(57)【要約】  本発明は、低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法及び該方法により検出された遺伝子に係り、さらに詳しくは、癌が誘発されたＡＫＲ／Ｊマウス及び正常のＩＣＲマウスに低レベル放射線を照射し、ここで、胸腺を採取し、前記胸腺に対してマイクロアレイを行って糖代謝関連遺伝子を分類し、前記遺伝子を増幅し、且つ、発現量を測定することにより、癌誘発個体で発掘され、正常個体で検証される低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法を提供する。このような構成を有する本発明は、交絡変数の介入を防いで放射線に特異的に反応する遺伝子を正確に検出することができるという効果がある。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｉ）癌が誘発されたＡＫＲ／Ｊマウス及び正常のＩＣＲマウスに低レベル放射線を照射するステップと、
II）前記ＡＫＲ／Ｊマウス及びＩＣＲマウスから胸腺を採取するステップと、
III）前記胸腺に対してマイクロアレイを行うステップと、
IV）前記マイクロアレイから糖代謝関連遺伝子を分類するステップと、
Ｖ）前記遺伝子を増幅し、且つ、発現量を測定するステップと、
を含み、
癌誘発個体で発掘され、正常個体で検証される低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法。
【請求項２】
前記低レベル電離放射線は、ガンマ線（Ｃｓ−１３７）を０．７ｍＧｙ／時間の強さで最終的に１．７Ｇｙの放射線量で照射することを特徴とする請求項１に記載の低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法。
【請求項３】
前記方法は、胸腺癌診断用キットの製作、癌患者の癌進行及び治療程度の評価、産業及び医療従事者の放射線被曝と発癌との間の相関性評価、放射線と癌発生との間の因果関係評価、放射線被曝に対する生物学的線量評価または低レベル放射線による胸腺癌発生及び進行度評価の指標として活用されることを特徴とする請求項１に記載の低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法。
【請求項４】
前記癌は、胸腺癌であることを特徴とする請求項１に記載の低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法。
【請求項５】
前記ステップII）の胸腺の採取は、癌によって斃死が始まる時点で行われることを特徴とする請求項１に記載の低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法。
【請求項６】
前記糖代謝関連遺伝子は、ＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）及びＧ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）よりなる群から選ばれる遺伝子であることを特徴とする請求項１に記載の低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法。
【請求項７】
前記ＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）遺伝子は配列番号１及び２に記載のプライマ、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）遺伝子は配列番号３及び４に記載のプライマ、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）遺伝子は配列番号５及び６に記載のプライマ、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）遺伝子は配列番号７及び８に記載のプライマ、且つ、Ｇ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）遺伝子は配列番号９及び１０に記載のプライマによって増幅されることを特徴とする請求項６に記載の低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法。
【請求項８】
胸腺癌悪化に関与する糖代謝関連遺伝子であるＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）及びＧ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）よりなる群から選ばれる遺伝子の塩基配列を含む放射線敏感性または放射線発癌診断用マーカー。
【請求項９】
請求項８に記載のマーカーを備える放射線敏感性または放射線発癌診断用キット。
【請求項１０】
請求項８に記載のマーカーを備える放射線敏感性または放射線発癌診断用マイクロアレイ。
【請求項１１】
Ｉ）ヒトを除く胸腺癌を有する哺乳動物に放射線を照射するステップと、
II）前記放射線が照射された哺乳動物から摘出した胸腺組織と試験物質を接触させるステップと、
III）前記胸腺組織から胸腺癌悪化に関与する糖代謝関連遺伝子であるＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）及びＧ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）よりなる群から選ばれる遺伝子の発現変化を測定するステップと、
