(57)【要約】本発明は、ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性、特にＶＥＧＦＲ３リガンドＶＥＧＦ−Ｃ及び／又はＶＥＧＦ−Ｄにより媒介される活性の阻害剤としての、ＰＣＴ公開公報である国際公開第２００４／１０５７６５号パンフレットに記載されている大環状キナゾリン誘導体のいくつかの使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2010507626.tif 000008
［式中；
ＺはＮＨを示し；
Ｙは−Ｃ３−９アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１３−Ｃ１−５アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１４−ＣＯ−Ｃ１−５アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ＮＨ−ＣＯ−Ｈｅｔ２０−又は−Ｈｅｔ２２−ＣＨ２−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ１−３アルキル−を示し；Ｘ１はＯ又は−Ｏ−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｘ２は直接結合、−Ｃ１−２アルキル−、Ｏ、−Ｏ−Ｃ１−２アルキル−、ＮＲ１２又はＮＲ１２−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｒ１は水素、シアノ、ハロ又はヒドロキシを示し；
Ｒ２は水素、シアノ、ハロ又はヒドロキシを示し；
Ｒ３は水素を示し；
Ｒ４はＣ１−４アルキルオキシ−を示し；
Ｒ１２は水素又はＣ１−４アルキル−を示し；
Ｒ１３は水素又はＣ１−４アルキルを示し；
Ｒ１４は水素又はＣ１−４アルキルを示し；
Ｈｅｔ２０はピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示し；そして
Ｈｅｔ２２はピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示す］
の化合物、その製薬学的に許容され得る酸もしくは塩基付加塩及び立体化学的異性体の治療的に有効な量を、処置の必要な哺乳類患者に投与することを含んでなる、哺乳類患者におけるＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性の処置又は予防方法。
【請求項２】
式（Ｉ）の化合物において；
ＺはＮＨを示し；
Ｙは−Ｃ３−９アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１４−ＣＯ−Ｃ１−５アルキル−又は−Ｃ１−３アルキル−ＮＨ−ＣＯ−Ｈｅｔ２０−を示し；
Ｘ１はＯを示し；
Ｘ２は−Ｃ１−２アルキル−、Ｏ又はＮＲ１２−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｒ１は水素又はハロを示し；
Ｒ２は水素又はハロを示し；
Ｒ３は水素を示し；
Ｒ４はＣ１−４アルコキシを示し；
Ｒ１２はＣ１−４アルキル−を示し；
Ｒ１４は水素又はＣ１−４アルキルを示し；そして
Ｈｅｔ２０はピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示す
請求項１に記載の方法。
【請求項３】
式（Ｉ）の化合物が
４，６−エタンジイリデン−１９Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１３，１］ベンゾジオキサアザシクロ−ペンタデシン，１５−クロロ−８，９，１０，１１，１２，１３−ヘキサヒドロ−２０−メトキシ−；
１２Ｈ−４，６−エタンジイリデン−１３，１７−メタノピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１６］ベンズオキサトリアザシクロノナデシン−１２−オン，２１−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，１６，１８，２３−デカヒドロ−２５−メトキシ−；
４，６−エタンジイリデン−１２Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１３］ベンズオキサトリアザシクロヘキサデシン−１２−オン，１８−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，２０−オクタヒドロ−２１−メトキシ−１３，１４−ジメチル−；
及び
４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−；
又はその製薬学的に許容され得る酸付加塩
より成る群から選ばれる請求項１の方法。
【請求項４】
化合物が
４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−；
又はその製薬学的に許容され得る酸付加塩
である請求項３に記載の方法。
【請求項５】
化合物の治療的に有効な量を経口的又は非経口的に投与する請求項１に記載の方法。
【請求項６】
式（Ｉ）の化合物をさらに別の抗−ガン剤と組み合わせて投与する請求項１に記載の方法。
【請求項７】
さらに別の抗−ガン剤が、乳ガンの場合のヘルセプチン（ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ）、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、アントラサイクリン及びカペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）；前立腺ガンの場合のドセタキセル及びミトキサントロン（ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）；結腸ガンの場合のオキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）、５−ＦＵ、アバスチン（ａｖａｓｔｉｎ）、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）及びセツクシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）；ならびに肺ガンの場合のタキソテレ（ｔａｘｏｔｅｒｅ）、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）及びジェミシタビン（ｇｅｍｉｃｉｔａｂｉｎｅ）より成る群から選ばれる請求項６に記載の方法。
【請求項８】
ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性が、哺乳類患者におけるガンの転移的拡大；リンパ管を介する局部的リンパ節への転移；ガンにおける腫瘍関連リンパ管形成；ＶＥＧＦＲ３リガンドを発現するガン細胞の新生脈管形成における、ＶＥＧＦＲ３を発現する内皮細胞の補充及び増殖；ならびにこれらの組み合わせより成る群から選ばれる請求項１に記載の方法。
【請求項９】
該ＶＥＧＦＲ３リガンドがＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ又はそれらの組み合わせである請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性が哺乳類における進行した乳ガンであり、請求項１〜４のいずれか１つで定義された化合物の治療的に有効に量を該哺乳類に投与する段階を含んでなる請求項１の方法。
【請求項１１】
ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性の処置のための薬剤の製造における式（Ｉ）
【化２】
2010507626.tif 000009
［式中；
ＺはＮＨを示し；
Ｙは−Ｃ３−９アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１３−Ｃ１−５アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１４−ＣＯ−Ｃ１−５アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ＮＨ−ＣＯ−Ｈｅｔ２０−又は−Ｈｅｔ２２−ＣＨ２−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ１−３アルキル−を示し；Ｘ１はＯ又は−Ｏ−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｘ２は直接結合、−Ｃ１−２アルキル−、Ｏ、−Ｏ−Ｃ１−２アルキル−、ＮＲ１２又はＮＲ１２−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｒ１は水素、シアノ、ハロ又はヒドロキシ、好ましくはハロを示し；
Ｒ２は水素、シアノ、ハロ又はヒドロキシを示し；
Ｒ３は水素を示し；
Ｒ４はＣ１−４アルキルオキシ−を示し；
Ｒ１２は水素又はＣ１−４アルキル−を示し；
Ｒ１３は水素又はＣ１−４アルキルを示し；
Ｒ１４は水素又はＣ１−４アルキルを示し；
Ｈｅｔ２０はピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示し；
Ｈｅｔ２２はピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示す］
の化合物、その製薬学的に許容され得る酸もしくは塩基付加塩及び立体化学的異性体の使用。
【請求項１２】
式（Ｉ）の化合物において；
ＺはＮＨを示し；
Ｙは−Ｃ３−９アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１４−ＣＯ−Ｃ１−５アルキル−又は−Ｃ１−３アルキル−ＮＨ−ＣＯ−Ｈｅｔ２０−を示し；
Ｘ１はＯを示し；
Ｘ２は−Ｃ１−２アルキル−、Ｏ又はＮＲ１２−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｒ１は水素又はハロを示し；特にＲ１は水素又はクロロを示し；さらに特定的にＲ１は水素を示し；
Ｒ２は水素又はハロを示し；特にＲ２は水素、クロロ又はブロモを示し；さらに特定的にＲ２はクロロ又はブロモを示し；
Ｒ３は水素を示し；
Ｒ４はＣ１−４アルキルオキシを示し；特にＲ４はメトキシを示し；
Ｒ１２はＣ１−４アルキル−を示し；特にＲ１２はメチルを示し；
Ｒ１４は水素又はＣ１−４アルキルを示し；特にＲ１４は水素又はメチルを示し；さらに特定的にＲ１４は水素を示し；そして
Ｈｅｔ２０はピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示し；特にＨｅｔ２０はピペリジニルを示す
請求項１０に記載の使用。
【請求項１３】
式（Ｉ）の化合物が；
４，６−エタンジイリデン−１９Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１３，１］ベンゾジオキサアザシクロ−ペンタデシン，１５−クロロ−８，９，１０，１１，１２，１３−ヘキサヒドロ−２０−メトキシ−；
１２Ｈ−４，６−エタンジイリデン−１３，１７−メタノピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１６］ベンズオキサトリアザシクロノナデシン−１２−オン，２１−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，１６，１８，２３−デカヒドロ−２５−メトキシ−；
