(57)【要約】本発明は、記憶力及び学習能力の改善に有効であり、認知症及び軽度認識障害の治療及び予防用の薬剤と、認知機能を含む脳機能改善用の健康食品の有効成分であるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物の用途に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物を有効成分として含有する認知症及び軽度認識障害の治療及び予防に有効な薬剤であって、
【化５】
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Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は各々水素またはＣ1〜Ｃ4のアルキル基であり、Ｒ4はＣ1〜Ｃ4のアルキル基またはＣ1〜Ｃ4のヒドロキシアルキル基であり、Ｒ5及びＲ6は各々水素または糖であって、Ｒ5及びＲ6のうち少なくとも１つは、グルコース、ガラクトース、ラムノース、キシロース、アラビノース及びグルクロン酸の中から選択される糖である。
【請求項２】
前記式１に表される化合物は、エレウテロサイドＫ（eleutheroside K）、ヘデラサポニンＢ（hederasaponin B）、ヘデラコルチサイドＥ（hederacolchiside E）、エラトサイドＡ（elatoside A）、エラトサイドＣ（elatoside C）、ロニセロサイドＡ（loniceroside A）、ロニセロサイドＢ（loniceroside B）及びハリギリサポニンＢ（kalopanaxsaponin B）からなる群から選択されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物である、請求項１記載の薬剤。
【請求項３】
下記式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物を含有する脳機能の改善に有効な健康食品であって、
【化６】
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Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は各々水素またはＣ1〜Ｃ4のアルキル基であり、Ｒ4はＣ1〜Ｃ4のアルキル基またはＣ1〜Ｃ4のヒドロキシアルキル基であり、Ｒ5及びＲ6は各々水素または糖であって、Ｒ5及びＲ6のうち少なくとも１つは、グルコース、ガラクトース、ラムノース、キシロース、アラビノース及びグルクロン酸の中から選択される糖である。
【請求項４】
前記式１に表される化合物は、エレウテロサイドＫ（eleutheroside K）、ヘデラサポニンＢ（hederasaponin B）、ヘデラコルチサイドＥ（hederacolchiside E）、エラトサイドＡ（elatoside A）、エラトサイドＣ（elatoside C）、ロニセロサイドＡ（loniceroside A）、ロニセロサイドＢ（loniceroside B）及びハリギリサポニンＢ（kalopanaxsaponin B）からなる群から選択されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物である、請求項１記載の健康食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、認知機能を含む脳機能の改善、認知症及び軽度認識障害の治療及び予防に用いる健康食品の有効成分として、記憶力及び学習能力の改善に有効である下記式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物の用途に関する。
【化１】
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前記式１において、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は各々水素またはＣ1〜Ｃ4のアルキル基であり、Ｒ4はＣ1〜Ｃ4のアルキル基またはＣ1〜Ｃ4のヒドロキシアルキル基であり、Ｒ5及びＲ6は各々水素または糖であり、Ｒ5及びＲ6のうち少なくとも１つは、グルコース、ガラクトース、ラムノース、キシロース、アラビノース及びグルクロン酸の中から選択される糖である。
【背景技術】
【０００２】
トリテルペンサポニンは、トリテルペンを有し、糖または糖鎖とグリコシド結合またはエステル結合を形成しているサポゲニン（アグリコン）化合物のことを言う。トリテルペンサポニンは、サポゲニンの種類によって分類される。トリテルペンサポニンの代表的な例は、５環性トリテルペンを有するサポニンであり、例えば、オレアナン、ウルサン（ursane）、ルパン（lupane）、ホパン（hopane）、タラセラン（ｔａｒａｘｅｒａｎｅ）などがある。また、サポニンは糖鎖との結合部位によって区別される。オレアノール酸（oleanolic acid）を例に挙げると、Ｃ−３またはＣ−２８の位置のうちいずれかの位置で糖鎖と結合したものをモノデスモシド（ｍｏｎｏｄｅｓｍｏｓｉｄｅ）と呼び、Ｃ−３及びＣ−２８の両方の位置で糖鎖と結合したものをビスデスモシド（bisdesmoside）と呼ぶ。主にＣ−３の位置でグリコシド結合がなされ、エステル結合が主にＣ−２８の位置でなされる。サポニンと典型的に結合する糖は、グルコース、ガラクトース、ラムノース、キシロース、アラビノース、グルクロン酸などである。
【０００３】
ビスデスモシドの状態のとき、腸内でのサポニンの吸収率は一般に低い。しかし、サポニンのＣ−２８の位置でのエステル結合は、腸内細菌の酵素により容易に加水分解される。糖鎖が除去されるため、グルコシド結合によりＣ−３の位置に結合された糖鎖は、末端から部分的に加水分解され始め、その後体内に吸収される［Kim DH, Bae EA, Han MJ, Park HJ, Choi JW. Metabolism of Kalopanaxsaponin K by human intestinal bacteria and antirheumatoid arthritis activity of their metabolites. Biol Pharm Bull. 2002 Jan; 25(1): 68-71］。対照的に、糖と結合されないトリテルペンサポゲニン自体は、溶解度が低いだけでなく、腸内吸収が比較的低いため、動物実験において、配糖体に比べて活性が低下する［Yoshikawa M, Matsuda H. Antidiabetogenic activity of oleanolic acid glycosides from medicinal foodstuffs. BioFactors. 2000; 13(1-4): 231-7］。
【０００４】
全世界を通じた高齢者の人口の増加により、各種の退行性高齢者疾患が社会的・経済的問題として提起されている。アルツハイマー病協会及び国立老化研究所により発表された統計によると、約４百万人の米国人が認知症を患っている。通常、認知症は６０歳以降で発病するが、まれに、５０代からでも始まる。６５歳以上の全ての米国人の１０．３％が認知症を患っており、認知症の治療に毎年９５０億ドルの莫大な費用が費やされている。
【０００５】
韓国保健社会研究院の報告書によると、認知症患者の人口は、高齢者の数の増加につれて急激に増加している。６５歳以上の認知症患者の人口は、１９９５年の８．３％から、２０２０年には０．７％増加の９％と推定されている。そして、韓国統計局の推計によると、認知症を患っている高齢者人口は、２０００年の２７７，０４８人（６５歳以上の高齢者の８．３％）から、２０１５年には５２７，０６８人（９％）に、２０２０年には６１９，１３２人（９％）に増加すると推定されている。認知症は、患者の生活を荒廃させるだけでなく、患者の家族の生活も破壊する難治性疾患であるため、深刻な社会的、経済的問題であって、克服しなければならない。
