(57)【要約】  本発明は、一般的に、ある種のペプチド及びタンパク質の生物学的活性を模倣する小分子、それらを含む組成物及びそれらの使用に関する。特に、本発明はＢＨ３オンリープロテインの生物学的活性を模倣し、生存促進性Ｂｃｌ−２タンパク質に結合しこれを中和することができる一般式(Ｉ)の化合物に関し、ここで、Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｘ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びｔは明細書に記載の通りである。本発明はまたある種のペプチド及びタンパク質の一部を模倣するベンゼンスルホンアミド化合物を製造する方法、細胞死の調節及び細胞死の調節解除に関連する疾患又は症状の治療及び／又は予防におけるかかる化合物の使用にも関する。
2010510237.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)：
2010510237.tif 000052
[上式中、
ＸはＮＯ２又は−ＳＯ２−Ｃ(Ｘ’)３(ここで、Ｘ’はＨ又はハロである)であり；
Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２及びＢ３は独立してＮ又はＣＲ４であり；
Ｚはシクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロ環式又はヘテロアリール基であり；
Ｒ１及びＲ２は独立してアリール、ヘテロアリール、−ＮＲ５Ｒ６、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、−Ｏ(ＣＨ２)ｒアリール、−Ｏ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＣＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＣＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＣＯ２(ＣＨ２)ｒアリール、−ＣＯ２(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＯＣＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＯＣＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＳＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＳＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＳＯ２(ＣＨ２)ｒアリール又は−ＳＯ２(ＣＨ２)ｒヘテロアリールであり；
Ｒ３はアルキル、アルケニル、−(ＣＨ２)ｔシクロアルキル、−(ＣＨ２)ｔシクロアルケニル、−(ＣＨ２)ｔアリール、−(ＣＨ２)ｔヘテロシクリル又は−(ＣＨ２)ｔヘテロアリールであり、ここで、各シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリールは、アルキル、アルケニル、ハロ、ニトロ、ハロアルキル、あるいは１、２又は３のアルキル、アルケニル、アルコキシ、ハロ又はニトロ基で置換されていてもよいフェニルで置換されていてもよく；
Ｒ４は水素、ハロゲン、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−６アルケニル、−Ｃ２−６アルキニル、ヒドロキシ、−ＯＣ１−６アルキル、−ＯＣ２−６アルケニル、−ＯＣ２−６アルキニル、−Ｎ(Ｒ７)２、アシル、−Ｃ(Ｒ８)３又は−ＣＯＮ(Ｒ９)２であり；
Ｒ５及びＲ６は独立して水素、アルキル又はアルケニルであるか、又はＲ５及びＲ６は、それらが結合している窒素と共にヘテロ環式又はヘテロアリール環を形成し；
各Ｒ７は独立して水素、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−６アルケニル、−Ｃ２−６アルキニル又はアシルであり；
各Ｒ８は独立して水素又はハロゲンであり；
各Ｒ９は独立して水素、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−６アルケニル又は−Ｃ２−６アルキニルであり、
ｔは０又は１から６の整数であり；かつ
ｒは０又は１から６の整数であり；
各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリール基は置換されていてもよい。]
の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
部分：
2010510237.tif 000053
が、
2010510237.tif 000054
である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＸがＮＯ２又は−ＳＯ２−ＣＦ２Ｘ’(該式中、Ｘ’はＦ又はＣｌである)である請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘが−ＳＯ２−ＣＦ２Ｃｌである請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｚがピペラジン−１−イルである請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１がアリール、ヘテロアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒアリール、又は−Ｓ(ＣＨ２)ｒヘテロアリールである請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１が−Ｓフェニルである請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
部分−(ＣＨ２)ｔＲ１が−ＣＨ２−Ｓ−フェニルである請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２が−ＮＲ５Ｒ６又は−ＣＯＮＲ５Ｒ６である請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
−ＮＲ５Ｒ６又は−ＣＯＮＲ５Ｒ６(上式中、Ｒ５及びＲ６はそれらが結合する窒素原子と共にヘテロ環又はヘテロ芳香環を形成する)である請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
基−(ＣＨ２)ｔＲ２が、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−アザパニル)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−オキサザパニル)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−ピロリジニル)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−７−アザビシクロ[２．２．１]ヘプタニル)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−２オキサ−５−アザビシクロ[２．２．１]ヘプタニル)である請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
基−(ＣＨ２)ｔＲ２が−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨｓ)２である請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
基−(ＣＨ２)ｔＲ２が−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−モルホリン)である請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ３が
2010510237.tif 000055
[上式中、ＱはＯ、ＣＨ２、Ｃ(アルキル)２又はＣＨ２ＣＨ２であり；Ｒ１２はハロであり；Ｒ１３及びＲ１４は共にＨ又は共にアルキルである]である請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
上記化合物が
2010510237.tif 000056
2010510237.tif 000057
2010510237.tif 000058
2010510237.tif 000059
2010510237.tif 000060
2010510237.tif 000061
2010510237.tif 000062
2010510237.tif 000063
2010510237.tif 000064
の一つである請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
細胞死を調節する方法において、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物の有効量に上記細胞を接触させることを含む方法。
【請求項１７】
望まれないか又は損傷を受けた細胞においてアポトーシスを誘導する方法において、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物の有効量に上記望まれないか又は損傷を受けた細胞を接触させることを含む方法。
【請求項１８】
哺乳動物における生存促進性Ｂｃｌ−２メンバー媒介疾患又は症状の治療及び／又は予防の方法において、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物の有効量を上記哺乳動物に投与することを含む方法。
【請求項１９】
哺乳動物における望まれないか又は損傷を受けた細胞の不適切な持続又は増殖により特徴付けられる疾患又は症状の治療及び／又は予防の方法において、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物の有効量を上記哺乳動物に投与することを含む方法。
【請求項２０】
請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物と少なくとも一種の薬学的に許容可能な担体を含有する薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、その全内容を出典明示によりここに援用する２００６年１１月１５日出願の仮米国特許出願第６０／８５９３１５号の優先権を主張する。
【０００２】
本発明は一般に悪性疾患を治療するための治療剤として有用であるＢｃｌ−２ファミリータンパク質の新規な阻害剤に関する。本発明はまた細胞死の調節及び細胞死の調節解除に関連する疾患又は症状の治療及び／又は予防に有用な化合物及び組成物の調製方法にも関する。
【背景技術】
【０００３】
アポトーシスは全ての生存種の組織ホメオスターシスにおける本質的な生物学的プロセスとして現在認識されている。特に哺乳動物において、それは胚発生を調節することが示されている。生活の後期で、細胞死は危険な細胞(例えば癌欠陥を有する細胞)を潜在的に除去するデフォルト機構である。数種のアポトーシス経路が明らかにされており、最も重要なものの一つはタンパク質のＢｃｌ−２ファミリーを含む。構造的相同ドメインＢＨ１からＢＨ４がこのファミリーの特徴である。３種のサブファミリーの更なる分類は、タンパク質がこれらの相同ドメインの幾つを含んでいるのかと、その生物学的活性(アポトーシス誘導又は抗アポトーシス)とに依存している。
【０００４】
第一のサブグループは４つ全ての相同ドメインＢＨ１からＢＨ４を有するタンパク質を含む。その一般的な効果は、抗アポトーシス性であり、細胞が細胞死を開始することを防止する。Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｗ及びＢｃＬ−ｘＬのようなタンパク質はこの第一サブグループのメンバーである。第二サブグループに属するタンパク質はアポトーシス促進性効果を有しており、３つの相同ドメインＢＨ１〜ＢＨ３を含んでいる。この第二サブグループの二つの主な代表的タンパク質はＢａｘ及びＢａｋである。最後に、第三のサブグループはＢＨ３ドメインのみを含んでいるタンパク質からなり、このサブグループのメンバーは通常は「ＢＨ３オンリープロテイン(ＢＨ３−ｏｎｌｙ ｐｒｏｔｅｉｎｓ)」と呼ばれる。細胞に対するその生物学的効果はアポトーシス促進性である。Ｂｉｍ、Ｂａｄ、Ｂｍｆ、及びＢｉｄはこのタンパク質の第三サブファミリーの例である。
【０００５】
３つのサブグループ間の繊細なバランスは、細胞のホメオスターシスに対して重要である。最近の研究は、細胞内又は細胞外シグナルを受け取る際にプログラム細胞死を細胞が受けることを許容するタンパク質のＢｃｌ−２ファミリーを含む機構を解明しようとしている。かかるシグナルはＢＨ３オンリープロテインの活性化(翻訳後又は転写)を誘導する。これらのタンパク質は細胞死に至るカスケードの主要な誘導因子である。ＢＨ３オンリープロテインは主としてＢｃｌ−２サブグループと相互作用し、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ又はＢｃｌ−ｗのようなタンパク質がＢａｘ／Ｂａｋサブグループを阻害するのを停止させる。これらの後者タンパク質はミトコンドリア膜に既に固着しているか又はこの膜まで移動する。その活性化は、膜膨潤、チトクロムＣの放出及びエフェクターカスパーゼの下流活性化を生じさせ、アポトーシスを生じさせる。
【０００６】
既に述べたように、これらのタンパク質間のバランスは、様々な刺激に対する正しい細胞応答に必須である。このバランスの混乱は、主要な疾患を煽動し又は悪化させる。よって、アポトーシスの混乱は、例えば神経変性症状(上方制御されたアポトーシス)、例えばアルツハイマー病、又は増殖性疾患(下方制御されたアポトーシス)、例えば癌及び自己免疫疾患のような重要な疾患の起源であることが示されている。
【０００７】
Ｂｃｌ−２ファミリーの幾つかのタンパク質が癌性悪性疾患の発症に関与しているという発見は、この尚も解りにくい疾患を標的とする全く新規な途を明らかにした。特に、Ｂｃｌ−２のような生存促進性タンパク質が多くの癌型において過剰発現していることが示されている(表１参照)[Ｚｈａｎｇ，２００２]。この調節解除の効果は、正常な条件ではアポトーシスを受けたであろう改変細胞の生存にある。調節されない増殖を伴うこれらの欠陥の反復は癌性進化の出発点であると考えられる。ＢＨ３オンリープロテインは罹患した動物において発現したとき腫瘍の抑制因子として作用することがまた示されている。
2010510237.tif 000003
【０００８】
これらの知見並びに数多くの他の知見は、抗癌対策及び薬剤開発において新しい概念の出現を可能にした。ＢＨ３オンリープロテインの効果を模倣する物質が細胞に入り、生存促進性タンパク質過剰発現を克服することができるならば、アポトーシスプロセスをリセットすることが可能であろう。この方策は、通常はアポトーシス調節解除(異常な生存)の結果である薬物耐性の問題を軽減しうるという利点を有する可能性がある。
【０００９】
ＢＨ３オンリープロテインと生存促進性サブグループの間の重要な相互作用の構造的な詳細を理解するために多くの努力がなされている。Ｆｅｓｉｋと共同研究者等は、二量体Ｂａｄ／Ｂｃｌ−ｘＬの場合において幾つかの構造的要素の重要性を証明した[Ｍｕｃｈｍｏｒｅ等，１９９６；Ｓａｔｔｌｅｒ等，１９９７及びＰｅｔｒｏｓ等，２０００]：
−  ＢａｄのＢＨ３ドメイン及びＢｃｌ−ｘＬ上に位置する疎水性グルーブ間に結合が生じる；
−  ＢＨ３オンリープロテインＢａｄは、Ｂｃｌ−ｘＬの疎水性グルーブに結合する際、ヘリックス構造を採る；及び
−  ｉ、ｉ＋３、ｉ＋７及びｉ＋１１の間隔で位置するＢＨ３ドメインの４つの疎水性アミノ酸は、Ｂｃｌ−ｘＬへのＢａｄの結合に重要であり、Ｂｃｌ−ｘＬ結合グルーブに位置する４つの疎水性ポケットにおいて相互作用する。更に、ＢＨ３オンリーサブグループのメンバーの研究は、これらの４つの疎水性アミノ酸がサブグループを通して保存されていることを示している。
【００１０】
生存促進性タンパク質Ｂｃｌ−ｗの構造 [Ｈｉｎｄｓ等，２００３] 及びＢｃｌ−ｘＬと相互作用するＢＨ３オンリープロテインＢｉｍの構造[Ｌｉｕ等，２００３] が発表されている。この後者の構造はＢａｄ／Ｂｃｌ−ｘＬ相互作用の知見を確認する。
新規な薬物療法の潜在的な標的は、ＢＨ３オンリープロテインとＢｃｌ−２ファミリータンパク質間の相互作用を模倣する小分子である。最近、小分子ＢＨ３オンリープロテイン模倣剤が、ある種の癌細胞株において細胞傷害活性を有しており、放射線療法及び多くの化学療法剤の効果を亢進することが示されている[Ｏｌｔｅｒｓｄｏｒｆ等，２００５；米国特許出願公開第２００２／００８６８８７号；国際公開第０３／０８０５８６号；米国特許第６７２０３３８号；国際公開第０５／０４９５９７号；Ｐｅｔｒｏｓ等，２００６；Ｃｏｒｙ及びＡｄａｍｓ，２００５]。
【００１１】
αヘリックスは、ペプチド及びタンパク質に示される一般的な認識モチーフである。αヘリックス配列は、酵素-レセプター及び抗体-レセプター相互作用のようなタンパク質間相互作用にしばしば関与している。これらのタンパク質間相互作用を標的にすることは、現在、薬剤発見における大きな挑戦の一つと認識される。
容易に合成することができ、ＢＨ３オンリープロテインの活性を模倣する小分子に対する必要性が存在している。
【発明の概要】
【００１２】
本発明の一態様では、式(Ｉ)：
2010510237.tif 000004
[上式中、
ＸはＮＯ２又は−ＳＯ２−Ｃ(Ｘ’)３(ここで、Ｘ’はＨ又はハロである)であり；
Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２及びＢ３は独立してＮ又はＣＲ４であり；
Ｚはシクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロ環式又はヘテロアリール基であり；
Ｒ１及びＲ２は独立してアリール、ヘテロアリール、−ＮＲ５Ｒ６、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、−Ｏ(ＣＨ２)ｒアリール、−Ｏ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＣＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＣＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＣＯ２(ＣＨ２)ｒアリール、−ＣＯ２(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＯＣＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＯＣＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＳＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＳＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＳＯ２(ＣＨ２)ｒアリール又は−ＳＯ２(ＣＨ２)ｒヘテロアリールであり；
Ｒ３はアルキル、アルケニル、−(ＣＨ２)ｔシクロアルキル、−(ＣＨ２)ｔシクロアルケニル、−(ＣＨ２)ｔアリール、−(ＣＨ２)ｔヘテロシクリル又は−(ＣＨ２)ｔヘテロアリールであり、ここで、各シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリールは、アルキル、アルケニル、ハロ、ニトロ、ハロアルキル、あるいは１、２又は３のアルキル、アルケニル、アルコキシ、ハロ又はニトロ基で置換されていてもよいフェニルで置換されていてもよく；
