(57)【要約】（Ｒ）−ニフラテルが、殺菌剤および静菌剤としての使用、ならびに（Ｒ）−ニフラテルを含有する医薬組成物と共に開示される；（Ｒ）−ニフラテルは、驚くべきことに、ニフラテルラセミ体または（Ｓ）−ニフラテルのいずれよりも良好な抗菌プロフィルを有することが判明した。（Ｒ）−ニフラテルと（Ｓ）−ニフラテルの両方を合成するための新規な手段も開示される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ｒ）−ニフラテル。
【請求項２】
外性器感染、窒感染、尿路感染、胃腸感染または呼吸器感染の治療で使用するための（Ｒ）−ニフラテル。
【請求項３】
前記感染は、バクテリアまたは原生動物いずれかによることを特徴とする、請求項１に記載の治療で使用するための（Ｒ）−ニフラテル。
【請求項４】
哺乳類、好ましくはヒトに投与されることを特徴とする、請求項１に記載の治療で使用するための（Ｒ）−ニフラテル。
【請求項５】
０．００１〜１０００ｍｇ／Ｋｇ／日の投薬レジメンで投与されることを特徴とする、請求項４に記載の治療で使用するための（Ｒ）−ニフラテル。
【請求項６】
（Ｒ）−ニフラテルと少なくとも一つの医薬として許容される賦形剤またはアジュバントとを含有することを特徴とする医薬製剤。
【請求項７】
（Ｒ）−ニフラテルを製造するため方法であって、以下のステップ：
（ａ）（Ｒ）−２−（ベンジルオキシメチル）オキシランをヒドラジンと反応させて化合物１；
【化１】
2015515998.tif 000013
を得るステップと、
（ｂ）化合物１を化合物２；
【化２】
2015515998.tif 000014
に転換するステップと、
（ｃ）化合物２を脱ベンジル化して化合物３；
【化３】
2015515998.tif 000015
を得るステップと、
（ｄ）化合物３を化合物４；
【化４】
2015515998.tif 000016
に転換するステップと、
（ｅ）化合物４を（Ｒ）−ニフラテルに転換するステップと
を含むことを特徴とする方法。
【請求項８】
（Ｓ）−ニフラテルを製造するため方法であって、以下のステップ：
（ａ）（Ｓ）−２−（ベンジルオキシメチル）オキシランをヒドラジンと反応させて化合物１；
【化５】
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を得るステップと、
（ｂ）化合物１を化合物２；
【化６】
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に転換するステップと、
（ｃ）化合物２を脱ベンジル化して化合物３；
【化７】
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を得るステップと、
（ｄ）化合物３を化合物４；
【化８】
2015515998.tif 000020
に転換するステップと、
（ｅ）化合物４を（Ｓ）−ニフラテルに転換するステップと
を含むことを特徴とする方法。
【請求項９】
ステップ（ａ）は、３０〜１００℃、好ましくは約９０℃で実施されることを特徴とする、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
ステップ（ａ）は、水などの極性溶媒中で、または好ましくは無溶媒条件で実施されることを特徴とする、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１１】
ステップ（ｂ）は、触媒量のアルカリまたはアルカリ土類金属のＣ１〜Ｃ４アルコキシド、好ましくはナトリウムメトキシドまたはナトリウムエトキシドの存在下で、化合物１をＣ１〜Ｃ４−ジアルキルカーボネート、好ましくはジエチルカーボネートと反応させ、続いて、カーバメート、好ましくはｔｅｒｔ−ブチル−カーバメートとして遊離アミノ基を保護することによって実施されることを特徴とする、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１２】
化合物１とジエチルカーボネートとの反応は、無溶媒で、または極性有機溶媒、好ましくはメタノール、ＴＨＦまたはＤＭＦ中で実施されることを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
遊離アミノ基の保護は、Ｃ１〜Ｃ４アルキルクロロホルメートまたはＣ１〜Ｃ４アルキルカーボネート、好ましくは、メチルクロロホルメート、エチルクロロホルメートまたはｄｉ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートとの反応によって実施されることを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
遊離アミノ基の保護は、好ましくは１００℃未満の温度で、より好ましくは６０から９０℃で、極性溶媒、好ましくはＴＨＦまたはＤＭＦ中で実施されることを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
ステップ（ｃ）は、アルコール、好ましくはＣ１〜Ｃ４アルコール、より好ましくはメタノールまたはエタノール中で、炭素担持パラジウムまたは炭素担持白金などの適切な脱ベンジル化触媒、好ましくは、炭素担持１０％白金の存在下で、適切な圧力、好ましくは１５から４５ｐｓｉでＨ２を用いて室温で実施されることを特徴とする、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１６】
ステップ（ｃ）は、水素転移条件下で、好ましくは、適切な有機溶媒、好ましくはＣ１〜Ｃ４アルコール、より好ましくはメタノールまたはエタノール中で、ギ酸アンモニウムおよび適切な脱ベンジル化触媒、好ましくは、触媒量の炭素担持１０％パラジウムの存在下で、適切な温度、好ましくは６０から９０℃で、化合物２を加熱することによって、実施されることを特徴とする、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１７】
ステップ（ｄ）は、最初に化合物３のヒドロキシ基を官能化し、続いてこうして得られた中間体をアルカリまたはアルカリ土類金属チオメトキシドと反応させることによって実施されることを特徴とする、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１８】
ヒドロキシ基の官能化は、適切な有機溶媒、好ましくは、二塩化メチレンなど非プロトン性有機溶媒中、トリエチルアミンなど適切な塩基の存在下で、化合物３を、塩化メタンスルホニル、塩化トシル、塩化トリフルオロメタンスルホニルまたはｐ−塩化ニトロベンゼンスルホニル、好ましくは塩化メタンスルホニルで処理することによって得られることを特徴とする、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
