(57)【要約】  β−ラクタマーゼ阻害剤となる化合物（ＢＬＩｓ）が開示され、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼに対する活性を有する化合物が挙げられる。β−ラクタマーゼ阻害剤の製造方法、および該化合物の医薬組成物の製剤使用および抗菌性応用も開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物またはその薬剤的に許容可能な塩：
【化１】
2015512419.tif 000221
式中、
Ｒは、
【化２】
2015512419.tif 000222
から選択され；そして
Ｒ１は、
ａ．
【化３】
2015512419.tif 000223
（式中、Ｒ２は、
【化４】
2015512419.tif 000224
、および
【化５】
2015512419.tif 000225
（式中、各々Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、およびヒドロキシアルキル、ならびにｎは１、２、および３から選択される）
から選択される）；
ｂ．
【化６】
2015512419.tif 000226
（式中、Ｒ６は、Ｈおよび
【化７】
2015512419.tif 000227
から選択される）；
ｃ．
【化８】
2015512419.tif 000228
（式中、Ｒ７は、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ３）非置換アルキル、アミノ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキル、アミノシクロアルキル、ヒドロキシアルキル、および
【化９】
2015512419.tif 000229
から選択され、そして、
各々ｐおよびｑは、独立して、１および２から選択される）
から選択される。
【請求項２】
式（Ａ−Ｉ）の化合物またはその薬剤的に許容可能な塩：
【化１０】
2015512419.tif 000230
式中、
Ｒ＊は、
【化１１】
2015512419.tif 000231
から選択され；そして
Ｒ１＊は、
ａ．
【化１２】
2015512419.tif 000232
（式中、Ｒ２＊は、
【化１３】
2015512419.tif 000233
、および
【化１４】
2015512419.tif 000234
から選択され、
（Ｒ３＊は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、ヒドロキシアルキル、
【化１５】
2015512419.tif 000235
および
【化１６】
2015512419.tif 000236
から選択され、
各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、独立して、水素または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、およびヒドロキシアルキル、但し、Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊の少なくとも１つは水素であり、
ｎは、１、２、３および４から選択され、
ｍは、１、２および３から選択される）；
ｂ．
【化１７】
2015512419.tif 000237
（式中、Ｒ８は、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび
【化１８】
2015512419.tif 000238
（各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は前述の通りである）
から選択される）；
ｃ．
【化１９】
2015512419.tif 000239
（式中、Ｚは、ＣＲ９Ｒ１０およびＮＲ１１から選択され、
各々Ｒ９およびＲ１０は、独立して、Ｈ、ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび
【化２０】
2015512419.tif 000240
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
から選択され、
あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、これらが結合した炭素と一緒になって、４〜６員環のシクロアルキル環またはヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１１は、Ｈおよび
【化２１】
2015512419.tif 000241
（式中、各々Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、およびヒドロキシアルキル、但し、Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４の少なくとも１つは水素である）
から選択され、
Ｒ１５は、ＮＨ２および
【化２２】
2015512419.tif 000242
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
から選択され、
各々ｐ＊およびｑ＊は、独立して、０，１、２および３から選択され、
Ｔは、ＮＨおよびＯから選択され、
ｔは、０，１、２、３および４から選択され、そして
各々ｒおよびｙは、独立して、０および１から選択される）；
ｄ．
【化２３】
2015512419.tif 000243
（式中、Ｒ１６は、ＮＨ２および−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび
【化２４】
2015512419.tif 000244
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
ｓは、０および１から選択され、そして、
ｖは、０，１、２、３および４から選択される；
ｅ．
【化２５】
2015512419.tif 000245
式中、Ｒ１８は、ＮＨ２および
【化２６】
2015512419.tif 000246
式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである
Ｒ１７は、アミノおよびヒドロキシルから選択され；そして
ｗは、０および１から選択される；
ｆ．
【化２７】
2015512419.tif 000247
ｇ．
【化２８】
2015512419.tif 000248
（式中、Ｍは、ＮＲ１９、ＣＲ２０Ｒ２１およびＯから選択され、
Ｒ１９は、Ｈおよび
【化２９】
2015512419.tif 000249
（式中、各々Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４は、前述の通りである）
から選択され、
各々Ｒ２０およびＲ２１は、独立して、Ｈ、ＮＨ２および
【化３０】
2015512419.tif 000250
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
から選択され、そして
ｕは、０、１および２から選択される）；および
ｈ．
【化３１】
2015512419.tif 000251
から選択される。
【請求項３】
請求項２に記載の化合物および少なくとも１つのβ−ラクタム系抗生物質を含む医薬組成物またはその薬剤的に許容可能な塩。
【請求項４】
前記β−ラクタム系抗生物質がセファロスポリン系薬である、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記セファロスポリン系薬がセフトロザンである、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記β−ラクタム系抗生物質がカルバペネム系薬である、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記β−ラクタム系抗生物質がモノバクタム系薬である、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項８】
請求項３に記載の医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、細菌感染症の治療または予防の方法。
【請求項９】
請求項２に記載の化合物と併用して、β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、細菌感染症の治療方法。
【請求項１０】
前記β−ラクタム系抗生物質がセファロスポリン系薬である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記セファロスポリン系薬がセフトロザンである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記β−ラクタム系抗生物質がカルバペネム系薬である、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記β−ラクタム系抗生物質がモノバクタム系薬である、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
前記細菌感染症が、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる、請求項８または９のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記細菌感染症が、クラスＡ型またはクラスＣ型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記細菌感染症が、アシネトバクター属菌、アシネトバクター・バウマンニ、サイトロバクター属菌、エシェリキア属菌、大腸菌、インフルエンザ菌、モルガン菌、緑膿菌、クレブシエラ属菌、肺炎桿菌、エンテロバクター属菌、エンテロバクター・クロアカおよびエンテロバクター・エロゲネス、パスツレラ属菌、プロテウス属菌、プロテウス・ミラビリス、セラチア属菌、セラチア・マルセセンス、ならびにプロビデンシア属菌から選択される細菌が原因で起こる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記細菌感染症が、ＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記細菌感染症が、ＯＸＡ−１５型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記細菌感染症が、β−ラクタム耐性菌が原因で起こる、請求項８または９のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
それを必要としている対象の細菌感染症または治療方法であって、
ａ．請求項２に記載の化合物を前記対象に投与する工程；および
ｂ．β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を対象に投与する工程
を含む方法。
【請求項２１】
それを必要としている対象の細菌感染症の治療方法であって、
ａ．β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を前記対象に投与する工程；および
ｂ．請求項２に記載の化合物を対象に投与する工程
を含む方法。
【請求項２２】
対象の細菌感染症の治療用薬剤の製造のための請求項２に記載の化合物の使用。
【請求項２３】
対象の細菌感染症の治療用薬剤の製造のための請求項３に記載の組成物の使用。
【請求項２４】
前記細菌感染症が、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる、請求項２２または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項２５】
前記細菌感染症が、クラスＡ型またはクラスＣ型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる、請求項２２または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項２６】
前記細菌感染症が、アシネトバクター属菌、アシネトバクター・バウマンニ、サイトロバクター属菌、エシェリキア属菌、大腸菌、インフルエンザ菌、モルガン菌、緑膿菌、クレブシエラ属菌、肺炎桿菌、エンテロバクター属菌、エンテロバクター・クロアカおよびエンテロバクター・エロゲネス、パスツレラ属菌、プロテウス属菌、プロテウス・ミラビリス、セラチア属菌、セラチア・マルセセンス、およびプロビデンシア属菌から選択される細菌が原因で起こる、請求項２２または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項２７】
前記細菌感染症が、ＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる、請求項２２または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項２８】
前記細菌感染症が、ＯＸＡ−１５型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる、請求項２２または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項２９】
前記細菌感染症が、β−ラクタム耐性菌が原因で起こる、請求項２２または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項３０】
β−ラクタマーゼを阻害するための請求項２に記載の化合物の使用。
【請求項３１】
請求項２に記載の化合物を対象に投与することを含むβ−ラクタマーゼを阻害する方法。
【請求項３２】
前記化合物の結合親和力が少なくとも２５０ｍＭ−１ｓ−１である、請求項２に記載の化合物。
【請求項３３】
前記式Ａ−Ｉの化合物が、式Ａ−ＩＩ：
【化３２】
2015512419.tif 000252
に特定される立体化学を有する請求項２に記載の化合物またはその薬剤的に許容可能な塩。
【請求項３４】
【化３３】
2015512419.tif 000253
【化３４】
2015512419.tif 000254
【化３５】
2015512419.tif 000255
【化３６】
2015512419.tif 000256
【化３７】
2015512419.tif 000257
【化３８】
2015512419.tif 000258
【化３９】
2015512419.tif 000259
【化４０】
2015512419.tif 000260
【化４１】
2015512419.tif 000261
【化４２】
2015512419.tif 000262
【化４３】
2015512419.tif 000263
【化４４】
2015512419.tif 000264
【化４５】
2015512419.tif 000265
【化４６】
2015512419.tif 000266
【化４７】
2015512419.tif 000267
【化４８】
2015512419.tif 000268
【化４９】
2015512419.tif 000269
【化５０】
2015512419.tif 000270
【化５１】
2015512419.tif 000271
【化５２】
2015512419.tif 000272
【化５３】
2015512419.tif 000273
【化５４】
2015512419.tif 000274
【化５５】
2015512419.tif 000275
【化５６】
2015512419.tif 000276
【化５７】
2015512419.tif 000277
【化５８】
2015512419.tif 000278
【化５９】
2015512419.tif 000279
【化６０】
2015512419.tif 000280
【化６１】
2015512419.tif 000281
、および
【化６２】
2015512419.tif 000282
から選択される、請求項３３に記載の化合物またはその薬剤的に許容可能な塩。
【請求項３５】
Ｒ１＊が、
【化６３】
2015512419.tif 000283
および
【化６４】
2015512419.tif 000284
から選択される、請求項２または３のいずれかに記載の化合物。
【請求項３６】
【化６５】
2015512419.tif 000285
および
【化６６】
2015512419.tif 000286
から選択される、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３７】
式：
【化６７】
2015512419.tif 000287
である、請求項３６に記載の化合物またはその薬剤的に許容可能な塩。
【請求項３８】
式：
【化６８】
2015512419.tif 000288
である、請求項３６に記載の化合物またはその薬剤的に許容可能な塩。
【請求項３９】
請求項３７に記載の化合物およびセフトロザンを含む医薬組成物。
【請求項４０】
請求項３８に記載の化合物およびセフトロザンを含む医薬組成物。
【請求項４１】
請求項３９に記載の医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む、細菌感染症の治療または予防の方法。
【請求項４２】
請求項４０に記載の医薬組成物の治療効果のある量を、それを必要としている対象に投与することを含む、細菌感染症の治療または予防の方法。
【請求項４３】
前記β−ラクタム系抗生物質がセフトロザンであり、請求項２に記載の化合物が
【化６９】
2015512419.tif 000289
である、請求項９に記載の方法。
【請求項４４】
前記β−ラクタム系抗生物質がセフトロザンであり、請求項２に記載の化合物が
【化７０】
2015512419.tif 000290
である、請求項９に記載の方法。
【請求項４５】
β−ラクタム系抗生物質がセフトロザンであり、請求項２に記載の化合物が
【化７１】
2015512419.tif 000291
である、請求項２０に記載の方法。
【請求項４６】
β−ラクタム系抗生物質がセフトロザンであり、請求項２に記載の化合物が
【化７２】
2015512419.tif 000292
である、請求項２０に記載の方法。
【請求項４７】
β−ラクタム系抗生物質がセフトロザンであり、請求項２に記載の化合物が
【化７３】
2015512419.tif 000293
である、請求項２１に記載の方法。
【請求項４８】
β−ラクタム系抗生物質がセフトロザンであり、請求項２に記載の化合物が
【化７４】
2015512419.tif 000294
である、請求項２１に記載の方法。
【請求項４９】
β−ラクタム系抗生物質がセフトロザンであり、請求項２２に記載の化合物が
【化７５】
2015512419.tif 000295
である、請求項２２に記載の方法。
【請求項５０】
β−ラクタム系抗生物質がセフトロザンであり、請求項２２に記載の化合物が
【化７６】
2015512419.tif 000296
である、請求項２２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１２年３月３０日に出願された米国特許仮出願第６１／６１８，１２７号および２０１３年３月１５日に出願された米国特許仮出願第６１／７９０，２４８号の優先権の利益を主張する。これらの出願の全内容は、それらの全文を参照することにより本明細書に組み入れられるものとする。
【０００２】
技術分野
本開示は、β−ラクタマーゼの阻害剤として有効なβラクタマーゼ阻害剤（ＢＬＩｓ）に関し、β−ラクタム系抗生物質と併用されるとき、細菌感染症治療に有用である。β−ラクタム系抗生物質と併用されるとき、該化合物は、β−ラクタマーゼの存在のせいで、β−ラクタム系抗生物質に耐性である細菌が原因の感染症治療に有効である。上記化合物を含む医薬組成物、上記化合物を使用する方法、および上記化合物の合成方法も開示する。
【背景技術】
【０００３】
β−ラクタム系抗生物質に対する細菌耐性、特に、グラム陰性菌中のものは、通常、βラクタマーゼによって仲介される。β−ラクタマーゼは、β−ラクタム環の加水分解を触媒する酵素であり、β−ラクタム系抗生物質の抗菌活性を不活性化して、細菌が耐性を持つようになる。β−ラクタマーゼ阻害剤を用いるβ−ラクタマーゼの阻害は、β−ラクタム系抗生物質の分解を遅延または防御し、β−ラクタム系抗生物質の感受性をβ−ラクタマーゼ産生菌に回復させる。これらβ−ラクタマーゼの多くは、これらβ−ラクタマーゼを産生する細菌の治療に有効でないβ−ラクタム系抗生物質を提供している市場に現在出回っているβラクタマーゼ阻害剤によって有効に阻害されない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
臨床現場のβ−ラクタマーゼ阻害剤（例えば、ＫＰＣ型、クラスＣ型およびクラスＤ型β−ラクタマーゼ）により有効に阻害されないβ−ラクタマーゼを阻害し、β−ラクタム耐性菌が原因で起こる感染症治療のためにβ−ラクタム系抗生物質との併用で使用できる新規βラクタマーゼ阻害剤が緊急に必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
ひとつの態様では、本発明は、β−ラクタマーゼ阻害剤であって、細菌感染症治療のために、β−ラクタム系抗生物質との併用で有用である化学式（Ｉ）の化合物、またはその薬剤的に許容可能な塩を提供する。
【０００６】
【化１】
2015512419.tif 000002
式中、
Ｒは、
【０００７】
【化２】
2015512419.tif 000003
から選択され；および
Ｒ１は、
ａ．
【０００８】
【化３】
2015512419.tif 000004
（式中、Ｒ２は、
【０００９】
【化４】
2015512419.tif 000005
、および
【００１０】
【化５】
2015512419.tif 000006
（式中、各々Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、およびヒドロキシアルキル、ならびにｎは１、２、および３から選択される）
から選択される）；
ｂ．
【００１１】
【化６】
2015512419.tif 000007
（式中、Ｒ６は、Ｈおよび
【００１２】
【化７】
2015512419.tif 000008
から選択される）；
ｃ．
【００１３】
【化８】
2015512419.tif 000009
（式中、Ｒ７は、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ３）非置換アルキル、アミノ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキル、アミノシクロアルキル、ヒドロキシアルキル、および
【００１４】
【化９】
2015512419.tif 000010
から選択され、そして、
各々ｐおよびｑは、独立して、１および２から選択される）
から選択される。
【００１５】
別の態様では、本発明は、β−ラクタマーゼ阻害剤であって、細菌感染症治療のために、β−ラクタム系抗生物質との併用で有用である化学式（Ａ−Ｉ）またはその薬剤的に許容可能な塩を提供する。
【００１６】
【化１０】
2015512419.tif 000011
（Ａ−Ｉ）
式中、
Ｒ＊は、
【００１７】
【化１１】
2015512419.tif 000012
から選択され；そして
Ｒ１＊は、
ａ．
【００１８】
【化１２】
2015512419.tif 000013
（式中、Ｒ２＊は、
【００１９】
【化１３】
2015512419.tif 000014
、および
【００２０】
【化１４】
2015512419.tif 000015
から選択され、
（Ｒ３＊は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、ヒドロキシアルキル、
【００２１】
【化１５】
2015512419.tif 000016
および
【００２２】
【化１６】
2015512419.tif 000017
から選択され、
各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、およびヒドロキシアルキル、但し、Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊の少なくとも１つは水素であり、
ｎは、１、２、３および４から選択され、
ｍは、１、２および３から選択される）；
ｂ．
【００２３】
【化１７】
2015512419.tif 000018
（式中、Ｒ８は、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび
【００２４】
【化１８】
2015512419.tif 000019
（各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は前述の通りである）
から選択される）；
ｃ．
【００２５】
【化１９】
2015512419.tif 000020
（式中、Ｚは、ＣＲ９Ｒ１０およびＮＲ１１から選択され、
各々Ｒ９およびＲ１０は、独立して、Ｈ、ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび
【００２６】
【化２０】
2015512419.tif 000021
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
から選択され、
あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、これらが結合した炭素と一緒になって、４〜６員環のシクロアルキル環またはヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１１は、Ｈおよび
【００２７】
【化２１】
2015512419.tif 000022
（式中、各々Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、およびヒドロキシアルキル、但し、Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４の少なくとも１つは水素である）
から選択され、
Ｒ１５は、ＮＨ２および
【００２８】
【化２２】
2015512419.tif 000023
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
から選択され、
各々ｐ＊およびｑ＊は、独立して、０，１、２および３から選択され、
Ｔは、ＮＨおよびＯから選択され、
ｔは、０，１、２、３および４から選択され、そして
各々ｒおよびｙは、独立して、０および１から選択される）；
ｄ．
【００２９】
【化２３】
2015512419.tif 000024
（式中、Ｒ１６は、ＮＨ２および−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび
【００３０】
【化２４】
2015512419.tif 000025
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
ｓは、０および１から選択され、そして、
ｖは、０および１から選択される）；
ｅ．
【００３１】
【化２５】
2015512419.tif 000026
（式中、Ｒ１８は、ＮＨ２および
【００３２】
【化２６】
2015512419.tif 000027
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
Ｒ１７は、アミノおよびヒドロキシルから選択され；そして
ｗは、０および１から選択される）；
ｆ．
【００３３】
【化２７】
2015512419.tif 000028
ｇ．
【００３４】
【化２８】
2015512419.tif 000029
（式中、Ｍは、ＮＲ１９、ＣＲ２０Ｒ２１およびＯから選択され、
Ｒ１９は、Ｈおよび
【００３５】
【化２９】
2015512419.tif 000030
（式中、各々Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４は、前述の通りである）
から選択され、
各々Ｒ２０およびＲ２１は、独立して、Ｈ、ＮＨ２および
【００３６】
【化３０】
2015512419.tif 000031
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
から選択され、そして
ｕは、０、１および２から選択される）；および
ｈ．
【００３７】
【化３１】
2015512419.tif 000032
から選択される。
【００３８】
ひとつの実施形態では、本発明は、β−ラクタマーゼを阻害するための式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００３９】
ひとつの実施形態では、本発明は、β−ラクタマーゼを阻害するための式Ａ−Ｉの化合物の使用を提供する。
【００４０】
ひとつの実施形態では、本発明は、β−ラクタマーゼ酵素に対する高結合親和性を有する式Ｉの化合物を提供する。
【００４１】
ひとつの実施形態では、本発明は、β−ラクタマーゼ酵素に対する高結合親和性を有する式Ａ−Ｉの化合物を提供する。
【００４２】
ひとつの実施形態では、本発明は、また、式Ｉの化合物および少なくとも１つのβ−ラクタム系抗生物質を含む抗菌性組成物も提供する。
【００４３】
ひとつの実施形態では、本発明は、また、式Ａ−Ｉの化合物および少なくとも１つのβ−ラクタム系抗生物質を含む抗菌性組成物も提供する。
【００４４】
ひとつの実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物および少なくとも１つのβ−ラクタム系抗生物質を含む医薬組成物およびその使用方法を提供する。
【００４５】
ひとつの実施形態では、本発明は、式Ａ−Ｉの化合物および少なくとも１つのβ−ラクタム系抗生物質を含む医薬組成物およびその使用方法を提供する。
【００４６】
ひとつの実施形態では、本発明は、対象の細菌感染症治療のための式Ｉの化合物の使用方法を提供する。
【００４７】
ひとつの実施形態では、本発明は、対象の細菌感染症治療のための式Ａ−Ｉの化合物の使用方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１Ａ】表Ｉ、式Ａ−ＩＩの代表的な化合物を示す。
【図１Ｂ】表Ｉ、式Ａ−ＩＩの代表的な化合物を示す。
【図１Ｃ】表Ｉ、式Ａ−ＩＩの代表的な化合物を示す。
【図１Ｄ】表Ｉ、式Ａ−ＩＩの代表的な化合物を示す。
【図２Ａ】表ＩＩ、β−ラクタマーゼ発現同質遺伝子菌株および臨床菌株のパネルに対する標準β−ラクタマーゼ阻害剤増強最小発育阻止濃度アッセイを示す。
【図２Ｂ】表ＩＩ、β−ラクタマーゼ発現同質遺伝子菌株および臨床菌株のパネルに対する標準β−ラクタマーゼ阻害剤増強最小発育阻止濃度アッセイを示す。
【図３Ａ】表ＩＩＩ、β−ラクタマーゼ発現同質遺伝子菌株および臨床菌株のパネルに対する式ＩＩ−Ａの代表的化合物の相乗最小発育阻止濃度を示す。
【図３Ｂ】表ＩＩＩ、β−ラクタマーゼ発現同質遺伝子菌株および臨床菌株のパネルに対する式ＩＩ−Ａの代表的化合物の相乗最小発育阻止濃度を示す。
