるが、ドナー１及び２は双方、コントロールから２００％大きく巨核球のコロニー形成を刺激した。
【０２８５】
［３．リンパ球生成細胞集団］
これらの２の集団はドナー１で最大のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の効果を示した。Ｔ−ＣＦＣの反応はコントロールの３００％より大きく、ドナー１のＢ−ＣＦＣの２００％より大きかった。しかしながら、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のドナー２及び３に対する最大の効果は、コントロールの１５０％未満であった。ドナー２及び３のＴ−ＣＦＣは化合物用量の増加とともに漸進的な増加を示したが、Ｂ−ＣＦＣは化合物用量の増加とともにわずかな減少を示した。ドナー２及び３のＴ−ＣＦＣ集団は、コントロール値のわずかに上の０．１ピコモル（１０−１２Ｍ）で最大値を示した。ドナー２及び３については、ピーク値は１ｘ１０−１５Ｍで生じた。
【０２８６】
［Ｂ．結論］
３のドナーの全体的な反応は、最適な増殖因子及びサイトカイン濃度で刺激された場合に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）が、試験された７の総ての細胞集団の分化を増強することであった。最高用量では明らかな毒性はなかった。
【０２８７】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は複数系譜の前駆体であるＣＦＣ−ＧＥＭＭのコロニー形成を増加させるのに有効であり、一貫して、ＣＦＣ−ＧＥＭＭから生成されたコロニーを刺激するよう作用する。
【実施例５】
【０２８８】
［実施例５：例示的なサブスタンスＰアナログであるＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の幹細胞増殖及び分化に対する効果］
本研究の目的は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）  （ＩｍｍｕｎｅＲｅｇｅｎ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅｓ社）が、ＨＡＬＯ（登録商標）−９６ＨＰＰｒ（ＨｅｍｏＧｅｎｉｘ社）及び表現型分析を用いて検出されるような、初期のリンパ球造血系幹細胞（リンパ及び骨髄の双方の系譜の細胞）に影響を与えるかどうかを決定することであった。
【０２８９】
［Ａ．物質及び方法］
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（ロット番号Ｆ２０９）は固体化合物として出荷された。化合物はイスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）に溶解され、培養中の最終用量が１ｎＭないし１ｘ１０−１６Ｍの範囲になるように、連続した用量反応は単一の対数用量で調製された。総ての希釈作業はＩＭＤＭ中で行われた。
【０２９０】
ヒト骨髄細胞が得られた。単核細胞（ＭＮＣ）部分はＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ密度勾配遠心法を用いて骨髄全体から分離された。試料は９．３８ｘ１０６細胞数／ｍｌを含み、全有核細胞（ＴＮＣ）数は９９．１％の生存率を有して、２．８１ｘ１０７であった。
【０２９１】
ＨＡＬＯ（登録商標）−９６ＨＰＰｒアッセイ（コロラド州コロラドスプリングズのＨｅｍｏＧｅｎｉｘ社）は、高増殖能性の幹及び前駆細胞（ＨＰＰ−ＳＰ）と名付けられた初期のリンパ球造血系幹細胞集団用の第１及び第２の再播種アッセイである。米国特許第７，３５４，７２９号，第７，３５４，７３０号及び米国特許出願第１１／５６１，１３３号は、本明細書中にその全体を引用によって取り込んだ。
【０２９２】
ＨＰＰ−ＳＰ細胞集団は通常は静止状態、すなわちＧ０の細胞周期にある。アッセイの第１のステップは、ＨＰＰ−ＳＰが、インターロイキン３（ＩＬ−３）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、幹細胞因子（ＳＣＦ）、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、及び「Ｆｌｔ３」リガンド（Ｆｌ３−Ｌｉｇａｎｄ）を含む増殖因子／サイトカインのカクテルを用いて、静止状態外で、かつ細胞周期内で「初回刺激」を受ける培養液を調製するステップ（第１のアッセイと称する）を含んだ。ＭＮＣは５％のＣＯ２と５％のＯ２とを含む十分に加湿された雰囲気で、３７℃で５日間、１０，０００細胞数／ウェルの濃度でＳｕｓｐｅｎｓｉｏｎ  Ｅｘｐａｎｓｉｏｎ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（ＳＥＣ）の条件下で培養された。
【０２９３】
２の処理群と２のコントロールが生成された。処理群１は「初回刺激」のカクテルのない単独のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を有し、処理群２は「初回刺激」のカクテルを伴うＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を有する。２のコントロール群が生成された。コントロール群１はバックグラウンドであり、増殖因子が細胞に添加されず、コントロール２は「初回刺激」のカクテルで刺激された細胞を有する。
【０２９４】
各々の処理について、２４の複製ウェルは対数用量で１ｘ１０−１６Ｍないし１ｘ１０−９Ｍに、試験された各々の８のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）用量のために調製された。インキュベーションの５日後に、各用量及び各処理での８の複製ウェルは、生物発光による細胞内アデノシン三リン酸（ｉＡＴＰ）を検出することによって、細胞の増殖を測定するために用いられた。各用量の処理及びコントロールの残りの２４ウェルの細胞は除去され、貯留された。細胞は遠心分離され、上清は廃棄され、細胞濃度は各処理及びコントロールのために定量された。全細胞数は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみの細胞数に対する効果はないが、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激のカクテルの存在下で、コントロールで得られた以上の細胞数の増加が観察されたことを示した。最大の細胞数は０．１ピコモル（ｐＭ）でのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の用量で見られた。
【０２９５】
細胞は次いで、培養液が「完全な刺激」を受ける各用量の処理及びコントロールのために、ＳＥＣ培養液を調製することによって、第二次の再播種ステップ（第２のアッセイ）のために調製された。各々の培養液は４，０００細胞数／ウェルを含み、１２の複製が９６ウェルプレートで調製された。培養液は第１のアッセイと同一条件下でインキュベートされるが、インキュベート期間は６日間に延長された。この時点で、８の複製がｉＡＴＰ濃度ひいては増殖を定量化するために用いられた。各処理用量及びコントロールの残りの８の複製ウェルの細胞は除去され、貯留され、遠心分離された。上清の除去後、細胞は約０．７ｍｌのＩＭＤＭに再懸濁された。不十分な細胞が各管での細胞数を得るために用いられる。細胞懸濁剤は次いで、多様な表面抗原分類（ＣＤ）マーカに対する、異なる蛍光色素結合抗体パネルを用いて染色される６の管に分割された。
【０２９６】
用いられたパネルは、パネル１がＣＤ９０／ＣＤ１３３／ＣＤ４５／ＣＤ３４、パネル２がＣＤ６１／ＣＤ４１／ＣＤ４５、パネル３がＣＤ４５／ＣＤ１５／ＣＤ１４、パネル４がＣＤ４５／グリコフォリンＡ／７−ＡＡＤ、パネル５がＣＤ４５／ＣＤ３８／ＣＤ１１７、及びパネル６がＣＤ４５／ＣＤ５６／ＣＤ１９／ＣＤ３であった。総てのパネルに含まれるのが、総ての造血細胞に存在するＣＤ４５汎白血球マーカであった。更に表８を参照。
【０２９７】
最大５，０００事象がフローサイトメトリによって得られ、結果はＭａｃ用のソフトウェアであるＦｌｏＪｏ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ８．７を用いて評価された。分析から非造血細胞を除外するために、膜の発現マーカの存在（又は非存在）は、ＣＤ４５の「同期」部位を通して「同期」された。従って、集団がＣＤ３４陽性又はＣＤ３４陽性／ＣＤ１３３陽性の場合、双方は更にＣＤ４５陽性である。同様に、集団がグリコフォリンＡ陽性である場合、更にＣＤ４５陽性である。この同期手順はＣＤ４５陰性となりうる非常に初期の造血幹細胞を除外することができるが、更にＣＤ４５陰性であると知られる間葉系幹細胞も除外される。従って総ての結果は全集団ではなく、ＣＤ４５陽性細胞の割合として示される。
【０２９８】
【表８】
2010534653.tif 000009
【０２９９】
［Ｂ．結果：Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の幹細胞の増殖に対する効果］
２の処理群及び２のコントロール群は、ＨＰＰ−ＳＰ細胞を増殖する能力について試験された。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、初回刺激のカクテルの不存在下で試験されて、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみがＧ０期の外、かつ細胞周期内で静止状態のＨＰＰ−ＳＰ細胞を「初回刺激」する能力を有するかどうか（すなわち、第１のアッセイ）を決定した。更に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は初回刺激のカクテルを用いて試験されて、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）が「初回刺激」のＨＰＰ−ＳＰ細胞の増殖ポテンシャルを変更するかどうか（すなわち、第２のアッセイ）を決定した。
【０３００】
ヒトのＭＮＣから得られた初期のＨＰＰ−ＳＰ幹細胞は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみの用量の増加の存在下で、５日間のインキュベーション期間にわたって静止状態外で初回刺激された。これらの条件下で、ＡＴＰベースの生物発光によって検出されるような増殖の用量依存性の増減はなかった。更に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみは、「初回刺激」のカクテルとともにインキュベートされたＨＰＰ−ＳＰ細胞の第１のアッセイと比較して、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみを有する第１のアッセイのＡＴＰの不足によって示されるように、初回刺激の混合で、用いられる増殖因子及びサイトカインに置換することができなかった。
【０３０１】
更に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）が「初回刺激」のカクテルの存在下で試験された場合、ＨＰＰ−ＳＰ増殖に対する用量依存性の効果はなかった。
【０３０２】
実験の第２の部分においては、４の総ての処理条件での細胞はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の不存在下で総て、プレートから除去され、洗浄され、再播種されたが、増殖因子のカクテルは細胞の「完全な刺激」を促進した。増殖は５％のＣＯ２と５％のＯ２とを含む十分に加湿された雰囲気で、更に６日間、３７℃で細胞をインキュベートした後で、ＡＴＰ生物発光を用いて測定された。
