(57)【要約】低［ＡＡＧ］患者の治療に使用するための化合物ＡＲＲＹ−５２０が提供される。別の態様では、（ａ）患者由来の生物試料の［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｂ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｃ）患者が低［ＡＡＧ］である場合、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を患者に投与することとを含む患者の癌の治療に使用するためのＡＲＲＹ−５２０が提供される。別の態様では、（ａ）患者から生物試料を採取することと、（ｂ）生物試料の［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｃ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、及び（ｄ）患者が低［ＡＡＧ］である場合に、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を患者に投与することとを含む患者の癌の治療に使用するためのＡＲＲＹ−５２０が提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
低［ＡＡＧ］患者の癌の治療に使用するための化合物ＡＲＲＹ−５２０。
【請求項２】
患者の癌の治療に使用する化合物ＡＲＲＹ−５２０であって、（ａ）前記患者由来の生物試料の前記［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｂ）前記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｃ）前記患者が低［ＡＡＧ］である場合に、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を前記患者に投与することとを含む、治療に使用する化合物。
【請求項３】
患者の癌の治療に使用する化合物ＡＲＲＹ−５２０であって、（ａ）前記患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）前記生物試料の前記［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｃ）前記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｄ）前記患者が低［ＡＡＧ］である場合に、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を前記患者に投与することとを含む、治療に使用する化合物。
【請求項４】
低［ＡＡＧ］と特定された癌患者の癌を治療するための方法であって、（ａ）前記患者由来の生物試料をアッセイすることにより、前記患者を低［ＡＡＧ］と特定することと、（ｂ）ＡＲＲＹ−５２０を低［ＡＡＧ］の前記患者に投与することとを含む、前記患者をＡＲＲＹ−５２０で治療するステップを含む方法。
【請求項５】
低［ＡＡＧ］と特定された患者をＡＲＲＹ−５２０で治療するステップを含む癌患者の癌を治療するための方法であって、（ａ）前記患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）前記患者由来の前記生物試料をアッセイすることにより、前記患者を低［ＡＡＧ］と特定することと、（ｃ）低［ＡＡＧ］の前記患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む方法。
【請求項６】
ＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高い患者を検出するための方法であって、前記患者由来の生物試料を採取することと、前記試料をアッセイして［ＡＡＧ］を測定することとを含み、低［ＡＡＧ］が、ＡＲＲＹ−５２０に対し患者が応答する可能性が高いことの指標となる方法。
【請求項７】
ＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高い患者を検出するための方法であって、前記患者由来の生物試料を採取することと、前記試料をアッセイし［ＡＡＧ］を測定することと、前記患者がＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高いかどうかを判定することとを含み、低［ＡＡＧ］が、ＡＲＲＹ−５２０に対し患者が応答する可能性が高いことの指標となる方法。
【請求項８】
癌患者の応答の可能性を向上させるための方法であって、（ａ）前記患者由来の生物試料をアッセイすることにより、前記患者を低［ＡＡＧ］と特定することと、（ｂ）応答の可能性が向上したと分類された前記患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む方法。
【請求項９】
癌患者の応答の可能性を向上させるための方法であって、（ａ）前記患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）前記試料をアッセイに供し、［ＡＡＧ］を測定することと、（ｃ）前記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｄ）前記患者が低［ＡＡＧ］である場合に、前記患者を応答の可能性が向上したと分類することと、（ｅ）応答の可能性が向上したと分類された前記患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む方法。
【請求項１０】
ＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む癌を治療するための方法に対し患者が治療応答を示す可能性が向上したことを予測するための方法であって、（ａ）前記患者の生物試料中の［ＡＡＧ］を測定することと、（ｂ）前記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｃ）前記試料が低［ＡＡＧ］である場合に、前記癌を治療するための方法に対し治療応答を示す可能性が向上したと前記患者を分類することと、（ｄ）応答の可能性が向上したと分類された前記患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む方法。
【請求項１１】
ＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む癌を治療するための方法に対し患者が治療応答を示す可能性が向上したことを予測するための方法であって、（ａ）前記患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）前記患者の前記試料中の［ＡＡＧ］を測定することと、（ｃ）前記試料が低［ＡＡＧ］であるかを判定することと、（ｄ）前記試料が低［ＡＡＧ］である場合に、前記患者を、前記癌を治療するための方法に対し治療応答を示す可能性が向上したと分類することと、（ｅ）応答する可能性が向上したと分類された前記患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む方法。
【請求項１２】
癌患者がＡＲＲＹ−５２０治療に対して感受性を示す可能性がより高いことを判定するための方法であって、（ａ）前記患者由来の生物試料の［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｂ）前記生物試料が低［ＡＡＧ］である場合に、ＡＲＲＹ−５２０治療に対して感受性を示す可能性が高いと患者を特定することとを含む方法。
【請求項１３】
癌患者がＡＲＲＹ−５２０治療に対して感受性を示す可能性がより高いことを判定するための方法であって、（ａ）前記患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）前記生物試料中の［ＡＡＧ］を測定することと、（ｃ）前記生物試料が低［ＡＡＧ］である場合に、ＡＲＲＹ−５２０治療に対して感受性を示す可能性が高いと患者を特定することとを含む、方法。
【請求項１４】
約１．１ｇ／Ｌ未満のレベルの［ＡＡＧ］を有すると診断された患者を治療するためにＡＲＲＹ−５２０を使用するための方法であって、１または複数の単位用量ＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む、方法。
【請求項１５】
約１．１ｇ／Ｌ未満のレベルの［ＡＡＧ］を有すると診断された患者を治療するためにＡＲＲＹ−５２０を使用するための方法であって、予測インビトロＩＣ５０以上の非結合ＡＲＲＹ−５２０のレベルを得るために有効な量の１または複数の単位用量ＡＲＲＹ−５２０を前記患者に投与することを含む、方法。
【請求項１６】
低［ＡＡＧ］患者の癌を治療するための方法であって、有効量のＡＲＲＹ−５２０を前記患者に投与することを含む、方法。
【請求項１７】
低［ＡＡＧ］の哺乳動物の癌を治療するための方法であって、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を前記哺乳動物に投与することを含む方法。
【請求項１８】
ＫＳＰにより調節された疾患又は障害を治療するための方法であって、このような治療を必要としている哺乳動物に有効量のＡＲＲＹ−５２０を投与することを含み、前記哺乳動物が低［ＡＡＧ］である方法。
【請求項１９】
低［ＡＡＧ］患者の癌の治療のための薬物の製造におけるＡＲＲＹ−５２０の使用。
【請求項２０】
ＡＲＲＹ−５２０を含む低［ＡＡＧ］癌患者を治療するための医薬組成物。
【請求項２１】
ＡＲＲＹ−５２０及び薬学的に許容可能なキャリアー又は賦形剤を含む低［ＡＡＧ］癌患者を治療するための医薬組成物。
【請求項２２】
前記癌が血液癌である、請求項１〜２１に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項２３】
前記癌がリンパ腫、白血病及び多発性骨髄腫から選択される、請求項１〜２２に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項２４】
前記癌が固形腫瘍である、請求項１〜２１に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項２５】
前記癌が皮膚癌、乳癌、脳癌、子宮頚癌、及び精巣癌から選択される、請求項１〜２１または２４に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項２６】
前記癌が、乳癌、結腸直腸癌、非小細胞肺癌、膵臓癌、膀胱癌、唾液腺癌（腺様嚢胞癌）、食道癌、中皮腫癌、及び混合小細胞肺癌／非小細胞肺癌から選択される、請求項１〜２１または２４に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項２７】
前記低［ＡＡＧ］が約１．１ｇ／Ｌ未満である、請求項１〜２６のいずれか１項に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項２８】
