(57)【要約】  本発明は、ジヒドロリポ酸と、コエンザイムＱｎの還元型とを含むソフトゼラチンカプセルを含み、ジヒドロリポ酸が、コエンザイムＱｎの還元剤として、また、場合により、溶媒として作用する組成物を記載する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物であって、組成物が８％の水を含有するエタノール溶液を含まないという条件で、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）を含む組成物。
【請求項２】
さらに、担体を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
担体がＤＨＬＡである、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
担体が、植物油、魚油またはそれらの組み合わせである、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
さらに、抗酸化剤または抗酸化酵素を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
抗酸化剤が、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、ビタミンＣ、ビタミンＣ誘導体、プロブコール、リコピン、ビタミンＡ、カロテノイド、ビタミンＢ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ誘導体、フラボノイド、ポリフェノール、グルタチオン、ピロロキノリンキノン、ピクノジェノール、フラバンジェノール、セレン、リポ酸、リポ酸誘導体、Ｌ−カルニチンまたはそれらの混合物である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
抗酸化酵素が、スーパーオキシドジムスターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、グルタチオンレダクターゼ、カタラーゼおよびアスコルビン酸ペルオキシダーゼまたはそれらの混合物である、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
ソフトゼラチンカプセル内に被包されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物であって、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）から本質的になる組成物。
【請求項１０】
８％の水を含有するエタノール溶液を含まない、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
さらに、担体を含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】
担体がＤＨＬＡである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
担体が、植物油、魚油またはそれらの組み合わせである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１４】
さらに、抗酸化剤または抗酸化酵素を含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１５】
抗酸化剤が、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、ビタミンＣ、ビタミンＣ誘導体、プロブコール、リコピン、ビタミンＡ、カロテノイド、ビタミンＢ、ビタミンＢ誘導体、フラボノイド、ポリフェノール、グルタチオン、ピロロキノリンキノン、ピクノジェノール、フラバンジェノール、セレン、リポ酸、リポ酸誘導体またはそれらの混合物である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
抗酸化酵素が、スーパーオキシドジムスターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、グルタチオンレダクターゼ、カタラーゼおよびアスコルビン酸ペルオキシダーゼまたはそれらの混合物である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
ソフトゼラチンカプセル内に被包されている、請求項９に記載の組成物。
【請求項１８】
還元型コエンザイムＱ−１０溶液を調製する方法であって、
コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）を、十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）と接触させて、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するステップを含む方法。
【請求項１９】
歯周病、ミトコンドリア関連疾患および障害、パーキンソン病、プラター−ウィリー（Ｐｒａｔｅｒ−Ｗｉｌｌｅｙ）症候群、片頭痛または頭痛を治療する方法であって、それを必要とする個体に、有効量の請求項１に記載の組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項２０】
歯周病、ミトコンドリア関連疾患および障害、パーキンソン病、プラター−ウィリー（Ｐｒａｔｅｒ−Ｗｉｌｌｅｙ）症候群、片頭痛または頭痛を治療する方法であって、それを必要とする個体に、有効量の請求項９に記載の組成物を投与するステップを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）の還元型の独特の組み合わせに関する。ＣｏＱ１０は、ジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）の存在下でユビキノールに還元されるが、ここでは、ＤＨＬＡは、還元剤としてだけでなく、担体としても働く。
【背景技術】
【０００２】
ＣｏＱ−１０（コエンザイムＱ１０）は、ビタミンＫと構造的に同様である脂溶性キノン、ベンゾキノンであり、ユビキノンとしてよく知られている。ＣｏＱ−１０は、ほとんどの生物において見られ、細胞エネルギーの生成にとって必須である。ＣｏＱ−１０（２，３ジメチル−５メチル−６−デカプレニルベンゾキノン）は、肉類および海産物中に少量で見られる内因性抗酸化剤である。ＣｏＱ−１０はすべてのヒト細胞に見られるが、ＣｏＱ−１０の最高濃度は、心臓、肝臓、腎臓および膵臓において生じる。多数の哺乳類種の臓器において天然に見られる。
【０００３】
ＣｏＱ−１０は、ミトコンドリアと呼ばれる細胞小器官の膜内にあるので重要な栄養素である。ミトコンドリアは、好気性（酸素）代謝の工程によって分解された栄養素に由来するプロトンを往復させることによって、細胞エネルギー、すなわちＡＴＰを生成するその能力のために、細胞の「発電設備」として知られている。ＣｏＱ−１０はまた、抗酸化剤としての二次的役割も有する。ＣｏＱ−１０は、ＡＴＰ合成における関与のために、ほとんどすべての身体の細胞の機能に影響を及ぼし、そのため、すべてのヒト組織および臓器の健康にとって不可欠なものとなっている。ＣｏＱ−１０は、特に、最も代謝的に活性である細胞：心臓、免疫系、歯肉および胃粘膜に影響を及ぼす。
【０００４】
ＣｏＱ−１０は、ほとんどの親水性溶媒、例えば、水に難溶性である。したがって、ＣｏＱ−１０は、粉末の形で、錠剤として、懸濁液として投与されることが多い。しかし、これらの方法によるＣｏＱ−１０の送達は、個体に対する物質のバイオアベイラビリティを制限する。
【０００５】
いくつかの臨床試験により、ＣｏＱ−１０は、血圧およびコレステロールレベルの支持において有効であると示されている。さらに、ＣｏＱ−１０はまた、心血管の健康を改善することもわかっている。ＣｏＱ−１０は、種々の疾患、例えば、特定の種類の癌の阻止における必須成分であるとされている。これらの事実により、多数の人が、個体の満足できる生活状態にはＣｏＱ−１０補給が不可欠であると考えることとなっている。
【０００６】