【０３０３】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみ（第２のアッセイ−Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみ＋「完全な刺激」）で事前処理された培養液を用いた「完全な刺激」下で、あるいは、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋「初回刺激」のカクテル（第２のアッセイ−Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋「完全な刺激」）の存在下で、第２のアッセイのバックグラウンド、及び、第２のアッセイのＨＰＰ−ＳＰの「完全な刺激」のコントロールと比べて、増殖の決定的な変化は観察されなかった。従って、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の用量依存性の効果は観察されなかった。
【０３０４】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の細胞表現型に対する効果を試験するために、細胞は６日間のインキュベーション後に第２の播種から除去された。「完全な刺激」条件下での第２の播種後の、初期の培養中の幹細胞及び分化細胞に対するＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の効果は、フローサイトメトリを用いて決定された。
【０３０５】
総ての造血細胞はＣＤ４５陽性マーカを発現するため、細胞はこのマーカで同期され、更に対象の表現型に依存して更なるＣＤマーカの存在に基づき単離された。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の初期の造血幹細胞及び前駆細胞に対する効果を試験するために、抗体はＣＤ３４陽性細胞、ＣＤ９０陽性細胞、及びＣＤ１３３陽性細胞集団に対して用いられた。影響を受けた細胞の比率は小さく、ＣＤ４５陽性部位の利用可能な幹細胞の比率から予測される。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみのＣＤ３４陽性、ＣＤ９０陽性、及びＣＤ１３３陽性の細胞に対する効果は、総ての３の細胞集団で増加し、０．０１ｐＭ（１ｘ１０−１４Ｍ）で最大値を有し、その後低減し、明確にプラトーになった。最大刺激で、約１％のＣＤ４５陽性細胞が３の細胞集団のマーカを有する。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激の存在下で、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の濃度が増加すると、１ｐＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）に対するＣＤ３４陽性細胞の漸進的な増加（ＣＤ４５陽性細胞の約０．５％）が明らかになり、ＣＤ３４陽性を発現する細胞の低減が続く。ＣＤ１３３陽性細胞の比率は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の濃度の増加とともにＣＤ４５陽性細胞の約０．７５％から約０．４％まで低減するのが見られるが、０．０１ｐＭでの明らかな域外値を除いて、ＣＤ９０陽性細胞の割合は、ＣＤ４５陽性細胞のほぼ２％まで増加し、０．１ｐＭで最大値に達し、ＣＤ４５陽性細胞の約０．７５％へのＣＤ９０陽性細胞の低減が続く。総ての集団に対する反応はコントロールよりも大きく、ＣＤ９０陽性集団はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激処理群で有意に増加する。幹細胞集団のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみに対する反応の増加は、より多数の関連する分化細胞が、増殖因子及びサイトカインによって影響を受ける場合に利用可能であることを意味している。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激の存在下でのＣＤ３４陽性細胞の小さな増加は、同様の反応を意味する。しかしながら、ＣＤ１３３陽性細胞はＣＤ９０陽性又はＣＤ３４陽性細胞のいずれよりも初期的であり、この集団の低減はＣＤ９０陽性及びＣＤ３４陽性細胞の増加で生じるであろう。これは、ＣＤ３４陽性のわずかな増加、及びＣＤ９０陽性細胞のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激に対するより有意な増加の理由になりうる。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激に反応するＣＤ９０陽性細胞の増加は、更にＣＤ３陽性のＴリンパ球の増加に対する前駆体となりうる。
【０３０６】
ＣＤ４５陽性を発現する次の二重陽性の幹細胞集団が試験され、ＣＤ３４陽性／ＣＤ１３３陽性、ＣＤ３４陽性／ＣＤ９０陽性、及びＣＤ９０陽性／ＣＤ１３３陽性細胞を含んだ。二重陽性の幹細胞集団は、ＨＳＰのみに対する単一の陽性の幹細胞反応と同一のパターンに従い、０．０１ｐＭでピーク反応を生成する。影響を受けた細胞の比率は、ＣＤ４５陽性のおよそ１％となる単一の陽性細胞とほぼ同様である（ＣＤ４５陽性細胞の約０．６５％ないし約０．９％の範囲）。しかしながら、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激に対するこの二重の集団反応は、単一の陽性集団と比較して低減する（二重の陽性集団の値は総てＣＤ４５陽性細胞の０．４％未満である）。特に、ＣＤ３４陽性／ＣＤ９０陽性及びＣＤ９０陽性／ＣＤ１３３陽性は双方とも、単一のＣＤ９０陽性集団と比較して劇的に低減する。低比率の二重陽性細胞は、初期細胞の関連分化経路への流出を示しうる。コントロールと比較して、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみに対する反応は有意に増加する。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、分化アッセイ中の細胞コロニーの形成を初期段階の幹細胞から増加させ、恐らくはこれらの二重の陽性集団を増加させることが示された。
【０３０７】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の巨核球に対する効果を決定するために、ＣＤ４１陽性又はＣＤ６１の単一マーカを発現する細胞、又は二重マーカ（ＣＤ４１陽性／ＣＤ６１陽性）を発現する細胞が試験された。ＣＤ６１及びＣＤ４１の双方は時として、巨核球及び血小板の存在を決定するためにのみ用いられる。これらの２の組合せがそれらの存在を最終的に規定する。従って、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみで、低比率の細胞はＣＤ６１陽性の抗原を発現する（ＣＤ４５陽性細胞の約２％）が、非常にわずかなＣＤ４１陽性があり、二重陽性細胞が存在する（０．５％未満）。逆に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激の存在下においては、単一陽性及びＣＤ４１／ＣＤ６１二重陽性の集団は１０ｐＭでピークとなる。このＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）用量でのＣＤ４１陽性及びＣＤ６１陽性の単一の陽性細胞の比率は、ＣＤ４５陽性細胞の約１８％であるが、ＣＤ４５陽性細胞の約３５％がＣＤ４１及びＣＤ６１の双方のマーカを発現する（二重陽性細胞）。これは、コントロールと比較して劇的な増加であり、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）がこの系譜に対し特に有効になりうることを意味する。更に、骨髄幹細胞が巨核球コロニーの形成を促進する増殖因子及びサイトカインに曝される場合、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の培養液への添加は血小板コロニー形成を増加させる。複数ドナーの実験において、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の不存在下で培養されるコントロールの少なくとも２倍で巨核球コロニー形成活性を刺激する。これらの組合せ実験はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）が、巨核球への幹細胞の成熟化の初期及び後期の双方の段階で機能しうることを示唆する。初期のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の機能は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激試料で見られる血小板表現型の増加によって示される。本研究では、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、静止状態外で初回刺激中の初期培養液でのみ添加された。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の後期段階の機能は、コロニ形成アッセイによって示され、効果は骨髄系譜と関連する細胞で見られ、巨核球コロニー形成を評価するのに用いられた増殖因子及びサイトカインに反応する。
【０３０８】
ＣＤ１５陽性細胞の存在は顆粒球の有効性を示す。コントロールと比較すると、ＣＤ１５陽性細胞は単独で用いられたか、又は第１の培養液中の「初回刺激」とともに用いられたかにかかわらず、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の用量範囲にわたって影響を与えるように見えない。ＣＤ４５陽性細胞の約５５％が、コントロールと比較して約４２％のＣＤ１５陽性マーカを有する場合には、１０−１１ＭでのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激を伴うバックグラウンドレベル以上の発現の増加がある。しかしながら、顆粒球の減少は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみ、及びＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激でのＣＤ１４陽性細胞の増加によってなされる。明らかな域外値はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）では０．１ｐＭで、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激では１ｐＭで生じるが、ＣＤ１４陽性集団は増加する。効果はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみで最大であり、約１５％のＣＤ４５陽性細胞はＣＤ１４陽性を発現し、値は約１１％のバックグラウンドのＣＤ１４陽性発現レベル以上である。従って、ＣＤ１４陽性細胞の増加はＣＤ１５陽性の顆粒球を犠牲にしうる。幹細胞分化を試験する別個のコロニー形成アッセイは、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の能力を確認して、骨髄幹細胞の試料からの顆粒球／マクロファージコロニーの数を増加させる。しかしながら、コロニー形成アッセイは顆粒球とマクロファージ前駆細胞との間を区別しない。組合せデータはＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）が顆粒球と比べ、初期段階のマクロファージ細胞に対し更なる効果を与え、静止状態の細胞が細胞周期に入る場合に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）がマクロファージ集団に優先的に作用しうることを示唆する。これらの細胞で、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、幹細胞が静止状態になる初期段階、及び、幹細胞が骨髄系譜と関連づけられて、分化し始める後期段階の双方で、機能するように見える。
【０３０９】