前記［ＡＡＧ］が、Ｒ＆ＤシステムズインコーポレイティッドのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅのヒトα１−酸性糖タンパク質イムノアッセイにより測定される、請求項２７に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項２９】
デキサメタゾンがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項３０】
ボルテゾミブがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項３１】
カルフィルゾミブがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項３２】
ポマリドミドがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【請求項３３】
Ｇ−ＣＳＦがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の化合物、方法、使用又は組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、２０１２年８月１３日出願の米国特許仮出願第６１／６８２，６８２号、２０１３年１月３日出願の米国特許仮出願第６１／７３４，１４９号、及び２０１３年５月３１日出願の米国特許仮出願第６１／８２９，７７９号の優先権を主張する。これらの出願は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
本発明は、ＡＲＲＹ−５２０及び低［ＡＡＧ］癌患者の治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
下記の構造
【化１】
2015524845.tif 000002
を有し、「ＡＲＲＹ−５２０」としても知られる（Ｓ）−２−（３−アミノプロピル）−５−（２，５−ジフルオロフェニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−２−フェニル−１，３，４−チアジアゾール−３（２Ｈ）−カルボキサミドは、キネシンスピンドルタンパク質（「ＫＳＰ」）阻害剤である（米国特許第７，４４９，４８６号、米国特許出願公開第２０１０／００９９６９７号及び国際公開第２０１０／０４５６２４号を参照されたい。これらの特許の内容は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）。ＫＳＰ抑制は、増殖細胞の有糸分裂停止と、それに続く細胞死とを引き起こす。ＡＲＲＹ−５２０は、再発・難治性多発性骨髄腫（「ＭＭ」）の患者で臨床効果が認められた。静脈内（「ＩＶ」）投与にも関わらず、ＡＲＲＹ−５２０薬物動態学（「ＰＫ」）は、患者間で変動する。
薬剤に結合する血清タンパク質は、薬剤の効力とＰＫとを変えることがあり、おそらく臨床効果にも影響すると思われる。ヒト血清アルブミン（「ＨＳＡ」）及びヒトα１−酸性糖タンパク質（「ＡＡＧ」）は、それぞれ、約４０ｇ／Ｌ及び０．６〜１．２ｇ／Ｌの平均生理的濃度を有する最も豊富な血漿タンパク質である。ＡＡＧは、炎症と感染とに応答して肝臓により産生される急性期血清タンパク質である。いくつかの肝臓外発現が報告されているが、ＡＡＧは、主に肝臓で産生される。ＡＡＧは、多発性骨髄腫などの癌の患者の血液中で増加することがある。ＡＡＧ血漿中濃度は、生理的、病理学的および遺伝的因子に起因して変化する可能性がある。ＡＡＧ血漿中濃度の変動は、非結合薬剤の濃度に直接的影響を与え、その結果、薬剤ＰＫ及び薬力学（「ＰＤ」）を変えることになる。ＡＡＧの濃度が高い場合は、薬剤がＡＡＧに固く結合することが原因で、ＡＡＧは応答の低下及び無増悪生存期間（「ＰＦＳ」）の減少に関与する（Ｂｒｕｎｏ，Ｒｅｎｅ，ｅｔ  ａｌ．「α−１−Ａｃｉｄ  Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓ  ａｎ  Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｐｒｅｄｉｃｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ａｎｄ  ａ  Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  Ｆａｃｔｏｒ  ｏｆ  Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ  Ｃｅｌｌ  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ」．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．Ｖｏｌ．９（２００３）：ｐｐ１０７７−１０８２）。診断では、多発性骨髄腫患者のＡＡＧの濃度は、０．４〜４．１ｇ／Ｌの範囲で、２４％の患者が高濃度のＡＡＧであった（Ｆｅｌｌｉｎｉｅｍｉ  Ｔａｒｊａ−Ｔｅｒｔｔｕ，ｅｔ  ａｌ．  「Ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−６  ａｎｄ  Ａｃｕｔｅ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｓ  Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  Ｆａｃｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｍｙｅｌｏｍａ」．  Ｂｌｏｏｄ．Ｖｏｌ．８５，Ｎｏ．３（Ｆｅｂｒｕａｒｙ  １，１９９５）：ｐｐ．７６５−７７１）。また、Ｂｒｏｗｎ，Ｋａｒｉｎ  Ｄ．，ｅｔ  ａｌ．「Ａｎ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  Ａｓｓｅｓｓ  ｔｈｅ  Ｉｍｐａｃｔ  ｏｆ  α−１  Ａｃｉｄ  Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｕｎｂｏｕｎｄ  ｏｆ  ａ  Ｄｒｕｇ．「１７ｔｈ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃｓ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ａｔｌａｎｔａ，Ｇｅｏｒｇｉａ，Ｏｃｔｏｂｅｒ  １８，２０１１，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ＃２５０２２，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ４７９．ｐｄｆ、も参照されたい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第７，４４９，４８６号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２０１０／００９９６９７号明細書
【特許文献３】国際公開第２０１０／０４５６２４号
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｂｒｕｎｏ，Ｒｅｎｅ，ｅｔ  ａｌ．「α−１−Ａｃｉｄ  Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓ  ａｎ  Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｐｒｅｄｉｃｔｏｒ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ａｎｄ  ａ  Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  Ｆａｃｔｏｒ  ｏｆ  Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ  Ｃｅｌｌ  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ」．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．Ｖｏｌ．９（２００３）：ｐｐ１０７７−１０８２
【非特許文献２】Ｆｅｌｌｉｎｉｅｍｉ  Ｔａｒｊａ−Ｔｅｒｔｔｕ，ｅｔ  ａｌ．  「Ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−６  ａｎｄ  Ａｃｕｔｅ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｓ  Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  Ｆａｃｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｍｙｅｌｏｍａ」．  Ｂｌｏｏｄ．Ｖｏｌ．８５，Ｎｏ．３（Ｆｅｂｒｕａｒｙ  １，１９９５）：ｐｐ．７６５−７７１
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
意外にも、ＡＲＲＹ−５２０を投与された患者は、これらの患者がＡＲＲＹ−５２０の投与前に低［ＡＡＧ］を示す場合には応答が良好であることが明らかになった。
【０００６】
一態様では、本発明は、低［ＡＡＧ］患者の癌の治療に使用するためのＡＲＲＹ−５２０に関する。
【０００７】
別の態様では、（ａ）患者由来の生物試料の［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｂ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｃ）患者が低［ＡＡＧ］である場合、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を患者に投与することとを含む患者の癌の治療に使用するためのＡＲＲＹ−５２０が提供される。
【０００８】
別の態様では、（ａ）患者から生物試料を採取することと、（ｂ）生物試料の［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｃ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、及び（ｄ）患者が低［ＡＡＧ］である場合に、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を患者に投与することとを含む患者の癌の治療に使用するためのＡＲＲＹ−５２０が提供される。
【０００９】
別の態様では、（ａ）患者由来の生物試料をアッセイすることにより患者を低［ＡＡＧ］と特定することと、（ｂ）ＡＲＲＹ−５２０を低［ＡＡＧ］患者に投与することとを含む患者をＡＲＲＹ−５２０で治療するステップを含む、低［ＡＡＧ］と特定された癌患者の癌を治療するための方法が提供される。
【００１０】
別の態様では、（ａ）患者から生物試料を採取することと、（ｂ）患者由来の生物試料をアッセイすることにより患者を低［ＡＡＧ］と特定することと、（ｃ）ＡＲＲＹ−５２０を低［ＡＡＧ］患者に投与することとを含む患者をＡＲＲＹ−５２０で治療するステップを含む、低［ＡＡＧ］と特定された癌患者の癌を治療するための方法が提供される。