こうして得られた中間体を、好ましくは室温で、極性有機溶媒、好ましくはＤＭＦ中で、アルカリまたはアルカリ土類金属チオメトキシド、好ましくはナトリウムチオメトキシドと反応させることを特徴とする、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
ステップ（ｅ）は、最初に化合物４のカーバメートを脱保護して、続いて５−ニトロフラン−２−カーボアルデヒドと反応させることによって実施されることを特徴とする、請求項７または８に記載の方法。
【請求項２１】
カーバメート脱保護は、好ましくは室温で、化合物４を非プロトン性有機溶媒、好ましくはＴＨＦに溶解した溶液を、塩化水素またはトリフルオロ酢酸を有機非プロトン性溶媒、好ましくはジオキサンに溶解した溶液と反応させることによって実施されることを特徴とする、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
こうして得られた中間体を、極性有機溶媒、好ましくはアルコール、より好ましくはＣ１〜Ｃ４アルコール、より一層好ましくはエタノール中で、５−ニトロフラン−２−カーボアルデヒドと反応させることを特徴とする、請求項２０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、（Ｒ）−ニフラテル、（Ｒ）−ニフラテルを含む医薬組成物ならびに殺菌剤および静菌剤としてのその使用に関する。それはまた、（Ｒ）−ニフラテルと（Ｓ）−ニフラテル両方を合成するための新規な手段を提供するものであり、その化学式は、以下に報告する通りである。
【０００２】
【化１】
2015515998.tif 000003
【背景技術】
【０００３】
ニフラテル（ＣＡＳ  ４９３６−４７−４）は、強力な殺トリコモナス活性およびグラム陰性とグラム陽性両方の細菌に対して作用する広い抗菌スペクトルを有するラセミ体ニトロフラン誘導体である。それはまた、クラミジアトラコマチス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）およびマイコプラズマ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）種に対しても活性である。ニフラテルは、非常に安全な毒性プロフィルを有しており、マウスおよびラットにおける急性試験において非毒性であり、経口および窒内投与を反復しても十分に許容される。催奇性効果も観察されていないので、ニフラテルはまた、妊娠中でも指定される。この化合物は、外陰窒感染の治療およびピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ）の根絶のために現在使用されている。同じ疾患を治療するのに使用される他の薬物と対照的に、ニフラテル治療の期間中に抵抗現象はこれまで報告されていない。
【０００４】
ニフラテルおよびその合成が開示されている（例えば、特許文献１参照）。エナンチオピュアな（Ｓ）−エピクロロヒドリン（ＣＡＳ  ６７８４３−７４−７）から出発し、ラセミ体ニフラテルの合成に対して既に記載したのと類似の化学経路を使用する、（Ｓ）−ニフラテルの調製が開示されている（例えば、特許文献２参照）。（Ｓ）−ニフラテルは、ラセミ体化合物より良好な抗炎症性および抗真菌性活性を有することが開示されている（例えば、同じく特許文献２参照）が、（Ｒ）−ニフラテルの調製については情報が提供されておらず、ラセミ体化合物の分割によってそれを単離することは不可能であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】英国特許第９６９１２６号明細書
【特許文献２】中国特許出願第１０１０３７４３５号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｇｒｅｅｎ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｆｏｕｒｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ）Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ
【非特許文献２】Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｔｗｅｎｔｉｅｔｈ  Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆Ｗｉｌｌｃｉｎｓ：Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，２０００
【発明の概要】
【０００７】
本発明者らは、驚くべきことに、第１のステップで使用される試薬の立体化学に応じて、純粋な（Ｒ）−または（Ｓ）−ニフラテル鏡像体［（Ｒ）−または（Ｓ）−５−（メチルチオメチル）−３−（（５−ニトロフラン−２−イル）メチレンアミノ）オキサゾリジン−２−オン］のいずれかを生成する新規な合成反応系列を今般見出した。本発明者らは、さらにより驚くべきことに、（Ｒ）−ニフラテルがニフラテルラセミ体または（Ｓ）−ニフラテルのいずれよりも良好な抗菌プロフィルを有することを見出した。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】（Ｒ）−ニフラテル（１ａ）のプロフィルを示す図である。
【図２】（Ｓ）−ニフラテル（１ｂ）のプロフィルを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
したがって、本発明の一実施形態は、バクテリアまたは原生動物いずれかによる外性器感染、窒感染、尿路感染、胃腸感染、呼吸器感染の治療で使用するための（Ｒ）−ニフラテルによって代表される。本発明の別の実施形態は、（Ｒ）−ニフラテルまたは（Ｓ）−ニフラテルを調製するための方法によって代表される。具体的には、本発明の方法は、（Ｒ）鏡像体（ｌａ）を合成するためのスキーム１および（Ｓ）鏡像体（ｌｂ）を合成するためのスキーム２におけるステップを含む。
【００１０】
【化２】
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【００１１】
第１のステップ、すなわち定義されたステップ（ａ）は、市販の（Ｒ）−２−（ベンジルオキシメチル）オキシランをヒドラジンと反応させて化合物１を得ることを伴う。この反応は、過剰のヒドラジン水和物、通常６から９当量を使用して、適切な温度、一般に３０〜１００℃、好ましくは約９０℃で実施される。反応は、水などの極性溶媒中で、または好ましくは無溶媒条件で（すなわち、いかなる追加の溶媒も使用しないで反応物中において反応を実施することによって）実施される。
【００１２】
