(57)【要約】  本発明は医薬に関連し、コレステロール値を正常化する薬剤を生成するために用いることができる。本発明の目的は、毒性がなく、かつ生体に依存症を引き起こすことがない、生理学的に許容されるコレステロール制御剤を開発することである。上記薬剤を生成するための方法は、３６．５〜４０．０％ホルムアルデヒド薬物溶液を重量比２〜６にて用いる工程、及び注入のために用いられる、滅菌された、０．８５〜０．９５％塩化ナトリウム溶液を重量比９９４〜９９８にて上記ホルムアルデヒド薬物溶液に添加し、０．０７〜０．２４％ホルムアルデヒド溶液を生成する工程である。上記薬剤は、温度１５〜３５℃で保管される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
コレステロール低下作用を有する製剤であって、
化学物質由来の有効成分としての、濃度３６．５〜４０％のホルムアルデヒド水溶液と、特定用途の賦形剤としての、濃度０．８５〜０．９５％の注入用塩化ナトリウム等張液とを、以下の重量比：
濃度３６．５〜４０％のホルムアルデヒド水溶液  ２〜６；
濃度０．８５〜０．９５％の注入用塩化ナトリウム等張液  ９９４〜９９８
で含有することを特徴とする製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は薬物に関し、コレステロール低下薬を生成するために用いることができる。
【背景技術】
【０００２】
血中コレステロールは、脂質代謝の重要な特徴である。アテローム性動脈硬化症及び冠状動脈性心臓病を患う患者において、コレステロールを低下させるための治療は、結果的に心疾患による死亡率の３０〜４０％の減少をもたらす。血中コレステロールレベルと冠状動脈性心臓病との間には直接的な関係がある。
【０００３】
植物調製物に基づくコレステロール低下薬が知られている。
【０００４】
特に、コレステロール低下薬（IPC A61K35/78によるRF Patent No. 2162333, Jan. 27, 2001公開を参照のこと）は、リコポディウム（Licopodium）（ウルフズ−クロウズ（wolfs-claws））、オーラムイオダタム（Aurum iodatum）(金ヨウ素酸（auric iodate）)、バリウムカルボニカム（Barium carbonicum）（炭酸バリウム）、及びアルイムサチバム（Alluim sativum）（ニンニク）を、Ｃ１２希釈において同一比で含むことが知られている。
【０００５】
この薬物はホメオパシー調製物の混合物であり、これらの調製物は、それぞれ、低血圧及びアテローム硬化進行から慢性肝疾患、尿路結石症、脂肪過多症等までの特定の兆候のために用いられる。上述したような多成分薬物の使用は多剤併用（polyprogmasy）と同等である。多剤併用により生じる治療に対する患者の反応は、通常、解釈が困難であり、かつ適切な治療計画の組み立てから最終的に除外することが困難である。
【０００６】
植物調製物に基づくコレステロール低下薬（IPC A61K35/78によるRF Patent No. 2152221, Jul. 10, 2000公開を参照のこと）は、有効成分としてサルソラコリナ（Salsola Collina）ハーブの乾燥抽出物を含むことが知られている。
【０００７】
サルソラコリナに基づく植物調製物の使用は、化学物質の組み合わせの使用と同等である。なぜならば、上記特許明細書に記載されているように、有効な複合体に、フラボノイド、多糖、カロチノイド、ステリン、サポニン、脂質、アミノ酸、及び微量元素が含まれているからである。上述の類似物と同様に、このような多種は、多剤併用と同等であり、治療に対する患者の反応の正確な解釈を妨害する。さらに、薬物中の活性成分の含有量が、０．２５％から、薬物規格の低レベルを示す９９．９％まで変化する。
【０００８】
化学調製物に基づくコレステロール低下薬が知られている。特に興味深いのは、ニコチン酸及びその誘導体、胆汁酸抑制剤（bile acids sequestrants）、フィブリン酸誘導体（フィブラート）、プロブコールのような薬物である(Okorokov, A.N. Treatment of Internal Diseases / Practical Guide. Minsk: Vysheshaya Shkola, Vitebsk: Belmedkniga, 1996, vol. 3, book 1, pp. 19-41を参照のこと)。