を含む放射線敏感性または放射線発癌を測定する遺伝子の検出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法及び該方法により検出された遺伝子に係り、さらに詳しくは、癌誘発マウス及び正常マウスに低レベル放射線を照射して胸腺から正常マウス及び癌誘発マウスから共通して特異的に観察される糖代謝関連遺伝子を分類する低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
産業及び医療的放射線の活用の増加とあいまって、人体影響への取り組みが盛んに行われており、主として放射線照射を用いた癌治療に関心が寄せられている。高線量電離放射線は、ＤＮＡ損傷、遺伝的変形、癌をはじめとする疾病を引き起こすが、２００ｍＧｙ以下の線量と６ｍＧｙ／時間以下の線量率放射線は免疫反応を活性化させて癌発生を抑制することが知られている。
【０００３】
一般に、放射線と癌発生との間の相関性、特に、遺伝子反応への取り組みが行われてきたが、その結果の信頼性を阻害する交絡変数が多数介入されていた。しかしながら、これまで、ほとんどの研究では、遺伝子の一部を変形したり癌細胞株を用いたりしたため、身体を構成する細胞、組織、臓器、そして、身体段階で観察される様々な反応を説明することができなかった。すなわち、一般マウスを用いて遺伝子反応を評価したため、発現遺伝子が様々であっただけではなく、癌発生が特定の臓器に限定されていなかったため遺伝子反応を解析することが困難であったという問題がある。
【０００４】
癌研究のために細胞を利用する従来の方法では、遺伝子を変更したり、癌発生で重要視されるｐ５３が欠如した癌細胞に放射線を照射したりしたため、正常細胞の反応とは根本的に異なる結果、その結果を個体に適用することができないという問題があり、このような欠点を補うために、ヒトと遺伝子が９５％以上同じマウスを用いて放射線に対する癌発生への取り組みを行っている。しかしながら、一般マウスは自然癌発生率が非常に低いため、様々な癌研究用モデルマウスが用いられている。
【０００５】
従来の研究では、低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に敏感な糖代謝関連遺伝子を発掘するために種々の方法を利用した。しかしながら、本発明において提示した糖代謝関連遺伝子は、過去に低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に対して敏感な遺伝子であることが知られていない。
【０００６】
本願発明の低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に敏感な糖代謝関連遺伝子プロファイルの発掘に先行された技術は、下記の通りである。
【０００７】
（１）癌細胞は、糖吸収及び糖分解活性化の特徴を示している（Warburg O, Science 1956; 123: 309-314）。
【０００８】
（２）活性化された糖代謝は胸腺でｐ５３の活性を抑制し、ｐｕｍａの誘導を抑制し、Ｂｃｌ２ファミリタンパク質発現の細胞死滅抑制のバランスに影響を与え、癌生存を維持した（Zhao Y et. al., J Biol Chem 2008; 283: 36344-36353）。
【０００９】
（３）電離放射線が照射され、且つ、Ａｋｔ１発現が抑制されたマウスの回腸で細胞死滅が増大された（Plastarasら, 2008）。
【００１０】
そこで、本発明者らは、低レベル電離放射線に対して敏感な糖代謝関連遺伝子プロファイル発掘することにより本発明を完成するに至った。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法及び該方法により検出された遺伝子を提供するところにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
前記目的を達成するために、本発明は、Ｉ）癌が誘発されたＡＫＲ／Ｊマウス及び正常のＩＣＲマウスに低レベル放射線を照射するステップと、II）前記ＡＫＲ／Ｊマウス及びＩＣＲマウスから胸腺を採取するステップと、III）前記胸腺に対してマイクロアレイを行うステップと、IV）前記マイクロアレイから糖代謝関連遺伝子を分類するステップと、Ｖ）前記遺伝子を増幅し、且つ、発現量を測定するステップと、を含み、癌誘発個体で発掘され、正常個体で検証される低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法を提供する。
【００１３】
また、本発明は、胸腺癌悪化に関与する糖代謝関連遺伝子であるＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）及びＧ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）よりなる群から選ばれる遺伝子の塩基配列を含む放射線敏感性または放射線発癌診断用マーカーを提供する。
【００１４】
さらに、本発明は、上記のマーカーを備える放射線敏感性または放射線発癌診断用キットを提供する。
【００１５】
さらに、本発明は、上記のマーカーを備える放射線敏感性または放射線発癌診断用マイクロアレイを提供する。
【００１６】