化合物１から化合物２への転換、すなわち、定義されたステップ（ｂ）は、好ましくは、最初に化合物１を環化して５員環オキサゾリジノンとなし、続いて遊離アミノ基を保護することによって実施される。化合物１の５員環オキサゾリジノンへの環化は、好ましくは、触媒量のアルカリまたはアルカリ土類金属のＣ１〜Ｃ４アルコキシド、好ましくはナトリウムメトキシドまたはナトリウムエトキシドの存在下で、Ｃ１〜Ｃ４−ジアルキルカーボネート、好ましくはジエチルカーボネートと反応させることによって実施される。反応は、溶媒に応じて、一般に１００℃未満、好ましくは６０から９０℃の温度での通常の加熱下、無溶媒で、または適切な溶媒、好ましくはメタノール、ＴＨＦまたはＤＭＦなど極性有機溶媒中で実施される。化合物２は、カーバメート、好ましくはｔｅｒｔ−ブチル−カーバメートとして遊離アミノ基を保護した後に得られる。この化学修飾は、溶媒に応じて、適切な温度、好ましくは１００℃未満、好ましくは６０から９０℃で、適切な溶媒、好ましくはＴＨＦまたはＤＭＦなど極性有機溶媒中で、化合物をＣ１〜Ｃ４アルキルクロロホルメートまたはＣ１〜Ｃ４アルキルカーボネート、一般にメチルクロロホルメート、エチルクロロホルメートまたはｄｉ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートで処理して実施される。
【００１３】
化合物２の化合物３への転換、すなわち、脱ベンジル化ステップ（ｃ）は、好ましくは、アルコールなどの適切な有機溶媒、好ましくはＣ１〜Ｃ４アルコール、より好ましくはメタノールまたはエタノール中で、炭素担持パラジウムまたは炭素担持白金などの適切な脱ベンジル化触媒、好ましくは炭素担持１０％パラジウムの存在下で、適切な圧力、好ましくは１５〜４５ｐｓｉでＨ２を用いて、室温、好ましくは２０〜２５℃で反応させて化合物３を得ることによって実施される。脱ベンジル化の同反応は、水素転移条件下で、例えば、アルコールなどの適切な有機溶媒、好ましくはＣ１〜Ｃ４アルコール、より好ましくはメタノールまたはエタノール中で、ギ酸アンモニウムおよび適切な脱ベンジル化触媒、好ましくは、触媒量の炭素担持１０％パラジウムの存在下で、適切な温度、好ましくは６０から９０℃で、化合物２を加熱することによって得ることができる。
【００１４】
化合物３の化合物４への転換、すなわち、ステップ（ｄ）は、好ましくは、最初にヒドロキシ基を官能化し、続いてこうして得られた中間体をアルカリまたはアルカリ土類金属チオメトキサイドと反応させることによって実施される。より詳細には、ヒドロキシ基の官能化は、適切な有機溶媒、好ましくは、二塩化メチレンなど非プロトン性有機溶媒中、トリエチルアミンなど適切な塩基の存在下で、化合物３を、塩化メタンスルホニル、塩化トシル、塩化トリフルオロメタンスルホニルまたはｐ−塩化ニトロベンゼンスルホニルで処理して得られる。次いで、この中間体を、適切な温度、一般に室温、より好ましくは２０から２５℃で、適切な有機溶媒、好ましくは、ＤＭＦなど極性有機溶媒中で、アルカリまたはアルカリ土類金属チオメトキシド、好ましくはナトリウムチオメトキシドと反応させて化合物４を得る。
【００１５】
化合物４の（Ｒ）−ニフラテルへの転換、すなわち、ステップ（ｅ）は、好ましくは、最初にカーバメートを脱保護して、続いて５−ニトロフラン−２−カーボアルデヒドと反応させることによって実施される。カーバメートの脱保護は、好ましくは、参照により本明細書に組み込まれる文献（例えば、非特許文献１参照）に開示されているものなど当技術分野で周知の方法を介して実施される；好ましくは、これは、適切な時間、一般に１８から９６時間、適切な温度、一般に室温、より好ましくは２０から２５℃で、化合物４をＴＨＦなど適切な有機溶媒、好ましくは非プロトン性溶媒に溶解した溶液を、塩化水素またはトリフルオロ酢酸を適切な有機非プロトン性溶媒、好ましくはジオキサンに溶解した溶液と反応させることによって得られる。適切な極性有機溶媒、一般にアルコール、好ましくは、エタノールなどのＣ１〜Ｃ４アルコール（または、かかるアルコールと水の混合物、好ましくはエタノール／水混合物）に溶解したこうして得られた中間体を、適切な温度、好ましくは室温、より好ましくは２０から２５℃で、適切な時間、通常１５から６０分間、適切な極性有機溶媒、一般にアルコール、好ましくは、エタノールなどＣ１〜Ｃ４アルコールに溶解した市販の５−ニトロフラン−２−カーボアルデヒドと反応させて、所望の（Ｒ）−ニフラテル（１ａ）を得る。
【００１６】
記載した合成ステップのすべてにおいて、通常の検査後、粗生成物は、必要であれば、クロマトグラフィー、粉砕、結晶化または分離用ＨＰＬＣなど通常の精製法によって精製することができる。
【００１７】
（Ｓ）−ニフラテル（１ｂ）の合成は、同じ反応系列を使用して得られるが、市販の（Ｓ）−２−（ベンジルオキシメチル）オキシランから出発する。全体の反応系列は、スキーム２に報告する通りである。
【００１８】
【化３】
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【００１９】
必要であれば、（Ｓ）−および（Ｒ）−ニフラテルの鏡像体過剰率は、例えば、アセトニトリル／エタノール（１：１）など適切な溶媒中の結晶化によってさらに増加させることができる。鏡像体過剰率は、Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ−ＲＨ１５０×２．１ｍｍ×５μｍなどキラルＨＰＬＣカラムを使用して評価することができる（図１：（Ｒ）−ニフラテル（１ａ）のプロフィルおよび図２：（Ｓ）−ニフラテル（１ｂ）のプロフィル）。
【００２０】
（Ｒ）−ニフラテルは、公知の方法にしたがって医薬として製剤することができる。本発明の化合物は、通常の方式で、例えば、経口で、静脈内に、皮下に、経粘膜的に（頬側に、舌下で、経尿道的および直腸へを、含む）、局所的に、経皮的に、吸入によって、または任意の他の投与経路を使用して投与することができる。
【００２１】
（Ｒ）−ニフラテルは、公知の方法にしたがって医薬として製剤することができる。医薬組成物は、治療の目的で選定することができる。前記組成物は、それらの成分を適切に混合することによって調製され、経口または非経口投与のために適切に適合化される；それらは、錠剤、カプセル、経口剤、粉末、顆粒、トローチ剤、再生可能粉末、液体の注射用もしくは注入用溶液、懸濁液、乳化液または坐薬として製剤することができる。経口投与用の錠剤およびカプセルは、通常、単一投与形態として提供され、結合剤、フィラー、稀釈剤、錠剤形成剤、潤滑剤、洗剤、崩壊剤、染料、芳香剤および湿潤剤などの通常の賦形剤を含有することができる。錠剤は、当技術分野で周知の方法にしたがってコートすることができる。適切なフィラーとして、セルロース、マンニトール、ラクトースおよびさらなる類似の剤が挙げられる。適切な崩壊剤として、デンプン、ポリビニルピロリドンおよびデンプンナトリウムグリコレートなどのデンプン誘導剤が挙げられる。適切な潤滑剤として、例えば、ステアリン酸マグネシウムが挙げられる。適切な湿潤剤として、ラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。
【００２２】