【００１１】
別の態様では、患者から生物試料を採取することと、上記試料をアッセイして［ＡＡＧ］を判定することとを含む、ＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高い患者を検出するための方法が提供される。上記方法では、患者がＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高い指標が低［ＡＡＧ］である。
【００１２】
別の態様では、患者から生物試料を採取することと、上記試料をアッセイして［ＡＡＧ］を判定することと、患者がＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高いかどうかを判定することとを含み、患者がＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高い指標が低［ＡＡＧ］である、ＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高い患者を検出するための方法が提供される。
【００１３】
別の態様では、（ａ）患者由来の生物試料をアッセイすることにより、患者を低［ＡＡＧ］と特定することと、（ｂ）応答の可能性が高められたとして分類された患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む、癌患者の応答の可能性を向上させるための方法が提供される。
【００１４】
別の態様では、（ａ）患者から生物試料を採取することと、（ｂ）上記試料をアッセイに供して［ＡＡＧ］を測定することと、（ｃ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｄ）患者が低［ＡＡＧ］である場合、患者を応答の可能性が高いとして分類することと、（ｅ）応答の可能性が高いとして分類された患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む、癌患者の応答の可能性を向上させるための方法が提供される。
【００１５】
別の態様では、ＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む癌を治療するための方法に治療応答を示す可能性の高い患者を予測するための方法が提供され、上記方法は、（ａ）患者由来生物試料中の［ＡＡＧ］を測定することと、（ｂ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｃ）上記試料が低［ＡＡＧ］である場合に、癌を治療するための方法に治療応答する可能性が向上したと患者を分類することと、（ｄ）応答の可能性が向上したと分類された患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む。
【００１６】
別の態様では、ＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む癌を治療するための方法に治療応答を示す可能性の高い患者を予測するための方法が提供され、上記方法は、（ａ）患者から生物試料を採取することと、（ｂ）患者の上記試料中の［ＡＡＧ］を測定することと、（ｃ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｄ）上記試料が低［ＡＡＧ］である場合に、癌を治療するための方法に対し治療応答を示す可能性が向上したと患者を分類することと、（ｅ）応答する可能性が向上したと分類された患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む。
【００１７】
別の態様では、（ａ）患者由来の生物試料の［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｂ）生物試料の［ＡＡＧ］が低い場合に、ＡＲＲＹ−５２０治療に対し感受性が高い可能性があるとして患者を特定することとを含む、癌患者のＡＲＲＹ−５２０治療に対する感受性を示す可能性が高いことを判定するための方法が提供される。
【００１８】
別の態様では、（ａ）患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）生物試料中の［ＡＡＧ］を測定することと、（ｃ）生物試料の［ＡＡＧ］が低い場合に、ＡＲＲＹ−５２０治療に対して感受性を示す可能性が高いと患者を特定することとを含む、癌患者のＡＲＲＹ−５２０治療に対する感受性を示す可能性が高いことを判定するための方法が提供される。
【００１９】
別の態様では、１または複数の単位用量のＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む、ＡＲＲＹ−５２０を使用して［ＡＡＧ］レベルが約１．１ｇ／Ｌ未満と診断された患者を治療するための方法が提供される。
【００２０】
別の態様では、ＡＲＲＹ−５２０を使用して［ＡＡＧ］レベルが約１．１ｇ／Ｌ未満と診断された患者を治療するための方法が提供され、上記方法は、予測インビトロＩＣ５０以上の非結合ＡＲＲＹ−５２０のレベルを得るのに有効な量の１または複数の単位用量のＡＲＲＹ−５２０を前記患者に投与することを含む。
【００２１】
別の態様では、患者に有効量のＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む低［ＡＡＧ］患者の癌を治療するための方法が提供される。
【００２２】
別の態様では、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を哺乳動物に投与することを含む低［ＡＡＧ］の哺乳動物の癌を治療するための方法が提供される。
【００２３】
別の態様では、ＫＳＰにより調節された疾患又は障害を治療するための方法が提供され、上記方法は、このような治療を必要としている低［ＡＡＧ］の哺乳動物に有効量のＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む。
【００２４】
別の態様では、低［ＡＡＧ］患者の癌の治療用薬物の製造におけるＡＲＲＹ−５２０の使用が提供される。
【００２５】
別の態様では、ＡＲＲＹ−５２０を含む低［ＡＡＧ］の癌患者を治療するための医薬組成物が提供される。
【００２６】
別の態様では、ＡＲＲＹ−５２０及び薬学的に許容可能なキャリアー又は賦形剤を含む低［ＡＡＧ］の癌患者を治療するための医薬組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】細胞アッセイを示す図である。
【図２】母集団ＰＫ（「ｐｏｐＰＫ」）モデルシミュレーションを示す図である。
【図３】母集団ＰＫ（「ｐｏｐＰＫ」）モデルシミュレーションを示す図である。
【図４】ヒト臨床試験の分析を示す図である。
【図５】ヒト臨床試験の分析を示す図である。
【図６】アッセイの変動性を示す図である。
【図７】２種のアッセイを比較した線形回帰分析を示す図である。
【図８】２種のアッセイを比較した線形回帰分析を示す図である。
【図９】２種のアッセイを比較した線形回帰分析を示す図である。
【図１０】２種のアッセイを比較した線形回帰分析を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
以降で、特定の実施形態に対し詳細に説明を行う。実施形態を列挙して説明するが、本発明をこれらの実施形態に限定する意図がないことは理解されたい。むしろ逆に、本発明では、全ての代替物、変形物、及び均等物が含まれ、これらが特許請求の範囲で規定される本発明の範囲内に包含されることが意図されている。当業者なら本明細書記載のものに類似又は均等な多くの本発明の実施に使用可能な方法及び物質に気付くであろう。本発明は、記載された方法及び物質に限定するものでは全くない。本明細書に組み込まれた１種または複数の文献及び類似の資料が、限定されるものではないが、用語の定義、用語の使用法、記載技術などで本願と異なるか、又は矛盾する場合は、本願が優先される。
【００２９】
定義
本発明の方法は、様々な種類の癌、望ましくない血管新生に関連するか、又はこれを特徴とする疾患および障害の治療、予防、ならびに／または管理の方法を包有する。本明細書では、特段の記載がない限り、用語の「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「治療する（ｔｒｅａｔ）」は、特定の疾患又は障害の発症後に、本発明の化合物又は他の追加の活性薬剤の投与を意味する。用語の「治療する（ｔｒｅａｔ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」も同様に、治療的又は対症療法的処置を意味する。有益な又は所望の臨床結果には、限定するものではないが、検出の可否にかかわらず、症状の軽減、疾患の程度の低下、安定した（すなわち、悪化しない）疾患状態、疾患進行の遅延化又は緩徐化、疾患状態の改善又は軽減、及び寛解（部分的又は完全）が含まれる。また、「治療」は、治療を受けない場合に予測されるよりも生存を延ばすことを意味する場合もある。治療を必要としている人には、既に状態又は障害がある人、ならびに状態又は障害になる傾向がある人が含まれる。本明細書では、特別の定めのない限り、用語の「予防（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」は、発症の前に、特に癌及び望ましくない血管新生に関連するか、又はこれを特徴とする他の疾患及び障害になる恐れのある患者に投与することを意味する。用語の「予防（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」には、特定の疾患又は障害の症状の抑制が含まれる。癌及び望ましくない血管新生に関連するか、又はこれを特徴とする疾患や障害の家族歴を有する患者は、予防計画の優先候補である。本明細書では、特に指示がない限り、用語の「管理（ｍａｎａｇｉｎｇ）」は、特定の疾患又は障害を患う患者における再発を防止すること、および／またはこの疾患又は障害を患う患者の寛解を持続させる時間を延ばすことを包含する。
【００３０】
本明細書では用語の「約（ａｂｏｕｔ）」は、概略（ｒｏｕｇｈｌｙ）、又は前後（ａｒｏｕｎｄ）の範疇の、凡そ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）の意味で使用される。用語の「約」が数値範囲と共に使用される場合、記載の数値の大小方向に境界を延長することによりその範囲を調節する。一般に、本明細書では、用語「約」は、表示値を２０％変動させて数値を大小方向に調節するのに使用される。
【００３１】
