(57)【要約】本発明は、呼吸器および肺の感染もしくは慢性疾患（特に、下気道感染および慢性閉塞性肺疾患）の危険性を診断および／または層化するための方法に関する。上記方法において、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントもしくは部分ペプチド、特にコペプチンもしくはニューロフィジンＩＩが測定される。本発明はさらに、インビトロ診断のための適切な生体マーカーの組み合わせに関する。プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、好ましくは、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩは、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断のための優れた感受性および特異性を実証する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法であって、ここでプロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの測定が行われる、方法。
【請求項２】
気道および肺の感染もしくは慢性疾患の増大した危険性および／または不利な予後を有する患者を同定するための、請求項１に記載の気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法。
【請求項３】
前記患者は、徴候性の患者および／または無徴候性の患者、特に、急患である、請求項１または２に記載の気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法。
【請求項４】
臨床的決定、特に、薬物療法、特に抗生物質によるさらなる処置および治療、特に、集中医療または救急救命医療において行うための、ならびに前記患者の入院のための、請求項１〜３のいずれか１項に記載の気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法。
【請求項５】
前記マーカープロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの測定が、各場合において、試験されるべき患者においてプロカルシトニンおよび／またはＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、またはその部分配列の群と組み合わせて、行われる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法。
【請求項６】
前記診断は、予防のために、予後のために、早期認識および鑑別診断による認識のために、重篤度の程度の評価のために、ならびに治療の過程にわたる予後の評価のために行われることで特徴づけられる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法。
【請求項７】
前記マーカープロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの、前記診断のためのカットオフ（閾値）、６〜２０ｐｍｏｌ／Ｌ、特に、６〜１０ｐｍｏｌ／Ｌ、または前記予後のためのカットオフ（閾値）、１０〜５０ｐｍｏｌ／Ｌ、特に、１０〜４０ｐｍｏｌ／Ｌは、有意（特異的）であることで特徴づけられる、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
さらに、炎症マーカーの群から選択される少なくとも１種の他のマーカーの測定が行われることで特徴づけられる、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記炎症マーカーは、サイトカイン（例えば、ＴＮＦ−α、例えば、インターロイキン（例えば、ＩＬ−６）、および例えば、接着分子（例えば、ＶＣＡＭもしくはＩＣＡＭ）のうちの少なくとも１種のマーカーから選択されることで特徴づけられる、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記マーカーの並行測定または同時測定が行われることで特徴づけられる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記測定は、少なくとも１つの患者サンプルを使用して行われることで特徴づけられる、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記測定は、自動化分析デバイスを用いて、特に、Ｋｒｙｐｔｏｒによって行われることで特徴づけられる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記測定は、迅速試験によって、特に、単一のパラメーター測定または複数のパラメーター測定を用いて行われることで特徴づけられる、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記危険性の層化は、予後について、初期認識および鑑別診断による認識について、重篤度の程度の評価のために、ならびに急性冠症候群の治療過程にわたる予後の評価のために、行われることで特徴づけられる、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩ、およびおそらくさらなるマーカーの使用。