還元型ベンゾキノンは、酸素または脂質ラジカルの有効な還元剤として知られている。いくつかの研究によって、還元型ＣｏＱ−１０（ユビキノール）は、有効な抗酸化剤であることが示されている。実際、現在、還元型ＣｏＱ−１０は、抗酸化剤活性の複雑な連鎖の一部として機能すると思われている。還元型ＣｏＱ−１０は、α−トコフェロールおよびアスコルビン酸が、生理学的系に存在する酸素またはカルボキシルラジカルによって酸化される場合に形成されるこれらの抗酸化剤のラジカルの還元において、役割を果たすことが明らかである。トコフェリルラジカルまたは外部のアスコルビン酸ラジカルの直接還元のための既知酵素はないが、すべての膜中に、ＣｏＱ−１０を還元できる酵素があり、生じた還元型ＣｏＱ−１０が、続いてトコフェリルまたはアスコルビン酸ラジカルを還元してトコフェロールまたはアスコルビン酸を提供する。還元型ＣｏＱ−１０は、脂質または酸素ラジカルとの相互作用によって形成されるセミキノンが、容易に自己酸化され、スーパーオキシドラジカルを形成するので、ＣｏＱ−１０を還元する酵素の助けなしでは、あまり有効な抗酸化剤ではない。
【０００７】
したがって、吸収され得、抗酸化活性を保持する形の還元型ＣｏＱ−１０を提供する方法および組成物が必要である。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、驚くべきことに、ジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）を含む、コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）および還元型ＣｏＱ−１０の溶液を提供する。興味深いことに、少なくとも１モル量のＤＨＬＡを、１モル当量のＣｏＱ−１０と組み合わせると、ＣｏＱ−１０の酸化型がＣｏＱ−１０の還元型に還元される。通常、９０％を越えるＣｏＱ−１０の酸化型が、ＣｏＱ−１０の還元型に変換され、特に、９５％を超え、本質的に酸化型ＣｏＱ−１０が残存しない程度までの変換が起こる。次いで、過剰のＤＨＬＡが、溶媒担体として働き、還元型ＣｏＱ−１０を安定化するのに役立ち、これによって在庫が長期間安定化される。
【０００９】
一態様では、本発明は、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）を含む、還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を提供する。特定の実施形態では、本組成物は、８％の水を含有するエタノール溶液を含まない。
【００１０】
もう１つの態様では、本発明は、本質的に、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）からなる、還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を提供する。
【００１１】
さらにもう１つの態様では、本発明は、還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を被包するソフトゼラチンカプセル剤を提供する。還元型ＣｏＱ−１０組成物は、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）を含む。
【００１２】
さらにもう１つの態様では、本発明は、本質的に、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）からなる還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を被包するソフトゼラチンカプセル剤を提供する。
【００１３】
本組成物およびソフトゼラチンカプセル剤は、種々の担体および添加剤、例えば、適した抗酸化剤および／またはビタミンをさらに含み得る。
【００１４】
本発明はまた、還元型ＣｏＱ−１０の溶液を調製する方法を提供する。
【００１５】
本発明はさらに、それを必要とする個体に、本明細書に開示される組成物のいずれかの有効量を投与することによって、ＣｏＱ−１０のレベルの低下と関連する種々の状態、例えば、ミトコンドリア関連疾患および障害、パーキンソン病、プラター−ウィリー（Ｐｒａｔｅｒ−Ｗｉｌｌｅｙ）症候群、片頭痛または頭痛を治療する方法を提供する。
【００１６】
さらにもう１つの態様では、本発明はまた、本明細書に開示されるパッケージングされた栄養補給食品を提供する。
【００１７】
複数の実施形態が開示されるので、以下の詳細な説明から当業者には本発明のさらにその他の実施形態が明らかとなる。明らかなように、本発明は、種々の明らかな態様において、すべて本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく修飾できる。したがって、詳細な説明は、本来、例示と見なされるべきであって、制限ではない。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】ＤＨＬＡ中、種々の温度でのＣｏＱ−１０の溶解度を示す図である。
【図２】ＣｏＱ−１０と、過剰のＤＨＬＡ間の反応の１時間後のＵＶスペクトログラフである。
【図３】ＣｏＱ−１０と、過剰のＤＨＬＡ間の反応の６時間後のＵＶスペクトログラフである。
【図４】３０時間にわたる過剰のＤＨＬＡを用いた、ＣｏＱ−１０の還元のグラフ表示である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明は、驚くべきことに、ジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）を含む、コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）および還元型ＣｏＱ−１０の溶液を提供する。興味深いことに、少なくとも１モル量のＤＨＬＡを、１モル当量のＣｏＱ−１０と組み合わせると、ＣｏＱ−１０の酸化型がＣｏＱ−１０の還元型に還元される。
【００２０】
通常、９０％を越えるＣｏＱ−１０の酸化型が、ＣｏＱ−１０の還元型に変換され、特に、９５％、より特には、９６％、さらにより特には、９７％、より特には、９８％、さらにより特には、９９％を超える、本質的に酸化型ＣｏＱ−１０が残存しない程度までの変換が起こる。次いで、過剰のＤＨＬＡが、溶媒担体として働き、還元型ＣＯＱ−１０を安定化するのに役立ち、これによって在庫が長期間安定化される。
【００２１】
一態様では、本発明は、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）を含む、還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を提供する。特定の実施形態では、本組成物は、８％の水を含有するエタノール溶液を含まない。
【００２２】
本明細書では、また請求の範囲では、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、制約のない用語であり、「含むが、．．．．に限らない」ことを意味すると解釈されなくてはならない。これらの用語は、より制限的な用語「本質的にからなる」および「からなる」を包含する。
【００２３】
ジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）は、細胞代謝の成分である。ＤＨＬＡは、２つのチオール残基を有し、これによってラジカル種に対して感受性となり、したがって、生体分子に抗酸化機能を提供する。酸化還元（レドックス反応）は、ドナーからアクセプターへの電子の移動を含む。ドナーが電子を失うと、その還元型から酸化型へ変換される。アクセプターが電子を獲得すると、その酸化型から還元型へ変化する。合わせて、レドックス成分、例えば、リポ酸およびＤＨＬＡまたはＣｏＱ−１０（ユビキノン）および還元型ＣｏＱ−１０（ユビキノール）の酸化型および還元型は、「レドックス対」と呼ばれる。
【００２４】
ジヒドロリポ酸は、リポ酸（チオクト酸）の還元（電子が付加された）型である。ＤＨＬＡが酸化される（電子が除去されている）と、リポ酸が生じる。ＤＨＬＡは、ＲまたはＳ鏡像異性体のいずれであってもよく、またはラセミ化合物であってもよいということは理解されなくてはならない。同様に、リポ酸もまた、鏡像異性的に純粋であってもよいし、ラセミ化合物であってもよい。
【００２５】
【化１】
2010527905.tif 000002
【００２６】
同様に、ユビキノールは、ユビキノン（ＣｏＱ−１０）の還元（電子が付加された）型である。ユビキノールが酸化される（電子が除去されている）と、ユビキノンが生じる。
【００２７】
驚くべきことに、本発明によって、７より下のｐＨ範囲では、本発明は、ＵＶスペクトロメトリーによって示されるようにラジカル形成の徴候を全く提供しないことがわかった。理論によって制限されるものではないが、これらの条件下で「２電子移動」反応が起こると考えられる。このことはまた、この反応のｐＨでは、ＤＨＬＡがラジカル形成に対して感受性ではなく、このことがラジカル反応の必要条件であるので、論理的であると思われる。