【０００９】
しかしながら、ニコチン酸を用いた処置は、肝機能障害、慢性胃炎の悪化、胃潰瘍のような複数の副作用に結びつく。また、ニコチン酸を用いた処置は、高血糖症、皮膚充血及び血中の尿酸値の上昇の原因となり得る。
【００１０】
胆汁酸抑制剤（sequestrant）を用いた治療は、吐き気、鼓腸、便秘及び下痢のような副作用に結びつく。このような治療はまた、トリグリセリド値の上昇、並びに脂溶性ビタミン（Ａ、Ｄ、Ｋ）及び葉酸の消化傷害を引き起こし得る。
【００１１】
フィブラート（ベザフィブラート（bezafibrate）、フェノフィブラート（fenophibrate）、ゲムフィブロジル（gemfibrozil））の使用の副作用には、筋疾患及び胆道結石症の増進があり、さらに白血球減少、血小板減少症及び貧血の原因となる可能性がある。
【００１２】
プロブコールは、心室不整脈及び消化不良になる傾向があり、肝機能障害を進行させ得る。
【００１３】
ロバスタチン（Lovastatin）（同義語：メバコール（Mevacor）、ロバコール（Lovacor）、メドスタチン（Medostatin）、レコール（Recol）、ロバコール（Rovacol））は、代謝過程を調節するコレステロール低下薬であり、化学物質由来の有効成分及び特殊用途の賦形剤を含む。ロバスタチンは、適用された薬物に非常に密接に関連している(Vidal's Guide. Drugs in Russia. Moscow: AstraFarmServis, 2000, pp. B-364 to B-365を参照のこと)。
【００１４】
上記有効成分は、スタチンに属しており、[IS(Iα (R*), 3α, 7β, 8β (2S*, 4S*), 8 αβ) 1,2,3,7,8, 8 α, - ヘキサヒドロ-3,7-ジメチル-8[2-(テトラヒドロ)-4-ヒドロキシ-6-オキソ-2H-ピラン-2-イル]-1-ナフタレニル 2-酪酸メチルである。この成分は、コレステロールの生合成を抑制することによって作用する。体内において、ロバスタチンは、β−酸素酸を得るために代謝される。β−酸素酸は、酵素3-ヒドロキシ-3-メチル-グルタリル 補酵素A(HMG-CoA)還元酵素の競合抑制剤である。
【００１５】
この薬物はまた、賦形剤として、ラクトース、ゲル化でんぷん、微結晶性セルロース、ブチル化ヒドロキシアニソール、インジゴチン（EI32）及びステアリン酸マグネシウムを含んでいる。
【００１６】
ロバスタチンを含むスタチンの欠点は、これらの薬物を長期間服用すべき点である。さらに、スタチンは、肝臓、筋肉、胃腸管に影響を及ぼす可能性があり、睡眠障害、頭痛を引き起こし得る。繰り返し薬物投与することによって、薬物治療の有効性は減少し得る（タキフィラキシー）（Cromwell W.C. Ziajka P.E. Development of tachyphylaxis among patients taking HMG CoA reductase inhibitors./ Am J. Cardiol 2000; 86: 1123-1127// The translation is published in CONSILIUM medicum journal, 2001, vol. 3, no.2. Translated by Elagin, R.I. Razvitie takhifilaksii u patsientov, poluchayushchikh ingibitory HMG-CoA reductasyを参照のこと）。さらに、スタチンは生体異物特性を示す。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
本発明の目的は、毒性及びタキフィラキシーのない、生理学的に許容可能なコレステロールを低下させる製剤を開発することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
