(57)【要約】  本発明は、そのすべての立体化学的配置にある式（Ｉ）の化合物のシュウ酸塩、その調製方法、並びに気分障害、不安障害、うつ及び痙攣状態の治療、学習能力の改善、健忘症の逆転、薬物及び薬物乱用による禁断症候群の消散におけるその使用に関する。好ましくは、本発明は、ｒｅｌ−（３Ｒ，３ａＳ，７ａＳ）−３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩に関する。
2010509310.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）の化合物のシュウ酸塩。
【化４】
2010509310.tif 000014
【請求項２】
１つ以上の立体化学化合物及びそれらの混合物の形態の式（１）の化合物のシュウ酸塩である、請求項１に記載のシュウ酸塩。
【請求項３】
ジアステレオマー又はラセミ混合物の形態の式（１）の化合物のシュウ酸塩である、請求項２に記載のシュウ酸塩。
【請求項４】
ｒｅｌ−（３Ｒ，３ａＳ，７ａＳ）−３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩である、請求項１乃至３のいずれか１項に記載のシュウ酸塩。
【請求項５】
請求項１乃至４のいずれか１項に記載の３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩を調製する方法であって、
ｉ）遊離塩基３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンをシュウ酸と反応させるステップと、
ｉｉ）反応混合物を１０℃未満の１つ以上の冷却サイクルに供するステップと、を含む方法。
【請求項６】
ステップｉ）の遊離塩基３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンが、前記塩基を対応する塩酸塩から遊離する、ステップｉ）に先行するステップで得られる、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
塩酸塩からの遊離塩基の遊離がジクロロメタンによって行われる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
ステップｉ）のシュウ酸が二水和物の形態である、請求項５乃至７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
ステップｉ）が氷浴で行われる、請求項５乃至８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
ステップｉｉ）の冷却が２から８℃の温度で起こる、請求項５乃至９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
薬剤として使用するための、式（１）の化合物のシュウ酸塩。
【化５】
2010509310.tif 000015
【請求項１２】
薬剤として使用するための、１つ以上の立体化学化合物及びそれらの混合物の形態の式（１）の化合物のシュウ酸塩である、請求項１１に記載のシュウ酸塩。
【請求項１３】
薬剤として使用するための、ジアステレオマー又はラセミ混合物の形態の式（１）の化合物のシュウ酸塩である、請求項１２に記載のシュウ酸塩。
【請求項１４】
薬剤として使用するための、ｒｅｌ−（３Ｒ，３ａＳ，７ａＳ）−３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩である、請求項１１乃至１３のいずれか１項に記載のシュウ酸塩。
【請求項１５】
請求項１乃至４のいずれか１項に記載のシュウ酸塩及び医薬的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１６】
シュウ酸塩が０．１から１００ｍｇの量で存在する、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
請求項１乃至４のいずれか１項に記載のシュウ酸塩及び適切な賦形剤を含む錠剤。
【請求項１８】
適切な賦形剤が、プレゲルデンプン、微結晶性セルロース、デンプングリコール酸ナトリウム、タルク、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、サッカロース、ステアリン酸、及びマンニトールからなる群から選択される、請求項１７に記載の錠剤。
【請求項１９】
シュウ酸塩が錠剤単位当たり１から１００ｍｇの量で存在する、請求項１７又は１８に記載の錠剤。
【請求項２０】
シュウ酸塩が錠剤単位当たり１から５０ｍｇの量で存在する、請求項１９に記載の錠剤。
【請求項２１】
気分障害、不安障害、うつ及び痙攣状態の治療、学習能力の改善、健忘症の逆転、薬物及び薬物乱用による禁断症候群の消散の薬剤を製造するための、式（１）の化合物のシュウ酸塩の使用。
【化６】
2010509310.tif 000016
【請求項２２】
シュウ酸塩が、１つ以上の立体化学化合物及びそれらの混合物の形態の式（１）の化合物のシュウ酸塩である、気分障害、不安障害、うつ及び痙攣状態の治療、学習能力の改善、健忘症の逆転、薬物及び薬物乱用による禁断症候群の消散の薬剤を製造するための、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
シュウ酸塩が、ジアステレオマー又はラセミ混合物の形態の式（１）の化合物のシュウ酸塩である、気分障害、不安障害、うつ及び痙攣状態の治療、学習能力の改善、健忘症の逆転、薬物及び薬物乱用による禁断症候群の消散の薬剤を製造するための、請求項２２に記載の使用。
