(57)【要約】  本発明は、樹状キレート化合物、該化合物を製造する方法及び該化合物を含有する医薬組成物に関する。本発明の樹状キレート錯体は下記式Ｉを有する：[[ＭＣ]-Ｅn-[Ｄ]m-Ｘ1p1 Ｘ2p2 Ｘ3p3 Ｘ4p4]z- ｚＢ+  (Ｉ)。式中、Ｍは磁気又はシンチグラフィーマーカーであり、Ｃは磁気マーカーＭ用のキレート剤であり、Ｅはスペーサーであり、ｎ＝０又は１、Ｄは、樹状構造体を形成し得る化合物であり、ｍは１又は２又は４に等しい整数であり、Ｘ1は錯体の親油性を増加させる基であり、p1は０〜12の整数であり、Ｘ2は、特定の器官に対する錯体の特異性を増加させる基であり、p2は０、１、２又は４に等しい整数であり、Ｘ3は治療活性を有する基であり、p3は０、１、２又は４に等しい整数であり、Ｘ4はCH3基であり、p4は０〜12の整数であり、Ｂは対イオンであり、ｚは０、１、２、３又は４に等しい整数である。本発明は、薬学の分野で、より正確には医学的画像化に使用することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉ：
[[ＭＣ]-Ｅn-[Ｄ]m-Ｘ1p1 Ｘ2p2 Ｘ3p3 Ｘ4p4]z- ｚＢ+      式Ｉ
（式中、
−  Ｍは磁気又はシンチグラフィーマーカーであり、好ましくはGd3+、Mn2+及び99mTc3+イオンから選択され、
−  Ｃは磁気マーカーＭ用のキレート剤であり、
−  [ＭＣ]は磁気マーカーＭのキレートであり、
−  Ｅはスペーサーであり、
−  ｎ＝０又は１、
−  [Ｄ]は、そのコアがベンジルアルコール又はベンジルアミンに由来する少なくとも１つの基を含んでなり、そのベンジル環が３位、４位、５位においてポリエチレングリコール単位から構成される鎖で置換されている樹状構造体であり、
−  ｍは１又は２又は４に等しい整数であり、
−  Ｘ1は錯体の親油性を増加させる基、好ましくはtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1は０〜12(両端を含む)に等しい整数であり、
−  Ｘ2は、特定の器官、好ましくは脳に対する錯体の特異性を増加させる基、例えばＬ-ドーパミンであり、
−  p2は０、１、２又は４(両端を含む)に等しい整数であり、
−  Ｘ3は治療活性、好ましくは神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病及び多発性硬化症に対する治療活性を有する基であり、
−  p3は０、１、２又は４(両端を含む)に等しい整数であり、
−  Ｘ4はCH3基であり、
−  ｍ＝１のときp1＋p2＋p3＋p4＝３、又はｍ＝２のときp1＋p2＋p3＋p4＝６、又はｍ＝４のときp1＋p2＋p3＋p4＝12、
−  p4は０〜12(両端を含む)に等しい整数であり、
−  Ｂは対イオンであり、好ましくはNa+又はK+であり、
−  ｚは０、１、２、３又は４に等しい整数である）
を有することを特徴とする樹状キレート錯体。
【請求項２】
キレート剤Ｃがジエチレントリアミン五酢酸(DTPA)、カテコール由来トリポッド又は８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであることを特徴とする請求項１に記載の錯体。
【請求項３】
樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなるポリエチレングリコール鎖であることを特徴とする請求項１又は２に記載の錯体。
【請求項４】
ｍ＝１であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項５】
ｍ＝２又は４であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項６】
−  ｎ＝p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p4＝６、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  ＭがGd3+であり、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
の下記式II-1：
【化１】
2010507571.tif 000096
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項７】
−  ｎ＝p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p4＝６、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、
−  ｍ＝２、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  ＭがMn2+であり、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝２
の下記式II-2：
【化２】
2010507571.tif 000097
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項８】
−  ｎ＝p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p4＝６、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、
−  ｍ＝２、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  Ｍが99mTc3+であり、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
の下記式II-3：
【化３】
2010507571.tif 000098
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項９】
−  Ｃがカテコール由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を有する鎖であり、
−  ｍ＝１、
−  ＭがGd3+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p4＝３、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝３
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１０】
−  Ｃがカテコール由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を有する鎖であり、
−  ｍ＝１、
−  ＭがMn2+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p4＝３、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝４
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１１】
−  Ｃがカテコール由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を有する鎖であり、
−  ｍ＝１、
−  Ｍが99mTc3+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p4＝３、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝３
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１２】
−  Ｃが８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝１、
−  ＭがGd3+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p4＝３、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝０
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１３】
−  Ｃが８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝１、
−  ＭがMn2+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p4＝３、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１４】
−  Ｃが８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝１、
−  Ｍが99mTc3+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p4＝３、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝０
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１５】
−  Ｃがカテコール由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２又は４、
−  ＭがGd3+であり、
−  ｍ＝２のときp4＝６又はｍ＝４のときp4＝12、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝３
であることを特徴とする請求項１、３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１６】
−  Ｃがカテコール由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２又は４、
−  ＭがMn2+であり、
−  ｍ＝２のときp4＝６又はｍ＝４のときp4＝12、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝４
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１７】
−  Ｃがカテコール由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２又は４、
−  Ｍが99mTc3+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  ｍ＝２のときp4＝６又はｍ＝４のときp4＝12、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝３
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１８】
−  Ｃが８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２又は４、
−  ＭがGd3+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  ｍ＝２のときp4＝６又はｍ＝４のときp4＝12、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝０
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項１９】
−  Ｃが８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２又は４、
−  ＭがMn2+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  ｍ＝２のときp4＝６又はｍ＝４のときp4＝12、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２０】
−  Ｃが８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであり、
−  ｎ＝１、
−  Ｅがエチレンジアミン又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２又は４、
−  Ｍが99mTc3+であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  p1＝p2＝p3＝０、
−  Ｘ4がCH3であり、
−  ｍ＝２のときp4＝６又はｍ＝４のときp4＝12、
−  ＢがNa3+であり、
−  ｚ＝０
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２１】
−  ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、
−  ＭがGd3+であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝１、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1＝３、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２２】
−  ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、
−  ＭがMn2+であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝１、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1＝３、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝２
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２３】
−  ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、
−  Ｍが99mTc3+であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝１、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1＝３、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２４】
−  ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、
−  ＭがGd3+であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２又は４、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  ｍ＝２のときp1＝６又はｍ＝４のときp1＝12、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２５】
−  ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、
−  ＭがMn2+であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２又は４、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  ｍ＝２のときp1＝６又はｍ＝４のときp1＝12、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝２
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２６】
−  ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、