【０００６】
認知症は様々な原因により発病し得るが、その主な症状には、学習能力と記憶力を著しく減退させることに特徴がある。
【０００７】
１９９３年にＦＤＡにより承認された初の認知症治療薬であるタクリンは、脳内のアセチルコリン（ＡＣｈ）の分解を抑制することにより、初期または中期のアルツハイマー病患者の約３０％を認知機能の損失から遅らせることができる。しかし、肝臓に係る副作用を多く引き起こすため、近年ではほとんど使用されていない。１９９６年にＦＤＡの承認を受けたアリセプトは、アセチルコリンのレベルを増加させるのに使用される。この薬剤は、就寝前に一日一回服用することができる。一般的な副作用としては、吐き気、下痢、疲労感があるが、それらは長く続かない。従って、効果が良く、副作用の少ない新規の認知症治療薬の開発が要求される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の発明者らは、毒性が少なく、記憶力及び学習能力を改善するのに効果的な物質を開発するために、集中的な研究を行った。その結果、発明者らは、オレアナン型トリテルペンサポニン化合物が認知症及び軽度認識障害の治療、及び認知機能の改善に効果的であることを発見した。
【０００９】
従って、本発明の目的は、有効成分としてオレアナン型トリテルペンサポニン化合物を含有する脳機能改善用治療薬と健康食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、下記式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物を含有する認知症及び軽度認識障害の治療薬又は脳機能改善用健康食品に関する。
【化２】
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前記式１において、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は各々水素またはＣ1〜Ｃ4のアルキル基であり、Ｒ4はＣ1〜Ｃ4のアルキル基またはＣ1〜Ｃ4のヒドロキシアルキル基であり、Ｒ5及びＲ6は各々水素または糖であって、Ｒ5及びＲ6のうち少なくとも１つは、グルコース、ガラクトース、ラムノース、キシロース、アラビノース及びグルクロン酸の中から選択される糖である。
【００１１】
以下に、本発明をさらに詳しく説明する。
【００１２】
式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物として、下記式１ａに表されるオレアノール酸サポニンと下記式１ｂに表されるヘデラゲニンサポニンが当業界で広く知られている。
【化３】
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【化４】
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【００１３】
上記式１ａに表されるオレアノール酸は、サポゲニンとしてオレアノール酸を有するサポニン化合物であり、抗癌及び抗炎症作用［Li J, Guo WJ, Yang QY. Effects of ursolic acid and oleanolic acid on human colon carcinoma cell line HCT15. World J Gastroenterol. 2002 Jun; 8(3): 493-5］、脳神経保護作用［Qian YH, Liu Y, Hu HT, Ren HM, Chen XL, Xu JH. The effects of the total saponin of Dipsacus asperoides on the damage of cultured neurons induced by β-amyloid protein 25-35］、抗ウイルス作用［Kapil A, Sharma S. Effect of oleanolic acid on complement in adjuvant- and carrageenan-induced inflammation in rats. J. Pharm Pharmacol. 1995 Jul; 47(7): 585-7］、抗脂質異常症作用［Lee KT, Sohn IC, Kim DH, Choi JW, Kwon SH, Park HJ. Hypoglycemic and hypolipidemic effects of tectorigenin and kaikasaponin III in the streptozotocin-lnduced diabetic rat and their antioxidant activity in vitro. Arch Pharm Res. 2000 Oct; 23(5): 461-6］、抗アレルギー作用［Park KH, Park J, Koh D, Lim Y. Effect of saikosaponin-A, a triterpenoid glycoside, isolated from Bupleurum falcatum on experimental allergic asthma. Phytother Res. 2002 Jun; 16(4): 359-63］、免疫調節作用［Ju DW, Zheng QY, Cao X, Fang J, Wang HB. Esculentoside A inhibits tumor necrosis factor, interleukin-1, and interleukin-6 production induced by lipopolysaccharide in mice. Pharmacology. 1998 Apr; 56(4): 187-95］、及び血管形成抑制作用［大韓民国特許第１０１，４８０号］を有することで知られている。
【００１４】
そして、上記式１ｂに表されるヘデラゲニンサポニンは、サポゲニンとしてヘデラゲニンを有する化合物であり、抗炎症作用［Kwak WJ, Han CK, Chang HW, Kim HP, Kang SS, Son KH. Loniceroside C, an antiinflammatory saponin from Lonicera japonica. Chem Pharm Bull (Tokyo). 2003 Mar; 51(3): 333-5］、鎮痛作用［Choi J, Huh K, Kim SH, Lee KT, Park HJ, Han YN. Antinociceptive and anti-rheumatoidal effects of Kalopanax pictus extract and its saponin components in experimental animals. J Ethnopharmacol. 2002 Feb; 79(2): 199-204］、抗酸化作用［Choi J, Huh K, Kim SH, Lee KT, Lee HK, Park HJ. Kalopanaxsaponin A from Kalopanax pictus, a potent antioxidant in the rheumatoidal rat treated with Freund's complete adjuvant reagent. J Ethnopharmacol. 2002 Jan; 79(1): 113-8］、及び血糖低下作用［Kim DH, Yu KW, Bae EA, Park HJ, Choi JW. Metabolism of Kalopanaxsaponin B and H by human intestinal bacteria and antidiabetic activity of their metabolites. Biol Pharm Bull. 1998 Apr; 21(4): 360-5］を有することで知られている。
