(57)【要約】  本発明は、異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性が関係する疾患または障害、特にc-kit、PDGFRαおよびPDGFRβキナーゼの異常な活性化が関係する疾患または障害を処置するまたは予防するための、新規のクラスの化合物、該化合物を含む医薬組成物、および該化合物の使用方法を提供する。2010509349.tif 000076
2010509349.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2010509349.tif 000074
[式中、
Ｘは、結合およびＮＨから選択され；
Ｙは、結合およびＮＨから選択され；
Ｒ１は、シクロヘキシル、ピリジニル、キノリニル、イソキノリニルおよびフェニルから選択され；ここで、Ｒ１のシクロヘキシル、ピリジニル、キノリニル、イソキノリニルまたはフェニルは、所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−ＮＲ５ａＲ５ｂ、−ＯＸ１ＮＲ５ａＲ５ｂおよびヘテロシクリルから独立して選択される１から３個の基で置換されていてもよく；ここで、Ｘ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから独立して選択され；
Ｒ２は、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから選択され；
Ｒ３は、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから選択され；
Ｒ４は、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)Ｒ５、−Ｘ１ＯＸ２ＯＲ５、−ＯＸ１Ｒ５、−Ｘ１Ｒ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＯＲ５、−Ｘ１ＯＲ５および−Ｘ１ＯＸ１ＯＲ５から独立して選択される１から３個の基で置換されているヘテロアリールであり；ここで、それぞれのＸ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｘ２はＣ１−４アルキレンであり；それぞれのＲ５は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキルおよびヘテロシクリルから独立して選択され；
ここで、Ｒ４のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル置換基は、所望によりハロ、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−Ｌ−ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ６および−Ｌ−Ｒ６から独立して選択される１から３個の基でさらに置換されていてもよく；ここで、Ｌは、結合およびＣ１−４アルキレンから選択され；Ｒ６は、水素、Ｃ１−６アルキルおよびヘテロシクリルから選択される。ただし、Ｒ４は、トリフルオロメチル基によって置換されているピリジン−３−イルではない。]
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
請求項１に記載された式Ia：
【化２】
2010509349.tif 000075
[式中、
Ｘは、結合およびＮＨから選択され；Ｙは、結合およびＮＨから選択され；ここで、ＸまたはＹの何れかは結合であるが両方とも結合ではなく；
Ｒ３は、ハロ、メチル、メトキシ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから選択され；
Ｒ４は、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)Ｒ５、−Ｘ１ＯＸ２ＯＲ５、−ＯＸ１Ｒ５、−Ｘ１Ｒ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＯＲ５、−Ｘ１ＯＲ５および−Ｘ１ＯＸ１ＯＲ５から独立して選択される１から３個の基で置換されているヘテロアリールであり；ここで、それぞれのＸ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｘ２はＣ１−４アルキレンであり；それぞれのＲ５は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキルおよびヘテロシクリルから独立して選択され；
ここで、Ｒ４のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル置換基は、所望によりハロ、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−Ｌ−ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ６および−Ｌ−Ｒ６から独立して選択される１から３個の基でさらに置換されていてもよく；ここで、Ｌは、結合およびＣ１−４アルキレンから選択され；Ｒ６は、水素、Ｃ１−６アルキルおよびヘテロシクリルから選択され；
Ｒ７は、水素であり；Ｒ８は、水素、ハロ、メトキシ、アミノ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、ピロリジニル、モルホリノ、２−メチル−モルホリノ、２,６−ジメチル−モルホリノ、シアノ、−ＮＲ５ａＲ５ｂおよびメチルから選択されるか；またはＲ７およびＲ８は、Ｒ７およびＲ８が結合している炭素原子と一体となってフェニルを形成し；ここで、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから独立して選択され；
Ｒ９は、水素、モルホリノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−ＮＲ５ａＲ５ｂ、−ＯＸ１ＮＲ５ａＲ５ｂおよびヘテロシクリルから選択され；ここで、Ｘ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される。]
の化合物。
【請求項３】
Ｒ３がメチルであり；
Ｒ４が、ピラゾリル、ピリジニル、インドリル、インドリン−２−イル、チエニル、チアゾリル、３−オキソ−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−６−イル、フラニル、ベンゾ[ｂ]フラニル、１,３,４−チアジアゾリル、ベンゾ[ｂ]チオフェニル、ピロリル、１Ｈ−インダゾリル、イミダゾ[１,２−ａ]ピリジン−３−イル、オキサゾリル、ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル、１Ｈ−ベンゾ[ｄ][１,２,３]トリアゾール−５−イル、キノリニル、１Ｈ−インドリル、３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ[２,３−ｂ]ピリジニル、３−オキソ−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−７−イルまたは２,３−ジヒドロフロ[２,３−ｂ]ピリジニルであり；
ここで、Ｒ４のヘテロアリールは、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、メチル、アミノ、フェニル、ヒドロキシ−エチル(メチル)アミノ、ピペリジニル、トリフルオロメチル、２−メチルアリルオキシ、シクロプロピル−メチル(プロピル)アミノ−メチル、トリフルオロメトキシ、３,４−ジヒドロイソキノリン−２(１Ｈ)−イル、アミノ−カルボニル−メチル(エチル)アミノ−メチル、ピリジニル−メチル(エチル)−アミノ−メチル、イソプロピル(エチル)−アミノ−メチル、プロピル(エチル)−アミノ−メチル、モルホリノ、ブチル(メチル)アミノ−メチル、イソブチル(メチル)アミノ−メチル、ベンジル(エチル)アミノ−メチル、ピリジニル、ピロリジニル、アゼパニル、ヒドロキシ−プロピルオキシ、エチル、メトキシ、メチル−カルボニル、エトキシ、プロピルオキシ、ｔ−ブチル、ベンジル、プロピル、イソプロピルオキシ、イソプロピル、ジエチルアミノ−スルホニル、メチル−スルホニル、イソプロピル−スルホニル、ジエチル−アミノ−メチル、トリフルオロエトキシ、ピペリジニル、イソキノリニル、(ヒドロキシ−エチル)(メチル)アミノ、ジフルオロ−エトキシ、シクロプロピル、シクロプロピル−メトキシおよびテトラヒドロフラニル−オキシから独立して選択される１から３個の基で置換されており；
ここで、Ｒ４のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル置換基は、所望によりハロ、メチル、ピロリジニル−メチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ−メチル、ヒドロキシおよびシアノから独立して選択される１から３個の基でさらに置換されていてもよい、
請求項２に記載された化合物。
【請求項４】
Ｒ９が、水素およびジメチル−アミノ−プロピルオキシから選択される、請求項３に記載された化合物。
【請求項５】
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−５−(トリフルオロメチル)−２−メチルオキサゾール−４−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−モルホリノピリジン−４−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−６−メトキシピリジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−６−メトキシピリジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(５−メチルピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
２−(２,２−ジフルオロエトキシ)−Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)ピリジン−４−カルボキサミド；
６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)−Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)ピリジン−３−カルボキサミド；
３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−Ｎ−(３,４−ジヒドロ−３−オキソ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−６−イル)−４−メチルベンズアミド；および
Ｎ−(３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
から選択される、請求項４に記載された化合物。
【請求項６】
薬学的に許容される賦形剤と組み合わせた、治療有効量の請求項１に記載された化合物を含む医薬組成物。
【請求項７】
該薬学的に許容される賦形剤が非経腸投与に適切である、請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項８】
該薬学的に許容される賦形剤が経口投与に適切である、請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項９】
キナーゼ活性を調節する方法であって、それが必要な系または対象に、治療有効量の請求項１に記載された化合物またはその薬学的に許容される塩、またはそれらの医薬組成物を投与し、それによってキナーゼ活性を調節することを含む方法。
【請求項１０】
該キナーゼが、c-kit、Abl、Lyn、MAPK14 (p38δ)、PDGFRα、PDGFRβ、ARG、BCR-Abl、BRK、EphB、Fms、Fyn、KDR、LCK、PDGF-R、b-Raf、c-Raf、SAPK2、Src、Tie2およびTrkB、またはその組み合わせから選択される、請求項９に記載された方法。
【請求項１１】
該キナーゼがc-kitキナーゼ受容体である、請求項９に記載された方法。
【請求項１２】
請求項１に記載された化合物を、c-kit、PDGFRαおよび／またはPADGRβキナーゼ受容体と直接接触させる、請求項１１に記載された方法。
【請求項１３】
該接触をin vitroまたはin vivoで行う、請求項１２に記載された方法。
【請求項１４】
キナーゼ活性の調節が、疾患または状態の病状および／または症候を予防する、阻害するまたは改善する疾患または状態を処置する方法であって、対象に、治療有効量の請求項１に記載された化合物またはその薬学的に許容される塩、またはそれらの医薬組成物、および所望により治療有効量の第２薬物を投与することを含む方法。
【請求項１５】
該キナーゼが、c-kit、PDGFRαおよびPADGRβキナーゼ受容体から選択される、請求項１４に記載された方法。
【請求項１６】
第２薬物が、気管支拡張剤、抗炎症剤、ロイコトリエン・アンタゴニストまたはIgEブロッカーである、請求項１４に記載された方法。
【請求項１７】
請求項１に記載された化合物を、第２薬物の前に、同時に、または後に投与する、請求項１４に記載された方法。
【請求項１８】
該疾患または状態が、腫瘍性障害、アレルギー性障害、炎症性障害、自己免疫障害、マラリア原虫関連疾患、肥満細胞関連疾患、移植片対宿主病、代謝性症候群、CNS関連障害、神経変性障害、疼痛状態、薬物乱用障害、プリオン病、癌、心臓疾患、線維性疾患、特発性動脈性高血圧(IPAH)または原発性肺高血圧(PPH)である、請求項１４に記載された方法。
【請求項１９】
該腫瘍性障害が、肥満細胞症、胃腸間質性腫瘍、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、急性骨髄球性白血病、急性リンパ性白血病、骨髄異形成症候群、慢性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胃癌、精巣癌、神経膠芽腫、または星状細胞腫である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２０】
該アレルギー性障害が、喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性副鼻腔炎、アナフィラキシー症候群、蕁麻疹、血管浮腫、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、結節性紅斑、多形性紅斑、皮膚壊死性細静脈炎、昆虫刺傷皮膚炎症、または吸血性寄生虫侵入である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２１】
該炎症性障害が、関節リウマチ、結膜炎、リウマチ性脊椎炎、骨関節炎または痛風性関節炎である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２２】
該自己免疫障害が、多発性硬化症、乾癬、腸炎症性疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、関節リウマチ、多発性関節炎、局所または全身性強皮症、全身性エリテマトーデス、円板状エリテマトーデス、皮膚狼瘡、皮膚筋炎、多発性筋炎、シェーグレン症候群、結節性汎動脈炎、自己免疫性腸疾患または増殖性糸球体腎炎である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２３】
該移植片対宿主病が、臓器移植拒絶反応である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２４】
臓器移植が、腎臓移植、膵臓移植、肝臓移植、心臓移植、肺移植または骨髄移植である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２５】
該代謝症候群が、I型糖尿病、II型糖尿病または肥満である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２６】
該CNS関連障害が、鬱病、気分変調性障害、気分循環性障害、摂食障害、過食症、月経前症候群、閉経後症候群、精神遅延、集中力喪失、悲観的心配、煽動、自己卑下および性欲減退、不安障害、精神障害または統合失調症である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２７】
該神経変性障害が、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、プリオン病、運動神経疾患(MND)、または筋萎縮性側索硬化症(ALS)である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２８】
該疼痛状態が、急性疼痛、術後疼痛、慢性疼痛、侵害受容性疼痛、癌性疼痛、神経因性疼痛または心因性疼痛症候群である、請求項１８に記載された方法。
【請求項２９】
該薬物使用障害が、薬物中毒、薬物乱用、薬物嗜癖、薬物依存、退薬症状または過剰投与である、請求項１８に記載された方法。
【請求項３０】
癌が、黒色腫、胃腸間質性腫瘍(GIST)、小細胞肺癌、または他の固形腫瘍である、請求項１８に記載された方法。
【請求項３１】
該線維性疾患が、Ｃ型肝炎(HCV)、肝線維症、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、肝硬変、肺線維症、または骨髄線維症である、請求項１８に記載された方法。
【請求項３２】
該マラリア原虫関連疾患がマラリアである、請求項１８に記載された方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互引用
本出願は、米国仮特許出願第60/864,378号(2006年11月3日出願)についての優先権の利益を主張している。この出願の全ての開示は、言及することによって、全ての目的について、その全体が組み込まれる。
【０００２】
本発明の背景
本発明の分野
本出願は、異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性が関係する疾患または障害、特にc-kit、PDGFRαおよびPDGFRβキナーゼの異常な活性化が関係する疾患または障害を処置するまたは予防するための、新規のクラスの化合物、該化合物を含む医薬組成物、および該化合物の使用方法を提供する。
【背景技術】
【０００３】
背景
タンパク質キナーゼは、広範囲の細胞過程の調節および細胞機能の制御の維持に中心的な役割を果たすタンパク質の大きなファミリーを代表する。これらのキナーゼの部分的非制限的リストは、受容体チロシンキナーゼ、例えば血小板由来増殖因子受容体キナーゼ(PDGF-R)、神経成長因子受容体、trkB、および線維芽細胞増殖因子受容体、FGFR3、B-RAF；非受容体チロシンキナーゼ、例えばAblおよび融合キナーゼBCR-Abl、Lck、Bmxおよびc-src；およびセリン／トレオニン・キナーゼ、例えばc-RAF、sgk、MAPキナーゼ(例えばMKK4、MKK6など)およびSAPK2αおよびSAPK2βを含む。良性および悪性増殖障害を含む多くの疾病状態ならびに免疫系および神経系の不適切な活性化に起因する疾患において、異常なキナーゼ活性が観察されている。
【０００４】
本発明の新規化合物は、１種以上のタンパク質キナーゼの活性を阻害し、従って、キナーゼ関連疾患の処置に有用であると予測される。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の概要
一つの態様において、本発明は、式Ｉ：
【化１】
2010509349.tif 000003
[式中、
Ｘは、結合およびＮＨから選択され；
Ｙは、結合およびＮＨから選択され；
【０００６】
Ｒ１は、シクロヘキシル、ピリジニル、キノリニル、イソキノリニルおよびフェニルから選択され；ここで、Ｒ１のシクロヘキシル、ピリジニル、キノリニル、イソキノリニルまたはフェニルは、所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−ＮＲ５ａＲ５ｂ、−ＯＸ１ＮＲ５ａＲ５ｂおよびヘテロシクリルから独立して選択される１から３個の基で置換されていてもよく；ここで、Ｘ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから独立して選択され；
Ｒ２は、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから選択され；
【０００７】
Ｒ３は、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから選択され；
Ｒ４は、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)Ｒ５、−Ｘ１ＯＸ２ＯＲ５、−ＯＸ１Ｒ５、−Ｘ１Ｒ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＯＲ５、−Ｘ１ＯＲ５および−Ｘ１ＯＸ１ＯＲ５から独立して選択される１から３個の基で置換されているヘテロアリールであり；ここで、それぞれのＸ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｘ２はＣ１−４アルキレンであり；それぞれのＲ５は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキルおよびヘテロシクリルから独立して選択され；
ここで、Ｒ４のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル置換基は、所望によりハロ、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−Ｌ−ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ６および−Ｌ−Ｒ６から独立して選択される１から３個の基でさらに置換されていてもよく；ここで、Ｌは、結合およびＣ１−４アルキレンから選択され；Ｒ６は、水素、Ｃ１−６アルキルおよびヘテロシクリルから選択される。ただし、Ｒ４は、トリフルオロメチル基によって置換されているピリジン−３−イルではない。]
の化合物、およびそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護誘導体、個々の異性体および異性体混合物；および該化合物の薬学的に許容される塩および溶媒和物(例えば水和物)を提供する。
【０００８】
第二の態様において、本発明は、１種以上の適切な賦形剤と混合した、式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体混合物；またはそれらの薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を提供する。
【０００９】
第三の態様において、本発明は、動物において、キナーゼ活性、特にc-kit、PDGFRαおよび／またはPDGFRβ活性の阻害により、疾患の病状および／または症候を予防、阻害または寛解し得る疾患を処置する方法であって、該動物に、治療有効量の式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体混合物、またはそれらの薬学的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。