Ｒ４は水素、ハロゲン、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−６アルケニル、−Ｃ２−６アルキニル、ヒドロキシ、−ＯＣ１−６アルキル、−ＯＣ２−６アルケニル、−ＯＣ２−６アルキニル、−Ｎ(Ｒ７)２、アシル、−Ｃ(Ｒ８)３又は−ＣＯＮ(Ｒ９)２であり；
Ｒ５及びＲ６は独立して水素、アルキル又はアルケニルであるか、又はＲ５及びＲ６は、それらが結合している窒素と共にヘテロ環式又はヘテロアリール環を形成し；
各Ｒ７は独立して水素、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−６アルケニル、−Ｃ２−６アルキニル又はアシルであり；
各Ｒ８は独立して水素又はハロゲンであり；
各Ｒ９は独立して水素、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−６アルケニル又は−Ｃ２−６アルキニルであり、
ｔは０又は１から６の整数であり；かつ
ｒは０又は１から６の整数であり；
各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリール基は置換されていてもよい。]
の化合物又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【００１３】
本発明のまた別の態様では、望まれない又は損傷を受けた細胞においてアポトーシスを誘導する方法であって、有効量の式(Ｉ)の化合物に上記望まれない又は損傷を受けた細胞を接触させることを含む方法が提供される。
本発明のまた別の態様では、哺乳動物における生存促進性Ｂｃｌ−２メンバー媒介疾患又は症状の治療及び／又は予防の方法であって、有効量の式(Ｉ)の化合物を上記哺乳動物に投与することを含んでなる方法が提供される。
【００１４】
本発明のまた別の態様では、哺乳動物における望まれない又は損傷を受けた細胞の不適切な持続又は増殖により特徴付けられる疾患又は症状の治療及び／又は予防の方法であって、有効量の式(Ｉ)の化合物を上記哺乳動物に投与することを含んでなる方法が提供される。
本発明の更なる態様では、式(Ｉ)の化合物と少なくとも一種の薬学的に許容可能な担体を含有する薬学的組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１Ａ】２４時間後のヨウ化プロピジウムの取り込みによって評価されるある種のマウス胚線維芽(ＭＥＦ)細胞の生存％に対する、増加濃度の化合物１の効果を示すグラフである。Ｎｏｘａ及びＢａｄは、Ｃｈｅｎ等，２００５に記載されているようにしてｐＭＩＧレトロウイルスを用いて細胞をレトロウイルス的に感染させることによって導入した。
【図１Ｂ】２４時間後のヨウ化プロピジウムの取り込みによって評価されるある種のマウス胚線維芽(ＭＥＦ)細胞の生存％に対する、増加濃度のエトポシドの効果を示すグラフである。Ｎｏｘａ及びＢａｄは、Ｃｈｅｎ等，２００５に記載されているようにしてｐＭＩＧレトロウイルスを用いて細胞をレトロウイルス的に感染させることによって導入した。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本明細書及びそれに続く特許請求の範囲において、文脈に反しない限り、「含む(comprise)」なる語句及び例えば「含む(comprises)」及び「含んでいる(comprising)」のような変形語は、記載された整数又は工程又は整数又は工程の群を含むことを意味するが、他の整数又は工程又は整数又は工程の群を排除することを意味するものではないことが理解される。
【００１７】
本発明の一態様では、式(Ｉ)：
2010510237.tif 000005
[上式中、
ＸはＮＯ２又は−ＳＯ２−Ｃ(Ｘ’)３(ここで、Ｘ’はＨ又はハロである)であり；
Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２及びＢ３は独立してＮ又はＣＲ４であり；
Ｚはシクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロ環式又はヘテロアリール基であり；
Ｒ１及びＲ２は独立してアリール、ヘテロアリール、−ＮＲ５Ｒ６、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、−Ｏ(ＣＨ２)ｒアリール、−Ｏ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＣＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＣＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＣＯ２(ＣＨ２)ｒアリール、−ＣＯ２(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＯＣＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＯＣＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＳＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＳＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＳＯ２(ＣＨ２)ｒアリール又は−ＳＯ２(ＣＨ２)ｒヘテロアリールであり；
Ｒ３はアルキル、アルケニル、−(ＣＨ２)ｔシクロアルキル、−(ＣＨ２)ｔシクロアルケニル、−(ＣＨ２)ｔアリール、−(ＣＨ２)ｔヘテロシクリル又は−(ＣＨ２)ｔヘテロアリールであり、ここで、各シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリールは、アルキル、アルケニル、ハロ、ニトロ、ハロアルキル、あるいは１、２又は３のアルキル、アルケニル、アルコキシ、ハロ又はニトロ基で置換されていてもよいフェニルで置換されていてもよく；
Ｒ４は水素、ハロゲン、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−６アルケニル、−Ｃ２−６アルキニル、ヒドロキシ、−ＯＣ１−６アルキル、−ＯＣ２−６アルケニル、−ＯＣ２−６アルキニル、−Ｎ(Ｒ７)２、アシル、−Ｃ(Ｒ８)３又は−ＣＯＮ(Ｒ９)２であり；
Ｒ５及びＲ６は独立して水素、アルキル又はアルケニルであるか、又はＲ５及びＲ６は、それらが結合している窒素と共にヘテロ環式又はヘテロアリール環を形成し；
各Ｒ７は独立して水素、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−６アルケニル、−Ｃ２−６アルキニル又はアシルであり；
各Ｒ８は独立して水素又はハロゲンであり；
各Ｒ９は独立して水素、−Ｃ１−６アルキル、−Ｃ２−６アルケニル又は−Ｃ２−６アルキニルであり、
ｔは０又は１から６の整数であり；かつ
ｒは０又は１から６の整数であり；
各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリール基は置換されていてもよい。]
の化合物又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【００１８】
ここで使用される場合、「アルキル」なる用語は、１から１０の炭素原子を有する直鎖状又は分枝状の飽和炭化水素基を意味する。適切な場合、アルキル基は特定の数の炭素原子を有し得、例えば直鎖又は分枝状の配置で１、２、３、４、５又は６の炭素原子を有するアルキル基を含むＣ１−６アルキルである。適切なアルキル基の例には、限定しないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、２−メチルブチル、３−メチルブチル、４−メチルブチル、ｎ−ヘキシル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、４−メチルペンチル、５−メチルペンチル、２−エチルブチル、３−エチルブチル、ヘプチル、オクチル、ノニル及びデシルが含まれる。
【００１９】
ここで使用される場合、「アルケニル」なる用語は、一又は複数の炭素原子間二重結合を有し２から１０の炭素原子を有する直鎖状又は分枝状の炭化水素基を意味する。適切な場合、アルケニル基は特定の数の炭素原子を有しうる。例えば、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」におけるようなＣ２−Ｃ６は、直鎖又は分枝状の配置で２、３、４、５又は６の炭素原子を有する基を含む。適切なアルケニル基の例には、限定しないが、エテニル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、ブタジエニル、ペンテニル、ペンタジエニル、ヘキセニル、ヘキサジエニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル及びデセニルが含まれる。
【００２０】
ここで使用される場合、「アルキニル」なる用語は、一又は複数の炭素原子間三重結合を有し２から１０の炭素原子を有する直鎖状又は分枝状の炭化水素基を意味する。適切な場合、アルキニル基は特定の数の炭素原子を有しうる。例えば、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」におけるようなＣ２−Ｃ６は、直鎖又は分枝状の配置で２、３、４、５又は６の炭素原子を有する基を含む。適切なアルキニル基の例には、限定しないが、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、オクチニル、ノニニル及びデシニルが含まれる。
【００２１】
ここで使用される場合、「シクロアルキル」なる用語は、飽和環状炭化水素基を意味する。シクロアルキル環は特定の数の炭素原子を有しうる。例えば、３〜８員のシクロアルキル基は、３、４、５、６、７又は８の炭素原子を有しうる。適切なシクロアルキル基の例には、限定しないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンタニル、シクロヘキサニル、シクロヘプタニル及びシクロオクタニルが含まれる。
【００２２】
ここで使用される場合、「シクロアルケニル」なる用語は、少なくとも一の二重結合を有する環状炭化水素を意味する。シクロアルケニル環は特定の数の炭素原子を有しうる。例えば、４〜８員のシクロアルケニル基は、少なくとも一の二重結合と４、５、６、７又は８の炭素原子を含む。適切なシクロアルケニル基の例には、限定しないが、シクロペンテニル、シクロペンタ−１，３−ジエニル、シクロヘキセニル、シクロヘキセン−１，３−ジエニル、又はシクロヘキセン−１，４−ジエニルが含まれる。
【００２３】
ここで使用される「アシル」なる用語は、(Ｃ＝Ｏ)Ｒによって定義されるアルカノイル又はアロイル基を意味し、ここで適切なＲ基には、限定されないが、−Ｃ１−７アルキル、−Ｃ１−７アルケニル、−Ｃ１−７アルキニル、−Ｃ３−８シクロアルキル、−Ｃ３−８シクロアルケニルアリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、−Ｃ１−７アルキルアリール、−Ｃ１−７アルキルシクロアルキル、−Ｃ１−７アルキルシクロアルケニル、−Ｃ１−７アルキルヘテロシクリル、−Ｃ１−７アルキルヘテロアリール、−Ｃ１−７アルコキシアルキル、−Ｃ１−７アルキルチオアルキル、−Ｃ１−７アルキルチオアリール、−Ｃ１−７アルコキシアリール等々が含まれる。
【００２４】
ここで使用される「アルキルオキシ」又は「アルコキシ」、「アルケニルオキシ」、「アルキニルオキシ」、「シクロアルキルオキシ」、「シクロアルケニルオキシ」「アリールオキシ」、「ヘテロシクリルオキシ」、「ヘテロアリールオキシ」、「Ｏアルキル」、「Ｏアルケニル」、「Ｏアルキニル」、「Ｏシクロアルキル」、「Ｏシクロアルケニル」、「Ｏアリール」、「Ｏヘテロシクリル」及び「Ｏヘテロアリール」なる用語は、酸素架橋を介して結合した定義されたアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロシクリル又はヘテロアリール基を表す。適切なアルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、シクロアルキルオキシ、シクロアルケニルオキシ、アリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ及びヘテロアリールオキシ基の例には、限定されないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロピルオキシ、ｎ−ブチルオキシ、ｎ−ペンチルオキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、エテニルオキシ、プロペニルオキシ、ブテニルオキシ、ペンテニルオキシ、ヘキセニルオキシ、エチニルオキシ、プロピニルオキシ、ブチニルオキシ、ペンチニルオキシ、ヘキシニルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、シクロペンテニルオキシ、シクロヘキセニルオキシ、フェノキシ、ナフトキシ、ピロリジニルオキシ、テトラヒドロフラニルオキシ、フラニルオキシ及びピリジニルオキシが含まれる。
【００２５】
ここで使用される「アルキルチオ」、「アルケニルチオ」、「アルキニルチオ」、「Ｓアルキル」及び「Ｓアルケニル」は、硫黄架橋を介して結合した定義されたアルキル、アルケニル又はアルキニル基を表す。適切なアルキルチオ、アルケニルチオ及びアルキニルチオには、限定しないが、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、ペンチルチオ、ヘキシルチオ、エテニルチオ、プロペニルチオ、ブテニルチオ、ペンテニルチオ、ヘキセニルチオ、エチニルチオ、プロピニルチオ、ブチニルチオ、ペンチニルチオ及びヘキシニルチオが含まれる。
【００２６】
ここで使用される場合、「アリール」なる用語は、各環７原子までの任意の安定な単環又は二環式炭素環を意味し、ここで、少なくとも一の環が芳香族である。かかるアリール基の例には、限定しないが、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル及びビナフチルが含まれる。
ここで使用される場合、「ハロゲン」又は「ハロ」なる用語は、フッ素(フルオロ)、塩素(クロロ)、臭素(ブロモ)及びヨウ素(ヨード)を意味する。
【００２７】
ここで使用される「ヘテロ(複素)環式」又は「ヘテロシクリル」なる用語は、１〜４の炭素原子が独立してヘテロ原子Ｎ、Ｓ又はＯによって置き換えられている環式炭化水素を意味する。複素環は飽和でも不飽和でもよい。適切なヘテロシクリル基の例には、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、ピロリジニル、ピロリニル、ピラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ピラゾリニル、ジチオリル、オキサチオリル、ジオキサニル、ジオキシニル、モルホリノ、チオモルホリノ及びオキサジニルが含まれる。
【００２８】
ここで使用される「ヘテロアリール」なる用語は、各環７原子までの任意の安定な単環又は二環式環を表し、ここで、少なくとも一の環が芳香族であり、少なくとも一の環が、Ｏ、Ｎ及びＳからなる群から選択される１〜４のヘテロ原子を含んでいる。この定義の範囲内のヘテロアリール基は、限定しないが、アクリジニル、カルバゾリル、シンノリニル、キノキサリニル、ピラゾリル、インドリル、ベンゾトリアゾリル、フラニル、チエニル、チオフェニル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、キノリニル、イソキノリニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、テトラヒドロキノリン、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル及び１，２，４−チアジアゾリルが含まれる。特定のヘテロアリール基は５員又は６員環、例えばピラゾリル、フラニル、チエニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，４−トリアゾリル及び１，２，４−オキサジアゾリル及び１，２，４−チアジアゾリルが含まれる。
【００２９】
各アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリールは、個々の基であろうと大きな基の一部としてであろうと、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ２−６アルケニルオキシ(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ２−６アルキニルオキシ(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ３−６シクロアルコキシ(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ１−６アルキルチオ(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ２−６アルケニルチオ(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ２−６アルキニルチオ(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ３−６シクロアルキルチオ(ＣＨ２)ｐ−、ヒドロキシ(ＣＨ２)ｐ−、−(ＣＨ２)ｐＳＨ、−(ＣＨ２)ｐＣＯ２Ｈ、−(ＣＨ２)ｐＣＯ２Ｃ１−６アルキル、(ＣＨ２)ｐＣＯＮ(Ｒ１０)２、Ｃ２−６アシル(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ２−６アシルオキシ(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ２−６アルキルＳＯ２(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ２−６アルケニルＳＯ２(ＣＨ２)ｐ−、Ｃ２−６アルキニルＳＯ２(ＣＨ２)ｐ−、アリールＳＯ２(ＣＨ２)ｐ−、ヘテロアリールＳＯ２(ＣＨ２)ｐ−、ヘテロシクリルＳＯ２(ＣＨ２)ｐ−、−(ＣＨ２)ｐＮＨ２、−(ＣＨ２)ｐＮＨ(Ｃ１−６アルキル)、−(ＣＨ２)ｐＮ(Ｃ１−６アルキル)２、−(ＣＨ２)ｐＮＨ(フェニル)、−(ＣＨ２)ｐＮ(フェニル)２、−(ＣＨ２)ｐＮＨ(アシル)、−(ＣＨ２)ｐＮ(アシル)(フェニル)、−(ＣＨ２)ｐＮＨ−(ＣＨ２)ｐ−Ｓ−アリール、−(ＣＨ２)ｐＮ＝ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ２、−(ＣＨ２)ｐＣ(Ｒ１１)３、−(ＣＨ２)ｐＯＣ(Ｒ１１)３、−(ＣＨ２)ｐＳＣ(Ｒ１１)３、−(ＣＨ２)ｐＣＮ、−(ＣＨ２)ｐＮＯ２、−(ＣＨ２)ｐハロゲン、−(ＣＨ２)ｐヘテロシクリル、ヘテロシクリルオキシ(ＣＨ２)ｐ−、−(ＣＨ２)ｐヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ(ＣＨ２)ｐ−、−(ＣＨ２)ｐアリール、−(ＣＨ２)ｐＣ(Ｏ)アリール及びアリールオキシ(ＣＨ２)ｐ−からなる群から選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよく、ここで各Ｒ１１は、独立して水素又はハロゲンであり；各Ｒ１０は独立してＨ、Ｃ１−６アルキル、フェニル又はシクロアルキルであるか、又は二つのＲ１０は、それらが結合する窒素と共に、ヘテロシクリル又はヘテロアリール環を形成することができ；ｐは０又は１から６の整数である。適切な基の例には、限定しないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔブチル、ビニル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、ヒドロキシ、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ヒドロキシブチル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、シアノ、ニトロ、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＯ２ＣＨ３、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチルチオ、アセチル、モルホリノ、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、フェニル、フェニルカルボニル、ＮＨＣＯフェニル、ＮＨＣＯベンジル(ここで、フェニル環はメチル又はメトキシで置換されていてもよい)、ＮＨＣＯエチルフェニル、ＮＨＣＯＣＨ２Ｓフェニル、−Ｎ＝ＮＨＣ(Ｏ)ＮＨ２、−ＣＨ＝Ｃ(ＣＮ)２及びフェノキシが含まれる。特定の置換基には、フルオロ、クロロ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、シアノ、ニトロ、アセチル、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、フェニル及びベンジル(該フェニル又はベンジル環はハロ、メチル又はメトキシで置換されていてもよい)が含まれる。
