(57)【要約】本発明は、低酸素腫瘍又は虚血組織をイン  ヴィヴォ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で検出するのに有用な、式（Ｉ）の新規な放射性標識化生体還元性トレーサーに関する。一実施形態において、該トレーサーは、２−ニトロイミダゾール部分、トリアゾール、薬物動態を向上させる置換基を有する代謝的に安定なリンカー及び放射性同位元素からなる。好ましいイン  ヴィヴォ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）造影手法は陽電子放射断層撮影である。【選択図】【化１】
2010523596.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉを含んでなる化合物。
【化１】
2010523596.tif 000035
式中：
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の若しくは置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり；
Ｘ1は、それぞれ、独立してヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択され；
Ｙは、下式のトリアゾリルであり；
【化２】
2010523596.tif 000036
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基は、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されておらず；
Ａは、放射性元素であり；そして、
Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又は、それぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。
【請求項２】
Ｘが、１、２若しくは３個のヒドロキシル基、又は１、２若しくは３個の−ＮＨ2乃至ＮＨ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル基で置換されていてもよい（Ｃ1〜Ｃ4）アルキレニル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘが、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−及びＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−からなる群から選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘが、−ＣＯＮＲ'−、−（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルＣＯＮＲ'−、−ＣＯＮＲ'（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル−及び（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルＣＯＮＲ'（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルからなる群から選択され、Ｒ'がＨ又は（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘ、Ｚ又はＡのいずれか１つが11Ｃを含んでなる、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
式ＩＩ又はＩＩＩを含んでなる請求項１に記載の化合物。
【化３】
2010523596.tif 000037
式中：
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル又はハロであり；
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよい（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換されているか置換されておらず；
Ａは、放射性元素であり；そして、
Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又はそれぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。
【請求項７】
式ＩＩｂを含んでなる化合物。
【化４】
2010523596.tif 000038
式中：
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基は、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換されているか置換されておらず；
Ｒ"は、Ｈであるか、又は（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択され；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択され；そして、
Ａは、放射性元素である。
【請求項８】
Ｚが、ヒドロキシル、チオール、アミノ、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル、（Ｃ1〜Ｃ4）アルコキシ、チオ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル及びハロからなる群から独立して選択された１、２又は３個の基で置換されていてもよい（Ｃ1〜Ｃ4）アルキレニル基である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｚが、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ2ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−及びＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−からなる群から選択される、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ａが、18Ｆ又は11Ｃ−Ｍｅである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ａが18Ｆである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
下式を含んでなる請求項１１に記載の化合物。
【化５】
2010523596.tif 000039
【請求項１３】
式ＩＶを含んでなる化合物。
【化６】
2010523596.tif 000040
式中：
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり；
Ｒ'は、Ｈであるか、又は（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択され；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル、（Ｃ1〜Ｃ4）アルコキシ、チオ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル及びハロからなる群から選択される。
【請求項１４】
Ｘが、１若しくは２個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ5）アルキレニルであるか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯＮＲ'−又は−ＮＲ'ＣＯ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２若しくは３個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキルを形成しており、ここで、Ｘ1は、−ＯＨ又はＮＨ2である。
【請求項１５】
式Ｖを含んでなる化合物。
【化７】
2010523596.tif 000041
式中：
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換又は置換（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり；
Ｒ'は、Ｈであるか、又は（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択され；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択される。
【請求項１６】
下式を含んでなる請求項１５に記載の化合物。
【化８】
2010523596.tif 000042
【請求項１７】
以下からなる群から選択された請求項１に記載の化合物。
【化９】
2010523596.tif 000043
【請求項１８】
ａ）式Ｉの化合物を哺乳動物に投与すること；
【化１０】
2010523596.tif 000044
（式中、
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択され；
Ｙは、下式のトリアゾリルであり；
【化１１】
2010523596.tif 000045
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基は、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換されているか置換されておらず；
Ａは、放射性元素であり；
Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又は、それぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。）：
並びに
ｂ）哺乳動物の低酸素細胞中に保持された放射性元素の存在をＰＥＴによって検出すること：を含んでなる、
細胞の低酸素を検出する方法。
【請求項１９】
Ｘが、１、２若しくは３個のヒドロキシル基又は１、２若しくは３個の−ＮＨ2乃至ＮＨ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル基で置換されていてもよい、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキレニル基である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
Ｘが、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−及びＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−からなる群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
Ｘが、−ＣＯＮＲ'−、−（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルＣＯＮＲ'−、−ＣＯＮＲ'（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル−及び−（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルＣＯＮＲ'（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル−からなる群から選択され、ここで、Ｒ'がＨ又は（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
化合物が、式ＩＩ又はＩＩＩの化合物である請求項１８に記載の方法。
【化１２】
2010523596.tif 000046
式中：
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択され；
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基は、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されておらず；
Ａは、放射性元素であり；
Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又はそれぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。
【請求項２３】
化合物が式ＩＩの化合物である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
Ｚが、１、２若しくは３個のヒドロキシル基又は１、２若しくは３個のヒドロキシ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル基で置換されていてもよい、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキレニル基である請求項１８〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
Ｚが、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ2ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−及びＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−からなる群から選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
Ａが、18Ｆ又は11Ｃ−Ｍｅである、請求項１８〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
Ａが18Ｆである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
化合物が下式を含んでなる、請求項１８に記載の方法。
【化１３】
2010523596.tif 000047
【請求項２９】
低酸素細胞が、腫瘍細胞又は虚血性細胞である、請求項１８に記載の方法。
【請求項３０】
式ＩＩ若しくはＩＩＩの化合物又はそれらの混合物を調製する方法であって
【化１４】
2010523596.tif 000048
（式中：
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択され；
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換されているか又は置換されておらず；
Ａは、放射性元素であり；そして、
Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又は、それぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。）：
ａ）アジド置換化合物Ａ'−Ｚ−Ｎ3を、アセチレン置換ニトロイミダゾールで処理し（ここで、Ａ'は脱離基である）；
【化１５】
2010523596.tif 000049
及び
ｂ）Ａ'を放射性標識化剤で置き換えることによりステップａ）の生成物を放射性標識化することによって、化合物ＩＩ若しくはＩＩＩ又はその混合物を形成すること（ここで、Ａは、18Ｆ又は11Ｃである。）
を含んでなる方法。
【請求項３１】
化合物が下式の化合物である、請求項３０に記載の方法。
【化１６】
2010523596.tif 000050
【請求項３２】
放射性標識化剤がＫ18Ｆである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
治療を必要としている哺乳動物において癌を治療する方法であって、治療上有効量の、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の、化合物を哺乳動物に投与することを含んでなる方法。
【請求項３４】
化合物が、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の非放射性標識化化合物である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
化合物が、直腸、局所、経口、舌下又は非経口的に投与される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
化合物が、１日当たり、約０．００１から約１００ｍｇ／ｋｇ（哺乳動物の体重）投与される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