【請求項１６】
気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための、プロカルシトニンおよび／またはＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、ならびにおそらくさらなるマーカーとの組み合わせにおける、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの使用。
【請求項１７】
気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のためのキットであって、該キットは、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩ、ならびにおそらく請求項８または９のうちの１項に記載の他のマーカー、および補助物質を測定するための検出試薬を含む、キット。
【請求項１８】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法を行うための診断デバイス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、気道および肺の感染もしくは慢性疾患、特に、下気道感染（ＬＲＴＩ）およびＣＯＰＤ（慢性閉塞性肺疾患）の診断および／または危険性の層化のための方法に関する。ここでプロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチン（ｃｏｐｅｐｔｉｎ）もしくはニューロフィジンＩＩの決定が行われる。さらに、本発明は、この目的に適した、インビトロ診断のための生体マーカーの組み合わせに関する。
【０００２】
適切な治療の目的で、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の初期診断および区別（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）は、臨床的決定を行うことの必要性と関連して、救急救命室において既に必要とされている。気道および肺の感染もしくは慢性疾患の場合における非特異的症状（呼吸困難  ｄｉｆｆｉｃｕｌｔｙ  ｂｒｅａｔｈｉｎｇ）が原因で、他の疾患からの区別および識別（ｄｉｓｔｉｎｃｔｉｏｎ）の両方、ならびに気道および肺の具体的感染もしくは慢性疾患の認識は、必須である。
【０００３】
コペプチン（Ｃ末端プロＡＶＰともいう）は、ＷＯ２００６／０１８３１５（ＢＲＡＨＭＳ  ＡＧ）において、心疾患および関連する肺機能不全（「肺障害」）のインビトロ診断のための生体マーカーとして記載されている。これに関連するコペプチンアッセイは、Ｍｏｒｇｅｎｔｈａｌｅｒら（Ｎｉｌｓ  Ｇ．Ｍｏｒｇｅｎｔｈａｌｅｒ，Ｊｏａｃｈｉｍ  Ｓｔｒｕｃｋ，Ｃｈｒｉｓｔｉｎｅ  Ａｌｏｎｓｏ  ａｎｄ  Ａｎｄｒｅａｓ  Ｂｅｒｇｍａｎｎ，Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｏｐｅｐｔｉｎ，ａ  Ｓｔａｂｌｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｏｆ  Ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ５２：１１２−１１９，２００６）に記載される。
【０００４】
当該分野の技術水準において、上記プロカルシトニン（ＰＣＴ）測定は、細菌性敗血症（閾値＞０．５ｎｇ／ｍＬ）を他の疾患原因から区別するための研究の目的について記載される（ＥＰ０６５６１２１）。ＰＣＴはまた、上記研究が主に診断と関連している場合に、既に診断されている肺炎の原因における異なる病因タイプ間を区別するために、肺炎と関連する文献中に記載される（Ｐｒａｔ  Ｃ，Ｄｏｍｉｎｇｕｅｚ  Ｊ，Ａｎｄｒｅｏ  Ｆ，Ｂｌａｎｃｏ  Ｓ，Ｐａｌｌａｒｅｓ  Ａ，Ｃｕｃｈｉｌｌｏ  Ｆ，Ｒａｍｉｌ  Ｃ，Ｒｕｉｚ−Ｍａｎｚａｎｏ  Ｊ，Ａｕｓｉｎａ  Ｖ，プロカルシトニンおよびｎｅｏｐｔｅｒｉｎ  ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ａｅｔｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｓｅｖｅｒｉｔｙ  ｏｆ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ，Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ．５２（３）（２００６）：ｐｐ１６９−１７７ならびにＭａｓｉａ  Ｍ，Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ  Ｆ，Ｓｈｕｍ  Ｃ，Ｐａｄｉｌｌａ  Ｓ，Ｎａｖａｒｒｏ  ＪＣ，Ｆｌｏｒｅｓ  Ｅ，Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ  Ｉ，Ｍａｓｉａ  Ｍ，Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ  Ｆ，Ｓｈｕｍ  Ｃ，Ｐａｄｉｌｌａ  Ｓ，Ｎａｖａｒｒｏ  ＪＣ，Ｆｌｏｒｅｓ  Ｅ，Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ  Ｉ、Ｃｈｅｓｔ  １２８（４）（２００５）：ｐｐ２２２３−２２３９、Ｂｏｕｓｓｅｋｅｙ  Ｎ，Ｌｅｒｏｙ  Ｏ，Ｇｅｏｒｇｅｓ  Ｈ，Ｄｅｖｏｓ  Ｐ，ｄ’Ｅｓｃｒｉｖａｎ  Ｔ，Ｇｕｅｒｙ  Ｂ，Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  ｖａｌｕｅｓ  ｏｆ  ａｄｍｉｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ  ｌｅｖｅｌｓ  ｉｎ  ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ−ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ  ｉｎ  ａｎ  ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ  ｃａｒｅ  ｕｎｉｔ．Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ３３（４）（２００５）：ｐｐ  ２５７−６３）。Ｚｈｏｕら（Ｚｈｏｕ  ＣＤら  Ｚｈｏｎｇｇｕｏ  Ｗｅｉ  Ｚｈｏｎｇ  Ｂｉｎｇ  Ｊｉ  Ｊｉｕ  Ｙｉ  Ｘｕｅ．２００６  Ｊｕｎ，１８（６），３７０−２）によって記載される研究において、ＰＣＴは、集中治療室における人工呼吸器関連肺炎（ｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）の初期診断のための診断マーカーとして表される。ＰＣＴはまた、肺炎における診断マーカーとして記載されている（Ｐｒａｔら．２００６（前出）およびＭａｓｉａ  Ｍら  ２００５（前出），Ｂｏｕｓｓｅｋｅｙ  Ｎら．２００５（前出）、Ｃｈｒｉｓｔ−Ｃｒａｉｎ  Ｍ，Ｍｏｒｇｅｎｔｈａｌｅｒ  ＮＧ，Ｓｏｌｚ  Ｄ，Ｍｕｌｌｅｒ  Ｃ，Ｂｉｎｇｉｓｓｅｒ  Ｒ，Ｈａｒｂａｒｔｈ  Ｓ，Ｔａｍｍ  Ｍ，Ｓｔｒｕｃｋ  Ｊ，Ｂｅｒｇｍａｎｎ  Ａ，Ｍｕｌｌｅｒ  Ｂ，Ｐｒｏ−ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｌｉｎ  ｔｏ  ｐｒｅｄｉｃｔ  ｓｅｖｅｒｉｔｙ  ａｎｄ  ｏｕｔｃｏｍｅ  ｉｎ  ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ−ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ，Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  １０（３）（２００６）：ｐｐ  Ｒ９６）。さらに、抗生物質治療を要する臨床的に関連する感染（細菌性肺炎を含む）が、ＰＣＴを用いて、それぞれ、＞０．１ｎｇ／ｍＬかつ＞０．２５ｎｇ／ｍＬの閾値濃度において下気道の感染（肺炎を含む）を有すると疑われている患者において検出されることが示された研究が存在する（Ｃｈｒｉｓｔ−Ｃｒａｉｎ  Ｍ，Ｓｔｏｌｚ  Ｄ，Ｂｉｎｇｉｓｓｅｒ  Ｒ，Ｍｕｌｌｅｒ  Ｃ，Ｍｉｅｄｉｎｇｅｒ  Ｄ，Ｈｕｂｅｒ  ＰＲ，Ｚｉｍｍｅｒｌｉ  Ｗ，Ｈａｒｂａｒｔｈ  Ｓ，Ｔａｍｍ  Ｍ，Ｍｕｌｌｅｒ  Ｂ，Ｐｒｏｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ−ａｃｑｕｉｒｅｄ  Ｐｎｅｕｍｏｎｉａ：Ａ  Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  Ｔｒｉａｌ，Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ  １７４（１）（２００６），ｐｐ．８４−９３およびＣｈｒｉｓｔ−Ｃｒａｉｎ  Ｍ，Ｊａｃｃａｒｄ−Ｓｔｏｌｚ  Ｄ，Ｂｉｎｇｉｓｓｅｒ  Ｒ，Ｇｅｎｃａｙ  ＭＭ，Ｈｕｂｅｒ  ＰＲ，Ｔａｍｍ  Ｍ，Ｍｕｌｌｅｒ  Ｂ，Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｐｒｏｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ−ｇｕｉｄｅｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｎ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｕｓｅ  ａｎｄ  ｏｕｔｃｏｍｅ  ｉｎ  ｌｏｗｅｒ  ａｉｒｗａｙ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ：ｃｌｕｓｔｅｒ−ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｓｉｎｇｌｅ−ｂｌｉｎｄｅｄ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ  ｔｒｉａｌ，Ｌａｎｃｅｔ  ２１；３６３（９４０９）（２００４）：ｐｐ６００−６０７，Ｓｔｏｌｚ  Ｄ，Ｃｈｒｉｓｔ−Ｃｒａｉｎ  Ｍ，Ｇｅｎｃａｙ  ＭＭ，Ｂｉｎｇｉｓｓｅｒ  Ｒ，Ｈｕｂｅｒ  ＰＲ，Ｍｕｌｌｅｒ  Ｂ，Ｔａｍｍ  Ｍ，Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｖａｌｕｅ  ｏｆ  ｓｉｇｎｓ，ｓｙｍｐｔｏｍｓ  ａｎｄ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｖａｌｕｅｓ  ｉｎ  ｌｏｗｅｒ  ａｉｒｗａｙ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，Ｓｗｉｓｓ  Ｍｅｄ  Ｗｋｌｙ  ８；１３６（２７−２８）（２００６）：ｐｐ  ４３４−４４０）。
