(57)【要約】発作性夜間血色素尿症又は他の溶血性疾患を、補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物、例えば補体抑制抗体を用いながら治療する。１つの態様において、本発明は、対象における血栓症の発生を低減する方法を提供し、この方法は前記対象における補体を抑制することを含む。特定の実施形態においては、該方法は前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物は、ａ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｂ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｃ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される。
2010509338.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における血栓症の発生を低減する方法であって、該方法が該対象における補体を抑制することを含む、方法。
【請求項２】
前記方法が前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物が、ａ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｂ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｃ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記対象が総顆粒球数の０．１％超の発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）顆粒球クローンを有する、請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記対象が総顆粒球数の１％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する、請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記対象が総顆粒球数の１０％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する、請求項１記載の方法。
【請求項６】
前記対象が総顆粒球数の５０％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する、請求項１記載の方法。
【請求項７】
前記化合物が抗体、可溶性補体抑制化合物、蛋白質、蛋白質フラグメント、ペプチド、小分子、ＲＮＡアプタマー、Ｌ−ＲＮＡアプタマー、シュピーゲルマー、アンチセンス化合物、セリンプロテアーゼ阻害剤、２本鎖ＲＮＡ、短鎖干渉ＲＮＡ、ロックド核酸抑制剤、及びペプチド核酸抑制剤からなる群より選択される、請求項２記載の方法。
【請求項８】
前記化合物がＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプレスタチン、及びＫ７６ＣＯＯＨからなる群より選択される、請求項２記載の方法。
【請求項９】
前記化合物がＣ５ｂ活性を抑制する、請求項２記載の方法。
【請求項１０】
前記化合物がＣ５の切断を抑制する、請求項２記載の方法。
【請求項１１】
前記化合物が終末補体を抑制する、請求項２記載の方法。
【請求項１２】
前記化合物がＣ５ａ活性を抑制するか、又はＣ５ａのその受容体への結合を抑制する、請求項２記載の方法。
【請求項１３】
前記対象がヒトである、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
前記対象が血栓症事象１つ以上の病歴を有する、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物が抗体又は抗体フラグメントである、請求項７記載の方法。
【請求項１６】
前記抗体又は抗体フラグメントがポリクローナル抗体、モノクローナル抗体又は抗体フラグメント、ダイアボディー、キメラ化若しくはキメラ抗体又は抗体フラグメント、ヒト化抗体又は抗体フラグメント、脱免疫化ヒト抗体又は抗体フラグメント、完全なヒト抗体又は抗体フラグメント、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｄ、及びＦ（ａｂ’）２からなる群より選択される、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項１５記載の方法。
【請求項１８】
前記抗体がエクリズマブである、請求項１５記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物が前記対象に長期的に投与される、請求項２記載の方法。
【請求項２０】
前記化合物が前記対象に全身投与される、請求項２記載の方法。
【請求項２１】
前記化合物が前記対象に局所投与される、請求項２記載の方法。
【請求項２２】
前記方法が２５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項１記載の方法。
【請求項２３】
前記方法が５０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項１記載の方法。
【請求項２４】
前記方法が７５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項１記載の方法。
【請求項２５】
前記方法が９０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項１記載の方法。
【請求項２６】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも２５％の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２７】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも５０％の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２８】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも７５％の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項２９】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも９０％の低減をもたらす、請求項１記載の方法。
【請求項３０】
第２の化合物を投与することを更に含み、該第２の化合物が造血を増大させる、請求項２記載の方法。
【請求項３１】
前記第２の化合物がステロイド、免疫抑制物質、抗凝固剤、葉酸、鉄、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＰＥＧ化ＥＰＯ、ＥＰＯ模倣物、Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）、赤血球生成刺激剤、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）及び抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）からなる群より選択される、請求項３０記載の方法。
【請求項３２】
ＥＰＯを抗Ｃ５抗体と共に投与する、請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項３２記載の方法。
【請求項３４】
前記抗体がエクリズマブである、請求項３２記載の方法。
【請求項３５】
抗血栓化合物を投与することをさらに含む、請求項２記載の方法。
【請求項３６】
前記抗血栓化合物が抗凝固剤である、請求項３５記載の方法。
【請求項３７】
前記抗凝固剤を抗Ｃ５抗体と共に投与する、請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
前記抗凝固剤が抗血小板剤である、請求項３６記載の方法。
【請求項３９】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項３７記載の方法。
【請求項４０】
前記抗体がエクリズマブである、請求項３７記載の方法。
【請求項４１】
正常より高値のラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）レベルを有する対象における血栓症の発生を低減する方法であって、該方法が該対象における補体を抑制することを含む、方法。
【請求項４２】
前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物が、ａ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｂ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｃ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される、請求項４１記載の方法。
【請求項４３】
前記対象が正常値の上限より高値のＬＤＨレベルを有する、請求項４１記載の方法。
【請求項４４】
前記対象が正常値の上限の１．５倍以上のＬＤＨレベルを有する、請求項４１記載の方法。
【請求項４５】
前記対象が正常値の上限の２．５倍以上のＬＤＨレベルを有する、請求項４１記載の方法。
【請求項４６】
前記対象が正常値の上限の５倍以上のＬＤＨレベルを有する、請求項４１記載の方法。
【請求項４７】
前記対象が正常値の上限の１０倍以上のＬＤＨレベルを有する、請求項４１記載の方法。
【請求項４８】
前記化合物が抗体、可溶性補体抑制化合物、蛋白質、蛋白質フラグメント、ペプチド、小分子、ＲＮＡアプタマー、Ｌ−ＲＮＡアプタマー、シュピーゲルマー、アンチセンス化合物、セリンプロテアーゼ阻害剤、２本鎖ＲＮＡ、短鎖干渉ＲＮＡ、ロックド核酸抑制剤、及びペプチド核酸抑制剤からなる群より選択される、請求項４２記載の方法。
【請求項４９】
前記化合物がＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプレスタチン、及びＫ７６ＣＯＯＨからなる群より選択される、請求項４２記載の方法。
【請求項５０】
前記化合物がＣ５ｂ活性を抑制する、請求項４２記載の方法。
【請求項５１】
前記化合物がＣ５の切断を抑制する、請求項４２記載の方法。
【請求項５２】
前記化合物が終末補体を抑制する、請求項４２記載の方法。
【請求項５３】
前記化合物がＣ５ｂ活性を抑制するか、又はＣ５ａのその受容体への結合を抑制する、請求項４２記載の方法。
【請求項５４】
前記対象がヒトである、請求項４１記載の方法。
【請求項５５】
前記対象が血栓症事象１つ以上の病歴を有する、請求項４１記載の方法。
【請求項５６】
前記化合物が抗体又は抗体フラグメントである、請求項４２記載の方法。
【請求項５７】
前記抗体又は抗体フラグメントがポリクローナル抗体、モノクローナル抗体又は抗体フラグメント、ダイアボディー、キメラ化若しくはキメラ抗体又は抗体フラグメント、ヒト化抗体又は抗体フラグメント、脱免疫化ヒト抗体又は抗体フラグメント、完全なヒト抗体又は抗体フラグメント、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｄ、及びＦ（ａｂ’）２からなる群より選択される、請求項５６記載の方法。
【請求項５８】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項５６記載の方法。
【請求項５９】
前記抗体がエクリズマブである、請求項５６記載の方法。
【請求項６０】
前記化合物が前記対象に長期的に投与される、請求項４２記載の方法。
【請求項６１】
前記化合物が前記対象に全身投与される、請求項４２記載の方法。
【請求項６２】
前記化合物が前記対象に局所投与される、請求項４２記載の方法。
【請求項６３】
前記方法が２５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項４１記載の方法。
【請求項６４】
前記方法が５０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項４１記載の方法。
【請求項６５】
前記方法が７５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項４１記載の方法。
【請求項６６】
前記方法が９０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項４１記載の方法。
【請求項６７】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも２５％の低減をもたらす、請求項４１記載の方法。
【請求項６８】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも５０％の低減をもたらす、請求項４１記載の方法。
【請求項６９】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも７５％の低減をもたらす、請求項４１記載の方法。
【請求項７０】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも９０％の低減をもたらす、請求項４１記載の方法。
【請求項７１】
第２の化合物を投与することを更に含み、該第２の化合物が造血を増大させる、請求項４２記載の方法。
【請求項７２】
前記第２の化合物がステロイド、免疫抑制物質、抗凝固剤、葉酸、鉄、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＰＥＧ化ＥＰＯ、ＥＰＯ模倣物、Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）、赤血球生成刺激剤、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）及び抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）からなる群より選択される、請求項７１記載の方法。
【請求項７３】
ＥＰＯを抗Ｃ５抗体と共に投与する、請求項７２記載の方法。
【請求項７４】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項７３記載の方法。
【請求項７５】
前記抗体がエクリズマブである、請求項７３記載の方法。
【請求項７６】
抗血栓化合物を投与することをさらに含む、請求項４２記載の方法。
【請求項７７】
前記抗血栓化合物が抗凝固剤である、請求項７６記載の方法。
【請求項７８】
前記抗凝固剤を抗Ｃ５抗体と共に投与する、請求項７７記載の方法。
【請求項７９】
前記抗凝固剤が抗血小板剤である、請求項７７記載の方法。
【請求項８０】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項７８記載の方法。
【請求項８１】
前記抗体がエクリズマブである、請求項７８記載の方法。
【請求項８２】
ＰＮＨ顆粒球クローン及び正常値の上限より高値のＬＤＨレベルを有する対象における血栓症の発生を低減する方法であって、該方法が該対象における補体を抑制することを含む、方法。
【請求項８３】
前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物が、ａ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｂ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｃ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される、請求項８２記載の方法。
【請求項８４】
前記対象が総顆粒球数の０．１％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する、請求項８２記載の方法。
【請求項８５】
前記対象が総顆粒球数の０．１％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する、請求項８２記載の方法。
【請求項８６】
前記対象が総顆粒球数の１％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する、請求項８２記載の方法。
【請求項８７】
前記対象が総顆粒球数の１０％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する、請求項８２記載の方法。
【請求項８８】
前記対象が総顆粒球数の５０％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する、請求項８２記載の方法。
【請求項８９】
前記化合物が抗体、可溶性補体抑制化合物、蛋白質、蛋白質フラグメント、ペプチド、小分子、ＲＮＡアプタマー、Ｌ−ＲＮＡアプタマー、シュピーゲルマー、アンチセンス化合物、セリンプロテアーゼ阻害剤、２本鎖ＲＮＡ、短鎖干渉ＲＮＡ、ロックド核酸抑制剤、及びペプチド核酸抑制剤からなる群より選択される、請求項８３記載の方法。
【請求項９０】
前記化合物がＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプレスタチン、及びＫ７６ＣＯＯＨからなる群より選択される、請求項８３記載の方法。
【請求項９１】
前記化合物がＣ５ｂ活性を抑制する、請求項８３記載の方法。
【請求項９２】
前記化合物がＣ５の切断を抑制する、請求項８３記載の方法。
【請求項９３】
前記化合物が終末補体を抑制する、請求項８３記載の方法。
【請求項９４】
前記化合物がＣ５ｂ活性を抑制するか、又はＣ５ａのその受容体への結合を抑制する、請求項８３記載の方法。
【請求項９５】
前記対象がヒトである、請求項８２記載の方法。
【請求項９６】
前記対象が血栓症事象１つ以上の病歴を有する、請求項８２記載の方法。
【請求項９７】
前記化合物が抗体又は抗体フラグメントである、請求項８９記載の方法。
【請求項９８】
前記抗体又は抗体フラグメントがポリクローナル抗体、モノクローナル抗体又は抗体フラグメント、ダイアボディー、キメラ化若しくはキメラ抗体又は抗体フラグメント、ヒト化抗体又は抗体フラグメント、脱免疫化ヒト抗体又は抗体フラグメント、完全なヒト抗体又は抗体フラグメント、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｄ、及びＦ（ａｂ’）２からなる群より選択される、請求項９７記載の方法。
【請求項９９】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項９７記載の方法。
【請求項１００】
前記抗体がエクリズマブである、請求項９７記載の方法。
【請求項１０１】
前記化合物が前記対象に長期的に投与される、請求項８３記載の方法。
【請求項１０２】
前記化合物が前記対象に全身投与される、請求項８３記載の方法。
【請求項１０３】
前記化合物が前記対象に局所投与される、請求項８３記載の方法。
【請求項１０４】
前記方法が２５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項８２記載の方法。
【請求項１０５】