【００２８】
この結果は、７以上のｐＨ値では、通常、リポ酸はＤＨＬＡへと電子を供与し、ＤＨＬＡはフリーラジカルと反応し、次いで、酸化されてリポ酸に戻り、リポ酸が、次いで、細胞性還元性同等物（ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨ）を用いて還元されてＤＨＬＡに戻り、このようにして、レドックスサイクルを続けるという点で驚くべきことである。２つの型が電子を交換するので、それらは迅速に変換する。リポ酸の特性の多くは、迅速に電子を交換するこの能力に依存するものである。このレドックス対と組み合わせたＤＨＬＡは、電子をその他の酸化型種、例えば、ＣｏＱ−１０に供与し、したがって、ＣｏＱ−１０をユビキノールに還元し、ＤＨＬＡをリポ酸に酸化できる。
【００２９】
用語「コエンザイムＱ」または「ユビキノン」（ＣｏＱ−１０）は、本明細書を通じて、ミトコンドリア調製における、すなわち、チトクロム系によるコハク酸塩または還元型ニコチンアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）の酸化における電子移動に関与している脂溶性ベンゾキノンの群を説明するために用いられる。これらの化合物は、コエンザイムＱｎ（式中、ｎは、１〜１２である）またはユビキノン（ｘ）（式中、ｘは、側鎖中の炭素原子の総数を指定し、５の任意の倍数であり得る）として表され得る。特性の違いは、鎖の長さの違いによる。特に、本発明において使用するためのユビキノンは、コエンザイムＱ１０の還元型であり、ユビキノールとして知られている。したがって、用語ＣｏＱ−１０は、ｎが１〜１２であるすべての変形を含む。同様に、還元型ＣｏＱ−１０もまた、ｎが１〜１２であるすべての変形を含む。
【００３０】
用語「ユビキノール」は、本明細書を通じて、本発明の組成物中の活性薬剤として用いられるコエンザイムＱｎの還元型を表すために用いられる。ユビキノールでは、化合物の構造が以下に示されるように現れるようコエンザイムＱｎのキノン環が還元されている。一態様では、ユビキノールは、ｎが１０であり、コエンザイムＱ１０に由来することが好ましい。本発明の組成物中に含まれるユビキノールの量の範囲は、ソフトゼラチンカプセル中に被包される最終組成物の約０．１重量％〜約５０重量％、より好ましくは、約０．５重量％〜約１０重量％、さらにより好ましくは、約１重量％〜約５重量％の範囲である。被包されるべき組成物中に含まれるユビキノールの量は、本発明の組成物中に含まれる脂溶性還元剤の量の約０．１〜約１０．０倍、より好ましくは、約１〜約３倍（重量パーセントで）の範囲である。
【００３１】
本明細書を通じて、ＣｏＱ−１０および還元型ＣｏＱ−１０への言及は、ｎが上記で詳述されるとおりであるすべてのあり得る誘導体を指すということは理解されなくてはならない。
【００３２】
【化２】
2010527905.tif 000003
【００３３】
理論によって制限されるものではないが、ＤＨＬＡの有効な濃度は、実質的にすべてのユビキノンをユビキノールに変換すると考えられる。その他の実施形態では、ＤＨＬＡの有効な濃度はまた、本発明の組成物の保存の間に、ユビキノールがユビキノンに酸化されるのを防ぐ、あるいは、ユビキノールから酸化されていた任意のユビキノンを還元するのに役立つ。
【００３４】
ＤＨＬＡ中のコエンザイムＱ１０の濃度は、約１％〜約３３％（ｗ／ｗ）、特に、約３％〜約２２％、最も特に、約８％〜約１５％（ｗ／ｗ）の範囲であり得る。より高濃度、特に、２５％以上では、ＣｏＱ−１０が結晶化する傾向がある。しかし、例えば、約３３％のＣｏＱ１０対約６７％のＤＨＬＡまたはさらに２重量部のＣｏＱ１０対１重量部のＤＨＬＡの重量比を有する、ＤＨＬＡ中のＣｏＱ１０の溶液を製造することが可能であるとわかっている。ただし、このような溶液を製造する反応時間は、数週間の範囲であり得る。
【００３５】
２：１以上の重量比のＣｏＱ１０対ＤＨＬＡを含有する溶液は、室温で、結晶化する傾向があり、固体の形で存在する傾向がある。
【００３６】
本発明の組成物は、液体の形で存在し得る。そうでなければ、本組成物は、室温で、ＣｏＱ−１０濃度に応じてゲルとしてまたは固体として存在し得るが、体温（３７℃）では液体となり得る。ＤＨＬＡ中の溶液中のＣｏＱ１０の濃度が、２２％を下回る場合には、固体混合物は、３７℃の温度で６分以内に透明な溶液となる。
【００３７】
一態様では、溶解ステップは、５を下回るｐＨ値で実施する。一実施形態では、反応媒体は、通常、ＤＨＬＡ以外の任意の溶媒を含まず、ｐＨを５以上の値に調整する薬剤もない。
【００３８】
本発明の製品は、それらが、単一の製品中に、有効用量の還元型ＣｏＱ１０およびＤＨＬＡ／リポ酸の両方を提供できるという事実のために特に有用である。通常、ＣｏＱ１０は、約１０〜３０ｍｇの間で投与され、リポ酸は５０〜２００ｍｇの間で投与される。したがって、例えば、１００〜１５０ｍｇの本発明の溶液は、ＣｏＱ１０およびＤＨＬＡ／リポ酸の両方を有効濃度で送達し得る。
【００３９】
適した担体として、それだけには限らないが、例えば、任意の供給源、例えば、限定するものではないが、天然または合成オイル、脂肪、ワックスまたはそれらの組み合わせに由来し得る、脂肪酸、エステルおよびそれらの塩が挙げられる。さらに、脂肪酸は、限定するものでないが、非硬化油、部分硬化油、完全硬化油またはそれらの組み合わせに由来し得る。脂肪酸（そのエステルおよび塩）の限定されない例示的供給源として、種子油、魚油または海産物油、菜種油、植物油、サフラワー油、ヒマワリ油、キンレンカ種子油、カラシ油、オリーブオイル、ゴマ油、ダイズ油、コーンオイル、ピーナッツオイル、綿実油、ヌカ油、ババスナッツオイル、ヤシ油、低エルカ酸菜種油、パーム核油、ルピナスオイル、ココナッツオイル、アマニ油、月見草油、ホホバ、獣脂、牛脂、バター、ニワトリ脂、ラード、乳製品乳脂肪、シアバターまたはそれらの組み合わせが挙げられる。
【００４０】
特定の限定されない例示的な魚油または海産物油供給源として、貝油、マグロ油、サバ油、サーモン油、メンハーデン、アンチョビ、ニシン、マス、イワシまたはそれらの組み合わせが挙げられる。特に、脂肪酸の供給源として、魚または海産物油（ＤＨＡまたはＥＰＡ）、ダイズ油またはアマニ油がある。あるいは、または上記で同定された担体のうち１種と組み合わせて、蜜蝋も適した担体として、ならびにシリカ（二酸化ケイ素）などの懸濁剤も使用してよい。
【００４１】
特定の限定されない例示的な魚油または海産物油供給源として、貝油、マグロ油、サバ油、サーモン油、メンハーデン、アンチョビ、ニシン、マス、イワシまたはそれらの組み合わせが挙げられる。特に、脂肪酸の供給源として、魚または海産物油（ＤＨＡまたはＥＰＡ）、ダイズ油またはアマニ油がある。あるいは、または上記で同定された担体のうち１種と組み合わせて、蜜蝋も適した担体として、ならびにシリカ（二酸化ケイ素）などの懸濁剤も使用してよい。
【００４２】
さらに、リモネンが、単独で、かつ／または、精油（類）、例えば、オレンジオイル（９５％以上のｄ−リモネンを含み得る）を含有するその他の環状モノテルペンを含んで、１種以上の担体とともに含まれ得る。ｄ−リモネン含有オイルの限定されない例として、ラビンジン（Ｌａｖｉｎｄｉｎ）、ペパーミント、ジンジャー、カンファー、ゼラニウム、オレンジ、レモン、ラベンダー、ティーツリーおよびローズマリーが挙げられる。
【００４３】
本発明の製剤は、還元型ＣｏＱ−１０および／またはさらなる抗酸化剤を必要とする個体中の還元型ＣｏＱ−１０および／またはさらなる抗酸化剤の量を増大するのに有用な栄養補助食品と考えられる。
【００４４】
本発明の製剤は、また、化粧品において使用できる。
【００４５】
あるいは、本発明の製剤はまた、栄養補給食品であると考えられる。用語「栄養補給食品」とは、当技術分野において認識され、疾患を防ぎ得る食品中に見られる特定の化合物を表すよう意図される。還元型ＣｏＱ−１０および抗酸化剤はこのような化合物である。
【００４６】
本発明の製剤は、安定化するのに役立つ、またはＣｏＱ−１０および／またはアミノ酸（類）のバイオアベイラビリティを促進するのに役立つ、または個体の食事のさらなる栄養素として働く種々の成分をさらに含み得る。適した添加剤として、ビタミンおよび生物学的に許容されるミネラルを挙げることができる。ビタミンの限定されない例として、ビタミンＡ、Ｂビタミン、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫおよび葉酸が挙げられる。ミネラルの限定されない例として、鉄、カルシウム、マグネシウム、カリウム、銅、クロム、亜鉛、モリブデン、ヨウ素、ホウ素、セレン、マンガン、それらの誘導体またはそれらの組み合わせが挙げられる。これらのビタミンおよびミネラルは、限定されるものではないが、任意の供給源または供給源の組み合わせに由来するものであり得る。限定されない例示的Ｂビタミンとして、限定されるものではないが、チアミン、ナイアシンアミド、ピリドキシン、リボフラビン、シアノコバラミン、ビオチン、パントテン酸またはそれらの組み合わせが挙げられる。