固体経口組成物は、通常の混合、充填または圧縮によって調製することができる。多量のフィラーを含有する組成物中の有効成分を分散するために混合操作を反復することが可能である。これらの操作は、通常のものである。
【００２３】
液状経口剤は、例えば、水性もしくは油性懸濁液または溶液、乳化液、シロップもしくはエリクシルとして製剤することができ、または凍結乾燥生成物として提供して使用前に水もしくは適切なビヒクルで再生することができる。前記液状剤は、懸濁剤、例えば、ソルビトール、シロップ、メチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは水素化食用脂肪、乳化剤、例えば、レシチン、ソルビタンモノオレエートまたはアカシア；非水性ビヒクル（食用油を含むことができる）、例えば、アーモンド油、分別ココナツ油、グリセリンエステルなどの油性エステル、プロピレングリコール、またはエチルアルコール；防腐剤、例えば、メチルもしくはプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸またはソルビン酸および所望であれば通常の芳香剤および染料などの通常の添加剤を含有することができる。
【００２４】
経口剤として、腸溶性のコート錠剤や顆粒など通常の徐放形態が挙げられる。
【００２５】
非経口投与では、化合物と殺菌ビヒクルとを含有する流体投与単位を調製することが可能である。化合物は、選定されたビヒクルおよび濃度に応じて、懸濁または溶解させることができる。非経口溶液は、通常、化合物をビヒクル中に溶解し、ろ過によって殺菌し、適切なバイアルに充填し、密封することによって調製される。有利には、局所麻酔薬、防腐剤および緩衝剤などの適切なアジュバントをビヒクル中に溶解することも可能である。安定性を向上させるために、組成物は、バイアルに充填し、真空下で水を除去した後に凍結することができる。非経口懸濁液は、実質的に同じ方式で調製することができるが、化合物はビヒクル中に溶解するよりも懸濁させる場合があるという点で異なり、それらは、殺菌ビヒクル中に懸濁させる前にエチレンオキシドによる処理によって殺菌することができる。有利には、本発明の化合物の均一な分散を容易にする目的で界面活性剤または湿潤剤を組成物中に含ませることが可能である。
【００２６】
本発明の化合物は、局所的に投与することができる。局所剤として、例えば、軟膏、クリーム、ゲル、ローション、溶液、ペーストなどを挙げることができ、および／またはリポソーム、ミセル、および／もしくはミクロ球を含有するように調製することができる。医薬製剤の技術分野で周知のように、軟膏は、通常、ワセリンまたは他の石油誘導体に基づく準固形剤である。軟膏の例として、油性軟膏基材、例えば、植物油、動物から得られる脂肪、および石油から得られる準固形炭化水素、乳化性軟膏基材、例えば、ヒドロキシステアリンスルフェート、無水ラノリンおよび親水性ワセリン、乳化軟膏基材、例えば、セチルアルコール、グリセリルモノステアレート、ラノリンおよびステアリン酸、ならびに多様な分子量のポリエチレングリコールから調製される水溶性軟膏基材が挙げられる。（例えば、非特許文献２参照）。やはり当技術分野で周知のように、クリームは、粘性のある液体または準固形乳化剤であり、油相と、乳化剤と水性相とを含有する。油相は、一般に、ワセリン、およびセチルまたはステアリルアルコールなどの脂肪族アルコールからなる。水性相は、一般に、保湿剤を含有する。クリーム製剤中の乳化剤は、非イオン性、アニオン性、カチオン性または両性界面活性剤のなかから選定される。単一相ゲルは、担体液体全体に実質的に均一に分散した有機高分子を含有し、これは通常、水性であるが、また、好ましくは、アルコールおよび任意選択で油を含有する。好ましいゲル化剤は、架橋アクリル酸ポリマー（「カルボマー」ポリマー、例えば、商標Ｃａｒｂｏｐｏｌで市場から入手できるカルボキシポリアルキレンなどである。また、ポリエチレンオキシド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーおよびポリビニルアルコールなどの親水性ポリマー；ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートおよびメチルセルロースなどのセルロース系ポリマー；トラガカントおよびキサンタンガムなどのガム；アルギン酸ナトリウム；ならびにゼラチンも好ましい。均一なゲルを調製するために、アルコールまたはグリセリンなどの分散剤を添加してもよく、ゲル化剤は、粉砕、機械的混合、および／または撹拌によって分散させてもよい。
【００２７】
本発明の化合物はまた、経皮放出を介して投与することもできる。典型的な経皮剤として、クリーム、油、ローションやペーストなどの通常の水性および非水性ベクターが挙げられ、またはメンブランまたは薬用プラスターとして提供することもできる。一実施形態では、本発明の化合物は、皮膚に接着する感圧性プラスター中に分散している。この製剤によって、化合物が皮膚を通ってプラスターから患者に広がることが可能になる。真皮中を薬物が徐放するために、天然ゴムおよびシリコーンを感圧性接着剤として使用することができる。
【００２８】
通常実施されているように、組成物には、通常、当該の治療で使用するための手書きまたは印刷説明書が添付されている。
【００２９】
（Ｒ）−ニフラテルの投与量は、患者およびその立場、疾患の進行度、選定された投与法、選定された一日の投与回数などの要因により大きく変動する。参考として、これらは、０．００１〜１０００ｍｇ／Ｋｇ／日の用量間隔で投与することができる。
【００３０】
［実施例］
１．化学合成
別段の指示のない限り、出発試薬はすべて、市販されていることが判明しており、いかなる事前の精製をすることなく使用した。本発明の化合物は、通常の合成手段を使用して容易に調製することができる。これらの反応では、当業者にそれ自体が公知であるがより詳細には言及されていない変形形態を利用することも可能である。さらに、本発明の化合物を調製するための他の方法は、以下の反応スキームおよび実施例に照らして当業者に容易に明白である。別段の指示のない限り、変数はすべて上で定義されている通りである。
【００３１】
「類似の」手段の使用という場合、当業者には理解されるが、かかる手段には、微小な変形、例えば、反応温度、試薬／溶媒量、反応時間、検査条件またはクロマトグラフィー精製条件の変形を含むことができる。
【００３２】
本明細書で使用される略語を表１にまとめる。
【００３３】
【表１】
2015515998.tif 000006
【００３４】
別段の指示のある場合を除いて、温度はすべて、℃（摂氏）またはＫ（絶対）である。
【００３５】
プロトン核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルをＢｒｕｋｅｒ  ３００ＭＨｚで記録した。化学シフトをｐｐｍ（ｐｐｍ、δ単位）で表す。分裂パターンは、明白な多重項を示し、ｓ（一重項）、ｄ（二重項）、ｔ（三重項）、ｑ（四重項）、ｑｕｉｎｔ（五重項）、ｓｘｔ（六重項）、ｍ（多重項）、ｂｒ．ｓ（広い一重項）として示される。