前記方法が５０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項８２記載の方法。
【請求項１０６】
前記方法が７５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項８２記載の方法。
【請求項１０７】
前記方法が９０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項８２記載の方法。
【請求項１０８】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも２５％の低減をもたらす、請求項８２記載の方法。
【請求項１０９】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも５０％の低減をもたらす、請求項８２記載の方法。
【請求項１１０】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも７５％の低減をもたらす、請求項８２記載の方法。
【請求項１１１】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも９０％の低減をもたらす、請求項８２記載の方法。
【請求項１１２】
第２の化合物を投与することを更に含み、該第２の化合物が造血を増大させる、請求項８３記載の方法。
【請求項１１３】
前記第２の化合物がステロイド、免疫抑制物質、抗凝固剤、葉酸、鉄、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＰＥＧ化ＥＰＯ、ＥＰＯ模倣物、Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）、赤血球生成刺激剤、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）及び抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）からなる群より選択される、請求項１１２記載の方法。
【請求項１１４】
ＥＰＯを抗Ｃ５抗体と共に投与する、請求項１１３記載の方法。
【請求項１１５】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項１１４記載の方法。
【請求項１１６】
前記抗体がエクリズマブである、請求項１１４記載の方法。
【請求項１１７】
抗血栓化合物を投与することをさらに含む、請求項８３記載の方法。
【請求項１１８】
前記抗血栓化合物が抗凝固剤である、請求項１１７記載の方法。
【請求項１１９】
前記抗凝固剤を抗Ｃ５抗体と共に投与する、請求項１１８記載の方法。
【請求項１２０】
前記抗凝固剤が抗血小板剤である、請求項１１８記載の方法。
【請求項１２１】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項１１９記載の方法。
【請求項１２２】
前記抗体がエクリズマブである、請求項１１９記載の方法。
【請求項１２３】
正常値より低値の酸化窒素（ＮＯ）レベルに罹患した対象における血栓症の発生を低減する方法であって、該方法が該対象における補体を抑制することを含む、方法。
【請求項１２４】
前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物が、ｉ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｉｉ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｉｉｉ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択され、前記方法が血清中酸化窒素（ＮＯ）レベルを増大させる、請求項１２３記載の方法。
【請求項１２５】
前記方法が２５％超までＮＯレベルを増大させる、請求項１２３記載の方法。
【請求項１２６】
前記方法が５０％超までＮＯレベルを増大させる、請求項１２３記載の方法。
【請求項１２７】
前記方法が１００％超までＮＯレベルを増大させる、請求項１２３記載の方法。
【請求項１２８】
前記方法が３倍超までＮＯレベルを増大させる、請求項１２３記載の方法。
【請求項１２９】
前記対象がＰＮＨを有する、請求項１２３記載の方法。
【請求項１３０】
前記化合物が抗体、可溶性補体抑制化合物、蛋白質、蛋白質フラグメント、ペプチド、小分子、ＲＮＡアプタマー、Ｌ−ＲＮＡアプタマー、シュピーゲルマー、アンチセンス化合物、セリンプロテアーゼ阻害剤、２本鎖ＲＮＡ、短鎖干渉ＲＮＡ、ロックド核酸抑制剤、及びペプチド核酸抑制剤からなる群より選択される、請求項１２４記載の方法。
【請求項１３１】
前記化合物がＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプレスタチン、及びＫ７６ＣＯＯＨからなる群より選択される、請求項１２４記載の方法。
【請求項１３２】
前記化合物がＣ５ｂ活性を抑制する、請求項１２４記載の方法。
【請求項１３３】
前記化合物がＣ５の切断を抑制する、請求項１２４記載の方法。
【請求項１３４】
前記化合物が終末補体を抑制する、請求項１２４記載の方法。
【請求項１３５】
前記化合物がＣ５ｂ活性を抑制するか、又はＣ５ａのその受容体への結合を抑制する、請求項１２４記載の方法。
【請求項１３６】
前記対象がヒトである、請求項１２３記載の方法。
【請求項１３７】
前記対象が血栓症事象１つ以上の病歴を有する、請求項１２３記載の方法。
【請求項１３８】
前記化合物が抗体又は抗体フラグメントである、請求項１３０記載の方法。
【請求項１３９】
前記抗体又は抗体フラグメントがポリクローナル抗体、モノクローナル抗体又は抗体フラグメント、ダイアボディー、キメラ化若しくはキメラ抗体又は抗体フラグメント、ヒト化抗体又は抗体フラグメント、脱免疫化ヒト抗体又は抗体フラグメント、完全なヒト抗体又は抗体フラグメント、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｄ、及びＦ（ａｂ’）２からなる群より選択される、請求項１３８記載の方法。
【請求項１４０】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項１３８記載の方法。
【請求項１４１】
前記抗体がエクリズマブである、請求項１３８記載の方法。
【請求項１４２】
前記化合物が前記対象に長期的に投与される、請求項１２４記載の方法。
【請求項１４３】
前記化合物が前記対象に全身投与される、請求項１２４記載の方法。
【請求項１４４】
前記化合物が前記対象に局所投与される、請求項１２４記載の方法。
【請求項１４５】
前記方法が２５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項１２３記載の方法。
【請求項１４６】
前記方法が５０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項１２３記載の方法。
【請求項１４７】
前記方法が７５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項１２３記載の方法。
【請求項１４８】
前記方法が９０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する、請求項１２３記載の方法。
【請求項１４９】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも２５％の低減をもたらす、請求項１２３記載の方法。
【請求項１５０】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも５０％の低減をもたらす、請求項１２３記載の方法。
【請求項１５１】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも７５％の低減をもたらす、請求項１２３記載の方法。
【請求項１５２】
前記方法がＬＤＨレベルにおいて少なくとも９０％の低減をもたらす、請求項１２３記載の方法。
【請求項１５３】
第２の化合物を投与することを更に含み、前記第２の化合物が造血を増大させる、請求項１２４記載の方法。
【請求項１５４】
前記第２の化合物がステロイド、免疫抑制物質、抗凝固剤、葉酸、鉄、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＰＥＧ化ＥＰＯ、ＥＰＯ模倣物、Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）、赤血球生成刺激剤、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）及び抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）からなる群より選択される、請求項１５３記載の方法。
【請求項１５５】
ＥＰＯを抗Ｃ５抗体と共に投与する、請求項１５４記載の方法。
【請求項１５６】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項１５５記載の方法。
【請求項１５７】
前記抗体がエクリズマブである、請求項１５５記載の方法。
【請求項１５８】
抗血栓化合物を投与することをさらに含む、請求項１２４記載の方法。
【請求項１５９】
前記抗血栓化合物が抗凝固剤である、請求項１５８記載の方法。
【請求項１６０】
前記抗凝固剤を抗Ｃ５抗体と共に投与する、請求項１５９記載の方法。
【請求項１６１】
前記抗凝固剤が抗血小板剤である、請求項１５９記載の方法。
【請求項１６２】
前記抗体がペキセリツマブである、請求項１６０記載の方法。
【請求項１６３】
前記抗体がエクリズマブである、請求項１６０記載の方法。
【請求項１６４】
溶血性障害を有する対象が血栓症に罹患し易いかどうかを決定する方法であって、該対象のＰＮＨ顆粒球クローンサイズを計測することを含み、該クローンサイズが０．１％超である場合には該対象は血栓症に罹患し易い、方法。
【請求項１６５】
前記クローンサイズが１％超である、請求項１６４記載の方法。
【請求項１６６】
前記クローンサイズが１０％超である、請求項１６４記載の方法。
【請求項１６７】
前記クローンサイズが５０％超である、請求項１６４記載の方法。
【請求項１６８】
対象のＰＮＨ赤血球質量を増大させる方法であって、該方法が該対象における補体を抑制することを含む、方法。
【請求項１６９】
前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物が、ｉ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｉｉ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｉｉｉ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される、請求項１６８記載の方法。
【請求項１７０】
前記対象がＰＮＨ顆粒球クローンを有する、請求項１６８記載の方法。
【請求項１７１】
前記ＰＮＨ顆粒球クローンが総顆粒球数の０．１％超である、請求項１７０記載の方法。
【請求項１７２】
前記ＰＮＨ顆粒球クローンが総顆粒球数の１％超である、請求項１７０記載の方法。
【請求項１７３】
前記ＰＮＨ顆粒球クローンが総顆粒球数の１０％超である、請求項１７０記載の方法。
【請求項１７４】
前記ＰＮＨ顆粒球クローンが総顆粒球数の５０％超である、請求項１７０記載の方法。
【請求項１７５】
前記対象が正常値の上限より高値のＬＤＨレベルを有する、請求項１６８記載の方法。
【請求項１７６】
前記対象が正常値の上限の１．５倍以上のＬＤＨレベルを有する、請求項１７５記載の方法。
【請求項１７７】
前記対象が正常値の上限の２．５倍以上のＬＤＨレベルを有する、請求項１７５記載の方法。
【請求項１７８】
前記対象が正常値の上限の５倍以上のＬＤＨレベルを有する、請求項１７５記載の方法。
【請求項１７９】
前記対象が正常値の上限の１０倍以上のＬＤＨレベルを有する、請求項１７５記載の方法。
【請求項１８０】
対象における溶血性貧血を治療する方法であって、該方法が該対象における補体を抑制することを含む、方法。
【請求項１８１】
前記方法が該対象に化合物を投与することを含み、該化合物が、ｉ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｉｉ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｉｉｉ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択され、該方法が赤血球（ＲＢＣ）質量を増大させる、請求項１８０記載の方法。
【請求項１８２】
ＲＢＣ質量がＲＢＣの絶対数として計測される、請求項１８１記載の方法。
【請求項１８３】
ＲＢＣ質量がＰＮＨのＲＢＣ質量である、請求項１８１記載の方法。
【請求項１８４】
前記方法が１０％超までＲＢＣ質量を増大させる、請求項１８３記載の方法。
【請求項１８５】
前記方法が２５％超までＲＢＣ質量を増大させる、請求項１８３記載の方法。
【請求項１８６】
前記方法が５０％超までＲＢＣ質量を増大させる、請求項１８３記載の方法。
【請求項１８７】
前記方法が１００％超までＲＢＣ質量を増大させる、請求項１８３記載の方法。
【請求項１８８】
前記方法が２倍超までＲＢＣ質量を増大させる、請求項１８３記載の方法。
【請求項１８９】
前記方法が輸血の必要性を低下させる、請求項１８０記載の方法。
【請求項１９０】
前記方法がヘモグロビンレベルを安定化させる、請求項１８０記載の方法。
【請求項１９１】
前記方法がヘモグロビンレベルの上昇をもたらす、請求項１８０記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
この出願は、２００６年１１月８日に出願された、米国出願第１１／５９５，１１８号（この全体の開示は、参考として本明細書に援用される）の利益を主張する。
【０００２】
本開示は補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を投与することにより、溶血性疾患、例えば発作性夜間血色素尿症（「ＰＮＨ」）を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
発作性夜間血色素尿症（「ＰＮＨ」）は赤血球が弱化し、このため正常な赤血球よりも急速に破壊される特殊な血液障害である。ＰＮＨは異常な血球の形成をもたらす骨髄細胞の突然変異に起因する。より具体的には、ＰＮＨは成熟血球の異なる集団を生じさせる造血幹細胞の障害であると考えられる。疾患の根拠は、細胞膜に蛋白質を結合させることを担っているグリコシル−ホスファチジルイノシトール（「ＧＰＩ」）アンカーの合成を不能とする体細胞突然変異であると考えられる。突然変異した遺伝子、ＰＩＧ−Ａ（ホスファチジルイノシトールグリカンクラスＡ）はＸ染色体内に居留し、そして欠失から点突然変異にまで変動する数種の異なる突然変異を有する場合がある。
【０００４】
ＰＮＨは補体媒介破壊に対する感受性をもたらし、そしてこの感受性は細胞膜内に存在する。ＰＮＨ細胞は多くの蛋白質、特に必須補体調節表面蛋白質において欠乏している。これらの補体調節表面蛋白質には、崩壊加速因子（「ＤＡＦ」）又はＣＤ５５及び反応性溶解の膜抑制剤（「ＭＩＲＬ」）又はＤ５９が包含される。
【０００５】
ＰＮＨは溶血性貧血（赤血球の減数）及びヘモグロビン尿症（尿中の過剰のヘモグロビン）を特徴とする。ＰＮＨ罹患個体は発作を有することが知られており、それは暗着色した尿を伴う溶血の赤としてここでは定義する。溶血性貧血は補体成分による赤血球の血管内破壊による。他の知られた症状は嚥下障害、疲労、勃起不全、血栓症、再発性腹痛、肺高血圧、及び全体的に悪化したクオリティーオブライフを包含する。
【０００６】
赤血球の血管内破壊に起因する溶血は、遊離のヘモグロビンの放出を介して局所的及び全身的な酸化窒素（ＮＯ）欠乏をもたらす。遊離のヘモグロビンは非赤血球コンパートメントにおけるＮＯの接触し易さ、及び酸素に対するよりもＮＯに対してヘム部分の親和性が１０６倍高値であることに部分的に起因して、ＮＯのきわめて効率的なスカベンジャーとなっている。血管内溶血の発生は、頻繁にはハプトグロビンを完全に枯渇させるために十分な遊離のヘモグロビンを発生する。このヘモグロビンスカベンジャー蛋白質の許容量をいったん超えると、内因性のＮＯの消費が続いて起こる。例えば、ＬＤＨレベルが日常的に正常範囲の上限を超過し、そして一般的にはその正常レベルの２〜３倍のレベルに達しているＰＮＨのような血管内溶血の状況においては、遊離のヘモグロビンは０．８〜１．６ｇ／Ｌの濃度を達成していると考えられる。ハプトグロビンはハプトグロビンのアロタイプに応じてヘモグロビン０．７〜１．５ｇ／Ｌ程度に結合できるのみであるため、遊離ヘモグロビンの大過剰が発生する。腎近位細管によるヘモグロビンの再吸収の許容量を超えると、ヘモグロビン尿症が起こる。血管内溶血の間の遊離のヘモグロビンの放出はＮＯの過剰な消費と、その後の増強した平滑筋収縮、血管収縮、及び血小板の活性化及び凝集をもたらす。ヘモグロビンによるＮＯスカベンジングを伴ったＰＮＨ関連の病的状態は腹痛、勃起不全、食道痙攣、及び血栓症を包含する。
【０００７】
溶血の研究室における評価は通常は血液学的、血清学的、及び尿試験を包含する。血液学的試験は赤血球（ＲＢＣ）の形態学的な異常を調べる血液スミアの検査（因果関係を調べるため）及び全血における網状赤血球の計測（ＲＢＣ損失に関する骨髄の補償を調べるため）を包含する。血清学的試験はラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ；広範に実施）、及び遊離ヘモグロビン（広範には実施されない）を溶血の直接の尺度として包含する。ＬＤＨレベルは溶血を有する患者の診断及びモニタリングにおいて有用であることができる。他の血清学的試験はビリルビン又はハプトグロビンをそれぞれ分解産物又はスカベンジング予備分の尺度として包含する。尿試験はビリルビン、ヘモジデリン、及び遊離ヘモグロビンを包含し、そして一般的には、溶血の日常的なモニタリングよりはむしろ、溶血の肉眼的重症度を計測し及び溶血の血管内対血管外病因の区別をするために用いられる。更に又、ＲＢＣ数、ＲＢＣ（即ち血球結合）ヘモグロビン、及びヘマトクリットは一般的には、溶血活性そのものの尺度としてよりはむしろ、何れかを伴った貧血の程度を調べるために実施される。
【０００８】
ステロイドは溶血性疾患の治療法として使用されており、そして一部の患者においては溶血を抑制する場合に有効であるが、ステロイド治療の長期使用は多くの負の副作用を有している。罹患患者は輸血を必要とする場合があり、それは感染症の危険を伴っている。抗凝固剤療法も又、血塊形成を予防するために必要である場合があり、そして出血をもたらす場合がある。骨髄移植はＰＮＨを治癒させることが知られているが、骨髄の一致は発見することがきわめて困難である場合が多く、そして死亡率はこの操作法では高値である。
【０００９】
ＰＮＨのような溶血性疾患及びその作用を安全かつ信頼性高く除去及び／又は制限する治療法を提供することは好都合である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