【０００５】
しかし、コペプチンおよびプロカルシトニンのマーカー組み合わせは、記載されていない。
【０００６】
ＣＯＰＤに関する特定の臨床研究は、公知である（Ｓｏｌｅｒ−Ｃａｔａｌｕｎａ  ＪＪ，Ｍａｒｔｉｎｅｚ−Ｇａｒｃｉａ  ＭＡ，Ｒｏｍａｎ  Ｓａｎｃｈｅｚ  Ｐ，ら．  Ｓｅｖｅｒｅ  ａｃｕｔｅ  ｅｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ．  Ｔｈｏｒａｘ  １００５；６０：９２５−９３１；Ａｎｔｏｎｅｌｌｉ  Ｉｎｃａｌｚｉ  Ｒ，Ｆｕｓｏ  Ｌ，Ｄｅ  Ｒｏｓａ  Ｍ，ら．  Ｃｏ−ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ  ｔｏ  ｐｒｅｄｉｃｔ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ．  Ｅｕｒ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｊ  １９９７；１０：２７９４−２８００；Ｙｏｈａｎｎｅｓ  ＡＭ，Ｂａｌｄｗｉｎ  ＲＣ，Ｃｏｎｎｏｌｌｙ  ＭＪ．  Ｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ  ｏｆ  １−ｙｅａｒ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｄｉｓｃｈａｒｇｅｄ  ｆｒｏｍ  ｈｏｓｐｉｔａｌ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ａｃｕｔｅ  ｅｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ．  Ａｇｅ  Ａｇｅｉｎｇ  ２００５；３４：４９１−４９６；Ａｌｍａｇｒｏ  Ｐ，Ｂａｒｒｅｉｒｏ  Ｂ，Ｏｃｈｏａ  ｄｅ  Ｅｃｈａｇｕｅｎ  Ａ，ら．  Ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｈｏｓｐｉｔａｌ  ｒｅａｄｍｉｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ．  Ｒｅｓｐｉｒａｔｉｏｎ  ２００６；７３：３１１−３１７）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかし、危険性のある患者の初期および完全な検出が成功しないことが、以前に既知のマーカーを使用する公知の診断方法の欠点であるので、危険性の層化は、不十分な程度にのみ起こる。従って、本発明の根底にある１つの課題は、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法を開発することにあり、これは、危険性のある患者の改善された検出を可能にする。
【０００８】
当該分野の技術水準において、上記マーカーの十分な感受性および／または特異性が一般に達成されていないことは、さらに不利である。
【０００９】
従って、別の課題は、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法を利用可能にすることにある。ここで少なくとも１種のマーカーまたはマーカーの組み合わせは、十分な感受性および特異性を実証する。
【００１０】
従って、本発明の課題は、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法を利用可能にすることである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
この課題は、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法によって達成され、ここでプロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの測定が行われる（本明細書以降：本発明に従う方法）。
【００１２】
驚くべきことに、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、好ましくは、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩは、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断のための優れた感受性および特異性を実証する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、プレ−プロバソプレシンのアミノ酸配列を示す。