【図４】表ＩＶ、ＫＰＣ−２型β−ラクタマーゼに対する式ＩＩ−Ａの代表的化合物の阻害反応速度を決定するアッセイを示す。
【図５Ａ】表Ｖ、β−ラクタマーゼ発現同質遺伝子菌株および臨床菌株のパネルに対する対照化合物の相乗最小発育阻止濃度を示す。
【図５Ｂ】表Ｖ、β−ラクタマーゼ発現同質遺伝子菌株および臨床菌株のパネルに対する対照化合物の相乗最小発育阻止濃度を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
定義
本出願で使用されるとき、分子関連用語は、特に指定しない限り、それらの通常の意味である。
【００５０】
「アルキル」という語は、特に指定しない限り、１〜約１２個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖の飽和ラジカルと定義される。好ましいアルキルラジカルは、１〜約５個の炭素原子を有する「低級アルキル」ラジカルである。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソプロピル、およびヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキルという語のある部分集合は、置換基を有しないアルキル基と定義される「（Ｃ１〜Ｃ３）非置換アルキル」である。「（Ｃ１〜Ｃ３）非置換アルキル」の例としては、メチル、エチル、プロピルおよびイソプロピルが挙げられる。もし、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルが、「置換された」ものであれば、１つ以上の水素原子が置換基に置き換わったものと理解される。
【００５１】
アミノという語は、ＮＨ２ラジカルを意味する。
【００５２】
「アミノアルキル」という語は、１つ以上のアルキル水素原子がアミノ基に置き換わったアルキルを意味する。
【００５３】
「アミノシクロアルキル」という語は、１つのシクロアルキル水素原子がアミノ基に置き換わったシクロアルキルを意味する。
【００５４】
「シクロアルキル」または「シクロアルキル環」という語は、３〜１２員環の単環状炭素環構造または縮合環状炭素環構造で、飽和または部分的に不飽和な環状炭素と定義される。好ましい実施形態では、シクロアルキルは、３〜７員環構造である。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロヘキシル、およびシクロヘプチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５５】
「ヒドロキシアルキル」という語は、１つ以上のアルキル水素原子がヒドロキシル基に置き換わったアルキルラジカルを意味する。
【００５６】
【化３２】
2015512419.tif 000033
または−
は、式中指示された置換基の結合点を意味すると、当業者であれば理解されよう。例えば、
【００５７】
【化３３】
2015512419.tif 000034
または−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ５は、アミド部分の結合点が、カルボニル炭素にあることを表している。
【００５８】
β−ラクタマーゼの機能分類化ならびに「クラスＡ型」、「クラスＣ型」、および「クラスＤ型」β−ラクタマーゼは、当業者であれば理解され、そして「Updated Functinal Classification of β-Lactamases」（Bush, K.; Jacoby, G. A.; Antimicrob. Agents Chemother. 2010, 54, 969-976）に記載されており、参照することにより本明細書に組み入れられる。
【００５９】
本発明の化合物の塩としては、酸付加塩および塩基付加塩が挙げられる。ひとつの実施形態では、該塩は、式Ｉの化合物の薬剤的に許容可能な塩である。「薬剤的に許容可能な塩」という語は、アルカリ金属塩の形成および遊離酸または遊離塩基の付加塩の形成するために、一般的に、使用される塩を包含する。該塩は、薬剤的に許容可能でさえあれば、その性質は重大な意味を持たない。本発明の化合物の適切な薬剤的に許容可能な酸付加塩は、無機酸または有機酸から合成され得る。この無機酸の例としては、塩化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸およびリン酸が挙げられるが、これらに限定されない。適切な有機酸の例としては、脂肪族酸類、環式脂肪族酸類、芳香族酸類、アリール脂肪族酸類、複素環式有機酸類、カルボン酸類およびスルホン酸類に分類される有機酸類から選択され得、これらの例としては、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、マレイン酸、エンボン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、パントテン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルファニル酸、メシル酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、ステアリン酸、アルゲン酸（algenic acid）、β−ヒドロキシ酪酸、マロン酸、ガラクト酸（galactic acid）およびガラクツロン酸が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の化合物の適切な薬剤的に許容可能な塩基付加塩としては、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛から合成される金属塩またはＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、リジンおよびプロカインから合成される有機塩が挙げられるが、これらに限定されない。これらの塩の全ては、例えば、本発明の化合物を適切な酸または塩基と処理することによって、対応する本発明の化合物から常法で合成され得る。
【００６０】
本発明の化合物は、１つ以上の不斉炭素原子を有することができ、従って、そのラセミ体または非ラセミ体混合物の形態だけでなく、光学異性体の形態で存在する可能性がある。本発明の化合物は、単一異性体としてまたは立体化学異性体の混合物として本発明で利用され得る。ジアステレオ異性体、すなわち、重ね合わせることができない立体化学異性体は、クロマトグラフィー、蒸留、結晶化または昇華などの常法で分離され得る。光学異性体は、例えば、光学活性な酸または塩基との処理によりジアステレオ異性体塩を生成するなど、従来法に従ってラセミ体混合物の分割により得られることができる。適切な酸の例としては、酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸およびショウノウスルホン酸が挙げられるが、これらに限定されない。ジアステレオ異性体混合物は、結晶化し、次いで、光学活性塩から光学活性塩基の遊離することにより分離され得る。別の光学異性体分離方法としては、鏡像異性体の分離を最大限に実施できるように最適に選択されたキラルクロマトグラフィーカラムの使用が挙げられる。更に別の実施可能な方法としては、本発明の化合物を、活性化した形態の光学的に純粋な酸と、または光学的に純粋なイソシアネートと処理することによる、共有結合性ジアステレオ異性体分子の合成が挙げられる。合成したジアステレオ異性体を、クロマトグラフィー、蒸留、結晶化または昇華などの常法で分離でき、次いで、加水分解すると、純粋な鏡像異性体化合物が得られる。本発明の光学活性化合物は、光学活性な出発物質を利用することにより、同様に得られることができる。これらの異性体は、遊離酸、遊離塩基、エステルまたは塩の形態であり得る。
【００６１】
本明細書に記載の化合物としては、１つ以上の原子が同じ原子番号であるが、原子質量または質量数が自然に通常見られる原子質量または質量数と異なる原子に置き換わった同位体で標識された化合物も包含する。本明細書に記載の化合物に包含するのに適した同位元素の例としては、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、３６Ｃｌ、１８Ｆ、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、３２Ｐ、および３５Ｓが挙げられるが、これらに限定されない。ひとつの実施形態では、同位体標識化合物は、製剤および／または基質組織分布研究に有用である。別の実施形態では、重水素などのより重い同位体の置換により、より大きな代謝的安定性（例えば、生体内での半減期増加または必要投薬量の低減）をもたらす。更に別の実施形態では、１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏおよび１３Ｎなどの陽電子放射同位元素は、基質受容体占有調査のポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）研究に有用である。同位体標識化合物は、いずれの適切な方法でも、または、それ以外の場合に使用される同位体標識のない試薬の代わりに、適切な同位体標識試薬を使用する方法で合成される。
【００６２】
本発明はまた、単離化合物も包含する。単離化合物とは、混合物中に存在する該化合物が、少なくとも２０％、少なくとも５０％、およびさらに少なくとも８０％など、少なくとも１０％である化合物をいう。ひとつの実施形態では、該化合物、その薬剤的に許容可能な塩、または該化合物を含む医薬組成物は、本明細書に記載したような、従来のバイオアッセイで試験したとき、検知可能な（すなわち、統計学的に有意な）活性を示す。
【００６３】
β−ラクタマーゼ阻害剤（ＢＬＩｓ）
ひとつの態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬剤的に許容可能な塩を提供する：
【００６４】
【化３４】
2015512419.tif 000035
【００６５】
式Ｉの置換基Ｒは、
【００６６】
【化３５】
2015512419.tif 000036
から選択される。
【００６７】
好ましい実施形態では、Ｒは、
【００６８】
【化３６】
2015512419.tif 000037
である。
【００６９】
式ＩのＲ１基は、
ａ． 
【００７０】
【化３７】
2015512419.tif 000038
（式中、Ｒ２は、
【００７１】
【化３８】
2015512419.tif 000039
および
【００７２】
【化３９】
2015512419.tif 000040
（式中、各々Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、およびヒドロキシアルキル、ならびにｎは１、２、および３から選択される）
から選択される）；
ｂ．
【００７３】
【化４０】
2015512419.tif 000041
（式中、Ｒ６は、Ｈおよび
【００７４】
【化４１】
2015512419.tif 000042
から選択される）；
ｃ．
【００７５】
【化４２】
2015512419.tif 000043
（式中、Ｒ７は、Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ３）非置換アルキル、アミノ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキル、アミノシクロアルキル、ヒドロキシアルキル、および
【００７６】
【化４３】
2015512419.tif 000044
から選択され、そして各々ｐおよびｑは、独立して、１および２から選択される）
から選択される。
【００７７】
本発明のひとつの態様では、ｎは１である。本発明の別の態様では、ｎは２である。本発明の別の態様では、ｎは３である。
【００７８】
ひとつの態様では、Ｒ１は、−ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）２ＮＨ２、
【００７９】
【化４４】
2015512419.tif 000045
【００８０】
【化４５】
2015512419.tif 000046
【００８１】
【化４６】
2015512419.tif 000047
【００８２】
【化４７】
2015512419.tif 000048
、または
【００８３】
【化４８】
2015512419.tif 000049
から選択される。
【００８４】
本発明のひとつの実施形態では、Ｒ１は、
【００８５】
【化４９】
2015512419.tif 000050
、または
【００８６】
【化５０】
2015512419.tif 000051
から選択される。
【００８７】
本発明のひとつの実施形態では、本発明の化合物は、式ＩＩに開示する立体化学のものである。
【００８８】
【化５１】
2015512419.tif 000052
【００８９】
本発明の別の実施形態では、化合物は、式ＩＩのものであり、Ｒは−ＯＳＯ３Ｈであり、Ｒ１は−ＣＨ２ＮＨ２である。
【００９０】
本発明の別の実施形態では、化合物は、式ＩＩのものであり、Ｒは−ＯＳＯ３Ｈであり、Ｒ１は−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２である。
【００９１】
本発明の別の実施形態では、化合物は、式ＩＩのものであり、Ｒは−ＯＳＯ３Ｈであり、Ｒ１は−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）２ＮＨ２である。
【００９２】
本発明の別の実施形態では、化合物は、式ＩＩのものであり、Ｒは−ＯＳＯ３Ｈであり、Ｒ１は
【００９３】
【化５２】
2015512419.tif 000053
である。
【００９４】
本発明の別の実施形態では、化合物は、式ＩＩのものであり、Ｒは−ＯＳＯ３Ｈであり、Ｒ１は
【００９５】
【化５３】
2015512419.tif 000054
である。
【００９６】
本発明の別の実施形態では、化合物は、式ＩＩのものであり、Ｒは−ＯＳＯ３Ｈであり、Ｒ１は
【００９７】
【化５４】
2015512419.tif 000055
である。
【００９８】
本発明の別の実施形態では、化合物は、式ＩＩのものであり、Ｒは−ＯＳＯ３Ｈであり、Ｒ１は
【００９９】
【化５５】
2015512419.tif 000056
である。
【０１００】
本発明の別の実施形態では、化合物は、式ＩＩのものであり、Ｒは−ＯＳＯ３Ｈであり、Ｒ１は
【０１０１】
【化５６】
2015512419.tif 000057
である。
【０１０２】
好ましい式Ｉの化合物は、化合物：
【０１０３】
【化５７】
2015512419.tif 000058
および
【０１０４】
【化５８】
2015512419.tif 000059
である。
【０１０５】
Ｒ１およびＲの性質に依存して、式Ｉの化合物が塩で存在するか、または双性イオンの形態で存在し得ることは、当業者であれば、理解されるだろう。
【０１０６】
ひとつの態様では、本発明は、式Ａ−Ｉの化合物またはその薬剤的に許容可能な塩を提供する：
【０１０７】
【化５９】
2015512419.tif 000060
式Ａ−Ｉの置換基Ｒ＊は、
【０１０８】
【化６０】
2015512419.tif 000061
から選択される。
【０１０９】
好ましい実施形態では、Ｒ＊は、
【０１１０】
【化６１】
2015512419.tif 000062
である。
【０１１１】
Ｒ１＊基は、
ａ．
【０１１２】
【化６２】
2015512419.tif 000063
（式中、Ｒ２＊は、
【０１１３】
【化６３】
2015512419.tif 000064
、および
【０１１４】
【化６４】
2015512419.tif 000065
（Ｒ３＊は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、ヒドロキシアルキル、
【０１１５】
【化６５】
2015512419.tif 000066
および
【０１１６】
【化６６】
2015512419.tif 000067
から選択され、
各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、およびヒドロキシアルキルであり、但し、Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊の少なくとも１つは水素であり、
ｎは、１、２、３および４から選択され、そして
ｍは、１、２および３から選択される）から選択される）；
ｂ．
【０１１７】
【化６７】
2015512419.tif 000068
（式中、Ｒ８＊は、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび
【０１１８】
【化６８】
2015512419.tif 000069
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである））；
ｃ．
【０１１９】
【化６９】
2015512419.tif 000070
（式中、Ｚは、ＣＲ９Ｒ１０およびＮＲ１１から選択され、
各々Ｒ９およびＲ１０は、独立して、Ｈ、ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび
【０１２０】
【化７０】
2015512419.tif 000071
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）から選択され、
あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、これらが結合した炭素と一緒になって、４〜６員環のシクロアルキル環またはヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１１は、Ｈおよび
【０１２１】
【化７１】
2015512419.tif 000072
（各々Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、およびヒドロキシアルキル、但し、Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４の少なくとも１つは水素である）
から選択され、
Ｒ１５は、ＮＨ２および
【０１２２】
【化７２】
2015512419.tif 000073
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）から選択され、
各々ｐ＊およびｑ＊は、独立して、０，１、２および３から選択され、
Ｔは、ＮＨおよびＯから選択され、
ｔは、０，１、２、３および４から選択され、そして
各々ｒおよびｙは、独立して、０および１から選択される）；
ｄ．
【０１２３】
【化７３】
2015512419.tif 000074
（式中、Ｒ１６は、ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルおよび
【０１２４】
【化７４】
2015512419.tif 000075
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
ｓは、０および１から選択され、そして、
ｖは、０、１、２、および３から選択される）
ｅ．
【０１２５】
【化７５】
2015512419.tif 000076
（式中、Ｒ１８は、ＮＨ２および
【０１２６】
【化７６】
2015512419.tif 000077
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
から選択され、
Ｒ１７は、アミノおよびヒドロキシルから選択され、そして
ｗは、０および１から選択される）；
ｆ．
【０１２７】
【化７７】
2015512419.tif 000078
ｇ．
【０１２８】
【化７８】
2015512419.tif 000079
（式中、Ｍは、ＮＲ１９、ＣＲ２０Ｒ２１およびＯから選択され、
Ｒ１９は、Ｈおよび
【０１２９】
【化７９】
2015512419.tif 000080
（式中、各々Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４は、前述の通りである）
各々Ｒ２０およびＲ２１は、独立して、Ｈ、ＮＨ２および
【０１３０】
【化８０】
2015512419.tif 000081
（式中、各々Ｒ４＊、Ｒ５＊、Ｒ６＊およびＲ７＊は、前述の通りである）
から選択され、そして
ｕは、０、１および２から選択される）；および
ｈ．
【０１３１】
【化８１】
2015512419.tif 000082
から選択される。本発明のひとつの態様では、Ｒ１＊は、
【０１３２】
【化８２】
2015512419.tif 000083
【０１３３】
【化８３】
2015512419.tif 000084
【０１３４】
【化８４】
2015512419.tif 000085
【０１３５】
【化８５】
2015512419.tif 000086
【０１３６】
【化８６】
2015512419.tif 000087
【０１３７】
【化８７】
2015512419.tif 000088
【０１３８】
【化８８】
2015512419.tif 000089
【０１３９】
【化８９】
2015512419.tif 000090
【０１４０】
【化９０】
2015512419.tif 000091
【０１４１】
【化９１】
2015512419.tif 000092
【０１４２】
【化９２】
2015512419.tif 000093
【０１４３】
【化９３】
2015512419.tif 000094
【０１４４】
【化９４】
2015512419.tif 000095
【０１４５】
【化９５】
2015512419.tif 000096
【０１４６】
【化９６】
2015512419.tif 000097
【０１４７】
【化９７】
2015512419.tif 000098
【０１４８】
【化９８】
2015512419.tif 000099
【０１４９】
【化９９】
2015512419.tif 000100
【０１５０】
【化１００】
2015512419.tif 000101
【０１５１】
【化１０１】
2015512419.tif 000102
【０１５２】
【化１０２】
2015512419.tif 000103
【０１５３】
【化１０３】
2015512419.tif 000104
【０１５４】
【化１０４】
2015512419.tif 000105
【０１５５】
【化１０５】
2015512419.tif 000106
【０１５６】
【化１０６】
2015512419.tif 000107
【０１５７】
【化１０７】
2015512419.tif 000108
【０１５８】
【化１０８】
2015512419.tif 000109
【０１５９】
【化１０９】
2015512419.tif 000110
【０１６０】
【化１１０】
2015512419.tif 000111
、および
【０１６１】
【化１１１】
2015512419.tif 000112
から選択される。
【０１６２】
本発明のひとつの実施形態では、Ｒ１＊は、
【０１６３】
【化１１２】
2015512419.tif 000113
、および
【０１６４】
【化１１３】
2015512419.tif 000114
から選択される。
【０１６５】
本発明のひとつの実施形態では、本発明の化合物は、式Ａ−ＩＩに開示する立体化学のものである。
【０１６６】
【化１１４】
2015512419.tif 000115
本発明の別の実施形態では、Ｒ＊およびＲ１＊は、表Ｉ（図Ｉ参照）の一覧に記載した置換基から選択される。好ましい式Ａ−Ｉの化合物は、
【０１６７】
【化１１５】
2015512419.tif 000116
および
【０１６８】
【化１１６】
2015512419.tif 000117
である。
【０１６９】
Ｒ１＊およびＲ＊の性質に依存して、式Ｉの化合物が塩の形態で存在するか、または双性イオンの形態で存在することは、当業者であれば、理解されるだろう。
【０１７０】
酵素阻害および結合親和性
本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、β−ラクタマーゼの阻害に有効である。本発明のひとつの態様では、表Ｉの化合物は、有効なβ−ラクタマーゼ阻害剤である。ひとつの態様では、化合物
【０１７１】
【化１１７】
2015512419.tif 000118
は、β−ラクタマーゼの阻害に有効である。ひとつの態様では、化合物
【０１７２】
【化１１８】
2015512419.tif 000119
は、β−ラクタマーゼの阻害に有効である。
【０１７３】
β−ラクタム系抗生物質と併用されるとき、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、ひとつのβ−ラクタマーゼまたは複数のβ−ラクタマーゼの存在のために、通常にβ−ラクタム系抗生物質耐性のある微生物に対するβ−ラクタム系抗生物質の活性を増強する。
【０１７４】
本発明のひとつの態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼから選択されるβ−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式Ｉの化合物は、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼから選択されるβ−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式Ａ−Ｉの化合物は、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼから選択されるβ−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式ＩＩの化合物は、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼから選択されるβ−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式Ａ−ＩＩの化合物は、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼから選択されるβ−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、表Ｉの化合物は、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼから選択されるβ−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式
【０１７５】
【化１１９】
2015512419.tif 000120
の化合物は、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼから選択されるβ−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式
【０１７６】
【化１２０】
2015512419.tif 000121
の化合物は、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼから選択されるβ−ラクタマーゼを阻害する。例えば、クラスＡ型β−ラクタマーゼとしては、ＴＥＭ、ＳＨＶ、ＣＴＸ−Ｍ、ＫＰＣ、ＧＥＳ、ＶＥＢ、ＳＭＥ、およびＧＥＸが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の好ましい態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、ＫＰＣ型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明の好ましい態様では、式Ｉの化合物は、ＫＰＣ型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明の好ましい態様では、式Ａ−Ｉの化合物は、ＫＰＣ型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明の好ましい態様では、式ＩＩの化合物は、ＫＰＣ型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明の好ましい態様では、式Ａ−ＩＩの化合物は、ＫＰＣ型β−ラクタマーゼを阻害する。より好ましくは、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、ＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。より好ましくは、式Ｉの化合物は、ＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。より好ましくは、式Ａ−Ｉの化合物は、ＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。より好ましくは、式ＩＩの化合物は、ＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。より好ましくは、式Ａ−ＩＩの化合物は、ＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、臨床株（図２、表ＩＩ）のＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式Ｉの化合物は、臨床株（図２、表ＩＩ）のＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式Ａ−Ｉの化合物は、臨床株（図２、表ＩＩ）のＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式ＩＩの化合物は、臨床株（図２、表ＩＩ）のＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明のひとつの態様では、式Ａ−ＩＩの化合物は、臨床株（図２、表ＩＩ）のＫＰＣ−２型またはＫＰＣ−３型β−ラクタマーゼを阻害する。例えば、クラスＣ型β−ラクタマーゼとしては、染色体性ＡｍｐＣ類、およびプラスミド性ＡＣＣ型、ＤＨＡ型、ＣＭＹ型、ＦＯＸ型、ＡＣＴ型、ＭＩＲ型、ＬＡＴ型、ＭＯＸ型β−ラクタマーゼが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、クラスＤ型β−ラクタマーゼ酵素としては、オキサシリナーゼまたはＯＸＡ型β−ラクタマーゼが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の好ましい態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、ＯＸＡ−１５型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明の好ましい態様では、式Ｉの化合物は、ＯＸＡ−１５型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明の好ましい態様では、式Ａ−Ｉの化合物は、ＯＸＡ−１５型β−ラクタマーゼを阻害する。本発明の好ましい態様では、式ＩＩの化合物は、ＯＸＡ−１５型β−ラク��マーゼを阻害する。本発明の好ましい態様では、式Ａ−ＩＩの化合物は、ＯＸＡ−１５型β−ラクタマーゼを阻害する。