１つの態様において、本出願は、対象における血栓症の発生を低減する方法であって、前記方法が前記対象における補体を抑制することを含む方法を提供する。特定の実施形態においては、該方法は前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物は、ａ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｂ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｃ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される。
【００１１】
特定の実施形態においては、該対象は総顆粒球数の０．１％超の発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）顆粒球クローンを有する。特定の実施形態においては、該対象は総顆粒球数の１％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する。特定の実施形態においては、該対象は総顆粒球数の１０％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する。特定の実施形態においては、該対象は総顆粒球数の５０％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する。
【００１２】
特定の実施形態においては、該化合物は抗体、可溶性補体抑制化合物、蛋白質、蛋白質フラグメント、ペプチド、小分子、ＲＮＡアプタマー、Ｌ−ＲＮＡアプタマー、シュピーゲルマー（ｓｐｉｅｇｅｌｍｅｒ）、アンチセンス化合物、セリンプロテアーゼ阻害剤、２本鎖ＲＮＡ、短鎖干渉ＲＮＡ、ロックド核酸（ｌｏｃｋｅｄ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）抑制剤、及びペプチド核酸抑制剤からなる群より選択される。
【００１３】
特定の実施形態においては、該化合物はＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプレスタチン、及びＫ７６ＣＯＯＨからなる群より選択される。
【００１４】
特定の実施形態においては、該化合物はＣ５ｂ活性を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物はＣ５の切断を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物は終末補体を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物はＣ５ｂ活性を抑制するか、又はＣ５ａのその受容体への結合を抑制する。
【００１５】
特定の実施形態においては、該対象はヒトである。特定の実施形態においては、該対象は血栓症事象１つ以上の病歴を有する。
【００１６】
特定の実施形態においては、該化合物は抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態においては、該抗体又は抗体フラグメントはポリクローナル抗体、モノクローナル抗体又は抗体フラグメント、ダイアボディー（ｄｉａｂｏｄｙ）、キメラ化若しくはキメラ抗体又は抗体フラグメント、ヒト化抗体又は抗体フラグメント、脱免疫化ヒト抗体（ｄｅｉｍｍｕｎｉｚｅｄ  ｈｕｍａｎ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）又は抗体フラグメント、完全なヒト抗体又は抗体フラグメント、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｄ、及びＦ（ａｂ’）２からなる群より選択される。
【００１７】
特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００１８】
特定の実施形態においては、該化合物は前記対象に長期的に投与される。特定の実施形態においては、該化合物は前記対象に全身投与される。特定の実施形態においては、該化合物は前記対象に局所投与される。
【００１９】
特定の実施形態においては、該方法は２５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は５０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は７５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は９０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。
【００２０】
特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも２５％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも５０％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも７５％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも９０％の低減をもたらす。
【００２１】
特定の実施形態においては、該方法は第２の化合物を投与することを更に含み、前記第２の化合物は造血を増大させる。特定の実施形態においては、該第２の化合物はステロイド、免疫抑制物質、抗凝固剤、葉酸、鉄、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＰＥＧ化ＥＰＯ、ＥＰＯ模倣物、Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）、赤血球生成刺激剤、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）及び抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）からなる群より選択される。特定の実施形態においては、  ＥＰＯを抗Ｃ５抗体と共に投与する。特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００２２】
特定の実施形態においては、該方法は抗血栓化合物を投与することを更に含む。特定の実施形態においては、抗血栓化合物は抗凝固剤である。特定の実施形態においては、該抗凝固剤を抗Ｃ５抗体と共に投与する。特定の実施形態においては、該抗凝固剤は抗血小板剤である。特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００２３】
別の態様において、本発明は、正常より高値のラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）レベルを有する対象における血栓症の発生を低減する方法であって、前記方法は前記対象における補体を抑制することを含む方法を提供する。
【００２４】
特定の実施形態においては、該方法は前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物は、ａ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｂ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｃ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される。
【００２５】
特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限より高値のＬＤＨレベルを有する。特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限の１．５倍以上のＬＤＨレベルを有する。特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限の２．５倍以上のＬＤＨレベルを有する。特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限の５倍以上のＬＤＨレベルを有する。特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限の１０倍以上のＬＤＨレベルを有する。
【００２６】
特定の実施形態においては、該化合物は抗体、可溶性補体抑制化合物、蛋白質、蛋白質フラグメント、ペプチド、小分子、ＲＮＡアプタマー、Ｌ−ＲＮＡアプタマー、シュピーゲルマー、アンチセンス化合物、セリンプロテアーゼ阻害剤、２本鎖ＲＮＡ、短鎖干渉ＲＮＡ、ロックド核酸抑制剤、及びペプチド核酸抑制剤からなる群より選択される。
【００２７】
特定の実施形態においては、該化合物はＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプレスタチン、及びＫ７６ＣＯＯＨからなる群より選択される。
【００２８】
特定の実施形態においては、該化合物はＣ５ｂ活性を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物はＣ５の切断を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物は終末補体を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物はＣ５ｂ活性を抑制するか、又はＣ５ａのその受容体への結合を抑制する。
【００２９】
特定の実施形態においては、該対象はヒトである。特定の実施形態においては、該対象は血栓症事象１つ以上の病歴を有する。
【００３０】
特定の実施形態においては、該化合物は抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態においては、該抗体又は抗体フラグメントはポリクローナル抗体、モノクローナル抗体又は抗体フラグメント、ダイアボディー、キメラ化若しくはキメラ抗体又は抗体フラグメント、ヒト化抗体又は抗体フラグメント、脱免疫化ヒト抗体又は抗体フラグメント、完全なヒト抗体又は抗体フラグメント、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｄ、及びＦ（ａｂ’）２からなる群より選択される。
【００３１】
特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００３２】
特定の実施形態においては、該化合物は前記対象に長期的に投与される。特定の実施形態においては、該化合物は前記対象に全身投与される。特定の実施形態においては、前記化合物は前記対象に局所投与される。
【００３３】
特定の実施形態においては、該方法は２５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は５０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は７５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は９０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。
【００３４】
特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも２５％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも５０％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも７５％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも９０％の低減をもたらす。
【００３５】
特定の実施形態においては、該方法は第２の化合物を投与することを更に含み、前記第２の化合物は造血を増大させる。特定の実施形態においては、前記第２の化合物はステロイド、免疫抑制物質、抗凝固剤、葉酸、鉄、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＰＥＧ化ＥＰＯ、ＥＰＯ模倣物、Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）、赤血球生成刺激剤、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）及び抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）からなる群より選択される。特定の実施形態においては、  ＥＰＯを抗Ｃ５抗体と共に投与する。特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００３６】
特定の実施形態においては、該方法は抗血栓化合物を投与することを更に含む。特定の実施形態においては、該抗血栓化合物は抗凝固剤である。特定の実施形態においては、該抗凝固剤を抗Ｃ５抗体と共に投与する。特定の実施形態においては、該抗凝固剤は抗血小板剤である。特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００３７】
更に別の態様において、本発明はＰＮＨ顆粒球クローン及び正常値の上限より高値のＬＤＨレベルを有する対象における血栓症の発生を低減する方法であって、前記方法が前記対象における補体を抑制することを含む方法を提供する。特定の実施形態においては、該方法は前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物は、ａ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｂ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｃ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される。
【００３８】
特定の実施形態においては、該対象は総顆粒球数の０．１％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する。特定の実施形態においては、該対象は総顆粒球数の０．１％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する。特定の実施形態においては、該対象は総顆粒球数の１％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する。特定の実施形態においては、該対象は総顆粒球数の１０％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する。特定の実施形態においては、該対象は総顆粒球数の５０％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する。
【００３９】
特定の実施形態においては、該化合物は抗体、可溶性補体抑制化合物、蛋白質、蛋白質フラグメント、ペプチド、小分子、ＲＮＡアプタマー、Ｌ−ＲＮＡアプタマー、シュピーゲルマー、アンチセンス化合物、セリンプロテアーゼ阻害剤、２本鎖ＲＮＡ、短鎖干渉ＲＮＡ、ロックド核酸抑制剤、及びペプチド核酸抑制剤からなる群より選択される。
【００４０】
特定の実施形態においては、該化合物はＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプレスタチン、及びＫ７６ＣＯＯＨからなる群より選択される。
【００４１】
特定の実施形態においては、該化合物はＣ５ｂ活性を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物はＣ５の切断を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物は終末補体を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物はＣ５ｂ活性を抑制するか、又はＣ５ａのその受容体への結合を抑制する。
【００４２】
特定の実施形態においては、該対象はヒトである。特定の実施形態においては、該対象は血栓症事象１つ以上の病歴を有する。
【００４３】
特定の実施形態においては、該化合物は抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態においては、該抗体又は抗体フラグメントはポリクローナル抗体、モノクローナル抗体又は抗体フラグメント、ダイアボディー、キメラ化若しくはキメラ抗体又は抗体フラグメント、ヒト化抗体又は抗体フラグメント、脱免疫化ヒト抗体又は抗体フラグメント、完全なヒト抗体又は抗体フラグメント、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｄ、及びＦ（ａｂ’）２からなる群より選択される。
【００４４】
特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００４５】
特定の実施形態においては、該化合物は前記対象に長期的に投与される。特定の実施形態においては、該化合物は前記対象に全身投与される。特定の実施形態においては、該化合物は前記対象に局所投与される。
【００４６】
特定の実施形態においては、該方法は２５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は５０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は７５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は９０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。
【００４７】
特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも２５％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも５０％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも７５％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも９０％の低減をもたらす。
【００４８】
特定の実施形態においては、該方法は第２の化合物を投与することを更に含み、前記第２の化合物は造血を増大させる。特定の実施形態においては、該第２の化合物はステロイド、免疫抑制物質、抗凝固剤、葉酸、鉄、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＰＥＧ化ＥＰＯ、ＥＰＯ模倣物、Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）、赤血球生成刺激剤、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）及び抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）からなる群より選択される。特定の実施形態においては、  ＥＰＯを抗Ｃ５抗体と共に投与する。特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００４９】
特定の実施形態においては、該方法は抗血栓化合物を投与することを更に含む。特定の実施形態においては、該抗血栓化合物は抗凝固剤である。特定の実施形態においては、該抗凝固剤を抗Ｃ５抗体と共に投与する。特定の実施形態においては、該抗凝固剤は抗血小板剤である。特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００５０】