用語の「癌」及び「癌性の」は、通常、異常な又は未制御の細胞増殖を特徴とする哺乳動物の生理学的条件を意味するか又は説明する。「腫瘍」は、１つまたは複数の癌細胞を含む。癌の例として、限定するものではないが、細胞腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病又はリンパ性腫瘍が挙げられる。さらにこのような癌の具体例として、扁平上皮癌（例えば、上皮性扁平上皮癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌（「ＮＳＣＬＣ」）、肺腺癌及び肺扁平上皮癌を含む肺癌、腹膜癌、肝細胞癌、消化管癌を含む胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ  ｏｒ  ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、膵臓癌、神経膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、癌肉腫、結腸直腸癌、子宮内膜又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌又は腎癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、黒色腫を含む皮膚癌、ならびに頭頸部癌が挙げられる。
【００３２】
「薬学的に許容可能な」との文言は、物質又は組成物が、製剤を含む他の成分、および／または上記製剤で治療される哺乳動物と化学的に、および／または毒物学的に適合可能であることを示す。
【００３３】
本明細書では、「薬学的に許容可能な塩」との文言は、本明細書記載の化合物の薬学的に許容可能な有機又は無機塩類を意味する。
【００３４】
「治療有効量」又は「有効量」との文言は、このような治療を必要としている哺乳動物に投与する場合、（ｉ）特定の疾患、状態、又は障害を治療するか又は防ぐ、（ｉｉ）特定の疾患、状態、もしくは障害の１種または複数の症状を弱める、回復させる、もしくは取り除く、又は（ｉｉｉ）本明細書記載の特定の疾患、状態、もしくは障害の１種または複数の症状の発症を防ぐ、もしくは遅らせるために十分な本明細書記載の化合物の量を意味する。このような量に対応する化合物の量は、特定の化合物、疾患状態及びその重症度、治療を必要としている哺乳動物の固有の特性（例えば、体重）などの因子に応じて変動するものであるが、そのような場合でも、当業者が行う通常の方法で決定できる。
【００３５】
用語の「哺乳動物」は、本明細書記載の疾患に罹患しているか、又は罹患する恐れのある温血動物を意味し、限定するものではないが、モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ハムスター、およびヒトなどの霊長類を含む。
【００３６】
低［ＡＡＧ］患者
ＡＲＲＹ−５２０は、インビトロアッセイでＡＡＧに対し低マイクロモル濃度の親和性を示すが、アルブミンなどの他の通常の血清タンパク質に対しては親和性を示さない（実施例１）。低［ＡＡＧ］患者のＡＲＲＹ−５２０を使った治療が有益であることが明らかになった。
【００３７】
用語の「［ＡＡＧ］」は、ＡＲＲＹ−５２０投与前に患者の生物試料で測定したＡＡＧの濃度を意味する。用語の「低［ＡＡＧ］」は、約１．１ｇ／Ｌ未満の［ＡＡＧ］を意味する。実施例７に示すように、１．１ｇ／Ｌのレベルは、Ｒ＆Ｄ  ＳｙｓｔｅｍｓのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）アッセイを使って血漿中で測定された。実施例８に示すように、このアッセイでは、少なくとも８．６％の変動が存在する。特定の実施形態では、用語の「約１．１ｇ／Ｌ」は、１．１ｇ／Ｌ±２０％を意味する。特定の実施形態では、用語の「約１．１ｇ／Ｌ」は、１．１ｇ／Ｌ±１０％を意味する。特定の実施形態では、用語の「約１．１ｇ／Ｌ」は、１．１ｇ／Ｌ±８．６％を意味する。別の実施形態では、低［ＡＡＧ］は、Ｒ＆Ｄ  ＳｙｓｔｅｍｓのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）アッセイで判定される、血漿中の約１．１ｇ／Ｌ未満の［ＡＡＧ］を意味する（実施例７に記載）。
【００３８】
また、種々のアッセイを使って［ＡＡＧ］を測定し得ることも理解されよう。他のアッセイは、そのアッセイの相違に応じて、わずかに異なる結果を生ずる場合がある。他のアッセイを使用する場合、得られたデータを実施例７で使用されるＲ＆Ｄ  ＳｙｓｔｅｍｓのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）アッセイの１．１ｇ／Ｌ測定値に補正すべきである。２種のアッセイの相関を求めるための科学的・統計的方法は、当技術分野で既知である。相関（相互比較）の例は、実施例１０に示されている。他のアッセイには、特に、Ｒａｎｄｏｘ  Ｉｍｏｌａ免疫比濁アッセイ、Ｒａｎｄｏｘ  Ｄａｙｔｏｎａ免疫比濁アッセイ、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ａｄｖｉａ免疫比濁アッセイ、及びＳｉｅｍｅｎｓ  ＢＮＩＩ免疫比濁アッセイ、を挙げてもよい。
【００３９】
特定の実施形態では、［ＡＡＧ］の測定に用いられる生物試料は、血液である。患者からの採血（生物試料の採取）は、当業者にはよく知られている。さらなる実施形態では、［ＡＡＧ］の測定に用いられる生物試料は、血漿である。別のさらなる実施形態では、［ＡＡＧ］の測定に用いられる生物試料は、血清である。Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ａｄｖｉａ、Ｓｉｅｍｅｎｓ  ＢＮＩＩおよびＲａｎｄｏｘ  Ｉｍｏｌａアッセイ（全アッセイは、実施例中で特に別の方法を指定しない限り、メーカーのプロトコルに従って行った）では、内部試験で、血清と血漿の［ＡＡＧ］の間で良相関（＞０．９）があると思われた。
【００４０】
ＡＲＲＹ−５２０は、通常、静脈内に投与される。ＡＲＲＹ−５２０は、一般に、ＩＶ使用向けの１型透明ガラスバイアルに収納された凍結乾燥粉末として提供される。粉末は無菌の水を使って注射用に再構成して溶液が形成され、ＩＶ投与前に生理食塩水で希釈される。
【００４１】
主要なＡＲＲＹ−５２０の用量制限毒性（「ＤＬＴ」）は、好中球減少症であることが明らかになった。従って、予防として顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ−ＣＳＦ」）を投与してもよい。
【００４２】
ＡＲＲＹ−５２０は、通常、１４日サイクルの１日目及び２日目（Ｑ２Ｗの１日目と２日目）に投与される。ＡＲＲＹ−５２０は、通常、このスケジュールに従って、Ｇ−ＣＳＦなしで２．５ｍｇ／ｍ２／サイクル（１．２５ｍｇ／ｍ２／日）を、及び予防用のＧ−ＣＳＦと共に３．０ｍｇ／ｍ２／サイクル（１．５ｍｇ／ｍ２／日）を投与される。しかし、ＡＲＲＹ−５２０を１４日サイクルの１日目（Ｑ２Ｗの１日目）、又は２８日サイクルの１日目と１５日目（Ｑ４Ｗの１日目と１５日目）にも、投与してもよい。
【００４３】
ＡＲＲＹ−５２０の低［ＡＡＧ］患者への投与により、その患者のＡＲＲＹ−５２０に対する応答の可能性が高まることが明らかになった。
【００４４】
従って、一実施形態は、低［ＡＡＧ］患者の癌の治療に使用するためのＡＲＲＹ−５２０を提供する。
【００４５】
特定の実施形態は、（ａ）患者由来の生物試料の［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｂ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｃ）患者が低［ＡＡＧ］である場合に、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を患者に投与することとを含む、患者の癌の治療に使用するためのＡＲＲＹ−５２０を提供する。
【００４６】
別の実施形態は、（ａ）患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）生物試料の［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｃ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｄ）患者が低［ＡＡＧ］である場合に、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を患者に投与することとを含む、患者の癌の治療に使用するためのＡＲＲＹ−５２０を提供する。
【００４７】
特定の実施形態は、患者をＡＲＲＹ−５２０で治療するステップを含む低［ＡＡＧ］と特定された癌患者の癌を治療するための方法を提供し、上記方法は、（ａ）患者由来の生物試料をアッセイすることにより、患者を低［ＡＡＧ］と特定することと、（ｂ）ＡＲＲＹ−５２０を低［ＡＡＧ］患者に投与することとを含む。
【００４８】
別の実施形態は、患者をＡＲＲＹ−５２０で治療するステップを含む低［ＡＡＧ］と特定された癌患者の癌を治療するための方法を提供し、上記方法は、（ａ）患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）患者由来の生物試料をアッセイすることにより、患者を低［ＡＡＧ］と特定することと、（ｃ）ＡＲＲＹ−５２０を低［ＡＡＧ］患者に投与することとを含む。
【００４９】
特定の実施形態は、患者由来の生物試料を採取することと、上記試料をアッセイして［ＡＡＧ］を判定することとを含むＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性の高い患者を検出するための方法を提供する。この場合、低［ＡＡＧ］であることが、ＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高い患者の指標となる。
【００５０】
別の実施形態は、患者由来の生物試料を採取することと、上記試料をアッセイして［ＡＡＧ］を判定することと、患者がＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高いかどうかを判定することとを含むＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性の高い患者を検出するための方法を提供する。この場合、低［ＡＡＧ］であることが、ＡＲＲＹ−５２０に応答する可能性が高い患者の指標となる。
【００５１】
特定の実施形態は、（ａ）患者由来の生物試料をアッセイすることにより、患者を低［ＡＡＧ］と特定することと、（ｂ）応答する可能性が高いとして分類された患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む、癌患者の応答の可能性を向上させるための方法を提供する。
【００５２】
別の実施形態は、（ａ）患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）上記試料をアッセイに供して［ＡＡＧ］を測定することと、（ｃ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｄ）患者が低［ＡＡＧ］の場合に、応答する可能性が高いとして患者を分類することと、（ｅ）応答する可能性が高いとして分類された患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む、癌患者の応答の可能性を向上させるための方法を提供する。
【００５３】
