(57)【要約】本発明は、ＯＮＪおよびＯＲＮＪの進行を治療、予防または減速するのに有用な組成物および方法を提供する。本発明は、ＯＮＪおよびＯＲＮＪの進行を治療、予防または減速するのに有用な医薬の調製における、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの使用を提供する。本発明は、ＯＮＪおよびＯＲＮＪの進行を治療、予防または減速するのに有用な医薬の調製における、生体適合性マトリックス中に配置される、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの使用を提供する。一実施形態では、ＯＮＪまたはＯＲＮＪの進行を治療、予防または減速する方法は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦ溶液を含む組成物を提供するステップと、組成物を顎中の所望の部位に適用するステップとを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の顎の骨壊死または顎の放射線骨壊死の進行を治療、予防または減速するための医薬の調製における、生体適合性マトリックスに配置された血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）の溶液を含む組成物の使用。
【請求項２】
患者の顎の骨壊死または顎の放射線骨壊死の進行を治療、予防または減速するための医薬の調製における、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦを含む組成物の使用。
【請求項３】
前記生体適合性マトリックスが、足場材料および生体適合性結合剤を含む、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記生体適合性マトリックスが、リン酸カルシウム含有化合物または同種移植片を含む、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
患者の顎の骨壊死または顎の放射線骨壊死の発症または進行を治療、予防または遅延する方法であって、
生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦ溶液を含む組成物を提供するステップと；
前記組成物を、前記患者の顎の骨壊死または顎の放射線骨壊死の発症または進行を、治療、予防、遅延するのに有効な量で、顎中の所望の部位に適用するステップと
を含む方法。
【請求項６】
患者の顎の骨壊死または顎の放射線骨壊死の発症または進行を、治療、予防または遅延するための方法であって、
薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦを含む組成物を提供するステップと；
前記組成物を、患者の顎の骨壊死または顎の放射線骨壊死の発症または進行を、治療、予防、遅延するのに有効な量で、顎中の所望の部位に適用するステップと
を含む方法。
【請求項７】
患者の顎の骨壊死または顎の放射線骨壊死の発症または進行を、予防または遅延するのに有用なキットであって、
生体適合性マトリックスを含む第１の容器と、
ＰＤＧＦを含む溶液を含む第２の容器と
を含むキット。
【請求項８】
前記第２の容器が、緩衝液溶液中のＰＤＧＦを含む、請求項７に記載のキット。
【請求項９】
前記ＰＤＧＦがｒｈＰＤＧＦ−ＢＢであり、前記緩衝液が酢酸緩衝液である、請求項８に記載のキット。
【請求項１０】
前記生体適合性マトリックスが、生体適合性結合剤をさらに含む、請求項９に記載のキット。
【請求項１１】
前記生体適合性マトリックスが、リン酸カルシウムを含む、前記請求項のいずれかに記載の生体適合性マトリックス。
【請求項１２】
βリン酸三カルシウムである、前記請求項のいずれかに記載のリン酸カルシウム。
【請求項１３】
コラーゲンを含む、前記請求項のいずれかに記載の生体適合性結合剤。
【請求項１４】
同種移植片、脱灰凍結乾燥移植骨、石灰化凍結乾燥移植骨または粒子状脱灰骨マトリックスを含む、前記請求項のいずれかに記載の生体適合性マトリックス。
【請求項１５】
組換えヒトＰＤＧＦ−ＢＢである、前記請求項のいずれかに記載のＰＤＧＦ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、顎の骨壊死および顎の放射線骨壊死の進行を治療、予防または遅延するのに有用な、組成物、方法およびキットに関する。
【背景技術】
【０００２】
顎の骨壊死（ＯＮＪ）は、特定の患者における歯科外科処置の病的続発症であり得る。確定的なＯＮＪ病因論は決定されていないが、ＯＮＪを発症し得る最も感受性の高い患者は、ビスホスホネートを投与されている、また、転移性骨癌（例えば、前立腺、乳房、肺、腎臓由来）、多発性骨髄腫、骨形成不全症およびパジェット病の併存疾患を有しているという懸念が高まっている。
【０００３】
ＯＮＪの病因論は、血管新生の減少と関連している可能性がある。血管新生は、粘膜治癒、歯周再生および骨形成に先行する重要な過程である。ビスホスホネート投与中の患者では、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）および血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）が減少していると報告されている。ＰＤＧＦは、新規血管形成を誘導し、ＶＥＧＦは、血管新生の際の内皮細胞の内皮細胞成熟を促進する。結果として、傷薬因子ＰＤＧＦおよびＶＥＧＦのタンデム効果は、創傷治癒部位での新規血管形成ならびに血管の成熟および機能的安定性にとって不可欠なものである。
【０００４】
放射線療法を受けた癌患者における顎の放射線骨壊死（ＯＲＮＪ）において見られるように、血管が発達しないと、組織創傷治癒は起こらず、粘膜組織は急激に変性する。血管がないことまたは減少すること、軟部組織創傷治癒が悪いこと、ならびに粘膜の破壊および裂開は、ＯＮＪおよびＯＲＮＪに共通の臨床徴候である。
【０００５】
さらに、回復中の骨損傷での血管欠損は、前破骨細胞系細胞、具体的には、前破骨細胞になり得る血液由来単球の減少というさらなる悪影響を及ぼす。前破骨細胞前駆体集団の減少の重要性は、回復中の骨および骨ホメオスタシス両方のリモデリングと高度に関連している。下顎骨および上顎骨における高代謝回転（すなわち、リモデリング）には、骨形成細胞、骨芽細胞および骨吸収細胞、破骨細胞間のバランスが必要であると示唆されている。ビスホスホネートは、破骨細胞性骨吸収を混乱させ、破骨細胞機能を低下させ、破骨細胞アポトーシス（すなわち、細胞死）を増大させる。さらに、ビスホスホネートの結果としての下顎骨および上顎骨における脈管構造の減少は、血管を通る単球移行とそれらのその後の破骨細胞との結合進行を大幅に制限することによって破骨細胞再生を制限する。骨細胞不均衡（すなわち、破骨細胞：骨芽細胞比）の結果として、リモデリングがアンカップリングになり、骨ホメオスタシス（すなわち、骨代謝：損傷を受けた骨の置換および再生）が喪失する。したがって、下顎骨および上顎骨における微小破壊が、適切に修復されず、この領域をＯＮＪにさせる。さらに、下顎骨および上顎骨は、咀嚼および嚥下からの連続生体力学的刺激のために高骨代謝回転領域であり、ビスホスホネート誘導性ホメオスタシスの不均衡は口腔領域をＯＮＪにさせる。
【０００６】
ビスホスホネートは、破骨細胞形成および活性、ならびに、生存力を阻害することがわかっている。ビスホスホネートは、石灰化した組織、例えば、骨に組み込まれ、骨中で最大１２年の半減期を有し得る。したがって、再吸収の際に骨断片をインターナライズする骨吸収性破骨細胞は、大きく影響を受ける。骨代謝回転、骨芽細胞−破骨細胞カップリングを含むリモデリングのホメオスタシス過程は、１０年毎の骨の完全骨格リモデリングをもたらすと記載することは注目に値する。結果として、破骨細胞に対するビスホスホネート効果は、ホメオスタシス骨代謝回転に対して大きな効果を有し、その効果の大きさは、ビスホスホネートの化学によって決まる。
【０００７】
ビスホスホネートは、アミン基または非アミン基のいずれかを含有するものとして分類され得る。アミノビスホスホネートは、現代の薬物のクラスであり、細胞傷害性であるアデノシン三リン酸類似体を導入し、それによって、アポトーシスを促進し、ならびに、ファルネシル二リン酸合成を阻害することによって破骨細胞に影響を及ぼす。この結果、破骨細胞の細胞内輸送を混乱させ、細胞骨格組織崩壊を引き起こす。さらに、アミノビスホスホネートが、骨芽細胞由来の破骨細胞阻害因子のアップレギュレーションを促進するという仮説が立てられている。
【０００８】
ビスホスホネートの全体的な治療的有用性は、大きなものであり、骨粗鬆症患者にとって、特に、多発性骨髄腫、骨形成不全症、パジェット病および癌転移を有する患者にとって不可欠なものである。しかし、骨粗鬆症のための長期のビスホスホネート治療の不利点のために、ビスホスホネート投与計画の戦略上重要な再評価が促されている。例えば、ビスホスホネートによって引き起こされる破骨細胞および骨芽細胞間のアンカップリング作用の結果として、リモデリングは負に影響を受ける。結果として、ミネラルが高密度であるように見え得る新規骨の沈着にもかかわらず、新規骨は実際には、生体力学的に能力がなく、したがって、骨折しやすい。沈着した骨は、実際には、大理石骨病の様である。したがって、医学界の多くによって「ビスホスホネート」からの「回避」を可能にする戦略が、広められている。
【０００９】
ＯＲＮＪは、放射線によって引き起こされる。顎腫瘍は、腫瘍を根絶するために放射線で治療されることがある。しかし、放射線治療の悪影響が、限局化された組織低酸素、低細胞性および低血管分布をもたらす場合がある。これらの続発症は、固体状態の腫瘍とって、細胞過多および血管過多と関与する腫瘍学的活性を根絶するのに有効である。
【００１０】
ＯＲＮＪは、局所血管分布を増大させることによって逆転させることができる。高圧酸素（ＨＢＯ）治療は、ＯＲＮＪにとって有効な治療である。ＨＢＯは、新規血管の形成を増大させると思われる。しかし、ＨＢＯは、ＯＮＪにとっては有効ではなかった。ＯＮＪに対して、ＨＢＯを用いても利益がない理由は、ＯＮＪが、ＯＲＮＪとは異なる病因論を有するということである。ＯＲＮＪとＯＮＪの病因論間の明確に表す、際立った相違は、後者の病理学は、低血管性であることに加え、リモデリング不均衡をもたらす、破骨細胞−骨芽細胞アンカップリングでもあるということである。この不均衡が、分解に対する回復中の骨の局所感受性を高め、それによって、壊死性となると思われる。したがって、血管分布の問題（すなわち、低血管分布）のために病因論に重複する類似点があるものの、ＯＮＪは、骨芽細胞と破骨細胞間のリモデリング不均衡というさらなる病因論的関与を有し、これはＯＲＮＪとは一致しないと思われる。
【００１１】
現在、ＯＮＪを防ぐために利用可能な製剤はない。ＯＮＪのための既存の治療は、一時的に抑えるものであり、生存出血骨への極めて限定された拡張を伴う壊死骨のデブリードマン、鎮痛、クロルヘキシジンすすぎおよび抗生物質を含み得る種々のプロトコールからなる。
【００１２】
前記の問題を考慮して、ＯＮＪを治療するための組成物および方法を提供することが望まれるであろう。また、ＯＮＪを発症する危険のある患者のＯＮＪを予防またはその進行を遅延するための組成物および方法を提供することも望まれるであろう。また、ＯＲＮＪを予防および治療またはその進行を遅延するための組成物および方法も必要とされる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、ＯＮＪを発症する危険のある患者のＯＮＪを治療するために、ＯＮＪを予防するためにまたはその進行を遅延するために有用な、またＯＲＮＪを治療および／または予防またはその進行を遅延するための組成物および方法を提供することによってこれらの必要性に対処する。
【００１４】
本発明は、患者のＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療、予防またはその進行を減速するための医薬の調製における薬学的に許容されるビヒクルにおけるＰＤＧＦの使用を提供する。本発明は、患者のＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療、予防またはその進行を減速するための医薬の調製における生体適合性マトリックス中に配置された薬学的に許容されるビヒクル中のＰＤＧＦの溶液を含む組成物の使用を提供する。
【００１５】
一実施形態では、これらの組成物は、生体適合性マトリックス中にＰＤＧＦを含む。別の実施形態では、本組成物は、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの溶液を含む。転移性骨癌、多発性骨髄腫およびパジェット病の併存疾患を有しているか、または有していないビスホスホネートを投与（経口的にまたは静脈内に）されている個体は、ＯＮＪにかかりやすく、ＯＮＪを防ぐための予防的処置から大きく恩恵を受ける。予防的処置は、ＯＮＪの危険のある患者集団に適当である。
【００１６】
例えば、癌治療の際に放射線治療を受けている個体は、ＯＲＮＪにかかりやすく、ＯＲＮＪのための治療から大きく恩恵を受ける。予防的処置は、ＯＲＮＪの危険のある患者集団に適当である。
【００１７】