【請求項２４】
シュウ酸塩が、ｒｅｌ−（３Ｒ，３ａＳ，７ａＳ）−３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩である、気分障害、不安障害、うつ及び痙攣状態の治療、学習能力の改善、健忘症の逆転、薬物及び薬物乱用による禁断症候群の消散の薬剤を製造するための、請求項２１乃至２３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２５】
薬剤が経口投与用である、請求項２１乃至２４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２６】
経口投与用の薬剤が、錠剤、カプセル剤、カシェ剤、粉剤、顆粒剤、又は液体中の懸濁剤からなる群から選択される、請求項２５に記載の使用。
【請求項２７】
式（１）の化合物のシュウ酸塩が、薬剤単位当たり１から１００ｍｇの量である、請求項２５又は２６に記載の使用。
【請求項２８】
薬剤が錠剤であり、式（１）の化合物のシュウ酸塩が、錠剤単位当たり１から１００ｍｇの量である、請求項２７に記載の使用。
【請求項２９】
薬剤が局所投与用である、請求項２１乃至２４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３０】
局所投与用の薬剤が、クリーム、油、軟膏剤、エマルション、ゲル、水溶液、噴霧液、及び硬膏剤からなる群から選択される、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
式（１）の化合物のシュウ酸塩が、薬剤単位当たり１から１００ｍｇの量である、請求項２９又は３０に記載の使用。
【請求項３２】
薬剤が非経口投与用である、請求項２１乃至２４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３３】
非経口投与用の薬剤が無菌水性調剤である、請求項３２に記載の酸付加塩の使用。
【請求項３４】
式（１）の化合物のシュウ酸塩が、薬剤単位当たり０．１から１００ｍｇの量である、請求項３２又は３３に記載の酸付加塩の使用。
【請求項３５】
気分障害、不安障害、うつ及び痙攣状態の治療、学習能力の改善、健忘症の逆転、薬物及び薬物乱用による禁断症候群の消散において使用するための、式（１）の化合物のシュウ酸塩。
【化７】
2010509310.tif 000017
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、そのすべての立体化学的配置にある下式の化合物のシュウ酸塩、その調製方法、並びに気分障害、不安障害、うつ及び痙攣状態の治療、学習能力の改善、健忘症の逆転、薬物及び薬物乱用による禁断症候群の消散におけるその使用に関する。より具体的には、本発明は、ｒｅｌ−（３Ｒ，３ａＳ，７ａＳ）−３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩に関する。
【０００２】
【化１】
2010509310.tif 000003
【背景技術】
【０００３】
ＢＴＧ１６４０として公知の化合物ｒｅｌ−（３Ｒ，３ａＳ，７ａＳ）−３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンは、特許文献１の国際出願に記載されており、新しい精神活性化合物の群に属する。
【０００４】
具体的には、特許文献１の明細書の特許出願において、化合物全群の精神安定活性が提示されており、特に化合物ＢＴＧ１６４０の活性、並びに学習能力及び健忘症の逆転におけるその作用が試験されている。
【０００５】
そのような文献によれば、化合物ＢＴＧ１６４０は、黄色の油として調製され、提示の活性を実証する試験では、ＰＥＧ及び蒸留水で希釈した後に用いられている。
【０００６】
製薬の実施において、油物質は、主として取扱い及び製剤化が困難であることに関連する多くの欠点を有することが知られている。油は実際に加重が困難であり、基本的に温度変化に対して安定性が低く、通常の溶媒に可溶性が低く、したがって医薬製剤の調製のために用量を加えることが技術的により困難である。
【０００７】
一般に、活性成分の形態は、具体的には医薬製剤の活性の取扱いに関してより良い特性を通常示す固体であることが望ましい。
【０００８】
このことに関して、特許文献１は、式（Ｉ）の化合物の遊離塩基を適切な遊離酸で処理することにより、一般式（Ｉ）の新しい精神活性化合物の塩形態を調製する可能性について言及している。具体的には、特許文献１は、白色結晶性粉末の形態で得られるＢＴＧ１６４０の塩酸塩を記載している。
【０００９】
そのような塩を参照とし、それにより薬物製剤のステップにおいて油形態の遊離塩基ＢＴＧ１６４０の使用を回避することを望んで、薬物の貯蔵及び保存条件を提示するために、活性成分としてのそのような塩酸塩の安定性が評価された。種々の温度及び湿度条件にやがて暴露される場合、同じ初期特性が維持されるならば、医薬物質は安定しているとみなされることが公知である。実施例で実証されるとおり、安定性分析は、ＢＴＧ１６４０の塩酸塩は３０℃より高い温度で不安定であり、したがって活性物質として単一の塩だけでなく、近年開発されており、そのような活性成分をベースとする種々の医薬製剤に関しても、予防的に２〜８℃の温度での冷蔵庫保存が望ましいものとなることを示した。
【００１０】