【００３０】
本発明の化合物は薬学的に許容可能な塩の形態であり得る。しかしながら、非薬学的に許容可能な塩もまた、これらが薬学的に許容可能な塩の調製における中間体として有用であるか又は貯蔵又は輸送中に有用であり得るので、本発明の範囲に入ることが理解されるであろう。適切な薬学的に許容可能な塩には、限定しないが、薬学的に許容可能な無機酸、例えば塩酸、硫酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、スルファミン酸、及び臭化水素酸の塩、又は薬学的に許容可能な有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、酪酸、酒石酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、乳酸、粘液酸、グルコン酸、安息香酸、コハク酸、シュウ酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、サリチル酸、スルファニル酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、エデト酸、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、ラウリン酸、パントテン酸、タンニン酸、アスコルビン酸及び吉草酸の塩が含まれる。
【００３１】
塩基塩には、限定しないが、薬学的に許容可能なカチオン、例えばナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム及びアルキルアンモニウムで形成されたものが含まれる。
塩基性窒素含有基は、ハロゲン化低級アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、及びブチル塩化物、臭化物及びヨウ化物；硫酸ジメチル及びジエチルのようなジアルキルサルフェート；及びその他のような薬剤で第四級化することができる。
【００３２】
本発明の化合物及び塩はプロドラッグの形態で提供されてもよい。「プロドラッグ」なる用語はその最も広い意味で使用され、インビボで本発明の化合物に転換される誘導体を包含する。かかる誘導体は当業者には直ぐに想起でき、Ｎ−α−アシルオキシアミド類、Ｎ−（アシルオキシアルコキシカルボニル）アミン誘導体、エステル及びフェノール及びアルコールのα−アシルオキシアルキルエステルが含まれる。プロドラッグは本発明の化合物の官能基の一又は複数への修飾を含みうる。
【００３３】
「プロドラッグ」なる用語はまた本発明の化合物と脂質の組み合わせを包含する。脂質の存在は、化合物が細胞膜を通って細胞の細胞質又は核内に転位するのを助けうる。適切な脂質には、脂肪酸エステルの形成によって化合物に結合されうる脂肪酸が含まれる。特定の脂肪酸には、限定しないが、ラウリン酸、カプロン酸、パルミチン酸及びミリスチン酸が含まれる。
他の官能基との関連で使用される「インビボで転換されうる誘導体」なる語句には、哺乳動物に投与されたとき述べた官能基に転換されうる全ての官能基又は誘導体が含まれる。当業者は、ある基がインビボで他の官能基に転換されうるかどうかを常套的な酵素的又は動物研究を使用して容易に決定することができる。
【００３４】
本発明の化合物は不斉中心を有し得、よって一を超える立体異性体として存在しうることがまた認識されるであろう。よって、本発明は、例えば約９０％ｅｅより大きく、例えば約９５％又は９７％ｅｅ又は９９％ｅｅより大きい一又は複数の不斉中心での実質的に純粋な異性体形態の化合物、並びにそのラセミ混合物を含む混合物にも関する。かかる異性体は、例えばキラル中間体を使用して、又はキラル分割によって、不斉合成によって調製することができる。
【００３５】
特定の実施態様では、次の少なくとも一つが次の部分に関して適用される：
2010510237.tif 000006
Ａ１及びＡ２の各々はＣＲ４であり、あるいはＡ１及びＡ２の一方がＮで、他方がＣＲ４であり；
Ｂ１、Ｂ２及びＢ３の各々はＣＲ４であり、あるいはＢ１、Ｂ２及びＢ３の一つはＮであり、他の二つはＣＲ４である。
【００３６】
特定の実施態様では、部分：
2010510237.tif 000007
は、
2010510237.tif 000008
である。
【００３７】
ＸはＮＯ２又は−ＳＯ２−Ｃ(Ｘ’)３(ここで、Ｘ’はＨ又はハロである)である。特定の実施態様では、ＸはＮＯ２又は−ＳＯ２−ＣＦ２Ｘ’(ここで、Ｘ’はＦ又はＣｌである)である。特定の実施態様では、ＸはＮＯ２である。特定の実施態様では、Ｘは−ＳＯ２−ＣＦ３である。特定の実施態様では、Ｘは−ＳＯ２−ＣＦ２Ｃｌである。
Ｚはシクロアルキル又はヘテロシクリル基である。特定の実施態様では、Ｚはヘテロシクリル基である。特定の実施態様では、Ｚはピペラジン基、例えばピペラジン−１−イルである。
Ｒ１及びＲ２は独立してアリール、ヘテロアリール、−ＮＲ５Ｒ６、−ＣＯＮＲ５Ｒ６、−Ｏ(ＣＨ２)ｒアリール、−Ｏ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＣＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＣＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＣＯ２(ＣＨ２)ｒアリール、−ＣＯ２(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＯＣＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＯＣＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＳＯ(ＣＨ２)ｒアリール、−ＳＯ(ＣＨ２)ｒヘテロアリール、−ＳＯ２(ＣＨ２)ｒアリール又は−ＳＯ２(ＣＨ２)ｒヘテロアリールである。
【００３８】
特定の実施態様では、Ｒ１はアリール、ヘテロアリール、−Ｓ(ＣＨ２)ｒアリール、又は−Ｓ(ＣＨ２)ｒヘテロアリールである。特定の実施態様では、Ｒ１は−Ｓ(ＣＨ２)ｒアリール又は−Ｓ(ＣＨ２)ｒヘテロアリールである。特定の実施形態では、Ｒ１は−Ｓアリール又は−Ｓヘテロアリールである。特定の実施態様では、Ｒ１は−Ｓフェニルである。特定の実施態様では、部分−(ＣＨ２)ｔＲ１は−ＣＨ２−Ｓ−フェニルである。
【００３９】
特定の実施態様では、Ｒ２は−ＮＲ５Ｒ６又は−ＣＯＮＲ５Ｒ６である。特定の実施態様では、Ｒ２は−Ｎ(アルキル)(アルキル)、−ＣＯＮ(アルキル)(アルキル)である。特定の実施態様では、基−(ＣＨ２)ｔＲ２は−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨｓ)２、−ＣＨ２ＣＯＮ(ＣＨ３)２である。
特定の実施態様では、Ｒ２は−ＮＲ５Ｒ６又は−ＣＯＮＲ５Ｒ６であり、ここでＲ５及びＲ６はそれらが結合している窒素原子と共にヘテロ環式又はヘテロ芳香族環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ５及びＲ６は一緒にモルホリン、ピペリジン、ピペラジン又はチオモルホリンを形成する。特定の実施態様では、基−(ＣＨ２)ｔＲ２は、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−モルホリン)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−ピペリジン)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−ピペラジン)及び−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−チオモルホリン)である。特定の実施態様では、基−(ＣＨ２)ｔＲ２は、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−アゼパニル)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−オキサザパニル)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−ピロリジニル)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−７−アザビシクロ[２．２．１]ヘプタニル)、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−２オキサ−５−アザビシクロ[２．２．１]ヘプタニル)である。特定の実施態様では、基−(ＣＨ２)ｔＲ２は、−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ(ＣＨ３)２である。特定の実施態様では、基−(ＣＨ２)ｔＲ２は、−ＣＨ２ＣＨ２(Ｎ−モルホリン)である。
【００４０】
Ｒ３は、ハロ、−(ＣＨ２)ｔシクロアルキル、−(ＣＨ２)ｔシクロアルケニル、−(ＣＨ２)ｔアリール、−(ＣＨ２)ｔヘテロシクリル、−(ＣＨ２)ｔヘテロアリールであり、ここで、各シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリールは、アルキル、アルケニル、ハロ、ニトロ、ハロアルキル、又は１、２又は３のアルキル、アルケニル、アルコキシ、ハロ又はニトロ基で置換されていてもよいフェニルで置換されていてもよい。特定の実施態様では、Ｒ３は、４位がハロ基で置換されていてもよいフェニル基で置換されていてもよい−(ＣＨ２)ｔアリールである。特定の実施態様では、Ｒ３は、４位がクロロ基で置換されたフェニル基で置換された−(ＣＨ２)ｔアリールである。特定の実施態様では、Ｒ３は、２−(４−ハロフェニル)フェニルメチルである。特定の実施態様では、Ｒ３は、２−(４−クロロフェニル)フェニルメチルである。
【００４１】
特定の実施態様では、Ｒ３は、
2010510237.tif 000009
であり、ここで、ＱはＯ、ＣＨ２、Ｃ(アルキル)２又はＣＨ２ＣＨ２であり；Ｒ１２はハロであり；Ｒ１３及びＲ１４は共にＨであるか共にアルキルである。特定の実施態様では、ＱはＣ(ＣＨ３)２である。特定の実施態様では、Ｒ１２はＣｌである。特定の実施態様では、ＱはＣ(ＣＨ３)２であり、Ｒ１３及びＲ１４は共にＨである。特定の実施態様では、ＱはＯである。特定の実施態様では、ＱはＯであり、Ｒ１３及びＲ１４は共にＨである。特定の実施態様では、Ｒ３は、
2010510237.tif 000010
である。
【００４２】
特定の実施態様では、Ｒ３は、
2010510237.tif 000011
である。
Ｒ４は、水素、ハロゲン、−Ｃ１−３アルキル、−ＯＣ１−３アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ(Ｃ１−３アルキル)、−Ｎ(Ｃ１−３アルキル)２、−ＮＨ(アシル)、−Ｎ(Ｃ１−３アルキル)(アシル)、アシル、−ＣＦ３、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ(Ｃ１−３アルキル)及び−ＣＯＮ(Ｃ１−３アルキル)２である。特定の実施態様では、Ｒ４は、水素、ハロゲン、メチル、メトキシ、−ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ(ＣＨ３)２、ＣＦ３及びＣＯＮＨ２である。特定の実施態様では、Ｒ４は水素である。
【００４３】
Ｒ５及びＲ６は独立して水素又はＣ１−６アルキルである。特定の実施態様では、Ｒ５及びＲ６は独立して水素又はＣ１−３アルキルである。特定の実施態様では、Ｒ５及びＲ６は、それらが結合している窒素と共にヘテロ環式又はヘテロアリール環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ５及びＲ６は、ヘテロ環式環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ５及びＲ６は、共にメチルである。Ｒ５及びＲ６は、一緒になってモルホリン、チオモルホリン、ピペリジン又はピペラジン環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ５及びＲ６は、一緒になってモルホリン環を形成する。
ｔは０又は１〜５の整数である。特定の実施態様では、ｔは０又は１〜３の整数である。
ｒは０又は１〜５の整数である。特定の実施態様では、ｒは０又は１〜３の整数である。
【００４４】
本発明の特定の実施態様では、化合物は式ＩＩ：
2010510237.tif 000012
(上式中、Ｘ、Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、式(Ｉ)に対して定義した通りである)のものである。
【００４５】
本発明の特定の化合物には、
2010510237.tif 000013
2010510237.tif 000014
2010510237.tif 000015
2010510237.tif 000016
2010510237.tif 000017
2010510237.tif 000018
2010510237.tif 000019
2010510237.tif 000020
2010510237.tif 000021
が含まれる。
【００４６】
本発明の化合物は当該分野で知られている合成手順によって調製することができる。化合物を調製する一つの手段は、置換アリールスルホンアミドを調製し、置換ヘテロ環式化合物を調製し、ついで二分子を一緒に反応させて本発明の化合物を形成する収斂合成法を使用することである。
【００４７】
分子のアリールスルホンアミド部分はスキーム１に示されるようにして調製することができる：
2010510237.tif 000022
【００４８】
分子のヘテロ環式部分はスキーム２に示されるようにして調製することができる：
2010510237.tif 000023
【００４９】
二つの部分はスキーム３に示されるようにして一緒に結合させることができる：
2010510237.tif 000024
【００５０】
式：
2010510237.tif 000025
の幾つかの化合物は商業的に入手でき、他のものは当該分野で知られている方法によって調製することができる。例えば、複素環部分がキナゾリン基を含む化合物はスキーム４に示されたようにして調製することができる：
2010510237.tif 000026
【００５１】
当業者は、発明の化合物の合成中、幾つかの置換基は反応性であり得、望まれない副反応を防止するために隠すか又は保護されなければならないことに気づくであろう。望まれない反応から反応性基を保護するための適切な保護基はＧｒｅｅｎ及びＷｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓに提供されている。
【００５２】
本発明の他の態様では、細胞死を調節する方法であって、ここに定義された式(Ｉ)の化合物の有効量に上記細胞を接触させることを含む方法が提供される。
本発明の他の態様では、望まれない又は損傷を受けた細胞においてアポトーシスを誘導する方法であって、ここに定義された式(Ｉ)の化合物の有効量に上記望まれない又は損傷を受けた細胞を接触させることを含む方法が提供される。
【００５３】
本発明の方法に従って処理される細胞はエキソビボ又はインビボに位置しうる。「エキソビボ」とは、細胞が被験者の体から取り除かれていることを意味し、その活性の調節はインビトロで開始される。例えば、細胞は、異常な細胞死シグナル伝達によって特徴付けられる症状の病原の一又は複数の側面を研究するためのモデルとして使用される細胞でありうる。特定の実施態様では、被験者細胞はインビボに位置している。
【００５４】
本発明の更に他の態様では、哺乳動物における生存促進性Ｂｃｌ−２メンバー媒介疾患又は症状の治療及び／又は予防方法であって、ここに定義された式(Ｉ)の化合物の有効量に上記哺乳動物に投与することを含む方法が提供される。
本発明の更に他の態様では、哺乳動物における望まれない又は損傷を受けた細胞の不適切な残留又は増殖によって特徴付けられる疾患又は症状の治療及び／又は予防方法であって、ここに定義された式(Ｉ)の化合物の有効量に上記哺乳動物に投与することを含む方法が提供される。
【００５５】
本発明の更に他の態様では、生存促進性Ｂｃｌ−２ファミリーメンバー媒介疾患又は症状の治療及び／又は予防のための、又は望まれない又は損傷を受けた細胞の不適切な残留又は増殖によって特徴付けられる疾患又は症状の治療及び／又は予防のための医薬の製造におけるここに定義された式(Ｉ)の化合物の使用が提供される。
【００５６】
ここで使用される「哺乳動物」なる用語には、ヒト、霊長類、家畜動物(例えばヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ロバ)、実験室試験動物(例えばマウス、ウサギ、ラット、モルモット)、コンパニオンアニマル(例えばイヌ、ネコ)及び捕らえた野生動物(例えばキツネ、カンガルー、シカ)が含まれる。特定の実施態様では、哺乳動物はヒト又は実験室試験動物である。特定の実施態様では、哺乳動物はヒトである。
【００５７】
ここで使用される場合、「生存促進性Ｂｃｌ−２ファミリーメンバー媒介疾患又は症状」なる用語は、望まれないか又は損傷を受けた細胞が正常な細胞性プロセスによって除去されない疾患又は症状、あるいは細胞が異常な望まれないか又は不適切な増殖を受ける疾患又は症状を意味する。かかる疾患には、不適切な細胞増殖によって特徴付けられる疾患を含むアポトーシス(細胞死)の不活化に関するものが含まれる。不適切な細胞増殖によって特徴付けられる疾患には、例えば、炎症性症状、例えば急性肺損傷を含む急性組織損傷から生じる炎症、リンパ腫を含む癌、例えば前立腺肥大、遺伝子型腫瘍、自己免疫疾患、組織肥大等々が含まれる。例えば、望まれないか又は損傷を受けた細胞の不適切な持続又は増殖に関連した又はそれによって特徴付けられる疾患又は症状には、望まれないか又は損傷を受けたＢ細胞に関するもの、例えばＢ細胞非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス及び関連した関節症が含まれる。望まれないか又は損傷を受けたＴ細胞の不適切な持続に関連した又はそれによって特徴付けられる疾患及び症状には、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病、Ｔ細胞非ホジキンリンパ腫及び移植片対宿主病が含まれる。望まれないか又は損傷を受けた骨髄細胞の不適切な持続に関連した又はそれによって特徴付けられる疾患及び症状には、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病及び慢性骨髄単球白血病が含まれる。望まれないか又は損傷を受けた形質細胞の不適切な持続に関連した又はそれによって特徴付けられる疾患及び症状には、多発性骨髄腫が含まれる。望まれないか又は損傷を受けた癌細胞の不適切な持続に関連した又はそれによって特徴付けられる疾患及び症状には、癌、特に卵巣癌、乳癌及び前立腺癌細胞が含まれる。