防止（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）は予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ）を重視し、これは、歯科処置と同時のＰＤＧＦ含有組成物の同時投与を意味する。例えば、抜歯などの歯科外科的処置の危険にある、また、これを受けた患者は、一実施形態では、例えば、歯科抜歯医薬または包帯と同時投与されたＰＤＧＦ含有組成物を受ける。ＰＤＧＦ含有組成物の使用についてのさらに別の例として、ＰＤＧＦ含有組成物が嚢胞腔中に入れられる口腔歯科嚢胞切除術がある。さらに別の例として、歯肉組織が切開され、歯槽および／または歯根間オッセオ−デンタル（ｏｓｓｅｏ−ｄｅｎｔａｌ）術が実施され、ＰＤＧＦ含有組成物が歯周治療包帯と同時投与される歯周処置が挙げられる。
【００１８】
いくつかの実施形態では、投与されるＰＤＧＦ含有組成物の量は、例えば、抜歯窩、嚢胞切除術から、または歯周骨手術の間に、外科的に除去された骨容積によって決まる。
【００１９】
骨治癒処置のために投与されるＰＤＧＦ含有治療用組成物の投与は、不可欠なものである。以下の記載に拘束されようとは思わないが、ＰＤＧＦは、化学誘引物質として、間葉系細胞、例えば、それだけには限らないが、骨芽細胞、破骨細胞、間葉系幹細胞、線維芽細胞および血管平滑筋細胞を、細胞が不足している可能性がある回復中の骨損傷に補充すると考えられている。さらに、ＰＤＧＦの有糸分裂促進性が、有糸分裂誘発（すなわち、細胞複製）を誘導することによって、骨治癒部位に補充される細胞の量を増幅または増大させる。この結果が、この豊富な細胞プールが、そうでなければ長期のビスホスホネート治療を受けた可能性がある患者にとって治癒性芽体になり得るということであり、長期のビスホスホネート治療は細胞集団および骨治癒に必要なその集団の活性を大幅に減少させる。以下の記載に拘束されようとは思わないが、ＰＤＧＦの血管新生特性は、ＯＲＮＪの低血管分布部位へ血管分布を回復させるのに役立ち得るということも考えられている。
【００２０】
本発明のいくつかの実施形態では、ＯＮＪの進行を治療または遅延するための組成物および方法が提供される。本発明のいくつかの実施形態では、ＯＮＪを予防するための組成物および方法が提供される。
【００２１】
本発明のいくつかの実施形態では、ＯＲＮＪの進行を治療または遅延するための組成物および方法が提供される。本発明のいくつかの実施形態では、ＯＲＮＪを予防するための組成物および方法が提供される。
【００２２】
一態様では、本発明は、ＰＤＧＦを含む溶液と、生体適合性マトリックスとを含んでなり、溶液が、生体適合性マトリックス中に配置される、ＯＮＪの進行を治療、予防または遅延するための組成物を提供する。この組成物は、骨壊死の部位または骨壊死に弱い部位などの所望の部位に適用される。
【００２３】
別の態様では、本発明は、ＰＤＧＦを含む溶液と、生体適合性マトリックスとを含んでなり、溶液が、生体適合性マトリックス中に配置される、ＯＲＮＪの進行を治療、予防または遅延するための組成物を提供する。この組成物は、骨壊死の部位または骨壊死に弱い部位などの所望の部位に適用される。
【００２４】
いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌまたは約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で溶液中に存在する。溶液内でのＰＤＧＦの濃度は、上記の濃度範囲のいずれか内であり得る。
【００２５】
本発明のいくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは、ＰＤＧＦ−ＡＡ、ＰＤＧＦ−ＢＢ、ＰＤＧＦ−ＡＢ、ＰＤＧＦ−ＣＣ、ＰＤＧＦ−ＤＤおよびそれらの混合物および誘導体をはじめとするＰＤＧＦホモ二量体およびヘテロ二量体を含む。一実施形態では、ＰＤＧＦは、ＰＤＧＦ−ＢＢを含む。別の実施形態では、ＰＤＧＦは、組換えヒトＰＤＧＦ−ＢＢ（ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢ）などの組換えヒト（ｒｈ）ＰＤＧＦを含む。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは、種々のホモ二量体および／またはヘテロ二量体の混合物を含む。本発明の実施形態は、ＰＤＧＦ−ＡＡ、ＰＤＧＦ−ＢＢ、ＰＤＧＦ−ＡＢ、ＰＤＧＦ−ＣＣおよび／またはＰＤＧＦ−ＤＤの任意の組合せを考慮する。
【００２６】
本発明のいくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは、１種以上のＰＤＧＦ断片を含む。一実施形態では、ｒｈＰＤＧＦ−Ｂは、以下の断片を含む：全Ｂ鎖のうちアミノ酸配列１〜３１、１〜３２、３３〜１０８、３３〜１０９および／または１〜１０８。ＰＤＧＦのＢ鎖の完全アミノ酸配列（１〜１０９）は、米国特許第５，５１６，８９６号の図１５に提供されている。本発明のｒｈＰＤＧＦ組成物は、無傷のｒｈＰＤＧＦ−Ｂ（１〜１０９）およびその断片の組合せを含んでなり得るということは理解されるべきである。米国特許第５，５１６，８９６号に開示されるものなどのＰＤＧＦのその他の断片を使用してもよい。一実施形態に従って、ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢは、無傷のｒｈＰＤＧＦ−Ｂ（１〜１０９）の全アミノ酸配列の少なくとも６０％を含む。
【００２７】
生体適合性マトリックスは、本発明のいくつかの実施形態によれば、足場材料を含む。いくつかの実施形態では、足場材料は、リン酸カルシウムを含む。リン酸カルシウムは、一実施形態では、β−リン酸三カルシウム（β−ＴＣＰ）を含む。
【００２８】
別の態様では、本発明は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦ溶液を含んでなり、生体適合性マトリックスが、足場材料と生体適合性結合剤とを含む、ＯＮＪまたはＯＲＮＪの進行を治療、予防または遅延するのに有用な組成物を提供する。いくつかの実施形態では、生体適合性結合剤は、組み合わされた物質間の接着を促進するよう働く材料を含む。生体適合性結合剤は、例えば、生体適合性マトリックスの形成において足場材料の粒子間の接着を促進し得る。一実施形態では、コラーゲンを含む生体適合性結合剤は、足場材料のβ−ＴＣＰ粒子間の接着を促進し得る。さらに、足場材料と、生体適合性結合剤とを含む生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦ溶液は、本明細書に記載されるＰＤＧＦの濃度を有し得る。
【００２９】
生体適合性結合剤は、本発明のいくつかの実施形態によれば、タンパク質、多糖、グリコサミノグリカン、核酸、炭水化物、合成ポリマーまたはそれらの混合物を含む。一実施形態では、生体適合性結合剤は、コラーゲンを含む。別の実施形態では、生体適合性結合剤は、ヒアルロン酸を含む。さらなる実施形態では、生体適合性結合剤は、キトサンまたはエラスチンを含む。さらに、生体適合性結合剤を含めた生体適合性マトリックスは、本明細書に提供されるものと一致し得る。一態様では、生体適合性マトリックスは、生体適合性結合剤または移植骨、例えば、脱灰凍結乾燥移植骨（ＤＦＤＢＡ）、石灰化凍結乾燥移植骨（ＦＤＢＡ）または粒子状脱灰骨マトリックス（ＤＢＭ）または異種移植骨またはそれらの組合せを伴って、または伴わずに、リン酸カルシウム粒子を含み得る。
【００３０】
別の態様では、本発明は、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦ溶液を含む、ＯＮＪまたはＯＲＮＪの進行を治療、予防または遅延するのに有用な組成物を提供する。
【００３１】
別の態様では、本発明は、第１の容器中の生体適合性マトリックスと、第２の容器中のＰＤＧＦを含む溶液とを含んでなり、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するのに有用であるキットを提供する。別の実施形態では、キットは、容器中に薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦを含む溶液を含んでなり、キットは、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するのに有用である。別の実施形態では、キットは、第１の容器中の薬学的に許容される緩衝液と、ＰＤＧＦを含む第２の容器とを含んでなり、キットは、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するのに有用である。いくつかの実施形態では、溶液は、所定の濃度のＰＤＧＦを含む。ＰＤＧＦの濃度は、ＯＮＪまたはＯＲＮＪの進行を治療、予防または遅延することなどの実施されている外科的処置に従って予め決定され得る。さらに、いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、キット中に所定量で存在し得る。キットによって提供される生体適合性マトリックスの量は、実施されている外科的処置に応じて変わり得る。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦ溶液を含有する第２の容器は、シリンジを含む。シリンジは、生体適合性マトリックス中でのＰＤＧＦ溶液の配置を促進し得る。キットは、その使用のための使用説明書を場合により含む。
【００３２】
本発明は、さらに、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するのに有用な組成物を製造する方法を提供する。一実施形態では、このような組成物を製造する方法は、ＰＤＧＦを含む溶液を提供することと、生体適合性マトリックスを提供することと、この溶液を生体適合性マトリックス中に配置することとを含む。
【００３３】
別の態様では、本発明は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦ溶液を含む組成物を提供することと、上顎骨または下顎骨および／または関連軟部組織中の損傷または欠損の少なくとも１部位に組成物を適用することとを含む、ＯＮＪを治療する方法を提供する。
【００３４】
別の態様では、本発明は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦ溶液を含む組成物を提供することと、ＯＮＪに弱い顎中の少なくとも１部位に組成物を適用することとを含む、ＯＮＪを予防するか、またはＯＮＪの進行を遅延させる方法を提供する。
【００３５】
別の態様では、本発明は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦ溶液を含む組成物を提供することと、上顎骨または下顎骨および／または関連軟部組織中の損傷または欠損の少なくとも１部位に組成物を適用することとを含む、ＯＲＮＪを治療する方法を提供する。
【００３６】
別の態様では、本発明は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦ溶液を含む組成物を提供することと、ＯＲＮＪに弱い顎中の少なくとも１部位に組成物を適用することとを含む、ＯＲＮＪを予防するか、またはＯＲＮＪの進行を遅延させる方法を提供する。
【００３７】
したがって、本発明の目的は、ＯＮＪを治療するのに有用な、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦを含む組成物を提供することである。
【００３８】
本発明の別の目的は、ＯＮＪの進行を予防するか、または進行を遅延させるのに有用な、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦを含む組成物を提供することである。
【００３９】
本発明のさらに別の目的は、ＯＲＮＪを治療するのに有用な、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦを含む組成物を提供することである。
【００４０】
本発明の別の目的は、ＯＲＮＪの進行を予防するか、または進行を遅延させるのに有用な、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦを含む組成物を提供することである。
【００４１】
本発明のさらに別の目的は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦを含む組成物を投与することを含む、ＯＮＪを治療するのに有用な方法を提供することである。
【００４２】
本発明の別の目的は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦを含む組成物を投与することを含む、ＯＮＪの進行を予防または減速するのに有用な方法を提供することである。
【００４３】
本発明のさらに別の目的は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦを含む組成物を投与することを含む、ＯＲＮＪを治療するのに有用な方法を提供することである。
【００４４】
本発明の別の目的は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦを含む組成物を投与することを含む、ＯＲＮＪの進行を予防または減速するのに有用な方法を提供することである。
【００４５】