特定の実施形態は、ＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む癌を治療するための方法に対し患者が治療応答を示す可能性が高いことを予測するための方法が提供され、上記方法は、（ａ）患者の生物試料の［ＡＡＧ］を測定することと、（ｂ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｃ）上記試料が低［ＡＡＧ］である場合に、癌を治療するための方法に対し治療応答を示す可能性が高いとして患者を分類することと、（ｄ）応答の可能性が高いとして分類された患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む。
【００５４】
別の実施形態は、ＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む癌を治療するための方法に対し患者が治療応答を示す可能性が高いことを予測するための方法が提供され、上記方法は、（ａ）患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）患者の試料中の［ＡＡＧ］を測定することと、（ｃ）上記試料が低［ＡＡＧ］であるかどうかを判定することと、（ｄ）上記試料が低［ＡＡＧ］である場合に、癌を治療するための方法に対し治療応答を示す可能性が高いとして患者を分類することと、（ｅ）応答の可能性が高いとして分類された患者にＡＲＲＹ−５２０を投与することとを含む。
【００５５】
特定の実施形態は、（ａ）患者由来の生物試料の［ＡＡＧ］をアッセイすることと、（ｂ）生物試料が低［ＡＡＧ］の場合に、患者がＡＲＲＹ−５２０治療に対して感受性を示す可能性が高いと特定することとを含む、癌患者がＡＲＲＹ−５２０治療に対し感受性を有する可能性が高いことを判定するための方法を提供する。
【００５６】
特定の実施形態は、（ａ）患者由来の生物試料を採取することと、（ｂ）生物試料中の［ＡＡＧ］を測定することと、（ｃ）生物試料が低［ＡＡＧ］の場合に、ＡＲＲＹ−５２０治療に対して感受性を示す可能性が高いと患者を特定することとを含む、癌患者がＡＲＲＹ−５２０治療に対し感受性を有する可能性が高いことを判定するための方法を提供する。
【００５７】
特定の実施形態は、１または複数の単位用量のＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む、ＡＲＲＹ−５２０を使って、［ＡＡＧ］レベルが約１．１ｇ／Ｌ未満と診断された患者を治療するための方法を提供する。
【００５８】
特定の実施形態は、予測インビトロＩＣ５０以上の非結合ＡＲＲＹ−５２０レベルを得るために有効な量の１または複数の単位用量のＡＲＲＹ−５２０を前記患者に投与することを含む、ＡＲＲＹ−５２０を使って、［ＡＡＧ］レベルが約１．１ｇ／Ｌ未満と診断された患者を治療するための方法を提供する。さらなる実施形態では、予測されたインビトロＩＣ５０は、約０．２ｎｇ／ｍＬである。さらなる実施形態では、予測されたインビトロＩＣ５０は、０．２ｎｇ／ｍＬである。
【００５９】
特定の実施形態は、有効量のＡＲＲＹ−５２０を患者に投与することを含む低［ＡＡＧ］患者の癌を治療するための方法を提供する。
【００６０】
特定の実施形態は、治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を哺乳動物に投与することを含む低［ＡＡＧ］の哺乳動物の癌を治療するための方法を提供する。
【００６１】
特定の実施形態は、ＫＳＰにより調節された疾患又は障害を治療するための方法を提供し、上記方法は、このような治療を必要としている哺乳動物に有効量のＡＲＲＹ−５２０を投与することを含み、哺乳動物は低［ＡＡＧ］である。
【００６２】
別の実施形態は、低ＡＡＧの患者の癌の治療用の薬物の製造におけるＡＲＲＹ−５２０の使用を提供する。
【００６３】
一実施形態は、ＡＲＲＹ−５２０を含む低［ＡＡＧ］の癌患者の治療用の医薬組成物を含む。さらなる実施形態は、薬学的に許容可能なキャリアー又は賦形剤と併せてＡＲＲＹ−５２０を含む低［ＡＡＧ］の癌患者の治療用の医薬組成物を提供する。特定の実施形態では、薬学的に許容可能な賦形剤は、マンニトールである。
【００６４】
また、ＡＲＲＹ−５２０を投与することによる疾患又は状態を治療するための方法が提供される。一実施形態では、低［ＡＡＧ］のヒト患者が、検出可能な程度にＫＳＰ活性を阻害する量のＡＲＲＹ−５２０、及び薬学的に許容可能なキャリアー、アジュバント、又はビークルで治療される。
【００６５】
別の実施形態では、このような治療を必要としている哺乳動物の癌の治療又は予防方法が提供され、上記方法は、前記哺乳動物に治療有効量のＡＲＲＹ−５２０を投与することを含む。
【００６６】
特定の実施形態では、癌は、乳癌、卵巣癌、子宮頸部癌、前立腺癌、精巣癌、尿生殖路癌、食道癌、喉頭癌、神経膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、胃癌、皮膚癌、角化棘細胞腫、肺癌、類表皮癌、大細胞癌、ＮＳＣＬＣ、小細胞癌、肺腺癌、骨癌、結腸癌、腺腫、膵臓癌、腺癌、甲状腺癌、濾胞状癌、未分化癌、乳頭癌、セミノーマ、黒色腫、肉腫、膀胱癌、肝臓及び胆汁道癌、腎臓癌、骨髄疾患、リンパ節症、ヘアリー細胞癌、頬側口腔及び咽頭（経口）癌、唇癌、舌癌、口癌、咽頭癌、小腸癌、結腸−直腸癌、大腸癌、直腸癌、脳及び中枢神経系癌、ホジキン病ならびに白血病から選択される。
【００６７】
特定の実施形態では、癌は血液癌である。特定の実施形態では、癌は、リンパ腫、白血病及び多発性骨髄腫から選択される。特定の実施形態では、癌は、白血病及び多発性骨髄腫から選択される。特定の実施形態では、癌は、急性骨髄性白血病及び多発性骨髄腫から選択される。特定の実施形態では、癌は多発性骨髄腫である。特定の実施形態では、癌は急性骨髄性白血病である。
【００６８】
特定の実施形態では、癌は、固形腫瘍である。特定の実施形態では、癌は、皮膚癌、乳癌、脳癌、子宮頚癌、及び精巣癌から選択される。特定の実施形態では、癌は、乳癌、結腸直腸癌、非小細胞肺癌、膵臓癌、膀胱癌、唾液腺癌（腺様嚢胞癌）、食道癌、中皮腫癌、及び混合小細胞肺癌／非小細胞肺癌から選択される。
【００６９】
併用療法
本明細書記載の化合物およびその立体異性体及び薬学的に許容可能な塩は、単独で、又は他の治療用治療薬と組み合わせて使用できる。本明細書記載の化合物は、１種または複数の追加の薬剤、例えば、異なる標的タンパク質に対する作用を介して機能する抗過剰増殖（又は抗癌）薬剤と組み合わせて使用できる。医薬品併用処方又は投与計画の第２の化合物は、本明細書記載の化合物に対し相補的な活性を有し、相互に悪影響しないことが好ましい。このような分子は、意図した目的に効果的な量の組み合わせで適宜存在する。化合物は、単一の医薬組成物で一緒に投与しても、又は別々に投与してもよく、別々に投与する場合は、同時に、又は任意の順に逐次的に投与できる。このような逐次投与は、短い時間間隔で行っても、又は長くあけた時間間隔で行ってもよい。
【００７０】
特定の実施形態では、Ｇ−ＣＳＦがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される。
【００７１】
特定の実施形態では、デキサメタゾンがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される。特定の実施形態では、Ｇ−ＣＳＦがＡＲＲＹ−５２０及びデキサメタゾンと組み合わせて投与される。
【００７２】
特定の実施形態では、ボルテゾミブがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される。特定の実施形態では、Ｇ−ＣＳＦがＡＲＲＹ−５２０及びボルテゾミブと組み合わせて投与される。
【００７３】
特定の実施形態では、カルフィルゾミブがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される。特定の実施形態では、Ｇ−ＣＳＦがＡＲＲＹ−５２０及びカルフィルゾミブと組み合わせて投与される。
【００７４】
特定の実施形態では、ポマリドミドがＡＲＲＹ−５２０と組み合わせて投与される。特定の実施形態では、Ｇ−ＣＳＦがＡＲＲＹ−５２０及びポマリドミドと組み合わせて投与される。
【実施例】
【００７５】
実施例
例示の目的のために、次の実施例が示される。しかし、これらの実施例は、本発明を限定するものではなく、本発明を実施する方法を提案することのみを意図していることを理解されたい。
【００７６】
下記の実施例で、特に指示がない限り、全ての温度は、℃で示される。試薬は、市販品供給源から購入し、特段の記載のない限り、さらに精製せずに使用した。
【００７７】
実施例１
ＡＲＲＹ−５２０  ＴＲＡＮＳＩＬ（登録商標）結合法
ＴＲＡＮＳＩＬ（登録商標）結合法（ｗｗｗ．ａｄｍｅｃｅｌｌ．ｃｏｍ）−アッセイ緩衝液：燐酸塩緩衝食塩水（「ＰＢＳ」）、ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ１００１０）およびジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）。プレート：ＡＤＭＥｃｅｌｌ（Ａｌａｍｅｄａ，ＣＡ）製。ＡＧＰ−フルプレート：ＴＢＰ−０２１１−００９６；ＡＧＰ−ストリッププレート：ＴＢＰ−０２１１−１１９６；ＨＳＡ−フルプレート：ＴＢＰ−０２１０−００９６；ＨＳＡ−ストリッププレート：ＴＢＰ−０２１０−１１９６。停止液：内部標準（０．４μＭ最終濃度）添加１００％アセトニトリル。
【００７８】
薬剤希釈：最終２μＭ薬剤濃度（１％ＤＭＳＯ）を作製するための薬剤試料の希釈（タンパク質試験当たり３６０μＬの最終希釈薬剤を使用、すなわち、ＡＡＧとＨＳＡの両方を行うために７２０μＬを使用）。薬剤を１０ｍＭのＤＭＳＯにおいてストック溶液にした。１０ｍＭのストックを２００μＭ（０．２ｍＭ）ストック溶液に希釈した（１０ｍＭストック溶液４μＬを１９６μＬのＤＭＳＯ中に加えた）。２００μＭストックを２０μＭストック溶液に希釈した（２００μＭのＤＭＳＯストック溶液１００μＬを９００μＬのＰＢＳ緩衝液中に加えた、ｐＨ７．４）。
【００７９】
アッセイキットを室温で（約３時間）、又は４℃の冷蔵庫中で一晩解凍した。化合物の添加の前に、ＣＯ２（５％）下で３０分間、プレートをインキュベータ中に置いた。前希釈化合物液（１０倍アッセイ濃度）を調製した（上記の薬剤希釈ステップを参照）。プレート中に化合物を注入する前に、薬剤希釈液を３７℃の水浴で温めた。注意：前希釈液を沈殿が無いか注意深く確認し、十分な緩衝液の溶解性と試験品の安定性とを確保すること。試験品溶液（４５μＬ）を、すぐに使えるキットのチューブ／ウェルに加え、２分間インキュベートした。ビーズを再懸濁することにより１０回混合した。バイアルの全容積の約半分を再懸濁した（全容積：４５０μＬ）。オービタルシェーカーは使用しなかった。バイアルを、旋回式遠心分離機を使用して７５０ｇで１０分間遠心した。１００μＬを注意深く９６ウェルプレートに移した。アセトニトリル（５０μＬ）を内部標準としてのラベタロールと共に加えた（０．４μＭ最終濃度）。プレートを分析用に密封した。上清の濃度をＬＣ／ＭＳ（ＡＰＩ４０００）を使って定量した。前出のＢｒｏｗｎ，Ｋａｒｉｎ  Ｄ．の文献も参照されたい。結果を表１に示す。ＡＣＤ／ｐＫａ  ＤＢソフトウェアを使用してｐＫａ値を推定した。以下に計算式を示す。
【数１】
2015524845.tif 000003
【表１】
2015524845.tif 000004
