(57)【要約】  本発明は、チャネル活性化プロテアーゼを調節するために有用である化合物および医薬組成物ならびにプロスタシン、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１（例えば、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｂ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ）、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４（ＭＴＳＰ−２）、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ−１）、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡまたは好中球エラスターゼを含む（これらに限定はされない）、チャネル活性化プロテアーゼと関連する状態を処置、改善または予防するためのこのような化合物を使用するための方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）：
【化１】
2010518097.tif 000063
〔式中、
Ｂは
【化２】
2010518097.tif 000064
または（ＣＲ２）ｋ−Ｒ５であり；
Ｙは−ＳＯ２−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯ−または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−である。ただし、Ｒ２がＣ１−６アルキルまたはフェニルであるとき、ＹはＳＯ２であり；
Ｊは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１個以上のヘテロ原子を含む、所望により置換されている５−１２員単環式または縮合ヘテロ環式環であり；
Ｒ１はＨ、所望によりハロゲン化されているＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６アルキニル；シアノ、ＯＨ、Ｏ（ＣＲ２）ｌＲ６、ＳＯ２Ｒ６、ＣＯＮＲ（ＣＲ２）ｌＲ６、ＣＯＮＲ７Ｒ８または
【化３】
2010518097.tif 000065
であり、ここで、Ｒ７およびＲ８は、ＮＲ７Ｒ８中のＮと一体となって、窒素原子を介して（ＣＲ２）ｍに結合している所望により置換されている５−７員ヘテロ環式環を形成するか；または、Ｒ１は所望により置換されているＣ３−７シクロアルキル、アリールまたは窒素原子を有さない５−７員ヘテロ環式環もしくはヘテロアリールであるか；または、
【化４】
2010518097.tif 000066
であり、ここで、環Ｐは所望により置換されている５−７員炭素環式環であり；
Ｒ２はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリールまたは−Ｌ−（ＣＲ２）ｐ−Ｒ５であり、ここで、ＬはＯ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２またはＯＣ（Ｏ）であり；
Ｒ３はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニルまたは−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５であり；
Ｒ４はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、−ＣＲ＝ＣＲ−Ｒ６、Ｃ２−６アルキニルまたは所望により置換されている５−１２員炭素環式環、ヘテロ環式環、アリールもしくはヘテロアリールであるか；または、Ｒ４は
【化５】
2010518097.tif 000067
であり、ここで、環Ｅは所望により置換されている５−１２員単環式または縮合炭素環式またはヘテロ環式環であり；
Ｒ５およびＲ６は、独立して所望により置換されている５−１２員炭素環式環、ヘテロ環式環、アリールまたはヘテロアリールであるか；または、Ｒ６はＣ１−６アルキルまたはＣ２−６アルケニルであってよく；
それぞれのＲはＨまたはＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルもしくはＣ２−６アルキニルであり；
ｌは０−６であり；そして、
ｋ、ｍ、ｎおよびｐは独立して１−６である〕
で示される化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｊがベンゾオキサゾリル；１，２，３−オキサジアゾール−４−イル；１，３，４−オキサジアゾール−２−イル；１，２，４−オキサジアゾール−３−イル；オキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［５，４−ｃ］ピリジン−２−イルまたはオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルであり、これらのいずれも所望によりＣ１−６アルキル、ハロ、シクロプロピル、ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、ＯＣＨ３、ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＦ３または−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５で置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｊが１，２，４−オキサジアゾール−３−イルであり、そして、所望によりＣ１−６アルキル、ＣＦ３または−（ＣＲ２）０−１−Ｒ５で置換されており、ここで、Ｒ５は所望により置換されているフェニルまたはＣ３−７シクロアルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｏ（ベンジル）、ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２またはシアノであるか；または、Ｒ１がフェニル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、テトラヒドロピラニル、フラニル、ピペリジン−２−オニル、ピロリジン−２−オニル、ピロリジン−１−カルボニル、
【化６】
2010518097.tif 000068
または
【化７】
2010518097.tif 000069
であり、これらのいずれも所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、シアノ、ＯＨまたはＣ１−６アルコキシで置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２がＣ１−６アルキル、所望により置換されているフェニルまたは−Ｌ−（ＣＲ２）ｐ−Ｒ５であり、ここで、ＬはＯである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
該化合物が式（２）：
【化８】
2010518097.tif 000070
〔式中、Ｊはベンゾオキサゾリル；１，２，３−オキサジアゾール−４−イル；１，３，４−オキサジアゾール−２−イル；１，２，４−オキサジアゾール−３−イル；オキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［５，４−ｃ］ピリジン−２−イルまたはオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルであり、これらのいずれも所望によりＣ１−６アルキル、ハロ、シクロプロピル、ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、ＯＣＨ３、ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＦ３または−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５で置換されており；
ＹはＳＯ２または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
ｑは１−５であり；そして、
Ｒ９はハロ、Ｃ１−６アルキルまたはＯ（Ｃ１−６アルキル）である〕
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｊが１，２，４−オキサジアゾール−３−イルであり、所望によりＣ１−６アルキル、ＣＦ３または−（ＣＲ２）０−１−Ｒ５で置換されており、ここで、Ｒ５は所望により置換されているフェニルまたはＣ３−７シクロアルキルである、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
ＹがＳＯ２であり、そして、Ｒ３がＣ１−６アルキルである、請求項６に記載の化合物。
【請求項９】
ｑが１−２であり、そして、Ｒ９がハロである、請求項６に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ４が所望により置換されているピペリジニル、シクロヘキシル、フェニル、
【化９】
2010518097.tif 000071
または
【化１０】
2010518097.tif 000072
である、請求項６に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ４がピペリジニルである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
該化合物が式（３）：
【化１１】
2010518097.tif 000073
〔式中、Ｒ１はＣ３−７シクロアルキルまたはフェニルであり；
ｑは１−５であり；そして、
Ｒ９はハロ、Ｃ１−６アルキルまたはＯ（Ｃ１−６アルキル）である〕
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ５が所望により置換されているシクロヘキシル、ピペリジニルまたはチアゾリルである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１４】
下記式からなる群から選択される請求項１に記載の化合物：
【化１２】
2010518097.tif 000074
【化１３】
2010518097.tif 000075
【化１４】
2010518097.tif 000076
【化１５】
2010518097.tif 000077
【化１６】
2010518097.tif 000078
【化１７】
2010518097.tif 000079
【化１８】
2010518097.tif 000080
【化１９】
2010518097.tif 000081
【化２０】
2010518097.tif 000082
【化２１】
2010518097.tif 000083
【請求項１５】
治療有効量の請求項１−１４のいずれかに記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１６】
細胞もしくは組織系または哺乳動物のチャネル活性化プロテアーゼを阻害するための請求項１−１４のいずれかに記載の化合物の使用であって、該チャネル活性化プロテアーゼがプロスタシン、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１（例えば、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｂ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ）、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４（ＭＴＳＰ−２）、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ−１）、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡまたは好中球エラスターゼである、使用。
【請求項１７】
細胞もしくは組織系または哺乳動物のチャネル活性化プロテアーゼが介在する状態を処置するための薬物を製造するための請求項１−１４のいずれかに記載の化合物の、所望により第２の治療剤と組み合わせた使用であって；該チャネル活性化プロテアーゼがプロスタシン、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１（例えば、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｂ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ）、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４（ＭＴＳＰ−２）、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ−１）、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡまたは好中球エラスターゼである、使用。
【請求項１８】
該状態がイオンを輸送する上皮を介する体液の移動または呼吸器組織における粘液および唾液の蓄積、またはそれらの組合せと関連する、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
該状態が嚢胞性線維症、原発性線毛機能不全症、肺癌腫、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、喘息または呼吸器感染症である、請求項１７に記載の使用。
【請求項２０】
該第２の治療剤が抗炎症剤、気管支拡張剤、抗ヒスタミン剤、鎮咳剤、抗生物質またはＤＮａｓｅであり、請求項１−１３のいずれかに記載の化合物に対して前に、同時にまたは後に投与される、請求項１７に記載の使用。
【請求項２１】
該チャネル活性化プロテアーゼがプロスタシンである、請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項２２】
該細胞または組織系が気管支上皮性細胞を含む、請求項１６または１７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２００７年２月９日出願の米国仮出願番号６０／８８９，００８の優先権の利益を主張し、それは引用により、その全体を、本出願に包含させる。
【０００２】
技術分野
一般的に、本発明は、チャネル活性化プロテアーゼ（ＣＡＰ）阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
プロスタシンは種々の哺乳動物組織に存在するトリプシン様セリンプロテアーゼである。それは、細胞の細胞外膜上に発現するが、また、体液、例えば、精液、尿および気道表面液に分泌され得る膜固定プロテアーゼである。プロスタシン（ＰＲＳＳ８）はマトリプターゼ、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１、カテプシンＡおよび好中球エラスターゼのようなプロテアーゼと共に、アミロリド感受性の上皮性ナトリウムチャネル（ＥＮａＣ）の活性を刺激することができる。これらの酵素の阻害は上皮性イオン移動の変化、したがって上皮性膜を介する体液ホメオスタシスの変化を誘導することができる。例えば、腎臓のＣＡＰ阻害は利尿を促進すると考えられ、一方で気道のＣＡＰ阻害は肺の粘液または唾液のクリアランスを促進する。したがって、腎臓のＣＡＰ阻害は高血圧を処置するために治療的に使用され得る。気道のＣＡＰ阻害は、そうしなければ患者を続発性細菌感染にかかりやすくする傾向がある呼吸器分泌物の停滞を防ぐ。