別の態様では、本発明は、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を提供することと、上顎骨または下顎骨および／または関連軟部組織中の損傷または欠損の少なくとも１部位に組成物を適用することとを含む、組成物を適用することとを含む、ＯＮＪを治療する方法を提供する。
【００４６】
別の態様では、本発明は、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を提供することと、ＯＮＪに弱い顎中の少なくとも１部位に組成物を適用することとを含む、ＯＮＪを予防するか、またはＯＮＪの進行を遅延させる方法を提供する。
【００４７】
別の態様では、本発明は、組成物、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの溶液を提供することと、上顎骨または下顎骨および／または関連軟部組織中の損傷または欠損の少なくとも１部位に組成物を適用することとを含む、ＯＲＮＪを治療する方法を提供する。
【００４８】
別の態様では、本発明は、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を提供することと、ＯＲＮＪに弱い顎中の少なくとも１部位に組成物を適用することとを含む、ＯＲＮＪを予防するか、またはＯＲＮＪの進行を遅延させる方法を提供する。
【００４９】
したがって、本発明の目的は、ＯＮＪを治療するのに有用な、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を提供することである。
【００５０】
本発明の別の目的は、ＯＮＪの進行を予防またはＯＮＪの進行を遅延させるのに有用な、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を提供することである。
【００５１】
本発明のさらに別の目的は、ＯＲＮＪを治療するのに有用な、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を提供することである。
【００５２】
本発明の別の目的は、ＯＲＮＪの進行を予防またはＯＲＮＪの進行を遅延させるのに有用な、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を提供することである。
【００５３】
本発明のさらに別の目的は、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を投与することを含む、ＯＮＪを治療するのに有用な方法を提供することである。
【００５４】
本発明の別の目的は、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を投与することを含む、ＯＮＪの進行を予防または減速するのに有用な方法を提供することである。
【００５５】
本発明のさらに別の目的は、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む組成物を投与することを含む、ＯＲＮＪを治療するのに有用な方法を提供することである。
【００５６】
本発明の別の目的は、組成物、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を投与することを含む、ＯＲＮＪの進行を予防または減速するのに有用な方法を提供することである。
【００５７】
本発明のこれらおよびその他の実施形態は、以下の詳細な説明において、より詳細に説明される。本発明のこれらおよびその他の目的、特徴および利点は、開示される実施形態および特許請求の範囲の以下の詳細な説明を検討した後に明らかになる。
【発明を実施するための形態】
【００５８】
本発明は、ＯＮＪおよびＯＲＮＪの進行を治療、予防および遅延するための組成物および方法に関する。用語、顎は、ＯＮＪまたはＯＲＮＪに言及する場合は、下顎骨、上顎骨、口腔および／または関連軟部組織のその他の骨を含むと理解されるべきである。本発明は、患者のＯＮＪまたはＯＲＮＪの進行を治療、予防または減速する医薬の調製における、薬学的に許容されるビヒクル中のＰＤＧＦの使用を提供する。本発明はまた、患者のＯＮＪまたはＯＲＮＪの進行を治療、予防または減速する医薬の調製における、生体適合性マトリックス中に配置された薬学的に許容されるビヒクル中のＰＤＧＦの溶液を含む組成物の使用を提供する。
【００５９】
一実施形態では、例えば、ＯＮＪまたはＯＲＮＪの進行を治療、予防または遅延するための組成物は、ＰＤＧＦを含む溶液と、生体適合性マトリックスとを含んでなり、溶液は生体適合性マトリックス中に配置されている。別の実施形態では、本組成物は、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの溶液を含む。別の実施形態では、本組成物は、生体適合性マトリックス中に配置されたＰＤＧＦ溶液を含んでなり、生体適合性マトリックスは、足場材料と、生体適合性結合剤とを含む。一態様では、生体適合性マトリックスは、生体適合性結合剤または異種移植骨または移植骨、例えば、脱灰凍結乾燥移植骨（ＤＦＤＢＡ）、石灰化凍結乾燥移植骨（ＦＤＢＡ）または粒子状脱灰骨マトリックス（ＤＢＭ）またはそれらの組合せを伴って、または伴わずに、リン酸カルシウム粒子を含み得る。別の実施形態では、生体適合性結合剤は、コラーゲンである。
【００６０】
本発明はまた、ＯＮＪおよびＯＲＮＪを予防および治療するのに有用なキットを提供する。別の態様では、本発明は、生体適合性マトリックスを含む第１の容器と、第２の容器中のＰＤＧＦを含む溶液とを含むキットを提供する。第２の容器は、シリンジなどの分配手段として作用し得る。いくつかの実施形態では、溶液は、所定の濃度のＰＤＧＦを含む。別の実施形態では、キットは、容器中に薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦを含む溶液を含んでなり、キットは、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するのに有用である。別の実施形態では、キットは、第１の容器中の薬学的に許容される緩衝液と、ＰＤＧＦを含む第２の容器とを含んでなり、キットは、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するのに有用である。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦの濃度は、本明細書に提供される値と一致する。ＰＤＧＦの濃度は、治療されている状態に従って予め決定され得る。キットは、骨足場材料をさらに含む場合もあり、骨足場材料は、生体適合性結合剤をさらに含む場合もある。さらに、キットによって提供される生体適合性マトリックスの量は、治療されている骨欠損の性質または分類に応じて変わり得る。さらに、いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、キット中に所定量で存在し得る。キットによって提供される生体適合性マトリックスの量は、実施されている外科的処置に応じて変わり得る。キット中に含まれ得る生体適合性マトリックスは、骨足場材料、骨足場材料および生体適合性結合剤ならびに／またはＤＦＤＢＡ、ＦＤＢＡもしくはＤＢＭなどの移植骨ならびに／または異種移植骨あるいはそれらの組合せであり得る。いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、β−リン酸三カルシウム（β−ＴＣＰ）を含む。いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、β−リン酸三カルシウムをコラーゲンなどの結合剤とともに含む。シリンジは、所望の部位、例えば、顎中の部位での適用のための生体適合性マトリックス中のＰＤＧＦ溶液の配置を容易にし得る。キットはまた、使用のための使用説明書を含み得る。
【００６１】
次いで、本発明の種々の実施形態に含まれ得る成分については、本発明の組成物は、ＰＤＧＦを含む溶液を含む。
ＰＤＧＦ溶液
一態様では、本発明によって提供される組成物は、ＰＤＧＦを含む溶液と、生体適合性マトリックスとを含んでなり、溶液は生体適合性マトリックス中に配置されている。別の態様では、本発明によって提供される組成物は、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの溶液を含む。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌまたは約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で溶液中に存在する。ＰＤＧＦは、これらの記載された範囲内の任意の濃度で溶液中に存在し得る。その他の実施形態では、ＰＤＧＦは、以下の濃度のうちのいずれか１種で溶液中に存在する：約０．０５ｍｇ／ｍｌ；約０．１ｍｇ／ｍｌ；約０．１５ｍｇ／ｍｌ；約０．２ｍｇ／ｍｌ；約０．２５ｍｇ／ｍｌ；約０．３ｍｇ／ｍｌ；約０．３５ｍｇ／ｍｌ；約０．４ｍｇ／ｍｌ；約０．４５ｍｇ／ｍｌ；約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．５５ｍｇ／ｍｌ、約０．６ｍｇ／ｍｌ、約０．６５ｍｇ／ｍｌ、約０．７ｍｇ／ｍｌ；約０．７５ｍｇ／ｍｌ；約０．８ｍｇ／ｍｌ；約０．８５ｍｇ／ｍｌ；約０．９ｍｇ／ｍｌ；約０．９５ｍｇ／ｍｌ；約１．０ｍｇ／ｍｌ；または約３．０ｍｇ／ｍｌ。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは、約０．２ｍｇ／ｍｌ〜約２ｍｇ／ｍｌ、約０．３ｍｇ／ｍｌ〜約３ｍｇ／ｍｌ、約０．４ｍｇ／ｍｌ〜約４ｍｇ／ｍｌまたは約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で溶液中に存在する。これらの濃度は単に、特定の実施形態の例であり、ＰＤＧＦの濃度は、上記の濃度範囲のいずれか内であり得るということは理解されるべきである。
【００６２】
種々の量のＰＤＧＦを本発明の組成物中に使用してよい。任意の臨床上有効な量を使用してよい。使用してよいＰＤＧＦの量として、以下の範囲中の量が挙げられる：約１μｇ〜約５０ｍｇ、約１０μｇ〜約２５ｍｇ、約１００μｇ〜約１０ｍｇおよび約２５０μｇ〜約５ｍｇ。
【００６３】
本発明の実施形態における、ＰＤＧＦまたはその他の増殖因子の濃度は、米国特許第６，２２１，６２５号、同５，７４７，２７３号および同５，２９０，７０８号に記載される酵素結合免疫測定法ならびにＰＤＧＦ濃度を調べるための当技術分野で公知の任意のその他のアッセイを使用することによって調べることができる。本明細書に提供される場合、ＰＤＧＦのモル濃度は、ＰＤＧＦ二量体の分子量（例えば、ＰＤＧＦ−ＢＢ；ＭＷ約２５ｋＤａ）に基づいて求められている。
【００６４】
本発明の実施形態では、ＰＤＧＦは、ＰＤＧＦホモ二量体およびヘテロ二量体、例えば、ＰＤＧＦ−ＡＡ、ＰＤＧＦ−ＢＢ、ＰＤＧＦ−ＡＢ、ＰＤＧＦ−ＣＣ、ＰＤＧＦ−ＤＤならびにそれらの混合物および誘導体を含む。一実施形態では、ＰＤＧＦは、ＰＤＧＦ−ＢＢを含む。別の実施形態では、ＰＤＧＦは、組換えヒトＰＤＧＦ、例えば、ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢを含む。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは、種々のホモ二量体および／またはヘテロ二量体の混合物を含む。本発明の実施形態は、ＰＤＧＦ−ＡＡ、ＰＤＧＦ−ＢＢ、ＰＤＧＦ−ＡＢ、ＰＤＧＦ−ＣＣおよび／またはＰＤＧＦ−ＤＤの任意の組合せを考慮する。
【００６５】
ＰＤＧＦは、いくつかの実施形態では、天然供給源から得ることができる。その他の実施形態では、ＰＤＧＦは、組換えＤＮＡ技術によって製造することができる。その他の実施形態では、ＰＤＧＦまたはその断片は、固相ペプチド合成などの技術分野の当業者に公知のペプチド合成技術を用いて製造することができる。ＰＤＧＦは、天然供給源から得られる場合には、生体液に由来するものであり得る。いくつかの実施形態によれば、生体液は、生体と関連している任意の処理または未処理液、例えば、血液を含んでなり得る。
【００６６】
別の実施形態では、生体液はまた、血液成分、例えば、血小板濃縮物（ＰＣ）、アフェレーシス血小板、多血小板血漿（ＰＲＰ）、血漿、血清、新鮮凍結血漿（ＦＦＰ）およびバフィーコート（ＢＣ）を含む場合がある。生体液は、さらなる実施形態では、血漿から分離され、生理液に再懸濁された血小板を含む場合がある。
【００６７】
組換えＤＮＡ技術によって製造される場合には、単一のモノマー（例えば、ＰＤＧＦ  Ｂ鎖またはＡ鎖）またはその断片をコードするＤＮＡ配列を、いくつかの実施形態では、発現し、続いて、ホモ二量体（例えば、ＰＤＧＦ−ＢＢまたはＰＤＧＦ−ＡＡ）を生成するために培養原核細胞または真核細胞に挿入することができる。その他の実施形態では、ＰＤＧＦヘテロ二量体を、ヘテロ二量体の両単量体ユニットをコードするＤＮＡ配列を、培養された原核生物、真核細胞または昆虫細胞に挿入することと、翻訳された単量体ユニットが細胞によってプロセシングされてヘテロ二量体（例えば、ＰＤＧＦ−ＡＢ）が生じるのを可能にすることとによって作製することができる。市販のｃＧＭＰ組換えＰＤＧＦ−ＢＢは、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｃｈｉｒｏｎ）（Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ、ＣＡ）から商業的に入手できる。研究等級のｒｈＰＤＧＦ−ＢＢは、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ．（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）およびＣｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（Ｔｅｍｅｃｕｌａ、ＣＡ）をはじめ、複数の供給源から入手できる。いくつかの実施形態では、単量体ユニットは、原核細胞において変性した形で産生され得、この変性した形は、その後、活性分子にリフォールディングされる。