そのような冷蔵庫保存条件は、必要であるが、かなりの不利益を生じる。実際に、そのような保存の予防措置の観察はほとんど患者に認められず、必要に迫られて薬物を冷蔵庫に保管しなければならないことにより、患者は明らかに日常の習慣及び活動に組み入れられない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】国際公開第９３／１７００４号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
特有の保存条件を必要としない形態である化合物３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンを提供することが依然として求められている。
【００１３】
したがって、本発明の目的は、特有の保存及び保管条件を必要としない形態の３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンを提供することである。
【００１４】
さらなる目的は、公知のＢＴＧ１６４０の塩酸塩の特性に少なくとも匹敵する生物学的利用能特性を示すＢＴＧ１６４０の塩を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明の発明者は研究及び調査を行い、結果として驚いたことに下式のシュウ酸塩が、４０℃／７５％ＲＨで６カ月保存された後でも、特有の保存条件を必要としない高度に改善された安定性を示すことを見出した。
【００１６】
したがって、本発明は、請求項１に記載のシュウ酸塩、新しい調製方法、並びに具体的には気分障害、不安障害、うつ及び痙攣状態の治療、学習能力の改善、健忘症の逆転、薬物及び薬物乱用による禁断症候群の消散における薬剤としてのその使用に関する。
【００１７】
好ましくは、本発明によれば、２つのエナンチオマー形態及びラセミ混合物としての分子を含む、ｒｅｌ−（３Ｒ，３ａＳ，７ａＳ）−３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩が提供される。
【００１８】
【化２】
2010509310.tif 000004
【００１９】
利点及びさらなる特性は従属請求の範囲に示す。
【００２０】
本発明において、式（１）で表される分子３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンは、キラル中心に関連する任意の立体化学的配置、並びに当業者に公知である分離技術によって得ることのできるエナンチオマー及びラセミ混合物、及び２つ以上の立体化学化合物の任意の混合物をその定義に含む。
【００２１】
【化３】
2010509310.tif 000005
【００２２】
本発明を、特に付属の図面を参照することにより、ここにより詳細に記載する。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】試験物質の純度に関して、５℃、２５℃／６０％ＲＨ、３０℃／６５％ＲＨ、及び４０℃／７５％ＲＨの温度及び湿度条件においてＢＴＧ１６４０塩酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図２】全不純物の評価に関して、５℃、２５℃／６０％ＲＨ、３０℃／６５％ＲＨ、及び４０℃／７５％ＲＨの温度及び湿度条件においてＢＴＧ１６４０塩酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図３】試験物質の純度に関して、５℃、２５℃／６０％ＲＨ、３０℃／６５％ＲＨ、及び４０℃／７５％ＲＨの温度及び湿度条件においてＢＴＧ１６４０シュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図４】全不純物の評価に関して、５℃、２５℃／６０％ＲＨ、３０℃／６５％ＲＨ、及び４０℃／７５％ＲＨの温度及び湿度条件においてＢＴＧ１６４０シュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図５】試験物質の純度に関して、温度５℃においてＢＴＧ１６４０メタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、塩酸塩、及びシュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図６】試験物質の純度に関して、温度２５℃及び湿度６０％ＲＨにおいてＢＴＧ１６４０メタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、塩酸塩、及びシュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図７】試験物質の純度に関して、温度３０℃及び湿度６５％ＲＨにおいてＢＴＧ１６４０メタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、塩酸塩、及びシュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図８】試験物質の純度に関して、温度４０℃及び湿度７５％ＲＨにおいてＢＴＧ１６４０メタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、塩酸塩、及びシュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図９】全不純物の評価に関して、温度５℃においてＢＴＧ１６４０メタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、塩酸塩、及びシュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図１０】全不純物の評価に関して、温度２５℃及び湿度６０％ＲＨにおいてＢＴＧ１６４０メタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、塩酸塩、及びシュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図１１】全不純物の評価に関して、温度３０℃及び湿度６５％ＲＨにおいてＢＴＧ１６４０メタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、塩酸塩、及びシュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図１２】全不純物の評価に関して、温度４０℃及び湿度７５％ＲＨにおいてＢＴＧ１６４０メタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、塩酸塩、及びシュウ酸塩で行った安定性試験で得られた結果のグラフである。
【図１３】５％アラビアゴム水性懸濁液に分散したＢＴＧ１６４０の塩酸塩又はシュウ酸塩を含有する製剤を用量１０ｍｇ／ｋｇ（ＢＴＧ１６４０の遊離塩基として表す）で経口投与したＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットの吸収動態の結果のグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
したがって、本発明は、分子３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩に関する。
【００２５】
本発明によれば、そのような塩は、遊離塩基３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンをシュウ酸で処理することによって、あるいは遊離塩基として分子３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンを遊離する処理、それに続くシュウ酸との反応によって３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンの塩酸塩から得ることができる。
【００２６】
他の態様において、本発明は、請求項５に従って３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩を調製する方法であって、
ｉ）遊離塩基３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンをシュウ酸と反応させるステップと、
ｉｉ）反応混合物を１０℃未満の１つ以上の冷却サイクルに供するステップと、を含む方法に関する。
【００２７】
あるいは、ステップｉ）の遊離塩基３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンは、上記塩基を対応する塩酸塩から遊離する、ステップｉ）に先行するステップで得ることができる。
【００２８】
具体的には、わずかに褐色の透明油の形態である遊離塩基として、分子３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンを得るために、３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンの塩酸塩を続いてジクロロメタンによる抽出に供することができる。そのような溶液に、約２〜８℃の冷却サイクルの後にシュウ酸塩を分離するために、結晶の形態で、好ましくは二水和物の形態で氷浴の存在下、シュウ酸を添加できる。有機合成技術者は塩のさらなる調製方法を提供できる。そのように得られた塩を、必要であれば、さらに場合によって精製法に供することができる。
【００２９】
そのように得られたシュウ酸塩は、実施例で実証されるとおり、種々の保存条件で安定であり、したがってそれ自体が塩酸塩より安定であることが実証された。
【００３０】
３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩は、驚いたことに、公知の塩酸塩より安定であっただけでなく、以下で広く実証されるとおり、生物学的により利用可能であり、すなわちインビボで塩酸塩より良好な吸収動態プロファイルを示した。
【００３１】
さらに、３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩は、驚いたことに、以下に示すとおり塩酸塩より低い毒性であった。
【００３２】
改善された安定性を有する式（１）の化合物のシュウ酸塩は、本発明による医薬組成物を製剤化するのに適した賦形剤と組み合わせることができ、気分障害、不安障害、うつ及び痙攣状態の治療、学習能力の改善、たとえばアルツハイマー病又は血管性認知症によって生じる健忘症の逆転、薬物及び薬物乱用による禁断症候群の消散において医薬活性物質として作用することができる。
【００３３】
指示した病変の治療において薬効に達するのに必要とされる日用量は、年齢、体重、及び全体的な健康状態に応じて対象によって異なるが、１日１回以上、１から１００ｍｇの範囲で経口又は局所投与に適した用量を投与することができ、１日１回以上、０．１から１００ｍｇの範囲で非経口に適した用量を投与することができる。
【００３４】
式（１）の化合物のシュウ酸塩は、非経口、経口、又は局所投与される医薬組成物を得るために、医薬的に許容される担体、及び場合によって他の賦形剤に添加される。「医薬的に許容される担体」という用語は、溶媒、助剤、希釈剤などを包含することを意図し、それらは本発明の塩の投与に適した担体を提供するために添加剤として用いられる。
【００３５】