【発明の概要】
【０００４】
発明の開示
本発明はチャネル活性化プロテアーゼ（ＣＡＰ）を調節するための化合物、医薬組成物およびこのような化合物を使用する方法を提供する。例えば、本発明の化合物および組成物はプロスタシン、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１（例えば、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｂ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ）、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４（ＭＴＳＰ−２）、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ−１）、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡおよび好中球エラスターゼを調節するために使用され得る。
【０００５】
１つの局面において、本発明は、式（１）：
【化１】
2010518097.tif 000002
〔式中、
Ｂは
【化２】
2010518097.tif 000003
または（ＣＲ２）ｋ−Ｒ５であり；
Ｙは−ＳＯ２−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯ−または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−である。ただし、Ｒ２がＣ１−６アルキルまたはフェニルであるとき、ＹはＳＯ２であり；
Ｊは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１個以上のヘテロ原子を含む、所望により置換されている５−１２員単環式または縮合ヘテロ環式環であり；
Ｒ１はＨ、所望によりハロゲン化されているＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６アルキニル；シアノ、ＯＨ、Ｏ（ＣＲ２）ｌＲ６、ＳＯ２Ｒ６、ＣＯＮＲ（ＣＲ２）ｌＲ６、ＣＯＮＲ７Ｒ８または
【化３】
2010518097.tif 000004
であり、ここで、Ｒ７およびＲ８は、ＮＲ７Ｒ８中のＮと一体となって、窒素原子を介して（ＣＲ２）ｍに結合している所望により置換されている５−７員ヘテロ環式環を形成するか；または、Ｒ１は所望により置換されているＣ３−７シクロアルキル、アリールまたは窒素原子を有さない５−７員ヘテロ環式環もしくはヘテロアリールであるか；または、
【化４】
2010518097.tif 000005
であり、ここで、環Ｐは所望により置換されている５−７員炭素環式環であり；
Ｒ２はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリールまたは−Ｌ−（ＣＲ２）ｐ−Ｒ５であり、ここで、ＬはＯ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２またはＯＣ（Ｏ）であり；
Ｒ３はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニルまたは−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５であり；
Ｒ４はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、−ＣＲ＝ＣＲ−Ｒ６、Ｃ２−６アルキニルまたは所望により置換されている５−１２員炭素環式環、ヘテロ環式環、アリールもしくはヘテロアリールであるか；または、Ｒ４は
【化５】
2010518097.tif 000006
であり、ここで、環Ｅは所望により置換されている５−１２員単環式または縮合炭素環式またはヘテロ環式環であり；
Ｒ５およびＲ６は、独立して所望により置換されている５−１２員炭素環式環、ヘテロ環式環、アリールまたはヘテロアリールであるか；または、Ｒ６はＣ１−６アルキルまたはＣ２−６アルケニルであってよく；
それぞれのＲはＨまたはＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルもしくはＣ２−６アルキニルであり；
ｌは０−６であり；そして、
ｋ、ｍ、ｎおよびｐは独立して１−６である〕
で示される化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００６】
上記式（１）において、Ｒ２はＣ１−６アルキル、所望により置換されているフェニルまたは−Ｌ−（ＣＲ２）ｐ−Ｒ５であってよく、ここで、ＬはＯである。
【０００７】
１つの態様において、本発明は式（２）：
【化６】
2010518097.tif 000007
〔式中、Ｊはベンゾオキサゾリル；１，２，３−オキサジアゾール−４−イル；１，３，４−オキサジアゾール−２−イル；１，２，４−オキサジアゾール−３−イル；オキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［５，４−ｃ］ピリジン−２−イルまたはオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルであり、これらのいずれも所望によりＣ１−６アルキル、ハロ、シクロプロピル、ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、ＯＣＨ３、ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＦ３または−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５で置換されており；
ＹはＳＯ２または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
ｑは１−５であり；
Ｒ９はハロ、Ｃ１−６アルキルまたはＯ（Ｃ１−６アルキル）であり；そして、
Ｒ、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ｍおよびｎは式（１）に定義のとおりである〕
を有する化合物を提供する。
【０００８】
いくつかの例において、式（２）のＹはＳＯ２であり、そして、Ｒ３はＣ１−６アルキルである。他の例において、Ｒ４は所望により置換されているピペリジニル、シクロヘキシル、フェニル、
【化７】
2010518097.tif 000008
または
【化８】
2010518097.tif 000009
である。特定の例において、Ｒ４はピペリジニルである。
【０００９】
他の態様において、本発明は式（３）：
【化９】
2010518097.tif 000010
〔式中、Ｒ１はＣ３−７シクロアルキルまたはフェニルであり；
ｑは１−５であり；
Ｒ９はハロ、Ｃ１−６アルキルまたはＯ（Ｃ１−６アルキル）であり；そして、
Ｒ、Ｒ５、Ｊ、ｋおよびｍは式（１）に定義のとおりである〕
を有する化合物を提供する。
【００１０】
上記式（２）および（３）において、ｑは１−２であってよく、そして、Ｒ９はハロである。いくつかの例において、式（３）のＲ５は所望により置換されているシクロヘキシル、ピペリジニルまたはチアゾリルであってよい。特定の例において、Ｒ５は所望によりピペリジニルで置換されているチアゾリルである。
【００１１】
上記式（１）、（２）および（３）において、Ｊはベンゾオキサゾリル；１，２，３−オキサジアゾール−４−イル；１，３，４−オキサジアゾール−２−イル；１，２，４−オキサジアゾール−３−イル；オキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［５，４−ｃ］ピリジン−２−イルまたはオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルであってよく、これらのいずれも所望によりＣ１−６アルキル、ハロ、シクロプロピル、ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、ＯＣＨ３、ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＦ３または−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５で置換されている。特定の例において、Ｊは所望により、例えば、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３または−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５で置換されていてもよい１，２，４−オキサジアゾール−３−イルであり、ここで、Ｒ５は所望により置換されているフェニルまたはＣ３−７シクロアルキルである。
【００１２】
上記式（１）、（２）および（３）において、Ｒ１はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｏ（ベンジル）、ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２またはシアノであり得るか；または、Ｒ１がフェニル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、テトラヒドロピラニル、フラニル、ピペリジン−２−オニル、ピロリジン−２−オニル、ピロリジン−１−カルボニル、
【化１０】
2010518097.tif 000011
または
【化１１】
2010518097.tif 000012
であり、これらのいずれも所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、シアノ、ＯＨまたはＣ１−６アルコキシで置換されている。
【００１３】
他の局面において、本発明は、式（１）、（２）または（３）の化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【００１４】
本発明は、また、チャネル活性化プロテアーゼを調節するための方法であって、治療有効量の式（１）、（２）または（３）を有する化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはその医薬組成物を系または哺乳動物に投与し、それによって、該チャネル活性化プロテアーゼを調節することを含む方法を提供する。
【００１５】
１つの態様において、本発明はチャネル活性化プロテアーゼを阻害するための方法であって、治療有効量の式（１）、（２）または（３）を有する化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはその医薬組成物を細胞もしくは組織系または哺乳動物に投与し、それによって、該チャネル活性化プロテアーゼを阻害する方法であって；ここで、該チャネル活性化プロテアーゼがプロスタシン、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１（例えば、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｂ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ）、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４（ＭＴＳＰ−２）、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ−１）、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡまたは好中球エラスターゼである方法を提供する。特定の例において、本発明はプロスタシンを阻害するための方法を提供する。
【００１６】
他の局面において、本発明はチャネル活性化プロテアーゼが介在する状態を改善または処置するための方法であって、有効量の式（１）、（２）または（３）を有する化合物もしくはその薬学的に許容される塩またはその医薬組成物を、所望により第２の治療剤と共に細胞もしくは組織系または哺乳動物に投与し、それによって、該状態を処置する方法であって；ここで、該チャネル活性化プロテアーゼがプロスタシン、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１（例えば、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｂ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ）、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４（ＭＴＳＰ−２）、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ−１）、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡまたは好中球エラスターゼである方法を提供する。
【００１７】
さらに、本発明は、チャネル活性化プロテアーゼが介在する状態を処置するための方法において使用するための式（１）、（２）または（３）の化合物を提供する。本発明は、また、チャネル活性化プロテアーゼが介在する状態を処置するための薬剤の製造における、式（１）、（２）または（３）の化合物の、所望により第２の治療剤と組み合わせた使用を提供する。
【００１８】
特定の例において、本発明の化合物はプロスタシン−介在状態を処置するために使用され得る。１つの態様において、第２の治療剤は抗炎症剤、気管支拡張剤、抗ヒスタミン剤、鎮咳剤、抗生物質またはＤＮａｓｅであってよく、式（１）、（２）または（３）の化合物に対して前、同時または後に投与される。いくつかの例において、本発明の化合物は気管支上皮性細胞、特にヒト気管支上皮性細胞に投与される。
【００１９】
本発明の化合物を使用して改善または処置され得る状態の例は、イオンを輸送する上皮を介する体液の移動または呼吸器組織における粘液または唾液の蓄積と関連する状態、またはそれらの組合せを含むが、これらに限定はされない。いくつかの例において、本発明の化合物を使用して介在され得る状態は嚢胞性線維症、原発性線毛機能不全症、肺癌腫、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、喘息または呼吸器感染症である。
【００２０】
定義
基および他の基、例えばハロ置換アルキルおよびアルコキシの構造成分としての“アルキル”は、直鎖または分岐鎖であり得る。本明細書で使用される所望により置換されているアルキル、アルケニルまたはアルキニルは、所望によりハロゲン化されているか（例えば、ＣＦ３）、または、ヘテロ原子、例えば、ＮＲ、ＯまたはＳで置換されている、または、置き換えられている１個以上の炭素を有してもよい（例えば、−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、アルキルチオール、チオアルコキシ、アルキルアミン等）。
【００２１】
“アリール”は炭素原子を含む単環式または縮合二環式芳香環を意味する。例えば、アリールはフェニルまたはナフチルであり得る。“アリーレン”はアリール基から生じる二価のラジカルを意味する。
【００２２】
“ヘテロアリール”は１個以上の環員がヘテロ原子であるときの上記アリールを定義する。ヘテロアリールの例は、ピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ［１，３］ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ−イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニルなどを含むが、これらに限定はされない。