【００４７】
ビタミン（類）は、存在する場合には、約５ｍｇ〜約５００ｍｇの範囲の量で本発明の組成物中に存在する。より特には、ビタミン（類）は、約１０ｍｇ〜約４００ｍｇの範囲の量で存在する。さらにより具体的には、ビタミン（類）は、約２５０ｍｇ〜約４００ｍｇで存在する。最も具体的には、ビタミン（類）は、約１０ｍｇ〜約５０ｍｇの範囲の量で存在する。例えば、Ｂビタミンは、通常、約１ミリグラム〜約１０ミリグラム、すなわち、約３マイクログラム〜約５０マイクログラムのＢ１２の範囲で組み込まれる。葉酸は、例えば、通常、約５０〜約４００マイクログラムの範囲で組み込まれ、ビオチンは、通常、約２５〜約７００マイクログラムの範囲で組み込まれ、シアノコバラミンは、約３マイクログラム〜約５０マイクログラムの範囲で組み込まれる。
【００４８】
ミネラル（類）は、存在する場合には、約２５ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲の量で本発明の組成物中に存在する。より詳しくは、約２５ｍｇ〜約５００ｍｇの範囲のミネラル（類）が組成物中に存在する。さらにより詳しくは、ミネラル（類）は、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇの範囲の量で組成物中に存在する。
【００４９】
種々の添加剤が、本組成物中に組み込まれ得る。本組成物の任意選択の添加剤として、限定されるものではないが、リン脂質、Ｌ−カルニチン、デンプン、糖類、脂肪、抗酸化剤、アミノ酸、タンパク質、矯味剤、着色剤、加水分解デンプン（類）およびそれらの誘導体またはそれらの組み合わせが挙げられる。
【００５０】
本明細書において、用語「リン脂質」は、当技術分野で認識されており、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ならびにホスファチジン酸、セラミド、セレブロシド、スフィンゴミエリンおよびカルジオリピンを指す。
【００５１】
本明細書において、用語「抗酸化剤」は、当技術分野で認識されており、化合物の酸化変質を防ぐまたは遅延する合成または天然物質を指す。例示的抗酸化剤として、トコフェロール、フラボノイド、カテキン、スーパーオキシドジムスターゼ、レシチン、γオリザノール；ビタミン、例えば、ビタミンＡ、Ｃ（アスコルビン酸）およびＥおよびβ−カロテン；天然成分、例えば、カモソール（ｃａｍｏｓｏｌ）、カルノシン酸およびローズマリー中に見られるロスマノールおよびサンザシ抽出物、プロアントシアニジン、例えば、グレープシードまたはマツ樹皮抽出物中に見られるものおよび緑茶抽出物が挙げられる。
【００５２】
本明細書において、用語「フラボノイド」とは、当技術分野で認識されており、身体を癌から保護するのに役立つと考えられている、多数の食品中に見られる植物色素を含むよう意図される。これらとして、例えば、エピガロカテキン没食子酸塩（ＥＧＣＧ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）およびエピカテキン（ＥＣ）が挙げられる。
【００５３】
任意の投与形、およびそれらの組み合わせが、本発明によって考慮される。このような投与形の例として、限定されるものではないが、チュアブル錠剤、エリキシル剤、液体、溶液、懸濁液、エマルジョン、カプセル剤、ソフトゼラチンカプセル剤、ハードゼラチンカプセル剤、カプレット剤、トローチ剤、チュアブルトローチ剤、坐剤、クリーム剤、局所剤、摂取可能なもの、注射用物質、点滴薬、ヘルスバー、糖剤、動物の飼料、シリアル、シリアルコーティングおよびそれらの組み合わせが挙げられる。上記の投与形の調製は、当業者には周知である。
【００５４】
例えば、ヘルスバーは、限定するものではないが、製剤および賦形剤（例えば、結合剤、充填剤、フレーバー、色味など）を可塑性素材コンシステンシーに混合することによって調製できる。次いで、素材を伸長するか、または成形して「キャンディーバー」の形を形成し、次いで、これを乾燥させるか、または固化させて最終製品を形成する。
【００５５】
ソフトゲルまたはソフトゼラチンカプセル剤は、例えば、限定するものではないが、製剤を適当なビヒクル（例えば、ヌカ油、ＤＨＬＡおよび／または蜜蝋）中に分散して高粘度混合物を形成することによって調製できる。次いで、この混合物をゼラチンベースのフィルムを用い、ソフトゲル産業の当業者に公知の技術および機械を使用して被包する。次いで、そのように形成された産業単位を恒量に乾燥させる。通常、カプセルの重量は、約１００〜約２５００ミリグラムの間であり、特に、約１５００〜約１９００ミリグラムの間の重量であり、より具体的には、約１５００〜約２０００ミリグラムの間の重量であり得る。
【００５６】
例えば、ソフトゼラチンシェルを調製する場合には、シェルは、約２０〜７０パーセントの間のゼラチンと、通常、可塑剤と、約５〜約６０重量％のソルビトールとを含み得る。ソフトゼラチンカプセル剤の充填物は、液体（主に、必要に応じて、ヌカ油および／または蜜蝋と組み合わせた、リモネン）であり、抗酸化活性物質（ａｃｔｉｖｅｓ）のほかに、親水性マトリックスを含み得る。親水性マトリックスは、存在する場合には、平均分子量が約２００〜１０００であるポリエチレングリコールである。さらなる成分として、場合により、増粘剤がある。一実施形態では、親水性マトリックスは、平均分子量が約２００〜１０００であるポリエチレングリコールと、５〜１５％のグリセロールと、５〜１５重量％の水とを含む。ポリエチレングリコールはまた、プロピレングリコールおよび／またはプロピレンカーボネートと混合してもよい。
【００５７】
もう１つの実施形態では、ソフトゲルカプセル剤は、ゼラチンと、グリセリンと、水と、種々の添加剤とから調製される。通常、ゼラチンのパーセンテージ（重量での）は、約３０〜約５０重量パーセントの間、特に、約３５〜約重量パーセントの間、より具体的には、約４２重量パーセントである。製剤は、約１５〜約２５重量パーセントのグリセリン、より詳しくは、約１７〜約２３重量パーセント、より具体的には、約２０重量パーセントのグリセリンを含む。
【００５８】
カプセル剤の残りの部分は、通常、水である。量は、約２５重量パーセント〜約４０重量パーセントの間、より詳しくは、約３０〜約３５重量パーセントの間、より具体的には、約３５重量パーセントで変わる。カプセルの残部は、通常、矯味剤（類）、糖、着色剤（類）などまたはそれらの組み合わせからなる約２〜約１０重量パーセントの間で変わり得る。カプセル剤を加工した後、最終カプセルの含水量は、約５〜約１０重量パーセント、より詳しくは、７〜約１２重量パーセント、より具体的には、約９〜約１０重量パーセントの間であることが多い。
【００５９】
製造に関しては、標準ソフトシェルゼラチンカプセル剤製造技術を用いてソフトシェル製品を調製できると考えられる。有用な製造技術の例として、プレート法（ｐｌａｔｅ  ｐｒｏｃｅｓｓ）、Ｒ．Ｐ．Ｓｃｈｅｒｅｒによって開発されたロータリーダイ法（ｒｏｔａｒｙ  ｄｉｅ  ｐｒｏｃｅｓｓ）、Ｎｏｒｔｏｎカプセル機およびＡｃｃｏｇｅｌ機を用いる方法およびＬｅｄｅｒｌｅによって開発された方法がある。これらの方法の各々は、成熟した技術であり、ソフトゼラチンカプセル剤を調製しようとするいずれにも、すべて広く利用されている。
【００６０】
通常、ソフトゲルカプセル剤が調製される場合には、総重量は約２５０ミリグラム〜約２．５グラムの重量、例えば、４００〜７５０ミリグラムの間である。したがって、ビタミンおよび抗酸化剤などの添加剤の総重量は、約８０ミリグラム〜約２０００ミリグラムの間、あるいは、約１００ミリグラム〜約１５００ミリグラムの間、特に、約１２０ミリグラム〜約１２００ミリグラムの間である。特に、ソフトゲルカプセル剤は、通常、約１０００ミリグラム〜１３００ミリグラムの間の重量であり、充填量パーセンテージは、カプセルの全重量の約５０％、すなわち、約５００〜約６００ミリグラム充填物重量である。充填物重量は、有効成分（類）、可溶化剤などを含む。
【００６１】
ソフトゲルカプセル剤の調製は、当技術分野で周知の方法、例えば、それだけには限らないが、本明細書を通じて、およびその開示内容が参照によりその全文が本明細書に組み込まれる、米国特許第６，６１６，９４２号、同６，６２３，７３４号および同時係属米国出願第１０／０３５，７５３号および同０９／８２５，９２０号中に記載されるものによって達成した。