【００１５】
しかし、オレアノール酸サポニンまたはヘデラゲニンサポニンを含む上記式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物の、認知症及び軽度認識障害の治療及び脳機能の改善効果については、現在まで何も知られていない。
【００１６】
日本特許公開公報第２０００−２４７９９３号では、オレアノール酸とシグマ受容体との親和性が高いことを認識し、シグマ受容体と関連する様々な脳疾患、即ち、統合失調症、うつ病、不安神経症、脳卒中、高齢者の行動障害、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、薬物中毒、ストレスなどの治療に効果的であることを開示している。しかしながら、この特許は、前記疾患の治療と直接的に係る生体内動物実験または体外神経細胞実験の結果を提示していない。
【００１７】
サポゲニンとしてオレアノール酸またはヘデラゲニンを有するオレアナン型トリテルペンサポニン化合物は、Ｃ−３またはＣ−２８の位置で糖と結合したモノデスモシドの形態か、Ｃ−３とＣ−２８の両方の位置に糖と結合したビスデスモシドの形態であってもよい。これらは、糖鎖の多様な組合せにより１５０種以上のサポニン化合物が存在する［Kang Sam Sik, Triterpenoid saponin, Seoul National University Press, 1996, TradiMed Database］。
【００１８】
オレアノール酸サポニン：
アキラントサイドＣ（Achyranthoside C）、アクトサイドＡ−Ｇ（acutosides A-G）、アケボサイドＳｔｊ（akeboside Stj）、アネモサイドＡ（anemoside A）、アラリアサポニンＸＩＩ−ＸＶＩＩＩ(araliasaponins XII-XVIII)、アラロサイドＤ(araloside D)、アルベンソサイドＡ−Ｂ（arvensoside A-B）、ベータブルガロサイドＩＶ−Ｖ（betavulgarosides IＶ-Ｖ）、ブプレウルム（Bupleurum chinense）トリテルペン配糖体Ｓ１（triterpene glycoside S1）、カラガノサイドＡ（caraganoside A）、チクセツサポニンＩＢ（chikusetsusaponins IB）、ＩＶ、シウジアノサイドＡ１（ciwujianosides A1）、Ｃ４、Ｃ３、Ｄ１、クレマチチネノサイド（clematichinenoside）Ａ、Ｃ、チャイニーズ・クレマティス・プロサポゲニンＣＰ９、ＣＰ９ａ、ＣＰ７ａ、ＣＰ２ｂ（Clematis chinensis prosapogenins CP9, CP9a, CP7a, CP2b, ）、クレモンタノサイドＥ、Ｆ（clemontanosides E, F）、サフラン（クロッカス・サティウス）オレアノール酸サポニン（saffron (Crocus sativus) oleanolic acid saponin）、エラトサイドＢ、Ｄ（elatosides B, D）、エレウテロサイドＫ（eleutheroside K）、ファットシアサイド  Ａ１（fatsiaside A1）、ヘデラコルチサイドＥ（hederacolchiside E）、ヘデラサポニンＢ（hederasaponin B）、フザンゴサイドＡ、Ｂ、Ｃ（huzhangosides A, B, C）、ラブラボサイドＡ（lablaboside A）、ルシノサイドＨ（lucyoside H）、６'−メチルモモジンＩ（6'-methylmomordin I）、モモジンＩ、ＩＣ、ＩＩＢ（momordins I, IC, IIB）、３−Ｏ−α−Ｌ−アラビノピラノシルオレアノール酸（3-O-α-L-arabinopyranosyloleanolic acid）、３−Ｏ−α−Ｌ−アラビノピラノシルオレアノール酸−２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコシル(１→６)−β−Ｄ−グルコシド（3-O-α-L-arabinopyranosyloleanolic acid-28-O-β-D-glucosyl(1→6)β-D-glucoside）、３−Ｏ−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシルオレアノール酸−２８−Ｏ−β−Ｄ−キシロピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル（3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosyloleanolic acid 28-O-β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl ester）、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル(１→２)−β−Ｄ−グルコロピラノシルオレアノール酸（3-O-β-D-galactopyranosyl(1→2)-β-D-glucolopyranosyloleanolic acid）、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシルオレアノール酸（3-O-β-D-glucopyranosyl(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosyloleanolic acid）、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシルオレアノール酸−２８−ゲンチオバイオサイド（3-O-β-D-glucopyranosyl(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosyloleanolic acid-28-gentiobiocide）、２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオレアノール酸（28-O-β-D-glucopyranosyloleanolic acid）、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオレアノール酸（3-O-β-D-glucopyranosyloleanolic acid）、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオレアノール酸（3-O-β-D-glucolopyranosyloleanolic acid）、３−Ｏ−β−Ｄ−リボピラノシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシルオレアノール酸（3-O-β-D-ribopyrosyl(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosyloleanolic acid）、３−Ｏ−β−Ｄ−キシロピラノシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシルオレアノール酸（3-O-β-D-xylopyranosyl(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosyloleanolic acid）、３−Ｏ−β−Ｄ−キシロシル(１→４)−β−Ｄ−グルコシル(１→４)−α−Ｌ−ラムノシル(１→３)−β−Ｄ−グルコシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノシル(１→２)−α−アラビノシルオレアノール酸−２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコシル(１→６)−β−Ｄ−グルコシルエステル（3-O-β-D-xylosyl(1→4)-β-D-glucosyl(1→4)-α-L-rhamnosyl(1→3)-β-D-glucosyl(1→3)-α-L-rhamnosyl(1→2)-α-arabinosyloleanolic acid 28-O-β-D-glucosyl(1→6)-β-D-glucosyl ester）、２'−Ｏ−グルコピラノシルモモジンＩｃ（2'-O-glucopyranosylmomordin Ic）、２'−Ｏ−グルコピラノシルモモジンＩｃ（2'-O-glucopyranosylmomordin Ic）、３−Ｏ−β−Ｄ−キシロピラノシル(１→４)−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノサイドオレアノール酸−２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル（3-O-β-D-xylopyranosyl(1→4)-β-D-glucopyranosyl(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosideoleanolic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl ester）、オレアノール酸３−Ｏ−ネオヘスペリドサイド（oleanolic acid 3-O-neohesperidoside）、オレアノール酸３−Ｏ−α−Ｌ−アラビノピラノシル−２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル（oleanolic acid 3-O-α-L-arabinopyranosyl-28-O-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl ester）、オレアノール酸３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノサイド（oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranoside）、 ペリカープサポニンＪ３（pericarpsaponin J3）、プロサポゲニンＣＰ４（prosapogenin CP4）、キナトサイドＤ（quinatoside D）、ラデアニンＡ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ（raddeanins A, C, D, E, F）、ラデアノサイドＲ１０、Ｒ１１（raddeanosides R10, R11）、リブラリニン（rivularinin）、スピナコサイドＣ、Ｄ（spinacosides C, D）、スピナサポニンＡ（ spinasaponin A）、タラサポニンＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩ（ tarasaponins II, III, VI）、カミヤツデサポニンＲ−３、Ｒ−１−ａ、Ｒ−４ｂ（Tetrapanax papyriferum saponins R-3, R-1-a, R-4b）、ウドサポニンメチルエステルＡ−Ｃ（udosaponin methyl esters A-C）。
【００１９】
ヘデラゲニンサポニン：
アケビアサポニンＡ−Ｇ（Akebia saponins A-G）、アケボサイド（akeboside）、アスペロサポインＦ、Ｈ１(asperosaponins F, H1)、カルコサイドＤ（calcoside D）、カウロサイドＤ、Ｆ(caulosides D, F)、チャイニーズ・クレマティス・プロサポゲニンＣＰ１０、ＣＰ１０ａ、Ｃｐ8ａ、ＣＰ３ｂ、ＣＰ０、ＣＰ３ａ、ＣＰ２ａ(Clematis chinensis prosapogenins CP10, CP10a, Cp8a, CP3b, CP0, CP3a, CP2a)、３−Ｏ−β−Ｄ−キシロピラノシル(１→３)−α−Ｌ−アラビノピラノシルヘデラゲニン−２８−Ｏ−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→４)−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノサイド(3-O-β-D-xylopyranosyl(1→3)-α-L-arabinopyranosylhederagenin-28-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→4)-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside)、ヘデラゲニン−３−Ｏ−α−Ｌ−アラビノサイド（hederagenin-3-O-α-L-arabinoside）、ヘデラゲニン−３−Ｏ−[α−ｌ−ラムノピラノシル−（１→２）−α−Ｌ−アラビノピラノシル]−２８−Ｏ−β−Ｄ−キシロピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル（hederagenin-3-O-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosyl]-28-O-β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl ester）、ヘデラゲニン−３−Ｏ−[α−ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシル]−２８−Ｏ−[３−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノサイド（hederagenin-3-O-[α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosyl]-28-O-[3-O-acetyl-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside）、ヘデラゲニン−３−Ｏ−[α−ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシル]−２８−Ｏ−[３−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−キシロピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノサイド（hederagenin-3-O-[α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosyl]-28-O-[3-O-acetyl-β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside）、ヘデラゲニン−３−Ｏ−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→３)−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシル２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル（hederagenin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→3)-β-D-glucopyranosyl(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosyl 28-O-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl ester）、ヘデラゲニン−３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシル２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル（hederagenin-3-O-β-D-glucopyranosyl(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosyl 28-O-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl ester）、ヘデラゲニン−３−Ｏ−(４−Ｏ−アセチル)−α−Ｌ−アラビノピラノシル２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノシルエステル（hederagenin-3-O-(4-O-acetyl)-α-L-arabinopyranosyl 28-O-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl ester）、ハリギリサポニンＢ、Ｇ、ＪＬａ、ＪＬｂ（kalopanaxsaponins B, G, JLa, JLb）、レオントサイドＡ、Ｂ（leontosides A, B）、 ルシオサイドＡ、Ｅ（lucyosides A, E）、ムクロジサポニンＥＩ、Ｇ、Ｘ、Ｙ２、ＹＩ（mukurozisaponins EI, G, X, Y2, YI）、４’−Ｏ−アセチルアケビアサポニンＤ（4'-O-acetylakebiasaponin D）、３−Ｏ−[α−Ｌ−アラビノシル]ヘデラゲニン−２８−Ｏ−[β−Ｄ−グルコシル]エステル（3-O-[α-L-arabinosyl]hederagenin-28-O-[β-D-glucosyl]ester）、３−Ｏ−α−Ｌ−ラムノピラノシル(��→３)β−Ｄ−グルコシル(１→３)−α−Ｄ−ラムノシル(１→２)−α−アラビノシルヘデラゲニン−２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコシル(１→６)β−Ｄ−グルコシルエステル（3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→3)β-D-glucosyl(1→3)-α-D-rhamnosyl(1→2)-α-arabinosylhederagenin-28-O-β-D-glucosyl(1→6)β-D-glucosyl ester）、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノピラノシル(１→２)−α−Ｌ−アラビノピラノシルヘデラゲニン（3-O-β-D-glucopyranosyl(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-arabinopyranosylhederagenin）、３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルヘデラゲニン（3-O-β-D-glucopyranosylhederagenin）、３−Ｏ−(β−Ｄ−グルコシル(１→４)−α−Ｌ−ラムノシル(１→３)β−Ｄ−グルコシル(１→３)−α−Ｄ−ラムノシル(１→２)−α−アラビノシルヘデラゲニン−２８−Ｏ−β−Ｄ−グルコシル(１→６)−β−Ｄ−グルコシルエステル（3-O-(β-D-glucosyl(1→4)-α-L-rhamnosyl(1→3)β-D-glucosyl(1→3)-α-D-rhamnosyl(1→2)-α-arabinosylhederagenin-28-O-β-D-glucosyl(1→6)-β-D-glucosyl ester）、３−Ｏ−(β−Ｄ−グルコシル(１→４)−α−Ｌ−ラムノシル(１→３)−β−Ｄ−グルコシル(１→３)−α−Ｌ−ラムノシル(１→２)−α−アラビノシルヘデラゲニン（3-O-(β-D-glucosyl(1→4)-α-L-rhamnosyl(1→3)-β-D-glucosyl(1→3)-α-L-rhamnosyl(1→2)-α-arabinosylhederagenin）、３−Ｏ−(β−Ｄ−キシロシル(１→４)β−Ｄ−グルコシル(１→４)−α−Ｌ−ラムノシル(１→３)−β−Ｄ−グルコシル(１→３)−α−Ｌ−アラビノシル(１→２)−α−アラビノシルヘデラゲニン（3-O-(β-D-xylosyl(1→4)β-D-glucosyl(1→4)-α-L-rhamnosyl(1→3)-β-D-glucosyl(1→3)-α-L-arabinosyl(1→2)-α-arabinosylhederagenin）、３−Ｏ−[(２’−Ｏ−アセチル)−α−Ｌ−アラビノピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノシル]ヘデラゲニン（3-O-[(2'-O-acetyl)-α-L-arabinopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl]hederagenin）、３−Ｏ−(２’−Ｏ−アセチル)−α−Ｌ−アラビノピラノシルヘデラゲニン−２８−Ｏ−[β−Ｄ−グルコピラノシル(１→６)−β−Ｄ−グルコピラノサイド]（3-O-(2'-O-acetyl)-α-L-arabinopyranosylhederagenin-28-O-[β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside]）、パーカープサポニンＣ、Ｊ２、Ｇ、Ｋ（percarpsaponins C, J2, G, K）、プルサチロサイドＡ、Ｂ、Ｃ（pulsatilosides A, B, C）、キナトサイドＡ、Ｂ、Ｃ（quinatosides A, B, C）、サピンドサイドＡ、Ｂ、Ｃ（sapindosides A, B, C）、
スタウノサイドＡ、Ｂ、Ｄ、Ｅ（staunosides A, B, D, E）、タウロサイドＧ３（tauroside G3）、ウドサポニンメチルエステルＤ、Ｅ、Ｆ（udosaponin methyl esters D, E, F）。
【００２０】