【００２３】
本明細書で使用される“炭素環式環”は、所望により、例えば、＝Ｏで置換されていてもよい、炭素原子を含む飽和または部分的に不飽和、単環式、縮合二環式または架橋多環式環を意味する。炭素環式環の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロプロピレン、シクロヘキサノンなどを含むが、これらに限定はされない。
【００２４】
本明細書で使用される“ヘテロ環式環”は、１個以上の環炭素がヘテロ原子であるときの上記炭素環式環を定義する。例えば、ヘテロ環式環は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｎ＝、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２またはＮＲを含んでよく、ここで、Ｒは水素、Ｃ１−４アルキルまたは保護基であり得る。ヘテロ環式環の例は、モルホリノ、ピロリジニル、ピロリジニル−２−オン、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニロン、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−８−イルなどを含むが、これらに限定はされない。
【００２５】
他に記載のない限り、置換基が“所望により置換”されていると考えられるとき、それは、その置換基が、個々に、かつ独立して、例えば、所望により、ハロゲン化されているアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルキルアミン、アルキルチオ、アルキニル、アミド、モノおよびジ置換アミノ基を含むアミノ、アリール、アリールオキシ、アリールチオ、カルボニル、炭素環式、シアノ、シクロアルキル、ハロゲン、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロアリール、ヘテロ環式、ヒドロキシ、イソシアネート、イソチオシアネート、メルカプト、ニトロ、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｓ−スルホンアミド、Ｎ−スルホンアミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、パーハロアルキル、パーフルオロアルキル、シリル、スルホニル、チオカルボニル、チオシアネート、トリハロメタンスルホニルおよびそれらの保護された化合物から選択される１個以上の基で置換されていてもよい基であることを意味する。上記置換基の保護された化合物を形成し得る保護基は、当業者に既知であり、そして、文献、例えば、Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley & Sons, New York, NY, 1999、およびKocienski, Protective Groups, Thieme Verlag, New York, NY, 1994で見つけることができる（これらを出典明示によりそれらの内容を本明細書に包含させる）。
【００２６】
本明細書で使用される“共投与”または“組合せ投与”などの用語は、一人の患者に選択された複数治療剤を投与することを含むことを意味し、そして必ずしも複数薬剤が同じ投与経路によりまたは同時に投与されない処置レジメンを含むことを意図する。
【００２７】
本明細書で使用される“薬学的組合せ”なる用語は、複数の活性成分の混合または組合せから得られる生産物を意味し、そして複数の活性成分の固定された組合せおよび固定されていない組合せの両方を含む。“固定された組合せ”なる用語は、複数の活性成分、例えば式（１）の化合物、および共薬剤両方が、単一の物または投与形で同時に患者に投与されることを意味する。“固定されていない組合せ”なる用語は、複数の活性成分、例えば式（１）の化合物、および共薬剤両方が、同時に、共にまたは特定の時間制限なしに連続してのいずれかで、別々の物として投与することを意味し、このような投与は、治療有効量の活性成分を患者の体内に提供する。後者は、カクテル療法、例えば３つ以上の活性成分の投与にも適用する。
【００２８】
“治療有効量”なる用語は、研究者、獣医、医師または他の臨床医により求められる、細胞、組織、臓器、系、動物またはヒトの生物または医学応答を誘導する対象化合物の量を意味する。
【００２９】
対象化合物の“投与”または“投与する”なる用語は、処置を必要とする個体に本発明の化合物のプロドラッグを含む本発明の化合物を提供することを意味すると理解すべきである。
【００３０】
本明細書で使用される、“処置する”、“処置し”および“処置”なる用語は疾患および／またはそれに付随する症候群を緩和または寛解する方法を意味する。
【００３１】
“プロスタシン”なる用語は、また、ヒトチャネル活性化プロテアーゼ（ｈＣＡＰ）；チャネル活性化プロテアーゼ−１；およびＰＲＳＳ８、ＭＥＲＰＯＰＳ  ＩＤ  Ｓ０１．１５９を意味し得る。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
発明を実施するための形態
本発明はチャネル活性化プロテアーゼ（ＣＡＰ）を調節するための化合物、医薬組成物およびこのような化合物を使用する方法を提供する。
【００３３】
１つの局面において、本発明は、式（１）：
【化１２】
2010518097.tif 000013
〔式中、
Ｂは
【化１３】
2010518097.tif 000014
または（ＣＲ２）ｋ−Ｒ５であり；
Ｙは−ＳＯ２−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯ−または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−である、ただし、Ｒ２がＣ１−６アルキルまたはフェニルであるとき、ＹはＳＯ２であり；
Ｊは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１個以上のヘテロ原子を含む、所望により置換されている５−１２員単環式または縮合ヘテロ環式環であり；
Ｒ１はＨ、所望によりハロゲン化されているＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６アルキニル；シアノ、ＯＨ、Ｏ（ＣＲ２）ｌＲ６、ＳＯ２Ｒ６、ＣＯＮＲ（ＣＲ２）ｌＲ６、ＣＯＮＲ７Ｒ８または
【化１４】
2010518097.tif 000015
であり、ここで、Ｒ７およびＲ８は、ＮＲ７Ｒ８中のＮと一体となって、窒素原子を介して（ＣＲ２）ｍに結合している所望により置換されている５−７員ヘテロ環式環を形成するか；または、Ｒ１は所望により置換されているＣ３−７シクロアルキル、アリールまたは窒素原子を有さない５−７員ヘテロ環式環もしくはヘテロアリールであるか；または、
【化１５】
2010518097.tif 000016
であり、ここで、環Ｐは所望により置換されている５−７員炭素環式環であり；
Ｒ２はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、アリールまたは−Ｌ−（ＣＲ２）ｐ−Ｒ５であり、ここで、ＬはＯ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２またはＯＣ（Ｏ）であり；
Ｒ３はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニルまたは−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５であり；
Ｒ４はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、−ＣＲ＝ＣＲ−Ｒ６、Ｃ２−６アルキニルまたは所望により置換されている５−１２員炭素環式環、ヘテロ環式環、アリールもしくはヘテロアリールであるか；または、Ｒ４は
【化１６】
2010518097.tif 000017
であり、ここで、環Ｅは所望により置換されている５−１２員単環式または縮合炭素環式またはヘテロ環式環であり；
Ｒ５およびＲ６は、独立して所望により置換されている５−１２員炭素環式環、ヘテロ環式環、アリールまたはヘテロアリールであるか；または、Ｒ６はＣ１−６アルキルまたはＣ２−６アルケニルであってよく；
それぞれのＲはＨまたはＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルもしくはＣ２−６アルキニルであり；
ｌは０−６であり；そして、
ｋ、ｍ、ｎおよびｐは独立して１−６である〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００３４】
１つの態様において、本発明は式（２）：
【化１７】
2010518097.tif 000018
〔式中、Ｊはベンゾオキサゾリル；１，２，３−オキサジアゾール−４−イル；１，３，４−オキサジアゾール−２−イル；１，２，４−オキサジアゾール−３−イル；オキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［５，４−ｃ］ピリジン−２−イルまたはオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルであり、これらのいずれも所望によりＣ１−６アルキル、ハロ、シクロプロピル、ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、ＯＣＨ３、ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＦ３または−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５で置換されており；
ＹはＳＯ２または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
ｑは１−５であり；
Ｒ９はハロ、Ｃ１−６アルキルまたはＯ（Ｃ１−６アルキル）であり；そして、
Ｒ、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ｍおよびｎは式（１）に定義のとおりである〕
を有する化合物を提供する。
【００３５】
他の態様において、本発明は式（３）：
【化１８】
2010518097.tif 000019
〔式中、Ｒ１はＣ３−７シクロアルキルまたはフェニルであり；
ｑは１−５であり；
Ｒ９はハロ、Ｃ１−６アルキルまたはＯ（Ｃ１−６アルキル）であり；そして、
Ｒ、Ｒ５、Ｊ、ｋおよびｍは式（１）に定義のとおりである〕
を有する化合物を提供する。
【００３６】
他の態様において、上記式（１）、（２）および（３）のＪはイミダゾリン−２−イル；イミダゾール−２−イル；オキサゾリン−２−イル；オキサゾール−２−イル；チアゾリン−２−イル；チアゾル−２−イル；チアゾル−５−イル；１，３，４−チアジアゾール−２−イル；１，２，４−チアジアゾール−３−イル；１，２，４−チアジアゾール−５−イル；イソチアゾル−３−イル；１，２，３−トリアゾール−４−イル；１，２，３−トリアゾール−５−イル；１，２，４−トリアジン−３−イル；１，３，５−トリアジン−２−イル；テトラゾール−５−イル；イソキサゾール−３−イル；１，２，３，４−オキサトリアゾール−５−イル；１，２，３−オキサジアゾール−４−イル；１，３，４−オキサジアゾール−２−イル；１，２，４−オキサジアゾール−３−イル；２−ピラゾリン−３−イル；ピラゾール−３−イル；ピラジン−２−イル；ピリダジン−３−イル；ピリミジン−２−イル；１Ｈ−インダゾール−３−イル；ベンゾキサゾール−２−イル；ベンゾイミダゾール−２−イル；ベンゾチアゾル−２−イル；４，５，６，７−テトラヒドロ−ベンゾチアゾル−２−イル；シンノリン−３−イル；フタラジン−１−イル；ナフト［２，１−ｄ］チアゾル−２−イル；ナフト［１，２−ｄ］チアゾル−２−イル；キノキサリン−２−イル；４−オキソキナゾリン−２−イル；キナゾリン−２−イル；キナゾリン−４−イル；プリン−２−イル；プリン−８−イル；プテリジン−２−イル；プテリジン−６−イル；オキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル；オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル；オキサゾロ［５，４−ｃ］ピリジン−２−イル；オキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イル；チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル；チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルおよびチアゾロ［５，４−ｃ］ピリジン−２−イルを含むが、これらに限定はされない群から選択される。特定の例において、Ｊはベンゾオキサゾリル；１，２，３−オキサジアゾール−４−イル；１，３，４−オキサジアゾール−２−イル；１，２，４−オキサジアゾール−３−イル；オキサゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル、オキサゾロ［５，４−ｃ］ピリジン−２−イルまたはオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルであり、これらのいずれも所望によりＣ１−６アルキル、ハロ、シクロプロピル、ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、ＯＣＨ３、ＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＦ３または−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ５で置換されている。
【００３７】
上記式（１）、（２）および（３）において、Ｒ１は非塩基性置換基、または、例えば、ｐＫａ＜５、ｐＫａ＜２またはｐＫａ＜０を有する比較的弱い塩基の基である。Ｒ１の例は、Ｈ、所望によりハロゲン化されているＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ３−６アルキニル；シアノ、ＯＨ、Ｏ（ＣＲ２）ｌＲ６、ＳＯ２Ｒ６、ＣＯＮＲ（ＣＲ２）ｌＲ６、ＣＯＮＲ７Ｒ８または
【化１９】
2010518097.tif 000020
であり、ここで、Ｒ７およびＲ８は、ＮＲ７Ｒ８中のＮと一体となって、所望により置換されている５−７員ヘテロ環式環を形成するか；または、Ｒ１は所望により置換されているＣ３−７シクロアルキル、アリールまたは窒素原子を有さない５−７員ヘテロ環式環もしくはヘテロアリールであるか；または、
【化２０】
2010518097.tif 000021
であり、ここで、環Ｐは所望により置換されている５−７員炭素環式環であるが、これらに限定はされない。
【００３８】
上記式（１）、（２）および（３）において、所望により置換されている部分のそれぞれはハロ、＝Ｏ、Ｃ１−６アルコキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニルまたはＣ２−６アルキニルで置換されていてよく、その各々は所望によりハロゲン化されていてよく、または、所望によりＮ、ＯまたはＳ；ＣＯ２Ｒ１０、Ｏ−（ＣＲ２）ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１０；−（ＣＲ２）ｌ−Ｒ１０、−（ＣＲ２）ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１０または−（ＣＲ２）ｌ−ＳＯ２−Ｒ１０；で置き換えられているか、または置換されていてもよい炭素を有してよく、またはそれらの組合せであってよく、ここでそれぞれのＲ１０はＨ、アミノ、Ｃ１−６アルキルまたは所望により置換されている炭素環式環、ヘテロ環式環、アリールもしくはヘテロアリールである。