【００６２】
例えば、ソフトゲルカプセル剤は、還元型ＣｏＱ−１０のＤＨＬＡ溶液を混合してシロップ状の混合物を提供することによって調製できる。次いで、混合物を、上記のようにゼラチンカプセル内に被包する。
【００６３】
錠剤、カプセル剤、散剤および／または溶液は、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、着色剤、凝集阻害剤、吸収促進剤、可溶化剤、安定剤などのうち１種以上を含み得る。
【００６４】
賦形剤として、例えば、精製糖、ラクトース、グルコース、コーンデンプン、マンニトール、晶質セルロース、リン酸カルシウム、硫酸カルシウムなどが挙げられる。
【００６５】
崩壊剤として、例えば、デンプン、寒天、クエン酸カルシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン、晶質セルロース、カルボキシメチルセルロース、トラガカントなどが挙げられる。
【００６６】
滑沢剤として、例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油などが挙げられる。
【００６７】
結合剤として、例えば、エチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、トラガカント、セラック、ゼラチン、アラビアガム、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ソルビトールなどが挙げられる。
【００６８】
本発明はまた、還元型ＣｏＱ−１０および／またはＣｏＱ−１０およびＤＨＬＡおよび錠剤、カプセル剤、エリキシル剤などの使用のための使用説明書のパッケージングされた製剤を提供する。通常、パッケージングされた製剤は、どんな形であれ、個体の食事中の還元型ＣｏＱ−１０の量の増大を必要とする、それを必要とする個体に投与される。通常、必要投与量は、１日あたり約１〜約４投与量の間である。
【００６９】
ＣｏＱ−１０は、種々の生化学経路に関係があるとされており、心血管状態、例えば、ＣｏＱ−１０を天然に産生する身体の能力に影響を及ぼすスタチン薬と関連しているものの治療にとって適している。ＣｏＱ−１０はまた、種々の歯周病と関係があるとされている。さらに、ＣｏＱ−１０は、ミトコンドリア関連疾患および障害、例えば、アセチルコエンザイムＡを産生できないこと、神経疾患、例えば、パーキンソン病およびプラター−ウィリー（Ｐｒａｔｅｒ−Ｗｉｌｌｅｙ）症候群など、片頭痛および頭痛と関係があるとされている。
【００７０】
１から６３の結果として列挙される以下の段落は、本発明の種々の態様を提供する。一実施形態では、第１段落（１）において、本発明は、
組成物が８％の水を含有するエタノール溶液を含まないという条件で、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）を含む還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を提供する。
【００７１】
２．さらに、担体を含む第１の段落の組成物。
【００７２】
３．担体がＤＨＬＡである、第２の段落の組成物。
【００７３】
４．担体が、植物油、魚油またはそれらの組み合わせである、第２の段落の組成物。
【００７４】
５．さらに、抗酸化剤または抗酸化酵素を含む、段落１から４のいずれかの組成物。
【００７５】
６．抗酸化剤が、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、ビタミンＣ、ビタミンＣ誘導体、プロブコール、リコピン、ビタミンＡ、カロテノイド、ビタミンＢ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ誘導体、フラボノイド、ポリフェノール、グルタチオン、ピロロキノリンキノン、ピクノジェノール、フラバンジェノール、セレン、リポ酸、リポ酸誘導体、カルニチン（例えば、Ｌ−カルニチン）またはそれらの混合物である、段落５の組成物。
【００７６】
７．抗酸化酵素が、スーパーオキシドジムスターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、グルタチオンレダクターゼ、カタラーゼおよびアスコルビン酸ペルオキシダーゼまたはそれらの混合物である、段落５の組成物。
【００７７】
８．組成物のｐＨ範囲が、約６のｐＨ〜３のｐＨの間である、段落１から７のいずれかの組成物。
【００７８】
９．ｐＨ範囲が、約５．５〜約３．５の間である、段落８の組成物。
【００７９】
１０．ｐＨ範囲が、約４〜約３．５の間である、段落９の組成物。
【００８０】
１１．ｐＨ範囲が、約３．９〜約３．８の間である、段落１０の組成物。
【００８１】
１２．ＣｏＱ−１０の還元型が、約９８．５重量％以上の量で存在する、段落１から１１のいずれかの組成物。
【００８２】
１３．本質的にすべてのＣｏＱ−１０が、還元型で存在する、段落１から１１のいずれかの組成物。
【００８３】
１４．ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）から本質的になる還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物。
【００８４】
１５．８％の水を含有するエタノール溶液を含まない、段落１４の組成物。
【００８５】
１６．さらに、担体を含む、段落１４または１５のいずれかの組成物。
【００８６】
１７．担体がＤＨＬＡである、段落１６の組成物。
【００８７】
１８．担体が、植物油、魚油またはそれらの組み合わせである、段落１６の組成物。
【００８８】
１９．さらに、抗酸化剤または抗酸化酵素を含む、段落１４から１８のいずれかの組成物。
【００８９】
２０．抗酸化剤が、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、ビタミンＣ、ビタミンＣ誘導体、プロブコール、リコピン、ビタミンＡ、カロテノイド、ビタミンＢ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ誘導体、フラボノイド、ポリフェノール、グルタチオン、ピロロキノリンキノン、ピクノジェノール、フラバンジェノール、セレン、リポ酸、リポ酸誘導体、カルニチン（例えば、Ｌ−カルニチン）またはそれらの混合物である、段落１９の組成物。
【００９０】
２１．抗酸化酵素が、スーパーオキシドジムスターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、グルタチオンレダクターゼ、カタラーゼおよびアスコルビン酸ペルオキシダーゼまたはそれらの混合物である、段落１９の組成物。
【００９１】
２２．組成物のｐＨ範囲が、約６のｐＨ〜３のｐＨの間である、段落１４から２１のいずれかの組成物。
【００９２】
２３．ｐＨ範囲が、約５．５〜約３．５の間である、段落２２の組成物。
【００９３】
２４．ｐＨ範囲が、約４〜約３．５の間である、段落２３の組成物。
【００９４】
２５．ｐＨ範囲が、約３．９〜約３．８の間である、段落２４の組成物。
【００９５】
２６．ＣｏＱ−１０の還元型が、約９８．５重量％以上の量で存在する、段落１４から２５のいずれかの組成物。
【００９６】
２７．本質的にすべてのＣｏＱ−１０が、還元型で存在する、段落１４から２５のいずれかの組成物。
【００９７】
２８．ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）を含む還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物と、
還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を被包するソフトゼラチンカプセルと
を含む還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を被包するソフトゼラチンカプセル剤。
【００９８】
２９．還元型ＣｏＱ−１０組成物が、８％の水を含有するエタノール溶液を含まない、段落１６のソフトゼラチンカプセル剤。
【００９９】
３０．さらに、担体を含む、段落２８または２９のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１００】
３１．担体がＤＨＬＡである、段落３０のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１０１】