【０１７７】
特に指示しない限り、β−ラクタマーゼ阻害剤化合物の活性は、それらの両方ともβ−ラクタム存在下で実施される相乗最小発育阻止濃度アッセイまたはβ−ラクタマーゼ阻害剤増強アッセイ（例えば、本明細書に記載の）から得られる最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）値によって記述され得る。β−ラクタマーゼ阻害剤化合物の作用機序に関係なく（例えば、β−ラクタマーゼ阻害剤によるβ−ラクタマーゼの阻害または他の作用機序または作用機序の組み合わせを含む）、相乗最小発育阻止濃度値または最小発育阻止濃度値がより低いほど、β−ラクタマーゼ阻害剤は、より高活性である。相乗最小発育阻止濃度およびβ−ラクタマーゼ阻害剤増強アッセイデータは、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）が、β−ラクタマーゼ阻害によるβ−ラクタマーゼ産生菌株に対するβ−ラクタム系抗生物質の活性を増強する（すなわち、より強力にする）ことを立証している。
【０１７８】
ひとつの実施形態では、β−ラクタマーゼ阻害剤活性は、相乗最小発育阻止濃度（ｓＭＩＣ）アッセイで、β−ラクタマーゼ産生菌株の生育阻害により測定される。好ましくは、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の相乗最小発育阻止濃度値は、８μｇ／ｍＬ以下である。本発明のより好ましい態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の相乗最小発育阻止濃度値は、４μｇ／ｍＬ〜８μｇ／ｍＬである。本発明の更により好ましい態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の相乗最小発育阻止濃度値は、１〜２μｇ／ｍＬである。本発明の更により好ましい態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の相乗最小発育阻止濃度値は、０．２〜０．５μｇ／ｍＬである。本発明の代表的な化合物の相乗最小発育阻止濃度値は、表ＩＩＩ（図３参照）に記載されている。β−ラクタマーゼ産生菌株の生育阻害は、国際特許出願第ＷＯ２００８／０３９４２０号に開示されたようなチェッカーボード相乗アッセイまたは一定濃度のβ−ラクタマーゼ阻害剤を使用する標準β−ラクタマーゼ阻害剤増強アッセイによっても、測定され得ることは、当業者であれば、理解されるだろう。
【０１７９】
ひとつの実施形態では、β−ラクタマーゼ阻害剤活性は、一定濃度のβ−ラクタマーゼ阻害剤を使用する標準β−ラクタマーゼ阻害剤増強アッセイで、β−ラクタマーゼ産生菌株の生育阻害によって測定される。好ましくは、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）値は、８μｇ／ｍＬ以下である。本発明のより好ましい態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）値は、４〜８μｇ／ｍＬである。本発明の更により好ましい態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）値は、１〜２μｇ／ｍＬである。本発明の更により好ましい態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）値は、０．２μｇ／ｍＬ〜０．５μｇ／ｍＬである。
【０１８０】
本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、多種多様なβ−ラクタマーゼ産生菌に渡った活性の広域抗菌スペクトルを有する。本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、クラスＤ型β−ラクタマーゼＯＸＡ−１５型β−ラクタマーゼを発現する菌株に対するβ−ラクタム系抗生物質、特に、セフトロザンの活性増強する活性がある。現在市販されているβ−ラクタム系抗生物質は、クラスＡ型β−ラクタマーゼのほとんどを阻害するが、クラスＡ型のＫＰＣ型β−ラクタマーゼおよびクラスＣ型β−ラクタマーゼの阻害は不十分であり、ペニシリナーゼおよびカルバペネマーゼ型のクラスＤ型β−ラクタマーゼの阻害は、成功したりしなかったりである。本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、クラスＡ型およびクラスＣ型β−ラクタマーゼを発現する多種多様な菌株に対する活性があり、クラスＤ型セファロスポリナーゼＯＸＡ−１５を発現する菌株に対しても、驚いたことに、活性がある（表ＩＩおよび表ＩＩＩ）。異なる型のβ−ラクタマーゼの産生菌に対する種々の有効性は、耐性菌株の治療のためにβ−ラクタム系抗生物質を効果的に使用するために必要であるので、クラスＤ型β−ラクタマーゼに対する活性増加は、重大な意味を持つ（下記参照）。
【０１８１】
ひとつの実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、最も構造的に類似した化合物であるアビバクタム（対照化合物ＣＣＣ）より、ＯＸＡ−１５型β−ラクタマーゼを発現する菌株に対して、予想外に、より高活性である。クラスＤ型セファロスポリナーゼＯＸＡ−１５を発現する菌株に対するアビバクタムより高活性である化合物は、例えば、化合物６０３、６０４、６１１、６１４、６１８である。
【０１８２】
ひとつの実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、最も構造的に類似した化合物であるアビバクタムより、ＫＰＣ型β−ラクタマーゼを発現する菌株に対して、予想外に、高活性であり、および／または活性のより広域な抗菌スペクトルを示す。ＫＰＣ型β−ラクタマーゼを発現する、少なくとも１つの菌株に対して、アビバクタムより高活性であり、および／またはＫＰＣ型β−ラクタマーゼを発現する菌株に対する活性が、アビバクタムより良好な抗菌スペクトルを示す化合物は、例えば、化合物６０１、６０２、６０３、６０４、６０５、６０６、６０７、６０８、６０９、６１０、６１１、６１２、６１３、６１４、６１５、６１６、６１７、６１８、６２０、６２１、６２２、６２３、６２４、６２５、６２６、および６２７である。
【０１８３】
本発明の別の態様では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、β−ラクタマーゼ酵素に対する高結合親和性を有する。その結果、これらの化合物は、β−ラクタマーゼ酵素のより良好な阻害剤となる。本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の阻害反応速度は、実施例３７で概要を述べた方法に従って測定された。本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、β−ラクタマーゼ酵素に対する高結合親和性を有する。
【０１８４】
ひとつの実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、１０００〜５０００ｍＭ−１ｓ−１の結合親和力を有する。１０００〜５０００ｍＭ−１ｓ−１の結合親和力を有する化合物は、例えば、化合物６０４および６０８（表ＩＶ）である。
【０１８５】
ひとつの実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、１００〜９９９ｍＭ−１ｓ−１の結合親和力を有する。１００〜９９９ｍＭ−１ｓ−１の結合親和力を有する化合物は、例えば、化合物６０１、６０３、６０５、６０６、６０７、６０９、６１０、６１１、６１２、６１３、６１４、６１５、６１６、６１７、６１８、６１９、６２０、６２１、６２２、６２３、６２４、６２５、６２６、および６２７（表ＩＶ）である。
【０１８６】
ひとつの実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、１〜９９ｍＭ−１ｓ−１の結合親和力を有する。１〜９９ｍＭ−１ｓ−１の結合親和力を有する化合物は、例えば、６０２（表ＩＶ）である。
【０１８７】
本発明の化合物が、最も近似した構造の対照物であるアビバクタムより、β−ラクタマーゼ酵素に対する高結合親和性を有することは、驚くべき発見であった（表ＩＶ、図４参照）。
【０１８８】
本発明の化合物は、図５に示すように他の対照化合物より良好なβ−ラクタマーゼ阻害剤であることも分かった。
【０１８９】
本発明の化合物を含む医薬組成物およびその使用
本発明の別の目的は、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）またはその塩を含み、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質をさらに含む医薬組成物または医薬処方物である。本発明のひとつの実施形態では、式Ｉの化合物またはその塩を含み、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質をさらに含む医薬組成物または医薬処方物である。本発明のひとつの実施形態では、式Ａ−Ｉの化合物またはその塩を含み、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質をさらに含む医薬組成物または医薬処方物である。本発明のひとつの実施形態では、式ＩＩの化合物またはその塩を含み、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質をさらに含む医薬組成物または医薬処方物である。本発明のひとつの実施形態では、式Ａ−ＩＩの化合物またはその塩を含み、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質をさらに含む医薬組成物または医薬処方物である。本発明のひとつの実施形態では、表Ｉの化合物を含む医薬組成物または医薬処方物である。本発明のひとつの実施形態では、式
【０１９０】
【化１２１】
2015512419.tif 000122
の化合物、またはその塩を含み、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質をさらに含む医薬組成物または医薬処方物である。本発明のひとつの実施形態では、式
【０１９１】
【化１２２】
2015512419.tif 000123
の化合物、またはその塩を含み、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質をさらに含む医薬組成物または医薬処方物である。
【０１９２】
該医薬組成物は、細菌感染症などの疾病の治療処置または予防処置のための経口投与、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与または非経口投与用に処方され得る。好ましくは、該医薬組成物は、静脈内投与用に処方される。
【０１９３】
本明細書に開示した医薬製剤は、標準的な方法に従って製剤化され、感染症を軽減、予防または除去するために選択される用量で投与され得る（例えば、ヒトの治療用の種々の抗菌剤投与方法の一般的記述のため、Remington著 「Pharmaceutical Sciences」Mack Publishing Company, Easton, PAおよびGoodmanおよびGilman著「The Pharmaceutical Basis of Therapeutics」Pergamon Press, New York, NY（これらの内容は参照することにより本明細書に組み入れられる）を参照）。
【０１９４】
該医薬組成物は、β−ラクタム系抗生物質と併せて、１つ以上の無毒で薬剤的に許容可能な担体および／または希釈剤および／または補助剤および／または賦形剤と共に、１つ以上の本明細書に開示した化合物（例えば、１つ以上の式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物を含むことができる。本明細書で使用するとき、「薬剤的に許容可能な担体」という言い回しは、薬剤投与に適合する任意のおよび全ての溶媒類、分散媒質、塗布剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤等をいう。このような媒質や薬剤の薬剤的に活性な物質のため使用することは、当分野で周知である。担体および賦形剤の限定されない例としては、コーンスターチまたはゼラチン、ラクトース、ショ糖、微結晶性セルロース、カオリン、マニトール、リン酸二カルシウム、塩化ナトリウムおよびアルギン酸が挙げられる。該組成物は、クロスカルメロースナトリウム、微結晶性セルロース、コーンスターチ、デンプングリコール酸ナトリウムおよびアルギン酸を含み得る。
【０１９５】
含有され得る錠剤の結合剤は、アカシア、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン(ポビドン)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ショ糖、デンプンおよびエチルセルロースである。
【０１９６】
使用され得る潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウムまたは他のステアリン酸金属塩、ステアリン酸、シリコーン油、タルク、ワックス類、油類およびコロイドシリカが挙げられる。
【０１９７】
ペパーミント、ウインターグリーン油、チェリー着香料等のような着香料剤も使用され得る。製剤形態をより見た目がよい外観にするため、または生成物を同定し易くするために着色剤を添加することも望ましいかもしれない。
【０１９８】
経口投与または非経口投与のため、β−ラクタム系抗生物質と併用して、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、従来の医薬担体および賦形剤と混合し、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウエハース等の形態で使用され得る。本発明の化合物を含む組成物は、約１０重量％〜約３０重量％など、活性化合物を約０．１重量％〜約９９重量％含有し得る。
【０１９９】
経口使用のため、錠剤およびカプセル剤などの固体製剤化は有用である。持続的放出または腸溶性製剤も考案され得る。小児および老人向け応用のため、ひとつの実施形態では、懸濁剤、シロップ剤および歯でかみ砕ける錠剤を提供する。経口投与のため、医薬組成物は、例えば、錠剤、カプセル剤、懸濁剤または液剤の形態である。
【０２００】
該医薬組成物は、治療有効量の活性成分を含有する投薬単位の形態で作成され得る。このような投薬単位の例としては、錠剤およびカプセル剤がある。治療目的のため、活性成分に加えて、結合剤などの従来の担体、例えば、アラビアゴム、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ソルビトール、またはトラガカント；充填材、例えば、リン酸カルシウム、グリシン、ラクトース、トウモロコシデンプン、ソルビトールまたはショ糖；潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、シリカ、またはタルク;崩壊剤、例えば、ジャガイモデンプン、着香料または着色剤、または許容可能な湿潤剤を含有できる錠剤およびカプセル剤。経口液製剤は、一般的に、水性または油性溶液、懸濁液、乳化液、シロップ液またはエリキシル剤の形態であり、本発明の製剤は、懸濁化剤、乳化剤、非水性剤、保存剤、着色剤および着香料などの従来の添加剤を含み得る。液体製剤用添加剤の限定されない例としては、アカシア、アーモンド油、エチルアルコール、分別されたヤシ油、ゼラチン、グルコースシロップ、グリセリン、水素化食用脂類、レシチン、メチルセルロース、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルまたはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、プロピレングリコール、ソルビトール、またはソルビン酸が挙げられる。
【０２０１】
静脈内（ＩＶ）使用のため、医薬組成物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、通常使用される静脈内輸液のいずれにでも、溶解または懸濁され、注入により投与され得る。静脈内輸液としては、生理食塩水またはリンゲル液が挙げられるが、これらに限定されない。静脈内投与は、されに限定されないが、注射器、ミニポンプまたは静脈ラインを使用することにより、実施され得る。
【０２０２】
注射剤のため、本発明の医薬組成物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、使用直前に、滅菌注射液剤または分散剤への再調製用滅菌散剤だけでなく、薬剤的に許容可能な水性または非水性溶液剤、分散剤、懸濁剤または乳剤を含む。適切な水性および非水性担体、希釈剤、溶媒または媒体の例としては、水、エタノール、ベンジルアルコール、ポリオール類（グリセロール、プロピレングリコール、およびポリエチレングリコールなど）、およびそれらの適切な混合物、植物油類（トウモロコシ油またはオリーブ油など）、およびオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステル類が挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング剤の使用により、分散剤の場合、必要な粒子サイズの維持により、および界面活性剤の使用により、保持され得る。該組成物は、種々の緩衝剤を含むことができる。
【０２０３】
これらの組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、および分散剤などの補助剤も含み得る。それらはまた、当分野で周知の追跡用添加物または他の偽造防止剤も含み得る。微生物作用の防止は、種々の抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、およびフェノールソルビン酸などを含有することにより確保され得る。糖類および塩化ナトリウムなどの等張剤を含有することも望ましいかもしれない。注射可能な医薬品形態の遅延吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅延する薬剤の含有によりもたらされ得る。
【０２０４】
注射可能なデポー剤形は、ポリ乳酸−ポリグリコール酸などの生分解性ポリマー中に薬剤のマトリックス型マイクロカプセル化することにより製剤され得る。薬剤のポリマーに対する比率および使用した特定のポリマーの性質に依存して、薬剤放出速度を制御できる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリオルトエステル類およびポリ酸無水物類が挙げられる。注射可能なデポー剤処方物はまた、体組織に適合するリポソーム類またはマイクロエマルション類に薬剤を封入することでも製剤され得る。
【０２０５】
注射可能な処方物は、例えば、細菌保持性フィルターを通して濾過、または滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を含ませることにより、滅菌され、該処方物は、使用直前に、滅菌水または他の滅菌注射可能媒体中に溶解または分散され得る。
【０２０６】
経口投与用固体剤形としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、および顆粒剤が挙げられる。このような形態は、口腔環境で直ぐに溶解または崩壊する形態を含み得る。このような固体剤形では、活性化合物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用で、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、少なくとも１つの不活性で薬剤的に許容可能な賦形剤または担体と混合され得る。適切な賦形剤としては、例えば、（ａ）デンプン類、ラクトース、ショ糖、グルコース、マニトール、およびケイ酸などの充填材または増量剤；（ｂ）セルロースおよびセルロース誘導体（ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、およびカルボキシメチルセルロースなど）、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖、およびアカシアなどの結合剤；（ｃ）グリセロールなどの湿潤剤；（ｄ）デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロース、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプンまたはタピオカ粉、アルギン酸、いくつかのケイ酸塩類、および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；（ｅ）パラフィンなどの溶液遅延剤；（ｆ）四級化アンモニウム化合物などの吸収促進剤；（ｇ）セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール、ソルビタン脂肪酸エステル、ポロキサマー類、およびポリエチレングリコール類などの湿潤剤；（ｈ）カオリンおよびベントナイト粘土などの吸収剤；（ｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール類、ラウリル硫酸ナトリウム、およびそれらの混合物などの潤滑剤；および（ｊ）タルク、および二酸化ケイ素などの流動促進剤が挙げられる。他の適切な賦形剤としては、例えば、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムが挙げられる。該剤形はまた、緩衝剤も含み得る。
【０２０７】
錠剤、糖剤、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の剤形を包含する固体剤形は、機能性および麻酔性腸溶コーティングおよび医薬製剤分野で周知の他のコーティングなどのコーティング剤およびシェル剤を用いて製剤され得る。それらは、乳白剤および着色剤を含んでもよい。それらはまた、放出制御可能または持続放出可能な形態であってもよい。このような目的で使用され得る包埋組成物の例としては、高分子物質およびワックス類が挙げられる。
【０２０８】
該医薬組成物は、放出制御性（例えば、カプセル剤）または徐放性（例えば、生体内分解性マトリックス）送達システムを使用して、送達され得る。医薬組成物の投与に適切な製剤送達の典型的遅延放出送達システムは、米国特許第４，４５２，７７５号（Kent取得）、同第５，０３９，６６０号（Leonard取得）、および同第３，８５４，４８０号（Zaffaroni取得）に記載されている。
【０２０９】
いくつかの場合に、製剤の効果を延長するために、皮下注射または筋肉内注射の後、製剤の吸収を遅くすることが望ましいかもしれない。これは、水難溶性の結晶性または非晶性材料の液体懸濁液の使用により達成され得る。非晶性材料は、単独または必要に応じて安定剤と一緒に使用され得る。そして、製剤の吸収速度は、その溶解速度に依存し、溶解速度は次に、結晶サイズおよび結晶形態に依存し得る。
【０２１０】
あるいは、非経口投与剤形の遅延吸収は、油性媒体中に製剤を溶解または懸濁することにより達成され得る。
【０２１１】
筋肉内製剤のため、化合物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物、またはそれらの適切な可溶塩の形態、例えば、塩化水素塩などの滅菌処方物は、注射用水（ＷＦＩ）、生理食塩水または５％グルコースなどの医薬用希釈剤に溶解し、投与され得る。該化合物の適切な難溶性形態は、水性基剤または、例えば、オレイン酸エチルなどの長鎖脂肪酸エステルなどの薬剤的に許容可能な油性基剤中の懸濁液として製剤し投与され得る。
【０２１２】
化合物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物の静脈内、筋肉内、または非経口処方物の投薬量は、急速投与またはゆっくり注入することにより投与され得る。急速投与は、３０分以内に投与される用量である。ひとつの実施形態では、急速投与は、１５分以内または１０分以内に投与される。別の実施形態では、急速投与は、５分以内に投与される。更に別の実施形態では、急速投与は、１分以内に投与される。注入は、３０分以上の速度で投与される用量である。ひとつの実施形態では、注入は１時間以上である。別の実施形態では、注入は、実質的に一定になされる。
【０２１３】
局所使用では、該医薬組成物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、皮膚、または鼻粘膜および咽頭粘膜に施される適切な形態でも製剤され、クリーム剤、軟膏剤、液体スプレー剤または吸入剤、トローチ剤、または咽頭塗布剤の形態を取ることができる。このような局所処方物は、活性成分の表面浸透促進のため、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などの化学物質をさらに含むことができる。
【０２１４】
目または耳に応用するため、該医薬組成物は、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、塗布剤または散剤として、親水性または疎水性基剤中に処方した液体または半液体で提供され得る。
【０２１５】
直腸投与のために、該医薬組成物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、カカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐剤ワックス、または他のグリセリドなど、室温で固体であるが、体温で液体になるので、直腸内または腟腔で融解して活性化合物を放出する従来の担体と混合した坐剤の形態で投与され得る。
【０２１６】
あるいは、該医薬組成物は、送達する時に、適切な薬剤的に許容可能な担体に再構成するための散剤の形態であり得る。別の実施形態では、化合物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物の単位剤形は、滅菌密封アンプルまたは滅菌注射器に、適切な希釈剤中の１つ以上の化合物またはその塩の溶液であり得る。化合物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用で、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物の単位投薬量中の濃度は、使用した化合物およびその溶解性および医師により要求された用量に依存し、例えば、約１％〜約５０％など変わり得る。もし組成物が、単位用量を含有するならば、各々単位用量は、１〜５００ｍｇの活性物質を含むことができる。成人の治療では、適用される用量は、投与経路および投与頻度に依存して、１日５ｍｇ〜１０ｇの範囲で変動し得る。
【０２１７】
本明細書に開示した医薬組成物は、薬剤的に許容可能な担体に配合され得、製剤送達の公知の方法に従って、受容対象（例えば、ヒト）に送達される。一般的に、該医薬組成物の生体内送達方法は、当該技術分野で認められているプロトコル中の製剤を本発明の化合物で置き換えるという実質的手順の修正のみで、製剤送達のための当該技術分野で認められているプロトコルを利用する。同様に、例えば、細胞培養液の細菌汚染レベルを除去または低減するために、特許請求項範囲の化合物を培養下の細胞処置に使用する方法は、当該技術分野で認められているプロトコル中の製剤を本発明の化合物で、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質との組み合わせで、置き換えるという実質的手順の修正のみで、細胞培養を抗菌剤で処置するための当該技術分野で認められているプロトコルを利用する。
【０２１８】
抗菌剤送達の典型的方法は、Rogers取得された米国特許第６，４６８，９６７号；同第６，８５２，６８９号；および同第５，０４１，５６７号および国際特許出願第ＥＰ９４／０２５５２号（国際特許公開第ＷＯ９５／０５３８４号）に記載されており、これらの開示は、それらの全文を参照することにより本明細書に組み入れられる。ひとつの実施形態では、本発明の１つ以上の化合物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物、またはその医薬組成物は、経口的に、直腸内にまたは注射（静脈内、筋肉内または皮下）により投与される。別の実施形態では、本発明の１つ以上の化合物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物、またはその医薬組成物は、β−ラクタム耐性菌が原因で起こる感染症を治療するために、経口的に、直腸内にまたは注射（静脈内、筋肉内または皮下）により投与される。別の実施形態では、本発明の１つ以上の化合物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物、またはその医薬組成物は、β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる感染症を治療するために、経口投与される。
【０２１９】
本明細書で使用されるとき、「治療有効用量」および「治療有効量」という言い回しは、細菌感染症の発症を防止する、症状を緩和する、進行を止める、または、例えば、臨床症状改善またはリンパ球および／または抗体レベル低下／上昇などの別の所望の生物学的結果をもたらす化合物の量をいう。
【０２２０】
「治療すること」または「治療」という語は、対象に、感染症発症予防および感染症制御または排除の両方のために、１つ以上の化合物の治療有効量を投与することと定義される。治療を必要としているものは、疾病の危険にあるもの（すなわち、最終的に障害を患いそうであるもの）だけでなく、特定の医学的疾病を既に有する個人を包含され得る。
【０２２１】
本明細書で使用されるとき、「対象」という語は、哺乳類、植物、下等動物、または細胞培養液をいう。ひとつの実施形態では、対象は、抗菌治療を必要とするヒトまたは他の動物患者である。
【０２２２】