又更に別の態様において、本出願は正常値より低値の酸化窒素（ＮＯ）レベルに罹患した対象における血栓症の発生を低減する方法であって、前記方法が前記対象における補体を抑制することを含む方法を提供する。特定の実施形態においては、該方法は前記対象に化合物を投与することを含み、該化合物は、ｉ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｉｉ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｉｉｉ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択され、該方法が血清中酸化窒素（ＮＯ）レベルを増大させる。
【００５１】
特定の実施形態においては、該方法は２５％超までＮＯレベルを増大させる。特定の実施形態においては、該方法は５０％超までＮＯレベルを増大させる。特定の実施形態においては、該方法は１００％超までＮＯレベルを増大させる。特定の実施形態においては、該方法は３倍超までＮＯレベルを増大させる。
【００５２】
特定の実施形態においては、該対象はＰＮＨを有する。
【００５３】
特定の実施形態においては、該化合物は抗体、可溶性補体抑制化合物、蛋白質、蛋白質フラグメント、ペプチド、小分子、ＲＮＡアプタマー、Ｌ−ＲＮＡアプタマー、シュピーゲルマー、アンチセンス化合物、セリンプロテアーゼ阻害剤、２本鎖ＲＮＡ、短鎖干渉ＲＮＡ、ロックド核酸抑制剤、及びペプチド核酸抑制剤からなる群より選択される。
【００５４】
特定の実施形態においては、該化合物はＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプレスタチン、及びＫ７６ＣＯＯＨからなる群より選択される。
【００５５】
特定の実施形態においては、該化合物はＣ５ｂ活性を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物はＣ５の切断を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物は終末補体を抑制する。特定の実施形態においては、該化合物はＣ５ｂ活性を抑制するか、又はＣ５ａのその受容体への結合を抑制する。
【００５６】
特定の実施形態においては、該対象はヒトである。特定の実施形態においては、該対象は血栓症事象１つ以上の病歴を有する。
【００５７】
特定の実施形態においては、該化合物は抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態においては、該抗体又は抗体フラグメントはポリクローナル抗体、モノクローナル抗体又は抗体フラグメント、ダイアボディー、キメラ化若しくはキメラ抗体又は抗体フラグメント、ヒト化抗体又は抗体フラグメント、脱免疫化ヒト抗体又は抗体フラグメント、完全なヒト抗体又は抗体フラグメント、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆｄ、及びＦ（ａｂ’）２からなる群より選択される。
【００５８】
特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００５９】
特定の実施形態においては、該化合物は対象に長期的に投与される。特定の実施形態においては、該化合物は対象に全身投与される。特定の実施形態においては、該化合物は対象に局所投与される。
【００６０】
特定の実施形態においては、該方法は２５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は５０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は７５％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。特定の実施形態においては、該方法は９０％超まで血栓塞栓症の比率を低減する。
【００６１】
特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも２５％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも５０％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも７５％の低減をもたらす。特定の実施形態においては、対象における該方法はＬＤＨレベルにおいて少なくとも９０％の低減をもたらす。
【００６２】
特定の実施形態においては、該方法は第２の化合物を投与することを更に含み、前記第２の化合物は造血を増大させる。特定の実施形態においては、該第２の化合物はステロイド、免疫抑制物質、抗凝固剤、葉酸、鉄、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＰＥＧ化ＥＰＯ、ＥＰＯ模倣物、Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）、赤血球生成刺激剤、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）及び抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）からなる群より選択される。特定の実施形態においては、  ＥＰＯを抗Ｃ５抗体と共に投与する。特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００６３】
特定の実施形態においては、該方法は抗血栓化合物を投与することを更に含む。特定の実施形態においては、該抗血栓化合物は抗凝固剤である。特定の実施形態においては、該抗凝固剤を抗Ｃ５抗体と共に投与する。特定の実施形態においては、該抗凝固剤は抗血小板剤である。特定の実施形態においては、該抗体はペキセリツマブである。特定の実施形態においては、該抗体はエクリズマブである。
【００６４】
別の態様において、本出願は、溶血性障害を有する対象のＰＮＨ顆粒球クローンサイズを計測することを含む前記対象が血栓症に罹患し易いかどうかを決定する方法であって、クローンサイズが０．１％超である場合には前記対象は血栓症に罹患し易い、上記方法を提供する。特定の実施形態においては、該クローンサイズは１％超である。特定の実施形態においては、該クローンサイズは１０％超である。特定の実施形態においては、該クローンサイズは５０％超である。
【００６５】
更に別の態様においては、本出願は、対象のＰＮＨ赤血球質量（ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌ  ｍａｓｓ）を増大させる方法であって、前記方法が前記対象における補体を抑制することを含む方法を提供する。特定の実施形態においては、該方法は前記対象に化合物を投与することを含み、化合物は、ｉ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｉｉ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｉｉｉ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される。
【００６６】
特定の実施形態においては、該対象はＰＮＨ顆粒球クローンを有する。特定の実施形態においては、該ＰＮＨ顆粒球クローンは総顆粒球数の０．１％超である。特定の実施形態においては、該ＰＮＨ顆粒球クローンは総顆粒球数の１％超である。特定の実施形態においては、該ＰＮＨ顆粒球クローンは総顆粒球数の１０％超である。特定の実施形態においては、該ＰＮＨ顆粒球クローンは総顆粒球数の５０％超である。
【００６７】
特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限より高値のＬＤＨレベルを有する。特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限の１．５倍以上のＬＤＨレベルを有する。特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限の２．５倍以上のＬＤＨレベルを有する。特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限の５倍以上のＬＤＨレベルを有する。特定の実施形態においては、該対象は正常値の上限の１０倍以上のＬＤＨレベルを有する。
【００６８】
更に別の態様において、本出願は対象における溶血性貧血を治療する方法であって、前記方法が前記対象における補体を抑制することを含む方法を提供する。特定の実施形態においては、該方法は該対象に化合物を投与することを含み、該化合物は、ｉ）補体成分１つ以上に結合する化合物、ｉｉ）補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及びｉｉｉ）補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択され、前記方法が赤血球（ＲＢＣ）質量を増大させる。
【００６９】
特定の実施形態においては、該ＲＢＣ質量はＲＢＣの絶対数として計測される。特定の実施形態においては、該ＲＢＣ質量はＰＮＨのＲＢＣ質量である。特定の実施形態においては、該方法は１０％超までＲＢＣ質量を増大させる。特定の実施形態においては、該方法は２５％超までＲＢＣ質量を増大させる。特定の実施形態においては、該方法は５０％超までＲＢＣ質量を増大させる。特定の実施形態においては、該方法は１００％超までＲＢＣ質量を増大させる。特定の実施形態においては、該方法は２倍超までＲＢＣ質量を増大させる。
【００７０】
特定の実施形態においては、該方法は輸血の必要性を低下させる。
【００７１】
特定の実施形態においては、該方法はヘモグロビンレベルを安定化させる。
【００７２】
特定の実施形態においては、該方法はヘモグロビンレベルの上昇をもたらす。
【００７３】
本出願は上記した態様及び実施形態の何れかの組み合わせを意図する。
【図面の簡単な説明】
【００７４】
【図１Ａ】図１Ａは、抗Ｃ５抗体を用いたＰＮＨ患者の治療の間に計測した溶血の生化学的パラメーターを報告したものである。
【図１Ｂ】図１Ｂは、ラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）レベルに対する抗Ｃ５抗体を用いた治療の効果をグラフにより示したものである。
【図２】図２は、ＰＮＨ患者におけるヘモグロビン尿症の発作の発生率をモニタリングするために考案された尿色スケールを示す。
【図３】図３は、患者の発作率に対するエクリズマブ治療の効果を治療前の率と比較したグラフである。
【図４】図４は、補体を完全にブロックすることに適する溶血、症状及び薬力学に対する本発明の迅速な正の効果を反映した、ＰＮＨ患者の尿試料及びヘモグロビン尿症、嚥下障害、ＬＤＨ、ＡＳＴ、薬物動態（ＰＫ）及び薬力学（ＰＤ）を示す。
【図５】図５は、経時的なヘモグロビン尿症に対する抗Ｃ５抗体投薬スケジュールの効果をグラフにより示したものである。
【図６Ａ】図６ａ及び６ｂは、抗Ｃ５抗体を用いた治療の前及び治療中における、月当たり患者当たりに必要な輸血単位の数量を比較したグラフであり；図６ａは血球減少患者を示し；そして図６ｂは非血球減少患者を示す。
【図６Ｂ】図６ａ及び６ｂは、抗Ｃ５抗体を用いた治療の前及び治療中における、月当たり患者当たりに必要な輸血単位の数量を比較したグラフであり；図６ａは血球減少患者を示し；そして図６ｂは非血球減少患者を示す。
【図７】図７は、抗Ｃ５抗体及びエリスロポエチン（ＥＰＯ）を投与することによる血小板減少症患者への対処を示す。
【図８】図８は、Ｃ５抗体の薬力学をグラフにより示したものである。
【図９】図９は、クオリティオブライフの問題を意図した抗Ｃ５抗体用法の間に実施した欧州癌研究治療機構（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ）のアンケート（「ＥＯＲＴＣ  ＱＬＣ−Ｃ３０」）の結果のチャートである。
【図１０】図１０は、ＰＮＨに関連した有害症状に対する抗Ｃ５抗体治療の効果を示すチャートである。
【図１１】図１１は、プラセボと比較した場合のエクリズマブを用いた治療の間のＰＮＨのＲＢＣ質量の変化を示す。
【図１２】図１２は、ＰＮＨＩＩＩ型のＲＢＣ質量及び輸血の必要性に対するエクリズマブ及び組み換えヒトエリスロポエチンの効果を示す。ひし形はＰＮＨＩＩＩ型のＲＢＣ数を示し、そして黒色のバーは輸血された充填赤血球（ＰＲＢＣ）単位の数量を示す。ｘ軸は日時を示す。
【図１３】図１３は、エクリズマブ治療の間、及びプラセボ対照に関するＦＡＣＩＴ−疲労評点の変化を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００７５】
本開示は哺乳類における発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）及び他の溶血性疾患を治療する方法に関する。特に、本明細書に記載した溶血性疾患を治療する方法では、補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を使用する。本発明の方法は意外な結果をもたらすことがわかった。例えば、補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物の投与により、溶血が急速に終結し、ＬＤＨ及びヘモグロビン尿症は治療直後に有意に低減した。更に又、溶血患者は赤血球の１２０日の生活環を遙かに超過した延長期間（１２か月以上）に渡り、輸血に対して低依存性となるか、輸血非依存性となることができる。更に又、ＩＩＩ型赤血球数は赤血球溶解の他の機序の中央において劇的に増大することができる（非補体媒介性、及び／又は早期補体成分媒介性、例えばＣｂ３）。意外な結果の別の例は種々の症状が消散していることであり、ＮＯの血清中レベルが赤血球溶解の他の機序の存在下であっても十分増大していることを示している。これら、及び本明細書に記載した他の結果は、予期されなかったものであり、そして溶血性疾患の以前の治療からは予測できないことである。
【００７６】
補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする何れかの化合物を本発明の方法において使用できる。特に有用なそのような化合物の特定のクラスはヒト補体成分に特異的な抗体、特に抗Ｃ５抗体を包含する。抗Ｃ５抗体は補体カスケードを抑制し、最終的には終末補体複合体Ｃ５ｂ−９による赤血球（ＲＢＣ）溶解を予防する。ＲＢＣの溶解を抑制及び／又は低減することにより、ＰＮＨ及び他の溶血性疾患の作用（ヘモグロビン尿症、貧血、嚥下障害、疲労、勃起不全、再発性腹痛及び血栓症のような症状を包含）が排除又は低下される。
【００７７】
別の実施形態においては、蛋白質ＣＤ５５及びＣＤ５９の可溶性形態を、単独又は相互に組み合わせて対象に投与することにより、補体カスケードをその代替経路において抑制することができる。ＣＤ５５はＣ３のレベルで抑制され、これにより、カスケードのそれ以上の進行を予防する。ＣＤ５９は膜攻撃複合体を形成するようにＣ５ｂ−８複合体がＣ９と複合体化することを抑制する（後述の考察を参照）。
【００７８】
補体系は細菌及びウィルスの病原体の侵入に対抗して防御するために身体の他の免疫系と連携して作用する。血漿蛋白質及び膜コファクターの複雑な収集物として観察されている補体カスケードに関与する蛋白質少なくとも２５種が存在する。補体成分は、一連の内因性ではあるが厳密な酵素切断及び膜結合事象において相互作用することにより、その免疫防御機能を達成する。その結果として生じる補体カスケードはオプソニン性、免疫調節性、及び溶解性の機能を有する生成物の産生をもたらす。補体活性化に関連する生物学的活性の簡潔な要約は、例えばＴｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ第１６版に記載されている。
【００７９】
補体カスケードは古典的経路、代替経路、又はレクチン経路を介して進行する。これらの経路は多くの成分を共有しており、そしてそれらはそれらの初期の工程においては異なるものの、それらは標的細胞の活性化及び破壊を担っている同じ「終末補体」成分（Ｃ５〜Ｃ９）に収束して共有している。古典的な補体経路は、典型的には標的細胞上の抗原性部位を抗体が認識してそれに結合することにより開始される。代替経路は通常は抗体非依存性であり、そして病原体表面上の特定の分子により開始されることができる。更に又、レクチン経路は典型的には高マンノース基質へのマンノース結合レクチン（ＭＢＬ）の結合と共に開始される。これらの経路は、補体成分Ｃ３が活性なプロテアーゼにより切断されてＣ３ａ及びＣ３ｂを形成する地点において収束している。
Ｃ３ａはアナフィラトキシンである（後述の考察参照）。Ｃ３ｂは細菌及び他の細胞に、そして特定のウィルス及び免疫複合体に結合し、そして循環系からの除去のためにそれをタグ付けする。この役割におけるＣ３ｂはオプソニンとして知られている、Ｃ３ｂのオプソニン機能は一般的に補体系の最も重要な抗感染作用であると考えられている。Ｃ３ｂ機能をブロックする遺伝子的患部を有する患者は、広範な種類の病原性生物による感染に対して脆弱であるのに対し、補体カスケード順路のより後期において患部を有する患者、即ち、Ｃ５機能をブロックする患部を有する患者はナイセリアの感染に対してのみより脆弱であり、そしてその後は幾分のみより脆弱であることが分かっている（Ｆｅａｒｏｎ，Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２ｎｄ  Ｅｄ．Ｆａｎｔａ  ａｎｄ  Ｍｉｎａｋｅｒ，ｅｄｓ．Ｂｒｉｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｏｍｅｎ’ｓ  ａｎｄ  Ｂｅｔｈ  Ｉｓｒａｅｌ  Ｈｏｓｐｉｔａｌｓ．１９８３）。
【００８０】
Ｃ３ｂは又、各経路に独特の他の成分との複合体を形成することにより、古典的又は代替のＣ５コンバターゼを形成し、これがＣ５をＣ５ａ及びＣ５ｂに分解する。即ちＣ３は、それが３つの活性化経路全てにとって必須であることから、補体反応順路において中枢的な蛋白質とみなされている（Ｗｕｒｚｎｅｒら、Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ｉｎｆｌａｍｍ．１９９１，８：３２８−３４０）。Ｃ３ｂのこの特性は血清中のプロテアーゼ第Ｉ因子により調節され、これはＣ３ｂに対して効果し、ｉＣ３ｂ（不活性Ｃ３ｂ）を産生する。オプソニンとしてなお機能性であるものの、ｉＣ３ｂは活性なＣ５コンバターゼを形成できない。
【００８１】
プロＣ５前駆体はアミノ酸６５５及び６５９の後で切断され、アミノ末端フラグメントとしてのベータ鎖（配列のアミノ酸残基＋１〜６５５）及びカルボキシル末端フラグメントとしてのアルファ鎖（配列のアミノ酸残基６６０〜１６５８）を生じさせ、２者の間で４アミノ酸（配列のアミノ酸残基６５６〜６５９）が欠失する。Ｃ５はグリコシル化され、その質量の約１．５〜３パーセントは炭水化物に帰属するものである。成熟Ｃ５は６５５アミノ酸の７５ｋＤａのベータ鎖にジスルフィド結合した９９９アミノ酸の１１４ｋＤａのアルファ鎖のヘテロ２量体である。Ｃ５は正常血清中は概ね７５μｇ／ｍｌ（０．４μＭ）で存在する。Ｃ５は単コピー遺伝子の単鎖前駆体蛋白質産物として合成される（Ｈａｖｉｌａｎｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９１，１４６：３６２−３６８）。この遺伝子の転写物のｃＤＮＡ配列は１８アミノ酸リーダー配列に沿った１６５８アミノ酸の分泌プロＣ５前駆体を予測させる（米国特許６，３５５，２４５参照）。
【００８２】