【図２】図２は、ＣＡＰ／肺炎を有する患者の病院滞在と、入室時の測定されたコペプチン血漿値との間の関係を示す。これは、経時的な病院退院の確率として示される。入室時にコペプチン値＜４０ｐｍｏｌ／Ｌを有する患者は、コペプチン値＞４０ｐｍｏｌ／Ｌを有する患者と比較して、有意に短い病院滞在を有した。示された日数（ｄ）での患者数：コペプチン＜４０ｐｍｏｌ／Ｌ：ｎ＝１４０（０ｄ）  ８８（５ｄ）  ５４（１０ｄ）  ２８（１５ｄ）  １２（２０ｄ）  １（２５ｄ）  １（３０ｄ）  ０（３５ｄ）コペプチン3４０ｐｍｏｌ／Ｌ：ｎ＝２７（０ｄ）  ２３（５ｄ）  １８（１０ｄ）  １２（１５ｄ）  ５（２０ｄ）  ４（２５ｄ）  １（３０ｄ）  ０（３５ｄ）。
【図３】図３は、合併症の頻度（死亡、退院後の反復入院）と、上記入室時のコペプチン血漿値吐の間の関係を示す。これは、事象がない（事象から解放されている）時間として示される。事象は、死亡または最初の退院後の反復入院として定義される。入室時にコペプチン値＜４０ｐｍｏｌ／Ｌを有する患者は、コペプチン値＞４０ｐｍｏｌ／Ｌを有する患者より有意に低い頻度のこの事象を有した。示された日数（ｄ）での患者数：コペプチン＜４０ｐｍｏｌ／Ｌ：ｎ＝１４０（０ｄ）  １３３（３０ｄ）  １２９（６０ｄ）  １２６（９０ｄ）  １２３（１２０ｄ）  １２０（１５０ｄ）  １１５（１８０ｄ）コペプチン＞４０ｐｍｏｌ／Ｌ：ｎ＝２７（０ｄ）  ２１（３０ｄ）  １６（６０ｄ）  １６（９０ｄ）  １５（１２０ｄ）  １３（１５０ｄ）  １２（１８０ｄ）。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の範囲内において、用語「気道および肺の感染」とは、特に、細菌、ウイルス、真菌、もしくは原生動物によって引き起こされる感染、例えば、下気道感染（ＬＲＴＩ）、気管支炎、肺炎、サルコイドーシス、気管支拡張症、非心原性肺水腫（ｎｏｎ−ｃａｒｄｉａｃ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｅｄｅｍａ）のような適応症を意味すると理解される。
【００１５】
さらに、下気道感染（ＬＲＴＩ）、気管支炎、腐敗性気管支炎、肺炎は、本発明によれば、特に好ましい。肺炎、特に、市中肺炎（ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）（ＣＡＰ）、および下気道感染（ＬＲＴＩ）は、非常に好ましい。
【００１６】
本発明の範囲内において、肺炎は、肺組織の急性疾患もしくは慢性疾患を意味することが理解され、そしてその感染は、細菌、ウイルスもしくは真菌、原性動物、希には、毒性物質の吸入によっても、または免疫学的に引き起こされる。臨床医に関しては、肺炎は、胸部Ｘ線で認められ得る少なくとも１種の浸潤物との組み合わせにおいて、種々の症状（発熱もしくは低体温症、震え、咳、胸膜性胸痛（ｐｌｅｕｒｉｔｉｃ  ｔｈｏｒａｘ  ｐａｉｎ）、増大した喀痰生成、増大した呼吸率、鈍い打診音、気管支性呼吸、耳近くの捻髪音、胸膜摩擦音（ｐｌｅｕｒａｌ  ｒｕｂｂｉｎｇ））の一群である（Ｈａｒｒｉｓｏｎｓ  Ｉｎｎｅｒｅ  Ｍｅｄｉｚｉｎ｛Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ｝，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  ｂｙ  Ｍａｎｆｒｅｄ  Ｄｉｅｔｅｌ，Ｎｏｒｂｅｒｔ  Ｓｕｔｔｏｒｐ  ａｎｄ  Ｍａｒｔｉｎ  Ｚｅｉｔｚ，ＡＢＷ  Ｗｉｓｓｅｎｓｃｈａｆｔｓｖｅｒｌａｇ  ２００５）。
【００１７】
本発明の範囲内において、「肺および気道の慢性疾患」とは、間質性肺疾患および肺線維症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、特にＣＯＰＤ感染悪化、気管支喘息、特に、気管支喘息の場合における感染悪化、気管支癌のような適応症であることが理解される。ＣＯＰＤ、特に、ＣＯＰＤ感染悪化が特に好ましい。
【００１８】
本発明によれば、ＣＯＰＤとは、咳、増大した喀痰、およびストレス下での呼吸困難によって特徴づけられる慢性疾患の群をいう。慢性閉塞性気管支炎および肺気腫が主に言及されるべきである。両方の疾患プロフィールが、呼息（ｅｘｈａｌａｔｉｏｎ）（呼気作用（ｅｘｐｉｒａｔｉｏｎ））が特に妨げられることで特徴づけられる。ＣＯＰＤの主な症状の口語的用語はまた、「喫煙による咳（ｓｍｏｋｅｒ’ｓ  ｃｏｕｇｈ）」である。本発明は、急性悪化の場合において特に有利である。
【００１９】
本発明によれば、用語「危険性の層化」とは、気道および肺の感染もしくは慢性疾患のより集中的な診断および治療／処置の目的で、より乏しい予後を有する患者、特に急患および危険性のある患者を見いだすことを包含する。この目的は、最も有利な考えられる過程を可能にする。従って、本発明に従う危険性の層化は、医薬、特に抗生物質を用いて、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の場合において考えられる有効な処置方法を可能にする｛原文のまま−文中第１の部分では、単数形の直接目的語、この直接目的語に関連する関連文節においては複数形を受ける動詞｝。
【００２０】