化合物が、１日当たり、約０．１から約５０ｍｇ／ｋｇ（哺乳動物の体重）投与される、請求項３３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イン  ヴィヴォ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で低酸素細胞の検出に有用な、新規な放射性標識化生体還元性トレーサーに関する。一側面において、本出願は、低いバックグラウンド取り込みを示し、良好な腫瘍／バックグラウンド比を生じる新規な低酸素造影剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）は、疾患の検出に有効に用いられる分子イメージング技術である。ＰＥＴイメージングシステムは、患者の組織における陽電子放射同位元素の分布に基づいて画像を創り出す。同位元素は、典型的には、細胞内で容易に代謝され若しくは局在化される分子（例えば、グルコース）又は細胞内部の受容体部位に化学的に結合する分子に共有結合した、Ｆ−１８、Ｃ−１１、Ｎ−１３又はＯ−１５のような、陽電子放射同位元素を含むプローブ分子の注射によって、患者に投与される。ある場合には、同位元素はイオン溶液として又は吸入によって患者に投与される。最も広く用いられる陽電子放射体標識化ＰＥＴ分子イメージングプローブの１つは、２−デオキシ−２−［18Ｆ］フルオロ−Ｄ−グルコース（［18Ｆ］ＦＤＧ）である。
【０００３】
グルコース輸送体及びヘキソキナーゼを主として標的とするグルコース類似体［18Ｆ］ＦＤＧを用いるＰＥＴスキャニングは、癌の早期検出、病期診断及び再病期診断のための正確な臨床手段である。ＰＥＴ−ＦＤＧイメージングは、また、グルコース利用率の初期変化が結果予測と相関することが示されているので、癌の化学療法及び化学放射線療法をモニターするために用いられている。腫瘍細胞の特徴的な性質は、急速に増殖する腫瘍組織の高い代謝要求に起因する、加速された糖分解速度である。グルコースと同様に、ＦＤＧは、グルコース輸送体を介して癌細胞に取り込まれ、ヘキソキナーゼによってリン酸化されてＦＤＧ−６リン酸となる。ＦＤＧ−６リン酸は、糖分解連鎖を先に進むことができず、又はその電荷のため細胞を離れることができず、その結果、高い糖分解速度を有する細胞が検出可能となる。
【０００４】
ＦＤＧ−ＰＥＴイメージングは、多くの状況で有用であるが、癌をモニターするための限界も存在する。炎症組織における蓄積は、ＦＤＧ−ＰＥＴの特異性を制限する。逆に、非特異的なＦＤＧの取り込みは、腫瘍応答予測のためのＰＥＴの感度を制限する可能性もある。治療で誘発された細胞ストレス反応が、放射線療法及び化学療法薬によって処置された腫瘍細胞系に、ＦＤＧ取り込みの一時的な増大をもたらすことが示されている。更に、（例えば脳内における）生理的に高い正常バックグラウンド活性は、身体の幾つかの領域において、癌に関連したＦＤＧ取り込みの定量化を不可能にする可能性がある。
【０００５】
これらの制限があるため、癌組織における他の酵素媒介性の転換を標的とする、他のＰＥＴイメージングトレーサー、例えばＤＮＡ複製のための３'−［Ｆ−１８］フルオロ−３'−デオキシチミジン（ＦＬＴ）及びコリンキナーゼのための［Ｃ−１１］（メチル）コリン、並びに超高特異活性受容体−リガンド結合（例えば、１６α［Ｆ−１８］フルオロエストラジオール）及び潜在的遺伝子発現（例えば、［Ｆ−１８］フルオロ−ガンシクロビル）等が開発されつつある。癌の非侵襲的ＰＥＴイメージングに分子標的剤が大きな潜在的価値を有することが実証されている。
【０００６】
これらの研究は、非侵襲的ＰＥＴイメージングが癌の特定の代謝標的に対して大いに価値のあることを実証している。ＰＥＴイメージングを患者の管理に組み入れることには明らかな臨床的価値があるにもかかわらず、制限も存在する。いくつかの例では、現在用いられているイメージングプローブは特異性を欠くか又はバックグラウンド特性に対して不十分なシグナルを有する。更に、治療的介入のために試験されている新しい生体標的は、治療可能性を評価するための新しいイメージングプローブを必要とする。
【０００７】
従って、癌用薬物開発を支援するため、更にヘルスケア提供者に、疾患を正確に診断し治療をモニターする手段を提供するために、腫瘍標的に非常に高い親和性及び特異性を示す補足的なバイオマーカーが求められている。そのようなイメージングプローブは、僅かナノモル量のトレーサーを患者に注射することにより、より小さな腫瘍を検出可能にし、患者の結果を劇的に改善することができる。
【０００８】
癌治療の臨床的成功の鍵は、特定の型の癌がどのように治療に反応するかを予測する能力である。腫瘍の特定の例において、腫瘍の表現型、大きさ及び位置等の要素は全て治療的処置の決定に劇的に影響する。様々な腫瘍を治療するために標準的な化学療法又は放射線治療計画が用いられるが、ある種の腫瘍型は標準的な治療計画に抵抗性を示し、従って患者の臨床結果を悪化させる可能性がある。
【０００９】
癌細胞成長の独特な性質のため、その増殖の性質は治療的処置の手がかりを与え得る。例えば、癌性腫瘍の急速かつ無秩序な成長のため、しばしば無秩序な血管新生が起こり、不充分な血管形成環境がもたらされる（Ｗａｎｇ，Ｊ．及びＬ．Ｍａｕｒｅｒ、Ｐｏｓｉｔｒｏｎ  Ｅｍｉｓｓｉｏｎ  Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００５、５：ｐ１０５３〜１０７５）。次に、１００〜２００μｍが血管供給から除かれた環境は低酸素となる可能性があり、これは１０ｍｍＨｇ未満の組織ｐＯ2で特徴付けられる。これらの低酸素状態に応答して、腫瘍の低酸素誘導因子１（ＨＩＦ−１）の過剰発現は腫瘍の生存に必要な、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡ−ＩＸ）及び糖分解酵素を始めとする、いくつかのタンパク質の上方制御を招く。
【００１０】
低酸素腫瘍は臨床的に問題となる。低酸素腫瘍は、放射線療法及び細胞毒性療法の両方の作用に抵抗性を示し、治療を失敗させる可能性がある（Ａｄａｍｓ，Ｇ．、Ｈｙｐｏｘｉａ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、Ｃａｎｃｅｒ、１９８１．４８：ｐ６９６〜７０７；Ｍｏｕｌｄｅｒ，Ｊ．及びＳ．Ｒｏｃｋｗｅｌｌ、Ｈｙｐｏｘｉｃ  ｆｒａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ：ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ａｎａｌｙｓｉｓ，ａｎｄ  ａ  ｓｕｒｖｅｙ  ｏｆ  ｅｘｉｓｔｉｎｇ  ｄａｔａ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓ．、１９８４．１０：ｐ６９５〜７１２；Ｎｏｒｄｓｍａｒｋ，Ｍ．、Ｍ．Ｏｖｅｒｇａａｒｄ及びＪ．Ｏｖｅｒｇａａｒｄ、Ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ  ｐｒｅｄｉｃｔｓ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｉｎ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｅａｄ  ａｎｄ  ｎｅｃｋ、Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ．Ｏｎｃｏｌ、１９９６．４１：ｐ３１〜３９）。更に、低酸素癌細胞は、患者の全身に侵襲的に広がることが知られている悪性癌と関連があるとされている（Ｂｒｉｚｅｌ，Ｄ．Ｍ．ら、Ｔｕｍｏｕｒ  ｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ  ｐｒｅｄｉｃｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄ  ｏｆ  ｄｉｓｔａｎｔ  ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｓｏｆｔ  ｔｉｓｓｕｅ  ｓａｒｃｏｍａ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、１９９６．５６：ｐ９４１〜９４３；Ｈｏｃｋｅｌ，Ｍ．ら、Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｕｍｏｒ  ｈｙｐｏｘｉａ  ａｎｄ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｃａｎｃｅｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｅｒｖｉｘ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、１９９６．５６：ｐ９４１〜９４３）。乳癌、子宮頸癌及び非小細胞肺癌を始めとするヒト癌のいくつかの型が低酸素となることがよく知られている（Ｖａｕｐｅｌ，Ｐ．ら、Ｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｔｕｍｏｕｒｓ：ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｉｓｓｕｅ  ｏｘｙｇｅｎ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｉｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒｓ  ｂｙ  ｃｏｍｐｕｔｅｒｉｚｅｄ  Ｏ2  ｔｅｎｓｉｏｎ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、１９９１．５１：ｐ３３１６〜３３２２）。
【００１１】
低酸素腫瘍は、従来の放射線及び細胞毒性療法のいずれにも応答が不充分であるため、高圧Ｏ2、ＡＲＣＯＮ、放射線増感剤及び生体環元細胞毒性剤を始めとする、低酸素癌細胞を治療するためのいくつかの代替となるアプローチが存在する（Ｓｅｄｄｏｎ，Ｂ．Ｍ．及びＰ．Ｗｏｒｋｍａｎ、Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｎｄ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｒａｄｉｏｌ．、２００３．７６：ｐＳ１２８〜Ｓ１３８）。最後の例において、ニトロイミダゾール化学種を含有する生体還元剤は、細胞内で還元され、最終的に細胞内に捕捉されるラジカルアニオン代謝産物を形成する。有酸素（ｏｘｉｃ）環境では、ラジカルアニオンは、Ｏ2と反応し、前代謝状態に戻る。
【００１２】
治療のために生体還元に基づく療法を適切に計画するため、患者における腫瘍低酸素を確認する必要がある。腫瘍内部のｐＯ2濃度を電極測定することによって腫瘍低酸素を求めるのは、どのように考えても非実用的な試みである。更に、この技法では表在する腫瘍を調べられるだけである。癌細胞の低酸素的性質を検出するための、より一般的で、より侵襲性の低い方法は、細胞内ｐＯ2に反比例して低酸素細胞内部に局在する放射性標識化生体還元性トレーサーに依存する。
【００１３】
イン  ヴィヴォ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で低酸素細胞を検出することのできるいくつかの生体還元性造影剤があり、それには［18Ｆ］Ｆ−ＭＩＳＯ（Ｒａｓｅｙ，Ｊ．Ｓ．ら、Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  ｔｈｅ  ｈｙｐｏｘｉｃ  ｆｒａｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ａ  ｒａｔ  ｇｌｉｏｍａ  ｂｙ  ｕｐｔａｋｅ  ｏｆ  ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  ｆｌｕｏｒｏｍｉｓｏｎｉｄａｚｏｌｅ、Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．、２０００．１５３：ｐ８４〜９２；Ｂｅｎｔｚｅｎ，Ｌ．ら、Ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  ｈｙｐｏｘｉａ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｍｏｕｓｅ  ｔｕｒｎｏｕｒｓ  ｗｉｔｈ  18Ｆ−ｆｌｕｏｒｉｎａｔｅｄ  ｔｒａｃｅｒｓ  ａｎｄ  ｐｏｓｉｔｒｏｎ  ｅｍｉｓｓｉｏｎ  ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ：ａ  ｓｔｕｄｙ  ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ  18Ｆ−Ｆｌｕｏｒｏｍｉｓｏｎｉｄａｚｏｌｅ  ａｎｄ  ［18Ｆ］Ｆｌｕｏｒｏ−２−ｄｅｏｘｙ−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ、Ａｃｔａ．Ｏｎｃｏｌ．、２０００．３９：ｐ６２９〜６３７）、［18Ｆ］Ｆ−ＥＦ１（Ｈｕｓｔｉｎｘ，Ｒ．ら、Ｎｏｎ−ｉｎｖａｓｉｖｅ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｈｙｐｏｘｉａ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ２−ｎｉｔｒｏｉｍｉｄａｚｏｌｅ  18Ｆ−ＥＦＩ  ａｎｄ  ＰＥＴ、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．、１９９９．４：ｐ９９Ｐ（アブストラクト４０１））、［18Ｆ］−ＦＥＴＮＩＭ（Ｃｈａｏ，Ｋ．Ｓ．ら、Ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ｏｖｅｒｃｏｍｅ  ｈｙｐｏｘｉｃ  ｔｕｍｏｒ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ：Ｃｕ−ＡＴＳＭ−ｇｕｉｄｅｄ  ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ−ｍｏｄｕｌａｔｅｄ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｔｈｅｒａｐｙ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｐｈｙｓ．、２００１．４９：ｐ１１７１〜１１８２；Ｙａｎｇ，Ｄ．Ｊ．ら、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  18Ｆ−ｌａｂｅｌｅｄ  ｆｌｕｏｒｏｅｒｙｔｈｒｏｎｉｔｒｏｉｍｉｄａｚｏｌｅ  ａｓ  ａ  ＰＥＴ  ａｇｅｎｔ  ｆｏｒ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｔｕｍｏｒ  ｈｙｐｏｘｉａ、Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ、１９９５．１９４：ｐ７９５〜８００；Ｇｒｏｎｒｏｏｓ，Ｔ．ら、Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ［18Ｆ］−ＦＥＴＮＩＭ．Ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｈｙｐｏｘｉａ  ｍａｒｋｅｒ  ｆｏｒ  ＰＥＴ、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．、２００１．４２：ｐ１３９７〜１４０４）、［18Ｆ］−ＦＲＰ−１７０（Ｉｓｈｉｋａｗａ，Ｙ．ら、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ［18Ｆ］−ＦＲＰ−１７０  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｈｙｐｏｘｉａ  ｂｙ  ＰＥＴ、ＫａｋｕＩｇａｋｕ、２００５．４２：ｐ１〜１０）及び［62Ｃｕ］−ＡＴＳＭ（Ｆｕｊｉｂａｙａｓｈｉ，Ｙ．ら、Ｃｏｐｐｅｒ−６２−ＡＴＳＭ−ａ  ｎｅｗ  ｈｙｐｏｘｉａ  ｉｍａｇｉｎｇ  ａｇｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ｈｉｇｈ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｌｏｗ  ｒｅｄｏｘ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．、１９９７．３８：ｐ１１５５〜１１６０）が含まれる。
【００１４】
臨床的に最も研究されている低酸素マーカーの１つは、［18Ｆ］Ｆ−ＭＩＳＯ、即ち、低酸素細胞放射線増感剤ミソニダゾールのフッ素類似体である。［18Ｆ］Ｆ−ＭＩＳＯは首尾よく患者の低酸素腫瘍を同定するが、しかしながら、低酸素腫瘍への拡散が遅いため、イメージングまでにより長い取り込み時間を必要とし、加えて、高いバックグラウンド取り込みのため、腫瘍／バックグラウンド比が小さくなる。代替物として、いくつかのグループが、正常酸素組織からのトレーサーの洗い流しを増大することにより腫瘍／バックグラウンド比を高くすることを試みて、より脂肪親和性の低いニトロイミダゾールを調製している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