「投与すること」または「投与」という語および同類の語は、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）を、治療を必要としている対象に提供することをいう。好ましくは、該対象は、哺乳類、より好ましくは、ヒトである。本発明は、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）を、β−ラクタム系抗生物質と併用して投与することを含む。本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）が、β−ラクタム系抗生物質と併用して投与されるとき、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）およびβ−ラクタム系抗生物質は、同時にまたは異なる時に投与され得る。本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）およびβ−ラクタム系抗生物質が、同時に投与されるとき、それらは、単一組成物としてまたは医薬組成物として投与され、または、それらは別々に投与され得る。本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）が、β−ラクタム系抗生物質と併用して投与されるとき、活性剤は、１つの組み合わせまたは複数の組み合わせで投与され得ると理解される。例えば、静脈内投与されるとき、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、通常使用される静脈内輸液のいずれにも溶解または懸濁され、注入により投与され、次いで、β−ラクタム系抗生物質は、通常使用される静脈内輸液のいずれにも溶解または懸濁され、注入により投与され得る。逆に、β−ラクタム系抗生物質は、通常使用される静脈内輸液のいずれにも溶解または懸濁され、注入により投与され、次いで、式Ｉの化合物は、通常使用される静脈内輸液のいずれにも溶解または懸濁され、注入により投与され得る。あるいは、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）およびβ−ラクタム系抗生物質を含む医薬組成物は、通常使用される静脈内輸液のいずれにも溶解または懸濁され、注入により投与され得る。
【０２２３】
本発明のひとつの実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）およびβ−ラクタム系抗生物質を含む医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式Ｉの化合物およびβ−ラクタム系抗生物質を含む医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式Ａ−Ｉの化合物およびβ−ラクタム系抗生物質を含む医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式ＩＩの化合物およびβ−ラクタム系抗生物質を含む医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式Ａ−ＩＩの化合物およびβ−ラクタム系抗生物質を含む医薬組成物の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。
【０２２４】
本発明のひとつの実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）と併用して、β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式Ｉの化合物と併用して、β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式Ａ−Ｉの化合物と併用して、β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式ＩＩの化合物と併用して、β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式Ａ−ＩＩの化合物と併用して、β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、表Ｉの化合物と併用して、β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式
【０２２５】
【化１２３】
2015512419.tif 000124
の化合物と併用して、β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。本発明のひとつの実施形態では、式
【０２２６】
【化１２４】
2015512419.tif 000125
の化合物と併用して、β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を、それを必要としている対象に投与することを含む細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。
【０２２７】
本発明のひとつの実施形態では、
ａ．本発明の化合物を対象に投与する工程；および
ｂ．β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を対象に投与する工程
を含む、対象の細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。
【０２２８】
ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式Ｉの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式Ａ−Ｉの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式ＩＩの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式Ａ−ＩＩの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、表Ｉの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式Ａ−ＩＩの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式
【０２２９】
【化１２５】
2015512419.tif 000126
の化合物である。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式
【０２３０】
【化１２６】
2015512419.tif 000127
の化合物である。ひとつの実施形態では、工程ｂのβ−ラクタム系抗生物質は、セフトロザンまたはセフタジジムである。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式
【０２３１】
【化１２７】
2015512419.tif 000128
の化合物および工程ｂのβ−ラクタム系抗生物質はセフトロザンである。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式
【０２３２】
【化１２８】
2015512419.tif 000129
の化合物であり、工程ｂのβ−ラクタム系抗生物質はセフトロザンである。
【０２３３】
本発明のひとつの実施形態では、
ａ．β−ラクタム系抗生物質の治療有効量を対象に投与する工程；および
ｂ．本発明の化合物を対象に投与する工程
を含む、対象の細菌感染症の治療方法または予防方法が提供される。
【０２３４】
ひとつの実施形態では、工程ｂの化合物は、式Ｉの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ｂの化合物は、式Ａ−Ｉの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ｂの化合物は、式ＩＩの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ｂの化合物は、式Ａ−ＩＩの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ｂの化合物は、表Ｉの化合物である。ひとつの実施形態では、工程ｂの化合物は、式
【０２３５】
【化１２９】
2015512419.tif 000130
の化合物である。ひとつの実施形態では、工程ｂの化合物は、式
【０２３６】
【化１３０】
2015512419.tif 000131
の化合物である。ひとつの実施形態では、工程ａのβ−ラクタム系抗生物質は、セフトロザンまたはセフタジジムである。ひとつの実施形態では、工程ｂの化合物は、式
【０２３７】
【化１３１】
2015512419.tif 000132
の化合物であり、工程ａのβ−ラクタム系抗生物質はセフトロザンである。ひとつの実施形態では、工程ａの化合物は、式
【０２３８】
【化１３２】
2015512419.tif 000133
のｂ化合物であり、工程ａのβ−ラクタム系抗生物質はセフトロザンである。ひとつの実施形態では、本発明は、１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物、またはその組成物の治療有効量を投与することにより、対象の感染症治療方法を提供する。ひとつの実施形態では、該方法は、少なくとも１つの本明細書に記載の化合物、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物を含む医薬組成物を、それを必要としている対象に、投与することを含む。ひとつの実施形態では、該化合物は、β−ラクタム系抗生物質、好ましくは、セフトロザンまたはセフタジジム、またはその組成物との併用で、式
【０２３９】
【化１３３】
2015512419.tif 000134
の化合物である。ひとつの実施形態では、該化合物は、β−ラクタム系抗生物質、好ましくは、セフトロザンまたはセフタジジム、またはその組成物との併用で、式
【０２４０】
【化１３４】
2015512419.tif 000135
の化合物である。ひとつの実施形態では、該医薬組成物は、本明細書に記載の化合物のいずれか１つを、単独の活性化合物として、または別の化合物、組成物、または生物由来物質との併用で含むことができる。該化合物は、経口的に、非経口的に、吸入により、局所的に、直腸内に、鼻腔内に、口腔に、腟内に、または移植リザーバーにより、外部ポンプまたはカテーテルにより、投与され得る。該化合物は、目に関する使用またはエアロゾルの使用のために製剤され得る。本発明の化合物は、肺炎または他の肺関連感染症の治療のためのエアロゾルとして投与され得る。ひとつの実施形態では、エアロゾル送達媒体は、無水粉末または乾燥粉末吸入器である。１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物、または、それらの医薬組成物はまた、膿瘍、室もしくは関節へ直接、注射または投与もされ得る。非経口投与としては、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、骨液包内、槽内、くも膜下腔内、肝内、病巣内および頭蓋内注射または点滴が挙げられる。ひとつの実施形態では、１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、静脈内、皮下または経口で投与される。１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物を、細胞培養液に投与するためのひとつの実施形態では、１つ以上の該化合物は、培養液に投与され得る。
【０２４１】
ひとつの実施形態では、１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、その感染症が、グラム陰性菌などの細菌の任意の型が原因で起こる、または悪化する細菌感染症を有する対象を治療するために使用され得る。本発明のひとつの態様では、細菌感染症は、β−ラクタム耐性菌が原因で起こる。ひとつの態様では、細菌感染症は、β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる。別の態様では、細菌感染症は、クラスＡ型、クラスＣ型またはクラスＤ型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる。別の態様では、細菌感染症は、クラスＡ型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる。別の態様では、感染症は、クラスＣ型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる。別の態様では、感染症は、クラスＤ型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる。更に別の態様では、感染症は、ＫＰＣ型β−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる。更に別の態様では、感染症は、ＯＸＡ型β−ラクタマーゼ産生菌による原因で起こる。更に別の態様では、細菌感染症は、複数のβ−ラクタマーゼを産生する細菌が原因で起こる。複数のβ−ラクタマーゼを産生する細菌は、同じクラスまたは異なるクラス（例えば、クラスＡ型およびクラスＡ型、またはクラスＡ型およびクラスＣ型、またはクラスＡ型およびクラスＤ型など）のβ−ラクタマーゼを産生し得る。
【０２４２】
β−ラクタマーゼを発現することが知られている代表的なグラム陰性病原菌としては、アシネトバクター属菌（アシネトバクター・バウマンニを含む）、サイトロバクター属菌、エシェリキア属菌（大腸菌を含む）、インフルエンザ菌、モルガン菌、緑膿菌、クレブシエラ属菌（肺炎桿菌を含む）、エンテロバクター属菌（エンテロバクター・クロアカおよびエンテロバクター・エロゲネスを含む）、パスツレラ属菌、プロテウス属菌（プロテウス・ミラビリスを含む）、セラチア属菌（セラチア・マルセセンスを含む）、およびプロビデンシア属菌が挙げられるが、これらに限定されない。細菌感染症は、ペニシリン系薬、セファロスポリン系薬、モノバクタム系薬および／またはカルバペネム系薬の耐性を付与し得るβ−ラクタマーゼを発現する菌株を含むグラム陰性菌が原因で起こり、または悪化され得る。これらのβ−ラクタマーゼを阻害する新規β−ラクタマーゼ阻害剤のβ−ラクタム系抗生物質との同時投与は、β−ラクタム耐性菌が原因で起こる感染症の治療のために、使用され得る。
【０２４３】
本発明のひとつの態様では、感染症は、アシネトバクター属菌、サイトロバクター属菌、大腸菌、エンテロバクター・クロアカ）、インフルエンザ菌、緑膿菌、プロテウス・ミラビリス、セラチア・マルセセンス、および肺炎桿菌から選択されるβ−ラクタマーゼ産生菌が原因で起こる。
【０２４４】
本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）と同時に投与され得るβ−ラクタム系抗生物質としては、セファロスポリン系、カルバペネム系、モノバクタム系、ペネム系およびペニシリン系抗生物質が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４５】
本発明のひとつの実施形態では、β−ラクタム系抗生物質は、セファロスポリン系薬である。セファロスポリン系薬の例としては、セファセトリル（Cefacetrile）（セファセトリル（cephacetrile））、セファドロキシル（Cefadroxil）（セファドロキシル（cefadroxyl））、セファレキシン（Cefalexin）（セファレキシン（cephalexin））、セファログリシン（Cefaloglycin） （セファログリシン（cephaloglycin））、セファロニウム（Cefalonium）（セファロニウム（cephalonium））、セファロリジン（Cefaloridine）（セファロラジン（cephaloradine））、セファロチン（Cefalotin）（セファロチン（cephalothin））、セファピリン（Cefapirin）（セファピリン（cephapirin））、セファトリジン、セファザフル、セファゼドン、セファゾリン（Cefazolin）（セファゾリン（cephazolin））、セフラジン（Cefradine）（セフラジン（cephradine））、セフロキサジン、セフテゾール、セファクロル、セファマンドール、セフメタゾール、セフォニシド、セフォテタン、セフォキシチン、セフプロジル（セフプロキシル）、セフロキシム、セフゾナム、セフカペン、セフダロキシム、セフジニル、セフジトレン、セフェタメト、セフィキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフォタキシム、セフピミゾール、セフポドキシム、セフテラム、セフチブテン、セフチオフル、セフチオレン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフォペラゾン、セフタジジム、セフクリジン、セフェピム、セフルプレナム、セフォセリス、セフォゾプラン、セフピロム、セフキノム、セファクロメジン（Cefaclomezine）、セファロラム、セファパロール、セフカネル、セフェドロロール、セフェムピドン（Cefempidone）、セフェトリゾール、セフィビトリル、セフマチレン、セフメピジウム（Cefmepidium）、セフォベシン、セホキサゾール、セフロチル、セフスミド、セフタロリン、セフチオキシド、セフラセチム、セフブペラゾン、セフミノクス、セフォラニド、セフォチアム、セフピラミド、セフスロジン、セフトビプロールラタモキセフ、ロラカルベフおよびセフトロザンが挙げられるが、これらに限定されない。ひとつの実施形態では、セファロスポリン系薬は、セフトロザンまたはセフタジジムである。
【０２４６】
本発明のひとつの実施形態では、β−ラクタム系抗生物質は、カルバペネム系薬である。カルバペネム系抗生物質の例としては、イミペネム、イミペネム／シラスタチン、ビアペネム、ドリペネム、メロペネム、エルタペネムおよびパニペネムが挙げられるが、これらに限定されない。ひとつの実施形態では、カルバペネム系薬は、イミペネム／シラスタチンまたはメロペネムである。
【０２４７】
本発明のひとつの実施形態では、β−ラクタム系抗生物質は、モノバクタム系薬である。モノバクタム系抗生物質の例としては、アズトレオナム、チゲモナム、カルモナム、ＢＡＬ３００７２およびノカルジシンＡが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４８】
本発明のひとつの実施形態では、β−ラクタム系抗生物質は、ペネム系薬である。本発明のひとつの実施形態では、β−ラクタム系抗生物質は、ペニシリン系薬である。ペニシリン系抗生物質の例としては、アモキシシリン、アンピシリン、アズロシリン、メズロシリン、アパルシリン、ヘタシリン、ベカンピシリン（Becampicillin）、カルベニシリン、スルベニシリン、チカルシリン、ピペラシリン、アズロシリン、メシリナム、ピブメシリナム、メチシリン、シクラシリン、タランピシリン、アスポキシシリン、オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フルクロキサシリン、ナフシリンおよびピバンピシリンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４９】
医薬組成物、より好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、β−ラクタム耐性菌、好ましくは、グラム陰性β−ラクタム耐性菌が原因で起こる体中の任意の器官または組織の細菌感染症治療のために使用され得る。これらの器官または組織はとしては、骨格筋、皮膚、血流、腎臓、心臓、肺臓および骨が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、少なくとも１つの本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物を含む医薬組成物は、それに限定されないが、皮膚感染症および軟部組織感染症（例えば、皮膚複合感染など）、菌血症、腹腔内感染症および尿路感染症（例えば、複雑性尿路感染症（ｃＵＴＩ）など）の治療のために、対象に投与され得る。加えて、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、それに限定されないが、中耳炎、副鼻腔炎、慢性気管支炎および肺炎（市中肺炎、院内肺炎および人工呼吸器関連肺炎を含む）を含み、薬剤耐性緑膿菌が原因の肺炎を含む地域感染型呼吸器肺炎の治療のために使用され得る。少なくとも１つの本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、異なる型のグラム陰性菌を含む、またはグラム陽性菌およびグラム陰性菌の両方を含む混合感染を治療するため、対象に投与され得る。これらのタイプの感染症は、腹腔内感染症および産科／婦人科感染症を包含する。少なくとも１つの本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物はまた、限定されないが、心内膜炎、腎炎、化膿性関節炎、腹腔内敗血症、骨感染症および関節感染症ならびに骨髄炎を含む感染症を治療するためにも、対象に投与され得る。少なくとも１つの本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物、またはその医薬組成物はまた、膿瘍、室または関節に直接、注射または投与もされ得る。本発明（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と共に式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物の医薬組成物は、肺炎または他の肺関連感染症の治療のためのエアロゾルとして投与され得る。ひとつの実施形態では、エアロゾル送達媒体は、無水粉末または乾燥粉末吸入器である。
【０２５０】
１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物の医薬組成物中の活性成分の実際の用量レベルは、特定の患者、組成物、および投与方法に関する所望の治療反応を達成するための活性化合物の治療有効量を得るために、変更され得る。該有効量は、本明細書に記載のように決定され得る。選択した用量レベルは、特定の化合物活性、投与経路、治療される状態の重篤度、ならびに治療を受ける患者の状態およびに前病歴に依存するだろう。しかしながら、所望の治療効果を達成するために必要な量より低いレベルで化合物の用量を開始し、所望の治療効果が達成されるまで、徐々に用量を増加してゆくことは、先行技術の範囲内である。ひとつの実施形態では、アッセイから得られたデータは、ヒトに使用するための用量範囲の処方に使用され得る。該組成物が本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）およびβ−ラクタム系抗生物質を含むとき、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）およびβ−ラクタム系抗生物質の両方ともが、活性化合物であることは、当業者であれば、理解されるだろう。
【０２５１】
該方法は、１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して、有効な用量を、対象に投与することを含む。本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）の有効用量は、一般的に、１２５ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日である。ひとつの実施形態では、有効用量は、約０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇの１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）またはその薬剤的に許容可能な塩である。ひとつの実施形態では、該用量は、約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇの１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）またはその薬剤的に許容可能な塩である。別の実施形態では、該用量は、約１〜約２５ｍｇ／ｋｇの１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）またはその薬剤的に許容可能な塩である。別の実施形態では、該用量は、約１〜約１２ｍｇ／ｋｇの１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）である。別の実施形態では、該用量は、約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、または約１２ｍｇ／ｋｇの１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）である。別の実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、１日に４回まで投与量当たり１００ｍｇ〜１０００ｍｇの用量で、ヒトに投与される。別の実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、１日に４回まで投与量当たり１２５ｍｇ〜７５０ｍｇの用量で、ヒトに投与される。別の実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、１日に４回まで投与量当たり２５０ｍｇ〜５００ｍｇの用量で、ヒトに投与される。細胞培養液のための効果的用量は、通常、約０．１μｇ／ｍＬと約１０００μｇ／ｍＬの間である。ひとつの実施形態では、細胞培養液のための効果的用量は、通常、約０．１μｇ／ｍＬと約２００μｇ／ｍＬの間である。
【０２５２】
ひとつの実施形態では、β−ラクタム系抗生物質および本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、抗生物質：本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）が１：４〜８：１の比率で投与される。ひとつの実施形態では、該比率が１：４である。別の実施形態では、該比率が３：４である。別の実施形態では、該比率が５：４である。別の実施形態では、該比率が７：４である。別の実施形態では、該比率が１：２である。別の実施形態では、該比率が３：２である。別の実施形態では、該比率が５：２である。別の実施形態では、該比率が７：２である。別の実施形態では、該比率が１：３である。別の実施形態では、該比率が２：３である。別の実施形態では、該比率が４：３である。別の実施形態では、該比率が５：３である。別の実施形態では、該比率が７：３である。別の実施形態では、該比率が１：２である。別の実施形態では、該比率が３：２である。別の実施形態では、該比率が５：２である。別の実施形態では、該比率が７：２である。別の実施形態では、該比率が１：１である。別の実施形態では、該比率が２：１である。別の実施形態では、該比率が３：１である。別の実施形態では、該比率が４：１である。別の実施形態では、該比率が５：１である。別の実施形態では、該比率が６：１である。別の実施形態では、該比率が７：１である。別の実施形態では、該比率が８：１である。β−ラクタム系抗生物質および本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、製剤送達方法にかかわらず、提供された比率の範囲内で投与され得ることは、当業者であれば、理解されるだろう。β−ラクタム系抗生物質および本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、例えば、医薬組成物中一緒に、または順次、すなわち、β−ラクタム系抗生物質が投与され、次に本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）が投与される、またはその逆で、提供された比率の範囲内で投与され得ることも、当業者であれば、理解されるだろう。
【０２５３】
１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）はまた、患者または動物の食事制限中または食事中に投与され得る。もし全食事摂取の途中で投与されるなら、使用される化合物の量は、０．５重量％以下などの食事量の１重量％以下にできる。動物の食餌は、該化合物を添加または前以て混合できる普通の食糧であり得る。
【０２５４】
１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、１日１回または１日複数回の用量で投与され得る。ひとつの実施形態では、１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、１日１回の用量で投与され得る。別の実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、１日２回、同じ用量で投与され得る。別の実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、１日３回、同じ用量で投与され得る。別の実施形態では、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、１日４回、同じ用量で投与され得る。治療処方計画は、例えば、数日間または２〜４週間などの長期間に渡って投与する必要があるかもしれない。投薬量当たりの量または全投与量は、感染症の性質および重篤度、患者の年齢や健康状態、本発明の化合物およびβ−ラクタム系抗生物質および微生物または感染症に伴う微生物に対する患者の許容度などの因子に依存するだろう。１つの型の感染症のための治療処方計画は、別の感染症の治療処方計画と大きく異なり得る。例えば、１つの型の感染症で、１日１回の静脈内投与を経て投薬する必要があり、一方で、別の感染症は、複数回の経口投薬の治療処方計画が必要であり得る。
【０２５５】
１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、細菌感染症が根絶または軽減されるまで、この方法に従って投与され得る。ひとつの実施形態では、１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、３日〜６か月の期間、投与される。別の実施形態では、１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、７〜５６日間、投与される。別の実施形態では、１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、７〜２８日間、投与される。さらに実施形態では、１つ以上の本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物は、７〜１４日間、投与される。本発明の化合物は、望まれれば、より長期間またはより短期間、投与され得る。
【０２５６】
本発明の他の実施形態としては：
本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物またはその薬剤的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
少なくとも１つのセファロスポリン系抗生物質と共に、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物またはその薬剤的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
