(57)【要約】  本発明は、新規なベンズアミジン誘導体、その製造方法およびそれを含む骨粗しょう症の予防または治療用薬学的組成物に関する。本発明のベンズアミジン誘導体は、非常に低い濃度で破骨細胞に対する分化を効果的に抑制することにより、骨粗しょう症の予防または治療に有用に使用できる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１で表されるベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩：
【化１】
2010534648.tif 000040
式中、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニル、シクロヘキシル、モルホリニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルで置換されたもしくは無置換の
【化２】
2010534648.tif 000041
、ＮＲ６Ｒ７またはＣＨ２ＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ２は１次または２次アミンであって、ＮＲ８Ｒ９、
【化３】
2010534648.tif 000042
、ピペリジン、ピロリジン、イミダゾールまたはトリアゾールであり；
Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立に水素、メチル、エチル、ハロゲン、ヒドロキシまたはメトキシ基であり；
Ｒ５はヒドロキシ基であり；
Ｒ６およびＲ７はそれぞれ独立に水素、メチル、エチル、プロピル、ヒドロキシエチル、メトキシエチル、２−モルホリノエチル、ベンジル、ピリジン−３−イルメチル、ピリジン−４−イルメチル、３−ピリジニルカルボニルまたはエタンスルホニルであり；
Ｒ８およびＲ９はそれぞれ独立に水素；メチル；エチル；プロピル；イソプロピル；ブチル；イソブチル；ｔ−ブチル；ヒドロキシエチル；メトキシエチル；２−モルホリノエチル；ベンジル；３−イミダゾール−１−イル−プロピル；シクロプロピル；または３−ピリジニルおよび４−ピリジニルの中から選ばれた一つの基で置換されたカルボニルであり；
Ｒ１０およびＲ１１はそれぞれ独立に水素またはメチルであり；
Ｘ１およびＸ３はそれぞれ独立に酸素、硫黄、アミンまたはメチルアミン基であり；
Ｘ２はプロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、エチレン−Ｏ−エチレン、エチレン−ＮＨ−エチレン、ブチレンカルボニル、２−ブテニル、メチレン−１，２−フェニレン−メチレン、メチレ−１，３−フェニレン−メチレン、メチレン−１，４−フェニレン−メチレンまたはメチレン−ピリジニル−メチレンであり；
ＹはＯ、ＳまたはメチルアミノまたはＣＨ２基であり；
ｎは０または１の整数である。
【請求項２】
前記化学式１の化合物は、下記の化合物よりなる群から選ばれることを特徴とする、請求項１に記載のベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩：
１）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−メチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
３）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−アミノ−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−２−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
５）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２，５−ジ−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
６）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−モルホリン−４−イル−５−チオモルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
７）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−モルホリン−４−イル−５−ピロリジン−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
８）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
９）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−メチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
１０）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−チオモルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１１）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−ピペリジン−１−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１２）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−ジメチルアミノメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１３）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−ブチルアミノメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１４）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［５−（イソブチルアミノ−メチル）−２−メチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
１５）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［５−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−メチル）−２−メチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
１６）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−プロピルアミノメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１７）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−メチル−５−［（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−メチル］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
１８）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛５−［（３−イミダゾール−１−イル−プロピルアミノ）−メチル］−２−メチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
１９）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−ピロリジン−１−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２０）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イミダゾール−１−イルメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２１）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［５−（ベンジルアミノ−メチル）−２−メチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
２２）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−シクロプロピルアミノメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２３）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２４）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（メチル−ピリジン−４−イルメチル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
２５）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−［（２−ヒドロキシ−エチル）−メチル−アミノ］−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
２６）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（エチル−メチル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
２７）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（ベンジル−メチル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
２８）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
２９）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−５−チオモルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３０）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛５−｛［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−メチル｝−２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３１）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
３２）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛５−（イソプロピルアミノ−メチル）−２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３３）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛５−［（２−メトキシ−エチルアミノ）−メチル］−２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３４）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−［（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミノ］−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３５）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（メチル−プロピル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
３６）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（メチル−ピリジン−３−イルメチル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
３７）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−メチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
３８）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−メチル−５−［（ピリジン−４−カルボニル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３９）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−メチル−５−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
４０）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−フェニル−５−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
４１）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−ジメチルアミノ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
４２）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−ジメチルアミノ−２−フェニル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４３）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−シクロヘキシル−５−ジメチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４４）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４５）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−フェニル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４６）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４７）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−ピリジン−３−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４８）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−エチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４９）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−シクロヘキシル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
５０）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
５１）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−モルホリン−４−イル−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
５２）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−モルホリン−４−イル−２−ピペリジン−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン。
【請求項３】
前記薬学的に許容される塩は塩酸塩またはメタンスルホン酸塩であることを特徴とする、請求項１または２に記載のベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
下記１）〜７）の段階を含む、下記化学式１ａのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）化学式２の化合物を化学式３の化合物と無機塩基の存在下に反応させて化学式４の化合物を製造する段階、
２）化学式５の化合物を、前記１）段階で得た化学式４の化合物と無機塩基の存在下に反応させて化学式６の化合物を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式６の化合物を臭素化合物と反応させて化学式７のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
４）前記３）段階で得た化学式７のα−臭素化化合物を化学式８のチオアミド化合物と反応させ、化学式９のチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
５）前記４）段階で得た化学式９の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式１０の臭素化チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
６）前記５）段階で得た化学式１０の化合物を化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式１２のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
７）前記６）段階で得た化学式１２の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ａのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩を製造する段階：
【化４】
2010534648.tif 000043
【化５】
2010534648.tif 000044
【化６】
2010534648.tif 000045
【化７】
2010534648.tif 000046
【化８】
2010534648.tif 000047
【化９】
2010534648.tif 000048
【化１０】
2010534648.tif 000049
【化１１】
2010534648.tif 000050
【化１２】
2010534648.tif 000051
【化１３】
2010534648.tif 000052
【化１４】
2010534648.tif 000053
【化１５】
2010534648.tif 000054
式中、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、モルホリニルまたはアミノであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は請求項１で定義したとおりである。
【請求項５】
下記１）〜６）段階を含む、下記化学式１ｂのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）請求項４の１）段階で得た化学式４の化合物を化学式１３の化合物と反応させ、化学式１４のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式１４の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式１５のα−臭素化ベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式１５のα−臭素化化合物を化学式８のチオアミド化合物と反応させ、化学式１６のチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
４）前記３）段階で得た化学式１６の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式１７の臭素化チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
５）前記４）段階で得た化学式１７の化合物を化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式１８のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