３２．担体が、植物油、魚油またはそれらの組み合わせである、段落３０のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１０２】
３３．さらに、抗酸化剤または抗酸化酵素を含む、段落２８から３２のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１０３】
３４．抗酸化剤が、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、ビタミンＣ、ビタミンＣ誘導体、プロブコール、リコピン、ビタミンＡ、カロテノイド、ビタミンＢ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ誘導体、フラボノイド、ポリフェノール、グルタチオン、ピロロキノリンキノン、ピクノジェノール、フラバンジェノール、セレン、リポ酸、リポ酸誘導体、カルニチン（例えば、Ｌ−カルニチン）またはそれらの混合物である、段落３３のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１０４】
３５．抗酸化酵素が、スーパーオキシドジムスターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、グルタチオンレダクターゼ、カタラーゼおよびアスコルビン酸ペルオキシダーゼまたはそれらの混合物である、段落３３のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１０５】
３６．組成物のｐＨ範囲が、約６のｐＨ〜３のｐＨの間である、段落２８から３５のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１０６】
３７．ｐＨ範囲が、約５．５〜約３．５の間である、段落３６のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１０７】
３８．ｐＨ範囲が、約４〜約３．５の間である、段落３７のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１０８】
３９．ｐＨ範囲が、約３．９〜約３．８の間である、段落３８のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１０９】
４０．ＣｏＱ−１０の還元型が、約９８．５重量％以上の量で存在する、段落２８から３９のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１１０】
４１．本質的にすべてのＣｏＱ−１０が、還元型で存在する、段落２８から３９のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１１１】
４２．本質的に、
ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）と、
還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を被包するソフトゼラチンカプセルとからなる、還元型コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）組成物を被包するソフトゼラチンカプセル剤。
【０１１２】
４３．８％の水を含有するエタノール溶液を含まない、段落４２のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１１３】
４４．さらに、担体を含む、段落４２または４３のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１１４】
４５．担体がＤＨＬＡである、段落４４のソフトゼラチンカプセル剤。  
【０１１５】
４６．担体が、植物油、魚油またはそれらの組み合わせである、段落４４のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１１６】
４７．さらに、抗酸化剤または抗酸化酵素を含む、段落４２から４６のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１１７】
４８．抗酸化剤が、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、ビタミンＣ、ビタミンＣ誘導体、プロブコール、リコピン、ビタミンＡ、カロテノイド、ビタミンＢ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ誘導体、フラボノイド、ポリフェノール、グルタチオン、ピロロキノリンキノン、ピクノジェノール、フラバンジェノール、セレン、リポ酸、リポ酸誘導体、カルニチン（例えば、Ｌ−カルニチン）またはそれらの混合物である、段落４７のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１１８】
４９．抗酸化酵素が、スーパーオキシドジムスターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、グルタチオンレダクターゼ、カタラーゼおよびアスコルビン酸ペルオキシダーゼまたはそれらの混合物である、段落４７のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１１９】
５０．ソフトゼラチンカプセル剤のｐＨ範囲が、約６のｐＨ〜３のｐＨの間である、段落４２から４９のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１２０】
５１．ｐＨ範囲が、約５．５〜約３．５の間である、段落５０のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１２１】
５２．ｐＨ範囲が、約４〜約３．５の間である、段落５１のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１２２】
５３．ｐＨ範囲が、約３．９〜約３．８の間である、段落５２のソフトゼラチンカプセル剤。
【０１２３】
５４．ＣｏＱ−１０の還元型が、約９８．５重量％以上の量で存在する、段落４２から５３のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１２４】
５５．本質的にすべてのＣｏＱ−１０が、還元型で存在する、段落４２から５３のいずれかのソフトゼラチンカプセル剤。
【０１２５】
５６．コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）を、十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）と接触させて、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するステップを含む、還元型コエンザイムＱ−１０溶液を調製する方法。
【０１２６】
５７．ＤＨＬＡがまた担体でもあるよう、過剰のＤＨＬＡが用いられる、段落５６の方法。
【０１２７】
５８．約６のｐＨを下回るｐＨで実施される、段落５６または５７のいずれかの方法。
【０１２８】
５９．約５のｐＨを下回るｐＨで実施される、段落５６または５７のいずれかの方法。
【０１２９】
６０．それを必要とする個体に、段落１から５５の組成物のいずれかの有効量を投与するステップを含む、歯周病、ミトコンドリア関連疾患および障害、パーキンソン病、プラター−ウィリー（Ｐｒａｔｅｒ−Ｗｉｌｌｅｙ）症候群、片頭痛または頭痛を治療する方法。
【０１３０】
６１．モル過剰のジヒドロリポ酸を、１モルのコエンザイムＱ−１０と接触させるステップを含み、組成物が８％の水を含有するエタノール溶液を含まない、還元型コエンザイムＱ−１０を調製する方法。
【０１３１】
６２．担体が単環式テルペンである、段落２の組成物。
【０１３２】
６３．単環式テルペンが、リモネン、ジンジャーオイル、ラバンジンオイル、ペパーミントオイル、カンファーオイル、ゼラニウムオイル、オレンジオイル、レモンオイル、ラベンダーオイル、ティーツリーオイル、ローズマリーオイルまたはそれらの混合物を含む、段落６２の組成物。
【０１３３】
特定の実施形態では、抗酸化剤は、Ｌ−カルニチン、グルタチオンおよびＶＢ１のうち１種以上の混合物である。
【０１３４】
以下の実施例は、単に例示であるよう意図されるものであって、限定と考えられてはならない。
【実施例１】
【０１３５】
ＤＨＬＡによるＣｏＱ−１０の溶解および還元（１３％溶液の調製）：