少なくとも１つのセフトロザンと共に、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物またはその薬剤的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
少なくとも１つのカルバペネム系抗生物質と共に、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物またはその薬剤的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
少なくとも１つのモノバクタム系抗生物質と共に、本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物またはその薬剤的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
が挙げられる。
【０２５７】
本明細書に記載の実施形態は、新規であり、活性β−ラクタマーゼ阻害剤である本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物を提供する。本明細書に記載の他の実施形態は、感染症治療のため、本発明の新規化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、β−ラクタム系抗生物質と併用して式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物を提供する。本明細書に記載の実施形態は更に、その分類の他の化合物が有さないβ−ラクタマーゼに対する予期されない活性を示す本発明の新規化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）、好ましくは、式Ａ−Ｉまたは式Ａ−ＩＩの化合物を提供する。
【０２５８】
本発明の化合物の合成
本発明の化合物（例えば、式Ｉの化合物、式Ａ−Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、式Ａ−ＩＩの化合物）は、本明細書に記載の合成スキームを含む種々に合成経路で合成され得る。これらの合成経路は、反応順序の適切な調整、反応状態、単離／精製方法および環境に優しく、コスト効果の高い溶媒の選択で、大量合成に適応させ得る。
【０２５９】
次の略語は、特に指示しない限り、次の意味を有する。下記に定義しない略語は、それらの一般的に認められた意味を有する。
Ｂｎ＝ベンジル
Ｂｏｃ＝ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
Ｂｏｃ２Ｏ＝二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
バージェス試薬＝Ｎ−（トリエチルアンモニウムスルホニル）カルバミン酸メチル
ＣＤＩ＝カルボニルジイミダゾール
ＣＦＵ＝コロニー形成単位
ＣＬＳＩ＝臨床・検査標準協会
ｃＳＳＳＩ＝複雑性皮膚・皮膚組織感染症
ＤＢＵ＝１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
ＤＥＡＤ＝アゾジカルボン酸ジエチル
ＤＩＡＤ＝アゾジカルボン酸ジイソプロピル
ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＡｃ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
ＥＤＣＩ＝１−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＥＬＳＤ＝蒸発光散乱検出器
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＥＳＩ−ＭＳ＝エレクトロスプレー方式質量分析
Ｆｍｏｃ＝フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＨＡＰ＝院内肺炎
ＨＡＴＵ＝ヘキサフルオロリン酸２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム
ＨＣｌ＝塩化水素
ＨＯＢｔ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
Ｈｒｓ＝時間
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー
ヒューニッヒ塩基＝Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ローソン試薬＝２，４−ビス（４−メトキシフェニル）−１，３，２，４−ジチアジホスフェタン−２，４−ジスルフィド
ＭＩＣ＝最小発育阻止濃度
ｍＬ＝ミリリットル
ＭＳ＝質量分析
ＭＲＳＡ＝メチシリン耐性黄色ブドウ球菌
ＮＭＲ＝核磁気共鳴
Ｎｓ＝ニトロベンゼンスルホニル
Ｐａ＝緑膿菌
Ｐｒｅｐ＝分取
Ｐｐｍ＝１００万分の１
Ｐｙ＝ピリジン
ｓａｔ．＝飽和
ｒｔ＝室温
ＴＢＡＦ＝フッ化テトラブチルアンモニウム
ＴＢＳ＝ｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＥＳ＝トリエチルシリル
ＴＥＡ＝トリエチルアミン
ＴＥＭＰＯ＝２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシフリーラジカル
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＭＳ＝トリメチルシリル
ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー
ＶＡＰ＝人工呼吸器関連肺炎
【０２６０】
式Ｉの化合物は、容易に入手可能な出発物質、試薬および、例えば、米国特許第７１１２５９２号および国際特許公開第ＷＯ２００９／０９１８５６号に記載の従来の合成手順を使用して、次の反応スキームおよび実施例、またはそれらの修正に従って、中間体１から合成され得る。化合物３は、エステル中間体１から合成できるクロロオキシム中間体２ｄ（例えば、Abele, E.; Lukevics, E. Heterocycles 2000, 53, 2285-2336; Barr, L.; Lincoln, S. F.; Easton, C. J. Chemistry-A European Journal 2006, 12, 8571-8580; Walker, D. G.; Brodfuehrer, P. R.; Brundidge, S. P. Shih, K. M.; Sapino, C. Jr. J. Org. Chem. 1988, 53, 983-991、およびこれらの中の引用文献参照）から標準的イソオキサゾール環形成化学に従って合成され得る。
Ｒ１基の性質に依り、分子の特定の官能性を保護する必要があり得る。これらの官能性の保護は、当業者の専門知識の範囲内であろう。例えば、P. G. M. Wuts and T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Fourth Edition, John Wiley and Sons, 2006（以降Ｇｒｅｅｎｅと呼ぶ）参照。
【０２６１】
【化１３５】
2015512419.tif 000136
【０２６２】
３のベンジルエーテル保護基は、これに限定されないが、ＭｅＯＨまたはＴＨＦ中Ｐｄ／Ｈ２、などの標準的水素化分解条件または、これに限定されないが、ＤＣＭ中ＢＣｌ３などの酸触媒加水分解を経て取り除くことができ、ヒドロキシ尿素中間体４を生成し、これは、さらに精製することなく、次工程で直接使用され得る。４の硫酸化は、ピリジン、ＤＭＦまたはＤＭＡｃなどの適切な溶媒中、０〜８０℃の温度で、好ましくは室温で、これに限定されないが、ＳＯ３−ピリジン錯体などの硫酸化試薬と処理することにより達成され得る。次いで、化合物５は、常法で単離、精製され得る。実施例では、５は、例えば、ギ酸アンモニウム緩衝液などの適切な緩衝系を用いて、標準的な逆相分取ＨＰＬＣにより精製され得る。いくつかの場合、５は、硫酸テトラブチルアンモニウム塩などの適切な塩の形態に転換後、順相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製され得る。次いで、テトラブチルアンモニウム塩は、カチオン交換によりナトリウム塩に転換され得る。側鎖に保護基が存在するとき（例えば、アミンおよびグアニジン保護のＢｏｃまたはＦｍｏｃ、アルコール保護のＴＢＳまたはＴＥＳなど）、脱保護工程は５をその最終生成物６に転換する必要があり、最終生成物は、上述の条件を用いて、逆相分取ＨＰＬＣにより精製され得る。実施例では、Ｎ−Ｂｏｃ脱保護では、５を、０〜３０℃の温度で、好ましくは、０℃〜室温で、ＤＣＭなどの適切な溶媒中、ＴＦＡなどの酸で処理して、６を得ることができる。Ｏ−ＴＢＳまたはＯ−ＴＥＳ脱保護では、ＨＦ−ピリジン錯体、ＨＦ−ＮＥｔ３錯体またはＴＢＡＦなどのフッ化物試薬を使用され得る。Ｆｍｏｃ脱保護では、ジエチルアミン、ＤＢＵ、ピペリジンなどのアミンが使用され得る。
【０２６３】
実施例
次に続く具体例は、いくつかの化合物の合成を例示する。開示される方法は、式（Ｉ）の化合物を製造するための変法に利用され得るが、特に具体的に開示しない。さらに、本開示は、この開示に基づいて、当業者により理解されるであろう式（Ｉ）の化合物の製造のための、本明細書に記載の方法の変法を包含する。
【０２６４】
全ての温度は、指定しないとき、摂氏であると理解される。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル特性は、標準試料のテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対して、百万分の一（ｐｐｍ）で表される化学シフト（γ）で示す。プロトンＮＭＲスペクトルデータの様々なシフトで報告される相対面積は、分子の特定の官能型の水素原子数に対応している。多重度に関するシフトの性質は、ブロードな一重線（ｂｒ  ｓ）、ブロードな二重線（ｂｒ  ｄ）、一重線（ｓ）、多重線（ｍ）、二重線（ｄ）、四重線（ｑ）、二重の二重線（ｄｄ）、二重の三重線（ｄｔ）、および二重の四重線（ｄｑ）で報告される。ＮＭＲスペクトル測定に使用する溶媒は、ＤＭＳＯ−ｄ６（重ジメチルスルホキシド）、Ｄ２Ｏ（重水）、ＣＤＣｌ３（重クロロホルム）および他の通常のの重水素化溶媒である。分取ＨＰＬＣの条件は：ウォーターズ社ＳｕｎＦｉｒｅ（登録商標）Ｃ１８（３０ｘ１００ｍｍ、５μｍＯＢＤ）カラム；流速：３０〜８０ｍＬ／分、蒸発光散乱検出（ＥＬＳＤ）または質量感応式分取；試料投入：各々の注入は、それらの溶解性および純度特性に依り種々の粗試料３０〜３００ｍｇから変わる；ギ酸アンモニウム緩衝液使用の溶媒系：溶媒Ａ：２０ｍＭギ酸アンモニウム含有水溶液、溶媒Ｂ：２０ｍＭギ酸アンモニウム含有８５％アセトニトリル水溶液。ＮＨ４ＨＣＯ３緩衝液使用の溶媒系：溶媒Ａ：１０ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３含有水溶液、溶媒Ｂ：アセトニトリル。ＮＨ４ＯＨ緩衝液使用の溶媒系：溶媒Ａ：０．１％ＮＨ４ＯＨ含有水溶液、溶媒Ｂ：０．１％ＮＨ４ＯＨ含有アセトニトリルである。
【実施例１】
【０２６５】
６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−エチル（中間体化合物１）の合成
ｃ
【０２６６】
【化１３６】
2015512419.tif 000137
工程１：５−オキソピペリジン−１，２−ジカルボン酸（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル
方法Ａ：
【０２６７】
【化１３７】
2015512419.tif 000138
無水（dry）ＴＨＦ（３Ｌ）中のＴＭＳＣＨＮ２（６００ｍＬ、１．５ｍｏｌ）溶液に、−７８℃で、ｎ−ＢｕＬｉ（６００ｍＬ、１．５ｍｏｌ）を添加し、混合物を−７８℃で３０分間撹拌した。それから、混合物を、無水（dry）ＴＨＦ（３Ｌ）中の５−オキソピロリジン−１，２−ジカルボン酸（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（３００ｇ、１．１７ｍｏｌ）溶液に、カニューレを介して移し、混合物を−７８℃で３０分間撹拌した。それから、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で反応停止し、ＤＣＭ（３回）を用いて抽出した。合わせた有機層を減圧下濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１石油エーテル／ＥｔＯＡｃ）により精製し、黄色固体の２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−ジアゾ−５−オキソヘキサン酸（Ｓ）−エチル（２６２ｇ、７５％）を得た。
【０２６８】
ＤＣＭ（７５０ｍＬ）中のＲｈ２（ＯＡｃ）４（３．５ｇ、７．９ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、ＤＣＭ（１５００ｍＬ）中の２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−６−ジアゾ−５−オキソヘキサン酸（Ｓ）−エチル（３５０ｇ、１．１８ｍｏｌ）の溶液を添加した。それから、反応混合物を一夜２０℃で撹拌し、それから、減圧下濃縮した。粗試料を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５：１石油エーテル／ＥｔＯＡｃ）により精製し、黄色油状の５−オキソピペリジン−１，２−ジカルボン酸（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（１７５．９ｇ、５５％）を得た。
【０２６９】
方法Ｂ：
【０２７０】
【化１３８】
2015512419.tif 000139
無水（dry）ＤＭＳＯ（３Ｌ）中のヨウ化トリメチルスルホキソニウム（７５０ｇ、３．５ｍｏｌ）溶液に、ｔ−ＢｕＯＫ（３３０ｇ、２．９ｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。５−オキソピロリジン−１，２−ジカルボン酸（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（９００ｇ、３．５ｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で２〜３時間撹拌した。水を添加して、反応を停止し、混合物をＥｔＯＡｃ（５回）で抽出した。合わせた有機層を減圧下濃縮して、粗試料をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１石油エーテル／ＥｔＯＡｃ、次いで１：１０ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製し、白色固体のスルホキソニウムイリド中間体（９７７ｇ、８０％）を得た。
【０２７１】
トルエン（４Ｌ）中のスルホキソニウムイリド中間体（１５６ｇ、０．４４６ｍｏｌ）および［Ｉｒ（ＣＯＤ）Ｃｌ］２（３ｇ、４．４６ｍｍｏｌ）溶液を、１０分間、溶液に窒素を通気することにより脱気した。反応混合物を、８０〜９０℃まで２〜３時間加熱し、それから、２０℃に冷却した。それから、トルエンを減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１〜３：１勾配溶出石油エーテル／ＥｔＯＡｃ）により精製し、黄色油状の５−オキソピペリジン−１，２−ジカルボン酸（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（１４０ｇ、５７．８％）を得た。
【０２７２】
工程２：５−ヒドロキシピペリジン−１，２−ジカルボン酸（２Ｓ，５Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチルの合成
【０２７３】
【化１３９】
2015512419.tif 000140
ＥｔＯＨ（１５００ｍＬ）中の５−オキソピペリジン−１，２−ジカルボン酸（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（２５０ｇ、０．９２ｍｏｌ）の−４０℃の溶液に、ＮａＢＨ４（３６ｇ、１．０ｍｏｌ）を、−４０℃で、小分けして添加した。それから、反応混合物を０．５時間撹拌し、それから、１０％ＨＯＡｃ溶液で反応停止した。水で希釈後、混合物をＤＣＭ（３回）で抽出した。合わせた有機層を減圧下濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１石油エーテル／ＥｔＯＡｃ）により精製して、黄色油状の５−ヒドロキシピペリジン−１，２−ジカルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（２０５ｇ、８０％）を得た。
【０２７４】
工程３：５−（Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロフェニルスルホンアミド）ピペリジン−１，２−ジカルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチルの合成
【０２７５】
【化１４０】
2015512419.tif 000141
ピリジン（１５００ｍＬ）中のＯ−ベンジルヒドロキシルアミン塩化水素（４００ｇ、２．５１ｍｏｌ）の０℃の溶液に、ピリジン（１５００ｍＬ）中の塩化２−ニトロベンゼン−１−スルホニル（５００ｇ、２．２６ｍｏｌ）溶液を滴下して添加した。反応混合物を室温まで温め、それから２０℃で一夜撹拌した。混合物を減圧下濃縮し、ＤＣＭで希釈してＨＣｌ（１０％、３回）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下濃縮し、ＤＣＭで再結晶化して、黄色固体のＮ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロベンゼンスルホンアミド（４８５ｇ、６２．６％）を得た。
【０２７６】
ＴＨＦ（１０００ｍＬ）中のＮ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロベンゼンスルホンアミド（２１２ｇ、０．６９ｍｏｌ）溶液に、５−ヒドロキシピペリジン−１，２−ジカルボン酸（２Ｓ，５Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（１７１ｇ、０．６３ｍｏｌ）およびＰＰｈ３（２７５ｇ、１．０５ｍｏｌ）を添加し、次いで、ＴＨＦ（５００ｍＬ）中のＤＥＡＤ（１９５ｇ、１．１２ｍｏｌ）溶液を滴下して添加した。それから、混合物を２０℃で一夜撹拌した。それから、反応混合物を減圧下濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１石油エーテル／ＥｔＯＡｃ）により精製して、黄色油状の５−（Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロフェニルスルホンアミド）ピペリジン−１，２−ジカルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（２８３．８ｇ、８０％）を得た。
【０２７７】
工程４：５−（（ベンジルオキシ）アミノ）ピペリジン−１，２−ジカルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチルの合成
【０２７８】
【化１４１】
2015512419.tif 000142
ＤＭＦ（１２００ｍＬ）中５−（Ｎ−（ベンジルオキシ）−２−ニトロフェニルスルホンアミド）ピペリジン−１，２−ジカルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（２５１ｇ、０．４５ｍｏｌ）溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（９５ｇ、２．３ｍｏｌ）および２−メルカプト酢酸（１２４ｇ、１．３ｍｏｌ）を添加した。それから、反応混合物を２０℃で一夜撹拌した。反応混合物を水で希釈して、ＥｔＯＡｃ（３回）で抽出した。合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム（３回）で洗浄し、減圧下濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１石油エーテル／ＥｔＯＡｃ）により精製して、黄色固体の５−（（ベンジルオキシ）アミノ）ピペリジン−１，２−ジカルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（１２２．９ｇ、８５％）を得た。
【０２７９】
工程５：５−（（ベンジルオキシ）アミノ）ピペリジン−２−カルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−エチルの合成
【０２８０】
【化１４２】
2015512419.tif 000143
ＤＣＭ（６００ｍＬ）中５−（（ベンジルオキシ）アミノ）ピペリジン−１，２−ジカルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−エチル（２６３ｇ、０．７ｍｏｌ）溶液に、ＴＦＡ（６００ｍＬ）を、２０℃で添加した。混合物を室温で一夜撹拌し、それから、減圧下濃縮した。粗生成物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液でｐＨ１０に調整し、それから、ＤＣＭ（３回）で抽出した。合わせた有機層を減圧下濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（２０：１ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）により精製して、黄色油状の５−（（ベンジルオキシ）アミノ）ピペリジン−２−カルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−エチル（１８４．９ｇ、９５％）を得た。
【０２８１】
工程６：６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３.２.１］オクタン−２−カルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−エチルの合成
【０２８２】
【化１４３】
2015512419.tif 000144
ＤＣＭ（２０００ｍＬ）中の５−（（ベンジルオキシ）アミノ）ピペリジン−２−カルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−エチル（５０ｇ、０．１８ｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２８ｍＬ、０．７２ｍｏｌ）の０℃の溶液に、トリホスゲン（２１．３ｇ、７２ｍｍｏｌ）を小分けして添加した。反応混合物を室温まで温めた。室温で一夜撹拌後、反応混合物をＨ３ＰＯ４（１０％）および飽和ＮａＣｌで洗浄した。合わせた有機層を減圧下濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１石油エーテル／ＥｔＯＡｃ）により精製して、黄色固体の６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−エチル（２７．４ｇ、５０％）を得た。１ＨＮＭＲ（４００Ｍｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．４３〜７．３６（ｍ，５Ｈ），５．０６（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），４．１１〜４．０８（ｍ，１Ｈ），３．３２〜３．３１（ｍ，１Ｈ），３．０８〜３．０５（ｍ，１Ｈ），２．９３（ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，１Ｈ），２．１４〜２．０５（ｍ，２Ｈ），２．０５〜２．００（ｍ，１Ｈ），１．７１〜１．６３（ｍ，１Ｈ），１．２９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。
【実施例２】
【０２８３】
（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルバルデヒド（中間体化合物２ｂ）の合成
【０２８４】
【化１４４】
2015512419.tif 000145
【０２８５】
【化１４５】
2015512419.tif 000146
ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中の６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボン酸（２Ｓ，５Ｒ）−エチル（５ｇ、１６．４４ｍｍｏｌ）の−１０℃の溶液に、ＬｉＢＨ４（０．５４ｇ、２４．６７ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後に、ＬｉＢＨ４（０．５４ｇ、２４．６７ｍｍｏｌ）の別の小分けを添加し、混合物を−１０〜０℃で４〜５時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨ２ＰＯ４（５０ｍＬ）を０℃で添加することにより、注意深く反応停止した。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３回）で抽出した。合わせた有機層を濃縮して、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶出０〜１００％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル、それから、０〜２％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）により精製して、白色固体の（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−２−（ヒドロキシメチル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−オン（３．８ｇ、８８％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２６３．１。１ＨＮＭＲ（５００Ｍ，ＣＤＣｌ３）：７．４４−７．３５（ｍ，５Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），３．７３〜３．６９（ｍ，１Ｈ），３．６１〜３．５８（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｍ，１Ｈ），３．０１（ｂｒｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｍ，１Ｈ），２．０３〜１．９５（ｍ，２Ｈ），１．５８〜１．５４（ｍ，１Ｈ），１．３９〜１．２４（ｍ，１Ｈ）。
【０２８６】
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−２−（ヒドロキシメチル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−オン（７．８ｇ，３０ｍｍｏｌ）および１，３，５−トリクロロ−１，３，５−トリアジナン−２，４，６−トリオン（７．０ｇ，３０ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、ＴＥＭＰＯ（４８ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ）を、小分けして添加した。混合物を０℃で２時間撹拌し、セライト（登録商標）を通して濾過した。濾液をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、黄色油状の（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルバルデヒド（７．０ｇ，９０％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２６１．１。１ＨＮＭＲ（５００Ｍ，ＣＤＣｌ３）：９．７４（ｓ，１Ｈ），７．４５〜７．３６（ｍ，５Ｈ），５．０７（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９２（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２７（ｍ，１Ｈ），３．２１〜３．０５（ｍ，１Ｈ），２．５６（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），２．２０〜２．１５（ｍ，１Ｈ），２．０５〜２．０１（ｍ，１Ｈ），１．９５〜１．９３（ｍ，１Ｈ），１．４９〜１．４６（ｍ，１Ｈ）。
【実施例３】
【０２８７】
（Ｅ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルバルデヒドオキシム（中間体化合物２ｃ）の合成
【０２８８】
【化１４６】
2015512419.tif 000147
ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中、（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルバルデヒド（５１０ｍｇ，１．９６ｍｍｏｌ），ヒドロキシルアミン塩酸塩（１５８ｍｇ，２．２７ｍｍｏｌ）およびピリジン（６２１ｍｇ、７．８５ｍｍｏｌ）を室温で２時間撹拌した。それから、反応混合物を濃縮し、残渣をＤＣＭ（２５ｍＬ）で希釈し、水（３回）および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（３：１〜３：２石油エーテル／ＥｔＯＡＣ）により精製して、白色固体の（Ｅ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルバルデヒドオキシム（２２８ｍｇ，４２％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２７６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例４】
【０２８９】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（アミノメチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６０１）の合成
【０２９０】
【化１４７】
2015512419.tif 000148
【０２９１】
【化１４８】
2015512419.tif 000149
【０２９２】
