(57)【要約】一般式（Ｉ）を有するＣ型肝炎ウイルス阻害剤が開示されている。該化合物を含む組成物、およびＨＣＶを阻害するための該化合物の使用方法もまた開示されている。2010510234.tif 000210     （Ｉ）
2010510234.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2010510234.tif 000205
（Ｉ）
［式中、
ｎは、１、２、または３であり；
Ｒ1は、ヒドロキシおよび−ＮＨＳＯ2Ｒ7から選択され；
Ｒ2は、水素、アルケニル、アルキル、シアノアルキル、シクロアルキル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ3は、アルケニル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
Ｒ4は、−ＯＲ8であり；
Ｒ5は、アルケニル、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、アリールアルキル、カルボキシアルキル、シアノアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、（ＮＲaＲb）アルキル、および（ＮＲaＲb）カルボニルアルキルから選択され；
Ｒ6は、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、シクロアルキルオキシカルボニル、シクロアルキル、ハロアルコキシカルボニル、ハロアルキル、ハロアルキルカルボニル、（ＮＲaＲb）カルボニル、および（ＮＲaＲb）スルホニルから選択され；または
Ｒ6は、フェニル、並びに窒素、酸素、および硫黄から選択される１個、２個、３個、または４個のヘテロ原子を適宜含む５もしくは６員の一部もしくは完全に不飽和の環から選択され；その中で、該環の各々は、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルファニル、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、−ＮＲgＲh、（ＮＲjＲk）カルボニル、（ＮＲjＲk）スルホニル、およびオキソから独立して選択される１個、２個、３個、または４個の置換基で適宜置換されており；
Ｒ7は、アルキル、アリール、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、および−ＮＲcＲdから選択され；
Ｒ8は、アルコキシアルキル、アルキル、アルキルカルボニル、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、シクロアルキルカルボニル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、（ＮＲeＲf）カルボニル、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）2から選択され；その中で、ＲeおよびＲfは独立して、水素、アルキル、およびアリールアルキルから選択され；またはＲeおよびＲfは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、Ｏ、ＮＲx、およびＳから選択される１つの別のヘテロ原子を適宜含む５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成し；Ｒxは、水素およびアルキルから選択され；並びにＲ’は、水素およびアルキルから選択され；
ＲaおよびＲbは独立して、水素、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
ＲcおよびＲdは独立して、アルコキシ、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；またはＲcおよびＲdは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成し；
ＲgおよびＲhは独立して、水素、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アリールアルキル、およびハロアルキルから選択され；並びに
ＲjおよびＲkは独立して、水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、およびヘテロサイクリルから選択され；その中で、該アリール、該アリールアルキルのアリール部分、および該ヘテロサイクリルは、アルコキシ、アルキル、およびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されている］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
式（ＩＩ）：
【化２】
2010510234.tif 000206
（ＩＩ）
［式中、
ｎは、１、２、または３であり；
Ｒ2は、水素、アルケニル、アルキル、シアノアルキル、シクロアルキル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ3は、アルケニル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
Ｒ5は、アルケニル、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、アリールアルキル、カルボキシアルキル、シアノアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、（ＮＲaＲb）アルキル、および（ＮＲaＲb）カルボニルアルキルから選択され；
Ｒ6は、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、シクロアルキルオキシカルボニル、シクロアルキル、ハロアルコキシカルボニル、ハロアルキル、ハロアルキルカルボニル、（ＮＲaＲb）カルボニル、および（ＮＲaＲb）スルホニルから選択され；または
Ｒ6は、フェニル、並びに窒素、酸素、および硫黄から選択される１個、２個、３個、または４個のヘテロ原子を適宜含む５もしくは６員の一部もしくは完全に不飽和の環から選択され；その中で、該環の各々は、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルファニル、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、−ＮＲgＲh、（ＮＲjＲk）カルボニル、（ＮＲjＲk）スルホニル、およびオキソから独立して選択される１個、２個、３個、または４個の置換基で適宜置換されており；
Ｒ7は、アルキル、アリール、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、および−ＮＲcＲdから選択され；
Ｒ8は、アルコキシアルキル、アルキル、アルキルカルボニル、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、シクロアルキルカルボニル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、（ＮＲeＲf）カルボニル、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）2から選択され；その中で、ＲeおよびＲfは独立して、水素、アルキル、およびアリールアルキルから選択され；またはＲeおよびＲfは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、Ｏ、ＮＲx、およびＳから選択される１つの別のヘテロ原子を適宜含む５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成し；Ｒxは、水素およびアルキルから選択され；並びにＲ’は、水素およびアルキルから選択され；
ＲaおよびＲbは独立して、水素、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
ＲcおよびＲdは独立して、アルコキシ、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；またはＲcおよびＲdは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成し；
ＲgおよびＲhは独立して、水素、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アリールアルキル、およびハロアルキルから選択され；並びに
ＲjおよびＲkは独立して、水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、およびヘテロサイクリルから選択され；その中で、該アリール、該アリールアルキルのアリール部分、および該ヘテロサイクリルは、アルコキシ、アルキル、およびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されている］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３】
ｎが、１であり；
Ｒ2が、アルケニル、アルキル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ3が、アルケニル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
Ｒ5が、アルケニル、アルキル、およびアリールアルキルから選択され；
Ｒ6が、アルコキシカルボニル、シクロアルキルオキシカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、（ＮＲaＲb）カルボニルから選択され；または
Ｒ6が、アルコキシおよびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されたフェニルであり；並びに
Ｒ7が、シクロアルキルである、請求項２の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ3が、アリールおよびヘテロサイクリルから選択される、請求項３の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ3が、アリールである、請求項４の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項６】
【化３−１】
2010510234.tif 000207
【化３−２】
2010510234.tif 000208
【化３−３】
2010510234.tif 000209
から選択される化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項７】
請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩、並びに医薬的に許容される担体を含む組成物。
【請求項８】
抗ＨＣＶ活性を有する少なくとも一つの別の化合物をさらに含む、請求項７の組成物。
【請求項９】
該少なくとも一つの別の化合物が、インターフェロンまたはリバビリンである、請求項８の組成物。
【請求項１０】
該インターフェロンが、インターフェロンα２Ｂ、ペグ化インターフェロンα、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα２Ａ、およびリンパ芽球インターフェロンτから選択される、請求項９の組成物。
【請求項１１】
該少なくとも一つの別の化合物が、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を亢進する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、アマンタジン、およびリマンタジンから選択される、請求項８の組成物。
【請求項１２】
該少なくとも一つの別の化合物が、ＨＣＶ感染の治療のために、ＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー、ＨＣＶアセンブリ、ＨＣＶイグレス、ＨＣＶ ＮＳ５Ａタンパク質、およびＩＭＰＤＨから選択される標的の機能を阻害するのに有効である、請求項８の組成物。
【請求項１３】
請求項１の化合物、またはその医薬的に許容される塩の治療上の有効量を患者に投与することを特徴とする、患者におけるＨＣＶ感染の治療方法。
【請求項１４】
請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩の投与の前、後、または同時に、抗ＨＣＶ作用を有する少なくとも一つの別の化合物を投与することをさらに特徴とする、請求項１３の方法。
【請求項１５】
該少なくとも一つの別の化合物が、インターフェロンまたはリバビリンである、請求項１４の方法。
【請求項１６】
該インターフェロンが、インターフェロンα２Ｂ、ペグ化インターフェロンα、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα２Ａ、およびリンパ芽球インターフェロンτから選択される、請求項１５の方法。
【請求項１７】
該少なくとも一つの別の化合物が、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を亢進する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、アマンタジン、およびリマンタジンから選択される、請求項１４の方法。
【請求項１８】
該少なくとも一つの別の化合物が、ＨＣＶ感染の治療のために、ＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー、ＨＣＶアセンブリ、ＨＣＶイグレス、ＨＣＶ ＮＳ５Ａタンパク質、およびＩＭＰＤＨから選択される標的の機能を阻害するのに有効である、請求項１４の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２００６年１１月１６日に出願された米国特許仮出願第６０／８６６，１３０号の利益を主張する。
本開示は一般に、抗ウイルス性化合物を対象とし、さらに具体的にはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）によりコードされる（本明細書において「セリンプロテアーゼ」とも称される）ＮＳ３プロテアーゼの機能を阻害する化合物、このような化合物を含む組成物、およびＮＳ３プロテアーゼの機能を阻害する方法を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
ＨＣＶは、主要なヒト病原体であり、世界中で１億７千万人が感染していると推定され、これはヒト免疫不全ウイルス１型の感染数の概ね５倍である。これらのＨＣＶ感染者のかなりの割合が肝硬変および肝細胞癌を含めた重篤な進行性肝疾患を発症させる。
【０００３】
現在、最も有効なＨＣＶ治療は、α−インターフェロンおよびリバビリンの組合せを用い、これは患者の４０％において持続的効果をもたらしている。ペグ化α−インターフェロンは、単独療法としては未修飾α−インターフェロンより優れていることを、最近の臨床結果は示している。しかし、ペグ化α−インターフェロンおよびリバビリンの組合せを伴う試験的な治療計画をもってしても、患者の大部分は、ウイルス量が持続的に減少することがない。したがって、ＨＣＶ感染の治療のための有効な療法を開発する明確であり、まだ満たされていない必要性が存在する。
【０００４】
ＨＣＶは、プラス鎖ＲＮＡウイルスである。５’非翻訳領域における推定されるアミノ酸配列および広範な類似性の比較に基づいて、ＨＣＶは、フラビウイルス科ファミリーの独立した属として分類されてきた。フラビウイルス科ファミリーの全てのメンバーは、単一の中断されていないオープンリーディングフレームの翻訳を介して全て公知のウイルス特異的タンパク質をコードするプラス鎖ＲＮＡゲノムを含有するエンベロープに包まれたビリオンを有する。
【０００５】
ＨＣＶゲノムに亘ってヌクレオチドおよびコードされたアミノ酸配列内にかなりの多様性が見い出される。６つの主要な遺伝子型が特性決定され、５０を超える亜型が説明されてきた。ＨＣＶの主要な遺伝子型は世界的にその分布が異なっており、病原および治療における遺伝子型の影響の可能性についての多くの研究にも関わらず、ＨＣＶの遺伝的多様性の臨床的意義は依然として捕らえにくい。
【０００６】
一本鎖ＨＣＶ  ＲＮＡゲノムは、約９５００ヌクレオチドの長さであり、約３０００個のアミノ酸の単一の大きなポリタンパク質をコードする単一のオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を有する。感染細胞において、このポリタンパク質は、細胞プロテアーゼおよびウイルスプロテアーゼによって複数の部位で切断され、構造タンパク質および非構造（ＮＳ）タンパク質を生成する。ＨＣＶの場合、成熟非構造タンパク質（ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５Ａ、およびＮＳ５Ｂ）の生成は、２種のウイルスプロテアーゼによってもたらされる。最初のものは、ＮＳ２−ＮＳ３接合部を切断し；第２のものは、ＮＳ３のＮ末端領域内に含有されるセリンプロテアーゼであり、ＮＳ３の下流、すなわち、ＮＳ３−ＮＳ４Ａ切断部位においてシスで、残りのＮＳ４Ａ−ＮＳ４Ｂ、ＮＳ４Ｂ−ＮＳ５Ａ、ＮＳ５Ａ−ＮＳ５Ｂ部位においてトランスでの両方における以降の切断の全てを仲介する。ＮＳ４Ａタンパク質は、複数の機能を果たしていると思われ、ＮＳ３プロテアーゼの補助因子として作用し、ＮＳ３および他のウイルスレプリカーゼ成分の膜局在性をおそらく補助している。ＮＳ３タンパク質のＮＳ４Ａとの複合体形成は、効率的なポリタンパク質の進行、部位の全てにおけるタンパク分解切断の増強に本質的である。ＮＳ３タンパク質はまた、ヌクレオシドトリホスファターゼおよびＲＮＡヘリカーゼ活性を示す。ＮＳ５Ｂは、ＨＣＶの複製に関与するＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼである。
【０００７】
本開示は、例えば、ＮＳ４Ａプロテアーゼと組み合わせて、ＮＳ３プロテアーゼの機能を阻害することができるペプチド化合物を提供する。さらに、本開示は、患者への併用療法の投与について記載し、それによって、ＨＣＶ  ＮＳ３プロテアーゼを阻害するのに効果的な本開示による化合物は、抗ＨＣＶ作用を有する１種または２種のさらなる化合物と共に投与することができる。
【０００８】
第１の態様において、本開示は、式（Ｉ）：
【化１】
2010510234.tif 000003
（Ｉ）
［式中、
ｎは、１、２、または３であり；
Ｒ1は、ヒドロキシおよび−ＮＨＳＯ2Ｒ7から選択され；
Ｒ2は、水素、アルケニル、アルキル、シアノアルキル、シクロアルキル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ3は、アルケニル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
Ｒ4は、−ＯＲ8であり；
Ｒ5は、アルケニル、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、アリールアルキル、カルボキシアルキル、シアノアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、（ＮＲaＲb）アルキル、および（ＮＲaＲb）カルボニルアルキルから選択され；
Ｒ6は、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、シクロアルキルオキシカルボニル、シクロアルキル、ハロアルコキシカルボニル、ハロアルキル、ハロアルキルカルボニル、（ＮＲaＲb）カルボニル、および（ＮＲaＲb）スルホニルから選択され；または
Ｒ6は、フェニル、並びに窒素、酸素、および硫黄から選択される１個、２個、３個、または４個のヘテロ原子を適宜含む５もしくは６員の一部もしくは完全に不飽和の環から選択され；その中で、該環の各々は、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルファニル、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、−ＮＲgＲh、（ＮＲjＲk）カルボニル、（ＮＲjＲk）スルホニル、およびオキソから独立して選択される１個、２個、３個、または４個の置換基で適宜置換されており；
Ｒ7は、アルキル、アリール、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、および−ＮＲcＲdから選択され；
Ｒ8は、アルコキシアルキル、アルキル、アルキルカルボニル、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、シクロアルキルカルボニル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、（ＮＲeＲf）カルボニル、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）2から選択され；その中で、ＲeおよびＲfは独立して、水素、アルキル、およびアリールアルキルから選択され；またはＲeおよびＲfは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、Ｏ、ＮＲx、およびＳから選択される１つの別のヘテロ原子を適宜含む５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成し；Ｒxは、水素およびアルキルから選択され；並びにＲ’は、水素およびアルキルから選択され；
ＲaおよびＲbは独立して、水素、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
ＲcおよびＲdは独立して、アルコキシ、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；またはＲcおよびＲdは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成し；
ＲgおよびＲhは独立して、水素、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アリールアルキル、およびハロアルキルから選択され；並びに
ＲjおよびＲkは独立して、水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、およびヘテロサイクリルから選択され；その中で、該アリール、該アリールアルキルのアリール部分、および該ヘテロサイクリルは、アルコキシ、アルキル、およびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されている］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０００９】
第２の態様において、本開示は、式（ＩＩ）：
【化２】
2010510234.tif 000004
（ＩＩ）
［式中、
ｎは、１、２、または３であり；
Ｒ2は、水素、アルケニル、アルキル、シアノアルキル、シクロアルキル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ3は、アルケニル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
Ｒ5は、アルケニル、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキル、アリールアルキル、カルボキシアルキル、シアノアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、（ＮＲaＲb）アルキル、および（ＮＲaＲb）カルボニルアルキルから選択され；
Ｒ6は、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルホニル、シクロアルキルオキシカルボニル、シクロアルキル、ハロアルコキシカルボニル、ハロアルキル、ハロアルキルカルボニル、（ＮＲaＲb）カルボニル、および（ＮＲaＲb）スルホニルから選択され；または
Ｒ6は、フェニル、並びに窒素、酸素、および硫黄から選択される１個、２個、３個、または４個のヘテロ原子を適宜含む５もしくは６員の一部もしくは完全に不飽和の環から選択され；その中で、該環の各々は、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルキルスルファニル、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、−ＮＲgＲh、（ＮＲjＲk）カルボニル、（ＮＲjＲk）スルホニル、およびオキソから独立して選択される１個、２個、３個、または４個の置換基で適宜置換されており；
Ｒ7は、アルキル、アリール、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、および−ＮＲcＲdから選択され；
Ｒ8は、アルコキシアルキル、アルキル、アルキルカルボニル、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、シクロアルキルカルボニル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、（ＮＲeＲf）カルボニル、および−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）2から選択され；その中で、ＲeおよびＲfは独立して、水素、アルキル、およびアリールアルキルから選択され；またはＲeおよびＲfは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、Ｏ、ＮＲx、およびＳから選択される１つの別のヘテロ原子を適宜含む５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成し；Ｒxは、水素およびアルキルから選択され；並びにＲ’は、水素およびアルキルから選択され；
ＲaおよびＲbは独立して、水素、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
ＲcおよびＲdは独立して、アルコキシ、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；またはＲcおよびＲdは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成し；
ＲgおよびＲhは独立して、水素、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アリールアルキル、およびハロアルキルから選択され；並びに
ＲjおよびＲkは独立して、水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、およびヘテロサイクリルから選択され；その中で、該アリール、該アリールアルキルのアリール部分、および該ヘテロサイクリルは、アルコキシ、アルキル、およびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されている］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１０】
第２の態様の第１の実施形態において、本開示は、
ｎが、１であり；
Ｒ2が、アルケニル、アルキル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ3が、アルケニル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロサイクリル、およびヘテロサイクリルアルキルから選択され；
Ｒ5が、アルケニル、アルキル、およびアリールアルキルから選択され；
Ｒ6が、アルコキシカルボニル、シクロアルキルオキシカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、（ＮＲaＲb）カルボニルから選択され；または
Ｒ6が、アルコキシおよびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されたフェニルであり；並びに
Ｒ7が、シクロアルキルである、式（ＩＩ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１１】
第２の態様の第２の実施形態において、本開示は、
ｎが、１であり；
Ｒ2が、アルケニル、アルキル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ3が、アリールおよびヘテロサイクリルから選択され；
Ｒ5が、アルケニル、アルキル、およびアリールアルキルから選択され；
Ｒ6が、アルコキシカルボニル、シクロアルキルオキシカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、（ＮＲaＲb）カルボニルから選択され；または
Ｒ6が、アルコキシおよびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されたフェニルであり；並びに
Ｒ7が、シクロアルキルである、式（ＩＩ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１２】
第２の態様の第３の実施形態において、本開示は、
ｎが、１であり；
Ｒ2が、アルケニル、アルキル、およびハロアルキルから選択され；
Ｒ3が、アリールであり；
Ｒ5が、アルケニル、アルキル、およびアリールアルキルから選択され；
Ｒ6が、アルコキシカルボニル、シクロアルキルオキシカルボニル、ハロアルコキシカルボニル、（ＮＲaＲb）カルボニルから選択され；または
Ｒ6が、アルコキシおよびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されたフェニルであり；並びに
Ｒ7が、シクロアルキルである、式（ＩＩ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００１３】
第３の態様では、本開示は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩と、医薬的に許容される担体とを含む組成物を提供する。第３の態様の第１の実施形態では、この組成物は、抗ＨＣＶ作用を有する少なくとも１種のさらなる化合物をさらに含む。第３の態様の第２の実施形態では、さらなる化合物の少なくとも１つは、インターフェロンまたはリバビリンである。第３の態様の第３の実施形態では、インターフェロンは、インターフェロンα２Ｂ、ペグ化インターフェロンα、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα２Ａ、およびリンパ芽球インターフェロンτ(lymphoblastiod interferon tau)から選択される。
【００１４】
第３の態様の第４の実施形態では、本開示は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩と、医薬的に許容される担体と、抗ＨＣＶ作用を有する少なくとも１種のさらなる化合物とを含む組成物を提供し、さらなる化合物の少なくとも１つは、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、アマンタジン、およびリマンタジンから選択される。
【００１５】
第３の態様の第５の実施形態では、本開示は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩と、医薬的に許容される担体と、抗ＨＣＶ作用を有する少なくとも１種のさらなる化合物とを含む組成物を提供し、さらなる化合物の少なくとも１つは、ＨＣＶ感染の治療のためのＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ  ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー(HCV entry)、ＨＣＶアセンブリ(HCV assembly)、ＨＣＶイグレス(HCV egress)、ＨＣＶ  ＮＳ５Ａタンパク質、およびＩＭＰＤＨから選択される標的の機能を阻害するのに効果的である。
【００１６】
第４の態様では、本開示は、患者に治療有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩を投与する工程を含む、患者においてＨＣＶ感染症を治療する方法を提供する。第４の態様の第１の実施形態では、この方法は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩の前、後、または同時に、抗ＨＣＶ作用を有する少なくとも１種のさらなる化合物を投与する工程をさらに含む。第４の態様の第２の実施形態では、さらなる化合物の少なくとも１つは、インターフェロンまたはリバビリンである。第４の態様の第３の実施形態では、インターフェロンは、インターフェロンα２Ｂ、ペグ化インターフェロンα、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα２Ａ、およびリンパ芽球インターフェロンτから選択される。
【００１７】
第４の態様の第４の実施形態では、本開示は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩の前、後、または同時に、患者に治療有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩と、抗ＨＣＶ作用を有する少なくとも１種のさらなる化合物とを投与する工程を含む、患者においてＨＣＶ感染症を治療する方法を提供し、さらなる化合物の少なくとも１つは、インターロイキン２、インターロイキン６、インターロイキン１２、１型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物、干渉ＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、イミキモド、リバビリン、イノシン５’−一リン酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、アマンタジン、およびリマンタジンから選択される。
【００１８】
第４の態様の第５の実施形態では、本開示は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩の前、後、または同時に、患者に治療有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩と、抗ＨＣＶ作用を有する少なくとも１種のさらなる化合物とを投与する工程を含む、患者においてＨＣＶ感染症を治療する方法を提供し、さらなる化合物の少なくとも１つは、ＨＣＶ感染の治療のためのＨＣＶメタロプロテアーゼ、ＨＣＶセリンプロテアーゼ、ＨＣＶポリメラーゼ、ＨＣＶヘリカーゼ、ＨＣＶ  ＮＳ４Ｂタンパク質、ＨＣＶエントリー、ＨＣＶアセンブリ、ＨＣＶイグレス、ＨＣＶ  ＮＳ５Ａタンパク質、およびＩＭＰＤＨから選択される標的の機能を阻害するのに効果的である。
【００１９】
第５の態様では、本開示は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩と、抗ＨＣＶ作用を有する１種、２種、３種、４種、または５種のさらなる化合物と、医薬的に許容される担体とを含む組成物を提供する。第５の態様の第１の実施形態では、この組成物は、抗ＨＣＶ作用を有する３種または４種のさらなる化合物を含む。第５の態様の第２の実施形態では、この組成物は、抗ＨＣＶ作用を有する１種または２種のさらなる化合物を含む。
【００２０】
第６の態様では、本開示は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩の前、後、または同時に、患者に治療有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩と、抗ＨＣＶ作用を有する１種、２種、３種、４種、または５種のさらなる化合物とを投与する工程を含む、患者においてＨＣＶ感染症を治療する方法を提供する。第６の態様の第１の実施形態では、この方法は、抗ＨＣＶ作用を有する３種または４種のさらなる化合物を投与する工程を含む。第６の態様の第２の実施形態では、この方法は、抗ＨＣＶ作用を有する１種または２種のさらなる化合物を投与する工程を含む。
【００２１】
本開示の他の態様は、本明細書において開示されている実施形態の適切な組合せを含むことができる。
また他の態様および実施形態は、本明細書において提供する説明において見い出すことができる。
本明細書における本開示の説明は、化学結合の法則および原理と適合させて解釈するべきである。場合によっては、任意の所与の場所に置換基を配置するために水素原子を取り除くことが必要な場合がある。
【００２２】
本開示に包含される化合物は、医薬品として使用するために適切に安定的なものであることを理解すべきである。
本明細書において引用されている全ての特許、特許出願、および文献参照は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれている。不整合がある場合は、定義を含めた本開示を優先する。
【００２３】
本明細書において使用されているように、下記の用語は、示される意味を有する。
本明細書で使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には、特に断りがなければ、複数の指示対象が含まれる。
「アルケニル」という用語は、本明細書で使用する場合、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含有する２個から６個の炭素原子の直鎖または分岐鎖基を意味する。
「アルコキシ」という用語は、本明細書で使用する場合、酸素原子を介して親分子の部分に結合しているアルキル基を意味する。
【００２４】
「アルコキシアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個のアルコキシ基で置換されているアルキル基を意味する。
「アルコキシカルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、カルボニル基を介して親分子の部分に結合しているアルコキシ基を意味する。
「アルコキシカルボニルアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個のアルコキシカルボニル基で置換されているアルキル基を意味する。
【００２５】
「アルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個から６個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素由来の基を意味する。
「アルキルカルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、カルボニル基を介して親分子の部分に結合しているアルキル基を意味する。
「アルキルスルファニル」という用語は、本明細書で使用する場合、硫黄原子を介して親分子の部分に結合しているアルキル基を意味する。
「アルキルスルホニル」という用語は、本明細書で使用する場合、スルホニル基を介して親分子の部分に結合しているアルキル基を意味する。
【００２６】
「アリール」という用語は、本明細書で使用する場合、フェニル基、または環の１つもしくは両方がフェニル基である二環式縮合環系を意味する。二環式縮合環系は、４〜６員の芳香族または非芳香族炭素環に縮合されたフェニル基からなる。本開示のアリール基は、基中の任意の置換可能な炭素原子を介して親分子の部分に結合することができる。アリール基の代表例には、それだけに限らないが、インダニル、インデニル、ナフチル、フェニル、およびテトラヒドロナフチルが挙げられる。本開示のアリール基は、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキル、第２のアリール基、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ニトロ、−ＮＲxＲy、（ＮＲxＲy）アルコキシ、（ＮＲxＲy）アルキル、（ＮＲxＲy）カルボニル、およびオキソから独立して選択される１個、２個、３個、４個、または５個の置換基で適宜置換されている場合があり；該第２のアリール基、該ヘテロシクリル、および該ヘテロシクリルアルキルのヘテロシクリル部分は、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、およびニトロから独立して選択される１個、２個、３個、４個、または５個の置換基でさらに適宜置換されている場合がある。
【００２７】
「アリールアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個のアリール基で置換されているアルキル基を意味する。
「カルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、−Ｃ（Ｏ）−を意味する。
「カルボキシ」という用語は、本明細書で使用する場合、−ＣＯ2Ｈを意味する。
【００２８】
「カルボキシアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個のカルボキシ基で置換されているアルキル基を意味する。
「シアノ」という用語は、本明細書で使用する場合、−ＣＮを意味する。
「シアノアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個のシアノ基で置換されているアルキル基を意味する。
【００２９】
「シクロアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、３〜１４個の炭素原子と０個のヘテロ原子とを有する飽和単環式、二環式、または三環式炭化水素環系を意味する。シクロアルキル基の代表例には、それだけに限らないが、シクロプロピル、シクロペンチル、ビシクロ［３．１．１］ヘプチル、およびアダマンチルが挙げられる。本開示のシクロアルキル基は、アルケニル、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルキル、アリールアルキル、アリールカルボニル、シアノ、シクロアルケニル、（シクロアルキル）アルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、および（ＮＲjＲk）カルボニルから独立して選択される１個、２個、３個、または４個の置換基で適宜置換されていてもよく；その中で、ＲｊおよびＲｋは独立して、水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、およびヘテロシクリルから選択され；該アリール、該アリールアルキルのアリール部分、および該ヘテロシクリルは、アルコキシ、アルキル、およびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されている。
【００３０】
「（シクロアルキル）アルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個のシクロアルキル基で置換されているアルキル基を意味する。
「シクロアルキルカルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、カルボニル基を介して親分子の部分に結合しているシクロアルキル基を意味する。
「シクロアルキルオキシ」という用語は、本明細書で使用する場合、酸素原子を介して親分子の部分に結合しているシクロアルキル基を意味する。
【００３１】
「シクロアルキルオキシカルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、カルボニル基を介して親分子の部分に結合しているシクロアルキルオキシ基を意味する。
「ハロ」および「ハロゲン」という用語は、本明細書で使用する場合、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩを意味する。
「ハロアルコキシ」という用語は、本明細書で使用する場合、酸素原子を介して親分子の部分に結合しているハロアルキル基を意味する。
「ハロアルコキシアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個のハロアルコキシ基で置換されているアルキル基を意味する。
【００３２】
「ハロアルコキシカルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、カルボニル基を介して親分子の部分に結合しているハロアルコキシ基を意味する。
「ハロアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、３個、または４個のハロゲン原子で置換されているアルキル基を意味する。
「ハロアルキルカルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、カルボニル基を介して親分子の部分に結合しているハロアルキル基を意味する。
【００３３】
「ヘテロシクリル」という用語は、本明細書で使用する場合、窒素、酸素、および硫黄から独立して選択される１個、２個、もしくは３個のヘテロ原子を含有する５員、６員、または７員環を意味する。５員環は、０から２個の二重結合を有し、６員および７員環は、０から３個の二重結合を有する。また「ヘテロシクリル」という用語には、ヘテロシクリル環が４〜６員芳香族もしくは非芳香族炭素環または他の単環式ヘテロシクリル基に縮合している二環式基が含まれる。本開示のヘテロシクリル基は、基中の炭素原子または窒素原子を介して親分子の部分に結合している場合がある。ヘテロシクリル基の例には、それだけに限らないが、ベンゾチエニル、フリル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、モルホリニル、オキサゾリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピロロピリジニル、ピロリル、チアゾリル、チエニル、およびチオモルホリニルが挙げられる。本開示のヘテロシクリル基は、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキル、アリール、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、第２のヘテロシクリル基、ヘテロシクリルアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ニトロ、−ＮＲxＲy、（ＮＲxＲy）アルコキシ、（ＮＲxＲy）アルキル、（ＮＲxＲy）カルボニル、およびオキソから独立して選択される１個、２個、３個、４個、または５個の置換基で適宜置換されている場合があり；該アリール、該第２のヘテロシクリル基、および該ヘテロシクリルアルキルのヘテロシクリル部分は、アルコキシ、アルキル、シアノ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヒドロキシ、およびニトロから独立して選択される１個、２個、３個、４個、または５個の置換基でさらに適宜置換されている場合がある。
【００３４】
「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個のヘテロシクリル基で置換されているアルキル基を意味する。
「ヒドロキシ」という用語は、本明細書で使用する場合、−ＯＨを意味する。
「ヒドロキシアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個のヒドロキシ基で置換されているアルキル基を意味する。
【００３５】
「−ＮＲaＲb」という用語は、本明細書で使用する場合、窒素原子を介して親分子の部分に結合している２つの基であるＲaおよびＲbを意味する。ＲaおよびＲbは各々独立して、水素、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ハロアルコキシアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクリル、およびヘテロシクリルアルキルから選択される。
「（ＮＲaＲb）アルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個の−ＮＲaＲb基で置換されているアルキル基を意味する。
【００３６】
「（ＮＲaＲb）カルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、カルボニル基を介して親分子の部分に結合している−ＮＲaＲb基を意味する。
「（ＮＲaＲb）カルボニルアルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個の（ＮＲaＲb）カルボニル基で置換されているアルキル基を意味する。
「（ＮＲaＲb）スルホニル」という用語は、本明細書で使用する場合、スルホニル基を介して親分子の部分に結合している−ＮＲaＲb基を意味する。
【００３７】
「−ＮＲcＲd」という用語は、本明細書で使用する場合、窒素原子を介して親分子の部分に結合している２個の基であるＲcおよびＲdを意味する。ＲcおよびＲdは独立して、アルコキシ、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクリル、およびヘテロシクリルアルキルから選択され；あるいはＲcおよびＲdは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成する。
【００３８】
「−ＮＲeＲf」という用語は、本明細書で使用する場合、窒素原子を介して親分子の部分に結合している２個の基であるＲeおよびＲfを意味する。ＲeおよびＲfは独立して、水素、アルキル、およびアリールアルキルから選択され；あるいはＲeおよびＲfは、それらに結合する窒素原子と共に一緒になって、Ｏ、ＮＲx、およびＳから選択される１つの別のヘテロ原子を適宜含む５もしくは６員単環式ヘテロ環を形成し；その中で、Ｒxは、水素およびアルキルから選択され；並びにＲ’は、水素およびアルキルから選択される。
【００３９】
「−ＮＲgＲh」という用語は、本明細書で使用する場合、窒素原子を介して親分子の部分に結合している２個の基であるＲgおよびＲhを意味する。ＲgおよびＲhは独立して、水素、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アルキルカルボニル、アリールアルキル、およびハロアルキルから選択される。
【００４０】
「−ＮＲjＲk」という用語は、本明細書で使用する場合、窒素原子を介して親分子の部分に結合している２個の基であるＲjおよびＲkを意味する。ＲjおよびＲkは独立して、水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、およびヘテロシクリルから選択され；その中で、該アリール、該アリールアルキルのアリール部分、および該ヘテロシクリルは、アルコキシ、アルキル、およびハロから独立して選択される１個または２個の置換基で適宜置換されている。
【００４１】
「（ＮＲjＲk）カルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、カルボニル基を介して親分子の部分に結合している−ＮＲjＲk基を意味する。
「（ＮＲjＲk）スルホニル」という用語は、本明細書で使用する場合、スルホニル基を介して親分子の部分に結合している−ＮＲeＲf基を意味する。
「−ＮＲxＲy」という用語は、本明細書で使用する場合、窒素原子を介して親分子の部分に結合している２個の基であるＲxおよびＲyを意味する。ＲxおよびＲyは独立して、水素およびアルキルから選択される。
【００４２】
「（ＮＲxＲy）アルコキシ」という用語は、本明細書で使用する場合、酸素原子を介して親分子の部分に結合している（ＮＲxＲy）アルキル基を意味する。
「（ＮＲxＲy）アルキル」という用語は、本明細書で使用する場合、１個、２個、または３個の−ＮＲxＲy基で置換されているアルキル基を意味する。
「（ＮＲxＲy）カルボニル」という用語は、本明細書で使用する場合、カルボニル基を介して親分子の部分に結合している−ＮＲxＲy基を意味する。
「ニトロ」という用語は、本明細書で使用する場合、−ＮＯ2を意味する。
「オキソ」という用語は、本明細書で使用する場合、＝Ｏを意味する。
「スルホニル」という用語は、本明細書で使用する場合、−ＳＯ2−を意味する。
【００４３】
本開示の化合物は、プロドラッグとして存在することができる。「プロドラッグ」という用語は、本明細書で使用する場合、血液中の加水分解によって親化合物にインビボで急速に変換される化合物を表す。本開示のプロドラッグには、親分子上のヒドロキシ基のエステル、親分子上のカルボキシ基のエステル、および親分子上のアミンのアミドが挙げられる。
【００４４】
本開示の化合物は、医薬的に許容される塩として存在することができる。「医薬的に許容される塩」という用語は、本明細書で使用する場合、妥当な医学的判断の範囲内において、妥当な便益／リスク比に見合った過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症なしに患者の組織と接触して使用するのに適切であり、それらの使用目的のために効果的である、水溶性もしくは油溶性もしくは分散性の本開示の化合物の塩または双性イオン形態を表す。塩は、化合物の最終単離および精製の間に、または別々に適切な塩基官能基を適切な酸と反応させることによって調製することができる。代表的な酸付加塩には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩；ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パルモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラ−トルエンスルホン酸塩、およびウンデカン酸塩が挙げられる。医薬的に許容される付加塩を形成するために用いることができる酸の例には、無機酸（塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸など）、ならびに有機酸（シュウ酸、マレイン酸、コハク酸、およびクエン酸など）が挙げられる。
【００４５】
塩基付加塩は、酸性基を、適切な塩基（金属カチオンの水酸化物、炭酸塩、または重炭酸塩など）と、あるいはアンモニアまたは有機第一級、第二級、もしくは第三級アミンと反応させることによって、化合物の最終単離および精製の間に調製することができる。医薬的に許容される塩のカチオンには、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、およびアルミニウム、ならびに無毒性の四級アミンカチオン（アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルフェネチルアミン、およびＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンなど）が挙げられる。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミンには、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン、およびピペラジンが挙げられる。
【００４６】
本明細書で使用する場合、「抗ＨＣＶ作用」という用語は、化合物がＨＣＶウイルスの治療に効果的であることを意味する。
「本開示の化合物」という用語、および同等の表現は、式（Ｉ）の化合物、ならびにその医薬的に許容されるエナンチオマー、ジアステレオマー、および塩を包含することを意味する。同様に、中間体への言及は、文脈上許容される場合、それらの塩を包含することを意味する。
「患者」という用語は、ヒトおよび他の哺乳動物の両方を含む。
【００４７】
「医薬組成物」という用語は、投与方法および剤形の種類によって、少なくとも１種のさらなる医薬担体、すなわち、希釈剤、保存料、充填剤、流動性調整剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、香味剤、香料剤、抗菌剤、抗真菌剤、滑沢剤および予製剤などの補助剤、賦形剤またはビヒクルと組み合わせた本開示の化合物を含む組成物を意味する。例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA (1999)において一覧表示された成分を使用することができる。
【００４８】
「医薬的に許容される」という言回しは本明細書において、過度の毒性、刺激作用、アレルギー反応、または妥当な危険性／受益性割合に比例した他の問題もしくは合併症を伴わずに、患者の組織と接触する使用に適した、正しい医療判断の範囲内である化合物、材料、組成物、および／または剤形を意味するために用いられる。
【００４９】
「治療有効量」という用語は、有意義な患者利益、例えば、ウイルス量の持続的減少を示すのに十分なそれぞれの活性物質の総量を意味する。単独で投与される個々の活性成分に適用する場合、この用語はその成分単独を意味する。組合せに適用する場合は、この用語は、組合せであれ、連続的であれ、または同時投与であれ、治療効果をもたらす活性成分の組み合わせた量を意味する。
【００５０】
「治療」および「治療する」という用語は、（ｉ）疾患、障害および／または状態にかかりやすい場合があるが、まだその診断を受けていない患者において、疾患、障害または状態が起こることを防止し；（ｉｉ）疾患、障害または状態を阻害、すなわち、その進行を止め；ならびに／あるいは（ｉｉｉ）疾患、障害または状態を軽減、すなわち、疾患、障害および／または状態の退行をもたらすことを意味する。
【００５１】
本開示の化合物の命名に使用する場合、記号Ｐ１’、Ｐ１、Ｐ２*、Ｐ３およびＰ４は、本明細書で使用する場合、天然ペプチド切断基質の結合に対する、結合しているプロテアーゼ阻害剤のアミノ酸残基の相対的位置を表示する。天然基質において、切断はＰ１とＰ１’との間で起こり、ここでノンプライム位置は、ペプチド天然切断部位のＣ末端から始まってＮ末端に向けて伸びているアミノ酸を表し；一方、プライム位置は、指定切断部位のＮ末端から始まり、Ｃ末端に向かって伸びる。例えば、Ｐ１’は、切断部位のＣ末端の右側末端から離れた第１の位置（すなわち、Ｎ末端第１位置）を示し；一方、Ｐ１はＣ末端切断部位の左側から番号付けを始め、Ｐ２はＣ末端からの第２の位置などである）。（Berger A. & Schechter I., Transactions of the Royal Society London series (1970), B257, 249-264を参照されたい］。
【００５２】
下図は、本開示の化合物についての記号を示す。
【化３】
2010510234.tif 000005
【００５３】
不斉中心は、本開示の化合物において存在する。例えば、化合物は、式
【化４】
2010510234.tif 000006
のＰ１シクロプロピル要素を含むことができ、式中、Ｃ1およびＣ2はそれぞれ、シクロプロピル環の１位および２位における不斉炭素原子を表す。
【化５】
2010510234.tif 000007
本開示は、ＨＣＶプロテアーゼを阻害する能力を有する全ての立体化学的形態、またはその混合物を包含することを理解すべきである。
【００５４】
本開示の特定の化合物はまた、分離可能である場合がある異なる安定的な高次構造形態で存在することができる。非対称の単結合の周りの束縛回転に起因するねじれによる不斉は、例えば立体障害または環ひずみによって、異なる配座異性体の分離を可能にすることができる。本開示には、これらの化合物のそれぞれの配座異性体およびこれらの混合物が挙げられる。
【００５５】
本開示の特定の化合物は、双性イオン形態で存在する場合があり、本開示には、これらの化合物のそれぞれの双性イオン形態およびこれらの混合物が含まれる。
【００５６】
治療に使用するために、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、ならびにその医薬的に許容される塩を、原化学物質(raw chemical)として投与することが可能である場合、活性成分を医薬組成物として提示することが可能である。したがって、本開示は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩と、１種もしくは複数の医薬的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とを含む医薬組成物をさらに提供する。式（Ｉ）の化合物およびその医薬的に許容される塩は、上記の通りである。担体（複数可）、希釈剤（複数可）、または賦形剤（複数可）は、製剤の他の成分と適合性であり、そのレシピエントに対して有害ではないという意味で許容できるものでなければならない。本開示の他の態様によって、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩を、１種もしくは複数の医薬的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と混合する工程を含む、医薬製剤を調製するための方法もまた提供する。
【００５７】
医薬製剤は、単位用量当たり所定の量の活性成分を含有する単位用量形態で存在することができる。１日当たり約０．０１〜約２５０ミリグラム／キログラム（「ｍｇ／ｋｇ」）体重、好ましくは１日当たり約０．０５〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の本開示の化合物の投与量レベルが、ＨＣＶ媒介疾患の予防および治療のための単独療法において典型的である。典型的には、本開示の医薬組成物は、１日当たり約１〜約５回、あるいは持続注入として投与される。このような投与は、長期治療または救急治療として使用することができる。単一の剤形を得るため担体物質と合わせることのできる活性成分の量は、治療される状態、状態の重篤度、投与回数、投与経路、用いる化合物の排せつ率、治療期間、ならびに患者の年齢、性別、体重、および状態によって変化する。好ましい単位製剤は、本明細書において上記のように、活性成分の１日用量もしくは部分用量、またはその適切な画分を含有する製剤である。一般に治療は、実質的に化合物の適量未満の少量の投与量で開始する。その後、この条件の下で最適な効果が得られるまで少しずつ投与量を増加させる。一般に化合物は、有害または害毒を及ぼす副作用をもたらさずに抗ウイルス的に効果的な結果を生じさせるであろう濃度レベルで投与することが最も望ましい。
【００５８】
本開示の組成物が、本開示の化合物と、１種または複数のさらなる治療剤または予防薬との組合せを含む場合、化合物およびさらなる薬剤の両方は通常、単独療法において通常投与される投与量の約１０〜１５０％、さらに好ましくは約１０〜８０％の投与量レベルで存在する。
【００５９】
医薬製剤は、任意の適切な経路による投与、例えば、経口（口腔または舌下を含めた）、直腸、経鼻、局所（口腔、舌下、または経皮を含めた）、経腟、あるいは非経口（皮下、皮内、筋内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、くも膜下腔内、病巣内、静脈内、または皮内注射もしくは注入を含めた）経路による投与に適合することができる。このような製剤は、薬学の技術分野において公知の任意の方法によって、例えば活性成分を担体（複数可）または賦形剤（複数可）と結合することによって調製することができる。
【００６０】
経口投与に適合された医薬製剤は、カプセル剤または錠剤；散剤または顆粒剤；水性もしくは非水性液体中の溶液剤または懸濁剤；食用の泡またはホイップ；あるいは水中油型液体乳剤または油中水型乳剤などの個別単位として提示することができる。
【００６１】
例えば、錠剤またはカプセル剤の形態における経口投与のために、活性薬物成分は、エタノール、グリセロール、水などの経口で無毒性の医薬的に許容される不活性担体と合わせることができる。散剤は、化合物を適切な微細なサイズに微粉砕し、食用炭水化物（例えば、デンプンまたはマンニトールなど）などの同様に微粉砕した医薬担体と混合することによって調製される。香味剤、保存剤、分散剤、および着色剤もまた存在することができる。
【００６２】
カプセル剤は、上記のように粉末混合物を調製し、ゼラチンの形成被覆に充填することによって作製される。コロイダルシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、または固体ポリエチレングリコールなどの流動促進剤および滑沢剤を、充填操作の前に粉末混合物に加えることができる。カプセル剤を摂取する場合に薬物の有効性を向上させるために、寒天、炭酸カルシウム、または炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤をまた加えることができる。
【００６３】
さらに、所望であるかまたは必要な場合、適切な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、および着色剤もまた、混合物中に組み込むことができる。適切な結合剤には、デンプン、ゼラチン、天然糖（グルコースまたはβラクトースなど）、コーン甘味料、天然および合成のガム（アカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウムなど）、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。これらの剤形において使用される滑沢剤には、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤には、これらだけに限らないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、顆粒化またはスラッギングし、滑沢剤および崩壊剤を加え、錠剤に圧入することによって製剤される。粉末混合物は、適切に粉砕した化合物を、上記のような希釈剤または基剤と、および所望により、結合剤（カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、またはポリビニルピロリドンなど）、溶解遅延剤（パラフィンなど）、再吸収促進剤（第四級塩など）および／または吸収剤（ベントナイト、カオリン、またはリン酸二カルシウムなど）と混合することによって調製される。粉末混合物は、結合剤（シロップ、デンプン糊、アラビアゴム粘液、またはセルロース系材料もしくは高分子材料の溶液など）で湿らせ、強制的にスクリーンを通過させるによって顆粒化することができる。顆粒化に代わるものとして、粉末混合物を錠剤成形機にかけることができ、その結果は、顆粒剤へと割れる不完全に形成されたスラグとなる。顆粒剤は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱油を添加することによって潤滑にされ、錠剤成形型に粘着することを防止することができる。次いで、潤滑混合物を錠剤に圧縮する。本開示の化合物はまた、易流動性の不活性担体と合わせ、顆粒化またはスラッギング工程を経ることなく直接錠剤に圧縮することができる。セラックのシーリングコートからなる透明または不透明な保護コーティング、糖または高分子材料のコーティング、およびワックスの光沢コーティングを提供することができる。これらのコーティングに染料を加えて、異なる単位用量を識別することができる。
【００６４】
溶液剤、シロップ剤、およびエリキシル剤などの経口流体は、一定量が所定の量の化合物を含有するように、投与単位形態で調製することができる。シロップ剤は、化合物を適切に香味付けした水溶液に溶解することによって調製することができ、一方エリキシル剤は、無毒性ビヒクルの使用によって調製される。可溶化剤および乳化剤（エトキシ化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなど）、保存剤、香味添加剤（ハッカ油または天然甘味料など）、またはサッカリンもしくは他の人工甘味料などもまた加えることができる。
【００６５】
適切な場合には、経口投与のための投与単位製剤は、マイクロカプセル化することができる。製剤はまた、例えば、粒子材料をポリマー、ワックス、または同種のものでコーティングするか、それらに包埋することによって、放出を延長または維持するように調製することができる。
【００６６】
式（Ｉ）の化合物、およびその医薬的に許容される塩はまた、小さな単膜小胞、大きな単膜小胞、および多重膜小胞などのリポソームデリバリーシステムの形態で投与することができる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジルコリンなどの種々のリン脂質から形成することができる。
【００６７】
式（Ｉ）の化合物およびその医薬的に許容される塩はまた、化合物分子が結合する個々の担体としてモノクローナル抗体を使用することによって送達することができる。化合物はまた、標的可能な薬物担体として可溶性ポリマーに結合することができる。このようなポリマーには、パリトイル残基(palitoyl residue)で置換されているポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルタミドフェノール、またはポリエチレンオキシドポリリシンを含むことができる。さらに、化合物は、薬物の制御放出を実現するのに有用な生分解性ポリマーの類（例えば、ポリ乳酸、ポリεカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマー）に結合することができる。
【００６８】
経皮的投与に適合された医薬製剤は、レシピエントの表皮と長時間密着し続けることを目的とする個別のパッチとして提示することができる。例えば、活性成分は、Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)において概ね記載されているようにイオン泳動によってパッチから送達することができる。
【００６９】
局所投与に適合された医薬製剤は、軟膏剤、クリーム剤、懸濁剤、ローション剤、散剤、溶液剤、ペースト剤、ゲル剤、スプレー剤、エアゾール剤、または油剤として製剤することができる。
【００７０】
眼または他の外部組織、例えば口および皮膚の治療のために、製剤は、好ましくは局所軟膏剤またはクリーム剤として施用される。軟膏剤中に配合される場合、活性成分は、パラフィン軟膏基剤または水混和性軟膏基剤と共に用いることができる。あるいは、活性成分は、水中油型クリーム基剤または油中水型基剤と共にクリーム剤中に配合することができる。
【００７１】
眼への局所投与に適合された医薬製剤には、活性成分が適切な担体、特に水性溶媒に溶解または懸濁している点眼薬が挙げられる。
口内の局所投与に適合された医薬製剤には、ロゼンジ、香錠、および口内洗浄剤が挙げられる。
直腸投与に適合された医薬製剤は、坐薬としてまたは浣腸として提示することができる。
【００７２】
担体が固形物である経鼻投与に適合された医薬製剤には、鼻から吸い込む方法、すなわち、鼻の近くに保持した粉末容器から鼻腔を通した急速な吸入によって投与される、例えば２０〜５００ミクロンの範囲の粒径を有する粗粉末が挙げられる。鼻用スプレーまたは点鼻薬として投与するための、担体が液体である適切な製剤には、活性成分の水溶液または油溶液が挙げられる。
【００７３】
吸入による投与に適合された医薬製剤には、様々なタイプの定量加圧式エアロゾル、ネブライザー、または注入器によって生成することができる、微粒子の塵または霧が挙げられる。
膣投与に適合された医薬製剤は、ペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤、またはスプレー製剤として提示することができる。
【００７４】
非経口投与に適合された医薬製剤には、抗酸化剤、バッファー、制菌剤、ならびに製剤を対象とするレシピエントの血液と等張にする溶質；ならびに懸濁化剤および増粘剤を含む場合がある水性および非水性の無菌懸濁剤を含有してもよい、水性および非水性の滅菌注射液が挙げられる。製剤は、単位用量または複数用量の容器、例えば密封したアンプルおよびバイアル中に存在してもよく、注射のため使用直前に、無菌の液体担体、例えば水の添加だけを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）した状態で保存してもよい。無菌散剤、顆粒剤、および錠剤から即時調合注射液および懸濁剤を調製することができる。
【００７５】
特に上述した成分に加えて、製剤には、問題の製剤のタイプを考慮して当技術分野で常用の他の薬剤を含むことができ、例えば経口投与に適した薬剤には、香味剤が含まれる場合があることを理解すべきである。
【００７６】
下記の表１では、本開示の化合物と共に投与することができる化合物のいくつかの実例を一覧表示する。本開示の化合物は、一緒にもしくは別々に、または化合物を組成物に合わせることによって、併用療法において他の抗ＨＣＶ作用化合物と共に投与することができる。
【表１−１】
2010510234.tif 000008
【表１−２】
2010510234.tif 000009
【表１−３】
2010510234.tif 000010
【００７７】
本開示の化合物はまた、実験用試薬として使用することができる。化合物は、ＨＣＶ疾患の機構の知識をさらに向上させるための、ウイルス複製アッセイの設計、動物アッセイ系の確認および構造生物学研究のための研究道具の提供において有益な場合がある。さらに、本開示の化合物は、例えば拮抗阻害によって、他の抗ウイルス性化合物の結合部位の確立または決定において有用である。
【００７８】
本開示の化合物はまた、物質のウイルス汚染を処理または予防し、したがって実験室、またはこのような物質（例えば、血液、組織、手術器具および手術着、実験器具および実験着、ならびに採血もしくは輸血の装置および材料）と接触する医療関係者もしくは患者のウイルス感染の危険性を減少させるために使用することができる。
【００７９】
本開示は、合成過程によって、あるいは人体もしくは動物体（インビボ）内で生じる過程またはインビトロで生じる過程を含めた代謝過程によって調製される場合、式（Ｉ）を有する化合物を包含することを意図する。
【００８０】
本願、例えば特に以下のスキームの例および実施例に使用される略語は、当業者に広く知られている。使用されるいくつかの略語は、次の通りである：
ＣＤＩ：１，１’−カルボニルジイミダゾール；
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン；
ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン；
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムリン酸塩；
ＰｙＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩；
ＭｅＩ：ヨウ化メチル；
ＢｏｃもしくはＢＯＣ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル；
ＯｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブトキシ；
ＴＢＭＥ：ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル；
Ｅｔ3Ｎ：トリエチルアミン；
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；
ＯＡｃ：アセテート；
ＤＰＰＡ：ジフェニルホスホリルアジド；
Ｍｅ：メチル；
ＴＢＡＦ：フッ化テトラブチルアンモニウム；
ＤＭＡＰ：４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン；
ｔＢｕＬｉ：ｔｅｒｔ−ブチルリチウム；
ＬｉＨＭＤＳ：リチウムヘキサメチルジシラジド；
Ｔｌｅ：ｔｅｒｔ−ブチルロイシン（ｔｅｒｔ−ブチルグリシンとも呼ばれる）；
４−ＢｉｐｈＭｇＢｒ：４−ビフェニルマグネシウムブロミド；
ＤＣＭ：ジクロロメタン；
ＭｅＯ：メトキシ；
ＥＤＡＣもしくはＥＤＣ：１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩；および
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール。
【００８１】
本開示の化合物の合成に有用な出発物質は当業者には公知であり、容易に製造することができ、または市販されている。
【００８２】
以下に記載する下記の方法は、例示の目的のために提供するものであり、特許請求された開示の範囲を制限することを意図しない。従来の保護基を使用して官能基を保護し、次いで保護基を除去して本開示の化合物を提供するようにこのような化合物を調製することが必要である場合があることが理解されるであろう。本開示による保護基の使用に関する詳細は、当業者には公知である。
【００８３】
トリペプチドカルボン酸をＰ１｀スルホンアミドとカップリングさせることによって式（Ｉ）の化合物を構成する一般的な方法を、反応式ＩＩに示す。前記カップリング反応には、ＴＨＦのような溶媒中、カルボン酸（１）をカルボニルジイミダゾールのようなカップリング試薬で処理し（還流するまで加熱してもよい）、続いてＤＢＵのような塩基の存在下、ＴＨＦまたはジクロロメタンのような溶媒中、（１）の形成された誘導体をＰ１｀スルホンアミドに加えることが必要である。
反応式ＩＩ
【化６】
2010510234.tif 000011
【００８４】
式（Ｉ）の化合物を構成するための別法を、反応式ＩＩＩに示す。反応式Ｉに用いられる方法を使用して、Ｐ１｀スルホンアミド要素をＰ１要素とカップリングさせる。次いで生じたＰ１−Ｐ１｀部分を、そのアミノ末端で脱保護してもよい。この一般的な実施例にはＢｏｃ保護基が用いられるが、多数の適当なアミノ保護基がこの方法に用いられてもよいことを当業者は認識している。ジクロロエタンのような溶媒中、トリフルオロ酢酸のような酸を用いてＢｏｃ保護基を除去して、ＴＦＡ塩として脱保護アミンを提供してもよい。ＴＦＡアミン塩を後のカップリング反応に直接用いてもよく、または別法として、最初にＴＦＡアミン塩をＨＣｌアミン塩に変換し、このＨＣｌアミン塩を、反応式ＩＩＩに示される前記カップリング反応に用いてもよい。ＨＣｌアミン塩（３）と、カルボキシル末端のＰ４−Ｐ３−Ｐ２中間体とのカップリングを、ジクロロメタンのような溶媒中、カップリング試薬（例えばＨＡＴＵ）を用いて行って、式（Ｉ）の化合物（４）を提供してもよい。
反応式ＩＩＩ
【化７】
2010510234.tif 000012
【００８５】
式（Ｉ）の化合物を構成するための別法を、反応式ＩＶに示す。ここで、ジクロロメタンのような溶媒中、ジイソプロピルアミンのような塩基の存在下、ＰｙＢＯＰのようなカップリング剤を用いて、Ｐ１−Ｐ１｀末端アミン（１）の塩酸塩を、Ｐ２要素の遊離カルボキシル基とカップリングさせる。生じたＰ２−Ｐ１−Ｐ１｀中間体を、２段階の工程で式（Ｉ）の化合物に変換してもよく、その中で、第１ステップは、ジクロロメタンのような溶媒中、ＴＦＡのような酸を用いたＰ２アミン末端の脱保護である。ジクロロメタンのような溶媒を用いて、ジイソプロピルアミンのような塩基の存在下、ＰｙＢＯＰのような標準的なカップリング剤を用いて、生じたトリフルオロ酢酸塩をＰ４−Ｐ３要素のカルボキシル末端とカップリングさせて、式（Ｉ）の化合物（４）を提供してもよい。
反応式ＩＶ
【化８】
2010510234.tif 000013
【００８６】
上記の反応式に利用されるＰ４−Ｐ３−Ｐ２中間体は、一般的な反応式Ｖに示されるこの方法のさらなる説明を用いて、先に記載したように構成されうる。その中で、Ｐ４−Ｐ３中間体（１）の遊離カルボキシル末端を、Ｐ２要素のアミノ末端とカップリングさせて、Ｐ４−Ｐ３−Ｐ２ジペプチド（２）を提供してもよい。Ｐ４−Ｐ３−Ｐ２中間体のカルボキシル末端を、エステル基のけん化によって脱保護して、遊離カルボン酸（３）として、Ｐ４−Ｐ３−Ｐ２を提供してもよい。（３）のような中間体を、本明細書に記載した方法を用いて、式（Ｉ）の化合物に変換してもよい。
反応式Ｖ
【化９】
2010510234.tif 000014
【００８７】
式（Ｉ）の化合物はまた、本明細書に記載するような式（Ｉ）の他の化合物に変換することができる。このような方法の例をスキームＶＩに示し、そこにおいてはＰ４位においてＢｏｃ基を有する式（Ｉ）の化合物（１）を、式（Ｉ）の化合物（３）（前記化合物はＰ４位において尿素基を有する）に変換する。（１）の（３）への変換は、２つの工程方法で行うことができ、その最初は、（１）をジクロロメタンなどの溶媒中でＴＦＡなどの酸で処理することによる（１）のアミン（２）への変換である。このように得られたアミンＴＦＡ塩を、１当量の塩基の存在下、イソシアネート（例えばｔｅｒｔ−ブチルイソシアネート）で処理し、式（Ｉ）の化合物（３）（Ｐ３部分は尿素でキャッピングされている）を提供することができる。前述のように、中間体（２）は、式（Ｉ）の化合物（Ｐ３基はアミドまたはカルバメートでキャッピングされている）の調製のための出発物質として使用することができることを当業者であれば理解するであろう。式（Ｉ）の前記化合物の構築は、アミンからの前記Ｐ４官能基の形成のための標準状態を使用して達成することができる。
反応式ＶＩ
【化１０】
2010510234.tif 000015
【００８８】
式（Ｉ）の化合物の構成において、上記で概説し、下記でより詳細に説明する一般的な方法の一つを用いて、Ｐ１｀末端を分子に組み入れる。いくつかの例において、Ｐ１｀要素は、シクロアルキルスルホンアミドまたはアルキルスルホンアミドであり、それは市販品として入手可能であるか、またはスルホニルクロリドをアンモニアで処理することによって、対応のアルキルスルホニルクロリドまたはシクロアルキルスルホニルクロリドから製造されうる。あるいは、これらのスルホンアミドを、反応式ＶＩＩで概説する一般的な方法を用いて合成してもよい。その中で、市販品として入手可能な３−クロロ−プロピルスルホニルクロリド（１）を、例えばｔｅｒｔ−ブチルアミンで処理することによって、適当に保護したスルホンアミドに変換する。次いで得られたスルホンアミド（２）を、ＴＨＦのような溶媒中、２当量の塩基（例えばブチルリチウム）で処理することによって、対応のシクロアルキルスルホンアミドに変換する。生じたシクロアルキルスルホンアミドを、酸で処理することによって脱保護して、目的の非保護シクロアルキルスルホンアミドを得てもよい。
反応式ＶＩＩ
【化１１】
2010510234.tif 000016
【００８９】
また置換シクロアルキルスルホンアミドを、上記の方法を変更したものを用いて、式（Ｉ）の化合物に組み入れてもよい。例えば、反応式ＶＩＩＩの中間体２を、２当量の塩基（例えばブチルリチウム）で処理し、生じた反応混合物をヨウ化メチルのような求電子剤で処理して、置換シクロアルキルスルホンアミド（３）を得てもよい。この中間体（３）をＮ末端で脱保護し、生じた化合物（４）を、式（Ｉ）の化合物の製造における中間体として利用してもよい。
反応式ＶＩＩＩ
【化１２】
2010510234.tif 000017
【００９０】
式（Ｉ）の化合物の生成に用いられるＰ１｀中間体は、一部の例ではスルファミド誘導体から誘導される。このような場合において、スルファミド中間体は、いくつかの合成経路、例えば反応式ＩＸで概説した経路によって得ることができる。
反応式ＩＸ
【化１３】
2010510234.tif 000018
【００９１】
スルファモイルクロリド（２）は、ＴＨＦのような溶媒中、水（例えば１当量）をクロロスルホニルイソシアネート１（例えば１当量）に加え、−２０℃のような低温で維持し、生じた溶液を０℃に加温することによって、インサイチュー(in situ)で製造されうる。この溶液に、塩基（例えば無水トリエチルアミン（例えば１当量）を加え、続いてアミン（例えば１当量）を加える。次いで反応混合物を室温に加温し、濾過し、濾液を濃縮して、目的のスルファミド（３）を得る。
【００９２】
反応式Ｘで定義する合成経路に従って、スルファミドを式（Ｉ）の化合物に組み入れてもよい。その中で、カルボン酸のＰ１要素（１）を、ＣＤＩのような活性化剤で処理する。分離フラスコにおいて、強塩基を上記のスルファミドの溶液に加え、生じた反応混合物を数時間攪拌し、その後、この反応混合物を、活性化カルボン酸を入れたフラスコに加えて、アシルスルファミド誘導体（２）を得る。２のような中間体を、本明細書に記載するように、式（Ｉ）の化合物に変換してもよい。
反応式Ｘ
【化１４】
2010510234.tif 000019
【００９３】
またアシルスルファミド誘導体を、反応式ＸＩで定義する１段階の方法で、トリペプチドカルボン酸から製造してもよいことは留意されるべきである。
反応式ＸＩ
【化１５】
2010510234.tif 000020
【００９４】
式（Ｉ）の化合物を生成するのに利用されるＰ１要素は、一部の例では市販品として入手可能であるが、そうでなければ、当業者に知られている方法を用いて、かつこれらに限らないが、本明細書に記載した意図で合成され、続いて本明細書に記載した方法を用いて式（Ｉ）の化合物に組み入れられる。置換Ｐ１シクロプロピルアミノ酸を、反応式ＸＩＩで概説する一般的な方法に従って合成してもよい。
【００９５】
塩基生成物の存在下、市販品として入手可能なまたは容易に合成されるイミン（１）を、１，４−ジハロブテン（２）で処理することによって、イミン（３）が得られる。次いで化合物（３）の酸加水分解によって、主要生成物として、カルボキシル基に対してシン(syn)のアリル置換基を有する化合物（４）が得られる。化合物（４）のアミン部分はＢｏｃ基を用いて保護されて、完全に保護されたアミノ酸（５）を与えうる。この中間体はラセミ体であり、化合物（５）のエステル部分がプロテアーゼによって開裂されて対応するカルボン酸を得る酵素的方法により、分割されうる。いずれの特定の理論にも拘束されず、エナンチオマーの一つがその鏡像体よりも著しく大きな速度でその反応を受け、中間体であるラセミ体の速度論的分割をもたらすという点で、この反応が選択的であると信じられている。本明細書で列挙された例の態様において、式（Ｉ）の化合物に組み込むための立体異性体は、（１Ｒ，２Ｓ）立体化学を提供する化合物（５ａ）である。酵素の存在下、このエナンチオマーはエステル開裂を受けず、そのためこのエナンチオマー（５ａ）は反応混合物から回収される。しかしながら、（１Ｓ，２Ｒ）立体化学を提供する他のエナンチオマー（５ｂ）は、エステル開裂、すなわち、加水分解を受けて、遊離の酸（６）を提供する。この反応が完了すると、エステル（５ａ）は、慣用の方法、例えば水抽出法またはクロマトグラフィーによって、酸生成物（６）から分離されうる。
反応式ＸＩＩ
【化１６】
2010510234.tif 000021
【００９６】