【００３６】
以下の条件でＬＣ−ＭＳを記録した：
（方法Ａ）：Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ  ＺＱ（Ｗａｔｅｒｓ）に接続したＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ：ＥＳＩポジティブモード。カラムＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ−ＢＥＨＣ１８（５０×２．１ｍｍ、１．７μｍ）。流速０．５ｍＬ／ｍｉｎ、４０℃におけるカラム。
【００３７】
移動相：Ａ相＝Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ９５／５＋０．１％ＴＦＡ；Ｂ相＝Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ５／９５＋０．１％ＴＦＡ。
【００３８】
【表２】
2015515998.tif 000007
【００３９】
（方法Ｂ）Ｓａｍｐｌｅ  ＭａｎａｇｅｒおよびＭａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ  ＺＱ（Ｗａｔｅｒｓ）に接続した２９９６  ＰＤＡ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ（Ｗａｔｅｒｓ）を備えたＵＰＬＣ。ＺＱインターフェース：ＥＳＩポジティブモード。１０２から９００ａｍｕのフル走査。キャピラリー３．２Ｖ、コーン２５Ｖ、エクストラクタ３Ｖ、ＲＦ０．３Ｖ、ソース温度１１５°Ｃ、脱溶媒和温度３５０°Ｃ、ガス流速８００ｌ／ｈ、コーン１００ｌ／ｈ。カラムＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ−ＢＥＨ  Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ、１．７μｍ）。流速０．６ｍＬ／分、４０℃におけるカラム、注入２μｌ。
【００４０】
移動相：Ａ相＝Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ９５／５＋０．１％ＴＦＡ；Ｂ相＝Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ５／９５＋０．１％ＴＦＡ
【００４１】
【表３】
2015515998.tif 000008
【００４２】
（方法Ｃ）静止相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ−ＲＨ１５０×２．１ｍｍ×５μｍ。方法：定組成Ａ７０％、Ｂ３０％。流速：０．３ｍＬ／分
移動相：Ａ相＝Ｈ２Ｏ＋０．１％酢酸；Ｂ相＝ＣＨ３ＣＮ
【００４３】
（実施例１）（Ｓ）−ニフラテル
＜１Ａ．（Ｓ）−３−アミノ−５−（ベンジルオキシメチル）オキサゾリジン−２−オン＞
（Ｓ）−２−（ベンジルオキシメチル）オキシラン（２．５ｇ、１５．２３ｍｍｏｌ）を、事前に９０℃で加熱したヒドラジン一水和物（５．４４ｇ、１０７ｍｍｏｌ）に滴下した。撹拌下で混合物を３０分間還流した。６時間、６０℃の真空下（８ｍｂａｒ）で、次いで１８時間、激しい磁気撹拌下室温で過剰のヒドラジン水和物を蒸発させた。得られた粘着性の無色油を、乾燥メタノール（５ｍＬ）およびナトリウムメトキシド溶液（ＭｅＯＨ中０．５Ｍ、４．５７ｍＬ、２．２８ｍｍｏｌ）に溶解し、次いでジエチルカーボネート（２．１６ｇ、１８．２７ｍｍｏｌ）を滴下した。４時間３０分混合物を還流した。溶媒を蒸発させ、粗製物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝７５：１）によって精製して黄色油として標題化合物を得た。これは静置により固化した（白色固体）（２．０７４ｇ、９．３３ｍｍｏｌ）。収率＝６１％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 7.22-7.44 (m, 5H); 4.56-4.66 (m, 1H); 4.53-4.56 (m, 2H); 4.52 (s, 2H); 3.62 (t, 1H); 3.61 (dd, 1H); 3.56 (dd, 1H); 3.34 (dd, 1H).
LC-MS m/z (ESI+): 223.1 (MH+), Rt = 1.07分(方法A).
【００４４】
＜１Ｂ．（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート＞
（Ｓ）−３−アミノ−５−（ベンジルオキシメチル）オキサゾリジン−２−オン（２．０６ｇ、９．２７ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２０ｍｌ）に溶解した溶液にジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（５．０６ｇ、２３．１７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６時間、窒素下６０℃で撹拌した。溶媒を蒸発させ、ＡｃＯＥｔを添加した。溶液を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させた。粗製物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２００：１）によって精製した。２つの生成物、すなわち、標題化合物（１．５４７ｍｇ、４．８０ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−ｄｉｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（８２９ｍｇ、１．９６２ｍｍｏｌ）を白色固体として単離した。収率＝５２％（標題化合物）。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 9.31 (br. s, 1H); 7.27-7.42 (m, 5H); 4.75 (m, 1H); 4.56 (s, 2H); 3.53-3.80 (m, 3H); 3.44 (t, 1H); 1.41 (br. s, 9H).
LC-MS m/z (ESI+): 345.1 (MNa+), Rt = 1.44分(方法A).
（Ｓ）−ｄｉｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 7.24-7.43 (m, 5H); 4.77-4.94 (m, 1H); 4.57 (s, 2H); 3.78 (dd, 1H); 3.55-3.71 (m, 2H); 3.45-3.55 (m, 1H); 1.46 (s, 9H); 1.41 (s, 9H). LC-MS m/z (ESI+): 445.1 (MNa+), Rt = 1.73分(方法A).