工程１：無水（ｄｒｙ）ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルバルデヒドオキシム（５６０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）溶液に、ＮＣＳ（２９５ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。それから、ピリジン（１滴）を添加し、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。溶液を蒸発させて、塩化（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−Ｎ−ヒドロキシ−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボイミドイルを得て、これを次工程に直接使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２７４［Ｍ−Ｃｌ］＋。
【０２９３】
工程２：無水（dry）ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の塩化（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−Ｎ−ヒドロキシ−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボイミドイル（約２．０ｍｍｏｌ）溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルプロパ−２−イン−１−イルカルバメート（０．３７ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、無水（dry）ＤＣＭ（２．０ｍＬ）中のＴＥＡ（０．３１ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）を、３０分の時間をかけて添加した。反応混合物を室温で一夜撹拌し、それから、混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水および飽和塩化ナトリウムで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：２石油エーテル／ＥｔＯＡｃ）により精製して、白色固体のｔｅｒｔ−ブチル（（３−（（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−イル）イソオキサゾール−５−イル）メチル）カルバメート（１８０ｍｇ、２工程で２１％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４２９．１［Ｍ＋Ｈ］＋。１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．４５〜７．３５（ｍ，５Ｈ），６．２４（ｓ，１Ｈ），５．０９（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９３（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．５８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），４．４３（ｍ，２Ｈ），３．３２（ｓ，１Ｈ），２．８６〜２．８４（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），２．３４〜２．３０（ｍ，１Ｈ），２．２３〜２．１８（ｍ，１Ｈ），２．１０〜２．０４（ｍ，１Ｈ），１．８２〜１．７８（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。
【０２９４】
工程３：ＴＨＦ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（３−（（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−２−イル）イソオキサゾール−５−イル）メチルカルバメート（２１０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）を添加した。それから、反応混合物を濾過し、濃縮して、淡黄色固体のｔｅｒｔ−ブチル（（３−（（２Ｓ，５Ｒ）−６−ヒドロキシ−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−２−イル）イソオキサゾール−５−イル）メチル）カルバメート（１８０ｍｇ、９９％）を得て、これを、次工程で直接使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３３９．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９５】
工程４：無水（ｄｒｙ）ピリジン（２．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（３−（（２Ｓ，５Ｒ）−６−ヒドロキシ−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−２−イル）イソオキサゾール−５−イル）メチルカルバメート（１８０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）溶液に、ＳＯ３−ピリジン錯体（４８０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌し、それから、減圧下濃縮した。残渣をＮａＨ２ＰＯ４（１．５Ｍ、２０ｍＬ）水溶液に再溶解し、それから、硫酸水素テトラブチルアンモニウム（２３０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２０分間撹拌し、それから、ＥｔＯＡｃ（４回）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し、濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶出１０：１〜３：１ＤＣＭ／アセトン）により精製して、白色固体の硫酸テトラブチルアンモニウム（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（１８０ｍｇ、５４％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ−，ｍ／ｚ）：４１７．０［Ｍ−Ｈ］−。１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ６．２８（ｓ，１Ｈ），４．９７（ｂｓ，１Ｈ），４．５４（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），４．４４〜４．３０（ｍ，２Ｈ），４．３５（ｍ，１Ｈ），３．３５〜３．２８（ｍ，８Ｈ），３．１９〜３．１７（ｍ，１Ｈ），２．７６（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），２．３６〜２．３２（ｍ，１Ｈ），２．２７〜２．２４（ｍ，１Ｈ），２．１８〜２．１２（ｍ，１Ｈ），１．８７〜１．８１（ｍ，１Ｈ），１．７１〜１．６５（ｍ，８Ｈ），１．５０〜１．４７（ｍ，１７Ｈ），１．０１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１２Ｈ）。
【０２９６】
工程５、樹脂交換：硫酸テトラブチルアンモニウム（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）−イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（１８０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を最少量のＨＰＬＣ用水（約１０ｍＬ）に溶解し、２０ｇのＤＯＷＥＸ５０ＷＸ８Ｎａ＋樹脂（樹脂は、０．５Ｌ超のＨＰＬＣ用水で前洗浄した）カラムを通し、ＨＰＬＣ用水で溶出して、凍結乾燥の後に白色固体の硫酸ナトリウム（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（１０９ｍｇ、９２％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ−，ｍ／ｚ）：４１７．０［Ｍ−Ｈ］−。１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ６．３２（ｓ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），４．３２（ｓ，２Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），３．１０〜３．０８（ｍ，１Ｈ），２．９１（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，１Ｈ），２．２１〜２．１７（ｍ，１Ｈ），２．０９〜２．０２（ｍ，２Ｈ），１．８６〜１．８２（ｍ，１Ｈ），１．３４（ｓ，９Ｈ）。
【０２９７】
工程６：無水（ｄｒｙ）ＤＣＭ（１．２ｍＬ）中の硫酸ナトリウム（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）−イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（５４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、ＴＦＡ（０．４０ｍＬ）を添加した。反応混合物を０℃で３０分間〜１時間撹拌し、それから、ジエチルエーテルで希釈した。沈殿を遠心分離で集め、エーテル（３回）で洗浄し、高真空下さらに乾燥して、硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（アミノメチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イルのＴＦＡ塩（約３０ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３１９．２。ＴＦＡ塩（約３０ｍｇ）を、ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して分取ＨＰＬＣにより、さらに精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（アミノメチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６０１、１０ｍｇ、２６％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３１９．２１。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．６１（ｓ，１Ｈ），４．６８〜４．６５（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｓ，２Ｈ），４．１７〜４．１４（ｍ，１Ｈ），３．１４〜３．１０（ｍ，１Ｈ），２．９５〜２．９１（ｍ，１Ｈ），２．３１〜１．８０（ｍ，４Ｈ）。
【実施例５】
【０２９８】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（グアニジノメチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６０３）の合成
【０２９９】
【化１４９】
2015512419.tif 000150
【０３００】
【化１５０】
2015512419.tif 000151
【０３０１】
工程１：１−（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）プロパ−２−インの合成：
ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中のプロパ−２−イン−１−アミン（２７５ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（１．５ｇ、１５ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メタンジイリデンジカルバメート（１．７１ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃で３時間撹拌し、それから、減圧下濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１０ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、白色固体の１−（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）プロパ−２−イン（１．４ｇ、９３％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２９８．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０２】
工程２：（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−２−（５−（（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−オンの合成：
無水（ｄｒｙ）ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の塩化（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−Ｎ−ヒドロキシ−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−２−カルボイミドイル（４７３ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）溶液に、１−（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）プロパ−２−イン（３６２ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を室温で添加し、次いで、ＴＥＡ（０．１６ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）を滴下して添加した。混合物を室温で２時間撹拌し、それから、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶出１：１５〜１：５ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、白色固体の（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−２−（５−（（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−オン（１９０ｍｇ，２工程で２２％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：５７１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１１．４９（ｓ，１Ｈ），８．８６（ｂｓ，１Ｈ），７．４７〜７．３４（ｍ，５Ｈ），６．３２（ｓ，１Ｈ），５．０９（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９３（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．８７〜４．７６（ｍ，２Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），３．３６（ｓ，１Ｈ），２．８７〜２．８５（ｍ，１Ｈ），２．７０（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），２．３５〜２．３０（ｍ，１Ｈ），２．２４〜２．１８（ｍ，１Ｈ），２．１０〜２．０５（ｍ，１Ｈ），１．８１〜１．７８（ｍ，１Ｈ），１．５０（ｓ，１８Ｈ）。
【０３０３】
工程３：（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ヒドロキシ）−２−（５−（（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−オンの合成：
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ベンジルオキシ）−２−（５−（（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−オン（２４０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（１２０ｍｇ）を添加した。混合物を室温で１．５時間、Ｈ２雰囲気下撹拌した。それから、反応混合物を濾過し、濃縮して、白色固体の（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ヒドロキシ）−２−（５−（（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−オン（２００ｍｇ、９９％）を得て、これを次工程に直接使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４８１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０４】
工程４：硫酸テトラブチルアンモニウム（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イルの合成：
無水（ｄｒｙ）ピリジン（２．５ｍＬ）中の（２Ｓ，５Ｒ）−６−（ヒドロキシ）−２−（５−（（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−オン（２００ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）溶液に、ＳＯ３−ピリジン錯体（４００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌し、それから、減圧下濃縮した。残渣をＮａＨ２ＰＯ４（１．５Ｍ、２０ｍＬ）水溶液に再溶解した。硫酸水素テトラブチルアンモニウム（２００ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２０分間撹拌し、それから、ＥｔＯＡｃ（４回）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶出１０：１〜５：１ＤＣＭ／アセトン）により精製して、白色固体の硫酸テトラブチルアンモニウム（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（２２０ｍｇ、６６％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ−，ｍ／ｚ）：５５９．０［Ｍ−Ｈ］−。１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１１．４８（ｓ，１Ｈ），８．７８（ｂｓ，１Ｈ），６．３４（ｓ，１Ｈ），４．７７〜４．７６（ｍ，２Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），４．３５（ｍ，１Ｈ），３．３８〜３．２８（ｍ，８Ｈ），３．２０〜３．１８（ｍ，１Ｈ），２．７８（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），２．３７〜２．３０（ｍ，１Ｈ），２．２８〜２．２４（ｍ，１Ｈ），２．１７〜２．１１（ｍ，１Ｈ），１．８８〜１．８２（ｍ，１Ｈ），１．７１〜１．６３（ｍ，８Ｈ），１．５０〜１．４４（ｍ，２６Ｈ），１．０１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１２Ｈ）。
【０３０５】
工程５：無水（ｄｒｙ）ＤＣＭ（６．６０ｍＬ）中の硫酸テトラブチルアンモニウム（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（４６５ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、ＴＦＡ（２．２０ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温まで温めた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、それから、エーテルで希釈した。沈殿を遠心分離で集め、ジエチルエーテル（３回）で洗浄し、高真空下さらに乾燥した。粗ＴＦＡ塩を、ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（グアニジノメチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６０３、６０ｍｇ、２０％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３６１．２。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ／ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．５８（ｓ，１Ｈ），４．７４〜４．７１（ｍ，１Ｈ），４．６７（ｓ，２Ｈ），４．２３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．２２〜３．１７（ｍ，１Ｈ），２．９９（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），２．３６〜２．２６（ｍ，１Ｈ），２．２４〜２．１０（ｍ，２Ｈ），２．０２〜１．９１（ｍ，１Ｈ）。
【実施例６】
【０３０６】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−アミノエチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６０２）の合成
【０３０７】
【化１５１】
2015512419.tif 000152
実施例４の工程１〜６に従い、工程２のｔｅｒｔ−ブチルプロパ−２−イン−１−イルカルバメートを、ｔｅｒｔ−ブチルブタ−３−イン−１−イルカルバメートで置き換えて；淡黄色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−アミノエチル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イルＴＦＡ塩（６０２、８ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３３３．２。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．３９（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１６−４．１２（ｍ，１Ｈ），３．３２（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），３．２５−３．０４（ｍ，４Ｈ），２．９７−２．９３（ｍ，１Ｈ），２．３０−１．７９（ｍ，４Ｈ）。
【実施例７】
【０３０８】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−グアニジノエチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６０４）の合成
【０３０９】
【化１５２】
2015512419.tif 000153
実施例５の工程１〜５に従い、工程１のプロパ−２−イン−１−アミンを、ブタ−３−イン−１−アミンで置き換えて、ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、淡黄色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−グアニジノエチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６０４、４８ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３７５．１。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ／ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．３３（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．１５〜３．０７（ｍ，１Ｈ），３．０５（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．８８（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．２６〜１．９９（ｍ，３Ｈ），１．８５〜１．８０（ｍ，１Ｈ）。
【実施例８】
【０３１０】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−７−オキソ−２−（５−（ピペリジン−４−イル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６０６）の合成
【０３１１】
【化１５３】
2015512419.tif 000154
実施例４の工程１〜６に従い、工程２のｔｅｒｔ−ブチルプロパ−２−イン−１−イルカルバメートを４−エチニルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルで置き換えて、ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−７−オキソ−２−（５−（ピペリジン−４−イル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６０６、３５ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３７１．３。
【実施例９】
【０３１２】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（１−カルバムイミドイルピペリジン−４−イル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６０７）の合成
【０３１３】
【化１５４】
2015512419.tif 000155
実施例５の工程１〜５に従い、工程１のプロパ−２−イン−１−アミンを、４−エチニルピペリジンで置き換えて、硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（１−カルバムイミドイルピペリジン−４−イル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イルＴＦＡ塩（６０７、３２ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４１５．２。
【実施例１０】
【０３１４】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（２−アミノエチル）カルバモイル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６０５）の合成
【０３１５】
【化１５５】
2015512419.tif 000156
実施例４の工程１〜６に従い、工程２のｔｅｒｔ−ブチルプロパ−２−イン−１−イルカルバメートをｔｅｒｔ−ブチル（２−プロピオルアミドエチル）カルバメートで置き換えて、淡黄色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（２−アミノエチル）カルバモイル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イルＴＦＡ塩（６０５、２０ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３７６．１。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ７．０５（ｓ，１Ｈ），４．７０（ｍ，１Ｈ、Ｄ２Ｏピークと重複）４．１６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．６６（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．１９（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．１６〜３．０８（ｍ，１Ｈ），２．９３（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），２．３１〜２．２４（ｍ，１Ｈ），２．１６〜２．０４（ｍ，２Ｈ），１．９４〜１．８５（ｍ，１Ｈ）。
【実施例１１】
【０３１６】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（２−グアニジノエチル）カルバモイル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６０８）の合成
【０３１７】
【化１５６】
2015512419.tif 000157
実施例５の工程１〜５に従い、工程１のプロパ−２−イン−１−アミンをＮ−（２−アミノエチル）プロピオルアミドで置き換えて；ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（２−グアニジノエチル）カルバモイル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６０８、２５ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４１８．１２。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ４．７９〜４．７６（ｍ，１Ｈ），４．１６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．４７〜４．３２（ｍ，４Ｈ），４．１７〜４．１１（ｍ，２Ｈ），３．１９〜３．１６（ｍ，１Ｈ），２．９２（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），２．３２〜２．２２（ｍ，１Ｈ），２．２０〜２．０６（ｍ，２Ｈ），１．９７〜１．８８（ｍ，１Ｈ）。
【実施例１２】
【０３１８】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−７−オキソ−２−（５−（２−（ピペリジン−４−イルアミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６０９）の合成
【０３１９】
【化１５７】
2015512419.tif 000158