６）前記５）段階で得た化学式１８の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｂのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩を合成する段階：
【化１６】
2010534648.tif 000055
【化１７】
2010534648.tif 000056
【化１８】
2010534648.tif 000057
【化１９】
2010534648.tif 000058
【化２０】
2010534648.tif 000059
【化２１】
2010534648.tif 000060
【化２２】
2010534648.tif 000061
式中、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、またはフェニルであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は請求項１で定義したとおりである。
【請求項６】
下記１）〜４）の段階を含む、下記化学式１ｃのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）請求項４の３）段階で得た化学式７の化合物をチオウレア化合物（１９）と反応させ、化学式２０のアミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式２０の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式２１の臭素化アミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式２１の化合物を化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式２２のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
４）前記３）段階で得た化学式２２の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｃのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩を製造する段階：
【化２３】
2010534648.tif 000062
【化２４】
2010534648.tif 000063
【化２５】
2010534648.tif 000064
【化２６】
2010534648.tif 000065
【化２７】
2010534648.tif 000066
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびｎは請求項１で定義したとおりである。
【請求項７】
下記１）〜３）の段階を含む、下記化学式１ｄのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）請求項６の１）段階で得た化学式２０の化合物を化学式２３の化合物と反応させ、化学式２４のチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式２４の化合物をホルムアルデヒドおよび化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式２５のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
３）前記２）段階で得た化学式２５の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｄのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩を製造する段階：
【化２８】
2010534648.tif 000067
【化２９】
2010534648.tif 000068
【化３０】
2010534648.tif 000069
【化３１】
2010534648.tif 000070
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびｎは請求項１で定義したとおりである。
【請求項８】
下記１）〜４）段階を含む、下記化学式１ｅのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）請求項４の４）段階で得た化学式９の化合物を硝酸と反応させ、化学式２６の亜硝酸基を含むチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式２６の化合物を鉄または塩化錫二水和物と反応させ、化学式２７のアミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式２７の化合物を化学式２８のハライド反応物と反応させ、１次アミンが置換された化学式２９のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
４）前記３）段階で得た化学式２９の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｅのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩を製造する段階：
【化３２】
2010534648.tif 000071
【化３３】
2010534648.tif 000072
【化３４】
2010534648.tif 000073
【化３５】
2010534648.tif 000074
【化３６】
2010534648.tif 000075
式中、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニルまたはシクロヘキシルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ８（Ｒ８が水素の場合を除く）、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は請求項１で定義したとおりである。
【請求項９】
下記１）および２）の段階を含む、下記化学式１ｆのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）請求項８の２）段階で得た化学式２７の化合物を化学式２８のハライド化合物と反応させ、１次アミンが置換された化学式３０のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
２）前記１）段階で得た化学式３０の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｆのベンズアミジン誘導体およびその薬学的に許容される塩を製造する段階：
【化３７】
2010534648.tif 000076
【化３８】
2010534648.tif 000077
式中、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニルまたはシクロヘキシルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ８（Ｒ８が水素の場合を除く）、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は請求項１で定義したとおりである。
【請求項１０】
下記１）〜４）の段階を含む、下記化学式１ａのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）請求項４の３）段階で得た化学式７の化合物を化学式１１の１次または２次アミンと反応させ、化学式３１のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式３１の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式３２のα−臭素化化合物を得る段階、
３）前記２）段階で得た化学式３２の化合物を化学式８のチオアミド化合物と反応させ、化学式１２のチアゾール基を有するベンズアミジン誘導体を製造する段階、および
４）前記３）段階で得た化学式１２のベンゾニトリル誘導体をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ａのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩を製造する段階：
【化３９】
2010534648.tif 000078
【化４０】
2010534648.tif 000079
【化４１】
2010534648.tif 000080
【化４２】
2010534648.tif 000081
式中、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、またはフェニルであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は請求項１で定義したとおりである。
【請求項１１】
下記１）段階を含む、下記化学式１ｇのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）請求項８の２）段階で得た化学式２７の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｇのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩を製造する段階：
【化４３】
2010534648.tif 000082
式中、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニル、またはシクロヘキシルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は請求項１で定義したとおりである。
【請求項１２】
下記１）および２）の段階を含む、下記化学式１ｂのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）請求項４の４）段階で得た化学式９の化合物をホルムアルデヒドおよび化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させて化学式１８のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
２）前記１）段階で得た化学式１８の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｂのベンズアミジン誘導体およびその薬学的に許容される塩を製造する段階：
【化４４】
2010534648.tif 000083
【化４５】
2010534648.tif 000084
式中、Ｒ１はＣ１〜Ｃ６アルキルで置換されたまたは無置換の
【化４６】
2010534648.tif 000085
、ＣＨ２ＮＲ６Ｒ７またはＮＲ６Ｒ７（Ｒ６およびＲ７の両者ともが水素の場合を除く）であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＹは請求項１で定義したとおりである。
【請求項１３】
下記１）〜５）の段階を含む、下記化学式１ｈのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法：
１）請求項４の３）段階で得た化学式７の化合物をチオウレア化合物と反応させ、化学式３３のアミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式３３の化合物を化学式３４の鎖の両末端がハロゲンで置換された化合物と反応させ、化学式３５のヘテロ環で置換されたチアゾール基を有するベンズアミジン誘導体を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式３５の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式３６の臭素化アミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
４）前記３）段階で得た化学式３６の化合物を化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式３７のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
５）前記４）段階で得た化学式３７の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｈのベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩を製造する段階：
【化４７】
2010534648.tif 000086
【化４８】
2010534648.tif 000087
【化４９】
2010534648.tif 000088
【化５０】
2010534648.tif 000089
【化５１】
2010534648.tif 000090
【化５２】
2010534648.tif 000091
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＹは請求項１で定義したとおりである。
【請求項１４】
前記化学式８のチオアミド化合物は、チオアセトアミド、チオプロピオンアミド、チオイソブチルアミド、トリメチルチオアセトアミド、チオヘキサノアミド、シクロヘキサンカルボチオン酸アミド、ピペリジン−４−カルボチオン酸アミド、モルホリン−４−カルボチオン酸アミド、Ｎ−メチルチオウレア、Ｎ−エチルチオウレア、およびＮ−プロピルチオウレアよりなる群から選ばれることを特徴とする、請求項４、５または１０に記載のベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法。
【請求項１５】
前記化学式２３、２８のハライド化合物は、ヨードメタン、ヨードエタン、ヨードプロパン、プロピルブロマイド、２−クロロエチルメチルエーテル、クロロエチルモルホリン、３−ブロモメチルピリジン、ブロモエタノール、ニコノイルクロライド、ベンジルブロマイド、ニコチノイルクロライド、エタンスルホニルクロライド、およびイソニコノイルクロライドよりなる群から選ばれることを特徴とする、請求項７〜９のいずれか１項に記載のベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法。
【請求項１６】
ベンゾニトリルのベンズアミジンへの転換段階で、Ｒ５がＯＨの場合、使用されるアミンがヒドロキシルアミン塩酸塩であり；前記ヒドロキシルアミン塩酸塩をトリエチルアミン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）、ジエチルメチルアミン（Ｅｔ２ＮＭｅ）、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、ピリジンおよび２，６−ジメチルピルジンよりなる群から選ばれる有機塩基または炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムアミド、水素化ナトリウム、ナトリウムメトキシドおよびナトリウムエトキシドよりなる群から選ばれる無機塩基の存在下に、６０〜８０℃で１〜９時間、メタノール、エタノールおよびアセトニトリルよりなる群から選ばれる単一溶媒、またはこれらと水との混合溶媒中で反応させることを特徴とする、請求項４〜１３のいずれか１項に記載のベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩の製造方法。
【請求項１７】
請求項１または２による化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、骨粗しょう症の予防または治療用薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なベンズアミジン誘導体、その製造方法およびそれを含む骨粗しょう症の予防または治療用薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
骨は、身体の物理的支持体であって、必要な骨量と構造を保存する役割を果たす。また、骨は、カルシウム（Ｃａ２＋）などの保管庫として機能し、カルシウムなどの血中濃度維持に重要な役割を果たしている。そのために、骨の成長は 造骨細胞および破骨細胞の活性間の代謝バランスである。したがって、骨は、骨吸収と骨形成の両者が活発に進んで、代謝的な側面で平衡に至る定常状態である。このような骨吸収と骨形成間の平衡関係が破壊されると、骨吸収が骨形成に相対的に上回ることになり、骨密度または骨量の減少を引き起こし、骨強度が維持されない状態である骨粗しょう症が現れるおそれがあるが、これは中老年層の女性に特に多く現れる疾患である。
【０００３】
骨粗しょう症（Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ）は、骨吸収と骨形成の均衡が崩れて発生するもので、骨形成より過多に骨吸収が行われるのに起因した疾患である。骨粗しょう症は、骨組織の石灰が減少して骨の緻密質が薄くなり、それにより骨髄腔が広くなり、症状が進展するにつれて骨が弱くなるため、小さい衝撃にも骨折し易い。骨組織は、造骨細胞によって形成され、破骨細胞によって破壊吸収がひっきりなしに繰返し行われる定常状態組織である。
【０００４】
骨粗しょう症に関連し、過去には主に骨のミネラル、例えば、カルシウムとリンの代謝を中心にその研究が行われてきたが、その発病メカニズムの解明には大きい進展を見せていない。
【０００５】
現在、骨粗しょう症治療剤として使われている物質には、ビスホスホネート製剤（アレンドロネート、エチドロネート）、ホルモン製剤（ラロキシフェン）、ビタミンＤ製剤、カルシトニン製剤、カルシウム製剤などがあるが、これらは副作用を有するものと知られている。具体的に、ビスホスホネート製剤は、吸収率が低下し、服用方法がややこしいうえ、食道炎を誘発させる。ホルモン製剤は、一生服用しなければならず、長期投与の場合には乳房癌、子宮癌、胆石および血栓症などの副作用が現れる。ビタミンＤ製剤は高価であり、効果が非常に少なく、カルシトニン製剤は高価であり、投与が難しい。カルシウム製剤は、副作用は少ないが、治療ではなく、骨粗しょう症の予防効果に限定されるという欠点がある。
【０００６】
骨粗しょう症は、薬物の短期投与のみでは治療することができず、一般的に薬物の長期投与が必須的である。したがって、薬物を長期投与した場合に前述の副作用がなく、優れた薬効を有する新しい物質の必要性が要求されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
そこで、本発明者は、骨粗しょう症に対する効果的な治療剤を開発するために広範囲の研究を行った結果、新規なベンズアミジン誘導体を合成した。本発明者はこれらの化合物が破骨細胞による骨吸収抑制効果に優れて骨粗しょう症の治療および予防に優れた効果を示すことを見出し、本発明を完成した。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の目的は、新規なベンズアミジン誘導体を提供することにある。
【０００９】
本発明の他の目的は、新規なベンズアミジン誘導体の製造方法を提供することにある。
【００１０】
本発明の別の目的は、新規なベンズアミジン誘導体を含む、骨粗しょう症の予防または治療用薬学的組成物を提供することにある。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のベンズアミジン誘導体は、非常に低い濃度で破骨細胞に対する分化を効果的に抑制して骨粗しょう症の予防または治療に有用に使用できる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
一つの様態において、本発明は、下記化学式１で表される新規なベンズアミジン誘導体を提供する。
【００１３】
【化１】
2010534648.tif 000002
【００１４】
式中、Ｒ１はピリジンおよび
【００１５】
【化２】
2010534648.tif 000003
【００１６】
の中から選ばれた一つの基で置換されたもしくは無置換のＣ1〜Ｃ６アルキル；Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル；フェニル；ベンジル；Ｃ１〜Ｃ６アルキルで置換されたもしくは無置換のピリジニル；グアニジノ；ＮＲ６Ｒ７；ＣＨ２ＮＲ２Ｒ７；
【００１７】
【化３】
2010534648.tif 000004
【００１８】
（前記ＡはＣ1〜Ｃ6アルキルであり、ｍは２〜６の整数である）；またはＣ1〜Ｃ6アルキルで置換されたもしくは無置換の