この目的のために、本発明はまた、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の増大した危険性および／または不利な予後を有する患者、特に、徴候的な患者および／または無徴候性の患者の場合において、特に、急患の同定に関する。
【００２１】
救急救命医療および／または集中治療医療（ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ−ｃａｒｅ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ）の場合、特に、信頼性のある層化は、本発明に従う方法によって、特に、有利な様式において、行われ得る。従って、本発明に従う方法は、迅速な治療成功をもたらし、死亡の回避をもたらす臨床的決定を可能にする。このような臨床的決定はまた、本発明によれば、上記患者の入院を包含する。
【００２２】
この理由が原因で、本発明はまた、臨床的決定（例えば、さらなる処置および治療を行う目的で、薬物療法、特に抗生物質によって、好ましくは、集中治療医療もしくは救急救命医療の時間が重要な状況において、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法に関する。
【００２３】
従って、別の好ましい実施形態において、本発明に従う方法は、気道および肺の感染または慢性疾患の治療制御に関する。
【００２４】
本発明に従う方法の別の好ましい実施形態において、上記診断および／または危険性の層化は、予後のため、初期認識および鑑別診断による認識のため、重篤度の程度の評価のため、ならびに治療の過程にわたる進行の評価のために行われる。
【００２５】
別の好ましい実施形態において、本発明は、気道および肺の感染もしくは慢性疾患のインビトロ診断ならびに／または危険性の層化のための方法に関し、ここで上記マーカー、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド（特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩ）の測定は、試験される患者に対して行われる。しかし、コペプチンまたはそのフラグメントもしくは部分配列が特に好ましい。特に、コペプチンは、インビトロ診断の目的で、血清および血漿中での特に優れた安定性を示す（Ｍｏｒｇｅｎｔｈａｌｅｒ  ＮＧ，Ｓｔｒｕｃｋ  Ｊ，Ａｌｏｎｓｏ  Ｃ．ら．  Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｏｐｅｐｔｉｎ，ａ  ｓｔａｂｌｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｏｆ  ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ，Ｃｌｉｎ  Ｃｈｅｍ  ２００６；５２：１１２−１１９）。
【００２６】
さらに、本発明は、上記実施形態のうちの１つによれば、気道および肺の感染および慢性疾患の診断および／または危険性の層化のための方法、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の初期診断もしくは鑑別診断または予後のためのインビトロ診断のための方法に関し、ここで上記症状の出現後、上記マーカープロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの６〜２０ｐｍｏｌ／Ｌのカットオフ（閾値）値は、診断および／または危険性の層化に対して有意（特異的）である。さらに、好ましくは、上記症状の出現の２時間後に、６〜１０ｐｍｏｌ／Ｌ、特に、９ｐｍｏｌ／Ｌのカットオフ（閾値）が好ましい。
【００２７】
さらに、本発明は、上記実施形態のうちの１つによれば、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための方法、あるいは気道および肺の感染もしくは慢性疾患の初期診断もしくは鑑別診断または予後のための方法に関し、ここで上記症状の出現後、上記マーカープロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの１０〜５０ｐｍｏｌ／Ｌのカットオフ（閾値）は、予後および／または危険性の層化に対して有意（特異的）である。さらに、１０〜４０ｐｍｏｌ／Ｌのカットオフ（閾値）が好ましい。
【００２８】
これに基づいて、本発明に従うこれらの方法は、有利なことには、感受性である。
【００２９】
本発明に従う方法の一実施形態において、体液、特に血液、必要に応じて、全血もしくは血清もしくは入手可能な血漿が試験されるべき患者から採取され、上記診断は、インビトロで／エキソビボで（すなわち、ヒトもしくは動物の身体の外で）行われる。上記マーカープロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンおよびニューロフィジンＩＩの測定に基づいて、気道および肺の感染もしくは慢性疾患に対する優れた感受性および特異性が達成され、そして上記診断または危険性の層化は、少なくとも１種の患者サンプル中に存在するその量を使用して行われ得る。しかし、上記マーカーコペプチン（ｐｒｏＡＶＰの安定なフラグメントまたはプレ−プロバソプレシン）またはそのフラグメントもしくは部分配列が特に好ましい。