これらの低酸素造影剤は臨床的に有望でありそうであるが、より速く、より正確な可能性がある低酸素評価のために、より短時間でピークシグナル対ノイズ比をもたらす、向上した薬物動態プロファイルを有する低酸素トレーサーが、依然として求められている。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、低いバックグラウンド取り込みを示し、高い腫瘍／バックグラウンド比を生じる新規な低酸素造影剤に関する。より詳細には、本発明は、迅速な、顕著な腎クリアランスを示し、低いバックグラウンド取り込み、低い腹部取り込み及び一般に高い腫瘍／バックグラウンド比を生じる、新規な２−ニトロイミダゾールをベースとする、低酸素造影剤に関する。
【００１７】
本発明は、イン  ヴィヴォ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で低酸素腫瘍を検出するのに有用な、新規な放射性標識化生体還元性トレーサーに関する。一実施形態において、トレーサーは、２−ニトロイミダゾール部分、トリアゾール、薬物動態を向上させる置換基を伴う代謝的に安定なリンカー及び単一光子放射コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）又は陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）イメージングに適した放射性同位元素からなる。好ましいイン  ヴィヴォ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）イメージング手段は陽電子放射断層撮影である。低酸素細胞は、細胞毒性療法及び放射線療法に抵抗性であり、更に近傍の組織に増殖及び繁殖する高い傾向を有するため、患者の癌の低酸素性を正確に評価することによって、治療計画を導き結果に大きな影響を及ぼすことができる。
【００１８】
一側面において、式Ｉを含んでなる化合物が提供される。
【００１９】
【化１】
2010523596.tif 000003
【００２０】
式中、
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル又はハロであり；
Ｙは、下式のトリアゾリルであり；
【００２１】
【化２】
2010523596.tif 000004
【００２２】
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、ここで、炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基は、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されておらず；
Ａは、放射性元素であり；そして、
Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立してＨであるか、又は、それぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。
【００２３】
上記の１つの変形において、Ｘは、１、２若しくは３個のヒドロキシル基又は１、２若しくは３個の−ＮＨ2乃至ＮＨ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル基で置換されていてもよい、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキレニル基である。他の変形において、Ｘは、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−及びＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−からなる群から選択される。特定の変形において、Ｘは、−ＣＯＮＲ'−、−（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルＣＯＮＲ'−、−ＣＯＮＲ'（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル−、−（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルＣＯＮＲ'（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルからなる群から選択され、Ｒ'は、Ｈ又は（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルである。上記化合物の特定の変形において、Ｘ、Ｚ又はＡのいずれか１つは、11Ｃを含んでなる。
【００２４】
他の側面において、式ＩＩ又はＩＩＩの化合物が提供される。
【００２５】
【化３】
2010523596.tif 000005
【００２６】
式中、Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子は、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはその組み合わせであり；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択され；
Ｚは、炭素原子の１つが−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で置換されていてもよい、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換されているか置換されておらず；
Ａは、放射性元素であり；そして、
Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又はそれぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。
【００２７】
特定の一実施形態において、式ＩＩｂを含んでなる化合物が提供される。
【００２８】
【化４】
2010523596.tif 000006
【００２９】
式中、
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基は、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換されているか置換されておらず；
Ｒ"は、Ｈであるか、又は、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択され；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル又はハロであり；そして、
Ａは、放射性元素である。
【００３０】
上記のそれぞれの特定の変形において、Ｚは、ヒドロキシル、チオール、アミノ、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル、（Ｃ1〜Ｃ4）アルコキシ、チオ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル及びハロからなる群から独立に選択された１、２又は３個の基で置換されていてもよい、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキレニル基である。上記化合物の一変形において、Ｚは、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ2ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−及びＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−からなる群から選択される。
【００３１】
上記のそれぞれの変形において、Ａは、18Ｆ又は11Ｃ−Ｍｅである。上記の特定の変形において、Ａは18Ｆである。上記の一変形において、下式の化合物が提供される。
【００３２】
【化５】
2010523596.tif 000007
【００３３】
他の実施形態において、式ＩＶを含んでなる化合物が提供される。
【００３４】
【化６】
2010523596.tif 000008
【００３５】
式中、
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル若しくは（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはその組み合わせであり；
Ｒ'は、Ｈであるか、又は、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択され；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル、（Ｃ1〜Ｃ4）アルコキシ、チオ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル及びハロからなる群から選択される。
【００３６】
上記化合物の特定の変形において、Ｘが、１若しくは２個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ5）アルキレニルであるか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯＮＲ'−又は−ＮＲ'ＣＯ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２若しくは３個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキルを形成しており、ここで、Ｘ1は、−ＯＨ又はＮＨ2である。
【００３７】
他の実施形態において、式Ｖを含んでなる化合物が提供される。
【００３８】
【化７】
2010523596.tif 000009
【００３９】
式中、
Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、
ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり、
Ｒ'は、Ｈであるか、又は、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択され；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択される。
【００４０】
上記の特定の変形において、下式を含んでなる化合物が提供される。
【００４１】
【化８】
2010523596.tif 000010
【００４２】
上記化合物の他の側面において、以下の化合物が提供される。
【００４３】
【化９】
2010523596.tif 000011
【００４４】
他の実施形態において、
ａ）式Ｉの化合物を哺乳動物に投与すること；
【００４５】
【化１０】
2010523596.tif 000012
【００４６】
（式中、Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはその組み合わせであり、
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択され、
Ｙは、下式のトリアゾリルであり；
【００４７】
【化１１】
2010523596.tif 000013
【００４８】
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基は、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換されているか置換されておらず、
Ａは、放射性元素であり、
Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又は、それぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。）：
並びに
ｂ）哺乳動物の低酸素細胞に保持された放射性元素の存在をＰＥＴによって検出すること：を含んでなる、
細胞の低酸素を検出する方法が提供される。
【００４９】
上記方法の特定の変形において、Ｘは、１、２若しくは３個のヒドロキシル基又は１、２、若しくは３個の−ＮＨ2乃至ＮＨ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル基で置換されていてもよい、（Ｃ1〜Ｃ4）アルキレニル基である。上記の他の変形において、Ｘは、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−及びＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−からなる群から選択される。上記方法の他の変形において、Ｘは、−ＣＯＮＲ'−、−（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルＣＯＮＲ'−、−ＣＯＮＲ'（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル−及び（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルＣＯＮＲ'（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルからなる群から選択され、Ｒ'は、Ｈ又は（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルである。
【００５０】
上記方法の特定の一変形において、化合物は、式ＩＩ又はＩＩＩの化合物である。
【００５１】
【化１２】
2010523596.tif 000014
【００５２】
式中、Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換又は置換（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、又或いはこれらの組み合わせであり；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択され；
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基は、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されておらず；
Ａは、放射性元素であり；Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又は、それぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。
【００５３】
上記方法の一変形において、化合物は、式ＩＩの化合物である。上記方法のそれぞれの他の変形において、Ｚは、１、２若しくは３個のヒドロキシル基又は１、２若しくは３個のヒドロキシ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル基で置換されていてもよい（Ｃ1〜Ｃ4）アルキレニル基である。上記方法の特定の一変形において、Ｚは、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ（ＣＨ2ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−及びＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2−からなる群から選択される。上記方法のそれぞれの特定の変形において、Ａは、18Ｆ又は11Ｃ−Ｍｅである。この方法の他の特定の変形において、Ａは18Ｆである。
【００５４】
上記方法の一変形において、化合物は以下の式を含んでなる。
【００５５】
【化１３】
2010523596.tif 000015
【００５６】
上記方法の特定の態様において、低酸素細胞は、腫瘍細胞又は虚血性細胞である。
【００５７】
他の実施形態において、式ＩＩ若しくはＩＩＩの化合物又はその混合物を調製する方法が提供され、
【００５８】
【化１４】
2010523596.tif 000016
【００５９】
（式中、Ｘは、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニルであり、ここで、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル炭素原子の１つが、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ'−、−ＮＲ'ＣＯ−、−ＮＲ'−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよいか、或いは（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換され又は置換されていない、非置換又は置換（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成しているか、或いはこれらの組み合わせであり；