赤血球細胞はグリコフォリンＡ陽性（ＣＤ２３５ａ）細胞に対する抗体を用いて試験された。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみ、及びＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激の双方が、１の対数だけ位相が不一致に見える、興味深いが、ほぼ同一の反応を生成する。最低用量のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）での細胞の比率は、更にコントロールと同様であるように見え、全反応は各々のコントロール以上に有意に増加しない（Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激については０．７５％、及びＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみについては約１％）。反応はコントロール値に近いにもかかわらず、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激の左側と反応した変化は、細胞がより敏感になったことを示す。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、「初回刺激」期間中に細胞に与えられる場合、このアッセイにおいて有効ではないが、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）はコロニー形成アッセイによって確認されるように、後期段階で赤血球細胞を刺激するよう機能する。例えば、実施例４及び６参照。コロニー形成アッセイにおいて、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のないコントロールと比較して、２倍以上の赤血球前駆体の形成を増加させる。これらの差はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）が、細胞周期に既に入り、骨髄系譜に関連づけられた幹細胞に作用することにより、赤血球前駆体を増加させる場合のモデルを支持する。
【０３１０】
ＣＤ３８発現マーカの存在は関連する造血前駆細胞、及び、赤芽球バースト形成細胞や顆粒球／マクロファージコロニー形成細胞などの前駆細胞の指標である。ＣＤ３８陽性細胞の反応は多くの点でグリコフォリンＡ陽性細胞と同様であるが、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみ及びＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激に対する反応が、１０−１１ＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）濃度でのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみの最大の刺激（ＣＤ４５陽性細胞の約３５％）と比べて、最大の発現（ＣＤ４５陽性細胞の約３５％）が１０−１２ＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で生じたため、より大きな感度を示すＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激の細胞と同様であり、一対数だけ位相のずれがあるからである。ＣＤ４５陽性細胞の比率としてはほとんど差異がないが、ＣＤ３８陽性細胞の比率の増加は、コントロール中のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激で更に見られる。ＣＤ１１７陽性細胞集団の、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみ、又はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激に対する用量依存性の反応はいずれもないが、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみと比較してＣＤ１１７を発現する一定の割合のＣＤ４５陽性細胞を刺激した（約２．５％ないし約０．５％未満）。
【０３１１】
ＣＤ３陽性、ＣＤ１９陽性、及びＣＤ５６陽性の細胞に対する抗体はリンパ系譜の細胞を同定するのに用いられた。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激処理については、ＣＤ４５陽性細胞の約３５％のバックグラウンド値以上の、１ｐＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）でのＣＤ４５陽性細胞について５０％の最大値に到達するＣＤ３陽性のＴリンパ球の増加があるように見える。変動はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみで生じるが、ほとんどの値はコントロールと同様である。ＣＤ３陽性細胞での反応と対照的に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみは、１ｐＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で約５％のＣＤ４５陽性細胞の最大値を有するＣＤ１９陽性のＢリンパ球集団に対し、コントロール以上に（ＣＤ４５陽性の１．１％）に増加する。コントロールについてはこの状況は反転し、ＣＤ５６発現はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみ又はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激を有するいずれのコントロールからも相応には異ならないが、この状況はＣＤ５６陽性のＮＫ細胞集団について、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみと同様であるように見える。
【０３１２】
［Ｃ．結論］
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみ及びＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激に対する表現型反応は細胞型特異的であり、いくつかの集団については、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のみが劇的な効果を有するが、他の集団については、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋初回刺激が効果を有することを示す。更に双方の処理が、コントロールと異なる反応を起こす。増殖レベルでの反応の不足と対照的に、幹細胞での発現マーカ、及び関連する分化細胞の応答は非常に劇的である。
【０３１３】
更に、データは、幹細胞レベルで、刺激及び／又は増強が生じ、次いでコロニー形成アッセイによって確認されるように、特異的な系譜集団の増減を生じさせることを示す。従って、ＣＤ９０陽性細胞の増加はリンパ球生成幹細胞のＴリンパ球及びＢリンパ球系譜への流入を増加できた。ＣＤ３４陽性／ＣＤ１３３陽性のマーカを発現する造血幹細胞の増加は、特異的な造血関連細胞、特に巨核球及びＣＤ１４陽性細胞の増加を示し、後者はＣＤ１５陽性顆粒球を犠牲になることを示した。
【実施例６】
【０３１４】
［実施例６：例示的なサブスタンスＰアナログであるＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、例示的な成体幹細であるヒト骨髄細胞（ＨＢＭＣ）の増殖を刺激する］
本研究の目的は、インビトロでのヒト骨髄細胞を用いて、天然のＣ末端でアミド化されたサブスタンスＰと、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の幹細胞造血を比較することであった。
【０３１５】
［Ａ．物質及び方法］
コロニー形成単位（ＣＦＵ）アッセイが、ヒト骨髄から単離された造血幹細胞を刺激して、系譜特異的な前駆細胞に分化する際に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の効果を試験するのに用いられた。幹細胞は増殖因子に反応して分化するため、顕微鏡を用いて可視化できる異なる形態を有する細胞のコロニーを形成する。本研究は赤血球、血小板、及び顆粒球／マクロファージの３の異なる前駆細胞集団の形態を試験した。
【０３１６】
骨髄吸引液は、以下の好適なガイドライン及びプロトコルに従って、１８ないし３５歳の３人の健康なドナーから取得した。骨髄単核細胞は、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｈｙｐａｑｕｅ密度勾配を用いて単離され、その他から赤血球を分離した。各ドナーからの細胞は独立して処理され、ある場合にはドナー変異性の効果を評価するために、別個の実験を設定するのに用いられた。
【０３１７】
細胞（１Ｘ１０５）は試験される各条件のために、３５ｍｍの組織培養プレート上に２回播種され、Ｒａｍｅｓｈｗａｒ  ｅｔ  ａｌ．１９９３，Ｂｌｏｏｄ．８１：２，３９１−３９８に記載のように設定された。赤血球及び顆粒球／マクロファージの培養液は、メチルセルロースを用いて播種され、巨核球の培養液（血小板の前駆体）はコラーゲンベースの担体を用いた（カナダ国バンクーバーのＳｔｅｍＣｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社、カタログ品番０４９７３）。細胞は様々な濃度でＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）又はサブスタンスＰのいずれかの存在下で培養された。血小板の研究においては、ニューロキニン受容体の拮抗薬は受容体特有の効果を示すために用いられた。ＣＰ９９，９９４（Ｐｆｉｚｅｒ社）はニューロキニン１受容体の拮抗薬として用いられ、ＳＲ４８９６８（Ｓａｎｏｆｉ社）はニューロキニン２受容体の拮抗薬として用いられた。
【０３１８】
赤芽球バースト形成細胞（ＢＦＵ−Ｅ）培養液、赤芽球コロニー形成細胞（ＣＦＵ−Ｅ）培養液、及び顆粒球／マクロファージコロニー形成細胞（ＣＦＵ−ＧＭ）培養液に添加されるサイトカイン及び増殖因子は、増殖性ユニットによって規定されるように添加された。ＢＦＵ−Ｅ培養液は２ユニットのヒトインターロイキン３（ｈＩＬ−３）と、２ユニットの組換型ヒトエリスロポエチン（ｒｈＥｐｏ）とを含んだ。２ユニットのＩＬ−３は約０．１ｎｇ／３ｍｌである。Ｒａｍｅｓｈｗａｒ私信。ＣＦＵ−Ｅ培養液は２ユニットのｒｈＥｐｏを含み、ＣＦＵ−ＧＭ培養液は２．６ユニットの組換型ヒト顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）を含んだ。２．６ユニットのＧＭ−ＣＳＦは約２ｎｇ／３ｍｌである。Ｒａｍｅｓｈｗａｒ私信。
【０３１９】
Ｅｐｏ用の増殖ユニットの生物活性は、因子依存型ヒト赤白血病の株化細胞であるＴＦ−１細胞、を用いた細胞増殖アッセイにおいて、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ社によって特徴づけられた。Ｋｉｔａｍｕｒａ，ｅｔ  ａｌ，１９８９，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，１４５：３２３−３３４。ｈＩＬ−３及びＧＭ−ＣＳＦ用のユニットは、ＩＬ−３／ＧＭ−ＣＳＦ依存型の株化細胞のＭ−０７ｅという、Ｍ−０７のヒト巨核芽球性白血病の株化細胞の亜系統を用いて規定された。Ａｖａｎｚｉ，Ｇ  ｅｔ  ａｌ，１９９０，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ，１４５：４５８−４６４。標準成長曲線はｒｈＩＬ−３（５０ｎｇ／ｍｌ）又はｒｈＧＭ−ＣＳＦ（１ｎｇ／ｍｌ）の連続希釈を用いて確立された。あるサイトカインの増殖ユニットは、Ｍ−０７ｅ細胞の最大増殖の半分を刺激するのに要求される量として規定された。
【０３２０】