Ｐ２中間体および式（Ｉ）の化合物を作製するための非限定的な手順を、下記のスキームにおいて示す。前記中間体、反応条件および具体例において示す方法は、他の置換パターンを有する化合物に広く適用することができる。例えば、スキームＸＩＩＩの式（Ｉ）の化合物において見い出されるＰ２成分の合成は、明確な合成経路に従って調製することができる。そこにおいては、容易に得られるか、または市販品として入手可能なＮ−Ｂｏｃ−４−オキソ−Ｌ−プロリン、またはＮ−Ｃｂｚ−４−オキソ−Ｌ−プロリンを、グリニャール試薬（あるいは、アルキルまたはアリールリチウム種、あるいは、アルキルまたはアリール亜鉛種）などの有機金属剤で処理し、プロリンのＣ４位がＲ3置換基および遊離の第三級ヒドロキシ基を有する中間体（２）を提供する。次いで、中間体（２）のアルコール官能基を官能化して、所望のＲ8官能基を提供することができる。この工程において、中間体（２）のアルコールは、一連の当技術分野で十分に確立した反応に関与することができる。例えば、（２）のアルコールは、アシル化され、エステル、カルバメートまたはカルボネートを提供することができ；アルキル化され、エーテルを提供することができ、ホスホン化され、ホスフェートを提供することができる。スキームＸＩＩＩの中間体（２）の中間体（３）への変換のために、示されているように（２）のカルボン酸基を最初に保護することが必要な場合がある。
【００９７】
アルコールの官能化のための化学反応は、Ｒｉｃｈａｒｄ  ＬａｒｏｃｋによるComprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations. Second Additionなどのこのテーマについての標準的なテキストに記載されている。このテキストは、Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓによって出版されている。そこにおいては、当業者がスキームＸＩＩＩの中間体（２）の中間体（３）への変換のために容易に用いることができる特定の参照文献および概説が強調されている。例えばアルコールからのエーテルの形成のための条件および適切な参照文献は、Ｌａｒｏｃｋのテキストの８８３〜９２９ページに見い出すことができる。さらに具体的には、８９０〜８９４ページに引用されている条件および参照文献は、本開示の実施の構築のために最も適切である。アルコールを対応するエステル誘導体へ変換するための同様の条件は、Ｌａｒｏｃｈのテキストの１９５２〜１９５５ページに見い出すことができる。さらに、Journal of Organic Chemsitry 2001, volume 66, page 8926およびそこに引用されている適切な参照文献に記載されている化学反応は、本開示の実施の構築のために有用である。
反応式ＸＩＩＩ
【化１７】
2010510234.tif 000022
【化１８】
2010510234.tif 000023
【００９８】
反応式ＸＩＩＩで描いた式（Ｉ）の化合物の合成への別のアプローチを、反応式ＸＩＶに示す。後半のステップの中間体（５）へのグリニャール付加によって、プロリン基のＣ４位を官能基化して、中間体６が得られ、次いでそれを式（Ｉ）の化合物に変換してもよい。中間体（５）は、市販品として入手可能な中間体（１）から開始する４段階の手順で得られ、その第１ステップには、化合物（１）を、当該技術分野で確立したＰ１−Ｐ１｀中間体カップリング試薬とカップリングさせることが含まれる。中間体（２）のＮ−Ｂｏｃ基の酸触媒による脱保護によって、遊離のアミン中間体（３）が得られ、続いてそれをＰ３−Ｐ４断片とカップリングさせて、中間体（４）が得られる。中間体（４）におけるＣ４ヒドロキシ基を選択的に酸化して中間体（５）を得ることは、酸化剤、例えばデス・マーチン試薬を用いて遂行されうる。
反応式ＸＩＶ
【化１９】
2010510234.tif 000024
【００９９】
プロリン誘導体１のケトン部分（スキームＸＶＩ）への有機金属剤の添加は、当技術分野で十分に確立していることに留意すべきである。例えば、Ｈｒｕｂｙおよび共同研究者（J. Org. Chem. 2001, 66, 3593）は、臭化フェニルマグネシウムの一般構造１の中間体（スキームＸＶＩ）への添加について記載している。これらの知見は、ｔｅｒｔ−ブチルエステル基をＣ２カルボキシル部分の保護基として用いる場合、所望の１，２付加生成物（スキームＸＶＩの２）の最適収率が得られるという証拠を提供する。さらに、この著作物は、この付加反応の立体化学的な結果についてＸ線結晶構造解析の形態で明らかな証拠を提供した。具体的には、ケトン１への上記のグリニャール添加の結果として、Ｃ４ヒドロキシル基およびＣ２カルボキシル基が５員環の周りでシンの相対的配向をとる単一の生成物を得た。この構造決定から、Ｒ3Ｍの１のケトンへの付加における面選択性は、スキームＸＶＩの構造１においてαであると推定された。すなわち、有機金属は、選択的に１中のカルボニルのｒｅ面（底面）に添加され、示された立体化学を有する相当する第三級アルコール（２）を提供する。
反応式ＸＶＩ
【化２０】
2010510234.tif 000025
【０１００】
Ｈｒｕｂｙの上記の著作物は、特定のグリニャール試薬の１の誘導体への添加を記載している（スキームＸＶＩ）。しかし、種々のグリニャール試薬のプロリン１への添加は、本開示に例示される。グリニャール試薬を含めた有機金属剤のケトンへの添加について記載した文献は、多数あり、Comprehensive Organic Functional Group Transformations. Volume 2: Synthesis: Carbon with one heteroatom attached by a single bond. Editor in Chief Alan. R. Katritzky, et al.1995. Chapter 2.02, page 37など当技術分野で総括して要約されている。このクラスの反応はまた、Comprehensive Organic Synthesis. Editor in Chief Barry M Trost, Volume 1: Additions to C-X pi-bonds (part 1). 1991に記載されている。
【０１０１】
当技術分野の最近の研究は、ケトンへの付加反応におけるグリニャール試薬のさらなる最適化のための条件を提供し、これらの著作物は、本開示において有用である場合がある。例えばＩｓｈｉｈａｒａおよび共同研究者（Org. Lett. 2005, Vol. 7, No. 4, 573）は最近、マグネシウムアート錯体の形成および有用性について記載した。マグネシウムアート錯体であるＲ3ＭｇＬｉは、グリニャール試薬およびアルキルリチウムに由来する。Ｉｓｈｉｈａｒａによって記載されているように、これらの錯体は、ケトンに対する反応において１，２付加生成物の優れた収率を実現する。別の研究において、Ｋｎｏｃｈｅｌおよび共同研究者（Angew. Chem Int. Ed. 2006, 45, 497）は、有機マグネシウム試薬と併せたＬｎＣｌ3などの可溶性ランタニド塩の使用を記載している。これらのランタニド塩が存在することによって、カルボニル化合物への１，２付加反応の効率の改善をもたらす。これらの著作物、およびそこにおいて引用されている参照文献は、カルボニル化合物への単純な付加におけるグリニャール反応の最適化に関して現況技術を確立し、本開示における重要な情報源として役立つ。
【０１０２】
一連の有機金属反応剤は、ケトンへの付加反応に関与することにも留意すべきである。この著作物において含まれるのは、１，２様式でカルボニル部分に添加されることが周知である、アリールリチウム、アルキルリチウムおよびヘテロアリールリチウム試薬などの試薬である。例えば、Ｄｏｎｄｏｎｉおよび共同研究者による最近の研究（J. Org. Chem. 2005, 70, 9257）において、ＢｕＬｉを使用してベンゾチアゾールをリチウム化し、このように得られたＣ２−リチウム種を、１，２様式でラクトンに加える。類推によると、リチウム化ベンゾチアゾールは、１，２様式でスキームＸＶＩのケトン１に添加され、２ａなどの中間体を提供することが予想される。
【０１０３】
オキサゾールおよびチアゾールおよびイミダゾールなどのヘテロ環由来の有機金属反応剤はまた、ケトン１への１，２付加反応に関与できることを当業者であれば理解するであろう。これらのヘテロ環系のそれぞれのために用いられる固有の条件を定義する多数の文献があり、当業者はこの情報を容易に利用できる。例えば、ケトンへの付加反応におけるベンゾオキサゾールまたはオキサゾール由来の有機金属反応剤の使用は、マグネシウム酸リチウムの使用を必要とする。Ｂａｙｈおよび共同研究者によるこの最近の研究の詳細は、J. Org. Chem., 2005, 70, 5190に記載されている。スキームＸＶＩのケトン１へのベンゾオキサゾールの添加によって、２ｂなどの中間体へのアクセスを可能にする。
【０１０４】
ヘテロ環由来の広範囲の有機金属反応剤を使用したケトンへの添加については、重要な文献の前例がある。例えば、Ｂｅｈｉｎｄａおよび共同研究者の著作物（Tet. Lett. 42, 2001, 647）は、リチウム化ベンズイミダゾールの形成および単純なラクトンへのその添加について記載している。類推によると、スキームＸＶＩのケトン１への付加反応におけるこのリチウム化ベンズイミダゾールの使用は、２ｃなどの中間体へのアクセスを可能にする。さらに、Ｋａｗａｓａｋｉおよび共同研究者による最近の研究（Bioorganic and Medicinal Chem. Lett. 13, 2003, 87）は、一連のリチウム化ヘテロ芳香族化合物の形成および活性化アミドへのそれらの付加反応について記載している。類推によると、スキームＸＶＩのケトン１への付加反応におけるこれらのリチウム化ヘテロ芳香族中間体の使用は、中間体２ｄ〜２ｋへのアクセスを可能にする。
【０１０５】
ケトン１への１，２付加反応においてビアリール、またはヘテロアリール−アリール系由来の有機金属を使用することはまた、本開示に対して適切である。このクラスの有機金属反応剤のケトン１への添加は、２ｌおよび２ｍなどの中間体へのアクセスを可能にする。本開示の例示において、スキームＸＶＩのケトン１への付加反応において続いて使用するためのビアリール、またはヘテロ−アリール有機金属を合成することが必要である場合があることに留意すべきである。当業者であれば、このタイプの有機金属およびその前駆体の調製について記載している重要な文献を理解するであろう。例えば、Ｃｈｉｎｃｈｉｌｌａおよび共同研究者による最近の概説（Chem. Rev. 2004, 104, 2667）は、金属化ヘテロ環の調製およびそれらの利用について記載している。ビアリールまたはヘテロアリール−アリール系の調製のための基本的な化学反応は、鈴木様カップリング反応を用いる場合が多い。Ｇｒｅｇｏｒｙ  Ｆｕによって発表された文献は、このようなカップリング反応における現況技術について記載し、これらの参照文献のサブセットは以下の通りである。JACS 2004, 126, 1340; JACS, 2002, 124, 13662; Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, No.11, 1945; Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, No.20, 3910; JACS 2002, 122, 4020; JACS 2001, 123, 10099; Org. Lett. 2001, Vol. 3, No. 26, 4295; Angew. Chem. Int. Ed. 1998, 37, No.24, 3387。この著作物に加えて、この領域における重要な概説は、ＲｏｓｓｉによるSynthesis 2004, No.15, 2419など容易に利用可能である。
【０１０６】
（実施例）
以下に本開示を一定の実施形態に関して説明するが、これらは本開示の範囲を限定しようとするものではない。それどころか、本開示は、請求項の範囲に含まれうる全ての代替物、変形、および均等物を包含する。したがって、具体的実施形態を含む実施例を以下に挙げて本開示の実施の一例を示すが、これらの実施例は一定の実施形態を例証するためのものであって、その手法および概念的態様の最も有用ありかつ容易に理解される説明であると考えられるものを提供するために提示されるものであると理解される。
【０１０７】
別段の明記がない限り、溶液のパーセンテージは重量対体積の関係を表し、溶液比は体積対体積の関係を表す。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルはＢｒｕｋｅｒ ３００、４００または５００ＭＨｚ分光計で記録されたものであり、化学シフト（δ）を百万分率（ｐｐｍ）で報告する。フラッシュクロマトグラフィーは、Ｓｔｉｌｌのフラッシュクロマトグラフィー技法（J. Org. Chem. 1978, 43, 2923）に従って、シリカゲル（ＳｉＯ2）で行った。
【０１０８】
本明細書に記載の実施例で説明する中間体を利用して、式１の化合物を合成することができる。
【実施例１】
【０１０９】
P1'中間体の製造
1．シクロプロピルスルホンアミドの製造
方法1：
【化２１】
2010510234.tif 000026
スキーム１
【化２２】
2010510234.tif 000027
ステップ１：
ｔｅｒｔ-ブチルアミン（３.０ｍｏｌ、３１５ｍＬ）をＴＨＦ（２.５Ｌ）に溶解した。その溶液を-２０℃まで冷却した。３-クロロプロパンスルホニルクロリド（１.５ｍｏｌ、１８２ｍＬ）をゆっくり加えた。反応混合物を室温まで温まらせ、２４時間撹拌した。その混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をＣＨ2Ｃｌ2（２.０Ｌ）に溶解した。その結果生じた溶液を１.０Ｍ ＨＣｌ（１.０Ｌ）、水（１.０Ｌ）、およびブライン（１.０Ｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して得たわずかに黄色い固形物を、ヘキサンから結晶化することにより、生成物を白色固形物（３１６.０ｇ、９９％）として得た。1H NMR (CDCl3) δ 1.38 (s, 9H), 2.30-2.27 (m, 2H), 3.22 (t, J=7.35Hz, 2H), 3.68 (t, J=6.2Hz, 2H), 4.35 (b, 1H).
【０１１０】
ステップ２：
ステップ１の生成物（２.１４ｇ、１０.０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液にｎ-ＢｕＬｉ（２.５Ｍヘキサン溶液、８.０ｍＬ、２０.０ｍｍｏｌ）を-７８℃で加えた。反応混合物を１時間かけて室温まで温まらせ、減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルと水（各２００ｍＬ）に分配した。分離した有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサンから再結晶することにより、所期の生成物を白色固形物（１.０ｇ、５６％）として得た。1H NMR (CDCl3) δ 0.98-1.00 (m, 2H), 1.18-1.19 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 2.48-2.51 (m, 1H), 4.19 (b, 1H).
【０１１１】
ステップ３：
ステップ２の生成物（１１０ｇ、０.６２ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（５００ｍＬ）溶液を室温で１６時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチル／ヘキサン（６０ｍＬ／２４０ｍＬ）から再結晶することにより、所期の生成物を白色固形物（６８.５ｇ、９１％）として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 0.84-0.88 (m, 2H), 0.95-0.98 (m, 2H), 2.41-2.58 (m, 1H), 6.56 (b, 2H).
【０１１２】
方法２：
【化２３】
2010510234.tif 000028
０℃まで冷却したＴＨＦ １００ｍＬの溶液に、飽和に達するまで、アンモニアガスをバブリングした。この溶液に、シクロプロピルスルホニルクロリド（Ａｒｒａｙ Ｂｉｏｐｈａｒｍａから購入）５ｇ（２８.４５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を加えた。その溶液を一晩、室温まで温め、さらに１日撹拌した。その混合物を溶媒が残り１〜２ｍＬになるまで濃縮し、３０ｇのＳｉＯ2プラグ（３０％-６０％酢酸エチル／ヘキサン類で溶出）に注ぐことにより、３.４５ｇ（１００％）のシクロプロピルスルホンアミドを白色固形物として得た。1H NMR (メタノール-d4) δ 0.94-1.07 (m, 4H), 2.52-2.60 (m, 1H); 13C NMR (メタノール-d4) δ 5.92, 33.01.
【０１１３】
２．Ｃ１-置換シクロプロピルスルホンアミド類の製造
２ａ．Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-メチル)シクロプロピル-スルホンアミドの製造
【化２４】
2010510234.tif 000029
ステップ１：Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(３-クロロ)プロピルスルホンアミドの製造
【化２５】
2010510234.tif 000030
上述のように製造した。
【０１１４】
ステップ２：Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-メチル)シクロプロピル-スルホンアミドの製造
【化２６】
2010510234.tif 000031
ステップ１の生成物（４.３ｇ、２０ｍｍｏｌ）の溶液を乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、-７８℃まで冷却した。この溶液にｎ-ブチルリチウム（１７.６ｍＬ、４４ｍｍｏｌ、２.５Ｍヘキサン溶液）をゆっくり加えた。ドライアイス浴を取り除き、１.５時間かけて反応混合物を室温まで温めた。この混合物を-７８℃に冷却し、ｎ-ブチルリチウムの溶液（２０ｍｍｏｌ、８ｍＬ、２.５Ｍヘキサン溶液）を加えた。反応混合物を室温まで温め、２時間かけて-７８℃まで冷却し、ヨウ化メチルのニート溶液（５.６８ｇ、４０ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を一晩、室温まで温めた後、室温において飽和ＮＨ4Ｃｌ（１００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下で濃縮して得た黄色油状物を、ヘキサンから結晶化することにより、所期の生成物をわずかに黄色い固形物（３.１ｇ、８１％）として得た：1H NMR (CDCl3) δ 0.79 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.52 (m, 2H), 1.62 (s, 3H), 4.10 (br s, 1H).
【０１１５】
ステップ３：１-メチルシクロプロピルスルホンアミドの製造
【化２７】
2010510234.tif 000032
ステップ２の生成物（１.９１ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液をＴＦＡ（３０ｍＬ）に溶解し、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して得た黄色油状物を酢酸エチル／ヘキサン（１：４、４０ｍＬ）から結晶化することにより、所期の生成物を白色固形物（１.２５ｇ、９６％）として得た：1H NMR (CDCl3) δ 0.84 (m, 2H), 1.41 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 4.65 (br s, 2H)．元素分析（C4H9NO2Sとして）計算値：C, 35.54; H, 6.71; N, 10.36．実測値：C, 35.67; H, 6.80; N, 10.40.
【０１１６】
２ｂ．１-プロピルシクロプロピルスルホンアミドの製造
【化２８】
2010510234.tif 000033
この化合物は、１-メチルシクロプロピルスルホンアミドの製造について説明した手法を使用し、このプロセスの第２ステップにおいてヨウ化メチルの代わりにプロピルハライドを使用することによって製造した。
【０１１７】
２ｃ．１-アリルシクロプロピルスルホンアミドの製造
【化２９】
2010510234.tif 000034
ステップ１：Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-アリル)シクロプロピルスルホンアミドの製造
【化３０】
2010510234.tif 000035
この化合物は、１.２５当量の臭化アリルを求電子剤として使用することにより、Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-メチル)シクロプロピルスルホンアミドの合成で説明した手法に従って、９７％の収率で得た。この化合物は、これ以上精製せずに次の反応に使用した：1H NMR (CDCl3) δ 0.83 (m, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.37 (m, 2H), 2.64 (d, J=7.3Hz, 2H), 4.25 (br s, 1H), 5.07-5.10 (m, 2H), 6.70-6.85 (m, 1H).
【０１１８】
ステップ２：１-アリルシクロプロピルスルホンアミドの製造
【化３１】
2010510234.tif 000036
この化合物は、１-メチルシクロプロピルスルホンアミドの合成で説明した手法に従って、ステップ１の生成物から４０％の収率で得た。溶離液として２％メタノール／ジクロロメタンを用いるＳｉＯ2でのカラムクロマトグラフィーによって化合物を精製した：1H NMR (CDCl3) δ 0.88 (m, 2H), 1.37 (m, 2H), 2.66 (d, J=7.0Hz, 2H), 4.80 (s, 2H), 5.16 (m, 2H), 5.82 (m, 1H); 13C NMR (CDCl3) δ 11.2, 35.6, 40.7, 119.0, 133.6.
【０１１９】
２ｄ．１-ベンジルシクロプロピルスルホンアミドの製造
【化３２】
2010510234.tif 000037
ステップ１：Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-ベンジル)シクロプロピル-スルホンアミドの製造
【化３３】
2010510234.tif 000038
この化合物は、１.０５当量の臭化ベンジルを使用した後、１０％酢酸エチル／ヘキサンで摩砕した点を除き、Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-メチル)シクロプロピルスルホンアミドの合成について説明した手法を使って、６０％の収率で得た：1H NMR (CDCl3) δ 0.92 (m, 2H), 1.36 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 3.25 (s, 2H), 4.62 (br s, 1H), 7.29-7.36 (m, 5H).
【０１２０】
ステップ２：１-ベンジルシクロプロピルスルホンアミドの製造
【化３４】
2010510234.tif 000039
この化合物は、１-メチルシクロプロピルスルホンアミドの合成について説明した手法を使用し、次に最少量の１０％酢酸エチル／ヘキサンから再結晶することにより、Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル(１-ベンジル)シクロプロピルスルホンアミドから６６％の収率で得た：1H NMR (CDCl3) δ 0.90 (m, 2H), 1.42 (m, 2H), 3.25 (s, 2H), 4.05 (s, 2H), 7.29 (m, 3H), 7.34 (m, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 11.1, 36.8, 41.9, 127.4, 128.8, 129.9, 136.5.
【０１２１】
２ｅ．１-(１-シクロヘキセニル)シクロプロピル-スルホンアミドの製造
【化３５】
2010510234.tif 000040
ステップ１：Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-[１-(１-ヒドロキシ)シクロヘキシル]-シクロプロピルスルホンアミドの製造
【化３６】
2010510234.tif 000041
この化合物は、１.３０当量のシクロヘキサノンを使用した点以外はＮ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-メチル)シクロプロピルスルホンアミドの合成について説明した手法を使用し、次に最少量の２０％酢酸エチル／ヘキサンから再結晶することにより、８４％の収率で得た：1H NMR (CDCl3) δ 1.05 (m, 4H), 1.26 (m, 2H), 1.37 (s, 9H), 1.57-1.59 (m, 6H), 1.97 (m, 2H), 2.87 (br s, 1H), 4.55 (br s, 1H).
【０１２２】
ステップ２：１-(１-シクロヘキセニル)シクロプロピル-スルホンアミドの製造
【化３７】
2010510234.tif 000042
この化合物１-(１-シクロヘキセニル)-シクロプロピルスルホンアミドは、１-メチルシクロプロピルスルホンアミドの合成について説明した手法を使用し、次に最少量の酢酸エチルおよびヘキサンから再結晶することにより、Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-[１-(１-ヒドロキシ)シクロヘキシル]-シクロプロピルスルホンアミドから８５％の収率で得た：1H NMR (DMSO-d6) δ 0.82 (m, 2H), 1.28 (m, 2H), 1.51 (m, 2H), 1.55 (m, 2H), 2.01 (s, 2H), 2.16 (s, 2H), 5.89 (s, 1H), 6.46 (s, 2H); 13C NMR (DMSO-d6) δ 11.6, 21.5, 22.3, 25.0, 27.2, 46.9, 131.6, 132.2; LR-MS (ESI): 200 (M+-1).
【０１２３】
２ｆ．１-ベンゾイルシクロ-プロピルスルホンアミドの製造
【化３８】
2010510234.tif 000043
ステップ１：Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-ベンゾイル)シクロプロピル-スルホンアミドの製造
【化３９】
2010510234.tif 000044
この化合物は、１.２当量の安息香酸メチルを求電子剤として使用した点以外はＮ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-メチル)シクロプロピルスルホンアミドの合成について説明した手法を使って、６６％の収率で得た。３０％-１００％ジクロロメタン／ヘキサンを用いるＳｉＯ2でのカラムクロマトグラフィーによって化合物を精製した：1H NMR (CDCl3) δ 1.31 (s, 9H), 1.52 (m, 2H), 1.81 (m, 2H), 4.16 (br s, 1H), 7.46 (m, 2H), 7.57 (m, 1H), 8.05 (d, J=8.5Hz, 2H).
【０１２４】
ステップ２：１-ベンゾイルシクロ-プロピルスルホンアミドの製造
【化４０】
2010510234.tif 000045
この化合物は、１-メチルシクロプロピルスルホンアミドの合成について説明したプロセスを使用し、次に最少量の酢酸エチル／ヘキサンから再結晶することにより、Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル(１-ベンゾイル)シクロプロピルスルホンアミドから８７％の収率で得た：1H NMR (DMSO-d6) δ 1.39 (m, 2H), 1.61 (m, 2H), 7.22 (s, 2H), 7.53 (t, J=7.6Hz, 2H), 7.65 (t, J=7.6Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.2Hz, 2H); 13C NMR (DMSO-d6) δ 12.3, 48.4, 128.1, 130.0, 133.4, 135.3, 192.0.
【０１２５】
２ｇ．Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-フェニルアミノカルボキシ)-シクロプロピルスルホンアミドの製造
【化４１】
2010510234.tif 000046
この化合物は、１当量のフェニルイソシアネートを使って、Ｎ-ｔｅｒｔ-ブチル-(１-メチル)シクロプロピルスルホンアミドの合成について説明した手法を使用し、次に最少量の酢酸エチル／ヘキサンから再結晶することにより、４２％の収率で得た。1H NMR (CDCl3) δ 1.38 (s, 9H), 1.67-1.71 (m, 4H), 4.30 (br s, 1H), 7.10 (t, J=7.5Hz, 1H), 7.34 (t, J=7.5Hz, 2H), 7.53 (t, J=7.5Hz, 2H).
【０１２６】
３．Ｃ１-置換シクロプロパンスルホンアミド類の製造：Ｎ-Ｂｏｃ保護基の使用
３ａ．Ｃ１-置換シクロプロピルスルホンアミド類の製造におけるキー中間体であるシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートの製造
【化４２】
2010510234.tif 000047
ステップ１：３-クロロプロピルスルホンアミドの製造
【化４３】
2010510234.tif 000048
３-クロロプロパンスルホニルクロリド（５５ｇ、３１０.７ｍｍｏｌ）の溶液をＴＨＦ（２００ｍＬ）に溶解し、ＮＨ4ＯＨ（２００ｍＬ）の溶液に、０℃で、３０分かけて滴下した。反応混合物を室温まで温め、１時間撹拌し、水層をジクロロメタン（５００ｍＬ×４）で抽出した。合わせた抽出物を１Ｎ ＨＣｌ（１５０ｍＬ）、水（１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗固形物を最少量のジクロロメタン／ヘキサン類から再結晶することにより、所期の生成物を白色固形物（４５.３ｇ、９３％）として得た。1H NMR (CDCl3) δ 2.34 (m, 2H), 3.32 (t, J=7.3Hz, 2H), 3.70 (t, J=6.2Hz, 2H), 4.83 (s, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 27.10, 42.63, 52.57.
【０１２７】
ステップ２：３-クロロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートの製造
【化４４】
2010510234.tif 000049
ステップ１の生成物（３０.２ｇ、１９１.５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３０.２ｍＬ、２１７.０ｍｍｏｌ）、および４-ＤＭＡＰ（２.４０ｇ、１９.６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３５０ｍＬ）溶液に、０℃で、ジ-ｔｅｒｔ-ブチルジカーボネート（４７.２ｇ、２１６.９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５０ｍＬ）溶液を、３０分かけて滴下した。反応混合物を室温まで温め、さらに３時間撹拌し、１Ｎ ＨＣｌ（３００ｍＬ）、水（３００ｍＬ）、およびブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮することにより、粗生成物を得た。この物質を７０ｍＬの５％ジクロロメタン／ヘキサン類で摩砕することにより、所期の生成物をオフホワイトの固形物（４７.２ｇ、９６％）として得た：1H NMR (CDCl3) δ 1.51 (s, 9H), 2.33 (m, 2H), 3.60 (t, J=7.3Hz, 2H), 3.68 (t, J=6.21Hz, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 26.50, 27.95, 42.37, 50.40, 84.76, 149.53.
【０１２８】
ステップ３：シクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートの製造
【化４５】
2010510234.tif 000050
ｎ-ブチルリチウムの溶液（７４.７ｍＬ、１１９.５ｍｍｏｌ、１.６Ｍヘキサン溶液）を乾燥ＴＨＦ（１０５ｍＬ）に溶解し、アルゴン雰囲気下で-７８℃まで冷却した。この溶液に、ステップ２の生成物（１４ｇ、５４.３ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１０５ｍＬ）溶液を２０〜３０分かけて滴下した。ドライアイス浴を取り除き、反応混合物を２時間かけて室温まで温まらせた。反応混合物を氷酢酸（３.４ｍＬ）でクエンチし、減圧下で濃縮し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）に分配した。有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下で濃縮することにより、所期の生成物をロウ状のオフホワイト固形物（１２.０８ｇ、１００％）として得た：1H NMR (CDCl3) δ 1.10 (m, 2H), 1.34 (m, 2H), 1.50 (s, 9H), 2.88 (m, 1H), 7.43 (s, 1H). 13C NMR (CDCl3) δ 6.21, 28.00, 31.13, 84.07, 149.82.
【０１２９】
３ｂ．１-メトキシ-メチルシクロプロピル-スルホンアミドの製造
ステップ１：１-メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートの製造
【化４６】
2010510234.tif 000051
-７８℃まで冷却したＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解したシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメート（１.０ｇ、４.５ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎ-ブチルリチウム（６.４ｍＬ、１０.２ｍｍｏｌ、１.６Ｍヘキサン溶液）を加え、その反応混合物を１時間撹拌した。この溶液にクロロメチルメチルエーテル（０.４０ｍＬ、５.２４ｍｍｏｌ）のニート溶液を加え、その混合物をゆっくりと室温まで一晩温まらせた。溶液ｐＨを１Ｎ ＨＣｌ水溶液で３に調節してから、酢酸エチル（各５０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮したところ、１-メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートが、ロウ状の固形物（１.２０ｇ、１００％）として得られ、それを、これ以上精製せずに次の反応にそのまま使用した：1H NMR (CDCl3) δ 1.03 (m, 2H), 1.52 (s, 9H), 1.66 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 7.54 (s, 1H); 13C NMR (CDCl3) δ 11.37, 28.29, 40.38, 58.94, 73.43, 83.61, 149.57.
【０１３０】
ステップ２：１-メトキシメチルシクロプロピルスルホンアミドの製造
【化４７】
2010510234.tif 000052
１-メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメート（１.１４ｇ、４.３０ｍｍｏｌ）の溶液を５０％ＴＦＡ／ジクロロメタンの溶液（３０ｍＬ）に溶解し、室温で１６時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＳｉＯ2 ８０ｇでのクロマトグラフィー（０％-６０％酢酸エチル／ヘキサン類で溶出）にかけることにより、１-メトキシメチルシクロプロピルスルホンアミドを白色固形物（０.５５ｇ、２ステップ全体で７７％）として得た：1H NMR (CDCl3) δ 0.95 (m, 2H), 1.44 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.65 (s, 2H), 4.85 (s, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 11.17, 40.87, 59.23, 74.80; LRMS m/z 183 (M++NH4).
【０１３１】
３ｃ．１-シクロプロピルメチルシクロプロピルスルホンアミドの製造
【化４８】
2010510234.tif 000053
ステップ１：１-シクロプロピルメチルシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートの製造
【化４９】
2010510234.tif 000054
１-シクロプロピルメチルシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートを、１.１０当量のシクロプロピルメチルブロミドを求電子剤として使用した点以外は１-メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートの合成で説明した手法に従って、９２％の収率で得た。この化合物はこれ以上精製せずに次の反応にそのまま使用した：1H NMR (CDCl3) δ 0.10 (m, 2H), 0.51 (m, 2H), 0.67 (m, 1H), 1.10 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.62 (m, 2H), 1.87 (d, J=7.0Hz, 2H).
【０１３２】
ステップ２：１-シクロプロピルメチル-シクロプロピルスルホンアミドの製造
【化５０】
2010510234.tif 000055
この化合物は、１-メトキシメチルシクロプロピルスルホンアミドの合成について説明した手法に従って、１-シクロプロピルメチルシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートから６５％の収率で得た。０％-６０％酢酸エチル／ヘキサン類を溶離液として用いるＳｉＯ2でのカラムクロマトグラフィーによって、化合物を精製した：1H NMR (CDCl3) δ 0.15 (m, 2H), 0.51 (m, 2H), 1.01 (m, 2H), 1.34 (m, 3H), 1.86 (d, J=7.0Hz, 2H), 4.83 (s, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 4.65, 7.74, 11.26, 35.62, 41.21; LRMS m/z 193 (M++NH4).
【０１３３】
３ｄ．１-プロピルカルバモイルシクロプロパン-スルホンアミドの製造
【化５１】
2010510234.tif 000056
ステップ１：１-プロピルカルバモイルシクロプロパンスルホンアミドｔｅｒｔ-ブチルカルバメートの製造
【化５２】
2010510234.tif 000057
この化合物は、１.１０当量のｎ-プロピルイソシアネートを求電子剤として使用した点以外は１-メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチル-カルバメートの合成について説明した手法に従って、１００％の粗収率で得た。この化合物はこれ以上精製せずに次の反応にそのまま使用した：
1H NMR (CDCl3) δ 0.10 (m, 2H), 0.51 (m, 2H), 0.67 (m, 1H), 1.10 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.62 (m, 2H), 1.87 (d, J=7.0Hz, 2H).
【０１３４】
ステップ２：１-プロピルカルバモイルシクロプロパン-スルホンアミドの製造
【化５３】
2010510234.tif 000058
この化合物は、最少量のジクロロメタン／ヘキサン類から再結晶させたのでクロマトグラフィーを使用しなかった点以外は、１-メトキシメチルシクロプロピルスルホンアミドの合成について説明した手法に従って、１-プロピルカルバモイルシクロプロパンスルホンアミドｔｅｒｔ-ブチルカルバメートから５０％の収率で得た：1H NMR (CDCl3) δ 0.15 (m, 2H), 0.51 (m, 2H), 1.01 (m, 2H), 1.34 (m, 3H), 1.86 (d, J=7.0Hz, 2H), 4.83 (s, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 4.65, 7.74, 11.26, 35.62, 41.21; LRMS m/z 193 (M++NH4).
【０１３５】
３ｅ．１-(３,５-ジメチルイソオキサゾール-４-イル)カルバモイルシクロプロパンスルホンアミドの製造
【化５４】
2010510234.tif 000059
ステップ１：１-(３,５-ジメチルイソオキサゾール-４-イル)カルバモイルシクロプロパンスルホンアミドｔｅｒｔ-ブチルカルバメートの製造
【化５５】
2010510234.tif 000060
この化合物は、１.２０当量の３,５-ジメチルイソオキサゾール-４-イソシアネートを求電子剤として使用した点以外は１-メトキシメチルシクロプロピルスルホニルアミンｔｅｒｔ-ブチルカルバメートの合成について説明した手法に従って、１００％の粗収率で得た。この化合物はこれ以上精製せずに次の反応にそのまま使用した。
【０１３６】
ステップ２：１-(３,５-ジメチルイソオキサゾール-４-イル)カルバモイルシクロプロパンスルホンアミドの製造
【化５６】
2010510234.tif 000061
この化合物は、１.６２ｇ（４.５２ｍｍｏｌ）の１-(３,５-ジメチルイソオキサゾール-４-イル)カルバモイルシクロ-プロパンスルホンアミドｔｅｒｔ-ブチルカルバメートから、３０ｍＬ（１２０ｍｍｏｌ）の４Ｎ ＨＣｌ／ジオキサン類を使用し、終夜撹拌し、濃縮し、Ｂｉｏｔａｇｅ ４０Ｍカラムでのクロマトグラフィー（０％-５％メタノール／ジクロロメタンで溶出）にかけることにより、５０％の収率（５８０ｍｇ）で得た：1H NMR (メタノール-d4) δ 1.57 (m, 2H), 1.61 (m 2H), 2.15 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 4.84 (s, 3H); 13C NMR (メタノール-d4) δ 9.65, 10.94, 15.01, 46.11, 114.82, 159.45, 165.55, 168.15; LRMS m/z 260 (M++H).