Ｃ５の切断によりＣ５ａが放出され、これは強力なアナフィラトキシン及び化学走性因子であり、そして溶解終末補体複合体Ｃ５ｂ−９の形成をもたらす。Ｃ５ａはアルファ鎖の最初の７４アミノ酸（即ち配列のアミノ酸残基６６０〜７３３）を含むアミノ末端フラグメントとして代替又は古典的Ｃ５コンバターゼの何れかによりＣ５のアルファ鎖から切り出される。Ｃ５の１１ｋＤａの質量の概ね２０パーセントは炭水化物に帰属するものである。コンバターゼ作用のための切断部位は、配列のアミノ酸残基７３３において、又はその直近隣接部である。この切断部位において、又はその隣接部において結合する化合物は、切断部位へのＣ５コンバターゼ酵素の接近をブロックする能力を有し、そしてこれにより補体抑制剤として機能すると考えられる。
【００８３】
Ｃ５ｂはＣ６、Ｃ７及びＣ８と複合体化して標的細胞表面においてＣ５ｂ−８複合体を形成する。数種のＣ９分子との結合時には、膜攻撃複合体（「ＭＡＣ」、Ｃ５ｂ−９、終末補体複合体−ＴＣＣ）が形成される。ＭＡＣの十分な数量が標的細胞膜内に挿入されれば、それらが形成した開口部（ＭＡＣ細孔）が標的細胞の急速な浸透圧性溶解を媒介する。ＭＡＣのより低値の非溶解性の濃度は、他のプロ炎症性効果をもたらす場合がある。特に、内皮細胞及び血小板内への少数のＣ５ｂ−９複合体の膜挿入は有害な細胞活性化を誘発する場合がある。一部の例においては、活性化は細胞の溶解に先行し得る。
【００８４】
Ｃ５ａ及びＣ５ｂ−９は又下流の炎症因子、例えば加水分解酵素、反応性酸素種、アラキドン酸代謝及び種々のサイトカインの放出を増幅することにより多面性細胞活性化特性を有する。Ｃ５は又、Ｃ５コンバターゼ活性以外の手段によっても活性化できる。制限トリプシン消化（Ｍｉｎｔａ  ａｎｄ  Ｍａｎ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９７７，１１９：１５９７−１６０２；Ｗｅｔｓｅｌ  ａｎｄ  Ｋｏｌｂ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８２，１２８：２２０９−２２１６）及び酸処理（Ｙａｍａｍｏｔｏ  ａｎｄ  Ｇｅｗｕｒｚ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９７８，１２０：２００８；Ｄａｍｅｒａｕら、Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８９，２６：１１３３−１１４２）も又、Ｃ５を切断して活性なＣ５ｂを形成することができる。
【００８５】
上記した通り、Ｃ３及びＣ５ａはアナフィラトキシンである。これらの活性化補体成分は肥満細胞脱顆粒化をトリガーすることができ、これによりヒスタミン及び他の炎症メディエーターが放出され、平滑筋の収縮、増大した血管の透過性、白血球活性化、及び他の炎症現象、例えば過剰細胞性をもたらす細胞増殖が起こる。Ｃ５ａは又、補体活性化の部位にプロ炎症性顆粒球を誘引する働きを有する化学走性ペプチドとして機能する。
【００８６】
ヒト補体成分の何れかに結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする何れかの化合物を本発明の開示に従って利用してよい。一部の実施形態においては、ヒト補体成分に特異的な抗体が本明細書において有用である。一部の化合物は補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、Ｄ因子、Ｂ因子、Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、及びＭＡＳＰ−２に対して指向された抗体を包含し、これによりＣ５ａに関連するアナフィラトキシン活性の発生を予防、及び／又はＣ５ｂに関連する膜攻撃複合体の組み立てを防止する。
【００８７】
本発明の方法において同様に有用なものは、天然に存在する、又は可溶性形態の補体抑制化合物、例えばＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプレスタチン、及びＫ７６ＣＯＯＨである。ヒト補体成分の何れかに結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックするために利用してよい他の化合物は、例えば限定しないが、蛋白質、蛋白質フラグメント、ペプチド、小分子、ＲＮＡアプタマー、例えばＡＲＣ１８７（Ａｒｃｈｅｍｉｘ  Ｃｏｒｐ．，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓより入手可能）、Ｌ−ＲＮＡアプタマー、シュピーゲルマー、アンチセンス化合物、セリンプロテアーゼ阻害剤、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）において利用してよい分子、例えば２本鎖ＲＮＡ、例えば短鎖干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ロックド核酸（ＬＮＡ）抑制剤、ぺプチド核酸（ＰＮＡ）抑制剤等を包含する。
【００８８】
機能的には、化合物の１つの適当なクラスは潜在的にプロ炎症性の分子であるＣ５ａ及びＣ５ｂ−９（終末補体複合体）の形成をブロックするＣ５の切断の抑制を行う。好ましくは、化合物はオプソニン効果及び免疫複合体のクリアランスの重要な免疫保護機能を助長するＣ３ｂの形成の防止を行わない。
【００８９】
これらの膜攻撃複合体分子の形成を防止しつつ、Ｃ５おける補体カスケードの抑制は、多くの病原性微生物のオプソニン効果のため、並びに免疫複合体の可溶化及びクリアランスのために重要であるＣ３ｂを形成する能力を温存する。Ｃ３ｂを形成する能力を保持することは、血栓症、感染症、疲労、嗜眠及び免疫複合体クリアランス障害への罹患し易さが、疾患過程の予備的に存在する臨床特徴である溶血性疾患に対する補体抑制における治療因子として特に重要であると考えられる。
【００９０】
本明細書における使用のために特に有用な化合物は、補体成分Ｃ５ａ及びＣ５ｂへの補体成分Ｃ５の変換を直接又は間接的に低減する抗体である。有用な抗体の１つのクラスは、抗原結合部位少なくとも１つを有し、そしてヒト補体成分Ｃ５への特異的結合を呈するものである。特に有用な補体抑制剤は約３０％超までＣ５ａ及び／又はＣ５ｂ−９の形成を低減する化合物である。Ｃ５ａの形成をブロックするための望ましい能力を有する抗Ｃ５抗体は、少なくとも１９８２年から当該分野で知られている（Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉら、Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ．１９８２，１６２：３９７；Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉら、Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ．１９８３，１６５：３２３）。Ｃ５又はＣ５フラグメントに対して免疫反応性である当該分野で知られた抗体は，Ｃ５ベータ鎖に対する抗体（Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉら、Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ．１９８２，１６２：３９７；Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉら、Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ．１９８３，１６５：３２３；Ｗｕｒｚｎｅｒら、上出；Ｍｏｌｌｎｅｓら、Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８８，２８：３０７−３１２）；Ｃ５ａ（例えばＡｍｅｓら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９４，１５２：４５７２−４５８１；米国特許４，６８６，１００；及び欧州特許公開０４１１３０６参照）；及び非ヒトＣ５に対する抗体（例えばＧｉｃｌａｓら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．１９８７，１０５：２０１−２０９参照）を包含する。特に有用な抗Ｃ５抗体はｈ５Ｇ１．１−ｍＡｂ、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ及び他の機能的なｈ５Ｇ１．１フラグメントである。ｈ５Ｇ１．１−ｍＡｂ、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ及び他の機能的なｈ５Ｇ１．１フラグメントを製造するための方法は、米国特許６，３５５，２４５及び「Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｂｙ  Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  Ａｎｔｉ−Ｃ５  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ａｎｄ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｆｖ」、Ｔｈｏｍａｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．３３，Ｎｏ．１７／１８，ｐ．１３９８−１４０１，１９９６に記載されており、それらの開示は参照により全体が本明細書に組み込まれる。抗体ｈ５Ｇ１．１−ｍＡｂは商品名エクリズマブの下に現在臨床治験中である。
【００９１】
補体成分Ｃ５に対して反応性のモノクローナル抗体を製造するハイブリドーマはＳｉｍｓらの米国特許５，１３５，９１６の教示に従って得ることができる。抗体は公知の方法に従って免疫原として補体Ｃ５成分の精製された成分を使用しながら製造される。本開示に従えば、補体成分Ｃ５、Ｃ５ａ又はＣ５ｂが免疫原として好ましく使用される。特に好ましい有用な実施形態においては、免疫原はＣ５のアルファ鎖である。
【００９２】
特に有用な抗体は前パラグラフにおいて考察した必要な機能特性を共有しており、そして以下の特性、即ち：（１）それらは５Ｇ１．１に対して特異的に免疫反応性であるＣ５の部分への結合に関して競合すること；（２）それらはＣ５アルファ鎖に特異的に結合し、そのような特異的な結合、及び結合に関する競合は、当該分野で周知の種々の方法、例えばプラズモン表面共鳴法により測定できること（Ｊｏｈｎｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．１９９３，１６０：１９１−１９８）；及び（３）それらはＣ３又はＣ４（これらはＣ５コンバターゼの成分である）の何れかへのＣ５の結合をブロックすること；の何れかを有している。
【００９３】
補体成分少なくとも１つの産生及び／又は活性を抑制する化合物は、種々の単位用量形態において投与できる。用量は使用される特定の化合物に従って変動することになる。例えば、異なる抗体は異なる質量及び／又は親和性を有する場合があり、そのため、異なる用量レベルを要する。フラグメント（例えばＦａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ）として製造される抗体も又、それらが等価な未損傷の免疫グロブリンよりもかなり低値の質量のものであり、そしてこのため患者の血液中で同じモルレベルに到達するためにはより低い用量を要するため、そのような未損傷の免疫グロブリンからは異なる用量を要することになる。
【００９４】
用量は又、投与の様式、治療すべき患者の特定の症状、患者の全般的な健康、状態、体格及び年齢、及び処方医師の判断に応じて変動することになる。
【００９５】
補体成分少なくとも１つの産生及び／又は活性を抑制する化合物の投与は、好ましくは、注射による静脈内注入を介するものとなるが、適当な製薬用担体を用いたエアロゾル形態、皮下注射、経口又は舌下においておこなってもよい。所望により他の投与経路を使用してよい。
【００９６】
補体抑制化合物を溶血性疾患に関する既知の療法の投薬法と組み合わせて投与する複合療法を使用できることも更に意図される。そのような投薬法は１）造血を増大させること（例えば生成を増強すること、幹細胞破壊を排除すること、又は幹細胞抑制を排除することによる）が公知の化合物１つ以上の、２）補体成分１つ以上に結合する化合物、補体成分１つ以上の形成をブロックする化合物、及び補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される化合物と組み合わせた投与を包含する。造血を増大させることが公知の適当な化合物は、例えば、ステロイド、免疫抑制物質（例えばシクロスポリン）、抗凝固剤（例えばワーファリン）、葉酸、鉄等、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）、ＥＰＯ誘導体、ＥＰＯ模倣物、及びダルベポエチンアルファ（Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）としてＡｍｇｅｎ，Ｉｎｃ．，Ｔｈｏｕｓａｎｄ  Ｏａｋｓ，Ｃａｌｉｆ．より販売（Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）は組み換えＤＮＡ技術によりチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において生産された人工型ＥＰＯである））を包含する。特に有用な実施形態においては、エリスロポエチン（ＥＰＯ）（造血を増大させることが公知の化合物）、ＥＰＯ誘導体、又はダルベポエチンアルファを、ｈ５Ｇ１．１−ｍＡｂ、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ及びｈ５Ｇ１．１の他の機能的フラグメントからなる群より選択される抗Ｃ５抗体と組み合わせて投与してよい。
【００９７】
注射に適する製剤はＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，１７ｔｈ  ｅｄ（１９８５）に記載されている。そのような製剤は滅菌され、そして非発熱物質含有でなければならず、そして一般的に薬学的に有効な担体、例えば食塩水、緩衝（例えばリン酸塩緩衝）食塩水、ハンク溶液、リンゲル溶液、デキストロース／食塩水、グルコース溶液等を包含する。製剤は必要に応じて製薬上許容しうる副次的物質、例えば浸透圧調節剤、湿潤剤、殺菌剤、保存料、安定化剤等を含有してよい。
【００９８】
本発明の開示は補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物１つ以上を投与することにより溶血性疾患に罹患した患者において溶血を低減する方法を意図している。溶血を低減するとは、個人が溶血に罹患している持続時間を約２５％以上低減することを意味する。治療の有効性は患者における溶血のレベルを測定するための当該分野で公知の種々の様式の何れかにおいて評価できる。溶血を検出するための１つの定性的な方法はヘモグロビン尿症の発生を観察することである。非常に意外であるが、本発明の方法による治療はヘモグロビン尿症の急速な低減により測定される通り溶血を低減する。
【００９９】
溶血を計測するより定性的な様式は患者の血流中のラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）レベルを計測することである。ＬＤＨはピルベートとラクテートの相互変換を触媒する。赤血球はグルコースを代謝してラクテートとし、これが血液中に放出され、そして肝臓により取り込まれる。ＬＤＨレベルは溶血の客観的インジケーターとして使用される。当該分野で知られる通り、ＬＤＨの「正常上限」レベルの計測は、使用される特定のアッセイ及びアッセイを実施する厳密な様式を包含する多くの要因に応じて実験室毎に変動することになる。しかしながら一般的には、本発明の方法は正常なＬＤＨレベルの上限の２０％以内までの患者におけるＬＤＨレベルの低減により反映される通り、溶血性疾患に罹患した患者において溶血を低減することができる。或いは、本発明の方法は、患者の治療前のＬＤＨレベルの５０％超、好ましくは患者の治療前のＬＤＨレベルの６５％超、最も好ましくは患者の治療前のＬＤＨレベルの８０％超の患者におけるＬＤＨレベルの低減により反映される通り、溶血疾患に罹患した患者における溶血を低減することができる。
【０１００】
溶血の低減の別の定量的な計測はＧＰＩ欠損赤血球（ＰＮＨ赤血球）の存在である。当該分野で知られる通り、ＰＮＨ赤血球は細胞表面上のＧＰＩアンカー蛋白質発現を有さない。ＧＰＩ欠損細胞（ＰＮＨ細胞）の比率は例えばＲｉｃｈａｒｄｓら、Ｃｌｉｎ．Ａｐｐｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，ｖｏｌ，１，ｐ．３１５−３３０，２００１に記載の手法を用いながらフローサイトメトリーにより測定することができる。次にＰＮＨ細胞の絶対数を求めることができる。本発明の方法はＰＮＨ赤血球の増大により反映される通り、溶血性疾患に罹患した患者における溶血を低減できる。好ましくは、総赤血球の２５％超の患者におけるＰＮＨ赤血球レベルの増大が達成され、より好ましくは総赤血球の５０％超の患者におけるＰＮＨ赤血球レベルの増大が達成され、最も好ましくは総赤血球の７５％超の患者におけるＰＮＨ赤血球レベルの増大が達成される。
【０１０１】
ＰＮＨ又は他の溶血性疾患に関連する症状１つ以上を低減する方法も又、本発明の開示の範囲に包含される。そのような症状は例えば腹痛、疲労、及び呼吸困難を包含する。症状は赤血球の溶解の直接の結果であることができ（例えばヘモグロビン尿症、貧血、疲労、低赤血球数等）、又は症状は患者の血流中の低酸化窒素（ＮＯ）レベルに起因することができる（例えば腹痛、勃起不全、嚥下障害、血栓症等）。最近の報告によれば、４０％超のＰＮＨ顆粒球クローンを有する患者は血栓症、腹痛、勃起不全及び嚥下障害の発生率が増大しており、高い溶血率を示している（Ｍｏｙｏら、Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．１２６：１３３−１３８（２００４）参照）。
【０１０２】
特に有用な実施形態においては、本発明の方法はマイクロリットル当たり３０，０００を超過する、好ましくはマイクロリットル当たり７５，０００を超過する、最も好ましくはマイクロリットル当たり１５０，０００を超過する血小板数を有する患者（低形成患者）において、ＰＮＨ又は他の溶血性疾患に関連する症状１つ以上の低減をもたらす。他の実施形態においては、本発明は対象の総赤血球含有量のＰＮＨＩＩＩ型赤血球の比率が１０％超、好ましくは２５％超、最も好ましくは５０％を超過するような患者においてＰＮＨ又は他の溶血性疾患に関連する症状１つ以上の低減をもたらす。更に別の実施形態において、本発明の方法はリットル当たり８０ｘ１０９を超過する、より好ましくはリットル当たり１２０ｘ１０９を超過する、最も好ましくはリットル当たり１５０ｘ１０９を超過する網状赤血球数を有する患者において、ＰＮＨ又は他の溶血性疾患に関連する症状１つ以上の低減をもたらす。上記した最も好ましい範囲にある患者は活動性の骨髄を有しており、そして十分な数量の赤血球を産生できることになる。ＰＮＨ又は他の溶血性疾患に罹患した患者において赤血球が１つ以上の状況（ｗａｙ）において欠損性である場合（例えばＧＰＩ欠損）、本発明の方法は補体活性化に起因する溶解からそのような細胞を保護する場合に特に有用である。即ち好ましい範囲に含まれる患者は本発明の方法から最も利益を被る。
【０１０３】