７．１ｇ（３４．１ｍｍｏｌ）のＤＨＬＡに、１．１ｇ（１．２７ｍｍｏｌ）のＣｏＱ−１０（酸化型の）を加えた。この混合物を、均一な溶液が達成されるまで撹拌した。この溶液を２５℃で１週間維持し、その後、ＨＰＬＣ分析（２１０ｎｍでのＵＶ検出器）を実施した。混合物中のＣｏＱ１０の酸化型（ユビキノン）とＣｏＱ１０の還元型（ユビキノールの形）の割合は、１：５〜９８．５であった。溶液のｐＨ値は約３．８０であった（Ｍｅｔｒｏｈｍ８２７ｐＨ  Ｌａｂによって測定した）。
【実施例２】
【０１３６】
保存条件下での再酸化からの還元型コエンザイムＱ−１０の保護
４０ｍｌのＴＨＦに、３ｇ（３．４８ｍｍｏｌ）のＣｏＱ−１０（酸化型）を溶解し、０．３２ｇ（８．６５ｍｍｏｌ）のＮａＢＨ４を加えた。この溶液を、３０℃で１時間維持した。ＨＰＬＣ分析（２１０ｎｍでのＵＶ検出器）下では、ＣｏＱ−１０の酸化型（ユビキノン）は溶液中に検出されなかった。
【０１３７】
その後、３０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２を加え、有機層を６ｍｏｌ／ＬのＨＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、８．１ｇ（３８．９ｍｍｏｌ）のＤＨＬＡを加えた。この溶液を真空蒸留してＣＨ２Ｃｌ２およびＴＨＦを除去した。残存する溶液を１週間保存した。ＨＰＬＣ分析（２１０ｎｍでのＵＶ検出器）下で、還元型ＣｏＱ−１０の再酸化が生じないことがわかった。
【実施例３】
【０１３８】
ＤＨＬＡ中、ＣｏＱ−１０の溶解；溶解度の温度依存性
種々の温度で、ＤＨＬＡにコエンザイムＱ１０を溶解した。図１は、種々の温度でのＣｏＱ−１０の溶解度を示す。縦座標は、ＤＨＬＡ中の溶解したＣｏＱ−１０のパーセンテージを示す。
【０１３９】
ＤＨＬＡ中、還元型ＣｏＱ−１０の溶液を冷却すると、還元型ＣｏＱ−１０は沈殿する場合がある。還元型の再加熱時に、ＣｏＱ−１０は、ＤＨＬＡに再溶解する。このサイクルを反復した後には、ＣｏＱ−１０の酸化型は検出され得ない。
【０１４０】
さらに、ＨＰＬＣ分析は、ＣｏＱ−１０−ＤＨＬＡ溶液においてレドックス反応が起こることを示す。これに関して、酸化されるＤＨＬＡの量は、還元されるＣｏＱ１０の量に等しい。
【実施例４】
【０１４１】
ＤＨＬＡ中、ＣｏＱ−１０の８％溶液の調製
１１．０９ｇ（５３．３ｍｍｏｌ）のＤＨＬＡに、０．９ｇ（１．０４ｍｍｏｌ）のＣｏＱ−１０（酸化型）を加えた。この混合物を、均一な溶液が達成されるまで撹拌した。この溶液を２５℃で１週間維持し、その後、ＨＰＬＣ分析（２１０ｎｍでのＵＶ検出器）を実施した。混合物中のＣｏＱ１０の酸化型（ユビキノン）とＣｏＱ１０の還元型（ユビキノールの形）の割合は、１：５〜９８．５であった。溶液のｐＨ値は約３．８０〜３．９０であった。
【０１４２】
この溶液を室温で１ヶ月維持したが、検出される組成物中の変化がないことがＨＰＬＣによって決定された。
【実施例５】
【０１４３】
ＨＰＬＣによるＤＨＬＡのリポ酸（ＬＡ）への変換およびＣｏＱ−１０の還元型の安定性の分析
分析法
機器および材料：
ＨＰＬＣ：７１７プラスオートサンプラーおよび２９９６ＰＤＡ検出器を備えたＷａｔｅｒｓ６００ポンプ
天秤：Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  ＢＰ  ２１１Ｄ
試薬：アセトニトリル（ＨＰＬＣ等級、Ｆｉｓｈｅｒ）、蒸留水（Ｎｅｓｔｌｅ）、メタノール（Ｆｉｓｈｅｒ、ＨＰＬＣ等級）
【０１４４】
標準：ＤＨＬＡ（８９．３％）、Ｓｉｇｍａ製ＬＡ、９９．０％、酸化型ＣｏＱ−１０（９８．５％）
【０１４５】
ＨＰＬＣ条件
ＬＡおよびＤＨＬＡ：
移動相：０．０３％  Ｈ３ＰＯ４：アセトニトリル＝６０：４０
カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ  ｅｌｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ１８（１５０ｍｍ＊４．６ｍｍ、５μｍ□
温度：３０℃
ＵＶ検出：２２０ｎｍ
注入容量：１０μｌ
流速：１．０ｍｌ／分
【０１４６】
還元型および酸化型ＣｏＱ１０：
移動相：メタノール：エタノール＝７５：２５
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ１８（１５０ｍｍ＊４．６ｍｍ、５μｍ）
温度：３０℃
ＵＶ検出：２１０ｎｍ
注入容量：２μｌ
流速：１．０ｍｌ／分
【０１４７】
５ｍｌ容積ボトル中で、メタノール／エタノール（５０／５０、ｖ／ｖ）を用いて、５０〜１００ｍｇのＣｏＱ−１０−ＤＨＬＡ溶液を溶解することによってサンプルを作製した。
【０１４８】
結果は表１に列挙されている。
【０１４９】
【表１】
2010527905.tif 000004
【０１５０】
表１は、ＣｏＱ−１０−ＤＨＬＡ溶液中の、リポ酸（ＬＡ）（ＤＨＬＡと比較した）およびＣｏＱ１０の還元型（ＣｏＱ１０の酸化型と比較した）のそれぞれの面積％を提供する。
【０１５１】
結果は、約５２時間後、ＤＨＬＡによって酸化型ＣｏＱ１０がほぼ完全に還元されたということを示す。最初の４０時間では、還元型ＣｏＱ１０の含量は極めて迅速に増加し、次いで、反応速度が落ちる。
【０１５２】
反応のエンドポイントに近づくと、還元型ＣｏＱ１０は空気に対して極めて感受性であり、容易に再酸化され得、そのため還元型ＣｏＱ１０の含量は約９７〜９８％のままである。
【実施例６】
【０１５３】
８０ｇのＤＨＬＡに、２０ｇのＣｏＱ−１０（酸化型）を加えた。この混合物を、固体が完全に溶解するまで、ゆっくりと撹拌し、３７℃で加熱した。ＣｏＱ１０が完全に溶解するまでの反応時間は、約７日であった。ＣｏＱ１０／ＤＨＬＡ溶液を含む容器を密閉した後、ＣｏＱ１０の還元型は少なくとも１ヶ月間安定なままであった（本明細書に記載されるＨＰＬＣによる、９７〜９８％以上の還元型ＣｏＱ１０の値）。溶液のｐＨ値は、約３．８０〜３．９０であった。
【実施例７】
【０１５４】
５ｇのＤＨＬＡに、１０ｇのＣｏＱ１０（酸化型）を加えた。この混合物を、固体が完全に溶解するまで、撹拌し、５０℃で加熱した。溶液を含有するボトルを密閉し、５０℃の温度で７０日間維持した。その後、溶液中のＣｏＱ１０の還元型（ユビキノール）とＣｏＱ１０の酸化型の割合は、９９：１を上回っていることがわかると本明細書に記載されるＨＰＬＣによって決定された。溶液のｐＨ値は約３．８０〜３．９０であった。
【実施例８】
【０１５５】
２５℃で、７．１ｇのＤＨＬＡに１．１ｇのＣｏＱ−１０を溶解した。ＣｏＱ−１０ラジカルの形成をＵＶ分光光度法で追跡調査した。ラジカルによって反応が進行する場合には、ＣｏＱ−１０ラジカルが４８０ｎｍ付近の顕著なバンドとして現れることが予測される。
【０１５６】
しかし、ラジカル形成の徴候は全くないことが、４８０ｎｍにバンドがないことによって証明された。（図２参照）。このことは、ＣｏＱ−１０の還元が２電子移動反応機構によって起こることを示唆する。このことは、この反応のｐＨ（３．８０〜３．９０）では、ＤＨＬＡがラジカル形成に対して感受性でなく、このことがラジカル反応の必要条件であるので、論理的であると思われる。
【０１５７】
図２では、約３２０ｎｍのバンドは、リポ酸（最大３２０ｎｍ）の生成を示し、約４８０ｎｍのバンドは、セミユビキノンラジカルが生じる領域である。
【０１５８】
図２は、反応の開始の１時間後に作成した。見られるように、リポ酸が形成されているが、ユビキノンラジカルの徴候は全くない。
【０１５９】
図３は、開始６時間後にとった。図３は、ユビキノンラジカルの徴候が全くないことを実証する。
【０１６０】
図２および３は、ラジカル形成を伴わずに成分間に２電子移動還元が生じるという証拠を提供する。
【実施例９】
【０１６１】
以下の実施例は、ＣｏＱ−１０とＤＨＬＡ間の還元反応の経時変化を示す。図４に見られるように、最初の３０時間の反応時間内に直線関係があり、このことは、８．９％のＣｏＱ１０溶液中（９１．１％ＤＨＬＡ  ｗ／ｗ、ｐＨ＝約３．８〜約３．９、室温）では、１時間あたり、約０．３ｍｍｏｌの還元型ＣｏＱ１０／１００ｇ溶液が形成されるということを示す。
【０１６２】
図４に示される直線関係はまた、ＣｏＱ−１０の非ラジカル還元の証拠を提供する。
【０１６３】
興味深いことに、ＣｏＱ−１０の還元に必要とされるものの（表２参照）、約３倍以上のＤＨＬＡが酸化される（約３０ｍｍｏｌ）。最も可能性が高い説明は、ＤＨＬＡ／ＬＡ間の平衡は、ｐＫ値に基づいて達せられるということである。
【０１６４】
【表２】
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【０１６５】