【００１９】
【化４】
2010534648.tif 000005
【００２０】
であり；
Ｒ２は１次または２次アミンであって、ＮＲ８Ｒ９、
【００２１】
【化５】
2010534648.tif 000006
【００２２】
、ピロリジン、ピペリジン、トリアゾール、テトラゾールまたはイミダゾールであり；
Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立に水素；ハロゲン；ヒドロキシ；ハロゲンで置換されたもしくは無置換のＣ1〜Ｃ6アルキル；Ｃ3〜Ｃ６シクロアルキルアミノ；Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ；Ｃ１〜Ｃ６アルカノイルオキシ；Ｃ２〜Ｃ６アルケニルオキシ；フェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ；フェノキシ；Ｃ２〜Ｃ６アルケノイルオキシまたはフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルカノイルオキシ；またはカルボキシ、エステル化されたカルボキシおよびアミド化されたカルボキシの中から選ばれた一つの基で置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキルオキシ；またはアミノオキシ基であり；
Ｒ５は水素またはヒドロキシ基であり；
Ｒ６およびＲ７はそれぞれ独立に水素；ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ピリジンおよび
【００２３】
【化６】
2010534648.tif 000007
【００２４】
の中から選ばれた一つの基で置換されたもしくは無置換のＣ１〜Ｃ６アルキル；フェニル；ベンジル；ピリジニル；Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、フェニル、ベンジル、ピリジンおよび
【００２５】
【化７】
2010534648.tif 000008
【００２６】
の中から選ばれた一つの基で置換されたカルボニル；またはＣ１〜Ｃ６アルカンスルホニルであり；
Ｒ８およびＲ９はそれぞれ独立に水素；ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、モルホリン、イミダゾールおよびＮＲ６Ｒ７の中から選ばれた一つの基で置換されたもしくは無置換のＣ１〜Ｃ６アルキル；Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ；Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル；フェニル；ベンジル；ピリジニル；モルホリン；Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、フェニル、ベンジル、ピリジンおよび
【００２７】
【化８】
2010534648.tif 000009
【００２８】
の中から選ばれた一つの基で置換されたカルボニル；ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシおよびイミダゾールの中から選ばれた一つの基が置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルで置換されたカルボニル；またはＣ１〜Ｃ６アルカンスルホニルであり；
Ｒ１０およびＲ１１はそれぞれ独立に水素、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシまたはハライドであり、
Ｘ１およびＸ３はそれぞれ独立にＯ；Ｓ；ＮＨ；またはＮ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｎ−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｎ−ベンジルまたはＮ−フェニル基であり；
Ｘ２はＣ３〜Ｃ７アルキレン；Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−Ｃ２〜Ｃ７アルケニレン−Ｃ１〜Ｃ３アルキレン；Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ３アルキレン；Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ３アルキレン；Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−ＮＨ−Ｃ１〜Ｃ３アルキレン；Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−フェニレン−Ｃ１〜Ｃ３アルキレン；Ｃ１〜Ｃ３アルキレン−ピリジレン−Ｃ１〜Ｃ３アルキレンまたはＣ１〜Ｃ３アルキレン−ナフチレン−Ｃ１〜Ｃ３アルキレン；Ｃ１〜Ｃ３アルキルおよびヒドロキシルで置換されたＣ３〜Ｃ７アルキレン；Ｃ３〜Ｃ７アルキレンカルボニル；またはピペラジンによって中絶されたＣ３〜Ｃ７アルキレンであり；
ＹはＯ、Ｓ、ＮＲ６またはＣＨ２基であり；
ｎは０または１の整数である。
【００２９】
前記化学式１において、特にＲ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニル、シクロヘキシル、モルホリニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルで置換されたもしくは無置換の
【００３０】
【化９】
2010534648.tif 000010
【００３１】
、ＮＲ６Ｒ７またはＣＨ２ＮＲ６Ｒ７であり；
Ｒ２は１次または２次アミンであって、ＮＲ８Ｒ９、
【００３２】
【化１０】
2010534648.tif 000011
【００３３】
、ピペリジン、ピロリジン、イミダゾールまたはトリアゾールであり；
Ｒ３およびＲ４はそれぞれ独立に水素、メチル、エチル、ハロゲン、ヒドロキシまたはメトキシ基であり；
Ｒ５はヒドロキシ基であり；
Ｒ６およびＲ７はそれぞれ独立に水素、メチル、エチル、プロピル、ヒドロキシエチル、メトキシエチル、２−モルホリノエチル、ベンジル、ピリジン−３−イルメチル、ピリジン−４−イルメチル、３−ピリジニルカルボニルまたはエタンスルホニルであり；
Ｒ８およびＲ９はそれぞれ独立に水素；メチル；エチル；プロピル；イソプロピル；ブチル；イソブチル；ｔ−ブチル；ヒドロキシエチル；メトキシエチル；２−モルホリノエチル；ベンジル；３−イミダゾール−１イル−プロピル；シクロプロピル；または３−ピリジニルおよび４−ピリジニルの中から選ばれた一つの基で置換されたカルボニルであり；
Ｒ１０およびＲ１１はそれぞれ独立に水素またはメチルであり；
Ｘ１およびＸ３はそれぞれ独立に酸素、硫黄、アミンまたはメチルアミン基であり；
Ｘ２はプロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、エチレン−Ｏ−エチレン、エチレン−ＮＨ−エチレン、ブチレンカルボニル、２−ブテニル、メチレン−１，２−フェニレン−メチレン、メチレ−１，３−フェニレン−メチレン、メチレン−１，４−フェニレン−メチレンまたはメチレン−ピリジニル−メチレンであり；
ＹはＯ、ＳまたはメチルアミノまたはＣＨ２基であり；
ｎは０または１の整数である。
【００３４】
本発明の化学式１の化合物において、Ｒ３およびＲ４は−Ｏ−（ＣＨ２）５−Ｏ−を基準としてオルトまたはメタに位置し、−Ｃ（ＮＨ２）＝Ｎ−Ｒ５はメタまたはパラに位置する。
【００３５】
本発明の化学式１のベンズアミジン誘導体のうちで好ましい化合物は、具体的に下記のとおりである：
１）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−メチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
３）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−アミノ−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−２−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
５）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２，５−ジ−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
６）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−モルホリン−４−イル−５−チオモルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
７）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−モルホリン−４−イル−５−ピロリジン−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
８）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
９）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−メチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
１０）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−チオモルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１１）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−ピペリジン−１−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１２）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−ジメチルアミノメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１３）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−ブチルアミノメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１４）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［５−（イソブチルアミノ−メチル）−２−メチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
１５）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［５−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−メチル）−２−メチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
１６）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−プロピルアミノメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
１７）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−メチル−５−［（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−メチル］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
１８）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛５−［（３−イミダゾール−１−イル−プロピルアミノ）−メチル］−２−メチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
１９）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−ピロリジン−１−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２０）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−イミダゾール−１−イルメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２１）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［５−（ベンジルアミノ−メチル）−２−メチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
２２）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−シクロプロピルアミノメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２３）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
２４）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（メチル−ピリジン−４−イルメチル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
２５）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−［（２−ヒドロキシ−エチル）−メチル−アミノ］−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
２６）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（エチル−メチル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
２７）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（ベンジル−メチル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
２８）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
２９）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−５−チオモルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３０）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛５−｛［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−メチル｝−２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３１）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
３２）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛５−（イソプロピルアミノ−メチル）−２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３３）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛５−［（２−メトキシ−エチルアミノ）−メチル］−２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３４）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−［（２−メトキシ−エチル）−メチル−アミノ］−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３５）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（メチル−プロピル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
３６）Ｎ−ヒドロキシ−４−（５−｛４−［２−（メチル−ピリジン−３−イルメチル−アミノ）−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル］−フェノキシ｝−ペンチルオキシ）−ベンズアミジン、
３７）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−メチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
３８）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−メチル−５−［（ピリジン−４−カルボニル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
３９）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−メチル−５−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
４０）Ｎ−ヒドロキシ−４−［５−（４−｛２−フェニル−５−［（ピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
４１）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−ジメチルアミノ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ−ペンチルオキシ］−ベンズアミジン、
４２）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−ジメチルアミノ−２−フェニル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４３）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−シクロヘキシル−５−ジメチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４４）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４５）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−フェニル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４６）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４７）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−ピリジン−３−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４８）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−エチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
４９）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−アミノ−２−シクロヘキシル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
５０）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
５１）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−モルホリン−４−イル−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン、
５２）Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（５−モルホリン−４−イル−２−ピペリジン−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン。
【００３６】