−  Ｍが99mTc3+であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝２又は４、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  ｍ＝２のときp1＝６又はｍ＝４のときp1＝12、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２７】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  ＭがGd3+であり、
−  ｍ＝１、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1＝２、
−  Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、
−  p2＝１、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２８】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  ＭがMn2+であり、
−  ｍ＝１、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1＝２、
−  Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、
−  p2＝１、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝２
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項２９】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  Ｍが99mTc3+であり、
−  ｍ＝１、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1＝２、
−  Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、
−  p2＝１、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項３０】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  ＭがGd3+であり、
−  ｍ＝２、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1＝４、
−  Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、
−  p2＝２、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項３１】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  ＭがMn2+であり、
−  ｍ＝２、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1＝４、
−  Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、
−  p2＝２、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝２
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項３２】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、
−  Ｍが99mTc3+であり、
−  ｍ＝２、
−  Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1＝４、
−  Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、
−  p2＝２、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝１
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項３３】
−  Ｃがジエチレントリアミン五酢酸又はカテコール由来若しくは８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドのいずれかであり、
−  ｎ＝０又は１、
−  ｎ＝１のとき、Ｅはエチレンジアミン鎖又はブタンジアミン鎖であり、
−  樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３又は４のエチレングリコール単位を含んでなる鎖であり、
−  ｍ＝１又は２又は４、
−  ＭがGd3+又はMn2+又は99mTc3+であり、
−  Ｘ1はtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1は０〜12(両端を含む)に等しい整数であり、
−  Ｘ2はＬ-ドーパミンであり、
−  p2は０、１、２又は４(両端を含む)に等しい整数であり、
−  Ｘ3は治療薬剤であり、
−  p3は０、１、２又は４(両端を含む)に等しい整数であり、
−  p4＝０、
−  ＢがNa+であり、
−  ｚ＝０、１、２、３又は４
であることを特徴とする請求項１〜３及び５のいずれか１項に記載の錯体。
【請求項３４】
以下の工程：
ａ)トリエチレングリコールモノメチルエーテルと塩化トシルとの反応、
ｂ)工程ａ)で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｃ)対応するアルコールを得るための、工程ｂ)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｄ)工程ｃ)で得られる生成物の臭素化、
ｅ)工程ｄ)で得られる生成物とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｆ)工程ｅ)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4との反応、
ｇ)工程ｆ)で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応、
ｈ)工程ｇ)で得られる生成物と塩化Gd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応
を含んでなることを特徴とする請求項６〜８のいずれか１項に記載の錯体を合成する方法。
【請求項３５】
以下の工程：
ａ)tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成、
ｂ)工程ａ)で得られる生成物と塩化トシルとの反応、
ｃ)工程ｂ)で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｄ)対応するアルコールを得るための、工程ｃ)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｅ)工程ｄ)で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応
ｆ)工程ｅ)で得られる生成物と塩化Gd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応
を含んでなることを特徴とする請求項２１〜２３のいずれか１項に記載の錯体を合成する方法。
【請求項３６】
以下の工程：
ａ)tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成、
ｂ)工程ａ)で得られる生成物と塩化トシルとの反応、
ａ')メチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートと無水酢酸との反応、
ｂ')工程ａ')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ')工程ｂ')で得られる生成物の、好ましくは炭酸カリウムでの塩基性加水分解、
ｄ')工程ｃ')で得られる生成物と工程ｂ)で得られるトシレートとの反応
ｅ')工程ｄ')で得られる生成物のアルコール官能基の脱保護、
ａ'')Ｌ-ドーパミンのFmocクロライドでの保護、
ｂ'')工程ａ'')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ'')工程ｂ'')で得られる生成物とモルホリンとの反応、
ｄ'')工程ｃ'')で得られる生成物のエステル化、
ｅ'')工程ｄ'')で得られる生成物の鹸化、
ｆ'')工程ｅ'')で得られる生成物の工程ｅ')で得られる生成物とのエステル化、
ｇ'')対応するアルコールを得るための、工程ｆ'')で得られる生成物の還元、
ｈ'')工程ｇ'')で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応、
ｉ'')工程ｈ'')で得られる生成物と塩化Gd(III)、塩化Mn(II)又は過テクネテートとの反応
を含んでなることを特徴とする請求項２７〜２９のいずれか１項に記載の錯体を合成する方法。
【請求項３７】
以下の工程：
ａ)tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成、
ｂ)工程ａ)で得られる生成物と塩化トシルとの反応、
ａ')メチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートと無水酢酸との反応、
ｂ')工程ａ')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ')工程ｂ')で得られる生成物の炭酸カリウムでの塩基性加水分解、
ｄ')工程ｃ')で得られる生成物と工程ｂ)で得られるトシレートとの反応
ｅ')工程ｄ')で得られる生成物のアルコール官能基の脱保護、
ａ'')Ｌ-ドーパミンのFmocクロライドでの保護、
ｂ'')工程ａ'')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ'')工程ｂ'')で得られる生成物とモルホリンとの反応、
ｄ'')工程ｃ'')で得られる生成物のエステル化、
ｅ'')工程ｄ'')で得られる生成物の鹸化、
ｆ'')工程ｅ'')で得られる生成物の工程ｅ')で得られる生成物とのエステル化、
ｇ'')対応するアルコールを得るための、工程ｆ'')で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｈ'')工程ｇ'')で得られる生成物の臭素化
ｉ'')工程ｈ'')で得られる生成物とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｊ'')対応するアルコールを得るための、工程ｉ'')で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｋ'')工程ｊ'')で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応、
ｌ'')工程ｋ'')で得られる生成物と塩化Gd(III)又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応
を含んでなることを特徴とする請求項３０〜３２のいずれか１項に記載の錯体を合成する方法。
【請求項３８】
医薬的に許容され得る賦形剤中に、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の錯体又は請求項３４〜３７のいずれか１項に記載の方法により得られる錯体を少なくとも１つ含んでなることを特徴とする医薬組成物。
【請求項３９】
神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病及び多発性硬化症の検出のための請求項３８に記載の医薬組成物の使用。
【請求項４０】
神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病又は多発性硬化症を治療又は改善するための請求項３８に記載の医薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、樹状キレート錯体、該錯体の製造方法及び該錯体を含有する医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
磁気共鳴画像化及び核医学は、種々の医学分野において解剖学的及び機能的情報の両方への非侵襲性で非外傷性のアクセスを提供するので、ライフサイエンス分野における必須の研究ツールとなってきた。
現在の開発の１つの本線は機能的画像化に関する。機能的画像化は、詳細には、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病又は多発性硬化症(MS)に関与する機序の理解における基本ツールを構成する。
磁気共鳴画像化に使用される製品は、磁気造影剤(磁気マーカーと名付けられたマーカーを含む)として知られる造影剤である。
【０００３】
現時点で存在する磁気造影剤は、磁気マーカーがガドリニウム又はマンガンである化合物である。
核医学では、造影剤はシンチグラフィー造影剤と呼ばれ、これにはシンチグラフィーマーカーと名付けられたマーカーが含まれる。現時点で最も一般的に使用されるシンチグラフィーマーカーはテクネチウム-99mである。
これら全ての造影剤は、拘束性の仕様を満足しなければならない。よって、これらは、良好な生体適合性、低い毒性、生体における高い安定性を有し、低濃度で有効であり、加えて可能であれば、標的とする器官又は組織に特異的でなければならない(リガンドにグラフトされる官能基により提供されるベクトル化)。
【０００４】
しかし、現在市場にある製品及び文献に記載された製品は、これらが毒性(特に肝毒性)を示すかもしれないという事実に加え、生体における低い安定性を有し、標的とする器官又は組織に対して特異的でない。
よって、Masato Hitoらは、Magnet. Res. Imag. 2006, 24, 625-630に公表した論文で、キレート剤がジエチレントリアミン五酢酸(DTPA)であるガドリニウムキレートである造影剤を、脳に対する特異性を有するものとして記載している。
しかし、これは、該キレートの脳への真のベクトル化ではない。
【０００５】
なぜなら、常に脳に至るのは注射した造影剤の４％であるからである。ここで、Masato Hitoにより提案された分子は、１分子あたりのガドリニウム原子の数は３であり、一方先行技術の造影剤には、造影剤１分子あたりガドリニウム原子が１つだけ存在する。したがって、Masato Hitoにより提案された分子では、実際には、脳に到達するガドリニウムの濃度の増加であり、キレートの脳への真のベクトル化ではない。
更に、この製品は肝臓毒性を示す。
Min Liuらは、Bioconj. chem. 2005, 16, 1126-1132で、マーカーがテクネチウム-99mであり、キレート剤がジエチレントリアミン五酢酸(DTPA)であり、リガンドがポリエチレングリコール(PEG)ベースのポリマーである造影剤を提案した。
【０００６】
この製品(核医学で使用することができる)は肝臓に結合し、腎臓によって排出され、このことによって腎臓の画像化を可能とする。
この製品もまた、造影剤のベクトル化という意味では特定の器官に特異的でない。
更に、このポリエチレングリコールベースポリマーのアプローチには、放射性医薬品の合成の再現性という問題があり、任意のポリマー合成と同様に、得られる製品の十分で既知の純度という問題もある。
【０００７】
Jakub Rudovskyらは、Chem. Commun., 2005, 2390-2392で、下記式のDOTA(２,２',２'',２'''-(１,４,７,10-テトラアザシクロテトラデカン-１,４,７,10-テトライル)四酢酸)アナログの樹状ガドリニウム(3+)錯体を提案した。