【００８０】
実施例２
細胞（ＮＣＩ  Ｈ９２９  ＭＭ）３日生存率アッセイ
Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅ増殖アッセイ：ＭＭ株に対するＡＲＲＹ−５２０細胞傷害性活性に与えるＡＡＧの効果。
【００８１】
試薬：ＲＰＭＩ−８２２６、Ｈ９２９、ＲＰＭＩ１６４０培地、１０％ＦＢＳ、Ｇｌｕｔａｍａｘ。
【００８２】
キット：Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅ細胞生存率アッセイ、プロメガコーポレーション．（ウィスコンシン州マディソン）カタログ番号第Ｇ８０８１。
【００８３】
化合物：
ＡＲＲＹ−５２０のＤＭＳＯ中１０ｍＭストック。
２５０ｍｇのヒト血漿由来ＡＡＧ：シグマ−アルドリッチコーポレーション．リミティッド・ライアビリティ・カンパニー（ミズーリ州セントルイス）から購入：カタログ番号第Ｇ９８８５
６．２ｍＬのＰＢＳを添加→４０ｍｇ／ｍＬストック
４℃で貯蔵。
【００８４】
手順：
ＡＲＲＹ−５２０希釈液を９６ウェルのｖ底プレート中に用意した：
１０μＬのＤＭＳＯをウェルＢ２〜Ｂ１１に置いた。
１０μＬの１００μＭ  ＡＲＲＹ−５２０をウェルＢ２に加え、ピペット操作で上下して混合した。
新しいピペットチップを使って、Ｂ２の１０μＬをウェルＢ３に移し、ピペット操作で上下して混合した。
Ｂ１０まで手順を繰り返し、Ｂ１０から１０μＬを廃棄した。
ウェルＢ１１はＤＭＳＯ対照ウェルである。
上記の結果、ウェルＢ２〜Ｂ１０は、１０μＬのＡＲＲＹ−５２０の１：２倍系列希釈液（５０μＭ〜２００ｎＭ）を含む。
１９０μＬの増殖培地を各ウェルに添加した（１：２０希釈、５％ＤＭＳＯ  ｆ．ｃ．）。
プレート上に蓋を置き、脇に置いた。
ＡＡＧ溶液を調製した：
３０ｍｇ／ｍＬ：４０ｍｇ／ｍＬの１５０μＬ＋５０μＬ  ＰＢＳ
２０ｍｇ／ｍＬ：４０ｍｇ／ｍＬの１００μＬ＋１００μＬ  ＰＢＳ
１０ｍｇ／ｍＬ：４０ｍｇ／ｍＬの１００μＬ＋３００μＬ  ＰＢＳ
５ｍｇ／ｍＬ：１０ｍｇ／ｍＬの１００μＬ＋１００μＬ  ＰＢＳ
ＭＭ細胞数を計数した。
１．２×１０６細胞を８ｍＬの増殖培地中に置き、静かに攪拌して細胞懸濁液（１４３細胞／μＬ）を生成した。
下記に概略を示すように、１０μＬ（１／１０容量）の化合物希釈液（上記）を２個の９６ウェルの黒側壁で透明底の組織培養プレート（シグマ−アルドリッチ  カタログ番号第ＣＬＳ３９０４）に加えた。
１０μＬが各プレートの底にあるのを確認した。
１０μＬのＡＲＲＹ−５２０希釈液をｖ底プレートのウェルＢ２〜Ｂ１１から２個の同じ黒側壁の９６ウェルプレートの横列Ｂ〜Ｇに置いた。
８０μＬの１５０細胞／μＬ細胞懸濁液（１２，０００細胞／ウェル全体）を横列Ｂ〜Ｇの縦列２〜１１に置いた：プレート１−ＲＰＭＩ８２２６、及びプレート２−ＮＣＩＨ９２９。
ＡＡＧ添加：
１０μＬのＰＢＳを各プレートの横列Ｂに加えた
１０μＬの４０ｍｇ／ｍＬ  ＡＡＧ溶液を各プレートの横列Ｃに加えた（４ｍｇ／ｍＬ  ｆ．ｃ．）。
１０μＬの３０ｍｇ／ｍＬ  ＡＡＧ溶液を各プレートの横列Ｄに加えた（３ｍｇ／ｍＬ  ｆ．ｃ．）。
１０μＬの２０ｍｇ／ｍＬ  ＡＡＧ溶液を各プレートの横列Ｅに加えた（２ｍｇ／ｍＬ  ｆ．ｃ．）。
１０μＬの１０ｍｇ／ｍＬ  ＡＡＧ溶液を各プレートの横列Ｆに加えた（１ｍｇ／ｍＬ  ｆ．ｃ．）。
１０μＬの５ｍｇ／ｍＬ  ＡＡＧ溶液を各プレートの横列Ｇに加えた（０．５ｍｇ／ｍＬ  ｆ．ｃ．）。
１００μＬの培地をプレートの残りの外側ウェルに加えた。
細胞に最終容量の１００μＬの化合物を播種後、プレートを３７℃のインキュベータ（５％又は０％ＣＯ２）中に置き、２４、４８及び７２時間後にアッセイした：
２０μＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅ試薬を各ウェルに加え、プレートシェーカー上で１０秒間手短に混合し、インキュベータに戻して２〜４時間配置した。
蛍光を、Ｇｅｍｉｎｉ（蛍光プレートリーダー、Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ、モレキュラーデバイス）を使用して、Ｅｘ／Ｅｍ：５６０／５９０ｎｍ（カットオフフィルター：５９０ｎｍ）で読み取った。
計算蛍光シグナル−バックグラウンド（ＲＦＵ）をＥｘｃｅｌに出力し、４パラメータフィット方程式：Ｆｉｔ＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／ｘ）＾Ｄ））））でＸＬＦｉｔ４を使用して用量反応を解析した。
【００８５】
結果：ＡＡＧレベルの増加により、両細胞株で、ＡＲＲＹ−５２０に対する細胞の感受性が明らかに低下する。ＡＲＲＹ−５２０に対する細胞の感受性は、アッセイ中の［ＡＡＧ］の増加に伴い、３０倍超減少する。この結果は、［ＡＡＧ］の増加に伴う非結合ＡＲＲＹ−５２０の減少と一致する。ＮＣＩ  Ｈ９２９の結果に関しては図１を参照されたい。
【００８６】
実施例３
進行癌の患者に対するＡＲＲＹ−５２０の試験
ＡＲＲＹ−５２０の第１相試験。ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ００４６２３５８；及びＧｏｎｃａｌｖｅｓ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．，「Ａ  Ｐｈａｓｅ  １  Ｓａｆｅｔｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ＡＲＲＹ−５２０  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ」，２０１０  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ａｂｓｔｒａｃｔ＃２５７０，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ３８７．ｐｄｆ、を参照されたい。これらの内容は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【００８７】
実施例４
進行性骨髄性白血病の患者に対するＡＲＲＹ−５２０の試験
単一薬剤としてのＡＲＲＹ−５２０の第２相試験。ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ００６３７０５２；Ｇａｒｃｉａ−Ｍａｎｅｒｏ，Ｇｕｉｌｌｅｒｍｏ，ｅｔ  ａｌ．，「Ａ  Ｐｈａｓｅ  １  Ｄｏｓｅ−Ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｏｖｅｌ  ＫＳＰ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＡＲＲＹ−５２０  ｉｎ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｌｅｕｋｅｍｉａｓ」，２００９  ５１ｓｔ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｅｘｐｏｓｉｔｉｏｎ，Ａｂｓｔｒａｃｔ＃２２７９９，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ３６８．ｐｄｆ；及び、Ｅｓｔｒｏｖ，Ｚ．，ｅｔ  ａｌ．，「Ａ  Ｐｈａｓｅ  １  Ｄｏｓｅ−Ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｏｖｅｌ  ＫＳＰ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＡＲＲＹ−５２０  ｉｎ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｌｅｕｋｅｍｉａｓ」，  ２００９  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ３４７．ｐｄｆ、を参照されたい。これらの内容は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【００８８】
実施例５
再発性又は難治性多発性骨髄腫の患者に対するＡＲＲＹ−５２０の試験
ＡＲＲＹ−５２０及びデキサメタゾンの第１／２相試験。ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ００８２１２４９；Ｓｈａｈ，Ｊ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，「Ａ  Ｐｈａｓｅ  １／２  Ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＫＳＰ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＡＲＲＹ−５２０  ｉｎ  Ｒｅｌａｐｓｅｄ／Ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｍｙｅｌｏｍａ」，２０１０  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｕｍｂｅｒ  １９５９，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ４２８．ｐｄｆ；Ｓｈａｈ，Ｊ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，「ＡＲＲＹ−５２０  Ｓｈｏｗｓ  Ｄｕｒａｂｌｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｒｅｌａｐｓｅｄ／Ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｍｙｅｌｏｍａ  ｉｎ  ａ  Ｐｈａｓｅ  １  Ｄｏｓｅ−Ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ  Ｓｔｕｄｙ」，２０１１  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ４９３．ｐｄｆ；Ｌｏｎｉａｌ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，「Ｔｈｅ  Ｎｏｖｅｌ  ＫＳＰ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＡＲＲＹ−５２０  Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｓ  Ｓｉｎｇｌｅ−Ａｇｅｎｔ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  Ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  Ｍｙｅｌｏｍａ：Ｒｅｓｕｌｔｓ  Ｆｒｏｍ  ａ  Ｐｈａｓｅ  ２  Ｔｒｉａｌ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｒｅｌａｐｓｅｄ／Ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｍｙｅｌｏｍａ」，２０１１  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ａｂｓｔｒａｃｔ＃２９３５，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ５６３．