経口投与に適した本発明の組成物は、好都合には錠剤、カプセル剤、カシェ剤、粉剤、もしくは顆粒剤などの個別単位、又はさらに液体中の懸濁剤の形態となる。
【００３６】
より好ましくは、経口投与用の本発明の組成物は、錠剤の形態となる。
【００３７】
本発明による錠剤は、好ましくは錠剤単位当たり１から１００ｍｇ、好ましくは１から５０ｍｇの量の式（１）の化合物のシュウ酸塩を含む。有利には、錠剤はまた、プレゲルデンプン（ｐｒｅ−ｇｅｌ  ｓｔａｒｃｈ）、微結晶性セルロース、デンプングリコール酸ナトリウム、タルク、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、スクロース、ステアリン酸、及びマンニトールなどの適切な賦形剤を含む。
【００３８】
好ましくは、錠剤は、錠剤の総重量に対して１．７重量％から４０重量％、より好ましくは２．１重量％から３４．７重量％の３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩を含む。
【００３９】
経口投与用の組成物は、好ましくは、１から１００ｍｇの３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩を含む。
【００４０】
非経口投与用の組成物は、好都合には、無菌水性調剤を含む。
【００４１】
非経口投与用の組成物は、好ましくは、０．１から１００ｍｇの３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩を含む。
【００４２】
局所投与用の組成物は、好都合には、クリーム、油、軟膏剤、エマルション、ゲル、水溶液、噴霧液、及び硬膏剤の形態となる。
【００４３】
局所投与用の組成物は、好ましくは、１から１００ｍｇの３−ベンジル−２−メチル−２，３，３ａ，４，５，６，７，７ａ−オクタヒドロベンゾ［ｄ］イソオキサゾール−４−オンのシュウ酸塩を含む。
【００４４】
本発明を、本発明の非限定的な例として、ＢＴＧ１６４０のシュウ酸塩の調製、並びに従来技術の塩酸塩及び本発明のシュウ酸塩の安定性の評価、吸収有効性、及び毒性に関して、以下の実施例において、ここにより詳細に記載する。
【００４５】
［実施例１］
ＢＴＧ１６４０のシュウ酸塩の調製
Ａ．遊離塩基の調製
ＢＴＧ１６４０塩酸塩１０ｇを５％重炭酸ナトリウム７０ｍｌに溶解した。得られた溶液を２５０ｍｌの分液漏斗に移し、ジクロロメタン５０ｍｌを添加した。３０秒間強く攪拌した後、２層に分離するまで溶液を静置した。次いで、ジクロロメタンを含有する相を三角フラスコに移し、分液漏斗にさらにジクロロメタン２０ｍｌを添加した。次いで、分液漏斗に含まれる溶液を再び３０秒間強く攪拌し、新たに２層に分離するまで溶液を静置した。ジクロロメタン相が分離したら、それを三角フラスコに加え、さらにジクロロメタン２０ｍｌで抽出を繰り返した。次いで、ジクロロメタンの３回の一定分量を硫酸ナトリウムで脱水し、濾紙で濾過し、３５℃未満の温度においてロータリーエバポレータ（ｒｏｔａｖａｐｏｒ）で蒸発させた。わずかに褐色の油として得られた残留物はＢＴＧ１６４０の遊離塩基に相当した。
【００４６】
Ｂ．シュウ酸塩の調製
その後、Ａに示したとおり得られたＢＴＧ１６４０の遊離塩基１ｇをメタノール２０ｍｌに溶解した。次いで、シュウ酸二水和物（ＰＭ＝１２６．０７）５１４ｍｇを含むメタノール溶液１０ｍｌを滴加した。添加中、ＢＴＧ１６４０の溶液は氷浴に浸漬を続けた。
【００４７】
次いで、ヘキサン５ｍｌ（又はエーテル５ｍｌを用いることができる）を添加し、溶液を２〜８℃の冷蔵庫に少なくとも４８時間移した。４８時間の終わりに、形成した結晶を濾過によって単離し、最後に３５℃で真空下、乾燥器で乾燥した。その後、母液を残留物に濃縮し、その実施中に他の結晶が形成した。この溶液を２〜８℃の温度で冷蔵庫に４８時間置き、その後、形成した結晶を濾過によって単離し、最後に３５℃で真空下、乾燥器で乾燥した。母液を再び残留物に濃縮し、次いで、そのような残留物をジイソプロピルエーテル５５ｍｌ及び酢酸エチル３０ｍｌに再び溶解した。得られた溶液を再び２〜８℃の冷蔵庫に４８時間入れた。４８時間の終わりに、形成した結晶を濾過によって単離し、最後に３５℃で真空下、乾燥器で乾燥した。このプロセスの全収率は６８％であった。
【００４８】
そのように得られた結晶を、それらがＢＴＧ１６４０のシュウ酸塩に相当することを実証するために、特性決定に供した。
【００４９】
結晶の試料を元素分析に供したが、得られた結果は、提示した化学式に基づいて算出した値に相当した。
【００５０】
ＢＴＧ１６４０のシュウ酸塩：Ｃ１６Ｈ２０ＮＯ４。
【００５１】
【表１】
2010509310.tif 000006
【００５２】
次いで、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを得て、それによりＢＴＧ１６４０のシュウ酸塩の形成を確認した。
【００５３】
１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．６３−２．６０（ｍ，６Ｈ）Ｈ５  Ｈ６  Ｈ７；２．４１（ｓ，３Ｈ）Ｎ−ＣＨ３；２．７５−２．８２（ｍ，２Ｈ）ベンジルＣＨ２；２．８５−２．９５（ｍ，１Ｈ）Ｈ３ａ；３．３８（ｂｒ，１Ｈ）Ｈ３；４．３０（ｂｒ，１Ｈ）Ｈ７ａ；７．１５−７．４０（ｍ，５Ｈ）芳香族構造。
【００５４】
［実施例２］
ＢＴＧ１６４０の塩酸塩の安定性分析
ＢＴＧ１６４０の塩酸塩の試料それぞれ１００ｍｇを以下の保存条件に暴露した。
【００５５】
ａ）５℃
ｂ）２５℃及び６０％ＲＨ
ｃ）３０℃及び６５％ＲＨ
ｄ）４０℃及び７０％ＲＨ
その後、起こり得る変化を明確に示すために、最初は３カ月毎に、定期的に純度を分析した。