オレアノール酸サポニンとヘデラゲニンサポニンを含有するオレアナン型トリテルペンサポニン化合物は、次の植物から抽出される。ヒユ（Amaranthus）属の植物、例えば、イノコズチ種(Achyranthes sp.)、ヒユ種(Amaranthus sp.)など、ウコギ(Araliaceae)科の植物、例えば、コシアブラ種(Acanthopanax sp.)、タラノキ種(Aralia sp.)、ヤツデ種（ Fatsia sp.）、ハリギリ種（Kalopanax sp.）、トチバニンジン種（Panax sp.）、カミヤツデ種（Tetrapanax sp.）など、ツルムラサキ（Basellaceae）科の植物、例えば、アカザカズラ種（Boussingaultia sp.）など、メギ（Berberidaceae）科の植物、例えば、ルイヨウボタン種（Caulophyllum sp.）など、ムラサキ（Boraginaceae）科の植物、例えば、ウシノシタグサ種（Anchusa sp.）など、スイカズラ（Caprifoliaceae）科の植物、例えば、スイカズラ種（Lonicera sp.）など、アカザ（Chenopodiaceae）科の植物、例えば、アカザ種（Chenopodium sp.）など、ウリ（Cucurbitaceae）科の植物、例えば、ゴキヅル種（Actinostemma sp.）、ヘチマ種（Luffa sp.）、ツルレイシ種（Momordica sp.）など、マツムシソウ（Dipsacaceae）科の植物、例えば、ナベナ種（Dipsacus sp.）など、トウダイグサ（Euphorbiaceae）科の植物、例えば、ツゲモドキ種（Putranjiva sp.）など、トチノキ（Hippocastanaceae）科の植物、例えば、トチノキ種（Aesculus sp.）など、アケビ（Lardizabalaceae）科の植物、例えば、アケビ種（Akebia sp.）など、マメ（Leguminosae）科の植物、例えば、アカシア種（Acacia sp.）、ネムノキ種（Albizzia sp.）、イチベンバナ種（Swartzia sp.）など、カナビキボク（Opiliaceae）科の植物、例えば、オピリア種（Opilia sp.）など、ヤマゴボウ（Phytolaccaceae）科の植物、例えば、ヤマゴボウ種（Phytolacca sp.）など、キンポウゲ（Ranunculaceae）科の植物、例えば、イチリンソウ種（Anemone sp.）、センニンソウ種（Clematis sp.）、キヅタ種（Hedera sp.）、オキナグサ種（Pulsatilla sp.）など、アカネ（Rubiaceae）科の植物、例えば、ミサオノキ種（Randia sp.）、ゼロンフィス種（Xeromphis sp.）など、ムクロジ（Sapindaceae）科の植物、例えば、シマリュウガン種（Pometia sp.）、ムクロジ種（Spindus sp.）、ティノウイア種（Thinouia sp.)など、オミナエシ（Valerianaceae）科の植物、例えば、オミナエシ種（Patrinia sp.）。
【００２１】
本発明の発明者らは動物実験を行い、薬物を投与しなかった対照群、神経伝達物質の伝達を阻害することで記憶力を減退させるとして知られているスコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ）を投与した群、スコポラミンの投与１時間後に式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物を投与した群を比較することで、有意義な記憶力向上効果が観察された。
【００２２】
従って、式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物は、認知症及び軽度認識障害の治療用調合薬または認知機能改善用の健康食品の有効成分として使用することができる。
【００２３】
式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物を有効成分として含有する薬剤は、経口または非経口での投与が可能な一般的な薬剤の形態であり得る。経口投与または非経口投与用薬剤の製剤において、通常使用されている薬剤学的または食品学的に許容できる充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を使用することができる。
【００２４】
経口投与のための固形製剤の例としては、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などがある。固形製剤は、澱粉、炭酸カルシウム、スクロース、ラクトース、ゼラチンなどの少なくとも１つの賦形剤を、リグナン、ラクトンまたはこれらの誘導体と混ぜて製造される。更に、ステアリン酸マグネシウム及びタルクのような界面活性剤が賦形剤に更に添加され得る。経口投与のための液状製剤の例としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などがある。水、流動パラフィンのような単純希釈剤に加えて、様々な賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味料、香料、保存料などを使用することができる。
【００２５】
非経口投与のための製剤の例には、滅菌された水溶液、非水溶性液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤及び坐薬がある。非水溶性液剤または懸濁剤は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物油、オレイン酸エチルのような注射可能なエステルなどを含む。商標「Witepsol」、マクロゴール、名称「Tween  ６１」、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチンなどを坐薬の基剤として用いることができる。
【００２６】
薬剤内の有効成分の含有量は、体内への吸収度、不活性化度、排泄速度、使用者の年齢、性別、健康状態を考慮して適切に選択される。推奨する投薬量は、式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物を基準として、１日０．１〜１０ｍｇ／ｋｇであり、好ましくは、０．５〜５ｍｇ／ｋｇである。上記薬剤は１日１〜３回投与することができる。
【００２７】
また、式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物は、有効成分として前記化合物を含有する健康食品の形態で提供することができる。本明細書での「健康食品」とは、式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物が添加された一般的な食品またはカプセル剤、粉末剤、懸濁液の形態に製造された食品のことを言う。これを摂取した場合、前記健康食品は健康上特別な効果をもたらす。しかし、一般薬品とは異なり、食品として製造されているため、長期間使用した後も副作用などが起きない。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】本発明によるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物を１回経口投与した後の記憶力の向上を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明の実用的で好ましい実施の形態を下記例に例示するが、当業者が本発明を考慮して、本発明の精神および範囲内で修正および改善をし得ることは言うまでもない。
【００３０】
実施例１：オレアナン型トリテルペンサポニンの抽出
オレアノール酸サポニンとヘデラゲニンサポニンを多量に含有するとして知られている次の薬用植物から下記の方法により、オレアノール酸サポニンとヘデラゲニンサポニンを分離した。
各１ｋｇ（乾燥重量）のタラノキ、ヒロハオキナグサ、スイカズラ、ハリギリを、７Ｌの５０％エタノールに４時間還流しながら抽出した。この過程を２回実施した。前記抽出液を濾過し、ロータリーエバポレータを使用して５０℃で減圧雰囲気下で濃縮した。得られた濃縮物に水を添加して、約５当量（Ｖ／Ｗ）とした。得られた懸濁液を等量の水飽和ｎ−ブタノールと混合して、分離装置（ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｆｕｎｎｅｌ）に入れ、攪拌した後、２４時間放置し、前記ブタノール層を分離した。２〜３回更に再分画した後、蒸留器を利用してブタノール分画を濃縮し、真空オーブンで溶媒を完全に除去した。