【００６８】
本発明の実施形態では、ＰＤＧＦは、１種以上のＰＤＧＦ断片を含む。一実施形態では、組換えヒト（ｒｈ）ＰＤＧＦ−Ｂは、以下の断片を含む：全Ｂ鎖のうちアミノ酸配列１〜３１、１〜３２、３３〜１０８、３３〜１０９および／または１〜１０８またはそれらの混合物。ＰＤＧＦのＢ鎖の完全アミノ酸配列（１〜１０９）は、米国特許第５，５１６，８９６号の図１５に提供されている。ｒｈＰＤＧＦ組成物は、本発明のいくつかの実施形態では、無傷のｒｈＰＤＧＦ−Ｂ（１〜１０９）およびその断片の組合せを含んでなり得るということは理解されるべきである。米国特許第５，５１６，８９６号に開示されるものなどのＰＤＧＦのその他の断片を使用してもよい。一実施形態に従って、ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢは、無傷のｒｈＰＤＧＦ−Ｂ（１〜１０９）の少なくとも６０％を含む。別の実施形態では、ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢは、無傷のｒｈＰＤＧＦ−Ｂ（１〜１０９）の少なくとも６５％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または９９％を含む。
【００６９】
本発明のいくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは精製されている場合もある。本明細書において、精製ＰＤＧＦは、本発明の溶液中への組み込みに先立って約９５重量％を越えるＰＤＧＦを有する組成物を含む。溶液は、任意の薬学的に許容される溶液であり得る。その他の実施形態では、ＰＤＧＦは、実質的に精製されていてもよい。本明細書において、実質的に精製されたＰＤＧＦは、本発明の溶液中への組み込みに先立って約５％〜約９５重量％のＰＤＧＦを有する組成物を含む。一実施形態では、実質的に精製されたＰＤＧＦは、本発明の溶液中への組み込みに先立って約６５％〜約９５重量％のＰＤＧＦを有する組成物を含む。その他の実施形態では、実質的に精製されたＰＤＧＦは、本発明の溶液中への組み込みに先立って約７０％〜約９５％、約７５％〜約９５％、約８０％〜約９５％、約８５％〜約９５％または約９０％〜約９５重量％のＰＤＧＦを有する組成物を含む。精製ＰＤＧＦおよび実質的に精製されたＰＤＧＦは、足場および結合剤中に組み込まれてもよい。
【００７０】
さらなる実施形態では、ＰＤＧＦは、部分精製されている場合もある。本明細書において、部分精製されたＰＤＧＦは、多血小板血漿（ＰＲＰ）、新鮮凍結血漿（ＦＴＰ）またはＰＤＧＦを製造するために収集および分離を必要とする任意のその他の血液製剤という状況でＰＤＧＦを有する組成物を含む。本発明の実施形態は、ホモ二量体およびヘテロ二量体を含む、本明細書に提供されるＰＤＧＦアイソフォームのいずれも、精製または部分精製されていてもよいということを考慮する。ＰＤＧＦ混合物を含有する本発明の組成物は、部分精製された割合でＰＤＧＦアイソフォームまたはＰＤＧＦ断片を含み得る。部分精製および精製ＰＤＧＦは、いくつかの実施形態では、米国特許出願番号第１１／１５９，５３３号（公開番号第２００６００８４６０２号）に記載のとおり調製できる。
【００７１】
いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦを含む溶液は、ＰＤＧＦを１種以上の緩衝液に溶解することによって形成される。本発明のＰＤＧＦ溶液において使用するのに適した緩衝液は、それだけには限らないが、炭酸塩、リン酸塩（例えば、リン酸緩衝生理食塩水）、ヒスチジン、酢酸塩（例えば、酢酸ナトリウム）、酸性緩衝液、例えば、酢酸およびＨＣｌならびに有機緩衝液、例えば、リシン、Ｔｒｉｓ緩衝液（例えば、ｔｒｉｓ（ヒドロキシメチル）アミノエタン）、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）および３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）を含んでなり得る。緩衝液は、ＰＤＧＦとの生体適合性および緩衝液の、望ましくないタンパク質修飾を妨げる能力に基づいて選択され得る。緩衝液は、宿主組織との適合性に基づいてさらに選択され得る。別の態様では、本発明によって提供される組成物が、薬学的に許容される緩衝液中にＰＤＧＦの溶液を含む場合には、当業者に公知の任意の薬学的に許容される緩衝液を使用してよい。一実施形態では、酢酸ナトリウム緩衝液が用いられる。緩衝液は種々のモル濃度、例えば、約０．１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約１ｍＭ〜約５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約４０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭまたは約１５ｍＭ〜約２５ｍＭまたはこれらの範囲内の任意のモル濃度で使用してよい。一実施形態では、酢酸緩衝液は、約２０ｍＭのモル濃度で使用される。
【００７２】
別の実施形態では、ＰＤＧＦを含む溶液は、凍結乾燥したＰＤＧＦを水に可溶化することによって形成され、これでは、可溶化に先立って、ＰＤＧＦは適当な緩衝液から凍結乾燥される。
【００７３】
ＰＤＧＦを含む溶液は、本発明の実施形態によれば、約３．０〜約８．０の範囲のｐＨを有し得る。一実施形態では、ＰＤＧＦを含む溶液は、約５．０〜約８．０、より好ましくは、約５．５〜約７．０、最も好ましくは、約５．５〜約６．５の範囲のｐＨ、またはこれらの範囲内の任意の値を有する。ＰＤＧＦを含む溶液のｐＨは、いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦまたは任意のその他の所望の生物学的に活性な薬剤の長期の安定性および効力と適合し得る。ＰＤＧＦは、通常、酸性環境においてより安定である。したがって、一実施形態に従って、本発明は、ＰＤＧＦ溶液の酸性保存製剤を含む。この実施形態に従って、ＰＤＧＦ溶液は、好ましくは、約３．０〜約７．０の、より好ましくは、約４．０〜約６．５のｐＨを有する。しかし、ＰＤＧＦの生物活性は、中性のｐＨ範囲を有する溶液中で最適化され得る。したがって、さらなる実施形態では、本発明は、ＰＤＧＦ溶液の中性ｐＨ製剤を含む。この実施形態に従って、ＰＤＧＦ溶液は、好ましくは、約５．０〜約８．０、より好ましくは、約５．５〜約７．０、最も好ましくは、約６．０〜約７．０のｐＨを有する。本発明の方法に従って、酸性ＰＤＧＦ溶液は、中性ｐＨ組成物に再処方され、次いで、このような組成物がＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するために用いられる。本発明の好ましい実施形態に従って、溶液中で利用されるＰＤＧＦとして、ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢがある。
【００７４】
いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦ含有溶液のｐＨは、ＰＤＧＦのマトリックス基板またはリンカーとの結合動力学を最適化するよう変更され得る。必要に応じて、マテリアルのｐＨは隣接するマテリアルと平衡化するので、結合しているＰＤＧＦは不安定になり得る。
【００７５】
ＰＤＧＦを含む溶液のｐＨは、いくつかの実施形態では、本明細書に列挙される緩衝液によって制御され得る。種々のタンパク質は、それらが安定である種々のｐＨ範囲を示す。タンパク質安定性は、等電点およびタンパク質上の電荷によって主に反映される。ｐＨ範囲は、タンパク質のコンホメーション構造およびタンパク質分解、加水分解、酸化およびタンパク質の構造への修飾および／または生物活性をもたらし得るその他のプロセスに対するタンパク質の感受性に影響を及ぼし得る。当業者に公知の任意の薬学的に許容される緩衝液を用いて、レシピエントへの投与のためのＰＤＧＦの溶液を形成してもよい。
【００７６】
いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦを含む溶液は、その他の生物活性薬剤などのさらなる成分をさらに含んでなり得る。その他の実施形態では、ＰＤＧＦを含む溶液は、細胞培養培地、アルブミンなどのその他の安定化タンパク質、抗菌剤、プロテアーゼ阻害剤［例えば、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレングリコール−ビス（β−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）、アプロチニン、ε−アミノカプロン酸（ＥＡＣＡ）など］ならびに／または繊維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）、ケラチノサイト増殖因子（ＫＧＦ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）もしくはＰＤＧＦ−ＡＡ、ＰＤＧＦ−ＢＢ、ＰＤＧＦ−ＡＢ、ＰＤＧＦ−ＣＣおよび／もしくはＰＤＧＦ−ＤＤの組成物をはじめとするその他のＰＤＧＦなどのその他の増殖因子をさらに含んでなり得る。
【００７７】
本発明の組成物は、ＰＤＧＦを含む溶液に加え、中にＰＤＧＦ溶液が配置され、生体適合性結合剤も含んでなり得る生体適合性マトリックスも含む。
【００７８】
生体適合性マトリックス
足場材料
生体適合性マトリックスは、本発明の実施形態によれば、足場材料を含む。足場材料は、本発明の実施形態によれば、新規組織および／または骨成長が始まるためのフレームワークまたは足場を提供する。足場材料は、いくつかの実施形態では、さまざまな直径の多方向の、相互接続している細孔を含む。いくつかの実施形態では、足場材料は、相互接続している細孔に加え、種々の直径の複数のポケットおよび相互接続していない細孔を含む。いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、異種移殖片またはＤＦＤＢＡ、ＦＤＢＡもしくはＤＢＭなどの同種移植片またはそれらの組合せを含む。足場材料は、いくつかの実施形態では、少なくとも１種のリン酸カルシウムを含む。いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、少なくとも１種のリン酸カルシウムを、結合剤、例えば、コラーゲンおよび／または同種移植片とともに含む。その他の実施形態では、足場材料は、複数のリン酸カルシウムを含んでなり得る。足場材料として使用するのに適したリン酸カルシウムは、本発明の実施形態では、０．５〜２．０の範囲のカルシウム対リン原子比を有する。
【００７９】
足場材料として使用するのに適したリン酸カルシウムの限定されない例は、非晶質リン酸カルシウム、リン酸一カルシウム一水和物（ＭＣＰＭ）、リン酸一カルシウム無水物（ＭＣＰＡ）、リン酸二カルシウム二水和物（ＤＣＰＤ）、リン酸二カルシウム無水物（ＤＣＰＡ）、リン酸八カルシウム（ＯＣＰ）、α−リン酸三カルシウム、β−リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイト（ＯＨＡｐ）、低結晶性ヒドロキシアパタイト、リン酸四カルシウム（ＴＴＣＰ）、十リン酸七カルシウム、メタリン酸カルシウム、ピロリン酸カルシウム二水和物、炭酸リン酸カルシウムおよびピロリン酸カルシウム、ヒドロキシアパタイトまたはそれらの誘導体を含む。
【００８０】
いくつかの実施形態では、足場材料は、ポリマー材料を含む。ポリマー足場は、いくつかの実施形態では、コラーゲン、ポリ乳酸、ポリ（Ｌ−ラクチド）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）、ポリグリコール酸、Ｌ−ラクチド・グリコリド共重合体、Ｌ−ラクチド・Ｄ，Ｌ−ラクチド共重合体、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ポリメチルメタクリレート、キトサンまたはそれらの組合せもしくは誘導体を含む。
【００８１】
いくつかの実施形態では、足場材料は、多孔性構造を含む。多孔性足場材料は、いくつかの実施形態によれば、約１μｍ〜約１ｍｍの範囲の直径を有する細孔を含んでなり得る。一実施形態では、足場材料は、約１００μｍ〜約１ｍｍの範囲またはそれを超える直径を有するマクロ孔を含む。別の実施形態では、足場材料は、約１０μｍ〜約１００μｍの範囲の直径を有するメソ細孔を含む。さらなる実施形態では、足場材料は、約１０μｍ未満の直径を有するミクロ細孔を含む。本発明の実施形態は、マクロ孔、メソ細孔およびミクロ細孔またはそれらの任意の組合せを含む足場材料を考慮する。
【００８２】