さらに、本発明は、Ｉ）ヒトを除く胸腺癌を有する哺乳動物に放射線を照射するステップと、II）前記放射線が照射された哺乳動物から摘出した胸腺組織と試験物質を接触させるステップと、III）前記胸腺組織から胸腺癌悪化に関与する糖代謝関連遺伝子であるＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）及びＧ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）よりなる群から選ばれる遺伝子の発現変化を測定するステップと、を含む放射線敏感性または放射線発癌を測定する遺伝子の検出方法を提供する。
【００１７】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００１８】
放射線に対する人体影響のうち癌発生への取り組みが盛んに行われてきたが、癌細胞若しくは遺伝子が変形された細胞株や一般マウスを用いたが故に様々な人体反応（遺伝子反応）を説明することが困難であった。特に、個体次元で電離放射線に敏感な糖代謝関連遺伝子プロファイルを発掘して機能を説明したことがない。この理由から、本発明では、１）正常的なＩＣＲマウスと胸腺癌を発病するＡＫＲ／Ｊマウスに低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線を照射（癌発生刺激因子）した後、胸腺で特異的に発現する低レベル放射線に敏感な糖代謝関連遺伝子プロファイルを発掘して機能を分析した後、２）胸腺癌発生段階を診断する糖代謝関連遺伝子プロファイルの構成因子として使用しようとした。
【００１９】
本発明は、Ｉ）癌が誘発されたＡＫＲ／Ｊマウス及び正常のＩＣＲマウスに低レベル放射線を照射するステップと、II）前記ＡＫＲ／Ｊマウス及びＩＣＲマウスから胸腺を採取するステップと、III）前記胸腺に対してマイクロアレイを行うステップと、IV）前記マイクロアレイから糖代謝関連遺伝子を分類するステップと、Ｖ）前記遺伝子を増幅し、且つ、発現量を測定するステップと、を含み、癌誘発個体で発掘され、正常個体で検証される低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法を提供する。
【００２０】
本発明の低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法において、前記低レベル電離放射線は、ガンマ線（Ｃｓ−１３７）を０．７ｍＧｙ／時間の強さで最終的に１．７Ｇｙの放射線量で照射することが好ましく、本願発明の前記方法は、胸腺癌診断用キットの製作、癌患者の癌進行及び治療程度の評価、産業及び医療従事者の放射線被曝と発癌との間の相関性評価、放射線と癌発生との間の因果関係評価、放射線被曝に対する生物学的線量評価または低レベル放射線による胸腺癌発生及び進行度評価の指標として活用されることが好ましい。
【００２１】
また、本発明の低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法において、前記癌は、胸腺癌であることが好ましく、前記ステップII）の胸腺の採取は、癌によって斃死が始まる時点で行われることが好ましい。
【００２２】
さらに、本発明の低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法において、前記糖代謝関連遺伝子は、ＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）及びＧ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）よりなる群から選ばれる遺伝子であることが好ましく、このとき、前記ＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）遺伝子は配列番号１及び２に記載のプライマ、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）遺伝子は配列番号３及び４に記載のプライマ、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）遺伝子は配列番号５及び６に記載のプライマ、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）遺伝子は配列番号７及び８に記載のプライマ、且つ、Ｇ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）遺伝子は配列番号９及び１０に記載のプライマによって増幅されることが好ましい。
【００２３】
前記マイクロアレイから糖代謝関連遺伝子を分類する前記ステップIV）においては、放射線照射前の癌誘発個体に比べて放射線照射後の癌誘発個体で過剰発現または低発現された遺伝子をマイクロアレイを用いて検出した後、配列番号１番〜１０番のプライマを用いて検証し、遺伝子の機能検索法を用いて前記過剰発現または低発現された遺伝子の本質を究明することを特徴とする。マイクロアレイ分析の詳細については、下記の実施例において説明しており、遺伝子の機能検索は、下記の実施例において、生物情報データベースＤＡＶＩＤ（http://apps1.niaid.nih.gov/david/）及びＰｕｂｍｅｄデータベース（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/）を用いて行ったが、これに限定されるものではない。
【００２４】