【００５８】
「有効量」は、少なくとも部分的に、所望の応答を達成し、又は治療されている特定の症状の、発症を遅延させ又は進行を抑制し又は発症と進行を合わせて停止させるのに必要な量を意味する。該量は、治療される個体の健康及び身体的状態、治療される個体の分類学的グループ、所望の保護の度合い、組成物の製剤、医療状況の評価、及び他の関連因子に応じて変動する。該量は、常套的な試験によって決定することができる比較的広い範囲に入ることが予想される。例えば、ヒト患者に関する有効量は、用量当たり、約０．１ｎｇ／ｋｇ体重から１ｇ／ｋｇ体重の範囲に入りうる。特定の実施態様では、投薬量は、用量当たり、１ｍｇ／ｋｇ体重から１ｇ／ｋｇ体重の範囲のように、１μｇから１ｇ／ｋｇ体重の範囲である。一実施態様では、投薬量は、用量当たり、１ｍｇから５００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。他の実施態様では、投薬量は、用量当たり、１ｍｇから２５０ｍｇ／ｋｇ体重まで、例えば５０ｍｇ／ｋｇ体重までの範囲である。更に他の実施態様では、投薬量は、用量当たり、１μｇから１ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。投薬量計画は最適な治療応答をもたらすように調節されうる。例えば、数回の小分けした用量を毎日、毎週、毎月又は他の適切な時間間隔で投与することができ、あるいは用量を状況の緊急性によって示されるように比例して減少させてもよい。
【００５９】
ここでの「治療」及び「予防」に対する言及は、その最も広い意味で考慮されなければならない。「治療」なる用語は、患者が完全に回復するまで治療されることを必ずしも意味するものではない。同様に、「予防」は患者が最終的に疾患状態に罹らないことを必ずしも意味しているものではない。従って、治療及び予防は特定の症状の徴候を軽減し、又は特定の症状の発症を防止し又はそのリスクを減少等させることを含む。「予防」なる用語は、特定の症状の重篤度又は発症を低減させるものと考えることができる。「治療」はまた現在の症状の重篤度を低減させうる。
【００６０】
本発明は、望まれないか又は損傷を受けた細胞の不適切な持続又は増殖によって特徴付けられる疾患及び症状の治療に有用である他の薬剤又は手順の哺乳動物への施与と共に本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩又はプロドラッグの投与のような、併用療法を更に考える。例えば、本発明の化合物は、他の化学療法薬と併用して、又は放射線療法のような他の治療法と併用して、投与されうる。適切な化学療法剤には、限定しないが、シクロホスファミド、ドキソルビシン、エトポシド、ホスフェート、パクリタキセル、トポテカン、カンプトテシン、５−フルオロウラシル、タモキシフェン、スタウロスポリン、アバスチン、アービタックス、イマチニブ及びビンクリスチンが含まれる。
【００６１】
治療での使用では、本発明の化合物はニートな化学品として投与されうる。特定の実施態様では、本発明の化合物は薬学的組成物で投与される。
よって、本発明の更なる態様では、ここに定義される式(Ｉ)の化合物と少なくとも一種の薬学的に許容可能な担体を含有する薬学的組成物が提供される。担体は組成物の他の成分と適合性があるという意味で「許容可能」であり、その受容者に有害であってはならない。
【００６２】
薬学的製剤には、経口、直腸、経鼻、局所(頬側及び舌下)、膣内又は非経口(筋肉内、皮下及び静脈内を含む)投与に適したもの又は吸入又はガス注入による投与に適した形態のものが含まれる。よって、本発明の化合物は、一般的なアジュバント、担体、賦形剤、又は希釈剤と共に、薬学的組成物の形態及びその単位投薬形態にされ得、かかる形態で、経口投与のためには、錠剤又は充填カプセルのような固形物として、又は液体、例えば溶液、懸濁液、乳剤、エリキシル剤、又はこれらが満たされたカプセル剤として、直腸投与のためには座薬の形態で；あるいは非経口(皮下を含む)用途のための滅菌注射溶液の形態で用いられうる。かかる薬学的組成物及びその単位投薬形態は、更なる活性化合物又は成分と共に又はこれを伴わずに、常套的な割合で一般的な成分を含み得、かかる単位投薬形態は、用いられる意図された毎日の投薬範囲と釣り合った適切な有効量の活性成分を含みうる。従って、活性成分の１０ミリグラム又はより広くは０．１から２００ミリグラムを錠剤当たりに含む製剤が、適切な代表的な単位投薬形態である。本発明の化合物は広い範囲の経口及び非経口投薬形態で投与されうる。次の投薬形態が活性成分として本発明の化合物又は本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩又は誘導体の何れかを含みうることは当業者には明らかであろう。
【００６３】
本発明の化合物から薬学的組成物を調製する場合、薬学的に許容可能な担体は固形か液体でありうる。固形形態調製物には、粉剤、錠剤、丸薬、カプセル剤(capsules)、カプセル(cachets)、座薬、及び分散性顆粒が含まれる。固形担体は、希釈剤、香味料、溶解剤、潤滑剤、懸濁剤、バインダー、保存料、錠剤崩壊剤、又はカプセル封入材料としても作用しうる一又は複数の物質でありうる。
粉剤では、担体は、微細に粉砕された活性成分との混合物である微細に粉砕された固形物である。
錠剤では、活性成分は、必要な結合能を有する担体と適切な割合で混合され、所望された形状とサイズに圧密化される。
【００６４】
特定の実施態様では、粉剤及び錠剤は５又は１０から約７０パーセントの活性化合物を含む。適切な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ワックス、ココアバター等である。「調製」なる用語は、カプセル(capsule)を提供する担体としてカプセル化材料を用いた活性成分の製剤化を含むことを意図しており、活性成分は、担体と共に又は担体を伴わないで、担体によって囲まれ、よってそれと結合している。同様に、カプセル(cachets)とトローチ剤(lozenges)が含まれる。錠剤、粉剤、カプセル剤(capsules)、丸薬、カプセル(cachets)、及びトローチ剤(lozenges)は経口投与に適した固形形態として使用することができる。
【００６５】
座薬の調製では、脂肪酸グリセリド又はココアバターの混合物のような低融点ワックスが最初に融かされ、例えば撹拌によって、活性成分がそこに均一に分散させられる。ついで、溶融された均一な混合物は簡便なサイズの型に注がれ、冷却され、よって固化する。
膣内投与に適した製剤は、適切であることが当該分野で知られているような担体を活性成分に加えて含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、フォーム又はスプレーとして提供されうる。
液体形態調製物は、溶液、懸濁液、及び乳剤、例えば水又は水−プロピレングリコール溶液を含む。例えば、非経口注射液体調製物はポリエチレングリコール水溶液中の溶液として製剤化することができる。
【００６６】
よって、本発明に係る化合物は、非経口投与(例えば注射、例えばボーラス注入又は点滴)用に製剤化され得、アンプルの単位投与形態、前もって満たしたシリンジ、小容量点滴又は保存料添加の複数用量容器の形態で提供されうる。組成物は懸濁液、溶液又は油又は水性ビヒクル中の乳剤のような形態をとり得、懸濁、安定及び／又は分散剤のような製剤化用剤を含みうる。あるいは、活性成分は、適切なビヒクル、例えば無菌で発熱物質不含有の水で使用前に構成するための、滅菌固形物の無菌単離又は溶液からの凍結乾燥によって得られる粉末形態でありうる。
経口用途に適した水溶液は、活性成分を水に溶解させ、必要に応じて適切な着色料、香料、安定及び増粘剤を添加することによって調製できる。
経口用途に適した水性懸濁液は、粘性材料、例えば天然又は合成ガム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、あるいは他のよく知られている懸濁剤を用いて水中に微細に粉砕した活性成分を分散させることによって製造することができる。
【００６７】
また含められるものは、使用する少し前に経口投与のための液体形態調製物に転換されることが意図された固形形態の調製物である。かかる液体形態には、溶液、懸濁液、及び乳剤が含まれる。これらの調製物は、活性成分に加えて、着色料、香料、安定剤、バッファー、人工及び天然甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤等を含みうる。
表皮への局所投与に対しては、本発明に係る化合物は、軟膏、クリーム又はローション、又は経皮パッチとして製剤化されうる。軟膏及びクリームは、例えば適切な増粘及び／又はゲル化剤の添加と共に水性又は油性基剤を用いて製剤化することができる。ローションは、水性又は油性基剤を用いて製剤化することができ、一般には一又は複数の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、又は着色剤を含む。
口内への局所投与に適した製剤には、香味基剤、通常はスクロース及びアカシア又はトラガカントに活性剤を含有するトローチ剤(lozenges)；ゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアカシアのような不活性基剤に活性成分を含有するトローチ(pastilles)；及び適切な液体担体に活性成分を含有する口腔洗浄薬が含まれる。
【００６８】
溶液又は懸濁液は、一般的な手段、例えばスポイト、ピペット又はスプレーを用いて鼻腔に直接適用される。該製剤は単剤又は複数用量形態で提供されうる。スポイト又はピペットの後者の場合、これは、溶液又は懸濁液の適切な前もって定まった容量を投与する患者によって達成されうる。スプレーの場合、これは、例えば計量噴霧スプレーポンプによって達成されうる。経鼻送達及び保持を改善するために、本発明に係る化合物はシクロデキストリンでカプセル化することができ、又は鼻粘膜での送達と保持を亢進することが期待される薬剤と共に製剤化することができる。
気道への投与は、活性成分が適切な噴霧剤、例えばクロロフルオロカーボン(ＣＦＣ)、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、又はジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、又は他の適切なガスを用いた加圧パックとして提供されるエアロゾル製剤によってもまた達成することができる。簡便にはエアロゾルはまたレシチンのような界面活性剤を含んでいてもよい。薬剤の用量は計量弁を設けることによって制御することができる。
【００６９】
あるいは、活性成分は、乾燥粉末、例えば適切な粉末基剤、例えばラクトース、デンプン、デンプン誘導体、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース及びポリビニルピロリドン(ＰＶＰ)中における化合物の粉末混合物の形態で提供されうる。
簡便には、粉末担体は鼻腔中にゲルを形成する。粉末組成物は、単位投薬形態、例えばゼラチンのカプセル又は薬包、又は粉末が吸入器によって投与されうるブリスター包装の形で提供されうる。
鼻腔内製剤を含む気道への投与を意図した製剤において、化合物は、一般に、例えば１から１０ミクロン又はそれ以下のオーダーの小粒子径を有している。かかる粒子径は、当該分野で既知の手段、例えば微粒子化によって得ることができる。
所望される場合、活性成分の徐放をもたらすように適合化された製剤を用いることができる。
【００７０】
特定の実施態様では、薬学的調製物は単位投薬形態である。かかる形態では、調製物は、適切な量の活性成分を含む単位用量に小分けされる。単位投薬形態は、包装が個々の量の調製物を含む包装調製物であり得、例えば小包化錠剤、カプセル、及びバイアル又はアンプル中の粉末である。また、単位投薬形態は、カプセル剤、錠剤、カプセル(cachet)、又はトローチ(lozenge)自体であり得、あるいは包装形態での適切な数のこれらの何れかであり得る。
特定の薬学的組成物は鼻腔内投与のための液体又は粉末、経口投与のための錠剤又はカプセル剤、及び静脈内投与のための液体である。
【００７１】
本発明の幾つかの特定の態様及び実施態様を例示する次の実施例を参照して本発明を以下に記載する。しかしながら、本発明の次の記載の詳細事項は本発明の前の記載の一般性に優先するものではないことは理解されなければならない。
【実施例】
【００７２】
実施例１  ４−フルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニル)ベンゼンスルホンアミド
2010510237.tif 000027
中間体４−フルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニル)ベンゼンスルホンアミドを、合衆国特許出願公開第ＵＳ２００７／００２７１３５号に記載された手順に従って調製した。２５℃にてＤＭＦ(３５ｍＬ)中のメチルビオロゲン塩酸塩(０．５１ｇ)を、ヨウ化トリフルオロメチルで飽和させ、２−フルオロベンゼンチオールａ(５．１ｇ，４．２４ｍＬ)及びＴＥＡ(８．８ｍＬ)で処理し、２２時間撹拌し、水(２４０ｍＬ)で希釈し、ジエチルエーテルで抽出した。抽出物を１ＭのＮａＯＨ、飽和塩化アンモニウム及びブラインで希釈し、濃縮して、５．３３ｇの中間体ｂ(収率６８％)を得た。
【００７３】
２５℃にて１：１：２の四塩化炭素／アセトニトリル／水(３３６ｍＬ)中の中間体ｂ(５．３３ｇ)を、過ヨウ素酸ナトリウム(２３．８６ｇ)及び塩化ルテニウム(ＩＩＩ)水和物(７７ｍｇ)で処理し、１８時間撹拌し、ジクロロメタン(５０ｍＬ)で希釈し、珪藻土(Ｃｅｌｉｔｅ(登録商標))で濾過した。濾液を飽和重炭酸ナトリウムで洗浄しジクロロメタンで抽出した。抽出物をブラインで洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、濾過濃縮した。濃縮物をシリカゲルを通して濾過して６．５２ｇの中間体ｃ(収率７７％)を得た。
１２０℃にてクロロスルホン酸(５．６ｍＬ)中の中間体ｃ(６．４２ｇ)を１８時間撹拌し、２５℃に冷却し、ピペットで砕いた氷上に配した。混合物を酢酸エチルで抽出し、抽出物を水とブラインで洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、濾過濃縮して、５．７１ｇの中間体ｄ(収率６２％)を得た。
−７８℃にてイソプロパノール(１７５ｍＬ)中の中間体ｄ(５．７１ｇ)を水酸化アンモニウム(２４ｍＬ)で１時間かけて処理し、１時間撹拌し、６ＭのＨＣｌ(８８ｍＬ)で反応停止させ、２５℃に温め、濃縮した。濃縮物を水と混合し、酢酸エチルで抽出した。抽出物を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、濾過濃縮した。濃縮物を酢酸エチル／ヘキサンから再結晶化させて４．３３ｇの中間体４−フルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニル)ベンゼンスルホンアミドを得た(収率８０％)。
【００７４】
実施例２  (Ｒ)−４−(４−モルホリノ−１−(フェニルチオ)ブタン−２−イルアミノ)−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
2010510237.tif 000028
蒸留Ｈ２Ｏ中のＮａＯＨ(６Ｍ，５００ｍｌ)の溶液に(Ｒ)−アスパラギン酸ａ(６５ｇ，４８９ｍｍｏｌ)を加えて、０℃における溶液のｐＨを１３に調整した後、１．７当量のクロロギ酸ベンジル(１４１ｇ，８３１ｍｍｏｌ)を磁気撹拌下で加えた。混合物を室温に温め、２日間反応させた。ついで、混合物をエーテルで洗浄し、水性相を６ＮＨＣ１で酸性化した後、ＡｃＯＥｔで抽出した。最後に、有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ペーパーフィルターで濾過し、ロータリエバポレータで濃縮した。無色透明の膠質の残留物の形態で８０ｇの生成物ｂが得られた(収率：５９％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ−Ｈ−)：２６６；１Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ７．２７−７．２１(ｍ，５Ｈ)，６．１４(ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ)，５．０５(ｓ，２Ｈ)，４．６０(ｍ，１Ｈ)，２．９９(ｍ，１Ｈ)，２．７５(ｍ，１Ｈ)。
【００７５】
ＥｔＯＡｃ(５００ｍＬ)中の中間体ｂ(８０ｇ，３００ｍｍｏｌ)の撹拌懸濁液を塩化チオニル(７１ｇ，６００ｍｍｏｌ)を滴下して処理し、得られた均質な混合物を室温で１６時間撹拌し、濃縮した。得られた固形物を２時間かけて１：１ジエチルエーテル／ヘキサン中で粉砕し、濾過した。固形物を乾燥させて所望の生成物ｃ(６０ｇ，収率：８０％)を得た。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：２５０。
ＴＨＦ(１００ｍＬ)中の撹拌懸濁液ＮａＢＨ４(５．８ｇ，１５４ｍｍｏｌ)を０℃まで冷却し、５０ｍＬのＴＨＦ中で化合物ｃ(３２ｇ，１２８ｍｍｏｌ)の溶液を滴下して処理し、放置して室温まで温め、２時間撹拌した。得られた混合物を濃ＨＣｌ(２６．２ｍＬ)及びエタノール(２６．２ｍＬ)で処理し、１２時間加熱して還流させ、室温まで冷却し、ブライン中に注ぎ、層を分離させた。水性層をＥＡで抽出し、組み合わせた抽出物を乾燥させ、濾過し、濃縮し、シリカによって精製して所望の生成物ｄを得た(１７ｇ，収率：５７％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：２３６；１Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ７．３３−７．２８(ｍ，５Ｈ)，５．３２(ｍ，１Ｈ)，５．０９(ｓ，２Ｈ)，４．４９(ｂｒｓ，２Ｈ)，４．２２(ｍ，１Ｈ)，２．８４(ｄｄ，Ｊ＝２５７．６１８Ｈｚ，１Ｈ)，２．４５(ｄｄ，Ｊ＝２．８１７．６Ｈｚ，１Ｈ)。
【００７６】
２００ｍＬのジオキサン中の中間体ｄ(２７ｇ，１１５ｍｍｏｌ)及びモルホリン(２０ｇ，２３０ｍｍｏｌ)の溶液を７０℃で１８時間撹拌し、濃縮し、ＥｔＯＡｃ(５００ｍｌ)を加え、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して油として生成物ｅを得、これを更なる精製なしに次の工程に使用した(３１ｇ，８４％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：３２３；１Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ７．３８−７．３１(ｍ，５Ｈ)，５．８５(ｍ，１Ｈ)，５．１２(ｂｒｓ，２Ｈ)，３．９２(ｍ，１Ｈ)，３．７１−３．４９(ｍ，１０Ｈ)，２．９１(ｍ，１Ｈ)，２．５０(ｍ，１Ｈ)。
無水ＤＣＭ(３００ｍＬ)中の中間体ｅ(２０ｇ，６２ｍｍｏｌ)及びトリエチルアミン(６．９ｇ，６８ｍｍｏｌ)の溶液に、温度を＜１０℃に維持しつつ、塩化メタンスルホニル(７．９ｇ，６８ｍｍｏｌ)(ＤＣＭ中で１：１希釈)を加えた。添加後、反応物を０℃で１時間撹拌した。完了時に、反応を水(５０ｍＬ)で停止させた。水性層を切り、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空下で除去して黄色油として生成物ｆを得、これを精製なしに次の工程に使用した。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：４０１；