【００５６】
下記の表２の結果を得た。
【００５７】
【表２】
2010509310.tif 000007
【００５８】
得られた結果を図１に示した。図１から分かるように、ＢＴＧ１６４０塩酸塩は、ａ）〜ｃ）で示したＴ／ＲＨ条件では１２カ月の期間、良好な安定性を示したが、４０℃及び７５％ＲＨに暴露した場合、最初の数カ月から強い不安定性を示し、したがって条件ｄ）はすでに６カ月の時点で塩の分解が認められることを実証した。試験の終わりに、これらの結果に基づいて、薬物は１２カ月の有効期間を有し、４０℃及び７５％ＲＨの条件では強度の分解が生じるため、予防的に好ましくは２から８℃の温度で保存されることが示された。
【００５９】
同時に、条件ａ）〜ｄ）のＴ／ＲＨ％条件で不純物分析を行った。下記の表３の結果を得た。
【００６０】
【表３】
2010509310.tif 000008
【００６１】
次いでこれらの結果を図２に示したが、図２から、条件ｄ）においてＢＴＧ１６４０塩酸塩が、３カ月の４０℃／７５％ＲＨでの安定性試験の後にすでに許容できない率の不純物を示したことが分かった。
【００６２】
［実施例３］
ＢＴＧ１６４０のシュウ酸塩の安定性分析
実施例１Ｂに従って調製したＢＴＧ１６４０シュウ酸塩の試料それぞれ１００ｍｇを以下の保存条件に暴露した。
【００６３】
ａ）５℃
ｂ）２５℃及び６０％ＲＨ
ｃ）３０℃及び６５％ＲＨ
ｄ）４０℃及び７０％ＲＨ
その後、起こり得る変化を明示するために、３カ月毎及び９カ月の全期間の純度を分析した。下記の表４の結果を得た。
【００６４】
【表４】
2010509310.tif 000009
【００６５】
これらの結果を図３に示した。図３から分かるように、ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩は、ＢＴＧ１６４０塩酸塩と同様に、全期間にわたってａ）〜ｃ）で示したＴ／ＲＨ条件で良好な安定性を示し、そのような安定性は、ＢＴＧ１６４０塩酸塩とは異なり、ｄ）のより厳しい条件においても観察の全期間にわたって変化することなく維持され、したがって、塩酸塩と比較してシュウ酸塩のより高い安定性が実証された。
【００６６】
そのような証拠の確認として、同じ条件ａ）〜ｄ）のＴ／ＲＨ％に暴露した試料の不純物率を評価するための試験を並行して行った。表５の実験値を得た。
【００６７】
【表５】
2010509310.tif 000010
【００６８】
得られた結果を図４に示した。
【００６９】
図４から分かるように、ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩は、条件ｄ）においても、観察の６カ月までゼロ時点と変わらない不純物プロファイルを示し、したがって最適であり、そのため塩酸塩とは異なり完全に許容される。
【００７０】
したがって、実行した試験から、ＢＴＧ１６４０の塩酸塩と比較してシュウ酸塩の高い安定性が明らかである。
【００７１】
［実施例４］
ＢＴＧ１６４０の種々の塩の安定性分析
比較として、実施例１に示した手順に従い、シュウ酸の代わりにメタンスルホン酸、マレイン酸、及びコハク酸を用いて、ＢＴＧ１６４０の他の塩を調製したが、正確には以下のとおりである。
【００７２】
−ＢＴＧ１６４０メタンスルホン酸塩
−ＢＴＧ１６４０マレイン酸塩
−ＢＴＧ１６４０コハク酸塩
次いで、塩の試料それぞれ１００ｍｇを以下の類似の保存条件に暴露することによって、安定性を評価した。
【００７３】
ａ）５℃
ｂ）２５℃及び６０％ＲＨ
ｃ）３０℃及び６５％ＲＨ
ｄ）４０℃及び７０％ＲＨ
その後、起こり得る変化を明確に示すために、３カ月毎及び９カ月の全期間の純度を分析した。
【００７４】
得られた結果を、比較を容易にするために塩酸塩に関して実施例２で得た結果、シュウ酸塩に関して実施例３で得た結果と共に表６に記載し、さらに図５〜図８に示した。
【００７５】
【表６】
2010509310.tif 000011
【００７６】
図５〜図８から分かるように、ＢＴＧ１６４０のメタンスルホン酸塩、マレイン酸塩、及びコハク酸塩の安定性プロファイルは、ＢＴＧ１６４０塩酸塩の安定性プロファイルよりさらに劣ると考えられる。
【００７７】
メタンスルホン酸塩は、記載の条件ｂ）〜ｄ）において安定性試験の三カ月後にすでに分解が始まり、当然ながら条件が厳しくなるにつれて、すなわちａ）からｄ）となるにつれて量が多くなる。マレイン酸塩は、条件ａ）及びｂ）では許容されるプロファイルを示すが、条件ｃ）に暴露した場合、すでに６カ月でかなりの分解を示し、条件ｄ）では許容されない程度に分解する。最後にコハク酸塩は、すべての観察条件ａ）〜ｄ）において、すでに３カ月から分解を示し、保存条件が厳しくなるにつれて、すなわちａ）からｄ）となるにつれて相当に多くなる。
【００７８】
これらの結果と矛盾することなく、そのような保存条件に暴露した塩の試料の不純物プロファイルは、表７の不純物の結果に基づいて得られ、図９〜図１２に表した図に示されるとおり、塩自体の分解と同様に許容できない増加を示した。
【００７９】
【表７】
2010509310.tif 000012
【００８０】
驚いたことに、このようにシュウ酸塩は、公知の塩酸塩及び調製した他の酸付加塩とは異なる改善された安定性を示し、したがって、特有の保存条件を必要としない医薬組成物を製剤するための最良の成分であることが分かった。
【００８１】
本発明は、シュウ酸塩の同定によって安定なＢＴＧ１６４０の形態を得る技術的問題を解決することに成功した。
【００８２】
［実施例５］
ＢＴＧ１６４０のシュウ酸塩及び塩酸塩の吸収動態の分析