４，６−エタンジイリデン−１２Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１３］ベンズオキサトリアザシクロヘキサデシン−１２−オン，１８−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，２０−オクタヒドロ−２１−メトキシ−１３，１４−ジメチル−；及び
４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−；
又はそれらの製薬学的に許容され得る酸付加塩
より成る群から選ばれる請求項１１に記載の使用。
【請求項１４】
式（Ｉ）の化合物が
４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−；
又はそれらの製薬学的に許容され得る酸付加塩
である請求項１１に記載の使用。
【請求項１５】
薬剤が経口的もしくは非経口的投与用である請求項１１〜１４のいずれか１つに記載の使用。
【請求項１６】
式（Ｉ）の化合物をさらに別の抗−ガン剤と組み合わせて投与する請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
さらに別の抗−ガン剤が、乳ガンの場合のヘルセプチン、ドセタキセル、アントラサイクリン及びカペシタビン；前立腺ガンの場合のドセタキセル及びミトキサントロン；結腸ガンの場合のオキサリプラチン、５−ＦＵ、アバスチン、イリノテカン及びセツクシマブ；ならびに肺ガンの場合のタキソテレ、カルボプラチン及びジェミシタビンより成る群から選ばれる請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性が；
−哺乳類患者におけるガンの転移的拡大；
−リンパ管を介する局部的リンパ節への転移；
−ガン、例えば胃ガン、前立腺ガン、ヒト結直腸ガン、侵襲性頸ガン、乳ガン、カポジ肉腫及び黒色腫における腫瘍−関連リンパ管形成；ならびに
−ＶＥＧＦＲ３リガンドを発現するガン細胞の新生脈管形成における、ＶＥＧＦＲ３を発現する内皮細胞の補充及び増殖；
より成る群から選ばれる請求項１１〜１４のいずれかに記載の使用。
【請求項１９】
該ＶＥＧＦ３リガンドがＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ又はそれらの組み合わせである請求項８に記載の使用。
【請求項２０】
ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性が進行した乳ガンである請求項１〜４のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ＰＣＴ公開公報である特許文献１に記載されている大環状キナゾリン誘導体のいくつかが、ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性、特にＶＥＧＦＲ３リガンドＶＥＧＦ−Ｃ及び／又はＶＥＧＦ−Ｄにより媒介される活性の阻害剤として有用であるという発見に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
ガンは、２１世紀の初めにおいてまだ世界中で死亡の主な原因であり、進行中の研究及び開発に関する主な焦点であり続けている。
【０００３】
近年、ガンの治療的介在のための有望な方法は抗脈管形成治療に集中してきた。ガン進行に介在するこの方法は、腫瘍への血液供給を妨げるか又はそうでなければ制限することが腫瘍に酸素及び栄養を枯渇させ、腫瘍細胞成長及び増殖を阻止するであろうという考えを利用する。この方法は有効であることが見出され、現在、第Ｉ、ＩＩ又はＩＩＩ相臨床試験における評価の種々の段階を経ている２０種を越える抗−脈管形成薬及び前臨床的開発中の多数の他のものがある。
【０００４】
多様な性質を示す多種の形態のガンがあるが、多くのガンが共有する１つの因子は、それらは、致死であるために転移しなければならないことうことである。転移が起こるような時点まで、腫瘍は悪性であり得るが、それは体の１つの領域に閉じ込められている。転移前にそれを捜し出すことができれば、外科手術の介在によりガンを処置するか又は除去さえすることができるが、それでもこれは不快及び／又は痛みを引き起こし得るか、あるいはもっと重大な問題さえ生じ得る。残るガン細胞を抑制する限り、そのような孤立したガンを有意な問題なく制御することができる。しかしながら、転移はガン細胞を体に侵入させ、外科手術的切除は原発性腫瘍を除去することができるが、異なる部位へのガンの転移的拡大は非常に処置し難い。
【０００５】
リンパ管を介する局部的リンパ節への転移は、ガンの進行における共通の段階である。転移は、多くの型のガンにおいて重要な予後因子であり、局部的リンパ節の外科手術的及び放射線処置に関する基礎を形成する。腫瘍転移の過程は、局部的侵入及び細胞間マトリックスの破壊、血管中への異物侵入、リンパ管又は他の通路の輸送、循環中の生存、第２の部位における管からの遊出及び新しい場所における成長を含む多段階的出来事である（非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３及び非特許文献４）。転移的沈着（ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｄｅｐｏｓｉｔｓ）の確立に成功するには、腫瘍細胞がこれらの段階を連続的に達成できることが必要である。
【０００６】
近年、いくつかの系列の証拠が、リンパ管の形成であるリンパ管形成がリンパ管転移を促進することを示した（非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７）。リンパ管形成の抑制は、ガン治療においてリンパ節転移を予防するための新規な戦略を与えることができる。
【０００７】
最近の研究は、脈管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）群のメンバーであるＶＥＧＦ−Ｃが、その受容体であるＶＥＧＦＲ３に結合すると、リンパ管形成ならびにリンパ管内皮細胞成長及び移動を刺激することを示した（非特許文献８）。ＶＥＧＦ−Ｃは、胃ガン、前立腺ガン、ヒト結直腸ガン、侵襲性頸ガン、乳ガン転移及びヒト黒色腫転移のような多数の充実
性ガンにおいて、腫瘍−関連リンパ管形成の誘導を介してリンパ管−媒介転移を促進することも示された。これらを支持するものの中に、ガン細胞におけるＶＥＧＦ−Ｃ過剰発現が腫瘍−関連リンパ管形成を有意に増加させ、局部的リンパ節への転移を増強することを示す前臨床的データがある（非特許文献９）。さらに、ＶＥＧＦ−Ｃ／Ｄ−媒介シグナリングの遮断が、マウスにおける腫瘍リンパ管形成及びリンパ節転移を抑制することが示された（非特許文献１０）。
【０００８】
貫膜チロシンキナーゼ受容体であるＶＥＧＦＲ３は、初期胚形成の間に内皮細胞中で広範囲に発現される（非特許文献１１）。発達の後期の段階の間に、ＶＥＧＦＲ−３の発現は発達中のリンパ管に限られるようになる［非特許文献１２］。成人では、リンパ管内皮及びいくつかの高内皮性小静脈がＶＥＧＦＲ−３を発現し、転移性リンパ節及びリンパ管腫中のリンパ洞において発現の増加が起こる。ＶＥＧＦＲ−３はＣＤ３４＋造血細胞のサブセットにおいても発現され、それは過剰発現研究により示されるＶＥＧＦ−Ｃの骨髄造血活性を媒介し得る。マウス胚におけるＶＥＧＦＲ−３遺伝子の標的化された崩壊は、一次脈管網の改造（ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ）の失敗及び胚日（ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｄａｙ）９．５の後の死に導く［非特許文献１３］。これらの研究は、胚脈管構造の発達における、及び又リンパ管形成の間のＶＥＧＦＲ−３に関する本質的な役割を示唆している。
【０００９】
前記から、ＶＥＧＦＲ３の阻害剤が治療薬として非常に大きな可能性を有し、この型の新規な薬剤が、多様な腫瘍形成性障害又は細胞増殖性障害の成長及び／又は拡大を妨げるための技術分野において継続的に必要であることが明らかであろう。ＶＥＧＦＲ３に結合するリガンドの阻害を含むＶＥＧＦＲ３活性の阻害は、ＶＥＧＦＲ−３を発現する内皮細胞の増殖により特徴付けられる疾患を有すると診断された哺乳類患者の処置において有用である。例えば多くの腫瘍は血管又はリンパ管の新生脈管形成を特徴とし、ここで新生脈管形成はＶＥＧＦＲ−３を発現する内皮細胞を含む。いくつかのガンにおいて、ガン細胞自身がＶＥＧＦＲ３を発現し、標的細胞に相当する。他のガン、おそらく重複する組のガンにおいて、ガン細胞は、ＶＥＧＦ−Ｃ及びＶＥＧＦ−Ｄから選ばれるＶＥＧＦＲ−３リガンドを発現する。リガンドは内皮細胞の補充及びそれらの成長の刺激に含まれ、それによりガンの栄養供給（ｎｏｕｒｉｓｈｍｅｎｔ）及び／又は拡大を助長すると思われる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】国際公開第２００４／１０５７６５号パンフレット
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｉｄｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．著，Ａｄｖ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２８，１９７８年，１４９−２５０
【非特許文献２】Ｌｉｏｔｔａ，ｅｔ  ａｌ．著，Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｒｅｓ．４０，１９８８年，２２３−２３８
【非特許文献３】Ｎｉｃｏｌｓｏｎ著，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙ．Ａｃｔａ  ９４８，１９８８年，１７５−２２４
【非特許文献４】Ｚｅｔｔｅｒ，Ｎ．著，Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２２，１９９０年，６０５−６１２
【非特許文献５】Ｓｔａｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．著，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．７（２），２００１年，１８６−１９１
【非特許文献６】Ｓｋｏｂｅ  ｅｔ  ａｌ．著，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．７（２），２００１年，１９２−８
【非特許文献７】Ｍａｋｉｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．著，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．７（２），２００１年，１９９−２０５
【非特許文献８】Ｋａｒｋｋａｉｎｅｎ  ＭＪ，ｅｔ  ａｌ．著，Ｓｅｍｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅｖ  Ｂｉｏｌ．１３：２００２年，９−１８
【非特許文献９】Ｓｔａｃｋｅｒ  ＳＡ．，ｅｔ  ａｌ．著，ＦＡＳＥＢ  Ｊ  １６：２００２年，９２２−３４