多孔性足場材料は、一実施形態では、約２５％を超える、または約４０％を超える空隙率を有する。別の実施形態では、多孔性足場材料は、約５０％を超える、約６０％を超える、約６５％を超える、約７０％を超える、約８０％を超える、または約８５％を超える空隙率を有する。さらなる実施形態では、多孔性足場材料は、約９０％を超える空隙率を有する。いくつかの実施形態では、多孔性足場材料は、足場材料中への細胞移動を容易にする空隙率を含む。
【００８３】
いくつかの実施形態では、足場材料は、複数の粒子を含む。足場粒子は、ｍｍ、μｍまたは１ミクロン未満の（ｎｍ）大きさであり得る。足場粒子は、一実施形態では、約１μｍ〜約５ｍｍの範囲の平均直径を有する。その他の実施形態では、粒子は、約１ｍｍ〜約２ｍｍ、約１ｍｍ〜約３ｍｍまたは約２５０μｍ〜約７５０μｍの範囲の平均直径を有する。足場粒子は、別の実施形態では、約１００μｍ〜約３００μｍの範囲の平均直径を有する。さらなる実施形態では、足場粒子は、約７５μｍ〜約３００μｍの範囲の平均直径を有する。さらなる実施形態では、足場粒子は、約２５μｍ未満、約１μｍ未満または約１ｍｍ未満の平均直径を有する。
【００８４】
いくつかの実施形態では、足場粒子は、約１００μｍ〜約５ｍｍまたは約１００μｍ〜約３ｍｍの範囲の平均直径を有する。その他の実施形態では、足場粒子は、約２５０μｍ〜約２ｍｍ、約２５０μｍ〜約１ｍｍまたは約２００μｍ〜約３ｍｍの範囲の平均直径を有する。粒子はまた、約１ｎｍ〜約１μｍ、約５００ｎｍ未満または約２５０ｎｍ未満の範囲であり得る。
【００８５】
足場材料は、いくつかの実施形態によれば、移植に適した形（例えば、球、円柱またはブロック）で提供され得る。その他の実施形態では、足場材料は、成形可能、押し出し成形可能および／または注射可能である。成形可能、押し出し成形可能および注射可能足場材料は、顎の損傷および／または欠損中およびその周囲への本発明の組成物の効率的な配置を容易にし得る。いくつかの実施形態では、成形可能、押し出し成形可能および／または注射可能足場材料を、スパチュラまたは同等の装置を用いて顎中の部位に適用する。いくつかの実施形態では、足場材料は、流動性を有する。流動性を有する足場材料は、いくつかの実施形態では、シリンジおよびニードルまたはカニューレを通して顎中の部位に適用できる。
【００８６】
いくつかの実施形態では、足場材料は、生体吸収性である。足場材料は、一実施形態では、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の後、１年以内に、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％または９０％再吸収され得る。別の実施形態では、足場材料は、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の１、３、６、９、１２または１８ヶ月以内に、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％または９０％吸収され得る。いくつかの実施形態では、足場材料は、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の１、３、６、９、１２または１８ヶ月以内に、９０％を超えて吸収され得る。生体吸収性は、（１）マトリックス材料の性質（すなわち、その化学構成、物理的構造および大きさ）、（２）マトリックスが配置される身体内の位置、（３）使用されるマトリックス材料の量、（４）患者の代謝状態（糖尿病／非糖尿病、骨粗鬆症、喫煙者、高齢、ステロイド使用など）、（５）治療される損傷の程度および／または種類ならびに（６）その他の骨同化、異化および抗異化因子などの、マトリックスの他の、その他の材料の使用に応じて変わる。
【００８７】
同種移植片を含む足場
本発明の組成物は、いくつかの実施形態によれば、ＰＤＧＦとともに、移植材料、例えば、自己骨髄、自己血小板抽出物、同種移植片、合成骨マトリックス材料、異種移植片およびそれらの誘導体およびそれらの組合せをさらに含んでなり得る。いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、同種移植片、例えば、ＤＦＤＢＡ、ＦＤＢＡまたはＤＢＭまたはそれらの組合せを含む。このような同種移植片は、商業ベンダーおよび骨バンクから入手可能である。同種移植片の特徴として、それだけには限らないが、同種異系骨粒子（種々の範囲、１２５〜５００μｍ；１２５〜１，０００μｍ）が挙げられ、粒子は完全に、もしくは実質的に脱灰されている（約４％残部が、通常、使用される最も脱灰したものである）か、または脱灰されていないが、脱有機化されているのいずれか、およびそれらの組合せである。同様に、脱有機化異種材料、例えば、ＢｉｏＯｓｓ（Ｇｅｉｓｔｌｉｃｈ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ、Ｉｎｃ．）を使用してもよい。同種移植片および異種移殖片の特徴として、粒子、ブレンド、網目、ブロックおよび種々の量の脱灰および脱有機化ならびにそれらの組合せが挙げられる。
【００８８】
β−リン酸三カルシウムを含む足場
生体適合性マトリックスとして使用するための足場材料は、いくつかの実施形態では、β−リン酸三カルシウム（β−ＴＣＰ）を含む。β−ＴＣＰは、いくつかの実施形態によれば、種々の直径の多方向の、相互接続している細孔を有する多孔性構造を含んでなり得る。いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰは、相互接続している細孔に加え、種々の直径の複数のポケットおよび相互接続していない細孔を含む。β−ＴＣＰの多孔性構造は、一実施形態では、約１００μｍ〜約１ｍｍの範囲またはそれを超える直径を有するマクロ孔、約１０μｍ〜約１００μｍの範囲の直径を有するメソ細孔、約１０μｍ未満の直径を有するミクロ細孔を含む。β−ＴＣＰのマクロ孔およびメソ細孔は、軟骨細胞移動および増殖ならびに骨誘導および骨伝導を含めた組織内部成長を促進し、一方で、マクロ孔、メソ細孔およびミクロ細孔は、流体連絡および栄養素輸送を可能にし、β−ＴＣＰ生体適合性マトリックス中での軟骨および／または骨再生を含めた組織再生を支援し得る。
【００８９】
β−ＴＣＰは、多孔性構造を含むことにおいて、いくつかの実施形態では、２５％を超える、または約４０％を超える空隙率を有し得る。その他の実施形態では、β−ＴＣＰは、５０％を超える、約６０％を超える、約６５％を超える、約７０％を超える、約７５％を超える、約８０％を超える、または約８５％を超える空隙率を有し得る。さらなる実施形態では、β−ＴＣＰは、９０％を超える空隙率を有し得る。いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰは、β−ＴＣＰ中への細胞移動を容易にする空隙率を有し得る。
【００９０】
いくつかの実施形態では、足場材料は、β−ＴＣＰ粒子を含んでなり、β−ＴＣＰ粒子は、いくつかの実施形態では、個々に、足場材料について本明細書に提供される細孔直径、細孔構造および空隙率のいずれも示し得る。
【００９１】
β−ＴＣＰ粒子は、一実施形態では、約１μｍ〜約５ｍｍの範囲の平均直径を有する。その他の実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約１ｍｍ〜約２ｍｍ、約１ｍｍ〜約３ｍｍ、約１００μｍ〜約５ｍｍ、約１００μｍ〜約３ｍｍ、約２５０μｍ〜約２ｍｍ、約２５０μｍ〜約７５０μｍ、約２５０μｍ〜約１ｍｍ、約２５０μｍ〜約２ｍｍまたは約２００μｍ〜約３ｍｍの範囲の平均直径を有する。別の実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約１００μｍ〜約３００μｍの範囲の平均直径を有する。いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約７５μｍ〜約３００μｍの範囲の平均直径を有する。いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約２５μｍ未満の、約１μｍ未満の、または約１ｍｍ未満の平均直径を有する。いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約１ｎｍ〜約１μｍの範囲の平均直径を有する。さらなる実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約５００ｎｍ未満または約２５０ｎｍ未満の平均直径を有する。
【００９２】
β−ＴＣＰ足場材料を含む生体適合性マトリックスは、いくつかの実施形態では、移植に適した形（例えば、球、円柱またはブロック）で提供される。その他の実施形態では、β−ＴＣＰ足場材料は、成形可能である、押し出し成形可能である、かつ／または流動性を有し、それによって、顎中の所望の部位へのマトリックスの適用が容易になる。流動性を有するマトリックスは、シリンジ、チューブ、カニューレまたはスパチュラによって適用できる。
【００９３】
β−ＴＣＰ足場材料は、いくつかの実施形態によれば、生体吸収性である。一実施形態では、β−ＴＣＰ足場材料は、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の後、１年で、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％または８５％再吸収され得る。別の実施形態では、β−ＴＣＰ足場材料は、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の後、１年で、９０％を超えて再吸収され得る。
【００９４】
足場材料および生体適合性結合剤
別の実施形態では、生体適合性マトリックスは、足場材料および生体適合性結合剤を含む。
【００９５】
生体適合性結合剤は、いくつかの実施形態によれば、組み合わされた物質間の接着を促進するよう働く材料を含んでなり得る。生体適合性結合剤は、例えば、生体適合性マトリックスの形成において足場材料の粒子間の接着を促進し得る。特定の実施形態では、同一材料が、足場材料および結合剤の両方として働く場合がある。一実施形態では、例えば、コラーゲンまたはキトサンなどの本明細書に記載されるポリマー材料が、足場材料および結合剤の両方として働き得る。
【００９６】
生体適合性結合剤は、いくつかの実施形態では、コラーゲン、エラスチン、多糖、核酸、炭水化物、タンパク質、ポリペプチド、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（ラクトン）、ポリ（アミノ酸）、ポリ（無水物）、ポリウレタン、ポリ（オルトエステル）、ポリ（無水−コ−イミド）、ポリ（オルトカーボネート）、ポリ（α−ヒドロキシアルカノエート）、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（ホスホエステル）、ポリ乳酸、ポリ（Ｌ−ラクチド）（ＰＬＬＡ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）（ＰＤＬＬＡ）、ポリグリコリド（ＰＧＡ）、ラクチド・グリコリド共重合体（ＰＬＧＡ）、Ｌ−ラクチド・Ｄ，Ｌ−ラクチド共重合体、Ｄ，Ｌ−ラクチド・トリメチレンカーボネート共重合体、ポリグリコール酸、ポリヒドロキシブチレート（ＰＨＢ）、ポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（δ−バレロラクトン）、ポリ（γ−ブチロラクトン）、ポリ（カプロラクトン）、ポリアクリル酸、ポリカルボン酸、ポリ（アリルアミンヒドロクロリド）、ポリ（ジアリルジメチルアンモニウムクロリド）、ポリ（エチレンイミン）、ポリプロピレンフマレート、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリエチレン、ポリメチルメタクリレート、炭素繊維、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（エチルオキサゾリン）、ポリ（エチレンオキシド）−コ−ポリ（プロピレンオキシド）ブロックコポリマー、ポリ（エチレンテレフタレート）ポリアミドおよびそれらの共重合体および混合物を含んでなり得る。
【００９７】
生体適合性結合剤は、その他の実施形態では、アルギン酸、アラビアゴム、グアーガム、キサンタンガム（ｘａｎｔｈａｍ  ｇｕｍ）、ゼラチン、キチン、キトサン、酢酸キトサン、乳酸キトサン、硫酸コンドロイチン、Ｎ，Ｏ−カルボキシメチルキトサン、デキストラン（例えば、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリンまたはデキストラン硫酸ナトリウム）、フィブリン糊、レシチン、ホスファチジルコリン誘導体、グリセロール、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、セルロース（例えば、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースまたはヒドロキシエチルセルロース）、グルコサミン、プロテオグリカン、デンプン（例えば、ヒドロキシエチルデンプンまたは可溶性デンプン）、乳酸、プルロン酸（ｐｌｕｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄｓ）、グリセロリン酸ナトリウム、グリコーゲン、ケラチン、シルクおよびそれらの誘導体および混合物を含んでなり得る。
【００９８】