前記ｎ−ブタノール分画をオクタデシルシリル化したシリカ樹脂（ＹＭＣ*ＧＥＬ ＯＤＳ−Ａ １２ｎｍ、Ｓ−１５０ｍ）を用いてカラムクロマトグラフィーを行った。前記樹脂の量は、２５０ｇまたは試料の量（１０ｇ）の２５当量であった。前記樹脂の当量の２〜３倍である１０％（Ｖ／Ｖ）メタノールから、１０％（Ｖ／Ｖ）ずつ溶媒のメタノール含量を増やしていくステップ・グラジエント法（ｓｔｅｐ−ｇｒａｄｉｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ）を用いた。７０％、８０％及び９０％のメタノール溶媒（Ｖ／Ｖ）により分離された分画のみを取り、サポニン化合物を最大限濃縮した。
【００３１】
実施例２：オレアナン型トリテルペンサポニンの分離及び構造分析
前記メタノール分画物を、アセトニトリル／水の混合溶媒を使用して高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を行った。ＰＤＡ検出器を利用して、２１０ｎｍで最大吸光度を有し、トリテルペン特有の吸光スペクトルを見せる主要ピークを選定した。次いで、１分当り９．５ｍＬのアセトニトリル／水の混合溶媒を使用して分取ＨＰＬＣを行い、選定したピークを分離した。蒸留器を用いて濃縮した後、真空オーブン内で乾燥することにより、前記溶媒を完全に除去した。ＹＭＣ Ｊ’Ｓｐｈｅｒｅ ＯＤＳ−Ｈ８０カラムを使用し、成分分析を２１０ｎｍで行った。前記分離されたピーク成分を１００℃で２Ｎ Ｈ2ＳＯ4の酸条件で６０分間加水分解し、サポニンから糖を除去した。得られた産物をシグマ（Ｓｉｇｍａ）で購入したオレアノール酸とヘデラゲニンの標準物質と共にＨＰＬＣで分析した。オレアノール酸サポニンまたはヘデラゲニンサポニンであることを確認した前記ピーク成分を更に分離して、下記表１の８種の物質を得た。
【００３２】
分離された物質の構造を決定するために、1Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ)、13Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ）、ＤＥＰＴ及び２Ｄ ＮＭＲ(1Ｈ−1Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣ、ＴＯＣＳＹ、ＮＯＥＳＹ)分析を行った。そして、糖の種類と数を確認するために、加水分解された糖を炭水化物分析システムで分析し、ＴＭＳ誘導体化した後、ＧＣで分析した。各糖の構造を２Ｄ ＮＭＲ（1Ｈ−1Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣ、ＴＯＣＳＹ、ＮＯＥＳＹ)分析を通して行った。糖の結合を２Ｄ ＮＭＲ（ＨＭＢＣ、ＮＯＥＳＹ）により分析した。
【００３３】
下記表１のように、８種のオレアノール酸サポニンまたはヘデラゲニンサポニン１００〜５００ｍｇを得た。
【００３４】
【表１】
2010507651.tif 000007
【００３５】
実施例３：受動回避実験
上記８種のオレアノール酸サポニンまたはヘデラゲニンサポニンの体内での記憶力向上効果を確認するために、受動回避実験を行った。また、サポニン化合物のアグリコンであるオレアノール酸とヘデラゲニンが実験に含まれた。
５０ｃｍ×１５ｃｍ×４０ｃｍの寸法のシャトルボックスが使用された。前記ボックスはギロチン式扉（gillotin door）により２つの部屋に分けられている。１つの部屋は明るく照らし、もう１つの部屋は黒い布で覆った。
マウスを明室に入れた後、ギロチン式扉を開けると、マウスは暗闇を好むので２０秒以内に暗室に移動した。マウスが暗室に入ったと同時に、ギロチン式扉は自動的に閉められた。このようにして、潜伏時間（ｌａｔｅｎｃｙ ｔｉｍｅ）または、マウスが明室を出て暗室に進入するまでの経過時間が決定された。全てのマウスが２０秒以内に暗室に入るまで、この訓練課程を実験初日に実施した。
その次の日、訓練されたマウスを一匹ずつ明室に入れ、暗室に移動するようにした。マウスが暗室に進入すると、暗室の床に設置された電気格子を通して足部刺激（３秒間０．８ｍＡ）を与えた。
この習得訓練の２４時間後、マウスを明室に入れ、暗室に移動するようにした。その後、正常なマウスは前日の刺激を記憶し、暗室に行くことをためらった。マウスが暗室に侵入するのにかかった時間を３００秒を最大として測定した。
滞留時間（ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｔｉｍｅ）を測定し、記憶力向上効果を評価した。対照群にはスコポラミンまたは薬物を投与しなかった。神経伝達物質の伝達を阻害することで記憶力を減退させることで知られているスコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ）を投与し、１時間後、サポニン（３０ｍｇ／ｋｇ）とアグリコン（３０ｍｇ／ｋｇ）、陽性対照としてアリセプト（ドネペジル（donepezil）、１ｍｇ／ｋｇ）、陰性対照として水を投与した。
アリセプトを経口投与した陰性対照群は、水を投与した陰性対照群より滞留時間が１．６倍長かった。アグリコンと糖の構成によって若干の差があるが、本発明による８種のオレアノール酸サポニンまたはヘデラゲニンサポニン薬物全てに、陰性対照群に比べて２．５〜３．０倍の滞留時間の増加が見られた。
更に、これらのサポニンは、アグリコンであるオレアノール酸（２．４倍）とヘデラゲニン（２．３倍）よりも高い認知機能の向上効果が見られた（表２及び図１参照）。
従って、オレアノール酸サポニン及びヘデラゲニンサポニンは、認知症及び軽度認識障害によって減退させられた記憶力の向上に有効であると結論することができる。それらは、認知症の治療に使用されるアリセプトだけでなく、サポニンのアグリコンであるオレアノール酸とヘデラゲニンよりも効果の上で優れている。
【００３６】
【表２】
2010507651.tif 000008
【００３７】
以下は、式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物を有効成分として含有する治療用薬剤または健康食品を製造する例である。しかし、これらは本発明の範囲を限定するものではない。
【００３８】
製造例１：粉末剤及びカプセル剤の製造
オレアナン型トリテルペンサポニン化合物５０ｍｇをラクトース７４ｍｇ、結晶性セルロース１５ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム１ｍｇと混合して、粉末剤を製造した。得られた粉末剤を適当な装置を使用してＮｏ．５ゼラチンカプセルに充填した。
【００３９】
製造例２：液状薬の製造
オレアナン型トリテルペンサポニン化合物５０ｍｇを砂糖２０ｇ、異性化糖２０ｇ、レモン香料適量に添加した。総量が１００ｍＬとなるように滅菌精製水を加えた。得られた液体を茶色の瓶に詰めて滅菌した。
【００４０】
製造例３：健康食品の製造
式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物１００ｍｇを高麗人参抽出物１００ｍｇ、緑茶抽出物１００ｍｇ、ビタミンＣ１００ｍｇ、粉末ビタミンＥ１２０ｍｇ、乳酸鉄２ｍｇ、酸化亜鉛２ｍｇ、ニコチンアミド２０ｍｇ、ビタミンＡ５ｍｇ、ビタミンＢ１ ２ｍｇ、ビタミンＢ２ ２ｍｇ、コーンスターチ２００ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム２０ｍｇを混合した（１日分）。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