【非特許文献１０】Ｈｅ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．著，Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．９４：２００２年，８１９−２５
【非特許文献１１】Ｐａｊｕｓｏｌａ  Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．著，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５３（１６）：１９９２年，３８４５
【非特許文献１２】Ｋａｉｐａｉｎｅｎ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．著，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９２：１９９５年，３５６６−３５７０
【非特許文献１３】Ｄｕｍｏｎｔ  ｅｔ  ａｌ．著，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８２：１９９８年，９４６−９４９
【発明の概要】
【００１２】
発明の概略
本発明は一部において、引用することによりその開示全体が本明細書の内容となる国際公開第２００４／１０５７６５号パンフレットに記載されているある種の化合物を用いて、ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性を処置するか又は予防する方法を目的とする。
【００１３】
関連する態様において、本発明は、ガンを有すると思われる哺乳類患者に本発明の化合物を、ガンの転移的拡大を妨げるのに有効な量で投与することを含んでなる、哺乳類患者におけるガンの転移的拡大を妨げる方法；ならびにガンを有すると診断される哺乳類患者に本発明の化合物を含んでなる組成物を、ガンの成長又は腫瘍形成性拡大を減じるのに有効な量で投与することを含んでなる、ガンの処置方法を提供する。ガン成長又は拡大の速度における低下（生命及び生命の質を延長することができる）が処置の成功の指標であることは、認識されるであろう。好ましい態様において、ガン成長は完全に停止する。さらにもっと好ましい態様において、ガンは収縮するか又は全体的に根絶される。処置のための好ましい患者は人間の患者であるが、他の動物、特にネズミ、ラット、イヌ、ウシ、ブタ、霊長類及びガン処置のための他のモデルシステムが意図されている。
【００１４】
ＶＥＧＦＲ−３を発現するいくつかのガンにおいて、ガン成長の直接の阻害又はガンを消滅させることは、機構であり得る。ＶＥＧＦＲ−３を発現するすべてのガン及び成長する腫瘍中及びその回りにおける脈管形成又はリンパ管形成により特徴付けられるすべてのガンの処置が包含される。例えば脳、肺、肝臓、脾臓、腎臓、リンパ節、小腸、血球、膵臓、結腸、胃、乳房、子宮内膜、前立腺、睾丸、卵巣、皮膚、頭頸部、食道、骨髄及び血液より成る群から選ばれる組織、器官又は細胞のガンの処置が包含される。本発明の特定の態様において、乳房、肺、前立腺及び結腸より成る群から選ばれる組織、器官又は細胞
のガンの処置が包含される。
【００１５】
前記の処置法の１つの変形において、化合物を第２のガン治療薬と共に投与する。第２の薬剤はいずれかの化学療法薬、放射性薬剤、放射線、ガン治療薬をコードする核酸、抗体、タンパク質及び／又は他の抗−リンパ管形成剤もしくは抗−脈管形成剤であることができる。第２の薬剤を本発明の化合物の前、後又はそれと同時に投与することができる。
【００１６】
１つの変形において、処置されるべき患者は手術可能な腫瘍を有すると診断され、投与段階は、腫瘍が患者から切除される前、その間又はその後に行なわれる。腫瘍切除と一緒の化合物処置は、切除され損なったガン細胞からの腫瘍の再成長を減少させるか又は取り除くことを目的とする。
【００１７】
もっと一般的に記載すると、本発明は、必要のある人に本発明の化合物を投与する段階を含んでなる、ＶＥＧＦＲ−３に結合する自然のリガンドへのＶＥＧＦＲ−３結合により特徴付けられる病理学の処置方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】ＶＥＧＦ−Ｃ誘導ＶＥＧＦＲ３活性への４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−（化合物２）の効果。上の枠は、ニトロセルロース膜に転移され、ホスホ−チロシン抗体で染色されたＶＥＧＦＲ−３免疫沈降の結果を与える。下の枠は、ニトロセルロース膜に転移され、ＶＥＧＦＲ−３抗体で染色されたＶＥＧＦＲ−３免疫沈降の結果を与える。左の列１及び２は、負及び正の標準、すなわちＶＥＧＦ−Ｃの不在及び存在下におけるＤＭＳＯ処置を与える。
【図２】５ｕＭの化合物２の存在下での、ＨＭＶＥＣｄ細胞におけるＥｒｋ１／２リン酸化のＶＥＧＦ及びＶＥＧＦ−Ｃ刺激。上の列は、一次抗体としてＴｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４マウスモノクローナル抗体、及び二次抗体としてＩＲＤｙｅ  ８００ｎｍに複合させたヤギ抗−マウスを用いるリン酸化Ｅｒｋ  １／２（Ｐ−Ｅｒｋ  １／２）の染色を与える。下の列は、一次抗体としてＥｒｋ  １／２特異的ウサギポリクローナル抗体及び二次抗体としてＡｌｅｘａ  ６８０ｎｍに複合させたヤギ抗−ウサギを用いる全Ｅｒｋ  １／２の染色を与える。左のパネルは、ＨＭＶＥＣｄ細胞におけるＥｒｋ−１／２のＶＥＧＦ誘導リン酸化に関する結果を与える。右のパネルは、ＨＭＶＥＣｄ細胞におけるＥｒｋ  １／２のＶＥＧＦ−Ｃ誘導リン酸化に関する結果を与える。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
発明の詳細な記述
国際公開第２００４／１０５７６５号パンフレットは、多重標的キナーゼ阻害剤（ｍｕｌｔｉ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ）としての式（Ｉ）のある種類の大環状キナゾリン誘導体の製造、調製及び製薬学的性質を記載している。
【００２０】
【化１】
2010507626.tif 000002
【００２１】
今回、前記の種類の範囲内の化合物の特定の群がＶＥＧＦＲ３阻害活性を有し、それはＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性の処置又は予防において、特に哺乳類患者におけるガンの転移的拡大の処置又は予防のためにそれらを有用なものとすることが見出された。
【００２２】
従って、１つの側面において、本発明は、例えば哺乳類患者におけるガンの転移的拡大の処置又は予防におけるような、ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性の処置又は予防のための薬剤の製造における；
ＺがＮＨを示し；
Ｙが−Ｃ３−９アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１３−Ｃ１−５アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１４−ＣＯ−Ｃ１−５アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ＮＨ−ＣＯ−Ｈｅｔ２０−又は−Ｈｅｔ２２−ＣＨ２−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ１−３アルキル−を示し；Ｘ１がＯ又は−Ｏ−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｘ２が直接結合、−Ｃ１−２アルキル−、Ｏ、−Ｏ−Ｃ１−２アルキル−、ＮＲ１２又はＮＲ１２−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｒ１が水素、シアノ、ハロ又はヒドロキシ、好ましくはハロを示し；
Ｒ２が水素、シアノ、ハロ又はヒドロキシを示し；
Ｒ３が水素を示し；
Ｒ４がＣ１−４アルキルオキシ−を示し；
Ｒ１２が水素又はＣ１−４アルキル−を示し；
Ｒ１３が水素又はＣ１−４アルキルを示し；
Ｒ１４が水素又はＣ１−４アルキルを示し；
Ｈｅｔ２０がピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示し；そして
Ｈｅｔ２２がピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示す
式（Ｉ）の化合物、その製薬学的に許容され得る酸もしくは塩基付加塩及び立体化学的異性体の使用を提供する。
【００２３】
本発明のさらに別の側面は、式Ｉ
【００２４】
【化２】
2010507626.tif 000003
【００２５】
［式中；
ＺはＮＨを示し；
Ｙは−Ｃ３−９アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１３−Ｃ１−５アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１４−ＣＯ−Ｃ１−５アルキル−、−Ｃ１−３アルキル−ＮＨ−ＣＯ−Ｈｅｔ２０−又は−Ｈｅｔ２２−ＣＨ２−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ１−３アルキル−を示し；Ｘ１はＯ又は−Ｏ−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｘ２は直接結合、−Ｃ１−２アルキル−、Ｏ、−Ｏ−Ｃ１−２アルキル−、ＮＲ１２又はＮＲ１２−Ｃ１−２アルキル−を示し；
Ｒ１は水素、シアノ、ハロ又はヒドロキシ、好ましくはハロを示し；
Ｒ２は水素、シアノ、ハロ又はヒドロキシを示し；
Ｒ３は水素を示し；
Ｒ４はＣ１−４アルキルオキシ−を示し；
Ｒ１２は水素又はＣ１−４アルキル−を示し；
Ｒ１３は水素又はＣ１−４アルキルを示し；
Ｒ１４は水素又はＣ１−４アルキルを示し；
Ｈｅｔ２０はピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示し；
Ｈｅｔ２２はピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示す］
の化合物ならびにその製薬学的に許容され得る酸もしくは塩基付加塩及び立体化学的異性体の治療的に有効な量を、処置の必要な哺乳類患者に投与することを含んでなる、例えば哺乳類患者におけるガンの転移的拡大の処置又は予防におけるような、ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性の処置又は予防のための方法を目的とする。
【００２６】
さらに、ＶＥＧＦＲ３が媒介する生物学的活性には以下が含まれるものとする；
−哺乳類患者におけるガンの転移的拡大。処置のために好ましい患者は人間の患者であるが、他の動物、特にネズミ、ラット、イヌ、ウシ、ブタ、霊長類及びガン処置のための他のモデルシステムが意図されている。
−リンパ管を介する局部的リンパ節への転移。従って本発明は（ｉｔ）、リンパ節転移の処置又は予防における本発明に従う化合物の使用を提供する。
−ガンにおける、例えば胃ガン、前立腺ガン、ヒト結直腸ガン、侵襲性頸ガン、乳ガン、カポジ肉腫及び黒色腫における腫瘍−関連リンパ管形成。従って本発明は、ガンにおける、例えば胃ガン、前立腺ガン、ヒト結直腸ガン、侵襲性頸ガン、乳ガン、カポジ肉腫及び黒色腫における腫瘍−関連リンパ管形成の処置又は予防における本発明に従う化合物の使用を提供する。
−ＶＥＧＦ−Ｃ又はＶＥＧＦ−Ｄから選ばれるＶＥＧＦＲ３リガンドを発現するガン細胞の新生脈管形成における、ＶＥＧＦＲ３を発現する内皮細胞の補充及び増殖。従って本発明は、成長する腫瘍中及びその回りにおける脈管形成又はリンパ管形成を特徴とするガンの処置における本発明に従う化合物の使用を提供する。