シュウ酸塩及び塩酸塩の形態であるＢＴＧ１６４０分子の吸収の程度及び速度を評価した。
【００８３】
そのために、２種の塩を５％アラビアゴム水性懸濁液に分散し、それによって２種の製剤を得て、それぞれ用量１０ｍｇ／ｋｇ（ＢＴＧ１６４０の遊離塩基として表す）で食道強制投与（ｏｅｓｏｐｈａｇｅｏｕｓ  ｇａｖａｇｅ）によって、５頭のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットに経口投与した。
【００８４】
分子ＢＴＧ１６４０の血漿濃度を種々の時点で求めた（表８参照）。表８の結果を得て、図１３に示した。
【００８５】
【表８】
2010509310.tif 000013
【００８６】
ラット血漿中の分子ＢＴＧ１６４０の濃度プロファイルの図から、投与からわずか２分後に、シュウ酸塩が塩酸塩と比べてどれほど高濃度の遊離未変化活性成分ＢＴＧ１６４０を提供するか明らかである。
【００８７】
これにより、濃度と時間の両方の観点からシュウ酸塩の高度な吸収が明確に示される。
【００８８】
したがって、ＢＴＧ１６４０のシュウ酸塩は、その化学安定性プロファイルだけでなく、経口投与のインビボでの吸収動態プロファイルに関しても、塩酸塩より良好な結果をもたらした。
【００８９】
［実施例６］
急性経口毒性の評価
ＢＴＧ１６４０の塩酸塩及びシュウ酸塩の急性経口毒性を評価した。
【００９０】
２種の塩を水性懸濁液に分散し、それによって２種の製剤を得て、それぞれ用量２０００ｍｇ／体重ｋｇ（ＢＴＧ１６４０の遊離塩基として表す）で食道強制投与によって、１群当たり３頭の雌ＣＤ−１マウスを含む２群の１つに経口投与した。
【００９１】
観察を１４日続けた。
【００９２】
各群のすべての動物において、処置後最初の数分で自発的運動活性の低下が記録されたが、急速に消失した。塩酸塩ＢＴＧ１６４０で処置されたマウスでは嗜眠、運動失調、攻撃性、及び発声が観察され、そのうちの２頭は全用量の投与後第１日に死亡した。体重はすべての実験群において観察の全期間にわたって完全に安定したままであった。検死では変化のないことが明らかとなったが、いずれにしても起こり得る塩の腎臓毒性を評価するために、各動物から腎臓を試料として採取した。塩酸塩を投与した群の組織病理学検査は、皮質の急性尿細管壊死の小さな病巣、上皮の膨化変性、及び曲尿細管の拡張を示した。
【００９３】
シュウ酸塩を投与した群では、病巣の軽度の尿細管の上皮の膨化変性が記録された。論じた結果から、雌マウスへのＢＴＧ１６４０シュウ酸塩２０００ｍｇ／体重ｋｇの投与は、投与後に急速に逆転可能な神経学的徴候があり、低い毒性をもたらしたが、同じ用量のＢＴＧ１６４０塩酸塩では３頭のうち２頭の動物が死亡した。
【００９４】
経口投与用でＢＴＧ１６４０のシュウ酸塩を含む本発明による医薬組成物の重量約１２０ｍｇを有する錠剤を調製するためのいくつかの製剤実施例を以下に示す。
【００９５】
［実施例７］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ２．６ｍｇ
スクロース  ８１．４ｍｇ
微結晶性セルロース  ２０．４ｍｇ
タルク  ９．６ｍｇ
ステアリン酸  ６．０ｍｇ
【００９６】
［実施例８］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ５．２ｍｇ
スクロース  ７８．８ｍｇ
微結晶性セルロース  ２０．４ｍｇ
タルク  ９．６ｍｇ
ステアリン酸  ６．０ｍｇ
【００９７】
［実施例９］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  １０．４ｍｇ
スクロース  ７３．６ｍｇ
微結晶性セルロース  ２０．４ｍｇ
タルク  ９．６ｍｇ
ステアリン酸  ６．０ｍｇ
【００９８】
［実施例１０］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ２０．８ｍｇ
スクロース  ６３．２ｍｇ
微結晶性セルロース  ２０．４ｍｇ
タルク  ９．６ｍｇ
ステアリン酸  ６．０ｍｇ
【００９９】
［実施例１１］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ４１．６ｍｇ
スクロース  ４２．４ｍｇ
微結晶性セルロース  ２０．４ｍｇ
タルク  ９．６ｍｇ
ステアリン酸  ６．０ｍｇ
【０１００】
［実施例１２］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ２．６ｍｇ
プレゲルデンプン  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ７６．６ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【０１０１】
［実施例１３］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ５．２ｍｇ
プレゲルデンプン  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ７４．０ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【０１０２】
［実施例１４］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  １０．４ｍｇ
プレゲルデンプン  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ６９．２ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【０１０３】