本発明の化学式１のベンズアミジン誘導体は、薬学的に許容される塩の形態で使用することができ、塩としては、薬学的に許容される遊離酸によって形成された酸付加塩が有用である。本発明において使用するのに適合な遊離酸は、無機酸または有機酸となる。無機酸としては、塩酸、臭素酸、硫酸、リン酸などを使用することができ、有機酸としては、クエン酸、酢酸、乳酸、酒石酸、フマル酸、蟻酸、プロピオン酸、シュウ酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、マレイン酸、安息香酸、グルコン酸、グリコール酸、コハク酸、４−モルホリンエタンスルホン酸、カンファスルホン酸、４−ニトロベンゼンスルホン酸、ヒドロキシ−Ｏ−スルホン酸、４−トルエンスルホン酸、ガラクツロン酸、エンボン酸、グルタミン酸、アスパラギン酸などを使用することができる。好ましくは、無機酸として塩酸を使用し、有機酸としてメタンスルホン酸を使用することができる。
【００３７】
本発明において、化学式１の化合物の置換基に使用された用語は、次のように定義される：
用語「ハロゲン」とは、ハロゲン族原子を示し、塩素、フッ素、臭素、ヨウ素などのラジカルを含む。
【００３８】
用語「アルキル」とは、炭素数１〜６の直鎖または側鎖の飽和炭化水素ラジカルを意味し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどを含む。
【００３９】
用語「アルコキシ」とは、炭素数１〜６の直鎖または側鎖のアルキルが酸素に連結されたラジカルを意味し、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどを含む。
【００４０】
用語「シクロアルキル」とは、炭素数３〜６の非芳香族炭化水素環を意味し、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。
【００４１】
用語「アルケニル」とは、炭素数２〜６の直鎖または側鎖の不飽和炭化水素を意味し、一つ以上の二重結合を有する。
【００４２】
用語「アルカイルオキシ」とは、アルキル基の末端炭素原子がカルボニルラジカルで置換されたオキシ含有ラジカルを意味する。
【００４３】
用語「アルケノイルオキシ」とは、アルケニル基の末端炭素原子がカルボニルラジカルで置換されたオキシ含有ラジカルを意味する。
【００４４】
用語「アルケニルオキシ」とは、オキシ含有アルケニル基を意味する。
【００４５】
用語「アルキレン」は、２つ以上の共有結合のための結合点を有する炭素数１〜７の直鎖または側鎖飽和炭化水素ラジカルを意味し、例えばメチレン、エチレン、メチルエチレン、イソプロピリデンなどを含む。
【００４６】
用語「アルケニレン」は、２つ以上の共有結合のための結合点および一つ以上の二重結合を有する炭素数２〜７の直鎖または側鎖不飽和炭化水素ラジカルを意味し、例えば１，１−ビニリデン（ＣＨ２＝Ｃ）、１，２−ビニリデン（−ＣＨ＝ＣＨ−）、１，４−ブタジエニル（−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−）などを含む。
【００４７】
用語「カルボニル」は、４つの共有結合のうち２つが酸素原子と共有された炭素ラジカルを意味する。
【００４８】
他の様態において、本発明は、化学式１のベンズアミジン誘導体の製造方法を提供する。
【００４９】
Ｒ１がメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、モルホリニルまたはアミノである化学式１の化合物は、下記１）〜７）の段階を含んで下記反応スキーム１でのように製造できる：
１）化学式２の化合物を化学式３の化合物と無機塩基の存在下に反応させて化学式４の化合物を製造する段階、
２）化学式５の化合物を前記１）段階で得た化学式４の化合物と無機塩基の存在下に反応させて化学式６の化合物を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式６の化合物を臭素化合物と反応させて化学式７のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
４）前記３）段階で得た化学式７のα−臭素化化合物を化学式８のチオアミド化合物と反応させ、化学式９のチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
５）前記４）段階で得た化学式９の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式１０の臭素化チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
６）前記５）段階で得た化学式１０の化合物を化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式１２のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
７）前記６）段階で得た化学式１２の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ａのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００５０】
【化１１】
2010534648.tif 000012
【００５１】
前記反応スキーム１において、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、モルホリニルまたはアミノであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００５２】
Ｒ１がメチル、エチル、イソプロピルまたはフェニルであり、ｎが１である化学式１の化合物は、下記１）〜６）の段階を含んで下記反応スキーム２でのように製造できる：
１）前記反応スキーム１の１）段階で得た化学式４の化合物を化学式１３の化合物と反応させ、化学式１４のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式１４の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式１５のα−臭素化ベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式１５のα−臭素化化合物を化学式８のチオアミド化合物と反応させ、化学式１６のチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
４）前記３)段階で得た化学式１６の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式１７の臭素化チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
５）前記４）段階で得た化学式１７の化合物を化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式１８のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
６）前記５）段階で得た化学式１８の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｂのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００５３】
【化１２】
2010534648.tif 000013
【００５４】
前記反応スキーム２において、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピルまたはフェニルであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００５５】
Ｒ１がＣＨ２ＮＨＲ６またはＮＨＲ６（Ｒ６が水素の場合を除く）であり、ｎが１である化学式１の化合物は、下記１）〜４）の段階を含んで下記反応スキーム３でのように製造できる：
１）前記反応スキーム１の３）段階で得た化学式７の化合物をチオウレア化合物（１９）と反応させ、化学式２０のアミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式２０の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式２１の臭素化アミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式２１の化合物を化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式２２のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
４）前記３）段階で得た化学式２２の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｃのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００５６】
【化１３】
2010534648.tif 000014
【００５７】
前記反応スキーム３において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００５８】
Ｒ１がＣＨ２ＮＲ６Ｒ７またはＮＲ６Ｒ７（Ｒ６およびＲ７の両者ともが水素の場合を除く）である化学式１の化合物は、下記１）〜３）の段階を含んで下記反応スキーム４でのように製造できる：
１）前記反応スキーム３の１）段階で得た化学式２０の化合物を化学式２３の化合物と反応させ、化学式２４のチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式２４の化合物をホルムアルデヒドおよび化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式２５のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
３）前記２）段階で得た化学式２５の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｄのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００５９】
【化１４】
2010534648.tif 000015
【００６０】
前記反応スキーム４において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびｎは前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００６１】
Ｒ１がメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニルまたはシクロヘキシルである化学式１の化合物は、下記１）〜４）の段階を含んで下記反応スキーム５でのように製造できる：
１）前記反応スキーム１の４）段階で得た化学式９の化合物を硝酸と反応させ、化学式２６の亜硝酸基を含むチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式２６の化合物を鉄または塩化錫二水和物と反応させ、化学式２７のアミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式２７の化合物を化学式２８のハライド反応物と反応させ、１次アミンが置換された化学式２９のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
４）前記３）段階で得た化学式２９の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｅのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００６２】
【化１５】
2010534648.tif 000016
【００６３】
前記反応スキーム５において、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニルまたはシクロヘキシルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ８、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００６４】
Ｒ１がメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニルまたはシクロヘキシルである化学式１の化合物は、下記１）および２）の段階を含んで下記反応スキーム６でのように製造できる：
１）反応スキーム５の２）段階で得た化学式２７の化合物を化学式２８のハライド化合物と反応させ、１次アミンが置換された化学式３０のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
２）前記１）段階で得た化学式３０の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｆのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００６５】
【化１６】
2010534648.tif 000017
【００６６】
前記反応スキーム６において、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニルまたはシクロヘキシルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ８（Ｒ８が水素の場合を除く）、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００６７】
Ｒ１がメチル、エチル、イソプロピルまたはフェニルである化学式１の化合物は、下記１）〜４）の段階を含んで下記反応スキーム７でのように製造できる：
１）前記反応スキーム１の３）段階で得た化学式７の化合物を化学式１１の１次または２次アミンと反応させ、化学式３１のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式３１の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式３２のα−臭素化化合物を得る段階、
３）前記２）段階で得た化学式３２の化合物を化学式８のチオアミド化合物と反応させ、化学式１２のチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
４）前記３）段階で得た化学式１２のベンゾニトリル誘導体をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ａのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００６８】
【化１７】
2010534648.tif 000018
【００６９】
前記反応スキーム７において、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、またはフェニルであり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００７０】
Ｒ１がメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニル、またはシクロヘキシルである化学式１の化合物は、下記１）の段階を含んで下記反応スキーム８でのように製造できる：
１）前記反応スキーム５の２）段階で得た化学式２７の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｇのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００７１】
【化１８】
2010534648.tif 000019
【００７２】
前記反応スキーム８において、Ｒ１はメチル、エチル、イソプロピル、フェニル、ピリジニル、またはシクロヘキシルであり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３は前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００７３】
Ｒ１がＣ１〜Ｃ６アルキルで置換されたまたは無置換の
【００７４】
【化１９】
2010534648.tif 000020
【００７５】
、ＣＨ２ＮＲ６Ｒ７またはＮＲ６Ｒ７（Ｒ６およびＲ７の両者ともが水素の場合を除く）である化学式１の化合物は、下記１）および２）の段階を含んで下記反応スキーム９でのように製造できる：
１）前記反応スキーム１の４）段階で得た化学式９の化合物をホルムアルデヒドおよび化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させて化学式１８のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
２）前記１）段階で得た化学式１８の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させ、化学式１ｂのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００７６】
【化２０】
2010534648.tif 000021
【００７７】
前記反応スキーム９において、Ｒ１はＣ１〜Ｃ６アルキルで置換されたまたは無置換の
【００７８】
【化２１】
2010534648.tif 000022
【００７９】
、ＣＨ２ＮＲ６Ｒ７またはＮＲ６Ｒ７（Ｒ６およびＲ７の両者ともが水素の場合を除く）であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＹは前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００８０】
Ｒ１がＣ１〜Ｃ６アルキルで置換されたまたは無置換の
【００８１】
【化２２】
2010534648.tif 000023
【００８２】
である化学式１の化合物は、下記１）〜５）の段階を含んで下記反応スキーム１０でのように製造できる：
１）前記反応スキーム１の３）段階で得た化学式７の化合物をチオウレア化合物と反応させ、化学式３３のアミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
２）前記１）段階で得た化学式３３の化合物を化学式３４の鎖の両末端がハロゲンで置換された化合物と反応させ、化学式３５のヘテロ環で置換されたチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
３）前記２）段階で得た化学式３５の化合物を臭素化合物と反応させ、化学式３６の臭素化アミノ−チアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体を製造する段階、
４）前記３）段階で得た化学式３６の化合物を化学式１１の１次または２次アミン化合物と反応させ、化学式３７のベンゾニトリル誘導体を製造する段階、および
５）前記４）段階で得た化学式３７の化合物をヒドロキシルアミンまたは塩酸アルコール溶液およびアンモニアと反応させて化学式１ｈのベンズアミジン誘導体を製造する段階。
【００８３】
【化２３】
2010534648.tif 000024
【００８４】
前記反応スキーム１０において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＹは前記化学式１の化合物で定義したとおりである。
【００８５】
本発明のチアゾール誘導体が置換されたベンズアミジン誘導体の製造方法を具体的に説明すると、次のとおりである：
前記反応スキーム１〜９において、化合物（２）、化合物（４）、化合物（５）、化合物（６）、アミン（１１）、化合物（１３）、化合物（１４）、チオアミド（８）、ハライド化合物（２３、２８）、鎖の両末端がハロゲンで置換された化合物（３）、および化合物（３４）は、商業的に市販される物質を使用し或いは公知の方法で簡単に合成して使用することができる。
【００８６】
次に、前記反応スキーム１について具体的な化合物の例を挙げて説明する。
【００８７】
段階１）では、４−シアノフェノール（２；Ｒ４＝Ｈ、Ｘ３＝Ｏ）と１−ブロモ−５−クロロペンタン（３；Ｂｒ−Ｘ２−Ｃｌ：Ｘ２＝ペンチレン）とを塩基存在の下に反応させて４−（５−クロロペントキシ）ベンゾニトリル（４）を製造する。この際、使用される塩基は無機塩基を使用することができ、好ましくは炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、および水素化ナトリウムよりなる群から選ばれたものを使用する。反応は１０〜９０℃で１〜９時間行うことが好ましく、反応溶媒としてはアセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を使用することが好ましい。