【００２７】
さらに別の態様において、本発明は、乳房、肺（小細胞及び非−小細胞肺ガンの両方の処置を含む）、直腸及び前立腺より成る群から選ばれる組織、器官又は細胞のガンの処置用の製薬学的組成物の調製のための前記の式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００２８】
本発明は、哺乳類に前記の式（Ｉ）の化合物の治療的に有効な量を投与する段階を含んでなる、該哺乳類における乳ガン、肺ガン、結腸ガン及び／又は前立腺ガンの処置方法にも関する。
【００２９】
さらに別の態様において、本発明は、進行した乳ガンの処置用の製薬学的組成物の調製のための前記の式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。「進行した乳ガン」という用語は本明細書で、以前の処置に反応しなかったか、あるいはそのような処置の後に再発した乳ガンならびに又、診断時に転移性疾患を呈する患者における乳ガンを指すために用いられる。
【００３０】
本発明は、哺乳類に前記の式（Ｉ）の化合物の治療的に有効な量を投与する段階を含んでなる、哺乳類、特に婦人における進行した乳ガンの処置方法にも関する。
【００３１】
特に、本発明は、以下の制限の１つもしくはそれより多くが適用される式（Ｉ）の化合物の使用に関する；
ＺはＮＨを示す；
Ｙは−Ｃ３−９アルキル−、−Ｃ１−５アルキル−ＮＲ１４−ＣＯ−Ｃ１−５アルキル−又は−Ｃ１−３アルキル−ＮＨ−ＣＯ−Ｈｅｔ２０−を示す；
Ｘ１はＯを示す；
Ｘ２は−Ｃ１−２アルキル−、Ｏ又はＮＲ１２−Ｃ１−２アルキル−を示す；
Ｒ１は水素又はハロを示す；特にＲ１は水素又はクロロを示す；さらに特定的にＲ１は水素を示す；
Ｒ２は水素又はハロを示す；特にＲ２は水素、クロロ又はブロモを示す；さらに特定的にＲ２はクロロ又はブロモを示す；
Ｒ３は水素を示す；
Ｒ４はＣ１−４アルコキシを示す；特にＲ４はメトキシを示す；
Ｒ１２はＣ１−４アルキル−を示す；特にＲ１２はメチルを示す；
Ｒ１４は水素又はＣ１−４アルキルを示す；特にＲ１４は水素又はメチルを示す；さらに特定的にＲ１４は水素を示す；
Ｈｅｔ２０はピロリジニル、ピペラジニル又はピペリジニルを示す；特にＨｅｔ２０はピペリジニルを示す。
【００３２】
上記の式（Ｉ）中で示される番号付けを用いて、Ｒ１が３’位にあり、Ｒ２が５’位にあり、Ｒ４が７位にあり、そしてＸ２が２’位にある式（Ｉ）の化合物も、前記の使用において興味深い。
【００３３】
最も好ましい化合物は；
４，６−エタンジイリデン−１９Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１３，１］ベンゾジオキサアザシクロ−ペンタデシン，１５−クロロ−８，９，１０，１１，１２，１３−ヘキサヒドロ−２０−メトキシ−；
１２Ｈ−４，６−エタンジイリデン−１３，１７−メタノピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１６］ベンズオキサトリアザシクロノナデシン−１２−オン，２１−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，１６，１８，２３−デカヒドロ−２５−メトキシ−；
４，６−エタンジイリデン−１２Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１３］ベ
ンズオキサトリアザシクロヘキサデシン−１２−オン，１８−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，２０−オクタヒドロ−２１−メトキシ−１３，１４−ジメチル−；及び
４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−
又はそれらの製薬学的に許容され得る酸付加塩より成る群から選ばれる化合物である。後者の化合物は特に好ましい。
【００３４】
本発明に従って用いるのに最も好ましい化合物は、以下の構造：
【００３５】
【化３】
2010507626.tif 000004
【００３６】
を有する化合物；あるいはその製薬学的に許容され得る酸付加塩より成る群から選ばれるものである。
【００３７】
以下の化合物：
【００３８】
【化４】
2010507626.tif 000005
【００３９】
又はその製薬学的に許容され得る酸付加塩は特に好ましい。
【００４０】
前記の定義及び下記において用いられる場合、
−ハロはフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードの総称であり；
−Ｃ１−２アルキルはメチル又はエチルを定義し；
−Ｃ１−３アルキルは、１〜３個の炭素原子を有する直鎖状及び分枝鎖状飽和炭化水素基、例えばメチル、エチル、プロピルなどを定義し；
−Ｃ１−４アルキルは、１〜４個の炭素原子を有する直鎖状及び分枝鎖状飽和炭化水素基、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、１−メチルエチル、２−メチルプロピル、２，２−ジメルエチルなどを定義し；
−Ｃ１−５アルキルは、１〜５個の炭素原子を有する直鎖状及び分枝鎖状飽和炭化水素基、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、１−メチルブチル、２，２−ジメチルプロピル、２，２−ジメルエチルなどを定義し；
−Ｃ３−９アルキルは、３〜９個の炭素原子を有する直鎖状及び分枝鎖状飽和炭化水素基、例えばプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルなどを定義し；
−Ｃ１−４アルキルオキシは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ブチルオキシ、１−メチルエチルオキシ、２−メチルプロピルオキシなどのような直鎖状もしくは分枝鎖状飽和炭化水素基を定義し；
−「ＣＯ」という用語は、カルボニル基を指す。
【００４１】
上記で言及した製薬学的に許容され得る酸もしくは塩基付加塩は、式（Ｉ）の化合物が形成することができる治療的に活性な無毒性の酸及び無毒性の塩基付加塩の形態を含むものとする。適した酸を用いる該塩基の形態の処理により、塩基性を有する式（Ｉ）の化合物をそれらの製薬学的に許容され得る酸付加塩に転換することができる。適した酸は例えば無機酸、例えばハロゲン化水素酸、例えば塩酸もしくは臭化水素酸；硫酸；硝酸；リン酸などの酸；あるいは有機酸、例えば酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸（すなわちブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸などの酸を含む。
【００４２】
適した有機及び無機塩基を用いる酸の形態の処理により、酸性を有する式（Ｉ）の化合物をそれらの製薬学的に許容され得る塩基付加塩に転換することができる。適した塩基塩の形態は、例えばアンモニウム塩、アルカリ及びアルカリ土類金属塩、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩など、有機塩基との塩、例えばベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン塩、ならびに例えばアルギニン、リシンなどのようなアミノ酸との塩を含む。
【００４３】
酸もしくは塩基付加塩という用語は、式（Ｉ）の化合物が形成することができる水和物及び溶媒付加形態も含む。そのような形態の例は、例えば水和物、アルコラートなどである。
【００４４】
前記で用いられた式（Ｉ）の化合物の立体化学的異性体という用語は、同じ結合の順列により結合する同じ原子で構成されているが、式（Ｉ）の化合物が有することができる互換不可能な異なる三−次元構造を有するすべての可能な化合物を定義する。他にことわるか又は指示しなければ、化合物の化学的名称は、該化合物が有することができるすべての可能な立体化学的異性体の混合物を包含する。該混合物は該化合物の基本的分子構造のすべてのジアステレオマー及び／又はエナンチオマーを含有することができる。純粋な形態又は互いとの混合物の両方における式（Ｉ）の化合物のすべての立体化学的異性体が本発明の範囲内に包含されることが意図されている。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物のいくつかは、それらの互変異性体においても存在し得る。そのような形態は、上記の式において明白に示されてはいないが、本発明の範囲内に含まれることが意図されている。
【００４６】
下記で用いられる場合は常に、「式（Ｉ）の化合物」又は「本発明に従う化合物」という用語は、製薬学的に許容され得る酸もしくは塩基付加塩及びすべての立体異性体も含むものとする。
【００４７】
当該技術分野において既知の方法により、そして特に本明細書で言及され且つ引用することによりその記載事項が本明細書の内容となる公開特許明細書に記載されている方法に従って、本発明に従う化合物を製造し、製薬学的組成物に調製することができる；式（Ｉ）の化合物に関し、適した例をＰＣＴ公開公報、国際公開第２００４／１０５７６５号パンフレット中に見出すことができる。前記の製薬学的組成物の調製のために、場合により付加塩の形態にあることができる特定の化合物の治療的に有効な量を活性成分として、製薬学的に許容され得る担体と緊密な混合物において合わせ、その担体は、投与のために望ましい調製物の形態に依存して多様な形態をとることができる。望ましくはこれらの製薬学的組成物は、好ましくは経口的、経皮的又は非経口的投与のような全身的な投与；あるいは吸入、鼻スプレー、点眼薬を介するか又はクリーム、ジェル、シャンプーなどを介するような局所的投与に適した単位投薬形態にある。例えば経口的投薬形態における組成物の調製において、通常の製薬学的媒体のいずれか、例えば懸濁剤（ナノ懸濁剤を含む）、シロップ、エリキシル剤及び溶液のような経口用液体調製物の場合、水、グリコール、油、アルコールなど；あるいは粉剤、丸薬、カプセル及び錠剤の場合、澱粉、糖類、カオリン、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などのような固体担体を用いることができる。それらの投与の容易さのために、錠剤及びカプセルは最も有利な経口的投薬単位形態物を与え、その場合には固体の製薬学的担体が用いられるのは明らかである。非経口用組成物の場合、担体は通常少なくとも大部分において無菌水を含んでなるが、例えば溶解性を助けるための他の成分が含まれることができる。例えば担体が食塩水、グルコース溶液又は食塩水とグルコース溶液の混合物を含んでなる注入可能な溶液を調製することができる。式（Ｉ）の化合物を含有する注入可能な溶液を、長時間の作用のために油中で調製することができる。この目的のために適した油は、例えばピーナツ油、ゴマ油、綿実油、コーン油、大豆油、長鎖脂肪酸の合成グリセロールエステル及びこれらの油及び他の油の混合物である。注入可能な懸濁剤も調製することができ、その場合には適した液体担体、懸濁化剤などを用いることができる。経皮的投与に適した組成物において、担体は場合により浸透促進剤及び／又は適した湿潤剤を含んでなることができ、それらは場合により小さい割合におけるいずれかの性質の適した添加剤と組み合わされていることができ、その添加剤は皮膚に有意な悪影響を引き起こさない。該添加剤は皮膚への投与を容易にすることができるか、及び／又は所望の組成物の調製の助けとなることができる。これらの組成物を種々の方法で、例えば経皮パッチとして、スポット−オンとして又は軟膏として投与することができる。局所的適用に適した組成物として、薬剤を局所的に投与するために通常用いられるすべての組成物、例えばクリーム、ジェル、包帯、シャンプー、チンキ剤、塗布剤、軟膏、軟膏剤（ｓａｌｖｅｓ）、粉剤などを挙げることができる。該組成物の適用は、例えば窒素、二酸化炭素、フレオンのようなプロペラントを用いるか、又はポンプスプレーのようにプロペラントを用いないエアゾール、滴剤、ローション又は半固体、例えば綿棒により適用することができる増粘された組成物によることができる。特に軟膏剤、クリーム、ジェル、軟膏などのような半固体組成物は、簡単に用いられるであろう。