【０００８】
【化１】
2010507571.tif 000002
【０００９】
しかし、この場合、錯体はデンドリマーの周縁部にあり、このことによりベクトル化剤での錯体自体の官能化が妨げられる。デンドリマーの全ての端部がキレートで占められている。
Paula Baiaらは、Eur. J. Inorg. Chem. 2005, 2110-2119に、ジエチレントリアミン五酢酸ビスアミド複合多糖ランタニド(III)キレートを記載している。
これら分子は、ベクトル化剤(βガラクトシル残基)がグラフトされたポリアミドタイプの樹状構造体に結合したGd3+イオンキレート性構造体から構成される。
【００１０】
このベクトル化は、肝臓を標的とするためのベクトル化である。
しかし、この製品は、肝臓に対して特異的であるが脳に対しては特異的でないという事実に加えて、ポリアミドデンドリマーに起因する毒性を示す。
特許出願US No. 2006/0165601A1は、金属カチオン、特にGd3+カチオンをキレートするための樹状化合物を記載する。
【００１１】
これら化合物において、Gd3+キレート剤はジエチレントリアミン五酢酸(DTPA)であり、樹状構造体のコアはポリオール化合物であり、樹状構造体のデンドライトは、ヒドロキシル(OH)又はアミン(NH2)又はO-(C1〜C10)アルキル基で終端するポリエチレングリコール鎖から構成される。
しかし、これら化合物は、脳に対する特異性を有さず、既知の画像化製品と比較して、特別な血管残留性(vascular remanence)を有さない。
よって、今日までの全ての既存の及び記載された造影剤の中で、脳に対して或る種の「特異性」を有する唯一の製品は、Masato Hitoによって記載されたジエチレントリアミン五酢酸由来のGd3+イオンキレートであるが、これは、脳への真のベクトル化を示さず、加えて肝毒性を示す。
【００１２】
他の全ての造影剤は肝臓又は腎臓に対して特異的であり、(特にPaula Baiaらにより提案された製品の場合には、ポリアミドデンドリマーの使用に起因して)生体に対して毒性を示すことがある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、良好な生体適合性、低い毒性及び高い感度を有し、低濃度で有効であり、高い血管残留性を有し、加えて、(特に脳に対して)真の特異性(ベクトル化)を有する造影剤を提案することによって先行技術の課題を解決することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
この趣旨で、本発明は、樹状構造体の各デンドライトが官能化され得る遊離末端を有するマーカー-樹状構造体タイプのキレート錯体の構造を有する造影剤を提案する。
デンドライトの官能化により、特定の器官、特に脳への造影剤のベクトル化を得ることが可能になる。デンドライト-官能化剤は、特に血液脳関門を横断できるよう、造影剤の親油性を増加させるように選択することもできる。デンドライトの別のタイプの可能な官能化は、治療薬剤での官能化である。
更に別のタイプの官能化により、本発明の造影剤の血管残留性を増大させることも可能である。
【００１５】
樹状構造体のデンドライトは、全てが同じ官能を有することもできるし、幾つかのデンドライトが第１のタイプの官能を有し、その他のデンドライトが別のタイプの官能を有することもできる。例えば、樹状構造体の少なくとも１つのデンドライトが、造影剤の親油性を増加させて血液脳関門を横断できるように官能化され、樹状構造体の少なくとも１つの他のデンドライトは、脳への造影剤の特異性を増加させるように官能化することができる。
このことにより、中枢神経系の病状(例えばアルツハイマー病及びパーキンソン病)の診断を可能にするのみならず、これら疾患に関与する機序の理解も可能にする新規造影剤を得ることが可能になる。
しかし、別の実施形態では、造影剤の少なくとも１つのデンドライトは、本発明の錯体の脳へのベクトル化が得られるように官能化し、樹状構造体の少なくとも１つの他のデンドライトは血液脳関門の横断が可能なように官能化し、樹状構造体の少なくとも１つの更に他のデンドライトは、脳に対して直接的かつ特異的に作用するように、中枢神経系疾患に特異的な治療薬剤で官能化してもよい。
【００１６】
本発明の各樹状構造体(デンドロンとも呼ばれる)は、内在部(樹状構造体のコアとも呼ばれる)と、デンドライト自体に対応する周縁部とから構成される。
磁気又はシンチグラフィーマーカーのキレート剤又はキレート性の構造体に関して、それらは、造影剤のインビボ安定性を増大させるために修飾されていてもよい。
本発明の錯体の各樹状構造体は、ヒト生体に対して非毒性である。このことは、具体的には、この樹状構造体がポリアミドポリマー又はデンドリマーをベースにする構造体ではあり得ないことを意味する。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下の説明を読めば、本発明はより明確に理解され、本発明の他の利点及び特徴はより明確になる。
一般的な実施形態では、本発明は、下記一般式Ｉ：
[[ＭＣ]-Ｅn-[Ｄ]m-Ｘ1p1 Ｘ2p2 Ｘ3p3 Ｘ4p4]z-.ｚＢ+      式Ｉ
を有することを特徴とする樹状キレート錯体に関する。
【００１８】
一般式Ｉ中：
−  Ｍは磁気マーカー、好ましくはGd3+、Mn2+及び99mTc3+イオンから選択される磁気マーカーであり、
−  Ｃは磁気マーカーＭ用のキレート剤であり、
−  [ＭＣ]は磁気マーカーＭのキレートであり、
−  Ｅはスペーサーであり、
−  ｎ＝０又は１、
【００１９】
−  [Ｄ]は樹状構造体であり、そのコアはベンジルアルコール又はベンジルアミンに由来する少なくとも１つの基を含んでなり、そのベンジル環は、３位、４位、５位で、ポリエチレングリコール単位から構成されるデンドライトで置換されており、
−  ｍは１又は２又は４に等しい整数であり、
−  Ｘ1は錯体の親油性を増大させる基、例えばtert-ブチル(tBu)基であり、
−  p1は０〜12(両端を含む)に等しい整数であり、
−  Ｘ2は、特定の器官(好ましくは脳)に対する錯体の特異性を増加させる基、例えばＬ-ドーパミンであり、
−  p2は、０、１、２又は４(両端を含む)に等しい整数であり、
【００２０】
−  Ｘ3は治療活性、好ましくは神経変性疾患(例えばアルツハイマー病、パーキンソン病及び多発性硬化症)に対する治療活性を有する基であり、
−  p3は、０、１、２又は４(両端を含む)に等しい整数であり、
−  Ｘ4はCH3基であり、
−  p4は０〜12(両端を含む)に等しい整数であり、
−  ｍ＝１のときp1＋p2＋p3＋p4＝３、又はｍ＝２のときp1＋p2＋p3＋p4＝６、又はｍ＝４のときp1＋p2＋p3＋p4＝12、
−  Ｂは対イオンであり、好ましくはNa+又はK+であり、
−  ｚは０、１、２、３又は４に等しい整数である。
【００２１】
好ましくは、キレート剤Ｃは、ジエチレントリアミン五酢酸(DTPA)、カテコール由来トリポッド(三脚状配位子；tripod)又は８-ヒドロキシキノリン由来トリポッド(これらは、Gd3+、Mn2+及び99mTc3+イオンに対する優れたキレート剤である)である。
本発明の錯体の各樹状構造体又はデンドロンは、Dendrimers and other dendric polymers, J.M.J Frechet, D.A. Tomalia, Wiley, New York, 2001に記載されるようなFrechetデンドロンタイプである。
Frechetデンドロンは、これらデンドロンが属する世代に依存して下記式を有する。
−  第一世代Frechetデンドロン、すなわち、その内在部又はコア部がベンジルアルコールタイプの基であり、ベンジル環は３、４、５位で、デンドライトを構成するポリエーテル鎖で置換されている１つの樹状構造体を含んでなるもの。
【００２２】
【化２】
2010507571.tif 000003
【００２３】
本発明の錯体では、上記式を参照すれば、O-Rは、エチレングリコール単位(-OCH2CH2)から構成される鎖であり、Ｘはキレート(式Ｉでは[ＭＣ]で示される)を表す；
−  第二世代Frechetデンドロン、すなわち上記の第一世代Frechetデンドロンと同一の樹状構造体を２つ含んでなるもの。
【００２４】
【化３】
2010507571.tif 000004
【００２５】
本発明の錯体では、上記式を参照すれば、O-R鎖はエチレングリコール単位から構成され、Ｘはキレート(式Ｉでは[ＭＣ]で示される)を表す；
−  第三世代Frechetデンドロン、すなわち上記の第一世代Frechetデンドロンと同一の樹状構造体を４つ含んでなり、上記の第二世代Frechetデンドロンと同一の構造体を２つ形成するように対に結合するもの。
第二世代Frechetデンドロンと同一の構造体の各々が、それぞれ、ベンジルアルコールタイプの環の３位及び５位で結合している。
【００２６】
【化４】
2010507571.tif 000005
【００２７】
第一世代及び第二世代のFrechetデンドロンに関しては、上記式中O-Rで示されるポリエーテル鎖は、本発明の錯体では、エチレングリコール単位から構成され、Ｘはキレート(式Ｉでは[ＭＣ]で示される)を表す。
上記のFrechetデンドロンは、樹状構造体が構造体[ＭＣ]に直接結合しているとき、すなわち式Ｉ中ｎ＝０のときに、又は樹状構造体がキレート[ＭＣ]にポリエチレングリコールタイプのスペーサーを介して結合しているときに使用される。
本発明で使用される好ましいスペーサーは下記で説明する。
【００２８】
樹状構造体がキレート[ＭＣ]に直接結合していないが、ポリエチレングリコール鎖以外のスペーサー(式Ｉ中Ｅで示される)により結合されているとき、すなわち、式Ｉ中ｎ＝１のとき、本発明の樹状構造体は、世代に依存して、下記式を有する。
この場合、スペーサーに結合するベンジル環は、もはやベンジルアルコールに由来する環ではなく、ベンジルアミンに由来する環であることに注意すべきである。
−  樹状構造体がスペーサーＥによりキレート[ＭＣ]に結合しているときに使用される第一世代デンドロン：
【００２９】
【化５】
2010507571.tif 000006
【００３０】
この式中、Ｅはスペーサーを表し、O-Rはエチレングリコール単位から構成されるデンドライトを表す。
−  樹状構造体がスペーサーＥによりキレート[ＭＣ]に結合しているときの第二世代樹状構造体。
この場合、スペーサーに結合するベンジル環は、ベンジルアミンタイプのものである。よって、樹状構造体は、下記式に対応する樹状構造体を有する：
【００３１】
【化６】
2010507571.tif 000007
【００３２】
前記の場合と同様に、Ｅはスペーサーを表し、デンドライト(O-Rで示される)はエチレングリコール単位から構成される。
−  樹状構造体がスペーサーによりキレート[ＭＣ]に結合しているときの第三世代樹状構造体；
ここでも繰り返すが、スペーサーに結合するベンジル環は、ベンジルアミンタイプの環ある。第三世代樹状構造体は下記式を有する：
【００３３】
【化７】
2010507571.tif 000008
【００３４】
この式では、Ｅは所望のスペーサーを表し、O-R鎖はエチレングリコール単位から構成される。
インビボでのポリエチレングリコールの非毒性は、長年、証明されている。
好ましくは、本発明の錯体のデンドライトは、３つ、より好ましくは４つのエチレングリコール単位を含んでなる。
【００３５】
本発明の錯体の樹状構造体は、ベンジルアルコール又はベンジルアミン環の１位の遊離末端を介して、磁気マーカーのキレート(式Ｉ中[ＭＣ]で表される)に、直接か又はスペーサー(式Ｉ中Ｅで表される)により結合している。
スペーサーは、有利には、キレート剤がカテコール由来トリポッド又は８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであるときに使用され得、キレート剤がDTPAであるときには推奨されない。
これは、キレート剤がDTPAであるとき、デンドロンをグラフトするためにDTPAの分枝の１つを独占することが、形成される錯体を脱安定化し、そして安定性のこの損失を、キレートに近いデンドロンの膨大な球状構造を維持することによって克服する必要があるためである。
【００３６】
しかし、キレート剤がカテコール由来トリポッド又は８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであるときは、形成される錯体は十分に安定であり、デンドロンの膨大な球状構造の保護効果を必要とせず、このデンドロン構造体とキレートとの間のスペーサーＥの存在により、生じ得る立体障害の問題を回避するように２つの構造体の互いの間の距離を十分とすることが可能になる。
更に、スペーサーは、最後には脳へのより多くの分布を促進することにより、体内での本発明の錯体の生体内分布を改変することを可能にする。
【００３７】
よって、スペーサーＥは、カチオン性化合物であっても、アニオン性化合物であっても、更には中性化合物であってもよい。
本発明で使用する中性スペーサーは、下式のジアミンタイプのスペーサーである。
【００３８】
【化８】
2010507571.tif 000009
【００３９】
ｎは好ましくは１又は２に等しく、すなわち、好ましいスペーサーはエチレンジアミン及びブタンジアミンのスペーサーである。
他の好ましい中性スペーサーはエチレングリコールのスペーサー、好ましくはトリ又はテトラエチレングリコールタイプのスペーサーである：
【００４０】
【化９】
2010507571.tif 000010
【００４１】
本発明で使用するカチオン性スペーサーは、芳香族アンモニウムタイプ又は分枝状脂肪族鎖を含んでなるアンモニウムタイプの化合物である。
芳香族アンモニウムタイプのカチオン性スペーサーは、下記の単位から構成される：
【００４２】
【化１０】
2010507571.tif 000011
【００４３】
好ましくは、ｎ＝１又は２である。
本発明で使用する分枝状鎖を含んでなる脂肪族アンモニウムタイプのカチオン性スペーサーは下記式を有する：
【００４４】
【化１１】
2010507571.tif 000012
【００４５】
この式において、好ましくはｎ＝１又は２である。
本発明で使用するアニオン性スペーサーは下記式を有する：
【００４６】
【化１２】
2010507571.tif 000013
【００４７】
この式において、ｎは好ましくは１又は２である。
本発明の錯体のデンドライトの末端に存在する基に従って、種々の特性が得られる。これが、デンドライトの官能化と呼ばれるものである。
よって、本発明の第１の実施形態では、一般式Ｉの樹状キレート錯体は、キレート剤ＣがDTPAであり、デンドライト(式Ｉ中Ｘ4で示される)がメチル基で官能化されている錯体である。
本発明の第１の実施形態による錯体の例は、下記式II-１の化合物である：
【００４８】
【化１３】
2010507571.tif 000014
【００４９】
上記式II-１の錯体を健常マウスにおいてMRI画像化で試験し、この錯体は0.5mmol/kgの用量で検出可能な毒性を示さないことが分かった。
事実、インビボで、遊離ガドリニウム(これはカルシウムと同じイオン半径を有する)は、カルシウム依存性の系と競合し、細網内皮系をブロックし、そのことにより心筋収縮性、凝固、カルシウム依存性酵素、ミトコンドリア呼吸及び神経伝達に影響する。このことは、血圧降下に続く心血管停止(cardiovascular arrest)及び肺麻痺によって顕在化することがある。
しかし、本発明の錯体により、DTPA錯体の熱力学的安定性は、毒性量のGd3+の遊離を防ぐに十分である。このことはニューロン細胞について確証されている(乳酸デヒドロゲナーゼ(LDH)のレベルを含む)。１〜10000μMの範囲の濃度について、本発明による式II-Iの錯体を用いても、キレート剤がDTPAであるGd3+キレートのみからなる市販製品を用いても、LDHのレベル及び神経細胞の増殖は同じであることが分かった。
【００５０】