【００８８】
段階２）では、前記段階１）で製造された４−（５−クロロペントキシ）ベンゾニトリル誘導体（４）と４−ヒドロキシアセトフェノン（５；Ｒ３＝Ｈ、Ｘ１＝Ｏ）とを塩基存在の下に反応させて４−［５−（４−アセチル−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル（６）を製造する。化合物（６）を製造するために使用される塩基としては無機塩基を使用することができ、好ましくは炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、および水素化ナトリウムよりなる群から選ばれたものを使用する。反応は１０〜９０℃で１〜９時間行うことが好ましく、反応溶媒としてはアセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を使用することが好ましい。
【００８９】
段階３）では、前記段階２）で製造された４−［５−（４−アセチル−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル誘導体（６）と臭素化合物とを反応させ、α−臭素化化合物としての４−｛５−［４−（２−ブロモ−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（７）を製造する。この際、反応に使用される試薬は臭化銅（ＩＩ）または臭素を使用することができ、反応は２０〜８０℃で８〜２４時間行うことが好ましく、反応溶媒としては酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルムなどを使用する。
【００９０】
段階４）では、前記段階３）で製造されたα−臭素化化合物（７）をチオアミド化合物（８）と反応させ、チアゾール環を有する化合物（９）を製造する。この際、反応に使用されるチオアミド化合物（８）は、化学式１の化合物において置換基Ｒ１を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切な置換基を有するチオアミド化合物（８）を選択することができる。反応温度と時間はチオアミド化合物（８）の種類によって異なり、６０〜９０℃で５〜２４時間反応させることが好ましい。このようなチオアミド化合物（８）としては、例えばチオアセトアミド、チオプロピオンアミド、チオイソブチルアミド、トリメチルチオアセトアミド、チオヘキサノアミド、シクロヘキサンカルボチオン酸アミド、Ｎ−（２−アミノ−２−チオキソエチル）−２−メチルプロパンアミド、ピペリジン−４−カルボチオン酸アミド、モルホリン−４−カルボチオン酸アミド、チオウレア、アミジノチオウレア、チオベンズアミド、グリシンチオアミド、２，２−ジメチルチオプロピオンアミド、Ｎ−メチルチオウレア、Ｎ−エチルチオウレア、Ｎ−プロピルチオウレアなどがあり、商業的に市販される物質或いは公知の方法で簡単に合成することが可能な化合物である。また、反応溶媒としてはエタノール単一溶媒、またはエタノールと水との混合溶媒を使用する。
【００９１】
段階５）では、前記段階４）で製造したチアゾール環を有する化合物（９）を臭素と反応させて化合物（１０）を製造する。この際、反応は０〜８０℃で１〜４時間行うことが好ましく、反応溶媒はクロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチルなどを使用することが好ましい。
【００９２】
段階６）では、前記段階５）で製造した化合物（１０）を１次または２次アミン化合物（１１）と反応させて化合物（１２）を製造する。化合物（１２）を製造するために使用されるアミン化合物（１１）は、化学式１の化合物において置換基Ｒ２を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切なアミン化合物（１１）を選択することができる。このようなアミン化合物（１１）は、メチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、ブチルアミン、ジブチルアミン、ｔ−ブチルアミン、イソプロピルオキシプロピルアミン、ピペリジン、ピロリジン、モルホリン、ピリミジン、イミダゾール、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン、ジメトキシエチルアミン、イソブチリルアミン、ジヒドロキシエチルアミン、２，６−ジメチルモルホリン、チオモルホリン、アミノエチルモルホリン、アミノプロピルイミダゾール、アミノプロピルモルホリン、アミノエチルイミダゾール、シクロペンチルアミン、シクロプロピルアミン、シクロヘキシルアミンなどを使用することができ、商業的に市販される物質を使用し、或いは当業者であれば公知の方法で簡単に合成して使用することができる。反応は２０〜１８０℃で１〜２４時間行うことが好ましい。また、反応溶媒としてアセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を用いて反応し、或いは溶媒なしでアミン自体のみを用いて反応する。
【００９３】
段階７）では、前記段階６）で製造した化合物（１２）をアミン化合物と塩基存在の下に反応させて化学式１の化合物（１ａ）を製造する。この際、Ｎ−ヒドロキシアミジンの場合（Ｒ５＝ＯＨ）はヒドロキシルアミン塩酸塩を塩基存在の下に反応させ、塩基はトリエチルアミン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）、ジエチルメチルアミン（Ｅｔ２ＮＭｅ）、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、ピリジン、２，６−ジメチルピリジンなどの有機塩基、および炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムアミド、水素化ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドなどの無機塩基よりなる群から選ばれたものを使用する。この際、反応は６０〜９０℃で１〜１５時間行うことが好ましく、反応溶媒はメタノール、エタノール、アセトニトリルなどの単一溶媒、またはこれらと水との混合溶媒を使用することが好ましい。
【００９４】
アミンの場合（Ｒ５＝Ｈ）は、まず塩酸メタノール溶液で１０〜３０℃で２４〜４８時間反応させてメトキシイミンを製造した後、溶媒を減圧除去し、アンモニアエタノール溶液を用いて４５〜６０℃の温度で高圧反応器によって２４〜５０時間反応させてアミジンを製造する。反応溶媒はエタノールを使用することが好ましい。
【００９５】
次に、前記反応スキーム２について具体的に説明する。
【００９６】
段階１）では、前記反応スキーム１の段階１）で製造された４−（５−クロロペントキシ）ベンゾニトリル誘導体（４）と４−ヒドロキシプロピオフェノン（１３；Ｒ３＝Ｈ、Ｘ１＝Ｏ）とを塩基存在の下に反応させて４−［５−（４−プロピオニル−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル（１４）を製造する。化合物（１４）を製造するために使用される塩基としては無機塩基を使用することができ、好ましくは炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、および水素化ナトリウムよりなる群から選ばれたものを使用する。反応は１０〜９０℃で１〜９時間行うことが好ましく、反応溶媒としてはアセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を使用することが好ましい。
【００９７】
段階２）では、前記段階１）で製造された４−［５−（４−プロピオニル−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル（１４）を臭素化合物と反応させ、α−臭素化化合物としての４−｛５−［４−（２−ブロモ−プロピオニル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１５）を製造する。この際、反応に使用される試薬は臭化銅（ＩＩ）または臭素を使用することができ、反応は２０〜８０℃で８〜２４時間行うことが好ましく、反応溶媒としては酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルムなどを使用する。
【００９８】
段階３）では、前記段階２）で製造されたα−臭素化化合物（１５）をチオアミド化合物（８）と反応させ、チアゾール環を有する化合物（１６）を製造する。反応に使用されるチオアミド化合物（８）は、化学式１の化合物において置換基Ｒ１を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切な置換基を有するチオアミド化合物（８）を選択することができる。この際、反応温度と時間はチオアミド化合物（８）の種類によって異なり、反応は６０〜９０℃で５〜２４時間行うことが好ましい。このようなチオアミド化合物（８）としては、例えばチオアセトアミド、チオプロピオンアミド、チオイソブチルアミド、トリメチルチオアセトアミド、チオヘキサノアミド、シクロヘキサンカルボチオン酸アミド、Ｎ−（２−アミノ−２−チオキソエチル）−２−メチルプロパンアミド、ピペリジン−４−カルボチオン酸アミド、チオウレア、アミジノチオウレア、チオベンズアミド、グリシンチオアミド、２，２−ジメチルチオプロピオンアミド、Ｎ−メチルチオウレア、Ｎ−エチルチオウレア、Ｎ−プロピルチオウレアなどがあり、商業的に市販される物質、または公知の方法で簡単に合成することが可能な化合物である。また、反応溶媒としてはエタノール単一溶媒、またはエタノールと水との混合溶媒を使用する。
【００９９】
段階４）では、前記段階３）で製造したチアゾール環を有する化合物（１６）をＮ−ブロモコハク酸イミドと反応させて化合物（１７）を製造する。反応は０〜８０℃で１〜４時間行うことが好ましく、反応溶媒は四塩化炭素、クロロホルム、ジクロロメタンなどを使用することが好ましい。
【０１００】
段階５）では、前記段階４）で製造した化合物（１７）を１次または２次アミン化合物（１１）と反応させて化合物（１８）を製造する。化合物（１８）を製造するために使用されるアミン化合物（１１）は、化学式１の化合物において置換基Ｒ２を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切なアミン化合物（１１）を選択することができる。このようなアミン化合物（１１）は、メチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、ブチルアミン、ジブチルアミン、ｔ−ブチルアミン、イソプロピルオキシプロピルアミン、ピペリジン、ピロリジン、モルホリン、ピリミジン、イミダゾール、Ｎ−メチルピペラジン、Ｎ−メチルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン、ジメトキシエチルアミン、イソブチリルアミン、ジヒドロキシエチルアミン、２，６−ジメチルモルホリン、チオモルホリン、アミノエチルモルホリン、アミノプロピルイミダゾール、アミノプロピルモルホリン、アミノエチルイミダゾール、シクロペンチルアミン、シクロプロピルアミン、シクロヘキシルアミンなどを使用することができ、商業的に市販される物質を使用し、或いは当業者であれば公知の方法で簡単に合成して使用することができる。反応は２０〜１８０℃で１〜２４時間行うことが好ましい。また、反応溶媒としてアセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を用いて反応し、或いは溶媒なしでアミン自体のみを用いて反応する。
【０１０１】
段階６）では、前記段階５）で製造した１次または２次アミンで置換されたチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（１８）をアミン化合物と前記反応スキーム１の７）段階と同一の条件および方法で反応させて化学式１ｂの化合物を製造する。
【０１０２】
次に、前記反応スキーム３について具体的に説明する。
【０１０３】
段階１）では、前記反応スキーム１の３）段階で製造された４−｛５−［４−（２−ブロモ−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル化合物（７）をチオウレア（１９）と反応させ、置換されたアミノチアゾール基を有する化合物（２０）を製造する。
【０１０４】
段階２）では、前記段階１）で製造した、置換されたアミノチアゾール基を有する化合物（２０）を臭素と反応させて化合物（２１）を製造する。反応は０〜８０℃で１〜４時間行うことが好ましく、反応溶媒はクロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチルなどを使用することが好ましい。
【０１０５】
段階３）では、前記段階２）で製造した化合物（２１）と１次または２次アミン化合物（１１）とを反応させて化合物（２２）を製造する。化合物（２２）を製造するために使用されるアミン化合物（１１）は、化学式１の化合物において置換基Ｒ２を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切なアミン化合物（１１）を選択することができる。このようなアミン化合物（１１）は、メチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、ブチルアミン、ジブチルアミン、ｔ−ブチルアミン、イソプロピルオキシプロピルアミン、ピペリジン、ピロリジン、モルホリン、ピリミジン、イミダゾール、Ｎ−メチルピペラジン、Ｎ−メチルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン、ジメトキシエチルアミン、イソブチリルアミン、ジヒドロキシエチルアミン、２，６−ジメチルモルホリン、チオモルホリン、アミノエチルモルホリン、アミノプロピルイミダゾール、アミノプロピルモルホリン、アミノエチルイミダゾール、シクロペンチルアミン、シクロプロピルアミン、シクロヘキシルアミンなどを使用することができ、商業的に市販される物質を使用し、或いは当業者であれば公知の方法で簡単に合成して使用することができる。反応は２０〜１８０℃で１〜２４時間行うことが好ましい。また、反応溶媒としてアセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を用いて反応し、或いは溶媒なしでアミン自体のみを用いて反応する。
【０１０６】
段階４）では、前記段階３）で製造したチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（２２）をアミン化合物と前記反応スキーム１の７）段階と同一の条件および方法で反応させて化学式１ｃの化合物を製造する。
【０１０７】
次に、前記反応スキーム４について具体的に説明する。
【０１０８】
段階１）は、前記反応スキーム３の段階１）で製造されたアミノチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（２０）をハライド化合物（２３）と反応させて化合物（２４）を製造する。ハライド化合物（２３）は、化合物（２０）のアミノ基に置換基を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切な置換基とハライドを有するハライド化合物（２３）を選択することができる。この際、反応温度と時間はハライド化合物（２３）の種類によって異なり、反応は０〜９０℃で５〜２４時間行うことが好ましい。このようなハライド化合物（２３）にはヨードメタン、ヨードエタン、ヨードプロパン、プロピルブロマイド、２−クロロエチルメチルエーテル、クロロエチルモルホリン、３−ブロモメチルピリジン、ブロモエタノール、ニコノイルクロライド、ベンジルブロマイド、ニコチノイルクロライド、エタンスルホニルクロライド、イソニコノイルクロライドなどがあり、商業的に市販される物質または公知の方法で簡単に合成することが可能な化合物である。また、反応溶媒としてはジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどを用いることが好ましい。
【０１０９】
段階２）は、前記段階１）で製造したチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（２４）をホルムアルデヒドおよびアミン化合物（１１）と共に反応させて化合物（２５）を製造する。化合物（２５）を製造するために使用するアミン化合物（１１）は、メチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、ブチルアミン、ジブチルアミン、ｔ−ブチルアミン、イソプロピルオキシプロピルアミン、ピペリジン、ピロリジン、モルホリン、ピリミジン、イミダゾール、Ｎ−メチルピペラジン、Ｎ−メチルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン、ジメトキシエチルアミン、イソブチリルアミン、ジヒドロキシエチルアミン、２，６−ジメチルモルホリン、チオモルホリン、アミノエチルモルホリン、アミノプロピルイミダゾール、アミノプロピルモルホリン、アミノエチルイミダゾール、シクロペンチルアミン、シクロプロピルアミン、シクロヘキシルアミンなどを使用することができ、商業的に市販される物質を使用し、或いは当業者であれば公知の方法で簡単に合成して使用することができる。反応は０〜９０℃で１〜２４時間行うことが好ましい。また、反応溶媒としてメタノール、エタノール、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を用いることが好ましい。
【０１１０】
段階３）では、前記段階２）で製造したチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（２５）をアミン化合物と前記反応スキーム１の７）段階と同一の条件および方法で反応させて化学式１ｄの化合物を製造する。
【０１１１】
次に、前記反応スキーム５について具体的に説明する。
【０１１２】
段階１）では、前記反応スキーム１の段階４）で製造した化合物（９）を硝酸と反応させて化合物（２６）を製造する。反応は０〜８０℃で１〜２４時間行うことが好ましい。また、反応溶媒としては酢酸またはトリフルオロ酢酸などが好ましい。
【０１１３】
段階２）では、前記段階１）で製造した化合物（２６）を鉄および塩化アンモニウムまたは塩化錫二水和物と反応させて化合物（２７）を製造する。反応は２０〜１００℃で１〜１５時間行うことが好ましく、反応溶媒はメタノール、エタノール、アセトニトリルなどの単一溶媒、またはこれらと水との混合溶媒を用いることが好ましい。
【０１１４】
段階３）では、前記段階２）で製造した化合物（２７）をハライド化合物（２８）と塩基存在の下に反応させて化合物（２９）を製造する。ハライド化合物（２８）は化合物（２７）のアミノ基に置換基を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切な置換基とハライドを有するハライド化合物（２８）を選択することができる。反応温度と時間はハライド化合物（２８）の種類によって異なり、反応は０〜９０℃で１〜２４時間行うことが好ましい。このようなハライド化合物（２８）にはヨードメタン、ヨードエタン、ヨードプロパン、プロピルブロマイド、２−クロロエチルメチルエーテル、クロロエチルモルホリン、３−ブロモメチルピリジン、ブロモエタノール、ニコノイルクロライド、ベンジルブロマイド、ニコチノイルクロライド、エタンスルホニルクロライド、イソニコノイルクロライドなどがあり、商業的に市販される物質または公知の方法で簡単に合成することが可能な化合物である。また、反応溶媒としてはジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどを用いることが好ましい。
【０１１５】
段階４）では、前記段階３）で製造した化合物（２９）をアミン化合物と前記反応スキーム１の７）段階と同一の条件および方法で反応させて化学式１ｅの化合物を製造する。
【０１１６】
次に、前記反応スキーム６について具体的に説明する。
【０１１７】