Ｘ1は、それぞれ独立して、ヒドロキシル、チオール、アミノ、アルキル、アルコキシ、チオアルキル及びハロからなる群から選択され；
Ｚは、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基であり、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の炭素原子の１つは、−ＣＯ−、−ＣＯＮＲ"−、−ＮＲ"ＣＯ−、−ＮＲ"−、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択された基で、置換されていてもよく、（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基が、１、２、３若しくは４個のＸ1で置換されているか又は置換されておらず；
Ａは、放射性元素であり；そして、
Ｒ'及びＲ"は、それぞれ独立して、Ｈであるか、又は、それぞれ独立して、（Ｃ1〜Ｃ6）アルキル、−ＣＯ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル、−ＣＯＮＨ（Ｃ1〜Ｃ3）アルキル及びＣＯ2（Ｃ1〜Ｃ3）アルキルからなる群から選択される。）：
この方法は、
ａ）アジド置換化合物Ａ'−Ｚ−Ｎ3を、アセチレン置換ニトロイミダゾールで処理（Ａ'は脱離基である。）すること；及び
【００６０】
【化１５】
2010523596.tif 000017
【００６１】
ｂ）Ａ'を放射性標識化剤で置き換えることによって、ステップａ）の生成物を放射性標識化して、化合物ＩＩ若しくはＩＩＩ又はその混合物を形成すること（ここで、Ａは18Ｆ又は11Ｃである。）を含んでなる。
【００６２】
上記の一変形において、化合物は下式の化合物である。
【００６３】
【化１６】
2010523596.tif 000018
【００６４】
上記方法の特定の変形において、放射性標識化剤はＫ18Ｆである。
【図面の簡単な説明】
【００６５】
【図１】静脈注射（５ｍＭ溶液２００μｌ）１２０分後の雄白マウスにおける化合物１の生体内分布を示す図である。
【図２】野生型ラットにおける化合物１の血漿及び尿薬理試験（濃度１０ｍＭで１ｍｌ）
【図３】細胞毒性アッセイ（異なる濃度の化合物とインキュベートしたＡ１７２細胞）
【図４】細胞毒性アッセイ（異なる濃度の化合物とインキュベートしたＬＳ１７４Ｔ細胞）
【図５】細胞毒性アッセイ（異なる濃度の化合物とインキュベートしたＡＭＬ１２細胞）
【図６】ＰＥＴ画像
【発明を実施するための形態】
【００６６】
本発明を、以下により、詳細に記載する。しかしながら、本発明は多くの異なる形態で具体化することができ、本明細書に記載の実施形態に限定されるものであると解釈されるべきではない。むしろ、これらの実施形態は、この開示を徹底的かつ完全なものにし、当業者に本発明の範囲を充分に伝えるために提供されるものである。
【００６７】
本明細書に記載の新規な化合物は、低酸素腫瘍をイメージングするために必要である必須の２−ニトロイミダゾール核を含有する。機構的には、低酸素条件下における細胞内生体還元は、２−ニトロイミダゾール核を修飾し、次いで、これが細胞内部で、共有結合で媒介されて、配置される。有酸素条件下で、生体還元されたニトロイミダゾールは、その本来の状態に戻り、細胞内外に自由に拡散する。
【００６８】
本明細書に開示した新規な化合物は、また、有利なイメージング薬物動態特性を示す。これらの化合物は、腎排泄による有利なクリアランス特性を有し、従って、肝臓及び腸領域で低い取り込みを示す。これらの化合物は、血液及び筋肉組織の両方から迅速に排除され、従って、望ましい腫瘍／バックグラウンド比を生じる。更に、これらの有利なクリアランス特性は、「理想的な基準である（ｇｏｌｄ  ｓｔａｎｄａｒｄ）」［18Ｆ］Ｆ−ＭＩＳＯより早い時点で腫瘍／バックグラウンド比のピークを生じる。これらのトレーサーは、非低酸素腫瘍に対するよりも低酸素腫瘍に対して高度に選択性を示す。異種移植マウス及びラットにおいて、このトレーサーは低酸素腫瘍内に優先的に局在し、ほとんどの場合、２：１より大きい腫瘍／バックグラウンド比を有する。
【００６９】
この一群の化合物は、例えば、化合物１が１０，０００ｎＭまでの濃度で正常ヒト又は癌細胞において細胞毒性作用を示さないという点で、細胞レベルで無害であると考えられる。
定義
本明細書では、単数形「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに別段の規定をしないかぎり複数の指示物を含む。
【００７０】
「アルキル」は、典型的には約１から２０原子の長さの炭化水素鎖を、指す。そのような炭化水素鎖は、分枝鎖でも直鎖でもよいが、典型的には、直鎖が好ましい。代表的なアルキル基には、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、１−メチルブチル、１−エチルプロピル、３−メチルペンチル等が含まれる。本明細書では、３個以上の炭素原子が参照されるとき、「アルキル」はシクロアルキルを含む。
【００７１】
「アルキレニル」は、２つの異なる基に２価結合している、典型的には約１から２０原子の長さ又は１から１０炭素原子の長さである、炭化水素鎖を指す。そのような炭化水素鎖は、分枝鎖でも直鎖でもよい。代表的なアルキレニル基には、エチレニル、プロピレニル、イソ−プロピレニル、ブチレニル、イソ−ブチレニル、ペンチレニル、１−メチルブチレニル、１−エチルプロピレニル、３−メチルペンチレニル等が含まれ、ここで２価結合は、アルキレニル基の任意の炭素原子にあるか、又は特に示されたとおりであってよい。本明細書では、３個以上の炭素原子に言及するとき、「アルキレニル」は、シクロアルキレニルをも含む。
【００７２】
「アリール」は、それぞれ５又は６個の核炭素原子からなる１つ以上の芳香環を意味する。アリールは、多重のアリール環を含み、それらはナフチルのように縮合していてもよく、ビフェニルのように縮合していなくてもよい。アリール環は、また、１つ以上の環式炭化水素、ヘテロアリール又は複素環と、縮合していても縮合していなくてもよい。本明細書では、「アリール」は、ヘテロアリールを含む。
【００７３】
「生体標的」は、任意の種々の疾患及び状態に関連する生物学的経路に関与する任意の生体分子であることができ、それらの疾患及び状態には、癌（例えば、白血病、リンパ腫、脳腫瘍、乳癌、肺癌、前立腺癌、胃癌、並びに、皮膚癌、膀胱癌、骨癌、子宮頸癌、結腸癌、食道癌、眼癌、胆嚢癌、肝臓癌、腎臓癌、咽頭癌、口腔癌、卵巣癌、膵臓癌、陰茎癌、腺腫、直腸癌、小腸癌、肉腫、精巣癌、尿道癌、子宮癌及び膣癌）、糖尿病、神経変性疾患、心血管疾患、呼吸器疾患、消化器系疾患、感染症、炎症性疾患、自己免疫疾患等が含まれる。代表的な生物学的経路には、例えば、細胞周期の調節（例えば、細胞増殖及びアポトーシス）、血管新生、シグナル伝達経路、腫瘍抑制経路、炎症（ＣＯＸ−２）、癌遺伝子及び成長因子受容体が含まれる。生体標的は、「標的生体高分子」又は「生体高分子」と称することもできる。生体標的は、酵素受容体、リガンド依存性イオンチャネル、Ｇタンパク質共役型受容体及び転写因子等の、受容体であることができる。生体標的は、好ましくは、酵素、膜輸送タンパク質、ホルモン及び抗体等の、タンパク質又はタンパク質複合体である。
【００７４】
「隣接する原子」は、互いに隣接する原子を意味する。例えば、「（Ｃ1〜Ｃ10）アルキレニル基の２、３若しくは４個の隣接する原子は、非置換の又は置換された（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環を形成する」という表現は、アルキレニル基又はリンカー中の２、３又は４個の隣接する原子が、例えば、（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル又は（Ｃ3〜Ｃ8）ヘテロシクロアルキル環の一部を形成することを意味する。例えば、下記のフラグメント「Ａ」に表される３個の隣接炭素原子では、それらの原子がシクロヘキシル基等の非置換の（Ｃ3〜Ｃ8）シクロアルキル基を形成するとき、そのフラグメントは、フラグメント「Ｂ」に示されるように形成されることができる。
【００７５】
【化１７】
2010523596.tif 000019
【００７６】
「シクロアルキル」は、好ましくは３から約１２個の炭素原子、好ましくは３から８個の炭素原子、で構成される飽和の、部分的に不飽和の又は不飽和の、環式炭化水素鎖を指し、架橋環、縮合環又はスピロ環を含む、。
【００７７】
「ヘテロアリール」は、１から４個のヘテロ原子、好ましくはＮ、Ｏ若しくはＳ又はそれらの組み合わせ、を含有するアリール基である。ヘテロアリール環は、また、１つ以上の環式炭化水素、複素環、アリール環又はヘテロアリール環と縮合していてもよい。
【００７８】
「複素環」又は「複素環式」は、不飽和性又は芳香族性を有し又は有しない、炭素ではない少なくとも１つの環原子を有する、３〜１２個の原子、好ましくは５〜７個の原子、からなる１つ以上の環を意味する。好ましいヘテロ原子には、硫黄、酸素及び窒素が含まれる。
【００７９】
本明細書では、「脱離基」は、例えば、アミン、チオール若しくはアルコール求核試薬又はその塩等の、求核試薬によって容易に置換される基を指す。そのような脱離基は、よく知られており、例えばカルボキシラート、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール、ハロゲン化物、トリフラート、トシラート、ノシラート、−ＯＲ及びＳＲ等を含む。
【００８０】
本明細書では、「リンカー」は、１から１０個の原子を含んでなる鎖を指し、Ｃ、−ＮＲ−、Ｏ、Ｓ、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）2−、ＣＯ、−Ｃ（ＮＲ）−等の、１、２若しくは３個の隣接し又は隣接しない原子又は基を含んでなっていてもよく、ここでＲは、Ｈであるか、又は、それぞれ置換され又は置換されていない、（Ｃ1〜10）アルキル、（Ｃ3〜8）シクロアルキル、アリール（Ｃ1〜5）アルキル、ヘテロアリール（Ｃ1〜5）アルキル、アミノ、アリール、ヘテロアリール、ヒドロキシ、（Ｃ1〜10）アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシからなる群から選択される。即ち、例えば、リンカーは、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＮＨ−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＮＨＣ（Ｏ）−ＣＨ2−、−ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−ＣＨ2−、−ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ2−等の基を含むことができる。リンカー鎖は、また、多環式及び複素芳香環を含む、飽和環、不飽和環又は芳香環の一部を含んでいてもよい。本出願の化合物のある側面において、変数記号Ｘ及びＺは、リンカーであってもリンカー鎖であってもよい。本明細書では、「（Ｃ1〜3）アルキル」という表現は、例えば、同じ意味を示すために、「Ｃ1〜Ｃ4アルキル」と交換可能に用いられる。
【００８１】
「患者」及び「被験者」という用語は、特に全ての哺乳動物を含む、任意のヒト又は動物の被験者を指す。
【００８２】
本明細書では、「放射性化学品」は、共有結合した放射性同位元素を含有する任意の有機、無機又は有機金属化合物、任意の無機放射性イオン溶液（例えば、Ｎａ［18Ｆ］Ｆイオン溶液）、又は任意の放射性ガス（例えば、［11Ｃ］ＣＯ2）を包含することが意図され、特に組織イメージングを目的として患者に投与（例えば、吸入、経口摂取又は静脈注射による）するための放射性分子イメージングプローブを含み、これらは当技術分野において、放射性医薬品、放射性トレーサー又は放射性リガンドとも称される。本発明は、主として、ＰＥＴイメージングシステムで用いる陽電子放射分子イメージングプローブの合成を対象としているが、本発明は、単一光子放射コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）等の他のイメージングシステムに有用な放射性化学物質を始めとする、放射性核種を含む任意の放射性化合物の合成に容易に適応させることができる。
【００８３】
本明細書では、「放射性同位元素」又は「放射性元素」という用語は、放射性崩壊（即ち、陽電子放出）を示す同位元素及び放射性同位元素を含んでなる放射性標識化剤（例えば、［11Ｃ］メタン、［11Ｃ］一酸化炭素、［11Ｃ］二酸化炭素、［11Ｃ］ホスゲン、［11Ｃ］尿素、［11Ｃ］臭化シアン、並びに、炭素−１１を含有する種々の酸塩化物、カルボン酸、アルコール、アルデヒド及びケトン）を指す。そのような同位元素又は元素は、当技術分野において、放射性同位元素又は放射性核種とも称される。放射性同位元素は、本明細書において、元素の名称又は記号及び質量数の、一般に用いられる種々の組み合わせを用いて命名される（例えば、18Ｆ、Ｆ−１８又はフッ素−１８）。代表的な放射性同位元素には、Ｉ−１２４、Ｆ−１８フッ化物、Ｃ−１１、Ｎ−１３及びＯ−１５が含まれ、これらは、それぞれ、半減期４．２日、１１０分、２０分、１０分及び２分を有する。放射性同位元素は、好ましくは、極性非プロトン性溶媒等の有機溶媒に溶解される。好ましくは、本発明の方法で用いられる放射性同位元素には、Ｆ−１８、Ｃ−１１、Ｉ−１２３、Ｉ−１２４、Ｉ−１２７、Ｉ−１３１、Ｂｒ−７６、Ｃｕ−６４、Ｔｃ−９９ｍ、Ｙ−９０、Ｇａ−６７、Ｃｒ−５１、Ｉｒ−１９２、Ｍｏ−９９、Ｓｍ−１５３及びＴｌ−２０１が含まれる。好ましくは、本発明の方法で用いられる放射性同位元素は、Ｆ−１８である。用いることのできる他の放射性同位元素には、Ａｓ−７２、Ａｓ−７４、Ｂｒ−７５、Ｃｏ−５５、Ｃｕ−６１、Ｃｕ−６７、Ｇａ−６８、Ｇｅ−６８、Ｉ−１２５、Ｉ−１３２、Ｉｎ−１１１、Ｍｎ−５２、Ｐｂ−２０３及びＲｕ−９７が含まれる。
【００８４】
本明細書では、「置換された」又は「置換基」は、１つ以上の水素原子を含んでなる化合物又は官能基が、−Ｃ1〜5アルキル、Ｃ2〜5アルケニル、ハロゲン又はハロ（塩素、フッ素、臭素、ヨウ素原子）、−ＣＦ3、ニトロ、アミノ（−ＮＨ2、−ＮＨＲ、−ＮＲ2等）、オキソ（即ち、−Ｃ（＝Ｏ）−を形成）、−ＯＨ、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、−ＣＯＯＣ1〜5アルキル、−ＯＣ1〜5アルキル、−ＣＯＮＨＣ1〜5アルキル、−ＮＨＣＯＣ1〜5アルキル、−ＯＳＯＣ1〜5アルキル、−ＳＯＯＣ1〜5アルキル、−ＳＯＯＮＨＣ1〜5アルキル、−ＮＨＳＯ2Ｃ1〜5アルキル、アリール、ヘテロアリール等の基（置換基）で、置換されていることを意味し、これらの基のそれぞれが、更に置換されていてもよい。
【００８５】
「チオアルキル」は、非置換であるか、又は、Ｃ1〜5アルキル、Ｃ2〜5アルケニル、ハロゲン又はハロ（塩素、フッ素、臭素、ヨウ素原子）、−ＣＦ3、ニトロ、アミノ（−ＮＨ2、−ＮＨＲ、−ＮＲ2等）、オキソ（即ち、−Ｃ（＝Ｏ）−を形成）、−ＯＨ、カルボキシル、−ＣＯＯＣ1〜5アルキル、−ＯＣ1〜5アルキル、−ＣＯＮＨＣ1〜5アルキル、−ＮＨＣＯＣ1〜5アルキル、−ＯＳＯＣ1〜5アルキル、−ＳＯＯＣ1〜5アルキル、−ＳＯＯＮＨＣ1〜5アルキル、−ＮＨＳＯ2Ｃ1〜5アルキル、アリール及びヘテロアリールで置換されていてもよい、Ｃ1〜10アルキル−Ｓ−基を意味する。
【００８６】
本明細書では、「トリアゾール」は、１，３，４−若しくは１，２，３−トリアゾール又はそれらの混合物を意味する。好ましい実施形態において、「トリアゾール」は、１−及び５−位（「ｓｙｎ」）で若しくは１−及び４−位（「ａｎｔｉ」）において置換されている１，２，３−トリアゾール又はその混合物である。特に好ましい実施形態において、１，２，３−トリアゾールは、１−及び４−位で置換されている。
クリックケミストリー法
クリックケミストリーは、候補造影剤のライブラリーを迅速に作成する機会を化学者に提供し、このライブラリーから最適な薬力学的特性及び薬物動態特性を有する、潜在的な小分子ＰＥＴイメージングトレーサーを同定することができる。クリックケミストリーは、最も実用的で信頼できる化学転換のみを利用する化学合成に対するモジュール式アプローチである。クリックケミストリー技術は、例えば、以下の文献に記載されており、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
１．Ｋｏｌｂ，Ｈ．Ｃ．；Ｆｉｎｎ，Ｍ．Ｇ．；Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｋ．Ｂ．  Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ２００１、４０、２００４〜２０２１