いくつかの実施形態では、生体適合性結合剤は水溶性である。水溶性結合剤は、生体適合性マトリックス移植後すぐに、生体適合性マトリックスから溶解することができ、それによって、生体適合性マトリックスにマクロ多孔性が取り入れられる。本明細書で論じられるマクロ多孔性は、インプラント部位での破骨細胞および骨芽細胞のアクセス、その結果として、リモデリング活性を増強することによって、インプラント材料の骨伝導性を高め得る。
【００９９】
いくつかの実施形態では、生体適合性結合剤は、マトリックスの約５重量パーセント〜約５０重量パーセントの範囲の量で、生体適合性マトリックス中に存在し得る。その他の実施形態では、生体適合性結合剤は、生体適合性マトリックスの約１０重量パーセント〜約４０重量パーセントの範囲の量で存在し得る。別の実施形態では、生体適合性結合剤は、生体適合性マトリックスの約１５重量パーセント〜約３５重量パーセントの範囲の量で存在し得る。さらなる実施形態では、生体適合性結合剤は、生体適合性マトリックスの約２０重量パーセントの量で存在し得る。別の実施形態では、生体適合性結合剤は、マトリックスの約５０重量パーセントを超える、または約６０重量パーセントを超える量で生体適合性マトリックス中に存在し得る。一実施形態では、生体適合性結合剤は、マトリックスの最大約９９重量パーセントの量で生体適合性マトリックス中に存在し得る。
【０１００】
足場材料および生体適合性結合剤を含む生体適合性マトリックスは、いくつかの実施形態によれば、流動性を有し、成形可能であり、かつ／または押し出し成形可能であり得る。このような実施形態では、生体適合性マトリックスは、ペースト、パテまたは顆粒形の形であり得る。ペーストまたはパテの形の生体適合性マトリックスは、一実施形態では、生体適合性結合剤によって互いに接着している足場材料の粒子を含んでなり得る。
【０１０１】
ペーストまたはパテの形の生体適合性マトリックスは、所望のインプラントの形に成形してもよいし、移植部位の輪郭に成形してもよい。一実施形態では、ペーストまたはパテの形の生体適合性マトリックスは、シリンジまたはカニューレを用いて移植部位に注射してもよい。
【０１０２】
いくつかの実施形態では、ペーストまたはパテの形の生体適合性マトリックスが、移植後に硬化せず、流動性を有し、成形可能な形のままである。別の実施形態では、ペーストまたはパテは移植後に硬化し、それによってマトリックス流動性および成形性を低減し得る。
【０１０３】
足場材料および生体適合性結合剤を含む生体適合性マトリックスは、いくつかの実施形態では、所定の形、例えば、ブロック、球または円柱または任意の所望の形、例えば、型または適用部位によって規定される形で提供され得る。
【０１０４】
足場材料および生体適合性結合剤を含む生体適合性マトリックスは、いくつかの実施形態では、生体吸収性である。生体適合性マトリックスは、このような実施形態では、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の１年以内に再吸収され得る。別の実施形態では、足場材料および生体適合性結合剤を含む生体適合性マトリックスは、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の１、３、６または９ヶ月内に再吸収され得る。いくつかの実施形態では、足場材料および生体適合性結合剤を含む生体適合性マトリックスは、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の１、３または６年以内に再吸収され得る。生体吸収性は、（１）マトリックス材料の性質（すなわち、その化学構成、物理的構造および大きさ）、（２）マトリックスが配置される身体内の位置、（３）使用されるマトリックス材料の量、（４）患者の代謝状態（糖尿病／非糖尿病、骨粗鬆症、喫煙者、高齢、ステロイド使用など）、（５）治療される損傷の程度および／または種類ならびに（６）その他の骨同化、異化および抗異化因子などの、マトリックスの他の、その他の材料の使用に応じて変わる。
β−ＴＣＰおよびコラーゲンを含む生体適合性マトリックス
いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、β−ＴＣＰ足場材料および生体適合性コラーゲン結合剤を含んでなり得る。コラーゲン結合剤との組合せに適したβ−ＴＣＰ足場材料は、本明細書において上記で提供されたものと一致する。
【０１０５】
コラーゲン結合剤は、いくつかの実施形態では、任意の種類のコラーゲン、例えば、Ｉ型、ＩＩ型およびＩＩＩ型コラーゲンを含む。一実施形態では、コラーゲン結合剤は、コラーゲンの混合物、例えば、Ｉ型およびＩＩ型コラーゲンの混合物を含む。その他の実施形態では、コラーゲン結合剤は、生理学的条件下で可溶性である。骨または筋骨格組織中に存在するその他の種類のコラーゲンを、使用してもよい。組換え、合成および天然に存在する形のコラーゲンを本発明において使用してもよい。
【０１０６】
生体適合性マトリックスは、いくつかの実施形態によれば、コラーゲン結合剤で互いに接着している複数のβ−ＴＣＰ粒子を含んでなり得る。いくつかの実施形態では、コラーゲン結合剤と組み合わせるためのβ−ＴＣＰ粒子は、約１μｍ〜約５ｍｍの範囲の平均直径を有する。その他の実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約１ｍｍ〜約２ｍｍ、約１ｍｍ〜約３ｍｍ、約１００μｍ〜約５ｍｍ、約１００μｍ〜約３ｍｍ、約２５０μｍ〜約２ｍｍ、約２５０μｍ〜約７５０μｍ、約２５０μｍ〜約１ｍｍ、約２５０μｍ〜約２ｍｍまたは約２００μｍ〜約３ｍｍの範囲の平均直径を有する。別の実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約１００μｍ〜約３００μｍの範囲の平均直径を有する。いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約７５μｍ〜約３００μｍの範囲の平均直径を有する。いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約２５μｍ未満、約１μｍ未満または約１ｍｍ未満の平均直径を有する。いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約１ｎｍ〜約１μｍの範囲の平均直径を有する。さらなる実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、約５００ｎｍ未満または約２５０ｎｍ未満の平均直径を有する。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子をコラーゲン結合剤によって互いに接着し、多孔性構造を有する生体適合性マトリックスを製造できる。いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスの多孔性構造は、さまざまな直径の多方向の、相互接続している細孔を示す。いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、相互接続している細孔に加え、種々の直径の複数のポケットおよび相互接続していない細孔を含む。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスは、約１μｍ〜約１ｍｍの範囲またはそれを超える直径を有する細孔を含んでなり得る。β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスは、約１００μｍ〜約１ｍｍの範囲の直径を有するマクロ孔、約１０μｍ〜１００μｍの範囲の直径を有するメソ細孔および約１０μｍ未満の直径を有するミクロ細孔を含んでなり得る。
【０１０９】
β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスは、約２５％を超える、または約４０％を超える空隙率を有し得る。別の実施形態では、生体適合性マトリックスは、約５０％を超える、約６５％を超える、約７０％を超える、約７５％を超える、約８０％を超える、または約８５％を超える空隙率を有し得る。さらなる実施形態では、生体適合性マトリックスは、約９０％を超える空隙率を有し得る。いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、マトリックス中への細胞移動を容易にする空隙率を有し得る。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子は、個々に、β−ＴＣＰおよびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスについて本明細書に提供される細孔直径、細孔構造および空隙率のいずれも示す。
【０１１１】
β−ＴＣＰ粒子を含む生体適合性マトリックスは、いくつかの実施形態では、コラーゲン結合剤を、マトリックスの約５重量パーセント〜約５０重量パーセントの範囲の量で含んでなり得る。その他の実施形態では、コラーゲン結合剤は、生体適合性マトリックスの約１０重量パーセント〜約４０重量パーセントの範囲の量で存在し得る。別の実施形態では、コラーゲン結合剤は、生体適合性マトリックスの約１５重量パーセント〜約３５重量パーセントの範囲の量で存在し得る。さらなる実施形態では、コラーゲン結合剤は、生体適合性マトリックスの約２０重量パーセントの量で存在し得る。
【０１１２】
β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスは、いくつかの実施形態によれば、流動性を有し、成形可能であり、かつ／または押し出し成形可能であり得る。このような実施形態では、生体適合性マトリックスは、ペーストまたはパテの形であり得る。ペーストまたはパテは、所望のインプラントの形に成形してもよいし、移植部位の輪郭に成形してもよい。一実施形態では、β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む、ペーストまたはパテまたは顆粒の形の生体適合性マトリックスは、シリンジまたはカニューレを用いて移植部位に注入できる。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む、ペーストまたはパテの形の生体適合性マトリックスは、移植された場合に流動性を有する形態および成形可能な形態を保持し得る。その他の実施形態では、ペーストまたはパテが、移植後に硬化し、それによって、マトリックス流動性および成形性を低減し得る。
【０１１４】
β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスは、いくつかの実施形態では、ブロック、球または円柱などの所定の形で提供され得る。
【０１１５】
β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスは、再吸収され得る。一実施形態では、β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスは、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の１年後に少なくとも７５％再吸収され得る。別の実施形態では、β−ＴＣＰ粒子およびコラーゲン結合剤を含む生体適合性マトリックスは、ｉｎ  ｖｉｖｏ移植の１年後に９０％を超えて再吸収され得る。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦを含む溶液を、生体適合性マトリックス中に配置し、ＯＮＪまたはＯＲＮＪの進行を治療、予防または減速するための組成物を製造することができる。いくつかの実施形態では、骨を治療するために、ＰＤＧＦを含む溶液を生体適合性マトリックス中に配置できる。
生体適合性マトリックス中にＰＤＧＦ溶液を配置すること
本発明は、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するための組成物を製造する方法を提供する。一実施形態では、このような組成物を製造する方法は、ＰＤＧＦを含む溶液を提供することと、生体適合性マトリックスを提供することと、この溶液を生体適合性マトリックス中に配置することとを含む。組み合わせるのに適したＰＤＧＦ溶液および生体適合性マトリックスは、本明細書において上記で記載したものと一致する。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスをＰＤＧＦ溶液中に浸漬することによって、ＰＤＧＦ溶液を生体適合性マトリックス中に配置できる。ＰＤＧＦ溶液は、別の実施形態では、生体適合性マトリックスをＰＤＧＦ溶液とともに注入することによって、生体適合性マトリックス中に配置できる。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦ溶液を注入することは、ＰＤＧＦ溶液をシリンジ中に配置することと、ＰＤＧＦ溶液を生体適合性マトリックス中に放出して生体適合性マトリックスを満たすこととを含んでなり得る。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは、生体適合性マトリックスの細孔中に吸収される。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦは、生体適合性マトリックスの細孔内の表面を含む、生体適合性マトリックスの１以上の表面上に吸着される。