本発明において使用する「低レベル電離放射線に敏感な遺伝子」とは、放射線を照射する前の癌誘発個体と比較して、放射線を照射した後の癌誘発個体で差別的に過剰発現または低発現される遺伝子のことをいう。すなわち、癌誘発個体で放射線刺激によって発現パターンの変化が誘導される遺伝子を意味し、特定の癌と関連したターゲット遺伝子、すなわち、腫瘍形成遺伝子または腫瘍抑制遺伝子であってもよい。このような癌特異的な遺伝子を検出することにより、癌患者に対する放射線治療の分子的な機序を確立して放射線治療効果の増大に寄与することができるだけではなく、新たな腫瘍形成または腫瘍抑制遺伝子を発掘してこれらの発現を調節することにより、分子生物学的レベルにおける癌治療剤または治療方法の開発のための基盤を設けることができる。
【００２５】
また、本発明は、胸腺癌悪化に関与する糖代謝関連遺伝子であるＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）及びＧ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）よりなる群から選ばれる遺伝子の塩基配列を含む放射線敏感性または放射線発癌診断用マーカーを提供する。
【００２６】
さらに、本発明は、上記のマーカーを備える放射線敏感性または放射線発癌診断用キットを提供する。
【００２７】
さらに、本発明は、上記のマーカーを備える放射線敏感性または放射線発癌診断用マイクロアレイを提供する。
【００２８】
さらに、本発明は、Ｉ）ヒトを除く胸腺癌を有する哺乳動物に放射線を照射するステップと、II）前記放射線が照射された哺乳動物から摘出した胸腺組織と試験物質を接触させるステップと、III）前記胸腺組織から胸腺癌悪化に関与する糖代謝関連遺伝子であるＩＲＳ１（ＮＭ＿０１０５７０）、Ｇｌｕｔ１（ＭＭ＿０１１４００）、Ｇｌｕｔ４（ＮＭ＿００９２０４）、ＬＰＫ（ＮＭ＿０１３６３１）及びＧ６ｐｃ（ＮＭ＿００８０６１）よりなる群から選ばれる遺伝子の発現変化を測定するステップと、を含む放射線敏感性または放射線発癌を測定する遺伝子の検出方法を提供する。
【００２９】
本発明では、胸腺癌研究モデルであるＡＫＲ／Ｊマウス及び正常的なマウス種であるＩＣＲに対して低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）ガンマ線（Ｃｓ−１３７）を照射し、ＡＫＲ／Ｊマウスが胸腺癌によって斃死し始める時点（１００日目）を規定して胸腺を採取した。採取した胸腺に対してマイクロアレイを行った後にＤＡＶＩＤ生物情報データベースを用いて低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に対して敏感な反応を示す糖代謝関連遺伝子を分類し、低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に対して敏感な反応を示す糖代謝関連遺伝子を核酸増幅し、且つ、発現量を測定した。
【００３０】
その結果、本発明により、低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に対して敏感な反応を示す糖代謝（ＩＲＳ１、Ｇｌｕｔ１、Ｇｌｕｔ４、ＬＰＫ及びＧ６ｐｃ）に重要な５個の遺伝子を発掘し、低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に対して敏感な反応を示す糖代謝（ＩＲＳ１、Ｇｌｕｔ１、Ｇｌｕｔ４、ＬＰＫ及びＧ６ｐｃ）関連遺伝子の機能を理解しやすいように提示した。なお、胸腺癌によって斃死が観察される１００日目を規定して胸腺を採取することにより、低レベル放射線に反応を示す糖代謝遺伝子反応を高い一貫性で観察できるようにした。
【００３１】
このため、本発明は、１）胸腺癌診断用診断キットの開発のための糖代謝関連遺伝子プロファイルとして活用することができ、２）低レベル放射線環境下で生活する産業及び医療従事者の癌発生因果関係評価の指標として活用することができ、３）癌患者の癌発生を診断し、且つ、治療対策を立てる情報用遺伝子プロファイルとして活用することができ、４）放射線被曝と胸腺癌発生との間の因果関係を区別する指標として活用することができ、５）低レベル放射線被曝に対する生物学的線量の評価のための新たな遺伝子指標として幅広く活用することができ、しかも、６）電離放射線に敏感な糖代謝シグナル伝達は、低レベル放射線被曝に対するターゲット治療に適用することができる。
【発明の効果】
【００３２】
上記の構成を有する低レベル電離放射線に敏感な遺伝子の検出方法は、胸腺癌診断用キットを製作するための低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に敏感な糖代謝関連指標遺伝子プロファイルとして活用することができ、癌患者の癌進行及び治療程度を評価する低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に敏感な糖代謝関連指標遺伝子として活用することができる。また、産業及び医療従事者の放射線被曝と発癌との間の相関性を評価する低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に敏感な糖代謝関連指標遺伝子として活用することができ、放射線と癌発生との間の因果関係を評価する低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に敏感な糖代謝関連指標として活用することができる。さらに、放射線被曝に対する生物学的線量の評価のための新たな指標として活用することができ、低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線による胸腺癌の発生及び進行度、抑制効果を評価する低レベル放射線に敏感な糖代謝関連指標遺伝子として活用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線を照射して胸腺癌を抑制する糖代謝関連遺伝子の機能を理解しやすいように図式化して示す図である。