【００４８】
投与の容易さ及び投薬量の均一性のために、前記の製薬学的組成物を投薬単位形態物において調製するのが特に有利である。本明細書及び本明細書の請求項で用いられる投薬単位形態物は、１回の投薬量として適した物理的に分離された単位を指し、各単位は所望の治療効果を生むために計算されたあらかじめ決められた量の活性成分を、必要な製薬学的
担体と一緒に含有する。そのような投薬単位形態物の例は錠剤（刻み付き又はコーティング錠を含む）、カプセル、丸薬、粉剤小包、ウェハース、注入可能な溶液又は懸濁剤、小匙一杯、大匙一杯など、ならびに分離されたそれらの複数である。
【００４９】
好ましくは、本発明に従う化合物を含んでなる製薬学的組成物の治療的に有効な量を、経口的又は非経口的に投与する。該治療的に有効な量は、患者において多用な腫瘍形成性障害又は細胞増殖性障害（上記参照）の転移及び／又は成長を有効に妨げるかあるいはその大きさを縮小させる量である。現在のデータに基づき、本発明の化合物そして特に４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロ−ペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−を活性成分として含んでなる製薬学的組成物を、１日に１０ｍｇ〜数（１〜５）グラムの量で、１回の投薬としてかあるいは例えば１日２、３又は４回をも含む１回より多い投薬に細分して経口的に投与することができると思われる。好ましい量は、１日に５００〜４，０００ｍｇの範囲である。そのような化合物に関する特に好ましい投薬量は、１日に７５０ｍｇ〜３，０００ｍｇの範囲内である。本明細書で活性成分とも呼ばれる本発明に従う化合物の、治療的効果を達成するのに必要な量が、投与の経路、受容者の年令及び状態ならびに処置されている特定の障害又は疾患とともにもちろん変わるであろうことは認識されるであろう。最適な投薬量及び投薬管理は、通常の方法を用い且つ本明細書に示される情報を見て、当該技術分野における熟練者により容易に決定され得る。この処置を継続的に、あるいは例えばこれらに限られないが、サイクル当たりに１〜２１日の処置を与える３〜４週間のサイクル又は有効且つ安全であることが示される他のスケジュールを含んで断続的に与えることができる。
【００５０】
上記のＶＥＧＦＲ３阻害剤を１種もしくはそれより多い他のガン処置と組み合わせて用いることができる。そのような組み合わせは、いずれかの確立された抗腫瘍治療、例えばこれらに限られないが化学療法、放射線ならびに標的に基づく治療、例えば抗体及び小分子を包含することができる。これらの治療を、最適の有効性／安全性必要条件に依存して、全身的治療においてあるいは局所的滴注／投与（例えば硬膜下腔内に）おいて組み合わせることができる。
【００５１】
ある好ましい態様において、種々の腫瘍の型に関し、本発明のＶＥＧＦＲ３阻害剤と組み合わせるのに適した１種もしくはそれより多い他のガン処置には；
乳ガン：ヘルセプチン（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ）、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、アントラサイクリン、カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）
前立腺ガン：ドセタキセル、ミトキサントロン（ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）
結腸ガン：オキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）、５−ＦＵ、アバスチン（ａｖａｓｔｉｎ）、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）、セツクシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）
肺ガン；タキソテレ（ｔａｘｏｔｅｒｅ）、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）、ジェミシタビン（ｇｅｍｉｃｉｔａｂｉｎｅ）
が含まれるが、これらに限られない。
【００５２】
本発明のＶＥＧＦＲ３阻害剤及びさらに別の抗−ガン剤を同時に（例えば別々の又は単一の組成物中で）あるいはいずれかの順序で逐次的に投与することができる。後者の場合、２つの化合物は、有利なもしくは相乗的効果が達成されるのを保証するのに十分である期間内に、ならびにそのような量及びやり方で投与されるであろう。好ましい投与の方法及び順序ならびに組み合わせの各成分に関するそれぞれの投薬量及び投薬管理が、投与される特定のＶＥＧＦＲ３阻害剤及びさらに別の抗−ガン剤、それらの投与経路、処置されている特定の腫瘍ならびに処置されている特定の宿主に依存するであろうことは、認識されるであろう。最適の投与の方法及び順序ならびに投薬量及び投薬管理は、通常の方法を
用い且つ本明細書に示される情報を見て、当該技術分野における熟練者により容易に決定され得る。
【００５３】
化合物の製造及び調製：
化合物９５、１２Ｈ−４，６−エタンジイリデン−１３，１７−メタノピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１６］ベンズオキサトリアザシクロノナデシン−１２−オン，２１−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，１６，１８，２３−デカヒドロ−２５−メトキシ−の製造
段階１．
チタン，テトラキス（２−プロパノラート）（０．００５モル）を、ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍｌ）中の３−ピペリジンカルボン酸エチルエステル（０．５４ｇ，０．００５モル）及び４−クロロ−２−ニトロベンズアルデヒド（０．９３ｇ，０．００５モル）の溶液に加えた。混合物を室温で１時間攪拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（０．００５５モル）を加えた。反応混合物を室温で１時間攪拌し、追加分のＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（０．００２７５モル）を加え、混合物を室温で２時間攪拌し、次いでＮａＨＣＯ３（Ｈ２Ｏ中で飽和）を加えた。有機層を分離し、乾燥し（Ｋ２ＣＯ３）、濾過し、溶媒を蒸発させ、トルエンと共−蒸発させ、残留ＣＨ２Ｃｌ２を除去した。粗残留物としての３−ピペリジンカルボン酸，１−［（４−クロロ−２−ニトロフェニル）メチル］−，エチルエステルをそのまま次の反応段階において用いた。
【００５４】
段階２．
エタノール（１５０ｍｌ）中の３−ピペリジンカルボン酸，１−［（４−クロロ−２−ニトロフェニル）メチル］−，エチルエステル（１．６９ｇ，０．００５モル）の混合物を、チオフェン溶液（１ｍｌ）の存在下で触媒としてＰｔ／Ｃ  ５％（０．５ｇ）を用いて水素化した。Ｈ２（３当量）の吸収後、触媒を濾過し、濾液を蒸発させた。残留物をＥｔＯＡｃ中に溶解し、この溶液をＥｘｔｒｅｌｕｔｅ上で濾過した。ヘプタンを加えたが、結晶は現れなかった。溶媒を蒸発させ、残留物をＣＨ３ＯＨ中に再溶解し、濾紙上で濾過してシリカグリースを除去した。溶媒を蒸発させ、１．３５ｇの３−ピペリジンカルボン酸，１−［（２−アミノ−４−クロロフェニル）メチル］−，エチルエステルを褐色の油として与えた。
【００５５】
段階３．
２−プロパノール（十分量）中の３−ピペリジンカルボン酸，１−［（２−アミノ−４−クロロフェニル）メチル］−，エチルエステル（０．００１１モル）の溶液に、４−クロロ−７−メトキシ−６−キナゾリノール  ６−アセテート（０．２７３ｇ，０．００１０８モル）を加え、次いで反応混合物を８０℃で終夜振盪させた。次いで混合物を８０℃でさらに６．５時間振盪させ、溶媒を蒸発させた。収穫：３−ピペリジンカルボン酸，１−［［２−［［６−（アセチルオキシ）−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］−４−クロロフェニル］メチル］−，エチルエステル（粗；そのまま次の反応段階において使用）。
【００５６】
段階４．
ＮＨ３／ＣＨ３ＯＨ  ７Ｎ（約１０ｍｌ）を３−ピペリジンカルボン酸，１−［［２−［［６−（アセチルオキシ）−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］−４−クロロフェニル］メチル］−，エチルエステル（０．００１１４モル）に加え、反応混合物を３５℃で１時間振盪させ、次いで溶媒を蒸発させた。収穫：３−ピペリジンカルボン酸，１−［［４−クロロ−２−［（６−ヒドロキシ−７−メトキシ−４−キナゾリニル）アミノ］フェニル］メチル］−，エチルエステル（そのまま次の反応段階において使用）。
【００５７】
段階５．
３−ピペリジンカルボン酸，１−［［４−クロロ−２−［（６−ヒドロキシ−７−メトキシ−４−キナゾリニル）アミノ］フェニル］メチル］−，エチルエステル（０．００１１４モル）、Ｎ−（３−ブロモプロピル）カルバミン酸  １，１−ジメチルエチルエステル（１当量）及びＣｓ２ＣＯ３（１．８５８２ｇ）の混合物を室温で終夜攪拌し、次いで反応混合物を５０℃で３０分間攪拌した。必要な場合にはさらにＮ−（３−ブロモプロピル）カルバミン酸  １，１−ジメチルエチルエステルを加え、混合物を室温で４時間及び５０℃でさらに１５分間攪拌した。溶媒を蒸発させ（Ｇｅｎｅｖａｃ）、残留物をＣＨ２Ｃｌ２中に溶解した。この溶液をジカライト上で濾過し、濾液を蒸発させた。収穫：３−ピペリジンカルボン酸，１−［［４−クロロ−２−［［６−［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］プロポキシ］−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］フェニル］メチル］−，エチルエステル。
【００５８】
段階６．
ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＩＳ（９０／８／２）（１１．４ｍｌ）中の３−ピペリジンカルボン酸，１−［［４−クロロ−２−［［６−［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］プロポキシ］−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］フェニル］メチル］−，エチルエステル（残留物；約０．００１１４モル）の溶液を７〜８時間攪拌し、次いで溶媒を蒸発させ、得られる残留物をオーブン中で終夜乾燥した。収穫：３−ピペリジンカルボン酸，１−［［２−［［６−（３−アミノプロポキシ）−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］−４−クロロフェニル］メチル］−．ＣＦ３ＣＯＯＨ。