上記記載から明らかなとおり、式１に表されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物は、記憶力向上効果が優れているため、認知症及び軽度認識障害の治療薬、及び認知機能を含む脳機能向上用の健康食品として有用である。
【図１】
2010507651.tif 000011
【手続補正書】
【提出日】平成21年7月15日(2009.7.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
オレアノール酸サポニンとヘデラゲニンサポニンを含有するオレアナン型トリテルペンサポニン化合物は、次の植物から抽出される。ヒユ（Amaranthus）科の植物、例えば、イノコズチ種(Achyranthes sp.)、ヒユ種(Amaranthus sp.)など、ウコギ(Araliaceae)科の植物、例えば、コシアブラ種(Acanthopanax sp.)、タラノキ種(Aralia sp.)、ヤツデ種（ Fatsia sp.）、ハリギリ種（Kalopanax sp.）、トチバニンジン種（Panax sp.）、カミヤツデ種（Tetrapanax sp.）など、ツルムラサキ（Basellaceae）科の植物、例えば、アカザカズラ種（Boussingaultia sp.）など、メギ（Berberidaceae）科の植物、例えば、ルイヨウボタン種（Caulophyllum sp.）など、ムラサキ（Boraginaceae）科の植物、例えば、ウシノシタグサ種（Anchusa sp.）など、スイカズラ（Caprifoliaceae）科の植物、例えば、スイカズラ種（Lonicera sp.）など、アカザ（Chenopodiaceae）科の植物、例えば、アカザ種（Chenopodium sp.）など、ウリ（Cucurbitaceae）科の植物、例えば、ゴキヅル種（Actinostemma sp.）、ヘチマ種（Luffa sp.）、ツルレイシ種（Momordica sp.）など、マツムシソウ（Dipsacaceae）科の植物、例えば、ナベナ種（Dipsacus sp.）など、トウダイグサ（Euphorbiaceae）科の植物、例えば、ツゲモドキ種（Putranjiva sp.）など、トチノキ（Hippocastanaceae）科の植物、例えば、トチノキ種（Aesculus sp.）など、アケビ（Lardizabalaceae）科の植物、例えば、アケビ種（Akebia sp.）など、マメ（Leguminosae）科の植物、例えば、アカシア種（Acacia sp.）、ネムノキ種（Albizzia sp.）、イチベンバナ種（Swartzia sp.）など、カナビキボク（Opiliaceae）科の植物、例えば、オピリア種（Opilia sp.）など、ヤマゴボウ（Phytolaccaceae）科の植物、例えば、ヤマゴボウ種（Phytolacca sp.）など、キンポウゲ（Ranunculaceae）科の植物、例えば、イチリンソウ種（Anemone sp.）、センニンソウ種（Clematis sp.）、キヅタ種（Hedera sp.）、オキナグサ種（Pulsatilla sp.）など、アカネ（Rubiaceae）科の植物、例えば、ミサオノキ種（Randia sp.）、ゼロンフィス種（Xeromphis sp.）など、ムクロジ（Sapindaceae）科の植物、例えば、シマリュウガン種（Pometia sp.）、ムクロジ種（Spindus sp.）、ティノウイア種（Thinouia sp.)など、オミナエシ（Valerianaceae）科の植物、例えば、オミナエシ種（Patrinia sp.）。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
実施例３：受動回避実験
上記８種のオレアノール酸サポニンまたはヘデラゲニンサポニンの体内での記憶力向上効果を確認するために、受動回避実験を行った。また、サポニン化合物のアグリコンであるオレアノール酸とヘデラゲニンが実験に含まれた。
５０ｃｍ×１５ｃｍ×４０ｃｍの寸法のシャトルボックスが使用された。前記ボックスはギロチン式扉（gillotin door）により２つの部屋に分けられている。１つの部屋は明るく照らし、もう１つの部屋は黒い布で覆った。
マウスを明室に入れた後、ギロチン式扉を開けると、マウスは暗闇を好むので２０秒以内に暗室に移動した。マウスが暗室に入ったと同時に、ギロチン式扉は自動的に閉められた。このようにして、潜伏時間（ｌａｔｅｎｃｙ ｔｉｍｅ）または、マウスが明室を出て暗室に進入するまでの経過時間が決定された。全てのマウスが２０秒以内に暗室に入るまで、この訓練課程を実験初日に実施した。
その次の日、訓練されたマウスを一匹ずつ明室に入れ、暗室に移動するようにした。マウスが暗室に進入すると、暗室の床に設置された電気格子を通して足部刺激（３秒間０．８ｍＡ）を与えた。
この習得訓練の２４時間後、マウスを明室に入れ、暗室に移動するようにした。その後、正常なマウスは前日の刺激を記憶し、暗室に行くことをためらった。マウスが暗室に侵入するのにかかった時間を３００秒を最大として測定した。
滞留時間（ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｔｉｍｅ）を測定し、記憶力向上効果を評価した。対照群にはスコポラミンまたは薬物を投与しなかった。神経伝達物質の伝達を阻害することで記憶力を減退させることで知られているスコポラミン（１ｍｇ／ｋｇ）を投与し、１時間後、サポニン（３０ｍｇ／ｋｇ）とアグリコン（３０ｍｇ／ｋｇ）、陽性対照としてアリセプト（ドネペジル（donepezil）、１ｍｇ／ｋｇ）、陰性対照として水を投与した。
アリセプトを経口投与した陽性対照群は、水を投与した陰性対照群より滞留時間が１．６倍長かった。アグリコンと糖の構成によって若干の差があるが、本発明による８種のオレアノール酸サポニンまたはヘデラゲニンサポニン薬物全てに、陰性対照群に比べて２．５〜３．０倍の滞留時間の増加が見られた。
更に、これらのサポニンは、アグリコンであるオレアノール酸（２．４倍）とヘデラゲニン（２．３倍）よりも高い認知機能の向上効果が見られた（表２及び図１参照）。
従って、オレアノール酸サポニン及びヘデラゲニンサポニンは、認知症及び軽度認識障害によって減退させられた記憶力の向上に有効であると結論することができる。それらは、認知症の治療に使用されるアリセプトだけでなく、サポニンのアグリコンであるオレアノール酸とヘデラゲニンよりも効果の上で優れている。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項４】
前記式１に表される化合物は、エレウテロサイドＫ（eleutheroside K）、ヘデラサポニンＢ（hederasaponin B）、ヘデラコルチサイドＥ（hederacolchiside E）、エラトサイドＡ（elatoside A）、エラトサイドＣ（elatoside C）、ロニセロサイドＡ（loniceroside A）、ロニセロサイドＢ（loniceroside B）及びハリギリサポニンＢ（kalopanaxsaponin B）からなる群から選択されるオレアナン型トリテルペンサポニン化合物である、請求項３記載の健康食品。
【手続補正４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１】
2010507651.tif 000012
【国際調査報告】
2010507651.tif 000013
2010507651.tif 000014