２．Ｋｏｌｂ，Ｈ．Ｃ．；Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｋ．Ｂ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  ２００３、８、１１２８〜１１３７
Ｒｏｓｔｏｖｔｓｅｖ，Ｖ．Ｖ．；Ｇｒｅｅｎ，Ｌ．Ｇ．；Ｆｏｋｉｎ，Ｖ．Ｖ．；Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｋ．Ｂ．  Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ２００２、４１、２５９６〜２５９９
３．Ｔｏｒｎｏｅ，Ｃ．Ｗ．；Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ，Ｃ．；Ｍｅｌｄａｌ，Ｍ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２００２、６７、３０５７〜３０６４
４．Ｗａｎｇ，Ｑ．；Ｃｈａｎ，Ｔ．Ｒ．；Ｈｉｌｇｒａｆ，Ｒ．：Ｆｏｋｉｎ，Ｖ．Ｖ．；Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｋ．Ｂ．；Ｆｉｎｎ，Ｍ．Ｇ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ２００３、１２５、３１９２〜３１９３
５．Ｌｅｅ，Ｌ．Ｖ．；Ｍｉｔｃｈｅｌｌ，Ｍ．Ｌ．；Ｈｕａｎｇ，Ｓ．−Ｊ．；Ｆｏｋｉｎ，Ｖ．Ｖ．；Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｋ．Ｂ．；Ｗｏｎｇ，Ｃ．−Ｈ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ２００３、１２５、９５８８〜９５８９
６．Ｌｅｗｉｓ，Ｗ．Ｇ．；Ｇｒｅｅｎ，Ｌ．Ｇ．；Ｇｒｙｎｓｚｐａｎ，Ｆ．；Ｒａｄｉｃ，Ｚ．；Ｃａｒｌｉｅｒ，Ｐ．Ｒ．；Ｔａｙｌｏｒ，Ｐ．；Ｆｉｎｎ，Ｍ．Ｇ．；Ｂａｒｒｙ，Ｋ．  Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００２、４１、１０５３〜１０５７
７．Ｍａｎｅｔｓｃｈ，Ｒ．；Ｋｒａｓｉｎｓｋｉ，Ａ．；Ｒａｄｉｃ，Ｚ．；Ｒａｕｓｈｅｌ，Ｊ．；Ｔａｙｌｏｒ，Ｐ．；Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｋ．Ｂ．；Ｋｏｌｂ，Ｈ．Ｃ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ２００４、１２６、１２８０９〜１２８１８
８．Ｍｏｃｈａｒｌａ，Ｖ．Ｐ．；Ｃｏｌａｓｓｏｎ，Ｂ．；Ｌｅｅ，Ｌ．Ｖ．；Ｒｏｅｐｅｒ，Ｓ．；Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｋ．Ｂ．；Ｗｏｎｇ，Ｃ．−Ｈ．；Ｋｏｌｂ，Ｈ．Ｃ．  Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００５、４４、１１６〜１２０
９．Ｍ．Ｗｈｉｔｉｎｇ、Ｊ．Ｍｕｌｄｏｏｎ、Ｙ．−Ｃ．Ｌｉｎ、Ｓ．Ｍ．Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ、Ｗ．Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ、Ａ．Ｊ．Ｏｌｓｏｎ、Ｈ．Ｃ．Ｋｏｌｂ、Ｍ．Ｇ．Ｆｉｎｎ、Ｋ．Ｂ．Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ、Ｊ．Ｈ．Ｅｌｄｅｒ、Ｖ．Ｖ．Ｆｏｋｉｎ，  Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．２００６、１１８、１４６３〜１４６７；Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．２００６、４５、１４３５〜１４３９
上記の文献に記載されているような、他のクリックケミストリー官能基を用いることができるが、環化付加反応、特にアジドとアルキニル基との反応、の使用が好ましい。末端アルキン等のアルキンとアジドとは、１，３−双極性環化付加され、１，４−二置換１，２，３−トリアゾールを形成する。又は、アジド及びアルキニル試薬を用いて、１，５−二置換１，２，３−トリアゾールを形成できる（Ｋｒａｓｉｎｓｋｉ，Ａ．、Ｆｏｋｉｎ，Ｖ．Ｖ．及びＢａｒｒｙ，Ｋ．  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２００４、１２３７〜１２４０）。ヘテロＤｉｅｌｓ−Ａｌｄｅｒ反応又は１，３−双極性環化付加反応も用いることができるであろう（Ｈｕｉｓｇｅｎ  １，３−Ｄｉｐｏｌａｒ  Ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｖｏｌ．１）（Ｐａｄｗａ，Ａ．編）、ｐ１〜１７６、Ｗｉｌｅｙ；Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ  Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．２０００、３９、３５５８〜３５８８；Ｔｉｅｔｚｅ，Ｌ．Ｆ．及びＫｅｔｔｓｃｈａｕ，Ｇ．  Ｔｏｐ．Ｃｕｒｒ．Ｃｈｅｍ．１９９７、１８９、１〜１２０参照）。特定の一実施形態において、本明細書に記載のクリックケミストリー法は、更にＰＥＴ標識が組み込まれている新規な化合物を提供する。
【００８７】
本出願を通じて言及された全ての文献の開示全体が参照により本明細書に組み込まれる。
実験
式ＩＩ及びＩＩＩの化合物を合成するための一般的な手順を以下に概説する。
【００８８】
【化１８】
2010523596.tif 000020
【００８９】
１，５−二置換（「ｓｙｎ」）トリアゾール合成の一般スキーム：
【００９０】
【化１９】
2010523596.tif 000021
【００９１】
１，４−二置換（「ａｎｔｉ」）トリアゾール合成の一般スキーム：
【００９２】
【化２０】
2010523596.tif 000022
【００９３】
上記の一般スキームに示したとおり、Ａが脱離基を含んでなるアルキル基等の基であるか又はＡが脱離基である場合、本明細書に開示のとおり、Ａを放射性同位元素又は放射性元素で代替し又は置換することによって、放射性同位元素又は放射性元素を含むトリアゾールを調製することができる。
一般的な実験条件
全ての反応は、Ａｒ雰囲気下、オーブン乾燥したガラス容器中で行なった。シリカゲルカートリッジを用いる順相精製の勾配条件をＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ混合物について、以下に挙げる。実験続行時間はカラム容量（ｃｖ）で示す。検出波長は２５４ｎｍに設定した。反応溶媒は、無水グレードを購入し、更に精製することなく用いた。
【００９４】
【表１】
2010523596.tif 000023
【００９５】
化合物８及び１２の調製。
【００９６】
【化２１】
2010523596.tif 000024
【００９７】
２−ニトロ−１−（プロパ−２−イニル）−１Ｈ−イミダゾール（１０）：
丸底フラスコに、２−ニトロイミダゾール（５００ｍｇ、４．４２ｍｍｏｌ）、臭化プロパルギル（６３１ｍｇ、５．３１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（７３３ｍｇ、５．３１ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（５ｍＬ）を加えた。反応物を室温で一晩攪拌した。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ）により、反応の完了が示された。反応物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）中に抽出した。合一した有機物を水（５×２０ｍＬ）で洗浄した。次いで、有機層を真空中で濃縮し、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いてシリカゲルカートリッジで精製して、淡黄色の固体として５７１ｍｇ（収率８５％）の１０を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ），δ：２．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），５．２３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），７．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），７．４６（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（低分解能）：Ｃ6Ｈ5Ｎ3Ｏ2計算値：１５１．０４；実測値：１５２．１０（Ｍ＋Ｈ）。
【００９８】
２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エタノール（１１）：
丸底フラスコに、ニトロプロピン１０（１５０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）及びアジドエタノール（８６ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）を加えた。このフラスコにＣｕＳＯ4（０．０４Ｍ、１００μＬ）及びアスコルビン酸ナトリウム（０．１Ｍ、１００μＬ）を添加した。１６時間後、反応物をＥｔＯＡｃに注ぎ、ＮＨ4ＯＨで洗浄した。有機物を合一し、残留物を、溶離液として、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ、次いでＤＣＭ：ＭｅＯＨ、を用いて、ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈシステムで精製して、清澄無色の油として１８０ｍｇ（収率７６．３％）の１１を得た。ＭＳ（低分解能）：Ｃ8Ｈ10Ｎ6Ｏ3計算値：２３８．０８；実測値：２３９．１０（Ｍ＋Ｈ）。
【００９９】
２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エタノール（１１）：
丸底フラスコに、ニトロプロピン１０（１５０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）及びアジドエタノール（８６ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）を加える。反応物を６０℃で一晩攪拌する。残留物を、溶離液として、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ、次いでＤＣＭ：ＭｅＯＨ、を用いて、ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈシステムで精製して、清澄無色の油として１１を得る。
【０１００】
１−（２−フルオロエチル）−４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール（８）：
アルコール１１（２０ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を含有する丸底フラスコに、ＢＡＳＴ（２０．３ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応物を０℃で１時間攪拌した。反応物を真空中で濃縮し、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いてシリカゲルカートリッジで精製して、清澄無色の油として１２ｍｇ（収率６０％）の８を得た。
【０１０１】
２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エチル  ４−メチルベンゼンスルホネート（１２）：
アルコール１１（１６０ｍｇ、０．６７２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（１３６ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）及びＤＣＭ（５ｍＬ）を含有する丸底フラスコに、Ｔｓ2Ｏ（２６３ｍｇ、０．８０６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で４時間攪拌した。ＴＬＣにより、反応の完了が示された。反応物を真空中で濃縮し、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いてシリカゲルカートリッジで精製して、淡橙色の油として１４０ｍｇ（収率５３％）の１２を得た。ＭＳ（低分解能）：Ｃ15Ｈ16Ｎ6Ｏ5Ｓ計算値：３９２．０９２；実測値：３９３．１０（Ｍ＋Ｈ）。
化合物３及び１６の調製。
【０１０２】
【化２２】
2010523596.tif 000025
【０１０３】
４−（アジドメチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン（１３）：
（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル  ４−メチルベンゼンスルホネート（５．７３ｇ、２０．００ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４０ｍＬ）溶液に、アジ化ナトリウム（２．６ｇ、４０．００ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で１８時間攪拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３×７５ｍＬ）で３回抽出し、それをＨ2Ｏ（１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で連続して洗浄し、最後にＭｇＳＯ4上で乾燥した。溶媒を真空下で除去して、褐色の油として２．２ｇの１３を得た（収率７６％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ：４．２１−４．２７（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｄｄ，Ｊ＝６．４，８．４Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｄｄ，Ｊ＝６．０，８．４Ｈｚ，１Ｈ），３．３６（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．２６（ｄｄ，Ｊ＝５．６，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），１．４３（ｓ，３Ｈ），１．３３（ｓ，３Ｈ）。
【０１０４】
３−アジド−２−ヒドロキシプロピル  ４−メチルベンゼンスルホネート（１４）：
４−（アジドメチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン  １３（２．２ｇ、１３．９９ｍｍｏｌ）をメタノール（２５ｍＬ）に溶解した。この溶液にＨＣｌのジエチルエーテル溶液（２Ｍ、５ｍＬ）を０℃で添加した。混合物を室温で一晩攪拌し、その後、減圧下で濃縮して黄色の油を得て、これを精製することなく次のステップに用いた。０．５時間乾燥した後、残留物をＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）に溶解し、Ｂｕ2ＳｎＯ（０．０７１ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、次いでＴｓＣｌ（２．８６ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（２．２ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）で処理した。室温で３時間攪拌した後、水（３０ｍＬ）を添加し、有機層を分離した。水層をＣＨ2Ｃｌ2（２×５０ｍＬ）で抽出し、有機層をＨ2Ｏ（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で連続して洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。溶媒を真空下で除去し、溶離液として３３％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いて残留物をシリカゲルで精製して、清澄無色の油として１．８６ｇの１４を得た（収率４８％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ：７．７７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．９６−４．０９（ｍ，３Ｈ），３．３１−３．４０（ｍ，２Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ（低分解能）：Ｃ10Ｈ13Ｎ3Ｏ4Ｓ計算値：２７１．０６；実測値：２９４．１（Ｍ＋Ｎａ+）。