合成スキーム：
【０３２０】
【化１５８】
2015512419.tif 000159
【０３２１】
方法および特性決定：
工程１：４−（ブタ−３−イニルアミノ）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成：
ＭｅＯＨ（５００ｍＬ）中のブタ−３−イン−１−アミン塩酸塩（２６．４ｇ、０．２５ｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１７．４ｇ、０．１３ｍｏｌ）、および４−オキソピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（４１．８ｇ、０．２１ｍｏｌ）の混合物を室温で５時間撹拌した。それから、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１３３．６ｇ、０．６３ｍｏｌ）を添加し、懸濁液を室温で１７時間撹拌した。粗反応混合物を次工程に直接使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２５３．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２２】
工程２：４−（ブタ−３−イニル（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成：
工程１の反応混合物を０℃に冷却し、Ｅｔ３Ｎ（８８．０ｍＬ、０．６３ｍｏｌ）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（９１．６ｇ、０．４２ｍｏｌ）を添加した。溶液を室温まで温め、それから、室温で１７時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、それから、ＥｔＯＡｃ（８００ｍＬ）を添加した。有機層を飽和塩化ナトリウム（３回）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶出０〜１０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）により精製して、無色油状の４−（ブタ−３−イニル（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６６．０ｇ、９０％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３５３．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２３】
工程３〜６：実施例５の工程２〜５に従い、工程２の１−（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）プロパ−２−インを４−（ブタ−３−イン−１−イル（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルで置き換えて；ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−７−オキソ−２−（５−（２−（ピペリジン−４−イルアミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６０９、２２０ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４１６．４。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．２９（ｓ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｓ，１Ｈ），３．３９（ｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，２Ｈ），３．１０−２．９１（ｍ，９Ｈ），２．２３〜１．９５（ｍ，５Ｈ），１．８７〜１．７６（ｍ，１Ｈ），１．５４〜１．４０（ｍ，２Ｈ）。
【実施例１３】
【０３２４】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（（１−カルバムイミドイルピペリジン−４−イル）アミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１０）の合成
【０３２５】
【化１５９】
2015512419.tif 000160
合成スキーム：
【０３２６】
【化１６０】
2015512419.tif 000161
【０３２７】
方法および特性決定：
工程１：ピペリジン−４−オンの合成：
４−オキソピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１０．０ｇ、５０ｍｍｏｌ）、ＴＦＡ（２０ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）の混合物を室温で１時間撹拌した。それから、反応混合物を濃縮して、無色油状のピペリジン−４−オン（１５．０ｇ，１００％）を得た。１ＨＮＭＲ：（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．５１（ｍ，４Ｈ），３．４３（ｍ，４Ｈ），９．０３（ｍ，２Ｈ）。
【０３２８】
工程２：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−オキソピペリジン−１−イル）メチレンジカルバメートの合成：
ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中のピペリジン−４−オン（１５ｇ、５０ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（２５．４ｇ、２５１ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、（Ｚ）−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチレンジカルバメート（１６．３ｇ、５２．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温まで温め、それから、室温で１７時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、それから、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）を添加した。有機層を飽和塩化ナトリウム（３回）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶出０〜２０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）により精製して、白色固体のジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−オキソピペリジン−１−イル）メチレンジカルバメート（１２．８ｇ、７５％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３４２．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２９】
工程３：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ブタ−３−イニルアミノ）ピペリジン−１−イル）メタンジイリデンジカルバメートの合成：
ブタ−３−イン−１−アミン塩酸塩（３．０ｇ、２８．４ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２．０ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−オキソピペリジン−１−イル）メチレン−ジカルバメート（８．１ｇ、２３．７ｍｍｏｌ）および４Åモレキュラーシーブ（６．０ｇ）の混合物を室温で３時間撹拌した。それから、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１５．１ｇ、７１．１ｍｍｏｌ）を添加し、懸濁液を７０℃で１時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濃縮して、黄色油状のジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ブタ−３−イニルアミノ）ピペリジン−１−イル）メタンジイリデンジカルバメート（約１５．０ｇ）を得て、これを次工程に直接使用した。
【０３３０】
工程４：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ブタ−３−イニル（ｔｅｒｔ−ブチルカルバメート））ピペリジン−１−イル）メタンジイリデンジカルバメートの合成：
ＴＨＦ（１２０ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ブタ−３−イニルアミノ）ピペリジン−１−イル）メタンジイリデンジカルバメート（約１５．０ｇ）、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１０．３ｇ、４７．４ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ３水溶液（６０ｍＬ）の混合物を室温で２時間撹拌した。それから、反応混合物を濃縮して、ＥｔＯＡｃ（３回）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶出０〜２０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）により精製して、無色油状のジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ブタ−３−イニル（ｔｅｒｔ−ブチルカルバメート））ピペリジン−１−イル）メタンジイリデンジカルバメート（７．１ｇ、６０％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４９５．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３３１】
工程５〜８：実施例５の工程２〜５に従い、工程２の１−（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジノ）プロパ−２−インを、ｔｅｒｔ−ブチル（１−（Ｎ，Ｎ'−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）カルバムイミドイル）ピペリジン−４−イル）（ブタ−３−イン−１−イル）カルバメートで置き換えて；ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（（１−カルバムイミドイルピペリジン−４−イル）アミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１０、５０２ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４５８．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．３５（ｓ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｓ，１Ｈ），３．８５（ｄ，Ｊ＝１４．５Ｈｚ，２Ｈ），３．４０〜３．３０（ｍ，３Ｈ），３．２０〜２．９０（ｍ，６Ｈ），２．２０〜１．７５（ｍ，６Ｈ），１．６２〜１．４６（ｍ，２Ｈ）。
【０３３２】
実施例１４〜３３に記載の化合物は、実施例１〜１３の同様な方法に従い、反応スキームに記載のように合成された。
【実施例１４】
【０３３３】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（Ｒ＊）−２−グアニジノ−１−ヒドロキシエチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１１）の合成
【０３３４】
【化１６１】
2015512419.tif 000162
合成スキーム：
【０３３５】
【化１６２】
2015512419.tif 000163
【０３３６】
【化１６３】
2015512419.tif 000164
【０３３７】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（Ｒ＊）−２−グアニジノ−１−ヒドロキシエチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１１、４６ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３９１．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．４６（ｓ，１Ｈ），５．０４（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），４．１１（ｓ，１Ｈ），３．５６（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．０８（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），２．８５（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ），２．２４〜２．１４（ｍ，１Ｈ），２．１２〜２．００（ｍ，２Ｈ），１．８６〜１．７６（ｍ，１Ｈ）。
【実施例１５】
【０３３８】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（Ｓ＊）−２−グアニジノ−１−ヒドロキシエチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１２）の合成
【０３３９】
【化１６４】
2015512419.tif 000165
合成スキーム：
【０３４０】
【化１６５】
2015512419.tif 000166
【０３４１】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（Ｓ＊）−２−グアニジノ−１−ヒドロキシエチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１２、７２ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３９１．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．４７（ｓ，１Ｈ），５．０４（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），４．６３（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｓ，１Ｈ），３．６５〜３．４９（ｍ，２Ｈ），３．０９（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２０〜１．９８（ｍ，３Ｈ），１．８６〜１．７８（ｍ，１Ｈ）。
【実施例１６】
【０３４２】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１−グアニジノシクロプロピル）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１３）の合成
【０３４３】
【化１６６】
2015512419.tif 000167
合成スキーム：
【０３４４】
【化１６７】
2015512419.tif 000168
【０３４５】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１−グアニジノシクロプロピル）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１３、２８ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４０１．３。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．３５（ｓ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｂｒｓ，１Ｈ），３．１１〜３．０９（ｍ，１Ｈ），３．０８〜２．９８（ｍ，２Ｈ），２．８９（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），２．２０〜２．００（ｍ，３Ｈ），１．８９〜１．７８（ｍ，１Ｈ），０．９７〜０．９５（ｍ，４Ｈ）。
【実施例１７】
【０３４６】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１−メチルグアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１４）の合成
【０３４７】
【化１６８】
2015512419.tif 000169
合成スキーム：
【０３４８】
【化１６９】
2015512419.tif 000170
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１−メチルグアニジノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１４，１２ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３７５．１。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６を数滴添加したＤ２Ｏ）δ６．５５（ｓ，１Ｈ），４．７３（ｓ，２Ｈ），４．６４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．１５〜３．０７（ｍ，１Ｈ），３．０６（ｓ，３Ｈ），２．８９（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２６〜２．２０（ｍ，１Ｈ），２．１５〜２．０９（ｍ，２Ｈ），１．９２〜１．８５（ｍ，１Ｈ）。
【実施例１８】
【０３４９】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（３−グアニジノプロピル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１５）の合成
【０３５０】
【化１７０】
2015512419.tif 000171
合成スキーム：
【０３５１】
【化１７１】
2015512419.tif 000172
【０３５２】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（３−グアニジノプロピル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１５、１８ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３８９．１。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６を数滴添加したＤ２Ｏ）δ６．２８（ｓ，１Ｈ），４．５７（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），４．１１（ｓ，１Ｈ），３．１７（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），３．０７（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），２．８８（ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ），２．８３（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），２．２２〜１．７５（ｍ，６Ｈ）。
【実施例１９】
【０３５３】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１ｓ，３Ｒ）−３−アミノシクロブチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１６）の合成
【０３５４】
【化１７２】
2015512419.tif 000173
合成スキーム：
【０３５５】
【化１７３】
2015512419.tif 000174
【０３５６】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１ｓ，３Ｒ）−３−アミノシクロブチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１６、７ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３５９．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ６．４３（ｓ，１Ｈ），４．４６（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），４．０２（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７５〜３．６８（ｍ，１Ｈ），３．５１〜３．４５（ｍ，１Ｈ），２．９４〜２．８５（ｍ，１Ｈ），２．７２〜２．６０（ｍ，３Ｈ），２．３６〜２．３０（ｍ，２Ｈ），２．１５〜１．９５（ｍ，１Ｈ），１．９９〜１．９０（ｍ，２Ｈ），１．７８〜１．７２（ｍ，１Ｈ）。
【実施例２０】
【０３５７】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１ｓ，３Ｒ）−３−グアニジノシクロブチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１７）の合成
【０３５８】
【化１７４】
2015512419.tif 000175
合成スキーム：
【０３５９】
【化１７５】
2015512419.tif 000176
【０３６０】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１ｓ，３Ｒ）−３−グアニジノシクロブチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１７、３７ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４０１．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ８．１１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．１４（ｂｒ  ｓ，４Ｈ），６．４１（ｓ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），４．０２（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），３．４０〜３．３０（ｍ，１Ｈ），２．９１（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），２．８０〜２．６３（ｍ，３Ｈ），２．３０〜２．１０（ｍ，３Ｈ），２．００〜１．８５（ｍ，２Ｈ），１．８２〜１．６６（ｍ，１Ｈ）。
【実施例２１】
【０３６１】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（アゼチジン−３−イルメチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１８、）の合成
【０３６２】
【化１７６】
2015512419.tif 000177
合成スキーム：
【０３６３】
【化１７７】
2015512419.tif 000178
【０３６４】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（アゼチジン−３−イルメチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１８、７５ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３５９．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．２３（ｓ，１Ｈ），４．５６（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１５〜４．０８（ｍ，２Ｈ），３．９３〜３．８２（ｍ，２Ｈ），３．４４（ｄｄ，Ｊ＝１４．３，７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．２８（ｄｔ，Ｊ＝１５．９，７．９Ｈｚ，１Ｈ），３．１０〜３．０３（ｍ，３Ｈ），２．８７（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ），２．２１〜１．９４（ｍ，３Ｈ），１．８４〜１．７６（ｍ，１Ｈ）。
【実施例２２】
【０３６５】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１−カルバムイミドイルアゼチジン−３−イル）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６１９、）の合成
【０３６６】
【化１７８】
2015512419.tif 000179
合成スキーム：
【０３６７】
【化１７９】
2015512419.tif 000180
【０３６８】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（１−カルバムイミドイルアゼチジン−３−イル）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１９、４５ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４０１．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ７．２８（ｂｒ  ｓ，４Ｈ），６．３６（ｓ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１８（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），４．０２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．８６〜３．７１（ｍ，２Ｈ），３．１６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．０９〜３．０４（ｍ，１Ｈ），２．９０（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），２．６７（ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，１Ｈ），２．１６〜２．０９（ｍ，１Ｈ），２．００〜１．９０（ｍ，２Ｈ），１．８０〜１．７２（ｍ，１Ｈ）。
【実施例２３】
【０３６９】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（（２−アミノエチル）アミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２０）の合成
【０３７０】
【化１８０】
2015512419.tif 000181
合成スキーム：
【０３７１】
【化１８１】
2015512419.tif 000182
【０３７２】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（（２−アミノエチル）アミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６２０、２０ｍｇ、ギ酸塩として）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３７６．３。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ８．３２（ｓ，１Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），４．１１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．３４（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．３０〜３．１３（ｍ，６Ｈ），３．１１〜３．０３（ｍ，１Ｈ），２．９１（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２１〜１．９８（ｍ，３Ｈ），１．８８〜１．７８（ｍ，１Ｈ）。
【実施例２４】
【０３７３】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（（２−グアニジノエチル）アミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２１、）の合成
【０３７４】
【化１８２】
2015512419.tif 000183
合成スキーム：
【０３７５】
【化１８３】
2015512419.tif 000184
【０３７６】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（（２−グアニジノエチル）アミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６１２、１５ｍｇ、ギ酸塩として）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：４１８．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ８．２８（ｓ，１Ｈ），６．３０（ｓ，１Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．４０（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），３．２５（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），３．１４〜３．０１（ｍ，５Ｈ），２．８７（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ），２．１６〜２．０９（ｍ，１Ｈ），２．０７〜１．９２（ｍ，２Ｈ），１．８３〜１．７４（ｍ，１Ｈ）。
【実施例２５】
【０３７７】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（アゼチジン−３−イルアミノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２２、）の合成
【０３７８】
【化１８４】