培養液はプレートごとに１の前駆体の分化を促進する、限定されたサイトカイン及び増殖因子で設定された。ＳｔｅｍＣｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社によって示唆及び供給されるように、巨核球コロニー形成細胞（ＣＦＵ−Ｍｋ）培養液に添加された増殖因子及びサイトカインは比重量を用い、５０ｎｇ／ｍｌの組換え型ヒトトロンボポエチン（ｒｈＴｐｏ）と、１０ｎｇ／ｍｌの組換え型ヒトインターロイキン６（ｒｈＩＬ−６）と、１０ｎｇ／ｍｌの組換え型ヒトインターロイキン３（ｒｈＩＬ−３）を含んだ。
【０３２１】
細胞は以下のモル濃度：１０−７、１０−８、１０−９、１０−１０、１０−１１、１０−１２、１０−１３、及び１０−１４Ｍにわたり、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）又はサブスタンスＰの存在下で培養された。各化合物は、内毒素のない水に０．１ｍＭの最終濃度まで溶解された。再構成後、溶液はシリコン処理された微小遠心管内に等分され、筐体のヘッドスペースの酸素を除去した窒素ガスに曝された。ＡＵアリコートは再構成の１月以内に使用する又は使用されるまで、−２０℃で保存された。Ｒａｍｅｓｈｗａｒ，ｅｔ  ａｌ．１９９７，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５８：３４１７−３４２４参照。
【０３２２】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）又はサブスタンスＰのないコントロールのプレートは、コロニー増殖のベースラインを評価するために用いられた。培養液は３７℃で約１４日間、５％のＣＯ２を用いてインキュベートされ、その後、コロニーは顕微鏡を用いて手作業で計数された。巨核球コロニーを計数するために、細胞は固定され、次いで、以下の抗体：第１−マウス抗ヒトＧＰ１１ｂ／１１１ａ、アイソタイプコントロール−マウス抗トリニトロフェニル、第２−ビオチン複合型ヤギ抗マウスＩｇＧ、検出−アビジン−アルカリホスファターゼ複合物を用いた手順で染色した。
【０３２３】
結果は、コントロールの培養液（Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）又はサブスタンスＰなし）のコロニーに対する割合として示される。コントロールのコロニーの数は１００％で規格化され、Ｙ軸のゼロレベルとして示された。
【０３２４】
［Ｂ．結果］
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は試験された総ての幹細胞前駆体についてコロニー数の増加の点で、サブスタンスＰより有効であった。ＢＦＵ−Ｅ及びＣＦＵ−Ｅという、２の異なる赤血球前駆体型が試験され、多分化能幹細胞（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）という共通前駆体から得られた。ＢＦＵ−ＥはＣＦＵ−Ｅに成熟し、最終的には機能的な赤血球に発達する（図１及び２）。
【０３２５】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は幹細胞分化の増加の点で、サブスタンスＰより有効であった。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、コントロールと比較して２倍（又は、１００％）、ＢＦＵ−Ｅのコロニー形成を増加させたが、サブスタンスＰはコントロールから約１．５倍（又は、６０％）コロニーを増加させた。これらの効果は実施例４と同様である。
【０３２６】
ＣＦＵ−Ｅについては、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）とサブスタンスＰとの間の処理の差異は、ほとんどはっきりしなかった。例えば、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）はコントロール値の８０％以上、コロニー形成を増加させたが、サブスタンスＰはコントロール値の約７０％、コロニー形成を増加させた（図２）。
【０３２７】
本研究は、１０−１３ないし１０−９Ｍのいくつかの異なるＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）濃度で培養された場合に、顆粒球／マクロファージ前駆体の２倍以上の増加を示し、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、ヒト幹細胞のＣＦＵ−ＧＭへの分化を刺激する際に、サブスタンスＰの２倍有効であった。これらの結果は、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）がインビボでの顆粒球及びマクロファージの循環レベルを増加させ、骨髄から、あるいは分化及び動員の組合せを通して、前駆体を動員するようおそらくは作用することが示唆される。２倍の刺激は実施例４で観察されたレベルと同様である。
【０３２８】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）及びサブスタンスＰの処理はそれぞれ、血小板前駆体についてコントロールの約２倍以上の刺激作用を示した。しかしながら、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）はサブスタンスＰより１対数単位低い濃度で有効であった（１０−８Ｍに対し１０−９Ｍ）。サブスタンスＰの効果がニューロキニン１受容体の活性化を通じて生じたことを示すために、２の異なる受容体拮抗薬がサブスタンスＰの存在下で用いられた。ＣＰ−９９，９９４はサブスタンスＰの刺激活性を遮断するニューロキニン１受容体の拮抗薬である。更に、ニューロキニン２受容体の拮抗薬ＳＲ４８９６８が用いられ、サブスタンスＰのＭｋコロニーに対する効果がニューロキニン１受容体を介することを示す血小板コロニー形成の増加において、サブスタンスＰ活性に対する効果を示さなかった。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の血小板前駆体に対する効果は、実施例４で観察された２倍のレベルと同様である。
【０３２９】
［Ｃ．結論］
これらのデータはＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）が３の総ての主要な血液細胞型の造血を刺激しうることを示す。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は１０−７Ｍないし１０−１４Ｍの範囲の濃度で有効であった。更に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）はＢＦＵ−Ｅ、ＣＦＵ−Ｅ、ＣＦＵ−ＧＭ、及びＣＦＵ−Ｍｋのコロニー形成を増加させる場合に、サブスタンスＰよりも効力があった。
【実施例７】
【０３３０】
［実施例７：例示的なサブスタンスＰアナログであるＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の線維芽細胞の増殖に対する効果］
［Ａ．物質及び方法］
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（酢酸塩として）はＣＳ  Ｂｉｏ社のＩｍｍｕｎｅＲｅｇｅｎによって得られた。ペプチドは冷凍状態で出荷され、再構成まで−２０℃で保存された。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の再構成は、ｐＨ７．４の無菌リン酸バッファ食塩水（ＰＢＳ）で化合物を１ｍｇ／ｍｌの最終濃度まで溶解することによって行われ、次いで、ポリプロピレン筐体中に４℃で、再構成されたＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を保存した。好適な希釈液は無菌ＰＢＳで希釈することによって、この１ｍｇ／ｍｌの作業ストックから生成された。スパンタイドＩ（ＣＡＳ登録番号９１２２４−３７−２）は、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ社から取得され、１０μＭの濃度で添加された。標準的なヒト線維芽細胞はＡＴＣＣ社から得られ（２ないし３継代）、１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、品番１０４３７−０２８）、及びペニシリン−ストレプトマイシン−アンホテリシンＢ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、品番１５２４０−１０４）を含むＩＭＤＭ−Ｇｌｕｔａｍａｘ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、品番３１９８０−０３０）で成長させた。これらの細胞は４０継代まで培養された。細胞は、カルシウム及びマグネシウムのないＨａｎｋｓ液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、品番１４１７０）中で、０．０５％のトリプシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、品番１５４００−０５４）を用いてトリプシン処理され、次いで、１０％のＦＢＳを含むイスコフ培地中で中和された。細胞は細胞インキュベータ内に３７℃、５％のＣＯ２で維持された。
【０３３１】
増殖を定量化するために、ＭＴＴアッセイ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｍ６４９４）が行われた。Ｍｏｓｍａｎ，１９８３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ６５：５５参照。手短に言うと、細胞はウェルごとに２，０００の細胞で９６ウェルの組織培養プレートに播種された。培養液は次いでＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で処理されて、全容量が０．１ｍＬに保たれた。ＭＴＴは蒸留水で荷重（５ｍｇ）及び溶解され、２００ミクロンの注射器フィルタを用いてフィルタをかけられ、４℃で暗所に保存された。１０μＬのＭＴＴは書くウェルに添加され、混合された。培養液はＭＴＴを用いて４時間インキュベートされた。ついで、培地が除去され、２００μＬのＤＭＳＯが各ウェルに添加され、吸光度は、試料の信号を得るために５７０ｎｍの試験波長と６３０ｎｍの参照波長を用いてＥＬＩＳＡプレートリーダで測定された。
【０３３２】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）が増殖を直接的に誘発できるか、あるいは増殖因子駆動型の増殖を促進するように作用するかどうかを試験するために、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は、血清不足（０．５％のＦＢＳ）あるいは血清含有（２．５％、５％、１０％のＦＢＳ）の条件下でそれぞれ規定の期間（２４、４８、又は７２時間）、増殖条件の変化（血清のない又は血清含有）の下で、様々な濃度（０．０１ないし１０μＭの範囲内の）で試験された。血清の最適濃度を決定するために、ＭＴＴアッセイは０．５％、２．５％、５％、又は１０％のＦＢＳを含む培地で増殖させた線維芽細胞で行われた。これらの研究は、標準的な包皮線維芽細胞が血清不足状態（０．５％のＦＢＳ含有）で５日間生存し、５％のＦＢＳを含む培地中で増殖でき、４日間で最大の増殖を得られることを示した。これらの研究の各々において、平均光学密度は８の複製で表した。
【０３３３】
生存細胞の数とＯＤ（ＭＴＴアッセイから得られる）との間の関係を確立するために、細胞は様々な量（２，０００ないし２００，０００細胞数／ウェル）で播種され、ＭＴＴアッセイを受けた。平均ＯＤは８の複製から計算された。グラフ解析（生存細胞数に対するＯＤ）は飽和が３０，０００ないし４０，０００の間の細胞数／ウェルで０．７ないし０．８の間のＯＤユニットを生じることを明らかにした。２０００細胞数／ウェルを播種することによって生成された成長曲線は、これが４ないし５日の増殖で生じることを示す。このように、総ての更なる実験は、成長の増殖段階中に細胞をＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）に曝すべく、この期間に行われた。