この化合物について行った研究により、この製品は血液脳関門(BBB)を横断できないことが示された一方で、高い血管残留性が証明された：この造影剤は少なくとも72時間は安定で、血中で循環状態のままであり、このことにより、毒性の危険性なく、長く結果的により完全な検査を可能にする。このことが先行技術の市販製品に対する利点である。
下記式II-2を有し、磁気マーカーがMn2+である本発明の樹状キレート錯体は、同じ利点を有する。このことは、MEMRI(マンガン増強磁気共鳴画像化)と呼ばれるMn2+を用いる磁気画像化の分野において、相当の進歩である。
【００５１】
【化１４】
2010507571.tif 000015
【００５２】
事実、Mn2+マーカーによってGd3+マーカーより更い高いコントラストを得ることが可能になるが、動物実験で現在使用されているMnCl2形態では、Mn2+マーカーは、Mn2+が高濃度で神経毒であるので、非常に毒性である。
更に、マンガン錯体はインビボで比較的不安定であり、生物学的な媒体で解離する。
しかし、本発明の樹状キレート錯体によれば、Mn2+マーカーを有する造影剤は非常に安定であり、緩慢に拡散し、従って非毒性である。
具体的には、生きた健常マウスで行った毒性研究により、この錯体は、マーカーがGd3+である上記式II-1の錯体と同様に、毒性でないことが示されている。
【００５３】
デンドライトがCH3基で終端しているこれら製品は、３日間生体内に留まるだけでなく、この３日間は安定なままでもある。これら製品の非毒性を説明するのが、この安定性である。なぜなら、これら製品が安定であるので、生物中に磁気マーカーを迅速に放出することなく、マーカーが未だキレート形態にある間に生物により排除されるからである。
毒性に関して同じ利点が、シンチグラフィーマーカーが99mTc3+である下記式II-3を有する樹状キレート錯体を用いる核医学で見出される。
利点は安定性に関しても見出されるが、当然ながら99mTc3+の半減期(６時間半である)に制限される。
【００５４】
【化１５】
2010507571.tif 000016
【００５５】
上記式II-1〜II-3のものに対応するが、第一世代及び第三世代である錯体も、またデンドライトがテトラエチレングリコール鎖でありもはやトリエチレングリコール鎖でない錯体も、同じ利点を有する。
これら全ての錯体において、磁気マーカーは、配位結合を介して、DTPAに結合している。
例えば、Gd3+については、DTPA-Gd3+キレートは以下の様式で結合する：
【００５６】
【化１６】
2010507571.tif 000017
【００５７】
本発明の錯体の安定性を増加させるために、本発明の第２の実施形態では、磁気又はシンチグラフィーマーカーのキレートは、カテコール由来トリポッドであり、もはやDTPAではない。
この場合において、本発明の好ましい錯体は、下記式III-1〜III-3の錯体である。
【００５８】
【化１７】
2010507571.tif 000018
【００５９】
【化１８】
2010507571.tif 000019
【００６０】
これら式において、一般式Ｉを参照して、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトは、３つのエチレングリコール単位を含んでなるメチル化ポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝１、キレート剤Ｃは、カテコール由来トリポッドであり、ｎ＝p1＝p2＝p3＝０、ＢはNa+でありｚ＝３又は４である。
式III-1ではマーカーはGd3+であり、式III-2ではマーカーはMn2+であり、式III-3ではマーカーは99mTc3+である。
増加した安定性を有する本発明の第２の実施形態による他の好ましい錯体は、下記式IV-1〜IV-3を有する：
【００６１】
【化１９】
2010507571.tif 000020
【００６２】
【化２０】
2010507571.tif 000021
【００６３】
これら式において、一般式Ｉを参照して、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトは３つのエチレングリコール単位を有するメチル化ポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝１、Ｃが８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであり、p1＝p2＝p3＝０、ＢはNa+であり、ｚ＝０又は１である。
式IV-1中マーカーはGd3+であり、式IV-2中マーカーはMn2+であり、式IV-3中マーカーは99mTc3+である。
しかし、増大した安定性を有する、本発明の第２の実施形態による他の好ましい錯体は、世代G2の樹状構造体を有する(すなわち、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するメチル化ポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝２、Ｃがカテコール由来トリポッドであり、p1＝p2＝p3＝０、ＢはNa+である)錯体である。
【００６４】
マーカーがGd3+であるとき、ｚ＝３であり、錯体が下記式V-1を有する：
【化２１】
2010507571.tif 000022
【００６５】
マーカーがMn2+であるとき、ｚ＝４であり、錯体は下記式V-2を有する：
【化２２】
2010507571.tif 000023
【００６６】
マーカーが99mTc3+であるとき、ｚ＝３であり、錯体は下記式V-3を有する：
【化２３】
2010507571.tif 000024
【００６７】
第三世代錯体、またデンドライトがメチル化テトラエチレングリコール鎖である第一世代、第二世代又は第三世代の錯体及びこれら錯体に対応しキレート剤がカテコール由来トリポッド又は８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドである第一世代、第二世代又は第三世代の錯体も、本発明の好ましい化合物である。
しかし、キレート性構造体がカテコール由来トリポッドであるが、キレートがスペーサー(式Ｉ中Ｅで示され、上記スペーサーの１つである)を介してデンドロン(これらは、第一世代又は第二世代又は第三世代である)により形成される構造体から遠ざけられている対応する錯体は、より高い程度で脳に分布するので、最も特に好ましい。
下記式III-4〜V-6を有する化合物が最も特に好ましい：
【００６８】
【化２４】
2010507571.tif 000025
【００６９】
【化２５】
2010507571.tif 000026
【００７０】
【化２６】
2010507571.tif 000027
【００７１】
【化２７】
2010507571.tif 000028
【００７２】
【化２８】
2010507571.tif 000029
【００７３】
【化２９】
2010507571.tif 000030
【００７４】
【化３０】
2010507571.tif 000031
【００７５】
【化３１】
2010507571.tif 000032
【００７６】
【化３２】
2010507571.tif 000033
【００７７】
よって、O-Rが３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなるエチレングリコール鎖を表す下記式を有する第三世代錯体が、特に好ましい。
【化３３】
2010507571.tif 000034
【００７８】
対応する第一世代及び第二世代の錯体、またスペーサーが上記のものの１つである対応する第一世代、第二世代又は第三世代の錯体も、全て特に好ましい。
事実、磁気又はシンチグラフィー造影剤の有効性は、形成する錯体の安定性に主として依存する。なぜなら、トレーサーのインビボ分布(タンパク質による、錯体の破壊、放射性元素の取込み)が細胞の非選択的照射を誘導し、不可逆性損傷を引き起こすからである。したがって、使用する錯体は優れたインビボ安定性を有することが重要である。
ここで、キレート球(chelation sphere)中への芳香族環の挿入により、構造のより良好な強直性が提供され、そのためリガンドの予備組織化(pre-organization)が可能になる。
【００７９】
キレート剤がカテコール由来トリポッドでありＭが99mTc3+である本発明による式V-6の錯体と、キレート剤がDTPAである式II-3の対応する錯体(共にメチル化末端を有する水溶性デンドリマーがグラフトされている)との間での比較動力学モニターによって、キレート剤がカテコール由来トリポッドである錯体がより安定であることが確証されている。
事実、式V-6の錯体の８０％より多くが90分後に安定である一方、式II-3の錯体の50％が同一期間内に解離する。
【００８０】
しかし、本発明による他の好ましい錯体は、キレート剤Ｃが８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであり、スペーサー及び３つ若しくは４つのエチレングリコール単位を含んでなるデンドライトを有するか又は有しない第一世代、第二世代又は第三世代である錯体である。
よって、増大した安定性を有する本発明のこれら錯体(これらもまた好ましい)において、一般式Ｉも参照して、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトは３つのエチレングリコール単位を有するメチル化ポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝２、Ｃが８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドであり、p1＝p2＝p3＝０、対イオンＢはNa+である。
【００８１】
マーカーＭがGd3+であるとき、ｚ＝０であり、錯体は下記式VI-1を有する：
【化３４】
2010507571.tif 000035
【００８２】
マーカーＭがMn2+であるとき、ｚ＝１であり、錯体は下記式VI-2を有する：
【化３５】
2010507571.tif 000036
【００８３】
マーカーＭが99mTc3+であるとき、ｚ＝０であり、錯体は下記式VI-3を有する：
【化３６】
2010507571.tif 000037
【００８４】
上記式VI-1〜VI-3の錯体に対応する第一世代又は第三世代の錯体、及びスペーサーを含んでなり、及び/又はデンドライトがテトラエチレングリコールである第一世代又は第二世代又は第三世代のものも、本発明の好ましい化合物である。
例えば、ブタンジアミンスペーサーを含んでなる第二世代錯体(上記式VI-1〜VI-3の錯体に対応する)は、下記式VI-4〜VI-6を有する：
【００８５】
【化３７】
2010507571.tif 000038
【００８６】
【化３８】
2010507571.tif 000039
【００８７】
【化３９】
2010507571.tif 000040
【００８８】
更に、これら錯体は、キレート剤がカテコール由来トリポッドであるものと同じ安定性を有する。
上記に記載の錯体は、相当の利点を有するが、特定の器官に特異的ではない。
これらが血液脳関門を横断することを可能にするために、本発明の第３の実施形態において、本発明の錯体の親油性は、樹状構造体の少なくとも１つのデンドライトを疎水性基で官能化することによって増大される。この基は、好ましくはtert-ブチル基である。
【００８９】
よって、本発明の第３の実施形態は、Ｘ1がtert-ブチル基であり、p1が０〜12(両端を含む)に等しい整数である一般式Ｉを有する樹状キレート錯体に関する。
より具体的には、本発明のこの第３の実施形態では、好ましい錯体は、ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、マーカーＭがGd3+であり、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝１、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝３、ＢはNa+であり、ｚ＝１である一般式Ｉの錯体である。この錯体は下記式VII-1を有する：
【００９０】
【化４０】
2010507571.tif 000041
【００９１】
本発明の第３の実施形態による別の好ましい錯体は、ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、マーカーＭがMn2+であり、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝１、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝３、ＢはNa+であり、ｚ＝２である一般式Ｉの錯体である。この錯体は下記式VII-2を有する：
【００９２】
【化４１】
2010507571.tif 000042
【００９３】
本発明の第３の実施形態による別の好ましい錯体は、ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、マーカーＭが99mTc3+であり、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝１、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝３、ＢはNa+であり、ｚ＝１である一般式Ｉの錯体である。この錯体は下記式VII-3を有する：
【００９４】
【化４２】
2010507571.tif 000043
【００９５】
当然のことながら、第二世代(G2)の樹状構造体を含んでなる(すなわちｍ＝２である)本発明の錯体もまた、本発明の第３の実施形態による好ましい錯体の一部である。
これら錯体は：
−  ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、マーカーＭがGd3+であり、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝２、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝６、ＢはNa+であり、ｚ＝１である一般式Ｉの錯体。この錯体は下記式VIII-1を有する：
【００９６】
【化４３】
2010507571.tif 000044
【００９７】
−  ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、ＭがMn2+であり、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝２、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝６、ＢはNa+であり、ｚ＝２である一般式Ｉの錯体。この錯体は下記式VIII-2を有する：
【００９８】
【化４４】
2010507571.tif 000045
【００９９】
−  ｎ＝p2＝p3＝p4＝０、Ｍが99mTc3+であり、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、ｍ＝２、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝６、ＢはNa+であり、ｚ＝１である一般式Ｉを有する錯体。この錯体は下記式VIII-3を有する：
【０１００】
【化４５】
2010507571.tif 000046
【０１０１】
当然のことながら、式VIII-1〜VIII-3のものに対応する、第三世代である(すなわち、ｍ＝４)及び/又はデンドライトがテトラエチレングリコール鎖である錯体、及び式IX-1〜IX-3のものに対応する、スペーサーを含んでなる第一世代又は第二世代又は第三世代である錯体もまた、本発明の第３の実施形態による好ましい化合物である。
少なくとも１つのデンドライトがtert-ブチル基で官能化されている本発明の第３の実施形態による錯体は、本発明において特に好ましい。なぜなら、これら錯体は血液脳関門を横断するからである。