【００４５】
＜１Ｃ．（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ヒドロキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート＞
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（１．５３７ｇ、４．７７ｍｍｏｌ）をエタノール（２５ｍＬ）に溶解した溶液を１０％Ｐｄ／Ｃ（０．７６１ｇ、０．７１５ｍｍｏｌ）によって４０ｐｓｉで１８時間水素化した。転換率は約４０％であった。触媒を濾別し、新鮮な１０％Ｐｄ／Ｃ（０．２５４ｇ、０．２３８ｍｍｏｌ）で置換した；ギ酸アンモニウム（０．７５２ｇ、１１．９２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を５時間撹拌しながら窒素下で還流した。転換は完全であった。触媒を濾別し、溶媒を蒸発させた。残渣を熱ジイソプロピルエーテル／ＭｅＯＨ（１０：１）と一緒に粉砕し、室温で静置して沈殿させた。白色固体（８０２ｍｇ、３．４５ｍｍｏｌ）として標題化合物を得た。収率＝７２％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 9.28 (br. s, 1H); 5.15 (t, 1H); 4.34-4.65 (m, 1H); 3.64 (dd, 1H); 3.48-3.61 (m, 2H); 3.44 (t, 1H); 1.41 (s, 9H).
LC-MS m/z (ESI+): 255.2 (MNa+), Rt = 0.94分(方法A).
【００４６】
同様に、（Ｓ）−ｄｉｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（１６０ｍｇ、０．３７９ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解した溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ（１０１ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）およびギ酸アンモニウム（１１９ｍｇ、１．８９４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を３時間窒素下で還流した。追加のギ酸アンモニウム（６０ｍｇ、０．９４７ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を７０°Ｃで撹拌した。１５時間３０分後、標題化合物への転換は完全であった。触媒を濾別し、ろ液を蒸発させた。粘着性の固体をジイソプロピルエーテル／ＭｅＯＨ（２：１）と一緒に粉砕し、標題生成物を白色固体（７１ｍｇ、０．３０６ｍｍｏｌ）として得た。収率＝８１％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 9.27 (br. s, 1H); 5.15 (br. s, 1H); 4.40-4.74 (m, 1H); 3.64 (dd, 1H); 3.48-3.60 (m, 2H); 3.44 (t, 1H); 1.41 (s, 9H).
LC-MS m/z (ESI+): 255.1 (MNa+), Rt = 0.93分(方法A).
【００４７】
＜１Ｄ．（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（メチルチオメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート＞
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ヒドロキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（８００ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍｌ）に溶解した濁った溶液に、トリエチルアミン（４３６ｍｇ、４．３１ｍｍｏｌ）および塩化メタンスルホニル（４９３ｍｇ、４．３１ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１時間３０分窒素下室温で撹拌した。対応するメタンスルホニル中間体への転換は完全であった。溶液を冷クエン酸（ｐＨ＝４〜５）および冷ブラインで洗浄し、有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。３２℃で溶媒を蒸発させると無色の泡（９８０ｍｇ；収率＝９２％）が生成し、これをＤＭＦ（５ｍｌ）に溶解した。ナトリウムメタンチオレート（３０２ｍｇ、４．３１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１時間６０°Ｃで撹拌した。標題生成物への転換は完全であった。ＡｃＯＥｔを添加し、溶液を冷クエン酸（ｐＨ＝３〜４）、次いで冷水および冷ブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を蒸発させると粘着性のある黄色固体として標題化合物が残り、これをジイソプロピルエーテルから結晶化させて白色固体（４０４ｍｇ、１．５３９ｍｇ）とした。収率＝４５％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 9.32 (br. s, 1H); 4.64-4.86 (m, 1H); 3.76 (t, 1H); 3.42 (t, 1H); 2.83 (dd, 1H); 2.77 (dd, 1H); 2.14 (s, 3H); 1.42 (s, 9H).
LC-MS m/z (ESI+): 285.1 (MNa+), Rt = 1.27分(方法A).
【００４８】
＜１Ｅ．（Ｓ）−３−アミノ−５−（メチルチオメチル）オキサゾリジン−２−オンヒドロクロリド＞
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（メチルチオメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（３７４ｍｇ、１．４２６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解した溶液に、ジオキサン中の４Ｍ  ＨＣｌ（１．２５ｍＬ、４．９９ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を４日間室温で撹拌して、白色固体が沈殿した。得られた生成物をろ過し、熱ジイソプロピルエーテルと一緒に粉砕して標題化合物（２４０ｍｇ、１．２０８ｍｍｏｌ）を得た。収率＝８５％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 4.59-4.83 (m, 1H); 3.75 (t, 1H); 3.38 (dd, 1H); 2.80 (dd, 2H); 2.13 (s, 3H).
LC-MS m/z (ESI+): 163.1 (MH+), Rt = 0.51分(方法A).
【００４９】
＜１Ｆ．（Ｓ）−ニフラテル＞
（Ｓ）−３−アミノ−５−（メチルチオメチル）オキサゾリジン−２−オンヒドロクロリド（２３０ｍｇ、１．１５８ｍｍｏｌ）をエタノール／水（１：１；３ｍｌ）中に懸濁させた懸濁液に５−ニトロフラン−２−カーボアルデヒド（１６３ｍｇ、１．１５８ｍｍｏｌ）をエタノール（２ｍｌ）に溶解した溶液を撹拌下で滴下した。溶液は無色から暗黄色に変わり、所望の生成物が黄色微細固体として沈殿した。３０分後生成物をろ過し、ジイソプロピルエーテルと一緒に粉砕して、室温で真空下終夜デシケーターに入れた。標題化合物を黄色微細固体（３０３ｍｇ、１．０６２ｍｍｏｌ）として得た。収率＝９２％。［ａ］Ｄ２０＝＋１２８．２（ｃ０．２４、ＣＨＣＩ３）
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 7.86 (s, 1H); 7.78 (d, 1H); 7.15 (d, 1H); 4.99 (dq, 1H); 4.10 (t, 1H); 3.69 (dd, 1H); 2.86-3.04 (m, 2H); 2.16 (s, 3H).
LC-MS m/z (ESI+): 286.1 (MH+), Rt = 1.25分(方法A).
LC-MS m/z (ESI+): 286.1 (MH+), Rt = 2.29分(方法B).
LC-MS m/z (ESI+): 286.0 (MH+), Rt = 6.33分(方法C). ee≧99.5%.