指定した課題を解決するために、上記製剤は、有効成分としての、濃度３６．５〜４０％のホルムアルデヒドの水溶液と、特定用途の賦形剤としての、濃度０．８５〜０．９５％の注入用塩化ナトリウム等張液とを、以下の重量比：
濃度３６．５〜４０％のホルムアルデヒド水溶液  ２〜６；
濃度０．８５〜０．９５％の注入用塩化ナトリウム等張液  ９９４〜９９８
で含む。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明者らの認識として、特許文献及び科学技術文献において、レセプター親和性を増強することによってコレステロール値を低下させるような薬物に関する、有効なデータは全くない。
【００２０】
ホルムアルデヒドは、細胞代謝の自然産物として知られている（Hunter B.K. et al. Formaldehyde metabolism by Escherichia coli. Carbon and solvent deuterium incorporation into glycerol, 1,2-propanediol and 1,3-propanediol.// Biochemistry, 1985, vol. 24, no. 15, pp. 4148-4155を参照のこと）。ホルムアルデヒドは、真核生物及び原核生物において、代謝活動の結果としてアルコール及びアミノ酸から生成される。また、ホルムアルデヒドは、細胞内において、遊離状態、又は他の代謝産物、主としてテトラヒドロ葉酸塩及びグルタチオンに結合した状態で見られる。ホルムアルデヒドはまた、免疫調整剤として使用されることが知られている（IPC A61K31/115によるRF Patent No. 2077882, Apr. 27,1997公開を参照のこと）。
【００２１】
血中コレステロール調節のメカニズムは、本発明者らが確立した、コレステロール値を調節するレセプターの親和性を増強する超変異メカニズムを引き起こすホルムアルデヒドの能力に基づいている。
【００２２】
本発明者らは、in vitroのホルムアルデヒドの導入が、トランスフォーミング成長因子のレベル低下を導き、これによりアポトーシス又はプログラム細胞死を引き起こすことを実験で確立した。アポトーシスは、心臓冠動脈管の動脈硬化の病原性に関係する（例えば、Storozhakov G.I., Uteshev D.B. Apoptosis’ role in the development of atherosclerosis, myocardial ischemia and cardiac insufficiency/ Cardiac insufficiency -2000. vol. 1. No.4を参照のこと）。動脈硬化の病原性において、重要な局面の一つは、内皮細胞機能障害である。これまでに、内皮細胞機能障害は、経過に依存する全ての内皮細胞の本来の最適な経過をもたらす媒介物質間の不均衡として理解されており（例えば、Cherkashin D.V. Clinical significance and correction of endothelium function - htt:/www. Cardiolog.ruを参照のこと）、これにサイトカインの排斥に関連するトランスフォーミング成長因子も含まれる（例えば、Cooper M.E., Rumbler Y., Komers R. et. al. Diabets. 1994. - No.43 - P. 1221-1228を参照のこと）。
【００２３】
血管壁の異常細胞のみならず、肝臓、甲状腺、副腎のような他の組織においても、アポトーシスにさらされた。これは同様に、脂質分解を担う酵素の再活性化、及び最終的に血中コレステロール値の正常化を導く、血液タンパク質の物理化学的状態の正常化を含む、器官の機能的な回復を結果としてもたらす。
【００２４】
ホルムアルデヒドの水溶液は、特有の鼻を刺すようなにおいを有する無色透明な液体であり、全ての割合において水及びアルコールに混和できる。
【００２５】
ホルムアルデヒドは、アルデヒド  ＨＣＯＨの種類に属しており、鼻を刺すようなにおいを有する無色の気体である。ホルムアルデヒドの分子量は３０．０３であり、２０℃における密度は０．８１５、融点は９２℃、及び沸点は１９．２℃である。ホルムアルデヒドは水及びアルコールに対して優れた溶解性がある。この物質は、水溶性の媒体又は非水溶性の媒体（ブタン、ヘキサン）中のポリオキシメチレン中において、パラホルムアルデヒドを形成するために、容易に重合される。