【０１３７】
４．シクロアルキルブロミド類からのシクロアルキルスルホンアミド類の製造
４ａ．シクロブチルブロミドからのシクロブチルスルホンアミドの製造
【化５７】
2010510234.tif 000062
-７８℃まで冷却したシクロブチルブロミド５.０ｇ（３７.０ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（ジエチルエーテル）（３０ｍＬ）溶液に、４４ｍＬ（７４.８ｍｍｏｌ）の１.７Ｍ ｔｅｒｔ-ブチルリチウム／ペンタン類を加えた。その溶液を１.５時間かけてゆっくりと-３５℃まで温めた。この混合物を、-４０℃まで冷却したヘキサン類１００ｍＬ中の新しく蒸留した塩化スルフリル５.０ｇ（３７.０ｍｍｏｌ）の溶液に、導管を通してゆっくり加え、１時間かけて０℃まで温め、注意深く減圧下で濃縮した。この混合物をジエチルエーテルに再溶解し、いくらかの氷冷水で１回洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、注意深く濃縮した。この混合物を２０ｍＬのＴＨＦに再溶解し、５００ｍＬの飽和ＮＨ3／ＴＨＦに滴下し、終夜撹拌しておいた。その混合物を減圧下で濃縮して粗黄色固形物とし、それを、１〜２滴のメタノールを加えた最少量のジクロロメタン／ヘキサン類から再結晶することにより、所期の生成物１.９０ｇ（３８％）を白色固形物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 1.95-2.06 (m, 2H), 2.30-2.54 (m, 4H), 3.86 (p, J=8Hz, 1H), 4.75 (brs, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 16.43, 23.93, 56.29. HRMS m/z (M-H)-.（C4H8NSO2として）計算値：134.0276、実測値134.0282.
【０１３８】
４ｂ．シクロペンチルスルホンアミドの製造
【化５８】
2010510234.tif 000063
２Ｍシクロペンチルマグネシウムクロリドのエーテル溶液１８.５ｍＬ（３７.０ｍｍｏｌ）を、-７８℃まで冷却したヘキサン類１００ｍＬ中の新たに蒸留した塩化スルフリル（Ａｌｄｒｉｃｈから入手したもの）３.０ｍＬ（３７.０ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。その混合物を１時間かけて０℃まで温めてから、注意深く減圧下で濃縮した。この混合物をジエチルエーテル（２００ｍＬ）に再溶解し、いくらかの氷冷水（２００ｍＬ）で１回洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、注意深く濃縮した。この混合物を３５ｍＬのＴＨＦに再溶解し、５００ｍＬの飽和ＮＨ3／ＴＨＦに滴下し、終夜撹拌しておいた。その混合物を減圧下で濃縮して粗黄色固形物とし、溶離液として７０％酢酸エチル-ヘキサン類を使って、残渣を５０ｇのシリカゲル越しに濾過してから、その溶液を濃縮した。残渣を、１〜２滴のメタノールを加えた最少量のジクロロメタン／ヘキサン類から再結晶することにより、所期の生成物２.４９ｇ（４１％）を白色固形物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 1.58-1.72 (m, 2H), 1.74-1.88 (m, 2H), 1.94-2.14 (m, 4H), 3.48-3.59 (m, 1H), 4.80 (br s, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 25.90, 28.33, 63.54; MS m/e 148 (M-H)-.
【０１３９】
４ｃ．シクロヘキシルスルホンアミドの製造
【化５９】
2010510234.tif 000064
ジエチルエーテル中の２Ｍシクロヘキシルマグネシウムクロリド（ＴＣＩ Ａｍｅｒｉｃａｓ）の溶液１８.５ｍＬ（３７.０ｍｍｏｌ）を、-７８℃まで冷却したヘキサン類１００ｍＬ中の新たに蒸留した塩化スルフリル３.０ｍＬ（３７.０ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。その混合物を１時間かけて０℃まで温めてから、注意深く減圧下で濃縮した。この混合物をジエチルエーテル（２００ｍＬ）に再溶解し、いくらかの氷冷水（２００ｍＬ）で１回洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、注意深く濃縮した。この混合物を３５ｍＬのＴＨＦに再溶解し、５００ｍＬの飽和ＮＨ3／ＴＨＦに滴下し、終夜撹拌しておいた。その混合物を減圧下で濃縮して粗黄色固形物とし、溶離液として７０％酢酸エチル-ヘキサン類を使って、残渣を５０ｇのシリカゲル越しに濾過し、濃縮した。その濃縮物を、１〜２滴のメタノールを加えた最少量のジクロロメタン／ヘキサン類から再結晶することにより、所期の生成物１.６６ｇ（３０％）を白色固形物として得た：1H NMR (CDCl3) δ 1.11-1.37 (m, 3H), 1.43-1.56 (m, 2H), 1.67-1.76 (m, 1H), 1.86-1.96 (m, 2H), 2.18-2.28 (m, 2H), 2.91 (tt, J=12, 3.5Hz, 1H), 4.70 (br s, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 25.04, 25.04, 26.56, 62.74; MS m/e 162 (M-1)-.
【０１４０】
４ｄ.ネオペンチルスルホンアミドの製造
【化６０】
2010510234.tif 000065
シクロヘキシルスルホンアミドを製造するための手法に従って、ジエチルエーテル中の０.７５Ｍネオペンチルマグネシウムクロリド（Ａｌｆａ）４９ｍＬ（３７ｍｍｏｌ）を、白色固形物である所期の生成物１.５２ｇ（２７％）に変換した。1H NMR (CDCl3) δ 1.17 (s, 9H), 3.12 (s, 2H), 4.74 (brs, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 29.46, 31.51, 67.38; MS m/e 150 (M-1)-.
【０１４１】
４ｅ．シクロブチルカルビニルスルホンアミドの製造
【化６１】
2010510234.tif 000066
アセトン１５０ｍＬ中のシクロブチルカルビニルブロミド（Ａｌｄｒｉｃｈ）１２.３ｇ（８３ｍｍｏｌ）とヨウ化ナトリウム１３.７ｇ（９１ｍｍｏｌ）の溶液を、終夜加熱還流してから、室温まで冷却した。無機固形物を濾過によって除き、アセトンとヨウ化シクロプロピルカルビニル（８.４１ｇ、４６％）とを蒸留によって取り出した（それぞれ周囲温度および１５０ｔｏｒｒで８０℃）。
【０１４２】
-７８℃まで冷却した無水ジエチルエーテル３０ｍＬ中のヨウ化シクロブチルカルビニル４.０ｇ（２１.９８ｍｍｏｌ）の溶液を、１.３Ｍ ｓｅｃ-ブチルリチウム／シクロヘキサン類溶液１７ｍＬ（２１.９８ｍｍｏｌ）中に導管を通して加え、その溶液を５分間撹拌した。この混合物に、-７８℃まで冷却したヘキサン類１１０ｍＬ中の新たに蒸留した塩化スルフリル３.０ｇ（２１.９８ｍｍｏｌ）の溶液を、導管を通して加え、その混合物を１時間かけて室温まで温めてから、減圧下で注意深く濃縮した。この混合物をジエチルエーテルに再溶解し、いくらかの氷冷水で１回洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、注意深く濃縮した。この混合物を３０ｍＬのＴＨＦに再溶解し、５００ｍＬの飽和ＮＨ3／ＴＨＦに滴下し、終夜撹拌しておいた。その混合物を減圧下で濃縮して粗黄色固形物とし、それを、１〜２滴のメタノールを加えた最少量のジクロロメタン／ヘキサン類から再結晶することにより、所期の生成物１.３９ｇ（４２％）を白色固形物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 1.81-2.03 (m, 4H), 2.14-2.28 (m, 2H), 2.81-2.92 (m, 1H), 3.22 (d, J=7Hz, 2H), 4.74 (brs, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 19.10, 28.21, 30.64, 60.93. MS m/e 148 (M-H)-.
【０１４３】
４ｆ．シクロプロピルカルビニルスルホンアミドの製造
【化６２】
2010510234.tif 000067
シクロブチルカルビニルスルホンアミドの製造に使用した手法を使って、シクロプロピルカルビニルスルホンアミドをシクロプロピルカルビニルブロミド（Ａｌｄｒｉｃｈ）から製造した（JACS 1981, p.442-445も参照されたい）。1H NMR (CDCl3) δ 0.39-0.44 (m, 2H), 0.67-0.76 (m, 2H), 1.13-1.27 (m, 1H), 3.03 (d, J=7.3Hz, 2H), 4.74 (brs, 2H); 13C NMR (CDCl3) δ 4.33, 5.61, 59.93; MS m/e 134 (M-1).
【０１４４】
４ｇ．２-チオフェンスルホンアミドの製造
【化６３】
2010510234.tif 000068
所期の生成物を、２-チオフェンスルホニルクロリド（Ａｌｄｒｉｃｈから購入）から、Justus Liebigs Ann. Chem. 1933, 501, p.174-182に記載の方法を使って製造した。
【０１４５】
４ｈ．４-ブロモベンゼンスルホンアミドの製造
【化６４】
2010510234.tif 000069
市販の４-ブロモスルホニルクロリドを飽和アンモニア／ＴＨＦで処理することにより、４-ブロモフェニルスルホンアミドを製造した。
【０１４６】
５.スルファミド類を製造するための一般手法
【化６５】
2010510234.tif 000070
水（１当量）／ＴＨＦを、ＴＨＦ中のクロロスルホニルイソシアネート（１当量）の冷（-２０℃）撹拌溶液に加え、その結果生じた溶液を０℃まで温まらせることによって、中間体である塩化スルファモイルを製造した。この溶液に無水トリエチルアミン（１当量）を加え、次に必要な２級アミン（１当量）を加えた。反応混合物を室温まで温めてから、濾過し、その濾液を濃縮することにより、所期のスルファミドを得た。
【実施例２】
【０１４７】
Ｐ１中間体の製造
５．１-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノシクロプロパンカルボン酸は市販されている
【化６６】
2010510234.tif 000071
【０１４８】
６．１-アミノシクロブタンカルボン酸メチルエステル塩酸塩の製造
【化６７】
2010510234.tif 000072
１-アミノシクロブタンカルボン酸（１００ｍｇ、０.８６９ｍｍｏｌ）（Ｔｏｃｒｉｓ）を１０ｍＬのメタノールに溶解した。ＨＣｌガスを２時間バブリングした。反応混合物を１８時間撹拌した後、減圧下で濃縮することにより、１４４ｍｇの黄色油状物を得た。１０ｍＬのジエチルエーテルで摩砕することにより、所期の生成物１００ｍｇを白色固形物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 2.10-2.25 (m, 1H), 2.28-2.42 (m, 1H), 2.64-2.82 (m, 4H), 3.87 (s, 3H), 9.21 (br s, 3H).
【０１４９】
７ａ．(１Ｒ,２Ｒ)/(１Ｓ,２Ｓ)１-アミノ-２-エチルシクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ-ブチルエステル（ラセミ混合物）の製造
【化６８】
2010510234.tif 000073
ステップ１：下記２-エチルシクロプロパン-１,１-ジカルボン酸ジ-ｔｅｒｔ-ブチルエステルの製造
【化６９】
2010510234.tif 000074
５０％ＮａＯＨ水溶液（Ｈ2Ｏ １８５ｍＬ中に９２.４ｇ）に懸濁したベンジルトリエチルアンモニウムクロリド（２１.０ｇ、９２.２ｍｍｏｌ）に、１,２-ジブロモブタン（３０.０ｇ、１３８.９ｍｍｏｌ）およびジ-ｔｅｒｔ-ブチルマロネート（２０.０ｇ、９２.５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１８時間激しく撹拌し、氷と水の混合物で処理した。粗生成物をジクロロメタンで抽出し（３回）、水（３回）およびブラインで逐次洗浄した。有機抽出物を合わせ、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下で濃縮した。その結果生じた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（１００ｇ ＳｉＯ2、３％ジエチルエーテル／ヘキサン）で精製することにより、所期の生成物（１８.３ｇ、６７.８ｍｍｏｌ、収率７３％）を得て、それを、そのまま次の反応に使用した。
【０１５０】
ステップ２：下記ラセミ型２-エチルシクロプロパン-１,１-ジカルボン酸ｔｅｒｔ-ブチルエステルの製造
【化７０】
2010510234.tif 000075
ステップ１の生成物（１８.３ｇ、６７.８ｍｍｏｌ）を、乾燥ジエチルエーテル（５００ｍＬ）中のカリウムｔｅｒｔ-ブトキシド（３３.５５ｇ、２９９.０ｍｍｏｌ）の懸濁液に０℃で加え、Ｈ2Ｏ（１.３５ｍＬ、７５.０ｍｍｏｌ）で処理し、室温で終夜、激しく撹拌した。反応混合物を氷と水の混合物に注ぎ込み、ジエチルエーテルで洗浄した（３回）。水層を、０℃において、１０％クエン酸水溶液で酸性ｐＨに調節し、酢酸エチルで抽出した（３回）。合わせた有機層を水（２回）、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下で濃縮することにより、所期の生成物を淡黄色油状物（１０ｇ、４６.８ｍｍｏｌ、収率６９％）として得た。
【０１５１】
ステップ３：下記(１Ｒ,２Ｒ)/(１Ｓ,２Ｓ)２-エチル-１-(２-トリメチルシラニルエトキシカルボニルアミノ)シクロプロパン-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチルエステルの製造
【化７１】
2010510234.tif 000076
乾燥ベンゼン（１６０ｍＬ）に懸濁したステップ２の生成物（１０ｇ、４６.８ｍｍｏｌ）および新たに活性化した４Åモレキュラーシーブ３ｇに、トリエチルアミン（７.５０ｍＬ、５３.８ｍｍｏｌ）およびＤＰＰＡ（１１ｍＬ、１０.２１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３.５時間加熱還流し、２-トリメチルシリルエタノール（１３.５ｍＬ、９４.２ｍｍｏｌ）で処理し、終夜、加熱還流した。反応混合物を濾過し、ジエチルエーテルで希釈し、１０％クエン酸水溶液、水、飽和ＮａＨＣＯ3水溶液、水（２回）、およびブライン（２回）で逐次洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、１２０ｍＬのジクロロメタンに、１０ｇのＡｌｄｒｉｃｈポリイソシアネートスカベンジャー樹脂と共に懸濁し、室温で終夜撹拌し、濾過することにより、所期の生成物（８ｇ、２４.３ｍｍｏｌ；５２％）を淡黄色油状物として得た：1H NMR (CDCl3) δ 0.03 (s, 9H), 0.97 (m, 5H), 1.20 (br m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.40-1.70 (m, 4H), 4.16 (m, 2H), 5.30 (br s, 1H).
【０１５２】
ステップ４：下記(１Ｒ,２Ｒ)/(１Ｓ,２Ｓ)１-アミノ-２-エチルシクロプロパンカルボン酸ｔｅｒｔ-ブチルエステル（ラセミ混合物）の製造
【化７２】
2010510234.tif 000077
ステップ３の生成物（３ｇ、９ｍｍｏｌ）に１.０Ｍ ＴＢＡＦ／ＴＨＦ溶液（９.３ｍＬ、９.３ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を１.５時間加熱還流し、室温まで冷却し、５００ｍＬの酢酸エチルで希釈した。その溶液を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ×２）で逐次洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、減圧下で濃縮することにより、所期の生成物を得た。
【０１５３】
７ｂ．以下に示すようにＰ１ビニルＰ１置換基を持つ式Ｉの化合物を対応する飽和Ｐ１類似体に変換するための一般法
【化７３】
2010510234.tif 000078
ＥｔＯＡｃ約１５ｍＬ中の化合物Ａ（約１００ｍｇ）およびＰｔ（Ｓ）／Ｃ（５％、１０ｍｇ）の懸濁液を水素化した（Ｈ2（３０ＰＳＩ）で０.５時間）。セライトプラグを通して濾過した後、濾液を濃縮し、精製することにより、所期の生成物である化合物Ｂを得た。
【０１５４】
８．ラセミ型(１Ｒ,２Ｓ)/(１Ｓ,２Ｒ)-１-アミノ-２-ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルの製造：
スキーム１
【化７４】
2010510234.tif 000079
ステップ１：
グリシンエチルエステル塩酸塩（３０４ｇ、２.１６モル）をｔｅｒｔ-ブチルメチルエーテル（１.６Ｌ）に懸濁した。ベンズアルデヒド（２３１ｇ、２.１６モル）および無水硫酸ナトリウム（１５５ｇ、１.０９モル）を加え、その混合物を、氷冷浴を使って０℃まで冷却した。トリエチルアミン（４５５ｍＬ、３.２６モル）を３０分かけて滴下し、その混合物を室温で４８時間撹拌した。次に、氷冷水（１Ｌ）の添加によって反応をクエンチし、有機層を分離した。水相をｔｅｒｔ-ブチルメチルエーテル（０.５Ｌ）で抽出し、有機相を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ3水溶液（１Ｌ）とブライン（１Ｌ）との混合物で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮することにより、３９２.４ｇのＮ-ベンジルイミン生成物を濃厚な黄色油状物として得て、それを次のステップにそのまま使用した。1H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 1.32 (t, J=7.1Hz, 3H), 4.24 (q, J=7.1Hz, 2H), 4.41 (d, J=1.1Hz, 2H), 7.39-7.47 (m, 3H), 7.78-7.81 (m, 2H), 8.31 (s, 1H).
【０１５５】
ステップ２：
リチウムｔｅｒｔ-ブトキシド（８４.１ｇ、１.０５ｍｏｌ）の乾燥トルエン（１.２Ｌ）懸濁液に、乾燥トルエン（０.６Ｌ）中のグリシンエチルエステルのＮ-ベンジルイミン（１００ｇ、０.５２６ｍｏｌ）とｔｒａｎｓ-１,４-ジブロモ-２-ブテン（１０７ｇ、０.５００ｍｏｌ）との混合物を６０分かけて滴下した。添加が完了したら、水（１Ｌ）およびｔｅｒｔ-ブチルメチルエーテル（ＴＢＭＥ、１Ｌ）の添加によって、その深赤色混合物をクエンチした。水相を分離し、もう一度、ＴＢＭＥ（１Ｌ）で抽出した。有機相を合わせ、１.０Ｍ ＨＣｌ（１Ｌ）を加え、その混合物を室温で２時間撹拌した。有機相を分離し、水（０.８Ｌ）で抽出した。次に水相を合わせ、塩（７００ｇ）で飽和させ、ＴＢＭＥ（１Ｌ）を加え、その混合物を０℃まで冷却した。次に、１０.０Ｍ ＮａＯＨの添加によって、撹拌した混合物をｐＨ＝１４まで塩基性にし、有機層を分離し、水層をＴＢＭＥ（５００ｍＬ×２）で抽出した。有機抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、体積が１Ｌになるまで濃縮した。この遊離アミンの溶液に、Ｂｏｃ2Ｏ、すなわちジ-ｔｅｒｔ-ブチルジカーボネート（１３１ｇ、０.６００ｍｏｌ）を加え、その混合物を室温で４日間撹拌した。反応にジ-ｔｅｒｔ-ブチルジカーボネート（５０ｇ、０.２３ｍｏｌ）を追加し、その混合物を３時間還流した後、終夜、室温まで冷却させた。反応混合物をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮することにより、８０ｇの粗製物を得た。この残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２.５ｋｇのＳｉＯ2、１％-２％ＣＨ3ＯＨ／ＣＨ2Ｃ１2で溶出）で精製したところ、５７ｇ（５３％）のラセミ型Ｎ-Ｂｏｃ-(１Ｒ,２Ｓ)/(１Ｓ,２Ｒ)-１-アミノ-２-ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルが黄色油状物として得られ、これは冷蔵庫で静置している間に固化した：1H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 1.26 (t, J=7.1Hz, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.43-1.49 (m, 1H), 1.76-1.82 (br m, 1H), 2.14 (q, J=8.6Hz, 1H), 4.18 (q, J=7.2Hz, 2H), 5.12 (dd J=10.3, 1.7Hz, 1H), 5.25 (br s, 1H), 5.29 (dd, J=17.6, 1.7Hz, 1H), 5.77 (ddd, J=17.6, 10.3, 8.9Hz, 1H); MS m/z 254.16 (M-1).
【０１５６】
９．Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルの分割
【化７５】
2010510234.tif 000080
分割Ａ
３９℃に保持し、３００ｒｐｍで撹拌し、１２リットルのジャケット付き反応器内に収容したリン酸ナトリウムバッファーの水溶液（０．１Ｍ、４．２５リットル（「Ｌ」）、ｐＨ８）に、５１１グラムのＡｌｃａｌａｓｅ２．４Ｌ（約４２５ｍＬ）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ  Ｉｎｃ．）を加えた。混合物の温度が３９℃に到達したときに、水中の５０％ＮａＯＨを加えることによってｐＨを８．０に調節した。次いで、ラセミのＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（８５ｇ）のＤＭＳＯ（８５０ｍＬ）溶液を、４０分に亘って加えた。次いで、反応温度を４０℃に２４．５時間保持し、その間に混合物のｐＨを、水中の５０％ＮａＯＨを使用して１．５時間および１９．５時間時点で８．０に調節した。２４．５時間後、エステルのエナンチオ過剰率を９７．２％であると決定し、反応物を室温（２６℃）に冷却し、一晩撹拌し（１６時間）、その後エステルのエナンチオ過剰率は１００％であると決定した。次いで、反応混合物のｐＨを、５０％ＮａＯＨで８．５に調節し、このように得られた混合物を、ＭＴＢＥ（２×２Ｌ）で抽出した。次いで、合わせたＭＴＢＥ抽出物を５％ＮａＨＣＯ3（３×１００ｍＬ）、水（３×１００ｍＬ）で洗浄し、減圧濃縮して、鏡像異性的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを淡黄色の固形物（４２．５５ｇ；純度：９７％＠２１０ｎｍ、酸は含有せず；１００％鏡像体過剰率（「ｅｅ」））として得た。
【０１５７】
次いで、抽出工程からの水層を、５０％Ｈ2ＳＯ4でｐＨ２まで酸性化し、ＭＴＢＥ（２×２Ｌ）で抽出した。ＭＴＢＥ抽出物を水（３×１００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して、酸を淡黄色固形物（４２．７４ｇ；純度：９９％＠２１０ｎｍ、エステルを含有せず）として得た。
【化７６】
2010510234.tif 000081
2010510234.tif 000082
【０１５８】
分割Ｂ
２４ウェルプレート（容量：１０ｍＬ／ウェル）のウェル中の１００ｍＭのＨｅｐｓ・Ｎａバッファー（ｐＨ８．５）（０．５ｍＬ）に、０．１ｍＬのＳａｖｉｎａｓｅ１６．０Ｌ（バチルス・クラウシイからのプロテアーゼ）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ  Ｉｎｃ．）およびラセミのＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（１０ｍｇ）のＤＭＳＯ（０．１ｍＬ）溶液を加えた。プレートを密封し、２５０ｒｐｍで４０℃にてインキュベートした。１８時間後、エステルのエナンチオ過剰率は、下記のように４４．３％であると決定した。０．１ｍＬの反応混合物を取り出し、１ｍＬエタノールとよく混合し；遠心分離後、１０マイクロリットル（「μＬ」）の上清をキラルＨＰＬＣで分析した。残りの反応混合物に、０．１ｍＬのＤＭＳＯを加え、プレートをさらに３日間２５０ｒｐｍで４０℃にてインキュベートし、その後４ｍＬのエタノールをウェルに加えた。遠心分離後、１０μＬの上清をキラルＨＰＬＣで分析し、エステルのエナンチオ過剰率を１００％であると決定した。
【０１５９】
分割Ｃ
２４ウェルプレート（容量：１０ｍＬ／ウェル）のウェル中の１００ｍＭのＨｅｐｓ・Ｎａバッファー（ｐＨ８．５）０．５ｍＬに、０．１ｍＬのＥｓｐｅｒａｓｅ８．０Ｌ（バチルス・ハロデュランスからのプロテアーゼ）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ  Ｉｎｃ．）およびラセミのＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（１０ｍｇ）のＤＭＳＯ（０．１ｍＬ）溶液を加えた。プレートを密封し、２５０ｒｐｍで４０℃にてインキュベートした。１８時間後、エステルのエナンチオ過剰率は、下記のように３９．６％であると決定した。０．１ｍＬの反応混合物を取り出し、１ｍＬのエタノールとよく混合し；遠心分離後、１０μＬの上清を、キラルＨＰＬＣで分析した。残りの反応混合物に、０．１ｍＬのＤＭＳＯを加え、プレートをさらに３日間２５０ｒｐｍで４０℃にてインキュベートし、その後４ｍＬのエタノールをウェルに加えた。遠心分離後、１０μＬの上清をキラルＨＰＬＣで分析し、エステルのエナンチオ過剰率は１００％であると決定した。
【０１６０】
試料分析を下記の方法によって行った。
１）試料の調製：約０．５ｍＬの反応混合物を、１０容量のエタノールとよく混合した。遠心分離後、１０μＬの上清をＨＰＬＣカラムに注入した。
２）変換の決定：
カラム：ＹＭＣ  ＯＤＳ  Ａ、４．６×５０ｍｍ、Ｓ−５μｍ
溶媒：Ａ、水中の１ｍＭのＨＣｌ；Ｂ、ＣＨ3ＣＮ
グラジエント：１分間、３０％Ｂ；０．５分間、３０％〜４５％Ｂ；１．５分間、４５％Ｂ；０．５分間、４５％〜３０％Ｂ
流量：２ｍＬ／分
ＵＶ検出：２１０ｎｍ
保持時間：酸、１．２分；エステル、２．８分。
３）エステルについてのエナンチオ過剰率の決定：
カラム：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＤ−ＲＨ、４．６×１５０ｍｍ、Ｓ−５μｍ
移動相：水中のＣＨ3ＣＮ／５０ｍＭのＨＣｌＯ4（６７／３３）
流量：０．７５ｍＬ／分
ＵＶ検出：２１０ｎｍ
保持時間：
（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸、５．２分；
ラセミの（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル、１８．５分および２０．０分；
（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル、１８．５分。
【０１６１】
分割Ｄ
０．３Ｍのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ８）５Ｌを、２０リットルのジャケット付き反応器中で３８℃に保持し、１３０ｒｐｍで撹拌した。４リットルのＡｌｃａｌａｓｅ２．４Ｌ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ  Ｉｎｃ．）および１リットルの脱イオン水を反応器に加えた。混合物の温度が３８℃に近づいたとき、１０ＮのＮａＯＨでｐＨを７．８に調節した。ラセミのＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（５００グラム）のＤＭＳＯ（５リットル）溶液を、添加漏斗によって１時間に亘り反応器に加えた。次いで、反応温度を４８℃に調節した。２１時間後、エステルのエナンチオ過剰率は９９．３％に達した。加熱を２４時間で止め、反応物を室温（約２５℃）にゆっくりと冷却し、一晩撹拌した。１０ＮのＮａＯＨで反応混合物のｐＨを８．５に調節し、混合物をＭＴＢＥ（２×４Ｌ）で抽出した。合わせたＭＴＢＥ抽出物を、５％ＮａＨＣＯ3（３×４００ｍＬ）および水（３×４００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して、鏡像異性的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを淡黄色の結晶（２５９ｇ；純度：９６．９％＠２１０ｎｍ、酸を含有せず；１００％ｅｅ）として得た。
【０１６２】
分割Ｅ
１０Ｌの０．１Ｍのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ８）を、２０リットルジャケット付き反応器中で４０℃に保持し、３６０ｒｐｍで撹拌した。１．５リットルのＡｌｃａｌａｓｅ２．４Ｌ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ  Ｉｎｃ．）を反応器に加えた。混合物の温度が３８℃に近づいたときに、１０ＮのＮａＯＨでｐＨを８．０に調節した。ラセミのＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（２００グラム）のＤＭＳＯ（２リットル）溶液を、添加漏斗によって１時間に亘り反応器に加えた。次いで、反応温度を４０℃に調節した。３時間後、１０ＮのＮａＯＨでｐＨを８．０に調節した。２１時間後、反応物を２５℃に冷却し、１０ＮのＮａＯＨで反応混合物のｐＨを８．５に調節し、混合物をＭＴＢＥ（２×５Ｌ）抽出した。合わせたＭＴＢＥ抽出物を５％ＮａＨＣＯ3（３×５００ｍＬ）および水（３×２００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して、１１０グラムの黄色の油状物を得た。油状物は、一般的な吸引装置で室温にて固化し、鏡像異性的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを無色の長いロッド結晶（１０１ｇ；純度：９７．９％＠２１０ｎｍ、酸を含有せず；１００％ｅｅ）として得た。
結晶構造である鏡像異性的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを、単結晶分析（Ｘ線ＮＢ＃：５２７９５−０９３、参照コード：６３４５９２Ｎ１）によって特性決定した。公知のキラル中心またはより重い原子（複数可）がないために、絶対配置は確立されない。結晶軸に沿った鎖状構造が、アミド基とカルボニル酸素原子との間の分子間の水素結合（Ｎ…Ｏ３．１５９Å）を介して形成される。
【０１６３】
Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルの構造：
【化７７】
2010510234.tif 000083
結晶データ:                  実験:
化学式:C13H21N1O4            結晶化
晶系:斜方晶                  結晶源:MTBE
空間群:P212121                結晶の説明:無色のロッド
a=5.2902(1)Å、α=90°       結晶サイズ(mm):0.12×0.26×0.30
b=13.8946(2)Å、β=90°      データ収集
c=19.9768(3)Å、γ=90°      温度(K):293
V=1468.40(4)Å3              θmax(°):65.2(Cu Kα)
Z=4、dx=1.155gcm-3            測定反射数:7518
格子定数についての反射数:6817             独立反射数:2390(Rint=0.0776)
格子定数(°)についてのθ範囲:2.2〜65.2    測定反射数(I≧2σ:2284
吸収係数(mm-1):0.700                       吸収補正(Tmin-Tmax):0.688〜1.000
【０１６４】
分割Ｆ
０．２Ｍのホウ酸ナトリウムバッファー（ｐＨ９）５Ｌを、２０リットルジャケット付き反応器中で４５℃に保持し、４００ｒｐｍで撹拌した。３リットルの脱イオン水および４リットルのＳａｖｉｎａｓｅ  １６Ｌ、タイプＥＸ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ  Ｉｎｃ．）を、反応器に加えた。混合物の温度が４５℃に近づいたときに、１０ＮのＮａＯＨでｐＨを８．５に調節した。ラセミのＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／（１Ｓ，２Ｒ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（２００グラム）のＤＭＳＯ（２リットル）溶液を、添加漏斗によって４０分間に亘り反応器に加えた。次いで、反応温度を４８℃に調節した。２時間後、１０ＮのＮａＯＨでｐＨをｐＨ９．０に調節した。１８時間で、エステルのエナンチオ過剰率は７２％に達し、１０ＮのＮａＯＨでｐＨを９．０に調節した。２４時間で、温度を３５℃に下げた。４２時間で、温度を４８℃に上げ、１０ＮのＮａＯＨでｐＨを９．０に調節した。４８時間で加熱を止め、反応物を室温（約２５℃）にゆっくりと冷却し、一晩撹拌した。６６時間で、反応混合物のｐＨは８．６であった。混合物をＭＴＢＥ（２×４Ｌ）で抽出した。合わせたＭＴＢＥ抽出物を、５％ＮａＨＣＯ3（６×３００ｍＬ）および水（３×３００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して、鏡像異性的に純粋なＮ−Ｂｏｃ−（１Ｒ，２Ｓ）／−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを淡黄色の結晶（１０１Ａｇ；純度：９５．９％＠２１０ｎｍ、酸を含有せず；９８．６％ｅｅ）として得た。
【０１６５】
１０．キラルな(１Ｒ,２Ｓ)-１-アミノ-２-ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル塩酸塩の製造
【化７８】
2010510234.tif 000084
(１Ｒ,２Ｓ)Ｎ-Ｂｏｃ-１-アミノ-２-ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル（８.５ｇ、３３.３ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で、２００ｍＬの４Ｎ ＨＣｌ／ジオキサン（Ａｌｄｒｉｃｈ）と共に、室温で３時間、撹拌した。温度を４０℃未満に保ちながら溶媒を減圧下で除去した。これにより、６.５７ｇ（約１００％）の(１Ｒ,２Ｓ)-１-アミノ-２-ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステル塩酸塩を明黄褐色固形物として得た。1H NMR (300MHz, CD3OD) δ 1.31 (t, J=7.0Hz, 3H), 1.69-1.82 (m, 2H), 2.38 (q, J=8.8Hz, 1H), 4.29 (q, J=7.0Hz, 2H), 5.22 (d, J=10.3Hz, 1H), 5.40 (d, J=17.2Hz, 1H), 5.69-5.81 (m, 1H). MS m/z 156 (M++1).
【０１６６】
１１．Ｎ-Ｂｏｃ-(１Ｒ,２Ｓ)-１-アミノ-２-シクロプロピルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルの製造
【化７９】
2010510234.tif 000085
Ｎ-Ｂｏｃ-(１Ｒ,２Ｓ)-１-アミノ-２-ビニルシクロプロパンカルボン酸（２５５ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル（１０ｍＬ）溶液を酢酸パラジウム（５ｍｇ、０.０２２ｍｍｏｌ）で処理した。その橙／赤色溶液を窒素雰囲気下に置いた。ジエチルエーテル中の過剰量のジアゾメタンを１時間かけて滴下した。その結果生じた溶液を室温で１８時間撹拌した。過剰なジアゾメタンを窒素気流を使って除去し、その結果生じた溶液をロータリーエバポレーターで濃縮することにより、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（１０％酢酸エチル／ヘキサン）により、２１０ｍｇ（７８％）の(１Ｒ,２Ｓ)-Ｎ-Ｂｏｃ-１-アミノ-２-シクロプロピルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルを無色の油状物として得た。MS m/z 270 (M++H).