【００７７】
無水ＴＨＦ(３００ｍＬ)中のＰｈＳＨ(７．５ｇ，６８ｍｍｏｌ)の溶液に、１時間の間、温度を＜１０℃に維持しつつ、ＮａＨ(２．７ｇ，６８ｍｍｏｌ)を氷水バッチで少しずつ添加した後、中間体ｆの溶液を滴下して加え、反応物を室温で更に１．５時間撹拌した。完了時に、反応を水(１００ｍＬ)及びＥｔＯＡｃ(２００ｍＬ)で停止させた。水性層を切り、有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空下で除去して粗生成物を得、これをカラムで精製して１２ｇの所望の中間体ｇを得た(収率：４７％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：４１５。
酢酸(４０ｍｌ)中３０％のＨＢｒ中の中間体ｇ(４ｇ，９．７ｍｍｏｌ)の溶液を室温で２４時間撹拌し、その体積の半分まで濃縮し、１ＭのＨＣｌ(４０ｍｌ)中に注いだ。組み合わせた水性層をエーテル(３×５０ｍＬ)で洗浄し、０℃まで冷却し、固形ＫＯＨで１２に調整し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。組み合わせた抽出物をブラインで洗浄し、乾燥(Ｎａ２ＳＯ４)させ、濾過濃縮して、所望の生成物ｈを得た(２．５ｇ，収率：９３％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：２８１；１ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ７．３１(ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ)，７．２１(ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ)，７．１２(ｔ，Ｊ２５＝７．６Ｈｚ，１Ｈ)，３．５８−３．５０(ｍ，６Ｈ)，３．３８−３．３０(ｍ，３Ｈ)，３．０５(ｍ，１Ｈ)，２．８７(ｍ，１Ｈ)，２．５０(ｍ，１Ｈ)，２．２８(ｍ，１Ｈ)。
【００７８】
１００ｍｌのジオキサン中の中間体ｈ(２．５ｇ，８．９ｍｍｏｌ)及び中間体ｉ(１．９６ｇ，８．９ｍｍｏｌ)の溶液をＥｔ３Ｎ(１．８ｇ，１７．８ｍｍｏｌ)で処理し、一晩加熱して還流させ、濃縮し、ＰＥ：ＥＡ＝(１：１)で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、所望の生成物ｊ(３．６ｇ，収率：８４％)を得た。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：４８１；１Ｈ−ＮＭＲ(ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ)：δ８．６６(ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ)，８．３５(ｓ，１Ｈ)，７．６９(ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ)，７．４１−７．２１(ｍ，５Ｈ)，７．１５(ｍ，１Ｈ)，７．０５(ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ)，４．３９(ｍ，１Ｈ)，３．５２−３．３６(ｍ，１０Ｈ)，２．９６(ｍ，１Ｈ)，２．７６(ｍ，１Ｈ)。
１００ｍＬの無水ＴＨＦ中の中間体ｊ(２．０ｇ，４．２ｍｍｏｌ)の溶液を５５℃まで加熱し、ＴＨＦ中に１Ｍのボラン(１９ｍＬ)の溶液を１時間かけて滴下して処理した。得られた反応混合物を５５℃で１８時間撹拌し、０℃まで冷却し、メタノールで滴下処理し、濃縮した。粗残留物をメタノールに溶解させ、メタノール性ＨＣｌで処理し、加熱して２４時間還流させた。混合物を室温まで冷却させ、濃縮し、２ＭのＮａＯＨで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。組み合わせた抽出物を１ＭのＮａＯＨ及びブラインで洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝(１０：１)で溶離するシリカクロマトグラフィーによって精製して、所望の中間体(Ｒ)−４−(４−モルホリノ−１−(フェニルチオ)ブタン−２−イルアミノ)−３−ニトロベンゼンスルホンアミドを得た(１．３ｇ，収率：６６％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：４６７；１Ｈ−ＮＭＲ(ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ)：δ８．３８(ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ)，８．３７(ｓ，１Ｈ)，７．６８(ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ)，７．２９−７．２６(ｍ，３Ｈ)，７．２３(ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ)，７．１６(ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ)，７．０９(ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ)，４．１３(ｍ，１Ｈ)，３．４８(ｂｒｓ，４Ｈ)，３．３６(ｍ，２Ｈ)，２．４３(ｂｒｓ，４Ｈ)，２．１８(ｂｒｓ，２Ｈ)，２．４９(ｍ，２Ｈ)，１．９３(ｍ，１Ｈ)，１．８２(ｍ，１Ｈ)。
【００７９】
実施例３  (Ｒ)−４−(４−(ジメチルアミノ)−１−(フェニルチオ)ブタン−２−イルアミノ)−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
2010510237.tif 000029
蒸留Ｈ２Ｏ中のＮａＯＨ(６Ｍ，５００ｍｌ)の溶液に(Ｒ)−アスパラギン酸ａ(６５ｇ，４８９ｍｍｏｌ)を加えて、０℃における溶液のｐＨを１３に調整した後、１．７当量のクロロギ酸ベンジル(１４１ｇ，８３１ｍｍｏｌ)を磁気撹拌下で加えた。混合物を室温に温め、２日間反応させた。ついで、混合物をエーテルで洗浄し、水性相を６ＮのＨＣ１で酸性化した後、ＡｃＯＥｔで抽出した。最後に、有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ペーパーフィルターで濾過し、ロータリエバポレータで濃縮した。無色透明の膠質の残留物の形態で８０ｇの生成物ｂが得られた(収率：５９％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ−Ｈ−)：２６６；１Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ７．２７−７．２１(ｍ，５Ｈ)，６．１４(ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ)，５．０５(ｓ，２Ｈ)，４．６０(ｍ，１Ｈ)，２．９９(ｍ，１Ｈ)，２．７５(ｍ，１Ｈ)。
ＥｔＯＡｃ(５００ｍＬ)中の化合物ｂ(８０ｇ，３００ｍｍｏｌ)の撹拌懸濁液を塩化チオニル(７１ｇ，６００ｍｍｏｌ)を滴下して処理し、得られた均質な混合物を室温で１６時間撹拌し、濃縮した。得られた固形物を２時間かけて１：１ジエチルエーテル／ヘキサン中で粉砕し、濾過した。固形物を乾燥させて所望の生成物ｃ(６０ｇ，収率：８０％)を得た。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：２５０。
【００８０】
ＴＨＦ(１００ｍＬ)中の撹拌懸濁液ＮａＢＨ４(５．８ｇ，１５４ｍｍｏｌ)を０℃まで冷却し、５０ｍＬのＴＨＦ中で化合物ｃ(３２ｇ，１２８ｍｍｏｌ)の溶液を滴下して処理し、放置して室温まで温め、２時間撹拌した。得られた混合物を濃ＨＣｌ(２６．２ｍＬ)及びエタノール(２６．２ｍＬ)で処理し、１２時間加熱して還流させ、室温まで冷却し、ブライン中に注ぎ、層を分離させた。水性層をＥＡで抽出し、組み合わせた抽出物を乾燥させ、濾過し、濃縮し、シリカによって精製して所望の生成物ｄを得た(１７ｇ，収率：５７％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：２３６；１Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ７．３３−７．２８(ｍ，５Ｈ)，５．３２(ｍ，１Ｈ)，５．０９(ｓ，２Ｈ)，４．４９(ｂｒｓ，２Ｈ)，４．２２(ｍ，１Ｈ)，２．８４(ｄｄ，Ｊ＝２５７．６１８Ｈｚ，１Ｈ)，２．４５(ｄｄ，Ｊ＝２．８１７．６Ｈｚ，１Ｈ)。
２００ｍＬのジオキサン中の化合物ｅ(３０ｇ，１２７ｍｍｏｌ)及びＭｅ２ＮＨ(過剰)ｍｍｏｌ)の溶液を０℃で２４時間撹拌し、濃縮し、ＥｔＯＡｃ(５００ｍｌ)を加え、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた油ｅを更なる精製なしに次の工程のために向けた(３２ｇ，９０％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ５(Ｍ＋Ｈ＋)：２８１；１Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ７．３５−７．２７(ｍ，５Ｈ)，５．８９(ｍ，１Ｈ)，５．０９(ｓ，２Ｈ)，３．９７(ｍ，１Ｈ)，３．７８−３．６７(ｍ，２Ｈ)，２．７７−２．６２(ｍ，２Ｈ)。
【００８１】
無水ＤＣＭ(３００ｍＬ)中の化合物ｅ(２０ｇ，７１ｍｍｏｌ)及びトリエチルアミン(７．９ｇ，７８ｍｍｏｌ)の溶液に、温度を＜１０℃に維持しつつ、塩化メタンスルホニル(８．９ｇ，７８ｍｍｏｌ)(ＤＣＭ中で１：１希釈)を加えた。添加後、反応物を０℃で１時間撹拌した。完了時に、反応を水(５０ｍＬ)で停止させた。水性層を切り、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空下で除去して黄色油として生成物ｆを得、これを精製なしに次の工程に使用した。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：３５９。
無水ＴＨＦ(３００ｍＬ)中のＰｈＳＨ(８．６ｇ，７８ｍｍｏｌ)の溶液に、１時間の間、温度を＜１０℃に維持しつつ、ＮａＨ(３．１ｇ，７８ｍｍｏｌ)を氷水バッチで添加した後、化合物ｆの溶液を滴下して加え、反応物を室温で更に１．５時間撹拌した。完了時に、反応を水(１００ｍＬ)及びＥｔＯＡｃ(２００ｍＬ)で停止させた。水性層を切り、有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を真空下で除去して生成物ｇをカラムで精製した(１４ｇ，収率：４８％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：３７３；１Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ７．３３−７．１０(ｍ，１０Ｈ)，６．１９(ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ)，５．０１(ｓ，２Ｈ)，３．９７(ｍ，１Ｈ)，３．７０(ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，３Ｈ)，３．５６(ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，３Ｈ)，３．２８(ｍ，１Ｈ)，３．１４(ｍ，１Ｈ)，２５２．８１(ｍ，１Ｈ)，２．４５(ｍ，１Ｈ)。
【００８２】
酢酸(４０ｍｌ)中３０％のＨＢｒ中の化合物ｇ(４ｇ，１１ｍｍｏｌ)の溶液を室温で２４時間撹拌し、その体積の半分まで濃縮し、１ＭのＨＣｌ(４０ｍｌ)中に注いだ。組み合わせた水性層をエーテル(３×５０ｍＬ)で洗浄し、０℃まで冷却し、固形ＫＯＨで１２に調整し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。組み合わせた抽出物をブラインで洗浄し、乾燥(Ｎａ２ＳＯ４)させ、濾過濃縮して、所望の生成物ｈを得た(１．８ｇ，収率：７２％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：２３９；１Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ７．３０(ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ)，７．２１(ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ)，７．３０(ｔ，Ｊ＝７．６３７Ｈｚ，１Ｈ)，３．３６(ｍ，１Ｈ)，３．０４(ｍ，１Ｈ)，２．８５(ｍ，１Ｈ)，２．８８(ｓ，３Ｈ)，２．８３(ｓ，３Ｈ)，２．５１(ｍ，１Ｈ)，２．３０(ｍ，１Ｈ)。
ジオキサン中の化合物ｈ(１．８ｇ，７．６ｍｍｏｌ)及び化合物ｉ(１．７ｇ，７．６ｍｍｏｌ)の溶液をＥｔ３Ｎ(１．５ｇ，１５．２ｍｍｏｌ)で処理し、一晩加熱して還流させ、濃縮し、ＰＥ：ＥＡ＝(１：１)で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、所望の生成物ｊ(２．３ｇ，収率：７６％)を得た。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：４３９；１Ｈ−ＮＭＲ(ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ)：δ８．７４(ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ)，８．３５(ｓ，１Ｈ)，７．６７(ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ)，７．４１−７．０４(ｍ，７Ｈ)，４．３６(ｍ，１Ｈ)，３．３６(ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ)，３．１５(ｍ，１Ｈ)，２．９５(ｍ，１Ｈ)，１０２．８６(ｓ，３Ｈ)，２．７６(ｓ，３Ｈ)，２．７３(ｍ，１Ｈ)。
【００８３】
１００ｍＬの無水ＴＨＦ中の化合物ｊ(２．５ｇ，５．７ｍｍｏｌ)の溶液を５５℃まで加熱し、ＴＨＦ中に１Ｍのボラン(２５ｍＬ)の溶液を１時間かけて滴下して処理した。得られた反応混合物を５５℃で１８時間撹拌し、０℃まで冷却し、メタノールで滴下処理し、濃縮した。粗残留物をメタノールに溶解させ、メタノール性ＨＣｌで処理し、加熱して２４時間還流させた。混合物を室温まで冷却させ、濃縮し、２ＭのＮａＯＨで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。組み合わせた抽出物を１ＭのＮａＯＨ及びブラインで洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝(１０：１)で溶離するシリカクロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物(Ｒ)−４−(４−(ジメチルアミノ)−１−(フェニルチオ)ブタン−２−イルアミノ)−３−ニトロベンゼンスルホンアミド(１．２ｇ，収率：４６％)。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：４２５；１Ｈ−ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ)：δ９．０５(ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ)，８．６７(ｓ，１Ｈ)，７．７２(ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ)，７．３８−７．３６(ｍ，２Ｈ)，７．３０−７．２１(ｍ，３Ｈ)，６．７２(ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ)，７．３８−７．３６(ｍ，２Ｈ)，４．００(ｍ，１Ｈ)，３．１４(ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ)，２．４９(ｍ，１Ｈ)，２．３２２５(ｍ，１Ｈ)，２．０５(ｍ，１Ｈ)，１．８４(ｍ，１Ｈ)。
【００８４】
実施例４  ４−((Ｒ)−３−モルホリン−４−イル−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼンスルホンアミド
2010510237.tif 000030
ジオキサン中のスルホンアミドａ(１．６３ｍｍｏｌ)、アミンｂ(１．６３ｍｍｏｌ)及びジイソプロピルエチルアミン(３．２６ｍｍｏｌ)を５０℃で４時間攪拌した。混合物を１０％の炭酸水素ナトリウム溶液(３０ｍｌ)で処理し、ついで水溶液を酢酸エチル(２×２０ｍｌ)で抽出した。有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮した。得られた残留物を、１００％ジクロロメタンから５％メタノール／ジクロロメタンで溶離するシリカクロマトグラフィー勾配にかけて、４−((Ｒ)−３−モルホリン−４−イル−３−オキソ−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼンスルホンアミドｃを白色固形物として得た(７７％)。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ)δ７．９７(１Ｈ，ｄ，Ｊ２．２Ｈｚ)，７．８３(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ９．２及び２．２Ｈｚ)，７．３９−７．２７(７Ｈ，ｍ，ＡｒＨ)，７．２１(１Ｈ，ｔｔ，Ｊ６．８及び１．６５Ｈｚ)，７．００(１Ｈ，ｂｄ，Ｊ９．５Ｈｚ)，４．３８−４．２５(１Ｈ，ｍ)，３．４０−３．２７(２Ｈ，ｍ)，３．５０−３．３７(１０Ｈ，ｍ)，２．９４(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１６．８及び５．８Ｈｚ)，２．７１(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１６．８及び５．１Ｈｚ)。ＬＣＭＳ−ｒｔ７．１７，Ｍ＋Ｈ５６８。
【００８５】
窒素雰囲気下で室温にてテトラヒドロフラン(１０ｍｌ)中のアミド中間体ｃ(１．２４ｍｍｏｌ)に２時間かけて滴下してボランテトラヒドロフラン錯体(４．２１ｍｍｏｌ)を加えた。ついで溶液を５５℃で２４時間攪拌した。溶液を０℃まで冷却し、メタノール(２ｍｌ)で処理した。この混合物に濃塩酸(０．５ｍｌ)を加え、溶液を６５℃で１０時間加熱した。ついで、溶液を真空濃縮し、２Ｎの水酸化ナトリウム溶液(１０ｍｌ)に注いだ。ついで、水性層を酢酸エチル(２×１０ｍｌ)で抽出し、有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮した。得られた残留物を、１００％ジクロロメタンから１０％メタノール／ジクロロメタンで溶離するシリカクロマトグラフィー勾配に適用して、中間体４−((Ｒ)−３−モルホリン−４−イル−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼンスルホンアミド、４−((Ｒ)−３−モルホリン−４−イル−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼンスルホンアミドを白色固形物(７６％)として得た。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ)δ７．９７(１Ｈ，ｄ，Ｊ２．２Ｈｚ)，７．８３(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ９．２及び２．３Ｈｚ)，７．３５−７．２６(６Ｈ，ｍ，ＡｒＨ)，７．２０(１Ｈ，ｔｔ，Ｊ７．０及び１．８Ｈｚ)，７．０４(１Ｈ，ｄ，Ｊ９．６Ｈｚ)，６．８９(１Ｈ，ｂｄ，Ｊ９．１Ｈｚ)，４．１２−４．０２(１Ｈ，ｍ)，３．４９(４Ｈ，ｂｓ)，３．３７−３．２２(２Ｈ，ｍ)，２．３３−２．１４(６Ｈ，ｍ)，１．９４−１．８８(１Ｈ，ｍ)，１．７６−１．７０(１Ｈ，ｍ)。ＬＣＭＳ−ｒｔ−５．６９，Ｍ＋Ｈ５５４。