【００１０】
第四の態様において、本発明は、動物において、キナーゼ活性、特にc-kit、PDGFRαおよび／またはPDGFRβ活性が、疾患の病状および／または症候に寄与する疾患を処置する医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００１１】
第五の態様において、本発明は、式Ｉの化合物、およびそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護誘導体、個々の異性体および異性体混合物、およびそれらの薬学的に許容される塩の製造方法を提供する。
【００１２】
本発明の詳細な説明
定義
基としての、および他の基(例えばハロ置換アルキルおよびアルコキシ)の構成要素としての“アルキル”は、直鎖であっても分枝鎖であってもよい。Ｃ１−４−アルコキシは、メトキシ、エトキシなどを含む。ハロ置換アルキルは、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、トリフルオロエトキシ(およびその異性体)などを含む。
【００１３】
“アリール”は、６から１０個の環炭素原子を含む、単環式または縮合二環式芳香環を意味する。例えば、アリールは、フェニルであってもナフチルであってもよく、好ましくはフェニルである。“アリーレン”は、アリール基から誘導される二価の基を意味する。
【００１４】
“ヘテロアリール”は、−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｓ−、−Ｓ(Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)２−(ここで、Ｒは、水素、Ｃ１−４アルキルまたは窒素保護基である。)から独立して選択される１から３個のヘテロ原子を含む５から１０員の不飽和の環系である。本出願で用いられる例は、ピラゾリル、ピリジニル、インドリル、チアゾリル、３−オキソ−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−６−イル、フラニル、ベンゾ[ｂ]フラニル、ピロリル、１Ｈ−インダゾリル、イミダゾ[１,２−ａ]ピリジン−３−イル、オキサゾリル、ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル、１Ｈ−ベンゾ[ｄ][１,２,３]トリアゾール−５−イル、キノリニル、１Ｈ−インドリル、３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ[２,３−ｂ]ピリジニルおよび２,３−ジヒドロフロ[２,３−ｂ]ピリジニル、３−オキソ−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−７−イルなどを含み、これらに限定されない。
【００１５】
“シクロアルキル”は、示された数の環原子を含む、飽和または部分的に不飽和の、単環式、縮合二環式または架橋多環式環を意味する。例えば、Ｃ３−１０シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。
【００１６】
“ヘテロシクリル”は、−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｓ−、−Ｓ(Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)２−(ここで、Ｒは、水素、Ｃ１−４アルキルまたは窒素保護基である。)から独立して選択される１から３個のヘテロ原子を含む、５から１０員の飽和または部分的に不飽和の環系を意味する。例えば、本発明の化合物を表記するために本出願で用いられるヘテロシクリルは、モルホリノ、ピロリジニル、アゼパニル、ピペリジニル、イソキノリニル、テトラヒドロフラニル、ピロリジニル、ピロリジニル−２−オン、ピペラジニル、ピペリジニルオン(piperidinylone)、１,４−ジオキサ−８−アザ−スピロ[４.５]デカ−８−イル、３,４−ジヒドロイソキノリン−２(１Ｈ)−イルなどを含む。
【００１７】
“ハロゲン”(またはハロ)は、好ましくはクロロまたはフルオロを表すが、ブロモまたはヨードであってもよい。
【００１８】
“キナーゼ・パネル”は、Abl(ヒト)、Abl(T315I)、JAK2、JAK3、ALK、JNK1α1、ALK4、KDR、Aurora-A、Lck、Blk、MAPK1、Bmx、MAPKAP-K2、BRK、MEK1、CaMKII(ラット)、Met、CDK1/サイクリンB、p70S6K、CHK2、PAK2、CK1、PDGFRα、CK2、PDK1、c-kit、Pim-2、c-RAF、PKA(h)、CSK、PKBα、cSrc、PKCα、DYRK2、Plk3、EGFR、ROCK-I、Fes、Ron、FGFR3、Ros、Flt3、SAPK2α、Fms、SGK、Fyn、SIK、GSK3β、Syk、IGF-1R、Tie-2、IKKβ、TrKB、IR、WNK3、IRAK4、ZAP-70、ITK、AMPK(ラット)、LIMK1、Rsk2、Axl、LKB1、SAPK2β、BrSK2、Lyn(h)、SAPK3、BTK、MAPKAP-K3、SAPK4、CaMKIV、MARK1、Snk、CDK2/サイクリンA、MINK、SRPK1、CDK3/サイクリンE、MKK4(m)、TAK1、CDK5/p25、MKK6(h)、TBK1、CDK6/サイクリンD3、MLCK、TrkA、CDK7/サイクリンH/MAT1、MRCKβ、TSSK1、CHK1、MSK1、Yes、CK1d、MST2、ZIPK、c-Kit (D816V)、MuSK、DAPK2、NEK2、DDR2、NEK6、DMPK、PAK4、DRAK1、PAR-1Bα、EphA1、PDGFRβ、EphA2、Pim-1、EphA5、PKBβ、EphB2、PKCβI、EphB4、PKCδ、FGFR1、PKCη、FGFR2、PKCθ、FGFR4、PKD2、Fgr、PKG1β、Flt1、PRK2、Hck、PYK2、HIPK2、Ret、IKKα、RIPK2、IRR、ROCK-II(ヒト)、JNK2α2、Rse、JNK3、Rsk1(h)、PI3 Kγ、PI3 KδおよびPI3-Kβを含むキナーゼのリストである。本発明の化合物は、キナーゼ・パネル(野生型および／またはその変異体)に対してスクリーニングされ、当該パネルの少なくとも１種のメンバーの活性を阻害する。
【００１９】
“BCR-Abl変異体”は、野生型の配列からの１個または多数のアミノ酸変化を意味する。BCR-ABLの変異は、タンパク質と阻害剤(例えばGleevecなど)の不可欠な接触点を乱すことによって、より多くの場合には、不活性な状態から活性状態、すなわちBCR-ABLとGleevecが結合できないコンホメーションへの変化を誘発することによって作用する。臨床サンプルの分析から、耐性表現型に関係して見出される変異のレパートリーは、時間の経過と共に、ゆっくりと、しかし確実に増大している。変異は、４個の主要な領域に集中して起こるようである。変異の１つのグループ(G250E、Q252R、Y253F/H、E255K/V)は、ＡＴＰのためのホスフェート結合ループ(Ｐ−ループとしても知られている)を形成するアミノ酸を含む。第２のグループ(V289A、F311L、T315I、F317L)は、Gleevec結合部位で見出され、水素結合またはVan der Waals相互作用を介して、阻害剤と直接相互作用する。変異の第３のグループ(M351T、E355G)は、触媒ドメイン近くで集中して起こる。変異の第４のグループ(H396R/P)は、活性化ループに位置し、そのコンホメーションはキナーゼの活性化／不活性化を制御する分子スイッチである。CMLおよびALL患者で検出されるGleevec耐性に関係するBCR-ABL点変異は、M224V、L248V、G250E、G250R、Q252R、Q252H、Y253H、Y253F、E255K、E255V、D276G、T277A、V289A、F311L、T315I、T315N、F317L、M343T、M315T、E355G、F359V、F359A、V379I、F382L、L387M、L387F、H396P、H396R、A397P、S417Y、E459K、およびF486Sを含む(１文字表記によって示されるアミノ酸の位置は、GenBank配列受付番号AAB60394のものであり、ABL型1aに対応する; Martinelli et al., Haematologica/The Hematology Journal, 2005, April; 90-4)。本発明について特記しない限り、Bcr-Ablは、該酵素の野生型および変異体を言う。
【００２０】
“処置する”、“処置すること”および“処置”は、疾患および／またはそれに付随する症候を緩和または寛解する方法を言う。
【００２１】
好ましい態様の記載
c-kit遺伝子は、受容体チロシンキナーゼをコードし、該c-kit受容体のリガンドは、幹細胞因子(SCF)と呼ばれる。幹細胞因子は肥満細胞の主要な増殖因子である。c-kit受容体タンパク質チロシンキナーゼの活性は、正常細胞を制御し、c-kit遺伝子産物の正常な機能的活性は、正常な造血発生の維持、メラニン形成、遺伝子原性、ならびに肥満細胞の増殖および分化に必須である。SCF結合のないc-kitキナーゼ活性の構成的活性化を引き起こす変異は、喘息から悪性のヒトの癌の範囲の種々の疾患に関与している。
【００２２】
一つの態様において、式Ｉの化合物に関して、式Ia：
【化２】
2010509349.tif 000004
[式中、
Ｘは、結合およびＮＨから選択され；Ｙは、結合およびＮＨから選択され；ここで、ＸまたはＹの何れかは結合であるが両方とも結合ではなく；
【００２３】
Ｒ３は、ハロ、メチル、メトキシ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから選択され；
Ｒ４は、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)Ｒ５、−Ｘ１ＯＸ２ＯＲ５、−ＯＸ１Ｒ５、−Ｘ１Ｒ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＯＲ５、−Ｘ１ＯＲ５および−Ｘ１ＯＸ１ＯＲ５から独立して選択される１から３個の基で置換されているヘテロアリールであり；ここで、それぞれのＸ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｘ２はＣ１−４アルキレンであり；それぞれのＲ５は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキルおよびヘテロシクリルから独立して選択され；
ここで、Ｒ４のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル置換基は、所望によりハロ、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−Ｌ−ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ６および−Ｌ−Ｒ６から独立して選択される１から３個の基でさらに置換されていてもよく；ここで、Ｌは、結合およびＣ１−４アルキレンから選択され；Ｒ６は、水素、Ｃ１−６アルキルおよびヘテロシクリルから選択され；
【００２４】
Ｒ７は、水素であり；Ｒ８は、水素、ハロ、メトキシ、アミノ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、ピロリジニル、モルホリノ、２−メチル−モルホリノ、２,６−ジメチル−モルホリノ、シアノ、−ＮＲ５ａＲ５ｂおよびメチルから選択されるか；またはＲ７およびＲ８は、Ｒ７およびＲ８が結合している炭素原子と一体となってフェニルを形成し；ここで、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから独立して選択され；
Ｒ９は、水素、モルホリノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−ＮＲ５ａＲ５ｂ、−ＯＸ１ＮＲ５ａＲ５ｂおよびヘテロシクリルから選択され；ここで、Ｘ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される。]
の化合物である。
【００２５】
別の態様において、
Ｒ３がメチルであり；
Ｒ４が、ピラゾリル、ピリジニル、インドリル、インドリン−２−イル、チエニル、チアゾリル、３−オキソ−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−６−イル、フラニル、ベンゾ[ｂ]フラニル、１,３,４−チアジアゾリル、ベンゾ[ｂ]チオフェニル、ピロリル、１Ｈ−インダゾリル、イミダゾ[１,２−ａ]ピリジン−３−イル、オキサゾリル、ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル、１Ｈ−ベンゾ[ｄ][１,２,３]トリアゾール−５−イル、キノリニル、１Ｈ−インドリル、３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ[２,３−ｂ]ピリジニル、３−オキソ−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−７−イルまたは２,３−ジヒドロフロ[２,３−ｂ]ピリジニルであり；
ここで、Ｒ４のヘテロアリールは、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、メチル、アミノ、フェニル、ヒドロキシ−エチル(メチル)アミノ、ピペリジニル、トリフルオロメチル、２−メチルアリルオキシ、シクロプロピル−メチル(プロピル)アミノ−メチル、トリフルオロメトキシ、３,４−ジヒドロイソキノリン−２(１Ｈ)−イル、アミノ−カルボニル−メチル(エチル)アミノ−メチル、ピリジニル−メチル(エチル)−アミノ−メチル、イソプロピル(エチル)−アミノ−メチル、プロピル(エチル)−アミノ−メチル、モルホリノ、ブチル(メチル)アミノ−メチル、イソブチル(メチル)アミノ−メチル、ベンジル(エチル)アミノ−メチル、ピリジニル、ピロリジニル、アゼパニル、ヒドロキシ−プロピルオキシ、エチル、メトキシ、メチル−カルボニル、エトキシ、プロピルオキシ、ｔ−ブチル、ベンジル、プロピル、イソプロピルオキシ、イソプロピル、ジエチルアミノ−スルホニル、メチル−スルホニル、イソプロピル−スルホニル、ジエチル−アミノ−メチル、トリフルオロエトキシ、ピペリジニル、イソキノリニル、(ヒドロキシ−エチル)(メチル)アミノ、ジフルオロ−エトキシ、シクロプロピル、シクロプロピル−メトキシおよびテトラヒドロフラニル−オキシから独立して選択される１から３個の基で置換されており；
ここで、Ｒ４のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル置換基は、所望によりハロ、メチル、ピロリジニル−メチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ−メチル、ヒドロキシおよびシアノから独立して選択される１から３個の基でさらに置換されていてもよい。
【００２６】
別の態様において、Ｒ９は、水素およびジメチル−アミノ−プロピルオキシから選択される。
【００２７】
別の態様において、
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−５−(トリフルオロメチル)−２−メチルオキサゾール−４−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−モルホリノピリジン−４−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−６−メトキシピリジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−６−メトキシピリジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(５−メチルピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
２−(２,２−ジフルオロエトキシ)−Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)ピリジン−４−カルボキサミド；
６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)−Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)ピリジン−３−カルボキサミド；
３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−Ｎ−(３,４−ジヒドロ−３−オキソ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−６−イル)−４−メチルベンズアミド；および
Ｎ−(３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
から選択される化合物である。
【００２８】
本発明の化合物の代表例は、下記の実施例および表Ｉに記載されている。
【００２９】
一つの態様において、本発明は、c-kitおよびPDGFRα/βキナーゼ受容体によって調節される疾患または状態を処置する方法であって、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩、あるいはその医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。
【００３０】
本発明の化合物および組成物を用いて調節されるc-kit介在疾患または状態の例は、腫瘍性障害、アレルギー性障害、炎症性障害、自己免疫性障害、移植片対宿主病、マラリア原虫関連疾患、肥満細胞関連疾患、代謝症候群、CNS関連障害、神経変性障害、疼痛状態、薬物乱用障害、プリオン病、癌、心臓疾患、線維性疾患、特発性動脈性高血圧(IPAH)、または原発性肺高血圧(PPH)を含み、これらに限定されない。
【００３１】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得るマラリア原虫関連疾患の例は、マラリアを含み、これに限定されない。
【００３２】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る肥満細胞関連疾患の例は、挫瘡およびアクネ菌、進行性骨化性線維異形成症(FOP)、化学兵器または生物兵器(例えば炭疽菌および硫黄マスタード)への曝露によって誘発される炎症および組織破壊、嚢胞性線維症；腎臓疾患、炎症性筋肉障害、HIV、II型糖尿病、脳虚血、肥満細胞症、薬物依存および退薬症候、CNS障害、脱毛の予防および最少化、細菌感染、間質性膀胱炎、炎症性腸疾患、腫瘍血管新生、自己免疫疾患、炎症性疾患、多発性硬化症(MS)、アレルギー性障害(喘息を含む)、過敏性腸症候群(IBS)、鼻ポリープ、および骨量減少を含み、これらに限定されない。
【００３３】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る腫瘍性障害の例は、肥満細胞症、胃腸間質性腫瘍、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、急性骨髄球性白血病、急性リンパ性白血病、骨髄異形成症候群、慢性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胃癌、精巣癌、神経膠芽腫、または星状細胞腫を含み、これらに限定されない。
【００３４】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得るアレルギー性障害の例は、喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性副鼻腔炎、アナフィラキシー症候群、蕁麻疹、血管浮腫、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、結節性紅斑、多形性紅斑(erythema multifonne)、皮膚壊死性細静脈炎、昆虫刺傷皮膚炎症、または吸血性寄生虫侵入を含み、これらに限定されない。
【００３５】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る炎症性障害の例は、関節リウマチ、結膜炎、リウマチ性脊椎炎、骨関節炎または痛風性関節炎を含み、これらに限定されない。
【００３６】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る自己免疫障害の例は、多発性硬化症、乾癬、腸炎症性疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、関節リウマチ、多発性関節炎、局所または全身性強皮症、全身性エリテマトーデス、円板状エリテマトーデス、皮膚狼瘡、皮膚筋炎、多発性筋炎、シェーグレン症候群、結節性汎動脈炎、自己免疫性腸疾患または増殖性糸球体腎炎を含み、これらに限定されない。
【００３７】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る移植片対宿主病の例は、臓器移植片拒絶反応、例えば腎臓移植、膵臓移植、肝臓移植、心臓移植、肺移植または骨髄移植の拒絶反応を含み、これらに限定されない。
【００３８】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る代謝症候群の例は、I型糖尿病、II型糖尿病または肥満を含み、これらに限定されない。
【００３９】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得るCNS関連障害の例は、鬱病、気分変調性障害、気分循環性障害、摂食障害、過食症、月経前症候群、閉経後症候群、精神遅延(mental slowing)、集中力喪失、悲観的心配(pessimistic worry)、煽動(agitation)、自己卑下(self-deprecation)、および性欲減退、不安障害、精神障害または統合失調症を含み、これらに限定されない。
【００４０】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る鬱状態の例は、双極性鬱病、重度またはメランコリー型鬱病、非定型鬱病、難治性鬱病、または季節性鬱病を含み、これらに限定されない。本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る不安障害の例は、過呼吸および不整脈に関連する不安症、恐怖症、強迫性障害、外傷後ストレス障害、急性ストレス障害および全般性不安障害を含み、これらに限定されない。本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る精神障害の例は、精神病を含むパニック発作；妄想障害、転換性障害、恐怖症、躁病、譫妄；解離性健忘、解離性遁走および解離性自殺行為を含む解離性エピソード、自己無視、暴力または攻撃的行動、トラウマ、境界性人格障害および急性精神障害、例えば妄想型統合失調症、解体型統合失調症、緊張型統合失調症および未分化統合失調症を含む統合失調症を含み、これらに限定されない。
【００４１】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る神経変性障害の例は、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、プリオン病、運動神経疾患(MND)、または筋萎縮性側索硬化症(ALS)を含み、これらに限定されない。