１つの態様において、疲労を低減する方法が意図され、該方法は補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を溶血性疾患を有するか罹患し易い対象に投与する工程を包含する。疲労を低減するとは、個人が疲労に罹患している持続時間を約２５％以上低減することを意味する。疲労は、貧血が持続する場合であってもヘモグロビン尿症が消散する場合に疲労が和らぐため、血管内の溶血に関連すると考えられている症状である。赤血球の溶解を低減することにより、本発明の方法は疲労を低減させる。ＩＩＩ型赤血球、網状赤血球及び血小板の上記した好ましい範囲に包含される患者は本発明の方法から最も利益を被る。
【０１０４】
別の態様において、腹痛を低減する方法が意図され、該方法は補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を溶血性疾患を有するか罹患し易い対象に投与する工程を包含する。腹痛を低減するとは、個人が腹痛に罹患している持続時間を約２５％以上低減することを意味する。腹痛は、血管内溶血の結果として血流中へ放出された全ての遊離のヘモグロビンを処理することがハプトグロビンの患者本来のレベルでは不可能であるため、ＮＯのスカベンジング及び腸のジストニー及び痙攣がもたらされることに起因する症状である。赤血球の溶解を低減することにより、本発明の方法は血流中の遊離のヘモグロビンの量を低減し、これにより腹痛を低減する。ＩＩＩ型赤血球、網状赤血球及び血小板の上記した好ましい範囲に包含される患者は、本発明の方法から最も利益を被る。
【０１０５】
別の態様において、嚥下障害を低減する方法が意図され、該方法は補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を溶血性疾患を有するか罹患し易い対象に投与する工程を包含する。嚥下障害を低減するとは、個人が嚥下障害に罹患している持続時間を約２５％以上低減することを意味する。嚥下障害は、血管内溶血の結果として血流中へ放出された全ての遊離のヘモグロビンを処理することがハプトグロビンの患者本来のレベルでは不可能であるため、ＮＯのスカベンジング及び食道の痙攣がもたらされることに起因する症状である。赤血球の溶解を低減することにより、本発明の方法は血流中の遊離のヘモグロビンの量を低減し、これにより嚥下障害を低減する。ＩＩＩ型赤血球、網状赤血球及び血小板の上記した好ましい範囲に包含される患者は、本発明の方法から最も利益を被る。
【０１０６】
更に別の態様において、勃起不全を低減する方法が意図され、該方法は補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を溶血性疾患を有するか罹患し易い対象に投与する工程を包含する。勃起不全を低減するとは、個人が勃起不全に罹患している持続時間を約２５％以上低減することを意味する。勃起不全は、血管内溶血の結果として血流中へ放出された遊離のヘモグロビンによるＮＯのスカベンジングに関連すると考えられている症状である。赤血球の溶解を低減することにより、本発明の方法は血流中の遊離のヘモグロビンの量を低減し、これによりＮＯの血清中レベルを上昇させ、そして勃起不全を低減する。ＩＩＩ型赤血球、網状赤血球及び血小板の上記した好ましい範囲に包含される患者は、本発明の方法から最も利益を被る。
【０１０７】
更に別の態様において、ヘモグロビン尿症を低減する方法が意図され、該方法は補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を溶血性疾患を有するか罹患し易い対象に投与する工程を包含する。ヘモグロビン尿症を低減するとは、個人が赤色、茶色、又はより暗色の尿を有する回数の低減を意味し、その場合、低減は典型的には約２５％以上である。ヘモグロビン尿症は、血管内溶血の結果として血流中へ放出された全ての遊離のヘモグロビンを処理することがハプトグロビンの患者本来のレベルでは不可能であることに起因する症状である。赤血球の溶解を低減することにより、本発明の方法は血流中の遊離のヘモグロビンの量を低減し、これによりヘモグロビン尿症を低減する。非常に意外であるが、ヘモグロビン尿症の低減は急速に起こる。ＩＩＩ型赤血球、網状赤血球及び血小板の上記した好ましい範囲に包含される患者は、本発明の方法から最も利益を被る。
【０１０８】
又別の態様において、血栓症を低減する方法が意図され、該方法は補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を溶血性疾患を有するか罹患し易い対象に投与する工程を包含する。血栓症を低減するとは、個人が血栓症発作を有する持続時間を約２５％以上低減すること、又は血栓症発作の頻度が一年以上の期間に渡り約２５％以上低減することを意味する。血栓症は、血管内溶血の結果として血流中へ放出された遊離のヘモグロビンによるＮＯのスカベンジングに関連すると考えられている症状である。赤血球の溶解を低減することにより、本発明の方法は血流中の遊離のヘモグロビンの量を低減し、これによりＮＯの血清中レベルを上昇させ、そして血栓症を低減する。
【０１０９】
血栓症は遊離のヘモグロビンによるＮＯスカベンジング、溶解した赤血球膜からのプロ血栓性表面の露出、及び細胞内遊離ヘムによる内皮表面の変化を包含する病因において多因性であると考えられている。遊離ヘモグロビンの血管内放出は小型血管の血栓症に直接寄与する場合がある。ＮＯは血小板の凝集を抑制し、凝集した血小板の離解を誘導し、そして血小板の接着を抑制することがわかっている。逆に、ヘモグロビンによるＮＯスカベンジング又はアルギニン代謝の抑制によるＮＯ形成の低減は血小板凝集の増大をもたらす。赤血球の溶解を低減することにより、本発明の方法は血流中の遊離のヘモグロビンの量を低減し、これによりＮＯの血清中レベルを上昇させ、そして血栓症を低減する。
【０１１０】
特に有用な実施形態においては、本発明の方法は、特にマイクロリットル当たり３０，０００を超過する、好ましくはマイクロリットル当たり７５，０００を超過する、最も好ましくはマイクロリットル当たり１５０，０００を超過する血小板数を有する患者において血栓症を低減する。他の実施形態においては、本発明の方法は対象の総赤血球含有量のＰＮＨＩＩＩ型赤血球の比率が１％超、好ましくは１０％超、より好ましくは２５％超、更により好ましくは５０％超、そして最も好ましくは７５％を超過するような患者において、血栓症を低減する（例えばＨａｌｌら、Ｂｌｏｏｄ  １０２：３５８７−３５９１（２００３）；Ａｕｄｅｂｅｒｔら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５２：１３７９−１３８６（２００５）を参照）。更に別の実施形態において、本発明の方法はリットル当たり８０ｘ１０９を超過する、より好ましくはリットル当たり１２０ｘ１０９を超過する、最も好ましくはリットル当たり１５０ｘ１０９を超過する網状赤血球数を有する患者において、輸血血栓症を低減する。
【０１１１】
又別の態様においては、貧血を低減する方法が意図され、該方法は補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を溶血性疾患を有するか罹患し易い対象に投与する工程を包含する。貧血を低減するとは、個人が貧血に罹患している持続時間を約２５％以上低減することを意味する。溶血性疾患における貧血は、赤血球質量の損失により酸素を運搬する血液の能力の低減に起因する。赤血球の溶解を低減することにより、本発明の方法は赤血球レベルが上昇することを支援し、これにより貧血を低減する。
【０１１２】
別の態様において、溶血性疾患に罹患した患者における総内因性赤血球数を増大させる方法が意図される。患者のＲＢＣ数を増大させることにより、疲労、貧血及び患者の輸血の必要性が低減される。輸血の低減は輸血の頻度、輸血される血液単位の量、又は両方におけるものであることができる。
【０１１３】
溶血性疾患に罹患した患者における赤血球数を増大させる方法は、溶血性疾患に罹患した患者に補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を投与する工程を包含する。特に有用な実施形態においては、本発明の方法は、溶血性疾患に罹患した患者において、特にマイクロリットル当たり３０，０００を超過する、好ましくはマイクロリットル当たり７５，０００を超過する、最も好ましくはマイクロリットル当たり１５０，０００を超過する血小板数を有する患者において、赤血球数を増大させる。他の実施形態においては、本発明の方法は対象の総赤血球含有量のＰＮＨＩＩＩ型赤血球の比率が１％超、好ましくは１０％超、より好ましくは２５％超、更により好ましくは５０％超、そして最も好ましくは７５％を超過するような溶血性疾患に罹患した患者において赤血球数を増大させる。更に別の実施形態において、本発明の方法はリットル当たり８０ｘ１０９を超過する、より好ましくはリットル当たり１２０ｘ１０９を超過する、最も好ましくはリットル当たり１５０ｘ１０９を超過する網状赤血球数を有する溶血性疾患に罹患した患者において赤血球数を増大させる。一部の実施形態においては、本発明の開示の方法は約５０％までの輸血頻度の低下、典型的には約７０％までの輸血頻度の低下、より典型的には約９０％までの輸血頻度の低下をもたらす場合がある。
【０１１４】
更に別の態様において、本開示は対象に化合物を投与することにより溶血性疾患に罹患した対象を輸血に対してより低依存性、又は輸血非依存性とする方法を意図し、化合物は、補体成分１つ以上に結合する化合物、補体成分１つ以上の発生をブロックする化合物、及び補体成分１つ以上の活性をブロックする化合物からなる群より選択される。当該分野で知られる通り、赤血球の正常な生活環は約１２０日である。赤血球の半減期が長いとすれば、輸血非依存性の評価のためには６か月以上の治療を要する。一部の患者においては輸血非依存性は１２か月以上、一部の例では４年以上維持することができることが意外にもわかっており、赤血球の１２０日の生活環をより長期である。特に有用な実施形態においては、本発明の方法は溶血性疾患に罹患した患者において、特にマイクロリットル当たり３０，０００を超過する、好ましくはマイクロリットル当たり７５，０００を超過する、最も好ましくはマイクロリットル当たり１５０，０００を超過する血小板数を有する患者において、低下した輸血依存性、又は輸血非依存性をもたらす。他の実施形態においては、本発明の方法は対象の総赤血球含有量のＰＮＨＩＩＩ型赤血球の比率が１％超、好ましくは１０％超、より好ましくは２５％超、更により好ましくは５０％超、そして最も好ましくは７５％を超過するような溶血性疾患に罹患した患者において、低下した輸血依存性、又は輸血非依存性をもたらす。更に別の実施形態において、本発明の方法はリットル当たり８０ｘ１０９を超過する、より好ましくはリットル当たり１２０ｘ１０９を超過する、最も好ましくはリットル当たり１５０ｘ１０９を超過する網状赤血球数を有する溶血性疾患に罹患した患者において、低下した輸血依存性、又は輸血非依存性をもたらす。
【０１１５】
ＰＮＨ又は一部の他の溶血性疾患を有する患者における酸化窒素（ＮＯ）レベルを上昇させる方法も又、本発明の開示の範囲に包含される。ＮＯレベルを上昇させるこれらの方法は、補体成分１つ以上に結合するか、又は別様にその発生及び／又は活性をブロックする化合物を、溶血性疾患を有するか罹患し易い対象に投与する工程を包含する。低いＮＯレベルは、血管内溶血の結果として血流中へ放出された遊離のヘモグロビンによるＮＯのスカベンジングの結果としてＰＮＨ又は他の溶血性疾患に罹患した患者において生じる。赤血球の溶解を低減することにより、本発明の方法は血流中の遊離のヘモグロビンの量を低減し、これによりＮＯの血清中レベルを上昇させる。特に有用な実施形態においては、ＮＯホメオスタシスは、ＮＯ不全に起因する症状の消散により顕在化される通り、回復する。
【０１１６】
本出願を、それを如何なる様式に限定する意図も有することなく、以下の実施例によりさらに十分に説明する。
【実施例】
【０１１７】
（実施例１）
患者１１人がＰＮＨ及びそれに関連する症状に対する抗Ｃ５抗体の効果を評価するための療法治験に参加した。ＰＮＨ患者は輸血依存性であり、溶血性であった。患者は１２か月以内に輸血４回以上の履歴があれば輸血依存性と定義した。患者プール内の輸血の中央値の数は過去１２か月で９であった。過去１２か月に使用した輸血単位の中央値の数は患者プールに関して２２であった。
【０１１８】
４週間の過程に渡って、１１人の患者の各々が約３０分に渡り抗Ｃ５抗体の週６００ｍｇ静脈内輸液を受けた。試験において使用した特異的な抗Ｃ５抗体はエクリズマブである。患者には１週後にエクリズマブ９００ｍｇを投与し、その後２週毎に９００ｍｇを投与した。試験の最初の１２週間はパイロット試験とした。初期の急性期の１２週間の試験の終了後、患者全員が合計６４週間実施した延長試験に参加した。１１人のうち１０人は合計２年間まで実施した延長試験に参加した。
【０１１９】
ＰＮＨＩＩＩ型赤血球（「ＲＢＣ」）に対する抗Ｃ５抗体治療の効果を試験した。「ＰＮＨの型」とは細胞表面上に発現されるＧＰＩアンカー蛋白質の密度を指す。Ｉ型は正常な発現であり、ＩＩ型は中間的発現であり、そしてＩＩＩ型は細胞表面上のＧＰＩアンカー蛋白質発現を有さない。ＧＰＩ欠損細胞の比率はＲｉｃｈａｒｄら、Ｃｌｉｎ．Ａｐｐｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，ｖｏｌ．１．ｐ．３１５−３３０，２００１に記載されている様式においてフローサイトメトリーにより測定する。治療前の状態と比較して、ＰＮＨＩＩＩ型赤血球は延長試験中に５０％超増大した。全赤血球の３６．７％の試験前の平均値からＩＩＩ型赤血球の５８．４％の６４週平均値までの増大は、溶血が急激に低下したことを示していた。以下の表１を参照。エクリズマブ療法は補体媒介溶解からＰＮＨＩＩＩ型ＲＢＣを保護し、細胞の生存を延長した。ＰＮＨ罹患細胞のこのような保護は治験における全患者において輸血の必要性、発作及び全体的溶血を低減した。
【０１２０】
【表１】
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２年間の延長試験の過程の間、ＧＰＩ連結蛋白質の完全な欠損を有するＰＮＨ赤血球（ＩＩＩ型赤血球）は平均３６．７％から５８．９％まで治療期間中に進行性で増大した（ｐ＝０．００１）のに対し、部分的欠損のＰＮＨ赤血球（ＩＩ型）は５．３％から８．７％まで増大した（ｐ＝０．０１）。エクリズマブ療法の間に患者の何れにおいてもＰＮＨ好中球の比率の同時変化は観察されず、ＰＮＨ赤血球の比率の増大はＰＮＨクローン自体の変化よりはむしろ溶血及び輸血の低減に起因することが示された。
【０１２１】
ラクテートデヒドロゲナーゼレベル（「ＬＤＨ」）に対する抗Ｃ５抗体治療の効果を患者１１人全員に対して計測した。ＬＤＨはピルベート及びラクテートの相互変換を触媒する。赤血球はグルコースを代謝してラクテートとし、これが血液中に放出され、そして肝臓により取り込まれる。ＬＤＨレベルは溶血の客観的インジケーターとして使用される。ＬＤＨレベルは治療前のレベルと比較して８０％超まで低下した。ＬＤＨレベルは３１１１Ｕ／Ｌの試験前平均値から、５９４Ｕ／Ｌのパイロット試験中の平均値、そして６２２Ｕ／Ｌの６４週後の平均値にまで低下した（６４週の比較についてはｐ＝０．００２；図１Ａ及び１Ｂを参照）。
【０１２２】
同様に、赤血球溶血の別のマーカーであるアスパルテートアミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）レベルは、７６ＩＵ／Ｌの平均ベースライン値から治療１２及び６４週間の間にそれぞれ２６ＩＵ／Ｌ及び３０ＩＵ／Ｌまで低下した（６４週の比較についてはｐ＝０．０２）。ハプトグロビン、ヘモグロビン及びビリルビンのレベル、及び網状赤血球の数は６４週の治療期間中、試験前の値から有意に変化しなかった。
【０１２３】
発作率を測定し、治療前のレベルと比較した。本開示において使用する発作は１〜１０の尺度上において６以上の比色定量レベルを有する暗色の尿の発生率として定義する。図２は治療の前及び治療中のＰＮＨ患者におけるヘモグロビン尿症の発作の発生率をモニタリングするために考案された尿色スケールを示す。治療前のレベルと比較して、発作比率は９３％低減し（図３参照）、エクリズマブ治療前の月当たり患者当たり３．０発作から、最初の１２週の間の月当たり患者当たり０．１発作、そして６４週の治療の間の月当たり患者当たり０．２発作となった（図３（ｐ＜０．００１））。
【０１２４】
患者１１人中９人における血清溶血活性は、６４週の治療期間中を通じて完全にブロックされ、平衡状態におけるエクリズマブの定常レベルは約３５μｇ／ｍｌから３５０μｇ／ｍｌの範囲であった。延長試験の間、患者２人は補体を一貫してブロックするために必要なエクリズマブのレベルを維持していなかった。この血清中溶血活性のブレイクスルーは１４日の投薬間隔の最後の２日に起こり、複数回投薬の間で反復されるパターンであった。患者１人においては、図４に示される通り、補体ブロックのブレイクスルーはヘモグロビン尿症、嚥下障害、及び増大したＬＤＨ及びＡＳＴをもたらし、これらは血清中溶血活性の回復と相関していた。次回投薬時には、症状は消散し（図５）、そして１４日毎９００ｍｇから１２日毎９００ｍｇの投薬間隔の縮小は補体制御の回復をもたらし、これは両方の患者において６４週までの延長試験に渡って維持された。この患者は嚥下障害及びヘモグロビン尿症の２４時間消散を示した。１４日から１２日への投薬間隔の縮小は３５μｇ／ｍｌ超にエクリズマブのレベルを維持するために十分であり、そして両方の患者に関する延長試験の残余について血清中溶血活性を効果的に、そして一貫してブロックした。
【０１２５】
患者の輸血の必要性も又、エクリズマブを用いた治療により低減した。図６ａは、血球減少症患者に関する抗Ｃ５抗体を用いた治療の前及び治療中の、月当たり患者当たりに必要な輸血単位数を比較したものであり、図６ｂは、非血球減少症患者に関する抗Ｃ５抗体を用いた治療の前及び治療中の、月当たり患者当たりに必要な輸血単位数を比較したものである。輸血の必要性の有意な減少がやはり全体の群において観察（平均輸血率は治療前の１年間の期間の間の月当たり患者当たり２．１単位から、最初の１２週の間の月当たり患者当たり０．６単位、そして合計６４週の間の月当たり患者当たり０．５単位まで低下）されており、非血小板減少症患者が最も利益を被っていた。実際、正常な血小板数（マイクロリットル当たり≧１５０，０００）を有する非血小板減少症患者の４人は、６４週の治療の間に輸血非依存性になった。
【０１２６】
エリスロポエチン（ＥＰＯ）と組み合わせて投与されたエクリズマブの効果も又、血小板減少症患者において評価した。ＥＰＯ（ＮｅｏＲｅｃｏｒｍｏｎＴＭ，Ｒｏｃｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を試験の２３週目から開始して週当たり３回、１８０００ＩＵの量で投与した。図７に示す通り、この患者のために必要な輸血の頻度は有意に低減し、そして速やかに停止された。
【０１２７】
２年の延長試験の間、最初の３か月の試験からの患者１１人中１０人は１週おきにエクリズマブ９００ｍｇを投与され続けた（患者１人は２３か月後にエクリズマブ療法を中止した）。患者１１人中６人は正常な血小板数を有し（骨髄障害の臨床兆候無し）、１１人中５人は低値の血小板数を有していた。２３か月後にエクリズマブ療法を中止した患者については、血管内溶血はエクリズマブにより良好に抑制されたが、患者はエリスロポエチン療法後にも輸血を継続していた。この患者はエクリズマブ療法開始時において最も重度の形成不良を有しており、血小板数は３０ｘ１０９／Ｌ未満であり、継続中の輸血は伏在する骨髄障害の結果であると考えられた。