【００２６】
注入用塩化ナトリウム等張液は、塩辛い無色の液体である。この溶液は滅菌され、かつ非発熱性である。
【００２７】
塩化ナトリウムは、塩辛い、無臭の、水溶性（１：３）の、立方結晶又は白い結晶性粉末である。
【００２８】
適用された製剤は、無臭で、わずかに塩辛い無色透明の溶液である。
【００２９】
上記製剤は以下の方法で生成した。
【００３０】
重量比２〜６の３６．５〜４０％ホルムアルデヒド薬物溶液に、重量比９９４〜９９８の滅菌した注入用の０．８５〜０．９５％塩化ナトリウム溶液を添加し、０．０７〜０．２４％ホルムアルデヒド溶液を得た。この製剤は温度１５〜３５℃の暗所に保管すべきである。
【００３１】
実施例１：０．２ｍｌの３７％ホルムアルデヒド薬物溶液に、９９．８ｍｌの０．９％（又は０．９５％）塩化ナトリウム等張液を添加した。混合溶液を十分に撹拌した。得られた製剤中のホルムアルデヒドの終濃度は、０．０７４質量％になった。
【００３２】
実施例２：０．６ｍｌの３７％ホルムアルデヒド薬物溶液に、９９，４ｍｌの滅菌した０．９％（又は０．９５％）塩化ナトリウム等張液を添加した。混合溶液を十分に撹拌した。得られた製剤中のホルムアルデヒドの終濃度は、０．２２２質量％になった。
【００３３】
実施例３：０．６ｍｌの４０％ホルムアルデヒド薬物溶液を用いて、実施例２に記載の方法によって製剤を生成した。ホルムアルデヒドの終濃度は、０．２４質量％であった。
【００３４】
実施例４：３ｍｌの４０％ホルムアルデヒド薬物溶液に、９９７ｍｌの滅菌した０．９５％塩化ナトリウム等張液を添加した。混合溶液を十分に撹拌した。得られた製剤中のホルムアルデヒドの終濃度は、０．１２質量％であった。
【００３５】
特許請求した製剤に毒作用が全く存在しないことを証明するために、マウス実験を行った。
【００３６】
実験調査を、体重１８〜２４ｇの、異系交配ＩＣＲオスマウス及びメスマウス５６匹において行った。実験動物を、標準的な生活環境に保って飼育器の環境を定期的に手入れし、水及び餌を無制限に利用可能とした。
【００３７】
動物観察を、上記製剤の投与１４日後までの間行った。この継続した観察期間の間、全身状態、自発運動、行動、並びに刺激及び反射に対する反応を評価した。実験手順によって要求されたとき、動物の体重を測定し、餌及び水の消費量を決定した。実験中に死亡した動物を解剖し、変化の評価を行い、器官（脳、肝臓、心臓、脾臓、腎臓、副腎、精巣及び卵巣）の重量比を決定した。生存した動物は、継続した観察期間の終わりに、頸部脊椎を脱臼して固定し、解剖した。検死実験を、肉眼で確認できる変化があるか否かを評価するために行った。
【００３８】
毒性を、S. Rotの計算図表を用いて、プロビット解析のLitchfield-Wilcoxon法によって評価した。
【００３９】
０．２ｍｌの３７％ホルムアルデヒド溶液及び９９．８ｍｌの０．９％塩化ナトリウム溶液を含む製剤を、５．２５及び５０ｍｌ／体重ｋｇの分量で一度に筋肉注射により投与した。継続した観察期間の間、実験動物の体重を３回測定した（分量投与の１日後、７日後及び１４日後）。
【００４０】
調査において、５．０ｍｌ／ｋｇの分量で製剤を注入した後の実験動物の全身状態及び行動には全く変化が見られなかった。継続した観察期間中に動物が死亡した事例はなかった。体重増加は正常な範囲内であった。オス動物及びメス動物の間において、全身状態及び行動には全く相違が見られなかった。
【００４１】
２５ｍｌ／ｋｇ投与したグループにおける状況は、上述した状況と近似していた。全身状態、行動、餌及び水の消費量及び体重増加量は、オス及びメスの動物サブグループの両方において、正常な範囲内であった。
【００４２】
５０ｍｌ／ｋｇ投与したグループにおいて、動物は短期間（１分以下続く）のわずかな興奮を示したが、その後、このグループの動物の状態は、他の実験グループの状態に対して顕著な相違はなかった。
【００４３】