tert-ブチル化末端を有するデンドライトを含んでなる本発明による錯体(マーカーは99mTc3+である)を用い、健常マウスにおいて、核医学技法によって研究を行った。この研究では、マイクロモル濃度を通常どおり使用した。
【０１０２】
これら実験により、健常マウスの脳中放射活性をカウントすることによって示されるように、これら錯体が血液脳関門を横断することが示され、また、通常使用される市販製品(これはCis-Bio InternationalがTCK-6と呼ばれるキットの形態で販売しているペンテト酸三ナトリウムカルシウムである)を用いて得られるプロフィールより選択的なプロフィールも示された。
また、デンドライトがtert-ブチル化テトラエチレングリコール鎖でありマーカーはGd3+又はMn2+である第３の実施形態による本発明の錯体を、MRIにより試験した。これら錯体において、tert-ブチル基により引き起こされる水溶性の相当の減少は、デンドライトの鎖の長さによって一部補償され、そのことによってこれら錯体はMRIにおける使用(ミリモル濃度が必要である)に十分な水溶性を有することが可能となる。
これら錯体もまた血液脳関門を横断することが分かった。
【０１０３】
脳への本発明による錯体のベクトル化を得るために、これら錯体の樹状構造体の１又はそれより多いデンドライトは、ドーパミン作動性レセプターと結合する薬剤によって官能化することができる。本発明において好ましいそのような薬剤はＬ-ドーパミンである。
よって、本発明の第４の実施形態によれば、本発明において脳に対する特異性を有する造影剤としての使用に特に好ましい錯体は、各樹状構造体[Ｄ]のデンドライトがＬ-ドーパミン及び親油性を増加させる基(例えば、tert-ブチル基)で官能化されている一般式Ｉの錯体である。
よって、本発明の第４の実施形態による好ましい錯体は、以下の錯体である：
−  ｎ＝p3＝p4＝０、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、ＭがGd3+であり、ｍ＝１、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝２、Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、p2＝１、ＢはNa+であり、ｚ＝１である一般式Ｉの錯体。この錯体は下記式IX-1を有する：
【０１０４】
【化４６】
2010507571.tif 000047
【０１０５】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、ＭがMn2+であり、ｍ＝１、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝２、Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、p2＝１、ＢはNa+であり、ｚ＝２である一般式Ｉの錯体。この錯体は下記式IX-2を有する：
【０１０６】
【化４７】
2010507571.tif 000048
【０１０７】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、Ｍが99mTc3+であり、ｍ＝１、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝２、Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、p2＝１、ＢはNa+であり、ｚ＝１である式Ｉの錯体。この錯体は下記式IX-3を有する：
【０１０８】
【化４８】
2010507571.tif 000049
【０１０９】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、ＭがGd3+であり、ｍ＝２、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝４、Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、p2＝２、ＢはNa+であり、ｚ＝１である一般式Ｉの錯体。この錯体は下記式X-1を有する：
【０１１０】
【化４９】
2010507571.tif 000050
【０１１１】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、ＭがMn2+であり、ｍ＝２、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝４、Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、p2＝２、ＢはNa+であり、ｚ＝２である一般式Ｉの錯体。この錯体は下記式X-2を有する：
【０１１２】
【化５０】
2010507571.tif 000051
【０１１３】
−  ｎ＝p3＝p4＝０、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、Ｃがジエチレントリアミン五酢酸であり、Ｍが99mTc3+であり、ｍ＝２、Ｘ1がtert-ブチル(tBu)基であり、p1＝４、Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、p2＝２、ＢはNa+であり、ｚ＝１である一般式Ｉの錯体。この錯体は下記式X-3を有する：
【０１１４】
【化５１】
2010507571.tif 000052
【０１１５】
上記式IX-1〜X-3のものに対応するが、デンドライトがテトラエチレングリコール鎖であり、及び/又は第三世代のものであり、及び/又は本発明によるスペーサーを含んでなる錯体もまた、本発明の第４の実施形態の好ましい錯体である。
特に好ましい本発明の第５の実施形態によれば、本発明の錯体は、生体内で高い安定性を有し、血液脳関門を横断し、脳へのベクトル化を有し、神経変性疾患に対する治療活性を有する。これらのことにより、錯体は、治療活性を有する特に有利な化合物となる。
【０１１６】
この第５の実施形態において、本発明の錯体は、ジエチレントリアミン五酢酸(DTPA)、カテコールタイプのトリポッド、或いは８-ヒドロキシキノリンタイプのトリポッドに由来するキレート構造を有する。これらの樹状構造体は、tert-ブチル(tBu)タイプの親油性基で官能化された少なくとも４つのデンドライトと、脳に対する特異性を付与する基で官能化された少なくとも１つの他のデンドライトと、神経変性疾患用治療薬剤で官能化された少なくとも１つの他のデンドライトとを有する。
よって、本発明の第５の実施形態による好ましい錯体は、樹状構造体[Ｄ]の各デンドライトが３つのエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコール鎖であり、キレート剤Ｃがジエチレントリアミン五酢酸又はカテコール由来トリポッド又は８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドのいずれかであり、ｍ＝２、マーカーＭがGd3+又はMn2+又は99mTc3+のいずれかであり、Ｘ1がtert-ブチル基であり、p1＝４、Ｘ2がＬ-ドーパミンであり、p2＝１、Ｘ3が神経変性疾患用治療薬剤(例えば、メマンチン)であり、p3＝１、p4＝０、ｎ＝０、ＢはNa+であり、ｚ＝０、１、２、３又は４である一般式Ｉの錯体であり、下記式Ａの錯体である：
【０１１７】
【化５２】
2010507571.tif 000053
【０１１８】
デンドライトがテトラエチレングリコール鎖であり、及び/又は本発明によるスペーサーを含んでなり、及び/又は第三世代又は第一世代のものである上記式Ａのものに対応する錯体もまた、本発明の第５の実施形態による本発明の好ましい化合物である。
本発明の全ての錯体は、メチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエート又はヒドロキシベンジルアルコールを用い、トリエチレングリコールから出発する６〜19の工程を含んでなる方法によって合成することができる。
よって、本発明の他の主題は、式Ｉの錯体を合成する方法である。
【０１１９】
本発明の第１の実施形態による式II-1〜II-3の樹状キレート錯体(キレートがDTPAであり、デンドライトが官能化されておらず、第二世代(G2、ｍ＝２)の樹状構造体[Ｄ]を含んでなる)を合成する方法は、以下の工程を含んでなる：
【０１２０】
ａ)  トリエチレングリコールモノメチルエーテルと塩化トシルとの反応、
ｂ)  工程ａ)で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｃ)  対応するアルコールを得るための、工程ｂ)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｄ)  工程ｃ)で得られる生成物の臭素化、
ｅ)  工程ｄ)で得られる生成物とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｆ)  工程ｅ)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｇ)  工程ｆ)で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応、
ｈ)  工程ｇ)で得られる生成物と塩化Gd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応。
【０１２１】
本発明の別の主題は、本発明の第２の実施形態による式III-1〜III-3、IV-1〜IV-3の錯体(錯体のデンドライトは官能化されていないが、これら錯体の安定性を増大させるために、DTPAキレートがカテコール-由来又は８-ヒドロキシキノリン由来のトリポッドで置換され、第一世代(G1、m＝1)の樹状構造体[Ｄ]を含んでなる)を合成する方法であり、以下の工程を含んでなる：
【０１２２】
式III-1〜III-3：
ａ)  ２,３-ジヒドロキシ安息香酸の臭化アリルでのアリル化、
ｂ)  対応する酸を得るための、工程ａ)で得られる生成物の鹸化、
ｃ)  対応する酸フッ素化物を得るための、工程ｂ)で得られる生成物のフッ素化、
ａ')  トリアミントリポッドを得るための、トリニトリルトリポッドの還元、
ｂ')  工程ａ')で得られるトリポッドと工程ｃ)で得られる生成物との間のカップリング反応、
ｃ')  ｂ')で得られる生成物のアルコール官能基の、テトラブチルアンモニウムフルオリドTBAFでの脱保護、
ｄ')  対応するカルボン酸を得るためのｃ')で得られる生成物のSwern酸化、
ｅ')  ｄ')で得られる生成物とtert-ブチルカルボキシル官能基Bocでモノ保護化した１,４-ブタンジアミンとの間のカップリング反応、
ｆ')  ｅ')で得られる生成物のアルコール官能基の脱保護、
【０１２３】
ａ'')  トリエチレングリコールモノメチルエーテルの合成、
ｂ'')  トリエチレングリコールモノメチルエーテルと塩化トシルとの反応、
ｃ'')  工程ｂ'')で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｄ'')  対応する酸を得るための、工程ｃ'')で得られる生成物の鹸化、
ａ''')  ｆ')で得られる生成物とｄ'')で得られるものとの間のカップリング反応、
ｂ''')  カテコール官能基の脱アリル化、
ｃ''')  工程ｂ''')で得られる生成物と塩化Cd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応。
【０１２４】
本発明の更に別の主題は、式IV-1〜IV-3の錯体を合成する方法であり、この方法は以下の工程を含んでなる：
ａ)  ８-ヒドロキシキノリン-7-カルボン酸メチルエステルの臭化アリルでのアリル化、
ｂ)  対応する酸を得るための、工程ａ)で得られる生成物の鹸化、
ｃ)  対応する酸フッ素化物を得るための、工程ｂ)で得られる生成物のフッ素化、
ａ')  トリアミントリポッドを得るための、トリニトリルトリポッドの還元、
ｂ')  工程ａ')で得られるトリポッドと工程ｃ)で得られる生成物との間のカップリング反応、
ｃ')  ｂ')で得られる生成物のアルコール官能基のTBAFでの脱保護、
ｄ')  対応するカルボン酸を得るためのｃ')で得られる生成物のSwern酸化、
ｅ')  ｄ')で得られる生成物とBoc官能基でモノ保護化した１,４-ブタンジアミンとの間のカップリング反応、
【０１２５】
ｆ')  ｅ')で得られる生成物のアミン官能基の脱保護、
ａ'')  トリエチレングリコールモノメチルエーテルの合成、
ｂ'')  トリエチレングリコールモノメチルエーテルと塩化トシルとのとの反応、
ｃ'')  工程ｂ'')で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｄ'')  対応する酸を得るための、工程ｃ'')で得られる生成物の鹸化、
ａ''')ｆ')で得られる生成物とｄ'')で得られるものとの間のカップリング反応、
ｂ''')  アルコール官能基の脱アリル化、
ｃ''')  工程ｂ''')で得られる生成物と塩化Cd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応。
【０１２６】
同様に、本発明の別の主題は、式V-1〜V-3、VI-1〜VI-3の本発明による錯体(これら錯体の安定性を増大させるために、DTPAキレートがカテコール-由来又は８-ヒドロキシキノリン由来のトリポッドで置換され、第二世代(G2、ｍ＝２)の樹状構造体[Ｄ]を含んでなる)を合成する方法であり、この方法は以下の工程を含んでなる：
【０１２７】
式V-1〜V-3：
ａ)  ２,３-ジヒドロキシ安息香酸の臭化アリルでのアリル化、
ｂ)  対応する酸を得るための、工程ａ)で得られる生成物の鹸化、
ｃ)  対応する酸フッ素化物を得るための、工程ｂ)で得られる生成物のフッ素化、
ａ')  トリアミントリポッドを得るための、トリニトリルトリポッドの還元、
ｂ')  工程ａ')で得られるトリポッドと工程ｃ)で得られる生成物との間のカップリング反応、
ｃ')  ｂ')で得られる生成物のアルコール官能基のTBAFでの脱保護、
ｄ')  対応するカルボン酸を得るための、ｃ')で得られる生成物のSwern酸化、
ｅ')  ｄ')で得られる生成物とBoc官能基でモノ保護化した１,４-ブタンジアミンとの間のカップリング反応、
ｆ')  ｅ')で得られる生成物のアミン官能基の脱保護、
【０１２８】
ａ'')  トリエチレングリコールモノメチルエーテルの合成、
ｂ'')  トリエチレングリコールモノメチルエーテルと塩化トシルとの反応、
ｃ'')  工程ｂ'')で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｄ'')  対応するアルコールを得るための、工程ｃ'')で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｅ'')  工程ｄ'')で得られる生成物の臭素化、
ｆ'')  工程ｅ'')で得られる生成物とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｇ'')  対応する酸を得るための、工程ｆ'')で得られる生成物の鹸化、
ａ''')  ｆ')で得られる生成物とｇ'')で得られるものとの間のカップリング反応、
ｂ''')  カテコール官能基の脱アリル化、
ｃ''')  工程ｂ''')で得られる生成物と塩化Cd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応。
【０１２９】
本発明の別の主題は、式VI-1〜VI-3の本発明の化合物を合成する方法であり、この方法は以下の工程を含んでなる：
ａ)  ８-ヒドロキシキノリン-７-カルボン酸メチルエステルの臭化アリルでのアリル化、