【００５９】
段階７．
３−ピペリジンカルボン酸，１−［［２−［［６−（３−アミノプロポキシ）−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］−４−クロロフェニル］メチル］−．ＣＦ３ＣＯＯＨ（０．００１１４モル）及びＤＩＰＥＡ（０．００６８４モル）の溶液を、乾燥ＤＭＦ（２８５ｍｌ）中のＨＢＴＵ（０．００３４２モル）及びＨＯＢｔ（０．００２２８モル）の溶液に加え、次いで反応混合物を１時間反応させた。溶媒を蒸発させ、乾燥残留物を逆−相高−性能液体クロマトグラフィーにより精製した。生成物画分を集め、Ｎａ２ＣＯ３を加え、有機溶媒を蒸発させた。水性濃厚液にＣＨ２Ｃｌ２を加え、得られる混合物をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、次いで有機抽出物を乾燥し、集めた。収穫：０．０００７モルの１２Ｈ−４，６−エタンジイリデン−１３，１７−メタノピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１６］ベンズオキサトリアザシクロノナデシン−１２−オン，２１−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，１６，１８，２３−デカヒドロ−２５−メトキシ−（収率６２％）。
【００６０】
化合物９６、４，６−エタンジイリデン−１２Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１３］ベンズオキサトリアザシクロヘキサデシン−１２−オン，１８−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，２０−オクタヒドロ−２１−メトキシ−１３，１４−ジメチル−，（１３Ｓ）−の製造
段階１．
ＣＨ２Ｃｌ２（十分量）中のＮ−メチル−Ｌ−アラニン  メチルエステル  ヒドロクロリド（１．４ｇ，０．０１０モル）、４−クロロ−２−ニトロベンズアルデヒド（０．０１０モル）及びチタン，テトラキス（２−プロパノラート）（０．０１０モル）の混合物を室温で１時間攪拌した。次いでＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（０．０２２モル）を加え、混合物を室温で３時間攪拌した。さらにＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（０．０１１モル）を加え、混合物を室温で終夜攪拌した。次いで塩基性になるまでＮａＨＣＯ３（飽和）を加え、混合物をＰ３フィルター上で濾過した。有機層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｋ２ＣＯ３）、溶媒を蒸発乾固した。粗残留物、Ｌ−アラニン，Ｎ−［（４−クロロ−２−ニトロフェニル）メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステ
ルをそのまま次の反応段階において用いた。
【００６１】
段階２．
ＣＨ３ＯＨ（５０ｍｌ）中のＬ−アラニン，Ｎ−［（４−クロロ−２−ニトロフェニル）メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステル（１．０３ｇ，０．００３６モル）の混合物を、ＤＩＰＥ（０．５ｍｌ）中の４％チオフェン溶液の存在下で、触媒としてＰｔ／Ｃ  ５％（０．５ｇ）を用いて水素化した。Ｈ２（３当量）の吸収後、触媒を濾過し、濾液を蒸発させた。残留物をシリカゲル上で精製した（カートリッジを用いて）（溶離剤：４％
Ｅｔ３Ｎ／ＣＨ２Ｃｌ２）。所望の画分を集めた。所望の画分（２相形態）にヘプタンを加えた。ヘプタン層を分離してシリカグリースを除去した。溶媒の除去及び乾燥の後、０．５６７４ｇのＬ−アラニン，Ｎ−［（２−アミノ−４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステルが得られた（２２％；黄色の油）。粗生成物をそのまま次の反応段階において用いた。
【００６２】
段階３．
２−プロパノール（５ｍｌ）中のＬ−アラニン，Ｎ−［（２−アミノ−４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステル（０．０００５５モル）の溶液に、４−クロロ−７−メトキシ−６−キナゾリノール  ６−アセテート（０．０００５５モル）を加え、次いで反応混合物を８０℃で終夜振盪させ、溶媒を蒸発させた。収穫：Ｌ−アラニン，Ｎ−［［２−［［６−（アセチルオキシ）−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］−４−クロロフェニル］メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステル（粗、そのまま次の反応段階において使用）。
【００６３】
段階４．
Ｌ−アラニン，Ｎ−［［２−［［６−（アセチルオキシ）−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］−４−クロロフェニル］メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステル（０．０００５５モル）にＮＨ３／ＣＨ３ＯＨ  ７Ｎ（１０ｍｌ）を加え、反応混合物を１〜２時間振盪させ、次いで溶媒を蒸発させた。収穫：Ｌ−アラニン，Ｎ−［［４−クロロ−２−［（６−ヒドロキシ−７−メトキシ−４−キナゾリニル）アミノ］フェニル］メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステル（そのまま次の反応段階において使用）。
【００６４】
段階５．
Ｌ−アラニン，Ｎ−［［４−クロロ−２−［（６−ヒドロキシ−７−メトキシ−４−キナゾリニル）アミノ］フェニル］メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステル（０．０００５５モル）、Ｎ−（３−ブロモプロピル）カルバミン酸  １，１−ジメチルエチルエステル（１当量）及びＣｓ２ＣＯ３（０．８９６５ｇ）の混合物を室温で終夜攪拌し、次いで反応混合物を５０℃で３０分間攪拌した。必要な場合にはさらにＣＡＳ  Ｎ−（３−ブロモプロピル）カルバミン酸  １，１−ジメチルエチルエステルを加え、混合物を室温で４時間及び５０℃でさらに１５分間攪拌した。溶媒を蒸発させ（Ｇｅｎｅｖａｃ）、残留物をＣＨ２Ｃｌ２中に溶解した。この溶液をジカライト上で濾過し、濾液を蒸発させた。収穫：Ｌ−アラニン，Ｎ−［［４−クロロ−２−［［６−［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］プロポキシ］−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］フェニル］メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステル。
【００６５】
段階６．
ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＩＳ（９０／８／２）（５．５ｍｌ）中のＬ−アラニン，Ｎ−［［４−クロロ−２−［［６−［３−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］プロポキシ］−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］フェニル］メチル］−Ｎ−メチル−，メチルエステル（粗残留物；０．０００５５モル）の溶液を７〜８時間攪拌し、次いで溶媒を蒸発させ、得られる残留物をオーブン中で終夜乾燥した。収穫：Ｌ−アラニン，Ｎ−［［２−［［６−（３−アミノプロポキシ）−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］−４−クロロフェニル］メチル］−Ｎ−メチル−．ＣＦ３ＣＯＯＨ。
【００６６】
段階７．
Ｌ−アラニン，Ｎ−［［２−［［６−（３−アミノプロポキシ）−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］−４−クロロフェニル］メチル］−Ｎ−メチル−．ＣＦ３ＣＯＯＨ（０．０００５５モル）及びＤＩＰＥＡ（０．００３３モル）の溶液を、乾燥ＤＭＦ（１３７ｍｌ）中のＨＢＴＵ（０．００１６５モル）及びＨＯＢｔ（０．００１１モル）の溶液に加え、次いで反応混合物を１時間反応させた。溶媒を蒸発させ、乾燥残留物を逆−相高−性能液体クロマトグラフィーにより精製した。生成物画分を集め、Ｎａ２ＣＯ３を加え、有機溶媒を蒸発させた。水性濃厚液にＣＨ２Ｃｌ２を加え、得られる混合物をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、次いで有機抽出物を乾燥し、集めた。収穫：０．０４９ｇの４，６−エタンジイリデン−１２Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１０，１３］ベンズオキサトリアザシクロヘキサデシン−１２−オン，１８−クロロ−８，９，１０，１１，１３，１４，１５，２０−オクタヒドロ−２１−メトキシ−１３，１４−ジメチル−，（１３Ｓ）−。
【００６７】
実施例中で用いられる場合、「ＣＨ３ＯＨ」はメタノールを意味し、「Ｅｔ３Ｎ」はトリエチルアミンを意味し、「ＣＨ２Ｃｌ２」はジクロロメタンを意味し、「ＨＢＴＵ」は１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−ベンゾトリアゾリウムヘキサフルオロホスフェート（１−）３−オキシドを意味し、「ＤＭＦ」はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味し、「ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３」はナトリウムトリアセトキシボロハイドライドを意味し、「ＤＩＰＥＡ」はＮ−エチル−Ｎ−（１−メチルエチル）−２−プロパナミンを意味し、「ＨＯＢｔ」は１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾールを意味し、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を意味し、「ＴＩＳ」はトリス（１−メチルエチル）シランを意味し、「Ｋ２ＣＯ３」は炭酸カリウムを意味し、「Ｃｓ２ＣＯ３」は炭酸セシウムを意味し、「Ｎａ２ＣＯ３」は炭酸二ナトリウム塩を意味し、「ＮａＨＣＯ３」は炭酸一ナトリウム塩を意味する。
【００６８】
化合物２２、ＭＴＫＩ１の製造
本発明において用いられる好ましい化合物の、国際公開第２００４／１０５７６５号パンフレットから得た適した製造は以下の通りである：
実施例Ａ
ａ）１−ペンタノール，５−［［（４−ブロモ−２−ニトロフェニル）メチル］アミノ］−（中間体１）の製造