【００３０】
本発明の範囲内において、「プロバソプレシン」とは、プレ−プロバソプレシンから得られ得るヒトタンパク質もしくはポリペプチドであると理解され、そして上記プレ−プロバソプレシンの範囲内のアミノ酸２９−１６４（ＷＯ２００６／０１８３１５および図１もまた参照のこと）、およびそれから得られ得るフラグメントもしくは部分ペプチド、特に、コペプチン（フラグメント：アミノ酸１２６−１６４（３９アミノ酸配列：ＡＳＤＲＳＮＡＴＱＬ  ＤＧＰＡＧＡＬＬＬＲ  ＬＶＱＬＡＧＡＰＥＰ  ＦＥＰＡＱＰＤＡＹ）もしくはニューロフィジンＩＩ（フラグメント：プレ−プロバソプレシンのアミノ酸３２−１２４（９３アミノ酸配列：ＡＭＳＤＬＥＬＲＱＣ  ＬＰＣＧＰＧＧＫＧＲ  ＣＦＧＰＳＩＣＣＡＤ  ＥＬＧＣＦＶＧＴＡＥ  ＡＬＲＣＱＥＥＮＹＬ  ＰＳＰＣＱＳＧＱＫＡ  ＣＧＳＧＧＲＣＡＡＦ  ＧＶＣＣＮＤＥＳＣＶ  ＴＥＰＥＣＲＥＧＦＨ  ＲＲＡ）を含む。さらに、本発明に従うこれらポリペプチドは、翻訳後修飾（例えば、グリコシル化、脂質化、もしくは誘導体化を示し得る。
【００３１】
別の実施形態において、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの測定は、さらなるマーカー、具体的に好ましくは、気道および肺の感染もしくは慢性疾患を既に示すものを用いてさらに行われ得る。
【００３２】
この理由が原因で、本発明は、上記測定が、試験されるべき患者において、炎症マーカーの群から選択される少なくとも１種のさらなるマーカーでさらに実施される、本発明に従う方法の一実施形態に関する。
【００３３】
本発明によれば、上記炎症マーカーは、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、サイトカイン（例えば、ＴＮＦ−α）、例えば、インターロイキン（例えば、ＩＬ−６）、例えば、プロカルシトニン（１−１１６、３−１１６）、ならびに接着分子（例えば、ＶＣＡＭもしくはＩＣＡＭ）の群から選択される少なくとも１種のマーカーから選択され得る。
【００３４】
特に好ましい実施形態において、本発明は、生体マーカー、具体的には、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩと、プロカルシトニン（１−１１６、３−１１６）および／またはＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）の群との特に有利な組み合わせに関する。
【００３５】
この理由が原因で、本発明は、気道および肺の感染もしくは慢性疾患のインビトロ診断ならびに／または危険性の層化のための方法に関し、ここで上記マーカープロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの測定は、試験されるべき患者において、各場合において、プロカルシトニン（１−１１６、３−１１６）もしくはその部分配列と組み合わせて行われる。繰り返すと、ニューロフィジンＩＩ、コペプチンおよびプロカルシトニンの組み合わせは特に好ましく、特に、コペプチンおよびプロカルシトニンの組み合わせが好ましい。これら述べられた生体マーカー組み合わせは、特に有利な様式で相乗効果を実証し、診断に対して改善された特異性および感受性がもたらされる。
【００３６】
本発明の範囲内において、「プロカルシトニン」とは、出願人のＥＰ０６５６１２１、ＥＰ１１２１６００、およびＤＥ１００２７９５４Ａ１に記載されるように、１−１１６アミノ酸もしくは２―１６アミノ酸（ＰＣＴ  ２−１１６）もしくは３−１１６アミノ酸（ＰＣＴ  ３−１１６）のアミノ酸配列を有するヒトタンパク質またはポリペプチドであると理解される。さらに、本発明に従うプロカルシトニンは、翻訳後修飾（例えば、グリコシル化、脂質化、または誘導体化）を実証し得る。さらに、プロカルシトニンの部分配列またはフラグメントはまた、含められる。
【００３７】
本発明の別の実施形態において、本発明に従う方法は、上記マーカーの並行測定または同時測定（例えば、９６穴以上を有するマルチタイタープレート）によって、インビトロ診断の範囲内で行われ得る。ここで上記測定は、少なくとも１名の患者のサンプルに対して行われる。
【００３８】
さらに、本発明に従う方法およびその測定は、自動化分析デバイスを用いて、特に、Ｋｒｙｐｔｏｒ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｋｒｙｐｔｏｒ．ｎｅｔ／）を用いて行われ得る。
【００３９】
別の実施形態において、本発明に従う方法およびその測定は、単一のパラメーター測定を使用するかまたは複数のパラメーター測定を使用するかに関わらず、迅速な試験（例えば、側方流試験（ｌａｔｅｒａｌ  ｆｌｏｗ  ｔｅｓｔ））によって行われ得る。特に好ましい実施形態において、これは、救急救命時診断における使用に適した自己試験もしくはデバイスである。
【００４０】
さらに、本発明は、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための、ならびに／あるいは気道および肺の感染もしくは慢性疾患の初期診断もしくは鑑別診断のためのインビトロ診断または気道および肺の感染もしくは慢性疾患の予後のための、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの使用に関する。