【０１０５】
１−アジド−３−（トシルオキシ）プロパン−２−イル  アセテート（１５）：
３−アジド−２−ヒドロキシプロピル  ４−メチルベンゼンスルホネート１４（１．８３ｇ、６．７０ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（１５ｍＬ）に溶解し、ＴＥＡ（１．４ｍＬ、１０．００ｍｍｏｌ）、触媒量のＤＭＡＰ及び無水酢酸（０．９５ｍＬ、１０．００ｍｍｏｌ）で、室温で処理した。１時間攪拌した後、反応混合物にシリカを添加し、溶媒を蒸発させ、残留物を、５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液として用いて、シリカゲルで精製して、濃厚な清澄無色の油として２．０７ｇの１５を得た（収率９８．８％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ：７．７９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），５．０２−５．０７（ｍ，１Ｈ），４．０９−４．２１（ｍ，２Ｈ），３．４３−３．５３（ｍ，２Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ（低分解能）：Ｃ12Ｈ15Ｎ3Ｏ5Ｓ計算値：３１３．０７；実測値：３１４．１（Ｍ＋Ｈ+）。
【０１０６】
１−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−３−（トシルオキシ）プロパン−２−イル  アセテート（１６）：
２−ニトロ−１−（プロパ−２−イニル）−１Ｈ−イミダゾール１０（０．２ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を６０℃で一晩、１−アジド−３−（トシルオキシ）プロパン−２−イル  アセテート１５（０．４１ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）と共に加熱する。残留物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：１０）で精製して１６を得る。
【０１０７】
１−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−３−（トシルオキシ）プロパン−２−イル  アセテート（１６）：
２−ニトロ−１−（プロパ−２−イニル）−１Ｈ−イミダゾール（０．２ｇｍ、１．３２ｍｍｏｌ）及び１−アジド−３−（トシルオキシ）プロパン−２−イル  アセテート（０．４１ｇｍ、１．３２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．５ｍＬ）溶液を、室温でＣｕＩ（０．０２５ｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３ｍＬ、１．４６ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を一晩攪拌した後、シリカを添加し、溶媒を減圧下で蒸発させ、シリカゲルクロマトグラフィ（ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2、１：１０）で精製して、白色の固体として１−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−３−（トシルオキシ）プロパン−２−イル  アセテート（０．５ｇ、８１％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ：７．７６−７．７８（ｍ，３Ｈ），７．３５−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．１５（ｂｒ，１Ｈ），５．６８（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），５．２７−５．３２（ｍ，１Ｈ），４．５６−４．６７（ｍ，２Ｈ），４．１９（ｄｄ，Ｊ＝４．０，１１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｄｄ，Ｊ＝４．０，１１．２Ｈｚ，１Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ），１．９７（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（低分解能）：Ｃ18Ｈ20Ｎ6Ｏ7Ｓ計算値：４６４．１１；実測値：４６５．１（Ｍ＋Ｈ+）。
【０１０８】
【化２３】
2010523596.tif 000026
【０１０９】
１−アジド−３−フルオロプロパン−２−オール（１７）：
エピフルオロヒドリン（１３．１５ｍｍｏｌ）をエタノール（１０ｍｌ）と水（１０ｍｌ）との混合物に溶解した。塩化アンモニウム（２３．６ｍｍｏｌ）、次いでアジ化ナトリウム（２１．９１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を５０℃で一晩攪拌した。エタノールを真空中で除去した。混合物を酢酸エチル（２×５０ｍｌ）で抽出した。次いで、有機層を濃縮し、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いてシリカゲルカラムで精製して、清澄無色の油として７４０ｍｇの１７を得た。1Ｈ  ＮＭＲスペクトルは公表されている結果と一致した。
【０１１０】
１−フルオロ−３−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロパン−２−オール（３）：
バイアルにフルオロアジド１７（６９０ｍｇ、５．７９ｍｍｏｌ）及び１−プロピニル−２−ニトロイミダゾール（８７６ｍｇ、５．７９ｍｍｏｌ）を加えた。このフラスコにＴＨＦ（３ｍＬ）、ｔ−ＢｕＯＨ（３ｍＬ）、水（３ｍＬ）、ＣｕＳＯ4（１８５ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）及びアスコルビン酸ナトリウム（１．１５ｇ、５．７９ｍｍｏｌ）を添加した。１６時間後、反応物をＥｔＯＡｃに注ぎ、ＮＨ4ＯＨで洗浄した。有機物を合一し、次いで、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いて、その物質をシリカゲルカラムで精製した。その後、その物質を、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いた再結晶によって、更に精製して、淡黄色の結晶６５ｍｇ（収率４％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ），δ：４．０４（１Ｈ，ｂｒ  ｄ，Ｊ＝２０．４Ｈｚ），４．２０−４．４７（４Ｈ，ｍ），５．５３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），５．６６（２Ｈ，ｓ），７．１６（１Ｈ，ｓ），７．６８（１Ｈ，ｓ），８．０５（１Ｈ，ｓ）。
【０１１１】
１−フルオロ−３−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロパン−２−オール（３）：
バイアルにフルオロアジド１７（５．７９ｍｍｏｌ）及び１−プロピニル−２−ニトロイミダゾール（５．７９ｍｍｏｌ）を加える。この溶液を６０℃で一晩加熱する。次いで、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いて、その物質をシリカゲルカラムで精製する。その後、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いて再結晶によって、その物質を更に精製して、淡黄色の結晶を得る。
化合物５及び２１の調製。
【０１１２】
【化２４】
2010523596.tif 000027
【０１１３】
２−ブロモ−Ｎ−（プロパ−２−イニル）アセトアミド（１８）：
２−ブロモアセチルブロミド（１０ｇ、４９．５ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（５．０１ｇ、４９．５ｍｍｏｌ）及びＤＣＭ（２０ｍＬ）を含有する丸底フラスコに、０℃で、ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液としてプロパルギルアミン（２．７３ｇ、４９．５ｍｍｏｌ）を１時間かけて滴加した。反応物を室温で一晩攪拌した。反応物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、飽和ＮａＨＣＯ3（１×２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を１Ｎ  ＨＣｌ（１×２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を濃縮乾固し、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いて、シリカゲルカートリッジで精製して、淡橙色の固体として２．４４ｇ（収率２８％）の１８を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ），δ：２．２５（１Ｈ，ｓ），３．８４（２Ｈ，ｓ），４．０５（２Ｈ，ｓ），６．８２（１Ｈ，ｂｒ  ｓ）。ＭＳ（低分解能）：Ｃ5Ｈ6ＢｒＮＯ計算値：１７４．９６；実測値：１７６．００，１７８．００（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１４】
２−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−Ｎ−（プロパ−２−イニル）アセトアミド（１９）：
丸底フラスコに、アルキン１８（１．５６ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）、２−ニトロイミダゾール１０（１ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（１．２２ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を加えた。反応物を一晩攪拌した。反応物を水（１００ｍＬ）で希釈し、生じた沈殿物（１．２ｇ）を濾別し、水（２×４０ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ中に抽出した。有機層を濃縮乾固し、沈澱物と合一した。その物質を、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いてシリカゲルカートリッジで精製して、１９の白色固体を得た（３２４ｍｇ、１８％）。ＭＳ（低分解能）：Ｃ8Ｈ8Ｎ4Ｏ3計算値：２０８．０６；実測値：２０９．１０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１５】
Ｎ−（（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メチル）−２−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）アセトアミド（２０）：
バイアルにアルキン（３７５ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）及びアジドエタノール（１５７ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）を加えた。このバイアルにＴＨＦ（５ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（３４５μＬ、１．９８ｍｍｏｌ）及びヨウ化銅（３４．３ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を添加した。数時間後、アスコルビン酸ナトリウム（５０ｍｇ）を添加して、反応を完了させた。次いでその物質を、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いて、シリカゲルカラムで精製した。その後、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いた再結晶によってその物質を更に精製して、固体として３００ｍｇ（収率５６％）の２０を得た。
【０１１６】
Ｎ−（（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メチル）−２−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）アセトアミド（２０）：
バイアルにアルキン（３７５ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）及びアジドエタノール（１５７ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）を加える。この溶液を６０℃で一晩加熱する。次いで、その物質を、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いてシリカゲルカラムで精製する。その後、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いた再結晶によってその物質を更に精製して、固体として２０を得た。
【０１１７】
２−（４−（（２−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）アセトアミド）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エチル  ４−メチルベンゼンスルホネート（２１）：
丸底フラスコに、アルコール２０（１０６ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（３６．３ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）及びＤＣＭ（１０ｍＬ）を加えた。Ｔｓ2Ｏ（１１７ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）を一度に添加した。反応物を室温で４時間攪拌した。次いで、反応物を濃縮乾固し、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いてシリカゲルカートリッジで精製して、白色の固体として５５ｍｇ（収率３４％）の２１を得た。ＭＳ（低分解能）：Ｃ17Ｈ19Ｎ7Ｏ6Ｓ計算値：４４９．１１；実測値：４５０．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１８】
Ｎ−（（１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メチル）−２−（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）アセトアミド（５）：
アルコール２０（２０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を含有する丸底フラスコに、０℃で、ＢＡＳＴ（２０．３ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を０℃で１時間攪拌した。反応物を真空中で濃縮し、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いてシリカゲルカートリッジで精製して、清澄無色の油として５を得た。
化合物１及び２６の調製。
【０１１９】
【化２５】
2010523596.tif 000028
【０１２０】
２−フェニル−１，３−ジオキサン−５−イル  ４−メチルベンゼンスルホネート:
２リットル丸底フラスコに、２−フェニル−１，３−ジオキサン−５−オール（５０ｇ、２７７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４２．１ｇ、４１６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（３．３９ｇ、２７．７ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１Ｌ）を加えた。反応物を０℃に冷却した。この溶液に塩化トシル（５８．２ｇ、３０５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で一晩攪拌した。反応物を水（８００ｍＬ）に注ぎ入れ、ＤＣＭに抽出した。有機層を合わせ、濃縮乾固した。粗混合物をＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘから再結晶して、白色の固体８８ｇ（収率９６％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ），δ：２．４４（３Ｈ，ｓ），４．０９（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．６，２Ｈｚ），４．２７（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．６，１．６Ｈｚ），４．５１（２Ｈ，擬似ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．３３−７．３６（５Ｈ，ｍ），７．４４−７．４５（２Ｈ，ｍ），７．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３９Ｈｚ）。ＭＳ（低分解能）：Ｃ17Ｈ18Ｏ5Ｓ計算値：３３４．０９；実測値：３３５．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２１】
５−アジド−２−フェニル−１，３−ジオキサン（２２）：
１Ｌ丸底フラスコに、２−フェニル−１，３−ジオキサン−５−イル  ４−メチルベンゼンスルホネート（４０ｇ、１２０ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（５００ｍＬ）を加えた。ＮａＮ3（３１．３ｇ、４７８ｍｍｏｌ）を水溶液（１５０ｍＬ）として添加した。反応物を１０５℃で２日間攪拌した。その後、反応物を濃縮乾固した。その固体を水（７００ｍＬ）に溶解し、ＥｔＯＡｃ（３×５００ｍＬ）中に抽出した。合一した有機層を水（５回）で洗浄し、濃縮乾固して、橙色の固体を得た。次いで、その物質をヘキサンから再結晶して、淡褐色の固体として２０．７ｇ（収率８４％）の２２を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ），δ：３．６７（２Ｈ，擬似ｔ，Ｊ＝１１．５９Ｈｚ），３．７８−３．８８（１Ｈ，ｍ），４．３６−４．０４（２Ｈ，ｍ），７．３６−７．３９（３Ｈ，ｍ），７．４５−７．４７（２Ｈ，ｍ）。ＭＳ（低分解能）：Ｃ10Ｈ11Ｎ3Ｏ2計算値：２０５．０９；実測値：１７８．１（Ｍ＋Ｈ−Ｎ2）。
【０１２２】
２−アジドプロパン−１，３−ジオール（２３）：
２２（２１．７ｇ、１０６ｍｍｏｌ）のＥｔ2Ｏ（２９４ｍＬ）溶液を含有する１Ｌ丸底フラスコに、濃ＨＣｌ（１２６ｍＬ）を加えた。反応物を室温で一晩攪拌した。次いで、その物質を真空中シリカゲル上で濃縮し、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ（２０％ＥｔＯＡｃから１００％ＥｔＯＡｃ）を用いて精製して、黄色／琥珀色の油として１０．５ｇ（収率８４％）の２３を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ），δ：１．９４（２Ｈ，ｂｒ  ｓ），３．６３−３．６８（１Ｈ，ｍ），３．７５−３．８６（４Ｈ，ｍ）。
【０１２３】
２−アジド−３−ヒドロキシプロピル  アセテート（２４）：
２−アジドプロパン−１，３−ジオール２３（１０．４６ｇ、８９．３ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（４５０ｍＬ）に溶解し、室温で１時間、触媒量のｐ−トルエンスルホン酸一水和物（３４０ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）及びオルト酢酸トリエチル（２４．４ｍＬ、１３４ｍｍｏｌ）で処理した。オルトエステルの形成が完了した後、化学量論量の水（２．４ｍＬ、１３４ｍｍｏｌ）を混合物に添加した。次いで混合物を４０分間攪拌し、その後、真空中で濃縮した。溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ（５％ＥｔＯＡｃから１００％ＥｔＯＡｃ）を用いて残留物をシリカゲルカートリッジで精製して、清澄無色の油として８．１４ｇ（収率５７％）の２４を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ），δ：２．４５（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），２．１２（３Ｈ，ｓ），３．６３−３．７８（３Ｈ，ｍ），４．２０−４．３０（２Ｈ，ｍ）。
【０１２４】
３−ヒドロキシ−２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロピル  アセテート（２５）：
化合物２４（５００ｍｇ、３．１４ｍｍｏｌ）及び１−プロピニル−２−ニトロイミダゾール（４７５ｍｇ、３．１４ｍｍｏｌ）を含有するバイアルを６０℃で一晩加熱した。得られた固体を、溶離液としてＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いてシリカゲルカートリッジで精製して、白色の固体５０４ｍｇ（収率５２％）を得た。
【０１２５】
３−ヒドロキシ−２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロピル  アセテート（２５）：
化合物２４（５．５ｇ、３４．９ｍｍｏｌ）のｔ−ＢｕＯＨ：ＴＨＦ：Ｈ2Ｏ（１２０ｍＬ、１：１：１）溶液を含有するバイアルに、ＣｕＳＯ4・５Ｈ2Ｏ（４３５ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）、アスコルビン酸ナトリウム（６９１ｍｇ、３．４９ｍｍｏｌ）及び１−プロピニル−２−ニトロイミダゾール（５．２７ｇ、３４．９ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で一晩攪拌した。次いで、反応物をシリカ上で濃縮乾固した。得られた固体を、溶離液として５０％ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ、次いで１０％ＭｅＯＨ：ＤＣＭを用いてシリカゲルカートリッジで精製して、粘稠な黄色油９．１７ｇ（収率９０％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ），δ：２．０６（３Ｈ，ｓ），４．１１−４．１３（２Ｈ，ｍ），４．４７−４．５９（２Ｈ，ｍ），４．８１−４．８４（１Ｈ，ｍ），５．７２（２Ｈ，ｓ），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１２Ｈｚ），７．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１２Ｈｚ），７．８８（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（低分解能）：Ｃ11Ｈ14Ｎ6Ｏ5計算値：３１０．１０；実測値：３１１．１０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２６】
（２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−３−（２−ニトロフェニルスルホニルオキシ）プロピル  アセテート）２６：
２５（９．１７ｇ、２９．６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２００ｍＬ）溶液を含有する丸底フラスコに、ＴＥＡ（８．３ｍＬ、５９．２ｍｍｏｌ）及び４Å分子ふるい（２ｇ）を０℃で加えた。反応物を１時間攪拌した。２−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（７．８７ｇ、３５．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温まで昇温させた。反応物を室温で２時間攪拌した。反応物を真空中シリカゲル上で濃縮し、溶離液としてＭｅＯＨ：ＤＣＭ（２％ＭｅＯＨ：ＤＣＭから１０％ＭｅＯＨ：ＤＣＭ）を用いてシリカゲルカートリッジで精製して、淡黄色の固体９．７４ｇを得た。その物質を、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いて再結晶によって更に精製して、白色の固体４．５ｇ（収率３０．５％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ），δ：２．０６（３Ｈ，ｓ），４．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），４．７５（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１１．２，６．８０），５．１２−５．１６（１Ｈ，ｍ），５．６８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２０），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ），７．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．１２Ｈｚ），７．７５−７．８７（４Ｈ，ｍ），８．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５９，１．２Ｈｚ）。ＭＳ（低分解能）：Ｃ17Ｈ17Ｎ7Ｏ9Ｓ計算値：４９５．０８；実測値：４９６．１０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２７】
【化２６】
2010523596.tif 000029
【０１２８】
２−アジド−３−ヒドロキシプロピル  ベンゾエート（２７）：
ニートの２３（１．４８ｇ、１２．６５ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（１２７ｍＬ）に溶解し、室温で１時間、触媒量のｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．０４８ｇ、２０μｍｏｌ）及び（トリメトキシメチル）ベンゼン（３．２６ｍＬ、１８．９８ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2溶液で処理した。オルトエステルの形成完了後、化学量論量の水（３４０μＬ、１８．９８ｍｍｏｌ）を混合物に添加した。次いで、混合物を４０分間攪拌し、真空中で濃縮した。２５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンを用いて残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィで精製して、清澄無色の油として２．６ｇのモノアシル化生成物２７（収率９３％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ：８．０３−８．０６（ｍ，２Ｈ），７．５８（ｔｔ，Ｊ＝１．６，２．０，１．６  １Ｈ），７．４３−７．４７（ｍ，２Ｈ），４．５４（ｄｄ，Ｊ＝４．４，１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．４６（ｄｄ，Ｊ＝６．８，１２．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８５−３．９１（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１１．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７３（ｄｄ，Ｊ＝６．０，１１．６Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１２９】
２−アジド−３−フルオロプロピル  ベンゾエート（２８）：
化合物２７（９ｇ、４０．７２ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（７０ｍＬ）に溶解し、室温でＢＡＳＴ（３．７５ｍＬ、２０．３６ｍｍｏｌ）を滴下して処理した。１時間攪拌した後、更に３．７５ｍＬ（２０．３６ｍｍｏｌ）のＢＡＳＴを室温で滴加した。更に１時間攪拌した後、更に３．７５ｍＬ（２０．３６ｍｍｏｌ）のＢＡＳＴを室温で滴加し、反応混合物を１２時間攪拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3でクエンチし、有機層をＨ2Ｏとブラインとで連続して洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥、溶媒を真空下で除去した。溶離液として２５％エーテル：ヘキサンを用いて残留物をシリカゲルで精製して、清澄無色の油として３．２４ｇ（収率３７％）の２８を得た。５ｇの２７も回収した。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ：８．０４−８．０７（ｍ，２Ｈ），７．６０（ｔｔ，Ｊ＝１．６，２．０，１．６  １Ｈ），７．４５−７．４９（ｍ，２Ｈ），４．６２−４．７０（ｍ，１Ｈ），４．５２−４．５７（ｍ，２Ｈ），４．４２−４．４６（ｍ，１Ｈ），３．９８−４．０８（ｍ，１Ｈ），３．７３（ｄｄ，Ｊ＝６．０，１１．６Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１３０】
２−アジド−３−フルオロプロパン−１−オール（２９）：
化合物２８（１．６３ｇ、７．３０ｍｍｏｌ）をメタノール（１５ｍＬ）に溶解し、室温においてＮａＯＭｅ（０．８ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）で処理した。１時間攪拌した後、シリカを反応混合物に添加し、溶媒を蒸発させ、溶離液として５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンを用いてシリカゲルで精製して、清澄無色の油として０．８２８ｇ（収率９５％）の２９を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）δ：４．５９−４．６８（ｍ，１Ｈ），４．４７−４．５６（ｍ，１Ｈ），３．６８−３．８４（ｍ，３Ｈ）。
【０１３１】
３−フルオロ−２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロパン−１−オール（１）：
バイアルにアルキン１０（１．９ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）及び２９（１．５ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）を加える。溶液を６０℃で一晩加熱する。次いでその物質を、溶離液として１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ2Ｃｌ2を用いてシリカゲルカラムで精製する。その後、ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘを用いて再結晶によってその物質を更に精製して、固体として１を得る。
【０１３２】
３−フルオロ−２−（４−（（２−ニトロ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロパン−１−オール（１）：
１０（１．９ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）及び２９（１．５ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）のｔ−ＢｕＯＨ：ＴＨＦ：Ｈ2Ｏ（２２．５ｍＬ、１：１：１）溶液を、ＣｕＳＯ4・５Ｈ2Ｏ（０．３１ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）及びアスコルビン酸ナトリウム（０．５ｇ、２．５２ｍｍｏｌ）で処理し、室温で１時間攪拌した。有機溶媒を真空下で除去し、残留物をＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、Ｈ2Ｏ、次いでブラインで連続して洗浄し、次にＭｇＳＯ4上で乾燥した。その後、溶媒を真空中で濃縮し、溶媒として１０％ＭｅＯＨ：ＣＨ2Ｃｌ2を用いて残留物をシリカゲルで精製して、白色固体として１（３．００ｇ、８８％）を得た。ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶して、その生成物を更に精製した。1Ｈ  ＮＭＲ（（ＣＤ3）2ＣＯ，４００ＭＨｚ）δ：８．１５（ｓ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．７９（ｓ，２Ｈ），４．８７−５．０５（ｍ，２Ｈ），４．８２（ｄｄ，Ｊ＝４．０，１０．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１７−４．４５（ｍ，１Ｈ），４．０３（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）。13Ｃ  ＮＭＲ（（ＣＤ3）2ＣＯ，１００ＭＨｚ）δ：１４１．８，１２７．９，１２７．１，１２３．５，８３．０，８１．３，６３．０（ｄ，Ｊ＝１８．６９Ｈｚ，１Ｃ），６０．５（ｄ，Ｊ＝６．７３Ｈｚ，１Ｃ），δ：４４．８；19Ｆ  ＮＭＲ（（ＣＤ3）2ＣＯ，３７６ＭＨｚ）２３０．２（ｄｄｄ，Ｊ＝１９．１８，１９．５５，２１．６０Ｈｚ，１Ｆ）；ＭＳ（低分解能）：Ｃ9Ｈ11ＦＮ6Ｏ3計算値：２７０．０９；実測値：２７１．１（Ｍ＋Ｈ）。