【０１６７】
Ｐ１'-Ｐ１中間体の製造
１２．Ｐ１Ｐ１'の製造：
スキーム１
【化８０】
2010510234.tif 000086
ステップ１：
１(Ｒ)-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-２(Ｓ)-ビニル-シクロプロパンカルボン酸エチルエステル（３.２８ｇ、１３.２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７ｍＬ）およびメタノール（７ｍＬ）溶液に、ＬｉＯＨ（１.２７ｇ、５３.０ｍｍｏｌ）の水（１４ｍＬ）懸濁液を加えた。その混合物を室温で終夜撹拌した。その混合物に１.０Ｍ ＮａＯＨ（１５ｍＬ）、水（２０ｍＬ）および酢酸エチル（２０ｍＬ）を加えた。その混合物を振とうし、相を分離し、有機相を２０ｍＬの０.５Ｍ ＮａＯＨで再び抽出した。合わせた水相を１.０Ｍ ＨＣｌでｐＨ＝４まで酸性化し、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過することにより、所期の生成物を白色固形物（２.６２ｇ、８７％）として得た。1H NMR:(DMSO-d6) δ 1.22-1.26 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.50-1.52 (m, 1H), 2.05 (q, J=9Hz, 1H), 5.04 (d, J=10Hz, 1H), 5.22 (d, J=17Hz, 1H), 5.64-5.71 (m, 1H), 7.18, 7.53 (s, NH (回転異性体), 12.4 (br s, 1H)); LC-MS MS m/z 228 (M++H).
【０１６８】
ステップ２：
ステップ１の生成物（２.６２ｇ、１１.５ｍｍｏｌ）およびＣＤＩ（２.４３ｇ、１５.０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液を窒素下で５０分間、加熱還流した。その溶液を室温まで冷却し、導管を通して、シクロプロピルスルホンアミド（１.８２ｇ、１５.０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に移した。その結果生じた溶液にＤＢＵ（２.４０ｍＬ、１６.１ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を２０時間続けた。その混合物を１.０Ｍ ＨＣｌでｐＨ＝１にクエンチし、ＴＨＦを減圧下でエバポレートした。その懸濁液を酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機抽出物を合わせ、乾燥した（Ｎａ2ＳＯ4）。濾過、濃縮、およびヘキサン類-酢酸エチル（１：１）からの再結晶による精製を行うことで、所期の生成物（２.４ｇ）を白色固形物として得た。母液をＢｉｏｔａｇｅ ４０Ｓカラム（９％アセトン／ジクロロメタンで溶出）で精製することにより、所期の生成物の第２バッチ（１.１ｇ）を得た。両方のバッチを合わせた（合計収率９２％）。1H NMR:(DMSO-d6) δ 0.96-1.10 (m, 4H), 1.22 (dd, J=5.5, 9.5Hz, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.70 (t, J=5.5Hz, 1H), 2.19-2.24 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 5.08 (d, J=10Hz, 1H), 5.23 (d, J=17Hz, 1H), 5.45 (m, 1H), 6.85, 7.22 (s, NH (回転異性体)); LC-MS, MS m/z 331 (M++H).
【０１６９】
ステップ３：
ステップ２の生成物（３.５ｇ、１０.６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３５ｍＬ）およびＴＦＡ（３２ｍＬ）溶液を室温で１.５時間撹拌した。揮発物を減圧下で除去し、残渣を１.０Ｍ ＨＣｌ／ジエチルエーテル（２０ｍＬ）に懸濁し、減圧下で濃縮した。この操作を１回繰り返した。その結果生じた混合物をペンタンで摩砕し、濾過することにより、標題の化合物を吸湿性のオフホワイト固形物（２.６０ｇ、９２％）として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 1.01-1.15 (m, 4H), 1.69-1.73 (m, 1H), 1.99-2.02 (m, 1H), 2.38 (q, J=9Hz, 1H), 2.92-2.97 (m, 1H), 5.20 (d, J=11Hz, 1H), 5.33 (d, J=17Hz, 1H), 5.52-5.59 (m, 1H), 9.17 (br s, 3H); LC-MS, MS m/z 231 (M++H).
【０１７０】
１３．Ｐ１-Ｐ１'スルファミド誘導体の製造
【化８１】
2010510234.tif 000087
(１Ｒ,２Ｓ)１-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-２-ビニル-シクロプロパンカルボン酸（２１７ｍｇ、１.１９４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液にＣＤＩ（２９０ｍｇ、１.７９１ｍｍｏｌ）を加え、その反応混合物を４５分間加熱還流した。もう一つの丸底フラスコで、ＬｉＨＭＤＳ（１.０Ｍヘキサン類溶液、２.４ｍＬ、２.４ｍｍｏｌ）を、Ｎ-エチルメチルスルファミド（３３０ｍｇ、２.３８８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に加え、その反応混合物を室温で１時間撹拌した。それら２つの反応混合物を合わせ、室温で２時間撹拌した。水を加えて反応をクエンチし、その反応溶液を酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。濾過および濃縮によって得た粗生成物を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、所期のＮ-Ｂｏｃ保護Ｎ-アシルスルファミドを得た。次に、その化合物をジオキサン（２ｍＬ）中の４Ｎ ＨＣｌ溶液に溶解し、室温で４時間撹拌すると、Ｂｏｃ保護基が除去された。濃縮により、帯褐色油状物をＨＣｌ塩として得た（１１２ｍｇ、収率３３％）。1H NMR (400Mz, CD3OD) δ 1.16 (t, J=7.21Hz, 3H), 1.68 (dd, J=10.03, 7.83Hz, 1H), 2.15 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 3.30 (m, 2H), 5.31 (d, J=10.27Hz, 1H), 5.42 (d, J=17.12Hz, 3H), 5.68 (m, 1H). LC-MS (保持時間：0.883分), MS m/z 270 (M+Na+).
【実施例３】
【０１７１】
実施例３の製造
【化８２】
2010510234.tif 000088
【化８３】
2010510234.tif 000089
ステップ１：
(Ｓ)-１-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)-４-オキソピロリジン-２-カルボン酸（４６０ｍｇ、2.0ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、４-ビフェニルマグネシウムブロミド（０.５Ｍ ＴＨＦ、１６.０ｍＬ、８.０ｍｍｏｌ）を-５０℃で滴下した。この温度で４時間撹拌した後、その混合物を５％クエン酸でクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残った固形物を酢酸エチル：ヘキサン類（１５ｍＬ：１５ｍＬ）から再結晶することにより、中間体１を白色固形物（４１５ｍｇ、５４％）として得た。1H NMR (CD3OD) δ 1.49, 1.51 (d, 9H), 2.48-2.51 (m, 1H), 2.79-2.82 (m, 1H), 3.75-3.81 (m, 2H), 4.48-4.53 (m, 1H), 7.33-7.36 (m, 1H), 7.43-7.46 (m, 2H), 7.58-7.65 (m, 6H); MS m/z 384 (M++H).
【０１７２】
ステップ２：
ジクロロメタン（１０ｍＬ）中の中間体１（３８３ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ）、シクロプロパンスルホン酸(１-(Ｒ)-アミノ-２-(Ｓ)-ビニルシクロプロパンカルボニル)アミド塩酸塩（２９３ｍｇ、１.１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５７０ｍｇ、１.５ｍｍｏｌ）の氷冷混合物に、ジイソプロピルエチルアミン（５６０ｍｇ、５.０ｍｍｏｌ）を加えた。形成された溶液を４時間にわたって、周囲温度まで温まらせ、揮発物を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）で摩砕し、濾過した。濾液を５％クエン酸（５０ｍＬ、×２）およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をメタノール（４ｍＬ）で摩砕することにより、３１４ｍｇ（５３％）の所期の生成物、中間体２を得た。MS m/z 596 (M++H).
【０１７３】
ステップ３：
中間体２（１５０ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）の氷冷１,４-ジオキサン（１ｍＬ）懸濁液に、ＨＣｌ（４Ｍジオキサン溶液、５ｍＬ）を加えた。形成された溶液を周囲温度で2時間撹拌し、揮発物を減圧下で除去し、高真空下で終夜乾燥した。生成物を次のステップにそのまま使用した。MS m/z 496 (M++H).
【０１７４】
ステップ４：
中間体３（１３４ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）の氷冷ジクロロメタン（２.５ｍＬ）懸濁液に、ジイソプロピルエチルアミン（５６０ｍｇ、５.０ｍｍｏｌ）を滴下した。形成されたこの溶液に、ＨＡＴＵ（１４４ｍｇ、０.３８ｍｍｏｌ）および(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)-３,３-ジメチルブタン酸（６４ｍｇ、０.２８ｍｍｏｌ）を加えた。その最終混合物を終夜、周囲温度まで温まらせ、揮発物を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチル（１０ｍＬ）で摩砕し、濾過した。濾液を５％クエン酸（１０ｍＬ、×２）およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、１６ｍｇ（９％）の所期の生成物、実施例４を白色固形物として得た。1H NMR (CD3OD) δ 1.08-1.13 (m, 11H), 1.27-1.29 (m, 2H), 1.47-1.53 (m, 10H), 1.89-1.93 (m, 1H), 2.26-2.32 (m, 2H), 2.68-2.71 (m, 1H), 2.97-2.99 (m, 1H), 4.05-4.12 (m, 1H), 4.34-4.37 (m, 2H), 4.45-4.47 (m, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.33 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.77-5.82 (m, 1H), 7.36-7.37 (m, 1H), 7.44-7.47 (m, 2H), 7.62-7.67 (m, 6H); MS m/z 709 (M++H).
【実施例４】
【０１７５】
実施例４の製造
【化８４】
2010510234.tif 000090
ステップ１：
【化８５】
2010510234.tif 000091
フェニルマグネシウムブロミドを代わりに使用した点以外は実施例３ステップ１に記載の手法と同じ手法で、この生成物を製造した。1H NMR (DMSO-d6) δ 1.36-1.41 (m, 9H), 2.25-2.28 (m, 1H), 2.60-2.64 (m, 1H), 3.56-3.66 (m, 2H), 4.27-4.29 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 7.25-7.36 (m, 3H), 7.46-7.48 (m, 2H), 12.40 (br, 1H); MS m/z 308 (M++H).
【０１７６】
ステップ２：
【化８６】
2010510234.tif 000092
実施例４ステップ１の生成物を代わりに使用した点以外は実施例３ステップ２に記載の手法と同じ手法で、この生成物を製造した。MS m/z 520 (M++H).
【０１７７】
ステップ３：
【化８７】
2010510234.tif 000093
実施例４ステップ２の生成物を代わりに使用した点以外は実施例３ステップ３に記載の手法と同じ手法で、この生成物を製造した。MS m/z 420 (M++H).
【０１７８】
ステップ４：
実施例４ステップ３の生成物を代わりに使用した点以外は実施例３ステップ４に記載の手法と同じ手法で、実施例４を製造した。1H NMR (CD3OD) δ 1.08-1.12 (m, 11H), 1.27-1.28 (m, 2H), 1.48-1.52 (m, 10H), 1.89-1.90 (m, 1H), 2.26-2.32 (m, 2H), 2.68-2.71 (m, 1H), 2.97-2.99 (m, 1H), 4.05-4.09 (m, 1H), 4.34-4.35 (m, 2H), 4.45-4.47 (m, 1H), 5.14 (d, J=12Hz, 1H), 5.34 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.77-5.82 (m, 1H), 7.31-7.33 (m, 1H), 7.37-7.40 (m, 2H), 7.57-7.59 (m, 2H); MS m/z 633 (M++H).
【実施例５】
【０１７９】
実施例５の製造
【化８８】
2010510234.tif 000094
ステップ１：
【化８９】
2010510234.tif 000095
２-ナフチルマグネシウムブロミドを代わりに使用した点以外は実施例３ステップ１に記載の手法と同じ手法で、この生成物を製造した。1H NMR (CD3OD) δ 1.50, 1.52 (d, 9H), 2.54-2.56 (m, 1H), 2.89-2.91 (m, 1H), 3.84-3.87 (m, 2H), 4.51-4.53 (m, 1H), 7.45-7.52 (m, 2H), 7.62-7.64 (m, 1H), 7.85-7.94 (m, 3H), 7.99 (s, 1H); MS m/z 358 (M++H).
【０１８０】
ステップ２：
【化９０】
2010510234.tif 000096
実施例５ステップ１の生成物を代わりに使用した点以外は実施例３ステップ２に記載の手法と同じ手法で、この生成物を製造した。MS m/z 570 (M++H).
【０１８１】
ステップ３：
【化９１】
2010510234.tif 000097
実施例５ステップ２の生成物を代わりに使用した点以外は実施例３ステップ３に記載の手法と同じ手法で、この生成物を製造した。MS m/z 470 (M++H).
【０１８２】
ステップ４：
実施例５ステップ３の生成物を使用した点以外は実施例３ステップ４に記載の手法と同じ手法で、実施例５を製造した。1H NMR (CD3OD) δ 1.05-1.12 (m, 11H), 1.28-1.29 (m, 2H), 1.48-1.53 (m, 10H), 1.91-1.92 (m, 1H), 2.25-2.40 (m, 2H), 2.75-2.79 (m, 1H), 2.97-3.00 (m, 1H), 4.13-4.16 (m, 1H), 4.38-4.47 (m, 2H), 5.14 (d, J=12Hz, 1H), 5.33 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.77-5.82 (m, 1H), 7.49-7.51 (m, 2H), 7.70-7.73 (m, 1H), 7.86-7.92 (m, 3H), 8.04 (s, 1H); MS m/z 683 (M++H).
【実施例６】
【０１８３】
実施例６の製造
【化９２】
2010510234.tif 000098
ステップ１：
【化９３】
2010510234.tif 000099
４-フルオロフェニルマグネシウムブロミドを代わりに使用した点以外は実施例３ステップ１に記載の手法と同じ手法で、この生成物を製造した。1H NMR (CD3OD) δ 1.48, 1.50 (d, 9H), 2.44-2.47 (m, 1H), 2.74-2.95 (m, 2H), 3.69-3.76 (m, 2H), 4.45-4.53 (m, 1H), 7.08-7.12 (m, 2H), 7.52-7.54 (m, 2H);MS m/z 326 (M++H).
【０１８４】
ステップ２：
【化９４】
2010510234.tif 000100
実施例６ステップ１の生成物を代わりに使用した点以外は実施例３ステップ２に記載の手法と同じ手法で、この生成物を製造した。MS m/z 538 (M++H).
【０１８５】
ステップ３：
【化９５】
2010510234.tif 000101
実施例６ステップ２の生成物を代わりに使用した点以外は実施例３ステップ３に記載の手法と同じ手法で、この生成物を製造した。MS m/z 438 (M++H).
【０１８６】
ステップ４：
実施例６ステップ３の生成物を代わりに使用した点以外は実施例３ステップ４に記載の手法と同じ手法で、実施例６を製造した。1H NMR (CD3OD) δ 1.02-1.12 (m, 11H), 1.26-1.28 (m, 2H), 1.47-1.52 (m, 10H), 1.89-1.90 (m, 1H), 2.25-2.28 (m, 2H), 2.55-2.65 (m, 1H), 2.92-2.99 (m, 1H), 4.06-4.08 (m, 1H), 4.25-4.33 (m, 2H), 4.41-4.49 (m, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.77-5.82 (m, 1H), 7.09-7.12 (m, 2H), 7.60-7.63 (m, 2H); MS m/z 651 (M++H).
【実施例７】
【０１８７】
実施例７の製造
【化９６】
2010510234.tif 000102
【化９７】
2010510234.tif 000103
ステップ１：
【化９８】
2010510234.tif 000104
ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-ヒドロキシピロリジン-２-カルボキシレートＨＣｌ塩（５.４５ｇ、３０.０ｍｍｏｌ）、(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)-３,３-ジメチルブタン酸（６.９３ｇ、３０.０ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（１７.１ｇ、４５.０ｍｍｏｌ）のスラリーに、０℃で、ジイソプロピルエチルアミン（１６.８ｇ、１５０ｍｍｏｌ）を滴下した。形成された溶液を室温で終夜撹拌し、氷冷５％クエン酸および１Ｍ ＮａＯＨ（水性）で２回洗浄した後、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮することにより、１０.７５ｇ（１００％）を明帯褐色泡状物として得た。1H NMR (CD3OD) δ 1.04 (s, 9H), 1.46 (s, 9H), 2.01-2.06 (m, 1H), 2.27-2.29 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.77-3.87 (m, 2H), 4.31 (s, 1H), 4.49 (br, 1H), 4.56 (t, J=8.5Hz, 1H).
【０１８８】
ステップ２：
【化９９】
2010510234.tif 000105
実施例７ステップ１の生成物（１０.７５ｇ、３０.０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）およびメタノール（１００ｍＬ）溶液に、ＬｉＯＨ一水和物（６.３０ｇ、１５０ｍｍｏｌ）の水（１００ｍＬ）溶液を加えた。その最終溶液を室温で終夜撹拌した。揮発物を減圧下で除去した。残渣を１Ｍ ＨＣｌ（水性）でｐＨ２に酸性化した。酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮することにより、所期の生成物８.９５ｇ（８７％）をオフホワイトの泡状物として得た。1H NMR (CD3OD) δ 1.05 (s, 9H), 1.45 (s, 9H), 2.03-2.06 (m, 1H), 2.32-2.36 (m, 1H), 3.79-3.86 (m, 2H), 4.32 (br, 1H), 4.49 (br, 1H), 4.54 (t, J=8.5Hz, 1H).
【０１８９】
ステップ３：
【化１００】
2010510234.tif 000106
実施例７ステップ２で得た生成物（１.９５ｇ、５.６８ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（1５０ｍＬ）溶液に、０℃で、(１Ｒ,２Ｓ)-１-アミノ-Ｎ-(シクロプロピルスルホニル)-２-ビニルシクロプロパンカルボキサミドＨＣｌ塩（１.５１ｇ、５.６８ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物をこの温度で５分間撹拌してから、ジイソプロピルエチルアミン（１.９１ｇ、１７.０ｍｍｏｌ）を滴下した。形成された透明溶液を０℃でさらに５分間撹拌してから、ＥＤＣ（１.４１ｇ、７.３８ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（０.７７ｇ、５.６８ｍｍｏｌ）を加えた。その最終スラリーを室温で終夜撹拌した。形成された透明溶液を氷冷５％クエン酸（２回）、飽和クエン酸ナトリウム（水性）およびブラインで、逐次洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、１：１ヘキサン-アセトンを溶離液とするフラッシュカラムで精製することにより、所期の生成物２.５０ｇ（７９％）を白色泡状物として得た。1H NMR (CD3OD) δ 1.00-1.10 (m, 11H), 1.24-1.28 (m, 2H), 1.41-1.46 (m, 10H), 1.86-1.91 (m, 1H), 2.00-2.04 (m, 1H), 2.12-2.28 (m, 1H), 2.92-2.99 (m, 1H), 3.80-3.95 (m, 2H), 4.30-4.40 (m, 2H), 4.51 (br, 1H), 5.14 (d, J=12Hz, 1H), 5.35 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.77-5.82 (m, 1H); MS m/z 557 (M++H).
【０１９０】
ステップ４：
【化１０１】
2010510234.tif 000107
Ｄｅｓｓ Ｍａｒｔｉｎ試薬（９４０ｍｇ、２.２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、実施例７ステップ３の生成物（５５６ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ）を加えた。その溶液を室温で４時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣を熱酢酸エチル（１０ｍＬ）で摩砕し、珪藻土（セライト（登録商標））を通して濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。１：１ヘキサン-アセトンを溶離液とするフラッシュカラムで残渣を精製することにより、所期の生成物５５０ｍｇ（９９％）を白色泡状物として得た。1H NMR (CD3OD) δ 1.09-1.14 (m, 11H), 1.25-1.28 (m, 2H), 1.43-1.46 (m, 10H), 1.88-1.91 (m, 1H), 2.22-2.28 (m, 1H), 2.51-2.60 (m, 1H), 2.92-2.96 (m, 1H), 4.17-4.34 (m, 2H), 4.77-4.80 (m, 1H), 5.16 (d, J=12Hz, 1H), 5.33 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.72-5.82 (m, 1H); MS m/z 555 (M++H).
【０１９１】
ステップ５：
実施例７ステップ４の生成物（２３ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（０.５ｍＬ）溶液に、-５０℃で、４-メトキシフェニルマグネシウムブロミド（０.５ｍＬ、０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、０.２５ｍｍｏｌ）を滴下した。形成された溶液をこの温度で２時間撹拌し、塩化アンモニウム（水性）でクエンチした後、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、４.５ｍｇ（１４％）の実施例７を白色固形物として得た。1H NMR (CD3OD) δ 1.09-1.12 (m, 11H), 1.26-1.28 (m, 2H), 1.46-1.52 (m, 10H), 1.89-1.91 (m, 1H), 2.25-2.28 (m, 2H), 2.58-2.65 (m, 1H), 2.92-2.99 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 4.04-4.08 (m, 1H), 4.25-4.35 (m, 2H), 4.41-4.49 (m, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.74-5.82 (m, 1H), 6.92-6.94 (m, 2H), 7.48-7.50 (m, 2H); MS m/z 663 (M++H).
【実施例８】
【０１９２】
実施例８の製造
【化１０２】
2010510234.tif 000108
４'-メトキシ-３-ビフェニルマグネシウムブロミドを代わりに使用した点以外は実施例７ステップ５に記載の手法と同じ手法で、実施例８を製造した。1H NMR (CD3OD) δ 1.02-1.10 (m, 11H), 1.29-1.31 (m, 2H), 1.40-1.50 (m, 10H), 1.90-1.92 (m, 1H), 2.25-2.27 (m, 2H), 2.68-2.69 (m, 1H), 2.92-2.98 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 4.10-4.15 (m, 1H), 4.35-4.52 (m, 2H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 7.00-7.03 (m, 3H), 7.40-7.60 (m, 5H); MS m/z 739 (M++H).
【実施例９】
【０１９３】
実施例９の製造
【化１０３】
2010510234.tif 000109
実施例７で説明したように製造したｔｅｒｔ-ブチル=(Ｓ)-１-｛(Ｓ)-２-｛［(１Ｒ,２Ｓ)-１-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-２-ビニルシクロプロピル］カルバモイル｝-４-オキソピロリジン-１-イル｝-３,３-ジメチル-１-オキソブタン-２-イル-カルバメート（７７ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、-７８℃で、アリルマグネシウムブロミド（１.０Ｍジエチルエーテル溶液、０.７ｍＬ、０.７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温まで温め、終夜撹拌した。反応を飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液でクエンチした。その混合物を酢酸エチルで抽出し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。２：１ヘキサン類／アセトンを溶離液とするシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで粗生成物を精製することにより、標題の生成物（５０ｍｇ、６０％）を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.92-0.96 (m, 2H), 0.93-1.09 (m, 10H), 1.19-1.25 (m, 2H), 1.38-1.48 (m, 10H), 1.83-1.94 (m, 2H), 2.18-2.31 (m, 2H), 2.31-2.46 (m, 2H), 2.88-2.96 (m, 1H), 3.70 (d, J=9.82Hz, 1H), 3.81 (d, J=10.32Hz, 1H), 4.22 (d, J=9.32Hz, 1H), 4.32 (dd, J=9.06, 4.78Hz, 1H), 5.09-5.20 (m, 3H), 5.30 (dd, J=17.25, 1.38Hz, 1H), 5.69-5.80 (m, 1H), 5.87-5.99 (m, 1H), 6.69 (d, J=9.06Hz, 1H); MS m/z 619 (M+Na)+.
【０１９４】
実施例１０〜２５を製造するための一般手法
【化１０４】
2010510234.tif 000110
ｔｅｒｔ-ブチル=(Ｓ)-１-｛(Ｓ)-２-｛［(１Ｒ,２Ｓ)-１-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-２-ビニルシクロプロピル］カルバモイル｝-４-オキソピロリジン-１-イル｝-３,３-ジメチル-１-オキソブタン-２-イルカルバメート（８３ｍｇ、０.１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１〜５ｍＬ）溶液に、-７８℃で、グリニャール試薬（０.７５〜０.９０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温まで温めて１〜３時間撹拌した。反応を飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液（１ｍＬ）でクエンチした。その混合物を１Ｎ ＨＣｌで中和し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、所期の生成物を得た。
【実施例１０】
【０１９５】
実施例１０の製造
【化１０５】
2010510234.tif 000111
(３-フルオロフェニル)マグネシウムブロミド（１.０Ｍ ＴＨＦ溶液、０.７５ｍＬ、０.７５ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１０を製造し、５ｍｇ（６％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.98-1.01 (m, 2H), 1.03-1.11 (m, 10H), 1.21-1.27 (m, 2H), 1.37-1.51 (m, 10H), 1.87 (dd, J=8.18, 5.41Hz, 1H), 2.18-2.28 (m, 2H), 2.56-2.64 (m, 1H), 2.90-2.99 (m, 1H), 4.03 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.24 (d, J=10.58Hz, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.43 (dd, J=9.06, 4.03Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.45, 1.64Hz, 1H), 5.30 (dd, J=17.12, 1.51Hz, 1H), 5.70-5.82 (m, 1H), 6.99-7.07 (m, 1H), 7.30-7.41 (m, 3H); MS m/z 651 (M+H)+.
【実施例１１】
【０１９６】
実施例１１の製造
【化１０６】
2010510234.tif 000112
(３-メトキシフェニル)マグネシウムブロミド（１.０Ｍ ＴＨＦ溶液、０.７５ｍＬ、０.７５ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１１を製造し、７ｍｇ（７％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.98-1.01 (m, 2H), 1.03-1.12 (m, 10H), 1.20-1.27 (m, 2H), 1.42-1.47 (m, 10H), 1.87 (dd, J=8.18, 5.41Hz, 1H), 2.17-2.29 (m, 2H), 2.55-2.64 (m, 1H), 2.90-3.00 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.98-4.06 (m, 1H), 4.21-4.33 (m, 2H), 4.43 (dd, J=9.19, 3.90Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.45, 1.64Hz, 1H), 5.29 (dd, J=17.12, 1.51Hz, 1H), 5.69-5.82 (m, 1H), 6.85 (dd, J=8.06, 2.01Hz, 1H), 7.08 (d, J=7.81Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.23-7.30 (m, 1H); MS m/z 663 (M+H)+.
【実施例１２】
【０１９７】
実施例１２の製造
【化１０７】
2010510234.tif 000113
(３-クロロフェニル)マグネシウムブロミド（０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、１.８ｍＬ、０.９０ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１２を製造し、５ｍｇ（５％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.98-1.01 (m, 2H), 1.03-1.11 (m, 10H), 1.22-1.27 (m, 2H), 1.41-1.50 (m, 10H), 1.87 (dd, J=8.18, 5.41Hz, 1H), 2.19-2.28 (m, 2H), 2.56-2.64 (m, 1H), 2.90-2.98 (m, 1H), 4.04 (d, J=10.58Hz, 1H), 4.22 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.44 (dd, J=9.19, 3.90Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.32, 1.51Hz, 1H), 5.30 (dd, J=17.12, 1.51Hz, 1H), 5.70-5.81 (m, 1H), 7.28-7.37 (m, 2H), 7.47 (t, J=7.68Hz, 1H), 7.61 (s, 1H) ); MS m/z 689 (M+Na)+.
【実施例１３】
【０１９８】
実施例１３の製造
【化１０８】
2010510234.tif 000114
ｍ-トリルマグネシウムブロミド（１.０Ｍ ＴＨＦ溶液、０.９０ｍＬ、０.９０ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１３を製造し、１１ｍｇ（１１％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.99 (s, 2H), 1.04-1.09 (m, 10H), 1.21-1.27 (m, 2H), 1.42-1.47 (m, 10H), 1.87 (dd, J=8.31, 5.54Hz, 1H), 2.18-2.29 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.56-2.63 (m, 1H), 2.90-2.98 (m, 1H), 4.03 (d, J=11.08Hz, 1H), 4.24 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.28-4.32 (m, 1H), 4.41 (dd, J=9.06, 4.03Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.32, 1.51Hz, 1H), 5.29 (dd, J=17.25, 1.38Hz, 1H), 5.70-5.81 (m, 1H), 7.11 (d, J=7.55Hz, 1H), 7.23 (t, J=7.55Hz, 1H), 7.32 (d, J=7.81Hz, 1H), 7.37 (s, 1H) ); MS m/z 669 (M+Na)+.
【実施例１４】
【０１９９】
実施例１４の製造
【化１０９】
2010510234.tif 000115
(３-イソプロピルフェニル)マグネシウムブロミド（０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、１.５ｍＬ、０.７５ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１４を製造し、１２ｍｇ（１２％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.98-1.01 (m, 2H), 1.04-1.11 (m, 10H), 1.22-1.28 (m, 8H), 1.41-1.47 (m, 10H),1.87 (dd, J=8.18, 5.41Hz, 1H), 2.18-2.34 (m, 2H), 2.55-2.63 (m, 1H), 2.87-2.98 (m, 2H), 4.00-4.07 (m, 1H), 4.26 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.29-4.33 (m, 1H), 4.42 (dd, J=9.06, 4.03Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.45, 1.64Hz, 1H), 5.29 (dd, J=17.12, 1.51Hz, 1H), 5.70-5.81 (m, 1H), 7.17 (d, J=7.30Hz, 1H), 7.24-7.36 (m, 2H), 7.44 (s, 1H). MS m/z 675 (M+H)+.
【実施例１５】
【０２００】
実施例１５の製造
【化１１０】
2010510234.tif 000116
(３-イソプロポキシフェニル)マグネシウムブロミド（０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、１.５ｍＬ、０.７５ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１５を製造し、１２ｍｇ（１２％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.98-1.01 (m, 2H), 1.04-1.11 (m, 10H), 1.21-1.27 (m, 2H), 1.29 (d, J=6.04Hz, 6H), 1.42-1.47 (m, 10H), 1.87 (dd, J=8.18, 5.41Hz, 1H), 2.18-2.29 (m, 2H), 2.55-2.63 (m, 1H), 2.90-2.99 (m, 1H), 3.98-4.06 (m, 1H), 4.23 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.29 (s, 1H), 4.45 (dd, J=9.32, 3.78Hz, 1H), 4.57-4.66 (m, 1H), 5.12 (dd, J=10.32, 1.76Hz, 1H), 5.30 (dd, J=17.12, 1.51Hz, 1H), 5.70-5.81 (m, 1H), 6.83 (dd, J=8.06, 1.76Hz, 1H), 7.05 (d, J=7.81Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.20-7.28 (m, 1H); MS m/z 691 (M+H)+.
【実施例１６】
【０２０１】
実施例１６の製造
【化１１１】
2010510234.tif 000117
[３-(Ｎ,Ｎ-ジメチル)アニリン]マグネシウムブロミド（０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、１.５ｍＬ、０.７５ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１６を製造し、７ｍｇ（７％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 1.00 (s, 2H), 1.02-1.13 (m, 9H), 1.20-1.27 (m, 2H), 1.40-1.47 (m, 10H), 1.88 (dd, J=8.18, 5.41Hz, 1H), 2.19-2.29 (m, 2H), 2.59-2.70 (m, 1H), 2.90-3.00 (m, 1H), 3.08-3.19 (m, 6H), 4.01-4.14 (m, 2H), 4.24 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.50 (dd, J=9.44, 3.15Hz, 1H), 5.13 (dd, J=10.32, 1.76Hz, 1H), 5.30 (dd, J=17.25, 1.39Hz, 1H), 5.70-5.82 (m, 1H), 7.16-7.23 (m, 1H), 7.28-7.36 (m, 1H), 7.42 (t, J=7.43Hz, 1H), 7.52 (s, 1H); MS m/z 676 (M+H)+.
【実施例１７】
【０２０２】
実施例１７の製造
【化１１２】
2010510234.tif 000118
[３-(１-ピロリジニルメチル)フェニル]マグネシウムブロミド（０.２５Ｍ ＴＨＦ溶液、３.０ｍＬ、０.７５ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１７を製造し、９ｍｇ（９％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.98-1.02 (m, 3H), 1.04-1.09 (m, 9H), 1.24 (d, J=1.51Hz, 3H), 1.39-1.51 (m, 11H), 1.87 (dd, J=8.31, 5.54Hz, 1H), 2.18-2.29 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.56-2.63 (m, 1H), 2.90-2.98 (m, 1H), 4.03 (d, J=11.08Hz, 1H), 4.24 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.30 (s, 1H), 4.41 (dd, J=9.06, 4.03Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.32, 1.51Hz, 1H), 5.29 (dd, J=17.25, 1.38Hz, 1H), 5.70-5.81 (m, 1H), 7.11 (d, J=7.55Hz, 1H), 7.23 (t, J=7.55Hz, 1H), 7.32 (d, J=7.81Hz, 1H), 7.37 (s, 1H); MS m/z 716 (M+H)+.
【実施例１８】
【０２０３】
実施例１８の製造
【化１１３】
2010510234.tif 000119
[３-(１-ピペリジニルメチル)フェニル]マグネシウムブロミド（０.２５Ｍ ＴＨＦ溶液、３.０ｍＬ、０.７５ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１８を製造し、１５ｍｇ（１４％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.99-1.04 (m, 5H), 1.07 (s, 9H), 1.15-1.26 (m, 3H), 1.41-1.47 (m, 13H), 1.77-1.92 (m, 5H), 2.11-2.40 (m, 2H), 2.65-2.76 (m, 1H), 2.86-2.97 (m, 1H), 4.08-4.19 (m, 2H), 4.28 (s, 3H), 4.52 (dd, J=9.82, 2.77Hz, 1H), 5.05-5.15 (m, 1H), 5.22-5.34 (m, 1H), 5.72-5.85 (m, 1H), 7.44 (d, J=7.20Hz, 1H), 7.49 (t, J=7.43Hz, 1H), 7.66 (d, J=7.55Hz, 1H), 7.81 (s, 1H); MS m/z 732 (M+H)+.