【００８６】
実施例５  ４−((Ｒ)−３−ジメチルアミノ−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼンスルホンアミド
2010510237.tif 000031
ジオキサン中のスルホンアミドａ(１．６３ｍｍｏｌ)、アミンｂ(１．６３ｍｍｏｌ)及びジイソプロピルエチルアミン(３．２６ｍｍｏｌ)を５０℃で４時間攪拌した。混合物を１０％の炭酸水素ナトリウム溶液(３０ｍｌ)で処理し、ついで水溶液を酢酸エチル(２×２０ｍｌ)で抽出した。有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮した。得られた残留物を、１００％ジクロロメタンから５％メタノール／ジクロロメタンで溶離するシリカクロマトグラフィー勾配にかけて、ｃ(Ｒ)−Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−フェニルスルファニル−３−(４−スルファモイル−２−トリフルオロメタンスルホニルフェニルアミノ)−ブチルアミドを白色発泡物として得た(８４％)。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ)δ７．９７(１Ｈ，ｄ，Ｊ２．２Ｈｚ)，７．８３(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ９．２及び２．２Ｈｚ)，７．４７(１Ｈ，ｂｄ，Ｊ８．７Ｈｚ)，７．３７−７．３０(６Ｈ，ｍ，ＡｒＨ)，７．２１(１Ｈ，ｔｔ，Ｊ６．８及び１．６５Ｈｚ)，６．９９(１Ｈ，ｂｄ，Ｊ９．５Ｈｚ)，４．３８−４．２５(１Ｈ，ｍ)，３．４０−３．２７(２Ｈ，ｍ)，２．９１(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１７．２及び５．６Ｈｚ)，２．８６(３Ｈ，ｓ)，２．７６(３Ｈ，ｓ)，２．６８(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１６．７及び５．０Ｈｚ)。ＬＣＭＳ−ｒｔ−７．２４，Ｍ＋Ｈ５２６。
【００８７】
窒素雰囲気下で室温にてテトラヒドロフラン(１０ｍｌ)中の中間体ｃ(１．２４ｍｍｏｌ)に２時間かけて滴下してボランテトラヒドロフラン錯体(４．２１ｍｍｏｌ)を加えた。ついで溶液を５５℃で２４時間攪拌した。溶液を０℃まで冷却し、メタノール(２ｍｌ)で処理した。この混合物に濃塩酸(０．５ｍｌ)を加え、溶液を６５℃で１０時間加熱した。ついで、溶液を真空濃縮し、２Ｎの水酸化ナトリウム溶液(１０ｍｌ)に注いだ。ついで、水性層を酢酸エチル(２×１０ｍｌ)で抽出し、有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮した。得られた残留物を、１００％ジクロロメタンから１０％メタノール／ジクロロメタンで溶離するシリカクロマトグラフィー勾配に適用して、４−((Ｒ)−３−ジメチルアミノ−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼンスルホンアミドを無色の油として得た(６７％)。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ)δ７．９７(１Ｈ，ｄ，Ｊ２．２Ｈｚ)，７．８１(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ９．３及び２．２Ｈｚ)，７．４０−７．２６(７Ｈ，ｍ，ＡｒＨ)，７．２１(１Ｈ，ｔｔ，Ｊ６．８及び１．６５Ｈｚ)，６．９７(１Ｈ，ｂｄ，Ｊ９．５Ｈｚ)，４．０７−４．００(１Ｈ，ｍ)，３．３２(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１３．８及び６．１Ｈｚ)，３．２２(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１３．８及び６．４Ｈｚ)，２．４２−２．３３(１Ｈ，ｍ)，２．１９−２．０７(１Ｈ，ｍ)，１．９２−１．８５(１Ｈ，ｍ)，１．７７−１．７０(１Ｈ，ｍ)。ＬＣＭＳ−ｒｔ−５．６８，Ｍ＋Ｈ５１２。
【００８８】
実施例６  ７−(ピペラジン−１−イル)キナゾリン−４−オール
2010510237.tif 000032
ＤＭＳＯ(６０ｍｌ)中の２，４−ジニトロベンゾニトリル(１０ｇ)及びＢｏｃ−ピペラジン(２０ｇ，約２当量)を室温で３日間攪拌した。ついで、暗褐色の反応混合物を酢酸エチル(約４００ｍｌ)と水(約２×１００ｍＬ)の間で分配した[注意−生成物が有機層から結晶化してしまうのを防止するために加温がしばしば必要になる]。分離され乾燥された有機層を濃縮し、残留物をエーテルで粉砕し、濾過して深黄色粉末として中間体ｂ(第一回目の捕集８ｇ，収率４７％)を得た。第二の捕集は、幾らかの蒸発が起こった後の静置の際にエーテルの酢酸エチル上清から得た(第二捕集１．７ｇ，１０％)。
中間体ｂ(３ｇ)を６０度で急速攪拌して酢酸(２０ｍｌ)中の鉄粉末(２ｇ)を使用してアニリンｃに還元した。反応混合物を酢酸エチル(約６０ｍｌ)で希釈し、セライトを通して２回濾過し、酢酸を、約６Ｍの水性ＮａＯＨを使用する塩基洗浄で除去した。洗浄した有機層を分離し、乾燥させ、濃縮して、淡黄色粉末として中間体ｃ(収率５２−７２％)を得た。
【００８９】
１２０度にてＭｅＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ(１０ｍｌ)中の中間体ｃ(１．５ｇ)を酢酸ホルムアミジンで少しずつ(１時間の間に４×２．５当量)処理し、全体を更に６時間加熱し、その間に反応混合物は生成物形成のために不均一になった。室温で一晩静置した後、反応混合物をエーテル(約４０ｍＬ)と共に振揺し、濾過し、濾過ケーキをエーテルで更に洗浄し、ついで水(約４０ｍｌ)を用いてスラリー化し、再度濾過して無色粉末として中間体ｄを得た(約ｌ．ｌｇ，６９％)。静置後、有機層の蒸発後の濾液から粗生成物を更に得た(約２２％)。
ついで、中間体ｄ(４ｍｍｏｌ)を、急速に攪拌しながら[注意−激しい沸騰が発生した]約６Ｍの水性ＨＢｒ(約５−６ｍＬ)に加え、最初にＢｏｃ基を除去して中間体Ｖを得た。蓋付き容器中で更に攪拌し、３時間の間１３０℃で加熱することによって、熱い反応混合物を熱いメタノールに加え、全体を一晩冷却し濾過した後[注意−急速に冷却し過ぎると扱い難いゲルを生じる]、加水分解産物７−(ピペラジン−１−イル)キナゾリン−４−オール二臭素酸塩が無色の針状物(９７％)として得られた。Ｍ＋２３１。
【００９０】
実施例７  ２−ブロモメチル−４’−クロロ−ビフェニル
2010510237.tif 000033
アセトン／水(２５ｍｌ／２５ｍｌ)中の２−ブロモベンズアルデヒドａ(１９ｍｍｏｌ)、４−クロロフェニルボロン酸ｂ(１９ｍｍｏｌ)、ヨウ化テトラブチルアンモニウム(０．１９ｍｍｏｌ)、炭酸カリウム(５７ｍｍｏｌ)及び酢酸パラジウムを４０℃で３０分攪拌した。混合物を酢酸エチルと水との間で分配し、層を分離した。有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮した。得られた残留物を、１００％石油エーテルから５％酢酸エチル／石油エーテルで溶離するシリカクロマトグラフィー勾配に適用して中間体ｃの４’−クロロ−ビフェニル−２−カルバルデヒドを無色の油(７６％)として得た。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ９．９６(１Ｈ，ｓ)，８．０２(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ７．８及び１．０Ｈｚ)，７．６４−７．３０(７Ｈ，ｍ，ＡｒＨ)。
【００９１】
テトラヒドロフランとエタノールの混合物(７．５ｍｌ／７．５ｍｌ)中のアルデヒド(２．３ｍｍｏｌ)の混合物に室温で水素化ホウ素ナトリウム(１１．５ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を３０分攪拌し、ついで冷水を添加して反応を停止させた。ｐＨをｐＨ５−６に調整し、溶液を１５分攪拌した。ジエチルエーテル(２０ｍｌ)を溶液に添加し、ついで層を分離した。水溶液をジエチルエーテル(２０ｍｌ)で一回抽出した。組み合わせた有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮して、中間体ｄ４’−クロロ−ビフェニル−２−イル)−メタノールを無色の油(９５％)として得た。該化合物は更なる精製なしに次工程で使用するのに十分な純度であった。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ)δ７．５６−７．１８(８Ｈ，ｍ，ＡｒＨ)５．１(１Ｈ，ｂｓ，ＯＨ)及び４．３６(２Ｈ，ｓ，ＡｒＣＨ２)。
０℃にて無水ジクロロメタン(４０ｍｌ)中のアルコールｄ(４．６ｍｍｏｌ)の溶液にジクロロメタン(１０ｍｌ)中の三臭化リン(４．６ｍｍｏｌ)をゆっくり添加した。溶液を０℃で１時間攪拌し、ついで冷水を添加して反応を停止させた。層を分離し、ついで水性層をジクロロメタン(２０ｍｌ)で抽出した。組み合わせた有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮した。更なる乾燥により、中間体２−ブロモメチル−４’−クロロビフェニルが白色固形物(８０％)として得られた。該化合物は更なる精製なしに次工程で使用するのに十分な純度であった。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ７．５６−７．２３(８Ｈ，ｍ，ＡｒＨ)及び４．４４(２Ｈ，ｓ，ＡｒＣＨ２)。
【００９２】
実施例８  １−(２−(ブロモメチル)−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル)−４−クロロベンゼン
2010510237.tif 000034
無水ＴＨＦ(４００ｍｌ)中の２１ｇの炭酸ジメチル(０．２３ｍｏｌ)の溶液に０℃で水素化ナトリウム(９．６ｇ，０．２４ｍｏｌ)を少しずつ加えた。得られた混合物を０℃で３０分攪拌し、ついでＴＨＦ(１００ｍｌ)中の化合物ａ(７９ｍｍｏｌ)の１０ｇの溶液を３０分かけて滴下して加えた。得られた混合物を、室温に冷却する前に３時間６０℃−８０℃に加熱した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液に注ぎ、エーテルで抽出した。有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、２５ｇの中間体ｂ５，５−ジメチル−２−オキソシクロヘキサンカルボン酸メチル(収率：８４％)を得た。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：１８５。
【００９３】
無水ＤＣＭ(１００ｍｌ)中のｂ(１０ｇ，５４ｍｍｏｌ)の溶液に０℃で水素化ナトリウム(６．６ｇ，０．１６ｍｏｌ)を少しずつ加えた。得られた混合物を０℃で３０分攪拌し、ついで−７８℃まで冷却した。４６．６ｇのトリフルオロメタンスルホン酸無水物を１時間かけて滴下してスラリーに添加した。得られた混合物を室温まで温め、一晩攪拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液に注ぎ、ＤＣＭで抽出した。有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをカラムによって精製して９．５ｇの中間体ｃ５，５−ジメチル−２−(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)シクロヘキサ−１−エン−カルボン酸メチル(収率：５５％)を得た。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：３１７。
２：１ＤＭＥ／メタノール(１００ｍｌ)中の化合物ｃ(５．１ｇ，１６ｍｍｏｌ)、化合物ｄ(３．０ｇ，１９ｍｍｏｌ)、フッ化セシウム(６．１ｇ，４０ｍｍｏｌ)及びテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(０)(０．８ｍｍｏｌ)の混合物をＮ２雰囲気下で一晩７０℃に加熱した。混合物をセライトで濾過し、濃縮して粗生成物を得、これをカラムによって精製して４ｇの中間体ｅ２−(４−クロロフェニル)−５，５−ジメチルシクロヘキサ−１−エンカルボン酸メチル(収率：８９％)を得た。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：２７９。
【００９４】
エーテル(１００ｍｌ)中のＬｉＡｌＨ４(０．９５ｇ，２５ｍｍｏｌ)の懸濁液に−１０℃で３０分かけて中間体ｅ(２．７９ｇ，１０ｍｍｏｌ)を加えた。得られた混合物を−１０℃〜０℃で１時間３０分攪拌した。ついで、反応混合物を１ｍｌの水と１ｍｌの１０％ＮａＯＨ水溶液で０℃で反応停止させた。得られた混合物を濾過し、濾液をエーテルで希釈し、ついでエーテル層洗浄を水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して２．３ｇの中間体ｆ(２−(４−クロロフェニル)−５，５−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル)メタノール(収率：９５％)を得た。ＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｅ(Ｍ＋Ｈ＋)：２５１／２３３．１Ｈ−ＮＭＲ(ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ)：δ７．３５(ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ)，７．２０(ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ)，４．５２(ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ)，３．６７(ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ)，２．２１(ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ)，１．９２(ｓ，２Ｈ)，１．４０(ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ)，０．９４(ｓ，６Ｈ)。
ジクロロメタン(１０ｍｌ)中の三臭化リン(４．６ｍｍｏｌ)を、０℃でジクロロメタン(４０ｍｌ)中の中間体ｆ(４．６ｍｍｏｌ)の溶液にゆっくりと添加した。溶液を０℃で１時間攪拌し、ついで冷水を添加して反応を停止させた。層を分離し、ついで水性層をジクロロメタン(２０ｍｌ)で抽出した。組み合わせた有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮して、無色の油として１−(２−ブロモメチル−４，４−ジメチル−シクロヘキサ−１−エニル)−４−クロロ−ベンゼンを得た(９５％)。該化合物は更なる精製なしに次工程で使用するのに十分な純度であった。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ７．２６(４Ｈ，ｑ，Ｊ１７．２Ｈｚ)，３．８３(２Ｈ，ｓ)，２．３１−２．２７(２Ｈ，ｍ)，２．０９(３Ｈ，ｔ，Ｊ２．１Ｈｚ)，１．４９(２Ｈ，ｔ，Ｊ６．５Ｈｚ)及び１．０１(６Ｈ，ｓ)。
【００９５】
実施例９  ４−クロロ−７−[４−(４’−クロロ−ビフェニル−２−イルメチル)−ピペラジン−１−イル]−キナゾリン
2010510237.tif 000035
ジイソプロピルエチルアミン(２．５５ｍｍｏｌ)を、Ｎ，Ｎ−ｄｉメチルホルムアミド(１０ｍｌ)中のキナゾリノンｂ(１．２８ｍｍｏｌ)の攪拌溶液に添加した。この溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(４ｍｌ)中の臭化物中間体ａ(１．２８ｍｍｏｌ)を３０分かけて滴下して加えた。溶液を室温で２０時間攪拌した。１０％炭酸水素ナトリウム(５０ｍｌ)の溶液を攪拌溶液に加えた。得られた沈殿物を濾過し、真空オーブン中で乾燥させて、中間体ｃ７−[４−(４’−クロロ−ビフェニル−２−イルメチル)−ピペラジン−１−イル]−キナゾリン−４−オールを白色固形物(８０％)として得た。該化合物は更なる精製なしに次工程で使用するのに十分な純度であった。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ)δ７．９２(１Ｈ，ｓ)，７．８６(１Ｈ，ｄ，Ｊ９．０Ｈｚ)７．５２−７．３４(７Ｈ，ｍ)，７．２３(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ６．９及び１．９Ｈｚ)，７．１１(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ９．０及び２．２Ｈｚ)，６．８８(１Ｈ，ｄ，Ｊ２．３Ｈｚ)，３．３８(２Ｈ，ｓ)，３．２５(４Ｈ，ｂｓ)及び２．４１(４Ｈ，ｂｓ)。ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．５．７７，Ｍ＋Ｈ４３１。
【００９６】
窒素雰囲気下で７０℃にて、１，２−ジクロロエタン(３０ｍｌ)中のキナゾリノンｃ(１．１６ｍｍｏｌ)の攪拌溶液に、１，２−ジクロロエタン(２ｍｌ)中の塩化リン(０．５ｍｌ)及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(０．０５８ｍｍｏｌ)の溶液を１５分かけて滴下して加えた。更なる塩化リンを、更に１時間かけて１５分の増分(１ｍｌ)で添加した。該溶液を７０℃で２０時間攪拌した。ついで、溶液を真空濃縮して乾固させ、ついで１０％の炭酸水素ナトリウム(４０ｍｌ)及びジクロロメタン(４０ｍｌ)の溶液で希釈した。層を分離し、有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮した。ついで、得られた残留物を、１００％ジクロロメタンから０．５％メタノール／ジクロロメタンで溶離するアルミナカラムクロマトグラフィー勾配に適用して、４−クロロ−７−[４−(４’−クロロ−ビフェニル−２−イルメチル)−ピペラジン−１−イル]−キナゾリンを黄色発泡体として得た(５５％)。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ８．８０(１Ｈ，ｓ)，８．０２(１Ｈ，ｄ，Ｊ９．４Ｈｚ)７．３７−７．２４(７Ｈ，ｍ)，７．１２(１Ｈ，ｄ，Ｊ２．５Ｈｚ)，３．４５(６Ｈ，ｂｓ)，２．５５(４Ｈ，ｓ)。ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．３．６７，Ｍ＋Ｈ４４９。
【００９７】
実施例１０  ４−クロロ−７−(４−((２−(４−クロロフェニル)−５，５−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル)メチル)ピペラジン−１−イル)キナゾリン
2010510237.tif 000036