ＥｔＯＨ（１５ｍｌ）中の４−ブロモ−２−ニトロ−ベンズアルデヒド（０．０１３モル）、５−アミノ−１−ペンタノール（０．０１３モル）及びチタン，テトラキス（２−プロパノラート）（０．０１４モル）の溶液を室温で１時間攪拌し、次いで反応混合物を５０℃に加熱し、３０分間攪拌した。混合物を室温に冷まし、ＮａＢＨ４（０．０１３モル）を分けて加えた。反応混合物を終夜攪拌し、次いで氷水（５０ｍｌ）中に注ぎ出した。得られる混合物を２０分間攪拌し、生成する沈殿を濾過し（濾液（Ｉ）を与える）、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＤＣＭ中で攪拌した（生成物を溶解してそれをＴｉ−塩から取り出すために）。混合物を濾過し、次いで濾液を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、最後に溶媒を蒸発させた。ＥｔＯＨが除去されるまで濾液（Ｉ）を蒸発させ、水性濃厚液をＤＣＭで２回抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を蒸発させ、３．８ｇ（９３％）の中間体１を与えた。
【００６９】
実施例Ｂ
ａ）１−ペンタノール，５−［［（４−ブロモ−２−ニトロフェニル）メチル］メチルア
ミノ］−（中間体２）の製造
ＥｔＯＨ（１５０ｍｌ）中の中間体５０（０．００４７モル）、ホルムアルデヒド（０．０２５モル）及びチタン，テトラキス（２−プロパノラート）（０．００５１モル）の溶液を５０℃に加熱し、１時間攪拌し、次いでＮａＢＨ４（０．０２６モル）を室温で分けて加えた。反応混合物を終夜攪拌し、次いで水（１００ｍｌ）を用いてクエンチングした。得られる混合物を１時間攪拌し、生成する沈殿を濾過し、洗浄した。有機濾液を濃縮し、次いで水性濃厚液をＤＣＭで抽出し、乾燥した。溶媒を蒸発させ、残留物をシリカゲル上で濾過した（溶離剤：ＤＣＭ／ＣＨ３ＯＨ  ９８／２から９５／５）。生成物画分を集め、溶媒を蒸発させ、０．５ｇの中間体２を与えた。
【００７０】
ｂ）１−ペンタノール，５−［［（４−ブロモ−２−ニトロフェニル）メチル］メチルアミノ］−，アセテート（エステル）（中間体３）の製造
無水酢酸（８ｍｌ）中の中間体２（０．００１５モル）及びピリジン（０．０１５モル）の溶液を室温で終夜攪拌し、次いで溶媒を蒸発させ、トルエンと共−蒸発させ、中間体３を与えた。
【００７１】
ｃ）１−ペンタノール，５−［［（２−アミノ−４−ブロモフェニル）メチル］メチルアミノ］−，アセテート（エステル）（中間体４）の製造
ＴＨＦ（５０ｍｌ）中の中間体３（０．００１５モル）の混合物を、チオフェン溶液（０．５ｍｌ）［Ｈ１７９−０３４］の存在下で、触媒としてＰｔ／Ｃ  ５％（０．５ｇ）を用いて水素化した。Ｈ２（３当量）の吸収の後、触媒を濾過し、濾液を蒸発させ、０．５ｇの中間体４を与えた。
【００７２】
ｄ）６−キナゾリノール，４−［［２−［［［５−（アセチルオキシ）ペンチル］メチルアミノ］メチル］−５−ブロモフェニル］アミノ］−７−メトキシ−，アセテート（エステル）（中間体５）の製造
２−プロパノール（３０ｍｌ）中の中間体４（０．００１５モル）及び４−クロロ−７−メトキシ−６−キナゾリノールアセテート（エステル）（０．００１５モル）の混合物を８０℃に加熱し、反応混合物を１日攪拌した。減圧下で溶媒を蒸発させ、残留物をそのまま次の反応段階において用い、０．８３ｇの中間体５を与えた。
【００７３】
ｅ）６−キナゾリノール，４−［［５−ブロモ−２−［［（５−ヒドロキシペンチル）メチルアミノ］メチル］フェニル］アミノ］−７−メトキシ−（中間体６）の製造
メタノール（２５ｍｌ）中の中間体５（０．００１５モル）の溶液を室温で攪拌し、Ｈ２Ｏ（２．５ｍｌ）中のＫ２ＣＯ３（０．００３モル）の溶液を加え、次いで反応混合物を６０℃に加熱し、１８時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、Ｈ２Ｏ（２０ｍｌ）を加え、次いで酢酸を用いて混合物を中和し、生成する沈殿を濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、濃厚液をＤＣＭで抽出し、濾過し、次いで乾燥し（ＭｇＳＯ４）、混合物を減圧下で濃縮し、０．５ｇ（７０％）の中間体６を与えた。
【００７４】
実施例Ｃ
ａ）４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロ−ペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−（化合物ＭＴＫＩ１）の製造
ＴＨＦ（５０ｍｌ）中の中間体６（０．００１１モル）の溶液を室温で攪拌し、トリブチルホスフィン（０．００１６モル）を加え、次いで１，１’−（アゾジカルボニル）ビス−ピペリジン（０．００１６モル）を加え、反応混合物を２時間攪拌した。最初の体積の１／３まで溶媒を蒸発させた。得られる沈殿を濾過し、洗浄した。濾液を蒸発させ、残留物をＲＰ高−性能液体クロマトグラフィーにより精製した。生成物画分を集め、有機溶媒を蒸発させた。水性濃厚液をＤＣＭで２回抽出し、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、次
いで濾過した。溶媒を蒸発させ、残留物を５０℃で乾燥し（真空）、０．００４ｇ（０．８％）の化合物ＭＴＫＩ１を与えた。
【００７５】
化合物２、４，６−エタンジイリデン−１９Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１３，１］ベンゾジオキサアザシクロ−ペンタデシン，１５−クロロ−８，９，１０，１１，１２，１３−ヘキサヒドロ−２０−メトキシ−の製造；
実施例Ｄ
４，６−エタンジイリデン−１９Ｈ−ピリミド［４，５−ｂ］［６，１３，１］ベンゾジオキサアザシクロ−ペンタデシン，１５−クロロ−８，９，１０，１１，１２，１３−ヘキサヒドロ−２０−メトキシ−（化合物２）の製造
ＴＨＦ，乾燥（１００ｍｌ）中の中間体９（０．００２４モル）及びトリフェニルホスフィン（０．００３６モル）の溶液を室温で攪拌し、次いでＴＨＦ（１０ｍｌ）中のビス（１−メチルエチル）ジアゼンジカルボキシレート（０．００３６モル）の溶液を滴下した。反応混合物を６時間攪拌し、追加分のＴＨＦ（１０ｍｌ）中のビス（１−メチルエチル）ジアゼンジカルボキシレート（０．３５ｍｌ）を加えた。混合物を終夜攪拌し、濃縮した。残留物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＣＨ３ＯＨ／ＴＨＦ  ９０／５／５）により精製した。生成物画分を集め、ＲＰ高−性能液体クロマトグラフィーによりさらに精製した。生成物画分を集め、濃縮した。水性濃厚液を濾過し、保持される固体を洗浄し、６５℃で乾燥し（真空）、０．０６５ｇの化合物２，融点２５５．５〜２６０．２℃を与えた。
【００７６】
実施例Ｅ
ａ）ヘキサン酸，６−（２−クロロ−６−ニトロフェノキシ）−，メチルエステル（中間体６）の製造
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５０ｍｌ）中の２−クロロ−６−ニトロ−フェノール（０．０４６モル）の溶液を５０℃に加熱し、次いでＫ２ＣＯ３（０．０６９モル）を加え、反応混合物を１５分間攪拌した。６−ブロモ−，メチルエステルへキサン酸（０．０６９モル）を加え、混合物を終夜攪拌した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、残留物をそのまま次の段階において用い、１３．８８ｇの中間体６を与えた。
ｂ）ヘキサン酸，６−（２−アミノ−６−クロロフェノキシ）−，メチルエステル（中間体７）の製造
ＴＨＦ（ｍｌ）中の中間体６（０．０４６モル）及びエタナイム（ｅｔｈａｎｉｍｅ）（２ｇ）の混合物を、ＤＩＰＥ（２ｍｌ）の存在下で触媒としてＰｔ／Ｃ  ５％（３ｇ）を用いて水素化した。Ｈ２（３当量）の吸収後、Ｄｉｃａｌｉｔｅの小さい栓上で反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、中間体７を与えた。
ｃ）ヘキサン酸，６−［２−［［６−（アセチルオキシ）−７−メトキシ−４−キナゾリニル］アミノ］−６−クロロフェノキシ］−，メチルエステル（中間体８）の製造
２−プロパノール（１７０ｍｌ）中の４−クロロ−６−メチルカルボニルオキシ−７−メトキシキナゾリン（０．０２２モル）及び中間体７（０．０２２モル）の混合物を２時間攪拌し、且つ８０℃に加熱し、濃縮し、残留物をシリカゲル上でクロマトグラフィーにかけた（溶離剤：ＤＣＭ／ＣＨ３ＯＨ  ９７／３）。生成物画分を集め、溶媒を蒸発させ、５．１ｇの中間体８を与えた（そのまま次の反応段階において使用）。
ｄ）６−キナゾリノール，４−［［３−クロロ−２−［（６−ヒドロキシヘキシル）オキシ］フェニル］アミノ］−７−メトキシ−（中間体９）の製造
ＴＨＦ（４０ｍｌ）中のＬＡＨ（０．０２４６モル）の混合物を室温で攪拌した。ＴＨＦ（６０ｍｌ）中の中間体８（０．００６モル）の溶液を滴下した。反応混合物を１日攪拌し、次いで追加分のＬＡＨ（０．０１２３モル）を分けて加えた。混合物を週末に及んでさらに攪拌し、次いでＨ２Ｏ（２ｍｌ）を滴下し、続いて１５％ＮａＯＨ溶液（２ｍｌ）及びＨ２Ｏ（６ｍｌ）を滴下した。混合物を１５分間攪拌し、濾過し、濾液を濃縮した。残留物を沸騰ＣＨ３ＣＮ中で攪拌し、濾過し、保持される固体を６０℃で乾燥した（真空）。固体をＣＨ３ＯＨ／ＤＣＭ（１０／９０）中に再−溶解し、ＨＣｌ（１Ｎ）を用いてこの混合物を中和した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮し、１ｇの中間体９を与えた。
【００７７】
最も好ましい化合物、ＭＹＫＩ１に関する代表的な調剤の実施例は、以下の通りである：
実施例Ｆ：調剤：
生成物ＭＴＫＩ１を１０−ｍｇ／ｍＬの経口用溶液，ｐＨ２として調製することができる。それは精製水中に賦形剤、Ｃａｐｔｉｓｏｌ(R)（化学名：スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン，ＳＢＥ−β−ＣＤ）、クエン酸、Ｔｗｅｅｎ(R)２０、ＨＣｌ及びＮａＯＨを含有する。調剤を冷蔵保存（２〜８℃；３６〜４６°Ｆ）し、投薬量調製から前の最大で１時間、室温に温めることができる。
【００７８】
生成物ＭＴＫＩ１を、それぞれ３、４及び００のサイズの硬質ゼラチンカプセル中に活性化学物質（ａｃｔｉｖｅ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｅｎｔｉｔｙ）ＭＴＫＩ１、ラクトース一水和物（２００メッシュ）、ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウムを含有する５０−ｍｇ、１００−ｍｇ及び３００−ｍｇの経口用即時放出カプセルとして調製することもできる。カプセルは以下の成分のいずれか又はすべてを含有することもできる：ゼラチン、赤色酸化鉄及び酸化チタン。
【００７９】
実験データ
ＶＥＧＦＲ３阻害
リンパ節を含むこと（ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ）は、複数のガンの型において悪い予後因子である。最近の研究は、リンパ管形成が腫瘍進行において重要な役割を果たすことを示し、脈管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）Ｃ及びＤは、同族受容体ＶＥＧＦＲ３の活性化を介して作用する特異的リンパ管形成因子として同定された。下記で化合物２とも呼ばれる４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロ−ペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−は、独特のキナーゼ阻害側面（ｐａｎ  Ｈｅｒ及びＳｒｃ群）ならびに好ましい組織分布側面を有し、複数の実験モデルにおいて有力な抗腫瘍活性を生ずることが示された多重標的キナーゼ阻害剤である。