段階１）では、前記反応スキーム５の段階２）で製造した化合物（２７）をハライド化合物（２８）と塩基存在の下に反応させて化合物（３０）を製造する。ハライド化合物（２８）は、化合物（２７）のアミノ基に置換基を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切な置換基とハライドを有するハライド化合物（２８）を選択することができる。反応温度と時間は、ハライド化合物（２８）の種類によって異なり、反応は０〜９０℃で１〜２４時間行うことが好ましい。このようなハライド化合物（２８）には、ヨードメタン、ヨードエタン、ヨードプロパン、プロピルブロマイド、２−クロロエチルメチルエーテル、クロロエチルモルホリン、３−ブロモメチルピリジン、ブロモエタノール、ニコノイルクロライド、ベンジルブロマイド、ニコチノイルクロライド、エタンスルホニルクロライド、イソニコノイルクロライドなどがあり、商業的に市販される物質または公知の方法で簡単に合成することが可能な化合物である。また、反応溶媒としてはジクロロメタン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどを用いることが好ましい。
【０１１８】
段階２）では、前記段階１）で製造した化合物（３０）をアミン化合物と前記反応スキーム１の７）段階と同一の条件及び方法で反応させて化学式１ｆの化合物を製造する。
【０１１９】
次に、前記反応スキーム７について具体的に説明する。
【０１２０】
段階１）では、前記反応スキーム１の段階３）で製造した化合物（７）を１次または２次アミン化合物（１１）と反応させて化合物（３１）を製造する。アミン化合物（１１）は、化学式７の化合物において置換基Ｒ２を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切なアミン化合物（１１）を選択することができる。このようなアミン化合物（１１）は、メチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、ブチルアミン、ジブチルアミン、ｔ−ブチルアミン、イソプロピルオキシプロピルアミン、ピペリジン、ピロリジン、モルホリン、ピリミジン、イミダゾール、Ｎ−メチルピペラジン、Ｎ−メチルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン、ジメトキシエチルアミン、イソブチリルアミン、ジヒドロキシエチルアミン、２，６−ジメチルモルホリン、チオモルホリン、アミノエチルモルホリン、アミノプロピルイミダゾール、アミノプロピルモルホリン、アミノエチルイミダゾール、シクロペンチルアミン、シクロプロピルアミン、シクロヘキシルアミンなどを使用することができ、商業的に市販される物質を使用し、或いは当業者であれば公知の方法で簡単に合成して使用することができる。反応は０〜１００℃で１〜２４時間行うことが好ましい。反応溶媒としてはジクロロメタン、クロロホルム、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドを用いることが好ましい。
【０１２１】
段階２）では、前記段階１）で製造した化合物（３１）を臭素化合物と反応させてα−臭素化化合物（３２）を製造する。この際、反応に使用される試薬は、臭化銅（ＩＩ）または臭素を用いることができ、反応は０〜８０℃で１〜１５時間行うことが好ましく、反応溶媒としてはジクロロメタン、クロロホルム、酢酸エチルなどを用いる。
【０１２２】
段階３）では、前記段階２）で製造した化合物（３２）をチオアミド化合物（８）と反応させ、チアオール環を有する化合物（１２）を製造する。反応に使用されるチオアミド化合物（８）は、化学式１の化合物において置換基Ｒ１を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切な置換基を有するチオアミド化合物（８）を選択することができる。この際、反応温度と時間はチオアミド化合物（８）の種類によって異なり、反応は６０〜９０℃で５〜２４時間行うことが好ましい。このようなチオアミド化合物（８）としては、例えば、チオアセトアミド、チオプロピオンアミド、チオイソブチルアミド、トリメチルチオアセトアミド、チオヘキサノアミド、シクロヘキサンカルボチオン酸アミド、Ｎ−（２−アミノ−２−チオキソエチル）−２−メチルプロパンアミド、ピペリジン−４−カルボチオン酸アミド、モルホリン−４−カルボチオン酸アミド、チオウレア、アミジノチオウレア、チオベンズアミド、グリシンチオアミド、２，２−ジメチルチオプロピオンアミド、Ｎ−メチルチオウレア、Ｎ−エチルチオウレア、Ｎ−プロピルチオウレアなどがあり、商業的に市販される物質または公知の方法で簡単に合成することが可能な化合物である。また、反応溶媒としてはエタノール単一溶媒、またはエタノールと水との混合溶媒を用いる。
【０１２３】
段階４）では、前記段階３）で製造した化合物（１２）をアミン化合物と前記反応スキーム１の段階７）と同一の条件および方法で反応させて化学式１ａの化合物を製造する。
【０１２４】
次に、前記反応スキーム８について具体的に説明する。
【０１２５】
段階１）では、前記反応スキーム５の段階２）で製造した化合物（２７）をアミン化合物と前記反応スキーム１の段階７）と同一の条件および方法で反応させて化学式１ｇの化合物を製造する。
【０１２６】
次に、前記反応スキーム９について具体的に説明する。
【０１２７】
段階１）では、前記反応スキーム１の段階４）で製造されたチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（９）をホルムアルデヒドおよびアミン化合物（１１）と反応させて化合物（１８）を製造する。化合物（１８）を製造するためのアミン化合物（１１）としては、メチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、ブチルアミン、ジブチルアミン、ｔ−ブチルアミン、イソプロピルオキシプロピルアミン、ピペリジン、ピロリジン、モルホリン、ピリミジン、イミダゾール、Ｎ−メチルピペラジン、Ｎ−メチルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン、ジメトキシエチルアミン、イソブチリルアミン、ジヒドロキシエチルアミン、２，６−ジメチルモルホリン、チオモルホリン、アミノエチルモルホリン、アミノプロピルイミダゾール、アミノプロピルモルホリン、アミノエチルイミダゾール、シクロペンチルアミン、シクロプロピルアミン、シクロヘキシルアミンなどを使用することができ、商業的に市販される物質を使用し、或いは当業者であれば公知の方法で簡単に合成して使用することができる。反応は０〜９０℃で１〜２４時間行うことが好ましい。また、反応溶媒としてはメタノール、エタノール、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を使用することが好ましい。
【０１２８】
段階２）では、前記段階１）で製造したチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（１８）をアミン化合物と前記反応スキーム１の７）段階と同一の条件および方法で反応させて化学式１ｂの化合物を製造する。
【０１２９】
次に、前記反応スキーム１０について具体的に説明する。
【０１３０】
段階１）では、前記反応スキーム１の３）段階で製造された４−｛５−［４−（２−ブロモ−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル化合物（７）をチオウレアと反応させ、アミノチアゾール環を有する化合物（３３）を製造する。
【０１３１】
段階２）では、前記段階１）で製造されたアミノチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（３３）を鎖の両末端がハロゲンで置換された化合物（３４）と塩基存在の下に反応させ、Ｒ１がヘテロ環で置換されたチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（３５）を製造する。鎖の両末端がハロゲンで置換された化合物（３４）は、化学式１の化合物において置換基Ｒ１に
【０１３２】
【化２４】
2010534648.tif 000025
【０１３３】
を導入するための物質であって、置換基の種類によって適切な化合物（３４）を選択することができ、反応は０〜９０℃で４〜２４時間行うことが好ましい。このような化合物（３４）にはメクロエチルアミン、ビスジブロマイドエチルエステル、１，５−ジブロモペンタンなどがあり、商業的に市販される物質または公知の方法で簡単に合成することが可能な化合物である。また、反応溶媒としてはアセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を使用することが好ましい。
【０１３４】
段階３）では、前記段階２）で製造したチアゾール環を有する化合物（３５）を臭素と反応させて化合物（３６）を製造する。この際、反応は０〜８０℃で１〜４時間行うことが好ましく、反応溶媒はクロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチルなどを使用することが好ましい。
【０１３５】
段階４）では、前記段階３）で製造した化合物（３６）と１次または２次アミン化合物（１１）と反応させて化合物（３７）を製造する。化合物（３７）を製造するために用いられるアミン化合物（１１）は、化学式１の化合物において置換基Ｒ２を導入するための物質であって、置換基の種類に応じて適切なアミン化合物（１１）を選択することができる。このようなアミン化合物（１１）としては、メチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、ブチルアミン、ジブチルアミン、ｔ−ブチルアミン、イソプロピルオキシプロピルアミン、ピペリジン、ピロリジン、モルホリン、ピリミジン、イミダゾール、Ｎ−メチルピペラジン、Ｎ−メチルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチルアミン、ジメトキシエチルアミン、イソブチリルアミン、ジヒドロキシエチルアミン、２，６−ジメチルモルホリン、チオモルホリン、アミノエチルモルホリン、アミノプロピルイミダゾール、アミノプロピルモルホリン、アミノエチルイミダゾール、シクロペンチルアミン、シクロプロピルアミン、シクロヘキシルアミンなどを使用することができ、商業的に市販される物質を使用し、或いは当業者であれば公知の方法で簡単に合成して使用することができる。反応は２０〜１８０℃で１〜２４時間行うことが好ましい。また、反応溶媒としてアセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの溶媒を用いて反応し、或いは溶媒なしでアミン自体のみを用いて反応する。
【０１３６】
段階５）では、前記段階４）で製造したチアゾール基を有するベンゾニトリル誘導体（３７）をアミン化合物と前記反応スキーム１の７）段階と同一の条件および方法で反応させて化学式１ｈの化合物を製造する。
【０１３７】
別の様態において、本発明は、化学式１の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、骨粗しょう症の予防および治療用薬学的組成物に関する。
【０１３８】
本発明において、用語「骨粗しょう症」は、残っている骨には構造上何の異常もなく、骨を形成するミネラルと基質の量が過度に減少して骨にスポンジの如く多くの小孔が生じるから脆くて壊れ易い状態をいい、「骨減少症」（Ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ）とも呼ばれる。具体的な実施において、本発明の化学式１のベンズアミジン誘導体は破骨細胞の分化を低い濃度で著しく抑制した。
【０１３９】
本発明の組成物は、前記ベンズアミジン誘導体またはその薬学的に許容される塩に追加して同一または類似の機能を示す有効成分を少なくとも１種含有することができる。
【０１４０】
本発明の組成物は、投与のために、前述した成分以外に、薬学的に許容される担体を少なくとも１種さらに含んで製造することができる。薬学的に許容される担体は食塩水、滅菌水、リンガー液、緩衝食塩水、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、エタノール、またはこれらの組み合わせである。必要に応じて、抗酸化剤、緩衝液および静菌剤などの他の通常の添加剤を加えることができる。また、希釈剤、分散剤、界面活性剤、結合剤および潤滑剤をさらに添加し、水溶液、懸濁液および乳濁液などの注射用剤形、丸薬、カプセル、顆粒または錠剤に製剤化することができる。ひいては、当分野における適正な方法、或いはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ（最近版），Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡに開示されている方法を用いて、各疾患または成分に応じて好ましく製剤化することができる。
【０１４１】
本発明の組成物は、目的の方法に応じて経口投与または非経口投与（例えば静脈内、皮下、腹腔内または局所に適用）することができ、その投与量は、患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、排泄率および疾患の重症度などによってその範囲が様々である。前記ベンズアミジン誘導体の１日投与量は約５〜１０００ｍｇ／ｋｇであり、好ましくは約１０〜５００ｍｇ／ｋｇであり、１日１回〜数回に分けて投与する。
【０１４２】
本発明の組成物は、骨粗しょう症の予防および治療のために単独で、または手術、ホルモン治療、薬物治療、および生物学的反応調節剤を用いる方法と併用して使用することができる。
【実施例】
【０１４３】
以下、本発明の理解を助けるために好適な実施例および実験例を提示する。ところが、下記実施例および実験例は、本発明をより容易に理解するために提供されるものに過ぎず、本発明の内容を限定するものではない。
【０１４４】
〔製造例１：反応スキーム１による化合物（１２）の製造〕
＜１−１：４−（５−クロロペントキシ）−ベンゾニトリル（４）＞
８０ｍＬのアセトニトリルに３．０ｇ（２５．２ｍｍｏＬ）の４−シアノフェノールと３．６７ｇ（２７ｍｍｏＬ）の炭酸カリウムを順次加えた後、４．６７ｇ（２５．２ｍｍｏＬ）の１−ブロモ−５−クロロペンタンを加えた。次に８０〜８２℃の温度を維持しながら７時間混合物を還流させた後、加熱を停止して常温に冷やし、この反応液を酢酸エチルで希釈させ、精製水で洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を減圧蒸留した後、残渣をメタノールで再結晶し、この結晶を−１０℃のメタノールで洗浄した。収得物を減圧乾燥させて５．０９ｇ（収率：９０．３％）の目的化合物（４）を得た。
【０１４５】
1H-NMR(CDCl3) (ppm) 1.64(m, 2H), 1.82(m, 4H), 3.57(t, 2H), 4.01(t, 2H), 6.93(d, 2H), 7.57(d, 2H)。
【０１４６】
＜１−２：４−［５−（４−アセチル−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル（６）＞
０．１ＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに３０．０ｇ（２２０ｍｍｏＬ）の４−ヒドロキシアセトフェノンを加えてよく溶かした後、３６．５ｇ（２６４ｍｍｏＬ）の炭酸カリウムをゆっくり添加し、温度を５０℃に昇温した後、１時間攪拌した。前記１−１で得た４−（５−クロロペントキシ）−ベンゾニトリル５３．３ｇ（２２５ｍｍｏＬ）を同一の温度で添加した。混合物を９５℃まで加熱して５時間攪拌した。この反応液を室温に冷却させ、酢酸エチルで希釈し、有機層を水と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、メタノールで再結晶し、減圧乾燥させて６３．０ｇ（収率：８８％）の目的化合物（６）を得た。
【０１４７】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.56(m, 2H), 1.80(m, 4H), 2.51(s, 3H), 4.08(m, 4H), 7.02(d, 2H), 7.09(d, 2H), 7.75(d, 2H), 7.92(d, 2H)。
【０１４８】
＜１−３：４−｛５−［４−（２−ブロモ−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（７）＞
前記１−２で得た４−［５−（４−アセチル−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル化合物（６）６３．０ｇ（１９５ｍｍｏＬ）を２００ｍＬの酢酸エチルに溶かし、８７．０ｇ（３９０ｍｍｏＬ）の臭化銅（ＩＩ）を加えた。混合物を７０℃の温度で８時間還流させた。この反応液を常温に冷やした後、反応中に生じた塩を濾過して除去し、酢酸エチル層を炭酸水素ナトリウム溶液と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、メタノールで再結晶し、減圧乾燥させて６２．６ｇ（収率：８０％）の目的化合物（７）を得た。
【０１４９】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.79(m, 4H), 4.08(m, 4H), 4.83(s, 2H), 7.07(m, 4H), 7.75(d, 2H), 7.97(d, 2H)。
【０１５０】
＜１−４：４−｛５−［４−（２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（９）＞
前記１−３で得た４−｛５−［４−（２−ブロモ−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル化合物（７）４０．０ｇ（９９．４ｍｍｏＬ）を１５０ｍＬのエタノールに加えた後、１４．９ｇ（１９９ｍｍｏＬ）のチオアセトアミドを加えた。混合物を８０℃の温度で１２時間還流させた。この反応液を常温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、炭酸水素ナトリウム溶液と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、メタノールで再結晶し、減圧乾燥させて２５．５ｇ（収率：６８％）の目的化合物（９）を得た。
【０１５１】
1H-NMR(CDCl3) (ppm) 1.58(m, 2H), 1.80(m, 4H), 2.69(s, 3H), 4.02(m, 2H), 4.08(m, 2H), 6.97(d, 2H), 7.10(d, 2H), 7.73(s, 1H), 7.75(d, 2H), 7.83(d, 2H)。
【０１５２】
＜１−５：４−｛５−［４−（５−ブロモ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１０）＞
前記１−４で得た４−｛５−［４−（２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（９）１３ｇ（３４ｍｍｏＬ）を１２０ｍＬのクロロホルムに加えた後、１．８ｍＬ（３４ｍｍｏＬ）の臭素を１２ｍＬのクロロホルムに希釈してゆっくり加えた。混合物を室温で３時間攪拌させた。この反応液をジクロロメタンで希釈させ、中亜硫酸ナトリウム溶液と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、減圧乾燥させて１５ｇ（収率：９２％）の目的化合物（１０）を得た。
【０１５３】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.58(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.65(s, 3H), 4.06(m, 4H), 7.01(d, 2H), 7.09(d, 2H), 7.74(d, 2H), 7.81(d, 2H)。
【０１５４】
＜１−６：４−｛５−［４−（２−メチル−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１２）＞
前記１−５で得た４−｛５−［４−（５−ブロモ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１０）１．１ｇ（２４ｍｍｏＬ）に１０ｍＬのモルホリンを加えた後、１２０℃で２２時間攪拌させた。この反応液を室温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、精製水と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して１７０ｍｇ（収率：１５％）の目的化合物（１２）を得た。
【０１５５】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.58(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.59(s, 3H), 2.78(m, 4H), 3.73(m, 4H), 4.01(m, 4H), 6.95(m, 4H), 7.58(d, 2H), 8.05(d, 2H)。