【実施例１９】
【０２０４】
実施例１９の製造
【化１１４】
2010510234.tif 000120
[３-(４-モルホリニルメチル)フェニル]マグネシウムブロミド（０.２５Ｍ ＴＨＦ溶液、３.０ｍＬ、０.７５ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例１９を製造し、１６ｍｇ（１５％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.98-1.02 (m, 2H), 1.07 (s, 9H), 1.19-1.27 (m, 3H), 1.40-1.50 (m, 10H), 1.88 (dd, J=7.93, 5.67Hz, 1H), 2.16-2.38 (m, 2H), 2.60-3.01 (m, 6H), 3.71-3.83 (m, 4H), 4.00-4.16 (m, 3H), 4.22 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.26-4.32 (m, 1H), 4.48 (dd, J=9.32, 2.77Hz, 1H), 5.12 (d, J=10.58Hz, 1H), 5.30 (d, J=16.87Hz, 1H), 5.70-5.83 (m, 1H), 6.79 (d, J=8.81Hz, 1H), 7.33-7.45 (m, 2H), 7.56 (d, J=8.06Hz, 1H), 7.66 (s, 1H); MS 732 m/z (M+H)+.
【実施例２０】
【０２０５】
実施例２０の製造
【化１１５】
2010510234.tif 000121
[２-(４-モルホリニルメチル)フェニル]マグネシウムブロミド（０.２５Ｍ ＴＨＦ溶液、３.６ｍＬ、０.９０ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例２０を製造し、４ｍｇ（４％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.94-0.98 (m, 2H), 1.01-1.11 (m, 10H), 1.16-1.24 (m, 2H), 1.41-1.48 (m, 10H), 1.85 (dd, J=8.06, 5.29Hz, 1H), 2.12-2.22 (m, 1H), 2.45 (dd, J=12.59, 7.55Hz, 1H), 2.55-2.68 (m, 4H), 2.72-2.85 (m, 1H), 2.87-2.97 (m, 1H), 3.59-3.84 (m, 6H), 4.00-4.07 (m, 1H), 4.13-4.21 (m, 1H), 4.34-4.38 (m, 1H), 4.47 (d, J=10.83Hz, 1H), 5.10 (dd, J=10.20, 1.64Hz, 1H), 5.26 (dd, J=17.12, 1.26Hz, 1H), 5.68-5.80 (m, 1H), 6.77 (d, J=9.57Hz, 1H), 7.28-7.40 (m, 3H), 7.44-7.49 (m, 1H); MS m/z (M+H)+.
【実施例２１】
【０２０６】
実施例２１の製造
【化１１６】
2010510234.tif 000122
(３,５-ジメチルフェニル)マグネシウムブロミド（０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、１.８ｍＬ、０.９０ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例２１を製造し、７ｍｇ（７％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.97-1.11 (m, 12H), 1.19-1.27 (m, 2H), 1.37-1.51 (m, 10H), 1.87 (dd, J=8.18, 5.41Hz, 1H), 2.15-2.25 (m, 2H), 2.30 (s, 6H), 2.54-2.62 (m, 1H), 2.90-2.98 (m, 1H), 4.02 (d, J=10.58Hz, 1H), 4.21 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.27-4.32 (m, 1H), 4.41 (dd, J=9.06, 3.78Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.32, 1.51Hz, 1H), 5.29 (dd, J=17.12, 1.51Hz, 1H), 5.70-5.81 (m, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.15 (s, 2H); MS m/z 683 (M+Na)+.
【実施例２２】
【０２０７】
実施例２２の製造
【化１１７】
2010510234.tif 000123
(４-フルオロ-３-メチルフェニル)マグネシウムブロミド（１.０Ｍ ＴＨＦ溶液、０.９ｍＬ、０.９０ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例２２を製造し、８ｍｇ（８％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.97-1.02 (m, 2H), 1.03-1.11 (m, 10H), 1.20-1.27 (m, 2H), 1.41-1.47 (m, 10H), 1.87 (dd, J=8.18, 5.41Hz, 1H), 2.20-2.25 (m, 1H), 2.27 (d, J=1.51Hz, 3H), 2.55-2.63 (m, 1H), 2.89-2.98 (m, 1H), 4.03 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.21 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.26-4.31 (m, 1H), 4.41 (dd, J=9.19, 3.90Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.32, 1.76Hz, 1H), 5.30 (dd, J=17.12, 1.26Hz, 1H), 5.70-5.81 (m, 1H), 6.79 (d, J=9.06Hz, 1H), 6.96-7.03 (m, 1H), 7.33-7.40 (m, 1H), 7.41-7.46 (m, 1H); MS m/z 687 (M+Na)+.
【実施例２３】
【０２０８】
実施例２３の製造
【化１１８】
2010510234.tif 000124
(３-フルオロ-４-メチルフェニル)マグネシウムブロミド（０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、１.８ｍＬ、０.９０ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例２３を製造し、５ｍｇ（５％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.99 (s, 2H), 1.03-1.10 (m, 10H), 1.21-1.27 (m, 2H), 1.42-1.47 (m, 10H), 1.87 (dd, J=8.31, 5.54Hz, 1H), 2.19-2.22 (m, J=8.06Hz, 1H), 2.24 (d, J=1.51Hz, 3H), 2.54-2.61 (m, 1H), 2.90-2.98 (m, 1H), 4.01 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.22 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.26-4.30 (m, 1H), 4.41 (dd, J=9.06, 4.03Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.32, 1.76Hz, 1H), 5.29 (dd, J=17.25, 1.13Hz, 1H), 5.70-5.81 (m, 1H), 7.20-7.27 (m, 3H); MS m/z 665 (M+H)+.
【実施例２４】
【０２０９】
実施例２４の製造
【化１１９】
2010510234.tif 000125
(２,５-ジメチルフェニル)マグネシウムブロミド（０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、１.８ｍＬ、０.９０ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例２４を製造し、５ｍｇ（５％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 0.94-0.97 (m, 2H), 1.02-1.10 (m, 10H), 1.20-1.26 (m, 2H), 1.40-1.49 (m, 10H), 1.86 (dd, J=8.18, 5.41Hz, 1H), 2.16 (d, J=4.78Hz, 1H), 2.17-2.25 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.72 (dd, J=12.46, 8.18Hz, 1H), 2.88-2.97 (m, 1H), 4.09 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.13-4.21 (m, 1H), 4.37 (d, J=9.32Hz, 1H), 4.44 (d, J=10.83Hz, 1H), 5.11 (dd, J=10.32, 1.51Hz, 1H), 5.28 (dd, J=17.12, 1.51Hz, 1H), 5.70-5.80 (m, 1H), 6.82 (d, J=9.57Hz, 1H), 6.99 (t, J=7.68Hz, 1H), 7.11 (d, J=7.30Hz, 1H), 7.17 (d, J=7.81Hz, 1H); MS m/z 683 (M+Na)+.
【実施例２５】
【０２１０】
実施例２５の製造
【化１２０】
2010510234.tif 000126
(５-フルオロ-２-メトキシフェニル)マグネシウムブロミド（０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、１.８ｍＬ、０.９０ｍｍｏｌ）を使って、一般手法で説明したように実施例２５を製造し、５ｍｇ（５％）の生成物を得た。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 1.00-1.10 (m, 11H), 1.20-1.26 (m, 2H), 1.40-1.47 (m, 10H), 1.83-1.89 (m, 1H), 2.20-2.29 (m, 1H), 2.34-2.43 (m, 1H), 2.90-2.98 (m, 1H), 3.80 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.93 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.18-4.28 (m, 1H), 4.45 (d, J=10.83Hz, 1H), 4.56 (dd, J=9.69, 2.64Hz, 1H), 5.12 (dd, J=10.58, 1.51Hz, 1H), 5.30 (d, J=17.37Hz, 1H), 5.68-5.83 (m, 1H), 6.75 (d, J=8.81Hz, 1H), 6.98-7.04 (m, 2H), 7.36 (d, J=10.32Hz, 1H); MS m/z 703 (M+Na)+.
【実施例２６】
【０２１１】
実施例２６の製造
【化１２１】
2010510234.tif 000127
実施例７ステップ４で得た生成物（５５ｍｇ、０.１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（4ｍＬ）溶液に、(４-フェノキシフェニル)マグネシウムブロミド（０.５Ｍ／ＴＨＦ、１.０ｍＬ、０.５０ｍｍｏｌ）を-４０℃で滴下した。この温度で２時間撹拌し、次に０℃で１時間撹拌した後、その混合物を５％クエン酸でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣を熱ヘキサンで摩砕し、濾過した。こうして得た固形物を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、化合物１００を白色固形物（２.１ｍｇ、３％）として得た。
1H NMR (CD3OD) δ 1.02-1.09 (m, 11H), 1.26-1.29 (m, 2H), 1.45-1.50 (m, 10H), 1.90-1.92 (m, 1H), 2.25-2.27 (m, 2H), 2.68-2.69 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 4.05-4.07 (m, 1H), 4.35-4.52 (m, 2H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 6.97-7.01 (m, 4H), 7.15-7.16 (m, 1H), 7.36-7.39 (m, 2H), 7.56-7.58 (m, 2H);
LC-MS (保持時間：2.94分, 方法B), MS m/z 707 (M+-H2O).
【実施例２７】
【０２１２】
実施例２７の製造
【化１２２】
2010510234.tif 000128
スキーム５
【化１２３】
2010510234.tif 000129
ステップ１．
(２Ｓ,４Ｒ)-１-ベンジル=２-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-４-ヒドロキシピロリジン-１,２-ジカルボキシレート（１.２９４ｇ、３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）およびＭｅＯＨ（１０.００ｍｌ）溶液に、前もって調製された水酸化リチウム一水和物（０.２５２ｇ、６.００ｍｍｏｌ）の水（１０.００ｍｌ）溶液を加えた。形成された濁った溶液を室温で６時間撹拌した。水で希釈し、１Ｍ ＨＣｌでｐＨ３に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）で抽出した。有機層を５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残った粉末を４：１ヘキサン-ＥｔＯＡｃで摩砕することにより、所期の生成物（１.２０ｇ、収率９６％）を白色粉末として得た。
1H NMR (CD3OD) δ 2.53-2.57 (m, 1H), 2.79-2.86 (m, 1H), 3.83-3.90 (m, 2H), 4.62-4.66 (m, 1H), 5.16-5.20 (m, 2H), 7.24-7.46 (m, 8H), 7.57-7.66 (m, 6H);
LC-MS (保持時間：2.64分, 方法B), MS m/z 400 (M+-H2O).
【０２１３】
ステップ２．
ヘキサンで予洗した水素化カリウム（７３.３ｍｇ、０.５４８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２.５ｍＬ）中で撹拌した。(２Ｓ,４Ｒ)-１-(ベンジルオキシカルボニル)-４-(ビフェニル-４-イル)-４-ヒドロキシピロリジン-２-カルボン酸（１０４ｍｇ、０.２４９ｍｍｏｌ）を固形物として０℃で一度に加えた。形成された白色ゲルをこの温度で３０分間撹拌してから（この時点でほとんど透明な溶液になった）、ヨウ化アリル（０.０２７ｍＬ、０.２９９ｍｍｏｌ）を加えた。その濁った最終溶液をこの温度で２時間撹拌した。氷冷５％クエン酸でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。分取用ＨＰＬＣで精製することにより、３５ｍｇの出発物質と、白色固形物である所期の生成物（４５ｍｇ、収率４０％）とを得た。
1H NMR (CD3OD) δ 2.56-2.57 (m, 1H), 2.81-2.84 (m, 1H), 3.82-3.87 (m, 2H), 4.69-4.73 (m, 3H), 5.14-5.23 (m, 3H), 5.30-5.41 (m, 1H), 5.87-6.01 (m, 1H), 7.34-7.46 (m, 8H), 7.57-7.66 (m, 6H);
LC-MS (保持時間：2.64分, 方法B), MS m/z 458 (M++H).
【実施例２８】
【０２１４】
実施例２８の製造
【化１２４】
2010510234.tif 000130
スキーム６
【化１２５】
2010510234.tif 000131
ステップ１．
(２Ｓ,４Ｒ)-１-ベンジル=２-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-４-ヒドロキシピロリジン-１,２-ジカルボキシレート（５４０ｍｇ、１.２５２ｍｍｏｌ）の無水酢酸（１０ｍＬ、１０６ｍｍｏｌ）溶液に、前もって調製されたトリフルオロメタンスルホン酸スカンジウム（６１.６ｍｇ、０.１２５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（０.５ｍｌ）溶液を、０℃で滴下した。形成された明桃色溶液をこの温度で1時間撹拌した。飽和塩化アンモニウムでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、所期の生成物（２９０ｍｇ、４９％）をジアステレオマーの混合物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ 1.97 (s, 1/3H), 2.00 (s, 2/3H), 2.42-2.50 (m, 1/3H), 2.68-2.79 (m, 2/3H), 3.03-3.05 (m, 2/3H), 3.24-3.41 (m, 1/3H), 3.54, 3.77 (s, 1H, 回転異性体), 3.66, 3.79 (s, 2H, 回転異性体), 3.80-3.90 (m, 1/3H), 4.10-4.19 (m, 2/3H), 4.20-4.29 (m, 2/3H), 4.49-4.57 (m, 1/3H), 4.52-4.60 (m, 1H), 5.09-5.26 (m, 2H), 7.30-7.56 (m, 14H);
LC-MS (保持時間：2.78分, 方法B), MS m/z 496 (M+-CH3CO2OH).
実施例１０１
【０２１５】
実施例１０１の製造
【化１２６】
2010510234.tif 000132
スキーム１
【化１２７】
2010510234.tif 000133
ステップ１．
２口フラスコに粉砕したマグネシウムブロミドエーテラート（２５８ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ）を投入した。このフラスコを高真空下に、７０℃の油浴で、４時間加熱した。このフラスコを氷浴で冷却した後、実施例７ステップ４で得た生成物（１１０ｍｇ、０.２０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）と共に加え、その結果生じたわずかに黄色いスラリーを室温で終夜、激しく撹拌した。
【０２１６】
ステップ２．
１-(４-ブロモフェニル)-１Ｈ-ピロール（２３９ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（４ｍＬ）とが入っているもう一つの２口フラスコに、-７８℃で、ｎ-ＢｕＬｉ（２.５Ｍ、０.４ｍＬ、１.０ｍｍｏｌ）を滴下した。その結果生じた混合物をこの温度で１５分間撹拌した。そのスラリーを、前もって-７８℃まで冷却しておいたステップ１のフラスコに、導管を通して加えた。その最終混合物をこの温度で２時間撹拌し、０℃でさらに１時間撹拌した。その混合物を飽和ＮＨ4Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで希釈し、上側の有機相を分離した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣を熱ヘキサンで摩砕し、濾過した。得られた固形物を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、実施例１０１を白色固形物（１６.５ｍｇ、１２％）として得た。
1H NMR (CD3OD) δ 1.02-1.09 (m, 11H), 1.26-1.29 (m, 2H), 1.45-1.50 (m, 10H), 1.90-1.92 (m, 1H), 2.25-2.27 (m, 2H), 2.68-2.69 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 4.05-4.07 (m, 1H), 4.35-4.52 (m, 2H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 6.30 (m, 2H), 7.20-7.21 (m, 2H), 7.48-7.51 (m, 2H), 7.66-7.68 (m, 2H);
LC-MS (保持時間：2.81分, 方法B), MS m/z 698 (M++H), 680 (M+-H2O).
実施例１０２
【０２１７】
実施例１０２の製造
【化１２８】
2010510234.tif 000134
ステップ２において４'-ブロモ-２-メトキシビフェニルを１-(４-ブロモフェニル)-１Ｈ-ピロールの代わりに使用した点以外は実施例１０１で説明した手法と同じ手法で、実施例１０２を製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 1.02-1.09 (m, 11H), 1.26-1.29 (m, 2H), 1.45-1.50 (m, 10H), 1.90-1.92 (m, 1H), 2.25-2.27 (m, 2H), 2.68-2.69 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 4.05-4.07 (m, 1H), 4.35-4.52 (m, 2H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 7.00-7.09 (m, 2H), 7.27-7.34 (m, 2H), 7.44-7.51 (m, 4H);
LC-MS (保持時間：2.90分, 方法B), MS m/z 729 (M++H), 721 (M+-H2O).
実施例１０３
【０２１８】
実施例１０３の製造
【化１２９】
2010510234.tif 000135
ステップ１．
２口フラスコに粉砕した塩化セリウム(III)七水和物（３７３ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ）を投入した。このフラスコを高真空下に２０時間、７０℃の油浴で加熱し、次に１００℃で２時間、次に１２０℃で２時間、最後に１６０℃で１６時間加熱した。このフラスコを氷浴で冷却した後、実施例７ステップ４で得た生成物（１１０ｍｇ、０.２０ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（５ｍＬ）を加えた。その結果生じたわずかに黄色いスラリーを室温で４時間、激しく撹拌した。
【０２１９】
ステップ２．
２-(４-ブロモフェニル)ピリジン（JOC, 2003, p6959、２３３ｍｇ、１.０ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（４ｍＬ）とが入っているもう一つの２口フラスコに、-７８℃で、ｎ-ＢｕＬｉ（２.５Ｍ、０.４ｍＬ、１.０ｍｍｏｌ）を滴下し、その混合物をこの温度で１５分間撹拌した。形成されたスラリーを、前もって-７８℃に冷却しておいたステップ１のフラスコに、導管を通して加えた。その最終混合物をこの温度で２時間撹拌した後、０℃でさらに１時間撹拌した。その混合物を飽和ＮＨ4Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで希釈し、上側の有機層を分離した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣を熱ヘキサンで摩砕し、濾過した。得られた固形物を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、実施例１０３を白色固形物（１７ｍｇ、１２％）として得た。
1H NMR (CD3OD) δ 1.02-1.09 (m, 11H), 1.26-1.29 (m, 2H), 1.45-1.50 (m, 10H), 1.90-1.92 (m, 1H), 2.25-2.27 (m, 2H), 2.68-2.69 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 4.05-4.07 (m, 1H), 4.35-4.52 (m, 2H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 7.38-7.40 (m, 1H), 7.71-7.74 (m, 2H), 7.87-8.00 (m, 4H), 7.63-7.64 (m, 1H);
LC-MS (保持時間：2.24分, 方法B), MS m/z 710 (M++H).
実施例１０４
【０２２０】
実施例１０４の製造
【化１３０】
2010510234.tif 000136
ステップ２において２-ブロモベンゾ[ｄ]チアゾールを１-(４-ブロモフェニル)-１Ｈ-ピロールの代わりに使用した点以外は実施例１０１で説明した手法と同じ手法で、実施例１０４を製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 1.02-1.09 (m, 11H), 1.26-1.29 (m, 2H), 1.45-1.50 (m, 10H), 1.90-1.92 (m, 1H), 2.25-2.27 (m, 2H), 2.68-2.69 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 4.05-4.07 (m, 1H), 4.35-4.52 (m, 2H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 7.43-7.52 (m, 2H), 7.93-8.01 (m, 2H);
LC-MS (保持時間：2.79分, 方法B), MS m/z 690 (M++H).
実施例１０５
【０２２１】
実施例１０５の製造
【化１３１】
2010510234.tif 000137
ステップ２において２-(４-ブロモフェニル)チアゾールを１-(４-ブロモフェニル)-１Ｈ-ピロールの代わりに使用した点以外は実施例１０１で説明した手法と同じ手法で、実施例１０５を製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 1.02-1.09 (m, 11H), 1.26-1.29 (m, 2H), 1.45-1.50 (m, 10H), 1.90-1.92 (m, 1H), 2.25-2.27 (m, 2H), 2.68-2.69 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 4.05-4.07 (m, 1H), 4.35-4.52 (m, 2H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.72-7.74 (m, 2H), 7.90 (m, 1H), 7.98-7.99 (m, 2H);
LC-MS (保持時間：2.67分, 方法B), MS m/z 716 (M++H).
本開示の化合物の製造
実施例１０６
【０２２２】
化合物１０６の製造
【化１３２】
2010510234.tif 000138
スキーム２
【化１３３】
2010510234.tif 000139
ステップ１．
メチルスルホキシド（２３.９０ｍｌ、３３７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍｌ）溶液に、-７８℃で、塩化オキサリル（２Ｍ ＤＣＭ溶液、８４ｍｌ、１６８ｍｍｏｌ）を滴下した。形成された溶液をこの温度で３０分間撹拌した。(２Ｓ,４Ｒ)-１-ベンジル=２-メチル=４-ヒドロキシピロリジン-１,２-ジカルボキシレート（２１.３８ｇ、７７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍｌ）溶液を-７８℃で滴下した。形成されたスラリーを-７８℃で２時間撹拌してから、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（６６.７ｍｌ、３８３ｍｍｏｌ）を滴下した。その最終溶液を室温で３時間撹拌した。その混合物を氷冷１Ｍ ＨＣｌ、５％クエン酸、次にブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残った明褐色油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、４：１、３：１、次いで２：１のヘキサン-ＥｔＯＡｃで溶出させることにより、(Ｓ)-１-ベンジル=２-メチル=４-オキソピロリジン-１,２-ジカルボキシレート（１４.８ｇ、収率７０％）を明褐色粘性油状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ 2.58-2.63 (m, 1H), 2.90-2.99 (m, 1H), 3.62, 3.77 (s, 3H, 回転異性体), 3.95-4.02 (m, 2H), 4.82-4.89 (m, 1H), 5.11-5.24 (m, 2H), 7.32-7.39 (m, 5H).
【０２２３】
ステップ２．
(Ｓ)-１-ベンジル=２-メチル=４-オキソピロリジン-１,２-ジカルボキシレート（１４.０ｇ、５０.５ｍｍｏｌ）のトルエン（５００ｍＬ）溶液に、０℃で、ビフェニル-４-イルマグネシウムブロミド（１５２ｍＬ、０.５Ｍ ＴＨＦ溶液、７５.７５ｍｍｏｌ）を滴下した。形成された明黄色溶液をこの温度で１時間撹拌した。ＮＨ4Ｃｌでクエンチし、有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣をシリカゲルプラグに通して精製し、４：１、３：１、次に２：１、最後に３：２のヘキサン-ＥｔＯＡｃで溶出させて得た１１.７０ｇの白色固形物を、ＥｔＯＡｃ-ヘキサン（５０ｍｌ-１５０ｍｌ）から再結晶することにより、７.８ｇの(２Ｓ,４Ｒ)-１-ベンジル=２-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-４-ヒドロキシピロリジン-１,２-ジカルボキシレートを小さい針状物として得た。母液を濃縮し、フラッシュカラムで精製し、４：１、３：１、次に２：１、最後に３：２のヘキサン-ＥｔＯＡｃで溶出させることにより、さらに２.４１ｇの所期の生成物を得た。
1H NMR (CDCl3) δ 2.39-2.45 (m, 1H), 2.70-2.75 (m, 1H), 3.66, 3.86 (s, 3H, 回転異性体), 3.80-3.90 (m, 1H), 4.00-4.07 (m, 1H), 4.62 (dd, J1,2=9.5, 28Hz, 1H), 5.09-5.15 (m, 1H), 5.21-5.25 (m, 1H), 7.31-7.38 (m, 6H), 7.42-7.45 (m, 2H), 7.54-7.59 (m, 6H);
LC-MS (保持時間：2.77分, 方法B), MS m/z 414 (M+-H2O), 370 (M+-H2O-CO2).
【０２２４】
ステップ３．
(２Ｓ,４Ｒ)-１-ベンジル=２-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-４-ヒドロキシピロリジン-１,２-ジカルボキシレート（８.０８ｇ、１８.７３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５０ｍｌ）溶液に、０℃で、水素化ナトリウム（０.５２０ｇ、２０.６０ｍｍｏｌ）を加えた。形成された明褐色溶液をこの温度で３０分間撹拌した。硫酸ジメチル（１.９４９ｍｌ、２０.６０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。その最終溶液を室温で２時間撹拌した。５％クエン酸でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機分をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣をフラッシュカラムシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、４：１、３：１、次いで２：１のヘキサン-ＥｔＯＡｃで溶出させて得た所期の生成物１.４５ｇを、ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）から再結晶することにより、１.２０ｇ（収率１４.３８％）を白色固形物として得た。フラッシュカラム精製中に４.５０ｇの出発物質も回収された。
1H NMR (CDCl3) δ 2.51-2.56 (m, 1H), 2.85-2.89 (m, 1H), 2.95, 2.97 (s, 3H, 回転異性体), 3.67, 3.80 (s, 3H, 回転異性体), 3.69-3.86 (m, 1H), 4.02-4.08 (m, 1H), 4.62 (dd, J1,2=9.5, 28Hz, 1H), 5.09-5.17 (m, 1H), 5.20-5.29 (m, 1H), 7.29-7.46 (m, 10H), 7.57-7.60 (m, 4H);
LC-MS (保持時間：2.92分, 方法B), MS m/z 446 (M++H), 414 (M+-MeOH), 370 (M+-MeOH-CO2).
【０２２５】
ステップ４．
(２Ｓ,４Ｒ)-１-ベンジル=２-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-４-メトキシピロリジン-１,２-ジカルボキシレート（１.２９ｇ、２.９０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３０ｍｌ）溶液が入っている氷冷Ｐａｒｒ振とう容器に、パラジウム（０.３０８ｇ、０.２９０ｍｍｏｌ）炭素担持物（１０％、湿性）を加えた。その容器を、圧力２５ｐｓｉの水素下で５時間、Ｐａｒｒ振とう装置に置いた。セライトでクエンチした。濾過し、エバポレートすることにより、所期の生成物０.８１１ｇ（９１％）をオフホワイトの粉末として得た。この物質を、これ以上精製せずに、次のカップリング反応に使用した。
LC-MS (保持時間：1.92分, 方法B), MS m/z 312 (M++H), 280 (M+-MeOH).
【０２２６】
ステップ５．
(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレート（５００ｍｇ、１.６０６ｍｍｏｌ）、(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタン酸（４０９ｍｇ、１.７７ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（８６７ｍｇ、２.４０９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５ｍｌ）溶液に、０℃で、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（０.８３９ｍｌ、４.８２ｍｍｏｌ）を加えた。形成された溶液を室温で４時間撹拌した。ＤＣＭで希釈し、５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣をシリカゲルカラムで精製し、２：１ヘキサン-アセトンで溶出させることにより、所期の生成物（６００ｍｇ、収率７１％）を白色泡状物として得た。
1H NMR (CD3OD) δ 1.11 (s, 9H), 1.42 (s, 9H), 2.61-2.66 (m, 1H), 2.71-2.75 (m, 1H), 3.00 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 4.20-4.25 (m, 2H), 4.30-4.35 (m, 1H), 4.75-4.79 (m, 1H), 7.35-7.72 (m, 9H);
LC-MS (保持時間：3.04分, 方法B), MS m/z 525 (M++H), 493 (M+-MeOH).
【０２２７】
ステップ６．
(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレート（６００ｍｇ、１.１４４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍｌ）およびＭｅＯＨ（５.００ｍｌ）溶液に、前もって調製された水酸化リチウム一水和物（９６ｍｇ、２.２８７ｍｍｏｌ）の水（５.００ｍｌ）溶液を加えた。形成された濁った溶液を室温で８時間撹拌した。揮発物を除去し、５％クエン酸で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残った粉末（５３４ｍｇ、収率９１％）をＥｔＯＡｃ-ヘキサン（２ｍｌ-４ｍｌ）から再結晶することにより、所期の生成物４５０ｍｇを白色結晶として得た。
LC-MS (保持時間：2.93分, 方法B), MS m/z 511 (M++H), 479 (M+-MeOH).
【０２２８】
ステップ７．
ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍｌ）中の(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸（２５５ｍｇ、０.４９９ｍｍｏｌ）、(１Ｒ,２Ｓ)-１-アミノ-Ｎ-(シクロプロピルスルホニル)-２-ビニルシクロプロパンカルボキサミド、トシル酸水和物（２３１ｍｇ、０.５４９ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（２２８ｍｇ、０.５９９ｍｍｏｌ）のスラリーに、０℃で、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（０.４３５ｍｌ、２.４９７ｍｍｏｌ）を加えた。形成された明黄色溶液を０℃で３時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈し、５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレートした。残渣を分取用ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ-Ｌｕｎａ ３０×１００ｍｍ Ｓ１０、３０％Ｂ→１００％Ｂ、勾配時間１５分、２０分停止）で精製することにより、化合物１０６（２４８ｍｇ、収率６８.７％）を白色固形物として得た。
1H NMR (CD3OD) δ 1.01-1.12 (m, 11H), 1.26-1.27 (m, 2H), 1.43-1.50 (m, 10H), 1.87-1.90 (m, 1H), 2.20-2.25 (m, 1H), 2.49-2.57 (m, 2H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 4.07-4.09 (m, 1H), 4.22-4.24 (m, 1H), 4.42 (d, J=9Hz, 1H), 4.58-4.60 (m, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 7.38-7.39 (m, 1H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.57-7.67 (m, 6H);
LC-MS (保持時間：2.96分, 方法B), MS m/z 723 (M++H).
実施例１０７
【０２２９】
化合物１０７の製造
【化１３４】
2010510234.tif 000140
スキーム３
【化１３５】
2010510234.tif 000141
ステップ１．
(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレート（１５０ｍｇ、０.４８２ｍｍｏｌ）、(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)ノナ-８-エン酸（１４４ｍｇ、０.５３０ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（２６０ｍｇ、０.７２３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍｌ）溶液に、０℃で、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（０.２５２ｍｌ、１.４４５ｍｍｏｌ）を加えた。形成された溶液を室温で終夜撹拌した。ＤＣＭで希釈し、５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、所期の生成物（１４０ｍｇ、収率５１.５％）を白色泡状物として得た。
1H NMR (CD3OD) δ 1.31-1.57 (m, 15H), 1.62-1.65 (m, 1H), 1.78-1.82 (m, 1H), 2.11-2.13 (m, 2H), 2.66-2.69 (m, 1H), 2.84-2.89 (m, 1H), 3.00 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 4.16 (s, 2H), 4.30-4.35 (m, 1H), 4.79-4.81 (m, 1H), 4.95 (d, J=12Hz, 1H), 5.03 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.83-5.87(m, 1H), 7.32-7.39 (m, 1H), 7.45-7.56 (m, 4H), 7.64-7.71 (m, 4H);
LC-MS (保持時間：3.20分, 方法B), MS m/z 565 (M++H).
【０２３０】
ステップ２．
(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)ノナ-８-エノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレート（１６６ｍｇ、０.２９４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２ｍＬ）溶液に、前もって調製された水酸化リチウム一水和物（３７ｍｇ、０.８８２ｍｍｏｌ）の水（２ｍＬ）溶液を加えた。形成された濁った溶液を室温で終夜撹拌した。揮発物を減圧下で除去した。残渣を水にとり、１Ｍ ＨＣｌでｐＨ２に酸性化した。ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残った白色固形物（１４８ｍｇ、収率９１％）を、これ以上精製せずに、次のカップリング反応に使用した。
LC-MS (保持時間：3.14分, 方法B), MS m/z 551 (M++H).
【０２３１】
ステップ３．
ＤＣＭ（３ｍｌ）中の(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)ノナ-８-エノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸（７８ｍｇ、０.１４２ｍｍｏｌ）、(１Ｒ,２Ｓ)-１-アミノ-Ｎ-(シクロプロピルスルホニル)-２-ビニルシクロプロパンカルボキサミド、トシル酸水和物（６５.５ｍｇ、０.１５６ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（７７ｍｇ、０.２１２ｍｍｏｌ）のスラリーに、０℃で、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（０.０７４ｍｌ、０.４２５ｍｍｏｌ）を加えた。その最終混合物を室温で終夜撹拌した。ＤＣＭで希釈し、５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、化合物１０７（６４ｍｇ、収率５９％）を白色固形物として得た。
1H NMR (CD3OD) δ 1.11-1.12 (m, 2H), 1.26-1.28 (m, 2H), 1.37-1.51 (m, 15H), 1.64-1.72 (m, 1H), 1.87-1.89 (m, 2H), 2.08-2.11 (m, 2H), 2.28-2.31(m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.09 (s, 3H), 4.19 (d, J=9Hz, 1H), 4.38-4.41 (m, 2H), 4.95 (d, J=12Hz, 1H), 5.03 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.84 (m, 2H), 7.38-7.39 (m, 1H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.53-7.58 (m, 2H), 7.63-7.71 (m, 4H);
LC-MS (保持時間：3.15分, 方法B), MS m/z 763 (M++H).