ｂ)  対応する酸を得るための、工程ａ)で得られる生成物の鹸化、
ｃ)  対応する酸フッ素化物を得るための、工程ｂ)で得られる生成物のフッ素化、
ａ')  トリアミントリポッドを得るための、トリニトリルトリポッドの還元、
ｂ')  工程ａ')で得られるトリポッドと工程ｃ)で得られる生成物との間のカップリング反応、
ｃ')  ｂ')で得られる生成物のアルコール官能基のTBAFでの脱保護、
ｄ')  対応するカルボン酸を得るための、ｃ')で得られる生成物のSwern酸化、
ｅ')  ｄ')で得られる生成物とBoc官能基でモノ保護化した１,４-ブタンジアミンとの間のカップリング反応、
ｆ')  ｅ')で得られる生成物のアミン官能基の脱保護、
【０１３０】
ａ'')  トリエチレングリコールモノメチルエーテルの合成、
ｂ'')  トリエチレングリコールモノメチルエーテルと塩化トシルとの反応、
ｃ'')  工程ｂ'')で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｄ'')  対応するアルコールを得るための、工程ｃ'')で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｅ'')  工程ｄ'')で得られる生成物の臭素化、
ｆ'')  工程ｅ'')で得られる生成物とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｇ'')  対応する酸を得るための、工程ｆ'')で得られる生成物の鹸化、
ａ''')  ｆ')で得られる生成物とｇ'')で得られるものとの間のカップリング反応、
ｂ''')  アルコール官能基の脱アリル化、
ｃ''')  工程ｂ''')で得られる生成物と塩化Cd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応。
【０１３１】
本発明の別の主題は、式VII-1〜VII-3の本発明の錯体(キレートがDTPAであり、これら錯体の親油性を増大させるために、錯体のデンドライトがtert-ブチル基で官能化されており、第一世代(G1、ｍ＝１)の樹状構造体[Ｄ]を含んでなる)を合成する方法であり、この方法は以下の工程を含んでなる：
ａ)  tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成、
ｂ)  工程ａ)で得られる生成物と塩化トシルとの反応、
ｃ)  工程ｂ)で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｄ)  対応するアルコールを得るための、工程ｃ)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｅ)  工程ｄ)で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応
ｆ)  工程ｅ)で得られる生成物と塩化Gd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応。
【０１３２】
同様に、本発明の別の主題は、本発明による錯体(キレートがDTPAであり、これら錯体の親油性を増大させるために、錯体のデンドライトがtert-ブチル基で官能化された式VIII-1〜VIII-3のものであり、第二世代(G2、ｍ＝２)の樹状構造体[Ｄ]を含んでなる)を合成する方法であり、この方法は以下の工程を含んでなる：
【０１３３】
ａ)  tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成、
ｂ)  工程ａ)で得られる生成物と塩化トシルとの反応、
ｃ)  工程ｂ)で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｄ)  対応するアルコールを得るための、工程ｃ)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｅ)  工程ｄ)で得られる生成物の臭素化、
ｆ)  工程ｅ)で得られる生成物とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｇ)  対応するアルコールを得るための、工程ｆ)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｈ)  工程ｇ)で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応、
ｉ)  工程ｈ)で得られる生成物と塩化Gd(III)又は塩化Mn(III)又は過テクネテートとの反応。
【０１３４】
本発明の別の主題は、本発明による(式IX-1〜IX-3の)錯体(キレートがDTPAであり、錯体のデンドライトがＬ-ドーパミン及び親油性を増加させる基(例えばtert-ブチル基)で官能化されており、第一世代(G1、ｍ＝１)の樹状構造体[Ｄ]を含んでなる)を合成する方法であり、この方法は以下の工程を含んでなる：
【０１３５】
ａ)  tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成、
ｂ)  工程ａ)で得られる生成物と塩化トシルとの反応、
ａ')  メチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートと無水酢酸との反応、
ｂ')  工程ａ')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ')  工程ｂ')で得られる生成物の炭酸カリウムでの塩基性加水分解、
ｄ')  工程ｃ')で得られる生成物と工程ｂ)で得られるトシレートとの反応
ｅ')  工程ｄ')で得られる生成物のアルコール機能の脱保護、
【０１３６】
ａ'')  Ｌ-ドーパミンのフルオレニルメトキシカルボニルクロリド(Fmoc)での保護、
ｂ'')  工程ａ'')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ'')  工程ｂ'')で得られる生成物とモルホリンとの反応、
ｄ'')  工程ｃ'')で得られる生成物のエステル化、
ｅ'')  工程ｄ'')で得られる生成物の鹸化、
ｆ'')  工程ｅ'')で得られる生成物の工程ｅ')で得られる生成物とのエステル化、
ｇ'')  対応するアルコールを得るための、工程ｆ'')で得られる生成物の還元、
ｈ'')  工程ｇ'')で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応、
ｉ'')  工程ｈ'')で得られる生成物と塩化Gd(III)、塩化Mn(II)又は過テクネテートとの反応。
【０１３７】
同様に、本発明の別の主題は、本発明による(式X-1〜X-3の)錯体(キレートがDTPAであり、錯体のデンドライトがＬ-ドーパミン及び親油性を増加させる基(例えば、tert-ブチル基)で官能化されており、第二世代(G2、ｍ＝２)の樹状構造体[Ｄ]を含んでなる)を合成する方法であり、この方法は以下の工程を含んでなる：
【０１３８】
ａ)  tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成、
ｂ)  工程ａ)で得られる生成物と塩化トシルとの反応、
ａ')  メチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートと無水酢酸との反応、
ｂ')  工程ａ')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ')  工程ｂ')で得られる生成物の、好ましくは炭酸カリウムでの塩基性加水分解、
ｄ')  工程ｃ')で得られる生成物と工程ｂ)で得られるトシレートとの反応
ｅ')  工程ｄ')で得られる生成物のアルコール機能の脱保護、
ａ'')  Ｌ-ドーパミンのFmocクロライドでの保護、
ｂ'')  工程ａ'')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ'')  工程ｂ'')で得られる生成物とモルホリンとの反応、
【０１３９】
ｄ'')  工程ｃ'')で得られる生成物のエステル化、
ｅ'')  工程ｄ'')で得られる生成物の鹸化、
ｆ'')  工程ｅ'')で得られる生成物の工程ｅ')で得られる生成物とのエステル化、
ｇ'')  対応するアルコールを得るための、工程ｆ'')で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｈ'')  工程ｇ'')で得られる生成物の臭素化
ｉ'')  工程ｈ'')で得られる生成物とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートとの反応、
ｊ'')  対応するアルコールを得るための、工程ｉ'')で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｋ'')  工程ｊ'')で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応、
ｌ'')  工程ｋ'')で得られる生成物と塩化Gd(III)又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応。
【０１４０】
本発明の別の主題は、本発明による(式Ａの)錯体(キレートはDTPA又はカテコール由来トリポッド又は８-ヒドロキシキノリン由来トリポッドのいずれかであり、錯体のデンドライトはＬ-ドーパミン、メマンチン及び親油性を増加させる基(例えば、tert-ブチル基)で官能化されており、第二世代(G2、ｍ＝２)の樹状構造体[Ｄ]を含んでなる)を合成する方法であり、この方法は以下の工程を含んでなる：
【０１４１】
ａ)  メチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートと臭化アリルとの反応、
ａ')  tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成、
ｂ')  工程ａ')で得られる生成物と塩化トシルとの反応、
ａ'')  メチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートと無水酢酸との反応、
ｂ'')  工程ａ'')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ'')  工程ｂ'')で得られる生成物の、好ましくは炭酸カリウムでの塩基性加水分解、
ｄ'')  工程ｃ'')で得られる生成物と工程ｂ')で得られるトシレートとの反応、
ｅ'')  工程ｄ'')で得られる生成物のアルコール官能基の脱保護、
【０１４２】
ａ''')  Ｌ-ドーパミンのFmocクロライドでの保護、
ｂ''')  工程ａ''')で得られる生成物と臭化アリルとの反応、
ｃ''')  工程ｂ''')で得られる生成物とモルホリンとの反応、
ｄ''')  ｃ''')で得られる生成物のエステル化、
ｅ''')  工程ｄ''')で得られる生成物の鹸化、
ｆ''')  工程ｅ'')で得られる生成物と工程ｅ'')で得られる生成物とのエステル化、
ｇ''')  対応するアルコールを得るための、工程ｆ''')で得られる生成物の還元、
ｈ''')  工程ｇ''')で得られる生成物臭素化、
ｉ''')  工程ｈ''')で得られる生成物のアルコール官能基の脱保護、
【０１４３】
ａ'v)  メマンチンのエステル化、
ｂ'v)  工程ａ'v)で得られる生成物の鹸化、
ｃ'v)  工程ｂ'v)で得られる生成物のエステル化、
ｄ'v)  工程ｃ'v)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｅ'v)  工程ｄ'v)で得られる生成物の臭素化、
ｆ'v)  工程ｅ'v)で得られる生成物の工程ａ)で得られる生成物とのエーテル化、
ｇ'v)  工程ｆ'v)で得られる生成物のアルコール官能基の脱保護、
ｈ'v)  工程ｇ'v)で得られる生成物の工程ｉ''')で得られる生成物でのエーテル化、
ｉ'v)  工程ｈ'v)で得られる生成物の、好ましくはLiAlH4での還元、
ｊ'v)  工程ｉ'v)で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物又はカテコールトリポッド又は８-ヒドロキシキノリントリポッドとの反応。
【０１４４】
本発明はまた、医薬的に許容され得る賦形剤中に、本発明による少なくとも１つの錯体又は本発明による方法によって得られる少なくとも１つの錯体を含んでなる医薬組成物に関する。
この医薬組成物は、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病及び多発性硬化症の検出及びその機序の理解のための造影剤として使用し得る。
【０１４５】
しかし、この医薬組成物はまた、本発明による錯体の樹状構造体のデンドライトが治療薬剤(例えば、メマンチン(１,３-ジメチル-５-アミノアダマンタン))で官能化されているとき、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病又は多発性硬化症を治療又は改善するためにも使用し得る。
上記の構成のものに加えて、本発明はまた、下記の本発明の錯体を合成する方法の実施例に言及する説明から明らかになる他の構成のものを含んでなる。
しかし、これら実施例は本発明の主題の例示のためだけに提示するものであり、本発明の制限を何ら構成するものではないことを理解すべきである。
【実施例】
【０１４６】
使用した材料及び分析方法
Brucker AM300スペクトロメータ(300MHz)で、1Ｈ及び13Ｃ NMRスペクトルを記録した。スペクトルの内部参照は、非重水素化溶媒のピークに対応する(CDCl3：7.27ppm、CD2Cl2：5.32ppm)。
全ての市販製品及び反応試薬は、前処理なしで使用した。これらはSIGMA-Aldrich社、ACROS社及びSTREM Chemicals社のものである。
【０１４７】
実施例１：式II-1〜II-3の錯体の合成
【化５３】
2010507571.tif 000054
【０１４８】
工程ａ)：トリエチレングリコールモノメチルエーテルと塩化トシルとの反応
【化５４】
2010507571.tif 000055
【０１４９】
500ml丸底フラスコにおいて、トリエチレングリコールモノメチルエーテル(20.00ｇ，0.122mol)を蒸留水/THF混合物(20ml/140ml)中の水酸化ナトリウム(7.33ｇ，0.183mol)溶液に加える。氷浴を使用して、この溶液を０℃に冷却する。次いで、滴下漏斗を使用して、40mlのTHF中の塩化トシル(25.50ｇ，0.134mol)溶液を約30分間にわたって滴下して加える。このようにして得られる反応媒体を周囲温度にて24時間撹拌し、次いで０℃に冷却した200mlの飽和NaCl水溶液を含む800mlビーカー中に注ぐ。このとき二相が観察される。分液漏斗を用いて、黄色がかった上相(有機相に対応)を抽出する。続いて、これを500mlの飽和NaCl水溶液で洗浄する。続いて、最初の水相を200mlのCH2Cl2で処理し、得られる新たな有機相(これはこの時点で下相である(d20CH2Cl2＝1.325))を回収する。こうして得られる２つの有機相を併せて、飽和NaCl水溶液(500ml)で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、次いでロータリーエバポレーターを用いて蒸発させる。
生成物３が収率で94％ (36.30ｇ，0.113mol)で得られる。無色の油。
【０１５０】
工程ｂ)：工程ａ)で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応
【化５５】
2010507571.tif 000056
【０１５１】
ジメチルホルムアミド(DMF)(100ml)中のトシレート３(33.75ｇ，0.106mol)とメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエート(5.95ｇ，0.032mol)とK2CO3 (44.4ｇ，mol)との溶液を撹拌し、油浴を用いて72時間80℃に加温する。