【０１５６】
〔製造例２：反応スキーム２による化合物（１８）の製造〕
＜２−１：４−［５−（４−プロピオニル−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル（１４）＞
０．１ＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに３０．０ｇ（２００ｍｍｏＬ）の４−ヒドロキシプロピオフェノンを加えてよく溶かした後、９．５９ｇ（２４０ｍｍｏＬ）の水酸化ナトリウムをゆっくり添加し、温度を７０℃に昇温した後、１時間攪拌した。前記製造例１−１で得た４５．６ｇ（２０４ｍｍｏＬ）の４−（５−クロロペントキシ）−ベンゾニトリル（４）を同一の温度で添加した後、９５℃まで加熱して５時間攪拌した。この反応液を室温に冷やし、酢酸エチルで希釈し、有機層を水と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、メタノールで再結晶し、減圧乾燥させて５６．９ｇ（収率：８４％）の目的化合物（１４）を得た。
【０１５７】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.06(t, 3H), 1.57(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.95(m, 2H), 4.08(m, 4H), 7.02(d, 2H), 7.09(d, 2H), 7.74(d, 2H), 7.91(d, 2H)。
【０１５８】
＜２−２：４−｛５−［４−（２−ブロモ−プロピオニル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１５）＞
前記２−１で得た４−［５−（４−プロピオニル−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル（１４）２０．０ｇ（５９．３ｍｍｏＬ）を１００ｍＬ の酢酸エチルに溶かし、２６．５ｇ（１１９ｍｍｏＬ）の臭化銅（ＩＩ）を加えた。混合物を７０℃の温度で８時間還流させた。この反応液を常温に冷やした後、反応中に生じた塩を濾過して除去し、酢酸エチル層を炭酸水素ナトリウム溶液と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、酢酸エチルとｎ−ヘキサンで再結晶し、減圧乾燥させて１９．７ｇ（収率：８０％）の目的化合物（１５）を得た。
【０１５９】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.73(d, 3H), 1.78(m, 4H), 4.09(m, 4H), 5.76(q, 1H), 7.07(m, 4H), 7.74(d, 2H), 7.98(d, 2H)。
【０１６０】
＜２−３：４−｛５−［４−（２，５−ジメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１６）＞
前記２−２で得た４−｛５−［４−（２−ブロモ−プロピオニル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１５）５．０７ｇ（１２．２ｍｍｏＬ）を５０ｍＬのエタノールに加えた後、１．８３ｇ（２４．４ｍｍｏＬ）のチオアセトアミドを加えた。その混合物を８０℃の温度で１２時間還流させた。この反応液を常温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、炭酸水素ナトリウム溶液と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、メタノールで再結晶し、減圧乾燥させて３．５９ｇ（収率：７５％）の目的化合物（１６）を得た。
【０１６１】
1H-NMR(CDCl3) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.78(m, 4H), 2.44(s, 3H), 2.58(s, 3H), 4.01(m, 4H), 6.97(m, 4H), 7.54(d, 2H), 7.57(d, 2H)。
【０１６２】
＜２−４：４−｛５−［４−（５−ブロモメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１７）＞
前記２−３で得た４−｛５−［４−（２，５−ジメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１６）３．５９ｇ（９．１５ｍｍｏＬ）に４０ｍＬの四塩化炭素を加えた後、１．７９ｇ（１０．１ｍｍｏＬ）のＮ−ブロモコハク酸イミドと１５０ｍｇ（０．９１５ｍｍｏＬ）の２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）を入れ、その混合物を４時間還流させた。この反応液を常温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、炭酸水素ナトリウム溶液と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。その後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、減圧乾燥させて３．８７ｇ（収率：９０％）の目的化合物（１７）を得た。
【０１６３】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.80(m, 4H), 2.46(s, 2H), 2.68(s, 3H), 4.08(m, 4H), 7.02(d, 2H), 7.09(d, 2H), 7.54(d, 2H), 7.74(d, 2H)。
【０１６４】
＜２−５：４−｛５−［４−（２−メチル−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１８）＞
前記２−４で得た４−｛５−［４−（５−ブロモメチル−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１７）５００ｍｇ（１．１ｍｍｏＬ）に１０ｍＬのアセトニトリルと０．１８ｍＬのモルホリンを加えた後、１時間還流させた。この反応液を常温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、精製水と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。その後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーで精製して１８０ｍｇ（収率：３５％）の目的化合物（１８）を得た。
【０１６５】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.59(m, 2H), 1.80(m, 4H), 2.51(m, 4H), 3.34(s, 3H), 3.61(m, 4H), 3.77(s, 2H), 4.03(m, 4H), 6.92(d, 2H), 7.01(d, 2H), 7.58(m, 4H)。
【０１６６】
〔製造例３：反応スキーム３による化合物（２２）の製造〕
＜３−１：４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２０）＞
前記製造例１−３で得た４−｛５−［４−（２−ブロモ−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（７）１．９８ｇ（４．９２ｍｍｏＬ）を２０ｍＬのエタノールに加えた後、４８８ｍｇ（５．４１ｍｍｏＬ）のＮ−メチルチオウレアを加え、その混合物を８０℃の温度で２時間還流させた。この反応液を常温に冷やし、水で再結晶した後、酢酸エチルで洗浄し、減圧乾燥させて１．７４ｇ（収率：９０％）の目的化合物（２０）を得た。
【０１６７】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.58(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.87(s, 3H), 4.00-4.09(m, 4H), 6.89(s, 1H), 6.93(d, 2H), 7.10(d, 2H), 7.76(m, 4H)。
【０１６８】
＜３−２：４−｛５−［４−（５−ブロモ−２−メチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２１）＞
前記３−１で得た４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２０）３．０ｇ（７．６ｍｍｏＬ）に３０ｍＬのクロロホルムを加えた後、０．４０ｍＬ（７．６ｍｍｍｏＬ）の臭素を入れ、その混合物を室温で１時間攪拌させた。この反応液から溶媒を除去した後、次の反応の出発物質として使用した。
【０１６９】
＜３−３：４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２２）＞
前記３−２で得た４−｛５−［４−（５−ブロモ−２−メチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２１）に１３ｍＬのモルホリンを加えた後、１２０℃で１時間攪拌させた。反応液を室温に冷やし、酢酸エチルで希釈させた後、炭酸水素ナトリウムと塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーで精製して９７０ｍｇ（収率：２７％）の目的化合物（２２）を得た。
【０１７０】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.58(m, 2H), 1.80(m, 4H), 2.72(m, 4H), 3.34(s, 3H), 3.71(m, 4H), 4.01(m, 4H), 6.92(m, 4H), 7.60(d, 2H), 7.92(d, 2H)。
【０１７１】
〔製造例４：反応スキーム４による化合物（２５）の製造〕
＜４−１：４−［５−（４−｛２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル（２４）＞
前記製造例３−１で得た４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２０）１０．０ｇ（２５．４ｍｍｏＬ）に１００ｍＬのジメチルスルホキシドを入れて溶解させた後、３．０５ｇ（７６．２４ｍｍｏＬ）の水素化ナトリウムと５．６７ｇ（３０．５ｍｍｏＬ）のＮ−（２−クロロエチル）モルホリン塩酸塩を加え、５０℃の温度で４時間攪拌させた。この反応液を常温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、精製水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーで精製して７．１６ｇ（収率：５６％）の目的化合物（２４）を得た。
【０１７２】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.45(m, 2H), 2.51(m, 4H), 3.07(s, 3H), 3.55(m, 4H), 3.62(m, 2H), 4.00-4.09(m, 4H), 6.94(s, 1H), 6.96(d, 2H), 7.11(d, 2H), 7.76(m, 4H)。
【０１７３】
＜４−２：４−［５−（４−｛２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル（２５）＞
前記４−１で得た４−［５−（４−｛２−［メチル−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミノ］−チアゾール−４−イル｝−フェノキシ）−ペンチルオキシ］−ベンゾニトリル（２４）５．００ｇ（９．８７ｍｍｏＬ）に３０ｍＬのエタノールを加えた後、７．６ｍＬ（９８．７ｍｍｏＬ）のホルムアルデヒド（３５％）と７．７ｍＬ（８８．８ｍｍｏＬ）のモルホリンを入れ、８０℃の温度で２時間還流させた。この反応液を常温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーで精製して３．８１ｇ（収率：６４％）の目的化合物（２５）を得た。
【０１７４】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.43-2.51(m, 8H), 2.55(m, 1H), 3.02(s, 3H), 3.16(m, 1H), 3.53-3.56(m, 12H), 4.01-4.11(m, 4H), 6.95(d, 2H), 7.10(d, 2H), 7.49(d, 2H), 7.76(d, 2H)。
【０１７５】
〔製造例５：反応スキーム５による化合物（２６）の製造〕
＜５−１：４−｛５−［４−（２−メチル−５−ニトロ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２６）＞
前記製造例１−４で得た４−｛５−［４−（２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（９）１２．９ｇ（３４．０ｍｍｏＬ）を１３０ｍＬの酢酸に溶かした後、６５％の硝酸２．３０ｍＬを加えた。温度を８０℃に昇温した後、混合物を３時間攪拌した。反応液を酢酸エチルで希釈させ、精製水と塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、０℃でメタノールから再結晶し、減圧乾燥させて１３ｇ（収率：９０％）の目的化合物（２６）を得た。
【０１７６】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.59(m, 2H), 1.81(m, 4H), 2.71(s, 3H), 4.09(m, 4H), 7.03(d, 2H), 7.10(d, 2H), 7.73(d, 2H), 7.75(d, 2H)。
【０１７７】
＜５−２：４−｛５−［４−（５−アミノ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２７）＞
前記製造例５−１で得た４−｛５−［４−（２−メチル−５−ニトロ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２６）１．２０ｇ（２．８３ｍｍｏＬ）に水とエタノールの１：１混合溶媒を加え、さらに７９０ｍｇ（１４．１ｍｍｏＬ）の鉄と３０ｍｇ（０．５７ｍｍｏＬ）の塩化アンモニウムを加えた後、８時間還流させた。反応液をジクロロメタンで希釈させ、炭酸水素ナトリウムと塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーで精製して５００ｍｇ（収率：４５％）の目的化合物（２７）を得た。
【０１７８】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.44(s, 3H), 3.99(t, 2H), 4.08(t, 2H), 5.35(s, 2H), 6.91(d, 2H), 7.10(d, 2H), 7.66(d, 2H), 7.75(d, 2H)。
【０１７９】
＜５−３：４−｛５−［４−（２−メチル−５−メチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２９）＞
前記製造例５−２で得た４−｛５−［４−（５−アミノ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２７）３．０ｇ（７．６ｍｍｏＬ）と５９０ｍｇ（１５ｍｍｏＬ）の水素化ナトリウムを６０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに加えた後、混合物を室温で３０分間攪拌した。反応液に０．９１ｍＬ（１５ｍｍｏＬ）のヨウ化メチルを同一の温度で加えた後、３０分間攪拌した。この反応液を酢酸エチルで希釈させ、精製水で洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーで分離し、減圧乾燥させて１．６ｇ（収率：５１％）の目的化合物（２９）を得た。
【０１８０】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.58(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.50(s, 3H), 2.61(s, 3H), 4.04(m, 4H), 6.92(m, 4H), 7.58(d, 2H), 7.89(d, 1H), 7.97(d, 1H)。
【０１８１】
〔製造例６：反応スキーム６による化合物（３０）の製造〕
＜６−１：４−｛５−［４−（５−ジメチルアミノ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝のベンゾニトリル（３０）＞
前記製造例５−２で得た４−｛５−［４−（５−アミノ−２−メチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル化合物（２７）１．００ｇ（２．５４ｍｍｏＬ）を１５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解させた後、１２８ｍｇ（５．３３ｍｍｏＬ）の水素化ナトリウムと０．３２ｍＬ（５．０８ｍｍｏＬ）のヨウ化メチルを加え、その混合物を７０℃で２時間攪拌した。反応液を酢酸エチルで希釈させ、精製水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーで分離し、減圧乾燥させて４００ｍｇ（収率：３７％）の目的化合物（３０）を得た。
【０１８２】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.50(s, 3H), 2.57(s, 6H), 4.00(t, 2H), 4.08(t, 2H), 6.94(d, 2H), 7.00(d, 2H), 7.74(d, 2H), 7.97(d, 2H)。
【０１８３】
〔製造例７：反応スキーム７による化合物（１２）の製造〕
＜７−１：４−｛５−［４−（２−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３１）＞
前記製造例１−３で得た４−｛５−［４−（２−ブロモ−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル化合物（７）３．０ｇ（７．５ｍｍｏＬ）を７０ｍＬのアセトニトリルに溶かした後、６８０ｍｇ（７．５ｍｍｏＬ）の１，２，４−トリアゾールナトリウムを加えた。この混合物を室温で１８時間攪拌した。反応液を酢酸エチルで希釈させ、精製水と塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、カラムクロマトグラフィーで分離して１．７ｇ（収率：５９％）の目的化合物（３１）を得た。
【０１８４】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.58(m, 2H), 1.82(m, 4H), 4.11(m, 4H), 5.92(s, 2H), 7.10(m, 4H), 7.76(d, 2H), 8.00(s, 1H), 8.02(d, 2H), 8.50(s, 1H)。
【０１８５】
＜７−２：４−｛５−［４−（２−ブロモ−２−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３２）＞
前記７−１で得た４−｛５−［４−（２−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３１）８５０ｍｇ（２．２ｍｍｏＬ）を５ｍＬの酢酸に溶かし、１８０ｍｇ（２．２ｍｍｏＬ）の酢酸ナトリウムを加えた後、温度を４０℃に昇温し、０．１１ｍＬ（２．２ｍｍｏＬ）の臭素を加えた後、同一の温度で３０分間攪拌させた。この反応液を常温に冷やした後、ジクロロメタンで希釈し、炭酸水素ナトリウム溶液と塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、減圧乾燥させて８８０ｍｇ（収率：８８％）の目的化合物（３２）を得た。
【０１８６】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.59(m, 2H), 1.80(m, 4H), 4.09(m, 4H), 7.10(m, 4H), 7.34(s, 1H), 7.75(d, 2H), 8.01(s, 1H), 8.03(d, 2H), 8.49(s, 1H)。
【０１８７】
＜７−３：４−｛５−［４−（２−メチル−５−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１２）＞