【０３３４】
１０μＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で処理された線維芽細胞の群は、更にニューロキニン１受容体の拮抗薬である、１０μＭのスパンタイドＩに曝された。Ｈａｚｌｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉ．４８：７９７−８０７参照。
【０３３５】
実験は、標準的な包皮線維芽細胞が０．５％のＦＢＳを含むＩＭＤＭ（培地）を用いて９６ウェルプレートに播種され、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を用いて行われた。次の日に、これらの血清不足の細胞は、多様な量のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）又はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）＋拮抗薬（スパンタイドＩ）で１又は３日間処理された。細胞は３時間血清のない培地（０．５％のＦＢＳ）でＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を用いて事前処理された。スパンタイドＩは、スパンタイドＩで処理された１０ｕＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）処理群中へのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の添加の１時間前に添加された。細胞は次いで、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）及び／又はスパンタイドＩの存在を維持する間に、血清を用いて（５％のＦＢＳ）、又は血清を用いず（０．５％のＦＢＳ）に、最刺激された。ＭＴＴアッセイはＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）を伴う処理の１及び３日後に実行された。３の独立した実験（ｎ＝３）が行われ、平均ＯＤは８の複製の平均として表わされた。１の実験は細胞の初期数の低下を有し、分析から除外された。このように、以下の分析は８の複製でなされた２の独立した実験（ｎ＝２）で表わす。結果は増殖の割合として表わされ、各試料の平均ＯＤはコントロール（表９）で規格化する。
【０３３６】
［Ｂ．結果］
５％のＦＢＳに曝露された培養液において、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は曝露の１日後に増殖を増加する傾向にある。ピークの増殖の割合（ほぼ１４３％）は１０μＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）で見られ、１μＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）はコントロールの約１３５％の増殖を提供する。０．１μＭ及びそれ未満の濃度で、増殖はコントロールの約１１５％に増加した（０．０１μＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）濃度で１１４．８％、０．１μＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）濃度で１１５．５％）。Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は培養液が５％のＦＢＳに曝された場合に、用量依存性の方法における１日後の処理で増殖を増加させた。
【０３３７】
０．５％のＦＢＳに曝された培養液において、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の濃度の増加を用いた処理は、処理の３日後の増殖を増加する傾向にある。増殖に対する効果は、０．５％のＦＢＳに曝された培養液について１日後の曝露で観察されなかった。
【０３３８】
【表９】
2010534653.tif 000010
【０３３９】
［Ｃ．結論］
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）のヒト皮膚線維芽細胞に対する効果は、「血清不足」の（０．５％のＦＢＳ）、あるいは、血清に曝露された（５％のＦＢＳ）条件で評価された。増殖効果の増加はＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）とともに処理され、処理１日後に５％のＦＢＳに曝された培養液で観察された。処理１日後に、培養液は１μＭのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）に曝され、５％のＦＢＳはＭＴＴアッセイによって決定されたように、統計学的に有意（Ｐ＜０．０５）の増殖の増加を有した。この系（１日目の５％のＦＢＳの曝露）の他の群は、（表１）と同様の増殖の増加を示した。この増殖効果は５％のＦＢＳで曝露され、かつ、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）とともに３日間処理された培養液で、ほとんど顕著にならなかった。増殖効果の増加は更に、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）とともに処理され、かつ、３日後の処理で血清開始（０．５％のＦＢＳ）の状態に曝露される培養液で観察された。従って、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は５％のＦＢＳで培養されたヒト皮膚線維芽細胞の増殖に対しする短期間（約１日）の効果と、ＭＴＴアッセイによって決定されたように、０．５％のＦＢＳで培養されたヒト皮膚線維芽細胞の増殖に対する長期間（約３日）の効果を有しうる。
【実施例８】
【０３４０】
［実施例８：創傷治癒を促進するための例示的なサブスタンスＰアナログ，  Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）の使用］
本研究の目的は、ヨークシャー種ブタモデルの２８日間の深い創傷の治癒における局所的投与に伴う、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（Ｓａｒ９，Ｍｅｔ（Ｏ２）１１−サブスタンスＰ）の有効性を決定することであった。
【０３４１】
［Ａ．物質及び方法］
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（ロット番号Ｅ８４４）は以下のようにＰＢＳ中で調製された。３ｍｇのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は１８ｍＬの無菌のダルベッコリン酸バッファ食塩水（ＤＰＢＳ）（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ社、品番２１−０３１−ＣＶ、ロット番号２１０３１２６７）にゆっくりと添加され、室温で撹拌された。撹拌は溶液が透明になるまで続けられ、１０−４Ｍの原液を生成した。このストックから、１０−６Ｍ、１０−８Ｍ、１０−１０Ｍの様々な濃度を有する溶液が、希釈剤としてＤＰＢＳを用いて調製された。
【０３４２】
３月齢、体重２５ないし７５ｋｇの、健康な２匹の雌のヨークシャー種のブタは、少なくとも６日間室内で検疫及び順応させた。動物は耳の刺青を用いて同定された。動物は檻に収容され、収容場所及び衛生設備は標準的な手術手段によって行われた。動物は実験室用の犬の食餌が提供され、適宜水道水が提供された。
【０３４３】
食餌は麻酔投与前の少なくとも１２時間動物に与えなかった。麻酔は２０ｍｇ／ｋｇのケタミンと２ｍｇ／ｋｇのキシラジンによってなされた。創傷の日（０日）に、ブタは麻酔された。挿管と１ないし２％のイソフルランの吸入とがこの後に続いた。ブタの背側及び外側の胸部及び腹部は品番４０のＯｓｔｅｒ社のクリップブレードを用いてクリップされ、抗菌性のない石けんで洗浄された。丸鑿を用いて各ブタに、各々が３ｃｍの直径を有する２０の十分に深い全創傷が２ｃｍ間隔で動物の側部に１０ずつ生成された。刺青の標識は、効果を測定するために各創傷の周りに生成された。ブタは創傷導入後２１日間、疾病率及び毒性の徴候について日ごとに観察された。発熱、食欲不振、移動への抵抗、下痢、脱水、感染症などのような臨床上の病気の徴候は、獣医の指示で治療された。
【０３４４】
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（１０−４Ｍ、１０−６Ｍ、１０−８Ｍ、及び１０−１０Ｍでの）及びコントロール（ＤＰＢＳ）製品は、局所的な創傷内に塗布された。各ブタに、試験濃度での２ｍｌのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）、又はコントロール溶液が創傷を充填するように塗布され、生理食塩水で湿らせた（濡れていない）非付着性のＴｅｌｆａガーゼでそれをカバーした。ガーゼはＴｒａｎｓｐｏｒｅテープを用いて固定された。総ての創傷は皮膚に対して青色パッドの吸収層でカバーした。双方のブタはドレッシング剤の移動を防止する弾性包帯の層で包まれた。無菌技術は創傷領域での感染症のリスクを最小化するために外科手術中に可能な限り行われた。ドレッシング剤は５日ごとに交換され、Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は各ドレッシング剤の交換時に再塗布された。
【０３４５】
創傷治癒は創傷の７、１０、１４、１７、２１、及び２４日後の指定された時点で、４の異なる方向の創傷閉鎖の直径を測定することによって評価された。
【０３４６】
［Ｂ．結果］
各創傷の創傷測定値は、創傷の７、１０、１４、１７、２１、及び２４日後で取られた。総てのＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）処理群について創傷領域を低減する傾向があった。最高用量のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）（１０−４Ｍ）を受けた動物が最良に反応し、賦形剤治療のコントロールと比較して創傷１４日後でほぼ２７％の創傷サイズの減少、及び賦形剤治療のコントロールと比較して創傷２１日後で創傷領域の３７％の減少を示した。創傷サイズの減少は、コントロールと比較して７ないし２４日の期間にわたって観察された。別の用量のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）は創傷の閉鎖を促進したが、最高用量は最大の顕著な効果を示した。
【０３４７】
［Ｃ．結論］
Ｈｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）治療は、創傷の７ないし２４日後の間に、総ての時点で創傷領域を低減した。１０−４Ｍの、試験された最高用量のＨｏｍｓｐｅｒａ（登録商標）での治療は最も有効であり、１４日目ではコントロールと比較して２１％の創傷領域の低減、及び２１日目ではコントロールと比較して３７％の低減を与えた。
【０３４８】
本方法及び組成物は、特定の様態を行う現在の好ましいモードを含めた特定の実施例に対し記載されたが、当該技術分野の当業者は、添付の請求項に説明されるような本発明の精神及び範囲内に含まれる上述の系及び技術について、多数の変形物及び置換物が存在することが分かるであろう。
【０３４９】
本明細書中に引用された総ての文献は、総ての目的のために、全体を引用によって本明細書中に取り込まれる。
【図１】
2010534653.tif 000011
【図２】
2010534653.tif 000012
【図３】
2010534653.tif 000013
【配列表】
2010534653000001.xml
【手続補正書】
【提出日】平成22年5月13日(2010.5.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