【０１１９】
生体適合性マトリックスは、いくつかの実施形態によれば、ＰＤＧＦ溶液を入れる前にれんが状の塊または円柱などの所定の形であり得る。生体適合性マトリックスは、ＰＤＧＦ溶液を入れた後に、流動性を有し、押し出し成形可能であり、かつ／または注射可能であるペーストまたはパテの形を有し得る。その他の実施形態では、生体適合性マトリックスは、ＰＤＧＦを含む溶液を入れる前に、流動性を有し、押し出し成形可能であり、かつ／または注射可能なペーストまたはパテの形をすでに示す場合もある。
【０１２０】
生物学的に活性な薬剤をさらに含む組成物
本発明の組成物は、いくつかの実施形態によれば、ＰＤＧＦに加えて、１種以上の生物学的に活性な薬剤をさらに含んでなり得る。ＰＤＧＦに加えて、本発明の組成物に組み込むことができる生物学的に活性な薬剤は、有機分子、無機材料、タンパク質、ペプチド、核酸（例えば、遺伝子、遺伝子断片、低分子干渉リボ核酸［ｓｉ−ＲＮＡ］遺伝子調節配列、核転写因子およびアンチセンス分子）、核タンパク質、多糖（例えば、ヘパリン）、糖タンパク質およびリポタンパク質を含んでなり得る。例えば、抗癌剤、抗生物質、鎮痛薬、抗炎症薬、免疫抑制剤、酵素阻害剤、抗ヒスタミン剤、ホルモン、筋弛緩薬、プロスタグランジン、栄養因子、骨誘導タンパク質、増殖因子およびワクチンをはじめとする、本発明の組成物に組み込むことができる生物学的に活性な化合物の限定されない例は、米国特許出願番号第１１／１５９，５３３号（公開番号：２００６００８４６０２）に開示されている。本発明の組成物に組み込むことができる生物学的に活性な化合物として、骨誘導因子、例えば、インスリン様成長因子、繊維芽細胞増殖因子またはその他のＰＤＧＦが挙げられる。その他の実施形態に従って、本発明の組成物に組み込むことができる生物学的に活性な化合物は、骨誘導および骨刺激因子、例えば、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、ＢＭＰミメティクス、カルシトニンまたはカルシトニンミメティクス、スタチン、スタチン誘導体、繊維芽細胞増殖因子、インスリン様成長因子、増殖−分化因子、Ｗｎｔアンタゴニストの小分子または抗体ブロッカー（例えば、スクレロスチン、ＤＫＫ、可溶性Ｗｎｔ受容体）または副甲状腺ホルモンを含むことが好ましい。いくつかの実施形態では、因子として、また、プロテアーゼ阻害剤、ならびに骨吸収を低減する骨粗鬆症治療、例えば、ビスホスホネート、テリパラチド（ｔｅｒｉｐａｒａｄｉｄｅ）、およびＮＦ−ｋＢリガンド（ＲＡＮＫ）リガンドのアクチベーター受容体に対する抗体が挙げられる。
【０１２１】
さらなる生物学的に活性な薬剤の送達のための標準プロトコールおよび投与計画は、当技術分野で公知である。さらなる生物学的に活性な薬剤は、移植部位への薬剤の適当な投与形の送達を可能にする量で本発明の組成物中に導入することができる。ほとんどの場合、投与形は、開業医に公知であり、問題の特定の薬剤に適用される指針を用いて決定される。本発明の組成物に含まれるべく、さらなる生物学的に活性な薬剤の量は、状態の種類および程度、個々の患者の全体的な健康状態、生物学的に活性な薬剤の処方、放出動力学および生体適合性マトリックスの生体吸収性のような変数に応じて変わり得る。標準臨床試験を用いて、任意の特定のさらなる生物学的に活性な薬剤について用量および投与頻度を最適化できる。
【０１２２】
本発明の組成物は、いくつかの実施形態によれば、ＰＤＧＦとともに、自己骨髄、自己血小板抽出物、同種移植片、合成骨マトリックス材料、異種移植片およびそれらの誘導体をはじめとするさらなる移植材料の添加をさらに含んでなり得る。
ＯＮＪまたはＯＲＮＪの進行を治療、予防または減速するために本発明の組成物を投与すること
本組成物は、任意の適当な手段によって投与してよい。一実施形態では、ＰＤＧＦを含有する生体適合性マトリックスを含む組成物の投与は、所望の部位での組成物の直接適用によって起こり得る。別の実施形態では、薬学的に許容される担体中のＰＤＧＦの溶液を含む組成物の投与は、所望の部位での組成物の直接適用によって起こり得る。このような部位として、それだけには限らないが、歯槽構造およびＯＮＪまたはＯＲＮＪによって罹患する任意のその他の骨または軟部組織を含む、上顎骨、下顎骨およびそれらの付属器（ａｄｎｅｘｉａ）が挙げられる。下顎骨では、臼後隆起の前側の部位が所望の部位を構成し得る。例えば、手術野が、ＯＮＪまたはＯＲＮＪの患者の上顎骨または下顎骨中に開いており、壊死部位がデブリードメントされ、準備されると、組成物をシリンジ送達によって、ニードルまたはカニューレによって、スパチュラ、ピンセット、スプーンまたはその他の許容される手段を用いた直接適用によって適用してよい。その他の実施形態では、ＯＮＪまたはＯＲＮＪに弱いと予想される部位が同定されると、この部位を外科的に露出し、組成物を適用してもよく、または下顎骨または上顎骨中の部位を外科的に露出することなく、組成物を皮膚を通ってシリンジおよびニードル注射によって所望の部位の近傍に適用してもよい。その他の実施形態では、組成物を、直接経皮投与によって所望の部位に適用してもよい。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦ含有組成物が、歯科処置と同時に、または歯科処置の直後に投与される。例えば、抜歯などの歯科の外科的処置の危険のある、またこれを受けている患者は、一実施形態では、例えば、歯科抜歯医薬または包帯と同時投与されたＰＤＧＦ含有組成物を有する。ＰＤＧＦ含有組成物のさらに別の例として、ＰＤＧＦ含有組成物が嚢胞腔中に入れられる口腔歯科嚢胞切除術がある。さらに別の例として、歯肉組織が切開され、歯槽および／または歯根間オッセオ−デンタル（ｏｓｓｅｏ−ｄｅｎｔａｌ）術が実施され、ＰＤＧＦ含有組成物が歯周治療包帯と同時投与される歯周処置が挙げられる。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、投与されるＰＤＧＦ含有組成物の量は、例えば、抜歯窩、嚢胞切除術から、または歯周骨手術の際に、外科的に除去された骨容積によって決まる。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦ含有組成物を用いたＯＲＮＪまたはＯＮＪの予防的処置のために、先に記載した臨床徴候および症状に加え、歯根膜の厚さのＸ線写真による測定も考慮される診断基準であり得る。
キット
別の態様では、本発明は、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するのに有用である、生体適合性マトリックスを含む第１の容器と、第２の容器中のＰＤＧＦを含む溶液とを含むキットを提供する。いくつかの実施形態では、溶液は、所定の濃度のＰＤＧＦを含む。別の実施形態では、キットは、容器中に薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦを含む溶液を含んでなり、キットは、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するのに有用である。別の実施形態では、キットは、第１の容器中の薬学的に許容される緩衝液と、ＰＤＧＦを含む第２の容器とを含んでなり、キットは、ＯＮＪまたはＯＲＮＪを治療または予防するのに有用である。ＰＤＧＦの濃度は、治療されている骨折の性質または分類に従って予め決定され得る。キットは、骨足場材料をさらに含む場合もあり、骨足場材料は、生体適合性結合剤をさらに含む場合もある。さらに、キットによって提供される生体適合性マトリックスの量は、治療されている骨の性質または分類に応じて変わり得る。キット中に含まれ得る生体適合性マトリックスは、骨足場材料、骨足場材料および生体適合性結合剤ならびに／またはＤＦＤＢＡまたはＤＢＭなどの移植骨であり得る。いくつかの実施形態では、生体適合性マトリックスは、β−リン酸三カルシウム（β−ＴＣＰ）を含む。一実施形態では、骨足場材料は、β−ＴＣＰなどのリン酸カルシウムを含む。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦ溶液を含有する第２の容器は、シリンジを含む。シリンジは、骨中の骨折の部位などの手術部位に適用するために、生体適合性マトリックス中でのＰＤＧＦ溶液の配置を容易にし得る。キットはまた、その使用のための使用説明書を含み得る。
【０１２６】
以下の実施例は、本発明をさらに例示するために役立ち、しかし、同時に、そのいかなる制限も構成しない。対照的に、本明細書の説明を読んだ後に、本発明の趣旨から逸脱することなく、当業者に思い浮かぶ種々の実施形態、修飾およびそれと同等のものを用いてもよいということは明確に理解されるべきである。
【実施例】
【０１２７】
（実施例１）
ＰＤＧＦの溶液および生体適合性マトリックスを含む組成物の調製
ＰＤＧＦの溶液および生体適合性マトリックスを含む組成物を、以下の手順に従って調製した。
【０１２８】
予め秤量された、β−ＴＣＰおよびコラーゲンを含む生体適合性マトリックスのブロックを得た。β−ＴＣＰは、約１００μｍ〜約３００μｍの範囲の大きさを有する純粋なβ−ＴＣＰ粒子を含むものであった。β−ＴＣＰ粒子は、約２０重量％の可溶性１型ウシコラーゲン結合剤を含んで製剤されていた。このようなβ−ＴＣＰ／コラーゲン生体適合性マトリックスは、Ｋｅｎｓｅｙ  Ｎａｓｈ（Ｅｘｔｏｎ、Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ）から商業的に入手できる。
【０１２９】
ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢを含む溶液を入手した。ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢは、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから、酢酸ナトリウム緩衝液中、１０ｍｇ／ｍｌの保存濃度で（すなわち、ロット番号ＱＡ２２１７）市販されている。ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢは、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｃｈｉｒｏｎ）によって酵母発現系において産生され、米国食品医薬品局によってヒト使用のために承認されている、製剤ＲＥＧＲＡＮＥＸ（登録商標）、（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）およびＧＥＭ２１Ｓ（ＢｉｏＭｉｍｅｔｉｃ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）において利用されるｒｈＰＤＧＦ−ＢＢと同じ製造設備に由来する。このｒｈＰＤＧＦ−ＢＢはまた、欧州連合およびカナダにおいてヒト使用のために承認されている。ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢ溶液を、酢酸ナトリウム緩衝液で０．３ｍｇ／ｍｌに希釈した。ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢ溶液は、本発明の実施形態に従って任意の所望の濃度に希釈してよい。
【０１３０】
約１００ｇ乾重のβ−ＴＣＰ／コラーゲン生体適合性マトリックスに対して、約３ｍｌのｒｈＰＤＧＦ−ＢＢ溶液の比率を用いて組成物を製造した。ｒｈＰＤＧＦ−ＢＢ溶液を、シリンジで生体適合性マトリックス上に放出し、得られた組成物を、骨壊死の部位または骨壊死に弱い部位での適用のための調製において、ブレンドし、成形した。
【０１３１】
（実施例２）
顎の骨壊死の治療
ＰＤＧＦで修正された生体適合性マトリックス、例えば、移植骨の実施方法は、露出した骨の領域を治療するための従来の歯科業をたどる。患者がＯＮＪを示す場合には、患者の徴候および症状の以下の判定基準を評価する：
１）歯根膜の広がりのＸ線撮影による証拠；Ｘ線を通さない腐骨を含むか、含まない、虫に食われた不十分にしか決まらないＸ線透過性；
２）露出した骨の培養によって、アクチノミセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）種が同定され得る；
３）露出した骨および壊死骨を含む粘膜組織が局所的にないことの臨床上の証拠；
４）疼痛は症状であってもなくてもよい。
【０１３２】
記載される徴候および症状を同定した後、ＰＤＧＦを補給した同種移植片のための実施方法は、以下のステップを含む：同種移植片に加えてもよいＰＤＧＦの投与量は、出願において先に記載されており、それだけには限らないが、以下の開示内容を含む。同種移植に適用されるＰＤＧＦ溶液は、最終量が臨床上有効であるのに十分であるという条件で、上記の濃度中であり得る。ＰＤＧＦは、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌまたは約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で溶液中に存在する。ＰＤＧＦは、これらの記載された範囲内の任意の濃度で溶液中に存在し得る。その他の実施形態では、ＰＤＧＦは、以下の濃度のうち任意の１種で溶液中に存在する：約０．０５ｍｇ／ｍｌ；約０．１ｍｇ／ｍｌ；約０．１５ｍｇ／ｍｌ；約０．２ｍｇ／ｍｌ；約０．２５ｍｇ／ｍｌ；約０．３ｍｇ／ｍｌ；約０．３５ｍｇ／ｍｌ；約０．４ｍｇ／ｍｌ；約０．４５ｍｇ／ｍｌ；約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．５５ｍｇ／ｍｌ、約０．６ｍｇ／ｍｌ、約０．６５ｍｇ／ｍｌ、約０．７ｍｇ／ｍｌ；約０．７５ｍｇ／ｍｌ；約０．８ｍｇ／ｍｌ；約０．８５ｍｇ／ｍｌ；約０．９ｍｇ／ｍｌ；約０．９５ｍｇ／ｍｌ；または約１．０ｍｇ／ｍｌ。これらの濃度は、単に、特定の実施形態の例であり、ＰＤＧＦの濃度は、上記の濃度範囲のいずれか内であり得るということは理解されるべきである。