加温を停止した後、反応媒体を周囲温度に冷却し、次いでセライトで濾過する。溶媒の蒸発後、濾液の残渣を300mlのCH2Cl2中に取る。こうして得られる有機相を３×300mlの飽和NaCl水溶液で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させ、次いで濾過し、蒸発乾固させ、精製すべき32.60ｇの粗生成物を得る。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径4.5cm、Vsilica＝500ml、溶離剤：１/１ CH2Cl2/アセトン
生成物５が90％の収率(17.65ｇ，0.026mol)で得られる。
【０１５２】
工程ｃ)：対応するアルコールを得るための、工程ｂ)で得られる生成物の、好ましくはLiAIH4での還元
【化５６】
2010507571.tif 000057
【０１５３】
THF (34ml，0.034mol)中LiAlH4の１Ｍ溶液を、アルゴン下に維持し氷浴で０℃に冷却した20mlの無水THF中の生成物５(15.00ｇ，0.024mol)の溶液に、滴下して非常に注意深く加える。周囲温度にて20時間の撹拌後、反応媒体を氷浴で０℃に冷却し、20mlの酢酸エチル(EtOAc)、次いで20mlのメタノール(MeOH)、最後に20mlの水を添加して反応を停止させる。酢酸エチルの添加は、酢酸エチルをゆっくりと導入しなければ、激烈な反応を生じ、水の添加により塩の沈澱が引き起こされる。次いで反応媒体をセライトで濾過し、蒸発乾固させる。得られる残渣を200mlのCH2Cl2中に取り、３×200mlの飽和NaCl水溶液で洗浄する。得られる有機相を無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。
生成物７が79％の収率(11.18ｇ，0.0188mol)で得られる。
【０１５４】
工程ｄ)：工程ｃ)で得られる生成物の臭素化
【化５７】
2010507571.tif 000058
【０１５５】
TMSBr (2.67ｇ，2.3ml，0.017mol)を、不活性雰囲気(アルゴン)下で氷浴を用いて０℃に維持した10mlの無水CHCl3中の生成物７(8.30ｇ，0.014mol)の溶液に、シリンジを用いて滴下して加える。48時間の撹拌後、溶媒を蒸発除去して、生成物９が99％の収率(9.20ｇ，0.014mol)で得られる。更なる精製は必要ない。
【０１５６】
工程ｅ)：工程ｄ)で得られる生成物とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートとの反応
【化５８】
2010507571.tif 000059
【０１５７】
50mlのアセトン中、生成物９(3.00ｇ，4.56mmol)とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエート(348mg，2.07mmol)とK2CO3 (1.43ｇ，10.37mmol)とKI (15mg，0.93mmol)との溶液を60℃にて72時間加温する。次いで反応媒体を周囲温度に冷却し、セライトで濾過し、こうして得られる濾液を蒸発乾固させる。
残渣を  mlのCH2Cl2中に取り、得られる有機相を３×0mlの飽和NaCl水溶液で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、次いで蒸発乾固させて、精製すべき ｇの粗生成物を得る。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径4.5cm、Vsilica＝500ml，溶離剤：CH2Cl2：アセトン １：２
生成物11が75％の収率(5.00ｇ，3.4mmol)で得られる。黄色がかった油。
【０１５８】
工程ｆ)：工程ｅ)で得られる生成物のLiAIH4での還元
【化５９】
2010507571.tif 000060
【０１５９】
THF (6.35ml，6.35mmol)中のLiAlH4の１Ｍ溶液を、アルゴン下に維持し氷浴で０℃に冷却した100mlの無水THF中の生成物11(6.00ｇ，4.54mmol)の溶液に、滴下して非常に注意深く加える。周囲温度にて20時間の撹拌後、反応媒体を氷浴で０℃に冷却し、20mlの酢酸エチル(EtOAc)、次いで20mlのメタノール(MeOH)、最後に20mlの水を添加して反応を停止させる。酢酸エチルの添加は、酢酸エチルをゆっくりと導入しなければ、激烈な反応を生じ、水の添加により塩の沈澱が引き起こされる。次いで反応媒体をセライトで濾過し、蒸発乾固させる。得られる残渣を50mlのCH2Cl2中に取り、３×50mlの飽和NaCl水溶液で洗浄する。得られる有機相を無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。
生成物13が79％の収率(4.58ｇ，3.54mmol)で得られる。
【０１６０】
工程ｇ)：工程ｆ)で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応
【化６０】
2010507571.tif 000061
【０１６１】
ジエチレントリアミン五酢酸二無水物(63mg，0.177mmol)及び生成物13(230mg，0.177mmol)を17mlの無水塩化メチレンに溶解し、得られる懸濁物を50℃にて30分間撹拌する。次いでトリエチルアミン(0.247ml，1.77mmol)を加え、反応媒体50℃にて12時間撹拌した後、周囲温度に冷却し、５mlまで濃縮する。次いで、30mlのヘキサンをこれに加え、得られる溶液を一晩冷蔵庫(＋４℃)で放置する。沈澱した生成物をヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させ、次いでフラッシュクロマトグラフィーカラムで精製する。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径１cm、Vsilica＝20ml，溶離剤：CH2Cl2/50％ MeOH
生成物15が96％の収率(284mg，0.17mmol)で得られる。黄色がかった油。
【０１６２】
工程ｈ)：工程ｇ)で得られる生成物と塩化Gd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応
−  １．工程ｇ)で得られる生成物と塩化Gdとの反応：
【化６１】
2010507571.tif 000062
【０１６３】
リガンド15(350mg，0.209mmol)及びGd(ClO4)3 (191mgの50％水溶液，0.209mmol)を10mlの蒸留水に溶解し、NaOHの１Ｍ溶液を加えることによってpHを７に一定に維持しながら、この溶液を周囲温度にて12時間撹拌する。次いで、遊離Gd3+イオンを除去するために、反応媒体をChelex樹脂で１時間処理し、次いで濾過し、凍結乾燥させる。
錯体17が91％の収率(351mg，0.19mmol)で得られる。黄色がかった油。
式II-1の錯体が得られる。
【０１６４】
−  ２．工程ｇ)で得られる生成物と塩化Mnとの反応：
【化６２】
2010507571.tif 000063
【０１６５】
MnCl2. 4H2O (37mg，0.185mmol)を水(５ml)中の生成物15(310mg，0.185mmol)溶液に加え、周囲温度で撹拌する。30分間の撹拌後、不純な錯体19(NaClタイプの無機不純物が存在)を凍結乾燥させる。ナトリウム塩を除去するために精製を行なってもよい。
精製：凍結乾燥後、乾燥残渣を最小量のジクロロメタンに取り、得られる有機相を実質的飽和NaCl水溶液で洗浄した後、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、次いで蒸発乾固させる。
錯体19が90％の収率(300mg，0.168mmol)で得られる。
式II-2の錯体が得られる。
【０１６６】
−  ３．工程ｇ)で得られる生成物と過テクネテートとの反応：
【化６３】
2010507571.tif 000064
【０１６７】
放射能メータを備えたシールド核医学フード内で行う操作：
溶液状態の発生源から滅菌無発熱原性生理食塩水中に出てくる185MBq (５mCi)の過テクネテート99mTc3+O4- (２〜４ml)を、18μmolの錯体15−CaNa3及びストック溶液から凍結乾燥した２μmolの塩化スズ(Sn2+)を含むバイアルに加える。
混合物を穏やかに撹拌し、周囲温度にて２分間反応させる。
標識化の質を、移動相としてメチルエチルケトンを含むWhatmanペーパー(3MM CHR)上でクロマトグラフィーにより確証する：標識錯体は移動せず(Rf＝０)、遊離過テクネテートは溶媒先端と共に移動する(Rf＝1)。
これら条件下でｍ、標識化は常に98％より高い。
式II-3の錯体が得られる。
【０１６８】
実施例２：式III-1〜III-3の化合物の合成
【化６４】
2010507571.tif 000065
【０１６９】
実施例３：式IV-1〜IV-3の化合物の合成
【化６５】
2010507571.tif 000066
【０１７０】
実施例４：式V-1〜V-3の化合物の合成
【化６６】
2010507571.tif 000067
【０１７１】
実施例５：式VI-1〜VI-3の化合物の合成
【化６７】
2010507571.tif 000068
【０１７２】
実施例６：式VII-1〜VII-3の化合物の合成
【化６８】
2010507571.tif 000069
【０１７３】
工程ａ)：tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成
【化６９】
2010507571.tif 000070
【０１７４】
150mlのジクロロメタン中のMgSO4 (55.00ｇ，0.45mol)溶液を、バルブコンデンサーを備える二頸丸底フラスコに導入し、周囲温度にて撹拌する。このアセンブリは、絶対的に、密封されてアルゴン下になければならない。次いで、硫酸H2SO4 (6.42ml，0.111mol)、トリエチレングリコール(15.00ml，0.111mol)、次に非常にゆっくりとtert-ブタノール(52.80ml，0.556mol)をそれぞれ導入する。次いで、反応媒体を周囲温度にて19時間撹拌し、その後２時間還流させる。続いて、濾過し、有機相を水(300ml)、次いで飽和NaCl水溶液(２×300ml)で洗浄した後、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、次いで蒸発乾固させる。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径3.5cm、Vsilica＝400ml，溶離剤：95/5 CH2Cl2/MeOH
生成物１が23％の収率(5.29ｇ，0.026mol)で得られる。
【０１７５】
工程ｂ)：工程ａ)で得られる生成物と塩化トシルとの反応
【化７０】
2010507571.tif 000071
【０１７６】
４mlのTHFに溶解した塩化トシル(1.85ｇ，9.70mmol)を、０℃に冷却した水/THF混合物(2/14ml)中のNaOH (0.53ｇ，13.23mmol)及びアルコール１(1.82ｇ，8.82mmol)の溶液に滴下して加える。周囲温度にて68時間の撹拌後、反応媒体を０℃に冷却した50mlの飽和NaCl水溶液中に注ぐ。得られる有機相を飽和NaCl水溶液(100ml)で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径3.5cm、Vsilica＝400ml，溶離剤：CH2Cl2/MeOH 98：2
生成物２が67％の収率(0.87ｇ，5.89mmol)で得られる。
【０１７７】
工程ｃ)：工程ｂ)で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応
【化７１】
2010507571.tif 000072
【０１７８】
ジメチルホルムアミド(DMF)(20ml)中トシレート２(5.89ｇ，16.28mmol)とメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエート(0.91ｇ，4.93mmol)とK2CO3 (6.82ｇ，0.163mol)とKI (0.37ｇ，2.22mmol)との溶液を撹拌し、油浴を用いて80℃に72時間加温する。
加温を停止した後、反応媒体を周囲温度に冷却し、次いでセライトで濾過する。溶媒の蒸発後、濾液の残渣を300mlのCH2Cl2中に取る。こうして得られる有機相を３×300mlの飽和NaCl水溶液で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させ、次いで濾過し、蒸発乾固させ、精製すべき4.60ｇの粗生成物を得る。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径4.0cm、Vsilica＝400ml，溶離剤：98/2 CH2Cl2/MeOH
生成物４が82％の収率(2.96ｇ，4.03mmol)で得られる。
【０１７９】
工程ｄ)：対応するアルコールを得るための、工程ｃ)で得られる生成物の、好ましくはLiAIH4での還元
【化７２】
2010507571.tif 000073
【０１８０】
THF (6.64ml，6.64mmol)中LiAlH4の１Ｍ溶液を、アルゴン下に維持し氷浴で０℃に冷却した４mlの無水THF中の生成物４(2.96ｇ，4.03mmol)の溶液に、滴下して非常に注意深く加える。周囲温度にて20時間の撹拌後、反応媒体を氷浴で０℃に冷却し、４mlの酢酸エチル(EtOAc)、次いで４mlのメタノール(MeOH)、最後に４mlの水を添加して反応を停止させる。酢酸エチルの添加は、酢酸エチルをゆっくりと導入しなければ、激烈な反応を生じ、水の添加により塩の沈澱が引き起こされる。次いで反応媒体をセライトで濾過し、蒸発乾固させる。得られる残渣を35mlのCH2Cl2中に取り、３×35mlの飽和NaCl水溶液で洗浄する。得られる有機相を無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。
生成物６が88％の収率(2.56ｇ，3.55mmol)で得られる。
【０１８１】
工程ｅ)：工程ｄ)で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応
【化７３】
2010507571.tif 000074
【０１８２】
ジエチレントリアミン五酢酸二無水物(1.23ｇ，3.46mmol)及び生成物６(2.50ｇ，3.46mmol)を50mlの無水塩化メチレンに溶解し、得られる懸濁物を50℃にて30分間撹拌する。次いでトリエチルアミン(4.82ml，34.6mmol)を加え、反応媒体50℃にて12時間撹拌した後、周囲温度に冷却し、５mlまで濃縮する。次いで、30mlのヘキサンをこれに加え、得られる溶液を一晩冷蔵庫(＋４℃)で放置する。沈澱した生成物をヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させ、次いでフラッシュクロマトグラフィーカラムで精製する。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径１cm、Vsilica＝20ml，溶離剤：CH2Cl2/50％ MeOH
生成物８が95％の収率(3.59ｇ，3.28mmol)で得られる。黄色がかった油。
【０１８３】
工程ｆ)：工程ｅ)で得られる生成物と塩化Gd又は塩化Mn又は過テクネテートとの反応
−  １．塩化Gdとの反応
【化７４】
2010507571.tif 000075
【０１８４】