【００３９】
本発明は、また、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩の全ての適当な同位体化合物(variation)を含む。本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩の同位体化合物は少なくとも１個の原子が同じ原子数を有するが、通常天然で見られる原子質量と異なる原子質量を有する原子により置換されているものとして定義される。本発明の化合物およびその薬学的に許容される塩に包含され得る同位体の例は水素、炭素、窒素および酸素の同位体、例えば、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌおよび１２３Ｉを含むが、これらに限定されない。本発明の化合物およびその薬学的に許容される塩の特定の同位体化合物、例えば、放射性同位体、例えば、３Ｈまたは１４Ｃが包含される同位体化合物は、薬剤および／または基質組織分布研究において有用である。特定の例において、３Ｈおよび１４Ｃ同位体は製造および検出の容易さのため使用され得る。他の例において、同位体、例えば、２Ｈでの置換は、より大きな代謝安定性からもたらされる特定の治療利益、例えば、インビボで半減期の増加または必要用量の減少を提供し得る。本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩の同位体化合物は、一般的に適当な試薬の適当な同位体化合物を使用する慣用の製造法により製造することができる。
【００４０】
本発明の化合物および組成物はチャネル活性化プロテアーゼを調節するために有用であり得る。本発明の化合物および組成物を使用して調節され得るチャネル活性化プロテアーゼの例はプロスタシン、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１（例えば、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｂ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ）、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４（ＭＴＳＰ−２）、マトリプターゼ（ＭＴＳＰ−１）、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡまたは好中球エラスターゼを含むが、これらに限定はされない。本発明の化合物は、また、イオンチャネル、例えば、上皮性ナトリウムチャネルの活性を刺激するプロテアーゼの活性を阻害し得、ＣＡＰ−関連疾患の処置に有用であり得る。
【００４１】
薬理学および有用性
本発明の化合物はチャネル活性化プロテアーゼ、特にトリプシン様セリンプロテアーゼ、例えば、プロスタシンおよびそれ自体の活性を調節し、プロスタシンが、例えば、疾患の病状および／または総体症状に関与する疾患または障害を処置するために有用である。
【００４２】
特にトリプシン様セリンプロテアーゼ、例えば、プロスタシンによりチャネル活性化プロテアーゼが介在する疾患は上皮膜を介する体液量の調節と関連する疾患を含む。例えば、気道表面の体液の量は粘膜毛様体クリアランスおよび肺の健康の保持の重要な調節因子である。チャネル活性化プロテアーゼの阻害は気道上皮の粘膜側の液体貯留を促進し、それにより粘液クリアランスを促進し、呼吸器組織（肺気道を含む）における粘液または唾液の蓄積を防止する。このような疾患は呼吸器疾患、例えば、嚢胞性線維症、原発性線毛機能不全症、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、呼吸器感染症（急性および慢性；ウイルス性および細菌性）および肺癌腫を含む。チャネル活性化プロテアーゼが介在する疾患は、また、上皮を通過する体液の異常調節と関連する、あるいは表面の表面保護体液の異常な生理機能を伴う、呼吸器疾患以外の疾患、例えば、口腔乾燥症（ドライマウス）または乾性角結膜炎(keratoconjunctivitis sire)（ドライアイ）を含む。さらに、腎臓におけるＥＮａＣのＣＡＰ調節は利尿を促進し、それにより血圧低下作用を誘導するために使用することができる。
【００４３】
慢性閉塞性肺疾患は慢性気管支炎またはそれらに付随する呼吸困難、気腫、ならびに他の薬剤治療、特に他の吸入薬剤治療の後の気道過敏性の再燃を含む。本発明は、また、例えば、急性、アラキジン性(arachidic)、カタル性、クループ性(croupus)、慢性または結核様(phthinoid)気管支炎を含むすべてのタイプのまたは起源の気管支炎の処置に適用できる。
【００４４】
喘息は内因性（非アレルギー性）喘息および外因性（アレルギー性）喘息、軽度の喘息、中度の喘息、重度の喘息、気管支炎喘息、運動誘発喘息、職業的喘息および下記の細菌感染誘導喘息を含む。喘息は、また、喘鳴症候群を示し、主要な医学的懸念の確立された患者カテゴリーであり、しばしば初期のまたは早期の喘息として同定される“喘鳴小児”と診断されるまたは診断できる、４または５歳以下の対象を包含する“喘鳴小児症候群”と称される状態を包含する。
【００４５】
チャネル活性化プロテアーゼが介在する疾患を処置するためのチャネル活性化プロテアーゼ阻害剤、例えば、プロスタシン阻害剤の適合性は当分野で既知の上記および下記アッセイ方法にしたがってチャネル活性化プロテアーゼ阻害剤の阻害効果を同定することにより試験され得る。
【００４６】
前記によって、本発明は、さらに、処置を必要とする対象における、上記のいずれかの疾患または障害を予防または処置する方法であって、治療的有効量の式（１）、（２）または（３）の化合物またはその薬学的に許容される塩を該対象に投与することを含む、方法を提供する。上記の全ての使用に関して、必要な投与量は投与形態、処置すべき特定の状態および所望の効果に依存して変化する（下記“投与および医薬組成物”参照）。
【００４７】
投与および医薬組成物：
一般的に、本発明の化合物は単独でまたは１種以上の治療剤との組合せのいずれかで当分野で既知の通常のおよび許容される形式のいずれかを介して、治療有効量を投与される。
【００４８】
本発明のチャネル活性化プロテアーゼ阻害剤は、また、他の治療剤と組合せて使用するための共治療剤として有用である。例えば、チャネル活性化プロテアーゼ阻害剤は抗炎症剤、気管支拡張剤、抗ヒスタミン剤または鎮咳剤、抗生物質またはＤＮａｓｅ治療剤と組合せて使用され得る。チャネル活性化プロテアーゼ阻害剤および他の治療剤は同じもしくは異なる医薬組成物であり得る。チャネル活性化プロテアーゼ阻害剤は固定された医薬組成物中の他の治療剤と混合され得、または他の治療剤に対して別々に、前に、同時にまたは後に投与され得る。組合せは、例えば、このような薬剤の治療効果の増強剤として、またはこのような薬剤の必要用量もしくは潜在的副作用減少の手段として、特に嚢胞性線維症または閉塞性もしくは炎症性気道疾患、例えば、上記のものの処置において有用であり得る。
【００４９】
適当な抗炎症治療剤はステロイド、特にグルココルチコステロイド、例えば、ブデソニド、ベクロメタゾン（beclamethasone）ジプロピオネート、フルチカゾンプロピオネート、シクレソニドもしくはモメタゾンフロエート、または国際特許出願ＷＯ０２／８８１６７、ＷＯ０２／１２２６６、ＷＯ０２／１００８７９、ＷＯ０２／００６７９（例えば、実施例３、１１、１４、１７、１９、２６、３４、３７、３９、５１、６０、６７、７２、７３、９０、９９および１０１）、ＷＯ０３／３５６６８、ＷＯ０３／４８１８１、ＷＯ０３／６２２５９、ＷＯ０３／６４４４５、ＷＯ０３／７２５９２、ＷＯ０４／３９８２７およびＷＯ０４／６６９２０に記載されているステロイド；非ステロイド性グルココルチコイド受容体アゴニスト、例えば、ＤＥ１０２６１８７４、ＷＯ００／００５３１、ＷＯ０２／１０１４３、ＷＯ０３／８２２８０、ＷＯ０３／８２７８７、ＷＯ０３／８６２９４、ＷＯ０３／１０４１９５、ＷＯ０３／１０１９３２、ＷＯ０４／０５２２９、ＷＯ０４／１８４２９、ＷＯ０４／１９９３５およびＷＯ０４／２６２４８に記載されているもの；ＬＴＤ４アンタゴニスト、例えば、モンテルカストおよびザフィルカスト；ＰＤＥ４阻害剤、例えば、シロミラスト（ＡＲＩＦＬＯ（登録商標）  ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ロフルミラスト（登録商標）（Ｂｙｋ  Ｇｕｌｄｅｎ）、Ｖ−１１２９４Ａ（Ｎａｐｐ）、ＢＡＹ１９−８００４（Ｂａｙｅｒ）、ＳＣＨ−３５１５９１（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）、ＡＲＯＦＹＬＬＩＮＥ（登録商標）（Ａｌｍｉｒａｌｌ  Ｐｒｏｄｅｓｆａｒｍａ）、ＰＤ１８９６５９／ＰＤ１６８７８７（Ｐａｒｋｅ−Ｄａｖｉｓ）、ＡＷＤ−１２−２８１（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、ＣＤＣ−８０１（Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ＳｅｌＣＩＤ（ＴＭ）ＣＣ−１０００４（Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ＶＭ５５４／ＵＭ５６５（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）、Ｔ−４４０（田辺）、ＫＷ−４４９０（協和発酵工業）、およびＷＯ９２／１９５９４、ＷＯ９３／１９７４９、ＷＯ９３／１９７５０、ＷＯ９３／１９７５１、ＷＯ９８／１８７９６、ＷＯ９９／１６７６６、ＷＯ０１／１３９５３、ＷＯ０３／１０４２０４、ＷＯ０３／１０４２０５、ＷＯ０３／３９５４４、ＷＯ０４／０００８１４、ＷＯ０４／０００８３９、ＷＯ０４／００５２５８、ＷＯ０４／０１８４５０、ＷＯ０４／０１８４５１、ＷＯ０４／０１８４５７、ＷＯ０４／０１８４６５、ＷＯ０４／０１８４３１、ＷＯ０４／０１８４４９、ＷＯ０４／０１８４５０、ＷＯ０４／０１８４５１、ＷＯ０４／０１８４５７、ＷＯ０４／０１８４６５、ＷＯ０４／０１９９４４、ＷＯ０４／０１９９４５、ＷＯ０４／０４５６０７およびＷＯ０４／０３７８０５に記載されているもの；ならびに、アデノシンＡ２Ｂ受容体アンタゴニスト、例えば、ＷＯ０２／４２２９８（これらのいずれもその内容を本明細書に包含させる）に記載されているものを含む。
【００５０】
適当な気管支拡張治療剤はベータ−２アドレナリン受容体アゴニスト、例えば、アルブテロール（サルブタモール）、メタプロテレノール、テルブタリン、サルメテロールフェノテロール、プロカテロール、フォルモテロール、カルモテロールまたはそれらの薬学的に許容される塩；および、ＷＯ００／７５１１４に記載されている式（１）の化合物（遊離形または塩形または溶媒和物形）、式：
【化２１】
2010518097.tif 000022
の化合物、ＷＯ０４／１６６０１の式（１）の化合物（遊離形または塩形または溶媒和物形）、およびＥＰ１４４０９６６、ＪＰ０５０２５０４５、ＷＯ９３／１８００７、ＷＯ９９／６４０３５、ＵＳ２００２／００５５６５１、ＷＯ０１／４２１９３、ＷＯ０１／８３４６２、ＷＯ０２／６６４２２、ＷＯ０２／７０４９０、ＷＯ０２／７６９３３、ＷＯ０３／２４４３９、ＷＯ０３／４２１６０、ＷＯ０３／４２１６４、ＷＯ０３／７２５３９、ＷＯ０３／９１２０４、ＷＯ０３／９９７６４、ＷＯ０４／１６５７８、ＷＯ０４／２２５４７、ＷＯ０４／３２９２１、ＷＯ０４／３３４１２、ＷＯ０４／３７７６８、ＷＯ０４／３７７７３、ＷＯ０４／３７８０７、ＷＯ０４／３９７６２、ＷＯ０４／３９７６６、ＷＯ０４／４５６１８ＷＯ０４／４６０８３およびＷＯ０４／８０９６４（これらのいずれもその内容を本明細書に包含させる）の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩を含む。
【００５１】
適当な気管支拡張治療剤は、また、抗コリン剤または抗ムスカリン性薬剤、特にイプラトロピウムブロマイド、オキシトロピウムブロマイド、チオトロピウム塩およびＣＨＦ  ４２２６（Ｃｈｉｅｓｉ）、およびグリコピロレート、また、ＥＰ４２４０２１、ＵＳ３７１４３５７、ＵＳ５１７１７４４、ＷＯ０１／０４１１８、ＷＯ０２／００６５２、ＷＯ０２／５１８４１、ＷＯ０２／５３５６４、ＷＯ０３／００８４０、ＷＯ０３／３３４９５、ＷＯ０３／５３９６６、ＷＯ０３／８７０９４、ＷＯ０４／０１８４２２およびＷＯ０４／０５２８５（これらのいずれもその内容を本明細書に包含させる）に記載されているものを含む。
【００５２】
適当なデュアル抗炎症および気管支拡張治療剤はデュアルベータ−２アドレナリン受容体アゴニスト／ムスカリンアンタゴニスト、例えば、ＵＳ２００４／０１６７１６７、ＷＯ０４／７４２４６およびＷＯ０４／７４８１２に記載されているものを含む。
【００５３】
適当な抗ヒスタミン剤治療剤はセチリジンヒドロクロライド、アセトアミノフェン、フマル酸クレマスチン、プロメタジン、ロラチジン（loratidine）、デスロラチジン（desloratidine）、ジフェンヒドラミンおよびフェキソフェナジンヒドロクロライド、アクチバスチン（activastine）、アステミゾール、アゼラスチン、エバスチン、エピナスチン、ミゾラスチンおよびテフェナジン（tefenadine）ならびにＪＰ２００４１０７２９９、ＷＯ０３／０９９８０７およびＷＯ０４／０２６８４１（これらのいずれもその内容を本明細書に包含させる）に記載されているものを含む。
【００５４】
適当な抗生物質はマクロライド系抗生物質、例えば、トブラマイシン（ＴＯＢＩＴＭ）を含む。
【００５５】
適当なＤＮａｓｅ治療剤は選択的にＤＮＡを開裂する組み換えヒトデオキシリボヌクレアーゼＩ（ｒｈＤＮａｓｅ）の非常に精製された溶液であるドルナーゼアルファ（ＰＵＬＭＯＺＹＭＥＴＭ）を含む。ドルナーゼアルファが嚢胞性線維症を処置するために使用される。
【００５６】
チャネル活性化プロテアーゼ阻害剤と抗炎症治療剤の他の有用な組合せは、ケモカイン受容体のアンタゴニスト、例えば、ＣＣＲ−１、ＣＣＲ−２、ＣＣＲ−３、ＣＣＲ−４、ＣＣＲ−５、ＣＣＲ−６、ＣＣＲ−７、ＣＣＲ−８、ＣＣＲ−９およびＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、特にＣＣＲ−５アンタゴニスト、例えば、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−ＰｌｏｕｇｈアンタゴニストＳＣ−３５１１２５、ＳＣＨ−５５７００およびＳＣＨ−Ｄ、Ｔａｋｅｄａアンタゴニスト、例えば、Ｎ−［［４−［［［６，７−ジヒドロ−２−（４−メチル−フェニル）−５Ｈ−ベンゾ−シクロヘプテン−８−イル］カルボニル］アミノ］フェニル］−メチル］テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２Ｈ−ピラン−４−アミニウムクロライド（ＴＡＫ−７７０）ならびにＵＳ６１６６０３７、ＷＯ００／６６５５８、ＷＯ００／６６５５９、ＷＯ０４／０１８４２５およびＷＯ０４／０２６８７３（これらのいずれもその内容を本明細書に包含させる）に記載されているＣＣＲ−５アンタゴニストとである。
【００５７】