幹細胞疾患を治療又は寛解させる方法であって、対象に有効量のサブスタンスＰアナログを投与するステップを含み、前記サブスタンスＰアナログが、式（Ｉ）：
Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）  （配列番号１１）、
又はその薬学的に許容可能な塩であり、
Ｘａａ１がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ２がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ３がＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ４がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ５がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、
Ｚ１がＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、
各々のＲが独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、
残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」の各々が独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す、
ことを特徴とする方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法において、
Ｘａａ１がＡｒｇであり、
Ｘａａ２がＰｒｏであり、
Ｘａａ３がＬｙｓであり、
Ｘａａ４がＰｒｏであり、
Ｘａａ５がＧｌｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである、
こと（配列番号１３として開示される実施形態）を特徴とする方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法において、
前記残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、
Ｚ１がＨ２Ｎ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法において、前記サブスタンスＰアナログが、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ                          （配列番号１）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ                      （配列番号２）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ                          （配列番号３）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ                  （配列番号４）、
ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ                          （配列番号５）、
ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ  （配列番号６）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）                    （配列番号７）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）            （配列番号８）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）                  （配列番号９）、又は、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）          （配列番号１０）、
であることを特徴とする方法。
【請求項５】
請求項１に記載の方法において、
前記サブスタンスＰアナログがＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、
Ｚ１がＮＨ２であり、
Ｚ２がＣ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする方法。
【請求項６】
請求項１に記載の方法において、前記幹細胞疾患が、無巨核球症、再生不良性貧血、ブラックファン・ダイアモンド貧血、先天性血球減少症、先天性赤血球異形成貧血、先天性角化異常症、ファンコニ貧血、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、赤芽球ろう、急性骨髄線維症、原因不明骨髄様化生、真性多血症、本態性血小板血症、重症型ベータサラセミア、鎌状赤血球症、家族性赤血球貪食リンパ組織球症、血球貪食、ランゲルハンス細胞組織球症（組織球症Ｘ）、慢性肉芽腫症、先天性好中球減少症、毛細血管拡張性運動失調症、先天性造血障害（ｍｙｅｌｏｋａｔｈｅｘｉｓ）、裸リンパ球症候群、白血球粘着不全症、重症複合免疫不全症（ＳＣＩＤ）、分類不能型免疫不全症、裸リンパ球症候群、チェディアック・東症候群、コストマン症候群、オーメン症候群、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ欠損症、細網異形成症、ウィスコット・アルドリッチ症候群、Ｘ連鎖リンパ増殖性疾患、副腎白質ジストロフィ、フコシド症、ゴーシェ病、ハンター症候群（ＭＰＳ−ＩＩ）、ハーラー症候群（ＭＰＳ−ＩＨ）、クラッベ病、レッシュ・ナイハン症候群、マンノシドーシス、マロトー・ラミー症候群（ＭＰＳ−ＶＩ）、異染性白質ジストロフィ、ムコリピドーシスＩＩ（Ｉ細胞病）、神経セロイドリポフスチン症（バッテン病）、ニーマン・ピック病、サンドホフ病、サンフィリポ症候群（ＭＰＳ−ＩＩＩ）、モルキオ症候群（ＭＰＳ−ＩＶ）、スライ症候群、β−グルクロニダーゼ欠損症（ＭＰＳ−ＶＩＩ）、副腎白質ジストロフィ、シャイエ症候群（ＭＰＳ−ＩＳ）、スライ症候群、ティサックス病、ウォルマン病、ムコ多糖症（ＭＰＳ）、急性混合白血病、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性未分化細胞性白血病、成人Ｔ細胞白血病、成人Ｔ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、若年性慢性骨髄性白血病（ＪＣＭＬ）、若年性骨髄単球性白血病（ＪＭＭＬ）、骨髄／ナチュラルキラー細胞前駆急性白血病、非ホジキンリンパ腫、前リンパ球性白血病、急性骨髄線維症、原因不明骨髄様化生（骨髄線維症）、アミロイドーシス、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、本態性血小板血症、真性多血症、多発性骨髄腫、形質細胞性白血病、ワルデンストローム・マクログロブリン血症、軟骨毛髪形成不全、グランツマン血小板無力症、無巨核球症、先天性血小板減少症、先天性造血性ポルフィリン症（ギュンター病）、ディジョージ症候群、大理石骨病、脳腫瘍、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、乳癌、神経芽細胞腫、腎細胞癌、横紋筋肉腫、小細胞肺癌、精巣癌、胸腺腫（胸腺癌）、慢性活動性エプスタイン・バールウイルス感染症、エヴァンス症候群、多発性硬化症、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、胸腺異形成症、チェディアック・東症候群、慢性肉芽腫症、好中球アクチン欠乏症、細網異形成症、難聴、聴力障害、糖尿病、心疾患、肝疾患、筋ジストロフィ、パーキンソン病、脊髄損傷、又は脳卒中であることを特徴とする方法。
【請求項７】
請求項１に記載の方法において、白血球、リンパ球、好中球、杆状球、単球、顆粒球、赤血球、好酸球、好塩基球、又は血小板が前記対象中で増加することを特徴とする方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法において、前記リンパ球がＴリンパ球又はＢリンパ球であることを特徴とする方法。
【請求項９】
請求項１に記載の方法において、前記サブスタンスＰアナログの投与が、高増殖能性幹及び前駆細胞（ＨＰＰ−ＳＰ細胞）、多分化能幹細胞集団（ＣＦＣ−ＧＥＭＭ集団）、顆粒球マクロファージコロニー形成細胞（ＧＭ−ＣＦＣ）、巨核球コロニー形成細胞（Ｍｋ−ＣＦＣ）、Ｔリンパ球コロニー形成細胞（Ｔ−ＣＦＣ）、Ｂリンパ球コロニー形成細胞（Ｂ−ＣＦＣ）、巨核球コロニー形成細胞（ＣＦＵ−Ｍｋ細胞）、赤芽球バースト形成細胞（ＢＦＵ−Ｅ細胞）、赤芽球コロニー形成細胞（ＣＦＵ−Ｅ細胞）、又は顆粒球／マクロファージコロニー形成細胞（ＣＦＵ−ＧＭ細胞）の分化の増加を生じることを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法において、前記対象がヒトであることを特徴とする方法。
【請求項１１】
細胞と、当該細胞の分化を刺激するのに有効な量のサブスタンスＰアナログとを含む組成物であって、前記サブスタンスＰアナログが、式（Ｉ）：
Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）  （配列番号１１）、
又はその薬学的に許容可能な塩であり、
Ｘａａ１がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ２がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ３がＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ４がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ５がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、
Ｚ１がＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、
各々のＲが独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、
残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」が独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す、
ことを特徴とする組成物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の組成物において、
Ｘａａ１がＡｒｇであり、
Ｘａａ２がＰｒｏであり、
Ｘａａ３がＬｙｓであり、
Ｘａａ４がＰｒｏであり、
Ｘａａ５がＧｌｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである、
こと（配列番号１３として開示される実施形態）を特徴とする組成物。
【請求項１３】
請求項１１に記載の組成物において、
前記残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、
Ｚ１がＨ２Ｎ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする組成物。
【請求項１４】
請求項１１に記載の組成物において、前記サブスタンスＰアナログが、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ                          （配列番号１）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ                      （配列番号２）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ                          （配列番号３）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ                  （配列番号４）、
ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ                          （配列番号５）、
ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ  （配列番号６）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）                    （配列番号７）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）            （配列番号８）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）                  （配列番号９）、又は、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）          （配列番号１０）、
であることを特徴とする組成物。
【請求項１５】
請求項１１に記載の組成物において、
前記サブスタンスＰアナログがＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、
Ｚ１がＮＨ２であり、
Ｚ２がＣ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする組成物。
【請求項１６】
請求項１１に記載の組成物において、前記細胞が未分化細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項１７】
請求項１１に記載の組成物において、前記細胞が幹細胞、前駆細胞、又は部分的に分化された細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項１８】
請求項１７に記載の組成物において、前記幹細胞が造血幹細胞、リンパ球幹細胞、又は骨髄造血幹細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項１９】
請求項１１に記載の組成物において、前記分化がＣＤ１５を発現する細胞の増加を生じることを特徴とする組成物。
【請求項２０】
請求項１１に記載の組成物において、前記サブスタンスＰアナログが非経口投与されることを特徴とする組成物。
【請求項２１】
細胞、基質、及びサブスタンスＰアナログを含む、創傷治癒を促進するための組成物であって、前記サブスタンスＰアナログが、式（Ｉ）：
Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）  （配列番号１１）、
又はその薬学的に許容可能な塩であり、
Ｘａａ１がＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ２がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ３がＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、
Ｘａａ４がＰｒｏ又はＡｌａであり、
Ｘａａ５がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎ又はＡｓｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、
Ｚ１がＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、
各々のＲが独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、
残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」が独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す、
ことを特徴とする組成物。
【請求項２２】
請求項２１に記載の組成物において、
Ｘａａ１がＡｒｇであり、
Ｘａａ２がＰｒｏであり、
Ｘａａ３がＬｙｓであり、
Ｘａａ４がＰｒｏであり、
Ｘａａ５がＧｌｎであり、
Ｘａａ６がＧｌｎであり、
Ｘａａ７がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８がＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９がＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０がＬｅｕであり、
Ｘａａ１１がＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである、
こと（配列番号１３として開示される実施形態）を特徴とする組成物。
【請求項２３】
請求項２１に記載の組成物において、
前記残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、
Ｚ１がＨ２Ｎ−であり、
Ｚ２が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする組成物。
【請求項２４】
請求項２１に記載の組成物において、前記サブスタンスＰアナログが、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ                          （配列番号１）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ                      （配列番号２）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ                          （配列番号３）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ                  （配列番号４）、
ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ                          （配列番号５）、
ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ  （配列番号６）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）                    （配列番号７）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）            （配列番号８）、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）                  （配列番号９）、又は、
ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）          （配列番号１０）、
であることを特徴とする組成物。
【請求項２５】
請求項２１に記載の組成物において、
前記サブスタンスＰアナログがＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、
Ｚ１がＮＨ２であり、
Ｚ２がＣ（Ｏ）ＮＨ２である、
ことを特徴とする組成物。
【請求項２６】
請求項２１に記載の組成物において、前記細胞が幹細胞、前駆細胞、及び線維芽細胞からなる群から選択されることを特徴とする組成物。
【請求項２７】
請求項２６に記載の組成物において、前記前駆細胞が血管内の前駆細胞、又は内皮前駆細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項２８】
請求項２１に記載の組成物において、前記細胞が胎盤細胞、又は臍帯血細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項２９】
請求項２１に記載の組成物において、前記基質がコラーゲン、フィブリノーゲン、フィブリン、水素、又は羊膜同種移植片を含むことを特徴とする組成物。
【請求項３０】
請求項２１に記載の組成物において、前記創傷が糖尿病性創傷であることを特徴とする組成物。
【請求項３１】
請求項２１に記載の組成物において、前記創傷が褥瘡性潰瘍であることを特徴とする組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシン、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は総て−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。別の様態においては、サブスタンスＰアナログは  ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
更に別の態様においては、組成物は創傷治癒の促進を提供し、細胞、基質、及びサブスタンスＰアナログを含み、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。ある様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
更に別の態様においては、組成物は線維芽細胞の増殖を促進するステップを提供し、細胞と、担体と、サブスタンスＰアナログとを含み、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）であってもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
ある態様においては、組成物は線維芽細胞の増殖を促進するための包帯を提供し、包帯は線維芽細胞の増殖を促進するのに有効な量のサブスタンスＰアナログを含み、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）であってもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
ある態様においては、組成物はコラーゲン形成を促進するための包帯を提供し、包帯は細胞と、コラーゲン形成を促進するのに有効な量のサブスタンスＰアナログとを含み、サブスタンスＰアナログは式Ｉ：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ  （配列番号３）；ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
ある態様においては、本方法はコラーゲン形成を促進するステップを提供し、コラーゲン生成細胞を、コラーゲン生成を促進するのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）であってもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、コラーゲン生成細胞は線維芽細胞である。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは線維芽細胞の増殖を促進する方法であり、線維芽細胞を、線維芽細胞の増殖を促進するのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式Ｉ：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）であってもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは内皮前駆細胞を動員する方法であり、内皮前駆細胞を、動員を刺激するのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式Ｉ：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