ジイソプロピルエチルアミン(２．５５ｍｍｏｌ)を、Ｎ，Ｎ−ｄｉメチルホルムアミド(１０ｍｌ)中のキナゾリノンｂ(１．２８ｍｍｏｌ)の攪拌溶液に添加した。この溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(４ｍｌ)中の臭化物中間体ａ(１．２８ｍｍｏｌ)を３０分かけて滴下して加えた。溶液を室温で２０時間攪拌した。１０％炭酸水素ナトリウム(５０ｍｌ)の溶液を攪拌溶液に加えた。得られた沈殿物を濾過し、真空オーブン中で乾燥させて、中間体ｃを白色固形物(８０％)として得た。該化合物は更なる精製なしに次工程で使用するのに十分な純度であった。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ)δ７．９２(１Ｈ，ｓ)，７．８３(１Ｈ，ｄ，Ｊ９．０Ｈｚ)７．３６(２Ｈ，ｄ，Ｊ６．５Ｈｚ)，７．１５(２Ｈ，ｄ，Ｊ６．５Ｈｚ)，７．０６(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ９．０及び２．４Ｈｚ)，６．８２(１Ｈ，ｄ，Ｊ２．３Ｈｚ)，３．２５(４Ｈ，ｂｓ)，２．７４(２Ｈ，ｂｓ)，２．２７−２．２１(６Ｈ，ｍ)，１．９８(２Ｈ，ｓ)，１．４２(２Ｈ，ｔ，Ｊ６．４Ｈｚ)及び０．９６(６Ｈ，ｓ)。ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．５．９５，Ｍ＋Ｈ４６３。
【００９８】
窒素雰囲気下で７０℃にて、１，２−ジクロロエタン(３０ｍｌ)中のキナゾリノンｃ(１．１６ｍｍｏｌ)の攪拌溶液に、１，２−ジクロロエタン(２ｍｌ)中の塩化リン(０．５ｍｌ)及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(０．０５８ｍｍｏｌ)の溶液を１５分かけて滴下して加えた。更なる塩化リンを、更に１時間かけて１５分の増分(１ｍｌ)で添加した。該溶液を７０℃で２０時間攪拌した。ついで、溶液を真空濃縮して乾固させ、ついで１０％の炭酸水素ナトリウム(４０ｍｌ)及びジクロロメタン(４０ｍｌ)の溶液で希釈した。層を分離し、有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮した。ついで、得られた残留物を、１００％ジクロロメタンから０．５％メタノール／ジクロロメタンで溶離するアルミナカラムクロマトグラフィー勾配に適用して、４−クロロ−７−(４−((２−(４−クロロフェニル)−５，５−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル)メチル)ピペラジン−１−イル)キナゾリンを黄色発泡体として得た(５８％)。ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．６．４１，Ｍ＋Ｈ４６３。
【００９９】
実施例１１  化合物１  Ｎ−｛７−[４−(４’−クロロ−ビフェニル−２−イルメチル)−ピペラジン−１−５−イル]−キナゾリン−４−イル｝−４−((Ｒ)−３−ジメチルアミノ−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−ニトロ−ベンゼンスルホンアミド
2010510237.tif 000037
ジオキサン(４ｍｌ)中のクロロキナゾリンａ(０．２２ｍｍｏｌ)、スルホンアミドｂ(０．２２ｍｍｏｌ)、炭酸セシウム(０．３１ｍｍｏｌ)、パラジウムテトラキス(トリフェニルホスフィン)(０．０１５ｍｍｏｌ)、ヨウ化銅(０．０３ｍｍｏｌ)の溶液を、４５分間のマイクロ波照射(３００Ｗ，１５０−１８０℃，ＣＥＭ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒ  Ｌａｂｍａｔｅ)にかける前に５分間脱ガスした。混合物を酢酸エチルで洗浄して濾過し、ついで１０％の炭酸水素ナトリウム(１０ｍｌ)の溶液で洗浄した。有機層を乾燥(ＭｇＳＯ４)させ、真空濃縮して粗残留物(９０％)を得た。ついで、この残留物を、最終化合物２の精製のために調製的逆相ＨＰＬＣにかけた。１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ。ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．５．７７，Ｍ＋Ｈ８３７。
【０１００】
化合物２−８を同様な手順に従って調製した：
化合物２：Ｎ−｛７−[４−(４’−クロロ−ビフェニル−２−イルメチル)−ピペラジン−１−イル]−キナゾリン−４−イル｝−４−((Ｒ)−３−ジメチルアミノ−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼンスルホンアミド
１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ
ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．５．９８，Ｍ＋Ｈ９２４。
【０１０１】
化合物３：Ｎ−｛７−[４−(４’−クロロ−ビフェニル−２−イルメチル)−ピペラジン−１−イル]−キナゾリン−４−イル｝−４−((Ｒ)−３−モルホリン−４−イル−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ
ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．５．７８，Ｍ＋Ｈ８７９。
【０１０２】
化合物４：Ｎ−｛７−[４−(４’−クロロ−ビフェニル−２−イルメチル)−ピペラジン−１−イル]−キナゾリン−４−イル｝−４−((Ｒ)−３−モルホリン−４−イル−１−フェニルスルファニルメチル−プロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼンスルホンアミド
１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ
ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．６．００，Ｍ＋Ｈ９６６。
【０１０３】
化合物５：Ｎ−(７−｛４−[２−(４−クロロ−フェニル)−５，５−ジメチル−シクロヘキサ−１−エニルメチル]−ピペラジン−１−イル｝−キナゾリン−４−イル)−４−((Ｒ)−３−ジメチルアミノ−１−フェニルスルファニルメチルプロピルアミノ)−３−ニトロ−ベンゼンスルホンアミド
１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ
ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．５．９７，Ｍ＋Ｈ８６９。
【０１０４】
化合物６：Ｎ−(７−｛４−[２−(４−クロロ−フェニル)−５，５−ジメチル−シクロヘキサ−１−エニルメチル]−ピペラジン−１−イル｝−キナゾリン−４−イル)−４−((Ｒ)−３−ジメチルアミノ−１−フェニルスルファニルメチルプロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼンスルホンアミド
１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ
ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．６．１１，Ｍ＋Ｈ９５６。
【０１０５】
化合物７：Ｎ−(７−｛４−[２−(４−クロロ−フェニル)−５，５−ジメチル−シクロヘキサ−１−エニルメチル]−ピペラジン−１−イル｝−キナゾリン−４−イル)−４−((Ｒ)−３−モルホリン−４−イル−１−フェニルスルファニルメチルプロピルアミノ)−３−ニトロ−ベンゼンスルホンアミド
１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ
ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．５．９９，Ｍ＋Ｈ９１１。
【０１０６】
化合物８：Ｎ−(７−｛４−[２−(４−クロロ−フェニル)−５，５−ジメチル−シクロヘキサ−１−エニルメチル]−ピペラジン−１−イル｝−キナゾリン−４−イル)−４−((Ｒ)−３−モルホリン−４−イル−１−フェニルスルファニルメチルプロピルアミノ)−３−トリフルオロメタンスルホニルベンゼンスルホンアミド
１ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３)δ
ＬＣＭＳ−ｒ．ｔ．６．１６，Ｍ＋Ｈ９９８。
【０１０７】
実施例１２  化合物１(Ｒ)−Ｎ−(７−(４−((４’−クロロビフェニル−２−イル)メチル)ピペラジン−１−イル)キナゾリン−４−イル)−４−(４−(ジメチルアミノ)−１−(フェニルチオ)ブタン−２−イルアミノ)−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
2010510237.tif 000038
ａ)
2010510237.tif 000039
ＤＭＳＯ(２０ｍＬ)中のＢｏｃ−ピペラジン(２０ｍｍｏｌ)を２，４−ジニトロベンゾニトリル(１０ｍｍｏｌ)で処理し、直ぐに深いオレンジ／赤色になった反応混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物を酢酸エチルと１０％クエン酸の間で分配し、酢酸エチル層を更に洗浄し、蒸発させ、残留物をエーテルと共に粉砕して黄色粉末としてピペリジニル生成物(収率３３％)を得た。出発のニトリルで汚染されている場合は、酢酸エチル／エーテルからの結晶化が効果的であった(Ｍ＋[ＥＳ＋]３３３，１Ｈδ：(ｐｐｍ，ｄ６−ＤＭＳＯ)７．８２，ｄ(Ｊ１８．８６Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．６６，ｄ(Ｊ２，２．５２Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．２８，ｄｄ(Ｊ１８．８６Ｈｚ，Ｊ２２．５２Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；３．４−３．５，ｍ，８Ｈ，４×ＣＨ２；１．３９，ｍ，９Ｈ，ＣＭｅ３。
【０１０８】
ｂ)
2010510237.tif 000040
ピペラジニル化合物(１５ｍｍｏｌ)を、アセトニトリル(４０ｍＬ)中に溶解させ、アセトニトリル(２０ｍＬ)中の５当量のｐ−トルエンスルホン酸で処理し２時間放置して脱保護した。ついで、ビストシレートの形態の生成物をコースプリズム状体として濾過した(収率８５％)。(Ｍ＋[ＥＳ＋]２３３；１Ｈδ：(ｐｐｍ，ｄ６−ＤＭＳＯ)８．８０，ｂｓ，１Ｈ，Ｎ＋Ｈ；７．８８，ｄ(Ｊ１８．８２Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．７６，ｄ(Ｊ２２．５８Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．４６，ｄ(Ｊ１８．０７Ｈｚ)，４Ｈ，４×ＡｒＨ；７．３７，ｄｄ(Ｊ１８．８２Ｈｚ，Ｊ２２．５８Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．０９，ｄ(Ｊ１８．０７Ｈｚ)，４Ｈ，４×ＡｒＨ；３．６−３．７，ｍ，４Ｈ，２×ＣＨ２；３．１−３．３，ｍ，４Ｈ，２×ＣＨ２；２．２５，ｓ，６Ｈ，２×Ｍｅ。
【０１０９】
ｃ)
2010510237.tif 000041
イソプロパノール(１５ｍＬ)中の４ｍｍｏｌのビストシレート及び６ｍｍｏｌの臭化２−ブロモベンジルにトリエチルアミン(１４ｍｍｏｌ)を添加し、全体を３時間攪拌した。ついで、メタノールを添加し(２０ｍＬ)、混合物を数分そのままにし、臭化アリール生成物をオレンジ色の粉末として濾過精製した(９３％)。(Ｍ＋[ＥＳ＋]４０１，４０３；１Ｈδ：(ｐｐｍ，ｄ６−ＤＭＳＯ)７．８０，ｄ(Ｊ１８．９Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．６７，ｄ(Ｊ２２．４７Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．５８，ｄ(Ｊ１７．６Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．４９，ｄ(Ｊ１７．６Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．３６，ｄｄ(Ｊ１７．６Ｈｚ，Ｊ１７．６Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．３０，ｄｄ(Ｊ１８．９Ｈｚ，Ｊ２２．４７Ｈｚ)；７．１９，ｄｄ(Ｊ１７．６Ｈｚ，Ｊ１７．６Ｈｚ)；３．５８，ｓ，２Ｈ，ＣＨ２；３．４−３．５，ｍ４Ｈ，２×ＣＨ２；２．５−２．６，ｍ４Ｈ，２×ＣＨ２。
【０１１０】
ｄ)
2010510237.tif 000042
窒素下で１：１：１のジメトキシエタン：エタノール：水(２０ｍＬ)中で攪拌する３．４３ｍｍｏｌの臭化アリール、７０３ｍｇのｐ−クロロフェニルボロン酸、及び５０ｍｇのＰｄＣｌ２(ＰＰｈ３)２の混合物に、２Ｍの炭酸ナトリウム溶液(２．２５ｍＬ)を添加し、溶液を９０℃で４時間加熱した。反応混合物を酢酸エチルと水との間で分配し、セライトを通して濾過し、有機層を乾燥させ、蒸発させ、残留物を、アセトニトリル(２０ｍＬ)中の１０ｍｍｏｌのｐ−トルエンスルホン酸で処理し、ついでエーテル(４０ｍＬ)を加えた。フリーザー中に放置すると、ニトロアレーン生成物が黄色粉末として沈殿した：収率１．６８ｇ(８１％)。(Ｍ＋[ＥＳ＋]４３３，４３５；１Ｈδ：(ｐｐｍ，ｄ６−ＤＭＳＯ)９．５７，ｂｓ，１Ｈ，Ｎ＋Ｈ；７．８５，ｄ(Ｊ１８．８Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．７−７．８，ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ；７．６９，ｄ(Ｊ２２．５２Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；７．４−７．６，ｍ，６Ｈ，６×ＡｒＨ；７．２−７．４，ｍ，４Ｈ，４×ＡｒＨ；７．０８，ｄ(Ｊ１７．９Ｈｚ)，２Ｈ，２×ＡｒＨ；４．３６，ｍ，２Ｈ，ＣＨ２；４．０７，ｍ，２Ｈ，ＣＨ２；３．２２，ｍ，４Ｈ，２×ＣＨ２；２．８８，ｍ，２Ｈ，ＣＨ２；２．２５，２，３Ｈ，Ｍｅ。
【０１１１】
ｅ)
2010510237.tif 000043
氷酢酸(０．２ｍｌ)中のニトロアレーン化合物(６２ｍｇ)及び鉄粉末(５０ｍｇ)を１０分間攪拌しながら９０℃に加熱し、酢酸エチルと飽和重炭酸ナトリウムの間で分配し、有機層を分離し、洗浄し、蒸発乾固させて、褐色残留物として粗アニリンを得た。これを１．３ｇのスケールで繰り返した。粗残留物をエーテルで粉砕して精製した。これにより約６０％の収率でアニリン生成物が得られ、更に２５％が、所望される場合にはエーテル上清から回収できた。(Ｍ＋[ＥＳ＋]４０３，４０５；１Ｈδ：(ｐｐｍ，ｄ６−ＤＭＳＯ)７．１−７．６，ｍ，９Ｈ，９×ＡｒＨ；６．２３，ｄ(Ｊ１９．２Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；６．０４，ｓ，１Ｈ，ＡｒＨ；４．２３，ｂｓ，２Ｈ，ＣＨ２；３．４０，ｂｓ，２Ｈ，ＮＨ２；３．１９，ｂｓ，４Ｈ，２×ＣＨ２；２．３４，ｂｓ，４Ｈ，２×ＣＨ２。
【０１１２】
ｆ)
2010510237.tif 000044
アニリン化合物(２１６ｍｇ)を窒素下で３時間還流してＭｅＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ(５ｍＬ)中の酢酸ホルムアミジン(１０当量)と反応させ、少しの水を添加して暗色の冷却された反応混合物から生成物を沈殿させた。これを濾過し乾燥させて、アンモニア水での中和後に水性ＤＭＳＯから再結晶化できる淡黄色の固形物として、４−アミノキナゾリン化合物を得た(１９８ｍｇ，収率８１％)。Ｍ＋[ＥＳ＋]４３０，４３２．１Ｕδ：(ｐｐｍ，ｄ６−ＤＭＳ０)８．１８，ｓ，１Ｈ，ＡｒＨ(Ｈ２)；７．９５，ｄ，(Ｊ９．２Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ(Ｈ５)；７．４７−７．５０，ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ；７．４５，ｂｓ，４Ｈ，４×ＡｒＨ；７．２９−７．３６，ｍ，４Ｈ，２×ＡｒＨ＋ＮＨ２；７．２０−７．２３，ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ；７．１６，ｄｄ(Ｊ，９．２Ｈｚ，Ｊ２２．４Ｈｚ)１Ｈ，ＡｒＨ；６．８０，ｄ，(Ｊ２．３Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ；３．３７，ｓ，２Ｈ，ＣＨ２；３．２３，ｍ，４Ｈ，２×ＣＨ２(ピペラジン)；２．４０，ｍ，４Ｈ，２×ＣＨ２(ピペラジン)。
【０１１３】
ｇ)
2010510237.tif 000045
４−アミノキナゾリン化合物(１７６ｍｇ)を、空気冷却機を装備した小フラスコにおいて氷酢酸(２ｍＬ)及び濃(２５％)塩酸水溶液中で約１３０℃で９時間加熱した。溶媒を除去し、最小のアンモニア水での中和後に水性ＤＭＳＯから残留物を再結晶化させた。これにより淡黄色粉末として加水分解生成物が得られた(８７％収率)。Ｍ＋[ＥＳ＋]４３１，４３３．１Ｈδ：(ｐｐｍ，ｄ６−ＤＭＳＯ)１１．８，ｂｓ，１Ｈ，ＯＨ；７．９０，ｓ，１Ｈ，ＡｒＨ(Ｈ２)；７．８４，ｄ(Ｊ９．０Ｈｚ)，１Ｈ，ＡｒＨ(Ｈ５)；７．４６−７．５１，ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ；７．４４，ｂｓ，４Ｈ，４×ＡｒＨ；７．３０−７．３８，ｍ，２Ｈ，２×ＡｒＨ；７．２０−７．２３，ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ，７．０９，ｄｄ，(Ｊ，９．０Ｈｚ，Ｊ２２．０Ｈｚ)１Ｈ，ＡｒＨ；６．８６，ｄ，(Ｊ２．０Ｈｚ)１Ｈ，ＡｒＨ；４．４４−３．３７，ｂｓ，２Ｈ，ＮＣＨ２Ｐｈ；３．２７，ｍ，４Ｈ，２×ＣＨ２(ピペラジン)２．３８，ｂｍ，４Ｈ，２×ＣＨ２，(ピペラジン)。
【０１１４】
ｈ)
2010510237.tif 000046
加水分解生成物を、触媒量のＤＭＦ(１０ｕＬ)で１ｍＬの無水クロロホルム及び１ｍＬの塩化チオニル中の３０ｍｇを処理し、１時間還流させ、氷上に注ぎ、酢酸エチルで生成物を抽出して、特徴付けることなく反応した塩素化生成物を得た。
【０１１５】
ｉ)ｈ)からの塩素化生成物の一部(約８ｍｇ)を、炭酸カリウム(４０ｍｇ)と共にＤＭＦ(０．２ｍＬ)中で８５℃で一晩加熱することによって、次の実施例で調製されたスルホンアミド(８ｍｇ)にカップリングさせた。反応混合物を酢酸エチル(２ｍＬ)と水(２ｍＬ)との間で分配し、有機層を分離し、乾燥させ、蒸発させて黄色残留物を得た。これをＨＰＬＣによって精製して、３．５２分のピーク保持時間及び８３７(主ピーク)及び８３９(小ピーク)のＥＳ＋に分子イオンピークを持つ約８０％純度の黄色ガラスとして２ｍｇの化合物２を得た。
【０１１６】
ＨＰＬＣ条件
溶媒：
Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ギ酸
Ｂ：ＭｅＣＮ＋０．１％ギ酸
Ｃ：Ｈ２Ｏ
ＤＭｅＣＮ
圧力：
最小(ｐｓｉ)０．００
最大(ｐｓｉ)６２５８．００
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  ５ｕＣ１８１１０Ａ；５０×２．００ｍｍ。
プログラム：
時間(分)    流量(ｍＬ／分)    Ａ(％)    Ｂ(％)      Ｃ(％)    Ｄ(％)
０．００      １．０００      ９０      １０        ０        ０
８．００      １．０００        ０      １００      ０        ０
１０．００    １．０００        ０      １００      ０        ０
１０．１０    １．０００      ９０      １０        ０        ０
１２．００    １．０００      ９０      １０        ０        ０
１２．１０    ０．０００      ９０      １０        ０        ０
【０１１７】