ｐｄｆ；Ｓｈａｈ，Ｊ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，「Ｔｈｅ  Ｎｏｖｅｌ  ＫＳＰ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＡＲＲＹ−５２０  Ｉｓ  Ａｃｔｉｖｅ  Ｂｏｔｈ  ｗｉｔｈ  ａｎｄ  ｗｉｔｈｏｕｔ  Ｌｏｗ−Ｄｏｓｅ  Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｍｙｅｌｏｍａ  Ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  ｔｏ  Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ  ａｎｄ  Ｌｅｎａｌｉｄｏｍｉｄｅ：Ｒｅｓｕｌｔｓ  Ｆｒｏｍ  ａ  Ｐｈａｓｅ  ２  Ｓｔｕｄｙ」，２０１２  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ５５６．ｐｄｆ；Ｌｏｎｉａｌ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，「Ｔｈｅ  Ｎｏｖｅｌ  ＫＳＰ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＡＲＲＹ−５２０  Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｓ  Ｓｉｎｇｌｅ−Ａｇｅｎｔ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  Ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  Ｍｙｅｌｏｍａ：Ｒｅｓｕｌｔｓ  Ｆｒｏｍ  ａ  Ｐｈａｓｅ  ２  Ｔｒｉａｌ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｒｅｌａｐｓｅｄ／Ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｍｙｅｌｏｍａ」，��０１１  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ２９３５，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ５６３．ｐｄｆ；及び、Ｌｏｎｉａｌ，Ｓａｇａｒ，ｅｔ  ａｌ．，「Ｓｉｎｇｌｅ−Ａｇｅｎｔ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｏｖｅｌ  ＫＳＰ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＡＲＲＹ−５２０  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｒｅｌａｐｓｅｄ  ｏｒ  Ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｍｙｅｌｏｍａ（ＲＲＭＭ）：Ｒｅｓｕｌｔｓ  ｆｒｏｍ  Ｓｕｂｇｒｏｕｐ  Ａｎａｌｙｓｅｓ．」２０１３  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｙｅｌｏｍａ  Ｗｏｒｋｓｈｏｐ，Ｐｏｓｔｅｒ＃Ｐ−２２４，ｗｗｗ．ａｒｒａｙｂｉｏｐｈａｒｍａ．ｃｏｍ／＿ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ／ＰｕｂＡｔｔａｃｈｍｅｎｔ５６３．ｐｄｆ、を参照されたい。これらの内容は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【００８９】
実施例６
ＰＫモデリング
母集団ＰＫ（「ｐｏｐＰＫ」）モデリングは、実施例３〜５中の患者由来のＡＲＲＹ−５２０の血漿中濃度をベースにした。Ｐｈｏｅｎｉｘ６．３（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ミズーリ州セントルイス）のＱＲＰＥＭエンジンを使用してモデル最適化を行った。モデル選択は、ＡＩＣ比較及び診断プロットに基づいた。シミュレーションは、種々な［ＡＡＧ］を用いて、第２相の１日目と２日目の用量の１．５ｍｇ／ｍ２を投与された典型的な患者について行った。図２を参照されたい。１．１ｇ／Ｌを超える［ＡＡＧ］では、推定インビトロ非結合ＩＣ５０超での持続暴露は予測されない。
【００９０】
予測されたＫＳＰの抑制は、ＡＡＧが増加すると持続しない。臨床効果を得るためには、ＫＳＰの長期抑制（０．２ｎｇ／ｍＬ超の非結合ＡＲＲＹ−５２０  ＩＣ５０で２４時間を超える）が必要であろう。ＡＲＲＹ−５２０／時間の非結合濃度がｐｏｐＰＫモデル（Ｎ＝５０患者／ＡＡＧレベル）に基づいて、［ＡＡＧ］に対してシミュレートされた。０．２ｎｇ／ｍＬを超える非結合ＡＲＲＹ−５２０の濃度の予測合計時間が計算された。図３を参照されたい。
【００９１】
実施例７
ＡＡＧアッセイ
Ｒ＆Ｄシステムズインコーポレイティッド（ミソネタ州ミネアポリス）のＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）ヒト  α１−酸性糖タンパク質イムノアッセイ（カタログ番号第ＤＡＧＰ００）は、細胞培養液上清、血清、血漿、及び尿中のヒトＡＡＧを測定するように設計された４．５時間固相ＥＬＩＳＡである。このアッセイは、定量的サンドイッチ酵素免疫測定技術を採用した。ＡＡＧ特異的モノクローナル抗体がマイクロプレートにプリコートされている。標準及び試料がウェルにピペットで採取され、存在する全てのＡＡＧが固定化抗体に結合される。全ての非結合基質を洗い流した後、ＡＡＧ特異的酵素結合ポリクローナル抗体がウェルに添加される。全ての非結合抗体−酵素試薬を洗浄除去後、基質溶液がウェルに加えられ、初期ステップで結合したＡＡＧの量に比例して発色が起こる。発色が停止され、色の強度が測定される。下記で別の方法が記載される場合を除いて、アッセイは添付文書に記載のとおりに行った。
【００９２】
Ｒ＆ＤシステムズインコーポレイティッドのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）ヒトＡＡＧイムノアッセイ（カタログ番号第ＤＡＧＰ００）で提供される器具及び試料の内容を以下に示す。
ＡＡＧマイクロプレート（部品番号：８９３７８６）−９６ウェルポリスチレンマイクロプレート（８ウェル×１２ストリップ）：抗ＡＡＧマウスモノクローナル抗体でコート。
ＡＡＧ結合体（部品番号：８９３７８７）−２１ｍＬの防腐剤含有西洋ワサビペルオキシダーゼと結合した抗ＡＡＧポリクローナル抗体。
ＡＡＧ標準物質（部品番号：８９３７８８）−３バイアル（４００ｎｇ／バイアル）の、防腐剤含有緩衝液中のヒトＡＡＧ；凍結乾燥。
アッセイ希釈剤ＲＤ１−７３（部品番号：８９５５４１）−１２．５ｍＬの防腐剤含有緩衝液。
キャリブレータ希釈液ＲＤ５−２０濃縮物（部品番号：８９５３４６）−２バイアル（２１ｍＬ／バイアル）の防腐剤含有緩衝タンパク質ベース。
洗浄緩衝液濃縮物（Ｗａｓｈ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ）（部品番号：８９５００３）−２１ｍＬの防腐剤含有緩衝界面活性剤の２５倍濃縮液。
色試薬Ａ（部品番号：８９５０００）−１２．５ｍＬの安定化過酸化水素。
色試薬Ｂ（部品番号：８９５００１）−１２．５ｍＬの安定化クロモゲン（テトラメチルベンジジン）。
停止液（部品番号：８９５０３２）−６ｍＬの２Ｎ硫酸。
プレートカバー−４個の接着ストリップ。
【００９３】
Ｒ＆ＤシステムズインコーポレイティッドのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）ヒトＡＡＧイムノアッセイ（カタログ番号第ＤＡＧＰ００）に必要な他の器具及び試料の内容を以下に示す。
４５０ｎｍでの吸光度を測定でき、補正波長が５４０ｎｍ又は５７０ｎｍのマイクロプレートリーダー。
ピペット及びピペットチップ。
脱イオン水又は蒸留水。
スカートボトル、マニホールドディスペンサー、又は自動化マイクロプレートウォッシャー。
５００ｍＬメスシリンダー。
２〜８℃インキュベータ。標準及び試料の希釈用試験管。
【００９４】
試料採取及び貯蔵：血清−血清分離チューブ（ＳＳＴ）を使用し、試料を３０分間凝血させた後、１０００×ｇで１５分間遠心分離した。血清を取り出し、すぐにアッセイするか、分取して試料を−２０℃以下で貯蔵した。反復冷凍−解凍サイクルを回避した。血漿−抗凝固剤としてＥＤＴＡ又はヘパリンを使用して血漿を採取した。採取の３０分以内に、１０００×ｇで１５分遠心分離した。直ちにアッセイするか、又は分取して、−２０℃以下で貯蔵した。反復冷凍−解凍サイクルを回避した。注：クエン酸血漿は、このアッセイに使用する妥当性を検証されていない。
【００９５】
試料調製：血清及び血漿試料は、１０，０００倍希釈が必要であった。推奨される１０，０００倍希釈は、１０μＬの試料を９９０μＬのキャリブレータ希釈液ＲＤ５−２０（１×）に加えることにより行うことができる。１０μＬの希釈試料を９９０μＬのキャリブレータ希釈液ＲＤ５−２０（１×）に加えることにより１０，０００倍希釈を完了した。
【００９６】
試薬調製（使用前に全試薬を室温に戻した）：
洗浄緩衝液−濃縮物中に結晶が形成された場合は、室温に温め、結晶が完全に溶解するまで静かに混合した。２０ｍＬの洗浄緩衝液濃縮物を脱イオン水又は蒸留水中に希釈し、５００ｍＬの洗浄緩衝液を調製した。
キャリブレータ希釈液ＲＤ５−２０（１×）−２０ｍＬのキャリブレータ希釈液ＲＤ５−２０濃縮物を８０ｍＬの脱イオン水又は蒸留水に加え、１００ｍＬのキャリブレータ希釈液ＲＤ５−２０（１×）を調製した。
基質溶液−色試薬ＡとＢとは、使用の１５分以内に一緒に等容量で混合しなければならない。光から保護する。ウェル当たり２００μＬの得られた混合物が必要であった。
ＡＡＧ標準物質−ＡＡＧ標準物質を０．５ｍＬのキャリブレータ希釈液ＲＤ５−２０（１×）で再構成した。この再構成で、８００ｎｇ／ｍＬのストック溶液が得られた。この標準を混合し、完全な再構成を確実にし、希釈を行う前に、上記標準を静かに攪拌しながら少なくとも１５分間静置させた。
２５０μＬのキャリブレータ希釈液ＲＤ５−２０（１×）をピペットで各チューブに採取した。ＡＡＧストック溶液を使って２倍希釈系列を作製した。次に移る前に、各チューブをよく混合した。８００ｎｇ／ｍＬの標準を高度の標準として使用した。キャリブレータ希釈液ＲＤ５−２０（１×）をゼロ標準（０ｎｇ／ｍＬ）として使用した。
【００９７】
手順：使用前に、全試薬と試料とを室温に戻した。全試料と標準とを少なくとも２つの方式でアッセイすることが推奨された。
１．全試薬、作業標準、及び試料を上述のように調製した。
２．過剰マイクロプレートストリップをプレートフレームから取り出し、乾燥剤パックを入れたホイルポーチに戻し、再密封した。