【００４２】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る疼痛状態の例は、急性疼痛、術後疼痛、慢性疼痛、侵害受容性疼痛、癌性疼痛、神経因性疼痛または心因性疼痛症候群を含み、これらに限定されない。
【００４３】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る薬物使用障害の例は、薬物中毒、薬物乱用、薬物嗜癖、薬物依存、退薬症状または過剰投与を含み、これらに限定されない。
【００４４】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る癌の例は、黒色腫、胃腸間質性腫瘍(GIST)、小細胞肺癌、結腸直腸癌または他の固形腫瘍を含み、これらに限定されない。
【００４５】
本発明の化合物および組成物を用いて処置され得る線維性疾患の例は、Ｃ型肝炎(HCV)、肝線維症、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、肝硬変、肺線維症、心臓線維症または骨髄線維症を含み、これらに限定されない。
【００４６】
別の態様において、本発明は、c-kitキナーゼ受容体によって調節される疾患または状態を処置する方法であって、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩、またはそれらの医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。
【００４７】
薬理および有用性
本発明の化合物は、キナーゼの活性を調節し、それ自体、キナーゼが疾患の病状および／または症候に寄与する疾患または障害の処置に有用である。本明細書に記載された化合物および組成物によって阻害される、および本明細書に記載された方法が有用であるキナーゼの例は、c-kit、Abl、Lyn、MAPK14(p38δ)、PDGFRα、PDGFRβ、ARG、BCR-Abl、BRK、EphB、Fms、Fyn、KDR、LCK、b-Raf、c-Raf、SAPK2、Src、Tie2およびTrkBキナーゼを含み、これらに限定されない。
【００４８】
マラリアは、Plasmodium属の寄生性原虫によって引き起こされる。Plasmodium属の４種：Plasmodium falciparum；Plasmodium vivax；Plasmodium ovale；およびPlasmodium malariaは、種々の形態の疾患を生じさせ得る。P. falciparumは、最も流行しており危険な種であって、処置しなければ致死性の脳性マラリアを引き起こし得る。タンパク質チロシンキナーゼ活性は、P. falciparum寄生虫成熟期の全ての段階に寄与し、そして本発明のキナーゼ阻害剤は、マラリア原虫関連疾患を処置するために用いられ得る。本発明のチロシンキナーゼ阻害剤、特にc-kit阻害剤は、Plasmodium falciparumの成長阻害による、マラリア原虫関連疾患を処置するための経路であり得る。下記のin vitroアッセイは、種々のマラリア寄生種に対する、本発明の化合物の活性を決定するための手段として用いられる。
【００４９】
肥満細胞(MC)は、種々のメディエーターを産生する造血幹細胞の特定のサブセットから誘導される組織要素であり、そのメディエーターの大部分が強い炎症促進活性を有する。MCは、身体のほぼ全ての部位に分布しているため、活性化された要素によるメディエーターの過剰分泌は、多臓器不全を引き起こし得る。従って、肥満細胞は、多くの疾患に関与する中心的な役割を有する。本発明は、肥満細胞関連疾患を処置する方法であって、肥満細胞を減少させ得る化合物または肥満細胞の脱顆粒を阻害する化合物を、当該処置が必要なヒトに投与することを含む方法に関する。該化合物は、c-kit阻害剤から、より特定的には非毒性の選択的な強力なc-kit阻害剤から選択され得る。好ましくは、当該阻害剤は、IL-3存在下で培養されたIL-3依存性細胞死を促進できない。
【００５０】
肥満細胞関連疾患は、次に示すものを含み、これらに限定されない：挫瘡およびアクネ菌(挫瘡は、アクネ菌によって誘発されるものを含む、全ての形態の慢性皮膚炎症を含む)；進行性骨化性線維異形成症(FOP)として知られる、非常にまれな無能化遺伝性結合組織障害；化学兵器または生物兵器(例えば炭疽菌、硫黄マスタードなど)への曝露によって誘発される炎症および組織破壊の有害な効果；嚢胞性線維症(肺、消化器系および生殖器系遺伝性疾患)；腎臓疾患、例えば急性腎炎症候群、糸球体腎炎、腎アミロイドーシス、間質性腎線維症(種々の腎症における末期腎疾患を導く最終的な一般的経路)；筋炎および筋ジストロフィーを含む炎症性筋肉障害；HIV (例えばHIV感染した肥満細胞の減少は、HIV感染および関連疾患を処置するための新しい経路となり得る)；II型糖尿病、肥満および関連障害の処置(肥満細胞は、高血糖、高コレステロール血症、高血圧、内皮細胞機能不全、インシュリン抵抗性、および血管リモデリングを含む、アテローム性動脈硬化症の進行に寄与する幾つかのプロセスを制御する)；脳虚血；肥満細胞症(主に皮膚および骨髄、さらに脾臓、肝臓、リンパ節および消化器中の異なる組織における肥満細胞の異常な集積によって特徴付けられる非常に異質な障害のグループ)；薬物依存および退薬症状(特に薬物中毒、薬物乱用、薬物嗜癖、薬物依存、退薬症状および過剰投与)；CNS障害(特に鬱病、統合失調症、不安症、偏頭痛、記憶喪失、疼痛および神経変性疾患)；毛髪成長の促進(脱毛の予防および最少化を含む)；細菌感染(FimH発現細菌によって引き起こされる感染)；間質性膀胱炎(特に膀胱の内側の細胞の間の間隙で組織損傷をもたらす膀胱の壁の慢性炎症)；炎症性腸疾患(一般的に４種の腸疾患、すなわちクローン病、潰瘍性大腸炎、不定形大腸炎および感染性大腸炎に適用される)；腫瘍血管新生；自己免疫疾患(特に多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、クローン病、関節リウマチ、多発性関節炎、強皮症、エリテマトーデス、皮膚筋炎、天疱瘡、多発性筋炎、血管炎および移植片対宿主病)；炎症性疾患、例えば関節リウマチ(RA)；多発性硬化症(MS)；アレルギー性障害(特にアレルギー性鼻炎、アレルギー性副鼻腔炎、アナフィラキシー症候群、蕁麻疹、血管浮腫、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、結節性紅斑、多形性紅斑、皮膚壊死性細静脈炎および昆虫刺傷皮膚炎症、気管支性喘息)；および骨量減少。
【００５１】
アベルソン・チロシンキナーゼ(すなわちAbl、c-Abl)は、細胞周期の制御、遺伝毒性ストレスに対する細胞応答、およびインテグリン・シグナル伝達を介した細胞環境についての情報伝達に関与する。全体的にみて、Ablタンパク質は、種々の細胞外および細胞内供給源からのシグナルを統合する、および細胞周期およびアポトーシスに関する決定に影響を与える細胞モジュールとしての複雑な役割を果たすようである。アベルソン・チロシンキナーゼは、サブタイプ誘導体、例えば脱制御されたチロシンキナーゼ活性を有するキメラ融合物(腫瘍性タンパク質)BCR-Ablまたはv-Ablを含む。BCR-Ablは、慢性骨髄性白血病(CML)の９５％、および急性リンパ性白血病の１０％の病因として重要である。STI 571 (Gleevec)は、発癌性BCR-Ablチロシンキナーゼの阻害剤であり、慢性骨髄性白血病(CML)の処置に用いられる。しかし、CMLの急性転化の患者には、BCR-Ablキナーゼの変異により、STI-571抵抗性であるものがいる。現在、２２を越える変異が報告されており、その最も一般的なものは、G250E、E255V、T315I、F317LおよびM351Tである。
【００５２】
幾つかの本発明の化合物は、ablキナーゼ、特にv-ablキナーゼを阻害する。幾つかの本発明の化合物はまた、野生型BCR-AblキナーゼおよびBCR-Ablキナーゼ変異体を阻害し、そのために、Bcr-abl-ポジティブの癌および腫瘍疾患、例えば白血病(例えば慢性骨髄性白血病および急性リンパ芽球性白血病(特にアポトーシス・メカニズムの作用が見られる場合))の処置に適切である。幾つかの本発明の化合物はまた、白血病幹細胞のサブグループに対して有効であり、また、該細胞の除去(例えば骨髄除去)後にこれらの細胞をin vitroで精製し、癌細胞を除去した後、細胞を再移植する(例えば精製骨髄細胞の再移植)のに有用である可能性がある。
【００５３】
Ras-Raf-MEK-ERKシグナル伝達経路は、増殖シグナルに対する細胞応答を仲介する。Rasは、ヒトの癌の約１５％において発癌形態に変異している。Rafファミリーは、セリン／トレオニン・タンパク質キナーゼに属し、それは３個のメンバー、すなわちA-Raf、B-Rafおよびc-Raf (またはRaf-1)を含む。医薬標的であるRafへの焦点は、Rasの下流エフェクターとしてのRafの関係に絞られている。しかし、B-Rafは、活性化Ras対立遺伝子を必要とせずに、ある種の腫瘍の形成に顕著な役割を有し得る(Nature 417, 949 - 954 (01 Jul 2002)。特に、B-Raf変異は、大部分の悪性黒色腫で検出されている。
【００５４】
現存する黒色腫の医学的処置は、特に後期黒色腫でそれらの効果が限定されている。本発明の化合物はまた、b-Rafキナーゼが関与する細胞過程を阻害し、ヒトの癌、例えば黒色腫の処置における新規の治療の機会を提供する。
【００５５】
本発明の化合物はまた、c-Rafキナーゼが関与する細胞過程を阻害する。c-Rafは、ras発癌遺伝子によって活性化され、これは多くのヒトの癌において変異している。従って、c-Rafのキナーゼ活性の阻害は、ras介在腫瘍増殖を妨げる方法を提供し得る [Campbell, S. L., Oncogene, 17, 1395 (1998)]。
【００５６】
PDGF(血小板由来増殖因子)は、一般的に存在する増殖因子であり、これは、正常な増殖、ならびに例えば発癌および血管の平滑筋細胞の疾患(例えばアテローム性動脈硬化症および血栓症)で見られる病理学的細胞増殖の両方で重要な役割を果たす。本発明の化合物は、PDGF受容体(PDGFR)活性を阻害でき、従って、腫瘍疾患、例えば神経膠腫、肉腫、前立腺癌、ならびに結腸、乳房および卵巣の腫瘍；過好酸球増加症；線維症；肺高血圧；および心血管疾患の処置に適切である。
【００５７】
本発明の化合物は、例えば小細胞肺癌における腫瘍阻害物質としてのみではなく、非悪性増殖性障害、例えばアテローム性動脈硬化症、血栓症、乾癬、強皮症および線維症を処置する薬物としても用いられ得る。本発明の化合物はまた、幹細胞の保護のために、例えば化学療法薬(例えば５−フルオロウラシル)の血液毒性効果と戦う薬物としても、また喘息においても用いられ得る。本発明の化合物は、特に、PDGF受容体キナーゼの阻害に応答する疾患の処置に使用され得る。
【００５８】
本発明の化合物は、移植、例えば同種移植の結果として生じる障害、特に組織拒絶反応、例えば特に閉塞性細気管支炎(OB)、すなわち同種肺移植の慢性拒絶反応の処置に有用な効果を示す。OBを有しない患者と比較して、OBを有する患者は、しばしば、気管支肺胞洗浄液中のPDGF濃度の上昇を示す。
【００５９】
本発明の化合物はまた、血管平滑筋細胞遊走および増殖と関連する疾患(PDGFおよびPDGF-Rがしばしば役割を果たしているもの)、例えば再狭窄およびアテローム性動脈硬化症に有効である。in vitro および in vivo での血管平滑筋細胞の増殖または遊走におけるこれらの効果およびその結果は、本発明の化合物の投与によって、および in vivo での物理的外傷後の血管内膜肥厚化に対するその効果を調べることによって証明され得る。
【００６０】
ニューロトロフィン受容体のtrkファミリー(trkA、trkB、trkC)は、神経組織および非神経組織の生存、増殖および分化を促進する。TrkBタンパク質は、小腸および結腸の神経内分泌型細胞中で、膵臓のアルファ細胞中で、リンパ節および脾臓の単球およびマクロファージ中で、および表皮の顆粒層中で発現される(Shibayama and Koizumi, 1996)。TrkBタンパク質の発現は、ウィルムス腫瘍および神経芽細胞腫の好ましくない進行と関連している。TkrBは、さらに、癌性前立腺細胞で発現されるが正常細胞では発現されない。trk受容体の下流のシグナル伝達経路は、Shc、活性化Ras、ERK-1およびERK-2遺伝子を介したMAPK活性化カスケードおよびPLC-γ伝達経路に関与している(Sugimoto et al., 2001)。
【００６１】
キナーゼc-Srcは、多くの受容体の発癌シグナルを伝達する。例えば、腫瘍におけるEGFRまたはHER2/neuの過剰発現は、c-srcの構成的な活性化をもたらす。これは悪性細胞に特徴的であって、正常細胞ではみられない。他方、c-src発現欠損マウスは、大理石骨病の表現型を示し、このことは、破骨細胞機能におけるc-srcの重要な関与、および関連障害への関わりの可能性を示す。
【００６２】
TecファミリーキナーゼであるBmxは、非受容体タンパク質チロシンキナーゼであり、乳房上皮癌細胞の増殖を制御する。
【００６３】
線維芽細胞増殖因子受容体３は、骨成長に対する負の調節効果および軟骨細胞増殖の阻害を行うことが示された。致死性骨異形成症は、線維芽細胞増殖因子受容体３の異なる変異によって引き起こされ、１つの変異TDII FGFR3は、構成的チロシンキナーゼ活性を有し、これは転写因子Stat1を活性化して、細胞周期阻害因子の発現、増殖停止および異常骨成長をもたらす(Su et al., Nature, 1997, 386, 288-292)。FGFR3はまた、しばしば、多発性骨髄腫型癌において発現される。FGFR3活性の阻害剤は、関節リウマチ(RA)、コラーゲンII型関節炎、多発性硬化症(MS)、全身性エリテマトーデス(SLE)、乾癬、若年発症糖尿病、シェーグレン病、甲状腺疾患、サルコイドーシス、自己免疫性ブドウ膜炎、炎症性腸疾患(クローン病および潰瘍性大腸炎)、セリアック病および重症筋無力症を含む(これらに制限されない)、Ｔ細胞介在炎症性または自己免疫性疾患の処置に有用である。
【００６４】
血清およびグルココルチコイド制御キナーゼ(SGK)の活性は、混乱したイオンチャネル活性、特に混乱したナトリウムおよび／またはカリウムチャネル活性と相関しており、本発明の化合物は、高血圧を処置するのに有用であり得る。
【００６５】
Lin et al (1997) J. Clin. Invest. 100, 8: 2072-2078 および P. Lin (1998) PNAS 95, 8829-8834 は、乳癌および黒色腫の異種移植片モデルにおいて、腫瘍増殖および血管新生の阻害、および、アデノウイルス感染時またはTie-2(Tek)の細胞外ドメイン注射時の肺転移の減少を示している。Tie2阻害剤は、血管新生が不適切に起こる状況(すなわち、糖尿病性網膜症、慢性炎症、乾癬、カポジ肉腫、慢性血管新生(黄斑変性症、関節リウマチ、小児血管腫および癌による))において用いられ得る。
【００６６】
Lckは、Ｔ細胞シグナル伝達に役割を果たす。Lck遺伝子欠損マウスは、胸腺細胞を発育させる能力が低い。Ｔ細胞シグナル伝達の正のアクチベーターとしてのLckの機能は、Lck阻害剤が自己免疫性疾患(例えば関節リウマチ)を処置するのに有用であることを示唆している。
【００６７】
他のMAPK類と同様に、JNKは、癌、トロンビン誘発血小板凝集、免疫不全障害、自己免疫性疾患、細胞死、アレルギー、骨粗鬆症および心臓疾患に対する細胞応答を仲介するのに役割を有することが示唆されている。JNK経路の活性化に関する治療標的は、慢性骨髄性白血病(CML)、関節リウマチ、喘息、骨関節炎、虚血、癌および神経変性疾患を含む。肝臓疾患または肝臓虚血エピソードと関連するJNK活性化の重要性の結果として、本発明の化合物はまた、種々の肝臓障害を処置するのに有用であり得る。JNKが種々の形態の心臓ストレスに対する肥大応答を仲介することを示していることから、心血管疾患、例えば心筋梗塞または鬱血性心不全におけるJNKの役割もまた報告されている。JNKカスケードはまた、IL-2プロモーターの活性化を含むＴ細胞活性化に役割を果たすことが実証されている。従って、JNKの阻害剤は、病理学的免疫応答を変化させる点で治療的価値があり得る。種々の癌でのJNK活性化の役割もまた確立されており、癌におけるJNK阻害剤の使用の可能性を示唆している。例えば構造的に活性化されたJNKは、腫瘍形成を仲介するHTLV-1と関連している[Oncogene 13:135-42 (1996)]。JNKは、カポジ肉腫(KS)に役割を果たす。KS増殖に関係する他のサイトカイン、例えば血管内皮増殖因子(VEGF)、IL-6、およびTNFαの他の増殖効果もまた、JNKが仲介し得る。さらに、p210 BCR-ABL形質転換細胞中のc-jun遺伝子の制御は、JNKの活性と対応しており、慢性骨髄性白血病(CML)の処置におけるJNK阻害剤の役割を示唆している[Blood 92:2450-60 (1998)]。
【００６８】
ある異常増殖状態は、raf発現と関連すると考えられており、従って、raf発現の阻害に応答性であると考えられている。異常に高いレベルのrafタンパク質発現はまた、形質転換および異常細胞増殖に関係している。これらの異常増殖状態もまた、raf発現の阻害に応答性であると考えられている。例えば、全肺癌細胞株の６０％で異常に高レベルのc-raf mRNAとタンパク質が発現していると報告されているため、c-rafタンパク質発現は、異常細胞増殖に役割を果たすと考えられている。異常増殖状態のさらなる例は、過剰増殖障害、例えば癌、腫瘍、過形成、肺線維症、血管新生、乾癬、アテローム動脈硬化症、血管中の平滑筋細胞増殖、例えば狭窄または血管形成術後の再狭窄である。rafがその一部である細胞シグナル伝達経路はまた、Ｔ細胞増殖(Ｔ細胞活性化および増殖)によって特徴付けられる炎症性障害、例えば組織移植拒絶反応、内毒素ショック、および糸球体腎炎などに関係している。
【００６９】
ストレス活性化タンパク質キナーゼ(SAPK)は、c-jun転写因子の活性化およびc-junによって制御される遺伝子の発現をもたらすシグナル伝達経路の最後から２番目の段階を代表するタンパク質キナーゼのファミリーである。特に、c-junは、遺伝子毒性傷害により損傷したＤＮＡの修復に関与するタンパク質をコードする遺伝子の転写に関与している。従って、細胞中のSAPK活性を阻害する薬物はＤＮＡの修復を妨げ、かつ、ＤＮＡ損傷を誘発するかまたはＤＮＡ合成を阻害して細胞のアポトーシスを誘発する薬物または細胞増殖を阻害する薬物に対して細胞を感受性とする。
【００７０】
マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ(MAPK)は、転写因子、翻訳因子および種々の細胞外シグナルに応答する他の標的分子を活性化する保存されたシグナル伝達経路のメンバーである。MAPKは、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ・キナーゼ(MKK)による、配列Thr-X-Tyrを有する二重リン酸化モチーフでのリン酸化によって活性化される。より高等な真核生物では、MAPKシグナル伝達の生理学的役割は、細胞の事象、例えば増殖、発癌、発育および分化と相関している。従って、これらの経路を介して(特にMKK4およびMKK6を介して)、シグナル伝達を制御する能力は、MAPKシグナル伝達と関連するヒトの疾患、例えば炎症性疾患、自己免疫性疾患および癌のための処置および予防的治療の発展をもたらし得る。
【００７１】
ヒトのリボソームS6タンパク質キナーゼのファミリーは、少なくとも８個のメンバー(RSK1、RSK2、RSK3、RSK4、MSK1、MSK2、p70S6Kおよびp70S6 Kb)からなる。リボソームタンパク質S6タンパク質キナーゼは、重要な多面発現機能を果たし、とりわけタンパク質生合成の際のｍＲＮＡ翻訳の制御において重要な役割を有する (Eur. J. Biochem 2000 November; 267(21): 6321-30, Exp Cell Res. Nov. 25, 1999; 253 (1):100-9, Mol Cell Endocrinol. May 25, 1999;151(1-2):65-77)。S6リボソームタンパク質のp70S6によるリン酸化はまた、細胞運動性(Immunol. Cell Biol. 2000 August;78(4):447-51)および細胞増殖(Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 2000;65:101-27)の制御に関与しており、従って、腫瘍転移、免疫応答、組織修復ならびに他の疾病状態に重要であり得る。
【００７２】
SAPK(“jun Ｎ末端キナーゼ”または“JNK”とも呼ばれる)は、c-jun転写因子の活性化およびc-junによって制御される遺伝子の発現をもたらすシグナル伝達経路の最後から二番目の段階を代表するタンパク質キナーゼのファミリーである。特に、c-junは、遺伝子毒性傷害によって損傷したＤＮＡの修復に関与しているタンパク質をコードする遺伝子の転写に関与している。細胞中のSAPK活性を阻害する薬物は、ＤＮＡ修復を妨げ、ＤＮＡ損傷を誘発することによって作用する癌治療モダリティーに対して細胞を感受性とする。
【００７３】
BTKは、自己免疫性および／または炎症性疾患、例えば全身性エリテマトーデス(SLE)、関節リウマチ、多発性脈管炎(multiple vasculitides)、特発性血小板減少性紫斑病(ITP)、重症筋無力症、および喘息に役割を果たす。Ｂ細胞活性化におけるBTKの役割のために、BTK阻害剤は、Ｂ細胞介在病理学的活性、例えば自己抗体産生の阻害剤として有用であり、そしてＢ細胞リンパ腫および白血病の処置に有用である。
【００７４】
CHK2は、セリン／トレオニン・タンパク質キナーゼのチェックポイント・キナーゼ・ファミリーのメンバーであり、ＤＮＡ損傷、例えば環境変異誘発物質および内在性活性酸素種によって引き起こされる損傷の監視に用いられるメカニズムに関与している。結果として、それは、腫瘍抑制物質および癌治療の標的に関与する。
【００７５】
CSKは、癌細胞、特に結腸癌の転移の可能性に影響を与える。
【００７６】
Fesは、種々のサイトカインシグナル伝達経路ならびに骨髄細胞の分化に関与している非受容体タンパク質チロシンキナーゼである。Fesはまた、顆粒球分化機構の重要な要素である。
【００７７】
Flt3受容体チロシンキナーゼ活性は、白血病および骨髄異形成症候群に関与している。AMLの約２５％において、白血病細胞は、細胞表面に構成的に活性な形態の自己リン酸化(p)FLT3チロシンキナーゼを発現する。p-FLT3の活性は、白血球細胞に増殖および生存率の改善をもたらす。白血病細胞がp-FLT3キナーゼ活性を発現している急性白血病を有する患者は、全体的臨床成績が悪い。p-FLT3キナーゼ活性の阻害は、白血病細胞のアポトーシス(プログラムされた細胞死)を誘発する。
【００７８】
IKKαおよびIKKβ(１および２)の阻害剤は、関節リウマチ、移植拒絶反応、炎症性腸疾患、骨関節炎、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アテローム性動脈硬化症、乾癬、多発性硬化症、卒中、全身性エリテマトーデス、アルツハイマー病、脳虚血、外傷性脳傷害、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、くも膜下出血、または脳および中枢神経系における炎症性メディエーターの過剰産生と関連する他の疾患または障害を含む疾患のための治療薬である。