実施例１３  実施例１２で使用された(Ｒ)−４−(４−(ジメチルアミノ)−１−(フェニルチオ)ブタン−２−イルアミノ)−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
この化合物の調製のために従った手順は、一般にＷｅｎｄｔ等からのものであるが、次の適応化を行った：
2010510237.tif 000047
【０１１８】
化合物Ｂ及びＥ〜Ｈの調製はＷｅｎｄｔの手順に従った。しかしながら、化合物Ｃ及びＤは次にようにして調製した：
ｉ)
2010510237.tif 000048
０℃の１ｍＬのジクロロメタン中におけるトリエチルアミン(２９μＬ、１．２当量)との溶液である精製ＦｍｏｃアミノアルコールＢ(６８ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ)(石油エーテル／酢酸エチル９５：５から６０：４０を使用するシリカゲルでの精製)の溶液に、塩化メシル(１６μＬ，１．２当量)を滴下して加えた。反応を０℃で１時間放置し、室温まで温めた。その後、ＴＬＣ(５０：５０Ｐｅｔ．Ｅｔ．／ＡｃＯＥｔ)が、出発材料が残っていないことを示した。ついで、反応物をジクロロメタンで希釈し、１ＭのＮａＨＳＯ４、水及びブラインで洗浄した。ついで、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、無色の油を得た。この油を少量のジクロロメタンに溶解させ、固形物が沈殿し始めるまで石油エーテルを加えた。この混合物をフリーザー中に一晩置いた。固形物を濾過によって集め、石油エーテルですすいだ(Ｃの収率８３％)。ＮＭＲ(ＣＤＣ１３，ｐｐｍ)：７．７８(ｄ，２Ｈ)，７．６０(ｄ，２Ｈ)，７．４２(ｔ，２Ｈ)，７．３３(ｔ，２Ｈ)，５．４６(ｂｒ．ｄ．，１Ｈ)，４．４３(ｂｒｔ，２Ｈ)，４．３４(ｂｒｓ，２Ｈ)，４．２４(ｂｒｔ，１Ｈ)，３．０３(ｓ，３Ｈ)，２．６１(ｂｒｄ，２Ｈ)，１．４８(ｓ，９Ｈ)。
【０１１９】
ｉｉ)
2010510237.tif 000049
メシレートＣ(１００ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ)、チオフェノール(４３μＬ，２当量)、炭酸カリウム(５８ｍｇ，２当量)及び臭化テトラブチルアンモニウム(３ｍｇ)をトルエン中で全体で８７時間の間３０℃に加熱した。粗反応物をカラム上部に直接注ぎ、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した：１００％トルエン、ついでジクロロメタン１００％、ついで酢酸エチル／石油エーテル６０：４０から７０：３０(ｍ＝４３ｍｇ、７７％)、Ｄ)。ＭＳ：２６９(Ｍ＋Ｈ)。ＮＭＲ(ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ)：７．４１−７．３８(ｍ，２Ｈ)，７．３２−７．２７(ｍ，２Ｈ)，７．２１(ｔｔ，１Ｈ)，３．３８−３．３０(ｍ，Ａ１Ｂ１Ａ２Ｂ２Ｘ，１Ｈ)，３．１２(ｄｄ，Ａ１Ｂ１Ｘ，１Ｈ)，２．９０(ｄｄ，Ａ１Ｂ１Ｘ，１Ｈ)，２．６７(ｂｒｓ，２Ｈ)，２．５４(ｄｄ，Ａ２Ｂ２Ｘ，１Ｈ)，２．３８(ｄｄ，Ａ２Ｂ２Ｘ，１Ｈ)，１．４５(ｓ，９Ｈ)。
【０１２０】
実施例１４  Ｂｃｌ−２結合アッセイ
Ｂｃｌ−２ホモログ結合部位に対してのＢｉｍ２６−ｍｅｒとの本発明の化合物の競合の測定。
アルファスクリーン(Amplified Luminescent Proximity Homogenous Assay)は分子間の相互作用を測定するビーズベースの技術である。該アッセイは、結合相互作用によって近接させられたときに、ドナービーズからアクセプタービーズへの一重項酸素の移動を可能にする二つのヒドロゲル被覆ビーズからなる。
結合し６８０ｎｍでのレーザ光で励起されたときに、ドナービーズ中の光増感体が雰囲気酸素をより励起された一重項状態に転換する。この一重項酸素がついで拡散してアクセプタービーズ内で化学発光体と反応する。同じビーズ内のフルオロフォアが活性化され、５８０−６２０ｎｍで発光を生じる。
【０１２１】
本発明の化合物のスクリーニングは、アルファスクリーンＧＳＴ(グルタチオン ｓ−トランスフェラーゼ)検出キットシステムを使用して実施した。試験化合物は、ＧＳＴタグ付きＢｃｌｗΔＣ２９タンパク質(最終濃度０．０５ｎＭ)及びビオチン化Ｂｉｍ  ＢＨ３−２６ペプチドのビオチン−ＤＬＲＰＥＩＲＩＡＱＥＬＲＲＩＧＤＥＦＮＥＴＹＴＲＲ(最終濃度３．０ｎＭ)からなるアッセイ中で力価測定した。ＧＳＴタグ付きＢｃｌ-ｘＬアッセイでは、ＧＳＴタグ付きＢＣＩ−ＸＬΔＣ２５タンパク質(最終濃度０．６ｎＭ)及びビオチン化Ｂｉｍ  ＢＨ３−２６ペプチドのビオチン−ＤＬＲＰＥＩＲＩＡＱＥＬＲＲＩＧＤＥＦＮＥＴＹＴＲＲ(最終濃度５．０ｎＭ)を使用した。この反応混合物に、共に１５μｇ／ｍｌの最終濃度の抗ＧＳＴ被覆アクセプタービーズ及びストレプトアビジン被覆ドナービーズを加え、アッセイ混合物を読み取る前に室温で４時間インキュベートした。同様に、Ｂｃｌ−２タンパク質がＭｃｌ−１である場合、ＧＳＴタグ付きＭｃｌ−１タンパク質(最終濃度０．４ｎＭ)及びビオチン化Ｂａｋ ＢＨ３ペプチドのビオチン−ＰＳＳＴＭＧＱＶＧＲＱＬＡＩＩＧＤＤＩＮＲＲＹＤＳＥ−ＯＨ(最終濃度４．０ｎＭ)を使用した。
【０１２２】
詳細なプロトコル：
１)  ウェル当たり４．７５μＬのバッファーと０．２５μＬの化合物(ＤＭＳＯ中に２０ｍＭ)を用いて３８４ウェルを調製する。
２)  結合対を混合し、一試験管においてＢｃｌ−ｗ、ＢＣＩ−ＸＬ又はＭｃｌ−１及びアクセプタービーズを加え、第二の試験管にビオチン化ＢＨ３ペプチド及びドナービーズを加える。
３)  二対の結合対を３０分間、プレインキュベートする。
４)  １μＬのアクセプタービーズ：Ｂｃｌ−ｗ、ＢＣＩ−ｘＬ又はＭｃｌ−１タンパク質混合物を各ウェルに加える。
５)  プレートをシールし、室温で３０分間インキュベートする。
６)  １０μＬのドナービーズ：ＢＨ３ペプチド混合物を各ウェルに加える。
７)  プレートをシールし、フォイルで覆い、４時間インキュベートする。
【０１２３】
アッセイバッファーは、５０ｍＭのＨｅｐｅｓ(ｐＨ７．４)、１０ｍＭのＤＴＴ、１００ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ及び０．１ｍｇ／ｍｌのカゼインを含んでいた。ビーズ希釈バッファーは、５０ｍＭのＴｒｉｓ(ｐＨ７．５)、０．０１％のＴｗｅｅｎ及び０．１ｍｇ／ｍｌのカゼインを含んでいた。アッセイにおける最終ＤＭＳＯ濃度は０．５％であった。アッセイは３８４のウェルＯｐｔｉｐｌａｔｅｓで実施し、パーキン・エルマーのＦｕｓｉｏｎアルファプレートリーダー(Ｅｘ６８０，Ｅｍ５２０−６２０ｎＭ)で解析した。
ＧＳＴアルファスクリーン検出キット及びＯｐｔｉｐｌａｔｅｓはパーキン・エルマーから購入した。
本発明の化合物に対するアルファスクリーンの結果は次の通りである：実施例１はＢＣＩ−ｘＬに対して約３ｎＭのＩＣ５０を示した。
【０１２４】
2010510237.tif 000050
【０１２５】
実施例１５  細胞生存率アッセイ
本発明の化合物の効能を、様々な細胞株及びマウス腫瘍モデルを使用して細胞ベース死滅アッセイにおいて決定することがまたできる。例えば、細胞生存率に対するその活性は、培養された腫瘍原性及び非腫瘍原性細胞株、並びに原発性マウス又はヒト細胞集団、例えばリンパ球のパネルで評価されうる。これらのアッセイに対して、５０００−２００００の細胞を３７℃、１０％のＣＯ２で、適切な増殖培地、例えば９６ウェルプレートにおいてプレＢ Ｅμ−Ｍｙｃマウス腫瘍の場合には１０％のウシ胎仔血清、アスパラギナーゼ及び２−メルカプトエタノールを補填した１００μＬのダルベッコ変法イーグル培地中で培養する。細胞生存率はヨウ化プロピジウムを排除する細胞の能力によって決定する(フローサイトメータ(ＢＤ ＦＡＣＳｃａｎ)での６６０−６７５ｎｍの発光波長の免疫蛍光解析により１０μｇ／ｍＬ)。あるいは、Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｒｅ  ９６のようなハイスループットの比色アッセイを使用することができる。水性非放射性細胞増殖アッセイ(Promega)を使用することができる。アポトーシスによる細胞死は、ｚＶＡＤ−ｆｍｋのようなカスパーゼ阻害剤５０μＭと共に細胞をプレインキュベーションすることによって確認できる。
【０１２６】
正常な細胞においてＢｃｌ−ｘＬ及びＭｃｌ−１双方の抗アポトーシスタンパク質の中和が、下流Ｂａｘ／Ｂａｋ経路を介してアポトーシスを細胞が受ける前に必要となる[Ｃｈｅｎ等，２００５；Ｗｉｌｌｉｓ等，２００５]。Ｂｃｌ−ｘＬだけを標的とする化合物は、正常細胞に影響を及ぼさないはずであるが、それらが生存についてはＢｃｌ−ｘＬにより依存し、Ｍｃｌ−１には余り依存しないならば、ある種の癌細胞を死滅させることができるであろう。これを映して、化合物１について、野生型(ｗｔ)マウス胚線維芽細胞(ＭＥＦｓ)、Ｂａｘ／Ｂａｋダブルノックアウト(ＢＢ  ＤＫＯ)ＭＥＦｓ、Ｎｏｘａを発現したＭＥＦｓ、及びＢａｄを発現したＭＥＦｓの生存に対する効果を試験した。ＮｏｘａはＭｃｌ−１を特異的に中和する。よって、Ｎｏｘａを発現するＭＥＦｓは、生存に対してＢｃｌ−ｘＬに依存する癌細胞タイプを映し、Ｂｃｌ−ｘＬ及びＭｃｌ−１の双方が保護性であるＭＥＦｓよりも、Ｂｃｌ−ｘＬターゲティング化合物による死滅化に更により感受性があるはずである。確かに、図１Ａに示されるように、これは化合物１の場合には、しかりであることが分かる。
抗癌剤エトポシドはまた、ＢＢ  ＤＫＯ  ＭＥＦｓの耐性によって示されるように、Ｂａｘ／Ｂａｋ経路を介した細胞死を誘導する。しかしながら、図１Ｂに示されるように、それは化合物１よりは少ない選択性で誘導する。
【０１２７】
実施例１６  細胞力価−増殖ルミネッセンス細胞傷害アッセイ
化合物１−８の細胞傷害性を、次の手順に従って、Ｐｒｏｍｅｇａ  ＣｅｌｌＴｉｔｒｅ−ＧｌｏｗルミネッセンスアッセイキットＧ７５７１を使用して、SＣＬＣ細胞株ＮＣＩ−Ｈ８８９、ＮＣＩ−Ｈ１９６３及びＮＣＩ−Ｈ１４６について評価した。
培養培地及び細胞株：
１．  ＳＣＬＣ細胞株ＮＣＩ−Ｈ８８９、ＮＣＩ−Ｈ１９６３、及びＮＣＩ−Ｈ１４６をアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクションから購入した。細胞を、５％ＣＯ２を含む３７℃の加湿チャンバーにおいて、１０％ウシ胎仔血清(ＦＢＳ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ)、１％ピルビン酸ナトリウム、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ、４．５ｇ／Ｌのグルコース及び１％のペニシリン／ストレプトマイシン(Ｓｉｇｍａ)を補填したＲＰＭＩ１６４０(Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐ．，Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ)中に維持した。
２．細胞を、２５ｍｌの培地を含むＴ１６２フラスコにおいて懸濁凝集体として増殖させ、百万／ｍＬの濃度で維持した。
【０１２８】
試験化合物ストック：
１．  試験化合物はＤＭＳＯ中の１０ｍＭの原液として調製し、−２０℃で保存した。
試験化合物連続希釈：
１．  培地を３７℃に前もって温めた。
２．  化合物を室温まで解凍した。
３．  試験される最も高い濃度が幾らかを決定した。(つまり、１０μＭ)。
４．  エッペンドルフ管において第一用量(つまり、２×１０μＭ＝２０μＭ)の培養培地中に２×原液を調製した(つまり、１０００μｌに４μＬの５ｍＭ原液＝２０μＭ)。
５．  管を数回ひっくり返して混合した。
【０１２９】
９６ウェルプレートでの連続希釈：
化合物を、１０、５、２．５、１．３、０．６３、０．３２、０．１６、０．０８、０．０４及び０．０２μＭの濃度で３通り試験した。カラム１−１０は連続した試験化合物の処理からなり、カラム１１は未処理コントロールであり、カラム１２はバックグラウンドを決定するための「細胞なし」コントロールであった。
１．  ９６ウェルプレートにおいて、カラム２から１１において５０μｌ培地／ウェルを加え、カラム１２に１００μｌを加えた。
２．  カラム１において、１００μｌの２×化合物を加えた。
３．  ５０μｌをカラム２等からカラム１０までに移して連続希釈した。５０μｌをカラム１０に添加し混合した後、５０μｌを捨てた。
４．  細胞の添加準備ができるまでプレートを３７℃で保存した。
【０１３０】
細胞の調製
１．  細胞を培養培地中で一回洗浄し、懸濁液として調製した。
ａ．  細胞を最初にスピンして培地を取り除き、ついで〜１ｍｌの０．２５％トリプシンを添加し、穏やかに混合し、室温で３分程度だけインキュベートした。
ｂ．  〜１０ｍｌの培地を添加し、細胞を穏やかに数回ピペットで取った。
ｃ．  ついで、細胞を計数し、必要とされる全細胞数に必要な容積までスピンし、ついで培地に再懸濁させて、２００細胞／μｌ濃度(５００００細胞／ウェル)にした。
２．  ５０μｌの細胞プレップを適切なウェルに加えた。
３．  細胞を３７℃で４８時間インキュベートした。
【０１３１】
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏｗルミネッセンスアッセイ(Ｐｒｏｍｅｇａ−キットＧ７５７１)：
１．  解凍が完了するまで３７℃の水浴中でバッファーを解凍し、ついで少なくとも半時間室温に放置した。
２．  基質とバッファーを一緒に混合し、数回穏やかに逆さにして基質を溶解させた。
３．  細胞培養プレートをインキュベータから取り除き、少なくとも１５分の間、室温に調節した。
４．  １００ｕｌの試薬を１００ｕｌの培養培地に加え、室温で２分間プレートシェーカーで混合した。
５．  ベンチで１５分間、インキュベートした。
６．  ルミネッセンスをＢｉｏＴｅｋプレートリーダー(感度＝９５)で読み取った。
７．  平均バックグラウンド値を計算した(カラム１２)
８．  平均バックグラウンドカウントを全ての他のウェルから減じた(カラム１−１１)
９．  平均未処理コントロール値を計算した(カラム１１)
１０．  試験化合物で処理したウェルの値(列１−１０)を平均コントロール値で割り、ＥＣ５０として表した。
【０１３２】
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【０１３３】
文献
以下に列挙する文献、及びこの明細書における他の文献は、それらが豪州等における先行技術又は一般的常識の一部を形成することを認めたり示唆するものと認めるものと解してはならない。
Ｌ．Ｃｈｅｎ等，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ，２００５，１７，３９３−４０３。
Ｓ．Ｃｏｒｙ，Ｊ．Ａ．Ａｄａｍｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２００５，５−６。
Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ及びＰ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，３版，１９９９。
Ｍ．Ｇ．Ｈｉｎｄｓ，Ｍ．Ｌａｃｋｍａｎｎ，Ｇ．Ｌ．Ｓｋｅａ，Ｐ．Ｊ．Ｈａｒｒｉｓｏｎ，Ｄ．Ｃ．Ｓ．Ｈｕａｎｇ，Ｃ．Ｌ．Ｄａｙ，ＥＭＢＯＪ．２００３，２２，１４９７。
Ｘ．Ｌｉｕ，Ｓ．Ｄａｉ，Ｙ．Ｚｈｕ，Ｐ．Ｍａｒｒａｃｋ，Ｊ．Ｋａｐｐｌｅｒ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．２００３，１９，３４１。
Ｓ．Ｗ．Ｍｕｃｈｍｏｒｅ，Ｍ．Ｓａｔｔｌｅｒ，Ｈ．Ｌｉａｎｇ，Ｒ．Ｐ．Ｍｅａｄｏｗｓ，Ｊ．Ｅ．Ｈａｒｌａｎ，Ｈ．Ｓ．Ｙｏｏｎ，Ｄ．Ｎｅｔｔｅｓｈｅｉｍ，Ｂ．Ｓ．Ｃｈａｎｇ，Ｃ．Ｂ．Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．Ｗｏｎｇ，Ｓ．Ｌ．Ｎｇ，Ｓ．Ｗ．Ｆｅｓｉｋ，Ｎａｔｕｒｅ．１９９６，３８１，３３５。
【０１３４】
Ｔ．Ｏｌｔｅｒｓｄｏｒｆ，Ｓ．Ｗ．Ｅｌｍｏｒｅ，Ａ．Ｒ．Ｓｈｏｅｍａｋｅｒ，Ｒ．Ｃ．Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ，Ｄ．Ｊ．Ａｕｇｅｒｉ，Ｂ．Ａ．Ｂｅｌｌｉ，Ｍ．Ｂｒｕｎｃｋｏ，Ｔ．Ｌ．Ｄｅｃｋｗｅｒｔｈ，Ｊ．Ｄｉｎｇｅｓ，Ｐ．Ｊ．Ｈａｊｄｕｋ，Ｍ．Ｋ．Ｊｏｓｅｐｈ，Ｓ．Ｋｉｔａｄａ，Ｓ．Ｊ．Ｋｏｒｓｍｅｙｅｒ，Ａ．Ｒ．Ｋｕｎｚｅｒ，Ａ．Ｌｅｔａｉ，Ｃ．Ｌｉ，Ｍ．Ｊ．Ｍｉｔｔｅｎ，Ｄ．Ｇ．Ｎｅｔｔｅｓｈｅｉｍ，Ｓ．Ｎｇ，Ｐ．Ｍ．Ｎｉｍｍｅｒ，Ｊ．Ｍ．Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ，Ａ．Ｏｌｅｋｓｉｊｅｗ，Ａ．Ｍ．Ｐｅｔｒｏｓ，Ｊ．Ｃ．Ｒｅｅｄ，Ｗ．Ｓｈｅｎ，Ｓ．Ｋ．Ｔａｈｉｒ，Ｃ．Ｂ．Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｋ．Ｊ．Ｔｏｍａｓｅｌｌｉ，Ｂ．Ｗａｎｇ，Ｍ．Ｄ．Ｗｅｎｄｔ，Ｈ．Ｚｈａｎｇ，Ｓ．Ｗ．Ｆｅｓｉｋ，Ｓ．Ｈ．Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ｎａｔｕｒｅ，２００５，４３５，６７７−６８１。
【０１３５】
Ｇ．Ａ．Ｐａｔａｎｉ及びＥ．Ｊ．ＬａＶｏｉｅ，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，１９９６，９６，３１４７−３１７６。
Ａ．Ｍ．Ｐｅｔｒｏｓ，Ｊ．Ｄｉｎｇｅｓ，Ｄ．Ｊ．Ａｕｇｅｒｉ，Ｓ．Ａ．Ｂａｕｍｅｉｓｔｅｒ，Ｄ．Ａ．Ｂｅｔｅｂｅｎｎｅｒ，Ｍ．Ｇ．Ｂｕｒｅｓ，Ｓ．Ｗ．Ｅｌｍｏｒｅ，Ｐ．Ｊ．Ｈａｊｄｕｋ，Ｍ．Ｋ．Ｊｏｓｅｐｈ，Ｓ．Ｋ．Ｌａｎｄｉｓ，Ｄ．Ｇ．Ｎｅｔｔｌｅｓｈｅｉｍ，Ｓ．Ｈ．Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ｗ．Ｓｈｅｎ，Ｓ．Ｔｈｏｍａｓ，Ｘ．Ｗａｎｇ，Ｉ．Ｚａｎｚｅ，Ｈ．Ｚｈａｎｇ，Ｓ．Ｗ．Ｆｅｓｉｋ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００６，４９，６５６−６６３。
Ａ．Ｍ．Ｐｅｔｒｏｓ，Ｄ．Ｇ．Ｎｅｔｔｅｓｈｅｉｍ，Ｙ．Ｗａｎｇ，Ｅ．Ｔ．Ｏｌｅｊｎｉｃｚａｋ，Ｒ．Ｐ．Ｍｅａｄｏｗｓ，Ｊ．Ｍａｃｋ，Ｋ．Ｓｗｉｆｔ，Ｅ．Ｄ．Ｍａｔａｙｏｓｈｉ，Ｈ．Ｚｈａｎｇ，Ｃ．Ｂ．Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｓ．Ｗ．Ｆｅｓｉｋ，ＰｒｏｔｅｉｎＳｃｉｅｎｃｅ．２０００，９，２５２８。
Ｍ．Ｓａｔｔｌｅｒ，Ｈ．Ｌｉａｎｇ，Ｄ．Ｎｅｔｔｅｓｈｅｉｍ，Ｒ．Ｐ．Ｍｅａｄｏｗｓ，Ｊ．Ｅ．Ｈａｒｌａｎ，Ｍ．Ｅｂｅｒｓｔａｄｔ，Ｈ．Ｓ．Ｙｏｏｎ，Ｓ．Ｂ．Ｓｈｕｋｅｒ，Ｂ．Ｓ．Ｃｈａｎｇ，Ａ．Ｊ．Ｍｉｎｎ，Ｃ．Ｂ．Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｓ．Ｗ．Ｆｅｓｉｋ，Ｓｃｉｅｎｃｅ．１９９７，２７５，９８３。
【０１３６】
Ｗａｎｇ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２０００，９７，７１２４。
Ｗｅｎｄｔ等，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００６，４９，１１６５。
Ｓ．Ｎ．Ｗｉｌｌｉｓ等，ＧｅｎｅｓＤｅｖ．，２００５，１９，１２９４−１３０５。
Ｊ．Ｙ．Ｚｈａｎｇ，ＮａｔｕｒｅＲｅｖｉｅｗｓ／ＤｒｕｇＤｉｓｃｏｖｅｒｙ２００２，１，１０１。
【図１Ａ】
2010510237.tif 000065
【図１Ｂ】
2010510237.tif 000066
【国際調査報告】
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