ある態様においては、本明細書中で提供されるのは上皮前駆細胞を動員する方法であり、上皮前駆細胞を、動員を刺激するのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式Ｉ：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）である。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
ある態様においては、本方法は哺乳類中の循環内皮前駆細胞を増加させるステップを提供し、循環内皮前駆細胞を、循環内皮細胞の数を増加させるのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式１：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）にしてもよい。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６１】
ある態様においては、本方法は哺乳類中の循環上皮前駆細胞を増加させるステップを提供し、循環上皮前駆細胞を、循環上皮細胞の数を増加させるのに有効な量のサブスタンスＰアナログと接触させるステップを含み、サブスタンスＰアナログは式１：Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２（Ｉ）（配列番号１１）、又はその薬学的に許容可能な塩であり、Ｘａａ１はＡｒｇ、Ｌｙｓ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ２はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ３はＬｙｓ、Ａｒｇ、Ｎ６−メチルリシン、又は（Ｎ６，Ｎ６）−ジメチルリシンであり、Ｘａａ４はＰｒｏ又はＡｌａであり、Ｘａａ５はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎ又はＡｓｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、あるいは２、３、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、Ｎ−メチルロイシン、又はＮ−メチルバリンであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンであり、Ｚ１はＲ２Ｎ−又はＲＣ（Ｏ）ＮＲ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、あるいはその塩であり、各々のＲは独立であり、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ５−Ｃ２０）アリール、（Ｃ６−Ｃ２６）アルカリル、５ないし２０員環のヘテロアリール、又は６ないし２６員環のアルクヘテロアリールであり、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の各々の「−」は独立であり、アミド結合、置換アミド結合、又はアミド同配体を示す。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６２】
ある様態においては、Ｘａａ１はＡｒｇであり、Ｘａａ２はＰｒｏであり、Ｘａａ３はＬｙｓであり、Ｘａａ４はＰｒｏであり、Ｘａａ５はＧｌｎであり、Ｘａａ６はＧｌｎであり、Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、Ｘａａ１０はＬｅｕであり、Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシンである。別の様態においては、残基Ｘａａ１ないしＸａａ１１の間の「−」は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−を示し、Ｚ１はＨ２Ｎ−であり、Ｚ２は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である。更に別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ（配列番号２）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ（配列番号３）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（配列番号４）、ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ（配列番号５）、ＲＰＫＰＱＱＦ（４−Ｃｌ）Ｆ（４−Ｃｌ）ＧＬＭ（配列番号６）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ２）（配列番号９）、又はＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）（配列番号１０）である。別の様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であり、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９３】
アミノ末端の、１ないし４個目の内在性サブスタンスＰのペプチド（ＲＰＫＰ（配列番号１２））は、リンパ系及び骨髄系の双方の幹細胞、ならびに前駆細胞の増殖を抑制することが示されてきた（米国特許第７，１１９，０７１号参照）。一方、天然のサブスタンスＰ（ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（配列番号１））は赤血球及び骨髄の系譜で骨髄前駆細胞を刺激することも示されてきた。Ｒａｍｅｓｈｗａｒ，ｅｔ  ａｌ，１９９３，Ｂｌｏｏｄ，８１（２）３９１−３９８。しかしながら驚くべきことに、出願人は本明細書中に記載のような特定のサブスタンスＰアナログが、天然化合物より低い（いくつかの場合においては、対数スケールで小さい）濃度で、幹細胞の増殖又は分化を刺激し、同一のアミノ末端（ＲＰＫＰ（配列番号１２））を含むサブスタンスＰアナログがサブスタンスＰより非常に低濃度で幹細胞の増殖又は分化を刺激するのを見出した。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５４】
ある様態においては、サブスタンスＰアナログは例えば、１１番目のアミノ酸の位置がノルロイシン、すなわちペプチドが、Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｉｎ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｎｌｅ（ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＮｌｅ）（配列番号２）となるサブスタンスＰアナログのような、［Ｎｌｅ１１］−サブスタンスＰである。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは［Ｐｒｏ９］−サブスタンスＰであり、９番目のアミノ酸の位置がプロリンであるサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ｐｒｏ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ（ＲＰＫＰＱＱＦＦＰＬＭ）（配列番号３）を有する。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは［Ｓａｒ９］−サブスタンスＰであり、９番目のアミノ酸の位置  がサルコシン又はＮ−メチルグリシンであるサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  ＭｅＧｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ（ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ）（配列番号４）を有する。ある様態においては、サブスタンスＰアナログは［［［Ｔｙｒ］］Ｔｈｒ８］−サブスタンスＰであり、８番目のアミノ酸の位置がスレオニンであるサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ  ［［Ｔｙｒ］］Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ（ＲＰＫＰＱＱＦＴＧＬＭ）（配列番号５）を有する。［ｐ−Ｃｌ−Ｐｈｅ７，８］−サブスタンスＰは、位置７及び８のフェニルアラニン残基が４位で塩素化されたサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ（４−Ｃｌ）  Ｐｈｅ（４−Ｃｌ）  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ−ＮＨ２（ＲＰＫＰＱＱＦ（４−ＣＬ）Ｆ（４−ＣＬ）ＧＬＭ）（配列番号６）を有する。ある様態においては、１１番目のアミノ酸残基はメチオニンスルホキシドであり、ＲＰＩＣＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）（配列番号７）となる。ある様態においては、９番目のアミノ酸残基はサルコシンであり、１１番目の残基はメチオニンスルホキシドであり、ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ）（配列番号８）となる。ある様態においては、１１番目のアミノ酸残基はメチオニンスルホンであり、ＲＰＫＰＱＱＦＦＧＬＭ（Ｏ）２（配列番号９）となる。［Ｓａｒ９，Ｍｅｔ（Ｏ２）１１］−サブスタンスＰは、９番目のアミノ酸の位置がサルコシン又はＮ−メチルグリシンであり、１１番目のアミノ酸の位置がＭｅｔ（Ｏ２）であるサブスタンスＰアナログのことであり、配列：Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ｇｌｎ  Ｇｌｎ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  ＭｅＧｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ−Ｏ２（ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ−Ｏ２）（配列番号１０）を有する。
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５７】
ある様態においては、サブスタンスＰアナログは式（Ｉ）：
Ｚ１−Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０−Ｘａａ１１−Ｚ２  （Ｉ）  （配列番号［［１１］］１３）
であってもよく、
Ｘａａ１はＡｒｇであり、
Ｘａａ２はＰｒｏであり、
Ｘａａ３はＬｙｓであり、
Ｘａａ４はＰｒｏであり、
Ｘａａ５はＧｌｎであり、
Ｘａａ６はＧｌｎであり、
Ｘａａ７はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ８はＴｙｒ、Ｐｈｅ、又は４位で塩素と置換されたＰｈｅであり、
Ｘａａ９はＧｌｙ、Ｐｒｏ、又はＮ−メチルグリシンであり、
Ｘａａ１０はＬｅｕであり、
Ｘａａ１１はＭｅｔ、Ｍｅｔスルホキシド、Ｍｅｔスルホン、又はノルロイシン
である。
【手続補正２８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６０】
更により好ましい様態においては、サブスタンスＰアナログはＺ１−ＲＰＫＰＱＱＦＦＭｅＧｌｙＬＭ（Ｏ２）−Ｚ２（配列番号１０）であってもよく、Ｚ１はＮＨ２であり、Ｚ２はＣ（Ｏ）ＮＨ２である。
【国際調査報告】
2010534653.tif 000020
2010534653.tif 000021
2010534653.tif 000022