バイオアベイラビリティー試験
材料および処理：
５匹の雄のスプラーグ−ドーリーラット（体重２２０〜２５０ｇ、７〜８週齢）を、各処理群に使用してよい。処理群は、３群を含む。群Ａは、ＤＨＬＡとともにコエンザイムＱ１０を用いるものであり；群Ｂは、アスコルビルパルミチン酸塩とともにコエンザイムＱ１０を用いるものであり；群Ｃは、コエンザイムＱ１０のみを用いるものである。ラットには、コエンザイムＱ１０サンプルを経口投与し、コエンザイムＱ１０投与量は、２０ｍｇ／Ｋｇとする。
【０１６６】
ＤＨＬＡととものコエンザイムＱ１０は、実施例６に由来するものとする（Ｑ１０／ＤＨＬＡ＝１／４、ｗ／ｗ）；
コエンザイムＱ１０およびアスコルビルパルミチン酸塩は、コエンザイムＱ１０／アスコルビルパルミチン酸塩＝ｌ／４、ｗ／ｗ、を用いて調製し、適した乳化剤、例えば、Ｔｗｅｅｎを用いて乳化する；
コエンザイムＱ１０は、その他の機能性物質を含まない、コエンザイムＱ１０の還元型である。
【０１６７】
方法および検出：
血液サンプリング（０．５ｍＬ）は、投与（ｔ＝０）、および投与の１０、２０、３０、４０、５０、６０、９０，１２０、１５０、１８０、２４０分後に行う。
【０１６８】
２１０ｎｍで測定するＨＰＬＣアッセイを用いて、血液サンプル中の還元型コエンザイムＱ１０の量を検出する。
【０１６９】
分析法：
単回経口投与後の、時間に対するサンプルの平均還元型コエンザイムＱ１０血漿濃度を比較する。
【０１７０】
予想される結果：
結果は、群Ａの還元型コエンザイムＱ１０血漿濃度は、群Ｂのものよりも数倍高く、群ＣのコエンザイムＱ１０血漿濃度は極めて低いというものであるはずである。
【０１７１】
結論：
コエンザイムＱ１０の経口投与を受けたラットから得られたデータは、ＤＨＬＡととものコエンザイムＱ１０は、最高に吸収され、還元型Ｑ１０を最高に保護し、ならびにｉｎ  ｖｉｖｏで還元型コエンザイムＱ１０を最高に保持したということを明らかにすることができる。
【０１７２】
これらの結果は、本発明のＤＨＬＡ／還元型コエンザイムＱ１０製品の、より良好なバイオアベイラビリティーを説明するものである。
【０１７３】
本発明を、好ましい実施形態を参照して記載してきたが、当業者ならば、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、形および詳細に変更を施してもよいということは認識されよう。本明細書を通じて列挙されるすべての参照文献は、背景にあるものを含め、その全文が本明細書に組み込まれる。当業者ならば、本明細書に具体的に記載される本発明の特定の実施形態の多数の同等物を認識し、単にルーチンの実験を用いて確認できる。このような同等物は、以下の特許請求の範囲に包含されるよう意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年10月30日(2008.10.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）、及び還元型ＣｏＱ−１０がＤＨＬＡ中に溶解されるような担体として十分な量のＤＨＬＡを含む組成物。
【請求項２】
還元型ＣｏＱ−１０が２５℃で溶解される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
還元型ＣｏＱ−１０が３７℃で溶解される、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
還元型ＣｏＱ−１０が５０℃で溶解される、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
溶液が２５℃で１か月間安定である、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
溶液が２５℃で１週間安定である、請求項２に記載の組成物。
【請求項７】
ＣｏＱ−１０の還元型のＤＨＡに対する濃度が２０℃で約８重量％〜２５℃で約２５重量％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
ＣｏＱ−１０の還元型のＤＨＡに対する濃度が約８重量％〜約１５重量％である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
８％の水を含有するエタノール溶液を含まない、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
ソフトゼラチンカプセル内に被包されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元するのに十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）、及び還元型ＣｏＱ−１０がＤＨＬＡ中に溶解されるような担体として十分な量のＤＨＬＡから本質的になる組成物。
【請求項１２】
還元型ＣｏＱ−１０が２５℃で溶解される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
還元型ＣｏＱ−１０が３７℃で溶解される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１４】
還元型ＣｏＱ−１０が５０℃で溶解される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１５】
溶液が２５℃で１か月間安定である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１６】
溶液が２５℃で１週間安定である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１７】
ＣｏＱ−１０の還元型のＤＨＡに対する濃度が２０℃で約８重量％〜２５℃で約２５重量％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】
ＣｏＱ−１０の還元型のＤＨＡに対する濃度が約８重量％〜約１５重量％である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
８％の水を含有するエタノール溶液を含まない、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２０】
ソフトゼラチンカプセル内に被包されている、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２１】
還元型コエンザイムＱ−１０溶液を調製する方法であって、
還元型ＣｏＱ−１０とＤＨＬＡの溶液が生じるような過剰なＤＨＬＡが担体として存在する条件下で、コエンザイムＱ−１０（ＣｏＱ−１０）を、十分な量のジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）と組み合わせて、ＣｏＱ−１０を、９５重量％を越えてＣｏＱ−１０の還元型に還元することを特徴とする方法。
【請求項２２】
還元型ＣｏＱ−１０が２５℃で溶解される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
還元型ＣｏＱ−１０が３７℃で溶解される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
還元型ＣｏＱ−１０が５０℃で溶解される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
溶液が２５℃で１か月間安定である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
溶液が２５℃で１週間安定である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
ＣｏＱ−１０の還元型のＤＨＡに対する濃度が２０℃で約８重量％〜２５℃で約２５重量％である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２８】
ＣｏＱ−１０の還元型のＤＨＡに対する濃度が約８重量％〜約１５重量％である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
組成物が８％の水を含有するエタノール溶液を含まない、請求項２１に記載の方法。
【請求項３０】
組成物がソフトゼラチンカプセル内に被包されている、請求項２１に記載の方法。 
【国際調査報告】
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