【００５０】
（実施例２）（Ｒ）−ニフラテル
＜２Ａ．（Ｒ）−３−アミノ−５−（ベンジルオキシメチル）オキサゾリジン−２−オン＞
（Ｒ）−２−（ベンジルオキシメチル）オキシラン（２．５ｇ、１５．２３ｍｍｏｌ）を、事前に９５℃で加熱したヒドラジン一水和物（４．６７ｇ、９１ｍｍｏｌ）に激しい撹拌下で滴下した。混合物を３０分間還流した。５３℃で３時間、真空下で、次いで１８時間、激しい磁気撹拌下室温で過剰のヒドラジン水和物を蒸発させた。粘着性の無色油を得た。粗製物を乾燥ＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド０．５Ｍをメタノール（４．６ｍＬ、２．２８４ｍｍｏｌ）に溶解した溶液、次いでジエチルカーボネート（２．１６ｇ、１８．２７ｍｍｏｌ）を滴下した。６時間混合物を還流した。溶媒を蒸発させ、粗製物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝７５：１）によって精製して黄色油として標題化合物を得た。これは静置により固化して白色固体（２．２３２ｇ、１０．０４ｍｍｏｌ）になった。収率＝６６％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 7.25-7.42 (m, 5H); 4.56-4.66 (m, 1H); 4.55 (s, 2H); 4.51 (s, 2H); 3.63 (t, 1H); 3.61 (dd, 1H); 3.55 (dd, 1H); 3.34 (dd, 1H).
LC-MS m/z (ESI+): 223.2 (MH+), Rt = 1.08分(方法A).
【００５１】
＜２Ｂ．（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート＞
（Ｒ）−３−アミノ−５−（ベンジルオキシメチル）オキサゾリジン−２−オン（２．０６９ｇ、９．３１ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した溶液にジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（２．３３７ｇ、１０．７１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１２時間、窒素下６０℃で撹拌した。（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（主生成物）と（Ｒ）−ｄｉｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（マイナー生成物）の混合物を得た。溶媒を蒸発させ、ＡｃＯＥｔを添加した。５％クエン酸、重炭酸ナトリウム（飽和水溶液）およびブラインで洗浄した有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、次いで減圧下で蒸発させた。粗製物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２５０：１から１００：１）によって精製した。標題化合物を白色固体（１．９４６ｇ、６．０４ｍｍｏｌ）として得た。収率＝６５％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 9.31 (br. s, 1H); 7.23-7.50 (m, 5H); 4.63-4.96 (m, 1H); 4.56 (s, 2H); 3.52-3.87 (m, 3H); 3.44 (t, 1H); 1.41 (br. s, 9H).
LC-MS m/z (ESI+): 345.2 (MNa+), Rt = 1.45分(方法A).
【００５２】
マイナー生成物、（Ｒ）−ｄｉｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメートを回収し、特性を調べた（２８３ｍｇ、０．６７０ｍｍｏｌ）。収率＝７％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 7.22-7.46 (m, 5H); 4.77-4.95 (m, 1H); 4.57 (s, 2H); 3.78 (dd, 1H); 3.54-3.71 (m, 2H); 3.51 (t, 1H); 1.46 (s, 9H); 1.41 (s, 9H).
LC-MS m/z (ESI+): 445.2 (MNa+), Rt = 1.73分(方法A).
【００５３】
＜２Ｃ．（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ヒドロキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート＞
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（ベンジルオキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（１．９０８ｇ、５．９２ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（３１５ｍｇ、０．２９６ｍｍｏｌ）をエタノール（２５ｍＬ）に懸濁させた懸濁液にギ酸アンモニウム（９３３ｍｇ、１４．８０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を３時間３０分撹拌しながら窒素下で還流した。触媒を濾別し、溶媒を蒸発させた。残渣をジイソプロピルエーテル：ＭｅＯＨ＝１０：１と一緒に粉砕した。白色固体（８５２ｍｇ、３．６７ｍｍｏｌ）として標題化合物を得た。収率＝６２％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 9.27 (br. s, 1H); 5.15 (t, 1H); 4.26-4.68 (m, 1H); 3.64 (dd, 1H); 3.47-3.61 (m, 2H); 3.44 (t, 1H); 1.41 (s, 9H).
LC-MS m/z (ESI+): 255.1 (MNa+), Rt = 0.93分(方法A).
【００５４】
＜２Ｄ．（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（メチルチオメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート＞
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ヒドロキシメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（８４０ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解した濁った溶液に、トリエチルアミン（４５８ｍｇ、４．５２ｍｍｏｌ）および塩化メタンスルホニル（５１８ｍｇ、４．５２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を２時間３０分窒素下室温で撹拌した。溶液を冷水（生成ＰＨ＝７〜８）、冷クエン酸（生成ｐＨ＝４〜５）および冷ブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、蒸発させ、残渣（ベージュ色の泡）をジイソプロピルエーテルと一緒に粉砕して、（Ｓ）−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−オキソオキサゾリジン−５−イル）メチルメタンスルホネート（１．０５５ｇ、３．４０ｍｍｏｌ）を白色固体として得、これをＤＭＦ７ｍＬに溶解した。ナトリウムメタンチオレート（３１７ｍｇ、４．５２ｍｍｏｌ）を溶液に添加し、混合物を３時間６０°Ｃで撹拌した。ＡｃＯＥｔを添加し、溶液を冷水、冷クエン酸（ｐＨ＝６まで）、および冷ブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を蒸発させると黄色油が残った。標題化合物がジイソプロピルエーテルからの結晶化によって白色固体として沈殿し、ブフナー上のろ過によって回収された（４２９ｍｇ、１．６３５ｍｇ）。収率＝４５％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 9.32 (br. s, 1H); 4.75 (dq, 1H); 3.76 (t, 1H); 2.83 (dd, 1H); 2.77 (dd, 1H); 2.14 (s, 3H); 1.42 (s, 9H).
LC-MS m/z (ESI+): 285.1 (MNa+), Rt = 1.24分(方法A).