［実施例１５］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ２０．８ｍｇ
プレゲルデンプン  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ５８．４ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【０１０４】
［実施例１６］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ４１．６ｍｇ
プレゲルデンプン  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ３７．６ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【０１０５】
［実施例１７］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ２．６ｍｇ
ラクトース  ７３．８ｍｇ
微結晶性セルロース  ４３．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム  ０．６ｍｇ
【０１０６】
［実施例１８］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ５．２ｍｇ
ラクトース  ７３．８ｍｇ
微結晶性セルロース  ４０．４ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム  ０．６ｍｇ
【０１０７】
［実施例１９］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  １０．４ｍｇ
ラクトース  ７３．８ｍｇ
微結晶性セルロース  ３５．２ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム  ０．６ｍｇ
【０１０８】
［実施例２０］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ２０．８ｍｇ
ラクトース  ７３．８ｍｇ
微結晶性セルロース  ２４．８ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム  ０．６ｍｇ
【０１０９】
［実施例２１］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ４１．６ｍｇ
ラクトース  ７３．８ｍｇ
微結晶性セルロース  ４．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム  ０．６ｍｇ
【０１１０】
［実施例２２］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ２．６ｍｇ
マンニトール  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ７６．６ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【０１１１】
［実施例２３］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ５．２ｍｇ
マンニトール  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ７４．０ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【０１１２】
［実施例２４］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  １０．４ｍｇ
マンニトール  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ６９．２ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【０１１３】
［実施例２５］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ２０．８ｍｇ
マンニトール  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ５８．４ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【０１１４】
［実施例２６］
ＢＴＧ１６４０シュウ酸塩  ４１．６ｍｇ
マンニトール  ２４．０ｍｇ
微結晶性セルロース  ３７．６ｍｇ
デンプングリコール酸ナトリウム  ４．８ｍｇ
タルク  １２．０ｍｇ
【図１】
2010509310.tif 000018
【図２】
2010509310.tif 000019
【図３】
2010509310.tif 000020
【図４】
2010509310.tif 000021
【図５】
2010509310.tif 000022
【図６】
2010509310.tif 000023
【図７】
2010509310.tif 000024
【図８】
2010509310.tif 000025
【図９】
2010509310.tif 000026
【図１０】
2010509310.tif 000027
【図１１】
2010509310.tif 000028
【図１２】
2010509310.tif 000029
【図１３】
2010509310.tif 000030
【国際調査報告】
2010509310.tif 000031
2010509310.tif 000032