実施例１０８
【０２３２】
化合物１０８の製造
【化１３６】
2010510234.tif 000142
スキーム４
【化１３７】
2010510234.tif 000143
ステップ１．
水素化ナトリウム６０％油性分散液（４０.０ｍｇ、１.０００ｍｍｏｌ）をヘキサンですすぎ、ＤＭＦ（５ｍＬ）中で撹拌した。(２Ｓ,４Ｒ)-１-ベンジル=２-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-４-ヒドロキシピロリジン-１,２-ジカルボキシレート（２１６ｍｇ、０.５ｍｍｏｌ）を固形物として０℃で一度に加えた。形成された明黄色溶液をこの温度で３０分撹拌してから、臭化ベンジル（０.０７２ｍＬ、０.６００ｍｍｏｌ）を加えた。その最終溶液を０℃で２時間撹拌した。氷冷５％クエン酸でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣をシリカゲルカラムで精製し、４：１、３：１、次いで２：１のヘキサン-ＥｔＯＡｃで溶出させることにより、所期の生成物６４ｍｇ（収率２４％）をジアステレオマーの混合物として得ると共に、１５０ｍｇの出発物質を得た。
1H NMR (CDCl3) δ 2.28-2.34 (m, 0.5H), 2.51-2.60 (m, 0.5H), 2.90-3.02 (m, 1H), 3.41, 3.55, 3.56, 3.78 (s, 3H), 3.82-3.99 (m, 1H), 4.11-4.23 (m, 3H), 4.41-4.70 (m, 1H), 5.09-5.29 (m, 2H), 7.17-7.63 (m, 19H);
LC-MS (保持時間：3.18分, 方法B), MS m/z 522 (M++H).
【０２３３】
ステップ２．
(４Ｒ)-１-ベンジル=２-メチル=４-(ベンジルオキシ)-４-(ビフェニル-４-イル)ピロリジン-１,２-ジカルボキシレート（５８ｍｇ、０.１１１ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（１ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１ｍＬ）溶液が入っている氷冷Ｐａｒｒ振とう容器に、パラジウム（１２ｍｇ、０.０１１ｍｍｏｌ）炭素担持物（１０％、湿性）を加えた。その容器を、圧力２５ｐｓｉの水素下で３時間、Ｐａｒｒ振とう装置に置いた。セライトでクエンチした。濾過し、エバポレートすることにより、所期の生成物（３８ｍｇ、収率８８％）をオフホワイトの粉末として得た。この物質は、これ以上精製せずに、以下のカップリング反応に使用した。
LC-MS (保持時間：2.36分, 方法B), MS m/z 388 (M++H).
【０２３４】
ステップ３．
(４Ｒ)-メチル=４-(ベンジルオキシ)-４-(ビフェニル-４-イル)ピロリジン-２-カルボキシレート（６０ｍｇ、０.１５５ｍｍｏｌ）、(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタン酸（３９.３ｍｇ、０.１７ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（８４ｍｇ、０.２３２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍｌ）溶液に、０℃で、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（０.０８１ｍｌ、０.４６５ｍｍｏｌ）を加えた。形成された溶液を室温で終夜撹拌した。ＤＣＭで希釈し、５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣をシリカゲルカラムで精製し、３：１ヘキサン-アセトンで溶出させることにより、所期の生成物（７７ｍｇ、収率８３％）を白色泡状物として得た。
1H NMR (CDCl3) δ 1.04, 1.11 (s, 9H), 1.42, 1.43 (s, 9H), 2.38-2. 40 (m, 0.5H), 2.55-2.60 (m, 0.5H), 2.90-3.02 (m, 1H), 3.52, 3.75 (s, 3H), 4.10-4.18 (m, 2H), 4.24-4.26 (m, 1H), 4.34-4.38 (m, 1H), 4.63-4.64 (m, 0.5H), 4.80-4.82 (m, 0.5H), 5.20-5.29 (m, 1H), 7.16-7.61 (m, 14H);
LC-MS (保持時間：3.28分, 方法B), MS m/z 601 (M++H).
【０２３５】
ステップ４．
(４Ｒ)-メチル=４-(ベンジルオキシ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)ピロリジン-２-カルボキシレート（７４ｍｇ、０.１２３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１ｍＬ）溶液に、前もって調製された水酸化リチウム一水和物（１５.５ｍｇ、０.３７０ｍｍｏｌ）の水（１ｍＬ）溶液を加えた。形成された濁った溶液を室温で終夜撹拌した。揮発物を減圧下で除去した。残渣を水にとり、１Ｍ ＨＣｌでｐＨ２に酸性化した。ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残った白色固形物（５８ｍｇ、収率８０％）を、これ以上精製せずに、次のカップリング反応に使用した。
LC-MS (保持時間：3.19分, 方法B), MS m/z 587 (M++H).
【０２３６】
ステップ５．
ジクロロメタン（２ｍＬ）中の(４Ｒ)-４-(ベンジルオキシ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)ピロリジン-２-カルボン酸（６３ｍｇ、０.１０７ｍｍｏｌ）、(１Ｒ,２Ｓ)-１-アミノ-Ｎ-(シクロプロピルスルホニル)-２-ビニルシクロプロパンカルボキサミド、トシル酸水和物（４９.７ｍｇ、０.１１８ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（５８.０ｍｇ、０.１６１ｍｍｏｌ）のスラリーに、０℃で、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（０.０５６ｍＬ、０.３２２ｍｍｏｌ）を加えた。その最終混合物を室温で終夜撹拌した。ＤＣＭで希釈し、５％クエン酸およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、エバポレートした。残渣を分取用ＨＰＬＣ（溶離液としてＭｅＯＨ-水）で精製することにより、ジアステレオマー生成物の混合物（４８ｍｇ、収率５５.９％）を白色固形物として得た。この固形物をもう一度、別の分取用ＨＰＬＣ条件（溶離液としてアセトニトリル-水）にかけることにより、ホモキラルな生成物（１１ｍｇ）を得た。
1H NMR (CD3OD) δ 1.05-1.15 (m, 11H), 1.25-1.31 (m, 2H), 1.47-1.50 (m, 10H), 1.80-1.82 (m, 1H), 2.15-2.20 (m, 1H), 2.57-2.70 (m, 2H), 2.94-2.98 (m, 1H), 4.08-4.19 (m, 2H), 4.30 (s, 2H), 4.45 (d, J=9Hz, 1H), 4.72-4.76 (m, 1H), 5.13 (d, J=12Hz, 1H), 5.28 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.75-5.82 (m, 1H), 7.29-7.34 (m, 6H), 7.38-7.40 (m, 2H), 7.63-7.69 (m, 6H);
LC-MS (保持時間：3.22分, 方法B), MS m/z 799.5 (M++H).
実施例１０９
【０２３７】
化合物１０９の製造
【化１３８】
2010510234.tif 000144
ステップ１：(Ｅ/Ｚ)メチル=２-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-４,４-ジフルオロブタ-２-エノエートの製造
【化１３９】
2010510234.tif 000145
カリウムｔｅｒｔ-ブトキシド（３.９１ｇ、３４.９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）懸濁液に、メチル=２-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-２-(ジメトキシホスホリル)アセテート（１０.５ｇ、３１.７ｍｍｏｌ）を、Ｎ2下、-７８℃で加えた。それをこの温度で３０分撹拌した後、１-エトキシ-２,２-ジフルオロエタノール（７.９９ｇ、６３.４ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。その結果生じた混合物を室温まで温め、１８時間撹拌した。次にそれを水でクエンチし、数滴の１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝５に調節した。その混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮することにより、１０ｇの粗生成物を黄色油状物として得た。３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液としてＢｉｏｔａｇｅで精製することにより、７.１２ｇ（７９％）の(Ｅ/Ｚ)メチル=２-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-４,４-ジフルオロブタ-２-エノエートを油状物として得た。
LC-MS, 異性体の約１：８混合物. LC-MS, MS m/z 286 (M+1).
主要異性体: 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ ppm 3.84 (s, 3H), 5.18 (s, 2H), 6.21-6.43 (m, 1H), 6.70 (dt, J1=55.2Hz, J2=5.19, 1H), 6.90-7.05 (brs, 1H), 7.31-7.50 (m, 5H).
【０２３８】
ステップ２：下記(Ｅ/Ｚ)-メチル=２-((ベンジルオキシカルボニル)(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)アミノ)-４,４-ジフルオロブタ-２-エノエートの製造
【化１４０】
2010510234.tif 000146
(Ｅ/Ｚ)メチル=２-(ベンジルオキシカルボニルアミノ)-４,４-ジフルオロブタ-２-エノエート（１９ｇ、６６.６ｍｍｏｌ）、ジ-ｔｅｒｔ-ブチルジカーボネート（２９.１ｇ、１３３ｍｍｏｌ）および触媒量のＤＭＡＰ（０.８１４ｇ、６.６６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）溶液を室温で２時間撹拌した。次にそれをＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮することにより、３９.１ｇの粗生成物を無色の油状物として得た。２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液としてＢｉｏｔａｇｅで精製することにより、２２ｇ（８６％）の(Ｅ/Ｚ)-メチル=２-((ベンジルオキシカルボニル)(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)アミノ)-４,４-ジフルオロブタ-２-エノエートを無色の油状物として得た。
LC-MS, MS m/z 408(M+1+Na).主要異性体:1H NMR (500MHz, CDCl3) δ ppm 1.45 (s, 9H), 3.73 (s, 3H), 5.21 (s, 2H), 6.12-6.39 (dt, J1=54.3Hz, J2=6.10Hz, 1H), 6.72-6.81 (m, 1H), 7.29-7.41 (m, 5H).
【０２３９】
ステップ３：メチル=１-((ベンジルオキシカルボニル)(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)アミノ)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボキシレートの製造
【化１４１】
2010510234.tif 000147
ＤＭＳＯ（５０ｍｌ）中の水素化ナトリウム（０.８５０ｇ、２１.２６ｍｍｏｌ）の混合物に、ヨウ化トリメチルスルホキソニウム（４.９０ｇ、２２.２５ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温で１時間撹拌した。次に、(Ｅ/Ｚ)-メチル=２-((ベンジルオキシカルボニル)(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)アミノ)-４,４-ジフルオロブタ-２-エノエート（６.４ｇ、１６.６１ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を８０℃で２時間加熱した。次に反応を室温まで冷却し、１８時間撹拌した。水（１０ｍＬ）を加えた後、１Ｎ ＨＣｌを加えてｐＨを５に調節した。この混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を水（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮することにより、７ｇの粗生成物を黄色油状物として得た。１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液としてＢｉｏｔａｇｅで精製することにより、０.８ｇのメチル=１-((ベンジルオキシカルボニル)(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)アミノ)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボキシレートを油状物として得た。LC-MS, MS m/z 422 (M+1+Na)。このＢｉｏｔａｇｅ精製により、別途、１.３５ｇのｄｅｓ-Ｃｂｚ生成物、メチル=１-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボキシレートも、得られた。LC-MS, MS m/z 288 (M+1+Na)。合計収率は４２％である。
【０２４０】
ステップ４：１-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボン酸の製造
【化１４２】
2010510234.tif 000148
ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）および水酸化ナトリウム（１０ｍＬ、４０.０ｍｍｏｌ）中のメチル=１-((ベンジルオキシカルボニル)(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル)アミノ)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボキシレート（１.０５ｇ、２.６３ｍｍｏｌ）、メチル=１-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボキシレート（１.４３ｇ、５.３９ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、１Ｎ ＨＣｌを使ってｐＨ＝４に調節した。その溶液から沈殿した白色固形物を濾過によって集めた。濾過ケーキを水で洗浄することにより、１.２ｇの粗生成物を白色固形物として得た。ヘキサン／ＥｔＯＡｃからの結晶化により、１.０ｇ（５０％）の１-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボン酸を白色固形物として得た。この中間体は、ＣＦ2Ｈ置換基がカルボキシル基に対してｓｙｎである単一のジアステレオ異性体として単離された。
LC-MS, MS m/z 274 (M+1+Na).
1H NMR (300MHz, d4-MeOH) δ ppm 1.31-1.54 (m, 10H) 1.66-1.86 (m, 1H) 1.85-2.10 (m, 1H) 5.92 (t, J=55.81Hz, 1H).
【０２４１】
ステップ５：ｔｅｒｔ-ブチル=１-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロピルカルバメートの製造
【化１４３】
2010510234.tif 000149
テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中の１-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボン酸（９７５ｍｇ、３.８８ｍｍｏｌ）とＣＤＩ（７５５ｍｇ、４.６６ｍｍｏｌ）との混合物を、１時間、加熱還流した。次に、それを室温まで冷却してから、シクロプロパンスルホンアミド（５６４ｍｇ、４.６６ｍｍｏｌ）を加え、次にＤＢＵ（０.７０２ｍＬ、４.６６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で１８時間撹拌した。次に、それを減圧下で濃縮し、水で希釈し、１Ｎ ＨＣｌを使ってｐＨ＝４に調節した。その酸性溶液をＥｔＯＡｃで抽出し、水（１５ｍＬ×５）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、減圧下で濃縮することにより、１.６ｇの粗生成物を白色固形物として得た。ヘキサン/ＥｔＯＡｃからの再結晶により、１.１５ｇ（８４％）のｔｅｒｔ-ブチル=１-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロピルカルバメートを白色固形物として得た。LC-MS, MS m/z 377(M+1+Na)。
1H NMR (500MHz, d4-MeOH) δ ppm 1.03-1.17 (m, 2H), 1.18-1.25 (m, 1H), 1.25-1.35 (m, 1H), 1.39-1.46 (m, J=5.49Hz, 1H), 1.49  (s, 9H), 1.90-2.03 (m, 1H), 2.04-2.20 (m, 1H), 2.99 (s, 1H), 5.50-5.89 (m, 1H).
【０２４２】
ステップ６：１-アミノ-Ｎ-(シクロプロピルスルホニル)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボキサミド・ＨＣｌ塩の製造
【化１４４】
2010510234.tif 000150
ｔｅｒｔ-ブチル=１-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロピルカルバメート（１.１ｇ、３.１０ｍｍｏｌ）と４Ｎ ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）との混合物を室温で２時間撹拌した。次に、反応混合物を濃縮することにより、０.９３ｇ（１０３％）の１-アミノ-Ｎ-(シクロプロピルスルホニル)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボキサミド・ＨＣｌ塩を白色固形物として得た。
LC-MS, MS m/z 277(M+1+Na)。1H NMR (500MHz, d4-MeOH) δ ppm 1.07-1.21 (m, 2H) 1.20-1.37 (m, 2H) 1.70-1.85 (m, 1H) 2.21-2.36 (m, 2H) 2.96-3.11 (m, 1H) 5.86-6.13 (dt, J1=55.24Hz, J2=5.19Hz, 1H).
【０２４３】
ステップ７：化合物１０９の製造
ＤＣＭ（３ｍＬ）中の(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸（３０ｍｇ、０.０５９ｍｍｏｌ）、１-アミノ-Ｎ-(シクロプロピルスルホニル)-２-(ジフルオロメチル)シクロプロパンカルボキサミド・ＨＣｌ塩（１７.０８ｍｇ、０.０５９ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２６.８ｍｇ、０.０７１ｍｍｏｌ）および１-メチルピペリジン（２９.１ｍｇ、０.２９４ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１８時間撹拌した。次にそれを減圧下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と１Ｎ ＨＣｌを使ってｐＨ＝４に調節した水５ｍＬとに分配した。次に有機相を水（５ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮することにより、５０ｍｇの粗生成物を白色固形物として得た。分取用ＨＰＬＣで精製することにより、３８ｍｇの化合物１０９を白色固形物（２つのＰ１ジアステレオマーの約１：１混合物）として得た。LC-MS, MS m/z 747(M+1).
1H NMR (500MHz, d4-MeOH) δ ppm 0.82-1.68 (m, 23H), 1.89-1.91 (m, 2H), 2.41-2.74 (m, 2H), 2.92-3.05 (m, 1H), 3.05-3.21 (m, 3H), 3.98-4.17 (m, 1H), 4.13-4.29 (m, 1H), 4.27-4.49 (m, 1H), 4.49-4.73 (m, 1H), 5.67-6.14 (m, 1H), 7.38 (t, J=7.32Hz, 1H), 7.47 (t, J=7.32Hz, 2H), 7.52-7.81 (m, 6H).
実施例１１０
【０２４４】
化合物１１０の製造
【化１４５】
2010510234.tif 000151
中間体１１１：化合物１１１の製造
【化１４６】
2010510234.tif 000152
ｔｅｒｔ-ブチル=(Ｓ)-１-((２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-２-((１Ｒ,２Ｓ)-１-(シクロプロピルスルホニルカルバモイル)-２-ビニルシクロプロピルカルバモイル)-４-メトキシピロリジン-１-イル)-３,３-ジメチル-１-オキソブタン-２-イルカルバメートのＥｔＯＡｃ（１ｍＬ）溶液が入っている氷冷Ｐａｒｒ振とう容器に、パラジウム（２.０６１ｍｇ、１.９３７μｍｏｌ）炭素担持物（１０％、湿性）を加えた。その溶液を、圧力１０ｐｓｉの水素下で２時間、Ｐａｒｒ振とう装置に置いた。セライトでクエンチした。濾過し、エバポレートした。残渣を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、所期の生成物（６ｍｇ、収率４３％）を白色固形物として得た。
1H NMR (CD3OD) δ 0.98-1.02 (m, 4H), 1.10-1.14 (m, 10H), 1.26-1.35 (m, 4H), 1.29-1.62 (m, 12H), 2.48-2.51 (m, 1H), 2.55-2.61 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 4.07-4.09 (m, 1H), 4.22-4.24 (m, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.58-4.60 (m, 1H), 7.38-7.39 (m, 1H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.57-7.67 (m, 6H);
LC-MS (保持時間：3.00分, 方法B), MS m/z 725 (M++H), 693 (M+-MeOH).
実施例２００
【０２４５】
化合物２００の製造
【化１４７】
2010510234.tif 000153
ステップ１：(Ｓ)-３,３-ジメチル-２-(２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エトキシカルボニルアミノ)-酪酸の製造
【化１４８】
2010510234.tif 000154
ステップ１ａ：炭酸ピリジン-２-イルエステル２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エチルエステルの製造
【化１４９】
2010510234.tif 000155
ＴＨＦ（７０ｍＬ）中のＫＨ（１.０３ｇ、２５.８ｍｍｏｌ）のスラリーに、１,１,１-トリフルオロ-２-メチルプロパン-２-オール（３ｇ、２３.４２ｍｍｏｌ）を加えた。反応を０℃で２０分撹拌した。次に、ジピリジン-２-イル=カーボネート（５.０６ｇ、２３.４２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を、その混合物に加えた。その混合物を室温で終夜撹拌した。大量の固形物が溶液から析出した。その固形物を濾過し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で洗浄した。合わせたＴＨＦ／ＥｔＯＡｃ溶液を水で洗浄した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた白色固形物（１.２４ｇ、２１％）を次のステップにそのまま使用した。
【０２４６】
ステップ１ｂ：(Ｓ)-３,３-ジメチル-２-(２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エトキシカルボニルアミノ)-酪酸メチルエステルの製造
【化１５０】
2010510234.tif 000156
(Ｓ)-メチル=２-アミノ-３,３-ジメチルブタノエート（０.４１１ｇ、２.２６２ｍｍｏｌ）の氷冷ＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、Ｎ,Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（１.１８２ｍＬ、６.７９ｍｍｏｌ）を加えた。形成された溶液を５分間撹拌してから、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の炭酸ピリジン-２-イルエステル２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エチルエステル（１.２４ｇ、４.９８ｍｍｏｌ、ステップ１ａで得たもの）を加えた。その最終明黄色溶液を室温で終夜撹拌した。反応混合物を５％クエン酸水溶液、０.１Ｍ ＮａＯＨ水溶液、およびブラインで洗浄してから、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムで精製し、（４：１）ヘキサン-ＥｔＯＡｃで溶出させることにより、生成物として無色油状物を得た（６７３ｍｇ、９９％）。
1H-NMR (CDCl3-d) δ 0.96 (s, 9H), 1.65 (s, 6H), 3.73 (s, 3H),. 5.31 (m, 1H); LCMS RT=2.72分, [M+Na]+=322.3.
【０２４７】
ステップ１ｃ：(Ｓ)-３,３-ジメチル-２-(２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エトキシカルボニルアミノ)-酪酸の製造
【化１５１】
2010510234.tif 000157
(Ｓ)-３,３-ジメチル-２-(２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エトキシカルボニルアミノ)-酪酸メチルエステル（６７３ｍｇ、２.２４９ｍｍｏｌ、ステップ１ｂで得た物）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に、前もって調製された水酸化リチウム一水和物（１８９ｍｇ、４.５０ｍｍｏｌ）の水（４.００ｍＬ）溶液を加えた。その濁った白色溶液を室温で５時間撹拌した。その混合物に水１ｍＬ中のＬｉＯＨ １００ｍｇを追加し、その溶液を室温で終夜撹拌した。揮発物を除去し、反応混合物を５％クエン酸水溶液で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートした。白色固形物である粗製物（３２５ｍｇ、５１％）を、これ以上精製せずに、次のステップに使用した。
LCMS RT=2.55分, [M+Na]+=308.2.
【０２４８】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-３,３-ジメチル-２-(２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エトキシカルボニルアミノ)-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルの製造
【化１５２】
2010510234.tif 000158
この物質は、ステップ５における出発物質として(Ｓ)-３,３-ジメチル-２-(２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エトキシカルボニルアミノ)-酪酸を(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６で説明した手法と同じ手法で製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 1.11 (s, 9H), 1.57 (s, 3H), 1.62 (s, 3H), 2.59 (m, 1H), 2.76 (m, 1H), 2.94 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 4.12 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.72 (m, 1H), 7.31-7.68 (m, 9H); LCMS RT=3.33分, [M+Na]+=601.2.
【０２４９】
ステップ３：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-３,３-ジメチル-２-(２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エトキシカルボニルアミノ)-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸の製造
【化１５３】
2010510234.tif 000159
この物質は、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-３,３-ジメチル-２-(２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エトキシカルボニルアミノ)-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルを(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレートの代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.26分, [M+Na]+=587.2.
【０２５０】
ステップ４：{(Ｓ)-１-[(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-２-((Ｓ)-(１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピルカルバモイル)-４-メトキシ-ピロリジン-１-カルボニル]-２,２-ジメチル-プロピル}-カルバミン酸２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エチルエステルの製造
【化１５４】
2010510234.tif 000160
化合物２００は、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-３,３-ジメチル-２-(２,２,２-トリフルオロ-１,１-ジメチル-エトキシカルボニルアミノ)-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸を(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸の代わりに使用した点以外は、実施例１０６ステップ７に記載の手法と同じ手法で製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 1.12 (s, 9H), 1.30-1.26 (m, 4H), 1.43 (m, 1H), 1.64 (s, 3H), 1.69(s, 3H), 1.88 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.49 (m. 1H), 2.62 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 4.07 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.42 (d, J=9Hz, 1H), 4.56 (m, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.36-7.70 (m, 9H); LCMS RT=3.24分, [M+Na]+=799.3.
実施例２０１
【０２５１】
化合物２０１の製造：
【化１５５】
2010510234.tif 000161
ステップ１：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-３-メチル-ブチリル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルの製造
【化１５６】
2010510234.tif 000162
この物質は、ステップ５における出発物質として(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３-メチルブタン酸（Ａｌｄｒｉｃｈから市販されている物質）を(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.22分, [M+Na]+=533.4.
【０２５２】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-３-メチル-ブチリル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸の製造
【化１５７】
2010510234.tif 000163
この物質は、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-３-メチル-ブチリル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルを(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレートの代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ６に記載の手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.07分, [M+H]+=497.4.
【０２５３】
ステップ３：{(Ｓ)-１-[(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-２-((Ｓ)-(１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピルカルバモイル)-４-メトキシ-ピロリジン-１-カルボニル]-２-メチル-プロピル}-カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチルエステルの製造
【化１５８】
2010510234.tif 000164
(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-３-メチル-ブチリル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸を(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ７で説明した手法と同じ手法で、化合物２０１を製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 0.87 (m, 1H), 0.93 (m, 1H), 1.00 (m, 4H), 1.07 (m, 2H), 1.18-1.30 (m, 4H), 1.38 (m, 2H), 1.43 (m, 6H), 1.85 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.49 (m. 1H), 2.53 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 3.07 (s, 3H), 4.06 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 4.22 (t, 1H), 4.54 (d, J=9Hz, 1H), 5.10 (d, J=12Hz, 1H), 5.27 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.36-7.70 (m, 9H); LCMS RT=3.11分, [M+Na]+=731.2.
実施例２０２
【０２５４】
化合物２０２の製造
【化１５９】
2010510234.tif 000165
ステップ１：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-３-メチル-ペンタノイル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルの製造
【化１６０】
2010510234.tif 000166
この物質は、ステップ５における出発物質として(２Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３-メチルペンタン酸（Ａｌｄｒｉｃｈから市販されている物質）を(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.27分, [M+Na]+=547.4.
【０２５５】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-３-メチル-ペンタノイル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸の製造
【化１６１】
2010510234.tif 000167
この物質は、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-３-メチル-ブチリル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルを(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレートの代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.15分, [M+H]+=511.5.
【０２５６】
ステップ３：{(Ｓ)-１-[(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-２-((Ｓ)-(１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピルカルバモイル)-４-メトキシ-ピロリジン-１-カルボニル]-２-メチル-ブチル}-カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチルエステルの製造
【化１６２】
2010510234.tif 000168
(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-３-メチル-ペンタノイル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸を(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ７で説明した手法と同じ手法で、化合物２０２を製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 0.91-0.97 (m, 4H), 1.03 (m, 2H), 1.10 (m, 2H), 1.20-1.34 (m, 5H), 1.40-1.50 (m, 9H), 1.68 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 2.25 (m. 1H), 2.56 (m, 2H), 2.98 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 4.10 (m, 1H), 4.22 (m, 2H), 4.63 (d, J=9Hz, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.36-7.70 (m, 9H); LCMS RT=3.24分, [M+Na]+=745.3.
実施例２０３
【０２５７】
化合物２０３の製造
【化１６３】
2010510234.tif 000169
ステップ１：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-４-メチル-ペンタノイル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルの製造
【化１６４】
2010510234.tif 000170
この物質は、ステップ５における出発物質として(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-４-メチルペンタン酸（Ａｌｄｒｉｃｈから市販されている物質）を(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.26分, [M+Na]+=547.4.
【０２５８】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-４-メチル-ペンタノイル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸の製造
【化１６５】
2010510234.tif 000171
この物質は、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-３-メチル-ブチリル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルを(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレートの代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.16分, [M+Na]+=533.5.
【０２５９】
ステップ３：{(Ｓ)-１-[(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-２-((Ｓ)-(１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピルカルバモイル)-４-メトキシ-ピロリジン-１-カルボニル]-３-メチル-ブチル}-カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチルエステルの製造
【化１６６】
2010510234.tif 000172
(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-((Ｓ)-２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ-４-メチル-ペンタノイル)-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸を(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ７で説明した手法と同じ手法で、化合物２０３を製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 0.91-0.98 (m, 2H), 1.02 (m, 4H), 1.24-1.32 (m, 6H), 1.39-1.48 (m, 9H), 1.64 (m, 1H), 1.76 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 2.30 (m. 1H), 2.62 (m, 2H), 2.98 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 4.11 (m, 1H), 4.18 (d, J=9Hz, 1H), 4.37 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.36-7.70 (m, 9H); LCMS RT=3.24分, [M+Na]+=745.3.
実施例２０４
【０２６０】
化合物２０４の製造
【化１６７】
2010510234.tif 000173
ステップ１ａ：(Ｓ)-２-(アダマンタン-１-イルオキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチル-酪酸メチルエステルの製造
【化１６８】
2010510234.tif 000174
ＤＣＭ（２ｍＬ）溶液中の(Ｓ)-メチル=２-アミノ-３,３-ジメチルブタノエート（２００ｍｇ、１.３７７ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０.４８１ｍＬ、２.７５ｍｍｏｌ）との混合物に、１-アダマンチルフルオロホルメート（３３４ｍｇ、１.５１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／８０％ヘキサン）で精製することにより、生成物として無色の油状物（３５８ｍｇ、６８％）を得た。
1H-NMR (CDCl3-d) δ 0.94 (s, 9H), 1.62 (s, 6H), 2.07 (s, 6H), 2.13 (s, 3H), 3.70 (s, 3H),. 4.07 (d, J=9Hz, 1H), 5.09 (ブロードs, 1H, NH); LCMS RT=3.05分, [M+H]+=324.4.
【０２６１】
ステップ１ｂ：(Ｓ)-２-(アダマンタン-１-イルオキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチル-酪酸の製造
【化１６９】
2010510234.tif 000175
(Ｓ)-２-(アダマンタン-１-イルオキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチル-酪酸メチルエステル（３５８ｍｇ、１.１０７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）およびＭｅＯＨ（４ｍＬ）溶液に、前もって調製された水酸化リチウム一水和物（９３ｍｇ、２.２１４ｍｍｏｌ）の水（４.００ｍＬ）溶液を加えた。その濁った白色溶液を室温で５時間撹拌した。揮発物を除去し、反応混合物を希クエン酸溶液で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートすることにより、生成物として白色固形物（２９１.４ｍｇ、８５％）を得た。その粗製物をこれ以上精製せずに使用した。
LCMS RT=2.91分, [M+H]+=310.4.
【０２６２】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-１-[(Ｓ)-２-(アダマンタン-１-イルオキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルの製造
【化１７０】
2010510234.tif 000176
この物質は、(Ｓ)-２-(アダマンタン-１-イルオキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチル-酪酸を(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ５に記載した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.63分, [M+Na]+=625.4.
【０２６３】
ステップ３：(２Ｓ,４Ｒ)-１-[(Ｓ)-２-(アダマンタン-１-イルオキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸の製造
【化１７１】
2010510234.tif 000177
この物質は、(２Ｓ,４Ｒ)-１-[(Ｓ)-２-(アダマンタン-１-イルオキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルを(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレートの代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.16分, [M+Na]+=611.3.
【０２６４】
ステップ４：{(Ｓ)-１-[(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-２-((Ｓ)-(１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピルカルバモイル)-４-メトキシ-ピロリジン-１-カルボニル]-２,２-ジメチル-プロピル}-カルバミン酸アダマンタン-１-イルエステルの製造
【化１７２】
2010510234.tif 000178
(２Ｓ,４Ｒ)-１-[(Ｓ)-２-(アダマンタン-１-イルオキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸を(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ７で説明した手法と同じ手法で、化合物２０４を製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 1.00-1.10 (m, 10H), 1.22-1.31 (m, 3H), 1.43 (m, 1H), 1.64-1.71 (m, 6H), 1.88 (m, 1H), 1.97-2.22 (m, 10H), 2.50 (m. 1H), 2.63 (m, 1H), 2.98 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 4.04 (d, J=9Hz, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 5.12 (d, J=12Hz, 1H), 5.32 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.77 (m, 1H), 7.33-7.67 (m, 9H); LCMS RT=3.43分, [M+H]+=801.4.
実施例２０５
【０２６５】
化合物２０５の製造
【化１７３】
2010510234.tif 000179
ステップ１ａ：(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-酪酸メチルエステルの製造
【化１７４】
2010510234.tif 000180
ＤＣＭ（２ｍＬ）溶液中の(Ｓ)-メチル=２-アミノ-３,３-ジメチルブタノエート（２００ｍｇ、１.３７７ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０.４８１ｍＬ、２.７５ｍｍｏｌ）との混合物に、１-アダマンチルイソシアネート（３３４ｍｇ、１.５１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／８０％ヘキサン）で精製することにより、生成物として白色固形物（２６５ｍｇ、５９％）を得た。
1H-NMR (CDCl3-d) δ 0.94 (s, 9H), 1.64 (s, 6H), 1.93 (s, 6H), 2.04 (s, 3H), 3.70 (s, 3H),. 4.24 (d, J=9Hz, 1H), 4.34 (ブロードs, 1H, NH), 4.88 (ブロードs, 1H, NH); LCMS RT=2.87分, [M+H]+=323.4.
【０２６６】
ステップ１ｂ：(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-酪酸の製造
【化１７５】
2010510234.tif 000181
(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-酪酸メチルエステル（２６５ｍｇ、０.８２２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）およびＭｅＯＨ（４ｍＬ）溶液に、前もって調製された水酸化リチウム一水和物（６９ｍｇ、１.６４４ｍｍｏｌ）の水（４.００ｍＬ）溶液を加えた。その濁った白色溶液を室温で５時間撹拌した。揮発物を除去し、反応混合物を希クエン酸溶液で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、エバポレートすることにより、生成物として白色固形物（２３２ｍｇ、９２％）を得た。その粗製物をこれ以上精製せずに使用した。
LCMS RT=3.09分, [M+H]+=309.4.
【０２６７】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-１-[(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルの製造
【化１７６】
2010510234.tif 000182
この物質は、(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-酪酸を(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ５に記載した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.51分, [M+Na]+=624.4.
【０２６８】
ステップ３：(２Ｓ,４Ｒ)-１-[(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸の製造
【化１７７】
2010510234.tif 000183
この物質は、(２Ｓ,４Ｒ)-１-[(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルを(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレートの代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.42分, [M+H]+=588.3.
【０２６９】
ステップ４：(２Ｓ,４Ｒ)-１-[(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸((１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピル)-アミドの製造
【化１７８】
2010510234.tif 000184
(２Ｓ,４Ｒ)-１-[(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸を(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ７で説明した手法と同じ手法で、化合物２０５を製造した。
1H NMR (CD3OD) δ 1.05-1.11(m, 9H), 1.23-1.33 (m, 5H), 1.41 (m, 1H), 1.72 (s, 6H), 1.87 (m, 1H), 1.97-2.05 (m, 8H), 2.21 (m, 1H), 2.56 (m. 1H), 2.63 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 4.06 (d, J=9Hz, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.67 (m, 1H), 5.12 (d, J=12Hz, 1H), 5.28 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.77 (m, 1H), 7.33-7.67 (m, 9H); LCMS RT=3.40分, [M+Na]+=800.5.