【０１２８】
２年の延長試験の結果も又、患者の輸血の必要性が統計学的に有意に低下したことを明らかにしていた。患者３人は２年の治療期間全体の間、輸血非依存性を維持し、そして４人の血球減少症患者は輸血非依存性となり、３人はＥＰＯ（ＮｅｏＲｅｃｏｒｍｏｎＴＭ）による治療に従った。輸血の必要性の低減は良好な骨髄温存を有する患者においてもっとも顕著であることがわかった。
【０１２９】
エクリズマブ投薬に従って薬力学レベルを計測し、記録した。エクリズマブの薬力学的分析は標準的総ヒト血清補体溶血アッセイにおけるニワトリ赤血球を溶解する患者血清試料の能力を計測することにより調べた。慨すれば、患者試料又はヒト対照血清（Ｑｕｉｄｅｌ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．）をゼラチンベロナール緩衝食塩水（ＧＶＢ２＋，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．）で４０％ｖ／ｖに希釈し、そして各ウェル中の血清の終濃度が２０％となるように９６穴プレートに３連で添加した。次にプレートを室温でインキュベートし、その間ニワトリ赤血球（Ｌａｍｐｉｒｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ，Ｍａｌｖｅｒｎ，Ｐａ．）を洗浄した。ニワトリ赤血球は抗ニワトリ赤血球ポリクローナル抗体（０．１％ｖ／ｖ）を添加することにより感作した。次に血球を洗浄し、ＧＶＢ２＋緩衝液中に再懸濁した。ニワトリ赤血球（２．５ｘ１０６個／３０μＬ）をヒト対照血清又は患者試料を含有するプレートに添加し、そして３０分間３７℃でインキュベートした。各プレートには同一に調製されたニワトリ赤血球の追加６ウェルが含まれ、そのうち４ウェルはブランクとして２ｍＭＥＤＴＡ含有２０％血清と共にインキュベートし、そして２ウェルは自発的溶血に関する陰性対照としてＧＶＢ２＋緩衝液と共にインキュベートした。次にプレートを遠心分離し、そして、上澄みを新しい平底９６穴プレートに移した。ヘモグロビンの放出はマイクロプレートリーダーを用いながらＯＤ４１５ｎｍで測定した。パーセント溶血は以下の式：パーセント溶血＝１００ｘ（（ＯＤ患者試料−ＯＤブランク）／（ＯＤヒト血清対照−ＯＤブランク））を用いて求めた。
【０１３０】
薬力学のグラフ（図８）、即ち生理学的効果の試験は、経時的な血清溶血活性のパーセント（即ち細胞溶解のパーセント）を示す。細胞溶解は、患者の大多数においてエクリズマブ治療下に正常血清溶血活性の２０％未満にまで劇的に低減した。患者２人は溶血活性においてブレイクスルーを呈したが、補体ブロックは１２日への投薬間隔の低減により恒久的に回復した（図４参照）。
【０１３１】
クオリティーオブライフの問題の改善も又、欧州癌コア研究治療機構（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｏｒｅ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｏｒｔｅ．ｂｅ））のアンケート（「ＥＯＲＴＣ  ＱＬＣ−Ｃ３０」）を用いて評価した。参加患者各々はエクリズマブ治療の前及び治療中にＱＬＣ−３０アンケートに記入している。全体的改善は全般的健康状態、身体機能、役割機能、情動機能、認知機能、疲労、疼痛、呼吸困難及び不眠において観察された（図９参照）。
【０１３２】
２年間の試験における患者はＰＮＨに関連する有害症状における低減を経験している。例えば、図１０に示す通り、腹痛、嚥下障害、及び勃起不全の低下が、これらの症状をエクリズマブ投与前に報告していた患者においてエクリズマブ投与後に明らかになった。
【０１３３】
（実施例２）
臨床試験の説明
エクリズマブの安全性及び薬効は、８７患者無作為二重盲検プラセボコントロール２６週間第３相試験（試験Ｃ０４−００１）、進行中の９７患者オープンラベル５２週間第３相試験（試験Ｃ０４−００２）、及び１１患者オープンラベル１２週間第２相試験（試験Ｃ０２−００１；本試験は合計で追加１５６週となる２つの試験特異的延長試験［Ｅ０２−００１及びＸ３−００１］を有している）を包含する３つの別個の試験において評価した。試験Ｃ０４−００１、Ｃ０４−００２、又はＣ０２−００１／Ｅ０２−００１／Ｘ０３−００１を良好に終了した全患者を、約１９０人参加と予測されている進行中のオープンラベル１０４週第３相延長試験（試験Ｅ０５−００１）に参加するのを妥当とみなした。Ｅ０５−００１試験は、ＰＮＨ患者の全体的な集団におけるエクリズマブの追加的な長期の安全性及び効能のデータを提供するものであり、そして上記した患者に由来するプールされたエクリズマブ治療群に渡るエクリズマブ治療による血栓塞栓事象率の収集物を包含する。試験Ｅ０５−００１における血栓塞栓事象率の予備特定された二次終点は、エクリズマブ治療前、試験Ｃ０４−００１、Ｃ０４−００２、及びＣ０２−００１／Ｅ０２−００１／Ｘ０３−００１の患者の各々におけるエクリズマブ治療の間、並びに全試験に関する全体的患者集団におけるエクリズマブ治療の間の、試験Ｅ０５−００１患者の各々における血栓塞栓事象率に渡るように設計した。血栓塞栓事象率は主要有害血管事象（ＭＡＶＥ、表２参照）として捕捉した。
【０１３４】
全試験において、エクリズマブ治療患者には６００ｍｇの試験薬剤を毎週４週間、９００ｍｇを第５週に、そして次に９００ｍｇの用量を１４±２日毎に、試験期間中投与した。
【０１３５】
試験Ｃ０４−００１、Ｃ０４−００２、及びＣ０２−００１／Ｅ０２−００１／Ｘ０３−００１において、エクリズマブ治療は全ての予備特定された一次及び二次終点において高度に統計学的及び臨床的に有意な改善を伴っていた。
【０１３６】
【表２】
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臨床的に症候性の血栓症をもたらす病理生理学的経路に対するエクリズマブの効果
血栓塞栓（ＴＥ）事象はＰＮＨにおいて血管内溶血に直接関連付けられる場合が多い。血管内溶血は血漿中の遊離ヘモグロビンの蓄積をもたらし、これは酸化窒素を枯渇させ、そしてその後は血栓の形成をもたらすことが分かっている。
【０１３７】
エクリズマブを用いた治療は、複合Ｃ０４−００１及びＣ０４−００２試験において治療前２，０４２Ｕ／Ｌからエクリズマブ治療の２６週の２６１Ｕ／Ｌまでの中央値ＬＤＨにおける低下により計測される通り、血管内溶血を顕著に低減している（ｐ＜０．００１）。
【０１３８】
エクリズマブを用いた治療は、複合Ｃ０４−００１及びＣ０４−００２試験において治療前３６．７ｍｇ／ｄＬからエクリズマブ治療の２６週の５．６ｍｇ／ｄＬまでの中央値遊離ヘモグロビンレベルにより計測される通り、細胞遊離ヘモグロビンの循環レベルを顕著に低減している（ｐ＜０．００１）。
【０１３９】
エクリズマブを用いた治療は酸化窒素の消費における中央値の変化により測定される通り、酸化窒素の消費を効果的に低減しており、Ｃ０４−００１試験においては９．３μＭの中央値治療前酸化窒素は、エクリズマブ治療２６週で６７．１％低下し、そしてプラセボでは治療前酸化窒素９．９μＭはプラセボを用いた場合に２６週で１４．９％上昇している（ｐ＜０．００１）。
【０１４０】
全体的な試験集団における血栓率に対するエクリズマブの効果
エクリズマブ治療ＴＥ事象は、治療の意思に基づき、Ｃ０４−００１、Ｃ０４−００２、Ｃ０２−００１、Ｅ０２−００１、Ｘ０３−００１及びＥ０５−００１ＰＮＨ臨床試験に参加し、エクリズマブを投与された全患者に対して測定した。ＴＥ事象はＣ０４−００１、Ｃ０４−００２、及びＥ０５−００１試験においてはＭＡＶＥ基準（上記表２参照）により定義した（Ｃ０２−００１、Ｅ０２−００１、及びＸ０３−００１については一次有害事象及び医学的履歴のリストを使用した）。エクリズマブ曝露の患者の年数は、完了したＣ０４−００１、Ｃ０２−００１、Ｅ０２−００１及びＸ０３−００１試験に関して計算した。Ｃ０４−００２試験については、エクリズマブ曝露の患者年数は治療の２６週の後に各患者について調べた（６か月中間分析）。Ｅ０５−００１試験においては、曝露患者年数は２００６年４月までの全患者について調べた。
【０１４１】
治療前患者年数は、ＰＮＨの診断よりも早期、又は親ＰＮＨ臨床試験（Ｃ０４−００１、Ｃ０４−００２、Ｃ０２−００１）への参加よりも前の第１回血栓事象より調べ、そして又Ｃ０４−００１試験におけるプラセボ投与患者からの患者年数も包含した。総エクリズマブ治療前ＴＥ事象にはＣ０４−００１、Ｃ０４−００２、及びＣ０２−００１への参加前の全患者におけるＴＥ事象、さらにＣ０４−００１試験におけるプラセボ投与の間のＴＥ事象を包含するものとした（即ち、総エクリズマブ治療前期間ＴＥ事象は、表３のＣ０４−００１、Ｃ０４−００２、及びＣ０２−００１におけるエクリズマブ治療前ＴＥ事象、さらに表４のＣ４−００１前のＴＥ事象、さらに表４のプラセボ投与ＴＥ事象の合計に等しい）。総エクリズマブ期間ＴＥ事象は初回エクリズマブ投薬から開始される期間の全てのＴＥ事象を包含するものとした。一次ＴＥ分析（即ちＥ０５−００１二次終点）は符号付順位検定を用いて実施した。
【０１４２】
治療前の血栓塞栓事象率と比較して、エクリズマブ治療は個々の臨床試験の各々における同じ患者においてＴＥ事象率を低減し、そして全体的なＴＥ事象率を有意に低減した。全体的ＴＥ事象率はエクリズマブ治療を受けた同じ患者において、エクリズマブ治療前の年間（ｙｅａｒｓ）１００患者当たり７．４９ＴＥ事象から年間１００患者当たり１．２２ＴＥ事象まで低減した（ｐ＜０．００１）。これは８４％の相対的低減及び年間１００患者当たり６．２７ＴＥ事象の絶対的低減を表す。血栓塞栓事象率は表３に示す通りである。
【０１４３】
【表３】
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異なる試験前ＴＥ事象率における見かけの非均一性は３つの個々の試験の異なる参加基準及び／又は個々の試験に関与する異なる部位に部分的には関連していると考えられる。しかしながら、より早期の報告とは逆に、現在のＴＥ事象の確認は系統的、予測的であり、そしてＣ０４−００１、Ｃ０４−００２、及びＥ０５−００１試験においては多施設、国際間、及びコントロールを基準として実施されている。これらの理由から、現在の試験前ＴＥ事象率は、エクリズマブＰＮＨ試験への参加の前のこのＰＮＨ患者集団におけるＴＥ事象率を表している可能性がより高いが、このような推定は後に考察する真のＴＥ事象率を過小評価している場合もある。更に又、個々の試験前ＴＥ事象率における非均一性にも関わらず、エクリズマブ治療は一貫して、各個々の試験におけるＴＥ事象率を顕著に低減している。
【０１４４】
血栓に対するエクリズマブの効果の頑健性に関する試験
上記において観察されたＴＥ事象率の明確な低減のため、５種のポストホック分析を実施することにより、観察された作用の頑健性を試験した。確認された主要な混同し易い問題点は、医学的履歴と比較した場合の無作為化された臨床治験におけるＴＥ事象率報告の低減の可能性、エクリズマブ治療前の期間における経時的なＴＥ事象率の低減、エクリズマブ治療前と治療期間の年間患者数の間の定量的な不均衡、以前のＴＥを有する患者に対するエクリズマブ治療の影響、併用抗凝固剤療法に起因するエクリズマブ治療前の期間中のＴＥ事象率の低減であった。
【０１４５】
医学的履歴と比較した場合の無作為化された臨床治験におけるＴＥ事象率報告の低減の可能性の評価
参加前の医学的履歴と比較した場合の無作為化された臨床治験中のＴＥ報告の予期せぬ低減の潜在的な混同し易い影響に対してコントロールするために、ＴＥ事象を参加前及びプラセボ治療したＣ０４−００１患者において比較した。
【０１４６】
プラセボ治療した患者におけるＴＥ事象率はプラセボ治療の前の同じ患者における率と比較して低減していなかった。ＴＥ事象率はプラセボ治療前の年間１００患者当たり２．３４事象であり、そしてプラセボ治療した同じ患者において年間１００患者当たり４．３８事象であった。血栓塞栓事象率を表４に示す。
【０１４７】
この分析は、エクリズマブの臨床試験の間のＴＥ事象率の報告に何らかの内因性の低減があったという見解を裏付けていない。
【０１４８】
【表４】
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投与前１２か月対エクリズマブ投与
（ｉ）治験参加直前のＴＥ事象率における予期せぬ低減、及び（ｉｉ）エクリズマブ治療前とエクリズマブ治療期間に関連する年間患者数の間の定量的不均衡の両方の潜在性を評価するために、単一の分析を実施し；エクリズマブ治療前ＴＥ事象率を分割し、そしてエクリズマブ治療直前の１２か月の間のみ調べ、そして使用可能なエクリズマブ治療期間と比較した。この単一分析は分析からより隔たった年を除去し、そしてそれにより患者のもっとも最近の医学的状態により着目すること、及び、エクリズマブ治療を受けた現在使用可能な年間患者数に治療前の分析において考慮した年間患者数を等しくすることの両方に寄与している。
【０１４９】
エクリズマブ治療の開始直前のわずか１２か月の期間のＴＥ事象率と比較して、エクリズマブ治療は個々の臨床試験の各々における同じ患者のＴＥ事象率の低減、及び、全体的ＴＥ事象率の有意な低減をもたらしている。ＴＥ事象率はエクリズマブ治療前の年間１００患者当たり１７．２１事象から、エクリズマブ治療を受けた同じ患者において年間１００患者当たり１．２２事象に低減した（ｐ＝０．０１３）。これは９３％の相対的低減及び年間１００患者当たり１５．９９ＴＥ事象の絶対的低減を表す。血栓塞栓事象率は表５に示す通りである。
【０１５０】
特筆すべき点として、エクリズマブ治療直前１２か月の期間のＴＥ事象率は、最初のＴＥ／ＰＮＨ診断よりも早期からエクリズマブＰＮＨ治験の１つへの参加までに渡る全期間に関して、年間１００患者当たり７．４９ＴＥ事象の凝集事象率と比較した場合に、年間１００患者当たり１７．２１ＴＥ事象に顕著に増大している。即ちデータは、エクリズマブ治療直前の１２か月の間のＴＥ事象率は、全体的なエクリズマブ治療前事象率と比較して低減していないことを明らかにしている。治験参加直前のこの上昇したＴＥ事象率は、エクリズマブ治療前のデータセットにおける実質的な生存者の偏りを示すものと考えられる。更に又、エクリズマブ治療の開始直前の期間のＴＥ事象率のこの上昇パターン後には、エクリズマブ治療によるＴＥ事象率の相応した停止となる。
【０１５１】
以下の表５に示す通り、２つの比較群における年間患者数を等しくするために分析を分割することは、ＴＥ事象率に対するエクリズマブの観察された有益な影響を軽減しなかった。エクリズマブ治療の前及び治療中で概ね等しい量の年間患者数が分布しているとすれば、エクリズマブ治療によるＴＥ事象率の観察された相対的及び絶対的な低減は、もしあるとすれば、一次分析で観察されたものよりも高値である。
【０１５２】
【表５】
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以前のＴＥを有する患者に対するエクリズマブ治療の影響の評価
分析に対する以前の血栓の影響をコントロールし、そして識別するために、以前のＴＥを有する患者においてＴＥ事象率に対するエクリズマブの効果を調べた。エクリズマブ治療前にＴＥ事象を有していなかった患者は分析から除外した。
【０１５３】
エクリズマブ治療前に以前のＴＥを有していた患者における血栓塞栓事象率と比較して、エクリズマブ治療は個々の臨床試験の各々で同じ患者においてＴＥ事象率の低減及び全体的ＴＥ事象率の有意な低減をもたらした。ＴＥ事象率はエクリズマブ治療前年間１００患者当たり２１．９５ＴＥ事象から、エクリズマブ治療を受けた同じ患者において年間１００患者当たり３．４２ＴＥ事象にまで低減した（ｐ＜０．００１）。これは８４％の低減及び年間１００患者当たり１８．５３ＴＥ事象の絶対的低減を表す。血栓塞栓事象率は表６に示す通りである。
【０１５４】
こうして、エクリズマブ治療前に最も高値のＴＥ事象率を有する患者においては、エクリズマブ治療はＴＥ事象率の相応して高度に有意な低減を誘発した。
【０１５５】
【表６】
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抗凝固剤療法を同時適用された患者に対するエクリズマブ治療の影響の評価
エクリズマブ治療前に経時的にＴＥ事象率を低減する他の抗血栓症治療薬（抗凝固剤及び抗血小板療法の両方を含むことができる）の潜在的影響を評価するために、以前に抗凝固剤療法を受けた患者におけるＴＥ事象率に対するエクリズマブ治療の効果を具体的に調べることにより、抗凝固剤療法の潜在的に混同し易い効果をコントロールした。抗凝固剤を全く投与されたことのない患者におけるＴＥ事象率も又調べ；これらの分析においては、抗凝固剤療法の開始前のＴＥ事象は除外した。
【０１５６】
エクリズマブ治療前に抗凝固剤療法を受けた患者におけるＴＥ事象率と比較して、エクリズマブ治療は個々の臨床試験の各々における同じ患者においてＴＥ事象率を低減し、そして全体的なＴＥ事象率を有意に低減した。ＴＥ事象率は抗凝固剤療法を受けたがエクリズマブ治療開始前であった年間１００患者当たり１４．００ＴＥ事象から、同じ患者においてエクリズマブ治療を受けた年間１００患者当たり０．００ＴＥ事象まで低減した。これは１００％の相対的低減及び年間１００患者当たり１４．００ＴＥ事象の絶対的低減を表す。血栓塞栓事象率は表７に示す通りである。
【０１５７】
エクリズマブ治療前に抗凝固剤療法を受けなかった患者における血栓塞栓事象の無視できる率と比較して、エクリズマブ治療は血栓事象率の意味のある変化をもたらさなかった。ＴＥ事象率はエクリズマブ治療前の年間１００患者当たり１．３１ＴＥ事象であり、そしてエクリズマブ治療を受けた同じ患者においては年間１００患者当たり２．９０ＴＥ事象であった（ｐ＝１．０００）。血栓塞栓事象率は表８に示す通りである。
【０１５８】
【表７】
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【０１５９】
【表８】
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エクリズマブはＰＮＨの治療に関して安全であり、十分な耐容性を有することが明らかにされた。ＰＮＨと診断された患者の試験において、エクリズマブ療法に関連する見かけ上有意な安全性の問題点は存在しなかった。有害事象の頻度はエクリズマブとプラセボ治療患者で同様であり、そして重篤な有害事象の全体的頻度はプラセボよりもエクリズマブで低値であった。効果的に治療され、臨床的後発症を伴うことなく消散したワクチン接種ＰＮＨ患者におけるナイセリア種の感染が１例報告された。感染症の全体的頻度はエクリズマブとプラセボで同様であった。ＰＮＨ患者におけるエクリズマブの中断後の重篤な溶血は観察されず、そしてエクリズマブを中断した患者は標準的な施療により効果的に対処された。骨髄不全障害の発生率はエクリズマブ治療で変化しなかった。更に又、これらの試験において用量関連の毒性は観察されなかった。
【０１６０】
（実施例３）