【０１３３】
ＰＤＧＦの種々の最終量を、量が臨床上有効であるという条件で、本発明の同種移植に用いてもよい。使用してよいＰＤＧＦの量として、以下の範囲中の量が挙げられる：約１μｇ〜約５０ｍｇ；約１０μｇ〜約２５ｍｇ；約１００μｇ〜約１０ｍｇ；および約２５０μｇ〜約５ｍｇ。
【０１３４】
デブリードマン後の骨欠損を満たすために、十分な量の、ＰＤＧＦを含有する同種移植片が投与される。この容量は、罹患骨の腐骨摘出術およびデブリードマンの程度に基づいて異なる。手順を以下の文に記載する。局所麻酔を施して、罹患したＯＮＪ部位を麻酔する。軟部組織フラップは緩やかに持ち上がり、下部の壊死骨（すなわち、ＯＮＪ部位）を反映している。壊死骨の直径を測定する。皮質骨の除去を含む、保存的腐骨摘出術を、辺縁出血骨へ、および下位にある歯槽骨中に拡張して実行する。デブリードメントされた皮質骨の周縁部をノギスで測定し、除去された骨の深さを歯周プローブで測定する。データを、患者のカルテに記録する。指定された用量のｒｈＰＤＧＦ−ＢＢ（一実施形態では、０．３ｍｇ／ｍＬ）を、得られた欠損を埋めるのに必要な同種移植片の容積に加え、次いで、これを準備された被移植部中に入れる。部位に送達されるＰＤＧＦの用量は、治療的でなくてはならない。骨の「くぼみ」（腐骨摘出術およびデブリードマン後に残っている欠損）のばらつきの結果として、個々のくぼみに加えることができるＰＤＧＦの量は、同種移植片中に含まれるＰＤＧＦの量は、その部位でのＯＮＪの進行を治療、予防または減速するのに臨床上有効な量であるという条件で、変わり得る。
【０１３５】
十分な粘膜軟部組織が存在する場合には、フラップを引っ張らずに用意して治療されたＯＮＪ部位を覆い、そうでなければ、二次的意図によって非移植部位に肉芽組織が形成されることが許され、これは、口腔中の外皮または粘膜を閉じるのに不十分な能力であり得る場合に、軟部組織または堅組織における肉芽組織充填欠損に関与する。
【０１３６】
十分な粘膜軟部組織が存在しない場合には、吸収性コラーゲン材料を治療された部位上におき、移植材料を含むよう欠損の骨周縁部を越えて２〜３ｍｍ伸ばす。縫合は、移植片封じ込めを最大にするよう行う。
【０１３７】
同種移植片およびＰＤＧＦは、キット中に存在し得る。具体的には、一実施形態では、キットは、同種移植片および０．３ｍｇ／ｍｌのｒｈＰＤＧＦ−ＢＢの溶液を含有するシリンジを含む。同種移植片およびＰＤＧＦ溶液を、同種移植片粒子が十分に飽和されるよう、滅菌ダッペンディッシュまたは手術用ステンレスボウル中で混合する。この時間の間に、ＯＮＪ部位を、手用器具の使用および滅菌生理食塩水での最終洗浄を用いて、場合により、完全にデブリードメントしてもよい。次いで、水分補給した、ＰＤＧＦを含有する同種移植片を入れて骨欠損を埋め、かつ／または粘膜軟部組織フラップを上記のように用意してもよい。
【０１３８】
（実施例３）
ＰＤＧＦの溶液および生体適合性マトリックスを含む組成物の調製
この実施例では、生体適合性マトリックスは、移植骨、ＤＦＤＢＡ、ＦＤＢＡまたはＤＢＭを含む。既存の骨壊死の場合には、使用されるべき同種移植片の量は、骨喪失の程度と関連する。外科医が使用されるべき同種移植片の大きさを決定すると、所望の大きさのＤＦＤＢＡ、ＦＤＢＡまたはＤＢＭ片を得、ＰＤＧＦ溶液を、同種移植片の適用部位で有効である量で同種移植片に適用する。
【０１３９】
同種移植片に適用されるＰＤＧＦ溶液は、最終量が、臨床上有効であるのに十分であるという条件で、上記の濃度中であり得る。ＰＤＧＦは、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌまたは約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で溶液中に存在する。ＰＤＧＦは、これらの記載される範囲内の任意の濃度で溶液中に存在し得る。その他の実施形態では、ＰＤＧＦは、以下の濃度のうち任意の１種で溶液中に存在する：約０．０５ｍｇ／ｍｌ；約０．１ｍｇ／ｍｌ；約０．１５ｍｇ／ｍｌ；約０．２ｍｇ／ｍｌ；約０．２５ｍｇ／ｍｌ；約０．３ｍｇ／ｍｌ；約０．３５ｍｇ／ｍｌ；約０．４ｍｇ／ｍｌ；約０．４５ｍｇ／ｍｌ；約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．５５ｍｇ／ｍｌ、約０．６ｍｇ／ｍｌ、約０．６５ｍｇ／ｍｌ、約０．７ｍｇ／ｍｌ；約０．７５ｍｇ／ｍｌ；約０．８ｍｇ／ｍｌ；約０．８５ｍｇ／ｍｌ；約０．９ｍｇ／ｍｌ；約０．９５ｍｇ／ｍｌ；または約１．０ｍｇ／ｍｌ。これらの濃度は、単に、特定の実施形態の例であり、ＰＤＧＦの濃度は、上記の濃度範囲のいずれか内であり得るということは理解されるべきである。
【０１４０】
ＰＤＧＦの種々の最終量を、量が臨床上有効であるという条件で、本発明の同種移植片に入れてもよい。使用してよいＰＤＧＦの量として、以下の範囲中の量が挙げられる：約１μｇ〜約５０ｍｇ；約１０μｇ〜約２５ｍｇ；約１００μｇ〜約１０ｍｇ；および約２５０μｇ〜約５ｍｇ。
【０１４１】
手術野を同種移植片の適用のために露出すると、死骨または罹患骨を除去し、ＰＤＧＦ溶液を同種移植片に適用し、同種移植片を所望の部位に挿入する。
【０１４２】
（実施例４）
ＯＮＪの期間のある患者のための予防的処置
ＯＮＪの危険のある患者集団として、経口または静脈内ビスホスホネートを投与されている、歯科外科治療、特に、より侵襲的であるか、外傷性であると考えられる処置、例えば、それだけには限らないが、歯科インプラント処置、抜歯および歯周手術を必要とする任意の患者が挙げられる。これらの患者は、ＯＮＪの発生を予防するために治療部位に予防的に、実施例２または３に記載される同種移植片およびＰＤＧＦを投与される。
【０１４３】
（実施例５）
ＯＲＮＪの危険のある患者のための予防的処置
ＯＲＮＪの危険のある患者集団として、下顎骨、上顎骨または周囲組織および骨の放射線治療を受けている任意の患者が挙げられる。これらの患者は、ＯＲＮＪの発生を予防するために顎中の脆弱部位に予防的に、ＰＤＧＦを含有する同種移植片を投与される。組成物は、顎中の脆弱部位または複数の部位への経皮注射によって投与してよい。
【０１４４】
（実施例６）
ＯＮＪの危険のある患者のための予防的処置
ＯＮＪの危険のある患者集団として、経口または静脈内ビスホスホネートを投与されており、歯科外科治療、特に、より侵襲的であるか、外傷性であると考えられる処置、例えば、それだけには限らないが、歯科インプラント処置、抜歯および歯周手術を必要とする任意の患者が挙げられる。これらの患者は、ＯＮＪの発生を予防するために治療部位に予防的に、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの溶液を投与される。
【０１４５】
（実施例７）
ＯＲＮＪの危険のある患者のための予防的処置
ＯＲＮＪの危険のある患者集団として、下顎骨、上顎骨または周囲組織および骨の放射線治療を受けている任意の患者が挙げられる。これらの患者は、ＯＲＮＪの発生を予防するために顎中の脆弱部位に予防的に、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの溶液を投与される。組成物は、顎中の脆弱部位または複数の部位への経皮注射によって適用してよい。
【０１４６】
（実施例８）
顎の骨壊死のための治療
薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの溶液を含む組成物の適用を実施する方法は、露出した骨の領域を治療するための従来の歯科業をたどる。患者がＯＮＪを示す場合には、患者の徴候および症状の以下の判定基準を評価する：
１）歯根膜の広がりの証拠となるＸ線像；Ｘ線を通さない腐骨を含むか含まない、虫に食われた不十分にしか決まらないＸ線透過性；
２）露出した骨の培養によって、アクチノミセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）種が同定され得る；
３）露出した骨および壊死骨を含む粘膜組織が局所的にないことの臨床上の証拠；
４）疼痛は症状であってもなくてもよい。
【０１４７】
記載される徴候および症状を同定した後、薬学的に許容される緩衝液中のＰＤＧＦの溶液を含む組成物の投与のための実施方法は、以下のステップを含む。ＰＤＧＦの投与量は、出願において先に記載されており、それだけには限らないが、以下の開示内容を含む。ＰＤＧＦ組成物は、最終量が臨床上有効であるのに十分であるという条件で、上記の濃度中であり得る。ＰＤＧＦは、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌまたは約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で溶液中に存在する。ＰＤＧＦは、これらの記載された範囲内の任意の濃度で溶液中に存在し得る。その他の実施形態では、ＰＤＧＦは、以下の濃度のうち任意の１種で溶液中に存在する：約０．０５ｍｇ／ｍｌ；約０．１ｍｇ／ｍｌ；約０．１５ｍｇ／ｍｌ；約０．２ｍｇ／ｍｌ；約０．２５ｍｇ／ｍｌ；約０．３ｍｇ／ｍｌ；約０．３５ｍｇ／ｍｌ；約０．４ｍｇ／ｍｌ；約０．４５ｍｇ／ｍｌ；約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．５５ｍｇ／ｍｌ、約０．６ｍｇ／ｍｌ、約０．６５ｍｇ／ｍｌ、約０．７ｍｇ／ｍｌ；約０．７５ｍｇ／ｍｌ；約０．８ｍｇ／ｍｌ；約０．８５ｍｇ／ｍｌ；約０．９ｍｇ／ｍｌ；約０．９５ｍｇ／ｍｌ；または約１．０ｍｇ／ｍｌ。これらの濃度は、単に、特定の実施形態の例であり、ＰＤＧＦの濃度は、上記の濃度範囲のいずれか内であり得るということは理解されるべきである。
【０１４８】
ＰＤＧＦの種々の最終量を、量が臨床上有効であるという条件で、使用してもよい。使用してよいＰＤＧＦの量として、以下の範囲中の量が挙げられる：約１μｇ〜約５０ｍｇ；約１０μｇ〜約２５ｍｇ；約１００μｇ〜約１０ｍｇ；および約２５０μｇ〜約５ｍｇ。
【０１４９】
ＰＤＧＦを含む組成物の臨床上有効な量が、デブリードマン後の骨欠損に投与される。この量は、罹患骨の腐骨摘出術およびデブリードマンの程度に基づいて異なる。手順を以下の文に記載する。局所麻酔を施して、罹患したＯＮＪ部位を麻酔する。軟部組織フラップは緩やかに持ち上がり、下部の壊死骨（すなわち、ＯＮＪ部位）を反映している。壊死骨の直径を測定する。皮質骨の除去を含む、保存的腐骨摘出術を、辺縁出血骨へ、および下位にある歯槽骨中に拡張して実行する。デブリードメントされた皮質骨の周縁部をノギスで測定し、除去された骨の深さを歯周プローブで測定する。データを、患者のカルテに記録する。指定された用量のｒｈＰＤＧＦ−ＢＢ（一実施形態では、０．３ｍｇ／ｍＬ）を、治療的効果を提供するよう部位へ送達する。このような送達はシリンジ適用によってであり得る。骨の「くぼみ」（腐骨摘出術およびデブリードマン後に残っている欠損）のばらつきの結果として、個々のくぼみに加えることができるＰＤＧＦの量は、その部位でのＯＮＪの進行を治療、予防または減速するのに臨床上有効な量であるという条件で、変わり得る。
【０１５０】
十分な粘膜軟部組織が存在する場合には、フラップを引っ張らずに用意して治療されたＯＮＪ部位を覆い、そうでなければ、二次的意図によって被移植部位に肉芽組織が形成されることが許され、これは、口腔中の外皮または粘膜を閉じるのに不十分な能力であり得る場合に、軟部組織または堅組織における肉芽組織充填欠損に関与する。
【０１５１】
十分な粘膜軟部組織が存在しないという場合には、吸収性コラーゲン材料を治療された部位上におき、ＰＤＧＦを含むよう欠損の骨周縁部を越えて２〜３ｍｍ伸ばす。縫合は、移植片封じ込めを最大にするよう行う。
【０１５２】
ＰＤＧＦは、キット中に存在し得る。具体的には、一実施形態では、キットは、０．３ｍｇ／ｍｌのｒｈＰＤＧＦ−ＢＢの溶液を含有するシリンジを含む。別の実施形態では、第１の容器は、ＰＤＧＦを含んでなり、第２の容器は、薬学的に許容される緩衝液を含む。ＰＤＧＦおよび緩衝液を、場合により、第１の容器中またはシリンジ中で混合する。この時間の間に、ＯＮＪ部位を、手用器具の使用および滅菌生理食塩水での最終洗浄を用いて、場合により、完全にデブリードメントしてもよい。次いで、ＰＤＧＦ溶液を入れて、骨欠損を埋め、かつ／または粘膜軟部組織フラップを上記のように用意してもよい。
【０１５３】
上記で引用されるすべての特許、刊行物および要約は、参照によりその全文が本明細書に組み込まれる。前記のものは、本発明の好ましい実施形態にのみ関し、以下の特許請求の範囲において定義される本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、それに多数の修飾または変更を行ってもよいということは理解されるべきである。
【国際調査報告】
2010518946.tif 000002
2010518946.tif 000003
2010518946.tif 000004
2010518946.tif 000005