前記７−２で得た４−｛５−［４−（２−ブロモ−２−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３２）８８０ｍｇ（１．９ｍｍｏＬ）を１０ｍＬのエタノールに加えた後、２８０ｍｇ（３．８ｍｍｏＬ）のチオアセトアミドを加えた。この混合物を８０℃の温度で６時間還流させた。この反応液を常温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、炭酸カリウムと塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させた後、カラムクロマトグラフィーで精製して６０ｍｇ（収率：７％）の目的化合物（１２）をを得た。
【０１８８】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.56(m, 2H), 1.77(m, 4H), 2.76(s, 3H), 4.00(m, 4H), 6.91(m, 4H), 7.17(d, 2H), 7.58(d, 2H), 8.36(s, 1H), 8.85(s, 1H)。
【０１８９】
〔製造例８：反応スキーム９による化合物（１８）の製造〕
＜８−１：４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−５−モルホリン−４−イルメチル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１８）＞
前記製造例３−１で得た４−｛５−［４−（２−メチルアミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（２０）６．５０ｇ（１６．５ｍｍｏＬ）に３０ｍＬのエタノールを加えた後、１３．７ｍＬ（１６５ｍｍｏＬ）のホルムアルデヒド（３５％）と１４．３ｍＬ（１６５ｍｍｏＬ）のモルホリンを入れ、その混合物を７０℃の温度で２時間攪拌させた。この反応液を常温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーで精製して８６０ｍｇ（収率：１１％）の目的化合物（３３）を得た。
【０１９０】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.78(m, 4H), 2.41(m, 4H), 2.80(s, 3H), 3.34(m, 2H), 3.56(m, 4H), 4.01(m, 4H), 6.92(m, 4H), 7.49(d, 2H), 7.59(d, 2H)。
【０１９１】
〔製造例９：反応スキーム１０による化合物（３７）の製造〕
＜９−１：４−｛５−［４−（２−アミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３３）＞
記製造例１−３で得た４−｛５−［４−（２−ブロモ−アセチル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（７）２２．５ｇ（５５．９ｍｍｏＬ）を１００ｍＬのエタノールに加えた後、８．５１ｇ（１１２ｍｍｏＬ）のチオウレアを加えた。この混合物を８０℃の温度で１２時間還流させた。この反応液を常温に冷やした後、溶媒を除去し、メタノールで再結晶した後、減圧乾燥させて２０．７ｇ（収率：９８％）の目的化合物（３３）を得た。
【０１９２】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.78(m, 4H), 4.06(m, 4H), 7.04(d, 2H), 7.09(d, 2H), 7.10(s, 1H), 7.64(d, 2H), 7.75(d, 2H), 8.90(brs, 1H)。
【０１９３】
＜９−２：４−｛５−［４−（２−ピペリジン−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３５）＞
前記８−１で得た４−｛５−［４−（２−アミノ−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３３）１５ｇ（４０ｍｍｏＬ）を４５ｍＬのジメチルホルムアミドに溶かし、３．５ｇ（９０ｍｍｏＬ）の水素化ナトリウムをゆっくり加えた後、２０分間攪拌させた。６．０ｍＬ（４３ｍｍｏＬ）の１，５−ジブロモペンタンを加えた後、その混合物を５５℃〜６０℃で４時間攪拌させた。この反応物を酢酸エチルで希釈し、精製水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧蒸留した後、カラムクロマトグラフィーで精製し、減圧乾燥させて１２ｇ（収率：６７％）の目的化合物（３５）を得た。
【０１９４】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.57(m, 2H), 1.63(m, 6H), 1.77(m, 4H), 3.60(m, 4H), 4.04(m, 4H), 7.04(d, 4H), 7.10(s, 1H), 7.40(d, 2H), 7.68(d, 2H)。
【０１９５】
＜９−３：４−｛５−［４−（５−ブロモ−２−ピペリジン−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３６）＞
前記８−２で得た４−｛５−［４−（２−ピペリジン−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３５）２５０ｍｇ（０．５６ｍｍｏＬ）に１０ｍＬのクロロホルムを加えた後、０．０３ｍＬ（０．６７ｍｍｏＬ）の臭素を入れ、室温で１時間攪拌させた。この反応液で溶媒を除去した後、収得物を出発物質として使用した。
【０１９６】
＜９−４：４−｛５−［４−（５−モルホリン−４−イル−２−ピペリジン−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３７）＞
前記８−３で得た４−｛５−［４−（５−ブロモ−２−ピペリジン−１−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（３６）に０．９７ｍＬのモルホリンを加えた後、１２０℃で３時間攪拌させた。反応液を室温に冷やした後、酢酸エチルで希釈させ、炭酸水素ナトリウムと塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィーで精製して５０ｍｇ（収率：１７％）の目的化合物（３７）を得た。
【０１９７】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.59(m, 8H), 1.79(m, 4H), 2.75(m, 4H), 3.41(m, 4H), 3.73(m, 4H), 4.01(m, 4H), 6.92(m, 4H), 7.60(d, 2H), 7.92(d, 2H)。
【０１９８】
〔実施例１：Ｎ−ヒドロキシ−４−｛５−［４−（２−メチル−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンズアミジン（１）の製造〕
前記製造例１−６で得た４−｛５−［４−（２−メチル−５−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）−フェノキシ］−ペンチルオキシ｝−ベンゾニトリル（１２）１７０ｍｇ（０．３７ｍｍｏＬ）を１０ｍＬのエタノールに加え、０．１０ｍＬ（０．７３ｍｍｏＬ）のトリエチルアミンと５１ｍｇ（０．７３ｍｍｏＬ）のヒドロキシルアミン塩酸塩を加えた後、８０℃の温度で８時間還流攪拌させた。この反応物を減圧蒸留し、酢酸エチルで希釈した後、精製水と塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を減圧蒸留した後、カラムクロマトグラフィーで分離し、減圧乾燥させて前記目的化合物を得た。
【０１９９】
1H-NMR(DMSO-d6) (ppm) 1.58(m, 2H), 1.79(m, 4H), 2.59(s, 3H), 2.78(m, 4H), 3.73(m, 4H), 4.01(m, 4H), 5.71(s, 2H), 6.93-6.98(m, 4H), 7.58(d, 2H), 8.05(d, 2H), 9.45(s, 1H)。
【０２００】
〔実施例２〜７〕
前記製造例１〜６と同一の方法で得た化合物（１２）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ａ）を得た。
【０２０１】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表１に示した。
【０２０２】
【表１】
2010534648.tif 000026
【０２０３】
〔実施例８〜２２〕
製造例２〜５と同一の方法で得た化合物（１８）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ｂ）を製造した。
【０２０４】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表２および表３に示した。
【０２０５】
【表２】
2010534648.tif 000027
【０２０６】
【表３】
2010534648.tif 000028
【０２０７】
〔実施例２３〕
製造例３−３と同一の方法で得た化合物（２２）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ｃ）を得た。
【０２０８】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表４に示した。
【０２０９】
【表４】
2010534648.tif 000029
【０２１０】
〔実施例２４〜３６〕
製造例４−２と同一の方法で得た化合物（２５）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ｄ）を得た。
【０２１１】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表５および表６に示した。
【０２１２】
【表５】
2010534648.tif 000030
【０２１３】
【表６】
2010534648.tif 000031
【０２１４】
〔実施例３７〜４０〕
製造例５−３と同一の方法で得た化合物（２９）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ｅ）を得た。
【０２１５】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表７に示した。
【０２１６】
【表７】
2010534648.tif 000032
【０２１７】
〔実施例４１〜４３〕
製造例６−１と同一の方法で得た化合物（３０）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ｆ）を得た。
【０２１８】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表８に示した。
【０２１９】
【表８】
2010534648.tif 000033
【０２２０】
〔実施例４４〕
製造例７−３と同一の方法で得た化合物（１２）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ａ）を得た。
【０２２１】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表９に示した。
【０２２２】
【表９】
2010534648.tif 000034
【０２２３】
〔実施例４５〜４９〕
製造例５−２と同一の方法で得た化合物（２７）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ｇ）を得た。
【０２２４】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表１０に示した。
【０２２５】
【表１０】
2010534648.tif 000035
【０２２６】
〔実施例５０および５１〕
製造例８−１と同一の方法で得た化合物（１８）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ｂ）を得た。
【０２２７】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表１１に示した。
【０２２８】
【表１１】
2010534648.tif 000036
【０２２９】
〔実施例５２〕
製造例９−４と同一の方法で得た化合物（３７）を実施例１と同一の方法で製造して目的化合物（１ｈ）を得た。
【０２３０】
使用した溶媒および１Ｈ−ＮＭＲデータを表１２に示した。
【０２３１】
【表１２】
2010534648.tif 000037
【０２３２】
〔実験例１：破骨細胞の分化抑制効果〕
本発明のベンズアミジン誘導体が破骨細胞の形成および分化過程に及ぼす影響を調べるために、造骨細胞との共存培養によって評価した。
【０２３３】
＜１−１：細胞の準備＞
ａ）骨髄細胞の準備
６〜８週齢の雄ｄｄＹマウスから無菌的に頚骨を摘出し、摘出した頚骨から注射器（２１Ｇ、緑十字）を用いて骨髄細胞を回収し、α−ＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ社、炭酸水素ナトリウム２．０ｇ／Ｌ、ストレプトマイシン１００ｍｇ／Ｌ、ペニシリン１００，０００ｕｎｉｔ／ｍＬを添加した後、濾過滅菌する）５ｍＬに骨髄細胞を懸濁して集め、６００×ｇで５分間遠心分離して収去した。骨髄細胞内の赤血球を除去するために、トリス塩酸液（０．８３％ＮＨ４Ｃｌ、ｐＨ７．５）３ｍＬを添加してよく振とうした後、遠心分離によって回収した骨髄細胞の有核細胞数を確認し、共存培養のために直ちに使用した。
【０２３４】
ｂ）骨髄細胞の準備
１〜２日齢の新生ＩＣＲマウスから前駆骨と頭頂骨を無菌的に摘出してリン酸塩緩衝溶液（ＰＢＳ）で洗浄した後、混合酵素溶液（０．２％コラゲナーゼと０．１％ディスパーゼ）を連続的に６〜７回（１０、１０、１０、２０、２０、２０分）処理し、造骨細胞の特性を持つ細胞が多く存在する３〜６回群の細胞を集中的に収集して培養液（ｓｅｒｕｍ ｆｒｅｅ α−ＭＥＭ）で洗浄した。洗浄された細胞を１０％ ＦＢＳの含まれたα−ＭＥＭで２〜３日間培養した後、１次継代培養して集めた細胞を実験に使用し、回収した細胞を１×１０６細胞／ｍＬの濃度となるように回収して−７０℃で保管した。
【０２３５】
＜１−２：破骨細胞の分化程度の測定＞
ａ）試料の準備
本発明のベンズアミジン誘導体は全て滅菌蒸留水またはエタノールに溶解して各所望の濃度で希釈し、細胞培養液に入る最終試料の体積は１：１０００の比とした。
【０２３６】
ｂ）共存培養による試料との反応
破骨細胞の分化のために、前記１−１で準備した骨髄細胞と骨芽細胞を共存培養した。ＦＢＳの含まれたα−ＭＥＭ培地を用いて９６ウェルプレートに骨髄細胞（２５，０００ｃｅｌｌｓ／ｃｍ２）と骨芽細胞（１０，０００ｃｅｌｌｓ／ｃｍ２）を分注して入れた後、実験しようとする試料を入れて７日間培養した。培養する間にデキサメタゾン（１０−７Ｍ）とビタミンＤ３（１０−８Ｍ）などの分化因子を培養１日から複合投与し、２〜３日間毎に、前記試料と分化因子とが混合された新しい培地で交換した。
【０２３７】
ｃ）破骨細胞の分化程度の評価
１）ＴＲＡＰ(Tartaric Acid Resistance Alkaline Phosphatase)染色液の調製
ＴＲＡＰ染色液に対して陽性反応を示す破骨細胞の特性を用いて、成熟した破骨細胞を測定するマーカーとしてＴＲＡＰを使用した。
【０２３８】
ＴＲＡＰ染色液の調製は、基質ナフトールＡＳ−ＭＳホスフェイト（Ｓｉｇｍａ Ｎ−４８７５）５ｍｇおよび色素（Ｆａｓｔ Ｒｅｄ Ｖｉｏｌｅｔ ＬＢ ｓａｌｔ）２５ｍｇをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（約０．５ｍＬ）に溶かした。５０ｍＭの酒石酸を含んだ０．１Ｎ ＮａＨＣＯ３緩衝液５０ｍＬ（ｐＨ５．０）を添加した後、冷蔵保管して染色液として使用した。
【０２３９】
２）染色法
７日間培養した細胞から培養液を除去し、ＰＢＳで１回洗浄した後、１０％ホルマリンを含んだＰＢＳに細胞を２〜５分間固定した。前記細胞をエタノールとアセトンとの混合液（１／１）で約１分間再び固定した後、乾燥させた。ＴＲＡＰ染色液を１５分間処理した後、水洗乾燥させ、顕微鏡の下でＴＲＡＰ−陽性反応を示し、３つ以上の核を持つ破骨細胞のみを観察してその数を数えた。各実験群に対して３回以上の反復試験を行った。陰性対照群に対する破骨細胞分化抑制効能を百分率（％）で示した。
【０２４０】
その結果は表１３に示した。
【０２４１】
【表１３】
2010534648.tif 000038
【０２４２】
表１３に示すように、本発明のチアゾール誘導体が置換されたベンズアミジン誘導体は非常に低い濃度で破骨細胞に対する分化を効果的に抑制することが分かる。
【０２４３】
〔実験例２：細胞毒性実験〕
本発明のベンズアミジン誘導体の細胞毒性を調べるために、下記の実験を行った。
【０２４４】
薬物を適正の溶媒に１０−２Ｍの濃度で希釈した。準備された薬物を、細胞毒性に使用する細胞に適した培地に１０−６Ｍの濃度で希釈して９６ウェルプレートに１００μＬずつ分注した。細胞毒性に使用する細胞株を各ウェルに１．０×１０４細胞／１００μＬの数で入れた後、７２時間培養した。培養終結４時間前に、ＰＢＳに溶解した２ｍｇ／ｍＬのＭＴＴ[3-(4,5-dimetyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide]を２５μＬ添加した。反応終結の後、プレートを遠心分離し、培地を除去した後、ＤＭＳＯを１００μＬ添加してホルマザン(formazan)を溶解させた。最後に発色したプレートの吸光度を５４０ｎｍで測定した。細胞の生存程度は比較群に対比して％濃度で表わした。
【０２４５】
その結果は表１４に示した。
【０２４６】
【表１４】
2010534648.tif 000039
【０２４７】
表１４に示すように、本発明のベンズアミジン誘導体は細胞毒性が殆どないことが分かる。
【０２４８】
以下、本発明の組成物のための製剤例を例示する。
【０２４９】
製剤例：薬学的製剤
１．散剤の製造
化学式１のベンズアミジン誘導体                    ２ｇ
乳糖                                              １ｇ
前述した成分を混合し、気密布に充填して散剤を製造した。
【０２５０】
２．錠剤の製造
化学式１のベンズアミジン誘導体                    １００ｍｇ
コーンスターチ                                    １００ｍｇ
乳糖                                              １００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                          ２ｍｇ
前述した成分を混合した後、通常の錠剤の製造方法によって打錠して錠剤を製造した。
【０２５１】
３．カプセル剤の製造
化学式１のベンズアミジン誘導体                    １００ｍｇ
コーンスターチ                                    １００ｍｇ
乳糖                                              １００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                          ２ｍｇ
前述した成分を混合した後、通常のカプセル剤の製造方法によってゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造した。
【０２５２】
４．注射液剤の製造
化学式１のベンズアミジン誘導体                    １０μｇ／ｍＬ
薄い塩酸ＢＰ                                      ｐＨ３．５となるまで
注射用塩化ナトリウムＢＰ                          最大１ｍＬ
適切な容積の注射用塩化ナトリウムＢＰの中に化学式１のベンズアミジン誘導体を溶解させた後、生成された溶液のｐＨを薄い塩酸ＢＰを用いてｐＨ３．５に調節し、注射用塩化ナトリウムＢＰを用いて容積を調節し、十分混合した。溶液を透明ガラスからなる５ｍＬのタイプＩアンプル中に充填させ、ガラスを溶解させることにより、空気の上部格子の下に封入させ、１２０℃で１５分以上オートクレーブさせて殺菌することにより、注射液剤を製造した。
【国際調査報告】
2010534648.tif 000092
2010534648.tif 000093