【００７９】
Metは、主要なヒトの癌のほとんどのタイプと関連しており、その発現は、しばしば悪い予後および転移と相関している。Metの阻害剤は、癌、例えば肺癌、NSCLC(非小細胞肺癌)、骨の癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頚部癌、皮膚または眼内黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部の癌、胃癌、結腸癌、乳癌、婦人科腫瘍(例えば子宮肉腫、卵管の癌腫、子宮内膜の癌腫、子宮頚の癌腫、膣の癌腫または外陰部の癌腫)、ホジキン病、食道癌、小腸癌、内分泌系の癌(例えば甲状腺、副甲状腺または副腎の癌)、柔組織の肉腫、尿道の癌、陰茎の癌、前立腺癌、慢性または急性白血病、小児固形腫瘍、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎臓または尿管の癌(例えば腎臓細胞癌腫、腎盂の癌)、小児悪性腫瘍、中枢神経系の腫瘍(例えば原発性CNSリンパ腫、脊髄の軸の腫瘍、脳幹神経膠腫または下垂体腺腫)、血液の癌、例えば急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病など、バレット食道(前癌性症候群)、腫瘍性皮膚疾患、乾癬、菌状息肉腫および良性前立腺肥大症、糖尿病関連疾患、例えば糖尿病性網膜症、網膜虚血、および網膜血管新生、肝硬変、心血管疾患、例えばアテローム性動脈硬化症、免疫学的疾患、例えば自己免疫性疾患および腎臓疾患を含む疾患のための治療薬である。好ましくは、該疾患は、癌、例えば急性骨髄性白血病および結腸直腸癌である。
【００８０】
Nima関連キナーゼ２(Nek2)は、中心体に局在化する、有糸分裂開始時に最大活性を有する細胞周期制御タンパク質キナーゼである。機能の研究により、Nek2が、中心体分離および紡錘体形成の制御に関連付けられた。Nek2タンパク質は、子宮頚癌、卵巣癌、前立腺癌、特に乳癌を含む様々なヒトの腫瘍に由来する細胞株において、２〜５倍上昇している。
【００８１】
p70S6K介在疾患または状態は、増殖性障害、例えば癌および結節性硬化症を含み、これらに限定されない。
【００８２】
前記によって、本発明は、さらに、処置の必要な対象において、上記の疾患または障害の何れかを予防するまたは処置する方法であって、該対象に、治療有効量(以下の“投与および医薬組成物”を参照のこと)の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。上記の使用の何れにおいても、必要な投与量は、投与方法、処置されるべき特定の状態および望ましい効果に依存して変化する。
【００８３】
投与および医薬組成物
一般的に、本発明の化合物は、当業界で既知の何れかの有用かつ許容される方法を介して、単独でまたは１種以上の治療薬と組み合わせて、治療有効量で投与される。治療有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および相対的健康状態、用いられる化合物の力価、および他の因子に依存して、広く変化し得る。一般的に、全身に、約０.０３から２.５mg/kg体重の１日用量で、満足のいく結果が得られることが示されている。より大きな哺乳動物(例えばヒト)において適応される１日用量は、約０.５mgから約１００mgの範囲であり、便宜的には、例えば１日４回までの分割投与で、または徐放形で投与される。経口投与のための適切な単位投与形は、約１から５０mgの活性成分を含む。
【００８４】
本発明の化合物は、何れかの慣用の経路で、特に経腸で、例えば、錠剤またはカプセル剤などの形態で、経口で；または、例えば注射用溶液または懸濁液の形態で、非経腸で；例えばローション、ゲル、軟膏またはクリームの形態で、局所で；または鼻腔内で；吸入剤または坐剤の形態で、医薬組成物として投与され得る。少なくとも１種の薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせて、遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明の化合物を含む医薬組成物は、慣用の方法で、混合、顆粒化、またはコーティング法によって製造され得る。例えば、経口の組成物は、ａ)希釈剤、例えばラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；ｂ)滑沢剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウムもしくはカルシウム塩、および／またはポリエチレングリコール；錠剤のためには、さらにｃ)結合剤、例えばケイ酸マグネシウムアルミニウム、澱粉ペースト、ゼラチン、トラガカント・ゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース ナトリウム、および／またはポリビニルピロリドン；所望によりｄ)崩壊剤、例えば澱粉、寒天、アルギン酸もしくはそのナトリウム塩、または発泡性混合物；および／またはｅ)吸収剤、着色料、風味剤および甘味料と共に、活性成分を含む錠剤またはゼラチンカプセルであり得る。注射用組成物は、水性等張性溶液または懸濁液であり得る。そして坐剤は、脂肪性エマルジョンまたは懸濁液から製造され得る。該組成物は、滅菌されてもよく、そして／またはアジュバント、例えば保存料、安定剤、湿化剤、または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧調節のための塩および／または緩衝剤を含んでもよい。さらに、それらはまた、他の治療的に有益な物質を含んでもよい。経皮適用に適切な製剤は、担体と共に有効量の本発明の化合物を含む。担体は、宿主の皮膚を通過するのを助けるための吸収可能な薬理学的に許容される溶媒を含み得る。例えば、経皮デバイスは、裏打ち材(backing member)、所望により担体と共に本化合物を含むリザーバー、所望により制御されたおよび予め決められた速度で長時間に亘って本化合物を宿主の皮膚に送達する速度制御障壁、ならびに皮膚へデバイスを固定するための手段を含む包帯の形態である。マトリックス経皮用製剤もまた用いられ得る。例えば皮膚および眼への局所適用に適切な製剤は、好ましくは当業界で周知の水溶液、軟膏、クリームまたはゲルである。これらは、溶解剤、安定剤、張性増加剤(tonicity enhancing agent)、緩衝剤および保存料を含んでもよい。
【００８５】
本発明の化合物は、１種以上の治療薬(医薬組成物)と組み合わせて、治療有効量で投与され得る。例えば、他の喘息治療薬、例えばステロイドおよびロイコトリエン・アンタゴニストと相乗効果が起こり得る。
【００８６】
例えば、他の免疫調節物質または抗炎症物質と、例えばシクロスポリン、ラパマイシンまたはアスコマイシン、またはその免疫抑制アナログ(例えばシクロスポリンＡ(CsA)、シクロスポリンＧ(CsG)、FK-506、ラパマイシン)、または同等な化合物、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、ブレキナール(brequinar)、レフルノミド、ミゾリビン、ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチル、１５−デオキシスパガリン(15-deoxyspergualin)、免疫抑制抗体、特に白血球受容体のためのモノクローナル抗体、例えばMHC、CD2、CD3、CD4、CD7、CD25、CD28、B7、CD45、CD58またはそのリガンド、または他の免疫調節化合物、例えばCTLA41gと組み合わせて用いた場合に、相乗効果が起こり得る。本発明の化合物が他の治療と併用投与される場合、併用投与される化合物の投与量は、用いられる併用薬のタイプ、用いられる特定の薬物、処置される状態などに依存して、当然に変化する。
【００８７】
本発明はまた、薬学的組み合わせのための、例えば、ａ)本明細書で開示された遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明の化合物である第１薬物、およびｂ)少なくとも１種の併用薬を含むキットを提供する。該キットは、それの投与のための指示書を含み得る。
【００８８】
用語“併用投与”または“組み合わせ投与”などは、本明細書で用いるとき、一人の患者への選択された複数の治療薬の投与を含むことを意味し、該薬物が必ずしも同じ投与経路によってまたは同時に投与されるのではない処置レジメを含むことを意図している。
【００８９】
用語“薬学的組み合わせ”は、本明細書で用いるとき、１種以上の活性成分の混合または組み合わせにより得られる製剤を意味し、複数活性成分の固定化されたおよび固定化されていない組み合わせの両方を含む。用語“固定化された組み合わせ”は、複数活性成分、例えば式Ｉの化合物および併用薬が、両方とも１人の患者に同時に１個のものまたは投与形で投与されることを意味する。用語“固定化されていない組み合わせ”は、複数活性成分、例えば式Ｉの化合物および併用薬が、同時に(simultaneously)、一緒に(concurrently)、または特に時間の制限なく連続的に、別個のものとして両方とも１人の患者に投与される。ここで、このような投与は、患者の体内で治療有効量の２つの化合物を提供する。後者はまた、カクテル療法、例えば３種以上の活性成分の投与に適用される。
【００９０】
本発明の化合物の製造方法
本発明はまた、本発明の化合物の製造方法を含む。記載された反応において、最終生成物中で反応性官能基(例えばヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基)が望ましいとき、望ましくない反応への関与を避けるために、これらを保護する必要があり得る。慣用の保護基は、標準的な実施に従って用いられ得る。例えば、T.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991を参照のこと。
【００９１】
Ｙが結合であり、ＸがＮＨである式Ｉの化合物は、下記の反応スキームＩの通りに進めることによって製造され得る：
反応スキームＩ
【化３】
2010509349.tif 000005
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、本発明の概要に記載された通りである。
【００９２】
式Ｉの化合物は、式３の化合物と、適切な溶媒(例えばＤＭＦなど)、適切なカップリング剤(例えばＨＡＴＵなど)および適切な塩基(例えばＤＩＥＡなど)の存在下で反応させることによって製造され得る。該反応は、約０℃から約６０℃の範囲の温度で行われ、また完了には２４時間以下かかる。
【００９３】
Ｘが結合であり、ＹがＮＨである式Ｉの化合物は、下記の反応スキームIIの通りに進めることによって製造され得る：
反応スキームII
【化４】
2010509349.tif 000006
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、本発明の概要に記載された通りである。
【００９４】
式Ｉの化合物は、式４の化合物を、式５の化合物と、適切な溶媒(例えばＤＭＦなど)、適切なカップリング剤(例えばＨＡＴＵなど)および適切な塩基(例えばＤＩＥＡなど)の存在下で反応させることによって製造され得る。該反応は、約０℃から約６０℃の温度範囲で行われ、完了には２４時間以下かかる。
【００９５】
式Ｉの化合物の合成の詳細な例は、下記の実施例で見出され得る。
【００９６】
本発明の化合物の付加的製造方法
本発明の化合物は、遊離塩基形の本化合物を薬学的に許容される無機または有機酸と反応させることによって、薬学的に許容される酸付加塩として製造され得る。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩は、遊離酸形の本化合物を薬学的に許容される無機または有機塩基と反応させることによって製造され得る。あるいは、塩形の本発明の化合物は、出発物質または中間体の塩を用いて製造され得る。
【００９７】
遊離酸形または遊離塩基形の本発明の化合物は、それぞれ対応する塩基付加塩または酸付加塩から製造され得る。例えば、本発明の化合物の酸付加塩は、適当な塩基(例えば水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど)で処理することによって、対応する遊離塩基に変換され得る。本発明の化合物の塩基付加塩は、適当な酸(例えば塩酸など)で処理することによって、対応する遊離酸に変換され得る。
【００９８】
非酸化形の本発明の化合物は、本発明の化合物のＮ−オキシドから、還元剤(例えば硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、三塩化リン、三臭化リンなど)で、適当な不活性有機溶媒(例えばアセトニトリル、エタノール、水性ジオキサンなど)中で、０から８０℃で処理することによって製造され得る。
【００９９】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体は、当業者に既知の方法によって製造され得る(例えば、さらなる詳細については、Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985を参照のこと)。例えば、適切なプロドラッグは、誘導体化されていない本発明の化合物を、適当なカルバミル化剤(例えば１,１−アシルオキシアルキルカルボノクロリデート、パラ−ニトロフェニル カーボネートなど)と反応させることによって製造され得る。
【０１００】
本発明の化合物の保護誘導体は、当業者に既知の方法によって製造され得る。保護基の付加および除去に適応可能な技術の詳細な記載は、T. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999 で見出され得る。
【０１０１】
本発明の化合物は、簡便には、本発明の製造の間で、溶媒和物(例えば水和物)として製造され得るか、または形成され得る。本発明の化合物の水和物は、簡便には、水性／有機性溶媒混合物(ここで、有機溶媒には、例えばジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールを用いる。)から、再結晶することによって製造され得る。
【０１０２】
本発明の化合物は、本化合物のラセミ混合物を光学的に活性な分割剤と反応させ、１対のジアステレオアイソマー化合物を形成し、ジアステレオマーを分離し、光学的に純粋なエナンチオマーを回収することによって、個々の立体異性体として製造され得る。エナンチオマーの分離は、本発明の化合物の共有結合ジアステレオマー誘導体を用いて行うことができるが、分離可能な複合体が好ましい(例えば結晶性ジアステレオマー塩)。ジアステレオマーは、固有の物理学的性質(例えば融点、沸点、溶解度、反応性など)を有し、これらの相違点を利用することによって、容易に分離可能である。ジアステレオマーは、クロマトグラフィーによって、または好ましくは溶解度の違いに基づく分離／分割法によって、分離され得る。次いで、ラセミ化を起こさない何れかの実用的な手段によって、分割剤と共に光学的に純粋なエナンチオマーを回収する。ラセミ混合物からの化合物の立体異性体の分離に適応可能な方法のより詳細な記載は、Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981 で見出し得る。
【０１０３】
要約すると、式Ｉの化合物は、次に掲げるものを含む工程によって合成され得る：
(ａ) 反応スキームＩおよびIIの工程；ならびに
(ｂ) 所望により本発明の化合物を薬学的に許容される塩に変換すること；
(ｃ) 所望により本発明の化合物の塩形を非塩形に変換すること；
(ｄ) 所望により酸化されていない本発明の化合物を薬学的に許容されるＮ−オキシドに変換すること；
(ｅ) 所望により本発明の化合物のＮ−オキシドをその酸化されていない形態に変換すること；
(ｆ) 所望により本発明の化合物の個々の異性体を異性体混合物から分離すること；
(ｇ) 所望により誘導体化されていない本発明の化合物を、薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体に変換すること；および
(ｈ) 所望により本発明の化合物のプロドラッグ誘導体をその誘導体化されていない形態に変換すること。
【０１０４】
出発物質の製造が特に記載されていない場合は、本化合物は、既知であるか、または当業者に既知の方法と類似の方法または下記の実施例に記載された方法によって製造され得る。
【０１０５】
上記の変換は、本発明の化合物の製造方法の単なる代表例であり、周知の他の方法も同様に用いられ得ることが、当業者に明らかであろう。
【０１０６】
実施例
本発明は、さらに、本発明の式Ｉの化合物の製造を説明する下記の実施例によって例示されるが、これに限定されない。
【０１０７】
中間体の製造
６−メチル−Ｎ１−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)ベンゼン−１,３−ジアミン(５)の合成
【化５】
2010509349.tif 000007
【０１０８】
ｎ−ブタノール(２９ml)中の２−アミノ−４−ニトロトルエン(１)(０.０３３mol)に、２.１ｇの６５％硝酸水溶液を加え、硝酸塩を形成し、続いて水(２ml)中のシアナミド(０.０４７mmol)と縮合させる。得られた混合物を、２５時間還流する。０℃まで冷却した後、沈殿物を濾過によって集め、エタノール／ジエチルエーテル(１：１(v/v), ３０ml)で洗浄し、２−メチル−５−ニトロフェニルグアニジン硝酸エステル(２)を得る。
【０１０９】
ｎ−ブタノール(１５ml)中の２−メチル−５−ニトロフェニルグアニジン(２)(０.００７４mol)に、３(０.００７４mol)および水酸化ナトリウムのフレーク(０.００８mol)を加える。得られた混合物を１２時間還流する。０℃まで冷却した後、沈殿物を濾過によって集め、イソプロパノール(６ml)で、そしてメタノール(３ml)で洗浄し、４を得る。
1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 9.31 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 8.78 (m, 1H), 8.70 (m, 1H), 8.61 (m, 1H), 8.47 (m, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.55 (m, 3H), 2.39 (s, 3H).
【０１１０】
反応剤３を以下の手順によって得る。３−アセチルピリジン(２.４７mol)およびＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド ジメチルアセタール(２４０ml)の混合物を、１６時間還流する。溶媒を真空で除去し、ヘキサン(１００ml)を残渣に加え、固体を結晶化させる。該固体をジクロロメタン−ヘキサンから再結晶し、３−ジメチルアミノ−１−(３−ピリジル)−２−プロペン−１−オンを得る。
1H NMR (400MHz, d-クロロホルム) δ 9.08 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.66 (m, 1H), 8.20 (m, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.37 (m, 1H), 5.68 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 3.18 (s, 3H), 2.97 (s, 3H).
【０１１１】
反応容器に濃塩酸(１７ml)を入れ、続いて塩化錫二水和物(０.０３mol)を入れる。該混合物を１０分間撹拌し、次いで０〜５℃に冷却する。温度を０〜５℃に維持しながら、酢酸エチル(３ml)中の化合物４(５.６mmol)の溶液をゆっくりと加える(３〜４分かけて)。該反応混合物を室温に至らしめ、１.５時間撹拌する。これに水(５０ml)を加え、続いて５０％水酸化ナトリウム溶液(４０ml)をゆっくりと加える。得られた混合物をクロロホルム(２×２５ml)で抽出する。有機層を水で徹底的に洗浄し、蒸発させる。残渣を酢酸エチル(２ml)に溶解し、０〜１０℃まで冷却し、この温度で１時間維持する。得られた沈殿物を濾過によって集め、酢酸エチル(１ml)で洗浄し、１.０ｇの５を得る。
1H NMR (400MHz, d-クロロホルム) δ 9.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.71 (m, 1H), 8.48 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.34 (m, 1H), 7.59 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.42 (m, 1H), 3.50 (bs, 2H), 2.24 (s, 3H).
【０１１２】
３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチル安息香酸(９)の合成
【化６】
2010509349.tif 000008
【０１１３】
ｎ−ＢｕＯＨ(５０ml)中の３−アミノ−４−メチル−安息香酸メチルエステル(０.６mol)の溶液に、７０％  硝酸(２.７ml)を加え、硝酸塩を形成し、続いてシアナミド水溶液(５０％wt., ７ml, ０.０９mol)と縮合させる。得られた混合物を１６時間還流し、室温まで冷却し、続いてジエチルエーテル(１００ml)を添加する。０℃で３０分間冷却した後、濾過し、メタノール／ジエチルエーテル(１：１(v/v), １２０ml)で洗浄し、３−グアニジノ−４−メチル−安息香酸メチル硝酸エステル(７)を得る。
【０１１４】
ｎ−ＢｕＯＨ(４０ml)中の３−グアニジノ−４−メチル−安息香酸メチル硝酸エステル(７)(０.０２mol)に、３(０.０２mol)および水酸化ナトリウム・フレーク(０.０２mol)を加える。得られた混合物を、１２時間還流し、８を得る。１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液(２０ml)を、８のｎ−ＢｕＯＨ溶液に加え、３０分間還流する。室温まで冷却した後、１Ｎ  水性ＨＣｌ(２０ml)を、勢いよく撹拌しながら該混合物にゆっくりと加える。生成物を濾過によって集め、水で洗浄し、９を得る。
1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 9.28 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.7 (dd, J = 4.7, 1.5 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.46 (dt, J = 8.0, 1.8 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.65 (dd, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 7.7, 4.7 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.08 (s, 3H).
MS (m/z) (M+1)+: 307.2.