継続した観察期間（分量投与１４日後）の終わりに、実験動物の頸部脊椎の脱臼して固定し、解剖して、肉眼検査に供した。その後、内部を除去して体重を測定し、器官の重量比を決定した。検死実験は、実験グループ間において器官の重量比に顕著な相違はなく、正常な範囲内であったことを示した。局所反応（浸潤、充血、脱毛等）は観察されなかった。
【００４４】
他の調査において、薬物生成物の１０倍の強さと同等の濃度の製剤、例えば２ｍｌの３７％ホルムアルデヒド溶液及び９８ｍｌの０．９％塩化ナトリウム溶液を含む製剤を投与した。
【００４５】
製剤を、６、１２．５及び２５ｍｌ／ｋｇの分量で、ＩＣＲマウス（オス及びメス）にｉ．ｍ．投与した。
【００４６】
分量投与５〜６時間後までの間、実験動物は興奮性及び反応性の緩やかな機能低下を示した。呼吸及び心拍の緩やか加速があった。しかしながら、製剤の投与２４時間後までの間、動物の死亡が記録されることはなかった。ただ１匹のマウスが、呼吸停止によって、２５ｍｌ／ｋｇの分量の投与４日後に死亡した。
【００４７】
分量投与後、全ての動物において、筋肉細胞硬化の局所反応が生じた。実験の終わりに、脱毛症及び密度の高い浸潤物が注入部位に見られた。
【００４８】
調査は、初期中毒量が実験動物の体重増加に顕著な影響を全く及ぼさなかったことを示した。オスグループ及びメスグループにおける体重増加の値の変化は、許容限度内であった。
【００４９】
実験の終わりに、実験動物を固定し、肉眼検査に供した。そして、内部を除去して体重を測定し、器官の重量比を算出した。
【００５０】
治療分量の１０倍量の製剤を与えられた、オス及びメスの両方の実験動物において、脳、心臓、肝臓、脾臓、腎臓、副腎及び精巣（卵巣）における器官の重量比は、調査期間の終わりにおいて、一般の動物におけるそれぞれの正常な値から顕著に相違しなかったことを、調査は示した。
【００５１】
それゆえに、得られた結果は、適用した製剤の毒性が低いことを示唆している。
【００５２】
治療の方法は、５ｍｌの分量で上記製剤を、筋肉注射により、７日、２１日、３０日及び６０日間隔で与えることである。
【００５３】
患者のコレステロール値を測定するために、朝の時間に尺骨静脈から静脈血サンプルを得た。
【００５４】
上記製剤の臨床調査を、Declaration of Helsinkiの原則、国際倫理標準及びヒトを対象として含む調査の質及び設計のための科学的標準の要求、並びにPublic Health Law of the Republic of Belarus and Order of the Ministry of Health of the Republic of Belarus No.254 dated Aug. 18, 2000 On Conducting Clinical Studies of Drugsに従って、Republican Infectious Hospital of the Republic of Belarus (Minsk)において行った。
【００５５】
治療の有効性は、分量投与７日後、２８日後、３５日後及び６５日後に決定した。コレステロール値が５．２ｍＭ／Ｌ以下の患者は、正常であり（Okorokov, A.N. Treatment of Internal Diseases / Practical Guide. Minsk: Vysheshaya Shkola, Vitebsk: Belmedkniga, 1996, vol. 3, book 1, pp. 19-41を参照のこと）、コレステロール値が５．２〜６．２ｍＭ／Ｌの患者は中程度であり、コレステロール値が６．２ｍＭ／ｌより高い患者は重度の高コレステロール血症であると考えられる。
【００５６】
コレステロール値是正の結果を表１に示す。
【００５７】
【表１】
2010529190.tif 000002
【００５８】
表２及び３に示すデータは、中程度及び重度の高コレステロール血症の患者における治療の効果を示す例証的なデータである。
【００５９】
【表２】
2010529190.tif 000003
【００６０】
【表３】
2010529190.tif 000004
【００６１】
このように、適用した製剤は、毒性及びタキフィラキシーを引き起こすことなく血中コレステロール値を低下させる。
【国際調査報告】
2010529190.tif 000005
2010529190.tif 000006