補体抑制剤エクリズマブはＰＮＨを有する患者における血管内溶血及び輸血の必要性を低減することが分かった。エクリズマブ治療患者は、プラセボと比較して血管内溶血の８５．５％低減を示した（ＬＤＨ曲線下部面積により計測、ｐ＜０．００１）。エクリズマブによる溶血のこの低減は、ベースラインにおける０．８１ｘ１０１２個／Ｌの中央値から２６週における２．０５ｘ１０１２個／ＬまでのＰＮＨのＲＢＣ質量の２．５倍増大をもたらした（ｐ＜０．００１）が、プラセボ治療患者におけるＰＮＨのＲＢＣ質量は相対的に不変のままであった（１．０９ｘ１０１２個／Ｌの中央値から１．１６ｘ１０１２個／Ｌ）（図１１）。ＰＮＨのＲＢＣ質量の増大は、プラセボと相対比較してエクリズマブ治療患者においてヘモグロビンレベルの全体的上昇を伴っていた（ｐ＜０．００１、混合モデル分析）。輸血されたＰＲＢＣ単位の数量はプラセボでの１０．０／患者の中央値からエクリズマブで０．０／患者まで低下（ｐ＜０．００１）し、そしてエクリズマブ治療患者の５１．２％が輸血非依存性となった（これに対してプラセボ患者では０．０％、ｐ＜０．０１）。エクリズマブ使用時にある程度の輸血を要した患者であっても、プラセボで患者当たり１０．０単位の中央値からエクリズマブで６．０単位／患者にまで、輸血の必要性の顕著な低減を示した（ｐ＜０．００１）。エクリズマブによる輸血ＰＲＢＣ単位の低減は治療前の輸血の必要性とは無関係に観察され、統計学的有意性は３治療前輸血階層中３つにおいて達成された（４〜１４単位／年；１５〜２５単位／年；及び＞２５単位／年、各階層でｐ＜０．００１）（表９参照）。有意な低減は、輸血非依存性を達成したエクリズマブ治療患者（ｐ＜０．００１）並びに達成しなかった者（ｐ＜０．００１）における血管内溶血（ＬＤＨ）において観察された（表１０参照）。考え合わせると、これらのデータは、エクリズマブによるＰＮＨの血管内溶血の効果的なコントロールは、内因性ＲＢＣの増大、ヘモグロビンレベルの改善、及び輸血必要性の低減により明らかな通り、貧血の実質的な改善をもたらすことを示している。エクリズマブによる血管内溶血の実質的で有意な低減及び貧血の改善は、過去の輸血必要性や患者が治療中輸血非依存性を達成したかどうかに関わらず、明らかにされた。Ｈｉｌｌｍｅｎら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３５５：１２３３−１２３４（２００６）参照。
【０１６１】
【表９】
2010509338.tif 000011
【０１６２】
【表１０】
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（実施例４）
４８歳の輸血依存性の男性は１９８８年５月に再生不良性貧血、１９９３年９月にＰＮＨと診断された。患者は１９９３年９月からＰＮＨ発症のために輸血依存性となっており、４〜６週毎に充填赤血球（ＰＲＢＣ）の輸血を必要としている。患者はエクリズマブの注入を２００２年５月２２日に開始し、現在は１週おきに９００ｍｇを投与されている。２００２年１１月６日、エクリズマブ投与６か月の後、ｒＨｕＥｐｏ（ＮｅｏＲｅｃｏｒｍｏｎ（登録商標））療法を以下の用量、即ち；最初の２か月は４５０ＩＵ／ｋｇ／週、３分割用量；その後の１５か月は９００ＩＵ／ｋｇ／週、３分割用量；そして２００６年５月３日まで７５０ＩＵ／ｋｇ／週、３分割用量；において開始した。その時点で患者は２週毎に３００ｍｇの用量でＡｒａｎｅｓｐ（登録商標）に切り替えた。用量は２００６年６月２８日に２週毎５００ｍｃｇに増量した。
【０１６３】
血管内溶血は酵素ラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）のレベルを計測することにより評価した。赤血球生成のレベルは網状赤血球数を計測することにより測定した。ＰＮＨのＲＢＣ質量はフローサイトメトリーにより評価されたＰＮＨＩＩＩ型ＲＢＣの比率をＲＢＣの絶対数にかけ合わせることにより計算した。ヘモグロビンレベル及びＰＲＢＣ輸血必要性も又モニタリングした。全ての評価を収集して現データとし、結果を２００６年８月までに報告する。
【０１６４】
エクリズマブ療法の前年の間、平均ＬＤＨレベルは２，０７５ＩＵ／Ｌ（正常範囲の上限の４倍超）であり、平均のヘモグロビンレベルは１０．５ｇ／ｄＬであり、そして平均の網状赤血球数は７７．５ｘ１０９／Ｌであった（表１１）。ＰＮＨＩＩＩ型ＲＢＣの絶対数は１．１ｘ１０１２／Ｌであり、そしてこれらの細胞の比率は総ＲＢＣ質量の５０％未満を構成していた。患者は治療前期間は月当たりＰＲＢＣ１．８単位を必要とし（表１１）、合計９輸血及び２２単位を受けていた（図１２）。
【０１６５】
【表１１】
2010509338.tif 000013
エクリズマブ治療開始後、溶血は急速に、そして一貫して低減し、それは平均ＬＤＨレベルの７８％低下として示された（表１１）。ＰＮＨＩＩＩ型ＲＢＣ質量の同時増大（７３％）も又明らかになり、これらの細胞の増強された生存が裏付けられた。更に又、各月の必要な輸血の平均数が４４％まで低下た。ＲＢＣヘモグロビンは、たとえ輸血必要性が減少しても安定しており、内因性ヘモグロビンレベルの実質的上昇が示された（表１１）。
【０１６６】
エクリズマブ治療６か月の後、患者にｒＨｕＥｐｏ療法を併用したところ、１１３％の平均網状赤血球数の増大がもたらされた（表１１）。赤血球生成のこの増大はエクリズマブ治療単独で達成されたものを超えたＰＮＨＩＩＩ型ＲＢＣ質量の更に３２％の増大を伴っていた。更に又、ＲＢＣヘモグロビンレベルは同じ期間中１０．２ｇ／ｄＬから１１．４ｇ／ｄＬへの上昇を示していた。貧血におけるこの改善は輸血の必要性を更に低下させ、最終的には２年超の輸血非依存性をもたらした（図１２）。２年の輸血非依存性の後に１回の輸血を行ったところ、赤血球生成の一過性の低下が併発し、これは網状赤血球数の低下により明らかにされた（データ示さず）。血管内溶血の増大の兆候はなく、そしてＬＤＨレベルは全治療期間中、正常範囲内、又は正常範囲の上限の僅かに超えた程度のままであった。この患者はエクリズマブ及びｒＨｕＥｐｏの投与を受け続け、そして３年を超えて僅か１回の輸血しか受けていない。
【０１６７】
（実施例５）
肺高血圧（ＰＨＴ）は遺伝性の溶血性貧血の顕現性の一般的な合併症である。それは血管内溶血及び低下した酸化窒素（ＮＯ）生体利用性に機械的及び疫学的に関連付けられている。この合併症が鎌状赤血球疾患及びサラセミアを有する成人患者の約３０％で報告されているが、観察された血管内溶血の最高レベルを有する後天的疾患である発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を有する患者におけるＰＨＴの蔓延度は調べられていない。ＰＮＨ患者は頻繁には重度の疲労及び労作性呼吸困難を包含する溶血とＰＨＴの両方に一貫した症状を有する。従って、本発明者等はＰＮＨにおけるＰＨＴの存在について調べ、そしてその発症に関連する潜在的な機序を、オゾン系のケミルミネセンスを用いながらＮＯを瞬間的に消費する血漿の能力を計測することにより探索した。
【０１６８】
ドプラー心エコー検査を２８溶血性ＰＮＨ患者において実施することにより肺動脈収縮期圧力を推定した。収縮期ＰＨＴは休止時の≧２．５ｍ／ｓの三尖弁逆流ジェット速度（ＴＲＶ）により定義した。１４人（５０％）の患者が上昇した肺動脈収縮期圧力を有していた。１２人（４３％）は軽度〜中等度のＰＨＴ（平均ＴＲＶ２．６ｍ／ｓ±０．０１）であったのに対し、２人（７％）は中等度〜重度の圧力を有していた（平均ＴＲＶ３．７ｍ／ｓ±０．０２）。ＰＮＨ患者（ｎ＝３２）由来の血漿は３４．６±８．３μＭのＮＯを消費したのに対し、正常対象（ｎ＝９）は２．２±０．６μＭのＮＯを消費していた（ｐ＝０．０００１）。ＬＤＨレベルはＮＯ消費と相関していた（ｒ＝０．６３４２、ｐ＜０．０００２）。溶血を低減するために３年の中央値でエクリズマブにより治療された７患者の別個のコホートにおいては、ＮＯを消費する能力はより低値であった（１３．２±４．８μＭのＮＯ）。
【０１６９】
（実施例６）
ＰＮＨ患者は不良なクオリティーオブライフ（ＱｏＬ）をもたらす多様で重篤な溶血誘発の疾病に罹患する。ＰＮＨ患者における疲労は障害をもたらす場合があり、そしてレベルは貧血の癌患者と同様である。疲労は多因性であり、伏在する貧血と溶血の両方に関連する。患者は低減した全般的健康状態、患者機能、疼痛及び呼吸困難に罹患する。補体抑制剤エクリズマブによる治療は血管内溶血を低減し、貧血を改善する。疲労及び他の患者の報告された転帰のレベルに対するエクリズマブ治療の影響は、２つの異なる手段、即ちＦＡＣＩＴ−疲労及びＥＯＲＴＣＱＬＱ−Ｃ３０を用いながら二重盲検プラセボコントロール試験（ＴＲＩＵＭＰＨ）において予測的に検討されている。ＱｏＬの改善は種々の手段における臨床的利益の規模の尺度である標準化効果サイズ（ＳＥＳ）を用いて定量した。エクリズマブ治療は、プラセボと比較して、ＦＡＣＩＴ−疲労スケール（ＳＥＳ＝１．１３，ｐ＜０．００１）並びにＥＯＲＴＣ−ＱＬＱ−Ｃ３０疲労サブスケール（（ＳＥＳ＝１．１２、ｐ＜０．００１）で計測した場合に、疲労の極めて大きい有意な改善を伴っていた。同様に、予め特定された最少重要差（ＭＩＤ）を達成した患者のパーセントは、エクリズマブ及びプラセボ治療患者でＦＡＣＩＴ−疲労を用いた場合にはそれぞれ５３．７％対２０．５％（ｐ＝０．００３）；ＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−Ｃ３０を用いた場合にはそれぞれ６７．６％対２４．４％であった。治療非依存性一変量解析によれば、血管内溶血の低減（低下したＬＤＨレベル）及び貧血の改善（上昇したヘモグロビンレベル）は両方とも疲労の改善と有意に関連していた。更なる多変量解析によれば、溶血の低減は貧血の改善よりも高度に疲労の改善を予測するものであった。エクリズマブ治療は又、以下のＥＯＲＴＣ−ＱＬＱ−Ｃ３０サブスケールにおいて中〜大のＳＥＳを有する有意な改善を伴っており、即ち：全般的健康状態（０．８７、ｐ＜０．００１）；役割機能（０．９３、ｐ＜０．００１）；社会機能（０．５７、ｐ＝０．００３）；認知機能（０．７８、ｐ＝０．００２）；身体機能（１．０１、ｐ＜０．００１）；情動機能（０．５１、ｐ＝０．００８）；疼痛（０．６５、ｐ＝０．００２）；呼吸困難（０．６９、ｐ＜０．００１）；及び食欲喪失（０．５０、ｐ＜０．００１）であった。これらのデータはエクリズマブ治療による血管内溶血の消散は疲労、全般的健康状態、患者機能、及びＰＮＨの疾患関連症状を包含する患者の報告された転帰における大きな臨床的に意味のある改善をもたらしている。
【０１７０】
（実施例７）
発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）においては、血球からのＧＰＩアンカー終末補体抑制剤ＣＤ５９の欠如が赤血球を慢性溶血に罹患しやすくし、貧血、疲労、血栓、不良なクオリティーオブライフ（ＱｏＬ）、及び輸血への依存性をもたらす。エクリズマブ、即ち補体抑制剤は、無作為化プラセボコントロール治験（ＴＲＩＵＭＰＨ）において正常又は正常に近い血小板数を有する輸血依存性患者において、血管内溶血及び輸血必要性を低減した。ＳＨＥＰＨＥＲＤ、即ちオープンラベルの非プラセボコントロールの５２週臨床第ＩＩＩ相試験は、有意な血小板減少症及び／又は低い輸血必要性を有する患者を包含するより広範なＰＮＨ集団においてエクリズマブの安全性及び薬効を評価するために進行中である。エクリズマブは以下の通り、即ち：６００ｍｇＩＶ７日毎ｘ４；９００ｍｇ７日後；そして次に９００ｍｇを１４±２日毎に投与した。エクリズマブは３３国際地区において９７患者に対し投与した。予備特定された６か月の中間分析において、最も頻発した有害事象は頭痛（５０％）、鼻咽頭炎（２３％）、及び悪心（１６％）であり；大部分は軽度〜中等度の重症度であった。薬物に「恐らく」又は「決定的に」関連しているものとして報告された感染症又は重篤な有害事象は無かった。血管内溶血、即ちＰＮＨにおける中枢的な臨床兆候発現及び治験の一次代理薬効終点は、ラクテートデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）曲線下部面積の変化により評価した場合、エクリズマブ患者において有意に低減していた（ｐ＜０．００１）。ＬＤＨレベルはベースラインにおける２，０５１Ｕ／Ｌの中央値から２６週の２７０Ｕ／Ｌに低下した（ｐ＜０．００１；正常範囲１０３〜２２３Ｕ／Ｌ）。血管内溶血のコントロールは、輸血の必要性が治療前４．０ＰＲＢＣ単位／患者の中央値から治療中０．０に低下し（ｐ＜０．００１）、患者の約５０％が輸血非依存性となり（ｐ＜０．００１）、そしてヘモグロビンレベルが上昇した（ｐ＜０．００１）ことから、貧血の改善をもたらした。疲労は、ＦＡＣＩＴ−疲労及びＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−Ｃ３０手段の両方により計測した場合、ベースラインと比較してエクリズマブ治療では有意に改善されていた（各々ｐ＜０．００１）（図１３及び表１２）。他のＥＯＲＴＣ−ＱＬＱ−Ｃ３０患者の報告された改善を示す転機は、全般的健康状態（ｐ＜０．００１）、５種全ての患者機能サブスケール（ｐ＜０．００１）及び症状／単一項目サブスケール９種中７種（ｐ≦０．０３）を包含していた。これらの結果はＰＮＨにおけるエクリズマブの有益な効果は以前に試験されたものよりも遙かに広範な患者集団に適用されることを明らかにしており、そして更に、エクリズマブ治療が血管内溶血を顕著に低減し、これにより治療患者に臨床的利益を与えることを強調している。
【０１７１】
【表１２】
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（実施例８）
発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）は、終末補体による溶解に高度に感受性であるＰＮＨ赤血球のクローン増殖を態様とする。ＰＮＨにおける主要な疾患は免疫媒介性の再生不良性貧血及び種々の重症度の抹消血液血球減少症の形態の骨髄不全である。実施例１において補体抑制剤エクリズマブによる１１患者の溶血及び輸血の良好なコントロールを記載している。これらの１１患者のうち１０人は血管内溶血及び輸血の低減を維持しつつ約３年後もエクリズマブ療法を継続している。これらの患者におけるエクリズマブ療法の有効性は、補体媒介溶解からのＰＮＨ赤血球の保護及びこの細胞集団の増殖を介したものである。フローサイトメトリー試験によれば、ＰＮＨ赤血球のパーセントは治療前の平均値３６．７％から治療６４週の５８．４％まで有意に増大した。重要な点は顆粒球、単球及び血小板ＰＮＨクローンサイズが治療前には＞９０％であり、治験中を通じて全患者に関して安定であり続け、造血の大部分がＰＮＨ幹細胞に由来することを示唆していた。ＰＮＨ赤血球クローンは、ある患者において溶血がエクリズマブ療法により予防される場合には、これはＰＮＨ幹細胞の活性をより正確に示しているため、他の骨髄造血細胞のクローンサイズに接近するはずであると仮定できる。
【０１７２】
全患者において２１日までに溶血が実質的に低減した。１１患者中９人において、ＰＮＨ赤血球数の急速な上昇があり、ＰＮＨ赤血球の平均の絶対数は治療前の１．３７ｘ１０１２／Ｌからエクリズマブ治療２週で１．５０ｘ１０１２／Ｌ（Ｐ＝０．２１）、４週で１．７４ｘ１０１２／Ｌ（Ｐ＝０．００２）、そして１２週で２．１１ｘ１０１２／Ｌ（Ｐ＝０．００１）にまで上昇した。最大理論的赤血球応答は平均１７８日で達成された（範囲４９〜４１９日）。ＰＮＨ赤血球の平均絶対数は最大応答で２．３７ｘ１０１２／Ｌまで上昇し（Ｐ＝０．００１）、７３％の上昇であった（範囲３６％〜２０７％）。全患者が治療１８か月よりも前に最大応答を達成しており、クローンサイズはその後は安定していた。２患者では溶血の消散においてエクリズマブが有効であったにも関わらず、治療の前後でＰＮＨ赤血球の絶対数は変化しなかった。これは恐らくはこれらの患者において溶血の程度がより低値であったこと、及び骨髄不全がより深刻であったことに起因していると考えられる。エクリズマブ療法の最初の１２か月の間のＰＮＨ赤血球絶対数を測定することで、どの患者が輸血非依存性となるか、そしてどの患者が赤血球生成をブーストするための追加的な成長因子による支援から利益を被るかを確認できる。更に又、長期のエクリズマブ療法はこの初期の臨床試験における安定なＰＮＨ赤血球クローンサイズを伴うと考えられる。
【０１７３】
（実施例９）
意外にも、Ｃ０４−００２試験においてエクリズマブ治療はベースラインと比較して血小板活性化のパラメーターにおける見かけ上の上昇を伴っていた（混合モデル分析、全体）。統計学的に有意な上昇は単球−血小板凝集（平均上昇７．９％、Ｐ＝０．００２）、好中球−血小板凝集（平均上昇５．３％、Ｐ＜０．００１）、及びＰ−セレクチン陽性血小板のパーセント（平均上昇３．７％、Ｐ＜０．００１）において観察された。同様に、Ｃ０４−００１試験のエクリズマブ治療患者において、上昇が単球−血小板凝集（平均上昇１５．０％、Ｐ＝０．０５６）、好中球−血小板凝集（平均上昇１１．２％、Ｐ＝０．０７７）、及びＰ−セレクチン陽性血小板のパーセント（平均上昇５．１％、Ｐ＝０．０４４）において観察された。
【０１７４】
複合させたＣ０４−００１及びＣ０４−００２試験において、有意な上昇は又、単球−血小板凝集（平均上昇１０．１％、Ｐ＜０．００１）、好中球−血小板凝集（平均上昇７．０％、Ｐ＜０．００１）、及びＰ−セレクチン陽性血小板のパーセント（平均上昇４．１％、Ｐ＜０．００１）において観察された。このプラセボコントロールＣ０４−００１試験において、エクリズマブコホート並びにプラセボコホートは、ベースラインからの血小板活性化のパラメーターの同様の上昇を示した（表１３Ａ−Ｆ）。これらのプラセボ治療患者において、ベースラインからの上昇は単球−血小板凝集（平均上昇２．２％、Ｐ＝０．７７１）、好中球−血小板凝集（平均上昇６．９％、Ｐ＝０．１３５）、及びＰ−セレクチン陽性血小板のパーセント（平均上昇５．９％、Ｐ＝０．００１）において観察された（表１４Ａ−Ｃ）。
【０１７５】
【表１３Ａ】
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【０１７６】
【表１３Ｂ】
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【０１７７】
【表１３Ｃ】
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【０１７８】
【表１３Ｄ】
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【０１７９】
【表１３Ｅ】
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【０１８０】
【表１３Ｆ】
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【０１８１】
【表１４Ａ】
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【０１８２】
【表１４Ｂ】
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【０１８３】
【表１４Ｃ】
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参照による組み込み
本明細書に記載した全ての公開物及び特許は、各々個々の公開物又は特許が具体的及び個々に参照により組み込まれることを記載されているがごとく参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。矛盾がある場合は、ここに記載されている如何なる定義も含めて本出願が優先する。
【０１８４】
等価物
要件発明の特定の実施形態を本明細書において明示的に開示したが、上記明細書は例示的であって限定するものではない。本発明の多くの変形は本明細書及び後述する特許請求の範囲を鑑みれば当業者には明らかなものである。本発明の完全な範囲は特許請求の範囲、並びにその完全な範囲の等価物、及び明細書並びにその変形例を参照することにより決定されるべきである。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【国際調査報告】
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