【０１１５】
３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチル安息香酸(４３)の製造に関して、同じプロトコルを用いて、ピリジン環上で置換されたタイプ９の化合物を合成する。
【化７】
2010509349.tif 000009
【０１１６】
Ｎ１−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)−６−メチルベンゼン−１,３−ジアミン(１４)の合成
【化８】
2010509349.tif 000010
【０１１７】
乾燥トルエン(１５ml)中の、３−ブロモ−５−メトキシピリジン(３ｇ, １６mmol)、トリブチル(１−エトキシビニル)スタンナン(７ml, ２１mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(０.９２ｇ, ０.８mmol)の溶液を、マイクロ波中、１５０℃で３０分間加熱する。冷却後、該混合物を、ＭｅＯＨと共にセライトで濾過し、濃縮し、残渣を得る。これをシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(酢酸エチル：ヘキサン＝１：１(v/v))、１−(５−メトキシピリジン−３−イル)エタノン(１１)を得る(１.６ｇ, ６６％)。
MS (m/z) (M+1)+: 152.1。
【０１１８】
(Ｅ)−３−(ジメチルアミノ)−１−(５−メトキシピリジン−３−イル)プロパ−２−エン−１−オン(１２)を、３の合成と同様の手順を用いて製造する。Ｎ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)−４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−アミン(１３)を、４の合成と同様の手順を用いて製造する。
【０１１９】
ＭｅＯＨ(２０ml)中の、Ｎ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)−４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−アミン(１３)(５.０mmol)の溶液に、Ｐｄ(５％, 炭素上, ５０％湿潤, １０重量％)を加える。懸濁液を水素下で２時間撹拌する。該反応物をセライトで濾過し、セライトのケーキをＭｅＯＨで洗浄する。溶媒を減圧下で除去し、１４を得る。これをさらに精製することなく用いる。
MS (m/z) (M+1)+: 308.2。
【０１２０】
アニリン(１４)を用いて、アニリン(５)で行われるのと同じ種類の化合物を合成し得る。
【０１２１】
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−クロロピリジン−４−カルボキサミド(Ａ−１)の合成
【化９】
2010509349.tif 000011
【０１２２】
６−メチル−Ｎ１−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)ベンゼン−１,３−ジアミン(５)(５mmol)、２−クロロ−イソニコチン酸(６mmol)およびＨＡＴＵ(６mmol)を、乾燥ＤＭＦ(５ml)に、室温で溶解する。ジイソプロピルエチルアミン(６mmol)を、該溶液に滴下する。３０分後、該混合物を飽和水性ＮａＨＣＯ３にゆっくりと加える。固体を濾過し、水で洗浄し、真空下で終夜乾燥し、生成物Ａ１を明黄色の固体として得る。
1H NMR (400MHz, d4-メタノール) δ 9.3 (s, 1H), 8.65 (m, 1H), 8.6 (m, 1H), 8.55 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.84 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.4 (dd, J = 8.2, 2.1 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H).
MS (m/z) (M+1)+: 417.1。
【０１２３】
中間体、すなわち６−クロロ−Ｎ−(４−メチル−３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)フェニル)ニコチンアミド(１５)、５−ホルミル−Ｎ−(４−メチル−３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)フェニル)フラン−２−カルボキサミド(１６)および５−ブロモ−Ｎ−(４−メチル−３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)フェニル)ニコチンアミド(１７)の製造で、同様の手順を用い得る。
【化１０】
2010509349.tif 000012
【０１２４】
Ｎ−(３−(４−クロロピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキサミド(２２)の合成
【化１１】
2010509349.tif 000013
【０１２５】
２−クロロ−４−メトキシピリミジン(１８)(１０.０mmol)、２−メチル−５−ニトロベンゼンアミン(１５.０mmol)、Ｐｄ(ＯＡｃ)２(１mmol)、ＤＰＥ−Ｐｈｏｓ(１.５mmol)およびＮａＯ−ｔＢｕ(２０.０mmol)の混合物に、窒素下、１,４−ジオキサン(１５ml)を加える。得られた混合物を、マイクロ波条件下で、１５０℃で２０分間加熱する。該反応混合物をセライトのパッドで濾過し、濾液を酢酸エチル(１００ml)に希釈し、水で洗浄し、ＮａＳＯ４で乾燥し、濃縮する。粗生成物を、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(酢酸エチル：ヘキサン＝１：４(v/v))、４−メトキシ−Ｎ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)ピリミジン−２−アミン(１９)を、明黄色の固体として得る。
MS (m/z) (M+1)+: 261.1。
【０１２６】
ＭｅＯＨ(２０ml)中の４−メトキシ−Ｎ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)ピリミジン−２−アミン(１９)(５.０mmol)の溶液に、Ｐｄ(５％, 炭素上, ５０％湿潤, １０重量％)を加える。該懸濁液を、水素下、２時間撹拌する。該反応物をセライトで濾過し、セライトのケーキをＭｅＯＨで洗浄する。溶媒を減圧下で除去し、粗生成物(２０)を得る。これを、さらに、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製する(酢酸エチル：ヘキサン＝１：２(v/v))。
MS (m/z) (M+1)+: 231.1。
【０１２７】
Ｎ１−(４−メトキシピリミジン−２−イル)−６−メチルベンゼン−１,３−ジアミン(２０)(０.６５mmol)、１Ｈ−インダゾール−３−カルボン酸(０.６８mmol)およびＨＡＴＵ(０.７９mmol)を、乾燥ＤＭＦ(４.０ml)に、室温で溶解する。ジイソプロピルエチルアミン(４mmol)を、該溶液に加える。１時間後、該混合物を水(１００ml)で希釈する。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、真空下で乾燥し、２１を明黄色の固体として得る。
MS (m/z) (M+1)+: 375.1。
【０１２８】
ＡＣＮ(２ml)中の、Ｎ−(３−(４−メトキシピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキサミド(２１)(０.５３mmol)、ＴＭＳＣｌ(ＴＨＦ中２Ｍ, ２.１２mmol)およびＮａＩ(２.１２mmol)の混合物を、マイクロ波条件下で、１４０℃で２０分間加熱する。該反応混合物に、２Ｍ  水性Ｎａ２ＣＯ３(５０ml)を加え、次いで酢酸エチル(１００ml×２)で抽出する。有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、残渣を得る。この残渣にＰＯＣｌ３(５ml)を加え、得られた混合物を１５分間還流する。過剰のＰＯＣｌ３を真空で除去する。残渣を酢酸エチル(１００ml)に溶解し、Ｎａ２ＣＯ３溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過する。溶媒を真空で蒸発させ、粗生成物２２を得る。これを、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製する(酢酸エチル：ヘキサン＝１：２(v/v))。
1H NMR (400MHz, d-クロロホルム) δ 8.9 (s, 1H), 8.43 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.22-8.29 (m, 3H), 7.43-7.58 (m, 3H), 7.33 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H).
MS (m/z) (M+1)+: 379.1。
【０１２９】
２２と類似の化合物を、化合物２０を、２５の製造におけるカルボン酸類とは異なるカルボン酸類とカップリングさせることによって合成され得る。
【０１３０】
Ｎ−(３−(４−クロロピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド(２５)の合成
【化１２】
2010509349.tif 000014
【０１３１】
Ｎ１−(４−メトキシピリミジン−２−イル)−６−メチルベンゼン−１,３−ジアミン(２３)(０.６５mmol)、１−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸(０.６８mmol)およびＨＡＴＵ(０.７９mmol)を、乾燥ＤＭＦ(４.０ml)に、室温で溶解させる。ジイソプロピルエチルアミン(４mmol)を該溶液に加える。１時間後、該混合物を水(１００ml)で希釈する。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、真空下で乾燥し、２４を明黄色の固体として得る。
1H NMR (400MHz, d-クロロホルム) δ 8.49 (s, 1H), 8.12 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.14-7.20 (m, 2H), 6.94 (bs, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.21 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 4.50-4.56 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.43 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
MS (m/z) (M+1)+: 367.2。
【０１３２】
ＡＣＮ(２ml)中の、Ｎ−(３−(４−メトキシピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド(２４)(０.５３mmol)、ＴＭＳＣｌ(ＴＨＦ中２Ｍ, ２.１２mmol)およびＮａＩ(２.１２mmol)の混合物を、マイクロ波条件下で、１４０℃で２０分間加熱する。該反応混合物に、２Ｍ  水性Ｎａ２ＣＯ３(５０ml)を加え、酢酸エチル(１００ml×２)で抽出する。有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、残渣を得る。残渣にＰＯＣｌ３(５ml)を加え、得られた混合物を１５分間還流する。過剰のＰＯＣｌ３を真空で除去する。残渣を酢酸エチル(１００ml)に溶解し、Ｎａ２ＣＯ３溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過する。溶媒を真空で蒸発させ、粗生成物２５を得る。これを、さらに、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製する(酢酸エチル：ヘキサン＝１：２(v/v))。
MS (m/z) (M+1)+: 371.1。
【０１３３】
１−(４−シアノフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸(２８)の合成
【化１３】
2010509349.tif 000015
【０１３４】
ジクロロメタン中の４−ヒドラジニルベンゾニトリル塩酸塩(２６)(２.０６mmol)の溶液に、０℃で、炭酸カリウム(１.５９mmol)を加え、続いて２,４−ジオキソペンタン酸エチル(３.１６mmol)を加える。該反応混合物を室温で終夜撹拌する。該反応混合物をジクロロメタンで希釈し、水で、そして塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を除去し、粗生成物２７を得る。これをさらに精製することなく用いる。
【０１３５】
１−(４−シアノフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸エチル(２７)を、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ(３：２：１(v/v))の溶液に溶解し、６Ｎ  水酸化リチウム(３当量)を加える。該混合物を終夜撹拌する。溶媒を真空で除去し、残渣をＨ２Ｏに希釈し、ジクロロメタン(３回)で抽出し、水層のｐＨをｐＨ  ５に調節する。沈殿物を濾過し、乾燥し、１−(４−シアノフェニル)−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸(２８)を得る。これを、Ａ−７１〜Ａ−７３を合成するために用いる。
MS (m/z) (M+1)+: 228.1。
【０１３６】
６−メチル−Ｎ１−(４−(５−モルホリノピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)ベンゼン−１,３−ジアミン(３３)の合成
【化１４】
2010509349.tif 000016
【０１３７】
(Ｅ)−１−(５−ブロモピリジン−３−イル)−３−(ジメチルアミノ)プロパ−２−エン−１−オン(３０)を、２９から、３の合成と同様の手順を用いて製造する。４−(５−ブロモピリジン−３−イル)−Ｎ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)ピリミジン−２−アミン(３１)を、３０から、４の合成と同様の手順を用いて製造する。
【０１３８】
化合物３１(１５２mg, ０.４mmol)、モルホリン(１.２mmol)、Ｋ３ＰＯ４(１６８mg, ０.８mmol)、ＣｕＩ(１５mg, ０.０４mmol)およびＬ−プロリン(１９mg, ０.０８mmol)を、乾燥ＤＭＳＯ中、窒素下、９０℃で１６時間加熱する。該混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄する。溶媒を真空で除去した後、主に３２を含む残渣を、さらに精製することなく次の段階に用いる。
MS (m/z) (M+1)+: 393.2。
【０１３９】
粗製のＮ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)−４−(５−モルホリノピリジン−３−イル)ピリミジン−２−アミン(３２)を、ＳｎＣｌ２(０.７８ｇ, ４mmol)と共に、ＥｔＯＨ(５ml)中で、２時間還流する。１Ｎ  水性ＮａＯＨをｐＨ＞１４になるまで加える。該混合物を濾過し、ジクロロメタンで洗浄する。合わせた有機相を濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製し、３３を得る。
MS (m/z) (M+1)+: 363.2。
【０１４０】
化合物３１を異なるアミン類とカップリングすることによって、３３に類似する化合物を合成し得る。
【０１４１】
Ｎ１−(４−(５−(ジフルオロメトキシ)ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)−６−メチルベンゼン−１,３−ジアミン(３６)の合成
【化１５】
2010509349.tif 000017
【０１４２】
４−(５−メトキシピリジン−３−イル)−Ｎ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)ピリミジン−２−アミン(１３)(３ｇ, １０mmol)を、乾燥ジクロロメタン中に懸濁する。ＢＢｒ３(３ml, ３２mmol)を室温でゆっくりと導入する。該混合物を３日間撹拌し、氷水にゆっくりと添加することによってクエンチする。固体のＮａＯＨをｐＨ＞１４になるまで加える。該混合物をジクロロメタンで抽出する。水性濃塩酸を水相にｐＨ＝７までゆっくりと加える。固体を濾過し、真空下で乾燥し、３４を得る。これをさらに精製することなく用いる。
【０１４３】
５−(２−(２−メチル−５−ニトロフェニルアミノ)ピリミジン−４−イル)ピリジン−３−オール(３４)(９７mg, ０.３mmol)を、ＮａＯＨ(２４mg, ０.６mmol)およびＣｌＣＦ２ＣＯ２Ｎａ(９２mg, ０.６mmol)と共に、乾燥ＤＭＦ(１ml)中で、マイクロ波オーブン中、１８０℃で４５分間加熱する。残渣を酢酸エチルに溶解し、水で洗浄する。濃縮後、粗製の混合物を、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(酢酸エチル：ヘキサン＝１：１(v/v))、３５を得る。
MS (m/z) (M+1)+: 374.1。
【０１４４】
３５(５０mg, ０.１３mmol)を、ＳｎＣｌ２(０.３９ｇ, ２mmol)と共に、ＥｔＯＨ(２ml)中で２時間還流する。１Ｎ  ＮａＯＨをｐＨ＞１４になるまで加える。該混合物を濾過し、ジクロロメタンで洗浄する。合わせた有機相を濃縮し、３６を得る。これをさらに精製することなく用いる。
MS (m/z) (M+1)+: 344.2。
【０１４５】
Ｎ１−(４−(イソキノリン−４−イル)ピリミジン−２−イル)−６−メチルベンゼン−１,３−ジアミン(４０)の合成
【化１６】
2010509349.tif 000018
【０１４６】
ＡＣＮ(１０ml)中の、１９(１ｇ, ３.８mmol)、ＴＭＳＣｌ(ジクロロメタン中１Ｍ, ６.７ml, ６.７mmol)およびＮａＩ(１.４５ｇ, ７.７mmol)の混合物を、マイクロ波条件下で、１２０℃で２０分間加熱する。該反応混合物に、２Ｍ  水性Ｎａ２ＣＯ３(５０ml)およびジクロロメタン(２×１００ml)を加える。有機層を分離し、水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、粗製の２−(２−メチル−５−ニトロフェニルアミノ)ピリミジン−４−オール(３７)の残渣を得る。この残渣にＰＯＣｌ３(５ml)を加え、得られた混合物を２時間還流する。過剰のＰＯＣｌ３を真空で除去する。残渣をジクロロメタン(１００ml)に溶解し、Ｎａ２ＣＯ３溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過する。溶媒を真空で蒸発させ、粗生成物３８を得る。これをさらに精製することなく用いる。
MS (m/z) (M+1)+: 265.2, 267.2。
【０１４７】
４−クロロ−Ｎ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)ピリミジン−２−アミン(３８)(１ｇ, ４mmol)、イソキノリン−４−イルボロン酸(１ｇ, ４mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)２Ｃｌ２(１４０mg, ０.２mmol)を、スターラー・バーを備えた４０mlのバイアルに加える。該バイアルを５回排気し窒素を再充填する。１,４−ジオキサン(２０ml)および３Ｍ  水性Ｎａ２ＣＯ３(８ml, ２４mmol)を、シリンジによって加える。バイアルを密封し、マイクロ波条件下、１５０℃で１０分間加熱する。該混合物を濾過し、ジクロロメタンで希釈する。１Ｎ  ＮａＯＨ(５０ml)で洗浄した後、有機相を１Ｎ  ＨＣｌ(２０ml)で洗浄する。水相を終夜冷蔵庫に保存し、生成物３９を固体沈殿物として得て、それを濾過し、乾燥する。
MS (m/z) (M+1)+: 358.2。
【０１４８】
４−(イソキノリン−４−イル)−Ｎ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)ピリミジン−２−アミン(３９)(２００mg, ０.５５mmol)を、ＭｅＯＨ(１０ml)に溶解し、室温で、１atmの水素下で、５％  Ｐｄ／Ｃ(１４０mg)の存在下で、３時間撹拌する。濾過後、溶媒を除去し、Ｎ−１−(４−(イソキノリン−４−イル)ピリミジン−２−イル)−６−メチルベンゼン−１,３−ジアミン(４０)を得る。これをさらに精製することなく用いる。
MS (m/z) (M+1)+: 328.2。
【０１４９】
Ｎ−(３−(４−(５−ブロモピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−メチル−５−(トリフルオロメチル)オキサゾール−４−カルボキサミド(４２)の合成
【化１７】
2010509349.tif 000019
【０１５０】
４−(５−ブロモピリジン−３−イル)−Ｎ−(２−メチル−５−ニトロフェニル)ピリミジン−２−アミン(３１)(２１０mg, ０.５５mmol)を、ＳｎＣｌ２(３１１mg, １.６４mmol)と共に、ＥｔＯＨ(５ml)中で２時間還流する。１Ｎ  水性ＮａＯＨをｐＨ＞１４になるまで加える。該混合物を濾過し、ジクロロメタンで洗浄する。合わせた有機相を濃縮し、４１を得る。これをさらに精製することなく用いる。
MS (m/z) (M+1)+: 356.2, 358.2。
【０１５１】
粗製のＮ−１−(４−(５−ブロモピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)−６−メチルベンゼン−１,３−ジアミン(４１)(０.５mmol)を、２−メチル−５−(トリフルオロメチル)オキサゾール−４−カルボン酸(１０７mg, ０.５５mol)、ＨＡＴＵ(２５１mg, ０.６６mmol)およびＤＩＰＥＡ(０.３５ml, ２mmol)と共に、乾燥ＤＭＦ(２ml)中で、室温で３０分間撹拌する。該混合物を分取ＨＰＬＣによって精製し、Ｎ−(３−(４−(５−ブロモピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−メチル−５−(トリフルオロメチル)オキサゾール−４−カルボキサミド(４２)を得る。
MS (m/z) (M+1)+: 533.3, 535.3。
【実施例】
【０１５２】
実施例１
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド(Ａ−６)
【化１８】
2010509349.tif 000020
【０１５３】
６−メチル−Ｎ１−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)ベンゼン−１,３−ジアミン(５)(０.２７mmol)、５−クロロインドール−２−カルボン酸(０.３０mmol)およびＨＡＴＵ(０.３２mmol)を、乾燥ＤＭＦ(１.５ml)に、室温で溶解する。ジイソプロピルエチルアミン(６mmol)を溶液に加える。１２時間後、該混合物をメタノール(５ml)で希釈する。沈殿物を濾過し、メタノールで洗浄し、真空下で乾燥し、明黄色の固体を得る。次いでこれをメタノール中に懸濁し、ＨＣｌ(０.２ml, １,４−ジオキサン中２.０Ｍ溶液)で処理する。１時間後、該混合物を乾固するまで減らし、真空下で乾燥し、生成物Ａ６を明橙色の固体として得る。
1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 11.96 (s, 1H), 10.30 (s, 1H), 9.43 (bs, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.85 (m, 2H), 8.60 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.16 (bs, 1H), 7.85 (bs, 1H), 7.77 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 1H) 7.43 (bs, 1H), 7.25 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 2.25 (s, 3H).