［Ｆ−１８］標識化低酸素トレーサーの放射性標識化法の説明。放射性標識化用［Ｆ−１８］フッ化物を調製するための一般的な調製法
この反応は、ＧＩＮＡ−Ｓｔａｒソフトウェアを使用するコンピュータで制御されるｅｘｐｌｏｒａ（登録商標）ＲＮ化学反応モジュールで行なう。
【０１３３】
［Ｆ−１８］フッ化物イオンの調製：
サイクロトロンターゲットで生成される水性［Ｆ−１８］フッ化物イオンを、化学反応モジュールに配置されたアニオン交換樹脂カートリッジに送り、そこに捕捉させる。次いで、炭酸カリウム（３ｍｇ）の水（０．４ｍＬ）溶液を用いて、Ｆ−１８を反応器に溶出させる。次いで、アセトニトリル（１ｍＬ）に溶解したＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）２２２（２０ｍｇ）を反応器に添加する。
【０１３４】
その溶液を濃縮乾固して、アセトニトリル及び水を除去し（７０〜９５℃、減圧（２５０ｍｂａｒ）及びアルゴン流下）、それにより比較的乾燥した高度に活性化された形態の［Ｆ−１８］フッ化物イオンが得られる。
［Ｆ−１８］８の放射性標識化反応。
【０１３５】
前駆体１２（２０μｍｏｌ）のアセトニトリル（０．９ｍＬ）溶液を乾燥［Ｆ−１８］フッ化物イオンに添加する。混合物を約１１０℃に１０分間加熱して、［Ｆ−１８］フッ化物イオンと反応させる。
【０１３６】
反応混合物の精製及び滅菌濾過：
粗［Ｆ−１８］−標識化トレーサー生成物溶液を試料ループ（１．５ｍＬ）に移し、その後、セミ分取ＨＰＬＣカラム（例、ＡＣＥ  Ｃ１８、５ＡＱ、２５０×１０ｍｍ、１０％エタノール／１０％水（ｖ／ｖ）、４．０ｍＬ／分）に注入する。
【０１３７】
ｅｘｐｌｏｒａ（登録商標）ＲＮ化学反応モジュールは、ＵＶ検出器及びガイガーミュラー（ＧＭ）検出器の両方を備えている。フロースルー放射性検出器及びＵＶ（２５４ｎｍ）検出器でモニターしながら、生成物をカラムから集める。
【０１３８】
記載の溶出条件下、［Ｆ−１８］８の保持時間は、約８〜１０分である。［Ｆ−１８］−標識化トレーサーを含有する画分を滅菌フィルタ（０．２２μｍ）に通し、滅菌バイアルに集める。集められる原薬の容量は、典型的には８〜１０ｍＬである。
［Ｆ−１８］８の放射性標識化反応
【０１３９】
【化２７】
2010523596.tif 000030
【０１４０】
放射化学的収率：２．０５％（崩壊補正）
放射化学的純度：１００％
［Ｆ−１８］３の放射性標識化反応。
【０１４１】
アセトニトリル（０．５ｍＬ）とｔ−ＢｕＯＨ（０．５ｍＬ）との混合物に溶解した前駆体１６（１５±５ｍｇ、２０〜４０μｍｏｌ）の溶液を、無水［Ｆ−１８］フッ化物を含有する反応器に加える。容器を１２５±１５℃に７．５±２．５分間加熱して、［Ｆ−１８］フッ化物でノシラート脱離基を置換させる。
【０１４２】
冷却し、アセトニトリル及びｔ−ブタノールを蒸発させた後、塩酸水溶液（１．０Ｎ、０．８ｍＬ）を添加し、混合物を１１０±５℃に７．５±２．５分間加熱する。これにより、アセテート基が加水分解され、ヒドロキシル基に変換する。この加水分解反応によって粗［Ｆ−１８］３が形成される。反応混合物を冷却し、酢酸ナトリウム（２．０Ｍ、０．４ｍＬ）を添加して中和する。
【０１４３】
反応混合物の精製及び滅菌濾過：
粗［Ｆ−１８］−標識化トレーサー生成物溶液を試料ループ（１．５ｍＬ）に移し、その後、セミ分取ＨＰＬＣカラム（例、Ｓｙｎｅｒｇｉ、２５０×１０ｍｍ、５％エタノール／９５％水（ｖ／ｖ）、５．０ｍＬ／分）に注入する。
【０１４４】
ｅｘｐｌｏｒａ（登録商標）ＲＮ化学反応モジュールは、ＵＶ検出器及びガイガーミュラー（ＧＭ）検出器の両方を備えている。フロースルー放射性検出器及びＵＶ（２５４ｎｍ）検出器でモニターしながら、生成物をカラムから集める。
【０１４５】
記載の溶出条件下、［Ｆ−１８］３の保持時間は約８〜１０分である。［Ｆ−１８］−標識化トレーサーを含有する画分を滅菌フィルタ（０．２２μｍ）に通し、滅菌バイアルに集める。集められる原薬の容量は、典型的には８〜１０ｍＬである。
【０１４６】
【化２８】
2010523596.tif 000031
【０１４７】
放射化学的収率：３８．４２％（崩壊補正）
放射化学的純度：１００％
［Ｆ−１８］５の放射性標識化反応。
【０１４８】
アセトニトリル（０．５ｍＬ）とｔ−ＢｕＯＨ（０．５ｍＬ）との混合物に溶解した前駆体２１（１５±５ｍｇ、２０〜４０μｍｏｌ）の溶液を、無水［Ｆ−１８］フッ化物を含有する反応器に加える。容器を１２５±１５℃に７．５±２．５分間加熱して、［Ｆ−１８］フッ化物によるノシラート脱離基の置換を誘発する。
【０１４９】
反応混合物の精製及び滅菌濾過：
粗［Ｆ−１８］−標識化トレーサー生成物溶液を試料ループ（１．５ｍＬ）に移し、その後、セミ分取ＨＰＬＣカラム（例、Ｓｙｎｅｒｇｉ、２５０×１０ｍｍ、８％エタノール／９２％２１ｍＭリン酸緩衝液（ｖ／ｖ）に溶解、４ｍＬ／分）に注入する。
【０１５０】
ｅｘｐｌｏｒａ（登録商標）ＲＮ化学反応モジュールは、ＵＶ検出器及びガイガーミュラー（ＧＭ）検出器の両方を備えている。フロースルー放射性検出器及びＵＶ（２５４ｎｍ）検出器でモニターしながら、生成物をカラムから集める。
【０１５１】
記載の溶出条件下、［Ｆ−１８］５の保持時間は約７〜９分である。［Ｆ−１８］−標識化トレーサーを含有する画分を滅菌フィルタ（０．２２μｍ）に通し、滅菌バイアルに集める。集められる原薬の容量は、典型的には８〜１０ｍＬである。
【０１５２】
【化２９】
2010523596.tif 000032
【０１５３】
放射化学的収率：１２．１４％（崩壊補正）
放射化学的純度：４０％
［Ｆ−１８］１の放射性標識化反応。
【０１５４】
アセトニトリル（０．５ｍＬ）とｔ−ＢｕＯＨ（０．５ｍＬ）との混合物に溶解した前駆体２６（１５±５ｍｇ、２０〜４０μｍｏｌ）の溶液を、無水［Ｆ−１８］フッ化物を含有する反応器に加える。容器を１２５±１５℃に７．５±２．５分間加熱して、［Ｆ−１８］フッ化物によるノシラート脱離基の置換を誘発する。
【０１５５】
冷却し、アセトニトリル及びｔ−ブタノールを蒸発させた後、塩酸水溶液（１．０Ｎ、０．８ｍＬ）を添加し、混合物を１１０±５℃に７．５±２．５分間加熱する。これによりアセテート基を加水分解して、ヒドロキシル基に変換する。この加水分解反応によって粗［Ｆ−１８］１が形成される。反応混合物を冷却し、酢酸ナトリウム（２．０Ｍ、０．４ｍＬ）を添加して中和する。
【０１５６】
反応混合物の精製及び滅菌濾過：
粗［Ｆ−１８］１を含有する反応混合物をアルミナｓｅｐ−ｐａｋ  ｌｉｔｅに通して（未反応［Ｆ−１８］フッ化物を除去し）、次いでＨＰＬＣ試料ループに移す。粗反応材料を、セミ分取ＨＰＬＣカラム（Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＥ  ＡＱ逆相セミ分取カラム（２５０×１０ｍｍ）、ｐ／ｎＡＣＥ−１２６−２５１０，２５０×１０ｍｍ、５％エタノール／９５％２１ｍＭリン酸緩衝液に溶解、５．０ｍＬ／分）を用いてクロマトグラフ分離によって精製した。直列接続したＵＶ（２５４ｎｍ）検出器及び放射検出器を用いて、カラム流出液をモニターする。
【０１５７】
ｅｘｐｌｏｒａ（登録商標）ＲＮ化学反応モジュールは、ＵＶ検出器及びガイガーミュラー（ＧＭ）検出器の両方を備えている。フロースルー放射性検出器及びＵＶ（２５４ｎｍ）検出器でモニターしながら、生成物をカラムから集める。記載の溶出条件下、［Ｆ−１８］１の保持時間は約１７±５分である。空の滅菌捕集バイアルに、１〜６％エタノール、７５ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸及び９５％２１ｍＭリン酸を含有する滅菌希釈剤５〜１０ｍＬを予め充填する。ＨＰＬＣ精製カラムから溶離した精製［Ｆ−１８］１の画分を、０．２μｍ滅菌フィルタを通して予め充填した捕集バイアルに入れる。全放射能のインプロセスアッセイに基づいて、充分なアスコルビン酸及び滅菌希釈剤を添加して、アスコルビン酸濃度を５％（５０ｍｇ／ｍＬ）に、そして放射能濃度を３０ｍＣｉ／ｍＬ以下に調節する。
【０１５８】
【化３０】
2010523596.tif 000033
【０１５９】
放射化学的収率：３４％（崩壊補正）
放射化学的純度：１００％
［Ｆ−１８］１のための代替放射性標識化反応：
放射性［Ｆ−１８］フッ化物を、Ｋ２２２／Ｋ2ＣＯ3溶液０．５ｍＬ（ＭｅＣＮ  ９ｍＬ及びＨ2Ｏ  ９ｍＬに溶解したＫ２２２  ６６０ｍｇ及びＫ2ＣＯ3  ２１０ｍｇ）を含有する３ｍＬのＶバイアルに移す。この［Ｆ−１８］フッ化物を、Ａｒ流下、３×１ｍＬのＭｅＣＮで共沸乾燥する。アセトニトリル（１．０ｍＬ）に溶解した前駆体２６（１６±５ｍｇ、２０〜４０μｍｏｌ）の溶液を、無水［Ｆ−１８］フッ化物を含有する反応器に加える。容器を９５±５℃に７．５±２．５分間加熱して、［Ｆ−１８］フッ化物によるノシラート脱離基の置換を誘発する。
【０１６０】
冷却し、アセトニトリルを約０．１ｍＬに蒸発させた後、ＮａＯＨ水溶液（０．０５Ｎ、２．０ｍＬ）を添加し、混合物を６０±５℃に３±１分間加熱する。これによりアセテート基が加水分解されて、ヒドロキシル基に変換する。この加水分解反応によって粗［Ｆ−１８］１が形成される。
【０１６１】
反応混合物の精製及び滅菌濾過：
粗反応材料を、セミ分取ＨＰＬＣカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ逆相セミ分取カラム（２５０×１０ｍｍ、１０μ）、６％エタノール、５．０ｍＬ／分）を用いてクロマトグラフ分離によって精製した。直列に接続されたＵＶ（２５４ｎｍ）検出器及び放射検出器を用いて、カラム流出液をモニターする。
【０１６２】
ｅｘｐｌｏｒａ（登録商標）ＲＮ化学反応モジュールは、ＵＶ検出器及びガイガーミュラー（ＧＭ）検出器の両方を備えている。フロースルー放射性検出器及びＵＶ（２５４ｎｍ）検出器でモニターしながら、生成物をカラムから集める。記載の溶出条件下、［Ｆ−１８］１の保持時間は約１７±５分である。空の滅菌捕集バイアルに、１〜６％エタノール、７５ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸及び９５％２１ｍＭリン酸を含有する滅菌希釈剤５〜１０ｍＬを予め充填する。ＨＰＬＣ精製カラムから溶離した精製［Ｆ−１８］１の画分を、０．２μｍ滅菌フィルタを通して予め充填した捕集バイアルに入れる。全放射能のインプロセスアッセイに基づいて、充分なアスコルビン酸及び滅菌希釈剤を添加して、アスコルビン酸濃度を５％（５０ｍｇ／ｍＬ）に、そして、放射能濃度を３０ｍＣｉ／ｍＬ以下に調節する。
【０１６３】
【化３１】
2010523596.tif 000034
【０１６４】
放射化学的収率：３４％（崩壊補正）
放射化学的純度：１００％
ＨＸ系列の生物学的データ
動物実験
１）ＨＸ４の生体内分布及び生体内安定性
１Ａ：マウス試験
方法：化合物１をＤＭＳＯに溶解して、１００ｍＭの原液を得た。次いで、これを、３％Ｓｏｌｕｔｏｌを含有する１×ＰＢＳで希釈して、濃度５ｍＭとした。５ｍＭの化合物１の溶液２００μｌを、イソフルオラン麻酔下、マウスの尾静脈に注射した。イン  ヴィヴォ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）取り込みは２時間であった。
【０１６５】
血液試料及び尿試料を３０、６０、９０及び１２０分に採取した。試料を直ちに氷上に置いて化合物の分解を防いだ。１２０分に血液及び尿の試料採取が完了した後、マウスを頸部脱臼によって屠殺した。以下の全器官を次の順番で３０〜４０分以内に摘出した。下部消化管、上部消化管、脾臓、膵臓、胆嚢、肝臓、心臓、腎臓、肺、両脚から筋肉約０．３ｇ、背側皮膚約０．４ｇ、全脳及び腹部内脂肪約０．４ｇ。
【０１６６】
これらの試料に比例する量の溶解用緩衝液（約５ｍｌ／組織ｇ）を添加した後、動力式ホモジナイザを用いて組織を均質化した。血液試料及び尿試料に溶解用緩衝液５０μｌを添加した後、簡単にボルテックスミキサーに掛けた。器官均質化物２００μｌを、１．５ｍｌエッペンドルフ管に取った。全ての試料を１００℃で２分間加熱してタンパク質を変性し、その後、氷中に１５分間置いた。次いで、ギ酸４０μｌを器官試料に加え、２０μｌを血液試料及び尿試料に加えた。全ての管をボルテックスミキサーに掛けて、試料と酸を完全に混合した。次いで、試料を氷中に１５分間置いた後、４℃で１５分間、１３，０００ｒｐｍで遠心分離した。上清３０μｌをＭＳＤ分析のためにＨＰＬＣバイアルに移した。
【０１６７】
組織溶解処理に関して上に記載したものと同じ方法を用いて、広範囲の化合物１濃度で標準曲線を作成した。標準中、化合物の対応するピークを最初に同定した。ピーク面積を測定し、標準相関曲線に変換して、試料中の化合物１濃度を推定した。各試料中の化合物の量は、％注射用量／ｇ組織（％ＩＤ／組織ｇ）として表す。
１Ｂ：ラット試験
方法：
化合物１の溶液を前述のとおり調製した。１０ｍＭの化合物１の溶液１ｍｌを、イソフルオラン麻酔下、ラット（尾静脈）に静脈注射した。血液試料及び尿試料を注射前、注射後１５、３０、６０、９０及び１２０分に採取した。試料処理及びＬＣ／ＭＳ測定は、１Ａに記載したマウスの試料と同じである。
結果：
マウスデータ（図１）：
マウスでは、化合物１の血中濃度は、３０分で４．１％ＩＤ／ｇであり、１２０分では０．５９％に低下した。尿中の高い％ＩＤ／ｇ及び血液中の低い％ＩＤ／ｇ（３０分の尿で９５．６％ＩＤ／ｇ、３０分の血液で４．１％ＩＤ／ｇ）を考えると、血液クリアランス及び尿中排泄は迅速である。尿中排泄指数（１２０分における、血液％ＩＤ／ｇで除算した尿％ＩＤ／ｇの平均）は８８．６９であった。胆嚢及び消化管系の化合物１濃度は低い。
ラットデータ（図２）：
ラットでは、化合物１の血中濃度は、３０分及び１２０分で、それぞれ０．６７及び０．１５％ＩＤ／ｇである。尿中濃度は、３０分で、５．３％ＩＤ／ｇであった。尿中排泄指数（１２０分における、血液％ＩＤ／ｇで除算した尿％ＩＤ／ｇの平均）は３６．６２であった。従って、尿中の高い％ＩＤ／ｇ及び血液中の低い％ＩＤ／ｇを考えると、ラットにおける化合物１の尿中排泄及び血液クリアランスは迅速である。
２）ヒト正常細胞及び癌細胞系におけるＨＸ４の細胞毒性アッセイ：
方法：
このアッセイは、３−［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミドを着色ホルマザン結晶に還元する生細胞の能力に基づくものである。Ｌｓ１７４Ｔヒト結腸直腸腺癌、Ａ１７２ヒト脳神経膠芽腫、ＭＲＣ５ヒト正常肺線維芽細胞及びＡＬＭ１２マウス正常肝細胞系をこの試験のために選択した。細胞を異なる濃度の化合物１（０、１００、５００、１，０００、５，０００、１０，０００ｎＭ）と共に２４時間培養し、その後、０．５ｍｇ／ｍｌの３−［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミドと共に１時間インキュベートした。細胞を溶解し、ホルマザン結晶を２−プロパノールで１時間溶解し、得られた着色２−プロパノールの光学密度を測定した。光学密度に基づいて細胞生存百分率を算出した。
【０１６８】
結果：
４種の（正常及び癌性）細胞系全てにおいて、異なる濃度の化合物１で処理した生細胞の数は、未処理の対照細胞と統計的に相違のないことが示された。従って、化合物１は、正常細胞又は癌細胞に対して細胞毒性でない（図３〜図５）。
イメージングプロトコル：（図６）
各ＰＥＴスキャニング手順の持続時間（２時間まで）の間、イソフルラン／酸素吸入を用いて動物を麻酔した。各ＰＥＴスキャニングの持続時間の間、麻酔した動物を温めたパッドに置いた。典型的な注射用量は２５０μＬであり、典型的には２５０μＣｉの活性を含有した。Ｆ１８標識化トレーサー投与に続いて直ちに連続動的ＰＥＴスキャニングを開始した。
【０１６９】
本発明の広い概念から逸脱することなく、上記の実施形態に変更を加え得ることを当業者は理解するであろう。従って、本発明は開示した特定の実施形態に限定されるものではなく、添付の請求の範囲に定義される本発明の精神及び範囲内の改変を含むものであることが理解される。いくつかの代表的な実施形態、態様及び変形を本明細書に記載したが、当業者はある種の修正、置換、追加、並びにそれらの実施形態、態様及び変形の組み合わせ及びある種の下位組み合わせを認識する。添付の請求の範囲は、そのような全ての修正、置換、追加、並びにそれらの実施形態、態様及び変形の組み合わせ及びある種の下位組み合わせをそれらの範囲内に包含するものであると解釈されることを意図している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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