【００５５】
＜２Ｅ．（Ｒ）−３−アミノ−５−（メチルチオメチル）オキサゾリジン−２−オンヒドロクロリド＞
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（メチルチオメチル）−２−オキソオキサゾリジン−３−イルカーバメート（４２９ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３ｍＬ）に溶解した溶液に４Ｍ  ＨＣｌをジオキサン（１．０２２ｍｌ、４．０９ｍｍｏｌ）に溶解した溶液を添加した。反応物を窒素下終夜室温で撹拌した。転換は完全であった。白色固体として沈殿した標題化合物をろ過し、ジイソプロピルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥した（２６０ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）。収率＝８０％。
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 4.67-4.84 (m, 1H); 3.81 (t, 1H); 3.43 (dd, 1H); 2.85 (dd, 1H); 2.79 (dd, 1H); 2.13 (s, 3H).
LC-MS m/z (ESI+): 163.1 (MH+), Rt = 0.56分(方法A).
【００５６】
＜２Ｆ．（Ｒ）−ニフラテル＞
（Ｒ）−３−アミノ−５−（メチルチオメチル）オキサゾリジン−２−オンヒドロクロリド（２４８ｍｇ、１．２４８ｍｍｏｌ）をエタノール／水（１：１；３ｍＬ）中に懸濁させた懸濁液に５−ニトロフラン−２−カーボアルデヒド（１７６ｍｇ、１．２４８ｍｍｏｌ）をエタノール（２．５ｍＬ）に溶解した溶液を撹拌下で滴下した。溶液は無色から暗黄色に変わり、生成物が黄色微細固体として沈殿した。２０分後生成物をろ過し、ジイソプロピルエーテルと一緒に粉砕して、室温で真空下終夜、および４時間４０℃でデシケーターに入れた。標題化合物を黄色粉末（３３５ｍｇ、１．１７４ｍｍｏｌ）として得た。収率＝９４％。［α］Ｄ２０＝−１０６．２（ｃ０．２６、ＣＨＣＩ３）
1H-NMR (DMSO-d6, 303 K)δ: 7.86 (s, 1H); 7.78 (d, 1H); 7.15 (d, 1H); 4.99 (dq, 1H); 4.10 (t, 1H); 3.69 (dd, 1H); 2.83-3.04 (m, 2H); 2.16 (s, 3H).
LC-MS m/z (ESI+): 286.2 (MH+), Rt = 1.25分(方法A).
LC-MS m/z (ESI+): 286.04 (MH+), Rt = 2.28分(方法B).
LC-MS m/z (ESI+): 285.97 (MH+), Rt = 5.80分(方法C). ee≧98%.
【００５７】
（抗菌活性）
鏡像体の活性を試験するのに使用される生命体：
ミクロコッカスピオゲネス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ）（ＡＴＣＣ  １１６３１）、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）（ＡＴＣＣ  １１７７４）、ラクトバシリスイネルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｉｎｅｒｓ）（ＡＴＣＣ  ５５１９５）、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）（ＡＴＣＣ  １１７７５）、ミラビリス変形菌（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）  （ＡＴＣＣ  １４１５３）、肺炎桿菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）（ＡＴＣＣ  １００３１）、ソンネ赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｓｏｎｎｅｉ）（ＡＴＣＣ  １１０６０）、淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）（ＡＴＣＣ  １９４２４）、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）（ＡＴＣＣ  １４０２８）、パラチフスＢ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｐａｒａｔｙｐｈｉ  Ｂ）（ＡＴＣＣ  １０７１９）、ピロリ菌（ＡＴＣＣ  ４３５０４）およびアトポビウムバギネおよびガードネレラバジナリスの数種の株。
【００５８】
（調製および保存）
株を凍結乾燥ペレットから調製した。懸濁液の単離（株の純度を試験するため）および株の大幅成長は、寒天媒体上の微生物懸濁液をストリークすることによって実施した。寒天プレート上の細菌コロニーを３〜５ｍｌの特定液状媒体＋１５％グリセロールを用いて収集し、次いで分取液を−８０℃で凍結した。
【００５９】
化合物最小阻害濃度（ＭＩＣ）をｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ（ＣＬＳＩ）Ｍ０７−Ａ８およびＭ１１−Ａ７レファレンスにしたがって開発された方法を用いて培養液マイクロ稀釈感染試験によって決定した。特定の媒体（表３）中で検定を実施した。培養液マイクロ稀釈検定または寒天稀釈検定のいずれかにしたがって試験を実施した。化合物のストック溶液を１００％ＤＭＳＯ中１２．８ｍｇ／ｍＬで作製した。次いで株特異性培養液を使用して一連の２倍稀釈液を調製した。最終濃度は１％ＤＭＳＯにおいて０．１２５μｇ／ｍＬから６４μｇ／ｍＬであった。ＭＩＣは、いかなる可視成長をも防止する抗菌剤の最小濃度として定義される。
【００６０】
【表４】
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【００６１】
実施例で調製したニフラテル鏡像体の抗グラム陽性および陰性活性を、上に記載した方法によって測定し、ニフラテルラセミ体の示すＭＩＣと比較した。
【００６２】
【表５】
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【００６３】
【表６】
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【００６４】
両方の鏡像体は、ニフラテルラセミ体に匹敵する活性を保持した。全体では、ニフラテルラセミ体または（Ｓ）−ニフラテルのいずれかと比較した場合、（Ｒ）−ニフラテルが、より良好な抗菌プロフィルを示した。
２．Ｓ−およびＲ−ニフラテルのラットにおける薬物動態プロフィル
オスのラットにおける静脈内投与（２ｍｇ／ｋｇ）および強制経口投与（１５ｍｇ／ｋｇ）後にＳ−およびＲ−ニフラテルの薬物動態プロフィルを検定した。
【００６５】
薬物動態データのノンコンパートメント解析（ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ  ５．１）によって得られた結果を、ニフラテルラセミ体のデータと一緒に表において平均として報告する。
【００６６】
【表７】
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【００６７】
２ｍｇ／ｋｇ静脈内投与と１５ｍｇ／ｋｇ経口投与両方の後に、Ｓ−およびＲ−ニフラテルは、ニフラテルラセミ体に比較してはるかに良好な薬物動態プロフィルを示し、より遅いクリアランスおよびより大きいＣｍａｘおよびＡＵＣを示した。全体として、経口と静脈内両方の投与後に、（Ｒ）−ニフラテルは、最良の薬物動態プロフィルを示した。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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