MS (m/z) (M+1)+: 455.1。
【０１５４】
アニリン類１４、３３、３６、４０または同様の方法で合成される他のアニリン類を用いて、他のタイプＡの最終化合物を、Ａ−６を中間体５から合成するのと同様の手順を用いて合成する。
【０１５５】
実施例２
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−モルホリノピリジン−４−カルボキサミド(Ｂ−１)
【化１９】
2010509349.tif 000021
【０１５６】
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−クロロピリジン−４−カルボキサミド(Ａ−１)(２mmol)、モルホリン(１０mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(４mmol)を、マイクロ波オーブン中、２５０℃で８分間加熱する。該混合物を分取ＨＰＬＣによって精製する(ＡＣＮ／水, 濃度勾配１０〜７０％)。合わせた生成物の溶液を濃縮し、固体のＮａ２ＣＯ３をｐＨ＝１０になるまで加える。ジクロロメタンで抽出し、無水Ｋ２ＣＯ３で乾燥し、濃縮後、固体と油状物の混合物を得る。これを、さらに、ＭｅＯＨ／Ｅｔ２Ｏ中で磨砕する。濾過後、生成物Ｂ１を灰白色の固体として得る。
1H NMR (400MHz, d6-アセトン) δ 9.47 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.56 (dd, J = 4.7, 1.6 Hz, 1H), 8.45 (m, 1H), 8.41 (m, 1H), 8.4 (m, 1H), 8.15 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.37 (m, 2H), 7.3 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.11 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 5.1, 1.2 Hz, 1H), 3.63 (t, J = 4.7 Hz, 4H), 3.44 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 2.24 (s, 3H).
MS (m/z) (M+1)+: 468.1。
【０１５７】
同様の手順を用いて、６−クロロ−Ｎ−(４−メチル−３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)フェニル)ニコチンアミド(１５)を中間体として用いて、実施例Ｂ−１２およびＢ−１３、Ｂ−１６およびＢ−１７を製造する。
【０１５８】
実施例３
２−(３−ヒドロキシプロポキシ)−Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)ピリジン−４−カルボキサミド(Ｃ−２)
【化２０】
2010509349.tif 000022
【０１５９】
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−クロロピリジン−４−カルボキサミド(Ａ１)(０.０４８mmol)を、ＤＭＳＯ(１ml)中のプロパン−１,３−ジオール(０.４８mmol)およびＮａＨ(０.２４mmol)の混合物に加え、該反応混合物を１５０℃で２時間加熱する。該混合物を分取ＨＰＬＣによって精製し(ＡＣＮ／水, 濃度勾配１０〜７０％)、対応する生成物Ｃ２をＴＦＡ塩として得る。
1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.40 (s, 1H), 9.41 (d, J = 1.44 Hz, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.83-8.88 (m, 2H), 8.60 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.83-7.88 (m, 1H), 7.53 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.41-7.49 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.23 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.38 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.57 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.24 (s, 3H), 1.85-1.93 (m, 2H).
MS (m/z) (M+1)+: 457.1。
【０１６０】
同様の手順を用いて、６−クロロ−Ｎ−(４−メチル−３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)フェニル)ニコチンアミド(１５)を中間体として用いて、実施例Ｃ−９からＣ−１２を製造する。
【０１６１】
実施例４
３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−Ｎ−(３,４−ジヒドロ−３−オキソ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−６−イル)−４−メチルベンズアミド(Ｄ−２)
【化２１】
2010509349.tif 000023
【０１６２】
３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチル安息香酸(９)(０.１mmol)、６−アミノ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−３(４Ｈ)−オン(０.１mmol)およびＨＡＴＵ(０.１５mmol)を、乾燥ＤＭＦ(０.５ml)に、室温で溶解する。ジイソプロピルエチルアミン(０.５０mmol)を、該溶液に加える。該反応混合物を室温で１時間撹拌する。ＨＰＬＣで精製し、標的化合物Ｄ２をＴＦＡ塩として得る。
1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.78 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.29 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.74 (dd, J = 1.4, 4.9 Hz, 1H), 8.52-8.58 (m, 2H), 8.23 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 1.7, 7.9 Hz, 1H), 7.59-7.64 (m, 1H), 7.54 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 2.4, 8.7 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 2.34 (s, 3H). 
MS (m/z) (M+1)+: 453.2。
【０１６３】
同様の手順を用いて、３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチル安息香酸(４３)を中間体として用いて、実施例Ｄ−５からＤ−１２を製造する。
【０１６４】
実施例５
Ｎ−(３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド(Ｅ−４)
【化２２】
2010509349.tif 000024
【０１６５】
Ｎ−(３−(４−クロロピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド(２５)(０.０２１mmol)、３−メトキシ−５−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ピリジン(０.０２５mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)２Ｃｌ２(０.００１４mmol)を、スターラー・バーを備えた１０mlのシュレンク・フラスコに加える。該フラスコを５回排気し窒素を再充填する。１,４−ジオキサン(０.８ml)および水性Ｎａ２ＣＯ３(３.１Ｍ, ０.１２mmol)を、シリンジによって加える。シュレンク・フラスコを密封し、マイクロ波条件下で、１５０℃で１０分間加熱する。ＨＰＬＣで精製し、生成物Ｅ４をＴＦＡ塩として得る。
1H NMR (400MHz, d4-メタノール) δ 9.12 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.59-8.62 (m, 1H), 8.55 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.54 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.27-7.35 (m, 2H), 6.70 (s, 1H), 4.45-4.52 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.36 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
MS (m/z) (M+1)+: 444.2。
【０１６６】
同様の手順を用いて、Ｎ−(３−(４−クロロピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキサミド(２２)を中間体として用いて、実施例Ｅ−１からＥ−３を製造する。
【０１６７】
実施例６
５−((ジエチルアミノ)メチル)−Ｎ−(４−メチル−３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)フェニル)フラン−２−カルボキサミド(Ｆ−１)
【化２３】
2010509349.tif 000025
【０１６８】
ジクロロメタン(０.５ml)中の、Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−４−ホルミルシクロペンタ−１,３−ジエンカルボキサミド(１６)(０.０３mmol)、ジエチルアミン(０.０９mmol)および過剰のＮａ２ＳＯ４の混合物を、室温で１時間撹拌する。次いでＮａＢＨ(ＯＡｃ)３(０.１５mmol)を加え、終夜撹拌する。該混合物を分取ＨＰＬＣによって精製し(ＡＣＮ／水, 濃度勾配１０〜７０％)、対応する生成物Ｆ１をＴＦＡ塩として得る。
1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.14 (s, 1H), 9.28 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.70 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.52 (m, 2H), 7.99 (s, 1H), 7.57 (m, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 6.94 (m, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.13 (m, 4H), 2.55 (s, 3H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 6H).
MS (m/z) (M+1)+: 479.2。
【０１６９】
実施例７
Ｎ−(４−メチル−３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)フェニル)−５−モルホリノニコチンアミド(Ｇ−１)
【化２４】
2010509349.tif 000026
【０１７０】
オーブン乾燥したバイアルに、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.０１１mmol)、２'−(ジシクロヘキシルホスフィノ)−Ｎ,Ｎ−ジメチルビフェニル−２−アミン(０.０１３mmol)およびＮ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−５−ブロモピリジン−３−カルボキサミド(０.２１６mmol)を入れる。該バイアルを排気しＮ２を再充填する。次いでＬｉＮ(ＴＭＳ)２溶液(ＴＨＦ中１Ｍ, １.０ml)、１,４−ジオキサン(１ml)およびモルホリン(０.２６mmol)を、シリンジを介して加える。該混合物を、マイクロ波条件下、１４０℃で４５分間加熱する。得られた混合物を分取ＨＰＬＣによって精製し(ＡＣＮ／水, 濃度勾配１０〜７０％)、対応する生成物Ｇ１をＴＦＡ塩として得る。
1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.5 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.76 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.62 (m, 3H), 8.10 (m, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.67 (m, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 3.79 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.35 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.25 (s, 3H).
MS (m/z) (M+1)+: 468.2。
【０１７１】
実施例８
１−(３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−３−(ピリジン−２−イル)ウレア(Ｈ−６)
【化２５】
2010509349.tif 000027
【０１７２】
ピリジン−２−アミン(５mg, ０.０５mmol)を、乾燥ＴＨＦ中のトリホスゲン(４.９mg, ０.０１７mmol)と混合し、室温で２０分間混合する。Ｎ−１−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イル)−６−メチルベンゼン−１,３−ジアミン(１４)(１５mg, ０.０５mmol)を加え、２０分後にＭｅＯＨを添加することによって、反応をクエンチする。溶媒を除去し、残渣を分取ＨＰＬＣによって精製し、ウレアＨ−６を得る。
1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.46 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5 Hz,  1H), 8.44 (d, J = 2.4 Hz,  1H), 8.05 (s, 1H), 7.9 (s, 1H), 7.78 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 7.48 (m, 2H), 7.2 (m, 2H), 7.03 (1H, J = 5.7 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.55 (s, 1H), 2.21 (s, 3H).
MS (m/z) (M+1)+: 434.2。
【０１７３】
同様の方法で合成したアニリン類１４、３３、３６、４０またはその他のものを用いて、Ｈ−６を中間体１４から合成する手順と同様の手順を用いて、他のタイプＨの最終化合物を合成する。
【０１７４】
実施例９
Ｎ−(３−(４−(５−((２Ｓ,６Ｒ)−２,６−ジメチルモルホリノ)ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−メチル−５−(トリフルオロメチル)オキサゾール−４−カルボキサミド(Ｉ−１)
【化２６】
2010509349.tif 000028
【０１７５】
化合物４２(３０mg, ０.０５６mmol)、ジメチルモルホリン(１３mg, ０.１２mmol)、Ｋ３ＰＯ４(２４mg, ０.１１mmol)、ＣｕＩ(２.２mg, ０.００６mmol)およびＬ−プロリン(２.７mg, ０.０１２mmol)を、乾燥ＤＭＳＯ中、窒素下、９０℃で１６時間加熱する。該混合物を濾過し、分取ＨＰＬＣによって精製し、Ｉ−１を得る。
1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.52 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.7 (dd, J = 5.5, 3.4 Hz,  1H), 8.5 (m, 2H), 8.06 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.53 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.68 (m, 2H), 2.6 (s, 3H), 2.34 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.13 (d, J = 5.3 Hz, 6H).
MS (m/z) (M+1)+: 568.3。
【０１７６】
上記の実施例で記載した手順を繰り返して、適切な出発物質を用いて、表１に示した下記の式Ｉの化合物を得る。
【表１】
2010509349.tif 000029
【０１７７】
【表２】
2010509349.tif 000030
【０１７８】
【表３】
2010509349.tif 000031
【０１７９】
【表４】
2010509349.tif 000032
【０１８０】
【表５】
2010509349.tif 000033
【０１８１】
【表６】
2010509349.tif 000034
【０１８２】
【表７】
2010509349.tif 000035
【０１８３】
【表８】
2010509349.tif 000036
【０１８４】
【表９】
2010509349.tif 000037
【０１８５】
【表１０】
2010509349.tif 000038
【０１８６】
【表１１】
2010509349.tif 000039
【０１８７】
【表１２】
2010509349.tif 000040
【０１８８】
【表１３】
2010509349.tif 000041
【０１８９】
【表１４】
2010509349.tif 000042
【０１９０】
【表１５】
2010509349.tif 000043
【０１９１】
【表１６】
2010509349.tif 000044
【０１９２】
【表１７】
2010509349.tif 000045
【０１９３】
【表１８】
2010509349.tif 000046
【０１９４】
【表１９】
2010509349.tif 000047
【０１９５】
【表２０】
2010509349.tif 000048
【０１９６】
【表２１】
2010509349.tif 000049
【０１９７】
【表２２】
2010509349.tif 000050
【０１９８】
【表２３】
2010509349.tif 000051
【０１９９】
【表２４】
2010509349.tif 000052
【０２００】
【表２５】
2010509349.tif 000053
【０２０１】
【表２６】
2010509349.tif 000054
【０２０２】
【表２７】
2010509349.tif 000055
【０２０３】
【表２８】
2010509349.tif 000056
【０２０４】
【表２９】
2010509349.tif 000057
【０２０５】
【表３０】
2010509349.tif 000058
【０２０６】
【表３１】
2010509349.tif 000059
【０２０７】
【表３２】
2010509349.tif 000060
【０２０８】
【表３３】
2010509349.tif 000061
【０２０９】
【表３４】
2010509349.tif 000062
【表３５】
2010509349.tif 000063
【０２１０】
実施例１１
３−(２−メトキシ−フェニル)−Ｎ−[４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−フェニル]−プロピオンアミド
【化２７】
2010509349.tif 000064
【０２１１】
Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の、約５０％の無水プロピルリン酸を含む溶液(０.７７ml, 〜１.２mmol)を、２mlのＮ,Ｎ−ジメチルアセトアミド中の４−メチル−Ｎ３−[４−(３−ピリジニル)−２−ピリミジニル]−１,３−ベンゼンジアミン(２２１.９mg, ０.８mmol)、３−(２−メトキシ−フェニル)−プロピオン酸(１４４.２mg, ０.８mmol)およびトリエチルアミン(０.８８７ml, ６.４mmol)の混合物に、撹拌しながら、２０分以内で３回に分けて加える。室温で２４時間撹拌した後、該混合物を、炭酸水素ナトリウムの半飽和水溶液で処理し、酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機抽出物を乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、溶媒を減圧下で蒸発させる。粗生成物をアセトンから結晶化することによって精製し、表題化合物を褐色がかった固体として得る。
MS: 440.2 [M+H]+;
tR (HPLC, Nucleosil C18; 5-100% CH3CN+0.1%TFA/H2O+0.1%TFA, 5分間, 流速1.5ml/分): 3.91分;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 2.16 (s, 3H); 2.55 (t, 2H); 2.84 (t, 2H); 3.78 (s; 3H); 6.83 (t, 1H); 6.93 (d, 1H); 7.09-7.19 (m, 3H); 7.26 (m, 1H); 7.41 (d, 1H); 7.49 (dd, 1H); 7.87 (m, 1H); 8.45 (m, 1H); 8.49 (d, 1H); 8.67 (dd, 1H); 8.91 (s, 1H); 9.24 (m, 1H); 9.80 (s,1H).
【０２１２】
実施例１２
１−エチル−７−メチル−４−オキソ−１,４−ジヒドロ−[１,８]ナフチリジン−３−カルボン酸 [４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−フェニル]−アミド
【化２８】
2010509349.tif 000065
【０２１３】
Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中約５０％の無水プロピルリン酸を含む溶液(０.７７ml, 〜１.２mmol)を、２０分以内で３回に分けて、２mlのＮ,Ｎ−ジメチルアセトアミド中の、４−メチル−Ｎ３−[４−(３−ピリジニル)−２−ピリミジニル]−１,３−ベンゼンジアミン(２２１.９mg, ０.８mmol)、１−エチル−７−メチル−４−オキソ−１,４−ジヒドロ−[１,８]ナフチリジン−３−カルボン酸(１８５.８mg, ０.８mmol)およびトリエチルアミン(０.８８７ml, ６.４mmol)の混合物に、撹拌しながら加える。室温で２４時間撹拌した後、該混合物を、炭酸水素ナトリウム半飽和水溶液と酢酸エチルの層間に分配する。該沈殿物を濾過して取り、Ｈ２Ｏで、メタノールで、そしてジエチルエーテルで洗浄し、真空で乾燥し、表題化合物を褐色がかった固体として得る。
MS: 492.1 [M+H]+;
tR (HPLC, Nucleosil C18; 5-100% CH3CN+0.1%TFA/H2O+0.1%TFA, 5分間, 流速1.5ml/分): 4.23分;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 1.41 (t, 3H); 2.22 (s, 3H); 2.67 (s, 3H); 4.61 (q, 2H); 7.21 (d, 1H); 7.41 (m, 1H); 7.45 (d, 1H); 7.50-7.58 (m, 2H); 8.07 (d, 1H); 8.47-8.55 (m, 2H); 8.63 (d, 1H); 8.68 (dd, 1H); 8.96 (s, 1H); 9.10 (s, 1H); 9.28 (m, 1H); 12.19 (s,1H).
【０２１４】
実施例１３
１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸 [４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−フェニル]−アミド
【化２９】
2010509349.tif 000066
【０２１５】
表題化合物を、実施例１１に記載された方法と類似の方法で、３−(２−メトキシ−フェニル)−プロピオン酸の代わりに１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸を用いて製造する。
褐色がかった固体；
MS: 435.1 [M+H]+;
tR (HPLC, Nucleosil C18; 5-100% CH3CN+0.1%TFA/H2O+0.1%TFA, 5分間, 流速1.5ml/分): 4.15分;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 2.22 (s, 3H); 4.00 (s, 3H); 7.11 (t, 1H); 7.20 (d, 1H); 7.29 (m, 2H); 7.41-7.58 (m, 4H); 7.68 (d, 1H); 8.06 (d, 1H); 8.14 (dd, 1H); 8.46-8.52 (m, 2H); 8.68 (dd, 1H); 8.99 (s, 1H); 9.30 (m, 1H); 10.28 (s,1H).
【０２１６】
実施例１４
５−ニトロ−フラン−２−カルボン酸 [４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−フェニル]−アミド
【化３０】
2010509349.tif 000067
【０２１７】
表題化合物を、実施例１１に記載された方法と類似の方法で、３−(２−メトキシ−フェニル)−プロピオン酸の代わりに５−ニトロ−フラン−２−カルボン酸を用いて製造する。
褐色がかった固体；
MS: 417.1 [M+H]+;
tR (HPLC, Nucleosil C18; 5-100% CH3CN+0.1%TFA/H2O+0.1%TFA, 5分間, 流速1.5 ml/分): 3.65分;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 2.22 (s, 3H); 7.22 (d, 1H); 7.41-7.54 (m, 3H); 7.63 (d, 1H); 7.80 (d, 1H); 8.02 (m, 1H); 8.44 (dt, 1H); 8.51 (d, 1H); 8.67 (dd, 1H); 9.02 (s, 1H); 9.25 (d, 1H); 10.59 (s,1H).
【０２１８】
実施例１５
{２−[４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−ベンゾイルアミノ]−チアゾール−４−イル}−酢酸エチルエステル
【化３１】
2010509349.tif 000068
【０２１９】
Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中約５０％の無水プロピルリン酸を含む溶液(０.６７４ml, 〜１.０５mmol)を、２０分以内で３回に分けて、２mlのＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の、４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−安息香酸(２１４.４mg, ０.７mmol)、(２−アミノ−チアゾール−４−イル)−酢酸エチルエステル(１３０.４mg, ０.７mmol)およびトリエチルアミン(０.７７６ml, ５.６mmol)の混合物に、撹拌しながら加える。室温で２４時間撹拌した後、該混合物を炭酸水素ナトリウム半飽和水溶液と酢酸エチルの層間に分配する。該沈殿物を濾過して取り、Ｈ２Ｏで、そして酢酸エチルで洗浄し、真空で乾燥し、表題化合物をベージュ色の固体として得る。
MS: 475.1 [M+H]+;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 1.16 (t, 3H); 2.32 (s, 3H); 3.71 (s, 2H); 4.06 (q, 2H); 7.02 (s, 1H); 7.38 (d, 1H); 7.47-7.55 (m, 2H); 7.85 (dd, 1H); 8.38-8.46 (m, 2H); 8.54 (m, 1H); 8.68 (dd, 1H); 9.11 (s, 1H); 9.26 (m, 1H); 12.58 (br. s,1H).