【００４１】
特定の実施形態において、本発明は、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のための、各場合における、プロカルシトニン（１−１１６、３−１１６）またはその部分配列との組み合わせにおける、プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩの使用に関する。
【００４２】
本発明に従う使用は、必要に応じて、少なくとも１種の他の適切なマーカー（「パネル」もしくは「クラスター」といわれる）とともに行われ得る。
【００４３】
別の課題は、本発明に従う方法を行うための対応する診断デバイスを利用可能にすることである。
【００４４】
本発明の範囲内において、このような診断デバイスは、アレイもしくはアッセイ（例えば、免疫アッセイ、ＥＬＩＳＡなど）、最も広義において、本発明に従う方法を行うためのデバイスであることが特に理解される。
【００４５】
本発明はさらに、気道および肺の感染もしくは慢性疾患の診断ならびに／または危険性の層化のためのキットに関し、これらのキットは、上記プロバソプレシン（ｐｒｏＡＶＰ）またはそのフラグメントおよび部分ペプチド、特に、コペプチンもしくはニューロフィジンＩＩを測定するための検出試薬、およびおそらく上記で言及されるさらなるマーカーを含む。このような検出試薬は、例えば、抗体などを含む。
【００４６】
以下の実施例および図面は、本発明のより詳細な例示を果たすが、本発明をこれら実施例および図に限定することはない。
【実施例】
【００４７】
実施例１
血液サンプルを、呼吸窮迫の主な症状を有する、病院の救急救命室に来た患者から、初期評価（ｉｎｉｔｉａｌ  ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ）の間に採取した。
試験被験体の数：１６７
サンプル採取、生体マーカー分析：
血液サンプルを、標準血清モノベット（Ｍｏｎｏｖｅｔｔｅ）によって採取した。２０〜４０分間の凝固時環の後、２０００ｇで１５分間、遠心分離を行った；その後の血清分離を、デカントすることにより行った。上記血清サンプルを、さらに使用するときまで−２０℃で保存した。
【００４８】
Ｍｏｒｇｅｎｔｈａｌｅｒら（Ｍｏｒｇｅｎｔｈａｌｅｒ  ＮＧ，Ｓｔｒｕｃｋ  Ｊ，Ａｌｏｎｓｏ  Ｃ，ら  Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｏｐｅｐｔｉｎ，  ａ  ｓｔａｂｌｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｏｆ  ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ，  Ｃｌｉｎ  Ｃｈｅｍ  ２００６；  ５２：１１２−１１９）に従うコペプチンアッセイ。
検出限界：１．７ｐｍｏｌ／Ｌ。
【００４９】
急性の悪化（事象）の場合のＣＯＰＤ：
コペプチン、ＣＲＰ、およびプロカルシトニンは、１４日後または６ヶ月後に有意に増大することを測定することが可能であった。
【００５０】
１６７人の患者（年齢（平均）７０歳）のコペプチン値を研究した。上記患者は、現存のＣＯＰＤの急性悪化が原因で救急救命室に来た。上記患者を、入室の１４日後、および６ヶ月後に、彼らの肺機能に関して臨床的に試験した。表１は、救急救命室に入室した際の上記患者の臨床パラメーターの全体像を示す。
【００５１】
【表１−１】
2010509576.tif 000002
【００５２】
【表１−２】
2010509576.tif 000003
多変量分析（ｐ＝０．００６、コックス回帰分析）において、上記測定されたコペプチン値は、年齢、現存の併存疾患、低酸素血、および制限された肺機能とは無関係に、乏しい臨床経過の予測変数であった。入室時に４０ｐｍｏｌ／Ｌ以上のコペプチン値を有した患者のうちの４４％において、成功裏の長期治療を達成することが可能であるに過ぎなかった。これとは対照的に、４０ｐｍｏｌ／Ｌ未満のコペプチン値を有した患者のうちの８２％において成功を達成することが可能であった（ｐ＜０．０００１）。
【００５３】
このことから、コペプチンは、ＣＯＰＥ（および他の肺疾患）を有する患者の場合において、不利な臨床経過の予後マーカーを表すことが明らかになっている。コペプチンは、初期時点で、彼らの現存する肺疾患に対して特に集中治療を要する患者を同定することができた。
【００５４】
表２ならびに図２および図３は、詳細にその状況を説明する
【００５５】
【表２】
2010509576.tif 000004
【図１】
2010509576.tif 000005
【図２】
2010509576.tif 000006
【図３】
2010509576.tif 000007
【配列表】
2010509576000001.app
【国際調査報告】
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2010509576.tif 000009
2010509576.tif 000010
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