リガンド８(1.00ｇ，0.91mmol)及びGd(ClO4)3 (838mgの50％水溶液，0.91mmol)を５mlの蒸留水に溶解し、NaOHの１Ｍ溶液を加えることによってpHを７に一定に維持しながら、この溶液を周囲温度にて12時間撹拌する。次いで、遊離Gd3+イオンを除去するために、反応媒体をChelex樹脂で１時間処理し、次いで濾過し、凍結乾燥させる。
錯体12が92％の収率(1.07ｇ，0.83mmol)で得られる。黄色がかった油。
式式VII-1の錯体が得られる。
【０１８５】
−  ２．塩化Mnとの反応
【化７５】
2010507571.tif 000076
【０１８６】
MnCl2. 4H2O (182mg，0.91mmol)を水(25ml)中のリガンド８(1.00ｇ，0.91mmol)溶液に加え、周囲温度で撹拌する。30分間の撹拌後、不純な錯体(NaClタイプの無機不純物が存在)を凍結乾燥させる。ナトリウム塩を除去するために精製を行なってもよい。
精製：凍結乾燥後、乾燥残渣を最小量のジクロロメタンに取り、得られる有機相を実質的飽和NaCl水溶液で洗浄した後、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、次いで蒸発乾固させる。
錯体14が90％の収率(978mg，0.82mmol)で得られる。
式VII-2の錯体が得られる。
【０１８７】
−  ３．過テクネテートとの反応
【化７６】
2010507571.tif 000077
【０１８８】
放射能メータを備えたシールド核医学フード内で行う操作：
溶液状態の発生源から滅菌無発熱原性生理食塩水中に出てくる185MBq (５mCi)の過テクネテート99mTc3+O4- (２〜４ml)を、18μmolのリガンド8-CaNa3及びストック溶液から凍結乾燥した２μmolの塩化スズ(Sn2+)を含むバイアルに加える。
混合物を穏やかに撹拌し、周囲温度にて２分間反応させる。
標識化の質を、移動相としてメチルエチルケトンを含むWhatmanペーパー(3MM CHR)上でクロマトグラフィーにより確証する：標識錯体は移動せず(Rf＝０)、遊離過テクネテートは溶媒先端と共に移動する(Rf＝1)。
これら条件下で、標識化は常に98％より高い。
式VII-3の錯体が得られる。
【０１８９】
実施例７：式VIII-1〜VIII-3の化合物の合成
【化７７】
2010507571.tif 000078
【０１９０】
工程ａ)：tert-ブタノールからのtert-ブトキシトリエチレングリコールの合成
【化７８】
2010507571.tif 000079
【０１９１】
150mlのジクロロメタン中のMgSO4 (55.00ｇ，0.45mol)溶液を、バルブコンデンサーを備える二頸丸底フラスコに導入し、周囲温度にて撹拌する。このアセンブリは、絶対的に、密封されてアルゴン下になければならない。次いで、硫酸H2SO4 (6.42ml，0.111mol)、トリエチレングリコール(15.00ml，0.111mol)、次に非常にゆっくりとtert-ブタノール(52.80ml，0.556mol)をそれぞれ導入する。次いで、反応媒体を周囲温度にて19時間撹拌し、その後２時間還流させる。続いて、濾過し、有機相を水(300ml)、次いで飽和NaCl水溶液(２×300ml)で洗浄した後、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、次いで蒸発乾固させる。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径3.5cm、Vsilica＝400ml，溶離剤：95/5 CH2Cl2/MeOH
生成物１が23％の収率(5.29ｇ，0.026mol)で得られる。
【０１９２】
工程ｂ)：工程ａ)で得られる生成物と塩化トシルとの反応
【化７９】
2010507571.tif 000080
【０１９３】
４mlのTHFに溶解した塩化トシル(1.85ｇ，9.70mmol)を、０℃に冷却した水/THF混合物(2/14ml)中のNaOH (0.53ｇ，13.23mmol)及びアルコール１(1.82ｇ，8.82mmol)の溶液に滴下して加える。周囲温度にて68時間の撹拌後、反応媒体を０℃に冷却した50mlの飽和NaCl水溶液中に注ぐ。得られる有機相を飽和NaCl水溶液(100ml)で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径3.5cm、Vsilica＝400ml，溶離剤：CH2Cl2/MeOH 98：2
生成物２が67％の収率(0.87ｇ，5.89mmol)で得られる。
【０１９４】
工程ｃ)：工程ｂ)で得られるトシレートとメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエートとの反応
【化８０】
2010507571.tif 000081
【０１９５】
ジメチルホルムアミド(DMF)(20ml)中トシレート２(5.89ｇ，16.28mmol)とメチル３,４,５-トリヒドロキシベンゾエート(0.91ｇ，4.93mmol)とK2CO3 (6.82ｇ，0.163mol)とKI (0.37ｇ，2.22mmol)との溶液を撹拌し、油浴を用いて80℃に72時間加温する。
加温を停止した後、反応媒体を周囲温度に冷却し、次いでセライトで濾過する。溶媒の蒸発後、濾液の残渣を300mlのCH2Cl2中に取る。こうして得られる有機相を３×300mlの飽和NaCl水溶液で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させ、次いで濾過し、蒸発乾固させ、精製すべき4.60ｇの粗生成物を得る。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径4.0cm、Vsilica＝400ml，溶離剤：98/2 CH2Cl2/MeOH
生成物４が82％の収率(2.96ｇ，4.03mmol)で得られる。
【０１９６】
工程ｄ)：対応するアルコールを得るための、工程ｃ)で得られる生成物の、好ましくはLiAIH4での還元、
【化８１】
2010507571.tif 000082
【０１９７】
THF (6.64ml，6.64mmol)中LiAlH4の１Ｍ溶液を、アルゴン下に維持し氷浴で０℃に冷却した４mlの無水THF中の生成物４(2.96ｇ，4.03mmol)の溶液に、滴下して非常に注意深く加える。周囲温度にて20時間の撹拌後、反応媒体を氷浴で０℃に冷却し、４mlの酢酸エチル(EtOAc)、次いで４mlのメタノール(MeOH)、最後に４mlの水を添加して反応を停止させる。酢酸エチルの添加は、酢酸エチルをゆっくりと導入しなければ、激烈な反応を生じ、水の添加により塩の沈澱が引き起こされる。次いで反応媒体をセライトで濾過し、蒸発乾固させる。得られる残渣を35mlのCH2Cl2中に取り、３×35mlの飽和NaCl水溶液で洗浄する。得られる有機相を無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。
生成物６が88％の収率(2.56ｇ，3.55mmol)で得られる。
【０１９８】
工程ｅ)：工程ｄ)で得られる生成物の臭素化
【化８２】
2010507571.tif 000083
【０１９９】
TMSBr (0.58ml，4.44mmol)を、不活性雰囲気(アルゴン)下で氷浴を用いて０℃に維持した３mlの無水CHCl3中の生成物６(2.56ｇ，3.55mmol)の溶液に、シリンジを用いて滴下して加える。48時間の撹拌後、溶媒を蒸発除去して、生成物８が90％の収率(2.51ｇ，3.19mmol)で得られる。更なる精製は必要ない。
【０２００】
工程ｆ)：工程ｅ)で得られる生成物とメチル３,５-ジヒドロキシベンゾエートとの反応
【化８３】
2010507571.tif 000084
【０２０１】
15mlのアセトン中、生成物８(2.51ｇ，3.20mmol)と３,５-ジヒドロキシベンジルアルコール(0.25ｇ，1.46mmol)とK2CO3 (1.01ｇ，7.28mmol)とKI (７mg，0.44mmol)との溶液を60℃にて72時間加温する。次いで反応媒体を周囲温度に冷却し、セライトで濾過し、こうして得られる濾液を蒸発乾固させる。
残渣を50mlのCH2Cl2中に取り、得られる有機相を３×50mlの飽和NaCl水溶液で洗浄し、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、次いで蒸発乾固させて、精製すべき2.50ｇの粗生成物を得る。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径４cm、Vsilica＝450ml，溶離剤：アセトン
生成物10が88％の収率(1.98ｇ，1.28mmol)で得られる。黄色がかった油。
【０２０２】
工程ｇ)：工程ｆ)で得られる生成物のLiAlH4での還元
【化８４】
2010507571.tif 000085
【０２０３】
THF (1.73ml，1.73mmol)中のLiAlH4の１Ｍ溶液を、アルゴン下で維持し氷浴で０℃に冷却した50mlの無水THF中の生成物10(1.95ｇ，1.23mmol)の溶液に、滴下して非常に注意深く加える。周囲温度にて20時間の撹拌後、反応媒体を氷浴で０℃に冷却し、10mlの酢酸エチル(EtOAc)、次いで10mlのメタノール(MeOH)、最後に10mlの水を添加して反応を停止させる。酢酸エチルの添加は、酢酸エチルをゆっくりと導入しなければ、激烈な反応を生じ、水の添加により塩の沈澱が引き起こされる。次いで反応媒体をセライトで濾過し、蒸発乾固させる。得られる残渣を50mlのCH2Cl2中に取り、３×50mlの飽和NaCl水溶液で洗浄する。得られる有機相を無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。
生成物12が92％の収率(1.76ｇ，1.13mmol)で得られる。
【０２０４】
工程ｈ)：工程ｇ)で得られる生成物とジエチレントリアミン五酢酸二無水物との反応
【化８５】
2010507571.tif 000086
【０２０５】
ジエチレントリアミン五酢酸二無水物(115mg，0.32mmol)及び生成物12(500mg，0.32mmol)を35mlの無水塩化メチレンに溶解し、得られる懸濁物を50℃にて30分間撹拌する。次いでトリエチルアミン(0.45ml，3.2mmol)を加え、反応媒体50℃にて12時間撹拌した後、周囲温度に冷却し、５mlまで濃縮する。次いで、30mlのヘキサンをこれに加え、得られる溶液を一晩冷蔵庫(＋４℃)で放置する。沈澱した生成物をヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させ、次いでフラッシュクロマトグラフィーカラムで精製する。
精製：クロマトグラフィーカラム  直径１cm、Vsilica＝20ml，溶離剤：CH2Cl2/50％ MeOH
生成物14が89％の収率(553mg，0.28mmol)で得られる。黄色がかった油。
【０２０６】
工程ｉ)：工程ｈ)で得られる生成物と塩化Gd(III)又は塩化Mn(II)又は過テクネテートとの反応
−  １．塩化Gdとの反応
【化８６】
2010507571.tif 000087
【０２０７】
リガンド14(200mg，0.10mmol)及びGd(ClO4)3 (95mgの50％水溶液，0.10mmol)を５mlの蒸留水に溶解し、NaOHの１Ｍ溶液を加えることによってpHを７に一定に維持しながら、この溶液を周囲温度にて12時間撹拌する。次いで、遊離Gd3+イオンを除去するために、反応媒体をChelex樹脂で１時間処理し、次いで濾過し、凍結乾燥させる。
錯体16が87％の収率(189mg，0.087mmol)で得られる。黄色がかった油。
式VIII-1の錯体が得られる。
【０２０８】
−  ２．塩化Mnとの反応
【化８７】
2010507571.tif 000088
【０２０９】
MnCl2.4H2O (21mg，0.10mmol)を水(５ml)中の生成物14(200mg，0.10mmol)溶液に加え、周囲温度で撹拌する。30分間の撹拌後、不純な錯体18(NaClタイプの無機不純物が存在)を凍結乾燥させる。ナトリウム塩を除去するために精製を行なってもよい。
精製：凍結乾燥後、乾燥残渣を最小量のジクロロメタンに取り、得られる有機相を実質的飽和NaCl水溶液で洗浄した後、無水MgSO4で乾燥させ、濾過し、次いで蒸発乾固させる。
錯体18が88％の収率(189mg，0.088mmol)で得られる。
式VIII-2の錯体が得られる。
【０２１０】
−  ３．過テクネテートとの反応
【化８８】
2010507571.tif 000089
【０２１１】
放射能メータを備えたシールド核医学フード内で行う操作：
溶液状態の発生源から滅菌無発熱原性生理食塩水中に出てくる185MBq (５mCi)の過テクネテート99mTc3+O4- (２〜４ml)を、18μmolの錯体14-CaNa3及びストック溶液から凍結乾燥した２μmolの塩化スズ(Sn2+)を含むバイアルに加える。
混合物を穏やかに撹拌し、周囲温度にて２分間反応させる。
標識化の質を、移動相としてメチルエチルケトンを含むWhatmanペーパー(3MM CHR)上でクロマトグラフィーにより確証する：標識錯体は移動せず(Rf＝０)、遊離過テクネテートは溶媒先端と共に移動する(Rf＝1)。
これら条件下で、標識化は常に98％より高い。
式VIII-3の錯体が得られる。
【０２１２】
実施例８：式IX-1〜IX-3の化合物の合成
【化８９】
2010507571.tif 000090
【０２１３】
実施例９：式X-1〜X-3の化合物の合成
【化９０】
2010507571.tif 000091
【０２１４】
実施例10：式Ａの第一世代及び第二世代の化合物の合成
【化９１】
2010507571.tif 000092
【化９２】
2010507571.tif 000093
【０２１５】
実施例11：式Ａの第三世代の化合物の合成
【化９３】
2010507571.tif 000094
【０２１６】
実施例12：ブタンジアミンスペーサーを含んでなる式Ａの第一世代、第二世代又は第三世代の化合物の合成
本発明の錯体の官能化第一世代デンドロンにより形成された球状の樹状構造体、及び第二世代デンドロンの球状の樹状構造体の合成を、実施例10に示した。第三世代の球状の樹状構造体の合成を、同様に、実施例11に示した。これらデンドロンの形成後、所望であれば、本発明によるスペーサーを導入する。
このスペーサーが１,４-ブタンジアミンであるとき、合成は、第一世代錯体については、以下のスキームに従う：
【０２１７】
【化９４】
2010507571.tif 000095
【０２１８】
次いで、実施例10及び11に示すように、所望の生成物を得るために、キレートを導入する。
本発明を、マーカーGd3+、Mn2+及び99mTc3+に関して上記実施例で説明したが、関心ある任意のマーカーを同じ方法で錯体化し得ることは当業者に明確に理解される。
加えて、本発明の錯体に脳へのベクトル化を付与する樹状構造体の官能化に関して前記実施例で本発明を説明したが、他の器官に特異的な造影剤を得るために、他の器官のレセプターに特異的に結合する基でのデンドライトの官能化を使用し得ることは当業者に明確に理解される。
【０２１９】
更に、第一世代、第二世代又は第三世代の樹状構造体について本発明を説明したが、より高次の世代の樹状構造体を含んでなる錯体を想定することが全く可能であることは当業者に明確に理解される。
同様に、上記では、デンドライトを３つ又は４つのエチレングリコール単位を含んでなるものとして説明したが、４より多いエチレングリコール単位を含んでなるデンドライトの使用を想定することが全く可能であることは当業者に明確に理解される。
同様に、特定の還元剤、保護基及び他の化合物を使用する合成方法を説明したが、実施例で記載したものと同じ官能基を有する他の還元剤、保護基及び化合物を使用し得ることは当業者に明確に理解される。
更に、前記実施例では、使用した治療薬剤は、神経変性疾患用の治療薬剤であるが、或る器官及びこの器官の特定の疾患に対して標的とする作用を有する医薬組成物を得るために、他の任意の治療薬剤を、適切なベクトル化剤と併用して使用し得る。