本発明のプロスタシンが介在する疾患の処置において、遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明のチャネル活性化プロテアーゼ阻害剤は、適当な経路で、例えば、経口的に、例えば、錠剤、カプセルまたは液体形態で、非経腸的に、例えば、注射可能溶液または懸濁液の形態で、または鼻腔内に、例えば適当な鼻腔内送達デバイスで、例えば、当分野で既知の鼻腔用スプレーを使用する、エアロゾル形態または他の噴霧可能製剤により、または特に噴霧器で使用するための吸入により投与され得る。
【００５８】
チャネル活性化プロテアーゼ阻害剤は、薬学的に許容される希釈剤または担体と共に医薬組成物で投与され得る。このような組成物は、例えば、乾燥粉末、錠剤、カプセルおよび液体だけでなく、また、当分野で既知の他の製剤成分および技術を使用して製造され得る、注射溶液、輸液または吸入懸濁液でもあり得る。
【００５９】
遊離形または薬学的に許容される塩形のチャネル活性化プロテアーゼ阻害剤の用量は種々の因子、例えば、活性成分の活性および持続時間、処置される状態の重症度、投与経路、対象の種、性別、人種、年齢および体重および／またはその個々の状態に依存し得る。温血動物、特に約７５ｋｇのヒトに投与、例えば経口投与する典型的な１日用量は、約０．７ｍｇから約１４００ｍｇ、特に約５ｍｇから約２００ｍｇと概算される。該用量は、例えば、単回投与または例えば、５から２００ｍｇの複数回投与で投与され得る。
【００６０】
組成物がエアロゾル製剤を構成するとき、それは、例えば、ヒドロ−フルオロ−アルカン（ＨＦＡ）高圧ガス、例えば、ＨＦＡ１３４ａもしくはＨＦＡ２２７またはこれらの混合物を含み、そして１種以上の当分野で既知の共溶媒、例えば、エタノール（２０重量％まで）、および／または１種以上の界面活性剤、例えば、オレイン酸またはトリオレイン酸ソルビタン、および／または１種以上の充てん剤、例えば、ラクトースを含み得る。組成物が乾燥粉末製剤を構成するとき、それは、例えば、１０ミクロンまでの粒径を有するチャネル活性化プロテアーゼ阻害剤と、所望により所望の粒径分布の希釈剤または担体、例えば、ラクトース、および製品の湿度による性能悪化に対する保護に役立つ化合物、例えば、ステアリン酸マグネシウムを一緒に含む。組成物が噴霧製剤を構成するとき、それは、例えば、水、共溶媒、例えば、エタノールまたはプロピレングリコールおよび界面活性剤であり得る安定剤を含むビヒクル中に溶解されたまたは懸濁されたチャネル活性化プロテアーゼ阻害剤を含み得る。
【００６１】
特定の態様において、本発明は吸入可能形の、例えば、エアロゾルまたは他の噴霧組成物または吸入可能粒子の、例えば、微粉化形の式（１）、（２）または（３）の化合物を提供する。本発明は、また、吸入可能形の本発明の化合物を含む吸入可能薬剤；吸入可能形の本発明の薬剤と吸入デバイスを一緒に含む医薬品；および吸入可能形の本発明の化合物を含む吸入デバイスを提供する。
【００６２】
本発明の化合物の製造方法
本発明の化合物は下記実施例の例示的な製造法で製造され得る。
【００６３】
記載されている反応において、最終産物において望まれる反応性官能基（例えば、ヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基）を、反応へのこれらの望まない参加を避けるために当分野で既知の保護基を使用して保護し得る。慣用の保護基は、標準的技法にしたがって使用し得る。例えば、T.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991参照。
【００６４】
本発明の化合物は、また、遊離塩基形の化合物を薬学的に許容される無機酸または有機酸と反応させることにより薬学的に許容される酸付加塩として製造し得る。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩を、遊離塩基形の化合物を薬学的に許容される無機塩基または有機塩基と反応させることにより製造し得る。あるいは、塩形の本発明の化合物を出発物質または中間体の塩を使用して製造し得る。
【００６５】
遊離酸形または遊離塩基形の本発明の化合物を、対応する塩基付加塩形または酸付加塩形、各々から製造し得る。例えば酸付加塩形の本発明の化合物は、適当な塩基（例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど）と処理することにより対応する遊離塩基に変換し得る。塩基付加塩形の本発明の化合物は、適当な酸（例えば、塩酸など）と処理することにより対応する遊離酸に変換し得る。
【００６６】
非酸化形の本発明の化合物を、適当な不活性有機溶媒（例えば、アセトニトリル、エタノール、ジオキサン溶液など）中で、０から８０℃で還元剤（例えば、硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、リン三塩化物、三臭化物など）と処理することにより本発明の化合物のＮ−オキシドから製造し得る。
【００６７】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を当業者に既知の方法で製造し得る（例えばさらなる詳細のためにSaulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985参照のこと）。例えば、適当なプロドラッグを本発明の非誘導化化合物を適当なカルバミル化剤（例えば、１，１−アシルオキシアルキルカルバノクロリデート、パラ−ニトロフェニルカーボネートなど）と反応させることにより製造し得る。
【００６８】
本発明の化合物の保護された誘導体を当業者に既知の方法で製造し得る。保護基の創造およびその除去に適用できる技術の詳細な説明はT. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999において見ることができる。
【００６９】
本発明の化合物を、溶媒和物（例えば、水和物）として都合良く製造するか、または本発明の工程中に形成し得る。本発明の化合物の水和物を、有機溶媒、例えばジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールを使用して、水性／有機溶媒混合物から再結晶することにより都合良く製造し得る。
【００７０】
本発明の化合物を、化合物のラセミ混合物を光学的に活性な分割剤と反応させ、一組のジアステレオマー化合物を形成し、該ジアステレオマーを分離し、そして光学的に純粋なエナンチオマーを回収することにより、それらの個々の立体異性体として製造し得る。エナンチオマーの分離は本発明の化合物の共有結合ジアステレオマー誘導体を使用して行うとき、分離できる複合体が好ましい（例えば、結晶のジアステレオマー塩）。ジアステレオマーは異なる物理的性質（例えば、融点、沸点、溶解度、反応性など）を有し、そしてこれらの相違を利用して容易に分離し得る。ジアステレオマーをクロマトグラフィー、または溶解度の差異に基づく分割／分離技術により分割し得る。次に光学的に純粋なエナンチオマーを、ラセミ化をもたらさないであろう実用的手段により分割剤と共に回収する。ラセミ混合物から化合物の立体異性体の分離に適用できる技術のより詳細な説明はJean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981において見ることができる。
【００７１】
手短に言えば、本発明の化合物は実施例で例示されているとおりに製造し得、式（１）、（２）または（３）の化合物は下記の工程を含む方法により製造し得る：
（ａ）所望により本発明の化合物の薬学的に許容される塩への変換；
（ｂ）所望により塩形の本発明の化合物の非塩形への変換；
（ｃ）所望により非酸化形の本発明の化合物の薬学的に許容されるＮ−オキシドへの変換；
（ｄ）所望によりＮ−オキシド形の本発明の化合物の非酸化形への変換；
（ｅ）所望により異性体の混合物からの本発明の化合物の個々の異性体への分離；
（ｆ）所望により本発明の非誘導化合物の薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体への変換；および
（ｇ）所望により本発明の化合物のプロドラッグ誘導体のその非誘導化形態への変換。
【００７２】
出発物質の製造が特に記載されていない限り、その化合物は既知であるか、または当分野で既知の方法に準じてもしくは下記の実施例に記載のとおりに製造し得る。当業者は、上記変換が本発明の化合物の製造法の単なる代表例であり、そして他の既知の方法を同様に使用し得ることを理解できよう。本発明は、さらに本発明の化合物の製造を説明する下記中間体（参考化合物）および実施例により例示される。
【００７３】
参照化合物１
【化２２】
2010518097.tif 000023
１−Ｂ：出発物質のＣｂｚ−Ｐｈｅ−ＯＨ（１５．０ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５０ｍＬ）に溶解し、溶液を−１０℃に冷却し、次にトリエチルアミン（７．１ｍｌ、５０．０ｍｍｏｌ）を加え、イソブチルクロロホルメート（７．１ｍｌ、５５ｍｍｏｌ）を滴下する。得られた懸濁液を２時間０℃で撹拌する。反応混合物を濾過し、−１０℃に冷却する。ＮａＢＨ４（３．９７ｇ、１０５ｍｍｏｌ）を水（５０ｍｌ）に０℃で溶解し、溶液をＴＨＦ溶液に少しずつ加える。反応混合物を室温に温め、１時間撹拌する。反応混合物を１ＮのＨＣｌ溶液で酸性化し、水相をＥｔＯＡｃで数回抽出する。合わせた有機層を水、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および塩水で洗浄し；ＭｇＳＯ４で乾燥させ；溶媒を真空除去する。生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、所望の生成物を白色の泡状物として得る。
【００７４】
１−Ｃ：アルコール（１２．０２ｇ、４２．１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却する。ＤＣＭ（１００ｍｌ）中のデス・マーチン試薬（１９．５ｇ、４６．２ｍｍｏｌ）の溶液を少しずつ加える。懸濁液を室温に温め、変換が完了するまで（〜２時間）撹拌する。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および１ＭのＮａ２Ｓ２Ｏ３溶液の１：１混合物を加え、得られた二相系を２０分激しく撹拌する。有機層を分離し、水層をＤＣＭで１回抽出する。合わせた有機層を真空蒸留し、得られた油状物をＥｔＯＡｃに取り；６回ＮａＨＣＯ３／Ｎａ２Ｓ２Ｏ３混合物、水および塩水で洗浄し；ＭｇＳＯ４で乾燥させ；溶媒を真空除去させ、粗アルデヒドを黄色がかった油状物として得る。物質をさらなる精製なしに次の工程に直接使用する。
【００７５】
１−Ｄ：ＴＨＦ（１００ｍｌ）中のイソ−ＰｒＭｇＣｌ（７０．３ｍｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈの２Ｍ−ＴＨＦ溶液３５ｍｌ）の溶液にＴＨＦ（２０ｍｌ）中のベンゾオキサゾール（８．３６ｇ、７０．３ｍｍｏｌ）を−２０℃で加える。反応混合物を−２０℃で３０分撹拌し（色の変化：深赤色）、ＴＨＦ（２０ｍｌ）中のアルデヒド（１１．９ｇ、４２．０ｍｍｏｌ）の溶液を−２０℃から−１５℃の温度制御下でゆっくり加える。反応混合物を室温に温め、完了まで撹拌する。反応を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、溶媒を真空除去する。水相をＥｔＯＡｃで３回抽出し、合わせた有機層を１ＮのＨＣｌ溶液、水および塩水で過剰に洗浄し；ＭｇＳＯ４で乾燥させ；溶媒を真空除去させ、粗ベンゾオキサゾールを深赤色の油状物として得る。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：５から１：１）のシリカで精製し、ベンゾオキサゾールを薄い黄色の固体として得る。
【００７６】
１−Ｅ：化合物５（１．６ｇ、５．９６ｍｍｏｌ）をエタノール（３ｍＬ）に溶解する。Ｐｄ／Ｃ（１０％、湿性、Degussaタイプ）を加え、フラスコをＰａｒｒ攪拌機に一晩置き、４０ｐｓｉの水素ガスに付す。触媒をセライトを介して濾過し、溶媒を真空除去する。粗物質を最初にヘキサン／ＥｔＯＡｃの勾配を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、より低い極性の着色不純物を除き、次にＤＣＭ／ＭｅＯＨの勾配を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、所望の化合物５を溶離する。溶媒を真空除去させ、所望の化合物を白色の固体として得る。
【００７７】
参照化合物２
【化２３】
2010518097.tif 000024
２−Ｂ：この化合物は参照化合物１−Ｂの製造で記載されている方法と類似の方法を使用してＬ−Ｂｏｃ−アリルグリシンから製造する。
２−Ｃ：この化合物は参照化合物１−Ｃの製造で記載されている方法と類似の方法を使用して参照化合物２−Ｂから製造する。
２−Ｄ：この化合物は参照化合物１−Ｄの製造で記載されている方法と類似の方法を使用して参照化合物２−Ｃから製造する。
２−Ｅ：参照化合物２−Ｄ（３５０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（３ｍＬ）に溶解する。ＴＦＡ（２ｍＬ）を加え、反応物を出発物質が消費されるまで室温で撹拌する。溶媒を真空除去させ、ＴＦＡ塩として生成物２−Ｅを得、これをさらなる精製なしに使用する。
【００７８】
参照化合物３
【化２４】
2010518097.tif 000025
微粉末化されたＫＯＨ（１９．４ｇ、０．３４６ｍｏｌ）をＤＭＳＯに溶解し、室温で２０分撹拌し、次に０℃に冷却する。ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）に溶解したＮ−Ｂｏｃ−トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン（Ｂｏｃ−Ｈｙｐ−ＯＨ）（１０ｇ、４３．３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに１０分０℃で撹拌する。次に、４−クロロベンジルクロライド（３３．０ｇ、０．２０４ｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃でさらに１５分撹拌し、氷浴を除去した後、反応混合物を室温に温め、４時間撹拌する。反応混合物を水（３００ｍＬ）に注ぎ、反応容器を等量の水（３００ｍＬ）で濯ぐ。合わせた水層をエーテル（２×３００ｍＬ）で抽出し、捨てる。水層を８７％のＨ３ＰＯ４でｐＨ２．３に酸性化し、次にエーテル（３×３００ｍＬ）で抽出する。合わせたエーテル抽出物を水（２×４００ｍＬ）および塩水（２×４００ｍＬ）で洗浄し、次にＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮する。残渣をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（勾配  ０から１００％）のシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、化合物３を透明な油状物として得る。ＭＳ  ｍ／ｚ  ２５６．１（Ｍ＋１−Ｂｏｃ）；1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 7.39-7.31 (4H, m), 4.52-4.40 (2H, m), 4.16-4.10 (2H, m), 3.48-3.41 (2H, m), 2.40-2.30 (1H, m), 2.03-1.94 (1H, m), 1.39-1.34 (9H, m)。
【００７９】
参照化合物４
【化２５】
2010518097.tif 000026