実施例２０６
【０２７０】
化合物２０６の製造
【化１７９】
2010510234.tif 000185
ステップ１ａ：(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-酪酸メチルエステルの製造
【化１８０】
2010510234.tif 000186
この物質は、ｔｅｒｔ-ブチルイソシアネートを１-アダマンチルイソシアネートの代わりに使用した点以外は実施例２０５ステップ１ａに記載の手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=2.24分, [M+H]+=245.2.
【０２７１】
ステップ１ｂ：(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-酪酸の製造
【化１８１】
2010510234.tif 000187
この物質は、(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-酪酸メチルエステルを(Ｓ)-２-(３-アダマンタン-１-イル-ウレイド)-３,３-ジメチル-酪酸メチルエステルの代わりに使用した点以外は実施例２０５ステップ１ｂに記載の手法と同じ手法で製造した。
1H-NMR (CDCl3-d) δ 1.00 (s, 9H), 1.56 (s, 9H), 3.49 (s, 1H); LCMS RT=0.96分, [M+H]+=231.3.
【０２７２】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルの製造
【化１８２】
2010510234.tif 000188
この物質は、ステップ５における出発物質として(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-酪酸を使用した点以外は実施例１０６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.26分, [M+Na]+=546.3.
【０２７３】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸の製造
【化１８３】
2010510234.tif 000189
この物質は、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルを(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレートの代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.14分, [M+Na]+=532.3.
【０２７４】
ステップ３：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸((１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピル)-アミドの製造
【化１８４】
2010510234.tif 000190
(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸を(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ７で説明した手法と同じ手法で、化合物２０６を製造した。
1H NMR (CDCl3-d) δ 1.03-1.08 (m, 12H), 1.23-1.38 (m, 11H), 1.75 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 2.08 (m. 1H), 2.47 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 4.10 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.53 (d, J=9Hz, 1H), 4.80 (m, 1H), 5.11 (d, J=12Hz, 1H), 5.28 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 7.57-7.61 (m, 4H), 7.40-7.46 (m, 5H); LCMS RT=3.26分, [M+H]+=722.4.
実施例２０７
【０２７５】
化合物２０７および化合物２０８の製造
【化１８５】
2010510234.tif 000191
ステップ１：２-(３-メトキシ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-酪酸の製造
【化１８６】
2010510234.tif 000192
メタノール（３ｍＬ）中の３-メトキシアニリン（１００ｍｇ、０.８１２ｍｍｏｌ）とトリメチルピルビン酸（２１１ｍｇ、１.６２４ｍｍｏｌ）との混合物に、室温で、酢酸（０.９３０ｍＬ、１６.２４ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を室温で３０分撹拌した後、７０℃で２時間加熱した。その混合物を室温まで冷却してから、シアノトリヒドロホウ酸ナトリウム（１.６２４ｍＬ、１.６２４ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を室温で終夜撹拌した。水（１０ｍＬ）を加え、その混合物を酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ3およびブライン溶液で洗浄してから、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、濾過し、蒸発乾固した。残渣を分取用ＨＰＬＣで精製することにより、生成物として白色固形物（３０.５ｍｇ、１６％）を得た。
LCMS RT=3.46分, [M+H]+=238.2.
【０２７６】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルの製造
【化１８７】
2010510234.tif 000193
この物質は、２-(３-メトキシ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-酪酸を(Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ５で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.31分, [M+H]+=531.5.
【０２７７】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-１-[２-(３-メトキシ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-ピロリジン-２-カルボン酸の製造
【化１８８】
2010510234.tif 000194
この物質は、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-２-(３-ｔｅｒｔ-ブチル-ウレイド)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルを(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレートの代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.20分, [M+H]+=517.3.
【０２７８】
実施例２０７：化合物２０７および化合物２０８の製造
【化１８９】
2010510234.tif 000195
(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-１-[２-(３-メトキシ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-ピロリジン-２-カルボン酸を(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ７で説明した手法と同じ手法で、化合物２０７および化合物２０８を製造した。反応混合物を分取用ＨＰＬＣで分離することにより、化合物２０７、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-１-[(Ｓ)-２-(３-メトキシ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-ピロリジン-２-カルボン酸((１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピル)-アミドと、化合物２０８、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-４-メトキシ-１-[(Ｒ)-２-(３-メトキシ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-ピロリジン-２-カルボン酸((１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピル)-アミドとを得た。
化合物２０７：
1H NMR (CDCl3-d) δ 1.00-1.10 (m, 2H), 1.14 (s, 9H), 1.31-1.43 (m, 3H), 1.92 (m, 1H), 2.03 (m, 1H), 2.44 (m, 1H), 2.91-2.98 (m, 2H), 3.00 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.75 (m, 1H), 3.95 (d, J=10Hz, 1H ), 4.36 (d, J=9Hz, 1H), 4.57 (d, J=9Hz, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.28 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.72 (m, 1H), 6.17 (s, 1H), 6.21 (d, J=9.0Hz, 1H), 6.25 (d, J=9.0Hz, 1H), 7.00 (t, 1H), 7.34 (m, 3H), 7.45 (m, 2H), 7.58 (m, 4H); LCMS RT=3.29分, [M+H]+=729.4.
化合物２０８：
1H NMR (CDCl3-d) δ  1.09 (s, 9H), 1.30 (m, 2H), 1.44(m, 1H), 1.56 (m, 2H), 1.95(m, 1H), 2.64 (m, 1H), 2.72 (m, 1H), 2.86 (m, 2H), 2.90 (s, 3H), 3.77 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 4.01 (d, J=10Hz, 1H ), 4.60 (d, J=9Hz, 1H), 4.66 (d, J=9Hz, 1H), 5.11 (d, J=12Hz, 1H), 5.28 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.86 (m, 1H), 6.36 (s, 1H), 6.37 (d, J=9.0Hz, 1H), 6.43 (d, J=9.0Hz, 1H), 7.12 (t, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.44-7.48 (m, 4H), 7.59 (d, J=9Hz, 2H ), 7.66 (d, J=9Hz, 2H),; LCMS RT=3.37分, [M+H]+=729.4
実施例２０８
【０２７９】
化合物２０９および化合物２１０の製造
【化１９０】
2010510234.tif 000196
ステップ１：２-(３,４-ジフルオロ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-酪酸の製造
【化１９１】
2010510234.tif 000197
この物質は、３,４-ジフルオロアニリンを３-メトキシアニリンの代わりに使用した点以外は実施例２０７ステップ１で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=2.64分, [M+H]+=244.2.
【０２８０】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[２-(３,４-ジフルオロ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルの製造
【化１９２】
2010510234.tif 000198
この物質は、２-(３,４-ジフルオロ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-酪酸を２-(３-メトキシ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-酪酸の代わりに使用した点以外は実施例２０７ステップ２で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.37分, [M+H]+=537.5.
【０２８１】
ステップ２：(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[２-(３,４-ジフルオロ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸の製造
【化１９３】
2010510234.tif 000199
この物質は、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[２-(３,４-ジフルオロ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸メチルエステルを(２Ｓ,４Ｒ)-メチル=４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボキシレートの代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ６で説明した手法と同じ手法で製造した。
LCMS RT=3.26分, [M+H]+=523.3.
【０２８２】
実施例２０８：化合物２０９および化合物２１０の製造
【化１９４】
2010510234.tif 000200
(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[２-(３,４-ジフルオロ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸を(２Ｓ,４Ｒ)-４-(ビフェニル-４-イル)-１-((Ｓ)-２-(ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ)-３,３-ジメチルブタノイル)-４-メトキシピロリジン-２-カルボン酸の代わりに使用した点以外は実施例１０６ステップ７で説明した手法と同じ手法で、化合物２０９および化合物２１０を製造した。反応混合物を分取用ＨＰＬＣで分離することにより、化合物２０９、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｓ)-２-(３,４-ジフルオロ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸((１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピル)-アミドと、化合物２１０、(２Ｓ,４Ｒ)-４-ビフェニル-４-イル-１-[(Ｒ)-２-(３,４-ジフルオロ-フェニルアミノ)-３,３-ジメチル-ブチリル]-４-メトキシ-ピロリジン-２-カルボン酸((１Ｒ,２Ｓ)-１-シクロプロパンスルホニルアミノカルボニル-２-ビニル-シクロプロピル)-アミドとを得た。
化合物２０９：
1H NMR (CDCl3-d) δ 1.00-1.10 (m, 2H), 1.14 (s, 9H), 1.31-1.43 (m, 3H), 1.92 (m, 1H), 2.03 (m, 1H), 2.44 (m, 1H), 2.91-2.98 (m, 2H), 3.00 (s, 3H), 3.71 (d, J=10Hz, 1H ), 3.80 (d, J=10Hz, 1H ), 4.36 (d, J=9Hz, 1H), 4.57 (d, J=9Hz, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.28 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 6.26 (s, 1H), 6.41 (m, 1H), 6.86 (q, 1H), 7.26 (m, 1H), 7.29-7.39 (m, 2H), 7.45 (t, 2H), 7.58 (t, 4H); LCMS RT=3.05分, [M+Na]+=757.3.
化合物２１０：
1H NMR (CDCl3-d) δ 1.00-1.10 (m, 3H), 1.07 (s, 9H), 1.48 (m, 2H), 1.65 (m, 1H), 2.03 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 2.90 (s, 3H), 3.71 (d, J=10Hz, 1H ), 3.90 (d, J=10Hz, 1H ), 4.34 (d, J=9Hz, 1H), 4.61 (d, J=9Hz, 1H), 4.66 (d, J=9Hz, 1H), 5.15 (d, J=12Hz, 1H), 5.28 (d, J=18.5Hz, 1H), 5.89 (m, 1H), 6.28 (s, 1H), 6.60 (m, 1H), 7.03 (q, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.44-7.48 (m, 4H), 7.59 (d, J=9Hz, 2H ), 7.66 (d, J=9Hz, 2H); LCMS RT=3.13分, [M+H]+=757.3.
実施例２０９
【０２８３】
化合物２１１の製造
【化１９５】
2010510234.tif 000201
【０２８４】
生物学的研究
ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体酵素アッセイおよび細胞ベースのＨＣＶレプリコンアッセイを本開示において用い、下記のように調製し、実施し、確認した。
【０２８５】
組換えＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の産生
ＢＭＳ株、Ｈ７７株またはＪ４Ｌ６Ｓ株由来のＨＣＶ  ＮＳ３プロテアーゼ複合体を、下記で説明するように産生した。これらの精製した組換えタンパク質を、均一系アッセイ（下記を参照されたい）において使用するために産生し、ＨＣＶ  ＮＳ３タンパク質分解活性の阻害において本開示の化合物がいかに有効であるかを示した。
【０２８６】
ＨＣＶ感染患者からの血清を、サンフランシスコ病院のＴ．Ｗｒｉｇｈｔ医師から得た。ＨＣＶゲノム（ＢＭＳ株）の設計された完全長ｃＤＮＡ（相補デオキシリボ核酸）鋳型を、血清ＲＮＡ（リボ核酸）の逆転写−ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）によって得たＤＮＡフラグメントから、他の遺伝子型１ａ株の間の相同性に基づいて選択したプライマーを使用して作製した。全ゲノム配列の決定から、Ｓｉｍｍｏｎｄｓらの分類によって、ＨＣＶ分離株に対して遺伝子型１ａを割り当てた（P Simmonds, KA Rose, S Graham, SW Chan, F McOmish, BC Dow, EA Follett, PL Yap and H Marsden, J. Clin. Microbiol., 31(6), 1493-1503 (1993)を参照されたい）。非構造領域ＮＳ２−５Ｂのアミノ酸配列は、ＨＣＶ遺伝子型１ａ（Ｈ７７）に＞９７％同一であり、遺伝子型１ｂ（Ｊ４Ｌ６Ｓ）に８７％同一であることが示された。感染性クローンＨ７７（１ａ遺伝子型）およびＪ４Ｌ６Ｓ（１ｂ遺伝子型）は、Ｒ．Ｐｕｒｃｅｌｌ（ＮＩＨ）から得たが、配列はＧｅｎｂａｎｋにおいて公開されている（ＡＡＢ６７０３６、Yanagi,M., Purcell,R.H., Emerson,S.U. and Bukh,J. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94(16),8738-8743 (1997); AF054247を参照されたい、Yanagi,M., St Claire,M., Shapiro,M., Emerson,S.U., Purcell,R.H. and Bukh,J, Virology 244 (1), 161-172. (1998)を参照されたい）。
【０２８７】
Ｈ７７およびＪ４Ｌ６Ｓ株を組換えＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の産生のために使用した。これらの株について組換えＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体（アミノ酸１０２７〜１７１１）をコードするＤＮＡを、Ｐ．Ｇａｌｌｉｎａｒｉらによって記載されているように操作した（Gallinari P, Paolini C, Brennan D, Nardi C, Steinkuhler C, De Francesco R. Biochemistry. 38(17):5620-32, (1999)を参照されたい）。手短に言えば、３個のリシンの可溶化尾部を、ＮＳ４Ａコード領域の３’末端に添加した。ＮＳ４Ａ−ＮＳ４Ｂ切断部位のＰ１位中のシステイン（アミノ酸１７１１）をグリシンに変更し、リシンタグのタンパク質分解的切断を防止した。さらに、システインからセリンへの変異をアミノ酸位置１４５４でＰＣＲによって導入し、ＮＳ３ヘリカーゼドメインにおける自己分解による切断を防止した。Ｐ．Ｇａｌｌｉｎａｒｉらによって記載されたプロトコルに修正を加えて、変異ＤＮＡフラグメントをｐＥＴ２１ｂ細菌発現ベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ）中でクローン化し、ＮＳ３／４Ａ複合体を大腸菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で発現させた（Gallinari P, Brennan D, Nardi C, Brunetti M, Tomei L, Steinkuhler C, De Francesco R., J Virol. 72(8):6758-69 (1998)を参照されたい）。手短に言えば、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体発現を、０．５ミリモル（ｍＭ）のイソプロピルβ−Ｄ−１−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）によって２０℃で２２時間（ｈ）誘導した。典型的な発酵（１リットル（Ｌ））によって、約１０グラム（ｇ）の湿細胞ペーストを得た。２５ｍＭのＮ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ）（ｐＨ７．５）、２０％グリセロール、５００ｍＭの塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、０．５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、１マイクログラム／ミリリットル（「μｇ／ｍＬ」）のリゾチーム、５ｍＭの塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ2）、１μｇ／ｍｌのＤｎａｓｅＩ、５ｍＭのβ−メルカプトエタノール（βＭＥ）、プロテアーゼ阻害剤（エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）非含有）（Ｒｏｃｈｅ）からなる溶解バッファー（１０ｍＬ／ｇ）中で細胞を再懸濁させ、ホモジナイズし、４℃で２０分（分）間インキュベートした。ホモジネートを超音波処理し、４℃にて２３５０００ｇで１時間（ｈ）超遠心分離することによって清澄にした。イミダゾールを１５ｍＭの最終濃度まで上清に加え、ｐＨを８．０に調節した。粗タンパク質抽出物を、バッファーＢ（２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、２０％グリセロール、５００ｍＭのＮａＣｌ、０．５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、１５ｍＭのイミダゾール、５ｍＭのβＭＥ）で予め平衡化させたニッケル−ニトリロ三酢酸（Ｎｉ−ＮＴＡ）カラムに添加した。試料を１ｍＬ／分の流量で添加した。カラムを１５カラム容量のバッファーＣ（０．２％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００以外はバッファーＢと同一）で洗浄した。タンパク質を５カラム容量のバッファーＤ（２００ｍＭのイミダゾール以外はバッファーＣと同一）で溶出した。
【０２８８】
ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体含有画分をプールし、バッファーＤ（２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、２０％グリセロール、３００ｍＭのＮａＣｌ、０．２％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、１０ｍＭβＭＥ）で予め平衡化した脱塩カラムＳｕｐｅｒｄｅｘ−Ｓ２００に添加した。試料を１ｍＬ／分の流量で添加した。ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体含有画分をプールし、約０．５ｍｇ／ｍｌまで濃縮した。ＢＭＳ、Ｈ７７およびＪ４Ｌ６Ｓ株由来のＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の純度は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび質量分析法によって９０％超であると判断した。酵素は、アッセイバッファーにおいて使用する前に、−８０℃で貯蔵し、氷上で解凍し、希釈した。
【０２８９】
ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａタンパク質分解活性をモニターするためのＦＲＥＴペプチドアッセイ
このインビトロアッセイの目的は、本開示の化合物による上記のようなＢＭＳ株、Ｈ７７株またはＪ４Ｌ６Ｓ株由来のＨＣＶ  ＮＳ３プロテアーゼ複合体の阻害を測定することであった。このアッセイは、ＨＣＶ  ＮＳ３タンパク質分解活性の阻害において本開示の化合物がいかに有効であるかを示した。
【０２９０】
ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ活性をモニターするために、ＮＳ３／４Ａペプチド基質を使用した。基質は、Anal. Biochem. 240(2):60-67 (1996)においてＴａｌｉａｎｉらによって記載されたＲＥＴ  Ｓ１であった（共鳴エネルギー移動デプシペプチド基質；ＡｎａＳｐｅｃ、Ｉｎｃ．カタログ＃２２９９１）（ＦＲＥＴペプチド）。このペプチドの配列は、切断部位においてアミド結合ではなくエステル結合が存在すること以外は、ＨＣＶ  ＮＳ３プロテアーゼについてのＮＳ４Ａ／ＮＳ４Ｂ天然切断部位に大まかに基づいている。ペプチドはまた、ペプチドの一端近くに蛍光供与体ＥＤＡＮＳを、および他端の近くに容体ＤＡＢＣＹＬを含有する。ペプチドの蛍光は、供与体と受容体との間の分子間の共鳴エネルギー移動（ＲＥＴ）によってクエンチされるが、ＮＳ３プロテアーゼがペプチドを切断するにつれ、生成物がＲＥＴ消光から放出され、供与体の蛍光が明らかになる。
【０２９１】
ペプチド基質を、本開示の化合物の非存在下、または存在下で、３種の組換えＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の１種と共にインキュベートした。Ｃｙｔｏｆｌｕｏｒ  Ｓｅｒｉｅｓ４０００を使用して蛍光性反応生成物の形成をリアルタイムでモニターすることによって化合物の阻害作用を決定した。
【０２９２】
試薬は下記の通りであった。ＨＥＰＥＳおよびグリセロール（Ｕｌｔｒａｐｕｒｅ）は、ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬから入手した。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、Ｓｉｇｍａから入手した。β−メルカプトエタノールはＢｉｏ  Ｒａｄから入手した。
【０２９３】
アッセイバッファー：５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）；０．１５ＭのＮａＣｌ；０．１％Ｔｒｉｔｏｎ；１５％グリセロール；１０ｍＭのβＭＥ。基質：２μＭの最終濃度（−２０℃で貯蔵したＤＭＳＯ中の２ｍＭのストック溶液から）。ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ１ａ（１ｂ）型、２〜３ｎＭの最終濃度（２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、２０％グリセロール、３００ｍＭのＮａＣｌ、０．２％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００、１０ｍＭβＭＥ中の５μＭのストック溶液から）。アッセイ限界に近づいた作用強度を有する化合物については、アッセイバッファーに５０μｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ）を加え、プロテアーゼの最終濃度を３００ｐＭに下げることによって、アッセイをより感応性にした。
【０２９４】
アッセイを、Ｆａｌｃｏｎの９６−ウェルのポリスチレンブラックプレート中で行った。各ウェルは、アッセイバッファー中のＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体２５μｌ、１０％ＤＭＳＯ／アッセイバッファー中の本開示の化合物５０μｌ、およびアッセイバッファー中の基質２５μｌを含有した。対照（化合物を含有せず）もまた、同一のアッセイプレート上で調製した。基質の添加によって酵素反応が開始する前に、酵素複合体を化合物または対照溶液と１分間混合した。アッセイプレートをＣｙｔｏｆｌｕｏｒ  Ｓｅｒｉｅｓ４０００（Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して直ちに読み取った。２５℃にて３４０ｎｍでの発光および４９０ｎｍでの励起を読み取るように装置を設定した。反応は一般に約１５分間続いた。
【０２９５】
下記の式で阻害率を計算した。
１００−［（δＦinh／δＦcon）×１００］
式中、δＦは曲線の線形範囲に亘る蛍光の変化である。非線形曲線の当てはめを阻害−濃度データに適用し、式ｙ＝Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／ｘ）＾Ｄ）））を使用してＥｘｃｅｌ  ＸＬｆｉｔソフトウェアの使用によって５０％有効濃度（ＩＣ50）を計算した。
【０２９６】
すべての試験化合物は、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の活性を、１．６ｍＭ以下のＩＣ50で阻害することが分かった。さらに、本開示の化合物（２つ以上の型のＮＳ３／４Ａ複合体に対して試験した）は、１ａ株と比べて、１ｂ株に対してより強い効力(potency)を一様に示すが、該化合物は、類似する阻害特性を有することが分かった。
【０２９７】
特異性アッセイ
ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ複合体の阻害における本開示の化合物のインビトロ選択性を示すために、他のセリンまたはシステインプロテアーゼと比較した、特異性アッセイを行った。
【０２９８】
本開示の化合物の、種々のセリンプロテアーゼに対する特異性を決定した。ヒト好中球エラスターゼ（ＨＮＥ）、ブタ膵エラスターゼ（ＰＰＥ）およびヒト膵臓キモトリプシンおよび１種のシステインプロテアーゼであるヒト肝臓カテプシンＢ。全ての場合において、セリンプロテアーゼアッセイをある程度修正して、従前（ＰＣＴ特許出願第ＷＯ００／０９５４３号）に記載されているように、それぞれの酵素に特異的な蛍光分析のアミノ−メチル−クマリン（ＡＭＣ）基質を使用した９６ウェルプレートフォーマットプロトコルを使用した。全ての酵素はＳｉｇｍａ、ＥＭＤｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから購入し、一方基質はＢａｃｈｅｍ、ＳｉｇｍａおよびＥＭＤｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから購入した。
【０２９９】
化合物濃度は、それらの作用強度によって１００〜０．４μＭで変化した。１０分間プレインキュベートした酵素−阻害剤に室温で基質を加え、ｃｙｔｏｆｌｕｏｒで測定して１５％変換まで加水分解することによって、酵素アッセイをそれぞれ開始した。
【０３００】
各アッセイについての最終条件は下記の通りであった。
５０ｍＭのトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ）（ｐＨ８）、０、５Ｍの硫酸ナトリウム（Ｎａ2ＳＯ4）、５０ｍＭのＮａＣｌ、０．１ｍＭのＥＤＴＡ、３％ＤＭＳＯ、０．０１％Ｔｗｅｅｎ−２０、５μＭのＬＬＶＹ−ＡＭＣおよび１ｎＭのキモトリプシン。
【０３０１】
５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０、５０ｍＭのＮａＣｌ、０．１ｍＭのＥＤＴＡ、３％ＤＭＳＯ、０．０２％Ｔｗｅｅｎ−２０、５μＭのｓｕｃｃ−ＡＡＰＶ−ＡＭＣおよび２０ｎＭのＨＮＥまたは８ｎＭのＰＰＥ；
１００ｍＭのＮａＯＡＣ（酢酸ナトリウム）（ｐＨ５．５）、３％ＤＭＳＯ、１ｍＭのＴＣＥＰ（トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩）、５ｎＭのカテプシンＢ（酵素ストックは使用前に２０ｍＭのＴＣＥＰを含有するバッファー中で活性化させた）、およびＨ2Ｏで希釈した２μＭのＺ−ＦＲ−ＡＭＣ。
【０３０２】
阻害率は、式を使用して計算した。
［１−（（ＵＶinh−ＵＶblank）／（ＵＶctl−ＵＶblank））］×１００
【０３０３】
非線形曲線の当てはめを阻害−濃度データに適用し、Ｅｘｃｅｌ  ＸＬｆｉｔソフトウェアを使用して５０％有効濃度（ＩＣ50）を計算した。
【０３０４】
ＨＣＶレプリコンの産生
ＨＣＶレプリコン全細胞系を、Lohmann V, Korner F, Koch J, Herian U, Theilmann L, Bartenschlager R., Science 285(5424):110-3 (1999)によって記載されているように確立した。この系によって、本発明者らは、ＨＣＶ  ＲＮＡ複製に対する本発明者らのＨＣＶプロテアーゼ化合物の効果を評価することができた。手短に言えば、Ｌｏｈｍａｎｎの論文に記載されているＨＣＶ株１ｂ配列（登録番号：ＡＪ２３８７９９）を使用して、ＨＣＶ  ｃＤＮＡをＯｐｅｒｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ．（Ａｌａｍｅｄａ、ＣＡ）によって合成し、次いで完全長レプリコンをプラスミドｐＧｅｍ９ｚｆ（＋）（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）中で標準的な分子生物学技術を使用して構築した。レプリコンは、（ｉ）キャプシドタンパク質の最初の１２個のアミノ酸に融合したＨＣＶ５’ＵＴＲ、（ｉｉ）ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子（ネオ）、（ｉｉｉ）脳心筋炎ウイルス（ＥＭＣＶ）からのＩＲＥＳ、および（ｉｖ）ＨＣＶ  ＮＳ３からＮＳ５Ｂ遺伝子およびＨＣＶ３’ＵＴＲからなる。メーカーの説明書に従ってＴ７ＭｅｇａＳｃｒｉｐｔ転写キット（Ａｍｂｉｏｎ、Ａｕｓｔｉｎ、ＴＸ）を使用して、プラスミドＤＮＡをＳｃａＩで直線化し、ＲＮＡ転写物をインビトロで合成した。ｃＤＮＡのインビトロ転写物を、ヒト肝臓癌細胞系ＨＵＨ−７にトランスフェクトした。ＨＣＶレプリコンを恒常的に発現している細胞についての選択を、選択マーカーであるネオマイシン（Ｇ４１８）の存在下で行った。このように得られた細胞系を、プラス鎖およびマイナス鎖ＲＮＡ生成、ならびにタンパク質生成について経時で性質決定した。
【０３０５】
ＨＣＶレプリコンＦＲＥＴアッセイ
ＨＣＶレプリコンＦＲＥＴアッセイを、ＨＣＶウイルス複製に対する本開示において記載されている化合物の阻害作用をモニターするために開発した。ＨＣＶレプリコンを恒常的に発現しているＨＵＨ−７細胞を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）（Ｓｉｇｍａ）および１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ）を含有するダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ）中で増殖させた。細胞を、前夜に９６−ウェル組織培養無菌プレート中に（１．５×１０4細胞／ウェル）で播種した。化合物および化合物を含有しない対照を、希釈プレート中で４％ＦＣＳ、１：１００ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ）、１：１００Ｌ−グルタミンおよび５％ＤＭＳＯを含有するＤＭＥＭ中で調製した（アッセイにおいて０．５％のＤＭＳＯ最終濃度）。化合物／ＤＭＳＯ混合物を細胞に添加し、３７℃で４日間インキュベートした。４日後、ＣＣ50読取りのためにアラマーブルー（Ｔｒｅｋ  Ｄｉａｇｎｏｔｓｔｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して最初に細胞毒性について細胞を評価した。細胞をインキュベートしている培地に１０分の１容量のアラマーブルーを加えることによって、化合物の毒性（ＣＣ50）を決定した。４ｈ後、Ｃｙｔｏｆｌｕｏｒ  Ｓｅｒｉｅｓ４０００（Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、各ウェルからの蛍光シグナルを、５３０ｎｍでの励起波長および５８０ｎｍでの発光波長で読み取った。次いで、プレートをリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で完全にすすいだ（３度、１５０μｌ）。ＨＣＶプロテアーゼ基質、蒸溜水で１倍に希釈した５×細胞ルシフェラーゼ細胞培養溶解試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ  ＃Ｅ１５３Ａ）、１５０ｍＭの最終濃度まで加えたＮａＣｌ、１００％ＤＭＳＯ中の２ｍＭのストックから１０μＭの最終濃度まで希釈したＦＲＥＴペプチド基質（上記の酵素アッセイについて説明した通り）を含有する２５μｌの溶解アッセイ試薬で細胞を溶解した。次いで、プレートを、３４０ｎｍ励起／４９０ｎｍ発光、２１サイクルの自動モード、運動モードでのプレート読取りに設定してあるＣｙｔｏｆｌｕｏｒ４０００装置中に置いた。ＩＣ50決定について記載したように、ＥＣ50決定を行った。
【０３０６】
ＨＣＶレプリコンルシフェラーゼレポーターアッセイ
二次的アッセイとして、レプリコンＦＲＥＴアッセイからのＥＣ50決定を、レプリコンルシフェラーゼレポーターアッセイにおいて確認した。レプリコンルシフェラーゼレポーターアッセイの利用は、Ｋｒｉｅｇｅｒらによって最初に記載された（Krieger N, Lohmann V, and Bartenschlager R, J. Virol. 75(10):4614-4624 (2001)）。本発明者らのＦＲＥＴアッセイについて記載したレプリコンコンストラクトを、Ｒｅｎｉｌｌａルシフェラーゼ遺伝子のヒト化形態およびルシフェラーゼ遺伝子の３’末端に直接融合しているリンカー配列をコードするｃＤＮＡを挿入することによって改変した。この挿入物は、ネオマイシンマーカー遺伝子の直接上流のコア中に位置するＡｓｃ１制限部位を使用して、レプリコンコンストラクトに導入された。１１７９位での適応的変異（セリンからイソロイシン）もまた導入した（Blight KJ, Kolykhalov, AA, Rice, CM, Science 290(5498):1972-1974）。このＨＣＶレプリコンコンストラクトを恒常的に発現している安定的な細胞系を上記のように産生した。ルシフェラーゼレポーターアッセイを、下記のように修正してＨＣＶレプリコンＦＲＥＴアッセイのために説明したように設定した。３７℃／５％ＣＯ2のインキュベーター中で４日間後、Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｄｕａｌ−Ｇｌｏルシフェラーゼアッセイシステムを使用して、Ｒｅｎｉｌｌａルシフェラーゼ活性について細胞を分析した。培地（１００μｌ）を、細胞を含有する各ウェルから除去した。残りの５０μｌの培地に、５０μｌのＤｕａｌ−Ｇｌｏルシフェラーゼ試薬を加え、プレートを室温で１０ｍｉｎ〜２ｈ揺動させた。次いで、Ｄｕａｌ−Ｇｌｏ  Ｓｔｏｐ  ＆  Ｇｌｏ試薬（５０μｌ）を各ウェルに加え、プレートを室温でさらに１０ｍｉｎ〜２ｈ再び揺動させた。発光プログラムを使用してＰａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔ  ＮＸＴ上でプレートを読み取った。
【０３０７】
阻害率を下記の式を使用して計算した。
％対照＝    実験ウェル（＋化合物）における平均ルシフェラーゼシグナル    
ＤＭＳＯ対照ウェル（−化合物）における平均ルシフェラーゼシグナル
【０３０８】
ＸＬｆｉｔを使用して値をグラフ化し、分析し、ＥＣ50値を得た。
【０３０９】
本開示の代表的な化合物を、ＨＣＶ酵素アッセイ、ＨＣＶレプリコン細胞アッセイにおいて、および／またはいくつかの概説した特異性アッセイにおいて評価した。例えば、酵素アッセイにおいて、化合物３はＮＳ３／４Ａ ＢＭＳ株に対して４．４ナノモル（ｎＭ）のＩＣ50を有することが分かった。公開されたＨ７７（１．６ｎＭのＩＣ50）およびＪ４Ｌ６Ｓ（１．１ｎＭのＩＣ50）株を用いて、類似する効力の値が得られた。レプリコンＦＲＥＴアッセイにおけるＥＣ50値は、レプリコンルシフェラーゼアッセイにおいて１１ｎＭおよび１．４ｎＭであった。
【０３１０】
特異性アッセイにおいて、同じ化合物が以下の活性を有することが分かった：ＨＬＥ＝８２ｍＭ；ＰＰＥ＞１００ｍＭ；キモトリプシン＝７５ｍＭ；カテプシンＢ＞１００ｍＭ。これらの結果によって、このファミリーの化合物がＮＳ３プロテアーゼに対して特異性が高く、これらのメンバーの多くがＨＣＶレプリコン複製を阻害することが示された。
本開示の化合物を試験し、以下の範囲内の活性を有することが分かった：
ＩＣ50活性範囲（ＮＳ３／４Ａ ＢＭＳ株）：Ａは、１ｎＭ〜５０ｎＭであり；Ｂは、＞５０ｎＭ〜１００ｎＭ〜５００ｎＭであり；Ｃは、＞５００ｎＭである。
ＥＣ50活性範囲（試験化合物について）：Ａは、１ｎＭ〜５０ｎＭであり；Ｂは、＞５０ｎＭ〜１００ｎＭ〜５００ｎＭ；Ｃは、＞５００ｎＭである。
表２に示される特許化合物番号を用いることによって、化合物の構造を本明細書で見つけることができることに留意されたい。
【表２−１】
2010510234.tif 000202
【表２−２】
2010510234.tif 000203
【表２−３】
2010510234.tif 000204
【０３１１】
当業者であれば、本開示は上記の実施例に限定されず、その本質的な特性から逸脱することなく他の特定の形態で具体化することができることは明らかであろう。したがって、実施例はあらゆる点で例示的なものであり、限定するものではないと考えられ、参照は上記の実施例に対してではなくむしろ添付の特許請求に対してなされ、特許請求の範囲に相当する意義および範囲内である全ての変更は、したがってその中に包含されることを意図することが望ましい。
【国際調査報告】
2010510234.tif 000211
2010510234.tif 000212
2010510234.tif 000213
2010510234.tif 000214