【０２２０】
実施例１６
５−メチル−２−フェニル−２Ｈ−[１,２,３]トリアゾール−４−カルボン酸 [４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−フェニル]−アミド
【化３２】
2010509349.tif 000069
【０２２１】
Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中約５０％の無水プロピルリン酸を含む溶液(０.７０ml, 〜１.０８mmol)を、２０分以内で３回に分けて、２mlのＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の、４−メチル−Ｎ３−[４−(３−ピリジニル)−２−ピリミジニル]−１,３−ベンゼンジアミン(２００mg, ０.７２mmol)、５−メチル−２−フェニル−２Ｈ−[１,２,３]トリアゾール−４−カルボン酸(１４６.３mg, ０.７２mmol)およびトリエチルアミン(０.７９８ml, ５.７６mmol)の混合物に、撹拌しながら加える。室温で７２時間撹拌した後、溶媒を真空で除去し、残渣を炭酸水素ナトリウム半飽和水溶液と酢酸エチルの層間に分配する。沈殿物を濾過して取り、Ｈ２Ｏで、そして酢酸エチルで洗浄し、真空で乾燥し、表題化合物をベージュ色の固体として得る。
MS: 463.1 [M+H]+;
tR (HPLC, Nucleosil C18; 5-100% CH3CN+0.1%TFA/H2O+0.1%TFA, 5分間, 流速1.5 ml/分): 4.49分;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 2.23 (s, 3H); 2.57 (s, 3H); 7.22 (d, 1H); 7.41-7.63 (m, 6H); 8.12 (m, 2H); 8.17 (m, 1H); 8.46-8.54 (m, 2H); 8.68 (dd, 1H); 8.98 (s, 1H); 9.27 (d, 1H); 10.32 (s,1H).
【０２２２】
実施例１７
６−ヒドロキシ−Ｎ−[４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−フェニル]−ニコチンアミド
【化３３】
2010509349.tif 000070
【０２２３】
表題化合物を、実施例１６に記載された方法と類似の方法で、５−メチル−２−フェニル−２Ｈ−[１,２,３]トリアゾール−４−カルボン酸の代わりに６−ヒドロキシ−ニコチン酸を用いて製造する。濾過した沈殿物を、Ｈ２Ｏで、メタノールで、ＣＨ２Ｃｌ２で、そしてジエチルエーテルで洗浄し、真空で乾燥し、表題化合物をベージュ色の粉末として得る。
MS: 399.2 [M+H]+;
tR (HPLC, Nucleosil C18; 5-100% CH3CN+0.1%TFA/H2O+0.1%TFA, 5分間, 流速1.5ml/分): 2.99分;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 2.21 (s, 3H); 6.40 (d, 1H); 7.19 (d, 1H); 7.37-7.54 (m, 3H); 7.93-8.02 (m, 2H); 8.18 (m, 1H); 8.43-8.53 (m, 2H); 8.68 (dd, 1H); 8.90 (s, 1H); 9.27 (d, 1H); 9.90 (s, 1H); 12.02 (br. s,1H).
【０２２４】
実施例１８
２−ヒドロキシ−Ｎ−[４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−フェニル]−ニコチンアミド
【化３４】
2010509349.tif 000071
【０２２５】
表題化合物を、実施例１６に記載された方法と類似の方法で、５−メチル−２−フェニル−２Ｈ−[１,２,３]トリアゾール−４−カルボン酸の代わりに２−ヒドロキシ−ニコチン酸を用いて製造する。
褐色がかった固体；
MS: 399.2 [M+H]+;
tR (HPLC, Nucleosil C18; 5-100% CH3CN+0.1%TFA/H2O+0.1%TFA, 5分間, 流速1.5ml/分): 3.29分;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 2.22 (s, 3H); 6.57 (m, 1H); 7.19 (d, 1H); 7.30-7.60 (m, 3H); 7.77 (m, 1H); 8.07 (m, 1H); 8.39-8.55 (m, 3H); 8.67 (m, 1H); 8.92 (s, 1H); 9.26 (m, 1H); 12.17 (s,1H); 12.72 (br. S, 1H).
【０２２６】
実施例１９
３−ヒドロキシ−ピリジン−２−カルボン酸 [４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−フェニル]−アミド
【化３５】
2010509349.tif 000072
【０２２７】
表題化合物を、実施例１６に記載された方法と類似の方法で、５−メチル−２−フェニル−２Ｈ−[１,２,３]トリアゾール−４−カルボン酸の代わりに３−ヒドロキシ−ピリジン−２−カルボン酸を用いて製造する。酢酸エチル層をＣＨ２Ｃｌ２／メタノール(９：１)で希釈し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、真空で蒸発させる。このようにして得られた残渣をメタノールで結晶化し、表題化合物をベージュ色の固体として得る。
MS: 399.2 [M+H]+;
tR (HPLC, Nucleosil C18; 5-100% CH3CN+0.1%TFA/H2O+0.1%TFA, 5分間, 流速1.5ml/分): 3.89分;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 2.24 (s, 3H); 7.23 (d, 1H); 7.41-7.61 (m, 5H); 8.25 (m, 2H); 8.45-8.55 (m, 2H); 8.68 (dd, 1H); 8.97 (s, 1H); 9.31 (d, 1H); 10.82 (s, 1H); 12.17 (s, 1H).
【０２２８】
実施例２０
２−メチル−Ｎ−[４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イルアミノ)−フェニル]−ニコチンアミド
【化３６】
2010509349.tif 000073
【０２２９】
Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中約５０％の無水プロピルリン酸を含む溶液(０.７７ml, 〜１.２mmol)を、２０分以内で３回に分けて、２mlのＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド中の、４−メチル−Ｎ３−[４−(３−ピリジニル)−２−ピリミジニル]−１,３−ベンゼンジアミン(２２１.９mg, ０.８mmol)、２−メチル−ニコチン酸(１０９.７mg, ０.８mmol)およびトリエチルアミン(０.８８７ml, ６.４mmol)の混合物に、撹拌しながら加える。室温で２４時間撹拌した後、該混合物を炭酸水素ナトリウム半飽和水溶液で処理し、酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機抽出物を乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、溶媒を減圧下で蒸発させる。粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２／ジエチルエーテルから結晶化することによって精製し、表題化合物を褐色がかった固体として得る。
MS: 397.2 [M+H]+;
tR (HPLC, Nucleosil C18; 5-100% CH3CN+0.1%TFA/H2O+0.1%TFA, 5分間, 次いで100% CH3CN+0.1%TFA, 2分間, 流速1.5 ml/分): 2.91分;
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ): 2.21 (s, 3H); 2.57 (s, 3H); (q, 4H); 7.20 (d, 1H); 7.30-7.54 (m, 4H); 7.84 (m, 1H); 8.06 (m, 1H); 8.42-8.57 (m, 3H); 8.68 (dd, 1H); 9.00 (s, 1H); 9.26 (d, 1H); 10.40 (s,1H).
【０２３０】
アッセイ
本発明の化合物を、野生型のBa/F3細胞ならびにTel c-kitキナーゼおよびTel PDGFR融合チロシンキナーゼで形質転換されたBa/F3細胞の増殖を選択的に阻害する能力を測定するためにアッセイする。さらに、本発明の化合物は、Mo7e細胞におけるSCF依存性増殖を選択的に阻害する。さらに、本化合物を、Abl、ARG、BCR-Abl、BRK、EphB、Fms、Fyn、KDR、c-Kit、LCK、PDGF-R、b-Raf、c-Raf、SAPK2、Src、Tie2およびTrkBキナーゼを阻害する能力を測定するためにアッセイする。
【０２３１】
Ba/F3 FL FLT3増殖アッセイ
使用したマウス細胞株は、全長FLT3コンストラクトを過剰発現するBa/F3マウスpro-B細胞株である。これらの細胞を、ペニシリン ５０μｇ/mL、ストレプトマイシン ５０μｇ/mLおよびＬ−グルタミン ２００mMを加えたRPMI 1640／１０％ウシ胎児血清(RPMI/FBS)中で維持し、マウスのリコンビナントIL3を加える。Ba/F3全長FLT3細胞をIL3飢餓に１６時間置いて、次いで３８４ウェルＴＣプレートに、２５μｌ／ウェルの培地中５,０００細胞で播種し、試験化合物を０.０６nMから１０μＭで加える。化合物添加後、FLT3リガンドまたは細胞毒性コントロールのためのIL3を、２５μｌ／ウェルの培地中で、適切な濃度で加える。次いで、該細胞を、３７℃、５％ ＣＯ２で４８時間インキュベートする。細胞をインキュベートした後、２５μｌのBRIGHT GLO(登録商標)(Promega)を、製造者の指示書に従ってそれぞれのウェルに加え、Analyst GT−発光モード−50000積分時間、RLUを用いて該プレートを測定する。
【０２３２】
ヒトTG-HA-VSMC増殖アッセイ
ヒトTG-HA-VSMC細胞(ATCC)を、１０％ ＦＢＳを加えたDMEM中で、８０〜９０％コンフルエンスまで増殖させた後、１％ ＦＢＳおよび３０ng/mlのリコンビナントのヒトPDGF-BBを６ｅ４細胞／mlで加えたDMEM中に再度懸濁する。次いで、細胞を３８４ウェル・プレートに５０μｌ／ウェルで入れ、３７℃で２０時間インキュベートし、次いで０.５μｌの１００×化合物で、３７℃で４８時間処理する。処理後、２５μＬのCellTiter-Gloをそれぞれのウェルに１５分間加え、次いで該プレートをCLIPR(Molecular Devices)で測定する。
【０２３３】
増殖アッセイ：BaF3ライブラリー-Bright glo読み出しプロトコル
wt Ba/F3細胞およびTel融合チロシンキナーゼで形質転換したBa/F3細胞の増殖を阻害する能力について、化合物を試験する。形質転換していないBa/F3細胞を、リコンビナントのIL3を含む培地中に維持する。３８４ウェルＴＣプレートに、５０μｌ／ウェルの培地中５,０００細胞で、細胞を播種し、試験化合物を０.０６nMから１０μＭで加える。次いで細胞を、３７℃で５％  ＣＯ２で、４８時間インキュベートする。細胞をインキュベートした後、２５μｌのBRIGHT GLO(登録商標)(Promega)を、製造者の指示書に従ってそれぞれのウェルに加え、Analyst GT−発光モード−50000積分時間、RLUを用いて該プレートを測定する。５０％阻害に必要な化合物の濃度であるＩＣ５０値を、用量応答曲線から決定する。
【０２３４】
Mo7eアッセイ
９６ウェル・フォーマット中で内在的にc-kitを発現したMo7e細胞を用いて、SCF依存性増殖の阻害について、本明細書で記載した化合物を試験する。簡単には、ヒトのリコンビナントSCFで刺激したMo7e細胞の抗増殖活性について、２倍連続希釈した試験化合物(Ｃmax＝１０μＭ)を評価する。３７℃で４８時間インキュベートした後、細胞生存率を、MTT比色アッセイ(Promega)を用いることによって測定する。
【０２３５】
細胞のBcr-Abl依存性増殖の阻害(高スループット法)
用いたマウス細胞株は、BCR-Abl cDNA(32D-p210)で形質転換した32D造血性前駆細胞株である。これらの細胞は、ペニシリン ５０μｇ/mL、ストレプトマイシン ５０μｇ/mLおよびＬ−グルタミン ２００mMを加えたRPMI/１０％ウシ胎児血清(RPMI/FCS)中で維持する。形質転換していない32D細胞を、IL3供給源として１５％のWEHI馴化培地を添加して同様に維持する。
【０２３６】
５０μｌの32Dまたは32D-p210細胞懸濁液を、Greiner 384 ウェル・マイクロプレート(黒色)に、５０００細胞／ウェルの密度で播種する。５０nlの試験化合物(ＤＭＳＯストック溶液中１mM)をそれぞれのウェルに加える(STI571をポジティブ・コントロールとして含む)。細胞を３７℃、５％ ＣＯ２で７２時間インキュベートする。１０μｌの６０％ Alamar Blue溶液(Tek diagnostics)をそれぞれのウェルに加え、細胞をさらに２４時間インキュベートする。蛍光強度(励起 ５３０nm, 放出 ５８０nm)を、Acquest(商標)システム(Molecular Devices)を用いて定量する。
【０２３７】
細胞のBCR-Abl依存性増殖の阻害
32D-p210細胞を、９６ウェルＴＣプレートに、１５,０００細胞／ウェルの密度で播種する。５０μｌの試験化合物の２倍連続希釈液(Ｃｍａｘは４０μＭである)をそれぞれのウェルに加える(STI571をポジティブ・コントロールとして含む)。細胞を３７℃、５％ ＣＯ２で４８時間インキュベートした後、１５μＬのMTT(Promega)をそれぞれのウェルに加え、細胞をさらに５時間インキュベートする。５７０nmの光学密度を分光学的に定量し、ＩＣ５０値、すなわち５０％阻害に必要な化合物の濃度を、用量応答曲線から決定する。
【０２３８】
細胞周期分布に対する効果
32Dおよび32D-p210細胞を、６ウェルＴＣプレートに、５mlの培地中２.５×１０６細胞／ウェルの密度で播種し、試験化合物を１または１０μＭで加える(STI571をコントロールとして含む)。次いで細胞を３７℃、５％ ＣＯ２で、２４または４８時間インキュベートする。２mlの細胞懸濁液をPBSで洗浄し、７０％ ＥｔＯＨで１時間固定化し、PBS/EDTA/RNAアーゼ Aで、３０分間処理する。ヨウ化プロピジウム(Ｃｆ＝１０μｇ/ml)を加え、蛍光強度を流動細胞計測法によって、FACScalibur(商標)システム(BD Biosciences)で定量する。本発明の試験化合物は、32D-p210細胞に対してアポトーシス効果を示すが、親32D細胞においてはアポトーシスを誘発しない。
【０２３９】
細胞のBCR-Abl自己リン酸化に対する効果
BCR-Abl自己リン酸化を、捕捉Elisaで、c-abl特異的捕捉抗体および抗ホスホチロシン抗体を用いて定量する。32D-p210細胞を、９６ウェルＴＣプレートに、５０μＬの培地中２×１０５細胞／ウェルで播種する。５０μＬの試験化合物の２倍連続希釈液(Ｃｍａｘは１０μＭである)を、それぞれのウェルに加える(STI571をポジティブ・コントロールとして含む)。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で９０分間インキュベートする。次いで細胞を、氷上で、プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む１５０μｌの溶解緩衝液(５０mM Tris-HCl(pH 7.4)、１５０mM ＮａＣｌ、５mM ＥＤＴＡ、１mM ＥＧＴＡおよび１％ NP-40)で１時間処理する。５０μＬの細胞溶解物を、予め抗abl特異的抗体でコートして遮断した９６ウェルoptiplatesに加える。該プレートを４℃で４時間インキュベートする。TBS-Tween 20緩衝液で洗浄後、５０μｌのアルカリホスファターゼ結合抗ホスホチロシン抗体を加え、該プレートをさらに４℃で終夜インキュベートする。TBS-Tween 20緩衝液で洗浄後、９０μｌの発光基質を加え、発光をAcquest(商標)システム(Molecular Devices)を用いて定量する。BCR-Abl発現細胞の増殖を阻害する本発明の試験化合物は、投与量に依存して、細胞のBCR-Abl自己リン酸化を阻害する。
【０２４０】
Bcr-ablの変異体形態を発現する細胞の増殖に対する効果
BCR-Ablの野生型、またはSTI571耐性を有するかまたはSTI571への感受性が減退した変異体(G250E、E255V、T315I、F317L、M351T)の何れかの形態を発現するBa/F3細胞に対する抗増殖効果について、本発明の化合物を試験する。変異体BCR-Abl発現細胞および非形質転換細胞に対するこれらの化合物の抗増殖効果を、上記の通りに、１０、３.３、１.１および０.３７μＭで試験する(IL3がない培地中)。非形質転換細胞に対する毒性がない化合物のＩＣ５０値を、上記の通りに得られる用量応答曲線から決定する。
【０２４１】
FGFR3 (酵素アッセイ)
精製FGFR3(Upstate)でのキナーゼ活性アッセイは、キナーゼ緩衝液(３０mM Tris-HCl(pH 7.5)、１５mM ＭｇＣｌ２、４.５mM ＭｎＣｌ２、１５μＭ Ｎａ３ＶＯ４および５０μｇ/ml ＢＳＡ)中０.２５μｇ/mLの酵素および基質(５μｇ/mL ビオチン−ポリ−ＥＹ(Glu, Tyr)(CIS-US, Inc.)および３μＭ ＡＴＰ)を含む最終容積１０μＬにおいて行う。２個の溶液を調製する：キナーゼ緩衝液中のFGFR3酵素を含む５μｌの第１溶液は、始めに384フォーマット ProxiPlate(登録商標) (Perkin-Elmer)に入れ、続いて５０nlのＤＭＳＯに溶解させた化合物を添加し、次いでキナーゼ緩衝液中の基質(ポリ−ＥＹ)およびＡＴＰを含む５μｌの第２溶液を、それぞれのウェルに加える。反応物を室温で１時間インキュベートし、１０μＬのHTRF検出混合物[３０mM Tris-HCl(pH 7.5)、０.５Ｍ ＫＦ、５０mM ＥＴＤＡ、０.２mg/ml ＢＳＡ、１５μｇ／ml ストレプトアビジン−XL665 (CIS-US, Inc.)および１５０ng/ml クリプテート結合抗ホスホチロシン抗体(CIS-US, Inc.)を含む]を添加することによって反応を停止させる。ストレプトアビジン−ビオチン相互作用を可能にするために室温で１時間インキュベートした後、時間分解蛍光シグナルをAnalyst GT (Molecular Devices Corp.)で測定する。１２種の濃度(５０μＭから０.２８nMの１：３希釈)でのそれぞれの化合物の％阻害の線形回帰分析によってＩＣ５０値を計算する。このアッセイにおいて、本発明の化合物は、１０nMから２μＭの範囲のＩＣ５０を有する。
【０２４２】
FGFR3 (細胞アッセイ)
FGFR3細胞キナーゼ活性に依存する形質転換Ba/F3-TEL-FGFR3細胞増殖を阻害し得る能力について、本発明の化合物を試験する。Ba/F3-TEL-FGFR3を、培養培地として１０％ウシ胎児血清を加えたRPMI 1640を含む懸濁液中で８００,０００細胞/mLまで培養する。細胞を３８４ウェル・フォーマット・プレートに、５０μｌの培養培地中５０００細胞／ウェルで入れる。本発明の化合物をジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)に溶解し、希釈する。１２種の１：３連続希釈液をＤＭＳＯで調製し、典型的には１０mMから０.０５μＭの範囲の濃度勾配を作成する。細胞を５０nLの希釈された化合物と共に加え、細胞培養インキュベーター中で４８時間インキュベートする。細胞を増殖させることによって作り出される還元環境をモニターするために用いられ得るAlamarBlue(登録商標)(TREK Diagnostic Systems)を、１０％の最終濃度で細胞に加える。３７℃細胞培養インキュベーター中でさらに４時間インキュベートした後、還元されたAlamarBlue(登録商標)による蛍光シグナル(励起 ５３０nm、放出 ５８０nm)を、Analyst GT (Molecular Devices Corp.)で定量する。１２種の濃度でのそれぞれの化合物の％阻害の線形回帰分析によってＩＣ５０値を計算する。
【０２４３】
FLT3およびPDGFRβ(細胞アッセイ)
FLT3およびPDGFRβの細胞活性に対する本発明の化合物の効果は、Ba/F3-TEL-FGFR3を用いる代わりに、それぞれBa/F3-FLT3-ITDおよびBa/F3-Tel-PDGFRβを用いる以外、FGFR3細胞活性について上で記載した方法と同一の方法を用いて行う。
【０２４４】
b-Raf酵素アッセイ
b-Rafの活性を阻害する能力について、本発明の化合物を試験する。該アッセイは、黒壁および透明底を有する３８４ウェル MaxiSorp プレート(NUNC)中で行う。基質であるＩκＢαをＤＰＢＳ(１：７５０)で希釈し、１５μｌをそれぞれのウェルに加える。プレートを４℃で終夜インキュベートし、EMBLAプレート洗浄機を用いてTBST(２５mM Tris(pH 8.0)、１５０mM ＮａＣｌおよび０.０５％ Tween-20)で３回洗浄する。プレートを Superblock (１５μｌ／ウェル)によって室温で３時間ブロックし、ＴＢＳＴで３回洗浄し、軽打して乾かす(pat-dried)。２０μＭ ＡＴＰ(１０μｌ)を含むアッセイ緩衝液をそれぞれのウェルに加え、続いて１００nlまたは５００nlの化合物を加える。B-Rafをアッセイ緩衝液で希釈し(１μｌを２５μｌに)、１０μｌの希釈されたb-Rafをそれぞれのウェルに加える(０.４μｇ／ウェル)。プレートを室温で２.５時間インキュベートする。ＴＢＳＴでプレートを６回洗浄することによって、キナーゼ反応を停止させる。ホスホ−ＩκＢα(Ser32/36)抗体をSuperblock(１：１０,０００)で希釈し、１５μｌをそれぞれのウェルに加える。プレートを４℃で終夜インキュベートし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。AP結合ヤギ抗マウスIgGを Superblock (１:１,５００)で希釈し、１５μｌをそれぞれのウェルに加える。プレートを室温で１時間インキュベートし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。１５μｌの蛍光Attophos AP基質(Promega)をそれぞれのウェルに加え、プレートを室温で１５分間インキュベートする。AcquestまたはAnalyst GTで、蛍光強度プログラム(励起 ４５５nm、励起 ５８０nm)を用いてプレートを測定する。
【０２４５】
b-Raf細胞アッセイ