４−Ｂ：４−ピペリジンエタノール（４−Ａ）（５ｇ、３９．７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１２０ｍＬ）に溶解する。トリエチルアミン（５．６ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を０℃に冷却する。Ｂｏｃ２Ｏ（９．５９ｇ、４４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を一晩室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、酢酸エチル（１２０ｍＬ）に溶解した粗残渣を加え、溶液を０．１ＮのＨＣｌ（３×１００ｍＬ）および塩水（１×１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を真空蒸発し、化合物４−Ｂを透明な油状物として得る。
【００８０】
４−Ｃ：トリクロロイソシアヌル酸（２．６６ｇ、１１．４６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ中のアルコール（２．３９ｇ、１０．４２ｍｍｏｌ）の溶液に加え、溶液を撹拌し、０℃で維持し、次に触媒量のＴＥＭＰＯを加える。添加後、混合物を室温に温め、１時間撹拌し、次にセライトで濾過する。有機相を飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液、次に１ＮのＨＣＬおよび塩水で洗浄する。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発させ、４−Ｃを得る。1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 9.72 (1H, s), 4.07-4.01 (2H, m), 2.70-2.57 (2H, m), 2.35-2.31 (2H, m), 2.05-1.94 (1H, m), 1.64-1.46 (2H, m), 1.39 (9H, s), 1.30-1.02 (2H, m)。
【００８１】
４−Ｄ：ＴＨＦ中のＣｂｚ−α−ホスホノグリシントリメチルエステル、（２．８ｇ、８．４５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で１，１，３，３−テトラメチル−グアニジン（１．０２２ｍｌ、８．１４ｍｍｏｌ）を加える。１０分後、アルデヒド３（１．７６ｇ、７．７６ｍｍｏｌ）を加える。次に溶液を氷浴に０℃で１時間置き、室温に温め、１時間以上撹拌する。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、１ＭのＮａＨＳＯ４で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空濃縮する。残渣を酢酸エチル／ヘキサン０から１００％のクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ）により精製し、４−Ｄを白色の固体として得る。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３３３．２（Ｍ＋１）、1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.35-7.33 (5H, m), 6.63 (1H, t, J = 8 Hz), 6.30 (1H, bs), 5.12 (2H, s), 4.10-4.04 (2H, m), 3.73 (3H, s), 2.67-2.62 (2H, m), 2.14 (2H, t, J = 6.8 Hz), 1.63-1.46 (3H, m), 1.43 (9H, s), 1.14-1.06 (2H, m)。
【００８２】
４−Ｆ（工程ｄおよびｅ）：Ｐａｒｒ容器に、４−Ｄ（１ｇ、２．３１ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（１００ｍｌ）を窒素下で充填する。溶液を真空および窒素バブリングの３サイクルに付し、触媒（Ｒ，Ｒ）−エチル−ＤｕＰＨＯＳ−Ｒｈ（ＣＯＤ）トリフレートを加える（３０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）。混合物を６０ｐｓｉの水素ガス下に室温で２４時間置く。４−Ｅへの変換は２４時間後に完了し、単離せずに次の工程（ｅ）に使用する。溶液を窒素でフラッシュし、Ｐｄ／Ｃ（５％ｗｔ）を加える。混合物を５０ｐｓｉのＨ２下に室温でさらに２４時間置く。混合物を窒素でフラッシュし、セライトで濾過する。セライトケーキをＭｅＯＨで洗浄し、有機溶液を真空下で濃縮する。ヘキサンを加え、次に真空蒸発させ、残りのメタノールを共沸させ、油状物として４−Ｆを得、次にこれをさらなる精製なしに次工程に使用する。
【００８３】
４−Ｇ：粗４−Ｆ（０．６ｇ、１．９９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、２，４，６−コリジン（３１５ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロライド（０．１７０ｍｌ、２．１９ｍｍｏｌ）を溶液に加え、２時間撹拌する。反応物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し；１ＭのＮａＨＳＯ４（２×２５ｍＬ）および塩水（２５ｍＬ）で洗浄し；乾燥させる（ＭｇＳＯ４）。溶媒を真空除去し、粗残渣をヘキサンおよびＥｔＯＡｃの勾配を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、所望の生成物４−Ｇを得る。
【００８４】
４−Ｈ：化合物４−Ｇ（０．７０ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）をジオキサン（７ｍＬ）に溶解し、水（４ｍＬ）に溶解したＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２３２ｍｇ、５．５５ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を１時間撹拌する。溶媒を蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、１ＮのＮａＨＳＯ４（２５ｍＬ）および塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させる（ＭｇＳＯ４）。溶媒を真空除去させ、粗物質をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ勾配）により精製し、参照化合物４を白色の固体として得る。
【００８５】
参照化合物５
【化２６】
2010518097.tif 000027
参照化合物３の反応スキームにおいて、反応剤および条件は下記のとおりである：（ａ）ＳＯＣｌ２（３．０当量）、ＭｅＯＨ、０℃、１００％；（ｂ）塩化メシル（１．２当量）、Ｅｔ３Ｎ（３．０当量）、触媒ＤＭＡＰ、ＴＨＦ、２３℃、７９％；（ｃ）Ｈｏｖｅｙｄａ−Ｇｒｕｂｂｓメタセシス触媒（８ｍｏｌ％）、Ｎ−Ｂｏｃ−４−メチレンピペリジン（３．０当量）、ＤＣＭ、４０℃、５１％；（ｄ）ＬｉＯＨ、ジオキサン、Ｈ２Ｏ、２３℃、１００％。
【００８６】
５−Ａ：Ｄ−アリルグリシン（５．０３ｇ、４３．７３ｍｍｏｌ、１．０当量）を氷−水浴中でメタノール（７０ｍＬ）の懸濁液でスラリーにする。塩化チオニル（９．６ｍＬ、１３１．１９ｍｍｏｌ、３．０当量）を１０分にわたって滴下する。ＬＣ／ＭＳにより完了と示されるまで反応物を室温に温める。溶媒を蒸発させ、５−Ａの得られた白色の固体を次の工程に直接使用する。
【００８７】
５−Ｂ：Ｄ−アリルグリシンメチルエステル塩酸塩（５−Ａ、７．２０ｇ、４３．７３ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（１８ｍＬ、１３１．１９ｍｍｏｌ、３．０当量）およびＤＭＡＰ（１０ｍｇ、触媒）をＴＨＦ（１１０ｍＬ）に溶解し、室温で撹拌する。塩化メシル（４．０ｍＬ、５２．４８ｍｍｏｌ、１．２当量）を滴下し、反応物を６時間、室温で撹拌する。ＴＨＦを蒸発させ、粗反応生成物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に溶解し、水（１００ｍＬ）、１ＮのＨＣｌ（２×１００ｍＬ）および塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させる（ＭｇＳＯ４）。溶媒を真空除去し、粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）で精製し、５−Ｂを黄色の油状物として得る。
【００８８】
５−Ｃ：無水ジクロロメタン（１０ｍＬ、０．１Ｍ）をシリンジを介して５−Ｂ（２．１５ｇ、１０．３７ｍｍｏｌ、１．０当量）に、Ｈｏｖｅｙｄａ−Ｇｒｕｂｂｓ第２世代メタセシス触媒（１，３−ビス−（２，４，６−トリメチルフェニル）−２−イミダゾリジニリデン）ジクロロ（ｏ−イソプロポキシフェニルメチレン）ルテニウムＩＩジクロライド）（５１０ｍｇ、０．８１５ｍｍｏｌ、８ｍｏｌ％）を窒素雰囲気下で加える。
Ｎ−Ｂｏｃ−４−メチレンピペリジン（６ｍＬ、３１．１１ｍｍｏｌ、３．０当量）をシリンジを介して加え、反応物を還流冷却器に置き、４０℃に１２時間加熱する。反応がＬＣ／ＭＳにより完了を示した後、反応混合物を自動シリカ−ゲル精製（ヘキサン中で０−１００％の酢酸エチル）により直接精製し、５−Ｃを暗緑色の油状物として得る。ＭＳ  ｍ／ｚ  ２７７．２（Ｍ−Ｂｏｃ＋１）。
【００８９】
参照化合物５：５−Ｃの鹸化は前記参照化合物４の製造における製造法（工程ｇ）を使用して成し遂げる。
【００９０】
参照化合物６
【化２７】
2010518097.tif 000028
６−Ａ：塩化チオニル（９．１ｍＬ、１２５ｍｍｏｌ）を氷浴中で０℃で撹拌しながらメタノール（２５０ｍＬ）にゆっくり加える。３０分、撹拌後、Ｎ−アルファ−Ｃｂｚ−Ｌ−２，３−ジアミノプロピオン酸（Ｚ−Ｄａｐ−ＯＨ）（１５ｇ、６３ｍｍｏｌ）を加え、反応物を一晩、室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、得られた白色の固体をエーテル（３００ｍＬ）でトリチュレートし、濾過し、メチルエステル６−Ａを塩酸塩として得る。
【００９１】
６−Ｂ：参照化合物６−Ａ（５．０ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（７０ｍＬ）に取り、０℃に冷却する。この溶液にトリエチルアミン（５．４ｍｌ、３９．０ｍｍｏｌ）、次に５−クロロバレロイルクロライド（２．６３ｇ、１８．７ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を室温に温め、４時間撹拌する。反応物を塩水（１００ｍＬ）に注ぎ、有機層をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出し、１ＮのＨＣｌで洗浄し、乾燥させる（ＭｇＳＯ４）。溶媒を真空除去し、粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製し、所望の生成物を透明な油状物として得る。
【００９２】
６−Ｃ：クロライド６−Ｂ（４．１ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１１０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却する。この溶液にＮａＨ（鉱油中で６０％分散の０．５３ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で４時間撹拌する。ＤＭＦを真空除去し、残渣をＥｔＯＡｃに取り；１ＮのＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３および塩水で洗浄し；ＭｇＳＯ４で乾燥させる。粗物質をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、ラクタム６−Ｃを透明な油状物として得る。
【００９３】
６−Ｄ：６−Ｃの鹸化は前記参照化合物４の製造における製造法（工程ｇ）を使用して成し遂げる。
【００９４】
参照化合物６（工程ｅ、ｆ、ｇおよびｈ）：参照化合物６への６−Ｄの変換は前記参照化合物１の製造における製造法を使用して成し遂げる。
【００９５】
参照化合物７
【化２８】
2010518097.tif 000029
Ｄ−ホモフェニルアラニンエチルエステル塩酸塩（５．００ｇ、２０．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（８．７ｍＬ、５１．２５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、室温で撹拌する。塩化メシル（１．６７ｍＬ、２１．５２ｍｍｏｌ）を滴下し、反応物を６時間、室温で撹拌する。ＴＨＦを蒸発させ、粗物質をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に溶解し、水（１００ｍＬ）、１ＮのＨＣｌ（２×１００ｍＬ）および塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させる（ＭｇＳＯ４）。溶媒を真空除去し、粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）で精製し、エチルエステルを得る。得られたエチルエステルをジオキサン（５０ｍＬ）に溶解し、室温で撹拌する。水（２０ｍＬ）に溶解したＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（１．００ｍｇ、２４ｍｍｏｌ）を加え、反応物をエチルエステルが消失するまで（ＴＬＣおよびＬＣＭＳにより）撹拌する。溶媒を真空除去し、粗物質をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）および１ＮのＨＣｌ（５０ｍＬ）に分配する。水層をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を１ＭのＮａＨＳＯ４（２×５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させる。溶媒を蒸発させ、粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  勾配）により精製し、参照化合物７を白色の粉末として得る。
【００９６】
参照化合物８
【化２９】
2010518097.tif 000030
この化合物は前記参照化合物７の製造方法に類似の方法を使用して、Ｄ−ホモシクロヘキシルアラニンエチルエステル塩酸塩から出発して製造する。
【００９７】
参照化合物９
【化３０】
2010518097.tif 000031
この化合物は前記参照化合物７の製造方法に類似の方法を使用して、３−シアノフェニルアラニンから出発して製造する。
【００９８】
参照化合物１０
【化３１】
2010518097.tif 000032
参照化合物１０の反応スキームにおいて、反応剤および条件は下記のとおりである：（ａ）Ｃｂｚ−ＯＳｕ、Ｅｔ３Ｎ、ＴＨＦ、水、７６％；（ｂ）Ｈｏｖｅｙｄａ−Ｇｒｕｂｂｓメタセシス触媒、Ｎ−Ｂｏｃ−４−メチレンピペリジン、ＤＣＭ、４０℃、４７％。
【００９９】