2015512419.tif 000185
合成スキーム：
【０３７９】
【化１８５】
2015512419.tif 000186
【０３８０】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（アゼチジン−３−イルアミノ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６２２、２６７ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３７４．０。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．５５（ｓ，１Ｈ），４．６６（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２９〜４．１０（ｍ，５Ｈ），４．１０〜３．９８（ｍ，２Ｈ），３．１２（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ），２．３０〜２．１８（ｍ，１Ｈ），２．１８〜１．９９（ｍ，２Ｈ），１．９７〜１．７８（ｍ，１Ｈ）。
【実施例２６】
【０３８１】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（アゼチジン−３−イルアミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２３、）の合成
【０３８２】
【化１８６】
2015512419.tif 000187
合成スキーム：
【０３８３】
【化１８７】
2015512419.tif 000188
【０３８４】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（アゼチジン−３−イルアミノ）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６２３、４１ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３８８．０。
【実施例２７】
【０３８５】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（アゼチジン−３−イルオキシ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２４）の合成
【０３８６】
【化１８８】
2015512419.tif 000189
合成スキーム：
【０３８７】
【化１８９】
2015512419.tif 000190
【０３８８】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（（アゼチジン−３−イルオキシ）メチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６２４、３４９ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３７５．２。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．５１（ｓ，１Ｈ），４．６４（ｓ，２Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５６〜４．５２（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，６．７Ｈｚ，２Ｈ），４．１１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．９３（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．０８（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２２〜２．１４（ｍ，１Ｈ），２．１２〜２．００（ｍ，２Ｈ），１８７〜１．７８（ｍ，１Ｈ）。
【実施例２８】
【０３８９】
硫酸（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（１−メチルピリジン−１−イウム−４−イル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２５）の合成
【０３９０】
【化１９０】
2015512419.tif 000191
合成スキーム：
【０３９１】
【化１９１】
2015512419.tif 000192
【０３９２】
特性決定：
白色固体の硫酸（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（１−メチルピリジン−１−イウム−４−イル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６２５、２０ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ−，ｍ／ｚ）：３７９．０。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ９．１５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），８．６０（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），４．６６（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｓ，３Ｈ），４．０７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．００〜２．９８（ｍ，１Ｈ），２．７９（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２４〜２．２０（ｍ，１Ｈ），２．１０〜２．００（ｍ，２Ｈ），１．８２〜１．７８（ｍ，１Ｈ）。
【実施例２９】
【０３９３】
硫酸（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（１，１−ジメチルピペリジン−１−イウム−４−イル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２６）の合成
【０３９４】
【化１９２】
2015512419.tif 000193
合成スキーム：
【０３９５】
【化１９３】
2015512419.tif 000194
【０３９６】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（１，１−ジメチルピペリジン−１−イウム−４−イル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６２６、８６ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ−，ｍ／ｚ）：３９９．２。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＦ３ＣＯＯＤ）：δ７．２４（ｓ，１Ｈ），６．０３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），５．４４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．７６〜４．７２（ｍ，１Ｈ），４．５１（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），４．２６〜４．１２（ｍ，４Ｈ），３．９９〜３．９２（ｍ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．２６〜３．２２（ｍ，１Ｈ），３．２１〜２．８５（ｍ，７Ｈ）。
【実施例３０】
【０３９７】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−７−オキソ−２−（５−（ピペリジン−４−イルメチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２７）の合成
【０３９８】
【化１９４】
2015512419.tif 000195
合成スキーム：
【０３９９】
【化１９５】
2015512419.tif 000196
【０４００】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−７−オキソ−２−（５−（ピペリジン−４−イルメチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６２７、３１ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３８７．０。
【実施例３１】
【０４０１】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（アゼチジン−３−イル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２８）の合成
【０４０２】
【化１９６】
2015512419.tif 000197
【０４０３】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（アゼチジン−３−イル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６２８、１５ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３４５．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．４８（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４７〜４．２２（ｍ，５Ｈ），４．１５〜４．１２（ｍ，１Ｈ），３．１７〜３．０３（ｍ，１Ｈ），２．９１（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），２．２４〜２．１７（ｍ，１Ｈ），２．１２〜２．００（ｍ，２Ｈ），１．９０〜１．８０（ｍ，１Ｈ）．ＣＢ−６０６，１２２。
【実施例３２】
【０４０４】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（アゼチジン−３−イル）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６２９）の合成
【０４０５】
【化１９７】
2015512419.tif 000198
合成スキーム：
【０４０６】
【化１９８】
2015512419.tif 000199
【０４０７】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−２−（５−（２−（アゼチジン−３−イル）エチル）イソオキサゾール−３−イル）−７−オキソ−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６２９、３４ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：３７３．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ８．３３（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），６．３３（ｓ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．９２（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），３．６１（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），３．４０〜３．２６（ｍ，１Ｈ），２．９４〜２．８８（ｍ，１Ｈ），２．８５〜２．７０（ｍ，４Ｈ），２．１６〜２．０８（ｍ，１Ｈ），２．０６〜１．８７（ｍ，３Ｈ），１．８４〜１．６７（ｍ，１Ｈ）。
【実施例３３】
【０４０８】
硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−７−オキソ−２−（５−（ピロリジン−３−イルメチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（化合物６３０）の合成
【０４０９】
【化１９９】
2015512419.tif 000200
合成スキーム：
【０４１０】
【化２００】
2015512419.tif 000201
【０４１１】
特性決定：
ギ酸アンモニウム緩衝液を使用して、分取ＨＰＬＣにより精製して、白色固体の硫酸水素（２Ｓ，５Ｒ）−７−オキソ−２−（５−（ピロリジン−３−イルメチル）イソオキサゾール−３−イル）−１，６−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イル（６３０、９ｍｇ）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ−，ｍ／ｚ）：３７１．０。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ６．２９（ｓ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．４３（ｄｄ，Ｊ＝７．６，５．０Ｈｚ，１Ｈ），３．３９-３．２９（ｍ，１Ｈ），３．２６-３．１４（ｍ，１Ｈ），３．１２-３．０３（ｍ，１Ｈ），２．９７-２．８５（ｍ，４Ｈ），２．７４−２．６１（ｍ，１Ｈ），２．２０−２．００（ｍ，４Ｈ），１．８７−１．７８（ｍ，１Ｈ），１．７４-１．６０（ｍ，１Ｈ）。
【実施例３４】
【０４１２】
同質遺伝子型β−ラクタマーゼ菌株の構築
β−ラクタマーゼを発現する一連の同質遺伝子型大腸菌株は、β−ラクタマーゼ遺伝子をｐＢＲ３２２（ジェンバンク登録番号Ｊ０１７４９）のカスタム設計された誘導体にクローニングし、工学的に導入したプラスミドを大腸菌へ形質転換することにより構築した。ｐＢＲ３２２のプラスミド骨格内のＮｄｅＩ制限酵素部位を除去して、ｐＢＲ３２２ΔＮｄｅＩを生成した。ｂｌａＴＥＭ−１遺伝子を除くｐＢＲ３２２ΔＮｄｅＩベクターそれ自体は、２つのプライマー：（１）ｐＢＲ−Ｐｂｌａ５’−ｃｇｃａｔａｔｇａｃｔｃｔｔｃｃｔｔｔｔｔｃａａｔａｔｔａｔｔｇ−３、配列番号１、ｂｌａＴＥＭ−１プロモーターの３’末端に工学的に導入したＮｄｅＩ制限酵素部位を有するプライマーおよび（２）ｐＢＲ−ｖｅｃ−１５’−ｇｃｇｇａｔｃｃｃｔｇｔｃａｇａｃｃａａｇｔｔｔａｃｔｃ−３’、配列番号２、ｂｌａＴＥＭ−１オープンリーディングフレームの３’末端に工学的に導入したＢａｍＨＩ制限酵素部位を有するプライマーを使用して増幅した。クロラムフェニコール耐性遺伝子、ｃａｔは、該耐性遺伝子の、５’末端に工学的に導入したＮｄｅＩ制限酵素部位を有するプライマー（Ｐｂｌａ−ｃａｔ５’−ｇｃｃａｔａｔｇａｔｇｇａｇａａａａａａａｔｃａｃｔｇｇ−３’、配列番号３）および３’末端に工学的に導入したＢａｍＨＩ制限酵素部位を有するプライマー（Ｖｅｃ−１−ｃａｔ５’−ｃｇｇｇａｔｃｃｃｔａｇａｇａａｔａｇｇａａｃｔｔｃｇｇ−３’、配列番号４）を使用して、ｐＫＤ３（ジェンバンク登録番号ＡＹ０４８７４２）からＰＣＲ増幅により生成した。該２つのＰＣＲ生成物、ｐＢＲ３２２ΔＮｄｅＩおよびｃａｔは、一緒にライゲートし、ｐＢＲ３２２テトラサイクリン耐性カセット、ｔｅｔＡ、およびプラスミド複製起点の両方を保持するｐＢＲ−ＣＢＳＴ（ｐＢＲ３２２ΔＮｄｅＩΔＴＥＭ−１：：ｃａｔ配列番号５）を生成したが、ｂｌａＴＥＭ−１遺伝子はｃａｔ遺伝子に置き換わった。
【０４１３】
この工学的方法で、多くの種々クラス型β−ラクタマーゼ遺伝子産生プラスミド（下記参照）を、各々の遺伝子（ジェンスクリプト）の５’末端に工学的に導入したＮｄｅＩ制限酵素部位を有する合成遺伝子および３’末端に工学的に導入したＢａｍＨＩ制限酵素部位を有する合成遺伝子を使用して生成した。合成β−ラクタマーゼ遺伝子およびｃａｔ遺伝子の両方は、ｐＢＲ３２２ΔＮｄｅＩＰＣＲ生成物のＮｄｅＩ／ＢａｍＨＩ部位にライゲートし、エレクトロコンピテント大腸菌ＥｌｅｃｔｒｏＭａｘＤＨ１０Ｂ（インビトロジェン／ライフテクノロジーズ）へ形質転換した。組み換えプラスミドを内部に含む大腸菌ＤＨ１０Ｂは、ＬＢ寒天（２５μｇ／ｍＬのテトラサイクリンを添加）上で選択し、次いで、単離した単一コロニーを５ｍＬのＬＢ培地（２５μｇ／ｍＬのテトラサイクリンを添加）に接種し、そして、１８時間、常温通風（２５０ｒｐｍ）しながら、３７℃でインキュベートした。培養は、２０％グリセロール中、−８０℃に戻し凍結した。クローン化β−ラクタマーゼ遺伝子のＤＮＡ配列は確認された。組み換え大腸菌株のβ−ラクタマーゼ遺伝子発現は、ｐＢＲ−ＣＢＳＴプラスミドのｂｌａＴＥＭ−１プロモーターによって促進し、微量液体希釈アッセイでβ−ラクタム／β−ラクタマーゼ阻害剤の組み合わせのコンパレータに対する組み換え大腸菌株の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）プロファイリングによって特性を決定した。
【０４１４】
【表１】
2015512419.tif 000202
同質遺伝子型大腸菌株に使用されたｐＢＲ−ＣＢＳＴプラスミド（β−ラクタマーゼ遺伝子またはｃａｔ遺伝子を含む）の塩基配列（関連する制限酵素部位は下線；全てのｃａｐｓ、ｔｅｔＡ配列中のβ−ラクタマーゼ配列はイタリック体）
＜配列表＞
【表２−１】
2015512419.tif 000203
【表２−２】
2015512419.tif 000204
【表３−１】
2015512419.tif 000205
【表３−２】
2015512419.tif 000206
【表４−１】
2015512419.tif 000207
【表４−２】
2015512419.tif 000208
【表５−１】
2015512419.tif 000209
【表５−２】
2015512419.tif 000210
【表６−１】
2015512419.tif 000211
【表６−２】
2015512419.tif 000212
【表７−１】
2015512419.tif 000213
【表７−２】
2015512419.tif 000214
【表８−１】
2015512419.tif 000215
【表８−２】
2015512419.tif 000216
【表９−１】
2015512419.tif 000217
【表９−２】
2015512419.tif 000218
【表１０−１】
2015512419.tif 000219
【表１０−２】
2015512419.tif 000220
【実施例３５】
【０４１５】
標準β−ラクタマーゼ阻害剤増幅最小発育阻止濃度アッセイ
化合物のβ−ラクタム類活性増強能をβ−ラクタムおよびβ−ラクタマーゼ阻害化合物の組み合わせの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を、微量液体希釈法で様々なβ−ラクタマーゼ産生細菌株に対して評価することによって示した。実験プロトコルは、下記のように変更した臨床・検査標準協会（ＣＬＳＩ）ガイドライン（ＣＬＳＩガイドラインは、２０１２年１月に出版されたＣＬＳＩ文書Ｍ０７−Ａ９：「Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard-Ninth Edition」から引き出せる）に従い実施した。
【０４１６】
ＭＩＣ評価の準備のために、臨床分離株（肺炎桿菌、大腸菌、エンテロバクター属菌、サイトロバクター属菌、または緑膿菌）の凍結グリセロール貯蔵物を使用し、富栄養で非選択的な５％ヒツジ血液含有トリプシン大豆寒天培地（ＴＳＡＢ）上に、単離コロニーを得るためストリークした。クローン化β−ラクタマーゼ発現プラスミドを含み、実験室で工学的に導入した同質遺伝子型大腸菌株の凍結グリセロール貯蔵物を、２５μｇ／ｍＬテトラサイクリン添加した富栄養で選択的なＬＢ寒天上に、単離コロニーを得るためストリークしてプラスミドを保持した。全ての菌株は、１８〜２４時間、３７℃でインキュベートした。
【０４１７】
評価の日に、初代培養液は、臨床株を含むＴＳＡＢプレートまたは工学的に導入した株を含むテトラサイクリン添加ＬＢプレートから、５〜１０個のコロニーを擦り落とすことから始めた。臨床株材料は、１４ｍＬ培養管中の約５ｍＬの陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地（ＣＡＭＨＢ）に懸濁した。工学的に導入した株材料は、１４ｍＬ培養管中の陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地（２５μｇ／ｍＬテトラサイクリン添加）に懸濁した。全ての菌株は、６００ｎｍでの吸光度（ＯＤ６００）が≧０．１になるまで、約２時間、常温通風（２００ｒｐｍ）しながら、３７℃でインキュベートした。
【０４１８】
アッセイの２つの化合物成分は、各々、陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地（ＣＡＭＨＢ）に希釈し、９６穴微量液体希釈アッセイプレートに添加した。５０μＬのβ−ラクタムを、１２８〜０．１３μｇ／ｍＬの最終濃度範囲で２倍希釈して、該アッセイプレートの各穴へ添加した。２５μＬのβ−ラクタマーゼ阻害剤化合物を、４μｇ／ｍＬの最終濃度で希釈液体アッセイプレートの全穴に添加した。接種培養液は、初代培養液がＯＤ６００＝０．１になるように標準化し、次いで、臨床株用陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地または工学的に導入した株用陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地（１００μｇ／ｍＬテトラサイクリン添加）の１ｍＬ当たり２０μＬの調製初代培養液を添加することにより調製し、結果、最終接種密度は、ミリリットル当たり約１０５コロニー形成単位であった。希釈した接種培養液を使用し、９６穴微量液体希釈アッセイプレートの各穴に２５μＬ接種した。各々の穴の最終容量は１００μＬであり、異なる濃度のβ−ラクタム、４μｇ／ｍＬ濃度のβ−ラクタマーゼ阻害剤、ＯＤ６００が約０．００１の細菌培養液および、必要な場合、２５μｇ／ｍＬのテトラサイクリンを含有させた。
【０４１９】
プレートは、１８〜２０時間、常温通風（２００ｒｐｍ）しながら、３７℃でインキュベートした。インキュベーションの後、目視観察器具（下に鏡を備えたテーブル）の上にプレートを置き、目視で生育を確認し、そして、ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ３４０ＰＣ３８４プレートリーダー（モレキュラーデバイス、カリフォルニア州サニーベール）を使用して、ＯＤ６００を測定した。生育は、裸眼で検知できる濁度またはＯＤ６００最小値が０．１に達することと定義した。最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）値は、目視観察できる濁りが発生しない最低濃度として定義した。
【０４２０】
代表的な化合物の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）値を表ＩＩに示す。
【実施例３６】
【０４２１】
相乗最小発育阻止濃度（ｓＭＩＣ）アッセイ
相乗型最小発育阻止濃度（ｓＭＩＣ）アッセイは、β−ラクタマーゼ産生細菌株に対するβ−ラクタム系抗生物質の一定濃度の活性を増強するのに必要なβ−ラクタマーゼ阻害剤濃度を決定する。実験プロトコルは、下記のように変更した臨床・検査標準協会（ＣＬＳＩ）ガイドライン（ＣＬＳＩガイドラインは、２０１２年１月に出版されたＣＬＳＩ文書Ｍ０７−Ａ９：「Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard-Ninth Edition」から引き出せる）に従い実施した。アッセイは、９６穴微量液体希釈アッセイプレートの各列１２穴の内の１１穴に渡って、β−ラクタマーゼ阻害剤を連続的に希釈し、該アッセイプレートの全穴に一定濃度のβ−ラクタムを添加し、アッセイプレートに細菌株を接種し、一夜の細菌生育を阻止するのに必要なβ−ラクタマーゼ阻害剤最低濃度を決定する段取りで実施した。β−ラクタムを一定濃度で含有するが、β−ラクタマーゼ阻害剤を含有しないアッセイプレートの１２番目の穴の細菌生育は、細菌株が、４μｇ／ｍＬの一定濃度で、β−ラクタム系抗生物質（例えば、セフトロザン）耐性があることを示す。
【０４２２】
ＭＩＣ評価の準備のために、臨床分離株（肺炎桿菌、大腸菌、エンテロバクター属菌、サイトロバクター属菌、または緑膿菌）の凍結グリセロール貯蔵物を使用し、富栄養で非選択的な５％ヒツジ血液含有トリプシン大豆寒天培地（ＴＳＡＢ）上に、単離コロニーを得るためストリークした。クローン化β−ラクタマーゼ発現プラスミドを含み、実験室で工学的に導入した同質遺伝子型大腸菌株の凍結グリセロール貯蔵物を、２５μｇ／ｍＬテトラサイクリン添加した富栄養で選択的なＬＢ寒天上に、単離コロニーを得るためストリークしてプラスミドを保持した。全ての菌株は、１８〜２４時間、３７℃でインキュベートした。
【０４２３】
評価の日に、初代培養液は、臨床株を含むＴＳＡＢプレートまたは工学的に導入した株を含むテトラサイクリン添加ＬＢプレートから、５〜１０個のコロニーを擦り落とすことから始めた。臨床株材料は、１４ｍＬ培養管中の約５ｍＬの陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地（ＣＡＭＨＢ）に懸濁した。工学的に導入した株材料は、１４ｍＬ培養管中の陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地（２５μｇ／ｍＬテトラサイクリン添加）に懸濁した。全ての菌株は、６００ｎｍでの吸光度（ＯＤ６００）が≧０．１になるまで、約２時間、常温通風（２００ｒｐｍ）しながら、３７℃でインキュベートした。
【０４２４】
アッセイの２つの化合物成分は、各々、陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地（ＣＡＭＨＢ）に調製され、９６穴微量液体希釈アッセイプレートに添加された。５０μＬのβ−ラクタマーゼ阻害剤を、１２８〜０．１３μｇ／ｍＬの最終濃度範囲で２倍希釈して、該アッセイプレートの各穴へ添加した。２５μＬのβ−ラクタムを、４μｇ／ｍＬの最終濃度で希釈液体アッセイプレートの全穴に添加した。接種培養液は、初代培養液がＯＤ６００＝０．１になるように標準化し、次いで、臨床株用陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地または工学的に導入した株用陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培地（１００μｇ／ｍＬテトラサイクリン添加）の１ｍＬ当たり２０μＬの調整初代培養液を添加することにより調製し、結果、最終接種密度は、ミリリットル当たり約１０５コロニー形成単位であった。希釈した接種培養液を使用し、９６穴微量液体希釈アッセイプレートの各穴に２５μＬ接種した。各々の穴の最終容量は１００μＬであり、異なる濃度のβ−ラクタマーゼ阻害剤、４μｇ／ｍＬ濃度のβ−ラクタム、ＯＤ６００が約０．００１の細菌培養液および、必要な場合、２５μｇ／ｍＬのテトラサイクリンを含有させた。
【０４２５】
相乗最小発育阻止濃度（ｓＭＩＣ）データの解釈
プレートは、１８〜２０時間、常温通風（２００ｒｐｍ）しながら、３７℃でインキュベートした。インキュベーションの後、目視観察器具（下に鏡を備えたテーブル）の上にプレートを置き、目視で生育を確認し、そして、ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ３４０ＰＣ３８４プレートリーダー（モレキュラーデバイス、カリフォルニア州サニーベール）を使用して、ＯＤ６００を測定した。生育は、裸眼で検知できる濁度またはＯＤ６００最小値が０．１に達することと定義した。相乗最小発育阻止濃度（ｓＭＩＣ）値は、目視観察できる濁りが発生しない最低濃度として定義した。
【０４２６】
相乗最小発育阻止濃度（ｓＭＩＣ）値は、β−ラクタマーゼ産生菌の生育を阻止するため、４μｇ／ｍｌのＣＸＡ−１０１（セフトロザン）またはセフタジジムの活性増強に必要とするβ−ラクタマーゼ阻害剤の量を示す。
【０４２７】
代表的な化合物の相乗最小発育阻止濃度（ｓＭＩＣ）値を表ＩＩＩに示す。
【実施例３７】
【０４２８】
阻害反応速度論
テスト阻害剤によるＫＰＣ−２の阻害または不活性化は、レポーター基質として１００μＭのニトロセフィン（ＮＣＦ）を使用して評価した。アッセイは、９６穴プレートの半分の面積、５０μｌ反応容積において、１ｘＰＢＳｐＨ７．４、０．１ｍｇ／ｍｌＢＳＡで実施した。ニトロセフィン（ＮＣＦ）は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解し、アッセイ用緩衝液で希釈した。テスト阻害剤は、水またはＤＭＳＯに溶解し、最終濃度２０００〜０．１９５Ｍのアッセイで連続的に希釈した。テスト阻害剤の変化する濃度の存在下での酵素活性は、ＳｏｆｔＭａｘＰｒｏソフトウェア（モレキュラーデバイス）を装備したＳｐｅｃｔｒａＭａｘＰｌｕｓＰＣ３８４マイクロプレートリーダーを使用して、２５℃、５分間、分光光度測定法で、４８６ｎｍでニトロセフィン（ＮＣＦ）の加水分解をモニターすることにより測定した。データ解析は、グラフパッドプリズム（グラフパッドソフトウェア社）を使用して実施した。
進行曲線は、ｋ測定値（ｋｏｂｓ）を決定するために１次速度減衰式（数式１）にフィットさせた。
そして、ｋｏｂｓｖｓ．阻害剤濃度［Ｉ］曲線は、阻害剤解離定数（Ｋ）および無限大の阻害剤濃度での酵素不活性化の１次速度定数（ｋｉｎａｃｔ）を決定するために数式２にフィットさせた。表ＩＶに、代表的なテスト化合物の速度論的結果を示す。ｋｉｎａｃｔ／Ｋ比が大きいほど、より効果的な酵素不活性化を示している。
数式１
Ｙｔ＝Ｖ０＊（１−ｅ（−ｋｏｂｓ＊ｔ））／ｋｏｂｓ
式中、Ｙは、時間ｔでの吸光度であり、Ｖ０は、非阻害酵素の速度であり、ｋｏｂｓは、酵素活性化速度定数の測定値である。
数式２
ｋｏｂｓ＝ｋｉｎａｃｔ＊［Ｉ］／（［Ｉ］＋Ｋ（１＋Ｓ／Ｋｍ））
式中、Ｓは、ニトロセフィン（ＮＣＦ）濃度であり、Ｋｍは、ＮＣＦのＫＰＣ−２Ｋｍである。
【図１Ａ】
2015512419.tif 000297
【図１Ｂ】
2015512419.tif 000298
【図１Ｃ】
2015512419.tif 000299
【図１Ｄ】
2015512419.tif 000300
【図２Ａ】
2015512419.tif 000301
【図２Ｂ】
2015512419.tif 000302
【図３Ａ】
2015512419.tif 000303
【図３Ｂ】
2015512419.tif 000304
【図４】
2015512419.tif 000305
【図５Ａ】
2015512419.tif 000306
【図５Ｂ】
2015512419.tif 000307
【国際調査報告】
2015512419.tif 000308
2015512419.tif 000309
2015512419.tif 000310