A375細胞中でMEKのリン酸化を阻害する能力について、本発明の化合物を試験する。A375細胞株(ATCC)は、ヒトの黒色腫患者に由来し、B-Raf遺伝子上にV599E変異を有する。リン酸化されたMEKの濃度は、B-Rafの変異により上昇する。サブコンフルエントからコンフルエントのA375細胞を、血清を含まない培地中で、化合物と共に、３７℃で２時間インキュベートする。次いで、細胞を冷ＰＢＳで１回洗浄し、１％ Triton X100を含む溶解緩衝液で溶解させる。遠心分離後、上清をSDS-PAGEにかけ、次いでニトロセルロース膜に移す。次いで膜を抗ホスホ−MEK抗体(ser217/221)(Cell Signaling)でウェスタン・ブロットにかける。リン酸化MEKの量を、ニトロセルロース膜上のホスホ−MEKバンドの密度によってモニターする。
【０２４６】
Upstate KinaseProfiler(商標)−放射性酵素フィルター結合アッセイ
キナーゼ・パネルの個々のメンバーを阻害する能力について、本発明の化合物を評価する。この一般的なプロトコルに従って、最終濃度１０μＭで本化合物を２回試験する。キナーゼ緩衝液の組成と基質は、“Upstate KinaseProfiler(商標)”パネルに含まれる種々のキナーゼに対して変えることに注意する。キナーゼ緩衝液(２.５μｌ, １０×, 必要な場合はＭｎＣｌ２を含む)、活性なキナーゼ(０.００１〜０.０１単位；２.５μｌ)、キナーゼ緩衝液中特異的またはポリ(Glu4-Tyr)ペプチド(５〜５００μＭまたは.０１mg/ml)、およびキナーゼ緩衝液(５０μＭ；５μｌ)を氷上でエッペンドルフ中で混合する。Ｍｇ／ＡＴＰ混合物(１０μｌ、６７.５(または３３.７５)mM ＭｇＣｌ２、４５０(または２２５)μＭ ＡＴＰおよび１μCi/μｌ  [γ−３２Ｐ]−ＡＴＰ(３０００Ci/mmol))を加え、反応物を約３０℃で約１０分間インキュベートする。反応混合物を、２cm×２cm P81(ホスホセルロース, 正電荷ペプチド基質)またはWhatman No.1(ポリ(Glu4-Tyr)ペプチド基質)試験紙切片(square)上にスポット(２０μｌ)する。アッセイ切片を、０.７５％  リン酸で、それぞれ５分間４回洗浄し、そしてアセトンで５分間１回洗浄する。アッセイ切片をシンチレーション・バイアルに移し、５mlのシンチレーション・カクテルを加え、ペプチド基質に対する３２Ｐ組み込み(cpm)を、Beckmanシンチレーション計数機で定量する。％阻害をそれぞれの反応について計算する。
【０２４７】
SYBR Green Iを用いた抗マラリアアッセイ
感染した赤血球中の寄生虫血症の増殖を阻害する能力を測定するために、本発明の化合物をアッセイし得る。該増殖は、二重鎖ＤＮＡに高い親和性を有するSYBR Green I (Invitrogen)(登録商標) 色素を添加することによって定量される。
【０２４８】
薬物スクリーニングのために、ヒトの血清を含まない２０μｌのスクリーニング培地を、３個のアッセイ・プレートに入れる。次いで、抗マラリア・コントロール(クロロキンおよびアーテミシニン(artimesinin))を含む、５０nlのそれぞれの本発明の化合物を、アッセイ・プレートに移す。５０nlのＤＭＳＯをベースラインおよびバックグラウンド・コントロール・プレートに移す。次いで、３０μｌのスクリーニング培地中のP. falciparum感染ヒト赤血球の懸濁液を、最終ヘマトクリット２.５％、最終寄生虫血症３％となるように、アッセイ・プレートおよびベースライン・コントロール・プレートに入れる。感染していない赤血球を、最終ヘマトクリットが２.５％となるようバックグラウンド・コントロール・プレートに入れる。該プレートを、９３％ Ｎ２、４％ ＣＯ２および３％ Ｏ２ガス混合物と共に、３７℃のインキュベーター中で７２時間置く。１０μｌの１０×溶液のSYBR Green I (登録商標)を該プレートに入れる。該プレートを密封し、赤血球を溶解させるために−８０℃の冷凍庫中で終夜置く。該プレートを解凍し、最適染色のために室温で終夜放置する。Acquest system (Molecular Devices)を用いて、蛍光強度を測定する(励起 ４９７nm, 放出 ５２０nm)。それぞれの化合物について％阻害を計算する。
【０２４９】
遊離形または薬学的に許容される塩形の式Ｉの化合物は、例えば、本明細書に記載されたin vitro試験によって示される有益な薬理学的性質を示す。
【０２５０】
本明細書に記載された例および態様は、例示の目的のためのみであり、それに照らした種々の修飾または変更は当業者に示唆されており、またこの明細書および請求の範囲の精神および範囲に含まれるべきである。本明細書で引用された全ての文献、特許および特許明細書は、全ての目的について、言及することによって本明細書に組み込まれている。
【手続補正書】
【提出日】平成21年7月17日(2009.7.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2010509349.tif 000077
[式中、
Ｘは、結合およびＮＨから選択され；
Ｙは、結合およびＮＨから選択され；
Ｒ１は、シクロヘキシル、ピリジニル、キノリニル、イソキノリニルおよびフェニルから選択され；ここで、Ｒ１のシクロヘキシル、ピリジニル、キノリニル、イソキノリニルまたはフェニルは、所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−ＮＲ５ａＲ５ｂ、−ＯＸ１ＮＲ５ａＲ５ｂおよびヘテロシクリルから独立して選択される１から３個の基で置換されていてもよく；ここで、Ｘ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから独立して選択され；
Ｒ２は、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから選択され；
Ｒ３は、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから選択され；
Ｒ４は、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)Ｒ５、−Ｘ１ＯＸ２ＯＲ５、−ＯＸ１Ｒ５、−Ｘ１Ｒ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＯＲ５、−Ｘ１ＯＲ５および−Ｘ１ＯＸ１ＯＲ５から独立して選択される１から３個の基で置換されているヘテロアリールであり；ここで、それぞれのＸ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｘ２はＣ１−４アルキレンであり；それぞれのＲ５は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキルおよびヘテロシクリルから独立して選択され；
ここで、Ｒ４のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル置換基は、所望によりハロ、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−Ｌ−ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ６および−Ｌ−Ｒ６から独立して選択される１から３個の基でさらに置換されていてもよく；ここで、Ｌは、結合およびＣ１−４アルキレンから選択され；Ｒ６は、水素、Ｃ１−６アルキルおよびヘテロシクリルから選択される。ただし、Ｒ４は、トリフルオロメチル基によって置換されているピリジン−３−イルではない。]
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
請求項１に記載された式Ia：
【化２】
2010509349.tif 000078
[式中、
Ｘは、結合およびＮＨから選択され；Ｙは、結合およびＮＨから選択され；ここで、ＸまたはＹの何れかは結合であるが両方とも結合ではなく；
Ｒ３は、ハロ、メチル、メトキシ、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシから選択され；
Ｒ４は、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１ＯＲ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１Ｓ(Ｏ)２Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５Ｒ５、−Ｘ１ＮＲ５ＯＲ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)Ｒ５、−Ｘ１ＯＸ２ＯＲ５、−ＯＸ１Ｒ５、−Ｘ１Ｒ５、−Ｘ１Ｃ(Ｏ)ＯＲ５、−Ｘ１ＯＲ５および−Ｘ１ＯＸ１ＯＲ５から独立して選択される１から３個の基で置換されているヘテロアリールであり；ここで、それぞれのＸ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｘ２はＣ１−４アルキレンであり；それぞれのＲ５は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−１２シクロアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキルおよびヘテロシクリルから独立して選択され；
ここで、Ｒ４のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル置換基は、所望によりハロ、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−Ｌ−ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、−Ｌ−Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ６および−Ｌ−Ｒ６から独立して選択される１から３個の基でさらに置換されていてもよく；ここで、Ｌは、結合およびＣ１−４アルキレンから選択され；Ｒ６は、水素、Ｃ１−６アルキルおよびヘテロシクリルから選択され；
Ｒ７は、水素であり；Ｒ８は、水素、ハロ、メトキシ、アミノ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、ピロリジニル、モルホリノ、２−メチル−モルホリノ、２,６−ジメチル−モルホリノ、シアノ、−ＮＲ５ａＲ５ｂおよびメチルから選択されるか；またはＲ７およびＲ８は、Ｒ７およびＲ８が結合している炭素原子と一体となってフェニルを形成し；ここで、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから独立して選択され；
Ｒ９は、水素、モルホリノ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキル、ハロ置換Ｃ１−６アルコキシ、−ＮＲ５ａＲ５ｂ、−ＯＸ１ＮＲ５ａＲ５ｂおよびヘテロシクリルから選択され；ここで、Ｘ１は、結合およびＣ１−４アルキレンから独立して選択され；Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−６アルキルおよびハロ置換Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される。]
の化合物。
【請求項３】
Ｒ３がメチルであり；
Ｒ４が、ピラゾリル、ピリジニル、インドリル、インドリン−２−イル、チエニル、チアゾリル、３−オキソ−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−６−イル、フラニル、ベンゾ[ｂ]フラニル、１,３,４−チアジアゾリル、ベンゾ[ｂ]チオフェニル、ピロリル、１Ｈ−インダゾリル、イミダゾ[１,２−ａ]ピリジン−３−イル、オキサゾリル、ベンゾ[ｄ]チアゾール−６−イル、１Ｈ−ベンゾ[ｄ][１,２,３]トリアゾール−５−イル、キノリニル、１Ｈ−インドリル、３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ[２,３−ｂ]ピリジニル、３−オキソ−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−７−イルまたは２,３−ジヒドロフロ[２,３−ｂ]ピリジニルであり；
ここで、Ｒ４のヘテロアリールは、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、メチル、アミノ、フェニル、ヒドロキシ−エチル(メチル)アミノ、ピペリジニル、トリフルオロメチル、２−メチルアリルオキシ、シクロプロピル−メチル(プロピル)アミノ−メチル、トリフルオロメトキシ、３,４−ジヒドロイソキノリン−２(１Ｈ)−イル、アミノ−カルボニル−メチル(エチル)アミノ−メチル、ピリジニル−メチル(エチル)−アミノ−メチル、イソプロピル(エチル)−アミノ−メチル、プロピル(エチル)−アミノ−メチル、モルホリノ、ブチル(メチル)アミノ−メチル、イソブチル(メチル)アミノ−メチル、ベンジル(エチル)アミノ−メチル、ピリジニル、ピロリジニル、アゼパニル、ヒドロキシ−プロピルオキシ、エチル、メトキシ、メチル−カルボニル、エトキシ、プロピルオキシ、ｔ−ブチル、ベンジル、プロピル、イソプロピルオキシ、イソプロピル、ジエチルアミノ−スルホニル、メチル−スルホニル、イソプロピル−スルホニル、ジエチル−アミノ−メチル、トリフルオロエトキシ、ピペリジニル、イソキノリニル、(ヒドロキシ−エチル)(メチル)アミノ、ジフルオロ−エトキシ、シクロプロピル、シクロプロピル−メトキシおよびテトラヒドロフラニル−オキシから独立して選択される１から３個の基で置換されており；
ここで、Ｒ４のアリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル置換基は、所望によりハロ、メチル、ピロリジニル−メチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ−メチル、ヒドロキシおよびシアノから独立して選択される１から３個の基でさらに置換されていてもよい、
請求項２に記載された化合物。
【請求項４】
Ｒ９が、水素およびジメチル−アミノ−プロピルオキシから選択される、請求項３に記載された化合物。
【請求項５】
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１−エチル−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−５−(トリフルオロメチル)−２−メチルオキサゾール−４−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−２−モルホリノピリジン−４−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−６−メトキシピリジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−６−メトキシピリジン−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(５−メチルピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
Ｎ−(３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
２−(２,２−ジフルオロエトキシ)−Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)ピリジン−４−カルボキサミド；
６−(２,２,２−トリフルオロエトキシ)−Ｎ−(３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)ピリジン−３−カルボキサミド；
３−(４−(ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−Ｎ−(３,４−ジヒドロ−３−オキソ−２Ｈ−ベンゾ[ｂ][１,４]オキサジン−６−イル)−４−メチルベンズアミド；および
Ｎ−(３−(４−(５−メトキシピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ)−４−メチルフェニル)−１,５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
から選択される、請求項４に記載された化合物。
【請求項６】
薬学的に許容される賦形剤と組み合わせた、治療有効量の請求項１に記載された化合物を含む医薬組成物。
【請求項７】
該薬学的に許容される賦形剤が非経腸投与に適切である、請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項８】
該薬学的に許容される賦形剤が経口投与に適切である、請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項９】
キナーゼ活性を調節するための薬物であって、活性成分として、治療有効量の請求項１に記載された化合物またはその薬学的に許容される塩を含む薬物。
【請求項１０】
該キナーゼが、c-kit、Abl、Lyn、MAPK14 (p38δ)、PDGFRα、PDGFRβ、ARG、BCR-Abl、BRK、EphB、Fms、Fyn、KDR、LCK、PDGF-R、b-Raf、c-Raf、SAPK2、Src、Tie2およびTrkB、またはその組み合わせから選択される、請求項９に記載された薬物。
【請求項１１】
該キナーゼがc-kitキナーゼ受容体である、請求項９に記載された薬物。
【請求項１２】
c-kit、PDGFRαおよび／またはPADGRβキナーゼ受容体と直接接触するための、請求項１０に記載された薬物。
【請求項１３】
該接触をin vitroまたはin vivoで行う、請求項１２に記載された薬物。
【請求項１４】
キナーゼ活性の調節が、疾患または状態の病状および／または症候を予防する、阻害するまたは改善する疾患または状態を処置するための薬物であって、活性成分として、治療有効量の請求項１に記載された化合物またはその薬学的に許容される塩、および所望により治療有効量の第２薬物を含む薬物。
【請求項１５】
該キナーゼが、c-kit、PDGFRαおよびPADGRβキナーゼ受容体から選択される、請求項１４に記載された薬物。
【請求項１６】
第２薬物が、気管支拡張剤、抗炎症剤、ロイコトリエン・アンタゴニストまたはIgEブロッカーである、請求項１４に記載された薬物。
【請求項１７】
請求項１に記載された化合物を、第２薬物の前に、同時に、または後に投与するための、請求項１４に記載された薬物。
【請求項１８】
該疾患または状態が、腫瘍性障害、アレルギー性障害、炎症性障害、自己免疫障害、マラリア原虫関連疾患、肥満細胞関連疾患、移植片対宿主病、代謝性症候群、CNS関連障害、神経変性障害、疼痛状態、薬物乱用障害、プリオン病、癌、心臓疾患、線維性疾患、特発性動脈性高血圧(IPAH)または原発性肺高血圧(PPH)である、請求項１４に記載された薬物。
【請求項１９】
該腫瘍性障害が、肥満細胞症、胃腸間質性腫瘍、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、急性骨髄球性白血病、急性リンパ性白血病、骨髄異形成症候群、慢性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胃癌、精巣癌、神経膠芽腫、または星状細胞腫である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項２０】
該アレルギー性障害が、喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性副鼻腔炎、アナフィラキシー症候群、蕁麻疹、血管浮腫、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、結節性紅斑、多形性紅斑、皮膚壊死性細静脈炎、昆虫刺傷皮膚炎症、または吸血性寄生虫侵入である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項２１】
該炎症性障害が、関節リウマチ、結膜炎、リウマチ性脊椎炎、骨関節炎または痛風性関節炎である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項２２】
該自己免疫障害が、多発性硬化症、乾癬、腸炎症性疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、関節リウマチ、多発性関節炎、局所または全身性強皮症、全身性エリテマトーデス、円板状エリテマトーデス、皮膚狼瘡、皮膚筋炎、多発性筋炎、シェーグレン症候群、結節性汎動脈炎、自己免疫性腸疾患または増殖性糸球体腎炎である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項２３】
該移植片対宿主病が、臓器移植拒絶反応である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項２４】
臓器移植が、腎臓移植、膵臓移植、肝臓移植、心臓移植、肺移植または骨髄移植である、請求項２３に記載された薬物。
【請求項２５】
該代謝症候群が、I型糖尿病、II型糖尿病または肥満である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項２６】
該CNS関連障害が、鬱病、気分変調性障害、気分循環性障害、摂食障害、過食症、月経前症候群、閉経後症候群、精神遅延、集中力喪失、悲観的心配、煽動、自己卑下および性欲減退、不安障害、精神障害または統合失調症である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項２７】
該神経変性障害が、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、プリオン病、運動神経疾患(MND)、または筋萎縮性側索硬化症(ALS)である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項２８】
該疼痛状態が、急性疼痛、術後疼痛、慢性疼痛、侵害受容性疼痛、癌性疼痛、神経因性疼痛または心因性疼痛症候群である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項２９】
該薬物使用障害が、薬物中毒、薬物乱用、薬物嗜癖、薬物依存、退薬症状または過剰投与である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項３０】
癌が、黒色腫、胃腸間質性腫瘍(GIST)、小細胞肺癌、または他の固形腫瘍である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項３１】
該線維性疾患が、Ｃ型肝炎(HCV)、肝線維症、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、肝硬変、肺線維症、または骨髄線維症である、請求項１８に記載された薬物。
【請求項３２】
該マラリア原虫関連疾患がマラリアである、請求項１８に記載された薬物。
【国際調査報告】
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