１０−Ｂ：Ｄ−アリルグリシン（２．０７ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）およびＮ−（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミド（Ｃｂｚ−ＯＳｕ）（４．４９ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）を含む丸底フラスコに加える。混合物を室温で撹拌し、Ｅｔ３Ｎ（１０．１ｍＬ、７２．０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を一晩、室温で撹拌する。透明な溶液をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、１ＮのＨＣｌ（３×１００ｍＬ）および塩水（１×１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させる。溶媒を真空蒸発させ、１０−Ｂを白色の固体として得、これをさらなる精製なしに使用する。
【０１００】
参照化合物１０：無水ジクロロメタン（４ｍＬ、０．２Ｍ）をシリンジを介して１０−Ｂ（１９３ｍｇ、０．７６６ｍｍｏｌ、１．０当量）に加え、Ｈｏｖｅｙｄａ−Ｇｒｕｂｂｓ第２世代メタセシス触媒（１，３−ビス−（２，４，６−トリメチルフェニル）−２−イミダゾリジニリデン）ジクロロ（ｏ−イソプロポキシフェニルメチレン）ルテニウムＩＩジクロライド）（９８ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ、１５ｍｏｌ％）を窒素雰囲気下で加える。Ｎ−Ｂｏｃ−４−メチレンピペリジン（６０４ｍｇ、３．０６ｍｍｏｌ、４．０当量）をシリンジを介して加え、反応に還流冷却器を取り付け、４０℃に１２時間加熱する。反応がＬＣ／ＭＳにより完了が示された後、反応混合物を自動シリカ−ゲル精製（ヘキサン中で０−１００％の酢酸エチル）により直接精製し、参照化合物１０を暗緑色の油状物として得る。ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２２．３（Ｍ−Ｂｏｃ＋１）。
【０１０１】
参照化合物１１
【化３２】
2010518097.tif 000033
メチレンシクロヘキサンでの２−Ｄの交差−メタセシスは参照化合物１０の合成のために使用される方法に類似の方法を使用して成し遂げる。次にＢｏｃ脱保護は２−Ｅの合成で使用される方法に類似の方法を使用して成し遂げ、参照化合物１１を得る。
【０１０２】
参照化合物１２
【化３３】
2010518097.tif 000034
１２−Ｂ：Ｃｂｚ−Ａｓｐ−ＯＭｅ（２．５ｇ、８．８９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解し、ジメチルアミン塩酸塩（７９７ｍｇ、９．７８ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（３．７２ｇ、９．７８ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で１０分撹拌する。次にＤＩＥＡ（３．８ｍＬ、２２．２３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を一晩、室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ勾配）により直接精製する。溶媒を真空除去させ、参照化合物１２−Ｂを得る。
【０１０３】
１２−Ｃ：１００ｍＬの無水ＤＣＭ中のメチルエステル１２−Ｂ（２．７１ｇ、８．８ｍｍｏｌ）の冷（−７８℃）溶液にヘキサン（２２ｍＬ、２１．１ｍｍｏｌ）中のＤｉＢＡＬ−Ｈの１Ｍの溶液を−７０℃より低い反応温度を維持しながら滴下する。得られた溶液を−７８℃で１時間撹拌し、５％のクエン酸（６０ｍＬ）水溶液を反応混合物に加える。混合物を室温で１０分撹拌し、次に層を分離する。水層をＤＣＭで２回抽出する。合わせたＤＣＭ溶液を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過する。濾液を濃縮し、アルデヒド１２−Ｃを得、これをさらなる精製なしに次の工程に直接使用する。
【０１０４】
参照化合物１２への１２−Ｃの変換は前記参照化合物１の製造方法（工程ｃおよびｄ）を使用して成し遂げる。
【０１０５】
参照化合物１３
【化３４】
2010518097.tif 000035
１３−Ｂ（工程ａおよびｂ）：アルデヒド１３−Ｂへの市販のＢｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨの変換は前記参照化合物１−Ｃの製造方法（工程ａおよびｂ）を使用して成し遂げる。
【０１０６】
１３−Ｃ：ジオキサン（１０ｍＬ）に溶解させたアルデヒド１３−Ｂ（５．０６ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）を水（１０ｍＬ）中の重亜硫酸ナトリウム（２．０７ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）の冷（−５℃）溶液に加える。水（５ｍＬ）に溶解させたＫＣＮ（１．２９ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を一晩撹拌しながら徐々に室温に温める。反応物を真空濃縮し、次に水で希釈する。ｐＨを１ＭのＮａＨＳＯ４で５に調節し、水相をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮する。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製し、シアノヒドリン１３−Ｃを得る。
【０１０７】
１３−Ｄ：シアノヒドリン１３−Ｃ（３．６１ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解し、５０％のヒドロキシルアミン水溶液（１ｍＬ）で処理する。溶液を撹拌し、６０℃に２時間加熱し、このとき反応がＬＣＭＳにより完了する。溶媒を真空除去し、得られた粗物質をさらなる精製なしに次の工程に直接使用する。
【０１０８】
１３−Ｅ：ヒドロキシルアミジン１３−Ｄ（１．０ｇ、３．１７ｍｍｏｌ）をＳＭＩＴＨ  ＰＲＯＣＥＳＳ  ＶＩＡＬＴＭ中でジオキサン（１０ｍＬ）に溶解する。プロピオン酸無水物（０．４５ｍＬ、３．４９ｍｍｏｌ）を加え、溶液をマイクロ波反応器（例えば、Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒマイクロ波反応器）に置き、１５０℃に３５分加熱する。溶媒を真空除去し、粗残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ  溶離剤として）により精製し、オキサジアゾール１３−Ｅを得る。
【０１０９】
参照化合物１３：（５１５ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（３０ｍＬ）に溶解する。ＴＦＡ（２０ｍＬ）を加え、出発物質が消費されるまで反応物を室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、ヘキサンと共沸し、蒸発させ、乾燥させ、生成物をＴＦＡ塩として得、これをさらなる精製なしに使用する。
【０１１０】
参照化合物１４
【化３５】
2010518097.tif 000036
１４−Ｂ：市販シクロプロパンカルボン酸ヒドラジド１４−Ａ（１．０、１０．０ｍｍｏｌ）をオルトギ酸トリメチル（１０ｍＬ）に加える。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（５ｍｇ）を加え、反応混合物を撹拌し、還流温度に一晩加熱する。溶媒を真空除去し、得られた粗残渣を真空蒸留し、２−シクロプロピル−［１，３，４］オキサジアゾール１４−Ｂを得る。
【０１１１】
１４−Ｃ：無水ＴＨＦ（１２ｍＬ）中の２−シクロプロピル−［１，３，４］オキサジアゾール１４−Ｂ（２５７ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）の溶液を−７８℃に冷却する。ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中で１．６Ｍ、１．４６ｍＬ、２．３３ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を−７８℃で４０分撹拌する。ＭｇＢｒ２・ＯＥｔ（６０３ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）を加え、反応物を−４５℃に温め、次にこの温度で９０分撹拌する。ＴＨＦ（５ｍＬ）中のアルデヒド１３−Ｂ（５９５ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）の溶液を加え、反応物を−２０℃に温め、さらに４時間撹拌する。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、次にＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させる。溶媒を真空除去し、粗残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製し、所望の生成物１４−Ｃを得る。
【０１１２】
参照化合物１４：１４−Ｃの脱保護は前記参照化合物１３の製造方法（工程ｆ）を使用して成し遂げる。
【０１１３】
参照化合物１５
【化３６】
2010518097.tif 000037
１５−Ａ：ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中で２．５Ｍ、１９．８ｍＬ、４９．７ｍｍｏｌ）を１０分にわたってＴＨＦ（１３５ｍＬ）中のトリス（メチルチオ）メタン（７．０ｍＬ、４９．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に−６５℃で加える。沈殿が形成して２０分後、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のアルデヒド１３−Ｂ（２．９６ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）のあらかじめ冷やした（−６５℃）溶液を３０分にわたって加え、沈殿を溶解する。撹拌を５時間−６５℃で続ける。次に反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ／ＤＣＭ水溶液の撹拌混合物（４００ｍＬ、１：１２）に注ぐ。層を分離し、水層をＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を水および塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ、真空乾燥させる。シリカゲルクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、１５−Ａを油状物として得る。
【０１１４】
１５−Ｂ：ＭｅＯＨ（４６ｍＬ）および水（４ｍＬ）中のオルトチオエステル１５−Ａ（０．９８８ｇ、２．４１ｍｍｏｌ）の溶液をＨｇＣｌ２（２．２０ｇ、８．１０ｍｍｏｌ）およびＨｇＯ（０．６５８ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）と３日間撹拌する。反応混合物をセライトを介して濾過し、残渣をＤＣＭ（３００ｍＬ）、ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で洗浄する。二相濾液を分離し、水層をＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を飽和ＮＨ４ＯＡｃ水溶液（３×１００ｍＬ）および飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空濃縮する。得られた粗油状物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、メチルエステル１５−Ｂを得る。
【０１１５】
１５−Ｃ：ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ／５ｍＬ／５ｍＬ）中のメチルエステル１５−Ｂ（３０２ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に粉末化ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（１１２ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ）を加える。１５分後、１ＭのＮａＨＳＯ４水溶液（８ｍＬ）を加え、溶媒を減圧下蒸発する。残渣をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、１ＭのＮａＨＳＯ４水溶液でｐＨ＝２に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相をＨ２Ｏおよび塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空濃縮し、酸１５−Ｃを得る。
【０１１６】
１５−Ｄ：酸１５−Ｃ（５０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解する。Ｎ−ヒドロキシプロピオンアミジン（１５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（３４ｍｇ、０．１６）を加え、反応物を２時間撹拌する。ジシクロヘキシルウレア副産物を濾過し、溶媒を減圧下除去する。残渣をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＳＭＩＴＨＰＲＯＣＥＳＳＶＩＡＬＴＭに移し、ＰｅｒｓｏｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙＥｍｒｙｓＯｐｔｉｍｉｚｅｒマイクロ波反応器に置き、１８０℃に１０分加熱する。溶媒を真空除去し、粗残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ  溶離剤として）により精製し、オキサジアゾール１５−Ｄを得る。
【０１１７】
参照化合物１５：１５−Ｄの脱保護は前記参照化合物１３の製造方法（工程ｆ）を使用して成し遂げる。
【実施例】
【０１１８】
実施例１
【化３７】
2010518097.tif 000038
１−Ａ：ＴＦＡ塩の参照化合物１（８９５ｍｇ、３．３４ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解する。参照化合物３（１．３０ｇ、３．６７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１．４０ｇ、３．６７ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で１０分撹拌する。ＤＩＥＡ（１．５ｍＬ、８．４ｍｍｏｌ）をシリンジを介して加え、反応混合物を一晩室温で撹拌する。溶媒を真空除去、粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（１００ｇのシリカ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ  勾配）により直接精製する。溶媒を真空除去させ、１−Ａを泡状物として得る。
【０１１９】