【００８０】
試験管内キナーゼアッセイは、本発明の化合物がＥＧＦＲ、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ４及びＳｒｃ群キナーゼ（Ｓｒｃ、Ｆｙｎ、Ｌｃｋ、Ｙｅｓ、Ｌｙｎ）活性の有力な阻害を有することを示した。
【００８１】
本明細書で、ヒト脈管内皮細胞（ＨＭＶＥＣｄ）を用いる細胞に基づくアッセイにおいて試験管内キナーゼ阻害を確認し、そこにおいて化合物２はＥｒｋ  １／２のＶＥＧＦＲ３依存性ＶＥＧＦ−Ｃ刺激を妨げたが、それはＶＥＧＦＲ１が媒介するＶＥＧＦジナリングに影響しなかった。化合物２は本明細書で、ヒトＶＥＧＦＲ３を発現するように操作された細胞系を用い、ＶＥＧＦＲ３のＶＥＧＦ−Ｃ誘導リン酸化を阻害することも示された。
【００８２】
これらの結果を本明細書で、最近開発されたクセノプス（Ｘｅｎｏｐｕｓ）オタマジャクシモデルにおいてさらに確認し、そこで化合物２は、ＶＥＧＦ−Ｃノックアウトの効果を表現型模写することが見出された。
（Ｎｙ  ｅｔ  ａｌ．著，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．２００５  Ｓｅｐ；１１：９９８−１００４）。
【００８３】
方法
試験管内キナーゼアッセイ
ＶＥＧＦＲ３キナーゼ反応を、９６−ウェルミクロタイタープレート（ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒｐｌａｔｅ）中において３０℃で１０分間行なった。２５μｌの反応体積は、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７、２００μＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  ＭｇＡｃ、１０μＭ  非標識ＡＴＰ、０．５ｍＣｉ  ＡＴ３３Ｐ、５００μＭ  ＪＡＫ３−ｔｉｄｅ（Ａｃ−ＧＧＥＥＥＥＹＦＥＬＶＫＫＫＫ−ＮＨ２）、２５ｎｇ  ＶＥＧＦＲ３及び１００％ＤＭＳＯ中の２％の化合物を含有した。
【００８４】
５μｌの３％リン酸溶液の添加により、反応を停止させた。次いで１０μｌの反応混合物をＦｉｌｔｅｒｍａｔ  Ｐ３０フィルター（Ｗａｌｌａｃ）上にスポットし、０．７５％リン酸中で５分間に及んで３回、及びメタノール中で２分に及んで１回洗浄してから、４ｍｌのシンチレーション液を含有する密閉可能なプラスチックバッグに移し、シンチレーションカウンターにおいて読み取った。
【００８５】
ＶＥＧＦＲ３細胞アッセイ
ＶＥＧＦ−Ｃ誘導ＶＥＧＦＲ３活性の阻害
このアッセイのために、ヒトＶＥＧＦＲ−３を安定して発現するブタ大動脈内皮（ＰＡＥ）細胞を、１０ｃｍの皿の上で密集まで成長させた。終夜、細胞を血清欠乏させ（ｓｅｒｕｍ  ｓｔａｒｖｅｄ）、倍地を新しい無血清倍地で置き換えた。あらかじめ決められた量の化合物２又は標準ビヒクルを細胞に加え、次いで３７℃で１５分間インキュベーションした。これに続いてＶＥＧＦ−Ｃを１００ｎｇ／ｍｌの最終的濃度まで加え、細胞を３７℃で１０分間インキュベーションし、その後それらを氷−冷ＰＢＳで洗浄し、次いでライシスした。プロテアーゼ阻害剤を含有する細胞ライセートを、ＶＥＧＦＲ−３に特異的な抗体を用いて免疫沈降に供し、免疫沈降物をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分離した。タンパク質をニトロセルルロース膜に転移させ、次いで最初にホスホ−チロシン抗体及び次いでＶＥＧＦＲ−３抗体を用いて精査した（ｐｒｏｂｅｄ）。
【００８６】
ヒト微小管内皮細胞−皮膚（ＨＭＶＥＣ−ｄ）におけるＶＥＧＦ−Ｃにより誘導されるＥｒｋ活性化の阻害
ＨＭＶＥＣ−ｄ細胞（Ｃａｍｂｒｅｘ）を、５％ＣＯ２中で３７Ｃにおいて、フィブロネクチンがコーティングされた１２−ウェルプレート（ＢＤ  Ｂｉｏｃｏａｔ，Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）上で、適した血清含有倍地（Ｃａｍｂｒｅｘ）中において４日間培養した。次いで血清を含まず、代わりにＳＩＴＥ＋３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含有する以外は前と同じ倍地中で、細胞を１６時間欠乏させた（ｓｔａｒｖｅｄ）。次いで細胞を０．２％におけるＤＭＳＯ（溶媒）又は５ｕＭの化合物２と一緒に６０分間予備インキュベーションし、次いで１０ｎｇ／ｍｌのＶＥＧＦ又は１００ｎｇ／ｍｌのＶＥＧＦ−Ｃ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ）のいずれかを細胞に加えた。刺激の前又は刺激から１０及び３０分後、倍地を除去し、０．１ｍＭオルトバナジン酸ナトリウムを含有する氷−冷ＰＢＳで細胞を濯ぎ、０．１％ＳＤＳ及び１ｘホスファターゼ及びプロテアーゼ阻害剤（ＨＡＬＴ，ＰＩＥＲＣＥ）を含有するＭ−ＰＥＲ緩衝液（ＰＩＥＲＣＥ）中でライシスした。細胞をプレートからこすり落とし、氷上においてライシス緩衝液中で３０分間インキュベーションし、次いで４℃において１６０００ｘｇで１０分間遠心した。ＢＣＡ試薬を用い、製造者の指示（ＰＩＥＲＣＥ）に従ってライセートを定量し、５ｍｇの全タンパク質をＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル（ＮＵＰＡＧＥ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）上に負荷した。電気泳動及びＰＶＤＦ膜上へのブロッティングはすべて、ＮＵＰＡＧＥシステムからの試薬を用いて、製造者の指示に従って行なわれた。Ｏｄｙｓｓｅｙ遮断緩衝液（ＬＩＣＯＲ）を用いてブロットを１時間遮断し、次いでＯｄｙｓｓｅｙ遮断緩衝液と０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳの１：１混合物中で一次抗体（下記を参照されたい）を１：１０００に希釈し、４℃で終夜適用した：Ｐ−Ｅｒｋ１／２（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４，クローンＥ１０，マウスモノクローナル＃９１０６，Ｅｒｋ１／２（ウサギ
ポリクローナル＃９１０２）（すべてＣｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃから）。０．１％Ｔｗｅｅｎを含有するＰＢＳ中で５分間に及んで３回、ブロットを洗浄し、次いで二次抗体（０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳ中で１：１０００に希釈）と一緒に１時間インキュベーションした：ＩＲＤｙｅ  ８００ｎｍに複合させたヤギ抗−マウス（Ｒｏｃｋｌａｎｄ，Ｉｎｃ）又はＡｌｅｘａ  ６８０ｎｍに複合させたヤギ抗−ウサギ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ）。
【００８７】
０．１％Ｔｗｅｅｎを含有するＰＢＳ中で５分に及んで３回及びＰＢＳ中で１回、ブロットを洗浄し、ＬＩＣＯＲシステムを用い、７００ｎｍ及び８００ｎｍにおいて、強度５及び膜の走査に適したすべての設定を用いてブロットを走査した。
【００８８】
ＶＥＧＦＲ３生体内クセノプスアッセイ
リンパ管形成への化合物２の効果を分析するために、クセノプスオタマジャクシをモデルとして用いた（Ｎｙ  ｅｔ  ａｌ著，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １１：２００５年，９９８−１００４）。クセノプスオタマジャクシの倍地に、段階（ｓｔａｇｅ）２６−２８、すなわち血管及びリンパ管の両方の形成の前に開始して、ビヒクル標準とともに用量依存的やり方で、化合物を毎日投与した。トレーニングされた観察者により、化合物の効果を「生存分析（ｌｉｖｅ  ａｎａｌｙｓｉｓ）」によって監視し、すなわちリンパ管−欠損の証拠に関して生存胚を４日後に調べた。限られた数の実験における結果を確証する追加の手段として、オタマジャクシを段階３５−３６において固定し、Ｐｒｏｘ１に関してその場ハイブリッド形成を行い、リンパ管内皮細胞（ＬＥＣｓ）の後主静脈（ＰＣＶ）からそれらの背面の終点への移動を評価し、これはリンパ管形成の必須の段階を反映する。正常な状況下で、ＬＥＣｓはＰＣＶの領域から生じ、そこに堆積し、研究期間の間にそれらは限定される「領域（ａｒｅａｓ）」に（領域１から領域２及び領域３に）背面方向に移動し、そこでそれらは次いでさらに吻方向（ｒｏｓｔｒａｌｌｙ）及び尾方向（ｃａｕｄａｌｌｙ）に移動し、尾及び体幹におけるリンパ管構造を形成する。細胞の最大移動を決定することにより、ならびに尾中のこれらの種々の領域における細胞の数をカウントすることにより、ＰＣＶからのＬＥＣｓの移動における欠損を定量した。
【００８９】
結果
試験管内キナーゼアッセイ
以下の表は、上記のＶＥＧＦＲ３キナーゼアッセイを用いて本発明の化合物に関して得たｐＩＣ５０値を提供する。
【００９０】
【表１】
2010507626.tif 000006
【００９１】
ＶＥＧＦＲ−３発現性ブタ大動脈内皮細胞におけるＶＥＧＦ−Ｃ誘導ＶＥＧＦＲ−３リン酸化の阻害
ＶＥＧＦ−Ｃ誘導ＶＥＧＦＲ３活性への４，６−エタンジイリデンピリミド［４，５−ｂ］［６，１，１２］ベンズオキサジアザシクロ−ペンタデシン，１７−ブロモ−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１９−オクタヒドロ−２０−メトキシ−１３−メチル−（化合物２）の効果は、ＶＥＧＦＲ−３リン酸化における用量依存的減少から明らかである（図１の上の枠）。ＶＥＧＦＲ−３抗体を用いてウェスターンブロットを再−染色すると、種々の濃度におけるＶＥＧＦＲ−３の存在が確証される（図の下の枠）。
【００９２】
ＨＭＶＥＣ−ｄ細胞におけるＥｒｋリン酸化アッセイ
図２に示す通り、５μＭにおける化合物２は、ＶＥＧＦ−ＣによるＥｒｋ１／２のリン酸化を妨げたが、Ｅｒｋ１／２のＶＥＧＦ刺激を妨げなかった。これらのデータは、化合物２によるＶＥＧＦＲ−３の選択的阻害と一致する。
【００９３】
クセノプス研究結果
生存スクリーニング（ｌｉｖｅ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ）を用いて化合物２の効果を評価し、＞５０ｕＭの化合物２の濃度は、オタマジャクシの３０％において出血を引き起こした。２０ｕＭにおいて、オタマジャクシの１０％が水腫を発病し、それはビヒクルのみで処置されたオタマジャクシでは見られなかった。化合物２は、オタマジャクシにおいてリンパ管内皮細胞（ＬＥＣ）移動を用量依存的に妨げる（表１）。調べられた化合物の最低の濃度においてさえ（０．３１ｕＭ）、段階３５−３６におけるＬＥＣ移動は特に低下し、そしてこれはビヒクルのみの場合に観察されるより多かった。これらのデータは、この化合物が正常なリンパ管形成を妨げるという結論を支持する。
【００９４】
【表２】
2010507626.tif 000007
【００９５】
前記の明細書は本発明の原理を記載しており、例示の目的で実施例が与えられているが、本発明の実施は、以下の請求項及びそれらの同等事項の範囲内に含まれる通常の変更、応用及び／又は修正のすべてを包含することが理解されるであろう。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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