３．１００μＬのアッセイ希釈剤ＲＤ１−７３を各ウェルに加えた。
４．５０μＬの標準又は試料を各ウェルに加えた（血清と血漿試料は上述の希釈を必要とした）。接着ストリップで覆った。室温で２時間インキュベートした。アッセイする標準と試料のプレートレイアウトを作成して記録した。
５．各ウェルの吸引・洗浄プロセスを合計４回繰り返した。スカートボトル、マニホールドディスペンサー、又は自動化ウォッシャーを使って、各ウェルに洗浄緩衝液（４００μＬ）を充填することにより洗浄した。良い性能を得るためには、各ステップで液体を完全に除去することが重要である。最後の洗浄後、吸引するか、またはデカンテーションにより残っている洗浄緩衝液を全て取り出した。プレートをひっくり返し、清浄なペーパータオルにブロットした。
６．２００μＬのＡＡＧ結合体を各ウェルに加えた。新しい接着ストリップで覆った。室温で２時間インキュベートした。
７．ステップ５で行ったように、吸引／洗浄を繰り返した。
８．２００μＬの基質溶液を各ウェルに加えた。室温で３０分間インキュベートした。光から保護した。
９．５０μＬの停止液を各ウェルに加えた。ウェル中の色が青から黄色に変化するはずである。ウェル中の色が緑の場合、又は色の変化が均一に見えない場合、プレートを静かにたたいて全体の混合を確実にする。
１０．４５０ｎｍに設定したマイクロプレートリーダーを使用して３０分以内に各ウェルの光学密度を測定した。波長補正が利用できる場合は、５４０ｎｍ又は５７０ｎｍに設定した。波長補正が利用できなかった場合、５４０ｎｍ又は５７０ｎｍの計測値から、４５０ｎｍの計測値を減算した。この減算により、プレートの光学的不完全性が補正した。補正を行わずに４５０ｎｍで直接読み取った値は、計測値が高く可能性があり、精度が低下する。
【００９８】
結果の計算：各標準、対照、及び試料の２回の計測値を平均し、平均ゼロ標準光学密度値を減算した。４パラメータロジスティック（４−ＰＬ）曲線当嵌を生成できるコンピュータソフトウェアを使用してデータを換算することにより検量線を作成した。代わりの方法として、ｘ軸に濃度を、ｙ軸に各標準の平均吸光度をプロットし、グラフ上の点を通る最も良好に適合した曲線を引くことにより検量線を作成した。データは、ＡＡＧ濃度のｌｏｇとＯ．Ｄ．のｌｏｇをプロットすることにより直線化し得、回帰分析により最も良好に適合した直線が決定できる。この方法により、十分であるが、精度が落ちる適合データを作成できる。試料を希釈した場合は、検量線からの濃度計測値に希釈因子を掛け合わせる必要がある。
【００９９】
ベースライン多発性骨髄腫患者血漿試料（実施例５由来）の非結合ＡＲＲＹ−５２０及び［ＡＡＧ］のエクスビボ分析を図４に示す。高ベースライン［ＡＡＧ］を有する患者血漿試料は、より少ない利用可能ＡＲＲＹ−５２０と相関があった。図５に示すように、高［ＡＡＧ］からは、応答の不足と治療継続期間の減少が予測される。「高」ベースライン［ＡＡＧ］（１．１ｇ／Ｌ超）のほとんどの患者は５ヶ月未満で試験から離脱した。臨床的応答（最小の応答（「ＭＲ」）又は部分的応答（「ＰＲ」））を達成した全ての患者の［ＡＡＧ］は、健診時、１．１ｇ／Ｌ未満であった。試験を中断するリスクは、［ＡＡＧ］の１．０ｇ／Ｌ増加毎に２．５倍増加する（ｐ＜０．０１）。恣意的なカットオフ値１．１ｇ／Ｌを超えるベースライン［ＡＡＧ］の患者を除外すると、表２に示すように、全試験においてＡＲＲＹ−５２０治療後の応答率及び試験継続時間が増加する。応答する全患者は、１．１ｇ／Ｌ未満の低ベースライン［ＡＡＧ］であった（ｐ＝０．０３；ＦＥＴ、両側検定）。約３０％の患者が１．１ｇ／Ｌ超のベースライン［ＡＡＧ］であった。
【表２】
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【０１００】
実施例８
ＡＡＧアッセイの変動性
４種の試料に対し、実施例７のＲ＆ＤシステムズインコーポレイティッドＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）ヒトα１−酸性糖タンパク質イムノアッセイを非連続の３日間にわたり２つの方式で実施し、予備カットポイントの近傍の変動性を評価した。変動係数は、１．７％〜８．６％の範囲であった。結果を図６に示す。
【０１０１】
実施例９
ＡＡＧアッセイ
Ｔｈｅ  Ｒａｎｄｏｘ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｌｔｄ．（英国クラムリン）のＲＸ  Ｉｍｏｌａシリーズ装置で、α−１−酸性糖タンパク質  ＲＸシリーズ２４７２用免疫比濁法タンパク質診断試薬（Ｉｍｍｕｎｏｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｒｅａｇｅｎｔ）を使用した。下記で別の方法が記載される場合を除いて、添付文書に記載の通りにアッセイを行った。
【０１０２】
試薬組成：
Ｒ１．アッセイ緩衝液                初期濃度
ポリエチレングリコール        最大６％
トリス／ＨＣｌ緩衝液          ２０ｍｍｏｌ／ｌ、ｐＨ７．４
塩化ナトリウム                １５０ｍｍｏｌ／ｌ
アジ化ナトリウム
Ｒ２．抗体試薬
抗（ヒト）アルファ−１−酸性糖タンパク質
トリス／ＨＣｌ緩衝液            ２０ｍｍｏｌ／ｌ、ｐＨ７．４
塩化ナトリウム                  １５０ｍｍｏｌ／ｌ
アジ化ナトリウム
【０１０３】
提供されている試料：Ｒ１アッセイ緩衝液及びＲ２抗体試薬。
【０１０４】
必要試料：０．９％ＮａＣｌ溶液、Ｒａｎｄｏｘの液体特異的タンパク質キャリブレータ（Ｌｉｑｕｉｄ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃａｌｉｂｒａｔｏｒ）（カタログ番号第ＩＴ２６９２）、Ｒａｎｄｏｘの液体アッセイした特異的タンパク質対照レベル１（Ｌｉｑｕｉｄ  Ａｓｓａｙｅｄ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｓ  Ｌｅｖｅｌ  １）（カタログ番号第ＰＳ２６８２）、レベル２（カタログ番号第ＰＳ２６８３）、及びレベル３（カタログ番号第ＰＳ２６８４）。
【０１０５】
手順：特定のタンパク質キャリブレータインサートの与えられたロット特有値を入力した。Ｒａｎｄｏｘ専用ＲＸシリーズアッセイ用の化学パラメータは、分析器ＰＣのハードドライブに予め決定されている。必要なプログラムを、分析器ソフトウェアとしてダウンロードする必要がある。全ての必要なインストラクションがバーコードにエンコードされている。Ｒａｎｄｏｘの液体アッセイした特異的タンパク質キャリブレータを使って較正した。Ｒａｎｄｏｘの液体アッセイした特異的タンパク質対照、レベル１、レベル２及びレベル３を毎日の品質管理に使用した。
【０１０６】
実施例１０
アッセイの比較
実施例７のＲ＆ＤシステムズインコーポレイティッドのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）ヒト  α１−酸性糖タンパク質イムノアッセイを、Ｓｉｅｍｅｎｓ  ＢＮＩＩアッセイ（メーカーのプロトコルに従って実施）及びＲａｎｄｏｘ  Ｉｍｏｌａアッセイ（実施例９で異なる場合を除き、メーカーのプロトコルに従って実施）に対して比較した。アッセイ間、及び、各アッセイ内の血清と血漿にわたり値を比較した。
【０１０７】
２０人のＭＭ患者及び１０人の健常被験者の血清試料に対し、Ｒ＆ＤシステムズのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）及びＳｉｅｍｅｎｓ  ＢＮＩＩアッセイで比較試験を行った。この線形回帰分析を使って、Ｒ＆ＤシステムズのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）アッセイにおける１．１ｇ／Ｌカットオフが、Ｓｉｅｍｅｎｓ  ＢＮＩＩアッセイの場合の１．６３５ｇ／Ｌであると計算された。結果を図７と表３に示す。
【表３】
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【０１０８】
２０人のＭＭ患者及び１０人の健常被験者の血漿試料に対し、Ｒ＆ＤシステムズのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）及びＳｉｅｍｅｎｓ  ＢＮＩＩアッセイにより比較試験を行った。この線形回帰分析を使って、Ｒ＆ＤシステムズのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）アッセイの１．１ｇ／Ｌカットオフが、Ｓｉｅｍｅｎｓ  ＢＮＩＩアッセイの場合の１．５７７ｇ／Ｌであると計算された。結果を図８と表４に示す。
【表４】
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【０１０９】
２０人のＭＭ患者及び１０人の健常被験者の血清試料に対し、Ｒ＆ＤシステムズのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）及びＲａｎｄｏｘ  Ｉｍｏｌａアッセイで比較試験を行った。この線形回帰分析を使って、Ｒ＆ＤシステムズのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）アッセイの１．１ｇ／Ｌカットオフが、Ｒａｎｄｏｘ  Ｉｍｏｌａアッセイの場合の１．５１０ｇ／Ｌであると計算された。結果を図９と表５に示す。
【表５】
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【０１１０】
２０人のＭＭ患者及び１０人の健常被験者の血漿試料に対し、Ｒ＆ＤシステムズのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）及びＲａｎｄｏｘ  Ｉｍｏｌａアッセイで比較試験を行った。この線形回帰分析を使用して、Ｒ＆ＤシステムズのＱｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）アッセイの１．１ｇ／Ｌカットオフが、Ｒａｎｄｏｘ  Ｉｍｏｌａアッセイの場合の１．４６２ｇ／Ｌであると計算された。結果を図１０と表６に示す。
【表６】
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【０１１１】
上記実施形態により本発明をこれらの実施形態に限定する意図はないことが理解されよう。むしろ、本発明は、全ての代替物、修正物、及び均等物を包含することが意図され、それらは、特許請求の範囲で規定される本発明の範囲内に含まれ得る。従って、前出の説明は、本発明の原理の例証のみを目的とするものと見なされる。
【０１１２】
本明細書及び以下の特許請求の範囲に使用される場合、「備える」、「備えた」、「含む」、「含んでいる」、及び「有する」との単語は、示した特徴、整数、成分、又はステップの存在を特定することが意図されるが、１つまたは複数の他の特徴、整数、成分、ステップ、又はそれらのグループの存在または追加を排除するものではない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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