１−Ｂ：２０ｍＬスクリューキャップバイアルを撹拌棒および１−Ａ（１００ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）で充填する。ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＴＦＡ（２０％）を加え、バイアルを閉じ、溶液を１時間、室温で撹拌する。溶媒を真空除去、ヘキサンを加え、次に再び真空蒸発させ、乾燥させ、残りのＴＦＡを共沸蒸留するために必要であれば繰り返す。粗物質をさらなる精製なしに次の工程に直接使用する。
【０１２０】
１−Ｃ：ＴＦＡ塩の化合物１−Ｂ（９９ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解する。参照化合物４（５５ｍｇ、０．１５２ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（６７ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で１０分撹拌する。ＤＩＥＡ（０．１ｍＬ、０．１９ｍｍｏｌ）をシリンジを介して加え、反応混合物を一晩室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ勾配）により直接精製する。溶媒を真空除去させ、１−Ｃを泡状物として得る。
【０１２１】
１−Ｄ：アルコール１−Ｃ（１１３ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、デス−マーチン・ペルヨージナン（６６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を一晩室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、粗物質をＥｔＯＡｃ：ヘキサンの勾配を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ケトンを白色の泡状物として得る。
【０１２２】
実施例１：ケトン１−Ｄ（５９ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１ｍＬ）に溶解し、ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＴＦＡ５０％を加える。反応物を室温で２時間撹拌し、溶媒を真空除去する。粗物質を逆相ＨＰＬＣにより精製し、溶媒を凍結乾燥させ、実施例１を白色の粉末として得る。
【０１２３】
実施例２−７４
実施例２−７４は、当業者には容易に明白である適当な酸およびアミン成分を使用して、実施例１に類似の方法にしたがって製造する。
【０１２４】
実施例７５
【化３８】
2010518097.tif 000039
７５−Ａ：（トリメチルシリル）ジアゾメタン（ジエチルエーテル中で２Ｍ）（４．７ｍｌ、９．４５ｍｍｏｌ）の溶液をＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ  ５：１（２５ｍＬ）に溶解した参照化合物３（２．４ｇ、８．６ｍｍｏｌ）に室温で加える。ＬＣ／ＭＳにより測定したとき出発物質が消費されたとき、反応混合物を酢酸でクエンチし、真空濃縮し、粗残渣をフラッシュクロマトグラフィー（勾配  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）により精製し、メチルエステル７５−Ａを透明な油状物として得る。
【０１２５】
７５−Ｂ：丸底フラスコを撹拌棒および７５−Ａ（５１０ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）で充填する。ＤＣＭ（６ｍＬ）中のＴＦＡ（５０％）を加え、溶液を１時間、室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、ヘキサンを加え、次に再び真空蒸発させ、乾燥させ、必要なとき繰り返し、残りのＴＦＡを共沸する。粗物質をさらなる精製なしに次の工程に直接使用する。
【０１２６】
７５−Ｃ：ＴＦＡ塩のプロリン７５−Ｂ（１．０７ｇ、２．８ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解し；参照化合物４（１．０２ｇ、２．７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１．１２ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で１０分撹拌する。ＤＩＥＡ（１．５ｍＬ、８．４ｍｍｏｌ）をシリンジを介して加え、反応混合物を一晩室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（１２０ｇのシリカ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ勾配）により直接精製する。溶媒を真空除去させ、７５−Ｃを油半固体として得る。
【０１２７】
７５−Ｄ：メチルエステル７５−Ｃ（１．１５ｇ、１．８７ｍｍｏｌ）をジオキサン（１５ｍＬ）に溶解する。水酸化リチウム（１２０ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）を水（１５ｍＬ）に溶解し、メチルエステル７５−Ｃの溶液に滴下し、３時間、室温で撹拌する。反応混合物を真空濃縮し、ジオキサンを除去し、１ＭのＮａＨＳＯ４で酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させる。溶媒を真空除去させ、カルボン酸７５−Ｄをロウ状の固体として得る。
【０１２８】
７５−Ｅ：カルボン酸７５−Ｄ（１０２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解する。参照化合物１３（６２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（７１ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１０分、室温で撹拌する。次にＤＩＥＡ（０．１０ｍＬ、０．５１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を一晩室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、粗物質をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）に再溶解し、１ＭのＨＣｌ（２×１５ｍＬ）、次に飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×１５ｍＬ）および塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ）により精製し、所望の生成物を白色の泡状物として得る。
【０１２９】
７５−Ｆ：アルコール７５−Ｅ（９４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、デス・マーチン・ペルヨージナン（５６ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を一晩室温で撹拌する。溶媒を真空除去し、粗物質をＥｔＯＡｃ：ヘキサンの勾配を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ケトンを白色の泡状物として得る。
【０１３０】
実施例７５：ケトン７５−Ｆ（６０ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１ｍＬ）に溶解し、ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＴＦＡ５０％を加える。反応物を室温で２時間撹拌し、溶媒を真空除去する。粗物質を逆相ＨＰＬＣにより精製し、溶媒を白色の粉末に凍結乾燥させる。
【０１３１】
実施例７６−９１
実施例７６−９１は、当業者には容易に明白である適当な酸およびアミン成分を使用して、実施例１および７５に類似の方法にしたがって製造する。
【０１３２】
表１は実施例１−９１に記載されている式（１）の化合物を示す。
表１
【表１】
2010518097.tif 000040
【表２】
2010518097.tif 000041
【０１３３】
【表３】
2010518097.tif 000042
【表４】
2010518097.tif 000043
【０１３４】
【表５】
2010518097.tif 000044
【表６】
2010518097.tif 000045
【０１３５】
【表７】
2010518097.tif 000046
【表８】
2010518097.tif 000047
【０１３６】
【表９】
2010518097.tif 000048
【表１０】
2010518097.tif 000049
【０１３７】
【表１１】
2010518097.tif 000050
【表１２】
2010518097.tif 000051
【０１３８】
【表１３】
2010518097.tif 000052
【表１４】
2010518097.tif 000053
【０１３９】
【表１５】
2010518097.tif 000054
【表１６】
2010518097.tif 000055
【０１４０】
【表１７】
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【表１８】
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【０１４１】
【表１９】
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【表２０】
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【０１４２】
【表２１】
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【表２２】
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【０１４３】
【表２３】
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【０１４４】
アッセイ
チャネル活性化プロテアーゼが介在する疾患を処置するためのチャネル活性化プロテアーゼ阻害剤、例えば、プロスタシン阻害剤の適合性は、（１）Shipway et al.; Biochemical and Biophysical Research Communications 2004; 324(2):953-63に記載されている方法を使用する適当な生化学アッセイフォーマットを使用して、天然の、単離された、精製されたまたは組み換えのチャネル活性化プロテアーゼに対する；および／または（２）Bridges et al.; American Journal of Physiology Lung Cell Molecular Physiology 2001; 281(1):L16-23；およびDonaldson et al.; Journal of Biological Chemistry 2002; 277(10):8338-45に記載されている方法を使用して、適当な単離された細胞またはコンフルエントな上皮のイオンチャネル／イオン輸送機能に対する、チャネル活性化プロテアーゼ阻害剤の阻害効果を測定することにより試験され得る。
【０１４５】
生化学アッセイ
組み換えヒトプロスタシンおよびマトリプターゼならびにモルモットプロスタシンはShipway et al., Biochem. and  Biophys. Res. Commun. 2004; 324(2):953-63に記載されている方法にしたがって製造する。組み換え酵素を適当なマルチウェルアッセイプレート、例えば、９６または３８４ウェルプレート中、試験化合物またはビヒクルを含む電解質バッファー中でインキュベートする。酵素と化合物またはビヒクルの混合一定時間後に、適当な蛍光ペプチド基質をアッセイ混合物に加える。基質が活性酵素により開裂されたとき、蛍光（適当な蛍光プレートリーダーを使用して測定される）が増加し、基質（すなわち酵素活性）のターンオーバー率、したがって全ての試験化合物の阻害効果を定量し得る。試験化合物の効力は酵素活性の５０％減衰を誘導する濃度として示される（Ｋｉ）。
【０１４６】
一般的に、本発明の化合物は０．１ｎＭから５μＭのＫｉ値を有し得る。いくつかの例において、本発明の化合物は０．１ｎＭから５００ｎＭ；０．１ｎＭから５０ｎＭ；０．１ｎＭから５ｎＭ；または０．１ｎＭから０．５ｎＭのＫｉ値を有し得る。特定の例において、本発明の化合物は０．１ｎＭから０．５ｎＭ；０．５ｎＭから５ｎＭ；５ｎＭから５０ｎＭ；５０ｎＭから５００ｎＭ；または５００ｎＭから５μＭのＫｉ値を有し得る。さらに他の実施例において、化合物は０．１ｎＭ未満または５μＭ以上のＫｉ値を有し得る。
【０１４７】
上皮性イオン輸送
ヒト気管支上皮性細胞をDanahay et al., Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2002; 282(2):L226-36に記載されている方法にしたがって培養する。適当に分化したとき（先端−空気界面の構築から１４−２１日後）、上皮性細胞をビヒクル、アプロチニン（２００μｇ／ｍｌ）または試験化合物のいずれかで９０分間試験する。次に、上皮の先端側のビヒクル、アプロチニンまたは試験化合物の濃度を維持しながら、上皮を上記Danahay et al., に記載されているとおりにチャンバーに置く。次に短絡回路電流（ＩＳＣ）を上皮を０ミリボルトに留めるボルトにより測定する。次にアミロリド感受性のＩＳＣを上皮の先端表面にアミロリド（１０μＭ）を加えることにより測定する。試験化合物の効力はアミロリド感受性ＩＳＣの全アプロチニン感受性因子の５０％阻害を誘導する濃度として示される。
【０１４８】
一般的に、本発明の化合物は１ｎＭから１０μＭのＩＣ５０値を有し得る。いくつかの例において、本発明の化合物は１ｎＭから１μＭ；または、さらに特に１ｎＭから１００ｎＭのＩＣ５０値を有し得る。さらに他の実施例において、本発明の化合物は１００ｎＭから１μＭまたは１μＭから１０μＭのＩＣ５０値を有し得る。さらに他の実施例において、化合物は１ｎＭ未満または１０μＭ以上のＩＣ５０値を有し得る。
【０１４９】
気管電位差（インビボ）
モルモットを短期作用型の吸入麻酔、例えば、ハロセインおよびＮ２Ｏを使用して麻酔する。短時間作用型の麻酔下、胃ゾンデを口腔咽頭経路を介して気管に挿入する。気管に入ったら、適当な水性ベース希釈剤中の少量（５０−２００μｌ）のビヒクルまたは試験化合物を気道に注入する。その後動物は回復し、完全に歩行するようになる。あるいは、試験化合物を、エアロゾルまたは乾燥粉末投与を使用して、動物に投与してよい。投与一定時間後に、動物を、適当な麻酔剤、例えば、ケタミンおよびキシラジンを使用して、外科的に麻酔する。次に気管を暴露し、プラスチック寒天架橋電極を気管内腔に挿入する。基準電極を、また、動物の首の筋肉の層に挿入する。次に気管電位差を、Takahashi et al., Toxicol Appl Pharmacol. 1995; 131(1):31-6に記載されている適当な高インピーダンス電圧計を使用して、測定する。試験化合物の効力は気管電位差の感受性因子の５０％減少を誘導する用量として示される。
【０１５０】
ここに記載の例および態様は、説明の目的のためのみであり、それに照らした様々な修飾または変化が当業者には示唆され、それらは本発明の精神および範囲内および添付の特許請求の範囲内に包含されることは理解されるべきである。本明細書で引用する全ての刊行物、特許および特許出願は全ての目的のために引用して本明細書に包含する。
【国際調査報告】
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