【図２】図２は、ＡＫＲ／Ｊマウス及びＩＣＲマウスに低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線を照射した後に飼育しながら、ＡＫＲ／Ｊマウスが胸腺癌によって斃死し始める時点（１００日目）を規定して胸腺を採取して胸腺の重さを計測し、これを指標として放射線に敏感な糖代謝関連遺伝子の反応を分析したグラフである。
【発明を実施するための最良の態様】
【００３４】
以下、本発明を実施例を挙げてより具体的に説明する。しかしながら、下記の実施例は本発明を説明するためのものに過ぎず、下記の実施例によって本発明の権利範囲が限定されることはない。
【００３５】
＜実施例１＞
日本ＳＬＣ社から６週齢の胸腺癌研究モデルである雌性ＡＫＲ／Ｊマウス及び正常の雌性ＩＣＲマウスを購入した。ガンマ線発生装置（ＩＢＬ  １４７Ｃ、ＣＩＳ  ｂｉｏ  ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、Ｆｒａｎｃｅ）を用いて前記ＡＫＲ／Ｊマウスに低レベル放射線を最終線量が４．５Ｇｙに達するように照射（１３７Ｃｓ、０．７ｍＧｙ／時間）した。低レベル放射線を照射し終わったマウスは放射線が遮断された無菌飼育施設に移して１００日間飼育しながら胸腺癌の発生を観察した。遺伝子分析のために同じ実験条件下で別途に飼育した正常マウス（ＩＣＲマウス）に低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線を照射し、１００日後に採取した胸腺は液体窒素を用いて急速凍結させた後に遺伝子分析を行った。
【００３６】
＜実施例２＞  マイクロアレイ及び遺伝子分析
前記実施例１の結果、癌研究用モデルマウス（ＡＫＲ／Ｊマウス）を用いて低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線に敏感な糖代謝関連遺伝子を発掘し、これを正常マウス（ＩＣＲマウス）で証明した。すなわち、低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線が照射されたＡＫＲ／Ｊマウス及びＩＣＲマウスの胸腺で特異的に低レベル放射線に反応する糖代謝関連遺伝子を発掘し、且つ、機能を解析した。ＤＡＶＩＤ生物情報データベース、定量的核酸増幅法及び統計プログラムＳＡＳ（ＡＮＯＶＡとｔ−ｔｅｓｔ）を用いて分析した。
【００３７】
その結果を確認するために、前記遺伝子を核酸増幅した。具体的に、低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線が照射されたＡＫＲ／Ｊマウス及びＩＣＲマウスから採取した胸腺に対してマイクロアレイを行い、低レベル放射線に対して敏感な反応を示す糖代謝関連遺伝子に対して発現量を計測するために下記表１に記載のプライマを用いて増幅した。
【００３８】
【表１】
2015515865.tif 000003
【００３９】
また、ＡＫＲ／Ｊマウス及びＩＣＲマウスに低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線を照射した後に飼育しながら、ＡＫＲ／Ｊマウスが胸腺癌で斃死し始める時点（１００日目）で胸腺を採取した。採取した胸腺に対してマイクロアレイを行い、低レベル放射線に対して敏感な反応を示す糖代謝関連遺伝子を分類した後、核酸を増幅して発現量を測定した。その結果、低レベル放射線が照射されたマウスでは、糖代謝関連遺伝子（ＩＲＳ１、Ｇｌｕｔ１、Ｇｌｕｔ４、ＬＰＫ及びＧ６ｐｃ）が低レベル放射線に敏感に反応した。その結果を下記表２に示す。
【００４０】
【表２】
2015515865.tif 000004
【００４１】
また、図１に、低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線を照射して胸腺癌を抑制する糖代謝関連遺伝子の機能を理解しやすいように図式化して示す。低レベル放射線の照射はインスリンシグナル伝達（ＩＲＳ１）、糖吸収（Ｇｌｕｔ１及びＧｌｕｔ４）、糖分解（ＬＰＫ）及び新糖合成（Ｇ６ｐｃ）遺伝子の発現を低減し、胸腺癌を抑制した。
【００４２】
さらに、図２は、ＡＫＲ／Ｊマウス及びＩＣＲマウスに低レベル（０．７ｍＧｙ／時間）放射線を照射した後に飼育しながら、ＡＫＲ／Ｊマウスが胸腺癌で斃死し始める時点（１００日目）を規定して胸腺を採取し、胸腺の重さを計測し、これを指標として放射線に敏感な糖代謝関連遺伝子反応を分析した。本発明により、胸腺癌によって斃死が発生する癌発病の初期段階を規定して胸腺を採取し、重さを比較することにより、低レベル放射線に対して敏感な反応を示す糖代謝関連遺伝子を常に高い一貫性で測定することが可能になった。
【図１】
2015515865.tif 000005
【図２】
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【配列表】
2015515865000001.app
【国際調査報告】
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2015515865.tif 000009
2015515865.tif 000010
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